JP3140228B2

JP3140228B2 - 新規な大環状ラクトンおよびその生産菌

Info

Publication number: JP3140228B2
Application number: JP04323407A
Authority: JP
Inventors: 博之西田; 辰雄榊原; 雄治山内; 泰介稲垣; 康広小嶋; 仲夫小嶋
Original assignee: ファイザー製薬株式会社
Priority date: 1992-02-17
Filing date: 1992-12-02
Publication date: 2001-03-05
Anticipated expiration: 2016-03-05
Also published as: JPH05292948A; ATE145429T1; DE69306102T2; AU3658693A; EP0627009B1; DE69306102D1; FI943773A0; EP0627009A1; MX9300804A; DK0627009T3; IL104652A0; ES2095044T3; CA2128529A1; WO1993016189A1; FI943773A; GR3022309T3

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は新規大環状ラクトン、そ
の生産菌、ならびに前記大環状ラクトンの製造方法およ
び用途に関する。特に本発明は、微工研条寄第3688号、
微工研条寄第3832号またはアメリカン・タイプカルチャ
ーコレクションATCC 39471の番号で寄託されている微生
物を栄養培地中で培養することにより生産される新規大
環状ラクトンに関する。本発明はこれらの新規な大環状
ラクトンを有効成分とする免疫抑制用、真菌症治療用お
よび悪性腫瘍治療用薬剤に関する。更に、上記寄託微生
物を培養して新規および既知の大環状ラクトンを製造す
る方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】1983年アメリカ合衆国食品医薬品局は臓
器移植手術に革命をもたらしたペプチド性免疫抑制剤シ
クロスポリンを認可した。シクロスポリンは免疫系を阻
害することにより、臓器移植の際生ずる拒絶反応を抑制
する。シクロスポリンは臓器移植の拒絶抑制に効果的で
あるが、多くの場合、重篤な腎障害、肝障害、潰瘍を引
き起こす。したがって、より安全で副作用の少ない新規
化合物の探索が必要とされる。その後、マクロライド系
免疫抑制剤 FK506および FK520（ヨーロッパ特許第 018
4162; 特開昭61-148181 ）が発見され、またラパマイシ
ン (米国特許第3929992 および3993749 ）も免疫抑制剤
として効果があることが知られている。 FK506は腎障害
等を引き起こすという報告(R. L. Simmons and S. C. W
ang, Transplant. Proc., 23: 2152-2156, 1991)がある
がラパマイシンについては重篤な副作用は報告されてい
ない。ラパマイシンの誘導体に関しては、天然から見出
された27- デメトキシラパマイシン（J. A. Findlay et
al., Can. J. Chem., 60, 2046-2047, 1982) を除け
ば、化学修飾による誘導体が報告されているにすぎな
い。化学修飾による誘導体としては、二重結合を還元し
たジヒドロラパマイシンおよびテトラヒドロラパマイシ
ン（米国特許第567858）、42- オキソラパマイシン(米
国特許第564910) 、アシル誘導体 (米国特許第181252,
特開昭57-118586)およびアミノアシル誘導体 (米国特許
第806152, 特開昭62-215592)がある。なお本国内優先出
願の優先権の基礎となっている出願（特願平4-29669 ）
の後、27- デメチルラパマイシン（米国特許第5091389
）および 16, 27-ジデメチルラパマイシン（米国特許
第5093338 ）が報告された。一般的に、化学修飾による
天然物の誘導体合成において特定の官能基を選択的に化
学修飾する事は困難な場合が多い。例えば、ラパマイシ
ンの16位や27位だけを化学的手法により選択的に脱メチ
ル化する事は困難であるし、27位を選択的に還元する事
も難しいであろう。しかし、本発明によれば今まで知ら
れていなかった種々の大環状ラクトンを提供することが
できる。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、新規大環状
ラクトンを生産する菌を提供し、かつ優れた免疫抑制作
用、抗真菌作用および抗悪性腫瘍作用を有する一群の新
規大環状ラクトンを提供することを目的とする。さら
に、ストレプトミセス・ハイグロスコピカス（微工研条
寄第3688号）、アクチノプラネス・エスピー（微工研条
寄第3832号）またはストレプトミセス・トヨカエンシス
・サブエスピー・フミコラ（ ATCC 39471 ）の培養物か
ら大環状ラクトンを回収し、純粋な形で単離、精製する
方法を提供することも本発明の目的である。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、新規免疫
抑制剤を発見する目的で多数の微生物を検索した結果、
新菌株 N929-89（山口県で採取した土壌試料から分離し
た微工研条寄第3688号）、N902-109（微工研条寄第3832
号）および N469-34（ATCC 39471）が、免疫抑制活性、
抗真菌活性および抗悪性腫瘍活性を有する新規な大環状
ラクトンを生産することを見出した。

【０００５】本発明によれば、ここで大環状ラクトンと
総称する一群の物質はN929-89 、N902-109およびN469-3
4 を培地で好気的に培養することによって調製される。
すなわちN929-89 によって、少なくとも６種類の、しか
し密接に関連した大環状ラクトンが生産される。これら
はここに化合物N929-89 A, N929-89B, N929-89Ca, N929
-89Cb, N929-89Cgおよび N929-89M として記述する。N9
02-109からは、少なくとも15種類の大環状ラクトンが生
産される。これらはここに化合物N902-109 A、N902-109
B1、N902-109B2、N902-109C 、 N902-109D、N902-109E
1、N902-109E2、N902-109F 、N902-109G 、N902-109H
、N902-109I 、N902-109J 、 N902-109K、N902-109L
およびN902-109M として記述する。同様にN469-34 から
は、少なくとも６種類の大環状ラクトンが生産される。
これらはここに化合物N469-34 A 、N469-34B、N469-34
C、N469-34D、N469-34EおよびN469-34Fとして記述す
る。ここに得られた大環状ラクトンは、N929-89AとN929
-89Cb を除きすべて新規な大環状ラクトンである。

【０００６】これらの大環状ラクトンは、すべて免疫抑
制活性、抗真菌活性および抗悪性腫瘍活性を有する。こ
れらの物質はここで記述する様に、N929-89 、N902-109
およびN469-34 の培養により得られ、実質的に純粋な形
として回収することができる。

【０００７】N902-109は、既に本出願人により「新規ラ
パマイシン生産菌」の名称で日本特許庁に特許出願され
ており、菌学的性質も明らかにされている（特願平4-10
7612）。またN469-34 は、「中性マクロライド抗生物質
生産菌 (Streptomyces capable of producing neutral
macrolide antibacterial agents) 」の名称で米国にお
いて特許されており、菌学的性質も明らかにされている
（米国特許第4543334）。一方、N929-89 は、本発明に
より初めて提供される菌であり、その菌学的性質は次の
通りである。N929-89 をスラントから液体 ATCC#172 培
地に植菌し、28℃で４日間振盪培養した。次いでこれを
20分間遠心分離し、無菌水で３回洗浄し、放線菌目の微
生物の同定に通常使用される培地上に移した。これを28
℃でインキュベートし、種々な時間で結果を読み取った
が、大部分は14日目に読み取った。色は一般的な用語で
記述したが、厳密な色はColor Harmony Mannual, 4th E
d.のカラーチップと比較することにより判定した。全細
胞アミノ酸および糖の分析法は、B. Becker et al., Ap
pl. Microbiol., 12, 421-423, 1964 およびM. P.Leche
valier, J. Lab. Clin. Med., 71, 934-944, 1968に記
載されたものである。菌株の同定に用いた培地は次の通
りである。

