FI90429C - Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten adenosiinijohdannaisten valmistamiseksi ja välituotteita - Google Patents

Description

1 90429

Menetelma uusien terapeuttisesti kayttOkelpoisten adeno-siinijohdannaisten valmistamiseksi ja v&lituotteita

KeksintO koskee uusien kaavan I mukaisten adenosii-5 nijohdananisten ja niiden suolojen ja solvaattien valmis-tusta

RNH

//\

N ·-N

10 I li il \/\/‘ U)

N N

ΗίΛ i •—·

15 OH OH

jossa kaavassa R on syklopentyylirengas, joka on substi-tuoitu hydroksiryhmaiia ja mahdollisesti C1.6-alkyyliryh-mana. Nama yhdisteet ovat lipolyysin inhibiittoreita.

20 KeksintO koskee myOs adenosiinijohdannaisten val- mistuksessa kaytettavaa vaiituotetta, jonka kaava on R4nh 25 /"x : len -Λ \ /\ ί (i’)

NN 0 I

y\ / \! R3° I i 30 . .

OR2 ORj jossa X merkitsee samaa kuin edelia, R4 tarkoittaa samaa kuin edelia maaritelty R tai sen suojattua johdannaista, 35 jossa hydroksiryhma on suojattu hydrokarbyylikarbonyyli- 2 90429 ryhmaiia, ja R3, R2 ja R3 tarkoittavat toisistaan riippumat-ta vetya tai hydrokarbyylikarbonyylia, silia edellytyksel-ia, etta joko vahintaan yksi symboleista R3, R2 ja R3 on hydrokarbyylikarbonyyli tai R4 sisaitaa hydrokarbyylikarbo-5 nyyliryhman, tai sen suola.

Ryhman R sisaitaessa yhden tai useamman asymmetri-sen hiiliatomin, yhdisteryhman on katsottava kasittavan kaikki diastereoisomeerit ja niiden seokset.

Erityisia ryhman R esimerkkeja ovat 2-hydroksisyk-10 lopentyyli, 2-hydroksi-2-metyylisyklopentyyli ja 3-hydrok- sisyklopentyyli.

Kun ryhma R on substituoitu C^g-alkyyliryhmaiia, on tama edullisesti C^-alkyyli (esimerkiksi metyyli)-ryhma.

Sopivia fysiologisesti hyvaksyttavia kaavan (I) 15 mukaisten yhdisteiden suoloja ovat happoadditiosuolat, jotka on johdettu epaorgaanisista ja orgaanisista hapoista kuten sulfaatit, fosfaatit, bentsoaatit, kamforisulfonaa-tit, p-tolueenisulfonaatit, metaanisulfonaatit, sulfamaa-tit, askorbaatit, tartraatit, sitraatit, maleaatit, sali-20 sylaatit, fumaraatit, sukkinaatit, laktaatit, glutaraatit, glutakonaatit, asetaatit tai trikarballylaatit. Solvaatte-ja voivat olla esimerkiksi hydraatit.

Erityisen edullinen kaavan (I) mukaisten yhdisteiden luokka on se, jossa R on 2-hydroksisyklopentyyli- tai 25 2-hydroksi-2-metyylisyklopentyyliryhma.

Edullisia kaavan I mukaisia yhdisteita ovat: N-[(IS, trans)-2-hydroksisyklopentyyli]adenosiini; N-[(IR, trans)-2-hydroksisyklopentyyli]adenosiini; ja niiden seokset; ; 30 N-(cis-2-hydroksisyklopentyyli)adenosiini; N-(2B-hydroksi-2-metyylisyklopentyyli)adenosiini; ja niiden fysiologisesti hyvaksyttåvåt suolat ja solvaa-tit.

Erityisen edullisia kaavan I mukaisia yhdisteita : . 35 ovat: 3 90429 N-[(IS, trans)-2-hydroksisyklopentyyli]adenosiini ja N-[(IR, trans)-2-hydroksisyklopentyyli]adenosiini ja niiden seokset, viela erityisemmin N-[1S, trans)-2-5 hydroksisyklopentyyli]adenosiini ja sen fysiologisesti hyvSksyttSvat suolat ja solvaatit.

Eiainkokeet ovat osoittaneet, etta kaavan I mukaiset yhdisteet ovat lipolyysin inhibiittoreita, siten ne pienentSvåt plasman vapaarasvahappopitoisuuksia. Kaavan I 10 mukaisia yhdisteita voidaan siten kåyttaa hyperlipidemian hoidossa. Lisaksi seurauksena niiden antilipolyyttisesta vaikutuksesta on yhdisteilia kyky alentaa korottunutta veren glukoosia ja ketonikehotasoja ja siten niilia voi olla arvoa hoidettaessa diabeetesta. Koska antilipolyytti-15 silia aineilla on hypolipidemista ja hypofibrinogenemista aktiivlsuutta, voi yhdisteilia olla antiaterosteroottista aktiivisuutta.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden antilipolyyttinen aktiivisuus on esitetty niiden kykyna alentaa ei-esterbi-20 tyja rasvahappoja (NEFA) naiåssa pidetyilia rotilla annos-teltuna suun kautta.

Antilipolyyttisen vaikutuksensa lisaksi voivat kaavan I mukaiset yhdisteet riippumattomasti vaikuttaa sydamen toimintaan pienentamaiia sydamen nopeutta ja kiertoa. 25 Yhdisteita voidaan siten kayttaa hoidettaessa joukkoa sy-danverisuonisairauksia esimerkiksi sydamen rytmihairibi-ta, joka on erityisesti seurausta sydånlihaksen infarktis-ta ja kouristuksesta. Yhdisteet inhibioivat mybs reniinin vapautumista ja siten niita voidaan kayttaa hoidettaessa 30 liiallista verenpainetta ja sydanvikaa. Yhdisteet voivat olla kayttbkelpoisia mybs CNS-aineina (esimerkiksi hyp-noottisina, rauhoittavina, analgeettisina ja/tai kouris-tuksia estavina aineina.

Kaavan I mukaisista yhdisteista voidaan muodostaa 35 farmaseuttisia koostumuksia ja ne voidaan formuloida kon- 4 90429 ventionaalisesti kayttSen yhta tai useampaa fysikaalisesti hyvSksyttavaa kantajaa ja/tai lisaainetta.

Koostumukset voidaan formuloida suun kautta, pos-kesta, parenteraalisesti tai perasuolen kautta tapahtuvaa 5 annostelua vårten tai muotoihin, jotka sopivat annostelta-viksi inhalaatiolla tai sisaan puhaltamalla. Suun kautta tapahtuva annostelu on edullinen.

Yhdisteiden esitetty annos annosteltavaksi ihmisel-le (paino noin 70 kg) on 2 mg - 2 g, edullisesti 10 mg - 1 10 g aktiivista aineosaa yksikkOannosta kohti, joka voidaan annostella esimerkiksi 1-4 kertaa paivassa. Oletetaan, etta voi olla tarpeellista tehda rutiinimuutoksia annok-seen riippuen potilaan iasta ja tilasta. Annos riippuu myOs annostelutavasta.

