JP2015522692A - 糖およびその使用 - Google Patents
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Abstract
Description
本出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれている2012年7月16日出願の米国特許仮出願第61/672,221号の利益を主張する。
一態様では、本発明は、レジオナミン酸部分を含む糖に関する。レジオナミン酸(5,7−ジアセトアミド−3,5,7,9−テトラデオキシ−D−グリセロ−D−ガラクト−ノヌロソン酸またはLeg)は、C13H21N2O8 −の分子式を有する9炭素α−ケト酸である。レジオナミン酸は、約333Daの分子量を有する。
一態様では、本発明は、アルトルロン酸部分を含む糖に関する。アルトルロン酸((2S,3S,4R,5S)−2,3,4,5−テトラヒドロキシ−6−オキソヘキサン酸またはAltA)は、C6H10O7の分子式を有する。アルトルロン酸は、約194Daの分子量を有する。
一態様では、本発明は、グリセロールホスファート部分を含む糖に関する。グリセロールホスファート(2,3−ジヒドロキシプロピル二水素ホスファートまたはGro−1P)は、C3H9O6Pの分子式および約172Daの分子量を有する。一実施形態では、糖は、グリセロールホスファート部分およびグルコース(Glc)部分を含む。
一態様では、本発明は、レバン部分を含む糖に関する。レバン((2→6)−β−D−フルクトフラナンまたは6−β−D−Fruf−2)は、C18H32O16の分子式および約504Daの分子量を有する。
一態様では、本発明は、本明細書に記載の糖のうちのいずれか少なくとも2種の組合せを含む組成物に関する。例えば、一実施形態では、組成物は、(a)レジオナミン酸部分を含む多糖;(b)アルトルロン酸部分を含む多糖;(c)グリセロールホスファート部分を含む多糖;および(d)レバン部分を含む多糖のうちのいずれか少なくとも2種を含む。別の実施形態では、組成物は、本明細書に記載の単離多糖のうちのいずれか少なくとも3種を含む。また別の実施形態では、組成物は、本明細書に記載の単離多糖のうちのいずれか少なくとも4種を含む。
本明細書で使用する場合、「多糖−タンパク質コンジュゲート」は、1つまたは複数の共有結合によってタンパク質担体分子にコンジュゲートされている多糖分子を指す。標的ホストにおいて免疫原性であることが分かっている別の種のタンパク質に、多糖をコンジュゲートすることが望ましいことがある。したがって、一実施形態では、この担体分子は担体タンパク質である。本明細書において定義するとおり、そのような外来タンパク質を、「担体タンパク質」と称する。担体タンパク質は、多糖の抗原性および免疫原性を増強するために役立つ。本明細書で使用する場合、用語「担体効果」は、担体としてのより免疫原性な分子(例えば、異種タンパク質)に付着させることによって、弱免疫原性または非免疫原性分子の抗原性および免疫原性を増強するプロセスを指す。この場合、多糖−タンパク質コンジュゲートの組合せにおける多糖は、それを単独で提供した場合よりも、免疫原性が高くなる。担体タンパク質は、抗体応答を生じさせるためにT細胞ヘルプを刺激するためのT細胞エピトープを含有する。
一態様では、本発明は、レジオナミン酸部分を有する多糖および担体分子を含む組成物に関する。一実施形態では、多糖は、式(I)によって表される構造を含む。一実施形態では、多糖は、担体分子にコンジュゲートされている。一実施形態では、この組成物は免疫原性である。
コンジュゲーションは、多糖の原子がタンパク質表面の原子に共有結合する直接的なものであってよい。コンジュゲーションは、リンカー分子を介したものであってもよく、このリンカー分子は、多糖およびタンパク質の両方と反応して、その2つを接続し、炭水化物をタンパク質につないでいる。
多糖およびタンパク質担体のコンジュゲートは、多糖ポリマー断片の還元末端基を担体タンパク質の第一級アミノ基と反応させて、担体タンパク質に共有結合しているポリマーの抗原決定基を得ることによって形成され得る。還元基は、炭水化物の選択的加水分解もしくは特異的酸化的開裂、または両方の組合せによって形成され得る。
直接的なコンジュゲーションの成功は、どれほど多くの表面基が各反応パートナーに対して利用可能であるかに依存している。立体効果が、多糖とタンパク質とのコンジュゲーションの効率に影響を及ぼすことが知られている。これは、コンジュゲートされるタンパク質上の、そうしなければアクセス不可能な部位にアクセスするために、高度に柔軟な二官能性リンカーまたはスペーサーアーム(リンカー)を使用することで克服することができる。リンカーは、どのような統一的な分類スキームも有さないが、しかしながら、次の特徴において共通している:リンカーは低分子量で、多糖およびタンパク質上の選択された官能基と段階的または同時に反応し得る二官能性試薬である。細菌多糖は、ヒドロキシル基、アシル化されていてもされていなくてもよいアミノ基、ホスホジエステル、およびカルボキシル基のような幅広い一連の官能基を有し得る。これらの官能基のいずれも、原則的に、リンカーを多糖にカップリングさせるために使用することができる。
リンカーの使用は、コンジュゲート免疫原性組成物の分野では知られている。多糖と担体タンパク質との結合は、例えば、グルタルアルデヒドなどの架橋試薬を使用することによって達成することができる。しかしながら、ある種の実施形態では、多糖およびタンパク質担体をリンカーによって分離する。リンカーは、コンジュゲートの最適な免疫原性および多糖と担体とのより効率的なカップリングを促進する。リンカーは、2つの抗原成分を、その長さおよび柔軟性を所望のとおりに調節することができる鎖によって分離する。二官能性部位の間に、鎖は、ヘテロ原子および開裂部位を含めた様々な構造的特徴を含むことができる。またリンカーによって、抗原の翻訳特性および回転特性の増大に対応することが可能となり、結合部位と可溶性抗体とのアクセスが増大する。アジピン酸ジヒドラジド(ADH)の他に、適切なリンカーには、例えば、ε−アミノヘキサン酸、3−(2−ピリジルジチオ(pyridyidithio)プロピオニルヒドラジド(PDPH)、クロロヘキサノールジメチルアセタール、D−グルクロノラクトン、およびp−ニトロフェニルアミンなどのヘテロ二官能性リンカーが含まれる。使用が企図されるカップリング試薬には、ヒドロキシスクシンイミドおよびカルボジイミドが含まれる。当業者に知られている多くの他のリンカーおよびカップリング試薬も、使用に適している。
