JP2000290188A - キサンチンオキシダーゼ阻害剤 - Google Patents
キサンチンオキシダーゼ阻害剤Info
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- JP2000290188A JP2000290188A JP11098011A JP9801199A JP2000290188A JP 2000290188 A JP2000290188 A JP 2000290188A JP 11098011 A JP11098011 A JP 11098011A JP 9801199 A JP9801199 A JP 9801199A JP 2000290188 A JP2000290188 A JP 2000290188A
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- lagerstroemia
- organic solvent
- xanthine oxidase
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 安全性の高い植物からの抽出物を有効成分と
するキサンチンオキシダーゼ阻害剤を提供する。 【解決手段】 １０種類の植物素材におけるキサンチン
オキシダーゼ阻害活性を比較した結果、オオバナサルス
ベリ（バナバ）の活性が最も強いことが判明した。バナ
バを熱水等により抽出して得られる「粗抽出物」、この
粗抽出物をスチレン−ジビニルベンゼン系合成樹脂など
に吸着して得られる「樹脂吸着成分」、この樹脂吸着成
分を水と有機溶媒による分配操作によって得られる「有
機溶媒可溶成分」、及び、この有機溶媒可溶成分を高速
液体クロマトグラフィーで精製して得られる「エラグ
酸」「エラグ酸誘導体」「エラグ酸類似化合物」「リグ
ナン類」のいずれにもキサンチンオキシダーゼ阻害作用
を確認し、これら各抽出成分を有効成分とするキサンチ
ンオキシダーゼ阻害剤を提供することとした。
するキサンチンオキシダーゼ阻害剤を提供する。 【解決手段】 １０種類の植物素材におけるキサンチン
オキシダーゼ阻害活性を比較した結果、オオバナサルス
ベリ（バナバ）の活性が最も強いことが判明した。バナ
バを熱水等により抽出して得られる「粗抽出物」、この
粗抽出物をスチレン−ジビニルベンゼン系合成樹脂など
に吸着して得られる「樹脂吸着成分」、この樹脂吸着成
分を水と有機溶媒による分配操作によって得られる「有
機溶媒可溶成分」、及び、この有機溶媒可溶成分を高速
液体クロマトグラフィーで精製して得られる「エラグ
酸」「エラグ酸誘導体」「エラグ酸類似化合物」「リグ
ナン類」のいずれにもキサンチンオキシダーゼ阻害作用
を確認し、これら各抽出成分を有効成分とするキサンチ
ンオキシダーゼ阻害剤を提供することとした。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、植物由来の成分を有効
成分とするキサンチンオキシダーゼ阻害剤に関する。
成分とするキサンチンオキシダーゼ阻害剤に関する。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】哺乳動
物の肝臓、小腸粘膜、乳汁中に多く含まれるキサンチン
オキシダーゼは、プリン化合物分解経路の最終段階にお
いてヒポキサンチンからキサンチンを経て尿酸を生成す
る。
物の肝臓、小腸粘膜、乳汁中に多く含まれるキサンチン
オキシダーゼは、プリン化合物分解経路の最終段階にお
いてヒポキサンチンからキサンチンを経て尿酸を生成す
る。
【０００３】血中における尿酸濃度の上昇は、高尿酸血
症としての痛風等の様々な疾病を引き起こすため、高尿
酸血症を是正すべく臨床的に尿酸生成阻害剤つまりキサ
ンチンオキシダーゼ阻害剤の投与が行われており、キサ
ンチンオキシダーゼの活性を抑制し得る生理活性物質の
開発が注視されている。
症としての痛風等の様々な疾病を引き起こすため、高尿
酸血症を是正すべく臨床的に尿酸生成阻害剤つまりキサ
ンチンオキシダーゼ阻害剤の投与が行われており、キサ
ンチンオキシダーゼの活性を抑制し得る生理活性物質の
開発が注視されている。
【０００４】ところで、今日までキサンチンオキシダー
ゼ阻害作用を有する数多くの化合物が報告されている
が、それらの多くは化学的手法により合成されたもので
あり、人体に対する安全性が高いとは決して言えなかっ
た。また最近では、このような人体に対する安全性の観
点から天然物由来のキサンチンオキシダーゼ阻害剤も開
示されるようになってきたが（特開平５−２４４９６３
号、特開平９−２０２７３３号など）、これらのキサン
チンオキシダーゼ阻害効果は充分満足できるものではな
かった。
ゼ阻害作用を有する数多くの化合物が報告されている
が、それらの多くは化学的手法により合成されたもので
あり、人体に対する安全性が高いとは決して言えなかっ
た。また最近では、このような人体に対する安全性の観
