JP2001226380A - ３−デスメチルラパマイシンまたはその誘導体ならびにそれらの抗真菌剤および免疫抑制剤としての使用 - Google Patents
３−デスメチルラパマイシンまたはその誘導体ならびにそれらの抗真菌剤および免疫抑制剤としての使用Info
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Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【課題】 抗真菌剤または免疫抑制剤として有用な化合
物を提供する。 【解決手段】 ２９−デスメチルラパマイシンである下
記式（Ｉ）の化合物またはその誘導体あるいは該化合物
含有の医薬組成物。
物を提供する。 【解決手段】 ２９−デスメチルラパマイシンである下
記式（Ｉ）の化合物またはその誘導体あるいは該化合物
含有の医薬組成物。
Description
【０００１】（技術分野）本発明は新規な化合物および
その誘導体、それらの化合物を含有する医薬処方、医薬
療法における、特に細菌および真菌感染の治療における
それらの使用、さらに免疫抑制剤としてのそれらの使用
に関する。
その誘導体、それらの化合物を含有する医薬処方、医薬
療法における、特に細菌および真菌感染の治療における
それらの使用、さらに免疫抑制剤としてのそれらの使用
に関する。
【０００２】（背景技術）ラパマイシン（Rapamycin）
は公知化合物であり、最初、ストレプトミセス・ヒグロ
スコピカス（Streptomyces hygroscopicus）真菌からの
抽出物として単離され、抗真菌活性を有すると報告され
た（英国特許第１４３６４４７号）。その後、ラパマイ
シンは免疫抑制剤としての使用が関連づけられた（マー
テル・アール・アール（Martel R.R.）ら、カナディア
ン・ジャーナル・オブ・フィジオロジー・アンド・ファ
ーマコロジー（Can.J.Physiol.Pharmacol.）５５，４８
−５１，１９７７）。
は公知化合物であり、最初、ストレプトミセス・ヒグロ
スコピカス（Streptomyces hygroscopicus）真菌からの
抽出物として単離され、抗真菌活性を有すると報告され
た（英国特許第１４３６４４７号）。その後、ラパマイ
シンは免疫抑制剤としての使用が関連づけられた（マー
テル・アール・アール（Martel R.R.）ら、カナディア
ン・ジャーナル・オブ・フィジオロジー・アンド・ファ
ーマコロジー（Can.J.Physiol.Pharmacol.）５５，４８
−５１，１９７７）。
【０００３】（発明の開示）多くの微生物が、その後に
単離されかつ有用な治療活性を有することが明らかにさ
れた種々の代謝産物を産生することが判明した。このよ
うな化合物の一つが２９−デスメチルラパマイシンであ
る。この化合物は新規な化合物であると考えられてお
り、有用な抗真菌活性を、さらに免疫抑制特性を有する
ことが見いだされた。したがって、本発明は２９−デス
メチルラパマイシンおよびその誘導体を提供するもので
ある。第２の態様において、本発明はさらに、産生微生
物を培養し、その後、２９−デスメチルラパマイシンま
たはその誘導体を単離することからなる、２９−デスメ
チルラパマイシンの製法を提供するものである。
単離されかつ有用な治療活性を有することが明らかにさ
れた種々の代謝産物を産生することが判明した。このよ
うな化合物の一つが２９−デスメチルラパマイシンであ
る。この化合物は新規な化合物であると考えられてお
り、有用な抗真菌活性を、さらに免疫抑制特性を有する
ことが見いだされた。したがって、本発明は２９−デス
メチルラパマイシンおよびその誘導体を提供するもので
ある。第２の態様において、本発明はさらに、産生微生
物を培養し、その後、２９−デスメチルラパマイシンま
たはその誘導体を単離することからなる、２９−デスメ
チルラパマイシンの製法を提供するものである。
【０００４】（発明を実施するための最良の形態）２９
−デスメチルラパマイシンは、以下の構造式を有すると
考えられる：
−デスメチルラパマイシンは、以下の構造式を有すると
考えられる：
【化２】
【０００５】該化合物は以下の特性を有する； i） 高速原子衝撃（ＦＡＢ）質量分光法によれば見か
け分子量が８９９であること； ii） ストレプトミセス（Streptomyces）属の微生物を
培養することで得ることができること； iii） １３Ｃ ＮＭＲ分光法が分子中に５０個の炭素原
子を示すこと； iv） カンジダ・アルビカンス（Candida albicans）に
対して抗真菌活性を示すこと； v） 免疫抑制特性を示すこと。
け分子量が８９９であること； ii） ストレプトミセス（Streptomyces）属の微生物を
培養することで得ることができること； iii） １３Ｃ ＮＭＲ分光法が分子中に５０個の炭素原
子を示すこと； iv） カンジダ・アルビカンス（Candida albicans）に
対して抗真菌活性を示すこと； v） 免疫抑制特性を示すこと。
【０００６】２９−デスメチルラパマイシンは、産生微
生物を培養し、その培養菌から該化合物またはその誘導
体を回収することにより得ることができる。本明細書で
用いる「培養」なる語（およびその派生語）は、炭素、
窒素、硫黄および鉱塩の同化しうる供給源の存在下、微
生物のゆっくりした好気性増殖を意味する。このような
好気性増殖は、固体または半固体の栄養培地にて、また
は栄養素が溶解しているかまたは懸濁している液体培地
にて行うことができる。該培養は好気性表面でまたは液
内培養により行ってもよい。栄養培地は複合栄養素から
なっていてもよく、または化学的に限定することもでき
る。本発明の培養法において用いるための適当な微生物
は、２９−デスメチルラパマイシン合成能を有するスト
レプトミセス属に属する細菌株を含むことが見いだされ
た。さらには、このような菌株の一例は、天然の、さら
にその変異株からのｓｐ.ＮＣＩＢ ４０３１９であるこ
とが判明した。
生物を培養し、その培養菌から該化合物またはその誘導
体を回収することにより得ることができる。本明細書で
用いる「培養」なる語（およびその派生語）は、炭素、
窒素、硫黄および鉱塩の同化しうる供給源の存在下、微
生物のゆっくりした好気性増殖を意味する。このような
好気性増殖は、固体または半固体の栄養培地にて、また
は栄養素が溶解しているかまたは懸濁している液体培地
にて行うことができる。該培養は好気性表面でまたは液
内培養により行ってもよい。栄養培地は複合栄養素から
なっていてもよく、または化学的に限定することもでき
る。本発明の培養法において用いるための適当な微生物
は、２９−デスメチルラパマイシン合成能を有するスト
レプトミセス属に属する細菌株を含むことが見いだされ
た。さらには、このような菌株の一例は、天然の、さら
にその変異株からのｓｐ.ＮＣＩＢ ４０３１９であるこ
とが判明した。
【０００７】本明細書にて用いる「変異株」なる語は、
自発的にまたは外用剤を故意に適用するとしないとにか
かわらず該薬剤の作用を介して生まれるいずれの変異株
をも包含する。エッチ・アイ・アドラー（H.I.Adler)の
‘Radiation and Radioisotopes for Industrial Micro
organisms’における‘Techniques for the Developmen
t of Microorganisms’，Proceedings of a Symposiu
m，Vienna，１９７３，２４１頁、International Atomi
c Energy Authorityにより概説された株およびこれらの
株を包含する変異株の適当な産生方法は： （i） 電離放射線（例えば、Ｘ−線およびγ−線）、
紫外線、紫外線＋感光剤（例えば、８−メトキシプソラ
レン）、亜硝酸、ヒドロキシルアミン、ピリミジン塩基
類似体（例えば、５−ブロモウラシル）、アクリジン、
アルキル化剤（例えば、マスタードガス、エチル−メタ
ンスルホナート）過酸化水素、フェノール、ホルムアル
デヒド、加熱、および （ii） 例えば、組換え、形質転換、形質導入、溶原
化、溶原性変換、プロトプラスト融合および自発的変異
株の選択法を含む遺伝子技法を包含する。
自発的にまたは外用剤を故意に適用するとしないとにか
かわらず該薬剤の作用を介して生まれるいずれの変異株
をも包含する。エッチ・アイ・アドラー（H.I.Adler)の
‘Radiation and Radioisotopes for Industrial Micro
organisms’における‘Techniques for the Developmen
t of Microorganisms’，Proceedings of a Symposiu
m，Vienna，１９７３，２４１頁、International Atomi
c Energy Authorityにより概説された株およびこれらの
株を包含する変異株の適当な産生方法は： （i） 電離放射線（例えば、Ｘ−線およびγ−線）、
紫外線、紫外線＋感光剤（例えば、８−メトキシプソラ
レン）、亜硝酸、ヒドロキシルアミン、ピリミジン塩基
類似体（例えば、５−ブロモウラシル）、アクリジン、
アルキル化剤（例えば、マスタードガス、エチル−メタ
ンスルホナート）過酸化水素、フェノール、ホルムアル
デヒド、加熱、および （ii） 例えば、組換え、形質転換、形質導入、溶原
化、溶原性変換、プロトプラスト融合および自発的変異
株の選択法を含む遺伝子技法を包含する。
【０００８】
【表１】
【０００９】ベッカー・ビー・レケバリアー・エム・ピ
ー、ゴードン・アール・イー、レケバリアー・エッチ・
エイ（Becker B．Lechevalier M.P.，Gordon R.E.，Lec
he-valier H.A.），１９６４，アプライド・ミクロバイ
