JP2005350412A - 神経成長因子産生抑制剤、並びにその神経成長因子産生抑制剤を配合した皮膚外用剤、化粧料、医薬部外品、痒み予防及び治療剤、及びアトピー性皮膚炎治療剤 - Google Patents
神経成長因子産生抑制剤、並びにその神経成長因子産生抑制剤を配合した皮膚外用剤、化粧料、医薬部外品、痒み予防及び治療剤、及びアトピー性皮膚炎治療剤 Download PDFInfo
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Abstract
【課題】 Ｃ繊維の表皮への伸長に深く関与する神経成長因子の産生を抑制する作用をもつと同時に安全性の高い神経成長因子産生抑制剤、並びにその神経成長因子産生抑制剤を配合した皮膚外用剤、化粧料、医薬部外品、痒み予防及び治療剤、及びアトピー性皮膚炎治療剤を提供することを課題とする。
【解決手段】 エイジツ抽出物、ノバラ抽出物、ローズマリー抽出物、エンメイソウ抽出物、チョウジ抽出物、ジオウ抽出物、シャクヤク抽出物、ゲンチアナ抽出物、オウゴン抽出物、フキタンポポ抽出物、クレマティス抽出物及びドクダミ抽出物から選ばれる少なくとも１種を神経成長因子産生抑制剤に含有させたことを特徴とする。
【選択図】 なし
【解決手段】 エイジツ抽出物、ノバラ抽出物、ローズマリー抽出物、エンメイソウ抽出物、チョウジ抽出物、ジオウ抽出物、シャクヤク抽出物、ゲンチアナ抽出物、オウゴン抽出物、フキタンポポ抽出物、クレマティス抽出物及びドクダミ抽出物から選ばれる少なくとも１種を神経成長因子産生抑制剤に含有させたことを特徴とする。
【選択図】 なし
Description
本発明は、神経成長因子産生抑制剤、並びにその神経成長因子産生抑制剤を配合した皮膚外用剤、化粧料、医薬部外品、痒み予防及び治療剤、及びアトピー性皮膚炎治療剤に関する。
痒みは、皮膚、粘膜、角膜でのみ生じる特有の感覚で「引っ掻く欲望を伴う不快な感覚」と説明される。近年社会的問題になっているアトピー性皮膚疾患、花粉症、食物アレルギー、蕁麻疹等の炎症性及びアレルギー性の皮膚疾患において、この痒みという感覚は非常に重要且つ深刻な症状の一つである。また皮膚の乾燥を伴った老人性皮膚掻痒症や黄疸や透析に伴う痒み、糖尿病や悪性腫瘍の合併症においても痒みは問題になっている。
痒みは、皮膚の乾燥や温度変化、汗、圧迫、接触などの物理的刺激や起痒物質による化学刺激など、多種多様な刺激により、末梢性にまた中枢性に誘発される。内因性の起痒物質として最も重要で、その拮抗薬が臨床使用されているのはヒスタミンのみであり、Ｈ1 受容体が関与していると考えられている。ヒスタミンに対する競合拮抗物質、例えばマレイン酸クロルフェニラミン、ジフェンヒドラミン及びその類縁物質を配合した外用剤が痒みの治療に外用されている。しかし、これら抗ヒスタミン作用を有する外用剤には副作用のあることが問題とされている。
そこで、安全性に着目して天然の含有成分を配合した皮膚外用剤に関する下記特許文献１のような出願がなされている。この特許文献１は竹抽出成分を含有させた皮膚外用剤に関する発明を開示するものであるが、その従来技術の欄には、ボルネオールの肥満細胞膜安定可能を利用するもの（特開平６−２１１７１３号）、放線菌培養液による炎症抑制作用を利用するもの（特開平５−２５０５３号）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）やリノレン酸を含む油脂の抗アレルギー性を利用するもの（特開平２−２９０８１号）等が開示され、これら天然に存する抗アレルギー剤は副作用が少ないが、効果が十分でないことが記載されている。
特開２００３−２１２７８６号公報
しかし、この特許文献１に係る発明も、ヒスタミン遊離抑制試験やロイコトリエン分泌抑制試験で痒み抑制の効果を示すにとどまっている。
一方、近年の研究では、健常人皮膚では表皮真皮境界部までしか存在が認められていない痒みの伝達繊維終末（Ｃ繊維終末）が、アトピー性皮膚炎の皮膚や乾燥した皮膚では皮膚の表皮層まで伸長しており、このＣ繊維終末の表皮への伸長が老人性掻痒症、アトピー性皮膚炎、乾燥肌での激しい痒みの発生の一因ではないかと指摘されている。
このような問題に関しては、たとえば下記特許文献２の従来技術の欄に記載されている（明細書［０００５］〜［０００７］）。この特許文献２に係る発明は、ツリフネ草の花弁のエキスを抗アレルギー組成物に含有させたことを特徴とするものであるが、上記のような痒みのメカニズムを明らかにした上で、解決を図るものではないため、発明の効果も抗アレルギー、抗アナフィラキシー効果を奏するにとどまっている。
特開２００１−２７８７９６号公報
いずれにしても、皮膚表皮へのＣ繊維伸長の抑制を作用機序とした痒み抑制剤は未だに開発されていないのが現状である。
本発明は、このような問題点を解決するためになされたもので、Ｃ繊維の表皮への伸長に深く関与する神経成長因子の産生を抑制する作用をもつと同時に安全性の高い神経成長因子産生抑制剤、並びにその神経成長因子産生抑制剤を配合した皮膚外用剤、化粧料、医薬部外品、痒み予防及び治療剤、及びアトピー性皮膚炎治療剤を提供することを課題とする。
本発明者らは、このような課題を解決すべく鋭意研究した結果、エイジツ抽出物、ノバラ抽出物、ローズマリー抽出物、エンメイソウ抽出物、チョウジ抽出物、ジオウ抽出物、シャクヤク抽出物、ゲンチアナ抽出物、オウゴン抽出物、フキタンポポ抽出物、クレマティス抽出物及びドクダミ抽出物が、優れた神経成長因子産生抑制作用、特に皮膚に生じる炎症や痒みを緩和、改善すると同時に生体に対しては安全であることを見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち本発明は、神経成長因子産生抑制剤、並びにその神経成長因子産生抑制剤を配合した皮膚外用剤、化粧料、医薬部外品、痒み予防及び治療剤、及びアトピー性皮膚炎治療剤としてなされたもので、神経成長因子産生抑制剤に係る請求項１記載の発明は、エイジツ抽出物、ノバラ抽出物、ローズマリー抽出物、エンメイソウ抽出物、チョウジ抽出物、ジオウ抽出物、シャクヤク抽出物、ゲンチアナ抽出物、オウゴン抽出物、フキタンポポ抽出物、クレマティス抽出物及びドクダミ抽出物から選ばれる少なくとも１種を神経成長因子産生抑制剤に含有させたことを特徴とする。
本発明において、「エイジツ抽出物、ノバラ抽出物、ローズマリー抽出物、エンメイソウ抽出物、チョウジ抽出物、ジオウ抽出物、シャクヤク抽出物、ゲンチアナ抽出物、オウゴン抽出物、フキタンポポ抽出物、クレマティス抽出物及びドクダミ抽出物から選ばれる少なくとも１種を神経成長因子産生抑制剤に含有させる」とは、これらの１種のみからなるもの、或いは２種以上からなるものの他、上記各抽出物以外のものをも含む場合があることを意味する。
また、請求項２記載の発明は、請求項１記載の神経成長因子産生抑制剤を配合した皮膚外用剤に係る発明であり、請求項３記載の発明は、請求項１記載の神経成長因子産生抑制剤を配合した化粧料であり、請求項４記載の発明は、請求項１記載の神経成長因子産生抑制剤を配合した医薬部外品に係る発明である。
さらに、請求項５記載の発明は、請求項１記載の神経成長因子産生抑制剤を配合した痒み予防及び治療剤に関する発明であり、請求項６記載の発明は、請求項１記載の神経成長因子産生抑制剤を配合したアトピー性皮膚炎治療剤に係る発明である。
上述のようにＣ繊維終末は、健常人皮膚では表皮真皮境界部までしか存在が認められていないのであるが、アトピー性皮膚炎等の皮膚や乾燥した皮膚では皮膚の表皮層まで伸長しており、このＣ繊維終末の表皮への伸長が痒み発生の一因と考えられている。そして、このようにＣ繊維終末が表皮へ伸長するのは、神経成長因子であるＮＧＦがＣ繊維終末に作用するためであると推定され、従って本発明の神経成長因子産生抑制剤を用いることでＮＧＦの産生を抑制することができ、それによってＣ繊維終末が表皮まで伸長するのを阻止することができるのである。
上述のように、本発明によれば、Ｃ繊維の表皮への伸長に深く関与する神経成長因子であるＮＧＦの産生を抑制することで、痒みの要因を直接的に除去することができ、且つ安全性の高い神経成長因子産生抑制剤、並びにその神経成長因子産生抑制剤を配合した皮膚外用剤、化粧料等を提供することができる。
本発明で用いる抽出物とは、それぞれの植物の全草又はそれらの葉、茎、根、果実、種子および花のうち１又は２以上の箇所を乾燥し、又は乾燥することなく粉砕した後、低温又は室温ないし加温下に溶媒により抽出するか、又はソックスレー抽出器などの抽出器具を用いて抽出することにより得られる各種溶媒抽出液、その希釈液、その濃縮液、あるいはその乾燥末を意味するものである。抽出材料となる各植物の部位は特に限定されるものではないが、ノバラ、エイジツは果実、ローズマリーおよびクレマティスは葉、エンメイソウは葉および茎、チョウジはつぼみ、ジオウ、シャクヤク、オウゴンは根、ゲンチアナは根および茎、フキタンポポは花、ドクダミは地上部を、それぞれ抽出材料として用いることが好ましい。
上記の抽出溶媒としては、例えば水、メタノール、エタノールなどの低級１価アルコール、グリセリン、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール等の液状多価アルコール、含水アルコール類等の１種または２種以上を組み合わせて用いることができる。好ましい抽出方法の例としては、含水濃度２０〜８０容量％のエタノール又は１，３−ブチレングリコールを用い、室温にて１〜５日間抽出を行ったのち、濾過する方法が挙げられる。
