JP2007527859A

JP2007527859A - Glycogen synthase kinase-3 inhibitor

Info

Publication number: JP2007527859A
Application number: JP2006516816A
Authority: JP
Inventors: ハジトエルダー‐フィンケルマン，
Original assignee: テルアヴィヴユニヴァーシティフューチャーテクノロジーディヴェロップメントエル．ピー．
Priority date: 2003-06-27
Filing date: 2004-06-27
Publication date: 2007-10-04
Also published as: EP1638557A4; WO2005000192A3; EP1638557A2; CN1838954B; KR20060018902A; CA2530111A1; WO2005000192A2; CN1838954A

Abstract

ＧＳＫ−３の活性を阻害することができる化合物、かかる化合物を含む医薬組成物、及びＧＳＫ−３によって媒介された状態の治療におけるその使用方法が開示される。
【選択図】なしDisclosed are compounds capable of inhibiting the activity of GSK-3, pharmaceutical compositions containing such compounds, and methods of use thereof in the treatment of conditions mediated by GSK-3.
[Selection figure] None

Description

本発明は、グリコーゲンシンターゼキナーゼ−３（ＧＳＫ−３）を阻害するための新規な化合物、およびＧＳＫ−３活性により媒介される生物学的状態の調節におけるその使用に関し、より具体的には、ＩＩ型糖尿病、神経変性障害および神経変性疾患、ならびに情動障害などの生物学的状態の治療におけるこれらの化合物の使用に関する。 The present invention relates to novel compounds for inhibiting glycogen synthase kinase-3 (GSK-3) and their use in the modulation of biological conditions mediated by GSK-3 activity, more particularly II It relates to the use of these compounds in the treatment of biological conditions such as type 2 diabetes, neurodegenerative disorders and neurodegenerative diseases, and affective disorders.

プロテインキナーゼは、タンパク質基質をリン酸化する酵素であり、細胞外の事象を細胞質および核にシグナル伝達する際に重要な役割を果たすものであり、有糸***、分化およびアポトーシスを含む、細胞の生死に関係する事実上すべての事象に関与している。そのため、プロテインキナーゼは、これまで長い間、好都合な薬物標的であった。プロテインキナーゼの活性は細胞の満足すべき状態にとって極めて重要であるが、その一方で、その阻害は、多くの場合、細胞死をもたらすので、薬物標的としてのその使用は限られている。細胞死は、抗ガン薬物のための望ましい効果ではあるが、ほとんどの他の治療剤のためには大きな欠点である。 Protein kinases are enzymes that phosphorylate protein substrates and play an important role in signaling extracellular events to the cytoplasm and nucleus, including cell life and death, including mitosis, differentiation and apoptosis Is involved in virtually all events related to Thus, protein kinases have long been a convenient drug target. While the activity of protein kinases is critical to the satisfactory state of the cell, on the other hand, its use as a drug target is limited because its inhibition often results in cell death. Although cell death is a desirable effect for anticancer drugs, it is a major drawback for most other therapeutic agents.

グリコーゲンシンターゼキナーゼ−３（ＧＳＫ−３）はプロテインキナーゼファミリーのメンバーであり、インスリンのシグナル伝達および代謝調節、および同様に、胚発達時におけるＷｎｔシグナル伝達および細胞運命スキームに関与する細胞質プロリン指向セリン−トレオニンキナーゼである。ＧＳＫ−３αおよびＧＳＫ−３βと呼ばれるこの酵素の二つの類似するイソ型が同定されている。 Glycogen synthase kinase-3 (GSK-3) is a member of the protein kinase family and is involved in the signaling and metabolic regulation of insulin, as well as the cytoplasmic proline-directed serine − involved in Wnt signaling and cell fate schemes during embryonic development. Threonine kinase. Two similar isoforms of this enzyme termed GSK-3α and GSK-3β have been identified.

ＧＳＫ−３は、典型的にはシグナル伝達経路によって活性化される他のプロテインキナーゼとは異なり、通常、休止細胞において活性化され、その活性は、インスリンがその細胞表面受容体に結合することにより生じるシグナル伝達経路などの特定のシグナル伝達経路の活性化によって弱められるので、これまで長い間、プロテインキナーゼファミリーの中で好都合な薬物標的であると見なされてきた。インスリン受容体の活性化はプロテインキナーゼＢ（ＰＫＢ、これはまたＡｋｔとも呼ばれる）の活性化をもたらし、プロテインキナーゼＢの活性化は次にＧＳＫ−３をリン酸化し、それによりＧＳＫ−３を不活性化する。ＧＳＫ−３の阻害はグリコーゲン合成の活性化をもたらすと推定される。複雑なインスリンシグナル伝達経路は、セリン残基においてインスリン受容体基質−１をリン酸化するＧＳＫ−３自身によるインスリンシグナル伝達の負のフィードバック調節によってさらに複雑になっている（Ｅｌｄａｒ−Ｆｉｎｋｅｌｍａｎ他、１９９７）。 GSK-3, unlike other protein kinases that are typically activated by signal transduction pathways, is normally activated in resting cells and its activity is due to insulin binding to its cell surface receptors. It has long been regarded as a convenient drug target within the protein kinase family because it is weakened by the activation of certain signaling pathways, such as the resulting signaling pathway. Activation of the insulin receptor results in activation of protein kinase B (PKB, also called Akt), which in turn phosphorylates GSK-3, thereby deactivating GSK-3. Activate. Inhibition of GSK-3 is presumed to result in activation of glycogen synthesis. The complex insulin signaling pathway is further complicated by negative feedback regulation of insulin signaling by GSK-3 itself, which phosphorylates insulin receptor substrate-1 at serine residues (Eldar-Finkelman et al., 1997). .

従って、合成されたＧＳＫ−３阻害剤は、ＧＳＫ−３経路を使用する特定のホルモンおよび増殖因子（例えば、インスリンなど）の作用を模倣し得る。ある種の病理学的状態では、このスキームは、欠陥のある受容体、またはシグナル伝達機構の別の誤った成分の迂回を可能にし、その結果、インスリン非依存性ＩＩ型糖尿病の場合のように、シグナル伝達カスケードのいくつかの上流側の関与体が正常でないときでさえ、生物学的シグナルが効力を生じるようにすることができる。 Thus, synthesized GSK-3 inhibitors can mimic the action of certain hormones and growth factors (eg, insulin, etc.) that use the GSK-3 pathway. In certain pathological conditions, this scheme allows the bypass of defective receptors, or other mis-components of signaling mechanisms, so that as in the case of non-insulin dependent type II diabetes Biological signals can be made effective even when some upstream participants in the signaling cascade are not normal.

細胞におけるグリコーゲン異化作用の調節は、ホルモンのインスリンを含む様々なシグナル伝達要素の複雑な配置を包括する極めて重要な生物学的機能である。様々な媒介因子を介して、インスリンは、グリコーゲンシンターゼ（ＧＳ）によるグリコーゲンの合成を増大させることによってその調節作用を発揮する。インスリン作用における重要な事象は、多数のチロシン残基におけるインスリン受容体基質（ＩＲＳ−１、ＩＲＳ−２）のリン酸化であり、その結果、ＰＩ３キナーゼを含む数個のシグナル伝達成分の同時活性化がもたらされる（Ｍｙｅｒｓ他、１９９２）。同様に、グリコーゲンシンターゼの活性はそのリン酸化によって抑制される。ＩＩ型糖尿病患者の筋肉におけるグリコーゲンシンターゼ活性およびグリコーゲン濃度の顕著な低下が認められている（Ｄａｍｓｂｏ他、１９９１；Ｎｉｋｏｕｌｉｎａ他、１９９７；Ｓｈｕｌｍａｎ他、１９９０）。 Regulation of glycogen catabolism in cells is a vital biological function that encompasses the complex arrangement of various signaling elements, including the hormone insulin. Through various mediators, insulin exerts its regulatory effects by increasing the synthesis of glycogen by glycogen synthase (GS). An important event in insulin action is phosphorylation of insulin receptor substrates (IRS-1, IRS-2) at multiple tyrosine residues, resulting in the simultaneous activation of several signaling components including PI3 kinase (Myers et al., 1992). Similarly, glycogen synthase activity is inhibited by its phosphorylation. Significant reductions in glycogen synthase activity and glycogen concentrations in muscles of type II diabetic patients have been observed (Damsbo et al., 1991; Nikoulina et al., 1997; Shulman et al., 1990).

ＩＩ型糖尿病（インスリン非依存性糖尿病）の発症に関連する最も初期の変化の一つはインスリン耐性である。インスリン耐性は、高インスリン血症および高血糖によって特徴づけられる。インスリン耐性を生じさせる正確な分子機構は不明であるが、インスリンシグナル伝達経路の下流側成分の欠陥が原因であると考えられている。 One of the earliest changes associated with the development of type II diabetes (non-insulin dependent diabetes) is insulin resistance. Insulin resistance is characterized by hyperinsulinemia and hyperglycemia. The exact molecular mechanism that causes insulin resistance is unknown, but is thought to be due to defects in downstream components of the insulin signaling pathway.

グリコーゲンシンターゼキナーゼ−３（ＧＳＫ−３）はインスリンシグナル伝達経路の下流側成分の一つである。ＧＳＫ−３の大きな活性は、インスリン受容体基質−１（ＩＲＳ−１）のセリン残基をリン酸化することによって、無傷の細胞においてインスリンの作用を損なうことが見出され（Ｅｌｄａｒ−Ｆｉｎｋｅｌｍａｎ他、１９９７）、また同様に、細胞において発現する増大したＧＳＫ−３活性はグリコーゲンシンターゼ活性の抑制をもたらすことが見出された（Ｅｌｄａｒ−Ｆｉｎｋｅｌｍａｎ他、１９９６）。これに関連して行われたさらなる研究により、ＧＳＫ−３活性が糖尿病マウスの精巣上体脂肪組織において著しく増大していることが明らかにされた（Ｅｌｄａｒ−Ｆｉｎｋｅｌｍａｎ他、１９９９）。その後、増大したＧＳＫ−３活性がＩＩ型糖尿病患者の骨格筋において検出された（Ｎｉｃｋｏｕｌｉｎａ他、２０００）。さらなる近年の研究では、グリコーゲン代謝およびインスリンシグナル伝達におけるＧＳＫ−３の役割がさらに明らかにされた（総説については、Ｅｌｄａｒ−Ｆｉｎｋｅｌｍａｎ他、２００２；ＧｒｉｍｅｓおよびＪｏｐｅ、２００１；Ｗｏｏｄｇｅｔｔ、２００１を参照のこと）。それにより、ＧＳＫ−３活性の阻害は、インスリン活性をインビボで増大させる方法であり得ることが示唆された。 Glycogen synthase kinase-3 (GSK-3) is one of the downstream components of the insulin signaling pathway. The large activity of GSK-3 was found to impair the action of insulin in intact cells by phosphorylating the serine residue of insulin receptor substrate-1 (IRS-1) (Eldar-Finkelman et al., 1997) and similarly, increased GSK-3 activity expressed in cells was found to result in suppression of glycogen synthase activity (Eldar-Finkelman et al., 1996). Further studies conducted in this context revealed that GSK-3 activity is significantly increased in epididymal adipose tissue of diabetic mice (Eldar-Finkelman et al., 1999). Subsequently, increased GSK-3 activity was detected in skeletal muscle of type II diabetic patients (Nickoulina et al., 2000). Further recent studies further elucidated the role of GSK-3 in glycogen metabolism and insulin signaling (for review, see Eldar-Finkelman et al., 2002; Grimes and Jope, 2001; Woodgett, 2001) . Thereby, it was suggested that inhibition of GSK-3 activity could be a way to increase insulin activity in vivo.

ＧＳＫ−３はまた、アルツハイマー病の病理発生における重要な関与体であると考えられている。ＧＳＫ−３が、対らせんフィラメント（ＰＨＦ）の形成（アルツハイマー病の初期の特徴）に関与するタウ（微小管結合タンパク質）をリン酸化するキナーゼの一つとして同定された。外見的には、タウの異常な過剰リン酸化は、微小管の脱安定化およびＰＨＦ形成に対する原因である。いくつかのプロテインキナーゼは、タウのリン酸化を促進することが示されたという事実にもかかわらず、ＧＳＫ−３のリン酸化のみが、微小管の自己アセンブリーを促進するタウの能力に直接的な影響を及ぼすことが見出された（Ｈａｎｇｅｒ他、１９９２；Ｍａｎｄｅｌｋｏｗ他、１９９２；Ｍｕｌｏｔ他、１９９４；Ｍｕｌｏｔ他、１９９５）。この点におけるＧＳＫ−３の役割に対するさらなる証拠が、ＧＳＫ−３を過剰発現する細胞の研究からもたらされ、また、ＧＳＫ−３を脳において特異的に発現する遺伝子組換えマウスからもたらされた。両方の場合において、ＧＳＫ−３はＰＨＦ様エピトープのタウの生成をもたらした（Ｌｕｃａｓ他、２００１）。 GSK-3 is also thought to be an important participant in the pathogenesis of Alzheimer's disease. GSK-3 was identified as one of the kinases that phosphorylate tau (a microtubule-associated protein) involved in the formation of counter-helical filaments (PHF) (an early feature of Alzheimer's disease). Apparently, abnormal hyperphosphorylation of tau is responsible for microtubule destabilization and PHF formation. Despite the fact that several protein kinases have been shown to promote tau phosphorylation, only phosphorylation of GSK-3 is directly related to tau's ability to promote microtubule self-assembly. It was found to have an effect (Hanger et al., 1992; Mandelkow et al., 1992; Mulot et al., 1994; Mulot et al., 1995). Further evidence for the role of GSK-3 in this regard came from studies of cells that overexpress GSK-3 and from transgenic mice that specifically express GSK-3 in the brain . In both cases, GSK-3 resulted in the generation of the PHF-like epitope tau (Lucas et al., 2001).

ＧＳＫ−３は、細胞のアポトーシスにおけるその役割によってアルツハイマー病とさらに関係づけられる。インスリンはニューロンの生存因子であるという事実（Ｂａｒｂｅｒ他、２００１）、インスリンはＰＩ３キナーゼおよびＰＫＢの活性化によりその抗アポトーシス作用を開始するという事実（Ｂａｒｂｅｒ他、２００１）から、これらのシグナル伝達成分による負の調節を受けるＧＳＫ−３はニューロンのアポトーシスを促進することが示唆された。いくつかの研究では、実際にこの見解が確認され、ＧＳＫ−３が生死の決定において極めて重要であることが示された。その上、そのアポトーシス機能は、ＰＩ３キナーゼとは独立していることが示された。ＰＣ１２細胞におけるＧＳＫ−３の過剰発現はアポトーシスを引き起こした（Ｐａｐ他、１９９８）。小脳顆粒ニューロンにおけるＧＳＫ−３の活性化は遊走および細胞死を媒介した（Ｔｏｎｇ他、２００１）。ヒト神経芽細胞腫ＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞において、ＧＳＫ−３の過剰発現は、スタウロアポリン誘導の細胞アポトーシスを促進させた（Ｂｉｊｕｒ他、２０００）。 GSK-3 is further linked to Alzheimer's disease by its role in cellular apoptosis. Due to the fact that insulin is a neuronal survival factor (Barber et al., 2001) and the fact that insulin initiates its anti-apoptotic effect upon activation of PI3 kinase and PKB (Barber et al., 2001), these signaling components It was suggested that GSK-3 undergoing negative regulation promotes neuronal apoptosis. Several studies have actually confirmed this view and have shown that GSK-3 is extremely important in life and death decisions. Moreover, its apoptotic function has been shown to be independent of PI3 kinase. Overexpression of GSK-3 in PC12 cells caused apoptosis (Pap et al., 1998). Activation of GSK-3 in cerebellar granule neurons mediated migration and cell death (Tong et al., 2001). In human neuroblastoma SH-SY5Y cells, overexpression of GSK-3 promoted stauroaporin-induced cell apoptosis (Bijur et al., 2000).

ＧＳＫ−３阻害と、細胞死の防止との関係が、Ｆｒａｔ１（ＧＳＫ−３β阻害剤）の発現が、ＰＩ３キナーゼの阻害により誘導される死からニューロンを救うために十分であることを示した研究によってさらに明らかにされている（Ｃｒｏｗｄｅｒ他、２０００）。 Studies where the relationship between GSK-3 inhibition and prevention of cell death showed that expression of Frat1, a GSK-3β inhibitor, was sufficient to rescue neurons from death induced by inhibition of PI3 kinase (Crowder et al., 2000).

ＧＳＫ−３の別の関わりが情動障害（すなわち、双極性障害および躁うつ病）に関連して検出された。このつながりは、リチウム（双極性疾患において頻繁に使用される最初の気分安定化剤）が、臨床において使用される治療的濃度範囲でＧＳＫ−３の強い特異的な阻害剤であるという知見（Ｋｌｅｉｎ他、１９９６；Ｓｔａｍｂｏｌｉｃ他、１９９６；Ｐｈｉｅｌ他、２００１）に基づいていた。この発見は、リチウムが細胞プロセスにおいてＧＳＫ−３活性の喪失を模倣し得るかを明らかにするために始められた一連の研究に至った。実際に、リチウムは、グリコーゲン合成の活性化（Ｃｈｅｎｇ他、１９８３）、β−カテニンの安定化および蓄積（Ｓｔａｍｂｏｌｉｃ他、１９９６）、ツメガエル（Ｘｅｎｏｐｕｓ）胚における軸複製の誘導（Ｋｌｅｉｎ他、１９９６）、ならびにニューロン死の保護（Ｂｉｊｕｒ他、２０００）を引き起こすことが示された。バルプロ酸（別の一般に使用されている気分安定化剤）もまた、効果的なＧＳＫ−３阻害剤であることが見出されている（Ｃｈｅｎ他、１９９９）。まとめると、これらの研究は、ＧＳＫ−３がリチウムおよびバルプロ酸の主要なインビボ標的であり、従って、情動障害の新規な治療的治療において重要な意味を有することを示している。 Another involvement of GSK-3 was detected in connection with affective disorders (ie bipolar disorder and manic depression). This link is based on the finding that lithium (the first mood stabilizer frequently used in bipolar disease) is a strong specific inhibitor of GSK-3 in the therapeutic concentration range used clinically (Klein Et al., 1996; Stambolic et al., 1996; Piel et al., 2001). This discovery has led to a series of studies initiated to reveal whether lithium can mimic loss of GSK-3 activity in cellular processes. Indeed, lithium activates glycogen synthesis (Cheng et al., 1983), β-catenin stabilization and accumulation (Stambolic et al., 1996), induction of axial replication in Xenopus embryos (Klein et al., 1996), As well as the protection of neuronal death (Bijur et al., 2000). Valproic acid (another commonly used mood stabilizer) has also been found to be an effective GSK-3 inhibitor (Chen et al., 1999). Taken together, these studies indicate that GSK-3 is a major in vivo target for lithium and valproic acid and thus has important implications in novel therapeutic treatment of affective disorders.

リチウムおよび他のＧＳＫ−３阻害剤が、双極性障害を治療するために作用し得る一つの機構は、神経伝達物質のグルタミン酸によって誘導される異常に高いレベルの興奮にさらされたニューロンの生存を増大させることである（Ｎｏｎａｋａ他、１９９８）。グルタミン酸によって誘導されるニューロンの興奮性はまた、脳虚血、外傷性脳傷害および細菌感染などにおける急性損傷に伴う神経変性の主要な原因であると考えられている。その上、グルタミン酸の過度なシグナル伝達は、アルツハイマー病、ハンチングトン病、パーキンソン病、ＡＩＤＳ関連痴呆、筋萎縮性側索硬化症（ＡＭＬ）および多発性硬化症（ＭＳ）などの疾患において見られる慢性的なニューロン損傷における一因であると考えられている（Ｔｈｏｍａｓ、１９９５）。 One mechanism by which lithium and other GSK-3 inhibitors may act to treat bipolar disorder is the survival of neurons exposed to abnormally high levels of excitement induced by the neurotransmitter glutamate. To increase (Nonaka et al., 1998). Neuronal excitability induced by glutamate is also believed to be a major cause of neurodegeneration associated with acute injury in cerebral ischemia, traumatic brain injury and bacterial infections. Moreover, excessive glutamate signaling is chronic in diseases such as Alzheimer's disease, Huntington's disease, Parkinson's disease, AIDS-related dementia, amyotrophic lateral sclerosis (AML), and multiple sclerosis (MS). It is believed to be a contributor to neuronal damage (Thomas, 1995).

結果として、ＧＳＫ−３阻害剤は、これらの神経変性障害および他の神経変性障害における有用な処置であると考えられる。実際に、ＧＳＫ−３活性の調節異常が、近年、統合失調症（精神***病）（Ｂｅａｓｌｅｙ他、２００１；Ｋｏｚｌｏｖｓｋｙ他、２００２）、発作およびアルツハイマー病（ＡＤ）（ＢｈａｔおよびＢｕｄｄ、２００２；Ｈｅｒｎａｎｄｅｚ他、２００２；Ｌｕｃａｓ他、２００１；Ｍａｎｄｅｌｋｏｗ他、１９９２）を含むいくつかのＣＮＳ障害および神経変性疾患に関係している。 As a result, GSK-3 inhibitors are considered useful treatments in these and other neurodegenerative disorders. Indeed, dysregulation of GSK-3 activity has recently been associated with schizophrenia (schizophrenia) (Beasley et al., 2001; Kozlovsky et al., 2002), seizures and Alzheimer's disease (AD) (Bhat and Budd, 2002; Hernandez et al. 2002; Lucas et al., 2001; Mandelkow et al., 1992), which are associated with several CNS disorders and neurodegenerative diseases.

近年の研究では、ＧＳＫ−３が、発達（Ｈｅ他、１９９５）、腫瘍形成（Ｒｕｂｉｎｆｅｌｄ他、１９９６）およびタンパク質合成（Ｗｅｌｓｈ他、１９９３）を含むさらなる細胞応答に関与していることがさらに明らかにされている。重要なことは、ＧＳＫ−３はこれらの経路において負の役割を果たしている。このことはさらに、ＧＳＫ−３がシグナル伝達経路における細胞阻害剤であることを示唆している。 Recent studies further reveal that GSK-3 is involved in additional cellular responses including development (He et al., 1995), tumorigenesis (Rubinfeld et al., 1996) and protein synthesis (Welsh et al., 1993). Has been. Importantly, GSK-3 plays a negative role in these pathways. This further suggests that GSK-3 is a cell inhibitor in the signal transduction pathway.

様々なシグナル伝達経路におけるＧＳＫ−３の広範囲な関わりに照らして、ＧＳＫ−３の特異的な阻害剤の開発は、基礎研究においてだけでなく、様々な治療的介入において将来有望でありかつ重要な意味を有すると考えられる。 In light of the widespread involvement of GSK-3 in various signaling pathways, the development of specific inhibitors of GSK-3 is promising and important not only in basic research but also in various therapeutic interventions It is considered to have meaning.

上記で述べられるように、一部の気分安定化剤は、ＧＳＫ−３を阻害することが見出されていた。しかしながら、塩化リチウム（ＬｉＣｌ）によるＧＳＫ−３の阻害（ＰＣＴ国際特許出願公開ＷＯ９７／４１８５４）およびプリン系阻害剤によるＧＳＫ−３の阻害（ＰＣＴ国際特許出願公開ＷＯ９８／１６５２８）の両方が報告されているが、これらの阻害剤はＧＳＫ−３について特異的ではない。実際に、これらの薬物は多数のシグナル伝達経路に影響を及ぼし、イノシトールモノホスファターゼ（ＩＭｐａｓｅ）およびヒストンデアセチラーゼなどの他の細胞標的を阻害することが示された（Ｂｅｒｒｉｄｇｅ他、１９８９；ＰｈｉｅｌおよびＫｌｅｉｎ、２００１）。 As stated above, some mood stabilizers have been found to inhibit GSK-3. However, both inhibition of GSK-3 by lithium chloride (LiCl) (PCT International Patent Application Publication WO 97/41854) and inhibition of GSK-3 by purine inhibitors (PCT International Patent Application Publication WO 98/16528) have been reported. However, these inhibitors are not specific for GSK-3. Indeed, these drugs have been shown to affect numerous signaling pathways and inhibit other cellular targets such as inositol monophosphatase (IMpath) and histone deacetylase (Berridge et al., 1989; Piel and Klein, 2001).

同様に、処理されたｃＡＭＰ応答エレメント結合タンパク質（ＣＲＥＢ）（ＧＳＫ−３の知られている基質）が、他の潜在的なＧＳＫ−３ペプチド阻害剤（Ｆｉｏｌ他、１９９０）に加えて記載されている（Ｆｉｏｌ他、１９９４）。しかしながら、これらの基質もまた、ＧＳＫ−３活性を表面的に阻害しているにすぎない。 Similarly, processed cAMP response element binding protein (CREB) (a known substrate for GSK-3) has been described in addition to other potential GSK-3 peptide inhibitors (Fiol et al., 1990). (Fiol et al., 1994). However, these substrates also only superficially inhibit GSK-3 activity.

他のＧＳＫ−３阻害剤が最近になって報告された。ＧＳＫ−３を特異的に阻害する二つの構造的に関連する小分子（ＳＢ−２１６７６３およびＳＢ−４１５２８６）（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｅｉｎＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ）が開発され、これらは、グリコーゲン代謝および遺伝子転写を調節すること、ならびに、ＰＩ３キナーゼ活性の低下により誘導されるニューロン死から保護することが示された（Ｃｒｏｓｓ他、２００１；Ｃｏｇｈｌａｎ他、２０００）。別の研究では、インジルビン（慢性骨髄性白血病に対する漢方の有効成分）がＧＳＫ−３阻害剤であることが示された。しかしながら、インジルビンはまた、サイクリン依存性プロテインキナーゼ−２（ＣＤＫ−２）を阻害する（Ｄａｍｉｅｎｓ他、２００１）。これらのＧＳＫ−３阻害剤はＡＴＰ競合性であり、化学ライブラリーのハイスループットスクリーニングによって同定された。ＡＴＰ競合性阻害剤の大きな欠点はその限られた特異性であることが一般に受け入れられている（Ｄａｖｉｅｓ他、２０００）。 Other GSK-3 inhibitors have been recently reported. Two structurally related small molecules that specifically inhibit GSK-3 (SB-216763 and SB-415286) (Glaxo SmithKlein Pharmaceutical) have been developed, which regulate glycogen metabolism and gene transcription, and Have been shown to protect against neuronal death induced by reduced PI3 kinase activity (Cross et al., 2001; Coghlan et al., 2000). In another study, indirubin, an active ingredient of Kampo for chronic myeloid leukemia, was shown to be a GSK-3 inhibitor. However, indirubin also inhibits cyclin-dependent protein kinase-2 (CDK-2) (Damiens et al., 2001). These GSK-3 inhibitors are ATP competitive and have been identified by high-throughput screening of chemical libraries. It is generally accepted that the major drawback of ATP competitive inhibitors is their limited specificity (Davies et al., 2000).

特定のペプチドおよび他のＧＳＫ−３阻害剤を開発する一般的な方法論はＷＯ０１／４９７０９および米国特許出願公開第２００２０１４７１４６号に報告されている。これらの文献は本発明者によるものであり、その内容がすべてここに記載されているかの如く参照としてここに組入れられる。この一般的な方法論は、ＧＳＫ−３基質の構造的特徴を規定してこれらの特徴に従ってＧＳＫ−３阻害剤を開発することに基づいている。しかしながら、これらの文献はこれらの構造的特徴を規定しており、かつ効果的にＧＳＫ−３活性を阻害する様々な短いペプチドを教示しているが、これらの文献は、ＧＳＫ−３阻害剤として役立つことができる小分子の設計および合成については教示していない。本発明者によるＰＣＴ／ＩＬ０３／０１０５７はペプチドＧＳＫ−３阻害剤の末端に疎水性部分を取付けるとその阻害活性が増大することを開示している。 General methodologies for developing specific peptides and other GSK-3 inhibitors are reported in WO 01/49709 and US Patent Application Publication No. 20020147146. These documents are from the inventor and are hereby incorporated by reference as if fully set forth herein. This general methodology is based on defining the structural features of GSK-3 substrates and developing GSK-3 inhibitors according to these features. However, although these references define these structural features and teach various short peptides that effectively inhibit GSK-3 activity, these references are as GSK-3 inhibitors. It does not teach the design and synthesis of small molecules that can be useful. PCT / IL03 / 01057 by the present inventor discloses that the inhibitory activity increases when a hydrophobic moiety is attached to the end of a peptide GSK-3 inhibitor.

しかしながら、ペプチドは興味をそそる医薬標的であるが、それらの使用はしばしば例えば生物学的不安定性、免疫原性、細胞膜や血液脳関門（ＢＢＢ）の如き生物学的膜を透過することに対する低い能力によって制限される。 However, peptides are intriguing pharmaceutical targets, but their use is often low in ability to penetrate biological membranes such as biological instability, immunogenicity, cell membranes and blood brain barrier (BBB) Limited by.

従って、上記の制限を有さない、ＧＳＫ−３活性を阻害する非ペプチド化合物が必要であることが広く認識されており、従って、そのような化合物を有することは非常に好都合である。 Accordingly, it is widely recognized that there is a need for non-peptide compounds that inhibit GSK-3 activity that do not have the above limitations, and thus it would be very advantageous to have such compounds.

本発明者は、ＧＳＫ−３基質の認識モチーフの特異的な特徴に従って設計された化合物はＧＳＫ−３に対して基質競合阻害活性を示し、従ってＧＳＫ−３の活性を減少させることが有利である様々な用途において有効に使用されることができることを驚くべきことに今や見出した。 The inventor has the advantage that compounds designed according to the specific features of the recognition motif of the GSK-3 substrate show substrate competition inhibitory activity against GSK-3 and thus reduce the activity of GSK-3. It has now surprisingly been found that it can be used effectively in various applications.

従って、本発明の一側面によれば、以下の一般式を有する化合物または医薬的に許容され得るその塩が提供される：

式中、Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷはそれぞれ独立して炭素原子または窒素原子であり；
Ａはアルキルであるかまたは存在せず；
Ｂは式

を有する負に帯電した基であり、式中、Ｌはリン原子、イオウ原子、ケイ素原子、ホウ素原子および炭素原子からなる群から選択され；Ｑ，ＧおよびＤはそれぞれ独立して酸素およびイオウからなる群から選択され；Ｅはヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、カルボニル、チオカルボニル、Ｏ−カルボキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシおよびチオアリールオキシからなる群から選択されるかまたは存在せず、
Ｄは水素、アルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルホンアミド、カルボニル、ケトエステル、チオカルボニル、エステル、エーテル、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、ヒドラジン、アミノアルキルおよび疎水性部分からなる群から選択され；そして
Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４はそれぞれ独立して水素、孤立電子対、アルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルホンアミド、カルボニル、ケトエステル、チオカルボニル、エステル、エーテル、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニリノアルキル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジンおよびアンモニウムイオンからなる群から選択され；
ただし、Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷの少なくとも一つは窒素原子であるかおよび／またはＲ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４の少なくとも一つは少なくとも一つのアミノ部分を含む基であり、ただし、本化合物はピリドキサールリン酸ではない。 Thus, according to one aspect of the present invention, there is provided a compound having the general formula: or a pharmaceutically acceptable salt thereof:

In which X, Y, Z and W are each independently a carbon atom or a nitrogen atom;
A is alkyl or absent;
B is the formula

Wherein L is selected from the group consisting of phosphorus atoms, sulfur atoms, silicon atoms, boron atoms and carbon atoms; Q, G and D are each independently from oxygen and sulfur E is selected from the group consisting of hydroxy, alkoxy, aryloxy, carbonyl, thiocarbonyl, O-carboxy, thiohydroxy, thioalkoxy and thioaryloxy, or absent,
D is hydrogen, alkyl, trihaloalkyl, cycloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclic, halo, hydroxy, alkoxy, aryloxy, thiohydroxy, thioalkoxy, thioaryloxy, sulfinyl, sulfonyl, cyano, Nitro, azo, sulfonamide, carbonyl, ketoester, thiocarbonyl, ester, ether, thioether, thiocarbamate, urea, thiourea, O-carbamyl, N-carbamyl, O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amide, N- From the group consisting of amide, C-carboxy, O-carboxy, sulfonamide, trihalomethanesulfonamide, guanyl, guanidino, guanidinoalkyl, amino, hydrazine, aminoalkyl and hydrophobic moieties -Option is; and R _1, _R 2, _{R 3} and _{R 4} are each independently hydrogen, lone pair, alkyl, trihaloalkyl, cycloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclic, halo, hydroxy , Alkoxy, aryloxy, thiohydroxy, thioalkoxy, thioaryloxy, sulfinyl, sulfonyl, cyano, nitro, azo, sulfonamide, carbonyl, ketoester, thiocarbonyl, ester, ether, thioether, thiocarbamate, urea, thiourea, O-carbamyl, N-carbamyl, O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amide, N-amide, C-carboxy, O-carboxy, sulfonamide, trihalomethanesulfonamide, guanyl, guanylinoalkyl, gua Gino, guanidino alkyl, amino, selected from the group consisting of aminoalkyl, hydrazine and an ammonium ion;
Provided that at least one of X, Y, Z and W is a nitrogen atom and / or at least one of R ₁ , R ₂ , R ₃ and R ₄ is a group comprising at least one amino moiety, The compound is not pyridoxal phosphate.

以下に記述する本発明の好ましい態様のさらなる特徴によれば、上記式中のＤは疎水性部分であり、従って、本発明の他の側面によれば、上述の式を有する化合物であってＤが疎水性部分である化合物が提供される。本発明のこの側面による化合物は、疎水性部分によって置換された、上述の除外された化合物も含む。 According to further features in preferred embodiments of the invention described below, D in the above formula is a hydrophobic moiety, and thus according to another aspect of the invention is a compound having the above formula Is a hydrophobic moiety. Compounds according to this aspect of the invention also include the above excluded compounds substituted by a hydrophobic moiety.

上述の化合物はＧＳＫ−３の活性を阻害することができる。 The aforementioned compounds can inhibit the activity of GSK-3.

記述された好ましい態様におけるさらなる特徴によれば、Ａはアルキルである。 According to still further features in the described preferred embodiments A is alkyl.

記述された好ましい態様におけるさらなる特徴によれば、Ｌはリン原子である。 According to still further features in the described preferred embodiments L is a phosphorus atom.

記述された好ましい態様におけるさらなる特徴によれば、Ｑ，ＧおよびＤのそれぞれは酸素であり、Ｅは好ましくはヒドロキシである。 According to still further features in the described preferred embodiments each of Q, G and D is oxygen and E is preferably hydroxy.

記述された好ましい態様におけるさらなる特徴によれば、Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷの少なくとも一つは窒素原子である。 According to still further features in the described preferred embodiments at least one of X, Y, Z and W is a nitrogen atom.

記述された好ましい態様におけるさらなる特徴によれば、Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷの少なくとも二つは窒素原子である。好ましくは、ＸとＹがそれぞれ窒素原子であるかまたはＺとＷがそれぞれ窒素原子である。 According to still further features in the described preferred embodiments at least two of X, Y, Z and W are nitrogen atoms. Preferably, X and Y are each a nitrogen atom, or Z and W are each a nitrogen atom.

記述された好ましい態様におけるさらなる特徴によれば、Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４の少なくとも一つは少なくとも一つのアミノ部分を含む基である。 According to still further features in the described preferred embodiments at least one of R ₁ , R ₂ , R ₃ and R ₄ is a group comprising at least one amino moiety.

記述された好ましい態様におけるさらなる特徴によれば、Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４の少なくとも二つは少なくとも一つのアミノ部分を含む基である。好ましくはＲ_１とＲ_２がそれぞれ、またはＲ_３とＲ_４がそれぞれ少なくとも一つのアミノ部分を含む基である。 According to still further features in the described preferred embodiments at least two of R ₁ , R ₂ , R ₃ and R ₄ are groups comprising at least one amino moiety. Preferably, R ₁ and R ₂ are each a group, or R ₃ and R ₄ are each a group containing at least one amino moiety.

少なくとも一つのアミノ部分を含む基の例は、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノアルキル、その類似体、その誘導体およびそれらのいかなる組合せを限定なしに含む。 Examples of groups containing at least one amino moiety include, without limitation, guanidino, guanidinoalkyl, aminoalkyl, analogs thereof, derivatives thereof and any combination thereof.

記述された好ましい態様におけるさらなる特徴によれば、少なくとも一つのアミノ部分を含む基は少なくとも一つの正に帯電した基を含む。 According to still further features in the described preferred embodiments the group comprising at least one amino moiety comprises at least one positively charged group.

記述された好ましい態様におけるさらなる特徴によれば、正に帯電した基はアンモニウムイオンを含む。代わりに、正に帯電した基は、正に帯電したアミノ酸（例えばアルギニン、リジン、ヒスチジン、プロリンであるがこれらに限定されない）およびそれらのいかなる誘導体の側鎖から由来する化学構造を有する。 According to still further features in the described preferred embodiments the positively charged group comprises an ammonium ion. Instead, the positively charged group has a chemical structure derived from the side chain of positively charged amino acids (eg, but not limited to arginine, lysine, histidine, proline) and any derivatives thereof.

Ｄが疎水性部分である場合、疎水性部分は脂肪酸残基、４〜３０個の炭素原子を有する飽和アルキレン鎖、４〜３０個の炭素原子を有する不飽和アルキレン基、アリール、シクロアルキルおよび疎水性ペプチド配列からなる群から選択されることが好ましい。 When D is a hydrophobic moiety, the hydrophobic moiety is a fatty acid residue, a saturated alkylene chain having 4 to 30 carbon atoms, an unsaturated alkylene group having 4 to 30 carbon atoms, aryl, cycloalkyl and hydrophobic Preferably selected from the group consisting of sex peptide sequences.

脂肪酸は、例えばミリスチン酸、ラウリン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、アラキドン酸、リノール酸またはリノレイン酸であることができる。 The fatty acid can be, for example, myristic acid, lauric acid, palmitic acid, stearic acid, oleic acid, arachidonic acid, linoleic acid or linolenic acid.

本発明による好ましい化合物は、Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷのそれぞれが炭素原子であり、Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４の少なくとも一つが上述のような少なくとも一つのアミノ部分を含む基である化合物をさらに含む。 Preferred compounds according to the invention are those in which each of X, Y, Z and W is a carbon atom and at least one of R ₁ , R ₂ , R ₃ and R ₄ contains at least one amino moiety as described above. Further includes certain compounds.

さらに好ましい化合物はＸ，ＹおよびＺのそれぞれが炭素原子であり、Ｗが窒素原子であるものである。 Further preferred compounds are those in which each of X, Y and Z is a carbon atom and W is a nitrogen atom.

本発明のなお別の側面によれば、活性な成分として、ＧＳＫ−３の活性を阻害することができる上述の化合物、および医薬的に許容され得るキャリアを含む医薬組成物が提供される。 According to yet another aspect of the present invention, there is provided a pharmaceutical composition comprising, as an active ingredient, the above-mentioned compound capable of inhibiting the activity of GSK-3, and a pharmaceutically acceptable carrier.

記述された好ましい態様におけるさらなる特徴によれば、医薬組成物は包装用材料に詰められ、以下に詳述するようにＧＳＫ−３活性と関連する生物学的状態の治療において使用するために、包装用材料の表面またはその中での活字で識別される。 According to still further features in the described preferred embodiments the pharmaceutical composition is packaged in a packaging material and packaged for use in the treatment of biological conditions associated with GSK-3 activity as detailed below. It is identified by the surface of the material for use or the type in it.

記述された好ましい態様におけるさらなる特徴によれば、医薬組成物は以下に詳述するようにＧＳＫ−３の活性を変化させることができる少なくとも一つのさらなる活性な成分をさらに含む。 According to still further features in the described preferred embodiments the pharmaceutical composition further comprises at least one further active ingredient capable of altering the activity of GSK-3 as detailed below.

本発明のなお別の側面によれば、ＧＳＫ−３の活性に関連する生物学的状態を治療する方法が提供され、前記方法はその必要性のある対象に、治療効果的な量の上述のＧＳＫ−３の活性を阻害することができる化合物を投与することを含む。 According to yet another aspect of the present invention, there is provided a method of treating a biological condition associated with the activity of GSK-3, said method comprising a therapeutically effective amount of the above-mentioned in a subject in need thereof. Administering a compound capable of inhibiting the activity of GSK-3.

記述された好ましい態様におけるさらなる特徴によれば、本発明のこの側面による方法は、ＧＳＫ−３の活性を変化させることができる少なくとも一つのさらなる活性な成分を同時投与することをさらに含む。 According to further features in the described preferred embodiments, the method according to this aspect of the invention further comprises co-administering at least one additional active ingredient capable of altering the activity of GSK-3.

さらなる活性な成分は、ＧＳＫ−３の活性を阻害することができる活性な成分であるかまたはＧＳＫ−３の発現をダウンレギュレートすることができる活性な成分であることができる。 The further active component can be an active component that can inhibit the activity of GSK-3 or an active component that can down-regulate the expression of GSK-3.

本発明による生物学的状態は、肥満、インスリン非依存性糖尿病、インスリン依存性状態、情動障害、神経変性疾患または神経変性障害、および精神病的な疾患または障害からなる群から選択されることが好ましい。 The biological condition according to the present invention is preferably selected from the group consisting of obesity, non-insulin dependent diabetes, insulin dependent condition, affective disorder, neurodegenerative disease or neurodegenerative disorder, and psychotic disease or disorder. .

情動障害は、単極型障害（例えば、うつ病）または双極性障害（例えば、躁うつ病）であることができる。 The affective disorder can be a unipolar disorder (eg, depression) or a bipolar disorder (eg, manic depression).

神経変性障害は、脳虚血、発作、外傷性脳傷害および細菌感染からなる群から選択される事象から生じることがあり得、または神経変性障害は、アルツハイマー病、ハンチングトン病、パーキンソン病、ＡＩＤＳ関連痴呆、筋萎縮性側索硬化症（ＡＭＬ）および多発性硬化症からなる群から選択される疾患から生じる慢性の神経変性障害であり得る。 The neurodegenerative disorder can result from an event selected from the group consisting of cerebral ischemia, stroke, traumatic brain injury and bacterial infection, or the neurodegenerative disorder can be Alzheimer's disease, Huntington's disease, Parkinson's disease, AIDS. It can be a chronic neurodegenerative disorder resulting from a disease selected from the group consisting of associated dementia, amyotrophic lateral sclerosis (AML) and multiple sclerosis.

本発明の追加の側面によれば、ＧＳＫ−３を発現する細胞を、本発明による化合物の治療効果的な量と接触させることを含む、ＧＳＫ−３の活性を阻害する方法が提供される。 According to an additional aspect of the invention, there is provided a method of inhibiting the activity of GSK-3 comprising contacting a cell expressing GSK-3 with a therapeutically effective amount of a compound according to the invention.

