FI84486C

FI84486C - Foerfarande foer framstaellning av netilmicin och daer anvaenda utgaongsaemnen.

Info

Publication number: FI84486C
Application number: FI872621A
Authority: FI
Inventors: Chou-Hong Tann; Tiruvettipuram K Thiruvengadam; John Sze-Hung Chiu; Cesar Colon
Original assignee: Schering Corp
Priority date: 1985-10-15
Filing date: 1987-06-12
Publication date: 1991-12-10
Also published as: GR3002670T3; PL149511B1; SU1630614A3; ES2030395T3; FI872621A0; JPS63501079A; EP0242385A1; DK299587D0; EP0242385B1; PT83533B; FI84486B; EP0219093A3; KR870700632A; ZA867785B; AU597285B2; IE862706L; HU199498B; FI872621A; EP0219093A2; WO1987002365A2

Description

1 84486

Netilmisiinin valmistusmenetelmä ja siinä käytetyt lähtöaineet Förfarande för framställning av netilmicin och där använda utgängsämnen Tämän keksinnön kohteena on entistä parempi menetelmä, jolla sisomisiini muunnetaan netilmisiiniksi (1-N-etyyli-sisomi-siini).

Tarkemmin sanoen tämän keksinnön kohteena on menetelmä, jolla selektiivisesti salvattu sisomisiini muunnetaan 1-N-imiinijohdokseksi, sen jälkeen pelkistetään imiini 1-N-etyylijohdokseksi (netiImisiini) olosuhteissa, jotka johtavat halutun yhdisteen hyvin korkeisiin saantoihin ja häiritsevien sivutuotteiden hyvin alhaisiin saantoihin.

Netilmisiini, jolla on kaava NH0 OH 2 °H 0 J^°'"f

HN HO _ NH

/ ch3ch2hn -------—nh2 ch3 on yleisesti tunnettu aminoglykosidi-antibiootti. Tämä antibiootti ja sen valmistus on kuvattu US-patenteissa 4.002.742; [ 4.029.882; 4.230.847 ja 4.337.335. Netilmisiini valmistettiin alkuaan saattamalla sisomisiinisulfaatti reagoimaan asetalde-hydin kanssa pelkistävissä olosuhteissa. Koska sisomisiinillä on kuitenkin viisi aminoryhmää, tämän menetelmä johti epätavallisen korkeisiin ei-toivottujen tuotteiden prosenttimääriin, ja kokokonaissaanto oli vain noin 10 - 11 %. US-patentissa 4.320.847 kuvattu menetelmä merkitsi huomattavaa parannusta. Käyttämällä kuparikomplekseja voitiin salvata selektiivisesti sisomisiinin 3,2' ja 6’ aminoryhmät.

2 84486 Tämän välituotteen alkylointi asetaldehydin avulla pelkistimen läsnäollessa paransi oleellisesti saantoa (saanto laboratoriossa 60 %, 49 % kaupallisessa valmistuksessa).

Tämä parannettu menetelmä kuitenkin myös johtaa siihen, että kokonaissaantoa alentavia ei-toivottavia tuotteita muodostuu huomattava prosentuaalinen määrä. Suurin määrä ei-toivotuista sivutuotteista muodostuu 1,1-N-dimetyyli-sisomisiinistä. Olosuhteissa, joissa käytetään edellä mainitussa menetelmässä, so. saatetaan reagoimaan asetaldehydin kanssa pelkistimen läsnäollessa, reagoimaan tai ylimääräinen asetaldehydi näyttää reagoivan jo muodostuneen 1-N-ety1oidun sisomisiinin kanssa muodostaen 1,1-dietyloidun tuotteen.

