ES2925901T3

ES2925901T3 - Composición farmacéutica que comprende hGH recombinante para el tratamiento de la deficiencia de hormona del crecimiento

Info

Publication number: ES2925901T3
Application number: ES17753492T
Authority: ES
Inventors: Tae Kyung Kim; Young_Joo Ahn; Jung Won Woo; Woo Ick Jang; Ji-Eun Cha; Joan Yoon Ji Lee
Original assignee: HANDOK Inc; Genexine Inc
Current assignee: HANDOK Inc; Genexine Inc
Priority date: 2016-02-17
Filing date: 2017-02-16
Publication date: 2022-10-20
Anticipated expiration: 2037-02-16
Also published as: CN109152816B; TW201729831A; HUE059593T2; PL3416677T3; CN109152816A; PT3416677T; KR102312986B1; EP3416677B1; BR112018016817A2; TWI748990B; US20210177945A1; KR20180135839A; RU2018132694A3; JP2019508421A; JP6896749B2; EP3416677A1; CA3014164A1; JOP20170044B1; KR20170096968A; DK3416677T3

Abstract

Se proporciona un método para administrar una hormona de crecimiento humana recombinante GX-H9 para tratar la deficiencia de hormona de crecimiento. En particular, la presente divulgación se refiere a una composición farmacéutica para el tratamiento de la deficiencia de la hormona del crecimiento, que contiene una hGH GX-H9 recombinante y un vehículo farmacéuticamente aceptable, en la que la GX-H9 recombinante se administra una vez a la semana con una dosis de 0,1 a 0,3 mg por kg de peso de un paciente o dos veces al mes con una dosis de 0,1 a 0,4 mg por kg de peso del paciente. Además, la presente descripción se refiere a un método para tratar la deficiencia de la hormona del crecimiento que incluye la administración de una hGH GX-H9 recombinante a un paciente con deficiencia de la hormona del crecimiento una vez a la semana con una dosis de 0,1 a 0,3 mg por kg de peso del paciente o dos veces al mes. con una dosis de 0,1 a 0,4 mg por kg de peso del paciente. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Composición farmacéutica que comprende hGH recombinante para el tratamiento de la deficiencia de hormona del crecimiento

[Campo técnico] La presente divulgación se refiere a una composición farmacéutica para tratar la deficiencia de hormona del crecimiento, que contiene hGH-hyFc (GX-H9) que es una hormona del crecimiento humana recombinante preparada fusionando Fc híbrido a la hormona del crecimiento humana hGH, en la que la proteína de fusión de hGH recombinante resultante comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 1, en la que la hGH recombinante GX-H9 se administra una vez a la semana con una dosificación de 0,1 a 0,3 mg por kg de peso de un paciente o dos veces al mes con una dosificación de 0,1 a 0,4 mg por kg de peso del paciente.

[Técnica anterior] La hormona del crecimiento es una hormona que se secreta desde la hipófisis anterior, como un único polipéptido molecular compuesto por 191 aminoácidos. El factor de crecimiento similar a la insulina-1 (IGF-1) se expresa en combinación con un receptor de la hormona del crecimiento para participar en el crecimiento y la regeneración de las células. Se sabe que la hormona del crecimiento se produce en la hipófisis del cuerpo humano normal y aumenta gradualmente hasta la adolescencia y disminuye gradualmente con la edad.

La deficiencia de hormona del crecimiento más común es la deficiencia de hormona del crecimiento en adultos (AGHD) y la deficiencia de hormona del crecimiento pediátrica (PGHD). La deficiencia de hormona del crecimiento en adultos se produce cuando la hipófisis del paciente se lesiona por radiación o cirugía en el tratamiento de tumores cerebrales y hemorragia cerebral, o idiopáticamente. Si la secreción de la hormona del crecimiento no se realiza bien, se muestran síntomas que incluyen pérdida de peso, reducción de la densidad mineral del hueso, aumento de la grasa, reducción de HDL, aumento de LDL, disminución de la fuerza muscular y similares, y, por tanto, la calidad de vida se deteriora. En pacientes adultos con deficiencia de hormona del crecimiento, la concentración de IGF-1 en suero corresponde a una puntuación de desviación estándar (SDS) de -2 o menos (<-2 SDS) o dentro del percentil 2,5 (<percentil 2,5) en comparación con personas normales en el mismo grupo de edad. El valor de respuesta de la hormona del crecimiento en la sangre puede medirse mediante pruebas de estimulación tales como la prueba de tolerancia a la insulina (ITT), la prueba de carga de arginina (GHR^h+ ARG), la prueba de glucagón, la prueba de L-DOPA y la prueba de clonidina. Cuando el pico de GH de la hormona del crecimiento es de 11,0 |jg/l o menos en pacientes con un índice de masa corporal (IMC) de menos de 25 kg/m2, 8,0 jg /l o menos en pacientes con un IMC de 25 a 30 kg/m2, o 4,0 jg /l o menos en pacientes con un IMC de más de 30 kg/m2, el pico de GH se considera deficiencia (Guidelines for Use of Growth Hormone in Clinical Practice, Endocr. Pract. 2009; 15 (suplemento 2)).

Se produce deficiencia de hormona del crecimiento pediátrica cuando está presente daño en la hipófisis o trastornos del desarrollo. Un trastorno de la secreción de hormona del crecimiento se manifiesta como baja estatura y altura con un crecimiento inferior al 3 % o 5 cm o menos al año en la curva de crecimiento de la misma edad, y pueden mostrarse síntomas tales como hipoglucemia, deterioro de la resistencia, depresión e inmadurez mental. En el caso de que la altura sea inferior a la media en 3 SD o más a la misma edad, en el caso de que la altura sea inferior al promedio de la altura de los padres en 1,5 SD o más, en el caso de que la altura sea inferior a la altura media en 2 DE o más y menor que el crecimiento a la misma edad en 1 DE o más durante 1 año o más, en el caso de que la altura sea inferior al crecimiento a la misma edad en 0,5 DE o más durante 2 años o más, o en el caso de que, aunque no se manifiesten los síntomas de bajo crecimiento, la altura se mantenga en menos de 2 SD durante 1 año o más o 1,5 SD durante 2 años o más, el síntoma puede determinarse como deficiencia de hormona de crecimiento pediátrica (Consensus guideline for the diagnosis and treatment of GH deficiency in childhood and adolescence: summary statement of the GH Research Society. GH Research Society, J. Clin. Endocrinol. Metab., noviembre de 2000; 85 (11): 3990-3).

En el caso de la deficiencia de hormona del crecimiento en adultos, la dosificación del fármaco se seleccionó basándose en el peso del paciente en la técnica relacionada, pero recientemente, el paciente se trata con la dosificación individualizada. Es decir, el tratamiento comienza con una dosificación inferior a la dosificación terapéutica óptima esperada y se ajusta mediante un método de aumento o disminución de 0,1 a 0,2 mg/día de la dosificación dependiendo de la respuesta clínica, los acontecimientos adversos (glucosa en ayunas) o el nivel de IGF-1. Es necesario considerar el sexo, el estado de estrógenos y la edad del paciente al seleccionar la dosificación de tratamiento de la hormona del crecimiento. El objetivo del tratamiento en pacientes con deficiencia de hormona de crecimiento en adultos es mejorar la normalización del metabolismo y la calidad de vida. Para este fin, el nivel de IGF-1 en la sangre debe optimizarse a de la mitad (percentil 50 o 0 SDS) a 1 SDS del intervalo normal (-2 SDS a 2 SDS) de la dosificación según la edad y el sexo.

En el caso de la deficiencia de hormona de crecimiento pediátrica, se recomienda iniciar el tratamiento tan pronto como sea posible tras el diagnóstico como paciente. Generalmente, se usa un método de administración subcutánea de hormona del crecimiento todas las noches y la dosificación recomendada es de 25 a 50 jg/kg/día. Normalmente, la tasa de crecimiento se comprueba periódicamente a los 3 meses o 6 meses y se recomienda verificar los acontecimientos adversos para verificar el crecimiento en altura, un cambio en la tasa de crecimiento, el cumplimiento individual del paciente y la seguridad, y verificar los niveles de IGF-1 o IGFBP-3 en el suero. Un objetivo del tratamiento en pacientes con deficiencia de hormona del crecimiento pediátrica es aumentar normalmente la altura, y es necesario administrar la hormona del crecimiento para que los niveles de IGF-1 en la sangre estén cerca del promedio de la misma edad (percentil 50 o 0 SDS).

