HU229720B1 - Copolymer 1 related polypeptides for us as molecular weight markers and for therapeutic use - Google Patents
Copolymer 1 related polypeptides for us as molecular weight markers and for therapeutic use Download PDFInfo
- Publication number
- HU229720B1 HU229720B1 HU1300337A HUP1300337A HU229720B1 HU 229720 B1 HU229720 B1 HU 229720B1 HU 1300337 A HU1300337 A HU 1300337A HU P1300337 A HUP1300337 A HU P1300337A HU 229720 B1 HU229720 B1 HU 229720B1
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- molecular weight
- calibration standards
- calibration
- polypeptide
- amino acid
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims description 108
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims description 79
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 title claims description 74
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 title description 24
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 title description 3
- 108010072051 Glatiramer Acetate Proteins 0.000 claims description 42
- FHEAIOHRHQGZPC-KIWGSFCNSA-N acetic acid;(2s)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid;(2s)-2-aminopentanedioic acid;(2s)-2-aminopropanoic acid;(2s)-2,6-diaminohexanoic acid Chemical compound CC(O)=O.C[C@H](N)C(O)=O.NCCCC[C@H](N)C(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 FHEAIOHRHQGZPC-KIWGSFCNSA-N 0.000 claims description 35
- 229960003776 glatiramer acetate Drugs 0.000 claims description 34
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 28
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 claims description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 71
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 62
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 58
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 38
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 38
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 37
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 37
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 37
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 34
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 34
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 32
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 32
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 31
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 29
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 29
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 description 27
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 26
- 235000002374 tyrosine Nutrition 0.000 description 25
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 21
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 21
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 20
- 108010019911 (T,G)-A-L Proteins 0.000 description 19
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 19
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 17
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 17
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 17
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 17
- 229920001897 terpolymer Polymers 0.000 description 15
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 14
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 14
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 14
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 13
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 12
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 12
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 11
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 10
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 9
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 9
- YLOCGHYTXIINAI-XKUOMLDTSA-N (2s)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid;(2s)-2-aminopentanedioic acid;(2s)-2-aminopropanoic acid;(2s)-2,6-diaminohexanoic acid Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O.NCCCC[C@H](N)C(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 YLOCGHYTXIINAI-XKUOMLDTSA-N 0.000 description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 8
- 229940042385 glatiramer Drugs 0.000 description 8
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 7
- 230000002917 arthritic effect Effects 0.000 description 7
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 7
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 7
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 6
- -1 lirozyme Chemical compound 0.000 description 6
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 6
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 6
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- 102000043131 MHC class II family Human genes 0.000 description 5
- 108091054438 MHC class II family Proteins 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 5
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 5
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 5
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 4
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 4
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 4
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 4
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 3
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 3
- 208000016192 Demyelinating disease Diseases 0.000 description 3
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 description 3
- 108010046732 HLA-DR4 Antigen Proteins 0.000 description 3
- 108010027412 Histocompatibility Antigens Class II Proteins 0.000 description 3
- 102000018713 Histocompatibility Antigens Class II Human genes 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 3
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- YASYVMFAVPKPKE-UHFFFAOYSA-N acephate Chemical compound COP(=O)(SC)NC(C)=O YASYVMFAVPKPKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 3
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 3
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 3
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 3
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 3
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 102100029966 HLA class II histocompatibility antigen, DP alpha 1 chain Human genes 0.000 description 2
- 208000035186 Hemolytic Autoimmune Anemia Diseases 0.000 description 2
- 101000864089 Homo sapiens HLA class II histocompatibility antigen, DP alpha 1 chain Proteins 0.000 description 2
- 101000930802 Homo sapiens HLA class II histocompatibility antigen, DQ alpha 1 chain Proteins 0.000 description 2
- 101000968032 Homo sapiens HLA class II histocompatibility antigen, DR beta 3 chain Proteins 0.000 description 2
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 2
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 2
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 2
- 101710169105 Minor spike protein Proteins 0.000 description 2
- 101710081079 Minor spike protein H Proteins 0.000 description 2
- 102000006386 Myelin Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010083674 Myelin Proteins Proteins 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010041660 Splenomegaly Diseases 0.000 description 2
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- 201000000448 autoimmune hemolytic anemia Diseases 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 2
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 2
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 2
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 2
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 2
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 2
- 238000012384 transportation and delivery Methods 0.000 description 2
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 2
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- VZQHRKZCAZCACO-PYJNHQTQSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]propanoyl]amino]prop-2-enoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)C(=C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N VZQHRKZCAZCACO-PYJNHQTQSA-N 0.000 description 1
- ATCFYQUZTYQTJN-AXDSSHIGSA-N (2s)-2-amino-4-benzylpentanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ATCFYQUZTYQTJN-AXDSSHIGSA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 101710145634 Antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000015943 Coeliac disease Diseases 0.000 description 1
- 102000000503 Collagen Type II Human genes 0.000 description 1
- 108010041390 Collagen Type II Proteins 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 206010012305 Demyelination Diseases 0.000 description 1
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 240000000731 Fagus sylvatica Species 0.000 description 1
- 235000010099 Fagus sylvatica Nutrition 0.000 description 1
- 208000028387 Felty syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- 208000003807 Graves Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000015023 Graves' disease Diseases 0.000 description 1
- 108010010378 HLA-DP Antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000015789 HLA-DP Antigens Human genes 0.000 description 1
- 108010062347 HLA-DQ Antigens Proteins 0.000 description 1
- 108010058597 HLA-DR Antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000006354 HLA-DR Antigens Human genes 0.000 description 1
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 1
- 108010088652 Histocompatibility Antigens Class I Proteins 0.000 description 1
- 101000946275 Homo sapiens Protein CLEC16A Proteins 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 208000012659 Joint disease Diseases 0.000 description 1
- 208000003456 Juvenile Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 206010059176 Juvenile idiopathic arthritis Diseases 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- 206010024229 Leprosy Diseases 0.000 description 1
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 description 1
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 description 1
- 241001435619 Lile Species 0.000 description 1
- 101500021084 Locusta migratoria 5 kDa peptide Proteins 0.000 description 1
- 229920000433 Lyocell Polymers 0.000 description 1
- 108700005089 MHC Class I Genes Proteins 0.000 description 1
- 108700005092 MHC Class II Genes Proteins 0.000 description 1
- 208000010428 Muscle Weakness Diseases 0.000 description 1
- 206010028372 Muscular weakness Diseases 0.000 description 1
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 1
- 201000011152 Pemphigus Diseases 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 108010081690 Pertussis Toxin Proteins 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100034718 Protein CLEC16A Human genes 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 208000034189 Sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 1
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N Tin Chemical compound [Sn] ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000159243 Toxicodendron radicans Species 0.000 description 1
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 description 1
- 206010053613 Type IV hypersensitivity reaction Diseases 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N acetone Substances CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000061 acid fraction Substances 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 210000001188 articular cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000004067 bulking agent Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 1
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011651 chromium Substances 0.000 description 1
- 238000002983 circular dichroism Methods 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 210000004292 cytoskeleton Anatomy 0.000 description 1
- 210000004544 dc2 Anatomy 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002710 gonadal effect Effects 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004047 hyperresponsiveness Effects 0.000 description 1
- 230000008004 immune attack Effects 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 description 1
- 229940102213 injectable suspension Drugs 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000003127 knee Anatomy 0.000 description 1
- 238000002356 laser light scattering Methods 0.000 description 1
- 210000002414 leg Anatomy 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 238000011866 long-term treatment Methods 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000000968 medical method and process Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical group CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000007659 motor function Effects 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000005012 myelin Anatomy 0.000 description 1
- 210000003007 myelin sheath Anatomy 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 125000000740 n-pentyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 208000004235 neutropenia Diseases 0.000 description 1
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 201000001976 pemphigus vulgaris Diseases 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 1
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000379 polymerizing effect Effects 0.000 description 1
- 210000004896 polypeptide structure Anatomy 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000033764 rhythmic process Effects 0.000 description 1
- 238000010079 rubber tapping Methods 0.000 description 1
- 238000006748 scratching Methods 0.000 description 1
- 230000002393 scratching effect Effects 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- 230000003582 thrombocytopenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 102000035160 transmembrane proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005703 transmembrane proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 125000004044 trifluoroacetyl group Chemical group FC(C(=O)*)(F)F 0.000 description 1
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 description 1
- 230000005951 type IV hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 208000027930 type IV hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000000196 viscometry Methods 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/02—Peptides of undefined number of amino acids; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
- A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/06—Antianaemics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/001—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof by chemical synthesis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Immunology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Ophthalmology & Optometry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Obesity (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
Description
Kopollmer-1 -rokon pohpeptidek alkalmazása molekulatömeg kalibráló standardként és gyógyászati anyagként
A találmány molekulatömeg kalibráló standardokat ismertet a giaikamer-acetát, terpohmerek és más kopoHmerek molekulatömegének pontos meghatározására, A molekulatömeg kalibráló standardok olyan pohpeptidek, amelyeknek körülbelül 2GÖG-4GÖG0 daiton közötti, meghatározott molekulatömegük van és aminosav-összetételük megfelel egy glatiramer-acetálnak vagy ezzel rokon kopoh'mernek. Megbatározott molekulatömegekkel azok a pohpeptidek rendelkeznek, amelyek szekvenciái meghatározottak. A glatíramer-aoetátnak megfelelő molekulatömeg kalibráló standardok alanin, glutamlnsav, tirozín és lizin nevű aminosavakat, specifikus mőlarányban tartalmaznak, A rokon terpolimereknek megfelelő molekulatömeg kalibráló standardok a fenti négy aminosavból hármat tartalmaznak. Egy előnyős kiviteli alakban a polipeptld alanlnnal rendelkezik az N-láncvégen és tirozinnal az N-lánovégtöl számított negyedik pozícióban. A találmány több molekulatömeg kalibráló standardok sorozatára Is vonatkozik egy kopolimer-kompozíoiő molekulatömeg-lartományának meghatározására. A molekulatömeg kalibráló standardok ideális esetben a moláris elliptíeitás és a molekulatömeg vagy a retenciós idő és a molekulatömeg logaritmusa között lineáris kapcsolatot mutatnak.
Optimális esetben a pohpeptidek olyan biológiai aktivitást mutatnak, amely hasonló azon kopolimeréhez, amelyből azokat származtatják, A meghatározott molekulatömegekkel és a glatiramer-acefáthoz hasonló aminosav összetétellel rendelkező pohpeptidek optimális esetben gyógyászatilag is hasznosíthatók immunbetegségek és -állapotok kezelésére.
Autoimmun betegségek akkor fordulnak elő, amikor a szervezet immunrendszere a szervezet egyes saját szöveteit nem ismeri fel sajátjaként” és azokat idegenként” megtámadja. Normális esetben a sajáfanyag felismerés az immunrendszeren belüli, azon fejlődés során, amely megakadályozza, hegy a szervezet saját T -sejtjei és S-sejtjei a szervezet saját szöveteivel reagáljanak, korán kifejlődik. Ezeket a korai immunválaszokat az antigének MHC-molekulákhoz való kötődése és a T-sejt receptoroknak való bemutatás közvetíti.
Ez a sajatanyag felismerési folyamat összeomlik, amikor autoimmun betegségek fejlődnek kl, és a szervezet saját szöveteit és proteinjeit a szervezet immunrendszere autoanflgénekként Ismeri fel, és megtámadja. Például a sclerosis multiplexről azt gondolják, hogy egy autoimmun betegség, amely akkor fordul elő, amikor az immunrendszer megtámadja a mielin hüvelyt, amelynek az idegek elszigetelése és védelme. Ez egy kifejlődő g, amelyet demlelinezés, majd idegi és mozgás funkciós károsodás jellemez. A rheumatoid arthritis (RA”) vélhetően szintén autoimmun betegség, amely e szinovléüs Ízületek gyulladásából és aktivált T -sejtek, makrofagok és plazma sejtek beszüfedéséből áll és az ízületi porc progresszív károsodására vezet. Ez az Izületi betegség legsúlyosabb formája. A rheumatoid arthritis során megtámadott autoantigén(ek) természete kevéssé ismert, bár a li-típusú kollagén lehetséges felelős.
A sclerosis multiplex és a rheumatoid arthritis kifejlődésére való hajlam örökletes, A szóban forgó betegségek többször fordulnak elő azokban a személyekben, akik egy vagy több jellegzetes ll-osztályú MHC alléit (aheiomorf gént) hordoznak. Például a rheumatoid artrítisre való örökletes hajlam erős összefüggésben áll a H-oszláíyú MHC DR8V0401, DRBV04Ö4 vagy DRB 1*0405 vagy a ÖRS 1*0101 allélekkel. A hiszfokompatibilltás génhely antigének (HLA) sejtek felületén találhatók és a szövetek egyedi szórna jellegének meghatározását segítik különböző személyekből. A hisztokompatibilitás génhely antigének génjei a 6. számú kromougyanazon régiójában helyezkednek el nagyméretű hisztotibihtás komplexként (MHC). Az MH€-»régió molekulák számos különböze osztályát expresszélja a test különböző sejtjeiben, a gének a kromoszóma mentén szekvencia sorrendben I-, ii- és llí-osztályü MHC-gének, Az l-osztályű gének HLA-génekbol állnak, amelyek tovább csoportosíthatók A, B és C alrégiőkra. A H-osztályú gének tovább csoportosíthatók a DR, DO és DP alrégiokra, Az MHC-DR molekulákat ismerjük a legjobban; ezek az antigént bemutató sejtek, igy például makrofágök, a nyirokszövet dendrites sejtjei és felhám-sejtek felületén fordulnak elő. A Hl-osztályű MHC-termékek a komplement rendszer számos komponensében és egyes nem immun-rokon sejtekben expresszálödnak.
Számos gyógyászati anyagot fejlesztettek ki autoimmun betegségek kezelésére, igy szteroid- és nem-szteroid gyulladásellenes gyógyszereket, például metotrexátof: különböző interferonokat; és a proszfagíandín szintézis számos gátlószerét. A szóban forgó szerek azonban mérgezöek lehetnek, ha rövid Időtartamoknál hosszabb ideig alkalmazzák, vagy nemkívánatos mellékhatásokat okozhatnak. Más terápiás szerek, például antí-TNF-specifikus antitestek vagy antitest-fragmentumok, vagy a TNF-receptor oldható formái megkötik és/vagy gátolják a tumor nekrózís faktor (TNF) gyuHadáskeltö hatását. Ezek a szerek T-sejt felületén egy proteint juttatnak célba és általában megakadályozzák az antigén bemutató sejttel (ARC) való kölcsönhatást Azonban természetes hajlhásü proteineket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítása, kiszerelése, tárolása és célba juttatása gyakran bonyolult. Továbbá, az immunrendszer természetes heterogenitása e gyógyszerek hatásosságának határt szabhat és bonyolíthatja az autoimmun betegségek hosszú távú kezelését.
