FR2938439A1 - Extrait de parties aeriennes d'avoine recoltees avant epiaison - Google Patents

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Abstract

L'invention concerne un extrait de partie aérienne d'avoine à l'exclusion des graines, son procédé de préparation et ses utilisations.

Description

La présente invention concerne un extrait de parties aériennes d'avoine récoltées préférentiellement avant épiaison et son utilisation pour le traitement de dermatoses inflammatoires. L'avoine ou Avena sativa L. est une plante annuelle pouvant atteindre 1 m 50 de haut. A la germination, la jeune plante est gazonnante puis donne plusieurs tiges d'un port particulier. La tige ou chaume est creuse, de quelques millimètres de diamètre, interrompue de place en place, à l'endroit où s'insèrent les feuilles, par des diaphragmes pleins appelés noeuds. Les entre-noeuds, d'abord très courts à la base de la tige, deviennent de plus en plus longs.
Les feuilles sont alternes, distiques, de couleur glauque ; elles s'insèrent sur la tige au niveau des noeuds, par une longue gaine fendue en avant qui recouvre presque tout l'entre-noeud supérieur. Le limbe s'en détache à angle droit. Il est large, rubané, parcouru par de nombreuses nervures parallèles (rectinerves) ; il est habituellement pubescent. Au niveau du limbe où se détache la gaine, on observe entre la tige et le limbe une fine expansion membraneuse de la gaine, courte et tronquée, appelée ligule. La tige se termine par une grande panicule florale, étalée en tous sens, de forme pyramidale, très lâche, dont toutes les ramifications se terminent par une inflorescence élémentaire, de structure constante dans toute la famille des Poaceae et appelée épillet. Les épillets sont pendants, relativement grands et ne comprennent que deux fleurs. L'épillet ne naît pas à l'aisselle d'une bractée mère, mais il porte, à une courte distance de son insertion, deux bractées particulières, opposées, appelées glumes. Les glumes de l'avoine sont de grande taille ; elles atteignent 2 cm de long et enveloppent complètement l'épillet ; elles sont lancéolées, pourvues de 7-9 nervures et pubescentes. Les glumelles sont petites ; la glumelle externe porte une arête tordue, insérée non au sommet mais sur le dos, qui dépasse l'épillet de plus d'un centimètre. Aussitôt au-dessus des glumelles, l'axe floral porte deux petites pièces peu visibles, les glumellules et enfin la fleur proprement dite qui est réduite à trois étamines et à trois carpelles. Les étamines, d'abord sensiblement sessiles, voient ensuite leur filet s'allonger brusquement à la floraison, si bien que les anthères deviennent exertes et pendantes hors de l'épillet. Les anthères s'insèrent sur le filet par leur région médiane seulement, d'où leur nom d'anthères médifixes et oscillantes. Les trois carpelles forment un ovaire uniloculaire, avec un style qui se divise en deux lobes stigmatiques très étalés et plumeux. Tous ces caractères correspondent à une pollinisation par le vent. Il n'y a qu'un ovule, qui est anatrope et dressé au fond de la cavité ovarienne. Le fruit est un akène d'un type particulier, où l'assise externe vient s'appliquer directement contre le péricarpe. Ce fruit est appelé caryopse. C'est un grain allongé, effilé, pubescent, possédant un volumineux albumen amylacé. L'embryon possède un cotylédon très développé entourant presque complètement la tigelle et la séparant de l'albumen. L'embryon entier est rejeté sur le côté. Le fruit de l'avoine est reconnu comme une matière première médicinale par voie orale comme laxatif pour son effet de lest mais également dans le cas de cholestérol ou de diabète de type 2 pour sa teneur