JP2012102109A - Egfレセプターエピトープペプチドおよびその使用 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】抗腫瘍能力および活性を有する抗体の作成、または抗腫瘍応答である免疫学的応答を刺激する際に利用できる受容体エピトープ。具体的にはEGFRエピトープ。
【選択図】図1
Description
癌の免疫治療的処置は、疾患標的に対する高度に特異的であり得る点で、外科的処置、放射線療法および化学療法のような伝統的治療よりも優れた利点を有する。腫瘍特異的mAbは、癌細胞を標的とするのに用いることができ、潜在的標的としての腫瘍−関連抗原を同定し、つきとめる必要性を作り出す。EGFR、IL−2受容体およびp185 HER2のような増殖因子受容体の過剰発現は、しばしば、肺腫瘍、乳腫瘍、頭頸部腫瘍、および卵巣腫瘍のような腫瘍に関連付けられている。
多くの研究は、EGFRの細胞外領域に対する抗体の生産に焦点を当ててきた。創生されたmAbは、主として、リガンド結合をブロックすることおよびまたシグナル伝達の破壊により、その抗腫瘍活性を媒介する。EGFRを特異的に認識するPengら、1996(非特許文献14)およびMendelsonら、1997(非特許文献15)によって最初に開発された、数個のmAbが存在した。mAb425、528 IgG2aおよび225 IgG1は、頭頸部扁平細胞癌腫を有する患者を治療するために用いられた(非特許文献16)。放射性標識を含む実験作業は、mAb 425が、神経膠腫を含む腫瘍増殖の有効な阻害剤であることを示した(非特許文献17;非特許文献18;非特許文献19)。IMC−C225 mAbはEGFRを特異的に認識し、頭頸部癌、結直腸癌、膵臓癌および肺癌のような癌の治療においてかなりの潜在能力を有する。mAb 255は、p27 K1P1をアップレギュレートし、前立腺癌細胞系におけるG1停止を誘導する。引き続いて、マウス225抗体のキメラバージョン(ERBITUXTM(Imclone Systems,NY)IMC−C225)が、その治療能力を拡大するように開発された。このIMC−C225は、EGFRに対して増大した結合親和性を有し、マウスにおける異種移植片の増殖を低下させるのにより効果的である。マウス抗体およびキメラ抗体のはいずれも、放射線(非特許文献20)または化学療法(非特許文献21)との併用療法において投与される場合、さらにより効果的である。IMC−C225の作用の治療メカニズムとしては、効果的な受容体ブロッキング機能およびADCCに対する能力が挙げられるようである。IMC−225は、患者において腫瘍のサイズを低下させることができる。高用量のIMC−C225が、肝臓および皮膚の結合部位を飽和させるのに必要とされ、副作用は主としてざ瘡発疹および掻痒である。臨床試験は、シスプラチンと組み合わせた場合に、11%と22%との間の患者における腫瘍増殖の部分寛解率を示している。この抗体の前臨床および臨床進行はBaselgaら、[49]およびMendelsohnらによるレビューに取り上げられている(非特許文献22;非特許文献23)。
野生型EGFRはほとんどの上皮細胞で発現される。従って、受容体を治療的に標的化する欠点は、正常組織だけでなく癌細胞に対する毒性の副作用である。加えて、放射性アアイソタイプまたは細胞傷害剤と結合体化させた場合のそのような抗体は、正常な組織に対して潜在的な害を引き起こし得る。理想的には、癌細胞上のEGFRを優先的に標的化するのが有利である。de2−7EGFRは魅力的な治療剤である。なぜならば、成人においては、それは癌細胞に対して高度に特異的だからである。de2−7EGFRに対する抗体で行われた実験があり、そこでは、癌細胞系における細胞成長の阻害が示されている。mAb 528(非特許文献16;非特許文献34)および425(前記)は、de2−7EGFRおよびEGFR双方に結合する。スプライス部位におけるグリシンの挿入によって生じたde2−7EGFRの独特の配列は、細胞外領域のN−末端近くに位置する新規なエピトープを作り出す(非特許文献35;非特許文献36)。融合接合に対して特異的ないくつかの抗体が生産されており、mAb Y10が挙げられる(非特許文献12;非特許文献37;非特許文献38)。マウスにおける脳腫瘍異種移植片を治療するのに効果的に用いられたこの抗体は、細胞増殖を低下させることによって機構的に機能し、また、ADCCおよびCDCに対する能力も示した。融合接合に対して特異的な配列のペプチドに対して創製された抗体は、ファージディスプレイによって生じたFvフラグメントであるMR1を含む(非特許文献39)。Fvは固体腫瘍に浸潤する能力を有し、免疫トキシンを送達するのに用いられてきた。de2−7EGFRの融合接合を標的化するいくつかの抗体が放射性標識されており:これらとしてはL8A4、DH8.3およびUa30:2が挙げられる(非特許文献40;非特許文献41;非特許文献42)。放射性標識されたDH8.3抗体は、de2−7EGFRを認識するが、正常なEGFRを認識せず、ヌードマウスにおいて腫瘍のサイズを低下させる。
マウスモノクローナル抗体mAb−806(クラスIgG2b)は、de2−7EGFRに結合するが、正常に発現された野生型EGFRには結合しないことが示された(米国特許出願USSN;非特許文献43)。mAb−806は正常な野生型受容体と反応しないが、それは、増幅されたEGFR遺伝子を含有する腫瘍細胞上のある割合(〜10%)の野生型EGFRを認識した(非特許文献43;非特許文献44)。de2−7EGFRおよび増幅された野生型EGFRの両方(いずれも腫瘍において顕著な頻度で起こる)を標的化するmAb−806の能力は、治療剤としてmAb−806に対してさらなる有効性を与えるはずである。
mAbにおける免疫原性の問題を克服する代替的なアプローチは、完全な(十分な)ヒト抗体の生産である。ファージディスプレイ技術を使用して、親和性富化(affinity enrichment)の方法を用いて、抗原に特異的に結合するある範囲のヒト抗体を選択することができる(非特許文献48;非特許文献49)。バクテリオファージは、細菌のみに感染するウイルスであり、Escherichia coliにおいて複製される。ファージディスプレイプロセスは、ヒト遺伝子物質のファージゲノムへの挿入を包含する。フィラメント状ファージ系は独特の特性を有し、ここで、ファージ表面に提示されるリガンドの構造的および機能的情報(表現型)は、ファージゲノム内のリガンドの遺伝子的情報(遺伝子型)とリンクする。従って、フィラメント状ファージの表面上でIg分子のライブラリーを創製および提示させることができ、結合親和性を示すものを選択する。この方法は、高い抗原親和性を有する多くの抗体の非常に迅速な同時スクリーニングという利点を有する。それは、抗体のヒト化においても、十分な結合活性を保存するのに必要とされる潜在的に重要な残基の組を含むコンビナトリアルライブラリーを創製することによって、首尾よく用いられている。次いで、その重要な残基の無作為な突然変異誘発によって、フレームワークが最適化され得る。
近年、ヒトmAbを生産するファージディスプレイ方法に対する代替的なアプローチが開発されており、ここで、十分にヒトのタンパク質配列を作り出すことができるヒト遺伝子が、トランスジェニックマウスを作製するマウスDNAに挿入される。関係する方法のレビューについては、文献非特許文献50;非特許文献51;非特許文献52参照)。従って、これらのマウスは、標的抗原での免疫化に応答してヒト抗体を生産することができる。作成された抗体は事実上ヒトのものであり、宿主免疫系によって拒絶されるとは予測されない。Abgenixによって生産されたXenoMouse(登録商標)は、ヒト重鎖遺伝子のほぼ80%、および多数の軽鎖遺伝子を含有する。種々の株のマウスが生産されており、これらは、ある範囲の疾患を標的化することができる抗体の種々のクラスを含有している(非特許文献53;非特許文献54)。例えば、ABX−MA1は、MCAM/MUC18(マウスにおけるヒトメラノーマ細胞での腫瘍の密集および転移に関連する糖タンパク質)を標的化する十分にヒトの抗体であり、メラノーマの治療において有望性を示す(非特許文献55)。ABX−EGFはEGFRを標的化し、現在、頭頸部癌腫、非小細胞肺癌腫、および結腸癌の治療において第I/II相臨床試験中である。
CX1X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15
[式中、各Xn残基は以下のように独立して選択でき(配列番号11):
X1はG、P、NまたはSであり;
X2はA、P、T、SまたはLであり;
X3はD、HまたはSであり;
X4はS、Y、T、NまたはKであり;
X5はY、QまたはMであり;
X6はMまたはVであり;
X7はE、TまたはDであり;
X8はAまたは無しであり;
X9はEまたはKであり;
X10はDまたはNであり;
X11はGまたはAであり;
X12はV、I、LまたはTであり;
X13はR、QまたはKであり;
X14はR、KまたはMであり;
X15はCまたは無しである]
を有する単離されたペプチドを提供する。
CX1X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15
[式中、各Xn残基は以下のように独立して選択でき(配列番号12):
X1はG、P、N、Q、SまたはTであり、
X2はA、P、T、S、L、M、V、IまたはPであり、
X3はD、E、H、R、K、SまたはTであり、
X4はS、Y、F、W、T、N、Q、KまたはRであり、
X5はY、F、W、Q、N、M、V、A、L、IまたはPであり、
X6はM、V、A、L、IまたはPであり、
X7はE、D、TまたはSであり、
X8はA、V、L、I、P、Mまたは無しであり、
X9はD、E、KまたはRであり、
X10はD、E、NまたはQであり、
X11はG、A、M、V、L、IまたはPであり、
X12はV、I、L、M、A、P、SまたはTであり、
X13はR、K、H、QまたはNであり、
X14はR、K、H、M、A、V、L、IまたはPであり、
X15はCまたは無しである]
を有する単離されたペプチドを提供する。
CX1X2X3X4X5EX6X7X8X9GX10X11X12C
[式中、各Xnは以下のように独立して選択でき(配列番号13):
X1はGまたはAであり、
X2はAまたはKであり、
X3はDまたはAであり、
X4はSまたはAであり、
X5はYまたはAであり、
X6はMまたはAであり、
X7はEまたはAであり、
X8はEまたはAであり、
X9はDまたはAであり、
X10はV、AまたはKであり、
X11はRまたはAであり、
X12はKまたはAである]
を有する単離されたペプチドを提供する。
CX1X2X3X4X5EX6X7X8DGVRKC
[式中、各Xn残基は以下のように独立して選択でき(配列番号14):
X1はGまたはAであり、
X2はAまたはKであり、
X3はDまたはAであり、
X4はSまたはAであり、
X5はYまたはAであり、
X6はMまたはAであり、
X7はEまたはAであり、
X8はEまたはAである]
を有する単離されたペプチドを提供する。
a.配列番号1〜14のいずれかの群から選択されるEGF受容体エピトープペプチドの存在または露出が疑われるサンプルを、ペプチドの抗体への結合が起こる条件下で該EGF受容体ペプチドに対する抗体と接触させる工程;および、
b.そのサンプル由来のEGF受容体エピトープペプチドとその抗体との間で結合が起こったか否かを検出する工程;
によって測定され、
ここで、結合の検出は、サンプル中でのEGF受容体エピトープペプチドの存在または露出を示す。
本発明に従って、当業者の技量内にある慣用的分子生物学、微生物学、および組換えDNA技術を使用することができる。そのような技術は文献において十分に説明されている。例えば、Sambrookら、“Molecular Cloning:A Laboratory Manual”(1989);“Current Protocols in Molecular Biology”Volumes I−III[Ausubel, R.M.,ed.(1994)];“Cell Biology:ALaboratory Handbook” Volumes I−III[J.E.Celis,ed.(1994)];“Curent Protocols in Immunology” Volumes I−III[Coligan,J.E.,ed.(1994)];“Oligonucleotide Synthesis”(M.J.Gait ed.1984);“Nucleic Acid Hybridization”[B.D.Hames & S.J.Higgins eds.(1985)];“Transcription and Translation”[B.D.Hames & S.J.Higgins, eds.(1984)];“Animal Cell Culture”[R.I.Freshney,ed.(1986)];“Immobilized Cells And Enzymes”[IRL Press,(1986)];B.Perbal,“A Practical Guide To Molecular Cloning”(1984)。
前記表は、本明細書中においては交互に出現し得る3文字および1文字表記を相関させるために掲げる。
(非極性R基を有するアミノ酸)
アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、トリプトファン、メチオニン
(非荷電極性R基を有するアミノ酸)
グリシン、セリン、スレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン
((pH6.0において負に荷電した)荷電極性R基を有するアミノ酸)
アスパラギン酸、グルタミン酸
((pH6.0において正に荷電した)塩基性アミノ酸)
リシン、アルギニン、ヒスチジン(pH6.0における)
もう1つのグループ分けはフェニル基を有するアミノ酸であり得る:
フェニルアラニン、トリプトファン、チロシン
もう1つのグループ分けは分子量(すなわち、R基のサイズ)によるものであり得る:
グリシン 75
アラニン 89
セリン 105
プロリン 115
バリン 117
スレオニン 119
システイン 121
ロイシン 131
イソロイシン 131
アスパラギン 132
アスパラギン酸 133
グルタミン 146
リシン 146
グルタミン酸 147
メチオニン 149
(pH6.0における)ヒスチジン 155
フェニルアラニン165
アルギニン 174
チロシン 181
トリプトファン 204
特に好ましいのは:
−正の電荷を維持することができるようなArgに代えてのLys、およびその逆;
−負の電荷を維持することができるようなAspに代えてのGlu、およびその逆;
−遊離−OHを維持することができるようなThrに代えてのSer;および
−遊離NH2を維持することができるようなAsnに代えてのGln。
抗体は多数の方法で修飾できるため、用語「抗体」は、必要な特異性を有する結合ドメインを有するいずれかの特定の分子または物質を網羅すると解釈されるべきである。それゆえ、この用語は、天然または全部がまたは部分的に合成であるかを問わず、免疫グロブリン結合ドメインを含むいずれかのポリペプチドを含む、抗体フラグメント、誘導体、抗体の機能的同等体およびホモログをカバーする。もう1つのポリペプチドに融合した免疫グロブリン結合ドメインまたはその同等体を含むキメラ分子は従って含まれる。キメラ抗体のクローニングおよび発現はEP−A−0120694およびEP−A−0125023および米国特許第4,816,397号および第4,816,567号に記載されている。
ポリペプチドおよびアジュバントの混合物またはエマルジョンの調製するための方法は、免疫応答を誘導しおよび/または増強させる技術、およびワクチン接種の技術の分野における当業者に良く知られている。
なおさらなる態様において、本発明は、配列番号1〜14のいずれかから選択されるEGFファミリー受容体ペプチドに対する精製された抗体を提供する。
