FI82379C - Radioactively labeled monoclonal antibodies and a composition containing them and useful as diagnostic radiopharmaceutical - Google Patents
Radioactively labeled monoclonal antibodies and a composition containing them and useful as diagnostic radiopharmaceutical Download PDFInfo
- Publication number
- FI82379C FI82379C FI823633A FI823633A FI82379C FI 82379 C FI82379 C FI 82379C FI 823633 A FI823633 A FI 823633A FI 823633 A FI823633 A FI 823633A FI 82379 C FI82379 C FI 82379C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- tumor
- antibody
- cea
- labeled
- chelating agent
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/10—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody
- A61K51/1045—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody against animal or human tumor cells or tumor cell determinants
- A61K51/1048—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody against animal or human tumor cells or tumor cell determinants the tumor cell determinant being a carcino embryonic antigen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/10—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody
- A61K51/1045—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody against animal or human tumor cells or tumor cell determinants
- A61K51/1066—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody against animal or human tumor cells or tumor cell determinants the tumor cell being from skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/10—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody
- A61K51/1093—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody conjugates with carriers being antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2123/00—Preparations for testing in vivo
Description
1 823791 82379
Radioaktiivisesti leimattuja monoklonaalisia vasta-aineita sekä niitä sisältävä diagnostinen, radiofarmaseuttisena aineena käytettävä koostumus 5 Tämä keksintö koskee radionuklideilla leimattuja monoklonaalisia vasta-aineita. Keksintö koskee myös mainittuja monoklonaalisia vasta-aineita sisältäviä diagnostisia koostumuksia, jotka ovat käyttökelpoisia radiofarmaseuttisena aineena kasvainten havaitsemisessa.This invention relates to radionuclide-labeled monoclonal antibodies. The invention also relates to said diagnostic compositions containing monoclonal antibodies which are useful as a radiopharmaceutical for the detection of tumors.
10 On etsitty pitkään luotettavaa menetelmää kasvain ten ja niiden sijainnin löytämiseksi. On kuvattu esimerkiksi verenkierrossa olevan, ihmisen syöpään liittyvän karsinoembryonaalisen antigeenin (CEA) havaitsemismenetel-miä (katso US-patenttijulkaisut 3 663 684 ja 3 697 638). 15 On ilmeistä, ettei näitä menetelmiä voida käyttää kasvaimen sijainnin määrittämiseen. Myöhemmin on ehdotettu käytettäväksi jodin radioaktiivisilla isotoopeilla leimattuja vasta-aineita syöpään liittyvän antigeeniaineksen havaitsemiseksi. Siten US-patenttijulkaisussa 3 927 193 kuvataan 20 menetelmä, jossa käytetään 125I:lla ja 131I:lla leimattuja CEA:n vasta-aineita. Tuon patenttijulkaisun mukaan urospuolisilla syyrialaisilla hamstereilla, joihin oli istutettu ihmisen sinettisormussolusyöpä, tehdyissä kokeissa osoitettiin, että radioisotooppi kerääntyi kasvaimeen, kun 25 eläimiin ruiskuttiin leimattua vuohen anti-CEA:ta ja niiden elimet tutkittiin sen jälkeen. Siksi ehdotettiin, että kasvaimen paikka ihmisessä voitaisiin määrittää antamalla in vivo parenteraalisesti vasta-aineliuosta ja tekemällä sen jälkeen ihmisen kerroskuvaus.10 A reliable method for locating tumors and their location has long been sought. For example, methods for detecting circulating human cancer-associated carcinoembryonic antigen (CEA) have been described (see U.S. Patent Nos. 3,663,684 and 3,697,638). 15 It is obvious that these methods cannot be used to determine the location of a tumor. Subsequently, it has been proposed to use antibodies labeled with radioactive isotopes of iodine to detect cancer-associated antigenic material. Thus, U.S. Patent No. 3,927,193 describes a method using 125 I- and 131I-labeled CEA antibodies. According to that patent, experiments in male Syrian hamsters implanted with human seal ring cell cancer showed that the radioisotope accumulated in the tumor when 25 animals were injected with labeled goat anti-CEA and their organs were subsequently examined. Therefore, it was suggested that the location of the tumor in a human could be determined by parenteral administration of the antibody solution in vivo followed by human stratification.
30 Radioaktiivisella jodilla leimattujen vasta-ainei den varsinainen käyttö ei ole täyttänyt aiemman tutkimuksen herättämiä odotuksia. Esimerkiksi Goldenberg et ai. [N. Eng. J. Med. 298 (1978) 1384 - 1388] ilmoittivat saavuttaneensa jonkin verran menestystä v. 1978 tutkittaessa 35 ihmisiä radioaktiivisella jodilla leimatun anti-CEA:n 2 82379 avulla. Taustan jäännösradioaktiivisuuden takia ilmoitettu rajoitettu menestys oli kuitenkin riippuvainen vähennysme-netelmän käytöstä. Mach et ai. [N. Eng. J. Med. 303 (1980) 5-10] saavuttivat vielä heikomman menestyksen ja määrit-5 tivät, että vain 0,1 % annetusta annoksesta kerääntyi kasvaimeen. Tietyissä tapauksissa kasvaimen paikallistaminen oli kuitenkin vielä mahdollista.30 The actual use of radiolabelled antibodies has not met the expectations of the previous study. For example, Goldenberg et al. [OF. Eng. J. Med. 298 (1978) 1384-1388] reported some success in 1978 in the study of 35 people with radioiodine-labeled anti-CEA 2 82379. However, due to the residual radioactivity of the background, the reported limited success depended on the use of the reduction method. Mach et al. [OF. Eng. J. Med. 303 (1980) 5-10] achieved even less success and determined that only 0.1% of the administered dose accumulated in the tumor. In some cases, however, tumor localization was still possible.
On tunnettua, että eri lähteistä peräisin olevien antiseerumien affiniteettipuhdistus aiemmissa kasvainten 10 paikantamismenetelmissä käytettyjen vasta-aineiden saamiseksi johtaa tavallisesti affiniteetiltaan hyvän vasta-aineen häviämiseen ja että saadut vasta-aineet, jotka ovat seos antigeenin eri determinanteille spesifisistä vasta-aineista, sisältävät suurelta osin affiniteetiltaan heik-15 koja vasta-aineita sekä vasta-aineita, joiden reaktiot ovat epäspesifisiä. Monoklonaaliset vasta-aineet sen sijaan voidaan valita siten, että niillä on suuri kiinnitty-miskyky antigeenin valittuihin kohtiin ja alhainen epäspesifinen sitoutumistaipumus. Yllättävästi on kuitenkin ha-20 vaittu, että kasvaimen antigeenien monoklonaaliset vasta-aineet, jotka on leimattu jodin radioisotoopeilla tunnetuin menetelmin, kerääntyvät vieläkin heikosti kasvaimen kohdalle, vaikka immuunireaktiivisuus in vitro voidaan osoittaa. Tämä saattaa johtua, ja todennäköisesti johtuu-25 kin, leimatussa vasta-aineessa tapahtuvasta radioaktiivisen jodin häviämisestä. Siten on olemassa vieläkin tarve löytää luotettava diagnostinen aine kasvaimen paikan tarkaksi määrittämiseksi tarkasti in vivo.It is known that affinity purification of antisera from different sources to obtain antibodies used in previous tumor localization methods usually results in the loss of a good affinity antibody, and that the resulting antibodies, which are a mixture of antibodies specific for different antigenic determinants, largely contain low affinity. -15 koja antibodies as well as antibodies whose reactions are nonspecific. Monoclonal antibodies, on the other hand, can be selected to have high adhesion to selected sites on the antigen and a low non-specific binding tendency. Surprisingly, however, it has been found that monoclonal antibodies to tumor antigens, labeled with iodine radioisotopes by known methods, still accumulate poorly at the tumor site, although in vitro immunoreactivity can be demonstrated. This may be due, and probably due to, the loss of radioactive iodine in the labeled antibody. Thus, there is still a need to find a reliable diagnostic agent to accurately determine the location of a tumor in vivo.
Keksinnön mukainen vasta-aine tai vasta-aineen osa 30 leimataan kelatoivaan aineeseen sidotulla metalliradio-nuklidilla, esimerkiksi DPTA:han sidotulla luIn:lla, yhdistämällä kelatoiva aine vasta-aineeseen ja sen jälkeen muodostamalla kelatoivan aineen ja radionuklidin välinen kompleksi. Tällainen leimattu vasta-aine tai sen osa ke-35 rääntyy nopeasti ja hyvin spesifisesti itse kasvaimeen, 3 82379 kun sitä ruiskutetaan kasvainta kantavaan isäntään. Joissakin tapauksissa voi myös tapahtua kerääntyminen kaukaisiin etäispesäkkeisiin osoittamaan kasvaimen leviämisen. Kasvaimen sijainti voidaan määrittää kerroskuvausmenetel-5 min.The antibody or antibody portion 30 of the invention is labeled with a metal radionuclide bound to the chelating agent, e.g., luIn bound to DPTA, by combining the chelating agent with the antibody and then forming a complex between the chelating agent and the radionuclide. Such a labeled antibody, or portion thereof, is rapidly and very specifically invaded into the tumor itself, 3,837,99 when injected into a tumor-bearing host. In some cases, accumulation in distant metastases may also occur to indicate tumor spread. Tumor location can be determined by layer imaging method-5 min.
