JP2009504805A

JP2009504805A - 抗炎症活性を有するナノエマルジョン組成物

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Publication number: JP2009504805A
Application number: JP2008541150A
Authority: JP
Inventors: アール．ベーカー．ジェームズ
Original assignee: ナノバイオコーポレーション
Priority date: 2005-08-09
Filing date: 2006-08-09
Publication date: 2009-02-05
Also published as: CA2618974A1; US20110200657A1; CA2618974C; WO2008051186A3; WO2008051186A2; EP1951200A2; US20070036831A1

Abstract

低毒性であり、広範な微生物の不活性化又は疾患の予防を実証するナノエマルジョン組成物が記載される。ナノエマルジョンは、水性相、油と有機溶媒を含む油相、少なくとも１つの抗炎症剤、及び１種又はそれ以上の界面活性剤を含有する。また、ナノエマルジョンの製造方法及び病原性微生物の不活性化方法も提供される。

Description

本開示は、種々の病原性微生物による感染症を予防及び治療するための組成物及び方法に関する。

細菌及びウイルス感染症を含む感染症の効果的な治療は、一次感染症及び該感染症の二次的症状の治療を含むことができる。このような治療は、炎症プロセスの抑制と組み合わせた病原性感染症の根絶を含み、損傷及び炎症組織を治癒させる。

病原性微生物感染症を効果的に治療するためには、この感染症の微生物源が除去されるべきである。抗生物質及び抗菌剤療法は、非常に効果があり、現代医学の頼みの綱であるが、これらの療法は幾つかの不都合を招く。例えば、細菌株が、抗生物質耐性になり得る。細菌の抗生物質耐性菌株に感染した人は、抗生物質が感染症を排除できないことから、深刻で潜在的に生命を脅かす結果に直面する。肺炎及び髄膜炎を引き起こす肺炎球菌、下痢を引きこすサルモネラ菌及び大腸菌、並びに血流、外科創傷及び***症を引きこす腸球菌は、全て致死性感染症をもたらす抗生物質耐性になり得る。

さらに、抗生物質は、細菌胞子及びウイルスを除去又は不活性化するのに有効ではない。バシラス（Bacillus）属及びその他の属の細菌は、過酷な条件及び極端な温度に耐える安定な胞子を形成する。例えば、炭疽菌（B. anthracis）による農地の汚染は、家畜、農業動物、及び野生動物において、並びに感染動物又は畜産物と接触したヒトにおいて、致死性疾患を招き得る。ヒトの炭疽菌（B. anthracis）感染症は、ワクチン、抗生物質、及び適切な感染家畜の処分を含む効果的な動物管理により、もはや一般的ではない。しかし、動物の炭疽感染症は、土地及び農地を浄化することが困難なために未だに重要な問題である。さらに、炭疽菌（B. anthracis）胞子は、生物兵器として使用できる。バシラス（Bacillus）属のその他のメンバーもまた、多くのヒトの疾患の病原体であると報告されている。バシラス・セレウス（B. cereus）は、その胞子が調理法を生き残ることができるために、食物媒介疾患に関与する一般的な病原体である。バシラス・セレウス（B. cereus）はまた、局所敗血症、外傷及び全身感染症と関連がある。消毒薬及び殺生物剤、例えば次亜塩素酸ナトリウム、ホルムアルデヒド及びフェノール類は、細菌胞子に対して効果があり得るが、ヒト及びその他の動物の治療に十分に適合していない。これらの化合物の毒性は、揮発性ガスの接触又は吸入の後に組織壊死と重度の肺障害をもたらし得る。

ウイルスは、ヒト及び動物に感染し、これまでのところ不活性化の有効な手段がないさらなる病原体である。例えば、インフルエンザＡウイルスは、抗ウイルス剤をインビトロ及びインビボで試験するためのモデル系として広く使用される一般的な呼吸器病原体である。ウイルスサブタイプの抗原特異性を調べるインフルエンザＡ、赤血球凝集素（ＨＡ）及びノイラミニダーゼ（ＮＡ）のエンベロープ糖タンパク質は、容易に変異し、抗体がウイルスを中和することをできなくする。現在の抗ウイルス化合物及びノイラミニダーゼ阻害剤は、効果が小さく、ウイルス抵抗性は一般的である。

広範な抗微生物組成物及び抗炎症活性を有する組成物の使用を伴う二重（two-fold）微生物感染治療計画を使用することが望ましい。

従って、微生物抵抗性及び受容者に対する毒性を最小限にしながら微生物を不活性化することができ且つ抗炎症活性を提供することができる抗微生物組成物が当分野で依然として必要とされている。

これらの要求及びその他の要求に対応するために、エマルジョンは、水性相、油と有機溶媒を含む油相、少なくとも１種の抗炎症剤、並びに少なくとも１種の界面活性剤を含む。ナノエマルジョンは、好ましくは約２５０ｎｍ以下の平均直径を有する粒子を含む。

一つの実施形態において、本発明は、ナノエマルジョンを含む組成物の平均ナノエマルジョン粒径を小さくする方法を提供する。この方法は、水性相、油と有機溶媒を含む油相、少なくとも１種の抗炎症剤、及び界面活性剤を含み且つ約２５０ｎｍ以上の平均直径のナノエマルジョン粒子を有するナノエマルジョンを処理して、ナノエマルジョン粒子の平均直径を約２５０ｎｍ以下に小さくするステップを含む。

別の実施形態において、本発明は、ナノエマルジョンの製造方法を提供する。この方法は、一次ナノエマルジョンを、高圧ホモジナイザー又はマイクロフルイダイザーに、ナノエマルジョン粒子の平均直径を約２５０ｎｍ以下に小さくするのに有効な条件下で通すステップを含む。ナノエマルジョンは、水性相、油と有機溶媒を含む油相、少なくとも１種の抗炎症剤、及び１種又はそれ以上の界面活性剤を含む。ナノエマルジョン粒子は、約２５０ｎｍ以上の平均直径を有する。

さらなる実施形態は、微生物を不活性化させる方法を提供する。この方法は、微生物を、ナノエマルジョンを含む組成物と、微生物を不活性化させるのに有効な時間接触させるステップを含む。ナノエマルジョンは、水性相、油と有機溶媒を含む油相、少なくとも１種の抗炎症剤、及び１種又はそれ以上の界面活性剤を含む。ナノエマルジョン粒子は、約２５０ｎｍ以下の平均直径を有する。

さらに別の実施形態は、病原性微生物を不活性化させる方法を提供する。この方法は、微生物に感染した対象（subject）を、ナノエマルジョンを含む組成物と接触させるステップを含む。ナノエマルジョンは、水性相、油と有機溶媒を含む油相、少なくとも１種の抗炎症剤、及び１種又はそれ以上の界面活性剤を含み、この場合にナノエマルジョンは約２５０ｎｍ以下の平均直径を有する粒子を含む。

別の実施形態は、微生物によって引き起こされる感染状態を予防する方法を提供する。この方法は、対象に、微生物に曝露される前又は後に、ナノエマルジョンからなる組成物を投与するステップを含む。ナノエマルジョンは、水性相、油と有機溶媒を含む油相、少なくとも１種の抗炎症剤、及び１種又はそれ以上の界面活性剤を含み、この場合にナノエマルジョンは約２５０ｎｍ以下の平均直径を有する粒子を含む。

本発明は、さらに、抗炎症活性を有するナノエマルジョン組成物を含む組成物を含むキットを提供する。この場合に組成物は単一製剤又は二成分製剤で提供され、二成分製剤が組成物を使用する前に混合される。

前記の特徴及びその他の特徴を、以下の図面及び詳細な説明により例示する。

約２５０ｎｍ以下の平均粒径を有するエマルジョン粒子を有する組成物（「小粒径ナノエマルジョン」）は、改良された安定性及び／又は活性を有する。さらに抗炎症活性を有するこのような組成物は、微生物感染症の治療に特によく適合する。これらの小粒径ナノエマルジョンは、種々の病原性微生物と関係がある感染力、罹患率、及び／又は死亡率を低下させるための広範囲の用途で有用である。抗炎症活性は、抗微生物活性と共に、微生物感染症を除去することができ且つ組織の治癒を早めることができる。本明細書で使用するように、「病原性微生物」という用語は、宿主動物に対して望ましくない効果を生じることができる生物学的微生物を指し、例えば、制限なく、細菌、ウイルス、細菌胞子、カビ、白カビ（mildew）、真菌などが含まれる。この用語には、全てのこのような生物学的微生物が、その起源又はその産生方法にかかわらず、及びこのような生物学的微生物が施設・設備（facilities）に、軍需品、兵器に、又は他の場所に存在するか否かにかかわらず含まれる。

抗炎症活性を有する小粒径ナノエマルジョン組成物は、例えば、ヒト又は動物用の治療剤として、病原性微生物が定着又は感染した個体（individuals）を汚染除去するために、予防、治療、及び病原性微生物の感染力の低下のために有用である。広範な病原性微生物、例えば、増殖性細菌及びエンベロープウイルス並びに細菌胞子の不活性化は、低い毒性と組み合わせて、小粒径ナノエマルジョンを、特定の病原体を同定する前に一般的な汚染除去剤として使用するのに十分に適合させる。また、これらの組成物の抗炎症活性は、組織の治癒を促進する。

Ａ．ナノエマルジョン組成物
小粒径ナノエマルジョンを標準エマルジョンから製造するための粒径の縮小は、高圧ホモジナイザー又はマイクロフルイダイザーで効率的に及び経済的に達成される。小粒径ナノエマルジョンは、多量に迅速に製造でき、広い温度範囲で何ヶ月もの間安定である。

エマルジョンは、水性相と油相とを含有する組成物である。「エマルジョン」という用語は、制限なく、任意の水中油分散物又は液滴、例えば脂質構造体を指す。この脂質構造体は、水不混和性の相が水性相と混合されると、非極性残基（例えば、長い炭化水素鎖）を水から離れて方向に追いやり且つ極性頭部基を水に向かって追いやる疎水性力の結果として形成できる。これらのその他の脂質構造体としては、以下に限定されないが、単ラメラ、少数ラメラ、及び多ラメラ脂質小胞、ミセル、及びラメラ相が挙げられる。古典的又は標準的なエマルジョンは、直径で約５μｍを越える平均粒径を有する脂質構造体を含む。それよりも小さい粒径を有する標準ナノエマルジョンは公知であり、約５００ｎｍ〜約５μｍの平均粒径を有する脂質構造体を含む。一つの実施形態において、標準ナノエマルジョンは、約の平均粒径を有する。本明細書で使用するように、「小粒径ナノエマルジョン」とは、約２５０ｎｍ以下の平均直径を有するエマルジョンを指す。一つの実施形態において、平均粒径は、約２００ｎｍ以下、約１５０ｎｍ以下、約１００ｎｍ以下、又は約５０ｎｍ以下である。本明細書で使用するように、「ナノエマルジョン」という用語は、標準ナノエマルジョン及び小粒径ナノエマルジョンの両方を包含し得る。

エマルジョン粒径は、当分野で公知の任意の手段、例えば、レーザー光散乱を使用して測定することができる。

ナノエマルジョン組成物は、約５〜約５０容量％（ｖｏｌ％）の水性相を含有する。本明細書で使用するように、容量％（ｖｏｌ％）は、エマルジョン又は小粒径ナノエマルジョンの全容量に基づく。一つの実施形態において、水性相は約１０〜約４０ｖｏｌ％である。別の実施形態において、水性相は約１５〜約３０ｖｏｌ％である。水性相は、約４のｐＨから約１０のｐＨまでの範囲にわたる。一つの実施形態において、水性相のｐＨは、約６から約８までの範囲にわたる。水性相のｐＨは、酸又は塩基、例えば、塩酸又は水酸化ナトリウムの添加によって調節できる。一つの実施形態において、水性相は、脱イオン水（以下、「ｄｉＨ₂Ｏ」という）又は蒸留水である。

ナノエマルジョンの油相は、油と有機溶媒を含有する。ナノエマルジョンの油相は、ナノエマルジョンの全容量に基づいて約３０〜約９０ｖｏｌ％の油を含有する。一つの実施形態において、ナノエマルジョンは、約６０〜約８０ｖｏｌ％の油を含有する。別の実施形態において、ナノエマルジョンは、約６０〜約７０ｖｏｌ％の油を含有する。油相はまた、ナノエマルジョンの全容量に基づいて約３〜約１５ｖｏｌ％の有機溶媒を含有する。一つの実施形態において、ナノエマルジョンは、約５〜約１０ｖｏｌ％の有機溶媒を含有する。

適当な油としては、以下に限定されないが、ダイズ油、アボカド油、スクアレン油、オリーブ油、キャノーラ油、コーン油、ナタネ油、サフラワー油、ヒマワリ油、魚油、桂皮、ヤシ油、綿実油、アマニ油、松葉油、シリコーン油、鉱油、精油、香油、水不溶性ビタミン、及び前記の油類の１つ又はそれ以上を含む組み合わせが挙げられる。一つの実施形態において、油はダイズ油である。

適当な有機溶媒としては、以下に限定されないが、有機リン酸エステル溶媒、アルコール、及び前記溶媒の１つ又はそれ以上を含む組み合わせが挙げられる。適当な有機リン酸エステル溶媒としては、以下に限定されないが、１〜１０個の炭素原子、さらに好ましくは２〜８個の炭素原子を有するリン酸ジアルキル及びトリアルキルが挙げられる。リン酸ジアルキル又はトリアルキルのアルキル基は、全部が同一であることができ、又は該アルキル基は異なることができる。一つの実施形態において、リン酸トリアルキルは、リン酸トリ−ｎ−ブチルである。理論に縛られることなく、小粒径ナノエマルジョンに使用される有機溶媒は、ナノエマルジョンを安定化させ且つ病原体の膜内の脂質を除去又は崩壊する役割を果たすと考えられる。

適当なアルコールとしては、例えば、Ｃ₁−Ｃ₁₂アルコール、ジオール類、及びトリオール類、例えばグリセロール、メタノール、エタノール、プロパノール、オクタノール、及び前記アルコールの１つ又はそれ以上を含む組み合わせが挙げられる。一つの実施形態において、アルコールは、エタノール又はグリセロール、又はこれらの組み合わせである。

小粒径ナノエマルジョン組成物はまた、ナノエマルジョンの水性相、油相、又はこの２つの相に存在する１種又はそれ以上の界面活性剤を含有することができる。具体的な提案されたメカニズムに限定されないが、ナノエマルジョン組成物は、タンパク質を細菌膜から除去する役割を果たすことができ、その結果そのタンパク質の膜を「剥ぎ取る」である界面活性剤が有用であり得る。ナノエマルジョンは、ナノエマルジョンの全容量に基づいて約３〜約１５容量％の界面活性剤を含有することができる。一つの実施形態において、ナノエマルジョンは、約５〜約１０容量％の界面活性剤を含有する。