15 Kaavan I mukaisia yhdisteita ja niiden suoloja ja solvaatteja voidaan valmistaa siten, etta (a) kaavan II mukainen yhdiste

L

20 //%

N .-N

I II II

• · · II

\\ / \ /

N N

/\/M

HO . I

25 [_[

OH OH

jossa L on poistuva ryhma, tai sen suojattu johdannainen, saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava 30 RNH2, jossa R merkitsee samaa kuin edelia, tai sen suolan tai suojatun johdannaisen kautta, emSksisissS olosuhteis-sa, jonka jålkeen mikSli tarpeellista poistetaan mahdol-liset suojaavat ryhmat, (b) uudelleen jarjesteliaSn kaavan III mukainen 35 yhdiste 5 90429

NH

«

R

\ / \

N ·-N

c I II II

° · . . (III) \\ / \ / u ; N N A o f /V / \ HO \ 1 I I •—·

10 OH OH

jossa R merkitsee samaa kuin edelia, tai sen suojattu johdannainen kuumentamalla enråksen låsnSollessa, jonka jaikeen mikali tarpeellista poistetaan mahdolliset suo-15 jaavat ryhmat, (c) hydrataan kaavan V mukainen yhdiste R'NH- I 2 20 /'_« (V)

I II H

/\ Λ /*

X N N

/νΛ ·.·. HO ( , 25 ·-·_

OH OH

jossa joko X on vetyatomi ja R' on syklopentenyylirengas, joka on substituoitu hydroksiryhmaiia, ja mahdol11sesti 30 Cj.g-alkyyliryhmaiia, tai X on klooriatomi ja R' on ryhma R kuten se on maaritelty edelia, tai sen suojattu johdannainen, jonka jaikeen mikali tarpeellista poistetaan mahdolliset suojaavat ryhmat, tai (d) poistetaan mahdolliset suojaavat ryhmat kaavan 35 I mukaisen yhdisteen suojatusta johdannaisesta, 6 90429 jonkin edellå esitetyn menetelmån jålkeen halut-taessa muutetaan saatu kaavan I mukainen yhdiste suolak-seen tai muutetaan kaavan I mukaisen yhdisteen suola kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi tai sen toiseksi suolaksi, ja 5 jonkin edellå esitetyn menetelmån jalken halut- taessa erotetaan rasemaatti, jotta saadaan haluttu enan-tiomeeri.

MenetelmassM a) poistuva ryhma L voi olla esimer-kiksi halogeeniatomi, kuten klooriatomi, tai trimetylisi-10 lyylioksiryhma. Mahdolliset suojaavat ryhmat voidaan pois-taa esimerkiksi jaijempana menetelman d) yhteydessa kuva-tulla tavalla. Kaavojen (II) ja RNH2 yhdisteet voivat olla suojattuja kuten esimerkiksi esitetaan seuraavana. Siten kaavan (II) yhdiste voi olla suojattu esimerkiksi isopro-15 pyylideeni-, tribentsoyyli- tai triasetyylijohdannaisena ja kaavan RNH2 yhdiste voi olla suojattu esimerkiksi N-bentsyy1i j ohdannai sena.

Reaktio voidaan hyvin suorittaa joko liuottimen låsnåollessa tai ilman sitå, liuotin voi olla alkohol! 20 (esimerkiksi alempi alkanoli kuten propan-2-oli tai t-bu-tanoli), eetteri (esimerkiksi tetrahydrofuraani tai diok-saani), substituoitu amidi (esimerkiksi dimetyyliformami-di), halogenoitu hiilivety (esimerkiksi kloroformi) tai asetonitriili edullisesti korotetussa lSmpdtilassa (esi-25 merkiksi liuottimen palautuslåmpdtilassa) ja siten etta låsna on sopiva happositoja esimerkiksi epåorgaaninen emås kuten natrium- tai kaliumkarbonaatti tai orgaaninen emås kuten trietyyliamiini, di-isopropyylietyyliamiini tai py-ridiini tai alkyleenioksidit kuten etyleenioksidi tai pro-30 pyleenioksidi.

Kaavojen (II) ja RNH2 yhdisteet ja niiden suojatut johdannaiset ovat joko tunnettuja yhdisteitå tai ne voidaan valmistaa konventionaalisilla menetelmillå esimerkiksi kuten jaijempåna esitetåån.

7 90429

MenetelmassM b) kuumentaminen suoritetaan emaksen, kuten esimerkiksi alkalimetallihydroksidin (esimerkiksi natriumhydroksidin) tal alkalimetallikarbonaatin (esimerkiksi natriumkarbonaatin) låsnåollessa sopivasti liuotti-5 messa kuten alkoholin vesiliuoksessa (esimerkiksi etano-lissa) jonka jaikeen tarvittaessa poistetaan mahdolliset suojaavat ryhmat. Reaktio voidaan hyvin suorittaa lampOti-lassa 50-100°C.

Kaavan (III) yhdisteet ja niiden suojatut johdan-10 naiset voidaan valmistaa siten, etta kaavan (IV) yhdiste: NH, //\ N (IV) 15 \\ Λ /’

N N

0 t

ho'V M

i i •_m

OH OH

20 tai sen suojattu johdannainen ja vahva emas kuten Grig-nard-reagenssi (esimerkiksi isopropyylimagnesiumkloridi), saatetaan reagoimaan keskenaan, jonka jalkeen suoritetaan reaktio alkyloivan aineen kanssa, joka pystyy tuottamaan 25 halutun ryhman R, kuten sopivan halohydriinin tai epoksi-din kanssa. Siten esimerkiksi kun R on 2-hydroksisyklopen-tyyliryhma, voi tama yhdiste olla syklopenteenioksidi.

Kaavan (IV) yhdistet ja sen suojatut johdannaiset ovat joko tunnettuja yhdisteita tai ne voidaan valmistaa 30 konventionaalisilla menetelmilia.

Kun menetelmassa c) X on klooriatomi, suoritetaan hydraus hapon sitojan ldsnaollessa, kuten natriumasetaatin lasnaollessa.

Hydraus yleisen menetelman (c) mukaisesti voidaan 35 suorittaa konventionaalisilla menetelmilia esimerkiksi 8 90 429 kåyttaen vetya jalometallikatalyytin (esim. palladium, Raney-nikkeli, platina tai rodium) lasnSollessa. Katalyyt-ti voi olla tuettu ja kantajana voi olla esimerkiksi hiili tai alumiinioksidi tai vaihtoehtoisesti se on homogeeninen 5 katalyytti, kuten tris(trifenylifosfiini)rodiumkloridi.

Hydraus suoritetaan tavallisesti liuottimessa, kuten alko-holissa (esim. metanoli tai etanoli), eetterissa (esim. tetrahydrofuraani tai dioksaani), esterisså (esim. etyy-liasetaatti) tai vedessa tai liuottimien seoksessa (esi-10 merkiksi kahden edelia mainitun liuottimen seoksessa) lam-pOtila-alueella -20...+100°C ja paineessa 1-10 atmosfaa-ria.

Kaavan (V) yhdisteita, joissa X on vetyatomi, ja niiden suojattujen johdannaisia voidaan valmistaa esimer-15 kiksi kaavan (II) yhdisteen tai sen suojatun johdannaisen reaktiolla kaavan R'NH2 yhdisteen kanssa, jossa R* on kuten maariteliaan edelia, tai sen suolan kanssa kSyttSen olosuhteita, joita esiteta&n menetelmSssS (a).

Kaavan (V) yhdisteita, joissa X on klooriatomi, 20 voidaan valmistaa esimerkiksi menetelmaila, joka on ana-loginen menetelman (a) kanssa esimerkiksi 2,6-diklooripu-riini-fl-D-ribosidin tai sen suojatun johdannaisen reaktiolla kaavan RNH2 mukaisen yhdisteen kanssa tai sen suolan tai suojatun johdannaisen kanssa kéyttaen olosuhteita, 25 joita esitetaan menetelmassa (a).

Edelia kuvatuissa menetelmissS voi olla tarpeellis-ta tai toivottavaa suojata mahdolliset herkat ryhmat ky-seessa olevassa yhdisteessa, jotta vaitetaan ei-toivotut sivureaktiot. Esimerkiksi voi olla tarpeellista suojata 30 hydroksyyliryhmat kaavan (II), (III), (IV) tai (V) yhdisteessa tai typpiatomi kaavan RNH2 yhdisteessa.

