FR2705094A1 - New lupane derivatives, their preparation and pharmaceutical compositions containing them. - Google Patents

New lupane derivatives, their preparation and pharmaceutical compositions containing them. Download PDF

Info

Publication number
FR2705094A1
FR2705094A1 FR9305619A FR9305619A FR2705094A1 FR 2705094 A1 FR2705094 A1 FR 2705094A1 FR 9305619 A FR9305619 A FR 9305619A FR 9305619 A FR9305619 A FR 9305619A FR 2705094 A1 FR2705094 A1 FR 2705094A1
Authority
FR
France
Prior art keywords
temperature
general formula
region
radical
alkyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
FR9305619A
Other languages
French (fr)
Other versions
FR2705094B1 (en
Inventor
Dereu Norbert
Evers Michel
Poujade Christele
Soler Francoise
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Aventis Pharma SA
Original Assignee
Rhone Poulenc Rorer SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority to FR9305619A priority Critical patent/FR2705094B1/en
Application filed by Rhone Poulenc Rorer SA filed Critical Rhone Poulenc Rorer SA
Priority to EP94916260A priority patent/EP0698008A1/en
Priority to CA002162702A priority patent/CA2162702A1/en
Priority to PCT/FR1994/000532 priority patent/WO1994026695A1/en
Priority to AU67879/94A priority patent/AU6787994A/en
Priority to JP6525050A priority patent/JPH08509968A/en
Priority to ZA943201A priority patent/ZA943201B/en
Publication of FR2705094A1 publication Critical patent/FR2705094A1/en
Application granted granted Critical
Publication of FR2705094B1 publication Critical patent/FR2705094B1/en
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/22—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton having nitrogen atoms of amino groups bound to the carbon skeleton of the acid part, further acylated
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C235/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms
    • C07C235/40—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C235/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms
    • C07C235/42—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton
    • C07C235/44—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton with carbon atoms of carboxamide groups and singly-bound oxygen atoms bound to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring
    • C07C235/50—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton with carbon atoms of carboxamide groups and singly-bound oxygen atoms bound to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to an acyclic carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C235/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms
    • C07C235/42—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton
    • C07C235/44—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton with carbon atoms of carboxamide groups and singly-bound oxygen atoms bound to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring
    • C07C235/58—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton with carbon atoms of carboxamide groups and singly-bound oxygen atoms bound to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring with carbon atoms of carboxamide groups and singly-bound oxygen atoms, bound in ortho-position to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring
    • C07C235/60—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton with carbon atoms of carboxamide groups and singly-bound oxygen atoms bound to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring with carbon atoms of carboxamide groups and singly-bound oxygen atoms, bound in ortho-position to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring having the nitrogen atoms of the carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/06—Esters of carbamic acids
    • C07C271/08—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C271/26—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atom of at least one of the carbamate groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C07C271/28—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atom of at least one of the carbamate groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring to a carbon atom of a non-condensed six-membered aromatic ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2603/00—Systems containing at least three condensed rings
    • C07C2603/56—Ring systems containing bridged rings
    • C07C2603/90—Ring systems containing bridged rings containing more than four rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

Dérivés du lupane de formule générale (I) dans laquelle R est un radical de formule générale (II) pour lequel R' est un atome d'hydrogène ou de radical alcoyle, X est carbamoyle, N-méthyl carbamoyle, aminocarbonyle ou N-méthylaminocarbonyle, Y est phénylène substitué de formule générale (III), dans laquelle R1 et R2 sont H, halogène, alcoyle, alcoyloxy ou nitro, à l'exception d'être identiques lorsqu'ils représentent H, Rdegré et Rdegré degré identiques ou différents sont des atomes d'hydrogène ou des radicaux alcoyle et, n est 6 à 12, m est 0 à 2 et p est 0 à 2, avec: 6 < m+n+p < 12, les radicaux alcoyle (1 à 4C) étant droits ou ramifiés, ainsi que leurs sels lorsqu'ils existent et leur préparation. Les produits selon l'invention sont particulièrement intéressants dans le domaine du SIDA. (CF DESSIN DANS BOPI)Lupane derivatives of general formula (I) in which R is a radical of general formula (II) for which R 'is a hydrogen atom or an alkyl radical, X is carbamoyl, N-methyl carbamoyl, aminocarbonyl or N-methylaminocarbonyl , Y is substituted phenylene of general formula (III), in which R1 and R2 are H, halogen, alkyl, alkyloxy or nitro, with the exception of being identical when they represent H, Rdegre and Rdegré degree identical or different are hydrogen atoms or alkyl radicals and, n is 6 to 12, m is 0 to 2 and p is 0 to 2, with: 6 <m + n + p <12, the alkyl radicals (1 to 4C) being straight or branched, as well as their salts when they exist and their preparation. The products according to the invention are particularly advantageous in the field of AIDS. (CF DRAWING IN BOPI)

Description

NOUVEAUX DERIVES DU LUCANE LEUR PREPARATION ET LES COMPOSITIONS
PHARMACEUTIOUES OUI LES CONTIENNENT
La présente invention concerne des dérivés du lupane, de formule générale

Figure img00010001

leurs sels, leur préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.NOVEL DERIVATIVES OF LUCANE PREPARATION AND COMPOSITIONS
PHARMACEUTICLES YES CONTAINING
The present invention relates to lupane derivatives of the general formula
Figure img00010001

their salts, their preparation and the pharmaceutical compositions containing them.

Dans la demande de brevet japonais J 01 143 832 ont été décrits des dérivés de la bétuline de formule générale

Figure img00010002

dans laquelle R1 et R2 sont hydroxy ou acyloxy et R3 est notamment méthyle. Ces dérivés sont utiles dans le domaine des anticancéreux.Japanese Patent Application No. 1,143,832 has disclosed derivatives of betulin of the general formula
Figure img00010002

wherein R1 and R2 are hydroxy or acyloxy and R3 is especially methyl. These derivatives are useful in the field of anticancer drugs.

Il a été maintenant trouvé que les dérivés du lupane de formule générale (I) dans laquelle
R représente un radical de formule générale :

Figure img00020001

dans laquelle R' est un atome d'hydrogène ou de radical alcoyle,
X représente un radical carbamoyle, N-méthyl carbamoyle, aminocarbonyle ou N-méthylaminocarbonyle,
Y est un radical phénylène substitué de formule générale ::
Figure img00020002

dans laquelle R1 et R2 identiques ou différents représentent des atomes d'hydrogène ou d'halogène ou des radicaux alcoyle, alcoyloxy ou nitro, l'un au moins étant autre que l'hydrogène, RO et ROO identiques ou différents sont des atomes d'hydrogène ou des radicaux alcoyle (étant entendu que chaque motif -CR0R00 n'est pas nécessairement identique au précédent) et, n est un nombre entier de 6 à 12, m est un nombre entier de 0 à 2 et p est un nombre entier de 0 à 2 et sont tels que m + n + p soit compris entre 6 et 12, ainsi que leurs sels pharmaceutiquement acceptables lorsqu'ils existent, manifestent un effet cytoprotecteur de cellules infectées par un virus HIV (Human Immunodeficiency Virus) ainsi qu'une activité inhibitrice de la production de transcriptase inverse d'un virus HIV.It has now been found that lupane derivatives of general formula (I) in which
R represents a radical of general formula:
Figure img00020001

in which R 'is a hydrogen atom or an alkyl radical,
X represents a carbamoyl, N-methyl carbamoyl, aminocarbonyl or N-methylaminocarbonyl radical,
Y is a substituted phenylene radical of the general formula:
Figure img00020002

in which R1 and R2, which are identical or different, represent hydrogen or halogen atoms or alkyl, alkyloxy or nitro radicals, at least one being other than hydrogen, and RO and ROO, which are identical or different, are atoms of hydrogen or alkyl radicals (it being understood that each unit -CROR00 is not necessarily identical to the preceding one) and, n is an integer from 6 to 12, m is an integer of 0 to 2 and p is an integer of 0 to 2 and are such that m + n + p is between 6 and 12, and their pharmaceutically acceptable salts where they exist, exhibit a cytoprotective effect of cells infected with an HIV virus (Human Immunodeficiency Virus) as well as Inhibitory activity of reverse transcriptase production of an HIV virus.

Dans la formule générale ci-dessus, il est entendu que les radicaux alcoyle sont droits ou ramifiés et contiennent 1 à 4 atomes de carbone et que les atomes d'halogène peuvent être choisis parmi le fluor, le chlore, le brome et l'iode.In the general formula above, it is understood that the alkyl radicals are straight or branched and contain 1 to 4 carbon atoms and that the halogen atoms can be chosen from fluorine, chlorine, bromine and iodine. .

Dans les cas où RO et ROO sont différents, les produits de formule générale (I) présentent des formes stéréoisomères, il est également entendu que les formes stéréoisomères ainsi que leurs mélanges entrent aussi dans le cadre de la présente invention.In cases where RO and ROO are different, the products of general formula (I) have stereoisomeric forms, it is also understood that stereoisomeric forms and mixtures thereof are also within the scope of the present invention.

Selon l'invention le dérivé du lupane de formule générale (I) peut être obtenu à partir d'un dérivé du lupane de formule générale :

Figure img00030001

dans laquelle R" représente un radical de formule générale :
(CH2)n-COOH (IVa)
ou
(CH2)n-NH-R"' (IVb) dans lesquelles n est défini comme précédemment et R"' est un atome d'hydrogène ou un radical méthyle, par action respectivement d'une amine ou d'un acide de formules générales :
Figure img00030002

dans lesquelles RO, RO", m et p sont définis comme précédemment et
R"' est défini comme ci-dessus.According to the invention, the lupane derivative of general formula (I) can be obtained from a lupane derivative of general formula:
Figure img00030001

in which R "represents a radical of general formula:
(CH2) n-COOH (IVa)
or
(CH 2) n -NH-R "'(IVb) in which n is defined as above and R"' is a hydrogen atom or a methyl radical, by action respectively of an amine or an acid of general formulas :
Figure img00030002

in which RO, RO ", m and p are defined as before and
R "'is defined as above.

Il est entendu que les radicaux hydroxy du dérivé du lupane de formule générale (IV) sont de préférence protégés par des radicaux compatibles qui peuvent être mis en place et éliminés sans toucher au reste de la molécule. De même lorsque R' est un atome d'hydrogène il est nécessaire de protéger préalablement la fonction acide du produit de formule générale (Va) ou (Vb). A titre d'exemple les groupements protecteurs peuvent être choisis parmi les radicaux décrits par
T.W. GREENE, Protective Groups in Organic Synthesis, J. WILEY
Interscience Publication (1991) ou par Mc OMIE, Protective Groups in
Organic Chemistry, Plenum Press (1973). Il est notamment avantageux d'utiliser des radicaux protecteurs pouvant être éliminés simultanément. On choisira des radicaux pouvant être éliminés en milieu neutre, basique ou acide.It is understood that the hydroxyl radicals of the lupane derivative of general formula (IV) are preferably protected by compatible radicals which can be put in place and removed without affecting the rest of the molecule. Similarly, when R 'is a hydrogen atom, it is necessary to protect the acid function of the product of general formula (Va) or (Vb) beforehand. By way of example, the protective groups may be chosen from the radicals described by
TW GREENE, Protective Groups in Organic Synthesis, J. WILEY
Interscience Publication (1991) or by Mc OMIE, Protective Groups in
Organic Chemistry, Plenum Press (1973). In particular, it is advantageous to use protective groups that can be removed simultaneously. Radicals that can be removed in a neutral, basic or acidic medium will be selected.

Notamment, les radicaux hydroxy peuvent être protégés à l'état d'ester (formyloxy, acétoxy, i.butoxy, trichloracétyloxy, phénoxyacétyloxy, benzyloxy); dans ce cas, l'élimination s'effectue par hydrolyse en milieu basique, notamment en présence de soude à une température comprise entre 10 et 500C. La protection peut également être effectuée à l'état de cétone, sous forme de carbonate par un radical -COORa dans lequel Ra est un radical alcoyle ou benzyle éventuellement substitués ou encore par un radical trialcoylsilyle; les radicaux protecteurs d'acide peuvent être choisis parmi les radicaux alcoyle (méthyle, éthyle, t.butyle), alcoyle substitué (trichloréthyle, haloéthyle, p.toluènesulfonyl-éthyle, benzyle, benzyle substitué par un radical nitro, benzhydryle, triphénylméthyle, benzyloxyméthyle...), alcoyloxyalcoyle (méthoxyméthyle), tétrahydropyranyle ou triméthylsilyle. In particular, the hydroxy radicals can be protected in the ester state (formyloxy, acetoxy, i.butoxy, trichloroacetyloxy, phenoxyacetyloxy, benzyloxy); in this case, the elimination is carried out by hydrolysis in basic medium, especially in the presence of sodium hydroxide at a temperature between 10 and 500C. The protection may also be carried out in the form of a ketone in the form of carbonate with a -COORa radical in which Ra is an optionally substituted alkyl or benzyl radical or else with a trialkylsilyl radical; the acid-protecting groups may be chosen from alkyl radicals (methyl, ethyl, tert-butyl), substituted alkyl (trichloroethyl, haloethyl, p-toluenesulphonylethyl, benzyl, benzyl substituted with a nitro radical, benzhydryl, triphenylmethyl or benzyloxymethyl); ...), alkyloxyalkyl (methoxymethyl), tetrahydropyranyl or trimethylsilyl.

