ES2913803T3 - Derivados de GLP-1 diacilados - Google Patents

Abstract

Un análogo de GLP-1 modificado químicamente de Fórmula I: Xaa7-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Xaa12-Thr-Ser-Asp-Xaa16-Ser-Lys-Xaa19-Xaa20-Glu-Xaa22-Xaa23-Ala-Xaa25-Xaa26- Xaa27-Phe-Ile-Xaa30-Xaa31-Leu-Xaa33-Xaa34-Xaa35-Xaa36-Xaa37-Xaa38, en donde Xaa7 es L-histidina, imidazopropionilo, α-hidroxi-histidina, D-histidina, desamino-histidina, 2-amino-histidina, β- hidroxi-histidina, homohistidina, Nα-acetil-histidina, Nα-formil-histidina, α-fluorometil-histidina, α-metil-histidina, 3-piridilalanina, 2-piridilalanina o 4-piridilalanina; Xaa8 es Ala, Gly, Val, Leu, Ile, Thr, Ser, Lys, Aib, ácido (1-aminociclopropil) carboxílico, ácido (1-aminociclobutil) carboxílico, ácido (1-aminociclopentil) carboxílico, ácido (1-aminociclohexil) carboxílico, ácido (1- aminocicloheptil) carboxílico o ácido (1-aminociclooctil) carboxílico; Xaa12 es Phe o Leu; Xaa16 es Val o Leu; Xaa19 es Tyr o Gln; Xaa20 es Leu o Met; Xaa22 es Gly, Glu, Lys o Aib; Xaa23 es Gln, Glu o Arg; Xaa25 es Ala o Val; Xaa26 es Val, His, Lys o Arg; Xaa27 es Glu, His, Leu o Lys; Xaa30 es Ala, Glu, Lys o Arg; Xaa31 es Trp, Lys o His Xaa33 es Val o Lys; Xaa34 es Lys, Glu, Asn, Gly, Gln, Arg, His o está ausente; Xaa35 es Gly, Aib o está ausente; Xaa36 es Arg, Gly, Lys o está ausente; Xaa37 es Gly, Ala, Glu, Pro, Lys, Arg o está ausente; y Xaa38 es Ser, Gly, Ala, Glu, Pro, Lys, Arg o está ausente; cuyo análogo comprende un primer residuo de K en una posición correspondiente a la posición 18 y un segundo residuo de K en una posición correspondiente a 22, 26, 27, 30, 31, 34 o 37 de GLP-1(7-37) (SEQ ID NO: 1) y un máximo de doce cambios de aminoácidos en comparación con GLP-1(7-37), cuyo análogo de GLP-1 modificado químicamente comprende dos porciones de prolongación unidas a dicho primer y segundo residuo de K, respectivamente, mediante un conector, en donde la porción de prolongación se selecciona de Quím. 2, Quím. 1 y Quím. 3, en donde -C6H4- en Quím. 2 y Quím. 3 se refiere al fenileno: Quím. 2: HOOC-C6H4-O-(CH2)y-CO-* Quím. 1: HOOC-(CH2)x-CO-* Quím. 3: R2-C6H4-(CH2)z-CO-* , en el que x es un número entero en el intervalo de 6-18, y es un número entero en el intervalo de 3-17, z es un número entero en el intervalo de 1-5 y R2 es un grupo que tiene una masa molar no mayor que 150 Da; y el conector comprende **(Ver fórmula)** en donde k es un número entero en el intervalo de 1-5, y n es un número entero en el intervalo de 1-5; o dicho análogo de GLP-1 modificado químicamente en forma de una sal, amida o éster farmacéuticamente aceptable.

Description

DESCRIPCIÓN

Derivados de GLP-1 diacilados

Campo técnico

La presente invención se refiere a derivados de análogos del péptido similar al glucagón 1 (GLP-1), más en particular a derivados de GLP-1 diacilados acilados en K18 y en otro residuo de K del péptido, como se define en las reivindicaciones, y su uso farmacéutico.

La invención se define en las reivindicaciones. Cualquier contenido fuera del alcance de las reivindicaciones no forma parte de la invención reivindicada.

Incorporación del listado de secuencias como referencia

El Listado de secuencias, titulado "LISTADO DE SECUENCIAS", es de 627 bytes y se creó el 09 de junio de 2011. Antecedentes de la invención

El documento WO 99/43706 describe una serie de derivados de GLP-1 mono- y diacilados que incluyen algunos derivados K1826 y K1834.

El documento WO 2011/080103 que se publicó después de los datos de prioridad de la presente solicitud describe una serie de derivados de GLP-1 que están diacilados en K2637.

El documento WO 06/097537 describe una serie de derivados de GLP-1 que incluyen semaglutida (Ejemplo 4), un derivado de GLP-1 monoacilado para la administración una vez a la semana que se encuentra en desarrollo por Novo Nordisk A/S.

La Angewandte Chemie International Edition 2008, vol. 47, p. 3196-3201 informa el descubrimiento y caracterización de una clase de derivados de ácido 4-(p-yodofenil)butírico que supuestamente muestran una interacción de unión no covalente estable tanto con albúmina sérica de ratón (MSA) como con albúmina sérica humana (HSA).

Resumen

La invención se refiere a derivados de péptidos GLP-1.

Los derivados se encuentran acilados en una lisina sustituida por la serina nativa en la posición 18, así como también en otro residuo de lisina. El otro residuo de lisina puede ser una lisina nativa, o una lisina sustituida por otro residuo de aminoácido. Las cadenas laterales son porciones de unión a albúmina. Estas comprenden una porción de prolongación, preferentemente seleccionada de diácidos grasos y ácidos grasos con un grupo fenilo o fenoxi terminal o distal, ambos opcionalmente sustituidos. Un grupo carboxi del ácido graso o diácido graso se acila, opcionalmente mediante un conector, a un residuo de lisina del péptido GLP-1, preferentemente en el grupo épsilon amino de este. El péptido GLP-1 puede ser un análogo de GLP-1(7-37) (SEQ ID NO: 1) que tiene un total de hasta doce diferencias de aminoácidos en comparación con GLP-1(7-37). La porción de prolongación se une al péptido mediante un conector. El conector puede comprender una o más unidades de etilenglicol que pueden unirse secuencialmente entre sí como unidades de mono- u oligoetilenglicol.

Más en particular, la invención se refiere a un derivado de un análogo de GLP-1, como se define en más detalle en las reivindicaciones. El análogo comprende un primer residuo de K en una posición correspondiente a la posición 18 de GLP-1(7-37) (SEQ ID NO: 1), un segundo residuo de K en otra posición y un máximo de doce cambios de aminoácidos en comparación con GLP-1(7-37), cuyo derivado comprende dos porciones de prolongación unidas a dicho primer y segundo residuo de K, respectivamente, cada uno mediante un conector, en donde la porción de prolongación se selecciona de Quím. 1, Quím. 2 y Quím. 3:

Quím. 1: HOOC-(CH²)x-CO-*

Quím. 2: HOOC-C6H4-O-(CH2)y-CO-*

Quím. 3: R2-C6H4-(CH2)z-CO-* , en el que x es un número entero en el intervalo de 6-18, y es un número entero en el intervalo de 3-17, z es un número entero en el intervalo de 1-5, R2 es un grupo que tiene una masa molar no superior a 150 Da; y el enlazador comprende

Quím. 4:

en donde k es un número entero en el intervalo de 1-5, y n es un número entero en el intervalo de 1 -5; o una sal, amida o éster farmacéuticamente aceptable de este.

La invención también se refiere a tal derivado para el uso como un medicamento, en particular para el uso en el tratamiento y/o prevención de todas las formas de diabetes y enfermedades relacionadas, tales como trastornos alimenticios, enfermedades cardiovasculares, enfermedades gastrointestinales, complicaciones diabéticas, enfermedades críticas y/o síndrome del ovario poliquístico; y/o para mejorar parámetros lipídicos, mejorar la función de las células-p, y/o para retardar o evitar la progresión de la enfermedad diabética.

Los derivados de la invención son biológicamente activos. También, o alternativamente, estos tienen un perfil farmacocinético prolongado. También, o alternativamente, tienen una alta biodisponibilidad oral. También, o alternativamente, tienen buenas propiedades biofísicas. Estas propiedades son de importancia en el desarrollo de compuestos de GLP-1 de nueva generación para la administración subcutánea, intravenosa y/o en particular oral.

Descripción

En lo adelante, las letras del alfabeto griego pueden representarse por su símbolo o por el correspondiente nombre escrito, por ejemplo: a = alfa; p = beta; s = épsilon; y = gamma; o = omega; etc. También, la letra griega de |i puede representarse con "u", por ejemplo, en |il=ul, o en |iM=uM.

Un asterisco (*) en una fórmula química designa i) un punto de unión, ii) un radical y/o iii) un electrón no compartido.

La invención se refiere a un derivado de un análogo de GLP-1, como se define en más detalle en las reivindicaciones, cuyo análogo comprende un primer residuo de K en una posición correspondiente a la posición 18 de GLP-1(7-37) (SEQ ID NO: 1), un segundo residuo de K en otra posición y un máximo de doce cambios de aminoácidos en comparación con GLP-1(7-37); cuyo derivado comprende dos porciones de prolongación unidas a dicho primer y segundo residuo de K, respectivamente, mediante un conector, en donde la porción de prolongación se selecciona de Quím. 1, Quím. 2 y Quím. 3:

Quím. 1: HOOC-(CH²)x-CO-*

Quím. 2: HOOC-C6H4-O-(CH2)y-CO-*

Quím. 3: R2-C6H4-(CH2)z-CO-* ,

en el que x es un número entero en el intervalo de 6-18, y es un número entero en el intervalo de 3-17, z es un número entero en el intervalo de 1-5 y R2 es un grupo que tiene una masa molar no superior a 150 Da; y el conector comprende

Quím. 4:

en donde k es un número entero en el intervalo de 1-5, y n es un número entero en el intervalo de 1-5; o una sal, amida o éster farmacéuticamente aceptable de este.

Análogos de GLP-1

El término “análogo GLP-1” o "análogo de GLP-1" como se usa en la presente descripción se refiere a un péptido, o a un compuesto, que es una variante del péptido similar al glucagón tipo 1 humano (GLP-1 (7-37)), la secuencia del cual se incluye en el listado de secuencias como la SEQ ID NO: 1. El péptido que tiene la secuencia de SEQ ID NO: 1 también puede designarse como GLP-1 nativo.