オロジー（Appl.Microbiol.)１２，４２１−４２３およ
びウィリアムス・エス・ティー、グッドフェロー・エ
ム、ウェリントン・イー・エム・エッチ、ヴィッカーズ
・ジェイ・シー、アルダーソン・ジー、スネス・ピー・
エッチ・エイ、サッキン・エム・ジェイおよびモルチマ
ー・エム（Williams S.T.，Goodfellow M.，Wellington
E.M.H.，VickersJ.C.，Alderson.G.，Sneath P.H.A.，
Sackin M.J.およびMortimer M.）１９８３ ジャーナル
・オブ・ジェネラル・ミクロバイオロジー（J.Gen.Micr
obiol.）１２９，１８１５−１８３０の方法を用いて、
Ｓp.ＮＣＩＢ ４０３１９は未だ報告されていない不定
型のストレプトミセス株として同定され、かくして該微
生物はまた、特に生物学的に純粋な形にて本発明の一部
を形成する。該微生物を、１９９０年９月１４日付けで
番号４０３１９の下、スコットランド、アバディーンの
ナショナル・コレクションズ・オブ・インダストリアル
・アンド・マリン・バクテリア・リミテッド（National
Collections of Industrial and Marine Bacteria Lt
d.）（Ｎ.Ｃ.Ｉ.Ｂ）に寄託した。
ー、ゴードン・アール・イー、レケバリアー・エッチ・
エイ（Becker B．Lechevalier M.P.，Gordon R.E.，Lec
he-valier H.A.），１９６４，アプライド・ミクロバイ
オロジー（Appl.Microbiol.)１２，４２１−４２３およ
びウィリアムス・エス・ティー、グッドフェロー・エ
ム、ウェリントン・イー・エム・エッチ、ヴィッカーズ
・ジェイ・シー、アルダーソン・ジー、スネス・ピー・
エッチ・エイ、サッキン・エム・ジェイおよびモルチマ
ー・エム（Williams S.T.，Goodfellow M.，Wellington
E.M.H.，VickersJ.C.，Alderson.G.，Sneath P.H.A.，
Sackin M.J.およびMortimer M.）１９８３ ジャーナル
・オブ・ジェネラル・ミクロバイオロジー（J.Gen.Micr
obiol.）１２９，１８１５−１８３０の方法を用いて、
Ｓp.ＮＣＩＢ ４０３１９は未だ報告されていない不定
型のストレプトミセス株として同定され、かくして該微
生物はまた、特に生物学的に純粋な形にて本発明の一部
を形成する。該微生物を、１９９０年９月１４日付けで
番号４０３１９の下、スコットランド、アバディーンの
ナショナル・コレクションズ・オブ・インダストリアル
・アンド・マリン・バクテリア・リミテッド（National
Collections of Industrial and Marine Bacteria Lt
d.）（Ｎ.Ｃ.Ｉ.Ｂ）に寄託した。
【００１０】ＮＣＩＢ ４０３１９株は以下のように特
徴付けられる：ベッカー（Becker）ら（１９６４）によ
って記載されている全−細胞アミノ酸分析法を用いた。
培養菌の特性化に用いた確認培地は、ウィリアムス（Wi
lliams）ら（１９８３）によって記載されているものと
同じであった。加えて、澱粉カゼイン寒天（ワックスマ
ン・エス・エイ（Waksman S.A.)，１９６１．The Actin
o-mycetes Vol.2 Williams and Wilkins Co.Baltimore
pp1-363）を培養菌の形態的記載のために用いた。微生
物を、ウェル増殖プレートからの寒天プレートをＹブロ
ス（表１参照）に接種し、震盪器上、２８℃で３日間イ
ンキュベートすることにより特性付けた。ついで、３６
６０ｒｐｍで２０分間遠心機にかけ、蒸留水で２回洗浄
し、最後にリン酸緩衝生理食塩水（ダルベッコＡ（Dulb
ecco Ａ））に再懸濁させた。この接種物を、前記のよ
うな放線菌目のメンバーを同定するのに通常用いる培地
上にプレートした。プレートを２８℃でインキュベート
し、種々の時点でその結果を読み取るが、大部分は１４
日目に共通に行った。色相は共通の用語で記載するが、
正確な色相は Methuen Handbook of colour（第３版）
の色相チップと比較して決定した。
徴付けられる：ベッカー（Becker）ら（１９６４）によ
って記載されている全−細胞アミノ酸分析法を用いた。
培養菌の特性化に用いた確認培地は、ウィリアムス（Wi
lliams）ら（１９８３）によって記載されているものと
同じであった。加えて、澱粉カゼイン寒天（ワックスマ
ン・エス・エイ（Waksman S.A.)，１９６１．The Actin
o-mycetes Vol.2 Williams and Wilkins Co.Baltimore
pp1-363）を培養菌の形態的記載のために用いた。微生
物を、ウェル増殖プレートからの寒天プレートをＹブロ
ス（表１参照）に接種し、震盪器上、２８℃で３日間イ
ンキュベートすることにより特性付けた。ついで、３６
６０ｒｐｍで２０分間遠心機にかけ、蒸留水で２回洗浄
し、最後にリン酸緩衝生理食塩水（ダルベッコＡ（Dulb
ecco Ａ））に再懸濁させた。この接種物を、前記のよ
うな放線菌目のメンバーを同定するのに通常用いる培地
上にプレートした。プレートを２８℃でインキュベート
し、種々の時点でその結果を読み取るが、大部分は１４
日目に共通に行った。色相は共通の用語で記載するが、
正確な色相は Methuen Handbook of colour（第３版）
の色相チップと比較して決定した。
【００１１】結果： 細胞壁分析 全−細胞水解物はＬＬ−ジアミノピメリン酸を含有し
た。 微生物の増殖および外観の観察は次のとおりであった： 酵母抽出物−モルト抽出物寒天（ＩＳＰ ２ ディフコ
（Difco）） −増殖良好，白色粉末中心のクリーム色２ ２ａ）。コ
ロニーを産し、胞子形成はなく、どちらかと言えばしわ
になった。 無機塩澱粉寒天（ＩＳＰ４ ディフコ） −増殖良好，淡灰色ないし灰色を有する白色（１ １
ｂ，１ １ｃ），気中菌糸。コロニーは、中心がわずか
に***しており、ほとんどフラットな状態。リバーズク
リーム色（２ ２ａ）。 グリセロールアスパラギン寒天（S.A.Waksman,1961,p32
8），培地番号２ −増殖は中程度ないし良好，灰色中心の白色（１ １
ｄ）。コロニーはフラットで、リバーズクリーム（２
２ａ）。 澱粉鉱塩寒天 −増殖は非常に乏しい，不透明な小さなコロニー。気中
菌糸はない。
た。 微生物の増殖および外観の観察は次のとおりであった： 酵母抽出物−モルト抽出物寒天（ＩＳＰ ２ ディフコ
（Difco）） −増殖良好，白色粉末中心のクリーム色２ ２ａ）。コ
ロニーを産し、胞子形成はなく、どちらかと言えばしわ
になった。 無機塩澱粉寒天（ＩＳＰ４ ディフコ） −増殖良好，淡灰色ないし灰色を有する白色（１ １
ｂ，１ １ｃ），気中菌糸。コロニーは、中心がわずか
に***しており、ほとんどフラットな状態。リバーズク
リーム色（２ ２ａ）。 グリセロールアスパラギン寒天（S.A.Waksman,1961,p32
8），培地番号２ −増殖は中程度ないし良好，灰色中心の白色（１ １
ｄ）。コロニーはフラットで、リバーズクリーム（２
２ａ）。 澱粉鉱塩寒天 −増殖は非常に乏しい，不透明な小さなコロニー。気中
菌糸はない。
【００１２】澱粉カゼイン寒天 −増殖良好，明灰色ないし灰色の中心領域を有する白色
（１ １ｃ，１ １ｄ），灰色胞子形成域中、時おり小斑
の白色非胞子形成菌糸体。灰色領域にわたって小さな無
色の小滴。コロニーはだいたいフラットで、徐々にに丸
みを帯びている。インキュベーションの４週間後に、小
さな黒色の吸湿性の斑が生じるかもしれない。 形態学特性 インキュベーションの２週間後に澱粉カゼイン寒天につ
いて、これらの形態学特性を観察した：灰色種の胞子
塊；堅くコイル状となっているかまたはわずかに開口し
ている、小径の、一般に２〜６個の、時折それ以上のコ
イルの断面がらせん状の胞子鎖が、吸湿性塊に凝集しう
る。生長菌糸体の断片形成は見られなかった。
（１ １ｃ，１ １ｄ），灰色胞子形成域中、時おり小斑
の白色非胞子形成菌糸体。灰色領域にわたって小さな無
色の小滴。コロニーはだいたいフラットで、徐々にに丸
みを帯びている。インキュベーションの４週間後に、小
さな黒色の吸湿性の斑が生じるかもしれない。 形態学特性 インキュベーションの２週間後に澱粉カゼイン寒天につ
いて、これらの形態学特性を観察した：灰色種の胞子
塊；堅くコイル状となっているかまたはわずかに開口し
ている、小径の、一般に２〜６個の、時折それ以上のコ
イルの断面がらせん状の胞子鎖が、吸湿性塊に凝集しう
る。生長菌糸体の断片形成は見られなかった。
【００１３】生化学的特性 詳細には表２参照。要約すれば、メラニンは生成され
ず；硝酸塩は有機硝酸塩ブロスにて亜硝酸塩に還元され
ず；ペプトン−酵母抽出物鉄ブロスにてＨ２Ｓが生成さ
れ；抑制剤で非増殖；アルブチンのみ分解、バシラス・
サチリス（Bacillussubtilis）に対してのみ抗生作用。
炭水化物使用、グルコース、セロビオース、フルクトー
ス、イノシトール、マンニトール、ラフィノース、ラム
ノースおよびキシロース。用いた窒素供給源：アスパラ
ギン、ヒスチジンおよびヒドロキシプロリン、ａ−アミ
ノブチル酸をほんのわずか使用。 同定スコアの測定 ウィリアムス（Williams）ら（１９８３）のマトリック
ス確率パーセントに対し、既知または未知の菌株につい
て最適の同定スコアを付与するマチデンプログラム（Ma
tiden program)（スネス・ピー・エッチ・エイ（Sneath
P.H.A.),１９７９．コンピュータ・アンド・ゲオサイ
エンシス（Computers and Geo-sciences）５ １９５−
２１３）を用いてこれらのスコアを得た。ウィルコック
