HU228426B1 - Izobutil-gaba és származékai alkalmazása fájdalom kezelésére alkalmas gyógyszer elõállítására - Google Patents

Description

l2<öbut.il-gaba és származékai alkalmazása fájdalom kezelésére alkalmas gyógyszer előállítására

A találmány giutaminsav és gsmma-aminovajsav íGASA) analógok fájdalom terápiában való alkalmazására vonatkozik, mivel a vegyüietek fájdalomcsiiiapitö/hiperaigéziaellenes hatással rendelkeznek. A vegyüietek alkalmazásának előnyei között említhető az a felismerés, hogy ismételt alkalmazás nem vezet toleranciához, és nincs kereszt-tolerancia, a morfin és a vegyüietek között .

A találmány szerinti vegyüietek ismert szerek, amelyeket a központi idegrendszer rendellenességeinek, így az epilepszia, Huntington-kőr, agyisémia, Parkinson-kór, retardált diszkínézia és görcsös roham terápiájára használnak. Azt is ajánlották, hogy a vegyüietek depresszíoeilenes, szorongáselienes és an.tipszleheti kus szerekként használhatok. Lásd például a W092/09560 számon közzétett Ídl3,692 sorozatszámó, 1990·.. november 27-én tett amerikai egyesült államokbeli szabadalmi, bejelentésnek megfelelő) és a WO-93/.23383 számon közzétett ia 886,070 sorozatszámű, 1992, májas 20-án tett amerikai egyesült államokbeli szabadalmi bejelentésnek megfelelő) nemzetközi szabadalmi bejelentést.

A találmány eljárás egy (I) általános képietü vegyület fájdalom kezelésére, különösen krónikus fájdalom rendellenességek kezelésére való alkalmazására. Ilyen rendellenesség többek között, de nem kizárólag a gyulladásos fájdalom, a műtét utáni fájdalom, a metasztattkus rákkal társuló osteoarthritis fájdalom, a

&7.ÖOO/PA P99043ÓÍ 20öl Rovember trigeminális neuralgia, az akut somöros és sömör utáni nenralgia, a diabétesze» n.eurcpátía, cansalgia, a. brac'hia'l piexus avuisiox’i, az ofccipitális neuralgia., a szimpatikus reflex disztróíia, a fiforomialgia, a kasa vény, a. .fantom, lábfáj dalom, az égési fájdalom és a neuralgiás, neuropát.iás és ídiopátiás fájdalom szindrómák más formái.

A találmány szerint alkalmazott vsgyületetek az íi) általános képleté, vegyületek vagy gyógyászatilag elfogadható sóik, ahol a képletben

Rí jelentése egyenes- vagy elágazőláncű. 1-6 szénatomos alkilcsoport, fenilcsoport vagy 3-6 szénatomos cikloalkilcsoport;

R? jelentése hidrogénatom vagy m.etilcsoport; és

Rí jelentése hidrogénatom, métalesöpört vagy karboxilcsoport.

Az Cl) általános képleté vegyületek diasztereomeref és enantiomerel szintén a találmány körébe tartoznak.

A találmány szerinti előnyös vegyületek azok az 1. igénypontnak megfelelő vegyületek, amelyekben B.₃ és R_:i jelentése hidrogénatom, és Rj jelentése ~ ÍCHÁ iCgh általános képlett, csoport, (R; ·, <S}~ vagy (E,3)-izomer alakjában,

A találmány szerinti előnyösebb vegyületek az (S)-3-(amino-metil;-5-metiI-hexánsav és a 3-íamino-meti1;~5-metIl-hexánsav.

1.ábra: Gabapentin [1-íamino-metils-oiklöhexil-ecetsav]

Cl- 1008 [ (S)-3-(amiao-metii i-5-m.eti.l-'bexánsav] és

3-(aiaino~met.il)-5-metil-hexánsav hatása patkány talp formaiin tesztben

A vizsgálandó vegyületeket s.o. adagoltuk 1 órával 50 μΐ formaiin intraplantáris injekciója előtt. Az injektált talp nyaX ♦ * X * *

Ö7PÖÜ/PA P99O43Ö1 2.0Ö5. mvember

X «* « X « ** iogstásávai/harapdálásávai töltött időt a korai és a késői fázisban értékeltük. Az eredményeket 8-8 állatból álló hat csoportra vonatkozóan adjuk meg a középérték. ± standard hiba. formában.. A *P<ö,ö5 és a P*'*<0,81 szignifikánsan különbözik a hordozóval (Veh.) kezelt kontrollöktől ÍANOVA, majd bűnnelt-féle t-t.eszt> .

