JP2003517450A - マトリックス亜鉛メタロプロテアーゼ阻害剤として使用可能なホスフィン性擬ペプチド - Google Patents

マトリックス亜鉛メタロプロテアーゼ阻害剤として使用可能なホスフィン性擬ペプチド

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JP2003517450A JP2000594820A JP2000594820A JP2003517450A JP 2003517450 A JP2003517450 A JP 2003517450A JP 2000594820 A JP2000594820 A JP 2000594820A JP 2000594820 A JP2000594820 A JP 2000594820A JP 2003517450 A JP2003517450 A JP 2003517450A
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ファブリス・ボー
スタマニア・ヴァシリオ
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Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale INSERM
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Abstract

(57)【要約】 本発明は、式： 【化１】 ［式中、Ｒ1は、アミン官能性を阻害する基、又は、阻害された末端アミノ官能性を有するアミノ酸残基又はペプチドであり；Ｒ2は、天然又は非天然アミノ酸のラテラル鎖を表し；Ｒ3は１）アリール基によって置換されていない又は置換された、Gly及びAlaを除く天然アミノ酸のラテラル鎖、２）アラルキル基、又は３）少なくとも３つの炭素原子を有するアルキル基を表し；また、Ｒ4は、天然又は非天然アミノ酸のラテラル鎖、又は、ジニトロベンジル基を表す］の擬ペプチドに関する。それらは、マトリックス亜鉛プロテアーゼ阻害剤として、特に癌の治療において、有用である。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、ホスフィン性擬ペプチド（phosphinic pseudo-peptides）に関する
。該擬ペプチドは、特に、マトリックス亜鉛メタロプロテアーゼMMP、特にMMP-1
1、MMP-2、MMP-9及びMMP-8の非常に強力且つ特異的な阻害剤として用いることが
できる。しかしながら、これらの擬ペプチドは、MMP-1及びMMP-7に関しては低い
活性を示すようである。こうして、これらの阻害剤は、インビボにおいて、１つ
のMMPサブファミリーを阻害するのみの可能性を提供し、それゆえに、非常に広
い活性スペクトルを有するMMP阻害剤よりも低毒性であることを示すことができ
る。
【０００２】 前記擬ペプチドは、結合組織及び関節組織の退化、慢性関節リウマチ、変形性
関節症、大動脈瘤及び癌等の、マトリックスプロテアーゼの過剰発現によって特
徴付けられる疾患の治療への適用を有することができる。
【０００３】 インビボで行われた研究に基づくと、これらのホスフィン性阻害剤は、一次又
は二次腫瘍増殖を阻害する製薬組成物における使用を可能にすると考えられる。
【０００４】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】
マトリックス亜鉛メタロプロテアーゼMMPは、細胞外マトリックスの全てのタ
ンパク質を集団的に開裂させることができる酵素ファミリーを表す。細胞外マト
リックスタンパク質の役割に基づき、これらの酵素は、乳腺の退縮、瘢痕化、及
び特異的な免疫応答細胞の浸出等の、多様な組織の再造形過程の発生と経過の間
において、非常に重要な役割を果たす。
【０００５】 今日までに、MMPファミリーに属しているヒトの酵素として約１５の酵素が知
られている：
【表１】
【０００６】 コラゲナーゼは、繊維形態のコラーゲンを開裂させることができる唯一のMMPs
であると考えられる。ゼラチナーゼＡ及びＢは、ＩＶ型コラーゲンを開裂させる
能力によって特徴付けられる。該コラーゲンは、基底膜に豊富であり、変性形の
コラーゲンである。ストロメリジン（Stromelysins）１及び２は、フィブロネク
チンや種々のプロテオグリカン等の、その他の細胞塊マトリックスのタンパク質
の分解の原因であると考えられる。MT-MMPsは、ゼラチナーゼＡの活性化に関与
する上記全てであると考えられ、それらの膜における位置のために、これらのマ
トリキシン（matrixins）は、ゼラチナーゼＡの膜レセプターとしての役割を果
たしていると考えられる。ストロメリジン−３の生理的基質が今日まで知られて
いないことに注意するのは重要である。しかしながら、最初は乳癌（breast can
cer）において確認されたこのプロテアーゼについてのいくつかの研究から、ス
トロメリジン−３が、腫瘍の発生と生き残りにおける重要な因子であることが示
されている。
【０００７】 MMPsは、様々なヒト疾患、特に癌において過剰発現していると考えられる。こ
の疾患では、長い間、MMPsの役割は、腫瘍細胞の浸潤と、様々な障壁を通過して
二次腫瘍を形成するそれらの能力とに関与すると考えられていた。近年、様々な
研究によって、前記プロテアーゼが、確かに、発癌において、特に一次腫瘍増殖
に関与することによって、より根本的な役割を果たしていることが立証されてい
る。MMPsのこの機能を説明する別の理論としては、最も研究されているのは、そ
れらの役割が： −細胞外マトリックスタンパク質のタンパク質分解によって、前記マトリック
スから、腫瘍の発生と増殖に必須である増殖因子を放出させる、それらの能力、
及び、 −腫瘍増殖に必要とされる、血管新生 に関係しているということである。
【０００８】 腫瘍増殖におけるMMPsの明らかな関与は、これらの酵素を阻害することができ
る化合物の役割についての全世界的な数多くのチームを動かしている。
【０００９】 MMP阻害剤の合成プログラムは、数年前に提案された。このとき、MMP阻害剤の
応用は、結合組織の炎症性疾患に関していた。Brown, Medical Oncology, 1997,
14, 1-10,［１］に記載されるような、癌学におけるMMP阻害剤の応用について
の多重プログラムが開発されたのはさらに最近である。実際、上述のように、MM
Psを、新しい抗癌剤の開発における優先的なターゲットとして考えるべきである
ことを例証する研究は、比較的最近である。このように、１９９７年には、MMP
阻害剤に関連する６７の特許が全世界的に登録され、それらの大部分が、Becket
t et al, 1998, Exp. Opin. Ther. Patents, 8, p. 259-289,［２］に記載され
るように、癌学への応用に関連する。これらの特許の大部分では、合成された化
合物は、ヒドロキサメート官能基を含有する擬ペプチド誘導体のファミリーに属
している。いくつかの特許は、カルボキシ−アルキル又はチオール官能基を含有
する擬ペプチド化合物に関する。前記化合物では、そのヒドロキサメート、チオ
ール又はカルボキシ−アルキル官能基は、活性MMP部位に存在する亜鉛原子と相
互作用する。抗癌活性の点で最も進んだ化合物は、British Biotechnology社に
よって開発されている。２つの化合物Batimastat BB94及びMarimastatは、ヒト
での第ＩＩ相及び第ＩＩＩ相臨床研究を課されている。それから、他社（Roche,
Bayer, Agouron, Novartis）は、癌学におけるMMP阻害剤についての第Ｉ相及び
第ＩＩ相臨床研究を行っている。
【化９】
【００１０】 このように、参考文献［１］及び［２］によって既知であるMMPsを阻害しやす
い化合物は、ホスフィン性擬ペプチドからなるものではない。
【００１１】 しかしながら、文献：Goulet et al, Bioorg. Med. Chem. Lett. 4, 1994, p.
