JP2014532636A - ウイルス感染の処置のためのヌクレオシドアナログおよび該処置に対する感受性を評価するための方法 - Google Patents

ウイルス感染の処置のためのヌクレオシドアナログおよび該処置に対する感受性を評価するための方法 Download PDF

Info

Publication number
JP2014532636A
JP2014532636A JP2014537693A JP2014537693A JP2014532636A JP 2014532636 A JP2014532636 A JP 2014532636A JP 2014537693 A JP2014537693 A JP 2014537693A JP 2014537693 A JP2014537693 A JP 2014537693A JP 2014532636 A JP2014532636 A JP 2014532636A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
compound
treatment
hiv
virus
group
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP2014537693A
Other languages
English (en)
Other versions
JP2014532636A5 (ja
Inventor
カルヴェズ，ヴァンサン
マルスラン，アン−ジュヌヴィエーヴ
スーリエ，カティア
エテヴ−ケルクジュ，メラニー
ソログーブ，マチュー
Original Assignee
ユニヴエルシテ・ピエール・エ・マリー・キユリー・パリ・シス
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ユニヴエルシテ・ピエール・エ・マリー・キユリー・パリ・シス filed Critical ユニヴエルシテ・ピエール・エ・マリー・キユリー・パリ・シス
Publication of JP2014532636A publication Critical patent/JP2014532636A/ja
Publication of JP2014532636A5 publication Critical patent/JP2014532636A5/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H17/02—Heterocyclic radicals containing only nitrogen as ring hetero atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/70—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving virus or bacteriophage

Abstract

本発明は、ウイルス感染、特にＨＩＶ感染の処置のためのヌクレオシドアナログの使用、およびまた、少なくとも１種のこれらのアナログを含む組成物、および該処置に対する感受性を評価するための方法を記載する。

Description

本発明は、ウイルス感染、特にヒト後天性免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染の処置のためのヌクレオシドアナログおよびその使用を記載する。
発明の背景
ＨＩＶの処置に提唱されている医薬は、以下の６クラスに分類することができる：ヌクレオシド（ヌクレオチド）系逆転写酵素阻害剤［Ｎ（ｔ）ＲＴＩ］、非ヌクレオシド系逆転写酵素阻害剤［ＮＮＲＴＩ］、プロテアーゼ阻害剤［ＰＩ］、インテグラーゼ阻害剤［ＩＮＩ］、ＣＣＲ５アンタゴニスト、および融合阻害剤。
ＨＩＶ処置としての高活性抗レトロウイルス療法の導入は、世界中でＨＩＶを患う患者の死亡率および罹患率を顕著に低下させることを可能にした。ＨＩＶ感染のために推奨される初期処置には、ヌクレオシド系逆転写酵素阻害剤のクラスに属することが知られている少なくとも２種の医薬が挙げられる。
しかし、使用された化合物の大部分が毒性の問題を提起し、それら全てが耐性の問題に行き当たる。その結果、患者によるより高い服薬遵守が可能になり、耐性変異体の出現を制限し、それ故に患者の寿命および生活の質を改善するような、副作用の軽減および投薬の改善（例えば、固定用量配合丸剤の１日１回投与）が探究される。
従って、耐容性及び有効性の両者に優れ、新規な作用機作も有する新規抗ウイルス分子の必要性がある。
これに関連して本発明者らは、驚くことにベンゾイル化ヌクレオシドアナログのサブファミリーが、ネイティブなＨＩＶウイルスおよび耐性変異体の両方に有利な抗ウイルス活性を示し、同時に非常に低い毒性を有することを実証した。
発明の概要
本発明は、ウイルス感染、特にＨＩＶウイルス感染の処置に使用するための、式（Ｉ）

で示される化合物に関する。
本発明は、また、式（Ｉ）で示される少なくとも１種の化合物および薬学的に許容されうる支持体を含む薬学的組成物に関する。
本発明は、また、ＨＩＶウイルス、特にＨＩＶ−１に感染した患者が、本明細書において同義の化合物を用いた治療に感受性であるかどうかを評価するための、ウイルスの逆転写酵素のコドン２１５における突然変異を検索することを含むin vitro方法であって、野生型トレオニンのチロシンへの置換が、該化合物に対して野生型ウイルスよりも大きな感受性であることを示す方法を提供する。
ＴＤＦ（テノホビル）に比べたテトラベンゾイルアデノシンのＩＣ５０（５０％阻害濃度）の測定を示すグラフである。四角はテノホビルに、菱形はテトラベンゾイルアデノシン（下記式Ａに示されるＮ６，Ｎ６，Ｏ２’，Ｏ３’−テトラベンゾイルアデノシン）に対応する。 感染ＭＴ２細胞１５００００個についてのウイルスＤＮＡコピー数を時間の関数として示すグラフである（Ｃ＝対照、ＡＺＴ＝ジドブジン）。 感染ＭＴ２細胞１mlあたりのウイルスＲＮＡコピー数を時間の関数として示すグラフである（Ｃ＝対照、ＡＺＴ＝ジドブジン）。
発明の詳細な説明
本発明は、ウイルス感染の処置に使用するための、式（Ｉ）

