FI79316C - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt aktiva 2,3,4,5-tetrahydro-11-fenyl-1h-/1,4/diazepino/1,7-a/ indoler. - Google Patents

Description

1 79316

Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten 2,3,4,5-tetrahydro-ll-fenyyli-lH-/l, 4_7diatsepino/l, 7-a_7indolien valmistamiseksi 5 Tämä keksintö koskee 2,3,4,5-tetrahydro-lH-/l,47“ diatsepino/Ί,7-aJindolien ja niiden happoadditiosuolojen valmistusta.

Julkaisussa Chem. Pharm. Bull. 28 (1980) 900-909 on selostettu 4,5-dihydro-lH-/1,4_7diatsepino/"l, 7-a7indol-10 l(3H)-onin valmistusta eräänä muutamista sivutuotteista, joita muodostuu fotosyklisoitaessa N-klooriasetyyli-1-indolyylietyyliamiinia. Mitään hyötykäyttöä yhdisteelle ei ole ehdotettu.

Keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden 15 yleiskaava on I

-I]-R2 R--I | 3 N-R, 1 8 -N ^5 4/

7 6 I

R6 25 jossa ja R£ toisistaan riippumatta tarkoittavat vetyä, fluoria, klooria, bromia, (C^_^) alkyyliä, (C^_4) alkoksia tai trifluorimetyyliä; R3 on vety, (C1_^)alkyyli, (C3_g)- sykloalkyyli (C1_2) alkyyli, (C^_5) alkenyyli tai (C^^Jal-kinyyli, R4, R5 ja Rg toisistaan riippumatta tarkoittavat 30 vetyä tai (_^)alkyyliä. Keksintö käsittää myös kaavan I mukaisten yhdisteiden happoadditiosuolojen valmistuksen.

Jokaisessa alkyyli- tai alkoksiradikaalissa, jossa on 1-4 hiiliatomia, on ensisijaisesti 1-3 hiiliatomia, erityisesti 1 tai 2 hiiliatomia. Sykloalkyyli tai sykloalkyy-35 lialkyylin sykloalkyyliosa on tarkoituksenmukaisesti syk-lopentyyli ja erityisesti syklopropyyli. Sykloalkyylialk- 2 79316 yylin alkyyliosassa on tarkoituksenmukaisesti 1 hiiliatomi. Halogeeni on ensisijaisesti kloori tai fluori ja erityisesti kloori. Ensisijaisesti alkenyylin tai alkinyylin moninkertainen sidos ei ole &,β-asemassa.

5 Kaavassa I on ensisijaisesti ytimen 8- tai 9- asemassa. R2 on ensisijaisesti fenyylirenkaan 2- tai 4-asemassa.

Keksinnön mukaisten yhdisteiden piiriin sisältyvät kaikki mahdolliset yksityiset enantiomeerit, raseemiset 10 seokset, diastereoisomeerit samoin kuin niiden seokset.

Uusia yhdisteitä valmistetaan siten, että a) yhdisteen valmistamiseksi, jonka kaava on Ia , fc - *ϊ—rCH2R1 20 6

jossa R^, R2/ R^ - Rg ovat edellä määriteltyjä ja R^ on vety, (¢4.3)alkyyli, (C3_g)sykloalkyyli tai (C3_g)sykloalkyyli (C^_2) alkyyli , tai sen happoadditiosuolan valmista-25 miseksi, pelkistetään yhdiste, jonka kaava on II

R1 _Jv/*,-C»2R3 R ° R6 35 jossa R^, R2» R^ - Rg ja R3 ovat edellä määriteltyjä, tai sen happoadditiosuola ja 3 79316 b) yhdisteen valmistamiseksi, jonka kaava on Ib r2—L l

R1-- I I NH

— V_/ R6 10 jossa R^, R2» R4 - Rg ovat edellä määriteltyjä, tai sen happoadditiosuolan valmistamiseksi, demetyloidaan kaavan Ia mukainen yhdiste, jossa R^ on vety, tai sen happoaddi-tiosuola, ja 15 c) yhdisteen valmistamiseksi, jonka kaava on Ie - .J^A\ " 1 _/'* 3 R6 25 jossa R^, R2, - Rg ovat edellä määriteltyjä ja R” on (C2_g) sykloalkyyli, (C^g) sykloalkyyli ) alkyyli, (C^g)alkenyyli tai (C^_^)alkinyyli, tai sen happoadditiosuolan valmistamiseksi, liitetään ryhmä R ^ edellä määriteltyyn kaavan Ib mukaiseen yhdisteeseen, tai sen happo- 30 additiosuolaan, ja kaavan I mukainen yhdiste otetaan talteen vapaan emäksen muodossa tai happoadditiosuolan muodossa.

4 79316

Menetelmä a) voidaan suorittaa tavalliseen tapaan analogisten pelkistysten mukaisesti. Pelkistys voidaan suorittaa hydridi-kompleksilla kuten diboraanilla, alumi-niumhydridillä tai litiumaluminiumhydridillä. Tarkoituk-5 sen mukaista on käyttää inerttiä orgaanista liuotinta, esim. eetteriä, kuten tetrahydrofuraania tai dioksaania. Sopivat lämpötilat voivat olla huoneen lämpötilan ja liuottimen kiehumislämpötilan välillä.