1221-1224［３］は、ストロメリジン−１（MMP-3）の選択的阻害剤として使用
可能なホスフィン性擬ペプチドを記載しており、これは、最終配列：
【化１０】 を含む。
【００１２】 Caldwell et al, Bioorg. Med. Chem. Letter 6, 1996, p. 323-328［４］も
、参考文献［３］の擬ペプチドと同様の末端配列を含有する、ストロメリジン−
１（MMP-3）の選択的阻害剤であるホスフィン性擬ペプチドを記載している。
【００１３】 これらの参考文献［３］及び［４］では、MMP-3に対する活性を見出そうとし
ているが、一方、本発明では、MMP-11、MMP-2、MMP-9及びMMP-8に対する活性を
見出そうとしている。本発明では、Ｒ3がフェニルエチル残基だけでないことに
注意することが重要である。加えて、本発明は、この位置の置換基が化合物の阻
害力を増加させることを証明している。
【００１４】 文献FR-A-2 676 059［５］、FR-A-2 689 764［６］及びEP-A-0 725 075［７］
は、細菌性コラゲナーゼ並びに亜鉛エンドペプチダーゼ２４．１５及び２４．１
６に対する阻害活性を示すホスフィン性擬ペプチドを例示している。
【００１５】 本発明は、特に、マトリックス亜鉛メタロプロテアーゼMMP-11、MMP-2、MMP-9
及びMMP-8に対して強力且つ特異的な阻害活性を示す新規なホスフィン性擬ペプ
チドに関する。
【００１６】
【課題を解決するための手段】
本発明のホスフィン性擬ペプチドは、式：
【化１１】 ［式中、 −Ｒ1は、アミン官能性を阻害する基、又は、阻害された末端アミノ官能性を
有するアミノ酸残基又はペプチドであり、 −Ｒ2は、天然又は非天然アミノ酸のラテラル鎖を表し、 −Ｒ3は： １）アリール基によって置換されていない又は置換された、Gly及びAlaを
除く天然アミノ酸のラテラル鎖、 ２）アラルキル基、又は ３）少なくとも３つの炭素原子を有するアルキル基 を表し、また、 −Ｒ4は、天然又は非天然アミノ酸のラテラル鎖、又は、ジニトロベンジル基
を表す］ を満たしている。
【００１７】 式（Ｉ）の前記擬ペプチドは、ホスフィン型の化学基を含む擬ペプチドであり
、その機能は、MMPsの亜鉛原子をキレートすることである。前述の擬トリペプチ
ドでは、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4基の選択によって、該トリペプチドと、該MMPサブサイ
トＳ１、Ｓ１’及びＳ２それぞれとの相互作用を確実にすることが可能となる。
該Ｒ1基は、サブサイトＳ３／Ｓ２の連結で相互作用する。
【００１８】
【発明の実施の形態】
本発明の擬ペプチドの上記定義において、［５］のＲ1、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4に用
いられている用語「アミノ酸」は、標準的アミノ酸としても知られるタンパク質
に共通して見出される２０個のα−アミノ酸とそれらの類似体を表す。前記アミ
ノ酸のラテラル鎖は、線状及び分枝状の、アルキル、ヒドロキシアルキル、カル
ボキシアルキル、アラルキル、アミノアルキル、カルボキサミドアルキル、メル
カプトアルキル、フェニルアルキル、ヒドロキシフェニルアルキル、グアニジノ
アルキル、イミダゾイルアルキル、インドリルアルキル及びピロリジニル基を含
む。
【００１９】 用いてよいアミノ酸の例としては、アラニン、アルギニン、アスパラギン、ア
スパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン
、イソロイシン、ロイシン、ノルロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラ
ニン、プロリン、ヒドロキシプロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、
チロシン、バリン、ニトロフェニルアラニン、ホモ−アルギニン、チアゾリジン
及びデヒドロプロリンが含まれる。
【００２０】 しかしながら、Ｒ3の場合、当該アミノ酸は、Gly又はAlaではあり得ない。な
ぜなら、それらはMMPサブサイトＳ１’との十分な相互作用を示さないからであ
る。
【００２１】 好ましくは、Ｒ3に用いられるアミノ酸は、Phe、Leu、又は、ラテラル鎖がア
リールアルキル基によって置換されたSer、Cys残基から選択される。
【００２２】 用いられやすいアリール基は、アルキル又はアルコキシ基によっておそらく置
換されている単環又は多環芳香族核から誘導されたものである。用いてよいアリ
ール基の例としては、フェニル、ナフチル、ベンジル、及び、ｐ−メトキシベン
ジル等のアルコキシベンジル基が含まれる。
【００２３】 Ｒ3はまた、アラルキル基を表してよい。前記アラルキル基では、当該アリー
ル基は、上に述べた別のものすべてであってよい。該アラルキル基のアルキル部
は、１から６の炭素原子を有する、線状又は分枝状の鎖であってよい。
【００２４】 用いてよいアラルキル基の例としては、式：
【化１２】 ［式中、ｎは１から４までの整数である］ 及び、式：
【化１３】 ［式中、ｐは１又は２に等しい］ の基が含まれる。
【００２５】 Ｒ3に用いてよいアルキル基は、少なくとも３つの炭素原子を有する。それら
は、線状又は分枝状であり、好ましくは、多くとも７つの炭素原子を有する。用
いてよいアルキル基の例としては、基ＣＨ3−（ＣＨ2）6−及び（ＣＨ3）2−Ｃ
Ｈ−ＣＨ2−が含まれる。
【００２６】 好ましくは、Ｒ3は、以下の式：
【化１４】 の何れかを満たす基を表す。
【００２７】 本発明では、Ｒ2は、MMPサブサイトＳ１と相互作用するように選択される。Ph
eのラテラル鎖に相当するＲ2がメチル又はベンジル基；好ましくは、Ｒ2がメチ
ル又はベンジル基を表すとき、良好な結果が得られる。
【００２８】 本発明では、Ｒ4は、MMPサブサイトＳ２’と相互作用するように選択される。
Ｒ4が、Trpのラテラル鎖、又は、ジニトロベンジル基Dpaを表すとき、良好な結
果が得られる。
【００２９】 本発明の擬ペプチドでは、当該アミノ酸のラテラル鎖Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、Ｌ
又はＤ形であってよい。加えて、該擬ペプチドは、単一の異性体から成ってよく
、又は、Ｒ2及びＲ3残基を含むα炭素上に２つの不斉中心が存在することから、
４−ジアステレオ異性体の混合物により成ってもよい。全てのアミノ酸立体配置
が適しているであろうが、好ましくは、Ｒ4基はＬ形である。
【００３０】 しかしながら、Ｒ2及びＲ3の異なる立体配置に対応する４つのジアステレオ異
性体のうちの３つは、MMP阻害剤として、実質的に同等の活性を有する。
【００３１】 本発明の擬ペプチドでは、Ｒ1は様々な基を表してよく、その性質は、異なるM
MPsに対する該擬ペプチドの親和性に影響を与える。
【００３２】 Ｒ1は、「アミン官能基を阻害する基」を表してよい。これらの用語は、アミ
ノ酸とペプチドのアミン官能基を阻害するために用いてよい阻害基全てを含み、
例えば、ｔ−ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、シンナモイル、
ピバロリル及びＮ−（Ｉ−フルオレニル−メトキシカルボニル）Fmoc基である。
【００３３】 Ｒ1はまた、アセチル、ベンジルオキシアセチル、フェニルアミノアセチル、
ｍ−クロロフェニル）アミノアセチル、（２−ヒドロキシ−５−クロロ−フェニ
ル）アミノアセチル、インドリル−２−カルボニル、４，６−ジクロロ−インド
リル−２−カルボニル、キノリル−２−カルボニル及び１−オキサ−２，４−ジ
クロロ−７−ナフタレンカルボニル基から選択される阻害基、 又は、適切な基によって末端アミン官能基が阻害されたアミノ酸又はペプチド残
基を表してもよい。そのような残基の例としては、Ｚがベンジルオキシカルボニ
ル基を表すＺ−Ala及びＺ−Leu基が含まれる。
【００３４】 本発明の擬ペプチドは、通常の手法を用いて、式：
【化１５】 ［式中、Ｚはベンジルオキシカルボニル基を表し、Adはアダマンチル基］ のホスフィン性ブロックと、Ｒ4に対応するアミノ酸とから、Yotakis et al, J.