La réaction s'effectue selon les méthodes habituelles de condensation d'une amine sur un acide. Notamment, on opère en présence d'un accepteur d'acide tel qu'une base organique azotée (trialcoylamine, pyridine, N-méthyl-morpholine, diaza-1,8 bicyclo[5.4.0]undécène-7, diaza1,5 bicyclo[4.3.0] nonène-5 par exemple) dans un solvant organique comme un solvant chloré (dichlorométhane, dichloréthane, chloroforme par exemple) ou un amide (diméthylformamide par exemple). Il est également possible d'opérer en présence d'un agent de condensation tel qu'un carbodiimide (dicyclohexylcarbodiimide, chlorhydrate de 1-(3diméthylaminopropyl)-3-éthylcarbodiimide par exemple) et éventuelle ment en présence d'un catalyseur tel que le N-hydroxybenzotriazole ou le N-hydroxysuccinimide, à une température comprise entre -20 et 400C.The reaction is carried out according to the usual methods of condensing an amine on an acid. In particular, it operates in the presence of an acid acceptor such as a nitrogenous organic base (trialkylamine, pyridine, N-methyl-morpholine, 1,8-diaza-bicyclo [5.4.0] undecene-7, diaza1,5 bicyclo [4.3.0] nonene-5 for example) in an organic solvent such as a chlorinated solvent (dichloromethane, dichloroethane, chloroform for example) or an amide (dimethylformamide for example). It is also possible to operate in the presence of a condensing agent such as a carbodiimide (dicyclohexylcarbodiimide, 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride for example) and optionally in the presence of a catalyst such as N hydroxybenzotriazole or N-hydroxysuccinimide, at a temperature between -20 and 400C.

La condensation de l'amine de formule générale (Va) s'effectue de préférence à partir du chlorhydrate de l'amine. On opère généralement sur le chlorure de l'acide ou sur un ester activé.The condensation of the amine of general formula (Va) is preferably carried out from the hydrochloride of the amine. The chloride of the acid or an activated ester is generally used.

L'acide dérivé du lupane, de formule générale (IVa) peut être préparé par action d'un amino acide de formule générale :
H2N~(CH2)n~C H (VI) dans laquelle n est défini comme précédemment et dont la fonction acide a été préalablement protégée, sur le chlorure de l'acide de formule :

Figure img00050001

suivie de l'élimination des radicaux protecteurs.The acid derived from lupane, of general formula (IVa) can be prepared by the action of an amino acid of general formula:
H2N ~ (CH2) n ~ CH (VI) wherein n is defined as above and whose acid function has been previously protected, on the acid chloride of formula:
Figure img00050001

followed by the elimination of protective radicals.

La réaction de l'amino acide sur le chlorure de l'acide lupèn-20(29)oïque-28 de formule générale (VII) s'effectue selon les méthodes habituelles qui n'altèrent pas le reste de la molécule. On opère notamment en présence d'une base organique azotée telle qu'une trialcoylamine (triéthylamine par exemple) dans un solvant organique tel qu'un solvant chloré (chloroforme, dichloro-1,2 éthane, dichlorométhane) ou dans le tétrahydrofurane ou dans un mélange de ces solvants, à une température comprise entre 15 et 300C. The reaction of the amino acid on the lupen-20 (29) oic acid-28 chloride of the general formula (VII) is carried out according to the usual methods which do not affect the rest of the molecule. It is carried out especially in the presence of a nitrogenous organic base such as a trialkylamine (triethylamine for example) in an organic solvent such as a chlorinated solvent (chloroform, 1,2-dichloroethane, dichloromethane) or in tetrahydrofuran or in a mixture of these solvents at a temperature between 15 and 300C.

Le chlorure d'acide du dérivé du lupane de formule générale (VII) peut être préparé selon les méthodes connues. A titre d'exemple, on opère par action du chlorure d'oxalyle ou du chlorure de thionyle, dans un solvant chloré comme le chloroforme, le dichloroéthane ou le dichlorométhane.The acid chloride of the lupane derivative of general formula (VII) can be prepared according to known methods. By way of example, oxalyl chloride or thionyl chloride is reacted with a chlorinated solvent such as chloroform, dichloroethane or dichloromethane.

La protection et la libération des radicaux protecteurs s'effectuent comme décrit précédemment.The protection and release of the protective radicals are carried out as described above.

L'amino acide de formule générale (VI) peut être préparé comme décrit ci-après dans les exemples.The amino acid of general formula (VI) may be prepared as described hereinafter in the examples.

L'amine dérivée du lupane, de formule générale (IVb), pour laquelle
R''' est un atome d'hydrogène, peut être préparée à partir d'un dérivé du lupane de formule générale (VII), par action d'une diamine de formule générale :
H2N-(CH2)n-NH2 (VIII) dans laquelle n est défini comme précédemment.The amine derived from lupane, of general formula (IVb), for which
R '''is a hydrogen atom, can be prepared from a lupane derivative of general formula (VII), by action of a diamine of general formula:
H2N- (CH2) n -NH2 (VIII) wherein n is defined as above.

Les dérivés (IVb) pour lesquels R''' est un radical méthyle peuvent être obtenus par N-méthylation du produit de formule générale (IVb) pour lequel R''' est un atome d'hydrogène, selon la méthode de
A. KATRITSKY, J. Chem. Soc. Perkin Trans. I, 2539 (1987).The derivatives (IVb) for which R '''is a methyl radical can be obtained by N-methylation of the product of general formula (IVb) for which R''' is a hydrogen atom, according to the method of
A. KATRITSKY, J. Chem. Soc. Perkin Trans. I, 2539 (1987).

Les produits de formule générale (Va) ou (Vb) peuvent être préparés selon ou par analogie avec les méthodes décrites ci-après dans les exemples.The products of general formula (Va) or (Vb) may be prepared according to or by analogy with the methods described hereinafter in the examples.

Les nouveaux dérivés du lupane de formule générale (I) peuvent être purifiés le cas échéant par des méthodes physiques telles que la cristallisation ou la chromatographie.The new lupane derivatives of general formula (I) can be purified, if appropriate, by physical methods such as crystallization or chromatography.

Lorsque le dérivé du lupane de formule générale (I) présente des formes stéréoisomères, la préparation s'effectue au moyen de dérivés chiraux de formule générale (Va) ou (Vb). Il est entendu que lorsque l'on veut obtenir un intermédiaire chiral, la séparation s'effectue selon les méthodes habituelles qui n'affectent pas le reste de la molécule, telles que par exemple la chromatographie sur phase chirale, ou par conversion du mélange racémique en diastéréoisomères et séparation par cristallisation ou chromatographie.When the lupane derivative of general formula (I) has stereoisomeric forms, the preparation is carried out by means of chiral derivatives of general formula (Va) or (Vb). It is understood that when a chiral intermediate is to be obtained, the separation is carried out according to the usual methods which do not affect the remainder of the molecule, such as, for example, chiral phase chromatography, or by conversion of the racemic mixture. in diastereoisomers and separation by crystallization or chromatography.

Lorsque le radical R' (dans R) est un atome d'hydrogène, les produits selon l'invention peuvent être transformés en sels métalliques ou en sels d'addition avec une base azotée selon les méthodes connues en soi Ces sels peuvent être obtenus par action d'une base métallique (par exemple alcaline ou alcalino terreuse), de l'ammoniaque ou d'une amine sur un produit selon l'invention, dans un solvant approprié. Le sel formé précipite après concentration éventuelle de la solution il est séparé par filtration.When the radical R '(in R) is a hydrogen atom, the products according to the invention can be converted into metal salts or addition salts with a nitrogen base according to the methods known per se These salts can be obtained by action of a metal base (for example alkaline or alkaline earth), ammonia or an amine on a product according to the invention, in a suitable solvent. The salt formed precipitates after optional concentration of the solution and is separated by filtration.

Comme exemples de sels pharmaceutiquement acceptables peuvent être cités les sels avec les métaux alcalins (sodium, potassium, lithium) ou avec les métaux alcalinoterreux (magnésium, calcium), le sel d'ammonium, les sels de bases azotées (éthanolamine, diéthanolamine, triméthylamine, triéthylamine, méthylamine, propylamine, diisopropylamine, NN-diméthyléthanolamine, benzylamine, dicyclohexylamine,
N-benzylphénéthylamine, NN' -dibenzyléthylènediamine, diphénylènediamine, benzhydrylamine, quinine, choline, arginine, lysine, leucine, dibenzylamine).As examples of pharmaceutically acceptable salts may be mentioned salts with alkali metals (sodium, potassium, lithium) or with alkaline earth metals (magnesium, calcium), ammonium salt, nitrogenous base salts (ethanolamine, diethanolamine, trimethylamine , triethylamine, methylamine, propylamine, diisopropylamine, N, N-dimethylethanolamine, benzylamine, dicyclohexylamine,
N-benzylphenethylamine, N, N'-dibenzylethylenediamine, diphenylenediamine, benzhydrylamine, quinine, choline, arginine, lysine, leucine, dibenzylamine).

Les nouveaux dérivés du lupane selon la présente invention sont particulièrement utiles pour la prophylaxie et le traitement du SIDA (syndrome d'immunodéficience acquise) et de syndromes associés [ARC (AIDS related complex)]. Par prophylaxie nous sous-entendons le traitement des sujets qui ont été exposés aux virus HIVs, en particulier les séropositifs asymptomatiques qui présentent le risque de développer la maladie dans les mois ou les années à venir après la primoinfection.The novel lupane derivatives of the present invention are particularly useful for the prophylaxis and treatment of AIDS (Acquired Immunodeficiency Syndrome) and Associated Syndromes (ARC). By prophylaxis we mean the treatment of subjects who have been exposed to HIV viruses, especially asymptomatic HIV-positive people who are at risk of developing the disease in the months or years to come after primary infection.

Les produits selon l'invention, qui sont inhibiteurs de l'effet cytopathogène du HIV et inhibiteurs de la production de transcriptase inverse en culture cellulaire à des concentrations dépourvues d'effet cytotoxique ou cytostatique, sont particulièrement intéressants.The products according to the invention, which are inhibitors of the cytopathic effect of HIV and inhibitors of the production of reverse transcriptase in cell culture at concentrations devoid of a cytotoxic or cytostatic effect, are particularly interesting.

Les activités ont été mises en évidence dans les tests suivants : Actlvité vis-à-vis de l'effet cytopathogène du virus HIV
Les produits en poudre ont été mis en solution à raison de 2 mg de produit par 2 ml (environ 4 x 10 3 M) dans du diméthylformamide (DMF) pour obtenir une solution stock de produit à 100 % de DMF. Le test est réalisé sur la lignée lymphoblastoïde CEM 4. Dans une microplaque de 96 puits on dépose 25 pl/puits d'une solution de produit à tester dans du tampon phosphate isotonique (TPI) ou de TPI seul dans le cas des contrôles. Les produits sont étudiés à 8 concentrations, à raison de 6 puits par concentration.On ajoute alors 125 ul d'une suspension 4 de cellules CEM (8 x 10 cellules par ml) dans le milieu RPMI contenant 10 % de sérum de veau foetal, 100 UI/ml de pénicilline, 100 pg/ml de streptomycine et 2 umoles/ml de glutamine et les microplaques sont incubées une heure à 370C, sous une atmosphère contenant 5 % de gaz carbonique. Pour chaque concentration, l'essai est partagé en deux parties : une partie (3 puits) sur cellules infectées, pour la détermination de l'activité antivirale et l'autre partie (3 puits) sur cellules non infectées, pour déterminer la cytotoxicité des produits.On infecte alors la première série avec
HIV-1 (100 Ul par puits d'une suspension de virus LAV-1-BRU contenant 200-300 TCID50) tandis que l'autre série reçoit 100 ul de milieu RPMI tel que défini précédemment. Au bout de 5 jours d'incubation, 100 ul de cellules sont prélevés pour mesurer la viabilité cellulaire [déterminée selon une modification de la technique décrite par R.The activities were highlighted in the following tests: Actlvité vis-à-vis the cytopathogenic effect of the HIV virus
The powdered products were dissolved in a proportion of 2 mg of product per 2 ml (approximately 4 × 10 3 M) in dimethylformamide (DMF) to obtain a stock solution of 100% DMF product. The test is carried out on the lymphoblastoid line CEM 4. In a 96-well microplate, 25 μl / well of a test product solution is deposited in isotonic phosphate buffer (TPI) or TPI alone in the case of the controls. The products are studied at 8 concentrations, at the rate of 6 wells per concentration. 125 μl of a suspension 4 of CEM cells (8 × 10 7 cells per ml) are then added in RPMI medium containing 10% fetal calf serum. 100 IU / ml penicillin, 100 μg / ml streptomycin and 2 μmol / ml glutamine and the microplates are incubated for 1 hour at 370C under an atmosphere containing 5% carbon dioxide. For each concentration, the assay is divided into two parts: one part (3 wells) on infected cells, for the determination of the antiviral activity and the other part (3 wells) on uninfected cells, to determine the cytotoxicity of the cells. products.On then infects the first series with
HIV-1 (100 IU per well of a suspension of LAV-1-BRU virus containing 200-300 TCID50) while the other set receives 100 μl of RPMI medium as defined above. After 5 days of incubation, 100 μl of cells are taken to measure cell viability [determined by a modification of the technique described by R.