en (3-glucanes. Par voie topique, le fruit d'avoine est utilisé principalement sous forme de farine dont une qualité, appelée extrait colloïdal d'avoine, a une monographie à la Pharmacopée Américaine USP 22, 1990. Cet extrait colloïdal présente des propriétés émollientes et adoucissantes, et est défini comme étant la poudre résultant du broyage et autres traitements du grain entier, cette qualité correspond donc à une farine d'Avoine. La monographie fixe des normes de viscosité, de limites microbiennes, de perte à la dessiccation, de taille de particule et de teneurs en cendre, en lipides et azote. A partir de cette même partie de l'avoine, on peut extraire également de l'huile utilisée en cosmétologie et des protéines. Ces dernières, insolubles, ne sont pas utilisées directement mais après hydrolyse enzymatique ou chimique. On réalise un hydrolysat plus ou moins poussé qui permet d'obtenir, soit des peptides d'avoine de poids moléculaires variables, soit des acides aminés selon la force de l'hydrolyse. Les protéines d'avoine hydrolysées ont été examinées pour leurs propriétés dans les domaines cosmétique et dermatologique. Ainsi, il a été démontré des propriétés sur le cheveu comme la faculté qu'ont ces peptides à former un film sur la tige capillaire, de pénétrer dans la cuticule et ainsi par l'effet gainant résultant d'apporter un effet conditionneur. Des travaux réalisés in vitro sur cultures cellulaires ont permis d'évaluer l'activité anti-inflammatoire de l'extrait colloïdal d'avoine. Ainsi, cet extrait a montré une activité inhibitrice sur le métabolisme cutané de l'acide arachidonique et des eïcosanoïdes, sur l'expression de la phospholipase A2 cytosolique et la cyclooxygénase au niveau d'une lignée humaine de kératinocytes, ainsi qu'une activité inductrice de la cytokine anti-inflammatoire TGF(31. Les cytokines Thl et Th2 des cellules de l'immunité telles que IL2, IL4, ILS, IL13, sont également régulées par le même extrait colloïdal. Enfin, une étude clinique montre l'intérêt d'un extrait colloïdal d'avoine dans un modèle irritant cutané en double aveugle et sur 12 volontaires sains. La partie externe de la graine fournit des glucanes utilisés en diététique dans les fibres d'avoine afin de réduire le taux de cholestérol et les risques 15 cardiovasculaires. Les glucanes d'avoine ont été également étudiés pour leur propriété viscosante et gélifiante comme complément alimentaire. Les glucanes extraits de l'avoine présentent également une activité immunostimulante. D'autres activités valorisées dans le domaine cosmétique ont été 20 démontrées : protection contre les effets délétères des UV, stimulation du métabolisme cellulaire, stimulation de la synthèse du collagène et amélioration de la résistance aux tensions des cheveux. En dehors des grains, l'avoine est utilisé comme plante fourragère. Coupée jeune, elle donne un fourrage vert très estimé. La paille est quant à elle donnée aux 25 chevaux, vaches et moutons, mais n'est pas utilisée en alimentation humaine. En médecine traditionnelle, la paille d'avoine sert à la préparation de bains apaisants des douleurs rhumatismales, de la sciatique et des affections hépatiques. En Inde, des décoctions d'avoine ordinaire servaient au sevrage de toxicomanes sous l'emprise de l'opium. Un extrait alcoolique préparé à partir de 30 plantes fraîches a été utilisé dans le sevrage tabagique avec des résultats statistiquement significatifs.
Des bains à base de paille d'avoine ou d'extraits commerciaux auraient comme indications : rhumatismes, névralgie, eczéma chronique, neurodermatite, désordres vasculaires périphériques... L'avoine herbe fait l'objet d'une monographie EMEA (Ref.