Menetelmä b) voidaan suorittaa tavalliseen tapaan. 10 Demetyloinnit voidaan suorittaa esimerkiksi halogeeni-muurahaishappoestereillä, kuten kloorimuurahaishappoes-terillä, esim. etyyli-, fenyyli-, bentsyyli- tai vinyy-liesterillä.

Menetelmä c) voidaan suorittaa tavalliseen tapaan, 15 jolla substituoidaan sekundäärisiä amiineja. Esimerkiksi menetelmä c) voi olla alkylointireaktio. Alkylointireak-tiona se voidaan suorittaa tavalliseen tapaan, jolla al-kyloidaan analoginen sekundäärinen rengasamiini. Menetelmä voidaan suorittaa esim. käyttämällä alkyylihalo-20 genidejä, tai alkyylisulfaatteja. Vaihtoehtoisesti N- alkyylijohdannaisia voidaan saada pelkistämällä vastaavista N-asyyli-johdannaisista, joita voidaan valmistaa tavalliseen tapaan kaavan Ib mukaisesta yhdisteestä.

Kaavan II mukaista lähtöainetta voidaan saada esi-25 merkiksi seuraavasti: 5 79316 s ✓v-Jote 2 'γηΓΤ fciasvrcJL 1 J* I rr R4 red.K4 ——[fy T 5 5 < L Jl i Js J y^W 2

If0 XCHR, 1 c emas ^ 5 15 r 4 1 20 R7 = H, (C1_3)alkyyli, (C1-3)alkoksi, (C3_g)sykloalkyyli, (C3_g)sykloalkyyli)C3_2)alkyyli X = Cl, Br.

Sikäli kuin lähtöaineiden, esim. muiden kuin kaavan II mukaisten 2,3-dihydro-3-alkyyli-ll-fenyyli-diatse-25 piino/1,7-a/indol-3(5H)-onien valmistusta ei ole erityisesti selostettu, näitä yhdisteitä voidaan valmistaa analogisin tavoin kuin tunnettuja yhdisteitä tai tässä selostetuin menetelmin.

Keksinnön mukaisten yhdisteiden vapaat emäsmuodot voidaan 30 muuttaa happoadditiosuoloiksi tavalliseen tapaan ja päinvastoin. Sopivia happoja ovat, esimerkiksi kloorivetyhap-po, bromivetyhappo, maleiinihappo, fumaarihappo ja meri-pihkahappo.

Keksinnön mukaisten yhdisteiden raseeminen seos voidaan 35 erottaa tunnetulla tavalla, esimerkkiksi käyttämällä erotta- 6 79316 vana aineena optisesti aktiivista happoa. Vaihtoehtoisesti puhdasta enantiomeeri- tai diastereoisomeerimuotoa voidaan valmistaa käyttämällä optisesti aktiivisia vastaavia diastereo-isomeeri-lähtöaineita.

5 Seuraavissa esimerkeissä kaikki lämpötilat on il moitettu Celsius-asteina ja ovat korjaamattomia.

Taulukoissa käytetään seuraavia lyhenteitä: 1) fumaraatti 2) vetyfumaraatti 10 3) hydrokloridi 4) isomeeri A (trans) 5) isomeeri B (cis)

Esimerkki 1 2,3,4,5-tetrahydro-3-metyyli-ll-fenyyli-lH-15 /1,4J7’diatsepiino/l,7a7indoli /menetelmä a)7

Liuos, jossa on 26,7 ml rikkihappo-monohydraattia 267 ml:ssa tetrahydrofuraania lisätään tiputtamalla suspensioon, jossa on 37,8 g litiumaluminiumhydridiä 380 ml: ssa tetrahydrofuraania 0°C:ssa. Seosta sekoitetaan 15 mi-20 nuuttia 0°C:ssa, sitten lämmitetään 45°:seen ja seokseen lisätään tiputtamalla suspensio, jossa on 72,4 g 2,3-di-hydro-3-metyyli-ll-fenyyli-lH-/i,4/diatsepiino^l,1-aJ-indol-4(5H)-onia 725 ml:ssa tetrahydrofuraania. 2 1/2 tunnin sekoittamisen jälkeen seos jäähdytetään 0°C:seen.

25 Seokseen lisätään tiputtamalla 133 ml kyllästettyä nat-riumsulfaattiliuosta ja sen jälkeen lisätään 66 ml 33-prosenttista natriumhydroksidiliuosta. Sekoittamista jatketaan tunnin ajan. Seos suodatetaan, jäännös pestään eetterillä. Suodos haihdutetaan kuiviin vakuumissa ja 30 öljymäinen jäännös kromatografioidaan silikageelillä metyleenikloridillä, minkä jälkeen saadaan otsikon yhdistettä, sp 126-128°C (etanolista).