一態様では、本発明は、有効量の少なくとも1種の本明細書に記載の糖、オリゴ糖、多糖、その多糖−タンパク質コンジュゲート、またはその生物学的同等物を含む免疫原性組成物に関する。例えば、一実施形態では、免疫原性組成物は、式(I)によって表される構造を含む少なくとも1種の多糖および/またはその多糖−タンパク質コンジュゲートを含む。一実施形態では、免疫原性組成物は、式(II)によって表される構造を含む少なくとも1種の多糖および/またはその多糖−タンパク質コンジュゲートを含む。別の実施形態では、免疫原性組成物は、式(III)によって表される構造を含む少なくとも1種の多糖および/またはその多糖−タンパク質コンジュゲートを含む。また別の実施形態では、免疫原性組成物は、式(IV)によって表される構造を含む少なくとも1種の多糖および/またはその多糖−タンパク質コンジュゲートを含む。さらなる実施形態では、免疫原性組成物は、レバン部分を含む少なくとも1種の多糖および/またはその多糖−タンパク質コンジュゲートを含む。
使用方法
一態様では、本発明は、哺乳動物に、有効量の本明細書に記載の少なくとも1種の糖を投与することにより、哺乳動物において免疫応答を誘導する方法に関する。一実施形態では、方法は、グラム陽性球菌に対する免疫応答を誘導することを含む。グラム陽性球菌の例には、ブドウ球菌属種、エンテロコッカス属種、および連鎖球菌属種が含まれる。好ましい実施形態では、方法は、エンテロコッカス属種に対する、最も好ましくは、エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)に対する免疫応答を誘導することを含む。
また別の態様では、本発明は、診断マーカーとしての本明細書に記載の糖の方法および使用に関する。例えば、一実施形態では、本明細書に記載の単離糖は、グラム陽性球菌抗原および/または抗体(例えば、エンテロコッカス属抗原および/または抗エンテロコッカス属抗体など)の存在を試料中で検出するために有用であり得る。この試料は、グラム陽性球菌の感染が疑われる哺乳動物、食品もしくは水、または他の物質に由来するものであってよい。したがって、一態様では、本発明は、グラム陽性球菌を検査試料中で検出する方法に関する。方法は、試料を、少なくとも1種の本明細書に記載の糖の存在についてアッセイするステップを含む。グラム陽性球菌の例には、ブドウ球菌属種、エンテロコッカス属種、および連鎖球菌属種が含まれる。
一態様では、本発明は、本明細書に記載の糖と免疫反応性の抗体に関する。抗体調製物は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、マウスモノクローナルIgG抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、その断片、またはそれらの組合せのうちのいずれか1種を含んでよい。哺乳動物において、この多糖を使用することによって、抗体を生成させることができ、次いで、この抗体を、感染の可能性がある対象の胃液からエンテロコッカス属感染を示す抗原を検出するためのアッセイにおいて使用することができる。
ある種の実施形態では、抗多糖抗体はポリクローナル抗体である。ポリクローナル抗体は、本明細書において定義する場合、血清の調製に由来する種々の特異性を有し、かつ種々のB細胞クローンに由来する抗体の混合物を指す。ポリクローナル抗体の調製および特性決定は、当技術分野で知られている。
抗糖モノクローナル抗体は、既知のハイブリドーマ技法を使用することによって調製することができる。典型的には、モノクローナル抗体の調製は、初めに、適切な標的動物宿主を、本発明の糖、オリゴ糖、多糖、または多糖−タンパク質コンジュゲートを含む選択された免疫原で免疫化することを伴う。所望の場合には、アジュバント、緩衝剤、および/または賦形剤を含んでもよい。免疫化を、糖またはそのコンジュゲートに特異的に結合する抗体を産生または発現するようにBリンパ球を誘発するために十分に行う。別法では、リンパ球をインビトロで免疫化する。
一態様では、本発明は、例えば、エンテロコッカス属抗体および/または抗体断片などのグラム陽性球菌抗体および/または抗体断片を検出または生産するための本明細書に記載の糖の使用に関する。本明細書に記載の糖および/またはそれから生成される抗体は、ELISA関連技術およびマイクロアレイ関連技術を含めた当業者に知られている様々な免疫診断技法において使用することができる。加えて、これらの試薬は、例えば、免疫原性糖コンジュゲートに対する血清抗体レベルを含む抗体応答を評価するために使用することができる。本発明のアッセイ方法は、蛍光、化学発光、放射性、酵素標識、もしくは染料分子などの標識、および/または生体試料中の抗原もしくは抗体と、固体支持体に結合している対応する抗体もしくは抗原との複合体を直接的もしくは間接的に検出するための二次免疫試薬の使用を伴い得る。
また別の態様では、本発明は、本明細書に記載の糖のうちの少なくとも1種を生産するための方法に関する。方法は、グラム陽性球菌を培養するステップと、その細菌によって産生された糖を収集するステップとを含む。一実施形態では、グラム陽性球菌には、ブドウ球菌属種、エンテロコッカス属種、および連鎖球菌属種が含まれる。一実施形態では、細菌はエンテロコッカス属細菌である。一実施形態では、細菌は、エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)である。細菌は、E.フェシウム(E.faecium)の任意の株であってよい。好ましい実施形態では、細菌はE.フェシウム(E.faecium)TX0016(DO;E1794)である。別の好ましい実施形態では、細菌はE.フェシウム(E.faecium)E0155である。さらなる実施形態では、細菌はE.フェシウム(E.faecium)E155(Freiburg)である。
E.フェシウム(E.faecium)株
クローナルコンプレックス17(CC17)に関連する2つの株、TX0016(DO)および株E155(Freiburg)を、表面炭水化物を分析するために選択した。心内膜炎患者からもともとは単離されたTX0016株は、多形核白血球[PMN])媒介性死滅に対して耐性である。
発酵
