JP2000201651A - Production of gamma-aminobutyric acid and food containing gamma-aminobutyric acid - Google Patents
Production of gamma-aminobutyric acid and food containing gamma-aminobutyric acidInfo
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Abstract
Description
【０００１】[0001]
【発明の属する技術分野】本発明は、γ−アミノ酪酸の
生成方法及びγ−アミノ酪酸を含む食品に関するもので
ある。[0001] The present invention relates to a method for producing γ-aminobutyric acid and a food containing γ-aminobutyric acid.
【０００２】[0002]
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】成人病
或いは生活習慣病とも呼ばれる高血圧症は、通院患者原
因の第１位（平成７年度「人口動態統計」）であるとと
もに、心疾患の基礎疾患として保健・医療上、大きな問
題になっている。高血圧患者は高齢者社会の今後の進行
とともに益々増加する傾向にあると考えられるが、医療
費の削減が叫ばれる中、疾病治療に加え、「病気になら
ない」ことを主眼においた予防法の確立もまた極めて重
要である。こうした状況の中で、食品のもつ生体調節機
能に着目し、積極的にこれを疾病の治療や予防に利用し
ようとする動きが近年高まっており、高血圧症もそのタ
ーゲットのひとつになっている。2. Description of the Related Art Hypertension, also called adult disease or lifestyle-related disease, is the leading cause of outpatients ("Vital Statistics" in fiscal 1995) and the basis of heart disease. It is a major problem in health and medical care as a disease. It is thought that the number of hypertensive patients tends to increase with the progress of the aging society. Is also very important. Under these circumstances, there has been an increasing trend in recent years to pay attention to the biological regulation function of foods and actively use it for treatment and prevention of diseases, and hypertension is one of the targets.
【０００３】ところで、γ−アミノ酪酸は神経伝達物質
として作用する非タンパク質性アミノ酸であり、生体内
ではグルタミン酸脱炭酸酵素によってグルタミン酸から
生合成される。このγ−アミノ酪酸に血圧降下作用（Ta
kahasi, et al., Jap. J. Physiol.（1955））があるこ
とや高血圧症において血圧調節に有効であること（Chal
mers, et al., J. Hypertens. （1992））は動物実験結
果から既に広く知られている。このγ−アミノ酪酸の血
圧降下作用には一定の制限があり、必要量以上を投与し
ても正常血圧以下になることはないことから、安全性の
点でも非常に優れた機能性成分と考えられる。従って、
γ−アミノ酪酸は血圧降下作用と言うよりも、血圧上昇
抑制作用と呼ぶべき生理機能を有するアミノ酸であり、
この特性を生かした製品も「ギャバロン茶」等として既
に上市されている。[0003] By the way, γ-aminobutyric acid is a non-protein amino acid that acts as a neurotransmitter, and is biosynthesized from glutamic acid in vivo by glutamate decarboxylase. The blood pressure lowering effect (Ta
kahasi, et al., Jap. J. Physiol. (1955)) and that it is effective in controlling blood pressure in hypertension (Chal
mers, et al., J. Hypertens. (1992)) are already widely known from the results of animal experiments. This blood pressure lowering effect of γ-aminobutyric acid has a certain limitation, and it does not fall below normal blood pressure even if it is administered in a required amount or more, so it is considered to be a very excellent functional component also in terms of safety. Can be Therefore,
γ-aminobutyric acid is an amino acid having a physiological function that should be called an antihypertensive effect rather than an antihypertensive effect,
Products that take advantage of this property are already on the market as "Gabalon tea" and the like.
【０００４】このγ−アミノ酪酸を食品に応用するため
に、これを天然物に求めようとする試みは前述の「ギャ
バロン茶」以外にも多くの例がある。例えば、米胚芽の
水浸漬によるγ−アミノ酪酸の蓄積・生産（特開平７−
２１３２５２号）、柑橘系果実からのγ−アミノ酪酸抽
出（特開平１０−２１５８１２号）、植物由来グルタミ
ン酸脱炭酸酵素によるγ−アミノ酪酸の生産（特公平７
−１２２９６号）、乳酸菌によるγ−アミノ酪酸の生産
（特開平７−２２７２４５号）若しくは麹菌によるγ−
アミノ酪酸の生産（特開平１０−１６５１９１号）など
である。しかしながら、広範な食品に利用可能な機能性
食品素材を得るという目的からすると、上記方法には、
（１）生産工程が複雑、或いは長時間かかる、（２）得
られるγ−アミノ酪酸が比較的低濃度であるため機能性
を発揮させるには大量摂取が必要であり、利用者に多大
な負担をかける、（３）特定の食品との関連性が高いた
め、幅広い応用が困難である、等の欠点がありいずれも
十分なものとはいえない。[0004] In order to apply γ-aminobutyric acid to foods, there have been many examples of attempts to find natural γ-aminobutyric acid besides the above-mentioned “Gabalon tea”. For example, accumulation and production of γ-aminobutyric acid by immersing rice germ in water (Japanese Unexamined Patent Publication No.
No. 21252), extraction of γ-aminobutyric acid from citrus fruits (Japanese Patent Laid-Open No. 10-215812), production of γ-aminobutyric acid by plant-derived glutamate decarboxylase (Japanese Patent Publication No. Hei 7 (1994)).
-12296), production of γ-aminobutyric acid by lactic acid bacteria (JP-A-7-227245) or γ-aminobutyric acid by
Production of aminobutyric acid (JP-A-10-165191). However, for the purpose of obtaining a functional food material that can be used for a wide range of foods, the above methods include:
(1) The production process is complicated or it takes a long time. (2) Since the obtained γ-aminobutyric acid has a relatively low concentration, a large amount of ingestion is required to exert its function, and a great burden is imposed on the user. And (3) it has high relevance to specific foods, making it difficult to apply it to a wide range of applications.
【０００５】また、上記方法の内、特開平７−２１３２
５２号に開示された技術においては、γ−アミノ酪酸は
米胚芽内在のグルタミン酸からグルタミン酸脱炭酸酵素
の作用によって生成される為、γ−アミノ酪酸の生成量
は胚芽中のグルタミン酸の量に規制されてしまう。ま
た、胚芽中の蛋白質から蛋白質分解酵素の作用によって
グルタミン酸が生成され、このグルタミン酸からもγ−
アミノ酪酸が生成されるが、それでもγ−アミノ酪酸の
生成量は胚芽１００ｇあたり４００ｍｇ程度である。Further, of the above methods, Japanese Patent Application Laid-Open No. 7-2132
In the technique disclosed in No. 52, since γ-aminobutyric acid is produced from glutamate in rice germ by the action of glutamate decarboxylase, the amount of γ-aminobutyric acid produced is regulated by the amount of glutamic acid in the germ. Would. Glutamic acid is produced from the protein in the embryo by the action of proteolytic enzymes, and γ-
Although aminobutyric acid is produced, the production amount of γ-aminobutyric acid is still about 400 mg per 100 g of embryos.
【０００６】本発明は、上記問題点に鑑みてなされたも
ので、γ−アミノ酪酸の血圧上昇抑制作用を幅広い食品
に応用するため、大量のγ−アミノ酪酸を高濃度、安
全、安価、簡便に製造することができる実用性に秀れた
技術を提供するものである。The present invention has been made in view of the above-mentioned problems. In order to apply the effect of suppressing the increase in blood pressure of γ-aminobutyric acid to a wide range of foods, a large amount of γ-aminobutyric acid is safe, inexpensive, and simple. It is intended to provide a technology with excellent practicality that can be manufactured.
【０００７】[0007]
【課題を解決するための手段】本発明の要旨を説明す
る。The gist of the present invention will be described.
【０００８】米胚芽，胚芽を含む米糠若しくは胚芽米の
少なくとも１種に、グルタミン酸若しくはグルタミン酸
の塩を含む溶液を添加して反応させ、該添加溶液中のグ
ルタミン酸と前記米胚芽，胚芽を含む米糠若しくは胚芽
米中のグルタミン酸とを、前記米胚芽，胚芽を含む米糠
若しくは胚芽米中のグルタミン酸脱炭酸酵素の酵素作用
によりγ−アミノ酪酸とすることを特徴とするγ−アミ
ノ酪酸の生成方法に係るものである。A solution containing glutamic acid or a salt of glutamic acid is added to and reacted with at least one of rice germ, rice bran containing germ or germ rice, and glutamate in the added solution is reacted with rice bran containing said rice germ or germ. A method for producing γ-aminobutyric acid, wherein glutamic acid in germ rice is converted into γ-aminobutyric acid by enzymatic action of glutamate decarboxylase in the rice germ, rice bran containing germ or germ rice It is.
【０００９】また、請求項１記載のγ−アミノ酪酸の生
成方法において、グルタミン酸濃度を５０ミリモル／リ
ットル以上に設定したことを特徴とするγ−アミノ酪酸
の生成方法に係るものである。[0009] The method of producing γ-aminobutyric acid according to claim 1 is characterized in that the glutamic acid concentration is set to 50 mmol / L or more.
【００１０】また、請求項１，２いずれか１項に記載の
γ−アミノ酪酸の生成方法において、反応系にピリドキ
サルリン酸を添加することを特徴とするγ−アミノ酪酸
の生成方法に係るものである。A method for producing γ-aminobutyric acid according to any one of claims 1 and 2, wherein pyridoxalic acid is added to the reaction system. is there.
【００１１】また、請求項１〜３いずれか１項に記載の
γ−アミノ酪酸の生成方法において、反応系に２−モル
フォリノエタンスルホン酸を添加することを特徴とする
γ−アミノ酪酸の生成方法に係るものである。[0011] The method for producing γ-aminobutyric acid according to any one of claims 1 to 3, wherein 2-morpholinoethanesulfonic acid is added to the reaction system. Pertains to the method.