ス確率（Willcox Probability）−スコアが１.０に近け
れば近いほど、未知のものとマトリックス中の一群のも
のとの適合性がよい（スコア＞０.８５で許容可能）。
分類学的距離−低スコアは相関的であることを意味する
（スコア＜０.３で許容可能）。微生物は、ストレプト
ミセス・ヒグロスコピカス（Streptomyces hygroscopic
us）種を包含するクラスター３２（cluster３２）（ビ
オラセオニガー（violaceoniger））と同じ許容しうる
同定スコアを有した。
ず；硝酸塩は有機硝酸塩ブロスにて亜硝酸塩に還元され
ず；ペプトン−酵母抽出物鉄ブロスにてＨ２Ｓが生成さ
れ；抑制剤で非増殖；アルブチンのみ分解、バシラス・
サチリス（Bacillussubtilis）に対してのみ抗生作用。
炭水化物使用、グルコース、セロビオース、フルクトー
ス、イノシトール、マンニトール、ラフィノース、ラム
ノースおよびキシロース。用いた窒素供給源：アスパラ
ギン、ヒスチジンおよびヒドロキシプロリン、ａ−アミ
ノブチル酸をほんのわずか使用。 同定スコアの測定 ウィリアムス（Williams）ら（１９８３）のマトリック
ス確率パーセントに対し、既知または未知の菌株につい
て最適の同定スコアを付与するマチデンプログラム（Ma
tiden program)（スネス・ピー・エッチ・エイ（Sneath
P.H.A.),１９７９．コンピュータ・アンド・ゲオサイ
エンシス（Computers and Geo-sciences）５ １９５−
２１３）を用いてこれらのスコアを得た。ウィルコック
ス確率（Willcox Probability）−スコアが１.０に近け
れば近いほど、未知のものとマトリックス中の一群のも
のとの適合性がよい（スコア＞０.８５で許容可能）。
分類学的距離−低スコアは相関的であることを意味する
（スコア＜０.３で許容可能）。微生物は、ストレプト
ミセス・ヒグロスコピカス（Streptomyces hygroscopic
us）種を包含するクラスター３２（cluster３２）（ビ
オラセオニガー（violaceoniger））と同じ許容しうる
同定スコアを有した。
【００１４】結論：培養菌は塊状の灰色胞子、負のメラ
ニン反応およびらせん状コイル鎖に配置されている胞子
により特性付けられる。該胞子鎖は吸湿性塊に合体して
もよい。該培養菌は広範な炭水化物供給源を利用した。
全−細胞水解物はＬＬ−ジアミノピメリン酸の存在を示
す。
ニン反応およびらせん状コイル鎖に配置されている胞子
により特性付けられる。該胞子鎖は吸湿性塊に合体して
もよい。該培養菌は広範な炭水化物供給源を利用した。
全−細胞水解物はＬＬ−ジアミノピメリン酸の存在を示
す。
【００１５】 表１ １． Ｙブロス ｇ／Ｌ 特定のペプトン（Ｏxoid） ２.５ Lab Lemco 粉末（Ｏxoid） ２.５ トリプトン（Ｏxoid） ２.５ 中和大豆ペプトン（Ｏxoid） ２.５ 澱粉（ＢＤＨ） ２.５ グルコース（ＢＤＨ） ２.５ モルト抽出物（Ｏxoid） ２.５ グリセロール（Ｆisons） ２.５ ＣaＣl２・２Ｈ２Ｏ（ＢＤＨ） ０.０５ ＭgＣl２・６Ｈ２Ｏ（Ｓigma） ０.０５ ＮaＣl（ＢＤＨ） ０.０５ ＦeＣl３（Ｓigma） ０.０１５ ＺnＣl２（Ｓigma） ０.００２５ ＣuＣl２・２Ｈ２Ｏ（Ｓigma） ０.００２５ ＭnＳＯ４・４Ｈ２Ｏ（Ｓigma） ０.００２５ ＣoＣl２・６Ｈ２Ｏ（ＢＤＨ） ０.０２５
【００１６】 表２ ＮＣＩＢ ４０３１９の生化学的特性 試験 結果 メラニン生成 − 炭水化物の使用： アドニトール − セロビオース ＋ Ｄ−フルクトース ＋ メソ−イノシトール ＋ イヌリン − マンニトール ＋ ラフィノース ＋ Ｌ−ラムノース ＋ ウィルコックス確率 Ｄ−キシロース ＋ Ｄ−グルコース ＋ クラスター３２ ビオラセオニガー ＝０.９３６ 窒素源の使用： ＤＬ−ａ−アミノブチル酸 ＋／− Ｌ−ヒスチジン ＋ 分類学的距離 Ｌ−ヒドロキシプロリン ＋ アスパラギン ＋ クラスター３２ ビオラセオニガー ＝０.２８４ 分解： アラントイン − アルブチン ＋ キサンチン − ペクチン − レシチン − 硝酸塩還元 − Ｈ２Ｓ生成 ＋ 抑制剤に対する増殖： ナトリウムアジド（0.01% w/v） − ＮaＣl（7.0% w/v） − フェノール（0.1% w/v） − ４５℃での増殖 − 抗生作用： アスペルギルス・ニガー − （Aspergillus niger） バシラス・サチリス ＋ （Bacillus subtilis） ストレプトミセス・ムリヌス − （Streptomyces murinus）
【００１７】ｓｐ.ＮＣＩＢ４０３１９を培養するため
の発酵培地は、適当には、無機塩と一緒に同化しうる炭
素と同化しうる窒素の供給源を含有する。適当な窒素供
給源は、酵母抽出物、大豆粉末、ミート抽出物、綿実、
小麦粉、モルツ、蒸溜器乾燥溶解物、アミノ酸、蛋白質
水解物ならびにアンモニウムおよび硝酸塩の窒素を包含
する。適当な炭素供給源は、グルコース、ラクトース、
マルトース、澱粉およびグリセロールを包含する。適当
には、該培地はさらにアルカリ金属イオン（例えば、ナ
トリウム）、ハロゲンイオン（例えば、クロリド）およ
びアルカリ土類金属イオン（例えば、カルシウムおよび
マグネシウム）ならびに鉄およびコバルトのような微量
元素を包含する。培養は、適当には、約２０〜３５℃の
温度で、有利には２０〜３０℃の温度で行うことがで
き、培養菌は、所望の産物を最適収量で得るために、発
酵開始後、適当には７日までに、有利には３〜５日で収
穫してもよい。
の発酵培地は、適当には、無機塩と一緒に同化しうる炭
素と同化しうる窒素の供給源を含有する。適当な窒素供
給源は、酵母抽出物、大豆粉末、ミート抽出物、綿実、
小麦粉、モルツ、蒸溜器乾燥溶解物、アミノ酸、蛋白質
水解物ならびにアンモニウムおよび硝酸塩の窒素を包含
する。適当な炭素供給源は、グルコース、ラクトース、
マルトース、澱粉およびグリセロールを包含する。適当
には、該培地はさらにアルカリ金属イオン（例えば、ナ
トリウム）、ハロゲンイオン（例えば、クロリド）およ
びアルカリ土類金属イオン（例えば、カルシウムおよび
マグネシウム）ならびに鉄およびコバルトのような微量
元素を包含する。培養は、適当には、約２０〜３５℃の
温度で、有利には２０〜３０℃の温度で行うことがで
き、培養菌は、所望の産物を最適収量で得るために、発
酵開始後、適当には７日までに、有利には３〜５日で収
穫してもよい。
【００１８】ついで、所望の産物またはその誘導体を培
地から単離し、後処理し、このような化合物を精製する
際の常套手段を用いて精製できる。このような単離およ
び精製操作はすべて、低温ないし外界温度で、例えば、
４〜４０℃、都合よくは２０〜３５℃の温度で行うこと
ができる。所望の化合物は、抗真菌活性について試験す
ることにより、および／またはｈ.ｐ.ｌ.ｃ.の保持時間
をモニターすることにより慣用方法にて容易に同定でき
る。適当には、分離操作は、好ましくは最終工程として
高性能液体クロマトグラフィー工程を包含する。溶出は
メタノール水溶液を用いて行うことができる。２９−デ
スメチルラパマイシンおよびその誘導体は結晶性である
かまたは非結晶性であり、結晶性ならば、所望により水
和または溶媒和させてもよい。その誘導体は、好ましく
は、医薬上許容される誘導体である。誘導体は、医薬上
許容される対イオンの塩を包含する。
地から単離し、後処理し、このような化合物を精製する
際の常套手段を用いて精製できる。このような単離およ
び精製操作はすべて、低温ないし外界温度で、例えば、
４〜４０℃、都合よくは２０〜３５℃の温度で行うこと
ができる。所望の化合物は、抗真菌活性について試験す
ることにより、および／またはｈ.ｐ.ｌ.ｃ.の保持時間
をモニターすることにより慣用方法にて容易に同定でき
る。適当には、分離操作は、好ましくは最終工程として
高性能液体クロマトグラフィー工程を包含する。溶出は
メタノール水溶液を用いて行うことができる。２９−デ
スメチルラパマイシンおよびその誘導体は結晶性である
かまたは非結晶性であり、結晶性ならば、所望により水
和または溶媒和させてもよい。その誘導体は、好ましく
は、医薬上許容される誘導体である。誘導体は、医薬上
許容される対イオンの塩を包含する。
【００１９】本発明に係る化合物は、適当には、実質的
に純粋な形態、例えば、少なくとも５０％純度の、適当
には少なくとも６０％純度の、有利には少なくとも７５
％純度の、好ましくは少なくとも８５％純度の、より好
ましくは少なくとも９５％純度の、とりわけ少なくとも
９８％純度にて提供されるものである。ここで、すべて
の％は重量／重量として計算する。不純なまたは純粋で
ない形態の本発明に係る化合物は、例えば、医薬用途に
適するより純粋な形態の同じ化合物または関連化合物
（例えば、対応する誘導体）の製造に用いることができ
る。
に純粋な形態、例えば、少なくとも５０％純度の、適当
には少なくとも６０％純度の、有利には少なくとも７５
％純度の、好ましくは少なくとも８５％純度の、より好
ましくは少なくとも９５％純度の、とりわけ少なくとも
９８％純度にて提供されるものである。ここで、すべて
の％は重量／重量として計算する。不純なまたは純粋で
ない形態の本発明に係る化合物は、例えば、医薬用途に
適するより純粋な形態の同じ化合物または関連化合物
（例えば、対応する誘導体）の製造に用いることができ
る。
【００２０】２９−デスメチルラパマイシンおよびその
医薬上許容される誘導体は、抗真菌および免疫抑制特性
を有し、動物、特にヒトを包含する哺乳動物、とりわけ
ヒトおよび飼養動物（家畜動物を包含する）における真
菌感染の治療に有用である。該化合物は、他の微生物の
うち、カンジダ（Candida）、トリコフィトン（Trichop
