JP2013543872A - インターフェロン−βの安定に保存される組成物 - Google Patents

Abstract

インターフェロン−βおよびペグインターフェロン−βの安定に保存される組成物が説明される。
【選択図】なし

Description

（優先権の主張）
本出願は、２０１０年１１月２２日に出願された先行の米国特許仮出願第６１／４１６，２９１号の利益を主張し、それは、参照によりその全体が組み込まれる。

本説明は、インターフェロン−βおよびペグインターフェロン−βの安定に保存される組成物に関する。

多発性硬化症（ＭＳ）は、中枢神経系の最も一般的な疾患のうちの１つであり、世界中で２５０万人を超える人々に影響を及ぼしている。多発性硬化症の治療には、患者へのインターフェロン−βの投与が挙げられる。例えば、インターフェロン−β−１ａは、米国では、ＡＶＯＮＥＸ（商標）（Ｂｉｏｇｅｎ Ｉｄｅｃ ＭＡ Ｉｎｃ．）およびＲＥＢＩＦ（商標）（ＥＭＤ Ｓｅｒｅｎｏ）の商標名で販売され、インターフェロン−β−１ｂは、米国で、ＢＥＴＡＳＥＲＯＮ（商標）（Ｂｅｒｌｅｘ）およびＥＸＴＡＶＩＡ（商標）（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）として販売されている。

インターフェロンの単回使用の薬物製剤は、防腐剤を含有しない。加えて、単回使用の薬物製品の滅菌が損なわれる場合、その薬物は２４時間以内に使用されなければならないか、さもなければ、微生物成長からの汚染による、著しい患者への安全性の問題が存在し得る。現在の複数回使用の薬物製剤は、防腐剤として機能することができる、ベンジルアルコールを含有し、一連の用量が単一の容器から投与されることを可能にする。長期間にわたり使用されるとき、タンパク質は、一般に、薬学的防腐剤の存在下で、物理的もしくは化学的に不安定になる。インターフェロン−βでは、主な問題は、分解、凝集、および脱アミド化である。

本明細書に説明される組成物は、インターフェロン−β、例えば、インターフェロン−β−１ａ、インターフェロン−β−１ｂ、ペグインターフェロン−β−１ａ、またはペグインターフェロン−β−１ｂに対して優れた安定性を与えることが見出されている。

一実施形態において、約０．０５ｍｇ／ｍｌ〜約０．２ｍｇ／ｍｌの濃度のインターフェロンβ、約１ｍｇ／ｍｌ〜６ｍｇ／ｍｌのフェノール、および約２５０ｍＭ〜３５０ｍＭのスクロース、塩、ならびに界面活性剤を含む、水性の薬学的組成物が説明される。インターフェロンβは、インターフェロンβ−１ａもしくはペグインターフェロンβ−１ａ、またはインターフェロンβ−１ｂとすることができる。インターフェロンβは、０．１ｍｇ／ｍｌの濃度、または０．２ｍｇ／ｍｌの濃度とすることができる。インターフェロンβは、約０．１〜約０．２ｍｇ／ｍｌの濃度とすることができる。フェノールは、約２．５ｍｇ／ｍｌ〜約３．５ｍｇ／ｍｌの濃度とすることができる。スクロースは、３００ｍＭの濃度、または約２５０ｍＭ〜３５０ｍＭの濃度とすることができる。塩は、酢酸ナトリウムとすることができる。界面活性剤は、ポリソルベートとすることができる。本組成物のｐＨは、約４．５〜約６．０とすることができる。本組成物のｐＨは、約４．８とすることができる。本組成物は、凍結融解サイクル後、または攪拌ストレス後に安定とすることができる。本組成物は、インターフェロン−βのモノマー損失％によって測定された場合、室温で少なくとも１ヶ月の間安定とすることができる。本組成物は、インターフェロン−βの可溶性凝集体％によって測定された場合、室温で少なくとも１ヶ月の間安定とすることができる。他の実施形態において、本組成物は、約２〜２５℃、５℃、１０℃、１５℃、２０℃、または２５℃で保管されたとき、少なくとも１日、２日、３日、４日、５日、６日、１週間、２週間、３週間、１ヶ月、またはそれ以上の間安定とすることができる。