点から天然物由来のキサンチンオキシダーゼ阻害剤も開
示されるようになってきたが（特開平５−２４４９６３
号、特開平９−２０２７３３号など）、これらのキサン
チンオキシダーゼ阻害効果は充分満足できるものではな
かった。
【０００５】そこで本発明は、安全性の高い天然物由来
の成分を有効成分とし、しかも優れたキサンチンオキシ
ダーゼ活性阻害作用を有するキサンチンオキシダーゼ阻
害剤を提供せんとするものである。
の成分を有効成分とし、しかも優れたキサンチンオキシ
ダーゼ活性阻害作用を有するキサンチンオキシダーゼ阻
害剤を提供せんとするものである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、前記の課
題を解決するために、既に多年にわたって食用に供され
人体に対する安全性が確認されている植物についてキサ
ンチンオキシダーゼ阻害剤として利用価値のあるものを
検討した。その結果、ミソハギ科サルスベリ属の植物で
あるオオバナサルスベリ（Lagerstroemia speciosa）の
抽出物に強いキサンチンオキシダーゼ阻害作用を有する
ことを見出し、本発明を想到するに至ったものである。
題を解決するために、既に多年にわたって食用に供され
人体に対する安全性が確認されている植物についてキサ
ンチンオキシダーゼ阻害剤として利用価値のあるものを
検討した。その結果、ミソハギ科サルスベリ属の植物で
あるオオバナサルスベリ（Lagerstroemia speciosa）の
抽出物に強いキサンチンオキシダーゼ阻害作用を有する
ことを見出し、本発明を想到するに至ったものである。
【０００７】すなわち、本発明のキサンチンオキシダー
ゼ阻害剤は、サルスベリ属に属する植物から抽出された
成分を有効成分として含有することを特徴とする。
ゼ阻害剤は、サルスベリ属に属する植物から抽出された
成分を有効成分として含有することを特徴とする。
【０００８】本発明においては、サルスベリ属に属する
植物であれば全て使用可能であるが、中でも「オオバナ
サルスベリ（Lagerstroemia speciosa）」を好適に使用
することができる。この「オオバナサルスベリ（Lagers
troemia speciosa）」は、フィリピンをはじめとする熱
帯地方に生育し、バナバと呼ばれており、この抽出液は
フィリピンなどでは日常的なお茶として飲用されている
ため、人体に対する安全性は保証されていると言える。
植物であれば全て使用可能であるが、中でも「オオバナ
サルスベリ（Lagerstroemia speciosa）」を好適に使用
することができる。この「オオバナサルスベリ（Lagers
troemia speciosa）」は、フィリピンをはじめとする熱
帯地方に生育し、バナバと呼ばれており、この抽出液は
フィリピンなどでは日常的なお茶として飲用されている
ため、人体に対する安全性は保証されていると言える。
【０００９】本発明において抽出に供し得る植物体の部
位は、葉はもちろん、茎、花、木質部、木皮部、根部等
すべて利用可能であり、抽出の際にはこれら植物体を乾
燥させ粉砕して用いるのが好ましい。
位は、葉はもちろん、茎、花、木質部、木皮部、根部等
すべて利用可能であり、抽出の際にはこれら植物体を乾
燥させ粉砕して用いるのが好ましい。
【００１０】本発明における「抽出成分」としては、先
ず、上記植物体を水（熱水を含む）、有機溶媒またはそ
の混合溶液を用いて抽出して得られる「粗抽出物」を使
用することができる。この時の抽出温度は、４０〜１０
０℃、中でも特に９５〜１００℃に設定するのが好まし
い。有機溶媒としては、メタノール、エタノール、アセ
トンのような水溶性有機溶媒を使用するのが好ましく、
必要に応じて水と有機溶媒の組み合わせを使用すること
もできる。また、植物体を抽出する熱水、有機溶媒、有
機溶媒と熱水の混合溶液の量は、乾燥させた植物体重量
に対し、１：１０乃至１：１００、特に１：２５程度と
するのが好ましい。
ず、上記植物体を水（熱水を含む）、有機溶媒またはそ
の混合溶液を用いて抽出して得られる「粗抽出物」を使
用することができる。この時の抽出温度は、４０〜１０
０℃、中でも特に９５〜１００℃に設定するのが好まし
い。有機溶媒としては、メタノール、エタノール、アセ
トンのような水溶性有機溶媒を使用するのが好ましく、
必要に応じて水と有機溶媒の組み合わせを使用すること
もできる。また、植物体を抽出する熱水、有機溶媒、有
機溶媒と熱水の混合溶液の量は、乾燥させた植物体重量
に対し、１：１０乃至１：１００、特に１：２５程度と
するのが好ましい。
【００１１】上記「粗抽出物」をクロマトグラフィー技
術によって分離精製して得られる「樹脂吸着成分」も本
発明における「抽出成分」として用いることができる。
すなわち、スチレン−ジビニルベンゼン系合成樹脂（三
菱化成工業株式会社製DiaionHP-10,20,30,40,50、オル