hyton）、ミクロスポルム（Microsporum）またはエピデ
ルモフィトン（Epidermophyton）種により引き起こされ
るヒトでの局所真菌感染の治療に、またはカンジダ・ア
ルビカンス（Candida albicans）により引き起こされる
粘膜感染（例えば、鵞口瘡性および膣カンジダ症）の治
療に用いることができる。該化合物はまた、例えば、カ
ンジダ・アルビカンス（Candida albicans）、クリプト
コッカス・ネオフォルマンス（Cryptococcus neoforman
s）、アスペルギルス・フミガーツス（Aspergillus fum
igatus）、コクシジオデス（Coccidiodes）、パラコク
シシオデス（Paracocciciodes）、ヒストプラズマ（His
toplasma）またはブラストミセス（Blastomyces）によ
り引き起こされる全身性真菌感染の治療に用いることが
できる。該化合物はさらに、真菌腫、クロモプラズマ真
菌症およびフィコミコーシスの治療にて有用である。
医薬上許容される誘導体は、抗真菌および免疫抑制特性
を有し、動物、特にヒトを包含する哺乳動物、とりわけ
ヒトおよび飼養動物（家畜動物を包含する）における真
菌感染の治療に有用である。該化合物は、他の微生物の
うち、カンジダ（Candida）、トリコフィトン（Trichop
hyton）、ミクロスポルム（Microsporum）またはエピデ
ルモフィトン（Epidermophyton）種により引き起こされ
るヒトでの局所真菌感染の治療に、またはカンジダ・ア
ルビカンス（Candida albicans）により引き起こされる
粘膜感染（例えば、鵞口瘡性および膣カンジダ症）の治
療に用いることができる。該化合物はまた、例えば、カ
ンジダ・アルビカンス（Candida albicans）、クリプト
コッカス・ネオフォルマンス（Cryptococcus neoforman
s）、アスペルギルス・フミガーツス（Aspergillus fum
igatus）、コクシジオデス（Coccidiodes）、パラコク
シシオデス（Paracocciciodes）、ヒストプラズマ（His
toplasma）またはブラストミセス（Blastomyces）によ
り引き起こされる全身性真菌感染の治療に用いることが
できる。該化合物はさらに、真菌腫、クロモプラズマ真
菌症およびフィコミコーシスの治療にて有用である。
【００２１】本発明の化合物は免疫調整剤として活性で
ある。「免疫調整剤」なる語は、本発明の化合物が in
vitro におけるＴ（およびＢ）細胞応答を抑制すること
により、および／またはアジュバント誘発関節炎におけ
る炎症系応答介在の２次病変にて統計学上有意な減少を
もたらすことによって免疫抑制誘発能を有することを意
味する。治療に免疫調整剤を用いる適応症は、限定する
ものではないが、以下の症状を包含する： リウマチ様関節炎 全身性紅斑性狼瘡 多発性硬化症 急性移植／移植片拒絶 重症筋無力症 全身性進行性硬化症 多発性骨髄腫 アトピー性皮膚炎 高度免疫グロブリンＥ Ｂ型肝炎抗原陰性慢性活性肝炎 ハシモト甲状腺炎 家族性地中海熱 グレーヴズ病 自己免疫溶血性貧血 原発性胆汁性肝硬変 炎症性腸疾患 インスリン依存性真性糖尿病
ある。「免疫調整剤」なる語は、本発明の化合物が in
vitro におけるＴ（およびＢ）細胞応答を抑制すること
により、および／またはアジュバント誘発関節炎におけ
る炎症系応答介在の２次病変にて統計学上有意な減少を
もたらすことによって免疫抑制誘発能を有することを意
味する。治療に免疫調整剤を用いる適応症は、限定する
ものではないが、以下の症状を包含する： リウマチ様関節炎 全身性紅斑性狼瘡 多発性硬化症 急性移植／移植片拒絶 重症筋無力症 全身性進行性硬化症 多発性骨髄腫 アトピー性皮膚炎 高度免疫グロブリンＥ Ｂ型肝炎抗原陰性慢性活性肝炎 ハシモト甲状腺炎 家族性地中海熱 グレーヴズ病 自己免疫溶血性貧血 原発性胆汁性肝硬変 炎症性腸疾患 インスリン依存性真性糖尿病
【００２２】したがって、本発明は、医薬療法に用いる
ための、好ましくは抗真菌剤または免疫調整剤として用
いるための２９−デスメチルラパマイシンまたは誘導体
を提供するものである。さらに、本発明は、有効量の２
９−デスメチルラパマイシンまたはその誘導体を投与す
ることにより、真菌感染を患っているヒトまたは動物の
治療方法を提供するものである。その上、本発明は、有
効量の２９−デスメチルラパマイシンまたはその誘導体
を投与することにより、免疫調整を必要とするヒトまた
は動物の治療方法を提供するものである。本発明は、さ
らには、式（I）の化合物またはその医薬上許容される
塩を、医薬上許容される希釈剤または担体と一緒に配合
してなる医薬組成物を提供する。該組成物は、ヒト使用
では、錠剤、カプセル、注射可能なまたはクリーム形で
あることが好ましい。
ための、好ましくは抗真菌剤または免疫調整剤として用
いるための２９−デスメチルラパマイシンまたは誘導体
を提供するものである。さらに、本発明は、有効量の２
９−デスメチルラパマイシンまたはその誘導体を投与す
ることにより、真菌感染を患っているヒトまたは動物の
治療方法を提供するものである。その上、本発明は、有
効量の２９−デスメチルラパマイシンまたはその誘導体
を投与することにより、免疫調整を必要とするヒトまた
は動物の治療方法を提供するものである。本発明は、さ
らには、式（I）の化合物またはその医薬上許容される
塩を、医薬上許容される希釈剤または担体と一緒に配合
してなる医薬組成物を提供する。該組成物は、ヒト使用
では、錠剤、カプセル、注射可能なまたはクリーム形で
あることが好ましい。
【００２３】ヒト使用の場合、２９−デスメチルラパマ
イシンまたはその誘導体を単独で投与することができる
が、一般に、意図する投与経路および標準的医薬慣習に
関連して選択された医薬担体と混合して投与されるであ
ろう。例えば、該化合物は、澱粉またはラクトースのよ
うな賦形剤含有の錠剤の形態にて、または単独あるいは
賦形剤を混合したカプセルまたは小卵（ovule）にて、
またはフレーバー剤あるいは着色剤含有のエリキシルあ
るいは懸濁液の懸濁液にて経口投与してもよい。該化合
物は、非経口的に、例えば、静脈内に、筋肉内にまたは
皮下内に注射できる。非経口投与の場合、滅菌溶液の形
態で用いることが最適であり、他の物質、例えば、その
溶液を等張にするに十分な塩またはグルコースを含有し
ていてもよい。真菌感染を患っているヒト患者に経口お
よび非経口投与する場合、式（I）の抗真菌化合物の一
日の用量レベルは、経口または非経口経路による投与
で、０.１〜１０ｍｇ／ｋｇ（分割投与）であると考え
られる。このように、該化合物の錠剤またはカプセル
は、一回あるいは２回または適宜それ以上の回数で投与
する場合、活性化合物を５ｍｇ〜０.５ｇ含有すると考
えられる。いずれにおいても医者が、個々の患者に最適
であり、かつ個々の患者の年齢、体重および応答で変化
するであろう実際の用量を決定する。前記の用量は平均
的なケースの例示である。もちろん、より高用量あるい
はより低用量の範囲でメリットがあるとする場合もあ
り、その場合も本発明の範囲内である。
イシンまたはその誘導体を単独で投与することができる
が、一般に、意図する投与経路および標準的医薬慣習に
関連して選択された医薬担体と混合して投与されるであ
ろう。例えば、該化合物は、澱粉またはラクトースのよ
うな賦形剤含有の錠剤の形態にて、または単独あるいは
賦形剤を混合したカプセルまたは小卵（ovule）にて、
またはフレーバー剤あるいは着色剤含有のエリキシルあ
るいは懸濁液の懸濁液にて経口投与してもよい。該化合
物は、非経口的に、例えば、静脈内に、筋肉内にまたは
皮下内に注射できる。非経口投与の場合、滅菌溶液の形
態で用いることが最適であり、他の物質、例えば、その
溶液を等張にするに十分な塩またはグルコースを含有し
ていてもよい。真菌感染を患っているヒト患者に経口お
よび非経口投与する場合、式（I）の抗真菌化合物の一
日の用量レベルは、経口または非経口経路による投与
で、０.１〜１０ｍｇ／ｋｇ（分割投与）であると考え
られる。このように、該化合物の錠剤またはカプセル
は、一回あるいは２回または適宜それ以上の回数で投与
する場合、活性化合物を５ｍｇ〜０.５ｇ含有すると考
えられる。いずれにおいても医者が、個々の患者に最適
であり、かつ個々の患者の年齢、体重および応答で変化
するであろう実際の用量を決定する。前記の用量は平均
的なケースの例示である。もちろん、より高用量あるい
はより低用量の範囲でメリットがあるとする場合もあ
り、その場合も本発明の範囲内である。
【００２４】同じく、免疫調整の必要があるヒト患者の
場合、該化合物またはその誘導体を用いる一日の非経口
または経口投与レジメは、好ましくは、０.１ｍｇ／ｋ
ｇ〜３０ｍｇ／ｋｇである。該化合物を前記の用量範囲
で投与した場合、許容されない毒物学的効果は考えられ
ない。本発明に係る化合物および組成物は、他の抗真菌
剤または免疫調整剤で類推することにより、ヒトまたは
獣医学の医薬において用いるいずれか慣用の方法にて投
与用に処方できる。経口投与する場合、化合物ならびに
錠剤およびカプセルは単位投与形であってもよく、結合
剤、例えばシロップ、アカシア、ゼラチン、ソルビトー
ル、トラガカントまたはポリビニルピロリドン；充填
剤、例えばラクトース、ショ糖、トウモロコシ澱粉、リ
ン酸カルシウム、ソルビトールまたはグリシン；錠剤滑
沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリ
エチレングリコールまたはシリカ；崩壊剤、例えばポテ
ト澱粉；および医薬上許容される湿潤剤、例えばラウリ
ル硫酸ナトリウムのような慣用の賦形剤を含有していて
もよい。錠剤は、標準医薬操作における周知方法に従っ