2. ábra: Gabapentln és €1-1008 hatása a karregeninnei

Indukált mechanikai hiperal.géziára dooiceptív nyomás .küszöböket mértünk patkányokban talpnyomási kísérletben. Az alapvonal 1BL; méréseket az előtt végeztük, mielőtt az állatnak 100 pl 2%-os karragenin-oidatot adtunk volna intrapiantáris injekció formájában. Az eredményeket 8 állatból állő csoportokra vonatkozóan kösépérték 1 standard hiba formában adjuk meg, A gabapentint (GP) , a CI-löO8~at vagy a morfint (bOh.; 3 mg/kg) s.c. adtuk be 3,5 órával a karragenin injektálása után. A *P<0,05 és **P<ö,öl szignifikánsan különbözik a hordozóval kezelt kontroll csoporttól ugyanazon időpontban 'AhO'VA, bűnnét.t-fele t-tenztí .

3. ábra: Gabapentln és 0-1003 hatása karragenin által

Indukált termállá hiperalgéziára Nociceptlv termális küszöböket mértünk patkányokban

Kargreaves készülékkel. Az alapvonal (B'L) méréseket az előtt végeztük, mielőtt az állatnak 100 pl 2%-os karragenín-oldatot adtunk intrapiantáris injekció formájában. Az eredményeket 8 állatból álló csoportokra vonatkozóan középérték 1 standard hiba formában adjuk meg. A gabapentint (GP) vagy a Cl-löOS-at s.o. adtuk be 2,5 órával a karragenin injektálása után, A *P<0,Ö5 és

X : » Φ 9 9* * * * * fo.OOO/PA s Λ

P99Ö4361

2005. aovember **Ρ<0,01 szignifikánsan különbözik a hordozóval kezelt kontroll csoporttól ugyanazon időpontban (ANOVA, Dunnett-féle t-teszt).

4. ábra; Morfin <a}_r gabapentin (b) ás S~ ( + } -3-izobutilgaba (0; hatása termális hlperaigáziára patkány műtét utáni fájdalom modellben

A gabapentint vagy az S~(+}-3-izobutilgabát 1 órával a műtét előtt adagoltuk. A morfint 0,3 órával a műtét előtt adtuk be. A termálís talpvisszahüzási látenciákat (PWL) mind. az ipszilaterális, mind a kontralateráiis talpakra meghatároztuk a patkány piantáris teszt alkalmazásával, Az érthetőség megkönnyítésére a kontralaterális talp adatokat a szerrel kezelt állatok esetében nem tüntettük fel. Az alapvonal (BL) méréseket a műtét alőtt végeztük, és a PWL-'t 2, 2 4, 4 8 ás 72 órával a műtét után ismét meghatároztuk. Az eredményeket a PWL-ek csoportonként 8-10 állatra vonatkozó középértékeként fejeztük ki fa függőleges vonalak a ± standard hibát jelenőik). A '^;'P<v,C5 és a *-*P<0.,01 szignifikánsan különbözik fAhOAA, majd Dunnett-féle t-teszt), összehasonlítva a szerrel kezelt csoportok ipstilaterális talpára kapott érteket a vivöanyaggai kezeit csoport ipszilaterális talpára kapott értékkel minden egyes időpontban. Az ábrán a -··- a vivőanyagos kontralaterális, a -O- a vivőanyagos Ipssilaterális, a -Δ- az i, a a 3,· a -0- a 6 mg/kg morfin dózis hatását mutatja a 4a) ábrán, A 4b) ábrán a a 3, a -Π- a 10 és a -0- a mg/kg gabapentin hatását szemlélteti, A 4c) ábrán a -Δ- a 3, a a 10 és a ~v~ a 30 mg/kg 3-3 + ) ~i zobutiigaba hatását mutatja.

67,000/ΡΑ

Ρ990436:

2005. november *·Α. ,· η:

»* <0.

« * ♦ * « f < 0 *

10Α 0 «0 :0 0

Λ 0

5.. ábra: Morfin fa), gabapentln (fo) és S- fa) -3-ízobut i.Iga.fo?i hatása tapintási allodiniára patkány műtét utáni fájdalom Modellben

A gabapentínt vagy S-(+)-3-izobutli-gabát I órával, a morfint 0,5 órával a. műtét előtt adagoltuk. A Frey féle érzékenységmérővel. a taipvisszahúzási küszöbértékeket mind az ipszilaterálís, mind a kontralateréiis talpakra meghatároztuk. Az érthetőség megkönnyítésére a gyógyszerrel kezelt állatok esetében a kontralaterális talpadatokat nem tüntettük fel. Az alapvonal íBLf méréseket a műtét előtt végeztük, és a visszaházási küszöbértékeket a lantét után 3, 35, 45 és 73 órával ismét megmértük,