La hormona del crecimiento se extraía de la hipófisis de cadáveres cuando se inició el tratamiento con hormona del crecimiento por primera vez en la década de 1950, y el suministro era muy limitado y el coste era elevado porque la cantidad de hormona del crecimiento extraída de una persona es muy pequeña. Con el desarrollo de las tecnologías de recombinación génica, se lanzó hormona del crecimiento sintetizada en Escherichia coli (Somatropin, 1981, Genentech Corporation en EE. UU.). Los fármacos de hormona del crecimiento recombinante comercializados actualmente en los EE. UU. incluyen Genotropin de Pfizer, Humatrope de Eli Lilly, Nutropin de Genentech, Norditropin de Novo Nordisk y similares.

Sin embargo, las preparaciones de hormona de crecimiento recombinante son formulaciones diarias que requieren administración 6 o 7 veces a la semana. En la deficiencia de hormona del crecimiento en adultos, se usa Humatrope con una dosificación de 0,2 mg/día (un intervalo de 0,15 a 0,30 mg/día). Cuando Nutropin no se basa en el peso corporal y se establece como una dosificación, la dosificación inicial es de 0,2 mg/día (un intervalo de 0,15 a 0,3 mg/día) y puede cambiarse a una dosificación de 0,1 a 0,2 mg/día en ciclos de 1 a 2 meses. Cuando la dosificación de Nutropin se establece basándose en el peso corporal, se usa la dosificación inicial de modo que no exceda de 0,005 mg/kg/día o más. Si es necesario aumentar la dosificación, se aumenta la dosificación de modo que no exceda 0,01 mg/kg/día después de 4 semanas de administración. Cuando Norditropin no se basa en el peso corporal y se establece como una dosificación, la dosificación inicial es de 0,2 mg/día (un intervalo de 0,15 a 0,3 mg/día) y puede cambiarse a una dosificación de 0,1 y 0,2 mg/día en ciclos de 1 a 2 meses. Cuando la dosificación de Norditropin se establece basándose en el peso corporal, la dosificación inicial se usa de modo que no exceda 0,004 mg/kg/día o más. Si es necesario aumentar la dosificación, se aumenta la dosificación de modo que no exceda 0,016 mg/kg/día o más después de 6 semanas de administración. En el caso de deficiencia de hormona de crecimiento pediátrica, se usa Genotropin con una dosificación de 0,16 a 0,24 mg/kg/semana y se usa Humatrope con una dosificación de 0,026 a 0,043 mg/kg/día. Se usa Nutropin con una dosificación de 0,3 mg/kg/semana y se usa Norditropin con una dosificación de 0,024 a 0,034 mg/kg/día.

Actualmente, las preparaciones de hormona del crecimiento son formulaciones de un día, y particularmente, en el caso de pacientes pediátricos, no resulta conveniente inyectar el fármaco cada día durante un largo período de tratamiento de 3 a 4 años, y se sabe que el estrés mental provocado por la inyección reduce la calidad de vida del paciente. Además, el cumplimiento de la frecuencia de dosificación por parte del paciente se convierte en el factor más importante que dificulta el efecto del tratamiento. Además, también se sabe que el número de fallos en la administración aumenta notablemente a medida que aumenta la duración del tratamiento (Endocrine practice, marzo de 2008; 14 (2): 143-54). Aproximadamente 2/3 de los pacientes tienen un bajo cumplimiento por defecto y, de hecho, se sabe que reduce la velocidad de crecimiento en altura (PloS one, enero de 2011; 6(1): e16223).

Debido a estos problemas, se han hecho intentos de desarrollar una hormona del crecimiento de acción prolongada usando diversas técnicas, pero hasta ahora, el desarrollo es exitoso y, como producto lanzado al mercado, hay una sola formulación de acción prolongada. Genentech desarrolló Nutropin depot en los EE. UU. como una formulación mensual, pero debido a su dificultad de producción, se retiró del mercado. Eutropin Plus/Declage de LG Life Sciences desarrolló una formulación semanal usando ácido hialurónico (HA), pero debido al tamaño de la aguja más grande en comparación con la primera generación, presenta inconvenientes.

Por tanto, es necesario desarrollar una hormona del crecimiento de acción prolongada segura y eficaz que satisfaga la conveniencia del paciente debido a la reducción del cumplimiento. GX-H9 (hGH-Fc híbrido) es una preparación de hormona del crecimiento de acción prolongada en desarrollo clínico. En el registro de patente estadounidense n.° 7.867.491, se preparó un Fc de tipo híbrido capaz de superar la citotoxicidad dependiente del complemento y la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos que son problemas de la tecnología de fusión de Fc existente combinando inmunoglobulina IgD e inmunoglobulina IgG4. Posteriormente, en el registro de patente estadounidense n.° 8.529.899, se preparó una hGH recombinante (hGH-hyFc, GX-H9) que es un material capaz de reemplazar a una formulación de hormona del crecimiento de tipo diario existente fusionando Fc híbrido con hormona del crecimiento humana hGH. Sin embargo, la semivida real en el cuerpo y la dosificación terapéutica de la proteína fusionada con Fc cambian enormemente dependiendo del tipo de principio farmacológicamente activo que se une a Fc. Las dosificaciones eficaces y seguras y su frecuencia para el tratamiento de la deficiencia de hormona del crecimiento usando GX-H9, en el que la hormona del crecimiento humana hGH se fusiona con hyFc, aún no se han encontrado. En 2014 se anunció el ensayo de EudraCT número 2014-002698-13, que da a conocer el estudio clínico de fase II planificado de una dosificación una vez a la semana o cada dos semanas de GX-H9 (0,1 - 0,6 mg por dosis) en pacientes con AGHD.

Por tanto, en la presente divulgación, se realizaron ensayos clínicos dirigidos a 32 adultos sanos (2013-002771 18) y 45 pacientes adultos con deficiencia de hormona del crecimiento (2014-002698-13), EudraCT, para desarrollar la dosificación y la frecuencia de dosis que muestran el efecto óptimo de la hormona del crecimiento recombinante, GX-H9. Como resultado, la presente divulgación se completó confirmando la dosificación, la frecuencia de dosis y la seguridad de GX-H9 que mantiene el valor de SDS de IGF-1 en el intervalo normal con un número mínimo de efectos secundarios provocados por el crecimiento. La realización de la presente invención se refleja en la reivindicación independiente 1. Las realizaciones preferidas de la presente invención se reflejan en las reivindicaciones dependientes 2 a 4.

Divulgación

Problema técnico

Solución técnica

Un aspecto de la presente divulgación proporciona una composición farmacéutica para tratar la deficiencia de hormona del crecimiento que comprende una hormona del crecimiento humana recombinante, GX-H9, y un portador farmacéuticamente aceptable, en el que la hGH recombinante se administra una vez a la semana con una dosificación de 0,1 a 0,3 mg por kg de peso de un paciente.

Otro aspecto de la presente divulgación proporciona una composición farmacéutica para tratar la deficiencia de hormona del crecimiento que comprende una hGH recombinante GX-H9 y un portador farmacéuticamente aceptable, en la que la hGH recombinante se administra dos veces al mes con una dosificación de 0,1 a 0,4 mg por kg de peso de un paciente.

Según la presente divulgación, cuando la hormona del crecimiento humana recombinante, GX-H9, se administra a un paciente con deficiencia de hormona del crecimiento una vez a la semana con una dosificación de 0,1 a 0,3 mg por kg de peso del paciente o dos veces al mes con una dosificación de 0,1 a 0,4 mg por kg de peso del paciente, el nivel de hormona del crecimiento en el cuerpo puede mantenerse durante un periodo más prolongado y, con respecto al nivel de hGH, el valor de SDS de IGF-1 puede mantenerse en el intervalo normal durante un tiempo más prolongado. Por tanto, se brinda la posibilidad de tratar la deficiencia de hormona del crecimiento administrando una hormona del crecimiento una vez a la semana o dos veces al mes sin la necesidad de administración diaria.