て被覆できる。
場合、該化合物またはその誘導体を用いる一日の非経口
または経口投与レジメは、好ましくは、０.１ｍｇ／ｋ
ｇ〜３０ｍｇ／ｋｇである。該化合物を前記の用量範囲
で投与した場合、許容されない毒物学的効果は考えられ
ない。本発明に係る化合物および組成物は、他の抗真菌
剤または免疫調整剤で類推することにより、ヒトまたは
獣医学の医薬において用いるいずれか慣用の方法にて投
与用に処方できる。経口投与する場合、化合物ならびに
錠剤およびカプセルは単位投与形であってもよく、結合
剤、例えばシロップ、アカシア、ゼラチン、ソルビトー
ル、トラガカントまたはポリビニルピロリドン；充填
剤、例えばラクトース、ショ糖、トウモロコシ澱粉、リ
ン酸カルシウム、ソルビトールまたはグリシン；錠剤滑
沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリ
エチレングリコールまたはシリカ；崩壊剤、例えばポテ
ト澱粉；および医薬上許容される湿潤剤、例えばラウリ
ル硫酸ナトリウムのような慣用の賦形剤を含有していて
もよい。錠剤は、標準医薬操作における周知方法に従っ
て被覆できる。
【００２５】経口用液体調製物は、例えば、水性または
油性懸濁液、溶液、エマルジョン、シロップまたはエリ
キシルの形態であってもよく、または使用前に水あるい
は別の適当なビヒクルで復元させる乾燥生成物として提
供することができる。このような液体調製物は、例え
ば、沈殿防止剤、例えばソルビトール、メチルセルロー
ス、グルコースシロップ、ゼラチン、ヒドロキシエチル
セルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン
酸アルミニウムゲルまたは硬化食用脂；乳化剤、例えば
レシチン、ソルビタンモノオレアートまたはアカシア；
非水性ビヒクル（食用脂を含んでいてもよい）、例えば
扁桃油、油性エステル（例えばグリセリン）、プロピレ
ングリコールまたはエチルアルコール；保存剤、例えば
メチルまたはプロピルｐ−ヒドロキシベンゾアートまた
はソルビン酸；および所望により、慣用のフレーバー剤
および着色剤を包含する通常の添加剤を含有していても
よい。局所的に投与する意図の本発明に係る組成物は、
例えば、軟膏、クリーム、ローション、眼軟膏剤、点眼
剤、点耳剤、含浸包帯およびエアロゾルの形態とするこ
とができ、例えば、保存剤、薬剤の浸透性を補助するた
めの溶媒、ならびに軟膏およびクリーム中の軟化剤を包
含する適当な慣用添加剤を含有していてもよい。このよ
うな局所用処方はまた、慣用の相溶性担体、例えばクリ
ームまたは軟膏基剤、およびローション用のエタノール
またはオレイルアルコールを含有していてもよい。この
ような担体は、処方の約１重量％ないし約９８重量％か
らなっていてもよく、さらには処方の約８０重量％まで
からなっていてもよい。
油性懸濁液、溶液、エマルジョン、シロップまたはエリ
キシルの形態であってもよく、または使用前に水あるい
は別の適当なビヒクルで復元させる乾燥生成物として提
供することができる。このような液体調製物は、例え
ば、沈殿防止剤、例えばソルビトール、メチルセルロー
ス、グルコースシロップ、ゼラチン、ヒドロキシエチル
セルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン
酸アルミニウムゲルまたは硬化食用脂；乳化剤、例えば
レシチン、ソルビタンモノオレアートまたはアカシア；
非水性ビヒクル（食用脂を含んでいてもよい）、例えば
扁桃油、油性エステル（例えばグリセリン）、プロピレ
ングリコールまたはエチルアルコール；保存剤、例えば
メチルまたはプロピルｐ−ヒドロキシベンゾアートまた
はソルビン酸；および所望により、慣用のフレーバー剤
および着色剤を包含する通常の添加剤を含有していても
よい。局所的に投与する意図の本発明に係る組成物は、
例えば、軟膏、クリーム、ローション、眼軟膏剤、点眼
剤、点耳剤、含浸包帯およびエアロゾルの形態とするこ
とができ、例えば、保存剤、薬剤の浸透性を補助するた
めの溶媒、ならびに軟膏およびクリーム中の軟化剤を包
含する適当な慣用添加剤を含有していてもよい。このよ
うな局所用処方はまた、慣用の相溶性担体、例えばクリ
ームまたは軟膏基剤、およびローション用のエタノール
またはオレイルアルコールを含有していてもよい。この
ような担体は、処方の約１重量％ないし約９８重量％か
らなっていてもよく、さらには処方の約８０重量％まで
からなっていてもよい。
【００２６】本発明に係る組成物は坐剤として処方して
もよく、慣用の坐剤用基剤、例えばカカオ脂または他の
グリセリドを含有していてもよい。非経口的に投与する
意図の本発明に係る組成物は、都合よくは、流体単位投
与形であってもよく、該化合物と滅菌ビヒクル、プロピ
レングリコールを用いて製造してもよい。用いるビヒク
ルおよび濃度に依存して、該化合物はビヒクル中に懸濁
させるかまたは溶解させるかのいずれであってもよい。
非経口用懸濁液は、化合物を溶解させる代わりにビヒク
ルに懸濁させ、滅菌処理を濾過により行うことができな
い以外、実質的に同じ方法にて製造できる。その代わ
り、滅菌ビヒクルに懸濁させる前に酸化エチレンに暴露
することにより該化合物を滅菌処理できる。有利には、
化合物の均一な分布を促進するのに、界面活性剤または
湿潤剤をかかる懸濁液中に含ませる。
もよく、慣用の坐剤用基剤、例えばカカオ脂または他の
グリセリドを含有していてもよい。非経口的に投与する
意図の本発明に係る組成物は、都合よくは、流体単位投
与形であってもよく、該化合物と滅菌ビヒクル、プロピ
レングリコールを用いて製造してもよい。用いるビヒク
ルおよび濃度に依存して、該化合物はビヒクル中に懸濁
させるかまたは溶解させるかのいずれであってもよい。
非経口用懸濁液は、化合物を溶解させる代わりにビヒク
ルに懸濁させ、滅菌処理を濾過により行うことができな
い以外、実質的に同じ方法にて製造できる。その代わ
り、滅菌ビヒクルに懸濁させる前に酸化エチレンに暴露
することにより該化合物を滅菌処理できる。有利には、
化合物の均一な分布を促進するのに、界面活性剤または
湿潤剤をかかる懸濁液中に含ませる。
【００２７】（実施例）次に実施例を用いて本発明を説
明する。２９−デスメチルラパマイシンの製造 ２９−デスメチルラパマイシンを産生する培養菌はスト
レプトミセス・エス・ピー（Streptomyces sp）として
分類され、英国、スコットランド州、アバディーンＡＢ
２ １ＲＹ、ストリート・マッハー・ドライブ２３番、
ナショナル・コレクション・オブ・インダストリアル・
アンド・マリン・バクテリア（NationalCollection of
Industrial and Marine Bacteria）に受け入れ番号ＮＣ
ＩＢ ４０３１９で寄託された。該培養菌はアビュー
ク，ガンビア（Abuke,Gambia）でターマイト・ヒル（te
rmite hill）より単離した。
明する。２９−デスメチルラパマイシンの製造 ２９−デスメチルラパマイシンを産生する培養菌はスト
レプトミセス・エス・ピー（Streptomyces sp）として
分類され、英国、スコットランド州、アバディーンＡＢ
２ １ＲＹ、ストリート・マッハー・ドライブ２３番、
ナショナル・コレクション・オブ・インダストリアル・
アンド・マリン・バクテリア（NationalCollection of
Industrial and Marine Bacteria）に受け入れ番号ＮＣ
ＩＢ ４０３１９で寄託された。該培養菌はアビュー
ク，ガンビア（Abuke,Gambia）でターマイト・ヒル（te
rmite hill）より単離した。
【００２８】実施例１ 接種原調製 ルー（Roux）ボトル中、澱粉／カゼイン寒天（ＳＣＡ)
［可溶性澱粉（ＢＤＨ),１０ｇ／Ｌ；カゼイン（白色可
溶物）,１ｇ／Ｌ；Ｋ２ＨＰＯ４,０.５ｇ／Ｌ；ＭgＳＯ
４・７Ｈ２Ｏ,０.５／Ｌ；寒天テクニカル（オキソイド
Ｎo.３）,１８ｇ／Ｌ］上で増殖させた胞子形成培養菌
を０.０２％のツィーン（Tween）８０（５０ｍｌ）と一
緒に処理して胞子懸濁液を得た。胞子懸濁液７.５ｍｌ
を５Ｎ水酸化ナトリウムでpＨ７に調整したＲＳ１培地
［大豆ペプトン,１０ｇ／Ｌ；グルコースモノ水和物,２
０ｇ／Ｌ；パン酵母,５ｇ／Ｌ；ＮaＣl,２ｇ／Ｌ；Ｚn
ＳＯ４・７Ｈ２Ｏ,０.０５ｇ／Ｌ；ＭgＳＯ４・７Ｈ２
Ｏ,０.１２５ｇ／Ｌ；ＭnＳＯ４・４Ｈ２Ｏ,０.０１ｇ
／Ｌ；ＦeＳＯ４・７Ｈ２Ｏ,０.０２ｇ／Ｌ］４００ｍ
ｌに接種した。２リットルの震盪フラスコを用い、２５
℃、２４０ｒｐｍ（５０mmスロー）でインキュベートし
た。
［可溶性澱粉（ＢＤＨ),１０ｇ／Ｌ；カゼイン（白色可
溶物）,１ｇ／Ｌ；Ｋ２ＨＰＯ４,０.５ｇ／Ｌ；ＭgＳＯ
４・７Ｈ２Ｏ,０.５／Ｌ；寒天テクニカル（オキソイド
Ｎo.３）,１８ｇ／Ｌ］上で増殖させた胞子形成培養菌
を０.０２％のツィーン（Tween）８０（５０ｍｌ）と一
緒に処理して胞子懸濁液を得た。胞子懸濁液７.５ｍｌ
を５Ｎ水酸化ナトリウムでpＨ７に調整したＲＳ１培地
［大豆ペプトン,１０ｇ／Ｌ；グルコースモノ水和物,２
０ｇ／Ｌ；パン酵母,５ｇ／Ｌ；ＮaＣl,２ｇ／Ｌ；Ｚn
ＳＯ４・７Ｈ２Ｏ,０.０５ｇ／Ｌ；ＭgＳＯ４・７Ｈ２
Ｏ,０.１２５ｇ／Ｌ；ＭnＳＯ４・４Ｈ２Ｏ,０.０１ｇ
／Ｌ；ＦeＳＯ４・７Ｈ２Ｏ,０.０２ｇ／Ｌ］４００ｍ
ｌに接種した。２リットルの震盪フラスコを用い、２５
℃、２４０ｒｐｍ（５０mmスロー）でインキュベートし
た。
【００２９】最終段階の発酵 １５ＬのＲＰ２培地［大豆ペプトン,１０ｇ／Ｌ；グル
コース,２０ｇ／Ｌ；パン酵母,６ｇ／Ｌ；ＮaＣl,５ｇ
／Ｌ；Ｌリジン・モノ塩酸塩,６ｇ／Ｌ；Ｋ２ＨＰＯ４,
２.５ｇ／Ｌ；ＫＨ２ＰＯ４,２.５ｇ／Ｌ；ＭnＳＯ４・
７Ｈ２Ｏ,０.１２５ｇ／Ｌ；ＺnＳＯ４・７Ｈ２Ｏ,０.