1つの方法は、アフィニティー豊富化の方法を用いて抗原に特異的に結合するある範囲のヒト抗体を選択するのに用いることができるファージディスプレイ技術である。ファージディスプレイは文献に徹底的に記載されており、ファージディスプレイライブラリーの構築およびスクリーニングは当該分野で良く知られている。例えば、Hoogenboom ら、.Trends Biotechnol.,15:62−70(1997);Hoogenboomら、Immunotechnology 4:1−20(1998);McGregorら、Mol.Biotechnol,6:155−62(1996);およびBirdら、Science,242:423−426(1988)。十分にヒトの抗体は、ヒト免疫グロブリン重鎖および軽鎖の大きな部分を運ぶトランスジェニックマウスを免疫原で免疫化することによって調製することもできる。そのようなマウスの例は当該技術分野内で良く知られている。例えば、Xenomouse(登録商標)(Abgenix,Inc.)およびHuMAb−Mouse(Medarex,Inc.)参照。また、米国特許第6,207,418号、第6,150,584号、第6,111,166号、第6,075,181号、第5,922,545号、第5,545,806号および第5,569,825号も参照。次いで、抗体は、標準的な技術、例えば、標準的なハイブリドーマ技術によって、あるいはファージディスプレイによって調製することができる。
(a)検出可能な標識への、本発明の受容体ペプチドまたはそれに対する特異的な結合パートナーの直接的または間接的付着によって得られる、所定量の少なくとも1つの標識された免疫化学的に反応性の成分;
(b)他の試薬;および
(c)該キットの使用のための指示書;
を含む。
(a)免疫吸収剤を形成するための一般的には固相に結合した、あるいはあるいは、適当なタグ、あるいは複数のそのような最終産物など、(またはその結合パートナー)、各々1つに結合した前記した受容体ペプチド(または結合パートナー)の既知量;
(b)必要であれば、他の試薬;および
(c)該試験キットの使用のための指示書;
を含むことができる。
(a)検出可能な標識に受容体ペプチドをカップリングさせることによって得られた標識された成分;
(b)そのうち少なくとも1つの試薬がリガンドまたは固定化されたリガンドである1以上のさらなる免疫化学試薬、そのリガンドが:
(i)標識された成分(a)と結合することができるリガンド;
(ii)標識された成分(a)の結合パートナーと結合することができるリガンド;
(iii)測定すべき成分の少なくとも1つと結合することができるリガンド;および
(iv)測定すべき成分の少なくとも1つの結合パートナーの少なくとも1つに結合することができるリガンド;
よりなる群から選択され;および
(c)受容体ペプチドおよびそれに対する特異的な結合パートナーの間の免疫化学反応の1以上の成分の検出および/または測定のためのプロトコルの実施についての指示書;
を含む。
本発明では、さらに、本発明の治療方法を実行するのに有用な治療用組成物が考えられる。対象のの治療用組成物は、薬学的に受容可能な賦形剤(キャリア)および、特に、有効成分としての、本明細書中に記載された、配列番号1〜14のいずれかの配列を有するペプチドから選択される1以上の受容体ペプチド、またはその免疫原性フラグメントを混合して含む。
本発明の別の特徴は、本明細書中に開示された受容体ペプチドをコードするDNA配列の発現である。当該分野で周知なように、DNA配列は、適当な発現ベクター中で発現制御配列に操作可能に連結され、その発現ベクターを用いて適切な単細胞宿主を形質転換する。本発明のDNA配列の発現制御配列へのそのような操作可能な連結は、当然、そのDNA配列のすでに存在する部分でない場合は、DNA配列の上流の正しいリーディングフレーム内の開始コドンATGの配置を包含する。
T細胞によって認識される腫瘍抗原の特徴付けは、癌ワクチンアプローチを進化させ、よく規定された抗原を用いることによって、癌に対して患者を免疫化する機会を最初に提供した。メラノーマはプロトタイプの免疫原性腫瘍の1つであるため、多数の初期相臨床試験がメラノーマについて行われてきた。いくつかの腫瘍後退が、主として、転移性疾患を有する患者で報告されてきた。最近の進歩は、抗癌免疫応答のモニタリング、および頑強な抗メラノーマ免疫系を誘導すること目的とする、アジュバントの開発のための新しいツールを包含する。
上皮増殖因子受容体(EGFR)は多くの上皮癌で過剰発現され、観察はしばしば臨床結果の乏しいことに関連付けられている。EGFRの過剰発現は通常はEGFR遺伝子増幅によって引き起こされ、時々、その細胞外ドメインに内部欠失を保有する変異EGFR(de2−7 EGFRまたはEGFRvIII)の発現に関連付けられている。MAb 806は、過剰発現されると、de2−7 EGFRおよび野生型(wt)EGFRのサブセットを共に認識するが、正常な組織で発現されたwt EGFRに結合しない有意な抗腫瘍活性を持つ新規なEGFR抗体である。A431腫瘍細胞で発現されたwt EGFRのうちの小さな割合(約10%)に結合するのみにもかかわらず、mAb 806はヌードマウスで増殖したA431異種移植片に対して、強い抗腫瘍活性を呈する。そのユニークな特異性および抗腫瘍活性の態様に導くメカニズムを解明するために、本発明者らは、mAb 806のEGFR結合エピトープを決定した。酵母の表面に発現されたEGFR断片、またはイムノブロット様式でのEGFR断片のいずれかへのmAb 806結合の分析から、mAb 806のエピトープを含むようであるジスルフィド結合ループ(アミノ酸287−302)を同定した。実際に、mAb 806は、これらのアミノ酸に対応する合成EGFRペプチドに対して、見かけの高親和性(約30nM)で結合した。EGFR構造の分析から、このジスルフィド結合ループは、EGFRが不活性な連結された立体配座からリガンド結合した活性な立体配座へ変化する場合に起こる、移行形態の受容体の場合にのみ、mAb 806が結合するために利用可能であることを示す。mAb 806は、小さな割合の一時の受容体に結合してその活性化を妨げ、次いで強力な抗腫瘍効果を生じるようである。最後に、発明者らの所見は、増殖因子受容体の移行形態に対する抗体の作製が、正常組織の標的化を低下させ、依然として抗腫瘍活性を保持する、新規な方法を表し得ることを示唆する。
上皮増殖因子受容体(EGFR)は、多くの異なる細胞型の増殖および分化を指令することを担う170kDaの膜結合型チロシンキナーゼである(1,2)。EGFRの過剰発現は多くの上皮腫瘍で観察されており、EGFR発現レベルの増大は、通常は、臨床結果の乏しいことと関連付けられている(3−5)。受容体の過剰発現は、しばしば、EGFR遺伝子の増幅によって引き起こされ、この増幅はEGFR突然変異とリンクもされる事象である(6)。最も一般的なEGFR突然変異は、神経膠腫で頻繁に発現される、de2−7 EGFR(またはEGFRvIII)として公知のEGFRの細胞外切断である(6−8)。この切断の結果、EGFRの細胞外ドメインからの267アミノ酸の除去を生じ、そして新規なグリシンの挿入がもたらされ、このことは、de2−7 EGFRのN末端近くでのユニークな接合ペプチドを生じさせる(6−8)。de2−7 EGFRは公知のリガンドのいずれにも結合することができないが、低レベルの構成的活性化を呈しており、ヌードマウスにおいて異種移植片として成長させた場合に神経膠腫および***細胞の腫瘍形成性を増強させる(9−11)。
(抗体)
EGFRに対して特異的なIgG2bモノクローナル抗体806およびIgG2a mAb528を以前に記載されているように(27,28)Biological Production Facility(Ludwig Institute for Cancer Research,Melbourne)で生産し、精製した。
発現ベクターpEE14/sEGFR501およびpEE14/sEGFR513は従前に記載されており(29)、EGFRエクトドメインの、それぞれ、シグナルペプチド、ならびに最初の501アミノ酸および513アミノ酸、続いてc−mycエピトープタグをコードし、全てヒトサイトメガロウイルス前初期プロモーターの制御下で転写される。発現ベクターpEE14/sEGFR310−501は、エクトドメインのアミノ酸残基310−501とインフレームで融合したEGFRのシグナルペプチドをコードし、エピトープタグで終結するcDNAを、含有する。
ヒト293T胚性腎臓線維芽細胞を、ダルベッコ改変イーグル培地(DMEM)+10%胎児ウシ血清(FCS)中に維持した。トランスフェクションの前日、細胞を、2mLの培地を入れた6−ウェル組織培養プレート中にウェル当たり8×105にて播種した。
製造業者の指示に従い、細胞に、リポフェクタミン2000(Invitrogen)と複合体化させた3−4μgのプラスミドDNAをトランスフェクトした。トランスフェクションから24時間−48時間後、細胞培養を吸引し、細胞単層を250μlの溶解緩衝液(1% TritonX−100、10%グリセロール、150mM NaCl、50mM HEPES pH7.4、1mM EGTAおよび完全プロテアーゼ阻害剤ミックス(Roche))に溶解させた。
細胞溶解物(10−15μL)のアリコートを、1.5%β−メルカプトエタノールを含有するSDS試料緩衝液と混合し、100℃にて5分間加熱することによって変性し、10%NuPAGE ビス−トリスポリアクリルアミドゲル(Invitrogen)で電気泳動した。次いで、試料をニトロセルロース膜に電気移動させ、これをTBST緩衝液(10mMトリス−HCl、pH8.0、100mM NaClおよび0.1%Tween−20)中で濯ぎ、2.5%スキムミルクを含有するTBST中で室温にて30分間ブロックした。膜をブロッキング緩衝液中の0.5μg/mLのmAb 806と共に4℃にて一晩インキュベートした。平行膜をmAb 9B11(1:5000,Cell Signalling Technology)で一晩プローブして、c−mycエピトープを検出した。フィルターをTBST中で洗浄し、1:5000希釈のホースラディッシュペルオキシダーゼ結合体化ウサギ抗マウス免疫グロブリン(Biorad)を含有するブロッキング緩衝液中で室温にて2時間インキュベートした。次いで、ブロットをTBST中で洗浄し、Western Pico Chemilumicent Substrate(Pierce)とのインキュベーションに続いてオートラジオグラフィーフィルムを用いて現像した。ペプチド競合実験では、100倍モル過剰の競合ペプチドの存在下で、ブロットをMab 806で室温にて1時間プローブした。化学発光の検出に続いて、ブロットを9B11で再度プローブした。
EGFR断片をコードする適当な遺伝子を含有するように修飾されたpCT酵母ディスプレイプラスミドを、Bio−Rad(Richmond,CA)Gene Pulser Transfection Apparatusを用いるエレクトロポレーション(33)によって酵母株EBY100(32)に形質転換した。プラスミドは、DNAをそれらのゲノムに組み込んだ酵母につき選択するのに用いることができるtrp+マーカーを含有する。酵母細胞表面でのEGFRタンパク質の発現は、従前に記載されているように行った(BoderおよびWittrup,2000)。簡単に述べれば、形質転換されたコロニーを、酵母窒素塩基、カザミノ酸、デキストロース、およびリン酸化緩衝液pH7.4を含有する最小培地中で、5〜6のOD600に到達するまで、ほぼ1日間の振盪プラットフォームにて30℃で増殖させた。次いで、ガラクトースを含有する最小培地へ移すことによって、酵母細胞をタンパク質ディスプレイにつき誘導し、振盪しつつ、30℃にて24時間インキュベートした。次いで、分析まで培養を4℃にて保存した。
c−mycモノクローナル抗体9E10を含有する生腹水液はCovance(Richmond,CA)から入手した。1×106個の酵母細胞をFACS緩衝液(1mg/ml BSAを含有するPBS)で洗浄し、抗c−myc腹水液(1:50希釈)、または50μlの最終容量中のヒトEGFRモノクローナル抗体(10μg/mL)と共に4℃にて1時間インキュベートした。次いで、細胞を氷冷FACS緩衝液で洗浄し、光から保護された、50μlの最終容量中にてフィコエリスリン標識抗マウスIgG(1:25希釈)と共に4℃にて1時間インキュベートした。酵母細胞を氷冷FACS緩衝液で洗浄した後、Coulter Epics XLフローサイトメーター(Beckman−Coulter)で蛍光データを得、WinMDIサイトメトリーソフトウェア(J. Trotter,Scripps University)で分析した。直線状エピトープ 対 立体配座エピトープの測定では、酵母細胞を80℃にて30分間加熱し、次いで、20分間氷上で冷却し、その後抗体での標識した。
推定mAb 806エピトープを含有するペプチド(287CGADSYEMEEDGVRKC302(配列番号:1)、287CGADSYEMEEDGVRK301(配列番号:2)および287CGADSYEMEEDG298(配列番号:15))を、標準Fmoc化学を用いて合成し、マススペクトル分析によって確認した。アルカリ性条件での希薄ペプチド溶液の一晩の空気酸化によって環化ペプチドを調製した。線状(還元された)ペプチドは、合成ペプチドを10mM塩酸に溶解させることによって調製した。287〜302ペプチドの試料を嫌気性下で70%ギ酸中の臭化シアンと反応させて、N末端ペプチドおよびC末端ペプチドに対応する断片を生じさせた。0.1%トリフルオロ酢酸(TFA)の存在下で、アセトニトリルグラジエントを用い、ペプチドをC18 VydacカラムでのHPLCによって分離した。ペプチドの確実性は、引き続いて、マススペクトロメトリーおよびN末端配列決定によって特徴付けた。このペプチドを0.5M炭酸水素ナトリウムpH8.6と反応させ、続いて、ヨードアセトアミドを添加することによって、S−カルボキシメチル化ペプチド(SCM−ペプチド)の試料を生じさせた。SCM−ペプチドを、引き続いて、前記したように、RP−HPLCによって精製した。
白色ポリスチレン96−ウェルプレート(Greiner Lumitrac 600)のウェルを、10mMクエン酸ナトリウム(pH5.9)中、ヒトFc定常領域と融合した変異型sEGFR501である、501−Fc(T.Adams,未発表結果)の2μg/mlでコーティングし、次いで、TBS中の0.5%ニワトリオボアルブミンでブロックした。TBSTでの洗浄の後、0.5μg/mLのmAb806および種々の濃度のペプチド溶液(100μl/ウェル)をウェルに加えた。プレートに結合したmAb806を、ヤギ抗マウス免疫グロブリン−HRP(BioRad)およびWestern Pico Chemilumicent Substrate (Pierce)を用いて検出し、Wallac Victor 1420カウンター(Perkin Elmer)を用いて定量した。いくつかのアッセイにおいては、1−501 EGFRで96ウェルプレートをコーティングし、これを用いて、mAb 806の結合を従前に記載されているように分析した(Johnsら、Intl.J.Cancer 98:398−408,2002)。
BIAcore3000を全ての実験で用いた。mAb806の推定エピトープを含有するペプチドを、5μl/分の流速にて、アミンカップリングまたはチオール−ジスルフィド交換カップリングを用いて、CM5センサーチップに固定化した(34)。この806抗体を25℃にて5μl/分の流速でセンサー表面上を通過させた。実行の間、10μl/分の流速で10mM HClを注入することによって、そのセンサー表面を調製した。
異なるEGFR構築物を発現する培養した293細胞を、mAb528およびmAb806を用いてEGFR発現について分析した。1%HSAを含有するPBS中、1×106細胞を5μg/mlの一次抗体と共に4℃にて30分間インキュベートした。PBS/1%HSAで洗浄した後、FITC−結合化ヤギ抗マウス抗体と共に、細胞をさらに4℃にて30分間インキュベートした(1:100希釈;Calbiochem,San Diego,CA)。次いで、最小5,000事象を観察することによって、Epics Elite ESP(Beckman Coulter、Hialeah、FL)で細胞を観察し、Windows(登録商標)用のEXPO(バージョン2)を用いて分析した。
(EGFR断片のイムノブロッティングによるmAb 806エピトープの同定)