適当な界面活性剤としては、以下に限定されないが、種々のイオン性及び非イオン性界面活性剤、並びにナノエマルジョンの形成を促進することができるその他の乳化剤が挙げられる。油相が水相に懸濁した状態であることを可能にする界面活性剤を使用できる。一つの実施形態において、ナノエマルジョンは、非イオン性界面活性剤、例えばポリソルベート界面活性剤、すなわちポリオキシエチレンエーテルを含む。その他の有用な界面活性剤としては、以下に限定されないが、商品名ＴＷＥＥＮ（登録商標）２０、ＴＷＥＥＮ（登録商標）４０、ＴＷＥＥＮ（登録商標）６０、ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０として販売されているポリソルベート洗浄剤、フェノキシポリエトキシエタノール及びその重合体、例えばＴｒｉｔｏｎ（登録商標）（すなわち、Ｘ−１００、Ｘ−３０１、Ｘ−１６５、Ｘ−１０２、Ｘ−２００）、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ（登録商標）４０７、Ｓｐａｎ類（２０、４０、６０、及び８０）、チロキサポール、及び前記界面活性剤の１つ又はそれ以上を含む組み合わせが挙げられる。さらなる適切な界面活性剤としては、Ｂｒｉｊ（登録商標）３０、Ｂｒｉｊ（登録商標）３５、Ｂｒｉｊ（登録商標）５２、Ｂｒｉｊ（登録商標）５６、Ｂｒｉｊ（登録商標）５８、Ｂｒｉｊ（登録商標）７２、Ｂｒｉｊ（登録商標）７６、Ｂｒｉｊ（登録商標）７８、Ｂｒｉｊ（登録商標）９２、Ｂｒｉｊ（登録商標）９７、Ｂｒｉｊ（登録商標）９８、及びＢｒｉｊ（登録商標）７００が挙げられる。陰イオン性界面活性剤としては、以下に限定されないが、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）が挙げられる。界面活性剤の混合物も熟慮される。一つの実施形態において、界面活性剤は、ＴＷＥＥＮ（登録商標）２０又はＴｒｉｔｏｎ（登録商標）Ｘ−１００、あるいはこれらの組み合わせである。ＴｒｉｔｏｎＸ−１００は、脂質及びタンパク質を生物構造物から抽出するのに広く使用される強力な非イオン性洗浄剤及び分散剤である。ＴｒｉｔｏｎＸ−１００はまた、広範なエンベロープウイルスに対して殺ウイルス効果も有する。別の実施形態において、界面活性剤はノノキシノール−９である。

適当な抗炎症剤としては、ステロイド系及び非ステロイド系抗炎症剤が挙げられる。任意の適当なステロイドを使用できる。一つの実施形態において、ナノエマルジョン組成物は、非常に強い、強い、中程度に強い（moderately potent）、又は弱い（mild）として分類される１種又はそれ以上のステロイドを含むことができる。非常に強いステロイドとしては、例えば、ジプロピオン酸ベタメタゾン（Ｄｉｐｒｏｌｅｎｅ）、１７−プロピオン酸クロベタゾール（Ｄｅｒｍｏｖａｔｅ）、プロピオン酸ハロベタゾール（Ｕｌｔｒａｖａｔｅ）、ハルシノニド（Ｈａｌｏｇ）が挙げられる。強いステロイドとしては、例えば、アムシノニド（Ｃｙｃｌｏｃｏｒｔ）、ジプロピオン酸ベタメタゾン（Ｄｉｐｒｏｌｅｎｅ、ジェネリック薬）、吉草酸ベタメタゾン（Ｂｅｔａｄｅｒｍ、Ｂｅｌｅｓｔｏｄｅｒｍ、Ｐｒｅｖｅｘ）、デスオキシメタゾン（Ｄｅｓｏｘｉ、Ｔｏｐｉｃｏｒｔ）、吉草酸ジフルコルトロン（Ｎｅｒｉｓｏｎｅ）、フルオシノロンアセトニド（Ｄｅｒｍａ、Ｆｌｕｏｄｅｒｍ、Ｓｙｎａｌａｒ）、フルオシノニド（Ｌｉｄｅｍｏｌ、Ｌｉｄｅｘ、Ｔｙｄｅｒｍ、Ｔｉａｍｏｌ、Ｔｏｐｓｙｎ）及びフランカルボン酸モメタゾンが挙げられる。中程度に強いステロイドとしては、例えば、吉草酸ベタメタゾン（Ｂｅｔｎｏｖａｔｅ）、吉草酸ベタメタゾン（Ｃｅｌｅｓｔｏｄｅｒｍ）、１７−酪酸クロベタゾン（Ｅｕｍｏｖａｔｅ）、デソニド（Ｄｅｓｏｃｏｒｔ）、酢酸ヒドロコルチゾン（Ｃｏｒｔｅｆ、Ｈｙｄｅｒｍ）、吉草酸ヒドロコルチゾン（Ｗｅｓｔｃｏｒｔ、Ｈｙｄｒｏｖａｌ）、プレドニカルベート（Ｄｅｒｍａｔｏｐ）、トリアムシノロンアセトニド（Ｋｅｎａｌｏｇ、Ｔｒａｉｄｅｒｍ）が挙げられる。弱いステロイドとしては、例えば、ロラトジン（Ｃｌａｒａｔｉｎ）デソニド（Ｄｅｓｏｃｏｒｔ）、ヒドロコルチゾン（Ｃｏｒｔａｔｅ、Ｃｏｒｔｏｄｅｒｍ）、酢酸ヒドロコルチゾン（Ｃｏｒｔｅｆ、Ｈｙｄｅｒｍ）又はこれらの組み合わせが挙げられる。

任意の適当な非ステロイド系抗炎症薬を使用することができる。一つの実施形態において、非ステロイド系抗炎症薬は、例えば、アスピリン（Ａｎａｃｉｎ、Ａｓｃｒｉｐｔｉｎ、Ｂａｙｅｒ、Ｂｕｆｆｅｒｉｎ、Ｅｃｏｔｒｉｎ、Ｅｘｃｅｄｒｉｎ）、サリチル酸コリン及びマグネシウム（ＣＭＴ、Ｔｒｉｃｏｓａｌ、Ｔｒｉｌｉｓａｔｅ）、サリチル酸コリン（Ａｒｔｈｒｏｐａｎ）、セレコキシブ（Ｃｅｌｅｂｒｅｘ）、ジクロフェナクカリウム（Ｃａｔａｆｌａｍ）、ジクロフェナクナトリウム（Ｖｏｌｔａｒｅｎ、ＶｏｌｔａｒｅｎＸＲ）、ジクロフェナクナトリウム／ミソプロストール（Ａｒｔｈｒｏｔｅｃ）、ジフルニサル（Ｄｏｌｏｂｉｄ）、エトドラク（Ｌｏｄｉｎｅ、ＬｏｄｉｎｅＸＬ）、フェノプロフェンカルシウム（Ｎａｌｆｏｎ）、フルルビプロフェン（Ａｎｓａｉｄ）、イブプロフェン（Ａｄｖｉｌ、Ｍｏｔｒｉｎ、ＭｏｔｒｉｎＩＢ、Ｎｕｐｒｉｎ）、インドメタシン（Ｉｎｄｏｃｉｎ、ＩｎｄｏｃｉｎＳＲ）、ケトプロフェン（Ａｃｔｒｏｎ、Ｏｒｕｄｉｓ、ＯｒｕｄｉｓＫＴ、Ｏｒｕｖａｉｌ）、サリチル酸マグネシウム（Ａｒｔｈｒｉｔａｂ、ＢａｙｅｒＳｅｌｅｃｔ、Ｄｏａｎ'ｓＰｉｌｌｓ、Ｍａｇａｎ、Ｍｏｂｉｄｉｎ、Ｍｏｂｏｇｅｓｉｃ）、メクロフェナム酸ナトリウム（Ｍｅｃｌｏｍｅｎ）、メフェナム酸（Ｐｏｎｓｔｅｌ）、メロキシカム（Ｍｏｂｉｃ）、ナブメトン（Ｒｅｌａｆｅｎ）、ナプロキセン（Ｎａｐｒｏｓｙｎ、Ｎａｐｒｅｌａｎ）、ナプロキセンナトリウム（Ａｌｅｖｅ、Ａｎａｐｒｏｘ）、オキサプロジン（Ｄａｙｐｒｏ）、ピロキシカム（Ｆｅｌｄｅｎｅ）、ロフェコキシブ（Ｖｉｏｘｘ）、サルサラート（Ａｍｉｇｅｓｉｃ、Ａｎａｆｌｅｘ７５０、Ｄｉｓａｌｃｉｄ、Ｍａｒｔｈｒｉｔｉｃ、Ｍｏｎｏ−Ｇｅｓｉｃ、Ｓａｌｆｌｅｘ、Ｓａｌｓｉｔａｂ）、サリチル酸ナトリウム、スリンダク（Ｃｌｉｎｏｒｉｌ）、トルメチンナトリウム（Ｔｏｌｅｃｔｉｎ）、バルデコキシブ（Ｂｅｘｔｒａ）、及びこれらの組み合わせであることができる。

任意の適当な濃度の抗炎症剤を使用できる。例えば、ステロイド濃度は、０．０１〜１０％であることができる。一つの実施形態において、ステロイド濃度は、約０．０５〜約１％であることができる。別の実施形態において、ステロイド濃度は、約１０％未満、約５％未満、約３％未満、約２％未満、約１％未満、０．５％未満、０．５％未満、０．２％未満、０．１％未満、又は約０．０５％未満であることができる。

ナノエマルジョン組成物は、種々の添加剤をさらに含有することができる。典型的な添加剤としては、例えば、活性調節剤、ゲル化剤、増粘剤、補助界面活性剤、洗浄及び美観(aesthetics)を増強するその他の薬剤、並びにこれらの少なくとも一つを含む組み合わせが、これらがエマルジョンの活性及び／又は安定性に著しい悪影響を及ぼさない限りは挙げられる。添加剤は、ナノエマルジョンに混和することができ又はナノエマルジョンとは別に、すなわちナノエマルジョンを含有する組成物の一部として配合することができる。

「活性調節剤」とは、標的微生物に対するナノエマルジョンの活性に影響を及ぼす添加剤である。典型的な活性調節剤は、相互作用促進剤、例えば発芽促進剤、治療剤、緩衝剤などであり、これらを以下に記載する。

従って、活性調節剤の一つのクラスには、「相互作用促進剤」、すなわちナノエマルジョンと、細菌（例えば、グラム陽性菌又はグラム陰性菌）又は真菌の細胞壁、あるいはウイルスエンベロープとの相互作用を増大させる化合物又は組成物が含まれる。また、理論に縛られることなく、エマルジョンの活性は、部分的には、ナノエマルジョンと、微生物膜又はエンベロープとの相互作用によるものであることが提案される。適当な相互作用促進剤としては、ナノエマルジョンと、グラム陰性菌、例えばビブリオ属（Vibrio）菌、サルモネラ属（Salmonella）菌、赤痢属（Shigellae）菌、シュードモナス属（Pseudomonas）菌、エシェリキア属（Escherichia）菌、クレブシエラ属（Klebsiella）菌、プロテウス属（Proteus）菌、エンテロバクター属（Enterobacter）、セラチア属（Serratia）菌、モラクセラ属（Moraxella）菌、レジオネラ属（Legionella）菌、ボルデテラ属（Bordetella）菌、ヘリコバクター属（Helicobacter）菌、ヘモフィルス属（Haemophilus）菌、ナイセリア属（Neisseria）菌、ブルセラ属（Brucella）菌、エルシニア属（Yersinia）菌、パスツレラ属（Pasteurella）菌、バクテロイデス属（Bacteroides）菌及びその他の菌の細胞壁との相互作用を増大させる化合物が挙げられる。

一つの典型的な相互作用促進剤は、キレート化剤である。適当なキレート化剤としては、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、エチレンビス（オキシエチレンニトリロ）四酢酸（ＥＧＴＡ）、及びこれらの組み合わせが挙げられる。キレート化剤は、水中で又は緩衝液、例えばＴＲＩＳ緩衝液中で調製することができる。キレート化剤は、水性相と予備混合することができ、又は希釈剤に添加することができる。キレート化剤は、ナノエマルジョン組成物の全容量に基づいて約１μＭ〜約５０ｍＭの濃度で使用できる。一つの実施形態において、キレート化剤の濃度は、約１００μＭ〜約５０ｍＭの間にある。別の実施形態において、キレート化剤の濃度は、約２５μＭ以上、約５０μＭ以上、約７０μＭ以上、約８０μＭ以上、約１００μＭ以上、約１ｍＭ以上、又は約２ｍＭ以上であることができる。さらに別の実施形態において、キレート化剤の濃度は、約４０ｍＭ以下、約２７ｍＭ以下、約２５ｍＭ以下、約１０ｍＭ以下、又は約５ｍＭ以下であることができる。

別の典型的な相互作用促進剤は、陽イオン性ハロゲン含有化合物である。陽イオン性ハロゲン含有化合物は、水性相と予備混合することができ、又は別の製剤にナノエマルジョンと組み合わせて提供することができ得る。陽イオン性ハロゲン含有化合物は、ナノエマルジョンの全容量に基づいて約０．５〜約７容量％の濃度で使用できる。一つの実施形態において、陽イオン性ハロゲン含有化合物は、ナノエマルジョンの全容量に基づいて約０．５〜約３容量％の濃度で使用できる。

適当な陽イオン性ハロゲン含有化合物としては、以下に限定されないが、セチルピリジニウムハライド、セチルトリメチルアンモニウムハライド、セチルジメチルエチルアンモニウムハライド、セチルジメチルベンジルアンモニウムハライド、セチルトリブチルホスホニウムハライド、ドデシルトリメチルアンモニウムハライド、テトラデシルトリメチルアンモニウムハライド、アルキルベンジルジメチルアンモニウム塩及び前記化合物の１つ又はそれ以上を含む混合物が挙げられる。陽イオン性ハロゲン含有化合物の適当なハライドとしては、クロリド、フルオリド、ブロミド及びヨウ化物が挙げられる。一つの実施形態において、ハライドは、クロリド又はブロミドである。別の実施形態において、陽イオン性ハロゲン含有化合物は、セチルピリジニウムクロリド又は塩化ベンザルコニウム又はこれらの組み合わせである。

「発芽促進剤」は、例えば胞子の発芽を促進する。適当な発芽促進剤としては、ヌクレオシド、α−アミノ酸、これらの塩及び組み合わせが挙げられる。有用なヌクレオシドとしては、イノシンが挙げられる。有用なα−アミノ酸としては、例えば、グリシン並びにアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、トレオニン、リシン、フェニルアラニン、チロシンのＬ−鏡像異性体、及びこれらのアルキルエステルが挙げられる。適当な塩としては、例えば、塩化ナトリウム、塩化アンモニウム、塩化マグネシウム、塩化カルシウム、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）、及び塩化カリウムが挙げられる。一つの実施形態において、発芽促進剤は、グルコース、フルクトース、アスパラギン、塩化ナトリウム、塩化アンモニウム、塩化カルシウム、及び塩化カリウムの混合物である。別の実施形態において、発芽促進剤は、Ｌ−アラニン、イノシン、ＰＢＳ、及び塩化アンモニウムを含有する組み合わせである。

ある種の増殖培地は、発芽促進剤及び緩衝液を含有する。従って、ナノエマルジョンが胞子を不活性化する能力についてナノエマルジョンを試験する際に、発芽促進剤の添加は、試験がこのような発芽促進剤を含有する培地を使用して行われる場合には、必要とし得ない。同様に、ある種の増殖培地のエマルジョンへの添加は、殺胞子活性を高めることができる。

