HU196509B - Method and apparatus for carrying out forced-flowing expediently overpressurized separating technical testings in planar system - Google Patents
Method and apparatus for carrying out forced-flowing expediently overpressurized separating technical testings in planar system Download PDFInfo
- Publication number
- HU196509B HU196509B HU325885A HU325885A HU196509B HU 196509 B HU196509 B HU 196509B HU 325885 A HU325885 A HU 325885A HU 325885 A HU325885 A HU 325885A HU 196509 B HU196509 B HU 196509B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- layer
- laminate
- sheet
- carrier
- unit
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/90—Plate chromatography, e.g. thin layer or paper chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
- G01N27/44704—Details; Accessories
- G01N27/44717—Arrangements for investigating the separated zones, e.g. localising zones
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/90—Plate chromatography, e.g. thin layer or paper chromatography
- G01N2030/906—Plate chromatography, e.g. thin layer or paper chromatography pressurised fluid phase
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Electrochemistry (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
- Analysing Materials By The Use Of Radiation (AREA)
Abstract
Description
A találmány tárgya eljárás és berendezés kényszeráramlasos, célszerűen túlnyomásos elvélasztástechnikai vizsgálatok végzésére plenáris rendszerben. A javasolt eljárás szerint szorbensréteggel bevont réteglapra legalább egy mintát és a mintából meghatározott alkotórészeket meghatározott sorrendben elszállító vivőanyagot juttatunk, a vivőanyagot kényszeráramlásba hozzuk és vele a minta alkotórészeit a szorbensrétegben külön áramokban vándoroltatjuk, majd a réteglap szélét elhagyó vivóanyag külön áramait felfogjuk és egy anyagáramban egyesítjük, majd legalább egy összetevőjére vonatkozóan az áramló anyagban mérést végzünk. Az eljárás foganatosítására is alkalmas berendezés alaptest és fedótest között elrendezett, szorbensréteggel bevont legalább egy réteglapot, a réteglapban vivőanyagot kényszeráramlásban tartó egységet, mintabeviteli egységet, viyóanyagot a réteglap felületére juttató egységet, valamint a réteglap széléhez illesztett kivezető egységet, továbbá a kivezető egységgel kapcsolódó legalább egy mérőelemmel ellátott detektort tartalmaz. A találmány alapján különböző elválasztástechnikai eljárások előnyei egyesithetók.The present invention relates to a method and apparatus for conducting forced-flow, preferably over-pressurized, release tests in a plenary system. According to the proposed method, at least one sample and a carrier for transporting the specified constituents from the sample are applied to the sorbent-coated laminate sheet, the carrier is forced to flow and the constituents of the sample are transferred in separate streams and at least one of its components is measured in the flowing material. The apparatus for carrying out the process also comprises at least one layer sheet covered with a sorbent layer, a unit for carrying a flow of carrier material in the sheet sheet, a sample delivery unit, a unit for transferring material onto the surface of the sheet sheet, and an outlet unit contains a detector with a measuring element. According to the invention, the advantages of different separation techniques can be combined.
Az eljárástechnikai eljárások egyik alaptípusát az elektroforézises és a kromatográfiás eljárások jelentik, amelyek során megfelelő vivőanyagot hoznak kényszeráramlásba szorbensrétegben. Az áramoltatás lehetséges a kapilláris erő hatására is, de általában az elválasztás meggyorsítása érdekében a kényszeráramlást túlnyomással, elektroozmózissal, centrifugális eró, vákuum, stb. hatásával hozzák létre. Mivel az összetevőkre bontandó minta az esetek többségében ballasztanyagokat is tartalmaz, ezek mennyiségétől függően szokásosan a minta előtisztítását is elvégzik. A kényszeráramoltatás túlnyomással történő létrehozására mutat példát az 1 570 760 számú GB (angol) szabadalmi leírás, amely kromatográfiás berendezést ismertet. Ez a berendezés túlnyomásos kamrában elrendezett szorbensréteget tartalmaz, amely fölött túlnyomásos vizpárnarendszer van, amivel a például szilikagélbői, aluminium-oxidból vagy más ismert anyagból készült szorbensréteg fölött a gőztért kiküszöbölik. A kromatográfiás eluenst mikroszivattyüval juttatják a szorbensréteget hordozó réteglap kiválasztott pontjára. A réteglapnak legalább egyik oldalát impregnálással vagy műanyagfilmmel lezárják, s az eluensnek a réteglapon való vándoroltatása céljából az eluens bevezető nyílása előtt csatornát alakítanak ki vagy müanyaglapocskát helyeznek el.One of the basic types of process techniques is electrophoresis and chromatography, in which a suitable vehicle is forced to flow in a sorbent layer. The flow is also possible under the influence of capillary force, but generally, to accelerate the separation, the forced flow can be effected by overpressure, electro-osmosis, centrifugal force, vacuum, etc. created with the effect. Because the sample to be disassembled contains in most cases ballast materials, depending on their amount, the sample is usually pre-cleaned. An exemplary method of generating a forced flow by pressurization is disclosed in GB 1,570,760, which discloses a chromatographic apparatus. This apparatus comprises a sorbent layer arranged in a pressurized chamber, above which is a pressurized water vapor system, which eliminates vapor space above a sorbent layer made of, for example, silica gel, alumina or other known material. The chromatographic eluent is applied to the selected point of the sorbent layer by means of a micropump. At least one side of the laminate is sealed with an impregnation or plastic film, and a channel or plastic sheet is formed in front of the inlet opening of the eluent to migrate the eluent onto the laminate.
A túlnyomásos rétegkromatográfia továbbfejlesztésének lehetőségére mutat példát a 4 469 601 számú US szabadalmi leírás (Beaver et al.), amelyben két, sőt elméletileg három dimenzióban történő elválasztásra található példa. Az első dimenzióban történő kifejlesztés után a réteglapot kiszárítják, így felületéről az eluenst eltávolítják, ezt követően második dimenzióban újabb kifejlesztést végeznek és a réteglapról levezetett Összetevők mennyiségét mennyiségileg meghatározzák.An example of the potential for further development of pressurized layer chromatography is U.S. Patent 4,469,601 (Beaver et al.), Which provides an example of separation in two, and in theory, three dimensions. After developing in the first dimension, the laminate is dried to remove the eluent from its surface, and then in the second dimension, a further development is carried out and the amount of Ingredients derived from the laminate is quantified.
Az ismert eljárások és berendezések a hagyományos oszlopkromatográfiás eljárások plenáris változatát magas szintre fejlesztették, de továbbra is problémát jelent, hogy a réteglapon az elválasztást követően az anyag egy része ott marad és meghatározására nem kerül sor. Ez az összetételre vonatkozó információkat hamisítja meg, a mérés kevésbé megbízható.The known processes and equipment have developed the plenary version of the conventional column chromatography procedures to a high level, but there remains a problem that, after separation, some of the material remains on the layer sheet and is not determined. This falsifies composition information, making measurement less reliable.
Az említett US szabadalmi leírás is utal a folyamatos anyagelvétel lehetőségére. Ebből a túlnyomásos rétegkromatográfia továbbfejlesztéseként alakult ki az automatizált elemzés módszere, mivel a réteglapot elhagyó anyag könnyen összegyűjthető és átfolyásos rendszerű méröküvettakban, detektorokban összetételére jellemző adatok nyerhetők. Az eljárásnak hiányossága azonban az, hogy a réteglapot számos összetevő csak igen lassan képes elhagyni. Az idő múlásával növekszik annak veszélye is, hogy ezek az összetevők a réteglapon fizikai és/vagy kémiai folyamatok révén megkötődnek, az elemezésből kimaradnak és a réteglapot elszennyezik. Az így visszamaradó rész hatékony mosással sem mindig távolítható el. Bár a két-, illetve többdimenziós kifejlesztéssel a foltkapacitás elméletileg négyzetesen növelhető, a többszöri start miatt az irreverzibilisen megkötött anyag mennyisége is arányosan növekszik. A többszöri start azt jelenti, hogy az eluenst külön-külön kell az egyes dimenziókban végzendő fejlesztések esetén adagolni. A jelenlegi plenáris rendszerek két dimenzió esetén mindössze egy minta vizsgálatát teszik lehetővé egyidejűleg.The above-mentioned U.S. Patent also refers to the possibility of continuous uptake. This developed the method of automated analysis as a further development of the overpressure layer chromatography, since the material leaving the layer sheet can be easily collected and its composition data can be obtained in flow-through measuring cells and detectors. The disadvantage of this process, however, is that many of the components are only able to leave the laminate very slowly. Over time, there is also an increased risk that these components will be bonded to the lamina by physical and / or chemical processes, omitted from the analysis, and contaminated by the lamina. The remaining residue cannot always be removed by effective washing. Although the two- and multi-dimensional development can theoretically increase the patch capacity, the amount of irreversibly bound material increases proportionally due to the multiple start. Multiple starts means that the eluent has to be added separately for each dimension improvement. The current plenary systems allow the examination of only one sample at a time in two dimensions.