【００１２】また、請求項１〜４いずれか１項に記載の
γ−アミノ酪酸の生成方法により製造されたγ−アミノ
酪酸が添加されていることを特徴とするγ−アミノ酪酸
を含む食品に係るものである。A food containing γ-aminobutyric acid to which γ-aminobutyric acid produced by the method for producing γ-aminobutyric acid according to any one of claims 1 to 4 is added. It is related.
【００１３】[0013]
【発明の作用及び効果】本発明は繰り返した実験により
得られた作用効果を請求項としてまとめたものである。The present invention summarizes the effects obtained by repeated experiments as claims.
【００１４】精米過程で大量に排出され安価に入手が可
能である米胚芽，胚芽を含む米糠若しくは胚芽米をグル
タミン酸脱炭酸酵素源とし、このグルタミン酸脱炭酸酵
素により、添加した溶液中のグルタミン酸及び前記米胚
芽，胚芽を含む米糠若しくは胚芽米中のグルタミン酸を
反応させると、大量のγ−アミノ酪酸が得られることに
なる。即ち、γ−アミノ酪酸の元になるグルタミン酸
は、前記米胚芽，胚芽を含む米糠若しくは胚芽米中のグ
ルタミン酸のみならず、添加される溶液中のグルタミン
酸からも供給される為、十分なγ−アミノ酪酸を生成で
きることになる。また、添加する溶液中のグルタミン酸
濃度を順次増大させると、50ミリモル／リットル以下で
はγ−アミノ酪酸の生成速度の上昇は急激であり、50ミ
リモル／リットル以上ではγ−アミノ酪酸の生成速度の
上昇がなだらかとなることを実験により見い出した（図
１参照）。従って、γ−アミノ酪酸の生成速度を効率的
にする為のグルタミン酸濃度の臨界数値は50ミリモル／
リットルであることを確認した。Rice germ, rice bran or germ rice including germ, which is discharged in large quantities during the rice polishing process and can be obtained at low cost, is used as a source of glutamate decarboxylase. When glutamic acid in rice germ, rice bran containing germ or germ rice is reacted, a large amount of γ-aminobutyric acid is obtained. That is, since glutamic acid as a source of γ-aminobutyric acid is supplied not only from glutamic acid in the rice germ, rice bran containing germ or germ rice but also from glutamic acid in a solution to be added, sufficient γ-aminobutyric acid is obtained. Butyric acid can be produced. When the concentration of glutamic acid in the solution to be added is sequentially increased, the rate of formation of γ-aminobutyric acid is sharply increased at 50 mmol / L or less, and increased at 50 mmol / L or more. It was found by experiment that the surface became smooth (see FIG. 1). Therefore, the critical value of the glutamic acid concentration for making the production rate of γ-aminobutyric acid efficient is 50 mmol / mol.
Liters.
【００１５】また、反応系にピリドキサルリン酸を添加
するとγ−アミノ酪酸の生成量が増大することを実験に
より見い出した（図２参照）。Further, it was found by experiments that addition of pyridoxal phosphoric acid to the reaction system increased the amount of γ-aminobutyric acid produced (see FIG. 2).
【００１６】また、反応系は前記特開平７−２１３２５
２号に開示されているようにｐＨを調整した方が良い
が、このｐＨ調整用の酸として２−モルフォリノエタン
スルホン酸（２−morpholinoethanesulfonic acid; 以
下、ＭＥＳという。）を使用した場合にγ−アミノ酪酸
の生成量が増大することを実験により見い出した（図３
参照）。従って、ｐＨ調整用の酸としてはＭＥＳが最適
であることを確認した。本発明は上述のようにするか
ら、大量のγ−アミノ酪酸を高濃度、安全、安価、簡便
に製造することができる実用性に秀れた技術となる。The reaction system is the same as that described in the above-mentioned JP-A-7-21325.
It is better to adjust the pH as disclosed in No. 2, but when 2-morpholinoethanesulfonic acid (hereinafter referred to as MES) is used as the acid for adjusting the pH, γ is used. It was found by experiments that the production of aminobutyric acid increased (FIG. 3).
reference). Therefore, it was confirmed that MES was the most suitable acid for pH adjustment. The present invention, as described above, is a highly practical technique capable of easily producing a large amount of γ-aminobutyric acid at a high concentration, safely, inexpensively, and easily.
【００１７】また、γ−アミノ酪酸を含む食品素材や栄
養食品等の食品を簡便かつ効率的に製造することがで
き、製造した食品素材や栄養食品を、高血圧患者の食事
療法のみならず、高血圧予防のための栄養食品としても
利用することができる実用性に秀れた技術となる。Furthermore, food materials containing γ-aminobutyric acid and foods such as nutritional foods can be easily and efficiently manufactured, and the manufactured food materials and nutritional foods can be used not only in the diet therapy of hypertensive patients but also in hypertensive patients. This is a highly practical technology that can be used as a nutritional food for prevention.
【００１８】また、米胚芽や胚芽を含む米糠は精米過程
の副産物として大量に生じており、その処分に苦慮して
いるのが現状である。従って、本発明は、米胚芽や米糠
という未利用資源を有効に活用できる方法として、廃棄
物処理にも貢献することができる。In addition, rice germ and rice bran containing germ are produced in large quantities as a by-product of the rice milling process, and it is currently difficult to dispose of the rice germ and rice bran. Therefore, the present invention can also contribute to waste treatment as a method that can effectively utilize unused resources such as rice germ and rice bran.
【００１９】[0019]
【発明の実施の形態】本発明の実施例について、以下説
明する。Embodiments of the present invention will be described below.
【００２０】本実施例は、グルタミン酸脱炭酸酵素を含
む天然物に、グルタミン酸若しくはグルタミン酸の塩
（グルタミン酸ナトリウム等）を含む溶液を添加して反
応させ、該添加溶液中のグルタミン酸と前記天然物中の
グルタミン酸とを、前記天然物中のグルタミン酸脱炭酸
酵素の酵素作用によりγ−アミノ酪酸とするものであ
る。In this embodiment, a solution containing glutamic acid or a salt of glutamic acid (such as sodium glutamate) is added to a natural product containing glutamic acid decarboxylase to cause a reaction, and glutamic acid in the added solution is reacted with glutamic acid in the natural product. Glutamic acid is converted into γ-aminobutyric acid by the enzymatic action of glutamate decarboxylase in the natural product.
【００２１】グルタミン酸脱炭酸酵素を含む天然物とし
ては米胚芽を使用する。尚、米胚芽の米の品種は制限さ
れない。また、米胚芽を単独で用いる方が望ましいが、
胚芽を含む米糠や胚芽米も米胚芽と同様に利用すること
ができる。これら米胚芽，米糠，胚芽米は、通常の精米
機と適当なふるいを用いることで容易に調製可能であ
る。さらには、米胚芽，米糠，胚芽米からグルタミン酸
脱炭酸酵素を抽出或いは精製し、これを懸濁・溶解また
は固定化したものを用いることも可能である。Rice germ is used as a natural product containing glutamate decarboxylase. In addition, rice varieties of rice germ are not limited. It is also preferable to use rice germ alone,
Rice bran and germ rice including germ can be used similarly to rice germ. These rice germ, rice bran, and germ rice can be easily prepared by using an ordinary rice mill and a suitable sieve. Further, glutamate decarboxylase may be extracted or purified from rice germ, rice bran, or germ rice, and then suspended, dissolved or immobilized.
【００２２】反応溶液中のグルタミン酸或いはグルタミ
ン酸の塩の量は、γ−アミノ酪酸の希望生産量や触媒源
となる米胚芽，胚芽を含む米糠若しくは胚芽米の使用量
に基づいて決定すればよいが、好ましくは50ミリモル／
リットル以上に設定する（後記実験例１及び図１参
照）。グルタミン酸或いはグルタミン酸の塩は、精製或
いは抽出標品を用いてもよいが、各種蛋白質（ダイズ蛋
白質等）から酵素分解によっても生産できるので、蛋白
質と蛋白質分解酵素を併用した系を利用することもでき
る。The amount of glutamic acid or a salt of glutamic acid in the reaction solution may be determined based on the desired production amount of γ-aminobutyric acid and the amount of rice germ, rice bran including germ or germ rice used as a catalyst source. , Preferably 50 mmol /
It is set to liter or more (see Experimental Example 1 and FIG. 1 described later). Glutamic acid or a salt of glutamic acid may be purified or extracted, but can also be produced from various proteins (such as soybean proteins) by enzymatic degradation. Therefore, a system using both a protein and a protease can be used. .
【００２３】反応条件は、ｐＨは3.0〜7.0、好ましくは
5.5〜6.5とすると良い。また、温度は10〜50℃、好まし
くは35〜40℃とすると良い。The reaction conditions are such that the pH is 3.0 to 7.0, preferably
A good value is 5.5 to 6.5. The temperature is preferably 10 to 50 ° C, preferably 35 to 40 ° C.
【００２４】ｐＨ調製に用いる酸は無機酸と有機酸のい
ずれも使用可能である。無機酸を例示すると塩酸、硫酸
などである。また有機酸にはクエン酸、リンゴ酸、2−
モルフォリノエタンスルホン酸（2−morpholinoethanes
ulfonic acid；ＭＥＳ）等が使用可能であるが、後記実
験例３及び図３に示すように、有機酸の種類によってγ
−アミノ酪酸の生産量が大きく異なるので、有機酸の場
合は好ましくはＭＥＳを使用する。As the acid used for adjusting the pH, either an inorganic acid or an organic acid can be used. Examples of the inorganic acid include hydrochloric acid and sulfuric acid. Organic acids include citric acid, malic acid, 2-
Morpholinoethanesulfonic acid (2-morpholinoethanes
ulfonic acid (MES) and the like can be used, but as shown in Experimental Example 3 and FIG.
MES is preferably used in the case of organic acids, since the production of aminobutyric acid varies greatly.
【００２５】ｐＨ調整用アルカリとしては、水酸化ナト
リウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム等が用いら
れるが、当然、これに限るものではない。As the pH adjusting alkali, sodium hydroxide, potassium hydroxide, calcium hydroxide or the like is used, but is not limited thereto.