Tämän keksinnön avulla parannetaan edellä mainittua menetelmää ja päästään pienempiin sivureaktioihin ja siten korkeimpiin saantoihin. Tämän keksinnön mukaisessa menetelmässä: a) selektiivisesti salvattu sisomisiinijohdos, jonka yleiskaava on

NHY

CH3/Vr:ir\ V

/m' H2N^ ' ^- NHY CH2-^hy ch3 ^ R1 jossa kukin X on organosi1yyliryhmä Si- R2 ^ R3 jolloin R1 - R3 ovat toisistaan riippumatta alempi alkyyli, fenyyli tai fenyylialempialkyyli; X’ on vety tai edellä määritelty organosilyyliryhmä; 3 84486 kukin Y on aminoryhmän saIpausryhmä, joka on asetyyli, formyyli, propionyyli tai aryyli ja Y* on vety tai edellä määritelty Y, saatetaan reagoimaan asetaldehydin kanssa inertissä aprootti-sessa orgaanisessa liuottimessa vedettömissä olosuhteissa, jolloin muodostuu vastaava 1-N-etylideenijohdos; b) reaktioseoksessa mahdollisesti läsnäoleva ylimääräinen reagoimaton asetaldehydi pelkistetään metal 1ihydridipelkisti-mellä, kuten natriumboorihydridi11ä, aminoboraanei11 a tai 1itiumalumiinihydridi11ä huoneen lämpötilassa korkeintaan 30 minuuttia; c) 1-N-etylideeniryhmä pelkistetään etyyliaminoryhmäksi vesipitoisissa olosuhteissa ympäröivässä lämpötilassa korkeintaan 2 tuntia metal 1ihydridipelkistimel1ä säätämällä reaktion pH arvoon 7 - 12; d) kaikki suojaryhmät poistetaan; ja e) netilmisiini eristetään vapaana emäksenä tai happoadditio-suolana.

Sisomisiinijohdos saatetaan reagoimaan aminoryhmän salpausyh-disteiden kanssa 3,2',6' ja valinnaisesti 3"-asemassa. Parhaina pidettyjä aminoryhmän salpaussubstituentteja ovat asetyyli-, formyyli-, propionyyli- ja aroyyliryhmät, jolloin erityisen hyvinä pidetään asetyylisubstituentteja. Menetelmät, joilla asetyyli-, propionyyli- ja aroyyliryhmät lisätään sisomisiiniin on esitetty US-patentissa 4.337.335, joka tässä yhteydessä mainitaan viitteenä. Formyylisubstituentti voidaan lisätä saattamalla sisomisiini reagoimaan epäsymmetrisen muurahashappoan-hydridin kanssa.

3,2',6'-tri-N-asetyyli-sisomisiinin (jäljempänä yhdiste 1) muodostuminen sisomisiinistä on myös esitetty US-paten-teissa 4.320.848 ja 4.136.254. Kummassakin patentin esimerkissä 16C (1) on esitetty kupari (II)asetaatti- 4 84486 hydraatin reaktio sisomisiinin kanssa ja senjälkeinen reaktio etikkahappoanhydridin ja tämän jälkeen reaktio rikkivetykaasun kanssa. Tuote otetaan talteen ioninvaihto-hartsista hydroksidisyklissä. Tässä yhteydessä on annettu viitteenä spesifinen esimerkki.

Toinen menetelmä, jolla voidaan valmistaa 3,2',6'-tri-N-asetyylisisomisiini sisomisiinistä, on seuraavanlainen. Kupariin)asetaattiin, joka on suspendoitu N,N-dimetyyli-formamidin ja veeen noin 6:2-seokseen, lisätään sisomisiini-konsentraattia. pH säädetään arvoon 8,5 - 10,5 lisäämällä trietyyliamiinia. Suspensio jäähdytetään noin 5°C:een ja 0 - 10°C:ssa lisätään vähitellen etikkahappoanhydridin liuosta Ν,Ν-dimetyyliformamidissa samalla tehokkaasti sekoittaen. Reaktioseoksen pH pidetään arvossa välillä 8,5 - 10,5 lisäämällä tarvittaessa lisää trietyyliamiinia. Vaihtoehtoisesti lisätään kuvatulla tavalla ensin noin 90 % etikkahappoanhydridiliuoksesta N,N-dimetyyliform-amidissa. Liuoksen loput 10 % laimennetaan noin 6 tilavuudella Ν,Ν-dimetyyliformamidia ja lisätään tämän jälkeen.

Reaktion menemistä loppuun seurataan ohutlevykromato-grafian avulla. Jos reaktio ei ole täydellinen, voidaan reaktion loppuun saattamiseksi lisätä vähitellen etikka-happoanhydridiliuosta Ν,Ν-dimetyyliformamidissa. Reaktion tapahduttua loppuun seos väkevöidään alipaineessa.