Descripción de los dibujos

Los anteriores y otros aspectos, características y otras ventajas de la presente divulgación se entenderán más claramente a partir de la siguiente descripción detallada tomada conjuntamente con los dibujos adjuntos, en los que:

la figura 1 ilustra un resultado de la afinidad de unión de un receptor de Fcy FcyR I por la hGH recombinante (GX-H9);

la figura 2 ilustra un resultado de la afinidad de unión de Clq por la hGH recombinante (GX-H9);

la figura 3 es un resultado del aumento de peso en ratas hipofisectomizadas;

la figura 4 ilustra las características de farmacodinámica en una sola administración subcutánea de la hGH recombinante (GX-H9) a ratas;

la figura 5 ilustra las características de farmacodinámica en una sola administración subcutánea de la hGH recombinante (GX-H9) en monos;

la figura 6 ilustra las características de farmacodinámica en una administración subcutánea repetida de la hGH recombinante (GX-H9) en monos;

la figura 7 ilustra las características de farmacodinámica de la hGH recombinante (GX-H9) en un estudio clínico de fase 1;

la figura 8 ilustra las características de farmacocinética (SDS de IGF-1) de la hGH recombinante (GX-H9) en un estudio clínico de fase 1;

la figura 9 ilustra las características de farmacodinámica en una administración repetida de la hGH recombinante (GX-H9) en un estudio clínico de fase 2; y

la figura 10 ilustra las características de farmacocinética en una administración repetida de la hGH recombinante (GX-H9) en un estudio clínico de fase 2.

Modo de la invención

Todavía no se han encontrado una dosificación y frecuencia de dosis eficaces de hormona del crecimiento humana recombinante GX-H9 que promuevan el crecimiento real del ser humano.

Los inventores realizaron estudios clínicos con el fin de desarrollar la dosificación y la frecuencia de dosis capaces de presentar un efecto óptimo de GX-H9, seleccionando como diana 32 adultos sanos (2013-002771-18) y 45 pacientes adultos con deficiencia de hormona del crecimiento (2014-002698-13, EudraCT). Como resultado, se ha observado que, en el caso de administrar la hGH recombinante, GX-H9, una vez a la semana con una dosificación de 0,1 a 0,3 mg por kg de peso del paciente o dos veces al mes con una dosificación de 0,1 a 0,4 mg por kg de peso del paciente, se mantiene la hormona del crecimiento en el cuerpo durante un periodo más prolongado y el valor de SDS de IGF-1 puede mantenerse en el intervalo normal.

Un aspecto de la presente divulgación se refiere una composición farmacéutica para tratar la deficiencia de hormona del crecimiento que contiene una hGH recombinante (GX-H9) y un portador farmacéuticamente aceptable, en la que la hGH recombinante se administra una vez a la semana con una dosificación de 0,1 a 0,3 mg por kg de peso de un paciente. Particularmente, la presente divulgación se refiere a una composición farmacéutica, en la que la hGH recombinante se administra una vez a la semana con una dosificación de 0,1 a 0,2 mg por kg de peso de un paciente.

Además, otro aspecto de la presente divulgación se refiere a una composición farmacéutica para tratar la deficiencia de hormona del crecimiento que contiene una proteína hGH recombinante GX-H9 y un portador farmacéuticamente aceptable, en la que la hGH recombinante se administra dos veces al mes con una dosificación de 0,1 a 0,4 mg por kg de peso de un paciente. Particularmente, la presente divulgación se refiere a una composición farmacéutica, en la que la hGH recombinante se administra una vez cada dos semanas con una dosificación de 0,15 a 0,4 mg por kg de peso de un paciente.

En la composición farmacéutica de la presente divulgación, la hGH recombinante, GX-H9, comprende una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 1. La composición farmacéutica de la presente divulgación puede administrarse por vía subcutánea.

La hGH recombinante “GX-H9” usada en la presente solicitud se refiere a hGH-hyFc que es una hormona del crecimiento humana fusionada a Fc híbrido y tiene una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 1. La hGH recombinante GX-H9 puede prepararse mediante un método dado a conocer en el registro de patente estadounidense n.° 8.529.899.

Según la presente divulgación, la composición farmacéutica que contiene la hGH recombinante GX-H9 puede administrarse a adultos con deficiencia de hormona del crecimiento.

La deficiencia de hormona del crecimiento en adultos significa un caso en donde la puntuación de desviación estándar (SDS) en comparación con personas normales en el mismo grupo de edad en adultos es de -2 o menos (< -2 SDS) o dentro del percentil 2,5 (< percentil 2,5). En adultos con enfermedades de la hipófisis e hipopituitarismo, la deficiencia de hormona del crecimiento está implicada habitualmente en trastornos físicos y podría provocar trastornos mentales así como anomalías metabólicas y de la composición corporal. La deficiencia de hormona del crecimiento en adultos puede clasificarse en tres categorías. La deficiencia de hormona del crecimiento en adultos puede dividirse, en primer lugar, en deficiencia de hormona del crecimiento de inicio en la infancia, un caso de deficiencia de hormona del crecimiento debida a trastornos basados en el hipotálamo y la hipófisis, y deficiencia de hormona del crecimiento idiopática.

La composición farmacéutica de la presente divulgación incluye un portador farmacéuticamente aceptable que puede ser cualquier material no tóxico adecuado para administrar la hGH recombinante al paciente. Pueden incluirse agua destilada, alcohol, grasas, ceras y sólidos inertes como portador. Pueden incluirse adyuvantes farmacéuticamente aceptables tales como un tampón, un dispersante y un diluyente, por ejemplo, agua bacteriostática para inyección (BWFI), solución salina tamponada con fosfato, disolución de Ringer, una disolución de dextrosa, sacarosa, poloxámero, y similares en la composición farmacéutica para el uso de la presente divulgación.

En la presente divulgación, la hGH recombinante, GX-H9, puede administrarse una vez a la semana con una dosificación de 0,1 a 0,3 mg por kg de peso del paciente y por ejemplo, la dosis de administración puede variar con la dosificación de 0,1,0,15, 0,2, 0,25 o 0,3 mg por kg de peso según la edad, el sexo y los estados estrogénicos de los pacientes. Preferiblemente, la hGH recombinante GX-H9 puede administrarse una vez a la semana con una dosificación de 0,1 a 0,2 mg por kg de peso del paciente. Además, la hGH recombinante GX-H9 puede administrarse dos veces al mes con una dosificación de 0,1 a 0,4 mg por kg de peso del paciente y, por ejemplo, puede administrarse una vez cada dos semanas con una dosificación de 0,1, 0,15, 0,2, 0,25, 0,3, 0,35 o 0,4 mg por kg de peso del paciente según la edad, el sexo y los estados estrogénicos. Preferiblemente, la hGH recombinante GX-H9 puede administrarse dos veces al mes con una dosificación de 0,15 a 0,4 mg por kg de peso del paciente. Particularmente, la dosificación preferida de la hGH recombinante, GX-H9, es de 0,1 mg/kg administrados una vez a la semana, 0,2 mg/kg administrados dos veces al mes o 0,3 mg/kg administrados dos veces al mes. Además, en algunos casos, la hGH recombinante puede administrarse dos veces al mes, una vez cada tres semanas o mensualmente con de 0,3 a 0,6 mg/kg según la edad, el sexo y los estados estrogénicos.