Esimerkkeja sopivista hydroksyylisuojaryhmista ovat asyyli (esimerkiksi hydrokarbyyliryhmat kuten asetyyli, bentsoyyli, pivaloyyli ja oktanoyyli); alkyyli (esimerkik-35 si metyyli, t-butyyli ja metaksometyyli); aralkyyli (esi- 9 90429 merkiksi bentsyyli, difenyylimetyyli, trifenyylimetyyli ja p-metoksifenyylidifenyylimetyyli); ja silyyli (esimerkiksi trialkyylisilyyli kuten esimerkiksi t-butyylidimetyylisi-lyyli)ryhmat. Lisaksi kaksi vierekkaista hydroksyyliryhmaa 5 voidaan suojata alkylideeni- (esimerkiksi isopropylideeni) ryhmaiia tai disiloksanyyli- (esimerkiksi 1,1,3,3-tetra-isopropyylidisiloks-l,3-diyyli) ryhmaiia. Erityisen kayt-tOkelpoisia kaavojen (II), (III), (IV) ja (V) yhdisteiden suojattuja johdannaisia ovat isopropylideeni-, triasetyy-10 li-, tribentsoyyli- ja tri-t-butyylidimetyylisilyylijoh-dannaiset.

Sopivia N-suojaryhmien esimerkkeja kaavan RNH2-yh-disteelle ovat aryylimetyyli (esimerkiksi bentsyyli); asyyli (esimerkiksi asetyyli); ja silyyli (esimerkiksi 15 trimetyylisilyyli) ryhmat.

Suojaryhman poistaminen menetelmån d) mukaisesti voidaan suorittaa kayttamaiia konventionaalisia menetelmia kuten esitetaan "Protective Groups in Organic Synthesis" :ssa. T.W. Greene (John Wiley and Sons, 1981).

20 Siten esimerkiksi asyyli OH-suojaryhmat voidaan poistaa kayttaen metanolia emaksen kuten kaliumkarbonaa-tin, t-butyyliamiinin tai ammoniakin lasnaollessa. Isopropyl ideeniryhma voidaan poistaa happokatalysoidulla hyd-rolyysilia (esimerkiksi kayttaen trifluorietikka- tai rik-25 kihappoa). t-butyylidimetyylisilyyliryhmat voidaan poistaa alkaalisella hydrolyysilia (kayttaen esimerkiksi natrium-hydroksidia etanolissa).

N-bentsyyliryhma voidaan poistaa hydrogenolyysilia katalyytin lasnaollessa (esimerkiksi palladium hiilelia) 30 esimerkiksi kuten esitetaan menetelmassa (C). N-asyyli- ryhma (esimerkiksi asetyyliryhma) tai trimetyylisilyyli-ryhma voidaan poistaa happamissa tai emaksisissa olosuh-teissa (esimerkiksi kayttaen laimeaa kloorivetyhappoa tai natriumhydroksidia).

35 Spesifisia kaavan (I) yhdisteen diastereoisomeereja voidaan saada konventionaalisilla menetelmilia esimerkiksi 10 90 429 synteesilia sopivasta asymmetrisesta lahtOaineesta kayttaen jotakin tåssa esitettya menetelmaa ja milloin sopivaa erottamalla kaavan (I) isomeerien seos konventionaalisllla menetelmllia esimerkiksi jakokiteyttamisellå tai kromato-5 grafisesti.

Edelia esitetyissa yleisissa menetelmissa voidaan kaavan (I) mukaiset yhdisteet saada suolan muodossa, sopi-vasti fysiologisesti hyvaksyttavMn suolan muodossa. Tu-lisi kuitenkin ymmartaa, etta myrkylliset suolat voivat 10 olla arvokkaita vaiituotteina valmistettaessa fysikaali- sesti hyvaksyttavia kaavan (I) yhdisteen suoloja. Halut-taessa voidaan tailaiset suolat muuttaa vastaaviksi va-paiksi emaksiksi kayttaen konventionaalisia menetelmia.

Kaavan (I) yhdisteiden fysikaalisesti hyvaksyttavia 15 suoloja voidaan valmistaa kaavan (I) yhdisteen reaktiolla sopivan hapon tai emaksen kanssa sopivan liuottimen lås-naollessa kuten asetonitriilin, asetonin, kloroformin, etyyliasetaatin tai alkoholin (esimerkiksi metanolin, eta-nolin tai isopropanolin) lasnaollessa.

20 Fysikaalisesti hyvaksyttavia suoloja voidaan val mistaa myiis muista suoloista mukaanlukien muut fysiologisesti hyvaksyttavat kaavan (I) yhdisteiden suolat kayttaen konventionaalisia menetelmia.

Keksintaa valaistaan edelleen seuraavilla vaiituot-25 teilla ja esimerkeilia. Lamptttilat ovat °C. Orgaaniset liuottimet kuivattiin, kun nain on esitetty, vedettdmaiia natriumsulfaatilla. Ohutkerroskromatografiaa (tic) kaytet-tiin kayttaen silikaa. Pylvaskromatografiassa kaytettiin silikaa (Merck 7734), ellei toisin ole esitetty ja silika, 30 johon reaktioseokset adsorboitiin, oli myOs Merck 7734 ellei toisin ole esitetty. Flash-pylvaskromatografia (FCC) suoritettiin kayttaen silikaa (Merck 9385). Florisil oli 60-100 meshia (saatu BDH:lta). Kaytetaan seuraavia lyhen-teita: Systeemi A-dikloorimetaani:etanoli:0,88 ammoniak-35 kiliuos; Systeemi B-etyyliasetaatti:metanoli; DEA-N,N-di- 11 90 429 isopropyylietyyliamiini; THF-tetrahydrofuraani. 1 H-Nmr- spektri saatiin 250 MHz :11a lalmeilla dlmetyylisulfoksidln lluoksllla.

vailtuote 1 5 3-Atsa-2-oksabisyklo[2.2.l]heptaani-3-karboksyyll- happo, (fenyylimetyyll) esteri

Atsodikarbonamidia (5,0 g) sekoitettiin liuoksen kanssa, jossa oli kaliumhydroksidia (7,0 g) vedessM (12 ml) 4°C:ssa. Sekoitettiin jaahauteessa 1 tunti ja seos 10 laimennettiin jaa/vesi-seoksella (30 ml) ja liuos suoda-tettiin. Suodos laimennettiin kylmaiia (2°C) etanolilla (100 ml) ja saatu kiintea aine suodatettiin pois, pestiin etanolilla, metanolilla ja eetterilia, jolloin saatiin kaliumatsodikarboksylaattia (6,9 g). Tama sekoitettiin 15 sitten 3-atsa-2-oksabisyklo[2,2,l]hept-5-eeni-3-karbok- syylihappo, (fenyylimetyyll) esteriin (0,82 g) kuivassa pyridiinissa (60 ml) ja lisattiin etikkahappoa (2,20 g) samalla sekoittaen huoneeniampdtilassa. Tunnin kuluttua lisattiin edelleen annos jaaetikkahappoa (2,20 g) ja reak-20 tioseosta sekoitettiin 15,5 tuntia. Seos haihdutettiin kuiviin alipaineessa. Taman jaikeen lisattiin edelleen jaaetikkahappoa sammuttarnaan jaijelia olevaa di-imidi-edeltajan keltaista varia. Jaannds ositettiin kayttaen 0,5 M sitruunahappoa (75 ml) ja etyyliasetaattia (75 ml) ja 25 erotettiin orgaaninen faasi ja konsentroitiin vakuumissa. jaannds puhdistettin FCCrlla eluolden etyliasetaatti:syk-loheksaanilla (1:2), jolloin saatiin otsikon yhdistetta (0,69 g) Oljyna.

