FI95579C - Immunologinen menetelmä intaktin prokollageenipeptidin (tyyppi III) ja prokollageenin (tyyppi III) määrittämiseksi selektiivisesti elimistönesteistä ja väline sen toteuttamiseksi - Google Patents
Immunologinen menetelmä intaktin prokollageenipeptidin (tyyppi III) ja prokollageenin (tyyppi III) määrittämiseksi selektiivisesti elimistönesteistä ja väline sen toteuttamiseksi Download PDFInfo
- Publication number
- FI95579C FI95579C FI882018A FI882018A FI95579C FI 95579 C FI95579 C FI 95579C FI 882018 A FI882018 A FI 882018A FI 882018 A FI882018 A FI 882018A FI 95579 C FI95579 C FI 95579C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- type iii
- peptide
- procollagen
- intact
- bound
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 47
- 108010050808 Procollagen Proteins 0.000 title claims abstract description 39
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 20
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 title claims description 6
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 title abstract description 10
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 title abstract description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 11
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims abstract description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 7
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 12
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 9
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 9
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 9
- 230000003053 immunization Effects 0.000 claims description 6
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 claims description 5
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 claims description 5
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 5
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 claims description 4
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 4
- 241000283707 Capra Species 0.000 claims description 3
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 claims description 3
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 claims description 3
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 claims 3
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 claims 3
- 241000283903 Ovis aries Species 0.000 claims 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims 1
- 102000001187 Collagen Type III Human genes 0.000 abstract 1
- 108010069502 Collagen Type III Proteins 0.000 abstract 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 5
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- KYRUKRFVOACELK-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-(4-hydroxyphenyl)propanoate Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1CCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O KYRUKRFVOACELK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 241001474728 Satyrodes eurydice Species 0.000 description 1
- 239000012506 Sephacryl® Substances 0.000 description 1
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710123661 Venom allergen 5 Proteins 0.000 description 1
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N chloramine T Chemical compound [Na+].CC1=CC=C(S(=O)(=O)[N-]Cl)C=C1 VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 1
- 208000018631 connective tissue disease Diseases 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000001641 gel filtration chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- CSHFHJNMIMPJST-HOTGVXAUSA-N methyl (2s)-2-[[(2s)-2-[[2-[(2-aminoacetyl)amino]acetyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoate Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 CSHFHJNMIMPJST-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 1
- 125000004573 morpholin-4-yl group Chemical group N1(CCOCC1)* 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/78—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin or cold insoluble globulin [CIG]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Lifting Devices For Agricultural Implements (AREA)
- Tires In General (AREA)
- Agricultural Machines (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
j. 95579
Immunologinen menetelmä intaktin prokollageenipepti-din (tyyppi III) ja prokollageenin (tyyppi III) määrittämiseksi selektiivisesti elimistönesteistä ja väline sen toteuttamiseksi 5
Prokollageenipeptidi (tyyppi III) on kollageenin (tyyppi III) aminoterminaalinen propeptidi, joka pilkkoutuu solun ulkopuolisesti prokollageenimolekyy-lin (tyyppi III) erittymisen jälkeen. Radioimmunologi-10 sella määritysmenetelmällä, jota kuvataan EP-julkaisus sa 4940, voidaan määrittää tämän prokollageenipeptidin pitoisuus elimistönesteissä. Seerumin peptidipitoisuu-den tunteminen antaa tietoa sidekudossairauksien, esimerkiksi maksasairauksien aktiivisuudesta /Rohde, H.
15 et ai., Eur. J. Clin. Invest. 9 (1979) 451 - 4597.