ガノ株式会社製アンバーライトXAD-2,4 、或いは住友化
学工業株式会社製デュオライトS シリーズなど）、又は
デキストラン系合成樹脂（ファルマシア社製SephadexLH
-20 など）に上記「粗抽出物」を吸着させ、「樹脂吸着
成分」を有機溶媒、必要に応じて水と有機溶媒の混合溶
液によって溶出させて得ることができる。例えば、Diai
on HP-20を充填したカラムに「粗抽出物」を供し、水に
て非吸着成分を洗浄し、次いでメタノールにて「樹脂吸
着成分」を溶出させ回収することができる。
術によって分離精製して得られる「樹脂吸着成分」も本
発明における「抽出成分」として用いることができる。
すなわち、スチレン−ジビニルベンゼン系合成樹脂（三
菱化成工業株式会社製DiaionHP-10,20,30,40,50、オル
ガノ株式会社製アンバーライトXAD-2,4 、或いは住友化
学工業株式会社製デュオライトS シリーズなど）、又は
デキストラン系合成樹脂（ファルマシア社製SephadexLH
-20 など）に上記「粗抽出物」を吸着させ、「樹脂吸着
成分」を有機溶媒、必要に応じて水と有機溶媒の混合溶
液によって溶出させて得ることができる。例えば、Diai
on HP-20を充填したカラムに「粗抽出物」を供し、水に
て非吸着成分を洗浄し、次いでメタノールにて「樹脂吸
着成分」を溶出させ回収することができる。
【００１２】さらに、上記「樹脂吸着成分」を、水とク
ロロホルム、ヘキサン、酢酸エチル、ブタノールなどの
有機溶媒との分配操作で得られる「有機溶媒可溶成分」
も本発明における「抽出成分」として好ましく用いるこ
とができる。
ロロホルム、ヘキサン、酢酸エチル、ブタノールなどの
有機溶媒との分配操作で得られる「有機溶媒可溶成分」
も本発明における「抽出成分」として好ましく用いるこ
とができる。
【００１３】またさらに、上記「有機溶媒可溶成分」を
高速液体クロマトグラフィーを用いて精製若しくは単離
して得られる「高速液体クロマトグラフィー分取成分」
も本発明における「抽出成分」として用いることができ
る。高速液体クロマトグラフィーは、逆相、順相、ゲル
ろ過、イオン交換、疎水などの分離モードを用いたカラ
ムで行うことができるが、経済的な面から逆相モードで
行うのが好ましい。好適な一例としては、Diaion HP-20
樹脂吸着フラクションを酢酸エチル、ブタノールで分配
操作し、それぞれの酢酸エチル可溶フラクション、ブタ
ノール可溶フラクションを得、酢酸エチル可溶フラクシ
ョンについて、逆相ODS カラム、溶離液に５０％メタノ
ール（１％酢酸を含む）を使用し、主成分を分取するこ
とができる。
高速液体クロマトグラフィーを用いて精製若しくは単離
して得られる「高速液体クロマトグラフィー分取成分」
も本発明における「抽出成分」として用いることができ
る。高速液体クロマトグラフィーは、逆相、順相、ゲル
ろ過、イオン交換、疎水などの分離モードを用いたカラ
ムで行うことができるが、経済的な面から逆相モードで
行うのが好ましい。好適な一例としては、Diaion HP-20
樹脂吸着フラクションを酢酸エチル、ブタノールで分配
操作し、それぞれの酢酸エチル可溶フラクション、ブタ
ノール可溶フラクションを得、酢酸エチル可溶フラクシ
ョンについて、逆相ODS カラム、溶離液に５０％メタノ
ール（１％酢酸を含む）を使用し、主成分を分取するこ
とができる。
【００１４】「高速液体クロマトグラフィー分取成分」
には、エラグ酸、エラグ酸誘導体、エラグ酸類似化合
物、リグナン類が主成分として含まれており、これらい
ずれのフラクションについても優れたキサンチンオキシ
ダーゼ阻害作用が確かめられている。したがって、この
ようにして得られるエラグ酸、エラグ酸誘導体、エラグ
酸類似化合物、リグナン類のいずれか、又はこれらの２
以上の混合物も本発明における「抽出成分」として極め
て有効に用いることができる。
には、エラグ酸、エラグ酸誘導体、エラグ酸類似化合
物、リグナン類が主成分として含まれており、これらい
ずれのフラクションについても優れたキサンチンオキシ
ダーゼ阻害作用が確かめられている。したがって、この
ようにして得られるエラグ酸、エラグ酸誘導体、エラグ
酸類似化合物、リグナン類のいずれか、又はこれらの２
以上の混合物も本発明における「抽出成分」として極め
て有効に用いることができる。
【００１５】なお、上記エラグ酸、エラグ酸誘導体、エ
ラグ酸類似化合物、リグナン類の精製方法は上記方法に
限られるものではないし、また、その他の植物から得ら
れるならばそれらも同様にキサンチンオキシダーゼ阻害
剤の有効成分として用いることができる。更に、上記各
段階で得られる抽出成分を組み合わせて用いることもで
きる。エラグ酸誘導体としては、後述するvaloneic aci
d dilactone 以外、基本骨格としてエラグ酸構造を有
し、その水酸基に糖、脂質、アミノ酸、ポリフェノール
などが結合したもの、或いはその水酸基がメチル基、ア
