JP2002511423A

JP2002511423A - ワクチン

Info

Publication number: JP2002511423A
Application number: JP2000543159A
Authority: JP
Inventors: フリード，マーティン; エルマン，フィリップ
Original assignee: スミスクラインビーチャムバイオロジカルズソシエテアノニム
Priority date: 1998-04-09
Filing date: 1999-03-29
Publication date: 2002-04-16
Also published as: CA2325939A1; IL138000A0; WO1999052549A1; AU746163B2; PL354714A1; HUP0101619A3; CN1296416A; AR019026A1; HUP0101619A2; BR9909915A; NO20005051D0; TR200002930T2; NZ506603A; AU3419799A; NO20005051L; EP1069910A1; KR20010042573A

Abstract

(57)【要約】本発明は、ポリオキシエチレンエーテルまたはポリオキシエチレンエステルを、製薬上許容可能な賦形剤と組合せて包含するアジュバント組成物、ならびにこのようなアジュバント組成物および抗原を包含するワクチンに関する。さらに、本発明は、アジュバント処方物およびワクチン処方物の製造におけるポリオキシエチレンエーテルまたはエステルの使用、ならびに薬剤としてのそれらの使用に関する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】本発明は、ポリオキシエチレンエーテルまたはポリオキシエチレンエステルを
、製薬上許容可能な賦形剤と組合せて包含するアジュバント組成物、ならびにこ
のようなアジュバント組成物および抗原を包含するワクチンに関する。さらに、
本発明は、アジュバント処方物およびワクチン処方物の製造におけるポリオキシ
エチレンエーテルまたはエステルの使用、ならびに薬剤としてのそれらの使用に
関する。

【０００２】粘膜予防接種、例えば鼻腔内および経口予防接種は、全身注射による伝統的予
防接種より容易で且つ便利な予防接種方法を代表し得る。ワクチンを投与するた
めの注射の使用は、多数の欠点、即ち、注射後の注射部位での疼痛および刺激を
伴う。これらの因子は、予防接種レジメンに対する患者の不十分な服薬遵守を生
じることが知られている「針恐怖」をもたらし得る。さらに、慣用的全身性注射
は、皮膚穿刺の領域における感染源であり得る。

【０００３】注射に関する要件を回避することの他に、粘膜予防接種は、抗原の粘膜投与が
、多数の病原体の侵入経路である粘膜表面でより高い効率の防御応答誘導を示す
ということが動物で示されているため、魅力的である。さらに、粘膜予防接種、
例えば鼻腔内予防接種は、鼻粘膜だけでなく、生殖器粘膜のような離れた粘膜部
位においても粘膜免疫を誘導し得る、ということが示唆されている（Mestecky,
1987, Journal of Clinical Immunology, 7, 265-276; McGhee and Kiyono, Inf
ectious Agents and Disease, 1993, 2, 55-73）。

【０００４】注射による免疫感作に対するまたはその代わりの生育可能取換え物である粘膜
免疫感作のために、本予防接種経路は、少なくとも注射により誘導されるのと同
様に有効な全身性免疫応答を誘導できなければならない。ある抗原は、この経路
により投与される場合、全身性応答を誘導し得るということが報告されている（
Cahill et al., 1993, FEMS Microbiology Letters, 107, 211-216）が、一方、
それ自体鼻腔内投与されるほとんどの可溶性抗原は、免疫応答をほとんどまたは
全く誘導しない。

【０００５】多数の著者がこの問題を克服するために、以下に示すような種々のメカニズム
を介してそれらのアジュバント活性を発揮する、可能性のある粘膜アジュバント
を研究してきた：抗原の封入（例えば、リポソームおよび微小粒子）；または標
的細胞との直接相互作用、およびその後のそれからの免疫刺激性サイトカインの
放出（例えば、コレラ毒素および大腸菌耐熱性毒素）による；あるいは上皮を通
過する抗原の取込み増強による（例えば、コレラ毒素）。

【０００６】本出願人は、ポリオキシエチレンエーテルおよびポリオキシエチレンエステル
がワクチンのための効力のあるアジュバントとして作用する、という意外な知見
をここに示す。本発明のアジュバントは、安全で、容易に滅菌可能で、そして投
与が簡単である。有益には、このような組成物は、粘膜投与された場合に、ワク
チンの慣用的全身性注射後に観察されるのと少なくとも同じ高さの全身性免疫応
答を誘導するのに十分である。

【０００７】ポリオキシエチレンエーテル、例えばポリオキシエチレンラウリルエーテルは
、Merck目録（12th ed;entry 7717）に記載されているが、ここでは、療法的用
途は局所麻酔性、止痒性および硬化剤活性を含むと記述されている。このような
ポリオキシエチレンエーテルまたはエステルの一種類としては、非イオン性界面
活性剤がある。

【０００８】ポリオキシエチレンエーテルおよびエステルの鼻腔内投与は、鼻腔中でのイン
スリン取込みの増強に関して記載されている（Hirai et al., 1981, Internatio
nal Journal of Pharmaceutics, 9, 165-172; Hirai et al., 1981, Internatio
nal Journal of Pharmaceutics, 9, 173-184）。その他の非イオン性界面活性剤は、ワクチン処方物中に利用されている。ポリ
オキシエチレンひまし油またはカプリル酸／カプリン酸グリセリドの、ポリオキ
シエチレンソルビタンモノエステルとの混和物および抗原を包含するワクチン製
剤は、粘膜への局所投与後に全身性免疫応答を誘導し得る、ということが報告さ
れている（WO94/17827）。この特許出願は、トゥイーン20（商標）（ポリオキシ
エチレンソルビタンモノエステル）とImwitor742（商標）（カプリル／カプリン
酸グリセリド）の組合せを開示しているし、あるいはトゥイーン20（商標）とポ
リオキシエチレンひまし油の組合せは、鼻腔内免疫感作後の全身性免疫応答を増
強し得る。鼻腔内投与抗原に対する免疫応答の増強に及ぼすこの処方物の作用の
詳細は、文献中にも記載されている（Gizurarson et al., 1996, Vaccine Resea
rch, 5, 69-75; Aggerbeck et al., 1997, Vaccine, 15, 307-316）。

【０００９】 Novasome（米国特許第5,147,725号）は、ポリオキシエチレンエーテルを包含
する少薄層構造であり、コレステロールは抗原を封入し、そして全身投与後に抗
原に対する免疫応答を補佐し得る。界面活性剤は、非イオン性界面活性剤小胞（一般に、ネオソームとして知られ
ている。WO95/09651）を生成するような方法でも処方されている。このような小
胞は、コレステロールの存在下で、内部水性相内にまたは二層それ自体の中に、
抗原を導入し得る脂質二層性小胞を生成する。

【００１０】相対的低濃度のポリオキシエチレンエーテルまたはエステルは、同時投与抗原
に対する全身性免疫応答を有意に増強し得る、という意外な知見を我々はここに
示す。さらに、粘膜ワクチン処方物中に用いる場合、これらのアジュバントの増
強作用は、抗原の慣用的全身性注射により達成されるものと等しいかそれを上回
るレベルに全身性免疫応答を上げる。これらの分子は、慣用的全身性ワクチン目
的のための、または粘膜予防接種により全身性予防接種に取って代わるための、
ヒトにおける適用に適したアジュバントの一種を代表する。

【００１１】抗原封入のために多数の利用可能なワクチンアジュバントが機能する時、意外
にも、本発明は、非小胞性溶液または懸濁液の形態の有効なワクチンアジュバン
トとして作用する。したがって、本発明の一実施態様は、非小胞性溶液または懸
濁液の形態で存在する式（Ｉ）の界面活性剤を包含するアジュバント処方物を提
供する。本発明の別の実施態様は、コレステロールの非存在下で処方された、式
（Ｉ）の界面活性剤を包含するワクチンアジュバントの形態を取る。

【００１２】本発明のワクチンおよびアジュバント処方物は、一般式（Ｉ）：ＨＯ（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）_nＡ−Ｒ（式中、ｎは１〜50であり、Ａは一結合または−Ｃ（Ｏ）−であり、ＲはＣ_1-50 のアルキルまたはフェニルＣ_1-50アルキルである）の分子を包含する。

【００１３】本発明の一実施態様は、一般式（Ｉ）（式中、ｎは１〜50、好ましくは４〜24
、最も好ましくは９であり、Ｒ構成成分はＣ_1-50の、好ましくはＣ₄〜Ｃ₂₀のア
ルキル、最も好ましくはＣ₁₂のアルキルであり、そしてＡは一結合である）のポ
リオキシエチレンエーテルを包含するワクチン処方物から成る。ポリオキシエチ
レンエーテルの濃度は、0.1〜20％、好ましくは0.1〜10％、最も好ましくは0.1
〜１％の範囲であるべきである。好ましいポリオキシエチレンエーテルは、以下
の群から選択される：ポリオキシエチレン−９−ラウリルエーテル、ポリオキシ
エチレン−９−ステオリルエーテル、ポリオキシエチレン−８−ステオリルエー
テル、ポリオキシエチレン−４−ラウリルエーテル、ポリオキシエチレン−３５
−ラウリルエーテルおよびポリオキシエチレン−２３−ラウリルエーテル。

【００１４】本発明のさらに別の実施態様は、一般式（Ｉ）（式中、ｎは１〜50、好ましく
は４〜24、最も好ましくは９であり、ＲはＣ_1-50の、好ましくはＣ₄〜Ｃ₂₀のア
ルキル、最も好ましくはＣ₁₂のアルキルであり、そしてＡは−Ｃ（Ｏ）−である
）のポリオキシエチレンエステルを包含するワクチン組成物から成る。ポリオキ
シエチレンエステルの濃度は、0.1〜20％、好ましくは0.1〜10％、最も好ましく
は0.1〜1％の範囲であるべきである。好ましいポリオキシエチレンエステルは、
以下の群から選択される：ポリオキシエチレン−９−ラウリルエステル、ポリオ
キシエチレン−９−ステオリルエステル、ポリオキシエチレン−８−ステオリル
エステル、ポリオキシエチレン−４−ラウリルエステル、ポリオキシエチレン−
３５−ラウリルエステルおよびポリオキシエチレン−２３−ラウリルエステル。