A többszörös kifejlesztések másik problémája, hogy az oldószer elpárologtatósához szükséges megemelt hőmérséklet az érzékenyebb komponensek bomlását, denaturálását okozhatja, így az erre vonatkozó információ is alvész.Another problem with multiple developments is that the elevated temperature required for solvent evaporation can cause decomposition or denaturation of the more sensitive components, so information on this is lost.
Az elektroforézis az ionos tulajdonságú anyagok, például a fehérjék, peptidek, aminosavak, szervetlen ionok elválasztásához használatos, mivel az elektromos erőtérben ezek az anyagok polaritásuknak megfelelően a pozitív vagy a negatív sarok felé áramolnak. Az elektroforézis végezhető a kromatográfiához hasonlóan kényszeráramlasos rendszerben és ekkor a fentiekben elemzett problémákkal kell számolni.Electrophoresis is used to separate ionic substances, such as proteins, peptides, amino acids, inorganic ions, because in the electric field, these substances flow according to their polarity to the positive or negative corner. Electrophoresis can be carried out in a forced-flow system similar to chromatography, in which case the problems analyzed above are to be reckoned with.
A találmány célja az elválasztástechnikai vizsgálatok említett problémáinak megoldása. Igényként merült fel a plenáris rendszerű elválasztástechnikai eljárás hatékonyságának további javítása. A találmányunk feladata ennek az igénynek eleget tevő eljárás és bereidezés kidolgozása.SUMMARY OF THE INVENTION The object of the present invention is to solve the above problems of separation technology tests. There is a need to further improve the efficiency of the plenary separation process. It is an object of the present invention to provide a process and a presentation meeting this need.
Felismertük, hogy a kromatográfiás vizsgálatok hatékonysága növelhető, időigényessége csökkenthető, ha a réteglapról levitt anyag vizsgálatát kombináljuk a réteglapon maradt anyag mérésével. A hatékonyság további növeléséhez járul hozzá, ha a kromatográfiás vizsgálattal egyidejűleg elektroforézist is végzünk.It has been found that the efficiency of the chromatographic assays can be increased and the time consumed reduced by combining the examination of the material deposited on the laminate with the measurement of the material remaining on the laminate. It also contributes to further increase in efficiency when electrophoresis is performed simultaneously with the chromatographic assay.
A kitűzött feladat megoldására egyrészt eljárást, másrészt berendezést dolgoztunk ki. A javasolt eljárás szerint szorbensréteggel bevont réteglapra legalább egy mintát és a mintából meghatározott alkotórészeket meghatározott sorrendben elszállító vivőanyagot juttatunk, a vivőanyagot kényszeráramlásba hozzuk és vele a minta alkotórészeit a szorbensrétegben külön áramokban vándorolhatjuk, majd a réteglap szélét elhagyó vivőanyag külön áramait felfogjuk és egy anyagáramban egyesítjük, majd legalább égy őszszetevöjére vonatkozóan az áramló anyagban mérést végzünk, és a találmány szerint az összetevők meghatározását a vivőanyaggal vándorolhatott összetevőkhöz tartozó adott retenció eléréséig folytatjuk, majd a réteglapot kromatográfiai és/vagy elektroforetikus érzékelöegységhez viszonyítva mozgásba hozzuk, és a rajta maradt összetevők jellemzőit megmérjük.In order to solve this task, we developed a procedure and equipment on the one hand. According to the proposed method, at least one sample and a carrier for transporting specified constituents from the sample are delivered to a sorbent-coated laminate sheet, the carrier is forced to flow, and the constituents of the sample are migrated in separate flows and and measuring at least four of its constituents in the flowing material, and according to the invention, determining the constituents continues to achieve a given retention of the constituents that may be migrated with the carrier, then moving the layer sheet relative to the chromatographic and / or electrophoretic sensor unit.
Vivöanyagként kromatográfiai eluenst és/vagy oldószert juttatunk a réteglapra, a kényszerárammal a réteglapról levitt összetevőket étfolyócellás detektoregységgel, míg a réteglapon maradt összetevőket denzitométerrel mérjük.Chromatographic eluent and / or solvent is applied to the layer sheet as a vehicle, the components removed from the layer sheet under a forced current are measured with a flow cell detector unit, and the remaining components on the layer sheet are measured with a densitometer.
Célszerű a hőmérséklet szabályozott változtatása a réteglap felületén, illetve felületének adott pontjaiban.It is expedient to adjust the temperature in a controlled manner on the surface of the laminate or at specific points on its surface.
A vivöanyag kényszeráramlása biztosítható egyebek között túlnyomással, elektroozmózissal, vákuummal, vagy centrifugális erővel. Célszerűen túlnyomás alkalmazása esetén a réteglapon maradt összetevők mérése előtt a túlnyomást megszüntetjük.Forced flow of the vehicle can be provided by, inter alia, overpressure, electro-osmosis, vacuum, or centrifugal force. Preferably, if overpressure is used, the overpressure is removed before weighing the remaining components on the sheet.
A kromatográfiás és az elektroforézises vizsgálatok egyidejűleg végezhetők, ha a réteglap környezetében elektromos erőteret hozunk létre.Chromatography and electrophoresis may be performed simultaneously by generating an electric field in the vicinity of the sheet.
A mérési folyamat lefolytatásának egésze szempontjából előnyös lehet, ha a réteglapon még a vivőanyag levezetése előtt az összetevőket megmérjük.For the whole measurement process, it may be advantageous to measure the ingredients on the sheet before the carrier is drained.
Ugyancsak célszerű lehet a minta előtisztítását elvégezni, mielőtt azt a vivőanyaggal hoznánk kapcsolatba.It may also be desirable to pre-purify the sample before contacting it with the vehicle.
Ugyancsak a kitűzött cél elérésére szolgál az a találmány szerinti berendezés, amely alaptest és fedötest között elrendezett, szorbensréteggel bevont legalább egy réteglapot, a réteglapban vivöanyagot kényszeráramlásban tartó egységet, mintabeviteli egységet, vivöanyagot a réteglap felületére juttató egységet, valamint a réteglap széléhez illesztett folyadékot elvezető vezetéket, továbbá a vezetékkel kapcsolódó legalább egy méró4 elemmel ellátott detektort tartalmaz, és amelynek lényege, hogy a réteglap szorbensréteggel fedett felületével szemben elrendezett érzékelő egységgel van ellátva, ahol az érzékelő egység és a szorbensréteggel ellátott réteglap egymáshoz viszonyítva elmozdithatóan van megvezetve. A megvezetést előnyösen kerékkel vagy golyófészkes megtámasztással biztosítjuk.A further object of the present invention is to provide a device according to the invention which comprises at least one layer sheet, a carrier unit for forced flow flow in the sheet sheet, a carrier unit for applying a fluid to the surface of the sheet sheet and a fluid bed edge. and further comprising at least one detector having a measuring element 4 connected to the conductor and having a sensor unit disposed opposite to the sorbent layer-covered surface, wherein the sensor unit and the sorbent layer laminate are guided relative to one another. Advantageously, guiding is provided by wheel or ball seat support.
Célszerűen a réteglaphoz elektromos potenciálkülönbséget létrehozó elektródák vannak illesztve.Preferably, the electrode differential electrodes are applied to the layer sheet.
Az alaptest lehet síkszerű vagy hengeralakú, míg a fedótest ennek megfeieően szintén síkszerű vagy hengeres. A két test között elrendezett réteglapot alkalmas módon létrehozott túlnyomás szorítja a fedótesthez.The base body may be planar or cylindrical, while the cover body may also be planar or cylindrical. The laminate between the two bodies is pressed against the cover body by a suitably created overpressure.
Hengeres testek alkalmazása esetén a fedötest célszerűen kvarcüvegből áll és az érzékelóegység hozzá kapcsolódik.In the case of cylindrical bodies, the cover body is preferably composed of quartz glass and the sensor unit is connected thereto.
A találmány szerinti berendezésben alkalmazott réteglap felületén a célszerűen különböző anyagú szegmensekből összeállított szorbensréteg legalább egy oldalán impregnált szél van kialakítva. A szorbensréteg lehet egységes, de állhat kereszt alakot létrehozó vagy körszelet alakú elemekből.The surface of the laminate used in the apparatus of the present invention is provided with an impregnated edge on at least one side of the sorbent layer, preferably composed of segments of different materials. The sorbent layer may be uniform but may consist of cross-forming or circular-shaped elements.
A találmány szerinti eljárás és berendezés segítségével nagy hatékonyságú elválasztástechnikai vizsgálatokra nyílik lehetőség.The process and apparatus of the present invention enable high-efficiency separation techniques.