Lähtöainetta voidaan saada seuraavasti: a) 3-fenyyli-lH-indoli-2-etaaniamiini-karbamiini-35 happoetyyliesteri 7 79316

Liuokseen, jossa on 18,9 g 3-fenyyli-lH-indoli-2-etaaniamiinia 220 ml:ssa metyleenikloridia lisätään 15,3 ml kloorimuurahaishappoetyyliesteriä ja sen jälkeen 110 ml vettä. Seosta sekoitetaan 10 minuuttia. Lisätään 6,4 g nat-5 riumhydroksidia 100 ml:ssa vettä ja sekoittamista jatketaan edelleen 20 minuuttia huoneen lämpötilassa. Orgaaninen faasi erotetaan, pestään kerran 2-norm. viinihapolla ja vedellä, kuivataan ja haihdutetaan kuiviin vakuumissa. Otsikon yhdisteen öljymäistä jäännöstä käytetään enempää 10 puhdistamatta.

b) N-metyyli-3-fenyyli-lH-2-etaaniamiini

Kylmä liuos, jossa on 8,6 ml rikkihappo-monohyd-raattia 85,6 ml:ssa tetrahydrofuraania lisätään tiputtamalla suspensioon, jossa on 12,1 g litiumaluminiumhydri-15 diä 243 mlrssa tetrahydrofuraania 0°C:ssa. Seosta sekoitetaan 0°C:ssa 15 minuuttia ja lisätään tiputtamalla 0-10°C: ssa 24,6 g 3-fenyyli-lH-indoli-2-etaaniamiini-karbamiini-happoetyyliesteriä 274 mlrssa tetrahydrofuraania. Seosta lämmitetään kiehuttaen 45 minuuttia, sitten jäähdytetään 20 0°C:seen ja lisätään tiputtamalla 43 ml kyllästettyä nat-riumsulfaattiliuosta. Lisätään edelleen 21 ml 30-prosent-tista natriumhydroksidiliuosta ja seosta sekoitetaan tunnin ajan. Seos suodatetaan ja jäännös pestään eetterillä. Suodos haihdutetaan kuiviin vakuumissa ja jäännös kitey-25 tetään eetteri/pentaani-seoksesta, jolloin saadaan otsikon yhdistettä, sp 148-151°C.

c) 2-kloori-N-metyyli-N-^2-(3-fenyyli-lH-indol-2-yyli)etyyli7asetamidi

Liuos, jossa on 17,5 ml klooriasetyylikloridia 100 30 mlrssa kloroformia lisätään tiputtamalla 15 minuutin aikana liuokseen, jossa on 50,1 g N-metyyli-3-fenyyli-lH-indoli-2-etaaniamiinia ja 30,7 ml trietyyliamiinia 500 mlrssa kloroformia. 30 minuutin kuluttua seos tehdään al-kaliseksi ammoniakin vesiliuoksella. Orgaaninen faasi 35 erotetaan, pestään vedellä ja kuivataan. Haihduttamalla s 79316 liuotin pois saadaan otsikon yhdistettä, sp 135-138°C (metyleenikloridi/eetteri-seoksesta) .

d) 2,3-dihydro-3-metyyli-ll-fenyyli-lH-^i,4^di-atsepiino^l,7a7indol-4(5H)-oni 5 7,9 g natriumhydridi-dispersiota (55 % öljyssä) pes tään kaksi kertaa pentaanilla ja suspendoidaan 100 mlraan dimetyyliformamidia. 15 minuutin aikana lisätään tiputtamalla liuos, jossa on 49 g 2-kloori-N-metyyli-N-2-(3-fe-nyyli-lH-indol-2-yyli)etyyli/asetamidia 150 ml:ssa di-10 metyyliformamidia. Lämpötila kohoaa 50°C:seen. Seosta sekoitetaan 2 tuntia huoneen lämpötilassa, käsitellään jääveden ja etyyliasetaatin kanssa. Orgaaninen faasi kuivataan ja liuotin haihdutetaan pois, jolloin saadaan otsikon yhdistettä, sp 126-128°C (etanolista).

15 Esimerkki 2 2,3,4,5-tetrahydro-ll-fenyyli-lH-^1,47diatsepiino-£1,7-a7indoli^menetelmä b

Liuos, jossa on 23 ml kloorimuurahaishappoetyyli-esteriä 120 mlrssa tolueenia lisätään tiputtamalla seok-20 seen, jossa on 44,2 g 2,3,4,5-tetrahydro-3-metyyli-ll-fenyyli-lH-/!,47diatsepiino,A,7a/indolia ja 41,3 ml N-etyylidi-isopropyyliamiinia 320 mlrssa tolueenia 80°C: ssa. Seosta sekoitetaan 2 tuntia 80°C:ssa. Lisätään vettä ja etikkahappoetyyliesteriä. Orgaaninen faasi pestään 25 2-norm. suolahapolla ja vedellä, kuivataan ja haihdutetaan kuiviin. Öljymäistä jäännöstä lämmitetään kiehuttaen 2 tuntia liuoksessa, jossa on 118,5 g kaliumhydroksidia 790 mlrssa ]-propanolia. Seos kaadetaan jääveteen ja uutetaan metyleenikloridilla. Orgaaninen faasi pestään ve-30 dellä, kuivataan ja haihdutetaan kuiviin, jolloin saadaan otsikon yhdistettä, sp. 128-130°C (etanolista).