Az eredményeket csoportonként 8-10 állatra vonatkozóan azon erő középértéke ígj formájában adtuk meg, amely a talpvisszanüzást kiváltotta fa függőleges vonalak az első és a harmadik quartiiist jelentik), A *P<0,05 szignifikánsan különbözik íMannWhitney t-teszt) minden egyes időpontban a gyógyszerrel kezelt csoportok ipszilaterális talpára kapott értéket a vívoanyaggai kezelt csoport ipszilaterális talpára kapott értékkel összehasonlítva, Az 5. ábrán a “··- vivőanyagos komtralateráiís, -0- a vivöanyagos ipszilaterális értékeket jelenti. A morfin (5a) ábra) esetében -Á- az I, a 3 és -0- a 16 mg/kg dózis hatását mutatj a.

Az 5b) és 5c) ábrán a -Δ- a 3, a a lö és a ~é~ a 30 mg/kg gabapentln és S- { +) —izobütíigaba dózis hatását mutatja.

6, ábra; S~(+?~3~Tzobutilgaba hatása fa) a termális hiperalgézia és fb) a tapintáson ailodinia fenntartására •“ί ,·\ »S: .♦;«

67.00Ö/PA 7 Λ Uv

J9904361

205 «öveiuber patkány műtét utáni fájdalom modellben Az S~ H; -3-izobu.tilgabát (S~H)-!BG; 1 órával a műtét után adagoltuk. A termális talpisszehűzási látenciákat,· amelyeket a patkány plantáris teszttel határoztunk meg, és a talpvisszahúzási küszöbértékeket a Brey-féle érzékenységvizsgáiőval az állatok külön csoportjaiban határoztuk meg mind az ipszilaterális, mind a kontralateráli-s talpakra. Az érthetőség megkönnyítésére csak az ipszilaterális talpadatokat adjuk meg. Az alapvonal. {Blj méréseket a műtét előtt végeztük, és a visszahúzás!, küszöbértékeket a műtét utáni legfeljebb 6 óra elteltéig újra meghatároztuk.. A termál is hiperalgéziára vonatkozó adatokat. 6 állatból álló csoportokra a PWb középértéke formájában adtuk meg (a függőleges vonal i standard hibát jelent}, a 'P<ó,ö5, a *'*£«0,01 szignifikánsan különbözött (páratlan t-teszt) minden «gyes időpontban a hatóanyaggal kezeit csoport ipszilaterális talpra kapott értékeket a vivőanyaggai (Veh-O-) kezeit csoport ipszilaterális talpára kapott értékekkel összehasonlítva. A tapintási allodínia esetében az eredményeket azon. erő Cg) középértékeként fejeztük ki, amely a 6 állatból álló csoportokban a talp visszahúzását kiváltotta (a függőleges vonalak az első és a. harmadik qnartiiist jelentik) . A. *P<0,05 szignifikánsan különbözik piano Whitney t~teszt· minden egyes időpontban a hatóanyaggal kezeit csoport ipszilterális talpára vonatkozó és a vivőanyaggal kezelt csoport ipszilaterális talpára vonatkozó értékeket összehasonlítva. Az -·- az S-í+j-IBG hatását jelenti 30 mg/kg dózisnál.

A találmány tárgya eljárás egy fenti (!) általános képletű vegyület fájdalomcsillapítóként való alkalmazására a fentebb ő7.:.i<X?/FA P990436J 2005. november . 'o &

*x>* «* C' felsorolt fájdalmak kezelésében. A fájdalom többek között a gyulladásos fájdalom, neuropátiás fájdalom, rákos fájdalom, műtét utáni fájdalom és az idiopátiás fájdalom., amely ismeretlen eredetű fájdalom, például a fantom lábfájdalom. A neuropátiás fájdalmat sérülés vagy a perifériás érzőidegek fertőzése okozza. Ilyen például, de nőm kizárólag, a perifériás idegtrauma., a herpesz vírus által okozott fertőzés, a diahetes me Ili. tus·, a causalgia, a p'iexus avul sión, a íreuroma, a iáfoamputálás és a vasculítis. Neuropátiás fájdalmat vált ki a krónikus alkoholizmus okozta idegsérülés, a HÍV vírus okozta fertőzés, a csökkent pajzsmirigy~mnködés, az urérnie vagy a különféle vitaminok hiánya. Neuropátiás fájdalom többek között, de nem kizárólag, az idegsérülés által okozott fájdalom, például amelytől a cukorbetegek szenvednek.

A fenti állapotokról tudjuk, hogy a jelenleg forgalomban levő fájdalomcsillapítókkal, így a narkotikumokkal vagy nemszteroid gyűliadáséilenes szerekkel (HSAID) a nem kielégítő hatékonyságuk vagy a mellékhatások korlátozó volta miaut rosszul.

kezelhetők.