A találmány tárgyát a továbbiakban példakénti kiviteli alak, illetve foganatosítási mód alapján, a csatolt rajzra hivatkozással ismertetjük részletesen. A rajzon azDETAILED DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS The present invention will now be described in more detail by way of example and embodiment with reference to the accompanying drawings. In the drawing it is
1. ábra a találmány szerinti eljárás foganatosítása során felvett görbesereg és az ismert eljárásokkal felvett görbeseregek összehasonlítása, aFig. 1 is a comparison of a plurality of curves taken in carrying out the process of the present invention with curves of the prior art;
2. ábra a találmány szerinti túlnyomásos rétegkromatográfiás berendezés vázlata, aFigure 2 is a schematic diagram of a pressurized layer chromatography apparatus according to the invention, a
3. ábra a találmány szerint kialakított sokcsatornás túlnyomásos rétegkromatográfiás berendezés elölnézeti keresztmetszete, aFig. 3 is a front cross-sectional view of a multichannel pressurized layer chromatography apparatus according to the invention,
4. ábra a 3. ábra szeíinti berendezés oldalnézeti metszete, azFig. 4 is a side elevational view of the apparatus of Fig. 3;
5. ábra a 3. ábra szerinti berendezésben alkalmazott megvezetések vázlata, aFigure 5 is a schematic diagram of the guides used in the apparatus of Figure 3, a
6. ábra kétdimenziós túlnyomásos rétegkromatográfiás elválasztás sematikus ábrázolása, aFigure 6 is a schematic representation of two-dimensional high pressure layer separation;
7. ábra a rétegkromatográfiás és elektroforetikus elválasztás sémája túlnyomás alkalmazása mellett, aFigure 7 is a schematic of layer chromatography and electrophoretic separation using overpressure,
8. ábra liriearizált cirkuláris kifejlesztésre alkalmas réteglap felülnézete, aFig. 8 is a plan view of a layer sheet suitable for lirarized circular development, a
-3196509-3196509
9. ábra cirkuláris kényszeráramlásos elválasztáshoz használt réteglap felülnézete, aFigure 9 is a plan view of a laminated sheet used for circular forced flow separation, a
10. ábra kényszeráramlásos előtisztító rendszer felülnézete, míg aFig. 10 is a plan view of a forced flow pre-cleaning system, while a
11. ábra a találmány szerinti eljárás foganatosításának blokkvázlata.11 is a block diagram of an embodiment of the method of the present invention.
A találmány szerinti eljárás foganatosítása során először réteglapot alakítunk ki, amelyre elválasztandó minta összetevőinek továbbvitelére alkalmas vivöanyag egy vagy többirányú szétterjedésének feltételeit megteremtő szorbensréteget viszünk fel. A vivőanyag az adott minta várható összetételének megfelelő eluens (kromatográfiás kifejlesztés esetén) vagy alkalmas oldószer (elektroforézises kifejlesztés esetén) lehet. A kétféle kifejlesztés a találmány értelmében kombináltan is alkalmazható, ekkor a vivőanyagot oly módon kell megválasztani, hogy mind oldószerként, mind pedig eluensként hatásos legyen.In carrying out the process of the present invention, a laminate sheet is first applied to which a sorbent layer is provided which provides conditions for one or more directions of propagation of the carrier material to be separated. The vehicle may be an eluent (for chromatographic development) or a suitable solvent (for electrophoretic development) appropriate to the expected composition of the sample. The two types of development can be used in combination according to the invention, and the carrier must be selected so as to be effective as both a solvent and an eluent.
A réteglapok az ismert módon készíthetők el, de a továbbiakban ismertetendő különleges kialakításúak is lehetnek. A rajtuk levő szorbensréteg létrehozására különösen előnyös a különböző fajlagos felületű, póruseloszlású, pórusméretü, szemcseméret szerint is differenciált szilikagél, aluminium-oxid, magnézium-szilikát, talkum a szervetlen anyagok, mig cellulóz, műgyantapor, poliamid a szerves anyagok közül. Természetesen ezen túlmenően más anyagok is előnyösen használhatók, s a tapasztalat szerint igen kedvező eredmények érhetők el a kémiailag kötött forditott fázisú szorbenst tartalmazó réteglapok segítségével. Előnyös megoldás különböző hosszúságú és különleges, például Si-0-Si-C kötéssel felvitt alkil láncok alkalmazása. A szilikagél funkciós csoportok, egyebek között diói (vicinális hidroxil), amino-ciano, amino és nitro csoportok hordozására alkalmas, az így kialakított, vagy kémiailag kötött normális fázisú szorbensekel alkalmazó réteglapok szintén előnyösek. A szerves vagy szervetlen ioncserélő rétegek és ezek kombinációi ugyancsak pozitív eredményeket hoztak. Ezekben megfelelő funkciós csoportokkal lehet a gyenge kationcserélő vagy anioncserélő jellemzőket elérni.The laminates may be made in a known manner, but may also have the specific design described below. Particularly preferred are silica gel, alumina, magnesium silicate, talc inorganic materials, mig cellulose, synthetic resin powder, polyamide in organic materials having a specific pore size, pore size, differentiated particle size, to form the sorbent layer on them. Of course, other materials can also be advantageously used, and experience has shown that very good results can be achieved with chemically bonded reverse phase sorbents. A preferred solution is the use of alkyl chains of different lengths and specific ones, such as Si-O-Si-C bonded. Silica gel functional sheets, such as di (vicinal hydroxyl), aminocyano, amino and nitro groups, which are formed or chemically bonded with normal phase sorbents, are also preferred. Organic or inorganic ion exchange layers and combinations thereof have also produced positive results. In these, suitable functional groups can be used to achieve weak cation exchange or anion exchange properties.
A méret szerinti kizáráson (size exclusion) alapuló elválasztások esetén a nagy mértékben keresztkötésekkel kialakított polimer gélek és a szervetlen gélek (például széles pórustartományú szilikagél alapú keverékek szintezett vagy kémiailag módosított formában) használata ajánlható.In the case of size exclusion separations, the use of highly crosslinked polymer gels and inorganic gels (for example, wide pore silica gel based mixtures, in a leveled or chemically modified form) is recommended.
Optikailag aktív vegyületek elválasztása esetén a .királis (optikailag forgatóképes) anyagok alkalmazása célszerű.In the case of separation of optically active compounds, chiral (optically rotating) materials are preferred.
A réteglap készülhet egyebek között eloxált alumíniumból vagy szerves anyagból, például műanyagból, egyebek között színtereléssel, polimerizációval.The laminate may be made, inter alia, of anodized aluminum or organic material, such as plastics, by color guiding and polymerization, among others.
A szorbensréteg lehet homogén, több anyagból keveri vagy kapcsolt anyagú. Ez utóbbi esetben a réteg egymás mellett elrendezett, eltérő tulajdonságú szegmensekből áll.The sorbent layer may be homogeneous, mixed, or bonded. In the latter case, the layer consists of adjacent segments with different properties.
A szorbensréteg vastagsága célszerűen Ü,C5 és 5,0 mm között van, ezt az elválsztás feltételeinek megfelelően kell megválasztani.The thickness of the sorbent layer is preferably between Ü, C5 and 5.0 mm and should be selected according to the separation conditions.
A szorbensréteggel ellátott réteglap felületének kijelölt pontjára (pontjaira) a meghatározandó összetevőket tartalmazó egy vagy több minta felvitele a következő lépés. Ez az elválasztás feltételeitől függően sávosan vagy foltszerűen száraz vagy nedves szorbensrétegre történik, mégpedig a vivőanyag (kromatográfiai eluens és/vagy elektroforézishez szükséges oldószer) áramában történő beadagolással - ez az általános gyakorlat - vagy a beadagolástól függetlenül (mint azt a 2 091 579 számú QB /angol/ közzétételi iratban javasolták).The next step is to apply one or more samples containing the components to be determined to the designated point (s) of the surface of the laminated sheet having a sorbent layer. Depending on the conditions of the separation, this is done in a band or patch on a dry or wet sorbent layer, either by addition to the vehicle stream (chromatographic eluent and / or solvent for electrophoresis) - this is a general practice - or independently (as described in Q 2 091 579). English / Publication).
A felvitt minta környezetébe el kell juttatni a vivöanyagot. Ez történhet a minta felvitelétől függetlenül, vagy pedig, mint említettük, a vivöanyag biztosíthatja a minta bemosását a réteglap felületén levő szorbensrétegbe.The vehicle should be delivered to the surroundings of the applied sample. This can be done independently of the application of the sample or, as mentioned above, the carrier can provide a wash of the sample into the sorbent layer on the surface of the laminate.