En el listado de secuencias, el primer residuo de aminoácido de la SEQ ID NO 1: (histidina) se le asigna el núm. 1. Sin embargo, en lo siguiente - de acuerdo con la práctica establecida en la técnica, este residuo de histidina se refiere como núm. 7, y los residuos de aminoácidos subsecuentes se enumeran en consecuencia, terminando con la glicina núm. 37. Por lo tanto, generalmente, cualquier referencia en la presente descripción a un número del residuo de aminoácido o a un número de la posición de la secuencia de GLP-1(7-37) es a la secuencia que comienza con His en la posición 7 y termina con Gly en la posición 37.

Los análogos de GLP-1 de los derivados de la invención pueden describirse en referencia i) al número del residuo de aminoácido en el GLP-1(7-37) nativo correspondiente al residuo de aminoácido que se cambia (es decir, la posición correspondiente en el GLP-1 nativo) y ii) al cambio real.

El análogo de GLP-1 del derivado de la invención comprende un primer residuo de lisina en una posición correspondiente a la posición 18 de GLP-1 (7-37). Si la secuencia de aminoácidos de este análogo es de cualquier otra manera idéntica a la de GLP-1 nativo, tal análogo puede designarse como K18-GLP-1(7-37). Esta designación representa, en consecuencia, la secuencia de aminoácidos de GLP-1 nativo donde la serina en la posición 18 se ha sustituido con lisina. Como una observación adicional, este análogo comprende un segundo residuo de Lys en la posición 26 y un tercer residuo de Lys en la posición 34 (a saber, las lisinas nativas de GLP-1 (7-37)).

El análogo de GLP-1 del derivado de la invención comprende además un segundo residuo de lisina en otra posición, cuya posición puede designarse como "T". T, en consecuencia, representa cualquier otra posición diferente a la posición 18.

Por ejemplo, T puede representar 26, en cuyo caso el análogo, además de la lisina en la posición 18, comprende una lisina en una posición correspondiente a la posición 26 en el GLP-1 nativo. Tal análogo aún podría designarse como K18-GLP-1(7-37), siempre y cuando, excepto para la sustitución de K18, su secuencia de aminoácidos sea idéntica a la del GLP-1 nativo.

Como otro ejemplo, T puede representar 34, en cuyo caso el análogo, además de la lisina en la posición 18, comprende una lisina en una posición correspondiente a la posición 34 en el GLP-1 nativo. Tal análogo aún podría designarse también como K18-GLP-1(7-37), siempre y cuando, excepto para la sustitución de K18, su secuencia de aminoácidos sea idéntica a la del GLP-1 nativo.

Pero T también puede representar un número en el intervalo de 7-37 diferente de 18, 26 o 34. Tal análogo podría designarse como K18,KT-GLP-1(7-37), siempre y cuando, excepto para las sustituciones de K18 y de KT, su secuencia de aminoácidos sea idéntica a la del GLP-1 nativo.

El análogo de GLP-1 que forma parte del derivado de la invención tiene un máximo de doce cambios de aminoácidos cuando se compara con GLP-1 nativo (SEQ ID NO: 1) - en otras palabras, este es un péptido GLP-1 en el que una serie de residuos de aminoácidos se han cambiado cuando se compara con GLP-1 nativo (7-37) (SEQ ID NO: 1).

Los siguientes son ejemplos no limitantes de nomenclatura apropiada de los análogos.

Por ejemplo, el análogo [Aib8,Lys18,Glu22,Arg26,Arg34,Lys37]-GLP-1-(7-37) designa un péptido GLP-1(7-37) que, cuando se compara con GLP-1 nativo, se cambia mediante las siguientes sustituciones: La sustitución de alanina en la posición 8 con Aib (ácido aaminoisobutírico), de serina en la posición 18 con lisina, de glicina en la posición 22 con ácido glutámico, de lisina en la posición 26 con arginina, de lisina en la posición 34 con arginina y de lisina en la posición 37 con lisina. Este análogo también puede designarse brevemente como (8Aib, 18K, 22E, 26r , 34R, 37K).

Como otro ejemplo, el análogo [Lys18,Glu22,Arg26,Lys27,His31,Gly34]-GLP-1-(7-34) designa un péptido GLP-1(7-37), que, cuando se compara con GLP-1 nativo, se cambia mediante la sustitución de serina en la posición 18 con lisina, sustitución de glicina en la posición 22 con ácido glutámico, sustitución de lisina en la posición 26 con arginina, sustitución de ácido glutámico en la posición 27 con lisina, sustitución de triptófano en la posición 31 con histidina, sustitución de lisina en la posición 34 con glicina y mediante la deleción del C-terminal de glicina-arginina-glicina en la posición 35-36-37. Este análogo también puede designarse brevemente como (18K, 22E, 26R, 27K, 31H, 34G, des35-37), donde la referencia a GLP-1(7-37) está implícita y "des" representa una deleción.

1(7-37), que cuando se compara con GLP-1 nativo, comprende una sustitución de histidina en la posición 7 con ácido imidazopropiónico (Imp); y/o una sustitución de alanina en la posición 8 con ácido a-aminoisobutírico (Aib), o con serina. Este análogo puede comprender cambios adicionales en comparación con la SEQ ID NO: 1.

Como es evidente a partir de los ejemplos anteriores, los residuos de aminoácidos pueden identificarse por su nombre completo, su código de una letra y/o su código de tres letras. Estas tres maneras son totalmente equivalentes.

Las expresiones “una posición equivalente a” o "posición correspondiente" pueden usarse para caracterizar el sitio de cambio en una secuencia de GLP-1 en referencia a GLP-1(7-37) nativo (s Eq ID NO: 1). Las posiciones equivalentes o correspondientes se deducen fácilmente, por ejemplo por simple escritura e inspección visual; y/o puede usarse un programa estándar de alineamiento de proteínas o péptidos, tal como "align" que se basa en un alineamiento de Needleman-Wunsch. El algoritmo se describe en Needleman, S.B. y Wunsch, C.D., (1970), Journal of Molecular Biology, 48: 443-453, y el programa align por Myers y W. Miller en "Optimal Alignments in Linear Space" CABIOS (computer applications in the biosciences) (1988) 4:11-17. Para el alineamiento, puede usarse la matriz de puntuación predeterminada BLOSUM62 y la matriz de identidad predeterminada y la penalización para el primer residuo en una interrupción puede fijarse en -10 (menos 10) y las penalizaciones para residuos adicionales en una interrupción en -0,5 (menos 0,5).

Un ejemplo de tal alineamiento se inserta a continuación, en el cual la secuencia núm. 1 es la SEQ ID NO: 1, y la secuencia núm. 2 es el análogo (18K, 22E, 26R, 27K, 31H, 34G, des35-37) de esta:

# 1: GLP-1(7-37)

# 2: GLP-1 (7-37)_ANÁLOGO

# Matriz: EBLOSUM62

# Penalizaciónjnterrupción: 10,0

# Penalización_extendida: 0,5

# Longitud: 31

# Identidad: 22/31 (71,0 %)

# Similitud: 24/31 (77,4 %)

# Interrupciones: 3/31 (9,7 %)

# Puntuación: 105,0

1 1 HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRG 31 ||||||||||M|M||::||M|.

2 1 HAEGTFTSDVSKYLEEQAARKFIAHLVG— 28

En el caso de que se incluyan en la secuencia aminoácidos no naturales tales como Imp y/o Aib que se incluyen, estos pueden reemplazarse, para propósitos de alineamiento, con X. Si se desea, X puede corregirse después manualmente.

El término “péptido”, como se usa, por ejemplo, en el contexto de los análogos de GLP-1 de los derivados de la invención, se refiere a un compuesto que comprende una serie de aminoácidos interconectados mediante enlaces amida (o peptídicos).

Los péptidos de la invención comprenden al menos cinco aminoácidos constituyentes conectados mediante enlaces peptídicos. En modalidades particulares el péptido comprende al menos 10, preferentemente al menos 15, con mayor preferencia al menos 20, aún con mayor preferencia al menos 25 o con la máxima preferencia al menos 27 aminoácidos.

En modalidades particulares, el péptido está compuesto por al menos cinco aminoácidos constituyentes, preferentemente compuesto por al menos 10, al menos 15, al menos 20, al menos 25 o con la máxima preferencia compuesto por al menos 27 aminoácidos. Aún en modalidades particulares adicionales el péptido está compuesto por al menos 28, al menos 29, al menos 30, al menos 31 o al menos 32 aminoácidos.

En aún otra modalidad particular el péptido consiste de aminoácidos interconectados mediante enlaces peptídicos.

Los aminoácidos son moléculas que contienen un grupo amino y un grupo ácido carboxílico y, opcionalmente, uno o más grupos adicionales, frecuentemente denominados la cadena lateral de aminoácidos.

El término "aminoácido" incluye aminoácidos proteogénicos (codificado por el código genético, que incluye aminoácidos naturales y aminoácidos estándares), así como también aminoácidos no proteogénicos (no encontrado en proteínas, y/o no codificado por el código genético estándar) y aminoácidos sintéticos. Por lo tanto, los aminoácidos pueden seleccionarse a partir del grupo de aminoácidos proteinogénicos, aminoácidos no proteinogénicos, y/o aminoácidos sintéticos.

Los ejemplos no limitantes de aminoácidos que no están codificados por el código genético son gammacarboxiglutamato, ornitina y fosfoserina. Los ejemplos no limitantes de aminoácidos sintéticos son los D-isómeros de los aminoácidos tales como D-alanina y D-leucina, Aib (ácido a-aminoisobutírico), p-alanina y des-amino-histidina (desH, nombre alternativo ácido imidazopropiónico, abreviado Imp).

En lo siguiente, todos los aminoácidos para los cuales no se indica el isómero óptico debe entenderse que significa el isómero L (a menos que se especifique de cualquier otra manera).

Los derivados del GLP-1 y los análogos de la invención tienen actividad GLP-1. Este término se refiere a la capacidad de unirse al receptor de GLP-1 e iniciar una trayectoria de transducción de señales que resulta en la acción insulinotrópica u otros efectos fisiológicos como se conoce en la técnica. Por ejemplo, los análogos y derivados de la invención pueden analizarse adecuadamente en cuanto a la actividad de GLP-1 mediante el uso del ensayo de potencia in vitro descrito en el Ejemplo 148 en la presente descripción.

Derivados de GLP-1

El término “derivado” como se usa en la presente descripción en el contexto de un péptido o análogo de GLP-1 significa un péptido o análogo de GLP-1 modificado químicamente, en el que uno o más sustituyentes se han unido covalentemente al péptido. El sustituyente puede también referirse a una cadena lateral.