Konsentraatti laimennetaan vedellä, jäähdytetään noin 4 tuntia 0 - 10°C:ssa ja kiintoaines suodatetaan. Tuote otetaan jälleen talteen ioninvaihtohartsista osittaisessa amnjpniumsyklissä.

i

Jommalla kummalla menetelmällä valmistettu 3,2',6'-tri-N-asetyylisisomisiini spray-kuivataan tämän jälkeen veden poistamiseksi.

Tämän keksinnön mukaisella menetelmällä saadaan netilmi-siiniä noin 85 - 90 % saannolla tai enemmän laskettuna 5 84486 lähtöaineesta (yhdiste 1) reagoimattoman sisomisiinimäärän ollessa noin 3 - 7 %, yleensä noin 5 %, ja reaktion sivutuotteita ollessa mitätön määrä.

Tämän keksinnön mukaisen menetelmän ensimmäisessä vaiheessa silyloidaan 3,2',6'-tri-N-asetyylisisomisiini (yhdiste 1). Potentiaalisten reaktiokohtien salpaamisen lisäksi silylointi myös parantaa sisomisiinijohdoksen liukoisuutta liuottimeen. Silylointiaineisiin kuuluvat organosilyyli-yhdisteet, jotka reagoivat hydroksyylikohtien kanssa ja johtavat yleiskaavan D1 « ^ / mukaisiin organosilyylisubstituentteihin, jossa kaavassa R^· - R^ ovat alempialkyyli, fenyyli tai fenyylialempi-alkyyli. Parhaina pidettyjä substituentteja ovat trialempi-alkyylisilyylit ja erityisen hyvinä pidetään trimetyyli-silyylisubstituentteja.

Kolme hydroksyylikohtaa, so. 5,2” ja 4” voidaan silyloida. Keksinnön piiriin kuuluu kuitenkin myös se, että voidaan silyloida vain kaksi kohtaa, so. 5 ja 2" kohdat. Tämä voidaan suorittaa valitsemalla sopivalla tavalla silylointi- aine, silylointiolosuhteet ja säätelemällä lisätyn silylointiaineen määrää. Sisomisiinijohdoksen silyloitu-misen määrää voidaan seurata NMR.-llä. Silylointimene-telmän yksinkertaistamiseksi ja liukoisuuden parantamiseksi on suositeltavaa silyloida kaikki kolme hydroksyy-likohtaa. Jäljempänä kuvatussa parhaana pidetyssä menetelmässä silyloidaan 3,2',6'-tri-N-asetyylisisomisiini 3,2',6'-tri-N-asetyyli-5,2”,4"-trimetyylisilyylisiso-miiniksi (yhdiste 2) seuraavan reaktiokaavion mukaisesti.

6 84486

KAAVIO A

i NHAC

f h2n-^'^ ^-NHAC ^NHAc CH3 1 dimetoksietaani heksaraetyylidisilatsaani

\K

NHAC

OTMS

_NHAo CH3 H2

Kaaviossa A kuvattu reaktio suoritetaan vedettömissä olosuhteissa refluksoiden, parhaiten katalyytin, kuten sulfaattisuolan; ammoniumsuolan, kuten ammoniumkloridin tai ammoniuxnsulfaatin; rikkihapon; tai trimetyylisilyyli-kloridin läsnäollessa. Eräs hyvänä pidetty katalyytti on yhdisteen 1 sulfaattisuola, so. 3,2",6'-tri-N-asetyyli-sisomisiinisulfaatti. Yhdisteen 1 (jonka kanssa on sekoitettu hyvin pieni määrä sen sulfaattisuolaa) ja silylointiaineen, esimerkiksi trimetyyli-silylointi-aineen, kuten heksametyylidisilatsaanin, bis(trimetyyli-silyyli)asetamidin (BSA), mono(trimetyylisilyyli)-asetamidin (MSA), trimetyylikloorisilaanin (TMCS) tai muun vastaavan silylointiaineen välinen reaktio suoritetaan inertissä orgaanisessa liuottimessa, so. orgaa- 7 84486 nisessa liuottimessa, joka on inertti reaktio-olosuhteille, esimerkiksi asetonitriilissä, tolueenissa, 1,2-dimetoksi-etaanissa ja vastaavassa. Eräs hyvänä pidetty liuotin on 1,2-dimetoksietaani (DME). Silyloinnin etenemistä ·,

seurataan *H-NMR:n avulla. Reaktio tapahtuu loppuun I

noin 5 tunnissa. Silyloitua susbstituenttia käytetään salpaamaan alkyloituminen 3'-amiiniryhmässä trimetyyli-silyloitujen 2"- ja valinnaisesti 4"-asemien steerisen estymisen avulla.