【００１５】さらに、本発明の一実施態様を形成するのは、式（Ｉ）（式中、ｎは１〜50、
好ましくは４〜24、最も好ましくは９であり、ＲはＣ_1-50のフェニルアルキル、
好ましくはＣ₄〜Ｃ₂₀のフェニルアルキル、最も好ましくはＣ₁₂のフェニルアル
キルであり、そしてＡは一結合である）のポリオキシエチレンフェニルエーテル
を包含するワクチン処方物である。ポリオキシエチレンエーテルの濃度は、好ま
しくは0.1〜10％、最も好ましくは0.25〜１％の範囲であるべきである。

【００１６】本発明のワクチン製剤は、粘膜経路、例えば経口／頬／小腸／膣／直腸または
鼻経路を介して前記のワクチンを投与することにより、疾患に罹りやすい、また
は罹患した哺乳類を予防または治療するために用いられ得る。このような投与は
、小滴、噴霧、または乾燥粉末化形態であり得る。霧状化またはエアロゾル化ワ
クチン処方物も、本発明の一部を形成する。腸処方物、例えば経口投与用の胃耐
性カプセルおよび顆粒、直腸または膣投与のための座薬も、本発明の一部を形成
する。本発明は、皮膚に適用される（経皮または経皮送達）抗原の免疫原性を増
強するためにも用いられ得る。さらに、本発明のアジュバントは、非経口的に、
例えば筋肉内投与または皮下投与で送達され、アジュバントが小胞の形態でない
ことで特性化される得る。

【００１７】好ましい実施態様では、本発明は、粘膜ワクチン処方物に用いるためのアジュ
バントを提供する。このようなアジュバントは、ヒトにおいて十分耐用性であり
、全身性免疫応答のそれらの誘導に有効である。本発明のアジュバントは、溶液
、または非小胞性溶液または懸濁液の形態を取り、このようなものとして、粒状
アジュバント系の製造、安定性、均一性および品質制御に伴ういかなる問題も有
さない。これらの処方物は、有効なアジュバントであって、低反応原性を示し、
患者に十分耐容される。

【００１８】好ましくは、本発明のポリオキシエチレンエーテルは、溶血活性を有する。ポ
リオキシエチレンエーテルの溶血活性は、以下の検定を参照しながらin vitroで
測定され得るし、赤血球の溶解を引き起こすことができない最高濃度の洗剤と同
様に発現される：１．モルモットからの新鮮な血液を、卓上遠心分離器中で、リン酸塩緩衝化生
理食塩水（ＰＢＳ）で３回洗浄する。元の容量に再懸濁後、血液をさらに、ＰＢ
Ｓ中で10倍に稀釈する。

【００１９】２．この血液懸濁液50μlを、洗剤の２倍稀釈液を含有するＰＢＳ800μlに付
加する。３．８時間後、肉眼で、または上清の光学密度を測定することにより、溶血を
査定する。570 nmの光を吸収する赤色上清の存在は、溶血の存在を示す。４．溶血がもはや起きない一次洗剤稀釈液の濃度として、結果を表す。

【００２０】このような生物学的検定の固有の実験変動性内で、本発明の一般式（Ｉ）のポ
リオキシエチレンエーテルまたは界面活性剤は、好ましくは約 0.5〜0.0001％、
さらに好ましくは0.05〜0.0001％、さらに好ましくは 0.005〜0.0001％、最も好
ましくは 0.003〜0.0004％の溶血活性を有する。理想的には、前記のポリオキシ
エチレンエーテルまたはエステルは、ポリオキシエチレン−９−ラウリルエーテ
ルまたはポリオキシエチレン−８−ステロリルエーテルと同様の溶血活性を有す
るべきである。

【００２１】ポリオキシエチレン部分の長さ対界面活性剤中のアルキル鎖の長さの比（即ち
、ｎ：アルキル鎖長の比）は、水性媒質中のこの種類の洗剤の溶解度に影響を及
ぼす。したがって、本発明のアジュバントは溶液中に存在し得るか、またはミセ
ルのような粒子構造を生成し得る。本発明のアジュバントは、それらの非小胞性
のために、透明であって、曇ったりまたは不透明ではなく、安定で、220 nm膜を
通す濾過により容易に滅菌可能であって、容易で且つ制御された方式で製造され
る。

【００２２】本発明のワクチンは、製薬上許容可能な賦形剤、例えばＰＢＳまたは水、およ
び抗原または抗原性製剤中の一般式（Ｉ）のポリオキシエチレンエーテルまたは
エステルの非小胞性溶液または懸濁液の形態を取り得る。このようなワクチン処
方物は次に、感作または追加免疫予防接種レジメンにおいて、哺乳類の粘膜表面
に適用され得るか、あるいは、例えば経皮、皮下または筋肉内経路により、全身
的に投与される。

【００２３】粘膜および全身性免疫応答の両方を増強することが知られているその他のアジ
ュバントとしては、コレラ菌および大腸菌由来の細菌エンテロトキシン（即ち、
それぞれコレラ毒素（ＣＴ）および耐熱性エンテロトキシン（ＬＴ））が上げら
れる。ＣＴおよびＬＴは、毒性Ａサブユニットをクレードルするβ−サブユニッ
トの５量体環から成るヘテロダイマーである。それらの構造および生物学的活性
は、Clements and Finklestein, 1979, Infection and Immunity, 24:760-769;
Clements et al., 1980, Infection and Immunity, 24:91-97に開示されている
。近年、ＬＴの非毒性形態をその毒性形態に「スイッチオン」させ、一旦細胞か
ら放出させるのに必要なタンパク質分解部位を欠いたＬＴの非毒性誘導体が開発
された。この形態のＬＴ（ｍＬＴ（R192G）と呼ばれる）は、位置192でのアミノ
酸アルギニンのグリシンによる置換によってタンパク質分解切断に対して非感受
性にされ、そして非常に低減された毒性を有する一方、その有効なアジュバント
活性を保持することが示されている。したがって、ｍＬＴ（R192G）は、タンパ
ク質分解部位突然変異体と呼ばれる。ｍＬＴ（R192G）の製造方法は、特許出願W
O96/06627に開示されている。その他の突然変異形態のＬＴとしては、活性部位
突然変異体、例えばＬＴＡ配列の位置69におけるアラニンに代わるグリシンの置
換を含有するｍＬＴ（A69G）が挙げられる。粘膜ワクチンとしてのｍＬＴ（R192
G）の使用は、特許出願WO96/06627に記載されている。このようなアジュバント
は、有益には、本発明の非イオン性界面活性剤と組合され得る。

【００２４】したがって、本発明の代替的実施態様では、ポリオキシエチレンエーテルまた
はエステルはさらに、その他のアジュバントまたは免疫刺激剤、例えばコレラ毒
素およびそのＢサブユニット、モノホスホリル脂質Ａおよびその非毒性誘導体３
−デ−Ｏ−アシル化モノホスホリル脂質Ａ（英国特許第2,220,211号に記載）、
サポニン、例えばクイルＡ（南米の樹木のQuillaja Saponaria Molinaのの樹皮
から得られる）およびその分画、例えばQS21およびQS17（米国特許第5,057,540
号；Kensil, C.R., Crit Rev Ther Drug Carrier Syst, 1996, 12（1-2）:1-55
；EP0 362 279 B1； Kensil et al.,（1991, J. Immunology vol 146, 431-437
）；WO99/10008）、ならびに非メチル化CpG二ヌクレオチドを含有するオリゴヌ
クレオチドアジュバント系（WO96/02555に記載）と組合される。ＰＯＥとともに
用いられる特に好ましい免疫刺激在は、ＣｐＧ免疫刺激性オリゴヌクレオチドで
、この処方物は、大型動物における免疫応答の誘導および追加に有効である。好
ましいオリゴヌクレオチドは、以下の配列を有する：配列は、好ましくは、すべ
てのホスホロチオエート修飾化ヌクレオチド間連鎖を含有する：オリゴ１：TCC ATG ACG TTC CTG ACG TT オリゴ２：TCT CCC AGC GTG CGC CAT オリゴ３：ACC GAT GAC GTC GCC GGT GAC GGC ACC ACG 本発明に用いられるＣｐＧオリゴヌクレオチドは、当業界で既知のあらゆる方
法により合成され得る（例えば、EP468520）。このようなオリゴヌクレオチドは
、自動合成機を用いて合成されるのが便利である。

【００２５】あるいは、ポリオキシエチレンエーテルまたはエステルは、キトサンまたはそ
の他のポリ陽イオン性ポリマー、ポリラクチドおよびポリラクチド−コグリコリ
ド粒子、多糖または化学的修飾化多糖、コレステロールから成る粒子、無含有リ
ポソームおよび脂質ベースの粒子、水中油型エマルション（WO95/17210）、グリ
セロールモノエステルから成る粒子等で構成されるワクチンビヒクルと組合せ得
る。ポリオキシエチレンエーテルまたはエステルは、粉末化賦形剤、例えば、乾
燥粉末として投与され得る抗原を含有するラクトースとも混和され得る。

【００２６】本発明のアジュバントは、界面活性剤：ポリオキシエチレンエーテルまたはエ
ステルを包含するが、この場合、ポリオキシエチレンエーテルまたはエステルは
小胞の形態で存在しない。したがって、本発明は、アジュバント組成物およびワ
クチンの製造における一般式（Ｉ）のポリオキシエチレンエーテルおよびエステ
ルの使用を含み、この場合、一般式（Ｉ）の界面活性剤は小胞形態で存在しない
。