En una modalidad particular, la cadena lateral es capaz de formar agregados no covalentes con la albúmina, lo que promueve de esta manera la circulación del derivado con la corriente sanguínea, y también tiene el efecto de prolongar el tiempo de acción del derivado, debido al hecho de que el agregado del derivado de GLP-1 y la albúmina se desintegran sólo lentamente para liberar el ingrediente farmacéutico activo. Por lo tanto, el sustituyente, o cadena lateral, como un todo puede referirse como una porción de unión a albúmina.

En otra modalidad particular la porción de unión a albúmina comprende una porción que es particularmente relevante para la unión a albúmina y de esta manera la prolongación, cuya porción en consecuencia puede referirse como una porción de prolongación. La porción de prolongación puede estar en, o cerca, del extremo opuesto de la porción de unión a albúmina, con relación a su punto de unión al péptido.

En aún otra modalidad particular, la porción de unión a albúmina comprende una porción entre la porción de prolongación y el punto de unión al péptido, cuya porción puede referirse como un conector, una porción conectora, un espaciador o similar.

En modalidades particulares, la porción de prolongación es lipófila y/o con carga negativa a pH fisiológico (7,4). La porción de unión a albúmina, la porción de prolongación, o el conector puede unirse covalentemente a un residuo de lisina del péptido GLP-1 mediante acilación.

En una modalidad preferida, un éster activo de la porción de unión a albúmina, que comprende preferentemente una porción de prolongación y un conector, se une covalentemente a un grupo amino de un residuo de lisina, preferentemente el grupo épsilon amino de este, bajo la formación de un enlace amida (este proceso se refiere como acilación).

A menos que se indique de cualquier otra manera, cuando se hace referencia a una acilación de un residuo de lisina, se entiende que se trata del grupo épsilon amino de esta.

Un derivado que comprende dos porciones de prolongación unidas a un primer y un segundo residuo de K (por ejemplo, a K18 y KT) mediante un conector puede referirse como un derivado que se ha acilado dos veces, diacilado, o doble acilado en los grupos épsilon amino del primer y segundo residuo de lisina, por ejemplo en la posición 18 y T, respectivamente, del péptido GLP-1.

Para los presentes propósitos, los términos "porción de unión a albúmina", "porción de prolongación" y "conector" incluyen la molécula en sí así como también los radicales de esta. Si se entiende o no una u otra forma, queda claro en el contexto en el que se usa el término. En una modalidad preferida, estos términos se refieren a radicales. Los radicales son preferentemente adecuados para formar uno o más enlaces amida, es decir, con uno o dos electrones no compartidos (*) en relación con un grupo carbonilo y/o un grupo amino. Los ejemplos de tales radicales son Quím.

1-Quím. 3, cuyas estructuras se muestran a continuación.

En un aspecto, cada porción de prolongación comprende, o consiste en, una porción de prolongación, seleccionada independientemente de Quím. 1, Quím. 2 y Quím. 3:

Quím. 1: HOOC-(CH²)x-CO-*

Quím. 2: HOOC-C6H4-O-(CH2)y-CO-*

Quím. 3: R2-C6H4-(CH2)z-CO-* ,

en el que x es un número entero en el intervalo de 6-18, y es un número entero en el intervalo de 3-17, z es un número entero en el intervalo de 1-5 y R2 es un grupo que tiene una masa molar no superior a 150 Da.

En una modalidad, *-(CH²)x-* se refiere a alquileno lineal o ramificado, preferentemente lineal, en el cual x es un número entero en el intervalo de 6-18.

En otra modalidad, *-(CH2)y-* se refiere a alquileno lineal o ramificado, preferentemente lineal, en el que y es un número entero en el intervalo de 3-11.

Aún en una modalidad adicional, *-(CH²)z-* se refiere a alquileno lineal o ramificado, preferentemente lineal, en el que z es un número entero en el intervalo de 1-5.

Aún en una modalidad adicional *-(CH²)z-* se refiere a alquileno cíclico en el que z es un número entero en el intervalo de 1-5, preferentemente 3.

La nomenclatura es como es común en la técnica, por ejemplo en las fórmulas anteriores *-COOH se refiere a carboxi, *-C6H4-* a fenileno y *-CO-* a carbonilo (O=C<**). En modalidades particulares, los aromáticos, tales como los radicales fenoxi y fenileno, pueden ser, independientemente, orto, meta o para.

La masa molar (M) de una sustancia química (tal como el grupo R2) es la masa de un mol de la sustancia. La masa molar se expresa en dalton, símbolo Da, con la definición 1 Da = 1 g/mol.

La masa molar puede calcularse a partir de pesos atómicos estándares y, a menudo, se incluye en catálogos de productos químicos. La masa molar de un compuesto viene dada por la suma de los pesos atómicos estándares de los átomos que forman el compuesto multiplicada por la constante de masa molar, Mu que equivale a 1 g/mol. Como un ejemplo, la masa molar de terc. butilo (C⁴H⁹) es M(C4Hg) = ([4 * 12,01] [9 * 1,008]) * 1 g/mol = 57 Da.

Los pesos atómicos estándares son publicados por la Unión Internacional de Química Pura y Aplicada (IUPAC) y también reimpresos en una amplia variedad de libros de texto, catálogos comerciales, gráficos murales, etc.

Para los presentes propósitos, la masa molar de un compuesto se calcula mediante el uso de la masa exacta del isótopo más abundante de cada átomo constituyente del compuesto. La masa exacta se basa en el estándar de carbono 12. La masa exacta de cada átomo constituyente se redondea a un número entero antes de calcular la masa molar del compuesto.

Por ejemplo, para CF³ (un ejemplo de un sustituyente R2 de la invención) la masa molar se calcula de la siguiente manera: La masa exacta del isótopo de carbono más abundante (C12), redondeada a un número entero, es 12. La masa exacta del átomo de flúor más abundante (F19), redondeada a un número entero, es 19. En consecuencia, la masa molar de CF³ es (12 3x19) x 1 g/mol = 69 Da. Como se explicó anteriormente, los derivados de GLP-1 de la presente invención son diacilados, es decir, dos porciones de unión a albúmina se unen covalentemente al péptido GLP-1.

En una modalidad particular, las dos porciones de unión a albúmina (es decir, las cadenas laterales completas) son similares, preferentemente sustancialmente idénticas, o, con la máxima preferencia, idénticas.

En otra modalidad particular, las dos porciones de prolongación, son similares, preferentemente sustancialmente idénticas, o, con la máxima preferencia, idénticas.

En aún otra modalidad particular, los dos conectores son similares, preferentemente sustancialmente idénticos, o con la máxima preferencia, idénticos.

El término "sustancialmente idéntico" incluye diferencias a partir de la identidad que se deben a la formación de una o más sales, ésteres, y/o amidas; preferentemente, la formación de una o más sales, ésteres de metilo y amidas simples; con mayor preferencia la formación de no más de dos sales, ésteres de metilo, y/o amidas simples; aún con mayor preferencia, la formación de no más de una sal, éster de metilo, y/o amida simple; o con la máxima preferencia, la formación de no más de una sal.

En el contexto de los compuestos químicos tales como porciones de unión a albúmina, porciones de prolongación y conectores, la similitud y/o identidad pueden determinarse mediante el uso de cualquier programa de computadora adecuado y/o algoritmo conocido en la técnica.

Por ejemplo, la similitud de dos porciones de prolongación, dos conectores, y/o dos cadenas laterales completas puede determinarse adecuadamente mediante el uso de huellas moleculares. La huella es un método matemático para representar una estructura química (véase, por ejemplo, Chemoinformatics: A textbook, Johann Gasteiger y Thomas Engel (Eds), Wiley-VCH Verlag, 2003).

Los ejemplos de huellas adecuadas incluyen, sin limitación, las huellas UNITY, las huellas MDL y/o las huellas ECFP, tales como las huellas ECFP_6 (ECFP significa huellas de conectividad extendida).

En modalidades particulares, los dos porciones de prolongación, los dos conectores, y/o las dos cadenas laterales completas se representan como a) huellas ECFP_6; b) huellas UNITY; y/o c) huellas m Dl .

El coeficiente de Tanimoto se usa preferentemente para calcular la similitud de las dos huellas, si a), b), o c) son usadas.

En modalidades particulares, si a), b) o c) son usadas, las dos porciones de prolongación, los dos conectores, y/o las dos cadenas laterales completas, respectivamente, tienen una similitud de al menos 0,5 (50 %); preferentemente al menos 0,6 (60 %); con mayor preferencia al menos 0,7 (70 %), o al menos 0,8 (80 %); aún con mayor preferencia al menos 0,9 (90 %); o con la máxima preferencia al menos 0,99 (99 %), tal como una similitud de 1,0 (100 %).

Las huellas UNITY pueden calcularse mediante el uso del programa SYBYL (disponible de Tripos, 1699 South Hanley Road, St. Louis, MO 63144-2319, EE. UU.). Las huellas ECFP_6 y MDL pueden calcularse mediante el uso del programa Pipeline Pilot (disponible de Accelrys Inc., 10188 Telesis Court, Suite 100, San Diego, CA 92121, EE. UU.).

Para más detalles, véase, por ejemplo, J. Chem. Inf. Model. 2008, 48, 542-549; J. Chem. Inf. Comput. Sci. 2004, 44, 170-178; J. Med. Chem. 2004, 47, 2743-2749; J. Chem. Inf. Model. 2010, 50, 742-754; así como también SciTegic Pipeline Pilot Chemistry Collection: Basic Chemistry User Guide, marzo de 2008, SciTegic Pipeline Pilot Data Modeling Collection, 2008 - ambos de Accelrys Software Inc., San Diego, EE. UU., y las guías http://www.tripos.com/tripos_resources/fileroot/pdfs/Unity_111408.pdf y http://www.tripos.com/data/SYBYL/SYBYL_072505.pdf.

Un ejemplo de un cálculo de similitud se inserta a continuación, en el que la cadena lateral completa de Quím. 36 se compara con un éster de metilo de esta (Quím. 36a):

Quím. 36a:

Mediante el uso de a) las huellas ECFP_6 la similitud es de 0,798, mediante el uso de b) las huellas UNITY la similitud es de 0,957; y mediante el uso de las huellas MDL, la similitud es de 0,905.

En el caso de dos cadenas laterales idénticas (porciones de unión a albúmina) el derivado puede denominarse simétrico.

