JP2000502565A

JP2000502565A - ガラクトピラノシド類とそれらの使用

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Publication number: JP2000502565A
Application number: JP09523588A
Authority: JP
Inventors: ニルソン、クルト
Original assignee: プロクル・アクトボラーゲン
Priority date: 1995-12-21
Filing date: 1996-12-23
Publication date: 2000-03-07
Also published as: WO1997023637A1; US6444655B1; USRE39245E1; CA2240941A1; AU4883100A; AU1404597A; EP0873414A1; AU765631B2

Abstract

(57)【要約】本発明は簡易な合成、炭水化物ベースの新規な産物、および種々の炭水化物ベースの産物の実用的な使用に関する。これらの例は、(Gal α l-3Gal)、GlcNAc β1-3Gal、それらのα-またはβ-グリコシド、GlcNAc β 1-3Gal β 1Gal α 1-3Galを含有する三糖またはそれ以上の多糖類、それらのα-またはβ-グリコシド、GlcNAc β 1-3Galを含有する三糖、四糖、またはそれ以上の多糖、およびそれらの誘導体および／またはそれらのα-またはβ-グリコシド、Gal α 1-3GalGlcNAcβ 1-3Gal、それらのα-またはβ-グリコシド、Gal α 1-3Gal β 1-4GlcNAcβ 1-3Gal β 1-4Glc、またはGal α 1-3Gal構造を含有する他のさらに大きなオリゴ糖、それらのα-またはβ-グリコシド、修飾された炭水化物、ジ-、トリ-、オリゴ-または多官能基の、炭水化物構造を含有する産物、並びに合成、アフィニティー精製、診断への応用、および治療のための使用である。

Description

２２【発明の詳細な説明】ガラクトピラノシド類とそれらの使用本発明は、単純な合成法、炭水化物に基づく生成物、及び種々の炭水化物に基づく生成物の実際的使用に関する。これについての例は、（Ｇａｌα１−３Ｇａｌ）、ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌ、それのα−又はβ−グリコシド類、Ｇａｌ α１−３Ｇａｌ−含有三糖類又は四糖以上のオリゴ糖類、それらのα−又はβ− グリコシド類、ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌ含有三糖類、四糖類又は５糖以上のオリゴ糖類、及びこれらのいずれかの誘導体類及び／又はα−若しくはβ−グリコシド類、Ｇａｌα１−３ＧａｌＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌ、それのα−又は β−グリコシド類、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌ β１−４Ｇｌｃ又はその他のＧａｌα１−３Ｇａｌ−構造を含有する高度のオリゴ糖類、それらのα−又はβ−グリコシド類、修飾炭水化物類、炭水化物構造を含有する２−、３−、オリゴ−又は多官能性生成物、及び合成、アフィニティー精製、診断適用及び治療のための生成物の使用である。最近数年間に、特に糖タンパク質類、糖脂質類、プロテオグリカン類及びグリコアミノグリカン類の形でヒト、動物及び植物中に存在するいわゆる生物学的に活性な炭水化物類の例えば診断薬及び治療薬の範囲内での合成及び適用に対する大きな関心が生じてきた。これらの炭水化物類の例は、各々ＧａｌＮＡｃα１− ３（Ｆｕｃα１−２）Ｇａｌβ−及びＧａｌα１−３（Ｆｕｃα１−２）Ｇａｌ β−の構造を有する例えばＡ型及びＢ型決定基の物質のような血液型関連物質である。最近数年間には、例えばＧａｌα１−３Ｇａｌβ−を含有する炭水化物構造に大きな関心が生じてきたが、これはこのタイプの構造が牛における感染性疾患例えば(下痢)を惹起する病原体の結合において極めて重要であることが判明したためであり、さらに抗原性構造として例えば様々な癌細胞がこのエピトープを発現し、さらにＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃ−エピトープが様々なタイプの癌に対するワクチン化のために興味深いからである。同様にブタ臓器もＧａｌα１−３Ｇａｌβ−エピトープ及びこの構造を含有する長鎖炭水化物構造を発現する。このため、最近２、３年間には例えばＧａｌα １−３Ｇａｌβ−を含有する炭水化物構造、及びこの構造を含有するオリゴ糖類、例えばＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃ及びＧａｌα１−３Ｇａｌβ １−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃの使用と関連した可能性ある異種組織移植に相当に大きな関心が生じてきた。このタイプの構造は、ヒトを含む他の種へ移植されたブタ臓器の一次抗体媒介性拒絶反応（超急性拒絶反応：ＨＡＲ）に対する原因であると思われる。同一の問題は、臓器ドナーの血液型がレシピエントの血液型と異なる場合にはヒトからヒトへの移植においても発生するであろう。これは、特に急性状態の患者のための適切なドナー臓器の入手可能性を制限する。上記で言及した構造に加えて、ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌ及びこの構造を含有する例えばＧａｌβ１−３ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃのような三糖類、四糖類又は五糖以上のオリゴ糖類は抗生物質の代用品となり得るため興味深いが、それは例えば呼吸器病原菌はそうした炭水化物構造を通して気道に結合することが知られているからである。そうした構造の化合物、又はそれらの誘導体類を用いて感染症を抑制する可能性については相当に関心が高い。治療的適用に加えて、例えば該構造がアガロースのような分離材料に結合させられるアフィニティークロマトグラフィーを使用することによる細胞、酵素及びタンパク質の分離又は除去のための例えば上記で言及した構造には多大な関心が集まっている。例えばグリコシルトランスフェラーゼ類（受容体基質として糖構造を使用する）、レクチン類、抗体類のような構造に対して特異性を有するタンパク質類及びその他のタンパク質類の分離のためにそうした分離材料を使用することは極めて興味深い。同様に、細胞（例えば病原菌）、酵素、抗体、他の炭水化物結合タンパク質を測定するための診断用試薬としての前記構造の適用も相当に関心が高い。１つの例はバイオセンサー（例、バイアコア［ＢｉａＣｏｒｅ］、ファルマシア［Ｐｈａｒｍａｃｉａ］社）における適用である。この場合、炭水化物構造は表面に結合することができ、その後の細胞、酵素又はタンパク質の前記表面への結合（結合炭水化物との）が結合の度合いに関連する電気信号を生じさせる。その結果として、定性的及び定量的測定を実施できる。別の適用はＥＬＩＳＡ法( 酵素結合免疫吸着剤検定法)にある。この場合、炭水化物構造は例えば、スペーサー分子によって、又は例えば後でマイクロタイター・ウェルに結合させることのできるウシ血清アルブミンへの抱合によって、ＥＬＩＳＡプレート（例えば活性化ウェルへの直接共有結合によって、例、ＮＵＮＣ（デンマーク）社製）上のマイクロタイター・ウェルに結合させることができる。その後にはそうしたＥＬＩＳＡ−プレートを用いて例えば標準型のサンドイッチ−ＥＬＩＳＡ法を実施できるが、この場合は試料中の炭水化物特異的細胞、酵素又はタンパク質の数をＥＬＩＳＡ法で使用される標準的方法（例えば炭水化物修飾マイクロタイタープレートへサンプルを塗布してその後に洗浄、例えば炭水化物又は該炭水化物に特異的な抗体と共役したペルオキシダーゼのような酵素抱合体を塗布してその後に洗浄、酵素抱合体及び基質を添加してマイクロタイターウェルにおける吸光度を測定）のいずれかを用いて定量することができる。例えば診断用適用における、ダウンストリーム・プロセッシングにおける、細胞、タンパク質又は酵素の分離のための、癌に対するワクチン化における、アフィニティーリガンドとして適切な炭水化物決定基を使用する異種組織移植における血漿からの（異種）抗体の特異的除去のための、及び／又は可溶性炭水化物又はそれらの誘導体の添加による抗体の中性化のための、及び感染性疾患の防止における適用のための現在の炭水化物の適用における主要問題は、適切な炭水化物構造又はそれらの誘導体類を純粋な形かつ十分な量で製造することである。化学的方法は厄介（例、多段階合成）であり、副反応を生じさせ、例えば立体異性体の混合物（α／β−混合物）の形成を生じさせるため、化学的方法の使用は最小限に抑えることが望ましい。従って、上記の構造におけるα１−３−結合及びβ １−３−結合の合成のための適切な方法を発見することは極めて魅力的であろう。本発明は、例えば（Ｇａｌα１−３Ｇａｌ）、それのα−又はβ−グリコシド類、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃのタイプの三糖類及びその他のＧａｌα１−３Ｇａｌ−含有三糖類、それらのα−又はβ−グリコシド類、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌ、それらのα−又はβ− グリコシド類、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ１ −４Ｇｌｃ又はその他のＧａｌα１−３Ｇａｌ−構造を含有する高度のオリゴ糖類、それらのα−又はβ−グリコシド類のような二糖類、三糖類及びオリゴ糖類及びそれらのグリコシド類及び誘導体類、及びα１−３−結合ガラクトピラノシル−ガラクトピラノース含有修飾炭水化物類及びそれらの修飾β−グリコシド類、ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌ、それらの誘導体類、例えばＧａｌβ１−３ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌ及びＧａｌβ１−３ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ１− ４Ｇｌｃ及びそれらの誘導体類及び／又はα−若しくはβ−グリコシド類のようなＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌ含有三糖類、四糖類又は５糖以上のオリゴ糖類の単純な合成法を記載する。誘導体又は修飾炭水化物という用語は、糖類中の１又は２以上のヒドロキシル基又は−ＮＡｃ基が有機基又は無機基と置換されている構造を意味する。有機基および無機基の例は下記の説明で与えられる。本発明に従った方法における１つの成分は、天然に存在するグリコシダーゼ、（ＥＣ３．２）、又は化学的に修飾された、若しくは組換え技術によって修飾されたそれらの変異体が例えばグリコシル転移反応において使用されることに関する。下記ではα−グリコシドであるＧａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＲの生成のための例えばα−ガラクトシダーゼの使用の例を提供するが、式中、Ｒは必要な最終生成物に化学的に変換することのできるアリール基である。最初の反応は図１に示したタイプのいわゆるグリコシド転移反応を用いて実施される。この反応では、α−ガラクトシダーゼを触媒として使用する。本発明に従うと、ヘキソサミニダーゼ、グルクロニダーゼ、キシロシダーゼ、マンノシダーゼ、シアリダーゼ、グルコサミニダーゼ、ガラクトサミニダーゼ、グルコシダーゼのタイプのα−又はβ−グリコシダーゼ類のような別のα−若しくはβ−エンド− 又はエキソ−グリコシダーゼ（名称が供与体の特異性を示している）を使用することができる。下記のタイプの生成物が入手される： Dα1-iAα-ORまたはDα1-iAβ-ORまたはDβ1-iAβ-OR,またはDβ1-iAα-OR 式中、ｉは受容体の結合位置を示し、Ｄは供与体に、そしてＡは受容体に由来するが、後者は単糖、二糖、又はオリゴ糖物質を含有している。Ｇａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＲは非限定例である。その他の非限定例は、Ｇａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＲと同一方法で生成されるが、別の供与体、受容体及びグリコシダーゼを用いて、しかし同一タイプの受容体アグリコン（これらの場合にはＯＲ）を使用して生成されるＧａｌβ１−３Ｇａｌβ−ＯＲ、Ｇａｌβ１− ３ＧｌｃＮＡｃβ−ＯＲ、Ｇａｌβ１−３ＧａｌＮＡｃβ−ＯＲ、ＧａｌＮＡｃ β１−３Ｇａｌβ−ＯＲ、Ｍａｎα１−２Ｍａｎα−ＯＲ等である。例えば、Ｇａｌβ１−３Ｇａｌβ−ＯＲの場合には、β−ガラクトシドは供与体として、Ｇａｌβ−ＯＲは受容体として、β−ガラクトシダーゼは酵素として使用される。これらは専門家によって容易に選択されるので、これは本発明の範囲を限定しない。例えば１−２及び１−６−結合生成物のような他の位置異性体がしばしば入手されるが、これらは生成物の修飾前又は修飾後に例えばカラムクロマトグラフィマトグラフィー）を用いて、又は上記の反応において使用する酵素とは別の位置選択性を有する１又は２種のグリコシダーゼ類を用いての副生成物の酵素的加水分解を用いて必要な１−３結合生成物から分離することができる。酵素源としては、動物組織、植物又は微生物を利用することができる（例えばＧａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＲの製造における多量の酵素を含有しているコーヒー豆、又はアスペルギルス・オリザエ(Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｏｒｙｚａｅ) 、又はアスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ）からの α−ガラクトシダーゼ）。多量のα１−３−結合生成物を提供するその他の適切な酵素源も又専門家であれば選択することができる。例えばその反応は、修飾酵素、又は固定化酵素、又は非修飾酵素を用いて緩衝水（例、４〜８の間のＰＨを有する）中又は水と有機溶液の混合液中で、適切な温度（例、０℃〜８０℃の間の）及び適切な基質濃度（例、５０ｍＭ〜１Ｍ）で、至適生成物濃度を得るために適切な反応時間で実行することができる（後者はその後例えばＨＰＬＣを行うことができる）。反応条件及び酵素のタイプ（化学的修飾、架橋結合、ポリエチレングリコール修飾のような修飾のタイプ、固定化のタイプ、非修飾酵素のタイプ、又は修飾酵素のタイプ及び／又は組換え若しくは遺伝子工学テクノロジーを用いて生成される酵素のタイプ）は専門家によって選択かつ作り出されるので、本発明の範囲を限定しない。酵素の純度は決定的に重要ではなく、例えばコーヒー豆のホモゲナイゼーション、緩衝液を用いての抽出、硫酸アンモニウム（例、５０〜７０％飽和）を用いてのホモジネートの沈殿、透析及び凍結乾燥を行った後に入手される凍結乾燥酵素製剤を使用することができる。必要な場合は、酵素は上記の例におけるより純粋ではない形で、又は例えばサイズ分離（例えば、純度の低い酵素製剤中の変色基づくカラムクロマトグラフィー後に入手されるようなより純粋な形で使用することができる。いわゆるスペーサーによって固定化されたα−ガラクトシドを含有する例えば分離材料を使用する例えばアフィニティークロマトグラフイーを用いて入手されるさらに単離された酵素製剤も又本発明に従って使用することができる。これは本発明を限定しない。固定化酵素は、例えばトレシル−活性化担体（例、アガロース又はセルロース）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド活性化担体、例えばアガロース（例、ファルマシア社製の活性化ＣＭ−セファロース［ＳｅｐｔＦｌｏｗ］）又は例えば上記で言及した凍結乾燥酵素製剤又はさらに単離された酵素製剤の別の固定化方法を選択することによって入手される。これは専門家によって容易に実行されるので、本発明の適用を限定しない。固定化酵素は例えばバッチ法反応（ｂａｔｃｈ−ｗｉｓｅｒｅａｃｔｉｏｎ）又はカラム（連続的合成のため）において使用できる。これはいずれも本発明の範囲を全く限定しないであろう。酵素の（部分的）精製のための方法の１例として、上記ではアフィニティーリガンドとして単糖類を使用するアフィニティークロマトグラフィーが言及されている。本発明に従うと、さらに二糖配列順序又は酵素が合成するグリコシド結合を含有する炭水化物に基づくアフィニティーリガンドも又使用することができる、又は該炭水化物リガンドは不必要な炭水化物配列を含んでいてもよい。これは同一合成において相違する位置選択性を与える同一酵素源から相違するイソエンザイム類のアフィニティー分離を達成することを可能にするために使用される。従って、多数の酵素源は例えばα−ガラクトシダーゼ及びβ−ガラクトシダーゼのような少なくとも２種のイソエンザイム類を含有している。一部の例では、例えば加水分解又は酵素類を用いたグリコシド転移反応におけるより高度の選択性を得るためにこれらを分離することが有益である可能性がある。Ｇａｌα１−３Ｇａｌ−Ｒの合成のためにα−ガラクトシダーゼを使用する場合は、例えばＧａｌα１−３Ｇａｌα−Ｙを入手できるが、式中、この場合におけるＹは分離材料への結合に適した基である。Ｙ及び分離材料に対しては多くの可能性が存在するので、本発明の範囲を限定しない。従って、例えばＧａｌα１ −３Ｇａｌα−ＯＰｈＮＨ₂−ｐ又はＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃβ− ＯＰｈＮＨ₂−ｐを例えばアガロース又は他の分離材料上の、例えばＮ−ヒドロキシスクシンイミド活性化カルボキシル基へ結合させるための炭水化物に基づくアフィニティーリガンド類として使用することができる。その結果生じた物質は、この場合にはα−ガラクトシダーゼの分離のために使用できる。アフィニティーリガンドの加水分解は、例えば低温、又はコーヒー豆からのα−ガラクトシダーゼの場合におけるｐＨ８のような酵素にとっての至適ｐＨではないｐＨを用いることによって最小限に抑えることができる。酵素は、塩類又はより詳細には例えばガラクトース又はＧａｌα１−３Ｇａｌを用いて例えば非特異的に多数の方法で溶出することができる。また別の類似例は、例えばウシ精巣からのβ−ガラクトシダーゼ類であり、この場合は分離のためのアフィニティーリガンドとして例えばＧａｌβ１−３ＧｌｃＮＡｃ−スペーサーを使用することが可能である。上記の代替策は、アフィニティーリガンドとして例えば固定化単糖グリコシドを用いて問題のグリコシダーゼをあるタイプのアフィニティー材料へ結合させ、その後に、酵素を用いて合成／加水分解される例えば炭水化物構造を用いて溶出することである。上記で言及したグリコシダーゼ反応においては、Ｒ＝Ｒ’であるか、又はＲとＲ’は相違することがあり得る。この例は、図２（ＲＯ＝ｐ−ニトロフェニル）に、そしてα−ガラクトシダーゼについては図３（Ｒ’Ｏ＝ｐ−メトキシフェニル）に示されている。上記の反応の生成物はその後、本発明に従うと、生成されたグリコシド類から遊離糖類を作るために使用することができる。これは、非限定例として例えば図４及び５における原理に従った化学的方法を使用してＧａｌα１−３Ｇａ１又はＧａｌα１−３Ｇａｌβ−Ａの生成について例示される。これらの図中の反応図においては、どのようにしてＧａｌα１−３Ｇａｌ又はＧａｌα１−３Ｇａｌβ−Ａへ構造が変更され得るかが例示されている。そこに与えられた試薬の例は非限定例と見なすべきで、その他の適切な試薬は専門家であれば選択することができる。