Esimerkki 3 3-allyyli-2,3,4,5-tetrahydro-ll-fenyyli-lH-/l, 4_/di-atsepiino-/l, 7a7indoli ^rienetelmä c)J 35 Seosta, jossa on 4 g 2,3,4,5-tetrahydro-ll-fenyyli- 9 79316 1Η-/Ί,47diatsepiino/l,7-a7indolia, 1,4 ml allyylibromi-dia ja 4,5 g kaliumkarbonaattia 45 ml:ssa dimetyyliform-amidia sekoitetaan 2 tuntia 110°C:ssa. Seos kaadetaan veteen ja uutetaan etyyliasetaatilla. Orgaaninen faasi 5 kuivataan ja liuotin haihdutetaan pois. öljymäinen jäännös kromatografioidaan 50 grammalla silikageeliä käyttämällä eluenttina metyleenikloridia, jolloin saadaan otsikon yhdistettä. Vetymaleaatin sp 148-150°C (etanoli/eet-teri-seoksesta).

10 Esimerkki 4 3-syklopropyylimetyyli-2,3,4,5-hetrahydro-ll-fenyy-1Ϊ-1Η-/1,47diatsepiino/"l,7-a7indoli /menetelmä c)J Liuos, jossa on 2,1 ml syklopropaanikarboksyylihap-pokloridia 25 ml:ssa kloroformia lisätään kiehuvaan liu-15 okseen, jossa on 5,2 g 2,3,4,5-tetrahydro-ll-fenyyli-lH-/1,4_7diatsepino/l,7-aJindolia ja 4,2 ml trietyyliamiinia.

30 minuutin kuluttua lisätään 2-norm. suolahappoa ja vettä. Orgaaninen faasi kuivataan ja haihdutetaan kuiviin vakuu-missa, jolloin saadaan syklopropaanikarboksiamidia, sp 20 178-180°C (etanolista). Liuos, jossa on 2,35 ml rikkihap- po-monohydraattia 15 mltssa tetrahydrofuraania lisätään tiputtamalla suspensioon, jossa on 3,34 g litiumaluminium-hydridiä 35 ml:ssa tetrahydrofuraania 0°C:ssa. Seosta sekoitetaan 0°C:ssa 15 minuuttia ja sitten lämmitetään kie-25 huttaen. Lisätään tiputtamalla liuos, jossa on 5,8 g 2,3,4,5-tetrahydro-l l-fenyyli-lH-/l, 4_7diatsepiino/Ί ,1-sJ-indoli-3-syklopropaanikarboksiamidia 58 ml:ssa tetrahydrofuraania. Seosta sekoitetaan ja lämmitetään kiehuttaen 3 1/2 h, jäähdytetään 0°C:seen ja lisätään 12,8 ml kylläs-30 tettyä natriumsulfaattiliuosta. Sen jälkeen lisätään 6,4 ml 30-prosenttista natriumhydroksidiliuosta ja seosta sekoitetaan edelleen tunnin ajan 35°C:ssa. Sakka suodatetaan erilleen ja pestään eetterillä, suodos haihdutetaan kuiviin vakuumissa, jolloin saadaan otsikon yhdis-35 tettä. Hydrokloridin sp 225-227°C (etanolista) .

10 79316

Esimerkki 5

Samalla tavalla kuin on kuvattu esimerkkissä 1 valmistetaan seuraavia kaavan Ia mukaisia yhdisteitä, joissa R^' on vety: 5

Ex. Rl R2 R4 R5 R6 Sr>. °C

a 8-Cl H H H H 139-140 b 9-C1 H H H H 114-115 10 c 8-F H H H H 145-146 d 9-F H H H H 143-145 e 8-OCH3 H H H H 237-2392) f 9-OCH3 H H H H 203-2051) g 3-CH3 H H H H 109-110 15 h 9-CH3 H H H H 212-2142) i 8-CF3 H H H H 233-2352) j H p-Cl H H H 146-148 k H m-Cl H H H 96-98 1 H o-Cl H H H 278-2793) 20 m 7-Cl H H H H 111-112 n 10-Cl H H H H 198-2003) OH H H H CH3 248-2503) p H H H CH3 H 125-1282) q H H H CH3 CH3 180-1822) 25 r H H CH3 H H 196-1982) s H H CH3 H CH3 1384) t H H CH3 H CH3 100-1015)

Esimerkki 6 30 3-syklopropyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-ll-fenyy- li-lH-/l,47-diatsepiino^l,7-a/indoli Menetelmä a)7 Samalla tavalla kuin on selostettu esimerkissä 1 ja käyttämällä lähtöaineena 2,3-dihydro-3-syklopropyyli-metyyli-ll-fenyyli-lH-/l,47-diatsepiino/l,7-a/ indol-4(5H)-35 onia valmistetaan otsikon yhdistettä. 119 g otsikon yhdis- 11 79316 tettä liuotetaan 600 ml:aan abs.etanolia ja jäähdytetään jäähauteessa. Lisätään tiputtamalla ja sekoittaen 132 ml HCl-etanoliliuosta (3,4-norm). Hydrokloridi saostuu ja sen jälkeen kun on lisätty 900 ml eetteriä ja sekoitettu 5 15 minuuttia, otsikon yhdisteen hydrokloridi suodatetaan erilleen, sp 227-228°C.