［式中：
各Ｒ１は、ニトロ基（ＮＯ２）、アルキル基およびハロゲン原子より選択される１個または複数の置換基で場合により置換されているベンジル基およびベンゾイル基（Ｂｚ）より独立して選択され；
Ｒ２は、水素原子、アシル基、モノホスフェート、ジホスフェートもしくはトリホスフェート、または安定化されたホスフェート誘導体より選択される］
で示される化合物、その異性体、互変異性体もしくは鏡像異性体、そのプロドラッグもしくは薬学的に許容されうる塩、またはその混合物に関する。
ウイルスは、例えば、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、Ｂ型肝炎ウイルスまたはヘルペスウイルスでありうる。
その化合物は、現行処置に対する耐性、例えば、特にＨＩＶに関するヌクレオシドもしくは非ヌクレオシド系逆転写酵素阻害剤またはインテグラーゼ阻害剤もしくはプロテアーゼ阻害剤に対する耐性をウイルス株に付与する突然変異を有するウイルス株に感染した患者におけるウイルス感染を処置するために、特に有用である。
特に、ウイルス感染はＨＩＶである。全ての遺伝子型、特にＨＩＶ−１、ＨＩＶ−２およびＨＩＶ−Ｏ群が包含される。化合物は、任意の患者における感染を処置するために有用である。この化合物は、Ｔ２１５Ｙ突然変異を有するＨＩＶウイルス、特にＨＩＶ−１の感染と闘うために特に有効である。
好ましくは１個、好ましくは２個、好ましくは３個、より優先的には４個のＲ１基はベンゾイル基である。
好ましくは、Ｒ２は、水素原子、基

ならびに基

および基

［ここで、ＡｒおよびＡｒ’は、１個または複数のハロゲン原子で場合により置換されているフェニルまたはナフチル基であり、Ｒ、Ｒ’、Ｒ”およびＲ”’は、水素原子、ヒドロキシル基（ＯＨ）、アルキル、フェニルまたはアミン基ＮＲａＲｂ（ここで、ＲａおよびＲｂは、水素原子、アルキルおよびハロアルキルより選択される）より独立して選択される］
より選択される、安定化されたホスフェート誘導体より選択される。
大いに好ましくは、Ｒ２は水素原子である。
本発明において、用語「アルキル基」は、ハロゲン原子、ヒドロキシル（ＯＨ）基およびアミノ（ＮＨ２）基より選択される少なくとも１種の置換基で場合により置換された１〜８個の炭素原子を含む直鎖、分岐または環状の炭化水素に基づく基を意味する。一例として、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、シクロヘキシル、ヘプチルおよびオクチル基を挙げることができる。
本発明において用語「アシル基」は、分子の残りにＣ＝Ｏによって結合しているアルキル基を意味する。
本発明において用語「安定化されたホスフェート誘導体」は、ホスフェート基由来の基であって、安定化されたヌクレオチドプロドラッグを形成できるようにする基を意味する。
本発明において、用語「ハロゲン原子」は、塩素、臭素、ヨウ素またはフッ素原子を意味する。
本発明において、用語「ハロアルキル」は、少なくとも１個のハロゲン原子で置換された、上記と同義のアルキル基を意味する。一例として、特にトリフルオロメチル基を挙げることができる。
本発明において、式（Ｉ）で示される化合物の「プロドラッグ」という用語は、in vivo投与された場合に、式（Ｉ）で示される対応するモノリン酸化化合物に変換される化合物、またはそれ自体同じ活性を有する化合物を意味する。特に、活性化合物の薬学的に許容されうる塩およびある特定の５’誘導体、特に加水分解可能な誘導体を挙げることができる。
本発明において、用語「薬学的に許容されうる塩」は、望ましくない毒物学的作用をほとんどまたは全く有さない、式（Ｉ）で示される化合物の塩を意味する。それは、例えば、塩酸塩もしくは酢酸塩などの酸付加塩、またはナトリウム塩もしくはカリウム塩などの塩基付加塩でありうる。
式（Ｉ）で示される化合物は、例えばその活性、そのバイオアベイラビリティーもしくはその安定性を改善するために、または式（Ｉ）で示される化合物の任意の望ましくない性質を改変するために、安定化されたプロドラッグ形態で投与することができる。
本発明の化合物のうち、式Ａ