500mL種培養物を、通気させることなく、2%デキストロースを含むColumbiaブロス中、37℃にて一晩成長させた。体積全体を、8L撹拌タンク反応器内の同じ培地7.5Lに、pH制御下で加え、6時間または24時間成長させた。熱処理(60℃で1時間)によって死滅させた後に、細胞を遠心分離によって採取し、トリス/スクロース緩衝液150mlに再懸濁させ、1mg/mlリゾチームおよび10U/mlムタノリシン(mutanolysin)で一晩処理した。遠心分離(10,000rpm、20分)の後に、上清を100μg/ml RNアーゼおよび10U/ml DNアーゼで8時間にわたって、次いで、プロナーゼ(50μg/ml)で一晩処理した。エタノールを25%まで加え、沈殿物を遠心分離の後に廃棄した。上清を75%エタノールまで調節し、結果として生じた沈殿物を保持した。75%エタノールで2回洗浄した後に、ペレット状物を窒素で乾燥させ、30mMトリスpH7.5および0.05%アジ化Na20mlに再懸濁させた。こうして、粗製の炭水化物2〜3gを、湿潤細胞50〜100gから得た。
抗原精製
粗製の多糖を、50mMトリスpH7.5/100mM NaClで平衡化させておいたサイズ排除クロマトグラフィー(SEC)Sephacryl S−400カラム(直列の16/60および26/60カラム)に流速0.5ml/分で負荷した。画分を、215nM、254nM、および280nMでのUV吸収によって、Stains−All検出試薬を用いる天然PAGEゲル電気泳動によって、かつ炭水化物生化学アッセイ(アントロン、デオキシ−糖O−アセチル)でモニターした。TX0016(DO)株から抽出された多糖では、回収された画分を、アントロン活性を伴う主要なピークに対応する5つの貯留物にまとめた。最初の4つのSEC貯留物は、Stains−All染色により、高分子量物質を含有し;5番目は含有せず、さらには調査しなかった。個々のSEC貯留物を、25mMトリス/50mM NaClで平衡化させておいたアニオン交換カラムクロマトグラフィー(AEC)カラム(直列の2×HiTrap Q HP)に適用し、炭水化物を1M NaCl勾配で溶離した。画分を上記のとおりにスクリーニングし、対象のピーク活性に対応する試料を貯留し、30KDa MWCOスピンフィルターで濃縮し、水に対して透析し、生化学分析前に凍結乾燥させた。
抗原構造分析
炭水化物試料の構造決定は、1H−NMRおよび2D−NMR分析(DQCOSY、TOCSY、NOESY/ROESYおよび1H/13C HSQC)を伴った。単糖組成を、酢酸アルジトール誘導体のGC−MSによって決定した。試料をCiucanuおよびKerek手順(Carbohydr Res.1984;131:209〜217)によってメチル化した。部分メチル化誘導体を、対応する酢酸アルジトールに変換し、高オリフィス電圧ESI質量分析法に連結したガスクロマトグラフィー(GC)によって分析した。
分子量の決定
精製多糖の重量平均分子量(Mw)を、オンライン示差屈折率(dRI)、紫外線(UV)、および多角度光散乱(MALLS)の三重検出システムに連結しているサイズ排除クロマトグラフィー(SEC)によって決定した。サイズ排除クロマトグラフィーでは、多糖のサイズに基づく分離を、TSK−ゲルGMPWxl混合床分析カラムで、水性PBS緩衝液(pH6.8)を移動相として使用する0.8mL/分の流速での定組成溶離で行った。検出器については、OptiLab rex dRI、TREOS三角度MALLS検出器(両方ともWyatt Technology製)およびVarian単波長UV検出器を使用した。0.133mL/gの一般的なdn/dc値をすべての多糖試料について、SEC−UV−RI−MALLSによってMwを決定するために使用した。データの取得および分析を、Wyatt Technology ASTRAソフトウェア(v. 5.3.4.20)を使用して行った。
E.フェシウム(E.faecium)Pf1多糖の構造分析
この多糖は、SECによりボイド容量付近の単一ピークとして溶離し、結合することなくAECを通過した。これは、バシラス属に関連したレバン様ポリマーとして同定され、例えば、熱、寒冷、凍結温度、飢餓など)などの環境ストレスに対する忍容性を促進し得る。
E.フェシウム(E.faecium)Pf2多糖の構造分析
この多糖を、第2のSEC貯留物からアニオン交換クロマトグラフィーによって精製した。アントロンのポジティブピークは、AECカラムから0.22M NaClで溶離した。この試料を濃縮し、NMR分析(図2、3)の前に、Sephadex G−15で脱塩した。PSの酸性加水分解によって調製した酢酸アルジトールのGC分析によって、フコースおよびグルコースが3:2の量で存在することが示された。PSの2D NMRスペクトルのセット(DQCOSY、TOCSY、NOESY/ROESY、および1H/13C HSQC)を記録し、割り当てた(表2、図3)。スペクトルは、6種の単糖のスピン系を含有した。ピラノース形態のβ−ガラクツロン酸に典型的なTOCSYシグナルパターンおよびビシナルH−H結合定数を有する3種のフコース、2種のグルコース、および1種の単糖が同定された。ウロン酸の同定は決定的ではない。それというのも、光学的に純粋な2−ブタノールを用いたアセチル化グリコシド/エステルのGC−MSによってその絶対配置を決定しようとしても、ガラクツロン酸の誘導体が見出されていなかったためである。この単糖の13C NMRデータは、β−ガラクツロン酸の期待値と一致しなかった。また、β−Galに典型的であるH−1とH−5との間のNOE相関は観察されなかった。この状況は、β−GalおよびエクアトリアルなH−5と同じく環配置を有する4C1配座でα−L−アルトルロン酸が存在し、結果として、H−1とH−5との間にNOEが存在しないことを指し示した。
E.フェシウム(E.faecium)Pf3多糖の構造分析
この多糖を、AECカラムから0.58M NaClで溶離した第1および第2のSEC貯留物から同定した。これは、非常に弱いアントロン活性しか示さなかった。先行する1H−NMR調査の後に、これらの試料を合わせ、Sephadex G15で脱塩し、テイコ酸化合物が存在することにより、PF3と呼んだ。PF3(DQCOSY、TOCSY、ROESY、1H/31P HMQCおよび1H/13C HSQC)の2D NMRスペクトルのセットを記録し、割り当てた(表3)。スペクトルは、3種の単糖、すべてのα−Glcp、およびリン酸化グリセロールのスピン系を含んでいた。単糖および二糖置換を伴うか、または伴わないグリセロールホスファート主鎖を表す4つの別個の構造単位の構造を以下に示す:
E.フェシウム(E.faecium)Pf4多糖の構造分析
