【発明の詳細な説明】
ピリジノントロンビンインヒビター 発明の背景
トロンビンは、血漿中、前駆体、プロトロンビンの形態で存在するセリンプロ
テアーゼである。トロンビンは、溶液血漿蛋白質、フィブリノーゲンを不溶性フ
ィブリンに転化することによる血液凝固のメカニズムにおいて中心的な役割を果
たしている。
Edwardsら、J．Amer．Chem．Soc.,(1992)vol．114，1854-63頁では、セリンプ
ロテアーゼヒト白血球エラスターゼ及びブタすい臓エラスターゼの可逆性インヒ
ビターであるペプチジルα-ケトベンズオキサゾールについて記載している。
欧州特許公開第363284号は、基質ペプチドの切断性アミド基の窒素原子が水素
または置換カルボニル部分により置き換わったペプチターゼ基質の類似物につい
て記載している。
オーストラリア特許公開第86245677号も、活性化求電子性ケトン部分、例えば
、フルオロメチレンケトンまたはα-ケトカルボキシル誘導体などを有するペプ
チターゼインヒビターについ
て記載している。
R.J.Brownら、J.Med.Chem.,Vol.37，1259-1261頁（1994）は、トリフルオロメ
チルケトン及びピリジノン部分を含有するヒト白血球エラスターゼの経***性な
、非-ペプチド性インヒビターについて記載している。
H．Mackら、J．Enzyme Inhibition，Vol.9，73-86頁（1995）は、中心核構造
としてピリジノン部分を含有する硬質アミジノ-フェニルアラニントロンビンイ
ンヒビターについて記載している。発明の概要
本発明は、医薬的に許容可能なキャリヤ中に本発明の化合物を含む、ほ乳類に
おいて血小板の損失を阻止し、血小板凝集物の形成を阻止し、フィブリン形成を
阻止し、血栓形成を阻止し、且つ塞栓形成を阻止するための組成物を包含する。
これらの組成物は、場合により、抗凝血薬、抗血小板薬及び血栓溶解剤も包含し
得る。本組成物は、所望の阻害作用を得るために、血液、血液製品またはほ乳類
臓器にも添加し得る。
本発明は、医薬的に許容可能なキャリヤ中に本発明の化合物を含む、ほ乳類に
おける、不安定アンギナ、難治療性アンギナ、
心筋骨屈折(myocardinal infraction）、一過性虚血性発作、心房細動、血栓性
脳卒中、塞栓性脳卒中、深静脈血栓症、播種性血管内凝血、フィブリンの眼球内
集積(ocular build up)及び疎通化血管の再閉塞または再狭窄症を予防または治
療するための組成物も包含する。これらの組成物は場合により、抗凝血薬、抗血
小板薬及び血栓溶解剤も包含し得る。
本発明は、本発明の化合物を共有的または非共有的のいずれかで、表面に付与
することによる、ほ乳類の表面の凝塊形成を減少させる方法も包含する。
本発明は、ほ乳類における血栓形成の阻害、血栓形成の予防、トロンビンの阻
害、フィブリン形成の阻害及び血小板凝集物の形成を阻害するために薬剤の製造
時に、本発明の化合物または医薬的に許容可能なその塩の使用も包含する。
本願中で使用し得るいくつかの略語については以下のようになっている。略 号 表 示 保 護 基
BOC(BoC) t-ブチルオキシカルボニル
CBZ(Cbz) ベンジルオキシカルボニル(カルボベン
ズオキシ)
TBS(TBDMS) t-ブチル−ジメチルシリル活性基
HBT(HOBTまたはHOBt) 1-ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物表 示 結合試薬
BOP試薬 ベンゾトリアゾール-1-イルオキシトリ
ス(ジメチルアミノ)ホスホニウムヘキサ
フルオロホスフェート
BOP-Cl ビス(2-オキソ-3-オキサゾリジニル)
ホスフィン酸クロリド
EDC 1-エチル-3-(3−ジメチルアミノプロピル)
カルボジイミド塩酸塩他
(BOC)2O(BOC2O) ジ-t-ブチルジカーボネート
n-Bu4N+F- テトラブチルアンモニウムフルオリド
nBuLi(n-BuLi) n-ブチルリチウム
DMF ジメチルホルムアミド
Et３N(TEA) トリエチルアミン
EtOAC 酢酸エチル
TFA トリフルオロ酢酸
DMAP ジメチルアミノピリジン
DME ジメトキシエタン
NHM N-メチルモルホリン
DPPA ジフェニルホスホリルアジド
THF テトラヒドロフラン
DIPEA ジイソプロピルアミン
アミノ酸
Ile イソロイシン
Phe フェニルアラニン
Pro プロリン
Ala アラニン
Val バリン発明の詳細な説明及び好ましい態様
本発明の化合物は、トロンビンインヒビターとして有用であり、例えば、冠動
脈疾患の予防に治療的価値を有し、以下の構造：（式中、
Ｗは、水素、
R1、
R1OC(O)-
R1C(O)-、
R1SO2-、
R1NHSO2-、
(R1)2NSO2-、
R1(CH2)nNHC(O)-、または
(R1)2CH(CH2)nNHC(O)-であり、
ここでnは0〜4であり；
R1は、R2(CH2)r-、ここでｒは0〜4であり、
(R2)(OR2)CH(CH2)p-、ここでｐは1〜4であり、
(R2)2CH(CH2)r-、ここでｒは、0〜4であり、各R2は、同一または異なって
いてもよく、(R2)2は、CHと共に、C3-7シクロアルキル、C7-12二環性アルキル、
C10-16三環性アルキル、または飽和または不飽和であり得、且つＮ、Ｏ及びＳか
らなる群から選択される1〜3個のヘテロ原子を含む、5-〜7-員の一または二環性
複素環により表される環も形成し得る、
R2O(CH2)p-、ここでｐは1〜4であり、
R2(CO0R3)(CH2)r-、ここで4は1〜4であり；
R2及びR14は、
C1-4アルキル、C1-4アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、COOHまたはCONH2
の１個以上で置換または非置換のフェニル、
ナフチル、
ビフェニル、
飽和または不飽和であり得且つN、O及びＳからなる群から選択される1〜4
個のヘテロ原子を包含する5-〜7-員の一または9-〜10-員の二環性複素環、
C1-4アルキル、
C3-7シクロアルキル、
C7-12二環性アルキルまたは、
C10-16三環性アルキルから独立して選択され；
R3及びR3’は独立して
C1-4アルキル、
C3-7シクロアルキルまたは
トリフルオロメチルであり；
R4は、水素
C1-4アルキル、
C1-4アルコキシ、
ハロゲン、
-0CH2CF3、
-COOH、
-OH、
-COOR6、ここでR6は、C1-4アルキルであり、
-CONR7R8、ここでR7及びR8は、独立して水素またはC1-4アルキルであり、
-(CH2)1-4OH、
-CH2NHC(O)CH3、
-CH2NHC(O)CF3、
-CH2NHSO2CH3、
-SO2NH2、
-(CH2)1-4SO2NR7R8、
-(CH2)1-4SO2R6、
飽和または不飽和であり得且つＮ、Ｏ及びＳからなる群から選択される1
〜4個のヘテロ原子を含有する5-〜7-員の一または9-〜10-員の二環性複素環、
-XCH2CO2H、
-XCH2CO2CH3、
-XCH2CO2(CH2)1-3CH3、
-X(CHR9)1-3C(O)NR10R11、
ここでR9９はHまたはC1-4アルキルであり、
R10及びR11は独立して
水素、
C3-7シクロアルキル、
アリール、
ヘテロアリール、
ヘテロシクロアルキル、
ヒドロキシ、
COOH、
アミノ、
ジアルキルアミノ、
アリール、
ヘテロアリール、または
ヘテロシクロアルキルの一つ以上で置換または非置換のC1-4アル
キルであるか、または
R10及びR11は結合して、ヒドロキシ、アミノ若しくはアリールで置
換または非置換の4〜7-員のシクロアルキル環を形成し、
-XCH2R14、ここでＸはＯ、ＳまたはCH2であり；
R5は、水素、
ハロゲン、
C1-4アルキル、
C1-4アルコキシ、
CNまたは
C02NH2である）
及び医薬的に許容可能なその塩を有する。
化合物及び医薬的に許容可能なその塩の一つのクラスにおいては、Ｗは、R1ま
たはR1SO2である。
このクラスの化合物及び医薬的に許容可能なその塩のサブクラスにおいては、
R1はR2(CH2)rまたは(R2)2CH(CH2)r、フェニル-CH2SO2またはジフェニル-CHSO2で
ある。
このサブクラスの化合物及び医薬的に許容可能なその塩の一グループにおいて
は、R1は、フェニル-CH2SO2またはジフェニル-CHS02である。
このグループの化合物及び医薬的に許容可能なその塩のサブグループにおいて
は、R3は、C1-4アルキルである。
このサブグループの化合物及び医薬的に許容可能なその塩のファミリーにおい
ては、R3はメチルであり、R3’は水素である。
このファミリーの化合物及び医薬的に許容可能なそのサブファミリーにおいて
は、
R4は、水素、
塩素、
OH、
0CH2CF3、
OCH2C(O)NH2、
OCH2C(O)NHCH2CH3または
OCH2C(O)NH(CHCH2CH2)であり；及び
R5は、塩素である。
このサブフアァミリーの特定の態様としては(メチル基は、慣用的に環に結合
した単結合として表示されていることに留意)、以下のものが挙げられる： 本発明の化合物は、キラル中心を有し得、ラセミ化合物、ラセミ混合物及び個
々のジアステレオマーまたはエナンチオマーがあり得るが、全ての異性体形は本
発明に含まれる。ラセミ化合物またはラセミ混合物は、立体異性体の50：50混合
物を包含しない。
任意の構成成分または式Ｉにおいて１回以上任意の変動があるとき、各場合に
おけるその定義は、その他全ての場合におけるその定義に依存する。また、置換
基及び／または変動の組み合わせは、そのような組み合わせが安定な化合物とな
る場合にのみ許容可能である。
本明細書中、他に特記しないかぎり、「アルキル」とは、特定数の炭素原子を
有する分岐及び直鎖の飽和脂肪族炭化水素基のいずれをも包含するものとし（Me
はメチル、Etはエチル、Prはプロピル、Buはブチルである）；「アルコキシ」と
は、酸素橋を介して結合した表示数の炭素原子の直鎖または分岐アルキル基を表
すものとする。本明細書中で使用する「ハロ」とは、フルオロ、クロロ、ブロモ
及びヨードを意味するものとし；及び「対イオン」とは、小さな、単一の負に帯
電した種、例えば、クロリド、ブロミド、ヒドロキシド、アセテート、トリフル
オ
ロアセテート、パークロレート、ニトレート、ベンゾエート、マレエート、サル
フェート、タータレート、ヘミタータレート、ベンゼンスルホネート等を意味す
るものとする。
「C3-7シクロアルキル」なる用語は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロ
ペンチル、シクロヘキシル及びシクロヘプチルなどを包含するものとする。
「C7-12二環性アルキル」なる用語は、ビシクロ[2.2.1]ヘプチル（ノルボルニ
ル）、ビシクロ[2.2.2]オクチル、1,1,3-トリメチル-ビシクロ[2.2.1]ヘプチル
（ボルニル）等を包含するものとする。
本明細書中で使用する「アリール」なる用語は、他に記載しない限り、安定な
6-〜10-員の-または二環性環系、例えば、フェニルまたはナフチルなどを表す。
アリール環は、１個以上のC1-4低級アルキル；ヒドロキシ；アルコキシ；ハロゲ
ン；アミノで置換または非置換であってもよい。
本明細書中で使用する「複素環(heterocycle)」または「複素環式環(heterocy
clic ring)」なる用語は、他に記載しない限り、任意の環が飽和または不飽和で
あり得且つＮ、Ｏ及びＳからなる群から選択される1〜4個のヘテロ原子及び炭素
原子
からなる安定な5-〜7-員の一若しくは二環性または、安定な7-〜10-員の二環性
複素環式環系を表し、窒素及び硫黄ヘテロ原子は、場合により酸化され得、窒素
ヘテロ原子は場合により四級化され得、上記定義の任意の複素環式環は、ベンゼ
ン環に融合されている任意の二環性基を包含する。
１個の酸素若しくは硫黄、1〜4個の窒素原子または、１若しくは２個の窒素原
子と結合している１個の酸素若しくは硫黄を含有する環が特に有用である。複素
環式環は、任意のヘテロ原子または炭素原子と結合し得、これにより安定な構造
を作り出す。このような複素環式環の例としては、ピペリジニル、ピペラジニル
、2-オキソピペラジニル、2-オキソピペリジニル、2-オキソピロロジニル、2-オ
キソアゼピニル、アゼピニル、ピロリル、4-ピペリドニル、ビロリジニル、ピラ
ゾリル、ピラゾリジニル、イミダゾリル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、
ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、オキサゾリル、オキサゾ
リジニル、イソオキサゾリル、イソオキサゾリジニル、モルホリニル、チアゾリ
ル、チアゾリジニル、イソチアゾリル、キヌクリジニル(quinuclidinyl)、イソ
チアゾリジニル、インドリル、キノリニル、イソキノリニル、ベンズイミ
ダゾリル、チアヂアゾイル、ベンゾピラニル、ベンゾチアゾリル、ベンズオキサ
ゾリル、フリル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロピラニル、テトラゾール、
チエニル、ベンゾチエニル、チアモルホリニル、チアモルホリニルスルホキシド
、チアモルホリニルスルホン及びオキサジアゾリルが挙げられる。モルホリノは
モルホリニルと同一である。
式Ｉの化合物の医薬的に許容可能な塩（水-若しくは油-溶性または分散性生成
物の形態）としては、例えば、無機若しくは有機酸または塩基から形成した慣用
の非毒性塩または第４級アンモニウム塩が挙げられる。このような酸付加塩の例
としては、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸
塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、樟脳酸塩、樟脳ス
ルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩
、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、
ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、ヒドロブロミド、ヒドロヨ
ーダイド、2-ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンス
ルホン酸塩、2-ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、蓚酸塩、パモ
エート
(pamoate)、ペクチン酸塩、過硫酸塩、3-フェニルプロピオン酸塩、ビクリン酸
塩、ピバリン酸塩、プロピオン酸塩、琥珀酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン
酸塩、トシル酸塩及びウンデンカン酸塩が挙げられる。塩基性塩としては、アン
モニウム塩、アルカリ金属塩、例えば、ナトリウム及びカリウム塩、アルカリ土
類金属塩、例えば、カルシウム及びマグネシウム塩、有機塩基との塩、例えば、
ジシクロヘキシルアミン塩、N-メチル-D-グルカミン、アミノ酸との塩、例えば
、アルギニン、リシンが挙げられる。また、塩基性窒素-含有基は、低級アルキ
ルハライド、例えば、メチル、エチル、プロピル及びブチルクロリド、ブロミド
及びヨーダイド；ジメチル、ジエチル、ジブチルなどのジアルキルサルフェート
；及びジアミルサルフェート、長鎖ハライド、例えば、デシル、ラウリル、ミチ
スチル及びステアリルクロリド、ブロミド及びヨーダイド；アラルキルハライド
、例えば、ベンジル及びフェネチルブロミドなどの薬剤で四級化されていてもよ
い。トロンビンインヒビター治療的使用-使用法
抗凝血剤治療は、種々の血栓性疾患、特に冠状動脈及び脳血管疾患の治療及び
予防用に示されたものである。この分野の当
業者らは、抗凝血治療を必要とする状況に容易に気づく。本明細書中で使用する
「患者」なる用語は、ヒトを含む霊長類、羊、馬、牛、豚、犬、猫、ラット及び
ネズミ等のほ乳類を指すものとする。
トロンビン阻害は、血栓性疾患の個人の抗凝血剤治療に有効なだけでなく、貯
蔵全血の凝集防止及び試験または貯蔵用の他の生物学的サンプル中の凝集を防止
するなどの、血液凝固の阻害に何時でも有用である。従って、トロンビンインヒ
ビターは、トロンビンを含有しているかまたはその疑いのある任意の媒体であっ
て、血液凝固を阻害することが望ましいもの、例えば、ほ乳類の血液を管移植、
ステント、整形外科プロテーゼ、心臓プロテーゼ及び体外循環系(extracorporea
l circulation system)からなる群から選択される材料と接触させる際などに、
これらの媒体に添加またはこれと接触させることができる。
本発明のトロンビンインヒビターは、錠剤、カプセル(その各々は、継続的な
放出または時間指定で放出する配合物を包含する)、ピル、パウダー、粒子、エ
リキシル、チンキ、懸濁液、シロップ及びエマルションなどの経口形で投与し得
る。同様に、これらは、全て医薬業界の当業者には公知の形態を使用する、
静脈内(丸塊または注入)、腹腔内、皮下または筋肉内形で投与し得る。所望の化
合物の有効であるが非毒性量を、抗凝集薬として使用し得る。フィブリンの眼球
内集積(ocular build up)の治療には、本化合物は、眼球内または局所的並びに
経口または非経口で投与し得る。
トロンビンインヒビターは、活性成分の継続的放出ができるような状態で配合
し得るデポー注射またはインプラント調製物の形態で投与し得る。活性成分は、
ペレットまたは小さなシリンダー内に圧縮し、次いでデポー注射またはインプラ
ントとして皮下または筋肉内にインプラントし得る。インプラントは、生分解性
ポリマーまたは合成シリコーン、例えば、Silastic）シリコーンラバーまたはDo
w Chemical Corporationにより製造された他のポリマーなどの不活性材料を使用
し得る。
トロンビンインヒビターは、リポソームデリバリーシステム、例えば、小さな
ユニラメラ小胞、大きなユニラメラ小胞及びマルチラメラ小胞等の形状でも投与
し得る。リポソームは、種々のリン脂質、例えば、コレステロール、ステアリル
アミンまたはホスファチジルコリンから形成し得る。
トロンビンインヒビターは、化合物分子が結合する個々のキ
ャリヤとしてモノクローナル抗体を使用することによっても搬送し得る。トロン
ビンインヒビターは、標的可能なドラッグキャリヤとして溶解性ポリマーとも結
合させ得る。そのようなポリマーの例としては、ポリビニルピロリドン、ピラン
コポリマー、ポリヒドロキシ-プロピル-メタクリルアミド-フェノール、ポリヒ
ドロキシエチル-アスパルタミド-フェノールまたはパルミトイル残基で置換した
ポリエチレンオキシド-ポリリシンが挙げられる。さらに、トロンビンインヒビ
ターは、薬(drug)の放出を制御するために有用な一種の生分解性ポリマー、例え
ば、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー
、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルソエステル、
ポリアセタール、ポリジヒドロビラン、ポリシアノアクリレート及びヒドロゲル
の架橋または両親媒性ブロックコポリマーと結合させ得る。
トロンビンインヒビターを用いる用量治療方式(dosageregimen)は、患者のタ
イプ、種、年齢、体重、性別及び健康状態；治療すべき疾患の重篤度；投与方法
；患者の腎臓及び肝機能；及び用いる特定の化合物またはその塩に依存して選択
する。当業者である医師または獣医師は、疾患の進行を阻止、対抗ま
たは抑制すのに必要な薬の有効量を直ちに決定し、処方することができる。
表示作用のために使用する際、トロンビンインヒビターの経口用量は、１日当
たり体重１キログラム当たり約0.1g(mg/kg/日)〜約100mg/kg/日であり、1.0〜10
0mg/kg/日が好ましく、1〜20mg/kg/日が最も好ましい。１日に１回投与するため
の好適に調製した薬剤は、9mg〜9gを含み、90mg〜9gが好ましく、90mg〜1.8gが
最も好ましく、例えば100mg、500mg及び1gである。好都合には、トロンビンイン
ヒビターは、１日当たり2、3または4回に分けて投与し得る。そのような複数回
の投与のためには、個々の薬剤強度は、例えば、25mg、33mｇまたは50mgであり
得る。静脈内の場合には、最も好ましい用量は、一定速度の注入時に約0.01〜約
10mg/kg/分を変動する。さらに、これらは、当業者に公知の経皮スキンパッチの
形態を使用する経皮経路または好適な鼻腔内ビヒクルの局所使用を介する鼻腔内
形で投与し得る。経皮デリバリーシステムの形態で投与するためには、投与用量
または治療単位(course)は、用量治療方式を通して間欠的であるよりもむしろ連
続的である。
トロンビンインヒビターは、通常、投与の目的形、例えば、
経口錠剤、カプセル、エリキシル、シロップなど及び慣用の医薬的な実務と合致
するように好適に選択された、好適な医薬的希釈剤、賦形剤またはキャリヤ(以
後、集合名詞的に「キャリヤ」材料と称する)と混合した活性成分として投与する
。
例えば、錠剤またはカプセルの形態での経口投与の場合には、活性薬剤成分は
、経口の、非毒性の医薬的に許容可能な不活性キャリヤ（例えば、ラクトース、
スターチ、蔗糖、グルコース、メチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、
リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、マンニトール、ソルビトールなど）と混
合され得；液状で経口投与するためには、経口薬剤成分は、任意の経口の、非毒
性の、医薬的に許容可能な不活性キャリヤ(例えば、エタノール、グリセロール
、水など)と混合され得る。さらに、所望によりまたは必要により、好適なバイ
ンダー、潤滑剤、崩壊剤及び着色剤も混合物中に含ませ得る。好適なバインダー
としては、スターチ、ゼラチン、天然の糖(例えば、グルコース、β-ラクトース
、コーン-甘味料)、天然及び合成ガム(例えば、アカシア、トラガカントまたは
アルギン酸ナトリウム)、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコー
ル、蝋などが挙げられる。これらの用量形で使用する潤滑剤としては、
オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、
安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム等が挙げられる。崩壊剤
としては、これらに限定されないが、スターチメチルセルロース、寒天、ベント
ナイト、キサンタンガム等が挙げられる。
トロンビンインヒビターは、種々の病理学（ascular pathologies）の治療で
相乗効果を得るために、これらに限定されないが、フィブリノーゲンレセプター
アンタゴニスト、ヘパリン、アスピリン若しくはワルファリンを含む好適な抗凝
集剤または、プラスミノーゲン活性剤若しくはストレプトキナーゼなどの血栓溶
解剤と共に投与し得る。例えば、トロンビンインヒビターは、組織プラスミノー
ゲン活性剤-介在血栓溶解再潅流の効率を促進する。トロンビンインヒビターを
、まず最初に血栓形成後に投与し得、次いでその後組織プラスミノーゲン活性剤
または他のプラスミノーゲン活性剤を投与する。製造法
以下の合成例は、本発明の化合物を製造するために使用し得る。
実施例１による例示として（スキーム１）
出発物質の6-メチル-2-ヒドロキシ-ピリジン-3-カルボン酸を、段階Ａでジフ
ェニルホスホリルアジド(DPPA)及びベンジルアルコールと反応させて、保護化ア
ミノピリジンを得る。これを段階Ｂにてt-ブチルブロモアセテートでアルキル化
させ、CBZ基を段階Ｃで触媒による水素化で除去する。得られたアミンを次いで
、段階Ｄで酸掃去剤としてピリジンと、好適な試薬、この場合にはベンジルスル
ホニルクロリドと反応させ、次いでt-ブチルエステルを段階Ｅで酸性条件下で除
去する。次いで、酸を段階Ｆでアミン、例えば、2,5-ジクロロベンジルアミンと
結合させ、最終生成物を得る。スキーム１ 本発明の化合物を形成するためのアミド結合化、例えば、スキーム１の段階Ｆ
は、試薬、例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミドまたは1-エチル-3-(3-ジメ
チル-アミノプロピル)カルボジイミドとのカルボジイミド法により実施し得る。
アミドまたはペプチド結合を形成する他の方法としては、本方法に限定されない
が、酸クロリド、アジド、混合酸無水物または活性化エステルを介する合成法が
挙げられる。典型的には、溶液相アミド結合化を実施するが、伝統的なMerrifie
ld法による固相合成法も代わりに実施し得る。１種以上の保護基の添加または除
去も典型的な実施である。
本方法の変形では、表示合成段階で好適な試薬または好適に置換された出発物