mAb 806エピトープの広範な位置を決定するために、1−513のc−mycタグ付きEGFR断片および310−501のc−mycタグ付きEGFR断片をSDS−PAGEによって分離し、そしてmAb 806を用いてイムノブロットした。mAb 806は1−513断片と強い反応性を示したが、この抗体はEGFRの310−501セグメントには全く結合しなかった(図1、左側パネル)。310−501断片は膜上に存在した。というのは、この断片は、c−mycタグに対して特異的なmAb 9B11を用いて検出できたからである(図1、右側パネル)。他の実験において、本発明者らは、mAb 806もまたウェスタンブロットにおいてsEGFR501断片に結合することを確立した(データは示さず)。mAb 806は、アミノ酸6−273が欠失されたde2−7 EGFR(27)に結合すると仮定し、本発明者らは、mAb 806エピトープが残基274−310または残基510−513内に含まれるはずであると結論した。mAb 806のエピトープを表わすため、本発明者らは、全てアミノ酸501で終結する、一連のc−mycタグ付きEGFR断片を発現させた。mAb 806は274−501EGFR断片および282−501のEGFR断片の両方と反応したが、アミノ酸290またはアミノ酸298において開始するセグメントには結合しなかった(図1、左側パネル)。全てのEGFR構築物の存在を、c−myc抗体を用いて確認した(図1、右側パネル)。従って、mAb 806エピトープはアミノ酸282−310内に含まれるはずである。さらに、エピトープはアミノ酸290を超えて延びることができるだろうが、282−290の領域は、この特定のイムノブロッティングアッセイにおいてmAb 806反応性に対して決定的なアミノ酸残基のいくつかを含有するはずである。
本発明者らは、第二の独立したアプローチを用いて、mAb 806エピトープを決定した。EGFRの異なるドメインを含む断片を酵母の表面で発現させ、FACSによってmAb 806結合についてテストした。mAb 806は酵母の表面で発現された1−621および1−501断片を共に認識した(図2A)。mAb 806は、de2−7 EGFRの細胞外ドメインに対応する273−621 EGFR断片にも結合した(図2A)。対照的に、mAb 806は294−543EGFR断片または475−621EGFR断片を認識することができ(図2A)、これは、mAb 806エピトープの少なくともいくつかがアミノ酸274−294の間の領域内に含まれるはずであることを明瞭に示す(比較;上記で同定したアミノ酸282−290)。これらの2つの全く異なるアプローチがmAb 806結合に対して重要である同一の領域を同定すると、本発明者らは、EGFRのこのセクションがmAb 806エピトープのエネルギー的に重要な部分を含有するはずであると確信した。興味深いことには、1−501エピトープの80℃における熱変性はmAb 806結合に対して効果を有さず、このことは、該エピトープが立体配座的というよりはむしろ直線状であることを示唆する(図2B)。この結果は、一旦受容体がSDS−PAGEによって変性されるとmAb 806が「pan」EGFR抗体となることを示す本発明者らのデータと完全に一致する(27)。
mAb 806推定エピトープを含む可能性のあるシステインループに対応するペプチド(287CGADSYEMEEDGVRKC302)を合成した。このペプチドは、イムノブロットにおいて、1−501 EGFR断片および274−501 EGFR断片へのmAb 806の結合を阻害できた(図3A、上側パネル)。イムノブロットの双方の部分でのEGFR断片の存在は、ストリッピング、および抗mycでの再プロービングによって確認した(図3A、下側パネル)。溶液中の287−302 EGFRペプチドもまた、ELISAフォーマットを用いて、固定された1−501断片へのmAb 806の結合を阻害することができた(図3B)。興味深いことには、より短いペプチド(アミノ酸287−298)は、テストした濃度においてはmAb 806の結合を阻害しなかった(図3B)。従って、mAb 806エピトープは、EGFRにおいてジスルフィドにより拘束されるループを形成する残基287−302の中に含まれるようである。
いくつかの最近の結晶学的研究は、EGFR細胞外ドメインの構造を記載している。従って、本発明者らは、その構造位置についてmAb 806エピトープを分析して、このことがそのエピトープのユニークな特異性を説明するのを助けることができるかどうかを判断した。mAb 806エピトープを含有するシステインループ(図6A)は、システインリッチなCR1ドメインのC末端部分に位置する(図6B、マゼンタ)。興味深いことには、EGFRのこの領域は、構造中で特徴付けに最も乏しい領域の1つであり、相当な度合いの柔軟性を示唆する。287−302 EGFRループのかなりの部分がEGFR内に埋もれているが、2つの領域はより露出され、抗体によって潜在的に接近可能である。これらの第一のものはD290を中心とし(図6C、左側面図においてマゼンタで強調)、これらの第二のものはD297に焦点を当て、これは、当該分子が180°回転した場合に観察できる(図6C、右側面図においてはマジェンタで強調)。
mAb 806が非二量体化/連結されていないEGFRに優先的に結合するのを確認するために、本発明者らは、293細胞においてCR1二量体化アームを欠失する(deCR1−ループ)EGFRの突然変異を安定に発現させた(31)。この領域は、活性なEGFRダイマーを形成するにおけるその役割のため、およびCR1二量体化アームが連結に関連するCR1:CR2相互作用に総体的に関与するので、選択された。従って、deCR1は、de2−7 EGFRのように、構成的に連結されていない状態であるべきである。親293細胞は、FACSによるmAb 528の結合によって明らかなように、低レベルの野生型EGFR(ほぼ1×104EGFR/細胞)を発現する(図7)。予測されるように、mAb 806はこれらの細胞で発現された内因性EGFRに結合しない。de2−7 EGFRは、deCR1−ループのように、連結できなかったはずであり、かつ二量体化を減少したはずである。293細胞のde2−7 EGFRでのトランスフェクションは、他の細胞株において従前に示されたように、mAb 806の強力な結合を導いた(図7)。高度に立体配座依存性のmAb 528がdeCR1−ループEGFRに結合することにより、その立体配座への全体の変化がないことを確認する(図7)。実際に、本発明者らは、deCR1−ループEGFRがリガンドに結合できることを先に示しており、これは、さらに、その全体的構造が無傷なままであるという考えを支持する(31)。2つの独立したdeCR1−ループEGFRを発現するクローンのフローサイトメトリー分析は、mAb 806の結合を明瞭に示した(図7)。従って、本発明者らの仮説と合致して、mAb 806は、EGFRが活性なダイマーを形成する前に、移行の連結されていないEGFRに結合するようである。mAb 806はまた、連結に対して能力を下げられたEGFR点突然変異体への結合の増大を示す(以下の実施例2参照)。
de2−7 EGFRを発現するマウス線維芽細胞を用いた免疫化に続いて、mAb 806を作製し、そしてde2−7 EGFRに対する高い反応性、および野生型EGFRに対する無視できる活性について、混合したヘム吸着アッセイによって選択した(21)。さらなる特徴付けにより、mAb 806は、野生型EGFRが過剰発現された場合、特に、EGFR遺伝子が増幅されたが、正常な組織はそうでなかった場合の細胞株および神経膠腫検体を認識できたことが、すぐに明らかとされた(21)。最近、本発明者らは、mAb 806が、小胞体内に位置するde2−7 EGFRおよび野生型EGFR双方の高マンノース形態に優先的に結合することを示した。さらに、本発明者らは、高マンノース型wt EGFRのいくつかが、細胞が受容体を過剰発現する場合に、細胞表面に誤って向けられることを示した。しかしながら、この仕事は、mAb 806エピトープを同定せず、またmAb 806によって媒介される強力な抗腫瘍活性を適切に説明もしなかった。2つの独立した方法を用い、本発明者らは、mAb 806 エピトープを含有するシステインループ(アミノ酸287−302)を同定した。残基287−302を含む合成ペプチドに対するmAb 806の親和性は、本発明者らが、de2−7 EGFR発現細胞株を用いたScatchard分析によって従前に測定した親和性と同様であるので(27)、本発明者らは、それが完全なエピトープ配列を含むと確信する。明らかに、該ペプチドは、抗体結合のためのジスルフィド結合したループ内で限定される必要はない。というのは、mAb 806は溶液中の還元されたペプチド、チオール不動化ペプチドを認識し、そしてC302が欠失した可溶性ペプチドに弱く結合したためである。
(細胞表面の上皮増殖因子受容体の機能におけるCR1/CR2ドメイン相互作用の分析)
上皮増殖因子受容体(EGFR)の単離された細胞外ドメインについての最近の結晶学的データは、リガンドによるその活性化についてのモデルを提案した。本発明者らは、受容体活性化の調節に決定的であると考えられている細胞外ドメインの2つの領域(CR1およびCR2)へ突然変異を導入することによって、細胞表面に提示される全長EGFRに関して、このモデルをテストした。CR1およびCR2ドメインにおける突然変異は、リガンド結合親和性、受容体二量体化、チロシンキナーゼ活性化およびシグナル伝達能力に対して拮抗作用を有する。Tyr246はCR1ループにおける決定的な残基であり、これは、リガンド結合後における受容体ダイマー接合面の位置決定および安定化に関係し:Tyr246の突然変異は受容体の機能を損なうか、または廃止する。連結された状態に受容体を制限する相互作用を弱めるCR2における突然変異は、リガンドに対する親和性を増大させることによって、EGFに対する応答性を増強させる。しかしながら、CR1/CR2相互作用の弱めた結果、受容体のキナーゼの自然発生的な活性化を生じない。本発明者らは、負に抑制された連結された状態と、十分に活性な背中合わせの(back−to−back)ダイマー立体配座との間のEGF受容体の移行状態を認識する、抗体(mAb806)を用いて、リガンド結合後の野生型EGF受容体および突然変異EGF受容体における立体配座変化を追跡する。本発明者らの結果は、細胞表面上のEGFRは連結解除され得るが、この形態は不活性であることを示唆し;従って、受容体の連結解除は活性化のためには十分ではなく、そしてリガンド結合は、キナーゼ活性化を達成するための2つのサブユニットの正しい位置決定のために必須である。
過去20年以上にわたり、EGF受容体は、受容体関連細胞内チロシンキナーゼのリガンド活性化を研究するための重要な機会を提供してきた(1−3)。最近、いくつかのEGF受容体ファミリーメンバー(EGFR、ErbB−2およびErbB−3)についての細胞外ドメイン(ECD)の三次元構造が報告されている(4−9)。これらの構造は、EGF受容体ECDについての2つの有意に異なる立体配座を明らかとした(4;5;9)。TGF−αと複合体化したEGFRの可溶性切断型ECDの結晶構造(4)またはEGFと複合体化したEGFRの可溶性切断型ECDの結晶構造(5)において、リガンドはL1ドメインとL2ドメイン(リガンド結合ドメイン)との間でサンドイッチとなっており、ECDは、2つのインターロックされたCR1(システインリッチ)ドメインを主に介して、背中合わせのダイマーを形成し;対照的に、EGFとの複合体における自動阻害型EGFRの結晶構造においては、リガンドはL1ドメインに結合しているに過ぎず、ダイマーは存在せず、そしてモノマー受容体の主な分子内相互作用はCR1ループおよびCR2ドメインの間で起こる(9)。この構造においては、L1とL2との間の距離が1分子のEGFへの同時結合を可能とするには大き過ぎるのみならず、またL2がL1に結合したEGFから離れて回転されてもいる。従って、2つの決定的特徴は、非連結の形態(ダイマーの不存在、および高親和性でリガンドに結合する能力無し)のEGF受容体のECDから、自動阻害された(連結された)形態を区別する。興味深いことには、切断されたErbB−2 ECDの立体配座(8)および全長ErbB−2 ECDの立体配座(7)は、背中合わせのEGFRダイマーと似ており(4)、他方、リガンドの不存在におけるErbB−3 ECD(6)は、連結されたEGFR−ECD(9)と同様の立体配座を有する。
(試薬)
EGFRに対する抗体であるmAb528(19)およびmAb806(20;21)を、MelbourneのLudwig Institute for Cancer ResearchのGMP施設において生産し、精製した。抗flag抗体M2をSigma−Aldrichから購入し、抗ホスホチロシン(クローン4G10)および抗EGFR(ヒツジポリクローナル)は、Upstate(Lake Placid,NY)から購入し;抗ホスホp44/p42 MAPK抗体および抗MAPK抗体をCell Signaling(Beverly,MA)から購入した。HRP結合化ウサギ抗マウスIgおよびHRP結合化ウサギ抗ヒツジIgを、各々、BioRad(Hercules,CA)およびDako(Fort Collins,CO)から得た。Alexa 488標識化抗マウス免疫グロブリンを、Molecular Probes,Eugene,ORから購入した。フェニルアルシンオキシド(PAO)をSigma−Aldrichから購入した。水溶性ホモ二官能性架橋剤BS3(スペーサーアーム長:11.4Å)およびSulpho−EGS(スペーサーアーム長:16.1Å)をPierce(Rockford,IL)から得た。
野生型EGFRの単一点突然変異を、部位特異的突然変異誘発キット(Stratagene,La Jolla,CA)を用いて作製した。各突然変異誘発のための鋳型は、記載されているように(4)、哺乳動物発現ベクターpcDNA3(Invitrogen,Carlsbad,CA)中に、リーダー配列、続いて、FLAGタグコード配列を含有するヒトEGFR cDNA(24)であった。各構築物の自動ヌクレオチド配列決定を行って、各EGF受容体突然変異の完全性を確認した。EGFR発現構築物を293細胞(American Type Culture Collection,Manassas,VA)で一過性に発現させ、528抗体およびM2抗体で染色することによって、受容体タンパク質の存在を測定し、細胞表面における発現を確認し、タンパク質のフォールディングが適切に起こったことを確認した(データは示さず)。
従前に記載されているように(25)、野生型EGFR構築物および突然変異体EGFR構築物をIL−3依存性のネズミ造血細胞株BaF/3にトランスフェクトした。トランスフェクトされた細胞をG418において10日間選択した。flagタグに対する抗体(M2;PBS/5%FCS/5mM EDTA中10μg/ml)、および/またはEGFR細胞外ドメインに対する抗体(mAb528:PBS/5%FCS/5mM EDTA中10μg/ml)、続いてAlexa488標識化抗マウスIg(1:400最終希釈)を用いた、FACStar(Beckton and Dickinson,Franklin Lakes,NJ)でのFACS分析によって、生細胞をEGFR発現についてスクリーニングした。バックグラウンド蛍光を、細胞を無関係でクラスのマッチした一次抗体と共にインキュベートすることによって測定した。陽性プールを、FACS−DIVA(Becton and Dickinson)にて、適切なレベルのEGFR発現に対して区分した。最終的な選択の後、mRNAを各細胞株から単離し、そしてEGFRにおける全ての突然変異をPCR分析によって確認した。全ての細胞を、ルーチン的に、RPMI/10%FCS/10%WEHI3B馴化培地(26)および1.5mg/mlのG418において、継代した。
マウス下顎腺(27)から精製されたネズミEGFを、Iodogen(28)を用いて5〜8×105cpm/ピコモルの特定の放射能(activity)までヨウ素化した。コールドの飽和実験によって、内部移行阻害剤のフェニルアルシンオキサイド(PAO)(29)の存在下で、野生型EGFRまたは突然変異体EGFRを発現する細胞に結合するリガンドを室温で測定した。簡単に述べると、漸増量の未標識EGF(20pM〜5.12nM)の有りまたは無しにて、一定量(300pM)の125I EGFと共に、PBS/1%BSA/30μM PAO中で、細胞をインキュベートした。125I−EGFよりも500倍過剰の未標識EGFを用い、非特異的結合を測定した。全ての実験点は三連で調製した。インキュベーションの最後に、細胞をペレット化し、氷冷PBS中で2回洗浄し、その後、Wallac WIZARDγ−カウンター(Perkin Elmer,Boston,MA)での計数のために新鮮なチューブに移した。リガンド結合親和性および受容体の数についてのScatchardプロットおよび見積もりは、Radligプログラム(BioSoft,Cambride,UK)を用いて得られた。