Cada uno de los dos conectores del derivado de la invención comprende el siguiente primer elemento conector:

Quím. 4:

en donde k es un número entero en el intervalo de 1-5, y n es un número entero en el intervalo de 1-5.

En una modalidad particular, cuando k=1 y n= 1, este elemento conector puede designarse como OEG, o ácido 8-amino-3,6-dioxaoctánico, y/o puede representarse por la siguiente fórmula:

Quím. 4a:*-NH-(CH2)2-O-(CH2)2-O-CH2-CO-*

En otra modalidad particular, cada conector del derivado de la invención puede comprender además, independientemente, el siguiente segundo elemento conector:

que puede incluirse p veces, donde p es un número entero en el intervalo de 1-3. Este segundo elemento enlazador también puede referirse como gamma-Glu, o brevemente gGlu, debido al hecho de que este es el grupo gamma carboxilo del aminoácido ácido glutámico que se usa aquí para la conexión a otro elemento conector, o al grupo épsilon amino de la lisina. La estructura de Quím. 5 cubre la forma L, así como también la forma D de Glu. En modalidades particulares, Quím. 5 está a) en la forma L o b) en la forma D.

En otra modalidad particular, cada conector del derivado de la invención puede comprender además, independientemente, el siguiente tercer elemento conector:

Quím. 6: *-NH-(CH²)q-CHR3-CO-*,

en el que q es un número entero en el intervalo de 2-12, y R3 es hidrógeno (H). En Quím. 6, el grupo *-(CH²)q-* puede representar alquileno lineal o ramificado, preferentemente lineal, en donde q es un número entero en el intervalo de 2­ 12.

Aún en modalidades particulares adicionales el conector tiene a) de 6 a 41 átomos de C; y/o b) de 4 a 28 heteroátomos. Los ejemplos particulares y no limitantes de heteroátomos son átomos de N y de O. Los átomos de H no son heteroátomos.

En una modalidad particular, cada conector consiste en una vez Quím. 5 y dos veces Quím. 4, interconectados mediante enlaces amida y en la secuencia indicada, el conector así formado (combinado/agregado) está conectado en su extremo amino libre (HN-*) al grupo carbonilo libre (CO-*) de la porción de prolongación, y en su extremo carbonilo libre (CO-*) al grupo épsilon amino del primer y el segundo residuo de K del análogo GLP-1, respectivamente. En otra modalidad particular, cada conector consiste en dos veces Quím. 4 y una vez Quím. 5, interconectados mediante enlaces amida y en la secuencia indicada, el conector así formado (combinado/agregado) está conectado en su extremo amino libre (HN-*) al grupo carbonilo libre (CO-*) de la porción de prolongación, y en su extremo carbonilo libre (CO-*) al grupo épsilon amino del primer y el segundo residuo de K del análogo GLP-1, respectivamente.

De más está decir, solo para el buen orden: Aquí y en lo que sigue la frase "en la secuencia indicada" significa que el extremo *-NH del primer elemento conector mencionado (aquí el primero del dos veces Quím. 4) está conectado al extremo *-CO del prolongador y el extremo *-CO del último elemento conector mencionado (aquí Quím. 5) está conectado al grupo épsilon amino del residuo de K en cuestión del análogo de GLP-1.

Aún en modalidades particulares adicionales, dentro del alcance de las reivindicaciones, la invención se refiere a:

(a) Un derivado de un análogo de GLP-1, cuyo análogo comprende un primer residuo de K en una posición correspondiente a la posición 18 de GLP-1(7-37) (SEQ ID NO: 1), un segundo residuo de K en la posición 26 de GLP-1(7-37) (SEQ ID NO: 1) y un máximo de cuatro cambios de aminoácidos en comparación con GLP-1(7-37), cuyo derivado comprende dos porciones de prolongación unidas a dicho primer y segundo residuo de K, respectivamente, mediante un conector, en donde la porción de prolongación es Quím. 1: HOOC-(CH²)x-CO-* , en el que x es 12; y el conector comprende Quím. 4:

en donde k es 1, y n es 1; o una sal, amida o éster farmacéuticamente aceptable de este.

(b) Un derivado de un análogo de GLP-1, cuyo análogo comprende un primer residuo de K en una posición correspondiente a una posición 18 de GLP-1(7-37) (SEQ ID NO: 1), un segundo residuo de K en la posición 26 de GLP-1(7-37) (SEQ ID NO: 1) y un máximo de cuatro cambios de aminoácidos en comparación con GLP-1(7-37), cuyo derivado comprende dos porciones de prolongación unidas a dicho primer y segundo residuo de K, respectivamente, mediante un conector, en donde la porción de prolongación es Quím. 2:

HOOC-C6H4-O-(CH2)y-CO-*, en el que y es 9; y el conector comprende Quím. 4:

en donde k es 1 y n es 1; o una sal, amida o éster farmacéuticamente aceptable de este.

(c) Un derivado de (a) o (b), en donde el conector consiste en dos veces Quím. 4, interconectado mediante un enlace amida, el conector se conecta en su extremo *-NH al extremo *-CO de la porción de prolongación, y en su extremo *-CO al grupo épsilon amino del primer o el segundo residuo de K del análogo de GLP-1.

(d) Un derivado de (a) o (b), en donde el conector consiste en una vez Quím. 4, una vez Quím. 5a y una vez Quím. 4, interconectados mediante enlaces amida y en la secuencia indicada, el conector se conecta en su extremo *-NH al extremo *-CO de la porción de prolongación, y en su extremo *-CO al grupo épsilon amino del primer o el segundo residuo de K del análogo de GLP-1.

(e) El derivado de cualquiera de (a), (b), (c) o (d), en donde el análogo, además del cambio de K18, comprende además Q34.

(f) El derivado de cualquiera de (a), (b), (c), (d) o (e), en donde el análogo comprende Aib8.

(g) El derivado de cualquiera de (a), (b), (c), (d), (e) o (f), en donde el análogo comprende E22.

(h) El derivado de cualquiera de (a), (b), (c), (d), (e), (f) o (g), en donde el análogo comprende, preferentemente tiene, la Fórmula I:

Xaa7-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Xaa12-Thr-Ser-Asp-Xaa16-Ser-Lys-Xaa19-Xaa20-Glu-Xaa22-Xaa23-Ala-Xaa25-Xaa26-Xaa27-Phe-Ile-Xaa30-Xaa31-Leu-Xaa33-Xaa34-Xaa35-Xaa36-Xaa37-Xaa38, en donde

Xaa7 es His o desamino-histidina (imidazopropionilo); Xaa8 es Aib; Xaa¹²- es Phe o Leu; Xaa¹⁶ es Val; Xaa19 es Tyr; Xaa²⁰ es Leu; Xaa²² es Glu; Xaa23 es Gln, Glu, o Arg; Xaa25 es Ala o Val; Xaa²⁶ es Lys; Xaa27 es Glu, His, Leu o Lys; Xaa30 es Ala, Glu o Lys; Xaa31 es Trp, Lys o His; Xaa33 es Val; Xaa34 es Gln; Xaa35 es Gly o está ausente; Xaa36 es Arg o está ausente; Xaa37 es Gly, Lys o está ausente; y Xaa38 está ausente.

(i) El derivado de (h), en donde Xaa7 es His; Xaa¹²- es Phe; Xaa¹⁶ es Val; Xaa19 es Tyr; Xaa²⁰ es Leu; Xaa²² es Glu; Xaa23 es Gln; Xaa25 es Ala; Xaa²⁶ es Lys; Xaa27 es Glu; Xaa30 es Ala; Xaa31 es Trp; Xaa33 es Val; Xaa34 es Gln; Xaa35 es Gly; Xaa36 es Arg; Xaa37 es Gly; y Xaa38 está ausente.

(j) El derivado de cualquiera de (a), (b), (c), (d), (e), (f), (g), (h) o (i), en donde el análogo comprende, preferentemente tiene, los siguientes cambios de aminoácidos, en comparación con GLP-1(7-37) (SEQ ID NO: 1): 8Aib, 18K, 22E, 34Q.

(k) Un compuesto seleccionado de Quím. 21, Quím. 57, Quím. 101, Quím. 103, Quím. 104, Quím. 105, Quím.

107 y Quím. 109; o una sal, amida o éster farmacéuticamente aceptable de este.

(l) Un compuesto caracterizado por su nombre y seleccionado de una lista de cada uno de los nombres de los compuestos del Ejemplo 2, 38, 82, 84, 85, 86, 88 y 90; o una sal, amida o éster farmacéuticamente aceptable de este.

(m) El derivado de cualquiera de las modalidades (a), (b), (c), (d), (e), (f), (g), (h), (i), (j), (k) o (l), que tiene una potencia correspondiente a una EC⁵⁰ por debajo de 500 pM, preferentemente por debajo de 400 pM, con mayor preferencia por debajo de 300 pM, aún con mayor preferencia por debajo de 200 pM o con la máxima preferencia por debajo de 100 pM; en donde la potencia se determina como la EC⁵⁰ para la estimulación de la formación de AMPc en un medio que contiene el receptor de GLP-1 humano, mediante el uso de una línea celular transfectada

estable tal como BHK467-12A (tk-ts13); y en donde el AMPc se determina mediante el uso de un ensayo de

receptor funcional, por ejemplo, basado en la competencia entre AMPc formado endógenamente y el AMPc

marcado con biotina añadido exógenamente y, por ejemplo, la captura del AMPc mediante el uso de un anticuerpo

específico, tal como el ensayo de AMPc AlphaScreen, por ejemplo, como se describe en el Ejemplo 148.

(n) El derivado de cualquiera de las modalidades (a), (b), (c), (d), (e), (f), (g), (h), (i), (j), (k), (l) o (m), para el que

la afinidad de unión al receptor de GLP-1 (IC⁵⁰) en presencia de HSA al 0,005 % (albúmina baja) está por debajo

de 10 nM, preferentemente por debajo de 8,0 nM, aún con mayor preferencia por debajo de 6,0 nM, aún con mayor

preferencia por debajo de 4,0 nM, o con la máxima preferencia por debajo de 2,00 nM; en donde la afinidad de

unión al receptor de GLP-1 se mide por medio del desplazamiento de 125I-GLP-1 del receptor, por ejemplo mediante

el uso de un ensayo de unión a SPA; y en donde el receptor de GLP-1 se prepara mediante el uso de una línea

célula de riñón de hámster bebé transfectada, estable, tal como BHK tk-ts13; y en donde el valor de IC⁵⁰ se

determina como la concentración que desplaza el 50 % de 125I-GLP-1 del receptor.