-4A gíatíramer-aceíát (kopoíimer-1, Gop-1, a továbbiakban GLAT-kopoiimer) alanin, glutaminsav, llzin és tirozin sorrendben körülbelül 4,6:1,5:3,6:1,0 mólarányáböl álló polipeptid-elegy, amelyet a négy aminosav kémiai polimerlzáclójával állítanak elő, olyan termékeket képezve, amelyek átlagos molekulatömege körülbelül a 4000-13000 dalton tartományban van, A megfelelő móltörtek körülbelül alaninra 0,427, glutamínsavra 0,141, lizlnre 0,337 és tirozinra 0,033 és azok körülbelül ± 10 % mértékig változhatnak. A rokon kopolimerek az előbb említett négy aminosavbél háromból álló pollpepfld-elegyek (ezért terpolimerek). A kopolímer-1 és a terpohmerek az emlős immunrendszer és az emberi populáció természetes heterogenitását célozzák, és autoimmun betegségek és más immunállapotok kezelésére hatásosak. Előnyös átlagos molekulatömeg-tartományokat és terpollmer-előállítási eljárásokat ismertet az 5 800 308 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás, amely teljes tartalmára referenciaként hivatkozunk, A találmány szerinti kopoíimer-1 a szakember által ismert módon állítható elő, I. pl, az US 3 849 550 sz, szabadalom leírását. E szerint a tirozin, alanin, y-benzii-glutamát és az ε-Η-trifluor-aoetil-hzin M-karboxí-anhidridjét szobahőmérsékleten absz. dioxánban dietil-amln mint iniciátor jelenlétében polimerizálják, Á glutaminsav y-karboxil~csoportjának felszabadítását jégecetben bidrogén-hromlddal végzik; ezt követi a trifluor-acetil-csoportoknak a lizín maradékokból 1M piperidlnnel végzett eltávolítása. A jelen leírásban a „szobahőmérséklet” kifejezés a kb. 20 - kb. 26ÖC hőmérséklet tartományra vonatkozik. A keresett molekulatömeg profillal rendelkező kopel i mer-1~et bármelyik ismert módszerrel előállíthatjuk. Ilyen módszer pl, a nagy molekulájú elemeket tartalmazó kopolimer-1 kromatografálása és a nem-kívánt féleségeket nem tartalmazó frakciók összegyűjtése; a részleges savas vagy enzimes hidrolízis, amely a nagy molekulájú elemek eltávolítására irányul, majd ezt kővető tisztítás, dializissel vagy ultraszörésset Egy további eljárás szerint a keresett molekulatömeg profillal rendelkező kopolimer-1 előállítására az aminocsoportokaf védett alakban tartalmazó, keresett molekulatömeg profillal rendelkező kopölímer-1-böi indulunk ki és közvetlenül a védőcsoportok eltávolításával jutunk a megfelelő molekulatömeg féleséghez, A találmány szerinti készítmények a szakterületen Ismert eljárásokkal készíthetők ki. A készítményt előnyösen Isoíitizáíjuk és vizes oldattá alakítjuk, amely s.c, Injekció céljára alkalmas. Egy másik megoldás szerint a kopoümer-1 bármely, a szakember által peptid hatóanyagok esetében ismert alakban orális, nazális, bukkálls vagy rektális készítményként kikészíthető. A találmány más, három, négy vagy öt vagy több aminosav más kombinációiból álló kopolímereket is ismertet.
A kopolimer-1 vagy lerpolimer preparátum gyógyászati készítményekben való alkalmazásra történő tanúsításhoz szükséges a preparátumban lévő polipeptídek molekulatömeg-eloszlásának pontos meghatározása. A molekulatömeg meghatározásának egyik módja a kromatográfiás eljárás Superose-12 oszlopon. A Superose-12 keresztkötéses, agaróz alapú anyag, amelynek kizárási tartománya 2x10* Dalion, optimális szétválasztási tartóménya 1000-3x10 Dalfon és a gyöngyök átmérője 2Ö-4Ö pm, A glatiramer-aoetát molekulatömegének meghatározására szolgáló oszlopok kalibráló koefficienseit közvetetten mért molekulatömegekkel rendelkező gíatlramer-acetát-adagok alkalmazásával határozták meg. A közvetett mérések közé tartozott a viszkozimetria és a sebesség szedimentáoiós ultraeentrifugálás- Újabban a glatiramer-aoetát kalibrációs standardok olyan adagjait állhatták elő, amelyek molekulatömegét sokszögű lézerfény szórási eljárással (MALIS) határozták meg.
Ennélfogva igény van olyan molekulatömeg kalibráló standardokra, amelyek standardéként alkalmasak a találmány szeriníf Kopolimer kompozíciók molekulatömeg-eloszlásának meghatározására. A kívánt molekula tömeg kalibráló standardok meghatározott, olyan molekulatömegekkel és fizikai tulajdonságokkal rendelkeznek, amelyek analógok azokkal a molekulákkal, amelyek molekulatömege meghatározandó. Ideális esetben lineáris kapcsolat van a kalibráló standardok meghatározott molekulatömegei (vagy a meghatározott molekulatömegek logaritmusa) és egy mérhető fizikai tulajdonság, így például a kalibráló standardok moláris eliipticiiása vagy molekula méret szerint elválasztó oszlopon mért retenciós Ideje között..
A meghatározott szekvenclájú molekulatömeg kalibráld standardok, amelyek kémiai és fizikai tulajdonságai hasonlóak, a GLAT-kopollmerhez. pontos és megbízható kalibráló sorozatot biztosítanak a termék-adagok, molekulatömegének meghatározásaihoz. A találmány olyan GLAT-kopollmer származékokat ismertet, amelyek alkalmasak molekulatömeg kalibráló standardokként GLAT-kopollmer készítmények molekulatömeg tartományainak meghatározására és optimális esetben gyógyászatilag alkalmazhatók immunálíapotok kezelésére, A találmány továbbá meghatározott m. ο I e k u I a t ö m e g e k k e I re no e I ke zó ρ ο 1i p e p 11 d e k e t ismertet,, amelyek más kopohmerek származékai és amelyek alkalmasak a szóban forgó polimerek preparátumai molekulatömeg-tartományának meghatározására·. Amikor a szóban forgó kopolimerek gyógyászatilag hasznosíthatók, akkor optimális, esetbe n a származék-poiipeptldek is gyógyászatilag alkalmazhatók. A GLAT-kopollmer preparátum molekulatömeg tartományának meghatározására előnyös származék az olyan polipeptid, amely aminosav-összetéteie közelítőleg megfelel a
GLAT-kopollmerének és olyan meghatározott molekulatömeggel rendelkezik, amely körülbelül 2000-40000 dahon között van. A polipeptid előnyösen az aianin., a glutaminsav, a íirozm és a·· lizin nevű amínosavak specifikus móiarányaivai rendelkezik. Továbbá egy előnyös kiviteli alakban a polipeptid az N-láncvégnél aianint és az N-iáncvégtőí számított 4. pozícióban tlrozint tartalmaz, Egy terpolimer molekulatömegének meghatározására az előnyös származék meghatározott molekulatömeggel és olyan aminosav-ősszetéíellel rendelkezik, amely körülbelül a szóban forgó terpolimer ének felel meg, A találmány más köp ol lm ereket Is ismertet. A találmány szerinti kopolimer molekulatömegének meghatározásakor a pollpeptíd-származék meghatározott moleilatömeoqel és olyan aminosav-összetétehel rendelkezik, amely közelítőleg megfelel a szóban forgó kopolímeréne-k.
A találmány továbbá molekulatömeg kalibráló standardok sorozatát ismerteti a glatiramer-acefáf vagy egy terpolimer vagy más kopolimer molekulatömegének meghatározására molekulatömeg szerint elválasztó oszlopon. A kalibráló standardok 2-10 vagy több polípepííöel tartalmaznak, minden egyes polipeptid meghatározott molekulatömeggel rendelkezik. A glatiramer-acélát molekulatömeg tartományának meghatározásakor előnyösen a molekulatömeg kalibráló standardok sorozata körülbelül 20ÖÖ-4000Ö dahon, meghatározott molekulatömeggel és a glatiramer-acetátnak vagy a kiválasztott terpolimernek megfelelőamínosav-összet lehel rendelkeznek. Előnyös kiviteli alakokban lineáris kapcsolat van a molekulatömeg kalibráló standard polipeptid molekulatömegének logaritmusa és akár a molekulatömeg kalibráló standardok retencí.ös ideje a méret-meghatározó oszlopon vagy a molekulatömeg kalibráló standardok molekulatömege és a molekulatömeg kalibráló standardok moláris elllptlcltása között.
A találmány továbbá gyógyászati készítményt ismertet, amely GLAT-kopollmer molekulatömeg tartományának meghatározására molekulatömeg kalibráló standardként alkalmazható polipeptid gyógyászatííag hatásos mennyiségét tartalmazza és lényegében alanin, glutaminsav, tirozln és lizin amínosavakböi, (körülbelül 0,38-0,50 alanin, körülbelül 0,13-0,15 glutaminsav, körülbelül 0,08-0, Tö tirozln és körülbelül 0,3-0,4 lizin móltórtekkel) és egy gyógyászatííag elfogadható hordozóból áll.
A találmány továbbá gyógyászati készítményt ismertet, amely egy terpolímer molekulatömeg-tartományának meghatározására moiekulatömeg kalibráló standardként használható polipeptid győgyászaíilag hatásos mennyiségét tartalmazza, és lényegében alanin, tirozln és lizin amínosavakböi (körülbelül 0,3-0,8 alanin, körülbelül 0,005-0,25 tirozln és körülbelül 0,.1-0,5 lizin mőitörtekkei) és egy gyógyászatííag elfogadható hordozóból éli. A polipeptid előnyösen lényegében glutamlnsavtól mentes.
A találmány továbbá gyógyászati készítményt ismertet, amely egy terpohmer molekulatömeg tartományának meghatározására molekulatömeg kalibráló standardként alkalmas polipeptid gyógyászatííag hatásos mennyiségét tartalmazza, és lényegében glutamínsavból, tlrözlnból és lizínböl (körülbelül 0,05-0,300 glutaminsav, körülbelül 0,05-0,250 tirozln és körülbelül 0,3-0,7 lizin mőitörtekkei) és egy győgyászaíilag elfogad! β .η -y égé b e π ható hordozóból áll. A polipeptid -előnyösen alanintól mentes.
A találmány továbbá gyógyászati készítményt ismertet, amely egy terpoNmer molekulatömeg tartományának, maghatározására molekulatömeg kalibráló standardként alkalmas polipeptid gyógyászatlíag hatásos mennyiségét tartalmazza és lényegében alanínból, giutammsavból és tirozinból (körülbelül 0,005-0,8 aianín, 0,005-0,3 glutaminsav, körülbelül 0,005-0,25 iizln móltörtekkel) és egy gyógyászatlíag elfogadható hordozóból áll. A polipeptid előnyösen lényegében iizintöi mentes.
A találmány továbbá gyógyászati készítményt ismertet, amely egy terpoiimer molekulatömeg-tartományának meghatározására molekulatömeg kalibráló standardként alkalmas polipeptid győgyászatilag hatásos mennyiségét tartalmazza és lényegében alanínból, gluiaminsavból és íizlnből (körülbelül 0,005-0,6 aianin, körülbelül 0,005-0,3 glutaminsav és körülbelül 0,2-0,7 iizln móltörtekkel) és egy győgyászatilag elfogadható hordozóból áll... A p-o-iipepiid előnyösen lényegében tirozintól mentes.
Általában a találmány szerinti gyógyászati készítmények bármely számú (például 2-5, vagy több) amlnosavból álló kopoNmer molekulatömeg tartományának meghatározására, molekulatömeg kalibráló standardként, alkalmas polipeptid gyógyászatllag hatásos mennyiségét tartalmazzák. A giatiramer-acetát esetében az ilyen kopolimer az aminosav szekvenciák különböző csoportja. A- molekulatömeg kalibráló standardokként alkalmas polipeptid: az aminosavak olyan mőltörtjeibcl áll, amely közelítőleg megfelel a k;
mernek.
ί
A találmány továbbá eljárást Ismertet immun-közvetített és autoimmun betegségek kezelésére és megelőzésére emlősökben, amely szerint a találmány szerinti molekulatömeg kalibráló standard gyógyászatilag hatásos mennyiségét adagoljuk. Más kiviteli alakban az immun-közvetített és autoimmun betegségek kezelésére Irányuló eljárás emlősökben magában foglalja továbbá az immun támadással érintett T-sejtek szaporodásának gátlását. Más kiviteli alakban az immun-közvetített és autoimmun betegségek kezelési eljárásában emlősökben a találmány szerinti molekulatömeg kalibráló standardot egy antigén bemutató sejthez kötjük. További másik kiviteli álakban az emlősök immun-közvetített és autoimmun betegségei kezelési eljárása során a találmány szerinti molekulatömeg kalibráló standardot egy olyan ll-osztályú nagyméretű hisztokompatibilltás komplex -proteinhez kötjük, amely az autoimmun betegséggel van kapcsolatA találmány szerinti autoimmun betegségek közé tartoznak az arthritíses állapotok, a demlelinezési betegségek és gyulladásos betegségek. Például a találmány szerinti készítményekkel kezelhető autoimmun betegségek közé tartozik a selerosis multiplex, a rheumatoid arthritis, a osont-ízül eh gyulladás, az autoimmun haemolitiküs vérszegénység, az autoimmun szék gyulladás, az autoimmun pajzsra irigy
Uadás. az autoimmun uvaoretinltls, a Crohn-féle betegség, a krónikus immun trombocitopenlkus vörheny, a vasíagbélgyu tés érzékenységi betegség, a dla.bet.es meUitus betegség, a Gulllain-Barre-féle tünetcsoport, a betegség, az édiopathiás mixodéma, a myasthen
Uadás, az érina Gra vés-féle
Hashimoto-féle a gravis (Izomgyengeség), a pikkelysömör, a közönséges börhólyagosodás ípemphlgus vulgáris) vagy az általános lupus erythematosus.
Az immun-közvetített betegségek az immunrendszer különösen idegen antigénekre való nemkívánatos érzékenységéből származik. Ezekre példák a gazda-beültetetf-szövet-típusü betegség CHVCD1 és a beültetett szövet-gazöa-típusű betegség (GVHO) és számos késleltetett-típusú hiperszenzítivítás (DTK).
A találmány szerinti készítmények a szóban forgó betegségek közül egy vagy több kezelésére alkalmazhatok.
Az ábrák rövid ismertetése
Az la-i, ia-2, ia-3 ábrák az 1. táblázatban ismertetett molekula kaííbráJőstandardoköan crv-ka flórád ős standardok) az alanin megoszlását ismertetik. Az aminosav pozíciót az x-tengelyen jelöljük. Az alanin jelenlétét a jelzett aminosav pozícióban függőleges csík jelzi.
az lö-ΐ, ib-2, 10-3: ábrák az 1. táblázatban ismertetett TV-kaiibráciös standardokban a lizln megoszlását ismertetik. Az aminosav pozíciót az x-tengelyen jelöljük, a lizln egység jelenlétét a jelzett aminosav pozícióban f üggőleges sav jelzi.