EMEA/HMPC/202966/2007) dans laquelle est mentionnée l'utilisation soit des parties aériennes récoltée avant floraison et séchées, soit d'un extrait liquide (1 :5, éthanol 45% v/v) préparé à partir des parties aériennes fraîches de la plante récoltée pendant la période de floraison. L'utilisation traditionnelle de ces parties aériennes est décrite en cas de léger 10 stress mental et pour favoriser l'endormissement. D'après la bibliographie, les parties aériennes d'avoine sont composées de : - Flavonoïdes: C-glycosyl-flavones de type apigenine (vitexine, isovitexine...) ou luteoline (orientine, isoorientine, isoscoparine...), 15 = Flavones de type tricine, 0-glycosylés Flavonolignanes (salcolines A et B) - Saponines stéroïdiques bidesmosidiques: Avenacosides A et B (aglycone : nuatigenin) - Protéines 20 - Autres : Composés phénoliques (Avénanthramides, acides hydroxycinnamiques...), stérols, cérébrosides... La dermatite atopique (ou eczéma atopique) est une maladie dermatologique fréquente, touchant 10 à 15% des nourrissons en France, en augmentation au cours des dernières décennies. 25 La dermatite atopique est la manifestation cutanée de l'atopie, c'est une dermatose inflammatoire chronique ou eczéma, survenant sur un terrain génétiquement déterminé, touchant 15 à 30 % des enfants et 2 à 10 % des adultes ; sa prévalence est en augmentation constante dans les pays industrialisés, elle a doublé voire triplé au cours des trois dernières décennies et elle est maintenant considérée 30 comme une préoccupation majeure de la santé publique. La dermatite atopique est souvent associée à d'autres désordres atopiques tels que la rhinite allergique et l'asthme. Cette affection apparaît le plus souvent au cours de la petite enfance et se caractérise par des éruptions répétées pendant plusieurs années. Elle évolue par poussées entrecoupées de rémissions spontanées . La qualité de vie des patients atteints de dermatite atopique est profondément perturbée ; les traitements adoptés incluent les corticostéroïdes et immunomodulateurs topiques, les agents systémiques dont les fréquents effets secondaires limitent l'utilisation à long terme, les émollients. La thérapeutique actuelle est réactive û traitement des poussées û mais on estime maintenant qu'une intervention précoce focalisée sur le contrôle des éruptions et de l'inflammation cutanée peut être bénéfique aussi bien en termes de contrôle de la maladie que de l'éventuelle apparition d'asthme et/ou de rhinite (BIEBER , T. 2008, Atopic dermatitis, The New England Journal of Medecine, vol 358 (14) 1483-1494), la dermatite atopique étant considérée comme la phase initiale de l'évolution dite atopique. Dans la majorité des cas, les soins locaux associés apportent un complément aux traitements utilisés et permettent de soulager les patients. Il existe un besoin significatif pour des traitements alternatifs aux traitements par les corticostéroïdes. La dermatite atopique serait la résultante d'interactions complexes entre les prédispositions génétiques, les facteurs environnementaux tels que les allergènes et les microorganismes, le dysfonctionnement de la barrière cutanée, la dysrégulation du système immunitaire (SPERGEL, JM. 2008, Immunology and treatment of atopic dermatitis, Am J Clin Dermatol, vol 9(4) 233-244). Le psoriasis est également une maladie inflammatoire cutanée d'évolution chronique ; il affecte 2% de la population. Avec la dermatite atopique, ce sont les maladies inflammatoires chroniques cutanées les plus fréquentes. Il est caractérisé par une croissance anormale des cellules épidermiques associée à une réaction inflammatoire. Le mécanisme central du phénomène de l'inflammation est lié à l'action des cellules T du système immunitaire, cellules de type Thl en prédominance (WILSMANN-THEIS, D. ; HAGEMANN, T. ; JORDAN, J. ; BIEBER, T. ; NOVAK, N. 2008, Facing psoriasis and atopic dermatitis : are there more similarities or more differences ?, Eur J Dermatol, vol 18 (2) 172-180) qui initient et entretiennent le processus inflammatoire et stimulent la prolifération excessive des kératinocytes qui traversent alors une phase de différenciation accélérée et incomplète. Les kératinocytes expriment des récepteurs qui les rendent sensibles aux signaux inflammatoires et libèrent des médiateurs pro-inflammatoires. L'inflammation psoriasique se trouve ainsi entretenue par une stimulation mutuelle des cellules T et des kératinocytes. La maladie doit donc être traitée au long cours. Il existe ainsi un besoin et une forte demande pour des alternatives thérapeutiques à ces dermatoses inflammatoires.
De manière inattendue et surprenante, les inventeurs ont mis en évidence de nouvelles valorisations d'un extrait de parties aériennes d'avoine en thérapeutique et cosmétique/dermatologie. Avantageusement, ledit extrait présente des propriétés immunomodulatrices et anti-inflammatoires utiles dans le traitement de la dermatite atopique. L'extrait selon la présente invention a également montré de bonnes capacités à traiter l'acné et le vieillissement cutané. La présente invention a ainsi pour objet un extrait de partie(s) aérienne(s) d'avoine, à l'exclusion des graines, caractérisé par 2 à 15% de flavonoïdes et 0,2 à 2% d'avenacosides A et B. Par parties aériennes d'avoine, on entend au sens de la présente invention toute partie de la plante d'avoine située au-dessus du sol, à l'exclusion des graines. De préférence, les parties aériennes d'avoine comprennent les feuilles et/ou tiges et/ou épillets et/ou fleurs. L'extrait d'avoine obtenu se caractérise par sa teneur en flavonoïdes et en saponines d'intérêt. Ces dernières sont analysées par chromatographie liquide à haute pression, par deux méthodes différentes, appropriées à chaque type de composés. Les teneurs en ces différentes molécules varient en fonction des conditions d'extraction. Les flavonoïdes principaux sont l'isovitexin-2"-O-arabinopyranoside et l'isoorientin-2"-O-arabinopyranoside. Les avenacosides A et B sont les principales saponines. Ce sont des saponines stéroïdiques bisdesmosidiques.
