JP2015503342A - 合成二方向植物プロモーターubi1のための構築物および方法 - Google Patents
合成二方向植物プロモーターubi1のための構築物および方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2015503342A JP2015503342A JP2014550292A JP2014550292A JP2015503342A JP 2015503342 A JP2015503342 A JP 2015503342A JP 2014550292 A JP2014550292 A JP 2014550292A JP 2014550292 A JP2014550292 A JP 2014550292A JP 2015503342 A JP2015503342 A JP 2015503342A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- promoter
- nucleic acid
- gene
- sequence
- acid construct
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 78
- 230000002457 bidirectional effect Effects 0.000 title claims description 85
- 101100036900 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) RPL40A gene Proteins 0.000 title 1
- 101150106669 UBI1 gene Proteins 0.000 title 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 318
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims abstract description 257
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 232
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims abstract description 205
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims abstract description 117
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 claims abstract description 65
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 claims abstract description 65
- 235000007244 Zea mays Nutrition 0.000 claims abstract description 53
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 claims abstract description 27
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 165
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 128
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 128
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims description 96
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims description 96
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims description 96
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 72
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 70
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 65
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 claims description 59
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 59
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims description 52
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims description 52
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 claims description 50
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 49
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 45
- 230000035897 transcription Effects 0.000 claims description 44
- 238000013518 transcription Methods 0.000 claims description 44
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 42
- 230000009466 transformation Effects 0.000 claims description 27
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 26
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 claims description 24
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 claims description 23
- 238000013519 translation Methods 0.000 claims description 22
- 241000589158 Agrobacterium Species 0.000 claims description 21
- 108700009124 Transcription Initiation Site Proteins 0.000 claims description 19
- 230000035939 shock Effects 0.000 claims description 14
- 241000746970 Zea luxurians Species 0.000 claims description 13
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 13
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 claims description 13
- 108700026226 TATA Box Proteins 0.000 claims description 10
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims description 10
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims description 7
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims description 6
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 claims description 5
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 claims description 4
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 claims description 4
- 230000017730 intein-mediated protein splicing Effects 0.000 claims description 4
- 230000006798 recombination Effects 0.000 claims description 4
- 238000005215 recombination Methods 0.000 claims description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 4
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 claims description 3
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 claims description 3
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 3
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 3
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims description 3
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 claims description 3
- 108010017070 Zinc Finger Nucleases Proteins 0.000 claims description 2
- 102000044159 Ubiquitin Human genes 0.000 abstract description 14
- 101150084750 1 gene Proteins 0.000 abstract 1
- 108091005957 yellow fluorescent proteins Proteins 0.000 description 98
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 82
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 77
- 101100478623 Arabidopsis thaliana S-ACP-DES1 gene Proteins 0.000 description 74
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 58
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 56
- 108010060309 Glucuronidase Proteins 0.000 description 53
- 102000053187 Glucuronidase Human genes 0.000 description 52
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 48
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 48
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 45
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 42
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 39
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 34
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 32
- 239000013615 primer Substances 0.000 description 30
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 25
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 description 23
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 22
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 22
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 22
- 108010051210 beta-Fructofuranosidase Proteins 0.000 description 21
- 239000001573 invertase Substances 0.000 description 21
- 235000011073 invertase Nutrition 0.000 description 21
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 19
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 18
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 18
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 18
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 18
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 16
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 16
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 16
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 16
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 16
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 16
- 108010000700 Acetolactate synthase Proteins 0.000 description 15
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 15
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 15
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 14
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 14
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 13
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 13
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 12
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 description 12
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 12
- 230000002363 herbicidal effect Effects 0.000 description 12
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 12
- FPPNZSSZRUTDAP-UWFZAAFLSA-N carbenicillin Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)C(C(O)=O)C1=CC=CC=C1 FPPNZSSZRUTDAP-UWFZAAFLSA-N 0.000 description 11
- 229960003669 carbenicillin Drugs 0.000 description 11
- UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L di(octadecanoyloxy)lead Chemical compound [Pb+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 11
- 230000006870 function Effects 0.000 description 11
- 230000030279 gene silencing Effects 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 101710134784 Agnoprotein Proteins 0.000 description 10
- 102000011632 Caseins Human genes 0.000 description 10
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 description 10
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 10
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 10
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 10
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 10
- 239000005631 2,4-Dichlorophenoxyacetic acid Substances 0.000 description 9