Az (It általános képletben használt fogalmak, például hogy az alkilcsoport metil-, etil-,, propil--·, izopropil-, n-but.il-, ízohutil-, szek-butil-, terc-butil-, izopentil- és neopentílcsoportot jelent, illetve amelyek még előfordulnak, a szakember által ismertek.

A cikloalkiicsoport jelentése cikiopropil-, ciklobutil-, cikiopentil- és ciklohexilcsoport.

,ϊ r

Α.ΟΟΟ/ΡΑ.

P990436?

2005 . sövaKtbőt

A. találmány szerinti vegyületek szerves és szervetlen savakkal vagy bázisokkal gyógyászatilag elfogadható sokat képeznek. A bázikus vegyületek savaddiciős sóját például úgy állítjuk elő, hogy a szabad bázist a megfelelő .savat tartalmazó vizes vagy vizes alkoholos oldatban vagy más alkalmas oldószerrel készült oldatban oldjuk, és a sőt az oldat bepárlásával elkülönítjük. Ά gyógyászatilag elfogadható sok például a hidrogsn-klorídok, hiárogén-bromidok, hidrogén-szulfátok, valamint a nátrium-, a kálium- és a magnézium-sók.

A találmány szerinti vegyületek egy vagy több aszimmetriáé szénatomot tartalmazhatnak. A találmány magábaxz foglalja mind az egyes diasztereomereket vagy enantiomerekst, mind azok keverékeit. Az egyes diasztereomerek vagy en.antiom.erek a szakterületen jól ismert eljárásokkal állíthatók elő vagy különíthetők el.

A 3-alkil-4-arsíno-butánsavak előállításának 3-alkénsav-eszterek kiindulási anyagát a kereskedelemben kapható aldehidekből és monoé tíl-malonátbó.1 a Knoevenagei-reakcióval kapjuk. (Kna Y.C.·, Cogolase G.H., o.Med. C’hem. 1965: SSú9,) , kivétel az etii-4,4-dimet 11-2-penteno.át. 'Ezt a vegyületet 2,2-dimetil-propanal és etil-lítio-acetát reagál tatásával, majd a β-hidroxi-észter főszforil-kiorid és piridin segítségévei történő dehidratálásával állítjuk elő. A nifcre-metan a, β-telítetlen vegyületekre történő tííchael-addíciö ját 1,1,3,3-tetram.etil-guanldin vagy 1,8-díazabicíklo [5.4.0] undec-7-éíi (DSU) alkalmazásával segítjük elő, így a 4-nitro-észtereket jó hozammal kanjuk.

Noha. az alifás nitro-vegyületeket általában nyomás alatti katalitikus hidrogénezéssei, fémkatalizáit transzfer hidrogéné67.0Ö0/PA P990436Í 2005, Hwstó>er zéssel vagy az újabban, bevezetett hidrogénéi Isis eljárások szerint ammőnium-formiáttal vagy nátrium~bór~hidridáei és palíádíumkatalizátorral redukálják, mi azt találtuk, hogy a 4-nitro-karbonsav-észterek szinte kvantitatív hozammal redukálhatok a megfelelő 4~axtdnc—karbonsav-észterekké# ha a hidrogénezést lökés szénhordozós palládiumkataiizátor jelenlétében ecetsavban, szobahőmérsékleten és környezeti nyomáson végezzük, A képződött amíno-észtereket savasan hidroiizáijuk, Így a találmány szerinti, vegyületeket jő hozamban kapjuk. Ez az eljárás számos S-alkil-é-amino-bntánsav előállítására lehetőséget biztosit, amelyeket az 1. és 2. táblázatban példaként soroltunk fel, és így az eljárás a korábban használtakhoz viszonyítva előnyös.

ha a kiindulási anyag a kereskedelemben nem kapható, a szintézissort a megfelelő alkohollal kezdjük, amelyet Corey és munkatársainak módszerével ífetrahedron lett. 1975 : 2 6i7~-£ö5öj aldehiddé oxidálunk.

A szintetikusan előállított vegyületek gyógyászati készítmény formájában fájdalom kezelésére alkalmas szerként használhatók, ha egy U; általános képletű vagyaiét hatásos mennyiségét gyógyászatilag elfogadható hordozóval együtt alkalmazzuk, A gyógyszert ilyen rendellenességek kezelési eljárásában ilyen rendellenességtől szenvedő emlősökben, ezen belül emberekben használhatjuk, oly módon, hogy az ilyen emlősnek a fentebb leírt vegyület hatásos mennyiségét egységdőzis formában, adagoljuk.