Sen jälkeen muunnetaan yhdisteen 2 1-aminoryhmä N-iminoksi seuraavan reaktiokaavion mukaisesti parhaiten vedettömissä olosuhteissa. Veden läsnäolo N-iminon muodostamisvaiheen aikana voi johtaa epätäydellisiin reaktioihin 1-asemassa.

KAAVIO B

NHAc

OTMS

(.)-ch3cho OTMS Λ1 2---► Lnha _ HN iMb ° ______—NHAc aprootinen liuotin Ί ch3-hc=i^-*— CH3 (b) NaBH4 3

A

Tämän imiinin muodostamisreaktio on avainreaktio tämän keksinnön mukaisessa monivaiheisessa menetelmässä.

Yhdisteen 2 reaktio asetaldehydin kanssa suoritetaan lämpötiloissa välillä noin 10°C ja huoneen lämpötila 8 84486 (noin 25°C), parhaiten noin 15°C:ssa orgaanisessa aprootti- j sessa liuottimessa, joka on inertti reaktion olosuhteille, esimerkiksi 1,2-dimetoksietaanissa, asetonitriilissä, tolueenissa, heksaanissa, metyleenikloridissä, tetrahydro-furaanissa ja vastaavissa. Eräs hyvänä pidetty liuotin on metyleenikloridi. Sen jälkeen, kun reaktio on edennyt noin 30 minuuttia, lisätään seokseen metallihydridi-pelkistintä, jolloin parhaiten yhä ylläpidetään vedettömät olosuhteet, jotta mahdollinen ylimääräinen asetaldehydi saataisiin reagoimaan täydellisesti ja siten estettäisiin mahdolliset ei-toivotut sivureaktiot. Suositeltaviin pelkistimiin kuuluvat natriumboorihydridi, amiiniboraanit, litiumalumiinihydridi. Näistä erityisen hyvänä pidetään natriumboorihydridiä. Natriumboorihydridi lisätään ja reaktioseos lämmitetään noin huoneen lämpötilaan ja saatetaan reagoimaan noin 10 - 15 minuuttia. Imiinin muodostumista seurataan 'H-NMR:n avulla. Reaktion ensimmäinen vaihe tapahtuu loppuun noin 30 minuutissa. Natriumboorihydridi pelkistää mahdollisen reagoimattoman asetaldehydin ja estää näin ei-toivotut sivureaktiot.

Sen jälkeen, kun ylimääräinen asetaldehydi on poistettu, voidaan aminosubstituentti pelkistää etyyliamino-funk-tioksi pelkistimellä, kuten jo kuvatuilla pelkistimillä, vesipitoisissa tai vedettömissä olosuhteissa. Parhaiten lisätään puskurointiainetta ja pH pidetään välillä noin 7-12, parhaiten noin 9,5 - 10. Kun tässä vaiheessa käytetään pelkistimenä natriumboorihydridiä, mukana on-parhaiten protonointiainetta, kuten vettä ja/tai puskurointiainetta. Tämä reaktio on esitetty seuraavassa kaaviona C.

i 9 84486

KAAVIO C

NHAc °™1 .

OTMS' W

NaBHj CH3V^X^ O^V^^'hAc 3 .___>. ™ ch3ch2hit^ ch3 boraattipuskuri 4

Mikä tahansa tavanomainen puskuri, joka pitää pH:n arvossa noin 7 - 12, on sopiva, esimerkiksi fosfaatti-, sitraatti- tai boraattipuskuri. Parhaina pidetään boraatti-puskureita. Puskuri lisätään nopeasti reaktioseokseen, jota sen jälkeen sekoitetaan ympäristön lämpötiloissa noin 15 - 120 minuuttia, kunnes imiinin pelkistysreaktio on tapahtunut loppuun. Reaktion etenemistä voidaan seurata 'H-NMR:n avulla.