質の使用により、以下の広範な請求の範囲により考慮されたＷ、R3、R4及びR5基
が存在することができる。例えば、段階Ａの出発物質は、R3の異なる操作可能な
値とするために、6-置換基として、エチル、イソプロピル、シクロプロピル、ト
リフルオロメチルなどを有し得る。同様に、段階Ｄで好適なアルキル化剤、カル
ボニル化剤、スルホニル化剤、尿素化剤などを使用することにより異なるＷ基が
存在し得る。例えば、アルキルハライド、アルコキシカルボニルハライド、アシ
ルハライド、アルキルスルホニルハライドまたはアルキルイソシアネートを使用
すると、W(ここで、WはR1、R1OCO、R1CO、R1SO2または(R1)m(CH2)nNCOである)の
対応する値を与える。同様に、段階Ｆのアミンを好適に選択すると、R4及びR5の
異なる操作可能な値とすることができる。同様の及び自明の変形をするための本
方法の自明の変形及び変異は、当業者には明らかであろう。
末端基として2-ヒドロキシベンジルアミンを含むか、またはその誘導体である
化合物の製造法は、スキーム２に示されており、実施例２により例示される。
4-クロロサリアルデヒド(chlorosalicaldehyde)をエタノール性炭酸ナトリウ
ム水溶液中、ヒドロキシルアミン塩酸塩と濃縮した。オキシムをロジウムなどの
触媒による水素化により還元し、アミンを標準条件下でそのBOC誘導体として保
護する。フェノールを段階Ｄでエチルブロモアセテートなどの酢酸塩等価物でア
ルキル化し、得られたエステルを水酸化リチウムで加水分解する。生成物カルボ
ン酸を段階Ｆでエチルアミン等のアミンと結合させ、BOC基を強酸により除去す
る。アミンをスキーム１、段階Ｅの生成物と結合させ、最終生成物を得る。スキーム２ 本方法の変形により、以下の広範な請求の範囲により考慮された異なるR4及び
R5基が、表示合成段階の好適な試薬または好適に置換された出発物質を使用する
ことにより可能になる。例えば、段階Ｆのアミンを好適に選択することにより、
R7及びR8の異なる値とすることができる。本方法の種々の変異及び変形により、
同様及び異なる変異が得られることは当業者には公知である。
3-アミノ-4-トリフルオロメチル-2-ピリジノンの誘導体である化合物の製造法
をスキーム３に示す。段階Ａにおいては、1,1,1-トリフルオロメチル-2,4-ペン
タンジオンをエタノール性ジエチルアミン中ニトロアセトアミドと濃縮させると
、2-ヒドロキシ-6-メチル-3-ニトロ-4-トリフルオロメチルピリジンが得られる
。これを段階Ｂで塩基として水素化ナトリウムを使用してTHF中、t-ブチルブロ
モアセテートなどの酢酸塩等価物でアルキル化し、ニトロ基を段階Ｃで、炭素上
のパラジウムなどの触媒を使用する水素化により還元する。t-ブチル基を段階Ｄ
でHClなどの強酸により除去し、得られたカルボン酸を段階Ｅでエチル-2-アミノ
メチル-4-クロロフェノキシアセトアミドと結合させ、最終生成物を得る。
本方法の変形では、表示合成段階の好適な試薬または好適に置換された出発物
質の使用により、以下の広範な請求の範囲により考慮された異なるR3、R4及びR5
基が存在することができる。例えば、段階Ａの好適なジオン(dione)を使用する
ことにより、R3の異なる値とすることができる。同様に、段階Ｅのアミンを好適
に選択することにより、R4及びR5の異なる操作可能な値とすることができる。本
方法の自明の変異及び変形により、同様及び異なる変異が得られることは当業者
には公知である。スキーム３ 以下の実施例は、本発明者らにより考慮されたものとして本発明を例示するた
めのものであり、本発明の趣旨または範囲を限定するものではない。
実施例１ 3- ベンジルスルホニルアミノ-6-メチル-1-(メチレン-カルボキシアミドメチル-2 ,5-ジクロロフェニル)-2-ピリジノンの合成 段階Ａ：3-ベンジルオキシカルボニルアミノ-6-メチル-2-ピリジノン
DPPA(35.6ml，165mmol)を2-ヒドロキシ-6-メチルピリジン-3-カルボン酸(22.9
7g，165mmol)及びトリエチルアミン(23.0ml，165mmol)の乾燥ジオキサン(300ml)
中の撹拌溶液に添加し、得られた溶液を加熱して還流した。16時間後、追加のト
リエチルアミン(23.0ml，165mmol)及びベンジルアルコール(17.1ml，165mmol)を
添加し、溶液をさらに24時間還流した。反応を真空濃縮させて、揮発分の殆どを
除去した。残渣を塩化メチレン
(500ml)と塩水(500ml)の間で分配し、1M HCl(165mmol)でpH1の酸性にした。水性
層を塩化メチレンで(２回)抽出し、混合した有機層を炭酸水素ナトリウム溶液と
塩水で洗浄し、乾燥(Na2SO4)し、真空蒸発させると茶色の固体が得られた。これ
をメタノールから再結晶させると、褐色固体の標記化合物が得られた。
段階Ｂ：3-ベンジルオキシカルボニルアミノ-6-メチル-1-(t-ブチル-メチレンカ ルボキシ)-2-ピリジノン
水素化ナトリウム（5.3g，0.22mol）を3-ベンジルオキシカルボニルアミノ-6-
メチル-2-ピリジノン(53.2g，0.20mol)の撹拌スラリーに0℃で添加した。t-ブチ
ルブロモアセテート(45ml，0.27mol)を得られた溶液に添加すると、すぐに沈澱
が形成した。反応を１時間かけて温め、２時間後、溶媒を真空除去し、残渣を1:
1の水／塩水(200ml)及び6:1のTHF/塩化メチレン(700ml)の間で分配した。有機層
を乾燥(Na2SO4)させ、真空蒸発させると固体が得られ、これをヘキサンですり砕
くと結
晶性固体の標記化合物が得られた。
段階Ｃ：3-アミノ-6-メチル-1-(t-ブチル-メチレンカルボキシ)-2-ピリジノン
3-ベンジルオキシカルボニルアミノ-6-メチル-1-(t-ブチル-メチレンカルボキ
シ)-2−ピリジノン(5.59g，15.0mmol)及びパールマン(Pearlman)触媒(0.56g)の4
:1エタノール/水(200ml)中の混合物をH2(50psi)下、パール装置中２時間振盪さ
せた。反応混合物をセライトを通して濾過し、真空蒸発させ、エタノールで共沸
させると固体の標記化合物が得られた。
段階Ｄ：3-ベンジルスルホニルアミノ-6-メチル-1-(t-ブチル-メチレンカルボキ シ)-2-ピリジノン
塩化ベンジルスルホニル(3.15g，16.5mmol)を3-アミノ-6-
メチル-1-(t-ブチル-メチレンカルボキシ)-2-ピリジノン(3.55g，14.9mmol)のピ
リジン(30ml)中撹拌溶液に0℃で添加し、得られた溶液を撹拌するうちに、濃厚
な沈澱が形成した。１時間後、反応混合物を真空蒸発させてペースト状とし、こ
れを塩化メチレンと10％硫酸水素カリウム溶液の間で分配した。有機層を乾燥(N
a2SO4)し、真空蒸発させると、淡桃色固体の標記化合物が得られた。
段階Ｅ：3-ベンジルスルホニルアミノ-6-メチル-1-メチレンカルボキシ-2-ピリ ジノン
3-ベンジルスルホニルアミノ-6-メチル-1-(t-ブチル-メチレンカルボキシ)-2
−ピリジノン(5.70g，14.52mmol)の酢酸エチル(60ml)中の撹拌溶液内に0℃で、H
Clで飽和した溶液が形成されるまで、HClを泡立たせた。室温で1.5時間後、濃厚
懸濁液が形成した。混合物を窒素で脱気し、濾過すると、固体の標記化合物が得
られた。
段階Ｆ：3-ベンジルスルホニルアミノ-6-メチル-1-(N-2,5-ジクロロベンジル-ア セトアミド)-2−ピリジノン
3-ベンジルスルホニルアミノ-6-メチル-1-メチレンカルボキシ-2-ピリジノン(
70mg，0.21mmol)、HOBT(34mg，0.25mmol)、2,5-ジクロロベンジルアミン(44mg，
0.25mmol)及びトリエチルアミン(0.070ml，0.50mmol)のDMF(2.5ml)中の撹拌混合
物にEDC塩酸塩(48mg，0.25mmol)を添加し、混合物を16時間撹拌した。反応を酢
酸エチルで希釈し、塩水で洗浄し、乾燥(Na2SO4)し、真空蒸発させると固体とな
った。粗な生成物をシリカ上のフラッシュカラムクロマトグラフィー(50%酢酸エ
チル/ヘキサン)で精製すると、結晶固体の標記化合物が得られた。
実施例２ 3- ベンジルスルホニルアミノ-6-メチル-1-[エチル-(2-メチレンカルボキシアミ ドメチル-4-クロロフェノキシ)-アセトアミド]-2-ピリジノンの合成 段階Ａ：4-クロロサリックアルデヒドオキシム
ヒドロキシルアミン塩酸塩(16.7g，0.24mol)及び炭酸ナトリウム(12.7g，0.12
mol)の水(120ml)中の溶液を、4-クロロサリックアルデヒド(25.0g，0.16mol)の
エタノール(160ml)中撹拌溶液に添加し、得られた溶液を加熱して還流させた。
１時間後、反応を冷却し、水(320ml)を添加し、得られた結晶性沈殿物を濾過に
より単離した。第２収穫分を同様に集め、混合した固体を乾燥させると、標記化
合物が得られた。
段階Ｂ：2-ヒドロキシ-5-クロロベンジルアミン
4-クロロサリアルデヒドオキシム(10g，58.3mol)及び5%Rh/C(2.0g)の濃硫酸(1
0ml）含有エタノール(100ml)中の混合物を、24時間、H2(60psi)下パール装置中
で振盪した。水(100ml)を添加し、混合物をセライトを通して濾過した。濾液を
生成物が溶液から結晶化するまで濃縮した。固体を濾過により集め、濾液をさら
に濃縮し、水を添加して第２収穫分を得、これを第１収穫分と混合して乾燥させ
ると、標記化合物が得られた。
段階C：N-t-ブトキシカルボニル-2-ヒドロキシ-5-クロロベンジルアミン
2-ヒドロキシ-5-クロロベンジルアミン(1.22g，4.77mmol重硫酸塩として)、(B
OC)2O(1.56g，7.16mmol)及びN-メチルモルフォリン(1.05ml，9.54mmol)のDMF(10
ml)中混合物を室温で５時間撹拌した。反応を水と酢酸エチルとの間で分配し、
有機層を5%KHSO4溶液で２回、炭酸水素ナトリウム溶液及び塩水で洗浄し、乾燥(
Na2SO4)させ、真空蒸発させると固体となった。粗な生成物を酢酸エチル/ヘキサ
ン(1:5，12ml)で再結晶さ
せると標記化合物が得られた。 段階Ｄ：エチル(2-t-ブトキシカルボニルアミノメチル-4-クロロフェノキシ)-ア セテート
N-t-ブトキシカルボニル-2-ヒドロキシ-5-クロロベンジルアミン(730mg，2.83
mmol)、Cs2CO3(923mg，2.83mmol)及びエチルブロモアセテート(0.314ml，2.83mm
ol)のDHF(5ml)中混合物を２時間撹拌した。粗な反応混合物を水と酢酸エチルと
の間で分配し、有機層を塩水で洗浄し、乾燥(Na2SO4)させ、真空蒸発させると油
状となった。これを次の段階で使用した。段階Ｅ：2-t-ブトキシカルボニルアミノメチル-4-クロロフェノキシ酢酸
段階Ｄからの生成物を1:1:1メタノール/THF/水(9ml)中に溶解させ、水酸化リ
チウム水和物(126mg，3.0mmol)を添加した。16時間後、揮発成分を真空除去し、
溶液を水で希釈し、酢酸エチルで洗浄し、十分量の塩水を添加してエマルション
を分散さ
せた。水性層を5%KHSO4溶液で酸性とし、塩化メチレンで抽出し、乾燥(Na2SO4)
させ、真空蒸発させると固体の標記化合物が得られた。
段階Ｆ：エチル-(2-t-ブトキシカルボニルアミノメチル-4-クロロフェノキシア セトアミド
EDC塩酸塩(249mg，1.3mmol)を、2-t-ブトキシカルボニルアミノメチル-4-クロ
ロ-フェノキシ酢酸(316mg，1.0mmol)、HOBT(176mg，1.3mmol)、エチルアミン塩
酸塩(106mg，1.3mmol)及びN-メチルモルフォリン(0.396ml，3.6mmol)のDHF(4ml)
中撹拌混合物に添加し、混合物を16時間撹拌した。反応を酢酸エチルと5%KHSO4
溶液との間で分配し、有機層を5%KHSO4溶液、水、NaHCO3溶液及び塩水で洗浄し
、乾燥(Na2SO4)させ、真空蒸発させると固体の標記化合物(333mg)が得られた。
これを次の段階で使用した。段階Ｇ：エチル-(2-アミノメチル-4-クロロフェノキシ)-アセトアミド
段階Ｆからのエチル-(2-t-ブトキシカルボニルアミノメチル-4-クロロフェノ
キシ)-アセトアミドを2:1の塩化メチレン/TFA(3ml)中に溶解させ、15分後、溶液
を真空蒸発させた。残渣を水に溶解させ、溶液を塩化メチレンで(2回)洗浄した
。水性層を飽和炭酸ナトリウム溶液で塩基性化し、NaClで飽和させた。混合物を