で示される化合物（Ｎ６，Ｎ６，Ｏ２’，Ｏ３’−テトラベンゾイルアデノシン）が大いに好ましい。
Ｎ６，Ｎ６，Ｏ２’，Ｏ３’−テトラベンゾイルアデノシンＡは、最初にKhoranaら（Lohrmann, R.; Khorana, H. G. J. Am. Chem. Soc. 1964, 86, 4188-4194）によって記載されたように、またはScottら（Zhu, X.-F.; Scott, A. I. Synthetic Commun. 2008, 1346-1354）によって改良された方法を用いて、一時的な５’−ＯＨ保護基としてｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルを使用して、合成することができる。
本発明者らは、Ｎ６，Ｎ６，Ｏ２’，Ｏ３’−テトラベンゾイルアデノシンが、ＨＩＶ感染患者の処置のために最も広く使用されている抗レトロウイルス剤であるテノホビル（ＴＤＦ）よりも大きな抗ウイルス（特に抗ＨＩＶ）活性を有することを実証した。測定された低レベルの細胞毒性は、ＨＩＶ感染患者にこの化合物を採用することを特に有用にする。加えて、任意の作用機作に縛られたいわけではないが、本発明者らは、この化合物がウイルス感染初期に、すなわちウイルスが細胞のＤＮＡに組込まれる前に作用することを実証した。より詳細には、本発明者らは、プロウイルスＤＮＡ産生の阻害を示した。本発明の化合物のこの性質は、細胞組込み上流での有効な処置のために特に有利である。
本発明は、また、式（Ｉ）で示される少なくとも１種の化合物および薬学的に許容されうる支持体を含む薬学的組成物に関する。
本発明に関連して、用語「薬学的に許容されうる支持体」は、医薬の調製のために活性成分（１種または複数）と組み合わされた、慣例的に使用されている賦形剤、担体、佐剤、緩衝剤などの物質を意味する。そのような支持体の選択は、本質的に、予想される投与経路に依存する。
特定の一態様では、本発明の化合物は、例えばコーティング物質の膜に囲まれた活性成分の中核から成るリザーバーであるミクロスフェアまたはマイクロカプセルに導入されることによる、封入された形態でありうる。コーティング物質を形成するポリマーは、天然起源（ゼラチン、キトサンなど）、半合成起源（セルロース誘導体など）または一般に使用される乳酸−グリコール酸コポリマーなどの合成起源でありうる。本発明の化合物は、また、生分解性ポリマーベース、または隔離（sequestration）および／もしくは吸着により１種もしくは複数の活性分子を保持することができる脂質ベースの、大きさが１０から１００nmのコロイド系であるナノパーティクル中に封入することができる。
本発明による薬学的組成物は、好ましくは、５μgから１０００mgの間、好ましくは１から５００mgの間、好ましくは５から１００mgの間の量の本発明の化合物を含む。
本発明による化合物と薬学的に許容されうる支持体との重量比は、５／９５から９５／５の間、好ましくは２０／８０から８０／２０の間である。
本発明の化合物は、活性成分だけであってもよく、または他の活性成分と組合せることができる。従って、本発明による薬学的組成物は、また、少なくとも１種の他の薬学的活性剤、特にウイルス感染の処置に使用される少なくとも１種の医薬を含みうる。特に、本発明による組成物は、また、１種または複数の他の抗レトロウイルス剤、例えばテノホビルを含んでもよく、またはそれと組合せることができる。一般に、任意の抗レトロウイルス剤、すなわち逆転写酵素阻害剤、特にヌクレオシドまたはヌクレオチド系および非ヌクレオシド系阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、インテグラーゼ阻害剤、侵入阻害剤（抗ＣＣＲ５）、融合阻害剤、およびＣＤ４結合部位への付着のための阻害剤を組合せることができる。抗レトロウイルス剤のうち、例えばラミブジン、エムトリシタビン、ザルシタビン、アバカビル、ジドブジン、ジダノシン、スタブジン、アデホビル、テノホビル、エファビレンツ、エトラビリン、ネビラピン、デラブリジン（delavridine）、リルピビリン、アンプレナビル、ホスアンプレナビル、チプラナビル、ロピナビル、リトナビル、インジナビル、サキナビル、ダルナビル、アタザナビル、ネルフィナビル、ラルテグラビル、エビルテグラビル（eviltegravir）、ドルテグラビル（dolutegravir）、エンフビルチドまたはマラビロクなどの現在市販されている抗レトロウイルス剤を使用することができる。
本発明による化合物または組成物は、様々な方法および様々な形態で投与することができる。従って、それらは、全身、経口的に、吸入または注射により、例えば静脈内、筋肉内、皮下、経皮、動脈内などに投与することができ、静脈内、筋肉内、皮下および経口投与ならびに吸入による投与が好ましい。注射剤にために、化合物は、一般に例えばシリンジまたは注入により注射できる液体懸濁剤の形態で用意される。これに関して、化合物は、一般に薬学的使用に適合性で当業者に公知の緩衝液、等張液、生理学的溶液、食塩水などに溶解される。従って、組成物は、分散剤、溶解補助剤、安定化剤、保存料などより選択される１種または複数の薬剤または担体を含有しうる。液体製剤および／または注射用製剤に使用することができる薬剤または担体は、特に、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリソルベート８０、マンニトール、ゼラチン、ラクトース、植物油、アラビアゴムなどである。