Asetyyli- ja trimetyylisilyyliryhmät poistetaan yhdisteestä 4 hydrolysoimalla, jolloin saadaan netilmisiiniä, yhdistettä 5, kuten on havainnollistettu seuraavassa reaktiokaaviossa.

KAAVIO D

NH2 4---CH3CH2HN-^ n2 ch3 10 84486

Ennenkuin salpaus poistetaan yhdisteestä 4 hydrolysoimalla, natriumhydroksidi aluksi deaktivoidaan lisäämällä riittävästi natriumhydroksidia ja sen jälkeen liuotin poistetaan reaktioseoksesta. Tämä tulisi tehdä heti reaktion tapahduttua loppuun. Salpauksen poistaminen hydrolysoimalla on tavanomainen menetelmä. On havaittu, että kun sen jälkeen lisätään emästä, parhaiten 10-prosenttista natriumhydroksidia ja hydrolyysireaktio suoritetaan refluksoiden typen alla noin 10 - 20 tunnin ajan, saadaan hyvä tulos. Reaktion etenemistä voidaan seurata ohutlevy-kromatografian avulla. Saatu hydrolysaatti tehdään happameksi pH-arvoon 6 ja netilmisiini otetaan talteen noin 85 - 90 % saannolla.

Seuraavat menetelmät havainnollistavat keksintöä. Esimerkeissä HPLC on suuren suorituskyvyn nestekromatografia ja NMR on ydinmagneettinen resonanssi.

i ESIMERKKI 1

Tri-silvloitu tri-N-asetyylisisomisiini a) 15,0 g (26,2 millimoolia; HPLC:n perusteella puhtaus 83 %) 3,2',6'-tri-N-asetyylisisomisiiniä, 0,750 g (1,12 millimoolia 3,2 *,6'-tri-N-asetyylisisomisiinisulfaattia, 150 ml 1,2-dimetoksietaania (DME) ja 25 ml heksametyyli-disilatsaania (118,5 millimoolia) lisätään 500 ml:n kolmikaulaiseen pyöreäpohjäiseen kolviin, joka on varustettu yläpuolisella mekaanisella sekoituslaitteella, palautusjäähdyttimellä, jossa on kuivausputki, ja lämpömittarilla. Seosta kuumennetaan öljyhauteessa (ulkoisen öljyhauteen lämpötila 105°C) 5 tuntia ja silyloitumisen edistymistä seurataan 'H-NMR:n avulla. Silylointireaktio tapahtuu loppuun 5,2" ja 4" kohdissa noin 3-8 tunnin kuluessa.

π 84486

Silyloitu 1-N-etyyli 3,2",61-tri-N-asetyylisisomisiini b) Lisätään 150 ml metyleenikloridia vedettömään reaktio-seokseen osasta (a) huoneen lämpötilassa. Seos jäähdytetään noin 15°C:een, ennenkuin siihen lisätään 3,0 ml kylmää asetaldehydiä (53,6 millimoolia). Sekoittamista jatketaan 30 minuuttia ja sen jälkeen lisätään 1,9 g jauhemaista natriumboorihydridiä (50,2 millimoolia).

Reaktioseos lämmitetään takaisin huoneen lämpötilaan i ja sekoitetaan 10 - 15 minuuttia, jotta voitaisiin täydellisesti poistaa mahdollinen ylimääräinen asetaldehydi.

Sen jälkeen lisätään 30 ml 0,5M vesipitoista boraatti-puskuria (pH 9,75) seokseen tiputtaen nopeasti toisesta suppilosta ja annetaan sekoittua ympäristön lämpötilassa 2 tuntia ja näin pelkistetään imiini vastaavaksi etyyli-aminosubstituentiksi.