酢酸エチルで抽出し、有機層を乾燥(Na2SO4)させ、真空蒸発させると結晶性固体
の標記化合物が得られた。
段階Ｈ：3-ベンジルスルホニルアミノ-6-メチル-1-[エチル-(2-メチレンカルボ キシアミドメチル-4-クロロフェノキシ)-アセトアミド
DCC(103mg，0.50mmol)をエチル-(2-アミノメチル-4-クロロフェノキシ)-アセ
トアミド(137mg，0.57mmol)及び3-ベンジルスルホニルアミノ-6-メチル-1-メチ
レンカルボキシ-2-ピリ
ジノン(168mg，0.0.50mmol)の塩化メチレン(3ml)中の撹拌溶液に添加した。３時
間後、得られた濃厚な混合物をセライトを通して濾過し、生成物があまり溶解性
でないのでパッドを大容量の塩化メチレンで洗浄し、濾液を真空蒸発させると固
体となった。粗な生成物をシリカ上のフラッシュクロマトグラフィー(3:1ヘキサ
ン/アセトン、次いでメタノール/クロロホルム勾配液、2-4%メタノール)で精製
すると、結晶性固体の標記化合物が得られた。融点210〜213℃。
実施例２の方法を使用して以下の化合物を製造した。
実施例３ 3- ベンジルスルホニルアミノ-6-メチル-1-[シクロプロピル-(2-メチレン-カルボ キシアミドメチル-4-クロロフェノキシ)-アセトアミド]-2-ピリジノン DCC(103mg，0.50mmol)をシクロプロピル-(2-アミノメチル-4-クロロフェノキ
シ)-アセトアミド(127mg，0.50mmol)及び3-ベンジルスルホニルアミノ-6-メチル
-1-メチレンカルボキシ-2-ピリジノン(168mg，0.50mmol)の塩化メチレン(2ml)中
の撹拌溶液に添加した。16時間後、得られた濃厚な混合物をセライトを通して濾
過し、1:1メタノール/クロロホルムで洗浄し、濾液を真空蒸発させると固体とな
った。粗な生成物をシリカ上のフラッシュクロマトグラフィー(3:1ヘキサン/ア
セトン、次いでメタノール/クロロホルム勾配液、2-4%メタノール)で精製すると
、結晶性固体の標記化合物が得られた。融点>200℃。 実施例４ 3- ベンジルスルホニルアミノ-6-メチル-1-(2-メチレンカルボキシアミドメチル- 4-クロロフェノキシアセトアミド)-2-ピリジノン DCC(63mg，0.307mmol)を2-アミノメチル-4-クロロフェノキシアセトアミド(10
1mg，0.307mmol)及び3-ベンジルスルホニルアミノ-6-メチル-1-メチレンカルボ
キシ-2-ピリジノン(103mg，0.307mmol)の塩化メチレン(2ml)中の撹拌溶液に添加
した。66時間後、得られた濃厚な混合物をセライトを通して濾過し、1:1メタノ
ール/塩化メチレンで洗浄し、濾液を真空蒸発させると固体となった。粗な生成
物をシリカ上のフラッシュクロマトグラフィー(3:1ヘキサン/アセトン、次いで
メタノール/クロロホルム勾配液、2-5%メタノール)で精製すると、結晶性固体の
標記化合物が得られた。融点>200℃。
さらに、以下の実施例を実施した。実施例５ 3- ベンジルスルホニルアミノ-6-メチル-1-(2-メチレンカルボキシアミドメチル- 4-クロロフェノキシ)-2-ピリジノン EDC塩酸塩(236mg，1.23mmol)を3-ベンジルスルホニルアミノ-6-メチル-1-メチ
レンカルボキシ-2-ピリジノン(415mg，1.23mmol)、HOBT(167mg，1.23mmol)、2-
ヒドロキシ-5-クロロベンジルアミン(195mg，実施例Ｂ段階Ｂの生成物)及びNMM(
0.136ml，1.23mmol)のDHF(1.2ml)中の撹拌混合物に添加し、混合物を３時間撹拌
した。反応を酢酸エチルで希釈し、水で洗浄し、乾燥(NaSO4)させ、真空蒸発さ
せると固体となった。
粗な生成物をシリカ上のフラッシュクロマトグラフィー(酢酸エチル/ヘキサン/2
%酢酸勾配液、50-80%酢酸エチル)で精製すると、結晶性固体の標記化合物が得ら
れた。融点>200℃。
実施例６ 3- ベンジルスルホニルアミノ-6-メチル-1-[2,2,2-トリフルオロエチル-(2-メチ レンカルボキシアミドメチル-4-クロロ)フェノキシ]-2-ピリジノン DCC(25mg，0.12mmol)を2-(2,2,2-トリフルオロエチル)-5-クロロベンジルアミ
ン(29mg，0.12mmol)及び3-ベンジルスルホニルアミノ-6-メチル-1-メチレンカル
ボキシ-2-ピリジノン(61mg，0.18mmol)の塩化メチレン(0.7ml)中の撹拌溶液に添
加した。16時間後、得られた濃厚な混合物をセライトを通して濾過し、塩化メチ
レンで洗浄し、濾液を真空蒸発させると固体となった。粗な生成物をシリカ上の
フラッシュクロマトグラフィー(3:1ヘキサン/アセトン、次いで50%酢酸エチル/
ヘキサン)で精製すると、結晶性固体が得られ、これを塩化メチレンですり砕く
と、結晶性固体の標記化合物が得られた。融点>200℃。
実施例７ 3- ベンジルスルホニルアミノ-6-メチル-1-(メチレンカルボキシアミドメチル-3- クロロフェニル)-2-ピリジノン DCC(43mg，0.21mmol)を3-クロロベンジルアミン(0.025ml，0.21mmol)及び3-ベ
ンジルスルホニルアミノ-6-メチル-1-メチ
レンカルボキシ-2-ピリジノン(70mg，0.21mmol)の塩化メチレン(1.0ml)中の撹拌
溶液に添加した。16時間後、得られた濃厚な混合物をセライトを通して濾過し、
塩化メチレンで洗浄し、濾液を真空蒸発させると固体となった。粗な生成物をシ
リカ上のフラッシュクロマトグラフィー(3:1ヘキサン/アセトン、次いで酢酸エ
チル/ヘキサン勾配液、60-100%酢酸エチル)で精製すると、結晶性固体が得られ
、これをメタノールですり砕くと、固体の標記化合物が得られた。融点176-17℃
実施例８ プロテイナーゼ阻害を測定するin vitroアッセイ
ヒトα-トロンビン及びヒトトリプシンのアッセイを、S.D.LewisらのThrombos is Research
，Issue No.70，173頁(1993)の実質的に記載通りに実施した。
アッセイは、25℃、0.05M TRIS緩衝液中、pH7.4、0.15M NaCl、0.1%PEGで実施
した。トリプシンアッセイも１mM CaCl2を含有していた。p-ニトロアニリド（pn
a）基質の加水分解速度を測
定するアッセイでは、Thermomax 96-ウェルプレートリーダーを使用してp-ニト
ロアニリンの時間に依存した発生を(405nmで)測定した。sar-PR-pnaを使用して
ヒトα-トロンビン(Km＝125μＭ)及びウシトリプシン(Km＝125μＨ)をアッセイ
した。p-ニトロアニリド基質濃度を8270cm-1M-1の吸光係数を使用して342nmの吸
収を測定することにより決定した。
トロンビンの阻害度が非常に高い、強い阻害剤(Ki<10nM)の特定の研究におい
ては、より感受性の高い活性アッセイを使用した。本アッセイにおいては、蛍光
基質Z-GPR-afc(Km＝27μＭ)のトロンビン触媒加水分解速度を、7-アミノ-4−ト
リフルオロメチルクマリンの産生を伴う500nm(400nm励起)における蛍光の増加か
ら決定した。Z-GPR-afcの貯蔵溶液の濃度は、トロンビンによる貯蔵溶液のアリ
コートの加水分解完了時に産生した7-アミノ-4-トリフルオロメチルクマリンの3
80nmにおける吸収を測定することにより決定した。
活性アッセイを、終濃度≦0.1Kmに少なくとも10倍で基質の貯蔵溶液を酵素ま
たはインヒビターで平衡化した酵素含有溶液に希釈することにより実施した。酵
素とインヒビターとの間の平衡を達成するのに必要な倍率を対照実験より決定し
た。イン
ヒビターの非存在(V0)または存在(Vi)での産生物形成の最初の速度を測定した。
競合阻害及び単一体(unity)がKm/[S]、[I]/e、及び[I]/e(式中、[S]、[I]及びｅ
は、各々、基質濃度、インヒビター濃度及び酵素濃度を示す)と比較して無視し
得ると仮定し、酵素由来のインヒビターの解離の平衡定数(Ki)を、方程式１に示
される[I]のV0/Viの依存性から得ることができる。
V0/Vi＝１＋[I]/Ki （1）
本アッセイにより示される活性は、本発明の化合物が、不安定アンギナ、難治
療性アンギナ、心筋骨屈折、一過性虚血性発作、心房細動、血栓性脳卒中、塞栓
性脳卒中、深静脈血栓症、播種性血管内凝血及び再疎通化管の再閉塞または再狭
窄症に罹患している患者の種々の状態を治療するのに治療的に有効であることを
示している。Kiにより表される、以下の化合物の各々のヒトトロンビンに対する
阻害活性は、15nM未満である。これらは、少なくとも1800nMであるヒトトリプシ
ン(Kiにより表される)に対するそれらの阻害活性により明示されるように、選択
的化合物である。 実施例９ 血栓閉塞を測定するためのIn Vivo研究
本出願人は、KurtzらのThrombosis Research，No．60，269頁(1990)に記載の
以下のラット塩化鉄アッセイを実質的に使
用して、本明細書中に請求する本化合物のin vivo研究を実施した。
トロンビンインヒビターまたは本発明のin vivo活性を決定するために使用す
るアッセイにおいて、オスのSprague-Dawleyラット(体重200-350g)をダイアル-
ウレタン溶液(0.1ml/100g体重、最初の時点)で麻酔をかけ、側面尾静脈(lateral
tailvein)に12インチ長のPE50チューブと結合させた23ゲージ針でカニューレ挿
入した。チューブをチューブアダプターにより三方弁に結合させた。塩水(対照)
または試験化合物を好適には、尾静脈カテーテルを介して投与した。気管開口術
を0.75インチ長のPE205チューブで実施した。右頸動脈を露出させ、1.33mm径の
ドップラーフロープローブを血管内に設置した。ヒートランプを使用して、体温
を37℃に保持した。
ラット(8-10匹/グループ)を無作為に0.028ml/分の速度で尾静脈を介して投与
した塩水または試験化合物の連続静脈内注入にかけた。処理注入は、フロープロ
ーブ末端の露出頸動脈上に35%FeCl3で飽和させたワットマンNo.1濾紙の３mm2片
をおく前に60分イニシエーションにかけた。血栓閉塞が起きなかった場合または
血管の血栓閉塞後30分後に停止した場合、FeCl3適
用後さらに90分（全注入時間150分）、処理を継続した。閉塞までの時間は、FeC
l3の適用から管の血栓閉塞までの時間として定義した。研究終了時（閉塞しなか
った動物ではFeCl3投与後90分、または血栓閉塞後30分）、３ml血液サンプルを
心臓穿刺により3.8%クエン酸ナトリウム0.3ml中に抜き取った。
結果は、本発明の化合物は血栓閉塞を予防するのに有効であることを示す。
実施例１０ 錠剤製造
以下の活性化合物25.0、50.0及び100.0mgを各々含有する錠剤を以下に示すよ
うに製造する。
3-ベンジルスルホニルアミノ-6-メチル-1-(メチレンカルボキシアミドメチル-2,
5-ジクロロフェニル)-2-ピリジノン、
3-ベンジルスルホニルアミノ-6-メチル-1-[エチル-(2-メチレンカルボキシアミ
ドメチル-4-クロロフェノキシ)-アセトアミド]-2-ピリジノン、
3-ベンジルスルホニルアミノ-6-メチル-1-[シクロプロピル-(2-メチレンカルボ
キシアミドメチル-4-クロロフェノキシ)-アセトアミド]-2-ピリジノン、
3-ベンジルスルホニルアミノ-6-メチル-1-(2-メチレンカルボキシアミドメチル-
4-クロロフェノキシアセトアミド)-2-ピリジノン。活性化合物25〜100mg含有する用量表
量-mg
活性化合物 25.0 50.0 100.0
微結晶セルロース 37.25 100.0 200.0
改質食品コーンスターチ 37.25 4.25 8.5
ステアリン酸マグネシウム 0.50 0.75 1.5
全活性化合物、セルロース及び一部のコーンスターチを混合し、10%コーンス
ターチペーストに粒状化した。得られた粒状物を篩い分け、残りのコーンスター
チとステアリン酸マグネシウムとをブレンドした。得られた粒状物を錠剤１錠当
たり活性成分を各々25.0、50.0及び100.0mg含有する錠剤に成形した。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
Pyridinone thrombin inhibitor Background of the Invention
Thrombin is a serine protein that exists in plasma, in the form of a precursor, prothrombin.