本組成物は、複数回使用の薬学的製剤として調剤することができる。

他の特性は、例として種々の実施形態の特性を図示する付属の図面と合わせて、以下の発明を実施するための形態から明らかになるであろう。

５℃で１ヶ月後のモノマー損失％によって測定される、インターフェロン−β−１ａ製剤への凍結融解ストレスの影響のグラフ例示である。

５℃で１ヶ月後のモノマー損失％によって測定される、インターフェロン−β−１ａ製剤への７２時間の攪拌の影響のグラフ例示である。

２５℃で１ヶ月後のモノマー損失％によって測定される、インターフェロン−β−１ａ製剤への室温の影響のグラフ例示である。

５℃で１ヶ月後の凍結融解後の可溶性凝集体％によって測定される、インターフェロン−β−１ａ製剤への凍結融解ストレスの影響のグラフ例示である。

５℃で１ヶ月後の可溶性凝集体％によって測定される、インターフェロン−β−１ａ製剤への７２時間の攪拌の影響のグラフ例示である。

２５℃で１ヶ月後の可溶性凝集体％によって測定される、インターフェロン−β−１ａ製剤への室温の影響のグラフ例示である。

単回投与または複数回投与製剤に使用することができる、フェノールおよびスクロースの組み合わせを含有する、インターフェロン−βの安定に保存される組成物が説明される。

本明細書に使用されるとき、「インターフェロン」もしくは「ＩＦＮ」という用語は、ウイルス複製および細胞増殖を阻害し免疫反応を調節する、高度の相同種特異的タンパク質のファミリを意味する。ヒトインターフェロンは、αおよびβ−インターフェロンを含むＩ型、およびγ−インターフェロンのみによって表されるＩＩ型の２つのクラスにグループ分けされる。各グループの組み換え型が開発され、市販されている。各グループのサブタイプは、抗原特性／構造特性に基づく。本明細書に使用されるインターフェロンの一例は、残基８０（Ａｓｎ８０）においてグリコシル化され、かつ組み換えＤＮＡ技術を介して派生する、グリコシル化ヒトインターフェロン−βである。

このグリコシル化インターフェロン−βはまた、「インターフェロン−β−１ａ」もしくは「ＩＦＮ−β−１ａ」、または「インターフェロンβ １ａ」としても知られ、すべては互換的に使用される。「インターフェロン−β−１ａ」という用語もまた、その変異体を包含することを意味するが、ただし、かかる変異体もまた、残基８０（Ａｓｎ８０）においてグリコシル化されることを条件とする。インターフェロンを含むタンパク質を生成するための組み換えＤＮＡ方法は既知である。例えば、米国特許第４，３９９，２１６号、同第５，１４９，６３６号、および同第５，１７９，０１７号（Ａｘｅｌら）、ならびに米国特許第４，４７０，４６１号（Ｋａｕｆｍａｎ）を参照されたい。

インターフェロン−β−１ａの変異体が使用されてもよい。変異体は、当業者に既知の定方向突然変異誘発の従来の方法を使用して開発され、機能的に等価のインターフェロン−β−１ａポリペプチドに対してコードする、機能的に等価のインターフェロン−β−１ａポリヌクレオチドを含むことができる。

ヒト線維芽細胞インターフェロンの少なくとも一部、およびヒト線維芽細胞インターフェロンの免疫学的もしくは生物学的活性を有するポリペプチドの発現をコードする配列を含有する、組み換えＤＮＡプラスミドの構造もまた、企図される。異なるサブタイプ配列の組み合わせを含有する、ハイブリッドβ−インターフェロン遺伝子の構造は、当業者に既知の技術によって達成することができる。

本明細書に説明される組成物に使用し得る、典型的な好適な組み換えインターフェロン−βには、ＡＶＯＮＥＸ（商標）（Ｂｉｏｇｅｎ Ｉｄｅｃ ＭＡ Ｉｎｃ．）およびＲＥＢＩＦ（商標）（ＥＭＤ Ｓｅｒｏｎｏ）等のインターフェロンβ−１ａ、ならびにＢＥＴＡＳＥＲＯＮ（商標）（Ｂｅｒｌｅｘ）およびＥＸＴＡＶＩＡ（商標）（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）として米国で販売されるインターフェロン−β−１ｂが挙げられるが、これらに限定されない。

インターフェロン−βタンパク質は、Ｃ１〜Ｃ４アルキルポリアルキレングリコール、好ましくはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）のポリアルキレングリコール残基、またはかかるグリコールのポリ（オキシ）アルキレングリコール残基に抱合され得る。したがって、タンパク質が付着されるポリマーは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）のホモポリマーであってもよいか、またはポリオキシエチル化ポリオールであるが、ただし、すべての場合において、ポリマーが室温の水中で可溶性であることを条件とする。かかるポリマーの非制限的な例には、ＰＥＧ、またはポリプロピレングリコール、もしくはポリオキシエチル化グリコール等のポリアルキレンオキシドホモポリマー、そのコポリマーもしくはそのブロックコポリマーが挙げられるが、ただし、ブロックコポリマーの水溶性が維持されることを条件とする。ポリオキシエチル化ポリオールの例には、例えば、ポリオキシエチル化グリセロール、ポリオキシエチル化ソルビトール、ポリオキシエチル化グルコース、または同等物が挙げられる。ポリオキシエチル化グリセロールのグリセロール主鎖は、モノグリセリド、ジグリセリド、またはトリグリセリドにおいて、例えば、動物もしくはヒトに天然に存在する、同一の主鎖である。したがって、この分岐は、必然的に、体内では外来薬剤とみなされない。