Myös leimattujen monoklonaalisten vasta-aineiden seoksia voidaan käyttää.Mixtures of labeled monoclonal antibodies can also be used.
Keksinnön kohteena on siten on radioaktiivisesti leimattu monoklonaalinen vasta-aine, johon on sidottu me-10 talliradionuklidi vasta-aineeseen konjugoidun kelatoivan aineen välityksellä, joka kelatoiva aine on polyaminokar-boksyylihappo, jolla on kaavaThe invention thus relates to a radiolabeled monoclonal antibody to which a metal radionuclide is bound to the antibody via a conjugated chelating agent which is a polyaminocarboxylic acid of the formula
H09C-(CH ) (CH9) C0„HH09C- (CH) (CH9) C0 „H
IS \ /(CH2)y-C02HX / ^n-ch-(ch2)z ^-n-ch-(ch2)z-| n'IS \ / (CH2) y-CO2HX / ^ n-ch- (ch2) z ^ -n-ch- (ch2) z- | of'
H02C-'CH2>y <CH,> CO,HH02C-'CH2> y <CH,> CO, H
2 y 2 20 jossa x on 0 tai kokonaisluku, y on 1 tai 2, z on kokonaisluku 1 - 7 ja R on vety tai ryhmä, jonka välityksellä kelatoiva aine liittyy vasta-aineeseen, tai ryhmä, joka vaikuttaa kelatoivan aineen radionuklidiin sitoutumisva-kioon.2 y 2 20 wherein x is 0 or an integer, y is 1 or 2, z is an integer from 1 to 7, and R is hydrogen or a group through which the chelating agent binds to the antibody, or a group that affects the radionuclide binding constant of the chelating agent .
25 Keksinnön toisena kohteena diagnostisena farmaseut tisena aineena käyttökelpoinen koostumus, joka sisältää edellä mainitun monoklonaalisen vasta-aineen liuosta pa-renteraalisesti annettavaksi ja jota voidaan käyttää kasvaimien paikallistamiseksi sairaassa isännässä.Another object of the invention is a composition useful as a diagnostic pharmaceutical agent, comprising a solution of the above-mentioned monoclonal antibody for parenteral administration, which can be used for localizing tumors in a diseased host.
30 Keksinnön tavoitteiden toteuttaminen ilmenee liit teenä olevista piirroksista ja seuraavasta yksityiskohtaisesta kuvauksesta.The realization of the objects of the invention will become apparent from the accompanying drawings and the following detailed description.
Kuvio 1 on pylväsdiagrammi, joka kuvaa 111In:n ja 125I:n jakautumista kudokseen verrattuna 67Ga:n jakautumi-35 seen 111In:lla ja 125l:lla leimatun anti-CEA:n ja 67Ga-sitraa- 4 82379 seen mIn:lla ja 125I:lla leimatun anti-CEA:n ja 67Ga-sitraa-tin ruiskuttamisesta ihmisen paksusuolen syövällä infek-toituihin karvattomiin hiiriin kuluneen ajan funktiona.Figure 1 is a bar graph depicting the tissue distribution of 111In and 125I versus 67Ga distribution with 111In and 125I-labeled anti-CEA and 67Ga citrate with 4 82379 mIn and 125I. -labeled anti-CEA and 67Ga-zither tin-inoculation of human colon cancer are toituihin invention thus concerns and, as a function of elapsed time in nude mice.
Kuvio 2 on pylväsdiagrammi, joka kuvaa karvattomien 5 hiirien erittämiä luIn-, 125i- ja 67Ga-määriä ulIn- ja 125I-leimatun anti-CEA:n ja 67Ga-sitraatin ruiskuttamisesta kuluneen ajan funktiona.Figure 2 is a bar graph depicting the amounts of luIn, 125i, and 67Ga secreted by nude mice as a function of time elapsed from injection of ulIn and 125I-labeled anti-CEA and 67Ga citrate.
Kuvio 3 on pylväsdiagrammi, joka kuvaa U1ln:n ja 125I:n jakautumista karvattomien hiirien kudoksiin 48 h:n 10 kuluttua 711In- ja 125I-leimatun anti-CEA:n ruiskuttamisesta verrattuna lxlIn-sitraattiin ja 125I-leimattuun ihmisen albumiiniin.Figure 3 is a bar graph depicting the distribution of U1nn and 125I in nude mouse tissues 48 h 10 after injection of 711In- and 125I-labeled anti-CEA compared to 1xIIn citrate and 125I-labeled human albumin.
Kuvio 4 on pylväsdiagrammi, joka kuvaa 111 In:n ja 125I:n kasvain/kudos-suhteita ajan funktiona verrattuna 15 67Ga:iin, kun karvattomiin hiiriin on ruiskutettu luIn- ja 125I-leimattua anti-CEA:ta sekä 67Ga-sitraattia.Figure 4 is a bar graph depicting the tumor / tissue ratios of 111 In and 125 I as a function of time compared to 15 67Ga when nude mice were injected with luIn- and 125I-labeled anti-CEA and 67Ga citrate.
Kuten edellä on kuvattu, keksinnön mukaiset kasvaimeen liittyvien antigeenien monoklonaaliset vasta-aineet tai niiden osat leimataan kelatoiviin aineesiin sidotuilla 20 metalliradionuklideilla. Keksinnössä käyttökelpoiset monoklonaaliset vasta-aineet ovat nykyään hyvin tunnetun hyb-ridoomamenetelmän tuotteita. Viittauksena mainittakoon esimerkiksi Milsteinin ja Kohlerin alkuperäistutkimus [Nature 256 (1975) 495 - 497]. Menetelmässä lähdetään sii-25 tä, että hiireen tai muuhun sopivaan eläimeen ruiskutetaan immunogeeniä, tässä tapauksessa kasvaimeen liittyvää antigeeniä, kuten CEA:ta. Sitten immunisoitu hiiri tapetaan ja sen pernasta otetaan soluja, jotka yhdistetään luuydinkas-vainsoluihin, jolloin saadaan "hybridoomiksi" kutsuttuja 30 hybridisoluja, joita voidaan monistaa in vitro. Vasta-ai neita tuottavaa solupopulaatiota kasvatetaan selektiivisesti ja seulotaan, jotta saataisiin eristettyä yksittäiset kloonit, joista kukin tuottaa yhtä antigeenimolekyylin pinnan tietylle alueelle ("determinantille") spesifistä 35 vasta-ainelajia.As described above, monoclonal antibodies to tumor-associated antigens of the invention, or portions thereof, are labeled with metal radionuclides bound to chelating agents. The monoclonal antibodies useful in the invention are the products of a hybridoma method well known today. For example, the original study by Milstein and Kohler [Nature 256 (1975) 495-497] should be mentioned. The method is based on injecting an immunogen, in this case a tumor-associated antigen, such as CEA, into a mouse or other suitable animal. The immunized mouse is then killed and cells are taken from its spleen, which are combined with bone marrow tumor cells to obtain hybridoma cells called "hybridomas" that can be amplified in vitro. The antibody-producing cell population is selectively grown and screened to isolate individual clones, each producing one of 35 antibody species specific for a particular region ("determinant") of the surface of the antigen molecule.
ii 5 82379ii 5 82379
Yksittäiset kloonit voidaan seuloa edelleen niiden kloonien määrittämiseksi, jotka tuottavat vasta-aineita, joilla on korkein affiniteetti antigeeniin ja joilla on alhainen epäspesifinen sitoutumistaipumus. Radioaktiivi-5 seen leimaukseen valittu, tavallisesti askites-nesteestä eristetty vasta-aine liitetään sopivaan kelatoivaan aineeseen, jota sitten käytetään radionuklidin sitomiseen. Ke-latoiva aine voidaan sitoa vasta-aineeseen monilla erilaisilla menetelmillä. Yleensä koska vasta-aine on polypepti- 10 di, voidaan käyttää kelatoivaa ainetta, jossa on sellainen reaktiivinen ryhmä, jonka tiedetään olevan käyttökelpoinen liittämään ryhmä valkuaisainesubstraattiin. Sopivia reaktiivisia ryhmiä ovat mm. seuraavat:Individual clones can be further screened to determine those clones that produce antibodies with the highest affinity for the antigen and a low non-specific binding tendency. An antibody selected for radiolabeling, usually isolated from ascites fluid, is coupled to a suitable chelating agent, which is then used to bind the radionuclide. The chelating agent can be bound to the antibody by a variety of methods. In general, since the antibody is a polypeptide, a chelating agent having a reactive group known to be useful for attaching the group to a protein substrate may be used. Suitable reactive groups include e.g. the following:
Ch-NCS p.Ch-NCS p.