【０００８】1. トリプトン- 酵母エキスブロス (ISP
培地 No.1,ディフコ) 。 2. 酵母エキス- 麦芽エキス寒天 (ISP 培地 No.2,ディ
フコ) 。 3. オートミール寒天 (ISP 培地 No.3,ディフコ) 。 4. 無機塩類- でんぷん寒天 (ISP 培地 No.4,ディフ
コ) 。 5. グリセリン- アスパラギン寒天 (ISP 培地 No.5,デ
ィフコ) 。 6. ペプトン- 酵母エキス鉄寒天 (ISP 培地 No.6,ディ
フコ) 。 7. ツァペック- ショ糖寒天 (S. A. Waksman, The Act
inomycetes, Vol.2,培地No.1, p.328, 1961) 。 8. グルコース- アスパラギン寒天 (同上、培地 No.2,
p.328) 。 9. ベネット寒天 (同上、培地 No.30, p.331)。 10. エマーソン寒天 (同上、培地 No.28, p.331)。 11. 栄養寒天 (同上、培地 No.14, p.330)。 12. ゴードンおよびスミスのチロシン寒天 (R. E. Gord
on and M. H. Smith, J.Bacteriol., 69, 147-150, 195
5) 。 13. カゼイン寒天 (同上) 。 14. マレイン酸カルシウム寒天 (S. A. Waksman, Bacte
riol. Rev., 21, 1-29,1957) 。 15. ゼラチン寒天 (R. E. Gordon and J. M. Mihm, J.
Bacteriol., 73, 15-27,1957)。 16. でんぷん寒天 (同上) 。 17. 有機硝酸塩ブロス (同上) 。 18. デキストロース硝酸塩ブロス (S. A. Waksman, The
Actinomycetes, Vol.2,培地 No.1, p.328, 1961, 30 g
のショ糖の代わりに 3 gのデキストロースを使用し寒天
を除いた) 。 19. ばれいしょ人参寒天 (M. P. Lechevalier, J. Lab.
and Clinical Med., 71, 934-944, 1968, ただし 30
g のばれいしょ、 2.5 gの人参および 20 g の寒天のみ
使用した) 。 20. 2%水道水寒天。 21. スキムミルク (ディフコ) 。 22. セルロースの利用 ( H. L. Jensen, Proc. Linn. S
oc. N. S. W., 55, 231-248, 1930 および M. Levine a
nd H. W. Schoenlein, A Compilation of Culture Medi
a,培地 No.2511, 1930) 。 23. 炭水化物の利用 (ISP 培地 No. 9, ディフコ) 。 24. 温度範囲 (ISP 培地 No.2 にココナツミルクを培地
1 L (リットル) 当たり50 ml 添加した）。

【０００９】１．各培地における生育状態酵母エキス- 麦芽エキス寒天では、生育良好、淡灰色な
いし灰色（類灰色系列3 cb, 3 dc, 3 fe ）、中程度に
***、平滑ないししわが寄る、気菌糸は表面と同じ、裏
面は黄褐色、褐色、灰色から黒色（3 gc, 3 ie, 3 le,
類灰色系列 3 fe, 3 ml); 可溶性色素は淡黄褐色 (3 g
c) 。◎ オートミール寒天では、生育良好、灰色（類灰色系列 3
dc, 3 fe, 5 fe ）、中程度に***、平滑ないし顆粒
状、気菌糸は表面と同じ；裏面は灰色（類灰色系列 3 f
e ）；可溶性色素は淡黄色がかった色（1 1/2 ca）。無
機塩類- でんぷん寒天では、生育良好、白色、淡灰色な
いし灰色（類灰色系列 3 cb, 3 bc, 3 fe ）、***、平
滑ないしわずかにしわが寄る、気菌糸は表面と同じ；裏
面は淡灰色ないし灰色（類灰色系列 3 dc, 3 fe ）；可
溶性色素なし。グリセリン- アスパラギン寒天では、生
育貧弱ないし中程度、クリーム色だが数個の白色ないし
淡灰色の斑点あり（類灰色系列 3 cb, 3 dc ）、わずか
に***、平滑ないし顆粒状、気菌糸は白色ないし淡灰色
（類灰色系列 3 cb, 3 dc ）；裏面はクリーム色だが数
個の淡灰色ないし灰色の斑点あり（類灰色系列 3 dc, 3
fe ）；可溶性色素はクリーム色。ツァペック- ショ糖
寒天では、生育中程度ないし良好、クリーム色ないし淡
灰色（2 ca, 類灰色系列 3 cb ）、わずかに***、平滑
ないし顆粒状、気菌糸は淡灰色（類灰色系列 3 cb, 3 b
c ）；裏面は無色ないし淡灰色（類灰色系列 3 bc）；
可溶性色素なし。グルコース- アスパラギン寒天では、
生育中程度ないし良好、黄色がかった色（1 1/2 ea, 1
1/2 ga, 2 ea）、わずかに***、平滑ないし顆粒状、気
菌糸は白色ないし淡灰色（類灰色系列 3 cｂ）；裏面は
黄色がかった色（2 ga, 2 ea）；可溶性色素は黄色がか
った色（2 ga）。ゴードンおよびスミスのチロシン寒天
では、生育中程度、黄褐色（3 gcに近い）、薄いないし
わずかに***、平滑、気菌糸は白色ないし淡灰色（類灰
色系列 3cb ）；裏面は黄褐色（3 gc）；可溶性色素は
黄褐色（3 nc）。カゼイン寒天では、生育良好、白色だ
が数個の灰色の斑点あり（類灰色系列 3dc, 3 fe ）、
中程度に***、平滑ないしわずかに顆粒状、気菌糸は白
色、淡灰色ないし灰色（類灰色系列 3 dc, 3 fe ）；裏
面は黄色がかった色（2 ea）；可溶性色素は暗黄色がか
った色（2 pe）。ベネット寒天では、生育良好、白色、
淡灰色ないし灰色（類灰色系列 3 dc, 3fe ）；***、
平滑だが縁でしわが寄る、気菌糸は表面と同じ；裏面は
白色、淡灰色ないし灰色（類灰色系列 3 dc, 3 fe ）；
可溶性色素は淡黄色がかった色（2 ea）。エマーソン寒
天では、生育中程度ないし良好、白色ないし淡灰色（類
灰色系列3 cb ）、中程度に***、平滑ないししわが寄
る、気菌糸は表面と同じ、裏面は黄色がかった色（2 e
a）；可溶性色素は黄褐色（3 nc）。栄養寒天では、生
育貧弱ないし中程度、淡黄色がかった色（2 ca と2 ea
の中間）、薄いないしわずかに***、平滑、気菌糸な
し；裏面はクリーム色（2 ca）；可溶性色素なし。マレ
イン酸カルシウム寒天では、生育しないないしはまばら
なクリーム色の斑点状（2 ca）、気菌糸なし；裏面はク
リーム色；可溶性色素なし。ゼラチン寒天では、生育中
程度、白色ないし暗黄色がかった色（2 gc）、中程度に
***、平滑ないし顆粒状または縁に向かってわずかにし
わが寄る、気菌糸は白色；裏面はクリーム色ないし黄色
（2 ca, 2 ea）；可溶性色素なし。でんぷん寒天では、
生育中程度、白色ないし暗黄色（2 gc）、中程度に隆
起、平滑ないし顆粒状または縁に向かってしわが寄る、
気菌糸は白色；裏面はクリーム色ないし黄色（2 ca, 2
ea）；可溶性色素なし。ばれいしょ人参寒天では、生育
中程度、淡灰色ないし灰色（類灰色系列 3 cb,3 dc, 5
fe ）、わずかにないし中程度に***、平滑ないし顆粒
状、気菌糸は表面に同じ；裏面は灰色（類灰色系列 5
fe）；可溶性色素なし。水道水寒天では、生育貧弱ない
し中程度、灰色（類灰色系列 3 fe, 5 fe ）、薄いない
しわずかに***、平滑、気菌糸灰色（類灰色系列 3 fe,
5 fe ）；裏面は灰色（類灰色系列 5 fe, 5 ih ）；可
溶性色素なし。