Thease. Thrombin is an insoluble solution of fibrinogen, a solution plasma protein.
It plays a central role in the mechanism of coagulation by conversion to fibrin.
I'm sorry.
Edwards et al. Amer. Chem. Soc., (1992) vol. In pages 114, 1854-63,
Reversible inhibition of Rotase human leukocyte elastase and porcine pancreatic elastase.
Describes the bitter peptidyl α-ketobenzoxazole.
EP-A-363284 states that the nitrogen atom of the cleavable amide group of the substrate peptide is hydrogen.
Or analogs of peptidase substrates replaced by substituted carbonyl moieties.
It has been described.
Australian Patent Publication No. 86245677 also discloses an activated electrophilic ketone moiety, for example,
With, methylene fluoroketone or α-ketocarboxyl derivative
About titase inhibitors
It has been described.
R.J. Brown et al., J. Med. Chem., Vol. 37, pp. 1259-1261 (1994) describe trifluoromethods.
Orally active human leukocyte elastase containing tyl ketone and pyridinone moieties
, Non-peptidic inhibitors.
H. Mack et al. Enzyme Inhibition, Vol. 9, pp. 73-86 (1995)
Amidino-phenylalanine thrombin containing a pyridinone moiety
Inhibitors are described.Summary of the Invention
The present invention relates to mammals comprising a compound of the present invention in a pharmaceutically acceptable carrier.
Platelet loss, platelet aggregate formation and fibrin formation
A composition for inhibiting, inhibiting thrombus formation, and inhibiting embolization.
These compositions optionally also include anticoagulants, antiplatelet agents, and thrombolytic agents.
obtain. The composition may be used in blood, blood products or mammals to achieve the desired inhibitory effect.
It can also be added to organs.
The present invention relates to mammals comprising a compound of the present invention in a pharmaceutically acceptable carrier.
Angina, unstable angina, intractable angina,
Myocardinal infraction, transient ischemic attack, atrial fibrillation, thrombotic
Stroke, embolic stroke, deep vein thrombosis, disseminated intravascular coagulation, intraocular fibrin
Prevent or cure ocular build up and reocclusion or restenosis of communicating vessels
Also included are compositions for treating. These compositions may optionally contain anticoagulants,
Platelet drugs and thrombolytic agents may also be included.
The present invention provides compounds of the present invention either covalently or non-covalently on a surface.
And reducing the clot formation on the surface of the mammal.
The present invention is directed to inhibiting thrombus formation in mammals, preventing thrombus formation, and inhibiting thrombin.
Manufacture of drugs to inhibit harm, inhibition of fibrin formation and formation of platelet aggregates
Occasionally, the use of a compound of the invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof is also included.
Some abbreviations that may be used in this application are as follows.Abbreviation Display Protection group
BOC (BoC) t-butyloxycarbonyl
CBZ (Cbz) benzyloxycarbonyl (carboben
Zoxy)
TBS (TBDMS) t-butyl-dimethylsilylActive group
HBT (HOBT or HOBt) 1-hydroxybenzotriazole hydrateDisplay Binding reagent
BOP reagent benzotriazol-1-yloxytri
(Dimethylamino) phosphonium hexa
Fluorophosphate
BOP-Cl bis (2-oxo-3-oxazolidinyl)
Phosphinic acid chloride
EDC 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl)
Carbodiimide hydrochlorideother
(BOC)TwoO (BOCTwoO) di-t-butyl dicarbonate
n-BuFourN + F- tetrabutylammonium fluoride
nBuLi (n-BuLi) n-butyl lithium
DMF dimethylformamide
Et3N (TEA) triethylamine
EtOAC Ethyl acetate
TFA trifluoroacetic acid
DMAP dimethylaminopyridine
DME dimethoxyethane
NHM N-methylmorpholine
DPPA diphenylphosphoryl azide
THF tetrahydrofuran
DIPEA diisopropylamine
amino acid
Ile isoleucine
Phe phenylalanine
Pro Proline
Ala alanine
Val ValinDETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION AND PREFERRED EMBODIMENTS
The compounds of the present invention are useful as thrombin inhibitors, e.g.
It has therapeutic value in preventing cardiovascular disease and has the following structure:(Where
W is hydrogen,
R1,
R1OC (O)-
R1C (O)-,
R1SOTwo-,
R1NHSOTwo-,
(R1)TwoNSOTwo-,
R1(CHTwo)nNHC (O)-, or
(R1)TwoCH (CHTwo)nNHC (O)-
Where n is 0-4;
R1Is RTwo(CHTwo)r-, Where r is 0-4,
(RTwo) (ORTwo) CH (CHTwo)p-, Where p is 1-4,
(RTwo)TwoCH (CHTwo)r-, Where r is 0-4, each RTwoAre the same or different
(RTwo)TwoIs, together with CH, C3-7Cycloalkyl, C7-12Bicyclic alkyl,
C10-16Tricyclic alkyl, or saturated or unsaturated, and N, O and S
A 5- to 7-membered mono- or bicyclic comprising 1-3 heteroatoms selected from the group consisting of:
A ring represented by a heterocyclic ring may also be formed,
RTwoO (CHTwo)p-, Where p is 1-4,
RTwo(CO0RThree) (CHTwo)r-, Where 4 is 1-4;
RTwoAnd R14Is
C1-4Alkyl, C1-4Alkoxy, halogen, hydroxy, COOH or CONHTwo
Substituted or unsubstituted phenyl with one or more of
Naphthyl,
Biphenyl,
1-4 which can be saturated or unsaturated and are selected from the group consisting of N, O and S
A 5- to 7-membered one or 9- to 10-membered bicyclic heterocyclic ring containing
C1-4Alkyl,
C3-7Cycloalkyl,
C7-12Bicyclic alkyl or
C10-16Independently selected from tricyclic alkyls;
RThreeAnd RThree’Independently
C1-4Alkyl,
C3-7Cycloalkyl or
Trifluoromethyl;
RFourIs hydrogen
C1-4Alkyl,
C1-4Alkoxy,
halogen,
-0CHTwoCFThree,
-COOH,
-OH,
-COOR6, Where R6Is C1-4Alkyl,
-CONR7R8, Where R7And R8Is independently hydrogen or C1-4Alkyl,
-(CHTwo)1-4OH,
-CHTwoNHC (O) CHThree,
-CHTwoNHC (O) CFThree,
-CHTwoNHSOTwoCHThree,
-SOTwoNHTwo,
-(CHTwo)1-4SOTwoNR7R8,
-(CHTwo)1-4SOTwoR6,
1 which can be saturated or unsaturated and is selected from the group consisting of N, O and S
A 5- to 7-membered mono- or 9- to 10-membered bicyclic heterocycle containing 44 heteroatoms,
-XCHTwoCOTwoH,
-XCHTwoCOTwoCHThree,
-XCHTwoCOTwo(CHTwo)1-3CHThree,
-X (CHR9)1-3C (O) NRTenR11,
Where R99 is H or C1-4Alkyl,
RTenAnd R11Independently
hydrogen,
C3-7Cycloalkyl,
Aryl,
Heteroaryl,
Heterocycloalkyl,
Hydroxy,
COOH,
amino,
Dialkylamino,
Aryl,
Heteroaryl, or
C substituted or unsubstituted at one or more heterocycloalkyl1-4Al
Kill or
RTenAnd R11Are bonded and substituted with hydroxy, amino or aryl
Forming a substituted or unsubstituted 4-7-membered cycloalkyl ring;
-XCHTwoR14Where X is O, S or CHTwoIs;
RFiveIs hydrogen,
halogen,
C1-4Alkyl,
C1-4Alkoxy,
CN or
C0TwoNHTwoIs)
And pharmaceutically acceptable salts thereof.
In one class of compounds and pharmaceutically acceptable salts thereof, W is R1Ma
Or R1SOTwoIt is.
In a subclass of this class of compounds and pharmaceutically acceptable salts thereof,
R1Is RTwo(CHTwo)rOr (RTwo)TwoCH (CHTwo)r, Phenyl-CHTwoSOTwoOr diphenyl-CHSOTwoso
is there.
In a group of compounds of this subclass and pharmaceutically acceptable salts thereof
Is R1Is phenyl-CHTwoSOTwoOr diphenyl-CHS0TwoIt is.
In a sub-group of this group of compounds and pharmaceutically acceptable salts thereof
Is RThreeIs C1-4Alkyl.
In this subgroup of compounds and families of pharmaceutically acceptable salts thereof
Is RThreeIs methyl and RThree'Is hydrogen.
In this family of compounds and pharmaceutically acceptable subfamilies
Is
RFourIs hydrogen,
chlorine,
OH,
0CHTwoCFThree,
OCHTwoC (O) NHTwo,
OCHTwoC (O) NHCHTwoCHThreeOr
OCHTwoC (O) NH (CHCHTwoCHTwo); And
RFiveIs chlorine.
Specific embodiments of this subfamily include (a methyl group is
(Note that it is shown as a single bond). The compounds of the present invention may have a chiral center and are racemic, racemic mixtures and individual.
Although there may be various diastereomers or enantiomers, all isomeric forms
Included in the invention. A racemic compound or racemic mixture is a 50:50 mixture of stereoisomers
Does not include things.
When any component or any variation in formula I occurs one or more times, in each case
Its definition in all other cases depends on that definition. Also replace
Combinations of groups and / or variables result in compounds where such combinations are stable.
Is acceptable only if
In this specification, unless stated otherwise, “alkyl” refers to a specific number of carbon atoms.
And any of the branched and straight-chain saturated aliphatic hydrocarbon groups (Me
Is methyl, Et is ethyl, Pr is propyl, Bu is butyl);
Represents a linear or branched alkyl group of the indicated number of carbon atoms linked through an oxygen bridge.
Shall be “Halo” as used herein refers to fluoro, chloro, bromo
And iodine; and "counterion" is a small, single negative band.
Charged species such as chloride, bromide, hydroxide, acetate, trifle
Oh
Roacetate, perchlorate, nitrate, benzoate, maleate, monkey
Fate, tartrate, hemitartrate, benzenesulfonate, etc.
Shall be.
"C3-7The term "cycloalkyl" refers to cyclopropyl, cyclobutyl, cyclo
It is intended to include pentyl, cyclohexyl, cycloheptyl and the like.
"C7-12The term “bicyclic alkyl” refers to bicyclo [2.2.1] heptyl (norborny
Le), bicyclo [2.2.2] octyl, 1,1,3-trimethyl-bicyclo [2.2.1] heptyl
(Bornyl) and the like.
The term "aryl" as used herein, unless otherwise specified, is stable.
Represents a 6- to 10-membered or bicyclic ring system, such as phenyl or naphthyl.
An aryl ring has one or more C1-4Lower alkyl; hydroxy; alkoxy; halogen
May be substituted or unsubstituted with amino.
As used herein, a "heterocycle" or a "heterocycle"
The term `` clic ring) '' means, unless stated otherwise, that any ring is saturated or unsaturated.
1-4 heteroatoms and carbon, possibly and selected from the group consisting of N, O and S
atom
A stable 5- to 7-membered monocyclic or bicyclic or stable 7- to 10-membered bicyclic
Represents a heterocyclic ring system wherein the nitrogen and sulfur heteroatoms may be optionally oxidized
Heteroatoms can optionally be quaternized and any heterocyclic ring as defined above can be a benzene
Includes any bicyclic group fused to the ring.