Lähtöainetta voidaan saada seuraavasti: 3-fenyyli-lH-indoli-2-etaaniamiinin annetaan reagoida syklopropaanikarboksyylihappokloridin kanssa, jolloin 10 saadaan N-syklopropyylikarbonyyli-3-fenyyli-lH-indoli-2-etaaniamiinia, joka pelkistetään litiumaluminiumhydridil-lä N-syklopropyylimetyyli-3-fenyyli-lH-indoli-2-etaaniamii-niksi, jonka annetaan reagoida klooriasetyylikloridin kanssa, jolloin saadaan 2-kloori-N-syklopropyylimetyyli-N-/2-15 (3-fenyyli-lH-indol-2-yyli)etyyli7asetamidia, sp 104-106°C (etanoli/pentaani-seoksesta).

Liuos, jossa on 184,3 g 2-kloori-N-syklopropyyli-metyyli-N-/2-(3-fenyyli-lH-indol-2-yyli)etyyli7asetamidia 1843 ml:ssa metyleenikloridia lisätään tiputtamalla voi-20 makkaasti sekoittaen suspensioon, jossa on 17,9 g N-bents-yylitributyyli-ammoniumbromidia 1843 ml:ssa metyleenikloridia ja 921 ml 30-prosenttista natriumhydroksidia. Seosta sekoitetaan edelleen 10 minuuttia ja laimennetaan litralla vettä. Orgaaninen faasi erotetaan, pestään ve-25 dellä, kuivataan ja haihdutetaan kuiviin. Jäännös liuotetaan 500 ml:aan kiehuvaa etanolia, jäähdytetään ja käsitellään 500 ml:n kanssa eetteriä. Muodostunut kiteinen sakka suodatetaan erilleen, pestään etanoli/eetteri-seok-sella (1:1) ja sitten eetterillä, jolloin saadaan 2,3-30 dihydro-3-syklopropyylimetyyli-ll-fenyyli-lH-^l,4^7diatse-piino/1,7-a7indol-4(5H)-onia, sp. 149-150°C.

Esimerkki 7

Valmistetaan seuraavia kaavan I mukaisia yhdisteitä.: 12 79316

Saralla tavalla

Ex. Rl Rz R3 R4 R5 ^6 Sp.*C kuin esimerkissä 5 a H H CH(CH3)2 H H H 229-2322) 3 b H H CH2CH(CH3)2 H H H 211-2233) 1,3 c H H CH2-<)> h H H 185-1871) 1,3 d H H CH2-<( J H H H Π5-117 1,3 10 e H H CH2C=CH2 H H H 223-2283) 3 CH3 f H H CH2CH=CHCH3 H H H 93-95 3 15 Keksinnön mukaisella yhdisteillä on osoittautunut ole van farmakologisia vaikutuksia ja sen vuoksi niitä ehdotetaan käytettäviksi lääkeaineina, esim. hoitotarkoituksiin. Keksinnön mukaisilla yhdisteillä on erityisesti masentuneisuutta ehkäisevä vaikutus, jota osoittaa niiden keskeinen, 20 serotoniinin aktivoivan vaikutuksen vastainen vaikutus. Yhdisteillä on esimerkkiksi voimakas affiniteetti 5-HT2-resep-toreihin rotan otsakuoressa /S.J Peroutka'n ja S.H. Snyder'in modifioitu menetelmä, Molec.Pharmacol. 16, 687 (1979)^7.

Tämä koe on suoritettu seuraavasti: 25 Rotan aivoista saatu tuore otsakuorikudos homoge nisoidaan 20-kertaiseen tilavuusmäärään tris-HCl-puskuria (50 mmoolia, pH 7,7, jossa on 4 mmoolia CaCl2:ta, lO^umoo-lia pargyliiniä, ja 0,1 % askorbiinihappoa), ja sentrifu-goidaan. Pelletit suspendoidaan uudelleen 24-kertaiseen 30 tilavuusmäärään samaa puskuria, inkuboidaan 15 minuuttia 37°C:ssa, ja sentrifugoidaan uudelleen. Pelletit jäädytetään -20°C:ssa ja suspendoidaan uudelleen 360-kertai-seen tilavuusmäärään samaa puskuria kuin edellä ennen käyttöään sitomiskokeeseen. Koeseosten yhdistelmä (koko-35 naistilavuus = 2 ml) on seuraava: 50 mmoolia tris-HCl:ää pH 7,7, 4 mmoolia CaCl2:a, lO^umoolia pargyliiniä, 0,1 % i3 7931 6 askorbiinihappoa, kalvojen vastatessa 5 mg alkuperäisen 3 kudoksen painoa, ja 1 nmoolia H-spiperonia. Koeseokset epäspesifisen sitoutumisen määrittämiseksi sisältävät lisäksi kinanseriiniä konsentraatioin l,umoolia. Lääkkei- ' 3 5 den tehokkuuden määrittämiseksi ehkäistä H-spiperonin spesifistä sitoutumista S-IH^-reseptoreihin (kokonaissi-toutumisen ja epäspesifisen sitoutumisen välinen ero) koe-yhdisteitä lisätään siten, että saadaan 5-9 erilaista kon-sentraatiota, tavallisesti välille 1 nmoolia - lO^umoolia, ]_g kutakin kaksoiskappaleina. Tunnin inkuboinnin jälkeen 37°C: ssa koeseokset suodatetaan nopeasti Whatman GF/B-suodat-timien läpi ja pestään kahdesti 5 ml :11a jääkylmää inku-bointipuskuria ja lasketaan tuikelaskimella. IC^g-arvot (koelääkkeen konsentraatio, joka ehkäisee 5Q-prosentti-15 sesti 3H-spiperonin spesifistä sitoutumista) lasketaan lineaarisen regressioanalyysin avulla Hill-käyrästä.