Tic (sykloheksaani:etyyliasetaatti, 2:1) Rf 0,25.

30 vaiituote 2 N-(cis-3-Hydroksisyklopentyyli)karbamiinihappo, (fenyylimetyyll)esteri

Liuos, jossa oli 3-atsa-2-oksabisyklo[2,2.l]hep-taani-3-karboksyylihappoa, (fenyylimetyyll)esteri (0,5 g) 35 jaaetikassa (0,5 ml), lisattiin sekoitettuun suspensioon, 12 90 429 jossa oli jauhettua sinkkia (0,35 g) jaaetikan ja veden seoksessa (1:1; 4 ml) ja seosta sekoitettiin 60°C:ssa 7,5 tuntia. Lisattiin lisaa sinkkijauhetta (0,14 g) ja jaa-etikkaa (1 ml) ja sekoittamista jatkettiin edelleen 16,5 5 h. jaahdytettiin huoneeniampOtilaan, jonka jaikeen seos suodatettiin ja sinkin ylimaara pestiin 2 M kloorivety-hapolla (20 ml). Yhdistetyt suodokset ja pesuliuokset neutraloitiin kayttaen 8 % natriumkarbonaattia ja uutet-tiin etyyliasetaattiin (3 x 30 ml). Yhdistetyt uutokset 10 pestiin kyliastetylia suolaliuoksella (30 ml), kuivattiin ja konsentroitiin tyhjdssa. Puhdistettiin FCC:11a eluoiden etyyliasetaatilla:sykloheksaanilla (1:1), jolloin saatiin flljy (120 mg), joka muuttui kiinteaksi seosotettaessa ja joka uudelleenkiteytettiin sykloheksaanista, jolloin saa-15 tiin otsikon yhdistetta (70 mg), sp 62-63°C. vailtuote 3 trans-N-[3-(formyylioksi)syklopentyyll]karbamiini-happo, (fenyyllmetyyll)esteri

Dietyyliatsokarboksylaattia (1,78 g) lisattiin ti-20 poittain sekoitettuun liuokseen, jossa oli N-(cis-3-hyd-roksisyklopentyyli )-karbamiinlhappoa, ( fenyylimetyyli)-es-teri (1,19 g), trlfenyylifosfiinia (2,69 g) ja muurahais-happoa (0,47 g) THF:ssa (65 ml) typessa huoneeniamptttilas-sa. Saatua liuosta sekoitettiin 2 tuntia ja konsentroi-25 tiin, jolloin saatiin jaannds, jota sekoitettiin eetteris-sa (20 ml) noin -10°C:ssa typessa 1 tunti. Seos laimennet-tiin sykloheksaanilla (20 ml) ja kiintea aine suodatettiin ja pestiin eetteri:sykloheksaanilla (1:1; 3 x noin 20 ml). Yhdistetyt suodokset ja pesuliuokset konsentroitiin ja 30 saatava jaannOs puhdistettiin FCC:11a eluoiden etyyliase-taatti:sykloheksaanilla (2:3), jolloin saatiin otsikon yhdistetta (1,18 g). sp. 45-48°C.

13 9 0 429 vaiituote 4 trans-3-Amlnosyklopentanolihydrokloridi Liuosta, jossa oli trans N-[3-(formyylioksi)syklo-pentyyli]-karbamiinihappoa, (fenyylimetyyli)esteri (1,1 5 g) etanolissa (40 ml) sekoitettiin kaliumkarbonaatin (0,25 g) kanssa huoneeniampOtilassa yksi tunti. Taman jaikeen seos suodatettiin ja konsentroitiin tyhjassa. Saatu puo-likiintea aine liuotettiin etyyliasetaattiin (50 ml), suodatettiin ja suodos konsentroitiin tyhjOssa, jolloin jai 10 kiintea aine, joka hydrattiin etanolissa (50 ml) kayttaen 5 % palladiumia hiilelia (200 mg) katalyyttina yhden at-mosfaarin paineessa 20 tuntia. Katalyytti muutettiin sit-ten tuoreeksi 5 % palladiumhiileksi (200 mg) ja hydraamis-ta jatkettiin edelleen 20 tuntia. Sitten reaktioseos suo-15 datettiin ja suodos konsentroitiin tyhjOssa. jaannOs puh-distettiin FCCrlla eluoiden systeemilia A (40:10:1), jolloin saatiin 01jy (0,26 g), joka laimennettiin etanolilla (40ml), tehtiin happamaksi 3 N etanolisella vetykloridilla ja konsentroitiin tyhjOssa, jolloin saatiin otsikon tuo-20 tetta (0,34 g).

Tic (Systeemi A, 40:10:1) Rf 0,1. vaiituote 5 1,6-Dihydro-1-(trans-2-hydroksisyklopentyyli)-6-imino-9-[ [2,3,5-tris-0-(1, l-dimetyylietyyli)dimetyylisi-25 lyyli]-3-D-ribofuranosyyli]-9H-puriini

Isopropyylimagnesiumkloridia (2,0 M liuos THF:ssa; 1,23 ml), lisattiin jaahdytettyyn liuokseen, jossa oli 2 ’, 3', 5 '-tris-0- [ (1,1-dimetyylietyyli )dimetyylisilyyli] -adenosiinia kuivassa THF:ssa (20 ml). Sekoitettiin 15 mi-30 nuuttia, jonka jaikeen lisattiin liuos, jossa oli syklo-penteenioksidia (0,206 g) kuivassa THF:ssa (5 ml) ja liuosta kuumennettiin palautusjaahdyttimen alla 3 paivaa. Etyyliasetaattia (50 ml) ja vetta (50 ml) lisattiin ja faasit erotettiin. Orgaaninen faasi pestiin vedelia (50 35 ml), kuivattiin ja haihdutettiin alipaineessa. JaannOs 14 90 429 puhdistettiin pylvåskromatografisesti eluoiden Systeemilia A (800:40:1), jolloin saatiin otsikon yhdiste vaahtona (0,56 g).

Tic (Systeemi A, 800:40:1) Rf 0,54.

5 vaiituote 6 N-[(IS,trans)-2-Hydroksisyklopentyyli]-21,31-0-[1-metyylletyylldeeni]-adenosllni

Seosta, jossa oli 6-kloori-9-[2',3'-0-(l-metyyli-etyylideeni)-3-D-ribofuranosyyli]puriinia (25,0 g), (1S,-10 trans)-2-aminosyklopentanolihydrokloridia (12,64 g), DEA:-ta (29,67 g) ja kloroformia (250 ml), sekoitettiin ja kuu-mennettiin palautusjaahdyttaen typessa 20 tuntia. Saatu liuos jaahdytettiin noin 20°C:een ja pestiin 1 M sitruuna-hapon vesiliuoksella (2 x 150 ml). Yhdistetyt vesiliuokset 15 takaisinuutettiin kloroformilla (2 x 100 ml). Yhdistetyt orgaaniset liuokset konsentroitiin alipaineessa, jolloin saatiin vaahto. Isopropyyliasetaatti (750 ml) lisattiin vaahtoon ja saatu liuos konsentroitiin 500 ml:ksi alipaineessa, jolloin saatiin liete, joka jaahdytettiin 5°C:een. 20 Kiintea aine eristettiin suodattamalla, pestiin isopropyy-liasetaatilla (2 x 50 ml) ja kuivattiin tyhjOssa 40°C:ssa, jolloin saatiin otsikon yhdiste (24,8 g) sp 177-178°C. vaiituote 7 2 1,3 ', 5'-Trl-O-asetyyli-N-[(IS,trans)-2-hydroksi-25 syklopentyyli]adenosiini

Seosta, jossa oli 2',3',5'-tri-0-asetyyli-6-kloori-puriini-p-D-ribosidia (1,06 g), (lS-trans)-2-aminosyklo- pentanoli-hydrokloridia (0,41 g) ja natriumbikarbonaattia (0,50 g) isopropanolissa (12 ml), kuumennettiin palautus-30 jaahdyttimen alla nelja tuntia. Seos haihdutettiin ja jaannOs puhdistettiin pylvaskromatografisesti eluoiden Systeemilia B (50:1), jolloin saatiin otsikon yhdiste (0,71 g) lasina.