Avantageusement, l'extrait selon l'invention comprend une proportion de 5 à 10% des flavonoïdes principaux isovitexin-2"-O-arabinopyranoside et isoorientin-2"-O-arabinopyranoside. Avantageusement, l'extrait selon l'invention est un extrait obtenu en solvant organique. Avantageusement, l'extrait selon l'invention comprend moins de 1 ppm de protéines, préférentiellement moins de 0,5 ppm et encore plus préférentiellement moins de 0,3 ppm de protéines. Avantageusement, l'extrait selon l'invention est un extrait de partie(s) aérienne(s) d'avoine récoltées avant épiaison. Au sens de la présente invention, on appelle parties aériennes d'avoine récoltées avant épiaison les parties aériennes de l'avoine récoltées après germination (environ 2 semaines à 2 mois après germination) durant le stade de la montaison jusqu'à l'épiaison non comprise.
Au sens de la présente invention, on appelle montaison la phase de croissance qui correspond à l'élongation de la tige et à la montée de l'épi en formation, avant floraison. Un autre objet de la présente invention est un procédé de préparation d'un extrait de partie(s) aérienne(s) d'avoine, ladite partie aérienne ne comprenant pas de graine, comprenant les étapes suivantes : - séchage et broyage de la ou des partie(s) aérienne(s) d'avoine, - extraction en solvant organique choisi dans le groupe constitué des cétones, des esters, des alcools en Cl à C4 et des mélanges en toute proportion miscibles de ces solvants, et - centrifugation ou filtration. Avantageusement, le solvant organique du procédé selon l'invention est choisi dans le groupe constitué de l'acétone, la méthyl éthyl cétone, la méthyl isobutyl cétone, l'acétate d'éthyle, un alcool en Cl à C4 et un mélange en toute proportion miscible de ces solvants.
Avantageusement, la partie aérienne est récoltée après 2 mois, en fin de montaison mais avant épiaison, puis séchée puis broyée.
L'extraction est réalisée sous agitation ou de façon statique. L'extraction est réalisée à reflux ou à température ambiante. Avantageusement, l'extraction est réalisée dans un ratio plante/solvant pouvant varier de 1/7 à 1/20, de préférence de 1/8 à 1/12.
Préférentiellement, l'extraction est réalisée pendant une durée de 30 minutes à 48 heures, de manière particulièrement préférée de 60 à 120 minutes. L'extraction peut être renouvelée 2 ou 3 fois. Le marc obtenu par l'étape d'extraction est ensuite séparé de l'extrait par centrifugation ou filtration et la solution peut être plus ou moins concentrée jusqu'à l'obtention d'un extrait sec. Un traitement de décoloration peut être réalisé soit par délipidation par concentration, précipitation et filtration, soit en rajoutant à la solution extraite concentrée ou non un support absorbant comme le charbon actif ou une résine adsorbante.
