JP2015015933A - 植物の生育促進剤 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】ポラロモナス属、バリオボラックス属、ノボスフィンゴビウム属、ノカルディオイデス属、デボシア属、メソリゾビウム属、スフィンゴモナス属、フィロバクテリウム属、バチルス属、リゾビウム属又はストレプトマイセス属に属する微生物を含む、植物の生育促進剤を作物の種子または幼苗に接種する。
【選択図】なし
Description
[1]ポラロモナス属、バリオボラックス属、ノボスフィンゴビウム属、ノカルディオイデス属、デボシア属、メソリゾビウム属、スフィンゴモナス属、フィロバクテリウム属、バチルス属、リゾビウム属又はストレプトマイセス属に属する微生物を含む、植物の生育促進剤、
[2]植物が、ヒユ科に属する、[1]に記載の植物の生育促進剤、
[3]植物が、テンサイ及び/又はホウレンソウである、[2]に記載の植物の生育促進剤、
[4]ポラロモナス属に属する微生物が、HRRK103であり、バリオボラックス属に属する微生物が、HRRK170株であり、ノボスフィンゴビウム属に属する微生物が、HRRK193株及びHRRK010株であり、ノカルディオイデス属に属する微生物が、HRRP110株であり、デボシア属に属する微生物が、No.184株であり、メソリゾビウム属に属する微生物が、HRTP027株及びHRRK190であり、スフィンゴモナス属に属する微生物が、HRRP089株であり、フィロバクテリウム属に属する微生物が、HRTP192株であり、バチルス属に属する微生物が、HRTK156株であり、リゾビウム属に属する微生物が、HRRK005株であるか又はストレプトマイセス属に属する微生物が、HRTK192株である、[1]〜[3]のいずれかに記載の植物の生育促進剤。
菌株名 種名 受託番号
HRRK103 ポラロモナス属 NITE P−01607
(Polaromonas sp.)
HRRK170 バリオボラックス属 NITE P−01608
(Variovorax sp.)
HRRK193 ノボスフィンゴビウム属 NITE P−01610
(Novosphingobium sp.)
HRRP110 ノカルディオイデス属 NITE P−01612
(Nocardioides sp.)
No.184 デボシア属 NITE P−01606
(Devosia sp.)
HRTP027 メソリゾビウム属 NITE P−01615
(Mesorhizobium sp.)
HRRP089 スフィンゴモナス属 NITE P−01611
(Sphingomonas sp.)
HRTP192 フィロバクテリウム属 NITE P−01616
(Phyllobacterium sp.)
HRTK156 バチルス属 NITE P−01613
(Bacillus sp.)
HRRK010 ノボスフィンゴビウム属 NITE P−01605
(Novosphingobium sp.)
HRRK005 リゾビウム属 NITE P−01604
(Rhizobium sp.)
HRRK190 メソリゾビウム属 NITE P−01609
(Mesorhizobium sp.)
HRTK192 ストレプトマイセス属 NITE P−01614
(Streptomyces sp.)
北海道河西郡芽室町の北海道農業研究センター内の三要素栽培試験圃場において、テンサイ品種「アマホマレ」を移植栽培した。生育が旺盛な7月中旬に、通常施肥区(以下、NPK区)、窒素無施肥区(以下、PK区)、窒素およびリン酸無施肥区(以下、K区)の3試験区から各3個体を採取し、よく洗浄した後、葉身、葉柄、根、細根の各部位に分割して使用時まで−30℃で凍結保存した。
テンサイ共生細菌の分離はPK区及びK区から採取した細根を分離源とし、分離培地には、シクロヘキシミド50ppmを添加した、R2A寒天培地(ベクトン・ディッキンソン株式会社)又はTSA寒天培地(ベクトン・ディッキンソン株式会社のTryptic soy brothに1.5%濃度で寒天を加えた培地)の2種類を用いた(以下、培養法)。細根を乳鉢で摩砕した後、1/15Mリン酸緩衝液(pH7.0)で適当な濃度に薄め、分離培地に塗布した後、24℃で1週間培養した。培養後に形成されたコロニーを網羅的に釣菌し、各々200菌株、計800菌株を分離した。分離した800菌株のうち665菌株については16S rRNA遺伝子を解析し、属名を決定した。一方、NPK区、PK区及びK区から採取した根及び細根から抽出したDNAを用いて、培養することなく直接、細菌の16S rRNA遺伝子を解析し、テンサイの根及び細根に共生している細菌叢を解析した(以下、非培養法)。