本発明の皮膚外用剤、化粧料等におけるエイジツ抽出物、ノバラ抽出物、ローズマリー抽出物、エンメイソウ抽出物、チョウジ抽出物、ジオウ抽出物、シャクヤク抽出物、ゲンチアナ抽出物、オウゴン抽出物、フキタンポポ抽出物、クレマティス抽出物及びドクダミ抽出物等の各神経成長因子産生抑制剤の配合量は特に限定されるものではないが、乾燥固形物重量（複数の抽出物を含む場合はその合計量）で、総量を基準として０．０００１〜２０．０重量％が好ましい。配合量が０．０００１重量％未満であると、本発明の効果が充分に得られず、一方２０．０重量％を超えても、その増量に見合った効果の向上は認められないからである。この観点からは、０．０００５〜５．０重量％であることがより好ましい。
本発明の神経成長因子産生抑制剤は、皮膚外用剤として、例えば、ローション類、乳液類、クリーム類、軟膏類、パック類、ファンデーション等の剤型とすることができる。本発明の神経成長因子産生抑制剤には、形態に応じ、色素、防腐剤、界面活性剤、香料、顔料等を適宜配合することができる。
以下、本発明の実施例について説明する。
（実施例１）
本実施例は、エイジツ抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。エイジツ抽出物の調製は次のようにして行う。すなわち、先ずエイジツの果実を乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加える。次に、室温（２０〜３０℃程度の温度）にて５日間抽出を行った後、濾過することによって、エイジツ抽出物を得た。このとき、乾燥固形物量は、１．６１重量％であった。
（実施例１）
本実施例は、エイジツ抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。エイジツ抽出物の調製は次のようにして行う。すなわち、先ずエイジツの果実を乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加える。次に、室温（２０〜３０℃程度の温度）にて５日間抽出を行った後、濾過することによって、エイジツ抽出物を得た。このとき、乾燥固形物量は、１．６１重量％であった。
（実施例２）
本実施例は、ノバラ抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。ノバラの果実を乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加え、室温にて５日間抽出を行った後、濾過し、ノバラ抽出物を得た。乾燥固形物量は、１．５７重量％であった。
本実施例は、ノバラ抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。ノバラの果実を乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加え、室温にて５日間抽出を行った後、濾過し、ノバラ抽出物を得た。乾燥固形物量は、１．５７重量％であった。
（実施例３）
本実施例は、ローズマリー抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。ローズマリーの葉を乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加え、７０℃に加温して５日間抽出を行った後、濾過し、ローズマリー抽出物を得た。乾燥固形物量は、１．７５重量％であった。
本実施例は、ローズマリー抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。ローズマリーの葉を乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加え、７０℃に加温して５日間抽出を行った後、濾過し、ローズマリー抽出物を得た。乾燥固形物量は、１．７５重量％であった。
（実施例４）
本実施例は、エンメイソウ抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。エンメイソウの葉および茎を乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加え、室温にて５日間抽出を行った後、濾過し、エンメイソウ抽出物を得た。乾燥固形物量は、１．２７重量％であった。
本実施例は、エンメイソウ抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。エンメイソウの葉および茎を乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加え、室温にて５日間抽出を行った後、濾過し、エンメイソウ抽出物を得た。乾燥固形物量は、１．２７重量％であった。
（実施例５）
本実施例は、チョウジ抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。チョウジのつぼみを乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加え、室温にて５日間抽出を行った後、濾過し、チョウジ抽出物を得た。乾燥固形物量は、１．１３重量％であった。
本実施例は、チョウジ抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。チョウジのつぼみを乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加え、室温にて５日間抽出を行った後、濾過し、チョウジ抽出物を得た。乾燥固形物量は、１．１３重量％であった。
（実施例６）
本実施例は、ジオウ抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。ジオウ抽出物の調製は次のように行なう。先ずジオウの根を乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加え、室温にて５日間抽出を行った後、濾過し、ジオウ抽出物を得た。乾燥固形物量は、１．２８重量％であった。
本実施例は、ジオウ抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。ジオウ抽出物の調製は次のように行なう。先ずジオウの根を乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加え、室温にて５日間抽出を行った後、濾過し、ジオウ抽出物を得た。乾燥固形物量は、１．２８重量％であった。
（実施例７）
本実施例は、シャクヤク抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。シャクヤクの根を乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加え、室温にて５日間抽出を行った後、濾過し、シャクヤク抽出物を得た。乾燥固形物量は、１．５３重量％であった。
本実施例は、シャクヤク抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。シャクヤクの根を乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加え、室温にて５日間抽出を行った後、濾過し、シャクヤク抽出物を得た。乾燥固形物量は、１．５３重量％であった。
（実施例８）
本実施例は、ゲンチアナ抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。ゲンチアナの根及び茎を乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加え、室温にて５日間抽出を行った後、濾過し、ゲンチアナ抽出物を得た。乾燥固形物量は、１．４１重量％であった。
本実施例は、ゲンチアナ抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。ゲンチアナの根及び茎を乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加え、室温にて５日間抽出を行った後、濾過し、ゲンチアナ抽出物を得た。乾燥固形物量は、１．４１重量％であった。
（実施例９）
本実施例は、オウゴン抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。オウゴンの根を乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加え、室温にて５日間抽出を行った後、濾過し、オウゴン抽出物を得た。乾燥固形物量は、１．３５重量％であった。
本実施例は、オウゴン抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。オウゴンの根を乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加え、室温にて５日間抽出を行った後、濾過し、オウゴン抽出物を得た。乾燥固形物量は、１．３５重量％であった。
（実施例１０）
本実施例は、フキタンポポ抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。フキタンポポの花を乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加え、室温にて５日間抽出を行った後、濾過し、フキタンポポ抽出物を得た。乾燥固形物量は、１．３９重量％であった。