- 108010020183 3-phosphoshikimate 1-carboxyvinyltransferase Proteins 0.000 description 9
- 241001057636 Dracaena deremensis Species 0.000 description 9
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 9
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 9
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 description 9
- 239000005504 Dicamba Substances 0.000 description 8
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 8
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 8
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 8
- IWEDIXLBFLAXBO-UHFFFAOYSA-N dicamba Chemical compound COC1=C(Cl)C=CC(Cl)=C1C(O)=O IWEDIXLBFLAXBO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 8
- SXGZJKUKBWWHRA-UHFFFAOYSA-N 2-(N-morpholiniumyl)ethanesulfonate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)CC[NH+]1CCOCC1 SXGZJKUKBWWHRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000003155 DNA primer Substances 0.000 description 7
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 7
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 7
- 108010033272 Nitrilase Proteins 0.000 description 7
- 108700041896 Zea mays Ubi-1 Proteins 0.000 description 7
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 7
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 7
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 7
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 7
- 229920001184 polypeptide Chemical group 0.000 description 7
- 230000032361 posttranscriptional gene silencing Effects 0.000 description 7
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 7
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 7
- 238000012033 transcriptional gene silencing Methods 0.000 description 7
- 230000010474 transient expression Effects 0.000 description 7
- 108700024394 Exon Proteins 0.000 description 6
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 6
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 6
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 6
- 241000209149 Zea Species 0.000 description 6
- JFDZBHWFFUWGJE-UHFFFAOYSA-N benzonitrile Chemical compound N#CC1=CC=CC=C1 JFDZBHWFFUWGJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 description 6
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 6
- 230000000408 embryogenic effect Effects 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 6
- IAJOBQBIJHVGMQ-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4-[hydroxy(methyl)phosphoryl]butanoic acid Chemical compound CP(O)(=O)CCC(N)C(O)=O IAJOBQBIJHVGMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 239000005562 Glyphosate Substances 0.000 description 5
- 108010025815 Kanamycin Kinase Proteins 0.000 description 5
- 108010076039 Polyproteins Proteins 0.000 description 5
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 5
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 5
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 5
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 5
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 5
- 238000012226 gene silencing method Methods 0.000 description 5
- XDDAORKBJWWYJS-UHFFFAOYSA-N glyphosate Chemical compound OC(=O)CNCP(O)(O)=O XDDAORKBJWWYJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229940097068 glyphosate Drugs 0.000 description 5
- 108010002685 hygromycin-B kinase Proteins 0.000 description 5
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 5
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 5
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 5
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 5
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 5
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 5
- -1 phosphate Triester Chemical class 0.000 description 5
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 5
- 101150075980 psbA gene Proteins 0.000 description 5
- 230000005026 transcription initiation Effects 0.000 description 5
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 4
- CAAMSDWKXXPUJR-UHFFFAOYSA-N 3,5-dihydro-4H-imidazol-4-one Chemical compound O=C1CNC=N1 CAAMSDWKXXPUJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000000452 Acetyl-CoA carboxylase Human genes 0.000 description 4
- 108010016219 Acetyl-CoA carboxylase Proteins 0.000 description 4
- 241000589155 Agrobacterium tumefaciens Species 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000606545 Biplex Species 0.000 description 4
- 235000011299 Brassica oleracea var botrytis Nutrition 0.000 description 4
- 240000003259 Brassica oleracea var. botrytis Species 0.000 description 4
- 235000004977 Brassica sinapistrum Nutrition 0.000 description 4
- 101100442689 Caenorhabditis elegans hdl-1 gene Proteins 0.000 description 4
- 235000009854 Cucurbita moschata Nutrition 0.000 description 4
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 4
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 4
- 240000004713 Pisum sativum Species 0.000 description 4
- 235000010582 Pisum sativum Nutrition 0.000 description 4
- 244000062793 Sorghum vulgare Species 0.000 description 4
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 4
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 4
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 4
- GINJFDRNADDBIN-FXQIFTODSA-N bilanafos Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCP(C)(O)=O GINJFDRNADDBIN-FXQIFTODSA-N 0.000 description 4
- 108010031100 chloroplast transit peptides Proteins 0.000 description 4
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 4
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 4
- 238000003205 genotyping method Methods 0.000 description 4
- 101150054900 gus gene Proteins 0.000 description 4
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 4
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 4
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 4
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 4
- 230000010473 stable expression Effects 0.000 description 4
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 4
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 240000007124 Brassica oleracea Species 0.000 description 3
- 235000003899 Brassica oleracea var acephala Nutrition 0.000 description 3
- 235000011301 Brassica oleracea var capitata Nutrition 0.000 description 3
- 235000001169 Brassica oleracea var oleracea Nutrition 0.000 description 3
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 3
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000005561 Glufosinate Substances 0.000 description 3
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 3
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 3
- 244000299507 Gossypium hirsutum Species 0.000 description 3
- 108020004684 Internal Ribosome Entry Sites Proteins 0.000 description 3
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 3
- 238000000636 Northern blotting Methods 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 description 3
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 3
- 230000004186 co-expression Effects 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 3
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 3
- 108020002326 glutamine synthetase Proteins 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 3
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 3
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 3
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 3
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 3
- 108010058731 nopaline synthase Proteins 0.000 description 3
- 101150113864 pat gene Proteins 0.000 description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 3
- 108010082527 phosphinothricin N-acetyltransferase Proteins 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 3
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 3
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 3
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 3
- OVSKIKFHRZPJSS-UHFFFAOYSA-N 2,4-D Chemical compound OC(=O)COC1=CC=C(Cl)C=C1Cl OVSKIKFHRZPJSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940087195 2,4-dichlorophenoxyacetate Drugs 0.000 description 2
- SXERGJJQSKIUIC-UHFFFAOYSA-N 2-Phenoxypropionic acid Chemical compound OC(=O)C(C)OC1=CC=CC=C1 SXERGJJQSKIUIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101150033839 4 gene Proteins 0.000 description 2
- XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 4-Nitrophenyl Phosphate Chemical compound OP(O)(=O)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 2