【００２７】好ましくは、本発明のワクチン処方物は、ヒト病原体に対する免疫応答を引き
出し得る抗原または抗原組成物を含有し、この抗原または抗原組成物は、HIV-１
（例えば、tat、nef、gp120またはgp160）、ヒトヘルペスウイルス、例えばｇＤ
またはその誘導体、あるいは即早期タンパク質、例えばヒトHSV1またはHSV2から
のICP27、サイトメガロウイルス（特にヒト）（例えばｇＢまたはその誘導体）
、ロタウイルス（生弱毒化ウイルスを含む）、エプスタインバーウイルス（例え
ば、gp350またはその誘導体）、水痘−帯状疱疹ウイルス（例えばgpI、IIおよび
IE63）から得られ、あるいは肝炎ウイルス、例えばＢ型肝炎ウイルス（例えばＢ
型肝炎表面抗原またはその誘導体）、Ａ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルスおよ
びＥ型肝炎ウイルスから、あるいはその他のウイルス性病原体、例えばパラミク
ソウイルス：ＲＳウイルス（例えばＦおよびＧタンパク質またはそれらの誘導体
）、パラインフルエンザウイルス、麻疹ウイルス、流行性耳下腺炎ウイルス、ヒ
ト乳頭腫ウイルス（例えば、HPV6、11、16、18、…）、フラビウイルス（例えば
、黄熱病ウイルス、デング熱ウイルス、ダニ媒介脳炎ウイルス、日本脳炎ウイル
ス）またはインフルエンザウイルス（全生または不活性化ウイルス、分割インフ
ルエンザウイルス。卵またはＭＤＣＫ細胞、あるいはVero細胞または全フルーウ
イロソーム中で増殖（R. Gluck, Vaccine, 1992, 10, 915-920に記載）、あるい
はそれらの精製または組換えタンパク質、例えばHA、NP、NAまたはＭタンパク質
、あるいはそれらの組合せ）から得られ、もしくは、細菌病原体、例えばナイセ
リア属、例えばN. gonorrheaおよびN. meningitidis（例えば被膜多糖およびそ
の共役体、トランスフェリン結合タンパク質、ラクトフェリン結合タンパク質、
PilC、接着因子）；S. pyogenes（例えばタンパク質Ｍまたはその断片、Ｃ５Ａ
プロテアーゼ、リポテイコ酸）、S. agalactiae、S. mutans；H. ducreyi；モラ
クセラ属、例えばBranhamella catarrhalisとしても知られているM. catarrhali
s（例えば、高および低分子量付着因子およびインベーシン）；ボルデテラ属、
例えば百日咳菌B. pertussis（例えば、pertactin、百日咳毒素またはその誘導
体、糸状ヘマグルチニン、アデニレートシクラーゼ、線毛）、パラ百日咳菌B. p
arapertussisおよび気管支敗血症菌B. bronchiseptica；ミコバクテリウム属、
例えばヒト結核菌M. tuberculosis（例えば、ESST6、抗原85-Ａ、−Ｂまたは−
Ｃ）、ウシ結核菌M. bovis、らい菌M. leprae、鳥結核菌M. avium、パラ結核菌M
. paratuberculosis、スメグマ菌M. smegmatis；レジオネラ属、例えばレジオネ
ラニューモフィラ菌L. pneumophila；エシェリキア属、例えば腸毒性大腸菌（例
えばコロニー化因子、耐熱性毒素またはその誘導体、熱安定性毒素またはその誘
導体）、腸出血性大腸菌、腸病原性大腸菌（例えば、志賀毒素様毒素またはその
誘導体）；ビブリオ属、例えばコレラ菌V. cholera（例えば、コレラ毒素または
その誘導体）；赤痢菌属、例えばソネ赤痢菌S. sonnei、志賀赤痢菌S. dysenter
iae、フレクスナー赤痢菌S. flexnerii；エルジニア属、例えばY. enterocoliti
ca（例えば、Yopタンパク質）、ペスト菌Y. pestis、偽結核エルジニア菌Y. pse
udotuberculosis；カンピロバクター属、例えばC. jejuni（例えば、毒素、付着
因子およびインベーシン）およびC. coli；サルモネラ属、例えばチフス菌S. ty
phi、パラチフス菌S. paratyphi、ブタコレラ菌S. choleraesuis、腸炎菌S. ent
eritidis；リステリア属、例えばリステリア菌L. monocytogenes；ヘリコバクタ
ー属、例えばヘリコバクターピロリH. pylori（例えば、ウレアーゼ、カタラー
ゼ、空胞化毒素）；シュードモナス属、例えば緑膿菌P. aeruginosa；ブドウ球
菌属、例えば黄色ブドウ球菌S. aureus、表皮ブドウ球菌S. epidermidis；エン
テロコッカス属、例えば、E. faecalis、E. faecium；クロストリジウム属、例
えば破傷風菌C. tetani（例えば、破傷風毒素およびその誘導体）、ボツリヌス
菌C. botulinum（例えば、ボツリヌス毒素またはその誘導体）、C. difficile（
例えば、クロストリジウム毒素ＡまたはＢおよびそれらの誘導体）；バシラス属
、例えば炭疸菌B. anthracis（例えば、ボツリヌス毒素またはその誘導体）；コ
リネバクテリウム属、例えばジフテリア菌C. diphtheriae（例えば、ジフテリア
毒素またはその誘導体）；ボレリア属、例えばB. burgdorferi（例えば、OspA、
OspC、DbpA、DbpB）、B. garinii（例えば、OspA、OspC、DbpA、DbpB）、B. afz
elii（例えば、 OspA、OspC、DbpA、DbpB）、B. andersonii（例えば、OspA、Os
pC、DbpA、DbpB）、B. hermsii；エールリヒア属、例えばE. equiおよびヒト顆
粒球性エールリヒア症の作用物質；リケッチア属、例えば斑点熱リケッチアR. r
ickettsii；クラミジア属、例えばトラコーマクラミジアC. trachomatis（例え
ば、MOMP、ヘパリン結合タンパク質）、C. pneumoniae（例えば、MOMP、ヘパリ
ン結合タンパク質）、オウム病クラミジアC. psittaci；レプトプシラ属、例え
ばL. interrogans；トレポネーマ属、例えば梅毒トレポネーマT. pallidum（例
えば、稀外膜タンパク質）、T. denticola、T. hyodysenteriaeから得られ；あ
るいは寄生生物、例えばプラスモディウム属、例えば熱帯熱マラリア原虫P. fal
ciparum；トキソプラズマ属、例えばトキソプラズマT. gondii（例えば、SAG2、
SAG3、Tg34）；エントアメーバ属、例えば赤痢アメーバE. histolytica；バベシ
ア属、例えばB. microti；トリパノソーマ属、例えばクルーズトリパノソーマT.
cruzi；ジアルジア属、例えばランブル鞭毛虫G. lamblia；レシュマニア属、例
えばL. major；ニューモシスティス、例えばP. carinii；トリコモナス属、例え
ば膣トリコモナスT. vaginalis；住血吸虫属、例えばマンソン住血吸虫S. manso
niから得られ、あるいは酵母、例えばカンジダ属、例えばカンジダアルビカンス
C. albicans；クリプトコックス属、例えばクリプトコックスネオフォルマンスC
. neoformansから得られる。

【００２８】好ましい細菌ワクチンは、連鎖球菌属、例えば肺炎連鎖球菌S. pneumoniae（
例えば被膜多糖およびその共役体、PsaA、ＰｓｐＡ、ストレプトリジン、コリン
結合タンパク質）から得られる抗原およびタンパク質抗原ニューモリジンPneumo
lysin（Biochem. Biophys. Acta, 1989, 67, 1007; Rubins et al., Microbial
Pathogenesis, 25, 337-342）ならびにその突然変異体解毒化誘導体（WO90/0695
1; WO99/03884）を包含する。その他の好ましい細菌ワクチンは、ヘモフィルス
属、例えばＢ型インフルエンザ菌H. influenzae type B（例えば、ＰＲＰおよび
その共役体）、非分類可能型インフルエンザ菌、例えばOMP26、高分子量付着因
子P5、P6、タンパク質Ｄおよびリポタンパク質Ｄ、ならびにフィンブリンおよび
フィンブリン誘導ペプチド（米国特許第5,843,464号）、またはその多コピー変
異体または融合タンパク質を包含する。その他の好ましいワクチンは、Morexell
a Catarrhalis（例えば、その外膜小胞、およびOMP106（WO97/41731））由来の
、そしてナイセリア属のＢ型髄膜炎菌Neisseria mengitidis B（例えばその外膜
小胞、およびNspA（WO96/29412））由来の抗原を包含する。

【００２９】Ｂ型肝炎表面抗原の誘導体は当業界で周知であり、その例としては、特に、欧
州特許出願EP-A-414374; EP-A-0304578およびEP198-474に記載されたPreS1、Pre
S2 S抗原が挙げられる。好ましい一局面では、本発明のワクチン処方物は、特に
ＣＨＯ細胞虫に発現される場合には、HIV-1抗原、gp120を包含する。さらに別の
実施態様では、本発明のワクチン処方物は、前記のgD2tを包含する。

【００３０】本発明の好ましい実施態様では、特許請求したアジュバントを含有するワクチ
ンは、性器疣に関与すると考えられるヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）（HPV6また
はHPV11等）由来のの、そして頸部癌に関与するＨＰＶウイルス（HPV16、HPV18
等）由来の抗原を包含する。特に好ましい形態の性器疣予防または治療ワクチンは、Ｌ１粒子またはカプソ
マー、ならびにHPV 6およびHPV 11タンパク質Ｅ６、Ｅ７、Ｌ１およびＬ２から
選択される１つ又はそれ以上の抗原を含有する融合タンパク質を包含する。最も
好ましい形態の融合タンパク質は、WO96/26277に開示されたＬ２Ｅ７、ならびに
英国特許第9717953.5号（PCT/EP98/05285）に開示されたタンパク質Ｄ（1/3）−
Ｅ７である。

【００３１】好ましいＨＰＶ頸部感染または癌予防または治療ワクチン組成物は、HPV 16ま
たは18抗原を包含し得る。例えば、Ｌ１またはＬ２抗原モノマー、あるいはＬ１
またはＬ２抗原はウイルス様粒子（ＶＬＰ）として一緒に存在するか、あるいは
Ｌ１単独タンパク質がＶＬＰまたはカプソマー構造虫に単独で存在する。このよ
うな抗原ウイルス様粒子およびカプソマーは、それ自体が知られている（例えば
、WO94/00152、WO94/20137およびWO93/02184参照）。