Org. Chem., 1996, 61, page 6601-6605［８］及びJiracek et al, J. Biol. C
hem., 1995, 270, p. 21701-21706［９］及びJ. Biol. Chem., 1996, 271, p. 1
9606-19611［１０］に記載された方法に従い、固相化学合成によって調製してよ
い。
【００３５】 最初のホスフィン性ブロックは、Ｒ2基を含むホスフィン酸
【化１６】 の、Ｒ3基を有するアクリレート
【化１７】 ［式中、Etはエチル基を表す］ へのMichael付加によって得ることができる。
【００３６】 前記のＲ3基を有するアクリレートは、後に示すような、異なったプロセスを
用いて合成してよい。
【００３７】 本発明の擬ペプチドは、マトリックス亜鉛メタロプロテアーゼの過剰発現を含
む疾患の治療に用いてよい。
【００３８】 本発明はさらに、少なくとも１つのマトリックス亜鉛メタロプロテアーゼを阻
害する、少なくとも１つの上記式Ｉの擬ペプチドを含む製薬組成物に関する。
【００３９】 好ましくは、前記組成物は、MMP-2、MMP-8、MMP-9及びMMP-11から選択される
マトリックス亜鉛メタロプロテアーゼを阻害する。
【００４０】 前記組成物は、癌等の、マトリックスプロテアーゼの過剰発現によって特徴付
けられる疾患の治療を意図される。
【００４１】 本発明はさらに、少なくとも１つのマトリックス亜鉛プロテアーゼ、特にMMP-
2、MMP-8、MMP-9及びMMP-11を阻害する医薬品の製造のための上記式Ｉのホスフ
ィン性擬ペプチドの使用に関する。
【００４２】 本発明の他の特徴と有益性は、以下の、添付した図に対する記載を読むことに
よってより明確に成るであろうが、それらは当然、非限定的な例示として示され
ている。
【００４３】 下記実施例１から２７は、本発明の擬ペプチドの調製を例示する。
【００４４】 図１は、本発明の擬ペプチドの合成ダイアグラムを表し、Ｒ2基を含むホスフ
ィン酸１と、Ｒ3基を有するアクリレート２とから、Michael付加によってホスフ
ィン性ブロックを生成させる第一の反応を含む。
【００４５】 ホスフィン性ブロック３の形成後、アダマンチル基をブロック４のヒドロキシ
ホスフィニル官能基に導入し、それから、Ｃ−末端エステル官能基５を除去して
、そのＣ−末端の酸官能基に、必要なアミノ酸６を付加することによって、該擬
ペプチドの固相合成を行う。
【００４６】 この図では、Ｚはベンジルオキシカルボニル基を表す。
【００４７】
【実施例】実施例１から５ これらの実施例は、以下の方法を用いて、１つのＲ3基を含む、末端ＣＨ2を有
するアクリレート２の調製を例示する：
【化１８】
【００４８】 この合成は、EistetterらによってJ. Med. Chem., 25, p 109-113, 1982［１
１］に記載された方法に相当する。
【００４９】 この合成は、Ｒ3が表１に示す基を表す場合として以下に記載される。
【００５０】 ナトリウムエトキシドの溶液（１１mlの純エタノール中に１０mmolのナトリウ
ム）に対して、１０分かけて、１０mmolのマロン酸ジエチルを加える。その溶液
を５０℃で１時間撹拌し、それから、１０mmolの必要なブロミドを滴下する。そ
の混合物を５０℃で６時間撹拌させておき、真空中でエタノールを除去して、ジ
エチルエーテルを加える。この溶液を、水、ブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥さ
せ、濃縮して、オイル状の残留物を得る。それは、乾燥後、式：
【化１９】 のジエステルを、収率４０〜６５％で生じる。
【００５１】 ８mlのエタノール中の１０mmolジエステル溶液に対し、８mlのエタノール中の
KOH溶液（１０mmol）を加え、その混合物を１６時間撹拌する。有機溶媒を蒸発
させた後、残留物を水で処理してジエチルエーテルで抽出する。
【００５２】 その水相を6N HClで酸性化し、ジエチルエーテルで２回抽出する。有機層をNa 2 SO4で乾燥させ、蒸発させて、式：
【化２０】 のモノエステルを、収率６０〜９０％で得る。
【００５３】 ０．８mlのピリジン及び０．０５mlのピペリジン中のモノエステル溶液に対し
て、６mmolのパラホルムアルデヒドを添加し、しれから、その混合物を撹拌させ
て、５０〜５５℃で３時間加熱する。ジエチルエーテル添加後、有機相を水と3N
HClを用いて洗浄し、それから、Na2SO4で乾燥させ、濃縮して、表の化合物２ａ
から２ｃを、該表に示した収率で得る。
【００５４】 得られたアクリレート２ａから２ｅの融点も表１に示す。
【００５５】実施例６ Ｒ3がＣＨ2Ｒ’3を表すこの実施例では、以下の合成プロセスに従ってアクリ
レートを合成する：
【化２１】
【００５６】 この実施例において、この合成プロセスは、Ｒ3がＣＨ3（ＣＨ2）6基を表す、
すなわちＲ’3＝ＣＨ3−（ＣＨ2）5であるアクリレート２を調製するために用い
られる。アルゴン雰囲気中において、１５mlの純ジエチルエーテル中のヘキシル
ブロミド溶液ＣＨ3（ＣＨ2）5Ｂｒ（１．６５g、１０mmol）を、０．２２g（１
１mmol）のマグネシウムとヨウ素Ｉ2（触媒量）とを含むフラスコに、９０分間
かけて滴下する。
【００５７】 反応混合物を１時間還流煮沸する。０．１８mmolのCuIの添加後、混合物の温
度を−７８℃にまで低下させる。
【００５８】 それから、１．１５g（６．７mmol）の化合物
【化２２】 の溶液を、ゆっくりと、１０mlのEt2O:THFに添加する。その混合物を室温で３０
分間撹拌する。該混合物を0.5N HCl、５％NaHCO3及び水で処理した後、有機層を
Na2SO4で乾燥させる。溶媒を真空中で除去し、得られた残留物を、カラムクロマ