前記活性はリン酸化活性および／または自己リン酸化活性であることができる。 The activity may be phosphorylation activity and / or autophosphorylation activity.

本発明のなお追加の側面によれば、インスリンシグナル伝達を強化する方法であって、インスリン応答性細胞を上述の化合物の効果的な量と接触させることを含む方法が提供される。 According to yet an additional aspect of the invention, there is provided a method of enhancing insulin signaling comprising contacting insulin responsive cells with an effective amount of the above-described compound.

これらの方法のそれぞれにおいて、細胞を接触させることはインビトロまたはインビボで行われることができる。 In each of these methods, contacting the cells can be performed in vitro or in vivo.

記述された好ましい態様におけるさらなる特徴によれば、本発明のこれらの追加の側面による方法はそれぞれ、細胞を上述の少なくとも一つのさらなる活性な成分と接触させることをさらに含む。 According to further features in the described preferred embodiments, the method according to these additional aspects of the invention each further comprises contacting the cell with at least one additional active ingredient as described above.

本発明は、様々な生物学的状態の治療において効率的に使用することができる、ＧＳＫ−３活性を阻害するための新規に設計された非ペプチド化合物を提供することによって、現在知られている形態の欠点を対処することに成功している。 The present invention is currently known by providing newly designed non-peptide compounds for inhibiting GSK-3 activity that can be used efficiently in the treatment of various biological conditions. It has succeeded in dealing with the disadvantages of the form.

別途に定義されない場合、本明細書中で使用されるすべての技術的用語および科学的用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書中に記載される方法および材料と同様または同等である方法および材料を本発明の実施または試験において使用することができるが、好適な方法および材料が下記に記載される。矛盾する場合には、定義を含めて、本特許明細書が優先する。また、材料、方法および実施例は例示にすぎず、限定であることは意図されない。 Unless defined otherwise, all technical and scientific terms used herein have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which this invention belongs. Although methods and materials similar or equivalent to those described herein can be used in the practice or testing of the present invention, suitable methods and materials are described below. In case of conflict, the patent specification, including definitions, will control. In addition, the materials, methods, and examples are illustrative only and not intended to be limiting.

本発明は、例としてだけであるが、添付されている図面を参照して、本明細書中に記載される。次に図面を詳しく具体的に参照して、示されている細目は、例としてであり、また、本発明の好ましい実施形態の例示的な議論のためのものであり、従って、本発明の原理および概念的態様の最も有用かつ容易に理解された記述であると考えられるものを提供するために示されていることが強調される。これに関して、記述を図面と一緒に理解することにより、本発明のいくつかの形態が実際にどのように具体化され得るかが当業者には明らかになるので、発明の構造的詳細を、発明の基本的な理解のために必要であるよりも詳細に示すことは試みられていない。
図面の簡単な記述
図１ａ−ｂは、２Ｄ ^１Ｈ−ＮＭＲ研究によって得られた通りのペプチドｐ９ＣＲＥＢ（図１ａ）およびＣＲＥＢ（図１ｂ）の３Ｄ構造のコンピュータ画像を表わす（水素原子は示されていない；炭素骨格は灰色であり、窒素原子は青色であり、酸素原子は赤色であり、リン原子は黄色である）。
図２は、２Ｄ ^１Ｈ−ＮＭＲ研究によって得られたペプチドの３Ｄ構造に基づくｐ９ＣＲＥＢペプチドの静電分布を示す画像である。
図３は、フェニルリン酸、ピリドキサールリン酸（Ｐ−５−Ｐ）、ＧＳ−１、ＧＳ−２、ＧＳ−３の化学構造および新規化合物ＧＳ−４、ＧＳ−５およびＧＳ−２１の化学構造を表わす。
図４ａ−ｂは、ＧＳ−２１の合成の中間体である１，３，５−トリス（ヒドロキシメチル）ベンゼンの^１ＨＮＭＲスペクトル（図４ａ）および^１３ＣＮＭＲスペクトル（図４ｂ）を表わす。
図５ａ−ｂは、ＧＳ−２１の合成の中間体である３，５−ビス（ブロモメチル）ベンジルアルコールの^１ＨＮＭＲスペクトル（図５ａ）および^１３ＣＮＭＲスペクトル（図５ｂ）を表わす。
図６ａ−ｂは、ＧＳ−２１の合成の中間体である３，５−ビス（シアノメチル）ベンジルアルコールの^１ＨＮＭＲスペクトル（図６ａ）および^１３ＣＮＭＲスペクトル（図６ｂ）を表わす。
図７は、ＧＳ−２１の合成の中間体である３，５−ビス（アミノエチル）ベンジルアルコールの^１ＨＮＭＲスペクトルを表わす。
図８は、ＧＳ−２１の合成の中間体である３，５−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノエチル）ベンジルアルコールの^１ＨＮＭＲスペクトルを表わす。
図９ａ−ｃは、ＧＳ−２１の合成の中間体である、保護された３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸の^１ＨＮＭＲスペクトル（図９ａ）および^１３ＣＮＭＲスペクトル（図９ｂ）および^３１ＰＮＭＲスペクトル（図９ｃ）を表わす。
図１０ａ−ｄは、ＴＦＡ塩３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸（ＧＳ−２１ＴＦＡ塩）の^１ＨＮＭＲスペクトル（図１０ａ）および^１３ＣＮＭＲスペクトル（図１０ｂ）および^３１ＰＮＭＲスペクトル（図１０ｃ）およびＥＳＩ−ＭＳ（図１０ｄ）を表わす。
図１１ａ−ｅは、３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸（ＧＳ−２１）の^１ＨＮＭＲスペクトル（図１１ａ）および^１３ＣＮＭＲスペクトル（図１１ｂ）および^３１ＰＮＭＲスペクトル（図１１ｃ）およびＥＳＩ−ＭＳ（図１１ｄ）およびＨＰＬＣクロマトグラム（図１１ｅ）を表わす。
図１２は、インビトロ阻害アッセイにおけるフェニルリン酸、ＧＳ−１、ＧＳ−２、ＧＳ−３およびピリドキサールリン酸（Ｐ−５−Ｐ）のＧＳＫ−３阻害活性を示す比較プロットを表わす。
図１３は、インビトロ阻害アッセイにおけるＧＳ−１、ＧＳ−２、ＧＳ−３、ＧＳ−５およびＧＳ−２１のＧＳＫ−３阻害活性を示す比較プロットを表わす（黒色の丸はＧＳ−１を示し、赤色の丸はＧＳ−２を示し、緑色の丸はＧＳ−３を示し、青色の丸はＧＳ−５を示し、ピンク色の丸はＧＳ−２１を示す）。
図１４ａ−ｂは、ペプチドコントロール（１単位に正規化されている）で処理された細胞にわたる活性化倍率としての、ＧＳ−５およびＧＳ−２１で処理された細胞における［^３Ｈ］２−デオキシグルコース取込みによって表わされる、マウスの脂肪細胞におけるグルコース取込みに対するＧＳ−２１（図１４ｂ）およびＧＳ−５（図１４ａ）の影響を示す棒グラフである。 The present invention is described herein by way of example only and with reference to the accompanying drawings. Referring now more particularly to the drawings, the details shown are by way of example and for exemplary discussion of the preferred embodiments of the present invention and therefore the principles of the present invention It is emphasized that it is shown to provide what is considered to be the most useful and easily understood description of conceptual aspects. In this regard, it will be apparent to those skilled in the art, upon understanding the description in conjunction with the drawings, that some forms of the invention may actually be embodied, so that the structural details of the invention can be No attempt has been made to show in more detail than is necessary for a basic understanding of.
BRIEF DESCRIPTION OF THE FIGURES FIG. 1a-b represents a computer image of the 3D structure of peptides p9CREB (FIG. 1a) and CREB (FIG. 1b) as obtained by a 2D ¹ H-NMR study (hydrogen atoms shown). Not; the carbon skeleton is gray, the nitrogen atoms are blue, the oxygen atoms are red, and the phosphorus atoms are yellow).
FIG. 2 is an image showing the electrostatic distribution of the p9CREB peptide based on the 3D structure of the peptide obtained by 2D ¹ H-NMR studies.
FIG. 3 shows the chemical structure of phenylphosphate, pyridoxal phosphate (P-5-P), GS-1, GS-2, GS-3 and the chemical structures of novel compounds GS-4, GS-5 and GS-21. Represents.
FIGS. 4a-b represent the ¹ H NMR spectrum (FIG. 4a) and the ¹³ C NMR spectrum (FIG. 4b) of 1,3,5-tris (hydroxymethyl) benzene, an intermediate in the synthesis of GS-21.
FIGS. 5a-b represent the ¹ H NMR spectrum (FIG. 5a) and the ¹³ C NMR spectrum (FIG. 5b) of 3,5-bis (bromomethyl) benzyl alcohol, an intermediate in the synthesis of GS-21.
FIGS. 6a-b represent the ¹ H NMR spectrum (FIG. 6a) and the ¹³ C NMR spectrum (FIG. 6b) of 3,5-bis (cyanomethyl) benzyl alcohol, which is an intermediate in the synthesis of GS-21.
FIG. 7 represents the ¹ H NMR spectrum of 3,5-bis (aminoethyl) benzyl alcohol, which is an intermediate in the synthesis of GS-21.
FIG. 8 represents the ¹ H NMR spectrum of 3,5-bis (tert-butoxycarbonylaminoethyl) benzyl alcohol, which is an intermediate in the synthesis of GS-21.
FIGS. 9a-c show ¹ H NMR spectrum (FIG. 9a) and ¹³ C NMR spectrum (FIG. 9) of protected 3,5-bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate, which is an intermediate in the synthesis of GS-21. 9b) and ³¹ P NMR spectra (FIG. 9c).
FIG. 10a-d shows the ¹ H NMR spectrum (FIG. 10a) and ¹³ C NMR spectrum (FIG. 10b) and ³¹ P of TFA salt 3,5-bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate (GS-21 TFA salt). Represents the NMR spectrum (Figure 10c) and ESI-MS (Figure 10d).
11a-e shows the ¹ H NMR spectrum (FIG. 11a) and ¹³ C NMR spectrum (FIG. 11b) and ³¹ P NMR spectrum (FIG. 11) of 3,5-bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate (GS-21). 11c) and ESI-MS (FIG. 11d) and HPLC chromatogram (FIG. 11e).
FIG. 12 represents a comparative plot showing the GSK-3 inhibitory activity of phenylphosphate, GS-1, GS-2, GS-3 and pyridoxal phosphate (P-5-P) in an in vitro inhibition assay.
FIG. 13 represents a comparative plot showing GSK-3 inhibitory activity of GS-1, GS-2, GS-3, GS-5 and GS-21 in an in vitro inhibition assay (black circles indicate GS-1, The red circle indicates GS-2, the green circle indicates GS-3, the blue circle indicates GS-5, and the pink circle indicates GS-21).
Figure 14a-b are as fold activation over cells treated with peptide control (normalized to 1 unit), ^[3 H] in cells treated with GS-5 and GS-21 2-deoxy FIG. 15 is a bar graph showing the effect of GS-21 (FIG. 14b) and GS-5 (FIG. 14a) on glucose uptake in mouse adipocytes, represented by glucose uptake.

本発明は、ＧＳＫ−３活性を阻害することができ、従って、ＧＳＫ−３により媒介される生物学的状態の治療において使用することができる新規な非ペプチド化合物に関する。具体的には、本発明は、（ｉ）ＧＳＫ−３基質の立体配位結合に従って設計された化合物（これは、所望により疎水性部分を結合されていてもよい）、（ｉｉ）前記化合物を含有する医薬組成物、（ｉｉｉ）ＧＳＫ−３活性を阻害するために、およびインスリンシグナル伝達を強化するために、前記化合物を使用する方法、および（ｉｖ）肥満、インスリン非依存性糖尿病、インスリン依存性状態、情動障害、神経変性疾患および神経変性障害、ならびに精神病的な疾患または障害（これらに限定されない）などの生物学的状態の治療において前記化合物を使用する方法に関する。 The present invention relates to novel non-peptide compounds that can inhibit GSK-3 activity and thus can be used in the treatment of biological conditions mediated by GSK-3. Specifically, the present invention relates to (i) a compound designed according to the steric coordinate bond of the GSK-3 substrate (which may optionally be bound to a hydrophobic moiety), (ii) the compound Containing pharmaceutical compositions, (iii) methods of using said compounds to inhibit GSK-3 activity and to enhance insulin signaling, and (iv) obesity, non-insulin dependent diabetes, insulin dependent It relates to methods of using said compounds in the treatment of biological conditions such as, but not limited to, sexual conditions, affective disorders, neurodegenerative and neurodegenerative disorders, and psychotic diseases or disorders.

本発明の原理および操作は、図面および付随する記述を参照してより良く理解され得る。 The principles and operation of the present invention may be better understood with reference to the drawings and accompanying descriptions.

本発明の少なくとも一つの実施形態を詳しく説明する前に、本発明は、その適用において、下記の説明において示される細部、または実施例によって例示される細部に限定されないことを理解しなければならない。本発明は他の実施形態が可能であり、または様々な方法で実施することが可能であり、または様々な方法で実施される。また、本明細書中で用いられる表現法および用語法は記述のためであり、限定であるとして見なしてはならないことを理解しなければならない。 Before describing at least one embodiment of the present invention in detail, it should be understood that the present invention is not limited in its application to the details set forth in the following description or the details illustrated by the examples. The invention is capable of other embodiments or of being practiced in various ways or being carried out in various ways. It should also be understood that the wording and terminology used herein is for description only and should not be considered limiting.

基質−キナーゼを認識する役割を有するパラメータの一つは、基質内に位置する要素であり、これは通常、「認識モチーフ」に関連付けられている。上述の通りＧＳＫ−３は他のキナーゼとは異なり、特異的な認識モチーフを有し、これは配列番号１に規定されるアミノ酸配列ＳＸ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｓ（ｐ）を含み、ここでＳはセリンまたはスレオニンであり、Ｘ_１，Ｘ_２およびＸ_３のそれぞれはいかなるアミノ酸であることができ、Ｓ（ｐ）はリン酸化セリンまたはリン酸化スレオニンである。 One parameter that has the role of recognizing substrate-kinase is an element located within the substrate, which is usually associated with a “recognition motif”. As mentioned above, GSK-3, unlike other kinases, has a specific recognition motif, which contains the amino acid sequence SX ₁ X ₂ X ₃ S (p) defined in SEQ ID NO: 1, where S Is serine or threonine, each of X ₁ , X ₂ and X ₃ can be any amino acid and S (p) is phosphorylated serine or phosphorylated threonine.

ＷＯ０１／４９７０９および米国特許出願公報第２００２０１４７１４６号（これらの文献は、ここに完全に記載されているように参照として組入れられる）に幅広く教示されるように、この認識モチーフに基づいて設計されかつ合成された一組の短いペプチドは、基質または阻害剤としてのそれらの活性についてテストされた。これらのアッセイに基づき、これらのペプチドをＧＳＫ−３に対して活性な基質または阻害剤にする多数の特徴が決定された。最も重要な特徴の一つは、モチーフ中のリン酸化されたセリンまたはスレオニン残基はＧＳＫ−３に対する基質および阻害剤の両方の結合に必要であるということである。これらのアッセイはさらに、これらのペプチドのうちのいくらかはＧＳＫ−３の極めて強くかつ特異的な阻害剤であることを示した。これらのペプチドは基質競合的阻害剤として規定された。 Designed on the basis of this recognition motif as taught broadly in WO 01/49709 and US Patent Application Publication No. 20020147146, which are incorporated by reference as if fully set forth herein, and A set of synthesized short peptides was tested for their activity as substrates or inhibitors. Based on these assays, a number of features that make these peptides active substrates or inhibitors for GSK-3 were determined. One of the most important features is that a phosphorylated serine or threonine residue in the motif is required for both substrate and inhibitor binding to GSK-3. These assays further showed that some of these peptides are very strong and specific inhibitors of GSK-3. These peptides have been defined as substrate competitive inhibitors.

ＧＳＫ−３が予めリン酸化された基質、つまりリン酸化されたセリンまたはスレオニン残基を有する基質のみを認識するという発見に基づいて、予めリン酸化されたＧＳＫ−３基質はそれらがＧＳＫ−３の触媒コアと相互作用することを可能とする特異的な構造を有するという仮説が立てられた。さらに、この特異的な構造を決定することはＧＳＫ−３の基質競合的阻害剤として作用することができる小分子の開発を可能にするであろうという仮説が立てられた。 Based on the discovery that GSK-3 recognizes only pre-phosphorylated substrates, ie, substrates with phosphorylated serine or threonine residues, pre-phosphorylated GSK-3 substrates are those of GSK-3 It was hypothesized that it has a specific structure that allows it to interact with the catalyst core. Furthermore, it was hypothesized that determining this specific structure would allow the development of small molecules that could act as substrate competitive inhibitors of GSK-3.

従って、上述した小さいＧＳＫ−３ペプチド阻害剤の阻害活性を模倣する小分子の探求において、本発明を実施に移している間に、小さいリン酸化されたペプチド基質の三次元構造並びに特異的な構造上の特徴が決定され、これらの特徴によって特徴付けられる多数の化合物がＧＳＫ−３阻害剤としてのそれらの活性についてテストされた。 Thus, in the search for small molecules that mimic the inhibitory activity of the small GSK-3 peptide inhibitors described above, while practicing the present invention, the three-dimensional structure as well as the specific structure of the small phosphorylated peptide substrate The above characteristics were determined and a number of compounds characterized by these characteristics were tested for their activity as GSK-3 inhibitors.

ＧＳＫ−３阻害剤の代表例として、短い予めリン酸化されたペプチドｐ９ＣＲＥＢ（ＩＬＳＲＲＰＳ（ｐ）ＹＲ、配列番号２）が選択された。ｐ９ＣＲＥＢの三次元構造並びに対応するリン酸化されていないペプチドＣＲＥＢ（ＩＬＳＲＲＰＳＹＲ、配列番号３）の三次元構造が以下の実施例で詳述されるように２ＤＮＭＲによって決定された。 As a representative example of a GSK-3 inhibitor, a short pre-phosphorylated peptide p9CREB (ILSRRPS (p) YR, SEQ ID NO: 2) was selected. The three-dimensional structure of p9CREB as well as the three-dimensional structure of the corresponding non-phosphorylated peptide CREB (ILSRRPSYR, SEQ ID NO: 3) was determined by 2D NMR as detailed in the examples below.

図１ａおよび図１ｂに示されるように、リン酸化されたｐ９ＣＲＥＢ基質は溶液中で規定された構造を有するが（図１ａ）、対応するリン酸化されていないペプチドＣＲＥＢはいかなる特異的構造も示さない（図１ｂ）。 As shown in FIGS. 1a and 1b, the phosphorylated p9CREB substrate has a defined structure in solution (FIG. 1a), but the corresponding non-phosphorylated peptide CREB does not show any specific structure. (FIG. 1b).

これらの結果に鑑みて、リン酸化されたペプチド中のリン酸基は、チロシン（Ｙ８）とアルギニン（Ｒ４）の間の陽イオン−π相互作用を通して「ループ状」構造を有することが示唆され（表２および３）、その結果として、認識モチーフでのリン酸化されたセリンはループの外側に位置されることが示唆された。基質のかかる「曲がり」構造は、リン酸化されたセリンを、酵素の基質結合ポケットとの相互作用にアクセスできるようにする。 In view of these results, it is suggested that the phosphate group in the phosphorylated peptide has a “loop-like” structure through cation-π interaction between tyrosine (Y8) and arginine (R4) ( Tables 2 and 3), as a result, suggested that phosphorylated serine at the recognition motif is located outside the loop. Such a “bent” structure of the substrate makes phosphorylated serine accessible for interaction with the substrate binding pocket of the enzyme.

この示唆に対する支持は、Ｄａｊａｎｉ他（２００１）によって記述されたＧＳＫ−３の最近刊行された結晶化データ中に実際に見出された。Ｄａｊａｎｉ他の結晶化データは、ＧＳＫ−３の基質結合部位は三つの正に帯電した残基Ａｒｇ９６，Ａｒｇ１８０およびＬｙｓ２０５を含み、これらの残基がリン酸イオンと相互作用することを示す。 Support for this suggestion was actually found in the recently published crystallization data for GSK-3 described by Dajani et al. (2001). The crystallization data of Dajani et al. Show that the substrate binding site of GSK-3 contains three positively charged residues Arg96, Arg180 and Lys205, and these residues interact with phosphate ions.

図２は、これらの発見に基づいたｐ９ＣＲＥＢペプチドの「表面」上の静電分布を表わす。 FIG. 2 represents the electrostatic distribution on the “surface” of the p9CREB peptide based on these findings.

本発明を想起しつづけている間に、上述の発見から、基質競合的阻害活性を発揮するようにＧＳＫ−３基質の構造を模倣する小分子は、以下の特徴に従って設計されるべきであるということが導き出された： While continuing to recall the present invention, from the above findings, small molecules that mimic the structure of GSK-3 substrate to exert substrate competitive inhibitory activity should be designed according to the following characteristics: It was derived:

分子は負に帯電した基、好ましくはリン酸基を含むべきであり； The molecule should contain a negatively charged group, preferably a phosphate group;

負に帯電した基は立体的に障害を受けるべきでなく；および Negatively charged groups should not be sterically hindered; and

負に帯電した基は、少なくともその一つの側でまたは両側で一つまたは二つの正に帯電した基によって隣接されることが好ましい。 The negatively charged group is preferably adjacent by at least one side or both sides by one or two positively charged groups.

上述のことに基づいて、ＧＳＫ−３活性を阻害するための潜在的な化合物の一般式が設計された。以下の実施例部分で記述されるように、これらの化合物の「第一世代」、つまり、この式の最も単純化された構造を有する化合物を用いて行われた予備実験は、ＧＳＫ−３活性を阻害するこれらの化合物の能力を証明し、従って、かかる式を有する化合物の阻害能力の予備的な示唆を与えた。 Based on the above, a general formula for potential compounds to inhibit GSK-3 activity was designed. As described in the Examples section below, preliminary experiments conducted with the “first generation” of these compounds, ie, the compounds with the most simplified structure of this formula, show GSK-3 activity. Demonstrated the ability of these compounds to inhibit, thus providing a preliminary indication of the inhibitory ability of compounds having such a formula.

新規化合物を含む一層前進された世代の化合物も上述のことに基づいて設計されて合成された。以下の実施例部分で記述されるように、これらの化合物を用いて行われた実験はＧＳＫ−３活性を阻害するそれらの能力をさらに証明し、さらに、マウスの脂肪細胞においてグルコースの取込みを増大させるそれらの能力を証明し、かくして、かかる式に従って設計された化合物によって発揮される確かな阻害および治療効果を証明した。 More advanced generations of compounds, including novel compounds, were also designed and synthesized based on the above. As described in the Examples section below, experiments performed with these compounds further demonstrate their ability to inhibit GSK-3 activity and further increase glucose uptake in mouse adipocytes Their ability to be demonstrated, thus demonstrating the definitive inhibition and therapeutic effects exerted by compounds designed according to such a formula.

を有する負に帯電した基であり、式中、Ｌはリン原子、イオウ原子、ケイ素原子、ホウ素原子および炭素原子からなる群から選択され；Ｑ，ＧおよびＤはそれぞれ独立して酸素およびイオウからなる群から選択され；Ｅはヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、カルボニル、チオカルボニル、Ｏ−カルボキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシおよびチオアリールオキシからなる群から選択されるかまたは存在せず、
Ｄは水素、アルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルホンアミド、カルボニル、ケトエステル、チオカルボニル、エステル、エーテル、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキルおよび疎水性部分からなる群から選択され；そして
Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４はそれぞれ独立して水素、孤立電子対、アルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルホンアミド、カルボニル、ケトエステル、チオカルボニル、エステル、エーテル、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニリノアルキル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジンおよびアンモニウムイオンからなる群から選択される。 Thus, according to one aspect of the present invention, there is provided a compound having the general formula: or a pharmaceutically acceptable salt thereof:

Wherein L is selected from the group consisting of phosphorus atoms, sulfur atoms, silicon atoms, boron atoms and carbon atoms; Q, G and D are each independently from oxygen and sulfur E is selected from the group consisting of hydroxy, alkoxy, aryloxy, carbonyl, thiocarbonyl, O-carboxy, thiohydroxy, thioalkoxy and thioaryloxy, or absent,
D is hydrogen, alkyl, trihaloalkyl, cycloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclic, halo, hydroxy, alkoxy, aryloxy, thiohydroxy, thioalkoxy, thioaryloxy, sulfinyl, sulfonyl, cyano, Nitro, azo, sulfonamide, carbonyl, ketoester, thiocarbonyl, ester, ether, thioether, thiocarbamate, urea, thiourea, O-carbamyl, N-carbamyl, O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amide, N- Selected from the group consisting of amide, C-carboxy, O-carboxy, sulfonamide, trihalomethanesulfonamide, guanyl, guanidino, guanidinoalkyl, amino, aminoalkyl and hydrophobic moieties; R _1, _R 2, _{R 3} and _{R 4} are each independently hydrogen Te, lone pairs, alkyl, trihaloalkyl, cycloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclic, halo, hydroxy, alkoxy, Aryloxy, thiohydroxy, thioalkoxy, thioaryloxy, sulfinyl, sulfonyl, cyano, nitro, azo, sulfonamide, carbonyl, ketoester, thiocarbonyl, ester, ether, thioether, thiocarbamate, urea, thiourea, O-carbamyl , N-carbamyl, O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amide, N-amide, C-carboxy, O-carboxy, sulfonamide, trihalomethanesulfonamide, guanyl, guanylinoalkyl, guanidino, gua Jinoarukiru, amino, aminoalkyl, is selected from the group consisting of hydrazine and ammonium ions.

示された位置に配置される置換基（例えば、Ｄ，Ｇ，ＥおよびＲ_１〜Ｒ_４）のそれぞれの実現可能性は、置換基の原子価および化学的適合性、置換位置、ならびに他の置換基に依存することが当業者によって理解される。従って、本発明は、任意の位置について、実現可能な置換基のすべてを包含することが意図される。 The feasibility of each of the substituents (eg, D, G, E, and R ₁ -R ₄ ) located at the indicated positions depends on the valence and chemical compatibility of the substituent, the substitution position, and other It will be appreciated by those skilled in the art that it depends on the substituent. Thus, the present invention is intended to encompass all possible substituents at any position.

本明細書中で使用される用語「アルキル」は、直鎖基および分枝鎖基を含む飽和した脂肪族炭化水素を示す。好ましくは、アルキル基は１個〜２０個の炭素原子を有する。数値範囲、例えば「１個〜２０個」が本明細書で述べられる場合は常に、それは基（この場合はアルキル基）が１個の炭素原子、２個の炭素原子、３個の炭素原子などの２０個までの炭素原子を含むということを意味する。さらに好ましくは、アルキル基は、１個〜１０個の炭素原子を有する中程度のサイズのアルキルである。最も好ましくは、他に示さない限り、アルキル基は、１個〜４個の炭素原子を有する低級アルキルである。アルキル基は、置換または非置換であり得る。置換されるとき、置換基は、例えば、ヒドロキシアルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルフォンアミド、ケトエステル、カルボニル、チオカルボニル、エステル、エーテル、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニリノアルキル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジンおよびアンモニウムイオンであり得る。 The term “alkyl” as used herein refers to a saturated aliphatic hydrocarbon including straight chain and branched chain groups. Preferably, the alkyl group has 1 to 20 carbon atoms. Whenever a numerical range, such as “1-20” is mentioned herein, it means that the group (in this case an alkyl group) is 1 carbon atom, 2 carbon atoms, 3 carbon atoms, etc. Of up to 20 carbon atoms. More preferably, the alkyl group is a medium size alkyl having 1 to 10 carbon atoms. Most preferably, unless otherwise indicated, the alkyl group is a lower alkyl having 1 to 4 carbon atoms. Alkyl groups can be substituted or unsubstituted. When substituted, the substituent is, for example, hydroxyalkyl, trihaloalkyl, cycloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclic, halo, hydroxy, alkoxy, aryloxy, thiohydroxy, thioalkoxy, thioaryl Oxy, sulfinyl, sulfonyl, cyano, nitro, azo, sulfonamide, ketoester, carbonyl, thiocarbonyl, ester, ether, thioether, thiocarbamate, urea, thiourea, O-carbamyl, N-carbamyl, O-thiocarbamyl, N- Thiocarbamyl, C-amide, N-amide, C-carboxy, O-carboxy, trihalomethanesulfonamide, guanyl, guanylinoalkyl, guanidino, guanidinoalkyl, amino, aminoalkyl, It may be hydrazine and ammonium ions.

本明細書中で使用される用語「シクロアルキル」基は、環の一つまたは複数が完全共役のπ電子系を有しない、すべて炭素からなる単環基または縮合環（すなわち、隣接炭素原子対を共有する環）基を示す。シクロアルキル基の非限定な例には、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロペンテン、シクロヘキサン、シクロヘキサジエン、シクロヘプタン、シクロヘプタトリエンおよびアダマンタンがある。シクロアルキル基は、置換または非置換であり得る。置換されるとき、置換基は、例えば、アルキル、ヒドロキシアルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルフォンアミド、ケトエステル、カルボニル、チオカルボニル、エステル、エーテル、カルボキシ、チオカルボキシ、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニリノアルキル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジンおよびアンモニウムイオンであり得る。 As used herein, the term “cycloalkyl” group refers to an all-carbon monocyclic group or fused ring (ie, adjacent carbon atom pairs) in which one or more of the rings do not have a fully conjugated pi-electron system. A ring sharing a group. Non-limiting examples of cycloalkyl groups include cyclopropane, cyclobutane, cyclopentane, cyclopentene, cyclohexane, cyclohexadiene, cycloheptane, cycloheptatriene and adamantane. Cycloalkyl groups can be substituted or unsubstituted. When substituted, the substituents are, for example, alkyl, hydroxyalkyl, trihaloalkyl, cycloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclic, halo, hydroxy, alkoxy, aryloxy, thiohydroxy, thioalkoxy, Thioaryloxy, sulfinyl, sulfonyl, cyano, nitro, azo, sulfonamide, ketoester, carbonyl, thiocarbonyl, ester, ether, carboxy, thiocarboxy, thioether, thiocarbamate, urea, thiourea, O-carbamyl, N-carbamyl , O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amide, N-amide, C-carboxy, O-carboxy, sulfonamido, trihalomethanesulfonamide, guanyl, guanylinoalkyl, g Nijino, guanidino alkyl, amino, aminoalkyl, it is a hydrazine and ammonium ions.

「アルケニル」基は、本明細書中で定義されるように、少なくとも二つの炭素原子と少なくとも一つの炭素−炭素二重結合からなるアルキル基を示す。 An “alkenyl” group refers to an alkyl group consisting of at least two carbon atoms and at least one carbon-carbon double bond, as defined herein.

「アルキニル」基は、本明細書中で定義されるように、少なくとも二つの炭素原子と少なくとも一つの炭素−炭素三重結合からなるアルキル基を示す。 An “alkynyl” group refers to an alkyl group, as defined herein, consisting of at least two carbon atoms and at least one carbon-carbon triple bond.

「アリール」は、完全共役のπ電子系を有する、すべて炭素からなる単環基または縮合多環（すなわち、隣接炭素原子対を共有する環）基を示す。アリール基の非限定的な例には、フェニル、ナフタレニルおよびアントラセニルがある。アリール基は、置換または非置換であり得る。置換されるとき、置換基は、例えば、アルキル、ヒドロキシアルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルフォンアミド、ケトエステル、カルボニル、チオカルボニル、エステル、エーテル、カルボキシ、チオカルボキシ、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニリノアルキル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジンおよびアンモニウムイオンであり得る。 “Aryl” refers to a monocyclic or fused polycyclic (ie, ring sharing adjacent pairs of carbon atoms) groups consisting of all carbons with a fully conjugated pi-electron system. Non-limiting examples of aryl groups include phenyl, naphthalenyl and anthracenyl. Aryl groups can be substituted or unsubstituted. When substituted, the substituents are, for example, alkyl, hydroxyalkyl, trihaloalkyl, cycloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclic, halo, hydroxy, alkoxy, aryloxy, thiohydroxy, thioalkoxy, Thioaryloxy, sulfinyl, sulfonyl, cyano, nitro, azo, sulfonamide, ketoester, carbonyl, thiocarbonyl, ester, ether, carboxy, thiocarboxy, thioether, thiocarbamate, urea, thiourea, O-carbamyl, N-carbamyl , O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amide, N-amide, C-carboxy, O-carboxy, sulfonamido, trihalomethanesulfonamide, guanyl, guanylinoalkyl, g Nijino, guanidino alkyl, amino, aminoalkyl, it is a hydrazine and ammonium ions.

用語「ヘテロアリール」基には、例えば、窒素、酸素およびイオウなどの１個または複数個の原子を環（一つまたは複数）に有し、さらには完全共役のπ電子系を有する単環基または縮合環（すなわち、隣接炭素原子対を共有する環）基が含まれる。ヘテロアリール基の非限定的な例には、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、オキサゾール、チアゾール、ピラゾール、ピリジン、ピリミジン、キノリン、イソキノリンおよびプリンが含まれる。ヘテロアリール基は、置換または非置換であり得る。置換されるとき、置換基は、例えば、アルキル、ヒドロキシアルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルフォンアミド、ケトエステル、カルボニル、チオカルボニル、エステル、エーテル、カルボキシ、チオカルボキシ、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニリノアルキル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジンおよびアンモニウムイオンであり得る。 The term “heteroaryl” group includes, for example, monocyclic groups having one or more atoms in the ring (s), such as nitrogen, oxygen and sulfur, and further having a fully conjugated π-electron system Or a fused ring (ie, a ring sharing adjacent pairs of carbon atoms) groups are included. Non-limiting examples of heteroaryl groups include pyrrole, furan, thiophene, imidazole, oxazole, thiazole, pyrazole, pyridine, pyrimidine, quinoline, isoquinoline and purine. A heteroaryl group can be substituted or unsubstituted. When substituted, the substituents are, for example, alkyl, hydroxyalkyl, trihaloalkyl, cycloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclic, halo, hydroxy, alkoxy, aryloxy, thiohydroxy, thioalkoxy, Thioaryloxy, sulfinyl, sulfonyl, cyano, nitro, azo, sulfonamide, ketoester, carbonyl, thiocarbonyl, ester, ether, carboxy, thiocarboxy, thioether, thiocarbamate, urea, thiourea, O-carbamyl, N-carbamyl , O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amide, N-amide, C-carboxy, O-carboxy, sulfonamido, trihalomethanesulfonamide, guanyl, guanylinoalkyl, g Nijino, guanidino alkyl, amino, aminoalkyl, it is a hydrazine and ammonium ions.

「複素脂環」基は、例えば、窒素、酸素およびイオウなどの１個または複数個の原子を環（一つまたは複数）に有する単環基または縮合環基を示す。環はまた、一つまたは複数の二重結合を有することができる。しかしながら、環は完全共役のπ電子系を有しない。複素脂環基は、置換または非置換であり得る。置換されるとき、置換基は、例えば、孤立電子対、アルキル、ヒドロキシアルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルフォンアミド、ケトエステル、カルボニル、チオカルボニル、エステル、エーテル、カルボキシ、チオカルボキシ、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニリノアルキル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジンおよびアンモニウムイオンであり得る。代表的な例はピペリジン、ピペラジン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン、モルホリノなどである。 A “heteroalicyclic” group refers to a monocyclic or fused ring group having in the ring (s) one or more atoms such as, for example, nitrogen, oxygen and sulfur. The ring can also have one or more double bonds. However, the ring does not have a fully conjugated pi-electron system. Heteroalicyclic groups can be substituted or unsubstituted. When substituted, the substituent may be, for example, a lone pair, alkyl, hydroxyalkyl, trihaloalkyl, cycloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclic, halo, hydroxy, alkoxy, aryloxy, thiohydroxy , Thioalkoxy, thioaryloxy, sulfinyl, sulfonyl, cyano, nitro, azo, sulfonamide, ketoester, carbonyl, thiocarbonyl, ester, ether, carboxy, thiocarboxy, thioether, thiocarbamate, urea, thiourea, O-carbamyl , N-carbamyl, O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amide, N-amide, C-carboxy, O-carboxy, sulfonamide, trihalomethanesulfonamide, guanyl, guanylino Alkyl, guanidino, guanidinoalkyl, amino, aminoalkyl, be a hydrazine and ammonium ions. Representative examples are piperidine, piperazine, tetrahydrofuran, tetrahydropyran, morpholino and the like.

「孤立電子対」は結合に関与していない電子対を示す。孤立電子対はＸ，Ｙ，ＺまたはＷが非置換の窒素原子であるときのみ存在する。 A “lone electron pair” refers to an electron pair that is not involved in bonding. A lone pair exists only when X, Y, Z or W is an unsubstituted nitrogen atom.

「ヒドロキシ」基は−ＯＨ基を示す。 A “hydroxy” group refers to an —OH group.

「アゾ」基は−Ｎ＝Ｎ基を示す。 An “azo” group refers to a —N═N group.

「アルコキシ」基は、本明細書中で定義されるように、−Ｏ−アルキル基および−Ｏ−シクロアルキル基の両方を示す。 An “alkoxy” group refers to both an —O-alkyl and an —O-cycloalkyl group, as defined herein.

「アリールオキシ」基は、本明細書中で定義されるように、−Ｏ−アリール基および−Ｏ−ヘテロアリール基の両方を示す。 An “aryloxy” group refers to both an —O-aryl and an —O-heteroaryl group, as defined herein.

「チオヒドロキシ」基は−ＳＨ基を示す。 A “thiohydroxy” group refers to a —SH group.

「チオアルコキシ」基は、本明細書中で定義されるように、−Ｓ−アルキル基および−Ｓ−シクロアルキル基の両方を示す。 A “thioalkoxy” group refers to both an —S-alkyl and an —S-cycloalkyl group, as defined herein.

「チオアリールオキシ」基は、本明細書中で定義されるように、−Ｓ−アリール基および−Ｓ−ヘテロアリール基の両方を示す。 A “thioaryloxy” group refers to both an —S-aryl and an —S-heteroaryl group, as defined herein.

「カルボニル」基は、本明細書中で定義されるように、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ’基（式中、Ｒ’は、水素、アルキル、アルケニル、シクロアルキル、アリール、（環の炭素を通して結合された）ヘテロアリール、または（環の炭素を通して結合された）ヘテロ脂環状である）を示す。 A “carbonyl” group is a group —C (═O) —R ′, where R ′ is hydrogen, alkyl, alkenyl, cycloalkyl, aryl, (ring carbon, as defined herein. A heteroaryl bonded through a ring, or a heteroalicyclic bonded through a ring carbon).

「アルデヒド」基は、Ｒ’が水素であるカルボニル基を示す。 An “aldehyde” group refers to a carbonyl group where R ′ is hydrogen.

「チオカルボニル」基は−Ｃ（＝Ｓ）−Ｒ’基（式中、Ｒ’は本明細書中でＲ’として定義される通りである）を示す。 A “thiocarbonyl” group refers to a —C (═S) —R ′ group, where R ′ is as defined herein for R ′.

「Ｃ−カルボキシ」基は−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ’基（式中、Ｒ’は本明細書中で定義される通りである）を示す。 A “C-carboxy” group refers to a —C (═O) —O—R ′ group, where R ′ is as defined herein.

「Ｏ−カルボキシ」基はＲ’Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−基（式中、Ｒ’は本明細書中で定義される通りである）を示す。 An “O-carboxy” group refers to a R′C (═O) —O— group, where R ′ is as defined herein.

「カルボン酸」基は、Ｒ’が水素であるＣ−カルボキシル基を示す。 A “carboxylic acid” group refers to a C-carboxyl group where R ′ is hydrogen.

「ハロ」基は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を示す。 A “halo” group refers to fluorine, chlorine, bromine or iodine.

「トリハロメチル」基は−ＣＸ_３基（式中、Ｘは、本明細書中で定義されるようなハロ基である）を示す。 A “trihalomethyl” group refers to a —CX ₃ group, where X is a halo group as defined herein.

「トリハロメタンスルホニル」基はＸ_３ＣＳ（＝Ｏ）_２−基（式中、Ｘは、本明細書中で定義されるようなハロ基である）を示す。 A “trihalomethanesulfonyl” group refers to a X ₃ CS (═O) ₂ — group, where X is a halo group as defined herein.

「スルフィニル」基は−Ｓ（＝Ｏ）−Ｒ’基（式中、Ｒ’は本明細書中で定義される通りである）を示す。 A “sulfinyl” group refers to a —S (═O) —R ′ group, where R ′ is as defined herein.

「スルホニル」基は−Ｓ（＝Ｏ）_２−Ｒ’基（式中、Ｒ’は本明細書中で定義される通りである）を示す。 A “sulfonyl” group refers to a —S (═O) ₂ —R ′ group, where R ′ is as defined herein.

「Ｓ−スルホンアミド」基は−Ｓ（＝Ｏ）_２−ＮＲ’Ｒ”基（式中、Ｒ’は本明細書中で定義される通りであり、Ｒ”はＲ’として定義される通りである）を示す。 An “S-sulfonamido” group is a —S (═O) ₂ —NR′R ″ group, where R ′ is as defined herein and R ″ is defined as R ′. Is).

「Ｎ−スルホンアミド」基はＲＲ’Ｓ（＝Ｏ）_２−ＮＲ”基（式中、Ｒ’およびＲ”は本明細書中で定義される通りである）を示す。 An “N-sulfonamido” group refers to a RR ′S (═O) ₂ —NR ″ group, where R ′ and R ″ are as defined herein.

「トリハロメタンスルホンアミド」基はＸ_３ＣＳ（＝Ｏ）_２ＮＲ’−基（式中、Ｒ’およびＸは、本明細書中で定義される通りである）を示す。 A “trihalomethanesulfonamido” group refers to a X ₃ CS (═O) ₂ NR′— group, where R ′ and X are as defined herein.

「Ｏ−カルバミル」基は−ＯＣ（＝Ｏ）−ＮＲ’Ｒ”−基（式中、Ｒ’およびＲ”は本明細書中で定義される通りである）を示す。 An “O-carbamyl” group refers to a —OC (═O) —NR′R ″ — group, where R ′ and R ″ are as defined herein.

「Ｎ−カルバミル」基はＲ”ＯＣ（＝Ｏ）−ＮＲ’−基（式中、Ｒ’およびＲ”は本明細書中で定義される通りである）を示す。 An “N-carbamyl” group refers to an R ″ OC (═O) —NR′— group, where R ′ and R ″ are as defined herein.