【００１０】２．形態学的特性オートミール寒天上で14日間の培養後の観察では、気菌
糸は灰色系列；胞子鎖はらせん形セクションで、密に巻
いているかまたは巻いて不規則な塊となる、しばしば鉤
状あるいはわずかに開いている、小径（３〜４μm ）、
７回転まで；胞子鎖あたり 10 ないし 30 の胞子があ
り、しばしば集合して大きな塊状になる；気菌糸は 24
日間培養で黒色の湿潤化した斑点を形成する；胞子柄は
単純分枝しばしば輪生分枝；胞子は卵形、楕円形、短桿
状ないし桿状でしばしば両端が互いに平行でない、1 〜
1.6 （〜1.8 ）x 0.8 〜1.1 （〜1.2 ）μm ；走査電子
顕微鏡により解明されたところによれば胞子表面はしわ
状である。

【００１１】３．生化学的特性メラニンを産生しない；硫化水素を産生する；ゼラチン
を液化する；でんぷんを加水分解する；硝酸塩を亜硝酸
塩に還元する；両種のセルロースブロスでの発育は貧弱
でセルロースを分解しない；ミルクを凝固およびペプト
ン化する；カゼインの分解は陽性；チロシンの分解は陰
性。炭水化物の利用：グルコース、アラビノース、フル
クトース、イノシトール、マンニトール、ラフィノー
ス、ショ糖およびキシロースを利用する；ラムノースは
利用しない。

【００１２】４. 生育温度は、21℃で中程度ないし良好
な生育、28℃で良好ないし非常に良好な生育、37℃で中
程度の生育、45℃では生育しない。

【００１３】５．細胞壁の分析全細胞加水分解物は LL - ジアミノピメリン酸、グルコ
ース、マンノースおよびリボースを含有する。

【００１４】上記菌学的性質を要約すると、N929-89 は
放線菌目の細い菌糸、分断しない栄養菌糸および胞子鎖
を形成する気菌糸を有し、灰色系列の気菌糸、メラニン
反応陰性、およびらせん状に巻いた鎖の形に配列したし
わ状の胞子を特色とする。24日間培養後、酵母エキス-
麦芽エキス寒天、オートミール寒天、無機塩類- でんぷ
ん寒天およびばれいしょ人参寒天上で数個の胞子鎖の湿
潤化した斑点が産生された。栄養菌糸の色はクリーム
色、黄色、淡灰色ないし灰色にわたった。クリーム色、
淡黄色、黄色および黄褐色を除外すれば、明瞭な可溶性
色素は産生されなかった。グルコース、アラビノース、
フルクトース、イノシトール、マンニトール、ラフィノ
ース、ショ糖およびキシロースは利用したが、ラムノー
スは利用しなかった。全細胞加水分解物の分析によれば
LL-ジアミノピメリン酸の含有が認められた。

【００１５】以上の諸性状からN929-89 はストレプトミ
セス (Streptomyces) 属の菌種の中でストレプトミセス
・ハイグロスコピカス (Streptomyces hygroscopicus)
の性状と最も近似している。N929-89 はショ糖およびラ
フィノースの利用が陽性であることとラムノースの利用
が陰性であることを除けば、シャーリング（Shirling)
とゴットリーブ(Gottlieb)によりInt. J. Syst. Bacter
ial., 22: 265-394, 1972 に発表されたストレプトミセ
ス・ハイグロスコピカスのネオタイプ菌株 (neotype st
rain) の記載とよく一致する。トレスナー (Tresner)と
バッカス (Backus) により Appl. Microbiol., 4: 243-
250, 1956 で発表されたストレプトミセス・ハイグロス
コピカスの広義の種概念の提案によれば、炭水化物の利
用は菌株間で異なっている。従ってN929-89 はストレプ
トミセス・ハイグロスコピカス（ジェンセン）ワックス
マンおよびヘンリチ (Streptomyces hygroscopicus (Je
nsen) Waksman and Henrici)の新菌株であると考えら
れ、これは工業技術院微生物工業技術研究所にストレプ
トミセス・ハイグロスコピカス F. D. 29009 (Streptom
yces hygroscopicus F. D. 29009) の表示で微工研条寄
第3688号 (FERM BP-3688) として、ブダペスト条約の下
に1991年12月19日付けで寄託されている。

【００１６】なお、ストレプトミセス・ハイグロスコピ
カス微工研条寄第3688号をVezinaらによってJ. Antibio
tics, 28, 721-726, 1975に記載されているラパマイシ
ン生産菌ストレプトミセス・ハイグロスコピカスATCC 2
9253と比較すると、微工研条寄第3688号は硫化水素の産
生、ショ糖の利用陽性およびラムノースの利用陰性の点
で異なっている。さらに、グリセリン- アスパラギン寒
天およびベネット寒天上でコロニーの裏面が微工研条寄
第3688号は各々クリーム色および淡灰色ないし灰色であ
るのに対しATCC 29253は各々淡黄色ないしピンクがかっ
た色および淡黄色ないし緑がかった色である。グリセリ
ン- アスパラギン寒天上では微工研条寄第3688号の可溶
性色素はクリーム色であるのに対しATCC 29253のそれは
淡ピンク色である。

