DK168872B1 - Fremgangsmåde til fremstilling af antistoffer til immunologisk bestemmelse af aminoterminalt prokollagen peptid (type III) og/eller prokollagen (type III), antistoffer fremstillet ved fremgangsmåden, anvendelsen af antistofferne til immunologisk bestemmelse af aminoterminalt prokollagen peptid (type III) og/eller prokollagen (type III) og udgangsprodukt til brug ved fremgangsmåden - Google Patents
Fremgangsmåde til fremstilling af antistoffer til immunologisk bestemmelse af aminoterminalt prokollagen peptid (type III) og/eller prokollagen (type III), antistoffer fremstillet ved fremgangsmåden, anvendelsen af antistofferne til immunologisk bestemmelse af aminoterminalt prokollagen peptid (type III) og/eller prokollagen (type III) og udgangsprodukt til brug ved fremgangsmåden Download PDFInfo
- Publication number
- DK168872B1 DK168872B1 DK232988A DK232988A DK168872B1 DK 168872 B1 DK168872 B1 DK 168872B1 DK 232988 A DK232988 A DK 232988A DK 232988 A DK232988 A DK 232988A DK 168872 B1 DK168872 B1 DK 168872B1
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- type iii
- procollagen
- peptide
- antibodies
- amino
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 46
- 108010050808 Procollagen Proteins 0.000 title claims abstract description 43
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 23
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 title claims description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 9
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims abstract description 7
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 11
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 claims description 5
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 claims description 4
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 claims description 3
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims description 3
- 241000283707 Capra Species 0.000 claims description 3
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 claims description 3
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 claims description 3
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 claims description 3
- 241001494479 Pecora Species 0.000 claims 2
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 abstract description 8
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 abstract description 8
- 102000001187 Collagen Type III Human genes 0.000 abstract description 2
- 108010069502 Collagen Type III Proteins 0.000 abstract description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 11
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 11
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 11
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 5
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- KYRUKRFVOACELK-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-(4-hydroxyphenyl)propanoate Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1CCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O KYRUKRFVOACELK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 239000012506 Sephacryl® Substances 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N chloramine T Chemical compound [Na+].CC1=CC=C(S(=O)(=O)[N-]Cl)C=C1 VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 1
- 238000003271 compound fluorescence assay Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 230000003176 fibrotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000001641 gel filtration chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 1
- 238000010324 immunological assay Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- HQXKKQDTQDYERH-UHFFFAOYSA-N n'-cyclohexyl-n-(2-morpholin-4-ylethyl)methanediimine;methyl 4-methylbenzenesulfonate Chemical compound COS(=O)(=O)C1=CC=C(C)C=C1.C1CCCCC1N=C=NCCN1CCOCC1 HQXKKQDTQDYERH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010033916 pN-collagen type III Proteins 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 238000012207 quantitative assay Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/78—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin or cold insoluble globulin [CIG]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Lifting Devices For Agricultural Implements (AREA)
- Tires In General (AREA)
- Agricultural Machines (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
DK 168872 Bl i
Opfindelsen angår en fremgangsmåde til fremstilling af antistoffer til immunologisk bestemmelse åf aminoterminalt prokollagen peptid (type III) og/eller prokollagen (type III), antistoffer fremstillet ved fremgangsmåden, anvendelsen 5 af antistofferne til immunologisk bestemmelse af aminoterminalt prokollagen peptid (type III) og/eller prokollagen (type III) og udgangsprodukt til brug ved fremgangsmåden.
Prokollagen peptid (type III) er det aminoter-minale propeptid af kollagen (type III), der efter secer-10 nering af prokollagen (type III)-molekyler bliver fraspaltet extracellulært. Ved hjælp af en radioimmunologisk bestemmelsesmetode, som den der beskrives i europæisk patentskrift nr. 4940, kan koncentrationen af dette prokollagen peptid bestemmes i legemsvæsker. Viden om peptidets 15 serumskoncentration tillader udsagn om de fibrotiske sygdommes aktivitet, f.eks. i leveren (Rohde, H. et al.,
Eur. J. Clin. Invest. 9, 451-459 (1979)).