- 108091000044 4-hydroxy-tetrahydrodipicolinate synthase Proteins 0.000 description 2
- 244000291564 Allium cepa Species 0.000 description 2
- 235000002732 Allium cepa var. cepa Nutrition 0.000 description 2
- 240000007087 Apium graveolens Species 0.000 description 2
- 235000015849 Apium graveolens Dulce Group Nutrition 0.000 description 2
- 235000010591 Appio Nutrition 0.000 description 2
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 2
- 241001167018 Aroa Species 0.000 description 2
- 108090000121 Aromatic-L-amino-acid decarboxylases Proteins 0.000 description 2
- 102000003823 Aromatic-L-amino-acid decarboxylases Human genes 0.000 description 2
- 235000000832 Ayote Nutrition 0.000 description 2
- 241000219310 Beta vulgaris subsp. vulgaris Species 0.000 description 2
- 241000219198 Brassica Species 0.000 description 2
- 235000014698 Brassica juncea var multisecta Nutrition 0.000 description 2
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 description 2
- 235000006008 Brassica napus var napus Nutrition 0.000 description 2
- 235000017647 Brassica oleracea var italica Nutrition 0.000 description 2
- 235000006618 Brassica rapa subsp oleifera Nutrition 0.000 description 2
- 244000188595 Brassica sinapistrum Species 0.000 description 2
- 235000002566 Capsicum Nutrition 0.000 description 2
- 241000195585 Chlamydomonas Species 0.000 description 2
- 108010035563 Chloramphenicol O-acetyltransferase Proteins 0.000 description 2
- 244000241235 Citrullus lanatus Species 0.000 description 2
- 235000012828 Citrullus lanatus var citroides Nutrition 0.000 description 2
- 241000219112 Cucumis Species 0.000 description 2
- 235000015510 Cucumis melo subsp melo Nutrition 0.000 description 2
- 240000008067 Cucumis sativus Species 0.000 description 2
- 235000010799 Cucumis sativus var sativus Nutrition 0.000 description 2
- 240000004244 Cucurbita moschata Species 0.000 description 2
- 240000001980 Cucurbita pepo Species 0.000 description 2
- 235000009852 Cucurbita pepo Nutrition 0.000 description 2
- 235000009804 Cucurbita pepo subsp pepo Nutrition 0.000 description 2
- 108010066133 D-octopine dehydrogenase Proteins 0.000 description 2
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 2
- 101710177611 DNA polymerase II large subunit Proteins 0.000 description 2
- 101710184669 DNA polymerase II small subunit Proteins 0.000 description 2
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 2
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 2
- 235000002767 Daucus carota Nutrition 0.000 description 2
- 244000000626 Daucus carota Species 0.000 description 2
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 2
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 2
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 108010070675 Glutathione transferase Proteins 0.000 description 2
- 102000005720 Glutathione transferase Human genes 0.000 description 2
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 2
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 2
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 description 2
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 description 2
- 108010003774 Histidinol-phosphatase Proteins 0.000 description 2
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 2
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 2
- 235000003228 Lactuca sativa Nutrition 0.000 description 2
- 240000008415 Lactuca sativa Species 0.000 description 2
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 2
- 240000004658 Medicago sativa Species 0.000 description 2
- 235000017587 Medicago sativa ssp. sativa Nutrition 0.000 description 2
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 2
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 2
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 2
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 2
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 2
- UOZODPSAJZTQNH-UHFFFAOYSA-N Paromomycin II Natural products NC1C(O)C(O)C(CN)OC1OC1C(O)C(OC2C(C(N)CC(N)C2O)OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)N)OC1CO UOZODPSAJZTQNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700001094 Plant Genes Proteins 0.000 description 2
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000088415 Raphanus sativus Species 0.000 description 2
- 235000006140 Raphanus sativus var sativus Nutrition 0.000 description 2
- 240000000111 Saccharum officinarum Species 0.000 description 2
- 235000007201 Saccharum officinarum Nutrition 0.000 description 2
- 241000209056 Secale Species 0.000 description 2
- 235000007238 Secale cereale Nutrition 0.000 description 2
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 2
- 239000005708 Sodium hypochlorite Substances 0.000 description 2
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 2
- 235000002597 Solanum melongena Nutrition 0.000 description 2
- 244000061458 Solanum melongena Species 0.000 description 2
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 2
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 2
- 235000011684 Sorghum saccharatum Nutrition 0.000 description 2
- 238000002105 Southern blotting Methods 0.000 description 2
- 235000009337 Spinacia oleracea Nutrition 0.000 description 2
- 244000300264 Spinacia oleracea Species 0.000 description 2
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 2
- 101000951943 Stenotrophomonas maltophilia Dicamba O-demethylase, oxygenase component Proteins 0.000 description 2
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 2
- 235000021536 Sugar beet Nutrition 0.000 description 2
- 229940100389 Sulfonylurea Drugs 0.000 description 2
- 102000006467 TATA-Box Binding Protein Human genes 0.000 description 2
- 108010044281 TATA-Box Binding Protein Proteins 0.000 description 2
- 102000017354 TATA-Box binding protein-like Human genes 0.000 description 2
- 108050005399 TATA-Box binding protein-like Proteins 0.000 description 2
- 108010022394 Threonine synthase Proteins 0.000 description 2
- 235000019714 Triticale Nutrition 0.000 description 2
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 2
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 2
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 2
- 101500015412 Zea mays Ubiquitin Proteins 0.000 description 2
- FJJCIZWZNKZHII-UHFFFAOYSA-N [4,6-bis(cyanoamino)-1,3,5-triazin-2-yl]cyanamide Chemical compound N#CNC1=NC(NC#N)=NC(NC#N)=N1 FJJCIZWZNKZHII-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N acridine Chemical compound C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3N=C21 DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101150037081 aroA gene Proteins 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 239000007844 bleaching agent Substances 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 2
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 210000003763 chloroplast Anatomy 0.000 description 2
- 230000019113 chromatin silencing Effects 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 238000010219 correlation analysis Methods 0.000 description 2
- 244000038559 crop plants Species 0.000 description 2
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 102000004419 dihydrofolate reductase Human genes 0.000 description 2
- 239000012470 diluted sample Substances 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 2
- 239000012877 elongation medium Substances 0.000 description 2
- 238000001976 enzyme digestion Methods 0.000 description 2
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 2
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 102000005396 glutamine synthetase Human genes 0.000 description 2
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 2
- 239000003630 growth substance Substances 0.000 description 2
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 2
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 2
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 2
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 108010083942 mannopine synthase Proteins 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000012269 metabolic engineering Methods 0.000 description 2
- 235000019713 millet Nutrition 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 2
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229960001914 paromomycin Drugs 0.000 description 2
- UOZODPSAJZTQNH-LSWIJEOBSA-N paromomycin Chemical compound N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](N)C[C@@H](N)[C@@H]2O)O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)N)O[C@@H]1CO UOZODPSAJZTQNH-LSWIJEOBSA-N 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 2