発芽促進剤の有効量は、普通の当業者が容易に決定できる。ヌクレオシド及びアミノ酸は、約０．５ｍＭ〜約１００ｍＭの量で使用できる。一つの実施形態において、ヌクレオシド及びアミノ酸は、約１ｍＭ〜約５０ｍＭの濃度で使用される。別の実施形態において、ヌクレオシド及びアミノ酸は、約０．５ｍＭ〜約５ｍＭの濃度で使用される。塩は約０．５ｍＭ〜約１００ｍＭの量で存在させることができ、ＰＢＳは約０．０５×約１×の濃度で使用できる。

発芽促進剤は、ナノエマルジョンの形成に先立って水性相に混和することができる。一つの実施形態において、発芽促進剤は、ほぼ中性のｐＨで活性である。別の実施形態において、発芽促進剤は、約６〜約８の間のｐＨで活性であることができる。発芽促進剤を含有するナノエマルジョン組成物のｐＨの調節は、適当な手段、例えばナノエマルジョンのＰＢＳ中への希釈によって、又は中性ナノエマルジョンの調製によって、あるいは塩酸又は水酸化ナトリウムの添加によって達成できる。

「治療剤」とは、病原性微生物に感染した対象に投与された場合に病原性微生物に関連した感染力、罹患率及び／又は死亡率を低下させる薬剤を指す。適当な治療剤としては、例えば、抗微生物剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤など、及び前記薬剤の１つ又はそれ以上を含む組み合わせが挙げられる。細菌性、真菌性及びウイルス性感染症の治療の用途に現在利用できる多数の抗微生物剤がある。一般に、これらの薬剤としては、細胞壁合成を阻害する薬剤（例えば、ペニシリン類、セファロスポリン類、シクロセリン、バンコマイシン、バシトラシン）、イミダゾール系抗真菌剤（例えば、ミコナゾール、ケトコナゾール及びクロトリマゾール）、微生物の細胞膜を崩壊させるのに直接に作用する薬剤（例えば、ポリミキシン及びコリスチメテート並びに抗真菌剤ナイスタチン及びアンホテリシンＢ）、リボソームサブユニットに影響を及ぼしてタンパク質合成を阻害する薬剤（例えば、クロラムフェニコール、テトラサイクリン類、エリスロマイシン及びクリンダマイシン）、タンパク質合成を変化させ、細胞死を招く薬剤（例えばアミノグリコシド類）、核酸代謝に影響を及ぼす薬剤（例えば、リファマイシン類及びキノロン類）、代謝拮抗物質（例えば、トリメトプリム及びスルホンアミド類）、並びにＤＮＡ合成に必須のウイルス酵素を阻害するために作用する核酸類縁体（例えば、ジドブジン、ガングシクロビル、ビダラビン、及びアシクロビル）が挙げられる。その他の有用な治療剤としては、以下に限定されないが、抗微生物剤、例えばフェニルフェノール、プロピルパラベン及びポリ（ヘキサメチレンビグアニド）塩酸塩（ＰＨＭＢ）が挙げられる。

場合により、ナノエマルジョン組成物は、ゲル化剤を加えることによってゲルに形成することができる。適当なゲル化剤としては、例えば、ヒドロゲル、例えばＮａｔｒｏｓｏｌ（登録商標）２５０ＨＮＦ（Ｈｅｒｃｕｌｅｓ、Ｉｎｃ．Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、ＤＥ）が挙げられる。ヒドロゲルは、ゲルの全容量に基づいて約０．５重量％〜約５重量％の濃度で添加することができる。他の適当なゲル化剤としては、以下に限定されないが、約０．０５重量％〜約３重量％のセルロース重合体、例えばセルロースゴム又は陽イオン性グアー誘導体、及び最大約１０重量％までのワセリン、グリセリン、ポリエチレングリコール、ｉｎｃｒｏｑｕａｔｂｅｈｅｎｙｌＴＭＳ、パルミチン酸セチル、ステアリン酸グリセロールなどが挙げられる。

種々の補助界面活性剤は、場合によりナノエマルジョン組成物の特性を高めるのに使用できる。補助界面活性剤の選択は、組成物の意図する目的及びに界面活性剤の商業的入手性に関して使用者の所望により左右される。一つの実施形態において、補助界面活性剤は有機水溶性界面活性剤である。

その他の任意の添加剤、例えば香料、光沢剤、酵素、着色剤、洗浄剤ビルダー、泡抑制剤なども、美観（aesthetics）及び／又は清浄性能を高めるために組成物に使用できる。洗浄剤ビルダーは、補助界面活性剤又は共界面活性剤と結合し、効果を低下させるかもしれないカルシウム及びマグネシウムイオンを封鎖する。洗浄剤ビルダーは、補助界面活性剤を使用する場合、及び組成物を硬水道水、特に約１２グレーン／ガロンを越える硬度を有する水で使用前に希釈する場合に特に有用である。

ナノエマルジョン組成物は、泡抑制剤（suds supressor）を含有できる。泡抑制剤は、組成物を硬表面に使用する間の過剰の泡立ちを防止する低発泡性共界面活性剤である。泡抑制剤はまた、組成物の非洗浄用途の製剤に有用である。約０．５ｖｏｌ％〜約５ｖｏｌ％の濃度が一般に効果的である。泡抑制剤の選択は、ナノエマルジョン組成物に配合できるその能力及び残留物並びに組成物の洗浄プロフィールに依存する。泡抑制剤は、ナノエマルジョン組成物中の諸成分と化学的に相溶性であり、所与の組成物のｐＨで機能するものであるべきである。一つの実施形態において、泡抑制剤又は泡抑制剤を含有する組成物は、組成物が施用される表面に目に見える残留物を残さない。

低発泡性共界面活性剤は、ナノエマルジョン組成物における泡プロフィールを媒介するために泡抑制剤として使用できる。適当な泡抑制剤としては、ブロック共重合体、アルキル化一級及び二級アルコール、及びシリコーン系物質が挙げられる。典型的なブロック共重合体としては、例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）及びＴｅｔｒｏｎｉｃ（登録商標）（ＢＡＳＦＣｏｍｐａｎｙ）が挙げられる。アルキル化アルコールとしては、エトキシ化及びプロポキシ化されているアルコール、例えばｔｅｒｇｉｔｏｌ（ＵｎｉｏｎＣａｒｂｉｄｅ）又はｐｏｌｙ−ｔｅｒｇｅｎｔ（登録商標）（ＯｌｉｎＣｏｒｐ．）が挙げられる。シリコーン系物質としては、ＤＳＥ（ＤｏｗＣｏｒｎｉｎｇ）が挙げられる。泡抑制剤は、当分野で公知のいかなる手段によっても組成物に混和することができる。

Ｂ．小粒径ナノエマルジョンの製造方法
小粒径ナノエマルジョン及び抗炎症活性を有する小粒径ナノエマルジョンを含有する組成物は、適当な手段で製造することができる。小粒径ナノエマルジョンは、最初に形成することができ、又は大きな粒子を有するナノエマルジョンから形成することができる。例えば、小粒径ナノエマルジョンは、古典的又は標準的ナノエマルジョン（以下、「標準ナノエマルジョン」という）の粒径を小さくして、平均ナノエマルジョン粒径が約２５０ｎｍよりも小さい小粒径ナノエマルジョンを製造することによって製造できる。すなわち、約２５０ｎｍよりも大きい平均粒径を有するナノエマルジョンは、約２５０ｎｍ以下の平均直径を有する粒子を製造するのに効果的な方法で処理される。一つの実施形態において、小粒径ナノエマルジョン粒子は、約２００ｎｍ以下、約１５０ｎｍ以下、約１００ｎｍ以下、及び約５０ｎｍ以下の平均直径を有する。

油相を水性相と混合することによって標準ナノエマルジョンを製造する方法は、周知である。ナノエマルジョンは、油相を水性相と、約１：９から約５：１まで、約５：１から約３：１までの範囲、又は約４：１の油相対水性相の容量対容量基準で混合することによって形成することができる。油相と水性相は、ナノエマルジョンを形成するのに十分な剪断力を生じることができる装置、例えばフレンチプレス又は市販の低剪断又は高剪断ミキサーを使用して混合することができる。一つの実施形態において、標準エマルジョンは、高剪断の条件下で調製され、実質的に均一な粒度分布を有するナノエマルジョンを製造する。一つの実施形態において、ナノエマルジョン組成物を調製するのに使用される標準ナノエマルジョンは、約５００ｎｍ〜約５μｍ、約５００ｎｍ〜約１μｍ、４００ｎｍ〜約５μｍ、４００ｎｍ〜約１μｍ、約２５０ｎｍ〜約５μｍ、及び約２５０ｎｍ〜約１μｍの平均直径を有する粒子を含む。所望のｐＨを得るために、水性相のｐＨは、塩酸又は水酸化ナトリウムを使用して調節することができる。

標準ナノエマルジョンから小粒径ナノエマルジョンの形成は、例えば、標準ナノエマルジョンをマイクロフルイダイザー（ＭｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓＣｏｒｐ．、Ｎｅｗｔｏｎ、ＭＡ）に、所望の粒径を製造するのに十分な圧力で数回通すことによって達成することができる。マイクロフルイダイザーは、流体流を相互作用チャンバにポンプで送り込むことによって操作するホモジナイザーである。相互作用チャンバは、流体流を加速し、高乱流、剪断、及びキャビテーションをもたらす固定形状マイクロチャンネルを含む。Ｈ２１０Ｚチャンバ（２００μｍ）の上流側のＨ２３０Ｚチャンバ（４００μｍ）を使用できる。他のチャンバサイズ及び形状（Ｙ又はＺ）が、マイクロフルイダイザーを使用してナノエマルジョンを形成するのに使用できる。均質化中に、ナノエマルジョンは、ナノエマルジョンの温度が著しく上昇するのを防止するために熱交換器コイルの中を循環させるか又は冷却することができる。一つの実施形態において、標準ナノエマルジョンは、マイクロフルイダイザーに約２，０００〜約１０，０００ｐｓｉの圧力で２〜５回通される。別の実施形態において、圧力は３，０００〜約４，０００ポンド／平方インチである。これらの条件は、諸因子、例えば標準ナノエマルジョン粒径、ナノエマルジョン組成物、及び所望の最終粒径に応じて変化させることができる。

小粒径ナノエマルジョンを形成する別の手段は、標準ナノエマルジョンを、ＥｍｕｌｓｉＦｌｅｘ（登録商標）高圧ホモジナイザー（Ａｖｅｓｔｉｎ、Ｉｎｃ．、Ｏｔｔａｗａ、Ｃａｎａｄａ）のような高圧ホモジナイザーに通すことである。ホモジナイザーへの通送の回数及び流量は、標準ナノエマルジョンの粒径、ナノエマルジョン組成物、及び得られる小粒径ナノエマルジョンの所望の粒径に依存する。操作圧力は、流量と無関係であり、処理時間にわたって設定値のままである。一つの実施形態において、操作圧力は約２，５００〜約２０，０００ｐｓｉである。前記のマイクロフルイダイズ法と同様に、ナノエマルジョンは、熱交換器又はその他の方法を使用して冷却することができ、ナノエマルジョンはホモジナイザーに約２回〜約５回通すことができる。粒径は、通送の回数と操作圧力の両方に半比例して依存する。図５参照。

前記の方法の他に、小粒径ナノエマルジョンを予備混合することなく直接に製造することができる。例えば、前記のようなマイクロフルイダイザー又は高圧ホモジナイザーの直接使用は、予備混合した標準ナノエマルジョンから製造される小粒径ナノエマルジョンについて上記で論じた特性を有する小粒径ナノエマルジョンをもたらし得る。

小粒径ナノエマルジョンは、半固体クリームから、脱脂乳に似た水様液体までの範囲に及ぶ稠度を有することができる。クリーム状エマルジョンはそのままで使用でき、又は水と混合することができる。

ナノエマルジョンは、希釈状態又は未希釈状態で調製することができる。一つの実施形態において、ナノエマルジョンは、希釈状態及び未希釈状態の両方で適当な安定性を示す。適当な安定性とは、エマルジョンが少なくとも６ヶ月間分離（水性相から油相の分離）の兆候を示さないことを意味する。別の実施形態において、ナノエマルジョンは、最大で約２年間分離の兆候を示さない。さらに別の実施形態おいて、ナノエマルジョンは、最大で約３年間分離の兆候を示さない。希釈エマルジョンの沈降は、許容できる特徴であり、水性相から油相の分離を示さない。沈降は、エマルジョンがその希釈剤から分離することによるものであり、水性相から分離する油相によるではない。このような沈降は、ナノエマルジョンを単に振盪することによって容易に逆転されるが、これに対して濃厚エマルジョンの分離は、単に混合することによって逆転されず、代わりに再乳化を必要とする。

エマルジョンはまた、二次ナノエマルジョン内に乳化された一次ナノエマルジョンを含有することができ、この場合に一次ナノエマルジョンと二次ナノエマルジョンはそれぞれ水性相、油相、及び界面活性剤を含有することができる。この組成物の一方のエマルジョン又は両方のエマルジョンのいずれかは、抗炎症剤を含有することができる。一次ナノエマルジョン及び二次ナノエマルジョンのそれぞれの油相は、油と有機溶媒を含有することができる。一次ナノエマルジョン及び二次ナノエマルジョンは、同一であるか又は異なることができる。ナノエマルジョンはまた、二次ナノエマルジョンを形成するために再乳化された一次ナノエマルジョンを含有することができる。

ナノエマルジョンを特徴付ける一つの有用なパラメーターは、「ζ電位」である。ζ電位は、標準的な粘性挙動を示す固体表面に結合された剪断面（弾性挙動を示す液体の薄層を分離する仮想断面）の電位である。疎水性のコロイドの安定性は、部分的には、ζ電位に依存する。ナノエマルジョンのζ電位は、約−５０ｍＶ〜約＋５０であり得る。一つの実施形態において、エマルジョンのζ電位は、約＋１０ｍＶ以上であり得る。別の実施形態において、ζ電位は、約＋２０ｍＶ以上である。さらに別の実施形態において、エマルジョンのζ電位は、約＋４５ｍＶ以下、約＋４０ｍＶ以下又は約＋３０ｍＶ以下である。

一つの実施形態において、抗炎症活性を有し、場合により治療剤を含むナノエマルジョン組成物は、製薬学的に許容し得る組成物の形態で提供することができる。「製薬学的に許容し得る」又は「薬理学的に許容し得る」という用語は、動物又はヒトに投与した場合に著しい副作用、アレルギー反応、又はその他の都合の悪い反応を生じない組成物を指す。