本実施例は、フキタンポポ抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。フキタンポポの花を乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加え、室温にて５日間抽出を行った後、濾過し、フキタンポポ抽出物を得た。乾燥固形物量は、１．３９重量％であった。
（実施例１１）
本実施例は、クレマティス抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。クレマティスの葉を乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加え、室温にて５日間抽出を行った後、濾過し、クレマティス抽出物を得た。乾燥固形物量は、１．４６重量％であった。
本実施例は、クレマティス抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。クレマティスの葉を乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加え、室温にて５日間抽出を行った後、濾過し、クレマティス抽出物を得た。乾燥固形物量は、１．４６重量％であった。
（実施例１２）
本実施例は、ドクダミ抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。ドクダミの地上部を乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加え、室温にて５日間抽出を行った後、濾過し、ドクダミ抽出物を得た。乾燥固形物量は、１．２８重量％であった。
本実施例は、ドクダミ抽出物を含有した神経成長因子産生抑制剤の実施例である。ドクダミの地上部を乾燥して細かく砕いたもの１０ｇに、含水濃度５０容量％エタノール１００ｍｌを加え、室温にて５日間抽出を行った後、濾過し、ドクダミ抽出物を得た。乾燥固形物量は、１．２８重量％であった。
（試験例１）
本試験例は、正常ヒト皮膚線維芽細胞（ＮＨＤＦ）を用いた神経成長因子抑制試験である。本試験例では、エイジツ抽出物からなる神経成長因子産生抑制剤を対象としている。
本試験例は、正常ヒト皮膚線維芽細胞（ＮＨＤＦ）を用いた神経成長因子抑制試験である。本試験例では、エイジツ抽出物からなる神経成長因子産生抑制剤を対象としている。
正常ヒト皮膚線維芽細胞（ＮＨＤＦ）は、１０％牛胎児血清（５６℃、３０分処理）を含むDulbecco's MEM培地（Sigma 製）で３７℃、５％ＣＯ2 下培養した。ＮＨＤＦを１０5cells/ml となるように１０％牛胎児血清（５６℃、３０分処理）を含むDulbecco's MEM培地に懸濁させ、その懸濁液を１ウェルあたり１ｍｌずつ２４ウェルマイクロプレート（IWAKI 製）に分注した。
２４時間培養後、上清を吸引して取り除き、予め調製した０．２容量％、０．１容量％、０．０５容量％、又は０．０２５容量％のエイジツ抽出物を含む１０％牛胎児血清（５６℃、３０分処理、ICN 製）を含むDulbecco's MEM培地（Sigma 製）４５０μｌを分注した。３０分間インキュベートしたのち、１００ｎｇ／ｍｌのヒトインターロイキン１α／１０％牛胎児血清（５６℃、３０分処理）を含むDulbecco's MEM培地（Sigma ）溶液５０μｌを加え、さらに２４時間インキュベートした。培養上清を回収し、培養上清中の神経成長因子濃度をNGF Emax Immunoassay kit（Promega 製）で測定した。測定はＮ＝４で行い、平均値と標準偏差で表した。その結果を図１に示す。
エイジツ抽出物を添加しない場合の線維芽細胞の培養上清中への神経成長因子（ＮＧＦ）の遊離量（培養上清中のＮＧＦ濃度）が１０．２８ｐｇ／ｍｌであったのに対して、エイジツ抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で８．９６ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で７．５７ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で５．４７ｐｇ／ｍｌ、０．２容量％添加で２．７８ｐｇ／ｍｌであり、いずれもエイジツ抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、エイジツ抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またエイジツ抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
（試験例２）
実施例２のノバラ抽出物からなる神経成長因子産生抑制剤を対象として、上記実施例１と同様にしてＮＨＤＦを用いた神経成長因子産生抑制試験を行った。その結果を図２に示す。ノバラ抽出物を添加しない場合の培養上清中のＮＧＦ濃度が９．６９ｐｇ／ｍｌであったのに対して、ノバラ抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で８．２３ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で６．９５ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で３．６８ｐｇ／ｍｌ、０．２容量％添加で１．２５ｐｇ／ｍｌであり、いずれもノバラ抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、ノバラ抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またノバラ抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
実施例２のノバラ抽出物からなる神経成長因子産生抑制剤を対象として、上記実施例１と同様にしてＮＨＤＦを用いた神経成長因子産生抑制試験を行った。その結果を図２に示す。ノバラ抽出物を添加しない場合の培養上清中のＮＧＦ濃度が９．６９ｐｇ／ｍｌであったのに対して、ノバラ抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で８．２３ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で６．９５ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で３．６８ｐｇ／ｍｌ、０．２容量％添加で１．２５ｐｇ／ｍｌであり、いずれもノバラ抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、ノバラ抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またノバラ抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
（試験例３）
実施例３のローズマリー抽出物からなる神経成長因子産生抑制剤を対象として、上記実施例１と同様にしてＮＨＤＦを用いた神経成長因子産生抑制試験を行った。その結果を図３に示す。ローズマリー抽出液を添加しない場合の培養上清中のＮＧＦ濃度が１１．３３ｐｇ／ｍｌであったのに対して、ローズマリー抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で７．２８ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で５．６２ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で３．７８ｐｇ／ｍｌ、０．２容量％添加で２．０６ｐｇ／ｍｌであり、いずれもローズマリー抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、ローズマリー抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またローズマリー抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
実施例３のローズマリー抽出物からなる神経成長因子産生抑制剤を対象として、上記実施例１と同様にしてＮＨＤＦを用いた神経成長因子産生抑制試験を行った。その結果を図３に示す。ローズマリー抽出液を添加しない場合の培養上清中のＮＧＦ濃度が１１．３３ｐｇ／ｍｌであったのに対して、ローズマリー抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で７．２８ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で５．６２ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で３．７８ｐｇ／ｍｌ、０．２容量％添加で２．０６ｐｇ／ｍｌであり、いずれもローズマリー抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、ローズマリー抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またローズマリー抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
（試験例４）