- 230000029553 photosynthesis Effects 0.000 description 2
- 238000010672 photosynthesis Methods 0.000 description 2
- 230000010152 pollination Effects 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 230000029279 positive regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 2
- 238000002731 protein assay Methods 0.000 description 2
- ZCCUUQDIBDJBTK-UHFFFAOYSA-N psoralen Chemical compound C1=C2OC(=O)C=CC2=CC2=C1OC=C2 ZCCUUQDIBDJBTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000015136 pumpkin Nutrition 0.000 description 2
- HNZKUZTVTVKUFH-UHFFFAOYSA-N pyrimidin-2-yl benzenecarboperoxoate Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)OOC1=NC=CC=N1 HNZKUZTVTVKUFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 2
- 230000014493 regulation of gene expression Effects 0.000 description 2
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 2
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 2
- 239000012882 rooting medium Substances 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 2
- 229960000268 spectinomycin Drugs 0.000 description 2
- UNFWWIHTNXNPBV-WXKVUWSESA-N spectinomycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](NC)[C@@H](O)[C@H]([C@@H]([C@H]1O1)O)NC)[C@]2(O)[C@H]1O[C@H](C)CC2=O UNFWWIHTNXNPBV-WXKVUWSESA-N 0.000 description 2
- 235000020354 squash Nutrition 0.000 description 2
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical compound CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- YWBFPKPWMSWWEA-UHFFFAOYSA-O triazolopyrimidine Chemical compound BrC1=CC=CC(C=2N=C3N=CN[N+]3=C(NCC=3C=CN=CC=3)C=2)=C1 YWBFPKPWMSWWEA-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000228158 x Triticosecale Species 0.000 description 2
- JYEUMXHLPRZUAT-UHFFFAOYSA-N 1,2,3-triazine Chemical compound C1=CN=NN=C1 JYEUMXHLPRZUAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NDUPDOJHUQKPAG-UHFFFAOYSA-M 2,2-Dichloropropanoate Chemical compound CC(Cl)(Cl)C([O-])=O NDUPDOJHUQKPAG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010041188 2,4-dichlorophenoxyacetic acid monooxygenase Proteins 0.000 description 1
- GOCUAJYOYBLQRH-UHFFFAOYSA-N 2-(4-{[3-chloro-5-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]oxy}phenoxy)propanoic acid Chemical compound C1=CC(OC(C)C(O)=O)=CC=C1OC1=NC=C(C(F)(F)F)C=C1Cl GOCUAJYOYBLQRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YUVKUEAFAVKILW-UHFFFAOYSA-N 2-(4-{[5-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl]oxy}phenoxy)propanoic acid Chemical compound C1=CC(OC(C)C(O)=O)=CC=C1OC1=CC=C(C(F)(F)F)C=N1 YUVKUEAFAVKILW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OOLBCHYXZDXLDS-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2,4-dichlorophenoxy)phenoxy]propanoic acid Chemical compound C1=CC(OC(C)C(O)=O)=CC=C1OC1=CC=C(Cl)C=C1Cl OOLBCHYXZDXLDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZBMRKNMTMPPMMK-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4-[hydroxy(methyl)phosphoryl]butanoic acid;azane Chemical compound [NH4+].CP(O)(=O)CCC(N)C([O-])=O ZBMRKNMTMPPMMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZTTKDUXKVPEXCG-UHFFFAOYSA-N 2-cyano-3-cyclopropyl-1-(2-mesyl-4-trifluoromethylphenyl)propan-1,3-dione Chemical compound CS(=O)(=O)C1=CC(C(F)(F)F)=CC=C1C(=O)C(C#N)C(=O)C1CC1 ZTTKDUXKVPEXCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UPMXNNIRAGDFEH-UHFFFAOYSA-N 3,5-dibromo-4-hydroxybenzonitrile Chemical compound OC1=C(Br)C=C(C#N)C=C1Br UPMXNNIRAGDFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VXGRJERITKFWPL-UHFFFAOYSA-N 4',5'-Dihydropsoralen Natural products C1=C2OC(=O)C=CC2=CC2=C1OCC2 VXGRJERITKFWPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020003589 5' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 1
- QUTYKIXIUDQOLK-PRJMDXOYSA-N 5-O-(1-carboxyvinyl)-3-phosphoshikimic acid Chemical compound O[C@H]1[C@H](OC(=C)C(O)=O)CC(C(O)=O)=C[C@H]1OP(O)(O)=O QUTYKIXIUDQOLK-PRJMDXOYSA-N 0.000 description 1
- PRZRAMLXTKZUHF-UHFFFAOYSA-N 5-oxo-n-sulfonyl-4h-triazole-1-carboxamide Chemical compound O=S(=O)=NC(=O)N1N=NCC1=O PRZRAMLXTKZUHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FVFVNNKYKYZTJU-UHFFFAOYSA-N 6-chloro-1,3,5-triazine-2,4-diamine Chemical compound NC1=NC(N)=NC(Cl)=N1 FVFVNNKYKYZTJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WBFYVDCHGVNRBH-UHFFFAOYSA-N 7,8-dihydropteroic acid Chemical compound N=1C=2C(=O)NC(N)=NC=2NCC=1CNC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 WBFYVDCHGVNRBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000104 Actin-related protein 3 Proteins 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 108010021809 Alcohol dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 102100034033 Alpha-adducin Human genes 0.000 description 1
- 241000219194 Arabidopsis Species 0.000 description 1
- 108010055400 Aspartate kinase Proteins 0.000 description 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 1
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 1
- 238000009020 BCA Protein Assay Kit Methods 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108010077805 Bacterial Proteins Proteins 0.000 description 1
- 235000017166 Bambusa arundinacea Nutrition 0.000 description 1
- 235000017491 Bambusa tulda Nutrition 0.000 description 1
- 102100026189 Beta-galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 1
- 235000011331 Brassica Nutrition 0.000 description 1
- 235000010149 Brassica rapa subsp chinensis Nutrition 0.000 description 1
- 235000000536 Brassica rapa subsp pekinensis Nutrition 0.000 description 1
- 241000499436 Brassica rapa subsp. pekinensis Species 0.000 description 1
- 239000005489 Bromoxynil Substances 0.000 description 1
- WYBFVHADJKMGQD-UHFFFAOYSA-N C1=CC=C(C=C1)C#CC2=CC=CC=C2[P+](=O)[O-] Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C#CC2=CC=CC=C2[P+](=O)[O-] WYBFVHADJKMGQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 102100027668 Carboxy-terminal domain RNA polymerase II polypeptide A small phosphatase 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710134395 Carboxy-terminal domain RNA polymerase II polypeptide A small phosphatase 1 Proteins 0.000 description 1
- 235000009467 Carica papaya Nutrition 0.000 description 1
- 240000006432 Carica papaya Species 0.000 description 1
- 235000010523 Cicer arietinum Nutrition 0.000 description 1
- 244000045195 Cicer arietinum Species 0.000 description 1
- 101710094648 Coat protein Proteins 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 241000218631 Coniferophyta Species 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- 108030005585 Cyanamide hydratases Proteins 0.000 description 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 1
- 102000052510 DNA-Binding Proteins Human genes 0.000 description 1
- 230000004568 DNA-binding Effects 0.000 description 1
- 101710096438 DNA-binding protein Proteins 0.000 description 1
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 1
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 239000005506 Diclofop Substances 0.000 description 1
- 108010028143 Dioxygenases Proteins 0.000 description 1
- 102000016680 Dioxygenases Human genes 0.000 description 1
- 208000035240 Disease Resistance Diseases 0.000 description 1
- 101100491986 Emericella nidulans (strain FGSC A4 / ATCC 38163 / CBS 112.46 / NRRL 194 / M139) aromA gene Proteins 0.000 description 1
- 102100031780 Endonuclease Human genes 0.000 description 1
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 101100437498 Escherichia coli (strain K12) uidA gene Proteins 0.000 description 1
- 108091092566 Extrachromosomal DNA Proteins 0.000 description 1
- 108010074122 Ferredoxins Proteins 0.000 description 1
- 102000001390 Fructose-Bisphosphate Aldolase Human genes 0.000 description 1
- 108010068561 Fructose-Bisphosphate Aldolase Proteins 0.000 description 1
- 101150062467 GAT gene Proteins 0.000 description 1
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 1
- 102100021181 Golgi phosphoprotein 3 Human genes 0.000 description 1
- 102000002812 Heat-Shock Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010004889 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 101000799076 Homo sapiens Alpha-adducin Proteins 0.000 description 1
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 101100288095 Klebsiella pneumoniae neo gene Proteins 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- 108091026898 Leader sequence (mRNA) Proteins 0.000 description 1
- 241000209510 Liliopsida Species 0.000 description 1
- 241000234435 Lilium Species 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- 241000218922 Magnoliophyta Species 0.000 description 1