【００３２】付加的初期タンパク質は、単独で、または好ましくはＥ７、Ｅ２またはＥ５の
ような融合タンパク質として含まれ得る。この特に好ましい実施態様は、Ｌ１Ｅ
７融合タンパク質を包含するＶＬＰを含む（WO96/11272）。特に好ましいHPV 16抗原は、タンパク質Ｄ担体と融合した初期タンパク質Ｅ６
またはＥ７を包含して、HPV 16からのタンパク質Ｄ−Ｅ６またはＥ７融合体、ま
たはそれらの組合せ、あるいはＥ６またはＥ７のＬ２との組合せを形成する（WO
96/26277）。

【００３３】あるいは、HPV 16または18初期タンパク質Ｅ６およびＥ７は、単一分子で存在
し、好ましくはタンパク質Ｄ−Ｅ６／Ｅ７融合体であり得る。このようなワクチ
ンは、任意に、タンパク質Ｄ−Ｅ６またはタンパク質Ｄ−Ｅ７融合タンパク質ま
たはタンパク質ＤＥ６／Ｅ７融合タンパク質の形態で、HPV 18からのＥ６およ
びＥ７のいずれかまたは両方を含有し得る。

【００３４】本発明のワクチンは、その他のＨＰＶ株からの、好ましくはHPV6、11、31、33
または45株からの抗原を、付加的に包含し得る。本発明のワクチンはさらに、マラリアを引き起こす寄生生物由来の抗原を包含
する。例えば、Plasmodia falciparumからの好ましい抗原は、ＲＴＳおよびＴＲ
ＡＰである。ＲＴＳは、Ｂ型肝炎表面抗原のpreS2部分の４つのアミノ酸を介し
てＢ型肝炎ウイルスの表面（Ｓ）抗原に連結されたP. falciparumの環状スポロ
ゾイト（ＣＳ）タンパク質の実質的にすべてのＣ末端部分包含するハイブリッド
タンパク質である。その全構造は、英国特許出願第9124390.7号からの優先権を
主張するWO93/10152の番号で公開された国際特許出願PCT/EP92/02591に開示され
ている。酵母菌中で発現される場合、ＲＴＳはリポタンパク質粒子として産生さ
れ、ＨＢＶからのＳ抗原と同時発現される場合には、それはRTS,Sとして知られ
ている混合粒子を産生する。TRAP抗原は、WO90/01496下で公開された国際特許出
願PCT/GB89/00895に記載されている。本発明の好ましい実施態様は、抗原調製物
がRTS、SおよびTRAP抗原の組合せを包含するマラリアワクチンである。多段階マ
ラリアワクチンの構成成分である候補と思われるその他のマラリア原虫抗原は、
P. faciparum MSP1、AMA1、MSP3、EBA、GLURP、RAP1、RAP2、セクエストリン、P
fEMP1、Pf332、LSA1、LSA3、STARP、SALSA、PfEXP1、Pfs25、Pfs28、PFS27/25、
Pfs16、Pfs48/45、Pfs230およびプラスモジウム属におけるそれらの類似体であ
る。

【００３５】処方物は抗腫瘍抗原も含有し、免疫療法的治療癌に有用である。例えば、アジ
ュバント処方物は、腫瘍拒絶抗原、例えば前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、肺癌、
膵臓癌、腎臓癌または黒色腫に対するものとともに効用を見出す。例示的抗原と
しては、黒色腫の治療のためのMAGE1およびMAGE3、またはその他のMAGE抗原、PR
AME、BAGEまたはGAGE（Robbins and Kawakami, 1996, Current Opinions in Imm
unology 8, pps628-636; Van den Eynde et al., International Journal of Cl
inical & Laboratory Research（submitted 1997）; Correale et al.（1997）,
Journal of the National Cancer Institute 89, p293）が挙げられる。実際、
これらの抗原は、広範囲の腫瘍型、例えば黒色腫、肺癌、肉腫および膀胱癌で発
現される。その他の腫瘍特異的抗原は、本発明のアジュバントとともに用いるの
に適しており、その例としては、前立腺特異的抗原（PSA）またはHer-2/neu、KS
A（GA733）、MUC-1および癌胎児性抗原（CEA）が挙げられるが、これらに限定さ
れない。したがって、本発明の一局面では、本発明のアジュバント組成物および
腫瘍拒絶抗原を包含するワクチンが提供される。

【００３６】さらに、前記の抗原は、自己ペプチドホルモン、例えば多数の癌の治療におけ
る、または免疫去勢における、短い10アミノ酸長ペプチドである全長ゴナドトロ
ピンホルモン放出ホルモン（GnRH、WO95/20600）であり得る。本発明の組成物は、ボレリア属由来の抗原を含有するワクチンを処方するため
に用いられる、と先見される。例えば、抗原は核酸、病原体由来抗原または抗原
調製物、組換え的生成タンパク質またはペプチド、ならびにキメラ融合タンパク
質を含み得る。特に、抗原はOspAである。OspAは、（リポ−OspA）と呼ばれる宿
主細胞（大腸菌）の脂質化形態による完全成熟タンパク質または非脂質化誘導体
であり得る。このような非脂質化誘導体としては、インフルエンザウイルスの非
構造性タンパク質（NS1）の最初の81Ｎ末端アミノ酸を有する非脂質化NS1−OspA
融合タンパク質、および完全OspAタンパク質が挙げられ、そしてもう一つのMDP
−OspAは、３つの付加的Ｎ末端アミノ酸を保有する非脂質化形態のOspAである。

【００３７】本発明のワクチンは、アレルギーの予防または治療に用いられ得る。このよう
なワクチンは、アレルゲン特異的（例えば、Der p1）およびアレルゲン非特異的
抗原（例えばヒトＩｇＥ由来ペプチド。例としてはstanworthデカペプチドが挙
げられるが、これに限定されない（EP0477231B））を包含する。各ワクチン用量中のタンパク質の量は、典型的ワクチン中で有意の副作用を伴
わずに免疫防御応答を誘導する量として選択される。このような量は、特定の免
疫原が用いられ、それが以下に存在するかによって変わる。一般に、各用量は１
〜1000μgのタンパク質、好ましくは１〜500μg、好ましくは１〜100μg、最も
好ましくは１〜50μgのタンパク質を包含する、と予測される。特定のワクチン
に関する最適量は、被験者における適切な免疫応答の観察を含めた標準試験によ
り確認され得る。初回予防接種後、被験者は適切な間隔で、１回または数回の追
加免疫感作を受ける。

【００３８】本発明の組成物は、広範囲の供給源由来の抗原を含有するワクチンを処方する
ために用いられる、と先見される。例えば、抗原は、ヒト、細菌またはウイルス
核酸、病原体由来抗原または抗原調製物、腫瘍由来抗原または抗原調製物、宿主
由来抗原、例えばGnRHおよびＩｇＥペプチド、組換え的生成タンパク質またはペ
プチド、およびキメラ融合タンパク質を含み得る。

【００３９】本発明のワクチンは、経口経路によっても投与され得る。このような場合、製
薬上許容可能な賦形剤は、アルカリ性緩衝剤、あるいは腸被膜またはウイルスも
含み得る。本発明のワクチンは、膣経路でも投与され得る。このような場合、製
薬上許容可能な賦形剤は、乳化剤、ポリマー、例えばCARBOPOL（商標）、ならび
に膣クリームおよび座薬のその他の既知の安定剤も含み得る。本発明のワクチン
は、直腸経路でも投与され得る。このような場合、賦形剤は、直腸座薬を生成す
るために当業界で既知の蝋およびポリマーも含み得る。

【００４０】本発明の処方物は、予防的および治療的目的の両方に用い得る。したがって、
本発明は、感染性疾患または癌またはアレルギー、あるいは自己免疫疾患に罹り
やすいまたは罹患している哺乳類の治療方法を提供する。本発明のさらに別の局
面では、薬剤中に用いるための、本明細書中に記載のワクチンが提供される。ワ
クチン製剤は、一般に、New Trend and Developments in Vaccines, edited by
Voller et al., University Park Press, Baltimore, Maryland, U.S.A.1978に
記載されている。

【００４１】本発明は、式（Ｉ）の界面活性剤および製薬上許容可能な賦形剤を包含するア
ジュバント処方物の製造における一般式（Ｉ）のポリオキシエチレンエーテルま
たはエステルの使用に関する。本発明は、式（Ｉ）の界面活性剤および製薬上許
容可能な賦形剤および抗原を包含するワクチン処方物の製造における一般式（Ｉ
）のポリオキシエチレンエーテルまたはエステルの使用に関する。本発明は、処
方物がコレステロールを含有しない前記のようなアジュバント処方物またはワク
チンの製造における一般式（Ｉ）のポリオキシエチレンエーテルまたはエステル
の使用に関する。本発明はさらに、処方物が非小胞性溶液または懸濁液である前
記のようなアジュバント処方物またはワクチンの製造における一般式（Ｉ）のポ
リオキシエチレンエーテルまたはエステルの使用に関する。

【００４２】適切な製薬上許容可能な賦形剤の例としては、水、リン酸塩緩衝化生理食塩水
、等張緩衝溶液が挙げられる。ポリオキシエチレンラウリルエーテルの代替的用語または名称は、ＣＡＳ登録
に開示されている。ポリオキシエチレンラウリルエーテルのＣＡＳ登録番号は、
CAS REGISTRY NUMBER:9002-92-0である。