A kifejlesztés gyors és hatásos elvégzése céljából a vivőanyagot kényszeráramlásba hozzuk. Ez történhet túlnyomás alkalmazával, elektroozmózisos feltételek létrehozásával, a réteglapnak rajta kívül kijelölt tengely körüli forgásba hozásával (centrifugális erő hatásával), vákuummal vagy más alkalmas eljárással.To carry out the development quickly and efficiently, the vehicle is forced to flow. This can be accomplished by applying overpressure, creating electro-osmotic conditions, rotating the laminate around its designated axis (by centrifugal force), vacuum, or other suitable method.
A kényszeráramlásba hozott vivőanyag a mintában levő összetevők adott sorrendben oldékonyságuk, retenciójuk mértékében magával viszi és a vizsgálat idejével növekvő távolságra továbbítja.The forced-flow carrier carries the components of the sample in a specific order in terms of their solubility, retention, and transport over an increasing distance over the course of the test.
Mint az 1. ábrán látszik, a mintából elszállított összetevők optikai jellemzőinek, különösen denzitásának mérésével az összetevők mennyiségére is jellemző adatok nyerhetők. Ha a réLeglapon maradt anyagot tekintjük, akkor az 1. ábra szerinti A görbesereg nyerhető. Ebben 1 .... 7 sávban a jól vagy még elfogadhatóan mérhető összetevőknek megfelelő görbék láthatók, míg a 8 .... 14 sávban már a rosszul mérhető szintek szerepelnek. Ha a réteglap szélét elhagyó anyagot összegyűjtjük - mintánként külön csatornában - akkor a B görbesereg szerinti mérési adatok nyerhetők, amelyekből kitünően az 1 .... 7 sávokban a réteglapon maradt viszonylag nagy anyagmennyiség miatt alig vagy rosszul értékelhető csúcsok adódnak, mig a vivőanyaggal a réteglapról leginkább levitt anyagoknak a 8 .... 14 sávok felelnek meg. Ebből következik, hogy az A görbesereg esetén a, a B görbesereg esetén b’ mérési szakasz hordozza az igazán értékes információt, míg az A görbesereg b, a B görbesereg a’ mérési szakaszán kevéssé hasznosítható információ van. Az a és a’, illetve b és b' mérési szakaszok közötti határt a retenció függvényében, előzetes vizsgálatokkal határozzuk ineg.As can be seen in Figure 1, by measuring the optical properties, in particular the density, of the components transported from the sample, specific quantities of the components can also be obtained. When looking at the material remaining on the sheet, the curve set A of Figure 1 can be obtained. This bar of 1 .... 7 shows the curves corresponding to the components that are well or still reasonably measurable, while the bar of 8 ... 14 already contains the levels that are not measurable. By collecting the material leaving the edge of the plywood, in a separate channel per sample, measurement data can be obtained from a set of curves B which, due to the relatively large amount of material remaining in the lane sheet, exhibit little or no appreciable peaks, bands 8 ... 14 correspond to the most spread materials. It follows that, for Curve A, curve a, for curve B, contains the really valuable information, while curve A, curve b, has little useful information. The boundary between the measuring sections a and a 'and b and b' is determined by preliminary tests as a function of retention.
A találmányi gondolat lényege, hogy a szükséges feltételek megteremtése után az 1 .... 7 sávoknak megfelelő anyagokat (a mérési szakasz) a réteglapon, a 8 .... 14 savóknak megfelelő anyagokat (b' mérési szakasz) a réteglapon kívül kell mérni, s ennek megfelelően C gőrbesereget kell felvenni, amihez célszerűen kétféle mérőrendszerrel látjuk el a kromatográfiás és/vagy elektroforézises vizsgólatok végzésére alkalmas berendezést.The idea of the invention is that, once the necessary conditions have been created, the materials corresponding to the bands 1 to 7 (the measuring section) must be measured outside the laminate and the materials corresponding to the whey 8 to 14 (the measuring section b '). and, accordingly, a C-arm worm should be acquired, preferably by providing two types of measuring systems for chromatographic and / or electrophoretic testing.
A sávok szerinti felosztás határai az adott körülményektől függnek.Boundary breakdown limits depend on the circumstances.
A javasolt eljárás foganatosítása során a kővetkező kiegészítő lehetőségeket lehet célszerűen kihasználni:In carrying out the proposed procedure, the following additional options may be desirable:
1. A réteglap felületén a hőmérsékletet időbeni és térbeli eloszlásban adott program szerint, figyelembe véve az elválasztás körülményeit, szabályozzuk. Ezzel a csúcskapacitás és a foltkapacitás, valamint az érzékenység jelentős emelkedése érhető el. A hőmérséklet a vivőanyag áramlását is befolyásolja, hozzájárulhat a vizsgálati idő lerövidítéséhez.1. The temperature of the surface of the laminate is controlled by a program of time and space distribution, taking into account the conditions of separation. This results in a significant increase in peak and spot capacity as well as sensitivity. Temperature also influences the flow of the vehicle and may shorten the test time.
2. A réteglapon mérést végzünk, még mielőtt a vivőanyag a réteglap szélét elérte volna. Ezzel az elválasztás eredményeinek megbízhatósága, az elválasztás hatékonysága javítható.2. Measurement of the plywood sheet before the vehicle has reached the edge of the plywood sheet. This can improve the reliability of separation results and the efficiency of separation.
3. Állandó minőségű szorbensréteggel készített többszőr felhasználható vagy eldobható kialakítású réteglapot használunk, amely alkalmas lehet egyidejűleg több minta lineáris, cirkuláris vagy linearizált cirkuláris kifejlesztésére, a 6-10. ábrákon látható réteglapok alkalmazásával.3. A multiple-use or disposable laminate sheet made with a continuous quality sorbent layer, which may be capable of simultaneously developing multiple samples in a linear, circular, or linearized circular fashion, as shown in FIGS. using the layer sheets shown in FIGS.
4. A szorbensréteget több különböző szegmensből kialakítva célszerű lehet a minta beadagolása a vivöanyag áramába.4. Forming the sorbent layer from a plurality of different segments, it may be desirable to add the sample to the carrier stream.
5. A kétféle meghatározás mellett kétirányú és kétdimenziós elválasztást végzünk, például elektromos tér és/vagy hőmérsékletkülönbség létrehozásával.5. In addition to the two definitions, bidirectional and two-dimensional separation is performed, for example by generating an electric field and / or temperature difference.
6. Egyidejűleg, hőmérsékletszabályozás mellett, több mintát elemzünk. Ezzel a hatékonyság és a foltkapacitás javítható.6. Analyze several samples simultaneously with temperature control. This improves efficiency and blot capacity.
A találmány szerinti eljárással és berendezéssel a fenti változatok mind megvalósíthatók.All of the above embodiments can be achieved by the method and apparatus of the invention.
A találmány szerinti eljárás foganatosítása során tehát a külön-külön A és B görbesereg helyett (1. ábra) az elemzés céljaira sokkal jobban megfelelő C görbesereget vesszük fel. Ezen minden csúcsához egy-egy külön összetevő tartozik. Látható, hogy az A görbeseregböl végülis nem hasznosul a nagyobb távolságokra eljutó résznek megfelelő rész, míg a B görbeseregből az a rész marad ki, amelyhez a legrövidebb vándorlási idők tartoznak. A réteglap méreteinek célszerű megválsztásával ily módon lehetőség nyílik az elválasztás hatékonyságának növelésére. Szükség szerint a mérés során a hőmérsékletet a réteglap felületén azonos mértékben vagy meghatározott program szerint szegmensenként változtatjuk.Thus, in carrying out the process of the invention, instead of the curve sets A and B (Figure 1), the curve set C is much more suitable for analysis purposes. Each vertex has a separate component. It can be seen that, from curve set A, the portion corresponding to the longer distances is not utilized, while curve set B does not benefit from the part with the shortest migration times. In this way, by choosing the size of the laminate, it is possible to increase the separation efficiency. If necessary, during the measurement, the temperature on the surface of the laminate is varied to the same extent or according to a specific program per segment.