PAUWELS et coll., J. VIROL. Meth., 20, 309-321 (1988)]. On ajoute à ce prélèvement 10 ul d'une solution contenant 7 mg de MTT [bromure de 3-(4,5-diméthyl 2-thiazolyl)-2,5-diphényltétrazolium1 par ml de tampon phosphate isotonique. Après 3 heures d'incubation à 370C le surnageant est enlevé. Le MTT est converti en un sel de formazan (bleu) uniquement à l'intérieur des cellules vivantes. On ajoute alors 100 ul d'isopropanol (contenant 0,04 mole/l d'acide chlorhydrique) et les microplaques sont agitées jusqu'à la solubilisation du bleu de formazan. L'absorbance à 540 nm est lue avec un lecteur automatique de réactions ELISA en microplaques. Cette absorbance est proportionnelle à la quantité de cellules vivantes. Pauwels et al., J. Virol. Meth., 20, 309-321 (1988)]. 10 μl of a solution containing 7 mg of MTT [3- (4,5-dimethyl-2-thiazolyl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide] per ml of isotonic phosphate buffer is added to this sample. After 3 hours incubation at 370C the supernatant is removed. MTT is converted to a formazan salt (blue) only inside living cells. 100 μl of isopropanol (containing 0.04 mol / l of hydrochloric acid) are then added and the microplates are shaken until the solubilization of the formazan blue. The absorbance at 540 nm is read with an automatic reader of ELISA reactions in microplates. This absorbance is proportional to the amount of living cells.

Le taux de protection (en %) d'un produit donné est déterminé à partir des densités optiques (DO) par la formule
DO(cell. traitées et inf.)-DO(cell. non traitées et inf.)
DO(cell. traitées et non inf.)-DO(cell. non traitées et inf.)
Le cas échéant la concentration inhibitrice 50 % est déterminée.The protection rate (in%) of a given product is determined from the optical densities (OD) by the formula
OD (cell treated and inf.) - DO (cell untreated and inf.)
OD (cell treated and not inf) - DO (cell untreated and inf.)
If necessary, the 50% inhibitory concentration is determined.

Les résultats démontrent que pour des concentrations de produit testé comprises entre 0,01 et 10 pg/ml, on obtient une diminution significative de l'effet cytopathogène.The results demonstrate that for tested product concentrations of between 0.01 and 10 μg / ml, a significant decrease in the cytopathic effect is obtained.

Le taux de protection procuré par les produits selon l'invention est compris entre 20 et 100 %.The degree of protection provided by the products according to the invention is between 20 and 100%.

La concentration inhibitrice 50 % des produits selon l'invention est comprise entre 0,05 et 50 pg/ml lorsqu'elle peut etre déterminée.The 50% inhibitory concentration of the products according to the invention is between 0.05 and 50 μg / ml when it can be determined.

Détermination de la multiplication vlrale par dosage de la transcriptase inverse du virus HIV
L'activité de la transcriptase inverse est mesurée dans 10 ul de surnageant de culture. A l'aide du kit de dosage poly r(A) reverse transcriptase [3H]-SPA enzyme assay (RPQN 0100, Amersham, GB) selon la procédure préconisée par le fabricant. Le temps de réaction est de 6 heures et la radioactivité comptée à l'aide d'un compteur microbeta [TOPCOUNT . PACKARD]. Determination of the visual multiplication by assay of the reverse transcriptase of the HIV virus
The activity of the reverse transcriptase is measured in 10 μl of culture supernatant. Using assay kit poly r (A) reverse transcriptase [3H] -SPA enzyme assay (RPQN 0100, Amersham, GB) according to the procedure recommended by the manufacturer. The reaction time is 6 hours and the radioactivity counted using a microbeta counter [TOPCOUNT. PACKARD].

On observe des inhibitions de la production de transcriptase inverse associée au virus, comprises entre 20 et 100 % aux concentrations testées (0,01 à 10 ug/ml). Inhibitions of virus-associated reverse transcriptase production are observed between 20 and 100% at the tested concentrations (0.01 to 10 μg / ml).

Les exemples suivants donnés à titre non limitatif illustrent la présente invention
Exemple 1
A une solution de 1 g d'acide N-(3-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-8
3 3 aminooctanoique dans 30 cm de dichlorométhane, on ajoute 1,15 cm de chlorure de thionyle. La solution est agitée 15 heures à une tempéra ture voisine de 200C puis le mélange réactionnel est concentré à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 350C. Le résidu obtenu (1,05 g) et 695 mg de chlorhydrate de 5-amino-2-chloro
3 benzoate de méthyle sont mis en suspension dans 50 cm de dichloromé
3 thane puis on ajoute 0,44 cm de triéthylamine. Après 15 heures d'agitation à une température voisine de 200C, le mélange réactionnel est concentré sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voi 3 sine de 45 C.Au solide résiduel, on ajoute 25 cm d'acétate
3 d'éthyle. L'insoluble est filtré et rincé par au total 25 cm d'acé- tate d'éthyle. Le filtrat est concentré à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 450C. Le solide obtenu (1,06 g) est chromatographié sur une colonne de 4 cm de diamètre et 40 cm de haut de silice (0,02-0,045 mm) éluée par un mélange de dichlorométhane et d'acétate d'éthyle 95:5 (en volumes), en
3 recueillant des fractions de 25 cm . Les 35 premières fractions sont éliminées, et l'éluant est remplacé par un mélange de dichlorométhane et d'acétate d'éthyle 90:10 (en volumes) en recueillant des fractions
3 de 25 cm . Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C.On obtient 380 mg de N'-[N-(3ss-acétoxy-20(29)-lupèn-28-oyl)- 8-aminooctanoyl]-3-amino-6-chloro benzoate de méthyle sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,10 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant dichlorométhane - acétate d'éthyle 95:5 en volumes).The following nonlimiting examples illustrate the present invention.
Example 1
To a solution of 1 g of N- (3-acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl) -8 acid
In the 30 cm 3 dichloromethane solution, 1.15 ml of thionyl chloride are added. The solution is stirred for 15 hours at a temperature in the region of 200 ° C. and then the reaction mixture is concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 350 ° C. The resulting residue (1.05 g) and 695 mg of 5-amino-2-chloro hydrochloride
3 methyl benzoate are suspended in 50 cm of dichloromé
3 thane then 0.44 cm of triethylamine is added. After stirring for 15 hours at a temperature in the region of 200 ° C., the reaction mixture is concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature of 45 ° C. The residual solid is then added 25 cm 3 of acetate.
3 of ethyl. The insoluble material is filtered and rinsed with a total of 25 cm 3 of ethyl acetate. The filtrate is concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature of 450C. The solid obtained (1.06 g) is chromatographed on a column 4 cm in diameter and 40 cm high of silica (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of dichloromethane and ethyl acetate 95: 5. (in volumes),
3 collecting fractions of 25 cm. The first 35 fractions are removed, and the eluent is replaced by a mixture of dichloromethane and ethyl acetate 90:10 (by volume) by collecting fractions.
3 of 25 cm. The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 400 ° C. 380 g of N '- [N- (3ss-acetoxy-20 (29) -lupen-28- are obtained. Methyl 8-aminooctanoyl] -3-amino-6-chloro benzoate as a white meringue (Rf = 0.10, silica thin layer chromatography, eluent dichloromethane-ethyl acetate 95: 5 in volumes).


3 0,45 cm de soude 5N sont ajoutés en 5 minutes environ à une solution de 370 mg de N'-[N- (313-acétoxy-20 (29) -lupèn-28-oyl) -8-aminooctanoyl]-
3 3-amino-6-chloro benzoate de méthyle dans 4,6 cm de méthanol et
3 2,3 cm de tétrahydrofurane et le mélange réactionnel est agité pendant 15 heures à une température voisine de 200C. Le mélange réactionnel est acidifié à un pH voisin de 2 à l'aide d'acide
3 chlorhydrique 5N puis on ajoute 50 cm dTeau distillée. Après 1 heure
3 d'agitation, le solide est séparé par filtration et rincé par 50 cm au total d'eau distillée puis séché à l'air.Le solide est mis en
3 3 suspension dans 20 cm d'eau distillée, filtré et rincé par 50 cm au total d'eau distillée puis séché sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C. On obtient ainsi 285 mg d'acide N' [N-(3ss-hydroxy-20(29)-lupèn-28-oyl)-8-aminooctanoyl]-3-amino-6-chloro benzoïque fondant à une température voisine de 135-40 C(pâteux).
0.45 cm 3 of 5N sodium hydroxide solution are added over a period of 5 minutes to a solution of 370 mg of N '- [N- (313-acetoxy-20 (29) -lupen-28-alkyl) -8-aminooctanoyl] -
Methyl 3-amino-6-chloro benzoate in 4.6 cm 3 of methanol and
2.3 cm 3 of tetrahydrofuran and the reaction mixture is stirred for 15 hours at a temperature of 200C. The reaction mixture is acidified to a pH of about 2 using acid
5N hydrochloric acid and then 50 cm of distilled water. After 1 hour
After stirring, the solid is separated by filtration and rinsed with 50 cm of total distilled water and then dried in air.
The suspension is suspended in 20 cm 3 of distilled water, filtered and rinsed with a total of 50 cm 3 of distilled water and then dried under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 400 ° C. 285 mg of N '[N- (3ss-hydroxy-20 (29) -lupen-28-yl) -8-aminooctanoyl] -3-amino-6-chloro-benzoic acid are thus obtained, melting at a temperature in the region of 135.degree. -40 C (pasty).

L'acide N-(3ss-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-8-aminooctanoïque peut être préparé de la manière suivante :
Après avoir chauffé au reflux pendant 3 heures un mélange de 330 mg d'acide 8-aminooctanoïque et 410 mg de chlorotriméthylsilane dans
3 50 cm de dichlorométhane, la solution est refroidie vers 200C et on ajoute 1 g de chlorure de 313-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyle (préparé à
3 partir d'acide 3ss-acétoxylup-20(29)-èn-28-oïque) puis 0,81 cm de triéthylamine. L'agitation est maintenue pendant 15 heures à une température voisine de 200C et le solvant est concentré à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 350C. Le résidu est chromatographié sur une colonne de silice (0,02-0,045 mm) éluée avec un mélange de cyclohexane et d'acétate d'éthyle (60-40 en volumes).Les fractions contenant le produit sont rassemblées et concentrées à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 350C. On obtient ainsi 1,1 g d'acide N-(3ss-acétoxylup- 20(29)-èn-28-oyl)-8-aminooctanoïque sous la forme d'un meringue blanche (Rf = 0,4 ; chromatographie sur couche mince de silice éluant : cyclohexane, acétate d'éthyle (60-40 en volumes)).N- (3ss-Acetoxy-20 (29) -En-28-oyl) -8-aminooctanoic acid can be prepared in the following manner:
After refluxing for 3 hours a mixture of 330 mg of 8-aminooctanoic acid and 410 mg of chlorotrimethylsilane in
50 cm 3 of dichloromethane, the solution is cooled to 200 ° C. and 1 g of 313-acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl chloride (prepared with
From 3ss-acetoxylup-20 (29) -en-28-oic acid) followed by 0.81 cc of triethylamine. Stirring is maintained for 15 hours at a temperature in the region of 200 ° C. and the solvent is concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 350 ° C. The residue is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of cyclohexane and ethyl acetate (60-40 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature of 350C. There is thus obtained 1.1 g of N- (3ss-acetoxylup- (29) -En-28-alkyl) -8-aminooctanoic acid in the form of a white meringue (Rf = 0.4; thin silica eluent: cyclohexane, ethyl acetate (60-40 by volume)).

Le 5-amino-2-chlorobenzoate de méthyle peut être obtenu de la manière suivante :
3
A 100 cm de méthanol refroidis à une température voisine de -200C,
3 ajouter en 1 minute, 1,5 cm de chlorure de thionyle. L'agitation est maintenue 5 minutes à une température voisine de -20 C puis on ajoute 1,72 g d'acide 5-amino-2-chlorobenzolque. On laisse revenir à une température voisine de 200C en 30 minutes et maintient l'agitation 15 heures à une température voisine de 200C. Le mélange réactionnel est chauffé 6 heures à une température voisine du reflux.Le mélange est ramené à une température voisine de 20"C puis concentré à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 200C. Le
3 solide obtenu est repris par 50 cm de diéthyléther, filtré, rincé
3 par 60 cm au total de diéthyéther puis séché à pression atmosphé- risque On obtient ainsi 2,6 g de chlorhydrate de 5-amino-2-chlorobenzoate de méthyle sous la forme d'un solide blanc.Methyl 5-amino-2-chlorobenzoate can be obtained as follows:
3
At 100 cm of methanol cooled to a temperature of -200C,
Add 1.5 cm of thionyl chloride in 1 minute. Stirring is maintained for 5 minutes at a temperature in the region of -20 ° C. and then 1.72 g of 5-amino-2-chlorobenzoic acid are added. Allowed to return to a temperature of 200C in 30 minutes and stirring for 15 hours at a temperature of 200C. The reaction mixture is heated for 6 hours at a temperature close to reflux. The mixture is brought to a temperature in the region of 20 ° C. and then concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 200 ° C.
3 solid obtained is taken up in 50 cm of diethyl ether, filtered, rinsed
A total of 60 g of diethyl ether is then added and the mixture is dried under atmospheric pressure. 2.6 g of methyl 5-amino-2-chlorobenzoate hydrochloride are thus obtained in the form of a white solid.