「Ｏ−チオカルバミル」基は−ＯＣ（＝Ｓ）−ＮＲ’Ｒ”基（式中、Ｒ’およびＲ”は本明細書中で定義される通りである）を示す。 An “O-thiocarbamyl” group refers to a —OC (═S) —NR′R ″ group, where R ′ and R ″ are as defined herein.

「Ｎ−チオカルバミル」基はＲ”ＯＣ（＝Ｓ）ＮＲ’−基（式中、Ｒ’およびＲ”は本明細書中で定義される通りである）を示す。 An “N-thiocarbamyl” group refers to an R ″ OC (═S) NR′— group, where R ′ and R ″ are as defined herein.

「アミノ」基は−ＮＲ’Ｒ”基（式中、Ｒ’およびＲ”は本明細書中で定義される通りである）を示す。 An “amino” group refers to a —NR′R ″ group, where R ′ and R ″ are as defined herein.

「アミノアルキル」基は本明細書中で定義されるように、アミノ基で置換されたアルキルを示す。好ましくは、アルキルはアミノ基によって停止する。 An “aminoalkyl” group refers to an alkyl substituted with an amino group, as defined herein. Preferably the alkyl is terminated by an amino group.

「Ｃ−アミド」基は−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ’Ｒ”基（式中、Ｒ’およびＲ”は本明細書中で定義される通りである）を示す。 A “C-amido” group refers to a —C (═O) —NR′R ″ group, where R ′ and R ″ are as defined herein.

「Ｎ−アミド」基はＲ’Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ”基（式中、Ｒ’およびＲ”は本明細書中で定義される通りである）を示す。 An “N-amido” group refers to a R′C (═O) —NR ″ group, where R ′ and R ″ are as defined herein.

「尿素」基は−ＮＲ’Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ”Ｒ’’’基（式中、Ｒ’およびＲ”は本明細書中で定義される通りであり、Ｒ’’’はＲ’またはＲ”のいずれかとして定義される通りである）を示す。 A “urea” group is a —NR′C (═O) —NR ″ R ′ ″ group, where R ′ and R ″ are as defined herein, and R ′ ″ is R ′ Or as defined as either R ″).

「グアニジノ」基は−Ｒ’ＮＣ（＝ＮＲ’’’’）−ＮＲ”Ｒ’’’基（式中、Ｒ’，Ｒ”およびＲ’’’は本明細書中で定義される通りであり、Ｒ’’’’はＲ’，Ｒ”またはＲ’’’のいずれかとして定義される通りである）を示す。 A “guanidino” group is a —R′NC (═NR ″ ″) — NR ″ R ′ ″ group, where R ′, R ″ and R ′ ″ are as defined herein. And R ″ ″ is as defined as either R ′, R ″ or R ′ ″).

「グアニジノアルキル」基はグアニジノ基で置換されたアルキル基を示し、これらの用語は本明細書中で定義される通りである。好ましくは、アルキル基はグアニジノ基によって停止する。 A “guanidinoalkyl” group refers to an alkyl group substituted with a guanidino group, as these terms are defined herein. Preferably, the alkyl group is terminated by a guanidino group.

「グアニル」基はＲ’Ｒ”ＮＣ（＝ＮＲ’’’’）−基（式中、Ｒ’，Ｒ”，Ｒ’’’およびＲ’’’’は本明細書中で定義される通りである）を示す。 A “guanyl” group is a R′R ″ NC (═NR ″ ″) — group where R ′, R ″, R ″ ′ and R ″ ″ are as defined herein. Is).

「グアニリノアルキル」基はグアニル基で置換されたアルキル基を示し、これらの用語は本明細書中で定義される通りである。好ましくは、アルキル基はグアニル基によって停止する。 A “guanylinoalkyl” group refers to an alkyl group substituted with a guanyl group, as these terms are defined herein. Preferably, the alkyl group is terminated by a guanyl group.

「ニトロ」基は−ＮＯ_２基を示す。 A “nitro” group refers to a —NO ₂ group.

「シアノ」基は−Ｃ≡Ｎ基を示す。 A “cyano” group refers to a —C≡N group.

用語「ケトエステル」は−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−基を示す。 The term “ketoester” refers to the group —C (═O) —C (═O) —O—.

用語「チオ尿素」は、−ＮＲ’−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＲ”−基（式中、Ｒ’およびＲ”は上述の通り定義される）を示す。 The term “thiourea” refers to a —NR′—C (═S) —NR ″ — group, where R ′ and R ″ are defined as described above.

用語「ヒドラジン」はＮＲ’−ＮＲ”基（式中、Ｒ’およびＲ”は本明細書中で定義される通りである）を示す。 The term “hydrazine” refers to the group NR′—NR ″, where R ′ and R ″ are as defined herein.

用語「アンモニウムイオン」は（ＮＲ’Ｒ”Ｒ’’’）^＋（式中、Ｒ’，Ｒ”およびＲ’’’は本明細書中で定義される通りである）を示す。 The term “ammonium ion” refers to (NR′R ″ R ′ ″) ⁺ , where R ′, R ″ and R ′ ″ are as defined herein.

それ故、本発明の化合物は堅固な構造、即ち芳香環（Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷが全て炭素原子である場合）または複素芳香環（Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷの少なくとも一つが窒素原子である場合）に基づいており、そこに負に帯電した基が結合している。この構造は、立体的に障害されていない負に帯電した基を与えることによってＧＳＫ−３基質の特異的な構造を模倣しかつリン酸基に類似のまたはリン酸基と同一の幾何学的構造を有するので、これらの化合物はＧＳＫ−３活性を阻害することができる。 Therefore, the compound of the present invention has a rigid structure, that is, an aromatic ring (when X, Y, Z and W are all carbon atoms) or a heteroaromatic ring (at least one of X, Y, Z and W is a nitrogen atom). A negatively charged group attached to it). This structure mimics the specific structure of the GSK-3 substrate by providing a sterically unhindered negatively charged group and has a geometric structure similar to or identical to the phosphate group These compounds can inhibit GSK-3 activity.

表現「負に帯電した基」および「正に帯電した基」は、本明細書で用いられる通り、イオン化可能な基に言及し、この基はイオン化により、通常水性媒体中で、少なくとも一つの負または正の静電荷をそれぞれ有する。帯電した基は、本発明の化合物中で、それらのイオン化された形態またはイオン化される前の形態で存在することができる。 The expressions “negatively charged group” and “positively charged group”, as used herein, refer to an ionizable group, which by ionization, usually in at least one negative medium. Or each has a positive electrostatic charge. Charged groups can be present in the compounds of the present invention in their ionized or unionized form.

本発明による負に帯電した基は上で規定したような構造を有し、正に帯電した基は正に帯電したイオン自体（例えばアンモニウムイオン）または正に帯電したイオン（例えば二級、三級または四級アンモニウムイオン、イオン化されたアミノアルキルなど）によって置換されたいかなる基（例えばアルキル、シクロアルキル、アリールなど）であることができる。 A negatively charged group according to the present invention has a structure as defined above, and a positively charged group is a positively charged ion itself (eg, ammonium ion) or a positively charged ion (eg, secondary, tertiary). Or any group (eg, alkyl, cycloalkyl, aryl, etc.) substituted by a quaternary ammonium ion, ionized aminoalkyl, etc.

好ましくは、負に帯電した基はリン酸基であり、かくして上記式中、Ｌはリン原子であり、Ｑ，ＧおよびＤのそれぞれは酸素である。さらに好ましくは、Ｅはヒドロキシである。代わりに、ヒドロキシ基は別の負の静電荷を有するようにイオン化されることもできる。 Preferably, the negatively charged group is a phosphate group, thus, in the above formula, L is a phosphorus atom and each of Q, G and D is oxygen. More preferably, E is hydroxy. Alternatively, the hydroxy group can be ionized to have another negative electrostatic charge.

代わりに、負に帯電した基は、上記式に従って、チオホスフェート基、スルフェートまたはスルホネート基、ボレートまたはボロネート基などであることができる。 Alternatively, the negatively charged group can be a thiophosphate group, a sulfate or sulfonate group, a borate or boronate group, etc., according to the above formula.

負に帯電した基はアルキル基を介してアリール／ヘテロアリール環に結合されることが好ましく、かくして上記式中、Ａはアルキルであり、好ましくは非置換のアルキルであり、より好ましくはメチルである。 The negatively charged group is preferably bonded to the aryl / heteroaryl ring via an alkyl group, thus A in the above formula is alkyl, preferably unsubstituted alkyl, more preferably methyl. .

負に帯電した基をアルキル基を介して環に結合させることにより、負に帯電した基は自由に回転可能な基となる。これは、負に帯電した基が環に直接結合された場合のその堅固さとは対照的である。負に帯電した基の自由回転性は有利である。なぜなら、それは負に帯電した基が酵素の結合部位と容易に相互作用することを可能とするからである。 By attaching a negatively charged group to the ring via an alkyl group, the negatively charged group becomes a freely rotatable group. This is in contrast to its robustness when a negatively charged group is attached directly to the ring. The free rotation of the negatively charged group is advantageous. This is because it allows negatively charged groups to easily interact with the enzyme binding site.

本発明によるリン酸またはいかなる他の負に帯電した基の芳香環または複素芳香環への直接または間接結合は簡単な手順を介して行われ、構造的に単純な化合物を生成するが、限定された数のかかる化合物しか今まで合成されていないということに注意すべきである。これらはピリドキサールリン酸、ベンジルリン酸、フェニルリン酸および限定された数のそれらの誘導体（例えば置換されたピリドキサールリン酸、ベンジルリン酸およびフェニルリン酸）を含む。今までかかる化合物にはいかなる生物学的活性も関連付けられてこなかったので、当業者はかかる化合物を提供する動機付けを与えられなかったと考えられる。しかし、本発明のこの側面による化合物は、上記式によって包含されるいかなる現在公知の化合物も除外する。 Direct or indirect attachment of phosphoric acid or any other negatively charged group according to the present invention to an aromatic or heteroaromatic ring is accomplished via a simple procedure, producing a structurally simple compound, but with limited It should be noted that only a few such compounds have been synthesized so far. These include pyridoxal phosphate, benzyl phosphate, phenyl phosphate and a limited number of their derivatives (eg substituted pyridoxal phosphate, benzyl phosphate and phenyl phosphate). To date, no such biological activity has been associated with such compounds, and it is believed that one skilled in the art was not motivated to provide such compounds. However, the compound according to this aspect of the invention excludes any currently known compound encompassed by the above formula.

上述の通り、本発明の化合物の基本構造は芳香環または複素芳香環である。 As described above, the basic structure of the compound of the present invention is an aromatic ring or a heteroaromatic ring.

しかし、負に帯電した基に隣接する正に帯電した基を一つ有することが好ましく、二つ有することがより好ましいので、環は複素芳香環であることが好ましく、Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷの少なくとも一つが窒素原子であることが好ましい。好ましくは、ＺまたはＷが窒素原子である。 However, it is preferred to have one positively charged group adjacent to a negatively charged group, and more preferably two, so the ring is preferably a heteroaromatic ring, and X, Y, Z and W It is preferable that at least one of is a nitrogen atom. Preferably, Z or W is a nitrogen atom.

さらに好ましくは、Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷの少なくとも二つが窒素原子であり、より好ましくはＸとＹが窒素原子であるかまたはＺとＷが窒素原子であり、さらにより好ましくはＺとＷが窒素原子である。 More preferably, at least two of X, Y, Z and W are nitrogen atoms, more preferably X and Y are nitrogen atoms, or Z and W are nitrogen atoms, even more preferably Z and W are Nitrogen atom.

当該技術分野では周知であるように、芳香環内の窒素原子は通常、中性条件下では塩基性であり、従って、生物学的環境では、それはプロトン化されて正に帯電した＝ＮＨ^＋−基を生成する傾向がある。上述の通り、負に帯電した基に隣接して一つまたは二つのかかる正に帯電した基を有する化合物が好ましい。 As is well known in the art, a nitrogen atom in an aromatic ring is usually basic under neutral conditions, and thus in a biological environment it is protonated and positively charged = NH ⁺ -. There is a tendency to generate groups. As noted above, compounds having one or two such positively charged groups adjacent to a negatively charged group are preferred.

塩基性環内の正に帯電した窒素原子の代わりに、またはこれに追加して、Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４の少なくとも一つは、少なくとも一つのアミノ部分を含む基であることが好ましい。 Instead of or in addition to the positively charged nitrogen atom in the basic ring, at least one of R ₁ , R ₂ , R ₃ and R ₄ is a group containing at least one amino moiety Is preferred.

本明細書で用いられる通り、表現「少なくとも一つのアミノ部分を含む基」は、一以上のアミノ部分を含む上述の基（例えばアルキル、シクロアルキル、アリールなど）に言及し、アミノ部分という用語は本明細書で規定される通りのものである。 As used herein, the expression “group containing at least one amino moiety” refers to a group as described above that contains one or more amino moieties (eg, alkyl, cycloalkyl, aryl, etc.), and the term amino moiety is As defined herein.

少なくとも一つのアミノ部分を含む基の代表例は、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジン、尿素、チオ尿素、グアニル、アミド、カルバミル、グアニジノ、グアニジノアルキルおよびグアニリノアルキルを限定なしに含み、これらの用語は本明細書で規定される通りのものである。 Representative examples of groups containing at least one amino moiety include, without limitation, amino, aminoalkyl, hydrazine, urea, thiourea, guanyl, amide, carbamyl, guanidino, guanidinoalkyl and guanylinoalkyl, these terms are As defined herein.

当該技術分野では周知であるように、遊離アミノ基は通常、中性条件下では塩基性であり、従って、生物学的環境では、それはプロトン化されて正に帯電した−ＮＨ_３ ^＋基を例えば生成する傾向がある。上述の通り、負に帯電した基に隣接して一つまたは二つのかかる正に帯電した基を有する化合物が好ましい。 As is well known in the art, a free amino group is usually basic under neutral conditions, so in a biological environment it can be protonated and positively charged —NH ₃ ⁺ group, for example. Tend to generate. As noted above, compounds having one or two such positively charged groups adjacent to a negatively charged group are preferred.

従って、アミノ部分は容易にプロトン化される部分、即ち、アミノ窒素がかなりの部分負電荷を有する部分としてこの基中に存在することが好ましい。 Thus, it is preferred that the amino moiety be present in this group as a readily protonated moiety, i.e. the amino nitrogen has a substantial partial negative charge.

それ故、少なくとも一つのアミノ部分を含む基の好ましい代表例は、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジン、グアニル、グアニジノ、グアニジノアルキルおよびグアニリノアルキルを限定なしに含み、これらの用語は本明細書で規定される通りのものである。 Thus, preferred representative examples of groups containing at least one amino moiety include, without limitation, amino, aminoalkyl, hydrazine, guanyl, guanidino, guanidinoalkyl and guanylinoalkyl, which terms are defined herein. As it is.

少なくとも一つのアミノ部分を含む基は、本発明の化合物中でそれ自体でまたは正に帯電した基として存在することができ、後者の場合、少なくとも一つのアミノ部分はイオン化されている。 Groups containing at least one amino moiety can be present in the compounds of the invention as such or as a positively charged group, in which case at least one amino moiety is ionized.

上述の通り、本発明による正に帯電した基は、正に帯電した基の代表例が、アンモニウムイオンそれ自体（プロトン化されたアミノ基）およびアンモニウムイオン（上で規定した通りのもの）を担持するいかなる基（例えばアンモニウムイオンで置換されたアルキル、シクロアルキル、またはアリール、グアニジノ、グアニル、ヒドラジンなど）を限定なしに含むようにアンモニウムイオンを含む。 As described above, the positively charged group according to the present invention is such that a representative example of a positively charged group carries ammonium ion itself (protonated amino group) and ammonium ion (as defined above). An ammonium ion to include, without limitation, any group (eg, alkyl, cycloalkyl, or aryl, guanidino, guanyl, hydrazine, etc. substituted with an ammonium ion).

特に好ましいものは、正に帯電したアミノ酸（例えばリジン、アルギニン、ヒスチジン、プロリンおよびそれらの誘導体であり、このうち最初の二つのものが最も好ましい）の側鎖から由来する化学構造を有する正に帯電した基である。 Particularly preferred are positively charged having a chemical structure derived from the side chain of positively charged amino acids (eg, lysine, arginine, histidine, proline and derivatives thereof, the first two being most preferred). It is a group.

「正に帯電したアミノ酸の側鎖から由来する化学構造」により、正に帯電した基がかかる側鎖と類似のまたは同一の化学構造を有することを意味する。 By “chemical structure derived from the side chain of a positively charged amino acid” is meant that the positively charged group has a similar or identical chemical structure to such side chain.

好ましくは、Ｒ_１とＲ_２またはＲ_３とＲ_４は少なくとも一つのアミノ部分を含む基（例えば正に帯電した基）であり、この基は所望により負に帯電した基に隣接する。 Preferably, R ₁ and R ₂ or R ₃ and R ₄ are groups containing at least one amino moiety (eg, a positively charged group), which is optionally adjacent to a negatively charged group.

従って、本発明による好ましい化合物は以下の式を有するものである：

式中、ｍは１〜６の整数であり；Ｑ_１とＱ_２はそれぞれ独立して炭素原子または窒素原子であり；Ｇおよび／またはＫはそれぞれ遊離アミノ部分を含む基（例えば正に帯電した基）である。 Accordingly, preferred compounds according to the invention are those having the following formula:

Wherein m is an integer from 1 to 6; Q ₁ and Q ₂ are each independently a carbon atom or a nitrogen atom; G and / or K are each a group containing a free amino moiety (eg, positively charged) Group).

上述の通り、および以下の実施例部分でさらに証明されるように、多数の化合物が上述の一般式に従って設計され、成功裏に合成され、ＧＳＫ−３阻害活性を発揮することが見出された。これらの化合物の化学構造は図３に示されている。ＧＳＫ−３活性の阻害剤としてのこれらの化合物の効率は図１２および１３に示されており、マウスの脂肪細胞におけるグルコースの取込みに対するそれらの有利な効果は図１４ａおよび１４ｂに示されている。 As described above, and as further demonstrated in the Examples section below, a large number of compounds have been designed according to the above general formula and successfully synthesized and found to exhibit GSK-3 inhibitory activity. . The chemical structures of these compounds are shown in FIG. The efficiency of these compounds as inhibitors of GSK-3 activity is shown in FIGS. 12 and 13, and their beneficial effects on glucose uptake in mouse adipocytes are shown in FIGS. 14a and 14b.

図１２および１３に示されるように、および以下の実施例の部分に示される通り、テストされた化合物のいくつかは正に帯電した基を有していなかった（例えばＧＳ−１およびＧＳ−２）が、これらの化合物はＧＳＫ−３に対して阻害活性を発揮する。しかし、図１２および１３にさらに示されるように、塩基性の環内に窒素原子を有する化合物は一層活性な阻害剤であることが見出され、かくしてかかる基の有利な効果を示す。 As shown in FIGS. 12 and 13 and as shown in the Examples section below, some of the compounds tested did not have positively charged groups (eg, GS-1 and GS-2). However, these compounds exhibit inhibitory activity against GSK-3. However, as further shown in FIGS. 12 and 13, compounds having a nitrogen atom in the basic ring were found to be more active inhibitors and thus show the advantageous effects of such groups.

従って、本発明による追加の好ましい化合物は、上述の一般式に従う化合物であって、式中、Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷのそれぞれが炭素原子であり；Ｒ_３とＲ_４の少なくとも一つがアミノ部分を含む基（例えば正に帯電した基）であり；Ｄが水素またはアルキルである化合物である。より好ましい化合物は、Ｘ，ＹおよびＺのそれぞれが炭素原子であり、Ｗが窒素原子である化合物である。 Accordingly, additional preferred compounds according to the invention are compounds according to the general formula described above, wherein each of X, Y, Z and W is a carbon atom; at least one of R ₃ and R ₄ is an amino moiety A group containing, for example, a positively charged group; a compound in which D is hydrogen or alkyl. More preferred compounds are those in which each of X, Y and Z is a carbon atom and W is a nitrogen atom.

本発明のこの側面の別の好ましい態様では、化合物には疎水性部分が結合されている。 In another preferred embodiment of this aspect of the invention, the compound has a hydrophobic moiety attached.

本発明者によってＰＣＴ／ＩＬ０３／１０１５７に詳述されているように、ＧＳＫ−３ペプチド阻害剤のＮ末端に疎水性部分を結合させることはペプチドの阻害活性を増大させる。 As detailed by the inventor in PCT / IL03 / 10157, attaching a hydrophobic moiety to the N-terminus of a GSK-3 peptide inhibitor increases the inhibitory activity of the peptide.

ペプチド阻害剤中のリン酸化された残基はそのＣ末端に位置するので、負に帯電した基から最も遠い位置に位置する疎水性部分を含む本発明による化合物は、ペプチド阻害剤の場合のように、増大された阻害活性を発揮するだろうと考えられる。 Since the phosphorylated residue in the peptide inhibitor is located at its C-terminus, the compounds according to the invention comprising a hydrophobic moiety located furthest from the negatively charged group are as in the case of peptide inhibitors. In addition, it is believed that it will exhibit increased inhibitory activity.

従って、本発明の別の側面によれば、上述の一般式を有する化合物であって、式中、Ｄが疎水性部分である化合物が提供される。 Therefore, according to another aspect of the present invention, there is provided a compound having the above general formula, wherein D is a hydrophobic moiety.

本明細書中で使用される表現「疎水性成分」は、疎水性によって特徴づけられる任意の物質またはその残基を示す。 The expression “hydrophobic component” as used herein refers to any substance or residue thereof characterized by hydrophobicity.

この分野では広く受け入れられているように、用語「残基」は、別の物質（本明細書中では、本明細書中上記で記載される化合物）に共有結合的に連結される物質の主要な部分を記載する。 As widely accepted in the art, the term “residue” is the primary substance of a substance that is covalently linked to another substance (herein the compounds described hereinabove). I will describe the parts.

従って、本発明による疎水性成分は、好ましくは、疎水性物質の残基であり、好ましくは、本明細書中上記で記載される化合物に共有結合的に結合する。 Thus, the hydrophobic component according to the present invention is preferably a residue of a hydrophobic substance and preferably covalently binds to the compounds described hereinabove.

本発明の疎水性成分が由来し得る疎水性物質の代表的な例には、限定されないが、飽和アルキレン鎖、不飽和アルキレン鎖、アリール、環状アルキルおよび疎水性ペプチド配列が含まれる。 Representative examples of hydrophobic materials from which the hydrophobic component of the invention can be derived include, but are not limited to, saturated alkylene chains, unsaturated alkylene chains, aryls, cyclic alkyls, and hydrophobic peptide sequences.

本明細書中で使用される表現「アルキレン鎖」は、飽和または不飽和であることができる炭化水素の線状鎖を示す。アルキレン鎖は、上述のようにアルキル基に関して置換されているかまたは非置換であることができ、窒素、酸素、イオウ、リンなどの一以上の異種原子（ｈｅｔｅｒｏｇａｍｏｎｓ）によって中断されることができる。アルキレン鎖は、好ましくは少なくとも４個の炭素原子、より好ましくは少なくとも８個の炭素原子、さらに好ましくは少なくとも１０個の炭素原子を含み、２０個まで、２５個まで、さらに３０個までの炭素原子を有する。 The expression “alkylene chain” as used herein refers to a linear chain of hydrocarbons that can be saturated or unsaturated. The alkylene chain can be substituted or unsubstituted with respect to the alkyl group as described above and can be interrupted by one or more heterogamons such as nitrogen, oxygen, sulfur, phosphorus. The alkylene chain preferably comprises at least 4 carbon atoms, more preferably at least 8 carbon atoms, even more preferably at least 10 carbon atoms, up to 20, up to 25 and even up to 30 carbon atoms. Have

従って、本発明の疎水性成分は、本明細書中上記で記載された疎水性物質の残基を含むことができる。 Thus, the hydrophobic component of the present invention can include the residues of the hydrophobic materials described hereinabove.

本発明のこの側面によるアルキレン鎖の好ましい例は、カルボキシル基を含むもの、即ち脂肪酸残基である。 Preferred examples of alkylene chains according to this aspect of the invention are those containing carboxyl groups, ie fatty acid residues.

本発明に関連して使用可能である好ましい脂肪酸には、限定されないが、１０個を超える炭素原子（好ましくは１２個〜２４個の炭素原子）を有する飽和脂肪酸または不飽和脂肪酸が含まれ、例えば、ミリスチン酸、ラウリン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレイン酸、アラキドン酸など（これらに限定されない）が含まれる。 Preferred fatty acids that can be used in connection with the present invention include, but are not limited to, saturated or unsaturated fatty acids having more than 10 carbon atoms (preferably 12 to 24 carbon atoms), for example , Myristic acid, lauric acid, palmitic acid, stearic acid, oleic acid, linoleic acid, linolenic acid, arachidonic acid, and the like.

あるいは、本発明による疎水性成分は、疎水性ペプチド配列を含むことができる。本発明による疎水性ペプチド配列は、好ましくは２個〜１５個のアミノ酸残基を含み、より好ましくは２個〜１０個のアミノ酸残基を含み、より好ましくは２個〜５個のアミノ酸残基を含み、この場合、少なくとも一つのアミノ酸残基が疎水性アミノ酸残基である。 Alternatively, the hydrophobic component according to the invention can comprise a hydrophobic peptide sequence. The hydrophobic peptide sequence according to the present invention preferably comprises 2 to 15 amino acid residues, more preferably 2 to 10 amino acid residues, more preferably 2 to 5 amino acid residues. Wherein at least one amino acid residue is a hydrophobic amino acid residue.

疎水性アミノ酸残基の代表的な例には、限定されないが、本明細書中上記に記載されるように、アラニン残基、システイン残基、グリシン残基、イソロイシン残基、ロイシン残基、バリン残基、フェニルアラニン残基、チロシン残基、メチオニン残基、プロリン残基およびトリプトファン残基、または、それらの任意の修飾体が含まれる。 Representative examples of hydrophobic amino acid residues include, but are not limited to, alanine residues, cysteine residues, glycine residues, isoleucine residues, leucine residues, valine, as described hereinabove. Residues, phenylalanine residues, tyrosine residues, methionine residues, proline residues and tryptophan residues, or any modification thereof are included.

あるいは、疎水性アミノ酸残基は、それに対する疎水性成分の取り込みによって修飾されている任意の他のアミノ酸残基を含むことができる。 Alternatively, a hydrophobic amino acid residue can include any other amino acid residue that has been modified by incorporation of a hydrophobic moiety thereto.

本明細書中で使用される表現「アミノ酸残基」は、本明細書中では交換可能に「アミノ酸」とも呼ばれるが、ポリペプチド鎖内のアミノ酸ユニットを記載する。疎水性ペプチド配列内のアミノ酸残基は天然アミノ酸残基または修飾アミノ酸残基（これらの表現は本明細書中下記で定義される）のいずれでも可能である。 The expression “amino acid residue” as used herein, interchangeably referred to herein as “amino acid”, describes an amino acid unit within a polypeptide chain. The amino acid residues in the hydrophobic peptide sequence can be either natural amino acid residues or modified amino acid residues (the expressions of which are defined herein below).

本明細書中で使用される表現「天然アミノ酸残基」は、自然界に見出される２０個のアミノ酸のいずれかを含むアミノ酸残基（この用語は本明細書中上記で定義される）を記載する。 As used herein, the expression “natural amino acid residue” describes an amino acid residue comprising any of the 20 amino acids found in nature (this term is defined herein above). .

本明細書中で使用される表現「修飾アミノ酸残基」は、その側鎖での修飾を受けた天然アミノ酸を含むアミノ酸残基（この用語は本明細書中上記で定義される）を記載する。そのような修飾はこの分野では広く知られており、これらには、例えば、ヒドロキシ基、アミノ基、カルボキシ基およびリン酸基（これらに限定されない）などの機能性基の側鎖内における取り込みが含まれる。従って、この表現は、別途具体的に示されない限り、アミノ酸アナログ（例えば、ペニシラミン、３−メルカプト−Ｄ−バリンなど）を含む化学修飾されたアミノ酸、天然に存在するタンパク質非形成性のアミノ酸（例えば、ノルロイシンなど）、および、アミノ酸の特徴であることがこの分野で知られている性質を有する化学合成された化合物が含まれる。用語「タンパク質非形成性」は、アミノ酸が、広く知られている代謝経路によって細胞においてタンパク質に取り込まれ得ないことを示す。 As used herein, the expression “modified amino acid residue” describes an amino acid residue comprising a natural amino acid that has been modified in its side chain (this term is defined herein above). . Such modifications are widely known in the art and include, for example, the incorporation of functional groups such as, but not limited to, hydroxy, amino, carboxy and phosphate groups in the side chain. included. Thus, unless expressly indicated otherwise, this expression includes chemically modified amino acids including amino acid analogs (eg, penicillamine, 3-mercapto-D-valine, etc.), naturally occurring non-proteinogenic amino acids (eg, And chemically synthesized compounds having properties known in the art to be characteristic of amino acids. The term “non-protein-forming” indicates that amino acids cannot be taken up by proteins in cells by well-known metabolic pathways.

従って、本明細書中で使用される用語「アミノ酸（単数または複数）」は、２０個の天然に存在するアミノ酸；多くの場合にはインビボで翻訳後修飾されたそのようなアミノ酸（これらには、例えば、ヒドロキシプロリン、ホスホセリンおよびホスホトレオニンが含まれる）；および他の非通常型アミノ酸（これには、２−アミノアジピン酸、ヒドロキシリシン、イソデスモシン、ノルバリン、ノルロイシンおよびオルニチンが含まれるが、これらに限定されない）を包含することが理解される。さらに、用語「アミノ酸」は、この用語が本明細書中で定義されるように少なくとも一つのさらなるアミノ酸にペプチド結合またはペプチド結合アナログによって連結されるＤ−アミノ酸およびＬ−アミノ酸の両方を包含する。 Thus, as used herein, the term “amino acid (s)” refers to the 20 naturally occurring amino acids; such amino acids that are often post-translationally modified in vivo (including For example, hydroxyproline, phosphoserine and phosphothreonine); and other unusual amino acids, including 2-aminoadipic acid, hydroxylysine, isodesmosine, norvaline, norleucine and ornithine It is understood to include (but not limited to). Furthermore, the term “amino acid” encompasses both D-amino acids and L-amino acids linked by a peptide bond or peptide bond analog to at least one additional amino acid as the term is defined herein.

疎水性部分は増大された予測不可能な活性を提供するので、疎水性部分で置換された公知の化合物（フェニルリン酸やピリドキサールリン酸など）も本発明のこの側面の範囲に含まれる。 Since the hydrophobic moiety provides increased unpredictable activity, known compounds substituted with a hydrophobic moiety (such as phenyl phosphate and pyridoxal phosphate) are also within the scope of this aspect of the invention.

上で議論し、さらに以下の実施例部分で証明されるように、上述の本発明の化合物はＧＳＫ−３基質の三次元構造に基づいて設計されており、それ故、ＧＳＫ−３活性の潜在的な基質競合的阻害剤である。 As discussed above and further demonstrated in the Examples section below, the compounds of the present invention described above are designed based on the three-dimensional structure of the GSK-3 substrate, and therefore have the potential for GSK-3 activity. Substrate competitive inhibitor.

従って、本発明の別の側面によれば、ＧＳＫ−３の活性を阻害する方法が提供され、この方法は、ＧＳＫ−３を発現する細胞を上述の化合物の阻害効果的な量と接触させることによって達成される。 Thus, according to another aspect of the present invention, there is provided a method of inhibiting the activity of GSK-3, which comprises contacting a cell expressing GSK-3 with an inhibitory effective amount of the aforementioned compound. Achieved by:

本明細書中で使用される用語「阻害効果的な量」は、ＧＳＫ−３の活性を阻害するために十分である、この分野で知られているような検討事項によって決定される量である。活性は、ＧＳＫ−３のリン酸化および／または自己リン酸化活性であり得る。 The term “inhibitory effective amount” as used herein is an amount determined by considerations as known in the art that is sufficient to inhibit the activity of GSK-3. . The activity may be phosphorylation and / or autophosphorylation activity of GSK-3.

本発明のこの側面による方法は、細胞をインビトロおよび／またはインビボで化合物と接触させることによって達成することができる。この方法はさらに、本明細書中上記で記載されるように、細胞を、ＧＳＫ−３の活性を変化させることができるさらなる活性な成分と接触させることによって達成することができる。 The method according to this aspect of the invention can be achieved by contacting a cell with a compound in vitro and / or in vivo. This method can be further achieved by contacting the cell with an additional active ingredient capable of altering the activity of GSK-3, as described hereinabove.

ＧＳＫ−３活性の阻害は、インスリン活性をインビボで増大させるための一つの方法である。ＧＳＫ−３の大きい活性は無傷の細胞におけるインスリン作用を低下する（Ｅｌｄａｒ−Ｆｉｎｋｅｌｍａｎ他、１９９７）。この低下は、インスリン受容体基質−１（ＩＲＳ−１）のセリン残基がＧＳＫ−３によりリン酸化されることから生じている。ＩＩ型糖尿病（インスリン非依存性糖尿病、ＮＩＤＤＭ）患者において行われた研究では、グリコーゲンシンターゼ活性がこれらの患者では顕著に低下していること、および、インスリンによるプロテインキナーゼＢ（ＰＫＢ）（ＧＳＫ−３の上流側の調節因子）の低下した活性化もまた検出されることが示される（Ｓｈｕｌｍａｎ他（１９９０）；Ｎｉｋｏｕｌｉｎａ他（１９９７）；Ｃｒｏｓｓ他（１９９５））。高脂肪食により誘導される糖尿病および肥満に罹りやすいマウスは、精巣上体の脂肪組織におけるＧＳＫ−３活性が著しく増大している（Ｅｌｄａｒ−Ｆｉｎｋｅｌｍａｎ他、１９９９）。増大したＧＳＫ−３活性が細胞において発現することにより、グリコーゲンシンターゼ活性の抑制が生じていた（Ｅｌｄａｒ−Ｆｉｎｋｅｌｍａｎ他、１９９６）。 Inhibition of GSK-3 activity is one way to increase insulin activity in vivo. The large activity of GSK-3 reduces insulin action in intact cells (Eldar-Finkelman et al., 1997). This decrease results from the phosphorylation of the serine residue of insulin receptor substrate-1 (IRS-1) by GSK-3. Studies conducted in patients with type II diabetes (non-insulin dependent diabetes mellitus, NIDDM) show that glycogen synthase activity is significantly reduced in these patients and that protein kinase B (PKB) by insulin (GSK-3) It has been shown that reduced activation of (upstream regulators) is also detected (Shulman et al. (1990); Nikoulina et al. (1997); Cross et al. (1995)). Mice susceptible to diabetes and obesity induced by a high-fat diet have significantly increased GSK-3 activity in epididymal adipose tissue (Eldar-Finkelman et al., 1999). Increased GSK-3 activity was expressed in cells resulting in suppression of glycogen synthase activity (Eldar-Finkelman et al., 1996).

従って、ＧＳＫ−３活性の阻害は、インスリン依存性の状態においてインスリン活性を増大させるための有用な方法を提供する。従って、本発明の別の側面によれば、インスリンシグナル伝達を強化する方法が提供され、この方法は、インスリン応答性細胞を、本発明の化合物の、本明細書中上記で定義されるような効果的な量と接触させることによって達成される。 Thus, inhibition of GSK-3 activity provides a useful method for increasing insulin activity in an insulin dependent state. Thus, according to another aspect of the present invention, there is provided a method for enhancing insulin signaling, wherein the method comprises treating an insulin responsive cell as defined herein above for a compound of the present invention. Achieved by contacting with an effective amount.

本明細書中で使用される表現「インスリンシグナル伝達を強化する」には、インスリン受容体の下流側成分のリン酸化の増大、および、非治療の対象または細胞におけるグルコース取り込みと比較されるようなグルコース取り込み速度の増大が含まれる。 As used herein, the expression “enhance insulin signaling” includes increased phosphorylation of downstream components of the insulin receptor and as compared to glucose uptake in untreated subjects or cells. Increasing the rate of glucose uptake is included.

本発明のこの側面による方法は、細胞をインビトロまたはインビボにおいて本発明の化合物と接触させることによって達成されることができ、細胞をインスリンとさらに接触させることによっても達成されることができる。 The method according to this aspect of the invention can be achieved by contacting a cell with a compound of the present invention in vitro or in vivo, and can also be accomplished by further contacting the cell with insulin.

本発明の化合物の投与から生じるインビボでのインスリンシグナル伝達の強化は、臨床的な終点としてモニターすることができる。原理的には、患者におけるインスリン強化を観察するための最も容易な方法は、グルコース負荷試験を行うことである。絶食後、グルコースが患者に与えられ、血液循環からのグルコースの消失（すなわち、細胞によるグルコース取り込み）が、この分野で広く知られているアッセイによって測定される。グルコースクリアランスの遅い速度（健康な対象と比較したとき）により、インスリン耐性が示される。インスリン耐性患者に対する阻害剤の投与は、非治療の患者と比較したとき、グルコース取り込み速度を増大させる。阻害剤は、より長い期間にわたってインスリン耐性患者に投与することができ、血液循環におけるインスリン濃度、グルコース濃度およびレプチン濃度（通常、これらは高い）が測定され得る。グルコース濃度の低下は、阻害剤がインスリン作用を強化したことを示す。インスリン濃度およびレプチン濃度の低下は単独では、インスリン作用の強化を必ずしも示さないことがあるが、むしろ、他の機構による疾患状態の改善を示す。 The enhancement of in vivo insulin signaling resulting from administration of the compounds of the present invention can be monitored as a clinical endpoint. In principle, the easiest way to observe insulin enhancement in a patient is to perform a glucose tolerance test. After fasting, glucose is given to the patient and the disappearance of glucose from the blood circulation (ie glucose uptake by the cells) is measured by assays well known in the art. The slow rate of glucose clearance (when compared to healthy subjects) indicates insulin resistance. Administration of inhibitors to insulin resistant patients increases the rate of glucose uptake when compared to untreated patients. Inhibitors can be administered to insulin resistant patients over longer periods of time, and insulin concentration, glucose concentration and leptin concentration (usually high) in the blood circulation can be measured. A decrease in glucose concentration indicates that the inhibitor has enhanced insulin action. Decreased insulin and leptin levels alone may not necessarily show enhanced insulin action, but rather show improvement in disease state by other mechanisms.

本発明の化合物は、ＧＳＫ−３に関連する任意の生物学的状態を治療するために効果的に利用することができる。 The compounds of the present invention can be effectively utilized to treat any biological condition associated with GSK-3.

従って、本発明の別の側面によれば、ＧＳＫ−３活性に関連する生物学的状態を治療する方法が提供される。本発明のこの側面によるこの方法は、本明細書中上記で記載される本発明の化合物の治療効果的な量をその必要性のある対象に投与することによって達成される。 Thus, according to another aspect of the invention, a method of treating a biological condition associated with GSK-3 activity is provided. This method according to this aspect of the invention is achieved by administering to a subject in need thereof a therapeutically effective amount of a compound of the invention as described hereinabove.

本明細書中で使用される表現「ＧＳＫ−３活性に関連する生物学的状態」は、正常なレベルまたは異常なレベルであっても、効果的なＧＳＫ−３活性が同定される任意の生物学的または医学的な状態または障害を包含する。そのような状態または障害は、ＧＳＫ−３活性によって引き起こされ得るか、または、ＧＳＫ−３活性によって単に特徴づけられ得る。状態がＧＳＫ−３活性に関連するということは、その状態の何らかの側面がＧＳＫ−３に活性に突き止められ得ることを意味する。 As used herein, the expression “biological condition associated with GSK-3 activity” refers to any organism for which effective GSK-3 activity is identified, even at normal or abnormal levels. Includes a medical or medical condition or disorder. Such a condition or disorder can be caused by GSK-3 activity or simply characterized by GSK-3 activity. That a state is associated with GSK-3 activity means that some aspect of that state can be located in GSK-3 activity.

本明細書中において、用語「治療する」は、状態または障害の進行を妨げること、実質的に阻害すること、遅くすること、または逆向きにすること、あるいは、状態または障害の臨床的症状を実質的に改善すること、あるいは、状態または障害の臨床的症状の出現を実質的に妨げることを包含する。これらの効果は、本明細書中下記において詳しく記載されるように、例えば、ＩＩ型糖尿病に関してグルコース取り込み速度の低下によって、または、神経変性障害に関してニューロン細胞死を停止させることによって明らかにされ得る。 As used herein, the term “treating” refers to preventing, substantially inhibiting, slowing, or reversing the progression of a condition or disorder, or the clinical symptoms of a condition or disorder. It includes substantially improving or substantially preventing the appearance of clinical symptoms of the condition or disorder. These effects can be manifested, for example, by reducing glucose uptake rates for type II diabetes or by stopping neuronal cell death for neurodegenerative disorders, as described in detail herein below.

本明細書中で使用される用語「投与する」は、本発明の化合物と、状態または障害によって影響を受けた細胞とを、化合物がこれらの細胞におけるＧＳＫ−３活性に影響を及ぼし得るような様式で一緒にするための方法を記述する。本発明の化合物は、医学的に許容され得る任意の経路によって投与することができる。投与経路は、治療されている疾患、状態または傷害に依存し得る。可能な投与経路には、注射、非経口経路、例えば、血管内、静脈内、動脈内、皮下、筋肉内、腫瘍内、腹腔内、心室内、上皮内または脳室内などの経路、ならびに、経口、鼻腔、眼、直腸または局所的な経路よるもの、または吸入によるものが含まれる。持続放出投与もまた、デポー剤注射または侵食性インプラントのような手段によって、本発明において特に含まれる。投与はまた、関節内、直腸内、腹腔内、筋肉内、皮下であり得るか、またはエアロゾル吸入剤によって行われ得る。治療が全身的であるとき、化合物は、本明細書中下記において詳しく記載されるように、標的細胞内への化合物の導入を達成するために好適な組成物で提供される限り、経口的または非経口的（例えば、静脈内、筋肉内、皮下、眼窩内、嚢内、腹腔内または槽内など）に投与することができる。 As used herein, the term “administering” refers to a compound of the invention and a cell affected by a condition or disorder, such that the compound can affect GSK-3 activity in these cells. Describes how to join together in style. The compounds of the present invention can be administered by any medically acceptable route. The route of administration may depend on the disease, condition or injury being treated. Possible routes of administration include injection, parenteral routes such as intravascular, intravenous, intraarterial, subcutaneous, intramuscular, intratumoral, intraperitoneal, intraventricular, intraepithelial or intraventricular, as well as oral Nasal, ocular, rectal or topical routes, or by inhalation. Sustained release administration is also specifically included in the present invention by such means as depot injection or erodible implants. Administration can also be intra-articular, rectal, intraperitoneal, intramuscular, subcutaneous, or can be effected by aerosol inhalation. When treatment is systemic, the compound can be administered orally or as long as provided in a suitable composition to achieve introduction of the compound into the target cell, as described in detail herein below. It can be administered parenterally (eg, intravenously, intramuscularly, subcutaneously, intraorbitally, intracapsularly, intraperitoneally or intracisternally).