Un support peut être rajouté lors de l'étape de séchage dans des proportions massiques par rapport à la matière sèche extraite pouvant varier de 1 à 75%. Le support peut être un sucre comme la maltodextrine, le lactose, de la silice ou tout autre support cosmétologiquement acceptable. Un autre objet de la présente invention est un extrait de partie aérienne d'avoine, à l'exclusion des graines, susceptible d'être obtenu par le procédé selon l'invention. Avantageusement, cet extrait est obtenu par extraction acétonique ou acétone/eau jusqu'à 20% d'eau. Un extrait de type acétone ou acétone / eau jusqu'à 20% d'eau comporte les molécules d'intérêt, flavonoïdes et saponines, et est très largement appauvri en protéines. En effet, les méthodes de dosage de protéines décrites dans la Pharmacopée Européenne ne donnent aucun résultat, et une migration sur gel SDS- Page par électrophorèse après précipitation à l'acétone et révélation au bleu de Coomassie ou au nitrate d'argent montre l'absence de bande signalant la présence de protéine. Le dépôt d'un témoin sur cette même électrophorèse permet de quantifier la limite de détection de protéine à 1 ng, cet extrait possède donc une teneur en protéine inférieure à 1 ppm (ramenée à la quantité d'extrait déposée sur le gel). Préférentiellement, ladite teneur en protéines est inférieure à 0,5 ppm et encore plus préférentiellement inférieure à 0,3 ppm de protéines. Un autre objet de la présente invention concerne une composition dermatologique ou cosmétique comprenant un extrait selon l'invention et un ou plusieurs excipients, respectivement dermatologiquement ou cosmétologiquement acceptables. La composition selon l'invention peut en particulier contenir des additifs et aides à la formulation, tels que des émulsionnants, des épaississants, des gélifiants, des fixateurs d'eau, des agents d'étalement, des stabilisants, des colorants, des parfums et des conservateurs. La composition cosmétique ou dermatologique selon l'invention comprend, en outre, des excipients usuels dermatologiquement compatibles. Préférentiellement, la composition selon l'invention comprend une quantité 15 d'extrait de partie(s) aérienne(s) d'avoine, à titre de principe actif, comprise entre 0,1 à 5% en poids par rapport au poids total de ladite composition. Avantageusement, ladite quantité d'extrait est comprise entre 0,1% et 0,5% en poids par rapport au poids total de la composition. La composition dermatologique ou cosmétique selon la présente invention 20 peut être préparée sous la forme d'une émulsion eau dans huile (E/H) ou huile dans eau (H/E), d'une émulsion multiple comme par exemple, une émulsion eau dans huile dans eau (E/H/E) ou une émulsion huile dans eau dans huile (H/E/H),d'une micro-émulsion ou encore sous la forme d'une hydrodispersion ou une lipodispersion, un gel ou un aérosol. 25 Les excipients dermatologiquement ou cosmétiquement compatibles peuvent être tout excipient parmi ceux connus de l'homme de l'art en vue d'obtenir une composition pour l'application topique sous forme d'un lait, d'une crème, d'un baume, d'une huile, d'une lotion, d'un gel, d'un gel moussant, d'une pommade, d'un spray, etc. 30 Un autre objet de la présente invention concerne un extrait selon l'invention pour utilisation en tant que médicament.
Un autre objet de la présente invention concerne un extrait selon l'invention pour utilisation pour le traitement de dermatoses inflammatoires. Un autre objet de la présente invention concerne un extrait selon l'invention pour utilisation pour le traitement de la dermatite atopique, du psoriasis ou de 5 l'eczéma qui sont des dermatoses inflammatoires. Un autre objet de la présente invention concerne l'utilisation d'un extrait selon l'invention pour la préparation d'un médicament destiné au traitement de dermatoses inflammatoires. Un autre objet de la présente invention concerne l'utilisation d'un extrait 10 selon l'invention pour la préparation d'un médicament destiné au traitement de la dermatite atopique, du psoriasis ou de l'eczéma qui sont des dermatoses inflammatoires. Un autre objet de la présente invention concerne un extrait selon l'invention pour utilisation pour le traitement de l'acné ou du vieillissement cutané. 15 Un autre objet de la présente invention concerne l'utilisation d'un extrait selon l'invention dans une composition cosmétique et/ou dermatologique destinée au traitement de l'acné ou du vieillissement cutané. Les exemples suivants illustrent l'invention sans en limiter la portée.
20 Exemple 1 : préparation d'un extrait de parties aériennes d'avoine récoltées avant épiaison selon l'invention a. par extraction acétonique 400 kg de parties aériennes d'avoine récoltées avant épiaison séchés sont broyés puis placés dans un réacteur avec 10 volumes du mélange acétone /eau, sous 25 agitation pendant une heure à température ambiante. Une séparation solide / liquide permet d'obtenir un premier jus d'extraction. Le marc est extrait une seconde fois avec 10 volumes du mélange acétone / eau pendant une heure à température ambiante, sous agitation. Une séparation solide / liquide permet d'obtenir un second jus d'extraction qui est rassemblé avec le 30 premier. La solution obtenue est concentrée sur eau à 1,33 volumes / kg puis filtrée.