Pf4炭水化物を、AECから1.2M NaClで溶離したSEC貯留物3および4から回収した。試料は不均質で、ヘテロ七量体繰り返し構造を有する主なヘテログリカンを少量のラムナンおよびペプチド夾雑物と共に含有した。不均質性は、2個の非化学量論的グルコース残基のNMR分析による存在によって明白であった。少量のポリマーは、3個のRha繰り返し単位から明らかに作製されている。さらにアニオン交換(保持)およびSephadex G50(ボイド容量で溶離)によってそれらを精製することは不可能であったので、これらの少量の夾雑物は、主な多糖に共有結合し得る。単糖組成分析によって、約1:3:3の比のRha、Glc、およびGalが同定された。試料(図7)および得られた断片(以下)のNMR分析によって、次の構造が導かれ、側鎖Glcは、残基HおよびDに結合していた:
株E155(Freiburg)から同定された類似の多糖(Pf11〜Pf14)
TX0016(DO)株について上記したのと同じ精製スキームを使用して、E155(Freiburg)として知られている第2のE.フェシウム(E.faecium)臨床株から多糖を単離した。Pf1、Pf3、およびPf4と同一のNMRスペクトルを有する多糖が同定され、それぞれPf11、Pf13、およびPf14と名付けた(図9)。しかしながら、Pf2に類似した多糖は、使用した培養および単離条件下では存在しなかった。代わりに、Pf2に類似したSECおよびAEC特性を有するが、Pf4にマッチするNMRスペクトルを有するPf12と名付けた炭水化物が単離された。Pf12は、SECからPf14よりも早く溶離したためであった。
抗原CRM197コンジュゲートの調製
シアニル化手順および1−シアノ−4−ジメチルアミノ−ピリジニウムテトラフルオロボラート(CDAP)試薬を使用して、Pf1、Pf2、およびPf4のCRM197担体タンパク質コンジュゲートを調製した。CDAPは、シアナート基を炭水化物ヒドロキシル基に導入し、これは、タンパク質担体のアミノ基と共に共有結合を形成し得る。PS抗原(水1ml中の5mg)をCDAP(アセトニトリル中100mg/ml 50μl)と室温にて合わせ、30秒間にわたって混合した。0.2M TEA50μlを加え、反応物を穏やかに2分間にわたって混合した。等体積のCRM197(HEPES緩衝液中5mg/ml)を導入し、混合物を室温にて16時間撹拌した。反応混合物を100kDa MWCOスピン透析管に移し、0.9%NaCl中で3回洗浄した。最後の2ml体積をSECカラムに適用して、遊離担体タンパク質を除去し、未コンジュゲートの遊離多糖の分集団に対して、コンジュゲートされた多糖を濃縮した。遊離多糖よりも先に溶離する、コンジュゲートに対応する画分を貯留し、その炭水化物およびペプチド含有量を定量化した。
抗血清の調製
ウサギに、1×108熱死滅細菌およびISCOMATRIX(商標)アジュバント(CSL)100μgを0、4、および6週目に皮下注射することによって、TX0016(DO)株に対して生じるポリクローナルな全細胞抗血清を調製した。細胞は、65℃で45分間にわたって加熱することによって死滅させた。8週目にウサギから採血したが、3匹の動物すべてが、全細胞ELISAアッセイにおいて強い応答を示した(データは図示せず)(精製抗原に対するELISA力価については図12を参照されたい)。
フローサイトメトリー
ウサギ抗血清およびマッチさせた採血前(pre−bleed)対照血清を、フローサイトメトリー検出のための一次抗体として使用した。一晩細菌培養物を1×PBS中で洗浄し、加熱(45分、65℃)によって死滅させた。次いで、細胞を2%BSA/PBSで、室温にて1時間にわたってブロックした。PBS中で洗浄した後に、細胞を、一次ウサギ抗体を含むPBS中の2%BSAに再懸濁させ、室温にて1時間インキュベートした。洗浄した後に、フィコエリトリンコンジュゲートさせたロバ抗ウサギIgG(Jackson Immunoresearch、PA)での二次標識を続けた。細菌細胞を1%パラホルムアルデヒドで固定し、Accuri C6フローサイトメーター(BD Bioscience、CA)で分析した。PEチャネルの平均蛍光強度(MFI)を各試料で決定した(20,000イベントをカウント)。
HL−60オプソニン作用アッセイ
Pf1〜Pf4抗原をそこから精製した同じ発酵から、E.フェシウム(E.faecium)TX0016(DO)およびE155(Freiburg)の凍結前細菌ストックを調製した。細胞をペレット化し、1ml当たり1OD600単位の濃度まで、DPBS20%グリセロール中に懸濁させ、凍結させた。解凍した細胞を1×105CFU/mlまで、OPA緩衝液(ハンクス平衡塩溶液、0.1%ゼラチン、1mM MgCl2、2.5mM CaCl2)中で希釈し、10μl(103CFU)を、連続希釈した血清10μlで、4℃にて1時間にわたって、U底組織培養マイクロプレート内でオプソニン化した。その後、補体10μl(Baby Rabbit Serum、Pel−Freez)およびHL−60細胞20μl(0.5×107/ml)を加え、混合物を300rpm、37℃にて1時間にわたって、5%CO2インキュベーター中で振盪した。各反応物50μlのうちの10μlを、水200μlを含有する予め湿らせておいたMillipore MultiScreenHTS HVフィルタープレートの対応するウェルに移した。液体を減圧濾過した後に、Columbiaブロス(2%グルコースを含む)150μlを適用し、濾過し、プレートを37℃にて一晩インキュベートした。翌日、クマシー染料で染色した後に、ImmunoSpot(登録商標)分析器およびImmunoCaptureソフトウェアを使用して、コロニーを数えた。あらゆる検出可能なOPA活性の特異性を確立するために、オプソニン作用ステップの前に、免疫血清を20μg/ml精製抗原と共にプレインキュベートした。OPAアッセイは、観察されるいずれの死滅も、これらの成分に依存していることを実証するために、好中球様HL60または補体を伴わない対照反応を含む。
本明細書に記載の糖に結合する抗体の調製
本実施例では、多糖Pf1、Pf2、Pf3、Pf4などの本明細書に記載の糖、ならびに/またはそのイムノコンジュゲートおよび/もしくはその免疫原性組成物に特異的に結合し得るモノクローナル抗体の調製物を説明する。
次の条項において、本発明の追加の実施形態を記載する:
C1. レジオナミン酸部分、N−アセチルガラクトサミン部分、ガラクトース部分、およびグルコース部分を含む単離多糖。
C2. 前記レジオナミン酸部分が前記グルコース部分に結合している、条項C1の多糖。
C3. 前記レジオナミン酸部分が前記ガラクトース部分に結合している、条項C1の多糖。
C4. 前記レジオナミン酸部分が前記N−アセチルガラクトサミン部分に結合している、条項C1の多糖。
C5. 前記レジオナミン酸部分、N−アセチルガラクトサミン部分、ガラクトース部分、およびグルコース部分が1:1:2:3のモル比で存在する、条項C1の多糖。
C6.