本明細書中で使用される表現「治療効果的な量」は、ＧＳＫ−３活性に関連する状態の進行を妨げるか、実質的に阻害するか、遅くするか、または逆向きにするために、あるいは、そのような状態の臨床的症状を実質的に改善するために、あるいは、そのような状態の臨床的症状の出現を実質的に妨げるために十分である、個体に投与される量を記述する。ＧＳＫ−３活性はＧＳＫ−３キナーゼ活性であり得る。阻害量は、ＧＳＫ−３活性の阻害を測定することによって直接的に決定することができ、または、例えば、所望される効果が、ＧＳＫ−３を含む経路におけるＧＳＫ−３活性の下流側の活性に対する効果である場合、阻害は、下流側の効果を測定することによって測定することができる。従って、例えば、ＧＳＫ−３の阻害がグリコーゲンシンターゼのリン酸化の停止を生じさせる場合、化合物の効果には、インスリン依存的経路またはインスリンに関係した経路に対する効果が含まれることがあり、化合物は、グルコース取り込みが最適なレベルに増大するところに対して投与することができる。また、ＧＳＫ−３の阻害が、さらなる生物学的活性のために要求されるタンパク質（例えば、タウタンパク質）のリン酸化の非存在を生じさせる場合、化合物は、リン酸化されたタウタンパク質の多量体化が実質的に停止されるまで投与することができる。従って、ＧＳＫ−３活性の阻害は、部分的には、ＧＳＫ−３活性を伴う阻害された経路またはプロセスの性質に依存し、また、ＧＳＫ−３活性の阻害が特定の生物学的状況において有する効果に依存する。 As used herein, the expression “therapeutically effective amount” is intended to prevent, substantially inhibit, slow or reverse the progression of a condition associated with GSK-3 activity. Or an amount administered to an individual that is sufficient to substantially improve the clinical symptoms of such condition or to substantially prevent the appearance of clinical symptoms of such condition Describe. The GSK-3 activity can be GSK-3 kinase activity. The amount of inhibition can be determined directly by measuring inhibition of GSK-3 activity, or, for example, the desired effect is activity downstream of GSK-3 activity in a pathway involving GSK-3. Inhibition can be measured by measuring downstream effects. Thus, for example, where inhibition of GSK-3 results in termination of glycogen synthase phosphorylation, the effect of the compound may include an effect on an insulin-dependent pathway or an insulin-related pathway, It can be administered where glucose uptake increases to an optimal level. Alternatively, if inhibition of GSK-3 results in the absence of phosphorylation of a protein (eg, tau protein) required for further biological activity, the compound is a multimer of phosphorylated tau protein. Can be administered until crystallization is substantially stopped. Thus, inhibition of GSK-3 activity depends, in part, on the nature of the inhibited pathway or process involving GSK-3 activity, and inhibition of GSK-3 activity has in certain biological situations. Depends on effect.

阻害量を構成する化合物の量は、化合物およびその効力、体内における化合物の半減期、治療されている疾患または生物学的状態の進行速度、治療用量または投与パターンに対する状態の応答性、配合、医学的状況の主治医による評価、および他の関連要因、ならびに一般には、患者の健康状態、および他の検討事項（例えば、他の治療剤の以前の投与、または、化合物の阻害活性に対する影響を有する何らかの治療剤の同時投与、または、ＧＳＫ−３活性に対する影響を有する何らかの治療剤の同時投与、またはＧＳＫ−３活性により媒介される経路など）のようなパラメーターに依存して変化する。阻害量は、日常的な試験によって決定され得る比較的広い範囲に含まれることが予想される。 The amount of a compound that constitutes an inhibitory amount depends on the compound and its potency, the half-life of the compound in the body, the rate of progression of the disease or biological condition being treated, the responsiveness of the condition to the therapeutic dose or pattern of administration, formulation, medicine Evaluation of the clinical situation by the attending physician, and other relevant factors, and generally the patient's health and other considerations (eg, prior administration of other therapeutic agents or any effect on the inhibitory activity of the compound) Such as co-administration of therapeutic agents, or co-administration of any therapeutic agents that have an effect on GSK-3 activity, or pathways mediated by GSK-3 activity). The amount of inhibition is expected to fall within a relatively broad range that can be determined by routine testing.

本明細書中上記において詳しく議論されるように、ＧＳＫ−３は様々な生物学的経路に関与しており、従って、本発明のこの側面による方法は、本明細書中下記において詳しく記載されるように、様々な生物学的状態の治療において使用することができる。 As discussed in detail hereinabove, GSK-3 is involved in various biological pathways, and thus the method according to this aspect of the invention is described in detail herein below. As such, it can be used in the treatment of various biological conditions.

ＧＳＫ−３はインスリンシグナル伝達経路に関与しており、従って、一例において、本発明のこの側面による方法は、何らかのインスリン依存性の状態を治療するために使用することができる。 GSK-3 is involved in the insulin signaling pathway, and thus in one example, the method according to this aspect of the invention can be used to treat any insulin dependent condition.

ＧＳＫ−３阻害剤は、前脂肪細胞の脂肪細胞への分化を阻害することが知られているので、別の例では、本発明のこの側面による方法は、肥満を治療するために使用することができる。 In another example, the method according to this aspect of the invention may be used to treat obesity because GSK-3 inhibitors are known to inhibit the differentiation of preadipocytes into adipocytes. Can do.

さらに別の例において、本発明のこの側面による方法は、糖尿病を治療するために、特にインスリン非依存性糖尿病を治療するために使用することができる。 In yet another example, the method according to this aspect of the invention can be used to treat diabetes, particularly to treat non-insulin dependent diabetes.

糖尿病は、インスリン不足またはインスリン耐性または両者を一般には伴う多数の発症要因による炭水化物代謝の不均一な一次障害である。Ｉ型（若年性）インスリン依存性糖尿病は、内因性インスリン分泌能力をほとんど有しない患者に存在する。これらの患者は極端な高血糖症を発症し、差し迫った生存のための外因性インスリン治療に完全に依存している。ＩＩ型または成人発症型またはインスリン非依存性の糖尿病は、ある程度の内因性インスリン分泌能力を保持する患者に存在する。しかし、その大多数はインスリン欠乏性およびインスリン耐性の両方である。合衆国における全糖尿病患者の約９５％はインスリン非依存性のＩＩ型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）を有しており、従って、これは、医学的問題の大部分を占める糖尿病形態である。インスリン耐性はＮＩＤＤＭの根本的な特有の特徴であり、この代謝性欠陥により、糖尿病症候群がもたらされる。インスリン耐性は、インスリン受容体の不十分な発現、低下したインスリン結合親和性、またはインスリンシグナル伝達経路に沿ったいずれかの段階における何らかの異常のためであり得る（米国特許第５８６１２６６号を参照のこと）。 Diabetes is a heterogeneous primary disorder of carbohydrate metabolism due to a number of developmental factors commonly associated with insulin deficiency or insulin resistance or both. Type I (juvenile) insulin-dependent diabetes exists in patients who have little endogenous insulin secretory capacity. These patients develop extreme hyperglycemia and are completely dependent on exogenous insulin treatment for immediate survival. Type II or adult-onset or non-insulin dependent diabetes exists in patients who retain some endogenous insulin secretory capacity. However, the majority are both insulin deficient and insulin resistant. About 95% of all diabetic patients in the United States have insulin-independent type II diabetes (NIDDM), and this is therefore the form of diabetes that accounts for the majority of medical problems. Insulin resistance is a fundamental unique feature of NIDDM, and this metabolic defect results in diabetes syndrome. Insulin resistance can be due to insufficient expression of the insulin receptor, decreased insulin binding affinity, or some abnormality at any stage along the insulin signaling pathway (see US Pat. No. 5,861,266). ).

本発明の化合物は、下記のように、ＩＩ型糖尿病患者においてＩＩ型糖尿病を治療するために使用することができる。この場合、治療効果的な量の化合物が患者に投与され、臨床的マーカー（例えば、血糖濃度）がモニターされる。本発明の化合物はさらに、下記のように、対象においてＩＩ型糖尿病を防止するために使用することができる。この場合、予防効果的な量の化合物が患者に投与され、臨床的マーカー（例えば、ＩＲＳ−１のリン酸化）がモニターされる。 The compounds of the present invention can be used to treat type II diabetes in type II diabetic patients as described below. In this case, a therapeutically effective amount of the compound is administered to the patient and clinical markers (eg, blood glucose concentration) are monitored. The compounds of the present invention can further be used to prevent type II diabetes in a subject, as described below. In this case, a prophylactically effective amount of the compound is administered to the patient and clinical markers (eg, phosphorylation of IRS-1) are monitored.

糖尿病の治療は標準的な医学的方法によって決定される。糖尿病治療の目標は、糖濃度を、安全に可能であるように正常値の近くに低下させることである。一般に設定されている目標は、食事前において８０〜１２０ミリグラム／デシリットル（ｍｇ／ｄｌ）であり、かつ、就寝時において１００〜１４０ｍｇ／ｄｌである。特定の医師は、他の要因、例えば、患者がどのくらいの頻度で低血糖反応を有するかなどに依存して、患者について異なる目標を設定することがある。有用な医学的検査には、血糖濃度を測定するための患者の血液および尿に対する検査、グリケート化ヘモグロビン濃度（ＨｂＡ_１ｃ；過去２ヶ月〜３ヶ月にわたる平均血中グルコース濃度の指標、正常範囲は４％〜６％である）に対する検査、コレステロールおよび脂肪の濃度に対する検査、ならびに、尿タンパク質濃度に対する検査が含まれる。そのような検査は、当業者に知られている標準的な検査である（例えば、ＡｍｅｒｉｃａｎＤｉａｂｅｔｅｓＡｓｏｃｃｉａｔｉｏｎ（１９９８）を参照のこと）。成功する治療プログラムはまた、糖尿病性の眼疾患、腎臓疾患または神経疾患に関するプログラムを受けている患者がほとんどいないことによって決定され得る。 Treatment of diabetes is determined by standard medical methods. The goal of diabetes treatment is to reduce the sugar concentration to near normal values in a safe manner. A generally set target is 80-120 milligrams / deciliter (mg / dl) before meals and 100-140 mg / dl at bedtime. A particular physician may set different goals for a patient depending on other factors, such as how often the patient has a hypoglycemic response. Useful medical tests include tests on the patient's blood and urine to measure blood glucose levels, glycated hemoglobin levels (HbA _1c ; an indicator of average blood glucose levels over the past 2 to 3 months, a normal range of 4 % -6%), cholesterol and fat levels, and urine protein levels. Such tests are standard tests known to those skilled in the art (see, for example, American Diabetes Association (1998)). Successful treatment programs can also be determined by the fact that few patients are receiving programs for diabetic eye disease, kidney disease or neurological disease.

従って、本発明のこの側面による方法の一つの特定の態様において、インスリン非依存性糖尿病を治療する方法が提供される。この場合、患者はインスリン非依存性糖尿病の初期段階において診断される。本発明の化合物は腸溶性カプセルに配合される。患者は、インスリンシグナル伝達経路を刺激する目的のために一錠の錠剤を各食後に服用することが指示され、それにより、グルコース代謝が、外因性インスリンの投与が必要な状態を未然に防止するレベルに制御される。 Accordingly, in one particular embodiment of the method according to this aspect of the invention, a method of treating non-insulin dependent diabetes is provided. In this case, the patient is diagnosed at an early stage of non-insulin dependent diabetes. The compounds of the present invention are formulated in enteric capsules. Patients are instructed to take one tablet after each meal for the purpose of stimulating the insulin signaling pathway, so that glucose metabolism obviates conditions that require the administration of exogenous insulin Controlled by level.

本明細書中上記でさらに議論されるように、および本願と同日に出願された、同じ発明者による「グリコーゲンシンターゼキナーゼ−３阻害剤」と題するＰＣＴ出願で証明されているように、ＧＳＫ−３阻害は情動障害に関連する。従って、別の例において、本発明のこの側面による方法は、単極型障害（例えば、うつ病）および双極性障害（例えば、躁うつ病）などの情動障害を治療するために使用することができる。 As further discussed hereinabove and as demonstrated in a PCT application entitled “Glycogen Synthase Kinase-3 Inhibitor” filed on the same day as this application by the same inventor, GSK-3 Inhibition is associated with affective disorders. Thus, in another example, the method according to this aspect of the invention may be used to treat affective disorders such as unipolar disorders (eg, depression) and bipolar disorders (eg, manic depression). it can.

ＧＳＫ−３はまた、神経変性障害および神経変性疾患の病理発生における重要な関与体であると考えられるので、本発明のこの側面による方法はさらに、様々なそのような障害および疾患を治療するために使用することができる。 Since GSK-3 is also considered to be an important participant in the pathogenesis of neurodegenerative disorders and neurodegenerative diseases, the method according to this aspect of the present invention is further adapted to treat a variety of such disorders and diseases. Can be used for

一例において、ＧＳＫ−３の阻害は、ニューロン細胞死を停止させることをもたらすので、本発明のこの側面による方法は、ニューロン細胞死を引き起こす事象から生じる神経変性障害を治療するために使用することができる。そのような事象は、例えば、脳虚血、発作、外傷性脳傷害または細菌感染であり得る。 In one example, inhibition of GSK-3 results in stopping neuronal cell death, so the method according to this aspect of the invention can be used to treat a neurodegenerative disorder resulting from an event that causes neuronal cell death. it can. Such an event can be, for example, cerebral ischemia, stroke, traumatic brain injury or bacterial infection.

別の例では、ＧＳＫ−３活性は様々な中枢神経系の障害および神経変性疾患に関係しているので、本発明のこの側面による方法は、様々な慢性の神経変性疾患、例えば、アルツハイマー病、ハンチングトン病、パーキンソン病、ＡＩＤＳ痴呆、筋萎縮性側索硬化症（ＡＭＬ）および多発硬化症（これらに限定されない）などを治療するために使用することができる。 In another example, since GSK-3 activity is associated with various central nervous system disorders and neurodegenerative diseases, the method according to this aspect of the invention may be used for various chronic neurodegenerative diseases such as Alzheimer's disease, It can be used to treat Huntington's disease, Parkinson's disease, AIDS dementia, amyotrophic lateral sclerosis (AML), multiple sclerosis, and the like.

本明細書中上記で議論されるように、ＧＳＫ−３活性はアルツハイマー病の病理発生に特に関係している。従って、本発明のこの側面による方法の一つの代表的な態様において、アルツハイマー病患者を治療する方法が提供される。この場合、アルツハイマー病と診断された患者に、ＧＳＫ−３により媒介されるタウの過剰リン酸化を阻害する本発明の化合物が、血液脳関門（ＢＢＢ）を超える配合物に調製されて投与される。患者は、患者の脳細胞から単離されたタンパク質を、疾患の存在および進行を特徴づけるために知られているＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルでのタウのリン酸化形態の存在について定期的に分析することによって、タウのリン酸化多量体についてモニターされる。化合物の投薬量は、タウタンパク質のリン酸化形態の存在を減少させるために必要に応じて調節される。 As discussed hereinabove, GSK-3 activity is particularly implicated in the pathogenesis of Alzheimer's disease. Accordingly, in one exemplary embodiment of a method according to this aspect of the invention, a method of treating an Alzheimer's disease patient is provided. In this case, to a patient diagnosed with Alzheimer's disease, a compound of the invention that inhibits GSK-3 mediated hyperphosphorylation of tau is prepared and administered in a formulation above the blood brain barrier (BBB). . Patients can regularly analyze proteins isolated from their brain cells for the presence of phosphorylated forms of tau on SDS-PAGE gels known to characterize the presence and progression of the disease. Monitored for tau phosphorylated multimers. The dosage of the compound is adjusted as necessary to reduce the presence of the phosphorylated form of tau protein.

ＧＳＫ−３はまた、統合失調症などの精神病的障害に関しても関係している。従って、本発明のこの側面による方法はさらに、統合失調症などの精神病的な疾患または障害を治療するために使用することができる。 GSK-3 has also been implicated for psychotic disorders such as schizophrenia. Thus, the method according to this aspect of the invention can further be used to treat psychotic diseases or disorders such as schizophrenia.

本発明のこの側面による方法はさらに、ＧＳＫ−３の活性を変化させることができる一つまたは複数のさらなる活性な成分を対象に同時投与することによって達成することができる。 The method according to this aspect of the invention can further be achieved by co-administering to the subject one or more additional active ingredients capable of altering the activity of GSK-3.

本明細書中で使用される「同時投与する」は、本発明による化合物を、さらなる活性な成分（これはまた、活性な薬剤または治療剤として本明細書中では示される）との組合せで投与することを記述する。さらなる活性な薬剤は、患者の状態を治療するために有用である任意の治療剤であり得る。同時投与は、例えば、化合物および治療剤の混合物を投与することによって同時的であり得るか、または、化合物および活性な薬剤を短い期間内などで別々に投与することによって達成することができる。同時投与にはまた、化合物と、別の治療剤の一つまたは複数との連続した投与が含まれる。さらなる治療剤（一つまたは複数）は化合物の前または後に投与することができる。投薬治療は単回用量スケジュールまたは多回用量スケジュールであり得る。 As used herein, “co-administer” refers to administering a compound according to the present invention in combination with a further active ingredient, which is also indicated herein as an active agent or therapeutic agent. Describe what to do. The additional active agent can be any therapeutic agent that is useful for treating the patient's condition. Co-administration can be simultaneous, for example, by administering a mixture of the compound and the therapeutic agent, or can be accomplished by administering the compound and the active agent separately, such as within a short period of time. Simultaneous administration also includes sequential administration of the compound and one or more of the other therapeutic agents. The additional therapeutic agent (s) can be administered before or after the compound. Dosage treatment can be a single dose schedule or a multiple dose schedule.

さらなる活性な成分はインスリンであり得る。 The further active ingredient can be insulin.

好ましくは、さらなる活性な成分は、本発明によるさらなる活性な成分が、本発明の化合物とは異なる任意のＧＳＫ−３阻害剤、例えばＷＯ０１／４９７０９、ＰＣＴ／ＩＬ０３／０１０５７および米国特許出願公報第２００２０１４７４６Ａ１に記述されているような短いペプチドＧＳＫ−３阻害剤であり得るようにＧＳＫ−３の活性を阻害することができる。あるいは、ＧＳＫ−３阻害剤は例えば、リチウム、バルプロ酸および／またはリチウムイオンであり得る。 Preferably, the further active ingredient is any GSK-3 inhibitor, such as WO 01/49709, PCT / IL 03/01057 and US patent application publications, wherein the further active ingredient according to the invention is different from the compound of the invention. The activity of GSK-3 can be inhibited such that it can be a short peptide GSK-3 inhibitor as described in US2002014746A1. Alternatively, the GSK-3 inhibitor can be, for example, lithium, valproic acid and / or lithium ion.

あるいは、さらなる活性な成分は、ＧＳＫ−３の発現をダウンレギュレーションすることができる活性な成分であり得る。 Alternatively, the further active ingredient may be an active ingredient that can down regulate the expression of GSK-3.

ＧＳＫ−３の発現をダウンレギュレーションする薬剤は、ｍＲＮＡの濃度またはタンパク質の濃度のいずれかにおいてＧＳＫ−３合成に影響を及ぼす（減速させる）か、またはＧＳＫ−３分解に影響を及ぼす（促進させる）任意の薬剤を示す。例えば、ＧＳＫ−３の発現をダウンレギュレーションするために設計される小さい干渉性ポリヌクレオチド分子を、本発明のこの態様によるさらなる活性な成分として使用することができる。 Agents that down-regulate GSK-3 expression affect (slow down) GSK-3 synthesis, either at the level of mRNA or protein, or affect (promote) GSK-3 degradation. Indicates any drug. For example, small interfering polynucleotide molecules designed to down-regulate GSK-3 expression can be used as a further active ingredient according to this aspect of the invention.

ＧＳＫ−３の発現をダウンレギュレーションすることができる小さい干渉性ポリヌクレオチド分子についての一例が、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）の以前に記載された機構（ＨｕｔｖａｇｎｅｒおよびＺａｍｏｒｅ（２００２）、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．ＧｅｎｅｔｃｓａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、１２：２２５〜２３２）を介してｍＲＮＡの配列特異的な分解を行わせる二重鎖オリゴヌクレオチドを含む、例えば、Ｍｕｎｓｈｉ他（ＭｕｎｓｈｉＣＢ、ＧｒａｅｆｆＲ、ＬｅｅＨＣ、ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ、２００２（Ｄｅｃ、２０）：２７７（５１）：４９４５３〜８）によって記載されるモルホリノアンチセンスオリゴヌクレオチドなどの小さい干渉性ＲＮＡまたはｓｉＲＮＡである。 An example of a small interfering polynucleotide molecule capable of down-regulating GSK-3 expression is the previously described mechanism of RNA interference (RNAi) (Hutvagner and Zamore (2002), Curr. Opin. Genecs and Development). 12: 225-232), including double-stranded oligonucleotides that allow sequence-specific degradation of mRNA, eg, Munshi et al. (Munshi CB, Graeff R, Lee HC, J Biol Chem, 2002 (Dec, 20): 277 (51): 49453-8), which are small interfering RNAs or siRNAs such as morpholino antisense oligonucleotides.

本明細書中で使用される表現「二重鎖オリゴヌクレオチド」は、一つの自己相補性核酸鎖または少なくとも二つの相補的な核酸鎖のいずれかによって形成されるオリゴヌクレオチド構造またはその模倣体を示す。本発明の「二重鎖オリゴヌクレオチド」は、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）、ＤＮＡ−ＲＮＡハイブリッド、一本鎖ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）、単離されたＲＮＡ（すなわち、部分精製されたＲＮＡ、本質的には純粋なＲＮＡ）、合成ＲＮＡ、および組換え産生ＲＮＡから構成され得る。 As used herein, the expression “double-stranded oligonucleotide” refers to an oligonucleotide structure formed by either one self-complementary nucleic acid strand or at least two complementary nucleic acid strands or a mimetic thereof. . A “double-stranded oligonucleotide” of the present invention is a double-stranded RNA (dsRNA), a DNA-RNA hybrid, a single-stranded RNA (ssRNA), an isolated RNA (ie, partially purified RNA, essentially Can be composed of pure RNA), synthetic RNA, and recombinantly produced RNA.

好ましくは、本発明の特異的な小さい干渉性二重鎖オリゴヌクレオチドは、リボ核酸から主に構成されるオリゴヌクレオチドである。 Preferably, the specific small interfering duplex oligonucleotide of the present invention is an oligonucleotide composed mainly of ribonucleic acid.

ＲＮＡ干渉を媒介することができる二重鎖オリゴヌクレオチドを作製するための説明がｗｗｗ．ａｍｂｉｏｎ．ｃｏｍに示される。 Descriptions for making double stranded oligonucleotides capable of mediating RNA interference are available at www. ambion. com.

従って、本発明による小さい干渉性ポリヌクレオチド分子はＲＮＡｉ分子（ＲＮＡ干渉分子）であり得る。 Thus, small interfering polynucleotide molecules according to the present invention can be RNAi molecules (RNA interference molecules).

あるいは、小さい干渉性ポリヌクレオチド分子は、本明細書中下記においてさらに記載されるＧＳＫ−３特異的なアンチセンス分子またはリボザイム分子などのオリゴヌクレオチドであり得る。 Alternatively, the small interfering polynucleotide molecule can be an oligonucleotide, such as a GSK-3-specific antisense molecule or ribozyme molecule, further described herein below.

アンチセンス分子は、それぞれが少なくとも１個のヌクレオチドから構成される二つ以上の化学的に異なる領域を含有するオリゴヌクレオチドである。これらのオリゴヌクレオチドは、ヌクレアーゼ分解に対する増大した抵抗性、増大した細胞取り込み、および／または、標的ポリヌクレオチドに対する増大した結合親和性をオリゴヌクレオチドに付与するようにオリゴヌクレオチドが修飾されている少なくとも一つの領域を典型的には含有する。オリゴヌクレオチドのさらなる領域は、ＲＮＡ：ＤＮＡハイブリッドまたはＲＮＡ：ＲＮＡハイブリッドを切断することができる酵素のための基質として役立ち得る。そのような酵素についての一例が、ＲＮＡ：ＤＮＡ二重鎖のＲＮＡ鎖を切断する細胞エンドヌクレアーゼであるＲＮａｓｅＨである。従って、ＲＮａｓｅＨの活性化はＲＮＡ標的の切断をもたらし、それにより、遺伝子発現のオリゴヌクレオチド阻害の効率を大きく高める。その結果として、匹敵し得る結果を、多くの場合、キメラなオリゴヌクレオチドが使用されたとき、同じ標的領域にハイブリダイゼーションするホスホロチオエートデオキシオリゴヌクレオチドと比較して、より短いオリゴヌクレオチドを用いて得ることができる。ＲＮＡ標的の切断は、ゲル電気泳動によって、また、必要な場合には、この分野で知られている会合核酸ハイブリダイゼーション技術によって、常法により検出することができる。 Antisense molecules are oligonucleotides that contain two or more chemically distinct regions each composed of at least one nucleotide. These oligonucleotides have at least one modified oligonucleotide so as to confer to the oligonucleotide increased resistance to nuclease degradation, increased cellular uptake, and / or increased binding affinity for the target polynucleotide. The region typically contains. Additional regions of the oligonucleotide can serve as substrates for enzymes that can cleave RNA: DNA hybrids or RNA: RNA hybrids. An example for such an enzyme is RNase H, a cellular endonuclease that cleaves the RNA strand of an RNA: DNA duplex. Thus, activation of RNase H results in cleavage of the RNA target, thereby greatly increasing the efficiency of oligonucleotide inhibition of gene expression. As a result, comparable results can often be obtained with shorter oligonucleotides when chimeric oligonucleotides are used compared to phosphorothioate deoxyoligonucleotides that hybridize to the same target region. it can. Cleavage of the RNA target can be detected by conventional methods by gel electrophoresis and, if necessary, by associated nucleic acid hybridization techniques known in the art.

本発明のアンチセンス分子は、上記で記載されたように、二つ以上のオリゴヌクレオチド（すなわち、修飾されたオリゴヌクレオチド）の複合構造体として形成され得る。そのようなハイブリッド構造体の調製を教示する代表的な米国特許には、限定されないが、米国特許第５０１３８３０号、同第５１４９７９７号、同第５２２０００７号、同第５２５６７７５号、同第５３６６８７８号、同第５４０３７１１号、同第５４９１１３３号、同第５５６５３５０号、同第５６２３０６５号、同第５６５２３５５号、同第５６５２３５６号および同第５７００９２２号が含まれる（これらのそれぞれは全体が本明細書中に参考として組み込まれる）。 The antisense molecules of the present invention can be formed as a composite structure of two or more oligonucleotides (ie modified oligonucleotides) as described above. Representative US patents that teach the preparation of such hybrid structures include, but are not limited to, US Pat. Nos. 5,013,830, 5,149,977, 5,222,0007, 5,256,775, 5,366,878, No. 5403711, No. 5491133, No. 5565350, No. 5623065, No. 5562355, No. 5562356 and No. 5700922, each of which is incorporated herein by reference in its entirety. Incorporated).

リボザイム分子は、ｍＲＮＡの切断による遺伝子発現の配列特異的な阻害のためにますます使用されている。数個のリボザイム配列を本発明のオリゴヌクレオチドに融合することができる。これらの配列には、限定されないが、凝固経路における重要な成分であるＶＥＧＦ−Ｒ（血管内皮増殖因子受容体）の形成を特異的に阻害するＡＮＧＩＯＺＹＭＥ、および、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）ＲＮＡを選択的に破壊するために設計されたリボザイムのＨＥＰＴＡＺＹＭＥ（ＲｙｂｏｚｙｍｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ、ＷＥＢホームページ）が含まれる。 Ribozyme molecules are increasingly being used for sequence-specific inhibition of gene expression by cleavage of mRNA. Several ribozyme sequences can be fused to the oligonucleotides of the invention. These sequences include, but are not limited to, ANGIOZYME, which specifically inhibits the formation of VEGF-R (vascular endothelial growth factor receptor), an important component in the coagulation pathway, and hepatitis C virus (HCV) RNA. Includes the ribozyme HEPTAZYME (Rybozyme Pharmaceuticals, Incorporated, WEB homepage) designed for selective disruption.

さらにあるいは、本発明による小さい干渉性ポリヌクレオチド分子は、ＤＮＡザイムであり得る。 Additionally or alternatively, the small interfering polynucleotide molecule according to the present invention may be a DNAzyme.

ＤＮＡザイムは一本鎖の触媒作用核酸分子である。ＤＮＡザイムについての一般的なモデル（“１０−２３”モデル）が提案されている。“１０−２３”ＤＮＡザイムは、それぞれが７個〜９個のデオキシリボヌクレオチドからなる二つの基質認識ドメインが隣接する、１５個のデオキシリボヌクレオチドからなる触媒作用ドメインを有する。このタイプのＤＮＡザイムはその基質ＲＮＡをプリン：ピリミジン接合部において効果的に切断することができる（Ｓａｎｔｏｒｏ，Ｓ．Ｗ．＆Ｊｏｙｃｅ，Ｇ．Ｆ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ，Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ１９９；ＤＮＡザイムの総説については、Ｋｈａｃｈｉｇｉａｎ，ＬＭＣｕｒｒＯｐｉｎＭｏｌＴｈｅｒ２００２：４：１１９〜２１を参照のこと）。 DNAzymes are single-stranded catalytic nucleic acid molecules. A general model for the DNAzyme (“10-23” model) has been proposed. The “10-23” DNAzyme has a catalytic domain consisting of 15 deoxyribonucleotides, flanked by two substrate recognition domains, each consisting of 7-9 deoxyribonucleotides. This type of DNAzyme can effectively cleave its substrate RNA at the purine: pyrimidine junction (Santoro, SW & Joyce, GF Proc. Natl, Acad. Sci. USA 199; DNAzyme (See Khachigian, LM Curr Opin Mol Ther 2002: 4: 119-21).

一本鎖および二本鎖の標的切断部位を認識する操作された合成ＤＮＡザイムの構築および増幅の例が米国特許第６，３２６，１７４号（Ｊｏｙｃｅ他）に開示されている。ヒトウロキナーゼ受容体に向けられた類似する設計のＤＮＡザイムが、最近、ウロキナーゼ受容体の発現を阻害し、結腸ガン細胞の転移をインビボで阻害することに成功したことが観測された（Ｉｔｏｈ他、２００２、アブストラクト４０９、ＡｎｎＭｅｅｔｉｎｇＡｍＳｏｃＧｅｎＴｈｅｒｗｗｗ．ａｓｇｔ．ｏｒｇ）。別の適用において、ｂｃｒ−ａｂｌガン遺伝子に対して相補的なＤＮＡザイムは、白血病細胞におけるガン遺伝子の発現を阻害し、ＣＭＬおよびＡＬＬの場合において自家骨髄移植における再発率を小さくすることに成功した。 An example of the construction and amplification of engineered synthetic DNAzymes that recognize single and double stranded target cleavage sites is disclosed in US Pat. No. 6,326,174 (Joyce et al.). A similarly designed DNAzyme directed to the human urokinase receptor has recently been observed to successfully inhibit the expression of the urokinase receptor and inhibit colon cancer cell metastasis in vivo (Itoh et al., 2002, Abstract 409, Ann Meeting Am Soc Gen Ther www.asgt.org). In another application, a DNAzyme complementary to the bcr-abl oncogene successfully inhibited oncogene expression in leukemia cells and reduced relapse rates in autologous bone marrow transplants in the case of CML and ALL. .

本発明の教示に従って設計されたオリゴヌクレオチドは、この分野で知られている任意のオリゴヌクレオチド合成法（例えば、酵素合成または固相合成など）に従って作製することができる。固相合成を実行するための器具および試薬が、例えば、ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓから市販されている。そのような合成のための任意の他の手段もまた用いることができる。オリゴヌクレオチドの実際の合成は十分に当業者の能力の範囲内である。 Oligonucleotides designed in accordance with the teachings of the present invention can be made according to any oligonucleotide synthesis method known in the art, such as enzymatic synthesis or solid phase synthesis. Instruments and reagents for performing solid phase synthesis are commercially available from, for example, Applied Biosystems. Any other means for such synthesis can also be used. The actual synthesis of the oligonucleotide is well within the ability of one skilled in the art.

非常に効率的な治療剤である一方で、また、治療的適用では、多くの場合、効果的な量の活性な成分を治療されている個体に投与することが要求されるので、本発明の化合物は、好ましくは、治療されている個体に対する化合物の投与を容易にするために、また、おそらくは、標的化された組織または細胞への活性な成分の進入を容易にするために医薬的に許容され得るキャリアをさらに含む医薬組成物において、有効成分として含まれる。 While being a highly efficient therapeutic agent, and also in therapeutic applications, it is often required to administer an effective amount of the active ingredient to the individual being treated, The compound is preferably pharmaceutically acceptable to facilitate administration of the compound to the individual being treated, and possibly to facilitate entry of the active ingredient into the targeted tissue or cells. In a pharmaceutical composition further comprising a carrier that can be included as an active ingredient.

従って、本発明のなおさらなる側面によれば、有効成分としての本発明の化合物と、医薬的に許容され得るキャリアとを含む医薬組成物が提供される。 Thus, according to yet a further aspect of the present invention there is provided a pharmaceutical composition comprising a compound of the present invention as an active ingredient and a pharmaceutically acceptable carrier.

以降、表現「医薬的に許容され得るキャリア」および表現「生理学的に許容され得るキャリア」は、対象に対する著しい刺激を生じさせず、投与された化合物の生物学的な活性および性質を阻害しないキャリアまたは希釈剤を示す。キャリアの非限定的な例には、ポリエチレングリコール、生理的食塩水、有機溶媒と水とのエマルションおよび混合物がある。 Hereinafter, the expressions “pharmaceutically acceptable carrier” and “physiologically acceptable carrier” do not cause significant irritation to a subject and do not inhibit the biological activity and properties of the administered compound. Or a diluent is shown. Non-limiting examples of carriers include polyethylene glycol, saline, emulsions and mixtures of organic solvents and water.

本明細書中において、用語「賦形剤」は、化合物の投与をさらに容易にするために医薬組成物に添加される不活性な物質を示す。賦形剤の非限定的な例には、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々な糖およびタイプのデンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、植物油およびポリエチレングリコールが含まれる。 As used herein, the term “excipient” refers to an inert substance added to a pharmaceutical composition to further facilitate administration of a compound. Non-limiting examples of excipients include calcium carbonate, calcium phosphate, various sugars and types of starch, cellulose derivatives, gelatin, vegetable oils and polyethylene glycols.

医薬的に許容され得るキャリアにはさらに、他の薬剤、例えば、吸収遅延剤、抗菌剤、抗真菌剤、酸化防止剤、結合剤、緩衝化剤、増量剤、カチオン性脂質剤、着色剤、希釈剤、崩壊剤、分散剤、乳化剤、賦形剤、矯味矯臭剤、滑剤、等張剤、リポソーム、マイクロカプセル、溶媒、甘味剤、粘度改変剤、湿潤化剤および皮膚浸透増強剤など（これらに限定されない）が含まれ得る。 The pharmaceutically acceptable carrier further includes other agents such as absorption retardants, antibacterial agents, antifungal agents, antioxidants, binders, buffering agents, bulking agents, cationic lipid agents, coloring agents, Diluents, disintegrants, dispersants, emulsifiers, excipients, flavoring agents, lubricants, isotonic agents, liposomes, microcapsules, solvents, sweeteners, viscosity modifiers, wetting agents, skin penetration enhancers, etc. Can be included).

薬物の配合および投与のための様々な技術が“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ”（ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，最新版）に見出され得る（これは参考として本明細書中に組み込まれる）。 Various techniques for drug formulation and administration can be found in “Remington's Pharmaceutical Sciences” (Mack Publishing Co., Easton, PA, latest edition), which is incorporated herein by reference. .

好適な投与経路には、例えば、経口送達、直腸送達、経粘膜送達、経皮送達、腸管送達または非経口送達（これには、筋肉内注射、皮下注射および髄内注射、ならびに、クモ膜下注射、直接的な脳室内注射、静脈内注射、腹腔内注射、鼻内注射または眼内注射が含まれる）が含まれ得る。 Suitable routes of administration include, for example, oral delivery, rectal delivery, transmucosal delivery, transdermal delivery, intestinal delivery or parenteral delivery (including intramuscular, subcutaneous and intramedullary injection, and subarachnoid injection). Injection, direct intraventricular injection, intravenous injection, intraperitoneal injection, intranasal injection or intraocular injection).

本発明の医薬組成物は、この分野で十分に知られている様々なプロセスによって、例えば、混合、溶解、造粒、糖衣錠作製、研和、乳化、カプセル化、包括化または凍結乾燥の従来のプロセスによって製造することができる。 The pharmaceutical composition of the present invention can be obtained by various processes well known in the art, for example, conventional mixing, dissolving, granulating, dragee preparation, grinding, emulsifying, encapsulating, entrapping or lyophilizing. It can be manufactured by a process.

従って、本発明に従って使用される医薬組成物は、医薬品として使用され得る調製物への化合物の加工を容易にする賦形剤および補助剤を含む一つまたは複数の医薬的に許容され得るキャリアを使用して従来の様式で配合することできる。組成物は、エアロゾル送達形態物、水溶液、ボーラス剤、カプセル、コロイド、遅延放出、デポー剤、溶解可能な粉末、滴剤、エマルション、侵食性インプラント、ゲル、ゲルカプセル、顆粒剤、注射溶液、摂取可能な溶液、吸入可能な溶液、ローション、オイル溶液、ピル、坐薬、膏薬、懸濁物、持続放出、シロップ、錠剤、チンキ剤、局所用クリーム、経皮送達形態物などの送達形態物で配合することができる。適正な配合は、選ばれた投与経路に依存する。 Accordingly, a pharmaceutical composition used in accordance with the present invention comprises one or more pharmaceutically acceptable carriers containing excipients and adjuvants that facilitate the processing of the compound into a preparation that can be used as a medicament. It can be used and formulated in a conventional manner. Composition is aerosol delivery form, aqueous solution, bolus, capsule, colloid, delayed release, depot, dissolvable powder, drop, emulsion, erodible implant, gel, gel capsule, granule, injection solution, ingestion Formulated in delivery forms such as possible solutions, inhalable solutions, lotions, oil solutions, pills, suppositories, salves, suspensions, sustained release, syrups, tablets, tinctures, topical creams, transdermal delivery forms can do. Proper formulation is dependent upon the route of administration chosen.

注射の場合、本発明の化合物は、有機溶媒（例えば、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）を伴うか、または伴わない水溶液において、好ましくは生理学的に適合し得る緩衝液（例えば、ハンクス溶液、リンゲル溶液、または生理学的な生理的食塩水緩衝液など）において配合することができる。経粘膜投与の場合、浸透剤が配合において使用される。そのような浸透剤はこの分野では一般に知られている。 For injection, the compounds of the present invention are preferably in physiologically compatible buffers (eg, Hanks's solution, Ringer's solution) in aqueous solutions with or without organic solvents (eg, propylene glycol, polyethylene glycol, etc.). Or in physiological saline buffer, etc.). For transmucosal administration, penetrants are used in the formulation. Such penetrants are generally known in the art.

経口投与の場合、化合物は、化合物をこの分野で広く知られている医薬的に許容され得るキャリアと組み合わせることによって容易に配合され得る。そのようなキャリアは、本発明の化合物が、患者によって経口摂取される錠剤、ピル、糖衣錠、カプセル、液剤、ゲル、シロップ、スラリー剤および懸濁物などとして配合されることを可能にする。経口使用される薬理学的調製物を、固体の賦形剤を使用し、得られた混合物を場合により粉砕し錠剤または糖衣錠コアを得るために、所望する場合には好適な補助剤を添加した後、顆粒の混合物を加工して作製することができる。好適な賦形剤には、特に、ラクトース、スクロース、マンニトールまたはソルビトールを含む糖などの充填剤；セルロース調製物、例えば、トウモロコシデンプン、コムギデンプン、コメデンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ナトリウムカルボメチルセルロースなど；および／またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）などの生理学的に許容され得るポリマーがある。所望する場合には、架橋されたポリビニルピロリドン、寒天、またはアルギン酸もしくはその塩（例えば、アルギン酸ナトリウムなど）などの崩壊剤を加えることができる。 For oral administration, the compounds can be readily formulated by combining the compounds with pharmaceutically acceptable carriers that are widely known in the art. Such carriers allow the compounds of the present invention to be formulated as tablets, pills, dragees, capsules, solutions, gels, syrups, slurries and suspensions, etc. that are taken orally by the patient. For orally used pharmacological preparations, solid excipients are used, and the resulting mixture is optionally ground to obtain tablets or dragee cores, with suitable adjuvants added if desired Later, the mixture of granules can be processed and made. Suitable excipients include fillers such as sugars including lactose, sucrose, mannitol or sorbitol; cellulose preparations such as corn starch, wheat starch, rice starch, potato starch, gelatin, tragacanth gum, methylcellulose, hydroxy There are physiologically acceptable polymers such as propylmethylcellulose, sodium carbomethylcellulose; and / or polyvinylpyrrolidone (PVP). If desired, disintegrating agents can be added, such as cross-linked polyvinyl pyrrolidone, agar, or alginic acid or a salt thereof such as sodium alginate.

糖衣錠コアには、好適なコーティングが施される。この目的のために、高濃度の糖溶液を使用することができ、この場合、糖溶液は、場合により、アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カルボポールゲル、ポリエチレングリコール、二酸化チタン、ラッカー溶液および好適な有機溶媒または溶媒混合物を含有し得る。色素または顔料を、活性な成分の量を明らかにするために、または活性な成分の量の種々の組合せを特徴づけるために、錠剤または糖衣錠コーティングに加えることができる。 Dragee cores are provided with suitable coatings. For this purpose, high-concentration sugar solutions can be used, in which case the sugar solution is optionally gum arabic, talc, polyvinylpyrrolidone, carbopol gel, polyethylene glycol, titanium dioxide, lacquer solution and suitable Organic solvents or solvent mixtures. Dyestuffs or pigments can be added to the tablets or dragee coatings to characterize the quantity of active ingredient or to characterize different combinations of active ingredient quantities.