Tic. (Systeemi B, 50:1) Rf 0,21.

is 90429 vaiituote 8 N-[(IS,trans)-2-Hydroksisyklopentyyli]-N-(fenyyli-metyyll)adenoslinl

Seosta, jossa oil 6-klooripuriini-p-D-ribosidia 5 (688 mg) (IS,trans )-2-[(fenyylimetyyli)amino]syklopenta- nolia (516 mg) ja DEA (0,67 g) Isopropanolissa (20 ml), sekoitettiin ja kuumennettiin palautusjaahdyttimen alia typessa 7 paivaa. Taman jaikeen seos adsorboltiin silikaan ja puhdistettiln pylvaskromatografisesti eluolden Systee-10 milia A (75:8:1), jolloin saatiin vaahto (0,86 g), joka uudelleen puhdistettiln pylvaskromatografisesti eluolden etyliasetaatti:etanolilla (4:1), jolloin saatiin 61jy (700 mg). Tama liuotettiin etyyliasetaatilla (10 ml) ja saatu liuos kaadettiin sykloheksaaniin, jolloin saatiin otsikon 15 yhdiste (597 mg) kiinteana aineena.

Tic (Systeemi A, 75:8:1) Rf 0,21.

vaiituote 9 N-(cls-2-Hydrokslsyklopent-4-enyyli)adenoslinl

Seosta, jossa oli 6-klooripuriini-p-d-ribosidia 20 (2,01 g), cis-2-hydroksisyklopent-4-enyyliamiinlhydroklo- ridia (1,42 g), DEA:ta (3,19 g) ja isopropanolia (100 ml), kuumennettiin palautusjaahdyttimen alia 22 tuntia. Saatu liuos adsorboltiin silikaan ja puhdistettiin pylvaskromatografisesti eluolden Systeemi B:lia (5:1), jolloin saa-25 tiin otsikon yhdistetta (1,7 g) vaahtona.

Tic (Systeemi A, 50:8:1) Rf 0,11.

Analyysi havaittu: C 49,5; H 5,6; N, 18,9;

Ci 5 Hi 9 N5 °5 ·0,9·H2 0 vaatii: C 49,3; H 5,7; N, 19,2 %.

vaiituote 10 30 2-Kloori-N-[(IS,trans)-2-hydroksisyklopentyyli]- adenosiini

Seosta, jossa on 2,6-dikloori-9-(2',3',5'-tri-0-bentsoyyli-p-D-ribofuranosyyli )-9H-puriinia (1,68 g), (IS,trans)-2-amlnosyklopentanolihydrokloridia (380 mg) ja 35 DEA:ta (1,4 ml) isopropanolissa (25 ml), sekoitettiin ja 16 90429 kuumennettiin palautusjaahdyttimen alla 5,5 tuntia types-sa. Seos konsentroitiin tyhjOssa ja jaannOksen liuos meta-nollssa (25 ml) kasiteltlln vesipitoisella ammoniakilla (2 ml). Saatua seosta sekoitettiin 16 tuntia ja konsen-5 troitiin sitten tyhjiissa. JaannOs puhdistettiin pylvas-kromatografisesti eluoiden Systeemilia A (75:8:1), jolloin saatiin vaahto (570 mg). Tama liuotettiin etyyliasetaat-tiin (10 ml) ja saatu liuos kaadettiin sykloheksaaniin (80 ml), jolloin saatiin kiintea aine. Kiintea aine ja kitey-10 tysneste yhdistettiin, konsentroitiin tyhjOssa ja jaannOs liuotettiin metanolipitoiseen ammoniakkiin (10 ml). Liuok-sen annettiin seisoa 4 paivaa ja sitten konsentroitiin tyhjOssa, jolloin saatiin 01jy (570 mg), joka puhdistettiin pylvaskromatografisesti eluoiden systeemilia A (50: 15 8:1), jolloin saatiin otsikon yhdiste (212 mg).

Tic. (Systeemi A, 50:8:1) Rf 0,16.

Analyysi havaittu: C, 45,9; H, 5,55; N, 16,7; C15H20CIN3O5-0,5C2H60*0,6H20 vaatii C, 45,85; H, 5,7; N, 16,7%.

20 Esimerkki 1 N-[(IS,trans)-2-Hydrokslsyklopentyyli]adenoslini Seosta, jossa oli 6-klooripuriini-p-D-ribosidia (2,87 g) ja (IS,trans)-2-aminosyklopentanolihydrokloridia (1,38 g), kuumennettiin palautusjaahdyttimen alla isopro-25 panolissa (100 ml), joka sisalsi DEA:ta (3,87 g) 18 tuntia. Silikageeli (20 g) lisattiin jaahdytettyyn liuokseen ja suspensio haihdutettiin alipaineessa. Kuivattu kantaja lisattiin pylvaaseen, jossa oli silikageelia (250 g) ja eluoitiin Systeemilia B (9:1). Sopivat eluaatit otettiin 30 talteen ja haihdutettiin alipaineessa, jolloin saatiin valkoista jauhetta. Kiteyttamaiia etyyliasetaatista ja metanolista saatiin otsikon yhdiste valkoisena jauheena (2,3 g), sp 163-164°C.

Tic (Systeemi B, 9:1) Rf 0,23.

17 90429

Esimerkki 2 N-[(IR,trans)-2-Hydrokslsyklopentyyli]adenosiinl Seosta, jossa oli 6-klooripuriini-p-D-ribosidia (2,87 g) ja (IR,trans)-2-aminosyklopentanolihydrokloridia 5 (1,38 g), kuumennettiin palautusjaahdyttimen alla isopro- panolissa (100 ml), joka sisfllsi DEA:ta (3,87 g) 18 tun-tia. jaahdytettaessa saostui saostuma, joka suodatettiin, pestiin propan-2-olilla (50 ml) ja kuivattiin tyhjdssa, jolloin saatiin otsikon yhdiste (2,35 g), sp 235-236°C.

10 Tic (Systeemi B, 9:1) Rf 0,23.

Esimerkki 3 N-(2-8-Hydroksl-2-metyylisyklopentyyli)adenosiini Seosta, jossa oli 6-klooripuriini-p-D-ribosidia (1,0 g) ja trans-2-amlno-l-metyylisyklopentanolihydroklo-15 ridia (0,55 g) isopropanolissa (50 ml), jossa oli DEA:ta (1,35 g), kuumennettiin palautusjaahdyttimen alla 24 tun-tia. Suspensio adsorboitiin silikaan ja puhdistettin pyl-vaskromatografisesti eluoiden Systeemilia B (9:1), jolloin saatiin jauhe. Kiteyttamaiia isopropyyliasetaatista ja 20 metanolista saatiin otsikon yhdiste (0,75 g).

Tic (Systeemi B, 9:1) Rf 0,35.

Analyysi havaittu: C, 50,9; H, 5,6; N, 18,0; C16H23N505 ·0,105Η1002 * 0,75 H20 vaatii: C, 51,1; H, 6,5; N, 18,05 %.