医薬用途の組成物は、典型的には、製薬学的に許容し得る担体、例えば溶媒、分散媒、被覆剤、等張及び吸収遅延剤など及び例えばRemington's Pharmaceutical Sciences, 15th Ed. Easton: Mack Publishing Co. pp. 1405-1412 and 1461-1487（1975）、及びThe National Formulary XIV 14th Ed., Washington: American Pharmaceutical Association （1975）に記載のような前記担体の１つ又はそれ以上を含む組み合わせを含む。適当な担体としては、以下に限定されないが、炭酸カルシウム、カルボキシメチルセルロース、セルロース、クエン酸、デキストレート（dextrate）、デキストロース、エチルアルコール、グルコース、ヒドロキシメチルセルロース、ラクトース、ステアリン酸マグネシウム、マルトデキストリン、マンニトール、微晶質セルロース、オレイン酸塩（又はオレイン酸エステル）、ポリエチレングリコール、二リン酸カリウム、リン酸カリウム、ショ糖、二リン酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、ソルビトール、デンプン、ステアリン酸及びその塩、スクロース、タルク、植物油、水、並びに前記担体の１つ又はそれ以上を含む組み合わせが挙げられる。医薬活性物質についてのこのような媒体及び薬剤の使用は、当分野で周知である。慣用の媒体及び薬剤が本発明のエマルジョンと不混和性である場合を除いて、治療剤組成物においてこれらの使用が意図される。補助有効成分も、組成物に配合することができる。

局所用途について、製薬学的に許容し得る担体は、液体、クリーム、フォーム、ローション、又はゲルの形態をとることができ、さらに有機溶媒、乳化剤、ゲル化剤、モイスチャライザー、安定剤、界面活性剤、湿潤剤、防腐剤、徐放剤、及び少量の保湿剤、金属イオン封鎖剤、色素、香料、及び局所投与用の医薬組成物に常用されるその他の成分を含む。

Ｃ．ナノエマルジョン組成物を使用して病原性微生物を不活性化させる方法
抗炎症活性を有するナノエマルジョン組成物は、病原性微生物の不活性化が望まれ且つ抗炎症が有益である用途において特に有用である。不活性化という用語は、病原性微生物が宿主に接触して感染する能力を殺す、除去する、中和する又は抑制することを意味する。ナノエマルジョン組成物は、種々の病原性微生物と関係がある感染力、罹患率、及び／又は死亡率を低下させるのに有用である。

病原性微生物を不活性化させる方法は、病原性微生物を、該微生物を不活性化させるのに有効である量のナノエマルジョン組成物と接触させるステップを含む。接触させるステップは、汚染されているかもしれない又は汚染されていると疑われる基質（substrate）をナノエマルジョン組成物と接触させることを伴い得る。基質とは、制限なく対象、例えばヒト又は動物を意味し、接触はインビボ又はエクスビボであり得る。病原性微生物は、制限なく、細菌、ウイルス、真菌、原生動物又はこれらの組み合わせであり得る。

接触のステップは、微生物を不活性化させるか又は抗炎症剤を送達するのに十分な時間で行うことができる。一つの実施形態において、不活性化は、最初の接触後約５分〜約１０分以内に生じる。しかし、エマルジョンが治療状況（therapeutic context）で使用され且つ局所的又は全身的に施用される場合には、不活性化は投与後例えば、５分、１０分、１５分、２０分、２５分、３０分、６０分又はそれよりも長い長時間にわたって生じ得ることが理解される。

接触のステップは、適切な施用手段を使用して行うことができる。例えば、組成物は、噴霧、煙霧、ミスティング（misting）、エアロゾルアへの曝露、湿潤又は飽和させた布又はタオルで拭くこと、ドレンチング（drenching）、浸漬（immersing）によって投与できる。

ナノエマルジョン組成物は、接触によって増殖性細菌及び細菌胞子を不活性させるのに使用できる。ナノエマルジョン組成物によって不活性化される細菌は、グラム陰性菌又はグラム陽性菌であることができる。グラム陰性菌としては、例えば、制限なく、ビブリオ属（Vibrio）菌、サルモネラ属（Salmonella）菌、赤痢属（Shigellae）菌、シュードモナス属（Pseudomonas）菌、エシェリキア属（Escherichia）菌、クレブシエラ属（Klebsiella）菌、プロテウス属（Proteus）菌、エンテロバクター属（Enterobacter）、セラチア属（Serratia）菌、モラクセラ属（Moraxella）菌、レジオネラ属（Legionella）菌、ボルデテラ属（Bordetella）菌、ガルドネレラ属（Gardnerella）菌、ヘモフィルス属（Haemophilus）菌、ナイセリア属（Neisseria）菌、ブルセラ属（Brucella）菌、エルシニア属（Yersinia）菌、パスツレラ属（Pasteurella）菌、バクテロイド属（Bacteroides）菌、及びヘリコバクター属（Helicobacter）菌が挙げられる。グラム陽性菌としては、例えば、制限なく、バシラス属（Bacillus）菌、クロストリジウム属（Clostridium）菌、アルトロバクター属（Arthrobacter）種、ミクロコッカス属（Micrococcus）菌、ブドウ球菌属（Staphylococcus）菌、連鎖球菌属（Streptococcus）菌、リステリア属（Listeria）菌、コリネバクテリウム属（Corynebacteria）菌、扁平球菌属（Planococcus）菌、マイコバクテリウム属（Mycobacteria）菌、ノカルジア属（Nocardia）菌、ロドコッカス属（Rhodococcus）菌、及びマイコバクテリウム属（Mycobacteria）のような抗酸菌が挙げられる。一つの実施形態において、ナノエマルジョン組成物は、バシラス属（Bacillus）菌、例えば、制限なく、炭疽菌（B. anthracis）、バシラス・セレウス（B. cereus）、バシラス・サークランス（B. circulans）、枯草菌（B. subtilis）、及びバシラス・メガテリウム（B. megatertium）を不活性化させるのに使用できる。ナノエマルジョン組成物はまた、クロストリジウム属（Clostridium）菌、例えばボツリヌス菌（C. botulinum）、クロストリジウム・パーフリンジエンス（C. perfringens）及び破傷風菌（C. tetani）を不活性化させるのにも使用できる。ナノエマルジョンによって不活性させることができるその他の細菌としては、例えば、以下に限定されないが、ヘモフィルス・インフルエンザ（H. influenzae）、淋菌（N. gonorrhoeae）、ストレプトコッカス・アガラクチエ（S. agalactiae）、肺炎連鎖球菌（S. pneumonia）、化膿連鎖球菌（S. pyogenes）及びコレラ菌（V. cholerae）(古典型及びエルトール型）、並びにエルシニア属(Yersinia）菌、例えばペスト菌（Y. pestis）、腸炎エルシニア（Y. enterocolitica）、及び偽結核菌（Y. pseudotuberculosis）が挙げられる。別の実施形態において、細菌は炭疽菌（B. anthracis）である。別の実施形態において、細菌は結核菌（Mycobaterium tuberculosis）である。

細菌胞子をナノエマルジョンと接触させると、細菌胞子を不活性化させる。理論に縛られることなく、ナノエマルジョンの殺胞子能は、増殖型に完全に復帰させることのない発芽の開始により、胞子をエマルジョンによる崩壊に感受性にすることが提案される。発芽促進剤、例えばイノシン及びＬ−アラニンを使用する発芽の誘導は、ナノエマルジョンの殺胞子活性の促進をもたらし得、これに対してＤ−アラニンによる発芽の開始の阻害は殺胞子活性を遅らせることができる。ナノエマルジョンのこの独特な作用は、効果において１％漂白剤よりもよいものであり得、バシラス属（Bacillus）菌胞子が一般にほとんどの消毒薬、例えば多数の常用の洗浄剤に抵抗性であることから、興味深い。殺胞子効果は、ほぼ直ちに開始できる。一つの実施形態において、殺胞子効果は、ナノエマルジョンと接触の３０分以内に生じる。

ナノエマルジョン組成物をウイルスと接触させると、ウイルスを不活性化することができる。ナノエマルジョン組成物のウイルス性病原体に対する効果は、適当な手段、例えば、プラーク減少アッセイ（ＰＲＡ）、細胞酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）、Ｐ−ガラクトシダーゼアッセイ、及び電子顕微鏡検査法（ＥＭ）を使用して監視することができる。ナノエマルジョン組成物との接触によって不活性化することができるウイルスとしては、制限なく、バキュロウイルス科（Baculoviridae）、ヘルペスウイルス科（Herpesviridae）、イリドウイルス科（Iridoviridae）、ポックスウイルス科（Poxviridae）、「アフリカブタ熱ウイルス（African Swine Fever Viruses）」、アデノウイルス科（Adenoviridae）、カリモウイルス科（Caulimoviridae）、ミオウイルス科（Myoviridae）、フィコドナウイルス科（Phycodnaviridae）、テクティウイルス科（Tectiviridae）、パポーバウイルス科（Papovaviridae）、サーコウイルス科（Circoviridae）、パルボウイルス科（Parvoviridae）、ヘパドナウイルス科（Hepadnaviridae）、シストウイルス科（Cystoviridae）、ビルナウイルス科（Birnaviridae）、レオウイルス科（Reoviridae）、コロナウイルス科（Coronaviridae）、フラビウイルス科（Flaviviridae）、トガウイルス科（Togaviridae）、「アルテリウイルス（Arterivirus）」科、アストロウイルス科（Astroviridae）、カリシウイルス科（Caliciviridae）、ピコルナウイルス科（Picornaviridae）、ポティウイルス科（Potyviridae）、レトロウイルス科（Retroviridae）、オルトミクソウイルス科（Orthomyxoviridae）、フィロウイルス科（Filoviridae）、パラミクソウイルス科（Paramyxoviridae）、ラブドウイルス科（Rhabdoviridae）、アレナウイルス科（Arenaviridae）、及びブニヤウイルス科（Bunyaviridae）のウイルスが挙げられる。一つの実施形態において、ウイルスは、ヘルペスウイルス、ポックスウイルス、パピローマウイルス、コロナウイルス、インフルエンザウイルス、肝炎ウイルス、センダイウイルス、シンドビスウイルス及びワクシニアウイルス、西ナイルウイルス、ハンタウイルス、並びに風邪を引き起こすウイルスである。

さらに別の実施形態において、ナノエマルジョンを真菌と接触させると、真菌を不活性化させる。一つの実施形態において、真菌は、酵母、例えば、カンジダ種の種々の種（例えば、カンジダ・アルビカンス（Candida albicans））又は線維状酵母、例えば以下に限定されないがアスペルギルス（Aspergillus）種又は皮膚糸状菌、例えばトリコフィトン・ルブルム（Trichophyton rubrum）、トリコフィトン・メンタグロフィテス（Trichophyton mentagrophytes）、イヌ小胞子菌（Microsporum canis）、石膏状胞子菌（Microsporum gypseum）及びエピデルモフィトン・フロッコーズム(Epiderophyton floccosum）、並びにこれらの種類、その他である。

本発明の方法及び組成物、又は本発明の方法及び組成物の成分は、単一製剤に製剤することができ、又は特定の用途に所望し得るように使用中に後で混合するための二成分製剤に分けることができる。このような成分は、微生物感染症に対して使用するための、器具などを消毒するキットに都合よく入れることができる。このようなキットは、製剤をその目的とする作用及び所望の装置の部位に送達するのに必要とされる必須材料及び試薬の全てを含有し得る。

インビボ使用について、本発明の方法及び組成物は、単一又は別々の製薬学的に許容し得る注射剤組成物に製剤し得る。この場合に、容器手段は、それ自体、吸入器、注射器、ピペット、点眼薬ビンであってもよいし、又は製剤を肺などの体の感染部位に施用し得るか、動物に注射し得るか、又はさらにキットのその他の成分に加え且つ混合し得る器具のようなその他の容器手段であってもよい。

キットはまた、商業販売のために厳重な管理下にある小瓶を入れるための手段（例えば、その中に所望の小瓶を保持する射出又は吹き込み成形プラスチック容器）を含む。容器の数又は種類に関係なく、キットはまた、動物の体内への最終的複合組成物の注射／投与又は配置に役立つ器具を含むか又はそれをと共に包装し得る。このような器具は、吸入器、注射器、ピペット、鉗子、測定スプーン、点眼薬ビン、又はこのような医学的に承認された送達ビヒクルであり得る。

組成物中のナノエマルジョン及び添加剤の実際の量は、増殖性及び胞子性の微生物及び病原体を不活性化させるのに有効な量を提供するように変化させることができる。従って、選択される量は、治療のための性質及び部位、所望の応答、殺微生物作用の所望の期間、治療される対象の状態、及びその他の因子に左右される。ナノエマルジョン組成物は、例えば、液状組成物のミリリットル当たり約０．００１％〜約１００％のナノエマルジョンを含むことができる。一つの実施形態において、ナノエマルジョン組成物は、液体のミリリットル当たり約０．０１％〜約９０％のナノエマルジョンを含有することができる。これらは、単に典型的な範囲に過ぎない。ナノエマルジョン組成物はまた、液状組成物のミリリットル当たり約０．２５％、約１．０％、約５％、約１０％、約２０％、約３５％、約５０％、約６５％、約８０％、約９０％、又は約９５％を越えるナノエマルジョンを含むこともできる。

本明細書に記載の小粒径ナノエマルジョンは、種々の条件下で標準エマルジョンよりも安定であり、最大１ヶ月間、好ましくは最大４ヶ月間、さらに好ましくは最大１年又はそれ以上の間、最大約２１℃まで、好ましくは最大４０℃まで実質的に観察できる分離又は沈降を示さない。このような安定性は、希釈なしで、最大２．５％希釈まで、最大１０％希釈まで、さらに好ましくは最大５０％希釈又はそれ以上までである。

小粒径ナノエマルジョンは、病原性微生物の不活性化において標準エマルジョンに匹敵するか又はそれよりもよく機能し、病原体に対して１０％未満の失敗率（failure rate）、好ましくは５％未満の失敗率、さらに好ましくは１％未満の失敗率、最も好ましくは０％の失敗率を示す。本発明を、以下の非限定的実施例によりさらに例証する。

１．感染症の予防及び治療
抗炎症活性を有するナノエマルジョン組成物は、感染症の予防及び治療に有用である。病原性微生物を不活性化する方法は、微生物に感染しているか又は感染していると疑われる対象を、水性相、油相、１種又はそれ以上の抗炎症剤及び１種又はそれ以上の界面活性剤を含むナノエマルジョン組成物と接触させるステップを含む。油相は、前記のように油と有機溶媒を含む。ナノエマルジョン粒子は、約２５０ｎｍ以下の平均直径を有する。一つの実施形態において、前記粒子は、約２００ｎｍ以下、約１５０ｎｍ以下、約１００ｎｍ以下、又は約５０ｎｍ以下の平均直径を有する。

病原性微生物は、対象に又は対象の表面に全身的に感染していてもよい。微生物が対象上に存在しない場合には、ナノエマルジョン組成物が感染の部位に適当な方法で、例えば、注射、経口投与、坐薬などで送達される。一つの実施形態において、対象は動物である。別の実施形態において、動物はヒトである。

ナノエマルジョンを用いて治療又は予防できる典型的な感染状態としては、以下に限定されないが、細菌、真菌、原生動物及び／又はウイルス性の膣感染症、性行為感染症（ＳＴＤ）、皮膚感染症、例えば、ざ瘡、膿痂疹、水虫、爪甲真菌症、カンジダ症及びその他の急性真菌感染症、単純ヘルペス及び帯状疱疹並びに乾癬又はその他の皮膚炎症疾患に関連した感染症が挙げられる。一つの実施形態において、感染状態は、局所治療に特に感受性である。本明細書で使用するように、「感染状態」とは、病原性微生物による汚染を含み、このような感染状態の治療及び予防としては、以下に限定されないが、創傷汚染除去、皮膚、気道、及び／又は粘膜表面の汚染除去（例えば、炭疽菌胞子、ウイルス、細菌、及び／又は真菌による）、及びその他が挙げられる。ナノエマルジョン組成物はまた、外科手術洗浄薬としても使用できる。エマルジョンは、パーソナルヘルスケア産業において、デオドラント、せっけん、ボディーソープ、ざ瘡／皮膚糸状菌治療剤、口臭治療、及び皮膚消毒において使用できる。