−Ｘの例は、各々チオエタノール、チオフェノール又はＨＳＰｈＭｅを用いたさらなる反応後の−ＳＥｔ、−ＳＰｈ又は−ＳＰｈＭｅ−ｐである。 α−ＰｈＮＨＡｃグリコシドからβ−ＳＰｈＭｅグリコシドへの変化によりＧａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＰｈＮＯ₂−ｐをβ−グリコシド類及び二糖類（Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ−ＯＲを用いて記号化されている）のより高度のオリゴ糖類へ変化させるそれ以上の非限定例は図６に示されている。図６の反応ＶＩにおいてはＡｇ−トリフラートが挙げられているが、この試薬は例えばＮ−ヨードスクシンイミド、又はＮ−ブロモスクシンイミドに取り換えることができる。Ａの例は下記に挙げられている。より具体的な例として、三糖誘導体の合成においては、例えばＡは、例えば２ −デオキシ−２−アミノ−Ｄ−グルコピラノース基を含んでいる単糖誘導体であり、少なくとも６位が例えばベンゾイル基（非限定例）で保護され、且つ１位が例えば（非限定例）β−結合−ＯＣＨ₂ＣＨ₂ＰｈＮＯ₂−ｐ又は−ＯＰｈＮＨ− ＣＯ−Ｒのような適切な有機基で保護されている単糖誘導体であると言うことができるが、式中、−ＣＯ−Ｒは例えばＮＨ−基の一時的保護のために適切な有機基であり得、又は化学修飾後にタンパク質、ペプチド、分離材料又は低分子量の有機基もしくは無機基への共有結合のために使用できる基であってもよい。これらのＡの例では、２−アミノ−部位はアセチル基又は他のアシル基含有物質を用いて修飾することができ、それらのフタルイミド基及びトリクロロエトキシカルボニル基は非限定例である。これらのＡの例では、保護基は従来型化学的方法（及び／又は１位のニトロ基を還元する）を用いて取り除くことができ、それに基づいて生成物を下記に例示する適用において使用することができる。上記の例において第６、第２及び第１位置だけが保護される場合は、Ｇａｌα１−３Ｇａｌ基と２−デオキシ−２−アミノ−Ｄ−グルコピラノース基との間のβ１−４結合（大多数の例において優勢）及びβ１−３結合の両方が入手される。これらの２つの生成物は分離することができる、又は生成物の混合物を下記の適用において使用することができる。図４及び６においては、還元のためにＰｄ／Ｃが挙げられているが、これはバルク合成のためにもっと適切な他の還元試薬に取り換えることができる。非限定例は例えばアセチル化後に使用されるＺｎ／ＨＯＡｃであるが、これは本発明に従った適用に使用できる（下記参照）、又はアシル化して図４及び６においてｉｉ又はｉｉｉとして使用できるアミノ化合物を生じさせる。本発明に従ったＧａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＰｈＮＯ₂−ｐによるβ−ＳＰｈＭｅグリコシドの生成の代わりに、例えばＧａｌα１−３Ｇａｌα−ＳＥｔを図６におけるβ−ＳＰｈＭｅグリコシドと同一目的で使用できる。Ｇａｌα１−３Ｇａｌα−ＳＥｔは、例えば図２に挙げられているのと同一タイプだが、受容体としてＧａｌα−ＳＥｔ、供与体として例えばラフィノース又はＧａｌα−ＯＰｈＮＯ₂−ｐを用いるグリコシダーゼ反応によって入手される。同様に、Ｇａｌ α１−３Ｇａｌα−ＯＢｎは、例えばＧａｌα１−３Ｇａｌ、又はグリコシド類及びより高度のオリゴ糖類の生成のために、又は下記の説明に従った阻害剤としての直接的使用のために関心が高い可能性がある。Ｇａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＢｎの生成のためには、Ｇａｌα−ＳＥｔの代わりに受容体としてＧａｌα−ＯＢｎを使用する。同様に、酵素的方法（例えば図２に従ってグリコシダーゼを用いるが、受容体としてＧａｌα−ＯＭｅ又はその他のグリコシドを用いて）、及び／又は化学的方法を用いて生成されたＧａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＭｅ及びその他のＧａｌα１−３Ｇａｌα−グリコシド類、又はＧａｌα１−３Ｇａｌ−含有糖類は、本発明に従うと、例えば本発明に従った阻害剤としての直接使用のために、分析のために、又は分離材料において関心が高い可能性がある（下記参照）。本発明に従うと、これらの適用の一部のためには例えばＧａｌα１−３Ｇａｌα−Ｒのタイプの糖類が一般に有用であるが、式中、Ｒは例えば脂肪族炭化水素、芳香族炭化水素の一般基（フェニル、その他）、アミノ基、カルボキシル基、セラミド基、サルフェート基、アミノ酸、ペプチド、タンパク質、単糖、二糖、オリゴ糖、重合体、脂質、ステロイド、核酸、ヌクレオチドのうちの１又は２以上を含有する基のようなＯ、Ｎ、Ｃ−又はＳ−のグリコシド結合有機基であるか、又はＲは無機基である可能性がある。Ｒが有機基である場合は、Ｒは例えばアルキル基、脂肪族基、芳香族基、糖、脂質、アミノ酸、ペプチド、タンパク質であり得るか、又はこれらの基の２以上からの基を含有することができる。アルキル基の例は−（ＣＨ₂）ｎＣＨ₃のタイプの基であるが、式中、ｎは０以上の整数であり、好ましくはｎは０〜２０の間の整数である。Ｒ＝糖類の非限定例は、Ｎ− アセチル−グルコピラノース−基（例えばＧｌｃＮＡｃにおける第４位を介して結合したＧｌｃＮＡｃ−基）、グルコピラノシル基（Ｇｌｃ−基）、別の単糖、これらの基の１又は２以上を含有する二糖又はそれらの誘導体、これらの基の１又は２以上を含有するオリゴ糖又はそれらの誘導体、例えばアガロース、セルロース、ポリスチレン、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール（本発明に従って１−、２−又は多官能性生成物の生成のために使用できるポリエチレングリコール誘導体類の非限定例については例えばシェアウォーター［Ｓｈｅａｒｗａｔｅｒ］社の重合体カタログを参照。アグリコンとして糖に結合しているアミノ基含有スペーサーによって炭水化物を結合させることのできる例えばトレシル−Ｓｔａｒ−ＰＥＧタイプの後者の場合におけるそれ以上の例については下記参照）その他に基づく重合体である。アミノ酸類の例は、アスパラギン、セリン、トレオニンその他である。ペプチド類の例は、糖に結合しているアスパラギン、セリン及び／又はトレオニン残基その他を含有しているペプチドである。上記の本発明に従った同一原理及び方法は、さらに又本発明に従って上記のＤ α１−ｉＡα−ＯＲ又はＤα１−ｉＡβ−ＯＲ又はＤβ１−ｉＡβ−ＯＲ又はＤ β１−ｉＡα−ＯＲのタイプの化合物からの他の二糖類、三糖類及びオリゴ糖類、及びさらにそれらの誘導体類及び類似化合物類の合成のために使用することができる。例えば上記のα−ガラクトシダーゼによって触媒される合成による酵素的合成においては、Ｇａｌα−Ｒ、又は（６−Ｒ’）Ｇａｌα−Ｒ、又は（６−Ｒ’，２−Ｒ”）Ｇａｌα−Ｒのいずれかを受容体として利用するが、式中、Ｒ、Ｒ’ 及びＲ”はこの場合には有機基又は無機基を表している。−Ｒの非限定例は、例えば−ＳＥｔ、−Ｏ（ＣＨ₂）ｎＣＨ₃（ｎ＝例えば０〜１２の間の整数）、−Ｏ（ＣＨ₂）ｎＣＯＯＲ（Ｒ＝Ｈ、又は脂肪族又は芳香族有機基、ｎ＝例えば０〜１２の間の整数）、−ＯＰｈ、−ＯＣＨ₂Ｐｈ（−ＯＢｎ）、−ＯＰｈＮＯ₂−ｐ、−ＯＰｈＯＭｅ−ｐ、Ｇａｌに結合したＧｌｃ（例えばラクトースを受容体として使用する）、ＧｌｃＮＡｃ、ＧｌｃＮＴｅｏｃβ−ＳＥｔ又は別の糖、又は脂質、アミノ酸、例えばＬ−セリン若しくはＬ−トレオニン又はそれらの誘導体のようなペプチド又はその誘導体、又はこれらのいずれかを含有するペプチドのような脂肪族基又は芳香族基である。この関連におけるＲ’及びＲ”の非限定例は無機基又は有機基である。これについての非限定例は、サルフェート基、カルボキシル基及びフォスフェート基、デオキシ基（−ＯＨが−Ｈに置換されている）、エステル基（例えばベンゾイル、アセチル）、アリール基、ベンジル基又はｐ−メトキシベンジル基である。上記の供与体及び受容体物質は市販で入手可能である、又は専門家であれば容易に獲得又は容易に合成できるので、これは本発明の範囲を限定しない。上記のＲは１−、２−、３−、オリゴ−又は多（ポリ）官能性であり得る（例えば上記のＲの例を参照）、又は１−、２−、３−、オリゴ−又は多（ポリ）官能性となるように修飾できるが、これは１、２、３又は４個以上のサッカライド基がＲ中の相違する又は同一タイプの官能基にグリコシド結合していることを意味しており、例えば（Ｇａｌα１−３Ｇａｌα−）_n−Ｒ（ｎは１以上の整数）のタイプの生成物を本発明に従った方法によって生成することができる。これは、例えばガラビオース結合タンパク質（例えば異種適用における抗体類のような）に対する高いアフィニティーを生成物が有する場合は有益な可能性がある。そうした生成物の生成は本発明の範囲を限定せず、専門家が本発明に従った方法を使用すれば容易に実行することができる。Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ−Ａを生成するための図におけるＡは、例えば脂肪族炭化水素、芳香族炭化水素の一般基、アミノ基、カルボキシル基、サルフェート基、アミノ酸、ペプチド、タンパク質、単糖、二糖、オリゴ糖、重合体、セラミドのような脂質、ステロイド、核酸、ヌクレオチドのうちの１又は２以上を含有するＯ−、Ｎ−、Ｓ−、又はＣ−、β−又はα−グリコシド結合物質を表している。Ａの非限定例は、β−グリコシド結合Ｎ−アセチル−グルコピラノース−基( 例えばＧｌｃＮＡｃ中の第４位を介して結合したＧｌｃＮＡｃ−基)、グルコピラノシル基（Ｇｌｃ−基）、別の単糖、これら又はそれらの誘導体のいくつかを含有する二糖、これらの基又はそれらの誘導体の１又は数個を含有するオリゴ糖、例えばアガロース、セルロース、ポリスチレン、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール（本発明に従って１−、２−又は多官能性生成物の生成のために使用できるポリエチレングリコール誘導体類の非限定例については例えばシェアウォーター社の重合体カタログを参照。例えばアグリコンとして糖に結合しているアミノ基含有スペーサーによって炭水化物を結合させることのできる例えばトレシル−Ｓｔａｒ−ＰＥＧタイプの後者の場合におけるそれ以上の例については下記参照）その他に基づく重合体である。Ａに関連するアミノ酸の例はアスパラギン、セリン、トレオニンその他である。Ａは、例えば（ＣＨ₂）ｎＣＨ₃（ｎ＝例えば０〜１８）のようなアルキル基又は芳香族基を含むことができる。Ａのその他の非限定例については上記参照。ＡがＧｌｃＮＡｃβ−Ｒ'''又はＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌ基を含有している場合は、例えばＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−Ｒ'''、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌ β１−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ １−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌ−Ｒ'''、又はＧａｌα１−３Ｇａｌβ１− ４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃ−Ｒ'''のタイプの物質が本発明に従って生成される。例えば、ＧｌｃＮＡｃβ−Ｒ'''、ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌ又はＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃ又はそれらの誘導体を生成するためには化学的及び／又は酵素反応を使用することが可能であり、それらはその後例えば供与体としてＧａｌα１−３ＧａｌβＳＥｔ又はＧａｌα１−３ＧａｌβＳＰｈを用いて上記の図における受容体として使用することができる（上記のＲは前段落で例示されたα−又はβ−結合物質を表している）。そうした酵素反応の例は、Ｎ−アセチル−β−Ｄ−グルコサミニダーゼ(又は β−ヘキソサミニダーゼと呼ばれる)のサブグループに属するグリコシダーゼ(ＥＣ３．２．)又はＵＤＰ−ＧｌｃＮＡｃ−依存性Ｎ−アセチル−β−Ｄ−グルコサミニルトランスフェラーゼのサブグループに属するグリコシルトランスフェラーゼ（ＥＣ２．４）の使用であり、これらは受容体としてガラクトース、又はガラクトシド又はガラクトシル−サッカライドを用いると活性である。グリコシダーゼの場合には、平衡反応（非活性化供与体）又は好ましくはＧｌｃＮＡｃβ−Ｒのタイプの供与体を用いる動的反応が使用されるが、式中、Ｒはグリコシド結合有機基又は無機基である。この関連における−Ｒの非限定例は− ＯＰｈ、−ＯＰｈＮＯ₂−ｐ及び−ＯＰｈＯＭｅ−ｐ及びβ１−４結合ＧｌｃＮＡｃ又はキトビオースである。受容体としては、例えば（しかし非限定性）Ｇａｌβ−Ｒ又は（６−Ｒ’）Ｇａｌβ−Ｒ、又は（６−Ｒ’，２−Ｒ”）Ｇａｌβ −Ｒのようなガラクトース又はその誘導体が使用されるが、式中、この関連におけるＲ、Ｒ’及びＲ”は有機基又は無機基を表している。−Ｒの非限定例は、例えば−ＳＥｔ、−Ｏ（ＣＨ₂）ｎＣＨ₃（ｎ＝例えば０〜１２の間の整数）、−Ｏ（ＣＨ₂）ｎＣＯＯＲ（Ｒ＝Ｈ、又は脂肪族又は芳香族有機基、ｎ＝例えば０〜１２の間の整数）、−ＯＰｈ、−ＯＣＨ₂Ｐｈ（−ＯＢｎ）、−ＯＰｈＮＯ₂−ｐ、−ＯＰｈＯＭｅ−ｐのような脂肪族または芳香族基、β１−４結合Ｇｌｃ又はその他の糖、例えばＬ−セリンもしくはＬ−トレオニン、もしくはその誘導体のような、またはこれらをいくつか含有するペプチドのようなアミノ酸、ペプチド、またはそれらの誘導体である。この関連におけるＲ’及びＲ“の非限定例は無機基又は有機基である。これについての非限定例は、サルフェート基、カルボキシル基及びフォスフェート基、デオキシ基(−ＯＨが−Ｈに置換されている)、エステル基（例えばベンゾイル、アセチル）、アリール基、ベンジル基又はｐ−メトキシベンジル基である。上記の供与体及び受容体物質は市販で入手可能である、又は専門家であれば容易に合成することができ、これは本発明の範囲を限定しない。グリコシダーゼ源は専門家によって選択され、本発明の範囲を限定しない。適切な酵素源の非限定例は、アスペルギルス・オリザエ又はカメレア・ガリナ（Ｃｈａｍｅｌｅａｇａｌｌｉｎａ）からのＮ−アセチル−β−Ｄ−グルコサミニダーゼ（又はβ−ヘキソサミニダーゼと呼ばれる）である。下記では、本発明に従ったグリコシダーゼ触媒酵素反応の非限定例を具体的に説明する（全ての構造はＩＵＰＡＣ規則に従っており、糖はＤ−ピラノース立体配置である）：（２）さらにより明白にするためには、図７に従った分子構造を持つ反応ｂ、ｄ、ｆの図解を参照。上記のグリコシダーゼ反応においては、加水分解が一部は供与体の及び一部は生成した生成物の副反応として入手される。これは専門家には周知であり、本発明の範囲を限定しない。この反応の後にはＨＰＬＣ及び／又はＴＬＣ、及び／又は上記の例では生成したｐ−ニトロフェノール（ａｂｓ４０５）の測定が行われ、その結果反応は例えば短時間の熱処理(例えば７０〜９０℃の温度で３〜５分間)を使用して最大生成物収量で停止され、その後に生成物が単離される。生成物の単離は１種又は数種の方法：標準条件を用いての抽出（例えば塩化メチレン、酢酸エチル、ブタノールのうちの１種又は数種を用いて）、沈殿、又はクロマトグ達成できるが、これは本発明の範囲を限定しない。例えば上記で図解した第１反応において別の位置異性体が生成される場合は、この位置異性体は例えばクロマトグラフィーによって、及び／又はこの位置異性体を特異的に加水分解するヘキソサミニダーゼを用いる第２の酵素反応を使用して取り除くことができる。グリコシダーゼの代用品として、上述のように、供与体としてのＵＤＰ−ＧｌｃＮＡｃ及び受容体としてのＧａｌ−物質と一緒に、例えば上記のヘキソサミニダーゼ反応のためのタイプのものを使用することができる。本発明のある実施態様においては、上記のように調製したＧｌｃＮＡｃβ１− ３Ｇａｌ含有構造を上記の構造の誘導体類を生成するため、又は例えばＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃ（例、供与体としてパーアセチル化ＧｌｃＮＡｃβ１−３ＧａｌβＳＥｔを使用）の化学的合成のために使用することができる。ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌ、ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃ又はＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌ若しくはＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃの誘導体類のいずれか酵素、若しくは固定化酵素、若しくは修飾酵素は、活性である溶媒中、好ましくは緩衝水中（多くの場合ｐＨ４、４．５、５又は５．５〜６、７、７．５又は８、非限定例）、又は水−有機溶媒混合液中（専門家によって選択された適正な濃度及びタイプを用いて）において、専門家によって選択された適正な温度（非限定例として、多くの場合４、１０、室温、３０〜３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０又は８０℃、後者の場合は特に温度安定性酵素又は高基質濃度で使用する場合）で使用できる。これは本発明の範囲を限定しない。適正な条件は専門家によって選択される。上記のグリコシダーゼ触媒グリコシド転移反応においては、−Ｆはさらに供与体及び／又は受容体物質におけるアグリコンとして選択できるが、これは専門家であればＦ−グリコシド類を入手でき、さらにそれ以上の合成のために使用できることを意味している。本発明によれば、例えば供与体としてパーアセチル化ＧｌｃＮＡｃβ１−３ＧａｌβＳＥｔを使用してＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ１３Ｇａｌ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ−４Ｇｌｃ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌ−Ｒ'''、又はＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃ−Ｒ''' のタイプの生成物を形成するための供与体及び受容体物質として使用することができる。この反応は専門家によって化学的方法を使用して実行され、本発明の範囲を限定しない。例えば、二糖生成物ＧｌｃＮＡｃβ１−３（６，２−Ａｃ）Ｇａｌβ−ＯＭｅは、ＧｌｃＮＡｃ−ユニットの第６位置においてベンゾイル化（例えば塩化ベンゾイル／ピリジンを用いて）されており、従って適切な溶媒（例えばアセトニトリル又はジクロロメタン）中で適切な触媒（例えばＡｇ−トリフラート）の存在下でパーアセチル化ＧａｌＮＡｃβ１−３ＧａｌβＳＥｔと反応する。そこで( ２，３，４，６−Ａｃ)Ｇａｌα１−３（２，４，６−Ａｃ）Ｇａｌβ１−４（６−Ｂｚｌ）ＧｌｃＮＡｃβ１−３（６−，２−Ａｃ）Ｇａｌβ−ＯＭｅ（必要な場合はクロマトグラフィーによって分離できる（２，３，４，６−Ａｃ）Ｇａｌα１−３（２，４，６−ＯＡｃ）Ｇａｌβ１−３（６−Ｂｚｌ）ＧｌｃＮＡｃ β１−３（６−，２−Ａｃ）Ｇａｌβ−ＯＭｅと一緒に）が形成される。アセチル基及びベンゾイル基を除去した後（例えばメタノール中に溶解させた触媒量のナトリウムメトキシドを用いて）に、精製（クロマトグラフィー及び／又は沈殿）後にＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ−ＯＭｅが入手される。