JP2005512061A - スフィンゴ脂質の内部標準物質 - Google Patents
スフィンゴ脂質の内部標準物質 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2005512061A JP2005512061A JP2003549928A JP2003549928A JP2005512061A JP 2005512061 A JP2005512061 A JP 2005512061A JP 2003549928 A JP2003549928 A JP 2003549928A JP 2003549928 A JP2003549928 A JP 2003549928A JP 2005512061 A JP2005512061 A JP 2005512061A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- internal standard
- sphingolipid
- mass spectrometry
- standard substance
- acyl group
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/92—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving lipids, e.g. cholesterol, lipoproteins, or their receptors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2458/00—Labels used in chemical analysis of biological material
- G01N2458/15—Non-radioactive isotope labels, e.g. for detection by mass spectrometry
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2496/00—Reference solutions for assays of biological material
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
【解決手段】 内部標準物質が、前記測定対象のスフィンゴ脂質と同じオリゴ糖鎖及び長鎖スフィンゴシン塩基と、該測定対象のスフィンゴ脂質とは異なる質量のアシル基とを有し、かつ該測定対象のスフィンゴ脂質と同じ化学的特性のスフィンゴ脂質である。またこの内部標準物質の調製方法及び使用方法である。
Description
<実施例>
本発明は、ファブリー病を観察するためのCTHの合成及びその使用により以下に説明されるが、原理的には、グリコスフィンゴ脂質のリソソーム異化の全過程に対して適用することができる(図2参照)。
インフォームドコンセントを得た上で、旧型ファブリー病の男性患者と、正常な対照から血しょう及び尿が採取された。
50μgのリソ−CTHを、ガラス容器内のN2下で完全に乾燥した後、クロロホルム(10mg/ml)中の100μlのヘプタデカン酸無水物(heptadecanoic acid)中に解離させた。300μlのピリジン(pyridine)を添加した後、この溶液を十分に撹拌し、室温に30分放置した。余分なピリジンを全て除去するためにN2下で完全に乾燥させた後、クロロホルム(100mg/ml)中の100μlのヘプタデカン酸無水物と300μlのピリジンとを反応混合物へ添加した。これを再び十分に混合して、室温に30分放置した。反応混合物をN2下で乾燥し、非特許文献8に記載の通りにC-18固相抽出カートリッジ(英国ドーセット、プール所在Merck製、LiChrolute)を用いて脱塩した。
50μg(〜50nmol)の人の赤血球CTHを、20μlの酢酸ナトリウムの緩衝液中でpH5.0にて、1mUnitのスフィンゴ脂質セラミドN-デアシラーセと共に、37°Cで16時間温置する。この方法は、非特許文献13に実質的に記載されている。但し、トリトン(Toriton)X-100は、無脂肪酸1%BSA(w/v)により置き換えられる。この反応混合物を凍結乾燥し、5μlのクロロホルム/メタノール(1:2、v/v)中で脂質生成物を抽出した。酵素脱アシル化の程度は、5:4:1のクロロホルム:メタノール:酢酸(10%)を移動相として用いたシリカゲル・プレート(Shilica Gel 60, Merck製)上のTLCにより判定された。グリコスフィンゴ脂質及びリソ−グリコスフィンゴ脂質は、ヨウ素蒸気により検出され、標準と比較されることにより識別された。リソ−CTHは、TLCプレートから掻き取られ、500μlのクロロホルム:メタノール(2:1、v/v)による2回洗浄を用いてシリカから回収された。
1μgのCTH内部標準物質を100μlの血しょうへ添加し、2mlのクロロホルム:メタノール(2:1、v/v)を添加し撹拌器で20分振動撹拌することにより全脂質が抽出された。沈殿したタンパク質は、3000g10分の遠心分離により除去された。クロロホルム:メタノール(2:1、v/v)層は、ガラス容器へ移され、400μlのH2Oが添加された。このガラス容器はさらに20分振動撹拌された。2つの層は、10分の遠心分離により分離された。そしてCTHを含む中性グリコ脂質が含まれている下層を、新たなガラス容器へ移し、N2下で乾燥させた。このCTHは、質量分析に先立ってクロロホルム中での再構成により脱塩され、C-18カラム(LiChrolute)及びアセトン:メタノール(9:1)での溶出によるクロマトグラフィを行った(非特許文献8の通り)。