ナノエマルジョン組成物は、種々の併用療法、特に微生物に関連した併用療法において使用できる。このアプローチは、例えば、多剤耐性の結果として遭遇する問題を回避することにおいて都合がよいことが多い。

一つの実施形態において、抗炎症活性を有するナノエマルジョン組成物は、性器感染症の予防又は治療において使用できる。このような性行為感染性器感染症としては、以下に限定されないが、性器ヘルペス、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、トリコモナス症、淋病、梅毒、及びクラミジアが挙げられる。抗炎症活性を有するナノエマルジョン組成物は、***の前又は後にあるいは***の前後に性器に施用できる。一つの実施形態において、ナノエマルジョン組成物は、女性の膣内にほぼ***の時に導入される。別の実施形態において、ナノエマルジョン組成物は、女性の膣内に***の前に導入される。ナノエマルジョン組成物はまた、その他の粘膜に投与することもできる。ナノエマルジョン組成物の性器への施用は、適切な手段、例えば、軟膏、ゼリー、挿入物（坐薬、スポンジなど）、フォーム、及び洗浄を使用して達成できる。

抗炎症活性を有するナノエマルジョン組成物はまた、性行為によらない感染性器感染症、例えば真菌、原生動物、細菌感染症の治療において使用することもできる。ナノエマルジョン組成物で治療可能な真菌感染症としては、以下に限定されないが、白癬、カンジダ菌（例えば、カンジダ・アルビカンス（Candida albicans））が挙げられる。ナノエマルジョンを用いて治療可能な性行為以外で感染する細菌感染症としては、以下に限定されないが、例えば、ガルドネレラ・バジナリス（Gardnerella vaginalis）、ガルドネレラ・モビランカス（Gardneralla mobiluncus）、及びマイコプラズマ・ホムニス（Mycoplasma hominis）によって引き起こされる非特異的膣炎及び細菌性膣炎が挙げられる。

抗炎症活性を有するナノエマルジョン組成物はまた、呼吸器感染症の予防及び治療にも使用できる。ナノエマルジョン組成物は、制限なく、風邪、インフルエンザ、結核、レジオネラ症、及び急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）による感染症を予防するのに使用できる。一つの実施形態において、ナノエマルジョン組成物は、気道に、例えば、鼻腔内スプレーを使用して、該スプレーがこれらの病原体に曝される前に気道を被覆するように施用される。別の実施形態において、この使用は、呼吸器病原体を実質的に不活性化させるか又は除去し、病原体が病原性応答を誘発することを防止する。呼吸器感染症の予防及び治療におけるナノエマルジョンの使用はまた、特定の病原体に対する免疫反応を刺激することもでき、同じ病原体に対するさらなる曝露から保護することができる。

実施例１．標準エマルジョンと小粒径ナノエマルジョンとの比較
ナノエマルジョンを、表１のナノエマルジョンの成分により説明する。特に明記しない限りは、油はダイズ油である。製剤において、洗浄剤を最初に記載し、次いで洗浄剤の容量％を記載する（例えば、Ｗ₂₀５は５容量％のＴｗｅｅｎ２０を指す）。製剤において、表示Ｌ２は、マイクロフルイダイザーで製造した小粒径ナノエマルジョンを指し、これに対して表示Ｌ２がないのは、標準ナノエマルジョン（すなわち、２５０ｎｍ〜約１μｍの平均粒径）を指す。表示Ｌ３は、Ａｖｅｓｔｉｎｇ高圧ホモジナイザーを使用して製造したナノエマルジョンを指す。

一次ナノエマルジョンは、５４８ｍｌの水、２．２４ｇのＥＤＴＡ、２５ｇのセチルピリジニウムクロリド、１２５ｍｌのＴｗｅｅｎ２０、２００ｍｌのエタノール及び１６００ｍｌのダイズ油を含有する混合物から製造する。一次ナノエマルジョンを、ＳｉｌｖｅｒｓｏｎＬ４ＲＴミキサー及び微細乳化剤篩を用いて１０，０００±５００回転／分で１０分間予備混合する。

次いで、一次ナノエマルジョンを、ＭｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓＭ−１１０ＥＨマイクロフルイダイザープロセッサー中でＨ２３０Ｚ（４００μｍ）チャンバの下流側のＨ２１０Ｚ（２００μｍ）チャンバを使用して加工する。一次ナノエマルジョンを、マイクロフルイダイザーに、チャンバの周りのトレーにおいて冷却用氷を使用して、３，５００±５００ポンド／平方インチ（ｐｓｉ）の圧力で３〜４回通す。製造した小粒径ナノエマルジョンを、Ｗ₂₀ＥＣＥＤＬ２と呼ぶ。

次いで、二次ナノエマルジョンを蒸留水で希釈して、一連の希釈ナノエマルジョンを製造する。水とナノエマルジョンを、例えばナノエマルジョンが水に混和されるまで振盪することによって混合することができる。典型的な希釈ナノエマルジョンは、表２に示す通りである。示した％は、希釈物中のナノエマルジョンの容量％を指す。

実施例２．小粒径ナノエマルジョンの製造方法
標準ナノエマルジョン（すなわち、２５０ｎｍ〜５μｍの粒径）は、次の通りに形成される。混合物の全容量に基づいて２２容量％の蒸留水、１重量／容量％のセチルピリジニウムクロリド、５容量％のＴｗｅｅｎ２０、６４容量％のダイズ油、及び８容量％のエタノールの混合物を形成する。ナノエマルジョンは、標準混合アセンブリ及び微細エマルジョン篩を有するＳｉｌｖｅｒｓｏｎＬ４ＲＴミキサーを用いて１０，０００±５００回転／分で５分間混合することにより形成する。標準ナノエマルジョンをＷ₂₀５ＥＣと表す。

小粒径ナノエマルジョンは、Ｗ₂₀５ＥＣナノエマルジョンを、ＭｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓＭ−１１０ＥＨマイクロフルイダイザープロセッサーに、Ｈ２３０Ｚ（４００μｍ）チャンバの下流側のＨ２１０Ｚ（２００μｍ）チャンバを使用して４回通すことにより形成する。小粒径ナノエマルジョンをＷ₂₀５ＥＣＬ２と表す。

形成後に、Ｗ₂₀５ＥＣエマルジョン及びＷ₂₀５ＥＣＬ２エマルジョンを、さらに試験するために水で希釈する。粒径は、ＰａｒｔｉｃｌｅＳｉｚｉｎｇＳｙｓｔｅｍｓ（ＰＳＳ）製ＮｉｃｏｍｐＭｏｄｅｌ３８０で測定される。試料を、粒径を測定するために蒸留水で１／２０００に希釈する。製剤及びデータを表３に示す。

表３に示すように、エマルジョンの希釈は、標準ナノエマルジョン又は小粒径ナノエマルジョンの粒径に認め得るほどの影響を及ぼさない。Ｗ₂₀５ＥＣエマルジョンの平均粒径は約４００〜約５００ｎｍであり（試料１〜６）、Ｗ₂₀５ＥＣＬ２エマルジョンについては約１４０〜約２２０ｎｍである（試料７〜１２）。

実施例３．小粒径ナノエマルジョン粒子のサイズに対するマイクロフルイダイザーチャンバサイズの影響
Ｗ₂₀５ＧＢＡ２ナノエマルジョンを、表４に示すようにマイクロフルイダイザーチャンバの種々の組み合わせに通す。Ｗ₂₀５ＧＢＡ２Ｌ２小粒径ナノエマルジョンは、ＳｉｌｖｅｒｓｏｎＬ４ＲＴミキサーに１回通し、マイクロフルイダイザーに４回通して製造する。７５、２００、４００μｍのマイクロチャンネルを有するチャンバの組み合わせを使用して、マイクロチャンネルのサイズと製造した粒子サイズの間の関係を調べる。

表４に示すように、マイクロフルイダイザーで利用するチャンバサイズは、７５〜４００μｍの間で変化させた場合に、エマルジョンの粒径に著しい影響を及ぼさない。全ての場合に、粒径は、約２５０ｎｍ以下である。
実施例４．エマルジョン粒径に対するマイクロフルイダイザーに通す回数の影響

Ｗ₂₀５ＧＢＡ２ナノエマルジョンを、ＳｉｌｖｅｒｓｏｎＬ４ＲＴミキサー（高剪断）又は家庭用ハンドミキサー（低剪断）を使用して形成する。次いで、ナノエマルジョンを、マイクロフルイダイザーに１〜６回通し、粒径を測定する。マイクロフルイダイザーに通す回数とエマルジョンの粒径との関係を、表５及び図５に示す。

表５及び図５に示すように、マイクロフルイダイザーに通す回数は、ナノエマルジョンの粒径に対して大きな影響を及ぼさない。試料４及び５に示すように、マイクロフルイダイザーに４回通すと、常に２５０ｎｍよりも小さい粒径を生じる。出発エマルジョンの高剪断混合対低剪断混合に関して、高剪断混合は低剪断混合よりもばらつきのない粒径分布を生じ得るが、出発エマルジョンの高剪断混合は小粒径ナノエマルジョンを製造するのに必ずしも必要とされない。

実施例５．マイクロフルイダイザーに通す回数とマイクロフルイダイザーチャンバサイズの複合効果
マイクロフルイダイザーに通す回数と、マイクロフルイダイザーのチャンバサイズの両方の効果を、種々の製剤について研究する。出発エマルジョンは、ＳｉｌｖｅｒｓｏｎＬ４ＲＴミキサー（「Ｓｉｌｖ」）を使用するか又は０．０１０ｇａｐ（Ｒｏｓｓ）に予め設定した３インチＸ−シリーズローター／ステーターを有するＲｏｓｓＨＳＭ−４１０Ｘ高剪断ミキサーを使用して調製し、出発ナノエマルジョンの粒径（すなわち、マイクロフルイダイザーに通す前）に対する混合方法の影響を調べる。Ｌ２エマルジョンは、Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎ混合によって製造された標準ナノエマルジョンをマイクロフルイダイザーに通すことによって製造する。粒径を表６に示す。

表６に示すように、Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎ高剪断ミキサー（試料１〜６）は、約３００ｎｍ〜約５００ｎｍの粒径を生じる。Ｒｏｓｓ高剪断ミキサー（試料７〜１０）は、１回通した後には２６０ｎｍの粒径を生じ、４回通した後には約２２９〜２５４ｎｍの粒径を生じる。Ｒｏｓｓ高剪断ミキサーは、このようにＳｉｌｖｅｒｓｏｎミキサーよりも小さい粒径を製造することができる。また表６に示すように、マイクロフルイダイザーに通した試料（試料１１〜２３）は、いずれかの高剪断ミキサーを用いて混合した試料（試料１〜１０）よりも小さい粒径を有する。

マイクロフルイダイザーに通した試料に関して、試料１１及び１２に示すように、同様の粒径がマイクロフルイダイザーに２回又は３回通すことにより得られる。試料１３〜１６は、マイクロフルイダイザーチャンバのマイクロチャンネルのサイズを変えることはエマルジョンの粒径を低下させないことを示す。試料１７〜２３は、エマルジョンの配合と無関係に、約２５０ｎｍよりも小さい粒径を有するエマルジョンがエマルジョンをマイクロフルイダイザーに通すことによって形成できることを例証する。

実施例６．種々のナノエマルジョン製剤の粒径及びζ電位
この実験において、種々の小粒径ナノエマルジョン製剤について粒径及びζ電位を調べる。エマルジョンは、出発ナノエマルジョンをマイクロフルイダイザーに、Ｈ２３０Ｚ＋Ｈ２１０Ｚチャンバを使用して３回通すことによって形成する。粒径及びζ電位は、Ｎｉｃｏｍｐ３８０粒度計で測定した。得られたデータを表７に示す。

表７に示すように、製剤の全てが約２５０ｎｍ以下の粒径を有する。

実施例７．ナノエマルジョンの安定性
５％Ｔｗｅｅｎ−２０、８％エタノール、１％セチルピリジニウムクロリド、６４％ダイズ油及び残余の水を含有するＷ₂₀５ＥＣナノエマルジョンを形成した。Ｗ₂₀５ＥＣＬ２ナノエマルジョンを、マイクロフルイダイザーへの２回通送を使用して形成する。５％Ｔｗｅｅｎ−２０、８％グリセロール、１％セチルピリジニウムクロリド、６４％ダイズ油及び残余の水を含有するＷ₂₀５ＧＣナノエマルジョンを形成する。Ｗ₂₀５ＧＣＬ２ナノエマルジョンは、マイクロフルイダイザーへの２回通送を使用して形成する。Ｘ８Ｐナノエマルジョンは、８％トリトンＸ−１００、８％リン酸トリブチル、及び残余の水を使用して形成する。

安定性を、エマルジョンの外観を評価することによって判定する。本明細書で使用するように、クリーミングは、ナノエマルジョンの上部にナノエマルジョンの残部よりも不透明であるクリーム状物質の白い層が存在することである。沈降は、上部の低密度ナノエマルジョンからの下部の高密度希釈剤（水）の分離に起因する、上部から下部までナノエマルジョンの不透明度の漸次減少である。水は、小瓶の下部に透明層として現れる。沈降は、次の通りに分類される。軽度の沈降：ナノエマルジョンは、上方に向かうにつれてより不透明になる「曇り」の勾配を伴い曇って見える。中程度の沈降：部分的に透明な水溶液が試料の下部に現れる。ナノエマルジョンの残部は、上に向かうにつれてより不透明になる「曇り」の勾配を伴い曇って見える。若干のクリーミングが表面に存在し得る。高度の沈降：ナノエマルジョンは、３つの異なる層、すなわち部分的に透明な下部、曇りのある中間部、及びクリーム状の上部の外観を有する。極度の沈降：２層のみ、すなわち厚い部分的に透明な下部及び薄いクリーム状の上部。

分離は、ナノエマルジョン成分の相分離である。分離は、次の通りに分類される。軽度の分離：ナノエマルジョンの表面が、目に見える油滴をわずかしか見せない。中程度の分離：ナノエマルジョンの表面が、油の薄膜を有する。ナノエマルジョンの下部は、透明な水性層を有し得る。高度の分離：ナノエマルジョンは、３つの異なる層、すなわち下部の透明な水性層、白色又は曇りのある中間層、及び上部の濃厚油性層の外観を有する。極度の分離：上部の油層と下部の水に完全に分離。

環境貯蔵安定性試験は、ポリプロピレン瓶又は遠心分離管に未希釈（neat）エマルジョンを室温（２２〜２５℃）で貯蔵することを伴う。容器は、観察期間中、混合又は開封してもよい。エマルジョンは、分離又は外観のその他の変化について観察する。観察期間は、エマルジョンの種々の製造日により変化する。Ｗ₂₀５ＥＣエマルジョンについてデータを表８に示す。