One oxygen or sulfur, one to four nitrogen atoms or one or two nitrogen atoms
Particularly useful are rings containing one oxygen or sulfur that is attached to a ligand. Complex
Cyclic rings can be attached to any heteroatom or carbon atom, thereby providing a stable structure
To produce Examples of such heterocyclic rings include piperidinyl, piperazinyl
, 2-oxopiperazinyl, 2-oxopiperidinyl, 2-oxopyrrolidine, 2-oxo
Xoazepinyl, azepinyl, pyrrolyl, 4-piperidonyl, vilolidinyl, pyra
Zolyl, pyrazolidinyl, imidazolyl, imidazolinyl, imidazolidinyl,
Pyridyl, pyrazinyl, pyrimidinyl, pyridazinyl, oxazolyl, oxazo
Lysinyl, isoxazolyl, isoxazolidinyl, morpholinyl, thiazolyl
, Thiazolidinyl, isothiazolyl, quinuclidinyl, iso
Thiazolidinyl, indolyl, quinolinyl, isoquinolinyl, benzimi
Dazolyl, thiadiazoyl, benzopyranyl, benzothiazolyl, benzoxa
Zolyl, furyl, tetrahydrofuryl, tetrahydropyranyl, tetrazole,
Thienyl, benzothienyl, thiamorpholinyl, thiamorpholinyl sulfoxide
, Thiamorpholinyl sulfone and oxadiazolyl. Morpholino
Identical to morpholinyl.
Pharmaceutically acceptable salts of the compounds of the formula I (water- or oil-soluble or dispersible formations)
Product form), for example, a conventional material formed from an inorganic or organic acid or base
And quaternary ammonium salts. Examples of such acid addition salts
Include acetate, adipate, alginate, aspartate, benzoic acid
Salt, benzenesulfonate, bisulfate, butyrate, citrate, camphorate, camphorus
Sulfonate, cyclopentanepropionate, digluconate, dodecyl sulfate
, Ethanesulfonate, fumarate, glucoheptanate, glycerophosphate,
Hemisulphate, heptanoate, hexanoate, hydrochloride, hydrobromide, hydroiodide
-Dide, 2-hydroxyethanesulfonate, lactate, maleate, methanes
Sulfonate, 2-naphthalene sulfonate, nicotinate, nitrate, oxalate, pamoate
Eat
(pamoate), pectate, persulfate, 3-phenylpropionate, biculic acid
Salt, pivalate, propionate, succinate, sulfate, tartrate, thiocyan
Acid salts, tosylate salts and undenate salts. As basic salts,
Monium salts, alkali metal salts such as sodium and potassium salts, alkaline earth
Metal salts, such as calcium and magnesium salts, salts with organic bases, such as
Dicyclohexylamine salts, N-methyl-D-glucamine, salts with amino acids, such as
, Arginine and lysine. In addition, basic nitrogen-containing groups are
Lehalides such as methyl, ethyl, propyl and butyl chloride, bromide
And iodides; dialkyl sulfates such as dimethyl, diethyl and dibutyl
And diamyl sulfates, long-chain halides such as decyl, lauryl, michi
Still and stearyl chlorides, bromides and iodides; aralkyl halides
May be quaternized with agents such as, for example, benzyl and phenethyl bromide.
No.Thrombin Inhibitor Therapeutic Uses-Usage
Anticoagulant therapy is used to treat a variety of thrombotic diseases, especially coronary and cerebrovascular diseases.
It is indicated for prevention. In this area
Those skilled in the art readily recognize situations requiring anticoagulant therapy. As used herein
The term "patient" includes primates, including humans, sheep, horses, cows, pigs, dogs, cats, rats and
It refers to mammals such as rats.
Thrombin inhibition is not only effective in treating anticoagulants in individuals with thrombotic disorders, but also
Prevents aggregation of stored whole blood and prevents aggregation in other biological samples for testing or storage
It is always useful for inhibiting blood clotting, such as Therefore, thrombin inhibition
Bitter is any medium that contains or is suspected of containing thrombin.
What is desirable to inhibit blood coagulation, for example, tube transplantation of mammalian blood,
Stents, orthopedic prostheses, cardiac prostheses and extracorporeal circulation (extracorporea
l circulation system) when contacting with a material selected from the group consisting of
These media can be added to or contacted with.
The thrombin inhibitors of the present invention can be used as tablets, capsules (each of which is a continuous
Release or timed release formulations), pills, powders, particles,
It can be administered in oral form, such as elixirs, tinctures, suspensions, syrups and emulsions.
You. Similarly, they all use forms known to those skilled in the pharmaceutical arts,
It may be administered in intravenous (bulk or infusion), intraperitoneal, subcutaneous or intramuscular form. Desirable
An effective but non-toxic amount of the compound can be used as an anti-aggregant. Fibrin eyeball
For treatment of ocular build up, the compounds may be administered intraocularly or topically.
It can be administered orally or parenterally.
Thrombin inhibitors are formulated in such a way that the active ingredient can be released continuously.
It can be administered in the form of a depot injection or implant preparation which can be prepared. The active ingredient is
Compress into pellets or small cylinders, then depot injection or implant
Can be implanted subcutaneously or intramuscularly. Implants are biodegradable
Polymer or synthetic silicone, eg Silastic) silicone rubber or Do
w Uses inert materials such as other polymers manufactured by Chemical Corporation
I can do it.
Thrombin inhibitors are used in liposome delivery systems, such as small
Administered in the form of unilamellar vesicles, large unilamellar vesicles and multilamellar vesicles
I can do it. Liposomes include various phospholipids such as cholesterol, stearyl
It can be formed from amines or phosphatidylcholines.
Thrombin inhibitors are the individual keys to which compound molecules bind.
Carriers can also be delivered by using monoclonal antibodies as carriers. Tron
Bin inhibitors also bind to soluble polymers as targetable drug carriers.
Can be combined. Examples of such polymers include polyvinylpyrrolidone, pyran
Copolymer, polyhydroxy-propyl-methacrylamide-phenol, polyphenol
Substituted with droxyethyl-aspartamide-phenol or palmitoyl residue
Polyethylene oxide-polylysine. In addition, thrombin inhibitors
Is a type of biodegradable polymer useful for controlling the release of drugs, such as
For example, polylactic acid, polyglycolic acid, copolymer of polylactic acid and polyglycolic acid
, Polyepsilon caprolactone, polyhydroxybutyric acid, polyorthoester,
Polyacetal, polydihydrobiran, polycyanoacrylate and hydrogel
Or an amphiphilic block copolymer.
Dosage regimen with thrombin inhibitors is a
Ip, species, age, weight, sex and health condition; severity of disease to be treated;
Selection depending on the patient's kidney and liver function; and the particular compound or salt thereof used
I do. A physician or veterinarian having ordinary skill in the art should be able to
The effective amount of the drug required to control or control can be determined and prescribed immediately.
When used for labeling, the oral dose of thrombin inhibitor should be
It is about 0.1 g (mg / kg / day) to about 100 mg / kg / day per kilogram of body weight, and 1.0 to 10
0 mg / kg / day is preferred, and 1-20 mg / kg / day is most preferred. To be administered once a day
A suitably prepared medicament comprises 9 mg to 9 g, preferably 90 mg to 9 g, and 90 mg to 1.8 g.
Most preferred are, for example, 100 mg, 500 mg and 1 g. Conveniently, Thrombin Inn
The inhibitor may be administered in 2, 3 or 4 divided doses per day. Multiple times like that
For administration of an individual drug strength is, for example, 25 mg, 33 mg or 50 mg.
obtain. Intravenously, the most preferred doses will range from about 0.01 to about
Vary 10 mg / kg / min. In addition, they are known as transdermal skin patches known to those skilled in the art.
Intranasal via transdermal route using form or topical use of a suitable intranasal vehicle
It can be administered in the form. For administration in the form of a transdermal delivery system, the dosage
Or courses are linked rather than intermittent throughout the dosage regimen.
It is continuous.
Thrombin inhibitors are usually administered in the intended form, for example,
Consistent with oral tablets, capsules, elixirs, syrups, etc. and conventional pharmaceutical practice
A suitable pharmaceutical diluent, excipient or carrier, suitably selected to
(Collectively referred to collectively as "carrier" material))
.
For example, for oral administration in the form of a tablet or capsule, the active drug component may be
, An oral, non-toxic pharmaceutically acceptable inert carrier such as lactose,
Starch, sucrose, glucose, methylcellulose, magnesium stearate,
Mixed with dicalcium phosphate, calcium sulfate, mannitol, sorbitol)
For oral administration in liquid form, the oral drug component can be any oral, non-toxic
, Pharmaceutically acceptable inert carriers such as ethanol, glycerol
, Water, etc.). Further, if desired or necessary, a suitable
Binders, lubricants, disintegrants and coloring agents may also be included in the mixture. Suitable binder
Examples include starch, gelatin, natural sugars (e.g., glucose, β-lactose
, Corn-sweeteners), natural and synthetic gums (e.g., acacia, tragacanth or
Sodium alginate), carboxymethyl cellulose, polyethylene glycol
And wax. Lubricants used in these dosage forms include:
Sodium oleate, sodium stearate, magnesium stearate,
Examples include sodium benzoate, sodium acetate, sodium chloride and the like. Disintegrant
But not limited to, starch methylcellulose, agar, vent
Knight, xanthan gum and the like.
Thrombin inhibitors are used in the treatment of various ascular pathologies.
To obtain a synergistic effect, but not limited to fibrinogen receptor
Suitable anticoagulants, including antagonists, heparin, aspirin or warfarin
Or thrombolysis such as plasminogen activator or streptokinase
It may be administered with a peptizer. For example, a thrombin inhibitor is a tissue plasmin
Gen-activator-promotes the efficiency of thrombolytic reperfusion. Thrombin inhibitors
Can be administered first after thrombus formation, then tissue plasminogen activator
Or administer another plasminogen activator.Manufacturing method
The following synthetic examples can be used to make the compounds of the present invention.
As an example according to Example 1 (Scheme 1)
The starting material 6-methyl-2-hydroxy-pyridine-3-carboxylic acid is added in step A
Reaction with phenylphosphoryl azide (DPPA) and benzyl alcohol to give the protected
Minopyridine is obtained. This is alkylated in step B with t-butyl bromoacetate
And the CBZ group is removed in step C by catalytic hydrogenation. The resulting amine is then
Pyridine in step D with an acid scavenger and a suitable reagent, in this case benzylsulfur
Reaction with fonyl chloride, then the t-butyl ester is removed in step E under acidic conditions
Leave. The acid is then combined with an amine in step F, for example, 2,5-dichlorobenzylamine.
Combine to obtain the final product.Scheme 1 Amide conjugation to form compounds of the invention, for example, Step F of Scheme 1
Is a reagent such as dicyclohexylcarbodiimide or 1-ethyl-3- (3-dimethyl
Carbodiimide method with (tyl-aminopropyl) carbodiimide.
Other methods of forming amide or peptide bonds are not limited to this method
Is a synthetic route via acid chlorides, azides, mixed anhydrides or activated esters.
No. Typically, solution phase amide conjugation is performed, but traditional Merrifie
The solid phase synthesis method by the ld method can be performed instead. Addition or removal of one or more protecting groups
The past is also a typical practice.
In a variant of the method, suitable reagents or suitably substituted starting materials in the indicated synthesis step
Due to the use of quality, W, R considered by the following broad claimsThree, RFourAnd RFiveBase
Can exist. For example, the starting material for Step A is RThreeDifferent operation possible
6-substituents such as ethyl, isopropyl, cyclopropyl,
It can have trifluoromethyl and the like. Similarly, in step D, a suitable alkylating agent,
By using a bonylating agent, a sulfonylating agent, a ureating agent, etc., different W groups can be formed.
Can exist. For example, alkyl halide, alkoxycarbonyl halide, reed
Uses alkyl halide, alkyl sulfonyl halide or alkyl isocyanate
Then, W (where W is R1, R1OCO, R1CO, R1SOTwoOr (R1)m(CHTwo)nNCO)
Give the corresponding value. Similarly, with a suitable choice of the amine of Step F, RFourAnd RFiveof
Different operable values can be used. Books for making similar and obvious variants
Obvious variations and variations on the methods will be apparent to those skilled in the art.
Contains 2-hydroxybenzylamine as a terminal group or its derivative
The preparation of the compounds is shown in Scheme 2 and is exemplified by Example 2.
4-chlorosalicaldehyde to ethanolic sodium carbonate
And concentrated with hydroxylamine hydrochloride. Oximes such as rhodium
Reduction by catalytic hydrogenation to retain the amine as its BOC derivative under standard conditions.
Protect. The phenol was treated in step D with an acetate equivalent such as ethyl bromoacetate.
Alkylation and hydrolyzing the resulting ester with lithium hydroxide. Product carbo
The acid is combined with an amine such as ethylamine in step F, and the BOC group is removed with a strong acid.