経口使用され得る医薬組成物には、ゼラチンから作製されたプッシュ・フィット型カプセル、ならびに、ゼラチンおよび可塑剤（例えば、グリセロールまたはソルビトールなど）から作製された軟いシールされたカプセルが含まれる。プッシュ・フィット型カプセルは、充填剤（例えば、ラクトースなど）、結合剤（例えば、デンプンなど）、滑剤（例えば、タルクまたはステアリン酸マグネシウムなど）および場合により安定化剤との混合で有効成分を含有することができる。軟カプセルでは、有効成分を好適な液体（例えば、脂肪油、流動パラフィンまたは液状のポリエチレングリコールなど）に溶解または懸濁させることができる。また、安定化剤を加えることができる。経口投与される配合物はすべて、選ばれた投与経路について好適な投薬形態でなければならない。 Pharmaceutical compositions that can be used orally include push-fit capsules made of gelatin, as well as soft, sealed capsules made of gelatin and a plasticizer, such as glycerol or sorbitol. Push-fit capsules contain the active ingredients in admixture with fillers (eg lactose etc.), binders (eg starch etc.), lubricants (eg talc or magnesium stearate) and optionally stabilizers can do. In soft capsules, the active ingredients can be dissolved or suspended in suitable liquids such as fatty oils, liquid paraffin or liquid polyethylene glycols. In addition, stabilizers can be added. All formulations for oral administration should be in dosages suitable for the chosen route of administration.

口内投与の場合、組成物は、従来の様式で配合された錠剤またはトローチの形態をとることができる。 For buccal administration, the composition can take the form of tablets or lozenges formulated in a conventional manner.

吸入による投与の場合、本発明による化合物は、好適な噴射剤（例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタンまたは二酸化炭素）の使用により加圧パックまたはネブライザーからのエアロゾルスプレー提示物の形態で都合よく送達される。加圧されたエアロゾルの場合、投薬量単位が、計量された量を送達するためのバルブを備えることによって決定され得る。吸入器または吹き入れ器において使用される、例えば、ゼラチン製のカプセルおよびカートリッジで、成分および好適な粉末基剤（例えば、ラクトースまたはデンプンなど）の粉末混合物を含有するカプセルおよびカートリッジを配合することができる。 For administration by inhalation, the compounds according to the invention are suitable for aerosol spray presentations from pressurized packs or nebulizers by the use of suitable propellants (eg dichlorodifluoromethane, trichlorofluoromethane, dichlorotetrafluoroethane or carbon dioxide). Conveniently delivered in form. In the case of a pressurized aerosol, the dosage unit can be determined by providing a valve to deliver a metered amount. Capsules and cartridges used in inhalers or insufflators, eg capsules and cartridges made of gelatin, containing a powder mixture of the ingredients and a suitable powder base (eg lactose or starch etc.) it can.

本明細書中に記載される化合物は、例えば、ボーラス注射または連続注入による非経口投与のために配合することができる。注射用配合物は、場合により保存剤が添加された、例えば、アンプルまたは多回用量容器における単位投薬形態で提供され得る。組成物は、油性ビヒクルまたは水性ビヒクルにおける懸濁物または溶液剤またはエマルションにすることができ、また、懸濁化剤、安定化剤および／または分散化剤などの配合剤を含有することができる。 The compounds described herein can be formulated for parenteral administration, eg, by bolus injection or continuous infusion. Injectable formulations may be presented in unit dosage form, eg, in ampoules or multi-dose containers, optionally with preservatives added. The composition can be a suspension or solution or emulsion in an oily vehicle or an aqueous vehicle, and can contain compounding agents such as suspending, stabilizing and / or dispersing agents. .

非経口投与される医薬組成物には、水溶性形態での化合物の水溶液が含まれる。また、化合物の懸濁物を適切な油性の注射用懸濁物として調製することができる。好適な親油性の溶媒またはビヒクルには、脂肪油（例えば、ゴマ油など）、または合成脂肪酸エステル（例えば、オレイン酸エチルなど）、トリグリセリドまたはリポソームが含まれる。水性の注射用懸濁物は、懸濁物の粘度を増大させる物質、例えば、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ソルビトールまたはデキストランなどを含有することができる。場合により、懸濁物はまた、高濃度溶液の調製を可能にするために活性な成分の溶解性を増大させる好適な安定化剤または薬剤を含有することができる。 Pharmaceutical compositions for parenteral administration include aqueous solutions of the compounds in water-soluble form. Alternatively, suspensions of the compounds can be prepared as appropriate oily injection suspensions. Suitable lipophilic solvents or vehicles include fatty oils (such as sesame oil) or synthetic fatty acid esters (such as ethyl oleate), triglycerides or liposomes. Aqueous injection suspensions may contain substances that increase the viscosity of the suspension, such as sodium carboxymethyl cellulose, sorbitol, or dextran. Optionally, the suspension may also contain suitable stabilizers or agents that increase the solubility of the active ingredients to allow for the preparation of highly concentrated solutions.

あるいは、化合物は、好適なビヒクル（例えば、無菌のパイロジェン非含有水）を使用前に用いて構成される粉末形態にすることができる。 Alternatively, the compound can be in the form of a powder configured with a suitable vehicle (eg, sterile pyrogen-free water) prior to use.

本発明の化合物はまた、例えば、カカオ脂または他のグリセリドなどの従来の座薬基剤を使用して、座薬または停留浣腸剤などの直腸用組成物に配合することができる。 The compounds of the present invention can also be formulated in rectal compositions such as suppositories or retention enemas, using, eg, conventional suppository bases such as cocoa butter or other glycerides.

本明細書中に記載される医薬組成物はまた、ゲル相キャリアまたは賦形剤の好適な固体を含むことができる。そのようなキャリアまたは賦形剤の例には、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々な糖、デンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、およびポリマー（例えば、ポリエチレングリコールなど）が含まれるが、これらに限定されない。 The pharmaceutical compositions described herein can also include a suitable solid of gel phase carrier or excipient. Examples of such carriers or excipients include, but are not limited to, calcium carbonate, calcium phosphate, various sugars, starches, cellulose derivatives, gelatin, and polymers such as polyethylene glycol.

本発明に関連した使用のために好適な医薬組成物には、化合物が、その意図された目的を達成するために効果的な量で含有される組成物が含まれる。より具体的には、治療効果的な量は、治療されている対象の状態の症状に影響を及ぼすために効果的であるか、または、治療されている対象の生存を延ばすために効果的である、化合物の量を意味する。 Pharmaceutical compositions suitable for use in connection with the present invention include compositions wherein the compound is contained in an amount effective to achieve its intended purpose. More specifically, a therapeutically effective amount is effective to affect the symptoms of the condition of the subject being treated or effective to prolong the survival of the subject being treated. It means the amount of a compound.

治療効果的な量の決定は、特に本明細書中に提供される詳細な開示に照らして、十分に当業者の能力の範囲内である。 Determination of a therapeutically effective amount is well within the capability of those skilled in the art, especially in light of the detailed disclosure provided herein.

本発明の方法において使用される任意の活性な成分について、治療効果的な量または用量は、最初は細胞培養物および動物における活性アッセイから推定することができる。そのような情報は、ヒトにおける有用な用量をより正確に決定するために使用することができる。 For any active ingredient used in the method of the invention, the therapeutically effective amount or dose can be estimated initially from activity assays in cell cultures and animals. Such information can be used to more accurately determine useful doses in humans.

投薬量は、用いられる投薬形態物および利用される投与経路に依存して変化し得る。正確な配合、投与経路および投薬量は、患者の状態を考慮して個々の医師によって選ぶことができる（例えば、Ｆｉｎｇｌ他、１９７５、“ＴｈｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢａｓｉｓｏｆＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ”、第１章、１頁を参照のこと）。 The dosage can vary depending on the dosage form employed and the route of administration utilized. The exact formulation, route of administration and dosage can be chosen by the individual physician in view of the patient's condition (see, eg, Fingl et al., 1975, “The Pharmaceutical Basis of Therapeutics”, Chapter 1, page 1. )

本発明の組成物は、所望される場合には、化合物を含有する一つ以上の単位投薬形態物を含有し得る、ＦＤＡ承認キットなどのパックまたはディスペンサーデバイスで提供され得る。パックは、例えば、金属箔またはプラスチック箔を含むことができ、例えば、ブリスターパックなどである。パックまたはディスペンサーデバイスには、投与のための説明書が添付され得る。パックまたはディスペンサーにはまた、医薬品の製造、使用または販売を規制する政府当局により定められた形式で容器に付けられた通知が伴い得る。この場合、そのような通知は、組成物の形態またはヒトもしくは動物への投与の当局による承認を反映する。そのような通知は、例えば、処方薬物についての米国食品医薬品局により承認されたラベル書きであり得るか、または承認された製品添付文書であり得る。適合し得る医薬用キャリアに配合された本発明の化合物を含む組成物はまた、適応状態を治療するために、調製され、適切な容器に入れられ、かつ表示され得る。ラベルに示される好適な状態には、例えば、本明細書中上記で示される、ＧＳＫ−３活性に関連する生物学的状態のいずれかが含まれ得る。 The compositions of the invention can be provided in packs or dispenser devices, such as FDA approved kits, which can contain one or more unit dosage forms containing the compound, if desired. The pack can include, for example, metal foil or plastic foil, such as a blister pack. The pack or dispenser device can be accompanied by instructions for administration. The pack or dispenser can also be accompanied by a notice attached to the container in a form stipulated by a government authority that regulates the manufacture, use or sale of the pharmaceutical product. In this case, such notification reflects the form of the composition or approval by the authorities for administration to humans or animals. Such notice can be, for example, a label approved by the US Food and Drug Administration for prescription drugs, or an approved product package insert. Compositions comprising a compound of the invention formulated in a compatible pharmaceutical carrier can also be prepared, placed in a suitable container and labeled to treat the indication. Suitable conditions indicated on the label may include, for example, any of the biological conditions associated with GSK-3 activity as indicated herein above.

従って、本発明の医薬組成物は、ＧＳＫ−３に関連する生物学的状態の治療または防止における使用のために、包装用材料に詰められ、包装用材料の表面またはその中での活字で識別され得る。 Accordingly, the pharmaceutical composition of the present invention is packed into a packaging material for use in the treatment or prevention of biological conditions associated with GSK-3 and is identified by the surface of the packaging material or the type in the packaging material. Can be done.

本発明の医薬組成物はさらに、本明細書中上記で記載されるように、ＧＳＫ−３の活性を妨害することができるさらなる活性な成分を含むことができる。 The pharmaceutical compositions of the invention can further comprise additional active ingredients that can interfere with the activity of GSK-3, as described hereinabove.

本発明のさらなる目的、利点および新規な特徴が、限定であることが意図されない下記の実施例を検討したとき、当業者には明らかになる。また、本明細書中上記で説明され、請求項の節において特許請求されるような本発明の様々な実施形態および態様はそれぞれが、下記の実施例において実験的裏付けが見出される。 Further objects, advantages and novel features of the present invention will become apparent to those skilled in the art upon review of the following examples, which are not intended to be limiting. Also, each of the various embodiments and aspects of the invention as described hereinabove and as claimed in the claims section is found experimental support in the following examples.

次に、下記の実施例が参照される。下記の実施例は、上記の説明とともに、本発明を非限定的な様式で例示する。 Reference is now made to the following examples. The following examples, together with the above description, illustrate the invention in a non-limiting manner.

材料および実験方法
材料：
ペプチドは、ＧｅｎｅｍｅｄＳｙｎｔｈｅｓｉｓＩｎｃ．（ＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）によって合成された。 Materials and Experimental Methods Materials:
Peptides are available from Genemed Synthesis Inc. (San Francisco, CA).

放射性物質はＡｍｅｒｓｈａｍＬｔｄ．から購入された。 The radioactive material is Amersham Ltd. Purchased from.

フェニルリン酸およびピリドキサールリン酸（Ｐ−５−Ｐとも称される）は、Ｓｉｇｍａ（イスラエル）から得られた。 Phenyl phosphate and pyridoxal phosphate (also referred to as P-5-P) were obtained from Sigma (Israel).

すべての試薬および溶媒は、商業的な源（例えばＳｉｇｍａ，Ａｃｒｏｓ，Ａｌｄｒｉｃｈ）から得られ、特別に示さない限り、供給された通りに使用された。 All reagents and solvents were obtained from commercial sources (eg, Sigma, Acros, Aldrich) and used as supplied unless otherwise indicated.

ＧＳ−１，ＧＳ−２およびＧＳ−３は、以下に詳述される当業者には公知の手順に従って合成された。 GS-1, GS-2 and GS-3 were synthesized according to procedures known to those skilled in the art detailed below.

新規化合物ＧＳ−４，ＧＳ−５およびＧＳ−２１の合成は、以下に記述されるように設計されて実施された。 The synthesis of the new compounds GS-4, GS-5 and GS-21 was designed and carried out as described below.

ＮＭＲ分光分析および構造計算によるＧＳＫ−３基質の３Ｄ構造の決定：
公知のＧＳＫ−３基質ＣＲＥＢに従ってパターン化された小さなリン酸化されたペプチド（ｐ９ＣＲＥＢと名付けられた）および二つの追加のペプチド（リン酸化されていないペプチド９ＣＲＥＢおよびＳ^１がグルタミン酸で置換された変異体（帯電した基を模倣すると考えられる）９ＥＣＲＥＢ）がこれらの研究で用いられ、以下の表１に掲げられている。ＧＳＫ−３によるペプチドリン酸化の時間推移分析は、リン酸化されたペプチドであるｐ９ＣＲＥＢのみがＧＳＫ−３のための基質であり、９ＣＲＥＢおよび９ＥＣＲＥＢはＧＳＫ−３によってリン酸化されることに完全に失敗したことを確認し（データは示さず）、従ってリン酸化されたセリンはＧＳＫ−３にとって必須要件であることを再び示した。

Determination of 3D structure of GSK-3 substrate by NMR spectroscopy and structure calculation:
A small phosphorylated peptide (named p9CREB) patterned according to the known GSK-3 substrate CREB and two additional peptides (unphosphorylated peptides 9CREB and S ¹ mutants substituted with glutamic acid 9ECREB) (which is thought to mimic charged groups) was used in these studies and is listed in Table 1 below. Time course analysis of peptide phosphorylation by GSK-3 shows that only the phosphorylated peptide p9CREB is a substrate for GSK-3 and 9CREB and 9ECREB completely fail to be phosphorylated by GSK-3 Confirmed (data not shown), thus again showing that phosphorylated serine is an essential requirement for GSK-3.

２Ｄ ^１ＨＮＭＲ分光分析によるｐ９ＣＲＥＢ（図１ａ）、９ＣＲＥＢ（図１ｂ）および９ＥＣＲＥＢ（示されず）の３Ｄ構造は、以下の手順を用いて決定された： The 3D structures of p9CREB (FIG. 1a), 9CREB (FIG. 1b) and 9ECREB (not shown) by 2D ¹ H NMR spectroscopy were determined using the following procedure:

構造研究のため、それぞれのペプチドの溶液は、１０％Ｄ_２Ｏを含む水中に、凍結乾燥された粉末を溶解することによって調製された。２Ｄ−ＮＭＲスペクトルは、ＢｒｕｋｅｒＡｖａｎｃｅＤＭＸ分光光度計で６００．１３ＭＨｚの^１Ｈプロトン周波数で得られた。キャリア周波数は水のシグナルに設定され、ＷＡＴＥＲＧＡＴＥ法を適用することによって、および緩和期間中に低出力の照射を用いることによって抑制された。実験温度（２８０Ｋ）は、より周囲温度での速い交換による集団平均化を減少させかつ最良の可能な分光解像度を保存するために最適化された。すべての実験は、相感受性モード（ＴＰＰＩまたはＳｔａｔｅｓ−ＴＰＰＩ）で実行され、１２ｐｐｍのスペクトル幅、４Ｋの真のｔ_２データ点および５１２ｔ_１−増加で記録された。採取された２次元同核データは、１５０ｍ秒の混合時間を有するＭＬＥＶパルス配列を用いるＴＯＣＳＹ、および１００〜７５０ｍ秒の範囲の混合時間を有するＮＯＥＳＹ実験を含んでいた。通常、緩和遅延はＴＯＣＳＹおよびＮＯＥＳＹ実験においてそれぞれ１．５秒および２．０秒であった。ＲＯＥＳＹ測定では、スピンロックの期間は３．４ＫＨｚの出力で４００ｍ秒に設定された。すべてのスペクトルはテトラメチルシランに対して較正された。 For structural studies, solutions of each peptide were prepared by dissolving lyophilized powder in water containing 10% D ₂ O. 2D-NMR spectra were obtained on a Bruker Avance DMX spectrophotometer at a ¹ H proton frequency of 600.13 MHz. The carrier frequency was set to the water signal and was suppressed by applying the WATERGATE method and by using low power irradiation during the relaxation period. The experimental temperature (280K) was optimized to reduce population averaging due to faster exchange at more ambient temperatures and to preserve the best possible spectral resolution. All experiments were performed in phase sensitive mode (TPPI or States-TPPI) and were recorded with a spectral width of 12 ppm, a true t ₂ data point of 4K and a 512 t ₁ -increase. The two-dimensional homonuclear data collected included TOCSY using MLEV pulse sequences with a mixing time of 150 msec, and NOESY experiments with a mixing time in the range of 100-750 msec. Typically, the relaxation delay was 1.5 and 2.0 seconds in the TOCSY and NOESY experiments, respectively. In ROESY measurement, the spin lock period was set to 400 ms with an output of 3.4 KHz. All spectra were calibrated against tetramethylsilane.

データはＢｒｕｋｅｒＸＷＩＮＮＭＲソフトウェア（ＢｒｕｋｅｒＡｎａｌｙｔｉｓｃｈｅＭｅｓｓｔｅｃｈｎｉｋ，ＧｍｂＨ，ｖｅｒｓｉｏｎ２．７）を用いて処理された。全てのデータ処理、計算および分析はＳｉｌｉｃｏｎＧｒａｐｈｉｃｓワークステーション（ＩＮＤＹＲ４０００およびＩＮＤＩＧＯ２Ｒ１００００）で行われた。両方の次元でのシフトされた二重化正弦窓関数による自由誘導遅延のアポダイゼーションおよび間接次元のゼロフィリングは、スペクトル解像度を増大させるためにフーリエ変換に先立って適用された。スペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒによって開発された自動多項式基線補正を適用することによってさらに位相補正された。 Data was processed using Bruker XWIN NMR software (Bruker Analystique Messtechnik, GmbH, version 2.7). All data processing, calculations and analysis were performed on a Silicon Graphics workstation (INDY R4000 and INDIGO2R10000). Free induction delay apodization with shifted doubled sinusoidal functions in both dimensions and indirect dimension zero filling were applied prior to the Fourier transform to increase spectral resolution. The spectrum was further phase corrected by applying automatic polynomial baseline correction developed by Bruker.

共鳴割当ては、ＢｒｕｋｅｒソフトウェアプログラムＡＵＲＥＬＩＡ（ＢｒｕｋｅｒＡｎａｌｙｔｉｃＧｍｂＨ，ｖｅｒｓｉｏｎ２．７）を用いてＷｕｅｔｈｒｉｃｈによって開発された逐次的割当て方法に従って、同一の実験条件で測定されたＴＯＣＳＹおよびＮＯＥＳＹスペクトルに基づいていた。 Resonance assignment was based on TOCSY and NOESY spectra measured under the same experimental conditions, according to the sequential assignment method developed by Wetherich using the Bruker software program AURELIIA (Bruker Analytical GmbH, version 2.7).

ＮＯＥ距離制約は、４５０ｍ秒で記録されたＮＯＥＳＹスペクトルから由来していた。この最適混合時間は、１００ｍ秒〜７５０ｍ秒までの範囲の混合時間を有する一連の実験において、ＮＯＥシグナル強度を比較することによってｐ９ＣＲＥＢペプチドサンプルについて決定された。選択された混合時間は、スピン拡散からの有意な寄与を有さない最大ＮＯＥビルドアップを与えた。この値は、同一の実験条件を維持するために、リン酸化されていない類似体実験のために使用された。積分されたピーク値は、ｒ^−６従属性を用いて距離制約に変換され、チロシン芳香環の二つの隣接するプロトンの間の既知の距離である２．４７Åが較正のために用いられた。制約は、強い（１．８〜２．５Å）、中程度（１．８〜３．５Å）および弱い（１．８〜５．０Å）に分類された。０．５Åの経験的な補正が、メチル基を含む制約について上方結合に加えられた。 The NOE distance constraint was derived from the NOESY spectrum recorded at 450 ms. This optimal mixing time was determined for p9CREB peptide samples by comparing NOE signal intensity in a series of experiments with mixing times ranging from 100 msec to 750 msec. The selected mixing time gave the maximum NOE build-up with no significant contribution from spin diffusion. This value was used for non-phosphorylated analog experiments to maintain the same experimental conditions. The integrated peak value was converted to a distance constraint using r- ⁶ dependency, and a known distance between two adjacent protons of the tyrosine aromatic ring of 2.47 was used for calibration. Constraints were classified as strong (1.8-2.5 Å), moderate (1.8-3.5 Å) and weak (1.8-5.0 Å). An empirical correction of 0.5% was added to the upper bond for constraints involving methyl groups.

構造は、ハイブリッド距離幾何学−ＸＰＬＯＲ（ｖｅｒｓｉｏｎ３．８５６）を用いる動的シミュレートされたアニーリングによって計算された。ＮＯＥエネルギーは、５０Ｋｃａｌ／ｍｏｌ・Å^２の一定の力定数を有する平方井戸ポテンシャルとして誘導された。シミュレートされたアニーリングは、１０００Ｋでの１５００３ｆ秒ステップおよび３００Ｋへの冷却中の３０００１ｆ秒ステップからなっていた。最終的に、構造は、４０００回の繰返しについての共役勾配エネルギー最小化法を用いて最小化された。ＩＮＳＩＧＨＴＩＩ（ＭｏｌｅｃｕｌａｒＭｏｄｅｌｉｎｇＳｙｓｔｅｍｖｅｒｓｉｏｎ９７．０，ＭｏｌｅｃｕｌａｒＳｉｍｕｌａｔｉｏｎｓ，Ｉｎｃ．）は、ＮＭＲから由来された構造の可視化および分析のために用いられた。それらの質は、ＰＲＯＣＨＥＣＫを用いて評価された。 The structure was calculated by dynamic simulated annealing using hybrid distance geometry-XPLOR (version 3.856). NOE energy was derived as the square well potential with a constant force constant of 50Kcal / mol · Å ^2. The simulated annealing consisted of a 1500 3f second step at 1000K and a 3000 1f second step during cooling to 300K. Finally, the structure was minimized using a conjugate gradient energy minimization method for 4000 iterations. INSIGHT II (Molecular Modeling System version 97.0, Molecular Simulations, Inc.) was used for visualization and analysis of structures derived from NMR. Their quality was evaluated using PROCHECK.

分析方法：
プロトン、炭素、フッ素およびリンの核磁気共鳴スペクトルは、ＢｒｕｋｅｒＡＭＸ５００分光光度計またはＢｒｕｃｋｅｒＡＶ３００分光光度計で得られ、ｐｐｍ（σ）で報告された。テトラメチルシラン（ＴＭＳ）はプロトンスペクトルについての内部標準として用いられ、リン酸はリン原子についての内部標準として用いられ、溶媒ピークは炭素およびフッ素スペクトルについての参照ピークとして用いられた。 Analysis method:
Proton, carbon, fluorine and phosphorus nuclear magnetic resonance spectra were obtained on a Bruker AMX 500 spectrophotometer or a Brucker AV 300 spectrophotometer and reported in ppm (σ). Tetramethylsilane (TMS) was used as an internal standard for the proton spectrum, phosphoric acid was used as the internal standard for the phosphorus atom, and the solvent peak was used as a reference peak for the carbon and fluorine spectra.

質量分光スペクトルは、ＦｉｎｎｉｇａｎＬＣＱＤｕｏＬＣ−ＭＳイオン捕獲電子散布イオン化（ＥＳＩ）質量分光計で得られた。 Mass spectroscopic spectra were obtained on a Finnigan LCQ Duo LC-MS ion capture electron scatter ionization (ESI) mass spectrometer.

薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、Ａｎａｌｔｅｃｈシリカゲルプレートを用いて行われ、プレートをブタノール中の０．２重量％のニンヒドリンで染色することによって、または紫外（ＵＶ）光線によって可視化された。 Thin layer chromatography (TLC) was performed using Analtech silica gel plates and visualized by staining the plates with 0.2 wt% ninhydrin in butanol or by ultraviolet (UV) light.

元素分析は、ＱｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．（Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ，ＮＪ）によって行われた。 Elemental analysis is performed by Quantitative Technologies, Inc. (Whitehouse, NJ).

ＨＰＬＣ分析は、以下に示す標準溶媒勾配プログラムを用いて、ＨｙｐｅｒｓｉｌＢＤＳＣ１８Ｃｏｌｕｍｎ，４．６×１５０ｍｍ，５μｍ，ＣｏｌｕｍｎＴｅｍｐｅｒａｔｕｒｅＡｍｂｉｅｎｔ，Ｄｅｔｅｃｔｏｒ＠２２０ｎｍを用いて得られた。

HPLC analysis was obtained using a Hypersil BDS C18 Column, 4.6 × 150 mm, 5 μm, Column Temperature Ambient, Detector @ 220 nm using the standard solvent gradient program shown below.

インビトロ阻害アッセイ：
精製された組換えウサギＧＳＫ−３β（Ｅｌｄａｒ−Ｆｉｎｋｅｌｍａｎ他、１９９６）は、示された濃度でペプチド基質ＰＧＳ−１（ＹＲＲＡＡＶＰＰＳＰＳＬＳＲＨＳＳＰＳＱＳ（ｐ）ＥＤＥＥＥ）（配列番号１）およびフェニルリン酸、ピリドキサールリン酸（Ｐ−５−Ｐ），ＧＳ−１，ＧＳ−２，ＧＳ−３，ＧＳ−５またはＧＳ−２１（これらの構造式は図３に示されている）とインキュベーションされた。５０ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ＝７．３）、１０ｍＭのＭｇＡｃ、^３２Ｐ［γ−ＡＴＰ］（１００μＭ）、０．０１％のβ−メルカプトエタノールを含む反応混合物は、３０℃で１０分間インキュベーションされた。反応液は、（Ｅｌｄａｒ−Ｆｉｎｋｅｌｍａｎ他（１９９６）に記載されるように）ホスホセルロース紙（ｐ８１）にスポットし、１００ｍＭリン酸で洗浄し、放射能について計数した。 In vitro inhibition assay:
Purified recombinant rabbit GSK-3β (Eldar-Finkelman et al., 1996) was added to the peptide substrate PGS-1 (YRRAAVPPSPSLSRHSSSPSQS (p) EDEEE) (SEQ ID NO: 1) and phenyl phosphate, pyridoxal phosphate ( P-5-P), GS-1, GS-2, GS-3, GS-5 or GS-21 (these structural formulas are shown in FIG. 3). A reaction mixture containing 50 mM Tris (pH = 7.3), 10 mM MgAc, ³² P [γ-ATP] (100 μM), 0.01% β-mercaptoethanol was incubated at 30 ° C. for 10 minutes. The reaction was spotted on phosphocellulose paper (p81) (as described in Eldar-Finkelman et al. (1996)), washed with 100 mM phosphoric acid and counted for radioactivity.

単離された脂肪細胞におけるグルコース取り込み：マウス脂肪細胞は、以前の記載（Ｌａｗｒｅｎｃｅ他、１９７７）のように、０．８ｍｇ／ｍｌのコラーゲナーゼ（ＷｏｒｔｈｉｎｇｔｏｎＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ）を用いた消化によって精巣上皮脂肪パッドから単離された。消化された脂肪パッドはナイロンメッシュに通され、細胞は、１％のウシ血清アルブミン（第Ｖ画分、ＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒＭａｎｎｈｅｉｍ、ドイツ）、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ＝７．３）、５ｍＭのグルコースおよび２００ｎＭのアデノシンを含有するＫｒｅｂｓ重炭酸塩緩衝液（ｐＨ＝７．４）で３回洗浄された。細胞は、示された濃度で２．５時間、ＧＳ−５およびＧＳ−２１とインキュベーションされ、その後、２−デオキシ［^３Ｈ］グルコース（０．５μｃｉ／バイアル）が１０分間加えられた。アッセイは、ジノニルフタレート（ＩＣＮ、米国）による細胞の遠心分離によって終了された。その後、^３Ｈは液体シンチレーション分析器（Ｐａｃｋａｒｄ）によって定量された。２−デオキシ−［^３Ｈ］グルコースの非特異的な取り込みは、放射能物質の添加の３０分前にサイトカラシンＢ（５０μＭ）を加えることによって測定された。 Glucose uptake in isolated adipocytes: Mouse adipocytes are obtained from testicular epithelial fat pads by digestion with 0.8 mg / ml collagenase (Worthington Biochemical) as previously described (Lawrence et al., 1977). Isolated. The digested fat pad was passed through a nylon mesh and the cells were passed through 1% bovine serum albumin (Fraction V, Boehringer Mannheim, Germany), 10 mM HEPES (pH = 7.3), 5 mM glucose and 200 nM. Washed 3 times with Krebs bicarbonate buffer (pH = 7.4) containing adenosine. Cells were incubated with the indicated concentrations for 2.5 hours with GS-5 and GS-21, after which 2-deoxy [ ³ H] glucose (0.5 μci / vial) was added for 10 minutes. The assay was terminated by centrifugation of the cells with dinonyl phthalate (ICN, USA). ³ H was then quantified by a liquid scintillation analyzer (Packard). Nonspecific uptake of 2-deoxy- [ ³ H] glucose was measured by adding cytochalasin B (50 μM) 30 minutes before the addition of radioactive material.

実験結果
ＧＳＫ−３基質の３Ｄ構造の決定：
以上の表２および３は、３Ｄ構造の可視化のために構造分析ソフトウェア中に入力するために使用された構造座標データを表わす。 Experimental Results Determination of 3D structure of GSK-3 substrate:
Tables 2 and 3 above represent the structural coordinate data used for input into the structural analysis software for visualization of 3D structures.

図１ａおよび１ｂに表わされる、得られた３Ｄ構造において、リン酸化されたペプチドのみが、規定された構造配座を有することが観察された。図１ａに示される通り、ｐ９ＣＲＥＢについて、リン酸化はペプチド骨格の有意な「曲がり」を生じ、Ｔｙｒ８およびＡｒｇ４を接近させ、「ループ構造」を形成させ、それによりリン酸化された残基をループの外側に向ける。この配座は、一方では正に帯電した残基（Ａｒｇ４およびＡｒｇ５）の、酵素の触媒結合ポケットとの干渉を最小化し、他方では、リン酸化されたセリンを酵素に容易に接近可能とする。この構造分析はＧＳＫ−３の特異的な基質認識に対する説明を与える。従って、ここに表わされた構造を模倣する小分子の設計は、ＧＳＫ−３に対する潜在的な選択的阻害剤を得る方法を提供する。 In the resulting 3D structure represented in FIGS. 1a and 1b, only the phosphorylated peptide was observed to have a defined structural conformation. As shown in FIG. 1a, for p9CREB, phosphorylation results in a significant “bend” of the peptide backbone, bringing Tyr8 and Arg4 close together, forming a “loop structure”, thereby allowing phosphorylated residues to be Turn outward. This conformation minimizes interference of positively charged residues (Arg4 and Arg5) on the one hand with the enzyme's catalytic binding pocket and, on the other hand, makes phosphorylated serine readily accessible to the enzyme. This structural analysis provides an explanation for the specific substrate recognition of GSK-3. Thus, the design of small molecules that mimic the structure represented here provides a way to obtain potential selective inhibitors for GSK-3.

化学的分析：
ｐ−メチルベンジルホスフェート（ＧＳ−１）の合成：
ＧＳ−１の一般的な合成は、以下の式１に表わされる。

Chemical analysis:
Synthesis of p-methylbenzyl phosphate (GS-1):
The general synthesis of GS-1 is represented by Equation 1 below.

ジ−ｔｅｒｔ−ブチル、ｐ−メチルベンジルリン酸の調製：
１Ｈ−テトラゾール溶液（アセトニトリル中の０．４５Ｍ，２０ｍｌ，９ｍｍｏｌ，３当量）は、乾燥ＴＨＦ（３ｍｌ）中の４−メチルベンジルアルコール（０．４グラム、３．３ｍｍｏｌ、１．１当量）とジ−ｔｅｒｔ−ブチルジイソプロピルホスホルアミダイト（０．９５ｍｌ、０．８３グラム、３ｍｍｏｌ、１当量）との撹拌された溶液に一度に添加された。混合物は１５分間２０℃で撹拌された。混合物は（ドライアイス／アセトニトリルにより）−４０℃に冷却され、ジクロロメタン（４ｍｌ）中の８５％ｍ−クロロ過安息香酸（ｍＣＰＢＡ）（１ｍｌジクロロメタン中の０．８１グラム、４ｍｍｏｌ、１．３当量）の溶液は迅速に添加され、一方、反応温度は０℃以下に保持された。溶液は室温にまで暖められ、５分間２０℃で撹拌された後、１０％のＮａＨＳＯ_３水溶液（１０ｍｌ）が添加され、混合物はさらに１０分間撹拌された。次に、混合物はエーテル（７０ｍｌ）で抽出され、水性相が廃棄された。エーテル相は１０％のＮａＨＳＯ_３水溶液（２×２０ｍｌ）および５％のＮａＨＣＯ_３の飽和水溶液（２×２０ｍｌ）で洗浄され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過された。有機濾過物は蒸発され、残渣はＥｔＯＡｃ／ヘキサン１：１５の混合物を溶出液としてシリカゲルカラム上でクロマトグラフィーにより精製され、生成物（ジ−ｔｅｒｔ−ブチル、ｐ−メチルベンジルリン酸）と出発材料の混合物が得られ、これはさらなる分離なしに用いられた。

Preparation of di-tert-butyl, p-methylbenzyl phosphate:
1H-tetrazole solution (0.45 M in acetonitrile, 20 ml, 9 mmol, 3 eq) was diluted with 4-methylbenzyl alcohol (0.4 gram, 3.3 mmol, 1.1 eq) in dry THF (3 ml). -Added in one portion to a stirred solution of tert-butyldiisopropyl phosphoramidite (0.95 ml, 0.83 grams, 3 mmol, 1 eq). The mixture was stirred for 15 minutes at 20 ° C. The mixture was cooled to −40 ° C. (by dry ice / acetonitrile) and 85% m-chloroperbenzoic acid (mCPBA) in dichloromethane (4 ml) (0.81 grams, 4 mmol, 1.3 eq in 1 ml dichloromethane). Was quickly added while the reaction temperature was kept below 0 ° C. The solution was warmed to room temperature and stirred for 5 minutes at 20 ° C., after which 10% aqueous NaHSO ₃ solution (10 ml) was added and the mixture was stirred for an additional 10 minutes. The mixture was then extracted with ether (70 ml) and the aqueous phase was discarded. The ether phase was washed with 10% aqueous NaHSO ₃ (2 × 20 ml) and saturated aqueous 5% NaHCO ₃ (2 × 20 ml), dried over sodium sulfate and filtered. The organic filtrate is evaporated and the residue is purified by chromatography on a silica gel column with an EtOAc / hexane 1:15 mixture as eluent to give the product (di-tert-butyl, p-methylbenzyl phosphate) and starting material. Was obtained and used without further separation.

ｐ−メチルベンジルリン酸の調製：ＨＣｌ（ジオキサン中の４Ｍ、２ｍｌ、８ｍｍｏｌ、２．６当量）とジオキサン（６ｍｌ）の溶液が、得られたジ−ｔｅｒｔ−ブチル、ｐ−メチルベンジルリン酸に２０℃で添加され、反応はＴＬＣによって監視された。一旦加水分解が完了すると、ジオキサンは減圧下で蒸発され、残渣は水（１５ｍｌ）に溶解され、エーテル（２×１５ｍｌ）で洗浄されて過剰のベンジルアルコール出発材料が除去された。次に溶媒は減圧下で蒸発され、生じた清澄な油は、延長された高減圧乾燥により無色の固体へとゆっくりと変化し、０．１８グラム（３０％）の最終生成物を生じた。

Preparation of p-methylbenzyl phosphate: A solution of HCl (4M in dioxane, 2 ml, 8 mmol, 2.6 eq) and dioxane (6 ml) was added to the resulting di-tert-butyl, p-methylbenzyl phosphate. Added at 20 ° C. and the reaction was monitored by TLC. Once hydrolysis was complete, the dioxane was evaporated under reduced pressure and the residue was dissolved in water (15 ml) and washed with ether (2 × 15 ml) to remove excess benzyl alcohol starting material. The solvent was then evaporated under reduced pressure and the resulting clear oil slowly changed to a colorless solid upon prolonged high vacuum drying, yielding 0.18 grams (30%) of the final product.

ベンジルリン酸（ＧＳ−２）の合成：
ベンジルリン酸の一般的な合成は、以下の式２に表わされる。

Synthesis of benzyl phosphate (GS-2):
The general synthesis of benzyl phosphate is represented by Formula 2 below.

ジ−ｔｅｒｔ−ブチルベンジルリン酸の調製：
１Ｈ−テトラゾール溶液（アセトニトリル中の０．４５Ｍ，２０ｍｌ，９ｍｍｏｌ，３当量）は、乾燥ＴＨＦ（３ｍｌ）中のベンジルアルコール（０．３４ｍｌ、３．３ｍｍｏｌ、１．１当量）とジ−ｔｅｒｔ−ブチルジイソプロピルホスホルアミダイト（０．９５ｍｌ、０．８３グラム、３ｍｍｏｌ、１当量）との撹拌された溶液に一度に添加された。混合物は１５分間２０℃で撹拌され、その後、混合物は（ドライアイス／アセトニトリルにより）−４０℃に冷却された。ジクロロメタン（ＤＣＭ）（４ｍｌ）中の８５％ｍＣＰＢＡ（１ｍｌジクロロメタン中の０．８１グラム、４ｍｍｏｌ、１．３当量）の溶液は迅速に添加され、一方、反応温度は０℃以下に保持された。溶液は室温にまで暖められ、５分間２０℃で撹拌された後、１０％のＮａＨＳＯ_３水溶液（１０ｍｌ）が添加され、混合物はさらに１０分間撹拌された。次に、混合物はエーテル（７０ｍｌ）で抽出され、水性相が廃棄された。エーテル相は１０％のＮａＨＳＯ_３水溶液（２×２０ｍｌ）および５％のＮａＨＣＯ_３の飽和水溶液（２×２０ｍｌ）で洗浄され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過された。有機層は蒸発され、残渣はＥｔＯＡｃ／ヘキサン１：１５の混合物を溶出液としてシリカゲルカラム上でクロマトグラフィーにより精製され、生成物（ジ−ｔｅｒｔ−ブチルベンジルリン酸）と出発材料の混合物が得られ、これはさらなる精製なしに用いられた。

Preparation of di-tert-butylbenzyl phosphate:
1H-tetrazole solution (0.45M in acetonitrile, 20 ml, 9 mmol, 3 eq) was added to benzyl alcohol (0.34 ml, 3.3 mmol, 1.1 eq) and di-tert-butyl in dry THF (3 ml). To a stirred solution of diisopropyl phosphoramidite (0.95 ml, 0.83 grams, 3 mmol, 1 equiv) was added in one portion. The mixture was stirred for 15 minutes at 20 ° C., after which the mixture was cooled to −40 ° C. (by dry ice / acetonitrile). A solution of 85% mCPBA (0.81 grams, 4 mmol, 1.3 eq in 1 ml dichloromethane) in dichloromethane (DCM) (4 ml) was added rapidly while the reaction temperature was kept below 0 ° C. The solution was warmed to room temperature and stirred for 5 minutes at 20 ° C., after which 10% aqueous NaHSO ₃ solution (10 ml) was added and the mixture was stirred for an additional 10 minutes. The mixture was then extracted with ether (70 ml) and the aqueous phase was discarded. The ether phase was washed with 10% aqueous NaHSO ₃ (2 × 20 ml) and saturated aqueous 5% NaHCO ₃ (2 × 20 ml), dried over sodium sulfate and filtered. The organic layer is evaporated and the residue is purified by chromatography on a silica gel column with an EtOAc / hexane 1:15 mixture as eluent to give a mixture of product (di-tert-butylbenzyl phosphate) and starting material. This was used without further purification.

ベンジルリン酸の調製：ＨＣｌ（ジオキサン中の４Ｍ、２ｍｌ、８ｍｍｏｌ、２．６当量）とジオキサン（６ｍｌ）の溶液が、得られたジ−ｔｅｒｔ−ブチルベンジルリン酸に２０℃で添加され、反応はＴＬＣによって監視された。一旦加水分解が完了すると、ジオキサンは減圧下で蒸発され、残渣は水（１５ｍｌ）に溶解され、エーテル（２×１５ｍｌ）で洗浄されて過剰のベンジルアルコール出発材料が除去された。次に溶媒は減圧下で蒸発され、生じた清澄な油は、延長された高減圧乾燥により無色の固体へとゆっくりと変化し、０．１７グラム（３０％）の最終生成物を生じた。

Preparation of benzyl phosphate: A solution of HCl (4M in dioxane, 2 ml, 8 mmol, 2.6 eq) and dioxane (6 ml) was added to the resulting di-tert-butylbenzyl phosphate at 20 ° C. and the reaction Was monitored by TLC. Once hydrolysis was complete, the dioxane was evaporated under reduced pressure and the residue was dissolved in water (15 ml) and washed with ether (2 × 15 ml) to remove excess benzyl alcohol starting material. The solvent was then evaporated under reduced pressure, and the resulting clear oil slowly changed to a colorless solid upon prolonged high vacuum drying, yielding 0.17 grams (30%) of the final product.

３−ピリジルメチルリン酸（ＧＳ−３）の合成：
３−ピリジルメチルリン酸の一般的な合成は、以下の式３に表わされる。

Synthesis of 3-pyridylmethyl phosphate (GS-3):
The general synthesis of 3-pyridylmethyl phosphate is represented by Formula 3 below.