C7. nが約40から約60の間である、条項C6の多糖。
C8. 前記多糖の分子量が約60kDaから約100kDaの間である、条項C1の多糖。
C9. 図7に示されているとおりのNMRスペクトルを有する、条項C1の多糖。
C10. 分枝している、条項C1の多糖。
C11. グラム陽性球菌多糖である、条項C1の多糖。
C12. エンテロコッカス属多糖である、条項C11の多糖。
C13. エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)多糖である、条項C12の多糖。
C14. エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)TX0016(DO;E1794)多糖である、条項C13の多糖。
C15. エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)E0155多糖である、条項C13の多糖。
C16. 細胞表面多糖である、条項C1の多糖。
C17. 莢膜多糖である、条項C1の多糖。
C18. 免疫原性である、条項C1の多糖。
C19. オプソニン活性を有する免疫応答を誘導し得る、条項C18の多糖。
C20. 殺菌免疫応答を誘導し得る、条項C18の多糖。
C21. レジオナミン酸部分、N−アセチルガラクトサミン部分、ガラクトース部分、およびグルコース部分を含む分枝多糖。
C22. 前記レジオナミン酸部分が前記グルコース部分に結合している、条項C21の多糖。
C23. 前記レジオナミン酸部分が前記ガラクトース部分に結合している、条項C21の多糖。
C24. 前記レジオナミン酸部分が前記N−アセチルガラクトサミン部分に結合している、条項C21の多糖。
C25. 前記レジオナミン酸部分、N−アセチルガラクトサミン部分、ガラクトース部分、およびグルコース部分が1:1:2:3のモル比で存在する、条項C21の多糖。
C26.
C27. nが約40から約60の間である、条項C22の多糖。
C28. 前記多糖の分子量が約60kDaから約100kDaの間である、条項C21の多糖。
C29. 図7に示されているとおりのNMRスペクトルを有する、条項C21の多糖。
C30. グラム陽性球菌多糖である、条項C21の多糖。
C31. エンテロコッカス属多糖である、条項C30の多糖。
C32. エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)多糖である、条項C31の多糖。
C33. エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)TX0016(DO;E1794)多糖である、条項C32の多糖。
C34. エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)E0155多糖である、条項C32の多糖。
C35. 細胞表面多糖である、条項C21の多糖。
C36. 莢膜多糖である、条項C21の多糖。
C37. 免疫原性である、条項C21の多糖。
C38. オプソニン活性を有する免疫応答を誘導し得る、条項C37の多糖。
C39. 殺菌免疫応答を誘導し得る、条項C37の多糖。
C40. 化学的に合成されている、条項C21の多糖。
C41. 有効量の多糖と、薬学的に許容できる賦形剤とを含む免疫原性組成物であって、前記多糖がレジオナミン酸部分、N−アセチルガラクトサミン部分、ガラクトース部分、およびグルコース部分を含む、免疫原性組成物。
C42. 前記レジオナミン酸部分が前記グルコース部分に結合している、条項C41の多糖。
C43. 前記レジオナミン酸部分が前記ガラクトース部分に結合している、条項C41の多糖。
C44. 前記レジオナミン酸部分が前記N−アセチルガラクトサミン部分に結合している、条項C41の多糖。
C45. 前記レジオナミン酸部分、N−アセチルガラクトサミン部分、ガラクトース部分、およびグルコース部分が1:1:2:3のモル比で存在する、条項C41の組成物。
C46. 前記多糖が、
C47. nが約40から約60の間である、条項C42の組成物。
C48. 前記多糖の分子量が約60kDaから約100kDaの間である、条項C41の組成物。
C49. 前記多糖が図7に示されているとおりのNMRスペクトルを有する、条項C41の組成物。
C50. 前記多糖が分枝している、条項C41の組成物。
C51. 前記多糖がグラム陽性球菌多糖である、条項C41の組成物。
C52. 前記多糖がエンテロコッカス属多糖である、条項C51の組成物。
C53. 前記多糖がエンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)多糖である、条項C52の組成物。
C54. 前記多糖がエンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)TX0016(DO;E1794)多糖である、条項C53の組成物。
C55. 前記多糖がエンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)E0155多糖である、条項C53の組成物。
C56. 前記多糖が細胞表面多糖である、条項C41の組成物。
C57. 前記多糖が莢膜多糖である、条項C41の組成物。
C58. 前記多糖が化学的に合成されている、条項C41の組成物。
C59. 前記多糖が担体タンパク質にコンジュゲートされている、条項C41の組成物。
C60. 前記担体タンパク質が、ジフテリアトキソイド、CRM197、破傷風トキソイド、コレラトキソイド、百日咳トキソイド、大腸菌(E.coli)熱不安定性トキソイド(LT)、ニューモリシントキソイド、肺炎球菌表面タンパク質A(PspA)、肺炎球菌アドヘシンタンパク質A(PsaA)、連鎖球菌属のC5aペプチダーゼ、ヘモフィルス・インフルエンザエ(Haemophilus influenzae)タンパク質D、オボアルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン(KLH)、ウシ血清アルブミン(BSA)、ツベルクリンの精製タンパク質誘導体(PPD)、およびシュードモナス外毒素、またはその誘導体からなる群から選択されるタンパク質である、条項C59の組成物。
C61. 前記担体タンパク質がCRM197である、条項C60の組成物。
C62. アルトルロン酸部分、フコース部分、およびグルコース部分を含む単離多糖。
C63. 前記アルトルロン酸部分が前記フコース部分に結合している、条項C62の多糖。
C64. 前記フコース部分がグルコース部分に結合している、条項C62の多糖。
C65. 前記アルトルロン酸部分、フコース部分、およびグルコース部分が1:4:2のモル比で存在する、条項C62の多糖。
C66.
C67. nが約280から約300の間である、条項C63の多糖。
C68. 前記多糖の分子量が約250kDaから約350kDaの間である、条項C62の多糖。
C69. 図2に示されているとおりのNMRスペクトルを有する、条項C62の多糖。
C70. 分枝している、条項C62の多糖。
C71. グラム陽性球菌多糖である、条項C62の多糖。
C72. エンテロコッカス属多糖である、条項C71の多糖。
C73. エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)多糖である、条項C72の多糖。
C74. エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)TX0016(DO;E1794)多糖である、条項C73の多糖。
C75. エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)E0155多糖である、条項C73の多糖。
C76. 細胞表面多糖である、条項C62の多糖。
C77. 莢膜多糖である、条項C62の多糖。
C78. 免疫原性である、条項C62の多糖。
C79. オプソニン活性を有する免疫応答を誘導し得る、条項C78の多糖。
C80. 殺菌免疫応答を誘導し得る、条項C78の多糖。
C81. アルトルロン酸部分、フコース部分、およびグルコース部分を含む分枝多糖。
C82. 前記アルトルロン酸部分が前記フコース部分に結合している、条項C81の多糖。
C83. 前記フコース部分がグルコース部分に結合している、条項C81の多糖。
C84. 前記アルトルロン酸部分、フコース部分、およびグルコース部分が1:4:2のモル比で存在する、条項C81の多糖。
C85.