Exemple 2
A une solution de 1,3 g d'acide N-(3ss-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl) 8
3 3 aminooctanoique dans 6 cm de tétrahydrofurane et 0,282 cm de triéthylamine refroidie à une température voisine de -100C, on ajoute en
3 10 minutes 0,273 cm de chloroformiate d'isobutyle. Le mélange réac- tionnel est agité 30 minutes à une température voisine de -100C puis on ajoute goutte à goutte en 15 minutes une solution de 440 mg de
3 chlorhydrate de 2-amino-5-fluorobenzoate d'éthyle dans 6 cm de
3 dioxane et 2 cm d'eau distillée maintenant la température voisine de -100C. Le mélange réactionnel est agité 48 heures à une température voisine de 200C puis concentré à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C.Le résidu obtenu est repris par
3 3 20 cm de dichlorométhane et lavé successivement par 20 cm d'eau distillée, une solution aqueuse d'acide méthanesulfonique 1N puis 3
3 fois par 20 cm d'eau distillée. La phase organique est sechée sur sulfate de sodium puis concentrée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 350C. Le solide résiduel (1,6 g) est chromatographié sur une colonne de silice (0,02-0,045 mm), éluée avec un mélange de dichlorométhane et d'acétate d'éthyle 97-3 (en volumes), les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 350C. On obtient ainsi 550 mg de N'-[N-(3ss-acétoxy-20(29)-lupèn- 28-oyl) -8-aminooctanoyl] -2-amino-5-fluorobenzoate d' éthyle sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,20 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant dichlorométhane - acétate d'éthyle 97:3 en volumes).Example 2
To a solution of 1.3 g of N- (3ss-acetoxylup-20 (29) -en-28-alkyl) 8
3 3 aminooctanoic in 6 cm of tetrahydrofuran and 0.282 cm 3 of triethylamine cooled to a temperature in the region of -100.degree.
10 minutes 0.273 cm 3 of isobutyl chloroformate. The reaction mixture is stirred for 30 minutes at a temperature in the region of -100 ° C. and then a solution of 440 mg of toluene is added dropwise over 15 minutes.
3 ethyl 2-amino-5-fluorobenzoate hydrochloride in 6 cm of
3 dioxane and 2 cm distilled water keeping the temperature close to -100C. The reaction mixture is stirred for 48 hours at a temperature in the region of 200 ° C. and then concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 400 ° C. The residue obtained is taken up by
3 cm 3 of dichloromethane and washed successively with 20 cm 3 of distilled water, 1N aqueous methanesulfonic acid solution and 3
3 times per 20 cm of distilled water. The organic phase is dried over sodium sulfate and then concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature of 350C. The residual solid (1.6 g) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm), eluted with a mixture of dichloromethane and ethyl acetate 97-3 (by volume), the fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature of 350C. 550 mg of ethyl N '- [N- (3ss-acetoxy-20 (29) -lupen-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -2-amino-5-fluorobenzoate are thus obtained in the form of white meringue (Rf = 0.20, silica thin layer chromatography, eluent dichloromethane - ethyl acetate 97: 3 by volume).


3 1,75 cm de soude 4N sont ajoutés en 5 minutes environ à une solution de 370 mg de N' - [N- (313-acétoxy-20 (29) -lupèn-28-oyl) -8-aminooctanoylj -
3 3 2-amino-5-fluorobenzoate d'éthyle dans 3 cm de méthanol et 6 cm de tétrahydrofurane et le mélange réactionnel est agité pendant 15 heures à une température voisine de 200C. Le mélange réactionnel est concentré à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température 3 voisine de 300C Le residu est repris par 30 cm d'eau distillée est
3 acidifié à un pH voisin de 2 à l'aide de 2,2 cm d'acide chlorhy- drique 5N. Après 1 heure d'agitation,le solide est séparé par filtra
3 tion et rincé par 30 cm au total d'eau distillée puis séché sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 350C.On obtient ainsi 465 mg d'acide N'-[N-(3ss-acétoxy-20(29)-lupèn-28-oyl)-8- aminooctanoyl]-2-amino-5-fluorobenzoïque fondant à une température voisine de 1450C.
1.75 cm 4N sodium hydroxide solution are added over a period of 5 minutes to a solution of 370 mg of N '- [N- (313-acetoxy-20 (29) -lupen-28-alkyl) -8-aminooctanoyl -
Ethyl 3-amino-5-fluorobenzoate in 3 cm 3 of methanol and 6 cm 3 of tetrahydrofuran and the reaction mixture is stirred for 15 hours at a temperature of 200C. The reaction mixture is concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 300 ° C. The residue is taken up in 30 cm of distilled water.
3 acidified to a pH of about 2 with 2.2 cm of 5N hydrochloric acid. After stirring for 1 hour, the solid is separated by filtration.
3 and rinsed with a total of 30 cm 3 of distilled water and then dried under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 350 ° C. Thus 465 mg of N '- [N- (3 S) -acetoxy acid are obtained. (29) -Lupen-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -2-amino-5-fluorobenzoic acid melting at a temperature in the region of 1450C.

Le 2-amino-5-fluorobenzoate d'éthyle peut être obtenu de la manière suivante :
Dans une solution de 3,1 g d'acide 2-amino-5-fluoro benzoïque dans 50
3 cm d'éthanol à une température voisine de 400C, on fait passer durant approximativement 20 minutes un courant d'acide chlorhydrique gazeux de manière à obtenir une solution saturée, puis on chauffe 3 heures à une température voisine du reflux. Le mélange réactionnel est concentré à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C.Le solide pâteux obtenu est repris par un mélange de
3 3 20 cm d'éthanol et de 100 cm d'oxyde d'isopropyle, puis refroidi à une température voisine de 50C. Le solide est séparé par filtration,
3 lavé par 60 cm au total d'oxyde d'isopropyle et séché sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 300C. On obtient ainsi 3,54 g de chlorhydrate de 2-amino-5-fluorobenzoate d'éthyle sous la forme d'un solide blanc fondant à une température voisine de 1200C.Ethyl 2-amino-5-fluorobenzoate can be obtained as follows:
In a solution of 3.1 g of 2-amino-5-fluoro benzoic acid in 50
3 cm 3 of ethanol at a temperature in the region of 400 ° C., a stream of gaseous hydrochloric acid is passed for approximately 20 minutes to obtain a saturated solution and then is heated for 3 hours at a temperature close to reflux. The reaction mixture is concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 400 ° C. The pasty solid obtained is taken up in a mixture of
33 cm 3 of ethanol and 100 cm 3 of isopropyl ether, then cooled to a temperature of 50 ° C. The solid is separated by filtration,
3 was washed with a total of 60 cm 3 of isopropyl ether and dried under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 300 ° C. There is thus obtained 3.54 g of ethyl 2-amino-5-fluorobenzoate hydrochloride in the form of a white solid melting at a temperature of about 1200C.

Exemple 3
A une solution de 2 g d'acide N-(3ss-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-8-
3 3 aminooctanoïque dans 60 cm de dichlorométhane, on ajoute 2,30 cm de chlorure de thionyle. La solution est agitée 15 heures à une température voisine de 200C puis le mélange réactionnel est concentré à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 350C. Le
3 résidu obtenu (2,10 g) et mis en suspension dans 60 cm de dichlorométhane, puis 1,16 g de 3-amino-4-chlorobenzoate de méthyle sont ajoutés. Après 15 heures d'agitation à une température voisine de 200C, le mélange réactionnel est concentré sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 45"C. Au solide résiduel, on 3 ajoute 50 cm d'acétate d'éthyle. L'insoluble est filtré et rincé par
3 au total 50 cm d'acétate d'éthyle.Le filtrat est concentré à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 450C. Le solide obtenu (2,07 g) est chromatographié sur une colonne de silice (0,02-0,045 mm) éluée par un mélange de dichlorométhane et d'acétate d'éthyle 93:7 (en volumes). Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C. On obtient 540 mg de N'-[N-(3ss-acétoxy-20(29)- lupèn-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -3-amino-4-chlorobenzoate de méthyle sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,22 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant dichlorométhane - acétate d'éthyle 93:7 en volumes).Example 3
To a solution of 2 g of N- (3ss-acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl) -8-
In a 60 cm 3 dichloromethane solution, 3.30 cm 3 of thionyl chloride are added. The solution is stirred for 15 hours at a temperature in the region of 200 ° C. and then the reaction mixture is concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 350 ° C. The
The residue obtained (2.10 g) and suspended in 60 cm 3 of dichloromethane and then 1.16 g of methyl 3-amino-4-chlorobenzoate are added. After stirring for 15 hours at a temperature in the region of 200 ° C., the reaction mixture is concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 45 ° C. To the residual solid, 50 cm 3 of acetate are added. The insoluble material is filtered and rinsed
3 in total 50 cm 3 of ethyl acetate. The filtrate is concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 450 ° C. The solid obtained (2.07 g) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of dichloromethane and ethyl acetate 93: 7 (by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 400C. 540 mg of methyl N '- [N- (3ss-acetoxy-20 (29) -lupen-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -3-amino-4-chlorobenzoate are obtained in the form of a white meringue. (Rf = 0.22, thin layer chromatography of silica, eluent dichloromethane-ethyl acetate 93: 7 by volume).


3 0,66 cm de soude 5N sont ajoutés en 5 minutes environ à une solution de 370 mg de N' - [N- (3-acétoxy-20 (29) -lupèn-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -
3 3-amino-4-chlorobenzoate de méthyle dans 6,6 cm de méthanol et
3 3,3 cm de tétrahydrofurane et le mélange réactionnel est agité pen- dant 15 heures à une température voisine de 200C, acidifié à un pH voisin de 2 à l'aide d'acide chlorhydrique 5N puis concentré à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 35"C. Le 3' résidu est repris par 20 cm d'eau distillée après 1 heure d'agita- tion à une température voisine de 200C.Le solide est séparé par fil 3 tration et rincé par 50 cm au total d'eau distillée puis séché sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C. On obtient ainsi 450 mg d'acide N'-[N-(3ss-hydroxy-20(29)-lupèn-28-oyl)-8- aminooctanoylj-3-amino-4-chlorobenzoique fondant à une température voisine de 135-1400C(pâteux),
Le 3-amino-4-chlorobenzoate de méthyle peut etre obtenu de la manière suivante :
3
A 100 cm de méthanol refroidis à une température voisine de -20 C,
3 on ajoute en 1 minute, 1,5 cm de chlorure de thionyle. L'agitation est maintenue 5 minutes à une température voisine de -200C puis on ajoute 1,72 g d'acide 3-amino-4-chlorobenzoïque.On laisse revenir à une température voisine de 200C en 30 minutes et on maintient l'agitation 15 heures à une température voisine de 200C. Le mélange réactionnel est chauffé 3 heures à une température voisine du reflux.
0.66 cm of 5N sodium hydroxide solution are added over a period of 5 minutes to a solution of 370 mg of N '- [N- (3-acetoxy-20 (29) -lupen-28-alkyl) -8-aminooctanoyl] -
Methyl 3-amino-4-chlorobenzoate in 6.6 cm 3 of methanol and
3.3 cm 3 of tetrahydrofuran and the reaction mixture is stirred for 15 hours at a temperature in the region of 200 ° C., acidified to a pH of about 2 with 5N hydrochloric acid and then concentrated to dryness under reduced pressure (2 N). 7 kPa) at a temperature in the region of 35 ° C. The residue is taken up in 20 cm of distilled water after stirring for 1 hour at a temperature in the region of 200 ° C. The solid is separated by filtration and filtration. rinsed with 50 cm in total of distilled water and then dried under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 400 ° C. This gives 450 mg of N '- [N- (3ss-hydroxy-20) acid (29 ) -lupen-28-alkyl) -8-aminooctanoyl] -3-amino-4-chlorobenzoic acid melting at a temperature in the region of 135-1400 ° C (pasty),
Methyl 3-amino-4-chlorobenzoate can be obtained as follows:
3
At 100 cm of methanol cooled to a temperature of -20 ° C,
1.5 ml of thionyl chloride are added over 1 minute. Stirring is maintained for 5 minutes at a temperature in the region of -200 ° C., then 1.72 g of 3-amino-4-chlorobenzoic acid are added. The mixture is allowed to return to a temperature in the region of 200 ° C. in the course of 30 minutes and stirring is maintained. 15 hours at a temperature of 200C. The reaction mixture is heated for 3 hours at a temperature close to reflux.

Le mélange est ramené à une température voisine de 20"C puis concentré à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température
3 voisine de 20"C. Le solide obtenu (2,25 g) est repris par 50 cm de
3 diéthyléther, filtré, rincé par 40 cm au total de diéthyéther puis séché sous pression atmosphérique. On obtient ainsi 2,09 g de chlorhydrate de 3-amino-4-chlorobenzoate de méthyle sous la forme d'un solide blanc. Le chlorhydrate est mis en solution dans un 3 mélange de 50 cm d'eau distillée, 5 cm d'hydroxyde de sodium 2N et
3 50 cm d'acétate d'éthyle. La phase aqueuse est décantée, la phase
3 aqueuse est extraite par 25 cm d'acétate d'éthyle. Les phases organiques réunies sont séchées sur sulfate de magnésium puis concentrées à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 350C.On obtient ainsi 1,71 g de 3-amino-4-chlorobenzoate de méthyle.The mixture is brought to a temperature in the region of 20 ° C. and then concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature of
3 of 20 ° C. The solid obtained (2.25 g) is taken up in 50 cm of
3 diethyl ether, filtered, rinsed with a total of 40 cm 3 of diethyl ether and then dried under atmospheric pressure. There is thus obtained 2.09 g of methyl 3-amino-4-chlorobenzoate hydrochloride in the form of a white solid. The hydrochloride is dissolved in a mixture of 50 cm of distilled water, 5 cm of 2N sodium hydroxide and
50 cm 3 of ethyl acetate. The aqueous phase is decanted, the phase
The aqueous solution is extracted with 25 cm 3 of ethyl acetate. The combined organic phases are dried over magnesium sulphate and then concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 350 ° C. This gives 1.71 g of methyl 3-amino-4-chlorobenzoate.