You. The amine is coupled with the product of Scheme 1, Step E, to give the final product.Scheme 2 Due to a variation of this method, different R values taken into account by the following broad claimsFouras well as
RFiveThe group uses suitable reagents or suitably substituted starting materials for the indicated synthesis step
It becomes possible by doing so. For example, by suitably selecting the amine of Step F,
R7And R8Can be different. By various mutations and variations of the method,
It is known to those skilled in the art that similar and different mutations can be obtained.
Method for producing compounds that are derivatives of 3-amino-4-trifluoromethyl-2-pyridinone
Is shown in Scheme 3. In Step A, 1,1,1-trifluoromethyl-2,4-pen
Concentration of tandione with nitroacetamide in ethanolic diethylamine
To give 2-hydroxy-6-methyl-3-nitro-4-trifluoromethylpyridine
. This is carried out in step B using sodium hydride as base in THF in t-butyl bromide.
Alkylation with acetate equivalents, such as moracetate, and the nitro group in Step C on carbon
By hydrogenation using a catalyst such as palladium. t-butyl group in Step D
In a strong acid such as HCl, and the resulting carboxylic acid in step E is ethyl-2-amino
Coupling with methyl-4-chlorophenoxyacetamide gives the final product.
In a variation of the method, suitable reagents or suitably substituted starting materials for the indicated synthesis step
Due to the use of quality, different R's are taken into account by the following broad claimsThree, RFourAnd RFive
A group can be present. For example, using a suitable dione of Step A
By that, RThreeCan be different. Similarly, the amines of Step E are preferred
By selecting RFourAnd RFiveCan be different operable values. Book
It is understood by those skilled in the art that obvious mutations and variations of the method will give similar and different mutations.
Are known.Scheme 3 The following examples are intended to illustrate the invention as considered by the inventors.
It is not intended to limit the spirit or scope of the present invention.
Example 1 3- Benzylsulfonylamino-6-methyl-1- (methylene-carboxamidomethyl-2 Synthesis of (5-Dichlorophenyl) -2-pyridinone Step A: 3-benzyloxycarbonylamino-6-methyl-2-pyridinone
DPPA (35.6 ml, 165 mmol) was added to 2-hydroxy-6-methylpyridine-3-carboxylic acid (22.9
7 g, 165 mmol) and triethylamine (23.0 ml, 165 mmol) in dry dioxane (300 ml)
The resulting solution was heated to reflux. 16 hours later,
Liethylamine (23.0 ml, 165 mmol) and benzyl alcohol (17.1 ml, 165 mmol)
Was added and the solution was refluxed for another 24 hours. The reaction is concentrated in vacuo to remove most of the volatiles
Removed. Methylene chloride
(500 ml) and brine (500 ml) and acidified to pH 1 with 1M HCl (165 mmol). aqueous
The layers were extracted with methylene chloride (twice) and the combined organic layers were extracted with sodium bicarbonate solution.
Wash with brine and dry (NaTwoSOFour) And evaporated in vacuo to give a brown solid. this
Was recrystallized from methanol to give the title compound as a brown solid.
Step B: 3-benzyloxycarbonylamino-6-methyl-1- (t-butyl-methyleneca (Ruboxy) -2-pyridinone
Sodium hydride (5.3 g, 0.22 mol) was added to 3-benzyloxycarbonylamino-6-
To a stirred slurry of methyl-2-pyridinone (53.2 g, 0.20 mol) was added at 0 ° C. t-spot
Rubromoacetate (45 ml, 0.27 mol) was added to the resulting solution and immediately precipitated.
Formed. The reaction was warmed for 1 hour and after 2 hours the solvent was removed in vacuo and the residue
Partitioned between 1 water / brine (200 ml) and 6: 1 THF / methylene chloride (700 ml). Organic layer
Dried (NaTwoSOFour) And evaporate in vacuo to give a solid, which is triturated with hexane.
Knot
The title compound was obtained as a crystalline solid.
Step C: 3-amino-6-methyl-1- (t-butyl-methylenecarboxy) -2-pyridinone
3-benzyloxycarbonylamino-6-methyl-1- (t-butyl-methylenecarboxy
B) 4-pyridinone (5.59 g, 15.0 mmol) and Pearlman catalyst (0.56 g)
: 1 mixture in ethanol / water (200 ml)Two(50 psi), shaken for 2 hours in a pearl machine
I let you. The reaction mixture is filtered through celite, evaporated in vacuo and azeotroped with ethanol
This gave the title compound as a solid.
Step D: 3-benzylsulfonylamino-6-methyl-1- (t-butyl-methylenecarboxy C) -2-pyridinone
Benzylsulfonyl chloride (3.15 g, 16.5 mmol) was added to 3-amino-6-
Methyl-1- (t-butyl-methylenecarboxy) -2-pyridinone (3.55 g, 14.9 mmol)
Add to the stirred solution in lysine (30 ml) at 0 ° C., while stirring the resulting solution,
A precipitate formed. After one hour, the reaction mixture is evaporated to a paste by vacuum evaporation.
It was partitioned between methylene chloride and 10% potassium bisulfate solution. Dry the organic layer (N
aTwoSOFour) And evaporated in vacuo to give the title compound as a pale pink solid.
Step E: 3-benzylsulfonylamino-6-methyl-1-methylenecarboxy-2-pyri Zinone
3-benzylsulfonylamino-6-methyl-1- (t-butyl-methylenecarboxy) -2
At 0 ° C. in a stirred solution of pyridinone (5.70 g, 14.52 mmol) in ethyl acetate (60 ml).
HCl was bubbled until a solution saturated with Cl was formed. After 1.5 hours at room temperature, rich
A suspension formed. The mixture was degassed with nitrogen and filtered to give the title compound as a solid.
Was done.
Step F: 3-benzylsulfonylamino-6-methyl-1- (N-2,5-dichlorobenzyl-a (Cetamido) -2-pyridinone
3-benzylsulfonylamino-6-methyl-1-methylenecarboxy-2-pyridinone (
70 mg, 0.21 mmol), HOBT (34 mg, 0.25 mmol), 2,5-dichlorobenzylamine (44 mg,
0.25 mmol) and triethylamine (0.070 ml, 0.50 mmol) in DMF (2.5 ml) with stirring
EDC hydrochloride (48 mg, 0.25 mmol) was added to the mixture and the mixture was stirred for 16 hours. Vinegar reaction
Diluted with ethyl acid, washed with brine and dried (NaTwoSOFour) And evaporate in vacuo to a solid.
Was. The crude product is purified by flash column chromatography on silica (50%
Purification by chill / hexane) afforded the title compound as a crystalline solid.
Example 2 3- Benzylsulfonylamino-6-methyl-1- [ethyl- (2-methylenecarboxyamido Synthesis of Domethyl-4-chlorophenoxy) -acetamido] -2-pyridinone Step A: 4-chlorosalic aldehyde oxime
Hydroxylamine hydrochloride (16.7 g, 0.24 mol) and sodium carbonate (12.7 g, 0.12 g)
mol) in water (120 ml) was added to a solution of 4-chlorosalic aldehyde (25.0 g, 0.16 mol).
It was added to a stirred solution in ethanol (160 ml) and the resulting solution was heated to reflux.
After 1 hour, the reaction was cooled, water (320 ml) was added and the resulting crystalline precipitate was filtered.
More isolated. The second crop is collected as well, and the combined solids are dried,
The compound was obtained.
Step B: 2-hydroxy-5-chlorobenzylamine
4-chlorosalialdehyde oxime (10 g, 58.3 mol) and 5% Rh / C (2.0 g) concentrated sulfuric acid (1
0 ml) in ethanol (100 ml) containingTwo(60psi) lower pearl equipment
Was shaken. Water (100 ml) was added and the mixture was filtered through celite. The filtrate
The product was concentrated until it crystallized from solution. The solid is collected by filtration and the filtrate is
And a second crop is obtained by adding water, which is mixed with the first crop and dried.
This gave the title compound.
Step C: Nt-butoxycarbonyl-2-hydroxy-5-chlorobenzylamine
2-hydroxy-5-chlorobenzylamine (1.22 g, 4.77 mmol as bisulfate), (B
OC)TwoO (1.56 g, 7.16 mmol) and N-methylmorpholine (1.05 ml, 9.54 mmol) in DMF (10
ml) was stirred at room temperature for 5 hours. The reaction was partitioned between water and ethyl acetate,
Organic layer 5% KHSOFourWash twice with sodium bicarbonate solution and brine and dry (
NaTwoSOFour) And evaporated in vacuo to a solid. The crude product is
(1: 5, 12 ml)
This gave the title compound. Step D: Ethyl (2-t-butoxycarbonylaminomethyl-4-chlorophenoxy) -a Acetate
N-t-butoxycarbonyl-2-hydroxy-5-chlorobenzylamine (730 mg, 2.83
mmol), CsTwoCOThree(923 mg, 2.83 mmol) and ethyl bromoacetate (0.314 ml, 2.83 mm
ol) in DHF (5 ml) was stirred for 2 hours. The crude reaction mixture is combined with water and ethyl acetate
The organic layer was washed with brine, dried (NaTwoSOFour) And evaporate in vacuo to oil
It became a state. This was used in the next step.Step E: 2-t-butoxycarbonylaminomethyl-4-chlorophenoxyacetic acid
The product from Step D was dissolved in 1: 1: 1 methanol / THF / water (9 ml) and
Titium hydrate (126 mg, 3.0 mmol) was added. After 16 hours, the volatile components are removed in vacuo,
Dilute the solution with water, wash with ethyl acetate, add enough brine to make the emulsion
Distributed
I let you. 5% KHSO aqueous layerFourAcidify with solution, extract with methylene chloride, dry (NaTwoSOFour)
And evaporated in vacuo to give the title compound as a solid.
Step F: Ethyl- (2-t-butoxycarbonylaminomethyl-4-chlorophenoxya Cetamide
EDC hydrochloride (249 mg, 1.3 mmol) was added to 2-t-butoxycarbonylaminomethyl-4-chloro
Lo-phenoxyacetic acid (316 mg, 1.0 mmol), HOBT (176 mg, 1.3 mmol), ethylamine salt
DHF (4 ml) of acid salt (106 mg, 1.3 mmol) and N-methylmorpholine (0.396 ml, 3.6 mmol)
Was added to the medium stirred mixture and the mixture was stirred for 16 hours. Reaction was performed with ethyl acetate and 5% KHSOFour
Solution and partition the organic layer with 5% KHSOFourSolution, water, NaHCOThreeWash with solution and brine
, Dried (NaTwoSOFour) And evaporated in vacuo to give the title compound as a solid (333 mg).
This was used in the next step.Step G: Ethyl- (2-aminomethyl-4-chlorophenoxy) -acetamide
Ethyl- (2-t-butoxycarbonylaminomethyl-4-chloropheno from step F
Xy) -acetamide was dissolved in 2: 1 methylene chloride / TFA (3 ml) and after 15 minutes the solution was
Was evaporated in vacuo. The residue was dissolved in water and the solution was washed with methylene chloride (twice)
. The aqueous layer was basified with saturated sodium carbonate solution and saturated with NaCl. The mixture
Extract with ethyl acetate and dry the organic layer (NaTwoSOFour) And evaporate in vacuo to form a crystalline solid
The title compound was obtained.
Step H: 3-benzylsulfonylamino-6-methyl-1- [ethyl- (2-methylenecarbo (Xyamidomethyl-4-chlorophenoxy) -acetamide
DCC (103 mg, 0.50 mmol) was added to ethyl- (2-aminomethyl-4-chlorophenoxy) -acetate.
Toamide (137 mg, 0.57 mmol) and 3-benzylsulfonylamino-6-methyl-1-methyl
Rencarboxy-2-pyri
Dinone (168 mg, 0.0.50 mmol) was added to a stirred solution in methylene chloride (3 ml). 3 o'clock
After a while, the resulting thick mixture is filtered through celite and the product is less soluble
The pad is washed with a large volume of methylene chloride and the filtrate is evaporated in vacuo to a solid.
Became a body. The crude product was purified by flash chromatography on silica (3: 1 hex
/ Acetone, then methanol / chloroform gradient, 2-4% methanol)
This gave the title compound as a crystalline solid. 210-213 ° C.
The following compounds were prepared using the method of Example 2.
Example 3 3- Benzylsulfonylamino-6-methyl-1- [cyclopropyl- (2-methylene-carbo Xyamidomethyl-4-chlorophenoxy) -acetamido] -2-pyridinone DCC (103 mg, 0.50 mmol) was added to cyclopropyl- (2-aminomethyl-4-chlorophenoxy)
B) -acetamide (127 mg, 0.50 mmol) and 3-benzylsulfonylamino-6-methyl
1-methylenecarboxy-2-pyridinone (168mg, 0.50mmol) in methylene chloride (2ml)
Was added to the stirred solution. After 16 hours, the resulting thick mixture was filtered through celite.