Ch-C-N__JCh-C-N__J
Ch—- 7 Ch-SO-Cl 20 θ' * v chi-ο-Λ] 25Ch—- 7 Ch-SO-Cl 20 θ '* v chi-ο-Λ] 25
F FF F
s JKs JK
Ch-C-0—K /> F Ch-N-S02-CH=CH2Ch-C-O-K /> F Ch-N-SO 2 -CH = CH 2
FKFK
30 j__30 j__
Ch-N 11 Ch-N2+ (Ch-NHjista) 0 35 0Ch-N 11 Ch-N2 + (Ch-NHjista) 0 35 0
Ch-NH-C-CH0Br Ch-C-0-C-CHoCH (CH-,) „ 2 II li 2 3 2 o o 6 82379 joissa Ch on kelatoivan aineen tähde.Ch-NH-C-CHOBr Ch-C-O-C-CHoCH (CH-,) „2 II li 2 3 2 o o 6 82379 wherein Ch is a chelating agent residue.
Edellä annetussa kelatoivan aineen kaavassa x on edullisesti 0 tai 1, y on edullisesti 1 ja z on edullisesti 1 tai 7. Ryhmä R on edullisesti ryhmä 5 10 jossa A on ryhmä, jonka kautta liittyminen tapahtuu. A voi olla esimerkiksi -N2*, joka saadaan diatsotoimalla ryhmä -NH2, joka puolestaan voidaan saada aikaan pelkistämällä nitroryhmä (-N02), joka taas puolestaan voidaan saada ai-15 kaan nitraamalla fenyylirengas. Ryhmä A voi olla myös 0 -nh-c-ch2l 20 joka saadaan aikaan asetyloimalla ryhmä -NH2 tunnetuin menetelmin ja jossa L on irtaantuva ryhmä, joka korvataan liittämisen yhteydessä esimerkiksi halogeenilla, kuten Cl:lla, Br:lla tai I:lla (edullisesti Br:lla).In the above chelating agent formula, x is preferably 0 or 1, y is preferably 1 and z is preferably 1 or 7. The group R is preferably a group 5 wherein A is the group through which the coupling occurs. A can be, for example, -N2 * obtained by diazotizing the group -NH2, which in turn can be obtained by reducing the nitro group (-NO 2), which in turn can be obtained by nitrating the phenyl ring. The group A may also be O-nh-c-ch2l obtained by acetylation of the group -NH2 by known methods and wherein L is a leaving group which is replaced by a halogen such as Cl, Br or I upon coupling (preferably br).
Muissa tapauksissa R voi olla -CH3 tai 25 -CH2C6H40CH2C02H.In other cases, R may be -CH3 or -CH2C6H40CH2CO2H.
Liittäminen voidaan tehdä itse karboksyylihapporyh-män kautta muodostamalla esimerkiksi happoanhydridiväli-tuote [Krejcarek ja Tucker, Biochemical and Biophysical Research Communications 77 (1977) 581], 30 Polyaminokarboksyylihapoista ovat tässä yhteydessä edullisia polyaminoetikkahapot. Erityisiä käyttökelpoisia polyaminoetikkahappoja ovat etyleenidiaminotetraetikkahap-po (EDTA) ja sen johdannaiset, kuten dietyleenitriamino-pentaetikkahappo (DTPA), p-bromiasetamidifenyyli(etyleeni-35 dinitriilitetraetikka)happo ja l-(p-aminofenyyli)-etylee- nidiaminotetraetikkahappo, joista viimeinen muutetaan di-The coupling can be carried out via the carboxylic acid group itself, for example by forming an acid anhydride intermediate [Krejcarek and Tucker, Biochemical and Biophysical Research Communications 77 (1977) 581]. Of the polyaminocarboxylic acids, polyaminoacetic acids are preferred in this connection. Particularly useful polyaminoacetic acids include ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) and its derivatives, such as diethylenetriaminopentaacetic acid (DTPA), p-bromoacetamidephenyl (ethylene-35-dinitrile tetraacetic acid) and
IIII
7 82379 atsoniumsuolaksi liittymisen mahdollistamiseksi. Näistä kelatoivista aineista DTPA on edullinen.7 82379 to allow incorporation into the azonium salt. Of these chelating agents, DTPA is preferred.
Keksinnön mukaisesti käyttökelpoisia radionuklideja ovat sellaiset, jotka muodostavat pysyviä komplekseja 5 edellä mainittujen kelatoivien aineiden kanssa. Radio- nuklidit valitaan siten, että niillä on sellainen puoliintumisaika ja muut säteilyominaisuudet, että ne voidaan turvallisesti hävittää ja niitä voidaan antaa turvallisesti ihmisille.Radionuclides useful according to the invention are those which form permanent complexes with the above-mentioned chelating agents. Radionuclides are selected to have a half-life and other radiation properties that can be safely disposed of and administered to humans.
10 Edellä määritellyt kelatoivat aineet muodostavat pysyviä komplekseja hapetusasteeltaan +3 olevien radionuk-lidien kanssa. Radionuklideja, jotka muodostavat pysyviä komplekseja hapetusasteella +3, ovat mm. 52Fe, X11ln, ""Te, 68Ga, 67Ga, 169Yb, 57Co, 167Tm, 166Tm, 146Gd, 157Dy, 95"Nb, 103Ru, 15 97Ru, 99Rh, 101nRh ja 201T1.The chelating agents defined above form stable complexes with radionuclides with an oxidation state of +3. Radionuclides that form permanent complexes at an oxidation state of +3 include e.g. 52Fe, X11ln, "" Te, 68Ga, 67Ga, 169Yb, 57Co, 167Tm, 166Tm, 146Gd, 157Dy, 95 "Nb, 103Ru, 15 97Ru, 99Rh, 101nRh and 201T1.
Edullisesti radionuklidien gammasäteilyenergia on 100 - 400 keV ja niiden puoliintumisajat ovat 5 h - 5 d.Preferably, the radionuclides have a gamma radiation energy of 100 to 400 keV and a half-life of 5 h to 5 d.
Syistä, joita ei vielä tarkasti tunneta, tietyt yksittäiset kasvainantigeenien monoklonaaliset vasta-ai-20 neet vastustavat suoraa metallointia. Siksi keksinnön mukaisesti on edullista sitoa radionuklidi vasta-aineeseen käyttäen tapaa, jossa liitetään ensin kelatoiva aine vasta-aineeseen ja muodostetaan sitten kompleksi radionukli-din kanssa. Tässä suhteessa on erityisen edullista käyttää 25 111ln:ia (t^ = 2,8 d) radionuklidina yhdessä kelatoivana aineena toimivan DTPA:n kanssa.For reasons not yet precisely known, certain individual monoclonal antibodies to tumor antigens resist direct metallation. Therefore, according to the invention, it is preferable to bind the radionuclide to the antibody using a method in which the chelating agent is first coupled to the antibody and then complexed with the radionuclide. In this respect, it is particularly preferred to use 25 μl (t ^ = 2.8 d) as the radionuclide together with the chelating agent DTPA.
Tämän keksinnön mukainen radioaktiivisesta leimattu monoklonaalinen vasta-aine voi olla suunnattu CEA:ta, melanoomaan liittyvää antigeeniä, sinkkigylsinaattimerkkiai-30 netta, eturauhasperäistä hapanta fosfataasia (PAP), a-fe-toproteiinia, ferritiiniä, ihmisen korionkonadotropiinia vastaan. Edullisesti se on CEA:n tai melanoomaan liittyvän antigeenin monoklonaalinen vasta-aine. Diagnostisena ra-diofarmaseuttisena aineena leimattu vasta-aine ruiskute-35 taan sopivassa, parenteraaliseen antotapaan soveltuvassa liuottimessa potilaaseen. Riittävän ajan kuluttua poti- 8 82379 laalle tehdään kerroskuvaus kohtien havaitsemiseksi, johon säteily on kerääntynyt ja jotka ilmaisevat kasvaimen ja/-tai jonkin sen etäispesäkkeen.The radiolabeled monoclonal antibody of this invention may be directed against CEA, melanoma-associated antigen, zinc glycinate marker, prostate-derived acid phosphatase (PAP), α-pheprotein, ferritin, human chorionic chinadotropin. Preferably, it is a monoclonal antibody to CEA or a melanoma-associated antigen. As a diagnostic radiopharmaceutical, the labeled antibody is injected into a patient in a suitable solvent suitable for parenteral administration. After a sufficient time, the patient is layered to detect sites where radiation has accumulated and which indicate the tumor and / or one of its metastases.
Seuraavat kokeet, jotka tehtiin 125I- ja U1ln-leima- 5 tulla monoklonaalisella CEA:n vasta-aineella, osoittavat edut, jotka saavutetaan käytettäessä keksinnön mukaisia kelatoivaan aineeseen sidotuilla metalliradionuklideilla leimattuja monoklonaalisia vasta-aineita kasvaimen havaitsemiseen verrattuna menetelmiin, joissa käytetään jodilei-10 mattuja vasta-aineita.The following experiments performed with 125 I- and U1nn-labeled CEA monoclonal antibody demonstrate the advantages of using the chelating agent-bound metal radionuclide-labeled monoclonal antibodies of the invention for tumor detection over methods using iodine-labeled. antibodies.