化合物は、また、ゲル剤、油剤、錠剤、坐剤、散剤、ゲルカプセル剤、カプセル剤、エアロゾルなどの形態で、場合により徐放および／または遅延放出を提供するガレヌス形態または装置により、投与することができる。この種類の製剤のために、セルロース、炭酸塩またはデンプンなどの薬剤が有利に使用される。
注射の流速および／または用量は、当業者が患者、関係する病態、投与様式などに応じて調整することができると理解されている。典型的には、化合物は、０．１μgから１００mg/kg体重の間、より一般には０．０１〜１０mg/kg、典型的には０．１から１０mg/kgの間の範囲でありうる用量で投与される。一般に、１日に５μgから１０００mgの間、好ましくは１から５００mgの間、好ましくは５から１００mgの間で投与される。加えて、必要に応じて繰り返し注射を実施することができる。さらに、慢性処置のために、遅延または持続システムを使用することができる。
本発明は、また、ウイルス感染を処置するための方法であって、式（Ｉ）で示される少なくとも１種の化合物および／またはそれを含有する組成物の有効量を患者に投与することを含む方法に関する。
本発明の対象は、また、ウイルス感染の処置を目的とする薬学的組成物の調製に関連した、上記と同義の少なくとも１種の化合物の使用である。
個別化医療の目的で、本発明の対象は、また、本明細書記載の薬学的組成物を用いた処置に非常に感受性のＨＩＶウイルス感染患者、特にＨＩＶ−１感染患者を同定するための、逆転写酵素のコドン２１５における突然変異を検索することを含む方法であって、野生型トレオニンのチロシンへの置換が、本発明の化合物に対して野生型ウイルスよりも大きな感受性であることを示す方法である。用語「非常に感受性の患者」は、本発明の化合物が、野生型ウイルスまたは他の突然変異を有するウイルスの感染を処置するためにも有用なままであることを考慮して、本発明の化合物を用いた治療が特に有利な患者を意味するつもりである。
この突然変異の検索は、プローブを用いた遺伝子型決定、配列決定または迅速検出の任意の標準技法によって実施することができる（例えば、Ross, et al AIDS Research and Human Retroviruses, 1999, 15(14): 1287-1292; Mitsuya et al, J Virol. 2008, 82(21):10747-55参照）。
本発明に関連して、用語「処置」は、予防的、治癒的または対症的処置、さらに患者の管理（苦痛の軽減、寿命の向上、疾患の進行減速など）を意味する。処置は、また、他の化学的または物理的な薬剤または処置と組合せて実施することができる。本発明による化合物は、好ましくは他の治療剤または処置と組合せて、別々にまたは連続的に用意および投与することができる。本発明の処置および医薬は、特にヒトを対象とする。本発明の化合物および／または組成物で処置できる患者は、特に、ウイルス感染の処置のために慣例的に使用される抗ウイルス剤に耐性の患者の集団、特にヌクレオシドもしくは非ヌクレオシド系逆転写酵素阻害剤、またはインテグラーゼもしくはプロテアーゼ阻害剤に耐性の患者（好ましくはＨＩＶウイルス感染患者）の集団でありうる。
ヌクレオシド系逆転写酵素阻害剤は、特に、以下の分子を含む：ジドブジン（ＡＺＴとしても公知の分子）、ラミブジン、エムトリシタビン、ジダノシン、スタブジン、アバカビル、ザルシタビン、テノホビル、ラシビル（racivir）、アンドキソビル、アプリシタビン（apricitabine）、エルブシタビン。
非ヌクレオシド系逆転写酵素阻害剤は、特に、以下の分子を含む：エファビレンツ、ネビラピン、エトラビリン、デラビルジン、リルピビリン。
インテグラーゼ阻害剤には、エルビテグラビル（elvitegravir）およびドルテグラビルが挙げられる。
プロテアーゼ阻害剤には、以下の分子が挙げられる：アンプレナビル、チプラナビル、インジナビル、サキナビル、ホスアンプレナビル、リトナビル、ダルナビル、アタザナビル、ネルフィナビル。
本発明による化合物は、単純に（たった３段階で）、例えば市販のアデノシンから合成することができる。
この３段階は、間に精製段階が全く入ることなしに実施され；これは、まず第一にｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリドを用いたアデノシンの５’位の位置選択的保護段階に続き、塩基のアミン官能基ならびにリボースの２’および３’位の他の２個のヒドロキシルをベンゾイルクロリドで保護することを伴う。最終段階は、５’位のヒドロキシルの脱保護であり、これは、テトラブチルアンモニウムフルオリドまたはトリフルオロ酢酸で、好ましくはトリフルオロ酢酸で実施することができる。次に、クロマトグラフィーカラムを用いた精製段階は、関心が持たれる化合物を得ることができるようにする。
本出願の他の局面および利点は、以下の実施例を読むと明らかになるが、この実施例は非限定的な例証と見なすべきである。