Keksinnön mukaisilla yhdisteillä on edellen L-5-hydroksi-tryptofaanin hiirillä vapainaa aiheuttavan vai-kutuksen vastainen vaikutus iR. Ortmann'in ym:n modifioitu 20 menetelmä, Naunyn-Schmiedeberg's Arch. Pharmacol. 311, 185” 192 (1980)^7. Koe suoritettiin seuraavasti:

Neljän hiiren ryhmät (naaraita, 18-24 g, OF-1, SANDOZ, Basle) saivat 20 mg/kg i.p. clorgyline'ä ajankohtana -45'. Koerohdosta (3,2, 10 ja 32 mg/kg) annettiin 25 i.p. ajankohtana -30', senjälkeen 15 mg/kg i.p. L-5-hydr-oksitryptofaania 30' myöhemmin, ajankohtana O. Vapina arvioitiin sitten käyttämällä 5 pisteen taulukkoa ajankohtina +10', +20', +30', +40', +50' ja +60'. Vapinaa ei katsottu esiintyvän (0 pistettä), sitä esiintyi ajoit-30 tain (1 piste), sitä esiintyi (2 pistettä), sitä esiintyi ja voimakkaana (3 pistettä) tai sitä esiintyi ja erittäin voimakkaana (4 pistettä). 4 koehiiren osalta 6:n havaintoa jankohdan aikana suurimmaksi mahdolliseksi pistemääräksi saatiin näin 96 pistettä. Havaitut pisteet ilmoi-35 tettiin %:na tästä maksimiarvosta ja verrattiin kontrol- 14 7931 6 lirynmän arvoihin, jotka saivat koelääkkeen asemesta suolaliuosta. Vaikutusten statistinen merkitys arvioitiin vertaamalla kunkin lääkettä saaneen hiiren kokonaispistemäärää kontrollihiirten yksilölliseen kokonaispistemää-5 rään, käyttämällä Mann-Whitney U-koetta.

Keksinnön yhdisteet vähentävät edelleen paradoksaalista unta (PS) häiritsemättä 48 tunnin unen EEG:tä annettaessa niitä 3,2-32 mg/kg po rotille /H.Kleinlogel "EEG in Drug Research", toim. Hermann, Gustav Fischer Verlag, 10 Stuttgart, New York, 75-88 (1982)/.

Keksinnön yhdisteitä osoitetaan sen vuoksi käytettäviksi masentuneisuutta ehkäisevinä aineina. Tähän tarkoitukseen käytettäväksi osoitettu päivittäinen annostus on rajoissa noin 25 - noin 500 mg yhdistettä, annettuna 15 tarkoituksenmukaisesti jaettuina annoksina 2-4 kertaa päivässä annosyksikön muodossa, joka sisältää esimerkiksi noin 6 mg - noin 250 mg yhdistettä, tai pitkän ajan kuluessa vapautuvassa muodossa.

Sen lisäksi keksinnön yhdisteillä ilmenee konflik-20 tia heikentävää vaikutusta. Esimerkiksi etologisen elementin "stretched attend posture" (SAP) taajuus ja kesto, jotka osoittavat konfliktilta puolustautumismekanismia, määritetään sen jälkeen kun keksinnön yhdisteitä on annettu uroshiirille 0,1-10 mg/kg po /H P Käsermann, Experien-25 tia 39 (1983), 681-682/. Koe suoritetaan seuraavasti: 8 uroshiiren ryhmille (LAC, 40-50 g, Bromfield Ltd., Newton Abbot GB), joita on pidetty altistettuna valo-pimeä-vaihtelulle, annetaan suun kautta yhtä kolmesta 0,1, 1,0 tai 10 mg/kg:n koerohdosannoksesta. Tunnin ku-30 luttua annosta hiiret pantiin yksilöllisesti tuntemattomalle, perforoidulle, merkitylle muovialustalle ja käyt-tlytymistä analysoitiin 2 minuutin koeaikana. Käyttäyty-mistoimien taajuus- ja kestomuutokset arvioitiin vertailemalla toisiinsa yksilöllisesti lääkettä saaneita ja kont-35 rollieläimiä Mann-Ehitney U-koetta käyttäen. Keksinnön is 7931 6 mukaiset yhdisteet vähentävät jännittyneisyys-asentoa/SAP/ sekä taajuuden että keston osalta. Käyttäytymiselementin SAP reduktio osoittaa näiden lääkkeiden konfliktia vähentäviä ominaisuuksia epäsosiaalisessa tilanteessa.

