JP2008522215A - 細胞撮像用の光学システム - Google Patents
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Abstract
【解決手段】顕微鏡システム(10、10’、10''、10''')は、不均一な空間分布を有する光源光を発生するレーザ(18)または発光ダイオード(18''')を含む。光学システムは、視野を画定する対物レンズ(40)と、光源光を拡大された直径の平行光に変換し、拡大された直径の平行光を空間的に均質化し、さらに均質化された拡大された直径の平行光を対物レンズに結合して、視野の実質的に均一な静的照明を実現するように構成された光学素子列(22、22’、22''、22''')とを備える。カメラシステム(56)は、対物レンズによって視野の少なくとも大部分と静的に光学的に結合されている。
【選択図】図1
Description
2002年10月3日に出願され、2004年4月8日に米国特許出願公開第2004/0067162A1号として公開された米国特許出願第10/263,974号は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
2002年10月3日に出願され、2004年4月8日に米国特許出願公開第2004/0067536A1号として公開された米国特許出願第10/263,975号は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
発明者:Albert E. Weller, III、名称「Method and Apparatus for Detection of Rare Cells」で代理人整理番号BATZ 2 00009に対応する、本出願と同時に出願された米国特許出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
発明者:Steve Grimes、Thomas D. Haubert、Eric R. Navin、名称「Sample Tube Handling Apparatus」の、代理人整理番号BATZ 2 00010に対応する、本出願と同時に出願された米国特許出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
このように好ましい実施形態を説明したので、今や、本発明は、添付の特許請求の範囲のように特許請求される。
22 光学素子列
40 対物レンズ
Claims (30)
- 顕微鏡視野を撮像する光学システムであって、
上記顕微鏡視野に焦点を合わせた対物レンズと、
1または複数の固定光学部品を含む光学素子列とを備え、
上記1または複数の固定光学部品は、不均一な空間分布を有する光源光を受光するとともに、上記対物レンズによって上記顕微鏡視野に焦点を合わせたときに上記顕微鏡視野のほぼ全域に亘ってほぼ均一な静的照明を与える補正された空間分布を、上記対物レンズに出力することを特徴とする光学システム。 - 上記光学素子列は、上記不均一空間分布を拡散して空間的均一性を改善する固定ディフューザを備えることを特徴とする請求項1に記載の光学システム。
- 上記固定ディフューザは、約10°以下のFWHMを有する低角度ディフューザであることを特徴とする請求項2に記載の光学システム。
- 上記固定ディフューザは、上記光学素子列の光路に対して傾斜していることにより、上記視野のスペックル・パターンを実質的に減少させることを特徴とする請求項3に記載の光学システム。
- 上記固定ディフューザは、上記光学素子列の光路に対して少なくとも約30°傾斜していることを特徴とする請求項3に記載の光学システム。
- 上記固定ディフューザは、上記光学素子列の光路に対して傾斜していることを特徴とする請求項2に記載の光学システム。
- 上記光学素子列は、
上記不均一空間分布を実質的に平坦化して、改善された空間的均一性を有する出力光を生成する固定ビーム・ホモジナイザと、
上記対物レンズによって焦点を合わせたときに上記視野のほぼ均一な静的照明を与える空間分布に、空間不均一性を導入する少なくとも1の他の固定光学部品とを備えることを特徴とする請求項1に記載の光学システム。 - ほぼ均一に静的に照明された上記顕微鏡視野を撮像するカメラシステムをさらに備え、