【００２６】この条件で反応を行ってもある程度多量の
γ−アミノ酪酸を製造できるが（胚芽100ｇあたり約３
ｇのγ−アミノ酪酸を生成することができる）、γ−ア
ミノ酪酸の生成速度を早めて最大限の製造効率を得るた
めには、後記実験例２及び図２に示すごとく、ピリドキ
サルリン酸を加える方が望ましい。Even if the reaction is carried out under these conditions, a certain amount of γ-aminobutyric acid can be produced (about 3 g / 100 g of embryo).
g of .gamma.-aminobutyric acid), and in order to obtain the maximum production efficiency by increasing the rate of .gamma.-aminobutyric acid, pyridoxalic acid is added as shown in Experimental Example 2 and FIG. Is more desirable.
【００２７】ピリドキサルリン酸の量は生産したいγ−
アミノ酪酸の量や希望とする基質転換率（反応開始時に
反応液に存在するグルタミン酸量のうち、γ−アミノ酪
酸に転換されたものの量比）に基づいて決定すればよい
が、好ましくはグルタミン酸或いはグルタミン酸の塩と
ピリドキサルリン酸のモル比が、100（グルタミン酸或
いはグルタミン酸の塩）:１（ピリドキサルリン酸）〜
2,000（グルタミン酸或いはグルタミン酸の塩）：１
（ピリドキサルリン酸）になるようにする。The amount of pyridoxal phosphate is determined by the amount of γ-
It may be determined based on the amount of aminobutyric acid and the desired substrate conversion rate (the ratio of the amount of glutamic acid present in the reaction solution at the start of the reaction converted to γ-aminobutyric acid), but is preferably glutamic acid or The molar ratio of glutamic acid salt to pyridoxalic acid is from 100 (glutamic acid or glutamic acid salt): 1 (pyridoxalic acid)
2,000 (glutamic acid or glutamic acid salt): 1
(Pyridoxal phosphate).
【００２８】ピリドキサルリン酸は精製或いは抽出標品
が利用可能であるし、また、ピリドキサルリン酸はビタ
ミンＢ６の活性成分のひとつとして広範な生物材料に含
まれるので、これらをピリドキサルリン酸源として利用
することもできる。また、ピリドキサルリン酸はピリド
キサルをリン酸化することでも合成できるので、ピリド
キサルからの合成系を併用してもよい。Pyridoxal phosphate can be used as a purified or extracted preparation, and since pyridoxal phosphate is contained in a wide range of biological materials as one of the active ingredients of vitamin B6, it can be used as a pyridoxal phosphate source. it can. Further, since pyridoxal phosphate can be synthesized by phosphorylating pyridoxal, a synthesis system from pyridoxal may be used in combination.
【００２９】本実施例は上述のようにするから、大量の
γ−アミノ酪酸を簡便かつ安価に製造することが可能に
なる。また、使用する材料は米胚芽，胚芽を含む米糠若
しくは胚芽米、アミノ酸であるグルタミン酸やその塩、
ビタミンＢ６の活性成分であるピリドキサルリン酸、ｐ
Ｈ調製用の酸やアルカリであり、いずれの成分も食品に
用いた場合に有害作用を及ぼすものでないため、反応液
からの懸濁物除去、脱色、必要に応じて脱塩、などの簡
単な調整操作を行うのみで食品素材として供給すること
ができる。Since this embodiment is as described above, a large amount of γ-aminobutyric acid can be easily and inexpensively produced. The materials used are rice germ, rice bran or germ rice including germ, amino acid glutamic acid and its salts,
Pyridoxal phosphate, an active ingredient of vitamin B6, p
H is an acid or alkali for the preparation of H. Since none of the components has any harmful effects when used in foods, simple methods such as removal of suspended matter from the reaction solution, decolorization, and desalting as necessary It can be supplied as a food material only by performing an adjustment operation.
【００３０】また、高度な精製標品が必要な場合は、イ
オン交換クロマトグラフィーなどの常法を用いることで
γ−アミノ酪酸の簡易精製が可能である。得られた標品
は高濃度のγ−アミノ酪酸を含むため、少量の標品を摂
取、或いは食品中に混和するだけで血圧上昇抑制作用が
期待できる。このように、本実施例によって生産したγ
−アミノ酪酸液は食品素材として、また、栄養食品とし
て有効である。When a highly purified preparation is required, γ-aminobutyric acid can be easily purified by using a conventional method such as ion exchange chromatography. Since the obtained sample contains a high concentration of γ-aminobutyric acid, the effect of suppressing blood pressure increase can be expected only by ingesting a small amount of the sample or mixing it with food. Thus, γ produced according to this example
-The aminobutyric acid solution is effective as a food material and as a nutritional food.
【００３１】以下、本実施例の作用効果を裏付ける実験
例について述べる。Hereinafter, an experimental example supporting the operation and effect of this embodiment will be described.
【００３２】実験例１ コシヒカリから調整した胚芽0.2ｇを、3.0ミリリットル
のグルタミン酸ナトリウム−20マイクロモル／リットル
ピリドキサルリン酸−0.1モル／リットル ＭＥＳ混合
溶液（ｐＨ5.5）に懸濁し、40℃で反応させた。グルタ
ミン酸濃度は図１に示した濃度となるように調整した。
30分後にトリクロロ酢酸水溶液を８％濃度となるように
加えて反応を停止させた。反応溶液中のグルタミン酸と
γ−アミノ酪酸の濃度を、ο−フタルアルデヒドで蛍光
標識した後、ＨＰＬＣで分析することにより定量し、図
１を得た。EXPERIMENTAL EXAMPLE 1 0.2 g of germ prepared from Koshihikari was suspended in 3.0 ml of a mixed solution of sodium glutamate-20 μmol / liter pyridoxalic acid-0.1 mol / liter MES (pH 5.5) and reacted at 40 ° C. Was. Glutamic acid concentration was adjusted to the concentration shown in FIG.
After 30 minutes, the reaction was stopped by adding an aqueous solution of trichloroacetic acid to a concentration of 8%. The concentrations of glutamic acid and γ-aminobutyric acid in the reaction solution were fluorescently labeled with o-phthalaldehyde, and then quantified by HPLC analysis to obtain FIG.
【００３３】図１より、γ−アミノ酪酸の生成速度はグ
ルタミン酸濃度に依存することが判明した。また、グル
タミン酸濃度がある程度以上となると、γ−アミノ酪酸
の生成速度の上昇がにぶる為、γ−アミノ酪酸を生成す
る条件はグルタミン酸濃度が50ミリモル／リットル以上
であることが望ましいことが判明した。From FIG. 1, it was found that the production rate of γ-aminobutyric acid depends on the glutamic acid concentration. In addition, when the concentration of glutamic acid becomes a certain level or more, the rate of production of γ-aminobutyric acid increases, so it was found that the condition for producing γ-aminobutyric acid is desirably a glutamic acid concentration of 50 mmol / L or more. .
【００３４】実験例２ コシヒカリから調整した胚芽0.2ｇを、3.0ミリリットル
の100ミリモル／リットル グルタミン酸ナトリウム−0.
1モル／リットル ＭＥＳ混合溶液（ｐＨ5.5）に懸濁
し、必要に応じてピリドキサルリン酸を50マイクロモル
／リットルとなるように添加し、40℃で反応させた。所
定時間後にトリクロロ酢酸水溶液を８％濃度となるよう
に加えて反応を停止させた。反応溶液中のグルタミン酸
とγ−アミノ酪酸の濃度を、ο−フタルアルデヒドで蛍
光標識した後、ＨＰＬＣで分析することにより定量し、
図２を得た。EXPERIMENTAL EXAMPLE 2 3.0 g of 100 g / l sodium glutamate-0.2 g of germ prepared from Koshihikari was used.
The mixture was suspended in a 1 mol / liter MES mixed solution (pH 5.5), and pyridoxal phosphoric acid was added to the mixture at 50 μmol / liter as needed, and reacted at 40 ° C. After a predetermined time, the reaction was stopped by adding an aqueous solution of trichloroacetic acid to a concentration of 8%. The concentrations of glutamic acid and γ-aminobutyric acid in the reaction solution were quantified by fluorescently labeling with o-phthalaldehyde and then analyzing by HPLC,
FIG. 2 is obtained.
【００３５】図２より、γ−アミノ酪酸の生成速度はピ
リドキサルリン酸により速められることが反面した。FIG. 2 shows that the production rate of γ-aminobutyric acid can be increased by pyridoxal phosphate.
【００３６】実験例３ コシヒカリから調整した胚芽0.2ｇを、3.0ミリリットル
の100ミリモル グルタミン酸ナトリウム−50マイクロモ
ル ピリドキサルリン酸及び図３に示す各有機酸を含む
混合溶液（ｐＨ5.5）に懸濁し、40℃で反応させた。所
定時間後にトリクロロ酢酸水溶液を８％濃度となるよう
に加えて反応を停止させた。反応溶液中のグルタミン酸
とγ−アミノ酪酸の濃度を、ο−フタルアルデヒドで蛍
光標識した後、ＨＰＬＣで分析することにより定量し、
図３を得た。Experimental Example 3 0.2 g of germ prepared from Koshihikari was suspended in 3.0 ml of a mixed solution (pH 5.5) containing 100 mM sodium glutamate-50 μmol pyridoxal phosphoric acid and each of the organic acids shown in FIG. The reaction was carried out at ℃. After a predetermined time, the reaction was stopped by adding an aqueous solution of trichloroacetic acid to a concentration of 8%. The concentrations of glutamic acid and γ-aminobutyric acid in the reaction solution were quantified by fluorescently labeling with o-phthalaldehyde and then analyzing by HPLC,
FIG. 3 is obtained.
【００３７】図３より、γ−アミノ酪酸の生成速度は有
機酸の種類に依存することが判明した。また、ＭＥＳが
最も好適であることが判明した。From FIG. 3, it was found that the production rate of γ-aminobutyric acid depends on the type of the organic acid. Also, MES was found to be the most suitable.