Ｗ₂₀５ＥＣＬ２エマルジョンについてのデータを表９に示す。

表８及び９に示すように、小粒径ナノエマルジョンは、比較できる標準エマルジョンよりも室温で安定である。周囲温度で５ヶ月よりも長く貯蔵した標準Ｗ₂₀５ＥＣ未希釈（neat）ナノエマルジョンの種々のバッチは、ナノエマルジョンの表面に薄膜又は層を形成する油を示す。油層の厚みは、変化させることができ、容器に入れられている回数の他に、部分的には貯蔵容器中の空気の量に関連し得る。

小粒径Ｗ₂₀５ＥＣＬ２未希釈（neat）ナノエマルジョンの種々のバッチは、周囲温度で最大で４ヶ月間貯蔵される。これらのバッチには、沈降又は分離は観察されない。

加速安定性試験もまた次の通りに行う。ガラスビンに、２０ｍｌの未希釈（neat）ナノエマルジョン、１０％希釈ナノエマルジョン及び２．５％希釈ナノエマルジョンを満たす。エマルジョンを５５℃で貯蔵し、１週間に３回外観の変化を観察する。Ｗ₂₀５ＥＣＬ２エマルジョンについて追加の１組の小瓶は、貯蔵中の空気を除くために完全に満たす（約２５ｍｌ）。これらの完全に満たした小瓶を、クリーミング及び分離の観察を容易にするために７日目に反転させる。

標準Ｗ₂₀５ＥＣ及び小粒径ナノエマルジョンＷ₂₀５ＥＣＬ２の未希釈（neat）エマルジョン（１００％）は、５５℃での加速安定性試験下で、４日後及び５日後それぞれに、分離する油の薄膜を示す（図１及び表１０）。

比較のために、Ｘ８Ｐ未希釈（neat）ナノエマルジョンは、下部に明瞭な透明水性層及び表面に５％油層を伴う不安定な兆候を示す。Ｗ₂₀５ＧＣ及びＷ₂₀５ＧＣＬ２の両方の未希釈エマルジョンは、ナノエマルジョンの表面に油膜の黄変を示し、これに対してＷ₂₀５ＥＣ及びＷ₂₀５ＥＣＬ２については、油膜は無色である。未希釈小粒径ナノエマルジョンは、標準エマルジョンよりも１〜３日間長く安定である。

未希釈ナノエマルジョン（１０％又は２．５％）は、５５℃で４週間観察後に油の分離を示す（表１０）。

表１１は、加速老化試験後にナノエマルジョンについて観察された沈降を示す。

平均して、小粒径ナノエマルジョンは、標準エマルジョンよりも少ない油分離を示し且つ少ない油層と水層の分離を示す(表１０）。小粒径ナノエマルジョンは、希釈されていない場合に標準エマルジョンに匹敵する沈降及びクリーミングを示し、１０％又は２．５％に希釈された場合には向上した安定性を示す（表１１）。

沈降及びクリーミングは、５５℃で貯蔵した希釈エマルジョンに比べて、希釈大粒径エマルジョンにおいてより顕著である（図２〜３、表１２）。１０％Ｗ₂₀５ＥＣナノエマルジョンは、４週間後に８３％沈降し、これに対して１０％Ｗ₂₀５ＥＣＬ２ナノエマルジョンは、わずか９％が沈降するのみである。沈降の開始は、小粒径ナノエマルジョンでは後に生じ、１０％Ｗ₂₀５ＥＣについてはわずか３日であるのに比べて、１０％Ｗ₂₀５ＥＣＬ２については１０日以内に生じた。表１２に、エマルジョンのクリーミングと沈降を示す。

表１２に、加速老化条件下でのエマルジョンの分離と沈降を示す。

完全に満たされている小瓶に貯蔵したＷ₂₀ ５ＥＣＬ２ナノエマルジョンは、空間を含有する小瓶に貯蔵した同じナノエマルジョンと比べて分離を示さず、沈降は少ない（表１２）。興味深いことに、下部は、希釈ナノエマルジョンを満たした小瓶の２つについて１０日目及び２１日目に継ぎ目（seam）で断裂する。

加速安定性試験後のｐＨの変化を測定する。各ナノエマルジョンのｐＨは、５５℃での加速安定性インキュベーションの開始時及び終了時に測定する。希釈エマルジョンは、３−ｉｎ−１複合電極を使用して測定し、未希釈（neat）エマルジョンはセミマイクロ（semi-micro）電極を用いて測定する。未希釈Ｗ₂₀５ＥＣエマルジョン、及びＷ₂₀５ＥＣＬ２エマルジョン、Ｗ₂₀５ＧＣエマルジョン、及びＷ₂₀５ＧＣＬ２エマルジョンの初期ｐＨは、各エマルジョンについて類似して、４．２〜４．４の範囲にある。ｐＨは、これらのナノエマルジョンの希釈率を上げてゆくにつれて上昇し、２．５％希釈について５．６のｐＨまで上昇する。５５℃で４週間後に、未希釈エマルジョンのｐＨは、相変わらず変化せず、これに対して希釈エマルジョンのｐＨは、未希釈エマルジョンの値と同様の値まで低下する（４．０〜４．４）。これに対して、完全に満たした小瓶中でインキュベートしたＷ₂₀５ＥＣＬ２は、５５℃で４週間のインキュベーションの後に、ｐＨがわずかに上昇した。未希釈ナノエマルジョンと希釈ナノエマルジョンの間の差もまた維持される（図４）。

さらなる負荷試験を、遠心分離、凍結及び加圧滅菌により行う。遠心分離試験において、Ｗ₂₀５ＥＣＬ２ナノエマルジョンの未希釈物（１００％）及び１０％希釈物を、１，６５０×ｇで、室温で３０分間遠心分離し、次いで観察のために室温で貯蔵する。Ｗ₂₀５ＥＣＬ２の１０％希釈物のさらなる試料を、比較のために、遠心分離せずに、室温で貯蔵する。室温で６週間の貯蔵後に、未希釈エマルジョン又は希釈エマルジョンの分離は、観察されない。ごくわずかなクリーミングが１０％希釈エマルジョンにおいて認められるが、遠心分離試料と未遠心分離試料の間の相違は認められない。

−１８℃での凍結試験において、Ｗ₂₀５ＥＣＬ２の未希釈ナノエマルジョン及び１０％希釈物を、−１８℃で２４時間置き、次いで観察のために室温で放置した。未希釈ナノエマルジョンＷ₂₀５ＥＣＬ２を、−１８℃で２４時間凍結させ、次いで解凍し、観察する。室温で２４時間後に、分離は、未希釈ナノエマルジョン又は１０％希釈ナノエマルジョンにおいて観察されない。クリーミングが１０％希釈ナノエマルジョンにおいて観察され、沈降は認められなかった。

加圧滅菌試験において、未希釈Ｗ₂₀５ＥＣ、Ｗ₂₀５ＥＣＬ２、Ｗ₂₀５ＧＣ、及びＷ₂₀５ＧＣＬ２エマルジョンをＹａｍａｔｏオートクレーブに１２１℃で１５分間入れ、次いで観察のために室温で貯蔵する。エタノールを含有する両方のエマルジョン（Ｗ₂₀５ＥＣ及びＷ₂₀５ＥＣＬ２）は、オートクレーブ中で沸騰し、高度の分離が加圧滅菌直後に観察される。グリセロールを含有するエマルジョンは、加圧滅菌後に変化はなく、室温で貯蔵した場合に最大で３日間分離を示さない。

実施例８．高圧ホモジナイザーを使用する小粒径ナノエマルジョンの製造
この実施例は、高圧ホモジナイザー（ＡｖｅｓｔｉｎＥｍｕｌｓｉｆｌｅｘＣ３）を使用して標準ナノエマルジョンの粒径を５０〜１５０ｎｍの直径を有する粒子に小さくすることを実証する。ナノエマルジョン粒子のサイズは、圧力と通送回数に依存する。

最初に、２５０ｎｍ〜５μｍ、好ましくは約３００ｎｍ〜１μｍの平均直径を有する粒子を含有する標準ナノエマルジョンを形成する。標準ナノエマルジョンは、形成される混合物の全容量に基づいて、２２容量％蒸留水、１重量／容量％セチルピリジニウムクロリド、５容量％Ｔｗｅｅｎ２０、６４容量％ダイズ油、８容量％エタノール及び２ｍＭＥＤＴＡを含有する。ナノエマルジョンは、標準混合アセンブリ及び微細エマルジョンスクリーンを有するＳｉｌｖｅｒｓｏｎＬ４ＲＴミキサーを用いて１０，０００±５００回転／分で５分間混合することによって形成する。得られる標準ナノエマルジョンをＷ₂₀５ＥＣＥＤと表す。

次いで、種々のサイズの粒子を含有する小粒径ナノエマルジョンを、標準ナノエマルジョンをＡｖｅｓｔｉｎＥｍｕｌｓｉＦｌｅｘに、３，５００〜１７，０００ｐｓｉの範囲に及ぶ種々の圧力下で通すことによって形成する。ナノエマルジョンは、同じ条件下で４〜５回通した。機械は、ナノエマルジョンをダイナミックホモナイジングバルブに押し通すために高い圧力をかける。表１３に、乳化装置に種々に通すことにより得られる種々のナノエマルジョン粒径を記載する。

表１３及び図５は、粒径が均質化中に加えられる圧力の量及びナノエマルジョンが供される通送の回数に逆に依存することを実証する。

実施例９．ナノエマルジョンを含有する消毒薬の試験
実施例９は、標準ナノエマルジョンと小粒径ナノエマルジョン（Ｌ２と表す）の消毒薬としての効果を比較する。

ＡＯＡＣ（Association of Official Analytical Chemist）希釈試験は、キャリア（carrier）に基づいた試験である。キャリア（すなわち、ステンレス鋼製シリンダー）に、試験微生物を接種し、これを乾燥し、消毒薬製品の希釈物に曝露し、培養して細菌の生存を評価する。１回の試験は、一つの製品試料に対して一つの微生物で汚染された６０個の植菌キャリアの評価を伴う。６０個のキャリアの他に、６個のキャリアがキャリア細菌負荷を評価するのに必要とされ、６個以上が余剰として含まれる。従って、合計で７２個の植菌キャリアが１回の試験を行うのに必要とされる。

汚染された乾燥シリンダーキャリアが投薬管に加えられる。キャリアを投薬チューブに入れた直後に、チューブを３回回転させ、その後に管を浴の中に入れた。各キャリアを消毒薬に浸して１０分後に、各キャリアを滅菌フックで投薬管から取り出し、チューブの内側を軽くたたいて過剰の消毒薬を除去し、適当な中和剤（Ｌｅｔｈｅｅｎブロス、２０×１５０ｍｍ管に１０ｍＬ）を入れた一次継代培養管に移した。継代培養管を、３〜４秒間回転させる。一次継代培養管への移送は、移送の実際の時間（１０分）の±５秒以内であるべきである。少なくとも２個のキャリアについて細菌キャリア負荷をアッセイする。

試験キャリアを浸してから最小で３０分後に、各キャリアを、滅菌針金製フックを使用して、適当な中和剤１０ｍＬを入れた二次継代培養チューブに移す。キャリアは順々に移すが、その間隔は時間を定める必要はない。管を３〜４秒間回転させ、継代培養物を３７℃で４８時間インキュベートした。ブロス培養液が濁りを生じたら、その結果は陽性である。陰性結果は、ブロスが透明に見える結果である。各管を振盪して、その後に濁りの有無を調べ得て結果を記録する。各キャリアの一次及び二次継代培養管を「キャリアセット」と表す。一次または二次継代培養管のいずれかの陽性結果は、キャリアセットについて陽性結果とみなす。

グラム染色は、陽性培養管から採取される塗抹を用いて行う。さらなる確認試験については、ブロスのループを、試験微生物に適切な選択培地上に画線し、３７℃で２４時間インキュベートする。

表１４．微生物の同定を確実にするのに必要な選択培地上でのグラム染色及び培養

表１５に、黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）を用いたＷ₂₀５ＧＢＡ２＋２ｍＭＥＤＴＡ（ｐＨ７．２）ナノエマルジョン及びＷ₂₀５ＧＢＡ２Ｌ２＋２ｍＭＥＤＴＡ（ｐＨ７．２）ナノエマルジョンについての結果を示す。

表１５に示すように、小粒径ナノエマルジョンを用いて調製した消毒剤は、標準ナノエマルジョンよりも低い失敗率（failure ratio）を有する。標準ナノエマルジョンは、約５％の失敗率を有する。小粒径ナノエマルジョンは、１％未満の失敗率を有する。

また、表１６に、黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）に曝された種々の製剤について得られた結果を示す。

表１６は、小粒径ナノエマルジョン（試料３及び４）が、標準エマルジョン（試料１及び２）よりも黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）に対して大きい効果を示すことを実証する。

表１７に、ブタコレラ菌（Salmonella choleraesuis）に曝された種々の製剤について得られた結果を示す。

表１７は、小粒径ナノエマルジョン（試料３及び４）が、標準エマルジョン（試料１及び２）と比較して、ブタコレラ菌（Salmonella choleraesuis）に対して同様の効果を示すことを実証する。消毒試験において全体として、小粒径ナノエマルジョンは、標準エマルジョンと同じくらい良好であるか又はそれよりも良く機能する。

実施例１０．黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）に対するナノエマルジョンの殺細菌性
ナノエマルジョンの殺細菌活性を、管回転試験を使用して試験する。この試験において、最初に、培養物は、黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）の保存培養プレートから一つのコロニーを選別し、新しいＴＳＡに画線し、３７℃で一夜インキュベートすることにより調製する。翌朝に、一つのコロニーを寒天プレートから選別し、５０ｍｌスクリューキャップ管中の２５ｍＬのＴＳＢに移し、管回転器で、３７℃で培養物が濁るまで４〜５時間インキュベートする。４〜６時間増殖させた細菌を、１０ｍＬのＴＳＢに、培養培地がわずかに濁るまで加える。

Ｗ₂₀５ＥＣ及びＷ₂₀５ＥＣＬ２を前記のようにして使用する。次いで、エマルジョンを、水で２容量％、１容量％、０．２容量％、０．１容量％及び０．０２容量％に希釈する。

殺菌試験は、次の通りに行う。１．７ｍＬ微小遠心分離管において、０．５ｍＬの細胞懸濁物と０．５ｍＬの各ナノエマルジョン希釈物を混合し、管に栓をする。０．５ｍＬの細胞懸濁物と０．５ｍＬの滅菌蒸留水を含有する陽性対照を並行して調製する。前記の管を、管回転器で、３７℃で１０分間インキュベートする。得られた調製物のそれぞれを、９６ウエルプレートにＰＢＳを使用して連続希釈する（５Ｌｏｇ希釈）。各希釈物からの２５μｌを、ＴＳＡ上で３７℃で一夜インキュベートする。対照プレート及び試験プレートのコロニーの数を数える。対照プレートについての数は、初期細菌数を提供する。初期細菌数は、次のようにして得られる。