【００４３】以下の実施例により本発明をさらに説明するが、本発明はこれらに限定されな
い。実施例１．抗原特異的抗体（Ａｂ）応答を測定するために用いられる技法 OspA特異的血清ＩｇＧの測定のためのＥＬＩＳＡ： Maxisorp Nunc免疫プレートを、ＰＢＳ中に稀釈した50μl／ウエルの１μg/ml
抗原OspA（プレートのＢ〜Ｈ列）を用いて、またはＰＢＳ中の50μl／ウエルの
５μg/ml精製ヤギ抗マウスＩｇ（Boerhinger）（Ａ列）を用いて、４℃で一夜、
被覆する。プレートの空いた部位を飽和緩衝液：１％ＢＳＡ、0.1％ポリオキシ
エチレンソルビタンモノラウレート（トゥイーン20）および４％標準ウシ血清（
ＮＢＳ）を含有するＰＢＳで遮断した（37℃で1時間）。次に、標準曲線（Sigma
からのマウスモノクローナル抗体ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａおよびＩｇＧ２ｂ。200
ng/mlで開始し、Ａ列に入れる）として付加された、飽和緩衝液（50μl／ウエル
）で稀釈したＩｇＧアイソタイプ混合物の連続２倍稀釈物（飽和緩衝液中。50μ
l／ウエル）および血清標本（1/100稀釈で開始し、Ｂ〜Ｈ列に入れる）を37℃で
1時間30分インキュベートする。次にプレートを洗浄緩衝液（ＰＢＳ、0.1％ポリ
オキシエチレンソルビタンモノラウレート（トゥイーン20））で洗浄（ｘ３）す
る。次に、飽和緩衝液中で1/5000稀釈したビオチニル化ヤギ抗マウスＩｇＧ（Am
ersham）を37℃で、１時間30分インキュベートする（50μl／ウエル）。３回洗
浄し、その後ストレプタビジン−ホースラディッシュペルオキシダーゼ接合体（
Amersham）を付加した後、プレートを５回洗浄し、50μl／ウエルの曝露緩衝液
（50 mMｐＨ4.5クエン酸塩緩衝液中ＯＰＤＡ0.4 mg/ml（Sigma）およびＨ₂Ｏ₂0.
03％）とともに室温で20分間インキュベートする。50μl／ウエルのＨ₂ＳＯ₄２
Ｎを付加することにより、曝露を停止する。Biorad 3550イムノリーダーを用い
て、492および630 nmで光学密度を読み取る。SoftMaxProソフトウェアを用いて
、４パラメーター算法により、抗体力価を計算する。

【００４４】同様の技法を用いて、OspAコーティング抗原をＴＴ、ＦＨＡ、またはインフル
エンザ抗原に取り換えて、抗−ＴＴ、抗−ＦＨＡおよび抗−インフルエンザＩｇ
Ｇ力価を測定した。ＴＴは、市販供給源（Behring）により供給した。EP0427462
Bに記載された方法により、ＦＨＡを生成し、精製した。β−プロピオラクトン
（ＢＰＬ）で不活性化した全インフルエンザウイルスは、ＳＳＤＧｍＢＨ（Dr
esden Germany）により供給した。

【００４５】マウスにおける肺炎連鎖球菌S. pneumoniae多糖（PS14およびPS19）−特異的
血清ＩｇＧの測定のためのＥＬＩＳＡ Maxisorp Nunc免疫プレートを、ＰＢＳ中に稀釈した100μl／ウエルの5μg/ml
（PS14）または20 μg/ml（PS19）抗原を用いて、37℃で２時間、被覆する。次
に、プレートを洗浄緩衝液（ＰＢＳ、0.1％ポリオキシエチレンソルビタンモノ
ラウレート（トゥイーン20））で洗浄（ｘ３）する。次に、標準曲線（PS14に関
しては785 ng/mlで、PS19に関しては2040 ng/mlで開始し、Ａ列に入れる）とし
て付加されるPS14またはPS19−特異的モノクローナルＡｂ（ｍＡｂ）ＩｇＧ１の
連続２倍稀釈（ＰＢＳトゥイーン20中。100μl／ウエル）および血清標本（1/20
稀釈で開始し、Ｂ〜Ｈ列に入れる）を、攪拌しながら20℃で30分インキュベート
する。プレート上に付加し、稀釈する前に、非特異的反応物を排除するために
、ｍＡｂ標準および血清標本の両方を、共通多糖（ＣＰＳ）とともに37℃で1時
間、前インキュベートする。次にプレートを洗浄緩衝液（ＰＢＳ、トゥイーン20
）で洗浄（ｘ３）する。次に、ＰＢＳトゥイーン20中で1/5000稀釈したペルオキ
シダーゼ−接合化ヤギ抗マウスＩｇＧ（Jackson）を20℃で30分インキュベート
する（100μl／ウエル）。３回洗浄後、プレートを、100μl／ウエルの曝露緩衝
液（50 mMｐＨ4.5クエン酸塩緩衝液中ＯＰＤＡ0.4 mg/ml（Sigma）およびＨ₂Ｏ₂ 0.03％）とともに室温で15分間インキュベートする。50μl／ウエルのＨＣｌ1Ｎ
を付加することにより、曝露を停止する。Biorad 3550イムノリーダーを用いて
、492および630 nmで光学密度を読み取る。SoftMaxProソフトウェアを用いて、
４パラメーター算法により、抗体力価を計算する。

【００４６】サルにおけるOspA特異的血清ＩｇＡｂｓの測定のためのＥＬＩＳＡ： Maxisorp Nunc免疫プレートを、ＰＢＳ中に稀釈した50μl／ウエルの１μg/ml
OspAを用いて、4℃で一夜、被覆する。プレートの空いた部位を飽和緩衝液：1
％ＢＳＡ、0.1％ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート（トゥイーン20
）を含有するＰＢＳを用いて遮断する（37℃で1時間）。次に、標準曲線（60000
ＥＬＩＳＡ単位／mlの中点力価を有する血清。12 EU/mlで開始し、Ａ列に入れ
る）として付加された参照血清の連続２倍稀釈物（飽和緩衝液中。50μl／ウエ
ル）および血清標本（1/100稀釈で開始し、Ｂ〜Ｈ列に入れる）を37℃で1時間30
分インキュベートする。次にプレートを洗浄緩衝液（ＰＢＳ、0.1％ポリオキシ
エチレンソルビタンモノラウレート（トゥイーン20））で洗浄（ｘ３）する。次
に、飽和緩衝液中で1/3000稀釈したビオチニル化ヤギ抗ヒトＩｇ（Amersham）を
37℃で、1時間30分インキュベートする（50μl／ウエル）。３回洗浄し、その後
ストレプタビジン−ホースラディッシュペルオキシダーゼ接合体（Amersham）を
付加した後、プレートを５回洗浄し、50μl／ウエルの曝露緩衝液（50 mMｐＨ4.
5クエン酸塩緩衝液中ＯＰＤＡ0.4 mg/ml（Sigma）およびＨ₂Ｏ₂0.03％）ととも
に室温で20分間インキュベートする。50μl／ウエルのＨ₂ＳＯ₄２Ｎを付加する
ことにより、曝露を停止する。Biorad 3550イムノリーダーを用いて、492および
630 nmで光学密度を読み取る。SoftMaxProソフトウェアを用いて、４パラメータ
ー算法により、抗体力価を計算する。

【００４７】同様の技法を用いて、OspAコーティング抗原を全インフルエンザウイルス抗原
に取り換えて、β−プロピオラクトン（ＢＰＬ）で不活性化し、ＳＳＤＧｍＢ
Ｈ（Dresden Germany）により供給した抗−インフルエンザイムノグロブリン力
価を測定した。サルにおけるOspA特異的鼻ＩｇＡＡｂｓの測定のためのＥＬＩＳＡ： Maxisorp Nunc免疫プレートを、ＰＢＳ中に稀釈した50μl／ウエルの１μg/ml
抗原OspAを用いて（プレートのＢ〜Ｈ列）、またはＰＢＳ中に稀釈した50μl
／ウエルの5μg/ml 精製ヤギ抗ヒトＩｇＡ（Sigma）を用いて（Ａ列）、4℃で
一夜、被覆する。プレートの空いた部位を飽和緩衝液：1％ＢＳＡ、0.1％ポリオ
キシエチレンソルビタンモノラウレート（トゥイーン20）および4％標準ウシ血
清（ＮＢＳ）を含有するＰＢＳを用いて遮断する（37℃で1時間）。次に、標準
曲線（3000ＥＬＩＳＡ単位／mlの中点力価を有する分泌物。30 EU/mlで開始し
、Ａ列に入れる）として付加された参照分泌物の連続２倍稀釈物（飽和緩衝液中
。50μl／ウエル）および鼻腔用綿棒（1/5稀釈で開始し、Ｂ〜Ｈ列に入れる）を
22℃で2時間インキュベートする。次にプレートを洗浄緩衝液（ＰＢＳ、0.1％ポ
リオキシエチレンソルビタンモノラウレート（トゥイーン20））で洗浄（ｘ３）
する。次に、飽和緩衝液中0.2μg/mlのビオチニル化ヤギ抗ヒトＩｇＡ（ICN）を
37℃で、1時間30分インキュベートする（50μl／ウエル）。３回洗浄し、その後
ストレプタビジン−ホースラディッシュペルオキシダーゼ接合体（Amersham）を
付加した後、プレートを５回洗浄し、50μl／ウエルの曝露緩衝液（ＴＭＢ、Bio
rad）とともに室温で１0分間インキュベートする。50μl／ウエルのＨ₂ＳＯ₄0.4
Ｎを付加することにより、曝露を停止する。Biorad 3550イムノリーダーを用い
て、492および630 nmで光学密度を読み取る。SoftMaxProソフトウェアを用いて
、４パラメーター算法により、抗体力価を計算する。標本は、それらのＩｇＡ力
価が検定の打ち切りを越えた場合に陽性であると考えられる（0.3 EU/ml）。

【００４８】リポ−OspAに対する血清ＬＡ２様抗体力価の測定のための阻害検定それらのＬＡ２様特異性に関して、ワクチン中の抗体力価を調べた。ＬＡ２は
、細菌の表面の配座OspAエピトープを認識するネズミモノクローナル抗体であっ
て、ボレリア属のB. burgdorferiをin vitroで殺害し、ならびに実験室増殖スピ
ロヘータを用いた試験に対してマウスを防御し得ることが示されている（Schaib
le UE et al. 1990, Proc. Natl. Acad. Sci USA 87, 3768-3772）。さらに、Ｌ
Ａ−２ｍａｂは、殺細菌性抗体と相関することが示されており、ヒト血清に関
する研究は、総抗−OspAＩｇＧ力価とＬＡ−２力価との間の良好な相関も示した
（ＥＬＩＳＡにより測定）。