1. Radioaktiivisesta leimatun anti-CEA:n valmistus Monoklonaalinen anti-CEA (valmistaja Hybritech, Inc., La Jolla, Ca. ) leimattiin 125I:lla Boltonin ja Hunte-rin [Biochem. J. 133 (1973) 529 - 39] menetelmällä. Tuote 15 ajettiin Sephadex G-25 -kolonnin läpi ja lopputuote sisälsi vähemmän kuin 0,5 % vapaata jodidia. Radioaktiivisesti leimatun vasta-aineen sitoutumisaste oli yli 80 % Sepharo-se-geeliin sidotulla hevosen vasta-aineella hiirelle ja yli 75 % Sepharose-geeliin sidotulla CEA:lla.1. Preparation of Radiolabeled Anti-CEA Monoclonal anti-CEA (manufactured by Hybritech, Inc., La Jolla, Ca.) was labeled with 125 I of Bolton and Hunter [Biochem. J. 133 (1973) 529-39]. Product 15 was passed through a Sephadex G-25 column and the final product contained less than 0.5% free iodide. The degree of binding of the radiolabeled antibody was greater than 80% for equine antibody bound to Sepharose gel and more than 75% for CEA bound to Sepharose gel.
20 Sama monoklonaalinen anti-CEA leimattiin 111In:lla . käyttäen kelatoivana aineena konjugoitua DTPA:ta Krejcare- ‘ kin ja Tuckerin [Biochemical and Biophysical Research Com- • « munications 77 (1977) 581] menetelmällä. Antigeeniin si-- toutuminen oli verrattavissa 125I-leimatun vasta-aineen si- 25 toutumiseen. Leimausprosessi ei vaikuttanut vasta-aineen affiniteettivakioon (Ka) verrattuna kelatoimattomaan vasta-aineeseen CEA-titrauksella määritettynä.The same monoclonal anti-CEA was labeled with 111In. using conjugated DTPA as a chelating agent by the method of Krejcareki and Tucker [Biochemical and Biophysical Research Communications 77 (1977) 581]. Antigen binding was comparable to 125 I-labeled antibody binding. The labeling process did not affect the affinity constant (Ka) of the antibody compared to the non-chelated antibody as determined by CEA titration.
Leimattujen anti-CEA-vasta-aineiden in vitro -sta-biilisuudet määritettiin inkuboimalla osaa materiaalista 30 parenteraalisessa liuoksessa, joka sisälsi steriiliä normaalia fysiologista suolaliuosta (USP) 37 °C:ssa 72 h, ja määrittämällä radionuklidi kromatografisesti. Vasta-aine-. . liuokset pipetoitiin Baker IB -alumiinioksidiliuskoille ja eluoitiin vesi:asetoniseoksella (1:1). Proteiiniin sitou-35 tunut radionuklidi jää lähtöpisteeseen, kun taas vapaa radionuklidi liikkuu. Inkuboinnin jälkeen radiojodilla li 9 82379 leimatussa materiaalissa oli vapaana jäljellä alle 3 % aktiivisuutta jodina määritettynä. Säilytys 4 °C:ssa vähensi tätä 50 %:lla. Samoissa olosuhteissa oli mln-anti-CEA suhteellisen stabiili.The in vitro stability of labeled anti-CEA antibodies was determined by incubating a portion of the material in a parenteral solution containing sterile normal physiological saline (USP) at 37 ° C for 72 h and determining the radionuclide chromatographically. Antibody. . the solutions were pipetted onto Baker IB alumina strips and eluted with water: acetone (1: 1). The radionuclide bound to the protein remains at the starting point, while the free radionuclide moves. After incubation, less than 3% activity as determined as iodine remained free in the radioiodine-labeled li 9 82379 labeled material. Storage at 4 ° C reduced this by 50%. Under the same conditions, mln-anti-CEA was relatively stable.
5 2. Karvattomilla hiirillä tehdyt jakautumistutki- mukset5 2. Distribution studies in nude mice
Radioaktiivisesti leimatun monoklonaalisen hiiren anti-CEA:n kudosjakautumistutkimukset tehtiin karvattomilla hiirillä, joissa oli 0,5 - 1,0 g ihmisen paksusuolikas-10 vainta. Hiirien paino oli 17 - 28 g (keskiarvo noin 23 g). Kasvaimet istutettiin ruiskuttamalla ihon alle hienonnettua seosta, joka sisälsi CEArta tuottavia ihmisen paksusuolen rauhassyöpäsoluja. Jakautumistutkimukset tehtiin kolme viikkoa myöhemmin. Tehtiin kaksi koetta. Ensimmäi-15 sessä jaettiin 19 hiirtä neljään 4-6 hiiren ryhmään ja hiiriin ruiskutettiin laskimon sisäisesti (i.c.) 0,1 ml steriiliä fysiologista suolaliuosta (USP), joka sisälsi 0,5 pCi 125I-anti-CEA-vasta-ainetta (noin 0,3 pg vasta-ainetta) ja vertailunäytteeksi ilman kantaja-ainetta olevaa 20 67Ga-sitraattia, tunnettua epäspesifistä ihmisen paksusuolen kasvaimen havaitsemisainetta. Ruiskeet annettiin nukuttamatta käyttäen 100 pl:n Hamilton-ruiskua tarkkuuden takaamiseksi. Eläimet, joilla annos imeytyi osittain häntään, poistettiin kokeesta. Ruiskeen antamisen jälkeen 25 eläimet sijoitettiin steriileihin häkkeihin, joissa oli korotettu verkkolattia virtsan ja ulosteiden keräämiseksi. Lattian alle pakattiin 4X4 -harsokangas siten, etteivät eläimet ylettyneet siihen. Hiiret, joita pidettiin puhtaassa tilassa 4 °C:ssa antaen rajoittamattomasti steriiliä 30 ravintoa ja vettä, tapettiin ryhmittäin 4, 24, 48 ja 72 h:n kuluttua merkkiaineen ruiskutuksesta.Tissue distribution studies of radiolabeled monoclonal mouse anti-CEA were performed in nude mice containing 0.5 to 1.0 g of human colon-10 only. Mice weighed 17 to 28 g (mean approximately 23 g). Tumors were implanted subcutaneously by injection comminuted mixture, containing CEArta producing human colon rauhassyöpäsoluja. Distribution studies were performed three weeks later. Two experiments were performed. In the first 15, 19 mice were divided into four groups of 4-6 mice, and the mice were injected intravenously (ic) with 0.1 ml of sterile physiological saline (USP) containing 0.5 pCi of 125 I-anti-CEA antibody (approximately 0 3 pg of antibody) and the reference sample without a carrier 20 67Ga-citrate, a known non-specific human colon tumor havaitsemisainetta. Injections were given without anesthesia using a 100 μl Hamilton syringe to ensure accuracy. Animals with a partially absorbed dose were removed from the experiment. After injection, 25 animals were placed in sterile cages with a raised mesh floor to collect urine and feces. A 4X4 gauze cloth was packed under the floor so that the animals did not reach it. Mice maintained in a clean condition at 4 ° C with unrestricted sterile food and water were sacrificed in groups at 4, 24, 48, and 72 h after marker injection.
Hiiret nukutettiin eetterillä ja niistä otettiin verinäytteet suoraan sydämestä. Hiiret tapettiin kääntämällä kaula sijoiltaan. Tätä seuraavan ruumiinavauksen 35 aikana otettiin talteen kasvain, maksa, munuaiset, lihak- 10 82379 set, sydän, keuhkot, reisiluu ja perna, ne pestiin vedellä kahdesti, kerran 10 % formaliinilla, kuivattiin imupape-rilla ja punnittiin analyysivaa'alla. Käsittelemättömät vatsa ja suolisto poistettiin myös ja niiden radioaktiivi-5 suus mitattiin. Veren, lihasten ja luiden oletettiin painavan 7 %, 40 % ja vastaavasti 10 % koko ruumiin painosta tehtäessä koko elimistöä koskevia imeytymislaskelmia. Muut elimet punnittiin kokonaisina. Radioaktiivisuus mitattiin automaattisella kolokidegammalaskurilla, jonka raot oli 10 säädetty 1Z5I:n piikin 27 - 35 keV ja 57Ga:n piikin 93 keV mukaan. Laskuri oli ohjelmoitu lopettamaan mittaus joko 10 minuutin laskennan tai 10 miljoonan tuikkeen jälkeen, jotta saavutettaisiin tilastollinen merkitsevyys näytteillä, joiden aktiivisuus oli pienin. Taustasta ja rakojen väli-15 sen isotooppiaktiivisuuden käänteisvaikutuksesta aiheutuvat korjaukset tehtiin käyttäen valmistettuja lähteitä ja ratkaisemalla yhtälöt. Näytteiden aktiivisuutta verrattiin sitten ruiskutetuista materiaaleista tehtyihin standardeihin ja tulokset ilmoitettiin yksikköinä prosenttia ruisku-20 tetusta annoksesta/g ja prosenttia ruiskutetusta annokses-ta/elin. Kasvain/kudos -suhteet laskettiin prosenttia annoksesta/g -tiedoista. Suolten, virtsan ja ulosteiden aktiivisuudet laskettiin prosentteina ruiskutetusta koko-naisannoksesta.Mice were anesthetized with ether and blood samples were taken directly from the heart. Mice were killed by inverting the neck. During the subsequent necropsy, the tumor, liver, kidneys, muscles, heart, lungs, femur and spleen were harvested, washed twice with water, once with 10% formalin, blotted dry and weighed on an assay scale. Untreated stomach and intestines were also removed and their radioactivity was measured. Blood, muscle, and bone were assumed to weigh 7%, 40%, and 10% of total body weight, respectively, when whole-body absorption calculations were performed. The other organs were weighed whole. Radioactivity was measured with an automatic colocidega gamma counter with slits adjusted to a peak of 27 to 35 keV for the 1Z5I peak and 93 keV for the 57Ga peak. The counter was programmed to stop the measurement after either a 10-minute count or 10 million scintillations to achieve statistical significance for the samples with the lowest activity. Corrections for the background and the inverse effect of the isotope activity of the gap-15 were made using the prepared sources and solving the equations. The activity of the samples was then compared to standards made from the injected materials and the results were expressed in units of percent injected dose / g and percent injected dose / organ. Tumor / tissue ratios were calculated as a percentage of the dose / g data. Intestinal, urinary, and fecal activities were calculated as a percentage of the total injected dose.