【００１７】本発明における新菌株N929-89 の培養は次
の様に行うのが好ましい。小規模の培養を行うには、ま
ず適当量の栄養培地をフラスコの中に入れ、既知の方法
で滅菌した後、このフラスコにストレプトミセス・ハイ
グロスコピカス微工研条寄第3688号の胞子または栄養生
育細胞を植菌する。次にこのフラスコの口をゆるく綿栓
し、約28℃のロータリーシェーカー上約３ないし10日間
発酵を行う。大規模の培養には、攪拌機、通気装置およ
び滅菌装置を備えた適当な大きさのタンク中で行うのが
望ましい。栄養培地をタンク中に入れて滅菌し、ストレ
プトミセス・ハイグロスコピカス微工研条寄第3688号の
胞子または栄養生育細胞を植菌する。培地のpHは5 から
9 、好ましくは6 から7.5 が好ましい。培養は、約20な
いし40℃の範囲の温度で、栄養培地を攪拌および／また
は通気しながら約１ないし10日間行う。通気の程度はい
くつかの因子（例えば培養器の大きさ、攪拌速度等）に
よって変える必要がある。一般的に攪拌は0 ないし2,00
0rpm、好ましくは100 から360rpmで、また通気は培地容
量の0 ないし500%, 好ましくは80から120%の空気を毎分
送りこむことによって行うのが望ましい。

【００１８】本発明におけるN469-34 の培養は、培養液
中にラパマイシンを添加する他は、上記N929-89 と同様
の方法で培養できる。また、N902-109も、P450代謝酵素
の阻害物質である2-メチル-1,2-ジ-3-ピリジル-1-プロ
パノンを培養液中に添加する他は、上記N929-89 と同様
の方法で培養できる。一般に大環状ラクトンと表現して
いる本発明の新規物質は、ストレプトミセス・ハイグロ
スコピカス（微工研条寄第3688号）、アクチノプラネス
・エスピー（微工研条寄第3832号）およびストレプトミ
セス・トヨカエンシス・サブエスピー・フミコラ（ ATC
C 39471 ）を培養し、それらの培養液上清および菌体か
ら得られる。本発明の大環状ラクトンは、全培養液から
得られ溶媒抽出および各種のクロマトグラフィー技術を
用いて分離することができる。

【００１９】大環状ラクトンは以下に述べる如く抗カン
ジダ・アルビカンス活性およびＭＬＲ（混合リンパ球反
応）活性を測定すること、および各種のスペクトル特性
（たとえば大環状ラクトン特有の紫外線吸収スペクトル
を示すこと）によってその存在が確認される。このよう
にしてN929-89 からは、少なくとも６種類の大環状ラク
トン、N929-89A、N929-89B、N929-89Ca 、N929-89Cb 、
N929-89Cg および N929-89M が、N902-109からは、少な
くとも１５種類の大環状ラクトン、N902-109 A、N902-1
09B1、N902-109B2、N902-109C 、N902-109D 、 N902-10
9E1 、N902-109E2、N902-109F 、N902-109G 、N902-109
H 、N902-109I 、N902-109J 、N902-109K 、 N902-109L
およびN902-109M が、さらにN469-34 からは、少なくと
も６種類の大環状ラクトン、N469-34 A 、 N469-34B 、
N469-34C、N469-34D、N469-34EおよびN469-34Fが単離さ
れる。

【００２０】これらの中で、既に構造決定された大環状
ラクトンは次の式で表される。

【００２１】この平面構造式に於て大環状ラクトンの置換基は表１に
明らかにしてある。

【００２２】

【表１】 -------------------------------------------------- 化合物 R¹ R² R³ R⁴ R⁵ -------------------------------------------------- N929-89A O OH OH OH OCH₃ N929-89B O OH OCH₃ OH OCH₃ N929-89Ca O OCH₃ H OH OH N929-89Cb O OCH₃ OH OH OCH₃ N902-109A O OCH₃ OCH₃ H OCH₃ N902-109B1 H₂ OCH₃ OCH₃ OH OCH₃ N902-109C H₂ OCH₃ H OH OCH₃ N902-109H H₂ OCH₃ H OH OH N469-34A O OCH₃ OCH₃ OH OH -------------------------------------------------- 前述の平面構造式に於て本発明で単離された大環状ラク
トンは本明細書中では平面構造式で記載しているが、該
目的化合物の大環状ラクトンは複数（少なくとも１１個
の）不斉炭素原子を有し、光学異性体やジアステレオマ
ーが存在する。従って、当業者は本目的化合物の使用に
際し、所望によりその光学異性体およびジアステレオマ
ーを含めた他の異性体をその目的に応じて適宜使用する
ことができる。なお、N469-34Aの相対配置はラパマイシ
ンと同一である。

【００２３】本発明の大環状ラクトンのヒトMLR 活性の
測定は、D. P. Dubey et al., Manual Clinical Labora
tory Immunology, 3rd Ed., pp. 847-858, 1986 に記載
されている方法に従って行った。結果を表２に示す。ま
た本発明の新規大環状ラクトンの細胞毒性を測定した
（T. Mosmann, J. Immunol. Methods, 65, 55-63, 198
3）ところ、本発明の大環状ラクトンの細胞毒性を引き
起こす濃度は、MLR 活性を示す濃度に比べ数10培以上で
あった。この結果は、これら新規大環状ラクトンに免疫
抑制効果があることを示している。

【００２４】

【表２】 ------------------------------------------ 化合物 MLR 活性 (IC₅₀, ng/ml) ------------------------------------------ N929-89A 8 N929-89B 28 N929-89Ca 47 N929-89Cb 2.8 N929-89Cg 42 N929-89M 0.1 N902-109A >300 N902-109B1 82 N902-109B2 12 N902-109C 5 N902-109D 8 N902-109E 61 N902-109F 200 N902-109H 32 N902-109J 280 N469-34A 12 ラパマイシン 10 ------------------------------------------ 本発明の大環状ラクトンの抗カンジダ・アルビカンス活
性の測定は、ペーパーディスクを用いる寒天平板希釈法
で行い、その阻止円の大きさ（mm）で表した。ぺーパー
ディスクは直径８mm、厚型のもの（アドバンテック製）
を用い、培地は市販のネオマイシンアッセイ寒天培地
（ディフコ製）を用いた。本発明の新規大環状ラクトン
はすべて、カンジダ・アルビカンスの生育を阻止するこ
とから抗カビ剤としての効力を有している。結果を表３
に示す。

【００２５】

【表３】 ---------------------------------------------- 化合物濃度（μg/disc) 阻止円直径（mm) ---------------------------------------------- N929-89A 40 12 N929-89B 40 25 N929-89Ca 40 15 N929-89Cb 40 15 N929-89Cg 40 12 N929-89M 40 12 ラパマイシン 40 25 ---------------------------------------------- 本発明の新規大環状ラクトンは、すべて免疫抑制、抗真
菌または抗悪性腫瘍作用を示すが、特に好ましい化合物
は、N902-109C 、N902-109D およびN469-34Aである。