Netilmisiini 30 ml 10-prosenttista vesipitoista natriumhydroksidi-liuosta lisätään osasta (b) saatuun reaktioseokseen natriumboorihydridin deaktivoimiseksi. Liuotinseos (DME/CH2C12, poistetaan alipaineessa. Sen jälkeen lisätään 200 ml 10-prosenttista natriumhydroksidivesiliuosta ja seosta kuumennetaan refluksoiden öljyhauteessa (103°C) 20 tuntia lievän typpikaasuvirran alla. Reaktion edistymistä seurataan ohutlevykromatografiän (TLC) avulla käyttämällä kehitysliuottimena 1:1:1-kloroformi:metanoli: väkevä ammoniumhydroksidi-seoksen alempaa faasia.

Hydrolysaatti jäähdytetään jäähauteella, tehdään happa-meksi pH-arvoon 6 lisäämällä 25-prosenttista rikkihappoa ja sakka erotetaan suodattamalla. Näyte suodoksesta laimennetaan HPLC-määrityksen sopivaan konsentraatioon. Netilmisiinin korjattu HPLC-saanto on 88 %.

12 84486

ESIMERKKI II

2^,5-018117711-3,21,6'-tri-N-asetwlisisoroisiinin valmistaminen 4.4 ml heksametyylidisilatsaania lisättiin sekoitettuun suspensioon, joka sisälsi 4,0 g (6,04 millimoolia) HPLC-puhtaus 86,6 %) 3,2',6'-tri-N-asetyylisisomisiinia ja 0,04 g (0,06 millimoolia) 3,2’,6'-tri-N-asetyylisiso-misiinisulfaattia 40 ml:ssa 1,2-dimetoksietaania (DME), ja seosta kuumennettiin refluksoiden 3 tuntia ölj7hauteessa. Reaktioseos muuttui kirkkaaksi homogeeniseksi liuokseksi ja reaktio P7sä7tettiin tässä vaiheessa ('H-NMR:n perusteella seos sisälsi pääosaltaan 2",5-disil7loitua tri-N-asetyyli-sisomisiinia).

Imiinin muodostaminen, pelkistäminen ja hydrolysii suoritettiin esimerkissä I kuvatulla tavalla.

Korjattu HPLC-saanto netilmisiinille on 83 %.

ESIMERKKI III

Netilmisiinin valmistaminen 3,21,61,S^-tetra-N-asetvvli-sisomisiinista Tässä tutkimuksessa käytetty puhdistettu 3,2',6',3"-tetra-N-asetyylisisomisiini saatiin asetyloimalla 3,2’,6f — trl-N-asetyylisisomisiinin 3"-aminoryhmä N-asetyyli-imidatsolilla ja eristämällä silikageelipylvään avulla.

4 g tätä lyofilisoitua tetra-N-asetyylisisomisiinia suspendoitiin 40 ml:aan 1,2-dimetoksietaania ja lisättiin 4.4 ml HMDS. Seosta kuumennettiin refluksoiden 7 tuntia.

'H-NMR:n perusteella silylointireaktio oli tapahtunut loppuun. i 13 64486

Imiinin muodstaminen, pelkistäminen ja hydrolyysi suoritettiin esimerkissä I kuvatulla tavalla. Netilmisiinin korjattu HPLC-saanto on 83,5 %.

3,2',6'-tri-N-asetyyli-5,2",4"-trimetyylisisomisiinin ja 3,2',6'-tri-N-asetyyli 5,2",4"-l-N-etylideenisiso-misiinin Ή-NMR-arvot on esitetty seuraavassa taulukossa I.

TAULUKKO I

A. Tri-silyloitu tri-N-asetyylisisomisiini: 'H-NMR (CD2C12) 6 = 0,118 /S, 9H, Si-(CH3)3/, 0,124 /S, 9H, Si-(CH3)3/, 0,165 /S, 9H, Si-(CH3)3/, 1,38 (S, 3H, CH3 C-4":ssa 1,93 (S, 3H, CHj-C-N), 1,96 (S, 3H,

O

CH,C-N), 1,98 (S, 3H, CH,-C-N), 2,45 (S, 3H, CH^-N 3„ 3 £ C-3":ssa), 4,69 (dd, 1H, J = 3,29 ja 4,02 Hz, CH C-4 1:ssa, 5,01 (d, 1H, J = 2,19 Hz, CH C-l":ssa), 5,08 (d, 1H, J 1 1,82 Hz, CH C-l':ssa, 6,03 (d, 1H, J = 6,99 Hz, NH-C-), 6,47 (dd, 1H, J = 5,11 ja 6,96 Hz, CH, NH-C-), H Δ H |

O O

ja 7,1 ppm (d, 1H, J = 9,13 Hz, NH-C-).