L'extrait ainsi obtenu est séché par micro-onde après ajoût d'un support maltodextrine (qsp 25% / extrait natif). On obtient ainsi 36 kg d'une poudre marron clair titrant à 6% de flavonoïdes (isovitexine-2"-O-arabinopyranoside et isoorientine-2"-O-arabinopyranoside) et 0.6% d'avenacoside B. Et la teneur en protéine de l'extrait ainsi obtenu est inférieure à 0.3 ppm.
b. par extraction éthanolique Extraction de 100 g de plantes séchées et broyées par un mélange éthanol / eau 50:50 pendant une heure à reflux, séparation solide : liquide et évaporation sous vide à 50°C. 26g d'extrait sont ainsi obtenus sous forme de poudre marron, titrant entre 1,5 et 3 % en flavonoïdes (isovitexine-2"-O-arabinopyranoside et isoorientine-2"-O-arabinopyranoside).
Exemple 2 : Etude biologique de l'extrait de parties aériennes d'avoine récoltées avant épiaison de l'Exemple 1.a L'étude pharmacologique de l'extrait de parties aériennes d'avoine porte sur la composante immuno-inflammatoire de la dermatite atopique. L'altération de la barrière épidermique (mutation du gène de la filaggrine notamment) facilite la pénétration des allergènes de haut poids moléculaire (acariens, pollens, ...), leur capture par les cellules dendritiques et leur présentation aux cellules T ; cette interaction conduit à une réponse cellulaire T au niveau de la peau û initialement Th2 avec production d'un panel de cytokines et chemokines proinflammatoires capables de maintenir l'inflammation : IL-4, IL-5, IL-13 associées à la dermatite atopique, avec une émergence importante de l'IL-17 et l'IL-31 û mais plus tardivement Thl (INCORVAIA, C. ; FRATI, F. ; VERNA N. ; D'ALO, S. ; MOTOLESE, A. ; PUCCI, S. 2008, Allergy and die skin, Clin Exp Immunol, vol 153 (1) 27-29) ; (BIEBER , T. 2008, Atopic dermatitis, The New England Journal of Medecine, vol 358 (14) 1483-1494). L'activation des lymphocytes T est suivie de l'activation d'autres types cellulaires, kératinocytes et cellules endothéliales principalement, ce qui aboutit à la production de médiateurs inflammatoires (cytokines, prostaglandines) et à la production de chimiokines permettant le recrutement des cellules inflammatoires. a. Préparation des fractions : L'extrait de parties aériennes d'avoine peut être fractionné afin d'identifier la classe de molécules ou les molécules responsables de l'activité. Pour cela, l'extrait peut être déposé sur une colonne de silice moyenne pression et élué successivement par des solvants de polarité croissante, par exemple une concentration croissante de méthanol dans l'eau. En effet, le fractionnement obtenu après dépôt de l'extrait réalisé selon l'exemple 1.a sur une colonne de silice et élution d'abord par un mélange méthanol / eau 25 :75 puis 50 :50 puis 100 % méthanol a permis de séparer une fraction riche en flavonoïdes (fraction méthanol / eau 50 :50, 19% des flavonoïdes isovitexine-2-O-arabinopyranoside et isoorientine-2-0-arabinopyranoside exprimés en vitexine-2-arabinose) et une fraction riche en saponines (fraction 100% méthanol, 15% d'avenacoside B). De la première fraction ont été isolés par HPLC semi-préparative utilisant une colonne de silice inverse C-18 les flavonoïdes isovitexine-2-O-arabinopyranoside et isoorientine-2-O-arabinopyranoside, dont les structures ont été confirmées par spectrométrie de masse et résonance magnétique nucléaire.
De la fraction riche en saponines ont été isolés par HPLC semi-préparative l'avenacoside A et l'avenacoside B, dont les structures ont été identifiées par spectrométrie de masse et résonance magnétique nucléaire.
b. Activité immunomodulatrice Les cytokines, qui représentent un vaste ensemble de protéines régulatrices du système immunitaire, sont produites par les cellules cutanées, résidentes ou infiltrées, activées au cours des processus inflammatoires ou immunitaires. Les interleukines dont les I12, I14, I15 et I113, produites par les lymphocytes se divisent en deux groupes : les cytokines de type Thl dont l'I12 et les cytokines de type Th2 dont l'I14, I15 et I113. Toutes ces interleukines sont surproduites lors de pathologies inflammatoires comme l'atopie, l'eczéma de contact ou le psoriasis.