25 Toisessa kokeessa jaettiin 37 hiirtä, joilla oli samasta ihmisen paksusuolen kasvaimesta kasvatetut kasvaimet, viiteen 7-8 eläimen ryhmään. Yhtä ryhmää käytettiin vertailuryhmänä ja näihin hiiriin ruiskutettiin samanaikaisesti i.v. 1 pCi 1251-leimattua ihmisen seerumial-30 bumiinia (0,01 mg HSA) ja 3 pCi 111In-sitraattia (0,01 mg sitraattia ilman kantaja-ainetta) ja eläimet tapettiin 48 h:n kuluttua ruiskutuksesta. Muissa neljässä ryhmässä eläimiin ruiskutettiin samanaikaisesti 3 pCi 111 In-leimattua anti-CEA:ta (1,5 pg vasta-ainetta) ja 5 pCi 67Ga-sitraattia 35 (ilman kantaja-ainetta). Ryhmät tapettiin 4, 24, 48 ja25 In another experiment, were divided into 37 mice with tumors had grown from the same human colon tumor, five groups of 7-8 animals. One group was used as a control group and these mice were injected simultaneously i.v. 1 pCi 1251-labeled human serum albumin (0.01 mg HSA) and 3 pCi 111 In citrate (0.01 mg citrate without vehicle) and animals were sacrificed 48 h after injection. In the other four groups, animals were simultaneously injected with 3 pCi 111 In-labeled anti-CEA (1.5 pg antibody) and 5 pCi 67Ga citrate 35 (without vehicle). Groups 4, 24, 48 and
IIII
n 82379 vastaavasti 72 h:n kuluttua. Kudosten irrottaminen, näytteiden preparoiminen radioaktiivisuusmittausta varten, laskentamenetelmät ja laskelmat olivat samanlaisia kuin edellisessä kokeessa. mIn:n ollessa kyseessä spektrometri 5 säädettiin laskemaan piikki 247 keV 40 keV:n rakoa käyttäen (210 - 250 keV), kun taas 67Ga laskettiin raolla 30 keV (piikki 93 keV). Näillä säädöillä olivat radioaktiivi-suuskäänteisvaikutukset alle 10 %.n 82379 after 72 h, respectively. Tissue extraction, sample preparation for radioactivity measurement, counting methods and calculations were similar to the previous experiment. In the case of mIn, spectrometer 5 was adjusted to calculate a peak of 247 keV using a gap of 40 keV (210-250 keV), while 67Ga was calculated with a gap of 30 keV (peak of 93 keV). These adjustments had less than 10% radioactivity reversals.
Kuten kuviosta 1 ilmenee, kasvaimeen kerääntyvät 10 luln-anti-CEA-pitoisuudet kasvoivat tasaisesti ajan funktiona. Ruiskutetusta annoksesta oli akkumuloitunut 23 % 72 h:n kuluessa, ja tulokset viittaavat siihen, että tämä taso olisi voinut olla vielä korkeampi, jos näytteitä olisi otettu myöhemmin. Pitoisuus veressä sitä vastoin aleni 15 ajan kuluessa. Nopeaa kerääntymistä maksaan tapahtui ensimmäisten neljän tunnin aikana, minkä jälkeen seurasi vähäisen muutoksen jakso ja sitten kohoaminen 72 h:iin asti. Muissa kudoksissa tapahtui pieniä muutoksia tutkittuna ajanjaksona.As shown in Figure 1, the concentrations of luln anti-CEA accumulating in the tumor increased steadily as a function of time. 23% of the injected dose had accumulated within 72 h, and the results suggest that this level could have been even higher if samples had been taken later. In contrast, blood levels decreased over 15 years. Rapid accumulation in the liver occurred during the first four hours, followed by a period of minor change and then elevation to 72 h. Minor changes occurred in other tissues during the study period.
20 67Ga-taso kasvaimessa pysyi melko vakiona kokeen aikana ja se oli noin 1/4 mIn-anti-CEA:n tasosta 72 h:n kuluttua. 67Ga-taso veressä aleni jatkuvasti, kun taas pitoisuus maksassa vaihteli suunnilleen samalla lailla kuin 111In-leimatulla vasta-aineella. 67Ga-pitoisuus lihaksissa 25 aleni ensimmäisten 48 h:n aikana ja asettui sitten paikalleen, kun taas pitoisuus luissa pysyi samanlaisena koko ajan.20 67Ga levels in the tumor remained fairly constant during the experiment and were approximately 1/4 of the level of mIn anti-CEA after 72 h. The level of 67Ga in the blood decreased continuously, while the concentration in the liver varied approximately in the same way as with 111In-labeled antibody. The 67Ga concentration in muscle 25 decreased during the first 48 h and then settled, while the concentration in bones remained the same throughout.
Jodidimäärä kasvaimessa oli korkeimmillaan 4 h:n kuluttua ja oli alussa hieman korkeampi kuin 111In-määrä, 30 aleni sitten epäsäännöllisesti kokeen jatkon aikana ja oli vain 1/10 ulIn:n pitoisuudesta 72 h:n kuluttua. Tässä vaiheessa kasvaimessa oli 67Ga:ta kaksinkertainen määrä 125I:iin nähden. 125I:n tuiketiheys aleni kaikissa kudoksissa nopeasti 4 h:n kohdalla olleesta maksimiarvostaan ja saa-35 vutti joissakin tapauksissa taustatason 48 h:n kuluessa.The amount of iodide in the tumor peaked after 4 h and was initially slightly higher than 111In, then decreased irregularly during the continuation of the experiment and was only 1/10 of the concentration of 111In after 72 h. At this point, the tumor contained 67Ga twice the amount of 125I. The scintillation density of 125I decreased rapidly in all tissues from its maximum value at 4 h and in some cases reached the background level within 48 h.
i2 82379i2 82379
Eritystiedot (kuvio 2) osoittavat tasaista nousua virtsan inIn-pitoisuudessa 24 ja 72 h:n välillä ja se on korkeimmillaan 14 % ruiskutetusta annoksesta. Ulosteiden mIn-pitoisuus pysyi melko tasaisena 24 ja 48 h:n kuluttua 5 ja kohosi sitten 17 %:iin 72 h:n kuluttua, kun taas pitoisuus suolistossa pysyi melko tasaisena koko koejakson aikana eikä ylittänyt missään vaiheessa 5 % annoksesta.Excretion data (Figure 2) show a steady increase in urinary inIn concentration between 24 and 72 h, peaking at 14% of the injected dose. The fecal mIn concentration remained fairly constant after 24 and 48 h 5 and then increased to 17% after 72 h, while the intestinal concentration remained fairly constant throughout the experimental period and did not exceed 5% of the dose at any point.
67Ga erittyi suunnilleen samalla tavalla kuin luln, mutta enemmän merkkiainetta havaittiin suolistossa ja 10 ulosteissa ja vähemmän merkkiainetta virtsassa kuin inln:n ollessa kyseessä.67Ga was excreted in approximately the same manner as luln, but more tracer was detected in the intestine and feces and less tracer in urine than inln.