A. gyógyászati készítményt, amelyet A találmány szerint állítunk elő, a legváltozatosabb dózisformákká formálhatjuk és orális vagy parenterális úton adagolhatjuk. Például ezek a * «

67.O0Ö/PA P990436S 2005. fífsvciöber ti gyógyászati készítmények. közömbös, gyógyássatiiag elfogadható hordozókkal állíthatók elő, amelyek szilárdak vagy folyékonyak. A szilárd készítmények többek között porok, tabletták, díszpergáihatő szemcsék, kapszulák, levélkék és kúpok. Más szilárd és folyékony készítmények a szakterületen ismert eljárásokkal készíthetők, és orálisan megfelelő alakban vagy páreirt orálisan, így intravénás, íntrarvasskaláris vagy szubRután úton folyékony készítményként adagolhatok.

A készítmény egységdózisában levő hatóanyag mennyisége napi 1 mg és kb. 300 mg/kg kozott változhat sgy átlagosan 70 kg testtömegű betegre vonatkoztatva. Az előnyös napi dózistartomány a kb. 1 mg és kb. .50 mg/kg közötti. A dózisok azonban a beteg szükségletétől, a kezelendő állapot súlyosságától és az alkalmazott vegyületfői függően változtathatók. Az adott esetre megfe.....

lelő dózis meghatározása a szakember tudásához tartozik,

Gabapentin,.....Cl -1 &0 3 és 3- <amino-met 11) - 5-mstí 1 hexánsav haté sa a patkány formaiin talp tesztben

0-9Ό g testtömegű hím Spragne-Dawiey patkányokat 24 cm x 2.4 cm x 24 cm méretű pe-rspex: megfigyelő kamrákba helyeztünk legalább 15 perccel a vizsgálat előtt, A bal hátsó talp plantáris felületébe szubkután 50 pl 51-os formaiín-oldatot íöi formaldehid izotöniás sooldathan; injektáltunk, amivel a talp nyaiogatását/harapdálását váltottuk ki, Közvetlenül a formaiín injektálása után az injektált hátsó talp nyalogatását/harapdálását 5 perces Időközönként 60 percen át értékeltük. Az eredményeket a kombinált nysiogatás/harapdáiás idejének középértékeként fejeztük

47.000/ΡΑ 12

Ρ$9013ól 2005. sövetnber ki a korai fázisra (0-1.0 perel és a késéi fázisra (0-45 perc) vonatkozóan,

A 10-300 mg/kg gabapentin vagy sz. 1-100 mg/kg CI-1008 1 órával, a formaiín előtt történő s.c. adagolása dózis tői függően blokkolta a nyalogató/harapdálő viselkedést a formaiín válasz késői fázisa alatt 30 Illetve 10 mg/kg minimális hatásos dózisok (MED) esetében (1. ábra). Azonban a vegyületek egyike sem érintette a korai fázist egyetlen vizsgáit dózis alkalmazása esetén sem. A 3— (amino-metili-ő-metil-hexánsav hasonló adagolása 100 mg/kg dózisnál csak mérsékelten blokkolta a késői fázist.

Gabapentin és CI-1008 hatása a karragsnlnnel indokait hipera1géziára

A vizsgálat napján 2-3 alapvonal mérést végeztünk, mielőtt a 70-90 g testtömege him Sprague-Dawiey patkányok jobb hátsó talpába intrapiantárís injekcióval 100 gl 21-os karragenin-oldatot adagoltunk. A vizsgálandó anyagokat az állatoknak a hlperalgézia csúcs kifejlődése után adtuk. Az állatok külön csoportját használtuk a mechanikai és a termális hiperaigézíás vizsgálatokhoz.

A; Mechanikai hiperaigézía

Nociceptiv nyomás küszöbértékeket mértünk patkány talp nyomás vizsgálatban Ugo Basáié analgeziméter segítségével. Egy 350 g-os határértéket használtunk annak érdekében, hogy a talpnak ne okozzunk semmilyen sérülést. A ksrragenin int r api. ars. tár is injektálása csökkentette a nociceptiv nyomás küszöbértékét az injektálás utáni 3, és 5. óra között, ami a hiperaigézía kialakulásé-

07.000/ΡΑ.

Ρ9904ΑΟ 2005. november ra utalt. 3 mg/kg s.c. morfin teljesen blokkolta a hiperalgéziát /2. ábra) . A 3-3-00 mg/kg s.c. beadott gabapentin és az 1-100 mg/kg s.c. beadott C1-100S dózisfüggően antagonizáita a hiperalgéziát 10 illetve 3 mg/kg MED értékkel (2. ábra! .