【００３８】以上、実験例１〜３の結果により、γ−ア
ミノ酪酸を効率的に生成する際には、 グルタミン酸濃度を50ミリモル／リットル以上とす
る、 反応系にピリドキサルリン酸を添加する、 ｐＨ調整用の有機酸としてＭＥＳを選択する、 の各方法を採用すると良いことが判明した。As described above, according to the results of Experimental Examples 1 to 3, when γ-aminobutyric acid is efficiently produced, the concentration of glutamic acid is adjusted to 50 mmol / L or more, pyridoxal phosphoric acid is added to the reaction system, and the pH is adjusted. It has been found that each method of selecting MES as an organic acid for use is preferably employed.
【００３９】以下、上記実験例１〜３の結果をふまえた
本実施例の具体的な実験例について述べる。Hereinafter, a specific experimental example of the present embodiment based on the results of Experimental Examples 1 to 3 will be described.
【００４０】実験例４ コシヒカリから調整した胚芽11ｇを100ミリリットルの
0.36モル／リットル グルタミン酸カリウム−0.3モル／
リットル ＭＥＳの混合溶液（ｐＨ5.5）に懸濁し、ピリ
ドキサルリン酸1.7ｍｇを加え、温度40℃で６時間、遮
光下で反応させた。反応開始から１時間ごとにピリドキ
サルリン酸1.7ｍｇを追加添加した。また、１時間ごと
にｐＨを測定し、5.5〜6.0の範囲内となるように0.1モ
ル／リットル 塩酸を添加した。グルタミン酸とγ−ア
ミノ酪酸の濃度は、ο−フタルアルデヒドで蛍光標識し
た後、ＨＰＬＣで分析することにより定量した。Experimental Example 4 11 g of germ prepared from Koshihikari was added to 100 ml of
0.36 mol / liter potassium glutamate-0.3 mol /
The suspension was suspended in a mixed solution of 1 MES (pH 5.5), 1.7 mg of pyridoxal phosphoric acid was added, and the mixture was reacted at 40 ° C. for 6 hours under light shielding. An additional 1.7 mg of pyridoxal phosphoric acid was added every hour from the start of the reaction. The pH was measured every hour, and 0.1 mol / liter hydrochloric acid was added so as to be in the range of 5.5 to 6.0. The concentrations of glutamic acid and γ-aminobutyric acid were quantified by fluorescently labeling with o-phthalaldehyde and then analyzing by HPLC.
【００４１】実験結果を図４に示す。FIG. 4 shows the experimental results.
【００４２】図４より、６時間の反応によって、最初に
添加したグルタミン酸の82％以上をγ−アミノ酪酸に転
換できることが判明した。このときのγ−アミノ酪酸生
産量は3.1ｇで、胚芽100ｇ当たりにすると28.3ｇものγ
−アミノ酪酸を生産することが確認された。From FIG. 4, it was found that by reacting for 6 hours, more than 82% of the glutamic acid initially added can be converted to γ-aminobutyric acid. The amount of γ-aminobutyric acid produced at this time is 3.1 g, which is 28.3 g of γ per 100 g of germ.
-Production of aminobutyric acid was confirmed.
【００４３】米胚芽の水浸漬によるγ−アミノ酪酸の生
産量は約0.4〜0.5ｇ/100ｇ胚芽であると報告されている
ので（特開平７−２１３２５２号）、実験例４における
γ−アミノ酪酸生産効率は従来法の５０倍以上と推定で
きる。It has been reported that the amount of γ-aminobutyric acid produced by immersing rice germ in water is about 0.4 to 0.5 g / 100 g germ (Japanese Patent Application Laid-Open No. 7-213252). The production efficiency can be estimated to be 50 times or more of the conventional method.
【００４４】また、血圧上昇抑制作用に必要なγ−アミ
ノ酪酸の摂取量は、動物実験から推定すると１回あたり
0.5〜1ｇ程度と考えられるが（Y. Abe, et al., Am. J.
Hypertens., （1995））、これを実験例４の反応液量
に換算すると約16〜32ミリリットルとなり、わずかな量
を摂取するだけで血圧上昇抑制作用が期待できることが
わかる。In addition, the amount of γ-aminobutyric acid required for suppressing the increase in blood pressure is estimated to be
It is considered to be about 0.5 to 1 g (Y. Abe, et al., Am. J.
Hypertens., (1995)), which is about 16 to 32 ml when converted to the amount of the reaction solution in Experimental Example 4, indicating that the effect of suppressing blood pressure elevation can be expected by ingesting a small amount.
【００４５】実験例５ コシヒカリから調整した胚芽125ｇを、0.4モル／リット
ル グルタミン酸ナトリウム（ｐＨ5.5）溶液１リットル
に懸濁し、ピリドキサルリン酸36.3ｍｇを加え、40℃で
６時間、250ｒｐｍで撹拌しながら反応させた。反応開
始から１時間ごとにピリドキサルリン酸36.3ｍｇを追加
添加した。反応はバイオリアクターTBR‐2システム（千
代田製作所）を用いて実施し、反応ｐＨはｐＨコントロ
ーラ（千代田製作所製ＴＢＣ−ｐＨ−β）を使用して１
Ｎ− ＨＣｌにより5.5〜5.6でコントロールした。グル
タミン酸とγ−アミノ酪酸の濃度は、ο−フタルアルデ
ヒドで蛍光標識した後、ＨＰＬＣで分析することにより
定量した。Experimental Example 5 125 g of embryos prepared from Koshihikari were suspended in 1 liter of a 0.4 mol / l sodium glutamate (pH 5.5) solution, 36.3 mg of pyridoxal phosphoric acid was added, and the mixture was stirred at 250 rpm at 40 ° C. for 6 hours at 250 rpm. Reacted. Every hour after the start of the reaction, 36.3 mg of pyridoxal phosphoric acid was additionally added. The reaction was carried out using a bioreactor TBR-2 system (Chiyoda Seisakusho), and the reaction pH was adjusted to 1 using a pH controller (Chiyoda Seisakusho TBC-pH-β).
It was controlled at 5.5 to 5.6 with N-HCl. The concentrations of glutamic acid and γ-aminobutyric acid were quantified by fluorescently labeling with o-phthalaldehyde and then analyzing by HPLC.
【００４６】実験結果を図５に示す。FIG. 5 shows the experimental results.
【００４７】図５より、６時間の反応によって、最初に
添加したグルタミン酸の87.9％をγ−アミノ酪酸に転換
できることが判明した。このときのγ−アミノ酪酸生産
量は36.3ｇで、胚芽100ｇ当たりにすると29.0ｇものγ
−アミノ酪酸を生産することが確認された。From FIG. 5, it was found that 87.9% of the glutamic acid initially added can be converted to γ-aminobutyric acid by the reaction for 6 hours. At this time, the production amount of γ-aminobutyric acid is 36.3 g, which is 29.0 g of γ per 100 g of germ.
-Production of aminobutyric acid was confirmed.
【図１】実験例１におけるグルタミン酸濃度の影響を示
したグラフである。FIG. 1 is a graph showing the influence of glutamic acid concentration in Experimental Example 1.
【図２】実験例２におけるピリドキサルリン酸の影響を
示したグラフである。FIG. 2 is a graph showing the effect of pyridoxal phosphate in Experimental Example 2.
【図３】実験例３における有機酸の影響を示したグラフ
である。FIG. 3 is a graph showing the influence of an organic acid in Experimental Example 3.
【図４】実験例４におけるγ−アミノ酪酸の生成とグル
タミン酸の減少、ならびに添加したグルタミン酸からγ
−アミノ酪酸への転換率を示したグラフである。FIG. 4 shows the production of γ-aminobutyric acid and a decrease in glutamic acid in Experimental Example 4, and the production of γ-aminobutyric acid from added glutamic acid.
-It is the graph which showed the conversion rate to aminobutyric acid.
【図５】実験例５におけるγ−アミノ酪酸の生成とグル
タミン酸の減少、ならびに添加したグルタミン酸からγ
−アミノ酪酸への転換率を示したグラフである。FIG. 5: Production of γ-aminobutyric acid and reduction of glutamic acid in Experimental Example 5, and γ-aminobutyric acid from added glutamic acid
-It is the graph which showed the conversion rate to aminobutyric acid.
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【手続補正書】[Procedure amendment]
【提出日】平成１１年１月２７日（１９９９．１．２
７）[Submission date] January 27, 1999 (1999.1.2
7)
【手続補正１】[Procedure amendment 1]
【補正対象書類名】明細書[Document name to be amended] Statement
【補正対象項目名】全文[Correction target item name] Full text
【補正方法】変更[Correction method] Change
【補正内容】[Correction contents]
【書類名】 明細書[Document Name] Statement
【発明の名称】 γ−アミノ酪酸の生成方法及びγ−ア
ミノ酪酸を含む食品Title: Method for producing γ-aminobutyric acid and food containing γ-aminobutyric acid
【特許請求の範囲】[Claims]
【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
【０００１】[0001]
【発明の属する技術分野】本発明は、γ−アミノ酪酸の
生成方法及びγ−アミノ酪酸を含む食品に関するもので
ある。[0001] The present invention relates to a method for producing γ-aminobutyric acid and a food containing γ-aminobutyric acid.
【０００２】[0002]
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】成人病
或いは生活習慣病とも呼ばれる高血圧症は、通院患者原
因の第１位（平成７年度「人口動態統計」）であるとと
もに、心疾患の基礎疾患として保健・医療上、大きな問
題になっている。高血圧患者は高齢者社会の今後の進行
とともに益々増加する傾向にあると考えられるが、医療
費の削減が叫ばれる中、疾病治療に加え、「病気になら
ない」ことを主眼においた予防法の確立もまた極めて重
要である。こうした状況の中で、食品のもつ生体調節機
能に着目し、積極的にこれを疾病の治療や予防に利用し
ようとする動きが近年高まっており、高血圧症もそのタ
ーゲットのひとつになっている。2. Description of the Related Art Hypertension, also called adult disease or lifestyle-related disease, is the leading cause of outpatients ("Vital Statistics" in fiscal 1995) and the basis of heart disease. It is a major problem in health and medical care as a disease. It is thought that the number of hypertensive patients tends to increase with the progress of the aging society. Is also very important. Under these circumstances, there has been an increasing trend in recent years to pay attention to the biological regulation function of foods and actively use it for treatment and prevention of diseases, and hypertension is one of the targets.