【００２６】本発明の新規大環状ラクトンは単独で投与
することもできるが、多くの場合、薬学的に許容される
不活性担体との混合物として経口または非経口的に投与
される。たとえば、適当な賦形剤を含有する錠剤、丸
剤、カプセル剤、坐剤、液剤、乳剤、懸濁剤、その他製
剤的に適当な剤形で用いられる。賦形剤としては、水、
グルコース、ラクトース、アラビアゴム、ゼラチン、マ
ンニトール、澱粉、マグネシウム・トリシリケート、タ
ルク、コーンスターチ、ケラチン、コロイド状シリカ、
ポテトスターチ、尿素、その他通常の製剤に用いられる
ものを使用することができる。また必要に応じて溶解補
助剤、安定化剤、着色剤、芳香剤等を添加することもで
きる。

【００２７】本発明の新規大環状ラクトンの有効治療量
は、個々の患者によって異なるが、通常１日当たり0.01
mg から1,000 mgであり、好ましくは単独投与量で 0.
5、1、5 、10、50、100 、250 、または500 mgである。

【００２８】

【実施例】以下、本発明を実施例を用いて説明するが、
本発明はこれらの実施例において細部にわたって特定さ
れた事項に限定されるものではない。実施例で用いられ
る紫外線吸収スペクトルはメタノ−ル溶液中、日本分光
製分光光度計（Ubest-30）により測定した。また、¹Hお
よび ¹³C核磁気共鳴スペクトル（ＮＭＲ）は、特に指示
がないかぎり重クロロホルム（CDCl₃ ）の溶液で、ブル
カー製核磁気共鳴装置（モデルAM500 ）により測定され
たものである。また、ピーク位置はテトラメチルシラン
からダウンフィールドへ 100万分の１単位（ppm ）で表
現する。ピーク形状は次のように表す。ｓ：シングレッ
ト、ｄ：ダブレット、ｔ：トリプレット、ｍ：マルチプ
レット、ｂｒ：ブロード。LSI マススペクトル（LSI-M
S）はクラトス製質量分析器（モデル１S ）により、NaI
含有ジチオスレイトール／ジチオエリスリトール（3:1
）マトリクスで測定した。

【００２９】実施例１培地１（グルコース2%、ポリペプトン0.5%、肉エキス0.
3%、小麦グルテン0.5%、酵母エキス0.5%、ブラッドミー
ル0.3%、CaCO₃ 0.4%、pH 7.0〜7.2)を100 ml含む500 ml
容三角フラスコに、ストレプトミセス・ハイグロスコピ
カス微工研条寄第3688号を植菌する。このフラスコを直
径７cmの円回転（220 rpm ）のロータリーシェーカー上
で28℃、4 日間培養し第一の種培養液とした。

【００３０】培地１を150 ml含む5 個の500 ml容三角フ
ラスコに第一の種培養液7.5 mlを植菌する。このフラス
コを直径７cmの円回転（220 rpm ）のロータリーシェー
カー上で28℃、4 日間培養し第二の種培養液とした。

【００３１】培地２ (グルコース1%、コーンスターチ2
%、ＮＺアミンタイプＡ 0.5% 、小麦胚芽0.5%、酵母エ
キス0.5%、CoCl₂ ・6H₂O 0.0001%、CaCO₃ 0.4%、pH 7.2
〜7.4)を3 L 入れた5 個の6 L 容ガラス製のファーメン
ターに第二培養液150 mlずつを加える。これを通気量毎
分3 L 、回転速度1700 rpm、28℃にて 3日間培養する。

【００３２】培養終了後15 Lの培養液を等量の酢酸エチ
ルで３回抽出して得られた酢酸エチル抽出液を無水硫酸
ナトリウムで脱水し、減圧下濃縮乾固する。得られた1
0.4 gの大環状ラクトンを含む油状残渣のうち10 gをシ
リカゲル(250 g) を詰めたカラムを用いてクロマトグラ
フィーを行う。このカラムを1000 ml のヘキサンおよび
1000 ml のヘキサン：酢酸エチル (1:1)で順次洗浄した
後、1500 ml のヘキサン：酢酸エチル (1:2)および 100
0 mlの酢酸エチル、次に750 mlの酢酸エチル：アセトン
(2:1)で溶出する。活性画分を集めて濃縮し、セファデ
ックス LH-20ゲル500 ml をメタノールで詰めたカラム
でクロマトグラフィーを行う。活性画分を集めて濃縮
し、ケムコソルブ 5ODS-UH (直径20 mm x 長さ250 mm、
ケムコ製) を充填したカラムを用いて高速液体クロマト
グラフィーを行う。毎分5 mlの流速でメタノール：水
(４：１) の溶媒を用いて溶出し、溶出液の吸光度を305
nmで記録する。溶出ピークを分画し、6.4 mgの化合物N
929-89A、1.0 mgのN929-89B、1.0 mgのN929-89Ca およ
び0.5 mgのN929-89M、3.0 mgのN929-89Cb 、2.1 mgのN9
29-89Cg が得られた。６つの化合物の混合物を上記ケム
コソルブ 5ODS-UHを充填したカラム( 直径4.6 mm x 長
さ150 mm) を用い高速液体クロマトグラフィーを行う。
溶媒にメタノール：水(4:1から10:0まで30分間のリニア
グラジエント) 、40℃、毎分0.8 mlの流速で６つの化合
物は分離される。上記の条件における各化合物に特有の
保持時間は表４の通りである。検出は UV280nmで行っ
た。

【００３３】

【表４】_{------------------------------------} 化合物保持時間 (min)_{------------------------------------} N929-89A 6.58 N929-89B 7.35 N929-89Ca 11.31 N929-89Cb 11.46 N929-89Cg 11.10 N929-89M 10.29 _{------------------------------------} ここに得られた６種類の大環状ラクトン、N929-89 A 、
N929-89B、N929-89Ca、N929-89Cb 、N929-89Cg およびN
929-89Mの物理化学的性質は表５の通りである。化合物N
929-89Cg およびN929-89Mの存在は、これらのLSI マス
スペクトルで証明される。この場合、化合物N929-89Cg
およびN929-89Mの［M+Na］⁺ イオンピークには化合物N9
29-89Bと比べ28質量単位および44質量単位だけ小さいピ
ークが伴う（図11および12を参照のこと）。また、化合
物N929-89Cg およびN929-89Mの¹HNMRスペクトル（図5
および6 を参照のこと）によっても証明される。