Lähes 60 % 125I-radioaktiivisuudesta poistui virtsan mukana ensimmäisten 24 h:n aikana ja 75 % 48 h:ssa. Ulosteiden mukana poistui vielä 5 %. Siten noin 80 % alunperin 15 ruiskutetusta 125I:sta oli erittynyt eläimestä 72 h:n kuluttua. Virtsan sisältämän 125I:n kromatografinen tutkiminen osoitti suurimman osan siitä olevan vapaana jodidina, jonka lisäksi mukana oli todennäköisesti vapaata 125I:a kom-pleksoituneena johonkin muuhun aineeseen kuin proteiiniin. 20 Kuviossa 3 ovat tiedot mIn-leimatusta anti-CEA:sta 48 h:n kuluttua verrattuna U1ln-sitraattiin ja 125I-HSA:han. 111In-sitraattia käytettiin vertailunäytteenä mille tahansa indiumille, jota olisi voinut irrota vasta-aineesta, kun taas 125I-HSA:ta käytettiin epäspesifisenä proteiinivertai-25 lunäytteenä. mIn-anti-CEA jakautui hyvin eri tavalla kuin 111In-sitraatti ja kerääntyi tehokkaammin kasvaimeen (tekijä 10). Näiden kahden merkkiaineen kerääntyminen muihin kudoksiin oli myös erilaista. 125I-HSA:n pitoisuus kasvaimessa oli 20 % mIn-anti-CEA:n pitoisuudesta, mutta kuitenkin 50 30 % suurempi kuin 125I-anti-CEA:n pitoisuus. 125I-HSA:n jakau tuminen muihin kuin kasvainkudoksiin oli myös selvästi erilainen kuin mIn-anti-CEA-tuotteen. Erityisen merkittä-vää on se, että 125I-HSA, jota on pitkään pidetty stabiilina jodipitoisena proteiinina, erittyi lähes 60- %-sesti (43 % 35 virtsaan) 48 h:ssa, mikä sopii merkittävän hyvin yhteenNearly 60% of 125 I radioactivity was excreted in the urine during the first 24 h and 75% at 48 h. Another 5% was excreted in the faeces. Thus, approximately 80% of the 125 I originally injected was excreted from the animal after 72 h. Chromatographic examination of 125I in urine showed that most of it was free iodide, in addition to which free 125I was probably present complexed with a substance other than protein. Figure 3 shows data for mIn-labeled anti-CEA after 48 h compared to U1nn citrate and 125I-HSA. 111 In-citrate was used as a control for any indium that could have been detached from the antibody, while 125 I-HSA was used as a non-specific protein control. mIn-anti-CEA was distributed very differently from 111In-citrate and accumulated more efficiently in the tumor (factor 10). The accumulation of these two markers in other tissues was also different. The concentration of 125I-HSA in the tumor was 20% of the concentration of mIn-anti-CEA, but still 50-30% higher than the concentration of 125I-anti-CEA. The distribution of 125 I-HSA in non-tumor tissues was also markedly different from that of the mIn anti-CEA product. Of particular significance is the fact that 125 I-HSA, which has long been considered a stable iodine-containing protein, was excreted almost 60% (43% in 35 urine) at 48 h, which fits significantly well with
IIII
i3 82379 sen havainnon kanssa, että myös 125I-anti-CEA:ta löytyi virtsasta. Virtsassa oleva jodi on todennäköisesti vapaana jodidina.i3 82379 with the finding that 125 I-anti-CEA was also found in the urine. Iodine in urine is likely to be free iodide.
Kasvain/kudos-suhteet (kuvio 4) osoittavat, että 5 1:ilIn-anti-CEA on ylivoimainen 67Ga:iin nähden kaikissa muissa kudoksissa paitsi veressä, jossa se on suunnilleen samanlainen. 125I-anti-CEA-suhteet, vaikka ne näennäisesti ovat edullisempia kuin U1ln:n ja 67Ga:n arvot joissakin kudoksissa, ovat harhaanjohtavia, sillä ne aiheutuvat 10 enemmän normaalien kudosten alhaisesta 125I-pitoisuudesta kuin kerääntymisestä kasvaimeen.Tumor / tissue ratios (Figure 4) show that 5 L of 1 anti-CEA is superior to 67 Ga in all tissues except blood, where it is approximately similar. 125 I-anti-CEA ratios, although seemingly more favorable than U1nn and 67Ga values in some tissues, are misleading because they result from 10 more low 125I levels in normal tissues than accumulation in the tumor.
Edellä olevien kokeiden valossa 125I-anti-CEA on selvästi soveltumaton kasvainten paikallistamisaineeksi. Nopea ja laaja dehalogenoituminen alentaa kasvainten merk-15 kiaineen pitoisuutta ja suurentaa veressä olevaa taustapi-toisuutta, mikä estää sen käytön paikallistamisessa, ellei käytetä monimutkaisia vähennysmenetelmiä. Itse asiassa kasvain sisältää 72 h:n kuluttua kaksi kertaa niin paljon epäspesifistä 67Ga:ia grammaa kohden kuin 125I:a. Lisäksi 20 kasvain/veri-suhteet ovat parempia 67Ga:lla kuin jodipitoisella vasta-aineella. Kun otetaan huomioon se, että 67Ga:ta pidetään sopimattomana paksusuolen rauhassyövän havaitsemiseen, ovat Mach et al.'n [N. Eng. J. Med. 303 (1980) 5 -10] kohtaamat vaikeudet helposti selitettävissä. Nämä 25 125I:lla saadut tulokset osoittavat kiistattomasti, että jos käytettäisiin 131I: a ilman vähennysmenetelmää, tarvittaisiin hyvin suuria annoksia 131I-leimattua materiaalia, jotta saavutettaisiin tehokkaalle paikallistamiselle välttämättömät pitoisuudet kasvaimessa. Tämä johtaisi siihen, että poti-30 las saisi suuren säteilyannoksen 131I:n puoliintumisajan (8 d) ja 608 keV:n beeta-komponentin takia.In light of the above experiments, 125 I-anti-CEA is clearly unsuitable as a tumor localizing agent. Rapid and extensive dehalogenation lowers the tumor tracer concentration and increases the background concentration in the blood, which precludes its use in localization unless complex reduction methods are used. In fact, after 72 h, the tumor contains twice as much nonspecific 67Ga per gram as 125I. In addition, tumor / blood ratios are better with 67Ga than with iodinated antibody. Taking into account the fact that 67Ga is considered inappropriate for the detection of colorectal adenocarcinoma, are Mach, et al [N. Eng. J. Med. 303 (1980) 5 -10] can be easily explained. These results with 125 I unequivocally indicate that if 131I were used without the reduction method, very large doses of 131I-labeled material would be required to achieve the concentrations necessary for effective localization in the tumor. This would result in a pot-30 las receiving a high radiation dose due to the half-life (8 d) of 131I and the beta component of 608 keV.
Sitä vastoin kasvaimen sitoma suuri osuus ruiskutetusta ulIn-anti-CEA-annoksesta sekä luIn:n edullisemmat fysikaaliset ominaisuudet tekevät mahdolliseksi ruiskuttaa 35 pienempiä määriä radioaktiivista ainetta havaitsemistehok- 14 82379 kuuden parantuessa ja potilaan saaman säteilyannoksen pienetessä samalla.In contrast, the high tumor-bound proportion of the injected dose of ulIn anti-CEA, as well as the more favorable physical properties of luIn, allow the injection of 35 smaller amounts of radioactive material as the detection efficiency improves and the radiation dose received by the patient decreases.
i:iIn-anti-CEA:n kasvain/tausta -suhteet ovat hyvin alueella, joka vaaditaan havaitsemistarkoituksiin, 5 koska suuri osa radionuklidista kerääntyy kasvaimeen. Lisäksi tiedot viittaavat siihen, että kasvain vetää itseensä radioaktiivista merkkiainetta, joka kerran on imeytynyt tai tarttunut muihin kudoksiin.The tumor / background ratios of i: iIn-anti-CEA are well within the range required for detection purposes, 5 as a large proportion of the radionuclide accumulates in the tumor. In addition, the data suggest that the tumor absorbs a radioactive tracer that has once been absorbed or adhered to other tissues.
Kullekin hiirelle tehtiin kerroskuvaus 4, 24, 48 ja 10 72 h:n kuluttua mIn-leimatun anti-CEA:n ruiskutuksestaEach mouse was layered 4, 24, 48, and 10 72 h after injection of mIn-labeled anti-CEA.
Phogam H P Anger -gammakameraa käyttäen. Kasvain oli 48 h:n kuluttua hyvin määritettävissä tarvitsematta turvautua vähennysmenetelmään. 72 h:n kuluttua kasvain oli vieläkin paremmin havaittavissa.Using a Phogam H P Anger gamma camera. After 48 h, the tumor was well detectable without the need for recourse. After 72 h, the tumor was even more detectable.
15 On tunnettua, että CEA ja jotkut muut kasvaimeen liittyvät antigeenit erittyvät kasvaimesta. Sellaisissa tapauksissa taustasäteilyvaikutusta, joka johtuu siitä, että veressä tai muussa kudoksessa kiertävä antigeeni yhdistyy leimattuun vasta-aineeseen, voidaan vähentää anta-20 maila aluksi leimaamatonta vasta-ainetta, joka liittyy verenkierrossa olevaan antigeeniin. Tämä saattaisi vähentää myös leimatun vasta-aineen suurta imeytymistä maksaan. Sopivan ajan kuluttua lisätään leimattu vasta-aine ja kohteelle tehdään kerroskuvaus keskittyneen säteilyn kohdan 25 määrittämiseksi.It is known that CEA and some other tumor-associated antigens are secreted from the tumor. In such cases, the background radiation effect due to the antigen circulating in the blood or other tissue combining with the labeled antibody can be reduced by providing an initially 20 unlabeled antibody associated with the circulating antigen. This could also reduce the high absorption of the labeled antibody in the liver. After an appropriate time, the labeled antibody is added and the subject is subjected to layer imaging to determine site 25 of concentrated radiation.