トグラフィーによって、溶離液として４０から６０℃の石油エーテル／エーテル
混合物（１３：１）を用いて精製する。化合物２ｆは、この方法で、収率４０％
で得られる。化合物２ｆの特徴は、表１に示す。
【００５９】実施例７ この実施例において、Ｒ3＝Ｒ’3−ＣＨ2−を有するアクリレート２は、Baldw
in et al, J. Chem. Soc. Chem. Comm. 1986, p 1339-1340［１２］に記載され
る方法を用いて調製される。
【００６０】 これは、以下の反応ダイアグラムに相当する：
【化２３】
【００６１】 この方法は、Ｒ3が式：
【化２４】 の基を表すアクリレート２ｇを調製するために用いられる。
【００６２】 ４０mlのメタノール中の１．９g（１０mmol）のエチル ブロモメチル アク
リレートと、３．３g（２０mmol）のスルフィンベンゼン酸ナトリウム塩とを、
１２時間還流煮沸する。溶媒を除去し、ジエチルエーテルを加える。溶液を、水
、ブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濃縮して、２グラムの、オイルの形態
のスルフィン酸アクリレート
【化２５】 を、収率８０％で得る。
【００６３】 ４０mlの無水ベンゼン中の２g（８mmol）のスルフィン酸アクリレートの混合
物に、４．７g（１６．４mmol）のトリ−ｎ−ブチル水素化スズと０．１５g（０
．９６mmol）の２，２’−アゾビスイソブチロニトリル（AIBN）を加える。混合
物を１．５時間還流煮沸し、それから、水を加え、抽出した有機層をNa2SO4で乾
燥させ、濃縮する。未処理の生成物は、カラムクロマトグラフィーによって、溶
離液として石油エーテル（４０から６０℃）／エーテル（９：１）を用いて精製
する。２．９gのアルキルスタンナン
【化２６】 が、収率９０％で得られる。
【００６４】 １．４７g（３．６mmol）のアルキルスタンナンと０．３９g（１．８mmol）の
２−ブロモエチルナフタレンとを１０mlの無水ベンゼンに溶解させる。０．０６
４g（０．３９mmol）のAIBNを添加した後、その反応混合物を２時間還流煮沸す
る。水を添加した後、有機相を分離し、水で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、無水に
まで濃縮する。こうして、溶離液として石油エーテル（４０から６０℃）／エー
テル（９：１）を用い、クロマトグラフィーカラムで残留物を精製した後、表１
に示す、０．０６gのアクリレート２ｇが、収率１３％で得られる。
【００６５】実施例８及び９ これらの実施例では、下記の合成ダイアグラムに従って、Ｒ3が硫黄原子又は
酸素原子を含むアクリレート２を調製する： プロセスＤ：
【化２７】 このダイアグラムでは、Ｒ3は、Ｘ＝Ｓ又はＯであるＲＸ−ＣＨ2に相当する。
【００６６】 この方法は、アクリレート２ｈ及び２ｉを調製するために用いられ、ここで、
Ｒ3は、それぞれ、パラメトキシベンジルチオメチル基及びベンジルチオメチル
基を表す。
【００６７】 １５mlのメタノール中の、適切なチオールＲ−ＳＨの１０mmolの溶液を、３０
分間かけて、氷浴中で冷却している、２０mlのメタノール中の９mmolのナトリウ
ムの撹拌溶液に滴下する。チオールの添加後、混合物を無水にまで濃縮し、ジエ
チルエーテルを添加する。沈殿した塩を氷浴中で冷却する。生成物をろ過し、冷
Et2Oで洗浄し、P2O5で乾燥させて、８５から９５％の収率で、ナトリウム塩を得
る。４０mlの無水Et2O懸濁液中の１０mmolのナトリウム塩の混合物を氷浴で冷却
し、これに、４５分かけて、２０mlのジエチルエーテル中のブロモメタクリル酸
エチル（９mmol）の溶液を滴下する。その溶液を０℃で３０分間、そして室温で
１〜２時間撹拌する。その反応混合物を、２０mlの水で希釈し、有機層を水で洗
浄し、それから、Na2SO4で乾燥させて、蒸発させる。こうして得られた化合物２
ｈ及び２ｉを、カラムクロマトグラフィーによって、溶離液として石油エーテル
（４０〜６０℃）／Et2O（８：２）を用いて精製する。
【００６８】 収率は表２に示す。
【００６９】実施例１０ この実施例では、アクリレート２ｊ［式中、Ｒ3はＲＯＣＨ2に相当し、式Ｃ6
Ｈ4−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ2の基を表す］を、ＲＯＨを用いた上記反応ダイアグラム
に従って調製する。
【００７０】 完全に乾燥させたフラスコ中で、ナトリウムの小片（１０mmol）を２０mlの無
水ジエチルエーテルに加える。この反応混合物に、１０mlのジエチルエーテル中
の１０mmolのベンジルアルコールの溶液を、適度な還流下で、２時間かけて添加
する。その混合物を、さらに６時間還流煮沸する。得られた白色沈殿を氷浴中で
冷却し、ろ過し、無水の冷ジエチルエーテルで洗浄し、P2O5で乾燥させて、８５
から９５％の収率で、ナトリウム塩を得る。
【００７１】 前記塩とブロモメタクリル酸エチルとの反応、及び、得られた化合物の精製は
、実施例８に記載したように行う。
【００７２】 得られるアクリレート２ｊは、表２に示す。
【００７３】実施例１１から２１ これらの実施例では、表３に示すＲ2及びＲ3を有するホスフィン性ブロック３
を、Yotakis et al, J. Org. Chem., 1996, 61, 6601-6605［８］に記載される
手順を用いて調製する。
【００７４】 この手順は、まず第一に、図１に記載するMichael反応を含む。最初のホスフ
ィン酸１（図１）は、Baylis et al, J. Chem. Soc. Perkin Trans I, 1984, p.