Az ic-i, ic-2f ic-3 ábrák az 1. táblázatban ismertetett tv-kalioráciős standardokban a glutamlnsav megoszlását ismertetik. Az aminosav pozíciót az x-tengelyen jelöljük, A glutamlnsav egység jelenlétét a jelzett aminosav pozícióban függőleges sáv jelzi, az ld-1, td-2, ld-3 ábrák az 1. táblázatban ismertetett τν-kalíbráciös standardokban a tirozin megoszlását ismertetik. Az aminosav pozíciót az x-tengelyen jelöljük. A tirozin egység jelenlétét a jelzett amínosav pozícióban függőleges sáv jelzi.
A 2. ábra a találmány szerinti TV-kaíibrációs standardok moláris eiíípöcitása és molekulatömege ábrázolásával képzett pontsort ismerteti ismert glatiramer-acetát kalibráló standardokkal összehasonlítva. A moláris ellipticitást 10'5 deg cm'2 dmoP-öen, a molekulatömeget daftonban adjuk meg. A körök a TV-kalibrácios standardokat, a négyzetek a glatiramer-acetát kalibráló standar* * dókat jelentik. Amint 22 látható, a TV-kalibráciős standardok lineáris kapcsolatot biztosítanak a moláris eiílpticitás és a molekulatömeg között.
A 3a. ábra a találmány szerinti TV-kalibráclós standardok relatív retenelós ideje (RRT) és a szóban forgó kalibráló standardok molekulatömegének logaritmusa ábrázolásával felvett pontsort mutatja az RRT -alapú algoritmus alkalmazásával.
A 3 b. ábra a TV-kalíbráciős standardok molekulatömegének logaritmusa és a szóban forgó kalibráló standardok retenelós ideje (RT) ábrázolásával felvett pontsort mutatja a Millennium-alapú a 1 go r i tm u $ a 1 ka 1 ma zásával.
A 4 a. ábra a találmány szerinti τν-kallbráeiős standardok relatív retenelós ideje (RRT) és a szóban forgó kalibráló standardok molekulatömege ábrázolásával képzett több kalibrációt összegző pontsort ismerteti, RRT-alapű algoritmus alkalmazásával. Az adatokat 16 oszlopról gyűjtöttük. Mind a 16 kalibráció átlagos értékeit ismertetjük.
A 4b. ábra a találmány szerinti TV-kalibráciős standardok relatív retenelós ideje (RRT) és a szóban forgó kalibráló standardok molekulatömege ábrázolásával képzett több kalibrációt összegző pontsort ismerteti, Millennium-alapú algoritmus alkalmazásával. Az adatokat 16 oszlopról gyűjtöttük. Mind a 16 kalibráció átlagos értékeit ismertetjük.
Az 5, ábra mono-Cop-1 ELISA felvétele a Cop-i kötésének antt-Cop-1 poliklón antitestekhez négy W-kalibrációs standard és Cop-1 (03494) általi gátlását mutatja. Az abszorbancia aránya növekvő inhibitor koncentrációval mért abszorbanclát jelzi a kötő inhibitor hiányában mért abszoröanelához viszonyítva,
A szekvencíalísta ismertetése;
Szekvencia azonosítási szám <213>
<223>
mesterséges szekvencia szintetikus peptíd
2 3 | <213> <223> <213> <223> | mesterséges szekvencia szintetikus peptid mesterséges szekvencia szintetikus peptid |
4 | <213 > | mesterséges szekvencia |
<223 > | szintetikus peptid | |
5 | <213> | mesterséges szekve ncia |
<223> | szintetikus peptid | |
6 | <213 > | mesterséges szekvencia |
<223> | szintetikus peptid | |
7 | <213> | mesterséges szekvencia |
<. Zzó >> | szintetikus peptid |
A találmány szerinti molekulatömeg kalibráló standardok (például TV-kaiibrációs standardok) közé olyan poilpeptidek tartoznak,. amelyek aminosav összetétele közelítőleg megfelel a glatiramer-acetáténak vagy a rokon terpolimereknek és meghatározott molekulatömeggel rendelkeznek, amely körülbelül 200040000 daiton között van és alkalmasak a GLA τ -kopoiimer és a rokon terpolímerek molekulatömegének pontos meghatározására. A meghatározott molekulatömeg követelményéből következik, hogy a τν-kalíorációs standardnak diszkrét molekulatömeggel kell rendelkezni és nem molekulatömegek tartományával. Ennek megfelelően a W-kaiíbrácíős standardokat előre meghatározott aminosav szekvencia szerint állítjuk elő, amely összetételében megfelel annak a kopollmernek, amelyre a molekulatömeg tartomány meghatározandó. Optimális esetben a w-kalibrádős
κ a megfe van, A szóban hm no gyogyt ι alkalmazhatók bármely molekula méret megkülönböztető rendszerben bármei megfelelő molekulát?
te
IV alkalmazásával· Például a találmány szerinti kalibráló standardok alkalmazhatók poilpeptidek vagy proteinek molekulatömeg meghatározására alkalmazott bármely kro?
ráfiás eljárás vagy készülék kalibrálására. Az ilyen kromatográfiás készülék lehet molekulatömeg szerint elválasztó oszlop, amely a polipeptideket molekula méretük alapján különíti el. A molekulatömeg szerint elválasztó oszlopokra példák a TS&-oszlopok, a Sephadex-oszlopok, a Sepharose-osziopok és a Superose-oszlepok. Diszkrét mérettel és összetétellel rendelkező molekulatömeg kalibráló standardok biztosítása érdekében a találmány szerinti molekulatömeg kalibráló standardokat a szakember számára Ismert eljárásokkal előre meghatározott szekvenciák szerint állíthatjuk elő.
A találmány szerinti aminosavak közé tartozik a 20 általában előforduló aminosav, nem korlátozódik azonban a találmány ezekre. A találmány körébe tartoznak a természetben előforduló és szintetikus származékok, például a szelénoclszteirs is. Az amfnosavak közé tartoznak továbbá az aminosav analógok. Az aminosav “analóg az aminosav kémiailag rokon vegyület©, amely eltérő konfigurációval rendelkezik, például egy izomer vagy egy D-konflgurációjú vegyület L-konfiguráclő helyett; vagy egy az aminosavhoz közeli méretű és alakú szerves molekula vagy olyan aminosav, amelyen a peptíd kötésben résztvevő atomok módosítva vannak annak érdekében, hogy proteáz-ellenállók legyenek, amikor pepiidben vagy polípeptidben polimerizáljuk.
Az “aminosav és “aminosav szekvencia kifejezések a leírásban és az igénypontokban alkalmazva egy vagy több aminosav-származék és/vagy aminosav-analóg összetevőt jelenthetnek, amelyek egy része vagy egésze a szekvencia által jelzett, természetben előforduló 20 aminosav közül egy vagy több egységet tartalmaznak. Például egy egy vagy több tírozin egységgel rendelkező aminosav szekvenciában a szóban forgó egységek közül egy vagy több részlete ho-motírozinn-el helyettesíthető. Továbbá, ebbe a definícióba értendő egy olyan aminosav szekvencia, amely egy vagy több nem-pepiid vagy peptidutánzo kötéssel rendelkezik két szomszédos egység között.
Az egybetüs vagy hárombetűs aminosav rövidítések (és az aminosav, amelyet a rövidítés jelöl) a következők: A jelentése aia (aianln); C jelentése cys (císzíein); D jelentése asp (aszpartámsav); E jelentése glu (glutamínsav); F jelentése phe (feniiaianín); G jelentése gly (glicin); H jelentése his (hisztidin); I jelentése iíe (ízoíeucm); K jelentése lys mg; L je i za n f #á eu (leucin); M jelentése met (metionln); N jelentése asn (aszparagin); P jelentése pro (prolin); Q jelentése gin (giutamin); R jelentése -arg (arginin); S jelentése ser (szerín); T jelentése thr (treonin); V jelentése vai (valin); W jelentése trp (trlptofán); és Y jelentése tyr (tírozin).
A hidrofób” aminosav kifejezés a jelen leírásban és az igénypontokban alkalmazva az aianln (A vagy aia), a glícín (G vagy gly), az ízoieucin (I vagy iie). a leucin (L vagy leu), a prolin (P vagy pro), és- a valin (V vagy val) alifás aminosavakat - a zárójelben levő kifejezések az aminosavak egybetüs vagy hárombetűs általános rövidítései - és a trlptofán (W vagy trp), a fenilaianín (F vagy phe), és a tírozin (Y vagy tyr) aromás aminosavakat foglalja magában. Az aminosavak hidro-fobicitást mutatnak az alifás rész hossza és az aromás oldalláncok mérete függvényében, amikor azok a proteinen belül egységként talál hatók.
Az ”tőltéssél rendelkező” aminosav kifejezés a jelen leírásbán és az igénypontokban alkalmazva az sszparaginsav{£> vagy asp), a glutamlnsav (E vagy giu), a hisztidin (H vagy hisz), az arginin (R vagy arg) és a tizin <K vagy lys) aminosavakat foglalja, magában, amely amínosavak pozitív (his, lys és arg) vagy negatív (.asp· és gly) töltést adnak a szóban forgó egységeket tartaimazó proteineknek vizes oldatokban a pH élettani értékei mellett.
A találmány szerinti polípeptid kompozíció. A találmány szerint meghatározott molekulatömeggel rendelkező és a tírozín, a glutaminsav, az aianin és a íizin nevű amínosavak közöl hármat vagy mind a négyet tartalmazó polipeptidek előnyösek a tat élmény szerinti kalibráló standardokként. Azonban a szakember könnyen helyettesítheti a szerkezetileg rokon aminosavakat a találmány értelmétől való eltérés nélkül. Ennélfogva a találmány tárgyát képezik továbbá a találmány szerinti ponpepbdakben a tírozin, a gluiaminsav, az aianin és a lizín hagyományos aminosav-helyetteshései.' Az ilyen szerkezetileg rokon amínosavak közé tartoznak azok az amínosavak, amelyek körülbelül azonos töltéssel, hidrofób jelleggel és mérettel rendelkeznek, mint a tírozin, a gluíaminsav, az aianin vagy a lizin. Például a tizín szerkezetileg rokon az arginínnei és a hísztidmnel; a glutaminsav szerkezetileg rokon azaszparaginsavval: a tirozin szerkezetileg rokon a szérinnel, a treomónal, a triptofánnal és a fenUalaninnal; és az aianin szerkezetileg rokon a val.in.nai, a leucinna.1 és az izoleucinnal.
továbbá a találmány szerinti molekulatömeg kalibráló standardok állhatnak L~ vagy.ö-aminosavakból. Ámint az a szakem17 ser számára ismert, a legtöbb természetes proteinben L-amínosavak fordulnak elő. Azonban a O-amínosavak kereskedelmi forgalomban beszerezhetők és a találmány szerinti molekulatömeg kalibráló standardok előállítására alkalmazott egyes vagy összes · aminosavat helyettesíthetik,. A találmány tárgyát képezik a D- és L-aminosavak elegyeibőí képzett molekul;
kalibráló standardok és lényegében vagy L- vagy bői álló molekulatömeo kalibráló standardok is.
O-amlnosavakA találmány szerinti poiipeptidekben lévő arnínosavak átlagos molekulatömege és átlagos móiförtje változhat. Azonban a molekulatömeg a körülbelül 2000-40000 tartományban van, és a savas polipeptidekkel szemben inkább a bázikus pollpephöek előnyösek.
Egy kiviteli alakban a találmány tirozint,. alanint, glutaminsavat és lízínt meghatározott móiarányokban tartalmazó polipeptid kalibráló standardokat Ismertet. Egy előnyösebb kiviteli alakban a találmány szerinti poiipeptidekben lévő amlnosavak mólaránya azonos a GLAT-kopolímerben találftal. A mólarányok közötti Ilyen összefüggés biztosítja a legjobb molekulatömeg kalibráló standardokat, mert a szóban forgó kalibráló standardok töltése és molekula-alakja hasonló a GLAT-kopollmeréhez. Amikor szerkezetileg különböző kalibráló standardokat alkalmazunk,: a kalibráló standardok a GLAT-kopolimer preparátumoktól eltérőhöz vándorolhatnak vagy eltérőnél eíuáihatnak annak ellenére, hogy a szóban forgó preparátumok a kalibráló standardokkal azonos molekulatömegüek.
Továbbá egy előnyös kiviteli alakban az alanin az N~ novégen és a tirozín az N-láncvégtől számított 4, pozícióban van. Különböző gíaíiramer-acstát egységeken végzett Edmah-lebontási analízisek nagy mennyiségű alanin! mutattak ki az N-láncvégen és iirozlnf az N-láncvégtői számított 4. pozícióban. Ezért bizonyos előnyös kiviteli alakokban a GLAT-kopolimer molekulatömeg kalibráló standardok alanlnnal rendelkeznek az N-íáncvégen és tirozinnal az NMáncvégtől számított 4. pozícióban. A GLAT-kopolimer előállítására alkalmazott poilmerízáciős reakciók tanulmányozása kimutatta, hogy az alanin és a glutamlnsav gyorsabban polimerizálődik, mint a lizin. Ennek eredményeként a GLAT-kopolimer C-íánovégl részlete gyakran gazdagabb alaninban és gíutaminsavhan, mig az N-láncvégi részlet gyakran gazdagabb lizlnben. Előnyös kiviteli alakokban a GLAT-kopolimer molekulatömeg kalibráló standardokban az. aminosav egységek megoszlása ezt az eltolódást tükrözi.
A GLAT-kopolimer molekulatömeg-tartományának meghatározásakor az előnyös molekulatömeg kalibráló standard lényegében alanin, glutamlnsav, tirozín és lizin aminosavakböl áll alaninra körülbelül 0,38-0,50, glutamlnsavra körülbelül 0,13-0,15, tírozinra körülbelül 0,08-0,10 és lizinre körülbelül 0,3-0,4 mőitörtekkeí.
Más kiviteli alakokban a találmány az alanin. a glutamlnsav a llrozin és a lizin nevű négy aminosav- közül hármat meghatározott arányban tartalmazó molekulatömeg kalibráló standardokat ismertet. Előnyös kiviteli alakokban a rnoíekulatörneg kalibráló standardokban jelenlévő aminosavak mőiförtjei azoknak a mőltörteknek relelnek meg, amelyeket a megfelelő íerpolimerhen találunk.
Amikor a molekulatömeg kalibráló standard alanin!, giutaminsavat és tirozint tartalmaz, az alanin körülbelül 0,005-0,800, a glutamlnsav körülbelül 0,005-0,300, és a tirozin körülbelül 0,005-0,250 móltőrttel lehet jelen. A molekulatömeg körülbelül 2Ö0O-400ÖÖ dalion, és előnyösen körülbelül 300.0-12000 dalion.
Amikor a molekulatömeg kalibráló standard alanini, giutaminsavat és lizint tartalmaz, az alanin körülbelül 0,005-0,500, a glutamlnsav körülbelül 0,005-0,300 és a Hzln körülbelül 0,2-0,7 móltőrttel lehet jelen. A molekulatömeg körülbelül 2000-40000 dalton és előnyösen körülbelül 3000-12000 dalion.
Amikor a molekulatömeg kalibráló standard alani-ni, tirozint és lizint tartalmaz, az alanin körülbelül 0,3-0,5,, a tirozin körülbelül 0,005-0,250 és a tlzín körülbelül 0,1-0,5 móltörttel lehet leien. A molekulatömeg körülbelül 2000-40000 dalto.n és előnyösen körülbelül 3000-12000 dalton.