Vaikka edellä on painotettu yhden radionuklidilla leimatun monoklonaalisen vasta-aineen käyttöä, myös kahta tai jopa useampaa, antigeenin eri determinantteihin liittyvää, leimattua monoklonaalista vasta-ainetta voidaan 30 käyttää. Eri vasta-aineet valitaan siten, etteivät ne häiritse toisen vasta-aineen liittymistä antigeeniin. Käyttämällä useita toisiaan häiritsemättömiä leimattuja vasta-aineita voidaan kasvaimen havaitsemista tehostaa, sillä antigeenillä on tällöin kyky sitoa enemmän leimattua vas-35 ta-ainetta. Useiden vasta-aineiden käyttö on erityisen is 82379 hyödyllistä etsittäessä kasvainta, johon liittyvää antigeeniä on pieniä pitoisuuksia.Although the use of a single radionuclide-labeled monoclonal antibody has been emphasized above, two or even more labeled monoclonal antibodies associated with different antigenic determinants may also be used. The various antibodies are selected so as not to interfere with the binding of another antibody to the antigen. The use of several uninterrupted labeled antibodies can enhance tumor detection, as the antigen then has the ability to bind more labeled antibody. The use of multiple antibodies is particularly useful in the search for a tumor with low concentrations of associated antigen.
Edellä oleva kuvaus koskee tässä yhteydessä edullisia toteutusmuotoja ja on korostettava sitä, että alan 5 asiantuntijat löytävät helposti muita muunnelmia. Siten vain seuraavat patenttivaatimukset rajoittavat keksinnön sisältöä.The above description relates to preferred embodiments in this context and it should be emphasized that other variations will be readily apparent to those skilled in the art. Thus, only the following claims limit the scope of the invention.
Claims (6)
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US31528681A | 1981-10-27 | 1981-10-27 | |
| US31528681 | 1981-10-27 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI823633A0 FI823633A0 (en) | 1982-10-25 |
| FI823633L FI823633L (en) | 1983-04-28 |
| FI82379B FI82379B (en) | 1990-11-30 |
| FI82379C true FI82379C (en) | 1991-03-11 |
Family
ID=23223718
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI823633A FI82379C (en) | 1981-10-27 | 1982-10-25 | Radioactively labeled monoclonal antibodies and a composition containing them and useful as diagnostic radiopharmaceutical |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS58135820A (en) |
| AT (1) | AT392004B (en) |
| BE (1) | BE894829A (en) |
| CA (1) | CA1202892A (en) |
| CH (1) | CH653040A5 (en) |
| DE (1) | DE3239410A1 (en) |
| DK (1) | DK164682C (en) |
| ES (2) | ES516797A0 (en) |
| FI (1) | FI82379C (en) |
| FR (1) | FR2515046B1 (en) |
| GB (1) | GB2109407B (en) |
| IL (1) | IL67068A0 (en) |
| IT (1) | IT1153857B (en) |
| LU (1) | LU84441A1 (en) |
| NL (1) | NL8204108A (en) |
| NO (1) | NO169947C (en) |
| SE (1) | SE8206073L (en) |
| ZA (1) | ZA827806B (en) |
Families Citing this family (47)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4957939A (en) * | 1981-07-24 | 1990-09-18 | Schering Aktiengesellschaft | Sterile pharmaceutical compositions of gadolinium chelates useful enhancing NMR imaging |
| GB2122641B (en) * | 1982-06-07 | 1986-08-06 | Otto A Gansow | Metal chelate conjugated monoclonal antibodies where in the metal is an emitter |
| US4741900A (en) * | 1982-11-16 | 1988-05-03 | Cytogen Corporation | Antibody-metal ion complexes |
| GB2140030A (en) * | 1983-04-08 | 1984-11-21 | Kureha Chemical Ind Co Ltd | Monoclonal antibody to human urinary bladder cancer |
| GB2139645A (en) * | 1983-04-08 | 1984-11-14 | Kureha Chemical Ind Co Ltd | Antibody to human prostrate cancer |
| JPS59199636A (en) * | 1983-04-26 | 1984-11-12 | Nippon Mejifuijitsukusu Kk | Radioactive diagnostic agent and production thereof |
| US4677058A (en) * | 1983-05-19 | 1987-06-30 | Karl Tryggvason | Detecting malignant cells with monoclonal antibodies specific to type IV collagenase enzyme |
| US4732864A (en) * | 1983-10-06 | 1988-03-22 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Trace-labeled conjugates of metallothionein and target-seeking biologically active molecules |
| JPS60201260A (en) * | 1984-03-27 | 1985-10-11 | Yamasa Shoyu Co Ltd | Myocardial myosin diagnosing agent |
| JP2507982B2 (en) * | 1984-04-10 | 1996-06-19 | 武田薬品工業株式会社 | Method for producing human carcinoembryonic antigen-reactive monoclonal antibody |
| US4898724A (en) * | 1984-06-04 | 1990-02-06 | The Dow Chemical Company | Organis amine phosphonic acid complexes for the treatment of calcific tumors |
| CA1260827A (en) * | 1984-08-31 | 1989-09-26 | Richard C. Siegel | Antibody-metal ion complexes |
| US4837003A (en) * | 1984-09-13 | 1989-06-06 | Mallinckrodt, Inc. | Radiolabeled antibody fragments |
| US4659839A (en) * | 1984-10-10 | 1987-04-21 | Mallinckrodt, Inc. | Coupling agents for radiolabeled antibody fragments |
| US5242679A (en) * | 1985-01-14 | 1993-09-07 | Neorx Corporation | Metal radionuclide labeled proteins for diagnosis and therapy |
| US4897255A (en) * | 1985-01-14 | 1990-01-30 | Neorx Corporation | Metal radionuclide labeled proteins for diagnosis and therapy |
| US4986256A (en) * | 1985-02-28 | 1991-01-22 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Use of paramagnetic metalloporphyrins as contrast agents for tumors in MRI imaging |
| US4824986A (en) * | 1985-04-26 | 1989-04-25 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Metal chelate protein conjugate |
| US4830847A (en) * | 1985-06-28 | 1989-05-16 | The Procter & Gamble Company | Diphosphonate-derivatized macromolecules |
| US4732974A (en) * | 1986-03-05 | 1988-03-22 | Mallinckrodt, Inc. | Metal ion labeling of carrier molecules |
| US4877868A (en) * | 1986-03-12 | 1989-10-31 | Neorx Corporation | Radionuclide antibody coupling |
| US5082930A (en) * | 1986-05-29 | 1992-01-21 | Mallinckrodt Medical, Inc. | Coupling agents for joining radionuclide metal ions with biologically useful proteins |
| US4861869A (en) * | 1986-05-29 | 1989-08-29 | Mallinckrodt, Inc. | Coupling agents for joining radionuclide metal ions with biologically useful proteins |
| US4925804A (en) * | 1986-06-17 | 1990-05-15 | Baxter International Inc. | Interligand metal transfer assay |
| US4831175A (en) * | 1986-09-05 | 1989-05-16 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Backbone polysubstituted chelates for forming a metal chelate-protein conjugate |
| US5246692A (en) * | 1986-09-05 | 1993-09-21 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Health And Human Services | Backbone polysubstituted chelates for forming a metal chelate-protein conjugate |
| FR2604092B1 (en) * | 1986-09-19 | 1990-04-13 | Immunotech Sa | IMMUNOREACTIVES FOR TARGETING ANIMAL CELLS FOR VISUALIZATION OR DESTRUCTION IN VIVO |
| CA1340014C (en) * | 1986-10-27 | 1998-08-25 | Bryan Michael Longenecker | Carcinoma-marking monoclonal antibodies elicited with synthetic asialo-gmi antigen |
| US5057302A (en) * | 1987-02-13 | 1991-10-15 | Abbott Laboratories | Bifunctional chelating agents |
| US5227474A (en) * | 1987-02-13 | 1993-07-13 | Abbott Laboratories | Bifunctional chelating agents |
| DE3710730A1 (en) * | 1987-03-31 | 1988-10-20 | Schering Ag | SUBSTITUTED COMPLEX ILLUMINATORS, COMPLEX AND COMPLEX SALTS, METHOD FOR THE PRODUCTION THEREOF AND PHARMACEUTICAL AGENTS CONTAINING THEM |
| US5053493A (en) * | 1987-04-02 | 1991-10-01 | Centocor Cardiovascular Imaging Partners, L.P. | Method for labeling antibodies with a metal ion |
| US5177192A (en) * | 1987-04-02 | 1993-01-05 | Centocor, Incorporated | Method for labeling antibodies with a metal ion |
| US4838274A (en) * | 1987-09-18 | 1989-06-13 | Air Products And Chemicals, Inc. | Perfluoro-crown ethers in fluorine magnetic resonance imaging |
| US5217704A (en) * | 1987-11-06 | 1993-06-08 | Abbott Laboratories | Methods and materials for the preparation of metal labelled antibody solutions |
| US5648471A (en) * | 1987-12-03 | 1997-07-15 | Centocor, Inc. | One vial method for labeling antibodies with Technetium-99m |
| US4867962A (en) * | 1988-02-26 | 1989-09-19 | Neorx Corporation | Functionally specific antibodies |