- 101710125418 Major capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 108091027974 Mature messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 239000005578 Mesotrione Substances 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 108010074633 Mixed Function Oxygenases Proteins 0.000 description 1
- 102000008109 Mixed Function Oxygenases Human genes 0.000 description 1
- 240000005561 Musa balbisiana Species 0.000 description 1
- 235000018290 Musa x paradisiaca Nutrition 0.000 description 1
- 101710141454 Nucleoprotein Proteins 0.000 description 1
- 101710089395 Oleosin Proteins 0.000 description 1
- 241000233855 Orchidaceae Species 0.000 description 1
- 241000266501 Ormosia ormondii Species 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 108090000417 Oxygenases Proteins 0.000 description 1
- 102000004020 Oxygenases Human genes 0.000 description 1
- 241001520808 Panicum virgatum Species 0.000 description 1
- 239000006002 Pepper Substances 0.000 description 1
- 102000005877 Peptide Initiation Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010044843 Peptide Initiation Factors Proteins 0.000 description 1
- 101100056487 Petunia hybrida EPSPS gene Proteins 0.000 description 1
- 240000007377 Petunia x hybrida Species 0.000 description 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- 241001417958 Phialidium Species 0.000 description 1
- 108030002884 Phosphinothricin acetyltransferases Proteins 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 108010060806 Photosystem II Protein Complex Proteins 0.000 description 1
- 244000082204 Phyllostachys viridis Species 0.000 description 1
- 235000015334 Phyllostachys viridis Nutrition 0.000 description 1
- 235000016761 Piper aduncum Nutrition 0.000 description 1
- 240000003889 Piper guineense Species 0.000 description 1
- 235000017804 Piper guineense Nutrition 0.000 description 1
- 235000008184 Piper nigrum Nutrition 0.000 description 1
- 241000758706 Piperaceae Species 0.000 description 1
- 241000985694 Polypodiopsida Species 0.000 description 1
- 101710096655 Probable acetoacetate decarboxylase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101710083689 Probable capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 101150090155 R gene Proteins 0.000 description 1
- 102000009572 RNA Polymerase II Human genes 0.000 description 1
- 108010009460 RNA Polymerase II Proteins 0.000 description 1
- 108091030071 RNAI Proteins 0.000 description 1
- 101000629598 Rattus norvegicus Sterol regulatory element-binding protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 108010003581 Ribulose-bisphosphate carboxylase Proteins 0.000 description 1
- 108091081021 Sense strand Proteins 0.000 description 1
- 241000581524 Sesame mosaic virus Species 0.000 description 1
- 241000187391 Streptomyces hygroscopicus Species 0.000 description 1
- 108010043934 Sucrose synthase Proteins 0.000 description 1
- 239000005618 Sulcotrione Substances 0.000 description 1
- 241001420369 Thosea Species 0.000 description 1
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 1
- 240000000260 Typha latifolia Species 0.000 description 1
- 235000009754 Vitis X bourquina Nutrition 0.000 description 1
- 235000012333 Vitis X labruscana Nutrition 0.000 description 1
- 240000006365 Vitis vinifera Species 0.000 description 1
- 235000014787 Vitis vinifera Nutrition 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 125000000218 acetic acid group Chemical group C(C)(=O)* 0.000 description 1
- 108020002494 acetyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 102000005421 acetyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 239000011425 bamboo Substances 0.000 description 1
- 101150103518 bar gene Proteins 0.000 description 1
- 238000002869 basic local alignment search tool Methods 0.000 description 1
- 238000010009 beating Methods 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 238000010256 biochemical assay Methods 0.000 description 1
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 description 1
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 1
- 150000005693 branched-chain amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N carbonic acid monoamide Natural products NC(O)=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005859 cell recognition Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 1
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 1
- 239000012881 co-culture medium Substances 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- OILAIQUEIWYQPH-UHFFFAOYSA-N cyclohexane-1,2-dione Chemical compound O=C1CCCCC1=O OILAIQUEIWYQPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J diphosphate(4-) Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 1
- NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-N dithiophosphoric acid Chemical compound OP(O)(S)=S NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 230000009088 enzymatic function Effects 0.000 description 1
- 230000010502 episomal replication Effects 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 108010021843 fluorescent protein 583 Proteins 0.000 description 1
- 230000009368 gene silencing by RNA Effects 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- BRZYSWJRSDMWLG-CAXSIQPQSA-N geneticin Natural products O1C[C@@](O)(C)[C@H](NC)[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C(C)O)O2)N)[C@@H](N)C[C@H]1N BRZYSWJRSDMWLG-CAXSIQPQSA-N 0.000 description 1
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 125000003106 haloaryl group Chemical group 0.000 description 1
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001744 histochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000005462 in vivo assay Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- CTAPFRYPJLPFDF-UHFFFAOYSA-N isoxazole Chemical compound C=1C=NOC=1 CTAPFRYPJLPFDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 description 1
- 238000001638 lipofection Methods 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- KPUREKXXPHOJQT-UHFFFAOYSA-N mesotrione Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC(S(=O)(=O)C)=CC=C1C(=O)C1C(=O)CCCC1=O KPUREKXXPHOJQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N methylphosphonic acid Chemical compound CP(O)(O)=O YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 description 1
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 238000007431 microscopic evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- PUPNJSIFIXXJCH-UHFFFAOYSA-N n-(4-hydroxyphenyl)-2-(1,1,3-trioxo-1,2-benzothiazol-2-yl)acetamide Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1NC(=O)CN1S(=O)(=O)C2=CC=CC=C2C1=O PUPNJSIFIXXJCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091027963 non-coding RNA Proteins 0.000 description 1
- 102000042567 non-coding RNA Human genes 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 235000021232 nutrient availability Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 229940124276 oligodeoxyribonucleotide Drugs 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 125000001476 phosphono group Chemical group [H]OP(*)(=O)O[H] 0.000 description 1
- PTMHPRAIXMAOOB-UHFFFAOYSA-N phosphoramidic acid Chemical compound NP(O)(O)=O PTMHPRAIXMAOOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940061584 phosphoramidic acid Drugs 0.000 description 1
- OJMIONKXNSYLSR-UHFFFAOYSA-N phosphorous acid Chemical compound OP(O)O OJMIONKXNSYLSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 1
- 238000004161 plant tissue culture Methods 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 230000000379 polymerizing effect Effects 0.000 description 1
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 description 1
- 230000004952 protein activity Effects 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000008844 regulatory mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000007423 screening assay Methods 0.000 description 1
- 230000005562 seed maturation Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000012192 staining solution Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- PQTBTIFWAXVEPB-UHFFFAOYSA-N sulcotrione Chemical compound ClC1=CC(S(=O)(=O)C)=CC=C1C(=O)C1C(=O)CCCC1=O PQTBTIFWAXVEPB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124530 sulfonamide Drugs 0.000 description 1
- 150000003456 sulfonamides Chemical class 0.000 description 1
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- YROXIXLRRCOBKF-UHFFFAOYSA-N sulfonylurea Chemical class OC(=N)N=S(=O)=O YROXIXLRRCOBKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001360 synchronised effect Effects 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940113082 thymine Drugs 0.000 description 1