A találmány szerinti eljárás foganatosításának tapasztalat szerint egyik igen kedvező módja az, amikor a réteglapról az öszszetevöket a kromatográfiás eluenssel egy előre meghatározott értékű retenció eléréséig túlnyomásos kényszeráramlással visszük le. Ezt követően a túlnyomást megszüntetjük, majd a réteglapot olyan érzékelővel hozzuk kapcsolatba, amely a rajta maradt összetevők valamelyik jellegzetes paraméterének mérésére alkalmas. Ilyen mérőeszköz lehet a denzitométer. A réteglapról lefolyt anyagot étfolyásos küvettás érzékelőbe vezetjük, mely célszerűen szintén optikai úton képes az anyag valamely meghatározott jellemzőjének mérésére és igy az azonosítás megbízható elvégzésére. 'According to the experience of the present invention, one of the most advantageous ways of carrying out the process from the layer plate is by applying a positive pressure flow through the chromatographic eluent to a predetermined retention value. The overpressure is then removed and the laminate is contacted with a sensor capable of measuring a characteristic parameter of the remaining components. Such a measuring device may be a densitometer. The material discharged from the laminate is fed into a flow cuvette sensor, which is also preferably capable of optical measurement of a specific property of the material and thus reliable identification. '
A találmány szerinti eljárás foganatosításéra is alkalmas berendezés (2-5. ábra) három fő részre osztható, mégpedig D kifejlesztő kamrára, átfolyócellás E detektorra és célszerűen transzmissziós F denzitométerként kialakított érzékelő egységre. Benne D kifejlesztő kamra feladata olyan feltételek létrehozása, amelyben a minta hatékonyan bontható fel összetevőire. Az ehhez szükséges vivöanyag a mintából magából vitt összetevőkkel egyrészt az átfolyócellás E detektorra kerül, míg másik része az F érzékelő egység transzmissziós denzitométerének segítségével mérhető meg.The apparatus (Figs. 2-5) suitable for carrying out the method of the present invention can be divided into three main parts, namely the development chamber D, the flow cell detector E and the sensor unit preferably formed as a transmission F densitometer. In it, the role of the development chamber D is to create conditions in which the sample can be effectively decomposed into its components. The required carrier is transported from the sample to the flow cell detector E, while the remainder is measured using the transmission densitometer of the sensor unit F.
A D kifejlesztő kamra kialakítása sokféle lehet. A tapasztalat a sikszerű elrendezést tekinti különösen előnyösnek, de célszerűnek bizonyult hengeres kialakítás kidolgozása is. A sikszerű kiépítésű D kifejlesztő kamrában (2. és 3. ábra) 15 zárt térben nyomási közvetítésre alkalmas 16 közeg van, amelynek révén 17 alaplapra, mint alaptestre nyomást gyakorlunk. A 17 alaplaphoz a rá gyakorolt nyomás átadására kiképezett 18 munkalap illeszkedik, és ez 19 réteglappal érintkezik. A 19 réteglap fedőtesthez, például 20 felső testhez szorul, amelyen át 21 és 22 vezeték beömlése, illetve 23 vezeték kiömlése van elrendezve. A 21 vezeték az eluens, vagy az oldószer, a 22 vezeték a szétválasztandó öszszetevőket tartalmazó minta bevezetésére, mig a 23 vezeték a 19 réteglap felületét elhagyó eluensnek az átfolyócellás E detektorba való továbbítására szolgál. Az F érzékelő egység, mint említettük transzmissziós denzitométerként van kialakítva, 25 fényforrást és ennek a 19 réteglapról visszavert, illetve azon átengedett fényét felfogó 24 érzékelőket tartalmaz. Többcsatornás mérés esetén nagyobb, nem szükségszerűen azonos számú 25 fényforrás és 24 érzékelő használható. Mint látható (2. ábra), a 15 zárt tér két részre oszlik, az egyikben helyezkedik el a 17 alap-511 lap és 20 felsó test, míg a másik az F érzékelő egység transzmissziós derizitométeréhez van csatlakoztatva. Itt a ití munkaláp részére megfelelő megvezetés van kialakítva, amelyen ét az a transzmissziós denzitoniéter környezetébe tolható el.The design of the development chamber D can be varied. Experience considers a successful arrangement to be particularly advantageous, but it has also proved expedient to develop a cylindrical arrangement. The well-developed development chamber D (Figs. 2 and 3) has a closed space 15 for pressurizing fluid 16 to exert pressure on the base board 17. The base plate 17 is fitted with a worktop 18 designed to transfer pressure to it and is in contact with the layer plate 19. The laminate 19 is clamped to a cover body, such as an upper body 20, through which conduits 21 and 22 and conduit 23 are disposed. Line 21 is used to introduce the eluent, or solvent, line 22 for introducing a sample containing the components to be separated, while line 23 is used to transfer the eluent leaving the surface of the laminate 19 to the flow cell detector E. The sensor unit F, as referred to as the transmission densitometer, comprises light sources 25 and sensors 24 which reflect light reflected from or passed through the layer sheet 19. For multi-channel measurement, a larger, not necessarily equal number of light sources and 24 sensors can be used. As shown (FIG. 2), the enclosed space 15 is divided into two portions, one housing the base plate 17 and the upper body 20, and the other connected to the transmission derivative meter of the sensor unit F. Here, a suitable guide is provided for the Italian working platform, whereby it can be pushed into the environment of the transmission densitoneether.
Mint a 2. ábrán látható, a D kifejlesztő kamra két részre oszlik, ahol az E detektor az egyik, az F érzékelő egység a másik részhez csatlakozik. Ez utóbbi 27 nyitható tetővel van ellátva, amelyen át a 18 munkaláp kivehető.As shown in Fig. 2, the development chamber D is divided into two parts, where the detector E is connected to one part and the detector unit F to the other part. The latter is provided with an opening cover 27 through which the working platform 18 can be removed.
A találmány szerinti berendezés túlnyomással működő változatának egy másik megvalósítási lehetősége az, hogy a 20 felső test henger 'alakú, kór keresztmetszetű elem, amelyen a 19 réteglap és vele a szorbensréteg görbe felülettel van kialakítva. A 18 munkaláp ebben az esetben szintén hengeres. A 20 felső test áttetsző anyagú, például kvarcüvegből áll és belül például rugalmas tag szolgál a túlnyomás előállítására. Ekkor az eluens vagy az oldószer kényszeráramlását a 18 munkalap tengely körüli forgatásával is biztosíthatjuk, amikoris a 19 réteglap a centrifugális erő hatásának van kitéve. Ennél a berendezésnél a mérések úgy is kialakíthatók, hogy a 18 munkalap egyáltalában nem mozog, hanem az F érzékelő egység denzitométere az, amelynek 24 érzékelője a 25 fényforrással együtt mozog. Célszerű megoldás lehet ebben az esetben a 24 érzékelők mátrixba való elrendezése.Another embodiment of the pressurized version of the device according to the invention is that the upper body 20 is a cylindrical, cross-sectional element on which the lamina 19 and the sorbent layer are formed with a curved surface. The impeller 18 is also cylindrical in this case. The upper body 20 is made of a translucent material, such as quartz glass, and, for example, has a resilient member on the inside for producing overpressure. In this case, forced flow of the eluent or solvent can also be provided by rotating the worktop 18 about an axis, whereby the laminate 19 is subjected to centrifugal force. In this apparatus, the measurements can also be made so that the worktop 18 is not moving at all, but is the densitometer of the sensor unit F whose sensor 24 is moving with the light source 25. In this case, it may be convenient to arrange the sensors 24 in a matrix.
A kromatográfiai kifejlesztés során a 19 réteglapot elhagyó eluenst étfolyásos uiéröegységbe vezetjük, ahol több méróérzékelőt alkalmazunk az átfolyó anyag közvetlen mérésére. A 2. ábrán látható elrendezés akkor különösen előnyös, ha a 18 munkalapot az F érzékelő egységgel elvégzendő mérés előtt valamilyen módon, például vizszórással, szárítással, hűtéssel, melegítéssel vagy más fizikai eljárással előkészítő műveleteknek kell alávetni. .Ezeket a műveleteket általában a 15 zárt térből kivett 18 munkalápon hajtjuk végre. Ha nincs szükség előkészítésre, akkor az előzőekben említett hengeres elrendezés igen kedvező feltételeket teremt az elválasztás hatékonyságának javítására.During the chromatographic development, the eluent leaving the layer plate 19 is introduced into a flow-through flow unit, where multiple measuring sensors are used to directly measure the flow rate. The arrangement shown in Figure 2 is particularly advantageous if the worktop 18 has to undergo some preparatory operations, such as water spraying, drying, cooling, heating or other physical processes, before measuring with the sensor unit F. These operations are generally performed on a work platform 18 taken from the enclosed space 15. If no preparation is required, the above-mentioned cylindrical arrangement provides very favorable conditions for improving the separation efficiency.