B) Termállá hiperalgézia

Az alapvonal taipvisszahúzási látenciákat ÍPWL) mindegyik patkányra a Hargreavas modell alkalmazásával kaptuk. A karragenint a fentebb leírt módon injektáltak. Ezt követően az állatokat az adagolástól számdtott 2 óra elteltével a termális hlperaigéziára vonatkozóan vizsgáltuk. A 10-100 mg/kg gabapentint vagy az 1-30 mg/kg CX-1006-t a karragenin után 2,5 érával s.c. adagoltuk, és a PWL értékeket a karragenin adagolása után 3 és 4 órával ismét megmértük. A karragenin szignifíkánsan csökkentette .a taipvisszahúzási látenciát az injektálás után 2, 3- és 4 órával, ami a termállá hiperaigézia kialakulására utalt (3. ábra). A gabapentin és a Cl-bööO dózisfüggően autagonizálta a hiperalgézlát 30 illetve 3 mg/kg MED értékkel (3. ábrák.

Az adatok azt mutatják, hogy a gabapentin és a C1-D003 hatékony a gyulladásos fájdalom kezelésében.

Bennett G.J. módszere perifériás mononeuropátla állati modelljét bocsátja rendelkezésre patkányban, amely az emberben látottéhoz hasonló f-á jdaiomérzési rendellenességet okoz (Pain,

1903, 33:07-107).

Kim S.H.. és munkatársainak vizsgálata kísérleti modellt bocsát rendelkezésre szegmentált spinális Idege /.kötéssel létrehozott perifériás neuropátiára patkányban (Pain 1900, 50:355-303),

67.0ÍWA

F9904361

2005. novenitet **** ♦♦ ♦ »* ♦♦ * X ♦ ♦ ♦ « ♦ * *

Egy műtét utáni fájdalom patkány modellt Br-ennan és munkatársai írtak le (1996) . £ szerint a hátsó talpban a piantáris bőrben, izomhövelyben és irombán bemetszést készítenek. Ez reprodukálható és mennyiségileg meghatározható mechanikai hiperalgéziához vezet, amely több napig tart. Azt feltételezik, hogy ez a modell több tekintetben hasonlóságot mutat a humán műtét utáni fájdalom-állapothoz. A jelen tanulmányban a gabapentin és az S~(+j-3-izobutíIgaba. hatását vizsgáltuk, és összehasonlítottuk a morfinéval ebben a műtét utáni fájdalom modellben.

Eljárások 'hantin és Kingmen (Hull, d.E,) által rendelkezésünkre bocsátott 2S0-300 g testtömegü hím Sprague-Dawley patkányokat használtunk minden kísérletben. A műtét előtt az állatokat hatos csoportokban és 12 éra világos (amely 07 óra 00 perckos kezdődött) és 12 óra sötét ciklusban tartottuk, ezalatt a táphoz és a vízhez szabadon hozzáférhettek. A műtét után az állatokat párosával Aqua-sorb almon tartottuk, amely cellulózból készült (Béta Medicaí and Scientific, Sale, b'.K.i, ugyanilyen körülmények között. Minden kísérletet a gyógyszeres kezelésről nem tudó megfigyelővel végeztettünk,

Műtét

Az állatokat 2% í zof ruoránnal és 1,4 Ck/hCh keverékkel érzéstelenítettük, amit a műtét alatt egy orr-kőnusz segítségével tartottunk fenn. A jobb hátsó talp piantáris felületét 50%-os etanollal előkészítettük, és egy 1 cm-es lengitndináiis bemetszést végeztünk a bőrön és az izomhuvelyen keresztül, amely be-

i

67.000/ΤΆ Ρ990436Ϊ 2005. aovejxsbet

IS metszés a sarok szélétől 0, 5 cm-re kezdődött, és az uj jak irányában. haladt. A plán tár is ismét csipesszel kiemeltük, és iongltudinálisau bemetszettük. A sebet fonott selyexmel FST-02-es tű segítségévei két egyszerű öltéssel lezártuk, A seb helyét terramicin. spray vei. és auromicín porral borítottuk. A műtét után egyik állat sem mutatta semmi jelét a fertőzésnek, a sebek 24 óra elteltével jól gyógyultak. Az öltéseket 48: érával később eltávolít ettük.