０５ｇ／Ｌ；ＭnＳＯ４・４Ｈ２Ｏ,０.０１ｇ／Ｌ；Ｆe
ＳＯ４・７Ｈ２Ｏ,０.０２ｇ／Ｌ；グリセロール,３０.
０ｇ／Ｌ；大豆油,２０ｇ／Ｌ］を、０.５ｇ／ＬのＮＯ
ＰＣＯ Ｆoamaster消泡剤と一緒に２０Ｌの発酵槽中、
１２１℃で４５分間、in situにて滅菌処理した。滅菌
処理後、pＨを５０％ＮＨ３溶液で６.４に調整し、つい
で７２時間の種子培養菌で４％にて接種した。発酵槽を
０.２バール過圧下、７.５Ｌ／分の空気流で２５℃、４
８０ｒｐｍで作動させた。そのpＨを６.０に落とし、つ
いで５０％ＮＨ３溶液を添加することによってそのレベ
ルを維持した。Ｐluronic Ｌ８１消泡剤（大豆油の２０
％溶液）を添加することでフォーミングを制御した。ブ
ロスを１１８時間で収穫した。
コース,２０ｇ／Ｌ；パン酵母,６ｇ／Ｌ；ＮaＣl,５ｇ
／Ｌ；Ｌリジン・モノ塩酸塩,６ｇ／Ｌ；Ｋ２ＨＰＯ４,
２.５ｇ／Ｌ；ＫＨ２ＰＯ４,２.５ｇ／Ｌ；ＭnＳＯ４・
７Ｈ２Ｏ,０.１２５ｇ／Ｌ；ＺnＳＯ４・７Ｈ２Ｏ,０.
０５ｇ／Ｌ；ＭnＳＯ４・４Ｈ２Ｏ,０.０１ｇ／Ｌ；Ｆe
ＳＯ４・７Ｈ２Ｏ,０.０２ｇ／Ｌ；グリセロール,３０.
０ｇ／Ｌ；大豆油,２０ｇ／Ｌ］を、０.５ｇ／ＬのＮＯ
ＰＣＯ Ｆoamaster消泡剤と一緒に２０Ｌの発酵槽中、
１２１℃で４５分間、in situにて滅菌処理した。滅菌
処理後、pＨを５０％ＮＨ３溶液で６.４に調整し、つい
で７２時間の種子培養菌で４％にて接種した。発酵槽を
０.２バール過圧下、７.５Ｌ／分の空気流で２５℃、４
８０ｒｐｍで作動させた。そのpＨを６.０に落とし、つ
いで５０％ＮＨ３溶液を添加することによってそのレベ
ルを維持した。Ｐluronic Ｌ８１消泡剤（大豆油の２０
％溶液）を添加することでフォーミングを制御した。ブ
ロスを１１８時間で収穫した。
【００３０】単離操作 収穫の際に全ブロス（１５Ｌ）を硫酸でpＨ４に調整
し、得られた物をバッチ毎に２０００ｇで２０分間、遠
心機で処理した。菌糸固体を、ジクロロメタン中、５℃
で一夜浸漬し、つづいてブレード付スターラーを用いて
１時間混合することにより抽出した。固体を濾過（ホワ
ットマン（Whatman）ＧＦＤ濾紙）により除去し、液相
をローターリーエバポレーターを用いて粘性油にまで濃
縮した。該油をメタノールを用いて抽出し、そのメタノ
ール性相を軽油に濃縮した。シリカクロマトグラフィー
に付す前にアセトン−ヘキサン（１５：８５）６０ｍｌ
を加えた。
し、得られた物をバッチ毎に２０００ｇで２０分間、遠
心機で処理した。菌糸固体を、ジクロロメタン中、５℃
で一夜浸漬し、つづいてブレード付スターラーを用いて
１時間混合することにより抽出した。固体を濾過（ホワ
ットマン（Whatman）ＧＦＤ濾紙）により除去し、液相
をローターリーエバポレーターを用いて粘性油にまで濃
縮した。該油をメタノールを用いて抽出し、そのメタノ
ール性相を軽油に濃縮した。シリカクロマトグラフィー
に付す前にアセトン−ヘキサン（１５：８５）６０ｍｌ
を加えた。
【００３１】クロマトグラフィー精製 その溶液を、段階的勾配のアセトン／ヘキサンで溶出す
る、アセトン−ヘキサン（１５：８５）のシリカゲル
（ソルビジル（Sorbsil）Ｃ６０ ローヌ−プーラン（Rh
one-Poulenc）、マンチェスター）の３０×２.５ｃｍカ
ラム上でクロマトグラフィーに付した。３０％より多い
アセトンを用いて得られた、２９−デスメチルラパマイ
シン含有のフラクションを合し、真空下で濃縮して油３
３３ｍｇを得た。ラパマイシン含有の他のフラクション
は除去した。２９−デスメチルラパマイシン含有の油を
メタノール２.２ｍｌに溶かし、２０００ｒｐｍで遠心
分離に付すことで浄化した。上澄液を分取用逆相高性能
液体クロマトグラフィー（ｈｐｌｃ）を介して精製し
た。ダイナマックス（Dynamax）６０Ａ Ｃ１８カラム
（４１.４×２５０ｍｍ）およびプレカラム（４１.４×
５０ｍｍ）（米国、マサチューセッツ州０１８０１、ウ
ォバーン（Woburn）、ライニン・インストラメンツ（Ra
inin Instruments））を用いた。該カラムを５０ｍｌ／
分でメタノール−水（７２：２８）で溶出した。溶出を
２７５ｎｍでモニターした。２９−デスメチルラパマイ
シン含有のフラクションをプールし、蒸発乾固させ、白
色粉末２３ｍｇを得た。目的化合物を含有するフラクシ
ョンを、３０℃で操作し、２７５ｎｍで紫外線吸光度を
モニターする、２.０×２０ｍｍプレカラム（米国、ワ
シントン州９８２７７、オーク・ハーバー（Oak Harbou
r）、アップチャーチ・サイエンティフィック・リミテ
ッド（Upchurch ScientificLtd.））を備えたマイクロ
ソルブ（microsorb）５μｍ Ｃ１８カラム４.６×２５
０ｍｍ（ライニン・インストラメンツ）を用いる逆相ｈ
ｐｌｃにより分析した。該カラムを１ｍｌ／分でメタノ
ール−水（７８：２２）で溶出した。これらの条件下、
２９−デスメチルラパマイシンと称される目的化合物
は、ラパマイシンの保持時間と異なる、１０.８４分の
保持時間を有した。得られた化合物を、質量分光法（Ｆ
ＡＢ）［Ｍ＋Ｎa]＋＝９２２により、プロトンおよび１
３Ｃ核磁気共鳴分光法により特性付けた。（以下の実施
例２参照）、ＵＶ分光法は水性メタノール中、２６９、
２７８および２９１ｎｍでＵＶλｍａｘを示す。
る、アセトン−ヘキサン（１５：８５）のシリカゲル
（ソルビジル（Sorbsil）Ｃ６０ ローヌ−プーラン（Rh
one-Poulenc）、マンチェスター）の３０×２.５ｃｍカ
ラム上でクロマトグラフィーに付した。３０％より多い
アセトンを用いて得られた、２９−デスメチルラパマイ
シン含有のフラクションを合し、真空下で濃縮して油３
３３ｍｇを得た。ラパマイシン含有の他のフラクション
は除去した。２９−デスメチルラパマイシン含有の油を
メタノール２.２ｍｌに溶かし、２０００ｒｐｍで遠心
分離に付すことで浄化した。上澄液を分取用逆相高性能
液体クロマトグラフィー（ｈｐｌｃ）を介して精製し
た。ダイナマックス（Dynamax）６０Ａ Ｃ１８カラム
（４１.４×２５０ｍｍ）およびプレカラム（４１.４×
５０ｍｍ）（米国、マサチューセッツ州０１８０１、ウ
ォバーン（Woburn）、ライニン・インストラメンツ（Ra
inin Instruments））を用いた。該カラムを５０ｍｌ／
分でメタノール−水（７２：２８）で溶出した。溶出を
２７５ｎｍでモニターした。２９−デスメチルラパマイ
シン含有のフラクションをプールし、蒸発乾固させ、白
色粉末２３ｍｇを得た。目的化合物を含有するフラクシ
ョンを、３０℃で操作し、２７５ｎｍで紫外線吸光度を
モニターする、２.０×２０ｍｍプレカラム（米国、ワ
シントン州９８２７７、オーク・ハーバー（Oak Harbou
r）、アップチャーチ・サイエンティフィック・リミテ
ッド（Upchurch ScientificLtd.））を備えたマイクロ
ソルブ（microsorb）５μｍ Ｃ１８カラム４.６×２５
０ｍｍ（ライニン・インストラメンツ）を用いる逆相ｈ
ｐｌｃにより分析した。該カラムを１ｍｌ／分でメタノ
ール−水（７８：２２）で溶出した。これらの条件下、
２９−デスメチルラパマイシンと称される目的化合物
は、ラパマイシンの保持時間と異なる、１０.８４分の
保持時間を有した。得られた化合物を、質量分光法（Ｆ
ＡＢ）［Ｍ＋Ｎa]＋＝９２２により、プロトンおよび１
３Ｃ核磁気共鳴分光法により特性付けた。（以下の実施
例２参照）、ＵＶ分光法は水性メタノール中、２６９、