Keksinnön mukaisia yhdisteitä esitetään sen vuoksi käytettäväksi konfliktia vähentävinä aineina, esim. sivu-lääkityksenä psykoterapeuttisen hoidon yhteydessä ja levottomuutta ehkäisevinä aineina hoidettaessa psykiatrisia sairauksia, joille on tyypillistä sosiaalinen eristäytyminen 10 ja levottomuus. Tähän tarkoitukseen osoitettava päivittäinen annostus on rajoissa noin 20 - noin 300 mg yhdistettä, esim. noin 25 - noin 300 mg, joka on tarkoituksenmukaista antaa jaettuina annoksina 2-4 kertaa päivässä annosyksikön muodossa, joka sisältää esimerkiksi noin 15 5 mg - noin 150 mg yhdistettä, tai pitkän ajan kuluessa vapautuvassa muodossa.

Sen lisäksi keksinnön yhdisteillä ilmenee jännitystä laukaisevaa vaikutusta, kuten on osoitettu standar-dikokein, esim. liikunnan ehkäisyn avulla hiirillä. Täs-20 sä kokeessa 3 uroshiiren ryhmät (18-24 g, OF-1,Sandoz, . . Basle) saivat 3,2, 10, 32, 100 ja 320 mg koelääkettä po.

Tunnin kuluttua lääkkeen antamisesta hiiriä tarkkailtiin yksilöllisesti ja niiden liikehtimistä verrattiin kontrol-lieläinten liikehtimiseen. Arvioitiin että lääkkeellä 25 joko ei ollut vaikutusta liikehtimiseen, sillä oli selvästi suurempi tai vähäisempi vaikutus kuin kontrolli-eläimissä, huomattavasti suurempi tai vähäisempi vaikutus kuin kontrollieläimissä, tai esti sen täydellisesti.

Keksinnön yhdisteet sitoutuvat edelleen ^H-spipe-30 ronin sitoutumiskohtiin aivoissa /j. Leysen'in ym:n modifioitu menetelmä, Biochem. Pharmac. 27, 307 (1978)/. Koe suoritettiin seuraavasti: tuoretta vasikanaivojen stria-tal-kudosta homogenisoitiin 25-kertaiseen tilavuusmäärään trispuskuria (pH 7,4, 50 mmoolia, 120 mmoolia natrium-35 kloridia) ja sentrifugoitiin. Pelletit suspendoitiin 79316 16 22-kertaiseen tilavuusmäärään tris-puskuria, inkuboitiin 15 minuuttia 37°C:ssa ja sentrifugoitiin. Pelletit sus- pendoitiin 300-kertaiseen tilavuusmäärään tris-puskuria.

Koeseosten yhdistelmä oli seuraava: 45 mmoolia tris-pus- 5 kuria pH 7,7, 108 mmoolia natriumkloridia, kalvoja, jotka vastasivat 6 mg alkuperäisen kudoksen painoa, 0,1 nmoolia 3 -7 H-spiperonia, 5 x 10 moolia cinaserin'ia 5-HT2-resep-torien myötävaikutuksen eliminoimiseksi ja 1 ^amoolia merkitsemätöntä spiperonia epäspesifisen sitoutumisen mää-10 rittämiseksi. ^H-spiperonin spesifisen sitoutumisen estymisen määrittämiseksi koelääkkeitä lisättiin siten, että saatiin 5-9 erilaista konsentraatiota välillä 1 nmoolia ja 10 pmoolia, kutakin kaksoiskappaleina. 40 minuutin hau-tomisen jälkeen huoneen lämpötilassa koeseokset suodatet-15 tiin nopeasti Whatman GF/B-suodattimen läpi, suodatin pestiin kahdesti 5 ml:11a jääkylmää tris-puskuria ja laskettiin tuikelaskimella. ICc«-arvot (koerohdoksen konsent- DU 2 raatio, joka ehkäisee 50-prosenttisesti H-spiperonin spesifisen sitoutumisen) määritetään lineaarisen regressio-20 analyysin avulla.

Farmakologiset vertailukokeet “ : 3

Yhdiste H-spiperoni-sitoutuminen IC5Q (nM) es^m* Striatal-kudos (vasikka) 25 1 250 3 235 4 72 5d 366 5g 986 30 5j 137 5k 788 51 357 5n 726 5o 532 35

Clozapine 990 i7 79316

Keksinnön mukaisesti valmistettuja yhdisteitä osoitetaan sen vuoksi käytettäviksi jännitystä laukaisevina aineina hoidettaessa esim. mielisairauksia kuten jakomielitautia. Tähän käyttöön osoitettava päivittäin annos-5 tus on rajoissa noin 25 - noin 600 mg yhdistettä, joka annetaan tarkoituksenmukaisesti jaettuina annoksina 2-4 kertaa päivässä annosyksikön muodossa, joka sisältää esimerkiksi noin 6 mg - noin 300 mg yhdistettä, tai hitaasti vapautuvassa muodossa.

10 Ensisijainen yhdiste on esimerkin 4 yhdiste. Ensi sijainen indikaatio on masentuneisuuden vastainen lääkeaine .

Uusia yhdisteitä voidaan antaa vapaan emäksen muodossa tai farmaseuttisesti hyväksyttävän happoadditio-15 suolan muodossa. Sellaisia suoloja voidaan valmistaa tavalliseen tapaan ja niiden aktiivisuus on samaa luokkaa kuin vapaan emäsmuodon.