25 Esimerkki 4 N-(cls-3-Hydroksisyklopentyyli)adenosiini 6-Klooripuriini-8-D-ribosidia (1,0 g), cis-3-amlno-syklopentanolia (0,48 g) ja DEA:ta (0,96 g) sekoitettiin palautusjaahdyttimen alla isopropanolissa (50 ml) 30 tun-30 tia. Liuoksen annettiin jaahtya huoneeniampOtilaan ja kon-sentroitiin tyhjdssa. Puhdistamalla FCC:lla eluoiden Systeemilia A (50:10:1) saatiin otsikon yhdiste (0,9 g) vaah-tona.

Tic /Systeemi A, 50:10:1) Rf 0,4.

35 Analyysi havaittu: C, 50,3; H, 6,3; N, 18,9; is 90429 cx 5 H2 i N5 °5 *0' 5H2 °*° /2C4 He °2 vaatii: C, 50,1; H, 6,2; N, 19,0 %.

Esimerkki 5 N-(cls-2-Hydrokslsyklopentyyll)adenosllnl 5 Seosta, jossa oli N-(cls-2-hydroksisyklopent-4- enyyli)adenosiinia (1,6 g), 5 % palladiumia hiilelia (0,3 g) ja etanolia (80 ml) sekoitettiin vedyn lasnaollessa 20 tuntia. Saatu liuos suodatettiin ja suodos haihdutettiin. jaannds liuotettiin metanoliin (50 ml) ja liuos haihdutet-10 tiin, jolloin saatiin otsikon yhdistetta (1,2 g) vaahtona. Tic (Systeemi A, 30:8:1) Rf 0,30.

Analyysi havaittu: C, 49,6; H, 6,15; N, 19,1; C15H21N5°5 *0,3CH40*0, 5H20 vaatii: C, 49,6; H, 6,3; N, 18,9 %.

15 Esimerkki 6 N-(trans-2-Hydroksisyklopentyyli)adenosiini Seosta, jossa oli 6-klooripuriini-p-D-ribosidia (1,15 g), trans-2-aminosyklopentanolia (0,41 g), trietyy-liamiinia (0,41 g) ja isopropanolia (50 ml), kuumennettiin 20 palautusjaahdyttimen alla 20 tuntia. Edelleen lisattiin trans-2-aminosyklopentanolia (0,08 g) ja trietyyliamiinia (0,08 g) ja kuumentamista jatkettiin 4 tuntia. Saatu seos adsorboitiin silikaan ja puhdistettiin pylvaskromatogra-fialla eluoiden Systeemilia A (30:8:1), jolloin saatiin 25 kiintea aine (0,48 g). Tama puhdistettiin uudelleen pyl-vaskromatografisesti eluoiden Systeemilia B (12:1), jolloin saatiin vaahto, joka jauhettiin eetterin kanssa, jolloin saatiin otsikon yhdiste (0,31 g) diastereoisomeerien 2:1 seoksena.

30 Tic (Systeemi B, 12:1) Rf 0,35.

Analyysi havaittu: C, 50,8; H, 6,25; N, 18,8;

Ci ^ H2 i Ng Og ·0, 17 (C2 Hg >2 0*0/ 5H2 ° vaatii: C, 50, 5; H, 6,4; N, 18,8 %.

19 90 429

Esimerkki 7 N-(trans-3-Hydroksisyklopentyyli)adenoslini 6-Klooripuriini-p-D-ribosidia (0,63 g), trans-3-aminosyklopentanolihydrokloridia (0,3 g) ja DEA:ta (0,63 5 g) sekoitettiin palautusja&hdytt&en isoprapanolissa (30 ml) 3,5 paivaa. Reaktloseoksen annettiin jaahtya huoneen-lampOtilassa, jolloin muodostul saostuma, joka liuotettiln lisaamaiia metanolla. Lluos adsorboitiln sllikaan (Merck 9385) ja puhdistettlin FCCilla eluoiden Systeemilia B 10 (3:1), jolloin saatiin jauhe. Lopullisesti puhdistamalla pylvaskromatografialla silikalla (Merck 7734) eluoiden Systeemilia B (3:1) saatiin otsikon yhdiste (44 mg), sp 208-210°C, 52:48 diastereomeerien seoksena.

1 H-N.m.r. δ 1,4-2,2(6H,m) 3,5-3,78(2H,m), 3,99(lH,m), 4,1-15 4,2(lH,m), 4,2-4,3(lH,m), 4,55(lH,d), 4,62(lH,m), 4,8(1H, brm), 5,22(lH,d), 5,42-5,52(sH,m), 5,9(lH,d), 7,82(1H, brd), 8,2(lH,brs), 8,83(lH,s).

Esimerkki 8 N- [ (IS, trans )-2-Hydrokslsyklopentyyli]adenosiini-20 fumaarlhapposuola (1:1)

Fumaarihappoa (1,2 g) lisattiin palautusjaahdytet-tavaan liuokseen, jossa oli N-[(IS,trans)-2-hydroksisyk-lopentyylijadenosiinia (7,03 g) isopropanolissa (105 ml). Saatu kuuma liuos suodatettiin ja suodos jaahdytettiin ja 25 annettiin kiteytya. Kahden tunnin kuluttua 20°C:ssa kitei-nen tuote eristettiin suodattamalla, pestiin isopropano-lilla (10 ml) ja kuivattiin tyhjdssa 50°C:ssa 20 tuntia, jolloin saatiin otsikon yhdiste (6,5 g), sp 179-180°C. Taman suolan kromatografinen kayttaytyminen oli samanlais-30 ta kuin vapaan emaksen autenttisen naytteen kayttaytyminen.

20 90 429

Esimerkki 9 N-[ (IS, trans)-2-Hydroksisyklopentyyli]adenosiini (IS)-(+ )-10-kamforisulfonlhapposuola

Seosta, jossa oli N-[(IS, trans)-2-hydroksisyklopen-5 tyyli]adenosiinia (3,51 g) ja (lS)-(+)-10-kamforisulfoni-happoa (2,44 g) isopropanolissa (35 ml) kuumennettiin pa-lautusjaahdyttimen alia typessa kunnes saatiin klrkas liu-os. Lluos laimennettiin isopropyyliasetaatilla (50 ml) ja seos jaahdyte11 iin noin 25eC:een samalla sekoittaen. Saatu 10 kiteinen kiintea aine eristettiin suodattamalla, pestiin isopropanoli:isopropyyliasetaatilla (1:2; 2 x 15 ml) ja kuivattiin tyhjOssa 40°C:ssa, jolloin saatiin otsikon yh-diste (5,31 g) sp 150-152®C.

Analyysi havaittu: C,51,25; H, 6,7; N, 11,9; S, 5,3 15 C25H31N509 S vaatii: C,51,4; H, 6,4; N, 12,0; S, 5,5 %.

Esimerkki 10 N-[(IS,trans)-2-Hydroksisyklopentyyli]adenosiini

Seosta, jossa oli 6-kloori-9-[2',3'-0-(l-metyyli-etyylideeni)-p-D-ribofuranosyyli]puriinia (8,0 g), (1S,-20 trans)-2-aminosyklopentanollhydrokloridia (4,0 g), DEA:ta (12,7 ml), kloroformia (70 ml) ja isopropanolia (10 ml), sekoitettiin ja kuumennettiin palautusjaahdyttimen alia typessa 18 tuntia. Taman jaikeen liuos jaahdytettiin 25®-C:een ja pestiin 1M sitruunahapolla (2 x 80 ml); vesiker-25 rokset uutettiin takaisin perakkain kloroformilla (2 x 40 ml). Yhdistetyt kloroformiliuokset uutettiin 1M rikkiha-polla (50 ml + 25 ml) ja happouutokset pestiin perakkain kloroformilla (40 ml). Yhdistetyt rikkihappoliuokset sai-lytettiin 20°C:ssa 2 tuntia. Kaliumkarbonaattia (50 g) 30 lisattiin happoliuokseen ja seosta uutettiin isopropano-lilla (2 x 50 ml). Isopropanoliuutokset yhdistettiin ja konsentroitiin alipaineessa, jolloin saatiin Oljy, joka laimennettiin metanolilla (50 ml) ja konsentroitiin uudel-leen. jaannOs liuotettiin metanoliin (20 ml) palautus-35 jaahdyttaen ja lisattiin etyyliasetaattia (80 ml). Liuos 2ΐ 9Π 429 suodatettiin ja si ta sekoitettiin, jotta saatiin aikaan kiteytyminen. Neljan tunnin kuluttua kiteinen klintea aine eristettlin suodattamalla, pestiin etyyliasetaatilla (20 ml) ja kuivattiin tyhjdssa 40°C:ssa, jolloin saatiin ot-5 sikon yhdiste (4,81 g), sp 162-163°C. Sen kromatografinen kayttaytyminen vastasi autenttista ainetta.