【００３４】

【表５】_{--------------------------------------------------------------------} N929-89A N929-89B N929-89Ca _{--------------------------------------------------------------------} 性状白色粉末白色粉末白色粉末紫外線吸収スペクトル(nm) 267, 277, 288 267, 277, 288 267, 277, 288 分子量 886.10 900.17 870.14 分子式 C₄₉H₇₅NO₁₃ C₅₀H₇₇NO₁₃ C₄₉H₇₅NO₁₂ LSIMS(m/z) 908.5〔M+Na〕⁺ 922.5〔M+Na〕⁺ 892.5〔M+Na〕⁺ ¹ H NMR(ppm) 3.41(3H,s,-OMe) 3.34(3H,s,-OMe) 3.14(3H,s,-OMe) 3.41(3H,s,-OMe) _{----------------------------------------------------------------------} N929-89Cb N929-89Cg N929-89M _{----------------------------------------------------------------------} 性状白色粉末白色粉末白色粉末紫外線吸収スペクトル(nm) 267, 277, 288 267, 277, 288 267, 277, 288 分子量 900.17 − − 分子式 C₅₀H₇₇NO₁₃ − − LSIMS(m/z) 922.5〔M+Na〕⁺ 894.5〔M+Na〕⁺ 878.5〔M+Na〕⁺ ¹ H NMR(ppm) 3.14(3H,s,-OMe) 3.41(3H,s,-OMe) 3.41(3H,s,-OMe) 3.41(3H,s,-OMe) _{----------------------------------------------------------------------} 実施例２実施例１で得られたストレプトミセス・ハイグロスコピ
カス微工研条寄第3688号の第一の種培養液 5μl を実施
例１の培地２（100 ml）を含む500 ml容三角フラスコに
植菌する。このフラスコを直径７cmの円回転（220 rpm
）のロータリーシェーカー上で28℃、３日間培養す
る。得られた100 mlの培養液は、抗カンジダ・アルビカ
ンス活性およびＭＬＲ活性を示すので大環状ラクトンを
含んでいることは明白である。化合物N929-89A、N929-8
9B、N929-89Ca 、N929-89Cb 、N929-89Cg およびN929-8
9Mは実施例１と同様の方法で単離することができる。

【００３５】実施例３実施例１で得られたストレプトミセス・ハイグロスコピ
カス微工研条寄第3688号の第一の種培養液を、実施例１
の培地１を1 L 含む３個の3 L 容三角フラスコに植菌す
る。これを直径７cmの円回転（220 rpm ）のロータリー
シェーカー上で28℃、4 日間培養して第二の種培養液と
した。

【００３６】実施例１の培地２を70 L入れた100 L 容ス
テンレススチール製のファーメンターに第二の種培養液
３L を加える。これを通気量毎分70 L、回転速度 360 r
pm、28℃にて 3日間培養する。

【００３７】培養終了後70 Lの培養液を等量の酢酸エチ
ルで抽出する。酢酸エチル抽出液を無水硫酸ナトリウム
で脱水後、減圧下濃縮乾固する。得られた油状残渣は大
環状ラクトンを含んでおり抗カンジダ・アルビカンス活
性およびMLR 活性を示す。化合物 N929-89A 、N929-89
B、N929-89Ca 、N929-89Cb 、N929-89Cg およびN929-89
Mは実施例１と同様の方法で単離することができる。

【００３８】実施例４培地１を100 ml含む 500 ml 容三角フラスコに、凍結保
存したアクチノプラネス・エスピー微工研条寄第3832号
を植菌する。これを直径７cmの円回転（220 rpm ）のロ
−タリ−シェ−カ−上で26℃、4 日間培養し第一の種培
養液とした。

【００３９】培地１を150 ml含む5 個の500 ml容三角フ
ラスコに第一の種培養液7.5 mlを植菌する。これを直径
７cmの円回転（220 rpm ）のロ−タリ−シェ−カ−上で
26℃、３日間培養し第二の種培養液とした。

【００４０】実施例１の培地２を3 L 入れた5 個の 6 L
容ガラス製のファ−メンタ−に第二の種培養液750 mlを
加える。これを通気量毎分3 L 、回転速度1700 rpm、26
℃にて24時間培養した後、滅菌水で溶かした2-メチル-
1,2-ジ-3-ピリジル-1-プロパノンを５ｍＭになる量を添
加しさらに７２時間培養する。

【００４１】培養終了後、得られた30 Lの培養液を等量
の酢酸エチルで２回抽出する。酢酸エチル層を乾燥した
珪藻土（ス−パ−セル）を用いて濾過し、無水硫酸ナト
リウムで脱水後、減圧下にて乾固し、42 gの大環状ラク
トンを含む油状残渣を得る。この油状物質を200 g のシ
リカゲルを詰めたカラムでクロマトグラフィ−を行う。
このカラムを2000 ml のヘキサン：酢酸エチル (2:1)お
よび2000 ml のヘキサン：酢酸エチル (1:1)で展開す
る。更に3000 ml のヘキサン：酢酸エチル (1:2)および
3000 mlの酢酸エチルで溶出し、約 500 ml ずつ12本の
フラクション（フラクション No.1 からNo.12)に分画す
る。さらに 2000 mlの酢酸エチル：メタノール (9:1)で
溶出し、667 mlづつ３本のフラクション（フラクション
No.13からNo.15)を得る。2000 ml のヘキサン：酢酸エ
チル (1:1)画分を集めて濃縮し、セファデックス LH-20
ゲル 500 ml をメタノ−ルで詰めたカラムでクロマトグ
ラフィ−を行う。メタノ−ルで展開し 8 ml ずつ 27 本
のフラクションに分画する。23番目のフラクションを集
めて濃縮し、ケムコソルブ 5ODS-UH (直径20 mm x 長さ
250 mm、ケムコ製) を充填したカラムを用いて高速液体
クロマトグラフィ−を行う。毎分5 mlの流速でメタノ−
ル：水 (85:15)の溶媒を用いて溶出し、溶出液の吸光度
を280 nmで記録する。保持時間97分から106 分のフラク
ションを濃縮し、N902-109A 物質を3.7 mg得る。次に、
シリカゲルクロマトグラフィーで得られたフラクション
No.6 からNo.12 の画分を濃縮し、セファデックス LH-
20ゲル 500 ml をメタノ−ルで詰めたカラムでクロマト
グラフィ−を行う。メタノ−ルで展開し 8 ml ずつ 32
本のフラクションに分画する。26番目から31番目のフラ
クションを集めて濃縮し、ケムコソルブ 5ODS-UH (直径
20 mm x 長さ250 mm、ケムコ製) を充填したカラムを用
いて高速液体クロマトグラフィ−を行う。毎分5 mlの流
速でメタノ−ル：水 (85:15)の溶媒を用いて溶出し、溶
出液の吸光度を310nmで記録する。保持時間40.6分からN
902-109B2物質を8.1 mg、保持時間47.6分からN902-109D
物質を9.8 mg、保持時間63.9分からN902-109H 物質を
0.5 mg、保持時間82.6分からN902-109C 物質を9.1 mg、
保持時間86.8分からN902-109B1物質を4.5 mgを得る。ま
た、これらの化合物以外に保持時間17.7, 21.4, 23.1,
25.1,26.7, 28.4, 29.6, 33.2および69.2分に紫外部吸
収スペクトルが上述の5 つの化合物と一致するピークが
観察された。これらをN902-109E 、N902-109F 、N902-1
09G 、N902-109I 、N902-109J 、N902-109K 、N902-109
L およびN902-109M と命名した。５つの化合物を上記ケ
ムコソルブ 5 ODS-UH を充填した直径4.6 mm x長さ150
mmのカラムを用い高速液体クロマトグラフィ−を行う。
溶媒にメタノ−ル：水、7:3 から 10:0 、30分間のリニ
アグラジェント、40℃、毎分0.7 mlの流速で５つの化合
物は分離される。上記の条件における各化合物に特有の
保持時間は表６の通りである。