Amikor a molekulatömeg kalibráló standard glutamínsavat, tirozint és lizint tartalmaz, a glutamlnsav körülbelül 0,005-0,300, a. tirozin 0,005-0,250 és a Ílzin körülbelül 0,3-0,7 móltőrttel lehet jelen, A molekulatömeg körülbelül 2000-40000 dalton közötti érték, és előnyösen körülbelül 3000-12000 dalién.
A találmány szerinti polípeptidek a találmány körébe tartozó más kopolimerek molekulatömeg tartományának meghatározására alkalmazhatók, A találmány szerinti kopolimerek három, négy vagy őt vagy több aminosav kombinációjából állhatnak. Általában a találmány szerinti kopottmer molekulatömeg tartományának meghatározására a polipeptid molekulatömeg kalibráló standard meghatározott molekulatömeggel, és olyan aminosav összetétellel rendelkezik, amely a szóban forgó kopoiimerének közelítőleg megfelel. A szakember számára nyilvánvaló, hogy a ko polimerben az aminosavak eloszlásában bármely eltolódás meghatározható a fentebb a GLAT-kocohmernél ismertetett módon. Például egy terpolimer csoport minden egyes pozíciójában lévő aminosavak relatív mennyiségei megkaphatok egy Edman-lebonfás minden egyes lépéseiből származó termékek elemzésével Más megoldásként egy tér polimer csoportban lévő aminosavak arányai a szintézis során követhetők. Ahol az alkalmazható, molekulatömeg kalibráló standardok szintetizáihatők az eltolódás tükrében. Továbbá bizonyos előnyös terpoh'mer molekulatömeg kalibráló -standardok síaniní vagy tlrozínt tartalmaznak a 4. pozícióban.
Az előnyös polipeptid molekulatömeg kalibráló standard szekvenciákra példákat az 1. táblázat tartalmaz (szekvencia' azonosító számok: 1-7) a hagyományos egybetüs aminosav jelzés alkalmazásával, az N-láneveatöl a C-iáncvéu felé olvasva, A hét jelzett szekvencia polipeptídek egyedi preparátumai, amelyek a glatiramer-acetátnak megfelelő aminosav összetétellel rendelkeznek. Általában egy molekulatömeg kalibráló standard molekulában lévő aminosavak túlnyomó többségben egy konfi— gurációjúak (D- vagy L-konfiguráció),. Előnyős kiviteli alakokban a molekulatömeg kalibráló standard molekula teljes mértékben azonos konfigurációjú aminosavakból áll. Azonban kevert konfigurációjú aminosavakat tartalmazó molekulatömeg kalibráló standard molekulák előnyösek lehetnek bizonyos kiviteli alakokban, ahol a molekula-tömeget olyan glatiramer-acetát preparátumra határozzuk meg, amely kevert konfigurációjú aminosavskat tartalmaz
Kiválasztott TV-kalibrációs standardok aminosav szekvenciái
TV-4& _ | Szekvencia azonosítási szála | Ι Szekvencia j |
1 | ΛΚΚΥΛΚΚΕΚΛΑΚΚΑΥΚΚΕΛΚΑΚΑΑΕΑΑΛΚΕΛΑΥΕΑ j | |
TV-45 | 2 | ÁÁYEA Γ ! |
TV-56 | 3 | ΚΑΕΑΛΚΑΑΑΚΕΑΑΥΕΑ |
TV-66 | 4 | ™ffiffi^m^HMKAEAKK¥AKAAKAEK- |
TV-77 | 5 | ||
j í EÁAYEA ; | ||
TV-109 Ι 7 | ΛΚΚ7ΛΚΚΑΕΚΑ¥ΑΚΚΑΚΑΑΚΕΚΚΛΥΑΚΚΕΛ1(Α¥ΚΑΑΕΑΚΕ>Π |
A találmány egy más kiviteli alakjában molekulatömeg kalibráló standardok sorozatát ismerteti glatiramer-acetát vagy egy terpolimer molekulatömegének meghatározására molekulatömeg szerinti elválasztó oszlopon, A molekulatömeg kalibráló standardok sorozata polípeptidekből áll A kalibráló standardok állhatnak 2-től körülbelül 10 vág előnyös kiviteli alakban, a kabb
7. Minden egyes 40000 dalion
körülbelül 2000aminosav » >
összetétellel rendelkezik, amely közelítőleg megfelel a glatiramer-aeetát vagy a terpolímer összetételének.
Amikor ilyen molekulatömeg kalibráló standardok sorozatát alkalmazzuk a glatiramer-acetát vagy a terpolímer molekulatömegének meghatározására standardként, közelítőleg lineáris kapcsolat van a moiekulatömeg kalibráló standardok retenciós Ideje a kromatográfiás oszlopon és a molekulatömeg: logaritmusa kozott. Annyi kalibrációs standardot alkalmazunk, amely elegendő a közelítőleg lineáris kapcsolat biztosításához, bár ennél több alkalmazható, A 3, ábra a közelítőleg lineáris kapcsolatot mutatja a relatív retenciós idő és a molekulatömeg logaritmusa között a találmány szerinti TV-kallbrációs standardok esetében.
Más kiviteli alakban közeíhőleg lineáris kapcsolat van a molekulatömeg kalibráló standardok moláris ailípticítása és a kalibráló standardok molekulatömege között. Amikor a glatiramer-acetát preparátum molekulatömegét moláris ellipticltással határozzuk meg, annyi kalibráló standardot alkalmazunk, amely elegendő a közelítőleg lineáris kapcsolat biztosításához, bár ennél több alkalmazható. A glatiramer-acetát vagy terpolímer preparátumra a lineáris kapcsolaton alapuló molekulatömeget kapunk. A 2. ábra a találmány szerinti TV-kalibrációs standardokra a moláris eülpticilás és a molekulatömeg közötti közelítőleg lineáris kapcsolatot mutatja.
.rv mány szerinti gyógyászati készítmények. A LAT-kopolímernek összetételében megfelelő, találmány szerinti moiekulatömeg kalibráló standardok optimális esetben biológiai hatással rendelkeznek és a GLAT-kopohmerrel azonos módon alkalmazhatók betegségek kezelésére. A biológiai hatás23 >aí rendelkező TV-kaíiferácIós standardokra szeli kalibráló standardként hivatkozunk.. Pé váltakozva győgys daul a GLAT-kopo límer alkalmas emberekben selerosis multiplex (MS) kezelésére és egerekben, kísérleti allergiás encepbalomyelitis (EAE) blokkolására. A GLÁT-kopoíímernek megfelelő, találmány szerinti, meghatározott molekulatömeggel és aminosav összetétellel rendelkező pohpeptldekröl ezúton kimutatjuk, hogy hatásosak egér modellben· és a GLAT-kopohmeréhez hasonló Immunológiai tulajdonságokat mutatnak. Azok a monoklón antitestek, amelyek GLAT-kopolirnerhez kötődnek, TV-kalibrációs standardokhoz is kötődnek. Továbbá bizonyos T-sejteket, amelyeket 3 GLAT-kopollmer serkent, a találmány szerinti molekulatömeg kalibráló standardok Is serkentik.
Hasonlóan a meghatározott molekulatömeggel rendelkező és a gyógyászatilag alkalmazható terpoíimeroek megfelelő aminosav összetétellel rendelkező polipeptid optimális esetében gyógyászatilag alkalmazható. Általában egy biológiailag aktív kopobmernek összetételében megfelelő polipeptid molekulatömeg kalibráló standardok optimális esetben hasonló biológiai hatással re n d e I k e zn e k.
A. találmány szerinti molekulatömeg kalibráló standardok gyógyászatilag elfogadható hordozóanyagot tartalmazó gyógyászati készítményekké szerelhetők ki. A jelen leírásban alkalmazva a gyógyászatilag elfogadható hordozó'* jelentése magában foglalja az összes oldószert, diszperziós közeget, bevonatot, baktériumellenes és gomhaölő szert, íz ötön és felszívódást késleltető szert, édesítőszert és más ezekhez hasonlókat. A gyógyászatilag elfogadható hordozóanyagok sokféle anyagból előállíthatok, ideértve az iliatanyagokat, édesítőszereket és egyéb anyagokat, így például puffereket és abszorbenseket, amelyek szükségesek lehetnek meghatározott gyógyászati készítmény előállításához,, az anyagok köre nem. korlátozódik azonban ezekre. Az ilyen közegek és szerek alkalmazása a gyógyászatilag hatásos anyagokkal a szakterületen ismeretes. Kivéve·,. ha bármely hagyományos közeg vagy szer összeférhetetlen a hatóanyaggal,, annak alkalmazása a gyógyászati készítményekben nerc tartozik a találmány körébe. Kiegészítő hatóanyagok szintén a készítményekbe foglalhatók. A találmány szerinti készítmények klszerelhetők injektálható oldatként vagy szuszpenzlóként, spray-oldatként vagy szuszpeηzIóként.
A gyógyászati készítmények a találmány szerinti egy vagy több molekulatömeg kalibráló standard egy mennyiségéi tartalmazzák. Előnyösen a molekulatömeg kalibráló standardok lényegében a tlrozin, az alanin, a glufaminsav és s lizin nevű aminosavak közül mind a négyből vagy három aminosavbóí állnak meghatározott móltöritel. Az aminosavak. mőltörtlel a fentiek szerintiek.
Egy kiviteli alakban a gyógyászati készítmény molekulatömeg kalibráló standardjai képesek egy ll-osztályú MHCprotemhez való kötődésre, amely előnyösen egy autoimmun betegséggel függ össze. A . ll-osztályú MBC-proteín körülbelül egyenlő méretű «. és β alegységekből áll, amelyek közül mindkettő transzmembrán protein. Egy pepiid kotőzseh képződik az a és a β alegységek amino-végi részei által. Ennél a peptíd kötözsebnél történik az antigén bemutatása a T-sejteknek. Legalább három típusú ll-osztályú MHC molekula van: a HLA-DR, a zo
HLA-DQ és a HLA-DP molekulák. Számos alléi ís van, amely ezen HLA-molekelák minden típusait kódolja, A H-osztályú MHC molekulák túlnyomó többségben δ-hmfociták es antigén bemutató sejtek, Így például rnakroíágok felületen expresszálódnak. Bármely megfelelő eljárás alkalmazható annak megállapítására, hogy a molekulatömeg kalibráló standard egy vagy több ll-osztáíyú MHC-proteinhez kötodík-e. Például a polipeptid radioaktív jelzéssel látható ei vagy bÍQtmiiezheíő, keverhető nyers vagy tiszta H-osztályú MHC-proteín preparátummal és a kötés detektálható a jelző (repöfter) molekulának a li-os.ztályú MHC-proteín hez való tapadása által a nem kötött polipeptid eltávolítása után.
Egy másik kiviteli alakban a molekulatömeg kalibráló standardok képesek a scierosis muitíplex-szel összefüggő II-osztályú MHC-proíeinbez való kötődésre. A szóban forgó kiviteli alak szerinti polipeptid a scierosis multiplex-szél összefüggő 11-osztályú MHC-proteín antigén kötőhelyéhez azonos vagy nagyobb affinitással rendelkezhet, mint a kopolimer-1. Ezáltal a találmány szerinti polipeptid gátolhatja a megkötést vagy leszoríthatja a mielín autoantígének kötését a 1 i-osztályύ MHC-protelnröl. A scierosis multiplex-szel összefüggő egy H-osztályú MHC-proteln a HLA-DR4 (ORSriSOl).
Más kiviteli alakban a találmány szerinti molekulatömeg ka-
Hbráiő standardok képesek arthrítises állapottal; | például |
rheumatoid artritlsszoi vagy csont-ízületi gyulladással összefog- | |
gö H-osztályú MHC-proteinbez való kötődésre. Ennek r | negfele- |
lóén a szóban forgó kiviteli alak szerinti polipeptid a | z autó- |
immun betegséggel összefüggő h-oszfályü MHC-proteln | antigén |
kötőhelyéhez nagyobb affinitássá! rendelkezhet, mint a K-típusú kollagén 261-273 pepiid.. Ezáltal a találmány szerinti polipeptid a ll-tlpusú kollagén 261-273 pepiid kötését gátolhatta, vagy a szóban forgó pepiidet leszoríthatja a Ibosztályú MHC-protein antigén kötőhelyéről.
A találmány szerinti gyógyászati eljárások. A találmány továbbá eljárásokat ismertet Immunbetegségek kezelésére és megelőzésére emlősökben, amelyek szerint a találmány szerinti molekulatömeg kalibráló standardot tartalmazó készítmény gyógyászatilag hatásos- mennyiségét adagoljuk.
A találmány szerinti autoimmun betegségek közé tartoznak mind sejt-szabályozott betegségek (például T-sejt), mind antltest-szabályozolt (például B-sejt) rendellenességek, ilyen rendellenességek lehetnek többek között artbrítlses állapotok, demlelínezésí betegségek és gyulladásos betegségek. Például a találmány szerinti polipeptidekke! kezelhető autoimmun betegségek közé tartozik a sclerosls multiplex (MS), a rheumatoid arthritis (RA), a csont-izületi gyulladás, az autoimmun haemolitikus vérszegénység, az autoimmun petefészek gyulladás, áz autoimmun paizsmirigy-gyulLadás, sz autoimmun uveoretinltis, a Crobn-réle betegség, a krónikus immun irornöocitopenikus vörheriy, a vastagb-élgyuíladás, az érintés érzékenységi betegség, a diabetes meílítus, a Graves-féle betegség, a GuiUain-Barre-féie tünetcsoport, a Hashlmöto-íéie betegség, az löiopathlás mixödéma, -a myosihenia gravis (izcmgysngeség), a pikkelysömör, a közönséges bőrhólyagosodás (pe-mphigus vulgáris) vagy az általános lupus erythamatosus. A találmány szerinti készítmények alkalmazhatók a szóban forgó betegségek közül égy vagy több kezelésére,
Az 'farthdtises állapot” kifejezés jelentése a jelen leírásban alkalmazva olyan állapot, ahol a rheumatoid arthritis legalább egy tünete tapasztalható egy emlős legalább egy ízületében, példáéi vállbán, térdben, csípőben, hát-csontban vagy az emlős egy ujján. Az arthritlses állapotok közé tartozik a poHarihrltlsL amely olyan arthritlses állapot, amely több mint egy ízületet érint, a serdülőkori (juvenllis) arthritis, emberek arthritlses állapota 21. életév alatt, a Felty-féle tünetcsoport, amely magában foglalhatja a neutropénla, a spienomegália (lépna-gyobbodás), a fogyás,. a vérszegénység, a nyirokcsomó duzzanat (lymphadenopáfhla) és a bőrön pigment foltok tüneteit.