【００４９】 Maxisorp Nunc免疫プレートを、ＰＢＳ中に稀釈した50μl／ウエルの0.5μg/m
l リポOspAを用いて、4℃で一夜、被覆する。空いた部位を飽和緩衝液（100μl
／ウエルの飽和緩衝液：ＰＢＳ／ＢＳＡ1％／トゥイーン20、0.1％／ＮＢＳ 4％
）を用いて、37℃で1時間、遮断した。標準曲線を作成するために、4μg/mlで開
始するＬＡ２モノクローナルＡｂ（ｍＡｂ）の連続２倍稀釈物を、飽和緩衝液中
に稀釈した（50μl／ウエル）。ワクチン（1/10稀釈で開始）からの血清標本の
稀釈物も付加し、プレートを37℃で2時間インキュベートした。インキュベーシ
ョン後に、プレートをＰＢＳ／トゥイーン20（0.1％）で３回洗浄した。飽和緩
衝液中で稀釈したＬＡ２ｍＡｂ−ペルオキシダーゼ接合体（1/10,000）を各ウエ
ルに付加（50μl／ウエル）し、37℃で1時間インキュベートした。５回洗浄後、
プレートを50μl／ウエルの曝露緩衝液（50 mMｐＨ4.5クエン酸塩緩衝液中ＯＰ
ＤＡ0.4 mg/mlおよびＨ₂Ｏ₂0.03％）とともに室温で20分間インキュベートする
。Ｈ₂ＳＯ₄２Ｎを付加することにより、反応および発色を停止する。Biorad 355
0イムノリーダーを用いて、492および630 nmで光学密度を読み取る。SoftMaxPro
ソフトウェアを用いて、４パラメーター算法により、抗体力価を計算する。標準
曲線と比較することにより、ＬＡ２様抗体力価を確定した。

【００５０】実施例２．OspA抗原によるマウスの鼻腔内追加免疫 50μgミョウバン上の1μgの抗原リポ−OspAを用いて、8週齢雌Balb/cマウス（
８匹／群）を筋肉内免疫感作した。３ヶ月後、Ａ：5μgのリポ−OspA；Ｂ：36％
トゥイーン20、10％Imwitor 742中の5μgのリポ−OspA ；Ｃ：36％トゥイーン20
中の5μgのリポ−OspA；Ｄ：18％ポリオキシエチレン−９ラウリルエーテル中の
5μgのリポ−OspAを含有する10μlの溶液（5μl／nostril。ピペットによる小滴
として送達）を用いて、マウスを鼻腔内追加免疫した。追加免疫の14日後に、Ｉ
ｇＧおよびＬＡ２抗−OspAＥＬＩＳＡにより、リポ−OspAに対するＡｂに関して
血清を検定した（実施例１参照）。結果（図１参照）は、鼻腔内投与したリポ−
OspAが全身性リポ−OspA特異的ＩｇＧ力価を高め得ることを示す。この追加免疫
は、トゥイーン20＋Imwitor742またはトゥイーン20単独の存在により、限界的に
のみ増大される。一方、ポリオキシエチレン−９ラウリルエーテルは、非常に有
意の追加免疫を誘導する。同様のパターンは、ＬＡ２応答に関して観察される（
図２参照）。

【００５１】実施例３．OspA抗原によるマウスの鼻腔内追加免疫マウス群を、実施例２と同様に感作した。次に、5μgのリポ−OspA単独（Ａお
よびＣ群）を用いて、または；Ｂ：1％ナトリウムタウロコール酸；Ｄ：1％ドデ
シル−マルトシド；Ｅ：36％トゥイーン20またはＦ：18％ポリオキシエチレン−
９ラウリルエーテルの存在下で、マウスを追加免疫した（実施例２と同様の方法
を用いた）。ＡおよびＢ群に関する実験は、Ｃ、Ｄ、ＥおよびＦ群とは異なる時
機に実施したため、それらは下記の図では分けられている（図３参照）。1％ナ
トリウムタウロコール酸塩が、抗原単独を用いて得られたものより上に追加免疫
を有意に補助しない、ということは明らかである。1％のドデシル−マルトシド
または36％のトゥイーン20はわずかな補助作用を提供したが、しかしポリオキシ
エチレン−９ラウリルエーテルだけは、ＩｇＧ応答の非常に有意の増強を提供す
る。同様の作用は、ＬＡ２応答に関して観察される（図４参照）。

【００５２】実施例４．マウスの鼻腔内追加免疫−用量範囲試験前記の実施例で観察された鼻腔アジュバント活性を提供するために必要なポリ
オキシエチレン−９ラウリルエーテルの濃度を査定するために、用量範囲検定を
実施し、そして、この作用がその他のポリオキシエチレンエーテルを用いて達成
され得ることを示すために、我々はポリオキシエチレン−２３ラウリルエーテル
の使用を調べた。実施例１と同様に感作したマウスを、Ａ：ＰＢＳ；Ｂ：1％ポ
リオキシエチレン−９ラウリルエーテル；Ｃ：2％ポリオキシエチレン−９ラウ
リルエーテル；Ｄ：5％ポリオキシエチレン−９ラウリルエーテル；Ｅ：1％ポリ
オキシエチレン−23ラウリルエーテルまたはＦ：10％ポリオキシエチレン−23ラ
ウリルエーテルのいずれか中の5μgのリポ−OspAを含有する10μlを用いて、鼻
腔内追加免疫した。追加免疫の14日後に、血清を実施例２と同様に分析した。

【００５３】下記の図５および６は、1％という低いポリオキシエチレン−９ラウリルエー
テルの濃度は、免疫応答の非常に有意の増強を示す、ということを示す。ポリオ
キシエチレン−２３−ラウリルエーテルも、鼻腔内追加免疫応答を有意に増強す
る。実施例５．混合ワクチン−鼻腔内追加免疫鼻腔内追加免疫後の全身性免疫応答の増強へのポリオキシエチレンエーテルの
適用可能性を査定するために、市販のＤＴＰａワクチン（ジフテリア、破傷風、
無菌体百日咳ワクチン：INFANRIX（商標） SmithKline Beecham, Belgium）を用
いて、筋注により、雌balb/cマウスを感作した。ヒト用量の20％に相当する2 x
50μl注射を用いて、筋注で１回、マウスを感作した。３ヶ月後、Ａ：ＰＢＳ；
Ｂ：1％ポリオキシエチレン−９ラウリルエーテル中の破傷風トキソイド（ＴＴ
：5μg）または糸状ヘマグルチニン（ＦＨＡ：5μg）を用いて、またはＣ：ＤＴ
Ｐａワクチンの筋注（2 x 5μl）により、マウスを鼻腔内追加免疫した（実施例
と同様）。追加免疫の14日後に、それらのＴＴおよびＦＨＡ特異的ＩｇＧに関し
て、血清を分析した。力価は図７および８に示す。

【００５４】ＴＴに関しては、タンパク質はそれ自体では有意の追加免疫を誘導しないが、
しかしポリオキシエチレン−９ラウリルエーテルは免疫応答を有意に高め得る、
ということは明らかである。意外にも、このアジュバントの存在下で鼻腔内追加
免疫により得られる応答は、免疫応答の筋肉内追加免疫後に得られるものより大
きい。ＦＨＡの投与はそれ自体で免疫応答を誘導し、これは、アジュバントとし
てのポリオキシエチレン−９ラウリルエーテルの付加によりさらに有意に増強さ
れる。

【００５５】実施例６．ＡＧＭの鼻腔内追加免疫多くのアジュバントは、小型齧歯類においては作用するが、しかし大型哺乳類
で検査した場合、作用を示さないことが示されている。これが大型種で実施され
た場合に、鼻腔内追加免疫に及ぼすアジュバント作用をポリオキシエチレンエー
テルが発揮し得るか否かを査定するために、筋注によりミョウバン（500μg）上
のリポ−OspA（10μg）を用いて、アフリカミドリザル（ＡＧＭ：４匹／群）を
筋肉内感作した。10ヶ月後、Ａ：ＰＢＳまたはＢ：１％ポリオキシエチレン−９
ラウリルエーテルのいずれか中の60μgリポ−OspAを含有する200μl（Pfeiffer
GmBH, Germanyからの二用量噴霧装置を用いて麻酔下で投与されるnostril当たり
100μl）を用いて、動物を鼻腔内追加免疫した。14日後、抗−OspAイムノグロブ
リンおよびＬＡ２力価に関して血清を検査した。図９および１０は、各群に関す
る幾何学平均力価を示す。ミョウバン上のリポ−OspAの筋注により感作および追
加免疫の両方を施されていた10匹のＡＧＭから成るＣ群を、抗−OspAイムノグロ
ブリン応答に関して検定した（ＬＡ２力価のみに関して示された幾何学平均力価
。図１０）。

【００５６】リポ−OspA単独は、サルに鼻腔内投与した場合には全身性応答を高め得るが、
しかしこの追加免疫は、１％ポリオキシエチレン９ラウリルエーテルの付加によ
り非常に有意に増強される。意外にも、ポリオキシエチレン９ラウリルエーテル
の存在下で鼻腔内追加免疫後に得られる力価も、筋注後に得られるもの（Ｃ群）
より大きい。

【００５７】実施例７．ＡＧＭの鼻腔内感作および追加免疫前記の実施例において、ポリオキシエチレンエーテルが全身性応答の鼻腔内追
加免疫を補佐し得る、ということを我々は実証した。本実施例では、実験未使用
動物が鼻腔経路により感作され、追加免疫されて全身性免疫応答を誘導するか否
かを我々は調べる。さらに、大型動物へのこれらのアジュバントの適用可能性を
調べるために、アフリカミドリザル（ＡＧＭ）においてこの実験を実施した。

【００５８】Ａ：ＰＢＳ；Ｂ：1％ポリオキシエチレン−９ラウリルエーテル200μl（Pfeif
fer GmBH, Germanyからの二用量噴霧装置を用いて送達されるnostril当たり100
μl）中に送達される60μgのリポ−OspAを用いて、アフリカミドリザル（３匹／
群）を感作し、鼻腔内追加免疫した。追加免疫の14日後、それらのOsp−A特異的
イムノグロブリンに関して血清を検定した。図１１は、リポ−OspAが補佐されな
い場合、全身性免疫応答は鼻腔内感作および追加免疫後に検出され得ないことを
示す。ポリオキシエチレン−９ラウリルエーテルがアジュバントとして用いられ
た場合、この予防接種スケジュールは有意の抗−OspA力価を誘導した。