実施例
実施例１：本発明による化合物Ｎ６，Ｎ６，Ｏ２’，Ｏ３’−テトラベンゾイルアデノシン（化合物Ａ）の合成
実施例１．１：第１の態様
ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（ＴＢＳＣｌ）（３９６mg、２．６mmol）を０℃で市販のアデノシン（５４０mg、２．０mmol）およびピリジン（１０ml）の溶液に添加する。０℃で２時間撹拌後、反応混合物を外界温度に戻し、再度７時間撹拌する。次にこの溶液を０℃に冷却し、ベンゾイルクロリド（１．１２ml、９．６mmol）を滴下する。外界温度で一晩撹拌後、この混合物をＣＨ２Ｃｌ２（１００ml）に入れて希釈し、飽和ＮａＣｌ溶液（４０ml）で洗浄する。水相をＣＨ２Ｃｌ２で抽出し（２×４０ml）、有機相を混合し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。得られた粗反応物をＴＨＦ（３６ml）に溶解させ、トリフルオロ酢酸ＴＦＡ水溶液（１８ml、ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ＝１：１）をゆっくりと添加する。外界温度で３時間撹拌後、反応混合物をＮａＨＣＯ３溶液（Ｈ２Ｏ １００ml中に９．７２ｇ）で０℃にて中和し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出する（４×５０ml）。有機相を混合し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過後に減圧下で濃縮する。
得られた産物をクロマトグラフィーカラム（溶離液：シクロヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝４：１〜１：１、次にＣＨ２Ｃｌ２／ＣＨ３ＯＨ＝１００：５）で精製して、テトラベンゾイルアデノシンを白色固体の形態で得る。収量：１．３６ｇ（９９％）。
実施例１．２：第２の態様
ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（ＴＢＳＣｌ）（２．２ｇ、１４．６mmol）を０℃で市販のアデノシン（３ｇ、１１．２mmol）および蒸留ピリジン（６０ml）の溶液に添加する。０℃で４時間撹拌後、反応混合物を外界温度に戻し、再び一晩撹拌する。ピリジンを蒸発させて除去し、次に反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（５００ml）およびＭｅＯＨ（５０ml）中に入れ、ＮａＣｌ（５００ml）およびＮａＨＣＯ３（５００ml）の飽和溶液で洗浄する。水相をＣＨ２Ｃｌ２（２００ml）で抽出し、有機相を混合し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。固体をピリジン６０ml中に溶解させ、その溶液を０℃に冷却し、ベンゾイルクロリド（６．２６ml、５３．９mmol）を滴下する。外界温度で一晩撹拌後、その混合物をＣＨ２Ｃｌ２（３００ml）に入れて希釈し、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄する（２×１５０ml）。水相をＣＨ２Ｃｌ２（１５０ml）で抽出し、有機相を混合し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。得られた粗反応物をＴＨＦ（１００ml）中に溶解させ、トリフルオロ酢酸ＴＦＡ水溶液（５０ml、ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ＝１：１）をゆっくりと添加する。外界温度で一晩撹拌後、反応混合物をＮａＨＣＯ３溶液で０℃にて中和し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出する（２×１５０ml)。有機相を混合し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過後に減圧下で濃縮する。
得られた産物をクロマトグラフィーカラム（溶離液：シクロヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝４：１〜１：１、次にＣＨ２Ｃｌ２／ＣＨ３ＯＨ＝１００：５）で精製して、白色固体の形態でテトラベンゾイルアデノシンを得る。収量：５．９６ｇ（７７％）。
二つの態様で得られた産物の特徴づけ
Ｒｆ：０．２５（シクロヘキサン／ＥｔＯＡｃ＝２：１）；１Ｈ ＮＭＲ：（ＣＤＣｌ３）δ８．７０（ｓ，１Ｈ，Ｈ２またはＨ８）、８．２１（ｓ，１Ｈ，Ｈ２またはＨ８）、８．０５（ｄ，Ｊ＝７．５Hz，２Ｈ，Ｂｚ）、７．３３−７．８６（ｍ，１８Ｈ，Ｂｚ）、６．３６（ｍ，２Ｈ，Ｈ１’，Ｈ２’）、６．０６（ｄｄ，Ｊ＝１．６，５．２Hz １Ｈ，Ｈ３’）、５．５６（ｂｓ，１Ｈ，ＯＨ）、４．６４（ｂｓ，１Ｈ，Ｈ４’）、４．０５（ｍ，２Ｈ，２×Ｈ５’）
ＨＲＭＳ：Ｃ３８Ｈ２９Ｎ５Ｏ８Ｎａに関する計算値：７０６．１９１４、実測値７０６．１９１７［Ｍ＋Ｎａ＋］。
実施例２：抗ウイルスおよび細胞毒性試験
材料および方法：
化合物：