O

B. Silvloltu 1-N-etylideeni 3,2'-6 1-tri-N-asetwlisisomi-siini

Ji1 1 'HNM (CD3CN) δ = 0,08 /S, 9H, Si-(CH3)3/, 0,102 /S, 9H, Si-(CH3)3/, 0,140 /S, 9H, si-(CH3)3/, 1,5 (S, 3H, CH, C-4":ssa, 1,83 (S, 3H, CH,C-N), 1,86 (S, 3H, * O |j

O

CH,C-N), 1,89 (d, 3H, J = 4,76 Hz, CH,CH)=N), 1,93 (S, 3H,

3 η J

O

i4 84486 CHL CN), 2,36 (S, 3H, CHL-N C-3":ssa), 4,71 (bm, 2H, CH's 3 3 0 C-4':ssa ja C-l"), 5,19 (d, 1H, J = 1,46 Hz, CH C-l':ssa), 6,37 (d, 1H, J = 8,04, NH-C), 6,77 (d, 1H, J = 8,4 Hz,

NH-C-), 6,99 (t, 1H, J = 5?48 Hz, CH--N-C-) ja 7,69 ppm O ^ 1 M

(q, 1H, J = 4,76 Hz CH3CH=N). H 0 CNMR (CDjCN) δ = 162,04 (N - CHCH3) ja 22,46 ppm (N=CH- ch3).

i 1

Claims

1. Menetelmä netilmisiinin valmistamiseksi 1-N-etyloimalla sisomisiini asetaldehydin avulla, tunnettu siitä, että a) selektiivisesti salvattu sisomisiinijohdos, jonka yleiskaava on CX. f1 °/i NY 1 ° ---A CH„ / H^N-3· -NHY 1 - CH3 ά NHY ^ Rl jossa kukin X on organosilyyliryhmä Si-R2 ^ R3 jolloin R1 - R3 ovat toisistaan riippumatta alempi alkyyli, fenyyli tai fenyylialempialkyyli; X' on vety tai edellä määritelty organosilyyliryhmä; kukin Y on aminoryhmän salpausryhmä, joka on asetyyli, formyyli, propionyyli tai aryyli ja Y' on vety tai edellä määritelty Y, saatetaan reagoimaan asetaldehydin kanssa inertissä aprootti-sessa orgaanisessa liuottimessa vedettömissä olosuhteissa, jolloin muodostuu vastaava 1-N-etylideenijohdos; b) reaktioseoksessa mahdol1isesti läsnäoleva ylimääräinen reagoimaton asetaldehydi pelkistetään metal 1ihydridipelkisti-mellä, kuten natriumboorihydridi11ä, aminoboraanei11 a tai litiumalumiinihydridillä huoneen lämpötilassa korkeintaan 30 minuuttia; c) 1-N-etylideeniryhmä pelkistetään etyyliaminoryhmäksi vesipitoisissa olosuhteissa ympäröivässä lämpötilassa korkeintaan 2 tuntia metal 1ihydridipelkistimellä säätämällä reaktion pH arvoon 7 - 12; ie 84486 d) kaikki suojaryhmät poistetaan; ja e) netiImisiini eristetään vapaana emäksenä tai happoadditio-suo1ana.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että silylointia katalysoidaan katalyytillä, joka on valittu ryhmstä, johon kuuluvat su 1 faattisuo 1 a, ammoniumsuola, rikkihappo, trimetyy1isi1yy1ikloridi ja niiden seokset.

3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että silylointi suoritetaan 3,2',6’-tri-N-asetyylisisomisi inisulfaatin läsnäollessa.

4. Jonkin edellä olevan patenttivaatimuksen 1 - 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R1, R2 ja R3 ovat alempia alkyyleja.

5. Jonkin edellä olevan patenttivaatimuksen 1 - 4 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R1’ R2 ja R3 ovat kukin metyyli.