A jelen találmány szerinti Immun-közvetített: betegségek egy vagy több antigénre való nemkívánatos immun híperérzékenységgel jellemezhetők, és ezek közé tartoznak, a. gazda-beültetetí-szövet-tlpusú betegségek (HVGD) és a heüifeíefí-szővetgazda-típusú betegségek (GVHD), amelyekre példa sorrendben a gazda immunrendszere által a beültetett szövet kilökése és a donor-T sejtek gazda elleni támadása. Ezek a betegségek jelentős akadályt képeznek az átültetési (transzplantációs) rendszerekhez, így például szervátültetésekhez és csontvelő üjraképzeshez. Más találmány szerinti Immun-közvetített betegségek közé tartoznak a késleltetett típusú híperérzékenység (D7H), amely kontakt antigénekkel. Igy például szömoroével és mérges szömareével (Rhus-toxícodendron), számos kémiai anyaggal és tüdővésszel (tuberkulózis), leprával, lelshmanlasis-szal, mély gombafertőzéssel stb, függ össze.
Egy kiviteli alakban bármely aufőimmun betegség kezelhető a találmány szerinti molekulatömeg kalibráló standardokkal, amennyiben a szóban forgó kalibráló standard olyan ll-osztályú MHC-proteinhez kötődik, amely az autoimmun betegséggel őszífögg. A szóban forgó kiviteli alak egy formája eljárást Ismertet, amely szerint kiválasztunk egy olyan molekulatömeg kalibráló standardot,, amely gátolja egy antigén pepiid ll-osztályú MHC-proteinhez való kötődését (például olyan eljárást, amely szerint olyan molekulatömeg kalibráló standardot választunk továbbá, amely gátolja a 11-osztályú specifikus T-sejt válaszokat ll-osztályú MHC-profem-peptíd-komplexhez} és eljárást, ahol az antigén peptíd az autoimmun betegséggel összefügg; a találmány más kiviteli alakjában eljárást ismertet, ahol a ll-osztályú MHC-protein egy atuolmmnn betegséggel függ össze.
Egy más kiviteli alakban egy emlősben autoimmun betegség kezelésére irányuló eljárás során gátoljuk azon Τ-sejíek szaporodását vagy működését:, amelyek felelősek az antigénért. Az RA egy T sejt-közvetített autoimmun betegség, amely a találmány szerinti polipepfldekkel kezelhető. Az autoimmun betegségek kóros folyamatait és az immun kilökést T-sejtek szabályozzák. Az antigénhez kötődés után és annak felismerését kővetően a T-sejtek szaporodnak, cltokmeket választanak ki és további gyulladásos és citotoxíkus sejteket gyűjtenek a helyre. A találmány szerinti molekulatömeg kalibráló standardok megakadályozzak a T-sejtek szaporodását és a T-sejtek olyan funkcióit, mint a citokin kiválasztás és a gyulladásos és citotoxíkus sejtek az adott helyre való gyűjtése. Amikor az autoimmun betegség arthritises állapot, az autoantigén lehet kollagén és a találmány mm szerinti molekulatömeg kalibráló standardok gátolhatják a kollagénre reagáló T-sejtek szaporodását és működését.
Más kiviteli alakban emlős autoimmun betegségek kezelésére szolgáié eljárás szerint a molekulatömeg kalibráló standardot egy antigén bemutató sejthez., igy például makrofághoz, dendrites sejthez vagy ilmfold szövethez vagy hámsejthez kötjük. A T-sejfek szaporodása és működése aktiválódik, amikor egy megfelelő antigént mutatnak be azoknak. Az antigén bemutató sejthez való kötéssel a találmány szerinti molekulatömeg kalibráló standardok gátolhatják vagy egyébként befolyásolhatják a T-sejt aktiválódást.
Egy másik kiviteli alakban az emlős autoimmun betegsége kezelésére szolgáló eljárás szerint a molekulatömeg kalibráló standardot egy olyan Il-osztályú protein, nagyméretű hisztokompatibilitás komplexhez kötjük, amely az autoimmun betegség összefügg.. A Il-osztályú MHC-proteinek túlnyomó részben a B-llmfociták és az antigén bemutató sejtek, igy például makrofágok felületén expresszálódnak. Ezek a il-osztályú MHCöToielnek peplíd-köíö zsebbel rendelkeznek, amely ez a hely. ahol az antigén peptldeket a T-sejteknek bemutatják. Amikor a találmány szerinti polipeptldek egy Il-osztályú nagyméretű hisztokompatibllítás proteinhez kötődnek, a szóban forgó pölipeptidek blokkolhatják vagy egyébként befolyásolhatják az antigén bemutatást és/vagy a T-sejt aktiválást.
Egy másik kiviteli alakban egy emlősben autoimmun betegség kezelésére szolgáló eljárás szerint a molekulatömeg kalibráló standardot kopolimer-1 -reaktív 8-sejt antitestekhez és/vagy kopohmer-1-reaktív T-sejiekhez kötjük. A kopoiimer-1-reaktív
Ϊ-2/3 T-sejtek a kopoiimer-1 gyógyászati hatását fokozzák, A kopollmer-l-reakiiv T-sejtek megkötésekor a találmány .szerinti molekulatömeg kalibráló standardok serkentik a szóban forgó T-sejtek szaporodását, gyulladáseilenes oitokinek kiválasztását és növelik a találmány szerinti eljárások által megvalósított kezelés gyógyászati előnyeit. A találmány szerint a molekulatömeg kalibráló standardok autoanllpén-reaktlv antitestekhez Is kötődnek, amely blokkolhatja az antitestet a célszövet megtámadásában, ezáltal segítve az autoimmun betegség kifejlődésének
A találmány szerinti molekulatömeg kalibráló standardokat adagolhatjuk bármely megfelelő módon. Egy kiviteli alakban a találmány szerinti molekulatömeg kalibráló standardokat adagolhatjuk injekcióval az autoimmun betegséggel érintett szövetekhez való eljuttatás elősegítése érdekében. Ezáltal a találmány szerinti molekulatömeg kalibráló standardok lehetnek például Injekciós adagolásúak, a tápcsatornából felszívódok, beíégzéses vagy helyi alkaimazásúak. A találmány szerinti molekulatömeg kalibráló standardok kiszerelhetek krém, oldat vagy szuszpenzió formájában helyi adagolásra. A molekulatömeg kalibráló standardok előnyösen orális, helyi vagy adjuváns hozzáadása nélküli, injekciós adagolásúak,
A találmány szerint alkalmazható készlet (kit), A találmány egy kiviteli alakjában egy készletet ismertetünk egy anahzálan'-'i Z~>
vá v ez > » y nyagnak egy MHC-profelnhez való kötésének vizsgálatára, a forgó készlet vizoldékony MHC-proteint, például egy nem emlős sejtben rekombináns módon előállifóti MHC-proteint és az MHC-proteinen kötött anaíízáíandó anyag detektálására eszközt,, valamint használati utasítást tartalmaz. A készletben alkalmazott MHC-proteín egy H-osztálvú MHC-próteín, amely lenet
-R-osztál lyó MHC HLA-DR1 protein-, H-osztáliyű MHC HLA-DR2 protein vagy Π-osztályú MRC HLA-DR4 protein. A készlet tartsímazhat továbbá egy autoantigén pepiidet. A találmány szerinti készlet alkalmazható például a találmány szerinti molekulatömeg kalibráló standard ll-osztályú MHC-'p-ro-telnhez való kötődésének vizsgálatára vagy egy autoantigén peptid MHC-köté~ sének oatlására.
Egy előnyös kiviteti alakban a ll-osztályú MHC-protelnt egy gerinctelen állatban vagy egy mikroba sejtben állítjuk elő, Igy például egy rovarséjtben vagy élesztősejtben, ezért az mentes az antigén kötőzseben kötött pepiidtől. Az analizálandó anyagnak az.MHC-protelahez való kötődésének detektálására szolgáló eszköz lehet a szakterületen Ismert bármely radioaktív, fluorimetrlás, kemilurnlneszeenolás, enzimatikus vagy kolo-rimetrlás eszköz. Egy előnyös kiviteti alakban az MHC-protein í -osztályú MLA-DRI vagy HLA-DR4 protein. Az autoantigén peptídre példák a kollagén-lí-pepííd, míelin proteinből: származó peptid, mieltn olígodendrlt protein vagy más, egy autoimmun betegségben lévő proteinből származó
A következő példák a találmányt részletesen Ismertetik, bemutatva, hogy annak bizonyos specifikus, jellegzetes kiviteli alakjai hogyan állíthatók elő;: az anyagok, a készülék és az eljárási lépések kizárólag szemléltető példákként értendők. Közelebbről, a találmány nem értelmezendő az Itt ismertetett eljárá32 sokra, anyagokra, körülményekre, eljárási paraméterekre, készülékre és más ezekhez hasonlőakra korlátozva.
A jelen szabadalmi bejelentésben különböző publikációkra, szabadalmakra és szabadalmi bejelentésekre hivatkozunk. A találmányhoz tartozó technika állása teljesebb Ismertetése érdekében a szóban forgó publikációk, szabadalmak és szabadalmi bejelentések tartalmára teljes egészében referenciaként hivatkozunk a jelen szabadalmi bejelentésben.
Nyilvánvaló és elvárható, hogy az itt Ismertetett találmány éíelmétői való eltérések a szakember által megvalósíthatók. Az ilyen módosítások
Imány korába tartozónak tekintendők,
A következő példák a találmányt tovább szemléltetik.
1, példa
A TV-kalíbrációs standardok fizikai tulajdonságai
Szilárdfázisú szintézis
Prof. M. Frídkin (Weízmann Instltute of Science) laboratóriumában hét, körülbelül 3700-12000 dslton molekulatömegü molekulatömeg kalibráló standardot állítunk elő (2. táblázat). Ezeket a kalibráló standardokat TV-kalibrációs standardoknak nevezzük. Az egyes peptideket TV-## néven nevezzük, ahol a ## jelentése az amínosav egységek száma (például a TV-.35 jelentése 35 egységből álló kalibráló standard). A szóban forgó kalibráló standardok amínosav összetétele megfelelő a glatiramer-acefát leírásoknak (2. táblázat).
2. táblázat
TV-35-3757 Dalion molekulatömegű pepiid·
i Alá | Gtu 1 Tyr | Lys i |
Az egységek száma i 15 | 5 | 3 | 12 ! |
Möltört | 0,429 | j ϊ í 0,143 | 0,088 i 0,343 | |
TV-45 - 4720 Páston molekulatömegű pepiid
Alá i | Glu | I Tyr | Ί í 1 Lys ί | |
Az egységek száma | 20 1 | 6 | I 4 | | 15 j |
Möltört | 0,444 j | 0,133 | ! 0,089 | ~r-*, 1 0,333 j |
TV~56 - 6008 Dalion molekulatömegű pép | tid | |||
Á 1 a 1 | Glu | I Tyr | I Lys ; | |
Az egységek szarna | 24 ! | S | ! 5 | 1 19 f |
Móltört | 0,429 1 | 0,143 | ! 0.089 | 1 9,339 1 |
TV-66 ·· 7040 öalton molekulatömegű pép | tid | |||
Alá J | Glu | ! Lm. | J Lys j | |
Az egységek száma | | 29 i | 9 | • í'* I ° | 1 22 ΐ |
Möltört | 0.439 ) | 0,135 | | 0,091 | | 0,333 1 |
TV-77 - 8259 Dalion molekulatömegű pép | tid | |||
A Is ! | Glu | LliT...... | | Lys | | |
Az egységek száma | 33 I - | 11 | i 7 | 1 26 | 4--'-i |
Möltört
I 0.
0,143 Ϊ 0,091 [ 0,338
TV-86 - 9220 Dalion molekulatömegű pepiid
ígységek száma j 37 12
Mól tőrt
0,430 0,140 I 0,093 ! A O- 03 T ; V , Ο O !
Tyr ] Lys iV-109 - 11727 Daiton moiekulatömegü g eptlu i Ala ί Glu ι 3 egysegek s z á ro a
0« <<4 Ό
Mőlto r*
I 0,422 I 0,138 | 0,092 I 0,349
Az la.,· 1b., 1c. és 1d. ábrák sorrendben az aiantn, a llzin; aglutamínsav és a tirozín megoszlását mutatják a 2. táblázatban ismertetett TV-kaiibrációs standardokban.. Az aminosav pozíciót az X-tengelyen jelöljük úgy, hogy az. első aminosav a C-láncvégi helyzetnek felel meg. Az aminosav jelenlétét a jelzott aminosav pozícióban függőleges sáv jelzi.
A tömeg és a szekvencia hitelesítése
Polípeptid mintákat elemzőnk közvetlenül azok előállítása után, elektron spray ionforrással felszerelt. VG-platform tömegspektrofotométer alkalmazásával.. Néhány hónappal később az analízist TEVA-nál megismételjük elektron spray Ionforrással felszerelt PE-Sciex API 300 íömegspoktrofotométer alkalmazásával (3. táblázat, első preparátum). Ezek az eredmények jelzik, hogy minden egyes polípeptid TV-kallbráciös standard egy, cél szerinti molekulatömeggel rendelkező fö komponenssel rendelkezik.
3. táblázat
Meghatározott szekvenciája poiipeptidek lömegspektroszkóplás elemzése
ΐ Polipeptid | Szándékolt molekulatömeg (dal tón) | Meghatározott ] Meghatározott i molekulatömeg j molekulatömeg - 1, preparátum I - 2< preparátum (dalion) i (dalion) í |
i: TV- 3 5 | 3757 | , I 3757 | 3757 |
i TV-45 | 4780 | 4790 4780 |
j TV-5 6________ 1 TV-58 | 5008 | 5008 i 5008 |
7040_ | 7041 | 7040_ |
TV-77 | j 3258 | 9220 | 8253 1 8220 | 8259 |
TV-3 6 | ί 9220 | ||
TV-109·' | i 1 11727 | f 11728 | | 11727 |
* A 1Ö8 | egységből álló pc | dipeptidel fordított fázisú oszlopon | |
való iraki | rionalizálással tov | ább tisztítjuk. | Három frakciói gyüj- |
tönk, és | a 2, számú frak< | Tót kalibráló | célokra kijelöljük, és |
TV-109 jelzéssel látjuk el. | |||
A kai | Ibráiő standardok | egy második | adagját állítjuk sió. A |
tömegspe | xtroszköpia igazol; | a, hogy a más | rodlk előállítás szerinti |
polipeptid | ek azonosak az el | sö előállítás s | szerinti polipeptidekkel |
(3. táblázat, második előáll | tás). A két el | öállitás közötti hason- | |
lóságot S | uperose-12 kroma | tocráflás eljár | ássa; ís megerősítjük. |
Minden egyes kalibráló standard különböző retenclös időpontokban éles csúccsal eluái, tekintet nélkül az elemzett adagra.
Ennélfogva a találmány szerinti TV-kallforációs standardok redukálható tömegben állíthatók elő.
Edman lebontás
A pottpeptrdsk szándékolt szekvenciáját az első előállítás
Heööotasi ei-emzesevel erosipus. meg.
Cirkuláris dikroizmus
A molekulatömeg kalibráló standardok és a glatilram’er-acetát közötti szerkezeti hasonlóság előfeltétele a molekula méret szerinti elválasztó oszlop megfelelő kalibrációjának. A polipeptid szerkezetben lévő különbségek különböző hidrodinamikai méretet es ebből következően a kromatográfiás rendszerben módosult retenciős időt eredményezhetnek. A cirkuláris chkroizmussal meghatározott elíipticitás a polipeptid másodlagos szerkezetének méréséül szolgái. Amikor a molekulatömeg kalibráló standardok és a glatiramer-acefát elllptíclfása hasonló, a két vegyület szerkezete hasonló.