La dosificación de la hGH recombinante puede ajustarse basándose en la edad, el sexo y el estado estrogénico del paciente y puede aumentarse o disminuirse al tiempo que se monitoriza el progreso de la administración. La dosificación de la hGH recombinante administrada posteriormente puede ser mayor o menor que una dosificación inicial o igual a la dosificación inicial a medida que cambia el nivel de SDS de IGF-1. En la fase inicial, debe administrarse una pequeña cantidad de hGH recombinante de manera segura y luego puede aumentarse gradualmente tras verificar que no se producen reacciones adversas. Además, la dosificación de la hGH recombinante puede ajustarse mientras se monitoriza el cambio del nivel de SDS de IGF-1 en una muestra de plasma o suero del paciente. La dosificación de la hGH recombinante adecuada para cada paciente individual puede variar dependiendo de la edad, el sexo, la constitución, el peso corporal del paciente.

La composición farmacéutica para el uso de la presente divulgación que contiene la hGH recombinante, GX-H9, puede administrarse a un sujeto mediante diversos métodos. Por ejemplo, la composición farmacéutica puede administrarse por vía parenteral y, por ejemplo, por vía subcutánea, intramuscular o intravenosa. La composición puede esterilizarse según una técnica de esterilización generalmente bien conocida. La composición puede incluir sustancias auxiliares y adyuvantes farmacéuticamente aceptables, modificadores tóxicos y análogos de los mismos requeridos para el ajuste de las condiciones fisiológicas tal como ajuste del pH y, por ejemplo, pueden incluir acetato de sodio, cloruro de sodio, cloruro de potasio, cloruro de calcio, lactato de sodio, y similares. En las formulaciones, la concentración de la hGH recombinante puede ser muy diversa y puede seleccionarse preferentemente basándose en el volumen de un fluido corporal, las viscosidades, y similares según el método de administración específico seleccionado.

A continuación en el presente documento, la presente divulgación se describirá en más detalle a través de ejemplos. Estos ejemplos son tan solo para ejemplificar la presente divulgación, y resulta evidente para los expertos en la técnica que se interpreta que el alcance de la presente divulgación no se limita a estos ejemplos.

Ejemplo 1. Preparación de hGH recombinante, GX-H9

La hGH recombinante, GX-H9, puede prepararse según un método dado a conocer en registro de patente estadounidense n.° 8.529.899.

En primer lugar, se insertó una secuencia de ácido nucleico de hGH-hyFc en la que se fusionó hyFc con la hormona del crecimiento humana (hGH), que codifica una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 1, en un vector de expresión pAD15 para producir la línea celular que expresa hGH-hyFc. Para producir un vector que incluye un gen estructural de hGH-hyFc, se usó la secuencia de GenBank AAA98618.1 para el gen de hormona del crecimiento humana hGH y se produjo un gen de hyFc fusionando las secuencias de GenBank P01880 (IgD) y GenBank AAH25985 (IgG4). Los genes obtenidos del fabricante de genes se inyectaron usando enzimas de restricción específicas como vectores de expresión para la preparación de la producción de líneas celulares.

El vector de expresión garantizado por el método anterior se transfectó en células CHO DG44 (Universidad de Columbia, EE. U^u.) mediante un método de fosfato de calcio. Después de 6 h de la transfección, se lavaron las células transfectadas con un tampón fosfato y luego se reemplazó el medio por medios dFBS al 10 % (Gibco, EE. UU., 30067-334), MEM alfa (Gibco, 12561, EE. UU., n.° de cat. 12561-049) y HT+ (Gibco, EE. UU., 11067-030). Después de 48 h de la transfección, se realizó la selección con HT diluyendo de manera continua las células transfectadas en una placa de 100 mm usando medio de dFBS al 10 % MEM alfa sin HT. Mientras que el medio se reemplazó dos veces a la semana, las células transfectadas se dejaron hasta que se formó una sola colonia. Después de eso, con el fin de amplificar la productividad usando un sistema de DHFR, se realizó amplificación con MTX con respecto a los clones de la selección con HT. Después de la amplificación con MTX, se realizaron de 4 a 5 veces de subcultivo para estabilizar la célula para la evaluación de la productividad y se evaluó la productividad unitaria. Se obtuvo un clon adecuado para producir una proteína diana.

Para obtener el clon individual con respecto a los clones más productivos, se realizó clonación por dilución limitante (LDC). La LDC se inoculó en una placa de 96 pocillos diluyendo las células con un medio de cultivo para tener una concentración de 1 célula/pocillo. Después de 10 a 14 días de inoculación, se obtuvieron solo las células de los pocillos con clones individuales a través de un microscopio y se cultivaron en un frasco T25 suficiente para realizar la evaluación de la productividad, y luego se garantizó una línea celular que tenía una alta productividad.

Después de que se obtuviera una disolución de cultivo a partir de la línea celular garantizada, se purificó la proteína diana de la disolución de cultivo. Una muestra de disolución de cultivo de proteínas se sometió a la unión de la muestra usando la disolución de cultivo de proteínas con el uso de Prosep® Ultra Plus (Merck) y se equilibró usando fosfato de sodio 50 mM, cloruro de sodio 150 mM y un tampón de pH 7,0. Se usó una columna XK16/20 (GE Healthcare) y se eluyó la proteína usando citrato de sodio 100 mM, L-arginina 200 mM y tampón de pH 3,1.

Ejemplo 2. Pruebas de citotoxicidad mediada por células dependiente de anticuerpos (ADCC) y citotoxicidad mediada por el complemento (CDC) de hGH recombinante GX-H9

Para verificar que el dominio Fc híbrido de GX-H9 no inducía citotoxicidad mediada por células dependiente de anticuerpos (ADCC) y citotoxicidad dependiente del complemento (CDC), se realizó un ensayo de inmunoabsorción enzimática (ELISA).

Como grupos de control positivo, se usaron Rituxan (de Roche Corporation en Suiza) y Enbrel (de Amgen Corporation en EE. UU.), que se sabe que tienen una afinidad de unión muy alta a los receptores de Fcy FcyR I, II y III. Cada placa de 96 pocillos se recubrió con GX-H9, Rituxan y Enbrel y luego se hizo reaccionar con el receptor de F^cyI con dilución en serie. Una vez transcurrido el tiempo de reacción, se lavó la disolución de reacción con una disolución tampón para eliminar el receptor de Fcy I que no estaba unido a las sustancias de prueba. Después de eso, se midió la fuerza de unión entre el receptor de F^cyI y la sustancia de prueba usando un anticuerpo anti-FcyRI biotinilado y un anticuerpo frente a estreptavidina conjugado con HRP.

También se midió la fuerza de unión entre Clq y GX-H9 que induce citotoxicidad mediada por células usando el método de ELISA anterior. Como grupos de control positivo, se usaron Rituxan (de Roche Corporation en Suiza) y Enbrel (de Amgen Corporation en EE. UU.) y se midió la fuerza de unión entre las sustancias de prueba usando el anticuerpo anti-Clq conjugado con HRP.

Como resultado, se verificó que la GX-H9 tenía una baja fuerza de unión con el receptor de Fcy I que induce la citotoxicidad mediada por células dependiente de anticuerpos tal como se ilustra en la figura 1 y una baja fuerza de unión con Clq que induce la citotoxicidad mediada por el complemento tal como se ilustra en la figura 2.

Ejemplo 3. Resultado de la prueba preclínica de hGH recombinante GX-H9

3-1: Prueba de eficacia para la administración repetida subcutánea de GX-H9 usando ratas h i pofisectom izadas

Se sometió a prueba la eficacia de GX-H9 usando ratas hipofisectomizadas como modelo de enfermedad animal. Como grupo de control, se usó Genotropin (Pfizer Corporation, EE. UU.) como agente de administración diaria, y se administró GX-H9 una vez a la semana y luego se comparó la eficacia.

Se realizó una prueba seleccionando como diana un aumento de peso del 10 % o menos durante aproximadamente 1 semana después de la hipofisectomización. El grupo 1 era un grupo de control negativo y se le administró por vía subcutánea solo un tampón de formulación durante dos semanas. Al grupo 2 se le administró por vía subcutánea Genotropin a 0,2 mg/kg cada día. Al grupo 3 se le administró una vez a la semana Genotropin a 1,4 mg/kg que era una dosificación semanal. Al grupo 4 se le administró una vez a la semana GX-H9 a 1,4 mg/kg (correspondiente a una dosificación semanal de Genotropin). Al grupo 5 se le administró una vez a la semana GX-H9 a 3,5 mg/kg (correspondiente a 1/2 del número molar de una dosificación semanal de Genotropin). Al grupo 6 se le administró una vez a la semana GX-H9 a 7,0 mg/kg (correspondiente al mismo número molar que una dosificación semanal de Genotropin). Después de la administración del fármaco, se observaron los síntomas y se midieron los pesos cada día.