Præcis selektiv bestemmelse af prokollagen peptid (type III) i serum og andre legemsvæsker er dog ikke 20 mulig med de hidtil beskrevne metoder, da de polyklonale antistoffer, der anvendes i disse metoder, reagerer med divergerende lavere affinitet med forskellige i serum forekommmende antigener, der til dels er nedbrydningsprodukter af prokollagen peptid (type III) (Niemelå, 0. et 25 al., Clin. Chim. Acta 124, 39-44 (1982)). Dette fører til, at serumsfortyndingskurverne og fortyndingskurverne for andre legemsvæsker ikke er parallele med standardkurven, hvilken er fremstillet med rent prokollagen peptid (type III), og derfor skal antigenindholdet i flere fortyn-30 dinger bestemmes for hver ukendt prøve, for at måle antigenkoncentrationen via fortyndingskurvens 50 % intercept.
En yderligere ulempe ved disse fremgangsmåder er, at det på grund af en for. ringe krydsaktivitet mellem 35 antistoffet og rotte- eller museantigen ikke er muligt med en bestemmelse af antigenkoncentrationen i legemsvæsker 2 DK 168872 B1 fra disse arter.
Ved hjælp af den fremgangsmåde, der er beskrevet af Schuppan et al. /j. Hepatol. , 27-37 (1986)7, kan koncentrationen af antigener i rotteserum bestemmes.
5 Ganske vist har denne fremgangsmåde den samme ulempe, som også er beskrevet ved metoden for humane sera /Tliemelå et al., Clin. Chim. Acta 124, 39-44 (1982)7 med de ikke parallele inhibitionskurver ved forskellige legemsvæsker.
10 Ved hjælp af fremgangsmåden i europæisk patent ansøgning nr. 0089.008 er det muligt at løse dette tekniske problem, idet der anvendes antistoffer, der har sammenlignelig affinitet for intakt prokollagen peptid (type III) og nedbrydningsproduktet heraf Col 1. Ved 15 hjælp af denne fremgangsmåde kan intakt og nedbrudt prokollagen peptid (type III) bestemmes i fællesskab, hvilket dog fører til unøjagtighed ved det diagnostiske udsagn, da normalkollektiv og patientkollektiv, kan overlappe kraftigt.
20 Det har nu overraskende vist sig, at ved an vendelse af et peptid med en bestemt aminosyresekvens til immuniseringen kan der opnås antistoffer, ved hjælp af hvilke en specifik bestemmelse af det intakte prokollagen peptid (type III) er mulig. Ved hjælp af disse an-25 tistoffer kan indholdet af prokollagen peptid (type III) i legemsvæsker fra rotter eller mus overraskende også bestemmes, hvilket er gavnligt ved den dyreeksperimen-telle afprøvning af fibrosuppressive substanser.
Opfindelsen angår således en fremgangsmåde til 30 fremstilling af antistoffer til immunologisk bestemmelse af aminoterminalt prokollagen peptid (type III) og/eller prokollagen (type III), hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved, at a) dyr bliver immuniseret med et peptid med sekvensen 35 I-C—E-S-C-P-T-G-G-Q-N-Y-S-P- bundet til et immunogent protein, og 3 DK 168872 B1 b) der ud fra serumen udvindes antistoffer, der reagerer med intakt aminoterminalt prokollagen peptid (type III).
Opfindelsen angår også antistoffer, der er ejendommelige ved, at de kan fremstilles ved fremgangsmåden ifølge 5 opfindelsen.
Opfindelsen angår endvidere anvendelsen af disse antistoffer ved en immunologisk bestemmelse af aminoterminalt prokollagen peptid (type III) og/eller prokollagen (type III) .
10 Opfindelsen angår endelig også et udgangsprodukt til brug ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, hvilket udgangsprodukt er ejendommeligt ved, at det består af et peptid med sekvensen I-C-E-S-C-P-T-G-G-Q-N-Y-S-P 15 der er bundet til et immunogent protein.
I det følgende beskrives opfindelsen detaljeret, især i dens foretrukne udførelsesformer.
Til fremstillingen af antistoffet immuniseres dyr, fortrinsvis gnavere, såsom kaniner eller marsvin,
20 eller geder og får med peptidet med sekvensen I-C-E-S-C-P-T-G-G-Q-N-Y-S-P
koblet til et egnet immunogent protein i nærværelse af en komplet adjuvans. Især foretrukket anvendes der kaniner. Med gentagne sekundære injektioner, f.eks. med et 25 mellemrum på 4 til 8 uger, forstærkes immunsvaret. Resultatet af immuniseringen kontrolleres ved bestemmelse af koncentrationen af antistoffer ved den radioimrounologiske bindingsundersøgelse /R. Timpl og L. Risteli, Immunoche-mistry of the extracellular matrix, H. Furthmayr Ed., 30 Vol. 1, 199 (1982)7.