Λ találmány szerinti berendezés további megvalósítására mutatnak példát a 3., 4 és 5. ábrán keresztmetszetben látható elrendezések. Az ezekkel a keresztmetszetekkel jellemzett túlnyomásos vékonyréteg-kromatográfiás berendezések 28 készüléktestben vannak elrendezve, amelynek bal oldalán szárító gáz bevezetésére 26 beömlés van kialakítva, mig belső teréhez a 27 nyitható tetőn át lehet hozzáférni. A bal oldalon az eluens és/vagy az oldószer eltávolítására alkalmas egység is elhelyezhető. A berendezés jobb oldalán, akárcsak a 2. ábra szerinti berendezésnél, 15 zárt térben szorbensréteggel ellátott 19 réteglapot hordozó 18 munkalap van, a 18 munkalap fölött 20 felső test van elrendezve, míg alatta 52 kerekek vagy golyók vannak, amelyekre megfelelő egységen ét támaszkodik. Ez a támasz az 52 kerekekkel vagy golyókkal lehetővé teszi a 18 munkalap elinozgatását a berendezés bal oldali zárt terébe, ide csatlakozik a 21 vezeték beömlése, amellyel eluens és/vagy oldószer vezethető be, a 22 vezeték, amelyen át az eluens, illetve oldószer elvezetése biztosított. A 22 vezeték 30 bemenelekkel van összekapcsolva, amelyen ét a minta továbbítható. Ezek a 30 bemenetek csőcsoukként vannak kialakítva. A berendezés 31 elszívó nyilassal van kialakítva, amelyen át a 26 beömlésen át bejuttatott gáz eltávolítható. A 20 felső testben a 24 érzékelők és további 29 érzékelők részére elektromos csatlakozók vannak elrendezve.3, 4 and 5 are further exemplary embodiments of the apparatus of the invention. The pressurized thin-layer chromatography apparatus characterized by these cross-sections are arranged in a device body 28 having an inlet 26 for the introduction of a drying gas on the left side, while its interior space is accessible via the opening roof 27. A unit for removing the eluent and / or the solvent may also be provided on the left. On the right side of the apparatus, as in the apparatus of FIG. 2, there is a worktop 18 with a sorbent layer 15 enclosed in a closed space 15, above which the upper body 20 is disposed, while beneath there are wheels 52 or balls. This support, with wheels or balls 52, allows the worktop 18 to be moved to the left enclosure of the apparatus, including the inlet of conduit 21 for introducing eluent and / or solvent, conduit 22 through which the eluent or solvent is discharged. . Conduit 22 is connected to inlets 30 through which the sample can be transmitted. These inlets 30 are designed as tubing. The apparatus is provided with a suction arrow 31 through which the gas introduced through the inlet 26 can be removed. In the upper body 20, electrical connectors are provided for sensors 24 and further sensors 29.
Az ismertetett berendezés alkalmazása során a mintákat a szorbens száraz vagy benedvesitett rétegére juttatjuk, majd a szórbensréteget a nyíl által is mulatott irányban a 20 felső testhez szorítjuk. Amikor a 19 réteglapon az eluens (az oldószer) a szorbcnsréteg szélét eléri, a 24 érzékelő előtt áramlik, és a 23 vezetéken át hagyja el a rendszert. A 24 érzékelő az átfolyó anyag jellemzőit közvetlenül, valós időben méri. A 19 réteglap felületén, a szorbensrétegben maradó összetevők általában foltokat (sávokat! képeznek és ezek kiértékelésére többfélt· lehetőség adódik. Ezek egyike az, hogy az 52 kerekek vagy golyók segítségével a 18 munkalapot a 24 érzékelők érzékelési tartományába toljuk, vagyis a vízszintes nyíl irányában, ahol megfelelő gázt alkalmazunk szárításra. A szárított szorbensréteget tartalmazó 18 munkalapot a 24 érzékelőik) előtt eltoljuk és reflektált, illetve áteresztett, fényben a jellemzőket megmérjük. A találmány szerinti berendezés alkalmas arra is, hogy egyszerre több 18 munkalapot helyezzünk el a 1.5 zárt térben. Ekkor megfelelő adagolóegységgel juttatjuk el a 18 munkalapot az F érzékelő egység érzékelési tartományára.Using the apparatus described, the samples are applied to the dry or wetted layer of the sorbent, and the spherical layer is clamped to the upper body 20 in the direction of the arrow. When the eluent (solvent) on the layer sheet 19 reaches the edge of the sorbent layer, it flows in front of the sensor 24 and leaves the system via conduit 23. The sensor 24 measures the flow characteristics directly, in real time. The components remaining in the sorbent layer on the surface of the sheet 19 generally form patches and are evaluated by various means, one of which is to push the worktop 18 into the sensing area of the sensors 24, i.e., in the direction of the horizontal arrow. The worktop 18 containing the dried sorbent layer is shifted in front of their sensors 24 and the characteristics measured in reflected or transmitted light. The apparatus according to the invention is also suitable for simultaneously placing a plurality of worktops 18 in the enclosed space 1.5. The workpiece 18 is then moved to the detection area of the sensor unit F using a suitable dosing unit.
A találmány szerinti eljárás és berendezés lehetőséget nyújt a túlnyomásos vékonyréteg kromatográfia kétdimenziós változatának megvalósítására. Ebben az esetben a 18 munkalápra kerülő 19 réteglap szorbensréteget a 6. ábra szerinti formában alakítjuk ki. Az elválasztást először a 19 réteglapon kezdjük meg, amikoris az egyik dimenzióban történő kifejlesztés után a 18 munkalapot kivesszük a berendezésből, majd kiszárítjuk és a rajta levő anyagot újból kifejlesztjük. Természetesen az ismertetett megoldások mellett lehetséges a szárítás elvégzése a 15 zárt térben is. A második dimenzió irányában a kifejlesztést azt követően kezdjük meg, hogy a 19 réteglapot elhagyó keverék jellemzőit megmértük. Ezt követően a 19 réteglapon kifejlődött 32 foltokat értékeljük oly módon, hogy a 18 munkalapot a 24 érzékelők előtt elmozgatjuk.The process and apparatus of the present invention provide the ability to realize a two-dimensional version of high pressure thin layer chromatography. In this case, the sorbent layer 19 on the worktop 18 is formed as shown in Figure 6. The separation is first started on the layer sheet 19, after which, after developing in one dimension, the worktop 18 is removed from the apparatus, then dried and the material on it re-developed. Of course, in addition to the solutions described, it is also possible to perform drying in the enclosure 15. In the direction of the second dimension, the development begins after the characteristics of the mixture leaving the laminate 19 have been measured. The patches 32 on the sheet 19 are then evaluated by moving the worktop 18 in front of the sensors 24.
-613-613
A 19 réteglap szorbensrétegében a folyékony halmazállapotú vivőanyagot (tehát az eluenst és/vagy az oldószert) a 21 vezeték segítségével továbbítjuk. A vivőanyagot a 19 réteglapban létrehozott 33 csatornákban kényszeráramoltatjuk, amikoris a mintákat 34 mintafelvételi helyeknél, adott esetben sarkoknál adagoljuk be. A vívőanyag áramát 35 impregnált szél állítja meg, ahonnan az tovább áramolni nem tud, vagyis ebben az irányban nem hagyhatja el a szorbensréteget. Az ezzel a módszerrel kapott elválasztási eredményt 36 görbék mutatják.In the sorbent layer of the sheet 19, the liquid carrier (i.e., eluent and / or solvent) is passed through the conduit 21. The carrier is forced to flow through the channels 33 formed in the layer sheet 19, whereby the samples are introduced at the sampling points 34, optionally at corners. The flow of the carrier is stopped by 35 impregnated edges, from which it cannot flow further, i.e. it cannot leave the sorbent layer in this direction. The separation result obtained by this method is shown by 36 curves.
Mint a 7. ábrán látható, létrehozható olyan 18 munkalap is, amely alkalmas a különböző vizsgalatok egyidejű elvégzésére. A szorbensréteg ebben az esetben általában egy minta befogadására alkalmasan van kiképezve és szélei mentén 37 elektródok vannak. Az eluens, amely ebben az esetben oldószer is, a 21 vezetéken ét kerül a szorbensrétegre. Egyenes front mentén, a 33 csatornákban mozogva éri el a 35 impregnált szélt. Ennek során a 32 foltok maradnak a felületen. A 37 elektródok alkalmasak az elektroforézishez szükséges elektromos tér létrehozására, vagyis az egyik irányú kifejlesztést ebben az esetben például az elektromos tér, a másik irányút a kromatográfiai hatások biztosítják. Célszerűen a kromatográfiai kifejlesztés irányára merőleges elektromos teret gerjesztünk. A 3. ábra szerint a 24 érzékelők alkalmasak a 19 réteglapon maradó 32 foltokat kitöltő komponensek azonosítására, míg az eluens és/vagy az oldószer eltávolítására a 18 munkalap mellett létrehozott 38 elvezető csatorna és 39 elvezető nyílás szolgál. Az elválasztás befejezése után a 24 érzékelők a szorbensrétegben maradó komponensek kiértékelésére szolgálnak, amikoris a kifejlesztés, illetve az erőhatások 40, 41 nyilak irányában valósulnak meg.As shown in Figure 7, a worksheet 18 can be created which is capable of performing different exams simultaneously. The sorbent layer in this case is generally designed to receive a sample and has electrodes 37 along its edges. The eluent, which in this case is a solvent, is fed to the sorbent layer via line 21. It reaches the impregnated edge 35 along a straight front, moving through the channels 33. During this, the spots 32 remain on the surface. The electrodes 37 are capable of generating the electrical space required for electrophoresis, i.e., one-way development in this case is provided by, for example, the electric space and the other direction is provided by chromatographic effects. Preferably, an electric field perpendicular to the direction of chromatographic development is generated. As shown in Figure 3, the sensors 24 are capable of identifying the components that fill the blemishes 32 remaining on the sheet, while the drainage channel 38 and the outlet 39 are provided adjacent to the countertop 18 to remove eluent and / or solvent. Upon completion of the separation, the sensors 24 serve to evaluate the components remaining in the sorbent layer, whereby the development and the forces are directed in the direction of arrows 40, 41.