野生型EGFRまたは突然変異EGFRを発現するBaF/3細胞を、IL−3およびFCSを含まない培地中で3時間インキュベートした。細胞を遠心分離によって収集し、PBS中で2回洗浄し、EGF(100ng/ml)の有りまたは無しにて、室温にてPBS中で10分間インキュベートした。架橋実験において、PBS処理またはEGF処理の後に、細胞を1.3mM BS3またはスルホ−EGS(Pierce Biotechnologies, Rockford,IL)中で室温にて20分間インキュベートした。細胞を、還元剤(100mM β−メルカプトエタノール)の有りまたは無しにて、細胞をSDS/PAGE試料緩衝液中で溶解させた。全細胞溶解物を、3〜8%トリス/アセテートゲルまたは4〜12%ビス/トリス勾配ゲル(In Vitrogen,Carlsbad,CA)でのSDS−PAGEによって直接分析し、そしてPVDF膜に移し、その後、抗ホスホチロシン抗体(4G10、UBI、1:1000最終希釈)、抗EGFR抗体(ヒツジ抗EGFR、UBI、1:1000の最終希釈)または抗ホスホMAPK抗体(1:1000の最終希釈)、続いて、各々、HRP結合化抗マウスIg、HRP結合化抗ヒツジIg、またはHRP結合化抗ウサギIg(全て1:3000の最終希釈)を用いて免疫検出した。反応性バンドをECL試薬(Amersham)を用いて可視化した。EGFRの特異的チロシンリン酸化を測定するために、抗ホスホチロシン抗体でプローブした膜を0.1Mグリシンの溶液(pH2.1)でストリップし、抗EGFRまたは抗ホスホMAPK抗体で再度プローブした。フィルムをMolecular Dynamics走査デンシトメーター(Molecular Dynamics,Sunnyvale,CA)で走査し、幅広線ピーク積分(wide−line peak integration)を用いてバンド定量をImageQuantで行った。
対数相において増殖する細胞を収集し、3回洗浄して残存するIL−3を除去した。細胞をRPMI 1640+10%FCSに再度懸濁し、200μl当たり2×104細胞にてBiomek 2000(Beckman)を用いて96ウェルプレートに播種し、10%CO2中で37℃にて4時間インキュベートした。EGFを最初の力価測定点まで加え、96ウェルプレートにわたって2倍希釈とした二連で力価測定した。コントロールのウェルには、5%(v/v)の最終濃度のWEHI−3B馴化培地を与えた。3H−チミジン(0.5μCi/ウェル)を加え、プレートを5%CO2中で37℃にて20時間インキュベートし、その後、自動ハーベスター(Tomtec,Connecticut,USA)を用いてニトロセルロースフィルターに収集した。そのマットをマイクロ波で乾燥し、プラスチックの計数バックに入れ、シンチラント(10mL)を加えた。β線カウンター(1205 Betaplate,Wallac,Finland)を用いて取り込まれた3H−チミジンを測定した。
抗体染色およびFACS分析に先立って、細胞を抗体、EGFまたはコントロール培地と共にプレインキュベートした。抗体(mAb528、mAb806またはクラス適合性の無関係な抗体、全て10μg/ml)でのプレインキュベーションは、RPMI/10%FCS中で37℃にて30分〜16時間の範囲の時間で行った。EGF(氷冷FACS緩衝液中100ng/ml)とのプレインキュベーションを氷上で20分間行った。プレインキュベーションの後に、細胞を遠心分離によって収集し、コントロール抗体またはテスト抗体(全て、氷上でFACS緩衝液中10μg/mlで20分間、その後FACS緩衝液中で洗浄)、続いて、Alexa488−抗マウスIg(1:400の最終希釈、氷上で20分)で染色して、一次抗体を検出した。細胞を氷冷FACS緩衝液で洗浄し、遠心分離によって収集し、FACScanで分析し;ピーク蛍光チャネルおよびメジアン蛍光を、CellQuest(Becton and Dickinson)での統計学的ツールを用いて各試料につき測定した。バックグラウンド(ネガティブコントロール)蛍光を全ての測定から差し引いた。メジアン蛍光値を最も代表的なピーク形状および蛍光強度として選択し、これを用いて、mAb806の結合 対 mAb528の結合の比率を導いた。
この研究の目的は、細胞表面に発現した全長EGFRの立体配座の優先度、活性化のメカニズムおよびシグナル伝達能力についてのCR1−ループ/CR2相互作用の役割を決定することである。本発明者らは、CR1/CR1相互作用および/またはCR1/CR2相互作用を乱すと予測され、その結果、EGFRの連結された状態、非連結の状態、不活性状態および/または活性状態の間のバランスを変更すると予測される点突然変異を、CR1ドメインおよびCR2ドメインに導入した。これらの構築物は、内因性ErbBファミリーメンバーを欠いた、造血細胞株であるBaF/3で発現させた。本発明者らは、結合動力学、二量体化、リガンド依存性チロシンリン酸化およびシグナル伝達、ならびにEGF依存的にDNA合成を誘導する能力を測定することによって、EGFRの機能に対する突然変異の効果を分析した。しかしながら、これらのパラメーターは受容体オリゴマー化、立体配置変化または立体配座変化の間接的尺度であり;したがって、本発明者らは、EGFRの「休止」立体配座に対し、かつリガンド誘導性の立体配座変化および立体配置変化のダイナミクスに対する、突然変異の効果を評価するツールとして、2つの立体配座的に特異的な抗EGFR抗体、mAb528(19)およびmAb806(20;23;30)の結合も用いた。
6つの点突然変異を詳細に分析した(図9A、9B参照):Tyr246における3つのCR1突然変異(Phe、TrpおよびAsp)および3つのAsp563(Hisへ)、Glu578(Cysへ)およびVal538(Aspへ)におけるCR2置換。CR1/CR2相互作用をジスルフィド連結させる試みにおいて、本発明者らは、CR1およびCR2の各々において置換を持つ突然変異体を調製した(CysへのLeu245、およびCysへのGlu578)。組換えEGFRを造血細胞株BaF/3において発現させ、これは、EGFRの生化学的特徴付けで理想的である(18;25)。トランスフェクションおよびG418における選択後、抗flag抗体M2ならびにモノクローナル抗体528(EGFRの細胞外ドメインに向けられて、リガンド結合をブロックし(19)、かつ受容体の天然形態のみを認識すると報告されている)を用いて、受容体発現をモニターした。これらの抗体との反応性に基づいて、全ての突然変異体受容体は正しくフォールディングされ、細胞表面で発現されるようである。多数ラウンドのFACSソーティングの後、本発明者らは、同様なレベル(20〜40,000R/細胞)の突然変異体EGFRまたは野生型EGFRを発現する細胞系を得た(図10)。受容体の発現が100,000受容体/細胞未満であるのは必須であり:一過性発現実験は、通常、高レベルの細胞表面EGFR(>105/細胞)を生じるが、これらのレベルの発現においては、しばしば、EGFRの自然発生的な活性化(すなわち、リガンド非依存性チロシンリン酸化)が存在する。活性化に対する理由は明らかではないが、受容体のオリゴマー化、不正確なプロセッシングまたは誤ったフォールディングのためであろう;本発明者らは、<50,000R/細胞を発現する細胞株を作製することによって、この複雑性を回避しようとした。
EGFRの連結されたECDの結晶構造(9)および非連結のECDの結晶構造(4;5)から、2つの形態に対するリガンド親和性はかなり異なるであろうと仮定された。非連結の立体配座においては、リガンドはL1ドメインおよびL2ドメイン双方と接触を行うことができ、他方、連結された立体配座では、リガンドはL1ドメインまたはL2ドメインに結合できるに過ぎない。Fergusonら(9)は、CR1ループおよびCR2ループの間の相互作用の弱化はEGFに対するEGFR−ECDの見掛けの親和性を増大させると報告している;しかしながら、CR1ループおよびCR2ドメインの連結と、リガンド結合親和性との間の関連は、単離されたEGFR−ECDのBIAcore分析によって得られたデータに基づく(9;31)。細胞表面における全長EGFRについての動力学的結合データは、EGFR−ECDについての20〜350nMと比較して、少なくとも2オーダーの大きさより低い20pM−2nMである親和性定数を生じる。細胞関連におけるそのリガンドへのEGFRの結合動力学は、局所的受容体密度、オリゴマー化状態、およびサイトゾル要素または細胞骨格要素との相互作用のような、構造非依存性因子によって複雑化される(32−34)。全長受容体の関係では、キナーゼ、膜貫通ドメインおよび/またはC末端ドメインにおける修飾もまたそのリガンドに対するEGFRの親和性に影響する(35−39)。従って、無処理の細胞における受容体のリガンド結合親和性、オリゴマー化状態およびシグナル伝達(後記参照)に対するCR1突然変異およびCR2突然変異の効果を測定するのは重要である。生理学的温度におけるリガンド結合を評価しつつ内部移行を妨げるためには、30μMのフェニルアルシンオキシドの存在下で親和性測定を行った(29):これらのアッセイ条件下で、EGFRの内部移行は1%未満まで低下した(データは示さず)。野生型EGFRおよび突然変異体EGFRに対するEGF結合のScatchard分析の結果を表3および図11に示し、以下にまとめる。
(a):細胞当たりの受容体の数は、各リガンド結合実験におけるBmaxおよびチューブ当たりの細胞数から計算した。結果は少なくとも3つの別々の実験の平均および標準誤差である。
(b)Scatchard分析によって測定された受容体数(Bmax)はFACSによって、またはイムノブロッティングによって見積もられた受容体数の10%未満である。
CR1−ループ/CR2相互作用はEGFRのキナーゼ不活性な立体配座を安定させ、自然発生な活性化を妨げるようである(9)。本発明者らは、突然変異体受容体を発現する細胞において、基底時およびEGF依存性のチロシンリン酸化、ならびにMAPK活性化をモニターした。結果を図13に示す。リガンド結合は、ほとんどの突然変異体受容体分子のホスホチロシン含有量におけるいくらかの増加を引き起こす;しかしながら、個々の突然変異体の特異的活性化は有意に変化した(チロシンリン酸化 対 受容体タンパク質の比率によって、およびMAPKの特異的活性化によって測定した:図13B、および13C)。全てのCR2突然変異体は、リガンドによって、野生型受容体と同様なレベルに活性化される。低い親和性の部位のみを有し、よって、連結された(不活性な)形態で優勢に存在するE578Cでさえ、高濃度のEGF(16nM)において完全に刺激され得る。本発明者らは、細胞を漸増性濃度のEGF(30pM〜100nM)に細胞を暴露し、チロシンリン酸化およびMAPK活性化の誘導をモニターすることによって、リガンド結合親和性およびCR2突然変異体受容体のシグナル伝達の間の相関をテストした(図14)。E578C−EGFR発現細胞において、EGFRおよびシグナルトランスジューサーShcおよびMAPKのリン酸化のピークは、野生型と比較して有意により高い濃度のEGFにおいてのみ達成された。対照的に、V583D−EGFR発現細胞およびD563H−EGFR発現細胞についての受容体活性化は、野生型EGFRよりもより低い濃度のEGFにおいて起こった(図14B、14C)。これらの結果は、CR2ドメインにおける突然変異が結合親和性に影響するが、受容体機能を惹起する後発事象に影響しないという考えを支持する。飽和量のEGFにおいてさえ、全てのTyr246突然変異は受容体チロシンリン酸化およびMAPK活性化を著しく低下させ(図13):増殖性のCR1/CR1ループ相互作用を形成する能力は、キナーゼ活性化のために決定的である。CR1ループまたはそのドッキング領域への他の点突然変異(Y251A、F263A)は、EGFRシグナル伝達に対して最小効果を有したように見える(5)。しかしながら、CR1ループおよびそのドッキング部位が共に破壊される場合(例えば、Y251A/R285S二重突然変異体:(5))、シグナル伝達は完全に破壊される。これらの著者は、リガンド結合のレベルの低下も報告しており、これは、二量体化ドッキング部位の結合が、L1ドメインおよびL2ドメインがEGFに応答して再度配向する能力に影響し得ることを示唆する。
a)1nM EGFにおける野生型EGFR−BaF/3細胞の応答は最大として取られた。b)EC50は図7に示される用量応答曲線から決定された。c)細胞当たり500Rを占有するのに必要なEGFの濃度は、受容体占有率 対 EGF濃度のプロットを用いてScatchard分析から得られたKdおよびBmaxデータから計算した。EGFの各濃度における占有されたEGFRの数は、式:
([L]/[L]+Kdl)×R1+([L]/[L]+Kd2)×R2
(式中、[L]=EGF濃度;Kd1およびKd2=平衡結合定数;R1およびR2=高親和性受容体および低親和性受容体の数)
から計算した。
データは、少なくとも3つの別々の実験の代表である。
全長の細胞EGFRにおける受容体内および受容体間連結の役割を試験するために設計された突然変異(4;6;9)は、以下を示す。1)高親和性EGF結合部位の数は、CR1−ループ/CR2連結によって強く影響され、恐らくは、L1およびL2ドメインの相対的な配置を反映する。CR1/CR2連結の弱化は、高親和性部位の割合を増大させ、CR1−ループ/CR2連結の強化は、高親和性結合を根絶する(表3)。全長細胞受容体と単離されたECDとの間のリガンド結合親和性における有意な差にもかかわらず、CR1およびCR2相互作用は、2つの分子において同一の相対的変化を起こす(Ferguson et al.,(9)および本発明者らのデータ参照)。EGFRの近接膜またはキナーゼドメインの修飾に寄与する細胞内成分によるEGFR親和性の変調(36;44−46)は、従って、連結状態と非連結状態の間の改変されたバランスを反映するはずである。EGFRの細胞内部分の修飾がどのようにして細胞外ドメインの立体配座の改変に導くかは明らかでなく、これは、将来の興味深い挑戦であろう。2)EGFRのリガンド独立性二量体化(またはオリゴマー化)は、CR1−ループまたはCR2ドメインにおける突然変異によって有意には影響されない。CR1−ループ/CR2連結の弱化は構成的な二量体化を導かないし、連結の強化がそれを減少させもしない(図12):従って、CR1−ループが(表4中のmAb806結果によって示唆されるように)受容体間相互作用に利用できる場合でさえ、(ホスホチロシン含有量によって間接的に評価された)生産的二量体化および活性化は、リガンド結合なしでは起こらない。しかしながら、リガンド媒介性EGFR二量体化および活性化はCR1ループにおける突然変異によって影響されない。これらの結果は、構成的およびリガンド誘導ダイマーは同等ではなく、リガンド結合は、受容体サブユニットおよび結果としてのキナーゼ活性化の正しい配置に厳格に必要であることを示す(16)。CR1−ループにおけるTyr246は、活性化された複合体の形成のために非常に重要なようである。Tyr246の全ての突然変異が、連結された立体配座における受容体をロックするのは名目上可能ではあったが、立体配座特異的mAb806を用いて得られた本発明者らの結果(表6)は、Tyr246突然変異体がダイマー複合体を正しく配位させることができないことを代わりに示した。3)本発明者らは、抗体であるmAb806(こでは、EGFRの非連結形態を選択的に認識するが、不活性形態を認識しないようである)を用いて、EGFRの立体配座の有意な変化をモニターすることができた。CR1/CR2相互作用の破壊は、mAb806反応性を増加させ、他方、リガンド結合はそれを減少させる(表6)。興味深いことには、D563HおよびV583D突然変異ならびにY246突然変異は共に、CR1/CR2相互作用を弱化させ、mAb806との高い反応性に導く。さらに、Tyr246の突然変異を有する突然変異体は、(トリトファンおよびアスパラギン酸に対する)CR1/CR1相互作用を最も破壊するようであり、EGF結合後のmAb806反応性の有意な増加を示し、このことにより、活性化されたCR1/CR1配位が妥協される(compromise)ことを確認する。4)活性ダイマーを形成する能力が維持される場合は常に、EGFに対する応答は、親和性および受容体数の間のバランスによってのみ決定される。本発明者らは、リガンドを活性化可能なEGFRを発現するBaF/3細胞において、500個ほどの受容体/細胞が最大の半分の(half−maximal)DNA合成を刺激するのに占有される必要があり(表4)、そしてこれは、ShcおよびMAPKのような下流シグナル伝達エフェクターの閾値刺激に相関する(図13)ことを示した。従って、EGFRリン酸化それ自体は、受容体の占有(従って、リガンド依存性二量体化および活性化)に伴って継続的に増加するが、シグナル伝達経路はずっと低いリガンド濃度において十分に活性化され;実際に、マイトジェンの刺激がEGFの複数濃度において起こり、ここで、ShcおよびMAPKのリン酸化は容易に検出可能であるが、EGFRリン酸化は容易には検出可能ではない。