２７８および２９１ｎｍでＵＶλｍａｘを示す。
【００３２】実施例２ 接種原調製 実施例１に記載の操作を用いた。 最終段階の発酵 ３００ＬのＲＰ２培地（＋ＮＯＰＣＯ Ｆoamaster消泡
剤,０.５ｇ／Ｌ）を、４５０Ｌの発酵槽中、１２１℃で
６０分間、in situにて滅菌処理した。そのpＨを５０％
ＮＨ３溶液で６.４に調整し、ついで４８時間の種子培
養菌を用いて４％にて接種した。発酵槽を０.５バール
過圧下、１５０Ｌ／分の空気流で２５℃、２２０ｒｐｍ
（１〜１８時間の間は１１０ｒｐｍ）で作動させた。そ
のpＨを６.０に落とし、ついで５０％ＮＨ３溶液を添加
することによってそのレベルを維持した。Ｐluronic Ｌ
８１消泡剤（大豆油の２０％溶液）を添加することでフ
ォーミングを制御した。ブロスを１３７時間で収穫し
た。
剤,０.５ｇ／Ｌ）を、４５０Ｌの発酵槽中、１２１℃で
６０分間、in situにて滅菌処理した。そのpＨを５０％
ＮＨ３溶液で６.４に調整し、ついで４８時間の種子培
養菌を用いて４％にて接種した。発酵槽を０.５バール
過圧下、１５０Ｌ／分の空気流で２５℃、２２０ｒｐｍ
（１〜１８時間の間は１１０ｒｐｍ）で作動させた。そ
のpＨを６.０に落とし、ついで５０％ＮＨ３溶液を添加
することによってそのレベルを維持した。Ｐluronic Ｌ
８１消泡剤（大豆油の２０％溶液）を添加することでフ
ォーミングを制御した。ブロスを１３７時間で収穫し
た。
【００３３】単離操作 収穫の際に全ブロス（３２０Ｌ）を塩酸でpＨ４に調整
し、得られた物を３Ｌ／分でウェストファリア（Ｗestf
alia）ＳＡ７−０３−０７６液体／固体遠心分離機（ド
イツ国、オエルデ（Ｏelde）、ウェストファリア・セパ
レーター・リミテッド（Ｗestfalia Ｓeparator Ｌt
d.））に送り込んだ。蓄積固体を断続的に排出して濃縮
スラリーを形成させた。これをジクロロメタン１２０Ｌ
と一緒に１時間撹拌することにより抽出した。溶媒相を
遠心操作（シャープルズ超遠心機（Ｓharples supercen
trifuge））により回収し、固体を１００Ｌのジクロロ
メタンと一緒に１２時間撹拌することにより再度抽出し
た。第２抽出からの溶媒相を比重により分離し、第１溶
媒抽出液と合した。合した抽出液を温度を３５℃以下に
保持しながら真空下で濃縮し、４Ｌの黒色油といくらか
の懸濁固体を得た。メタノールに対するその油と固体の
多重分配（１１）により不純物を除去した。全部で６
２.４Ｌのメタノール相を比重分離により回収した。こ
れを濃縮して黒色油０.６５Ｌを得た。
し、得られた物を３Ｌ／分でウェストファリア（Ｗestf
alia）ＳＡ７−０３−０７６液体／固体遠心分離機（ド
イツ国、オエルデ（Ｏelde）、ウェストファリア・セパ
レーター・リミテッド（Ｗestfalia Ｓeparator Ｌt
d.））に送り込んだ。蓄積固体を断続的に排出して濃縮
スラリーを形成させた。これをジクロロメタン１２０Ｌ
と一緒に１時間撹拌することにより抽出した。溶媒相を
遠心操作（シャープルズ超遠心機（Ｓharples supercen
trifuge））により回収し、固体を１００Ｌのジクロロ
メタンと一緒に１２時間撹拌することにより再度抽出し
た。第２抽出からの溶媒相を比重により分離し、第１溶
媒抽出液と合した。合した抽出液を温度を３５℃以下に
保持しながら真空下で濃縮し、４Ｌの黒色油といくらか
の懸濁固体を得た。メタノールに対するその油と固体の
多重分配（１１）により不純物を除去した。全部で６
２.４Ｌのメタノール相を比重分離により回収した。こ
れを濃縮して黒色油０.６５Ｌを得た。
【００３４】最初のクロマトグラフィー精製 等容量のアセトン−ヘキサン（１５：８５）を油に加
え、得られた物をアセトン−ヘキサン（１５：８５）の
シリカカラム（１０×３０ｃｍソルビジルＣ６０シリカ
４０−６０μｍ（ローヌ・プーラン））上に充填した。
溶出を段階的勾配のアセトン−ヘキサンを用いて０.２
バールで実施した。２０％より多いアセトンを用いて得
られたフラクションはラパマイシンを含有しており、除
去した。２９−デスメチルラパマイシン含有の２５％よ
り多いアセトンを用いて得られたフラクションを合し、
蒸発させて油を得た。これをジエチルエーテルに溶か
し、５℃で不純物がいくらか沈殿した。残りの溶液を油
に蒸発させてシリカ上のクロマトグラフィーに付した。
え、得られた物をアセトン−ヘキサン（１５：８５）の
シリカカラム（１０×３０ｃｍソルビジルＣ６０シリカ
４０−６０μｍ（ローヌ・プーラン））上に充填した。
溶出を段階的勾配のアセトン−ヘキサンを用いて０.２
バールで実施した。２０％より多いアセトンを用いて得
られたフラクションはラパマイシンを含有しており、除
去した。２９−デスメチルラパマイシン含有の２５％よ
り多いアセトンを用いて得られたフラクションを合し、
蒸発させて油を得た。これをジエチルエーテルに溶か
し、５℃で不純物がいくらか沈殿した。残りの溶液を油
に蒸発させてシリカ上のクロマトグラフィーに付した。
【００３５】クロマトグラフィー精製 １５：８５のアセトン−ヘキサンにソルビジルＣ６０シ
リカ４０−６０μｍ（ローヌ・プーラン）を詰め込んだ
シリカカラム（２.５×２５ｃｍ）上に該油を充填した
後、溶出を２５：７５のアセトン−ヘキサンを用いて続
けた。２９−デスメチルラパマイシン含有のフラクショ
ンをプールし、真空下で濃縮して残渣を得た。これをメ
タノールに溶かし、分取用ｈｐｌｃを介してさらに精製
を行った。ダイナマックス６０ÅＣ１８カラム（４１.
４×２５０およびプレカラム４１.４×５０ｍｍ、ライ
ニン・インストラメンツ）を用いた。該カラムをメタノ
ール−水（７２：２８）、５０ｍｌ／分で溶出した。溶
出を２７５ｎｍでモニターした。目的化合物含有のフラ
クションをプールし、真空下で濃縮して白色固体を得
た。 マイクロソルブ（Ｍicrosorb）Ｃ１８５μｍカラム（２
１.４×２５０ｍｍ）（ライニン・インストラメンツ）
を用いる分取用ｈｐｌｃにより最終精製を行った。該カ
ラムをメタノール−水（７４：２６）で溶出し、繰返し
注入を用いて前記のカラムからの生成物をすべて精製し
た。純粋な２９−デスメチルラパマイシン含有のフラク
ションをプールし、真空下で濃縮して白色固体を得た。
真空下でさらに乾燥させた後、２９−デスメチルラパマ
イシン１９８.９ｍｇを得た。マイクロソルブ５μｍＣ
１８カラム４.６×２５０ｍｍ（ライニン・インストラ
メンツ）およびアップチャーチプレカラム（２.０×２
０ｍｍ）を用いる逆相ｈｐｌｃにより目的化合物含有の
フラクションを分析した。このシステムを３０℃で操作
し、２７５ｎｍでの紫外線吸光度によりモニター観察し
た。カラムをメタノール−水（７６：２４）で１ｍｌ／
分で溶出した。これらの条件下、２９−デスメチルラパ
マイシンで示される目的化合物は、ラパマイシンの保持
時間と異なる、１３.８分の保持時間を有した。２９−
デスメチルラパマイシンを、質量分光法ＦＡＢ［Ｍ＋Ｎ
a]＋＝９２２により、プロトンおよび１３Ｃ核磁気共鳴
分光法により特徴付けた。
リカ４０−６０μｍ（ローヌ・プーラン）を詰め込んだ
シリカカラム（２.５×２５ｃｍ）上に該油を充填した
後、溶出を２５：７５のアセトン−ヘキサンを用いて続
けた。２９−デスメチルラパマイシン含有のフラクショ
ンをプールし、真空下で濃縮して残渣を得た。これをメ
タノールに溶かし、分取用ｈｐｌｃを介してさらに精製
を行った。ダイナマックス６０ÅＣ１８カラム（４１.