試験にはテンサイ品種「リッカ」を供試した。種子は70%エタノールに1分、次に次亜塩素酸ナトリウム溶液(有効塩素濃度1%、tween20を0.01%添加)に15分、それぞれ浸漬した後、滅菌蒸留水で5回以上濯いで表面殺菌した。表面殺菌した種子を25℃で24時間、暗所に静置して発芽させた。発芽が確認された種子3粒を滅菌した育苗培土(商品名「ポットエース」、片倉チッカリン株式会社)80mlを充填したセル(セルサイズ:41x41x43.5(H)mm、商品名「セルボックス25穴」、明和株式会社)に置床し、その上に滅菌した育苗培土20mlを覆土して播種した。1処理区の反復は12セルとした。寒天培地(R2A寒天培地又はTSA寒天培地)上で24℃・3〜4日間、暗所で静置培養した菌体を白金耳で掻き取り、滅菌蒸留水中に懸濁した。この懸濁液の600nmにおける吸光度(OD値)を計測し、OD値が0.1となるように滅菌蒸留水で希釈したものを接種源とした。接種は、播種直後に行い、1セルあたり1mlの接種源を灌注して接種した。無接種区には滅菌蒸留水を灌注接種した。播種・接種後は、明期:25℃・16時間、暗期:20℃・8時間に調節した人工気象室内で栽培し、播種1週間後に間引きを行い1株/セルとした。播種1ヵ月後、セルからテンサイを慎重に抜き取り、丁寧に水洗いして根に付着した土壌を落とした。地上部と根部に切断し、80℃で3日間乾燥させた後、個体毎の乾物重を測定した。
テンサイ幼苗への接種試験の結果、無接種区と比較して乾物重が増加し、生育促進効果が認められた菌株として13菌株を選抜した(表1)。
テンサイへ幼苗への生育促進効果が認められた13菌株のうち10菌株について、テンサイと同じヒユ科に属するホウレンソウへの接種試験を実施した。試験にはホウレンソウ品種「おかめ(ネーキッド種子)」(タキイ種苗)を供試した。種子を18℃で72時間、暗所に静置して発芽させた。発芽が確認された種子4粒を滅菌したバーミキュライトまたは育苗培土(商品名「げんき君果菜200」、コープケミカル株式会社)50mlを充填したセル(セルサイズ:45x45x50(H)mm、商品名「プラグトレイ50穴」、ランドマーク社)に置床し、その上に滅菌した育苗培土10mlを覆土して播種した。子葉展開後、健全な苗3株となるように間引きし、1処理区の反復は12株(4セル)とした。寒天培地(R2A寒天培地又はTSA寒天培地)上で25℃・3〜4日間、暗所で静置培養した菌体を滅菌綿棒で集菌し、滅菌蒸留水中に懸濁した。この懸濁液の600nmにおける吸光度(OD値)を計測し、OD値が0.02となるように滅菌蒸留水で希釈したものを接種源とした。接種は、播種直後に行い、1セルあたり5mlの接種源を灌注して接種した。無接種区には滅菌蒸留水を灌注接種した。播種・接種後は、明期:25℃・16時間、暗期:25℃・8時間に調節した人工気象室内で栽培し、栽培期間中は水耕栽培液を全てセルに等量ずつ与え、土壌が乾燥することのないよう維持した。播種2週間後、セルからホウレンソウを慎重に抜き取り、丁寧に水洗いして根に付着した土壌を落とした。地上部と根部に切断し、個体毎の生重量を測定した。
ホウレンソウへの接種試験を実施した結果、ポラロモナス属に属するHRRK103株、バリオボラックス属に属するHRRK170株、ノカルディオイデス属に属するHRRP110株、デボシア属に属するNo.184株及びメソリゾビウム属に属するHRTP027株は顕著な生育促進効果を示し、ホウレンソウへの適用の可能性が明らかとなった(表2)。
Claims (5)
- ポラロモナス属、バリオボラックス属、ノボスフィンゴビウム属、ノカルディオイデス属、デボシア属、メソリゾビウム属、スフィンゴモナス属、フィロバクテリウム属、バチルス属、リゾビウム属又はストレプトマイセス属に属する微生物を含む、植物の生育促進剤。
- 植物が、ヒユ科に属する、請求項1に記載の植物の生育促進剤。
- 植物が、テンサイ及び/又はホウレンソウである、請求項2に記載の植物の生育促進剤。
- ポラロモナス属に属する微生物が、HRRK103であり、バリオボラックス属に属する微生物が、HRRK170株であり、ノボスフィンゴビウム属に属する微生物が、HRRK193株及びHRRK010株であり、ノカルディオイデス属に属する微生物が、HRRP110株であり、デボシア属に属する微生物が、No.184株であり、メソリゾビウム属に属する微生物が、HRTP027株及びHRRK190であり、スフィンゴモナス属に属する微生物が、HRRP089株であり、フィロバクテリウム属に属する微生物が、HRTP192株であり、バチルス属に属する微生物が、HRTK156株であり、リゾビウム属に属する微生物が、HRRK005株であるか又はストレプトマイセス属に属する微生物が、HRTK192株である、請求項1〜3のいずれか1項に記載の植物の生育促進剤。
- 請求項1〜4のいずれか1項に記載の植物の生育促進剤を種子又は植物の根部と接触させることを含む、植物の栽培方法。
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