セチル基等に置換・抱合されたものを挙げることがで
き、これらであればvaloneic acid dilactone と同様の
効果を発揮するものと考えられる。エラグ酸類似化合物
としては、3,4,8,9,10-pentahydroxy-dibenzo[b.d]pyra
n-6-one などのエラグ酸に構造が似ている化合物、例え
ば加水分解するとエラグ酸を生成するエラジタンニン
（ellagitannin) 等であり、これらは3,4,8,9,10-penta
hydroxy-dibenzo[b.d]pyran-6-one と同様の効果を発揮
するものと考えられる。
ラグ酸類似化合物、リグナン類の精製方法は上記方法に
限られるものではないし、また、その他の植物から得ら
れるならばそれらも同様にキサンチンオキシダーゼ阻害
剤の有効成分として用いることができる。更に、上記各
段階で得られる抽出成分を組み合わせて用いることもで
きる。エラグ酸誘導体としては、後述するvaloneic aci
d dilactone 以外、基本骨格としてエラグ酸構造を有
し、その水酸基に糖、脂質、アミノ酸、ポリフェノール
などが結合したもの、或いはその水酸基がメチル基、ア
セチル基等に置換・抱合されたものを挙げることがで
き、これらであればvaloneic acid dilactone と同様の
効果を発揮するものと考えられる。エラグ酸類似化合物
としては、3,4,8,9,10-pentahydroxy-dibenzo[b.d]pyra
n-6-one などのエラグ酸に構造が似ている化合物、例え
ば加水分解するとエラグ酸を生成するエラジタンニン
（ellagitannin) 等であり、これらは3,4,8,9,10-penta
hydroxy-dibenzo[b.d]pyran-6-one と同様の効果を発揮
するものと考えられる。
【００１６】本発明に係わるバナバの抽出物は、後記す
る実施例からも明らかなように、キサンチンオキシダー
ゼの活性を阻害する作用を有し、尿酸の生成を抑制する
ことができる。このため、痛風など高尿酸血症に起因し
て生じる様々な疾患の予防及び治療に利用することがで
き、更には炎症、老化、発癌、動脈硬化、脳障害など活
性酸素に起因して生じる様々な疾患の予防及び治療にも
効果を発揮する。
る実施例からも明らかなように、キサンチンオキシダー
ゼの活性を阻害する作用を有し、尿酸の生成を抑制する
ことができる。このため、痛風など高尿酸血症に起因し
て生じる様々な疾患の予防及び治療に利用することがで
き、更には炎症、老化、発癌、動脈硬化、脳障害など活
性酸素に起因して生じる様々な疾患の予防及び治療にも
効果を発揮する。
【００１７】本発明のキサンチンオキシダーゼ阻害剤
は、医薬品、医薬部外品、化粧品、食品、飲料（缶、ペ
ットボトル、瓶等）などとして様々に提供することがで
きる。例えば、キサンチンオキシダーゼ阻害作用を有す
るバナバ茶飲用として提供することもできる。剤型とし
ては、凍結乾燥或いは噴霧乾燥等により乾燥させて乾燥
粉末として提供することもできるし、また液剤、錠剤、
散剤、顆粒、糖衣錠、カプセル、懸濁液、液剤、乳剤、
アンプル、注射剤等とすることもできる。
は、医薬品、医薬部外品、化粧品、食品、飲料（缶、ペ
ットボトル、瓶等）などとして様々に提供することがで
きる。例えば、キサンチンオキシダーゼ阻害作用を有す
るバナバ茶飲用として提供することもできる。剤型とし
ては、凍結乾燥或いは噴霧乾燥等により乾燥させて乾燥
粉末として提供することもできるし、また液剤、錠剤、
散剤、顆粒、糖衣錠、カプセル、懸濁液、液剤、乳剤、
アンプル、注射剤等とすることもできる。
【００１８】また、上述の「抽出成分」のみを単独でキ
サンチンオキシダーゼ阻害剤の有効成分とすることもで
きるが、その他キサンチンオキシダーゼ阻害作用を有す
る食品、或いは抗高尿酸血症剤として知られているアロ
ブリノールやアロキサンチン、尿酸利尿剤として知られ
るブロベネシド、ベンズブロマロンなどを併用すれば一
層効果を高めることができる。
サンチンオキシダーゼ阻害剤の有効成分とすることもで
きるが、その他キサンチンオキシダーゼ阻害作用を有す
る食品、或いは抗高尿酸血症剤として知られているアロ
ブリノールやアロキサンチン、尿酸利尿剤として知られ
るブロベネシド、ベンズブロマロンなどを併用すれば一
層効果を高めることができる。
【００１９】
【発明の実施の形態】（植物素材からのスクーリニン
グ）いわゆる健康茶として知られいる１０種類の植物素
材を集め、これらのキサンチンオキシダーゼ酵素活性阻
害効果を比較検討した。各植物素材をミルにて粉砕後、
その０．５ｇをねじ付き三角フラスコに入れ、熱湯５０
ｍｌを加え、３０分間抽出した。得られた抽出液をフィ
ルターでろ過し、後述する測定方法によってキサンチン
オキシダーゼ酵素活性阻害効果を調べた。この結果は図
１に示した。
グ）いわゆる健康茶として知られいる１０種類の植物素