Egnede proteiner, til hvilke det nævnte peptid kan være bundet, er alle immunogene proteiner. Fortrinsvis anvendes hæmocyanin, albumin eller polylysin. Peptidet kan fremstilles efter af fagfolk kendte metoder, som 35 f.eks. beskrevet af G. Barany og A.B. Merrifield i The
Peptides, Vol. 2, side 3-254 (1980), Academic Press eller DK 168872 B1 4
O
af E. Brown, R.C. Sheppard og B.J. Williams, J. Chem. Soc. Perkin Transact. , 1161 (1983).
Antistofferne ifølge opfindelsen kan anvendes som serum eller oprenset i forskellige immunologiske frem-5 gangsmåder, inklusiv alle former for radioimmunanalyse, f.eks. sekventiel mætningsanalyse eller ligevægtsanalyse, mærkning med chloramin T eller Bolton-Hunter-reagens /Felber, Meth. Biochem. Anal. 22, 1 (1974), Shelley et al., Clin. Chem. 1_£, 146 (1975)^7 samt i andre kompetiti-10 ve bindingsanalyser, såsom fluorescensanalyse, enzymimmu-noanalyse, kemiluminescens- eller andre immunoanalyser. Antistofferne kan derfor anvendes til immunologiske fremgangsmåder til isolering og karakteriséring samt til kvantitativ bestemmelse af prokollagen peptid (type III) i 15 væv og legemsvæsker. Til kvantitativ bestemmelse gås frem efter af fagfolk i og for sig kendte metoder, idet en flydende prøve, der indeholder prokollagen peptid (type III), bringes til reaktion med antistofferne ifølge opfindelsen, og mængden af prokollagen peptid (type III) bestemmes via 20 det dannede antigen-antistof-kompleks. Derved spiller det ingen rolle, om prokollagen peptidet (type III) endnu er sammenbundet med aminoterminalen på prokollagen (type III) eller ikke. De hidtil ved den immunologiske bestemmelse forstyrrende nedbrydningsprodukter af prokollagen pepti-25 det (type III), især Col 1, medtages ikke af antistofferne ifølge opfindelsen.
I de følgende eksempler illustreres opfindelsen yderligere. Procentangivelser er baseret på vægten, såfremt andet ikke er anført.
30
Eksempel 1
Fremstilling af peptid-hæmocyanin konjugat-forbindelsen.
100 mg hæmocyanin (dialyseret mod 5x31 vand 35 og herefter lyophiliseret) opløses i 3 ml vand, og hertil sættes 24 mg af peptidet I-C-E-S-C-P-T-G-G-Q-N-Y-S-P.
5 DK 168872 B1 o
Under omrøring ved stuetemperatur sættes hertil i løbet af 2 timer portionsvis i alt 1 g N-cyclohexyl-N'-/£-(4-morpholinyl)ethyljcarbodiimid-methyl-p-toluensulfonat.
Efter omrøring natten over dialyseres reaktionsblandin-5 gen i 24 timer mod i alt 5 x 10 1 vand, og produktet isoleres derefter ved frysetørring. Der fås 137 mg af konju-gatforbindelsen.
Eksempel 2 10
Radioimmunbindingsanalyse.
300 ^ul antiserum fra kaniner, der er immuniseret med det ifølge eksempel 1 fremstillede konjugat, i en egnet fortynding inkuberes natten over med 100 ^ul af 15 en prokollagen peptid (type III)-opløsning (1 ng prote-in/100 ^ul, fremstillet som det er beskrevet i europæisk patentskrift nr. 4940, eksempel 1), der er radioaktivt 125 mærket med I. De dannede antigen-antistof-komplekser udfældes ved tilsætning af et antiserum fra en anden dyre-20 art, hvilket er rettet mod immunoglobulin G fra den til immuniseringen anvendte dyreart. Efter centrifugering og dekantering af den overstående væske bestemmes mængden af udfældet radioaktivitet i et 7*- scintillationsspektro-meter.
25
Eksempel 3 Radloimmunanalyse.
0,2 ml af den prøve, der skal analyseres, eller 30 af prokollagen peptid (type III)-standarden inkuberes med en hvad angår mængden af mærket antigen begrænsende mængde af antiserum (i 0,1 ml puffer) natten over ved 4°C.