【０００３】ところで、γ−アミノ酪酸は神経伝達物質
として作用する非タンパク質性アミノ酸であり、生体内
ではグルタミン酸脱炭酸酵素によってグルタミン酸から
生合成される。このγ−アミノ酪酸に血圧降下作用（Ta
kahasi, et al., Jap. J. Physiol.（1955））があるこ
とや高血圧症において血圧調節に有効であること（Chal
mers, et al., J. Hypertens. （1992））は動物実験結
果から既に広く知られている。このγ−アミノ酪酸の血
圧降下作用には一定の制限があり、必要量以上を投与し
ても正常血圧以下になることはないことから、安全性の
点でも非常に優れた機能性成分と考えられる。従って、
γ−アミノ酪酸は血圧降下作用と言うよりも、血圧上昇
抑制作用と呼ぶべき生理機能を有するアミノ酸であり、
この特性を生かした製品も「ギャバロン茶」等として既
に上市されている。[0003] By the way, γ-aminobutyric acid is a non-protein amino acid that acts as a neurotransmitter, and is biosynthesized from glutamic acid in vivo by glutamate decarboxylase. The blood pressure lowering effect (Ta
kahasi, et al., Jap. J. Physiol. (1955)) and that it is effective in controlling blood pressure in hypertension (Chal
mers, et al., J. Hypertens. (1992)) are already widely known from the results of animal experiments. This blood pressure lowering effect of γ-aminobutyric acid has a certain limitation, and it does not fall below normal blood pressure even if it is administered in a required amount or more, so it is considered to be a very excellent functional component also in terms of safety. Can be Therefore,
γ-aminobutyric acid is an amino acid having a physiological function that should be called an antihypertensive effect rather than an antihypertensive effect,
Products that take advantage of this property are already on the market as "Gabalon tea" and the like.
【０００４】このγ−アミノ酪酸を食品に応用するため
に、これを天然物に求めようとする試みは前述の「ギャ
バロン茶」以外にも多くの例がある。例えば、米胚芽の
水浸漬によるγ−アミノ酪酸の蓄積・生産（特開平７−
２１３２５２号）、柑橘系果実からのγ−アミノ酪酸抽
出（特開平１０−２１５８１２号）、植物由来グルタミ
ン酸脱炭酸酵素によるγ−アミノ酪酸の生産（特公平７
−１２２９６号）、乳酸菌によるγ−アミノ酪酸の生産
（特開平７−２２７２４５号）若しくは麹菌によるγ−
アミノ酪酸の生産（特開平１０−１６５１９１号）など
である。しかしながら、広範な食品に利用可能な機能性
食品素材を得るという目的からすると、上記方法には、
（１）生産工程が複雑、或いは長時間かかる、（２）得
られるγ−アミノ酪酸が比較的低濃度であるため機能性
を発揮させるには大量摂取が必要であり、利用者に多大
な負担をかける、（３）特定の食品との関連性が高いた
め、幅広い応用が困難である、等の欠点がありいずれも
十分なものとはいえない。[0004] In order to apply γ-aminobutyric acid to foods, there have been many examples of attempts to find natural γ-aminobutyric acid besides the above-mentioned “Gabalon tea”. For example, accumulation and production of γ-aminobutyric acid by immersing rice germ in water (Japanese Unexamined Patent Publication No.
No. 21252), extraction of γ-aminobutyric acid from citrus fruits (Japanese Patent Laid-Open No. 10-215812), production of γ-aminobutyric acid by plant-derived glutamate decarboxylase (Japanese Patent Publication No. Hei 7 (1994)).
-12296), production of γ-aminobutyric acid by lactic acid bacteria (JP-A-7-227245) or γ-aminobutyric acid by
Production of aminobutyric acid (JP-A-10-165191). However, for the purpose of obtaining a functional food material that can be used for a wide range of foods, the above methods include:
(1) The production process is complicated or it takes a long time. (2) Since the obtained γ-aminobutyric acid has a relatively low concentration, a large amount of ingestion is required to exert its function, and a great burden is imposed on the user. And (3) it has high relevance to specific foods, making it difficult to apply it to a wide range of applications.
【０００５】また、上記方法の内、特開平７−２１３２
５２号に開示された技術においては、γ−アミノ酪酸は
米胚芽内在のグルタミン酸からグルタミン酸脱炭酸酵素
の作用によって生成される為、γ−アミノ酪酸の生成量
は胚芽中のグルタミン酸の量に規制されてしまう。ま
た、胚芽中の蛋白質から蛋白質分解酵素の作用によって
グルタミン酸が生成され、このグルタミン酸からもγ−
アミノ酪酸が生成されるが、それでもγ−アミノ酪酸の
生成量は胚芽１００ｇあたり４００ｍｇ程度である。Further, of the above methods, Japanese Patent Application Laid-Open No. 7-2132
In the technique disclosed in No. 52, since γ-aminobutyric acid is produced from glutamate in rice germ by the action of glutamate decarboxylase, the amount of γ-aminobutyric acid produced is regulated by the amount of glutamic acid in the germ. Would. Glutamic acid is produced from the protein in the embryo by the action of proteolytic enzymes, and γ-
Although aminobutyric acid is produced, the production amount of γ-aminobutyric acid is still about 400 mg per 100 g of embryos.
【０００６】本発明は、上記問題点に鑑みてなされたも
ので、γ−アミノ酪酸の血圧上昇抑制作用を幅広い食品
に応用するため、大量のγ−アミノ酪酸を高濃度、安
全、安価、簡便に製造することができる実用性に秀れた
技術を提供するものである。The present invention has been made in view of the above-mentioned problems. In order to apply the effect of suppressing the increase in blood pressure of γ-aminobutyric acid to a wide range of foods, a large amount of γ-aminobutyric acid is safe, inexpensive, and simple. It is intended to provide a technology with excellent practicality that can be manufactured.
【０００７】[0007]
【課題を解決するための手段】本発明の要旨を説明す
る。The gist of the present invention will be described.
【０００８】米胚芽，胚芽を含む米糠若しくは胚芽米の
少なくとも１種に、グルタミン酸若しくはグルタミン酸
の塩を含む溶液を添加して反応させ、該添加溶液中のグ
ルタミン酸と前記米胚芽，胚芽を含む米糠若しくは胚芽
米中のグルタミン酸とを、前記米胚芽，胚芽を含む米糠
若しくは胚芽米中のグルタミン酸脱炭酸酵素の酵素作用
によりγ−アミノ酪酸とすることを特徴とするγ−アミ
ノ酪酸の生成方法に係るものである。A solution containing glutamic acid or a salt of glutamic acid is added to and reacted with at least one of rice germ, rice bran containing germ or germ rice, and glutamate in the added solution is reacted with rice bran containing said rice germ or germ. A method for producing γ-aminobutyric acid, wherein glutamic acid in germ rice is converted into γ-aminobutyric acid by enzymatic action of glutamate decarboxylase in the rice germ, rice bran containing germ or germ rice It is.
【０００９】また、請求項１記載のγ−アミノ酪酸の生
成方法において、グルタミン酸濃度を５０ミリモル／リ
ットル以上に設定したことを特徴とするγ−アミノ酪酸
の生成方法に係るものである。[0009] The method of producing γ-aminobutyric acid according to claim 1 is characterized in that the glutamic acid concentration is set to 50 mmol / L or more.
【００１０】また、請求項１，２いずれか１項に記載の
γ−アミノ酪酸の生成方法において、反応系にピリドキ
サルリン酸を添加することを特徴とするγ−アミノ酪酸
の生成方法に係るものである。A method for producing γ-aminobutyric acid according to any one of claims 1 and 2, wherein pyridoxalic acid is added to the reaction system. is there.
【００１１】また、請求項１〜３いずれか１項に記載の
γ−アミノ酪酸の生成方法において、反応系に２−モル
フォリノエタンスルホン酸を添加することを特徴とする
γ−アミノ酪酸の生成方法に係るものである。[0011] The method for producing γ-aminobutyric acid according to any one of claims 1 to 3, wherein 2-morpholinoethanesulfonic acid is added to the reaction system. Pertains to the method.
【００１２】また、請求項１〜４いずれか１項に記載の
γ−アミノ酪酸の生成方法により製造されたγ−アミノ
酪酸が添加されていることを特徴とするγ−アミノ酪酸
を含む食品に係るものである。A food containing γ-aminobutyric acid to which γ-aminobutyric acid produced by the method for producing γ-aminobutyric acid according to any one of claims 1 to 4 is added. It is related.
【００１３】[0013]
【発明の作用及び効果】本発明は繰り返した実験により
得られた作用効果を請求項としてまとめたものである。The present invention summarizes the effects obtained by repeated experiments as claims.
【００１４】精米過程で大量に排出され安価に入手が可
能である米胚芽，胚芽を含む米糠若しくは胚芽米をグル
タミン酸脱炭酸酵素源とし、このグルタミン酸脱炭酸酵
素により、添加した溶液中のグルタミン酸及び前記米胚
芽，胚芽を含む米糠若しくは胚芽米中のグルタミン酸を
反応させると、大量のγ−アミノ酪酸が得られることに
なる。即ち、γ−アミノ酪酸の元になるグルタミン酸
は、前記米胚芽，胚芽を含む米糠若しくは胚芽米中のグ
ルタミン酸のみならず、添加される溶液中のグルタミン
酸からも供給される為、十分なγ−アミノ酪酸を生成で
きることになる。Rice germ, rice bran or germ rice including germ, which is discharged in large quantities during the rice polishing process and can be obtained at low cost, is used as a source of glutamate decarboxylase. When glutamic acid in rice germ, rice bran containing germ or germ rice is reacted, a large amount of γ-aminobutyric acid is obtained. That is, since glutamic acid as a source of γ-aminobutyric acid is supplied not only from glutamic acid in the rice germ, rice bran containing germ or germ rice but also from glutamic acid in a solution to be added, sufficient γ-aminobutyric acid is obtained. Butyric acid can be produced.