(o) El derivado de cualquiera de las modalidades (a), (b), (c), (d), (e), (f), (g), (h), (i), (j), (k), (l), (m) o (n), en donde

la vida media terminal (Ty2) después de la administración i.v. en rata es al menos tres veces la vida media terminal

de semaglutida; en donde la vida media se determina en estudios farmacocinéticos in vivo en rata, por ejemplo

como se describe en el Ejemplo 154.

Los derivados de la invención pueden existir en diferentes formas estereoisoméricas que tienen la misma fórmula

molecular y secuencia de átomos unidos, pero que difieren solo en la orientación tridimensional de sus átomos en el

espacio. El estereoisomerismo de los derivados ejemplificados de la invención se indica en la sección experimental,

en los nombres así como también las estructuras, mediante el uso de la nomenclatura estándar. A menos que se

establezca de cualquier otra manera, la invención se refiere a todas las formas estereoisoméricas del derivado

reivindicado.

La concentración en plasma de los derivados de GLP-1 de la invención puede determinarse mediante el uso de

cualquier método adecuado. Por ejemplo, puede usarse la LC-MS (Espectroscopia de Masas acoplada a

Cromatografía Líquida), o inmunoensayos tales como el RIA (Radio Inmuno Ensayo), el ELISA (Ensayo Inmuno

Sorbente ligado a Enzimas) y el LOCI (Inmunoensayo de Luminiscencia de Canalización de Oxígeno). Los protocolos

generales para los ensayos RIA y ELISA adecuados se encuentran en, por ejemplo, el documento WO09/030738 en

las páginas 116-118. Un ensayo preferido es el ensayo LOCI descrito en 150 en la presente descripción.

Productos intermedios que son solo parte de la invención si se incluyen en las reivindicaciones

Un tipo de producto intermedio de la invención toma la forma de un análogo de GLP-1 que comprende los siguientes

cambios en comparación con GLP-1(7-37) (SEQ ID NO: 1): (i) 8Aib, 18K, 34R; (ii) 8Aib, 18K, 34Q; (iii) 8Aib, 18K,

22E, 34R; (iv) 8Aib, 18K, 22E, 34Q; (v) 8Aib, 12L, 18K, 34Q; (vi) 7Imp, 18K, 22E, 34Q; (vii) 18K, 34R; (iix) 18K, 34Q;

(ix) 18K, 22E, 34R; (x) 18K, 22E, 34Q; (xi) 18K, 26R, 31K, 34R; (xii) 18K, 26H, 31K, 34R; (xiii) 18K, 26H, 27K, 34Q;

(xiv) 18K, 22K, 26R, 34Q; (xv) 18K, 25V, 26R, 31K, 34R; (xvi) 18K, 22E, 26R, 31K, 34R; (xvii) 18K, 22E, 26H, 27K,

34R; (iixx) 18K, 22E, 26H, 27K, 34Q; (ixx) 18K, 22E, 26H, 27K, 31H, 34R; (xx) 18K, 22E, 26H, 27K, 31H, 34Q; (xxi)

18K, 22E, 25V, 26R, 31K, 34R; (xxii) 18K, 22E, 25V, 26R, 31K, 34Q; (xxiii) 18K, 22E, 25V, 26R, 31K, 34G; (xxiv) 18K,

22E, 25V, 26R, 27K, 34R; (xxv) 18K, 22E, 25V, 26R, 27K, 34Q; (xxvi) 18K, 22E, 25V, 26R, 27K, 31H, 34R; (xxvii) 18K,

22E, 25V, 26R, 27K, 31H, 34Q; (iixxx) 18K, 22E, 23E, 25V, 26R, 27K, 34R; (ixxx) 18K, 22E, 23E, 25V, 26R, 27K, 34Q;

(xxx) 18K, 22E, 25V, 26R, 31K, 34G, des35-37; (xxxi) 18K, 22E, 25V, 26R, 31H, des35-37; (xxxii) 18K, 22E, 25V, 26R,

30K, 34G, des35-37; (xxxiii) 18K, 22E, 25V, 26R, 30K, 31H, 34G, des35-37; (xxxiv) 18K, 22E, 25V, 26R, 27L, 30K,

34G, des35-37); (xxxv) 18K, 22E, 26R, 31K, 34G, des35-37; (xxxvi) 18K, 22E, 26R, 27K, 31H, 34G, des35-37; (xxxvii)

7Imp, 18K, 22E, 26R, 34R, 37K; (iixxxx) 7Imp, 18K, 22E, 26R, 27K, 31H, 34G, des35-37; (ixxxx) 7Imp, 18K, 22E, 25V,

26R, 31K, 34G, des35-37; (xxxx) 7Imp, 8Aib, 18K, 22E, 25V, 26R, 31K, 34G, des35-37; (xxxxi) 8S, 18K, 22E, 25V,

26R, 31K, 34G, des35-37; (xxxxii) 8Aib, 18K, 26V, 27K, 34R; (xxxxiii) 8Aib, 18K, 26H, 30K, 34R, des36-37; (xxxxiv)

8Aib, 18K, 25V, 26R, 31K, 34R; (xxxxv) 8Aib, 18K, 22E, 34R, des36-37; (xxxxvi) 8Aib, 18K, 22E, 26R, 34R, 37K;

(xxxxvii) 8Aib, 18K, 22E, 26R, 31K, 34R; (iixxxxx) 8Aib, 18K, 22E, 26R, 31K, 34G, des35-37; (ixxxxx) 8Aib, 18K, 22E,

26R, 30K, 34R, des36-37; (xxxxx) 8Aib, 18K, 22E, 26R, 30K, 34R; (xxxxxi) 8Aib, 18K, 22E, 26R, 27K, 31H, 34R, des36-

; (xxxxxvi) , 18K, 22E, xxx) 8Aib,

; (xxxxxxii) 18K, 22E, 25V, 26R, 27L, 30K, 34G, des35-37; (xxxxxxiii) 7Imp, 18K, 22E, 26R, 27K, 34Q; (xxxxxxiv) 34H; y (xxxxxxv)

8Aib, 18K, 34H; o una sal, amida o éster farmacéuticamente aceptable de cualquiera de los análogos de (i)-(xxxxxxv).

Otro tipo de producto intermedio toma la forma de una porción de unión a albúmina, o un intermediario de cadena

lateral, seleccionado de Quím. 137-160, y Quím. 184-188, en donde R y PG son grupos protectores; o una sal, amida

o éster farmacéuticamente aceptable de este.

En una modalidad particular, el grupo protector es un grupo que vuelve al compuesto no reactivo de forma reversible,

y que puede eliminarse selectivamente.

Los ejemplos no limitantes de grupos protectores son grupos funcionalizados como un éster activado, por ejemplo, sin limitación, OPfp, OPnp y OSuc.

Otros ésteres activados adecuados pueden seleccionarse, por ejemplo, de acuerdo con las enseñanzas de M. Bodanszky, "Principles of Peptide Synthesis", 2da ed., Springer Verlag, 1993.

Sal, amida o éster farmacéuticamente aceptable

Los derivados de la invención pueden estar en la forma de una sal, amida o éster farmacéuticamente aceptable. Las sales se forman, por ejemplo, mediante una reacción química entre una base y un ácido, por ejemplo: 2 NH³ + H²SO⁴ ^ (NH4)2SO4.

La sal puede ser una sal básica, una sal ácida, o puede no ser ninguna de estas (es decir una sal neutra). En agua, las sales básicas producen iones hidróxido y las sales ácidas iones hidronio.

Las sales de los derivados de la invención pueden formarse con cationes o aniones añadidos que reaccionan con grupos aniónicos o catiónicos, respectivamente. Estos grupos pueden ubicarse en la porción peptídica, y/o en la cadena lateral de los derivados de la invención.

Los ejemplos no limitantes de grupos aniónicos de los derivados de la invención incluyen grupos carboxílicos libres en la cadena lateral, si los hay, así como también en la porción peptídica. La porción peptídica incluye frecuentemente un grupo de ácido carboxílico libre en el C-terminal, y también puede incluir grupos carboxílicos libres en los residuos de aminoácidos ácidos internos tales como Asp y Glu.

Los ejemplos no limitantes de grupos catiónicos en la porción peptídica incluyen el grupo amino libre en el N-terminal, si se presenta, así como también cualquier grupo amino libre de residuos de aminoácidos básicos internos tales como His, Arg y Lys.

El éster de los derivados de la invención puede formarse, por ejemplo, mediante la reacción de un grupo de ácido carboxílico libre con un alcohol o un fenol, que conduce al reemplazo de al menos un grupo hidroxilo por un grupo alcoxi o ariloxi

La formación del éster puede implicar el grupo carboxílico libre en el C-terminal del péptido, y/o cualquier grupo carboxílico libre en la cadena lateral.

La amida de los derivados de la invención puede formarse, por ejemplo, mediante la reacción de una forma activada de un grupo de ácido carboxílico libre con una amina o una amina sustituida, o mediante la reacción de un grupo amino libre o sustituido con una forma activada de un ácido carboxílico.

La formación de amida puede implicar el grupo carboxílico libre en el C-terminal del péptido, cualquier grupo carboxílico libre en la cadena lateral, el grupo amino libre en el N-terminal del péptido, y/o cualquier grupo amino libre o sustituido del péptido en el péptido y/o la cadena lateral.

En una modalidad particular, el péptido o derivado tiene forma de una sal farmacéuticamente aceptable. En otra modalidad particular, el derivado tiene forma de una amida farmacéuticamente aceptable, preferentemente, con un grupo amida en el C-terminal del péptido. En aún otra modalidad particular, el péptido o derivado tiene forma de un éster farmacéuticamente aceptable.

Propiedades funcionales

En un primer aspecto, los derivados de la invención tienen una buena potencia. También, o alternativamente, en un segundo aspecto, tienen un perfil farmacocinético prolongado. También, o alternativamente, en un tercer aspecto, tienen una alta biodisponibilidad oral. También, o alternativamente, en un cuarto aspecto, tienen buenas propiedades biofísicas.

Actividad biológica (potencia)

De acuerdo con el primer aspecto, los derivados de la invención, así como también los péptidos GLP-1 constituyentes como tal (tales como K18-GLP-1(7-37) o análogos de este), son biológicamente activos o potentes.

En una modalidad particular, la potencia y/o la actividad se refieren a la potencia in vitro, es decir el rendimiento en un ensayo de receptor de GLP-1 funcional, más en particular a la capacidad de estimular la formación de AMPc en una línea celular que expresa el receptor de GLP-1 humano clonado.