125
Efter tilsætning af 0,1 ml I-mærket prokollagen peptid (type III) (indeholder 1 ng protein) inkuberes der i 35 6-8 timer ved 4°C, De dannede antigen-antistof-komplek ser udfældes ved hjælp af et mod IgG fra den til immuni- 6 DK 168872 B1
O
seringen anvendte dyreafct rettet antiserum. Efter fracen-trifugering og dekantering af den overstående væske bestemmes den udfældede radioaktivitet i et T-scinttila-tionsspektrometer.
5 Ved sammenligning med en standardkurve, til frem stillingen af hvilken standarder med forskellige koncentrationer af prokollagen peptid (type III) er anvendt, kan koncentrationen af prokollagen peptid (type III) derefter bestemmes i opløsningen med den ukendte koncentration.
10
Eksempel 4
Bestemmelse af molvægtfordelingen for med antistofferne 15 ifølge opfindelsen reagerende antigener i serum fra f.eks. okse og svin.
1 ml serum fraskilles ved gelfiltrationskromato-grafi via en "Sephacryl S 300"-søjle (1,6 x 130 cm), der er ækvilibreret i fosfatpuffret saltvand (PBS) 20 med 0,04 % Tween 20. Hver 0,2 ml af fraktionerne (hver 2,8 ml) anvendes til radioimmunanalysen ifølge eksempel 3.
Fig. 1a viser elueringsprofilen af antigenet fra svineserum, fig. 1b viser den af antigenet fra okseserum i 25 sammenligning med profilen af det ifølge europæisk patentskrift nr. 4940 bestemte antigen. Toppene 1/1a svarer til intakt prokollagen type III eller pN-kollagen type III (prokollagen, der mangler den C-terminale ende), toppene 2/2a svarer til intakt aminoterminal prokollagen 30 peptid type III, toppene 3/3a svarer til Col 1 samt til nedbrydningsprodukter af det aminoterminale prokollagen peptid type III med samme molvægt som Col 1.
35
Claims (11)
1. Fremgangsmåde til fremstilling af antistoffer til immunologisk bestemmelse af aminoterminalt prokollagen peptid (type III) og/eller prokollagen (type III), kendeteg-5 net ved, at a) dyr bliver immuniseret med et peptid med sekvensen I-C-E-S-C-P-T-G-G—Q—N-Y-S-P bundet til et immunogent protein, og b) der ud fra serumen udvindes antistoffer, der reagerer 10 med intakt aminoterminalt prokollagen peptid (type III).
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at peptidet er bundet til hæmocyanin, albumin eller polylysin.
3. Fremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, k e n -15 detegnet ved, at gnavere eller geder eller får immuniseres.
4. Fremgangsmåde ifølge krav 3, kendetegnet ved, at kaniner immuniseres.
5. Antistoffer, kendetegnet ved, at de kan 20 fremstilles ved fremgangsmåden ifølge krav 1-4.
6. Antistoffer ifølge krav 5, kendetegnet ved, at peptidet er bundet til hæmocyanin, albumin eller polylysin.
7. Antistoffer ifølge krav 5 eller 6, kende-25 tegnet ved, at gnavere eller geder eller får immuniseres .
8. Antistoffer ifølge krav 7, kendetegnet ved, at kaniner immuniseres.
9. Anvendelse af antistoffer ifølge krav 5-8 ved en 30 immunologisk bestemmelse af aminoterminalt prokollagen peptid (type III) og/eller prokollagen (type III).