Claims (8)

18 7931 6 Patenttivaatimus Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten 2,3,4,5-tetra-hydro-ll-fenyyli-lH-Zl, 4_7-diatsepinoA, Ί-aJindolien valmis-5 tamiseksi, joiden kaava on I -4j— r2 io R|4 >

10. A I R---I I 3N-R, 1 ^V—«y-V 3 R6 15 jossa ja R2 toisistaan riippumatta tarkoittavat vety-, fluori-, kloori- tai bromiatomia tai C^_^-alkyyli-, alkoksi tai trifluorimetyyliryhmää, R^ on vetyatomi tai C1_4-alkyyli-, C3_g-sykloalkyyli-, C3_g-sykloalkyyli-C1_3~alkyyli-, C3_5~alkenyyli- tai C3_5~alkinyyliryhmä,

20 R^f Rg ja Rg tarkoittavat toisistaan riippumatta vetyatomia tai C3_^-alkyyliryhmää, sekä niiden happoadditiosuolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että a) yhdisteen valmistamiseksi, jonka kaava on Ia 25 G-'1 R. Rc Ta j4 | 5 xa 3 0 \ ° R1__| j N-CH2R^ —N-^_/ jossa R^, R2, R^ - Rg tarkoittavat samaa kuin edellä ja 35 R3 on vetyatomi tai C^_3~alkyyli-, C3_g-sykloalkyyli- tai C3_g-sykloalkyyli-C1_2-alkyyliryhmä, tai niiden hap-poadditiosuolojen valmistamiseksi, pelkistetään yhdiste, jonka kaava on II 7931 6 4— r2 5 ] ]4 fc 11 ri-^ j;-ch2R; K o 10 jossa , R2, R^ - Rg ja R^ tarkoittavat samaa kuin edellä, tai sen happoadditiosuola, ja b) yhdisteen valmistamiseksi, jonka kaava on Ib 15 r2—rr -AM’ R _L 1 I NH Ri—/

20 I R6 jossa R^ R2, R4 - Rg tarkoittavat samaa kuin edellä, tai sen happoadditiosuolan valmistamiseksi demetyloidaan kaa-25 van Ia mukainen yhdiste, jossa vetyatomi tai sen hap-poadditiosula ja c) yhdisteen valmistamiseksi, jonka kaava on Ie R0--I 30 Ri Rc T R1-rjL_i /-R3 ^ 1—' R6 20 7931 6 jossa R1# R2/ R4 - Rg tarkoittavat samaa kuin edellä ja R'^ on Cg_6-sykloalkyyli-, C3_g-sykloalkyyli-C1_3-alkyyli-, C3_g-alkenyyli- tai C3_g-alkinyyliryhmä, tai sen happoad-ditiosuolan valmistamiseksi, liitetään ryhmä R'^ kaavan Ib 5 mukaiseen yhdisteeseen tai sen happoadditiosuolaan, ja että näin saatu kaavan I mukainen yhdiste otetaan talteen vapaana emäksenä tai happoadditiosuolana. 21 79316 Förfarande för framställning av terapeutiskt aktiva 2,3,4,5-tetrahydro-ll-fenyl-lH-^l,4/diazepino^l,T-aJ-5 indoler med formeln I . -H— r2 io jCiiJ5 10 2\ p--I l 3N-R Ri^V—3 15 väri och R2 oberoende av varandra betecknar en väte-, fluor-, klor- eller bromatom eller en C^_^-alkyl-, C^_4-alkoxi- eller trifluormetylgrupp, R^ är en väteatom eller en C^_4~alkyl-, C3_g-cykloalkyl-, C^g-cykloalkyl-Cj^-alkyl-, C3_g-alkenyl- eller C-^g-alkinylgrupp, R^, R,. och

20 Rg betecknar oberoende av varandra en väteatom oiler en C1_4-alkylgrupp, samt deras syraadditionssalter, kännetecknat därav, att a) för framställning av en förening med formeln Ia ϊ 25 ^ -- ^ X J_i Ia

30 R!-l· I_n1 N-CH2R' ^ r 35 väri R^, R2, R4 - Rg har ovan angiven betydelse och R^ är en väteatom eller en C1_3-alkyl-, C3_g-cykloalkyl- 22 7931 6 eller C^.g-cykloalkyl-Cj^-alkylgrupp, eller deras syra-additionssalter, produceras en förening med formeln II

4-R2 Ri-- I n-ch0r; Xx—V / 3 ^^ 10 r6 väri Rj, R2, R4 - Rg och R^ har ovan angivna betydelse, eller ett syraadditionssalt därav, och b) för framställning av en förening med formeln Ib ^ -

20 Ri-- I NH X/—n-n-/ *6 väri R^, Rj» R^ - Rg har ovan angivna betydelse, eller 25 ett syraadditionssalt därav, demetyleras en förening med formeln Ia, väri R^ är en väteatom, eller ett syraadditionssalt därav, och c) för framställning av en förening med formeln Ie 30 r2-h I Ryi RC t /. X il_i RI--Nx_/'R3 R6