【００５９】実施例８．霊長類におけるリポOspAに対する先進性および鼻腔体液性免疫応答
の誘導に及ぼすＣｐＧの鼻腔内アジュバント作用このモデルは、霊長類感作および追加免疫モデルにおいて、ポリオキシエチレ
ン−９ラウリルエーテル（ＰＯＥ−９ＬＥ）の感作および追加免疫作用を、付加
的免疫刺激剤を用いた場合と用いない場合とで検査するよう意図された。この試
験に用いた免疫刺激剤は、実施例９と同様のＣｐＧ1001であった。

【００６０】実験手法０（pI）および14日目（pII）に、アフリカミドリザルを感作し、鼻腔内免疫追
加した。Pfeiffer社からの二用量噴霧送達系（各nostril中100μl。麻酔下）を
用いて、ワクチンを投与した。試験した処方物を以下に示す：

【００６１】

【表１】

【００６２】リポOspAに対するＩｇＡｂ力価を、１４日目（pII後）に収集した血清中で測
定した。同時に収集した鼻腔用綿棒における高感受性ＥＬＩＳＡを用いて、抗原
特異的鼻腔ＩｇＡを測定し、動物は、それらのＩｇＡ力価がバックグラウンドレ
ベルより有意に上の予定レベルを上回ると、陽性であるとみなされた。結果血清OspA特異的イムノグロブリン図１２は、１４日目（pII後）に観察された血清抗−リポ−OspAイムノグロブ
リン応答のレベルを示す。感作および追加免疫処方物として単独で投与したリポ
−OspAは、いかなる検出可能な血清イムノグロブリンも誘導しなかった。この応
答は、ＣｐＧの存在下で改善されなかった。0.25％および0.5％のＰＯＥ−９Ｌ
Ｅの用量は、ＣｐＧ単独による予防接種後に観察されたものより大きい免疫応答
を引き出したが、しかし0.5％用量はこれに関してははるかに有効である。しか
しながら、ＣｐＧと併用した場合、0.25％用量は0.5％用量で得られるのと同様
の大きさのＡｂ応答を誘導し、これはＣｐＧとＰＯＥ構成成分の相乗作用を示す
。

【００６３】鼻腔OspA特異的ＩｇＡ血清Ｉｇ応答に関して観察されたように、リポOspAを単独でまたはＣｐＧと組
合せて含有するワクチンは、検出可能な鼻腔ＩｇＡＡｂを引き出すことができ
ない（全鼻腔応答の要約に関しては、図１３参照）。リポOspAを0.25％ポリオキ
シエチレンラウリルエーテルと組合せて投与された動物の25％だけが「鼻腔Ｉｇ
Ａ」陽性であることが判明した（これに対して、0.5％ＰＯＥ−９ＬＥでは50％
）。この0.25％ＰＯＥ処方物にＣｐＧを付加すると、100％の動物がＩｇＡ応答
を発現する。したがって、ＣｐＧとポリオキシエチレンラウリルエーテルとの間
の相乗作用は、粘膜性抗体の誘導に関しても得られる。

【００６４】したがって、ポリオキシエチレンラウリルエーテルとＣｐＧとの間の相乗作用
は、抗体特異的血清イムノグロブリンおよび鼻腔ＩｇＡの誘導に関してサルにお
いて得られる。実施例９．リポOspA抗原に対する全身性体液性免疫応答の追加免疫に及ぼすＣ
ｐＧの鼻腔内アジュバント作用以下の実施例は、ネズミ追加免疫モデルにおけるポリオキシエチレンエーテル
（ＰＯＥ−９ＬＥ）アジュバント系への他の免疫刺激剤の付加の作用を検査する
よう意図された。ＣｐＧは、PCT WO96/02555に記載された既知の免疫調節オリゴ
ヌクレオチドである。これらのワクチン処方物により追加免疫された免疫応答は
、慣用的筋注追加免疫予防接種により誘導されるものと少なくとも同じ高さであ
った。処方物をさらに、大腸菌からの耐熱性腸毒素（ｍＬＴ）である周知の鼻腔
内アジュバントと比較した。

【００６５】この実験に用いたＣｐＧ配列は、ＣｐＧ1001（TCC ATG AGC TTC CTG ACG TT）
、ＣｐＧ1002（TCT CCC AGC GTG CGC CAT）および対照非免疫刺激配列ＣｐＧ100
5（TCC ATG AGC TTC CTG AGC TT）であった。実験手法 50μgの水酸化アルミニウム上に吸着させた1μgのリポOspAを含有する100μl
のワクチンの筋肉内投与により、０日目にBalb/cマウスを感作した。107日目に
、麻酔下でマイクロピペットを用いた鼻腔滴下投与により、10μl（各nostrilで
5μl）で鼻腔内追加免疫を投与した。６匹マウス群に、以下のワクチン処方物を
用いて、鼻腔内（i.n.）にまたは筋肉内（i.m.）に追加免疫した：

【００６６】

【表２】

【００６７】追加免疫当日、追加免疫後14日目（pII）に、放血を実施した。OspAおよびＬ
Ａ２に対する特異的血清ＩｇＧ力価を、ここの血清に関するＥＬＩＳＡにより確
定した。結果図１４（抗原特異的ＥＬＩＳＡにより測定した場合のOspA特異的血清ＩｇＧを
示す）および図１５（血清中の殺細菌性ＬＡ２力価を示す）に示したように、血
清OspA特異的Ａｂ応答の改善は、ＣｐＧ単独では得られなかった。ポリオキシエ
チレンラウリルエーテルを含有するOspAの処方物は、その結果得られたＩｇＧお
よびＬＡ２力価を増強した。最良の応答は、リポ−OspAがポリオキシエチレンラ
ウリルエーテルとＣｐＧの両方とともに処方された場合に得られた。

【００６８】実施例１０．用量試験実施例４に記載したように、1％という低さのポリオキシエチレン−９ラウリ
ルエーテルの濃度は、免疫応答の非常に有意の増強を示す。前記の実施例で観察
された鼻腔アジュバント活性を提供するのに必要なポリオキシエチレン−９ラウ
リルエーテルの濃度を査定するために、低用量での用量範囲検定を実施した。

【００６９】実施例２と同様に感作したBalb/cマウスを、Ａ：ＰＢＳ；Ｂ：1％ポリオキシ
エチレン−９ラウリルエーテル；Ｃ：0.5％ポリオキシエチレン−９ラウリルエ
ーテル；Ｄ：0.25％ポリオキシエチレン−９ラウリルエーテル中に5μgのリポ−
OspAを含有する10μlを用いて、またはＥ：50μgのミョウバン上に吸着させた1
μgのリポOspAの筋注により、追加免疫した。追加免疫から１４日後に、上記血
清を実施例１におけるように分析した。

【００７０】結果下記の図１６および１７は、0.25％という低さのポリオキシエチレン−９ラウ
リルエーテルの濃度が、免疫応答の非常に有意の増強を示す、ということを示す
。このような低用量のアジュバントを用いた場合でも、達成されるＡｂ応答は、
非経口ワクチンにより引き出されるものと同様である。

【００７１】実施例１１．マウスにおける抗インフルエンザ予防接種鼻腔内追加免疫後の全身性抗インフルエンザ免疫応答の増強に対するポリオキ
シエチレンエーテルの適用可能性を査定するために、古典的単価分割インフルエ
ンザワクチンを用いて、雌Balb/cマウスを筋肉内追加免疫した。A/Singapore/6/
86分割単一バルクの1.5μg当量ヘマグルチニンＡ（ＨＡ）を含有する100μl注射
液を用いて、０および14日目に、筋肉内で２回、マウスを感作した。３ヶ月後、
Ａ：ＰＢＳ；Ｂ：１％ポリオキシエチレン−９ラウリルエーテル中の不活性化全
A/Singapore/6/86ウイルスの1.5μg当量ＨＡを用いて、またはＣ：分割A/Singap
ore/6/86ワクチン（1.5μg当量ＨＡ）の筋注により、マウスを鼻腔内追加免疫し
た（実施例２と同様に）。追加免疫後14日目に、それらのA/Singapore/6/86ウイ
ルス特異的ＩｇＧに関して、血清を分析した。

【００７２】結果力価を図１８に示す。純抗原はそれ自体、有意の追加免疫を誘導しないが、し
かしポリオキシエチレン−９ラウリルエーテルは、免疫応答を有意に高めること
ができる、ということは明らかである。このアジュバントの存在下で到達される
Ａｂ力価は、非経口ワクチンにより引き出される値より有意に低くはない。

【００７３】実施例１２．サルにおける抗インフルエンザ予防接種実施例１１では、ポリオキシエチレン−９ラウリルエーテルがマウスにおける
インフルエンザ抗原の免疫原性を増強する、ということを我々は実証した。この
界面活性剤が大型種において同様のアジュバント作用を発揮し得るか否かを査定
するために、200μlのＡ：ＰＢＳ；Ｂ：0.5％ポリオキシエチレン−９ラウリル
エーテル中の不活性化全A/Beijing/262/95ウイルスの50μg当量ＨＡを用いて、
アフリカミドリザル（ＡＧＭ：２匹／群／血液採取日）を感作し、鼻腔内追加免
疫した（実施例６と同様に）。追加免疫後2、7および14日目に、それらのA/Beij
ing/262/95ウイルス特異的ＩｇＡｂに関して血清を検定した。図１９は、ポリオ
キシエチレン−９ラウリルエーテルをアジュバントとして用いる場合には、イン
フルエンザ抗原に対する免疫応答が改善される、ということを明らかに示してい
る。