Como resultado, tal como se ilustra en la figura 3, cuando se administró Genotropin una vez al día, el peso promedio aumentó aproximadamente 20 g/kg cuando se administraron 0,2 mg/kg al día, pero cuando se administró una dosificación semanal (1,4 mg/kg) en conjunto una vez a la semana, no hubo aumento de peso. Cuando se administró la GX-H9 a una dosificación de 7 mg/kg una vez a la semana (grupo 6), el aumento de peso fue mayor que el de Genotropin (grupo 3) administrado con el mismo número de moles. Además, cuando se administró la GX-H9 a una dosificación de 3,5 mg/kg (grupo 5), se mostró una eficacia similar a un caso en donde se administró Genotropin a 0,2 mg/kg al día (grupo 2).

3-2: Prueba de farmacodinámica después de una sola administración subcutánea de hGH recombinante GX-H9 usando ratas

Para someter a prueba la farmacocinética de GX-H9, se administró GX-H9 a ratas una vez por vía subcutánea. Como grupo de control, se administró Eutropin (LG Life Sciences, Inc., en Corea) una vez por vía subcutánea y se comparó la eficacia. Al grupo 1 se le administró una sola dosificación de 200 ug/kg de Eutropin por vía subcutánea y al grupo 2 se le administró una sola dosificación de 200 ug/kg de GX-H9 por vía subcutánea. Al grupo 3 se le administró una sola dosificación de 1.000 ug/kg de GX-H9 por vía subcutánea.

Se extrajo sangre antes y durante 1, 4, 8, 12, 18, 24, 36, 48, 72, 96, 120, 144, 168, 216, 264 y 336 horas después de la administración subcutánea. Se midió la concentración de sangre de cada sustancia mediante bioensayo específico (ELISA).

Los resultados de la prueba se ilustraron en la figura 4 y la farmacocinética después de una sola administración subcutánea de GX-H9 a una dosificación de 200 o 1.000 ug/kg alcanzó la concentración en sangre más alta a las 17 o 24 horas (Tmáx.) y la GX-H9 se detectó en la sangre hasta los 9 días y 11 días. A medida que la dosis aumentó, también aumentó la exposición sistémica.

Cuando se comparó con un grupo de administración de 200 ug/kg de Eutropin como sustancia de control, se detectó la sustancia de prueba en la sangre durante un tiempo más prolongado (Eutropin 24 h frente a GX-H9 9 días). En el caso de la administración subcutánea de 200 ug/kg de GX-H9, la diferencia de tiempo en alcanzar la concentración en sangre máxima (Tmáx.) fue de aproximadamente 20 h (Eutropin 4 h frente a GX-H9 24 h). A partir de los resultados anteriores, se observó que GX-H9 se exponía de manera continua al sistema en la rata durante un tiempo prolongado en comparación con un fármaco de control, Eutropin. Además, a medida que la dosificación de la GX-H9 aumentó, la exposición sistémica después de la administración subcutánea aumentó proporcionalmente.

3- 3: Prueba de farmacodinámica después de una sola administración subcutánea de hGH recombinante GX-H9 en mono

Se analizó la farmacocinética de GX-H9 y Eutropin como sustancia de control en mono cynomolgus. En monos macho (tres/grupo), se administró GX-H9 por vía subcutánea repetidamente cuatro veces a la semana con dosificaciones de 500 |jg/kg y 1000 |jg/kg y se administró Eutropin como sustancia de control por vía subcutánea una vez a una dosificación de 1000 jg/kg.

En el grupo en el que se administró GX-H9, se tomaron muestras de sangre antes de la 1a y 4a administración (administración de 0 y 21 días) y durante 1, 4, 8, 12, 18, 24, 30, 36, 48, 60, 72, 96, 120, 144 y 168 horas después de la administración.

En un grupo en el que se administró Eutropin, se tomaron muestras de sangre antes de la administración individual y a las 1, 4, 8, 12, 18, 24, 30, 36, 48, 60, 72, 96, 120, 144 y 168 h después de la administración.

Se midió la concentración en sangre mediante bioensayo específico (ELISA) para GX-H9 y Eutropin y se ilustraron los resultados en las figuras 5 y 6. Cuando se administró GX-H9 por vía subcutánea a una dosificación de 500 o 1.000 jg/kg, se observó que la exposición sistémica aumentó en relación con un aumento de la dosis después de la administración individual (0 días) y después de la administración repetida (4 semanas).

En comparación con Eutropin (1000 jg/kg, administración subcutánea individual), se detectó la administración de GX-H9 (500 o 1000 jg/kg) (de 12 a 18 h después de la administración de Eutropin frente a 168 h después de la administración de GX-H9) durante un tiempo más prolongado en la sangre. Es decir, cuando se administra GX-H9 por vía subcutánea, se observó que la exposición sistémica era más persistente que la del fármaco de control, Eutropin. Además, a medida que la dosificación de GX-H9 aumentaba desde 500 hasta 1000 jg/kg, se observó que la exposición sistémica después de la administración subcutánea aumentaba en proporción al aumento de la dosis.

Ejemplo 4. Resultado del estudio clínico de fase 1 de hGH recombinante GX-H9

4- 1: Características farmacocinéticas de hGH recombinante GX-H9 en adultos sanos

Se realizó un estudio clínico de fase 1 de una sola dosis ascendente, aleatorizado, de doble enmascaramiento, controlado por placebo dirigido a voluntarios sanos. El fin del estudio clínico de fase 1 era evaluar la seguridad, tolerabilidad y características farmacodinámicas/farmacocinéticas después de una sola administración subcutánea de GX-H9. Después de que los voluntarios sanos se asignaran aleatoriamente a un grupo de estudio o un grupo de placebo, se realizó la evaluación durante un total de 56 días después de una sola administración subcutánea de GX-H9 a cuatro grupos de dosificación (0,2, 0,4, 0,8 y 1,6 mg/kg).

En el grupo en el que se administró GX-H9, se tomaron muestras de sangre antes de la administración individual y a las 0,25, 1,2, 4, 6, 8, 12, 16, 24, 28, 32, 36, 40, 48, 54, 60, 72, 80, 96, 144, 312, 480, 648 y 1320 h después de la administración.

Se midió la concentración en sangre mediante el bioensayo específico (ELISA) de GX-H9 y se ilustraron los resultados en la tabla 1 a continuación y la figura 7.

Se observó un pico a una concentración media geométrica aproximadamente 12 horas (de 8 a 16 horas) después de una sola administración subcutánea de GX-H9, y se observó un segundo pico a una concentración inferior aproximadamente 32 horas (de 28 a 32 horas) después de la administración. A la dosificación máxima, el segundo pico correspondía a Cmáx. (véase la figura 7). Cmáx. y AUC aumentaron más la dosificación con respecto a todas las dosificaciones. La semivida (t1/2) fue de desde 69,2 h hasta 138 h y hubo una variabilidad individual.

4-2: Características farmacocinéticas de hGH recombinante GX-H9 en adultos sanos

En el grupo en el que se administró GX-H9, se extrajo sangre antes de la administración individual y se extrajo sangre a las 12, 24, 36, 48, 60, 72, 96, 144, 312, 480, 648 y 1320 horas después de la administración. En la figura 8 se ilustró la cantidad de cambio estableciendo la concentración de IGF-1 en la sangre medida antes de la administración como momento basal.