材を集め、これらのキサンチンオキシダーゼ酵素活性阻
害効果を比較検討した。各植物素材をミルにて粉砕後、
その０．５ｇをねじ付き三角フラスコに入れ、熱湯５０
ｍｌを加え、３０分間抽出した。得られた抽出液をフィ
ルターでろ過し、後述する測定方法によってキサンチン
オキシダーゼ酵素活性阻害効果を調べた。この結果は図
１に示した。
【００２０】図１の結果より、バナバ葉を抽出して得ら
れた成分（粗抽出物）は、その他の素材と比較して優れ
ていることが判明した。そこで、バナバ葉の熱水抽出エ
キス（粗抽出物）を作成し、以下のようにHP-20 カラム
クロマトグラフィー、有機溶媒抽出による分画操作を行
い、各分画についてキサンチンオキシダーゼ阻害活性を
測定することとした。
れた成分（粗抽出物）は、その他の素材と比較して優れ
ていることが判明した。そこで、バナバ葉の熱水抽出エ
キス（粗抽出物）を作成し、以下のようにHP-20 カラム
クロマトグラフィー、有機溶媒抽出による分画操作を行
い、各分画についてキサンチンオキシダーゼ阻害活性を
測定することとした。
【００２１】（バナバ葉の抽出及び精製）図２に示す工
程でバナバ葉の抽出及び精製を行い、各分画について後
述する測定方法によってキサンチンオキシダーゼ阻害活
性を測定した。
程でバナバ葉の抽出及び精製を行い、各分画について後
述する測定方法によってキサンチンオキシダーゼ阻害活
性を測定した。
【００２２】すなわち、フィリピン産バナバ生葉を適宜
量強制的に充分乾燥させ、これを粉砕してよく混合した
バナバ葉１ｋｇを、５０リットル、９５〜１００℃の熱
水で３０分間抽出した。この時の抽出溶液のブリックス
（brix）は約１．５％であった。得られた抽出液をろ
過、遠心分離させた後、更にエバポレーターで濃縮し、
これを噴霧乾燥させて「熱水抽出物」すなわち粗抽出物
を得た。
量強制的に充分乾燥させ、これを粉砕してよく混合した
バナバ葉１ｋｇを、５０リットル、９５〜１００℃の熱
水で３０分間抽出した。この時の抽出溶液のブリックス
（brix）は約１．５％であった。得られた抽出液をろ
過、遠心分離させた後、更にエバポレーターで濃縮し、
これを噴霧乾燥させて「熱水抽出物」すなわち粗抽出物
を得た。
【００２３】次に、直径１０ｃｍ、長さ１００ｃｍのガ
ラスカラムにスチレン−ジビニルベンゼン系合成樹脂
（三菱化成工業株式会社製ダイヤイオンHP-20 ）を２．
５リットル充填し、この充填剤をメタノールで洗浄しさ
らに蒸留水で洗浄した後、上記「熱水抽出物」（全量）
を１リットルの蒸留水に溶かしてこれをガラスカラム内
に流し、次いでカラムに対して約６倍量相当の蒸留水を
流してスチレン−ジビニルベンゼン系合成樹脂に吸着さ
れなかった分画（以下「ＨＰ−２０非吸着分画」とい
う。）を取り除き、その後カラム容量に対して約５倍量
相当のメタノールを流してスチレン−ジビニルベンゼン
系合成樹脂に吸着された分画（以下「ＨＰ−２０吸着分
画」という。）を溶出させた。こうして得られた「ＨＰ
−２０非吸着分画」及び「ＨＰ−２０吸着分画」をそれ
ぞれ濃縮し、凍結乾燥して乾燥物として得た。
ラスカラムにスチレン−ジビニルベンゼン系合成樹脂
（三菱化成工業株式会社製ダイヤイオンHP-20 ）を２．
５リットル充填し、この充填剤をメタノールで洗浄しさ
らに蒸留水で洗浄した後、上記「熱水抽出物」（全量）
を１リットルの蒸留水に溶かしてこれをガラスカラム内
に流し、次いでカラムに対して約６倍量相当の蒸留水を
流してスチレン−ジビニルベンゼン系合成樹脂に吸着さ
れなかった分画（以下「ＨＰ−２０非吸着分画」とい
う。）を取り除き、その後カラム容量に対して約５倍量
相当のメタノールを流してスチレン−ジビニルベンゼン
系合成樹脂に吸着された分画（以下「ＨＰ−２０吸着分
画」という。）を溶出させた。こうして得られた「ＨＰ
−２０非吸着分画」及び「ＨＰ−２０吸着分画」をそれ
ぞれ濃縮し、凍結乾燥して乾燥物として得た。
【００２４】次に、得られた「ＨＰ−２０吸着分画」２
００ｇを１．５リットルの蒸留水に溶解し、２リットル
の酢酸エチルを加え、分液ロートにて充分に振った後、
酢酸エチル可溶成分として「酢酸エチル抽出分画」を採
取すると共に、続いてこのような酢酸エチル抽出操作を
２回繰り返して「酢酸エチル抽出分画」を得、これを濃
縮し、凍結乾燥して乾燥物として得た。
００ｇを１．５リットルの蒸留水に溶解し、２リットル
の酢酸エチルを加え、分液ロートにて充分に振った後、
酢酸エチル可溶成分として「酢酸エチル抽出分画」を採
取すると共に、続いてこのような酢酸エチル抽出操作を
２回繰り返して「酢酸エチル抽出分画」を得、これを濃
縮し、凍結乾燥して乾燥物として得た。
【００２５】他方、上記分液ロート内に残った蒸留水残
存成分に１．５リットルのブタノールを加えて充分に振
った後ブタノール抽出分画を採取すると共に、続いてこ
のようなブタノール抽出操作を２回繰り返して「ブタノ
ール抽出分画」得、これを濃縮し、凍結乾燥させて乾燥
物とした。