Eslmerkkl 11 N-[(lS-trans)-2-Hydroksisyklopentyyli]adenosllni Seosta, jossa oli 6-klooripuriini-p-D-ribosidia 10 (30,0 g), (IS,trans)-2-aminosyklopentanolihydrokloridia (15,0 g) ja vedetdnta natriumkarbonaattia (30,0 g) t-bu-tanolissa (300 ml), sekoitettiin palautusjaahdyttaen ty-pessa 21 tuntia. Suspension annettiin jaahtya 72“C:een, suodatettiin ja talteenotettu kiintea aine pestiin kuumal-15 la (75eC) t-butanolilla (2 x 60 ml). Yhdistetty suodos ja pesuliuokset konsentroitiin tyhjOssa, jolloin saatiin vaahto. Tama liuotettiin metanoliin (55 ml) palautusjaahdyttaen ja sitten lisattiin etyyliasetaattia (550 ml) ti-poittain 0,5 tunnin aikana pitaen palautusjaahdyttaminen 20 ylia (noin 65"C). Saatua seosta sekoitettiin typessa 1,5 tuntia ja jaahdytettiin 25eC:een, taman jaikeen sita pi-dettiin 20-25°C:ssa 1,5 tuntia. Kiintea aine suodatettiin, pestiin Systeemilia B (10:1; 2 x 60 ml) ja kuivattiin tyh-jttssa 50°C:ssa, jolloin saatiin otsikon yhdiste (31,50 g). 25 Taman kromatografinen kayttaytyminen muistutti autenttisen materiaalin kayttaytymista.

Analyysi havaittu: C, 51,2; H, 6,0; N, 19,8; ci5H2iN5°5 vaatii: C, 51,3; H, 6,0; N, 19,9 %.

Esimerkki 12 30 N-(trans-2-hydroksisyklopentyyli)adenosllni

Liuosta, jossa oli 1,6-dihydro-l-(trans-2-hydrok-sisyklopentyyli)-6-imino-9-[[2,3,5-tris-0-[1,1-dimetyyli-etyyli)dimetyyllsilyyli]-β-D-ribofuranosyyli]-9H-puriinia (0,3 g) etanolissa (20 ml), jossa oli 2N natriumhydroksi-35 dia (5 ml), kuumennettiin palautusjaahdyttaen alle 5 tun- 22 90 429 tia. Saatu suspensio adsorboitiin silikaan ja puhdistet-tiin pylvaskromatografisesti eluoiden Systeemilia B (9:1), jolloin saatiin jauhe. Tama kiteytettiin etyyliasetaatti-metanolista, jolloin saatiin otsikon yhdiste (0,11 g) 5 1R:1S diastereoisomeerien seoksena 65:35.

Tic (Systeemi B, 9:1) Rf 0,26.

Analysi havaittu: C, 49,5; H, 6,1; N, 19,6; C15H2XN5°5°'6H20 vaatii: C, 49,7; H, 6,2; N, 19,3 %.

Hplc: Pylvas: Spherisorb -C8 5 pm (25 cm x 4,6 mm) 10 Liikkuva faasi: 10 % asetonitriili trietyyliammonium- fosfaattipuskurissa (pH 3,5)

Virtausnopeus: 1 ml/min

Viipymaajat: (IR, trans) 10,2 min (65 %) (IS, trans) 8,4 min (35 %).

15 Esimerkki 13 (IS, trans)-N-(2-Hydroksisyklopentyyli)adenosiini Liuosta, jossa oli (IS,trans)-2-kloori-N-(2-hydrok-sisyklopentyyli)adenosiinia (102 mg) ja natriumasetaattia (108 mg) vedessa (3,2 ml) ja etanolissa (8,2 ml), hydrat-20 tiin kayttaen 10 % palladiumia hiilelia (50 % vetta, 100 mg) 21 tuntia. Seos suodatettiin ja suodos konsentroitiin, jolloin saatiin kiintea aine, joka liuotettiin kuumaan metanoliin (4 ml). Saatu liuos suodatettiin ja lisattiin etyyliasetaattia (2 ml) kuumaan liuokseen saostamaan ot-25 sikon yhdiste (64 mg).

Tic (Systeemi B, 9:1) Rf 0,24.

Hplc: Pylvas: Spherisorb -C8 5 pm (25 cm x 4,6 mm)

Liikkuva faasi: 25 % asetonitriili trietyyliammo-niumfosfaattipuskurissa (pH 3,5) 30 Virtausnopeus: 1 ml/min

Viipymaaika;: 9,6 min (joka oli sama kuin autentti-sella aineella).

23 90 429

Esimerkki 14 N-[(IS,trans)-2-Hydroksisyklopentyyll]adenosllni N-[(IS, trans)-2-Hydrokslsyklopentyyli]-21,3' ,-0-[l-metyylietyylideeni]adenosiini (24,0 g) liuotettiin seok-5 seen, jossa oil trifluorietikkahappoa (14,2 ml) ja vetta (120 ml) noin 20°C:ssa ja seosta sekoitettiin typessa 3,5 tuntia. Lisattiin vedetOnta kaliumkarbonaattia (28,0 g) ja liuos uutettiin dikloorimetaanilla (48 ml). Edelleen lisattiin kaliumkarbonaattia (68 g) ja vesiliuos uutettiin 10 isopropanolilla (2 x 48 ml). Yhdistetyt isopropanoliuutok-set pestiin kyliastetylia kaliumkarbonaatin vesiliuoksella (24 ml) ja kaksi vesifaasia uutettiin perakkain vieia isopropanolilla (48 ml). Yhdistetyt isopropanoliuutokset kon-sentroitiin alipaineessa dljyksi. Metanolia (120 ml) li-15 sattiin Oljyyn ja liuotin poistettiin alipaineessa ja sit-ten suurtyhjOssa saatiin puolikiintea aine. Tama liuotettiin kuumaan etyyliasetaattiin (120 ml) ja kuuma liuos kirkastettiin suodattamalla. Suodokseen lisattiin siemen ja sita sekoitettiin noin 20eC:ssa 5 tuntia. Kiintea tuote 20 eristettiin suodattamalla, pestiin Systeemilia B (8:1; 50 ml) ja kuivattiin tyhjdssa, jolloin saatiin otsikon yhdis-te (17,3 g), sp 159-162eC. Sen kromatografinen kayttayty-minen muistutti autenttisen aineen kayttåytymista.