Exemple 4
A une solution de 1 g de N-(313-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-ami-
3 nooctanoïque, dans 100 cm de dichlorométhane, on ajoute 30 mg de 3- amino-4-méthylbenzoate de méthyle, 240 mg d'hydrate de 1-hydroxybenzotriazole, 610 mg de chlorhydrate de 1-(3-diméthylaminopropyl)-3 3 éthylcarbodiimide et 0,67 cm de triéthylamine. La solution est agi- tée pendant 12 heures à une température voisine de 200C puis le solvant est éliminé sous presssion réduite (2,7 kPa) à une température 3 3 voisine de 400C. On ajoute 50 cm d'eau distillée et 50 cm d'acétate d'éthyle. La phase organique est extraite et la phase aqueuse est 3 épuisée par 75 cm au total d'acétate d'éthyle. Les extraits orga- niques sont rassemblés, séchés sur du sulfate de magnésium anhydre et concentrés à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C. Le résidu obtenu (1,8 g) est chromatographié sur une colonne de 5,5 cm de diamètre contenant 240 g de silice (0,020,045 mm), éluée avec un mélange de chlorure de méthylène et d'acé
3 tate d'éthyle 9-1 en volumes en recueillant des fractions de 75 cm
Les 43 premières fractions sont éliminées; les 37 suivantes sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40 C. On obtient ainsi 950 mg de N'-[N-(3ss-acétoxy- lup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -3-amino-4-méthylbenzoate de méthyle, sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,18 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chlorure de méthylèneacétate d'éthyle (9-1 en volumes)).Example 4
To a solution of 1 g of N- (313-acetoxylup-20 (29) -en-28-alkyl) -8-amine
In 100 cm 3 of dichloromethane, 30 mg of methyl 3-amino-4-methylbenzoate, 240 mg of 1-hydroxybenzotriazole hydrate and 610 mg of 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride are added. and 0.67 cm 3 of triethylamine. The solution is stirred for 12 hours at a temperature in the region of 200 ° C. and then the solvent is removed under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature close to 400 ° C. 50 cm 3 of distilled water and 50 cm 3 of ethyl acetate are added. The organic phase is extracted and the aqueous phase is extracted with a total of 75 cm 3 of ethyl acetate. The organic extracts are combined, dried over anhydrous magnesium sulphate and concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 400C. The residue obtained (1.8 g) is chromatographed on a column 5.5 cm in diameter containing 240 g of silica (0.020.045 mm), eluted with a mixture of methylene chloride and acetic acid.
3 ethyl acetate 9-1 by volume collecting 75 cm fractions
The first 43 fractions are eliminated; the following 37 are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. 950 mg of N '- [N- (3ss-acetoxy-lup-20 (29) -nn- Methyl 28-oyl) -8-aminooctanoyl] -3-amino-4-methylbenzoate as a white meringue (Rf = 0.18, silica thin layer chromatography, eluent: methyleneacetate ethyl chloride) (9-1 in volumes)).

Une solution de 950 mg de N' - [N- (313-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-
3 aminooctanoyl]-3-amino-4-méthylbenzoate de méthyle, 1,4 cm de soude
3 3 5N, 6 cm de tétrahydrofurane et 12 cm de méthanol est agitée
3 24 heures à une température voisine de 250C puis 1,5 cm d'acide
3 chlorhydrique 5N et 10 cm d'eau distillée sont ajoutés. Après 30 minutes sous agitation, le solide est séparé par filtration, lavé
3 par 50 cm au total d'eau distillée et séché à l'air. On obtient ainsi 720 mg d'acide N' - [N- (3f3-hydroxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-ami- nooctanoyl]-3-amino-4-méthylbenzoïque, sous la forme d'un solide blanc fondant vers 1550C. A solution of 950 mg N '- [N- (313-acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl) -8-
Methyl 3-aminooctanoyl-3-amino-4-methylbenzoate, 1.4 cm sodium hydroxide
3 to 5N, 6 cm of tetrahydrofuran and 12 cm of methanol is stirred
3 24 hours at a temperature of 250C then 1.5 cm of acid
5N hydrochloric acid and 10 cm of distilled water are added. After stirring for 30 minutes, the solid is separated by filtration, washed
3 per 50 cm total distilled water and air dried. 720 mg of N '- [N- (3f3-hydroxylup-20 (29) -en-28-yl) -8-aminoctoyanoyl] -3-amino-4-methylbenzoic acid are thus obtained in the form of a white solid melting at around 1550C.

Exemple 5
3
Une solution de 420 mg d'acide 3-amino-2-méthylbenzoïque et 0,71 cm
3 de chlorotriméthylsilane dans 30 cm de dichlorométhane est chauffée au reflux pendant 3 heures, puis refroidie à une température voisine
3 de 250C. A cette solution, on ajoute successivement 30 cm de dichlorométhane, 1 , 5 g d'acide N-(3ss-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-8- aminooctanolque, 360 mg d'hydrate de 1-hydroxybenzotriazole, 900 mg de chlorhydrate de 1-(3-diméthylaminopropyl)-3-éthylcarbodiimide et
3 1,47 cm de triéthylamine. La solution est agitée pendant 12 heures à une température voisine de 200C puis le solvant est éliminé sous presssion réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C.Le résidu obtenu (4,5 g) est chromatographié sur une colonne de 6 cm de diamètre contenant 240 g de silice (0,02-0,045 mm), éluée avec un mélange de chlorure de méthylène, d'acétate d'éthyle et de méthanol
3 9-9-1 en volumes en recueillant des fractions de 75 cm . Les 7 premières fractions sont éliminées; les 43 suivantes sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C. On obtient ainsi 780 mg d'acide N'-[N-(313-acétoxylup-20(29)- èn-28-oyl) -8-aminooctanoyl1 -3-amino-2-méthylbenzoïque, sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,1 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chlorure de méthylène-acétate d'éthyle-méthanol (9-9-1 en volumes)).Example 5
3
A solution of 420 mg of 3-amino-2-methylbenzoic acid and 0.71 cm
3 g of chlorotrimethylsilane in 30 cm 3 of dichloromethane is refluxed for 3 hours and then cooled to a similar temperature.
3 of 250C. To this solution is added successively 30 cm of dichloromethane, 1.5 g of N- (3ss-acetoxylup-20 (29) -en-28-alkyl) -8-aminooctanol, 360 mg of hydrate of 1- hydroxybenzotriazole, 900 mg of 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride and
3.47 cm 3 of triethylamine. The solution is stirred for 12 hours at a temperature in the region of 200 ° C. and then the solvent is removed under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 400 ° C. The residue obtained (4.5 g) is chromatographed on a column of 6 ° C. cm diameter containing 240 g of silica (0.02-0.045 mm), eluted with a mixture of methylene chloride, ethyl acetate and methanol
3 9-9-1 in volumes by collecting fractions of 75 cm. The first 7 fractions are eliminated; the following 43 are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 400C. 780 mg of N '- [N- (313-acetoxylup-20 (29) -en-28-alkyl) -8-aminooctanoyl] -3-amino-2-methylbenzoic acid are thus obtained in the form of a meringue. white (Rf = 0.1, silica thin layer chromatography, eluent: methylene chloride-ethyl acetate-methanol (9-9-1 by volume)).

Une solution de 780 mg d'acide N'-[N-(3ss-acétoxylup-20(29)-èn-28-
3 oyl)-8-aminooctanoyl]-3-amino-2-méthylbenzoïque, 0,7 cm de soude 5N,
3 3 5 cm de tétrahydrofurane et 10 cm de méthanol est agitée 24 heures
3 à une température voisine de 250C puis 1,0 cm d'acide chlorhydrique
3 5N et 10 cm d'eau distillée sont ajoutés. Après 30 minutes sous agi
3 tation, le solide est séparé par filtration, lavé par 50 cm au total d'eau distillée et séché à l'air.Le résidu obtenu (650 mg) est chromatographié sur une colonne de 3,5 cm de diamètre contenant 115 g de silice (0,02-0,045 mm), éluée avec un mélange de méthanol et d'acé
3 tate d'éthyle 1-19 en volumes en recueillant des fractions de 50 cm
Les 3 premières fractions sont éliminées ; les 4 suivantes sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C. On obtient ainsi 570 mg qui sont purifiés une nouvelle fois par chromatographie (colonne de 3,5 cm de diamètre, 100 g de silice (0,02-0,045 mm), éluant : acétate d'éthyle, volume 3 des fractions : 75 cm ).Les 19 premières fractions sont éliminées ; les 31 suivantes sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C. Les 190 mg obtenus sont dissous dans 1 cm de méthanol et additionnés de 20 cm d'eau distil 3 lée. Le solide obtenu est séparé par filtration et lavé par 100 cm d'eau distillée. On obtient ainsi 330 mg d'acide N'-[N-(3ss-hydroxy- lup-20(29)-èn-28-oyl)-8-aminooctanoyl]-3-amino-2-méthylbenzoïque, sous la forme d'un solide blanc fondant vers 1520C.A solution of 780 mg of N '- [N- (3ss-acetoxylup-20 (29) -en-28-
3-alkyl-8-aminooctanoyl] -3-amino-2-methylbenzoic acid, 0.7 cm 5N sodium hydroxide,
3 to 5 cm 3 of tetrahydrofuran and 10 cm of methanol is stirred for 24 hours.
3 at a temperature in the region of 250 ° C. and then 1.0 cm of hydrochloric acid
35N and 10 cm of distilled water are added. After 30 minutes under action
The solid is filtered off, washed with distilled water (50 cm 3) and air-dried. The residue obtained (650 mg) is chromatographed on a column 3.5 cm in diameter containing 115 g of water. silica (0.02-0.045 mm), eluted with a mixture of methanol and ace
3 tet of ethyl 1-19 in volumes by collecting fractions of 50 cm
The first 3 fractions are eliminated; the following 4 are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 400C. 570 mg are thus obtained, which are purified again by chromatography (column 3.5 cm in diameter, 100 g of silica (0.02-0.045 mm), eluent: ethyl acetate, volume 3 of the fractions: 75 cm The first 19 fractions are eliminated; the following 31 are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 400C. The 190 mg obtained are dissolved in 1 cm of methanol and 20 cm of distilled water are added. The solid obtained is separated by filtration and washed with 100 cm 3 of distilled water. 330 mg of N '- [N- (3ss-hydroxy-lup-20 (29) -En-28-alkyl) -8-aminooctanoyl] -3-amino-2-methylbenzoic acid are thus obtained in the form of a white solid melting at about 15 ° C.

Exemple 6
A une solution de 1 g d'acide N-(3ss-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-8-
3 aminooctanoïque, dans 100 cm de dichlorométhane, on ajoute 330 mg de 3-amino-4-méthoxybenzoate de méthyle, 240 mg d'hydrate de 1-hydroxybenzotriazole, 610 mg de chlorhydrate de 1-(3-diméthylaminopropyl)-3
3 éthylcarbodiimide et 0,67 cm de triéthylamine. La solution est agitée pendant 12 heures à une température voisine de 200C puis le solvant est éliminé sous presssion réduite (2,7 kPa) à une température
3 3 voisine de 40"C. On ajoute 50 cm d'eau distillée et 50 cm d'acétate d'éthyle. La phase organique est extraite et la phase aqueuse est
3 épuisée par 75 cm au total d'acétate d'éthyle.Les extraits organiques sont rassemblés, séchés sur du sulfate de magnésium anhydre et concentrés à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C. Le résidu obtenu (1,6 g) est chromatographié sur une colonne de 5 cm de diamètre contenant 210 g de silice (0,020,045 mm), éluée avec un mélange de chlorure de méthylène et d'acé 3 tate d'éthyle 19-1 en volumes en recueillant des fractions de 75 cm
Les 67 premières fractions sont éliminées; les 63 suivantes sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C.On obtient ainsi 780 mg de N'-[N-(3ss-acétoxy- lup-20(29)-èn-28-oyl)-8-aminooctanoyl]-3-amino-4-méthOxybenzoate de méthyle, sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,18 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chlorure de méthylèneacétate d'éthyle (19-1 en volumes)).Example 6
To a solution of 1 g of N- (3ss-acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl) -8-
3 amino-octanoic acid, in 100 cc of dichloromethane, 330 mg of methyl 3-amino-4-methoxybenzoate, 240 mg of 1-hydroxybenzotriazole hydrate, 610 mg of 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-hydrochloride are added.
3 ethylcarbodiimide and 0.67 cm 3 of triethylamine. The solution is stirred for 12 hours at a temperature in the region of 200 ° C. and the solvent is then removed under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature of
3 to 40 ° C. 50 cm of distilled water and 50 cm 3 of ethyl acetate are added, the organic phase is extracted and the aqueous phase is extracted.
The organic extracts are combined, dried over anhydrous magnesium sulphate and concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 400 ° C. The residue obtained (1.6 g) is chromatographed on a column 5 cm in diameter containing 210 g of silica (0.020.045 mm), eluted with a mixture of methylene chloride and 19-1 ethyl acetate. volumes by collecting fractions of 75 cm
The first 67 fractions are eliminated; the following 63 are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 400 ° C. Thus 780 mg of N '- [N- (3 S) -acetoxy-lup-20 (29) -en-28 are obtained. Methyl (-oyl) -8-aminooctanoyl] -3-amino-4-methoxybenzoate, as a white meringue (Rf = 0.18, silica thin layer chromatography, eluent: methyleneacetate ethyl chloride ( 19-1 in volumes)).