- KJAMZCVTJDTESW-UHFFFAOYSA-N tiracizine Chemical compound C1CC2=CC=CC=C2N(C(=O)CN(C)C)C2=CC(NC(=O)OCC)=CC=C21 KJAMZCVTJDTESW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003104 tissue culture media Substances 0.000 description 1
- 230000002463 transducing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 1
- 150000003918 triazines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003852 triazoles Chemical class 0.000 description 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 1
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 1
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 1
- 230000017260 vegetative to reproductive phase transition of meristem Effects 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
- 108700026215 vpr Genes Proteins 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/415—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8216—Methods for controlling, regulating or enhancing expression of transgenes in plant cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8216—Methods for controlling, regulating or enhancing expression of transgenes in plant cells
- C12N15/8222—Developmentally regulated expression systems, tissue, organ specific, temporal or spatial regulation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
- C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
- C12N15/8279—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance
- C12N15/8286—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance for insect resistance
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/10—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in agriculture
- Y02A40/146—Genetically Modified [GMO] plants, e.g. transgenic plants
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Insects & Arthropods (AREA)
- Botany (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Description
超高厳密性:5×SSCバッファー中65℃で16時間のハイブリダイゼーション;2×SSCバッファー中室温でそれぞれ15分間の洗浄2回;および0.5×SSCバッファー中65℃でそれぞれ20分間の洗浄を2回。
高厳密性:5×〜6×SSCバッファー中65〜70℃で16〜20時間のハイブリダイゼーション;2×SSCバッファー中室温でそれぞれ5〜20分間の洗浄2回;および1×SSCバッファー中55〜70℃でそれぞれ30分間の洗浄を2回。
中程度厳密性:6×SSCバッファー中室温から55℃で16〜20時間のハイブリダイゼーション;2×〜3×SSCバッファー中室温から55℃でそれぞれ20〜30分間の洗浄を少なくとも2回。
A.除草剤イミダゾリノンまたはスルホニル尿素に対するアセトヒドロキシ酸シンターゼ(AHAS)およびアセト乳酸シンターゼ(ALS)の抵抗性/耐性。AHASおよび変異体の遺伝子および変異体は、米国特許第4,761,373号、米国特許第5,304,732号、米国特許第5,331,107号、米国特許第5,853,973号、および米国特許第5,928,937号に開示されている。ALSの遺伝子および変異体は米国特許第5,013,659号および米国特許第5,141,870号に開示されている。
B.除草剤シクロヘキサンジオンおよび/またはアリールオキシフェノキシプロパン酸(Haloxyfop、Diclofop、Fenoxyprop、Fluazifop、Quizalopfopを含む)に対するアセチル補酵素Aカルボキシラーゼ(ACCas)の抵抗性/耐性遺伝子は米国特許第5,162,602号および米国特許第5,498,544号に記載されている。
C.グルホサート抵抗性/耐性の遺伝子。5−エノールピルビル−3−ホスホシキミ酸シンターゼ(ES3Pシンターゼ)の遺伝子は米国特許第4,769,601号に記載されている。5−エノールピルビルシキミ酸−3−リン酸シンターゼ(EPSPS)および変異体の遺伝子は米国特許第4,940,835号、米国特許第5,188,642号、米国特許第5,310,667号、米国特許第5,633,435号、米国特許第5,633,448号、および米国特許第6,566,587号に記載されている。
D.グルホシネート(ビアラホス、ホスフィノトリシン(PPT))抵抗性/耐性の遺伝子。ホスフィノトリシンアセチルトランスフェラーゼ(Pat)の遺伝子は米国特許第5,273,894号、米国特許第5,276,268号、および米国特許第5,550,318号に記載されており、ビアラホス抵抗性の遺伝子(Bar)は米国特許第5,561,236号、および米国特許第5,646,024号、米国特許第5,648,477号、および米国特許第7,112,665号に記載されている。グルタミンシンテターゼ(GS)の遺伝子は米国特許第4,975,372号および欧州特許出願EP0333033 A1に記載されている。
E.除草剤イソオキサゾール、ジケトニトリル、および/またはスルコトリオンおよびメソトリオンを含むトリケトンに対するヒドロキシフェニルピルビン酸ジオキシゲナーゼ(HPPD)の抵抗性/耐性遺伝子は、米国特許第6,268,549号および米国特許第6,069,115号に記載されている。
F.2,4−D抵抗性/耐性の遺伝子。2,4−D−モノオキシゲナーゼの遺伝子は米国特許第6,100,446号および米国特許第6,153,401号に記載されている。2,4−D抵抗性/耐性の追加の遺伝子はUS2009/0093366およびWO2007/053482に開示されている。
G.除草剤イミダゾールおよび/またはトリアゾールに対するイミダゾールグリセロールリン酸デヒドラターゼ(IGPD)の遺伝子は米国特許第5,541,310号に記載されている。除草剤Dicambaに対するDicamba分解酵素(オキシゲナーゼ、フェレドキシン、およびレダクターゼ)の遺伝子は米国特許第7,022,896号および米国特許第7,105,724号に開示されている。
H.トリアジン(psbAおよび1s+遺伝子)またはベンゾニトリル(ニトリラーゼ遺伝子)を含む、光合成を阻害する除草剤の遺伝子。例えば、変異psbA遺伝子をコードするプラスミドでのクラミドモナス(Chlamydomonas)の形質転換を開示しているPrzibilaら、Plant Cell 3:169 (1991)を参照されたい。ニトリラーゼ遺伝子のヌクレオチド配列は米国特許第4,810,648号に開示されており、これらの遺伝子を含有するDNA分子はATCC受託番号53435、ATCC受託番号67441、およびATCC受託番号67442下で入手可能である。グルタチオンS−トランスフェラーゼをコードするDNAのクローニングおよび発現はHayesら、Biochem. J. 285:173 (1992)により記載されている。
[実施例]
アグロバクテリウム・ツメファシエンス(Agrobacterium tumefaciens)の形質転換:pDAB108706バイナリーベクターはアグロバクテリウム・ツメファシエンス(Agrobacterium tumefaciens)株DAt13192ターナリー(米国特許仮出願第61/368965号)中に形質転換される。細菌コロニーは単離され、バイナリープラスミドDNAは単離され制限酵素消化を介して確かめられる。
トウモロコシユビキチン−1プロモーター(Ubi1)の例となる概略図は図1に示されている。Ubi1プロモーターはトウモロコシからクローニングされる。Ubi1プロモーターを含有するプラスミドは、高忠実度PCR増幅システムを使用してPCR増幅される。トウモロコシUbi1プロモーターのおよそ200nt領域がトウモロコシ(Zea mays)Ubi1最小コアプロモーター(minUbi1P)(配列番号1)として同定される。次に、配列番号1のminUbi1Pは、当技術分野で一般的に知られているクローニング法を使用して、トウモロコシ(Zea mays)ユビキチン−1エクソン(ZmUbi1エクソン)およびトウモロコシ(Zea mays)ユビキチン−1イントロン(ZmUbi1イントロン)を含むポリヌクレオチド(配列番号2)に付加され、配列番号3のポリヌクレオチドを作製する。次に、得られたポリヌクレオチドは、トウモロコシUbi1プロモーター(Ubi1上流調節配列(URS);配列番号4)を含む)を含む核酸の上流に逆配向でクローニングされて、配列番号5の合成二方向Ubi1プロモーターを作製する(例えば、図5参照)。
pDAB108706で形質転換されたトウモロコシ(Zea mays)胚におけるYFPおよびGUS一過性発現の代表的例が描かれている。二方向ZmUbi1プロモーターの両側は作動可能に連結されたyfpおよびGUSコード配列の強力な発現を駆動することができる。YFP発現レベルはGUS発現レベルに匹敵する。これらの所見により、二方向ZmUbi1プロモーターの両側が生物学的に機能的であることが確かめられる。さらに、合成二方向Ubi1プロモーターのminUbi1Pエレメントは、yfpコード配列を駆動する一方向ZmUbi1プロモーターを含有したバイナリープラスミド(pDAB101556)で形質転換されたトウモロコシ(Zea mays)カルスと比べた場合、類似する発現レベルでYFPを発現することができる。YFPまたはGUSの発現は、バイナリー構築物で形質転換されておらず、yfpまたはGUSコード配列を含有しない負の対照未熟胚では検出されない。
yfpコード配列を含有するpDAB108706バイナリーベクターで安定的に形質転換されているトウモロコシ(Zea mays)カルス細胞の画像を観察することができる。これらの細胞は、選択2培地上でずっと増殖しているトウモロコシ(Z.mays)胚から得られる。二方向ZmUbi1プロモーターはyfpコード配列の強力な発現を駆動することができる。これらの結果により、二方向ZmUbi1プロモーターのMin−UbiP1最小プロモーターエレメントは、安定的に形質転換されたトウモロコシ(Z.mays)カルス細胞においてレポーター遺伝子を発現することができることが確かめられる。YFPタンパク質の発現レベルは、yfpコード配列を駆動する一方向ZmUbi1プロモーターを含有した対照バイナリーベクター(pDAB101556)で形質転換されたトウモロコシ(Z.mays)カルスにおけるYFP発現と比べると、類似している。YFPまたはGUSの発現は、バイナリー構築物で形質転換されておらず、yfpまたはGUSコード配列を含有しない負の対照カルスでは検出されない。
トウモロコシ(Zea mays)胚は二方向ZmUbi1プロモーター、pDAB108706を含有するバイナリーベクターで形質転換されており、他の植物は対照バイナリーベクター、pDAB101556で形質転換されている。両セットのトウモロコシ(Z.mays)植物のゲノム内のyfpトランス遺伝子の存在は、加水分解プローブアッセイを介して確認される。カルスから成長した安定的に形質転換されたトランスジェニックトウモロコシ(Z.mays)小植物が得られ、分析されて、pDAB108706バイナリーベクターおよびpDAB101556対照バイナリーベクター由来の低コピー数(1〜2コピー)の完全長T鎖インサートを含有した事象を同定する。同定された小植物は温室に進めて栽培される。
低コピーT−DNA数のバイナリープラスミドpDAB108706を含有した全植物および低コピー数の対照バイナリープラスミドpDAB101556を含有した植物は温室で栽培される。pDAB108706で形質転換されたトウモロコシ(Z.mays)胚から得られるトランスジェニックT0トウモロコシ植物の葉および根の組織におけるYFPの安定な発現の代表的例が解析される。二方向ZmUbi1プロモーターは、葉組織でも根組織でもyfpコード配列の強力な発現を駆動させることができる。顕微鏡解析により、二方向ZmUbi1プロモーター中のMin−UbiP1最小プロモーターエレメントが、yfpコード配列の発現を駆動させる一方向ZmUbi1プロモーターを含有する対照バイナリープラスミド(pDAB101556)を駆動させることができることも確かめられる。これらの対照植物は、葉組織および根組織における安定なYFP発現も示している。
全可溶性タンパク質:形質転換されたT0トウモロコシ植物は、V6発生段階で試料採取された。最も若い折り畳まれていない葉由来の4つの葉パンチの全てがマトリックスチューブに試料採取され、マトリックスボックスに置かれた。負の対照として、V6発生段階の2つの非形質転換B104トウモロコシ植物の4つの葉パンチはマトリックスチューブに試料採取された。鋼製ビーズが試料と一緒にマトリックスチューブに入れられ、次に400μLのPBSTがそれぞれのチューブに添加された。チューブは蓋をされ、タンパク質はKleco(商標)組織粉砕機内、5分間1500rpmでビーズ叩打により抽出された。デブリは遠心分離によりペレット化された。
プラスミドpDAB105803構築物は、単一トウモロコシ(Zea mays)ユビキチン−1二方向プロモーターにより駆動される4遺伝子カセットスタック(aad1−2a−Phiyfpおよびcry34−2a−cry35)を作製するための開始プラスミドとして使用される。プラスミドpDAB105803の代表的マップは図16に示されており、これにはトウモロコシ(Zea mays)ユビキチン−1二方向プロモーターが含有される。
プラスミドpDAB105803構築物を使用して、単一トウモロコシ(Zea mays)ユビキチン−1二方向プロモーターにより駆動される第二の4遺伝子カセットスタック(Phiyfp−2a−aad1およびcry34−2a−cry35)を作製する。プラスミドpDAB105844由来のPhiyfp−2a−aad1断片は、当技術分野で一般に知られているクローニング方法を使用して、プラスミドpDAB105803のBamHIおよびSacI切断ベクター骨格にクローニングされる。これにより、中間プラスミドpDAB105845が生じた(図20)。プラスミドpDAB105840から得られるNotI/XbaI消化cry34(8V6)−2a−cry35断片は、プラスミドpDAB105845のNotI/SpeI部位の間にクローニングされて、プラスミドpDAB105846を構築する(図21)。プラスミドpDAB105846は、ZmUbi1二方向プロモーターのそれぞれの側にcry34(8V6)−2a−cry35およびPhiyfp−2a−aad1遺伝子カセットを含有する。
pDAB108717およびpDAB108718バイナリーベクターは、アグロバクテリウム・ツメファシエンス(Agrobacterium tumefaciens)ターナリー株DAt13192内に形質転換される(米国特許仮出願第61/368965号参照)。細菌コロニーは単離され、バイナリープラスミドDNAは抽出され、制限酵素消化により検証される。
穂減菌および胚単離:トウモロコシ未熟胚を入手するため、トウモロコシ(Zea mays)(c.v.B104)の植物が温室で栽培され、自家または兄弟姉妹受粉されて穂を産生する。穂は受粉のおよそ9〜12日後に収穫される。実験当日、穂は、5%次亜塩素酸ナトリウムを含有する家庭用漂白剤の20%溶液中に浸漬され、20〜30分振盪され、続いて減菌水で3回すすがれることにより表面減菌される。減菌後、未熟接合体胚(1.5〜2.2mm)はそれぞれの穂から無菌で解体され、液体感染培養液(LS Basal Medium、4.43g/L;N6 Vitamin Solution[1000X]、1.00mL/L;L−プロリン、700.0mg/L;スクロース、68.5g/L;グルコース、36.0g/L;2,4−D、1.50mg/L)を含有するマイクロ遠心チューブに無作為に分配される。所与のセットの実験では、2〜3穂からのプールされた胚は処置ごとに使用される。
pDAB108717で形質転換されたトウモロコシ(Zea mays)胚由来のPhiyfpの一過性発現が実施される。二方向ZmUbi1プロモーターは、非形質転換胚がいかなるPhiyfp蛍光も示さない、aad1−2a−Phiyfp遺伝子発現カセットからPhiyfpを発現することができる。予想されるレベルのYFP/Phiyfp発現を示された、単一Phiyfpコード配列を駆動する一方向トウモロコシ(Zea mays)(Zm)Ubi1プロモーターを含有するバイナリープラスミドpDAB105748(図15)で形質転換されたトウモロコシ(Zea mays)胚から、類似するレベルのPhiyfp発現を観察することができる。Phiyfpの一過性発現は、二方向ZmUbi1プロモーターがPhiyfp−2a−aad1遺伝子発現カセットからPhiyfpを発現することができる、pDAB108718で形質転換されたトウモロコシ(Zea mays)胚から観察することができる。