Esimerkki 15 25 N-[(lS-trans)-2-Hydroksisyklopentyyli]adenosiini

Liuoksen, jossa oli 2',3',5-tri-0-asetyyli-N-[(IS,-trans)-2-hydroksyklopentyyli]adenosiinia (0,34 g) metano-lissa (7 ml), jossa oli t-butyyliamiinia (3 ml), annettiin seisoa 23°C:ssa 16 tuntia. Liuos haihdutettiin kuiviin ja 30 jaijelia oleva t-butyyliamiini poistettiin atseotrooppi-sesti metanolilla, jolloin jaijelle jai lasimainen aine. Tdman lasimaisen aineen nayte (0,19 g) kiteytettiin meta-nolin ja etyyliasetaatin seoksesta (1:20), jolloin saatiin otsikon yhdiste (0,15 g), sp 160-163°C. Sen kromatografi-35 nen kayttaytyminen oli samanlaista kuin autenttisen ai- 24 90 429 neen.

Eslmerkki 16 N-[(IS,trans)-2-Hydrokslsyklopentyyli]adenosiini Liuosta, jossa oli N-[(IS,trans-2-hydrokslsyklopen-5 tyyli]-N-(fenyylimetyyli)adenoslinia (0,2 g) etanolissa (50 ml), hydrattiin ilmakehan paineessa ja 45°C:ssa kayt-taen 10 % palladlumia hiilelia (0,1 g) katalyyttina. Kah-deksantolsta tunnin kuluttua seos suodatettiin ja suodos haihdutettiin. jaannOs klteytettiin seoksesta, jossa oli 10 etyyliasetaattla ja metanolla, jolloin saatiln otsikon yhdlste (0,075 g), sp 162-163eC. Sen kromatogra£inen kayt-taytymlnen oil samanlalsta kuln autenttisella alneella.

Claims (11)

25 9 Π 4 2 9

1. Menetelma terapeuttisesti kaytettavien, kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi 5 RNH //\ N ·.—_N I II ;i Λ / (I)

10 NN 0 * s\/ \\

110 N I I * - - * OH OH 15 jossa R on syklopentyylirengas, joka on substituoitu hyd-roksiryhmålla, ja mahdol lisest i C1.6-alkyyliryhTnalla, sekå naiden yhdisteiden suolojen ja solvaattien valmistamisek-si, tunnettu siita, etta (a) kaavan II mukainen yhdiste 20 l. /Λ N . N 1 ! Ϊ (..) w / \ / N N : 25 /\Λ| H0 > I I 5h Oh jossa L on poistuva ryhma, tai sen suojattu johdannainen, 30 saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava RNH2, jossa R merkitsee samaa kuin edella, tai sen suolan tai suojatun johdannaisen kautta, emaksisissa olosuhteis-sa, jonka jalkeen mikali tarpeellista poistetaan mahdol-liset suojaavat ryhmat, 35 (b) uudelleen jarjestellaan kaavan III mukainen 26 9 0 429 yhdiste NH II R \ / \ N ·_N

2. Patenttivaatimuksen 1 (b) mukainen menetelma, tunnettu siita, etta kaavan III mukainen yhdiste tai sen suojattu johdannainen valmistetaan antamalla kaavan IV mukaisen yhdisteen 10 Ί'Η, /\ . . N--- (IV) I it ii • · · \\ / \ / N N 15 /V Af I I OH OH tai sen suojatun johdannaisen reagoida vahvan emaksen 20 kanssa, jonka jalkeen seuraa reaktio alkyloivan aineen kanssa, joka pystyy tuomaan mukaan halutun ryhman R.

3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelma kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa R on 2-hydroksisyklopentyyli-, 2-hydroksi-2-metyylisyklopen- 25 tyyli- tai 3-hydroksisyklopentyyliryhma.

4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelma kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa R on 2-hyd-roksisyklopentyyli- tai 2-hydroksi-2-metyylisyklopentyy-liryhma.

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelma N- [(IS,trans)-2-hydroksisyklopentyyli]adenosiinin tai sen fysiologisesti hyvaksyttåvan suolan tai solvaatin valmistamiseksi.

5. II II \A/· (I1I) N N /\ Λ J ho ; I I •-·

10 OH OH jossa R merkitsee samaa kuin edellM, tai sen suojattu johdannainen kuumentamalla emåksen lasnaollessa, jonka jSlkeen mikSli tarpeellista poistetaan mahdolliset suo-jaavat ryhmSt, 15 (c) hydrataan kaavan V mukainen yhdiste R'NH0 I 2 tf \-N (V ) I R II 20 y/*W Λ /* X N N X/\ H0 7 t •-· OH OH 25 jossa joko X on vetyatomi ja R' on syklopentenyylirengas, joka on substituoitu hydroksiryhmSlla, ja mahdollisesti C1.6-alkyyliryhmalla, tai X on klooriatomi ja R' on ryhma R kuten se on maaritelty edella, tai sen suojattu johdannainen, jonka jalkeen mikali tarpeellista poistetaan mah- 30 dolliset suojaavat ryhmat, tai (d) poistetaan mahdolliset suojaavat ryhmåt kaavan I mukaisen yhdisteen suojatusta johdannaisesta, jonkin edella esitetyn menetelman jalkeen halut-taessa muutetaan saatu kaavan I mukainen yhdiste suolak- 35 seen tai muutetaan kaavan I mukaisen yhdisteen suola kaa- 2? 9 0 429 van I mukaiseksi yhdisteeksi tai sen toiseksi suolaksi, ja jonkin edella esitetyn menetelman jalken halut-taessa erotetaan rasemaatti, jotta saadaan haluttu enan-5 tiomeeri.

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelma N-35 [(IS,trans)-2-hydroksisyklopentyyli]adenosiinin tai 28 90 429 N-[(IR,trans)-2-hydroksisyklopentyyli]adenosiinin tai niiden seoksen, tai naiden yhdisteiden fysiologisesti hy-våksyttSvån suolan tai solvaatin valmistamiseksi.

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelma N- 5 (cis-2-hydroksisyklopentyyli)adenosiinin tai N-(2B-hyd- roksi-2-metyylisyklopentyyli)adenosiinin tai naiden yhdisteiden fysiologisesti hyvaksyttåvån suolan tai solvaatin valmistamiseksi.

8. Adenosiinijohdannaisten valmistuksessa kaytet- 10 tava valituote, jonka kaava on R4nh //\ N ._N 15 ' “ " · · · v\ / \ / (I) N N A/M R3°^ I •_ · 20 0R2 0R1 jossa X merkitsee samaa kuin edella, R4 tarkoittaa samaa kuin R patenttivaatimuksessa 1 tai sen suojattua johdan-naista, jossa hydroksiryhmå on suojattu hydrokarbyylikar-25 bonyyliryhmalla, ja R1f R2 ja R3 tarkoittavat toisistaan riippumatta vetya tai hydrokarbyylikarbonyylia, sillå edellytyksella, etta joko vMhintaan yksi symboleista R,, R2 ja Rj on hydrokarbyylikarbonyyli tai R4 sisaltSa hydro-karbyylikarbonyyliryhman, tai sen suola.

9. Patenttivaatimuksen 8 mukainen valituote, tunnettu siita, ettå R,, R2 ja R3 tarkoittavat hydrokarbyylikarbonyylia tai R4 sisaltaa hydrokarbyyli-karbonyyliryhman, jolloin hydrokarbyylikarbonyyliryhmat on toisistaan riippumatta valittu ryhmasta asetyyli, 35 bentsoyyli, pivaloyyli ja oktanoyyli, tai sen suola. 29 90 429

10. Patenttivaatimuksen 9 mukainen valituote, tunnettu siita, etta R,, R2 ja R3 tarkoittavat asetyylia ja R4 tarkoittaa samaa kuin R patenttivaatimuk-sessa 1, tai sen suola. ' 5 11. 2 ' ,3 · ,5'-tri-0-asetyyli-N-[(IS, trans)-2-hyd- roksi-syklopentyyli]adenosiini tai sen suola. 30 9 0 429