Une solution de 780 mg de N'-[N-(3(3-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-8- 3 aminooctanoyl]-3-amino-4-méthoxybenzoate de méthyle, 1,4 cm de soude
3 3 5N, 5 cm de tetrahydrofurane et 10 cm de méthanol est agitée 24
3 heures à une température voisine de 250C et on ajoute 2,0 cm d'acide
3 chlorhydrique 5N et 10 cm d'eau distillée. Après 30 minutes sous
3 agitation, le solide est séparé par filtration, lavé par 50 cm au total d'eau distillée et séché à l'air. On obtient ainsi 650 mg d'acide N'-[N-(3ss-hydroxylup-20(29)-èn-28-oyl)-8-aminooctanoyl]-3- amino-4-méthoxybenzoïque, sous la forme d'un solide blanc fondant vers 1380C.A solution of 780 mg of methyl N '- [N- (3 (3-acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -3-amino-4-methoxybenzoate, 1.4 cm of soda
35 N, 5 cm of tetrahydrofuran and 10 cm of methanol is stirred.
3 hours at a temperature of 250 ° C. and add 2.0 cm of acid
5N hydrochloric acid and 10 cm distilled water. After 30 minutes under
After stirring, the solid is filtered off, washed with a total of 50 cm 3 of distilled water and dried in air. 650 mg of N '- [N- (3ss-hydroxylup-20 (29) -En-28-alkyl) -8-aminooctanoyl] -3-amino-4-methoxybenzoic acid are thus obtained in the form of a solid white melting towards 1380C.

Exemple 7
A une solution, refroidie à -100C, de 1,96 g de N-(3ss-acétoxylup-
3 20(29)-èn-28-oyl)-8-aminooctanoïque, dans 9 cm de tétrahydrofuranne
3 3 et 0,45 cm de triéthylamine, on ajoute 0,3 cm de chloroformiate d'isobutyle. L'agitation est maintenue pendant 30 minutes et on ajoute goutte à goutte une solution de 597 mg de 4-amino-3-méthoxy
3 benzoate de méthyle dans 9 cm de dioxane et 3 cm d'eau distillée. Example 7
To a solution cooled to -100 ° C., 1.96 g of N- (3ss-acetoxylup-
3 (29) -En-28-alkyl) -8-aminooctanoic, in 9 cm 3 of tetrahydrofuran
0.35 cm 3 and 0.45 cm 3 of triethylamine are added 0.3 cm 3 of isobutyl chloroformate. Stirring is maintained for 30 minutes and a solution of 597 mg of 4-amino-3-methoxy is added dropwise.
3 methyl benzoate in 9 cm of dioxane and 3 cm of distilled water.

La solution est agitée pendant 12 heures à une température voisine de 3 3 200C puis on ajoute 80 cm d'eau distillée et 20 cm de chlorure de méthylène. La phase organique est extraite et la phase aqueuse est
3 épuisée par 40 cm au total de chlorure de méthylène. Les extraits organiques sont rassemblés, séchés sur du sulfate de magnésium anhydre et concentrés à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40 C. Le résidu obtenu (1,74 g) est chromatographié sur une colonne de 2,5 cm de diamètre contenant 50 g de silice (0,02-0,045 mm), éluée avec un mélange de chlorure de méthylène et d'acétate d'éthyle 19-1 en volumes en recueillant des fractions de 3 5 cm .Les 73 premières fractions sont éliminées ; les 80 suivantes sont réunies et concentrées sous pression réduite (20 mm de mercure; 2,7 kPa) à une température voisine de 400C. On obtient ainsi 1,18 g de N' - [N- (313-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -4-amino-3- méthoxybenzoate de méthyle, sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,41 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant chlorure de méthylène-acétate d'éthyle (19-1 en volumes)).The solution is stirred for 12 hours at a temperature in the region of 3300 ° C., then 80 cm 3 of distilled water and 20 cm 3 of methylene chloride are added. The organic phase is extracted and the aqueous phase is
3 exhausted by 40 cm total of methylene chloride. The organic extracts are combined, dried over anhydrous magnesium sulphate and concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. The residue obtained (1.74 g) is chromatographed on a column of 2 × , 5 cm in diameter containing 50 g of silica (0.02-0.045 mm), eluted with a mixture of methylene chloride and ethyl acetate 19-1 by volume, collecting fractions of 35 cm. first fractions are eliminated; the following 80 are combined and concentrated under reduced pressure (20 mm Hg, 2.7 kPa) at a temperature in the region of 400C. There is thus obtained 1.18 g of methyl N '- [N- (313-acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -4-amino-3-methoxybenzoate, in the form of a white meringue (Rf = 0.41, thin layer chromatography of silica, eluent methylene chloride-ethyl acetate (19-1 by volume)).

Une solution de 420 mg de N'-[N-(35-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-8-
3 aminooctanoyl]-4-amino-3-méthoxybenzoate de méthyle, 1,3 cm de soude
3 3 4N, 3,5 cm de tétrahydrofurane et 2 cm de méthanol est agitée 24 heures à une température voisine de 25"C puis le solvant est évaporé à sec, sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine 3 de 400C. Le résidu est dilué dans 20 cm d'eau distillée et on ajoute
3 2 cm d'acide chlorhydrique 4N.Après 1 heure sous agitation, le so
3 lide obtenu est séparé par filtration, lavé par 50 cm au total d'eau distillée et séché sous pression réduite (15,5 Pa) à une température voisine de 350C. On obtient ainsi 172 mg d'acide N'-[N-(3ss-hydroxy- lup-20(29)-èn-28-oyl)-8-aminooctanoyl]-4-amino-3-méthOxybenzoïque, sous la forme d'un solide blanc fondant vers 133 C. A solution of 420 mg N '- [N- (35-acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl) -8-
Methyl 3-aminooctanoyl] -4-amino-3-methoxybenzoate, 1.3 cm sodium hydroxide
3 3 4N, 3.5 cm 3 of tetrahydrofuran and 2 cm of methanol are stirred for 24 hours at a temperature in the region of 25 ° C. and the solvent is then evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 3 ° C. 400 C. The residue is diluted in 20 cm of distilled water and added
3 cm of 4N hydrochloric acid. After 1 hour with stirring, the
The resulting acid is separated by filtration, washed with distilled water (50 cm 3) and dried under reduced pressure (15.5 Pa) at a temperature in the region of 350 ° C. There is thus obtained 172 mg of N '- [N- (3ss-hydroxy-lup-20 (29) -en-28-alkyl) -8-aminooctanoyl] -4-amino-3-methoxybenzoic acid, in the form of a white solid melting at about 133 C.

Exemple 8
A une solution de 2 g de N- (3(3-acétoxylup-20 (29) -èn-28-oyl) -8-ami- 3 3 nooctanoïque, dans 100 cm de dichlorométhane, on ajoute 2,13 cm de chlorure de thionyle. L'agitation est maintenue pendant 15 heures puis le solvant est évaporé sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 40"C. On ajoute au résidu une solution de 3 1,51 g de 4-amino-5-chloro-2-méthoxybenzoate de méthyle et 0,84 cm 3 de triéthylamine dans 100 cm de dichlorométhane. La solution est agitée pendant 15 heures à une température voisine de 200C puis on
3 ajoute 100 cm d'eau distillée.La phase organique est extraite, la
3 vée 2 fois par 100 cm d'eau distillée, séchée sur du sulfate de ma- gnésium anhydre et concentrée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C. Le résidu obtenu (3,2 g) est chromatographié sur une colonne de silice (0,02-0,045 mm) éluée avec un mélange de cyclohexane et d'acétate d'éthyle 70-30 en volumes. Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C. On obtient ainsi 1,7 g de N'-[N-(3-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-8-aminoocta- noyll-4-amino-5-chloro-2-méthoxybenzoate de méthyle, sous la forme d'une poudre blanche fondant vers 1560C.Example 8
To a solution of 2 g of N- (3 (3-acetoxylup-20 (29) -en-28-yl) -8-aminoctanoic acid, in 100 cm 3 of dichloromethane, 2.13 cm 3 of chloride are added. stirring is maintained for 15 hours then the solvent is evaporated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 40 ° C. A solution of 3 1.51 g of 4-amino is added to the residue. Methyl 5-chloro-2-methoxybenzoate and 0.84 cm 3 of triethylamine in 100 cm 3 of dichloromethane The solution is stirred for 15 hours at a temperature in the region of 200.degree.
3 add 100 cm of distilled water.The organic phase is extracted, the
3 times per 100 cm 3 of distilled water, dried over anhydrous magnesium sulphate and concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 400 ° C. The residue obtained (3.2 g) is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of cyclohexane and ethyl acetate 70-30 by volume. The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 400C. 1.7 g of methyl N '- [N- (3-acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl) -8-aminooctanoic-4-amino-5-chloro-2-methoxybenzoate are thus obtained. in the form of a white powder melting at about 1560C.

Une solution de 1,7 g de N'-[N-(3ss-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-8- aminooctanoyl] -4-amino-5-chloro-2-méthoxybenzoate de méthyle,
3 3 3 25,5 cm de soude 5N, 25,5 cm de tétrahydrofurane et 51 cm de mé- thanol est agitée 15 heures à une température voisine de 200C. Le
3 mélange réactionnel est dilué par 20 cm de méthanol puis acidifié
3 par de l'acide chlorhydrique 2N. On ajoute 200 cm d'eau distillée et après 2 heures sous agitation, le solide obtenu est séparé par filtration, lavé jusqu'à neutralité par de l'eau distillée et séché sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C. La poudre obtenue est chromatographiée sur une colonne de silice (0,020,045 mm) éluée avec de l'acétate d'éthyle.Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C. Le résidu est repris par
3 3 10 cm d'éther éthylique, filtré, lavé par 5 cm d'éther éthylique et séché sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 200C. On obtient ainsi 120 mg d'acide N'-[N-(35-hydroxylup-20(29)-èn- 28-oyl)-8-aminooctanoyl]-4-amino-5-chloro-2-méthOxybenzoïque, sous la forme d'un solide blanc fondant vers 1640C.A solution of 1.7 g of methyl N '- [N- (3ss-acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl) -8-aminooctanoyl] -4-amino-5-chloro-2-methoxybenzoate,
25.5 cm 3 of 5N sodium hydroxide, 25.5 cm 3 of tetrahydrofuran and 51 cm 3 of methanol are stirred for 15 hours at a temperature in the region of 200 ° C. The
3 reaction mixture is diluted with 20 cm of methanol and then acidified
3 with 2N hydrochloric acid. 200 cm 3 of distilled water are added and, after stirring for 2 hours, the solid obtained is separated by filtration, washed to neutrality with distilled water and dried under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 400C. The powder obtained is chromatographed on a silica column (0.020 × 45 mm) eluted with ethyl acetate. The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 400 ° C. The residue is taken up by
30 g of ethyl ether, filtered, washed with 5 cm of ethyl ether and dried under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 200 ° C. 120 mg of N '- [N- (35-hydroxylup-20 (29) -En-28-alkyl) -8-aminooctanoyl] -4-amino-5-chloro-2-methoxybenzoic acid are thus obtained under the form of a white solid melting towards 1640C.

Exemple9
A une suspension de 383 mg d'acide 3-méthoxycarbonyl-5-nitro ben zoïque dans 20 cm3 de dichlorométhane, on ajoute 260 mg d'hydrate de 1-hydroxybenzotriazole et 916 mg de N-(3ss-acétoxylup-20(29)-èn-28-
3 oyl)-1,7-diaminoheptane dans 20 cm de dichlorométhane. A la solution obtenue, on ajoute successivement 844 mg de chlorhydrate de 1-(3 3 diméthylaminopropyl)-3-éthylcarbodiimide puis 0,87 cm de
3 triéthylamine en solution dans 20 cm de dichlorométhane. La solution est agitée à une température voisine de 200C durant 15 heures puis le
3 mélange réactionnel est lavé 3 fois avec 20 cm d'eau distillée.La phase organique est ensuite séchée sur du sulfate de sodium est concentrée à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C. Le résidu obtenu est chromatographié sur une colonne de silice (0,02-0,045 mm) éluée avec du dichlorométhane. Les 120 3 fractions de 2 cm sont éliminées et l'éluant est remplacé par un mélange de dichlorométhane et d'acétate d'éthyle (8:2) (en volumes).example9
To a suspension of 383 mg of 3-methoxycarbonyl-5-nitro-benzoic acid in 20 cm3 of dichloromethane, 260 mg of 1-hydroxybenzotriazole hydrate and 916 mg of N- (3ss-acetoxylup-20 (29) are added. -en-28-
3 μl) -1,7-diaminoheptane in 20 cm 3 of dichloromethane. 844 mg of 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride are then successively added to the solution obtained, followed by 0.87 cm
3 triethylamine dissolved in 20 cm 3 of dichloromethane. The solution is stirred at a temperature of 200C for 15 hours and then the
The reaction mixture is washed 3 times with 20 cm 3 of distilled water. The organic phase is then dried over sodium sulfate and concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 400 ° C. The residue obtained is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm) eluted with dichloromethane. The 120 3 fractions of 2 cm are removed and the eluent is replaced by a mixture of dichloromethane and ethyl acetate (8: 2) (in volumes).

Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C. On obtient ainsi 740 mg de N-[(3ss-acétoxy-20(29)-lupèn-28-oyl)-7- aminoheptylcarbamoyl]-5-nitrobenzoate de méthyle sous la forme d'une meringue blanche (Rf = 0,80 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant dichlorométhane - acétate d'éthyle 8:2 en volumes).The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 400C. 740 mg of methyl N- [(3ss-acetoxy-20 (29) -lupen-28-oyl) -7-aminoheptylcarbamoyl] -5-nitrobenzoate are thus obtained in the form of a white meringue (Rf = 0.80 thin layer chromatography of silica, eluent dichloromethane - ethyl acetate 8: 2 by volume).

3 9 cm de soude N sont ajoutés en 5 minutes environ à une solution de 740 mg de 3-[N-(3ss-acétoxy-20(29)-lupèn-28-oyl)-7-aminoheptylcarba-
3 3 moyl]-5-nitrobenzoate de méthyle dans 4 cm de méthanol et 9 cm de tétrahydrofurane et le mélange réactionnel est agité pendant 15 heures à une température voisine de 200C. Le mélange réactionnel
3 est acidifié à un pH voisin de 2 à l'aide 4 cm d'acide chlorhydrique 3 4N. Après 1 heure d'agitation, on ajoute 100 cm d'eau distillée et
3 50 cm de dichlorométhane. La phase organique est décantée, la phase
3 aqueuse est extraite par 50 cm de dichlorométhane. Les phases orga- niques réunies sont séchée sur sulfate de sodium, puis concentrées à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C. Le solide obtenu (360 mg) est chromatographié sur une colonne de silice (0,02-0,045 mm) éluée par un mélange de chloroforme, de méthanol et d'ammoniaque 24:6:1 (en volumes), en recueillant des 3 fractions de 5 cm . Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 35 C. On obtient 170 mg d'acide 3-[N-(3ss-hydroxy-20(29)-lu- pèn-28-oyl)-7-aminoheptylcarbamoylJ-5-nitrobenzoïque fondant à une température voisine de 1180C. 35 cm3 of sodium hydroxide are added in about 5 minutes to a solution of 740 mg of 3- [N- (3ss-acetoxy-20 (29) -lupen-28-alkyl) -7-aminoheptylcarbamate.
Methyl 3-methyl-5-nitrobenzoate in 4 cm 3 of methanol and 9 cm 3 of tetrahydrofuran and the reaction mixture is stirred for 15 hours at a temperature of 200C. The reaction mixture
3 is acidified to a pH of about 2 with 4 cm 3N hydrochloric acid. After stirring for 1 hour, 100 cm 3 of distilled water are added and
3 50 cm of dichloromethane. The organic phase is decanted, the phase
The aqueous solution is extracted with 50 cm 3 of dichloromethane. The combined organic phases are dried over sodium sulphate and then concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 400.degree. The solid obtained (360 mg) is chromatographed on a column of silica (0.02-0.045 mm) eluted with a mixture of chloroform, methanol and ammonia 24: 6: 1 (by volume), collecting 3 fractions. 5 cm. The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 35 ° C. 170 mg of 3- [N- (3ss-hydroxy-20 (29) -lu- pien-28-yl) -7-aminoheptylcarbamoyl-5-nitrobenzoic acid melting at a temperature in the region of 1180C.

Le N-(3O-acétoxylup-20(29)-èn-28-oyl)-1,7-diaminOheptane peut etre obtenu de la manière suivante :
3 1000 cm d'une solution dans le dichlorométhane de chlorure de 313- acétoxylup-20(29)-èn-28-oyle (préparée à partir de 30 g d'acide 3ss- acétoxylup-20(29)-èn-28-oïque) sont ajoutés goutte à goutte en environ 10 heures à une solution de 46,8 g de 1,7-diaminoheptane dans
3 120 cm de dichlorométhane. Le mélange réactionnel est agité durant 15 heures à une température voisine de 200C puis concentré à sec sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C. Le résidu est repris par 2000 cm d'eau distillée. Le solide est filtré, 3 lavé par 3 fois 200 cm d'eau distillée, puis mis en solution dans
3 500 cm d'éthanol.La solution est filtrée, le solide est lavé 2 fois
3 avec 50 cm d'éthanol et les filtrats sont évaporés à sec sous pres- sion réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 500C Le résidu obtenu est chromatographié sur colonne de silice (0,02-0,045 mm), éluée avec un mélange de chloroforme, méthanol et ammoniaque à 20 % (24-6-1 en volumes). Les fractions contenant le produit sont réunies et concentrées sous pression réduite (2,7 kPa) à une température voisine de 400C. On obtient ainsi 28 g de N-(3ss-acétoxylup-20(29)-èn-28- oyl)-1,7-diaminoheptane sous la forme d'une meringue jaune. (Rf = 0,25 ; chromatographie sur couche mince de silice ; éluant : chloroforme-méthanol-ammoniaque à 20 % (24-6-1 en volumes)).N- (3O-acetoxylup-20 (29) -En-28-oyl) -1,7-diaminOheptane can be obtained as follows:
1000 cm 3 of a solution in 313-acetoxylup-20 (29) -en-28-alkyl chloride dichloromethane (prepared from 30 g of 3SS-acetoxylup-20 (29) -en-28- oique) are added dropwise in about 10 hours to a solution of 46.8 g of 1,7-diaminoheptane in
3,120 cm 3 of dichloromethane. The reaction mixture is stirred for 15 hours at a temperature in the region of 200 ° C. and then concentrated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 400 ° C. The residue is taken up in 2000 cm of distilled water. The solid is filtered, washed 3 times with 200 cm of distilled water and then dissolved in
3,500 cm of ethanol.The solution is filtered, the solid is washed twice
3 with 50 cm 3 of ethanol and the filtrates are evaporated to dryness under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 500 ° C. The residue obtained is chromatographed on a silica column (0.02-0.045 mm), eluted with a mixture of chloroform, methanol and ammonia at 20% (24-6-1 by volume). The fractions containing the product are combined and concentrated under reduced pressure (2.7 kPa) at a temperature in the region of 400C. 28 g of N- (3ss-acetoxylup-20 (29) -En-28-alkyl) -1,7-diaminoheptane are thus obtained in the form of a yellow meringue. (Rf = 0.25, thin layer chromatography of silica, eluent: chloroform-methanol-ammonia 20% (24-6-1 by volume)).

Le chlorure de 3P-acétoxylup-20 (29)-èn-28-oyle est préparé d'après
J. PROVITA et A. VYSTRCIL, Collect. Czech. Chem. Commun., 41, 1200 (1976). 3P-acetoxylup-20 (29) -en-28-oyl chloride is prepared according to
J. PROVITA and A. VYSTRCIL, Collect. Czech. Chem. Commun., 41, 1200 (1976).

La présente invention concerne également les compositions pharmaceutiques contenant au moins un produit de formule générale (I) éventuellement sous forme de sel, à l'état pur ou sous forme d'une association avec un ou plusieurs diluants ou adjuvants compatibles et pharmaceutiquement acceptables, ou avec un autre agent destiné au traitement du SIDA, un agent antiviral, immunomodulateur ou antimicrobien. The present invention also relates to pharmaceutical compositions containing at least one product of general formula (I) optionally in salt form, in the pure form or in the form of an association with one or more compatible and pharmaceutically acceptable diluents or adjuvants, or with another agent for the treatment of AIDS, an antiviral, immunomodulatory or antimicrobial agent.

La composition selon l'invention est capable de maintenir en vie les cellules infectées par un virus HIV et donc de réduire la progression vers le SIDA ou de diminuer sa gravité chez les sujets déjà infectés en réduisant la mortalité des cellules infectées. Les compositions peuvent être utilisées par voie orale, parentérale ou rectale.The composition according to the invention is capable of keeping cells infected with an HIV virus alive and thus of reducing progression to AIDS or of decreasing its severity in already infected subjects by reducing the mortality of infected cells. The compositions can be used orally, parenterally or rectally.

Les compositions peuvent être utilisées à titre curatif ou à titre préventif chez des sujets présentant une immunodéficience et/ou infectés par un virus HIV. Bien entendu, la constitution de ces compositions sera adaptée au cas particulier du tractus digestif des immu nodéprimés. The compositions may be used for curative or preventive use in subjects with immunodeficiency and / or infected with an HIV virus. Of course, the constitution of these compositions will be adapted to the particular case of the digestive tract of immunodepressed.

Comme compositions solides pour administration orale peuvent être utilisés des comprimés, des pilules, des gélules, des poudres ou des granulés. Dans ces compositions, le produit actif selon l'invention est mélangé à un ou plusieurs diluants ou adjuvants inertes, tels que saccharose, lactose ou amidon.As solid compositions for oral administration may be used tablets, pills, capsules, powders or granules. In these compositions, the active product according to the invention is mixed with one or more inert diluents or adjuvants, such as sucrose, lactose or starch.

Ces compositions peuvent comprendre des substances autres que les diluants, par exemple un lubrifiant tel que le stéarate de magnésium ou un enrobage destiné à une libération contrôlée.These compositions may comprise substances other than diluents, for example a lubricant such as magnesium stearate or a coating intended for controlled release.

Comme compositions liquides pour administration orale, on peut utiliser des solutions pharmaceutiquement acceptables, des suspensions, des émulsions, des sirops et des élixirs contenant des diluants inertes tels que l'eau ou l'huile de paraffine. Ces compositions peuvent également comprendre des substances autres que les diluants, par exemple des produits mouillants, édulcorants ou aromatisants.As liquid compositions for oral administration, pharmaceutically acceptable solutions, suspensions, emulsions, syrups and elixirs containing inert diluents such as water or paraffin oil can be used. These compositions may also comprise substances other than diluents, for example wetting, sweetening or flavoring products.

Les compositions pour administration parentérale, peuvent être des solutions stériles ou des émulsions. Comme solvant ou véhicule, on peut employer le propylèneglycol, un polyéthylèneglycol, des huiles végétales, en particulier l'huile d'olive, des esters organiques injectables, par exemple l'oléate d'éthyle. The compositions for parenteral administration may be sterile solutions or emulsions. As the solvent or vehicle, propylene glycol, a polyethylene glycol, vegetable oils, in particular olive oil, injectable organic esters, for example ethyl oleate, may be used.

Ces compositions peuvent également contenir des adjuvants, en particulier des agents mouillants, isotonisants, émulsifiants, dispersants et stabilisants.These compositions may also contain adjuvants, in particular wetting agents, isotonic agents, emulsifiers, dispersants and stabilizers.

La stérilisation peut se faire de plusieurs façons, par exemple à l'aide d'un filtre bactériologique, par irradiation ou par chauffage.Sterilization can be done in several ways, for example using a bacteriological filter, irradiation or heating.

Elles peuvent également être préparées sous forme de compositions solides stériles qui peuvent etre dissoutes au moment de l'emploi dans de l'eau stérile ou tout autre milieu stérile injectable.They can also be prepared as sterile solid compositions which can be dissolved at the time of use in sterile water or any other sterile injectable medium.

Les compositions par administration rectale sont les suppositoires ou les capsules rectales, qui contiennent outre le principe actif, des excipients tels que le beurre de cacao, des glycérides semi-synthétiques ou des polyéthylèneglycols. The compositions by rectal administration are suppositories or rectal capsules, which contain in addition to the active ingredient, excipients such as cocoa butter, semi-synthetic glycerides or polyethylene glycols.

En thérapeutique humaine, le médecin déterminera la posologie qu'il estime la plus appropriée en fonction d'un traitement préventif ou curatif, en fonction de l'âge, du poids, du degré de l'infection et des autre facteurs propres au sujet à traiter. Généralement, les doses sont comprises entre 10 et 100 mg/kg par voie orale pour un adulte.In human therapeutics, the doctor will determine the dosage he considers the most appropriate based on a preventive or curative treatment, depending on the age, weight, degree of infection and other factors specific to the subject to treat. Generally, the doses are between 10 and 100 mg / kg orally for an adult.

La présente invention concerne également les associations constituées d'un ou plusieurs dérivés du lupane de formule générale (I), et/ou le cas échéant leurs sels, et d'un autre principe actif connu pour son activité anti-rétrovirus, éventuellement en présence d'excipients pharmaceutiquement acceptables.The present invention also relates to combinations consisting of one or more lupane derivatives of general formula (I), and / or where appropriate their salts, and of another active ingredient known for its anti-retrovirus activity, possibly in the presence pharmaceutically acceptable excipients.

Les agents anti-rétrovirus pouvant être associés sont choisis parmi des agents compatibles et inertes vis-à-vis du dérivé du lupane de formule générale (I). A titre non limitatif ces agents sont choisis parmi des inhibiteurs de la reverse transcriptase [zidovudine (AZT), didanosine (DDI), didéoxycytidine (DDC), TIBO, névirapine, PMEA, D4T, pyridones, a-APA, HEPT... ], parmi des inhibiteurs de la protéase tomme par exemple le RO 31-8959 ou le A 77003], ou parmi des inhibiteurs de la protéine tat [comme par exemple le RO 24-7429]. The anti-retrovirus agents that can be combined are chosen from agents that are compatible and inert with respect to the lupane derivative of general formula (I). As a non-limiting example, these agents are chosen from reverse transcriptase inhibitors [zidovudine (AZT), didanosine (DDI), dideoxycytidine (DDC), TIBO, nevirapine, PMEA, D4T, pyridones, a-APA, HEPT ...] among protease inhibitors such as RO 31-8959 or A 77003], or among tat protein inhibitors [such as, for example, RO 24-7429].