二方向ZmUbi1プロモーターにより駆動される安定的に形質転換されたトウモロコシ(Zea mays)カルスにおけるPhiyfp発現:aad1−2a−Phiyfp遺伝子発現カセットを含有するpDAB108717バイナリーベクターで形質転換されたトウモロコシ(Zea mays)胚は、良好なPhiyfp発現を示す。二方向ZmUbi1プロモーターはPhiyfpの強力な発現を駆動することができる。これらの結果から、二方向ZmUbi1プロモーターのMin−UbiP1最小プロモーターエレメントがレポーター遺伝子、例えば、PhiyfpまたはYFPを発現することができることが確認される。Phiyfpタンパク質の発現レベルは、Phiyfpコード配列を駆動する一方向ZmUbi1プロモーターを含有した対照バイナリーベクター(pDAB105748)で形質転換されたトウモロコシ(Zea mays)カルスと比べると、類似している。Phiyfpの発現は、バイナリー構築物で形質転換されておらずPhiyfpコード配列を含有していなかった負の対照カルスでは検出されない。
リアルタイムTaqMan(商標)PCRを使用するトランス遺伝子コピー数推定:トウモロコシ(Zea mays)植物は二方向ZmUbi1プロモーターを含有するバイナリーベクター、pDAB108717およびpDAB108718で形質転換され、他の植物は対照バイナリーベクター、pDAB105748で形質転換される。pDAB108717およびpDAB108718へのトランスジェニックなトウモロコシ(Z.mays)植物のゲノム内のコード配列(Phiyfp、aad1、cry34、cry35、Pat)の存在は、TaqMan加水分解プローブアッセイにより確かめられた。対照ベクター、pDAB105748へのトランスジェニックな植物は、Phiyfp配列の存在について分析された。カルスから成長した安定的に形質転換されたトランスジェニックトウモロコシ(Z.mays)小植物が得られ、分析されて、pDAB108717およびpDAB108718バイナリーベクター、ならびにpDAB105748対照バイナリーベクター由来の低コピー数(1〜2コピー)の完全長T鎖インサートを含有する事象を同定した。確認された小植物は温室に進めて栽培される。
二方向ZmUbi1プロモーターにより駆動されるトウモロコシ(Zea mays)T0植物における安定なPhiyfp発現:aad1−2a−Phiyfp遺伝子発現カセットを含有するpDAB108717バイナリーベクターで形質転換されたトウモロコシ(Zea mays)胚を観察することができる。二方向ZmUbi1プロモーターは、苗条組織でも根組織でもPhiyfpの強力な発現を駆動させることができる。この結果から、二方向ZmUbi1プロモーターのMin−UbiP1最小プロモーターエレメントは、レポーター遺伝子、例えば、Phiyfpまたは2A配列を使用してaad1とバイシストロン性に融合されているYFPを発現することができることが確認される。Phiyfpタンパク質の発現レベルは、Phiyfpコード配列を駆動する一方向ZmUbi1プロモーターを含有する対照バイナリーベクター(pDAB105748)で形質転換されたトウモロコシ(Z.mays)胚に類似している。Phiyfpの発現は、バイナリー構築物で形質転換されておらずPhiyfpコード配列を含有していない負の対照植物では検出されない。
植物は、1鋼製ビーズ、続いてPBST+0.5%BSA(0.6mL)が添加されている1.5mL円錐チューブ中のマトリックスボックスのカラム1〜10に試料採取される。次に、このボックスは、Geno Grinderにおいて1500rpmで5分間試料粉砕のためにビーズ叩打され、次に4℃で7分間、3700rpmで遠心分離される。
二方向トウモロコシ(Zea mays)ユビキチン1プロモーター構築物(pDAB108717)により駆動されるトウモロコシT0植物のタンパク質解析:cry34−2a−cry35およびaad1−2a−Phiyfpを含有するpDAB108717で形質転換されたトウモロコシ(Zea mays)胚から得られた11のトランスジェニックT0トウモロコシ植物の代表的ELISA解析は表11にまとめられている。二方向ZmUbi1プロモーターは、葉においてCry34とCry35コード配列の両方の強力な発現を示している。驚くべきことに、タンパク質データは、一方向ZmUbi1駆動構築物と比べて、二方向構築物pDAB108717からCry34の最大4倍高い発現を実証している。一方向ZmUbi1駆動構築物と比べて、Cry35およびAAD1タンパク質の類似の8〜10倍高い発現も二方向構築物pDAB108717から予想外に観察される。これらの所見により、構築物pDAB108717中の単一Zmユビキチン1二方向プロモーターは、それぞれのコード配列が独立したZmUbiプロモーターにより駆動される、同じ遺伝子を駆動する一方向ZmUbi1プロモーターを含有するバイナリープラスミドで形質転換されたトウモロコシ(Zea mays)植物と比べた場合、複数の遺伝子(例えば、Cry34、Cry35、およびAAD1)を予想外に高いレベルで発現できることが明らかにされている。
二方向トウモロコシ(Zea mays)ユビキチン1プロモーター構築物により駆動されるT1植物の遺伝子発現:構築物あたり10から12の単一コピー事象が、対照構築物pDAB108716は1つの事象のみを有することを除いて、解析のために選択される。V6段階について5つの植物/事象が試験され、V10〜12および/R3段階について3つの植物/事象が試験される。タンパク質アッセイは、LCMSまたはELISAを使用して実施される。
二方向トウモロコシ(Zea mays)ユビキチン1プロモーター構築物により駆動されるT1植物の遺伝子発現:構築物あたり10から12の単一コピー事象が、対照構築物が構築物あたり4または5事象を有することを除いて、解析のために選択される。V6段階について5つの植物/事象が試験され、V10〜12および/R3段階について3つの植物/事象が試験される。タンパク質アッセイは、LCMSまたはELISAを使用して実施される。
Claims (66)
- トウモロコシ(Zea mays)またはゼア・ラグジュリアンズ(Zea luxurians)のユビキチン−1遺伝子由来の最小コアプロモーターエレメントを含む合成ポリヌクレオチド。
- 最小コアプロモーターエレメントが配列番号1に少なくとも75%同一であるポリヌクレオチド配列またはその相補体を含む、請求項1に記載の合成ポリヌクレオチド。
- 最小コアプロモーターエレメントが配列番号1および15〜39からなる群から選択されるポリヌクレオチド配列を含む、請求項1に記載の合成ポリヌクレオチド。
- 最小コアプロモーターエレメントが配列番号1またはその相補体を含む、請求項1に記載の合成ポリヌクレオチド。
- ユビキチン−1遺伝子由来のエクソンおよびユビキチン−1遺伝子由来のイントロンをさらに含む、請求項1に記載の合成ポリヌクレオチド。
- ユビキチン−1遺伝子由来の上流調節配列をさらに含む、請求項1に記載の合成ポリヌクレオチド。
- 上流調節配列が配列番号4またはその相補体を含む、請求項6に記載の合成ポリヌクレオチド。
- 上流調節配列(URS)、エンハンサーエレメント、エクソン、イントロン、転写開始部位、TATAボックス、熱ショックコンセンサスエレメント、およびそれらの組合せからなる群から選択されるエレメントをさらに含む、請求項1に記載の合成ポリヌクレオチド。
- 最小コアプロモーターエレメントに作動可能に連結された対象のヌクレオチド配列をさらに含む、請求項1に記載の合成ポリヌクレオチド。
- トウモロコシ(Zea mays)またはゼア・ラグジュリアンズ(Zea luxurians)のユビキチン−1遺伝子由来の第二の最小コアプロモーターエレメントをさらに含み、前記2つの最小コアプロモーターエレメントがポリヌクレオチドにおいて互いに関して逆相補的配向である、請求項1に記載の合成ポリヌクレオチド。
- ユビキチン−1遺伝子由来のエクソンおよびユビキチン−1遺伝子由来のイントロンをさらに含む、請求項10に記載の合成ポリヌクレオチド。
- 配列番号3またはその相補体を含む、請求項11に記載の合成ポリヌクレオチド。
- ユビキチン−1遺伝子由来の上流調節配列をさらに含む、請求項10に記載の合成ポリヌクレオチド。
- 上流調節配列が配列番号4またはその相補体を含む、請求項13に記載の合成ポリヌクレオチド。
- 上流調節配列(URS)、エクソン、イントロン、転写開始部位、TATAボックス、熱ショックコンセンサスエレメント、翻訳STARTおよび/またはSTOPヌクレオチド配列、ならびにそれらの組合せからなる群から選択されるエレメントをさらに含む、請求項10に記載の合成ポリヌクレオチド。
- 配列番号5またはその相補体を含む、請求項15に記載の合成ポリヌクレオチド。
- 最小コアプロモーターエレメントのうちの一つに作動可能に連結された対象の第一のヌクレオチド配列を含む、請求項10に記載の合成ポリヌクレオチド。
- 対象の第一のヌクレオチド配列に作動可能に連結されていない最小コアプロモーターエレメントに作動可能に連結されている対象の第二のヌクレオチド配列を含む、請求項17に記載の合成ポリヌクレオチド。
- 請求項1に記載のポリヌクレオチドで細胞を形質転換することを含む、トランスジェニック細胞を作製するための方法。
- 請求項10に記載のポリヌクレオチドで細胞を形質転換することを含む、トランスジェニック細胞を作製するための方法。
- 細胞が植物細胞である、請求項18に記載の方法。
- 細胞が植物細胞である、請求項19に記載の方法。
- 請求項1に記載のポリヌクレオチドを含む植物細胞。
- 請求項10に記載のポリヌクレオチドを含む植物細胞。
- 請求項23に記載の植物細胞を含む植物。
- 請求項24に記載の植物細胞を含む植物。
- 方向非依存的な様式で転写を開始するための手段に作動可能に連結された対象のヌクレオチド配列を植物細胞内に導入することを含む、植物細胞において対象のヌクレオチド配列を発現するための方法。
- 対象の2つの作動可能に連結されたヌクレオチド配列の転写を開始するための手段に作動可能に連結された対象のヌクレオチド配列を植物細胞内に導入することを含む、植物細胞において対象のヌクレオチド配列を発現するための方法。
- (a)対象の2つの作動可能に連結されたヌクレオチド配列の転写を開始するための手段に作動可能に連結された対象のヌクレオチド配列、および
(b)対象の2つの作動可能に連結されたヌクレオチド配列の転写を開始するための手段に作動可能に連結された対象の第二のヌクレオチド配列
を含む核酸を植物細胞内に導入することを含む、請求項28に記載の方法。 - エクソンがトウモロコシ(Zea mays)またはゼア・ラグジュリアンズ(Zea luxurians)のユビキチン−1遺伝子由来である、請求項5に記載の合成ポリヌクレオチド。
- 対象の2つの作動可能に連結されたヌクレオチド配列の転写を開始するための手段が配列番号5またはその相補体を含む、請求項29に記載の方法。
- 核酸が、対象の2つの作動可能に連結されたヌクレオチド配列の転写を開始するための手段に作動可能に連結された対象のヌクレオチド配列を植物細胞のDNAの所定の部位に標的するように、植物細胞内に導入される、請求項29に記載の方法。
- 対象の2つの作動可能に連結されたヌクレオチド配列の転写を開始するための手段に作動可能に連結された対象のヌクレオチド配列が、亜鉛フィンガーヌクレアーゼ媒介組換えを利用して所定の部位に標的される、請求項32に記載の方法。
- (a)二方向プロモーター、および
(b)二方向プロモーターの向かい合っている末端の2つの遺伝子発現カセット
を含み、
遺伝子発現カセットのうちの少なくとも1つが翻訳スイッチを介して連結された2つ以上の遺伝子を含む、
植物細胞および/または組織において複数の遺伝子を発現するための核酸構築物。 - 二方向プロモーターがウイルス配列を含まない、請求項34に記載の核酸構築物。
- 二方向プロモーターが少なくとも1つのエンハンサーを含む、請求項34に記載の核酸構築物。
- 核酸構築物がアグロバクテリウム(Agrobacterium)媒介形質転換のためのバイナリーベクターを含む、請求項34に記載の核酸構築物。
- 二方向プロモーターが、上流調節配列(URS)、エンハンサーエレメント、エクソン、イントロン、転写開始部位、TATAボックス、熱ショックコンセンサスエレメント、およびそれらの組合せからなる群から選択されるエレメントを含む、請求項34に記載の核酸構築物。
- 二方向プロモーターが、トウモロコシ(Zea mays)またはゼア・ラグジュリアンズ(Zea luxurians)のユビキチン−1遺伝子由来の最小コアプロモーターエレメントを含む、請求項34に記載の核酸構築物。
- 二方向プロモーターが、トウモロコシ(Zea mays)またはゼア・ラグジュリアンズ(Zea luxurians)由来の第二の最小コアプロモーターをさらに含み、前記2つの最小コアプロモーターエレメントが互いに関して逆相補的配向である、請求項39に記載の核酸構築物。
- 最小コアプロモーターエレメントが、配列番号1に少なくとも70%同一であるポリヌクレオチド配列またはその相補体を含む、請求項39に記載の核酸構築物。
- 二方向プロモーターが、ユビキチン−1遺伝子由来のエクソンおよび/またはユビキチン遺伝子由来のイントロンを含む、請求項39に記載の核酸構築物。
- 二方向プロモーターが配列番号3のポリヌクレオチドまたはその相補体を含む、請求項42に記載の核酸構築物。
- 二方向プロモーターがユビキチン遺伝子由来の上流調節配列を含む、請求項42に記載の核酸構築物。
- ユビキチン遺伝子由来の上流調節配列が、配列番号4のポリヌクレオチドまたはその相補体を含む、請求項44に記載の核酸構築物。
- 二方向プロモーターが配列番号5のポリヌクレオチドまたはその相補体を含む、請求項34に記載の核酸構築物。
- 二方向プロモーターがユビキチン遺伝子由来の上流調節配列(URS)を含む、請求項34に記載の核酸構築物。
- 二方向プロモーターが
(i)ユビキチン遺伝子のプロモーターとは異なるプロモーター、および
(ii)ユビキチン遺伝子由来の上流調節配列(URS)
を含む、請求項47に記載の核酸構築物。 - 両方の遺伝子発現カセットが翻訳スイッチを介して連結された2つ以上の遺伝子を含む、請求項34に記載の核酸構築物。
- 翻訳スイッチが、配列内リボソーム進入部位(IRES)、選択的スプライシング部位、リボザイム切断部位、2Aペプチドをコードするポリヌクレオチド配列、2A様ペプチドをコードするポリヌクレオチド配列、インテインをコードするポリヌクレオチド配列、プロテアーゼ切断部位をコードするポリヌクレオチド配列、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項34に記載の核酸構築物。
- 翻訳スイッチの上流の遺伝子が翻訳停止コドンを含まない、請求項34に記載の核酸構築物。
- 少なくとも4つの遺伝子の発現を可能にする、請求項33に記載の核酸構築物。
- 3つから20までの間の遺伝子の発現を可能にする、請求項34に記載の核酸構築物。
- 4つから8つまでの間の遺伝子の発現を可能にする、請求項53に記載の核酸構築物。
- 二方向プロモーターからの遺伝子の発現が、一方向プロモーターと比べた場合、少なくとも4倍高い、請求項34に記載の核酸構築物。
- 二方向プロモーターからの遺伝子の発現が、一方向プロモーターと比べた場合、3倍から10倍高い、請求項34に記載の核酸構築物。
- 請求項34に記載の核酸構築物で植物細胞を形質転換することを含む、トランスジェニック植物を作製するための方法。
- 請求項34に記載の核酸構築物で細胞を形質転換することを含む、トランスジェニック細胞を作製するための方法。
- 請求項34に記載の核酸構築物を含む植物細胞。
- 核酸構築物が植物細胞に安定的に形質転換されている、請求項59に記載の植物細胞。
- 請求項34に記載の核酸構築物を含むトランスジェニック植物。
- 核酸構築物がトランスジェニック植物の細胞に安定的に形質転換されている、請求項61に記載のトランスジェニック植物。
- 請求項34に記載の核酸構築物を植物細胞および/または組織中に導入することを含む、植物細胞および/または組織において複数の遺伝子を発現させるための方法。
- 植物細胞および/または組織が請求項34に記載の核酸構築物で安定的に形質転換されている、請求項63に記載の方法。
- 請求項34に記載の核酸構築物を含む、アグロバクテリウム(Agrobacterium)媒介形質転換のためのバイナリーベクター。
- 請求項1の合成ポリヌクレオチドを含む、アグロバクテリウム(Agrobacterium)媒介形質転換のためのバイナリーベクター。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201161582138P | 2011-12-30 | 2011-12-30 | |
US61/582,138 | 2011-12-30 | ||
US201261617252P | 2012-03-29 | 2012-03-29 | |
US61/617,252 | 2012-03-29 | ||
PCT/US2012/064683 WO2013101343A1 (en) | 2011-12-30 | 2012-11-12 | Construct and method for synthetic bidirectional plant promoter ubi1 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2015503342A true JP2015503342A (ja) | 2015-02-02 |
JP6220794B2 JP6220794B2 (ja) | 2017-10-25 |
Family
ID=48698500
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014550292A Expired - Fee Related JP6220794B2 (ja) | 2011-12-30 | 2012-11-12 | 合成二方向植物プロモーターubi1のための構築物および方法 |
Country Status (16)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9422569B2 (ja) |
EP (1) | EP2797406B1 (ja) |
JP (1) | JP6220794B2 (ja) |
KR (1) | KR20140107334A (ja) |
CN (1) | CN104135851B (ja) |
AR (1) | AR089510A1 (ja) |
AU (1) | AU2012363062B2 (ja) |
BR (1) | BR112014014037B8 (ja) |
CA (1) | CA2855902C (ja) |
HK (1) | HK1201121A1 (ja) |
IL (1) | IL233452A0 (ja) |
RU (1) | RU2639538C2 (ja) |
SA (1) | SA112340162B1 (ja) |
TW (1) | TWI601739B (ja) |
WO (1) | WO2013101343A1 (ja) |
ZA (1) | ZA201402992B (ja) |
Families Citing this family (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