【００４２】

【表６】_{--------------------------------} 化合物保持時間 (min)_{--------------------------------} N902-109A 24.5/25.3 N902-109Ｂ1 16.2/23.5 N902-109Ｂ2 17.6/23.4 N902-109C 18.3/23.0 N902-109D 19.2 N902-109H 17.0/21.2 _{--------------------------------} 実施例５実施例１の培地１を 100 ml 含む 500 ml 容の三角フラ
スコに凍結保存したストレプトミセス・トヨカエンシス
・サブエスピー・フミコラ ATCC 39471 を植菌する。こ
れを直径 7 cm の円回転 (220 rpm)のロータリーシェー
カー上で 26 ℃、４日間培養し第一の種培養液とした。
培地１を 150 ml 含む３個の 500 ml 容の三角フラスコ
に第一の種培養液 7.5 ml を植菌する。これを直径 7 c
m の円回転 (220 rpm)のロータリーシェーカー上で 26
℃、３日間培養し第二の種培養液とした。培地３ (グル
コース 3 %、コーンスターチ 1 %、コーンスティープパ
ウダー 0.75 % 、サングロス 0.5 %、綿実粉 0.5 %、Ca
CO₃ 0.4%、CoCl₂ ・6H₂O 0.0001%、pH 7.0) を 3 L入れ
た３個 6 L容ガラス製のファーメンターに第二の種培養
液 150 ml ずつ加える。これを通気量毎分 3 L、回転速
度 1700 rpm 、26℃で１日培養した後ラパマイシン溶液
(5 mg/ml)をファーメンター１個当り 30 ml添加し、26
℃で更に２日間培養した。

【００４３】培養終了後、得られた 15 L の培養液を等
量の酢酸エチルで３回抽出して得られた酢酸エチル抽出
液を無水硫酸ナトリウムで脱水し、減圧下濃縮乾固す
る。得られた大環状ラクトンを含む油状残渣をシリカゲ
ル (100 g)を詰めたカラムを用いてクロマトグラフィー
を行う。このカラムを 1000 mlのクロロホルムおよび 1
000 mlのクロロホルム：メタノール (100:1)で順次洗浄
した後 1000 mlのクロロホルム：メタノール (100:2)お
よびクロロホルム：メタノール (100:4)、最後に2000 m
lのメタノールで溶出する。活性区分を集めて濃縮し、
ケムコソルプ 3OC18 (ケムコ) 220 mlをメタノール：水
(4:1)で詰めたカラムでクロマトグラフィーを行う。活
性区分を集めて濃縮し、カプセルパック SG120 C-18 (
直径 20 mmx 長さ 250 mm 、資生堂) を充填したカラ
ムを用いて高速液体クロマトグラフィーを行う。毎分
7.5 ml の流速でメタノール：水 (4:1)の溶媒を用いて
溶出し、溶出液の吸光度を 310 nm で記録する。溶出ピ
ークを分画し、43.5 mg の化合物が得られ抗カンジダ・
アルビカンス活性および MLR活性を示した。６つの化合
物の混合物を上記ケムコソルプ 5ODS-UH (ケムコ) を充
填したカラム (直径 4.6mm x 長さ 150mm) を用い高速
液体クロマトグラフィーを行う。溶媒にメタノール：水
(7:3 から 10:0 まで 30 分間のリニアグラジェント)
、40℃、毎分 0.7ml の流速でラパマイシンより分離さ
れる。上記の条件における各化合物に特有の保持時間は
表７の通りである。検出は UV 280 nmで行った。

【００４４】

【表７】_{----------------------------------} 化合物保持時間 (min)_{----------------------------------} N469-34 A 18.2 N469-34 B 12.8 N469-34 C 13.4 N469-34 D 14.2 N469-34 E 15.6 N469-34 F 19.1 ラパマイシン 19.4_{----------------------------------}

【００４５】

【発明の効果】本発明により新菌株ストレプトミセス・
ハイグロスコピカス( 微工研条寄第3688号) が提供され
る。また新菌株ストレプトミセス・ハイグロスコピカス
（微工研条寄第3688号）、アクチノプラネス・エスピー
（Actinoplanes sp., 微工研条寄第3832号）およびスト
レプトミセス・トヨカエンシス・サブエスピー・フミコ
ラ（Streptomyces toyokaensis subsp. humicola, ATCC
39471）から生産される新規大環状ラクトンは免疫抑制
剤、真菌治療剤、または悪性腫瘍治療剤として有用であ
る。

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は、化合物N929-89Aの ¹Ｈ核磁気共鳴スペ
クトル図である。