2845-2853［１３］に記載される方法に従って調製する。
【００７５】 当該アクリレート２は、実施例１から１０で調製した。当該ホスフィン性ブロ
ックの調製は、以下のように進める。
【００７６】 １mmolのＮ−ベンゾイルオキシカルボニルホスフィン酸１と５mmolのヘキサメ
チルジシラザンとの懸濁液を、窒素雰囲気中で、１１０℃で１時間加熱する。
【００７７】 それから、１．３mmolの適切なアクリレート２を１５分間かけて滴下する。反
応混合物をさらに３時間、１１０℃で撹拌する。混合物を７０℃にまで冷却し、
３mlのエタノールを滴下する。室温まで冷却した後、反応混合物を濃縮する。残
留物を、カラムクロマトグラフィーによって、溶離液としてクロロホルム／メタ
ノール／酢酸（７：０．５：０．５）混合物を用いて精製する。こうして、ホス
フィン性ブロック３ａから３ｋが、表３に示す収率で得られる。
【００７８】 この表では、Ｒ3欄は、アクリレート２が、そのホスフィン性ブロックの合成
に用いられたことを示す。表３は、さらに、得られたブロックのRfを示す。
【００７９】 実施例２２及び２３ これらの実施例では、表３に示す式を満たすホスフィン性ブロック３ｌ及び３
ｍを、以下の手順を用いて調製する。
【００８０】 ２．１mmolのジイソプロピルアミンと２．１mmolのトリメチルシリルクロライ
ドとを、氷中で冷却した、２mlのクロロホルム中の１mmolのホスフィン酸１に加
える。
【００８１】 混合物を室温で３時間撹拌する。０℃にまで冷却した後、１．４mmolの適切な
エチルアクリレート２（２ｅ又は２ｇ）を添加し、反応混合物を室温で１６時間
撹拌する。エタノールを滴下した後、真空中で溶媒を除去する。表３の化合物３
ｌ又は３ｍが、実施例１１から２１のカラムクロマトグラフィー後に得られる。
【００８２】 得られるブロックの収率とRfを表３に示す。
【００８３】 さらに、ブロック３ｂ、３ｄ及び３ｅから３ｋが、プロトンＮＭＲ、炭素１３
及びリンを用いて確認した。得られた結果を添付する。
【００８４】実施例２４ この実施例では、図１の化合物４ａから４ｍを、化合物３ａから３ｍから、以
下の手順に従って調製する。
【００８５】 １mmolの化合物３ａから３ｍと、１．２mmolの１−アダマンチルブロミドとを
、１０mlのクロロホルムに溶解させる。反応混合物を還流煮沸させる。それから
、２mmolの酸化銀を５回に等分に分けて、５０分間かけて添加する。その溶液を
さらに３０分間還流煮沸させる。溶媒を除去した後、残留物をジエチルエーテル
で処理し、Celiteでろ過する。ろ液を濃縮する。残留物は、カラムクロマトグラ
フィーによって、溶離液としてクロロホルム／イソプロパノール（９．８：０．
２）混合物を用いて精製する。こうして、化合物４ａから４ｍが、表４に示す収
率で得られる。該化合物のRf値も表４に示す。
【００８６】実施例２５ この実施例では、図１に記載した手順に続いて、化合物４ａから４ｍが、化合
物５ａから５ｍに転換される。このために、以下の手順を用いる。
【００８７】 １mlの4N NaOHを、撹拌中の、５．５mlのメタノール中１mmolの化合物４ａか
ら４ｍの溶液に添加する。反応混合物を１８時間撹拌し、それから、溶媒を除去
する。残留物を水で希釈し、それから、氷浴中で0.5N HClを用いて酸性化し、Na 2 SO4で乾燥させて、白色固体の化合物５ａから５ｍを、表５に示す収率で得る。
前記化合物のRf値も表５に示す。
【００８８】実施例２６ この実施例では、式を表５から７に示すホスフィン性擬ペプチドを、表４のホ
スフィン性ブロックから、Yotakis et al, J. Org. Chem., 1996, 61, p. 6601-
6605［８］、Jiracek et al, J. Biol. Chem., 1995, 270, p. 21701-21706［９
］及びJ. Biol. Chem., 1996, 271, p. 19606-19611［１０］に記載される手順
に従って、Fmoc（フルオレニルメトキシカルボニル）化学的固相合成によって調
製する。
【００８９】 カップリングは、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾル−１−イル−１，１，３，３
−テトラメチルウロニウム−ヘキサフルオロホスフェート（HBTU）／ジイソプロ
ピルエチルアミンを用い、in situストラテジーによって行う。カップリング条
件は、以下のとおりである：ジメチルホルムアミド中の、３当量のアミノ酸Fmoc
誘導体と、４当量のジイソプロピルエチルアミンとを樹脂に添加して、３０分間
反応させる。ホスフィン性ブロック：
【化２８】 のカップリングには、１．５ブロック当量を用いる。
【００９０】 Fmoc基の開裂条件は、ジメチルホルムアミド中５０％ピペリジンで３０分間で
ある。該Fmoc基は、（フルオレミルメトキシ）カルボニルである。
【００９１】実施例２７ この実施例では、表８に示す、異なったタイプのＲ1基を含む擬ペプチドを合
成する。該Ｒ1基の導入条件は、基のタイプに応じて下に示す。
【００９２】 Ｒ1がインドール又はキノリン基を含む酸（表８の化合物３０，３１，３２，
３３）であるならば、該Ｒ1基は、該樹脂にカップリングしたまま、一般式
【化２９】 のペプチドに、以下の条件でカップリングした：少量のＮ−メチルピロリドンで
希釈した３当量の酸、３当量のHBTU（０．４Ｍ）、１０当量のジイソプロピルエ
チルアミン（１．２Ｍ）で、４５分のカップリング時間。該Ｒ1基の取り込みに
続いて、Kaiserテストを行う。そのアミン官能基が完全に置換されるまで、必要
に応じて、この操作を数回繰り返した。
【００９３】 Ｒ1＝Ph-CH2-O-CH2-CO-（化合物２６）基は、以下の条件下で、対応する塩素
化誘導体を用いて取り込まれた：塩素化誘導体（２５当量、０．５M/ジクロロメ
タン）及びジイソプロピルエチルアミン（２５当量、０．５M/ジクロロメタン）
を、樹脂に加える。そのアシル化反応に１／２時間を要する。
【００９４】 化合物２７，２８及び２９の合成には、樹脂にカップリングしたままの前記ペ
プチド
【化３０】 が、最初に、以下の条件下で、そのBr-CH2-CO-Br誘導体を用いてアシル化された
：該臭素化誘導体（２５当量、０．５M/ジクロロメタン）及びジイソプロピルエ
チルアミン（２５当量、０．５M/ジクロロメタン）を、１／２時間の反応時間で
樹脂に加える。第二の工程は、対応するアニリン誘導体のアルキル化に相当する
。この目的のために、該アニリン誘導体（５０当量／DMSO）を、２．５時間のカ
ップリング時間で樹脂に加える。
【００９５】 該樹脂のペプチドの開裂と、その保護基の加水分解は、２．５％水、２．５％
チオアニソール、１．２５％チオフェノール、１．２５％エタンジチオール及び
１．２５％トリイソプロピルシランを含むトリフルオロ酢酸溶液を用いて行った
。
【００９６】 実施例２６及び２７で合成したペプチドはすべて、水、０．０１％トリフルオ
ロ酢酸含有アセトニトリル溶液によるグラジエントを用いる逆相HPLCによって精