Parmi elles, l'interleukine 2 (IL-2) humaine, dérivée des cellules T, est capable de soutenir la prolifération des lymphocytes T activés et induit les processus de différenciation et d'activation des cellules B et NK (Natural Killer). In vitro, les cellules mononucléées humaines peuvent être stimulées et produire des cytokines. Le principe de ce test est d'étudier l'influence des extraits sur les productions d'IL2, IL4, ILS, IL13 induite par la double stimulation Phorbol Myristate Acetate /Ionomycine.
Résultats : Un extrait acétonique de parties aériennes d'avoine récoltées avant épiaison selon l'exemple 1.a inhibe de 52% le nombre de lymphocytes CD4 exprimant l'interleukine 2 et de 21% le taux d'IL2 intracellulaire à la concentration de 30 g/ml. Ce même extrait à la concentration de 34,g/ml inhibe les productions lymphocytaires d'interleukine 4 de 51%, d'interleukine 5 de 31% et d'interleukine 13 de 78%.
Cette activité intéressante pour le traitement de la dermatite atopique est portée par les saponines de l'extrait, dont les avenacosides A et B.
c. Activité anti-inflammatoire Principe : Le kératinocyte, cellule la plus représentée au niveau de l'épiderme, joue un rôle important dans l'initiation et la modulation des réactions inflammatoires cutanées. Ce modèle permet de déterminer in vitro les capacités de diverses molécules à moduler la production de médiateurs issus du métabolisme de l'acide arachidonique. La prostaglandine PG6KF la est un métabolite stable de la prostacycline PGI2, métabolite majeur produit par le kératinocyte humain stimulé.
Un extrait acétonique de parties aériennes d'avoine récoltées avant épiaison et ses fractions ont été évalués sur la production de cette prostaglandine induite au niveau du kératinocyte par le ionophore calcique A23187 (stimulant de la cascade de l'acide arachidonique).
Résultats : L'extrait acétonique selon l'exemple 1.a possède une activité significative (40% d'inhibition à 0,1 g/ml), et la fraction riche en flavonoïdes possède une activité significative avec un maximum d'inhibition de 49% à 10 g/ml. Cette activité anti-inflammatoire est portée par les flavonoïdes présents dans l'extrait, et en particulier par l'isoorientine-2"-O-arabinosyl (55% d'inhibition à 10 log/mi). Le mécanisme d'action de cette inhibition de la libération de la prostacycline a été en partie élucidé : on observe une inhibition directe, in vitro, de la cyclooxygénase 2 par l'extrait acétonique (68% d'inhibition à 100 g/ml), et aucune inhibition de la phospholipase A2.
d. Activité anti-oxydante L'activité antiradicalaire d'un extrait de parties aériennes d'avoine préparé selon l'exemple 1.a est évaluée à l'aide du test au DPPH' (2,2'-diphenyl-l- picrylhydrazyl). Ce test rapide et facile à mettre en oeuvre, est basé sur la mesure des capacités de piégeage du radical libre stable DPPH'. Le radical libre DPPH' absorbant à 517 nm, est réduit en hydrazine correspondante quand il réagit avec des donneurs de proton : R-OH + DPPH' R-O' + DPPH2 20 La CI50 correspond à la concentration de l'extrait entraînant 50% de réduction de l'absorbance d'une solution méthanolique de DPPH' (C = 25 g/ml). Dans ces conditions, la vitamine E possède une IC50 de 6-10 g/ml et l'extrait acétonique de parties aériennes d'avoine avant épiaison une IC50 de 70 25 g/ml. Cet extrait possède donc une activité anti-oxydante, et peut par conséquent être utilisé dans une formulation dermo-cosmétique comme anti-âge. e. Activité antimicrobienne L'extrait acétonique préparé selon l'exemple 1.a a une action sélective sur le germe impliqué dans l'acné, Propionibacterium acnes (voir tableau 1). • 3.07% • 3.07% 0.096% • 3.07% • 3.07% • 3.07% • 3.07% • 3.07% Tableau 1 : Concentrations minimales inhibitrices exprimées en pourcentage (p/p) d'un extrait acétonique de parties aériennes d'avoine selon l'exemple 1.a sur différents germes, bactéries gram +, gram -, levures et fongi.