存成分に１．５リットルのブタノールを加えて充分に振
った後ブタノール抽出分画を採取すると共に、続いてこ
のようなブタノール抽出操作を２回繰り返して「ブタノ
ール抽出分画」得、これを濃縮し、凍結乾燥させて乾燥
物とした。
【００２６】上記「酢酸エチル分画」については更に、
分取型高速液体クロマトグラフィーを用いて精製操作を
行った。カラムはYMC 社製カラムODS 120A（内径20mm×
250mm ）を使用し、５０％メタノール（１％酢酸含有）
を室温条件下、流速６ｍｌ／ｍｉｎで流した。溶出した
成分は紫外部吸収２５４ｎｍでモニタリングした。この
とき、大きく５つのピークを検出し（図３）。それぞれ
のピークに関し、フラクションコレクターを用いて回収
し、濃縮後、凍結乾燥によって乾燥物（「高速液体クロ
マトグラフィー分取成分」）を得た。
分取型高速液体クロマトグラフィーを用いて精製操作を
行った。カラムはYMC 社製カラムODS 120A（内径20mm×
250mm ）を使用し、５０％メタノール（１％酢酸含有）
を室温条件下、流速６ｍｌ／ｍｉｎで流した。溶出した
成分は紫外部吸収２５４ｎｍでモニタリングした。この
とき、大きく５つのピークを検出し（図３）。それぞれ
のピークに関し、フラクションコレクターを用いて回収
し、濃縮後、凍結乾燥によって乾燥物（「高速液体クロ
マトグラフィー分取成分」）を得た。
【００２７】そして、上述の各段階で得られた「熱水抽
出物」「ＨＰ−２０非吸着分画」「ＨＰ−２０吸着分
画」「酢酸エチル抽出分画」「ブタノール抽出分画」
「高速液体クロマトグラフィー分取成分」について、後
述する測定方法にてキサンチンオキシダーゼ阻害活性を
測定し比較検討した。
出物」「ＨＰ−２０非吸着分画」「ＨＰ−２０吸着分
画」「酢酸エチル抽出分画」「ブタノール抽出分画」
「高速液体クロマトグラフィー分取成分」について、後
述する測定方法にてキサンチンオキシダーゼ阻害活性を
測定し比較検討した。
【００２８】図４には、分画段階におけるキサンチンオ
キシダーゼ阻害活性を示した。これより、粗抽出エキス
をHP-20 に吸着させることによって活性を上昇させるこ
とができ、さらにＨＰ−２０吸着分画を酢酸エチル、ブ
タノールにて抽出操作することにより活性を更に上昇さ
せることができ酢酸エチル、ブタノール抽出成分はより
一層高い活性を示すことが判明した。
キシダーゼ阻害活性を示した。これより、粗抽出エキス
をHP-20 に吸着させることによって活性を上昇させるこ
とができ、さらにＨＰ−２０吸着分画を酢酸エチル、ブ
タノールにて抽出操作することにより活性を更に上昇さ
せることができ酢酸エチル、ブタノール抽出成分はより
一層高い活性を示すことが判明した。
【００２９】図５には、酢酸エチル分画を高速液体クロ
マトグラフィーで精製し、得られたピークのキサンチン
オキシダーゼ阻害活性を示した。これより、ピークNo.1
以外は酢酸エチル分画自身の阻害活性以上を示してい
た。特に阻害活性の強かったピークNo.2についてNMR 及
びマススペクトルを用いて機器分析したところ、リグナ
ン類である2,5-bis-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-
3,4-bis-(hydroxymethyl)-(2,3,4,5)-tetrahydrofuran
（化１）とエラグ酸誘導体であるvaloneic acid dilact
one （化２）の混合物であると同定できた、。さらに、
ピークNo.3についてはエラグ酸類似化合物である3,4,8,
9,10-pentahydroxy-dibenzo[b.d]pyran-6-one （化３）
であると同定でき、ピークNo.4についてはエラグ酸（化
４）であると同定できた。
マトグラフィーで精製し、得られたピークのキサンチン
オキシダーゼ阻害活性を示した。これより、ピークNo.1
以外は酢酸エチル分画自身の阻害活性以上を示してい
た。特に阻害活性の強かったピークNo.2についてNMR 及
びマススペクトルを用いて機器分析したところ、リグナ
ン類である2,5-bis-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-
3,4-bis-(hydroxymethyl)-(2,3,4,5)-tetrahydrofuran
（化１）とエラグ酸誘導体であるvaloneic acid dilact
one （化２）の混合物であると同定できた、。さらに、
ピークNo.3についてはエラグ酸類似化合物である3,4,8,
9,10-pentahydroxy-dibenzo[b.d]pyran-6-one （化３）
であると同定でき、ピークNo.4についてはエラグ酸（化
４）であると同定できた。
【００３０】
【化１】
【００３１】
【化２】
【００３２】
【化３】
【００３３】
【化４】
【００３４】（キサンチンオキシダーゼ阻害活性の測