ジ−ｔｅｒｔ−ブチル３−ピリジルメチルリン酸の調製：
１Ｈ−テトラゾール溶液（アセトニトリル中の０．４５Ｍ，２０ｍｌ，９ｍｍｏｌ，３当量）は、乾燥ＴＨＦ（３ｍｌ）中の３−ピリジルメタノール（０．３１ｍｌ、３．３ｍｍｏｌ、１．１当量）とジ−ｔｅｒｔ−ブチルジイソプロピルホスホルアミダイト（０．９５ｍｌ、０．８３グラム、３ｍｍｏｌ、１当量）との撹拌された溶液に一度に添加された。混合物は１５分間２０℃で撹拌され、その後、混合物は（ドライアイス／アセトニトリルにより）−４０℃に冷却された。ＤＣＭ（４ｍｌ）中の８５％ｍＣＰＢＡ（１ｍｌＤＣＭ中の０．８１グラム、４ｍｍｏｌ、１．３当量）の溶液は次に迅速に添加され、一方、反応温度は０℃以下に保持された。溶液は室温にまで暖められ、５分間２０℃で撹拌された後、１０％のＮａＨＳＯ_３水溶液（１０ｍｌ）が添加され、混合物はさらに１０分間撹拌された。次に、混合物はエーテル（７０ｍｌ）で抽出され、水性相が廃棄された。エーテル相は１０％のＮａＨＳＯ_３水溶液（２×２０ｍｌ）および５％のＮａＨＣＯ_３の飽和水溶液（２×２０ｍｌ）で洗浄され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過された。有機濾過物は蒸発され、残渣はＣＨＣｌ_３／ヘキサン１：１の混合物を溶出液としてシリカゲルカラム上でクロマトグラフィーにより精製され、生成物（ジ−ｔｅｒｔ−ブチル３−ピリジルメチルリン酸）と出発材料の混合物が得られ、これはさらなる精製なしに用いられた。

Preparation of di-tert-butyl 3-pyridylmethyl phosphate:
1H-tetrazole solution (0.45M in acetonitrile, 20 ml, 9 mmol, 3 eq) was added to 3-pyridylmethanol (0.31 ml, 3.3 mmol, 1.1 eq) and di-tert in dry THF (3 ml). -Added in one portion to a stirred solution of butyl diisopropyl phosphoramidite (0.95 ml, 0.83 grams, 3 mmol, 1 equiv). The mixture was stirred for 15 minutes at 20 ° C., after which the mixture was cooled to −40 ° C. (by dry ice / acetonitrile). A solution of 85% mCPBA (0.81 grams, 4 mmol, 1.3 eq in 1 ml DCM) in DCM (4 ml) was then quickly added while the reaction temperature was kept below 0 ° C. The solution was warmed to room temperature and stirred for 5 minutes at 20 ° C., after which 10% aqueous NaHSO ₃ solution (10 ml) was added and the mixture was stirred for an additional 10 minutes. The mixture was then extracted with ether (70 ml) and the aqueous phase was discarded. The ether phase was washed with 10% aqueous NaHSO ₃ (2 × 20 ml) and saturated aqueous 5% NaHCO ₃ (2 × 20 ml), dried over sodium sulfate and filtered. The organic filtrate is evaporated and the residue is purified by chromatography on a silica gel column, eluting with a mixture of CHCl ₃ / hexane 1: 1, and the product (di-tert-butyl 3-pyridylmethyl phosphate) and starting material Was obtained and used without further purification.

３−ピリジルメチルリン酸の調製：ＨＣｌ（ジオキサン中の４Ｍ、２ｍｌ、８ｍｍｏｌ、２．６当量）とジオキサン（６ｍｌ）の溶液が、得られたジ−ｔｅｒｔ−ブチル３−ピリジルメチルリン酸に２０℃で添加され、反応はＴＬＣによって監視された。一旦加水分解が完了すると、ジオキサンは減圧下で蒸発され、残渣は水（１５ｍｌ）に溶解され、エーテル（２×１５ｍｌ）で洗浄された。次に溶媒は減圧下で蒸発され、０．１９グラム（３０％）の最終生成物を生じた。

Preparation of 3-pyridylmethyl phosphate: A solution of HCl (4M in dioxane, 2 ml, 8 mmol, 2.6 eq) and dioxane (6 ml) was added to the resulting di-tert-butyl 3-pyridylmethyl phosphate to 20 Added at 0 C and the reaction was monitored by TLC. Once hydrolysis was complete, the dioxane was evaporated under reduced pressure and the residue was dissolved in water (15 ml) and washed with ether (2 × 15 ml). The solvent was then evaporated under reduced pressure to yield 0.19 grams (30%) of the final product.

３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸（ＧＳ−２１）の合成：
以下の式４に表わされるＧＳ−２１の合成の一般的な方法、並びに最終生成物の精製プロトコールが設計されて実行された。３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸（ＧＳ−２１）は８段階の合成により５％の全収量で得られた。対応するトリフルオロ酢酸塩も調製された。

Synthesis of 3,5-bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate (GS-21):
A general method for the synthesis of GS-21 represented by Formula 4 below, as well as a purification protocol for the final product, was designed and implemented. 3,5-bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate (GS-21) was obtained in an overall yield of 5% by an 8-step synthesis. The corresponding trifluoroacetate salt was also prepared.

ベンジルアルコール中間体（式４参照）は、以下に詳述するように、および式５に表わされるように、安価な出発材料であるトリメチル１，３，５−ベンゼントリカルボキシレートから４段階で得ることができる重要な中間体として同定された。

The benzyl alcohol intermediate (see Formula 4) is obtained in four steps from an inexpensive starting material,

trimethyl

1,3,5-benzenetricarboxylate, as detailed below and as represented in Formula 5. Identified as an important intermediate that can.

リン酸部分は次に、Ｊｏｈｎｓの方法（ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．１９８８，２９，２３６９−２３７２）に従って、テトラゾールの存在下で、アルコールをジ−ｔｅｒｔ−ブチルジイソプロピルホスホルアミダイトと反応させることによって導入された。ｍ−クロロ過安息香酸（ｍＣＰＢＡ）により、ホスファイトの単離なしで直ちに酸化することにより、対応するホスフェートエステルが生成された。アミンおよびホスフェートの全体的な脱保護は、制御された条件下でトリフルオロ酢酸を用いることによって達成された。次に、材料はそのトリフルオロ酢酸塩として得られた。後者は、イオン交換樹脂による処理前に再結晶化され、以下の式６に表わされるように適切な純度（通常、約９０％）（ＨＰＬＣによるＡＵＣ）を有する望ましい生成物を生じた。

The phosphate moiety was then introduced by reacting the alcohol with di-tert-butyldiisopropyl phosphoramidite in the presence of tetrazole according to the method of Johnson (Tetrahedron Lett. 1988, 29, 2369-2372). Immediate oxidation with m-chloroperbenzoic acid (mCPBA) without isolation of the phosphite produced the corresponding phosphate ester. Global deprotection of amines and phosphates was achieved by using trifluoroacetic acid under controlled conditions. The material was then obtained as its trifluoroacetate salt. The latter was recrystallized prior to treatment with the ion exchange resin to yield the desired product with the appropriate purity (usually about 90%) (AUC by HPLC) as shown in Equation 6 below.

以下は、合成の詳細な記述である。
１，３，５−トリス（ヒドロキシメチル）ベンゼンの調製：オーバーヘッド式撹拌器、追加の濾斗および還流冷却器を備えた３リットルの丸底フラスコに、リチウムアルミニウム水素化物（４９．７グラム、１．３１ｍｏｌ）および無水ＴＨＦ（５００ｍｌ）が窒素雰囲気下で充填された。生じた懸濁液はゆっくりと加熱されて還流され、無水ＴＨＦ（１．０リットル）中のトリメチル−１，３，５−ベンゼントリカルボキシレート（１００．０グラム、０．４０ｍｏｌ）の溶液がそこに滴下され、一方、おだやかな還流状態に維持された（３時間）。生じた灰色の懸濁液は還流下でさらに７時間撹拌され、外部氷水浴で冷却された。過剰のリチウムアルミニウム水素化物は水（５０ｍｌ、４５分）、および次に１５％ＮａＯＨ（５０ｍｌ、遅い流れ）、および最後に一層多くの水（１５０ｍｌ、遅い流れ）の滴下により加水分解された。生じた懸濁液は周囲温度で１４時間撹拌された。固型分は濾過され、濾過物は高真空化で濃縮されて無色の油が得られ、これはゆっくりと固化して、白色固体としての１，３，５−トリス（ヒドロキシメチル）ベンゼン（６２．３グラム、９４％）を生じた。図４ａ−ｂに表わされる^１ＨＮＭＲおよび^１３ＣＮＭＲスペクトルは、割り当てられた構造と一致した。 The following is a detailed description of the synthesis.
Preparation of 1,3,5-tris (hydroxymethyl) benzene: A 3 liter round bottom flask equipped with an overhead stirrer, additional funnel and reflux condenser was charged with lithium aluminum hydride (49.7 grams, 1 .31 mol) and anhydrous THF (500 ml) were charged under a nitrogen atmosphere. The resulting suspension was heated to reflux slowly, and a solution of trimethyl-1,3,5-benzenetricarboxylate (100.0 grams, 0.40 mol) in anhydrous THF (1.0 liter) was present. While maintaining a gentle reflux (3 hours). The resulting gray suspension was stirred at reflux for an additional 7 hours and cooled with an external ice-water bath. Excess lithium aluminum hydride was hydrolyzed by dropwise addition of water (50 ml, 45 minutes), and then 15% NaOH (50 ml, slow flow), and finally more water (150 ml, slow flow). The resulting suspension was stirred at ambient temperature for 14 hours. The solids are filtered and the filtrate is concentrated under high vacuum to give a colorless oil that slowly solidifies to give 1,3,5-tris (hydroxymethyl) benzene (62 as a white solid). Yielded 3 grams, 94%). The ¹ H NMR and ¹³ C NMR spectra represented in FIGS. 4 a-b were consistent with the assigned structure.

３，５−ビス（ブロモメチル）ベンジルアルコールの調製：磁気撹拌棒および追加の濾斗を備えた２リットルの丸底フラスコに、１，３，５−トリス（ヒドロキシメチル）ベンゼン（３３．７グラム、０．２０ｍｏｌ）および無水アセトニトリル（７５０ｍｌ）が充填された。生じた懸濁液に、ブロモトリメチルシラン（ＴＭＳＢｒ）（９７９．０ｍｌ、０．６０ｍｏｌ）が遅い流れとして撹拌されつつ添加された。白色スラリーは茶色に変色し、粘度も生じた。次に、反応混合物は４０℃に２５分間加熱され、清澄な溶液を生じた。反応の完了は、ＴＬＣ分析（９０：１０塩化メチレン／メタノール、ＵＶによる可視化、出発材料のＲｆは０．０７、生成物のＲｆは０．７７）によって判断された。溶媒は減圧下で除去されて茶色のペーストを生じた。粗材料はカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、０−５％ＭｅＯＨ／ＣＨ_２Ｃｌ_２）によって精製された。３，５−ビス（ブロモメチル）ベンジルアルコール（３３．５グラム、５７％）は白色固体として得られた。図５ａ−ｂに表わされる^１ＨＮＭＲおよび^１３ＣＮＭＲスペクトルは、割り当てられた構造と一致した。 Preparation of 3,5-bis (bromomethyl) benzyl alcohol: In a 2 liter round bottom flask equipped with a magnetic stir bar and additional funnel, add 1,3,5-tris (hydroxymethyl) benzene (33.7 grams, 0.20 mol) and anhydrous acetonitrile (750 ml) were charged. To the resulting suspension, bromotrimethylsilane (TMSBr) (979.0 ml, 0.60 mol) was added as a slow stream with stirring. The white slurry turned brown and had a viscosity. The reaction mixture was then heated to 40 ° C. for 25 minutes, resulting in a clear solution. Completion of the reaction was judged by TLC analysis (90:10 methylene chloride / methanol, UV visualization, starting material Rf 0.07, product Rf 0.77). The solvent was removed under reduced pressure to yield a brown paste. The crude material was purified by column chromatography (silica _{gel, 0-5% MeOH / CH 2 Cl} 2). 3,5-Bis (bromomethyl) benzyl alcohol (33.5 grams, 57%) was obtained as a white solid. The ¹ H NMR and ¹³ C NMR spectra depicted in FIGS. 5 a-b were consistent with the assigned structure.

３，５−ビス（シアノメチル）ベンジルアルコールの調製：オーバーヘッド式撹拌器、追加の濾斗および還流冷却器を備えた１リットルの丸底フラスコに、３，５−ビス（ブロモメチル）ベンジルアルコール（３３．１グラム、０．１１ｍｏｌ）およびメタノール（４００ｍｌ）が充填された。生じた清澄な溶液は加熱されて還流された。水（２５ｍｌ）中のシアン化ナトリウム（１６．２グラム、０．３３ｍｏｌ）の溶液がゆっくりと添加された。加熱は還流下で６時間続けられ、その後、反応の完了は、ＴＬＣ分析（９５：５塩化メチレン／メタノール、ＵＶによる可視化、出発材料のＲｆは０．６２、生成物のＲｆは０．３８）によって判断された。反応混合物は周囲温度に冷却され、溶媒は減圧下で除去されて茶色のペーストを生じた。後者はＭＴＢＥ（６×１００ｍｌ）で粉砕された。ＭＴＢＥ抽出物は組合され、溶媒は減圧下で除去された。かくして得られた黄色の油は次にカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、０−５％ＭｅＯＨ／ＣＨ_２Ｃｌ_２）によって精製された。３，５−ビス（シアノメチル）ベンジルアルコール（１８．７グラム、８９％）は薄茶色の油として得られ、これはワックス状の白色固体へとゆっくりと変化した。１グラムのサンプルが除去され、カラムクロマトグラフィーを介して精製され、精製されたサンプルを与えた。図６ａ−ｂに表わされる^１ＨＮＭＲおよび^１３ＣＮＭＲスペクトルは、割り当てられた構造と一致した。 Preparation of 3,5-bis (cyanomethyl) benzyl alcohol: To a 1 liter round bottom flask equipped with an overhead stirrer, additional funnel and reflux condenser, was added 3,5-bis (bromomethyl) benzyl alcohol (33. 1 gram, 0.11 mol) and methanol (400 ml) were charged. The resulting clear solution was heated to reflux. A solution of sodium cyanide (16.2 grams, 0.33 mol) in water (25 ml) was added slowly. Heating is continued for 6 hours under reflux, after which the completion of the reaction is confirmed by TLC analysis (95: 5 methylene chloride / methanol, UV visualization, starting material Rf 0.62, product Rf 0.38) Was judged by. The reaction mixture was cooled to ambient temperature and the solvent was removed under reduced pressure to yield a brown paste. The latter was ground with MTBE (6 × 100 ml). The MTBE extracts were combined and the solvent was removed under reduced pressure. Thus obtained yellow oil is then purified by column chromatography (silica _{gel, 0-5% MeOH / CH 2 Cl} 2) was purified by. 3,5-bis (cyanomethyl) benzyl alcohol (18.7 grams, 89%) was obtained as a light brown oil that slowly changed to a waxy white solid. A 1 gram sample was removed and purified via column chromatography to give a purified sample. The ¹ H NMR and ¹³ C NMR spectra depicted in FIGS. 6 a-b were consistent with the assigned structure.

３，５−ビス（アミノエチル）ベンジルアルコールの調製：３，５−ビス（シアノメチル）ベンジルアルコール（８．０グラム、０．０４ｍｏｌ）のサンプルが３分割され、それぞれ２．５〜３．０グラムの部分が別個のＰａｒｒボトルに充填され、次にエタノール（１００ｍｌ）およびＮａＯＨ水溶液（５ｍｌの水中の１．２グラム）が充填された。生じた溶液にラネーＮｉ（水中の５０％懸濁液、１．２グラム）が添加された。混合物は３０ｐｓｉでＰａｒｒシェーカー上で水素添加された。反応は^１ＨＮＭＲによって監視され、３時間後に完了したと判断された。触媒は珪藻土のパッドで濾過され、珪藻土のパッドはエタノール（２００ｍｌ）で洗浄された。すべての三つの反応からの濾過物は組合され、溶媒は減圧下で除去されて、茶色のペーストとしての３，５−ビス（アミノエチル）ベンジルアルコール（１４．１６グラム）を得た。図７に表わされる生成物の^１ＨＮＭＲスペクトルは、２５％（ｗ／ｗ）のエタノールの存在を示す。エタノール含有量における顕著な変化は、延長された時間の間、高真空下でサンプルが乾燥されるときに観察されなかった。この材料は、いかなるさらなる精製なしで合成の次の段階で用いられた。 Preparation of 3,5-bis (aminoethyl) benzyl alcohol: A sample of 3,5-bis (cyanomethyl) benzyl alcohol (8.0 grams, 0.04 mol) was divided into three, 2.5-3.0 grams each. Portions were filled into separate Parr bottles, followed by ethanol (100 ml) and aqueous NaOH (1.2 grams in 5 ml water). Raney Ni (50% suspension in water, 1.2 grams) was added to the resulting solution. The mixture was hydrogenated on a Parr shaker at 30 psi. The reaction was monitored by ¹ H NMR and judged complete after 3 hours. The catalyst was filtered through a pad of diatomaceous earth, and the pad of diatomaceous earth was washed with ethanol (200 ml). The filtrates from all three reactions were combined and the solvent was removed under reduced pressure to give 3,5-bis (aminoethyl) benzyl alcohol (14.16 grams) as a brown paste. The ¹ H NMR spectrum of the product represented in FIG. 7 shows the presence of 25% (w / w) ethanol. No significant change in ethanol content was observed when the sample was dried under high vacuum for an extended time. This material was used in the next step of the synthesis without any further purification.

３，５−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノエチル）ベンジルアルコールの調製：磁気撹拌棒、温度計およびガス入口アダプターを備えた三つ口の３リットルの丸底フラスコに、ＴＨＦ（５９０ｍｌ）中に溶解された３，５−ビス（アミノエチル）−１−ヒドロキシメチルベンジルアルコール（２９．４グラム）および２ＮのＮａＯＨ水溶液（５９０ｍｌ）が充填された。撹拌された混合物に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（５９．４グラム、２７２ｍｍｏｌ）が一度に添加された。混合物は４５℃に４時間加熱された。生じた溶液は周囲温度に冷却され、揮発性有機物は真空によって除去された。生じた水混合物にメタノール（６００ｍｌ）が添加された。撹拌された溶液は４５℃に２日間加熱され、カーバメートを保存しながらｔｅｒｔ−ブトキシカーボネート部分が選択的に加水分解された。周囲温度に冷却された後、溶液は揮発性成分を除去され、水性混合物はクロロホルム（３×６００ｍｌ）で抽出された。有機層は組合され、塩水（６００ｍｌ）で洗浄され、濃縮された。高真空下で乾燥された後、粗３，５−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノエチル）ベンジルアルコール（２４．８８グラム）が真っ白の固体として６７％の収量で得られた。図８に表わされる^１ＨＮＭＲスペクトルは、割り当てられた構造と一致した。粗材料はさらなる精製なしで用いられた。 Preparation of 3,5-bis (tert-butoxycarbonylaminoethyl) benzyl alcohol: dissolved in THF (590 ml) in a three-necked 3 liter round bottom flask equipped with a magnetic stir bar, thermometer and gas inlet adapter 3,5-bis (aminoethyl) -1-hydroxymethylbenzyl alcohol (29.4 grams) and 2N aqueous NaOH (590 ml) were charged. To the stirred mixture di-tert-butyl dicarbonate (59.4 grams, 272 mmol) was added in one portion. The mixture was heated to 45 ° C. for 4 hours. The resulting solution was cooled to ambient temperature and volatile organics were removed by vacuum. Methanol (600 ml) was added to the resulting water mixture. The stirred solution was heated to 45 ° C. for 2 days to selectively hydrolyze the tert-butoxycarbonate moiety while storing the carbamate. After cooling to ambient temperature, the solution was stripped of volatile components and the aqueous mixture was extracted with chloroform (3 × 600 ml). The organic layers were combined, washed with brine (600 ml) and concentrated. After drying under high vacuum, crude 3,5-bis (tert-butoxycarbonylaminoethyl) benzyl alcohol (24.88 grams) was obtained as a pure white solid in 67% yield. The ¹ H NMR spectrum represented in FIG. 8 was consistent with the assigned structure. The crude material was used without further purification.

保護された３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸の調製：磁気撹拌棒および追加の濾斗を備えた５００ｍｌの丸底フラスコに、３，５−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノエチル）ベンジルアルコール（２．３グラム、０．００５８ｍｏｌ）および無水塩化メチレン（４５ｍｌ）が充填された。生じた溶液は約５℃に氷水浴中で冷却された。無水アセトニトリル（４５ｍｌ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチルジイソプロピルホスホルアミダイト（４．５ｍｌ、０．０１４４ｍｏｌ）が追加の濾斗からの遅い流れとして添加された。次に、無水アセトニトリル／無水塩化メチレンの１：１混合物（９０ｍｌ）中のテトラゾール（１．０グラム、０．０１４４ｍｏｌ）の溶液がゆっくりと添加された（１５分間）。生じた白色懸濁液は約５℃で１時間撹拌され、反応の完了は、ＴＬＣ分析（９５：５クロロホルム／イソプロピルアルコール、ニンヒドリン中での染色による可視化、出発材料のＲｆは０．２３、生成物のＲｆは０．３０）によって判断された。溶媒は減圧下で除去されてペーストを生じ、これは無水塩化メチレン（７５ｍｌ）中に溶解され、ドライアイス／アセトニトリル浴中で冷却された。無水塩化メチレン（５０ｍｌ）中のｍＣＰＢＡ（１．３グラム、０．０１４４ｍｏｌ）の溶液が一度に添加された。生じた混合物は１時間撹拌され、周囲温度に暖められ（１時間）、さらに３０分間撹拌された。次に反応混合物は１．０Ｍのチオ硫酸ナトリウム水溶液（１００ｍｌ）および飽和された二炭酸ナトリウム（２×１００ｍｌ）で連続的に洗浄された。有機抽出物は無水硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過された。溶媒は減圧下で除去されて黄色の油としての粗リン酸塩を与え、これは次にカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、０−５％ＭｅＯＨ／ＣＨ_２Ｃｌ_２）によって精製された。保護された３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸（２．１グラム、６１％）は、粘性のある無色の油として得られた。図９ａ−ｃに表わされるその^１ＨＮＭＲ，^１３ＣＮＭＲおよび^３１ＰＮＭＲスペクトルは、割り当てられた構造と一致した。 Preparation of protected 3,5-bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate: In a 500 ml round bottom flask equipped with a magnetic stir bar and an additional funnel, add 3,5-bis (tert-butoxycarbonylaminoethyl). ) Benzyl alcohol (2.3 grams, 0.0058 mol) and anhydrous methylene chloride (45 ml) were charged. The resulting solution was cooled to about 5 ° C. in an ice-water bath. Di-tert-butyldiisopropyl phosphoramidite (4.5 ml, 0.0144 mol) in anhydrous acetonitrile (45 ml) was added as a slow stream from an additional funnel. Next, a solution of tetrazole (1.0 gram, 0.0144 mol) in a 1: 1 mixture of anhydrous acetonitrile / anhydrous methylene chloride (90 ml) was slowly added (15 minutes). The resulting white suspension was stirred at about 5 ° C. for 1 hour and reaction completion was confirmed by TLC analysis (95: 5 chloroform / isopropyl alcohol, visualized by staining in ninhydrin, starting material Rf 0.23, formation The Rf of the product was judged by 0.30). The solvent was removed under reduced pressure to give a paste, which was dissolved in anhydrous methylene chloride (75 ml) and cooled in a dry ice / acetonitrile bath. A solution of mCPBA (1.3 grams, 0.0144 mol) in anhydrous methylene chloride (50 ml) was added in one portion. The resulting mixture was stirred for 1 hour, warmed to ambient temperature (1 hour) and stirred for an additional 30 minutes. The reaction mixture was then washed successively with 1.0 M aqueous sodium thiosulfate solution (100 ml) and saturated sodium bicarbonate (2 × 100 ml). The organic extract was dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The solvent was removed under reduced pressure to give the crude phosphate as a yellow oil, which was then purified by column chromatography (silica gel, 0-5% MeOH / CH ₂ Cl ₂ ). Protected 3,5-bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate (2.1 grams, 61%) was obtained as a viscous colorless oil. Its ¹ H NMR, ¹³ C NMR and ³¹ P NMR spectra represented in FIGS. 9a-c were consistent with the assigned structure.

３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸ＴＦＡ塩の調製：磁気撹拌棒を備えた２５０ｍｌの丸底フラスコに、保護されたリン酸塩（２．９グラム、０．００４９ｍｏｌ）、無水ジクロロメタン（３０ｍｌ）およびトリフルオロ酢酸（３０ｍｌ）が充填された。生じた清澄な溶液は周囲温度で３時間撹拌された。反応の完了は^１ＨＮＭＲおよび^３１ＰＮＭＲ分析によって判断された。減圧下で溶媒を除去することにより、粘性のあるオレンジ色の油が得られ、これはメタノール（７．５ｍｌ）中に溶解され、ジエチルエーテル（５００ｍｌ）に撹拌しながら添加され、生成物の沈殿を生じた。生じたスラリーは周囲温度で１時間撹拌され、次に固体は沈殿させられた。清澄な溶液は上部からデカントされ、生成物はエーテル（２×１００ｍｌ）で粉砕された。固体が沈殿させられる度に清澄な溶液はデカントされた。生成物は最終的に真空オーブンで１０８時間５５℃で乾燥され、次にさらに１９２時間６５℃で乾燥され、白色固体としての３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸ＴＦＡ塩（１．７８グラム、７１％）を生じた。図１０ａ−ｃに表わされる^１ＨＮＭＲ，^１３ＣＮＭＲおよび^３１ＰＮＭＲスペクトルは、割り当てられた構造と一致した。^１ＨＮＭＲスペクトルは、生成物中の８．５％（ｗ／ｗ）のエーテルの存在を示した。このエーテルは除去することが極めて困難であることが証明され、材料は吸湿性であると特徴付けられた。図１０ｄに表わされる生成物の質量スペクトルは、ｍ／ｚ２７５［Ｃ_１１Ｈ_１９Ｎ_２Ｏ_４Ｐ＋Ｈ］^＋に分子ピークを示した。 Preparation of 3,5-bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate TFA salt: A 250 ml round bottom flask equipped with a magnetic stir bar was charged with protected phosphate (2.9 grams, 0.0049 mol), anhydrous Dichloromethane (30 ml) and trifluoroacetic acid (30 ml) were charged. The resulting clear solution was stirred at ambient temperature for 3 hours. Completion of the reaction was judged by ¹ H NMR and ³¹ P NMR analysis. Removal of the solvent under reduced pressure gave a viscous orange oil that was dissolved in methanol (7.5 ml) and added to diethyl ether (500 ml) with stirring to precipitate the product. Produced. The resulting slurry was stirred for 1 hour at ambient temperature and then the solid was allowed to settle. The clear solution was decanted from the top and the product was triturated with ether (2 × 100 ml). The clear solution was decanted each time a solid was precipitated. The product was finally dried in a vacuum oven for 108 hours at 55 ° C. and then further 192 hours at 65 ° C. to give 3,5-bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate TFA salt (1 Yielded .78 grams, 71%). The ¹ H NMR, ¹³ C NMR and ³¹ P NMR spectra depicted in FIGS. 10 a-c were consistent with the assigned structure. ¹ H NMR spectrum showed the presence of 8.5% (w / w) ether in the product. This ether proved extremely difficult to remove and the material was characterized as hygroscopic. The mass spectrum of the product represented in FIG. 10d showed a molecular peak at m / z 275 [C ₁₁ H ₁₉ N ₂ O ₄ P + H] ⁺ .

３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸（ＧＳ−２１）の調製：オーバーヘッド式機械撹拌器、温度計、１リットルの追加の圧力均等化濾斗およびガス入口アダプターを備えた三つ口の５リットルの丸底フラスコに、窒素雰囲気下で無水ジクロロメタン（１ｌ）中の３，５−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノエチル）ベンジルアルコール（２４．８８グラム、６３．１５ｍｍｏｌ）の溶液が充填された。反応混合物は氷／塩水浴で冷却された。無水アセトニトリル（１リットル）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチルジイソプロピルホスホルアミダイト（４９．８ｍｌ、１５７．９ｍｍｏｌ）が、反応温度が６℃未満に維持されるような速度で、圧力均等化濾斗を介して添加された。テトラゾール（アセトニトリル中の０．４５Ｍ溶液の３５１ｍｌ、１５７．９ｍｍｏｌ）は無水アセトニトリル（１５０ｍｌ）および無水ジクロロメタン（５００ｍｌ）で希釈され、温度が６℃未満に維持されるような速度で、圧力均等化濾斗を介して添加された。添加が完了した後、フラスコは冷浴中に移動され、反応混合物は１時間撹拌された。次にフラスコはドライアイス／アセトニトリル浴によって−３５℃に冷却された。無水ジクロロメタン（５００ｍｌ）中の３−クロロ過酸化安息香酸（１８．４グラム、８２．１ｍｍｏｌ）の溶液が一度に添加された。混合物は周囲温度に暖められ、その後２時間撹拌された。溶液は、水（１．５リットル）中のＮａ_２Ｓ_２Ｏ_３（２０グラム）およびＫ_２ＣＯ_３（５０グラム）の溶液中に注入された。生じた二相混合物は１１のｐＨを有していた。１５分間撹拌した後、揮発性の有機物は真空中で除去され、水層はクロロホルム（４×７５０ｍｌ）で抽出された。組合された有機層は硫酸マグネシウム上で乾燥され、濾過され、黄色の油（６９グラム）に濃縮された。粗材料はカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ＭＴＢＥ／ヘプタン、６：４）によって精製された。生成物を含む混合された画分は組合され、濃縮されて薄黄色の油（３２．６グラム）を生じた。この油のうち２８．６グラムがジクロロメタン（２８７ｍｌ、１０容量）中に溶解され、５００ｍｌの追加の圧力均等化濾斗および磁気撹拌棒を備えた１リットルの丸底フラスコ中に充填された。トリフルオロ酢酸（２８７ｍｌ、１０容量）は追加の圧力均等化濾斗を介して迅速に添加された。生じた溶液は５時間撹拌された。濃縮されて高真空下で一晩乾燥された後、濃いオレンジ色の油（３７．８８グラム）が得られた。残渣は水（５７ｍｌ、１．５容量）中に溶解され、撹拌されているメタノール（９０容量）中に滴下され、沈殿物を生じた。３０分間撹拌した後、固体は１時間沈殿させられ、液体はデカントされた。残りの液体は真空中で除去され、１３．７２グラムの固体を与えた。材料は水（６８ｍｌ、５容量）中に溶解され、Ｄｏｗｅｘ５０ＷＸ８−２００イオン交換樹脂（１３７グラム）中に添加された。カラムは水（５５０ｍｌ、４０容量）で洗浄された。生成物は３：１のＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ水溶液（２リットル、１４５容量）で溶離された。メタノール画分は減圧下で濃縮されて真っ白の固体を生じた。固体は最小量の水に溶解され、撹拌されているメタノール（４０容量）中に添加された。沈澱は濾過を介して収集され、真空下で一晩乾燥された。生じた粉末は水（７容量）で粉砕された。濾過および高真空下での乾燥後、最終生成物（２．０グラム）は白色粉末として得られた。濾過物は濃縮され、残渣は水（５容量）で粉砕された。濾過および高真空下での乾燥後、生成物の第二群（０．９グラム）が得られた。二つのロットは組合され、１０分間ブレンドされた。３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸（ＧＳ−２１）は白色粉末として得られた。図１１ａ−ｃに表わされる生成物の^１ＨＮＭＲ，^３１ＰＮＭＲおよび^１３ＣＮＭＲスペクトルは、割り当てられた構造と一致した。図１１ｄに表わされる質量スペクトルは、２７５［Ｃ_１１Ｈ_１９Ｎ_２Ｏ_４Ｐ＋Ｈ］^＋に分子ピークを示した。図１１ｅに表わされるＨＰＬＣクロマトグラム（上述の方法Ａを用いて得られる）は、生成物の９６．７％の純度を示した。最終生成物は非吸湿性であるとして特徴付けられた。 Preparation of 3,5-bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate (GS-21): three equipped with overhead mechanical stirrer, thermometer, 1 liter additional pressure equalizing funnel and gas inlet adapter A 5-liter round bottom flask with a neck is charged with a solution of 3,5-bis (tert-butoxycarbonylaminoethyl) benzyl alcohol (24.88 grams, 63.15 mmol) in anhydrous dichloromethane (1 l) under a nitrogen atmosphere. It was done. The reaction mixture was cooled with an ice / brine bath. Di-tert-butyldiisopropyl phosphoramidite (49.8 ml, 157.9 mmol) in anhydrous acetonitrile (1 liter) was passed through a pressure equalizing funnel at such a rate that the reaction temperature was maintained below 6 ° C. Added. Tetrazole (351 ml, 157.9 mmol of 0.45 M solution in acetonitrile) was diluted with anhydrous acetonitrile (150 ml) and anhydrous dichloromethane (500 ml) at a rate such that the temperature was maintained below 6 ° C. Added via funnel. After the addition was complete, the flask was moved into a cold bath and the reaction mixture was stirred for 1 hour. The flask was then cooled to -35 ° C with a dry ice / acetonitrile bath. A solution of 3-chloroperoxybenzoic acid (18.4 grams, 82.1 mmol) in anhydrous dichloromethane (500 ml) was added in one portion. The mixture was warmed to ambient temperature and then stirred for 2 hours. The solution was poured into a solution of Na ₂ S ₂ O ₃ (20 grams) and K ₂ CO ₃ (50 grams) in water (1.5 liters). The resulting biphasic mixture had a pH of 11. After stirring for 15 minutes, volatile organics were removed in vacuo and the aqueous layer was extracted with chloroform (4 × 750 ml). The combined organic layers were dried over magnesium sulfate, filtered and concentrated to a yellow oil (69 grams). The crude material was purified by column chromatography (silica gel, MTBE / heptane, 6: 4). The combined fractions containing the product were combined and concentrated to yield a light yellow oil (32.6 grams). Of this oil, 28.6 grams were dissolved in dichloromethane (287 ml, 10 vol) and charged into a 1 liter round bottom flask equipped with a 500 ml additional pressure equalizing funnel and a magnetic stir bar. Trifluoroacetic acid (287 ml, 10 vol) was added rapidly via an additional pressure equalizing funnel. The resulting solution was stirred for 5 hours. After being concentrated and dried overnight under high vacuum, a dark orange oil (37.88 grams) was obtained. The residue was dissolved in water (57 ml, 1.5 vol) and added dropwise to stirred methanol (90 vol) to give a precipitate. After stirring for 30 minutes, the solid was allowed to settle for 1 hour and the liquid was decanted. The remaining liquid was removed in vacuo to give 13.72 grams of solid. The material was dissolved in water (68 ml, 5 volumes) and added into Dowex 50WX8-200 ion exchange resin (137 grams). The column was washed with water (550 ml, 40 volumes). The product was eluted with 3: 1 aqueous MeOH / NH ₄ OH (2 liters, 145 volumes). The methanol fraction was concentrated under reduced pressure to yield a pure white solid. The solid was dissolved in a minimum amount of water and added to stirred methanol (40 vol). The precipitate was collected via filtration and dried overnight under vacuum. The resulting powder was ground with water (7 volumes). After filtration and drying under high vacuum, the final product (2.0 grams) was obtained as a white powder. The filtrate was concentrated and the residue was triturated with water (5 volumes). After filtration and drying under high vacuum, a second group of products (0.9 grams) was obtained. The two lots were combined and blended for 10 minutes. 3,5-Bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate (GS-21) was obtained as a white powder. The ¹ H NMR, ³¹ P NMR and ¹³ C NMR spectra of the product represented in FIGS. 11 a-c were consistent with the assigned structure. The mass spectrum represented in FIG. 11d showed a molecular peak at 275 [C ₁₁ H ₁₉ N ₂ O ₄ P + H] ⁺ . The HPLC chromatogram represented in FIG. 11e (obtained using Method A above) showed a 96.7% purity of the product. The final product was characterized as non-hygroscopic.

同様の方法を用いて、新規化合物ＧＳ−４およびＧＳ−５が以下のようにして合成された：
３−（グアニジノメチル）ベンジルリン酸（ＧＳ−４）の合成：
トリフルオロ酢酸塩としてのＧＳ−４の一般的な合成は以下の式７に表される：

Using similar methods, novel compounds GS-4 and GS-5 were synthesized as follows:
Synthesis of 3- (guanidinomethyl) benzyl phosphate (GS-4):
The general synthesis of GS-4 as the trifluoroacetate salt is represented by the following formula 7:

３−（アミノメチル）ベンジルアルコールの調製：ＴＨＦ中の３−（ヒドロキシメチル）ベンゾニトリルの溶液は、激しく撹拌されているＴＨＦ中のＬｉＡｌＨ_４の還流溶液中にゆっくりと添加され、窒素雰囲気下で維持された。溶液は還流状態で一晩加熱され、その後、水がゆっくりと滴下されて反応を停止させた（Ｈ_２のさらなる発生が明らかにならなくなるまで）。ＴＨＦは減圧下で蒸発され、エーテル／酸性化水が添加された。エーテル相は廃棄された。水性相はエーテルで洗浄され、有気相は廃棄された。水性相のｐＨがｐＨ７に達するまでＮａＯＨが添加された。溶液はＴＨＦで３回抽出され、ＭｇＳＯ_４上で乾燥され、減圧下で蒸発されて薄黄色の残渣を生じ、これは、酢酸エチルから始まり酢酸エチル：ＭｅＯＨの１：１混合物で終わる勾配溶離剤を用いてシリカゲルカラム上でクロマトグラフィーによって精製され、中間体を４０％の収量で与えた。

Preparation of 3- (aminomethyl) benzyl alcohol: A solution of 3- (hydroxymethyl) benzonitrile in THF was slowly added into a refluxing solution of LiAlH ₄ in THF under vigorous stirring, under a nitrogen atmosphere. Maintained. The solution was heated at reflux overnight, after which time water was slowly added dropwise to stop the reaction (until no further evolution of H ₂ became apparent). The THF was evaporated under reduced pressure and ether / acidified water was added. The ether phase was discarded. The aqueous phase was washed with ether and the gas phase was discarded. NaOH was added until the pH of the aqueous phase reached pH7. The solution is extracted three times with THF, dried over MgSO ₄ and evaporated under reduced pressure to give a pale yellow residue which begins with ethyl acetate and ends with a 1: 1 mixture of ethyl acetate: MeOH. Was purified by chromatography on a silica gel column to give the intermediate in 40% yield.

３−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ＢＯＣ−グアニジノメチル）ベンジルアルコールの調製：乾燥ＤＭＦ中の３−（アミノメチル）ベンジルアルコール、３−（Ｎ，Ｎ’−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｓ−メチルイソチオ尿素およびトリエチルアミノの溶液は、室温で一晩撹拌された。次にエーテル／水の混合物が添加され、有機層が分離され、一方、水性層はエーテルで抽出された。組合された有機抽出物は水で洗浄され、ＭｇＳＯ_４上で乾燥され、減圧下で蒸発された。粗生成物は、ヘキサンから始まり酢酸エチル：ヘキサンの１：５混合物で終わる勾配溶離剤を用いたフラッシュクロマトグラフィーによって精製され、８５％の収量を生じた。

Preparation of 3- (N, N′-bis-BOC-guanidinomethyl) benzyl alcohol: 3- (aminomethyl) benzyl alcohol, 3- (N, N′-bis (tert-butoxycarbonyl) -S in dry DMF The solution of methylisothiourea and triethylamino was stirred overnight at room temperature, then the ether / water mixture was added and the organic layer was separated, while the aqueous layer was extracted with ether. The extract was washed with water, dried over MgSO ₄ and evaporated under reduced pressure The crude product was flash chromatographed using a gradient eluent starting with hexane and ending with a 1: 5 mixture of ethyl acetate: hexane. To give a yield of 85%.

ジ−ｔｅｒｔ−ブチル３−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ＢＯＣ−グアニジノメチル）ベンジルリン酸の調製：
１Ｈ−テトラゾール溶液（アセトニトリル中の０．４５Ｍ，２０ｍｌ，９ｍｍｏｌ，３当量）は、乾燥ＴＨＦ（３ｍｌ）中の３−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ＢＯＣ−グアニジノメチル）ベンジルアルコール（１当量）とジ−ｔｅｒｔ−ブチルジイソプロピルホスホルアミダイト（１．４２ｍｌ、１．２４グラム、４．５ｍｍｏｌ、１.５当量）との撹拌された溶液に一度に添加された。混合物は３０分間２０℃で撹拌され、次に混合物は（ドライアイス／アセトニトリルにより）−４０℃に冷却された。ＤＣＭ（４ｍｌ）中の８５％ｍＣＰＢＡ（１.５ｍｌＤＣＭ中の１．２５グラム、６．１５ｍｍｏｌ、２．０当量）の溶液は迅速に添加され、一方、反応温度は０℃以下に保持された。溶液は室温にまで暖められ、２０分間撹拌された後、１０％のＮａＨＳＯ_３水溶液（１０ｍｌ）が添加され、混合物はさらに５分間撹拌された。次に、混合物はエーテル（７０ｍｌ）で抽出され、水性相が廃棄された。エーテル相は１０％のＮａＨＳＯ_３水溶液（２×２０ｍｌ）および５％のＮａＨＣＯ_３の飽和水溶液（２×２０ｍｌ）で洗浄され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過された。有機濾過物は蒸発され、残渣はＥｔＯＡｃ／ヘキサン１：９から１：５の勾配溶離剤を用いてシリカゲルカラム上でクロマトグラフィーにより精製され、リン酸エステル生成物とベンジルアルコール出発材料の混合物が得られ、これはＣＨＣｌ_３：ＭｅＯＨ３０：１から２０：１の勾配溶離剤を用いてシリカゲルカラム上でクロマトフラフィーによってさらに精製され、純粋なジ−ｔｒｅｔ−ブチル３−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ＢＯＣ−グアニジノメチル）ベンジルリン酸を７０％の収量で与えた。

Preparation of di-tert-butyl 3- (N, N′-bis-BOC-guanidinomethyl) benzyl phosphate:
1H-tetrazole solution (0.45 M in acetonitrile, 20 ml, 9 mmol, 3 eq) was combined with 3- (N, N′-bis-BOC-guanidinomethyl) benzyl alcohol (1 eq) in dry THF (3 ml). To a stirred solution of di-tert-butyldiisopropyl phosphoramidite (1.42 ml, 1.24 grams, 4.5 mmol, 1.5 eq) was added in one portion. The mixture was stirred for 30 minutes at 20 ° C., then the mixture was cooled to −40 ° C. (by dry ice / acetonitrile). A solution of 85% mCPBA (1.25 grams, 6.15 mmol, 2.0 equiv in 1.5 ml DCM) in DCM (4 ml) was added rapidly while the reaction temperature was kept below 0 ° C. The solution was allowed to warm to room temperature and stirred for 20 minutes before 10% aqueous NaHSO ₃ (10 ml) was added and the mixture was stirred for an additional 5 minutes. The mixture was then extracted with ether (70 ml) and the aqueous phase was discarded. The ether phase was washed with 10% aqueous NaHSO ₃ (2 × 20 ml) and saturated aqueous 5% NaHCO ₃ (2 × 20 ml), dried over sodium sulfate and filtered. The organic filtrate is evaporated and the residue is purified by chromatography on a silica gel column using a gradient eluent of EtOAc / hexane 1: 9 to 1: 5 to give a mixture of phosphate ester product and benzyl alcohol starting material. This was further purified by chromatography on a silica gel column using a gradient eluent of CHCl ₃ : MeOH 30: 1 to 20: 1 to give pure di-tret-butyl 3- (N, N′-bis- BOC-guanidinomethyl) benzyl phosphate was given in 70% yield.