A termál is hiperalgézia értékelése

A termális hiperalgésiának értékeléséhez a patkány plantáris tesztet (Ugo Basile, Olaszországi használtuk Hargreaves es munkatársai módszerének (1.988) módosított változatát követve. A patkányokat egy emelt üvegasztalon elhelyezett három külön perspex dobosból állá készülékhez szoktattuk. Egy mozgó sugárzó hőforrást helyeztünk az asztal alá, és a hátsó talpra fókuszáltuk, majd a. talp visszahúzás! látenciákat (PWLj feljegyeztük. Automatikus határértékként 22,5 másodpercet használtunk a szövetkárosoőás megelőzésére. A PWL értékeket 2-3 alkalommal mértük az állatok mindkét hátsó talpára vonatkozóan, ezek átlaga jelentette a jobb és bal hátsó talpak esetében az alapvonalat. A készüléket úgy kalibráltuk, hogy a PPL kb. lö másodperc legyen. A FÜL értékeket a fentivel azonos előírás szerint a műtét ufáíí 2, 24, 48 és 72 órával ismét meghatároztuk.

A_tapintási alloölnía értékelése

A tapintási allodiniát Semmes-Weinsteln gyártmányú (Sf.oel.ting, Illinois, ű.S.A.; Frey-féie érsékenységvíregáléval mértük. Az állatokat drótbalós aljú ketrecekbe helyeztük, amely lehetővé

V4*« KX φ ♦ * **

Φ ♦ ♦ »♦ Φ * * *

6'7,000/ΡΑ 16 ·

Ρ990436I 2Ö05. november tette a talpak aljához való hozzáférést. Az állatokat a kísérlet megkezdése előtt szoktattok ehhez a környezethez. A tapintási allodíniát úgy vizsgáltuk, hogy az állatok hátsó talpának plantáris felületéhez Frey-féle érzékenységvizsgálót érintettünk emelkedő (0,7, 1,2, 1,5; 2, 3,6; 5,5; 3,5; 1.1,8; 15,1 és 23 gs erőt alkalmazva addig, amíg visszahúzás! választ váltottunk ki. Mindegyik erőt 6 másodperéig vagy egy válasz megjelenéséig alkalmaztuk . Aaikor a visszahúzás! válasz már kialakult, a talpat újravizsgáltuk a következő, csökkenő nagyságú erővel addig, amíg már választ nem kaptunk, A legnagyobb, 23 g-os erő felemelte a talpat, valamint választ váltott ki, ez jelentette a határértéket. Minden állatnak mindkét hátsó talpát megvizsgáltuk ezzel a módszerrel, A legkisebb erőnagyságot, amely válasz kiváltásához szükséges volt, g-ban kifejezett visszahúzás! küszöbértékként jegyeztük fel. Amikor vegyüieteket adagoltunk a műtét előtt, ugyanazon állatokat használtuk a gyógyhatású anyag tapintási ailodiniára és termálís hiperalgéziára gyakorolt hatásának vizsgálatára, minden állatot a termálís hiperalgézía után 1 órával vizsgáltuk tapintási ailodiniára. Külön állatcsoportokat alkalmaztunk a tapintási aliodlnia és a termálís hiperalgézía vizsgálatára, amikor S- ( + )-3-ízobutilgabát adagoltunk a műtét után,

Statisztikák

A. termálís hiperalgéziára kapott adatokat egyirányú (varianciaanalizisi AKOVA-val, majd úunnett-fáie t-teszttei vizs-gáitűk, A

>Α4ν ♦·♦ * * * ' ' « φ Κ

67.Ö0Ö/P/1 Π

P9W36Í 2405. november

Frey~.fé.le érzékenységvizsgáiőval a tapintásos allodiniá~ra kapott eredményeket egyedi Maori-üh.ithey t--tesztnek, vetettük alá.

Eredmények

A. patkány plantáris: irmának bemetszése termális hiperaigéziat és tapintásos allodiniét váltott ki, Mindkét nociceptív válasz a műtét után 1 órán belül érte el a csúcspontját, és 3 napon át fennmaradt. A. kísérleti periódus alatt az. állatok jé egészségben maradtak,

Műtét előtt.....adagolt gabapen/tin, S-(dj-3-lzobut i 1 ~ gaha _ és morfin hatása a termális hlperaÍgériára

Ά műtét előtt 1 órával s.c.. adott (3-30 mg/kg nagyságú) egyetlen gabapontin dózis dőzisfüggőem blokkolta a termális hiperalgézia kialakulását 30 mg/kg MED érték mellett ílb) ábra) . A legnagyobb, 30 mg/kg gabapentin dózis 24 órán át megakadályozta a hiperalgéziás választ ílb) ábra), az S.....pH ~3-izobuti Igaba.

hasonló adagolása szintén dózisfüggően )3-30 mg/kg s.c.) akadályozta meg a termális hiperalgézia kialakulását 3 mg/kg MED érték mellett <lc> ábra). A. 30 mg/kg S~( + ) ~3~ízobntii~gaba dózis egészen három napig hatásos volt (Ic) ábra). A. műtét előtt 0,5 órával adagolt morfin dózisfüggően (1-6 mg/kg, s.c.) antagonizálta a termális hiperalgézia kialakulását 1 mg/kg MED érték mellett (la) ábra). Ezt a hatást 24 órán át fenntartotta (la) ábra).