初期細菌数＝ＣＦＵ×４０×プレート希釈

（式中、ＣＦＵはｍｌ当たりのコロニー形成単位である）。試験プレートのそれぞれについてコロニーの数を数える。２０〜５０のＣＦＵを有するプレートを数える。成績Ｌｏｇ菌減少数（reprot log reduction）は次のようにして得られる。

成績Ｌｏｇ菌減少数＝Ｌｏｇ（対照処理についての数）−Ｌｏｇ（処理についての数）

結果を表１８に示す。

表１９に示すように、０．０１％希釈及び０．０５％希釈では、標準ナノエマルジョンも小粒径ナノエマルジョンも、黄色ブドウ球菌（S. aureus）の生存性に対して顕著な効果を有さない。しかし、１％及び０．５％希釈は、黄色ブドウ球菌（S. aureus）の生存に対して同様の効果を有し、両方の粒径について１％及び０．５％で１００％殺滅率を有する。０．１％希釈は、小粒径ナノエマルジョンと比べて、ナノエマルジョンにおいてわずかによい殺滅率を示す。

小粒径ナノエマルジョンは、標準エマルジョンよりも幾つかの利点を有する。第一に、小粒径ナノエマルジョンは、室温又は５５℃で貯蔵した場合には、標準エマルジョンよりも安定であることができる。小粒径ナノエマルジョンは、室温で４ヶ月貯蔵した場合に、分離又は沈降を阻止することができる。未希釈の小粒径ナノエマルジョンは、中程度の分離を示すのに標準エマルジョンよりも約１〜３日長い時間を要する。２．５％〜１０％希釈小粒径ナノエマルジョンは、中程度〜極度の沈降を示すのに標準エマルジョンよりも約２〜７日長い時間を要する。さらに、５５℃での小粒径ナノエマルジョンの相分離の開始は、標準エマルジョンの相分離の開始よりも遅い。

第二に、小粒径ナノエマルジョンは、細菌を不活性化することにおいて標準エマルジョンに匹敵するか又はそれよりも良く機能する。消毒試験おいて、小粒径ナノエマルジョンは、黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）に対して、標準ナノエマルジョンの５％より大きい失敗率と比較して、１％未満の失敗率を示す。同じ試験において、前記ナノエマルジョン及び標準ナノエマルジョンは共に、ブタコレラ菌（Salmonella choleraesuis）に対して０％の失敗率を有する。管回転試験において、小粒径ナノエマルジョンは、黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）殺滅活性に対して標準エマルジョンと比べてわずかに改善された殺滅率を有する。

本発明を代表的な実施形態に関して説明するが、種々の変更を行い得、等価物をその要素の代わりに本発明の範囲から逸脱することなく置換し得ることは、当業者には理解される。さらに、その本質的な範囲から逸脱することなく、具体的な状況又は材料を本発明の教示に対して適合させるために多くの改変をなすことができる。従って、本発明は本発明を実施するために熟慮される最も良い形態として開示された具体的な実施形態に限定されないことが意図される。本明細書で引用された全ての参考文献及び刊行物はその全体を参照により組み込む。特に明記しない限りは、「ａ」又は「ａｎ」は「一つ又はそれ以上」を意味する。

５５℃で貯蔵した未希釈（neat）（１００％）エマルジョンの平均分離を表す。５５℃で貯蔵した１０％エマルジョンの平均沈降を表す。５５℃で貯蔵した２．５％エマルジョンの平均沈降を表す。加速安定性試験後のｐＨの変化を表す。未希釈（neat）エマルジョン及び希釈エマルジョンのｐＨは、５５℃でインキュベーションの０日及び３１日後に測定した。ナノエマルジョン粒径のＡｖｅｓｔｉｎＥｍｕｌｓｉＦｌｅｘ（登録商標）Ｃ３での通送回数及び圧力の依存性を表す。