La figura 8 ilustra la cantidad de cambio de la concentración (ng/ml) de IGF-1 en la sangre en comparación con el momento basal de los grupos en los que se administró placebo y 0,2, 0,4, 0,8 y 1,6 mg/kg de GX-H9. Después de la administración individual de GX-H9 por vía subcutánea a 0,2, 0,4, 0,8 y 1,6 mg/kg, la concentración de IGF-1 en la sangre aumentó en proporción a las dosificaciones. El aumento máximo medio (% de cambio con respecto al momento basal) fue del 81 %, el 157 %, el 301 % y el 349 % a la dosificación de 0,2, 0,4, 0,8 y 1,6 mg/kg, respectivamente. El tiempo en alcanzar la concentración más alta de IGF-1 en la sangre fue de 48 a 96 horas y aumentó en proporción a la dosificación. Se verificó que la concentración media de IGF-1 se recuperó con respecto al momento basal el 7° día después de la administración a la dosificación de 0,2 mg/kg y el 14° día a otras dosificaciones.

4-3: Resultado de seguridad de hGH recombinante GX-H9 en adultos sanos

La tabla 2 a continuación resume los resultados de acontecimientos adversos que surgen con el tratamiento observados en sujetos según el fármaco administrado, la relación entre el fármaco y los acontecimientos adversos, y la intensidad de los acontecimientos adversos.

(%) = Razón de individuos que experimentan acontecimientos adversos según el tratamiento (n/N)*100

No se registraron acontecimientos adversos graves o acontecimientos adversos leves.

Tal como se ilustra en la tabla 2, se notificó un total de 54 acontecimientos adversos a partir de 21 sujetos. No se notificaron muertes o acontecimientos adversos graves. Se notificó un acontecimiento adverso con gravedad grave en un sujeto, pero se determinó que no era un acontecimiento adverso relacionado con el fármaco. La gravedad de todos los acontecimientos adversos excepto el acontecimiento adverso anterior fue leve. Los acontecimientos adversos más frecuentemente notificados fueron trastornos musculoesqueléticos y del tejido conjuntivo (19 casos), trastornos sistémicos y trastornos en el sitio de administración (11 casos) y trastornos neurológicos (10 casos). Los acontecimientos adversos notificados tres o más veces fueron mialgia (7 casos), reacción en el sitio de inserción del catéter (6 casos), cefalea (5 casos), nasofaringitis (5 casos), artralgia (4 casos) y melagra (3 casos).

Mientras tanto, se analizó la formación de anticuerpo de GX-H9 en el sujeto al que se administró GX-H9. Se observó anticuerpo anti-fármaco (ADA) antes de la administración, y el 28° y 56° día. Como resultado, ningún paciente mostró el anticuerpo formado por GX-H9.

Ejemplo 5. Resultado del estudio clínico de fase 2 de hGH recombinante GX-H9

5-1: Características farmacocinéticas de GX-H9 en pacientes adultos con deficiencia de hormona del crecimiento

Se realizó un estudio de fase 2, aleatorizado, controlado por principio activo, sin enmascaramiento para evaluar la seguridad, tolerabilidad, eficacia y características farmacodinámicas/farmacocinéticas de la GX-H9 en pacientes adultos con deficiencia de hormona del crecimiento (tabla 3). La dosificación se administró repetidamente durante un total de 12 semanas con 0,1 mg/kg semanalmente (grupo 1), 0,3 mg/kg dos veces al mes (grupo 2) o 0,2 mg/kg dos veces al mes (grupo 3). Además, como fármaco de control activo, se administró Genotropin diariamente a 6 |jg/kg (G: Grupo 4).

Tabla 3

En el grupo en el que se administró GX-H9 una vez a la semana, se extrajo sangre durante la primera administración (1a semana) y la última administración (12a semana) y se extrajo a las 1, 2, 4, 8, 12, 18, 24, 48, 72 y 168 h después de la administración.

En el grupo en el que se administró GX-H9 dos veces al mes, se extrajo sangre antes de la primera administración (primera semana) y la última administración (11a semana) y se extrajo a las 1,2, 4, 8, 12, 18, 24, 48, 72, 168, 240 y 336 h después de la administración.

Se midió la concentración de la GX-H9 en la sangre a partir de las muestras de sangre obtenidas y se ilustraron los resultados en las tablas 4 a 6 y la figura 9.

Tabla 4

Grupo 1 (0,1 mg/kg, semanal)

Semana Tiempo

Media DE Mediana Mín. Máx.

1W Antes de la dosis 2,01 - 2,01 2,01 2,01

1 h 5,01 2,94 4,23 2,36 11,53

2 h 14,87 19,28 6,59 3,43 64,25

4 h 28,34 39,78 9,24 2,88 128,35

8 h 37,83 68,95 10,24 2,29 225,02

12 h 35,63 55,05 15,67 2,20 181,13

18 h 18,32 20,17 9,45 2,70 65,81

24 h 16,58 11,04 17,05 2,17 38,92

48 h 16,70 9,81 16,79 3,34 30,33

72 h 14,09 6,95 15,97 4,37 21,80

168 h 7,41 2,71 7,34 2,49 11,76

12W Antes de la dosis 12,52 2,92 12,94 8,41 17,67

1 h 15,67 4,04 15,71 9,42 23,21

2 h 20,70 8,70 21,60 10,46 35,73

4 h 24,19 10,84 22,86 10,43 44,43

8 h 28,89 17,64 24,16 10,99 73,31

12 h 33,35 28,20 25,39 10,98 110,06

18 h 23,74 12,27 21,72 9,00 50,42

24 h 24,17 14,01 21,65 11,26 61,57

48 h 26,00 9,55 27,44 12,65 38,46

72 h 22,01 6,97 23,64 14,43 32,37

168 h 12,75 4,92 11,77 5,73 21,28

Tabla 5

Grupo 2 (0,3 mg/kg, dos veces al mes)

Semana Tiempo

Media DE Mediana Mín. Máx.

1W Antes de la dosis 2,10 - 2,10 2,10 2,10

1 h 23,20 23,56 13,06 2,70 74,68

2 h 46,14 40,78 29,60 3,52 119,32

4 h 99,49 96,99 65,22 12,26 312,01

8 h 160,53 179,70 107,49 13,94 641,98

12 h 213,21 214,23 168,64 11,86 699,11

18 h 165,87 172,00 93,14 11,15 445,85

24 h 173,54 194,85 121,49 13,91 597,79

48 h 107,71 95,65 65,66 22,32 290,37 72 h 63,70 37,71 49,99 19,35 128,65 168 h 30,43 14,64 24,79 14,33 59,71 240 h 17,67 7,40 15,58 11,30 36,05 336 h 19,20 31,66 9,86 5,21 113,69 1W Antes de la dosis 10,89 4,10 10,40 4,72 17,75

1 h 28,72 24,53 17,34 8,37 84,15 2 h 53,91 50,49 34,38 11,19 151,94 4 h 78,89 76,77 52,08 13,69 258,54 8 h 132,65 135,54 62,56 22,65 435,16 12 h 148,42 174,84 58,52 17,01 580,24 18 h 130,20 199,98 54,56 15,46 730,83 24 h 141,26 198,15 69,33 20,28 738,26 48 h 115,82 135,33 64,10 21,43 481,25 72 h 74,40 52,33 56,64 21,19 197,28 168 h 34,64 13,79 32,26 20,53 71,03 240 h 21,37 8,64 19,24 10,70 39,98 336 h 11,58 4,70 11,07 4,51 20,63

Tabla 6

Grupo 3 (0,2 mg/kg, dos veces al mes) Semana Tiempo

Media DE Mediana Mín. Máx. W Antes de la dosis - - - - -1 h 10,64 6,35 9,09 3,35 21,51 2 h 23,93 19,02 24,79 4,69 56,43 4 h 37,89 33,96 37,37 5,24 85,93 8 h 67,01 81,94 28,71 10,92 236,12 12 h 67,17 83,37 28,02 12,76 245,62 18 h 47,21 69,50 18,22 7,01 213,04 24 h 50,89 46,57 38,16 21,58 170,68 48 h 29,31 8,40 29,18 17,83 41,02 72 h 23,56 5,48 23,25 12,08 30,71 168 h 10,98 3,62 11,42 4,23 15,71 240 h 7,16 2,44 7,95 3,84 10,23 336 h 4,57 1,07 4,54 3,52 5,66 1W Antes de la dosis 3,45 1,05 3,03 2,75 4,99