化合物Ａ（テトラベンゾイルアデノシン、実施例１での調製参照）をＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）に１０mMで溶解させる。市販のテノホビルを水に１g/lで溶解させる。
細胞およびウイルス：
ＨｅＬａ−Ｐ４細胞は、ＬａｃＺの発現がＨＩＶのトランス活性化Ｔａｔタンパク質によって誘導される、単一の複製サイクルからＨＩＶ−１感染性を正確に定量することが可能なＨｅＬａ ＣＤ４ ＬＴＲ−ＬａｃＺ細胞である。指数増殖しているＨｅＬａ−ＣＤ４細胞を９６ウェルプレート中に密度１×１０４個/mlで入れ、翌日に様々な濃度の化合物の存在下でＨＩＶ ｐ２４抗原３ngを感染させた。
ＨｅＬａ−Ｐ４細胞での抗ウイルス試験
単一サイクルのウイルスについての力価をＨｅＬａ−Ｐ４細胞で決定した。９６ウェルプレート中で細胞にＨＩＶ−１ ｐＮＬ−４．３クローン（ｐ２４抗原３ngに対応）を二つ組で感染させた。感染の４８時間後に、β−ガラクトシダーゼによるクロロフェノールレッド−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（ＣＰＲＧ）の切断に基づく比色試験（ＣＰＲＧ試験）によってＰ４溶解物中のβ−ガラクトシダーゼ活性を定量することにより、ウイルスの単一サイクルについての力価を決定した。５０％阻害濃度（ＩＣ５０）は、未処理感染細胞に比べてβ−ガラクトシダーゼレベルの５０％阻害を与える化合物Ａの濃度として決定した。
ＭＴ２細胞での抗ウイルス試験
ＭＴ２細胞を３×１０６個/mlに濃縮し、１０７個のウイルス（ＬＡＩ）を感染させた。細胞を９６ウェルプレート（１×１０５個／ウェル）に分配し、様々な濃度の化合物Ａの存在下でインキュベーションした（四つ組）。ウイルス量は、３日目に決定した（Cobas AmpliPrep/Cobas TaqMan (CTM)HIV-1 v2試験）。
細胞毒性試験
黄色テトラゾリウムＭＴＳ［３−（４，５−ジメチル−２−チアゾリル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド］試薬を用いた５６０および６９０nmでの吸光度を測定する細胞生存率試験を、テトラベンゾイルアデノシンを用いてＨｅＬａ−ＣＤ４、Ｖｅｒｏ、ＦＨ、ＭＴ２およびＳｕｐＴ１細胞系で実施した。
結果
ＨＩＶに対する抗ウイルス活性
本発明による化合物Ａの抗ウイルス活性は、ｐ２４抗原３ngに対応するＨＩＶ量を用いて評価した。比較のために本明細書に紹介するのは、Ｎ６位に二重ベンゾイル化を有さない化合物で得られた活性である。
ｐ２４抗原３ngに対応する量のＨＩＶを使用して、テトラベンゾイルアデノシン（化合物Ａ）のＩＣ５０は１から２μMの間である。同条件で、ＴＤＦ（テノホビル）のＩＣ５０は、５から１０μMの間である（図１参照）。
逆転写酵素遺伝子に位置する突然変異であって、診療に使用される主なＮＲＴＩに対する耐性に関連する突然変異を含むまたは含まない（ｗｔ）、場合により部位特異的突然変異誘発によって改変されたｐＮＬ４−３ウイルスで、本発明による化合物Ａを試験した。下表１Ａ〜１Ｃは、突然変異を有するウイルスおよび有さないウイルスに関する本発明による化合物Ａの耐性指数をまとめたものである。
突然変異体の耐性指数は、野生型ウイルスの成長を半分阻害することができる化合物の濃度（ＩＣ５０）に対する、被験突然変異ウイルスの成長を半分阻害することができる化合物の濃度（ＩＣ５０）の比を表す。
１以下の耐性指数は、被験ウイルス株が処置に感受性であること、または言い換えるとその化合物がウイルスの増殖を効果的に阻害することを示す。約１．５または２よりも大きい耐性指数は、そのウイルス株が処置に耐性であることを示す。
ＬＡＩウイルスに感染したＭＴ２細胞で化合物Ａを試験した。この場合ＩＣ５０は１．６μMと決定された。
全ての耐性突然変異体は、化合物Ａに感受性であり、その一部、特にＴ２１５Ｙ突然変異を有する突然変異体などは、いっそうさらに感受性（耐性指数＜１）である。
細胞毒性アッセイ
様々な細胞型（ＨｅＬａ−ＣＤ４、Ｖｅｒｏ、ＦＨ、ＭＴ２およびＳｕｐＴ１）を用いて、化合物ＡのＣＣ５０（５０％細胞毒性濃度）は全ての場合に１００μMよりも大きいと測定された。
実施例３：二本鎖プロウイルスＤＮＡ産生および細胞ＲＮＡ産生の阻害
ＭＴ２細胞を１５×１０６個/mlに濃縮し、１０または２５μMの化合物Ａと共に２時間インキュベーションした。次にＬａｉウイルスを感染効率０．０１で１時間添加する。細胞を洗浄し、次に１０または２５μMの被験化合物を含有する培地中でインキュベーションする。細胞１×１０６個の試料を様々な時点で採取し、ウイルスＤＮＡをTaqmanリアルタイムＰＣＲ法により定量する。培地中のウイルスＲＮＡ量を定量する（Cobas AmpliPrep/Cobas TaqMan (CTM)HIV-1 v2試験）。
結果を図２および３に示す。これらの図は、細胞内ウイルスＤＮＡの出現（図２）および細胞外ウイルスＲＮＡの産生（図３）が化合物Ａによって阻害されることを示している。言い換えると、化合物Ａは、細胞内ウイルスＤＮＡ産生を阻止し、その結果細胞外ＲＮＡの産生を阻止する。ＡＺＴ（ジドブジン）との比較は、ウイルス量の阻害に化合物Ａが明らかに優位であることを示している。