製した。大部分の事例では、そのクロマトグラムに、４つのピークが見られる。
これらは、前記ホスフィン性化合物の合成プロトコルによって生成したジアステ
レオ異性体の４つの形態に対応している。この方法で精製したすべてのホスフィ
ン性ペプチドを、質量分光法を用いて調べた。
【００９７】実施例２８ この実施例では、表５から８の擬ペプチドの親和性定数Kiを、様々なマトリッ
クスメタロプロテアーゼMMPに関して調べる。
【００９８】 用いられるMMPsは、E.coli発現系において、組換え形で生成し、それから、様
々なタイプのクロマトグラフィーを用いて精製された。ストロメリジン−３（MM
P-11）のほかに、該MMPsは、ヒト配列に対応するものを生じる。この研究で用い
られたストロメリジン−３は、マウス形に相当する。
【００９９】 各MMPの活性は、２つのフルオロゲン性合成基質を用いて測定した。前記基質
の切断は、開裂する基質の量に比例する蛍光シグナルを生じるものであり、当該
速度パラメーターの明確な測定を可能にする。当該基質の定数Kmの値は、Ki値の
決定に考慮されるもので、下記の表に示す。親和性定数Kiは、Horowitz et al,
Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1987, 84, p. 6654-6658［１４］の方程式を用い
て算出され、酵素及び基質濃度の関数として、阻害剤の濃度に従って実験により
測定された阻害のパーセンテージの依存性を明らかにする。
【０１００】 実験は、Tris/50mM HClバッファー、pH 6.8、10mM CaCl2、２５℃で行った。
【表２】
【０１０１】 得られた結果は表５から８に示す。
【０１０２】 この事例で合成された阻害剤の一般式は、それらがホスフィン性擬トリペプチ
ドであることを示す。MMPsの活性サイトとの前記化合物の仮定的結合モードでは
、前記阻害剤は、それぞれ、前記酵素のサブサイトＳ１、Ｓ１’及びＳ２’と相
互作用しているはずである。大部分の該阻害剤に含まれるＲ１基は、サブサイト
Ｓ３／Ｓ２の接合部と相互作用すると考えられる。
【化３１】
【０１０３】 表５は、MMP阻害剤としての前記擬ペプチドの効力におけるＲ3残基の型の影響
である。
【０１０４】 該化合物のＲ3基が関連する、該阻害剤と前記サブサイトＳ１’との相互作用
は、このサブサイトが、酵素−阻害剤相互作用選択性を主にコントロールすると
考えられるので、詳細な研究の目的であった。
【０１０５】 表５の分析は、Ｒ3残基のサイズと性質がその化合物の親和性に重大な役割を
果たすことを例証しており：こうして、該阻害剤の活性は、Ｒ3基をベンジルか
らフェニルプロピル残基に変えたとき（化合物７及び９）、MMP-8の場合では３
０の因子によって、倍加されるようだ。この置換に対応する親和性の増加は、異
なるMMPに対しては一定でないことが認められ、これは、各MMPのサブサイトＳ１
’がＲ3残基の性質に敏感であるかもしれないことを示している。これに関し、M
MP-11が、フェニルプロピル残基よりも、フェネチル基を好む唯一のMMPであるこ
とが観察されたことは興味深い（化合物８及び９）。
【０１０６】 Ｒ3残基上の１つの原子（C、O、S）だけが異なっている化合物９、１０及び１
１の比較により、該阻害剤のＲ3のγ位の硫黄原子と、MMPsのサブサイトＳ１’
との間の特異的相互作用の存在が示される。MMPのタイプにかかわりなく、化合
物１１は、常に、これら３つの阻害剤の中で最も強力である。
【０１０７】 表６では、当該阻害剤は、メチル残基（表５）のかわりに、Ｒ2のフェニル残
基の存在によって特徴付けられる。表５と６の比較によって、ベンジル残基の存
在が、該阻害剤の相対的親和性を増大させることができることが明らかとなる。
MMP-11の特定の場合、メチル−＞ベンジル置換は、このMMPに対して、他の場合
よりも顕著な増大を引き起こす。この結果は、メチル残基と比較しての、ベンジ
ル残基に対するMMP-11のサブサイトＳ１の選択性を示す。
【０１０８】 この系列のＲ3に大きな相違を与えることは、Ｒ3の残基の影響についてのより
明確な理解を得ることを可能にする。この系列は、特定のMMPsに関する強力なホ
スフィン性阻害剤を得るためには、Ｒ3位において、長いアリールアルキル鎖を
導入することが必要であることを示す。このようにして、化合物１８は、MMP-8
、MMP-11、MMP-2及びMMP-9の強力な阻害剤の一例である。
【０１０９】 これらのMMPsに関して、この研究で報告された阻害剤がMMP-14についてはより
強力ではないようであることが認められる。
【０１１０】 加えて、通則として、これらの擬ペプチドは、MMP-1とMMP-7については活性が
低いようだ。
【０１１１】 フェネチルＲ3残基を含む化合物１４が、MMP-11には非常に強力であるが、別
のMMPsについてはより活性が低いことに注意すべきである。
【０１１２】 表７は、Ｒ4位のトリプトファン残基の重要性と、該トリプトファン残基の立
体配置の重要性とを示す。化合物２４は、これらの阻害剤の該トリプトファンが
、MMP-11とMMP-8の場合、別の芳香族残基Dpa（ジニトロベンジル）に置き換えら
れてよいことを示す。
【０１１３】 表８は、Ｒ1基の様々な修飾の効果を示す（表IV）。その結果の分析によって
、Ｒ1が、様々なMMPsに関しての化合物の親和性に影響することが示される。化
合物３１は、MMP-11の非常に強力な阻害剤の一例であり、前記酵素に対する確か
な選択性を示している。化合物３４及び３５は、その、Ｒ1が天然アミノ酸であ
る強力な阻害剤の例を表す。
【０１１４】実施例２９ この実施例では、MMP阻害剤としての擬ペプチドの効力に対する、２つのポジ
ションＲ2及びＲ3の立体配置の影響が研究される。
【０１１５】 本発明のホスフィン性誘導体を調製するために上記実施例で用いた合成プロセ
スは、そのＲ2及びＲ3残基を含むアルファ炭素上に２つの不斉中心が存在するた
めに、４つのジアステレオ異性体の混合物の形態で、各阻害剤を生じる。これら
２つのポジションの立体配置の影響を評価するために、Ｒ又はＳ配置の化合物１
５を、光学的に純粋なホスフィン性フェニルアラニンアミノ酸を用いて再合成し
た。各合成から、２つのジアステレオ異性体： Z-(S)PheY(PO2CH2)(S)pPhe-Trp-NH2 及び Z-(S)PheY(PO2CH2)(R)pPhe-Trp
-NH2 または、 Z-(R)PheY(PO2CH2)(S)pPhe-Trp-NH2 及び Z-(R)PheY(PO2CH2)(R)pPhe-Trp
-NH2 の混合物が生成し、これらは、逆相HPLCによって容易に分離することができる。
表９は、様々なMMPsに関する、化合物１５の４つのジアステレオ異性体の活性を
示す。このクラスのホスフィン性化合物にとって、少なくとも３つのジアステレ
オ異性体が、ほぼ同等のの手法で、異なるMMPsを阻害することが認められること
は興味深い。この性質は、阻害剤の選択性のコントロールする手段であることと