1 h 22,99 16,71 19,90 8,98 43,17 2 h 18,71 8,94 17,37 10,52 28,24 4 h 61,84 74,97 30,99 13,04 172,34 8 h 24,89 15,48 18,51 13,63 42,54 12 h 84,46 106,13 42,95 11,73 240,19 18 h 72,53 95,15 32,42 12,23 213,05 24 h 57,04 47,03 44,36 15,52 123,94 48 h 35,16 3,07 36,47 31,65 37,35 72 h 28,70 3,88 27,51 25,46 34,32 168 h 13,53 3,14 13,28 10,52 16,79 240 h 6,77 1,73 6,42 5,24 8,65 336 h 3,70 0,97 3,53 2,81 4,92 Después de la administración repetida de la GX-H9 con 0,1 mg/kg durante 12 semanas, se analizó el cambio en la farmacocinética en la primera administración (1a semana) y la última administración (12a semana), antes de la administración y 1,2, 4, 8, 12, 18, 24, 48, 72 y 168 h después de la administración. Se verificó que la concentración media (desviación estándar) de GX-H9 desde antes de la administración (por debajo del límite de cuantificación, BLQ) hasta 168 h (7 días) después de la primera administración (1a semana) y la última administración (12a semana) fue de 7,41 (2,71) y 12,75 (4,92), respectivamente. Además, después de la administración repetida de la GX-H9 con 0,3 mg/kg y 0,2 mg/kg durante 12 semanas, se analizó el cambio en la farmacocinética en la primera administración (1a semana) y la última administración (11a semana), antes de la administración y 1,2, 4, 8, 12, 18, 24, 48, 72, 168, 240 y 336 h después de la administración. Se verificó que la concentración media (desviación estándar) de GX-H9 desde antes de la administración (por debajo del límite de cuantificación, BLQ) hasta 336 h (14 días) después de la primera administración (1a semana) y la última administración (12a semana) fue de 19,20 (31,66) y 11,58 (4,70) para 0,3 mg/kg/intervalo de dos veces al mes y de 4,57 (1,07) y 3,70 (0,97) para 0,2 mg/kg/dos veces al mes, respectivamente.

Por tanto, se mostró que cuando se administró GX-H9 semanalmente o dos veces al mes en el intervalo de concentración de 0,1 mg/kg a 0,3 mg/kg, la concentración de GX-H9 se mantuvo a un nivel normal sin ninguna acumulación en el cuerpo.

5-2: Características farmacocinéticas de hGH recombinante GX-H9 en pacientes adultos con deficiencia de hormona del crecimiento

En un grupo en el que se administró GX-H9 una vez a la semana, se extrajo sangre durante la primera administración (1a semana) y la última administración (12a semanas) y se extrajo a las 12, 24, 48, 72 y 168 h después de la administración. Con el fin de evaluar un cambio en la puntuación de desviación estándar de IGF-1 (SDS de IGF-1) en comparación con la persona normal en relación al tiempo y la concentración de dosis, se analizó la SDS de IGF-1 a los 4 días después de la administración de las semanas 3, 5, 7, 9 y 11. En el grupo en el que se administró GX-H9 dos veces al mes, se extrajo sangre durante la primera administración (1a semana) y la última administración (11a semanas) y se extrajo a las 12, 24, 48, 72, 168, 240 y 336 h después de la administración. Con el fin de evaluar un cambio en SDS de lGF-1 en relación al tiempo y la concentración de dosis, se analizó el cambio de SDS de IGF-1 a los 4 días después de la administración de las semanas 3, 5, 7 y 9.

Los resultados de las características de farmacodinámica de GX-H9 se ilustraron en las tablas 7 a 10 y la figura 10.

Tabla 7

Grupo 1 (0,1 mg/kg, semanal)

Semana Tiempo

Media DE Mediana Mín. Máx.

1W Antes de la dosis -2,48 0,93 -2,37 -4,07 -1,49

12 h -1,18 1,00 -1,11 -2,84 0,71

24 h -0,35 1,22 -0,56 -2,12 2,23

48 h 0,12 1,10 -0,15 -1,58 2,51

72 h 0,03 1,07 -0,02 -2,08 2,20

168 h -1,05 1,10 -0,79 -3,23 0,53

3W 0,16 1,17 0,28 -2,57 2,22

5w -0,07 0,80 0,01 -1,80 0,94

7W -0,01 0,91 0,08 -1,48 1,29

9W 0,44 1,23 0,68 -2,44 1,66

11W 0,44 1,20 0,66 -1,20 2,14

12W Antes de la dosis -0,43 1,02 -0,45 -2,27 0,95

12 h 0,21 0,90 0,08 -1,42 1,88

24 h 0,69 0,93 0,73 -0,87 2,60

48 h 1,01 0,87 0,95 -0,52 2,39

72 h 0,75 0,84 0,73 -1,09 1,91

168 h -0,41 0,97 -0,42 -2,27 1,15

Tabla 8

Grupo 2 (0,3 mg/kg, dos veces al mes) Semana Tiempo

Media DE Mediana Mín. Máx. W Antes de la dosis -2,64 1,25 -2,32 -5,42 -1,29

12 h -0,97 1,34 -0,67 -4,21 0,70 24 h 0,30 1,73 0,15 -2,99 3,30 48 h 1,86 2,00 1,79 -1,20 5,20 72 h 1,80 1,99 1,71 -1,33 4,85 168 h -0,10 1,79 0,60 -4,14 2,34 240 h -1,12 1,68 -0,56 -4,81 1,32 336 h -1,79 1,67 -2,01 -5,39 0,34 W 2,09 2,32 2,02 -2,28 5,91 W 1,85 2,05 1,91 -1,44 5,55 W 2,10 2,20 2,34 -1,20 6,52 W 2,06 1,93 2,64 -0,96 4,34 1W Antes de la dosis -1,72 1,53 -1,77 -4,92 0,86

12 h -0,40 1,27 -0,12 -3,18 1,20 24 h 0,68 1,43 1,02 -1,96 2,73 48 h 2,07 1,71 1,51 -0,31 5,14 72 h 2,12 1,82 1,88 -0,43 5,16 168 h 0,35 2,05 0,42 -3,60 3,77 240 h -0,59 1,97 -0,63 -4,24 2,44 336 h -1,36 1,59 -1,56 -4,44 0,82

Tabla 9

Grupo 3 (0,2 mg/kg, dos veces al mes) Semana Tiempo

Media DE Mediana Mín. Máx. W Antes de la dosis -2,40 0,82 -2,41 -3,60 -0,84

12 h -0,92 0,84 -1,11 -2,72 0,66 24 h 0,13 1,20 0,15 -2,34 2,05 48 h 0,93 1,43 0,94 -1,94 3,08 72 h 0,61 1,44 0,95 -2,45 3,10 168 h -1,20 1,18 -1,17 -3,60 0,94 240 h -1,81 1,06 -1,52 -3,92 -0,07 336 h -1,99 0,93 -1,99 -3,76 -0,58 W 0,65 1,89 1,40 -3,76 2,69 W 0,67 1,83 1,21 -3,27 3,08 W 0,35 1,97 0,79 -3,04 3,02 W 0,67 1,74 1,22 -2,64 2,90 1W Antes de la dosis -2,04 0,95 -1,91 -3,70 -0,49

12 h -0,45 1,16 -0,26 -3,04 1,13 24 h 0,61 1,60 0,68 -2,38 2,58 48 h 1,33 1,83 1,14 -2,20 3,99 72 h 1,01 1,74 1,18 -2,53 3,24 168 h -0,86 1,46 -0,96 -3,70 1,39 240 h -1,47 1,11 -1,53 -3,65 0,34 336 h -2,01 0,88 -1,81 -3,50 -0,61 Tabla 10

Grupo 4 (Genotropin 6 ^g/kg, al día)

Semana Tiempo

Media DE Mediana Mín. Máx.