４×２５０およびプレカラム４１.４×５０ｍｍ、ライ
ニン・インストラメンツ）を用いた。該カラムをメタノ
ール−水（７２：２８）、５０ｍｌ／分で溶出した。溶
出を２７５ｎｍでモニターした。目的化合物含有のフラ
クションをプールし、真空下で濃縮して白色固体を得
た。 マイクロソルブ（Ｍicrosorb）Ｃ１８５μｍカラム（２
１.４×２５０ｍｍ）（ライニン・インストラメンツ）
を用いる分取用ｈｐｌｃにより最終精製を行った。該カ
ラムをメタノール−水（７４：２６）で溶出し、繰返し
注入を用いて前記のカラムからの生成物をすべて精製し
た。純粋な２９−デスメチルラパマイシン含有のフラク
ションをプールし、真空下で濃縮して白色固体を得た。
真空下でさらに乾燥させた後、２９−デスメチルラパマ
イシン１９８.９ｍｇを得た。マイクロソルブ５μｍＣ
１８カラム４.６×２５０ｍｍ（ライニン・インストラ
メンツ）およびアップチャーチプレカラム（２.０×２
０ｍｍ）を用いる逆相ｈｐｌｃにより目的化合物含有の
フラクションを分析した。このシステムを３０℃で操作
し、２７５ｎｍでの紫外線吸光度によりモニター観察し
た。カラムをメタノール−水（７６：２４）で１ｍｌ／
分で溶出した。これらの条件下、２９−デスメチルラパ
マイシンで示される目的化合物は、ラパマイシンの保持
時間と異なる、１３.８分の保持時間を有した。２９−
デスメチルラパマイシンを、質量分光法ＦＡＢ［Ｍ＋Ｎ
a]＋＝９２２により、プロトンおよび１３Ｃ核磁気共鳴
分光法により特徴付けた。
【００３６】２９−デスメチルラパマイシンの抗真菌活
性 活性スペクトル 方法−活性スペクトルは、リン酸ナトリウム緩衝液（p
Ｈ６.６）に調製された化合物溶液を、ウェル中、種子
のあるサブローデキストロース寒天（Ｓabouraud’s Ｄ
extrose Ａgar）に置くことにより測定した。活性は、
３７℃（酵母およびアスペルギルス・ニガー（Aspergil
lus niger）または３０℃（他の繊維状真菌）で２４時
間インキュベーションした後の抑制ゾーンを測定するこ
とにより評価した。 結果−（表１）本発明の化合物は寒天拡散試験にて広範
なスペクトル活性を示した。
性 活性スペクトル 方法−活性スペクトルは、リン酸ナトリウム緩衝液（p
Ｈ６.６）に調製された化合物溶液を、ウェル中、種子
のあるサブローデキストロース寒天（Ｓabouraud’s Ｄ
extrose Ａgar）に置くことにより測定した。活性は、
３７℃（酵母およびアスペルギルス・ニガー（Aspergil
lus niger）または３０℃（他の繊維状真菌）で２４時
間インキュベーションした後の抑制ゾーンを測定するこ
とにより評価した。 結果−（表１）本発明の化合物は寒天拡散試験にて広範
なスペクトル活性を示した。
【００３７】ＭＩＣデータ 方法−最小抑制濃度（ＭＩＣ）は、化合物をマイクロタ
イタートレイのブロス培地にて希釈することにより測定
した。微生物を希釈し、ウェルに加え、約１０５細胞／
ｍｌまたは１０４真菌胞子／ｍｌの最終接種原を得た。
該トレイを３７℃でインキュベートし、各ウェルの濁度
を間隔をおいて書き留めた。ＭＩＣは有意な生長を防止
する最低濃度（ｍｇ／ｍｌ）をいう。
イタートレイのブロス培地にて希釈することにより測定
した。微生物を希釈し、ウェルに加え、約１０５細胞／
ｍｌまたは１０４真菌胞子／ｍｌの最終接種原を得た。
該トレイを３７℃でインキュベートし、各ウェルの濁度
を間隔をおいて書き留めた。ＭＩＣは有意な生長を防止
する最低濃度（ｍｇ／ｍｌ）をいう。
【００３８】
【表２】
【００３９】 表２ 最小抑制濃度（μｇ／ｍｌ） （インキュベーションの１および２日後に測定） 微生物* 日 ＭＩＣ カンジダ・アルビカンス １ ３２ ７３／０７９ ２ ３２ アスペルギルス・ニガー １ １６ ２ ３２ ＊ 各々、１０５細胞／ｍｌおよび１０４胞子／ｍｌの接種原
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ１２Ｐ 17/18 Ｃ１２Ｐ 17/18 Ｃ //(Ｃ１２Ｎ 1/20 (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ａ Ｃ１２Ｒ 1:465） Ｃ１２Ｒ 1:465） (Ｃ１２Ｐ 17/18 (Ｃ１２Ｐ 17/18 Ｃ Ｃ１２Ｒ 1:465） Ｃ１２Ｒ 1:465） (72)発明者 ピーター・ロビン・シェリー イギリス国サリー・アールエイチ３・７エ イジェイ、ベッチワース、ブロッカム・パ ーク スミスクライン・ビーチャム・ファ ーマシューティカルズ (72)発明者 ローナ・メアリー・バンクス イギリス国サリー・ケイティー20・７エヌ ティー、タッドワース、ドーキング・ロー ド、ウォルトン・オークス スミスクライ ン・ビーチャム・ファーマシューティカル ズ
Claims (4)
- 【請求項１】 ２９−デスメチルラパマイシンである式
（Ｉ）： 【化１】 で示される化合物またはその誘導体。 - 【請求項２】 次の特性： i） 高速原子衝撃（ＦＡＢ）質量分光法によれば、見
かけ分子量が８９９であること； ii） ストレプトミセス属の微生物を培養することで得
ることができること； iii） １３Ｃ ＮＭＲ分光法が、分子中、５０個の炭素
原子を示すこと； iv） カンジダ・アルビカンスに対して抗真菌活性を示
すこと； v） 免疫抑制特性を示すことを有することにより特徴
付けられる化合物。 - 【請求項３】 請求項１または請求項２に記載の化合物
あるいはその混合物またはその医薬上許容される誘導体
と、医薬上許容される担体または賦形剤とからなる医薬
組成物。 - 【請求項４】 免疫調節剤としてまたはヒトを包含する
動物の微生物感染の治療において有用な請求項１または
請求項２記載の化合物またはその混合物あるいは請求項
３記載の組成物。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB919103430A GB9103430D0 (en) | 1991-02-19 | 1991-02-19 | Novel compound |
| GB9103430.6 | 1991-02-19 |
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP50418792A Division JP3245158B2 (ja) | 1991-02-19 | 1992-02-14 | ３−デスメチルラパマイシンまたはその誘導体、それらの製法ならびにそれらの抗真菌剤および免疫抑制剤としての使用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2001226380A true JP2001226380A (ja) | 2001-08-21 |
Family
ID=10690214
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP50418792A Expired - Fee Related JP3245158B2 (ja) | 1991-02-19 | 1992-02-14 | ３−デスメチルラパマイシンまたはその誘導体、それらの製法ならびにそれらの抗真菌剤および免疫抑制剤としての使用 |
| JP2001000167A Pending JP2001226380A (ja) | 1991-02-19 | 2001-01-04 | ３−デスメチルラパマイシンまたはその誘導体ならびにそれらの抗真菌剤および免疫抑制剤としての使用 |
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP50418792A Expired - Fee Related JP3245158B2 (ja) | 1991-02-19 | 1992-02-14 | ３−デスメチルラパマイシンまたはその誘導体、それらの製法ならびにそれらの抗真菌剤および免疫抑制剤としての使用 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
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| EP (1) | EP0572454B1 (ja) |
| JP (2) | JP3245158B2 (ja) |
| DE (1) | DE69231898T2 (ja) |
| GB (1) | GB9103430D0 (ja) |
| WO (1) | WO1992014737A1 (ja) |
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| AU2001260613A1 (en) * | 2000-05-25 | 2001-12-03 | Sumitomo Osaka Cement Co., Ltd. | Thermoplastic hydraulic composition, formed product prepared from the composition by hardening through hydration thereof, and method for preparing the formed product |
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| KR20080077989A (ko) * | 2005-12-20 | 2008-08-26 | 와이어쓰 | 약물의 불순물 조절을 통한 ｃｃｉ-779 제형의 안정성 조절 |
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| MX2009008105A (es) * | 2007-01-29 | 2010-03-03 | Wyeth Corp | Ligando de inmunofilina ds y metodos para modular la inmunofilina y la actividad de canal de calcio. |
| US20080287675A1 (en) * | 2007-05-18 | 2008-11-20 | Abbott Laboratories | Cascade system |
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|---|---|---|---|---|
| US3993749A (en) * | 1974-04-12 | 1976-11-23 | Ayerst Mckenna And Harrison Ltd. | Rapamycin and process of preparation |
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