グリコ脂質の質量分析は、トリプル・クアドロポーVGクアトロ I装置(triple quadropole VG Quattro I instrument、英国アルトリンハム所在、MicroMass製)を用いて行った。この装置は、正イオン化モードで操作された。試料は、25mm(i.d.)溶融シリカ移送ライン経由にてハーバードシリンジポンプ(Harvard syringe pump)を流量25μl/分で用いてエレクトロスプレー源中へ直接注入された。キャピラリ電圧は、コーン電圧173Vと共に3.43kVに維持された。エレクトロスプレー源の温度は常時80°Cに保たれ、噴霧ガスとしてN2が流速30リットル/時で用いられた。全てのCTHアイソフォーム(イソ型)の質量が、質量分析を質量範囲m/z700〜1300で走査モードにて操作することにより決定された。生成イオンは、アルゴンガスを衝突ガスとして用いた衝突解離に続いて、質量範囲m/z50〜1200で決定された。最適衝突エネルギーは、最適ガスセル圧3.2×10−3mbarにて70eVとなるように定められた。データは、m/z162.0の中性損失走査を用いて取得され、多チャンネル取得モードで走査されかつ各イオン種のドゥエル時間を100m秒として操作した。定量解析においては、試料は、エレクトロスプレーイオン源及びCMA/200冷蔵自動サンプラーを用いて質量分析装置中へ注入された。
個々のCTHアイソフォーム及び内部標準物質の構造を確認するために、液体二次イオン化源と共に操作するタンデム質量分析装置(LSI-MS)を用いてCTHアイソフォームを解析した。このイオン化モードでは、ESI源を用いては得られないCTHのセラミド主鎖についてのより精密なフラグメンテーションが得られた。そして、各CTHアイソフォーム中のアシル基の最終的な決定を可能とした。グリコ脂質の質量分析は、トリプル・クアドロポールVGクアトロ I装置(英国、アルトリンハム所在、MicroMass製)を用いて行われた。この装置は、LSIMS源(CsI)に適合され、正イオン化モードで加速電圧9kVにて操作した。MS/MS実験は、30eVの衝突エネルギー及びガスセル圧3.2×10−3mbar(アルゴン)を用いて行った。
<C17-CTHの化学合成及び酵素合成>
人の赤血球は、アイソフォームの混合からなり、それらはアシル鎖の長さが異なる(図3a)。最も多いアイソフォームは、リグノセリン酸(C24:0)とネルボン酸(C24:1)とをこれらの適宜量の水酸化誘導体と共に含む。他の成分は、C24:2の酸、ベヘン酸(C22:0)、及びそのモノ不飽和誘導体(C22:1)並びにパルミチン酸(C16:0)アイソフォームである。スペクトル中のこれらのイオン全ては、モノ−ソディエイティド(mono-sodiated)CTHアイソフォームに帰することができ、このことは、この試料が非常に純粋で新しい標準物質を更正するために用いることができたことを示している。これらのイオンの質量は、スフィンゴシン部分がd-18:1であることを示唆する。スフィンゴシン部分の構造は、LSI-MS質量分析により確認され、それは、スフィンゴシンd-18:1からH2Oを引いたものに対応する264m/zの特徴的なフラグメントイオンを示した。
C-17CTH標準物質は、この標準物質の一定量を、異なる量の真のCTHと混合しその混合物をESI/MSにより解析することにより更正された(図5)。各アイソフォームについて適宜の範囲に亘って、応答比と真のCTH量との間の線形関係が観察された。これによりC-17CTHを、真のCTH異性体の量に関係付けて更正することが可能となる。血しょう中のCTHの濃度を測定すべくCTHC-17CTH標準物質を用いるために、1μgの標準物質を100μlの血しょうへ添加し、全CTHを抽出し、ESI/MSにより解析した。単一の正常な血しょう試料中のCTHの比較分析(12回)では、9.9%のばらつき係数が得られた。
[D4]C-16CTHはまた、酵素合成手順の第2ステップにおいてヘプタデカン酸を[D4]パルミチン酸に置き換えることにより酵素合成された。[D4]C-16CTHの構造は、C-17CTHと同様にESI-MS及びLSI-MSの組合せにより確認された。内部標準物質として[D4]C-16CTHを用いた単一の正常血しょう試料中のCTHの比較分析では7.9%のばらつき係数が得られ、内部標準物質としてC-17CTHを用いて決定された正常対照参照範囲内の値が得られた。
Claims (17)
- 測定対象のスフィンゴ脂質の濃度を決定するために質量分析において用いる内部標準物質において、前記内部標準物質が、
前記測定対象のスフィンゴ脂質と同じオリゴ糖鎖及び長鎖スフィンゴシン塩基と、該測定対象のスフィンゴ脂質とは異なる質量のアシル基とを有し、かつ該測定対象のスフィンゴ脂質と同じ化学的特性のスフィンゴ脂質であることを特徴とする
質量分析に用いる内部標準物質。 - 前記アシル基が前記測定対象のスフィンゴ脂質と同じ数の炭素原子を有しかつ同位体でラベル付けされていることを特徴とする
第1タイプの請求項1に記載の質量分析に用いる内部標準物質。 - 前記同位体によるラベル付けが、水素同位体または炭素同位体によることを特徴とする
第1タイプの請求項2に記載の質量分析に用いる内部標準物質。 - 前記スフィンゴ脂質が重水素化されたアシル基または13Cをもつアシル基を有し、天然のスフィンゴ脂質と化学的に同一であると共に質量が異なることにより、質量分析により検知可能であることを特徴とする
第1タイプの請求項3に記載の質量分析に用いる内部標準物質。 - [D4]C-16CTHを有することを特徴とする
第1タイプの請求項4に記載の質量分析に用いる内部標準物質。 - 前記スフィンゴ脂質の前記アシル基が奇数個の炭素原子を有することを特徴とする
第2タイプの請求項1に記載の質量分析に用いる内部標準物質。 - 前記内部標準物質の前記アシル基が、前記測定対象のスフィンゴ脂質のアシル基よりも1つ多いか1つ少ない炭素原子を有することを特徴とする
第2タイプの請求項6に記載の質量分析に用いる内部標準物質。 - C-15、C-17、C-19、C-21、C-23及びC-25アシルスフィンゴ脂質のうち1または複数を有することを特徴とする
第2タイプの請求項6に記載の質量分析に用いる内部標準物質。 - C-15CTH、C-17CTH、C-19CTH、C-21CTH、C-23CTH及びC-25CTHのうち1または複数を有することを特徴とする
第2タイプの請求項6に記載の質量分析に用いる内部標準物質。 - 測定対象のスフィンゴ脂質のための内部標準物質の調製方法において、
質量分析により検出可能なラベルを付けたアシル基を前記測定対象のスフィンゴ脂質のリソ型に対して付加することを有することを特徴とする