Exemple 3 : compositions selon la présente invention CREME EMOLLIENTE POUR PEAUX ATOPIQUES Extrait de parties aériennes d'avoine (ex. 1.a) 0,1 à 0,5% Huile minérale 10 à 20% Huile d'onagre 2,5% Cyclométhicone 5 à 8% Glycéryl stéarate / PEG-100 stéarate 5% Glycérine 5% Polyacrylamide & C13-14 isoparaffin & laureth-7 3% PEG-12 4% EDTA 0,2% Triéthano lamine 0,1% Conservateurs qs Eau qsp 100%
LAIT HYDRATANT POUR PEAUX ATOPIQUES Extrait de parties aériennes d'avoine (ex. 1.a) 0,1 à 0,5% Huile minérale 3% Vaseline 6 à 12% Diméthicone 2% Huile d'onagre 2,5% Sorbitan stéarate / sucrose cocoate 5% Gomme xanthane 0,4% Carbomer 0,2% Triéthano lamine 0,1% Glycérine 3% EDTA 0,2% Alcool béhénique 1 % Conservateurs qs Eau qsp 100%

Claims (17)

  1. Revendications1. Extrait de partie(s) aérienne(s) d'avoine à l'exclusion des graines, caractérisé par 2 à 15% de flavonoïdes et 0,2 à 2% d'avenacosides A et B.
  2. 2. Extrait selon la revendication 1, caractérisé en une proportion de 5 à 10% des flavonoïdes isovitexin-2"-O-arabinopyranoside et isoorientin-2"-O-arabinopyranoside. 10
  3. 3. Extrait selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce qu'il s'agit d'un extrait obtenu en solvant organique.
  4. 4. Extrait selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, comprenant moins de 1 ppm de protéines.
  5. 5. Extrait selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, ladite ou lesdites partie(s) aérienne(s) étant récoltée(s) avant épiaison.
  6. 6. Procédé de préparation d'un extrait de partie(s) aérienne(s) d'avoine, ladite 20 ou lesdites partie(s) aérienne(s) ne comprenant pas de graine, caractérisé par les étapes suivantes : - extraction en solvant organique choisi dans le groupe constitué de l'acétone, la méthyl éthyl cétone, la méthyl isobutyl cétone, l'acétate d'éthyle, un alcool en Cl à C4 et un mélange en toute proportion miscible de ces solvants, et 25 - centrifugation ou filtration.
  7. 7. Procédé selon la revendication 6, ladite ou lesdites partie(s) aérienne(s) étant récoltée(s) avant épiaison. 30
  8. 8. Extrait de partie(s) aérienne(s) d'avoine, susceptible d'être obtenu par le procédé selon l'une quelconque des revendications 6 à 7. 15
  9. 9. Composition dermatologique comprenant à titre de principe actif un extrait selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 et 8 et un ou plusieurs excipients dermatologiquement acceptables.
  10. 10. Composition dermatologique selon la revendication 9, comprenant 0,1 à 5% en poids d'extrait selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 et 8 par rapport au poids total de la composition. 10
  11. 11. Composition cosmétique comprenant un extrait selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 et 8 et un ou plusieurs excipients cosmétiquement acceptables.
  12. 12. Composition cosmétique selon la revendication 11, comprenant 0,1 à 5% en poids d'extrait selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 et 8 par rapport au 15 poids total de la composition.
  13. 13. Extrait selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 et 8 pour utilisation en tant que médicament. 20
  14. 14. Extrait selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 et 8 pour utilisation pour le traitement des dermatoses inflammatoires.
  15. 15. Extrait selon la revendication 14, la dermatose inflammatoire étant la dermatite atopique, le psoriasis ou l'eczéma.
  16. 16. Extrait selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 et 8 pour utilisation pour le traitement de l'acné.
  17. 17. Extrait selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 et 8 pour utilisation 30 pour le traitement du vieillissement cutané. 25
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