ポリアルキレンオキシドの代替として、デキストラン、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール、炭水化物ベースのポリマー、または同等物が使用され得る。当業者は、先述のリストが単に例示であり、本明細書に説明される特性を有するすべてのポリマー材料が企図されることを認識するであろう。ポリマーは、任意の特定の分子量を有する必要はないが、分子量が約３００〜１００，０００、より好ましくは、１０，０００〜４０，０００であることが好ましい。特に、２０，０００以上のサイズは、腎臓内の濾過によるタンパク質損失を防止する上で最も優れている。

ポリアルキレングリコール誘導体化は、ポリアルキレングリコール誘導体の以下の特性に関連する場合、ポリマー−インターフェロン−β−１ａ抱合体の調剤において多くの有益な特性を有する。すなわち、同時に抗原反応もしくは免疫反応を誘発しない水溶解度の改善、高度な生体適合性、ポリアルキレングリコール誘導体のインビボ生分解の非存在、および有機体による***の容易さである。ＰＥＧへのインターフェロン−βの抱合は、米国特許第７，４４６，１７３号、および米国特許公開第２００５０１０７２７７号にさらに説明されており、それらの両方は、参照により本明細書に組み込まれる。

本明細書に説明される組成物は、水性の薬学的組成物として調剤することができる。代替的には、本明細書に説明されるインターフェロン−βは、凍結乾燥型に調剤することができ、希釈剤を含むことができる。インターフェロン−βの安定した組成物は、長期間にわたり、例えば、１２ヶ月、２４ヶ月、３６ヶ月、またはそれより長く、１つ以上の凝集、フラグメンテーション、脱アミド化、酸化、または生物活性における変化のいずれかをわずかに呈するか、または全く呈しない。例えば、一実施形態において、１０％未満の組成物が凝集、フラグメント化、または酸化される。凝集、沈殿、および／または変性は、色および／または透明度の目視検査等の既知の方法によって、またはＵＶ光散乱もしくはサイズ排除クロマトグラフィーによって評価することができる。ＨＰＬＣもしくは逆相ＨＰＬＣ（ＲＰ−ＨＰＬＣ）、またはＨＰＬＣの変形を使用して、組成物中の共有的に無傷で、かつ可溶性のタンパク質の量を測定し得る。タンパク質の損失は、不安定が原因の分解を示す。使用することができる他の既知の方法は、参照により本明細書に組み込まれる、Ｍａｎｎｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．４，Ａｐｒｉｌ ２０１０に説明されており、タンパク質製剤の安定性を測定するためにも使用され得る。

タンパク質のその生物活性を保持する能力は、タンパク質の化学的に変化された形態を検出し、定量化することによって評価することができる。サイズ変更（例えば、クリッピング）は、例えば、サイズ排除クロマトグラフィー、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、および／またはマトリックス支援レーザー脱離イオン化／飛行時間型質量分析法（ＭＡＬＤＩ／ＴＯＦ ＭＳ）、またはエンドプロテイナーゼで処理されたタンパク質のペプチドマッピングを使用して評価することができる。化学的変化の他の種類には、荷電変化（例えば、脱アミド化の結果、生じる）が挙げられ、例えば、イオン交換クロマトグラフィーによって評価することができる。タンパク質は、所与の時間におけるタンパク質の生物活性が、アッセイにおいて決定されるように、薬学的製剤が調製された時点で呈された生物活性の約１０％以内である場合、薬学的製剤におけるその生物活性を保持する。

インターフェロン−βもしくはインターフェロン−β−１ａは、例えば、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約０．９ｍｇ／ｍｌ、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約０．５ｍｇ／ｍｌ、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約０．３ｍｇ／ｍｌ、または約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約０．２ｍｇ／ｍｌの濃度の緩衝溶液中に提供することができる。インターフェロン−β−１ａは、０．２５ｍｇ／ｍｌの濃度の緩衝溶液中に提供することができる。本組成物は、２〜２５℃、５℃、１０℃、１５℃、２０℃、または２５℃で保管することができる。本組成物は、１日、２日、３日、４日、または５日、またはそれ以上の間室温で安定とすることができる。室温は、約１８℃、１９℃、２０℃、２１℃、２２℃、２３℃、２４℃、または２５℃とすることができる。本組成物は、第１の低温、例えば、１８℃未満もしくはほぼ氷点下であるが、１５℃以下、１０℃以下、もしくは４℃以下で保管することができ、第２のより高い温度、例えば、冷蔵せずに、または室温で約１〜５日間保存することができる。他の実施形態において、下記に説明されるように調剤されるインターフェロン−βは、２〜２５℃、５℃、１０℃、１５℃、２０℃、または２５℃で保管されたとき、少なくとも１日、２日、３日、４日、５日、６日、１週間、２週間、３週間、１ヶ月、またはそれ以上安定とすることができる。

一実施形態において、インターフェロン−β−１ａは、フェノール、スクロース、塩、界面活性剤で調剤することができる。別の実施形態において、凍結乾燥されたインターフェロン−β−１ａは、フェノール、スクロース、塩、および／または界面活性剤を含む希釈剤で再構築することができる。本組成物は、抗酸化剤を用いずに調製することができる。本組成物は、メチオニンを含まなくてもよい。一実施形態において、製剤は、１ｍｇ／ｍｌ〜６ｍｇ／ｍｌ、２ｍｇ／ｍｌ〜５ｍｇ／ｍｌ、または２ｍｇ／ｍｌ〜４ｍｇ／ｍｌの濃度のフェノールで調製することができる。本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌ〜３．５ｍｇ／ｍｌの濃度のフェノールで調製することができる。本組成物は、約２．５ｍｇ／ｍｌ、２．６ｍｇ／ｍｌ、２．７ｍｇ／ｍｌ、２．８ｍｇ／ｍｌ、２．９ｍｇ／ｍｌ、３．０ｍｇ／ｍｌ、３．１ｍｇ／ｍｌ、３．２ｍｇ／ｍｌ. ３．３ｍｇ／ｍｌ、３，４ｍｇ／ｍｌ、３．５ｍｇ／ｍｌの濃度のフェノールで調製することができる。本組成物は、約２５０ｍＭ、３００ｍＭ、３５０ｍＭ、または４００ｍＭの濃度のスクロースで調製することができる。スクロースは、等張剤として機能し得るため、等張剤（複数可）は、体液と同一もしくは実質的に同一の浸透圧を溶液に付与する量で使用し得る。デキストロース、マンニトール、またはラクトース等の他の糖を使用することができる。

本組成物は、抗体の所望の生物活性を保持し、いかなる望ましくない毒性効果も付与しない塩を指す、薬学的に許容される塩を含むことができる（例えば、Ｂｅｒｇｅ，Ｓ．Ｍ．，ｅｔ ａｌ．（１９７７）Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．６６：１−１９を参照）。かかる塩の例には、酸付加塩および塩基付加塩が挙げられる。酸付加塩には、塩酸、硝酸、リン酸、硫酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、または同等物等の非毒性無機酸、ならびに脂肪族モノカルボン酸およびジカルボン酸、フェニル置換酸アルカン酸、ヒドロキシアルカン酸、芳香族酸、脂肪族および芳香族スルホン酸、遊離アミノ酸、または同等物等の非毒性有機酸に由来するものが挙げられる。塩基付加塩には、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、または同等物等のアルカリ土類金属、ならびにＮ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、Ｎ−メチルグルカミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、プロカイン、または同等物等の非毒性有機アミンに由来するものが挙げられる。

本組成物は、約１０ｍＭ〜約２００ｍＭの濃度の酢酸ナトリウムまたは塩化ナトリウム等の塩を含むことができる。本組成物は、２０ｍＭ、３０ｍＭ、４０ｍＭ、５０ｍＭ、１００ｍＭ、１２５ｍＭ、１５０ｍＭ、または１７５ｍＭの濃度の酢酸ナトリウムを含有することができる。

別の実施形態において、本組成物は、約０．００１％〜約２．０％、約０．００４％〜約０．４％、約０．００８〜約０．２％、または約０．０２％〜約０．０８％（ｗ／ｖ）（例えば、約０．０１％、約０．０２％、約０．０３％、約０．０４％、約０．０５％、約０．０６％、約０．０７％、約１％、または約１．５％）の量の、ポリソルベート８０等の界面活性剤等の薬学的に許容される賦形剤を含有することができる。使用することができる他の賦形剤には、ポリオキシエチレン誘導体、Ｔｗｅｅｎ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ、モノステアリン酸グリセリン、ステアリン酸ポリオキシル、ラウロマクロゴール、またはオレイン酸ソルビタンを挙げることができる。本組成物のｐＨは、約６．０±０．５、約５．０±０．５、約６．０±０．５、または約７．０±０．５とすることができる。本組成物のｐＨは、４．８とすることができる。本組成物のｐＨは、約ｐＨ４．５〜約６．０とすることができる。

薬学的組成物は、製造および保管条件下では滅菌されており、安定している。薬学的組成物は、それが投与のための規制基準および業界基準を確実に満たすように試験することもできる。

インターフェロンで治療することができる例示的状態には、細胞増殖障害、特に、多発性硬化症、癌（例えば、有毛細胞白血病、カボジ肉腫、慢性骨髄性白血病、多発性骨髄腫、基底細胞癌、および悪性黒色腫、卵巣癌、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫）、またはウイルス感染が挙げられるが、これらに限定されない。制限することなく、インターフェロンでの治療を使用して、インターフェロン感受性ウイルスの複製を抑制することで効果がある状態を治療し得る。例えば、インターフェロンは、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）／ＡＩＤＳの治療において、単独、もしくはＡＺＴと組み合わせて、またはＨＣＶの治療において、リバビリンと組み合わせて使用することができる。本発明に従い治療し得るウイルス感染には、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、他の非Ａ／非Ｂ型肝炎、ヘルペスウイルス、エプスタイン・バー・ウイルス（ＥＢＶ）、サイトメガロ・ウイルス（ＣＭＶ）、単純ヘルペス、ヒトヘルペスウイルス６型（ＨＨＶ−６）、パピローマ、ポックスウイルス、ピコルナウイルス、アデノウイルス、ライノウイルス、ヒトＴリンパ向性ウイルス１型および２型（ＨＴＬＶ−１／−２）、ヒトロタウイルス、狂犬病、ＨＩＶを含むレトロウイルス、脳炎、または呼吸器ウイルス感染が挙げられるが、これらに限定されない。

ＩＦＮ−βもしくはペグＩＦＮ−βは、上述の状態のうちのいずれかを治療するために、薬理学的に有効な量で投与される。「薬理学的に有効な量」という用語は、研究者もしくは臨床医によって求められている組織、系統、動物もしくはヒトの生物反応または医学的反応を誘発する、薬物もしくは医薬品の量を意味する。肯定的な臨床反応に著しく影響し、一方、低下したレベルの副作用を維持するのに十分な量である。それを必要とする被験者に投与され得るＩＦＮ−βの量は、０．０１〜１００μｇ／ｋｇ、または、より好ましくは、０．０１〜１０μｇ／ｋｇの範囲であり、単回投与または分割投与で投与される。説明される投与量の投与は、１日おきであり得るが、好ましくは、１週間に１回、または１週間おきに生じる。投与量は、注射によって、少なくとも２４週間の期間にわたって投与される。本明細書に説明される組成物を利用する投与量レジメンは、型、種、年齢、体重、性別、および患者の医学的状態、治療される状態の重度、投与経路、患者の腎機能および肝機能、または採用される特定の化合物もしくはその塩を含む、様々な因子に従い選択される。インターフェロン−βの活性および患者の副作用に対する感度も考慮される。当業者の医師もしくは獣医は、状態の進行を防止、抵抗、または停止するために必要な薬物の有効量を容易に決定し、処方することができる。

さらに別の実施形態において、本組成物は、皮下投与もしくは筋肉内投与に好適である。さらに別の実施形態において、本組成物は、ＩＶ投与に好適である。本明細書に説明される組成物は、非経口様式（例えば、皮下、腹腔内、または筋肉内注射）によって投与することができる。本明細書に使用されるとき、「非経口投与」および「非経口的に投与される」という語句は、通常注射による、腸内および局所投与以外の投与様式を意味し、皮下もしくは筋肉内投与、ならびに、静脈内、嚢内、眼窩内、心腔内、皮内、腹腔内、経気管、表皮下、嚢下、くも膜下、髄腔内、硬膜外、および胸骨内注射もしくは注入を含む。投与量の投与は、静脈内、皮下、筋肉内、または任意の他の許容される全身性方法であってもよい。主治医の判断に基づき、投与される薬物の量および使用される治療レジメンは、もちろん、局所毒性または全身性副作用によって明らかな場合、治療される患者の年齢、性別、既往歴、好中球数（例えば、好中球減少症の重度）、特定の疾患状態の重度および患者の治療に対する耐性に依る。

非経口注射可能な投与は、一般に、皮下、筋肉内、または静脈内注射もしくは注入に使用される。例えば、皮下注射を使用して、１週間にわたり、０．０１〜１００μｇ／ｋｇ、またはより好ましくは、０．０１〜１０μｇ／ｋｇのペグＩＦＮ−βを送達するとき、それぞれ０．００５〜５０μｇ／ｋｇ以上、またはより好ましくは、０．００５〜５μｇ／ｋｇの２回の注射は、０時間、および７２時間に投与され得る。加えて、非経口投与のための１つのアプローチは、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第３，７１０，７９５号に従う、一定レベルの用量が維持されるのを保証する、除放もしくは持続放出システムの埋め込みを採用する。

注射用の凍結乾燥された組成物は、例えば、溶解、分散等によって調製することができる。活性化合物は、例えば、水、生理食塩水、水性ブドウ糖、グリセロール、エタノール、または同等物等の薬学的に純粋の溶媒中に溶解されるか、またはそれと混合され、注射可能な溶液もしくは懸濁液を形成する。加えて、注射前に液体中で溶解するのに好適な固体／凍結乾燥形状は、調剤することができる。注射可能な組成物は、好ましくは、水性の等張溶液もしくは懸濁液である。本組成物は、滅菌されてもよく、かつ／または保存剤、安定化剤、湿潤剤、または乳化剤等のアジュバント、溶液プロモーター、浸透圧および／もしくは緩衝液を調整するための塩を含有してもよい。加えて、それらはまた、他の治療的に有益な物質も含有し得る。

薬学的組成物は、医療用デバイスを用いて投与することができる。例えば、薬学的組成物は、米国特許第５，３９９，１６３号、同第５，３８３，８５１号、同第５，３１２，３３５号、同第５，０６４，４１３号、同第４，９４１，８８０号、同第４，７９０，８２４号、または同第４，５９６，５５６号に開示されるデバイス等の無針皮下注射デバイスを用いて投与することができる。公知のインプラントおよびモジュールの例には、制御した速度で薬剤を分配するための埋め込み型マイクロ注入ポンプを開示する米国特許第４，４８７，６０３号、皮膚を介して薬剤を投与するための治療用デバイスを開示する米国特許第４，４８６，１９４号、正確な注入速度で薬剤を送達するための薬剤注入ポンプを開示する米国特許第４，４４７，２３３号、連続的薬物送達のための変流量の埋め込み型注入装置を開示する米国特許第４，４４７，２２４号、マルチチャンバコンパートメントを有する浸透圧薬物送達システムを開示する米国特許第４，４３９，１９６号、および浸透圧薬物送達システムを開示する米国特許第４，４７５，１９６号が挙げられる。治療用組成物はまた、皮下もしくは筋肉内投与のための生分解性もしくは非生分解性の持続放出製剤の形状であってもよい。例えば、米国特許第３，７７３，９１９号、および同第４，７６７，６２８号、ならびにＰＣＴ出願第ＷＯ９４／１５５８７号を参照されたい。連続投与もまた、埋め込み型もしくは外部ポンプを使用して達成することができる。投与もまた、断続的に、例えば、１日１回の注射、または低投与量で連続的に、例えば、持続放出製剤で実施することもできる。送達デバイスは、インターフェロン−βの投与に最適に適するように変更することができる。例えば、シリンジは、インターフェロン−βの保管および送達に最適である範囲までシリコン処理することができる。もちろん、多くの他のかかるインプラント、送達システム、およびモジュールも既知である。

インターフェロンβ−１ａ（１００μｇ／ｍｌ）、スクロース（３００ｍＭ）、フェノール（２．５ｍｇ／ｍｌもしくは３．５ｍｇ／ｍｌのいずれか）、ポリソルベート２０（０．００５ｗ／ｖ％）、酢酸ナトリウム（２０ｍＭ）、ｐＨ４．８を含有する製剤試験サンプルを、２０ｍＭの酢酸緩衝液中で、０．３ｍｇ／ｍｌインターフェロンβ−１ａの原液から調製した。同様に、ＲＥＢＩＦ（商標）およびＡＶＯＮＥＸ（商標）製剤組成物に対応する比較組成物もまた、１００μｇ／ｍｌのインターフェロンβ−１ａ濃度で調製した。ＲＥＢＩＦ（商標）製剤組成物に対応する比較組成物は、ｐＨ４．０で、１０ｍＭの酢酸ナトリウム、２４７ｍＭのマンニトール、０．８ｍＭのＬ−メチオニン、０．０５ｗ／ｖ％のポロキサマー１８８，４６ｍＭのベンジルアルコールをさらに含有する。ＡＶＯＮＥＸ（商標）製剤組成物に対応する比較組成物は、ｐＨ４．８で、２０ｍＭの酢酸ナトリウム、１５０ｍＭのＬ−アルギニンＨＣｌ、０．００５ｗ／ｖ％のポリソルベート２０を含有する。

すべての溶液を、０．２２μｍの真空ろ過ユニット（Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｐ／Ｎ４３１１５３、４３１０９６、４３１０９７および４３１０９８、ならびにＭｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｐ／Ｎ ＳＧＰ００５２５）を使用して滅菌ろ過した。これらの製剤を、適切な量の賦形剤原液を移すことによって、滅菌フード内で調製した。ｐＨ値を０．１ＭのＮａＯＨもしくは１ＭのＨＣｌを使用して標的値に調整した。最終的に調剤された溶液を０．２２μｍのＭｉｌｌｉｐｏｒｅの５０ｍｌの使い捨て真空ろ過ユニット（Ｐ／Ｎ ＳＧＰ００５２５）を使用して滅菌ろ過した。アリコートを滅菌フード内で、加圧滅菌された５ｍｌのバイアル（２０ｍｍのワイドネック、ガラスタイプ８４１２−Ｇ、Ｗｅｓｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，Ｐ／Ｎ６８０００３１８）および加圧滅菌されたストッパー（２０ｍｍのＦｌｏｒｏｔｅｃ，Ｗｅｓｔ Ｐ／Ｎ １９７０００２２）内に移した（各調剤に対して２ｍｌ）。すべてのバイアルにキャップをした後、各製剤に対して色分けを使用し、それらをフードから移し、圧着した。以下の組成物を下記に説明されるすべての実験に使用した：インターフェロンβ−１ａ（１００μｇ／ｍｌ）、スクロース（３００ｍＭ）、フェノール（２．５ｍｇ／ｍｌもしくは３．５ｍｇ／ｍｌのいずれか）、ポリソルベート２０（０．００５ｗ／ｖ％）、酢酸ナトリウム（２０ｍＭ）、ｐＨ４．８。

図１は、凍結融解サイクルおよび５℃で１ヶ月の保管後のモノマー損失％によって測定される、ＡＶＯＮＥＸ（商標）およびＲＥＢＩＦ（商標）の市販の製剤に対応する比較製剤に対する試験製剤の安定性への凍結融解ストレスの影響を示す。図１は、防腐剤の不安定効果を示す。ＡＶＯＮＥＸ（商標）は、防腐剤が存在しない、図１に示される唯一の製剤である。データは、フェノールの存在下で、スクロースがソルビトールまたはアルギニンよりも有効な安定剤であることを示す。

各製剤のサンプルを、環境温度で７２時間の攪拌研究のために、６５０ｒｐｍの回転シェーカー上に設置した。図２は、７２時間の攪拌、および５℃で１ヶ月の保管後のモノマー損失％によって測定される、ＡＶＯＮＥＸ（商標）およびＲＥＢＩＦ（商標）の市販の製剤に対応する比較製剤に対する試験製剤の安定性への攪拌ストレスの影響を表す。データは、フェノールの存在下で、スクロースがソルビトールもしくはアルギニンよりも有効な安定剤であることを表す。データは、スクロース−フェノール組成物が、ＡＶＯＮＥＸ（商標）およびＲＥＢＩＦ（商標）製剤に対応する比較製剤よりも安定していたことをさらに示す。

各製剤のサンプルを、５℃、２５℃、および４０℃で保管した。図３は、２５℃で１ヶ月後のモノマー損失％によって測定される、ＡＶＯＮＥＸ（商標）およびＲＥＢＩＦ（商標）の市販の製剤に対応する比較製剤に対する試験製剤の安定性への室温の影響を表す。データは、フェノールの存在下で、スクロースがソルビトールもしくはアルギニンよりも有効な安定剤であることを表す。

サンプルに１週間の期間にわたる、５回の凍結融解サイクル（凍結のために−７０℃、解凍のために環境温度）を受けさせた。時点を、Ｔ＝０、１週間、２週間、１ヶ月、および３ヶ月で取り、分析した。図４は、凍結融解サイクル、および５℃で１ヶ月の保管後の可溶性凝集体％で測定される、ＡＶＯＮＥＸ（商標）およびＲＥＢＩＦ（商標）の市販の製剤に対応する比較製剤に対する試験製剤の安定性への凍結融解ストレスの影響を示す。データは、フェノールの存在下で、スクロースがソルビトールもしくはアルギニンよりも有効な安定剤であることを表す。

各製剤のサンプルを、環境温度で７２時間の攪拌研究のために、６５０ｒｐｍの回転シェーカー上に設置した。図５は、７２時間の攪拌、および５℃で１ヶ月の保管後の可溶性凝集体％によって測定される、ＡＶＯＮＥＸ（商標）およびＲＥＢＩＦ（商標）の市販の製剤に対応する比較製剤に対する試験製剤の安定性への攪拌ストレスの影響を表す。データは、フェノールの存在下で、スクロースがソルビトールもしくはアルギニンよりも有効な安定剤であることを表す。

各製剤のサンプルを、５℃、２５℃、および４０℃で保管した。図６は、２５℃で１ヶ月後の可溶性凝集体％によって測定される、ＡＶＯＮＥＸ（商標）およびＲＥＢＩＦ（商標）の市販の製剤に対応する比較製剤に対する試験製剤の安定性への室温ストレスの影響を表す。データは、フェノールの存在下で、スクロースがソルビトールもしくはアルギニンよりも有効な安定剤であることを表す。データはまた、２．５〜３．５ｍｇ／ｍｌのフェノールの範囲の下限に向かうレベルにおいて、スクロース−フェノール製剤が、ＲＥＢＩＦ（商標）の市販の製剤に対応する比較製剤よりも安定し得ることを示唆する。

製剤を、２０ｍＭの酢酸緩衝液中で適切な量の賦形剤をインターフェロン−β−１ａの原液に追加することによって調製し、表１に記載される組成物を達成した。表１は、フェノールおよびｍ−クレゾール等の異なる防腐剤の存在下で、スクロース、マンニトール、グリシン、アルギニン、アルギニンＨＣｌ、ソルビトール、硫酸ナトリウム、ポリソルベート２０、塩化ナトリウムを含む安定剤のインターフェロン−β−１ａへの安定化効果を表す。インターフェロン−β−１ａの安定性を、２５℃で０日後、４日後、または２４日後に、ＲＰ−ＨＰＬＣを使用して、タンパク質濃度に基づき測定した。定量化は、不安定な製剤がタンパク質濃度を損失するという事実に基づいた。この安定化スクリーニングでは、酢酸ナトリウム中の２０ｍＭのＩＦＮ−β−１ａ、ｐＨ４．８を使用した。以下の安定剤の濃度、５０ｍｇ／ｍｌのスクロース、５０ｍｇ／ｍｌのマンニトール、５０ｍｇ／ｍｌのグリシン、１５０ｍＭのアルギニン、１５０ｍＭのアルギニンＨＣｌ、２５ｍｇ／ｍｌのソルビトール、７５ｍＭの硫酸ナトリウム、１ｍｇ／ｍｌのポリソルベート２０（０．１ｗ／ｖ％）、１５０ｍＭの塩化ナトリウムを使用した。以下の防腐剤の濃度、３ｍｇ／ｍｌのｍ−クレゾール、３ｍｇ／ｍｌのフェノールを使用した。

表１の測定値は、マイクログラム／ｍＬのタンパク質濃度である。表１に示されるように、製剤中のスクロースおよびフェノールの存在下で、タンパク質濃度の損失は無かったが、フェノールおよびｍ−クレゾールの存在もしくは不在下で、９個中の６個の安定剤の存在下で、著しいタンパク質濃度の損失があった。

示されるデータに基づき、スクロースは、攪拌、凍結融解、および上昇温度研究において、２．５ｍｇ／ｍｌおよび３．５ｍｇ／ｍｌの両方のフェノールの存在下で、最良の安定剤であると思われる。

上述の様々な実施形態は、例示目的のみで提供され、特許請求される本発明を制限すると解釈されてはならない。当業者は、本明細書に例示され、説明される実施例的実施形態および応用に従うことなく、かつ以下の特許請求の範囲に記載される特許請求される本発明の真の精神および範囲から逸脱することなく、特許請求される本発明に行われ得る様々な修正および変更を容易に認識するであろう。

Claims (20)

1. 約０．０５ｍｇ／ｍｌ〜約０．２ｍｇ／ｍｌの濃度のインターフェロンβ、約１ｍｇ／ｍｌ〜６ｍｇ／ｍｌのフェノール、および約２５０ｍＭ〜３５０ｍＭのスクロース、塩、ならびに界面活性剤を含む、水性薬学的組成物。
2. 前記インターフェロンβがインターフェロンβ−１ａである、請求項１に記載の組成物。
3. 前記インターフェロンβがペグインターフェロンβ−１ａである、請求項１に記載の組成物。
4. 前記インターフェロンβがインターフェロンβ−１ｂである、請求項１に記載の組成物。
5. 前記インターフェロンβがペグインターフェロンβ−１ｂである、請求項１に記載の組成物。
6. 前記インターフェロンβが、０．１ｍｇ／ｍｌの濃度である、請求項１に記載の組成物。
7. 前記インターフェロンβが、０．２ｍｇ／ｍｌの濃度である、請求項１に記載の組成物。
8. 前記インターフェロンβが、約０．１〜約０．２ｍｇ／ｍｌの濃度である、請求項１に記載の組成物。
9. 前記フェノールが、約２．５ｍｇ／ｍｌ〜約３．５ｍｇ／ｍｌの濃度である、請求項１に記載の組成物。
10. 前記スクロースが、約２５０ｍＭ〜３５０ｍＭの濃度である、請求項１に記載の組成物。
11. 前記スクロースが、３００ｍＭの濃度である、請求項１に記載の組成物。
12. 前記塩が酢酸ナトリウムである、請求項１に記載の組成物。
13. 前記界面活性剤がポリソルベートである、請求項１に記載の組成物。
14. ｐＨが、約４．５〜約６．０である、請求項１に記載の組成物。
15. ｐＨが、約４．８である、請求項１に記載の組成物。
16. 前記組成物が、凍結融解サイクル後に安定している、請求項１に記載の組成物。
17. 前記組成物が、攪拌ストレス後に安定している、請求項１に記載の組成物。
18. 前記組成物が、インターフェロン−βのモノマー損失％によって測定された場合、室温で少なくとも１ヶ月の間安定している、請求項１に記載の組成物。
19. 前記組成物が、インターフェロン−βの可溶性凝集体％によって測定された場合、室温で少なくとも１ヶ月の間安定している、請求項１に記載の組成物。
20. 前記組成物が、複数回使用の薬学的製剤として調剤される、請求項１に記載の組成物。

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