内部標準物質の調整方法。 - 前記ラベルが前記リソ−スフィンゴ脂質に対して化学的に付加されることを特徴とする
請求項10に記載の内部標準物質の調製方法。 - 前記ラベルがスフィンゴ脂質セラミドN-デアシラーゼの逆反応を用いて酵素により前記リソ−スフィンゴ脂質に対して付加されることを特徴とする
請求項10に記載の内部標準物質の調製方法。 - 請求項1〜9のいずれかに記載の、または請求項10〜12のいずれかに記載の方法により調製された内部標準物質を質量分析にて使用することを特徴とする使用方法。
- エレクトロスプレーイオン化タンデム質量分析にて前記内部標準物質を使用することを特徴とする請求項13に記載の使用方法。
- 請求項1〜9のいずれかに記載の、または請求項10〜12のいずれかに記載の方法により調製された内部標準物質を用いて質量分析によりスフィンゴ脂質のレベルについて生化学的試料を解析することを特徴とする
リソソーム蓄積症の診断方法。 - 前記生化学試料が、血液、血しょう、組織または尿の試料であることを特徴とする
請求項15に記載のリソソーム蓄積症の診断方法。 - 前記生化学試料が、新生児の踵からの採決試料であることを特徴とする
請求項16に記載のリソソーム蓄積症の診断方法。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GBGB0128498.3A GB0128498D0 (en) | 2001-11-28 | 2001-11-28 | International standards for sphingolipids |
PCT/GB2002/005327 WO2003048784A2 (en) | 2001-11-28 | 2002-11-27 | Internal standards for sphingolipids for use in mass spectrometry |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2005512061A true JP2005512061A (ja) | 2005-04-28 |
Family
ID=9926614
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2003549928A Pending JP2005512061A (ja) | 2001-11-28 | 2002-11-27 | スフィンゴ脂質の内部標準物質 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20050048567A1 (ja) |
EP (1) | EP1468294A2 (ja) |
JP (1) | JP2005512061A (ja) |
AU (1) | AU2002343101B2 (ja) |
GB (1) | GB0128498D0 (ja) |
WO (1) | WO2003048784A2 (ja) |
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008547031A (ja) * | 2005-06-30 | 2008-12-25 | バイオクラテス ライフ サイエンシズ アクチェンゲゼルシャフト | 代謝産物特性の定量分析のための装置 |
JP2011007690A (ja) * | 2009-06-26 | 2011-01-13 | Hitachi High-Technologies Corp | イオン源装置、イオン化プローブの製造方法及びイオン源装置の駆動方法 |
WO2012081508A1 (ja) * | 2010-12-13 | 2012-06-21 | 日本ケミカルリサーチ株式会社 | スフィンゴ糖脂質の定量法 |
JP2013511726A (ja) * | 2009-11-17 | 2013-04-04 | ベイラー リサーチ インスティテュート | 心疾患マーカーとしての尿中トリアオシルセラミド(gb3) |
JP2016522406A (ja) * | 2013-05-14 | 2016-07-28 | セントジーン アーゲー | ニーマン・ピック病の診断のための方法 |
JP2017524708A (ja) * | 2014-07-30 | 2017-08-31 | メタボロン,インコーポレイテッド | 構造的に多様な複合脂質を分析するための方法、組成物およびキット |
JP2020139755A (ja) * | 2019-02-26 | 2020-09-03 | 国立大学法人九州大学 | 脂質プロファイリングシステム、脂質プロファイリング方法、及び脂質プロファイリングプログラム |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AUPS293002A0 (en) * | 2002-06-14 | 2002-07-04 | Women's And Children's Hospital | Identification of oligosaccharides and their use in the diagnosis and evaluation of mucopolysaccharidoses and other related disorders |
EP1664721A4 (en) | 2003-09-22 | 2008-05-21 | Becton Dickinson Co | QUANTIFYING ANALYSTS USING INNER STANDARDS |
EP2102660A1 (en) * | 2006-12-21 | 2009-09-23 | Academisch Ziekenhuis Bij De Universiteit Van Amsterdam | Diagnostic marker for fabry disease |
US20120283290A1 (en) * | 2011-05-06 | 2012-11-08 | Amicus Therapeutics Inc. | Quantitation of gl3 in urine |