Claims (15)

  1. ウイルス感染の処置に使用するための、式（Ｉ）

    ［式中：
    各Ｒ１は、ニトロ基（ＮＯ２）、アルキル基およびハロゲン原子より選択される１個または複数の置換基で場合により置換されているベンジル基およびベンゾイル基より独立して選択され、
    Ｒ２は、水素原子、アシル基、モノホスフェート、ジホスフェートもしくはトリホスフェート、または安定化されたホスフェート誘導体より選択される］
    で示される化合物、その異性体、互変異性体もしくは鏡像異性体、そのプロドラッグもしくは薬学的に許容されうる塩、またはその混合物。
  2. ＨＩＶウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルスおよびヘルペスウイルスの感染より選択されるウイルス感染の処置に使用するための、請求項１記載の化合物。
  3. ＨＩＶウイルス感染であるウイルス感染の処置に使用するための、請求項１または２記載の化合物。
  4. ＨＩＶ−１ウイルス感染であるウイルス感染の処置に使用するための、請求項３記載の化合物。
  5. ＨＩＶウイルスに感染した、ヌクレオシド系逆転写酵素阻害剤に耐性の患者の処置に使用するための、請求項３または４記載の化合物。
  6. ４個のＲ１基がベンゾイル基である、請求項１〜５のいずれか一項記載のウイルス感染の処置に使用するための化合物。
  7. Ｒ２が、基

    および基

    ［式中、ＡｒおよびＡｒ’は、１個または複数のハロゲン原子で場合により置換されているフェニルまたはナフチル基であり、Ｒ、Ｒ’、Ｒ”およびＲ”’は、水素原子、ヒドロキシル基（ＯＨ）、アルキル、フェニル、およびアミン基ＮＲａＲｂ（ここで、ＲａおよびＲｂは、水素原子、アルキルおよびハロアルキルより選択される）より独立して選択される］
    より選択される、安定化されたホスフェート誘導体である、請求項１〜６のいずれか一項記載のウイルス感染の処置に使用するための化合物。
  8. Ｒ２が水素原子である、請求項１〜６のいずれか一項記載のウイルス感染の処置に使用するための化合物。
  9. Ｎ６，Ｎ６，Ｏ２’，Ｏ３’−テトラベンゾイルアデノシンである、請求項８記載のウイルス感染の処置に使用するための化合物。
  10. 医薬としての、請求項１〜９の一項と同義の化合物。
  11. 請求項１〜９の一項に規定した少なくとも１種の化合物および薬学的に許容されうる支持体を含む薬学的組成物。
  12. 式（Ｉ）で示される化合物がＮ６，Ｎ６，Ｏ２’，Ｏ３’−テトラベンゾイルアデノシンである、請求項１１記載の組成物。
  13. １種または複数の他の抗レトロウイルス剤も含む、請求項１０または１１記載の薬学的組成物。
  14. 経口投与に適する、請求項１１〜１３のいずれか一項記載の薬学的組成物。
  15. ＨＩＶウイルス、特にＨＩＶ−１に感染した患者が請求項１〜９の一項に規定した化合物を用いた治療に感受性であるかどうかを評価するための、ウイルスの逆転写酵素のコドン２１５における突然変異を検索することを含むin vitro方法であって、野生型トレオニンのチロシンへの置換が、該化合物に対して野生型ウイルスよりも大きな感受性であることを示す、方法。
JP2014537693A 2011-10-24 2012-10-23 ウイルス感染の処置のためのヌクレオシドアナログおよび該処置に対する感受性を評価するための方法 Pending JP2014532636A (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR1159622A FR2981650B1 (fr) 2011-10-24 2011-10-24 Analogues de nucleosides pour le traitement d'une infection virale et methode d'evaluation de la sensibilite audit traitement
FR1159622 2011-10-24
PCT/FR2012/052433 WO2013060980A1 (fr) 2011-10-24 2012-10-23 Analogues de nucleosides pour le traitement d'une infection virale, et methode d'evaluation de la sensibilite audit traitement

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2014532636A true JP2014532636A (ja) 2014-12-08
JP2014532636A5 JP2014532636A5 (ja) 2015-12-03

Family

ID=47221470

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2014537693A Pending JP2014532636A (ja) 2011-10-24 2012-10-23 ウイルス感染の処置のためのヌクレオシドアナログおよび該処置に対する感受性を評価するための方法

Country Status (6)