必要な場合は、（２，３，４，６−Ａｃ）Ｇａｌα１−３（２，４，６−ＯＡｃ）Ｇａｌβ１−３（６−Ｂｚｌ）ＧｌｃＮＡｃβ１−３（６−，２ −Ａｃ）Ｇａｌβ−ＯＭｅもまた同一方法で反応させることができ、それによってさらに後者の反応においてＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−３ＧｌｃＮＡｃβ１− ３Ｇａｌβ−ＯＭｅが入手される。これらの反応におけるアグリコンとしての− ＯＭｅの代わりに上記の通りに他のアグリコン類も使用できる。これの非限定例は、容易に他の分子へ結合するのに適切な基である−ＯＰｈＮＨ₂−ｐへ還元させることのできる有用な特性を持つ−ＯＰｈＮＯ₂−ｐである（下記参照）。上記の構造はさらに本発明に従うと、ガラクトシルトランスフェラーゼ、β１ −４ガラクトシルトランスフェラーゼを使用し、ＵＤＰ−ジガラクトシド（供与体）を上記のＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌ−サッカライド（受容体物質）へ添加することによって合成することができる： UDP-ガラビオース＋ GlcNAcβ1-3Gal-R → Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ1-3Ga l-R 式中、Ｒは例えばグルコースのような他の糖又は例えば上記で例示したようなアグリコンである。例えばＵＤＰ−ガラビオースは、化学的方法、又は酵素的方法を用いて図２−６で上述した酵素的に合成されたガラビトース構造（Ｇａｌα １−３Ｇａｌ構造）の一部から合成することができる。本発明に従ったβ−ガラクトシダーゼ及びα−ガラクトシダーゼの順次使用はさらに例えばＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＲ’β−Ｒ又はＧａｌα１ −３Ｇａｌβ１−３ＧｌｃＮＲ’β−Ｒの合成のためにも使用できるが、式中、Ｒは−ＯＨ又はＯ−、Ｓ−又はＣ−グリコシド結合脂肪族若しくは芳香族アグリコン、又は別のタイプのアグリコン（説明におけるＡ参照）であり、−Ｒ’は− ＨＡｃ、Ｔｅｏｃ（トリクロロエトキシカルボニル）又は他の有機基若しくは無機基である。例えば合成の第１工程においてはβ−ガラクトシダーゼを利用することができるが、これは例えば供与体としてのラクトース、又はモノ−、ジ−、若しくはトリ−ニトロフェニルβ−Ｄ−ガラクトピラノシド（又は一般には、この場合にはＧａｌβ−Ｒ”であるが、式中、−Ｒ”は例えば−Ｆ又は脂肪族若しくは芳香族有機基から選択されたアグリコンである）及び受容体としてのＧｌｃＮＲ’β− ＲからＧａｌβ１−４ＧｌｃＮＲ’β（又はＧａｌβ１−３ＧｌｃＮＲ’β−Ｒ）を生じさせる。例えばα−ガラクトシダーゼを用いる第２合成工程では、例えばグリコシル供与体としてのラフィノース、メリビオース、又はモノ−、ジ−、若しくはトリ−ニトロフェニルα−Ｄ−ガラクトピラノシド（又は一般には、Ｇａｌα−Ｒ”（式中−Ｒ”は、例えば−Ｆ又は、例えばアルキル基又は芳香族基であり得る有機基から選択されたアグリコンである）及び後者の反応における受容体としての第１反応工程で入手されたラクトサミン誘導体を用いてＧａｌα１ −３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＲ’β−Ｒが入手される。受容体として疎水性又は荷電ラクトサミン誘導体類を使用すれば、ある種の場合には、三糖生成物の単離中の生成物と副生成物の分離を改善するために価値が高い可能性がある。一定の場合には、より高い受容体濃度（好ましくは０．１Ｍ以上）及びより高い生成物収量を得るためにα−ガラクトシダーゼ反応においてラクトサミンのより可溶性の誘導体類を使用することが有益なことがある。後者の状況では、アミノ基又はカルボキシル基含有ラクトサミン誘導体であるＧａｌ β１−４ＧｌｃＮＲ’β−Ｒをα−ガラクトシダーゼ反応における受容体として使用することができる。β−ガラクトシダーゼ反応において入手されたラクトサミン誘導体はβ−ガラクトシダーゼを用いての合成後に直接に、又は化学的転換後に使用することができる。 β−ガラクトシダーゼの例は、Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＲ’β−Ｒの合成のためのブレラ・シングラリス（Ｂｕｌｌｅｒａｓｉｎｇｕｌａｒｉｓ）又はバシラス・シルクランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓｃｉｒｃｕｌａｎｓ）からの酵素である。上記のα−ガラクトシダーゼ、又は一般には、α１−３結合を与えるα−ガラクトシダーゼ類の一部はオリゴ糖の調製において使用される。三糖誘導体類の特異的合成の非限定例は下記の通りである：１．酵母のブレラ・シングラリスからのβ−ガラクトシダーゼは下記の反応を触媒する：ラクトース＋GlcNHTeocβ-SEt → Galβ1-4GlcNHTeocβ-SEt＋グルコース２．コーヒー豆からのα−ガラクトシダーゼは下記の反応を触媒する： Galα-OPhNO₂-p＋Galβ1-4GlcNHTeocβ-SEt → Galα1-3Galβ1-4GlcNHTeocβ-S Et ＋PNP （ＰＮＰ＝ｐ−ニトロフェノール；ＧｌｃＮＨＴｅｏｃβ−ＳＥｔ＝エチル２ −デオキシ（２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルアミノ）−１−チオ− β−Ｄ−グルコピラノシド）上記の合成を下記の非限定例で具体的に説明する：１．Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＨＴｅｏｃβ−ＳＥｔ。ラクトース（２０ｇ）及び受容体（ＧｌｃＮＨＴｅｏｃβ−ＳＥｔ；ＮＨＴｅｏｃ＝ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）− Ｏ−ＣＨ₂−ＣＣｌ₃；１０ｇ）を４００ｍｌの５０ｍＭ酢酸ナトリウム（ｐＨ６．０）中に溶解させ、酵母細胞（２０ｇ）を添加した。この反応は、３０℃及びｐＨ６．０で３日間に渡ってゆっくりと攪拌しながら実施した。生成物をカラムクロマトグラフィー（セファデックスＧ１０；４リットル；溶離液：水）により精製すると、未反応受容体（７．９ｇ）と生成物（２．８ｇ）が得られた。 NMR-データ(¹³C;D₂O-MeOD;1:1):δ85.28(C-1),57.39(C-2),74.80(C-3),79.67(C- 4),79.87(C-5),61.34(C-6),104.07(C-1'),72.08(C-2'),73.78(C-3'),69.67(C4') ,76.45(C-5'),62.06(C-6');Teoc基:157.03(C=O),75.26(CH₂),96.31(CCl₃). ２．Ｇａｌα−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＨＴｅｏｃβ−ＳＥｔ。Ｇａｌα−ＯＰｈＮＯ₂−ｐ（１５０ｍｇ）及びＧａｌβ１−４ＧｌｃＮＨＴｅｏｃβ−ＳＥｔ（１．０ｇ）を５０ｍＭリン酸ナトリウム（ｐＨ６．５）中に溶解させ、コーヒー豆からの酵素（５ mg；微粉砕、抽出、硫酸アンモニウム沈殿、透析、セファデックスＧ７５クロマトグラフィー、透析及び凍結乾燥によって部分的に精製）を添加した。反応を室温で進行させ、約３００ｍＭニトロフェノールが形成され、受容体の約１０％が生成物に転換される（混合生成物のＨＰＬＣ分析）まで供与体を段階的に添加した。生成物は、塩化メチレンを用いてｐＨ４〜４．５でのｐ−ニトロフェノールの抽出後にセファデックスＧ１５( 溶離液：水)上で精製した。 NMR-データ(¹³C;D₂O):δ85.09(C-1),57.25(C-2),74.77(C-3),78.15(C-4),79.64( C-5),61.22(C-6),103.7(C-1'),70.51(C-2'),75.98(C-3'),65.75(C-4'),79.49(C- 5'),61.8(C-6'),96.35(C-1'),69.10(C-2'),70.20(C-3').70.03(C-4'),71.75(C-5 '),61.91(C-6');Teoc基:157.5(C=O),75.2(CH₂),95.81(CCl₃). 後者の反応では、本発明に従うと例えば上記の第２反応において例えば２種の基質の０．５Ｍ以上の濃度を用いる高濃度の試薬を使用することによりＧａｌα １−３Ｇａｌα−ＯＰｈＮＯ₂−ｐ及びＧａｌα１−３βＧａｌβ１−４ＧｌｃＮＨＴｅｏｃβ−ＳＥｔの予備的合成を同時に達成することも又可能である。これは、２種の興味深い生成物（本発明により使用できる、又は転換できる）を本発明の後者の変形に従って予備量で同時に合成できることを意味している。生成物の分離は例えば１又は２以上の工程（例、抽出、例えばセファデックス及び／又はＣ１８シリカを用いてのクロマトグラフィー、沈殿の１又は２以上）を使用して達成できる。他の非限定例は下記の通りである：１．ブレラ・シングラリスからのβ−ガラクトシダーゼは下記の反応を触媒する：ラクトース＋GlcNHTeocβ-OH → Galβ1-4GlcNHTeocβ-OH＋グルコース２．コーヒー豆からのα−ガラクトシダーゼは下記の反応を触媒する： Galα-OPhNO₂-p＋Galβ1-4GlcNHTeocβ-OH → GalαC51-3Galβ1- 4GlcNHTeocβ-OH＋PNP （ＰＮＰ＝ｐ−ニトロフェノール；ＧｌｃＮＨＴｅｏｃβ−ＯＨ＝２−デオキシ（２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルアミノ）−β−Ｄ−グルコピラノシド）本発明は、この場合には上記の合成及び上記のように入手される上記の生成物、又はそれらに由来する生成物（上記の三糖誘導体の追加の化学的又は生化学的修飾後に入手される）、又は相応する方法で入手される別の類似生成物、並びに例えば臨床的又は診断的適用（例、本出願において言及されている異種適用）における可溶形又は固定化した形態のタンパク質阻害剤、抗体阻害剤、又は酵素阻害剤のような生成物の使用に関する。上記の三糖誘導体（Ｇａｌα１−３Ｇａｌ β１−４ＧｌｃＮＨＴｅｏｃβ−ＯＨ及びＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＨＴｅｏｃβ−ＳＥｔ）から（従来の有機化学によって）生成される三糖、四糖及び五糖の非限定例は、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＨＡｃ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＨＡｃβ１−３Ｇａｌ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＨＡｃβ１−３Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＨＡｃβ−Ｒ’、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＨＡｃβ１−３Ｇａｌ−Ｒ’、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＨＡｃβ１ −３Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃ−Ｒ’、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＲβ − Ｒ’、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＲβ１−３Ｇａｌ−Ｒ’、Ｇａｌ α１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＨＲβ１−３Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃ−Ｒ’であるが、式中、Ｒは本出願で例示されており、グルコサミン部分でアミノ基に結合しているような有機基又は無機基であり、さらにＲ’は本出願で例示されているようなα−又はβ−グリコシド結合有機基又は無機基である（本出願で与えられているＡの例も参照）。別のタイプの三糖生成物は、上記の三糖類のラクトース誘導体類であるＧａｌ α１−３Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃ−Ｒであるが、これは上記に従って（β−ガラクトシダーゼを用いずに）受容体としてラクトース−Ｒを用いて例えばラフィノース、メリビオース又はニトロフェニルα−Ｄ−ガラクトピラノシド（又は一般にはＧａｌα−Ｒ”、式中、Ｒ”は例えば−Ｆ又は有機基のようなアグリコンである）から生成できるが、式中、Ｒは例えばβ−結合−ＳＰｈＭｅ、−ＯＰｈＯＭｅ、−ＯＢｎ又は−ＯＰｈＮＯ₂−ｐである。この三糖生成物は標準的な化学的方法又は酵素的方法を用いて直接に使用できる、又は必要な生成物に転換することができる。三糖誘導体の追加のその他のタイプはＧａｌα１−３Ｇａｌα１−３Ｇａｌ− Ｒであるが、これは本発明に従って例えば（非限定例）触媒としてα−ガラクトシダーゼを用いて供与体としてのＧａｌα−ＯＰｈＮＯ₂−ｐと受容体としてのＧａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＰｈＮＯ₂−ｐの間での反応によって入手できる。上記の酵素的に生成された生成物の精製は、例えばニトロフェノールを用いる例えば抽出、濃縮、及び可能な場合は反応物質、副生成物及び／又は生成物の選（Ｂｉｏｇｅｌ）、Ｃ１８−シリカ、活性炭素／セライト、イオン交換体のいずれかを含有する１又は２本以上のカラムを使用するクロマトグラフィー、さらに適切な場合は生成物の沈殿によって達成される。セファデックス又は疎水性表面を有するいくつかの他の材料の長所は、位置異性体の分離を達成できる点である。本発明はこの場合には、グリコシダーゼ触媒合成における供与体としてのフェニル−、メトキシフェニル−、モノ−、ジ−、又はトリニトロフェニルグリコシド類に関連する特異的変形方法、つまり少なくとも下記の１つの使用に関する：グリコシダーゼ触媒反応工程後にフェノール、メトキシフェノール、又はニトロフェノールを除去するための一つの抽出工程、基質及び／又は生成物の濃縮及びマトグラフィー、及び適切な場合は生成物の沈殿。 α１−３−位置異性体／必要な生成物収量を与えるα−ガラクトシダーゼは専門家によって選択され、本発明の範囲を限定しない。上記のグリコシダーゼ触媒反応に対するそれ以外の条件（ｐＨ、溶媒、温度、基質濃度−しばしば受容体の０．１Ｍ濃度を超える受容体、その他）は専門家によって選択され、本発明の範囲を限定しない。上記の三糖類が形成されると、例えばα１−６−結合位置異性体のようなα１ −３−結合位置異性体以外の三糖誘導体類も又しばしば形成され（例えば加水分解された供与体に加えて）、さらに該位置異性体および所望の位置異性体は、必要な場合は不必要な位置異性体類に対して加水分解的特異性を有する１又は２以上のα−ガラクトシダーゼ類を用いて加水分解することができる。本発明に従った代替法は、α１−６−位置異性体の偶発的形成を回避するためにＧａｌβ１− ４ＧｌｃＮＲ’β−Ｒ又は上記のラクトース−Ｒの６’−修飾誘導体（即ち、ガラクトシル基の６位において修飾されている）を使用することである。そうした修飾の非限定例はアセチル基を用いての上記のガラクトシル位置の修飾である。天然に存在するグリコシダーゼ類、又はクローン化されているグリコシダーゼ類、又は天然に存在するグルコシダーゼ類と一次アミノ酸配列順序が少なくとも約７０％一致している修飾（組換え）グリコシダーゼ類は上記の酵素反応の１又は２以上において使用できる。これは本発明の範囲を限定せず、さらにより高度の位置選択性、及び／又はより高度の温度安定性、より高度の操作安定性、有機溶媒中でのより高度の活性または安定性、より高度の操作安定性、及び／又はより高度の収量（より少ないい加水分解）を達成するために関心が高いに違いない。後者は、例えばグリコシド転移反応と加水分解反応の間の高い比率を有する、又は加水分解反応を最小限に抑えるために特異的に修飾（化学的又は組換えテクノロジーによって）されている酵素を使用することによって達成できる。これを達成する方法は本発明の範囲を限定せず、例えば酵素の活性部位における触媒に参加する少なくとも１つの酸／塩基基又は酵素中の何か他の基を不活性アミノ酸基で修飾、置換することにより、又はアミノ酸配列から除外することによって達成できる。上記の三糖類は、他の物質へ転換でき、さらに例えば異種適用及び本発明の説明による他の適用に使用することができる。上記のＡ又はＲと特定されている上記の生成物のグリコシド結合アグリコンは１−、２−、３−、オリゴ−、又は多（ポリ）官能性（例えば本出願で言及されたＡの例を参照）である可能性があるが、これは１、２、３以上の糖基がＡ、即ち本発明に従った方法によって生成できる (Galα1-3Galβ-)_n-A,(Galα1-3Galα-)_n-A,(Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ-)_n-A,( Galα1-3Galβ1-4GlcNAca-)_n-A,(Galα1-3Galβ1-4GlcNRβ-)_n-A,(Galα1-3Gal β1-4GlcNRα)_n-A,または(GlcNAcβ1-3Galβ-)_n-A,または(Galβ1-3GlcNAcβ1-3 Galβ-)_n-A(nは、１以上の整数) のタイプの生成物における相違する又は同一タイプの官能基にグリコシド結合していることを意味する。これは例えばガラビオース結合タンパク質に、又は例えばＧｌｃＮＡｃβ１− ３Ｇａｌβ−結合細菌への高いアフィニティーを有する生成物が必要な場合には長所であり得る。そうした生成物の生成は本発明の範囲を限定せず、専門家によって単純な方法で実行される。例えば（ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ−）ｎ− Ａ及び（Ｇａｌβ１−３ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ−）ｎ−ＡにおけるＡは本出願の説明でＡについて上記で言及されてるものと同一タイプである可能性がある。非限定例として、上記のオリゴ糖誘導体は例えば二官能誘導体を生じさせるＤＳＧ（グルタール酸ジスクシニミジル）又はＤＳＳ（スベリン酸ジスクシニミジル）のような架橋剤、又は塩化アクリロイルと糖誘導体との結合による二官能生成物の合成のために使用することができ、その後には結果として生じた抱合体をオリゴ官能生成物を生じさせる標準方法によって重合化（低重合化）することができる。生成物はさらにネオグリコプロテイン類を生成するためにヒト又はウシ血清アルブミンのような例えばタンパク質へ抱合させることができる。オリゴ糖誘導体が塩化アクリロイルに抱合されている場合には、例えば糖−Ｒ−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ＝ＣＨ₂のタイプの生成物が得られるが、これは例えば触媒として過硫酸アンモニウム及びＴＥＭＥＤを用いることによって例えばアクリルアミノ基を導入するためにジエチルアミン又はヒドラジンを用いて誘導体化することができ（例えばＪａｋｏｂｙらの編集した「酵素学の方法、第３４巻（ＭｅｔｈｏｄｓＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌｕｍｅ３４）」参照）、その後重合体は −プレート、ＮＨＳ−活性化アガロース又は本説明で言及されている他の分離材料の一部へ共有的に結合させることができる。これらの生成物は本出願で言及されている他の構造と同様に分析、分離又は阻害のために使用される。糖の非限定例は、Ｇａｌα−、Ｇａｌα１−３Ｇａｌ、血液Ｂ型、ＧａｌＮＡｃα−、ＧａｌＮＡｃα１−３Ｇａｌ、ＧａｌＮＡｃα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃ、及び血液Ａ型糖である。