【００１５】また、添加する溶液中のグルタミン酸濃度
を順次増大させると、50ミリモル／リットル以下ではγ
−アミノ酪酸の生成速度の上昇は急激であり、50ミリモ
ル／リットル以上ではγ−アミノ酪酸の生成速度の上昇
がなだらかとなることを実験により見い出した（図１参
照）。従って、γ−アミノ酪酸の生成速度を効率的にす
る為のグルタミン酸濃度の臨界数値は50ミリモル／リッ
トルであることを確認した。Further, when the concentration of glutamic acid in the solution to be added is sequentially increased, when the concentration of glutamic acid is 50 mmol / L or less, γ
It has been found by experiments that the rate of formation of -aminobutyric acid is sharp, and that the rate of formation of γ-aminobutyric acid is gentle above 50 mmol / L (see FIG. 1). Therefore, it was confirmed that the critical value of the glutamic acid concentration for efficiently increasing the production rate of γ-aminobutyric acid was 50 mmol / liter.
【００１６】また、反応系にピリドキサルリン酸を添加
するとγ−アミノ酪酸の生成量が増大することを実験に
より見い出した（図２参照）。Further, it was found through experiments that addition of pyridoxal phosphoric acid to the reaction system increased the amount of γ-aminobutyric acid produced (see FIG. 2).
【００１７】また、反応系は前記特開平７−２１３２５
２号に開示されているようにｐＨを調整した方が良い
が、このｐＨ調整用の酸として２−モルフォリノエタン
スルホン酸（２−morpholinoethanesulfonic acid; 以
下、ＭＥＳという。）を使用した場合にγ−アミノ酪酸
の生成量が増大することを実験により見い出した（図３
参照)。従って、ｐＨ調整用の有機酸としてはＭＥＳが最
適であることを確認した。The reaction system is the same as that described in JP-A-7-21325.
It is better to adjust the pH as disclosed in No. 2, but when 2-morpholinoethanesulfonic acid (hereinafter referred to as MES) is used as the acid for adjusting the pH, γ is used. It was found by experiments that the production of aminobutyric acid increased (FIG. 3).
reference). Therefore, it was confirmed that MES was optimal as the organic acid for pH adjustment.
【００１８】本発明は上述のようにするから、大量のγ
−アミノ酪酸を高濃度、安全、安価、簡便に製造するこ
とができる実用性に秀れた技術となる。Since the present invention is as described above, a large amount of γ
-It is a highly practical technology that can produce aminobutyric acid at high concentration, safely, at low cost, and easily.
【００１９】また、γ−アミノ酪酸を含む食品素材や栄
養食品等の食品を簡便かつ効率的に製造することがで
き、製造した食品素材や栄養食品を、高血圧患者の食事
療法のみならず、高血圧予防のための栄養食品としても
利用することができる実用性に秀れた技術となる。Further, food materials including γ-aminobutyric acid and foods such as nutritional foods can be easily and efficiently manufactured, and the manufactured food materials and nutritional foods can be used not only in the diet for hypertensive patients but also in hypertensive patients. This is a highly practical technology that can be used as a nutritional food for prevention.
【００２０】また、米胚芽や胚芽を含む米糠は精米過程
の副産物として大量に生じており、その処分に苦慮して
いるのが現状である。従って、本発明は、米胚芽や米糠
という未利用資源を有効に活用できる方法として、廃棄
物処理にも貢献することができる。In addition, rice germ and rice bran containing germ are produced in large quantities as a by-product of the rice polishing process, and it is currently difficult to dispose of the rice germ and rice bran. Therefore, the present invention can also contribute to waste treatment as a method that can effectively utilize unused resources such as rice germ and rice bran.
【００２１】[0021]
【発明の実施の形態】本発明の実施例について、以下説
明する。Embodiments of the present invention will be described below.
【００２２】本実施例は、グルタミン酸脱炭酸酵素を含
む天然物に、グルタミン酸若しくはグルタミン酸の塩
(グルタミン酸ナトリウム等)を含む溶液を添加して反応
させ、該添加溶液中のグルタミン酸と前記天然物中のグ
ルタミン酸とを、前記天然物中のグルタミン酸脱炭酸酵
素の酵素作用によりγ−アミノ酪酸とするものである。In this example, a natural product containing glutamate decarboxylase was added to glutamate or a salt of glutamate.
A solution containing (such as sodium glutamate) is added and reacted, and glutamic acid in the added solution and glutamic acid in the natural product are converted into γ-aminobutyric acid by the enzymatic action of glutamate decarboxylase in the natural product. Things.
【００２３】グルタミン酸脱炭酸酵素を含む天然物とし
ては米胚芽を使用する。尚、米胚芽の米の品種は制限さ
れない。また、米胚芽を単独で用いる方が望ましいが、
胚芽を含む米糠や胚芽米も米胚芽と同様に利用すること
ができる。これら米胚芽，米糠，胚芽米は、通常の精米
機と適当なふるいを用いることで容易に調製可能であ
る。さらには、米胚芽，米糠，胚芽米からグルタミン酸
脱炭酸酵素を抽出或いは精製し、これを懸濁・溶解また
は固定化したものを用いることも可能である。Rice germ is used as a natural product containing glutamate decarboxylase. In addition, rice varieties of rice germ are not limited. It is also preferable to use rice germ alone,
Rice bran and germ rice including germ can be used similarly to rice germ. These rice germ, rice bran, and germ rice can be easily prepared by using an ordinary rice mill and a suitable sieve. Further, glutamate decarboxylase may be extracted or purified from rice germ, rice bran, or germ rice, and then suspended, dissolved or immobilized.
【００２４】反応溶液中のグルタミン酸或いはグルタミ
ン酸の塩の量は、γ−アミノ酪酸の希望生産量や触媒源
となる米胚芽，胚芽を含む米糠若しくは胚芽米の使用量
に基づいて決定すればよいが、好ましくは50ミリモル／
リットル以上に設定する（後記実験例１及び図１参
照）。グルタミン酸或いはグルタミン酸の塩は、精製或
いは抽出標品を用いてもよいが、各種蛋白質（ダイズ蛋
白質等）から酵素分解によっても生産できるので、蛋白
質と蛋白質分解酵素を併用した系を利用することもでき
る。The amount of glutamic acid or a salt of glutamic acid in the reaction solution may be determined based on the desired production amount of γ-aminobutyric acid and the amount of rice germ, germ-containing rice bran or germ rice used as a catalyst source. , Preferably 50 mmol /
It is set to liter or more (see Experimental Example 1 and FIG. 1 described later). Glutamic acid or a salt of glutamic acid may be purified or extracted, but can also be produced from various proteins (such as soybean proteins) by enzymatic degradation. Therefore, a system using both a protein and a protease can be used. .
【００２５】反応条件は、ｐＨは3.0〜7.0、好ましくは
5.5〜6.5とすると良い。また、温度は10〜50℃、好まし
くは35〜40℃とすると良い。The reaction conditions are as follows: pH is 3.0 to 7.0, preferably
A good value is 5.5 to 6.5. The temperature is preferably 10 to 50 ° C, preferably 35 to 40 ° C.
【００２６】ｐＨ調製に用いる酸は無機酸と有機酸のい
ずれも使用可能である。無機酸を例示すると塩酸、硫酸
などである。また有機酸にはクエン酸、リンゴ酸、2−
モルフォリノエタンスルホン酸（2−morpholinoethanes
ulfonic acid；ＭＥＳ）等が使用可能であるが、後記実
験例３及び図３に示すように、有機酸の種類によってγ
−アミノ酪酸の生産量が大きく異なるので、有機酸の場
合は好ましくはＭＥＳを使用する。As the acid used for adjusting the pH, either an inorganic acid or an organic acid can be used. Examples of the inorganic acid include hydrochloric acid and sulfuric acid. Organic acids include citric acid, malic acid, 2-
Morpholinoethanesulfonic acid (2-morpholinoethanes
ulfonic acid (MES) and the like can be used, but as shown in Experimental Example 3 and FIG.
MES is preferably used in the case of organic acids, since the production of aminobutyric acid varies greatly.
【００２７】ｐＨ調整用アルカリとしては、水酸化ナト
リウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム等が用いら
れるが、当然、これに限るものではない。As the pH adjusting alkali, sodium hydroxide, potassium hydroxide, calcium hydroxide or the like is used, but is not limited thereto.
【００２８】この条件で反応を行ってもある程度多量の
γ−アミノ酪酸を製造できるが（胚芽100ｇあたり約３
ｇのγ−アミノ酪酸を生成することができる）、γ−ア
ミノ酪酸の生成速度を早めて最大限の製造効率を得るた
めには、後記実験例２及び図２に示すごとく、ピリドキ
サルリン酸を加える方が望ましい。Even if the reaction is carried out under these conditions, a certain amount of γ-aminobutyric acid can be produced (about 3 g / 100 g of embryo).
g of .gamma.-aminobutyric acid), and in order to obtain the maximum production efficiency by increasing the rate of .gamma.-aminobutyric acid, pyridoxalic acid is added as shown in Experimental Example 2 and FIG. Is more desirable.