Prokollageenipeptidin (tyyppi III) tarkka selek-tiiviinen määrittäminen seerumista ja muista elimistö-nesteistä ei kuitenkaan ole mahdollista tähän mennessä kuvatuilla menetelmillä, koska polyklonaaliset vasta-20 aineet, joita käytetään näissä menetelmissä, reagoivat erilaisten seerumissa esiintyvien antigeenien, jotka ovat osaksi prokollageenipeptidin (tyyppi III) hajoamistuotteita, kanssa vaihtelevalla, alemmalla affiniteetilla /Niemelä, O. et ai., Clin. Chim. Acta 124 25 (1982) 39 - 447· Tämä johtaa siihen, etteivät seeru mista ja muista elimistönesteistä saatavat laimennus-käyrät ole yhdensuuntaisia pelkästä prokollageenipep-tidistä (tyyppi III) saadun kalibrointikäyrän kanssa ja kustakin tuntemattomasta näytteestä täytyy siten 30 määrittää antigeenipitoisuus useasta laimennoksesta antigeenipitoisuuden määrittämiseksi laimennuskäyrien 50 %:n leikkauskohdan avulla.
Tämän menetelmän lisäheikkoutena on se, että vasta-aineen ja rotan tai hiiren antigeenin välisen 35 heikon ristireaktiivisuuden takia ei ole ollut mahdol- 2 95579 lista määrittää näiden lajien elimistönesteiden antigee-nipitoisuutta.
Menetelmällä, jota ovat kuvanneet Schuppan et ai.
/j. Hepatol. 3 (1986) 27 - 377/ voidaan määrittää antigee-5 nipitoisuus rotan seerumissa. Tälläkin menetelmällä on kuitenkin se sama ihmisseerumille tarkoitetun menetelmän yhteudessä kuvattu haittapuoli /Niemelä et ai., Clin.
Chim. Acta 124 (1982) 39 - 44/, että eri elimistönesteiden inhibitiokäyrät eivät ole yhdensuuntaisia.
10 EP-hakemusjulkaisun 0 089 008 mukaisen menetelmän avulla on mahdollista ratkaista tämä tekninen ongelma käyttämällä vasta-aineita, joilla on vertailukelpoinen affiniteetti intaktin prokollageenipeptidin (tyyppi III) ja sen pilkkoutumistuotteen Col 1 suhteen. Tällä menetel-15 mällä määritetään intakti ja pilkkoutunut prokollageeni- peptidi (tyyppi III) yhdessä, mikä kuitenkin johtaa diagnostisen lausunnon epätarkkuuteen, koska normaali- ja potilasryhmät voivat olla voimakkaasti päällekkäisiä.
Yllättävästi on nyt havaittu, että käyttämällä 20 peptidiä, jolla on tietty aminohapposekvenssi, voidaan saada immunisointia varten vasta-aineita, joiden avulla on mahdollista määrittää intakti prokollageenipeptidi (tyyppi III) spesifisesti. Näiden vasta-aineiden avulla voidaan yllättävästi määrittää prokollageenipeptidin , 25 (tyyppi III) pitoisuus myös rotan tai hiiren elimistö- nesteistä, mikä on hyödyksi fibrosuppressiivisten aineiden tutkimisessa eläinkokein.
Keksintö koskee siten menetelmää aminoterminaali-sen prokollageenipeptidin (tyyppi III) määrittämiseksi im-30 munologisesti vasta-aineiden avulla, jolle menetelmälle ; on tunnusmerkillistä, että a) eläimet immunisoidaan peptidillä, jolla on sekvenssi I_C—E—S—C—P—T—G—G—Q—N—Y—S—P, 35 ja joka on sidottu immunogeeniseen proteiiniin, 3 95579 b) otetaan seerumista talteen vasta-aineet, jotka reagoivat intaktin aminoterminaalisen prokollageenipepti-din (tyyppi III) kanssa ja c) määritetään aminoterminaalisen prokollageeni- 5 peptidin (tyyppi III) ja prokollageenin (tyyppi III) mää rä muodostuneen antigeeni - vasta-aine-kompleksin kautta.
Keksintö koskee lisäksi vasta-aineita, joita muodostuu immunisoitaessa eläimiä edellä mainitulla peptidillä, joka on sidottu immunogeeniseen proteiiniin.
10 Seuraavassa kuvataan yksityiskohtaisesti keksin töä, erityisesti sen edullisia suoritusmuotoja. Keksintö määritellään lisäksi patenttivaatimuksissa.