Ｒの非限定例は−Ｐｈのタイプのグリコシド結合アグリコン及びその他の上記のアグリコン類である。Ｍａｎα１−６（Ｍａｎα１−３）Ｍａｎ−Ｒは二−又はオリゴ官能性ガラビオース化合物を形成するための「架橋」として使用できるオリゴ糖の別の非限定例である（Ｒはグリコシド結合有機基又は無機基であり、式中、Ｒは本出願で言及されているグリコシド結合Ｒ又はＡの例の一部であり得る）。この点において、非限定例としての二官能誘導体類は例えば上記のトリマンノシドにおけるＭａｎα１−６（Ｍａｎα１−３）−ユニット中の２個の６−ＯＨ基を、その後上記のガラビオース誘導体類中のアミノ基含有アグリコン類と反応することができる対応する６−Ｃ（Ｈ）＝Ｏ（即ち６位がアルデヒド基）へ選択的に酸化することによって生成できる。結果として生じるシッフ（Ｓｃｈｉｆｆ）塩基（−Ｎ＝ＣＨ−）はその後上記の糖類の１又は２以上とＭａｎα１−６（Ｍａｎα１−３）Ｍａｎ−Ｒとの間の安定な−ＮＨ−ＣＨ₂−結合（例えばシアノホウ水素化ナトリウムを用いて）へ還元させることができる。この方法は下記のタイプの抱合体を生じさせる：糖−スペーサーの非限定例はＧａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＰｈ−、Ｇａｌα１ −３Ｇａｌα−ＯＥｔＰｈ−、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ− ＯＰｈ−、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβＯＥｔＰｈ−及びＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃβＯＥｔＰｈ−の１又は数個である。この方法で、ｉｎｖｉｖｏの状況に類似するガラビオースユニットの有益な配向が入手される。トリマンノシドにおける二次（secondary）ヒドロキシル基をさらに酸化させることによってより多くの糖−スペーサー−ＮＨ−ユニットがトリマンノシドに結合させることができる。上記を生成する代替法は、トリマンノシドの修飾のためにグリコシルトランスフェラーゼ類を使用し、その後に例えばガラビオースユニットの結合のために例えばガラクトシルトランスフェラーゼを使用することである。類似の目的に使用できる別のタイプの分子の非限定例は、メタ−、又はオルト −ジアルデヒド類、又はベンゼンの時カルボキシル誘導体類であるが、これは上記に類似する方法でシッフ塩基の形成及びその後の還元によって相互に相対する糖−スペーサー−ユニットの相互配向をもたらす。ペプチドも又上記で言及されているが、これはそれに糖が直接的にグリコシド結合している、又はアミノ基若しくはカルボキシル基含有スペーサーによって結合している例えばセリン、トレオニン、アスパラギン、リシン、グルタミン酸その他の１又は数個を含有することができる。本発明による方法は、上記の糖（Ｇａｌα１−３Ｇａｌ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−またはＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ−）、またはＧａｌα１−３Ｇａｌβ−Ａ、もしくはＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ−Ａ、もしくはＧａｌβ１−３ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ−ＡのＧａｌα１−３部分もしくはＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ部分が各々修飾されているような糖の一以上のヒドロキシル基が修飾された生成物を作成するために用いることもできる。これは修飾された必要な特性を有する生成物を入手するためには関心が高い可能性がある。下記ではＧａｌα１−３Ｇａｌ関連生成物を優先的に例示するが、ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ−含有生成物にも同一方法を適用することができる。この方法で、タンパク質、例えばＧａｌα１−３Ｇａｌ構造に対する抗体に対する高いアフィニティーを有する生成物、又は加水分解に対する安定性を上昇させた、又はその代わりにｉｎｖｉｖｏ半減期を上昇させた生成物を入手できる。この状況においては、例えば酵素を使用することができる。非限定例は、例えばＧａｌα１−３Ｇａｌ−含有構造又はＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ−含有構造における１又は２以上のヒドロキシル基のアセチル化のためのリパーゼ又はプロテアーゼの使用、ヒドロキシル基の特異的酸化のためのオキシドレダクターゼの使用である。この状況においては、専門家によって選択される酵素修飾テクノロジーが使用され、これは本発明の範囲を限定しない。その代わりに、Ｇａｌα１−３Ｇａｌ−含有構造又はＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ−含有構造（酸化による例えばカルボキシル基、又はアミノ基、又は他の無機基、有機エステル基、アルキル基又は芳香族基を用いて修飾された）における１又は２以上のヒドロキシル基及びＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−のようなグルコサミン含有構造における特異的修飾のために化学的修飾を使用することができる。−ＮＨＡｃ基の代わりに、例えばＲ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ− 、Ｒ−ＮＨ₂−、ＳＯ₃−ＮＨのタイプの他の基を有する生成物を生成して使用することは興味深い可能性があるが、式中、Ｒは例えば−ＣＨ₃（ＣＨ₂）ｎのタイプの脂肪族基（式中、ｎは１〜２０の間の整数である）、又は芳香族（１−、２ −又はオリゴ環状の例えばベンゾイル）、又はアミノ酸（そのα−カルボキシル又は側鎖カルボキシル基によって結合したアミド）又はペプチド含有基である。この状況においては、現在利用可能な化学修飾方法が使用され、これは本発明の範囲を限定しない。グリコシド結合しているＡは、例えばＡがカルボキシル基又はアミノ基を含有しているときには他の物質へ結合するためのスペーサーとして使用することができる。この例は−Ｏ（ＣＨ₂）₆ＣＯＯＨ、又は−ＯＰｈＮＨ₂又は−Ｏ（ＣＨ₂ ）２ＰｈＮＨ₂である。この方法では、例えばＧａｌα１−３Ｇａｌβ−Ａ又はＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ−Ａを例えば活性化アガロース又はセルロースへ結合させることによって、例えばカラムクロマトグラフィーに適する生成物を入手することができる。例えば本発明に従った方法により入手されるＧａｌα１− ３Ｇａｌβ−Ａ生成物、Ｇａｌα１−３Ｇａｌα−Ａ生成物、又はＧａｌα１− ３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−Ａ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃβ −Ａ、ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ−Ａ又はＧａｌβ１−３ＧｌｃＮＡｃβ１ −３Ｇａｌβ−Ａ生成物の固定化のために適合するそうした生成物の例は、活ＣＯＯＨ−セルロース（例、ワットマン［Ｗｈａｔｍａｎ］社製）、例えばファ気ミクロスフェアは本発明により入手された生成物を固定化するために専門家によって活性化できる。１例はダイノ［Ｄｙｎｏ］社製のダイノビーズ［Ｄｙｎｏは本発明の範囲を限定しない。Ａが例えばＯ（ＣＨ₂）ｎＣＨ₃（例えばｎ＝０〜１８）のタイプの疎水性分子又はセラミドから構成される場合は、生成物は例えば注入可能なリポソーム類の生成のために使用することができる。本発明に従った可溶性１−、２−、オリゴ−又は多官能性Ｇａｌα１−３Ｇａｌ−含有生成物を使用する例は、阻害試験における、患者に本発明による可溶性１−、２−、オリゴ−又は多官能性Ｇａｌα１−３Ｇａｌ−含有生成物を注射することによる、患者の抗体（Ｇａｌα１−３Ｇａｌに対する）への結合による例えばブタ（例えば腎臓、肝臓、心臓等）からの異種組織移植片のヒトにおけるインビボ超急性拒絶反応の阻害である。異種組織移植においては、Ｇａｌα１−３Ｇａｌ抗原（ドナー臓器の内皮上にある）に対して誘導された患者の抗体間で初期反応が発生し、これが患者の補体系の活性化をもたらす。本発明に従った、前記パラグラフでの異種適用における抗体の投与および阻害のために、興味深いと思われる可溶性二糖及び三糖の具体的な非限定例としては、例えばＧａｌα１−３Ｇａｌ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＭｅ、Ｇａｌα１ − ３Ｇａｌα−ＯＥｔ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃ、糖異性体類、本発明に従った合成によって入手できるそれらの位置異性体類及びそれらの誘導体類のような位置異性体類及びそれらの誘導体類である。これに関係する二糖類及び三糖誘導体類の特異的非限定例は、Ｇａｌα１−２Ｇａｌ、Ｇａｌα１−６Ｇａｌ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＭｅ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＥｔ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌα−Ｏ（ＣＨ₂）ｎＣＨ₃（式中、ｎ＝０以上の整数であり、好ましくはｎ＝０〜２０の間の整数である）、 Galα1-3GalαOPhNH₂,Galα1-3GalαOPhNO₂,Galα1-3GalαOPhNHAc,Galα1-2Gal αOPhNH₂,Galα1-6GalαOPhNH₂,Galα1-3GalβO(CH₂)₂PhNH₂,Galα1-3GalβO(CH₂ )₂PhNO₂,Galα1-3GalβO(CH₂)₂PhNHAc,Galα1-2GalβO(CH₂)₂PhNH₂,Galα1-6Ga lβO(CH₂)₂PhNH₂ である。その他の非限定例は、Ｇａｌα１−３Ｇａｌα−Ｒ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ −Ｒ、Ｇａｌα１−２Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−Ｒ、Ｇａｌα１−６Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−Ｒ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ −Ｒ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃＮＲ’β−Ｒであるが、式中、例えばＲ’はＲ”−Ｃ（Ｏ）−のタイプ又はＳＯ₃−、またはＲ"−であり、Ｒ ”は例えばＣＨ₃（ＣＨ₂）ｎ（式中、ｎは１〜２０の間の整数である）のタイプのグルコサミン残基におけるアミノ基に結合した脂肪族基、または芳香族基、１ −、２−またはオリゴ環（例えばベンゾイル）、アミノ酸（そのα−カルボキシル基又は側鎖カルボキシル基によるアミド結合している）又はペプチド含有基若しくは別の有機基であり、式中、Ｒは例えば脂肪族炭化水素若しくは芳香族炭化水素、アミノ基、カルボキシル基、セラミド基、サルフェート基、アミノ酸、ペプチド、タンパク質、単糖、二糖、オリゴ糖、重合体、脂質、ステロイド、核酸、ヌクレオチドなどの一般基を１以上含有する基のようなＯ−、Ｎ−、Ｃ−又はＳ−グリコシド結合有機基であり得る、又はＲは無機基であり得る。有機基の場合には、Ｒは例えばアルキル基、脂肪族基、芳香族基、糖、脂質から構成できる。の非限定例としては、 Galα1-3Galα-R, Galα1-3Galα-Oセラミド、 Galα1-3GalαOPhNH(6-CO)-ガラクトシル-セラミド、 Galα1-3GalαOPhNH(6'-CO)-ラクトシル-セラミド、または、 Galα1-3GalαOPhNH(6-CO)-グルコシル-セラミドがあげられるだろう。 Galα1-3Galβ-R,Galα1-3Galβ-Oセラミドの非限定的な例としては、 Galα1-3GalβOPhNH(6-CO)-ガラクトシル-セラミド、 Galα1-3GalβOPhNH(6'-CO)-ラクトシル-セラミド、または、 Galα1-3GalβOPhNH(6-CO)-グルコシル-セラミドがあげられるだろう。 Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ-Rの非限定的な例としては、 Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ-Oセラミド、 Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ-OPhNH(6-CO)-ガラクトシル-セラミド、 Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ-OPhNH(6'-CO)-ラクトシル-セラミド、または、 Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ-OPhNH(6-CO)-グルコシル-セラミド、アミノ酸、ペプチド、タンパク質又はこれらの基の２以上の基を挙げることができる。アルキル基の例は−（ＣＨ₂）ｎＣＨ₃のタイプの基であるが、式中、ｎ＝０以上の整数であり、好ましくはｎ＝０〜２０の間の整数である。Ｒ＝糖類の場合における非限定例は下記の通りである：例えばＧｌｃＮＡｃの４位を介して結合したＮ−アセチル−グルコピラノシル基（ＧｌｃＮＡｃ−基）、又は−ＮＨＡｃ基の代わりに例えばＲ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、Ｒ−ＮＨ₂−、ＳＯ₃−ＮＨのタイプの別の基が使用されている類似結合のＧｌｃＮＡｃ基（式中、Ｒは例えばＣＨ₃（ＣＨ₂）ｎのタイプの脂肪族基であり、式中、ｎは１〜２０の間の整数である、又はＲは芳香族基、１−、２−、又はベンゾイルのようなオリゴ環状基である、又はアミノ酸（そのα−カルボキシル又は側鎖カルボキシル基によってアミド結合している）又は式中、Ｒはペプチド含有基である）、グルコピラノシル基（Ｇｌｃ−基）、別の単糖、これらのいずれかを含有する二糖又はそれらの誘導体、これらの基の１又は２以上を含有するオリゴ糖又はその誘導体、ポリリシンのような例えばペプチド鎖に基づく重合体、又はアスパラギン、グルタミン酸、セリン、トレオニン、グリシンなどのアミノ酸を一以上含有する重合体、例えば上記のようなタイプのオリゴ糖、アガロース又はセルロースのような多糖、ポリスチレン、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール（本発明に従って１−、２−又は多官能性生成物の生成のために使用できるポリエチレングリコール誘導体類の非限定例については例えばシェアウォーター社の重合体カタログを参照。例えばアグリコンとして糖に結合しているアミノ基含有スペーサーによって炭水化物を結合させることのできる例えばトレシル−Ｓｔａｒ−ＰＥＧタイプの後者の場合におけるそれ以上の例については下記参照）その他の１又は２以上を含有する重合体である。アミノ酸の例はアスパラギン、セリン、トレオニンその他である。本発明に従った注射用の三糖類及び三糖誘導体に関連するその他の特異的非限定例は、 Galα1-2Galβ1-iGlcNAc,Galα1-6Galβ1-iGlcNAc,Galα1-3Galβ1-iGlcNAc, Galα1-2Galβ1-iGlcNAcβOPhNH₂,Galα1-6Galβ1-iGlcNAcβOPhNH₂ Galα1-3Galβ1-iGlcNAcβO(CH₂)₂PhNH₂, Galα1-2Galβ1-iGlcNAcβO(CH₂)₂PhNH₂, Galα1-6Galβ1-iGlcNAcβOPhNH₂,Galα1-3Galβ1-iGlcNAcβOPhNH₂, Galα1-2Galβ1-iGlcNAcβOPhNH₂,Galα1-6Galβ1-iGlcNAcβOPhNH₂,(ここで、ｉは３，４または６のいずれかの整数である。),Galα1-2Galβ1-iGlcNR, Galα1-6Galβ1-iG,cNR,Galα1-3Galβ1-iGlcNR, Galα1-2Galβ1-iGlcNRβOPhNH₂,Galα1-6Galβ1-iGlcNRβOPhNH₂, Galα1-3Galβ1-iGlcNRβO(CH₂)₂PhNH₂, Galα1-2Galβ1-iGlcNRβO(CH₂)₂PhNH₂,Galα1-6Galβ1-iGlcNRβOPhNH₂, Galα1-3Galβ1-iGlcNRβOPhNH₂,Galα1-2Galβ1-iGlcNRβOPhNH₂, Galα1-6Galβ1-iGlcNRβOPhNH₂, （式中、ｉは整数の３、４若しくは６のうちの１つを表しており、Ｒはグルコース−アミノ基に結合した無機又は有機脂肪族又は芳香族基である（つまり−ＮＨＡｃ基の代わりに例えばＲ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、Ｒ−ＮＨ−、ＳＯ₃−ＮＨのタイプの別の基が使用されている。ここでＲはＣＨ₃（ＣＨ₂）ｎのタイプの脂肪族基（式中、ｎは１〜２０の間の整数）、又は芳香族基、１−、２−、又はベンゾイルのようなオリゴ環状基、又はアミノ酸（そのα−カルボキシル又は側鎖カルボキシル基によってアミド結合している）又はペプチド含有基である。）。上記の具体例におけるアグリコン基中のアミノ基類は、例えば１−、２−、３ −、又はオリゴ官能有機基又は無機基、即ち一般に糖−アグリコン−ＮＨＣＯ− Ｒを用いて修飾できるが、それらのうちＣＯ−Ｒの非限定例として下記を挙げることができる：（６’、６”ＣＯ）−修飾トリマンノシド（上記で言及されている）、その他のＣＯ−修飾オリゴ糖、例えば非限定例としての６−ＣＯ−ガラクトシルセラミド又は６’−ＣＯ−ラクトシル−セラミド、又は６−ＣＯ−グルコシルセラミドのような脂質、ステアリル、ブチリル、プロプロニル、アセチル（後者の場合、例えばＧａｌα１−３ＧａｌαＯＰｈＮＨＡｃ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−３ＧｌｃＮＡｃβＯＰｈＮＨＡｃ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−３ＧｌｃＮＡｃβＯ（ＣＨ₂）₂ＰｈＮＨＡｃ中の、及びＧａｌα１−３Ｇａｌβ１− ４ＧｌｃＮＡｃβＯ（ＣＨ₂）₂ＰｈＮＨＡｃに中のもの）のようなＣＯ−（ＣＨ₂ ）ｎＣＨ₃基（ｎは例えば１〜２０の間の整数である）、アミノ酸又はアミノ酸誘導体、例えば−ＣＯ−（ＣＨ₂）ｎ−ＣＯ−（即ち、二糖又は三糖誘導体が架橋剤と一緒に二価的に結合している）、−ＣＯ−（ＣＨ₂）ｎ−ＣＯＯＨ−（即ちこのタイプの誘導体はカルボキシル基で終了している；ｎは好ましくは０〜１８の範囲内の整数である）のタイプの架橋剤。ここに挙げたアミノ基類はさらに上記で言及されている他の２−、オリゴ−、又は多官能試薬の１又は２以上を用いて修飾でき、（ＰＥＧ、オリゴ糖類、ペプチド類の上記の例を参照）、それによって２−、オリゴ−、又は多官能可溶性三糖誘導体を入手できる（上記の例えばＡに関する説明を参照）。