(ランダム突然変異誘発および酵母表面ディスプレイによる抗上皮増殖因子受容体抗体の詳細なエピトープマッピング)
上皮増殖因子受容体(EGFR)に対する治療的に関連するモノクローナル抗体(mAb)の詳細なエピトープマッピングを、ランダム突然変異誘発および酵母表面ディスプレイによって達成した。EGFR外部ドメイン断片(残基273−621)の単一点突然変異体が酵母表面にディスプレイされたライブラリーをランダム突然変異誘発によって構築し、そのライブラリーを目的のmAbに対する結合を減少させることについて分類した。
EGFR突然変異体がmAbへの結合の喪失を示す場合、これは、突然変異した残基が潜在的に接触残基であることを示唆する。この方法を用い、本発明者らは、EGFRへのmAb806の結合でエネルギー的に重要な鍵となる残基を同定した。mAb806エピトープは、Cys287−Cys302からなるループの一表面に突き止められ、ジスルフィド結合および2つの塩橋によって連結される。本明細書中で同定されるように、mAb806エピトープは自己抑制性EGFRモノマー立体配座において十分に接近可能ではなく、これは、EGFRが自己抑制性モノマーから拡大されたモノマーへ変化するように、EGFRの移行型形態へのmAb806結合に一致する。
エピトープマッピングは、抗体−抗原相互作用を媒介することに関与する抗原残基の決定である。エピトープマッピングの以前の方法は、その後の抗体結合分析と共に、バクテリオファージ(1)、Escherichia coli(2)、または酵母(3)の表面でのペプチド断片の発現を伴っていた。抗体結合のマッピングもまたSPOT合成を通じて達成され、ここで、合成ペプチドがセルロース膜にスポットされ、抗体結合についてアッセイされる(4)。ファージディスプレイおよびSPOT技術は、ErbB受容体ファミリーメンバーに対する種々の抗体のエピトープを決定するのに利用されてきた(5,6,7)。しかしながら、ペプチドベースの方法は連続した非立体配座エピトープを同定できるに過ぎない。不連続エピトープを同定するために、H/D−交換質量分析法を用いて、エピトープが不連続なタンパク質分解断片に限局されている(8)。
加えて、アミノ酸残基6−273が欠失され、かつ新規なグリシンが接合部に挿入される、EGFR vIIIとして公知のEGFRの突然変異体形態は、神経膠芽細胞腫多形のような癌で観察されてきた(18)。従って、EGFRは癌治療のための重要な標的として出現し、EGFR細胞外ドメインに結合する種々の抗体がその機能を阻害するために開発されてきた。
(エピトープマッピングライブラリーの構築および分類)
EGFR断片273−621の低突然変異率エラープローンPCRランダム突然変異誘発を用いて、優れたエピトープマッピングライブラリーを構築した。この断片は、酵母表面における成功したEGFR突然変異体ディスプレイの検出用のC末端c−mycタグを含有した。最初のライブラリーのサイズは5×105クローンであり、100の未選択クローンの配列決定は、72%が野生型EGFRであり、17%が単一アミノ酸突然変異体であり、そして11%が複数突然変異またはフレームシフトであることを示した。これは関連ライブラリーサイズ8.5×104を与え、これは、この349残基断片の単一アミノ酸突然変異体の最大理論的多様性よりも大きいオーダー(6.6×103)であり、1.0×103の可能な単一ヌクレオチド突然変異よりもほぼ2倍のオーダーである。このライブラリーサイズを考えると、単一ヌクレオチド突然変異による遺伝コードでアクセスできる各アミノ酸はライブラリーにおいて十分に表されるはずである。このライブラリーを酵母に形質転換し、酵母Aga2タンパク質への融合として細胞表面にEGFR突然変異体をディスプレイするように誘導した。ライブラリーを高い濃度(野生型の見掛けの解離定数よりも少なくとも大きいオーダー)のmAbで標識し、野生型結合と親和性の喪失との間の識別を可能とする。細胞をニワトリ抗c−myc IgYで標識して、EGFR 273−621発現を検出した。酵母の表面にディスプレイされたが、mAbへの親和性の喪失を示した突然変異体を単離した(図18A−図18B)。著しく誤って折り畳まれた突然変異体は分泌質制御装置によって認識され保持されると予測され(31;35)、その結果、有意に低下されたこれらの突然変異体の細胞表面c−myc免疫蛍光をもたらした。十分な集団の富化が観察された後、単一EGFR突然変異体クローンを配列決定し、特徴付けた。
mAb806のエピトープマッピングのために、ライブラリーを、分類1では10nM 806で分類し、分類2および3では75nM 806で分類し、個々のクローンを分類2および3の後に配列決定する。100の配列決定されたクローンのうち、ほぼ20%が複数の突然変異を含み、その後の分析から除外された。mAb806への結合の喪失についてライブラリーから単離された単一突然変異体を、表7の左欄に示す。全ての突然変異は、以前に測定されているように(34)、システイン287と302との間のジスルフィド結合ループに突き止められる。しかしながら、残基レベルの分解能およびmAb806エピトープについてのさらなる情報が、本発明の方法を用いて得られている。mAb806への結合の喪失を伴う突然変異体は、75nM 806における野生型(図18D)と比較した場合、結合の完全または部分的のいずれかの喪失を示す(図18B−図18C)。突然変異体を75nM 806における結合の程度に従ってスコア付けし、++は野生型結合を示し、+は結合の部分的喪失、そして結合の完全な喪失を示す(表7、左欄)。優れたエピトープマッピングライブラリーからの結果を確認するために、部位特異的突然変異誘発(SDM)を介するアラニンスキャニングを全ループ287−302で行った(表7、右欄)。アラニンスキャニングによる結合の喪失を持つ全ての部位(287、293、298、および302)は、ライブラリーから単離された突然変異体に対応する。逆に、アラニン以外の残基の置換の際にのみmAb結合の喪失を持つ部位(D297Y、R300C、R300P、およびK301E)は、アラニンスキャニングによって同定可能ではなく、未だ明瞭ではないが、mAb 806エピトープのエネルギー的に重要な成分を形成する。平均6〜7のアミノ酸置換が単一ヌクレオチド突然変異誘発によって利用可能であるため、より大きな範囲の物理化学的多様性が、アラニンスキャニングと比較してサンプリングできる。しかしながら、75nMにおける低下したmAb 806標識を除いて、未変化c−myc免疫蛍光標識強度を持つ突然変異体は、抗体に対する低下した親和性を有すると推定することができる。75nMにおけるmAb806標識を特定の親和定数と定量的に相関させるために、酵母の表面の力価測定を3つのEGFR断片で行って、野生型273−621(++)、C287R(+)、およびE293K(−)についてmAb806の見掛けの解離定数を測定した。結果を図19に示す。酵母表面にディスプレイされた野生型273−621についてのmAb806の解離定数は2.13nM(1.83nM〜2.50nMの68%信頼区間)であり、これは、EGFR vIIIを発現する細胞へのmAb 806結合のScatchard分析によって見出された親和性と一致する(19)。C287R置換はこの解離定数を127nMまで上昇させ(103nM〜160nMの68%信頼区間)、これは、野生型と比較した場合に+2.4kcal/molのΔΔG値を与え、アラニンスキャニング項目においては、結合の中間的な喪失である(36)。E293K置換は、+5.7kcal/molのΔΔGに対応する少なくとも30mMのKd値に導き、これは、結合に対する「ホットスポット」を示す。前記ΔΔG値は、これらの突然変異の相対的エネルギー的重要性を用いて、75nM 806におけるそれらの結合スコア(++、+、または−)に基づいて他の突然変異体のエネルギー的重要性を大まかに見積もることができる。
mAb 806結合についてエネルギー的に重要なものとして同定された残基を図20に示す。これらの残基は、ループ287−302の1つの面でクラスターを形成し、これは、これらの残基がmAb 806エピトープであることを示す。興味深いことには、Val299はこれらの残基の中央に位置するが、ライブラリーまたはアラニンスキャンにおいて同定されなかった。それゆえ、V299KおよびV299D部位特異的突然変異体を作成し、エピトープは影響無くリシン残基を収容できるが、アスパラギン酸置換は検出可能な結合を除去する(表7)。これはさらに、mAb 806がループ287−302のこの面に接触するようであることを示す。mAb 806は熱およびSDS変性EGFRに結合し(34)、これは直線状エピトープを意味し;しかしながら、そのエピトープはライブラリー分析によって示されるように配列中で全部が連続的ではない。これは、Glu293の側鎖が他の推定接触面に対してループの一方側から突出することを示す、ループ287−302の構造の調査によって説明される。mAb 806エピトープはジスルフィド結合および2つの塩橋、Glu293−Arg300およびAsp297−Lys301によって連結される(図20C)。これらの連結に関与する全ての6つの残基を、mAb 806への結合の喪失のためにライブラリーから単離し、エピトープの連結された性質の重要性を強調する。位置287におけるシステインは、結合の中間的喪失をもたらす広範な置換を許容し(表7)、これは、エピトープに対するそのエネルギー的寄与が、抗体に接触することよりもループを連結することから生じ得ることを示す。しかしながら、位置302におけるシステインは接触残基である可能性が高く、なぜならば、そのシステインは芳香族性質を持つより大きな残基への置換を許容するのみだからである。自己抑制性EGFRモノマー構造の文脈におけるmAb 806エピトープを図20Dに示す。抗体結合部位は、この立体配座におけるエピトープから部分的にブロックされるようであり、これは、mAb 806が可溶性EGFRに結合しないが、自己抑制性の立体配座から乱された「非連結」EGFR突然変異体に結合するという観察と一致する(34)。
本研究は、酵母細胞表面でディスプレイされたランダムに突然変異誘発された抗原のスクリーニングを用いる、優れたエピトープマッピングの新規な方法を記載する。この方法は、潜在的な接触残基に関する事前の知識なしに複雑な真核生物タンパク質への抗体結合の非直線状エピトープを同定することができる。これらは、ペプチドエピトープマッピング法およびアラニンスキャニングに対するいくつかの利点がある。酵母表面ディスプレイプラットフォームは、各個々の突然変異体を可溶性発現し、精製する必要性を有さずにタンパク質発現を容易にする。突然変異体の特徴付けおよび力価測定もまた酵母の表面で効果的に行われる。この方法は、そのエピトープが三次構造依存性でないmAb 806についてのエピトープを明確に同定することができた。このため、mAb 806への結合の喪失のためのライブラリーから単離された全ての単一突然変異は、単一の可能な抗体接触表面につきとめられた。
(エピトープマッピングライブラリーの構築および発現)
Stratagene GeneMorph(登録商標)ランダム突然変異誘発キットを用いてエピトープマッピングライブラリーを構築して、低突然変異誘発率を得た。ライブラリー構築で用いた鋳型は、酵母ディスプレイのために挿入された、ジスルフィド誤対合を妨げるためのC283A突然変異を持つ、EGFR断片273−621を含有するpCT302骨格であった(27)。Qiagen Qiaquickゲル抽出キットを用い、PCR産物をゲル精製し、抽出した。ライブラリーを、Bio−Rad(Richmond,CA)遺伝子Pulserトランスフェクション装置を用いるエレクトロポレーション(40)および相同組換え(41)によってSaccharomyces Cerevisiae株EBY100(28)に形質転換した。最終的なライブラリーは、ZymoprepTM(Zymo Research)を用いるプラスミド回収および100ライブラリークローンの配列決定(MIT Biopolymers Laboratory)によって示されるように、EGFR断片に対するアミノ酸変化の大まかなポアソン分布を含んだ。酵母表面を用いるライブラリーの成長および発現は以前に記載されているように行った(28)。
抗ヒトEGFRマウスモノクローナル抗体806は、一般に、Ludwig Institute for Cancer Researchによって提供された。抗c−mycニワトリIgY画分を、Molecular Probes(Eugene,OR)から購入した。適当な数の酵母細胞(少なくとも10×ライブラリーサイズ)をFACS緩衝液(1mg/mLウシ血清アルブミンを含有するリン酸緩衝化生理食塩水)で処理した。細胞を4μg/mLの抗c−mycニワトリIgYおよび適当な濃度のmAbと共に25℃にて30分間インキュベートした。次いで、細胞をFACS緩衝液で洗浄し、1:25希釈フィコエリスリン標識したヤギ抗マウスIgG(Sigma)および1:100希釈Alexa Fluor(登録商標)488ヤギ抗ニワトリIgG(Molecular Probes)と共に4℃にて30分間インキュベートした。標識された細胞を濯ぎ、MITフローサイトメトリーコア施設においてMoFlo FACSマシーンを用いて細胞ライブラリーを分類した。
分類されたライブラリー集団からのプラスミドを、ZymoprepTMを用いて回収し、MIT Biopolymers Laboratoryにおいて配列決定した。QuickChange(登録商標)部位特異的突然変異誘発(Stratagene)を用いて部位特異的突然変異体を作成した。EZ酵母形質転換(Zymo Research)を用いて単一クローンを酵母に形質転換し、最小培地(酵母窒素塩基、カゼイン加水分解物、デキストロース、およびリン酸緩衝液pH7.4)中で一晩増殖させた。酵母表面タンパク質の発現を、ガラクトースを含む最小培地に移し、一晩インキュベートすることによって誘導した。各クローンについては、抗c−mycニワトリIgY、適当なmAbおよび二次蛍光抗体で、上記のように、1×106細胞を標識した。蛍光データは、Coulter Epics XLフローサイトメーター(Beckman−Coulter)を用いて得られ、DakoCytomation SummitTMソフトウェアを用いて分析した。
細胞を上記のように増殖させ、誘導した。1×106細胞は、上記のように、適当な濃度のmAb 806、抗c−mycニワトリIgY、および二次蛍光抗体を用いて標識した。c−myc陽性酵母の蛍光データはCoulter Epics XLフローサイトメーターを用いて得られ、最大および最小平均蛍光強度によって正規化した。結合相互作用は、リガンド欠失のない単一部位結合モデルであると推定された。力価測定データは方程式:
にフィットさせた。これらのデータセットの全体的フィットはMicrosoft Excelを用いて行い、68%信頼区間は(42)に従って計算した。
全てのEGFRタンパク質イメージは、PyMOLソフトウェア(pymol.orgにおけるDeLano Scientific LLC)を用いて作成した。EGFR(PDB ID 1NQL)の各残基の溶媒接近可能表面積はGetarea 1.1(scsb.utmb.edu/cgi−bin/get a form.tclにおけるSealy Center for Structural Biology, University of Texas Medical Branch)を用いて計算した。