【００２９】ピリドキサルリン酸の量は生産したいγ−
アミノ酪酸の量や希望とする基質転換率（反応開始時に
反応液に存在するグルタミン酸量のうち、γ−アミノ酪
酸に転換されたものの量比）に基づいて決定すればよい
が、好ましくはグルタミン酸或いはグルタミン酸の塩と
ピリドキサルリン酸のモル比が、100（グルタミン酸或
いはグルタミン酸の塩）:１（ピリドキサルリン酸）〜
2,000（グルタミン酸或いはグルタミン酸の塩）：１
（ピリドキサルリン酸）になるようにする。The amount of pyridoxal phosphate is determined by the amount of γ-
It may be determined based on the amount of aminobutyric acid and the desired substrate conversion rate (the ratio of the amount of glutamic acid present in the reaction solution at the start of the reaction converted to γ-aminobutyric acid), but is preferably glutamic acid or The molar ratio of glutamic acid salt to pyridoxalic acid is from 100 (glutamic acid or glutamic acid salt): 1 (pyridoxalic acid)
2,000 (glutamic acid or glutamic acid salt): 1
(Pyridoxal phosphate).
【００３０】ピリドキサルリン酸は精製或いは抽出標品
が利用可能であるし、また、ピリドキサルリン酸はビタ
ミンＢ６の活性成分のひとつとして広範な生物材料に含
まれるので、これらをピリドキサルリン酸源として利用
することもできる。また、ピリドキサルリン酸はピリド
キサルをリン酸化することでも合成できるので、ピリド
キサルからの合成系を併用してもよい。Pyridoxal phosphate can be used as a purified or extracted preparation. Since pyridoxal phosphate is contained in a wide range of biological materials as one of the active ingredients of vitamin B6, it can be used as a pyridoxal phosphate source. it can. Further, since pyridoxal phosphate can be synthesized by phosphorylating pyridoxal, a synthesis system from pyridoxal may be used in combination.
【００３１】本実施例は上述のようにするから、大量の
γ−アミノ酪酸を簡便かつ安価に製造することが可能に
なる。また、使用する材料は米胚芽，胚芽を含む米糠若
しくは胚芽米、アミノ酸であるグルタミン酸やその塩、
ビタミンＢ６の活性成分であるピリドキサルリン酸、ｐ
Ｈ調製用の酸やアルカリであり、いずれの成分も食品に
用いた場合に有害作用を及ぼすものでないため、反応液
からの懸濁物除去、脱色、必要に応じて脱塩、などの簡
単な調整操作を行うのみで食品素材として供給すること
ができる。Since the present embodiment is as described above, a large amount of γ-aminobutyric acid can be easily and inexpensively produced. The materials used are rice germ, rice bran or germ rice including germ, amino acid glutamic acid and its salts,
Pyridoxal phosphate, an active ingredient of vitamin B6, p
H is an acid or alkali for the preparation of H. Since none of the components has any harmful effects when used in foods, simple methods such as removal of suspended matter from the reaction solution, decolorization, and desalting as necessary It can be supplied as a food material only by performing an adjustment operation.
【００３２】また、高度な精製標品が必要な場合は、イ
オン交換クロマトグラフィーなどの常法を用いることで
γ−アミノ酪酸の簡易精製が可能である。得られた標品
は高濃度のγ−アミノ酪酸を含むため、少量の標品を摂
取、或いは食品中に混和するだけで血圧上昇抑制作用が
期待できる。このように、本実施例によって生産したγ
−アミノ酪酸液は食品素材として、また、栄養食品とし
て有効である。When a highly purified sample is required, γ-aminobutyric acid can be easily purified by using a conventional method such as ion exchange chromatography. Since the obtained sample contains a high concentration of γ-aminobutyric acid, the effect of suppressing blood pressure increase can be expected only by ingesting a small amount of the sample or mixing it with food. Thus, γ produced according to this example
-The aminobutyric acid solution is effective as a food material and as a nutritional food.
【００３３】以下、本実施例の作用効果を裏付ける実験
例について述べる。Hereinafter, an experimental example supporting the operation and effect of this embodiment will be described.
【００３４】実験例１ コシヒカリから調整した胚芽0.2ｇを、3.0ミリリットル
のグルタミン酸ナトリウム−20マイクロモル／リットル
ピリドキサルリン酸−0.1モル／リットル ＭＥＳ混合
溶液（ｐＨ5.5）に懸濁し、40℃で反応させた。グルタ
ミン酸濃度は図１に示した濃度となるように調整した。
30分後にトリクロロ酢酸水溶液を８％濃度となるように
加えて反応を停止させた。反応溶液中のグルタミン酸と
γ−アミノ酪酸の濃度を、ο−フタルアルデヒドで蛍光
標識した後、ＨＰＬＣで分析することにより定量し、図
１を得た。Experimental Example 1 0.2 g of germ prepared from Koshihikari was suspended in 3.0 ml of a mixed solution of sodium glutamate-20 μmol / liter pyridoxalic acid-0.1 mol / liter MES (pH 5.5) and reacted at 40 ° C. Was. Glutamic acid concentration was adjusted to the concentration shown in FIG.
After 30 minutes, the reaction was stopped by adding an aqueous solution of trichloroacetic acid to a concentration of 8%. The concentrations of glutamic acid and γ-aminobutyric acid in the reaction solution were fluorescently labeled with o-phthalaldehyde, and then quantified by HPLC analysis to obtain FIG.
【００３５】図１より、γ−アミノ酪酸の生成速度はグ
ルタミン酸濃度に依存することが判明した。また、グル
タミン酸濃度がある程度以上となると、γ−アミノ酪酸
の生成速度の上昇がにぶる為、γ−アミノ酪酸を生成す
る条件はグルタミン酸濃度が50ミリモル／リットル以上
であることが望ましいことが判明した。FIG. 1 shows that the production rate of γ-aminobutyric acid depends on the glutamic acid concentration. In addition, when the concentration of glutamic acid becomes a certain level or more, the rate of production of γ-aminobutyric acid increases, so it was found that the condition for producing γ-aminobutyric acid is desirably a glutamic acid concentration of 50 mmol / L or more. .
【００３６】実験例２ コシヒカリから調整した胚芽0.2ｇを、3.0ミリリットル
の100ミリモル／リットル グルタミン酸ナトリウム−0.
1モル／リットル ＭＥＳ混合溶液（ｐＨ5.5）に懸濁
し、必要に応じてピリドキサルリン酸を50マイクロモル
／リットルとなるように添加し、40℃で反応させた。所
定時間後にトリクロロ酢酸水溶液を８％濃度となるよう
に加えて反応を停止させた。反応溶液中のグルタミン酸
とγ−アミノ酪酸の濃度を、ο−フタルアルデヒドで蛍
光標識した後、ＨＰＬＣで分析することにより定量し、
図２を得た。EXPERIMENTAL EXAMPLE 2 0.2 g of germ prepared from Koshihikari was mixed with 3.0 ml of 100 mmol / l sodium glutamate-0.
The mixture was suspended in a 1 mol / liter MES mixed solution (pH 5.5), and pyridoxal phosphoric acid was added to the mixture at 50 μmol / liter as needed, and reacted at 40 ° C. After a predetermined time, the reaction was stopped by adding an aqueous solution of trichloroacetic acid to a concentration of 8%. The concentrations of glutamic acid and γ-aminobutyric acid in the reaction solution were quantified by fluorescently labeling with o-phthalaldehyde and then analyzing by HPLC,
FIG. 2 is obtained.
【００３７】図２より、γ−アミノ酪酸の生成速度はピ
リドキサルリン酸により速められることが判明した。[0037] From FIG. 2, the rate of formation of γ- aminobutyric acid was found to be accelerated by pyridoxal phosphate.
【００３８】実験例３ コシヒカリから調整した胚芽0.2ｇを、3.0ミリリットル
の100ミリモル／リットル グルタミン酸ナトリウム−50
マイクロモル／リットル ピリドキサルリン酸及び図３
に示す各有機酸を含む混合溶液（ｐＨ5.5）に懸濁し、4
0℃で反応させた。所定時間後にトリクロロ酢酸水溶液
を８％濃度となるように加えて反応を停止させた。反応
溶液中のグルタミン酸とγ−アミノ酪酸の濃度を、ο−
フタルアルデヒドで蛍光標識した後、ＨＰＬＣで分析す
ることにより定量し、図３を得た。Experimental Example 3 0.2 g of germ prepared from Koshihikari was mixed with 3.0 ml of 100 mmol / l sodium glutamate-50.
Micromoles / liter pyridoxal phosphate and FIG.
Suspended in a mixed solution (pH 5.5) containing each organic acid shown in
The reaction was performed at 0 ° C. After a predetermined time, the reaction was stopped by adding an aqueous solution of trichloroacetic acid to a concentration of 8%. The concentrations of glutamic acid and γ-aminobutyric acid in the reaction solution were
After fluorescent labeling with phthalaldehyde, it was quantified by HPLC analysis to obtain FIG.
【００３９】図３より、γ−アミノ酪酸の生成速度は有
機酸の種類に依存することが判明した。また、ＭＥＳが
最も好適であることが判明した。From FIG. 3, it was found that the production rate of γ-aminobutyric acid depends on the type of organic acid. Also, MES was found to be the most suitable.
【００４０】以上、実験例１〜３の結果により、γ−ア
ミノ酪酸を効率的に生成する際には、 グルタミン酸濃度を50ミリモル／リットル以上とす
る、 反応系にピリドキサルリン酸を添加する、 ｐＨ調整用の有機酸としてＭＥＳを選択する、 の各方法を採用すると良いことが判明した。As described above, from the results of Experimental Examples 1 to 3, when efficiently producing γ-aminobutyric acid, the concentration of glutamic acid is adjusted to 50 mmol / L or more, pyridoxal phosphoric acid is added to the reaction system, and the pH is adjusted. It has been found that each method of selecting MES as an organic acid for use is preferably employed.
【００４１】以下、上記実験例１〜３の結果をふまえた
本実施例の具体的な実験例について述べる。Hereinafter, specific experimental examples of the present embodiment based on the results of the above-described experimental examples 1 to 3 will be described.