定）キサンチンを基質としてその酸化酵素であるキサン
チンオキシダーゼによって生成する尿酸量を測定した。
使用した試薬はすべて和光純薬工業社の製品を使用し
た。予め分光光度計のセルに0.1Mリン酸緩衝液(pH7.4)
を０．３ｍｌ、サンプル溶液を０．０２ｍｌまたは０．
１ｍｌ、蒸留水を０．１８ｍｌまたは０．１ｍｌ、0.12
U/mLキサンチンオキシダーゼを０．１ｍｌ混合してお
き、0.1mM キサンチンを添加することによって反応を開
始させた。生成した尿酸は２９５ｎｍにおける吸光度を
モニタリングした。また、リファレンスセルにはキサン
チンオキシダーゼの代わりにリン酸緩衝液を加えた。キ
サンチンオキシダーゼ阻害活性は、コントロールとして
サンプルを添加しない場合を１００％として、サンプル
溶液添加による吸光度上昇の抑制により評価した。
定）キサンチンを基質としてその酸化酵素であるキサン
チンオキシダーゼによって生成する尿酸量を測定した。
使用した試薬はすべて和光純薬工業社の製品を使用し
た。予め分光光度計のセルに0.1Mリン酸緩衝液(pH7.4)
を０．３ｍｌ、サンプル溶液を０．０２ｍｌまたは０．
１ｍｌ、蒸留水を０．１８ｍｌまたは０．１ｍｌ、0.12
U/mLキサンチンオキシダーゼを０．１ｍｌ混合してお
き、0.1mM キサンチンを添加することによって反応を開
始させた。生成した尿酸は２９５ｎｍにおける吸光度を
モニタリングした。また、リファレンスセルにはキサン
チンオキシダーゼの代わりにリン酸緩衝液を加えた。キ
サンチンオキシダーゼ阻害活性は、コントロールとして
サンプルを添加しない場合を１００％として、サンプル
溶液添加による吸光度上昇の抑制により評価した。
【図１】１０種類の植物素材を熱水で抽出し、得られた
抽出液のキサンチンオキシダーゼ阻害活性を比較したグ
ラフである。
抽出液のキサンチンオキシダーゼ阻害活性を比較したグ
ラフである。
【図２】オオバナサルスベリ（バナバ）の抽出及び精製
の工程例を示した図である。
の工程例を示した図である。
【図３】分取型高速液体クロマトグラフィーによる溶出
パターンを示したグラフである。
パターンを示したグラフである。
【図４】オオバナサルスベリ（バナバ）の熱水抽出物、
HP20吸着、HP20非吸着、更にHP20吸着分画を酢酸エチ
ル、ブタノールで分配した分画、及びその水残査のキサ
ンチンオキシダーゼ阻害活性を比較したグラフである。
HP20吸着、HP20非吸着、更にHP20吸着分画を酢酸エチ
ル、ブタノールで分配した分画、及びその水残査のキサ
ンチンオキシダーゼ阻害活性を比較したグラフである。
【図５】分取型高速液体クロマトグラフィーで得られた
ピークのキサンチンオキシダーゼ阻害活性を比較したグ
ラフである。
ピークのキサンチンオキシダーゼ阻害活性を比較したグ
ラフである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 31/35 Ａ６１Ｋ 31/35 31/366 31/365 ６０１ (72)発明者 角田 隆巳 静岡県榛原郡相良町女神21 株式会社伊藤 園中央研究所内 Ｆターム(参考） 4C086 AA01 AA02 BA03 BA08 CA01 GA17 MA01 MA02 MA03 MA04 NA14 ZC20 ZC31 4C088 AB12 AB99 AC03 AC05 AC06 AC11 BA08 BA09 BA10 BA11 BA31 CA02 CA05 CA13 CA14 NA14 ZC20 ZC31
Claims (5)
- 【請求項１】 サルスベリ属に属する植物から抽出され
た成分を有効成分として含有するキサンチンオキシダー
ゼ阻害剤。 - 【請求項２】 サルスベリ属に属するオオバナサルスベ
リ（Lagerstroemia speciosa）を、水、熱水、有機溶媒
又はこれらの少なくとも２種類からなる混合溶液を用い
て抽出して得られる「粗抽出物」を有効成分として含有
するキサンチンオキシダーゼ阻害剤。 - 【請求項３】 サルスベリ属に属するオオバナサルスベ
リ（Lagerstroemia speciosa）を、水、熱水、有機溶媒
又はこれらの少なくとも２種類からなる混合溶液を用い
て抽出し、得られた「粗抽出物」をスチレン−ジビニル
ベンゼン系合成樹脂又はデキストラン系合成樹脂に吸着
させて得られる「樹脂吸着成分」を有効成分として含有
するキサンチンオキシダーゼ阻害剤。 - 【請求項４】 サルスベリ属に属するオオバナサルスベ
リ（Lagerstroemia speciosa）を、水、熱水、有機溶媒
又はこれらの少なくとも２種類からなる混合溶液を用い
て抽出し、得られた「粗抽出物」をスチレン−ジビニル
ベンゼン系合成樹脂又はデキストラン系合成樹脂に吸着
させ、得られた「樹脂吸着成分」を水と、クロロホル
ム、ヘキサン、酢酸エチル、ブタノールなどの有機溶媒
との分配操作で得られる「有機溶媒可溶成分」を有効成
分として含有するキサンチンオキシダーゼ阻害剤。 - 【請求項５】 サルスベリ属に属するオオバナサルスベ