1.0のウォータープローブサイズを用いて、表面にあるEGF接触残基の正しい同定を可能とした。20以上の値を持つ残基を表面残基とみなした。
Claims (39)
- 配列番号1〜14のいずれかに記載されたアミノ酸配列を含む、単離された受容体ポリペプチドおよびその免疫原性フラグメント。
- アミノ酸配列:
CX1X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15(配列番号11)
を有し、ここで各残基は、独立して以下:
X1はG、P、NまたはSであり;
X2はA、P、T、SまたはLであり;
X3はD、HまたはSであり;
X4はS、Y、T、NまたはKであり;
X5はY、QまたはMであり;
X6はMまたはVであり;
X7はE、TまたはDであり;
X8はAまたは無しであり;
X9はEまたはKであり;
X10はDまたはNであり;
X11はGまたはAであり;
X12はV、I、LまたはTであり;
X13はR、QまたはKであり;
X14はR、KまたはMであり;
X15はCまたは無しである、
のように選択され得る、単離されたペプチド。 - アミノ酸配列:
CX1X2X3X4X5X6X7X8X9X10X11X12X13X14X15(配列番号12)
を有し、ここで、各残基は独立して以下:
X1はG、P、N、Q、SまたはTであり;
X2はA、P、T、S、L、M、V、IまたはPであり;
X3はD、E、H、R、K、SまたはTであり;
X4はS、Y、F、W、T、N、Q、KまたはRであり;
X5はY、F、W、Q、N、M、V、A、L、IまたはPであり;
X6はM、V、A、L、IまたはPであり;
X7はE、D、TまたはSであり;
X8はA、V、L、I、P、Mまたは無しであり;
X9はD、E、KまたはRであり;
X10はD、E、NまたはQであり;
X11はG、A、M、V、L、IまたはPであり;
X12はV、I、L、M、A、P、SまたはTであり;
X13はR、K、H、QまたはNであり;
X14はR、K、H、M、A、V、L、IまたはPであり;
X15はCまたは無しである、
のように選択され得る、単離されたペプチド。 - アミノ酸配列:
CX1X2X3X4X5EX6X7X8X9GX10X11X12C(配列番号13)
を有し、ここで各Xn残基は、独立して以下:
X1はGまたはAであり;
X2はAまたはKであり;
X3はDまたはAであり;
X4はSまたはAであり;
X5はYまたはAであり;
X6はMまたはAであり;
X7はEまたはAであり;
X8はEまたはAであり;
X9はDまたはAであり;
X10はV、AまたはKであり;
X11はRまたはAであり;
X12はKまたはAである、
のように選択され得る、単離されたペプチド。 - アミノ酸配列:
CX1X2X3X4X5EX6X7X8DGVRKC(配列番号14)
を有し、ここで各Xn残基は独立して以下:
X1はGまたはAであり;
X2はAまたはKであり;
X3はDまたはAであり;
X4はSまたはAであり;
X5はYまたはAであり;
X6はMまたはAであり;
X7はEまたはAであり;
X8はEまたはAである、
のように選択され得る、単離されたペプチド。 - 配列番号1〜14のいずれかに記載されたペプチドをコードする、単離された核酸。
- 該ペプチドは配列番号1〜14のいずれかの1以上から選択される、免疫原性受容体ペプチドまたはその免疫原性フラグメント。
- 哺乳動物を免疫化する方法であって、該方法は、増殖因子受容体エピトープペプチドまたはその免疫原性フラグメントを投与する工程を包含し、それにより、異常発現または過剰発現された増殖因子受容体を発現する細胞上には露出されるが、野生型細胞には露出されないエピトープペプチドと免疫反応性の抗体が生産される、方法。
- 哺乳動物を免疫化する方法であって、該方法は、配列番号1〜14のいずれかから選択されるEGF受容体ペプチド、またはその免疫原性フラグメントを投与する工程を包含し、それにより、異常発現または過剰発現されたEGFRを発現する細胞上には露出されるが、野生型細胞では露出されないエピトープペプチドと免疫反応性である抗体が生産される、方法。
- 配列番号1〜14のいずれかから選択された1以上のEGFRペプチド、および薬学的に受容可能なアジュバントを含む、ワクチン。
- 配列番号1〜14のいずれかから選択された1以上のEGFRペプチド、および薬学的に受容可能なアジュバントを含む、免疫原性組成物。
- 配列番号1〜14のいずれかの群から選択された1以上のEGFファミリー受容体ペプチド、および薬学的に受容可能なアジュバントを含み、さらに、1以上のさらなる腫瘍抗原を含む、腫瘍ワクチンまたは抗癌ワクチン。
- 前記腫瘍抗原がEGF抗原またはEGFR抗原である、請求項22に記載のワクチン。
- 哺乳動物の治療用ワクチンであって、被験体は頭頸部癌、乳癌、または前立腺腫瘍および神経膠腫に罹患しており、該ワクチンは、配列番号1〜14のいずれかの群から選択される1以上のEGFファミリー受容体ペプチド、またはその免疫原性フラグメント、および薬学的に受容可能なアジュバントを含む、ワクチン。
- 前記ペプチドがキャリアに結合体化された、請求項に24記載のワクチン。
- 配列番号1〜14のいずれかから選択される1以上のペプチドから選択されるEGFファミリー受容体ペプチド、および薬学的に受容可能なキャリアを含む、薬学的組成物。
- 配列番号1〜14のいずれかから選択される1以上のペプチドと免疫反応性であるEGFファミリー受容体ペプチド抗体、および薬学的に受容可能なキャリアを含む、薬学的組成物。
- 配列番号1〜14のいずれかから選択されるEGFファミリー受容体ペプチドに対する、精製された抗体。
- モノクローナル抗体である、請求項28に記載の抗体。
- 検出可能な標識で標識された、請求項28に記載の抗体。
- 前記抗体が、治療または診断目的を有する1以上の他の分子または因子に共有結合されているかまたはそうでなければ会合している、請求項28に記載の抗体。
- 前記他の分子または因子が、異なる特徴を有する他の抗体または抗体フラグメント、トキシン、リガンド、放射性同位体および化学療法剤から選択される、請求項31に記載の抗体。
- 異常発現または過剰発現されたEGFRを発現する細胞に露出されるが、野生型細胞では露出されないエピトープに免疫反応性である抗体を創製する方法であって、該方法は、配列番号1〜14のいずれかからから選択されるEGF受容体ペプチドまたはそのフラグメントで動物を免疫化する工程、およびペプチド結合抗体を単離する工程を包含する、方法。
- 異常発現または過剰発現されたEGFRを発現する細胞で露出されるが、野生型細胞では露出されないエピトープと免疫反応性である抗体を選択する方法であって、該方法は、配列番号1〜14のいずれかから選択されるEGF受容体ペプチドまたはそのフラグメントで、候補抗体、または抗体もしくは活性な抗体フラグメントを発現する細胞をスクリーニングする工程を包含する、方法。
- 特に配列番号1〜14のいずれかから選択される免疫原性EGFファミリー受容体ペプチドをコードする核酸を含む、核酸ワクチンまたはDNAワクチン。
- 腫瘍抗原または免疫調節分子ペプチドをコードする核酸をさらに含む、請求項33に記載のワクチン。
- 配列番号1〜14のいずれかの群から選択されるEGF受容体エピトープペプチドの存在または露出を検出することによって、頭頸部癌、乳癌、または前立腺腫瘍および神経膠腫を含む腫瘍および癌を測定およびモニターする方法。
- 前記EGF受容体エピトープペプチドが:
a.配列番号1〜14のいずれかからなる群より選択されるEGF受容体エピトープペプチドの存在または露出が疑われるサンプルと、該EGF受容体ペプチドに対する抗体とを、該ペプチドの該抗体に対する結合を起こさせる条件下で接触させる工程;および
b.該サンプル由来の該EGF受容体エピトープペプチドと該抗体との間で結合が起こっているか否かを検出する工程、
によって測定され、
ここで、該結合の検出は、該サンプル中の該EGF受容体エピトープペプチドの存在または露出を示す、請求項35に記載の方法。 - 被験体において免疫応答を誘導する方法であって、該被験体は、頭頸部癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、膀胱癌、咽頭癌、扁平細胞癌腫、または前立腺腫瘍および神経膠腫を含む腫瘍または癌を有し、該方法は、配列番号1〜14のいずれかの群から選択されるEGF受容体エピトープペプチド、および薬学的に受容可能なキャリアを含む薬学的組成物の一定量を被験体に投与し、それにより免疫応答を誘導する工程を包含する、方法。
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---|---|---|---|---|
US20100056762A1 (en) * | 2001-05-11 | 2010-03-04 | Old Lloyd J | Specific binding proteins and uses thereof |
ES2334494T5 (es) | 2001-05-11 | 2013-05-29 | Ludwig Institute For Cancer Research Ltd. | Proteínas de unión específicas y usos de las mismas |
DK1399484T3 (da) * | 2001-06-28 | 2010-11-08 | Domantis Ltd | Dobbelt-specifik ligand og anvendelse af denne |
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DK1517921T3 (da) * | 2002-06-28 | 2006-10-09 | Domantis Ltd | Immunglobulin-enkeltvariable antigen-bindende domæner og dobbeltspecifikke konstruktioner deraf |
US9321832B2 (en) * | 2002-06-28 | 2016-04-26 | Domantis Limited | Ligand |
EP1578801A2 (en) * | 2002-12-27 | 2005-09-28 | Domantis Limited | Dual specific single domain antibodies specific for a ligand and for the receptor of the ligand |
US7767792B2 (en) * | 2004-02-20 | 2010-08-03 | Ludwig Institute For Cancer Research Ltd. | Antibodies to EGF receptor epitope peptides |
US20070009972A1 (en) * | 2005-02-16 | 2007-01-11 | Ginger Chao | Epidermal growth factor receptor polypeptides and antibodies |
ZA200803759B (en) * | 2005-11-02 | 2009-10-28 | Univ Duke | Concurrent chemotherapy and immunotherapy |
BRPI0619225A2 (pt) * | 2005-12-01 | 2017-11-07 | Domantis Ltd | monômero de anticorpo de domínio, ligando, ácidos nucleicos isolado e recombinante, vetor, célula hospedeira, método para produzir um monômero de dab de ligando, composição farmacêutica, dispositivo de liberação de medicamento, uso de um monômero de anticorpo de domínio, e, método para tratar uma doença inflamatória, artrite ou doença respiratória |
EP2163563A1 (en) * | 2006-03-31 | 2010-03-17 | Massachusetts Institute of Technology | Treatment of tumors expressing mutant EGF receptors |
WO2008033495A2 (en) * | 2006-09-15 | 2008-03-20 | Life Science Pharmaceuticals | Method for detecting and treating skin disorders |
MX2009007987A (es) | 2007-01-25 | 2010-03-01 | Dana Farber Cancer Inst Inc | Uso de anticuerpos anti-egfr en el tratamiento de enfermedad mediada por egfr mutante. |
AU2008218925A1 (en) | 2007-02-20 | 2008-08-28 | Anaptysbio, Inc. | Somatic hypermutation systems |
MX2009009782A (es) | 2007-03-15 | 2010-09-10 | Ludwig Inst Cancer Res | Metodo de tratamiento que utiliza anticuerpos egfr e inhibidores de src y formulaciones relacionadas. |
EP2147397A4 (en) * | 2007-04-23 | 2013-08-21 | Univ Ramot | SYSTEM, METHOD AND COMPUTER READABLE MEDIUM FOR PROVIDING AN OUTPUT IMAGE |
UA102993C2 (ru) | 2007-06-06 | 2013-09-10 | Домантис Лимитед | Анти-vegf единичный вариабельный домен иммуноглобулина |
WO2009023266A1 (en) * | 2007-08-14 | 2009-02-19 | Ludwig Institute For Cancer Research | Generation of antibodies to cell-surface receptors and cancer-associated proteins including egfr family members |
EP2188311B1 (en) | 2007-08-14 | 2016-10-05 | Ludwig Institute for Cancer Research Ltd. | Monoclonal antibody 175 targeting the egf receptor and derivatives and uses thereof |
EP2190861A4 (en) | 2007-08-22 | 2011-03-30 | Univ California | ACTIVE BINDING POLYPEPTIDES AND METHOD FOR THEIR IDENTIFICATION AND USE |
EP2615115A3 (en) | 2007-11-30 | 2014-01-08 | Glaxo Group Limited | Antigen-binding constructs |
WO2009149094A2 (en) * | 2008-06-02 | 2009-12-10 | University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Cytotoxic t cell defined egfr peptide and an optimized derivative peptide |