C86. nが約280から約300の間である、条項C85の多糖。
C87. 前記多糖の分子量が約250kDaおよび約350kDaの間である、条項C81の多糖。
C88. 図2に示されているとおりのNMRスペクトルを有する、条項C81の多糖。
C89. グラム陽性球菌多糖である、条項C81の多糖。
C90. エンテロコッカス属多糖である、条項C89の多糖。
C91. エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)多糖である、条項C90の多糖。
C92. エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)TX0016(DO;E1794)多糖である、条項C91の多糖。
C93. エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)E0155多糖である、条項C91の多糖。
C94. 細胞表面多糖である、条項C81の多糖。
C95. 莢膜多糖である、条項C81の多糖。
C96. 免疫原性である、条項C81の多糖。
C97. オプソニン活性を有する免疫応答を誘導し得る、条項C96の多糖。
C98. 殺菌免疫応答を誘導し得る、条項C96の多糖。
C99. 化学的に合成されている、条項C81の多糖。
C100. 有効量の多糖と、薬学的に許容できる賦形剤とを含む免疫原性組成物であって、前記多糖がアルトルロン酸部分、フコース部分、およびグルコース部分を含む免疫原性組成物。
C101. 前記アルトルロン酸部分が前記フコース部分に結合している、条項C100の組成物。
C102. 前記フコース部分がグルコース部分に結合している、条項C100の組成物。
C103. 前記アルトルロン酸部分、フコース部分、およびグルコース部分が1:4:2のモル比で存在する、条項C100の組成物。
C104. 前記多糖が、
C105. nが約280から約300の間である、条項C104の組成物。
C106. 前記多糖の分子量が約250kDaから約350kDaの間である、条項C100の組成物。
C107. 前記多糖が図2に示されているとおりのNMRスペクトルを有する、条項C100の組成物。
C108. 前記多糖が分枝している、条項C100の組成物。
C109. 前記多糖がグラム陽性球菌多糖である、条項C100の組成物。
C110. 前記多糖がエンテロコッカス属多糖である、条項C109の組成物。
C111. 前記多糖がエンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)多糖である、条項C110の組成物。
C112. 前記多糖がエンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)TX0016(DO;E1794)多糖である、条項C111の組成物。
C113. 前記多糖がエンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)E0155多糖である、条項C111の組成物。
C114. 前記多糖が細胞表面多糖である、条項C100の組成物。
C115. 前記多糖が莢膜多糖である、条項C100の組成物。
C116. 前記多糖が化学的に合成されている、条項C100の組成物。
C117. 前記多糖が担体タンパク質にコンジュゲートされている、条項C100の組成物。
C118. 前記担体タンパク質が、ジフテリアトキソイド、CRM197、破傷風トキソイド、コレラトキソイド、百日咳トキソイド、大腸菌(E.coli)熱不安定性トキソイド(LT)、ニューモリシントキソイド、肺炎球菌表面タンパク質A(PspA)、肺炎球菌アドヘシンタンパク質A(PsaA)、連鎖球菌属のC5aペプチダーゼ、ヘモフィルス・インフルエンザエ(Haemophilus influenzae)タンパク質D、オボアルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン(KLH)、ウシ血清アルブミン(BSA)、ツベルクリンの精製タンパク質誘導体(PPD)、およびシュードモナス外毒素、またはその誘導体からなる群から選択されるタンパク質である、条項C117の組成物。
C119. 前記担体タンパク質がCRM197である、条項C118の組成物。
C120. グリセロールホスファート部分およびグルコース部分の繰り返し単位を含む単離多糖であって、エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)TX0016(DO;E1794)多糖である単離多糖。
C121. グリセロールホスファート部分およびグルコース部分の繰り返し単位を含む単離多糖であって、エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)E0155多糖である単離多糖。
C122. 前記繰り返し単位が、
C123. nが約80から約100の間である、条項C122の多糖。
C124. 前記繰り返し単位が、
C125. nが約80から約100の間である、条項C124の多糖。
C126. 前記多糖の分子量が約10kDaから20kDaの間である、条項C120またはC121の多糖。
C127. 図6に示されているとおりのNMRスペクトルを有する、条項C120またはC121の多糖。
C128. 細胞表面多糖である、条項C120またはC121の多糖。
C129. 莢膜多糖である、条項C120またはC121の多糖。
C130. 免疫原性である、条項C120またはC121の多糖。
C131. オプソニン活性を有する免疫応答を誘導し得る、条項C130の多糖。
C132. 殺菌免疫応答を誘導し得る、条項C130の多糖。
C133. グリセロールホスファート部分およびグルコース部分の繰り返し単位を含む分枝多糖であって、エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)TX0016(DO;E1794)多糖である分枝多糖。
C134. グリセロールホスファート部分およびグルコース部分の繰り返し単位を含む分枝多糖であって、エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)E0155多糖である分枝多糖。
C135. 前記繰り返し単位が、
C136. nが約80から約100の間である、条項C135の多糖。
C137. 前記繰り返し単位が、
C138. nが約80から約100の間である、条項C137の多糖。
C139. 前記多糖の分子量が約10kDaから20kDaの間である、条項C133またはC134の多糖。
C140. 図6に示されているとおりのNMRスペクトルを有する、条項C133またはC134の多糖。
C141. 細胞表面多糖である、条項C133またはC134の多糖。
C142. 莢膜多糖である、条項C133またはC134の多糖。
C143. 免疫原性である、条項C133またはC134の多糖。
C144. オプソニン活性を有する免疫応答を誘導し得る、条項C143の多糖。
C145. 殺菌免疫応答を誘導し得る、条項C143の多糖。
C146. 化学的に合成されている、条項C133またはC134の多糖。
C147. 有効量の多糖と、薬学的に許容できる賦形剤とを含む免疫原性組成物であって、前記多糖がグリセロールホスファート部分およびグルコース部分の繰り返し単位を含み、前記多糖がエンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)TX0016(DO;E1794)多糖である免疫原性組成物。
C148. 有効量の多糖と、薬学的に許容できる賦形剤とを含む免疫原性組成物であって、前記多糖がグリセロールホスファート部分およびグルコース部分の繰り返し単位を含み、前記多糖がエンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)E0155多糖である免疫原性組成物。