Vasta-aineiden valmistamiseksi immunisoidaan eläimiä, edullisesti jyrsijöitä, kuten esimerkiksi kaniineja 15 tai marsuja, tai vuohia tai lampaita sopivaan immunogee niseen proteiiniin kytketyllä peptidillä, jolla on sekvenssi I-C-E-S-C-P-T-G-G-Q-N-Y-S-P , täydellisen apuaineen läsnä ollessa. Erityisen edullises-20 ti käytetään kaniineja. Immuunivastetta voimistetaan tois tetuilla sekundaari-injektioilla, esimerkiksi 4-8 viikon kuluttua. Immunisoitumisen onnistuminen tarkistetaan määrittämällä vasta-ainepitoisuus radioimmunologisella sitoutumistestillä (R. Timpl ja L. Risteli, Immunochemistry . 25 of the extracellular matrix, voi. 1, H. Furthmayr Ed.
1982, s. 199).
Soveltuvia proteiineja, joihin mainittu peptidi voidaan liittää, ovat kaikki immunogeeniset proteiinit. Edullisesti käytetään hemosyaniinia, albumiinia tai poly-30 lysiiniä. Peptidi voidaan valmistaa alan ammattimiesten tuntemin menetelmin, kuten esimerkiksi menetelmillä, joita kuvaavat G. Barany ja A. B. Merrifield (The Peptides, voi. 2, Academic Press 1980, s. 3 - 254) tai E. Brown, R. C. Sheppard ja B. J. Williams [j. Chem. Soc. Perkin 35 Transact. 1 (1983) 11617.
4 95579
Keksinnön mukaisia vasta-aineita voidaan käyttää seerumina tai puhdistettuina erilaisissa immunologisissa menetelmissä mukaan luettuina radioimmuunimääritysten kaikki muodot, esimerkiksi sekventiaalisissa kyllästys-5 analyyseissa tai tasapainoanalyyseissä, leimaamisessa klo ramiini T:llä tai Bolton - Hunter-reagenssilla ^Telber, Meth. Biochem. Anal. 22 (1974) 1; Shelley et ai., Clin. Chem. 19 (1975) 146] samoin kuin muissa kompetitiivisis-sa sitoutumismäärityksissä, kuten fluoresenssi-, entsyy-10 mi-, kemiluminesenssi- tai muissa immuunimäärityksissä.
Vasta-aineita voidaan siten käyttää immunologisissa menetelmissä kudoksissa ja elimistönesteissä esiintyvän pro-kollageenipeptidin (tyyppi III) eristämiseksi ja karakte-risoimiseksi samoin kuin määrittämiseksi kvantitatiivi-15 sesti. Kvantitatiivisen määrityksen tekemiseksi käyte tään alan ammattimiesten sinänsä tuntemia menetelmiä, joissa nestemäinen näyte, joka sisältää prokollageenipep-tidiä (tyyppi III), saatetaan reagoimaan keksinnön mukaisten vasta-aineiden kanssa ja määritetään prokollageenipep-’ 20 tidin (tyyppi III) määrä muodostuneen antigeeni - vasta- aine-kompleksin kautta. Tällöin ei ole merkitystä sillä seikalla, onko prokollageenipeptidi (tyyppi III) vielä kytkeytyneenä prokollageenin (tyyppi III) aminopäähän vai ei. Keksinnön mukaiset vasta-aineet eivät tunnista 25 immunologista määritystä tähän asti häirinneitä prokol- * lageenipeptidin (tyyppi III) hajoamistuotteita, erityi sesti Col l:ä.
Keksintöä valaistaan tarkemmin seuraavissa esimerk-keissä. Prosenttisuudet ovat painoprosentteina, ellei 30 toisin mainita.
t 95579
Esimerkki 1
Peptidi-hemosyaniinikonjugaattiyhdisteen valmistus 100 mg hemosyaniinia £dialysoitu vettä (5x31) vastaan ja kylmäkuivattu sitter^ liuotetaan veteen (3 ml), 5 ja lisätään 24 mg peptidiä I-C-E-S-C-P-T-G-G-Q-N-Y-S-P .