EP2959040A4 (en) * | 2013-08-06 | 2017-03-01 | University of South Florida | Target binding molecules identified by kinetic target-guided synthesis |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5272138A (en) * | 1988-02-12 | 1993-12-21 | The Biomembrane Institute | Naturally occurring gangliosides containing de-N-acetyl-sialic acid and their applications as modifiers of cell physiology |
US6258605B1 (en) * | 1999-03-26 | 2001-07-10 | Neo Gen Screening, Inc. | Clinical method for the genetic screening of newborns using tandem mass spectrometry |
US20080233655A1 (en) * | 2004-03-31 | 2008-09-25 | Children, Youth And Women's Health Service | Screening For Lysosomal Storage Disease Status |
-
2001
- 2001-11-28 GB GBGB0128498.3A patent/GB0128498D0/en not_active Ceased
-
2002
- 2002-11-27 JP JP2003549928A patent/JP2005512061A/ja active Pending
- 2002-11-27 US US10/497,218 patent/US20050048567A1/en not_active Abandoned
- 2002-11-27 WO PCT/GB2002/005327 patent/WO2003048784A2/en active Application Filing
- 2002-11-27 EP EP02779763A patent/EP1468294A2/en not_active Withdrawn
- 2002-11-27 AU AU2002343101A patent/AU2002343101B2/en not_active Ceased
Cited By (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008547031A (ja) * | 2005-06-30 | 2008-12-25 | バイオクラテス ライフ サイエンシズ アクチェンゲゼルシャフト | 代謝産物特性の定量分析のための装置 |
US8116983B2 (en) | 2005-06-30 | 2012-02-14 | Biocrates Life Sciences Ag | Device for quantitative analysis of a drug or metabolite profile |
JP2011007690A (ja) * | 2009-06-26 | 2011-01-13 | Hitachi High-Technologies Corp | イオン源装置、イオン化プローブの製造方法及びイオン源装置の駆動方法 |
JP2013511726A (ja) * | 2009-11-17 | 2013-04-04 | ベイラー リサーチ インスティテュート | 心疾患マーカーとしての尿中トリアオシルセラミド(gb3) |
WO2012081508A1 (ja) * | 2010-12-13 | 2012-06-21 | 日本ケミカルリサーチ株式会社 | スフィンゴ糖脂質の定量法 |
JP5977174B2 (ja) * | 2010-12-13 | 2016-08-24 | Jcrファーマ株式会社 | スフィンゴ糖脂質の定量法 |
JP2016522406A (ja) * | 2013-05-14 | 2016-07-28 | セントジーン アーゲー | ニーマン・ピック病の診断のための方法 |
JP2017524708A (ja) * | 2014-07-30 | 2017-08-31 | メタボロン,インコーポレイテッド | 構造的に多様な複合脂質を分析するための方法、組成物およびキット |
US11181535B2 (en) | 2014-07-30 | 2021-11-23 | Metabolon, Inc. | Isotopically-labeled cholesteryl ester internal standard composition and kit |
JP2020139755A (ja) * | 2019-02-26 | 2020-09-03 | 国立大学法人九州大学 | 脂質プロファイリングシステム、脂質プロファイリング方法、及び脂質プロファイリングプログラム |
JP7306676B2 (ja) | 2019-02-26 | 2023-07-11 | 国立大学法人九州大学 | 脂質プロファイリングシステム、脂質プロファイリング方法、及び脂質プロファイリングプログラム |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU2002343101A1 (en) | 2003-06-17 |
WO2003048784A2 (en) | 2003-06-12 |
AU2002343101B2 (en) | 2007-10-04 |
WO2003048784A3 (en) | 2003-12-18 |
GB0128498D0 (en) | 2002-01-23 |
EP1468294A2 (en) | 2004-10-20 |
US20050048567A1 (en) | 2005-03-03 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