異種適用のために興味深いと思われる可溶性四糖類及び五糖類の非限定例は、例えばＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌ、Ｇａｌα１ −３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃ、Ｇａｌα１− ３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＲβ１−３Ｇａｌ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＲβ１−３Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃ、及び本発明に従った合成方法によって入手でき、上記で説明されている位置異性体、類縁体、及び単−、二−、オリゴ −、又は多官能誘導体のような位置異性体類及び誘導体類である。その他の非限定例は、上記のようなしかし、Ｇａｌα１−２Ｇａｌβ１−ｉＧｌｃＮＲ、Ｇｌａα１−６Ｇａｌβ１−ｉＧｌｃＮＲ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−ｉＧｌｃＮＲ（式中、ＲはグルコサミンのＮに結合している：Ｒは上記で例示されている）を含有する類似四糖及び五糖構造、及び例えば上記で説明されているアグリコン類を含有する構造である。本発明に従うと、注射用化合物の追加の例は、糖グリコシド類、および例えばアグリコン部分に少なくとも１個の反応性基を含んでいるような誘導体、又は例えばＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＲのタイプの三糖のグルコサミン部分上のアミノ基によって結合している上記のような誘導体類である。この反応性基は本発明に従うと例えば異種反応性抗体と反応させるために使用することができる。炭水化物部分が抗体に結合し、これによって、反応性基が好ましくは抗体の特異的結合部位の近くに存在する基と反応するように促進され、抗体の抗原結合能力が強力に阻害されるという事実によって、特異性が得られる。このタイプのいわゆるアフィニティー標識化並びにそれに関連する反応性基に関する文献は広汎にあるので、これは本発明の範囲を限定しない。例えば異種組織移植において患者の血漿内で阻害されるべきガラビオース−抗体類の性質は均質ではない：ある抗体はガラビオースに比較的強力かつ特異的に結合し、他の抗体は比較的に弱くガラビオース構造に結合して、三糖類及び三糖誘導体の方に良好に結合する。本発明に従うと、ガラビオース含有二糖類、三糖類若しくは四糖以上のオリゴ糖類又はそれらのグリコシドの混合物は注射するために有用であると思われるが、それは余り複雑ではない二糖及び／又は二糖誘導体を患者の血液内のガラビオース抗体類の実質的部分を阻害するために使用することができ、優先的に三糖及び／又は三糖誘導体類へ結合する患者の血中の抗体を阻害するために、注射された三糖及び／又は三糖誘導体を使用することができるからである。同じことが、例えばＧａｌα１−３Ｇａｌα−のタイプの立体異性的ジガラクトシド類に対して特異性を有する患者の血漿中の一部の抗体類及びＧａｌα１− ６Ｇａｌ及びＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−３ＧｌｃＮＡｃのような位置異性体類に特異的な他の抗体類のような立体異性体類及び位置異性体類にも当てはまる。患者の血漿内中の該抗体類は、移植されたブタ臓器上に存在する二糖及び三糖構造に結合して急性拒絶反応を惹起する可能性がある。そこで本発明によれば、ヒトに移植されたブタの臓器の拒絶反応を阻害するために、二糖及び三糖（誘導体）だけではなく、立体異性体類及び／又は位置異性体類の混合物を患者の血中に注射することができる。異種適用における使用のために興味深いと思われる位置異性体類の混合物の非限定例としては、ブタ細胞へのヒト抗体（プールされた血漿及びＯ型血漿から）の結合を相当に大きく低下させ、さらにその後の細胞の溶解を阻害する(三糖誘導体混合物の総濃度：ヒト血漿１ミリリットル当たり２．５ｍｇ〜０．１ｍｇの間で)ことが証明されているＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβＯ(ＣＨ₂)₂ＰｈＮＨＡｃ及びＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−３ＧｌｃＮＡｃβＯ（ＣＨ₂ ）₂ＰｈＮＨＡｃという二つの三糖誘導体の３／２混合物を挙げることができる。そうした三糖位置異性体類の混合物は本発明に従うと、例えば供与体としてＧａｌα１−３ＧａｌβＳＰｈ及び受容体として６−ベンゾイルＧｌｃＮＡｃβＯ（ＣＨ₂）₂ＰｈＮＯ₂−Ｐを使用する例えば化学的合成を行い、続いて従来型化学的修飾を行った後に入手することができる（合成に関する詳細な情報については説明を参照）。注射用の二糖及び三糖混合物の非限定例としては、下記の混合物の１又は２以上の注射剤を挙げることができる： Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβO(CH₂)₂PhNHAc と Galα1-3Galα-OMeまたは Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβO(CH₂)₂PhNHAc と Galα1-3Galα-OEtまたは Galα1-3Galβ1-4GlcβO(CH₂)₂PhNHAc と Galα1-3Galα-OPhNH₂-pまたはGalα1 -3Galβ1-4GlcNAcβOR と Galα1-3Galα-OR'または (Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ)_n-A と (Galα1-3Galα)_n-A （式中、Ａ、Ａ’、Ｒ及びＲ’は１−、２−、オリゴ−、又は多官能Ａ又はＲの上記の例の一部から選択され、さらに式中、ｎは例えば１又は２（二価糖）の整数である、又はｎは例えば３〜１０の間の整数である）、及び Galα1-3Galβ1-4GlcβO(CH₂)₂PhNHAc と Galα1-3Galα-OMeまたは Galα1-3Galβ1-4GlcβO(CH₂)₂PhNHAc と Galα1-3Galα-OEtまたは Galα1-3Galβ1-4GlcβO(CH₂)₂PhNHAc と Galα1-3Galα-OPhNH₂-pまたは Galα1-3Galβ1-4GlcβOR と Galα1-3Galα-OR'または (Galα1-3Galβ1-4Glcβ)_n-A と (Galα1-3Galα)_n-A' 式中、Ａ、Ａ’、Ｒ及びＲ’は１−、２−、オリゴ−、又は多官能Ａ又はＲの上記の例の一部から選択され、さらに式中、ｎは例えば１又は２（二価糖）の整数である、又はｎは例えば３〜１０の間の整数である）、及び Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβOPhNH₂ と Galα1-3Galα-OMeまたは Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβOPhNH₂ と Galα1-3Galα-OEtまたは Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβOPhNH₂ と Galα1-3Galα-OPhNH₂-p および Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβOPhNHR と Galα1-3Galα-OMeまたは Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβOPhNHR と Galα1-3Galα-OEtまたは Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβOPhNHR と Galα1-3Galα-OPhNH₂-pまたは Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ-R と Galα1-3Galα-R'または (Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ)_n-A と (Galα1-3Galα)_n-A' （式中、Ａ、Ａ’、Ｒ及びＲ’は１−、２−、オリゴ−、又は多官能Ａ又はＲの上記の例の一部から選択され、さらに式中、ｎは例えば１又は２（二価糖（bifu nctional saccharide））の整数である、又はｎは例えば３〜１０の間の整数である）、及びＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＲβＯＰｈＮＨ₂及びＧａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＭｅ又はＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＲβＯＰｈＮＨ₂及びＧａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＥｔ又はＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＲβＯＰｈＮＨ₂及びＧａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＰｈＮＨ₂−ｐ又は（Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＲβＯＰｈＮＨ₂）ｎ−Ａ及び（Ｇａｌα１−３Ｇａｌα）_n−Ａ’（式中、Ａ、Ａ’、Ｒ、Ｒ’およびＲ”は１− 、２−、オリゴ−、又は多官能Ａ又はＲの上記の例の一部から選択され、さらに式中、ｎは例えば１又は２（二価糖）の整数であり、又はｎは例えば３〜１０の間の整数である）、及びＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＲβＯＰｈＮＨＲ’及びＧａｌα１− ３Ｇａｌα−ＯＭｅ又はＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＲβＯＰｈＮＨＲ’及びＧａｌα１− ３Ｇａｌα−ＯＥｔ又はＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＲβＯＰｈＮＨＲ’及びＧａｌα１− ３Ｇａｌα−ＯＰｈＮＨ₂−ｐ又はＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＲβ−Ｒ’及びＧａｌα１−３Ｇａｌ α−Ｒ”又は（Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＲβ）_n−Ａ及び（Ｇａｌα１−３Ｇａｌα）_n−Ａ’（式中、Ａ、Ａ’、Ｒ、Ｒ’およびＲ”は１−、２−、オリゴ−、又は多官能Ａ又はＲの上記の例の一部から選択され、さらに式中、ｎは例えば１又は２（二価糖）の整数である、又はｎは例えば３〜１０の間の整数である）。上記の二糖、三糖、四糖及び／又は五糖グリコシド類の混合物の上記の例はさらに又精製のためにアフィニティーカラム（アフィニティークロマトグラフィー）において使用するために分離材料に結合させるため、又は例えばブタ臓器から患者への異種組織移植の前及び／又は後に例えば患者の血漿から抗体を除去するために興味深い。そうしたアフィニティーカラムは例えば、分離材料へスペーサーによって固定化されている例えば上記のタイプの糖類の混合物を含有することができる、又は連続的に使用され得る分離カラムに種々の固定化された糖類を使用することができる。異種組織移植と関連して使用する場合は、本発明による生成物の使用は自然に存在する臓器の使用に限定されない。異種移植と関連する拒絶反応を最小限に抑えるためには、組換え（トランスジェニック）ブタから入手されたいわゆるトランスジェニック臓器の異種移植時及びその後に、本発明による可溶性１−、２− 、オリゴ−又は多官能生成物を組み合わせて患者に注射することが、本発明においては有用である。そうした臓器においては例えばＧａｌα１−３Ｇａｌエピトープの発現は低下しており（例えば拒絶を惹起しないＨ型エピトープの合成を生じさせるＧａｌα（１−２）フコシルトランスフェラーゼの発現のためのＧａｌ α（１−２）フコシルトランスフェラーゼ遺伝子の導入を使用する）、及び／又は臓器は例えば患者の補体系によって媒介される患者の拒絶反応の一部を阻害する能力を有する例えばタンパク質（類）の発現のための遺伝子を備えている。これについての例はＣＤ５９及びいわゆる崩壊加速因子の発現のための遺伝子である。ブタからの上記のタイプのトランスジェニック臓器／細胞の参照例はネーチャー・メディスン誌、第１巻（ＮａｔｕｒｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｖｏｌｕｍｅ１），第１２４８−１２５０頁及び第１２６１−１２６７頁に記載されている。上記の適用において注射される可溶性生成物の量はしばしば各生成物毎に専門家によって決定され、本発明の範囲を限定しない。血漿１リットル当たりの注射用物質の適切な量の例は５mgから、又は１０mgから、又は２０mgから、又は４０ mgから、又は１００mgから１０ｇまで、又は５ｇまで、又は２ｇまで、又は１ｇまで、又は０．５ｇまで、又は０．２ｇまでである。より高用量は、例えば非毒性生成物、又は１単位当たりの活性が低い生成物に適用されるが、他方より低用量は例えばより高活性を有する生成物に適用される。本発明による可溶性１−、２−、オリゴ−、又は多官能ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ−含有生成物又はＧａｌβ１−３ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ−含有生成物の使用の例は、例えば気道における感染症のｉｎｖｉｖｏでの阻害研究用であり、阻害用である。本発明により生成された不溶性Ｇａｌα１−３Ｇａｌ−含有生成物を使用する例は、例えば自然に存在する臓器の異種組織移植又は例えば上記の非限定例に従って組換え動物からの臓器の異種組織移植における拒絶反応を最小限に抑えることが可能なように、それらを例えば上記の抗体類の大部分を患者の血清から分離するための分離生成物として使用することである。本発明に従って入手されたそうした不溶性分離生成物の非限定例は、アガロースに共有的に結合したＧａｌα１−３Ｇａｌβ−Ａ（例えばＧａｌα１−３Ｇａｌβ−Ａとトレシル活性化アガロース又はＮ−ヒドロキシスクシンイミド活性化カルボキシル−アガロース又はカルボキシル−セルロースとの間の反応後に）、又は例えばセルロースのような他の材料に共有的に結合したＧａｌα１−３Ｇａｌβ−Ａである。Ａはスペーサーを含有している；これの非限定例は−Ｏ（ＣＨ２）₆ＮＨ₂であり、又は本発明のスペーサーの好適なタイプとしては、共用結合に対する反応性基を持つ−ＯＰｈＮＨ₂である（上記参照）。スペーサー、活性化アガロース又はセルロースの選択及び共有結合生成物の生成は専門家であれば容易に行うことができ、本発明の範囲を限定しない。アガロース、セルロース及びその他の適切な分離材料の配給業者の例は、ファルマシア社製のセファロース（架橋結合、ＣＬ又は非架橋結合）、ＣＯＯＨ−セルロース（例えばワットマン社製）、例えばファルマシア社製のパーセプティブ・バイオシステムズ及びバイオセプラの灌流クロマトグラフィー用材料である。本発明により生成及び使用される、アガロースまたはセファロースベースの分離用生成物のより具体的な非限定例は、 Galα1-3Galα-O(CH₂)₂PhNHCO--セファロース^R、 Galα1-3Galα-O(CH₂)₂PhNHCO--セルロース、 Galα1-3Galα-OPhNHCO--セファロース^R、 Galα1-3Galα-OPhNHCO--セルロース、 Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ-OPhNHCO--セファロース^Rと Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ-OPhNHCO--セルロース、 Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ1-3GalβOPhNHCO--セファロース^Rと Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ1-3GalβOPhNHCO--セルロース、 Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ-O(CH₂)₂PhNHCO--セファロース^Rと Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ-O(CH₂)₂PhNHCO--セルロース、 Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ1-3Galβ1-4GlcβOPhNHCO--セファロース^Rと Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ1-3Galβ1-4GlcβOPhNHCO--セルロース Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ1-3GalβO(CH₂)₂PhNHCO--セファロース^Rと Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ1-3GalβO(CH₂)₂PhNHCO--セルロース、 Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ1-3Galβ1-4GlcβO(CH₂)₂PhNHCO--セファロース^Rと Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ1-3Galβ1-4GlcβO(CH₂)₂PhNHCO--セルロース、 GlcNAcβ-O(CH₂)₂PhNHCO--セファロース^Rと GlcNAcβ-O(CH₂)₂PhNHCO--セルロース、 GlcNAcβ1-3GalβO(CH₂)₂PhNHCO--セファロース^Rと GlcNAcβ1-3GalβO(CH₂)₂PhNHCO--セルロース、 Galβ1-3GlcNAcβ1-3GalβO(CH₂)₂PhNHCO--セファロース^Rと Galβ1-3GlcNAcβ1-3GalβO(CH₂)₂PhNHCO--セルロース、 Galβ1-3GlcNAcβ1-3Galβ1-4GlcβO(CH₂)₂PhNHCO--セファロース^Rと Galβ1-3GlcNAcβ1-3Galβ1-4GlcβO(CH₂)₂PhNHCO--セルロースである。ＣＯ−セルロース又はＣＯ−セファロース（アガロース）、又はＣＯ−セルロース又はＣＯ−セファロースは、カルボキシル基含有物質を用いてセルロースまたはセファロースが修飾された後に、例えばＮ−ヒドロキシスクシンイミドを用いてカルボキシル基が活性化され、上記の炭水化物物質の結合のために使用されていることを意味している。本発明によりそれに糖含有リガンドを結合させることのできる市販で入手可能後者は上記で言及されている生成物における本発明の好適な変形において使用されている。後者の材料又は担体（例えばファルマシアから入手可能なＮＨＳ− 活性化セファロース−ＦＦ）は本発明によるアミノ基含有糖類の結合のために直接的に（即ち先行活性化を行わずに）使用することができる。本発明の優先変種は下記で非限定例として与えられる：それは無菌条件下で非限定典型的例において緩衝液（例えば非限定例として０．１Ｍリン酸ナトリウム）中でｐＨ７．５又はｐＨ８．０のＮＨＳ−活性化セファ１−３Ｇａｌα−ＯＰｈＮＨ₂又はＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃ β−ＯＰｈＮＨ₂；式中、ｎは例えば１〜２０の間の整数又は別の数であり、典型的非限定例はｎ＝５、８、１０、１２、１５又は２０のいずれかである）が２時間又は２０時間に渡り例えば室温で反応させられる。材料はガラスフィルター上で、又は他の無菌条件下で緩衝液を用いて洗浄され、残っている反応性基を反応させるために例えばトリス−ＨＣｌ緩衝液を用いて処理される。