実施例４のエンメイソウ抽出物からなる神経成長因子産生抑制剤を対象として、上記実施例１と同様にしてＮＨＤＦ神経成長因子産生抑制試験を行った。その結果を図４に示す。エンメイソウ抽出物を添加しない場合の培養上清中のＮＧＦ濃度が１０．８１ｐｇ／ｍｌであったのに対して、エンメイソウ抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で９．３８ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で８．７ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で７．０５ｐｇ／ｍｌ、０．２容量％添加で４．７３ｐｇ／ｍｌであり、いずれもエンメイソウ抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、エンメイソウ抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またエンメイソウ抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
実施例４のエンメイソウ抽出物からなる神経成長因子産生抑制剤を対象として、上記実施例１と同様にしてＮＨＤＦ神経成長因子産生抑制試験を行った。その結果を図４に示す。エンメイソウ抽出物を添加しない場合の培養上清中のＮＧＦ濃度が１０．８１ｐｇ／ｍｌであったのに対して、エンメイソウ抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で９．３８ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で８．７ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で７．０５ｐｇ／ｍｌ、０．２容量％添加で４．７３ｐｇ／ｍｌであり、いずれもエンメイソウ抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、エンメイソウ抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またエンメイソウ抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
（試験例５）
実施例５のチョウジ抽出物からなる神経成長因子産生抑制を対象として、上記実施例１と同様にしてＮＨＤＦ神経成長因子産生抑制試験を行った。その結果を図５に示す。チョウジ抽出物の培養上清への添加濃度は、０．１容量％、０．０５容量％、又は０．０２５容量％として実施例１と同様に神経成長因子産生抑制試験を行った。チョウジ抽出物を添加しない場合の培養上清中のＮＧＦ濃度が１５．５１ｐｇ／ｍｌであったのに対して、チョウジ抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で６．０ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で３．９１ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で１．０４ｐｇ／ｍｌであり、いずれもチョウジ抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、チョウジ抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またチョウジ抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
実施例５のチョウジ抽出物からなる神経成長因子産生抑制を対象として、上記実施例１と同様にしてＮＨＤＦ神経成長因子産生抑制試験を行った。その結果を図５に示す。チョウジ抽出物の培養上清への添加濃度は、０．１容量％、０．０５容量％、又は０．０２５容量％として実施例１と同様に神経成長因子産生抑制試験を行った。チョウジ抽出物を添加しない場合の培養上清中のＮＧＦ濃度が１５．５１ｐｇ／ｍｌであったのに対して、チョウジ抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で６．０ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で３．９１ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で１．０４ｐｇ／ｍｌであり、いずれもチョウジ抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、チョウジ抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またチョウジ抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
（試験例６）
実施例６のジオウ抽出物からなる神経成長因子産生抑制剤を対象として、上記実施例１と同様にしてＮＨＤＦ神経成長因子産生抑制試験を行った。その結果を図６に示す。ジオウ抽出物を添加しない場合の培養上清中のＮＧＦ濃度が２７．２５ｐｇ／ｍｌであったのに対して、ジオウ抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で２４．７５ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で２３．０８ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で２１．６２ｐｇ／ｍｌ、０．２容量％添加で１６．９１ｐｇ／ｍｌであり、いずれもジオウ抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、ジオウ抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またジオウ抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
実施例６のジオウ抽出物からなる神経成長因子産生抑制剤を対象として、上記実施例１と同様にしてＮＨＤＦ神経成長因子産生抑制試験を行った。その結果を図６に示す。ジオウ抽出物を添加しない場合の培養上清中のＮＧＦ濃度が２７．２５ｐｇ／ｍｌであったのに対して、ジオウ抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で２４．７５ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で２３．０８ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で２１．６２ｐｇ／ｍｌ、０．２容量％添加で１６．９１ｐｇ／ｍｌであり、いずれもジオウ抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、ジオウ抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またジオウ抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
（試験例７）
実施例７のシャクヤク抽出物からなる神経成長因子産生抑制剤を対象として、上記、実施例１と同様にしてＮＨＤＦ神経成長因子産生抑制試験を行った。その結果を図７に示す。シャクヤク抽出物を添加しない場合の培養上清中のＮＧＦ濃度が１７．４６ｐｇ／ｍｌであったのに対して、シャクヤク抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で１３．５ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で１２．８２ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で１１．５７ｐｇ／ｍｌ、０．２容量％添加で７．８３ｐｇ／ｍｌであり、いずれもシャクヤク抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、シャクヤク抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またシャクヤク抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
実施例７のシャクヤク抽出物からなる神経成長因子産生抑制剤を対象として、上記、実施例１と同様にしてＮＨＤＦ神経成長因子産生抑制試験を行った。その結果を図７に示す。シャクヤク抽出物を添加しない場合の培養上清中のＮＧＦ濃度が１７．４６ｐｇ／ｍｌであったのに対して、シャクヤク抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で１３．５ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で１２．８２ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で１１．５７ｐｇ／ｍｌ、０．２容量％添加で７．８３ｐｇ／ｍｌであり、いずれもシャクヤク抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、シャクヤク抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またシャクヤク抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