上記カメラシステムは、少なくとも上記対物レンズによって静的に照明された全顕微鏡視野と、静的に光学的に結合されていることを特徴とする請求項1に記載の光学システム。 - 上記光源光を発生するレーザまたは半導体レーザダイオードをさらに備えることを特徴とする請求項1に記載の光学システム。
- 上記不均一空間分布を有する上記光源光が小径のレーザビームであり、
上記光学素子列は、
上記小径のレーザビームの直径よりも実質的に大きな直径を有する平行光の空間的均一性を改善する大面積固定光学部品と、
上記光学素子列において上記大面積固定光学部品の前に配置された固定ビーム・エキスパンダ(Beam Expander)であって、上記小径のレーザビームを広げて、上記大面積固定光学部品に結合するのに適した実質的により大きな直径を有する平行光を生成する固定ビーム・エキスパンダと、
上記光学素子列において上記大面積固定光学部品の後に配置された固定ビーム・レジューサ(Beam Reducer)であって、上記平行光を上記対物レンズに結合する固定ビーム・レジューサとを備えることを特徴とする請求項1に記載の光学システム。 - 上記大面積固定光学部品は、固定ディフューザを有することを特徴とする請求項10に記載の光学システム。
- 上記大面積固定光学部品は、固定ビーム・ホモジナイザを有することを特徴とする請求項10に記載の光学システム。
- 上記光源光を発生する発光ダイオード(LED)をさらに備えることを特徴とする請求項1に記載の光学システム。
- 上記光学素子列は、
平行光の空間的均一性を改善する大面積固定光学部品と、
上記光学素子列において上記大面積固定光学部品の前に配置された固定コリメータであって、上記大面積固定光学部品に結合するのに適した直径を有する平行光に、上記光源光を変換する固定コリメータと、
上記光学素子列において上記大面積固定光学部品の後に配置された1または複数の結合光学部品であって、上記平行光の直径を少なくとも減少させて上記平行光を上記対物レンズに結合させる1または複数の結合光学部品とを備えることを特徴とする請求項1に記載の光学システム。 - 不均一な空間分布を有する光源光を発生するレーザ、半導体レーザダイオードまたは発光ダイオードと、
(i)視野を画定する対物レンズと、(ii)上記光源光を拡大された直径の平行光に変換して、これを空間的に均質化するとともに、この均質化した平行光を上記対物レンズに結合して、上記視野のほぼ均一な静的照明を実現する光学素子列とを含む光学システムと、
上記対物レンズによって上記視野の少なくとも大部分と静的に光学的に結合されたカメラシステムとを備えることを特徴とする顕微鏡システム。 - 光透過壁を有する試験管と、上記試験管中に配置されたフロートとをさらに備え、上記フロートと上記試験管内壁との間の環状ギャップが、上記視野と一致するように構成されていることを特徴とする請求項15に記載の顕微鏡システム。
- 上記光学素子列は、上記拡大された直径の平行光を拡散して空間的に均質化するディフューザを備えることを特徴とする請求項16に記載の顕微鏡システム。
- 上記ディフューザが上記光学素子列の光路に対して傾斜した状態で配置されていることを特徴とする請求項17に記載の顕微鏡システム。
- 対応する顕微鏡用スライドを支持するx−y平行移動ステージをさらに備えることを特徴とする請求項15に記載の顕微鏡システム。
- 上記光学素子列は、約10°以下のFWHMを有する低角度ディフューザを有し、この低角度ディフューザが、上記拡大された直径の平行光を拡散して空間的に均質化することを特徴とする請求項19に記載の顕微鏡システム。
- 上記ディフューザが上記光学素子列の光路に対して傾斜した状態で配置されていることを特徴とする請求項20に記載の顕微鏡システム。
- 顕微鏡視野を撮像する光学システムであって、
上記顕微鏡視野に焦点を合わせた対物レンズと、
不均一な空間分布を有する光源光を受光するとともに、上記光源光を拡散して空間的均一性を改善する固定ディフューザとを備え、上記拡散光が、上記対物レンズを通して上記顕微鏡視野の少なくとも大部分に亘ってほぼ均一な静的照明を与えるために使用されることを特徴とする光学システム。 - 上記固定ディフューザは、約10°以下のFWHMを有する低角度ディフューザであることを特徴とする請求項22に記載の光学システム。