Country Link
US (1) US9181294B2 (ja)
EP (1) EP2771344B1 (ja)
JP (1) JP2014532636A (ja)
CA (1) CA2849969A1 (ja)
FR (1) FR2981650B1 (ja)
WO (1) WO2013060980A1 (ja)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2016057866A1 (en) * 2014-10-09 2016-04-14 Board Of Regents Of The University Of Nebraska Compositions and methods for the delivery of therapeutics
US11839623B2 (en) 2018-01-12 2023-12-12 Board Of Regents Of The University Of Nebraska Antiviral prodrugs and formulations thereof
WO2019199756A1 (en) 2018-04-09 2019-10-17 Board Of Regents Of The University Of Nebraska Antiviral prodrugs and formulations thereof

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH04500795A (ja) * 1987-10-22 1992-02-13 テンプル　ユニバーシティ　―　オブ　ザ　コモンウェルス　システム　オブ　ハイヤー　エデュケーション ２′，５′―ホスホロチオエ―トオリゴアデニレ―トおよびその抗ウィルス用途
JPH04501867A (ja) * 1989-09-22 1992-04-02 フアルミタリア・カルロ・エルバ・エツセ・エルレ・エルレ 抗ウィルス剤としての５´―アルキルホスホニルヌクレオシド
JP2007526291A (ja) * 2004-03-05 2007-09-13 ケンブリッジ・バイオテクノロジー・リミテッド アデノシン受容体アゴニスト

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PH30703A (en) * 1990-06-21 1997-09-16 Patrick T Prendergast Administering particular compounds against variousparasites, mycoplasmas, other indications and otheer indications and other infections.
US20030008841A1 (en) * 2000-08-30 2003-01-09 Rene Devos Anti-HCV nucleoside derivatives

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH04500795A (ja) * 1987-10-22 1992-02-13 テンプル　ユニバーシティ　―　オブ　ザ　コモンウェルス　システム　オブ　ハイヤー　エデュケーション ２′，５′―ホスホロチオエ―トオリゴアデニレ―トおよびその抗ウィルス用途
JPH04501867A (ja) * 1989-09-22 1992-04-02 フアルミタリア・カルロ・エルバ・エツセ・エルレ・エルレ 抗ウィルス剤としての５´―アルキルホスホニルヌクレオシド
JP2007526291A (ja) * 2004-03-05 2007-09-13 ケンブリッジ・バイオテクノロジー・リミテッド アデノシン受容体アゴニスト

Also Published As

Publication number Publication date
FR2981650B1 (fr) 2013-12-27
EP2771344B1 (fr) 2016-04-13
US20140323425A1 (en) 2014-10-30
US9181294B2 (en) 2015-11-10
CA2849969A1 (fr) 2013-05-02
WO2013060980A1 (fr) 2013-05-02
FR2981650A1 (fr) 2013-04-26
EP2771344A1 (fr) 2014-09-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI687415B (zh) Hiv蛋白質膜抑制劑之固體形式
EP3752495B1 (en) Pyridine derivatives and their use for treating hiv infection
TWI715944B (zh) 治療性化合物
JP6742403B2 (ja) アレナウイルス科およびコロナウイルス科のウイルス感染を処置するための方法
KR101822348B1 (ko) 필로비리다에 바이러스 감염을 치료하는 방법
CA3139977A1 (en) Peptidomimetics for the treatment of coronavirus and picornavirus infections
ES2325088T3 (es) Compuestos utiles en el tratamiento de hiv.
CA2999516A1 (en) Compounds and combinations for the treatment of hiv
US9849143B2 (en) Broad spectrum antiviral and methods of use
US20230151048A1 (en) Crystal form, preparation method, and application of 4′-substituted nucleoside
JP5969031B2 (ja) Ｈｉｖ複製阻害剤
MX2010010082A (es) Utilización de 4'-thio-2'-deoxinucleótidos como agentes anti-orthopoxvirus.
JP4887305B2 (ja) Ｈｉｖの治療に有用な化合物
US20110059950A1 (en) Aniline derivative having anti-rna viral activity
US9181294B2 (en) Nucleoside analogues for the treatment of a viral infection, and method for evaluating the sensitivity to said treatment
JP2024507414A (ja) ウイルス感染症治療のためのｒｏｃｋ２阻害剤
JP2008526713A5 (ja)
RU2458916C2 (ru) Производные, родственные лизину, как ингибиторы аспартилпротеазы вич
TW201736391A (zh) 作為人類鼻病毒抑制劑之炔基核苷類似物
RU2515413C2 (ru) Производные 1,2,5-оксадиазолов, обладающие анти-вич активностью, фармацевтическая композиция, способ ингибирования интегразы вич-1
US20240041854A1 (en) Cold medicine and antiviral medicine
JP2024504982A (ja) マラリアを治療するための化合物および方法
CA3167114A1 (en) Spirocyclic inhibitors of hepatitis b virus
WO2019021319A1 (en) PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS
EP3641733A1 (en) Pharmaceutical compositions

Legal Events

Date Code Title Description
RD04 Notification of resignation of power of attorney

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424

Effective date: 20150312

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20151013

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20151013

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20160906

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20161125

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20170124

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20170303

A02 Decision of refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02

Effective date: 20170321