は別に、分子立体化学に敏感であり得る２つのパラメーターである代謝及び薬物
動態学に関して、非常に重要であることを証明することもできる。
【０１１６】 化合物１５のRIフラクションのプロトンＮＭＲ、炭素１３及びリンにより確認
された結果を添付する。
【０１１７】実施例３０ この実施例では、表９の化合物１５（RIフラクション）（RXPO3）の抗腫瘍効
果を測定する。
【０１１８】 インビボでの前記RXPO3阻害剤の効果を試験するために用いた腫瘍形成モデル
は、（注入した細胞と同じ遺伝的バックグラウンドを有する）同系マウスの悪性
マウスＣ２６細胞の皮下移植片から成る。
【０１１９】 Balb cマウス結腸癌から株化した前記Ｃ２６細胞（Corbett et al., 1975, Ca
ncer Res, 35: 2434-2439［１５］）を、わずかに融合状態（subconfluence）と
なるまで培養する。トリプシナイゼーション後、細胞を、１０００gで１０分間
遠心分離する。沈渣を洗浄し、１×PBSに再懸濁させる。５×１０4のＣ２６細胞
を含む２００ml容量を、８から９週齢のマウスの背中の２つの部位に皮下注入す
る。阻害剤を１×PBSに可溶化させ、１５０ml容量中１５０mgの阻害剤を腹腔内
経路で投与する。処理は、該Ｃ２６細胞の注入日に開始し、一日１回の注入割合
で２５日間続ける。腫瘍の容積は毎日測定する。
【０１２０】 ３つの同じ、それぞれ独立した発癌実験を、上記プロトコルに従って行った。
得られた結果は同じであった。それらの１つを下に報告する。
【０１２１】 該実験では、１２体の動物に関し、６体は処理（マウス１体あたり、１日あた
り、１５０μｇの阻害剤）を受け、６体は対照（１５０μｌの１×PBS）として
用いた。図２は、Ｃ２６細胞の注入後の経過時間（１０から２５日）の関数とし
て、腫瘍容積の中央値を示す。
【０１２２】 腫瘍がＤ１０日に現れ始めること、及び、、それらの平均及び中央値の容積が
、常に、阻害剤RXPO3で処理した動物のほうが低いことが観察される。この腫瘍
サイズの違いは、Ｄ１５日からＤ２０日において、５０％のオーダーである。そ
の後は、該阻害剤の効力は低いようである。これらの結果は、ストロメリジン−
３（MMP-3）の発現のための野生又は変異動物を用いる別の発癌モデルでの最近
の観察と一致しており、このマトリックスメタロプロテアーゼが最初の移植工程
に関与し、腫瘍の発達を促すことを示す。このモデルでは、前記阻害剤の効力が
、腫瘍発生の初日において最大であろう。
【０１２３】 参考文献 ［１］：Brown, Medical Oncology, 1997, 14, p. 1-10 ［２］：Beckett et al, 1998, Exp. Opin. Ther. Patents, 8, p. 259-289 ［３］：Goulet et al, Bioorg. Med. Chem. Lett. 4, 1994, p. 1221-1224 ［４］：Caldwell et al, Bioorg. Med. Chem. Letter 6, 1996, p. 323-328 ［５］：FR-A-2 676 059 ［６］：FR-A-2 689 764 ［７］：EP-A-0 725 075 ［８］：Yotakis et al, J. Org. Chem., 1996, 61, p. 6601-6605 ［９］：Jiracek et al, J. Biol. Chem., 1995, 270, p. 21701-21706 ［１０］：J. Biol. Chem., 1996, 271, p. 19606-19611 ［１１］：Eistetter et al, J. Med. Chem., 25, p 109-113, 1982 ［１２］：Baldwin et al, J. Chem. Soc. Chem. Comm. 1986, p 1339-1340 ［１３］：Baylis et al, J. Chem. Soc. Perkin Trans I, 1984, p. 2845-2853 ［１４］：Horowitz et al, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1987, 84, p. 6654-
6658 ［１５］：Corbett et al., 1975, Cancer Res, 35: 2434-2439
【０１２４】
【表３】
【０１２５】
【表４】
【０１２６】
【表５】
【表６】
【０１２７】
【表７】
【０１２８】
【表８】
【０１２９】
【表９】
【０１３０】
【表１０】
【０１３１】
【表１１】
【表１２】
【０１３２】
【表１３】
【０１３３】
【表１４】
【０１３４】
【表１５】
【０１３５】
【表１６】
【０１３６】
【表１７】
【０１３７】
【表１８】
【０１３８】
【表１９】
【０１３９】
【表２０】
【０１４０】
【表２１】
【０１４１】
【表２２】
【０１４２】
【表２３】
【図面の簡単な説明】
【図１】 図１は、本発明の擬ペプチドの合成ダイアグラムである。
【図２】 図２は、本発明の化合物の抗腫瘍効果を例示する図であり、対照
マウスと本発明の擬ペプチドで処理したマウスに対して癌性細胞を注入した後の
時間（日数）の関数として、その腫瘍の平均容積（mm3）を示す。
【手続補正書】
【提出日】平成１４年１１月２２日（２００２．１１．２２）
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【化ｌ】 ［式中、 −Ｒ1は、アミン官能性を阻害する基、又は、阻害された末端アミノ官能性を
有するアミノ酸残基又はペプチドであり、 −Ｒ2は、天然又は非天然アミノ酸のラテラル鎖を表し、 −Ｒ3は： １）アリール基によって置換されていない又は置換された、Gly及びAlaを
除く天然アミノ酸のラテラル鎖、 ２）アラルキル基、又は ３）少なくとも３つの炭素原子を有するアルキル基 を表し、また、 −Ｒ4は、天然又は非天然アミノ酸のラテラル鎖、又は、ジニトロベンジル基
を表す］ のホスフィン性擬ペプチド。
【化２】 ［式中、ｎは１から４までの整数である］ 及び、式：
【化３】 ［式中、ｐは１又は２に等しい］ の基から選択されるアラルキル基である、請求項１記載の擬ペプチド。
【化４】 の何れかを満たす基である、請求項１記載の擬ペプチド。
【化５】 の基である、請求項１記載の擬ペプチド。
【化６】 の基を表す、請求項１記載の擬ペプチド。
【化７】 ［式中、Ｚはベンジルオキシカルボニル基である］ を満たす、請求項１記載の擬ペプチド。
【化８】 がＬ形である、請求項９記載の擬ペプチド。
【化９】 ［式中、Ｚはベンジルオキシカルボニル基である］ を満たす、請求項１１記載の組成物。
【化１０】 がＬ形である、請求項１５記載の組成物。
【請求項１７】 少なくとも１つのマトリックス亜鉛プロテアーゼを阻害す
る医薬品の製造のための、請求項１記載のホスフィン性擬ペプチドの使用。
【請求項１８】 前記マトリックス亜鉛プロテアーゼが、MMP-2、MMP-8、MM