A polípeptidek moláris eüipticitását dofotn-Yvon CD spektrofotométerrel határozzuk meg. A 2. ábra és a 4. táblázat megmutatja, hogy a moláris eüipílcifás kiterjedése a polipeptid molekulatömegével összefügg. A legrövidebb peptid a legalacsonyabb elíipticitás értéket mutatja. Az új kalibráló standardok moláris eíiipticitása azonos nagyságrendű a jelenleg alkalmazott glatiramer-acetát molekulatömeg kalibráló standardokéval.
standardok pontos a glatiramer-acetát ontsorban alkalmazMegjegyezzük, hogy míg a TV-kallbráclos molekulatömegét pontsorral ábrázoljuk, szám szerinti átlagos molekulatömegét a p zuk.
Ezáltal az új kalibráló standardok és a giatiramer-acetát hasonló szerkezettel rendelkezik és ennélfogva a kalibráló standardok alkalmasak molekulatömeg kalibráló standardokként a giatiramer-acetát új preparátumaihoz.
4. táblázat
Μ ο I a k u i á rí s a 11 i p il c H á s
} ) Molekulatömeg ka- 1 ί Hbráíő standard } t | io le kutató m eg (dalion) | Molekuláris eilipticitás (210 nm) |
TV-kalibráló standardok | ||
TV-3 δ | 37 57 | -1,5367 |
TV-45 | 4790 | -2,1851 |
TV-5 6 | 6008 | -3,9658 |
τν-δδ | 7040 | -3,5172 |
TV-7 7 | 8259 | -4,8365 |
TV-86 | 9220 | ' —····: -5,4548 |
giatiramer-acetát
BD 743 | 3700 | ! -2,0188 | ||
BD 714 | 5600 | ) -4,4182 | 1 1 | |
BD 681 | 8600 | | -5,2019 | I | |
BD 677 | 7000 | i -6.0153 | ||
56895 | } | 8000 | -6,9062 | 1 |
90995 | 8500 | | -9.1738 | I | |
BD 6 56 | 8900 | l | -8,85 7 6 | _1 |
Ezek az analitikai adatok jelzik, hogy a szintetizált TVkalíbrációs standard polipeptídek jelentős fokú hasonlóságot mutatnak a jelenleg alkalmazott glatiramer-aoetát molekulatömeg kalibráló standardokhoz. Az amin ©sav-tartatom a giatiramer-acetátén belül van. Az új polipeptídek és a glatiramer-acetát molekulatömeg kalibráló standardok hasonló, moláris eHípfícrtásként kifejezett másodlagos szerkezettel rendelkeznek, Ennélfogva a TV-kalíbrácIós standardoknak olyan módon kell vándorolni vagy eluáfní gélpermeáoiós kromatográfiás (GPC) rendszerben, így például Superose-12 rendszerben, mint a glatiramer-acetát preparátum.
2. példa
Syperose-12 oszlop kalibráció TV-ftalibrációs standardokkal
A TV-kalihráciős standardoknak és a glatiramer-aoetát preparátumnak a relatív retenciös Idő (RRT) és a molekulatömeg logaritmusa kozott hasonló összefüggést kell mutatniuk. A TVkalibrációs standardokat több Superose-12 oszlopon kromatografáljuk. A csúcs retencsós időt minden egyes pollpeptídre rögzítjük. A molekulatömeg logaritmusa (MW) és a relatív retenciös idő (RRT) közötti lineáris összefüggést a következők szerint számítjuk;
T ~ 81 * B2 x logMW (lásd; 3a. ábra és 5, táblázat)
A most bevezetett Millenlum-alspú adatszerzési rendszer (Waters Corp., Mi?ford, MA) GPC-oszlopokra integrált kalibrációt biztosit. A kalibráció az algoritmusra a refeociés időn alapul, és a következő egyenlettel adható meg:
LogMW = A ± 8 x RT vagy MV7 = 10^* Síí*T$ ahol 'MVV jelentése a molekulatömeg, RT jelentése a retenciós idő, A és δ jelentése sorrendben a számított regressziós függvény fsngelymetszete és meredeksége (3b. ábra, 5. táblázat).
Ezzel az algoritmussal kapott eredmények gyakorlatilag azonosak azokkal, amelyeket az RRT-n alapuló. jelenleg alkatmazott algoritmussal kapunk. Az eljárások automatizálás £* i kében a Mllleniem-aiapú adatszerzés! rendszert alkalmazzuk a TV-kalibrációs standardok felhasználásával a kalibráció végrehajtására. Az elemzési eljárásokat ennek megfelelően korszeröA lóg MW és RRT között jó korrelációt (r‘‘ > 0,98} kapunk, bár a pontok nem egyenletesen oszlanak meg a regressziós vonal körül. Ez az eloszlás megfelel a különböző kalibráló standardok eliipticitásában tapasztalható különbségeknek, amint az a gfatiramer-acetátra is tapasztalható. A bizonyos linearitástöl eltérő alacsony molekulatömeg kalibráló standard nem zárható ki, mert a regressziónak lefelé 2500 daifonig magában kell foglalnia értékeket az első standard deviáció (+- ISO) disztribúciós paraméterhez. Ez egy általános jellemzője minden rővldebb pepiidnek - ezek kevésbé spirálisak, és inkább lineárisak.
A glatiramer-aceiát molekulatömeg kalibráló standardokon alapuló kalibrációhoz a iengelymetszei (81) és a meredekség (82) sorrendben 1,741 δ és -0,2784. Ez kedvezően viszonyul a FV-kaíibráshós standardokra kapott kalibráló értékekhez (B1 ~ 1,8936; 82 ~ -0.2705). A két kalibráló sorozatot alkalmazva kapott molekulatömegek a specifikációs tartományban tipikusan nem több. mint 20 %-kal térnek el az alacsony molekulatömeg tartományban és nem több, mint 12 %-kai a csúcs RRT-specííikácíős tartományában (átlagos molekulatömeg). Ezen viszonylag kis különbség következtében teljesül az Igény, hegyezek a kalibráló standardok helyettesíthessék a jelenleg alkalmazott glatiramer-acetát molekulatömeg kalibráló standardokat a molekulatömeg értékekben való jelentős változás nélkül.
5a. táblázat
Glatiramer-acetát molekulatömeg kalibráló standardok általi kalibráció
Kalibrációs | Molekula- | Molekula- | -,— .. _. i 1 Csúcs re- | RRT* | |
standard | tömeg | tömeg íoga- | tencíős Idő | 1 |
ritmusa j | ί j | ||
TV-3 5 | 3757 | 3.575 1 | 28,97 | 0,728 |
TV-4 5 | 4790 | 3.68 1 | I 27,98 | 0,703 1 |
TV-5 6 | 6008 | 3.779 j | 27,12 Ϊ 0,882 i |
TV-86 | 7040 | 3,648 1 | 26,32 ) 0,882 |
TV-7 7 | 8259 | 3,917 | | 1 : 25,56 j 0,843 ; |
TV-86 | 92.20 | 3,985 ! | 24,93 1 0,627 |
TV-109 | 11727 | 4,089 I | 23,57 I 0,593 |
Tengely- | “ A 8 | 13 v XÚ i V 1 | *** 81 1,8998 |
metszet | 1 | ||
Meredekség | B - | 3,0918 | | 32 -0,2705 |
r2 | 0,9927 I | 0,9923 |
RRT - RT/RT-aceton '* a Miilenniüm-egyerslet szerint számítva; lóg MW ~ A*8xRT '** a következő egyenlet szerint számítva; RRT ~ Sí + Bs x lóg MW
A TV-kahbráclés standardokon alapuló kalibrációi a giatiramer-acetát molekulatömeg kalibráló standardokén alapuló kalibrációhoz hasonlítjuk (5 b. táblázat). A két kalibrációt mindenegyes kalibráció sorozatra a 0,5-0,8 RRT tartományban a molekulatömeg számításával hasonlítjuk össze. A TV-kalíbrálő standard kalibráló sorozat magában foglalja a TV-109 frakciót, amelyet az oszlop kalibráció előtt fordított fázisú kromatográfiás eljáró s s a I tisztítunk.
5b, táblázat
Oszlop kalibráció TV-kalibrációs standardokka
RRT | RT (perc) | G tat iramé r- -a cetét (molekulatömeg. 1) | TV (0,1) (molekula- tömeg.m) | Különbség (m ο 1 e k u 1 a t ö ro e g. m - | |
-roolekuls | tömeg. 1) | ||||
(Dalion) | (Dalion) | (Dalion) | % | ||
0,5 | 19,88 | 28800 | 26700 | -2100 | -7,3% |
0,51 | 20,2 8 | 28500 | 24500 | -2 000 | -7,5% |
0,52 | 20,58 | 24400 | 22500 | -1800 | -7,4% |
0,53 , | 21 08 | 22500 | 20700 | -1800 | -8.0% |
0,54 | 21.48 | 20700 | 19100 | -1500 | -7.7% |
0,55 | 21,87 | 19000 | 17500 | -1500 | -7,9% |
0,56 | 22,27 | 17500 | 15100 | -1400 | í -8,0%: |
0,57 : | 22,87 | 16100 | 14800 | -1300 | -8.1% |
0,58 | 23,07 | 14900 | 13600 | -1300 | -8,7% |
0,59 | 2 3,46 | 13700 | 12500 | -1200 | -8.8% |
0.0 | 23,86 | 12600 | 11500 | -1100 | -8,7%: |
* X
£> O Ύ K Κ I ί; | | RT* ί j (perc) 5 fc fc { I | fc fc 1 Glatlramer- ( fc j -acélát 1 | TV (ÖJ) (molekula- tömeg.m) | Különbség (mo le ku f atö meg, m - -molekulatömeg.1) | |
i I | I | (Dalion) | (Dánon) | (□alton) | % |
ί 0,81 | ί' 24,28 | 11600 | 10600 | -1000 | -8,7% |
0,62 | 24,66 | 10700 | 9700 | -1000 | -9,3% |
0,63 | 25,05 | 9 300 | 9000 | -800 | -8,2% |
0,64 | 25,45 | 9000 | 8200 | -800 | -8,9% |
0,65 | 25,35 | 8300 | 7600 | -700 | -8,4% |
0,66 | 25,25 | 7700 | 7000 | -7 00 | fc -0.1% |
0,67 | 26,65 | 7100 | 8400 | -700 | -9,9% | |
0,68 | 27,04 | 6600 | 6900 | -600 | -9,2% l |
0,69 | 27.44 | 60 00 | 5400 | -800 | -10,0% 1 |
0,70 | 27,84 | 5500 | 5000 | -500 | i -9,1% .} |
0,71 | 28,24 | 5100 | 4600 | -500 | -9,8% |
0,72 ί | 28,83 | 4700 | 4200 | -500 | -10,6% |
0.73 ; | 29.03 | 4300 | 3900 | -400 | -9,3% |
0,74 | 29.43 | 4000 | 3600 | -400 | -10,0% |
0,75 | 29.83 | 3800 | 3300 | -300 | -8,3% |
0.76 | 30.23 | 34 00 | 3000 | -400 | -11,8% |
0,77 Í | 30,62 | 3109 | 2800 | -300 | -9,7% |
0.73 | 31.02 | 2800 | 2500 | -300 | -10.7% |
0,79 | 31 .42 | 2300 | 2300 | -300 | -11,5% |
0,80 : | 31.82 | 2400 | 2100 | -300 | -12,5% |
A kalibráló standardok közül hármat (TV-66, TV-7? és TV-86) fordított fázisú kromatográfiás eljárással tovább tisztítunk. Három frakciói kapunk minden egyes kalibráló standardra. A. csúcs nagyobb részét tartalmazó középső frakciót Superose-12 rendszerben a frakclonálatfan kalibráló standardokkal összehasonlítva kromatogzafáljijk (6. táblázat). TV-kalibrácios standardokat méret-kromatografálunk tisztítás nélkül (szabályos) és fordított fázisú kromatográfiás tisztítás után (tisztított), A csúcs retenciós időket meghatározzuk és a különbségeket számítjuk. A csúcs retenciós idő a tisztítás fokától független marad. Ezért a szintézis végterméke alkalmas pontos kalibrációra és különös tisztítás nem szükséges.
6. táblázat
A tisztítás retenciós időre gyakorolt hatása
A mért értékek :t- me
Hat adag, IS 93-ban és 1S34-ben gyártott glatiramer-acélától TV-kalibrácios standardokkal kalibrált GPC alkalmazásával újra elemzőnk. Ezek átlagos molekulatömegét és molekuiatömeg-elOsziását a kibocsátásukkor mért értékkel összeha44 somítunk. A 7. táblázat a molekulatömeg adatok ös -sze hason Ittasát mutatja az elemzés eredeti tanúsítványával és TV· kalibrációs standardokkal kalibrált Superose-12 oszlop alkalmazásával kapott molekulatömeg adatokkal. A mért értékekben lévő- különbségek tipikusan kisebbek, mint 10 %.
7. táblázat
Molekulatömeg meghatározások Összehasonlítása
Cop.-l Pre- | i | j Molekula- | Molekula- | %-OS |
parátum | i i | tömeg | tömeg | eltérés |
} í...................... | I Millennium L„.......................................... | CoA | ||
j átlag | 10250 | 9900 | -3,5 % | |
00193 | { - 1 SD | 20950 | 19100 | -9,7 % |
i + 1 SD | 51000 L ...................... | 4800 1 -6,3 % ! | ||
- átlag | 6700 | 6550 | -2,3 % i | |
I 00594 | - 1 SD | 1 5700 | 15100 | 7 rv $7 ; |
+ 1 SD | 3600 | 3400 | -5,9 % | |
áfíag | 9200 | 8600 | -7.0% | ||
I 00993 | - 1 SD | 18500 | 17350 | -6.9 % |
+ 1 SD | 4700 | 4400 | -8,8 % | |
átlag | 6100 | 6150 | 0,8 % | |
04194 | - 1 SD | 12600 | 1 25 00 | -0,8 % |
+ 1 SD | 3200 | 32 00 | 0,0 % | |
átlag | ssöb | 8300 | -6,0 % | |
01793 | - 1 SD | 181 00 | 173 00 | -4.5 % |
- 1 SD | 5200 | 4750 | -9,5 % | |
átlag | 31 0Ö | 8300 | 2,4 % | |
054 94 | - 1 SD | 17300 | 17450 | -2,0 % |
+ 1 SD | 4100 | 4100 | 0,0 % |
Az „SD” jelentése; átlagos eltérés
A kalibráló standardok stabilitása oldatban A TV-kalíbréciós standardokat 24 óra alatt négy alkalommal kromatografáljuk... Minden kalibráló- standardot szobahőmérsékleten oldatban tartunk, ás 8 órás időközönként elemezzük, A 8, táblázat a 4 Időpontban a TV-kalibrációs standardokra mért csúcs retenciós idői mutatja, 0,1 mg/ml koncentrációban a TVkalibrációs standardok oldatban legalább 24 óráig stabilak szób a h ö m é r s é k let e n
8. táblázat
A TV-kalibrációs standardok stabilitása oldatban szobabő mérsékleten
> | Csúcs retenciós idő (perc) | Átlag | Eltérés j (RSD) ! | |||
TV-3 5 | 29,883 | 29,883 | 29,900 | 29,950 | 29,904 | 0,106 % |
TV-4 5 | 28,933 | 28.917 | .28,917 | 28.933 | 28,925 | 0,032 % 1 |
TV-5 6 | 28,250 | 26.217 | 28,283 | 26,250 | 28,250 | i 0.095 % ί |
TV-56 | 27,400 | 27,350 | : 27,433 | i 27,433 | 27,404 | 0,143 % | |
TV-7 7 | 26,7 50 | 26.700 | 26,750 | 26,783 | 26,746 | 0,128 % |
TV-8 6 | 26,117 | : 26,100 | .26,150 | 26.150 | 26,1 29 | l 0,095 % ; |
TV- -lOSFr 11 | 24,783 | 24,850 | 24,383 | 24,850 | 24,842 | 0,169 % |
A kalibráló standardok oldatait ezen kívül különböző tárolási -körülmények között (2-8 ’C, -10-2-0 ’C aziddal vagy anélkül) legfeljebb 3,5 hónapig tároljuk. A TV-kalibrációs standardok fa46 gyasztott óidat formájában legalább 3 hónapig tárolás-stabilak (9, táblázat). Óvatosságból a fagyasztott oldatokat 2 hónapig engedj ük tárolni.