10. Udgangsprodukt til brug ved fremgangsmåden ifølge krav 1-4, kendetegnet ved, at det består af et peptid med sekvensen
35 I-C-E-S-C-P-T-G-G-Q-N-Y-S-P, der er bundet til et immunogent protein.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3714634 | 1987-05-02 | ||
| DE19873714634 DE3714634A1 (de) | 1987-05-02 | 1987-05-02 | Verfahren zur selektiven immunologischen bestimmung von intaktem prokollagen peptid (typ iii) und prokollagen (typ iii) in koerperfluessigkeiten und mittel zu dessen durchfuehrung |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK232988D0 DK232988D0 (da) | 1988-04-28 |
| DK232988A DK232988A (da) | 1988-11-03 |
| DK168872B1 true DK168872B1 (da) | 1994-06-27 |
Family
ID=6326686
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK232988A DK168872B1 (da) | 1987-05-02 | 1988-04-28 | Fremgangsmåde til fremstilling af antistoffer til immunologisk bestemmelse af aminoterminalt prokollagen peptid (type III) og/eller prokollagen (type III), antistoffer fremstillet ved fremgangsmåden, anvendelsen af antistofferne til immunologisk bestemmelse af aminoterminalt prokollagen peptid (type III) og/eller prokollagen (type III) og udgangsprodukt til brug ved fremgangsmåden |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0298210B1 (da) |
| JP (1) | JPH0780913B2 (da) |
| AT (1) | ATE98377T1 (da) |
| DE (2) | DE3714634A1 (da) |
| DK (1) | DK168872B1 (da) |
| ES (1) | ES2061545T3 (da) |
| FI (1) | FI95579C (da) |
| IE (1) | IE63385B1 (da) |
| NO (1) | NO175639C (da) |
| PT (1) | PT87375B (da) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6010862A (en) * | 1987-11-06 | 2000-01-04 | Washington Research Foundation | Methods of detecting collagen type III degradation in vivo |
| DE4225038C2 (de) * | 1992-07-29 | 1995-11-30 | Boehringer Mannheim Gmbh | Herstellung und Verwendung von Antikörpern gegen Kollagen |
| DE59406512D1 (de) * | 1993-07-28 | 1998-08-27 | Boehringer Mannheim Gmbh | Immunoassay zum nachweis von kollagen typ i oder kollagenfragmenten davon |
| WO1996012193A1 (en) | 1994-10-17 | 1996-04-25 | Osteometer Bio Tech A/S | Estimation of the fragmentation pattern of collagen in body fluids and the diagnosis of disorders associated with the metabolism of collagen |
| GB9506050D0 (en) | 1995-03-24 | 1995-05-10 | Osteometer A S | Assaying collagen fragments in body fluids |
| US6107047A (en) * | 1996-03-21 | 2000-08-22 | Osteometer Biotech A/S | Assaying protein fragments in body fluids |
| GB9617616D0 (en) | 1996-08-22 | 1996-10-02 | Osteometer Biotech As | Assaying protein fragments in body fluids |
| JP3913787B2 (ja) | 1996-12-09 | 2007-05-09 | オステオメーター・ビオテク・エー／エス | Ｉ型コラーゲン断片のサンドウイッチ測定法 |
| US6117646A (en) * | 1997-09-22 | 2000-09-12 | Osteometer Biotech A/S | Assaying protein fragments in body fluids |
| AU4362399A (en) * | 1998-05-28 | 1999-12-13 | Bayer Aktiengesellschaft | Monoclonal antibody and assay for detecting piiinp |
| US6916903B2 (en) | 1998-06-19 | 2005-07-12 | Washington Research Foundation | Collagen type III synthetic peptides for collagen resorption assays |
| US6602980B1 (en) | 1998-06-19 | 2003-08-05 | Washington Research Foundation | Collagen type III synthetic peptides for collagen resorption assays |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2816841A1 (de) * | 1978-04-18 | 1979-10-31 | Max Planck Gesellschaft | Radioimmunologische bestimmung von prokollagen (typ iii) und prokollagen- peptid (typ iii) |
| DE3209149A1 (de) * | 1982-03-13 | 1983-10-06 | Hoechst Ag | Verfahren zur gemeinsamen immunologischen bestimmung von prokollagen-peptid (typ iii) und prokollagen-peptid col 1 (typ iii) und verfahren zur herstellung von anti-prokollagen-peptid col 1 (typ iii)-serum |
-
1987
- 1987-05-02 DE DE19873714634 patent/DE3714634A1/de not_active Withdrawn
-
1988
- 1988-04-27 AT AT88106747T patent/ATE98377T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-04-27 DE DE88106747T patent/DE3886109D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1988-04-27 EP EP88106747A patent/EP0298210B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-04-27 ES ES88106747T patent/ES2061545T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1988-04-28 JP JP63104474A patent/JPH0780913B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1988-04-28 DK DK232988A patent/DK168872B1/da not_active IP Right Cessation
- 1988-04-29 NO NO881904A patent/NO175639C/no not_active IP Right Cessation
- 1988-04-29 PT PT87375A patent/PT87375B/pt active IP Right Grant