♦ ♦ <«

*♦ **

67.0CWÁ P990436Í 20ÖS. rtövetnber

Műtét előtt adagolt gabapentin, Sgy/) -3~lzobutil-gaba és morf.•inhatása a tapintásos allodini.ára

A. hatóanyagok tapintásos allodinla kifejlődésére gyakorolt hatását ugyanazokkal az állatokkal határoztuk meg, amelyeket fentebb a termálIs hiperaigézla. vizsgálatához alkalmaztunk, A termális hiperaigézla és a tapintásos allodinla tesztek között egy óra szünetet hagytunk, A gabapentin dózisfüggően akadályozta meg a tapintásos allodínia kifejlődését 10 mg/kg MED érték mellett. A 1 ö és 30 mg/kg gabapentin dózis 25 illetve 4 9 órán át hatásos volt (2b) ábra). Az S~ ( +)-3-izobutil-gaba szintén dózisfüggően (3-3-0 mg/kg) blokkolta az aliodzniás válasz kialakulását 10 mg/kg líEö érték mellett (2c) ábra) , A. nociceptiv válasz ezen blokádját 3 napon át fenntartotta a 30 mg/kg S~{+)-3-izobutil-gaba dózis (2c) ábra). Ezzel szemben az i-6 mg/kg morfin a műtét utáni tapintásos allodínia kialakulását csak 3 órán át akadályozta meg a 6 mg/kg-os legnagyobb dózisban (2a) ábra) .

Műtét után 1 órával adagolt S-j-t) -3-.lzobuti.l-ga.be tapintásos aliodlnlára és termáiis hiperaIgearára gyakorolt hatása

Az állatokban az allodínia és a hiperaigézla 1 érán beiéi érte el maximumát és a következő 5-6 órán át megmaradt. A műtét után 1 órával s.c. adagolt 30 mg/kg S~ ( +)~1zobutil-gaba 3—4 órán át blokkolta a tapintásos allodinla és termáiis hiperaigézla fennmaradását. Ezután mindkét nociceptiv válasz visszaállt a kontroll szintre, jelezvén az antihiperaigéziás ás antiailodíniás hatások eltűnését ·/. ábra).

67WA . - 99904761 « . 2003. Rovesifesr *··♦« ·> * ** Ό • í X »i » < * >

A gabapentin és az 3-·{ + )-3~izobutil-gaba nem. volt hatással a PWL-re a termálig hiperelgésiás tesztben vagy a tapintásom aliodinla értekekre a kontralaterális talpban a bármely kísérletben vizsgált legnagyobb dózisig. Ezzel szeriben a morfin. (6 mg, s.c.s növelte a kontralaterális talp FWL értékét a termálás híperalgéziás tesztben {adatokat nem tüntettünk fel; .

Az itt ismertetett, eredmények azt mutatják, hogy a patkány plantáris izom bemetszése legalább 3 napig tartó termális hiperaigéziát és tapintáson a.ilodíniát indukál, A jelen vizsgálat legfőbb eredményei hogy a gabapentin és az S- í + )-3-izobntí1-gaba egyformán hatásosan blokkolja mindkét nociceptiv választ.

Ezzel szemben a morfin hatékonyabb a bérmálás hiperalgézzávai szemben., mint a tapintásom allodiniával szemben. Továbbá az S~{e;~3~izobotil~gaba teljesen blokkolja az aliodinla és hiperalgézia kiváltását és fenntartását,

Claims (3)

1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK

   1. (I) általános képletö vegyület vagy gyógyászatllag elfogadható sójának, días
2. 2tereomerj'é.n-«.k. vagy enantiomerjénok - ahol a képletben

   Rí jelentése egyenes vagy elágazó láncú 1-6 szénatomos alkilcsoport, feniicsoport vagy 3-6 szénatomos cikloalkllcsoport;

   R;í jelentése hidrogénatom vagy metalcsoport és

   R< jelentése hidrogénatom, betűcsoport vagy karboxílesöpört alkalmazása fájdalom kezelésére használható gyógyszer előállítására ,

   1. Az 1, igénypont szerinti alkalmazás, ahol a vegyület olyan (R>-, iS)~ vagy ÍRS;-izomer formában levő {1} általános képietü vegyület, amelyben R_s és Rj jelentése egyaránt hidrogénatom. és R_x jelentése - (CRA §-₂-iC'A általános képietü csoport.
3. 3. Az 1. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a vegyület (Sj3- (amino-metll) ~5~meti.l-hexánsav vagy 3- iamino--m.et.il >: -5-metil-hexánsav.