（試験例８）
実施例８のゲンチアナ抽出物からなる神経成長因子産生抑制剤を対象として、上記実施例１と同様にしてＮＨＤＦ神経成長因子産生抑制試験を行った。その結果を図８に示す。ゲンチアナ抽出物を添加しない場合の培養上清中のＮＧＦ濃度が１４．５３ｐｇ／ｍｌであったのに対して、ゲンチアナ抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で１３．６１ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で１２．０４ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で１０．６３ｐｇ／ｍｌ、０．２容量％添加で８．３ｐｇ／ｍｌであり、いずれもゲンチアナ抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、ゲンチアナ抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またゲンチアナ抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
実施例８のゲンチアナ抽出物からなる神経成長因子産生抑制剤を対象として、上記実施例１と同様にしてＮＨＤＦ神経成長因子産生抑制試験を行った。その結果を図８に示す。ゲンチアナ抽出物を添加しない場合の培養上清中のＮＧＦ濃度が１４．５３ｐｇ／ｍｌであったのに対して、ゲンチアナ抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で１３．６１ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で１２．０４ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で１０．６３ｐｇ／ｍｌ、０．２容量％添加で８．３ｐｇ／ｍｌであり、いずれもゲンチアナ抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、ゲンチアナ抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またゲンチアナ抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
（試験例９）
実施例９のオウゴン抽出物からなる神経成長因子産生抑制剤を対象として、上記実施例１と同様にしてＮＨＤＦ神経成長因子産生抑制試験を行った。その結果を図９に示す。オウゴン抽出物を添加しない場合の培養上清中のＮＧＦ濃度が１４．７４ｐｇ／ｍｌであったのに対して、オウゴン抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で１１．９１ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で１０．３８ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で９．２８ｐｇ／ｍｌ、０．２容量％添加で６．１７であり、いずれもオウゴン抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、オウゴン抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またオウゴン抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
実施例９のオウゴン抽出物からなる神経成長因子産生抑制剤を対象として、上記実施例１と同様にしてＮＨＤＦ神経成長因子産生抑制試験を行った。その結果を図９に示す。オウゴン抽出物を添加しない場合の培養上清中のＮＧＦ濃度が１４．７４ｐｇ／ｍｌであったのに対して、オウゴン抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で１１．９１ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で１０．３８ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で９．２８ｐｇ／ｍｌ、０．２容量％添加で６．１７であり、いずれもオウゴン抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、オウゴン抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またオウゴン抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
（試験例１０）
実施例１０のフキタンポポ抽出物からなる神経成長因子産生抑制剤を対象として、上記実施例１と同様にしてＮＨＤＦ神経成長因子産生抑制試験を行った。その結果を図１０に示す。フキタンポポ抽出液を添加しない場合の培養上清中のＮＧＦ濃度が１４．５５ｐｇ／ｍｌであったのに対して、フキタンポポ抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で１２．３３ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で１０．５５ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で９．１８ｐｇ／ｍｌ、０．２容量％添加で７．１４ｐｇ／ｍｌであり、いずれもフキタンポポ抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、フキタンポポ抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またフキタンポポ抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
実施例１０のフキタンポポ抽出物からなる神経成長因子産生抑制剤を対象として、上記実施例１と同様にしてＮＨＤＦ神経成長因子産生抑制試験を行った。その結果を図１０に示す。フキタンポポ抽出液を添加しない場合の培養上清中のＮＧＦ濃度が１４．５５ｐｇ／ｍｌであったのに対して、フキタンポポ抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で１２．３３ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で１０．５５ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で９．１８ｐｇ／ｍｌ、０．２容量％添加で７．１４ｐｇ／ｍｌであり、いずれもフキタンポポ抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、フキタンポポ抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またフキタンポポ抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
（試験例１１）
実施例１１のクレマティス抽出物からなる神経成長因子産生抑制剤を対象として、上記実施例１と同様にしてＮＨＤＦ神経成長因子産生抑制試験を行った。その結果を図１１に示す。クレマティス抽出液を添加しない場合の培養上清中のＮＧＦ濃度が１４．３９ｐｇ／ｍｌであったのに対して、クレマティス抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で１２．５１ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で１２．１６ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で９．８８ｐｇ／ｍｌ、０．２容量％添加で０．８２ｐｇ／ｍｌであり、いずれもクレマティス抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、クレマティス抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またクレマティス抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
実施例１１のクレマティス抽出物からなる神経成長因子産生抑制剤を対象として、上記実施例１と同様にしてＮＨＤＦ神経成長因子産生抑制試験を行った。その結果を図１１に示す。クレマティス抽出液を添加しない場合の培養上清中のＮＧＦ濃度が１４．３９ｐｇ／ｍｌであったのに対して、クレマティス抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で１２．５１ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で１２．１６ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で９．８８ｐｇ／ｍｌ、０．２容量％添加で０．８２ｐｇ／ｍｌであり、いずれもクレマティス抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、クレマティス抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またクレマティス抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