３−（グアニジノメチル）ベンジルリン酸トリフルオロ酢酸塩の調製：ＤＣＭ中の２５％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）の溶液が、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル３−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ＢＯＣ−グアニジノメチル）ベンジルリン酸に２０℃で添加され、反応混合物は１８時間撹拌された。溶媒とＴＦＡはその後、減圧下で蒸発され、残渣は水に溶解され、エーテルで洗浄された。次に溶媒は減圧下で蒸発され、純粋な生成物を６０％の収量で与えた。

Preparation of 3- (guanidinomethyl) benzyl phosphate trifluoroacetate salt: A solution of 25% trifluoroacetic acid (TFA) in DCM was added to di-tert-butyl 3- (N, N′-bis-BOC-guanidinomethyl). ) Added to benzyl phosphoric acid at 20 ° C. and the reaction mixture was stirred for 18 hours. The solvent and TFA were then evaporated under reduced pressure and the residue was dissolved in water and washed with ether. The solvent was then evaporated under reduced pressure to give the pure product in 60% yield.

３−グアニジノベンジルリン酸（ＧＳ−５）の合成：
トリフルオロ酢酸塩としてのＧＳ−５の一般的な合成は、以下の式８に表わされる：

Synthesis of 3-guanidinobenzyl phosphate (GS-5):
The general synthesis of GS-5 as the trifluoroacetate salt is represented by the following formula 8:

３−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ＢＯＣ−グアニジノ）ベンジルアルコールの調製：Ｎ，Ｎ’−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｓ−メチルイソチオ尿素（１．３２グラム、４．４ｍｍｏｌ、１．１当量）、塩化水銀（１．２２グラム、４．４ｍｍｏｌ、１．１当量）およびトリエチルアミン（１．７２ｍｌ、１２ｍｍｏｌ、３当量）の溶液が、乾燥ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中の３−アミノベンジルアルコール（０．５グラム、４ｍｍｏｌ、１．０当量）に添加され、反応混合物は室温で５時間撹拌された。その後、混合物はエーテル／水で抽出され、有機層は飽和されたＮＨ_４Ｃｌ水溶液および塩水で洗浄された。水性層はエーテルで抽出された。組合されたエーテル溶液はＭｇＳＯ_４上で乾燥され、減圧下で蒸発された。粗生成物は、ヘキサンから４０：６０の酢酸エチル：ヘキサンまでの勾配溶離剤を用いてシリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィーによって精製され、中間体を６０％の収量で与えた。

Preparation of 3- (N, N′-bis-BOC-guanidino) benzyl alcohol: N, N′-bis (tert-butoxycarbonyl) -S-methylisothiourea (1.32 grams, 4.4 mmol, 1.1 equiv. ), Mercury chloride (1.22 grams, 4.4 mmol, 1.1 eq.) And triethylamine (1.72 ml, 12 mmol, 3 eq.) In 3-dimethylbenzyl alcohol (DMF) in dry dimethylformamide (DMF). 0.5 grams, 4 mmol, 1.0 eq.) And the reaction mixture was stirred at room temperature for 5 hours. The mixture was then extracted with ether / water and the organic layer was washed with saturated aqueous NH ₄ Cl and brine. The aqueous layer was extracted with ether. The combined ether solution was dried over MgSO ₄ and evaporated under reduced pressure. The crude product was purified by flash chromatography on silica gel using a gradient eluent from hexane to 40:60 ethyl acetate: hexane to give the intermediate in 60% yield.

ジ−ｔｅｒｔ−ブチル３−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ＢＯＣ−グアニジノ）ベンジルリン酸の調製：
１Ｈ−テトラゾール溶液（アセトニトリル中の０．４５Ｍ，１８．４ｍｌ，８．３ｍｍｏｌ，３当量）は、乾燥ＴＨＦ（３ｍｌ）中の３−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ＢＯＣ−グアニジノ）ベンジルアルコール（１グラム、２．８ｍｍｏｌ、１当量）とジ−ｔｅｒｔ−ブチルジイソプロピルホスホルアミダイト（１．１３ｍｌ、３.６ｍｍｏｌ、１.３当量）との撹拌された溶液に一度に添加された。混合物は２０℃で３０分間撹拌され、その後、混合物は（ドライアイス／アセトニトリルにより）−４０℃に冷却された。ＤＣＭ（４ｍｌ）中の８５％ｍＣＰＢＡ（１.５ｍｌＤＣＭ中の０．８５グラム、４.２０ｍｍｏｌ、１．５当量）の溶液は迅速に添加され、一方、反応温度は０℃以下に保持された。溶液は室温にまで暖められ、２０分間撹拌された後、１０％のＮａＨＳＯ_３水溶液（１０ｍｌ）が添加され、混合物はさらに１０分間撹拌された。次に、混合物はエーテル（５０ｍｌ）で抽出され、水性相が廃棄された。エーテル相は１０％のＮａＨＳＯ_３水溶液（２×２０ｍｌ）およびＮａＨＣＯ_３の飽和水溶液（２×２０ｍｌ）で洗浄され、硫酸ナトリウム上で乾燥され、濾過された。溶媒は蒸発され、残渣はＥｔＯＡｃ／ヘキサン１０：９０から３０：７０の勾配溶離剤を用いてシリカゲルカラム上でクロマトグラフィーにより精製され、保護された生成物を６０％の収量で与えた。

Preparation of di-tert-butyl 3- (N, N′-bis-BOC-guanidino) benzyl phosphate:
1H-tetrazole solution (0.45M in acetonitrile, 18.4 ml, 8.3 mmol, 3 eq) was added to 3- (N, N′-bis-BOC-guanidino) benzyl alcohol (1) in dry THF (3 ml). Gram, 2.8 mmol, 1 eq) and di-tert-butyldiisopropyl phosphoramidite (1.13 ml, 3.6 mmol, 1.3 eq) were added in one portion. The mixture was stirred at 20 ° C. for 30 minutes, after which the mixture was cooled to −40 ° C. (by dry ice / acetonitrile). A solution of 85% mCPBA (0.85 grams, 4.20 mmol, 1.5 eq in 1.5 ml DCM) in DCM (4 ml) was added rapidly while the reaction temperature was kept below 0 ° C. . The solution was allowed to warm to room temperature and stirred for 20 minutes before 10% aqueous NaHSO ₃ (10 ml) was added and the mixture was stirred for an additional 10 minutes. The mixture was then extracted with ether (50 ml) and the aqueous phase was discarded. The ether phase was washed with 10% NaHSO ₃ solution (2 × 20 ml) and saturated aqueous NaHCO ₃ (2 × 20ml), dried over sodium sulfate and filtered. The solvent was evaporated and the residue purified by chromatography on a silica gel column using a gradient eluent of EtOAc / hexane 10:90 to 30:70 to give the protected product in 60% yield.

３−グアニジノベンジルリン酸のトリフルオロ酢酸塩の調製：ＤＣＭ（４．５ｍｌ）中の２５％ＴＦＡ（１．５ｍｌ）の溶液が、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−３−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ＢＯＣ−グアニジノ）ベンジルリン酸（０．３グラム、０．５４ｍｍｏｌ、１当量）に２０℃で添加され、反応混合物は１８時間撹拌された。溶媒およびＴＦＡはその後、減圧下で蒸発され、残渣は水に溶解され、エーテルで洗浄された。溶媒は減圧下（凍結乾燥器）で蒸発され、純粋な生成物を４０％の収量で与えた（Ｃ_１０Ｈ_１３Ｆ_３Ｎ_３Ｏ_６Ｐ；Ｍｗ＝３５９．２グラム／ｍｏｌ）。

Preparation of trifluoroacetate salt of 3-guanidinobenzyl phosphate: A solution of 25% TFA (1.5 ml) in DCM (4.5 ml) was added to di-tert-butyl-3- (N, N′-bis- To BOC-guanidino) benzyl phosphate (0.3 grams, 0.54 mmol, 1 eq) was added at 20 ° C. and the reaction mixture was stirred for 18 hours. The solvent and TFA were then evaporated under reduced pressure and the residue was dissolved in water and washed with ether. The solvent under a reduced pressure is evaporated (lyophilizer), the pure product was given in 40% yield _{_{_{_{(C 10 H 13 F 3 N}}}} 3 O 6 P; Mw = 359.2 grams / mol).

インビトロ阻害アッセイ：
予備的な阻害アッセイにおいて、公知化合物であるフェニルリン酸、ピリドキサールリン酸、ＧＳ−１，ＧＳ−２およびＧＳ−３のＧＳＫ−３阻害活性が上述の通りテストされた。図１２に表わされる結果は、すべてのテストされた化合物が、ＧＳＫ−３に対する阻害活性を発揮し、ピリジンのリン酸塩誘導体、即ちピリドキサールリン酸、およびＧＳ−３がフェニルのリン酸塩誘導体（フェニルリン酸、ＧＳ−１およびＧＳ−２）よりも活性であったことを示した。 In vitro inhibition assay:
In a preliminary inhibition assay, the GSK-3 inhibitory activities of the known compounds phenyl phosphate, pyridoxal phosphate, GS-1, GS-2 and GS-3 were tested as described above. The results presented in FIG. 12 show that all tested compounds exerted inhibitory activity against GSK-3, the phosphate derivative of pyridine, ie pyridoxal phosphate, and the phosphate derivative of GS-3 phenyl ( It was shown to be more active than phenylphosphoric acid, GS-1 and GS-2).

さらなる阻害アッセイにおいて、ＧＳ−１，ＧＳ−２，ＧＳ−３，ＧＳ−５およびＧＳ−２１のＧＳＫ−３阻害活性がテストされた。ＰＧＳ−１ペプチド基質をリン酸化するＧＳＫ−３の活性は、これらの化合物の示された濃度の存在下で測定された。図１３に示される結果は、阻害剤を有さないコントロールのインキュベーションと比較したＧＳＫ−３活性の割合を表わし、二つの独立した実験の平均±ＳＥＭであり、各点は３回アッセイされた。 In a further inhibition assay, GS-1, GS-2, GS-3, GS-5 and GS-21 were tested for GSK-3 inhibitory activity. The activity of GSK-3 phosphorylating PGS-1 peptide substrates was measured in the presence of the indicated concentrations of these compounds. The results shown in FIG. 13 represent the percentage of GSK-3 activity compared to control incubations without inhibitor, and are the mean ± SEM of two independent experiments, each point assayed in triplicate.

図１３に示されるように、テストされた化合物はＧＳＫ−３活性を阻害することにおいて極めて活性であることが見出され（１〜５ｍＭのＩＣ５０値）、ＧＳ−３およびＧＳ−５が最も活性な化合物であった。これらの結果は、環中のまたはそれに隣接した位置（例えば環原子に直接結合された位置）での一以上の窒素原子の存在は、新規に設計された小分子のＧＳＫ−３阻害活性に影響を与えうる（ＧＳＫ−３阻害活性を増大させうる）特徴であるということを示唆する。 As shown in FIG. 13, the compounds tested were found to be very active in inhibiting GSK-3 activity (IC50 value of 1-5 mM), with GS-3 and GS-5 being the most active Compound. These results show that the presence of one or more nitrogen atoms in or adjacent to the ring (eg, directly attached to the ring atom) affects the GSK-3 inhibitory activity of the newly designed small molecule. It is suggested that it is a feature that can give (increase GSK-3 inhibitory activity).

グルコース取込み：
新規に設計された化合物ＧＳ−５およびＧＳ−２１の、グルコース取込みを促進させる能力が、マウスの始原脂肪細胞で上述のようにしてテストされた。非処理の脂肪細胞で観察された相対的な［^３Ｈ］２−デオキシグルコースの取込みは、１単位に正規化され、ＧＳ−５またはＧＳ−２１で処理された脂肪細胞における［^３Ｈ］２−デオキシグルコースについて得られた値は、ペプチドコントロールで処理された細胞に対する活性化倍率として表わされ、六つの独立した実験の平均±ＳＥＭであり、各点は３回アッセイされた。 Glucose uptake:
The ability of newly designed compounds GS-5 and GS-21 to promote glucose uptake was tested in mouse primordial adipocytes as described above. The relative [ ³ H] 2-deoxyglucose uptake observed in untreated adipocytes was normalized to 1 unit and [ ³ H] 2 in adipocytes treated with GS-5 or GS-21. -Values obtained for deoxyglucose are expressed as fold activation against cells treated with peptide control, and are the mean ± SEM of 6 independent experiments, each point assayed in triplicate.

図１４ａ（ＧＳ−５）および図１４ｂ（ＧＳ−２１）に表わされる結果は、ＧＳ−２１は５μＭおよび０．５μＭの濃度でグルコース取込みをそれぞれ２．５倍および１．７倍に増大したことを示す。いくらか減少された効果はＧＳ−５の存在下で観察され、これは１０μＭの濃度でグルコース取込みを約２倍に増大した。図１４ａおよび１４ｂにさらに示されるように、ＧＳ−５およびＧＳ−２１によって達成されるグルコース取込みの活性化は、１００ｎＭのインスリンの存在下で達成される活性化に匹敵していた。これらの結果は、これらの新規に設計された化合物が、インスリンシグナル伝達を増大することにおいて、および糖尿病の如きＧＳＫ−３によって媒介される病気を治療することにおいて、インスリンの模倣体として作用する能力を有することをさらに証明する。

The results presented in FIGS. 14a (GS-5) and 14b (GS-21) show that GS-21 increased glucose uptake by 2.5 and 1.7 fold at concentrations of 5 μM and 0.5 μM, respectively. Indicates. A somewhat reduced effect was observed in the presence of GS-5, which increased glucose uptake approximately 2-fold at a concentration of 10 μM. As further shown in FIGS. 14a and 14b, the activation of glucose uptake achieved by GS-5 and GS-21 was comparable to that achieved in the presence of 100 nM insulin. These results indicate that these newly designed compounds can act as insulin mimetics in increasing insulin signaling and in treating diseases mediated by GSK-3 such as diabetes. Prove that you have

明確にするため別個の実施態様で説明されている本発明の特定の特徴は単一の実施態様に組み合わせて提供することもできることは分かるであろう。逆に、簡潔にするため単一の実施態様で説明されている本発明の各種の特徴は別個にまたは適切なサブコンビネーションで提供することもできる。 It will be appreciated that certain features of the invention described in separate embodiments for clarity may also be provided in combination in a single embodiment. Conversely, the various features of the invention described in a single embodiment for the sake of brevity can also be provided separately or in appropriate subcombinations.

本発明はその特定の実施態様によって説明してきたが、多くの別法、変更及び変形があることは当業者には明らかであることは明白である。従って、本発明は、本願の請求項の精神と広い範囲の中に入るこのような別法、変更及び変形すべてを包含するものである。本願で挙げた刊行物、特許及び特許願はすべて、個々の刊行物、特許及び特許願が各々あたかも具体的にかつ個々に引用提示されているのと同程度に、全体を本明細書に援用するものである。さらに、本願で引用又は確認したことは本発明の先行技術として利用できるという自白とみなすべきではない。 While the invention has been described in terms of specific embodiments thereof, it will be apparent to those skilled in the art that there are many alternatives, modifications, and variations. Accordingly, the present invention is intended to embrace all such alternatives, modifications and variations that fall within the spirit and broad scope of the appended claims. All publications, patents, and patent applications cited in this application are hereby incorporated by reference in their entirety as if each individual publication, patent, and patent application were specifically and individually cited. To do. Furthermore, citation or confirmation in this application should not be considered as a confession that it can be used as prior art to the present invention.

図１ａ−ｂは、２Ｄ ^１Ｈ−ＮＭＲ研究によって得られた通りのペプチドｐ９ＣＲＥＢ（図１ａ）およびＣＲＥＢ（図１ｂ）の３Ｄ構造のコンピュータ画像を表わす。FIGS. 1a-b represent computer images of the 3D structure of peptides p9CREB (FIG. 1a) and CREB (FIG. 1b) as obtained by a 2D ¹ H-NMR study. ２Ｄ ^１Ｈ−ＮＭＲ研究によって得られたペプチドの３Ｄ構造に基づくｐ９ＣＲＥＢペプチドの静電分布を示す画像である。FIG. 3 is an image showing the electrostatic distribution of p9CREB peptide based on the 3D structure of the peptide obtained by 2D ¹ H-NMR studies. フェニルリン酸、ピリドキサールリン酸（Ｐ−５−Ｐ）、ＧＳ−１、ＧＳ−２、ＧＳ−３の化学構造および新規化合物ＧＳ−４、ＧＳ−５およびＧＳ−２１の化学構造を表わす。The chemical structure of phenylphosphoric acid, pyridoxal phosphoric acid (P-5-P), GS-1, GS-2, GS-3 and the chemical structure of novel compounds GS-4, GS-5 and GS-21 are shown. 図４ａは、ＧＳ−２１の合成の中間体である１，３，５−トリス（ヒドロキシメチル）ベンゼンの^１ＨＮＭＲスペクトルを表わす。FIG. 4a represents the ¹ H NMR spectrum of 1,3,5-tris (hydroxymethyl) benzene, an intermediate in the synthesis of GS-21. 図４ｂは、ＧＳ−２１の合成の中間体である１，３，５−トリス（ヒドロキシメチル）ベンゼンの^１３ＣＮＭＲスペクトルを表わす。FIG. 4b represents the ¹³ C NMR spectrum of 1,3,5-tris (hydroxymethyl) benzene, an intermediate for the synthesis of GS-21. 図５ａは、ＧＳ−２１の合成の中間体である３，５−ビス（ブロモメチル）ベンジルアルコールの^１ＨＮＭＲスペクトルを表わす。FIG. 5a represents the ¹ H NMR spectrum of 3,5-bis (bromomethyl) benzyl alcohol, an intermediate in the synthesis of GS-21. 図５ｂは、ＧＳ−２１の合成の中間体である３，５−ビス（ブロモメチル）ベンジルアルコールの^１３ＣＮＭＲスペクトルを表わす。FIG. 5b represents the ¹³ C NMR spectrum of 3,5-bis (bromomethyl) benzyl alcohol, an intermediate in the synthesis of GS-21. 図６ａは、ＧＳ−２１の合成の中間体である３，５−ビス（シアノメチル）ベンジルアルコールの^１ＨＮＭＲスペクトルを表わす。FIG. 6a represents the ¹ H NMR spectrum of 3,5-bis (cyanomethyl) benzyl alcohol, an intermediate in the synthesis of GS-21. 図６ｂは、ＧＳ−２１の合成の中間体である３，５−ビス（シアノメチル）ベンジルアルコールの^１３ＣＮＭＲスペクトルを表わす。FIG. 6b represents the ¹³ C NMR spectrum of 3,5-bis (cyanomethyl) benzyl alcohol, an intermediate in the synthesis of GS-21. ＧＳ−２１の合成の中間体である３，５−ビス（アミノエチル）ベンジルアルコールの^１ＨＮＭＲスペクトルを表わす。 ¹ represents a ¹ H NMR spectrum of 3,5-bis (aminoethyl) benzyl alcohol, which is an intermediate in the synthesis of GS-21. ＧＳ−２１の合成の中間体である３，５−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノエチル）ベンジルアルコールの^１ＨＮＭＲスペクトルを表わす。 ¹ represents a ¹ H NMR spectrum of 3,5-bis (tert-butoxycarbonylaminoethyl) benzyl alcohol, which is an intermediate in the synthesis of GS-21. 図９ａは、ＧＳ−２１の合成の中間体である、保護された３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸の^１ＨＮＭＲスペクトルを表わす。FIG. 9a represents the ¹ H NMR spectrum of protected 3,5-bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate, which is an intermediate in the synthesis of GS-21. 図９ｂは、ＧＳ−２１の合成の中間体である、保護された３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸の^１３ＣＮＭＲスペクトルを表わす。FIG. 9b represents the ¹³ C NMR spectrum of protected 3,5-bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate, which is an intermediate in the synthesis of GS-21. 図９ｃは、ＧＳ−２１の合成の中間体である、保護された３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸の^３１ＰＮＭＲスペクトルを表わす。FIG. 9c represents the ³¹ P NMR spectrum of protected 3,5-bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate, which is an intermediate in the synthesis of GS-21. 図１０ａは、ＴＦＡ塩３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸（ＧＳ−２１ＴＦＡ塩）の^１ＨＮＭＲスペクトルを表わす。FIG. 10a represents the ¹ H NMR spectrum of TFA salt 3,5-bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate (GS-21 TFA salt). 図１０ｂは、ＴＦＡ塩３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸（ＧＳ−２１ＴＦＡ塩）の^１３ＣＮＭＲスペクトルを表わす。FIG. 10b represents the ¹³ C NMR spectrum of TFA salt 3,5-bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate (GS-21 TFA salt). 図１０ｃは、ＴＦＡ塩３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸（ＧＳ−２１ＴＦＡ塩）の^３１ＰＮＭＲスペクトルを表わす。FIG. 10c represents the ³¹ P NMR spectrum of the TFA salt 3,5-bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate (GS-21 TFA salt). 図１０ｄは、ＴＦＡ塩３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸（ＧＳ−２１ＴＦＡ塩）のＥＳＩ−ＭＳ（図１０ｄ）を表わす。FIG. 10d represents the ESI-MS (FIG. 10d) of the TFA salt 3,5-bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate (GS-21 TFA salt). 図１１ａは、３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸（ＧＳ−２１）の^１ＨＮＭＲスペクトルを表わす。FIG. 11a represents the ¹ H NMR spectrum of 3,5-bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate (GS-21). 図１１ｂは、３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸（ＧＳ−２１）の^１３ＣＮＭＲスペクトルを表わす。FIG. 11b represents the ¹³ C NMR spectrum of 3,5-bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate (GS-21). 図１１ｃは、３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸（ＧＳ−２１）の^３１ＰＮＭＲスペクトルを表わす。FIG. 11c represents the ³¹ P NMR spectrum of 3,5-bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate (GS-21). 図１１ｄは、３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸（ＧＳ−２１）のＥＳＩ−ＭＳを表わす。FIG. 11d represents the ESI-MS of 3,5-bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate (GS-21). 図１１ｅは、３，５−ビス（２−アミノエチル）ベンジルリン酸（ＧＳ−２１）のＨＰＬＣクロマトグラムを表わす。FIG. 11e represents an HPLC chromatogram of 3,5-bis (2-aminoethyl) benzyl phosphate (GS-21). インビトロ阻害アッセイにおけるフェニルリン酸、ＧＳ−１、ＧＳ−２、ＧＳ−３およびピリドキサールリン酸（Ｐ−５−Ｐ）のＧＳＫ−３阻害活性を示す比較プロットを表わす。FIG. 6 represents a comparative plot showing GSK-3 inhibitory activity of phenylphosphate, GS-1, GS-2, GS-3 and pyridoxal phosphate (P-5-P) in an in vitro inhibition assay. インビトロ阻害アッセイにおけるＧＳ−１、ＧＳ−２、ＧＳ−３、ＧＳ−５およびＧＳ−２１のＧＳＫ−３阻害活性を示す比較プロットを表わす。FIG. 4 represents a comparative plot showing GSK-3 inhibitory activity of GS-1, GS-2, GS-3, GS-5 and GS-21 in an in vitro inhibition assay. 図１４ａ−ｂは、ペプチドコントロール（１単位に正規化されている）で処理された細胞にわたる活性化倍率としての、ＧＳ−５およびＧＳ−２１で処理された細胞における［^３Ｈ］２−デオキシグルコース取込みによって表わされる、マウスの脂肪細胞におけるグルコース取込みに対するＧＳ−２１（図１４ｂ）およびＧＳ−５（図１４ａ）の影響を示す棒グラフである。Figure 14a-b are as fold activation over cells treated with peptide control (normalized to 1 unit), ^[3 H] in cells treated with GS-5 and GS-21 2-deoxy FIG. 15 is a bar graph showing the effect of GS-21 (FIG. 14b) and GS-5 (FIG. 14a) on glucose uptake in mouse adipocytes, represented by glucose uptake.

配列番号１は、ＧＳＫ−３の認識モチーフコンセンサスである。
配列番号２〜４は、合成ペプチドの配列である。 SEQ ID NO: 1 is a recognition motif consensus of GSK-3.
SEQ ID NOs: 2 to 4 are synthetic peptide sequences.

を有する負に帯電した基であり、式中、Ｌはリン原子、イオウ原子、ケイ素原子、ホウ素原子および炭素原子からなる群から選択され；Ｑ^＊，ＧおよびＤ^＊はそれぞれ独立して酸素およびイオウからなる群から選択され；Ｅはヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、カルボニル、チオカルボニル、Ｏ−カルボキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシおよびチオアリールオキシからなる群から選択されるかまたは存在せず、
Ｄは水素、アルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルホンアミド、カルボニル、ケトエステル、チオカルボニル、エステル、エーテル、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、ヒドラジン、アミノアルキルおよび疎水性部分からなる群から選択され；そして
Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４はそれぞれ独立して水素、孤立電子対、アルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルホンアミド、カルボニル、ケトエステル、チオカルボニル、エステル、エーテル、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニリノアルキル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジンおよびアンモニウムイオンからなる群から選択され；
ただし、Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷの少なくとも一つは窒素原子であるかおよび／またはＲ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４の少なくとも一つは少なくとも一つのアミノ部分を含む基であり、ただし、本化合物はピリドキサールリン酸ではない。 Thus, according to one aspect of the present invention, there is provided a compound having the general formula: or a pharmaceutically acceptable salt thereof:

Wherein L is selected from the group consisting of a phosphorus atom, a sulfur atom, a silicon atom, a boron atom and a carbon atom; Q ^* , G and D ^* are each independently oxygen and Selected from the group consisting of sulfur; E is selected from the group consisting of hydroxy, alkoxy, aryloxy, carbonyl, thiocarbonyl, O-carboxy, thiohydroxy, thioalkoxy and thioaryloxy or absent
D is hydrogen, alkyl, trihaloalkyl, cycloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclic, halo, hydroxy, alkoxy, aryloxy, thiohydroxy, thioalkoxy, thioaryloxy, sulfinyl, sulfonyl, cyano, Nitro, azo, sulfonamide, carbonyl, ketoester, thiocarbonyl, ester, ether, thioether, thiocarbamate, urea, thiourea, O-carbamyl, N-carbamyl, O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amide, N- From the group consisting of amide, C-carboxy, O-carboxy, sulfonamide, trihalomethanesulfonamide, guanyl, guanidino, guanidinoalkyl, amino, hydrazine, aminoalkyl and hydrophobic moieties -Option is; and R _1, _R 2, _{R 3} and _{R 4} are each independently hydrogen, lone pair, alkyl, trihaloalkyl, cycloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclic, halo, hydroxy , Alkoxy, aryloxy, thiohydroxy, thioalkoxy, thioaryloxy, sulfinyl, sulfonyl, cyano, nitro, azo, sulfonamide, carbonyl, ketoester, thiocarbonyl, ester, ether, thioether, thiocarbamate, urea, thiourea, O-carbamyl, N-carbamyl, O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amide, N-amide, C-carboxy, O-carboxy, sulfonamide, trihalomethanesulfonamide, guanyl, guanylinoalkyl, gua Gino, guanidino alkyl, amino, selected from the group consisting of aminoalkyl, hydrazine and an ammonium ion;
Provided that at least one of X, Y, Z and W is a nitrogen atom and / or at least one of R ₁ , R ₂ , R ₃ and R ₄ is a group comprising at least one amino moiety, The compound is not pyridoxal phosphate.

記述された好ましい態様におけるさらなる特徴によれば、Ｑ^＊，ＧおよびＤ^＊のそれぞれは酸素であり、Ｅは好ましくはヒドロキシである。 According to still further features in the described preferred embodiments each of Q ^* , G and D ^* is oxygen and E is preferably hydroxy.

を有する負に帯電した基であり、式中、Ｌはリン原子、イオウ原子、ケイ素原子、ホウ素原子および炭素原子からなる群から選択され；Ｑ^＊，ＧおよびＤ^＊はそれぞれ独立して酸素およびイオウからなる群から選択され；Ｅはヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、カルボニル、チオカルボニル、Ｏ−カルボキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシおよびチオアリールオキシからなる群から選択されるかまたは存在せず、
Ｄは水素、アルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルホンアミド、カルボニル、ケトエステル、チオカルボニル、エステル、エーテル、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキルおよび疎水性部分からなる群から選択され；そして
Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４はそれぞれ独立して水素、孤立電子対、アルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルホンアミド、カルボニル、ケトエステル、チオカルボニル、エステル、エーテル、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニリノアルキル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジンおよびアンモニウムイオンからなる群から選択される。 Thus, according to one aspect of the present invention, there is provided a compound having the general formula: or a pharmaceutically acceptable salt thereof:

Wherein L is selected from the group consisting of a phosphorus atom, a sulfur atom, a silicon atom, a boron atom and a carbon atom; Q ^* , G and D ^* are each independently oxygen and Selected from the group consisting of sulfur; E is selected from the group consisting of hydroxy, alkoxy, aryloxy, carbonyl, thiocarbonyl, O-carboxy, thiohydroxy, thioalkoxy and thioaryloxy or absent
D is hydrogen, alkyl, trihaloalkyl, cycloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclic, halo, hydroxy, alkoxy, aryloxy, thiohydroxy, thioalkoxy, thioaryloxy, sulfinyl, sulfonyl, cyano, Nitro, azo, sulfonamide, carbonyl, ketoester, thiocarbonyl, ester, ether, thioether, thiocarbamate, urea, thiourea, O-carbamyl, N-carbamyl, O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amide, N- Selected from the group consisting of amide, C-carboxy, O-carboxy, sulfonamide, trihalomethanesulfonamide, guanyl, guanidino, guanidinoalkyl, amino, aminoalkyl and hydrophobic moieties; R _1, _R 2, _{R 3} and _{R 4} are each independently hydrogen Te, lone pairs, alkyl, trihaloalkyl, cycloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclic, halo, hydroxy, alkoxy, Aryloxy, thiohydroxy, thioalkoxy, thioaryloxy, sulfinyl, sulfonyl, cyano, nitro, azo, sulfonamide, carbonyl, ketoester, thiocarbonyl, ester, ether, thioether, thiocarbamate, urea, thiourea, O-carbamyl , N-carbamyl, O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amide, N-amide, C-carboxy, O-carboxy, sulfonamide, trihalomethanesulfonamide, guanyl, guanylinoalkyl, guanidino, gua Jinoarukiru, amino, aminoalkyl, is selected from the group consisting of hydrazine and ammonium ions.

好ましくは、負に帯電した基はリン酸基であり、かくして上記式中、Ｌはリン原子であり、Ｑ^＊，ＧおよびＤ^＊のそれぞれは酸素である。さらに好ましくは、Ｅはヒドロキシである。代わりに、ヒドロキシ基は別の負の静電荷を有するようにイオン化されることもできる。 Preferably, the negatively charged group is a phosphate group, thus in the above formula, L is a phosphorus atom and each of Q ^* , G and D ^* is oxygen. More preferably, E is hydroxy. Alternatively, the hydroxy group can be ionized to have another negative electrostatic charge.

Claims

以下の一般式を有する化合物または医薬的に許容され得るその塩：

を有する負に帯電した基であり、式中、Ｌはリン原子、イオウ原子、ケイ素原子、ホウ素原子および炭素原子からなる群から選択され；Ｑ，ＧおよびＤはそれぞれ独立して酸素およびイオウからなる群から選択され；Ｅはヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、カルボニル、チオカルボニル、Ｏ−カルボキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシおよびチオアリールオキシからなる群から選択されるかまたは存在せず；
Ｄは水素、アルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルホンアミド、カルボニル、ケトエステル、チオカルボニル、エステル、エーテル、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニリノアルキル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、ヒドラジン、アミノアルキルおよび疎水性部分からなる群から選択され；そして
Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４はそれぞれ独立して水素、孤立電子対、アルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルホンアミド、カルボニル、ケトエステル、チオカルボニル、エステル、エーテル、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニリノアルキル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジンおよびアンモニウムイオンからなる群から選択され；
ただし、Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷの少なくとも一つは窒素原子であるかおよび／またはＲ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４の少なくとも一つは少なくとも一つのアミノ部分を含む基であり、ただし、本化合物はピリドキサールリン酸ではない。 A compound having the following general formula or a pharmaceutically acceptable salt thereof:

Wherein L is selected from the group consisting of phosphorus atoms, sulfur atoms, silicon atoms, boron atoms and carbon atoms; Q, G and D are each independently from oxygen and sulfur E is selected from the group consisting of hydroxy, alkoxy, aryloxy, carbonyl, thiocarbonyl, O-carboxy, thiohydroxy, thioalkoxy and thioaryloxy, or absent;
D is hydrogen, alkyl, trihaloalkyl, cycloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclic, halo, hydroxy, alkoxy, aryloxy, thiohydroxy, thioalkoxy, thioaryloxy, sulfinyl, sulfonyl, cyano, Nitro, azo, sulfonamide, carbonyl, ketoester, thiocarbonyl, ester, ether, thioether, thiocarbamate, urea, thiourea, O-carbamyl, N-carbamyl, O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amide, N- Amides, C-carboxy, O-carboxy, sulfonamides, trihalomethanesulfonamides, guanyl, guanylinoalkyl, guanidino, guanidinoalkyl, amino, hydrazine, aminoalkyl and hydrophobic It is selected from the group consisting of partially; and R _{1, R} _2, R ₃ and R ₄ are each independently hydrogen, lone pair, alkyl, trihaloalkyl, cycloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclic Ring, halo, hydroxy, alkoxy, aryloxy, thiohydroxy, thioalkoxy, thioaryloxy, sulfinyl, sulfonyl, cyano, nitro, azo, sulfonamide, carbonyl, ketoester, thiocarbonyl, ester, ether, thioether, thiocarbamate, Urea, thiourea, O-carbamyl, N-carbamyl, O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amide, N-amide, C-carboxy, O-carboxy, sulfonamide, trihalomethanesulfonamide, guanyl, gua Rinoarukiru, guanidino, guanidinoalkyl, amino, selected from the group consisting of aminoalkyl, hydrazine and an ammonium ion;
Provided that at least one of X, Y, Z and W is a nitrogen atom and / or at least one of R ₁ , R ₂ , R ₃ and R ₄ is a group comprising at least one amino moiety, The compound is not pyridoxal phosphate.

ＧＳＫ−３の活性を阻害することができる請求項１に記載の化合物。 2. A compound according to claim 1 capable of inhibiting the activity of GSK-3.

Ａはアルキルである請求項１に記載の化合物。 2. A compound according to claim 1 wherein A is alkyl.

Ｌはリン原子である請求項１に記載の化合物。 The compound according to claim 1, wherein L is a phosphorus atom.

Ｑ，ＧおよびＤのそれぞれは酸素である請求項４に記載の化合物。 5. A compound according to claim 4 wherein each of Q, G and D is oxygen.

Ｅはヒドロキシである請求項４に記載の化合物。 5. A compound according to claim 4, wherein E is hydroxy.

Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷの少なくとも一つは窒素原子である請求項１に記載の化合物。 The compound according to claim 1, wherein at least one of X, Y, Z and W is a nitrogen atom.

Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷの少なくとも二つは窒素原子である請求項７に記載の化合物。 The compound according to claim 7, wherein at least two of X, Y, Z and W are nitrogen atoms.

ＸとＹがそれぞれ窒素原子である請求項８に記載の化合物。 The compound according to claim 8, wherein X and Y are each a nitrogen atom.

ＺとＷがそれぞれ窒素原子である請求項８に記載の化合物。 The compound according to claim 8, wherein Z and W are each a nitrogen atom.

Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４の少なくとも二つは前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項１に記載の化合物。 The compound according to claim 1, wherein at least two of R ₁ , R ₂ , R ₃ and R ₄ are groups containing the at least one amino moiety.

Ｒ_１とＲ_２がそれぞれ前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項１１に記載の化合物。 The compound according to claim 11, wherein R ₁ and R ₂ are each a group containing the at least one amino moiety.

Ｒ_３とＲ_４がそれぞれ前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項１１に記載の化合物。 The compound according to claim 11, wherein R ₃ and R ₄ are each a group containing the at least one amino moiety.

Ｄは疎水性部分である請求項１に記載の化合物。 2. A compound according to claim 1, wherein D is a hydrophobic moiety.

前記疎水性部分は脂肪酸残基、４〜３０個の炭素原子を有する飽和アルキレン鎖、４〜３０個の炭素原子を有する不飽和アルキレン基、アリール、シクロアルキルおよび疎水性ペプチド配列からなる群から選択される請求項１４に記載の化合物。 The hydrophobic moiety is selected from the group consisting of fatty acid residues, saturated alkylene chains having 4 to 30 carbon atoms, unsaturated alkylene groups having 4 to 30 carbon atoms, aryl, cycloalkyl, and hydrophobic peptide sequences 15. A compound as claimed in claim 14.

前記脂肪酸は、ミリスチン酸、ラウリン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、アラキドン酸、リノール酸およびリノレイン酸からなる群から選択される請求項１５に記載の化合物。 16. The compound of claim 15, wherein the fatty acid is selected from the group consisting of myristic acid, lauric acid, palmitic acid, stearic acid, oleic acid, arachidonic acid, linoleic acid and linolenic acid.

Ａがアルキルであり、Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷのそれぞれが炭素原子であり、Ｒ_３およびＲ_４の少なくとも一つが前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項５に記載の化合物。 A is alkyl, X, Y, are each carbon atoms of Z and W, A compound according to claim 5 at least one of R ₃ and R ₄ is a group containing said at least one amino moiety of.

前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基は、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジン、グアニル、グアニリノアルキルおよびそれらの組合せからなる群から選択される請求項１〜１７のいずれか一項に記載の化合物。 18. The group comprising at least one amino moiety is selected from the group consisting of guanidino, guanidinoalkyl, amino, aminoalkyl, hydrazine, guanyl, guanylinoalkyl, and combinations thereof. Compound described in 1.

前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基は少なくとも一つの正に帯電した基を含む請求項１〜１７のいずれか一項に記載の化合物。 18. A compound according to any one of claims 1 to 17, wherein the group comprising at least one amino moiety comprises at least one positively charged group.

前記少なくとも一つの正に帯電した基はアンモニウムイオンを含む請求項１９に記載の化合物。 20. A compound according to claim 19, wherein the at least one positively charged group comprises an ammonium ion.

前記少なくとも一つの正に帯電した基は正に帯電したアミノ酸の側鎖から由来する化学構造を有する請求項１９に記載の化合物。 20. The compound of claim 19, wherein the at least one positively charged group has a chemical structure derived from a side chain of positively charged amino acids.

前記正に帯電したアミノ酸は、アルギニン、リジン、ヒスチジン、プロリンおよびそれらの誘導体からなる群から選択される請求項２１に記載の化合物。 The compound of claim 21, wherein the positively charged amino acid is selected from the group consisting of arginine, lysine, histidine, proline and derivatives thereof.

Ｘ，ＹおよびＺのそれぞれが炭素原子であり、Ｗが窒素原子である請求項１に記載の化合物。 The compound according to claim 1, wherein each of X, Y and Z is a carbon atom, and W is a nitrogen atom.

を有する負に帯電した基であり、式中、Ｌはリン原子、イオウ原子、ケイ素原子、ホウ素原子および炭素原子からなる群から選択され；Ｑ，ＧおよびＤはそれぞれ独立して酸素およびイオウからなる群から選択され；Ｅはヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、カルボニル、チオカルボニル、Ｏ−カルボキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシおよびチオアリールオキシからなる群から選択されるかまたは存在せず；
Ｄは疎水性部分であり；そして
Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４はそれぞれ独立して水素、孤立電子対、アルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルホンアミド、カルボニル、ケトエステル、チオカルボニル、エステル、エーテル、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニリノアルキル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、ヒドラジン、アミノアルキルおよびアンモニウムイオンからなる群から選択される。 A compound having the following general formula or a pharmaceutically acceptable salt thereof:

Wherein L is selected from the group consisting of phosphorus atoms, sulfur atoms, silicon atoms, boron atoms and carbon atoms; Q, G and D are each independently from oxygen and sulfur E is selected from the group consisting of hydroxy, alkoxy, aryloxy, carbonyl, thiocarbonyl, O-carboxy, thiohydroxy, thioalkoxy and thioaryloxy, or absent;
D is a hydrophobic moiety; and R ₁ , R ₂ , R ₃ and R ₄ are each independently hydrogen, lone pair, alkyl, trihaloalkyl, cycloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, heterolipid Ring, halo, hydroxy, alkoxy, aryloxy, thiohydroxy, thioalkoxy, thioaryloxy, sulfinyl, sulfonyl, cyano, nitro, azo, sulfonamide, carbonyl, ketoester, thiocarbonyl, ester, ether, thioether, thiocarbamate, Urea, thiourea, O-carbamyl, N-carbamyl, O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amide, N-amide, C-carboxy, O-carboxy, sulfonamide, trihalomethanesulfonamide, guanyl, guanylinoa Selected from the group consisting of rualkyl, guanidino, guanidinoalkyl, amino, hydrazine, aminoalkyl and ammonium ions.

ＧＳＫ−３の活性を阻害することができる請求項２４に記載の化合物。 25. A compound according to claim 24, capable of inhibiting the activity of GSK-3.

前記疎水性部分は脂肪酸残基、４〜３０個の炭素原子を有する飽和アルキレン鎖、４〜３０個の炭素原子を有する不飽和アルキレン基、アリール、シクロアルキルおよび疎水性ペプチド配列からなる群から選択される請求項２４に記載の化合物。 The hydrophobic moiety is selected from the group consisting of fatty acid residues, saturated alkylene chains having 4 to 30 carbon atoms, unsaturated alkylene groups having 4 to 30 carbon atoms, aryl, cycloalkyl, and hydrophobic peptide sequences 25. The compound of claim 24.

前記脂肪酸は、ミリスチン酸、ラウリン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、アラキドン酸、リノール酸およびリノレイン酸からなる群から選択される請求項２６に記載の化合物。 27. The compound of claim 26, wherein the fatty acid is selected from the group consisting of myristic acid, lauric acid, palmitic acid, stearic acid, oleic acid, arachidonic acid, linoleic acid and linolenic acid.