Huoneen lämpötilassa sekoittaen lisätään 2 tunnin aikana annoksittain kaikkiaan 1 g. N-sykloheksyyli-N'-/2-(4-morfolinyyli)-etyyli7karbodi-imidi-metyyli-p-tolueenisul-fonaattia. Kun reaktioseosta on sekoitettu yön yli, sitä 10 dialysoidaan 24 tuntia vettä (5 x 10 1) vastaan, ja eris tetään tuote sitten kylmäkuivaamalla. Saadaan 137 mg kon-jugaattiyhdistettä.
Esimerkki 2
Radioimmuunisitoutumistesti 15 300 yul esimerkin 1 mukaisesti valmistetulla kon- jugaatilla immunisoidun kaniinin antiseerumia, joka on laimennettu sopivalla tavalla, inkuboidaan yön yli liuoksen (100 yul) kanssa, joka sisältää prokollageenipepti-diä (tyyppi III) (1 ng proteiinia/100 yul, valmistettu 20 EP-julkaisun 4940 esimerkin 1 mukaisesti), joka on radio- 125 leimattu I:llä. Muodostuneet antigeeni - vasta-aine-kompleksit saostetaan lisäämällä immunisointiin käytetyn lajin immunoglobuliini G:n vastaista toisen lajin anti-seerumia. Sentrifugoinnin ja supernatantin dekantoinnin 25 jälkeen määritetään saostuneen radioaktiivisuuden määrä ;: V-skintillaatiospektrometrillä.
Esimerkki 3 Radioimmuunitesti 0,2 ml analysoitavaa näytettä tai prokollageeni-30 peptidi (tyyppi III) -standardia inkuboidaan lämpötilas sa 4°C yön yli antiseerumin (0,1 ml:ssa puskuria) kanssa, jonka määrä on rajoitettu leimatun antigeenin määrän suh- 1 25 teen. KGn on lisätty 0,1 ml I-leimattua prokollageeni-peptidin (tyyppi III) liuosta (sisältää 1 ng proteiinia), 35 inkuboidaan 6-8 tuntia lämpötilassa 4°C. Muodostunut 6 95579 antigeeni - vasta-aine-kompleksi saostetaan immunisointiin käytetyn lajin IgG:n vastaisella antiseerumilla. Sentrifugoinnin ja supernatantin dekantoinnin jälkeen määritetään saostunut radioaktiivisuus Ύ'-skintillaatio-5 spektrometrillä.
Vertaamalla kalibrointikäyrään, jonka muodostamiseen on käytetty standardeja, joissa prokollageenipepti-din (tyyppi III) pitoisuus vaihtelee, voidaan määrittää prokollageenipeptidin (tyyppi III) pitoisuus tuntematto-10 massa liuoksessa.
Esimerkki 4
Keksinnön mukaisten vasta-aineiden kanssa reagoivien antigeenien molekyylipainojakakutuman määrittäminen esimerkiksi naudan tai sian seerumista 15 Seeruminäytteelle (1 ml) tehdään geelisuodatuskro- matografinen erotus Sephacryl S 30 <β -pylväällä (1,6 x 130 cm), joka on tasapainotettu fosfaattipuskuroidussa fysiologisessa suolaliuoksessa (PBS), joka sisältää 0,04 % Tween 20:ä. Kustakin fraktiosta (2,8 ml) käytetään 20 0,2 ml esimerkin 3 mukaiseen radioimmuunitestiin.