La estimulación de la formación de AMPc en un medio que contiene el receptor de GLP-1 humano puede determinarse preferentemente mediante el uso de una línea celular transfectada estable tal como BHK467-12A (tk-ts13) y/o mediante el uso de la determinación de AMPc en un ensayo de receptor funcional, por ejemplo, basado en la competencia entre el AMPc formado endógenamente y el AMPc marcado con biotina añadido exógenamente, en cuyo ensayo el AMPc se captura con mayor preferencia mediante el uso de un anticuerpo específico, y/o en donde un ensayo aún más preferido es el ensayo de AMPc AlphaScreen, con la máxima preferencia el descrito en el Ejemplo 148.

El término concentración efectiva semimáxima (EC⁵⁰) se refiere generalmente a la concentración que induce la mitad de una respuesta entre el valor basal y el máximo, en referencia a la curva de respuesta a la dosis. La EC⁵⁰ se usa como una medida de la potencia de un compuesto y representa la concentración en donde se observa el 50 % de su efecto máximo.

La potencia in vitro de los derivados de la invención puede determinarse como se describió anteriormente, y determinarse la EC⁵⁰ del derivado en cuestión. A menor EC⁵⁰, mejor la potencia.

En una modalidad particular, el medio tiene la siguiente composición (concentraciones finales en el ensayo): TRIS-HCl 50 mM; HEPES 5 mM; MgCh 10 mM, ⁶ H²O; NaCl 150 mM; Tween al 0,01 %; BSA al 0,1 %; IBMX 0,5 mM; ATP 1 mM; GTP 1 uM. Un primer medio alternativo es: TRIS-HCl 50 mM; HEPES 5 mM; MgCh 10 mM, ⁶ H²O; NaCl 150 mM; Tween al 0,01 %. Un segundo medio alternativo es: Tris-HCl 50 mM, EGTA 1 mM, MgSO41,5 mM, ATP 1,7 mM, GTP 20 mM, 3-isobutil-1-metiloxantina (IBMX) 2 mM, Tween-20 al 0,01 %, pH 7,4. En una modalidad particular adicional, el derivado de la invención tiene una potencia in vitro correspondiente a una EC⁵⁰ de o por debajo de 10000 pM, con mayor preferencia por debajo de 5000 pM, aún con mayor preferencia por debajo de 1000 pM, o con la máxima preferencia por debajo de 500 pM.

La capacidad de los derivados de la invención de unirse al receptor de GLP-1 también puede usarse como una medida de la actividad de GLP-1 (afinidad del receptor). Esta capacidad puede determinarse como se describe en el Ejemplo 149. Generalmente, la unión al receptor del GLP-1 a baja concentración de albúmina debería ser tan buena como sea posible, correspondiente a un valor de IC⁵⁰ bajo.

En otra modalidad particular los derivados de la invención son potentes in vivo, los que pueden determinarse como se conoce en la técnica en cualquier modelo animal adecuado, así como también en ensayos clínicos.

El ratón db/db diabético es un ejemplo de un modelo animal adecuado y el efecto de disminución de glucosa en sangre, así como también el efecto de disminución del peso del cuerpo pueden determinarse en tales ratones in vivo, por ejemplo, como se describe en el Ejemplo 151.

También, o alternativamente, el efecto sobre la ingestión de alimentos (o pienso) in vivo puede determinarse en estudios farmacodinámicos en cerdos, por ejemplo, como se describe en el Ejemplo 153.

Prolongación - unión al receptor / albúmina baja y alta

De acuerdo con el segundo aspecto, los derivados de la invención se prolongan.

La capacidad de los derivados de la invención de unirse al receptor de GLP-1 en presencia de una concentración baja y una alta de albúmina, respectivamente, puede determinarse como se describe en el Ejemplo 149.

Generalmente, la unión al receptor del GLP-1 a baja concentración de albúmina debería ser tan buena como sea posible, correspondiente a un valor de IC⁵⁰ bajo.

El valor de IC⁵⁰ a concentración alta de albúmina es una medida de la influencia de la albúmina en la unión del derivado al receptor de GLP-1. Como se conoce, los derivados de GLP-1 también se unen a la albúmina. Este es un efecto generalmente conveniente, el que extiende su tiempo de vida media en plasma. Por lo tanto, el valor de IC⁵⁰ a albúmina alta será mayor generalmente que el valor de IC⁵⁰ a albúmina baja, lo que corresponde a una unión reducida al receptor de GLP-1, provocada por la unión a la albúmina que compite con la unión al receptor de GLP-1.

Una relación alta (valor de IC50 (albúmina alta) / valor de IC⁵⁰ (albúmina baja)) puede tomarse por lo tanto como una indicación de que el derivado en cuestión se une bien a albúmina (puede tener una vida media larga) y además per se se une bien al receptor de GLP-1 (el valor de IC⁵⁰ (albúmina alta) es alto y el valor de IC⁵⁰ (albúmina baja) es bajo). Por lo tanto, la unión a albúmina puede no siempre ser conveniente, o la unión a albúmina puede hacerse muy fuerte. Por lo tanto, los intervalos convenientes para IC⁵⁰ (albúmina baja), IC⁵⁰ (albúmina alta) /, y la relación alta/baja puede variar de compuesto a compuesto, en dependencia del uso destinado y las circunstancias que rodean tal uso y de otras propiedades del compuesto de interés potencial.

Como un ejemplo, en una modalidad particular, la relación(alto/bajo), a saber, [afinidad de unión al receptor de GLP-1 (IC⁵⁰) en presencia de albúmina sérica humana (HSA) al 2,0 %, dividido por la afinidad de unión al receptor de GLP 1 (IC⁵⁰) en presencia de HSA al 0,005 %], es al menos 1, preferentemente al menos 10, con mayor preferencia al menos 20, aún con mayor preferencia al menos 30 o con la máxima preferencia al menos 50.

Prolongación - vida media in vivo en minicerdos

De acuerdo con el segundo aspecto, los derivados de la invención se prolongan. La prolongación puede determinarse como la vida media terminal (Ty) in vivo en ratas después de la administración i.v., como se describe en el Ejemplo 154. En modalidades particulares, la vida media en rata es al menos 7 horas, preferentemente al menos 10 horas, aún con mayor preferencia al menos 20 horas o con la máxima preferencia al menos 30 horas.

O, la prolongación puede determinarse en otra especie animal, por ejemplo

como la vida media terminal (Ty) in vivo en minicerdos después de la administración i.v., como se describes en el Ejemplo 152. En modalidades particulares, la vida media terminal es al menos 8 horas, preferentemente al menos 24 horas, aún con mayor preferencia al menos 40 horas o con la máxima preferencia al menos 60 horas.

Sorprendentemente, los presentes inventores identificaron una nueva clase de derivados de GLP-1, objetos de la presente invención, que tienen una alta potencia y al mismo tiempo preferentemente una buena vida media.

Biodisponibilidad oral

De acuerdo con el tercer aspecto, los derivados de la invención tienen una alta biodisponibilidad oral.

La biodisponibilidad oral de los derivados de GLP-1 comerciales es muy baja. La biodisponibilidad oral de los derivados de GLP-1 en desarrollo para la administración i.v. o s.c. es también muy baja.

En consecuencia, existe una necesidad en la técnica de derivados de GLP-1 de una biodisponibilidad oral mejorada. Tales derivados podrían ser candidatos adecuados para administración oral, siempre que su potencia sea generalmente satisfactoria y/o siempre que su vida media también sea generalmente satisfactoria.

Sorprendentemente, los presentes inventores identificaron una nueva clase de derivados de GLP-1, objeto de la presente invención, que tienen una biodisponibilidad oral sorprendentemente alta, y al mismo tiempo una potencia, y/o tiempo de vida media satisfactorios.

Generalmente, el término biodisponibilidad se refiere a la fracción de una dosis administrada de un ingrediente farmacéutico activo (API), tal como un derivado de la invención que llega a la circulación sistémica sin cambiar. .Por definición, cuando un API se administra por vía intravenosa, su biodisponibilidad es del 100 %. Sin embargo, cuando se administra a través de otras vías (tales como por vía oral), su biodisponibilidad disminuye (debido a la absorción incompleta y al metabolismo de primer paso). El conocimiento sobre la biodisponibilidad es importante cuando se calculan las dosis para las vías de administración no intravenosas.

La biodisponibilidad oral absoluta compara la biodisponibilidad (estimada como el área bajo la curva o AUC) del API en la circulación sistémica después de la administración oral, con la biodisponibilidad del mismo API después de la administración intravenosa. Es la fracción del API absorbida a través de la administración no intravenosa en comparación con la administración intravenosa correspondiente del mismo API. La comparación debe normalizarse para la dosis si se usan diferentes dosis; en consecuencia, cada AUC se corrige mediante la división por la dosis correspondiente administrada.

Se hace un gráfico de concentración plasmática del API frente al tiempo después de la administración tanto oral como intravenosa. La biodisponibilidad absoluta (F) es el AUC-oral dividido por el AUC-intravenoso corregido para la dosis.

En una modalidad particular, el derivado de la invención tiene una biodisponibilidad oral absoluta que es superior a la de la semaglutida, preferentemente al menos 10 % superior, con mayor preferencia al menos 20 % superior, aún con mayor preferencia al menos 30 % superior, o con la máxima preferencia al menos 40 % superior. En modalidades particulares adicionales, tiene una biodisponibilidad oral absoluta que es al menos 1,5 veces la de la semaglutida, preferentemente al menos 2,0 veces, con mayor preferencia al menos 3,0 veces, aún con mayor preferencia al menos 4,0 veces, o con la máxima preferencia al menos 5,0 veces la de la semaglutida.

Antes de analizar la biodisponibilidad oral los derivados de la invención pueden formularse adecuadamente como se conoce en la técnica de las formulaciones orales de compuestos insulinotrópicos, por ejemplo mediante el uso de cualquiera de una o más de las formulaciones descritas en el documento WO 2008/145728.

Se ha desarrollado una prueba, descrita en el Ejemplo 150, que resultó ser una predicción aceptable de la biodisponibilidad oral. De acuerdo con esta prueba, después de la inyección directa del derivado de GLP-1 en la luz intestinal de ratas, se determina la concentración (exposición) de este en plasma y la relación de concentración plasmática (pmol/l) dividida por la concentración de la solución de dosis (umol/l) se calcula para t=30 min. Esta relación es una medida de la biodisponibilidad intestinal y se espera que se correlacione con los datos reales de biodisponibilidad oral.