ＣＭ−変種も又使用できるが、先行活性化が必要とされる。セルロース又はアガロースの代わりに他の担体材料を使用することができるが、それらは上記で言及されている、上記のリガンドへ結合させるために例えばエポキシ基を用いて、又は他の活性化方法によって活性化される例えばポロス［ＰＯ同様に、例えばＧａｌα１−３Ｇａｌ−エピトープに対する抗体類から血液を分離するために、１本のカラム又は２本の個別カラム（カラムが同一又は相違する量の固定化糖を含有できる場合）に充填された、１つの及び同一担体上での２又は３以上の固定化炭水化物類又は上記の担体類の２又は３以上の混合物の組み合わせも使用できる。これの非限定例は、例えばＤＳＣ活性化（Ｄ１−Ｎ−カルボン酸スクシミジルを用いての活性化）、ＣＯＯＨ−セファロース又はＣＯＯＨ −セルロース上での二糖誘導体類であるＧａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＰｈＮＨ₂ 及びＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−Ｏ（ＣＨ₂）₂ＰｈＮＨ₂の固定化、又は例えばエポキシ基を用いてのポロス５０活性化又は他の活性化方法による固定化である。同様に、スペーサーが分離材料への共有結合に適したＯ−、Ｓ−又はＣ−グリコシド結合有機分子を表している場合のＧａｌα−スペーサーのタイプの単糖誘導体類も、Ｇａｌα１−３Ｇａｌ−エピトープに対する抗体類の一部又は大部分を除去するために上記のタイプの分離材料に結合させるために興味深い可能性がある。そうした分離材料の非限定例はＧａｌα−ＯＰｈＮＨＣＯ−−セファロース及びＧａｌα−Ｏ（ＣＨ₂）₂ＰｈＮＨＣＯ−−セファロースである。１本又は相違する複数のカラムにおいて固定化された様々の単糖類、二頭類、三糖類及び四糖以上の糖類のそうした組み合わせの長所の例は、例えば抗体のほとんどを除去（例えば患者の血液から）するために例えば固定化された単糖及び／又は二糖リガンドを、そして残っている抗体（例えば三糖リガンド及び／又は四糖以上の糖リガンドより二糖リガンドに対する結合能力の低い抗体）を除去するために固定化された三糖リガンド及び／又は固定化された四糖以上のオリゴ糖を使用することが可能である点である。この方法では２つの目的を達成することができる：一方では問題の抗体のより完全な除去、他方では二糖リガンド類より生成するために相当に費用が高くなる三糖リガンド又は四糖以上のオリゴ糖リガンドの使用を最小限に抑えること。上記のように、二糖、三糖、オリゴ糖又は多糖リガンドは又Ｇａｌα１−３Ｇａｌ−エピトープに対する抗体の除去のために生成して分離材料（例えば上記のタイプの）に固定化することができる。この方法では抗体と分離材料の間のより高いアフィニティーが達成される可能性がある。これは順に抗体のより完全な除去を達成することを可能にすることができる（特に、Ｇａｌα１−３Ｇａｌ−エピトープに対する他の抗体類と比較したときに、単官能、二糖、三糖、又は四糖以上のオリゴ糖リガンドへの特異性は有するがアフィニティーが低いような抗体）。そうしたオリゴ糖リガンドの非限定例は、例えば共役反応のためにカルボジイミド反応、又は例えば抱合体を調製するためのＢＳタイプ（ビス−スルホ− スベリン酸スクシニミジル）の架橋剤を使用して、例えばＧａｌα１−３Ｇａｌ α−ＯＰｈＮＨ₂及び／又はＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−ＯＰｈＮＨ₂、及び／又は非限定例として使用されるＧａｌα１−３Ｇａｌβ１− ４ＧｌｃＮＡｃβ−Ｏ（ＣＨ₂）₂ＰｈＮＨ₂と共役されたヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）である。（Ｇａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＰｈＮＨ−ＣＯ）ｎ−ＨＳＡ及び／又はＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−Ｏ（ＣＨ₂）₂ＰｈＮＨ −ＣＯ）ｎ−ＨＳＡ及び／又はＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ− ＯＰｈＮＨ−ＣＯ）ｎ−ＨＳＡのタイプの抱合体を含むこの非限定例は、例えば上記で言及された分離材料（担体類）と同一方法で固定化することができる。結果として生じる材料はＧａｌα１−３Ｇａｌ−エピトープに対する抗体類の除去のために使用できる。固定化された二糖、三糖、オリゴ糖、又は多糖リガンドに基づくこのタイプの分離材料はＧａｌα１−３Ｇａｌ−エピトープに対する抗体類の除去のために単独で使用できる、又は上記で言及された分離材料（上記のタイプの固定化された単糖、二糖、三糖及び／又は四糖以上のオリゴ糖リガンドを含有する）と組み合わせて使用できる。上述したように、ＣＯ−セルロース又はＣＯ−セファロース（アガロース）、又はＣＯ−セルロース又はＣＯ−セファロースは、セルロース又はセファロース（アガロース）が、上記の炭水化物物質の結合のために使用されるカルボキシル基含有物質を用いて修飾されており、さらにその後に例えばＮ−ヒドロキシスクシンイミド又はＤＳＣを用いてカルボキシル基において活性化されていることを意味している。固定化のためのセファロースの非限定例は上記で言及されている。セルロース又はアガロースの代わりに、上記の糖リガンド類の結合のために、上記で言及されている例えばエポキシ基を用いて、又は他の活性方法を用いて活性化されている例えばポロス５０のような他の材料を使用することができる。上記の分離用生成物はさらに、上記で与えられている例において、セファロース、セルロース又はポロス材料に結合されている構造がその代わりにＥＬＩＳＡプレート（例えばＮＵＮＣ社、デンマークから入手されるような）内の活性化マイクロタイター・ウェルに結合され、上記の最初で言及されている酵素細胞類、細菌類、タンパク質類、抗体類、検査中の細胞類のＥＬＩＳＡ測定に適する生成物が入手される場合には、酵素又は細胞、細菌、毒素、抗体及び本発明において上記で言及されているその他のタンパク質類の精製のために使用することができる。ＮＵＮＣ社製コバリンクへの結合の非限定例は、ＮＵＮＣ社製コバリンクへのＢＳ（ビス−スルホ−スベリン酸スクシニミジル）を添加すること、そしてその後に上記の糖類の数種又はその他の糖リガンド類を添加することである。非限定例は、Ｇａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＰｈＮＨ₂、又はＧａｌα１−３Ｇａｌβ１− ４ＧｌｃＮＡｃβ−Ｏ（ＣＨ₂）₂ＰｈＮＨ₂（Ｇａｌα１−３Ｇａｌ−エピトープに対する抗体類の測定のため）、又はＧａｌα１−３（Ｆｕｃα１−２）Ｇａｌβ−Ｏ（ＣＨ₂）₂ＰｈＮＨ₂−Ｐ（Ｂ型決定基の測定のため）のいずれかを添加することである。残りの活性基はその後例えばトリス−ＨＣｌ又は例えばＨＳＡのようなペルオキシダーゼ（最初に過ヨウ素酸塩を用いて酸化されている）の不活性タンパク質と反応させることができる。後者の例は、例えばＧａｌα１−３ＧａｌβＯＰｈＮＨ₂−ｐ又はＧａｌα１ −３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−ＯＰｈＮＨ₂とペルオキシダーゼとの抱合（過ヨウ素酸で最初から酸化されている）であり、その後シアノホウ水素化ナトリウムを用いての還元により、さらに例えばセファデックスＧ５０又はセファデックスＧ７５を用いてのクロマトグラフィー（抱合体の精製）により遮断又は反応させることができる。この抱合体はその後、非限定例としてＧａｌα１−３Ｇａｌβ又はＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−糖類の測定のために例えば工程１：マイクロタイター・プレート上の上記の構造のいずれかに対して特異性を有する抗体類の吸着、工程２：ペルオキシダーゼ抱合体と一緒にマイクロタイター・ウェルへの上記の糖類のいずれかを含有する試料の塗布、その後に工程３：ペルオキシダーゼ基質の塗布及びウェルにおける吸光度の測定により使用することができるこの方法では可溶性炭水化物濃度が上昇するときには低下する吸収が入手される。この競合的アッセイの代わりに、多数の他の構成を使用することができる。例えば上記のガラビオース構造類に対するタンパク質類又は抗体類の測定のためには、プレートをまず最初に抗ヒト抗体を用いてインキュベートし、その後にガラビオース、その後にペルオキシダーゼーガラビオース抱合体、その後に基質に特異的な抗体を用いてインキュベートし、最終的に吸光度の測定を行うことができる。インキュベーション時間、各工程間の緩衝及び洗浄は標準条件に対応する、又は専門家によって容易に決定されるように修飾される。類似の方法で、ＥＬＩＳＡにおいて使用される多数のその他のタイプの酵素を本発明に従った炭水化物類と共役させることができ、結果として生じた抱合体を同様に使用することができる。類似の方法で、炭水化物類は例えばビオチンに共役させることができ、生じた抱合体を例えば可溶性炭水化物の競合的アッセイにおいて、又は例えばガラビオースに対するタンパク質又は抗体の測定のためにストレプトアビジン−酵素抱合体と一緒に使用することができる。上記の異種組織移植例におけるアフィニティー適用においては、分離用生成物は本発明に従うと１本のカラム又は相違する複数カラムに充填することができ、さらにＧａｌα１−３Ｇａｌに対する患者の抗体の特異的除去のために患者からの血漿が上記のカラム内を通過させられる。その代わりに、生成物は磁気ミクロスフェア（例えばトシル活性化ダイノビーズへ例えば上記のタイプのスペーサーによって共有的に結合した例えばＧａｌα１−３Ｇａｌ）の形であり得るが、これは患者の血漿に添加され、添加されるとＧａｌα１−３Ｇａｌに対する患者の抗体はミクロスフェアに結合され、磁気を利用してのミクロスフェアの除去によって分離される。カラム及び／又は磁気微粒子を用いての処理後、拒絶反応は本発明に従うと、本発明に従った糖、又は糖誘導体、又は２若しくは３以上の相違する可溶性の１ −、２−、オリゴ−、及び／又は多官能生成物の注射によってさらに最小限に抑えることができる。カラムの設計、カラムのシステム、カラムからの再生（結合抗体の溶離）及び分離材料及び可溶性炭水化物生成物（例えば注射用可溶性生成物の濃度については上記参照）の総量は専門家によって決定され、本発明の範囲を限定しない。カラム内の分離材料の直径の非限定例は例えば５ｍｍから、又は１０ｍｍから、又は２０ｍｍから、又は４０ｍｍから、２００ｍｍまで、又は１５０ｍｍまで、又は１００ｍｍまで、又は１００ｍｍまでである可能性があり、カラム内の分離用生成物の充填高さは例えば２５ｍｍから、又は５０ｍｍから、又は７５ｍｍから、又は１００ｍｍから、５００ｍｍまで、又は４００ｍｍまで、又は２００ｍｍまで、又は現在Ｐｒｏｔｅｉｎ−Ａカラムのために使用されている寸法までである可能性がある。１本のカラムを使用できる、又は患者の血液又は血漿から抗体の至適除去を獲得するために２本又は３本以上のカラムを連続して使用することができる。その代わりに、血漿を患者の対外で接続した例えばブタからの天然に存在する又は組換え臓器（例、腎臓又は肝臓）を通して血漿を通過させる前に、患者からの血漿をＧａｌα１−３Ｇａｌ−含有生成物と一緒にカラム又は複数のカラムに通過させることによって処理を実行でき、この方法で患者の血漿の例えばブタ腎臓又はブタ肝臓に対する拒絶反応が最小限に抑えられる。ブタ臓器と接触させる前及びカラム又は磁気微粒子を用いての処理後に、本発明により本発明に従った可溶性１−、２−、オリゴ−、及び／又は多官能生成物の添加により拒絶反応のさらにいっそうの最小化を入手することが可能である。糖類の異種組織移植適用のための上記で言及したことは、本発明に従うとさらにヒトドナーからの臓器をＢ型又はＡ型の患者へ供与する場合にも適用することができるが、その場合には血液Ａ型糖類又は血液Ｂ型糖類及び／又はそれらの固定化誘導体類が例えば異種組織移植の場合についての上記に相応する方法で使用される。異種組織移植適用について上記で言及されたように、可溶性及び／又は固定化糖類の適用はトランスジェニック又は非トランスジェニック臓器と一緒に、及び興味深い可能性のある他の処理（免疫抑制剤その他）と組み合わせて使用することができる。非限定例は有機基を用いて共有的に修飾されているα−ガラクトシダーゼを用いての処理を含む処理である。これの非限定例は免疫原性を最小限に抑え、酵素の半減期を延長させるためのＰＥＧ抱合酵素（共役のためのＰＥＧ誘導体類は上記で例示されている）である。このＰＥＧ酵素は抗体反応を最小限に抑えるために移植前及び後にブタ臓器上のＧａｌα１−３Ｇａｌ−エピトープの数を最小化（Ｇａｌα−結合の特異的加水分解）するために使用できる。ＰＥＧ抱合α−ガラクトシダーゼ（酵素源の非限定例は上記の原理に従ってそれから酵素を精製できるコーヒー豆である）の生成は本発明の範囲を限定しないが、タンパク質類のＰＥＧ共役のための周知のテクノロジーを適用することによって専門家によって実行される。下記では、本発明の実際的使用の追加の非限定例を記載する。１．ＧｌｃＮＡｃβ−Ｏ（ＣＨ₂）₅ＣＯＯＥｔの合成。ＧｌｃＮＡｃβ−ＰＮＰ（７０ｇ）及びＨＯ（ＣＨ₂）₅ＣＯＯＥｔ（３２ｇ）をｐＨ６．０の５０ｍＭ酢酸ナトリウム緩衝液２．２リットル中で混合し、アスペルギルス・オリザエからのＮ−アセチル−β−Ｄ−グルコサミニダーゼ製剤１７ｇを室温で添加した。反応混合物を攪拌し、１０時間後に加熱処理（５分間、８０℃）を用いて中止させた。混合物を３０分間１１，３００ｇで遠心し（反応しなかった供与体基質の大半、約３８ｇが除去された）、非反応エステル基質／及びｐ−ニトロフェノールを除去するために酢酸エチルを用いて水相を抽出した。この水相を濃縮させ、セファデックスＧ１０（約２０リットルの充填量）上に載せた。水を用いての溶離によって生成物混合物が得られたので（約２５ｇ）、これをシリカ（ＣＭＨ／７：４：０．３）上でのクロマトグラフィーによって精製した。１５ｇの生成物が入手され（反応した供与体について計算すると約４５％ｗ／ｗ）、これはＮＭＲによると純粋であった。ＮＭＲデータ（１３Ｃ；非補正）：生成物の単糖部分： 173.63(C＝O),102.66(C-1),57.38(C-2), 77.90(C-3),72.13(C-4),76.09(C-5),62.79(C-6); 産物のアグリコン部位： 173.65(C-1),35.07(C-2).25.72(C-3),26.60(C-4),30.24(C-5),70.25(C-6),61.38 (C-1'),14.53(C-2')．選択された¹H-データ：非補正：4.79(d,H-1,J_1,2＝8.1),1 .97(s,NHAc),1.23(t,CH₃i,J_1',2'＝7.3)．２．ＧｌｃＮＡｃβ１−３（６−ＯＢｎ）Ｇａｌβ−ＳＥｔの合成。ＧｌｃＮＡｃβ−ＰＮＰ（５ｇ）及び（６−ＯＢｎ）Ｇａｌβ−ＳＥｔ（５．５ｇ）を０．２Ｍリン酸ナトリウム緩衝液（１５０ｍｌ、ｐＨ７）中で混合した。アスペルギルス・オリザエ（８ｇ）からのβ−Ｄ−グルコサミニダーゼ製剤を添加し、反応を室温で１５０分間継続させたところ、その間に約６０ｍＭのＰＮＰが遊離された、即ち供与体の約６０％（３ｇ）が反応した。反応混合物を濾過し、ｐＨ４の塩化メチレン（ＰＮＰの除去）、ＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍＬ）を用いて抽出すると、純粋の未反応（６−ＯＢｎ）Ｇａｌβ−ＳＥｔが生じたので、さらに水相を濃縮後にセファデックスＧ１０（１Ｌ）を含有するカラム上に適用し、蒸留水を用いて溶出した。フラクションを含む生成物を最後にクロマトグラフィーにより精製した（シリカ；Ｃ：Ｍ：Ｈ；７：３：０．３）。蒸発及び減圧での乾燥後、純粋な生成物を入手した(１５０ｍｇ、白色の堅い物質：反応した供与体の５％ｗ／ｗ)。パーアセチル化生成物の１３ＣＮＭＲデータ（ＣＤ₃ ＯＤ）：15.20.24.86(C-SEt),56.1(C-2'),62.84(C-6'),70.21(2C,C-2,C-4'),71. 88(C-4),72.67(C-5'),73.38(C-3'),74.36(C-6,CH2Ph),77.67(C-3),79.50(C-5),8 4.79(C-1),101.93(C-1'),128.75,128.99,129.38.139.45(6C,Ph),171.09-173.12( 6C=O). ３．パーアセチル化Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ−ＳＥｔ及びパーアセチル化Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ−ＳＰｈの合成。Ｇａｌα−ＯＰｈＯＭｅ−ｐ（２０ｇ）を０．１Ｍリン酸ナトリウム緩衝液（２００ｍｌ、ｐＨ６．５）中に溶解させた。コーヒー豆（２ｇ：Ｋｅｎｙａ産コーヒー豆を微粉砕し、緩衝液を用いて酵素を抽出し（上記参照）、７０％硫酸アンモニウムを用いての沈殿、透析及び凍結乾燥することにより調製）からのα− Ｄ−ガラクトシダーゼ製剤を添加し、２４時間中４５℃で反応を継続させると、その間に基質の大部分が反応した。これをｐＨ４の塩化メチレン（ＨＯＰｈＯＭｅ−ｐの除去）、ＥｔＯＡｃ（ＥｔＯＡｃ相中の未反応Ｇａｌα−ＯＰｈＯＭｅ −ｐの部分）、およびＥｔＯＡｃとｎ−ブタノールの混合物（残存していたＧａｌα−ＯＰｈＯＭｅ−ｐ、Ｇａｌα１−Ｇａｌα−ＯＰｈＯＭｅ−ｐ位置異性体類及び一部のガラクトースの混合物が有機相に存在した）を用いて抽出した。後者の有機相を、蒸発及び水中への溶解後に、セファデックスＧ１０（１．２リットル）により精製し、蒸留水を用いて溶出した。これは純粋のＧａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＰｈＯＭｅ−ｐ（２ｇ：生成物全部は精製しなかった）を生じた。これはその後各々パーアセチル化Ｇａｌα１−３β−ＳＥｔ及びパーアセチル化Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ−ＳＰｈを生じさせるために（パーアセチル化の後に各々脂肪族又は芳香族チオール化合物と反応させる）化学変換のために使用された。その代わりに上記の生成物をＧａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＰｈＮＯ₂−ｐによって調製し（これは上記に対応する酵素反応を用いて、しかし基質としてＧａｌ α−ＯＰｈＮＯ₂−ｐを用いて、Ｇａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＰｈＯＭｅ−ｐと同一方法で入手された）、これをＧａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＰｈＮＨ₂−ｐへ還元し、パーアセチル化し、アセトニトリル：水中でＣＡＮを用いて−ＯＰｈＮＨＡｃ−ｐを除去してパーアセチル化Ｇａｌα１−３Ｇａｌα、β−ＯＨを入手し、これをパーアセチル化Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ−ＯＣ（＝ＮＨ）ＣＣｌ₃によって各々パーアセチル化Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ−ＳＥｔ又はパーアセチル化Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ−ＳＰｈへ変換させ、その後に各脂肪族又は芳香族チオール化合物と反応させた。４．各々Ｇａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＰｈＮＨ−ＣＯ−セファロース及びＧａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＰｈＮＨ−ＣＯ−セルロースの調製。