Kuvio 1a esittää sian seerumin antigeenin eluoitu- miskäyrää ja kuvio 1b naudan seerumin eluoitumiskäyrää verrattuina EP-julkaisun 4940 mukaisesti määritetyn antigeenin käyrään. Piikit 1/1 a vastaavat intaktia prokolla-25 geeniä (tyyppi III) tai pN-kollageenia (tyyppi III) : (prokollageeni, josta puuttuu C-terminaalinen pää); pii kit 2/2a vastaavat intaktia aminoterminaalista prokolla-geenipeptidiä (tyyppi III); piikit 3/3a vastaavat Col l:ä samoin kuin aminoterminaalisen prokollageenipeptidin 30 (tyyppi III) pilkkoutumistuotteita, joilla on sama mole kyylipaino kuin Col l:llä.
il . iU l Bill I14-U4 · . -
Claims (8)
1. Menetelmä aminoterminaalisen prokollageenipepti-din (tyyppi III) määrittämiseksi immunologisesti vasta-ai- 5 neiden avulla, tunnettu siitä, että a) immunisoidaan eläimiä peptidillä, jolla on sekvenssi I-C-E-S-C-P-T-G-G-Q-N-Y-S-P 10 ja joka on sidottu immunogeeniseen proteiiniin, b) otetaan seerumista talteen vasta-aineet, jotka reagoivat intaktin aminoterminaalisen prokollageenipepti-din (tyyppi III) kanssa ja 15 c) määritetään aminoterminaalisen prokollageenipep- tidin (tyyppi III) ja/tai prokollageenin (tyyppi III) määrä muodostuneen antigeeni - vasta-aine-kompleksin avulla.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että peptidi on sidottu hemosya- 20 niiniin, albumiiniin tai polylysiiniin.
3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että immunisoidaan jyrsijöitä, vuohia, lampaita tai kaniineja.
4. Vasta-aine aminoterminaalisen prokollageenipep-I 25 tidin (tyyppi III) immunologista määrittämistä varten, tunnettu siitä, että se reagoi intaktin aminoterminaalisen prokollageenipeptidin (tyyppi III) ja/tai intaktin prokollageenin (tyyppi III) kanssa, mutta ei Col 1 kanssa eikä aminoterminaalisen prokollageenipeptidin 30 (tyyppi III) hajoamistuotteiden kanssa, joilla on sama • molekyylipaino kuin Col 1-fragmentilla, ja se on saatavis sa immunisoimalla eläimiä peptidillä, jolla on sekvenssi I-C-E-S-C-P-T-G-G-Q-N-Y-S-P ja joka on sidottu immunogeeniseen proteiiniin. 35 8 95579
5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen vasta-aine, tunnettu siitä, että peptidi on sidottu hemosya-niiniin, albumiiniin tai polylysiiniin.
6. Patenttivaatimuksen 4 tai 5 mukainen vasta-aine, 5 tunnettu siitä, että immunisoidaan jyrsijöitä, vuohia, lampaita tai kaniineja.
7. Yhdiste, tunnettu siitä, että se koostuu peptidistä, jolla on sekvenssi
10 I-C-E-S-C-P-T-G-G-Q-N-Y-S-P ja joka on sidottu immunogeeniseen proteiiniin, edullisesti hemosyaniiniin, albumiiniin tai polylysiiniin.