Mint a 8. és 9. ábrán is látható, célszerű a 19 réteglap szorbensrétegének több szegmensre való felbontása. Ezek a szegmensek célszerűen szabályos alakúak, például a 8, ábra szerint kereszt, a 9. ábra szerint kör alakú szorbensréteget adnak. Ebben az esetben is 21 vezeték szolgál az eluens és/vagy oldószer bevezetésére, míg a mintákat a 34 mintafelvételi helyeknél, adott esetben a szorbensréteg középső tartományában adagoljuk be. Innen indul a fejlesztés. A szorbensréteg szélénél 23 vezetékek szolgálnak az eluens elvezetésére, vagyis itt lehet a 19 réteglapot elhagyó anyagok keverékét összegyűjteni.As shown in Figures 8 and 9, it is expedient to divide the sorbent layer of the laminate 19 into several segments. These segments preferably have a regular shape, such as a cross-section of Figure 8, a circular sorbent layer of Figure 9. Here, too, 21 lines are provided for introducing the eluent and / or solvent, while the samples are fed at the sampling points 34, optionally in the middle region of the sorbent layer. This is where the development begins. At the edge of the sorbent layer, conduits 23 serve to drain the eluent, i.e. a mixture of materials leaving the layer sheet 19 can be collected here.
A 8. ábra szerinti kialakításban a 19 réteglap lehetővé teszi a linearizált körkörös kifejlesztést, amelynél a vívőanyag áramlásának kikényszerítésére célszerűen túlnyomást alkalmazunk. A szorbensréteg szegmenseinek a 9. ábra szerinti elrendezése esetén több minta körkörös kifejlesztése érhető el. Az említett alakú szorbensrétegek mind az E de8 tektorokkal, mind pedig az F érzékelő egységgel együttműködő mérések végrehajtására alkalmasak.In the embodiment of Fig. 8, the laminate sheet 19 allows for linearized circular development, preferably using overpressure to enforce the flow of the carrier material. In the arrangement of the segments of the sorbent layer as shown in Figure 9, it is possible to obtain circular development of several samples. Sorbent layers of the aforementioned shape are suitable for performing measurements in cooperation with both the E de8 detectors and the F sensor unit.
Ha a mintában a ballasztanyagok részaránya viszonylag nagy, szükség van előzetes megtisztításukra. Erre a találmány szerint olyan 19 réteglapot javasolunk, amelynek 21 vezetéke, amely eluens bevezetésére szolgál, K kapcsolóval csatlakozik, amely I, II és III tartályokból teszi lehetővé a szükséges eluens továbbítását (10. ábra). A 18 munkalapot ebben az esetben olyan.19 réteglappal borítjuk be, amelynek feladata a ballasztanyagok lehető legnagyobb részének visszatartása, de egyúttal a vizsgálni kivánt minta összetevőinek átengedése.If the proportion of ballast materials in the sample is relatively high, preliminary purification is required. According to the present invention, a laminate sheet 19 is proposed having a conductor 21 for introducing the eluent connected by a switch K, which allows the required eluent to be transported from tanks I, II and III (Fig. 10). In this case, the worktop 18 is covered with a 19-ply sheet which is intended to retain as much of the ballast material as possible, but also to allow the components of the sample to be tested.
A találmány szerinti eljárás és berendezés a 11. ábra szerinti rendszert valósítja meg. Ebben a 19 réteglap szorbensrétegébe vezetett vizsgálandó mintát 22 vezeték juttatja a kívánt helyre. A kifejlesztés során a szorbensréteg olyan 43 túlnyomásos rétegkromatográfiás egység hatása alatt áll, amelynek segítségével 42 vizsgálandó mintán ét a szükséges vívőanyag áramlása biztosított. A berendezés kívánt helyére 49 lapmozgató egység viszi tovább a 18 munkalapokat, és ez alkalmas szükség szerint nagyobb számú 18 munkalap egymást követő továbbítására. Felépítése a szokásos készüléképítése elveket követi, feladata, hogy az adott 18 munkalapot a mérések befejezése után megfelelő külső parancsra vagy automatizált módon a mérések helyéről eltávolítsa, oda a következő 18 munkalapot behelyezze. Az eluens vagy az oldószer kényszeráramlását túlnyomással, centrifugális erőhatással,· stb. biztosítani lehet és a hatást elektroforetikusan, elektromos tér generálásával is erősíthetjük. A vizsgálatok eredményeként 44 kromatogran.ot és/vagy eiektroforetogramot kapunk, amely az E detektorral és az F érzékelő egységgel végzett mérések nyomán alakul ki. A 24 érzékelők kimenő jelei 46 adatfeldolgozó egységbe jutnak, amely általában jól ismert felépítésű programozható mikroprocesszoros egység és biztosítja 47 mérési jegyzőkönyv előállítását. A rendszer legfontosabb elemeit 46 vezérlő egységre csatlakoztatjuk, amely alkalmas az üzem megfelelő felügyeletére, például a hőmérséklet megállapítására és szabályozására, a kényszeréramlás befolyásolására. A többdimenziós kifejlesztések céljaira 48 szárítóegység is bevethető.The method and apparatus of the invention implement the system of Figure 11. In this, the sample to be introduced into the sorbent layer of the sheet 19 is supplied by a conductor 22 to the desired location. During development, the sorbent layer is subjected to a 43-pressure Layer Chromatographic Unit to provide the required flow of diluent to 42 test specimens. At the desired location of the apparatus, the sheet feeder unit 49 conveys the countertops 18 and is capable of conveying a larger number of countertops 18 as needed. Its construction follows the usual device construction principles, its task is to remove the given worksheet 18 after the completion of the measurements by a suitable external command or by automated means, to place the next 18 worksheets there. Forced flow of eluent or solvent under pressure, centrifugal force, etc. and the effect can be enhanced electrophoretically by generating electric space. As a result of the tests, 44 chromatograms and / or electrophoretograms are obtained, which are determined by the measurements made with the detector E and the sensor unit F. The output signals from the sensors 24 are fed to a data processing unit 46, which is a programmable microprocessor unit of generally well-known design and provides measurement protocol 47. The most important elements of the system are connected to a control unit 46, which is suitable for proper monitoring of the plant, for example to determine and control the temperature, to influence the forced flow. 48 drying units can be used for multidimensional developments.
A kifejlesztések során a hőmérsékletet az adott folyamat szükségleteitől függően időben és térben változóan szabályozzuk. A legcélszerűbb a szabályozásnak egy előre meghatározott program szerinti végrehajtása, amikoris szükség szerint különböző felületi részeken különböző hőmérsékleteket biztosítunk. Mivel a vívőanyag áramlása és a komponensek viselkedését erőteljesen befolyásoló hőmérséklet a vizsgálatok egyik nagyon fontos összetevője lehet, a hűtésre és fűtésreDuring development, the temperature is varied over time and space depending on the needs of the process. It is most convenient to carry out the control according to a predetermined program, whereby different temperatures are provided on different surface portions as needed. Because the flux of the vehicle and the temperature that strongly influences the behavior of the components can be a very important component of the tests, cooling and heating
-715-715
Ifi kialakított elemeket a 17 alaplapban, a 20 felső testben, de szükség szerint a 18 munkalápban is elhelyezhetjük. Λ rendszer megvalósítható ultraibolya fluoreszcens sugárzásértékelökkel, de szükség szerint nem optikai érzékelési módszerek is alkalmazhatók.The juvenile elements may be located in the base board 17, the upper body 20, or, if necessary, in the work platform 18. Λ The system can be implemented with ultraviolet fluorescence detectors, but non-optical sensing methods can be used as needed.
A rajzon ném bemutatott módon az elektroforetikus kifejlesztéshez szükséges egyenáramot ismert felépítésű tápforrásból biztosítjuk. A 28 készüléktestben helyezhetők el az ehhez szükséges kontaktusok.As shown in the drawing, the direct current required for electrophoretic development is provided by a known power source. The contacts 28 can be placed in the housing 28 for this purpose.