【００４２】実験例４ コシヒカリから調整した胚芽11ｇを100ミリリットルの
0.36モル／リットル グルタミン酸カリウム−0.3モル／
リットル ＭＥＳの混合溶液（ｐＨ5.5）に懸濁し、ピリ
ドキサルリン酸1.7ｍｇを加え、温度40℃で６時間、遮
光下で反応させた。反応開始から１時間ごとにピリドキ
サルリン酸1.7ｍｇを追加添加した。また、１時間ごと
にｐＨを測定し、5.5〜6.0の範囲内となるように0.1モ
ル／リットル 塩酸を添加した。グルタミン酸とγ−ア
ミノ酪酸の濃度は、ο−フタルアルデヒドで蛍光標識し
た後、ＨＰＬＣで分析することにより定量した。Experimental Example 4 11 g of germ prepared from Koshihikari was added to 100 ml of
0.36 mol / liter potassium glutamate-0.3 mol /
The suspension was suspended in a mixed solution of 1 MES (pH 5.5), 1.7 mg of pyridoxal phosphoric acid was added, and the mixture was reacted at 40 ° C. for 6 hours under light shielding. An additional 1.7 mg of pyridoxal phosphoric acid was added every hour from the start of the reaction. The pH was measured every hour, and 0.1 mol / liter hydrochloric acid was added so as to be in the range of 5.5 to 6.0. The concentrations of glutamic acid and γ-aminobutyric acid were quantified by fluorescently labeling with o-phthalaldehyde and then analyzing by HPLC.
【００４３】実験結果を図４に示す。FIG. 4 shows the experimental results.
【００４４】図４より、６時間の反応によって、最初に
添加したグルタミン酸の82％以上をγ−アミノ酪酸に転
換できることが判明した。このときのγ−アミノ酪酸生
産量は3.1ｇで、胚芽100ｇ当たりにすると28.3ｇものγ
−アミノ酪酸を生産することが確認された。From FIG. 4, it was found that by reacting for 6 hours, more than 82% of the glutamic acid initially added can be converted to γ-aminobutyric acid. The amount of γ-aminobutyric acid produced at this time is 3.1 g, which is 28.3 g of γ per 100 g of germ.
-Production of aminobutyric acid was confirmed.
【００４５】米胚芽の水浸漬によるγ−アミノ酪酸の生
産量は約0.4〜0.5ｇ/100ｇ胚芽であると報告されている
ので（特開平７−２１３２５２号）、実験例４における
γ−アミノ酪酸生産効率は従来法の５０倍以上と推定で
きる。It is reported that the yield of γ-aminobutyric acid by immersing rice germ in water is about 0.4 to 0.5 g / 100 g germ (Japanese Patent Laid-Open No. 7-213252). The production efficiency can be estimated to be 50 times or more of the conventional method.
【００４６】また、血圧上昇抑制作用に必要なγ−アミ
ノ酪酸の摂取量は、動物実験から推定すると１日あたり
0.5〜1ｇ程度と考えられるが（Y. Abe, et al., Am. J.
Hypertens., （1995））、これを実験例４の反応液量
に換算すると約16〜32ミリリットルとなり、わずかな量
を摂取するだけで血圧上昇抑制作用が期待できることが
わかる。[0046] Further, intake of γ- aminobutyric acid required antihypertensive effect, per day when estimated from animal experiments
It is considered to be about 0.5 to 1 g (Y. Abe, et al., Am. J.
Hypertens., (1995)), which is about 16 to 32 ml when converted to the amount of the reaction solution in Experimental Example 4, indicating that the effect of suppressing blood pressure elevation can be expected by ingesting a small amount.
【００４７】実験例５ コシヒカリから調整した胚芽125ｇを、0.4モル／リット
ル グルタミン酸ナトリウム（ｐＨ5.5）溶液１リットル
に懸濁し、ピリドキサルリン酸36.3ｍｇを加え、40℃で
６時間、250ｒｐｍで撹拌しながら反応させた。反応開
始から１時間ごとにピリドキサルリン酸36.3ｍｇを追加
添加した。反応はバイオリアクターTBR‐2システム（千
代田製作所）を用いて実施し、反応ｐＨはｐＨコントロ
ーラ（千代田製作所製ＴＢＣ−ｐＨ−β）を使用して１
Ｎ− ＨＣｌにより5.5〜5.6でコントロールした。グル
タミン酸とγ−アミノ酪酸の濃度は、ο−フタルアルデ
ヒドで蛍光標識した後、ＨＰＬＣで分析することにより
定量した。Experimental Example 5 125 g of embryos prepared from Koshihikari were suspended in 1 liter of 0.4 mol / l sodium glutamate (pH 5.5) solution, 36.3 mg of pyridoxal phosphoric acid was added, and the mixture was stirred at 250 rpm for 6 hours at 40 ° C. Reacted. Every hour after the start of the reaction, 36.3 mg of pyridoxal phosphoric acid was additionally added. The reaction was carried out using a bioreactor TBR-2 system (Chiyoda Seisakusho), and the reaction pH was adjusted to 1 using a pH controller (Chiyoda Seisakusho TBC-pH-β).
It was controlled at 5.5 to 5.6 with N-HCl. The concentrations of glutamic acid and γ-aminobutyric acid were quantified by fluorescent labeling with o-phthalaldehyde and then analyzing by HPLC.
【００４８】実験結果を図５に示す。FIG. 5 shows the experimental results.
【００４９】図５より、６時間の反応によって、最初に
添加したグルタミン酸の87.9％をγ−アミノ酪酸に転換
できることが判明した。このときのγ−アミノ酪酸生産
量は36.3ｇで、胚芽100ｇ当たりにすると29.0ｇものγ
−アミノ酪酸を生産することが確認された。FIG. 5 shows that 87.9% of the initially added glutamic acid can be converted to γ-aminobutyric acid by the reaction for 6 hours. At this time, the production amount of γ-aminobutyric acid is 36.3 g, which is 29.0 g of γ per 100 g of germ.
-Production of aminobutyric acid was confirmed.
【図面の簡単な説明】[Brief description of the drawings]
【図１】実験例１におけるグルタミン酸濃度の影響を示
したグラフである。FIG. 1 is a graph showing the influence of glutamic acid concentration in Experimental Example 1.
【図２】実験例２におけるピリドキサルリン酸の影響を
示したグラフである。FIG. 2 is a graph showing the effect of pyridoxal phosphate in Experimental Example 2.
【図３】実験例３における有機酸の影響を示したグラフ
である。FIG. 3 is a graph showing the influence of an organic acid in Experimental Example 3.
【図４】実験例４におけるγ−アミノ酪酸の生成とグル
タミン酸の減少、ならびに添加したグルタミン酸からγ
−アミノ酪酸への転換率を示したグラフである。FIG. 4 shows the production of γ-aminobutyric acid and a decrease in glutamic acid in Experimental Example 4, and the production of γ-aminobutyric acid from glutamic acid.
-It is the graph which showed the conversion rate to aminobutyric acid.
【図５】実験例５におけるγ−アミノ酪酸の生成とグル
タミン酸の減少、ならびに添加したグルタミン酸からγ
−アミノ酪酸への転換率を示したグラフである。FIG. 5: Production of γ-aminobutyric acid and reduction of glutamic acid in Experimental Example 5, and γ-aminobutyric acid from added glutamic acid
-It is the graph which showed the conversion rate to aminobutyric acid.
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 江川 和徳 新潟県加茂市赤谷17−35 Ｆターム(参考） 4B018 MD08 MD09 MD19 MD49 ME04 4C206 AA04 FA45 ZA42 ────────────────────────────────────────────────── ─── Continuing on the front page (72) Inventor Kazunori Egawa 17-35 Akaya, Kamo-shi, Niigata F-term (reference) 4B018 MD08 MD09 MD19 MD49 ME04 4C206 AA04 FA45 ZA42
Claims (5)
の少なくとも１種に、グルタミン酸若しくはグルタミン
酸の塩を含む溶液を添加して反応させ、該添加溶液中の
グルタミン酸と前記米胚芽，胚芽を含む米糠若しくは胚
芽米中のグルタミン酸とを、前記米胚芽，胚芽を含む米
糠若しくは胚芽米中のグルタミン酸脱炭酸酵素の酵素作
用によりγ−アミノ酪酸とすることを特徴とするγ−ア
ミノ酪酸の生成方法。1. A method comprising adding a solution containing glutamic acid or a salt of glutamic acid to at least one kind of rice germ, rice bran containing germ or germ rice, and reacting the germic acid with the rice germ and germ in the added solution. A method for producing γ-aminobutyric acid, which comprises converting glutamic acid in rice bran or germ rice to γ-aminobutyric acid by the enzymatic action of glutamate decarboxylase in the rice germ or rice bran or germ rice containing germ.
法において、グルタミン酸濃度を５０ミリモル／リット
ル以上に設定したことを特徴とするγ−アミノ酪酸の生
成方法。2. The method for producing γ-aminobutyric acid according to claim 1, wherein the glutamic acid concentration is set to 50 mmol / L or more.
アミノ酪酸の生成方法において、反応系にピリドキサル
リン酸を添加することを特徴とするγ−アミノ酪酸の生
成方法。3. The γ- according to claim 1, wherein
A method for producing γ-aminobutyric acid, which comprises adding pyridoxal phosphoric acid to a reaction system.
アミノ酪酸の生成方法において、反応系に２−モルフォ
リノエタンスルホン酸を添加することを特徴とするγ−
アミノ酪酸の生成方法。4. The γ- according to any one of claims 1 to 3,
A method for producing aminobutyric acid, characterized in that 2-morpholinoethanesulfonic acid is added to the reaction system.
Method for producing aminobutyric acid.
アミノ酪酸の生成方法により製造されたγ−アミノ酪酸
が添加されていることを特徴とするγ−アミノ酪酸を含
む食品。5. The γ- according to any one of claims 1 to 4,
A food containing γ-aminobutyric acid, wherein γ-aminobutyric acid produced by a method for producing aminobutyric acid is added.
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