上記のようにして入手したＧａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＰｈＮＨ₂−ｐ（例、１、２、３、４、５、６、７又は８ｍｇ／ｍｌ活性化ゲル）をＤＳＣ活性化（触媒としてピリジンを用いてアセトン中でＤｉ−Ｎ−スクシミジルカルボナート、ＤＳＣを用いて活性化した：ＤＳＣはＮ−ヒドロキシスクシンイミド、ＮＨＳにシア社製）と室温で２時間に渡りｐＨ８で反応させ、トリス−ＨＣｌ（０．２Ｍ、ｐＨ８）を用いて室温で２時間に渡り処理した。この物質は０．１Ｍリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．０）を用いて洗浄され、Ｇａｌα１−３Ｇａｌ−エピトープに対する抗体類の分離のために使用された。対応する方法はワットマン社製ＤＳＣ活性化（触媒としてピリジンを用いてアセトン中でＤｉ−Ｎ−スクシミジルカルボナート、ＤＳＣを用いて活性化された：ＤＳＣはＮ−ヒドロキシスクシＯＯＨ／ｇ（乾量））についても使用され、結果として生じた物質はＧａｌα１ −３Ｇａｌ−エピトープに対する抗体類の分離のために使用された。５．各々Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ−１−４ＧｌｃＮＡｃβ−Ｏ（ＣＨ₂）₂−Ｐｈ−ＮＨ₂及びＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−Ｏ（ＣＨ₂）₂− Ｐｈ−ＮＨ−ＣＯ−セファロース及びＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−Ｏ（ＣＨ₂）₂−Ｐｈ−ＮＨ−ＣＯ−セルロースの調製。パーアセチル化Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ−ＳＥｔを例えばジクロロメタン（又はアセトニトリル）中のＡｇトリフラートの存在下で例えば（６−Ｏベンゾイル）ＧｌｃＮＰｈｔｈβ−Ｏ（ＣＨ₂）₂Ｐｈ−ＮＯ₂を用いて反応させ、結果として生じた（２，３，４，６−ＯＡｃ）Ｇａｌα１−３（２，４，６−ＯＡｃ）Ｇａｌβ１−４（６−Ｏベンゾイル）ＧｌｃＮＰｈｔｈβ−Ｏ（ＣＨ₂）₂Ｐｈ−ＮＯ₂を脱アセチル化及び脱ベンゾイル化させ、さらに脱フタリル化させ、アミノ基をアセチル化させ、ニトロ基を還元させると、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−Ｏ（ＣＨ₂）₂Ｐｈ−ＮＨ₂が生じた。アミノ基のアセチル化の代わりに他の有機又は無機物質（上記の説明参照）と反応させることができ、これを用いるとＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＲβ−Ｏ（ＣＨ₂）₂Ｐｈ− ＮＨ₂のタイプの生成物を入手できるが、式中、Ｒは有機又は無機物質である。一定量の位置異性体Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−３ＧｌｃＮＡｃβ−Ｏ（ＣＨ₂ ）₂Ｐｈ−ＮＯ₂は上記の還元前に、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−Ｏ（ＣＨ₂）₂Ｐｈ−ＮＯ₂とともに得られるが、これは例えばセファデックスＧ１０又はＧ１５カラムクロマトグラフィー（溶離液：水）を使用することによって分離できる。Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−Ｏ（ＣＨ₂ ）₂Ｐｈ−ＮＨ₂（例、１、２、３又は４ｍｇ／ｍｌ活性化ゲル）の一部はＤＳＣ活性化（触媒としてピリジンを用いてアセトン中でＤｉ−Ｎ−スクシミジルカルボナート、ＤＳＣを用いて活性化された：ＤＳＣはＮ−ヒドロキシスクシは４ＦＦ、ファルマシア社製）と室温で２時間に渡りｐＨ８で反応させ、トリス −ＨＣｌ（０．２Ｍ、ｐＨ８）を用いて室温で２時間に渡り処理した。この物質は０．１Ｍリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．０）を用いて洗浄され、Ｇａｌα １−３Ｇａｌ−エピトープに対する抗体類の分離のために使用された。対応する方法はワットマン社製ＤＳＣ活性化（触媒としてピリジンを用いてアセトン中でＤｉ−Ｎ−スクシミジルカルボナート、ＤＳＣを用いて活性化された：ＤＳＣはＮ−ヒドロキシスクシンイミド、ＮＨＳに類似している）ＣＯＯＨ−セルロース（０．１ｍｅｑＣＯＯＨ／ｇ（乾量））についても使用され、結果として生じた物質はＧａｌα１−３Ｇａｌ−エピトープに対する抗体類の分離のために使用された。６．各々Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ−１−４ＧｌｃＮＡｃβ−Ｏ（ＣＨ₂）₂−Ｐｈ−ＮＨ₂及びＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−Ｏ（ＣＨ₂）₂− Ｐｈ−ＮＨ−ＣＯ−セファロース及びＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−Ｏ（ＣＨ₂）₂−Ｐｈ−ＮＨ−ＣＯ−セルロース、各々Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ−１−４ＧｌｃＮＡｃβ−ＯＰｈ−ＮＨ₂及びＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−ＯＰｈ−ＮＨ−ＣＯ−セファロース及びＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−ＯＰｈ−ＮＨ−ＣＯ−セルロースの調製。パーアセチル化Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ−ＳＥｔを例えばジクロロメタン（又はアセトニトリル）中のＡｇ−トリフラートの存在下で低温（例えば−４Ｏ℃）で例えば（６−Ｏベンゾイル）ＧｌｃＮＡｃβ−ＯＰｈ−ＮＯ₂−ｐと反応させ、結果として生じた（２，３，４，６−ＯＡｃ）Ｇａｌα１−３（２，４，６− ＯＡｃ）Ｇａｌβ１−４（６−Ｏベンゾイル）ＧｌｃＮＡｃβ−ＯＰｈ−ＮＯ₂ −ｐを脱アセチル化及び脱ベンゾイル化させ、ニトロ基を還元させると、Ｇａｌ α１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−ＯＰｈ−ＮＨ₂が生じた。一定量の位置異性体Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−３ＧｌｃＮＡｃβ−ＯＰｈ−ＮＯ₂は上記の還元前に、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−ＯＰｈ−ＮＯ₂と一緒に入手されるが、これは例えばセファデックスＧ１０又はＧ１５カラムクロマトグラフィー（溶離液：水）を使用することによって必要な場合は分離できる。Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−ＯＰｈ−ＮＨ₂（例、１、２、３又は４ｍｇ／ｍｌ活性化ゲル）の一部はＤＳＣ活性化（触媒としてピリジンを用いてアセトン中でＤｉ−Ｎ−スクシミジルカルボナート、ＤＳＣを用いて活性化された：ＤＳＣはＮ−ヒドロキシスクシンイミド、ＮＨＳに類似している）Ｃで２時間に渡りｐＨ８で反応させ、トリス−ＨＣｌ（０．２Ｍ、ｐＨ８）を用いて室温で２時間に渡り処理した。この物質は０．１Ｍリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．０）を用いて洗浄され、Ｇａｌα１−３Ｇａｌ−エピトープに対する抗体類の分離のために使用された。対応する方法はワットマン社製ＤＳＣ活性化（触媒としてピリジンを用いてアセトン中でＤｉ−Ｎ−スクシミジルカルボナート、ＤＳＣを用いて活性化された：ＤＳＣはＮ−ヒドロキシスクシンイミド、ＮＨＳに類似している）ＣＯＯＨ−セルロース（０．１ｍｅｑＣＯＯＨ／ｇ（乾量））についても使用され、結果として生じた物質はＧａｌα１−３Ｇａｌ−エピトープに対する抗体類の分離のために使用された。７．各々、ａ）Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ−１−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌ、ｂ）Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ−１−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３βＧａｌβ−Ｏ（ＣＨ₂）₂−Ｐｈ−ＮＨ₂−ｐ及びｃ）Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ−１−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ−ＯＰｈ −ＮＨ₂−ｐ、ｄ）Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ−Ｏ（ＣＨ ₂）₂−Ｐｈ−ＮＨ−ＣＯ−セファロース、及びｅ）Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ−Ｏ（ＣＨ ₂）₂−Ｐｈ−ＮＨ−ＣＯ−セルロース、及び各々ｆ）Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ−ＯＰｈ− ＮＨ−ＣＯ−セファロース、及びｇ）Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ−ＯＰｈ− ＮＨ−ＣＯ−セルロースの調製。６（ａ）（ベンジル基は還元により最終工程で取り除かれた、Ｐｄ／Ｃ）、ｂ、ｄ及びｅ各々の調製並びにｃ，ｆ及びｇ各々の調製のために、実施例５で使用されたものに対応する反応が上記の実施例５と同一の供与体を用いて使用されたが、しかし受容体の代わりに下記のタイプの（６−Ｏベンジル）ＧｌｃＮＡｃβ１−３（６，２−ＯＡｃ）Ｇａｌβ−ＯＣＨ₂Ｐｈ、又は（６−Ｏベンジル）ＧｌｃＮＡｃβ１−３（６，２−ＯＡｃ）Ｇａｌβ−Ｏ（ＣＨ₂）₂−Ｐｈ−ＮＯ₂、又は（６−Ｏベンゾイル）ＧｌｃＮＡｃβ１−３（６，２−ＯＡｃ）Ｇａｌβ−ＯＰｈ−ＮＯ₂の各々を使用した（受容体に既にＮ−アセチル基が存在していたので、遊離アミノ基の各々脱フタリル化及びアセチル化は必要とされなかった）。アミノ基生成物は上記で言及したことに従ってＤＳＣ−活性化ＣＯＯＨ−セルロース及びセファロースへ各々結合するために使用された。８．Ｇａｌα１−３Ｇａｌ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ−Ｏ（ＣＨ₂）₂−ＰｈＮＨ₂及び固定化Ｇａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＰｈＮＨ₂及びＧａｌα１−３Ｇａｌ β１−４ＧｌｃＮＡｃβ−ＯＰｈＮＨ₂の生成。Ｇａｌα−ＯＰｈＮＯ₂−ｐ（２０ｇ）を０．１Ｍリン酸水素ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．５）中に溶解させ、凍結乾燥α−ガラクトシダーゼ製剤（２ｇ、微粉砕したコーヒー豆から緩衝液を用いての抽出、透析及び凍結乾燥により調製された）を４５℃で添加した。２４時間に渡って反応を継続させ、その後に混合物を加熱し（酵素の不活化）、冷却し、酢酸エチル、ブタノールを用いてｐＨ４．５で抽出した。ブタノール相を蒸発させ、クロマトグラフィー（セファデックスＧ１０、溶離剤：水）を用いて精製したところ、精製されたＧａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＰｈＮＯ₂−ｐ（凍結乾燥後には約３ｇ）が得られた。連続してＨ₂／Ｐｄ／Ｃ、Ａｃ₂Ｏ／ピリジン、ＣＡＮ／アセトニトリル水を用いて生成物の一部を処理すると、（Ａｃ）₇Ｇａｌα１−３Ｇａｌ−ＯＨ（原材料分子量に基づくと収量７５％）が得られ、従来型脱アセチル化後にはＧａｌα１−３Ｇａｌが得られたが、これはＮＭＲによると純粋であった。連続してＣｌ₃ＣＣＮ／ＮａＨ／ジクロロメタン、ＨＯ（ＣＨ₂）₂ＰｈＮＯ₂−Ｐ／ジクロロメタンーアセトニトリル／ＴＭＳＯトリフラートを用いて（Ａｃ）₇Ｇａｌα１−３Ｇａｌ一ＯＨを処理すると、（Ａｃ）７Ｇａｌα１−３Ｇａｌα−Ｏ（ＣＨ₂）₂ＰｈＮＯ₂ −Ｐが得られた。ＮａＯＭｅ／ＭｅＯＨを用いての脱アセチル化及びＭｅＯＨ水溶液中でＨ₂／Ｐｄ／Ｃを用いてのニトロ基の還元により、Ｇａｌα１−３Ｇａｌα−Ｏ（ＣＨ₂）₂ＰｈＮＯ₂−Ｐが得られたが、これはＮＭＲによると純粋であった。後者の物質をＤＳＣ活性化（触媒としてピリジンを用いてアセトン中でＤｉ−Ｎ−スクシミジルカルボナート、ＤＳＣを用いて活性化された：ＤＳＣはＮ−ヒドロキシスクシンイミド、ＮＨＳに類似している）ＣＯＯＨ−セフピトープに対する抗体類の分離のために使用した。上記のＨ₂／Ｐｄ／Ｃ工程後に生成したＧａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＰｈＮＨ₂及びＧａｌα１−３Ｇａｌβ １−４ＧｌｃＮＡｃβ−ＯＰｈＮＨ₂は上記の説明に従ってＮＨＳ活性化セファロース４ＦＦに対して固定化した。9.a)Gal α1-3Gala-OPh-NH-CO-PEG b)(Gal α1-3Galα-OPh-NH-CO)₂-PEG c)(Gal α1-3Galα-OPh-NH-CO)_n-PEG d)Gal α1-3Galβ1-4GlcNAcβ-OPh-NH-CO-PEG e)(Gal α1-3Galβ1-4GlcNAcβ-OPh-NH-CO)₂-PEG f)(Gal α1-3Galβ1-4GlcNAcβ-OPh-NH-CO)_n-PEG g)Gal α1-3Galβ1-4GlcNAcβ1-3Galβ-OPh-NH-CO-PEG h)(Gal α1-3Galβ1-4GlcNAcβ1-3Galβ-OPh-NH-CO)₂-PEG i)(Gal α1-3Galβ1-4GlcNAcβ1-3Galβ-OPh-NH-CO)_n-PEG j)GlcNAc β1-3Galβ-O(CH₂)₂-Ph-NH-CO-PEG k)(GlcNAc β1-3Galβ-O(CH₂)₂-Ph-NH-CO)₂-PEG l)(GlcNAc β1-3Galβ-O(CH₂)₂-Ph-NH-CO)_n-PEG m)Gal β1-3GlcNAcβ1-3Galβ-O(CH₂)₂-Ph-NH-CO-PEG n)(Gal β1-3GlcNAcβ1-3Galβ-O(CH₂)₂-Ph-NH-CO)₂-PEG i)(Gal β1-3GlcNAcβ1-3Galβ-O(CH₂)₂-Ph-NH-CO)_n-PEG の調製上記のタイプの生成物を入手するために、対応する二糖、三糖又は四糖をメトキシ−ＳＰＡ−ＰＥＧ（ａ、ｄ、その他）、ＳＰＡ₂−ＰＥＧ又はスター−トレシル−ＰＥＧ（シェアウォーター・ポリマーズ社、米国から入手可能、ＰＥＧ− 名称は同社のカタログから）と反応させた。上記は単に実施例を構成しており、他のタイプのＰＥＧ誘導体、架橋剤又はその他の結合のためのスペーサーを有する糖類を類似の可溶性糖抱合体を入手するために使用することができる。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】１９９７年１１月１４日（１９９７．１１．１４）【補正内容】請求の範囲１．式（R'-Gal α 1-3R"Gal α,β）n-Rを有する糖質化合物であって、Ｒは、脂肪族炭化水素、芳香族炭化水素、アミノ基、カルボキシル基、セラミド基、PEG、オリゴマーPEG、アミノ酸、ペプチド、タンパク質、単糖、二糖、オリゴ糖、ポリマー、脂質、ステロイド、核酸、およびヌクレオチドの中から選択される１以上の基を具備するＯ-、Ｎ-、Ｃ-もしくはＳ-グリコシドに結合した基、またはサルフェート基であり、Ｒ'は、2,3,4および６位の水酸基に相当するか、または一以上の置換された2,3,4および６位の水酸基を有し、Ｒ"は、2,4および６位の水酸基に相当するか、または一以上の置換された2, 4および６位の水酸基を有し、Ｒ'およびＲ"は同一であってもよく、または異なっていてもよく、サルフェート、カルボキシル、フォスフェート、デオキシ、エステル、アリル、ベンジルおよびp-メトキシベンジルからなる群から選択され、ｎは１以上の整数であり、 Gal α,βは、配置がα、βまたはそれらの混合物であることを意味する糖質化合物。２．請求項１の糖質化合物であって、Ｒ'が2,3,4および６位の水酸基に相当し、Ｒ"が２および６位の置換された水酸基を有する糖質化合物。３．請求項１の糖質化合物であって、Ｒがα 1-3結合したガラクトースである糖質化合物。４．請求項１の糖質化合物であって、Ｒが分枝したオリゴ糖である糖質化合物。５．請求項１の糖質化合物であって、Ｒが-OPh-NH-CO-PEG、(-OPh-NH-CO)_n-PEG、 -O(CH₂)₂-Ph-NH-CO-PEGまたは(-O(CH₂)₂-Ph-NH-CO)_n-PEGであり、Phはフェニルであって、ｎが１以上の整数であり、PEGがモノマー性、ダイマー性またはオリゴマー性のポリエチレングリコールである糖質化合物。６．請求項１の糖質化合物であって、Ｒがペルオキシダーゼである糖質化合物。７．請求項１の糖質化合物であって、Ｒがアルブミンである糖質化合物。８．請求項１の糖質化合物であって、Ｒがグルコース、Ｏに結合したグルコースアミンGlcNR'-R、またはグルコースもしくはグルコースアミンGclNR'-Rを含有する二糖もしくはオリゴ糖であり、Ｒはα-グルコシドまたはβ-グルコシド結合によって結合し、ＲおよびＲ'が請求項１で定義したとおりである糖質化合物。９．請求項１の糖質化合物であって、Ｒがカルボニル基を介して、NHSで活性化されたアガロースまたはカルボジイミドで活性化された血清アルブミンに結合した-OPh-NH-または-O(CH₂)₂-Ph-NHである糖質化合物。１０．請求項１の糖質化合物であって、単糖がGlcNAcである糖質化合物。１１．請求項１の糖質化合物を調製する方法であって、式R'-Galに相当する化合物を式R"-Galに相当する化合物と反応させ、グリコシダーゼ存在下の酵素ステップで、R'-GalとR"-Galの１位の水酸基を脂肪族炭化水素、芳香族炭化水素、-O Ph、-OPhNO₂-p、-OPhOMe-pからなる群から選択されるアグリコンで置換し、それによって式R'-Gal α 1.3R"-Galに相当する産物を形成せしめ、該産物において、R"-Galの１位のアグリコンが除去され、水酸基で置換されており、請求項１に記載されている他の糖質化合物を生産するためのさらなる反応ステップが任意に引き続き、Ｒ'とＲ"が上記のとおりである方法。１２．請求項１１に記載の方法であって、化合物Gal α 1-3Gal β 1-4ＧlcNR 'β-RまたはGal α 1.3Galβ 1-3GlcNR'β-Rを産生し、β-ガラクトシダーゼおよびα-ガラクトシダーゼを順次使用し、Ｒは上記のとおり、好ましくはSEtであり、Ｒ'は上記のとおり、好ましくは-HAcまたはトリクロロエトキシ-カルボニルである方法。１３．請求項１１の方法であって、α−エンドグリコシダーゼまたはα−エキソグリコシダーゼの存在下でＲ'-ＧalおよびＲ"-Ｇalを反応させる方法。１４．医薬品として使用するための請求項１に記載の糖質化合物。１５．臓器の異種移植と同時に、および異種移植の後に患者を治療するための医薬を調製するための請求項１に記載の糖質化合物の使用であって、血漿から前記糖質化合物に対する抗体を除去するために、前記糖質化合物を含有する分離装置と患者の血漿を接触せしめる使用。１６．細菌感染、好ましくは気道の細菌感染を予防または阻止するための医薬を調製するための請求項１に記載の糖質化合物の使用。１７．糖質化合物に対して特異性を有する細胞、タンパク質、および／または酵素を分離または除去するための請求項１に記載の糖質化合物の使用であって、前記細胞、タンパク質、および／または酵素を含有する試料を糖質化合物と接触させ、分離用素材に結合し、試料から細胞、タンパク質、および／または酵素を分離または除去する使用。