Wash with 1: 1 methanol / chloroform and evaporate the filtrate in vacuo to a solid.
Was. The crude product was purified by flash chromatography on silica (3: 1 hexane /
(Seton, then methanol / chloroform gradient, 2-4% methanol)
This gave the title compound as a crystalline solid. Melting point> 200 ° C. Example 4 3- Benzylsulfonylamino-6-methyl-1- (2-methylenecarboxamidomethyl- 4-chlorophenoxyacetamide) -2-pyridinone DCC (63 mg, 0.307 mmol) was treated with 2-aminomethyl-4-chlorophenoxyacetamide (10
1 mg, 0.307 mmol) and 3-benzylsulfonylamino-6-methyl-1-methylenecarbo
Add a stirred solution of xy-2-pyridinone (103mg, 0.307mmol) in methylene chloride (2ml)
did. After 66 hours, the resulting thick mixture was filtered through celite and 1: 1 methanol
And methylene chloride, and the filtrate was evaporated in vacuo to a solid. Coarse generation
The product was flash chromatographed on silica (3: 1 hexane / acetone, then
(Methanol / chloroform gradient, 2-5% methanol).
The title compound was obtained. Melting point> 200 ° C.
Further, the following examples were implemented.Example 5 3- Benzylsulfonylamino-6-methyl-1- (2-methylenecarboxamidomethyl- 4-chlorophenoxy) -2-pyridinone EDC hydrochloride (236 mg, 1.23 mmol) was treated with 3-benzylsulfonylamino-6-methyl-1-methyl
Lencarboxy-2-pyridinone (415 mg, 1.23 mmol), HOBT (167 mg, 1.23 mmol), 2-
Hydroxy-5-chlorobenzylamine (195 mg, product of Example B, Step B) and NMM (
0.136 ml, 1.23 mmol) to a stirred mixture in DHF (1.2 ml) and stir the mixture for 3 h
did. Dilute the reaction with ethyl acetate, wash with water and dry (NaSOFour) And let it evaporate in vacuum
It became a solid.
The crude product is flash chromatographed on silica (ethyl acetate / hexane / 2
(Acetic acid gradient, 50-80% ethyl acetate) to give the title compound as a crystalline solid.
Was. Melting point> 200 ° C.
Example 6 3- Benzylsulfonylamino-6-methyl-1- [2,2,2-trifluoroethyl- (2-methyl Lencarboxamidomethyl-4-chloro) phenoxy] -2-pyridinone DCC (25 mg, 0.12 mmol) was converted to 2- (2,2,2-trifluoroethyl) -5-chlorobenzylamido.
(29 mg, 0.12 mmol) and 3-benzylsulfonylamino-6-methyl-1-methylenecar
Add a stirred solution of boxy-2-pyridinone (61 mg, 0.18 mmol) in methylene chloride (0.7 ml).
Added. After 16 hours, the resulting thick mixture was filtered through celite to give methyl chloride.
Washed with ren and the filtrate was evaporated in vacuo to a solid. Crude product on silica
Flash chromatography (3: 1 hexane / acetone, then 50% ethyl acetate /
(Hexane) to give a crystalline solid, which is triturated with methylene chloride.
Afforded the title compound as a crystalline solid. Melting point> 200 ° C.
Example 7 3- Benzylsulfonylamino-6-methyl-1- (methylenecarboxamidomethyl-3- (Chlorophenyl) -2-pyridinone DCC (43 mg, 0.21 mmol) was added to 3-chlorobenzylamine (0.025 ml, 0.21 mmol) and
Ndylsulfonylamino-6-methyl-1-methyl
Stirring of lencarboxy-2-pyridinone (70mg, 0.21mmol) in methylene chloride (1.0ml)
Added to the solution. After 16 hours, the resulting thick mixture was filtered through celite,
After washing with methylene chloride, the filtrate was evaporated in vacuo to a solid. Crude product
Flash chromatography on silica (3: 1 hexane / acetone, then acetic acid
(Chill / hexane gradient, 60-100% ethyl acetate) to give a crystalline solid.
This was triturated with methanol to give the title compound as a solid. Melting point 176-17 ℃
Example 8 In vitro assays to measure proteinase inhibition
Assays for human α-thrombin and human trypsin were performed by S.D.Lewis et al.Thrombos is Research
, Issue No. 70, p. 173 (1993).
Assay performed at 25 ° C, 0.05M TRIS buffer, pH 7.4, 0.15M NaCl, 0.1% PEG
did. 1 mM CaCl for trypsin assayTwoWas contained. p-Nitroanilide (pn
a) Measure the hydrolysis rate of the substrate
For assays to determine, use a Thermomax 96-well plate reader to
The time-dependent evolution of roaniline was measured (at 405 nm). using sar-PR-pna
Human α-thrombin (Km= 125 μM) and bovine trypsin (Km= 125μH)
did. 8270 cm p-nitroanilide substrate concentration-1M-1Absorbance at 342 nm using the extinction coefficient of
It was determined by measuring the yield.
In certain studies with strong inhibitors (Ki <10 nM) with very high thrombin inhibition
For this purpose, a more sensitive activity assay was used. In this assay, the fluorescence
Substrate Z-GPR-afc (Km= 27 μM), the thrombin catalyzed hydrolysis rate was 7-amino-4-
Increased fluorescence at 500nm (400nm excitation) with production of trifluoromethylcoumarin?
Decided. The concentration of the stock solution of Z-GPR-afc is determined by the
7-Amino-4-trifluoromethylcoumarin produced at the completion of coat hydrolysis
It was determined by measuring the absorption at 80 nm.
The activity assay is performed at final concentration ≤ 0.1 KmTransfer the stock solution of substrate to the enzyme at least 10 times.
Or by diluting the enzyme-containing solution equilibrated with the inhibitor. Yeast
The magnification required to achieve equilibrium between the element and the inhibitor was determined from control experiments.
Was. Inn
Absence of inhibitor (V0) Or presence (Vi) Was measured for the initial rate of product formation.
Competition inhibition and unity are Km/ [S], [I] / e and [I] / e (where [S], [I] and e
Indicate the substrate concentration, inhibitor concentration and enzyme concentration, respectively.)
And the equilibrium constant (Ki) for the dissociation of the enzyme-derived inhibitor is shown in Equation 1.
[I] V0/ ViFrom the dependence of
V0/ Vi= 1 + [I] / Ki (1)
The activity exhibited by this assay indicates that the compound of the present invention is unstable angina, refractory
Refractory angina, myocardial bone refraction, transient ischemic attack, atrial fibrillation, thrombotic stroke, embolism
Stroke, deep vein thrombosis, disseminated intravascular coagulation, and reocclusion or restenosis of the recanalization duct
That it is therapeutically effective in treating various conditions in patients suffering from stenosis
Is shown. For each human thrombin of the following compounds represented by Ki
Inhibitory activity is less than 15 nM. These are at least 1800 nM human trypsin
(As represented by Ki)
Compound. Example 9 In Vivo Study for Measuring Thrombus Occlusion
Applicants are directed to Kurtz et al., Thrombosis Research, No. 60, 269 (1990)
Substantially use the following rat iron chloride assay:
In vivo studies of the compounds claimed herein were performed.
Used to determine the in vivo activity of a thrombin inhibitor or the invention.
Male Sprague-Dawley rats (weight 200-350 g)
Anesthetize with urethane solution (0.1 ml / 100 g body weight, first time point),
tailvein) with a 23-gauge needle connected to a 12-inch long PE50 tube.
Entered. The tube was connected to the three-way valve by a tube adapter. Brine (control)
Alternatively, test compounds are suitably administered via a tail vein catheter. Tracheostomy
Was performed in a 0.75 inch long PE205 tube. Exposing the right carotid artery
A Doppler flow probe was placed inside the blood vessel. Body temperature using heat lamp
Was kept at 37 ° C.
Rats (8-10 / group) randomly administered via tail vein at a rate of 0.028 ml / min
The saline or test compound was subjected to continuous intravenous infusion. Process injection is flow pro
35% FeCl on exposed carotid artery at end of probeThree3mm of Whatman No. 1 filter paper saturated withTwoPiece
60 minutes before starting. If thrombotic occlusion has not occurred or
If stopped 30 minutes after thrombotic occlusion of blood vessels, FeClThreeSuitable
The treatment was continued for an additional 90 minutes after use (total injection time 150 minutes). Time to blockage is FeC
lThreeWas defined as the time from application of to the thrombus occlusion of the tube. At the end of the study (without obstruction)
FeClThree90 minutes after administration or 30 minutes after thrombus occlusion)
It was drawn into 0.3 ml of 3.8% sodium citrate by cardiac puncture.
The results show that the compounds of the present invention are effective in preventing thrombotic occlusion.
Example 10 Tablet manufacturing
Tablets containing the following active compounds, 25.0, 50.0 and 100.0 mg, respectively, are shown below.
Manufacture.
3-benzylsulfonylamino-6-methyl-1- (methylenecarboxamidomethyl-2,
5-dichlorophenyl) -2-pyridinone,
3-benzylsulfonylamino-6-methyl-1- [ethyl- (2-methylenecarboxyamido
Domethyl-4-chlorophenoxy) -acetamido] -2-pyridinone,
3-benzylsulfonylamino-6-methyl-1- [cyclopropyl- (2-methylenecarbo
Xyamidomethyl-4-chlorophenoxy) -acetamido] -2-pyridinone,
3-benzylsulfonylamino-6-methyl-1- (2-methylenecarboxamidomethyl-
4-chlorophenoxyacetamide) -2-pyridinone.Dosage table containing 25-100 mg of active compound
Amount-mg
Active compound 25.0 50.0 100.0
Microcrystalline cellulose 37.25 100.0 200.0
Modified food corn starch 37.25 4.25 8.5
Magnesium stearate 0.50 0.75 1.5
Mix all active compounds, cellulose and some corn starch, 10% corn starch
Granulated into a tarch paste. The resulting granules are sieved and the remaining cornstar
Chi and magnesium stearate were blended. The obtained granules are applied to one tablet.
The active ingredient was formed into tablets containing 25.0, 50.0 and 100.0 mg, respectively.
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フロントページの続き
(81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，
ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ
Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ
，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，
ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，Ｓ
Ｚ，ＵＧ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ
，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ
，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，
ＥＥ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＧ，ＫＲ，Ｋ
Ｚ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ
，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＧ，
ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，Ｕ
Ｚ，ＶＮ，ＹＵ
(72)発明者 ライル，テリー・エイ
アメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・
07065、ローウエイ、イースト・リンカー
ン・アベニユー・126
(72)発明者 バツカ，ジヨージフ・ピー
アメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・
07065、ローウエイ、イースト・リンカー
ン・アベニユー・126
(72)発明者 ラマ，ウイリアム・シー
アメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・
07065、ローウエイ、イースト・リンカー
ン・アベニユー・126
(72)発明者 ブレイデイー，ステイーブン・エフ
アメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・
07065、ローウエイ、イースト・リンカー
ン・アベニユー・126
(72)発明者 タツカー，トーマス・ジエイ
アメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・
07065、ローウエイ、イースト・リンカー
ン・アベニユー・126────────────────────────────────────────────────── ───
Continuation of front page
(81) Designated countries EP (AT, BE, CH, DE,
DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, L
U, MC, NL, PT, SE), OA (BF, BJ, CF)
, CG, CI, CM, GA, GN, ML, MR, NE,
SN, TD, TG), AP (KE, LS, MW, SD, S
Z, UG), EA (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD
, RU, TJ, TM), AL, AM, AU, AZ, BA
, BB, BG, BR, BY, CA, CN, CU, CZ,
EE, GE, HU, IL, IS, JP, KG, KR, K
Z, LC, LK, LR, LT, LV, MD, MG, MK
, MN, MX, NO, NZ, PL, RO, RU, SG,
SI, SK, TJ, TM, TR, TT, UA, US, U
Z, VN, YU
(72) Inventor Lyle, Terry A
New Jersey, United States
07065, Lowway, East Linker
N Avenue 126
(72) Inventors Batska, Jojipf
New Jersey, United States
07065, Lowway, East Linker
N Avenue 126
(72) Inventor Rama, William Sea
New Jersey, United States
07065, Lowway, East Linker
N Avenue 126
(72) Inventor Brady, Stephen F
New Jersey, United States
07065, Lowway, East Linker
N Avenue 126
(72) Inventors Tatsuka, Thomas J.
New Jersey, United States
07065, Lowway, East Linker
N Avenue 126