- 1988-04-29 FI FI882018A patent/FI95579C/fi not_active IP Right Cessation
- 1988-04-29 IE IE128988A patent/IE63385B1/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0298210A3 (de) | 1991-05-15 |
| EP0298210B1 (de) | 1993-12-08 |
| FI882018A0 (fi) | 1988-04-29 |
| FI95579C (fi) | 1996-02-26 |
| IE881289L (en) | 1988-11-02 |
| NO175639B (da) | 1994-08-01 |
| DE3886109D1 (de) | 1994-01-20 |
| ES2061545T3 (es) | 1994-12-16 |
| NO175639C (no) | 1994-11-09 |
| FI95579B (fi) | 1995-11-15 |
| JPS63292061A (ja) | 1988-11-29 |
| PT87375A (pt) | 1989-05-31 |
| DK232988A (da) | 1988-11-03 |
| IE63385B1 (en) | 1995-04-19 |
| NO881904L (no) | 1988-11-03 |
| PT87375B (pt) | 1992-08-31 |
| NO881904D0 (no) | 1988-04-29 |
| DE3714634A1 (de) | 1988-11-17 |
| FI882018A (fi) | 1988-11-03 |
| ATE98377T1 (de) | 1993-12-15 |
| JPH0780913B2 (ja) | 1995-08-30 |
| DK232988D0 (da) | 1988-04-28 |
| EP0298210A2 (de) | 1989-01-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Clark et al. | Species correlations between cardiac isomyosins. A comparison of electrophoretic and immunological properties. | |
| Flanders et al. | Antibodies to peptide determinants in transforming growth factor. beta. and their applications | |
| EP0864865B1 (en) | Method for measuring glycated hemoglobin | |
| Nowack et al. | Specificity of the antibody response in inbred mice to bovine type I and type II collagen. | |
| US4264571A (en) | Radioimmunoassay of thymosin α1 | |
| JPH0588421B2 (da) | ||
| EP2105447A1 (en) | Avian-derived antibody capable of binding specifically to human hmgb1, immunological determination method for human hmgb1, and immunological determination reagent for human hmgb1 | |
| DK168872B1 (da) | Fremgangsmåde til fremstilling af antistoffer til immunologisk bestemmelse af aminoterminalt prokollagen peptid (type III) og/eller prokollagen (type III), antistoffer fremstillet ved fremgangsmåden, anvendelsen af antistofferne til immunologisk bestemmelse af aminoterminalt prokollagen peptid (type III) og/eller prokollagen (type III) og udgangsprodukt til brug ved fremgangsmåden | |
| Mercham et al. | [42] Antibodies to insoluble and solubilized elastin | |
| US4339427A (en) | Radioimmunoassay of thymosinα | |
| US4124700A (en) | Immunoassay for thymopoietin | |
| DK169571B1 (da) | Monoklont antistof, fremgangsmåde til dets fremstilling, hybridomcellelinie, der producerer antistoffet, fremgangsmåder til kvantitativ immunologisk bestemmelse af prokollagen-peptid (type III) med antistoffet, samt diagnostisk præparat indeholdende det monoklonale antistof | |
| Graindorge et al. | Radioimmunologic method for detection of antitubular basement membrane antibodies | |
| AU715797B2 (en) | Methods for determining the presence of brain protein S-100 | |
| CA2174559C (en) | Antibody to aminoterminal propeptide of type 1 procollagen, and assay method using it | |
| US5679583A (en) | Monoclonal antibodies for the selective immunological determination of intact procollagen peptide (type III) and procollagen (type III) in body fluids | |
| FI96433B (fi) | Monoklonaalisia vasta-aineita intaktin prokollageenipeptidin (tyyppi III) ja prokollageenin (tyyppi III) selektiivistä, immunologista määritystä varten kehonnesteistä | |
| Potter et al. | Identification of an antigenic determinant within the phylogenetically conserved triprolyl region of myelin basic protein. | |
| Erhard et al. | Identification of antigenic differences of recombinant and pituitary bovine growth hormone using monoclonal antibodies | |
| Marchalonis et al. | Lymphocyte surface immunoglobulins: Evolutionary origins and involvement in activation | |
| Ruoslahti et al. | Antigenic differences in nuclear proteins of normal liver and hepatoma | |
| Motte et al. | A two-site immunoradiometric assay for serum calcitonin using monoclonal anti-peptide antibodies | |
| Ikeyama et al. | Radioimmunoassay of serum thymic factor (FTS) | |
| US20030158391A1 (en) | Anitbodies and method for producing same, the use thereof and immunisation cocktails, immunoassays-sets and peptides | |
| Young et al. | Genetic control of the immune response to myoglobin. VII. Antibody responses to myoglobin variants reveal that gene restriction of the antibody responses to myoglobin antigenic sites is dependent on the chemical properties of the sites |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| B1 | Patent granted (law 1993) | ||
| PBP | Patent lapsed |