A találmány szerinti eljárás és az ezt megvalósító berendezés segítségével a kromatográfiai és elektroforetikus vizsgálatok külön vagy egyidejűleg, azonos vagy eltérő irányokban hajthatók végre. A gyakorlati tapasztalatok azt mutatják, hogy az egymásra merőleges irányú kifejlesztések révén a minták összetétele nagy felbontóképességgel határozható meg. Az adott feldolgozás révén ismert megoldásokkal lehet a mért értékeket értelmezni, kinyomtatni.By means of the process of the invention and the apparatus implementing it, chromatographic and electrophoretic tests can be performed separately or simultaneously in the same or different directions. Practical experience has shown that through perpendicular developments, the composition of the samples can be determined with high resolution. By the given processing, the measured values can be interpreted and printed with known solutions.
A javasolt megoldásokkal a kromatográfiai és elektroforetikus vizsgálatok hatékonysága mind felbontás, mind időtartam tekintetében jelentősen javul.The proposed solutions significantly improve the performance of chromatographic and electrophoretic assays in both resolution and time.
Claims (20)
Priority Applications (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HU325885A HU196509B (en) | 1985-08-29 | 1985-08-29 | Method and apparatus for carrying out forced-flowing expediently overpressurized separating technical testings in planar system |
| CH344786A CH673779A5 (en) | 1985-08-29 | 1986-08-25 | |
| GB8620632A GB2179564B (en) | 1985-08-29 | 1986-08-26 | Method of and apparatus for carrying out separation analysis investigations in a planar system |
| JP61200228A JPS6291859A (en) | 1985-08-29 | 1986-08-28 | Method and device for conducting separation analysis inspection in plane system |
| FR8612165A FR2586812B1 (en) | 1985-08-29 | 1986-08-28 | METHOD AND APPARATUS FOR IMPLEMENTING SEPARATION ANALYSIS TESTS IN A PLANAR SYSTEM |
| DE19863629394 DE3629394A1 (en) | 1985-08-29 | 1986-08-29 | METHOD AND DEVICE FOR CHROMATOGRAPHIC AND / OR ELECTROPHORETIC EXAMINATIONS OF THE COMPOSITION OF A SUBSTANCE SAMPLE IN A PLANAR SYSTEM WITH IN PARTICULAR CURRENT FLOW OF A CARRIER AGENT |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HU325885A HU196509B (en) | 1985-08-29 | 1985-08-29 | Method and apparatus for carrying out forced-flowing expediently overpressurized separating technical testings in planar system |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HUT43964A HUT43964A (en) | 1988-01-28 |
| HU196509B true HU196509B (en) | 1988-11-28 |
Family
ID=10963357
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU325885A HU196509B (en) | 1985-08-29 | 1985-08-29 | Method and apparatus for carrying out forced-flowing expediently overpressurized separating technical testings in planar system |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6291859A (en) |
| CH (1) | CH673779A5 (en) |
| DE (1) | DE3629394A1 (en) |
| FR (1) | FR2586812B1 (en) |
| GB (1) | GB2179564B (en) |
| HU (1) | HU196509B (en) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2191110B (en) * | 1986-06-06 | 1989-12-06 | Plessey Co Plc | Chromatographic separation device |
| DE4017804C2 (en) * | 1989-08-22 | 1994-11-24 | Finnigan Mat Gmbh | Method and use of a device for matrix-assisted laser desorption of analyte molecules, in particular biomolecules |
| DE4017805C2 (en) * | 1989-08-22 | 1998-03-26 | Finnigan Mat Gmbh | Method, preparation and device for providing an analyte for an examination |
| HUT60934A (en) * | 1990-08-28 | 1992-11-30 | Emil Mincsovics | Process, apparatus and sorbent layer for thin-layer chromatography |
| DE4407675C1 (en) * | 1994-03-08 | 1995-06-14 | Merck Patent Gmbh | TLC sepg. material useful for in-situ measurement of Raman spectra |
| JP2012093092A (en) * | 2009-11-05 | 2012-05-17 | Nagoya Institute Of Technology | Planer column, and separation system and separation method using the same |
| US20190170683A1 (en) * | 2016-12-26 | 2019-06-06 | Panasonic Intellecutal Property Management Co., Ltd. | Thin layer chromatography plate and sample analysis method using same |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4139458A (en) * | 1977-10-03 | 1979-02-13 | Shuyen Harrison | Preparative centrifugal chromatography device |
| US4469601A (en) * | 1981-03-17 | 1984-09-04 | Varex Corporation | System and apparatus for multi-dimensional real-time chromatography |
| US4346001A (en) * | 1981-06-12 | 1982-08-24 | Labor Muszeripari Muvek | Linear overpressured thin-layer chromatographic apparatus |
| GB2173125B (en) * | 1985-04-04 | 1989-04-19 | Mueszeripari Muevek Lab | Apparatus for overpressured thin-layer chromatographic technique |
-
1985
- 1985-08-29 HU HU325885A patent/HU196509B/en not_active IP Right Cessation
-
1986
- 1986-08-25 CH CH344786A patent/CH673779A5/de not_active IP Right Cessation
- 1986-08-26 GB GB8620632A patent/GB2179564B/en not_active Expired - Fee Related
- 1986-08-28 FR FR8612165A patent/FR2586812B1/en not_active Expired - Fee Related
- 1986-08-28 JP JP61200228A patent/JPS6291859A/en active Pending
- 1986-08-29 DE DE19863629394 patent/DE3629394A1/en not_active Withdrawn
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6291859A (en) | 1987-04-27 |
| GB2179564B (en) | 1990-04-25 |
| GB2179564A (en) | 1987-03-11 |
| GB8620632D0 (en) | 1986-10-01 |
| HUT43964A (en) | 1988-01-28 |
| CH673779A5 (en) | 1990-04-12 |
| FR2586812B1 (en) | 1990-07-20 |
| FR2586812A1 (en) | 1987-03-06 |
| DE3629394A1 (en) | 1987-03-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11573200B2 (en) | Devices and methods for sample characterization | |
| Quirino et al. | Electrokinetic chromatography | |
| Monnig et al. | Capillary electrophoresis | |
| US4865706A (en) | High performance microcapillary gel electrophoresis | |
| Radola | Isoelectric focusing in layers of granulated gels II. Preparative isoelectric focusing | |
| Kašička | Recent developments in CE and CEC of peptides (2009–2011) | |
| Shimura | Recent advances in IEF in capillary tubes and microchips | |
| EP1391723B1 (en) | Method and apparatus for analyzing a mixture of sample substances | |
| Wetzel et al. | Determination of trace level ions by ion chromatography with concentrator columns | |
| US20100108519A1 (en) | Polymeric Nanopillars and Nanotubes, Their Manufacture and Uses | |
| WO2010001675A1 (en) | Sample separation/adsorption appliance | |
| CA2482546A1 (en) | Sampling probe microarray read out using electrospray mass spectrometry | |
| JP3996511B2 (en) | Electrophoresis apparatus and use thereof | |
| US6969452B2 (en) | Two-dimensional protein separations using chromatofocusing and multiplexed capillary gel electrophoresis | |
| HU196509B (en) | Method and apparatus for carrying out forced-flowing expediently overpressurized separating technical testings in planar system | |
| Augustin et al. | Online preconcentration using monoliths in electrochromatography capillary format and microchips | |
| US20020046966A1 (en) | Use of support materials in capillary electrochromatography | |
| CA2571097A1 (en) | Comparative two-and three-dimensional gel electrophoresis systems | |
| RU2252411C1 (en) | Fluorescent sensor on basis of multichannel structures | |
| JP2004524540A (en) | Electrophoresis separation system | |
| CA2483450A1 (en) | Process and device for parallel analysis of biomolecules | |
| Fang et al. | Systematic optimization of exhaustive electrokinetic injection combined with micellar sweeping in capillary electrophoresis | |
| CN113804533A (en) | Purity testing of separated sample fractions as a basis for positive or negative decisions regarding further separation | |
| Wu et al. | Analysis of proteins by CE, CIEF, and microfluidic devices with whole-column-imaging detection | |
| Kontturi et al. | Determination of effective charge numbers of polydisperse polyelectrolyte |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HU90 | Patent valid on 900628 | ||
| HMM4 | Cancellation of final prot. due to non-payment of fee | ||
| HNF4 | Restoration of lapsed final prot. | ||
| HPC4 | Succession in title of patentee |
Owner name: MINCSOVICS, EMIL, HU Owner name: DR. TYIHAK, ERNOE, HU |
|
| HMM4 | Cancellation of final prot. due to non-payment of fee | ||
| HMM4 | Cancellation of final prot. due to non-payment of fee | ||
| HNF4 | Restoration of lapsed final prot. | ||
| HPC4 | Succession in title of patentee |
Owner name: OPLC-NIT MUESZERFEJLESZTOE, GYARTO ES FORGALMAZO K |
|
| HMM4 | Cancellation of final prot. due to non-payment of fee |