7 95579
8. Patenttivaatimuksen 7 mukaisen yhdisteen käyttö 15 antigeeninä. » t ^ 95579
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3714634 | 1987-05-02 | ||
| DE19873714634 DE3714634A1 (de) | 1987-05-02 | 1987-05-02 | Verfahren zur selektiven immunologischen bestimmung von intaktem prokollagen peptid (typ iii) und prokollagen (typ iii) in koerperfluessigkeiten und mittel zu dessen durchfuehrung |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI882018A0 FI882018A0 (fi) | 1988-04-29 |
| FI882018A FI882018A (fi) | 1988-11-03 |
| FI95579B FI95579B (fi) | 1995-11-15 |
| FI95579C true FI95579C (fi) | 1996-02-26 |
Family
ID=6326686
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI882018A FI95579C (fi) | 1987-05-02 | 1988-04-29 | Immunologinen menetelmä intaktin prokollageenipeptidin (tyyppi III) ja prokollageenin (tyyppi III) määrittämiseksi selektiivisesti elimistönesteistä ja väline sen toteuttamiseksi |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0298210B1 (fi) |
| JP (1) | JPH0780913B2 (fi) |
| AT (1) | ATE98377T1 (fi) |
| DE (2) | DE3714634A1 (fi) |
| DK (1) | DK168872B1 (fi) |
| ES (1) | ES2061545T3 (fi) |
| FI (1) | FI95579C (fi) |
| IE (1) | IE63385B1 (fi) |
| NO (1) | NO175639C (fi) |
| PT (1) | PT87375B (fi) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6010862A (en) * | 1987-11-06 | 2000-01-04 | Washington Research Foundation | Methods of detecting collagen type III degradation in vivo |
| DE4225038C2 (de) * | 1992-07-29 | 1995-11-30 | Boehringer Mannheim Gmbh | Herstellung und Verwendung von Antikörpern gegen Kollagen |
| DE59406512D1 (de) * | 1993-07-28 | 1998-08-27 | Boehringer Mannheim Gmbh | Immunoassay zum nachweis von kollagen typ i oder kollagenfragmenten davon |
| WO1996012193A1 (en) | 1994-10-17 | 1996-04-25 | Osteometer Bio Tech A/S | Estimation of the fragmentation pattern of collagen in body fluids and the diagnosis of disorders associated with the metabolism of collagen |
| GB9506050D0 (en) | 1995-03-24 | 1995-05-10 | Osteometer A S | Assaying collagen fragments in body fluids |
| US6107047A (en) * | 1996-03-21 | 2000-08-22 | Osteometer Biotech A/S | Assaying protein fragments in body fluids |
| GB9617616D0 (en) | 1996-08-22 | 1996-10-02 | Osteometer Biotech As | Assaying protein fragments in body fluids |
| JP3913787B2 (ja) | 1996-12-09 | 2007-05-09 | オステオメーター・ビオテク・エー／エス | Ｉ型コラーゲン断片のサンドウイッチ測定法 |
| US6117646A (en) * | 1997-09-22 | 2000-09-12 | Osteometer Biotech A/S | Assaying protein fragments in body fluids |
| AU4362399A (en) * | 1998-05-28 | 1999-12-13 | Bayer Aktiengesellschaft | Monoclonal antibody and assay for detecting piiinp |
| US6916903B2 (en) | 1998-06-19 | 2005-07-12 | Washington Research Foundation | Collagen type III synthetic peptides for collagen resorption assays |
| US6602980B1 (en) | 1998-06-19 | 2003-08-05 | Washington Research Foundation | Collagen type III synthetic peptides for collagen resorption assays |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2816841A1 (de) * | 1978-04-18 | 1979-10-31 | Max Planck Gesellschaft | Radioimmunologische bestimmung von prokollagen (typ iii) und prokollagen- peptid (typ iii) |
| DE3209149A1 (de) * | 1982-03-13 | 1983-10-06 | Hoechst Ag | Verfahren zur gemeinsamen immunologischen bestimmung von prokollagen-peptid (typ iii) und prokollagen-peptid col 1 (typ iii) und verfahren zur herstellung von anti-prokollagen-peptid col 1 (typ iii)-serum |
-
1987
- 1987-05-02 DE DE19873714634 patent/DE3714634A1/de not_active Withdrawn
-
1988
- 1988-04-27 AT AT88106747T patent/ATE98377T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-04-27 DE DE88106747T patent/DE3886109D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1988-04-27 EP EP88106747A patent/EP0298210B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-04-27 ES ES88106747T patent/ES2061545T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1988-04-28 JP JP63104474A patent/JPH0780913B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1988-04-28 DK DK232988A patent/DK168872B1/da not_active IP Right Cessation