【００７４】実施例１３．多糖抗原を用いた予防接種試験前記の実施例は、タンパク質型抗原に対して引き出される免疫応答を補佐する
ポリオキシエチレン−９ラウリルエーテルの能力を実証する。本実施例では、こ
のアジュバントが、非傾向的に感作されたマウスにおける鼻腔送達性多糖抗原の
追加免疫作用を増強し得るか否かを、を我々は調べる。タンパク質Ｄ担体に接合
された肺炎連鎖球菌PS14およびPS19多糖（各々1μg）を含有する100μl注射液を
用いて、１回、皮下に感作した。２ヶ月後、Ａ：ＮａＣｌ 150 mM、ｐＨ6.1；
Ｂ：１％ポリオキシエチレン−９ラウリルエーテル中の１μgのPS14およびPS19
接合体を含有する40μlの溶液（０日目に10μl／nostril。30分後に、再び10μl
／nostril。ピペットによる小滴として送達）を用いて、マウスを鼻腔内追加免
疫した。追加免疫の14日後に、PS14およびPS19特異的ＩｇＧＡｂｓに関して血清
を検定した。

【００７５】結果図２０および２１に示したように、PS14またはPS19の投与はそれ自体、追加免
疫応答を誘導し、これはさらに、アジュバントとしてのポリオキシエチレン−９
ラウリルエーテルの付加により増強される。実施例１４．ポリオキシエチレン−８ステアリルエーテルポリオキシエチレン−９ラウリルエーテルのアジュバント作用が他のポリオキ
シエチレンエーテルを用いて達成され得ることを示すために、ポリオキシエチレ
ン−８ステアリルエーテルの使用を、我々は調べた。

【００７６】実施例２と同様に感作したBalb/cマウスを、Ａ：ＰＢＳ；Ｂ：1％ポリオキシ
エチレン−９ラウリルエーテル；Ｃ：1％ポリオキシエチレン−８ステアリルエ
ーテル中に5μgのリポ−OspAを含有する10μlを用いて、またはＤ：50μgのミョ
ウバン上に吸着させた1μgのリポOspAの筋注により、鼻腔内追加免疫した。追加
免疫の14日後に、実施例１と同様に、血清を分析した。

【００７７】結果図２２および２３は、ポリオキシエチレン−８ステアリルエーテルが、抗原に
対する追加免疫応答の増強に関してポリオキシエチレン−９ラウリルエーテルと
同様に有効である、ということを示す。両ポリオキシエチレンエーテルを用いて
達成されるＡｂ力価は、非経口ワクチンにより引き出されるものと同様である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 39/112 Ａ６１Ｋ 39/112 39/118 39/118 39/12 39/12 39/155 39/155 39/21 39/21 39/245 39/245 39/29 39/29 47/34 47/34 Ａ６１Ｐ 31/12 Ａ６１Ｐ 31/12 35/00 35/00 37/04 37/04 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者エルマン，フィリップベルギー国，ベ−1330 リクサンサール，リュドゥランスティテュ 89，スミスクラインビーチャムバイオロジカルズソシエテアノニムＦターム(参考） 4C076 AA11 BB26 CC03 CC27 CC31 DD39A DD44A 4C085 AA03 BA16 BA18 BA24 BA51 BA69 BA78 BA79 BA83 BA88 BA89 BA92 BB11 BB33 CC04 DD86

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ポリオキシエチレンエーテルまたはポリオキシエチレンエス
テルを、製薬上許容可能な賦形剤および抗原または抗原組成物と組合せて包含す
るワクチン組成物であって、ポリオキシエチレンエーテルまたはエステルが小胞
の形態でないワクチン組成物。
【請求項２】一般式（Ｉ）：ＨＯ（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）_nＡ−Ｒ（式中、ｎは１〜50であり、Ａは一結合または−Ｃ（Ｏ）−であり、ＲはＣ_1-50 のアルキルまたはフェニルＣ_1-50アルキルである）の界面活性剤、製薬上許容可能な賦形剤および抗原または抗原組成物を包含する
ワクチン組成物であって、界面活性剤が小胞の形態でないワクチン組成物。
【請求項３】ｎが４〜24である式（Ｉ）の界面活性剤を包含する請求項２
に記載のワクチン組成物。
【請求項４】ｎが９である式（Ｉ）の界面活性剤を包含する請求項２記載
のワクチン組成物。
【請求項５】ＲがＣ_8-20のアルキルまたはフェニルＣ_8-20アルキルである
式（Ｉ）の界面活性剤を包含する請求項２〜４のいずれかに記載のワクチン組成
物。
【請求項６】ＲがＣ₁₂のアルキルまたはフェニルＣ₁₂アルキルである式（
Ｉ）の界面活性剤を包含する請求項２〜４のいずれかに記載のワクチン組成物。
【請求項７】Ａが一結合であり、それによりエーテルを形成する式（Ｉ）
の界面活性剤を包含する請求項２〜６のいずれかに記載のワクチン組成物。
【請求項８】Ａが−Ｃ（Ｏ）−であり、それによりエステルを形成する式
（Ｉ）の界面活性剤を包含する請求項２〜６のいずれかに記載のワクチン組成物
。
【請求項９】ポリオキシエチレン−９−ラウリルエーテル、ポリオキシエ
チレン−９−ラウリルエステル、ポリオキシエチレン−９−ステオリルエーテル
、ポリオキシエチレン−８−ステオリルエーテル、ポリオキシエチレン−４−ラ
ウリルエーテル、ポリオキシエチレン−３５−ラウリルエーテル、ポリオキシエ
チレン−２３−ラウリルエーテルから選択されるポリオキシエチレンエーテルま
たはエステルを包含する請求項１記載のワクチン組成物。
【請求項１０】ポリオキシエチレン−９−ラウリルエーテル、ポリオキシ
エチレン−９−ラウリルエステル、ポリオキシエチレン−９−ステオリルエーテ
ル、ポリオキシエチレン−８−ステオリルエーテル、ポリオキシエチレン−４−
ラウリルエーテル、ポリオキシエチレン−３５−ラウリルエーテル、ポリオキシ
エチレン−２３−ラウリルエーテルから選択される界面活性剤を包含する請求項
２記載のワクチン組成物。
【請求項１１】界面活性剤の濃度が 0.1〜10％の範囲である請求項１〜１
０のいずれかに記載のワクチン組成物。
【請求項１２】界面活性剤の濃度が0.25〜１％の範囲である請求項１〜１
０のいずれかに記載のワクチン組成物。
【請求項１３】抗原または抗原組成物が：ヒト免疫不全ウイルス、水痘−
帯状疱疹ウイルス、１型単純ヘルペスウイルス、２型単純ヘルペスウイルス、ヒ
トサイトメガロウイルス、デング熱ウイルス、Ａ、Ｂ、ＣまたはＥ型肝炎ウイル
ス、ＲＳウイルス、ヒト乳頭腫ウイルス、インフルエンザウイルス、Ｈｉｂ、髄
膜炎ウイルス、サルモネラ属、ナイセリア属、ボレリア属、クラミジア属、ボル
デテラ属、連鎖球菌属、マイコプラズマ属、マイコバクテリア属、ヘモフィルス
属、プラスモジウム属またはトキソプラズマ属、stanworthデカペプチド；ある
いは腫瘍関連抗原（ＴＭＡ）、ＭＡＧＥ、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥ、ＭＵＣ−１、Ｈ
ｅｒ−２neu、ＬｎＲＨ、ＣＥＡ、ＰＳＡ、ＫＳＡまたはＰＲＡＭＥから成る群
から得られる請求項１〜１２のいずれかに記載のワクチン組成物。
【請求項１４】その他のアジュバントをさらに包含する請求項１〜１３の
いずれかに記載のワクチン組成物。
【請求項１５】ＬＴ、ＣＴ、ＭＰＬ、ＣｐＧ、ＱＳ21から成る群から選択
されるその他のアジュバントをさらに包含する請求項１〜１３のいずれかに記載
のワクチン組成物。
【請求項１６】ＣｐＧアジュバントが：TCC ATG ACG TTC CTG ACG TTであ
る請求項１５記載のワクチン組成物。
【請求項１７】以下の群：キトサンまたはその他のポリ陽イオン性ポリマ
ー、ポリラクチドおよびポリラクチド−コ−グリコリド粒子、多糖または化学的
修飾化多糖から成る粒子あるいはグリセロールモノエステルから成る粒子のうち
のいずれかから成るビヒクルをさらに包含する請求項１〜１６のいずれかに記載
のワクチン組成物。
【請求項１８】アジュバント組成物の製造におけるポリオキシエチレンエ
ーテルまたはエステルの使用であって、ポリオキシエチレンエーテルまたはエス
テルが非小胞形態でアジュバント組成物中に存在する使用。
【請求項１９】アジュバント組成物の製造における一般式（Ｉ）の界面活
性剤の使用であって、一般式（Ｉ）の界面活性剤が非小胞形態でアジュバント組
成物中に存在する使用。
【請求項２０】ウイルス、細菌、寄生生物感染、アレルギーまたは癌の治
療のためのワクチンの製造のための請求項１〜１７のいずれかに定義されたよう
なワクチン組成物の使用。
【請求項２１】病原体感染、癌またはアレルギーに罹患しているかまたは
罹りやすい哺乳類の治療方法であって、安全且つ有効量の請求項１〜１７のいず
れかの組成物の投与を包含する方法。
【請求項２２】病原体感染、癌またはアレルギーに罹患しているかまたは
罹りやすい哺乳類の治療方法であって、安全且つ有効量の請求項１〜１７のいず
れかの組成物の粘膜投与を包含する方法。
【請求項２３】病原体感染、癌またはアレルギーに罹患しているかまたは
罹りやすい哺乳類の治療方法であって、安全且つ有効量の請求項１〜１７のいず
れかの組成物の鼻腔内投与を包含する方法。
【請求項２４】請求項１のワクチン組成物の製造方法であって、ポリオキ
シエチレンエーテルまたはエステル、製薬上許容可能な賦形剤、および抗原また
は抗原組成物を混ぜ合わせることを包含する方法。
【請求項２５】請求項２〜１７のいずれかに記載のワクチン組成物の製造
方法であって、一般式（Ｉ）の界面活性剤、製薬上許容可能な賦形剤、および抗
原または抗原組成物を混ぜ合わせることを包含する方法。
【請求項２６】小胞形態でないことを特徴とする、ポリオキシエチレンエ
ーテルまたはエステルおよび製薬上許容可能な賦形剤を包含するアジュバント組
成物。
【請求項２７】薬剤として用いるための本明細書中記載のワクチンまたは
アジュバント。