リ（Lagerstroemia speciosa）を、水、熱水、有機溶媒
又はこれらの少なくとも２種類からなる混合溶液を用い
て抽出し、得られた「粗抽出物」をスチレン−ジビニル
ベンゼン系合成樹脂又はデキストラン系合成樹脂に吸着
させ、得られた「樹脂吸着成分」を水と、クロロホル
ム、ヘキサン、酢酸エチル、ブタノールなどの有機溶媒
との分配操作で「有機溶媒可溶成分」を得、この「有機
溶媒可溶成分」を高速液体クロマトグラフィーで精製し
て得られるエラグ酸、エラグ酸誘導体、エラグ酸類似化
合物、リグナン類のいずれか、又はこれらの２以上の混
合物を有効成分として含有するキサンチンオキシダーゼ
阻害剤。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP09801199A JP3574001B2 (ja) | 1999-04-05 | 1999-04-05 | キサンチンオキシダーゼ阻害剤 |
| US10/013,351 US6589573B2 (en) | 1999-04-05 | 2001-12-13 | Xanthine oxidase inhibitor and method for producing the same |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP09801199A JP3574001B2 (ja) | 1999-04-05 | 1999-04-05 | キサンチンオキシダーゼ阻害剤 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2004019819A Division JP2004123761A (ja) | 2004-01-28 | 2004-01-28 | キサンチンオキシダーゼ阻害剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2000290188A true JP2000290188A (ja) | 2000-10-17 |
| JP3574001B2 JP3574001B2 (ja) | 2004-10-06 |
Family
ID=14207856
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP09801199A Expired - Lifetime JP3574001B2 (ja) | 1999-04-05 | 1999-04-05 | キサンチンオキシダーゼ阻害剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3574001B2 (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005350375A (ja) * | 2004-06-09 | 2005-12-22 | Kikkoman Corp | 血中尿酸値低下剤 |
| JP2006016340A (ja) * | 2004-07-02 | 2006-01-19 | Kikkoman Corp | ザクロ抽出物を有効成分とする、血中尿酸値低下剤 |
| JP2018131419A (ja) * | 2017-02-17 | 2018-08-23 | 国立大学法人宇都宮大学 | 血中尿酸値を低下させるための医薬および食品組成物 |
| CN110361474A (zh) * | 2019-08-02 | 2019-10-22 | 江苏红豆杉药业有限公司 | 一种别嘌醇的纯度检测方法 |
-
1999
- 1999-04-05 JP JP09801199A patent/JP3574001B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005350375A (ja) * | 2004-06-09 | 2005-12-22 | Kikkoman Corp | 血中尿酸値低下剤 |
| JP2006016340A (ja) * | 2004-07-02 | 2006-01-19 | Kikkoman Corp | ザクロ抽出物を有効成分とする、血中尿酸値低下剤 |
| JP2018131419A (ja) * | 2017-02-17 | 2018-08-23 | 国立大学法人宇都宮大学 | 血中尿酸値を低下させるための医薬および食品組成物 |
| CN110361474A (zh) * | 2019-08-02 | 2019-10-22 | 江苏红豆杉药业有限公司 | 一种别嘌醇的纯度检测方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3574001B2 (ja) | 2004-10-06 |
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