Ａはアルキルである請求項２４に記載の化合物。 25. A compound according to claim 24 wherein A is alkyl.

Ｌはリン原子である請求項２４に記載の化合物。 The compound according to claim 24, wherein L is a phosphorus atom.

Ｑ，ＧおよびＤのそれぞれは酸素である請求項２９に記載の化合物。 30. The compound of claim 29, wherein each of Q, G and D is oxygen.

Ｅはヒドロキシである請求項２９に記載の化合物。 30. The compound of claim 29, wherein E is hydroxy.

Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷの少なくとも一つは窒素原子である請求項２４に記載の化合物。 The compound according to claim 24, wherein at least one of X, Y, Z and W is a nitrogen atom.

Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷの少なくとも二つは窒素原子である請求項３２に記載の化合物。 The compound according to claim 32, wherein at least two of X, Y, Z and W are nitrogen atoms.

ＸとＹがそれぞれ窒素原子である請求項３３に記載の化合物。 The compound according to claim 33, wherein X and Y are each a nitrogen atom.

ＺとＷがそれぞれ窒素原子である請求項３３に記載の化合物。 The compound according to claim 33, wherein Z and W are each a nitrogen atom.

Ｗが窒素原子である請求項３２に記載の化合物。 The compound according to claim 32, wherein W is a nitrogen atom.

Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４の少なくとも一つは少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項２４に記載の化合物。 R _1, _R 2, A compound according to claim 24 at least one of _{R 3} and _{R 4} is a group containing at least one amino moiety of.

Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４の少なくとも二つは前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項３７に記載の化合物。 R _1, _R 2, A compound according to claim 37 at least two of _{R 3} and _{R 4} is a group containing at least one amino moiety of.

Ｒ_１とＲ_２がそれぞれ前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項３８に記載の化合物。 A compound according to claim 38 R ₁ and R ₂ are each the group containing at least one amino moiety of.

Ｒ_３とＲ_４がそれぞれ前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項３８に記載の化合物。 A compound according to claim 38 R ₃ and R ₄ are each the group containing at least one amino moiety of.

Ａはアルキルである請求項３０に記載の化合物。 31. A compound according to claim 30, wherein A is alkyl.

Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷのそれぞれが炭素原子である請求項４１に記載の化合物。 42. The compound of claim 41, wherein each of X, Y, Z and W is a carbon atom.

Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４のそれぞれが水素である請求項４２に記載の化合物。 R _1, _R 2, A compound according to claim 42 each of _{R 3} and _{R 4} are hydrogen.

Ｘ，ＹおよびＺのそれぞれが炭素原子でありＷが窒素原子である請求項４１に記載の化合物。 42. The compound according to claim 41, wherein each of X, Y and Z is a carbon atom and W is a nitrogen atom.

Ｒ_３およびＲ_４の少なくとも一つは少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項４２に記載の化合物。 A compound according to claim 42 at least one of R ₃ and R ₄ is a group containing at least one amino moiety of.

前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基は、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジン、グアニル、グアニリノアルキルおよびそれらの組合せからなる群から選択される請求項３７〜４０および４５のいずれか一項に記載の化合物。 46. The group comprising any of the at least one amino moiety is selected from the group consisting of guanidino, guanidinoalkyl, amino, aminoalkyl, hydrazine, guanyl, guanylinoalkyl, and combinations thereof. A compound according to one paragraph.

前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基は少なくとも一つの正に帯電した基を含む請求項３７〜４０および４５のいずれか一項に記載の化合物。 46. A compound according to any one of claims 37 to 40 and 45, wherein the group comprising at least one amino moiety comprises at least one positively charged group.

前記少なくとも一つの正に帯電した基はアンモニウムイオンを含む請求項４７に記載の化合物。 48. The compound of claim 47, wherein the at least one positively charged group comprises an ammonium ion.

前記少なくとも一つの正に帯電した基は正に帯電したアミノ酸の側鎖から由来する化学構造を有する請求項４７に記載の化合物。 48. The compound of claim 47, wherein the at least one positively charged group has a chemical structure derived from a side chain of positively charged amino acids.

前記正に帯電したアミノ酸は、アルギニン、リジン、ヒスチジン、プロリンおよびそれらの誘導体からなる群から選択される請求項４９に記載の化合物。 50. The compound of claim 49, wherein the positively charged amino acid is selected from the group consisting of arginine, lysine, histidine, proline and derivatives thereof.

活性な成分として、以下の一般式を有する化合物であってＧＳＫ−３の活性を阻害することができる化合物または医薬的に許容され得るその塩、および医学的に許容され得るキャリアを含む医薬組成物：

を有する負に帯電した基であり、式中、Ｌはリン原子、イオウ原子、ケイ素原子、ホウ素原子および炭素原子からなる群から選択され；Ｑ，ＧおよびＤはそれぞれ独立して酸素およびイオウからなる群から選択され；Ｅはヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、カルボニル、チオカルボニル、Ｏ−カルボキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシおよびチオアリールオキシからなる群から選択されるかまたは存在せず；
Ｄは水素、アルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルホンアミド、カルボニル、ケトエステル、チオカルボニル、エステル、エーテル、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニリノアルキル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、ヒドラジン、アミノアルキルおよび疎水性部分からなる群から選択され；そして
Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４はそれぞれ独立して水素、孤立電子対、アルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルホンアミド、カルボニル、ケトエステル、チオカルボニル、エステル、エーテル、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニリノアルキル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジンおよびアンモニウムイオンからなる群から選択される。 A pharmaceutical composition comprising, as an active ingredient, a compound having the following general formula, which can inhibit the activity of GSK-3, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and a medically acceptable carrier :

Wherein L is selected from the group consisting of phosphorus atoms, sulfur atoms, silicon atoms, boron atoms and carbon atoms; Q, G and D are each independently from oxygen and sulfur E is selected from the group consisting of hydroxy, alkoxy, aryloxy, carbonyl, thiocarbonyl, O-carboxy, thiohydroxy, thioalkoxy and thioaryloxy, or absent;
D is hydrogen, alkyl, trihaloalkyl, cycloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclic, halo, hydroxy, alkoxy, aryloxy, thiohydroxy, thioalkoxy, thioaryloxy, sulfinyl, sulfonyl, cyano, Nitro, azo, sulfonamide, carbonyl, ketoester, thiocarbonyl, ester, ether, thioether, thiocarbamate, urea, thiourea, O-carbamyl, N-carbamyl, O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amide, N- Amides, C-carboxy, O-carboxy, sulfonamides, trihalomethanesulfonamides, guanyl, guanylinoalkyl, guanidino, guanidinoalkyl, amino, hydrazine, aminoalkyl and hydrophobic It is selected from the group consisting of partially; and R _{1, R} _2, R ₃ and R ₄ are each independently hydrogen, lone pair, alkyl, trihaloalkyl, cycloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclic Ring, halo, hydroxy, alkoxy, aryloxy, thiohydroxy, thioalkoxy, thioaryloxy, sulfinyl, sulfonyl, cyano, nitro, azo, sulfonamide, carbonyl, ketoester, thiocarbonyl, ester, ether, thioether, thiocarbamate, Urea, thiourea, O-carbamyl, N-carbamyl, O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amide, N-amide, C-carboxy, O-carboxy, sulfonamide, trihalomethanesulfonamide, guanyl, gua Rinoarukiru, guanidino, guanidinoalkyl, amino, aminoalkyl, is selected from the group consisting of hydrazine and ammonium ions.

Ａはアルキルである請求項５１に記載の医薬組成物。 52. The pharmaceutical composition according to claim 51, wherein A is alkyl.

Ｌはリン原子である請求項５１に記載の医薬組成物。 52. The pharmaceutical composition according to claim 51, wherein L is a phosphorus atom.

Ｑ，ＧおよびＤのそれぞれは酸素である請求項５３に記載の医薬組成物。 54. The pharmaceutical composition according to claim 53, wherein each of Q, G and D is oxygen.

Ｅはヒドロキシである請求項５４に記載の医薬組成物。 55. The pharmaceutical composition according to claim 54, wherein E is hydroxy.

Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷの少なくとも一つは窒素原子である請求項５１に記載の医薬組成物。 52. The pharmaceutical composition according to claim 51, wherein at least one of X, Y, Z and W is a nitrogen atom.

Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷの少なくとも二つは窒素原子である請求項５６に記載の医薬組成物。 57. The pharmaceutical composition according to claim 56, wherein at least two of X, Y, Z and W are nitrogen atoms.

ＸとＹがそれぞれ窒素原子である請求項５７に記載の医薬組成物。 58. The pharmaceutical composition according to claim 57, wherein X and Y are each a nitrogen atom.

ＺとＷがそれぞれ窒素原子である請求項５７に記載の医薬組成物。 58. The pharmaceutical composition according to claim 57, wherein Z and W are each a nitrogen atom.

Ｄは疎水性部分である請求項５１に記載の医薬組成物。 52. The pharmaceutical composition according to claim 51, wherein D is a hydrophobic moiety.

前記疎水性部分は脂肪酸残基、４〜３０個の炭素原子を有する飽和アルキレン鎖、４〜３０個の炭素原子を有する不飽和アルキレン基、アリール、シクロアルキルおよび疎水性ペプチド配列からなる群から選択される請求項６０に記載の医薬組成物。 The hydrophobic moiety is selected from the group consisting of fatty acid residues, saturated alkylene chains having 4 to 30 carbon atoms, unsaturated alkylene groups having 4 to 30 carbon atoms, aryl, cycloalkyl, and hydrophobic peptide sequences 61. A pharmaceutical composition according to claim 60.

前記脂肪酸は、ミリスチン酸、ラウリン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、アラキドン酸、リノール酸およびリノレイン酸からなる群から選択される請求項６１に記載の医薬組成物。 62. The pharmaceutical composition according to claim 61, wherein the fatty acid is selected from the group consisting of myristic acid, lauric acid, palmitic acid, stearic acid, oleic acid, arachidonic acid, linoleic acid and linolenic acid.

Ａはアルキルである請求項５４に記載の医薬組成物。 55. The pharmaceutical composition according to claim 54, wherein A is alkyl.

Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷのそれぞれが炭素原子である請求項６３に記載の医薬組成物。 64. The pharmaceutical composition according to claim 63, wherein each of X, Y, Z and W is a carbon atom.

Ｄ，Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４のそれぞれが水素である請求項６４に記載の医薬組成物。 The pharmaceutical composition according to claim 64, wherein each of D, R ₁ , R ₂ , R ₃ and R ₄ is hydrogen.

Ｄがアルキルであり、Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４のそれぞれが水素である請求項６４に記載の医薬組成物。 D is _alkyl, R _1, R 2, Pharmaceutical composition according to claim 64 each of _{R 3} and _{R 4} are hydrogen.

Ｘ，ＹおよびＺのそれぞれが炭素原子であり、Ｗが窒素原子である請求項６３に記載の医薬組成物。 64. The pharmaceutical composition according to claim 63, wherein each of X, Y and Z is a carbon atom and W is a nitrogen atom.

Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４の少なくとも一つは少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項５１〜６７のいずれか一項に記載の医薬組成物。 R _1, _R 2, _{R 3} and at least one pharmaceutical composition according to any one of claims 51 to 67 is a group containing at least one amino moiety of _{R 4.}

Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４の少なくとも二つは前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項６８に記載の医薬組成物。 R _{1, R} _2, R ₃ and pharmaceutical composition of claim 68 at least two R ₄ is a group containing at least one amino moiety of.

Ｒ_１とＲ_２がそれぞれ前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項６９に記載の医薬組成物。 The pharmaceutical composition of claim 69 R ₁ and R ₂ are each the group containing at least one amino moiety of.

Ｒ_３とＲ_４がそれぞれ前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項６９に記載の医薬組成物。 R ₃ and pharmaceutical composition of claim 69 R ₄ are each the group containing at least one amino moiety of.

前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基は、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジン、グアニル、グアニリノアルキルおよびそれらの組合せからなる群から選択される請求項６８〜７１のいずれか一項に記載の医薬組成物。 72. The group comprising at least one amino moiety is selected from the group consisting of guanidino, guanidinoalkyl, amino, aminoalkyl, hydrazine, guanyl, guanylinoalkyl, and combinations thereof. A pharmaceutical composition according to 1.

前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基は少なくとも一つの正に帯電した基を含む請求項６８〜７１のいずれか一項に記載の医薬組成物。 72. A pharmaceutical composition according to any one of claims 68 to 71, wherein the group comprising at least one amino moiety comprises at least one positively charged group.

前記少なくとも一つの正に帯電した基はアンモニウムイオンを含む請求項７３に記載の医薬組成物。 74. A pharmaceutical composition according to claim 73, wherein the at least one positively charged group comprises an ammonium ion.

前記正に帯電した基は正に帯電したアミノ酸の側鎖から由来する化学構造を有する請求項７３に記載の医薬組成物。 74. The pharmaceutical composition according to claim 73, wherein the positively charged group has a chemical structure derived from a side chain of a positively charged amino acid.

前記正に帯電したアミノ酸は、アルギニン、リジン、ヒスチジン、プロリンおよびそれらの誘導体からなる群から選択される請求項７５に記載の医薬組成物。 76. The pharmaceutical composition according to claim 75, wherein the positively charged amino acid is selected from the group consisting of arginine, lysine, histidine, proline and derivatives thereof.

ＧＳＫ−３活性と関連する生物学的状態の治療において使用するために、包装用材料に詰められ、前記包装用材料の表面またはその中での活字で識別される請求項５１に記載の医薬組成物。 52. The pharmaceutical composition of claim 51, packed into a packaging material for use in the treatment of a biological condition associated with GSK-3 activity, identified by the surface of the packaging material or the type therein. object.

前記生物学的状態は、肥満、インスリン非依存性糖尿病、インスリン依存性状態、情動障害、神経変性疾患または神経変性障害、および精神病的な疾患または障害からなる群から選択される請求項７７に記載の医薬組成物。 78. The biological condition is selected from the group consisting of obesity, non-insulin dependent diabetes, insulin dependent conditions, affective disorders, neurodegenerative or neurodegenerative disorders, and psychotic diseases or disorders. Pharmaceutical composition.

前記情動障害は、単極型障害および双極性障害からなる群から選択される請求項７８に記載の医薬組成物。 79. The pharmaceutical composition according to claim 78, wherein the affective disorder is selected from the group consisting of a unipolar disorder and a bipolar disorder.

前記単極型障害がうつ病である請求項７９に記載の医薬組成物。 80. The pharmaceutical composition according to claim 79, wherein the monopolar disorder is depression.

前記双極性障害が躁うつ病である請求項７９に記載の医薬組成物。 80. The pharmaceutical composition of claim 79, wherein the bipolar disorder is manic depression.

前記神経変性障害は脳虚血、発作、外傷性脳傷害および細菌感染からなる群から選択される事象から生じる請求項７８に記載の医薬組成物。 79. The pharmaceutical composition according to claim 78, wherein the neurodegenerative disorder results from an event selected from the group consisting of cerebral ischemia, stroke, traumatic brain injury and bacterial infection.

前記神経変性障害は慢性の神経変性障害である請求項７８に記載の医薬組成物。 79. The pharmaceutical composition according to claim 78, wherein the neurodegenerative disorder is a chronic neurodegenerative disorder.

前記慢性の神経変性障害はアルツハイマー病、ハンチングトン病、パーキンソン病、ＡＩＤＳ関連痴呆、筋萎縮性側索硬化症（ＡＭＬ）および多発性硬化症からなる群から選択される疾患から生じる請求項８３に記載の医薬組成物。 84. The chronic neurodegenerative disorder resulting from a disease selected from the group consisting of Alzheimer's disease, Huntington's disease, Parkinson's disease, AIDS-related dementia, amyotrophic lateral sclerosis (AML) and multiple sclerosis. The pharmaceutical composition as described.

ＧＳＫ−３の活性を変化させることができる少なくとも一つのさらなる活性な成分をさらに含む請求項５１に記載の医薬組成物。 52. The pharmaceutical composition according to claim 51, further comprising at least one further active ingredient capable of altering the activity of GSK-3.

前記さらなる活性な成分はＧＳＫ−３の活性を阻害することができる請求項８５に記載の医薬組成物。 86. The pharmaceutical composition according to claim 85, wherein the further active ingredient is capable of inhibiting the activity of GSK-3.

前記さらなる活性な成分はＧＳＫ−３の発現をダウンレギュレートすることができる請求項８５に記載の医薬組成物。 86. The pharmaceutical composition of claim 85, wherein the additional active ingredient is capable of downregulating GSK-3 expression.

ＧＳＫ−３を発現する細胞を、以下の一般式を有する化合物であってＧＳＫ−３の活性を阻害することができる化合物または医薬的に許容され得るその塩の治療効果的な量と接触させることを含む、ＧＳＫ−３の活性を阻害する方法：

を有する負に帯電した基であり、式中、Ｌはリン原子、イオウ原子、ケイ素原子、ホウ素原子および炭素原子からなる群から選択され；Ｑ，ＧおよびＤはそれぞれ独立して酸素およびイオウからなる群から選択され；Ｅはヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、カルボニル、チオカルボニル、Ｏ−カルボキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシおよびチオアリールオキシからなる群から選択されるかまたは存在せず；
Ｄは水素、アルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルホンアミド、カルボニル、ケトエステル、チオカルボニル、エステル、エーテル、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニリノアルキル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジンおよび疎水性部分からなる群から選択され；そして
Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４はそれぞれ独立して水素、孤立電子対、アルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルホンアミド、カルボニル、ケトエステル、チオカルボニル、エステル、エーテル、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニリノアルキル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジンおよびアンモニウムイオンからなる群から選択される。 Contacting a cell expressing GSK-3 with a therapeutically effective amount of a compound having the following general formula and capable of inhibiting the activity of GSK-3 or a pharmaceutically acceptable salt thereof: A method of inhibiting the activity of GSK-3 comprising:

Wherein L is selected from the group consisting of phosphorus atoms, sulfur atoms, silicon atoms, boron atoms and carbon atoms; Q, G and D are each independently from oxygen and sulfur E is selected from the group consisting of hydroxy, alkoxy, aryloxy, carbonyl, thiocarbonyl, O-carboxy, thiohydroxy, thioalkoxy and thioaryloxy, or absent;
D is hydrogen, alkyl, trihaloalkyl, cycloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclic, halo, hydroxy, alkoxy, aryloxy, thiohydroxy, thioalkoxy, thioaryloxy, sulfinyl, sulfonyl, cyano, Nitro, azo, sulfonamide, carbonyl, ketoester, thiocarbonyl, ester, ether, thioether, thiocarbamate, urea, thiourea, O-carbamyl, N-carbamyl, O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amide, N- Amides, C-carboxy, O-carboxy, sulfonamides, trihalomethanesulfonamides, guanyl, guanylinoalkyl, guanidino, guanidinoalkyl, amino, aminoalkyl, hydrazine and hydrophobic It is selected from the group consisting of partially; and R _{1, R} _2, R ₃ and R ₄ are each independently hydrogen, lone pair, alkyl, trihaloalkyl, cycloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyclic Ring, halo, hydroxy, alkoxy, aryloxy, thiohydroxy, thioalkoxy, thioaryloxy, sulfinyl, sulfonyl, cyano, nitro, azo, sulfonamide, carbonyl, ketoester, thiocarbonyl, ester, ether, thioether, thiocarbamate, Urea, thiourea, O-carbamyl, N-carbamyl, O-thiocarbamyl, N-thiocarbamyl, C-amide, N-amide, C-carboxy, O-carboxy, sulfonamide, trihalomethanesulfonamide, guanyl, gua Rinoarukiru, guanidino, guanidinoalkyl, amino, aminoalkyl, is selected from the group consisting of hydrazine and ammonium ions.

Ａはアルキルである請求項８８に記載の方法。 90. The method of claim 88, wherein A is alkyl.

Ｌはリン原子である請求項８８に記載の方法。 90. The method of claim 88, wherein L is a phosphorus atom.

Ｑ，ＧおよびＤのそれぞれは酸素である請求項９０に記載の方法。 92. The method of claim 90, wherein each of Q, G and D is oxygen.

Ｅはヒドロキシである請求項９１に記載の方法。 92. The method of claim 91, wherein E is hydroxy.

Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷの少なくとも一つは窒素原子である請求項８８に記載の方法。 90. The method of claim 88, wherein at least one of X, Y, Z and W is a nitrogen atom.

Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷの少なくとも二つは窒素原子である請求項９３に記載の方法。 94. The method of claim 93, wherein at least two of X, Y, Z and W are nitrogen atoms.

ＸとＹがそれぞれ窒素原子である請求項９４に記載の方法。 95. The method of claim 94, wherein X and Y are each a nitrogen atom.

ＺとＷがそれぞれ窒素原子である請求項９４に記載の方法。 95. The method of claim 94, wherein Z and W are each a nitrogen atom.

Ｄは疎水性部分である請求項８８に記載の方法。 90. The method of claim 88, wherein D is a hydrophobic moiety.

前記疎水性部分は脂肪酸残基、４〜３０個の炭素原子を有する飽和アルキレン鎖、４〜３０個の炭素原子を有する不飽和アルキレン基、アリール、シクロアルキルおよび疎水性ペプチド配列からなる群から選択される請求項９７に記載の方法。 The hydrophobic moiety is selected from the group consisting of fatty acid residues, saturated alkylene chains having 4 to 30 carbon atoms, unsaturated alkylene groups having 4 to 30 carbon atoms, aryl, cycloalkyl, and hydrophobic peptide sequences 98. The method of claim 97, wherein:

前記脂肪酸は、ミリスチン酸、ラウリン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、アラキドン酸、リノール酸およびリノレイン酸からなる群から選択される請求項９８に記載の方法。 99. The method of claim 98, wherein the fatty acid is selected from the group consisting of myristic acid, lauric acid, palmitic acid, stearic acid, oleic acid, arachidonic acid, linoleic acid and linolenic acid.

Ａはアルキルである請求項９１に記載の方法。 92. The method of claim 91, wherein A is alkyl.

Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷのそれぞれが炭素原子である請求項１００に記載の方法。 101. The method of claim 100, wherein each of X, Y, Z and W is a carbon atom.

Ｄ，Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４のそれぞれが水素である請求項１０１に記載の方法。 _D, The method of claim 101 each R _1, R 2, _{R 3} and _{R 4} are hydrogen.

Ｄがアルキルであり、Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４のそれぞれが水素である請求項１０１に記載の方法。 D is _alkyl, R _1, R 2, A method according to claim 101 each of _{R 3} and _{R 4} are hydrogen.

Ｘ，ＹおよびＺのそれぞれが炭素原子であり、Ｗが窒素原子である請求項１００に記載の方法。 101. The method of claim 100, wherein each of X, Y and Z is a carbon atom and W is a nitrogen atom.

Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４の少なくとも一つは少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項８８〜１０４のいずれか一項に記載の方法。 R _1, _R 2, _{R 3} and A method according to any one of claims 88 to 104 at least one of _{R 4} is a group containing at least one amino moiety of.

Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４の少なくとも二つは前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項１０５に記載の方法。 R _1, method of claim 105, at least two of _R 2, _{R 3} and _{R 4} is a group containing at least one amino moiety of.

Ｒ_１とＲ_２がそれぞれ前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項１０６に記載の方法。 The method of claim 106 R ₁ and R ₂ are each the group containing at least one amino moiety of.

Ｒ_３とＲ_４がそれぞれ前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項１０６に記載の方法。 The method of claim 106 R ₃ and R ₄ are each the group containing at least one amino moiety of.

前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基は、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジン、グアニル、グアニリノアルキルおよびそれらの組合せからなる群から選択される請求項１０５〜１０８のいずれか一項に記載の方法。 109. The group according to any one of claims 105 to 108, wherein the group comprising at least one amino moiety is selected from the group consisting of guanidino, guanidinoalkyl, amino, aminoalkyl, hydrazine, guanyl, guanylinoalkyl and combinations thereof. The method described in 1.

前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基は少なくとも一つの正に帯電した基を含む請求項１０５〜１０８のいずれか一項に記載の方法。 109. The method of any one of claims 105-108, wherein the group comprising at least one amino moiety comprises at least one positively charged group.

前記少なくとも一つの正に帯電した基はアンモニウムイオンを含む請求項１１０に記載の方法。 111. The method of claim 110, wherein the at least one positively charged group comprises ammonium ions.

前記正に帯電した基は正に帯電したアミノ酸の側鎖から由来する化学構造を有する請求項１１０に記載の方法。 111. The method of claim 110, wherein the positively charged group has a chemical structure derived from a side chain of a positively charged amino acid.

前記正に帯電したアミノ酸は、アルギニン、リジン、ヒスチジン、プロリンおよびそれらの誘導体からなる群から選択される請求項１１２に記載の方法。 113. The method of claim 112, wherein the positively charged amino acid is selected from the group consisting of arginine, lysine, histidine, proline and derivatives thereof.

前記活性はリン酸化活性および／または自己リン酸化活性である請求項８８に記載の方法。 The method according to claim 88, wherein the activity is phosphorylation activity and / or autophosphorylation activity.

前記細胞を接触させることはインビトロで行われる請求項８８に記載の方法。 90. The method of claim 88, wherein the contacting is performed in vitro.

前記細胞を接触させることはインビボで行われる請求項８８に記載の方法。 90. The method of claim 88, wherein the contacting is performed in vivo.

前記細胞をＧＳＫ−３の活性を変化させることができる少なくとも一つのさらなる活性な成分と接触させることをさらに含む請求項８８に記載の方法。 90. The method of claim 88, further comprising contacting the cell with at least one additional active ingredient capable of altering the activity of GSK-3.

前記さらなる活性な成分はＧＳＫ−３の活性を阻害することができる請求項１１７に記載の方法。 118. The method of claim 117, wherein the additional active component is capable of inhibiting GSK-3 activity.

前記さらなる活性な成分はＧＳＫ−３の発現をダウンレギュレートすることができる請求項１１７に記載の方法。 118. The method of claim 117, wherein said additional active ingredient is capable of downregulating GSK-3 expression.

インスリンシグナル伝達を強化する方法であって、インスリン応答性細胞を以下の一般式を有する化合物であってＧＳＫ−３の活性を阻害することができる化合物または医薬的に許容され得るその塩の効果的な量と接触させることを含む方法：

を有する負に帯電した基であり、式中、Ｌはリン原子、イオウ原子、ケイ素原子、ホウ素原子および炭素原子からなる群から選択され；Ｑ，ＧおよびＤはそれぞれ独立して酸素およびイオウからなる群から選択され；Ｅはヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、カルボニル、チオカルボニル、Ｏ−カルボキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシおよびチオアリールオキシからなる群から選択されるかまたは存在せず；
Ｄは水素、アルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルホンアミド、カルボニル、ケトエステル、チオカルボニル、エステル、エーテル、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニリノアルキル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジンおよび疎水性部分からなる群から選択され；そして
Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４はそれぞれ独立して水素、孤立電子対、アルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルホンアミド、カルボニル、ケトエステル、チオカルボニル、エステル、エーテル、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニリノアルキル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジンおよびアンモニウムイオンからなる群から選択される。 A method of enhancing insulin signaling, wherein an insulin responsive cell is treated with a compound having the following general formula and capable of inhibiting the activity of GSK-3 or a pharmaceutically acceptable salt thereof: A method comprising contacting with an appropriate amount:

Ａはアルキルである請求項１２０に記載の方法。 121. The method of claim 120, wherein A is alkyl.

Ｌはリン原子である請求項１２０に記載の方法。 121. The method of claim 120, wherein L is a phosphorus atom.

Ｑ，ＧおよびＤのそれぞれは酸素である請求項１２２に記載の方法。 123. The method of claim 122, wherein each of Q, G, and D is oxygen.

Ｅはヒドロキシである請求項１２２に記載の方法。 123. The method of claim 122, wherein E is hydroxy.

Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷの少なくとも一つは窒素原子である請求項１２０に記載の方法。 121. The method of claim 120, wherein at least one of X, Y, Z and W is a nitrogen atom.

Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷの少なくとも二つは窒素原子である請求項１２５に記載の方法。 126. The method of claim 125, wherein at least two of X, Y, Z and W are nitrogen atoms.

ＸとＹがそれぞれ窒素原子である請求項１２６に記載の方法。 127. The method of claim 126, wherein X and Y are each a nitrogen atom.

ＺとＷがそれぞれ窒素原子である請求項１２６に記載の方法。 127. The method of claim 126, wherein Z and W are each a nitrogen atom.

Ｄは疎水性部分である請求項１２０に記載の方法。 121. The method of claim 120, wherein D is a hydrophobic moiety.

前記疎水性部分は脂肪酸残基、４〜３０個の炭素原子を有する飽和アルキレン鎖、４〜３０個の炭素原子を有する不飽和アルキレン基、アリール、シクロアルキルおよび疎水性ペプチド配列からなる群から選択される請求項１２９に記載の方法。 The hydrophobic moiety is selected from the group consisting of fatty acid residues, saturated alkylene chains having 4 to 30 carbon atoms, unsaturated alkylene groups having 4 to 30 carbon atoms, aryl, cycloalkyl, and hydrophobic peptide sequences 129. The method of claim 129, wherein:

前記脂肪酸は、ミリスチン酸、ラウリン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、アラキドン酸、リノール酸およびリノレイン酸からなる群から選択される請求項１３０に記載の方法。 131. The method of claim 130, wherein the fatty acid is selected from the group consisting of myristic acid, lauric acid, palmitic acid, stearic acid, oleic acid, arachidonic acid, linoleic acid and linolenic acid.

Ａはアルキルである請求項１２３に記載の方法。 124. The method of claim 123, wherein A is alkyl.

Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷのそれぞれが炭素原子である請求項１３２に記載の方法。 135. The method of claim 132, wherein each of X, Y, Z, and W is a carbon atom.

Ｄ，Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４のそれぞれが水素である請求項１３３に記載の方法。 _D, The method of claim 133 each R _1, R 2, _{R 3} and _{R 4} are hydrogen.

Ｄがアルキルであり、Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４のそれぞれが水素である請求項１３３に記載の方法。 D is _alkyl, The method of claim 133 each R _1, R 2, _{R 3} and _{R 4} are hydrogen.

Ｘ，ＹおよびＺのそれぞれが炭素原子であり、Ｗが窒素原子である請求項１３２に記載の方法。 135. The method of claim 132, wherein each of X, Y, and Z is a carbon atom and W is a nitrogen atom.

Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４の少なくとも一つは少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項１２０〜１３６のいずれか一項に記載の方法。 R _1, _R 2, _{R 3} and A method according to any one of claims 120 to 136, at least one of _{R 4} is a group containing at least one amino moiety of.

Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４の少なくとも二つは前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項１３７に記載の方法。 R _1, method of claim 137, at least two of _R 2, _{R 3} and _{R 4} is a group containing at least one amino moiety of.

Ｒ_１とＲ_２がそれぞれ前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項１３８に記載の方法。 The method of claim 138 R ₁ and R ₂ are each the group containing at least one amino moiety of.

Ｒ_３とＲ_４がそれぞれ前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項１３８に記載の方法。 The method of claim 138 R ₃ and R ₄ are each the group containing at least one amino moiety of.

前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基は、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジン、グアニル、グアニリノアルキルおよびそれらの組合せからなる群から選択される請求項１３７〜１４０のいずれか一項に記載の方法。 143. The group comprising at least one amino moiety is selected from the group consisting of guanidino, guanidinoalkyl, amino, aminoalkyl, hydrazine, guanyl, guanylinoalkyl, and combinations thereof. The method described in 1.

前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基は少なくとも一つの正に帯電した基を含む請求項１３７〜１４０のいずれか一項に記載の方法。 141. A method according to any one of claims 137 to 140, wherein the group comprising at least one amino moiety comprises at least one positively charged group.

前記少なくとも一つの正に帯電した基はアンモニウムイオンを含む請求項１４２に記載の方法。 143. The method of claim 142, wherein the at least one positively charged group comprises ammonium ions.

前記正に帯電した基は正に帯電したアミノ酸の側鎖から由来する化学構造を有する請求項１４２に記載の方法。 143. The method of claim 142, wherein the positively charged group has a chemical structure derived from a side chain of a positively charged amino acid.

前記正に帯電したアミノ酸は、アルギニン、リジン、ヒスチジン、プロリンおよびそれらの誘導体からなる群から選択される請求項１４４に記載の方法。 145. The method of claim 144, wherein the positively charged amino acid is selected from the group consisting of arginine, lysine, histidine, proline and derivatives thereof.

前記細胞をインスリンと接触させることをさらに含む請求項１２０に記載の方法。 121. The method of claim 120, further comprising contacting the cell with insulin.

前記細胞を接触させることはインビトロで行われる請求項１２０に記載の方法。 121. The method of claim 120, wherein contacting the cell is performed in vitro.

前記細胞を接触させることはインビボで行われる請求項１２０に記載の方法。 121. The method of claim 120, wherein contacting the cell is performed in vivo.

ＧＳＫ−３の活性に関連する生物学的状態を治療する方法であって、その必要性がある対象に、以下の一般式を有する化合物であってＧＳＫ−３の活性を阻害することができる化合物または医薬的に許容され得るその塩の治療効果的な量を投与することを含む方法：

を有する負に帯電した基であり、式中、Ｌはリン原子、イオウ原子、ケイ素原子、ホウ素原子および炭素原子からなる群から選択され；Ｑ，ＧおよびＤはそれぞれ独立して酸素およびイオウからなる群から選択され；Ｅはヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、カルボニル、チオカルボニル、Ｏ−カルボキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシおよびチオアリールオキシからなる群から選択されるかまたは存在せず；
Ｄは水素、アルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルホンアミド、カルボニル、ケトエステル、チオカルボニル、エステル、エーテル、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニリノアルキル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジンおよび疎水性部分からなる群から選択され；そして
Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４はそれぞれ独立して水素、孤立電子対、アルキル、トリハロアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、複素脂環、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオヒドロキシ、チオアルコキシ、チオアリールオキシ、スルフィニル、スルホニル、シアノ、ニトロ、アゾ、スルホンアミド、カルボニル、ケトエステル、チオカルボニル、エステル、エーテル、チオエーテル、チオカルバメート、尿素、チオ尿素、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、スルホンアミド、トリハロメタンスルホンアミド、グアニル、グアニリノアルキル、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジンおよびアンモニウムイオンからなる群から選択される。 A method of treating a biological condition associated with GSK-3 activity, wherein the compound has the following general formula and is capable of inhibiting GSK-3 activity in a subject in need thereof: Or a method comprising administering a therapeutically effective amount of a pharmaceutically acceptable salt thereof:

Ａはアルキルである請求項１４９に記載の方法。 148. The method of claim 149, wherein A is alkyl.

Ｌはリン原子である請求項１４９に記載の方法。 150. The method of claim 149, wherein L is a phosphorus atom.

Ｑ，ＧおよびＤのそれぞれは酸素である請求項１５１に記載の方法。 152. The method of claim 151, wherein each of Q, G and D is oxygen.

Ｅはヒドロキシである請求項１５２に記載の方法。 153. The method of claim 152, wherein E is hydroxy.

Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷの少なくとも一つは窒素原子である請求項１４９に記載の方法。 149. The method of claim 149, wherein at least one of X, Y, Z and W is a nitrogen atom.

Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷの少なくとも二つは窒素原子である請求項１５４に記載の方法。 157. The method of claim 154, wherein at least two of X, Y, Z and W are nitrogen atoms.

ＸとＹがそれぞれ窒素原子である請求項１５５に記載の方法。 The method of claim 155, wherein X and Y are each a nitrogen atom.

ＺとＷがそれぞれ窒素原子である請求項１５５に記載の方法。 The method of claim 155, wherein Z and W are each a nitrogen atom.

Ｄは疎水性部分である請求項１４９に記載の方法。 148. The method of claim 149, wherein D is a hydrophobic moiety.

前記疎水性部分は脂肪酸残基、４〜３０個の炭素原子を有する飽和アルキレン鎖、４〜３０個の炭素原子を有する不飽和アルキレン基、アリール、シクロアルキルおよび疎水性ペプチド配列からなる群から選択される請求項１５８に記載の方法。 The hydrophobic moiety is selected from the group consisting of fatty acid residues, saturated alkylene chains having 4 to 30 carbon atoms, unsaturated alkylene groups having 4 to 30 carbon atoms, aryl, cycloalkyl, and hydrophobic peptide sequences 159. The method of claim 158.

前記脂肪酸は、ミリスチン酸、ラウリン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、アラキドン酸、リノール酸およびリノレイン酸からなる群から選択される請求項１５９に記載の方法。 160. The method of claim 159, wherein the fatty acid is selected from the group consisting of myristic acid, lauric acid, palmitic acid, stearic acid, oleic acid, arachidonic acid, linoleic acid, and linolenic acid.

Ａはアルキルである請求項１５２に記載の方法。 153. The method of claim 152, wherein A is alkyl.

Ｘ，Ｙ，ＺおよびＷのそれぞれが炭素原子である請求項１６１に記載の方法。 164. The method of claim 161, wherein each of X, Y, Z and W is a carbon atom.

Ｄ，Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４のそれぞれが水素である請求項１６２に記載の方法。 _D, The method of claim 162 each R _1, R 2, _{R 3} and _{R 4} are hydrogen.

Ｄがアルキルであり、Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４のそれぞれが水素である請求項１６２に記載の方法。 D is _alkyl, The method of claim 162 each R _1, R 2, _{R 3} and _{R 4} are hydrogen.

Ｘ，ＹおよびＺのそれぞれが炭素原子であり、Ｗが窒素原子である請求項１６１に記載の方法。 164. The method of claim 161, wherein each of X, Y and Z is a carbon atom and W is a nitrogen atom.

Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４の少なくとも一つは少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項１４９〜１６５のいずれか一項に記載の方法。 R _1, _R 2, _{R 3} and A method according to any one of claims 149 to 165, at least one of _{R 4} is a group containing at least one amino moiety of.

Ｒ_１，Ｒ_２，Ｒ_３およびＲ_４の少なくとも二つは前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項１６６に記載の方法。 R _1, method of claim 166, at least two of _R 2, _{R 3} and _{R 4} is a group containing at least one amino moiety of.

Ｒ_１とＲ_２がそれぞれ前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項１６７に記載の方法。 The method of claim 167 R ₁ and R ₂ are each the group containing at least one amino moiety of.

Ｒ_３とＲ_４がそれぞれ前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基である請求項１６７に記載の方法。 The method of claim 167 R ₃ and R ₄ are each the group containing at least one amino moiety of.

前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基は、グアニジノ、グアニジノアルキル、アミノ、アミノアルキル、ヒドラジン、グアニル、グアニリノアルキルおよびそれらの組合せからなる群から選択される請求項１６６〜１６９のいずれか一項に記載の方法。 166. The group comprising at least one amino moiety is selected from the group consisting of guanidino, guanidinoalkyl, amino, aminoalkyl, hydrazine, guanyl, guanylinoalkyl, and combinations thereof. The method described in 1.

前記少なくとも一つのアミノ部分を含む基は少なくとも一つの正に帯電した基を含む請求項１６６〜１６９のいずれか一項に記載の方法。 170. The method of any one of claims 166 to 169, wherein the group comprising at least one amino moiety comprises at least one positively charged group.

前記少なくとも一つの正に帯電した基はアンモニウムイオンを含む請求項１７１に記載の方法。 181. The method of claim 171, wherein the at least one positively charged group comprises ammonium ions.

前記正に帯電した基は正に帯電したアミノ酸の側鎖から由来する化学構造を有する請求項１７１に記載の方法。 181. The method of claim 171, wherein the positively charged group has a chemical structure derived from a side chain of a positively charged amino acid.

前記正に帯電したアミノ酸は、アルギニン、リジン、ヒスチジン、プロリンおよびそれらの誘導体からなる群から選択される請求項１７３に記載の方法。 178. The method of claim 173, wherein the positively charged amino acid is selected from the group consisting of arginine, lysine, histidine, proline and derivatives thereof.

前記生物学的状態は、肥満、インスリン非依存性糖尿病、インスリン依存性状態、情動障害、神経変性疾患または神経変性障害、および精神病的な疾患または障害からなる群から選択される請求項１４９に記載の方法。 149. The biological condition is selected from the group consisting of obesity, non-insulin dependent diabetes, insulin dependent conditions, affective disorders, neurodegenerative or neurodegenerative disorders, and psychotic diseases or disorders. the method of.

前記情動障害は、単極型障害および双極性障害からなる群から選択される請求項１７５に記載の方法。 175. The method of claim 175, wherein the affective disorder is selected from the group consisting of a unipolar disorder and a bipolar disorder.

前記単極型障害がうつ病である請求項１７６に記載の方法。 177. The method of claim 176, wherein the monopolar disorder is depression.

前記双極性障害が躁うつ病である請求項１７６に記載の方法。 177. The method of claim 176, wherein the bipolar disorder is manic depression.

前記神経変性障害は脳虚血、発作、外傷性脳傷害および細菌感染からなる群から選択される事象から生じる請求項１７５に記載の方法。 175. The method of claim 175, wherein the neurodegenerative disorder results from an event selected from the group consisting of cerebral ischemia, stroke, traumatic brain injury and bacterial infection.

前記神経変性障害は慢性の神経変性障害である請求項１７５に記載の方法。 175. The method of claim 175, wherein the neurodegenerative disorder is a chronic neurodegenerative disorder.

前記慢性の神経変性障害はアルツハイマー病、ハンチングトン病、パーキンソン病、ＡＩＤＳ関連痴呆、筋萎縮性側索硬化症（ＡＭＬ）および多発性硬化症からなる群から選択される疾患から生じる請求項１８０に記載の方法。 181. In claim 180, wherein said chronic neurodegenerative disorder results from a disease selected from the group consisting of Alzheimer's disease, Huntington's disease, Parkinson's disease, AIDS-related dementia, amyotrophic lateral sclerosis (AML) and multiple sclerosis. The method described.

前記精神病的な障害が精神***病である請求項１７５に記載の方法。 175. The method of claim 175, wherein the psychotic disorder is schizophrenia.

前記対象にＧＳＫ−３の活性を変化させることができる少なくとも一つのさらなる活性な成分を同時投与することをさらに含む請求項１４９に記載の方法。 149. The method of claim 149, further comprising co-administering to the subject at least one additional active ingredient capable of altering the activity of GSK-3.

前記さらなる活性な成分はＧＳＫ−３の活性を阻害することができる請求項１８３に記載の方法。 184. The method of claim 183, wherein the additional active ingredient is capable of inhibiting GSK-3 activity.

前記さらなる活性な成分はＧＳＫ−３の発現をダウンレギュレートすることができる請求項１８３に記載の方法。
184. The method of claim 183, wherein the additional active ingredient is capable of downregulating GSK-3 expression.