- 1988-04-29 NO NO881904A patent/NO175639C/no not_active IP Right Cessation
- 1988-04-29 PT PT87375A patent/PT87375B/pt active IP Right Grant
- 1988-04-29 FI FI882018A patent/FI95579C/fi not_active IP Right Cessation
- 1988-04-29 IE IE128988A patent/IE63385B1/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0298210A3 (de) | 1991-05-15 |
| EP0298210B1 (de) | 1993-12-08 |
| FI882018A0 (fi) | 1988-04-29 |
| IE881289L (en) | 1988-11-02 |
| NO175639B (fi) | 1994-08-01 |
| DE3886109D1 (de) | 1994-01-20 |
| ES2061545T3 (es) | 1994-12-16 |
| NO175639C (no) | 1994-11-09 |
| FI95579B (fi) | 1995-11-15 |
| JPS63292061A (ja) | 1988-11-29 |
| PT87375A (pt) | 1989-05-31 |
| DK232988A (da) | 1988-11-03 |
| IE63385B1 (en) | 1995-04-19 |
| NO881904L (no) | 1988-11-03 |
| PT87375B (pt) | 1992-08-31 |
| NO881904D0 (no) | 1988-04-29 |
| DE3714634A1 (de) | 1988-11-17 |
| FI882018A (fi) | 1988-11-03 |
| ATE98377T1 (de) | 1993-12-15 |
| JPH0780913B2 (ja) | 1995-08-30 |
| DK168872B1 (da) | 1994-06-27 |
| DK232988D0 (da) | 1988-04-28 |
| EP0298210A2 (de) | 1989-01-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4312853A (en) | Radioimmunological determination of procollagen (type III) and procollagen peptide (type III) | |
| US4478744A (en) | Method of obtaining antibodies | |
| Motté et al. | Construction and clinical validation of a sensitive and specific assay for serum mature calcitonin using monoclonal anti-peptide antibodies | |
| US4264571A (en) | Radioimmunoassay of thymosin α1 | |
| FI95579C (fi) | Immunologinen menetelmä intaktin prokollageenipeptidin (tyyppi III) ja prokollageenin (tyyppi III) määrittämiseksi selektiivisesti elimistönesteistä ja väline sen toteuttamiseksi | |
| US4339427A (en) | Radioimmunoassay of thymosinα | |
| US4124700A (en) | Immunoassay for thymopoietin | |
| CA1338324C (en) | Monoclonal antibody for the selective immunological determination of intact procollagen peptide (type iii) and procollagen (type iii) in body fluids | |
| AU715797B2 (en) | Methods for determining the presence of brain protein S-100 | |
| AU707232B2 (en) | Antibody to aminoterminal propeptide of type 1 procollagen, and assay method using it | |
| US5679583A (en) | Monoclonal antibodies for the selective immunological determination of intact procollagen peptide (type III) and procollagen (type III) in body fluids | |
| US6008325A (en) | Antibody to aminoterminal propeptide of type 1 procollagen | |
| FI96433B (fi) | Monoklonaalisia vasta-aineita intaktin prokollageenipeptidin (tyyppi III) ja prokollageenin (tyyppi III) selektiivistä, immunologista määritystä varten kehonnesteistä | |
| US5514599A (en) | Antibodies against highly conserved amino acid sequences of insulin a process for the preparation of these antibodies and the use thereof in immunoassays | |
| Erhard et al. | Identification of antigenic differences of recombinant and pituitary bovine growth hormone using monoclonal antibodies | |
| CA1075600A (en) | Immunoassay for thymopoietin | |
| JP2001122899A (ja) | メダカ由来のビテロジェニンおよび抗体 | |
| Motte et al. | A two-site immunoradiometric assay for serum calcitonin using monoclonal anti-peptide antibodies | |
| Ikeyama et al. | Radioimmunoassay of serum thymic factor (FTS) | |
| JP2727477B2 (ja) | ＰＴＨｒＰのサンドイッチ法による免疫学的測定法 | |
| JPH10300749A (ja) | コラーゲン断片を認識する抗体 | |
| US20030158391A1 (en) | Anitbodies and method for producing same, the use thereof and immunisation cocktails, immunoassays-sets and peptides | |
| WIKLUND et al. | Further immunochemical studies of tissue polypeptide antigen (TPA) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| BB | Publication of examined application | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: HOECHST AKTIENGESELLSCHAFT Owner name: MAX-PLANCK-GESELLSCHAFT ZUR FOERDERUNG DER WISSENS |