C149. 前記繰り返し単位が、
C150. nが約80から約100の間である、条項C149の組成物。
C151. 前記繰り返し単位が、
C152. nが約80から約100の間である、条項C151の組成物。
C153. 前記多糖の分子量が約10kDaから20kDaの間である、条項C147またはC148の組成物。
C154. 前記多糖が、図6に示されているとおりのNMRスペクトルを有する、条項C147またはC148の組成物。
C155. 前記多糖が細胞表面多糖である、条項C147またはC148の組成物。
C156. 前記多糖が莢膜多糖である、条項C147またはC148の組成物。
C157. 前記多糖が化学的に合成されている、条項C147またはC148の組成物。
C158. 前記多糖が担体タンパク質にコンジュゲートされている、条項C147またはC148の組成物。
C159. 前記担体タンパク質が、ジフテリアトキソイド、CRM197、破傷風トキソイド、コレラトキソイド、百日咳トキソイド、大腸菌(E.coli)熱不安定性トキソイド(LT)、ニューモリシントキソイド、肺炎球菌表面タンパク質A(PspA)、肺炎球菌アドヘシンタンパク質A(PsaA)、連鎖球菌属のC5aペプチダーゼ、ヘモフィルス・インフルエンザエ(Haemophilus influenzae)タンパク質D、オボアルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン(KLH)、ウシ血清アルブミン(BSA)、ツベルクリンの精製タンパク質誘導体(PPD)、およびシュードモナス外毒素、またはその誘導体からなる群から選択されるタンパク質である、条項C158の組成物。
C160. 前記担体タンパク質がCRM197である、条項C159の組成物。
C161. −6−β−D−Fruf−2(式中、Fruはフルクトース部分である)の繰り返し単位を含む単離多糖であって、エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)TX0016(DO;E1794)多糖である単離多糖。
C162. −6−β−D−Fruf−2(式中、Fruはフルクトース部分である)の繰り返し単位を含む単離多糖であって、エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)E0155多糖である単離多糖。
C163. 前記繰り返し単位が[−6−β−D−Fruf−2]n(式中、Fruはフルクトース部分であり、nは1000〜100,000の整数である)を含む、条項C161またはC162の多糖。
C164. nが約35,000から約45,000の間である、条項C163の多糖。
C165. 前記多糖の分子量が約10,000kDaから20,000kDaの間である、条項C161またはC162の多糖。
C166. 図1に示されているとおりのNMRスペクトルを有する、条項C161またはC162の多糖。
C167. 細胞表面多糖である、条項C161またはC162の多糖。
C168. 莢膜多糖である、条項C161またはC162の多糖。
C169. 免疫原性である、条項C161またはC162の多糖。
C170. オプソニン活性を有する免疫応答を誘導し得る、条項C169の多糖。
C171. 殺菌免疫応答を誘導し得る、条項C169の多糖。
C172. −6−β−D−Fruf−2(式中、Fruはフルクトース部分である)の繰り返し単位を含む多糖であって、エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)TX0016(DO;E1794)多糖である、多糖。
C173. −6−β−D−Fruf−2(式中、Fruはフルクトース部分である)の繰り返し単位を含む多糖であって、エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)E0155多糖である、多糖。
C174. 前記繰り返し単位が、[−6−β−D−Fruf−2]n(式中、Fruはフルクトース部分であり、nは1000から100,000の整数である)を含む、条項C172またはC173の多糖。
C175. nが約35,000から約45,000の間である、条項C174の多糖。
C176. 前記多糖の分子量が約10,000kDaから20,000kDaの間である、条項C172またはC173の多糖。
C177. 図1に示されているとおりのNMRスペクトルを有する、条項C172またはC173の多糖。
C178. 細胞表面多糖である、条項C172またはC173の多糖。
C179. 莢膜多糖である、条項C172またはC173の多糖。
C180. 免疫原性である、条項C172またはC173の多糖。
C181. オプソニン活性を有する免疫応答を誘導し得る、条項C180の多糖。
C182. 殺菌免疫応答を誘導し得る、条項C180の多糖。
C183. 化学的に合成されている、条項C172またはC173の多糖。
C184. 有効量の多糖と、薬学的に許容できる賦形剤とを含む免疫原性組成物であって、前記多糖が−6−β−D−Fruf−2(式中、Fruはフルクトース部分である)の繰り返し単位を含み、前記多糖がエンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)TX0016(DO;E1794)多糖である免疫原性組成物。
C185. 有効量の多糖と、薬学的に許容できる賦形剤とを含む免疫原性組成物であって、前記多糖が−6−β−D−Fruf−2(式中、Fruはフルクトース部分である)の繰り返し単位を含み、前記多糖がエンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)E0155多糖である免疫原性組成物。
C186. 前記繰り返し単位が[−6−β−D−Fruf−2]n(式中、Fruはフルクトース部分であり、nは1000〜100,000の整数である)を含む、条項C184またはC185の組成物。
C187. nが約35,000から約45,000の間である、条項C186の組成物。
C188. 前記多糖の分子量が約10,000kDaから20,000kDaの間である、条項C184またはC185の組成物。
C189. 前記多糖が、図1に示されているとおりのNMRスペクトルを有する、条項C184またはC185の組成物。
C190. 前記多糖が細胞表面多糖である、条項C184またはC185の組成物。
C191. 前記多糖が莢膜多糖である、条項C184またはC185の組成物。
C192. 前記多糖が化学的に合成されている、条項C184またはC185の組成物。
C193. 前記多糖が担体タンパク質にコンジュゲートされている、条項C184またはC185の組成物。
C194. 前記担体タンパク質が、ジフテリアトキソイド、CRM197、破傷風トキソイド、コレラトキソイド、百日咳トキソイド、大腸菌(E.coli)熱不安定性トキソイド(LT)、ニューモリシントキソイド、肺炎球菌表面タンパク質A(PspA)、肺炎球菌アドヘシンタンパク質A(PsaA)、連鎖球菌属のC5aペプチダーゼ、ヘモフィルス・インフルエンザエ(Haemophilus influenzae)タンパク質D、オボアルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン(KLH)、ウシ血清アルブミン(BSA)、ツベルクリンの精製タンパク質誘導体(PPD)、およびシュードモナス外毒素、またはその誘導体からなる群から選択されるタンパク質である、条項C193の組成物。
C195. 前記担体タンパク質がCRM197である、条項C194の組成物。
C196. 条項C1〜C40、C62〜C99、C120〜C146、またはC161〜C183のいずれか一条項のとおりの少なくとも2種の多糖を含む組成物。
C197. 条項C1〜C40、C62〜C99、C120〜C146、またはC161〜C183のいずれかのとおりの少なくとも3種の単離多糖を含む、条項C196による組成物。