P-9及びMMP-11から選択される、請求項１７記載の使用。
【請求項１９】 前記医薬品が、マトリックスプロテアーゼの過剰発現によ
って特徴付けられる疾患の治療用の、請求項１７記載の使用。
【請求項２０】 前記疾患が癌である、請求項１９記載の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２９】 本発明の擬ペプチドでは、当該アミノ酸のラテラル鎖Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、Ｌ
又はＤ形であってよい。加えて、該擬ペプチドは、単一の異性体から成ってよく
、又は、Ｒ2及びＲ3残基を含むα炭素上に２つの不斉中心が存在することから、
４−ジアステレオ異性体の混合物により成ってもよい。全てのアミノ酸立体配置
が適しているであろうが、好ましくは、その単位は、Ｌ形である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 35/00 Ａ６１Ｐ 35/00 43/00 １１１ 43/00 １１１ Ｃ０７Ｆ 9/572 Ｃ０７Ｆ 9/572 Ａ (71)出願人 アンスティテュ ナスィヨナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル ＩＮＳＴＩＴＵＴ ＮＡＴＩＯＮＡＬ Ｄ Ｅ ＬＡ ＳＡＮＴＥ ＥＴ ＤＥ ＬＡ ＲＥＣＨＥＲＣＨＥ ＭＥＤＩＣＡＬＥ フランス国・75654 パリ セデ 13・リ ュ ドゥ トルビヤック，101 101， ｒｕｅ ｄｅ Ｔｏｌｂｉａｃ ／75654 ＰＡＲＩＳ ＣＥＤＥＸ 13 ／ＦＲＡＮＣＥ (71)出願人 セントレ・ナショナル・デ・ラ・レシェル シェ・サイエンティフィーク フランス国・Ｆ−75794・パリ・セデック ス・16・リュ・ミッシェル・アンジュ・３ (71)出願人 ジュネヴィエーヴ・バセット フランス・Ｆ−67200・オーベローベルジ ェン・リュ・ドゥ・カンパニョール・１ (72)発明者 ヴァンサン・ディーヴ フランス・Ｆ−94160・サン・マンドゥ・ アヴニュ・ジョフル・25−29 (72)発明者 フィリップ・クニアッセ フランス・Ｆ−75020・パリ・リュ・デ・ ピレネー・361 (72)発明者 マリー−クリスティーヌ・リオ フランス・Ｆ−67400・イルキルシュ・リ ュ・ドゥ・ラルジル・５ (72)発明者 アタナシオス・ヨタキス ギリシャ・15342・アグ・パラスケヴィ・ リュ・パラシドウ・７ (72)発明者 ファブリス・ボー フランス・Ｆ−91300・マッシー・リュ・ ドゥ・レフォール・ムテュエル・76 (72)発明者 スタマニア・ヴァシリオ ギリシャ・16233・アテネ・18・カレア ス・サランタポロウ（番地なし) (72)発明者 ポール・バセット フランス・Ｆ−67200・オーベローベルジ ェン・リュ・ドゥ・カンパニョール・１ Ｆターム(参考） 4C086 AA01 AA02 AA03 DA34 MA01 MA04 NA14 ZA36 ZA96 ZB15 ZB26 ZC20 4H050 AA01 AA03 AB28

Claims (18)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 式： 【化１】 ［式中、 −Ｒ1は、アミン官能性を阻害する基、又は、阻害された末端アミノ官能性を
    有するアミノ酸残基又はペプチドであり、 −Ｒ2は、天然又は非天然アミノ酸のラテラル鎖を表し、 −Ｒ3は： １）アリール基によって置換されていない又は置換された、Gly及びAlaを
    除く天然アミノ酸のラテラル鎖、 ２）アラルキル基、又は ３）少なくとも３つの炭素原子を有するアルキル基 を表し、また、 −Ｒ4は、天然又は非天然アミノ酸のラテラル鎖、又は、ジニトロベンジル基
    を表す］ のホスフィン性擬ペプチド。
  2. 【請求項２】 Ｒ2がメチル又はベンジル基を表す、請求項１記載の擬ペプ
    チド。
  3. 【請求項３】 Ｒ3が、Phe及びLeuから選択されたアミノ酸のラテラル鎖、
    又は、アリールアルキル基によってラテラル鎖が置換されたSer又はCys残基を表
    す、請求項１記載の擬ペプチド。
  4. 【請求項４】 Ｒ3が、式： 【化２】 ［式中、ｎは１から４までの整数である］ 及び、式： 【化３】 ［式中、ｐは１又は２に等しい］ の基から選択されるアラルキル基である、請求項１記載の擬ペプチド。
  5. 【請求項５】 Ｒ3が、以下の式： 【化４】 の何れかを満たす基である、請求項１記載の擬ペプチド。
  6. 【請求項６】 Ｒ3が、式： 【化５】 の基である、請求項１記載の擬ペプチド。
  7. 【請求項７】 Ｒ4が、式： 【化６】 の基を表す、請求項１から６の何れか１項に記載の擬ペプチド。
  8. 【請求項８】 Ｒ1が、アセチル、ベンジルオキシアセチル、フェニルアミ
    ノアセチル、ｍ−クロロフェニル）アミノアセチル、（２−ヒドロキシ−５−ク
    ロロ−フェニル）アミノアセチル、インドリル−２−カルボニル、４，６−ジク
    ロロ−インドリル−２−カルボニル、キノリル−２−カルボニル及び１−オキサ
    −２，４−ジクロロ−７−ナフタレンカルボニル基から選択される基を表す、請
    求項１から６の何れか１項に記載の擬ペプチド。
  9. 【請求項９】 式： 【化７】 ［式中、Ｚはベンジルオキシカルボニル基である］ を満たす、請求項１記載の擬ペプチド。
  10. 【請求項１０】 基 【化８】 がＬ形である、請求項９記載の擬ペプチド。
  11. 【請求項１１】 少なくとも１つの請求項１から１０の何れか１項に記載の
    擬ペプチドを含む、少なくとも１つのマトリックス亜鉛メタロプロテアーゼを阻
    害する製薬組成物。
  12. 【請求項１２】 前記マトリックス亜鉛メタロプロテアーゼが、MMP-2、MMP
    -8、MMP-9及びMMP-11から選択される、請求項１１記載の組成物。
  13. 【請求項１３】 マトリックスプロテアーゼの過剰発現によって特徴付けら
    れる疾患の治療のための、請求項１１及び１２の何れか１項に記載の製薬組成物
    。
  14. 【請求項１４】 癌の治療のための、請求項１３記載の組成物。
  15. 【請求項１５】 少なくとも１つのマトリックス亜鉛プロテアーゼを阻害す
    る医薬品の製造のための、請求項１から１０の何れか１項に記載のホスフィン性
    擬ペプチドの使用。
  16. 【請求項１６】 前記マトリックス亜鉛プロテアーゼが、MMP-2、MMP-8、MM
    P-9及びMMP-11から選択される、請求項１５記載の使用。
  17. 【請求項１７】 前記医薬品が、マトリックスプロテアーゼの過剰発現によ
    って特徴付けられる疾患の治療用の、請求項１５又は１６記載の使用。
  18. 【請求項１８】 前記疾患が癌である、請求項１７記載の使用。
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