Propiedades biofísicas

De acuerdo con el cuarto aspecto, los péptidos/derivados de la invención tienen buenas propiedades biofísicas. Estas propiedades incluyen, pero no se limitan, a estabilidad física y/o solubilidad. Estas y otras propiedades biofísicas pueden medirse mediante el uso de métodos estándar conocidos en la técnica de la química de proteínas. En una modalidad particular, estas propiedades mejoran en comparación con el GLP-1 nativo (SEQ ID NO: 1). Las propiedades oligoméricas modificadas de los péptidos/derivados pueden ser al menos parcialmente responsables de las propiedades biofísicas mejoradas.

Las modalidades particulares adicionales de los derivados de la invención se describen en las secciones tituladas "modalidades particulares" y "modalidades particulares adicionales" antes de la sección experimental.

Procesos de producción

La producción de péptidos tipo GLP-1(7-37) y análogos de GLP-1 se conoce bien en la técnica.

La porción GLP-1 de los derivados de la invención, a saber, K18-GLP-1(7-37) o un análogo de este, puede producirse, por ejemplo, mediante síntesis de péptidos clásica, por ejemplo, síntesis de péptidos en fase sólida mediante el uso de la química t-Boc o Fmoc u otras técnicas bien establecidas, ver, por ejemplo, Greene y Wuts, “Protective Groups in Organic Synthesis”, John Wiley & Sons, 1999, Florencio Zaragoza Dorwald, “Organic Synthesis on solid Phase”, Wiley-VCH Verlag GmbH, 2000 y “Fmoc Solid Phase Peptide Synthesis”, Editado por W.C. Chan y P.D. White, Oxford University Press, 2000.

También, o alternativamente, pueden producirse mediante métodos recombinantes, respectivamente, mediante el cultivo de una célula hospedera que contiene una secuencia de ADN que codifica el análogo y es capaz de expresar el péptido en un medio de nutrientes adecuado bajo condiciones que permiten la expresión del péptido. Los ejemplos de células hospederas adecuadas para la expresión de estos péptidos no limitantes son: Escherichia coli, Saccharomyces cerevisiae, así como también líneas celulares de mamíferos BHK o CHO.

Los derivados de la invención que incluyen aminoácidos no naturales y/o un mono- o dipéptido mimético N-terminal unido covalentemente pueden producirse, por ejemplo, como se describió en la parte experimental. O véase, por ejemplo, Hodgson y otros: "The synthesis of peptides and proteins containing non-natural amino acids", Chemical Society Reviews, vol. 33, núm. 7 (2004), páginas 422-430; y el WO 2009/083549 A1 titulado "Semi-recombinant preparation of GLP-1 analogues".

Los ejemplos específicos de métodos para preparar un número de derivados de la invención se incluyen en la parte experimental.

Composiciones farmacéuticas

Las composiciones farmacéuticas que comprenden un derivado de la invención o una sal, amida o éster farmacéuticamente aceptable de este y un excipiente farmacéuticamente aceptable pueden prepararse como se conoce en la técnica.

El término "excipiente" se refiere en un sentido amplio a cualquier componente además del (de los) ingrediente(s) terapéutico(s) activo(s). El excipiente puede ser una sustancia inerte, una sustancia inactiva, y/o una sustancia no activa medicinalmente.

El excipiente puede servir para varios fines, por ejemplo, como portador, vehículo, diluyente, auxiliar para comprimidos, y/o para mejorar la administración, y/o la absorción de la sustancia activa.

En la técnica se conoce la formulación de ingredientes farmacéuticamente activos con diversos excipientes, véase, por ejemplo, Remington: The Science and Practice of Pharmacy (por ejemplo, 19na edición (1995) y cualquiera de las ediciones posteriores).

Los ejemplos no limitantes de excipientes son: Los solventes, diluyentes, tampones, conservantes, agentes reguladores de la tonicidad, agentes quelantes, y estabilizadores.

Los ejemplos de formulaciones incluyen formulaciones líquidas, es decir, formulaciones acuosas, es decir, formulaciones que comprenden agua. Una formulación líquida puede ser una solución o una suspensión. Una formulación acuosa típicamente comprende al menos 50 % p/p de agua, o al menos 60 %, 70 %, 80 %, o incluso al menos 90 % p/p de agua.

Alternativamente una composición farmacéutica puede ser una formulación sólida, por ejemplo, una composición liofilizada o secada por pulverización, que puede usarse tal cual, a la que el médico o el paciente añade solventes y/o diluyentes antes de su uso.

El pH en una formulación acuosa puede ser cualquiera entre pH 3 y pH 10, por ejemplo, de aproximadamente 7,0 a aproximadamente 9,5; o de aproximadamente 3,0 a aproximadamente 7,0.

Una composición farmacéutica puede comprender un tampón. El tampón puede seleccionarse, por ejemplo, a partir del grupo que consiste en acetato de sodio, carbonato de sodio, citrato, glicilglicina, histidina, glicina, lisina, arginina, dihidrógeno fosfato de sodio, hidrógeno fosfato de disodio, fosfato de sodio y tris(hidroximetil)-aminometano, bicina, tricina, ácido málico, succinato, ácido maleico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido aspártico y las mezclas de estos.

Una composición farmacéutica puede comprender un conservante. El conservante puede seleccionarse, por ejemplo, a partir del grupo que consiste en fenol, o-cresol, m-cresol, p-cresol, p-hidroxibenzoato de metilo, p-hidroxibenzoato de propilo, 2-fenoxietanol, p-hidroxibenzoato de butilo, 2-feniletanol, alcohol bencílico, clorobutanol y tiomersal, bronopol, ácido benzoico, imidaurea, clorohexidina, deshidroacetato de sodio, clorocresol, p-hidroxibenzoato de etilo, cloruro de bencetonio, clorfenesina (3p-clorfenoxipropano-1,2-diol) y las mezclas de estos. El conservante puede presentarse en una concentración a partir de 0,1 mg/ml hasta 20 mg/ml.

Una composición farmacéutica puede comprender un agente isotónico. El agente isotónico puede seleccionarse, por ejemplo, a partir del grupo que consiste en una sal (por ejemplo, cloruro de sodio), un azúcar o azúcar alcohólico, un aminoácido (por ejemplo, glicina, histidina, arginina, lisina, isoleucina, ácido aspártico, triptófano, treonina), un alditol (por ejemplo, glicerol (glicerina), 1,2-propanodiol (propilenglicol), 1,3-propanodiol, 1,3-butanodiol) polietilenglicol (por ejemplo, PEG400) y las mezclas de estos. Puede usarse cualquier azúcar tal como mono-, di-, o polisacáridos, o glucanos solubles en agua, que incluye, por ejemplo, fructosa, glucosa, manosa, sorbosa, xilosa, maltosa, lactosa, sacarosa, trehalosa, dextrano, pululano, dextrina, ciclodextrina, alfa y beta HPCD, almidón soluble, hidroxietil almidón y carboximetilcelulosa de Na. El azúcar alcohólico se define como un hidrocarburo C4-C8 que tiene al menos un grupo -OH e incluye, por ejemplo, manitol, sorbitol, inositol, galactitol, dulcitol, xilitol y arabitol.

Una composición farmacéutica puede comprender un agente quelante. El agente quelante puede seleccionarse, por ejemplo, a partir de sales de ácido etilendiaminotetraacético (EDTA), ácido cítrico y ácido aspártico y mezclas de estos.

Una composición farmacéutica puede comprender un estabilizador. El estabilizador puede ser, por ejemplo, uno o más inhibidores de la oxidación, inhibidores de la agregación, tensioactivos y/o uno o más inhibidores de proteasas.

El término "formación de agregados" se refiere a una interacción física entre las moléculas polipeptídicas que resulta en la formación de oligómeros, que pueden permanecer solubles, o grandes agregados visibles que precipitan de la solución. La formación de agregados por un polipéptido durante el almacenamiento de una composición farmacéutica líquida puede afectar adversamente la actividad biológica de ese polipéptido, lo que resulta en la pérdida de la eficacia terapéutica de la composición farmacéutica. Además, la formación de agregados puede provocar otros problemas tales como el bloqueo de tubos, membranas, o bombas cuando la composición farmacéutica que contiene polipéptidos se administra mediante el uso de un sistema de infusión.

Una composición farmacéutica puede comprender una cantidad de una base de tipo aminoácido suficiente para disminuir la formación de agregados del péptido durante el almacenamiento de la composición. El término "base de aminoácido" se refiere a uno o más aminoácidos (tales como metionina, histidina, imidazol, arginina, lisina, isoleucina, ácido aspártico, triptófano, treonina) o los análogos de estos. Cualquier aminoácido puede presentarse ya sea en su forma de base libre o en su forma de sal. Cualquier estereoisómero (es decir, L, D o una mezcla de estos) de la base de aminoácido puede estar presente.

Puede añadirse metionina (u otros aminoácidos o análogos de aminoácidos sulfúricos) para inhibir la oxidación de los residuos de metionina a sulfóxido de metionina cuando el péptido es un polipéptido que comprende al menos un residuo de metionina susceptible a tal oxidación. Puede usarse cualquier estereoisómero de metionina (L o D) o sus combinaciones.

Una composición farmacéutica puede comprender un estabilizante que se selecciona a partir del grupo de polímeros de alto peso molecular o compuestos de bajo peso molecular. El estabilizador puede seleccionarse, por ejemplo, a partir de polietilenglicol (por ejemplo, PEG 3350), alcohol polivinílico (PVA), polivinilpirrolidona, carboxi-/hidroxicelulosa o derivados de estos (por ejemplo, HPC, HPC-SL, HPC-L y HPMC), ciclodextrinas, sustancias que contienen azufre como monotioglicerol, ácido tioglicólico y 2-metiltioetanol y sales diferentes (por ejemplo, cloruro de sodio).

Una composición farmacéutica puede comprender agentes estabilizadores adicionales tales como, pero sin limitarse a, metionina y EDTA, que protegen al polipéptido de la oxidación de la metionina y un tensioactivo no iónico, que protege al polipéptido de la agregación asociada a la congelación-descongelación o al cizallamiento mecánico.

Una composición farmacéutica puede comprender uno o más tensioactivos, por ejemplo un tensioactivo, al menos un tensioactivo o dos tensioactivos diferentes. El término "tensioactivo" se refiere a cualesquiera moléculas o iones que se comprenden de una parte soluble en agua (hidrófila) y una parte soluble en grasa (lipófila). El tensioactivo puede, por ejemplo, seleccionarse a partir del grupo que consiste en tensioactivos aniónicos, tensioactivos catiónicos, tensioactivos no iónicos y/o tensioactivos zwitteriónicos.