C198. 条項C1〜40のいずれか一条項のとおりの少なくとも1種の多糖と、条項C62〜C99のいずれか一条項のとおりの少なくとも1種の多糖と、条項C120〜C146のいずれか一条項のとおりの少なくとも1種の多糖と、条項C161〜C183のいずれか一条項のとおりの少なくとも1種の多糖とを含む、条項C196による組成物。
C199. 各多糖が担体分子にコンジュゲートされている、条項C196による組成物。
C200. 前記担体分子が担体タンパク質である、条項C199による組成物。
C201. 前記担体タンパク質が、ジフテリアトキソイド、CRM197、破傷風トキソイド、コレラトキソイド、百日咳トキソイド、大腸菌(E.coli)熱不安定性トキソイド(LT)、ニューモリシントキソイド、肺炎球菌表面タンパク質A(PspA)、肺炎球菌アドヘシンタンパク質A(PsaA)、連鎖球菌属のC5aペプチダーゼ、ヘモフィルス・インフルエンザエ(Haemophilus influenzae)タンパク質D、オボアルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン(KLH)、ウシ血清アルブミン(BSA)、ツベルクリンの精製タンパク質誘導体(PPD)、およびシュードモナス外毒素、またはその誘導体からなる群から選択されるタンパク質である、条項C200による組成物。
C202. 前記担体タンパク質がCRM197である、条項C201による組成物。
C203. 薬学的に許容できる賦形剤をさらに含む、条項C196による組成物。
C204. 条項C1〜C40、C62〜C99、C120〜C146、またはC161〜C183のいずれかのとおりの有効量の多糖を投与するステップを含む、哺乳動物において免疫応答を誘導する方法。
C205. 前記免疫応答がグラム陽性球菌に対するものである、条項C204の方法。
C206. 前記免疫応答がエンテロコッカス属に対するものである、条項C205の方法。
C207. 条項C1〜C40、C62〜C99、C120〜C146、またはC161〜C183のいずれかのとおりの多糖を含む有効量の組成物を投与するステップを含む、哺乳動物において免疫応答を誘導する方法。
C208. 前記組成物が、条項C41〜C61、C100〜C119、C147〜C160、またはC184〜C195のいずれかのとおりの組成物を含む、条項C207の方法。
C209. 前記免疫応答が、グラム陽性球菌に対するものである、条項C207の方法。
C210. 前記免疫応答が、エンテロコッカス属に対するものである、条項C209の方法。
C211. 条項C1〜C40、C62〜C99、C120〜C146、またはC161〜C183のいずれかのとおりの単離多糖を生産する方法であって、前記多糖を産生する能力を有するグラム陽性球菌を培養するステップと;前記細菌によって産生された多糖を収集するステップとを含む方法。
C212. 前記グラム陽性球菌がエンテロコッカス属である、条項C211の方法。
C213. 前記グラム陽性球菌がエンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)である、条項C212の方法。
C214. 前記グラム陽性球菌がエンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)TX0016(DO;E1794)である、条項C213の方法。
C215. 前記グラム陽性球菌がエンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)E0155である、条項C213の方法。
C216. 試料中のグラム陽性球菌を検出する方法であって、条項C1〜C40、C62〜C99、C120〜C146、またはC161〜C183のいずれかのとおりの多糖を接触させるステップと;抗体−抗原コンジュゲート複合体を検出するステップとを含み、前記抗体−抗原複合体が存在することは、グラム陽性球菌が前記試料中に存在することを示す、方法。
C217. 条項C1〜C40、C62〜C99、C120〜C146、またはC161〜C183のいずれかのとおりの多糖に特異的に結合する単離抗体またはその断片。
C218. 条項C217のとおりの単離抗体またはその断片を含む組成物。
C219. グラム陽性球菌を試料中で検出する方法であって、条項C217のとおりの抗体を接触させるステップと;抗体−抗原コンジュゲート複合体を検出するステップとを含み、前記抗体−抗原複合体が存在することは、グラム陽性球菌が前記試料中に存在することを示す、方法。
C220. 単離抗体またはその抗体断片を生産する方法であって、条項C1〜C40、C62〜C99、C120〜C146、またはC161〜C183のいずれかのとおりの有効量の多糖を哺乳動物に投与するステップと;前記哺乳動物によって産生された前記抗体またはその断片を単離するステップとを含む方法。
Claims (20)
- レジオナミン酸部分、N−アセチルガラクトサミン部分、ガラクトース部分、およびグルコース部分を含む、天然には存在しない多糖。
- 前記レジオナミン酸部分が前記グルコース部分に結合している、請求項1に記載の多糖。
- 前記レジオナミン酸部分が前記ガラクトース部分に結合している、請求項1に記載の多糖。
- 前記レジオナミン酸部分が前記N−アセチルガラクトサミン部分に結合している、請求項1に記載の多糖。
- 前記レジオナミン酸部分、N−アセチルガラクトサミン部分、ガラクトース部分、およびグルコース部分が1:1:2:3のモル比で存在する、請求項1に記載の多糖。
- グラム陽性球菌多糖である、請求項1に記載の多糖。
- エンテロコッカス属(Enterococcus)多糖である、請求項1に記載の多糖。
- エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)多糖である、請求項1に記載の多糖。
- エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)TX0016(DO;E1794)多糖である、請求項1に記載の多糖。
- 細胞表面多糖である、請求項1に記載の多糖。
- 莢膜多糖である、請求項1に記載の多糖。
- 免疫原性である、請求項1に記載の多糖。
- オプソニン活性を有する免疫応答を誘導し得る、請求項1に記載の多糖。
- 殺菌免疫応答を誘導し得る、請求項1に記載の多糖。
- 単離されている、請求項1に記載の多糖。
- 合成物である、請求項1に記載の多糖。
- 担体タンパク質にコンジュゲートされている、請求項1に記載の多糖。
- 前記担体タンパク質が、ジフテリアトキソイド、CRM197、破傷風トキソイド、コレラトキソイド、百日咳トキソイド、大腸菌(E.coli)熱不安定性トキソイド(LT)、ニューモリシントキソイド、肺炎球菌表面タンパク質A(PspA)、肺炎球菌アドヘシンタンパク質A(PsaA)、連鎖球菌属のC5aペプチダーゼ、ヘモフィルス・インフルエンザエ(Haemophilus influenzae)タンパク質D、オボアルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン(KLH)、ウシ血清アルブミン(BSA)、ツベルクリンの精製タンパク質誘導体(PPD)、およびシュードモナス外毒素、またはその誘導体からなる群から選択されるタンパク質である、請求項18に記載の多糖。
- 前記担体タンパク質がCRM197である、請求項18に記載の多糖。
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JP2020523323A (ja) * | 2017-06-10 | 2020-08-06 | インベントプライズ リミテッド ライアビリティ カンパニー | 改善された免疫原性及び結合活性を提供する2価又は多価コンジュゲート多糖を含む多価コンジュゲートワクチン |
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