AU2007226582B2 (en) | Substrates and internal standards for mass spectroscopy detection | |
Boutin et al. | LC–MS/MS analysis of plasma lyso-Gb3 in Fabry disease | |
Dupont et al. | A metabolomic study reveals novel plasma lyso-Gb3 analogs as Fabry disease biomarkers | |
JP2007524835A (ja) | invivoにおいて単一プロトコルにより2以上の生体分子の相対流速を比較する方法 | |
EP2802670B1 (en) | Lysosomal enzyme assay methods and compositions | |
JP2005512061A (ja) | スフィンゴ脂質の内部標準物質 | |
JP2009528544A (ja) | 質量分析法を用いて異性体を識別するための方法 | |
US20020102737A1 (en) | Diagnostic methods for pompe disease and other glycogen storage diseases | |
Vukelic et al. | Anencephaly: structural characterization of gangliosides in defined brain regions | |
US20060234326A1 (en) | Mass spectrometry methods for simultaneous detection of metabolic enzyme activity and metabolite levels | |
EP3387433A1 (en) | Bile acid biomarkers for niemann-pick diseases, methods and uses therefor | |
US9982288B2 (en) | Mucopolysaccharidosis IVA/VII screening and treatment method | |
JP6989636B2 (ja) | ニーマン・ピック病の診断のための方法 | |
Krüger et al. | Determination of globotriaosylceramide in plasma and urine by mass spectrometry | |
JP2016506501A (ja) | 異染性白質ジストロフィーの診断方法 | |
JP2016522677A (ja) | ライソゾーム病の検査に関する化合物および方法 | |
Fujiwaki et al. | Quantitative evaluation of sphingolipids using delayed extraction matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry with sphingosylphosphorylcholine as an internal standard: practical application to cardiac valves from a patient with fabry disease | |
US20240003908A1 (en) | Polyol biomarkers for congenital disorders of glycosylation | |
Kuchar et al. | Tandem mass spectrometry of sphingolipids: application in metabolic studies and diagnosis of inherited disorders of sphingolipid metabolism | |
Nakanishi et al. | Chemical diagnosis of Fabry's disease by fluorometric assay and fast atom bombardment/mass spectrometry | |
JP2004527770A (ja) | 血小板活性化因子の測定法 | |
WO2019124267A1 (ja) | ニーマンピック病c型の診断のための検査方法 | |
WO2023233433A1 (en) | Method for the in vitro diagnosis of neurogenerative metabolic diseases | |
WO2023232942A1 (en) | Method for detecting lysosomal storage disease biomarkers and kits for performing the method | |
Wei et al. | Targeted Quantification of Carbohydrate Biomarkers Using LC–MS |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20051101 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20081104 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20090204 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20090212 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20090303 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20090310 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20090609 |