6. Jonkin patenttivaatimuksen 1 - 5 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että X' on organosilyy1iryhmä.

7. Jonkin edellä olevan patenttivaatimuksen 1 - 6 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että sisomisiinijohdos silyloidaan saattamalla tämä sisomisiinijohdos kosketukseen yhdisteen kanssa, joka on valittu ryhmästä, johon kuuluvat heksametyylidisi1 atsaani, bis(trimetyy1 isilyy1i Jasetamidi, mono(trimetyy1isi1yy1i)asetamidi, trimetyy1ikloorisilääni ja niiden seokset.

8. Jonkin edellä olevan patenttivaatimuksen 1 - 7 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että sisomisiinijohdos 17 84486 silyloidaan saattamalla kosketukseen heksametyy1idisilatsaanin kanssa.

9. Jonkin edellä olevan patenttivaatimuksen 1 - 8 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että aproottinen liuotin on valittu ryhmästä, johon kuuluvat 1,2-dimetoksietaani, aseto-nitriili, tolueeni, heksaani, mety1eenik 1 oridi, tetrahydro-furaani ja niiden seokset.

10. Jonkin edellä olevan patenttivaatimuksen 1 - 9 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että aproottinen liuotin on dimetoksietaani.

11. Jonkin edellä olevan patenttivaatimuksen 1 - 10 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että ylimääräinen tai reagoimaton asetaldehydi eliminoidaan lisäämällä metallihyd-r i d i pe 1 k i st intä.

12. Jonkin edellä olevan patenttivaatimuksen 1-11 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että ylimääräisen tai reagoimattoman asetaldehydin eliminoimiseen käytetty metalli-hydridipelkistin on valittu ryhmästä, johon kuuluvat natrium-boorihydridi, amiiniboraanit, 1itiumalumiinihydridi ja niiden seokset.

13. Jonkin edellä olevan patenttivaatimuksen 1 - 12 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että ylimääräinen asetaldehydi saatetaan reagoimaan lisäämällä natriumboorihydridiä.

14. Jonkin edellä olevan patenttivaatimuksen 1-13 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että ylimääräisen asetaldehydin pelkistämisen jälkeen lisätään vesipitoista puskuria pH-arvon pitämiseksi välillä noin 7-12. * ie 84486

15. Jonkin edellä olevan patenttivaatimuksen 1 - 14 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että pH pidetään arvossa välillä noin 9,5 - 10 puskurin lisäämisen jälkeen.

16. Jonkin edellä olevan patenttivaatimuksen 1 - 15 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vesipitoinen puskuri on valittu boraatti-, fosfaatti-, sitraattipuskureista ja niiden seoksista.

17. Jonkin edellä olevan patenttivaatimuksen 1 - 16 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että puskuri on natrium-boraatt i.

18. Jonkin edellä olevan patenttivaatimuksen 1 - 17 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että 1-N-ety1ideeniryhmä pelkistetään etyy1iaminoryhmäksi lisäämällä pelkistintä, joka on valittu ryhmästä, johon kuuluvat natriumboorihydridi, amiiniboraanit, 1 itiumalumiinihydridi ja niiden seokset.

19. Jonkin edellä olevan patenttivaatimuksen 1 - 18 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että ety1ideenisubstitu-entti pelkistetään etyy1iaminosubstituentiksi lisäämällä natr i umboor i hyr i d i ä.

20. Selektiivisesti salvattu sisomisiinijohdos, jonka yleiskaava on °X' /' -----“>-- / ΝΠΧ NHY CH3 84486 ^ R1 jossa kukin X on organosilyyliryhmä Si-R2 ^ R3 jolloin R1 - R3 ovat toisistaan riippumatta alempi alkyyli, fenyyli tai fenyylialempialkyyli; X' on vety tai edellä määritelty organosi1yyliryhmä; kukin Y on aminoryhmän saipausryhmä, joka on asetyyli/ formyyli, propionyyli tai aryyli; Y' on vety tai edellä määritelty Y; ja 2 on H2 tai =CH-CH3.

21. Patenttivaatimuksen 20 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että kukin X on trimetyylisilyyli.

22. Patenttivaatimuksen 20 tai 21 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että kukin Y on asetyyli.

23. Jonkin edellä olevan patenttivaatimuksen 20 - 23 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että Y' on vety.

24. Patenttivaatimuksen 20 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että X’ on trimetyylisilyyli. 20 8 4 4 8 6