| US5075099A (en) * | 1988-05-31 | 1991-12-24 | Neorx Corporation | Metal radionuclide chelating compounds for improved chelation kinetics |
| US4988496A (en) * | 1988-05-31 | 1991-01-29 | Neorx Corporation | Metal radionuclide chelating compounds for improved chelation kinetics |
| US5218128A (en) * | 1988-06-15 | 1993-06-08 | Centocor, Inc. | Bifunctional coupling agents and radionuclide labeled compositions prepared therefrom |
| US5688488A (en) * | 1989-04-03 | 1997-11-18 | Purdue Research Foundation | Composition and method for tumor imaging |
| US5792444A (en) * | 1989-05-09 | 1998-08-11 | The General Hospital Corporation | Labeled chemotactic peptides to image focal sites of infection or inflammation |
| EP0955066A3 (en) * | 1992-07-31 | 2002-08-28 | Australian Nuclear Science And Technology Organisation | Metal complexes of hydroxyaryl containing aminocarboxylic acid chelating agents |
| US5807535A (en) * | 1992-07-31 | 1998-09-15 | Australian Nuclear Science & Technology Organisation | Metal complexes of hydroxyaryl containing aminocarboxylic acid chelating agents |
| US6558669B1 (en) | 1996-08-28 | 2003-05-06 | Immunomedics, Inc. | Stable radioiodine conjugates and methods for their synthesis |
| US6663866B1 (en) | 1996-08-28 | 2003-12-16 | Immunomedics, Inc. | Stable radioiodine conjugates and methods for their synthesis |
| US7521531B2 (en) | 1996-08-28 | 2009-04-21 | Immunomedics, Inc. | Methods for the purification of stable radioiodine conjugates |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4323546A (en) * | 1978-05-22 | 1982-04-06 | Nuc Med Inc. | Method and composition for cancer detection in humans |
| US4272503A (en) * | 1978-05-25 | 1981-06-09 | New England Nuclear Corporation | Reductant composition for technetium-99m and method for making technetium-99m labelled ligands |
| US4311688A (en) * | 1979-10-29 | 1982-01-19 | Serono Laboratories Inc. | Composition and method for cancer detection in humans |
| AU556548B2 (en) * | 1980-03-03 | 1986-11-06 | Milton David Goldenberg | Tumor localization and therapy with labeled antibodies and antibody fragments specific to tumor-associated markers |
-
1982
- 1982-10-25 GB GB08230356A patent/GB2109407B/en not_active Expired
- 1982-10-25 NL NL8204108A patent/NL8204108A/en not_active Application Discontinuation
- 1982-10-25 AT AT0391682A patent/AT392004B/en not_active IP Right Cessation
- 1982-10-25 DE DE19823239410 patent/DE3239410A1/en active Granted
- 1982-10-25 FR FR8217800A patent/FR2515046B1/en not_active Expired
- 1982-10-25 FI FI823633A patent/FI82379C/en not_active IP Right Cessation
- 1982-10-25 NO NO823530A patent/NO169947C/en unknown
- 1982-10-25 ES ES516797A patent/ES516797A0/en active Granted
- 1982-10-26 LU LU84441A patent/LU84441A1/en unknown
- 1982-10-26 JP JP57188921A patent/JPS58135820A/en active Granted
- 1982-10-26 IT IT23932/82A patent/IT1153857B/en active
- 1982-10-26 SE SE8206073A patent/SE8206073L/en not_active Application Discontinuation
- 1982-10-26 IL IL67068A patent/IL67068A0/en not_active IP Right Cessation
- 1982-10-26 CA CA000414208A patent/CA1202892A/en not_active Expired
- 1982-10-26 ZA ZA827806A patent/ZA827806B/en unknown
- 1982-10-26 CH CH6239/82A patent/CH653040A5/en not_active IP Right Cessation
- 1982-10-26 DK DK474182A patent/DK164682C/en active
- 1982-10-27 BE BE0/209345A patent/BE894829A/en not_active IP Right Cessation
-
1984
- 1984-01-31 ES ES529310A patent/ES8505482A1/en not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0564130B2 (en) | 1993-09-14 |
| ATA391682A (en) | 1990-07-15 |
| ES8404857A1 (en) | 1984-05-16 |
| FR2515046A1 (en) | 1983-04-29 |
| FI823633A0 (en) | 1982-10-25 |
| JPS58135820A (en) | 1983-08-12 |
| SE8206073D0 (en) | 1982-10-26 |
| IT1153857B (en) | 1987-01-21 |
| CA1202892A (en) | 1986-04-08 |
| DE3239410C2 (en) | 1991-12-19 |
| DK474182A (en) | 1983-04-28 |
| LU84441A1 (en) | 1983-06-13 |
| CH653040A5 (en) | 1985-12-13 |
| IT8223932A0 (en) | 1982-10-26 |
| NO169947C (en) | 1992-08-26 |
| FI82379B (en) | 1990-11-30 |
| DK164682C (en) | 1992-12-21 |
| DE3239410A1 (en) | 1983-05-19 |
| DK164682B (en) | 1992-08-03 |
| GB2109407B (en) | 1985-12-18 |
| NO823530L (en) | 1983-04-28 |
| ES529310A0 (en) | 1985-05-16 |
| FI823633L (en) | 1983-04-28 |
| GB2109407A (en) | 1983-06-02 |
| NO169947B (en) | 1992-05-18 |
| ES8505482A1 (en) | 1985-05-16 |
| NL8204108A (en) | 1983-05-16 |
| IL67068A0 (en) | 1983-02-23 |
| ZA827806B (en) | 1983-08-31 |
| BE894829A (en) | 1983-02-14 |
| AT392004B (en) | 1991-01-10 |
| ES516797A0 (en) | 1984-05-16 |
| SE8206073L (en) | 1983-04-28 |
| FR2515046B1 (en) | 1985-11-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI82379C (en) | Radioactively labeled monoclonal antibodies and a composition containing them and useful as diagnostic radiopharmaceutical | |
| Halpern et al. | Stability, characterization, and kinetics of 111In-labeled monoclonal antitumor antibodies in normal animals and nude mouse-human tumor models | |
| Anderson et al. | Copper-64-labeled antibodies for PET imaging | |
| Scheinberg et al. | Kinetic and catabolic considerations of monoclonal antibody targeting in erythroleukemic mice | |
| Chinn et al. | Preclinical evaluation of 90Y-labeled anti-CD20 monoclonal antibody for treatment of non-Hodgkin's lymphoma. | |
| US4634586A (en) | Reagent and method for radioimaging leukocytes | |
| Garg et al. | Comparative tissue distribution in mice of the α-emitter 211At and 131I as labels of a monoclonal antibody and F (ab′) 2 fragment | |
| Bernhard et al. | Localization of 111In-and 125I-labeled monoclonal antibody in guinea pigs bearing line 10 hepatocarcinoma tumors | |
| Goodwin et al. | Biological properties of biotin-chelate conjugates for pretargeted diagnosis and therapy with the avidin/biotin system | |
| Delaloye et al. | Comparison of copper-67-and iodine-125-labeled anti-CEA monoclonal antibody biodistribution in patients with colorectal tumors | |
| Gaffar et al. | Experimental studies of tumor radioimmunodetection using antibody mixtures against carcinoembryonic antigen (CEA) and colon‐specific antigen‐p (CSAp) | |
| Anderson et al. | Stability, targeting, and biodistribution of scandium-46-and gallium-67-labeled monocolonal antibody in erythroleukemic mice | |
| Andrew et al. | A comparison of iodine and indium labelled anti CEA intact antibody, F (ab) 2 and Fab fragments by imaging tumour xenografts | |
| Stein et al. | Advantage of a residualizing iodine radiolabel for radioimmunotherapy of xenografts of human non-small-cell carcinoma of the lung | |
| Sakahara et al. | Localization of human osteogenic sarcoma xenografts in nude mice by a monoclonal antibody labeled with radioiodine and indium-111 | |
| Buchsbaum et al. | Comparison of the distribution and binding of monoclonal antibodies labeled with 131-iodine or 111-indium | |
| Thakur et al. | Technetium-99m-labeled proteins for imaging inflammatory foci | |
| Alauddin et al. | An improved method of direct labeling monoclonal antibodies with 99mTc | |
| Epstein et al. | Radioimmunodetection of human B-cell lymphomas with a radiolabeled tumor-specific monoclonal antibody (Lym-1) | |
| Kobayashi et al. | Repeating the avidin “chase” markedly improved the biodistribution of radiolabelled biotinylated antibodies and promoted the excretion of additional background radioactivity | |
| Page et al. | Preclinical evaluation and PET imaging of 18F-labeled Mel-14 F (ab′) 2 fragment in normal dogs | |
| Hansen et al. | Labeling of anti-tumor antibodies and antibody fragments with Tc-99m | |
| Gadina et al. | Preclinical pharmacokinetics and localization studies of the radioiodinated anti-ovarian carcinoma MAb MOv18 | |
| Singh et al. | A simplified kit for instant preparation of technerium-99m human immunoglobulin-G for imaging inflammatory foci | |
| Zalutsky | Radiohalogens for radioimmunotherapy |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: HYBRITECH INCORPORATED Owner name: THE REGENTS OF THE UNIVERSITY OF |