1W Antes de la dosis -2,70 0,88 -2,54 -4,10 -1,72

12 h -1,56 0,55 -1,45 -2,49 -0,77

24 h -1,52 0,61 -1,58 -2,39 -0,55

48 h -1,08 0,63 -1,29 -2,03 -0,20

72 h -0,56 0,63 -0,36 -1,74 0,24

3W 0,29 1,04 0,24 -1,66 1,60

5W 0,14 0,92 0,20 -1,57 1,47

7W -0,59 1,65 -0,24 -3,84 1,06

9W -0,24 2,04 0,45 -4,26 2,20

11W -0,18 0,89 0,19 -1,70 0,58

12W Antes de la dosis -0,06 0,74 0,01 -1,33 0,82

12 h 0,42 0,82 0,63 -1,15 1,25

24 h -0,04 0,91 -0,15 -1,60 1,08

48 h 0,25 1,13 0,43 -1,87 1,62

72 h 0,35 1,36 0,60 -1,62 2,03

Después de la administración repetida de GX-H9 con 0,1 mg/kg durante 12 semanas, se analizó el cambio en la farmacodinámica en la primera administración (1a semana) y la última administración (12a semana), antes de la administración y 12, 24, 48, 72 y 168 h después de la administración. En los pacientes con deficiencia de hormona del crecimiento, la SDS de IGF-1 media (desviación estándar) de -2,48 (0,93) antes de la administración mostró un cambio con un mínimo de -0,41(0,97) y un máximo de 1,01 (0,87) en el plazo de 7 días después durante la última administración (12a semana). Además, después de la administración repetida de GX-H9 con 0,3 mg/kg y 0,2 mg/kg durante 12 semanas, se analizó el cambio en la farmacodinámica en la primera administración (1a semana) y la última administración (11a semana), antes de la administración y 12, 24, 48, 72, 168, 240 y 336 h después de la administración. En los pacientes con deficiencia de hormona del crecimiento, la SDS de IGF-1 media (desviación estándar) de -2,64 (1,25) y -2,40 (0,82) antes de la administración mostró un cambio con un mínimo de -1,36 (1,59) y -2,01 (0,88) y un máximo de 2,12 (1,82) y 1,33 (1,83) en el plazo de 14 días después de la última administración (11a semana). Además, después de la administración repetida de Genotropin, un fármaco de control activo, a 6 |jg/kg al día, se analizó el cambio en la farmacodinámica en la primera administración (1a semana) y la última administración (12a semana), antes de la administración y 12, 24, 48 y 72 h después de la administración. En pacientes con deficiencia de hormona del crecimiento, la SDS de IGF-1 media (desviación estándar) de -2,70 (0,88) antes de la administración mostró un cambio con un mínimo de y un máximo de 0,42 (0,82) en el plazo de 3 días después de la última administración (12a semana).

El cambio medio máximo en SDS de IGF-1 de GX-H9 se mostró entre 48 horas y 72 horas después de la administración de 0,1 mg/kg en un intervalo semanal o 0,3 mg/kg en un intervalo de dos veces al mes y el cambio medio mínimo se mostró en el plazo de 168 a 336 h después de la administración. Mientras tanto, en Genotropin, un fármaco de control activo, que se administró diariamente, el cambio medio máximo se mostró en el plazo de 12 h después de la administración y el cambio medio mínimo se alcanzó en el plazo de 24 h después de la administración.

El objetivo del tratamiento para pacientes adultos con deficiencia de hormona del crecimiento es mejorar la normalización del metabolismo y la calidad de vida. Ya que esto es diferente según la edad y el sexo de los pacientes, es necesario optimizar el nivel de IGF-1 en la sangre después de la administración de GX-H9 al intervalo de la mitad (percentil 50 o 0 SDS) a 1 SDS dentro del intervalo normal (-2 SDS a 2 SDS). Por consiguiente, en el caso de administrar GX-H9 una vez a la semana, se verificó que el intervalo de SDS de IGF-1 del paciente tratado puede mantenerse en el nivel normal ajustando la dosificación de tratamiento en un intervalo de concentración de 0,1 mg/kg a 0,2 mg/kg según el nivel e IGF-1. Además, en el caso de administrar GX-H9 dos veces al mes, se verificó que el intervalo de SDS de IGF-1 del paciente tratado puede mantenerse en el nivel normal ajustando la dosificación de tratamiento en un intervalo de concentración de 0,2 mg/kg a 0,4 mg/kg según el nivel de IGF-1.

5-3: Resultado de seguridad de hGH recombinante GX-H9 en pacientes con deficiencia de hormona del crecimiento

Los resultados del análisis de acontecimientos adversos observados en sujetos según el fármaco administrado y la relación entre el fármaco y los acontecimientos adversos se resumen en la tabla 11 a continuación.

Tabla 11

Una vez a la semana, Administración diaria de ________________________ 0,1 mg/kg de GX-H9 (N=11) 6 Mg/kg de Genotropin® (N=3) Total (N=14)

E n (%) E n (%) E n (%) Gravedad 11 5 (45,5 %) 2 2 (66,7 %) 13 7 (50,0 %) Relación con el fármaco

No relacionado 8 4 (36,4 %) 2 2 (66,7 %) 10 6 (42,9 %) Relacionado 3 1 (9,1 %) 0 0 0 3 1 (7,1 %) N= Número de individuos expuestos al fármaco

n= Número de individuos que muestran acontecimientos adversos

E= Número de acontecimientos adversos

(%) = Razón de individuos que experimentan acontecimientos adversos según el tratamiento (n/N) * 100 No se observaron acontecimientos adversos graves o acontecimientos adversos leves

Se notificó un total de 11 acontecimientos adversos en 5 pacientes en los que se administró GX-H9 una vez a la semana. No se notificaron muertes o acontecimientos adversos graves. La gravedad de todos los acontecimientos adversos fue leve. Los acontecimientos adversos más frecuentemente notificados fueron 2 casos de trastornos musculoesqueléticos y del tejido conjuntivo y 3 casos de trastornos de la sangre y de los órganos linfáticos. Se notificó que 3 acontecimientos adversos estaban relacionados con el fármaco. Todos los acontecimientos adversos notificados se observaron comúnmente en el tratamiento con hormona del crecimiento convencional.

5-4: Resultado de la reacción de anticuerpos (ADA) de hGH recombinante GX-H9 en pacientes con deficiencia de hormona del crecimiento

Con el fin de verificar el efecto farmacológico mediante administración continua, se examinó si se inducía formación de anticuerpos por GX-H9. En el caso de un paciente (muestra 1502-001), se mostró que el resultado de la prueba era positivo porque estaba presente el anticuerpo antes del inicio de los ensayos clínicos. Además, no hubo aumento en el valor de GX-H9 incluso los días 1, 32 y 106 después de la administración. Además, como resultado del examen de la farmacodinámica de los pacientes, se verificó que los niveles de IGF-1 aumentaron enormemente, y por tanto se sugirió que los anticuerpos anti-hGH existentes no están asociados con la terapia con GX-H9. Como resultado, la administración de GX-H9 no indujo respuestas de anticuerpos en todos los pacientes.

Tabla 12

Claims

REIVINDICACIONES

Composición farmacéutica para su uso en el tratamiento de la deficiencia de hormona del crecimiento que comprende una proteína de fusión de hGH y un portador farmacéuticamente aceptable,

en la que la proteína de fusión de hGH recombinante comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 1, y

en la que la proteína de fusión de hGH recombinante se administra una vez a la semana con una dosificación de 0,1 a 0,3 mg por kg de peso de un paciente; o

en la que la proteína de fusión de hGH recombinante se administra dos veces al mes con una dosificación de 0,1 a 0,4 mg por kg de peso de un paciente.

Composición farmacéutica para su uso según la reivindicación 1, en la que la proteína de fusión de hGH recombinante se administra una vez a la semana con una dosificación de 0,1 a 0,2 mg por kg de peso de un paciente.

Composición farmacéutica para su uso según la reivindicación 1, en la que la proteína de fusión de hGH recombinante se administra dos veces al mes con una dosificación de 0,15 a 0,4 mg por kg de peso de un paciente.

Composición farmacéutica para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que la composición farmacéutica se administra por vía subcutánea.