Claims

ナノエマルジョンを含み且つ抗炎症活性を有する組成物であって、前記ナノエマルジョンが、
水性相、
油と有機溶媒を含む油相、
少なくとも１種の抗炎症剤、
１種又はそれ以上の界面活性剤
を含み、且つ前記ナノエマルジョンが約２５０ｎｍ以下の平均粒径を有するナノエマルジョン粒子を含む、組成物。
前記ナノエマルジョン粒子が約２００ｎｍ以下、約１５０ｎｍ以下、約１００ｎｍ以下、又は約５０ｎｍ以下の平均直径を有する、請求項１に記載の組成物。
前記抗炎症剤がステロイドであるか又は非ステロイド系抗炎症薬である、請求項１に記載の組成物。
前記ステロイドが、ジプロピオン酸エステル（Ｄｉｐｒｏｌｅｎｅ）、１７−プロピオン酸クロベタゾール（Ｄｅｒｍｏｖａｔｅ）、プロピオン酸ハロベタゾール（Ｕｌｔｒａｖａｔｅ）、ハルシノニド（Ｈａｌｏｇ）、アムシノニド（Ｃｙｃｌｏｃｏｒｔ）、ジプロピオン酸ベタメタゾン（Ｄｉｐｒｏｌｅｎｅ、ジェネリック薬）、吉草酸ベタメタゾン（Ｂｅｔａｄｅｒｍ、Ｂｅｌｅｓｔｏｄｅｒｍ、Ｐｒｅｖｅｘ）、デスオキシメタゾン（Ｄｅｓｏｘｉ、Ｔｏｐｉｃｏｒｔ）、吉草酸ジフルコルトロン（Ｎｅｒｉｓｏｎｅ）、フルオシノロンアセトニド（Ｄｅｒｍａ、Ｆｌｕｏｄｅｒｍ、Ｓｙｎａｌａｒ）、フルオシノニド（Ｌｉｄｅｍｏｌ、Ｌｉｄｅｘ、Ｔｙｄｅｒｍ、Ｔｉａｍｏｌ、Ｔｏｐｓｙｎ）、フランカルボン酸モメタゾン、吉草酸ベタメタゾン（Ｂｅｔｎｏｖａｔｅ）、吉草酸ベタメタゾン（Ｃｅｌｅｓｔｏｄｅｒｍ）、１７−酪酸クロベタゾン（Ｅｕｍｏｖａｔｅ）、デソニド（Ｄｅｓｏｃｏｒｔ）、酢酸ヒドロコルチゾン（Ｃｏｒｔｅｆ、Ｈｙｄｅｒｍ）、吉草酸ヒドロコルチゾン（Ｗｅｓｔｃｏｒｔ、Ｈｙｄｒｏｖａｌ）、プレドニカルベート（Ｄｅｒｍａｔｏｐ）、トリアムシノロンアセトニド（Ｋｅｎａｌｏｇ、Ｔｒａｉｄｅｒｍ）、ロラタジン（Ｃｌａｒａｔｉｎ）デソニド（Ｄｅｓｏｃｏｒｔ）、ヒドロコルチゾン（Ｃｏｒｔａｔｅ、Ｃｏｒｔｏｄｅｒｍ）、酢酸ヒドロコルチゾン（Ｃｏｒｔｅｆ、Ｈｙｄｅｒｍ）、及びこれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項３に記載の組成物。
前記非ステロイド系抗炎症薬が、アスピリン（Ａｎａｃｉｎ、Ａｓｃｒｉｐｔｉｎ、Ｂａｙｅｒ、Ｂｕｆｆｅｒｉｎ、Ｅｃｏｔｒｉｎ、Ｅｘｃｅｄｒｉｎ）、サリチル酸コリン及びマグネシウム（ＣＭＴ、Ｔｒｉｃｏｓａｌ、Ｔｒｉｌｉｓａｔｅ）、サリチル酸コリン（Ａｒｔｈｒｏｐａｎ）、セレコキシブ（Ｃｅｌｅｂｒｅｘ）、ジクロフェナクカリウム（Ｃａｔａｆｌａｍ）、ジクロフェナクナトリウム（Ｖｏｌｔａｒｅｎ、ＶｏｌｔａｒｅｎＸＲ）、ジクロフェナクナトリウム／ミソプロストール（Ａｒｔｈｒｏｔｅｃ）、ジフルニサル（Ｄｏｌｏｂｉｄ）、エトドラク（Ｌｏｄｉｎｅ、ＬｏｄｉｎｅＸＬ）、フェノプロフェンカルシウム（Ｎａｌｆｏｎ）、フルルビプロフェン（Ａｎｓａｉｄ）、イブプロフェン（Ａｄｖｉｌ、Ｍｏｔｒｉｎ、ＭｏｔｒｉｎＩＢ、Ｎｕｐｒｉｎ）、インドメタシン（Ｉｎｄｏｃｉｎ、ＩｎｄｏｃｉｎＳＲ）、ケトプロフェン（Ａｃｔｒｏｎ、Ｏｒｕｄｉｓ、ＯｒｕｄｉｓＫＴ、Ｏｒｕｖａｉｌ）、サリチル酸マグネシウム（Ａｒｔｈｒｉｔａｂ、ＢａｙｅｒＳｅｌｅｃｔ、Ｄｏａｎ'ｓＰｉｌｌｓ、Ｍａｇａｎ、Ｍｏｂｉｄｉｎ、Ｍｏｂｏｇｅｓｉｃ）、メクロフェナム酸ナトリウム（Ｍｅｃｌｏｍｅｎ）、メフェナム酸（Ｐｏｎｓｔｅｌ）、メロキシカム（Ｍｏｂｉｃ）、ナブメトン（Ｒｅｌａｆｅｎ）、ナプロキセン（Ｎａｐｒｏｓｙｎ、Ｎａｐｒｅｌａｎ）、ナプロキセンナトリウム（Ａｌｅｖｅ、Ａｎａｐｒｏｘ）、オキサプロジン（Ｄａｙｐｒｏ）、ピロキシカム（Ｆｅｌｄｅｎｅ）、ロフェコキシブ（Ｖｉｏｘｘ）、サルサラート（Ａｍｉｇｅｓｉｃ、Ａｎａｆｌｅｘ７５０、Ｄｉｓａｌｃｉｄ、Ｍａｒｔｈｒｉｔｉｃ、Ｍｏｎｏ−Ｇｅｓｉｃ、Ｓａｌｆｌｅｘ、Ｓａｌｓｉｔａｂ）、サリチル酸ナトリウム、スリンダク（Ｃｌｉｎｏｒｉｌ）、トルメチンナトリウム（Ｔｏｌｅｃｔｉｎ）、バルデコキシブ（Ｂｅｘｔｒａ）、及びこれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項１に記載の組成物。
前記有機溶媒がＣ₁−Ｃ₁₂アルコール、ジオール、もしくはトリオール、リン酸ジアルキル、リン酸トリアルキル、又はこれらの組み合わせを含む、請求項１に記載の組成物。
前記アルコールがエタノール、イソプロピルアルコール、グリセロール又はこれらの組み合わせを含む、請求項１に記載の組成物。
前記リン酸トリアルキルがリン酸トリ−ｎ−ブチルである、請求項６に記載の組成物。
前記油がダイズ油、鉱油、アボカド油、スクアレン油、オリーブ油、キャノーラ油、コーン油、ナタネ油、サフラワー油、ヒマワリ油、魚油、香油、桂皮、ヤシ油、綿実油、アマニ油、松葉油、シリコーン油、精油、水不溶性ビタミン、又はこれらの組み合わせを含む、請求項１に記載の組成物。
前記油がダイズ油を含む、請求項９に記載の組成物。
前記界面活性剤が非イオン性界面活性剤である、請求項１に記載の組成物。
前記非イオン性界面活性剤がＴＷＥＥＮ（登録商標）２０、Ｔｒｉｔｏｎ（登録商標）Ｘ−１００、ノノキシノール−９、又はこれらの組み合わせである、請求項１１に記載の組成物。
前記界面活性剤が陽イオン性界面活性剤である、請求項１に記載の組成物。
前記陽イオン性界面活性剤がセチルピリジニウムクロリド、塩化ベンザルコニウム、又はこれらの組み合わせである、請求項１３に記載の組成物。
約５容量％〜約５０容量％の水性相、
約３０容量％〜約９０容量％の油相、及び
約３容量％〜約１５容量％の界面活性剤
を含む、請求項１に記載の組成物。
活性調節剤、ゲル化剤、補助界面活性剤、及び該添加剤の１種又はそれ以上を含む組み合わせからなる群より選択される添加剤をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
前記活性調節剤が、相互作用促進剤、発芽促進剤、治療剤であるか、又は前記促進剤の１種又はそれ以上を含む組み合わせである、請求項１６に記載の組成物。
前記発芽促進剤がグルコース、フルクトース、アスパラギン、塩化ナトリウム、塩化アンモニウム、塩化カルシウム、及び塩化カリウムを含む、請求項１６に記載の組成物。
前記発芽促進剤がＬ−アラニン、イノシン、ＰＢＳ、及び塩化アンモニウムを含む、請求項１７に記載の組成物。
前記治療剤が抗菌剤、抗真菌剤、抗ウイルス剤、抗カビ剤、抗白カビ剤、又はこれらの組み合わせである、請求項１７に記載の組成物。
前記治療剤が、ペニシリン、セファロスポリン、シクロセリン、バンコマイシン、バシトラシン、ミコナゾール、ケトコナゾール、クロトリマゾール、ポリミキシン、コリスチメテート、ナイスタチン、アンホテリシンＢ、クロラムフェニコール、テトラサイクリン類、エリスロマイシン、クリンダマイシン、アミノグリコシド、リファマイシン、キノロン、トリメトプリム、スルホンアミド、ジドブジン、ガングシクロビル、ビダラビン、アシクロビル、フェニルフェノール、プロピルパラベン、ポリ（ヘキサメチレンビグアニド）であるか、又は前記治療剤の１種又はそれ以上を含む組み合わせである、請求項１７に記載の組成物。
前記組成物が、組成物ミリリットル当たり約０．０１％〜約９０％のナノエマルジョンを含む、請求項１に記載の組成物。
前記組成物が、組成物ミリリットル当たり約０．２５％、約１．０％、約５％、約１０％、約２０％、約３５％、約５０％、約６５％、約８０％、約９０％、又は約９５％を越えるナノエマルジョンを含む、請求項１に記載の組成物。
さらに、製薬学的に許容し得る担体、補助界面活性剤、泡抑制剤、洗浄剤ビルダー、又はこれらの組み合わせを含む、請求項１に記載の組成物。
抗炎症活性を有し、ナノエマルジョンを含む組成物の平均ナノエマルジョン粒径を小さくする方法であって、水性相、油と有機溶媒を含む油相、及び界面活性剤を含み且つ約２５０ｎｍ以上の平均直径のナノエマルジョン粒子を有するナノエマルジョンを処理して、ナノエマルジョン粒子の平均直径を約２５０ｎｍ以下に小さくするステップを含む、方法。
前記ナノエマルジョン粒子を約２００ｎｍ以下、約１５０ｎｍ以下、約１００ｎｍ以下、又は約５０ｎｍ以下の平均直径にまで小さくする、請求項２５に記載の方法。
前記抗炎症剤がステロイドであるか又は非ステロイド系抗炎症薬である、請求項２５に記載の方法。
前記ステロイドが、ジプロピオン酸エステル（Ｄｉｐｒｏｌｅｎｅ）、１７−プロピオン酸クロベタゾール（Ｄｅｒｍｏｖａｔｅ）、プロピオン酸ハロベタゾール（Ｕｌｔｒａｖａｔｅ）、ハルシノニド（Ｈａｌｏｇ）、アムシノニド（Ｃｙｃｌｏｃｏｒｔ）、ジプロピオン酸ベタメタゾン（Ｄｉｐｒｏｌｅｎｅ、ジェネリック薬）、吉草酸ベタメタゾン（Ｂｅｔａｄｅｒｍ、Ｂｅｌｅｓｔｏｄｅｒｍ、Ｐｒｅｖｅｘ）、デスオキシメタゾン（Ｄｅｓｏｘｉ、Ｔｏｐｉｃｏｒｔ）、吉草酸ジフルコルトロン（Ｎｅｒｉｓｏｎｅ）、フルオシノロンアセトニド（Ｄｅｒｍａ、Ｆｌｕｏｄｅｒｍ、Ｓｙｎａｌａｒ）、フルオシノニド（Ｌｉｄｅｍｏｌ、Ｌｉｄｅｘ、Ｔｙｄｅｒｍ、Ｔｉａｍｏｌ、Ｔｏｐｓｙｎ）、フランカルボン酸モメタゾン、吉草酸ベタメタゾン（Ｂｅｔｎｏｖａｔｅ）、吉草酸ベタメタゾン（Ｃｅｌｅｓｔｏｄｅｒｍ）、１７−酪酸クロベタゾン（Ｅｕｍｏｖａｔｅ）、デソニド（Ｄｅｓｏｃｏｒｔ）、酢酸ヒドロコルチゾン（Ｃｏｒｔｅｆ、Ｈｙｄｅｒｍ）、吉草酸ヒドロコルチゾン（Ｗｅｓｔｃｏｒｔ、Ｈｙｄｒｏｖａｌ）、プレドニカルベート（Ｄｅｒｍａｔｏｐ）、トリアムシノロンアセトニド（Ｋｅｎａｌｏｇ、Ｔｒａｉｄｅｒｍ）、ロラタタジン（Ｃｌａｒａｔｉｎ）デソニド（Ｄｅｓｏｃｏｒｔ）、ヒドロコルチゾン（Ｃｏｒｔａｔｅ、Ｃｏｒｔｏｄｅｒｍ）、及び酢酸ヒドロコルチゾン（Ｃｏｒｔｅｆ、Ｈｙｄｅｒｍ）からなる群より選択される、請求項２７に記載の方法。
抗炎症活性を有するナノエマルジョンの製造方法であって、
水性相、
油と有機溶媒を含む油相、
少なくとも１種の抗炎症剤、及び
１種又はそれ以上の界面活性剤
を含み、ナノエマルジョン粒子の平均直径が約２５０ｎｍ以上である一次ナノエマルジョンを、高圧ホモジナイザー又はマイクロフルイダイザーに、ナノエマルジョン粒子の平均直径を約２５０ｎｍ以下に小さくするのに有効な条件下で通すステップを含む、製造方法。
前記ナノエマルジョン粒子を約２００ｎｍ以下、約１５０ｎｍ以下、約１００ｎｍ以下、又は約５０ｎｍ以下の平均直径にまで小さくする、請求項２９に記載の方法。
油相と水性相の比が約１：９〜約５：１、約５：１〜約３：１、又は約４：１である、請求項２５又は２９に記載の方法。
微生物を不活性化させる方法であって、前記微生物を、ナノエマルジョンを含み、且つ抗炎症活性を有する組成物と、該微生物を不活性化させるのに有効な時間接触させるステップを含み、前記ナノエマルジョンが、
水性相、
油及び有機溶媒を含む油相、
少なくとも１種の抗炎症剤、及び
１種又はそれ以上の界面活性剤
を含み且つ前記ナノエマルジョン粒子が約２５０ｎｍ以下の平均粒径を有する、方法。
前記ナノエマルジョンが約２００ｎｍ以下、約１５０ｎｍ以下、約１００ｎｍ以下、又は約５０ｎｍ以下の平均直径を有するナノエマルジョン粒子を含む、請求項３２に記載の方法。
前記組成物がさらに活性調節剤を含み、前記活性調節剤が相互作用促進剤、発芽促進剤、治療剤、又はこれらの１種又はそれ以上を含む組み合わせである、請求項３２に記載の方法。
前記組成物がさらに製薬学的に許容し得る担体を含む、請求項３２に記載の方法。
前記微生物が細菌、真菌、原生動物、ウイルスであるか、又は前記微生物の１種又はそれ以上の組み合わせである、請求項３２に記載の方法。
前記細菌が増殖性細菌、細菌胞子、又はこれらの組み合わせである、請求項３６に記載の方法。
前記細菌がグラム陰性菌、グラム陽性菌、抗酸菌、又はこれらの組み合わせである、請求項３６に記載の方法。
前記細菌胞子が炭疽菌（B. anthracis）である、請求項３７に記載の方法。
前記細菌が、炭疽菌（B. anthracis）、バシラス・セレウス（B. cereus）、バシラス・サークランス（B. circulans）、バシラス・メガテリウム（B. megatertium）、枯草菌（B. subtilis）、ボツリヌス菌（C. botulinum）、破傷風菌（C. tetani）、クロストリジウム・パーフリンジエンス（C. perfringens）、ヘモフィルス・インフルエンザ（H. influenzae）、淋菌（N. gonorrhoeae）、ストレプトコッカス・アガラクチエ（S. agalactiae）、肺炎連鎖球菌（S. pneumonia）、化膿連鎖球菌（S. pyogenes）、コレラ菌（V. cholerae）、黄色ブドウ球菌(S. aureus)、エルシニア属（Yersinia）種、ガードネレラ・バジナリス（G. vaginalis）、ガードネレラ・モビルンカス（G. mobiluncus）、マイコプラズマ・ホミニス（M. hominis）、サルモネラ属（Salmonellae）種、赤痢菌属（Shigellae）種、シュードモナス属（Pseudomonas）種、エシェリキア菌属（Eschericia）種、クレブシエラ属（Klebsiella）種、プロテウス属（Proteus）種、エンテロバクター属（Enterobacter）種、セラチア属（Serratia）種、モラクセラ属（Moraxella）種、レジオネラ属（Legionella）種、ボルデテラ属（Bordetella）種、ヘリコバクター属（Helicobacter）種、アルトロバクター属（Arthobacter）種、ミクロコッカス属（Micrococcus）種、リステリア属（Listeria）種、コリネバクテリウム属（Corynebacteria）種、扁平球菌属（Planococcus）種、ノカルジア属（Nocardia）種、ロドコッカス属（Rhodococcus）種、マイコバクテリウム属（Mycobacteria）種、又はこれらの組み合わせを含む、請求項３６に記載の方法。
前記ウイルスが、オルトミクソウイルス科（Orthomyxoviridae）、レトロウイルス科（Retroviridae）、アフリカブタコレラウイルス（African Swine Fever Viruses）、パポーバウイルス科（Papovaviridae）、ヘパドナウイルス科（Hepadnaviridae）、コロナウイルス科（Coronaviridae）、フラビウイルス科（Flaviviridae）、トガウイルス科（Togaviridae）、ピコルナウイルス科（Picornaviridae）、フィロウイルス科（Filoviridae）、パラミクソウイルス科（Paramyxoviridae）、又はラブドウイルス科（Rhabdoviridae）からなる群より選択される科に属する、請求項３６に記載の方法。
前記オルトミクソウイルス科ウイルスが、インフルエンザウイルス、単純ヘルペス、帯状疱疹、センダイウイルス、シンドビスウイルス、ポックスウイルス、痘瘡ウイルス又はワクシニアウイルスである、請求項４１に記載の方法。
前記レトロウイルス科ウイルスが、ヒト免疫不全ウイルス、西ナイルウイルス、ハンタウイルス、又はヒトパピローマウイルスである、請求項４１に記載の方法。
前記真菌が酵母又は糸状菌である、請求項３６に記載の方法。
糸状菌が、アスペルギルス属（Aspergillus）種又は皮膚糸状菌からなる群より選択される、請求項３６に記載の方法。
前記皮膚糸状菌が、トリコフィトン・ルブルム（Trichophyton rubrum）、トリコフィトン・メンタグロフィテス（Trichophyton mentagrophytes）、イヌ小胞子菌（Microsporum canis）、石膏状胞子菌（Microsporum gypseum）及びエピデルモフィトン・フロッコーズム(Epidermophyton floccosum）からなる群より選択される、請求項４５に記載の方法。
カビが、クラドスポリウム属（Cladosporium）、フザリウム属（Fusarium）、アルタナリア属（Alternaria）、クルブラリア属（Curvularia）、アスペルギルス属（Aspergillus）及びペニシリウム（Penicillium）属を含む、請求項３６に記載の方法。
病原性微生物を不活性化させる方法であって、該微生物に感染した対象に、抗炎症活性を有し、
水性相、
油と有機溶媒を含む油相、
少なくとも１種の抗炎症剤、及び
１種又はそれ以上の界面活性剤
を含み、約２５０ｎｍ以下の平均直径を有する粒子を含むナノエマルジョンを含む組成物を接触させるステップを含む、方法。
前記粒子が約２００ｎｍ以下、約１５０ｎｍ以下、約１００ｎｍ以下、又は約５０ｎｍ以下の平均直径を有する、請求項４８に記載の方法。
前記対象がヒト、動物、又は植物である、請求項４８に記載の方法。
前記組成物がさらに活性調節剤を含有し、前記活性調節剤が相互作用促進剤、発芽促進剤、治療剤、又はこれらの１種又はそれ以上を含む組み合わせである、請求項４８に記載の方法。
前記組成物がさらに製薬学的に許容し得る担体を含む、請求項４８に記載の方法。
前記微生物が細菌、真菌、原生動物、ウイルスであるか、又は前記微生物の１種又はそれ以上の組み合わせである、請求項４８に記載の方法。
前記細菌が増殖性細菌、細菌胞子、又はこれらの組み合わせである、請求項５３に記載の方法。
前記真菌が酵母である、請求項５３に記載の方法。
前記細菌がグラム陰性菌、グラム陽性菌、抗酸菌、又はこれらの組み合わせを含む、請求項５５に記載の方法。
前記細菌胞子が炭疽菌（B. anthracis）である、請求項５５に記載の方法。
前記細菌が、炭疽菌（B. anthracis）、バシラス・セレウス（B. cereus）、バシラス・サークランス（B. circulans）、バシラス・メガテリウム（B. megatertium）、枯草菌（B. subtilis）、ボツリヌス菌（C. botulinum）、破傷風菌（C. tetani）、クロストリジウム・パーフリンジエンス（C. perfringens）、ヘモフィルス・インフルエンザ（H. influenzae）、淋菌（N. gonorrhoeae）、ストレプトコッカス・アガラクチエ（S. agalactiae）、肺炎連鎖球菌（S. pneumonia）、化膿連鎖球菌（S. pyogenes）、コレラ菌（V. cholerae）、黄色ブドウ球菌(S. aureus）、エルシニア属（Yersinia）種、ガードネレラ・バジナリス（G. vaginalis）、ガードネレラ・モビルンカス（G. mobiluncus）、マイコプラズマ・ホミニス（M. hominis）、サルモネラ属（Salmonellae）種、赤痢菌属（Shigellae）種、シュードモナス属（Pseudomonas）種、エシェリキア属（Eschericia）種、クレブシエラ属（Klebsiella）種、プロテウス属（Proteus）種、エンテロバクター属（Enterobacter）種、セラチア属（Serratia）種、モラクセラ属（Moraxella）種、レジオネラ属（Legionella）種、ボルデテラ属（Bordetella）種、ヘリコバクター属（Helicobacter）種、アルトロバクター属（Arthobacter）種、ミクロコッカス属（Micrococcus）種、リステリア属（Listeria）種、コリネバクテリウム属（Corynebacteria）種、扁平球菌属（Planococcus）種、ノカルジア属（Nocardia）種、ロドコッカス属（Rhodococcus）種、マイコバクテリウム属（Mycobacteria）種、又はこれらの組み合わせである、請求項５３に記載の方法。
前記ウイルスが、オルトミクソウイルス科（Orthomyxoviridae）、レトロウイルス科（Retroviridae）、アフリカブタコレラウイルス（African Swine Fever Viruses）、パポーバウイルス科（Papovaviridae）、ヘパドナウイルス科（Hepadnaviridae）、コロナウイルス科（Coronaviridae）、フラビウイルス科（Flaviviridae）、トガウイルス科（Togaviridae）、ピコルナウイルス科（Picornaviridae）、フィロウイルス科（Filoviridae）、パラミクソウイルス科（Paramyxoviridae）、又はラブドウイルス科（Rhabdoviridae）からなる群より選択される科に属する、請求項５４に記載の方法。
前記オルトミクソウイルス科ウイルスが、インフルエンザウイルス、単純ヘルペス、帯状疱疹、センダイウイルス、シンドビスウイルス、ポックスウイルス、痘瘡ウイルス又はワクシニアウイルスである、請求項５９に記載の方法。
前記レトロウイルス科ウイルスが、ヒト免疫不全ウイルス、西ナイルウイルス、ハンタウイルス、又はヒトパピローマウイルスである、請求項５９に記載の方法。
前記糸状菌がアスペルギルス属（Aspergillus）種又は皮膚糸状菌、例えばトリコフィトン・ルブルム（Trichophyton rubrum）、トリコフィトン・メンタグロフィテス（Trichophyton mentagrophytes）、イヌ小胞子菌（Microsporum canis）、石膏状胞子菌（Microsporum gypseum）及びエピデルモフィトン・フロッコーズム(Epidermophyton floccosum）を含む、請求項５５に記載の方法。
前記カビが、クラドスポリウム属（Cladosporium）、フザリウム属（Fusarium）、アルタナリア属（Alternaria）、クルブラリア属（Curvularia）、アスペルギルス属（Aspergillus）及びペニシリウム（Penicillium）属からなる群より選択される、請求項５３に記載の方法。
微生物によって引き起こされる感染状態を予防する方法であって、対象に、微生物に曝露される前又は後に、抗炎症活性を有しナノエマルジョンを含む組成物を投与するステップを含み、前記ナノエマルジョンが、
水性相、
油と有機溶媒を含む油相、
少なくとも１種の抗炎症剤、及び
１種又はそれ以上の界面活性剤
を含み、約２５０ｎｍ以下の平均直径を有する粒子を含む、方法。
前記感染状態が性感染性器感染症である、請求項６４に記載の方法。
前記性感染性器感染症が、性器ヘルペス、ヒトパピローマウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、トリコモナス症、淋病、梅毒、及びクラミジアからなる群より選択される、請求項６５に記載の方法。
前記微生物が、ポックスウイルス、炭疽菌（B. anthracis）、及びエルシニア属（Yersinia）、種からなる群より選択される、請求項６４に記載の方法。
投与の段階が前記組成物を対象の粘膜に施用するステップを含む、請求項６４に記載の方法。
抗炎症活性を有し、ナノエマルジョンを含む組成物を含むキットであって、前記組成物が単一製剤又は二成分製剤で提供され、該二成分製剤が前記組成物を使用する前に混合される、キット。
前記組成物を使用するための説明書をさらに含む、請求項６９に記載のキット。
前記組成物が局所投与用に製剤され、前記キットがさらに前記組成物を局所施用するための手段を含む、請求項７０に記載のキット。