BR102014021330A2 (pt) * | 2013-08-30 | 2015-09-22 | Dow Agrosciences Llc | construtos para expressão de transgenes usando elementos reguladores de genes de ubiquitina de panicum |
TW201527316A (zh) | 2013-12-31 | 2015-07-16 | Dow Agrosciences Llc | 新穎玉米泛素啓動子(五) |
TW201527314A (zh) * | 2013-12-31 | 2015-07-16 | Dow Agrosciences Llc | 新穎玉米泛素啓動子(三) |
TW201527312A (zh) | 2013-12-31 | 2015-07-16 | Dow Agrosciences Llc | 新穎玉米泛素啓動子(一) |
TW201527313A (zh) * | 2013-12-31 | 2015-07-16 | Dow Agrosciences Llc | 新穎玉米泛素啓動子(二) |
TW201617451A (zh) * | 2014-11-11 | 2016-05-16 | 陶氏農業科學公司 | 合成雙向植物啓動子 |
TW201619386A (zh) * | 2014-11-11 | 2016-06-01 | 陶氏農業科學公司 | 合成性雙向植物啓動子 |
US10563220B2 (en) * | 2015-12-21 | 2020-02-18 | Monsanto Technology Llc | Compositions and methods for efficient targeting of transgenes |
CN105624163B (zh) * | 2016-04-06 | 2018-07-06 | 中国农业科学院生物技术研究所 | 一种来源于棉花的双向启动子及其应用 |
CN106676107B (zh) * | 2016-04-28 | 2019-04-05 | 华中农业大学 | 水稻内源双向表达启动子的分离克隆及功能分析 |
Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2006013072A2 (en) * | 2004-08-02 | 2006-02-09 | Basf Plant Science Gmbh | Method for isolation of transcription termination sequences |
WO2007014844A2 (en) * | 2005-07-27 | 2007-02-08 | Basf Plant Science Gmbh | Selection system for maize transformation |
WO2007031493A2 (en) * | 2005-09-13 | 2007-03-22 | Basf Plant Science Gmbh | A new selection system for wheat |
JP2007518392A (ja) * | 2003-12-31 | 2007-07-12 | カウンシル オブ サイエンティフィク アンド インダストリアル リサーチ | 遺伝子発現の活性化用人工的二方向プロモーター |
JP2010539930A (ja) * | 2007-09-27 | 2010-12-24 | ダウ・アグロサイエンス・エル・エル・シー | 5−エノールピルビルシキミ酸−3−リン酸シンターゼ遺伝子をターゲッティングする改変ジンクフィンガータンパク質 |
US20110252504A1 (en) * | 2008-12-17 | 2011-10-13 | Basf Plant Science Gmbh | Promoter From Z. Mais |
WO2011132127A1 (en) * | 2010-04-20 | 2011-10-27 | Basf Plant Science Company Gmbh | Enhanced methods for gene regulation in plants |
WO2011156535A1 (en) * | 2010-06-09 | 2011-12-15 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Regulatory sequences for modulating transgene expression in plants |
WO2013101344A1 (en) * | 2011-12-30 | 2013-07-04 | Dow Agrosciences Llc | Method and construct for synthetic bidirectional scbv plant promoter |
Family Cites Families (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5750866A (en) * | 1994-09-08 | 1998-05-12 | American Cyanamid Company | AHAS promoter useful for expression of introduced genes in plants |
US6072050A (en) | 1996-06-11 | 2000-06-06 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Synthetic promoters |
US6388170B1 (en) | 2000-04-07 | 2002-05-14 | University Of Kentucky Research Foundation | Bidirectional promoters and methods related thereto |
AU2002250064B2 (en) | 2001-02-13 | 2008-01-17 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | A bi-directional dual promoter complex with enhanced promoter activity for transgene expression in eukaryotes |
WO2005019459A1 (de) * | 2003-07-22 | 2005-03-03 | Sungene Gmbh & Co. Kgaa | Expressionskassetten zur bidirektionalen transgenen expression von nukleinsäuren in pflanzen |
US8344211B2 (en) | 2008-08-13 | 2013-01-01 | Ceres, Inc. | Plant nucleotide sequences and corresponding polypeptides |
US7235652B2 (en) | 2004-03-31 | 2007-06-26 | Council Of Scientific And Industrial Research | Artificial bidirectional promoter for activation of gene expression |
WO2006005023A2 (en) * | 2004-06-30 | 2006-01-12 | Ceres Inc. | Promoter, promoter control elements and combinations, and uses thereof |
TWI361220B (en) | 2005-08-02 | 2012-04-01 | Univ Nat Taiwan | A plant shsp gene bi-directional promoter and uses thereof |
CN102573452B (zh) | 2009-08-19 | 2015-07-22 | 陶氏益农公司 | Aad-1事件das-40278-9、相关的转基因玉米品系及其事件特异性鉴定 |
-
2012
- 2012-11-12 JP JP2014550292A patent/JP6220794B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2012-11-12 CA CA2855902A patent/CA2855902C/en active Active
- 2012-11-12 BR BR112014014037A patent/BR112014014037B8/pt active Search and Examination
- 2012-11-12 KR KR1020147017801A patent/KR20140107334A/ko not_active Application Discontinuation
- 2012-11-12 CN CN201280070882.8A patent/CN104135851B/zh active Active
- 2012-11-12 US US13/674,606 patent/US9422569B2/en active Active
- 2012-11-12 RU RU2014131448A patent/RU2639538C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2012-11-12 EP EP12861436.9A patent/EP2797406B1/en active Active
- 2012-11-12 WO PCT/US2012/064683 patent/WO2013101343A1/en active Application Filing
- 2012-11-12 AU AU2012363062A patent/AU2012363062B2/en not_active Ceased
- 2012-11-27 TW TW101144314A patent/TWI601739B/zh not_active IP Right Cessation
- 2012-12-27 AR ARP120105034A patent/AR089510A1/es active IP Right Grant
- 2012-12-30 SA SA112340162A patent/SA112340162B1/ar unknown
-
2014
- 2014-04-24 ZA ZA2014/02992A patent/ZA201402992B/en unknown
- 2014-06-29 IL IL233452A patent/IL233452A0/en unknown
-
2015
- 2015-02-16 HK HK15101716.4A patent/HK1201121A1/xx unknown
Patent Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2007518392A (ja) * | 2003-12-31 | 2007-07-12 | カウンシル オブ サイエンティフィク アンド インダストリアル リサーチ | 遺伝子発現の活性化用人工的二方向プロモーター |
WO2006013072A2 (en) * | 2004-08-02 | 2006-02-09 | Basf Plant Science Gmbh | Method for isolation of transcription termination sequences |
WO2007014844A2 (en) * | 2005-07-27 | 2007-02-08 | Basf Plant Science Gmbh | Selection system for maize transformation |
WO2007031493A2 (en) * | 2005-09-13 | 2007-03-22 | Basf Plant Science Gmbh | A new selection system for wheat |
JP2010539930A (ja) * | 2007-09-27 | 2010-12-24 | ダウ・アグロサイエンス・エル・エル・シー | 5−エノールピルビルシキミ酸−3−リン酸シンターゼ遺伝子をターゲッティングする改変ジンクフィンガータンパク質 |
US20110252504A1 (en) * | 2008-12-17 | 2011-10-13 | Basf Plant Science Gmbh | Promoter From Z. Mais |
WO2011132127A1 (en) * | 2010-04-20 | 2011-10-27 | Basf Plant Science Company Gmbh | Enhanced methods for gene regulation in plants |
WO2011156535A1 (en) * | 2010-06-09 | 2011-12-15 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Regulatory sequences for modulating transgene expression in plants |
WO2013101344A1 (en) * | 2011-12-30 | 2013-07-04 | Dow Agrosciences Llc | Method and construct for synthetic bidirectional scbv plant promoter |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
CHRISTENSEN, A.H. ET AL.: ""Ubiquitin promoter-based vectors for high-level expression of selectable and/or screenable marker g", TRANSGENIC RES., vol. 5, no. 3, JPN6016039723, 1996, pages 213 - 218, XP002725067, ISSN: 0003422689, DOI: 10.1007/BF01969712 * |
XIE, M. ET AL.: ""Bidirectionalization of polar promoters in plants."", NATURE BIOTECHNOL., JPN6016039725, 2001, pages 19 - 7, ISSN: 0003422690 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU2012363062A1 (en) | 2014-05-15 |
IL233452A0 (en) | 2014-08-31 |
RU2014131448A (ru) | 2016-02-20 |
CN104135851B (zh) | 2018-05-01 |
CA2855902A1 (en) | 2013-07-04 |
TW201329097A (zh) | 2013-07-16 |
AR089510A1 (es) | 2014-08-27 |
AU2012363062B2 (en) | 2018-04-12 |
EP2797406B1 (en) | 2020-01-08 |
ZA201402992B (en) | 2015-11-25 |
SA112340162B1 (ar) | 2016-02-22 |
US9422569B2 (en) | 2016-08-23 |
BR112014014037B8 (pt) | 2023-05-16 |
CA2855902C (en) | 2022-06-21 |
HK1201121A1 (en) | 2015-08-28 |
EP2797406A4 (en) | 2015-07-15 |
JP6220794B2 (ja) | 2017-10-25 |
BR112014014037B1 (pt) | 2022-06-21 |
WO2013101343A1 (en) | 2013-07-04 |
KR20140107334A (ko) | 2014-09-04 |
BR112014014037A2 (pt) | 2020-11-03 |
US20130254943A1 (en) | 2013-09-26 |
EP2797406A1 (en) | 2014-11-05 |
RU2639538C2 (ru) | 2017-12-21 |
TWI601739B (zh) | 2017-10-11 |
CN104135851A (zh) | 2014-11-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6220794B2 (ja) | 合成二方向植物プロモーターubi1のための構築物および方法 | |
JP6301265B2 (ja) | 合成二方向scbv植物プロモーターのための方法および構築物 | |
JP6262217B2 (ja) | アブラナ属(Brassica)二方向構成的プロモーターを使用してトランス遺伝子を発現するための構築物および方法 | |
TW201527313A (zh) | 新穎玉米泛素啓動子(二) | |
TW201527316A (zh) | 新穎玉米泛素啓動子(五) | |
TW201527312A (zh) | 新穎玉米泛素啓動子(一) | |
US20170029833A1 (en) | Construct and method for synthetic bidirectional plant promoter ubi1 | |
EP4267748A1 (en) | Maize regulatory elements and uses thereof | |
TW201527315A (zh) | 新穎玉米泛素啓動子(四) |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20151105 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20160921 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20161025 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20170125 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20170327 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170425 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20170905 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20171002 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6220794 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |