JP2012144552A - 発現増強ポリペプチド - Google Patents
発現増強ポリペプチド Download PDFInfo
- Publication number
- JP2012144552A JP2012144552A JP2012057380A JP2012057380A JP2012144552A JP 2012144552 A JP2012144552 A JP 2012144552A JP 2012057380 A JP2012057380 A JP 2012057380A JP 2012057380 A JP2012057380 A JP 2012057380A JP 2012144552 A JP2012144552 A JP 2012144552A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- polypeptide
- cys2
- cys1
- gly
- complex
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4702—Regulators; Modulating activity
- C07K14/4705—Regulators; Modulating activity stimulating, promoting or activating activity
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/62—DNA sequences coding for fusion proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/67—General methods for enhancing the expression
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
- C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
- C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
【解決手段】上記のEEDは第一および第二のシステインアミノ酸残基Cys1およびCys2をそれぞれ含み、Cys1は複合体ポリペプチド分子のN末端に対してCys2よりも近くに位置し、ここでCys1およびCys2はポリペプチドリンカーによって分離され、該リンカーは、システインおよびプロリンを含まず;Cys1およびCys2が分子内ジスルフィド結合で互いと結合する事を可能にするために十分な長さを定義し;かつ水溶液中で第二のポリペプチド構造を本質的に含まない、柔軟なポリペプチド高次構造を有し、ここで少なくとも1つのCys1およびCys2は、誘導体化部分によって誘導体化される複合体ポリペプチド。
【選択図】なし
Description
・システインおよびプロリンを含まず;
・Cys1およびCys2が分子内ジスルフィド結合で互いに結合する事を可能にするのに十分な長さを定義し;かつ
・水溶液中でポリペプチドの二次構造を本質的に含まない、柔軟なポリペプチド立体構造を有し、
ここでCys1およびCys2の少なくとも1つは、誘導体化成分によって誘導体化される。
(a)所望のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を提供する段階;
(b)所望のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列のどちらかの端に、発現増強ドメイン(「EED」)をコードするヌクレオチド配列を組み込む段階であって、EEDをコードしている該ヌクレオチド配列が第一および第二のシステインアミノ酸残基であるCys1およびCys2のコドンをそれぞれ含み、Cys1のコドンが、ヌクレオチド配列の5'末端に対してCys2のコドンよりも近くに位置し、ここで、Cys1およびCys2のコドンはポリペプチドリンカーをコードするヌクレオチド配列によって隔てられ、該リンカーはシステインを含まず; かつCys1およびCys2が分子内ジスルフィド結合で互いに結合することを可能にするのに十分な長さを定義する、段階;
(c)段階(b)からのヌクレオチド配列を、宿主の発現系に適切なベクターでトランスフェクトする段階;
(d) 段階(b)からのヌクレオチド配列の発現を生じさせるのに適切な条件下で宿主の発現系をインキュベートする段階;
(e)段階(d)において発現したポリペプチドを単離して複合体ポリペプチドを得る段階。
実施例1:C末端(His)6-Cys-(Gly)4-Cys-Proタグを有するscFv(すなわち上記のEEDを有するscFv)のクローニングおよび発現
scFv分子、すなわち重鎖抗体可変領域および軽鎖抗体可変領域とそれらの間に配置される(Gly4Ser)3ポリペプチドリンカーとを統合するポリペプチドを、本発明の構想を実証するためのモデル分子として使用した。本scFvは、所定の抗原に特異的に結合し、この所定の抗原を以降「抗原」と称する。C末端(His)6-Cys-(Gly)4-Cys-Proタグを有するscFvをVL特異的プライマーを用いるPCR反応により構築し、一方scFvヌクレオチド配列は、(His)6-Cys-(Gly)x-Cys-Proモチーフの各ヌクレオチド配列
のそれぞれによって独立して伸長させた。これにより、それぞれが長さの異なるグリシンリンカーにより隔てられた2つのシステイン残基を有するC末端タグを有する、4つの別々のscFvをコードする4つのヌクレオチド配列が得られた。このHisタグは、後の検出および精製段階において使用した。結果として生じたVL断片は、制限酵素認識部位SalIおよびNotI(PCRにより導入)を介して、pelBリーダー配列の後に対応するVHを含むpBADpelB(InvitrogenのベクターpBADMycA-Hisに由来)に、ペリプラズム(periplasmic)発現のためにサブクローニングした。熱ショック適格性の大腸菌(E.coli)XL1Blueへの形質転換の後単一のクローンを選択培地(LB、50μg/mlのカルベニシリン)において培養し、プラスミドを標準的なプロトコールに従って調製した。挿入物を配列決定することにより、クローニングの成功が確認された(Sequiserve, Munich)。
図1に見られるように、抗原に結合したscFvについての最も高い収量は、2つのC末端システイン間のリンカーとして4つのグリシンを有する構築物で観察された。
(His)6-Cys-(Gly)4-Cys-Proタグと共に伸長させたscFv(すなわち上記のEEDを有するscFv。図2で「4Gly」と称される)、および(His)6-Cys-Pro C末端タグと共に伸長させたscFv(すなわち上記のEEDを含まないscFv、図2で「HCP」と称される)のタンパク質発現レベルを比較した。両方の構築物は、大腸菌株BL21DE3を使用して小規模で分析した。それぞれの場合において、10個の異なるコロニーを、5mlのSB / 20mMのMgCl2 / 50μg/mlのカルベニシリン中に、37℃で4時間、振とう培養器において播種した。0.2%のL-アラビノースを細胞培養物に添加し、かつ温度を30℃に減少することによって再びタンパク質産生を開始した。終夜の誘導期の後、細胞を回収し、1mlのPBS中に再懸濁し、ペリプラズム画分を凍結/解凍方法により単離し、および、実施例1に説明したように、抗原特異的ELISAで分析した。本分析の結果を図2に示す。ELISAの結果は、C末端(His)6-Cys-Proモチーフを含むが第二のシステイン残基を欠いているscFv種と比較した、粗製ペリプラズム中に存在する(His)6-Cys-(Gly)4-Cys-Proタグ(「4Gly」)を有するscFvの有意に増加した収量を、明らかに示す。従って、C末端タグ(すなわち上記のEED)中の2つのシステイン残基間で制御された分子内ジスルフィド結合を形成する能力は明らかに、産生収量の増大の達成にとって極めて重要である。
大腸菌BL21DE3を発現プラスミドによって形質転換し、選択寒天培地上で増殖させた。単一のコロニーを、5mlのLB、50μg/mlのカルベニシリンに終夜37℃で播種するために使用した。産生培養のため、2lのシェーカフラスコ中の500mlのSB / 20mMのMgCl2 / 50μg/mlのカルベニシリンに終夜培養物の細菌懸濁液を播種し、37℃で増殖させて、光学濃度をOD600で0.6〜0.8とした。タンパク質産生を、L-アラビノースを添加して最終濃度を0.2%とすること、および30℃に温度を低下させることによって誘導した。30℃で終夜の産生期の後に細菌を回収し、40mlのPBS中に再懸濁した。外膜を温度ショックにより破壊し、scFv断片を含む溶解性のペリプラズムタンパク質を液体中に遊離させた。遠心分離による無傷の細胞および細胞片の除去後、上清をさらなる精製に使用した。
フリーのシステインのペグ化は、安定した均質なscFv-PEG複合体を生じさせるはずである。C末端(His)6-Cys-(Gly)4-Cys-Proタグを有する精製scFvおよびC末端(His)6-Cys-Proタグを有する精製scFvをそれぞれ含有する2つのタンパク質溶液を、最終濃度2mMのDTTと共に1時間室温でインキュベートすることによって末端ジスルフィド架橋を還元し、2つのフリーのスルフヒドリル基を生じさせた。
Claims (22)
- 所望のポリペプチドおよび発現増強ドメイン(「EED」)を含み、該EEDが第一および第二のシステインアミノ酸残基Cys1およびCys2をそれぞれ含み、Cys1が複合体ポリペプチド分子のN末端に対してCys2よりも近くに位置し、ここでCys1およびCys2がポリペプチドリンカーによって隔てられ、該リンカーが、
・システインおよびプロリンを含まず;
・Cys1およびCys2が分子内ジスルフィド結合で互いに結合する事を可能にするために十分な長さを定義し;かつ
・水溶液中でポリペプチドの二次構造を本質的に含まない、柔軟なポリペプチド立体構造を有し
ここでCys1およびCys2の少なくとも1つは、誘導体化成分によって誘導体化される、
複合体ポリペプチド。 - リンカー中のアミノ酸残基の少なくとも75%が、Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Ser、Thr、Met、Tyr、Asn、およびGlnから選択される、請求項1記載の複合体ポリペプチド。
- 1本鎖ポリペプチドである、請求項1または2記載の複合体ポリペプチド。
- EEDが複合体ポリペプチドのC末端またはN末端に位置する、前記請求項のいずれか一項記載の複合体ポリペプチド。
- EEDが以下の形態である、前記請求項のいずれか一項記載の複合体ポリペプチド:
-Cys1-(Xaa)n-Cys2-(Pro)m、
式中、
・nは2から20の任意の整数であり;
・mは0(ゼロ)または1であり;かつ
・Xaaは、各位置でGly、Ala、Thr、またはSerでもよい。 - n=4であり、および(Xaa)4が(Gly)4、(Gly)3Ser、(Gly)2SerGly、GlySer(Gly)2、またはGly(Ser)3である、請求項5記載の複合体ポリペプチド。
- n=5であり、および(Xaa)5が(Gly)5、(Gly)4Ser、(Gly)3SerGly、(Gly)2Ser(Gly)2、GlySer(Gly)3、またはSer(Gly)4である、請求項5記載の複合体ポリペプチド。
- EEDが以下の形態である、請求項5〜7のいずれか一項記載の複合体ポリペプチド:
-His-His-His-His-His-His-Cys1-(Xaa)n-Cys2-(Pro)m;または
-Cys1-(Xaa)n-Cys2-His-His-His-His-His-His-(Pro)m。 - 誘導体化されたCys1および/またはCys2が、マレイミド基、スルフヒドリル基、またはピリジルジスルフィド基を含む誘導体化成分とCys1残基および/またはCys2残基との反応生成物である、前記請求項のいずれか一項記載の複合体ポリペプチド。
- マレイミド基を含む誘導体化成分が、PEG-マレイミド(「PEG-MAL」)、マレイミド官能化蛍光マーカー、マレイミド官能化アッセイ検出マーカー、マレイミド官能化放射性トレーサー、またはマレイミド官能化タンパク質架橋剤から選択される、請求項9記載の複合体ポリペプチド。
- PEG-MALが以下から選択される、請求項10記載の複合体ポリペプチド:
・メトキシPEG-MAL 5 kD;
・メトキシPEG-MAL 20 kD;
・メトキシ(PEG)2-MAL 40 kD;
・メトキシPEG(MAL)2 5 kD;
・メトキシPEG(MAL)2 20 kD;
・メトキシPEG(MAL)2 40 kD;または
・これらの任意の組み合わせ。 - Cys1またはCys2が、5-チオ-2-ニトロ安息香酸(「TNB-チオール」)基またはスルフヒドリル基を含む誘導体化成分によって誘導体化され、特に該誘導体化成分が、ジスルフィド結合によりCys1に結合したCys2である、請求項9記載の複合体ポリペプチド。
- Cys1およびCys2の両方が誘導体化成分によって誘導体化される、前記請求項のいずれか一項記載の複合体ポリペプチド。
- Cys1またはCys2のいずれかが第一の誘導体化成分によって誘導体化され、一方、それぞれの他のCys2またはCys1がそれぞれ第二の誘導体化成分によって誘導体化される、請求項1〜12のいずれか一項記載の複合体ポリペプチド。
- 第二の誘導体化成分がエチルマレイミドである、請求項14記載の複合体ポリペプチド。
- 所望のポリペプチドが単一特異性1本鎖抗体または二重特異性1本鎖抗体から選択される、前記請求項のいずれか一項記載の複合体ポリペプチド。
- 二重特異性1本鎖抗体が、エフェクター抗原に特異的に結合する第一の部分、および標的抗原に特異的に結合する第二の部分を含む、請求項16記載の複合体ポリペプチド。
- エフェクター抗原が、ヒトCD3抗原、ヒトCD64抗原、ヒトCD89抗原、およびヒトNKG2D抗原から選択される、請求項17記載の複合体ポリペプチド。
- 標的抗原が、EpCAM、CCR5、CD19、HER-2neu、HER-3、HER-4、EGFR、PSMA、CEA、MUC-1(ムチン)、MUC2、MUC3、MUC4、MUC5AC、MUC5B、MUC7、hCG、ルイス-Y、CD20、CD33、CD30、ガングリオシドGD3、9-O-アセチル-GD3、GM2、Globo H、フコシルGM1、Poly SA、GD2、カルボ・アンヒドラーゼIX(MN/CA IX)、CD44v6、ソニックヘッジホッグ(Shh)、Wue-1、形質細胞抗原、(膜結合型)IgE、黒色腫コンドロイチン硫酸プロテオグリカン(MCSP)、CCR8、TNF-α前駆体、STEAP、メソセリン(mesothelin)、A33抗原、前立腺幹細胞抗原(PSCA)、Ly-6;デスモグレイン4、Eカドヘリンネオエピトープ、胎児のアセチルコリン受容体、CD25、CA19-9マーカー、CA-125マーカー、およびミュラー阻害物質(MIS)受容体II型、sTn(シアル酸付加Tn抗原; TAG-72)、FAP(繊維芽細胞活性化抗原)、エンドシアリン(endosialin)、EGFRvIII、LG、SAS、およびCD63から選択され、かつ全ての該抗原がヒト抗原である、請求項17または18記載の複合体ポリペプチド。
- 前記請求項のいずれか一項記載の複合体ポリペプチドおよび薬学的に許容される担体を含む組成物。
- 所望のポリペプチドを含みかつ所望のポリペプチドよりもより高収率で発現する請求項1〜19のいずれか一項記載の複合体ポリペプチドを生成する方法であって、以下を含む方法:
(a)所望のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を提供する段階;
(b)所望のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列のどちらかの端に、発現増強ドメイン(「EED」)をコードするヌクレオチド配列を組み込む段階であって、EEDをコードしている該ヌクレオチド配列が第一および第二のシステインアミノ酸残基であるCys1およびCys2のコドンをそれぞれ含み、Cys1のコドンが、ヌクレオチド配列の5'末端に対してCys2のコドンよりも近くに位置し、ここで、Cys1およびCys2のコドンはポリペプチドリンカーをコードするヌクレオチド配列によって隔てられ、該リンカーはシステインを含まず; かつCys1およびCys2が分子内ジスルフィド結合で互いに結合することを可能にするのに十分な長さを定義するものである段階;
(c)段階(b)からのヌクレオチド配列を、適切なベクターで宿主の発現系にトランスフェクトする段階;
(d)段階(b)からのヌクレオチド配列の発現を生じさせるのに適切な条件下で宿主の発現系をインキュベートする段階;
(e)段階(d)において発現したポリペプチドを単離して複合体ポリペプチドを得る段階。 - 段階(e)において得られた複合体ポリペプチドをCys1および/またはCys2で誘導体化するさらなる段階を含む、請求項21記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP04016890.8 | 2004-07-16 | ||
EP04016890 | 2004-07-16 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2007520779A Division JP5014988B2 (ja) | 2004-07-16 | 2005-07-15 | 発現増強ポリペプチド |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2012144552A true JP2012144552A (ja) | 2012-08-02 |
JP2012144552A5 JP2012144552A5 (ja) | 2013-05-02 |
Family
ID=35229693
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2007520779A Active JP5014988B2 (ja) | 2004-07-16 | 2005-07-15 | 発現増強ポリペプチド |
JP2012057380A Pending JP2012144552A (ja) | 2004-07-16 | 2012-03-14 | 発現増強ポリペプチド |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2007520779A Active JP5014988B2 (ja) | 2004-07-16 | 2005-07-15 | 発現増強ポリペプチド |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US8518403B2 (ja) |
EP (1) | EP1769000B1 (ja) |
JP (2) | JP5014988B2 (ja) |
KR (1) | KR20070042967A (ja) |
CN (1) | CN101018809B (ja) |
AU (1) | AU2005263555B2 (ja) |
CA (1) | CA2570990C (ja) |
EA (1) | EA010374B1 (ja) |
MX (1) | MX2007000387A (ja) |
NZ (1) | NZ552745A (ja) |
WO (1) | WO2006008096A1 (ja) |
ZA (1) | ZA200610478B (ja) |
Families Citing this family (30)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6136311A (en) | 1996-05-06 | 2000-10-24 | Cornell Research Foundation, Inc. | Treatment and diagnosis of cancer |
WO2007109321A2 (en) | 2006-03-20 | 2007-09-27 | The Regents Of The University Of California | Engineered anti-prostate stem cell antigen (psca) antibodies for cancer targeting |
CN101245110B (zh) * | 2007-02-16 | 2010-09-15 | 鲁南制药集团股份有限公司 | 重组中性粒细胞抑制因子和水蛭原嵌合蛋白及其药物组合物 |
WO2009032949A2 (en) * | 2007-09-04 | 2009-03-12 | The Regents Of The University Of California | High affinity anti-prostate stem cell antigen (psca) antibodies for cancer targeting and detection |
JP5951929B2 (ja) * | 2007-10-03 | 2016-07-13 | コーネル ユニヴァーシティー | Psma抗体を用いる増殖性障害の治療 |
RU2582244C2 (ru) * | 2008-06-30 | 2016-04-20 | ИЭсБиЭйТЕК, ЭН АЛЬКОН БАЙОМЕДИКАЛ РИСЕРЧ ЮНИТ ЭлЭлСи | Функционализированные полипептиды |
US20100069616A1 (en) * | 2008-08-06 | 2010-03-18 | The Regents Of The University Of California | Engineered antibody-nanoparticle conjugates |
AU2009299791B2 (en) * | 2008-10-01 | 2016-02-25 | Amgen Research (Munich) Gmbh | Cross-species-specific PSCAxCD3, CD19xCD3, C-METxCD3, EndosialinxCD3, EpCAMxC D3, IGF-1RxCD3 or FAPalpha xCD3 bispecific single chain antibody |
CN102171248B (zh) * | 2008-10-01 | 2015-07-15 | 安进研发(慕尼黑)股份有限公司 | 种间特异性PSMAxCD3双特异性单链抗体 |
EP2398504B1 (en) * | 2009-02-17 | 2018-11-28 | Cornell Research Foundation, Inc. | Methods and kits for diagnosis of cancer and prediction of therapeutic value |
JP2011026294A (ja) * | 2009-06-26 | 2011-02-10 | Canon Inc | 化合物 |
SG176947A1 (en) * | 2009-07-03 | 2012-01-30 | Avipep Pty Ltd | Immuno-conjugates and methods for producing them |
US8993715B2 (en) * | 2009-07-06 | 2015-03-31 | Canon Kabushiki Kaisha | Labeled protein and method for obtaining the same |
WO2011069019A2 (en) | 2009-12-02 | 2011-06-09 | David Ho | J591 minibodies and cys-diabodies for targeting human prostate specific membrane antigen (psma) and methods for their use |
US9315581B2 (en) | 2009-12-23 | 2016-04-19 | A Vipep Pty Limited | Immuno-conjugates and methods for producing them |
UA118950C2 (uk) | 2011-04-22 | 2019-04-10 | Аптево Рісьорч Енд Девелопмент Ллс | Поліпептид, який зв'язує специфічний мембранний антиген простати та комплекс т-клітинного рецептора |
EP2825553B1 (en) * | 2012-03-14 | 2018-07-25 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Multispecific antigen-binding molecules and uses thereof |
JO3519B1 (ar) | 2013-01-25 | 2020-07-05 | Amgen Inc | تركيبات أجسام مضادة لأجل cdh19 و cd3 |
US9212225B1 (en) | 2014-07-01 | 2015-12-15 | Amphivena Therapeutics, Inc. | Bispecific CD33 and CD3 binding proteins |
CN108289949B (zh) | 2015-05-29 | 2022-04-12 | 安普希韦纳治疗公司 | 双特异性cd33和cd3结合蛋白质的使用方法 |
RU2765242C2 (ru) | 2015-08-07 | 2022-01-27 | Имаджинаб, Инк. | Антигенсвязывающие конструкции против молекул-мишеней |
AU2016326449A1 (en) | 2015-09-21 | 2018-03-22 | Aptevo Research And Development Llc | CD3 binding polypeptides |
EP3448891A1 (en) | 2016-04-28 | 2019-03-06 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods of making multispecific antigen-binding molecules |
AU2018219887A1 (en) | 2017-02-08 | 2019-08-22 | Dragonfly Therapeutics, Inc. | Multi-specific binding proteins for activation of natural killer cells and therapeutic uses thereof to treat cancer |
WO2018147960A1 (en) | 2017-02-08 | 2018-08-16 | Imaginab, Inc. | Extension sequences for diabodies |
BR112019017197A2 (pt) | 2017-02-20 | 2020-04-14 | Dragonfly Therapeutics Inc | proteínas que se ligam a her2, nkg2d e cd16 |
JP2021512630A (ja) | 2018-02-08 | 2021-05-20 | ドラゴンフライ セラピューティクス, インコーポレイテッド | Nkg2d受容体を標的とする抗体可変ドメイン |
CN110668984B (zh) * | 2019-12-03 | 2020-04-10 | 凯莱英医药集团(天津)股份有限公司 | 一种依特卡肽中间体及依特卡肽的合成方法 |
US11617767B2 (en) | 2020-11-20 | 2023-04-04 | Simcere Innovation, Inc. | Armed dual CAR-T compositions and methods for cancer immunotherapy |
CN117285647A (zh) * | 2022-06-17 | 2023-12-26 | 南京北恒生物科技有限公司 | 靶向ccr8的嵌合抗原受体及其用途 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5739277A (en) * | 1995-04-14 | 1998-04-14 | Genentech Inc. | Altered polypeptides with increased half-life |
WO2001004135A2 (en) * | 1999-07-13 | 2001-01-18 | The Regents Of The University Of Michigan | Crosslinked dna condensate compositions and gene delivery methods |
US20030044423A1 (en) * | 2001-03-07 | 2003-03-06 | Lexigen Pharmaceuticals Corp. | Expression technology for proteins containing a hybrid isotype antibody moiety |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5013653A (en) * | 1987-03-20 | 1991-05-07 | Creative Biomolecules, Inc. | Product and process for introduction of a hinge region into a fusion protein to facilitate cleavage |
US5932448A (en) * | 1991-11-29 | 1999-08-03 | Protein Design Labs., Inc. | Bispecific antibody heterodimers |
NZ522847A (en) * | 2000-05-16 | 2004-11-26 | Bolder Biotechnology Inc | Methods for refolding proteins containing free cysteine residues |
AU6976201A (en) * | 2000-06-09 | 2001-12-24 | Us Health | Pegylation of linkers improves antitumor activity and reduces toxicity of immunoconjugates |
JP2004507231A (ja) * | 2000-06-15 | 2004-03-11 | アメリカ合衆国 | 免疫応答を向上させるための、gm−csfを発現する組換え非−複製性ウィルスおよびその使用 |
CN1195779C (zh) * | 2001-05-24 | 2005-04-06 | 中国科学院遗传与发育生物学研究所 | 抗人卵巢癌抗人cd3双特异性抗体 |
EP1497634A4 (en) * | 2001-11-08 | 2007-02-07 | Applied Research Systems | PROTEIN KNOT |
CA2707443A1 (en) * | 2007-11-30 | 2009-06-11 | Bristol-Myers Squibb Company | Conjugates of anti-rg-1 antibodies |
-
2005
- 2005-07-15 AU AU2005263555A patent/AU2005263555B2/en active Active
- 2005-07-15 NZ NZ552745A patent/NZ552745A/en unknown
- 2005-07-15 KR KR1020077001061A patent/KR20070042967A/ko not_active Application Discontinuation
- 2005-07-15 WO PCT/EP2005/007748 patent/WO2006008096A1/en active Application Filing
- 2005-07-15 US US11/572,116 patent/US8518403B2/en active Active
- 2005-07-15 CN CN2005800240023A patent/CN101018809B/zh active Active
- 2005-07-15 CA CA2570990A patent/CA2570990C/en active Active
- 2005-07-15 JP JP2007520779A patent/JP5014988B2/ja active Active
- 2005-07-15 MX MX2007000387A patent/MX2007000387A/es not_active Application Discontinuation
- 2005-07-15 EA EA200700292A patent/EA010374B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2005-07-15 EP EP05774883.2A patent/EP1769000B1/en active Active
-
2006
- 2006-12-14 ZA ZA200610478A patent/ZA200610478B/en unknown
-
2012
- 2012-03-14 JP JP2012057380A patent/JP2012144552A/ja active Pending
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5739277A (en) * | 1995-04-14 | 1998-04-14 | Genentech Inc. | Altered polypeptides with increased half-life |
WO2001004135A2 (en) * | 1999-07-13 | 2001-01-18 | The Regents Of The University Of Michigan | Crosslinked dna condensate compositions and gene delivery methods |
US20030044423A1 (en) * | 2001-03-07 | 2003-03-06 | Lexigen Pharmaceuticals Corp. | Expression technology for proteins containing a hybrid isotype antibody moiety |
Non-Patent Citations (5)
Title |
---|
JPN6011010977; 'Journal of Biochemistry' 1997, Vol.121, pp.831-834 * |
JPN6011010978; 'Protein Expression and Purification' 2001, Vol.21, pp.156-164 * |
JPN6011010979; 'Biochimica et Biophysica Acta' April 2004, Vol.1663, pp.158-166 * |
JPN6011010981; 'The Journal of Immunology' 1997, Vol.158, pp.2242-2250 * |
JPN6011010983; 'Protein Engineering' 2003, Vol.16, No.10, pp.761-770 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU2005263555A1 (en) | 2006-01-26 |
MX2007000387A (es) | 2007-03-28 |
CN101018809B (zh) | 2012-07-18 |
EP1769000A1 (en) | 2007-04-04 |
EP1769000B1 (en) | 2014-12-24 |
JP2008506659A (ja) | 2008-03-06 |
AU2005263555B2 (en) | 2011-01-27 |
ZA200610478B (en) | 2008-04-30 |
US20090053223A1 (en) | 2009-02-26 |
CA2570990C (en) | 2014-01-21 |
JP5014988B2 (ja) | 2012-08-29 |
EA200700292A1 (ru) | 2007-06-29 |
EA010374B1 (ru) | 2008-08-29 |
WO2006008096A1 (en) | 2006-01-26 |
CA2570990A1 (en) | 2006-01-26 |
KR20070042967A (ko) | 2007-04-24 |
CN101018809A (zh) | 2007-08-15 |
US8518403B2 (en) | 2013-08-27 |
NZ552745A (en) | 2009-01-31 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5014988B2 (ja) | 発現増強ポリペプチド | |
JP2008506659A5 (ja) | ||
JP7076152B2 (ja) | IgG結合ペプチドによる抗体の特異的修飾 | |
JP7481852B2 (ja) | 免疫リガンド/ペイロード複合体の生産方法 | |
JP3280376B2 (ja) | 多価抗原結合性蛋白質 | |
Kipriyanov et al. | High level production of soluble single chain antibodies in small-scale Escherichia coli cultures | |
EP0938571B1 (en) | Method for the oligomerisation of peptides | |
EP0338745B1 (en) | Method for producing recombinant DNA proteins | |
CN105722855B (zh) | 恒定链经修饰的双特异性五价和六价Ig-M抗体 | |
US20070274985A1 (en) | Antibody | |
AU2021215151B2 (en) | SIRP-alpha variant constructs and uses thereof | |
WO2007044887A2 (en) | Method for producing a population of homogenous tetravalent bispecific antibodies | |
Albrecht et al. | Monospecific bivalent scFv-SH: effects of linker length and location of an engineered cysteine on production, antigen binding activity and free SH accessibility | |
JP4112859B2 (ja) | 分子物質を結合させる方法 | |
JP5735972B2 (ja) | グリコシル化リピートモチーフ分子結合体 | |
WO2017143839A1 (zh) | 基于内含肽的药用重组蛋白的合成方法 | |
WO2001094547A2 (en) | Molecular delivery vehicle for delivery of selected compounds to targets | |
JP2561113B2 (ja) | 細胞接着活性ポリペプチド | |
JP7440516B2 (ja) | 切断多価多量体 | |
KR20190114550A (ko) | 단백질-단백질 결합체를 형성 매개 펩타이드 및 이를 이용한 단백질-단백질 결합체 형성 방법 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A712 Effective date: 20120921 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20121019 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20130308 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20131204 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20140212 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20140217 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20140806 |