JP2010006705A (ja) * | 2008-06-13 | 2010-01-14 | Atlas Antibodies Ab | Her2サブセット |
JP2011525241A (ja) * | 2008-06-18 | 2011-09-15 | アボット・ラボラトリーズ | PlGF−1コンパニオン診断方法および製品 |
US20100004306A1 (en) * | 2008-06-18 | 2010-01-07 | Abbott Laboratories | PIGF-1 Assay and kits and components thereof |
US8741287B2 (en) * | 2008-06-18 | 2014-06-03 | Abbott Laboratories | PlGF-1 assay and kits and components thereof |
WO2010077643A1 (en) * | 2008-12-08 | 2010-07-08 | Tegopharm Corporation | Masking ligands for reversible inhibition of multivalent compounds |
US8895702B2 (en) | 2008-12-08 | 2014-11-25 | City Of Hope | Development of masked therapeutic antibodies to limit off-target effects; application to anti-EGFR antibodies |
JP5851842B2 (ja) | 2009-01-12 | 2016-02-03 | サイトムエックス セラピューティクス, インク.CytomX Therapeutics, Inc. | 改変した抗体組成物、それを作製および使用する方法 |
WO2010096838A2 (en) * | 2009-02-23 | 2010-08-26 | Cytomx Therapeutics, Llc | Proproteins and methods of use thereof |
KR101477762B1 (ko) * | 2009-09-22 | 2014-12-30 | 상하이 캔서 인스티튜트 | 특이성 결합 단백질 및 용도 |
CN102127147B (zh) * | 2010-01-20 | 2014-07-02 | 上海市肿瘤研究所 | 表皮生长因子受体模拟表位肽及其应用 |
CN103539840B (zh) * | 2010-01-20 | 2015-04-01 | 上海市肿瘤研究所 | 表皮生长因子受体模拟表位肽及其应用 |
JP2013534515A (ja) | 2010-06-01 | 2013-09-05 | モナシュ ユニバーシティ | プロセシングされていない受容体型チロシンキナーゼc−METに対する抗体 |
WO2012024659A2 (en) | 2010-08-20 | 2012-02-23 | Massachusetts Institute Of Technology | Antibody-based constructs directed against tyrosine kinase receptors |
EP2699268A2 (de) | 2011-04-21 | 2014-02-26 | Seattle Genetics, Inc. | Neue binder-wirkstoff konjugate (adcs) und ihre verwendung |
IN2014DN08778A (ja) * | 2012-03-27 | 2015-05-22 | Green Cross Corp | |
JP6103832B2 (ja) | 2012-06-25 | 2017-03-29 | Hoya株式会社 | Egfr結合性ペプチド |
CN106163568B (zh) | 2013-12-23 | 2021-03-23 | 拜耳制药股份公司 | 含纺锤体驱动蛋白(ksp)的抗体药物偶联物(adc) |
EP3126388B1 (en) | 2014-03-11 | 2019-05-08 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Anti-egfrviii antibodies and uses thereof |
EP4218929A1 (en) | 2014-03-21 | 2023-08-02 | AbbVie Inc. | Anti-egfr antibodies and antibody drug conjugates |
US20190099475A1 (en) | 2015-04-08 | 2019-04-04 | Nantomics, Llc | Cancer neoepitopes |
CN108513593A (zh) | 2015-04-23 | 2018-09-07 | 南托米克斯有限责任公司 | 癌症新表位 |
CN108025084A (zh) | 2015-06-22 | 2018-05-11 | 拜耳医药股份有限公司 | 具有酶可裂解基团的抗体药物缀合物(adc)和抗体前药缀合物(apdc) |
WO2017060322A2 (en) | 2015-10-10 | 2017-04-13 | Bayer Pharma Aktiengesellschaft | Ptefb-inhibitor-adc |
EP3362930A4 (en) | 2015-10-12 | 2019-06-19 | Nantomics, LLC | SYSTEMS, COMPOSITIONS, AND METHODS FOR DISCOVERING MSI AND NEOEPPITOPES THAT PROVIDE SENSITIVITY TO IMMUNE CONTROL POINTS |
SG10202008909VA (en) | 2016-03-24 | 2020-10-29 | Bayer Pharma AG | Prodrugs of cytotoxic active agents having enzymatically cleavable groups |
CN109310781B (zh) | 2016-06-15 | 2024-06-18 | 拜耳制药股份公司 | 具有ksp抑制剂和抗-cd123-抗体的特异性抗体-药物-缀合物(adc) |
WO2018114804A1 (de) | 2016-12-21 | 2018-06-28 | Bayer Pharma Aktiengesellschaft | Spezifische antikörper-wirkstoff-konjugate (adcs) mit ksp-inhibitoren |
WO2018114798A1 (de) | 2016-12-21 | 2018-06-28 | Bayer Aktiengesellschaft | Prodrugs von cytotoxischen wirkstoffen mit enzymatisch spaltbaren gruppen |
IL310558A (en) | 2016-12-21 | 2024-03-01 | Bayer Pharma AG | Drug-antibody conjugates with enzymatically cleavable groups |
MA55089A (fr) | 2019-02-26 | 2022-01-05 | Janssen Biotech Inc | Traitements combinés et stratification des patients avec des anticorps bispécifiques anti-egfr/c-met |
AU2020247828A1 (en) * | 2019-03-22 | 2021-11-18 | Certis Therapeutics Pty Ltd | Anti-HER2 binding molecules |
US11879013B2 (en) | 2019-05-14 | 2024-01-23 | Janssen Biotech, Inc. | Combination therapies with bispecific anti-EGFR/c-Met antibodies and third generation EGFR tyrosine kinase inhibitors |
CN111647074B (zh) * | 2020-06-01 | 2023-12-19 | 皖南医学院 | 一种her3二聚化界面抗原肽、重组抗原肽、编码基因及其应用 |
AR124681A1 (es) | 2021-01-20 | 2023-04-26 | Abbvie Inc | Conjugados anticuerpo-fármaco anti-egfr |
AU2022298653A1 (en) | 2021-06-22 | 2023-10-12 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Anti-egfrviii antibody drug conjugates and uses thereof |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2002092771A2 (en) * | 2001-05-11 | 2002-11-21 | Ludwig Institute For Cancer Research | Specific binding proteins and uses thereof |
JP2003515330A (ja) * | 1999-10-29 | 2003-05-07 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | 抗前立腺幹細胞抗原(psca)抗体組成物及び使用方法 |
JP2003523207A (ja) * | 2000-01-25 | 2003-08-05 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | Liv−1関連タンパク質、それをコードするポリヌクレオチド、及び癌の治療へのその利用 |
WO2003084998A1 (fr) * | 2002-04-11 | 2003-10-16 | Fuso Pharmaceutical Industries, Ltd. | Anticorps monoclonal neutralisant la megsine |
Family Cites Families (62)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
USRE31006E (en) | 1968-09-24 | 1982-08-03 | Akzona Incorporated | Process for the demonstration and determination of reaction components having specific binding affinity for each other |
US3654090A (en) | 1968-09-24 | 1972-04-04 | Organon | Method for the determination of antigens and antibodies |
NL154598B (nl) | 1970-11-10 | 1977-09-15 | Organon Nv | Werkwijze voor het aantonen en bepalen van laagmoleculire verbindingen en van eiwitten die deze verbindingen specifiek kunnen binden, alsmede testverpakking. |
US4016043A (en) | 1975-09-04 | 1977-04-05 | Akzona Incorporated | Enzymatic immunological method for the determination of antigens and antibodies |
US4491632A (en) | 1979-10-22 | 1985-01-01 | The Massachusetts General Hospital | Process for producing antibodies to hepatitis virus and cell lines therefor |
US4444887A (en) | 1979-12-10 | 1984-04-24 | Sloan-Kettering Institute | Process for making human antibody producing B-lymphocytes |
US4342566A (en) | 1980-02-22 | 1982-08-03 | Scripps Clinic & Research Foundation | Solid phase anti-C3 assay for detection of immune complexes |
DE3167442D1 (en) | 1980-07-07 | 1985-01-10 | Nat Res Dev | Improvements in or relating to cell lines |
US4341761A (en) | 1980-07-25 | 1982-07-27 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Antibodies to immunogenic peptides and their use to purify human fibroblast interferon |
US4466917A (en) | 1981-02-12 | 1984-08-21 | New York University | Malaria vaccine |
US4493890A (en) | 1981-03-23 | 1985-01-15 | Miles Laboratories, Inc. | Activated apoglucose oxidase and its use in specific binding assays |
US4451570A (en) | 1981-03-26 | 1984-05-29 | The Regents Of The University Of California | Immunoglobulin-secreting human hybridomas from a cultured human lymphoblastoid cell line |
US4596792A (en) | 1981-09-04 | 1986-06-24 | The Regents Of The University Of California | Safe vaccine for hepatitis containing polymerized serum albumin |
US4399121A (en) | 1981-11-04 | 1983-08-16 | Miles Laboratories, Inc. | Iodothyronine immunogens and antibodies |
US4427783A (en) | 1981-12-14 | 1984-01-24 | Hoffmann-La Roche Inc. | Immunoassay of thymosin α1 |
GB8308235D0 (en) | 1983-03-25 | 1983-05-05 | Celltech Ltd | Polypeptides |
US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
US4493795A (en) | 1983-10-17 | 1985-01-15 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Synthetic peptide sequences useful in biological and pharmaceutical applications and methods of manufacture |