L'exemple suivant illustre une composition selon l'invention. The following example illustrates a composition according to the invention.

Exemple
On prépare des ampoules contenant une solution dosée à 10 mg d'acide N'-[N-[35-hydroxylup-20(29)-èn-28-oyl]-8-aminooctanoyl]-3-amino-2- méthylbenzoïque en ajoutant 2 % de glycine et 0,1 % de cystéine à 3 500 cm d'une solution à 0,2 * d'acide N'-[N-[3f3-hydroxylup-20(29) èn-28-oyl] -8-aminooctanoyl] -3-amino-2-méthylbenzoïque dans du tampon phosphate isotonique. La solution est divisée et répartie aseptiquement dans des ampoules. Chaque ampoule contient 10 mg de produit actif. Example
Ampoules containing a solution containing 10 mg of N '- [N- [35-hydroxylup-20 (29) -En-28-alkyl] -8-aminooctanoyl] -3-amino-2-methylbenzoic acid are prepared in adding 2% glycine and 0.1% cysteine to 3500 cc of a 0.2% solution of N '- [N- [3f3-hydroxylup-20 (29) en-28-alkyl] - 8-aminooctanoyl] -3-amino-2-methylbenzoic acid in isotonic phosphate buffer. The solution is divided and distributed aseptically into ampoules. Each ampoule contains 10 mg of active product.

Claims (3)

REVENDICATIONS 1 - Un dérivé du lupane de formule générale1 - A lupane derivative of general formula
Figure img00260001
Figure img00260001
 dans laquelle : in which : R représente un radical de formule générale :R represents a radical of general formula:
Figure img00260002
Figure img00260002
 dans laquelle R' est un atome d'hydrogène ou de radical alcoyle, in which R 'is a hydrogen atom or an alkyl radical, X représente un radical carbamoyle, N-méthyl carbamoyle, aminocarbonyle ou N-méthylaminocarbonyle,X represents a carbamoyl, N-methyl carbamoyl, aminocarbonyl or N-methylaminocarbonyl radical, Y est un radical phénylène substitué de formule générale ::Y is a substituted phenylene radical of the general formula:
Figure img00260003
Figure img00260003
 dans laquelle R1 et R2 identiques ou différents représentent des atomes d'hydrogène ou d'halogène ou des radicaux alcoyle, alcoyloxy ou nitro, l'un au moins étant autre que l'hydrogène, RO et ROO identiques ou différents sont des atomes d'hydrogène ou des radicaux alcoyle et, n est un nombre entier de 6 à 12, m est un nombre entier de 0 à 2 et p est un nombre entier de 0 à 2 et sont tels que m + n + p soit compris entre 6 et 12, étant entendu que les radicaux alcoyle sont droits ou ramifiés et contiennent 1 à 4 atomes de carbone, ainsi que leurs sels pharmaceutiquement acceptables lorsqu'ils existent et le cas échéant leurs formes stéréoisomères et leurs mélanges. in which R1 and R2, which are identical or different, represent hydrogen or halogen atoms or alkyl, alkyloxy or nitro radicals, at least one being other than hydrogen, and RO and ROO, which are identical or different, are atoms of hydrogen or alkyl radicals and, n is an integer from 6 to 12, m is an integer of 0 to 2 and p is an integer of 0 to 2 and is such that m + n + p is between 6 and 12, it being understood that the alkyl radicals are straight or branched and contain 1 to 4 carbon atoms, as well as their pharmaceutically acceptable salts when they exist and, where appropriate, their stereoisomeric forms and their mixtures. 2 - Procédé de préparation d'un dérivé du lupane selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on fait agir une amine ou un acide de formules générales :2 - Process for the preparation of a lupane derivative according to claim 1, characterized in that an amine or an acid of general formulas is reacted:
Figure img00270001
Figure img00270001
 dans lesquelles RO, ROO, m et p sont définis comme dans la revendication 1 et R"' est un atome d'hydrogène ou un radical méthyle, sur un dérivé du lupane de formule générale : in which RO, ROO, m and p are defined as in claim 1 and R "'is a hydrogen atom or a methyl radical, on a lupane derivative of the general formula:
Figure img00270002
Figure img00270002
 dans laquelle R" représente un radical de formule générale : (CH2)n-COOH  in which R "represents a radical of general formula: (CH 2) n -COOH ou or (CH2)n-NH-R"' dans lesquelles n est défini comme dans la revendication 1 et R"' est défini comme ci-dessus, puis élimine le cas échéant des radicaux protecteurs et transforme éventuellement le produit obtenu en un sel, lorsqu' ils existent. (CH2) n-NH-R "'in which n is defined as in claim 1 and R"' is defined as above, then optionally eliminates protective groups and optionally converts the product obtained into a salt, when ' they exist. 3 - Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle contient au moins un produit selon la revendication 1, à l'état pur ou en association avec tout diluant ou adjuvant compatible et pharmaceutiquement acceptable et/ou en association avec un autre principe actif antiviral, immunomodulateur ou antimicrobien. 3 - A pharmaceutical composition characterized in that it contains at least one product according to claim 1, in pure form or in combination with any compatible diluent or adjuvant and pharmaceutically acceptable and / or in combination with another antiviral active ingredient, immunomodulator or antimicrobial.
FR9305619A 1993-05-11 1993-05-11 New lupane derivatives, their preparation and the pharmaceutical compositions containing them. Expired - Lifetime FR2705094B1 (en)

Priority Applications (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR9305619A FR2705094B1 (en) 1993-05-11 1993-05-11 New lupane derivatives, their preparation and the pharmaceutical compositions containing them.
CA002162702A CA2162702A1 (en) 1993-05-11 1994-05-06 Novel lupane derivatives, their preparation and pharmaceutical compositions containing same
PCT/FR1994/000532 WO1994026695A1 (en) 1993-05-11 1994-05-06 Novel lupane derivatives, their preparation and pharmaceutical compositions containing same
AU67879/94A AU6787994A (en) 1993-05-11 1994-05-06 Novel lupane derivatives, their preparation and pharmaceutical compositions containing same
EP94916260A EP0698008A1 (en) 1993-05-11 1994-05-06 Novel lupane derivatives, their preparation and pharmaceutical compositions containing same
JP6525050A JPH08509968A (en) 1993-05-11 1994-05-06 Novel lupine derivative, production thereof and pharmaceutical composition containing the same
ZA943201A ZA943201B (en) 1993-05-11 1994-05-09 Novel lupane derivatives their preparation and pharmceutical compositions contiaining them

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR9305619A FR2705094B1 (en) 1993-05-11 1993-05-11 New lupane derivatives, their preparation and the pharmaceutical compositions containing them.

Publications (2)

Publication Number Publication Date
FR2705094A1 true FR2705094A1 (en) 1994-11-18
FR2705094B1 FR2705094B1 (en) 1995-08-04

Family

ID=9446985

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FR9305619A Expired - Lifetime FR2705094B1 (en) 1993-05-11 1993-05-11 New lupane derivatives, their preparation and the pharmaceutical compositions containing them.

Country Status (7)

Country Link
EP (1) EP0698008A1 (en)
JP (1) JPH08509968A (en)
AU (1) AU6787994A (en)
CA (1) CA2162702A1 (en)
FR (1) FR2705094B1 (en)
WO (1) WO1994026695A1 (en)
ZA (1) ZA943201B (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6124362A (en) * 1998-07-17 2000-09-26 The Procter & Gamble Company Method for regulating hair growth
US6482857B1 (en) 1998-07-17 2002-11-19 The University Of Texas Southwestern Medical Center Compositions which contain triterpenes for regulating hair growth

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5750578A (en) * 1997-02-11 1998-05-12 Regents Of The University Of Minnesota Use of betulin and analogs thereof to treat herpesvirus infection
US6048847A (en) * 1997-09-30 2000-04-11 Dabur Research Foundation Use of betulinic acid and its derivatives for inhibiting cancer growth and a method of monitoring this
US6228850B1 (en) 1997-09-30 2001-05-08 Dabur Research Foundation Antiangiogenic activity of betulinic acid and its derivatives
US6670345B1 (en) 1997-09-30 2003-12-30 Dabur Research Foundation Betulinic acid derivatives for inhabiting cancer growth and process for the manufacture of betulinic acid
DE69832363D1 (en) * 1998-03-18 2005-12-22 Dabur Pharma Ltd Betulinic derivatives for inhibiting cancer growth
US6214814B1 (en) 1998-03-18 2001-04-10 Dabur Research Foundation Use of betulinic acid derivatives for inhibiting cancer growth
US6369101B1 (en) 1999-02-26 2002-04-09 Regents Of The University Of Minnesota Therapeutic method to treat herpes virus infection
JP2005194192A (en) * 2002-01-11 2005-07-21 Meiji Seika Kaisha Ltd (4-OXOPIPERIDIN-1-YL)BENZOIC ACID DERIVATIVE AND METHOD FOR PRODUCING INTEGRIN alphavbeta3 INHIBITOR USING THE SAME

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH01143832A (en) * 1987-12-01 1989-06-06 Toa Nenryo Kogyo Kk Carcinostatic agent

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH01143832A (en) * 1987-12-01 1989-06-06 Toa Nenryo Kogyo Kk Carcinostatic agent

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DATABASE WPI Week 8929, Derwent World Patents Index; AN 89-204083 *
SUSAN BUDAVARI ET. AL.: "The Merck Index", 1989, MERCK & CO, RAHWAY., U.S.A. *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6124362A (en) * 1998-07-17 2000-09-26 The Procter & Gamble Company Method for regulating hair growth
US6451777B1 (en) 1998-07-17 2002-09-17 The University Of Texas Southwestern Medical Center Method for regulating hair growth
US6482857B1 (en) 1998-07-17 2002-11-19 The University Of Texas Southwestern Medical Center Compositions which contain triterpenes for regulating hair growth

Also Published As

Publication number Publication date
FR2705094B1 (en) 1995-08-04
AU6787994A (en) 1994-12-12
WO1994026695A1 (en) 1994-11-24
EP0698008A1 (en) 1996-02-28
CA2162702A1 (en) 1994-11-24
ZA943201B (en) 1995-01-16
JPH08509968A (en) 1996-10-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO1993010142A1 (en) New lupane derivatives, preparation thereof and pharmaceutical compositions containing them
EP0951473B1 (en) Cyclosporin derivative, its preparation and pharmaceutical compositions containing same
EP0036812B1 (en) Cephalosporin derivatives, process for their preparation and antibiotic compositions containing them
FR2762843A1 (en) NOVEL CYCLOSPORIN DERIVATIVES, THEIR PREPARATION AND THE PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS CONTAINING THEM
FR2757521A1 (en) NOVEL CYCLOSPORIN DERIVATIVES, THEIR PREPARATION AND THE PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS CONTAINING THEM
FR2757522A1 (en) CYCLOSPORIN DERIVATIVES, THEIR PREPARATION AND THE PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS CONTAINING THEM
FR2676442A1 (en) NEW PERHYDROISOINDOLE DERIVATIVES, THEIR PREPARATION AND THE PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS CONTAINING THEM
FR2705094A1 (en) New lupane derivatives, their preparation and pharmaceutical compositions containing them.
EP0518961A1 (en) Derivatives of glycinamide, their preparation and medicaments containing them
FR2705097A1 (en) New lupane derivatives, their preparation and pharmaceutical compositions containing them.
EP0520016B1 (en) Derivatives of urea, their preparation and medicaments containing them
EP0004494A1 (en) Derivatives of 1,3-dihydro-3-(1-(2-(2,3-dihydro-1,4-benzodioxin-2-yl)2-hydroxyethyl)piperidin-4-yl)2H-indol-2-on, process for their preparation, their use as medicaments and pharmaceutical compositions containing them
BE1001618A4 (en) Peptides and peptide derivatives, their preparation and their use as drugs.
EP1001943B1 (en) Polyhydroxyalkylpyrazine derivatives, preparation and medicines containing them
EP0772630B1 (en) Streptogramine derivatives, preparation of same and pharmaceutical compositions containing same
FR2487341A1 (en) TRIPEPTIDES INHIBITORS OF ANGIOTENSIN TRANSFORMATION ENZYME
WO2019054379A1 (en) Oleanolic acid derivative
CH642961A5 (en) BETA-LACTONES DERIVED FROM 2-HYDROXY CYCLOPENTANE CARBOXYLIC ACID, THEIR PREPARATION METHODS AND THE PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS CONTAINING THEM.
FR2655649A1 (en) NOVEL DERIVATIVES OF PIPERIDINE, PROCESS FOR THEIR PREPARATION AND PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS COMPRISING SAME.
EP0233801A1 (en) Substituted amides, their preparation and pharmaceutical compositions containing them
WO1994011390A1 (en) Novel pseudodipeptide derivatives, preparation thereof and use thereof as gastrin antagonists
WO2007101937A1 (en) Composition containing amidine derivatives or carboxamide derivatives and steroids, as a medicament
FR2801591A1 (en) Macrocyclic hydroxamic acid derivatives have antibacterial activity, useful for treatment of bacterial infections
EP0437382A1 (en) Thimidin derivatives, their preparation and compositions containing them
BE878763A (en) NOVEL AMINOGLUCOSIDES, THEIR PREPARATION AND THEIR APPLICATION AS MEDICAMENTS