１８．請求項１７に記載の使用であって、グリコシルトランスフェラーゼ、レクチンおよび抗体を単離する使用。１９．請求項１７に記載の使用であって、分離用素材がアガロースである使用。２０．糖質化合物に対する特異性を有する細菌、細胞、酵素、抗体、および／または炭水化物が結合したタンパク質の測定を行うための診断用試薬としての請求項１に記載の糖質化合物の使用であって、分離用素材に結合された糖質化合物に、前記細菌、細胞、酵素、抗体、および／または炭水化物が結合したタンパク質を含有する試料を接触させる使用。２１．請求項２０の使用であって、糖質化合物をバイオセンサーまたはELISA 中に用いる使用。【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】１９９８年１月８日（１９９８．１．８）【補正内容】達成できるが、これは本発明の範囲を限定しない。例えば上記で図解した第１反応において別の位置異性体が生成される場合は、この位置異性体は例えばクロマトグラフィーによって、及び／又はこの位置異性体を特異的に加水分解するヘキソサミニダーゼを用いる第２の酵素反応を使用して取り除くことができる。グリコシダーゼの代用品として、上述のように、供与体としてのＵＤＰ−ＧｌｃＮＡｃ及び受容体としてのＧａｌ−物質と一緒に、例えば上記のへキソサミニダーゼ反応のためのタイプのものを使用することができる。本発明のある実施態様においては、上記のように調製したＧｌｃＮＡｃβ１− ３Ｇａｌ含有構造を上記の構造の誘導体類を生成するため、又は例えばＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃ（例、供与体としてパーアセチル化ＧｌｃＮＡｃβ１−３ＧａｌβＳＥｔを使用）の化学的合成のために使用することができる。続いて、供与体としてラクトースまたはＧａｌβ−Ｒを用いるβ−ガラクトシダーゼによって触媒される反応の受容体として、ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌ、ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃ、またはＧｌｃＮＡｃβ１−３ＧａｌもしくはＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃの誘導体の何れも用いることができる（該速度論的反応のアグリコンは、ガラクトシダーゼまたはヘキソースアミニダーゼを用いた速度論的反応において前述したものと同じ種類のものである）。このような反応の例を以下に示す。酵素の入手源の例はウシの精巣であるが、専門家であれば所望の結果をもたらす他の酵素入手源を選択してもよく、発明の範囲を限定するものではない。使用前に、例えばリン酸ナトリウム緩衝液中でのホモゲナイゼーションを使用し、硫酸アンモニウムで沈殿させることによって、まず酵素を部分精製してもよい。次に、例えば適切な緩衝液に対して該沈殿を透析することができ、続いて、本記載の他の節に記載されているところに従って酵素調製物を固定化し得る。例えば、グリコシダーゼによって触媒される二つの別のタイプの反応に関して上述したように、所望の糖質産物の単離を行うことができる。使用前に（上記のタイプの）酵素を固定化してもよく、これにより、酵素の回収率および再使用、カラムリアクター中での使用が容易になる（連続的合成）。固定化の非限定的な例は、例えばトレシルクロリド（tresyl chloride）（酵素中のアミノ基と反応する反応性のトレシレートエステルを生成し、それによって酵素と素材間に共有結合を作る）で活性化された水酸基含有素材（アガロース、セ行うことができ、例えばpH6.5、7、7.5または8で行うことができる。酵素は、例えば化学物質（例えば架橋剤、またはポリエチレングリコール、ＰＥＧ：例えばトレシルまたはNHSで活性化されたPEG）を用いる他の方法で修飾することもでき、または組換え手法によって修飾することもできる。酵素、若しくは固定化酵素、若しくは修飾酵素は、活性である溶媒中、好ましくは緩衝水中（多くの場合ｐＨ４、４．５、５又は５．５〜６、７、７．５又は８、非限定例）、又は水−有機溶媒混合液中（専門家によって選択された適正な濃度及びタイプを用いて）において、専門家によって選択された適正な温度（非限定例として、多くの場合４、１０、室温、３０〜３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０又は８０℃、後者の場合は特に温度安定性酵素又は高基質濃度で使用する場合）で使用できる。これは本発明の範囲を限定しない。適正な条件は専門家によって選択される。上記のグリコシダーゼ触媒グリコシド転移反応においては、−Ｆはさらに供与体及び／又は受容体物質におけるアグリコンとして選択できるが、これは専門家であればＦ−グリコシド類を入手でき、さらにそれ以上の合成のために使用できることを意味している。本発明によれば、例えば供与体としてパーアセチル化ＧｌｃＮＡｃβ１−３ＧａｌβＳＥｔを使用してＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ１３Ｇａｌ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ−４Ｇｌｃ、成する方法は本発明の範囲を限定せず、例えば酵素の活性部位における触媒に参加する少なくとも１つの酸／塩基基又は酵素中の何か他の基を不活性アミノ酸基で修飾、置換することにより、又はアミノ酸配列から除外することによって達成できる。上記の三糖類は、他の物質へ転換でき、さらに例えば異種適用及び本発明の説明による他の適用に使用することができる。上記のＡ又はＲと特定されている上記の生成物のグリコシド結合アグリコンは１−、２−、３−、オリゴ−、又は多（ポリ）官能性（例えば本出願で言及されたＡの例を参照）である可能性があるが、これは１、２、３以上の糖基がＡ、即ち本発明に従った方法によって生成できる (Galα1-3Galβ-)_n-A,(Galα1-3Galα-)_n-A,(Galα1-3Galβ1-4GlcNAcβ-)_n-A, (Galα1-3Galβ1-4GlcNAcα-)_n-A,(Galα1-3Galβ1-4GlcNRβ-)_n-A, (Galα1-3Galβ1-4GlcNRα-)_n-A,または(GlcNAcβ1-3Galβ-)_n-A.または (Galβ1-3GlcNAcβ1-3Galβ-)_n-A(ｎは、１以上の整数) のタイプの生成物における相違する又は同一タイプの官能基にグリコシド結合していることを意味する。これは例えばガラビオース結合タンパク質に、又は例えばＧｌｃＮＡｃβ１− ３Ｇａｌβ−結合細菌への高いアフィニティーを有する生成物が必要な場合には長所であり得る。そうした生成物の生成は本発明の範囲を限定せず、専門家によって単純な方法で実行される。例えば（ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ−）ｎ− Ａ及び（Ｇａｌβ１−３ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌβ−）ｎ−ＡにおけるＡは本出願の説明でＡについて上記で言及されてるものと同一タイプである可能性がある。非限定例として、上記のオリゴ糖誘導体は例えば二官能誘導体を生じさせるＤＳＧ（グルタール酸ジスクシニミジル）又はＤＳＳ（スベリン酸ジスクシニミジル）のような架橋剤、又は塩化アクリロイルと糖誘導体との結合による二官能生成物の合成のために使用することができ、その後には結果として生じた抱合体をオリゴ官能生成物を生じさせる標準方法によって重合化（低重合化）することができる。生成物はさらにネオグリコプロテイン類を生成するためにヒト又はウシ血清アルブミンのような例えばタンパク質へ抱合させることができる。オリゴ糖誘導体が塩化アクリロイルに抱合されている場合には、例えば糖−Ｒ−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ＝ＣＨ₂のタイプの生成物が得られるが、これは例えば触媒として過硫酸アンモニウム及びＴＥＭＥＤを用いることによって例えばアクリルアミノ基を導入するためにジエチルアミン又はヒドラジンを用いて誘導体化することができ（例えばＪａｋｏｂｙらの編集した「酵素学の方法、第３４巻（ＭｅｔｈｏｄｓＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌｕｍｅ３４）」参照）、その後重合体は −プレート、ＮＨＳ−活性化アガロース又は本説明で言及されている他の分離材料の一部へ共有的に結合させることができる。これらの生成物は本出願で言及されている他の構造と同様に分析、分離又は阻害のために使用される。糖の非限定例は、Ｇａｌα−、Ｇａｌα１−３Ｇａｌ、血液Ｂ型、ＧａｌＮＡｃα−、ＧａｌＮＡｃα１−３Ｇａｌ、ＧａｌＮＡｃα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃ、及び血液Ａ型糖である。Ｒの非限定例は−Ｐｈのタイプのグリコシド結合アグリコン及びその他の上記のアグリコン類である。Ｍａｎα１−６（Ｍａｎα１−３）Ｍａｎ−Ｒは二−又はオリゴ官能性ガラビオース化合物を形成するための「架橋」として使用できるオリゴ糖の別の非限定例である（Ｒはグリコシド結合有機基又は無機基であり、式中、Ｒは本出願で言及されているグリコシド結合Ｒ又はＡの例の一部であり得る）。この点において、非限定例としての二官能誘導体類は例えば上記のトリマンノシドにおけるＭａｎα１−６（Ｍａｎα１−３）−ユニット中の２個の６−ＯＨ基を、その後上記のガラビオース誘導体類中のアミノ基含有アグリコン類と反応することができる対応する６−Ｃ（Ｈ）＝Ｏ（即ち６位がアルデヒド基）へ選択的に酸化することによって生成できる。結果として生じるシッフ（Ｓｃｈｉｆｆ）塩基（−Ｎ＝ＣＨ−）はその後上記の糖類の１又は２以上とＭａｎα１−６（Ｍａｎα１−３）Ｍａｎ−Ｒとの間の安定な−ＮＨ−ＣＨ₂−結合（例えばシアノホウ水素化ナトリウムを用いて）へ還元させることができる。この方法は下記のイクロタイター・ウェルに結合され、上記の最初で言及されている酵素細胞類、細菌類、タンパク質類、抗体類、検査中の細胞類のＥＬＩＳＡ測定に適する生成物が入手される場合には、酵素又は細胞、細菌、毒素、抗体及び本発明において上記で言及されているその他のタンパク質類の精製のために使用することができる。ＮＵＮＣ社製コバリンクへの結合の非限定例は、ＮＵＮＣ社製コバリンクへのＢＳ（ビス−スルホ−スベリン酸スクシニミジル）を添加すること、そしてその後に上記の糖類の数種又はその他の糖リガンド類を添加することである。非限定例は、Ｇａｌα１−３Ｇａｌα−ＯＰｈＮＨ₂、又はＧａｌα１−３Ｇａｌβ１ −４ＧｌｃＮＡｃβ−Ｏ（ＣＨ₂）₂ＰｈＮＨ₂（Ｇａｌα１−３Ｇａｌ−エピトープに対する抗体類の測定のため）、又はＧａｌα１−３（Ｆｕｃα１−２）Ｇａｌβ−Ｏ（ＣＨ₂）₂ＰｈＮＨ₂−ｐ（Ｂ型決定基の測定のため）のいずれかを添加することである。残りの活性基はその後例えばトリス−ＨＣｌ又は例えばＨＳＡのようなペルオキシダーゼ（最初に過ヨウ素酸塩を用いて酸化されている）の不活性タンパク質と反応させることができる。非限定的な例のように、上述されているところに従って糖質で誘導化されたプレート上のウェルを（例えば、ＮＵＮＣの推奨に従って）洗浄することにより、洗浄後に、試料中の成分（例えばGal-Gal-エピトープに対する抗体、または上述の例のＢ決定基に対する抗体）の測定を行う。すなわち、ウェルに試料を添加し、インキュベートし、例えば推奨した緩衝液で洗浄して、酵素−タンパク質複合体を加え（例えばヒト抗体に対して特異的な抗体に結合されたペルオキシダーゼ）、インキュベートし、ウェルを洗浄して、基質（例えばデンマークのDakoPatt sが推奨するように、ELISA中のペルオキシダーゼに対する基質として、例えばOP D−錠剤）を加え、インキュベートし、最後にウェル中の吸光度を測定する。上記の方法は非限定的な例であり、試料中成分の測定は、専門家が容易に測定できるいくつかの異なる方法で行うことができ、これにより発明の範囲を限定するものではない。例えば、上述のサンドイッチ法の代わりに、競合法または非競合法を用いることができ、例えば感度を高める場合にはビオチン−アビジンシステム、または特別な応用のためには、専門家の選択によってタンパク質Ａもしくは他の複合体を含め、検出用に多くの異なるタイプの複合体および基質を用い得る。タイプの）アミノ基を含有する他の糖質リガンドを結合するために、一般的に用いることもできる。これに関する非限定的な例は、血液型のＡ決定基に対する抗体を測定について上述したのと同様に、スペーサー（例えば、GalNAc α 1-3(Fu cα 1-2)Gal β-O(CH₂)₂PhNH_2-p)を用いて血液型のＡ決定基を結合することであり、上記の方法と同一の方法で試料中のグリコシルトランスフェラーゼ、レクチン、セレクチン（selectin）、アドヒーシン（adhesin）、酵素、毒素、細菌、ウイルスまたは細胞を測定するために、上記と同様の方法でグリコシルトランスフェラーゼ用の受容体である糖質リガンドを結合すること、レクチン、セレクチン、アドヒーシン、酵素、または毒素に結合する糖質リガンドを結合することである。種々のグリコシルトランスフェラーゼ、レクチン、セレクチン、アドヒーシン、酵素、毒素、細菌、またはウイルス（これらは、特定の使用のために、専門家により選択される）に対する種々の糖質の特異性について記載している文献は多岐にわたる。該方法を幅広く適用すれば、広範な種々の成分が容易に測定できる。該適用において示した炭水化物構造体は、ELISAに使用され得る酵素に共有結合させるためにも用いることができ、得られた複合体は、先に例示したタンパク質を測定するために、または可溶性炭水化物を測定するために使用できる。後者の例は、例えばＧａｌα１−３ＧａｌβＯＰｈＮＨ₂−ｐ又はＧａｌα１− ３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−ＯＰｈＮＨ₂とペルオキシダーゼとの抱合（過ヨウ素酸で最初から酸化されている）であり、その後シアノホウ水素化ナトリウムを用いての還元により、さらに例えばセファデックスＧ５０又はセファデックスＧ７５を用いてのクロマトグラフィー（抱合体の精製）により遮断又は反応させることができる。この抱合体はその後、非限定例としてＧａｌα１−３Ｇａｌβ又はＧａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ−糖類の測定のために例えば工程１：マイクロタイター・プレート上の上記の構造のいずれかに対して特異性を有する抗体類の吸着、工程２：ペルオキシダーゼ抱合体と一緒にマイクロタイター・ウェルへの上記の糖類のいずれかを含有する試料の塗布、その後に工程３：ペルオキシダーゼ基質の塗布及びウェルにおける吸光度の測定により使用することができるこの方法では可溶性炭水化物濃度が上昇するときには低下する吸収が入手される。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 31/7034 Ａ６１Ｋ 31/70 ６０９ 38/46 Ｃ０７Ｈ 3/06 Ｃ０７Ｈ 3/06 5/04 5/04 7/027 7/027 15/04 Ａ 15/04 Ｄ 15/18 15/18 15/203 15/203 Ａ６１Ｋ 37/54 (31)優先権主張番号９６００２９０−２ (32)優先日平成８年１月24日(1996．1．24) (33)優先権主張国スウェーデン（ＳＥ） (31)優先権主張番号９６００９９４−９ (32)優先日平成８年３月13日(1996．3．13) (33)優先権主張国スウェーデン（ＳＥ） (31)優先権主張番号９６０１３０９−９ (32)優先日平成８年４月２日(1996．4．2) (33)優先権主張国スウェーデン（ＳＥ） (31)優先権主張番号９６０１８４９−４ (32)優先日平成８年５月11日(1996．5．11) (33)優先権主張国スウェーデン（ＳＥ） (31)優先権主張番号９６０１８９１−６ (32)優先日平成８年５月15日(1996．5．15) (33)優先権主張国スウェーデン（ＳＥ） (31)優先権主張番号９６０１９１６−１ (32)優先日平成８年５月19日(1996．5．19) (33)優先権主張国スウェーデン（ＳＥ） (31)優先権主張番号９６０２８４４−４ (32)優先日平成８年７月18日(1996．7．18) (33)優先権主張国スウェーデン（ＳＥ） (31)優先権主張番号９６０３０４３−２ (32)優先日平成８年８月20日(1996．8．20) (33)優先権主張国スウェーデン（ＳＥ） (31)優先権主張番号９６０３４３４−３ (32)優先日平成８年９月18日(1996．9．18) (33)優先権主張国スウェーデン（ＳＥ） (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．炭水化物に基づく生成物、炭水化物に基づく生成物の合成方法及び炭水化物に基づく生成物の使用。２．請求項１に記載の炭水化物構造の１又は２以上に対する特異性を有する抗体をｉｎｖｉｖｏ又はｉｎｖｉｔｒｏで阻害又は除去するための前記生成物の使用。３．α１−３結合ガラクトピラノシル−ガラクトピラノース（Ｇａｌα１−３Ｇａｌ）、そのα−又はβ−グリコシド、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃ、その他の三糖、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌ又はＧａｌα１−３Ｇａｌを含有するより高度のオリゴ糖、修飾α１−３結合ガラクトピラノシル−ガラクトピラノース、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃのタイプの修飾三糖、その他の修飾三糖、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１ −４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌのタイプの修飾四糖又はそのより高度のオリゴ糖、それらの修飾β−グリコシド、又は上記構造の１又は２以上に関連する２− 、３−、オリゴ−、又は多官能性である生成物の１又は２以上を含む注射剤による非トランスジェニック又はトランスジェニック臓器の異種組織移植に関連する、及び異種組織移植後の患者の治療。４．α１−３結合ガラクトピラノシル−ガラクトピラノース（Ｇａｌα１−３Ｇａｌ）、そのα−グリコシド、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃ、Ｇａｌα１−３Ｇａｌを含有するその他の三糖又はより高度のオリゴ糖、修飾α １−３結合ガラクトピラノシル−ガラクトピラノース、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ １−４ＧｌｃＮＡｃのタイプの修飾三糖、その他の修飾三糖、Ｇａｌα１−３Ｇａｌβ１−４ＧｌｃＮＡｃβ１−３Ｇａｌ又はそれらの修飾、又はそれらのより高度のオリゴ糖、それらの修飾β−グリコシドの１又は２以上を含む分離材料を通しての血漿の通過による、非トランスジェニック又はトランスジェニック臓器の異種組織移植に関連する、及び異種組織移植後の患者の治療。５．上記の構造を含有する材料を通しての血漿の通過による非トランスジェニック又はトランスジェニック臓器の異種組織移植に関連する、及び異種組織移植後の患者の治療。６．ＰＥＧ修飾α−ガラクトシダーゼの使用を含む上記の処置を用いての、非トランスジェニック又はトランスジェニック臓器の異種組織移植に関連する、及び異種組織移植後の患者の治療。７．感染性疾患の予防又は治療における請求項１記載の一部の構造の使用。８．アフィニティークロマトグラフィー、ＥＬＩＳＡ又はバイオセンサー適用のための請求項１記載の一部の構造の使用。