（試験例１２）
実施例１２のドクダミ抽出物からなる神経成長因子産生抑制剤を対象として、上記実施例１と同様にしてＮＨＤＦ神経成長因子産生抑制試験を行った。その結果を図１２に示す。ドクダミ抽出物を添加しない場合の培養上清中のＮＧＦ濃度が２５．２８ｐｇ／ｍｌであったのに対して、ドクダミ抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で２０．６２ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で２１．８４ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で２０．６２ｐｇ／ｍｌ、０．２容量％添加で１７．１６ｐｇ／ｍｌであり、いずれもドクダミ抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、ドクダミ抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またドクダミ抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
実施例１２のドクダミ抽出物からなる神経成長因子産生抑制剤を対象として、上記実施例１と同様にしてＮＨＤＦ神経成長因子産生抑制試験を行った。その結果を図１２に示す。ドクダミ抽出物を添加しない場合の培養上清中のＮＧＦ濃度が２５．２８ｐｇ／ｍｌであったのに対して、ドクダミ抽出物を添加したときの培養上清中のＮＧＦ濃度は、０．０２５容量％添加で２０．６２ｐｇ／ｍｌ、０．０５容量％添加で２１．８４ｐｇ／ｍｌ、０．１容量％添加で２０．６２ｐｇ／ｍｌ、０．２容量％添加で１７．１６ｐｇ／ｍｌであり、いずれもドクダミ抽出物を添加しない場合に比べて培養上清中へのＮＧＦの遊離量（ＮＧＦ濃度）が減少した。従って、ドクダミ抽出物を添加することでＮＧＦの産生が抑制されることが判った。またドクダミ抽出物の添加量（容量％）が多くなるほどＮＧＦ濃度が減少し、ＮＧＦの産生抑制効果が増大することが判った。
（試験例１３）
本試験例は、マウス接触性皮膚炎に対する抑制効果の試験である。７週齢のBALB/c系雄性マウスをＳＬＣ株式会社より購入し、室温２３±３℃、湿度５５±１５％、明暗サイクル１２時間（明期７：００〜１９：００）の条件下に飼育した。ノバラ抽出物は感作３０分後投与（Ｎ＝５）群を設定した。当日に刈毛したマウスの腹部皮膚に５％ピクリルクロライド−エタノール溶液０．１５ｍｌを塗布し、感作処置を施した。その５日後に１％ピクリルクロライド−アセトン：オリーブオイル（４：１）溶液を左側耳介皮膚の両面に２０μl 塗布し、アレルギー反応を惹起した。
本試験例は、マウス接触性皮膚炎に対する抑制効果の試験である。７週齢のBALB/c系雄性マウスをＳＬＣ株式会社より購入し、室温２３±３℃、湿度５５±１５％、明暗サイクル１２時間（明期７：００〜１９：００）の条件下に飼育した。ノバラ抽出物は感作３０分後投与（Ｎ＝５）群を設定した。当日に刈毛したマウスの腹部皮膚に５％ピクリルクロライド−エタノール溶液０．１５ｍｌを塗布し、感作処置を施した。その５日後に１％ピクリルクロライド−アセトン：オリーブオイル（４：１）溶液を左側耳介皮膚の両面に２０μl 塗布し、アレルギー反応を惹起した。
アレルギー反応を惹起した３０分後、５０容量％エタノール溶液にて調製した５容量％ノバラ抽出物溶液５０μｌをマウス耳介部に投与した。対照群は５０μｌの５０容量％エタノール溶液を同様に投与した。アレルギー反応惹起前とその２４時間後に左側耳介の厚さをmicrometer（MITUTOYO）で測定し、耳介浮腫率より耳介浮腫抑制率を求めた。各群間の有意差検定はt-検定を行った。試験結果を図１３に示す。
図１３からも明らかなように、対象群の耳介浮腫率が６１．６±１３．９％であったのに対し、ノバラ抽出物投与群の耳介浮腫率は４２．９±６．７％（ｐ＝０．０２２）であった。ノバラ抽出物の投与により、有意に耳介浮腫を抑制した。上記試験は、アトピー性皮膚炎及び花粉症のスクリーニングとして用いられているものである。
（試験例１４）
本試験例は、ＮＣ／Ｎｇａマウスを用いた痒み抑制試験である。ＮＣ／Ｎｇａマウスは、コンベンショナルグレードの動物であって、アトピー性皮膚炎を自然発症するアトピー性皮膚炎モデルマウスであり、アトピーの発症に伴い痒みを誘発する。４週齢のＮＣ／Ｎｇａ系雄性マウス１０匹を日本チャールズ・リバー株式会社より購入し、室温２３±３℃、湿度５５±１５％、明暗サイクル１２時間（明期７：００〜１９：００）の条件下に飼育した。マウスは１ケージ５匹飼いとし、予備飼育後、アトピー性皮膚炎を発症した動物を１群５匹として以下の実験に供した。ノバラ抽出物は５日間連続投与（Ｎ＝５）群を設定した。
本試験例は、ＮＣ／Ｎｇａマウスを用いた痒み抑制試験である。ＮＣ／Ｎｇａマウスは、コンベンショナルグレードの動物であって、アトピー性皮膚炎を自然発症するアトピー性皮膚炎モデルマウスであり、アトピーの発症に伴い痒みを誘発する。４週齢のＮＣ／Ｎｇａ系雄性マウス１０匹を日本チャールズ・リバー株式会社より購入し、室温２３±３℃、湿度５５±１５％、明暗サイクル１２時間（明期７：００〜１９：００）の条件下に飼育した。マウスは１ケージ５匹飼いとし、予備飼育後、アトピー性皮膚炎を発症した動物を１群５匹として以下の実験に供した。ノバラ抽出物は５日間連続投与（Ｎ＝５）群を設定した。
マウス背部をバリカンおよび電気シェーバーにて剃毛し、１日２回、５０容量％エタノール溶液にて調製した５容量％ノバラ抽出物溶液１５０μｌを週５回連続して塗布投与した。対照群は１５０μｌの５０容量％エタノール溶液を同様に投与した。試験終了時に各マウスの２０分間の引っ掻き回数を測定した。測定値は、平均値と標準偏差で表した。各群間の有意差検定はｔ−検定を行い、５％以下の危険率を有意とした。
試験結果を図１４に示す。試験終了時の２０分間の引っ掻き回数の測定では、コントロール群が２７２±９２回、ノバラ抽出物投与群が１２１±７９回であり、有意な引っ掻き回数の低下が認められた。
（処方例１）
本処方例は、化粧料の一例としてのクリームの処方例であり、その組成は次のとおりである。
本処方例は、化粧料の一例としてのクリームの処方例であり、その組成は次のとおりである。
組成 配合比（重量％）
セタノール ２．５％
スクワレン １０．０％
サラシミツロウ １．０％
トリオクタン酸グリセリル ５．０％
ミリスチン酸オクチルドデシル １５．０％
酢酸トコフェロール ０．１％
１，３−ブチレングリコール ７．０％
モノステアリン酸グリセリン ３．０％
ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノステアレート １．０％
ソルビタンモノステアレート ２．０％
ノバラ抽出物 ０．１％
濃グリセリン ５．０％
パラオキシ安息香酸ブチル ０．１％
パラオキシ安息香酸エチル ０．２％
精製水 残量
セタノール ２．５％
スクワレン １０．０％
サラシミツロウ １．０％
トリオクタン酸グリセリル ５．０％
ミリスチン酸オクチルドデシル １５．０％
酢酸トコフェロール ０．１％
１，３−ブチレングリコール ７．０％
モノステアリン酸グリセリン ３．０％
ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノステアレート １．０％
ソルビタンモノステアレート ２．０％
ノバラ抽出物 ０．１％
濃グリセリン ５．０％
パラオキシ安息香酸ブチル ０．１％
パラオキシ安息香酸エチル ０．２％
精製水 残量
上記配合成分のうち、セタノール、スクワレン、サラシミツロウ、ミリスチン酸オクチルドデシルを加熱溶解後、トリオクタン酸グリセリル、酢酸トコフェロール、モノステアリン酸グリセリン、ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノステアレート（界面活性剤）、ソルビタンモノステアレートを加え、７０℃に調整し、均一に分散・溶解して油性ゲルを得た。次に、ノバラ抽出物、１，３−ブチレングリコール、濃グリセリン、パラオキシ安息香酸ブチル（防腐剤）、パラオキシ安息香酸エチル（防腐剤）を所定濃度精製水に溶解し、７０℃に調整した後、油性ゲルの中へ十分に攪拌しながらゆっくりと添加した。ホモミキサーで均一に混合した後、脱気、濾過後、３０℃まで冷却し、クリームを得た。
（処方例２）
本処方例もクリームの処方例であるが、神経成長因子産生抑制剤としてのノバラ抽出物の配合量を上記処方例１よりも多くしたこと以外は処方例１と組成は同じである。その組成は次のとおりである。クリームの調製は上記処方例１と同様に行なった。
本処方例もクリームの処方例であるが、神経成長因子産生抑制剤としてのノバラ抽出物の配合量を上記処方例１よりも多くしたこと以外は処方例１と組成は同じである。その組成は次のとおりである。クリームの調製は上記処方例１と同様に行なった。
組成 配合比（重量％）
セタノール ２．５％
スクワレン １０．０％
サラシミツロウ １．０％
トリオクタン酸グリセリル ５．０％
ミリスチン酸オクチルドデシル １５．０％
酢酸トコフェロール ０．１％
１，３−ブチレングリコール ７．０％
モノステアリン酸グリセリン ３．０％
ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノステアレート １．０％
ソルビタンモノステアレート ２．０％
ノバラ抽出物 ０．５％
濃グリセリン ５．０％
パラオキシ安息香酸ブチル ０．１％
パラオキシ安息香酸エチル ０．２％
精製水 残量
セタノール ２．５％
スクワレン １０．０％
サラシミツロウ １．０％
トリオクタン酸グリセリル ５．０％
ミリスチン酸オクチルドデシル １５．０％
酢酸トコフェロール ０．１％
１，３−ブチレングリコール ７．０％
モノステアリン酸グリセリン ３．０％
ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノステアレート １．０％
ソルビタンモノステアレート ２．０％
ノバラ抽出物 ０．５％
濃グリセリン ５．０％
パラオキシ安息香酸ブチル ０．１％
パラオキシ安息香酸エチル ０．２％
精製水 残量
（処方例３）
本処方例もクリームの処方例であるが、神経成長因子産生抑制剤としてのノバラ抽出物の配合量を上記処方例１、２よりも多くしたこと以外は処方例１、２と組成は同じである。その組成は次のとおりである。クリームの調製は上記処方例１と同様に行なった。
本処方例もクリームの処方例であるが、神経成長因子産生抑制剤としてのノバラ抽出物の配合量を上記処方例１、２よりも多くしたこと以外は処方例１、２と組成は同じである。その組成は次のとおりである。クリームの調製は上記処方例１と同様に行なった。
組成 配合比（重量％）
セタノール ２．５％
スクワレン １０．０％
サラシミツロウ １．０％
トリオクタン酸グリセリル ５．０％
ミリスチン酸オクチルドデシル １５．０％
酢酸トコフェロール ０．１％
１，３−ブチレングリコール ７．０％
モノステアリン酸グリセリン ３．０％
ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノステアレート １．０％
ソルビタンモノステアレート ２．０％
ノバラ抽出物 １．０％
濃グリセリン ５．０％
パラオキシ安息香酸ブチル ０．１％
パラオキシ安息香酸エチル ０．２％
精製水 残量
セタノール ２．５％
スクワレン １０．０％
サラシミツロウ １．０％
トリオクタン酸グリセリル ５．０％
ミリスチン酸オクチルドデシル １５．０％
酢酸トコフェロール ０．１％
１，３−ブチレングリコール ７．０％
モノステアリン酸グリセリン ３．０％
ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノステアレート １．０％
ソルビタンモノステアレート ２．０％
ノバラ抽出物 １．０％
濃グリセリン ５．０％
パラオキシ安息香酸ブチル ０．１％
パラオキシ安息香酸エチル ０．２％
精製水 残量
（処方例４）
本処方例もクリームの処方例であるが、神経成長因子産生抑制剤としてエイジツ抽出物を用いた点で、ノバラ抽出物を用いた処方例１と相違している。その組成は次のとおりである。クリームの調製は上記処方例１と同様に行なった。
本処方例もクリームの処方例であるが、神経成長因子産生抑制剤としてエイジツ抽出物を用いた点で、ノバラ抽出物を用いた処方例１と相違している。その組成は次のとおりである。クリームの調製は上記処方例１と同様に行なった。
組成 配合比（重量％）
セタノール ２．５％
スクワレン １０．０％
サラシミツロウ １．０％
トリオクタン酸グリセリル ５．０％
ミリスチン酸オクチルドデシル １５．０％
酢酸トコフェロール ０．１％
１，３−ブチレングリコール ７．０％
モノステアリン酸グリセリン ３．０％
ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノステアレート １．０％
ソルビタンモノステアレート ２．０％
エイジツ抽出物 ０．５％
濃グリセリン ５．０％
パラオキシ安息香酸ブチル ０．１％
パラオキシ安息香酸エチル ０．２％
精製水 残量
セタノール ２．５％
スクワレン １０．０％
サラシミツロウ １．０％
トリオクタン酸グリセリル ５．０％
ミリスチン酸オクチルドデシル １５．０％
酢酸トコフェロール ０．１％
１，３−ブチレングリコール ７．０％
モノステアリン酸グリセリン ３．０％
ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノステアレート １．０％
ソルビタンモノステアレート ２．０％
エイジツ抽出物 ０．５％
濃グリセリン ５．０％
パラオキシ安息香酸ブチル ０．１％
パラオキシ安息香酸エチル ０．２％
精製水 残量
（処方例５）
本処方例もクリームの処方例であるが、神経成長因子産生抑制剤としてローズマリー抽出物を用いた点が上記各処方例と相違している。その組成は次のとおりである。クリームの調製は上記処方例１と同様に行なった。
本処方例もクリームの処方例であるが、神経成長因子産生抑制剤としてローズマリー抽出物を用いた点が上記各処方例と相違している。その組成は次のとおりである。クリームの調製は上記処方例１と同様に行なった。
組成 配合比（重量％）
セタノール ２．５％
スクワレン １０．０％
サラシミツロウ １．０％
トリオクタン酸グリセリル ５．０％
ミリスチン酸オクチルドデシル １５．０％
酢酸トコフェロール ０．１％
１，３−ブチレングリコール ７．０％
モノステアリン酸グリセリン ３．０％
ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノステアレート １．０％
ソルビタンモノステアレート ２．０％
ローズマリー抽出物 ０．５％
濃グリセリン ５．０％
パラオキシ安息香酸ブチル ０．１％
パラオキシ安息香酸エチル ０．２％
精製水 残量
セタノール ２．５％
スクワレン １０．０％
サラシミツロウ １．０％
トリオクタン酸グリセリル ５．０％
ミリスチン酸オクチルドデシル １５．０％
酢酸トコフェロール ０．１％
１，３−ブチレングリコール ７．０％
モノステアリン酸グリセリン ３．０％
ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノステアレート １．０％
ソルビタンモノステアレート ２．０％
ローズマリー抽出物 ０．５％
濃グリセリン ５．０％
パラオキシ安息香酸ブチル ０．１％
パラオキシ安息香酸エチル ０．２％
精製水 残量
（処方例６）
本処方例もクリームの処方例であるが、神経成長因子産生抑制剤としてエンメイソウ抽出物を用いた点が上記各処方例と相違している。その組成は次のとおりである。クリームの調製は上記処方例１と同様に行なった。
本処方例もクリームの処方例であるが、神経成長因子産生抑制剤としてエンメイソウ抽出物を用いた点が上記各処方例と相違している。その組成は次のとおりである。クリームの調製は上記処方例１と同様に行なった。
組成 配合比（重量％）
セタノール ２．５％
スクワレン １０．０％
サラシミツロウ １．０％
トリオクタン酸グリセリル ５．０％
ミリスチン酸オクチルドデシル １５．０％
酢酸トコフェロール ０．１％
１，３−ブチレングリコール ７．０％
モノステアリン酸グリセリン ３．０％
ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノステアレート １．０％
ソルビタンモノステアレート ２．０％
エンメイソウ抽出物 ０．５％
濃グリセリン ５．０％
パラオキシ安息香酸ブチル ０．１％
パラオキシ安息香酸エチル ０．２％
精製水 残量
セタノール ２．５％
スクワレン １０．０％
サラシミツロウ １．０％
トリオクタン酸グリセリル ５．０％
ミリスチン酸オクチルドデシル １５．０％
酢酸トコフェロール ０．１％
１，３−ブチレングリコール ７．０％
モノステアリン酸グリセリン ３．０％
ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノステアレート １．０％
ソルビタンモノステアレート ２．０％
エンメイソウ抽出物 ０．５％
濃グリセリン ５．０％
パラオキシ安息香酸ブチル ０．１％
パラオキシ安息香酸エチル ０．２％
精製水 残量
（試験例１６）
本試験例では、上記処方例１乃至３のクリームについて痒み抑制試験を行った。
試験方法は次のとおりである。処方例１乃至３ののクリームを、それぞれ乾燥に伴う皮膚の痒みを訴える女子被験者（２５歳〜４５歳）２５人を対象にして、１日２回３ケ月間連用塗布した。評価は、皮膚の痒みを感じなくなったと回答した人数で示した。一方、クリーム基剤の組成が上記処方例１乃至３と同じであって植物抽出物の配合されていない次の組成のクリームを比較例１として同様の試験を行った。
本試験例では、上記処方例１乃至３のクリームについて痒み抑制試験を行った。
試験方法は次のとおりである。処方例１乃至３ののクリームを、それぞれ乾燥に伴う皮膚の痒みを訴える女子被験者（２５歳〜４５歳）２５人を対象にして、１日２回３ケ月間連用塗布した。評価は、皮膚の痒みを感じなくなったと回答した人数で示した。一方、クリーム基剤の組成が上記処方例１乃至３と同じであって植物抽出物の配合されていない次の組成のクリームを比較例１として同様の試験を行った。
（比較例１）
組成 配合比（重量％）
セタノール ２．５％
スクワレン １０．０％
サラシミツロウ １．０％
トリオクタン酸グリセリル ５．０％
ミリスチン酸オクチルドデシル １５．０％
酢酸トコフェロール ０．１％
１，３−ブチレングリコール ７．０％
モノステアリン酸グリセリン ３．０％
ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノステアレート １．０％
ソルビタンモノステアレート ２．０％
濃グリセリン ５．０％
パラオキシ安息香酸ブチル ０．１％
パラオキシ安息香酸エチル ０．２％
精製水 残量
組成 配合比（重量％）
セタノール ２．５％
スクワレン １０．０％
サラシミツロウ １．０％
トリオクタン酸グリセリル ５．０％
ミリスチン酸オクチルドデシル １５．０％
酢酸トコフェロール ０．１％
１，３−ブチレングリコール ７．０％
モノステアリン酸グリセリン ３．０％
ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノステアレート １．０％
ソルビタンモノステアレート ２．０％
濃グリセリン ５．０％
パラオキシ安息香酸ブチル ０．１％
パラオキシ安息香酸エチル ０．２％
精製水 残量
試験結果を表１に示す。
表１から明らかなように、処方例１では、皮膚の痒みを感じなくなったと回答した人数は比較例１に比べて少し多い程度であったが、処方例２ではその人数が比較例１に比べて約２倍となり、さらに処方例３では約３倍となった。
（試験例１７）
本試験例は、紫外線による炎症抑制試験である。上記処方例１乃至３のクリームを用い、炎症に対する改善効果を試験した。一方、陽性対象として抗炎症剤の一つであるインドメタシンを配合した医薬品であるインテバンクリーム（住友製薬）を比較例２として用いた。
本試験例は、紫外線による炎症抑制試験である。上記処方例１乃至３のクリームを用い、炎症に対する改善効果を試験した。一方、陽性対象として抗炎症剤の一つであるインドメタシンを配合した医薬品であるインテバンクリーム（住友製薬）を比較例２として用いた。
〔試験方法〕
４週齢のハートレー系モルモットをＳＬＣ（株）より購入し、室温２３±３℃、湿度５５±１５％、明暗サイクル１２時間（明期７：００〜１９：００）の条件下に飼育した。モルモットの背部をバリカンおよび電気シェーバーにて剃毛し、剃毛部位２ｃｍ×２ｃｍ）に、上記処方例１乃至３及び比較例１、２の試料を３日間連用し、紫外線を照射した。紫外線照射部位の皮膚色は色差計を用いて測定した。皮膚紅斑は、比較例１の場合を１００として比較算出したａ＊値で示した。
４週齢のハートレー系モルモットをＳＬＣ（株）より購入し、室温２３±３℃、湿度５５±１５％、明暗サイクル１２時間（明期７：００〜１９：００）の条件下に飼育した。モルモットの背部をバリカンおよび電気シェーバーにて剃毛し、剃毛部位２ｃｍ×２ｃｍ）に、上記処方例１乃至３及び比較例１、２の試料を３日間連用し、紫外線を照射した。紫外線照射部位の皮膚色は色差計を用いて測定した。皮膚紅斑は、比較例１の場合を１００として比較算出したａ＊値で示した。
試験結果を表２に示す。
表２から明らかなように、処方例１ではａ＊値が比較例１に比べて少し減少した程度であったが、処方例２ではａ＊値が比較例１に比べて約３０％程度減少し、さらに処方例３では約半分に減少した。ただし、比較例２の減少率には及ばなかった。しかしながら比較例２のインドメタシンは、副作用があることが一般に知られており、安全性の面では処方例１乃至３のものは、比較例２に比べて優れていると認められる。
本発明の神経成長因子産生抑制剤は、皮膚外用剤、化粧料、医薬部外品等に全般的に広く適用することができる他、用途の面からは、アトピー性皮膚炎治療剤、痒み予防及び治療剤、アレルギーによる肌荒れ改善作用を有する組成物等に広く適用することができる。
Claims (6)
- エイジツ抽出物、ノバラ抽出物、ローズマリー抽出物、エンメイソウ抽出物、チョウジ抽出物、ジオウ抽出物、シャクヤク抽出物、ゲンチアナ抽出物、オウゴン抽出物、フキタンポポ抽出物、クレマティス抽出物及びドクダミ抽出物から選ばれる少なくとも１種を含有することを特徴とする神経成長因子産生抑制剤。
- 請求項１記載の神経成長因子産生抑制剤を配合したことを特徴とする皮膚外用剤。
- 請求項１記載の神経成長因子産生抑制剤を配合したことを特徴とする化粧料。
- 請求項１記載の神経成長因子産生抑制剤を配合したことを特徴とする医薬部外品。
- 請求項１記載の神経成長因子産生抑制剤を配合した痒み予防及び治療剤。
- 請求項１記載の神経成長因子産生抑制剤を配合したアトピー性皮膚炎治療剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2004174251A JP2005350412A (ja) | 2004-06-11 | 2004-06-11 | 神経成長因子産生抑制剤、並びにその神経成長因子産生抑制剤を配合した皮膚外用剤、化粧料、医薬部外品、痒み予防及び治療剤、及びアトピー性皮膚炎治療剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2004174251A JP2005350412A (ja) | 2004-06-11 | 2004-06-11 | 神経成長因子産生抑制剤、並びにその神経成長因子産生抑制剤を配合した皮膚外用剤、化粧料、医薬部外品、痒み予防及び治療剤、及びアトピー性皮膚炎治療剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2005350412A true JP2005350412A (ja) | 2005-12-22 |
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ID=35585185
Family Applications (1)
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|---|---|---|---|
| JP2004174251A Pending JP2005350412A (ja) | 2004-06-11 | 2004-06-11 | 神経成長因子産生抑制剤、並びにその神経成長因子産生抑制剤を配合した皮膚外用剤、化粧料、医薬部外品、痒み予防及び治療剤、及びアトピー性皮膚炎治療剤 |
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| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2005350412A (ja) |
Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008037871A (ja) * | 2006-08-09 | 2008-02-21 | Korea Atomic Energy Research Inst | アトピー性皮膚炎治療用水和ゲル及びその製造方法 |
| JP2009084222A (ja) * | 2007-09-28 | 2009-04-23 | Naris Cosmetics Co Ltd | 神経成長因子（ｎｇｆ）産生抑制剤及びかゆみ抑制外用剤 |
| JP2009242332A (ja) * | 2008-03-31 | 2009-10-22 | Pias Arise Kk | ビタミンｄ受容体活性化剤、及びそのビタミンｄ受容体活性化剤を配合した皮膚外用剤、化粧料、医薬部外品 |
| JP2010001264A (ja) * | 2008-06-23 | 2010-01-07 | Taisho Pharmaceutical Co Ltd | 神経伸長抑制剤 |
| JP2010222306A (ja) * | 2009-03-24 | 2010-10-07 | Pias Arise Kk | 皮膚外用組成物 |
| KR101087572B1 (ko) | 2010-02-04 | 2011-11-28 | 참살이 모악골 영농조합법인 | 아토피 피부염의 예방 또는 치료를 위한 조성물 |
| JP5561365B2 (ja) * | 2010-08-17 | 2014-07-30 | 有限会社 健康百二十才 | 持続性鎮痒外皮用剤 |
| JP2016193863A (ja) * | 2015-03-31 | 2016-11-17 | 小林製薬株式会社 | セマフォリン３ａ遺伝子発現増強剤、及びセマフォリン３ａタンパク産生亢進剤 |
| FR3090376A1 (fr) * | 2018-12-20 | 2020-06-26 | L V M H Recherche | Extrait aqueux de fruits de Rose comme agent neuro-protecteur cutané |
| JP2020176065A (ja) * | 2019-04-15 | 2020-10-29 | 共栄化学工業株式会社 | 皮膚外用剤 |
| JP2021176881A (ja) * | 2016-06-23 | 2021-11-11 | 御木本製薬株式会社 | フィラグリン産生促進剤 |
-
2004
- 2004-06-11 JP JP2004174251A patent/JP2005350412A/ja active Pending
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| KR101087572B1 (ko) | 2010-02-04 | 2011-11-28 | 참살이 모악골 영농조합법인 | 아토피 피부염의 예방 또는 치료를 위한 조성물 |
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