US4943533A (en) | 1984-03-01 | 1990-07-24 | The Regents Of The University Of California | Hybrid cell lines that produce monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor |
US4599231A (en) | 1984-03-09 | 1986-07-08 | Scripps Clinic And Research Foundation | Synthetic hepatitis B virus vaccine including both T cell and B cell determinants |
US4599230A (en) | 1984-03-09 | 1986-07-08 | Scripps Clinic And Research Foundation | Synthetic hepatitis B virus vaccine including both T cell and B cell determinants |
US4601903A (en) | 1985-05-01 | 1986-07-22 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Vaccine against Neisseria meningitidis Group B serotype 2 invasive disease |
US5225539A (en) | 1986-03-27 | 1993-07-06 | Medical Research Council | Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies |
US5071773A (en) | 1986-10-24 | 1991-12-10 | The Salk Institute For Biological Studies | Hormone receptor-related bioassays |
US4981784A (en) | 1987-12-02 | 1991-01-01 | The Salk Institute For Biological Studies | Retinoic acid receptor method |
JP3040121B2 (ja) | 1988-01-12 | 2000-05-08 | ジェネンテク,インコーポレイテッド | 増殖因子レセプターの機能を阻害することにより腫瘍細胞を処置する方法 |
AU4128089A (en) | 1988-09-15 | 1990-03-22 | Rorer International (Overseas) Inc. | Monoclonal antibodies specific to human epidermal growth factor receptor and therapeutic methods employing same |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
AU633867B2 (en) | 1989-02-02 | 1993-02-11 | Eli Lilly And Company | Delivery of cytotoxic agents |
JP2975679B2 (ja) | 1989-09-08 | 1999-11-10 | ザ・ジョーンズ・ホプキンス・ユニバーシティ | ヒト神経膠腫のegf受容体遺伝子の構造変化 |
US5859205A (en) | 1989-12-21 | 1999-01-12 | Celltech Limited | Humanised antibodies |
US6075181A (en) | 1990-01-12 | 2000-06-13 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
US6150584A (en) | 1990-01-12 | 2000-11-21 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
US5459061A (en) | 1990-01-26 | 1995-10-17 | W. Alton Jones Cell Science Center, Inc. | Hybridomas producing monoclonal antibodies which specifically bind to continuous epitope on the human EGF receptor and compete with EGF for binding to the EGF receptor |
WO1991016350A1 (en) | 1990-04-20 | 1991-10-31 | Ludwig Institute For Cancer Research | Aberrant, epidermal growth factor receptor dna, rna and protein forms and method |
US5545806A (en) | 1990-08-29 | 1996-08-13 | Genpharm International, Inc. | Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
JP2938569B2 (ja) | 1990-08-29 | 1999-08-23 | ジェンファーム インターナショナル,インコーポレイティド | 異種免疫グロブリンを作る方法及びトランスジェニックマウス |
AU649275B2 (en) | 1990-11-06 | 1994-05-19 | Bristol-Myers Squibb Company | Prodrugs for beta-lactamase and uses thereof |
DE122009000019I1 (de) | 1991-04-25 | 2009-07-16 | Chugai Seiyaku K K 5 1 | Rekombinierte humane antikörper gegen den humanen interleukin-6 rezeptor |
US6797492B2 (en) | 1991-05-17 | 2004-09-28 | Merck & Co., Inc. | Method for reducing the immunogenicity of antibody variable domains |
WO1994001137A1 (en) | 1992-07-06 | 1994-01-20 | Hybritech Incorporated | Method for delivery of cytotoxic agents and components thereof |
CA2150262C (en) | 1992-12-04 | 2008-07-08 | Kaspar-Philipp Holliger | Multivalent and multispecific binding proteins, their manufacture and use |
US5922545A (en) | 1993-10-29 | 1999-07-13 | Affymax Technologies N.V. | In vitro peptide and antibody display libraries |
US6111166A (en) | 1994-09-19 | 2000-08-29 | Medarex, Incorporated | Transgenic mice expressing human Fcα and β receptors |
CA2206343C (en) | 1994-11-28 | 2009-04-07 | Thomas Jefferson University | Reagents and processes for targeting mutant epidermal growth factor receptors |
UA56132C2 (uk) | 1995-04-25 | 2003-05-15 | Смітклайн Бічем Байолоджікалс С.А. | Композиція вакцини (варіанти), спосіб стабілізації qs21 відносно гідролізу (варіанти), спосіб приготування композиції вакцини |
US5708156A (en) | 1996-05-31 | 1998-01-13 | Ilekis; John V. | Epidermal growth factor receptor-like gene product and its uses |
US5916771A (en) | 1996-10-11 | 1999-06-29 | Abgenix, Inc. | Production of a multimeric protein by cell fusion method |
US5942602A (en) | 1997-02-13 | 1999-08-24 | Schering Aktiengessellschaft | Growth factor receptor antibodies |
AU2001295002B2 (en) | 2000-08-09 | 2007-05-31 | Imclone Systems Incorporated | Treatment of hyperproliferative diseases with epidermal growth factor receptor antagonists |
US20100056762A1 (en) | 2001-05-11 | 2010-03-04 | Old Lloyd J | Specific binding proteins and uses thereof |
NZ530212A (en) * | 2001-06-13 | 2006-09-29 | Genmab As | An isolated human monoclonal antibody that binds to human epidermal growth factor receptor (EGFR) |
US20040248196A1 (en) * | 2001-08-03 | 2004-12-09 | Adams Timothy Edward | Methods of screening based on the egf receptor crystal structure |
US7767792B2 (en) | 2004-02-20 | 2010-08-03 | Ludwig Institute For Cancer Research Ltd. | Antibodies to EGF receptor epitope peptides |
WO2005118876A2 (en) | 2004-06-04 | 2005-12-15 | Genentech, Inc. | Egfr mutations |
MX2007006529A (es) | 2004-12-07 | 2007-06-22 | Genentech Inc | Seleccionar pacientes para terapia con un inhibidor her. |
WO2008033495A2 (en) | 2006-09-15 | 2008-03-20 | Life Science Pharmaceuticals | Method for detecting and treating skin disorders |
MX2009007987A (es) | 2007-01-25 | 2010-03-01 | Dana Farber Cancer Inst Inc | Uso de anticuerpos anti-egfr en el tratamiento de enfermedad mediada por egfr mutante. |
MX2009009782A (es) | 2007-03-15 | 2010-09-10 | Ludwig Inst Cancer Res | Metodo de tratamiento que utiliza anticuerpos egfr e inhibidores de src y formulaciones relacionadas. |
EP2188311B1 (en) | 2007-08-14 | 2016-10-05 | Ludwig Institute for Cancer Research Ltd. | Monoclonal antibody 175 targeting the egf receptor and derivatives and uses thereof |
US20110076232A1 (en) | 2009-09-29 | 2011-03-31 | Ludwig Institute For Cancer Research | Specific binding proteins and uses thereof |
US9209965B2 (en) | 2014-01-14 | 2015-12-08 | Microsemi Semiconductor Ulc | Network interface with clock recovery module on line card |
-
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2010
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-
2011
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Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003515330A (ja) * | 1999-10-29 | 2003-05-07 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | 抗前立腺幹細胞抗原(psca)抗体組成物及び使用方法 |
JP2003523207A (ja) * | 2000-01-25 | 2003-08-05 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | Liv−1関連タンパク質、それをコードするポリヌクレオチド、及び癌の治療へのその利用 |
WO2002092771A2 (en) * | 2001-05-11 | 2002-11-21 | Ludwig Institute For Cancer Research | Specific binding proteins and uses thereof |
WO2003084998A1 (fr) * | 2002-04-11 | 2003-10-16 | Fuso Pharmaceutical Industries, Ltd. | Anticorps monoclonal neutralisant la megsine |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
JPN6010064289; Cell, 2002, Vol.110, p.775-787 * |
JPN6010064290; Int. J. Cancer, 2002, Vol.98, p.398-408 * |
JPN6010064291; Cancer Research, 2001, Vol.61, p.5349-5354 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
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