A liofilizált TV-kalibrációs standardok legalább 2 évig stabilak a rendelkezésre álló stabilitási adatok szerint.
9. táblázat
A TV-kalibrációs standardok stabilitása -10 - -20 CC hőmérsékleten
Íí | j .........1 | ||||
jA kalibráció időpontja | 1997. | 1997 | 1 1997, | ||
-f i Intervallum (nap) | máj. 22, | júk 9 | í szept, 4x i | ||
48 | -í----------------- J | 108 i | ||||
1 Kalibráló | Molekula- | RT | RT | —---------- . J 1 RT 1 | |
i standard | tömeg | | | | |||
j TV-3 5 | 7 ,ς ? | 28,867 | 28,86 | 7 | i 28.957 i |
| TV-4 5 | 4790 | 27,833 | 27,91 | 7 | ......í j ) 27,350 |
| TV-SS | 6008 | 27,076 | 27,13 | 3 | | 27,100 i |
| TV-66 | 7040 | 26,233 | zo.31 | 7 | t : í 26,300 |
| TV-77 | 8259 | 25,467 | 25,61 | —> f | ·’ | 25,550 |
TV-86 | 9220 | 24,883 | 25,01 | 7 | j 24,950 |
I TV-109 | 11,727 | 23,500 | na 85 | 0 | I on sas t \A |
Az „.RT* jelentése: retenciós idő
A kalibráló adatok összegzése
A TV-kalibrációs standardokat összesen 53 alkalommal, két laboratóriumban elemeztük. Az adatok összegzését a 4. ábra és a 10. táblázat mutatja. Az egyes sorozatok között tapasztalható különbségek (4. ábra) inkább az oszlopok' közötti'különbségeket, mint a résztvevő laboratóriumok közötti különbségeket tükrözik. Ezt jelzi a 4. ábrán az egyes kísérletekre eltérő jelek alkalmazása. A 10. táblázatban a kalibráló állandókat IS oszlopra injektált 53 kalibráló sorozatból kapott adatokra a Millennium-egyenlet alkalmazásával számítjuk.
10, táblázat
A Piantex ás az Abic laboratóriumokban kapott kalibráló állandók
I Rstenciós Idő |j Retenciös ide
ΐ Kalib- ráló stsn óard | MoSsku- ísíömeg | I Kezép5 érték | Szórás ISO) | %-os eltérés {KSÖ) | Perc | **3Χ- | Ádag- SD | ÁUag-r j SD | i i |
TV-35 | 3757 | 29.69 | 0.463 | 1 .6 % I | 28, SS | 30.35 | 28,30 | 31,08 j |
TV-45 | 4700 | 23.72 | 0,48' | 7,7% ; | 27. SS | 2S.40 | 27,28 | 30,16 |
TV-Ő6 | 6008 | 27,99 | 0,520 | 1,9 % | 27,08 | 28,77 | 26,43 | 22.55 |
TY-se | 7040 | 27,19 | 0,526 | 1,9% | • 26.26 | 27,96 | 25,61 | 28,77 |
TV-77 | 8250 | 26,49 | 0,550 | 2,1 % | 25,51 | 27,33 | 24,84 | .... 48,74..... |
TV-8S | 9220 | 25,89 | 0,556 | 2,1 % | 24,89 | 26.72 | 24,22 | 27,56 |
TV-103 | 11727 | 24,56 | 0,557 | 2,3 % | 23,53 | 25,41 | 22,89 | 25,23 : |
Tencelvmetszet (A; | 6,4796 | 0,1220 | 1,9% | 6,2581 | 6,6600 | 6,1046 | 6,8066 | |
Meredekség {S; | -0,0968 ί | 0,0032 | -3,3 % | -0,1914 | -0,0919 | -0,1064 | -0.0873 | |
P | 0,9901 | 0,0022 | 0,2% | 0,9868 | 0,3828 | 0,9835 | 0,996? |
Az „SD jelentése; átlagos eltérés
Egy glatlramer-acetát preparátum molekulatőmeg-eloszSása .Egy adag glaüramer-acetálra meghatározzuk a molekulatömeget (BN 90835). A 11. táblázat TV-kaiíhrálo siandard-kalibráit oszlopon, 16 meghatározásból kapott adatokat összegzi.
lázat
A glatiramer-acsíát retenelós Idói (BH 90SS5}
ϊ l Átlag i | (SB) J %-os eltérés j | ||
| Csúcs i | 26.208 | | 0,434 | { 4 P* .*>> 5 í,Pt> j |
| -2SD (2,5 %) | | 19,865 | | 0,528 | - ------ -3 2,86 J |
| -1SD (16 %) | | t 22,578 ] | 0,477 | 2,11 | |
1 *SD (84 %) j | 28,934 | | 0,324 | 1.12 _.... ... · __ί |
Az „SD” jelentése: szórás
11b, táblázat
A gtatlramer-aeetát RRT-értéke (BN9Ö985)
Átlag | 1 (SE») | I %-os eltérés t (RSD) | |
n a £ 4 | t ! Ρ Ρ Ί Λ | I ο η q | |
Ο· 5 u U S | j V V t>' > | ||
-2SD (2.5 %) ; | 0,503 | I 0.016 | I ί 3,08 |
~1SD(1S%) | 0,572 | 1 0,015 | ) 2,54 |
MSB (84%) | 0,733 | 1 0,011 | i | 1,53 |
Az „SD” jelentése: szórás
Λ *
11c. táblázat
A glatiramer-acetát molekulatömege (dalion) (BN9Ö995)
] Atlas | (SD) | i %-os eltérés I (RSD) | |
Csúcs | /453 ί | 146 | ! 1,35 |
-ISO (16%) | 16822 | | 468 | i 2,80 |
+ 130(84%) | 4089 j | 77 | i 1,89 |
Az „SD’ jelentése: szórás
A molekulatömeg- és szekvencia-meghatározott kalibráló standardok sorozatának alkalmazása a Superose-12 oszlop kalibrálására számos előnnyel jár a jelenleg alkalmazott glatíramer-acetát molekulatömeg kalibráló standardokkal szemben .
Először a szilárdfázisú szintézis biztosítja minden egyes adag különböző preparátumainak állandóságát. Tömegspektroszkóplás eredmények (3. táblázat) megerősítették a szintézis reprodukálhatóságát. Az állandóság biztosítja a molekulatömeg meghatározások megnövekede11 pontosságát.
Másodszor, a jelenlegi kalibráció minden egyes glatiramer-acetát molekulatömeg kalibráló standard görbe alatti területének 50 %-ánál az RRT meghatározásán alapul. Az új kalibráló standardok éles csúcsokként eluálnak. Azok alkalmazása a kalibrációban pontosabb, mint egy széles csúcs alatti terület 50 %-ánái a számított retenciős idő.
Harmadszor, előre meghatározott szekvencia által definiált molekulatömeggel rendelkező kalibráló standardok alkalmazása előre kizár minden bizonytalanságot, amely a fizikai tulajdonsa * *
- 50 gok pontatlan mérésvei meghatározott moiekulatömegü kalibráló: standardok alkalmazását kísérheti.
negyedszer., a kalibráló eljárás megkönnyíti az oszlopok normalizálását molekulatömeg meghatározásokhoz, tekintet nélkül az oszlop-töltések időpontja, kor vagy műszerezettség közötti kisebb változásokra.
Á TV-kalibrációs standardok
A TV-kalibrációs standardok reaktivitása monoklón antitestekkel Cop-1-hoz
2.
:at anti-Cop-1 monokiőn antitestek kalibrációs standardokhoz való kötődését mutatja.. A TVkatibráciös standardokat. és referencia Glat-eiöáiiitásl adagokat tesztelünk, Mikroiiíráió egységeket 2 pg/ml antigénnel vonunk be. Az értékek a monokiőn antitestekhez kötött '^^l-jelzett kecske anti-egér IgG percenkénti beütéseinek számával (cpm) vannak megadva. Minden egyes TV-kaiibráló standardhöz az antitest kötődést a Cop-1 referencia standardhoz való antitest kötődéssel hasonlítunk össze
12. táblázat
TV-kaUbrációs standardok és Cop-1 reaktivitása mAbk-kel RIÁ-ban
lese nti-Cop-1 í anti-Cop-1 j anti-Cop(3-1-45) l (5-7-2)
Foszt á í p u f fe r ο I d a t
03494 (glatiramer-acetát)
1384J31 14880 I 20587
55286 (q latiramer-acetát)
13705 (91) í 17188 (83) 8883 (82)
55398 (glatirarner-acetát) _
13458 (90) | 17584 (85) j 9142 (88)
TV-3 5 (TV-kallbráló standard)
1178 (0)
343 (0) i 657 (1)
TV- 5 5 | (TV-kaisbráló standard) |
1814 (2)
1581 (6)
TV-77 | 2285 (8) | 2152(9) (TV-kalibráló standard) j_ί
TV-88 1825 (2) (TV-kalibráló standard) ’
9584 /91)
4259 (37)
1808(6) j 8140 (78)
Cop-1-specifikus T~sejtekkel való reaktivitás GLAT-kopolimerreí serkenthető T-sejtvonalakat alkalmazunk
TV-kalibrációs standardok serkentés! aktivitásának vizsgálatára szokásos GLAT-kopoiimer előállítási adagokkal összehasonlítva (13,. táblázat), Mint fent, a TV-kalibrációs standardok aktivitását in vitro- vizsgáljuk. Számos egér- és emberi T-sejtvonal szaporodását határozzuk meg tenyészetben peptidekre való reakcióként. A sejtvonaiak a következők; BALB/c-Ts-Cop-1; Salb/e-egerekpől származó .hőmérséklet-érzékeny vonal; 1-22-1; FI egerekből származó hőmérséklet-érzékeny klón; SC-103 és SC-14; emberi. Cop-1 specifikus T-sejt kiónok, A szaporodást lö pg GLAT-kopohmerreí vagy TV-kaiibráló standarddal tenyésztett T-sejtvonalak 3H-timid:in felvételének mérésével határozzuk meg.
A glatiramer-acetát adagok serkentőek, A TV-kalibrációs standardokat négy T-sejivonalból kettő esetében szintén serkentőnek találtuk, bár nem olyan erősen. A TV-kalibrációs standardokat mind az egér, mind az emberi glatiramer-acetátra specifikus T-sejtek felismerik. Ez megerősíti, hogy aminosav szekvencia és T-sejt epitop hasonlóság van a glatiramer-acetát és a TV-kalibrációs standardok között.
13. táblázat iramer-acetát és TV-kalibrációs standardok reaktivitása glatiramer-acetát specifikus T-sejfvonalakkal
H-timidin beépítés
j Foszíátpuífer oldat:
>3494 (q I ai i ra m e r - a ce tát)
3» ♦ *
55293 | 35320 | 17315 | 7143 (Sí) | 2973 (95) |
(glatiramer-acetát) | (110) | (108) | ||
55398 | 34281 | 17211 | 7019 (80) | 3253 |
(glatiramer-acetát) | (105) | (105) | (107) | |
TV-3 5 | 9465 (28) | 225 (0) | 438 (0) | 884 (0). |
(TV-kallbráió stan- | ||||
ríard) | ||||
TV-56 | 19545 | 232 (0) | 237 (0) | 3495 |
1 (TV-kalibráló stan- | (58) 1 | (117) | ||
tíard) | ||||
1 TV_77 | 1 17367“ j '300 (1) | _ | 2701 (83) | |
(TV-kalibráló standard) | (52) | |||
TV-86 | 14694 | 418 (1) | 298 (0) | 2284 (65) |
(TV-kailbrálő stan- | (44) | |||
d a r d) |
Kísérleti allergiás ©ncephaSomyelitis blokkolása A TV-kalibrációs standardok fiziológia? aktivitásának vizsgálata érdekében kísérleti allergiás encephalcmyeiitls-től (EAE) való védelmet vizsgálunk egerekben, Teljes Freund-féle adjuvánsban lévő kopollmer-1 és az encepbalitogén injekciója lényegében képes blokkolni az EAE-t, amint azt Aharoni és munkatársai a 17 Eur. d. Immunoi,, 23«. (1993) szakirodalmi helyen ismertetik. Más kutatók úgy találták, hogy a kopolimer-1 gyógyászat] hatása sclerosis multiplexben szenvedő betegek esetében szintén a TH2-sejtek indukciójával függ össze. Lásd; Lahat és munkatársai, 244 d. N-euroí. 128 (1897) szakirodalmi helyen. Ebben a példában a találmány szerinti különböző pohpeptidekkel blokkoljuk az EAE-t.
t *
Az EÁE indukciója
2.-3 hónapos nőnemű (SJL/JxBAL8/c)FI egérnek mind a négy lábába 1:1 arányban teljes Freuhd-f-éle adjuvánssal (CFA) emuigeált, 4 mg/ml mikohaktéríum tuberkulózis R37Ra~vai kiegészített egér gerincvelő homogenátot (3,5 mg/egér) injektálunk. Pertussis toxint (0.2.5 ml, 250 ng, Sigma) injektálunk Intravénásán közvetlenül utána és 48 órával később. Az. egereket naponta vizsgáljuk az Indukció utáni 10. naptól kezdve az EÁE klinikai jeleire nézve, amelyeket Ö-δ. skálán rögzítünk, amint azt Lando és munkatársai a 123 3. immunot 2156 (1679) szakirodalmi helyen ismertették.