- 上記固定ディフューザは、上記光学素子列の光路に対して傾斜していることを特徴とする請求項22に記載の光学システム。
- 試験管内壁とフロート壁の間の環状ギャップに含まれる生体液層の蛍光染料標識付き希少細胞を識別する方法であって、
顕微鏡システムを使用して、1または複数の焦点深度で1または複数の分析画像を取得するステップと、
取得した各分析画像を画像処理して、候補となる希少細胞の画像を識別するステップと、
選択的に、上記試験管を回転させるステップと、
選択的に、試験管の軸線に沿って上記試験管と上記顕微鏡システムを相対的に平行移動させるステップと、
選択的な回転および相対的な平行移動によって接近した複数の視野について、上記分析画像取得および画像処理を繰り返し、実質的に上記環状ギャップのスパニング(Spanning)を行うステップとを含むことを特徴とする方法。 - ディジタル・プロセッサで実行可能な命令を符号化する不揮発性記憶媒体を備え、1分析画像当たり約1個の染料標識付き細胞数より少ない蛍光染料標識付き細胞密度の生体液層の顕微鏡取得分析画像中の上記染料標識付き細胞を識別する方法を実行する装置であって、
上記方法は、
各分析画像を画像処理して、上記分析画像中の蛍光染料標識付き細胞画像の予想サイズにほぼ対応する特徴サイズの候補の形状を識別するステップを備えることを特徴とする装置。 - 選択可能な焦点深度に視野を有する顕微鏡システムを使用して、生体液層中の蛍光染料標識付き細胞を識別する方法であって、上記顕微鏡視野は上記生体液層の面積よりも実質的に小さいものであり、
上記蛍光染料標識付けによって生じた上記生体液層の背景蛍光に基づいて、上記生体液層の深度を特定するステップと、
特定した上記生体液層の深度またはその近傍の1または複数の焦点深度で、上記顕微鏡システムを使用して、1または複数の分析画像を取得するステップと、
取得した1または複数の分析画像を画像処理して、染料標識付き細胞に対応する可能性のある候補形状を識別するステップと、
上記視野と上記生体液層を相対的に動かすステップと、
上記深度の特定、分析画像の取得、画像処理および相対的移動を繰り返して、上記生体液層の領域に亘って候補形状を識別するステップとを含むことを特徴とする方法。 - 環状サンプリング領域にサンプルを含む若しくは支持する試験管を操作する試験管操作装置であって、
少なくとも2つのアライメント軸受を備え、上記アライメント軸受の少なくとも1つは上記環状サンプリング領域の第1の側に配置され、上記アライメント軸受の少なくとも1つの他のものは、上記試験管の管軸方向において上記環状サンプリング領域の上記第1の側と反対の上記環状サンプリング領域の第2の側に配置されており、さらに、
上記少なくとも2つのアライメント軸受に押し付ける方向に上記試験管を付勢して、上記環状サンプリング領域の部分を上記少なくとも2つのアライメント軸受に対して位置合わせする機械的付勢手段と、
加えられたトルクに応じて上記管軸を中心に上記試験管を回転させる回転継手とを備えることを特徴とする試験管操作装置。 - 試験管軸を画定し、環状サンプリング領域に対応サンプルを含む若しくは支持する試験管と、
上記試験管軸上において上記環状サンプリング領域と相対する側で、上記試験管と係合する少なくとも2つのアライメント軸受と、
上記少なくとも2つのアライメント軸受から放射状に間隔を開けて配置されるとともに、上記試験管を上記少なくとも2つのアライメント軸受に押し付けて、上記環状サンプリング領域の部分を上記少なくとも2つのアライメント軸受に対して位置合わせする少なくとも1つのバイアス軸受と、
上記試験管と係合して上記試験管を選択的に回転させるモータとを備えることを特徴とするサンプル操作装置。 - 環状サンプリング領域にサンプルを含む若しくは支持する試験管を操作する試験管操作装置であって、
上記環状サンプリング領域の第1の側で上記試験管と係合する固定軸受と、
上記試験管を上記固定軸受に押し付けるバイアス軸受と、
上記試験管と係合し、加えられたトルクを上記試験管に伝達することにより上記試験管を回転させる回転継手とを備えることを特徴とする試験管操作装置。
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