【図２】図２は、化合物N929-89Bの ¹Ｈ核磁気共鳴スペ
クトル図である。

【図３】図３は、化合物N929-89Caの ¹Ｈ核磁気共鳴ス
ペクトル図である。

【図４】図４は、化合物N929-89Cbの ¹Ｈ核磁気共鳴ス
ペクトル図である。

【図５】図５は、化合物N929-89Cgの ¹Ｈ核磁気共鳴ス
ペクトル図である。

【図６】図６は、化合物N929-89Mの ¹Ｈ核磁気共鳴スペ
クトル図である。

【図７】図７は、化合物N929-89Aの LSIマススペクトル
図である。

【図８】図８は、化合物N929-89 Ｂの LSIマススペクト
ル図である。

【図９】図９は、化合物N929-89Ca の LSIマススペクト
ル図である。

【図１０】図１０は、化合物N929-89Cb の LSIマススペ
クトル図である。

【図１１】図１１は、化合物N929-89Cg の LSIマススペ
クトル図である。

【図１２】図１２は、化合物N929-89Mの LSIマススペク
トル図である。

【図１３】図１３は、化合物N929-89Aの紫外線吸収スペ
クトル図である。

【図１４】図１４は、化合物N929-89Bの紫外線吸収スペ
クトル図である。

【図１５】図１５は、化合物N929-89Ca の紫外線吸収ス
ペクトル図である。

【図１６】図１６は、化合物N929-89Cb の紫外線吸収ス
ペクトル図である。

【図１７】図１７は、化合物N929-89Cg の紫外線吸収ス
ペクトル図である。

【図１８】図１８は、化合物N929-89Mの ¹Ｈ紫外線吸収
スペクトル図である。

【図１９】図１９は、化合物N902-109A の ¹Ｈ核磁気共
鳴スペクトル図である。

【図２０】図２０は、化合物N902-109C の ¹Ｈ核磁気共
鳴スペクトル図である。

【図２１】図２１は、化合物N902-109H の ¹Ｈ核磁気共
鳴スペクトル図である。

【図２２】図２２は、化合物N902-109C の LSIマススペ
クトル図である。

【図２３】図２３は、化合物N902-109H の LSIマススペ
クトル図である。

【図２４】図２４は、化合物N469-34Aの ¹Ｈ核磁気共鳴
スペクトル図である。

【図２５】図２５は、化合物N469-34Aの¹³Ｃ核磁気共鳴
スペクトル図である。

【図２６】図２６は、化合物N469-34Aの LSIマススペク
トル図である。

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩＣ０７Ｄ 498/18 Ｃ０７Ｄ 498/18 Ｃ１２Ｐ 17/18 Ｃ１２Ｐ 17/18 Ｃ //(Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:465） (Ｃ１２Ｐ 17/18 Ｃ１２Ｒ 1:465） (Ｃ１２Ｐ 17/18 Ｃ１２Ｒ 1:045） (72)発明者小嶋康広愛知県西尾市平坂町上縄83−２ (72)発明者小嶋仲夫愛知県名古屋市名東区社台３−153−１ −501 (56)参考文献米国特許4543334（ＵＳ，Ａ) Ｃａｎ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．，1982，Ｖｏｌ．60，Ｎｏ．15，ｐ．2046−2047 Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ．, 1975，Ｖｏｌ．28，Ｎｏ．10，ｐ．721 −726 (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) C12N 1/20 A61K 31/435 C07D 498/18 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】微工研条寄第3688号（FERM BP-3688）と
して寄託されているストレプトミセス・ハイグロスコピ
カス（Streptomyces hygroscopicus）。
【請求項２】ストレプトミセス・ハイグロスコピカス
（微工研条寄第3688号）、アクチノプラネス・エスピー
（Actinoplanes sp., 微工研条寄第3832号）またはスト
レプトミセス・トヨカエンシス・サブエスピー・フミコ
ラ（Streptomyces toyokaensis subsp. humicola, ATCC
39471）を培養して得られる、下記の式で表される化合
物：【化１】（式中、Ｒ¹が酸素、Ｒ²およびＲ⁴が水酸基、Ｒ³およびＲ⁵がメ
トキシ基；Ｒ¹が酸素、Ｒ²がメトキシ基、Ｒ³が水素、Ｒ⁴およびＲ
⁵が水酸基；Ｒ¹が酸素、Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁵がメトキシ基、Ｒ⁴が水
素；Ｒ¹が二つの水素、Ｒ³が水素、Ｒ²およびＲ⁵がメトキシ
基、Ｒ⁴が水酸基；Ｒ¹が二つの水素、Ｒ³が水素、Ｒ²がメトキシ基、Ｒ⁴お
よびＲ⁵が水酸基；又はＲ¹が酸素、Ｒ²およびＲ³がメト
キシ基、Ｒ⁴およびＲ⁵が水酸基）。
【請求項３】ストレプトミセス・ハイグロスコピカス
（微工研条寄第3688号）、アクチノプラネス・エスピー
（Actinoplanes sp., 微工研条寄第3832号）またはスト
レプトミセス・トヨカエンシス・サブエスピー・フミコ
ラ（Streptomyces toyokaensis subsp. humicola, ATCC
39471）を培養して得られる、FABマススペクトルにお
いてm/z 894.5 [M+Na]⁺を示す請求項２記載の化合物。
【請求項４】ストレプトミセス・ハイグロスコピカス
（微工研条寄第3688号）、アクチノプラネス・エスピー
（Actinoplanes sp., 微工研条寄第3832号）またはスト
レプトミセス・トヨカエンシス・サブエスピー・フミコ
ラ（Streptomyces toyokaensis subsp. humicola, ATCC
39471）を培養して得られる、FABマススペクトルにお
いてm/z 878.5 [M+Na]⁺を示す請求項２記載の化合物。
【請求項５】請求項２、３又は４記載の化合物の一種
または二種以上と不活性担体とからなることを特徴とす
る免疫抑制用医薬組成物。
【請求項６】請求項２、３又は４記載の化合物の一種
または二種以上と不活性担体とからなることを特徴とす
る真菌症治療用医薬組成物。
【請求項７】請求項２、３又は４記載の化合物の一種
または二種以上と不活性担体とからなることを特徴とす
る悪性腫瘍治療用医薬組成物。
【請求項８】ストレプトミセス・ハイグロスコピカス
（微工研条寄第3688号）、アクチノプラネス・エスピー
（Actinoplanes sp., 微工研条寄第3832号）またはスト
レプトミセス・トヨカエンシス・サブエスピー・フミコ
ラ（Streptomyces toyokaensis subsp. humicola, ATCC
39471）を培養し、該培養液から下記式の大環状ラクト
ンを回収することを特徴とする大環状ラクトンの製造方
法：【化２】（式中、Ｒ¹が酸素、Ｒ²およびＲ⁴が水酸基、Ｒ³およびＲ⁵がメ
トキシ基；Ｒ¹が酸素、Ｒ²がメトキシ基、Ｒ³が水素、Ｒ⁴およびＲ
⁵が水酸基；Ｒ¹が酸素、Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁵がメトキシ基、Ｒ⁴が水
素；Ｒ¹が二つの水素、Ｒ³が水素、Ｒ²およびＲ⁵がメトキシ
基、Ｒ⁴が水酸基；Ｒ¹が二つの水素、Ｒ³が水素、Ｒ²がメトキシ基、Ｒ⁴お
よびＲ⁵が水酸基；又はＲ¹が酸素、Ｒ²およびＲ³がメト
キシ基、Ｒ⁴およびＲ⁵が水酸基）。
【請求項９】ストレプトミセス・ハイグロスコピカス
（微工研条寄第3688号）、アクチノプラネス・エスピー
（Actinoplanes sp., 微工研条寄第3832号）またはスト
レプトミセス・トヨカエンシス・サブエスピー・フミコ
ラ（Streptomyces toyokaensis subsp. humicola, ATCC
39471）を培養し、該培養液からFABマススペクトルに
おいてm/z 894.5 [M+Na]⁺を示す化合物を回収すること
を特徴とする請求項８記載の製造方法。
【請求項１０】ストレプトミセス・ハイグロスコピカ
ス（微工研条寄第3688号）、アクチノプラネス・エスピ
ー（Actinoplanes sp., 微工研条寄第3832号）またはス
トレプトミセス・トヨカエンシス・サブエスピー・フミ
コラ（Streptomyces toyokaensis subsp. humicola, AT
CC 39471）を培養し、該培養液からFABマススペクトル
においてm/z 878.5 [M+Na]⁺を示す化合物を回収するこ
とを特徴とする請求項８記載の製造方法。