Az EÁE blokkolása
Minden tesztelt antigént encephalltogén oltóanyagba foglalunk. A 14. táblázat az EAE előfordulását mutatja olyan állatokban, amelyek TV~kalibrálő standarddal vagy glatiramer-acetáttál kiegészített encepnailtogén oltóanyagot kaptak és olyan állatokban, amelyek csak az encepbalítogén oltóanyagot kapták.. Az EAE átlagos kezdetet is mutatja ·« «rvnioHa a táblázat azokban az állatokbsn, amelyeket nem védtünk. A betegség intenzitását naponta rögzítjük az egerekben 0-5 közötti skálán (0 jelentése: egészséges, 5 jelentése: elpusztult). A kezdetet úgy határozzuk meg, mint azt a napot, amelyen az állat a betegségnek a szóban forgó skála szerinti legalább 1. súlyossága tünetét mutatja.
14. táblázat
EAE-től való védelem TV-kallbrációs standardok segítségével
i Blokkoló | | elő fór- | 1 Átlagos | Átlagos | i %-os | |
i antigén 1 1 :· | dulás | érték | kezdet | I BI | okkolás |
1 í | (nap) | | ! | |||
| Kontroll i | 10/10 | 4,9 | 11,3 | i { | |
1 | TV-45 | | 0/10 | 0 | ! | 100 | |
! | |||||
[ TV-66 | ii j | 6/10 | 2,8 | 11,7 | 40 | |
i TV-77 ( | 1/9 | 0,2 | 14,0 | | | 89 |
t :j 1 TV-86 i | 3/10 | 0,7 | 1 2,0 | ( ί i | 70 |
| TV-1:0 9 I 0/10 | 0 | ! ! | 100 | |||
| 03494 | | 0/10 | 0 | ! I | 100 | |
| 55396 f 0/10 | 0 | 100 |
Λ • >' $>
Claims (11)
1. Egy polipeptid, amelynek aminosav szekvenciáját az 1. azonosítási számú szekvencia,, a 2, azonosítási számú szekvencia, a 3. azonosítási számú szekvencia, a 4. azonosítási számú szekvencia, az 5, azonosítási számú szekvencia, a 8. azonosítási számú szekvencia vagy a 7. azonosítási számú szekvencia matatja be.
2. Az 1, igénypont szerinti polipeptid, amelynek aminosav szekvenciáját az 1. azonosítási számú szekvencia matatja be.
3. Az 1. igénypont szerinti polipeptid, amelynek aminosav szekvenciáját a 2. azonosítási számú szekvencia matatja be.
4. Az 1. igénypont szerinti polipeptid, amelynek aminosav szekvenciáját a 3, azonosítási számú szekvencia mutatja be.
5. Az 1. igénypont szerinti polipeptid, amelynek aminosav szekvenciáját a 4. azonosítási számú szekvencia matatja be.
6. Az 1. igénypont szerinti polipeptid, amelynek aminosav szekvenciáját az 5. azonosítási számú szekvencia mutatja be.
7. Az 1. igénypont szerinti polipeptid, amelynek aminosav szekvenciáját a 6, azonosítási számú szekvencia mutatja be.
8. Az 1. igénypont szerinti polipeptid, amelynek aminosav szekvenciáját a 7. azonosítási számú szekvencia mutatja be.
9. Az 1-8. igénypontok bármelyike szerinti polipeptid, ahol a polipeptid teljes egészében t-aminosavakbói áll, fö.
Az 1-8. igénypontok bármelyike szerinti polipeptid, ahol a polipeptid teljes egészében D-amínosavakbói áll.
11. Az 1-10. igénypontok bármelyike szerinti polípeptid glatiramer-acetát átlagos molekulatömegének meghatározásához történő alkalmazásra.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US10169398P | 1998-09-25 | 1998-09-25 | |
PCT/US1999/022402 WO2000018794A1 (en) | 1998-09-25 | 1999-09-24 | Copolymer 1 related polypeptides for use as molecular weight markers and for therapeutic use |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
HU229720B1 true HU229720B1 (en) | 2014-05-28 |
Family
ID=22285926
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
HU0103889A HU229289B1 (en) | 1998-09-25 | 1999-09-24 | Copolymer 1 related polypeptides for use as molecular weight markers and for therapeutic use |
HU1300505A HU229719B1 (en) | 1998-09-25 | 1999-09-24 | Copolymer-1-delated polipeptides for use as molecular weight markers and for therapeutic use |
HU1300337A HU229720B1 (en) | 1998-09-25 | 1999-09-24 | Copolymer 1 related polypeptides for us as molecular weight markers and for therapeutic use |
Family Applications Before (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
HU0103889A HU229289B1 (en) | 1998-09-25 | 1999-09-24 | Copolymer 1 related polypeptides for use as molecular weight markers and for therapeutic use |
HU1300505A HU229719B1 (en) | 1998-09-25 | 1999-09-24 | Copolymer-1-delated polipeptides for use as molecular weight markers and for therapeutic use |
Country Status (18)
Country | Link |
---|---|
EP (3) | EP2239269B1 (hu) |
JP (2) | JP4629229B2 (hu) |
AT (2) | ATE516297T1 (hu) |
AU (1) | AU757413B2 (hu) |
CA (2) | CA2794705C (hu) |
CY (3) | CY1110490T1 (hu) |
DE (2) | DE09004306T1 (hu) |
DK (3) | DK1115743T3 (hu) |
ES (3) | ES2369642T3 (hu) |
HK (3) | HK1040521A1 (hu) |
HU (3) | HU229289B1 (hu) |
IL (4) | IL142116A0 (hu) |
NO (2) | NO329877B1 (hu) |
NZ (1) | NZ511020A (hu) |
PT (3) | PT2239269E (hu) |
SI (1) | SI1115743T1 (hu) |
WO (1) | WO2000018794A1 (hu) |
ZA (1) | ZA200102269B (hu) |
Families Citing this family (30)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ES2527760T3 (es) | 1998-07-23 | 2015-01-29 | Yeda Research And Development Co., Ltd. | Tratamiento de enfermedad de Crohn con copolímero 1 y polipéptidos |
IL141021A0 (en) | 1998-07-23 | 2002-02-10 | Yeda Res & Dev | Treatment of autoimmune conditions with copolymer 1 and related copolymers |
US6800287B2 (en) | 1998-09-25 | 2004-10-05 | Yeda Research And Development Co., Ltd. | Copolymer 1 related polypeptides for use as molecular weight markers and for therapeutic use |
ZA200206457B (en) | 2000-02-18 | 2003-08-13 | Yeda Res & Dev | Oral, nasal and pulmonary dosage formulations of copolymer 1. |
US20020077278A1 (en) | 2000-06-05 | 2002-06-20 | Yong V. Wee | Use of glatiramer acetate (copolymer 1) in the treatment of central nervous system disorders |
WO2002076503A1 (en) | 2000-06-20 | 2002-10-03 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | Treatment of central nervous system diseases by antibodies against glatiramer acetate |
WO2001097785A2 (en) * | 2000-06-20 | 2001-12-27 | Caprion Pharmaceuticals Inc. | Basic copolymers for the treatment of prion-related-disease |
US20040037828A1 (en) * | 2002-07-09 | 2004-02-26 | Bar-Ilan University | Methods and pharmaceutical compositions for healing wounds |
WO2003029276A2 (en) * | 2001-10-03 | 2003-04-10 | President And Fellows Of Harvard College | Copolymers for suppression of autoimmune diseases, and methods of use |
EP1459065B1 (en) | 2001-12-04 | 2010-07-28 | Teva Pharmaceutical Industries, Ltd. | Processes for the measurement of the potency of glatiramer acetate |
WO2004064717A2 (en) | 2003-01-21 | 2004-08-05 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Cop 1 for treatment of inflammatory bowel diseases |
CN101287483B (zh) | 2003-08-07 | 2012-02-29 | 希尔洛有限公司 | 用于加速伤口愈合的药物组合物和方法 |
CA2558655A1 (en) * | 2004-03-01 | 2005-09-15 | Kai W. Wucherpfennig | Methods and compositions for treatment of autoimmune diseases |
US7655221B2 (en) | 2004-05-07 | 2010-02-02 | Peptimmune, Inc. | Methods of treating disease with random copolymers |
US7560100B2 (en) | 2004-09-09 | 2009-07-14 | Yeda Research And Development Co., Ltd. | Mixtures of polypeptides, compositions containing and processes for preparing same, for treating neurodegenerative diseases |
US7858337B2 (en) * | 2007-03-08 | 2010-12-28 | Novartis Ag | Process for the manufacture of a composite material |
US8399413B2 (en) | 2009-08-20 | 2013-03-19 | Yeda Research & Development Co., Ltd. | Low frequency glatiramer acetate therapy |
USRE49251E1 (en) | 2010-01-04 | 2022-10-18 | Mapi Pharma Ltd. | Depot systems comprising glatiramer or pharmacologically acceptable salt thereof |
US8759302B2 (en) | 2010-03-16 | 2014-06-24 | Teva Pharmaceutical Industries, Ltd. | Methods of treating a subject afflicted with an autoimmune disease using predictive biomarkers of clinical response to glatiramer acetate therapy in multiple sclerosis |
WO2012051106A1 (en) | 2010-10-11 | 2012-04-19 | Teva Pharmaceutical Industries Ltd. | Cytokine biomarkers as predictive biomarkers of clinical response for glatiramer acetate |
CA2827275A1 (en) | 2011-02-14 | 2012-09-20 | Usv Limited | Copolymer-1, process for preparation and analytical methods thereof |
MX2014004309A (es) | 2011-10-10 | 2015-07-06 | Teva Pharma | Polimorfismos de nucleotidos individuales utiles para predecir una respuesta clinica para el acetato de glatiramer. |
TW201420111A (zh) | 2012-10-10 | 2014-06-01 | Teva Pharma | 對格拉默醋酸鹽(glatiramer acetate)之臨床反應具預測性之生物標記 |
CN104098655B (zh) * | 2013-04-09 | 2018-01-30 | 深圳翰宇药业股份有限公司 | 用于合成醋酸格拉替雷的质谱内标的多肽 |
UY35790A (es) | 2013-10-21 | 2015-05-29 | Teva Pharma | Marcadores genéticos que predicen la respuesta al acetato de glatiramer |
CN105218646B (zh) * | 2014-06-24 | 2018-09-21 | 深圳翰宇药业股份有限公司 | 一种用于检测醋酸格拉替雷样本的uplc方法 |
US9155775B1 (en) | 2015-01-28 | 2015-10-13 | Teva Pharmaceutical Industries, Ltd. | Process for manufacturing glatiramer acetate product |
CN107531750B (zh) * | 2015-04-28 | 2021-03-16 | 深圳翰宇药业股份有限公司 | 多肽混合物高效液相色谱分析方法 |
EP3147667B1 (en) * | 2015-09-24 | 2019-06-12 | CHEMI S.p.A. | Analysis of the molecular weight distribution of complex polypeptide mixtures |
EP3600553A4 (en) | 2017-03-26 | 2020-09-02 | Mapi Pharma Ltd. | GLATIRAMER DEPOT SYSTEMS FOR TREATMENT OF PROGRESSIVE FORMS OF MULTIPLE SCLEROSIS |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2009996A1 (en) * | 1989-02-17 | 1990-08-17 | Kathleen S. Cook | Process for making genes encoding random polymers of amino acids |
US5800808A (en) | 1994-05-24 | 1998-09-01 | Veda Research And Development Co., Ltd. | Copolymer-1 improvements in compositions of copolymers |
-
1999
- 1999-09-24 DK DK99949923T patent/DK1115743T3/da active
- 1999-09-24 ZA ZA200102269A patent/ZA200102269B/en unknown
- 1999-09-24 PT PT101715530T patent/PT2239269E/pt unknown
- 1999-09-24 CA CA2794705A patent/CA2794705C/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-09-24 HU HU0103889A patent/HU229289B1/hu unknown
- 1999-09-24 NZ NZ511020A patent/NZ511020A/xx not_active IP Right Cessation
- 1999-09-24 EP EP10171553A patent/EP2239269B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-09-24 DK DK10171553.0T patent/DK2239269T3/da active
- 1999-09-24 JP JP2000572252A patent/JP4629229B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1999-09-24 DE DE09004306T patent/DE09004306T1/de active Pending
- 1999-09-24 DE DE69940888T patent/DE69940888D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-09-24 AT AT09004306T patent/ATE516297T1/de active
- 1999-09-24 EP EP09004306A patent/EP2090583B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-09-24 HU HU1300505A patent/HU229719B1/hu unknown
- 1999-09-24 PT PT09004306T patent/PT2090583E/pt unknown
- 1999-09-24 WO PCT/US1999/022402 patent/WO2000018794A1/en active IP Right Grant
- 1999-09-24 AT AT99949923T patent/ATE431359T1/de active
- 1999-09-24 ES ES09004306T patent/ES2369642T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-09-24 PT PT99949923T patent/PT1115743E/pt unknown
- 1999-09-24 SI SI9931035T patent/SI1115743T1/sl unknown
- 1999-09-24 ES ES99949923T patent/ES2327301T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-09-24 AU AU62695/99A patent/AU757413B2/en not_active Expired
- 1999-09-24 IL IL14211699A patent/IL142116A0/xx unknown
- 1999-09-24 HU HU1300337A patent/HU229720B1/hu unknown
- 1999-09-24 ES ES10171553T patent/ES2408706T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-09-24 CA CA2343929A patent/CA2343929C/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-09-24 DK DK09004306.8T patent/DK2090583T3/da active
- 1999-09-24 EP EP99949923A patent/EP1115743B1/en not_active Expired - Lifetime
-
2001
- 2001-03-20 IL IL142116A patent/IL142116A/en not_active IP Right Cessation
- 2001-03-21 NO NO20011441A patent/NO329877B1/no not_active IP Right Cessation
-
2002
- 2002-01-18 HK HK02100390.4A patent/HK1040521A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2009
- 2009-08-06 CY CY20091100835T patent/CY1110490T1/el unknown
- 2009-12-09 HK HK09111514.5A patent/HK1133021A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2010
- 2010-03-25 NO NO20100442A patent/NO336685B1/no not_active IP Right Cessation
- 2010-06-23 JP JP2010142689A patent/JP4903886B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2010-11-07 IL IL209190A patent/IL209190A/en not_active IP Right Cessation
- 2010-11-07 IL IL209189A patent/IL209189A/en not_active IP Right Cessation
-
2011
- 2011-04-08 HK HK11103596.9A patent/HK1149279A1/xx not_active IP Right Cessation
- 2011-10-05 CY CY20111100947T patent/CY1112197T1/el unknown
-
2013
- 2013-04-15 CY CY20131100310T patent/CY1113932T1/el unknown
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
HU229720B1 (en) | Copolymer 1 related polypeptides for us as molecular weight markers and for therapeutic use | |
US7615359B2 (en) | Copolymer 1 related polypeptides for use as molecular weight markers and for therapeutic use | |
US6514938B1 (en) | Copolymer 1 related polypeptides for use as molecular weight markers and for therapeutic use | |
CA2337688C (en) | Treatment of autoimmune conditions with copolymer 1 and related copolymers | |
EP2327712B1 (en) | Treatment of Crohn's disease with copolymer 1 and polypeptides | |
US20100298227A1 (en) | Treatment of autoimmune conditions with Copolymer 1 and related copolymers | |
JP4800481B2 (ja) | 共重合体1および関連する共重合体ならびにペプチドによる自己免疫疾患の治療 | |
AU5226299A (en) | Treatment of autoimmune conditions with copolymer 1 and related copolymers and peptides |