Una composición farmacéutica puede comprender uno o más inhibidores de proteasas, tales como, por ejemplo, EDTA (ácido etilendiamina tetraacético) y/o benzamidinaHCl.

Los ingredientes adicionales, opcionales de una composición farmacéutica incluyen, por ejemplo, agentes humectantes, emulsionantes, antioxidantes, agentes que añaden volumen, iones metálicos, vehículos oleosos, proteínas (por ejemplo, albúmina sérica humana, gelatina) y/o un zwitterión (por ejemplo, un aminoácido tal como betaína, taurina, arginina, glicina, lisina e histidina).

Además, una composición farmacéutica puede formularse como se conoce en la técnica de las formulaciones orales de compuestos insulinotrópicos, por ejemplo, mediante el uso de cualquiera de una o más de las formulaciones descritas en el documento WO 2008/145728.

Una dosis administrada puede contener de 0,01 mg - 100 mg del derivado, o de 0,01-50 mg, o de 0,01-20 mg, o de 0,01 mg - 10 mg del derivado.

El derivado puede administrarse en la forma de una composición farmacéutica. Puede administrarse a un paciente que lo necesita en diversos sitios, por ejemplo, en sitios tópicos tales como la piel o sitios de mucosa; en sitios en donde no se produce absorción tales como en una arteria, en una vena, o en el corazón; y en sitios que implican la absorción, tales como en la piel, bajo la piel, en un músculo o en el abdomen.

La vía de administración puede ser, por ejemplo, lingual; sublingual; bucal; en la boca; oral; en el estómago; en el intestino; nasal; pulmonar, tal como a través de los bronquiolos, los alvéolos o sus combinaciones; parenteral, epidérmico; dérmico; transdérmico; conjuntival; uretral; vaginal; rectal; y/u ocular. En una modalidad particular, la vía de administración es por vía oral.

Una composición puede administrarse en varias formas de administración de dosis, por ejemplo, como una solución; una suspensión; una emulsión; una microemulsión; emulsiones múltiples; una espuma; un ungüento; una pasta; un yeso; una pomada; un comprimido; un comprimido recubierto; una goma de mascar; un enjuague; una cápsula tal como cápsulas de gelatina duras o blandas; un supositorio; una cápsula rectal; gotas; un gel; un aerosol; un polvo; un aerosol; un inhalante; gotas oculares; una ungüento oftálmico; un enjuague oftálmico; un pesario vaginal; un anillo vaginal; un ungüento vaginal; una solución de inyección; una solución de transformación in situ, tal como la gelificación in situ, fraguado, precipitación y cristalización in situ; una solución de infusión; o como un implante. Una composición puede combinarse adicionalmente en un portador o sistema de suministro de fármacos, por ejemplo, para mejorar la estabilidad, biodisponibilidad y/o solubilidad. Una composición puede unirse a tal sistema a través de interacciones covalentes, hidrófobas y/o electrostáticas. El propósito de tal composición puede ser, por ejemplo, disminuir los efectos adversos, lograr la cronoterapia y/o aumentar el cumplimiento del paciente.

Una composición también puede usarse en la formulación de sistemas de suministro de fármacos de liberación controlada, sostenida, prolongada, retardada y/o lenta.

La administración parenteral puede realizarse mediante inyección subcutánea, intramuscular, intraperitoneal o intravenosa por medio de una jeringa, opcionalmente una jeringa tipo pluma o por medio de una bomba de infusión.

Una composición puede administrarse por vía nasal en la forma de una solución, una suspensión, o un polvo; o puede administrarse por vía pulmonar en la forma de un aerosol líquido o en polvo.

La administración transdérmica es una opción adicional, por ejemplo, mediante inyección sin aguja, desde un parche tal como un parche iontoforético, o mediante una vía transmucosal, por ejemplo, por vía bucal.

Una composición puede ser una formulación estabilizada. El término “formulación estabilizada” se refiere a una formulación con estabilidad física y/o química aumentada, preferentemente ambas. En general, una formulación debe ser estable durante el uso y el almacenamiento (de conformidad con el uso recomendado y las condiciones de almacenamiento) hasta que se alcance la fecha de vencimiento.

El término “estabilidad física” se refiere a la tendencia del polipéptido a formar agregados biológicamente inactivos y/o insolubles como un resultado de la exposición a esfuerzo termomecánico y/o a la interacción con interfaces y superficies desestabilizantes (tales como superficies hidrófobas). La estabilidad física de una formulación acuosa de polipéptido se evalúa por medio de inspección visual, y/o mediciones de la turbidez después de la exposición a esfuerzo mecánico/físico (por ejemplo, agitación) a diferentes temperaturas durante diversos períodos de tiempo. Alternativamente, la estabilidad física puede evaluarse mediante el uso de un agente espectroscópico o sonda del estado conformacional del polipéptido tal como, por ejemplo, Tioflavina T o sondas de “parche hidrófobo”.

El término “estabilidad química” se refiere a cambios químicos (en particular covalentes) en la estructura polipeptídica que conduce a la formación de productos de degradación química que tienen potencialmente una potencia biológica reducida, y/o un efecto inmunogénico aumentado en comparación con el polipéptido intacto. La estabilidad química puede evaluarse mediante la medición de la cantidad de productos de degradación química en varios puntos temporales después de la exposición a diferentes condiciones ambientales, por ejemplo mediante SEC-HPLC, y/o RP-HPLC.

El tratamiento con un derivado de acuerdo con la presente invención puede también combinarse con una más sustancias activas farmacológicamente adicionales, por ejemplo, seleccionadas a partir de agentes antidiabéticos, agentes antiobesidad, agentes reguladores del apetito, agentes antihipertensivos, agentes para el tratamiento y/o prevención de complicaciones resultantes de o asociadas con la diabetes y agentes para el tratamiento y/o prevención de complicaciones y trastornos resultantes o asociados con la obesidad. Ejemplos de estas sustancias farmacológicamente activas son: Insulina, sulfonilureas, biguanidas, meglitinidas, inhibidores de glucosidasa, antagonistas de glucagón, inhibidores de la DPP-IV (dipeptidil peptidasa-IV), inhibidores de enzimas hepáticas implicadas en la estimulación de la gluconeogénesis y/o glucogenólisis, moduladores de la captación de glucosa, compuestos que modifican el metabolismo lipídico tales como agentes antihiperlipidémicos como inhibidores HMG CoA (estatinas), polipéptidos inhibidores gástricos (análogos GIP), compuestos que reducen la ingestión de alimentos, agonistas RXR y agentes que actúan sobre el canal de potasio dependiente de ATP de las células P; colestiramina, colestipol, clofibrato, gemfibrozilo, lovastatina, pravastatina, simvastatina, probucol, dextrotiroxina, neteglinida, repaglinida; p-bloqueadores beta tales como alprenolol, atenolol, timolol, pindolol, propranolol y metoprolol, inhibidores de la ACE (enzima convertidora de angiotensina) tales como benazepril, captopril, enalapril, fosinopril, lisinopril, alatriopril, quinapril y ramipril, bloqueadores de los canales de calcio tales como nifedipina, felodipina, nicardipina, isradipina, nimodipina, diltiazem y verapamilo y a-bloqueadores a tales como doxazosina, urapidilo, prazosina y terazosina; agonistas de CART (transcrito regulado por cocaína y anfetamina), antagonistas de NPY (neuropéptido Y), agonistas de PYY, agonistas del receptor de Y2, agonistas del receptor de Y4, agonistas mixtos del receptor de Y2/Y4, agonistas de MC4 (melanocortina 4), antagonistas de orexina, agonistas del TNF (factor de necrosis tumoral), agonistas del CRF (factor de liberación de corticotropina), antagonistas del CRF BP (proteína de unión al factor de liberación de corticotropina), agonistas de urocortina, agonistas p3, oxintomodulina y análogos, agonistas de MSH (hormona estimulante de melanocitos), antagonistas de MCH (hormona concentradora de melanocitos), agonistas de CCK (colecistoquinina), inhibidores de la recaptación de serotonina, inhibidores de la recaptación de serotonina y noradrenalina, compuestos mixtos de serotonina y noradrenérgicos, agonistas de 5HT (serotonina), agonistas de bombesina, antagonistas de galanina, hormona de crecimiento, compuestos de liberación de la hormona del crecimiento, agonistas de TRH (hormona liberadora de tireotropina), moduladores de UCP 2 o 3 (proteínas desacopladoras 2 o 3), agonistas de leptina, agonistas de DA (bromocriptina, doprexina), inhibidores de lipasa/amilasa, moduladores de RXR (receptor retinoide X), agonistas p TR; antagonistas de histamina H3, agonistas o antagonistas del polipéptido inhibidor gástrico (análogos de GIP), gastrina y análogos de gastrina.

El tratamiento con un derivado de acuerdo con esta invención puede también combinarse con una cirugía que influya en los niveles de glucosa, y/o homeostasis lipídica tal como la banda gástrica o la derivación gástrica.

Indicaciones farmacéuticas

La presente invención también se refiere a un derivado de la invención, para el uso como un medicamento.

En modalidades particulares, el derivado de la invención puede usarse para los siguientes tratamientos médicos, todos preferentemente relacionados de una forma u otra con la diabetes:

(i) prevención y/o tratamiento de todas las formas de diabetes, tales como hiperglucemia, diabetes tipo 2, tolerancia a la glucosa alterada, diabetes tipo 1, diabetes no dependiente de insulina, MODY (diabetes de aparición en la madurez de los jóvenes), diabetes gestacional y/o para la reducción de HbAIC;

(ii) retardar o prevenir la progresión de la enfermedad diabética, tal como la progresión en la diabetes tipo 2, retardar la progresión de la tolerancia alterada a la glucosa (IGT) a diabetes tipo 2 que requiere insulina, y/o retardar la progresión de la diabetes tipo 2 que no requiere insulina a diabetes tipo 2 que requiere insulina;

(iii) mejorar la función de las células p, tal como disminuir la apoptosis de las células p, aumentar la función de las células p y/o la masa de células p, y/o restablecer la sensibilidad a la glucosa de las células p;

(iv) prevención y/o tratamiento de trastornos cognitivos;

(v) prevención y/o tratamiento de trastornos alimentarios, tales como obesidad, por ejemplo, mediante disminución de la ingestión de alimentos, la reducción del peso del cuerpo, la supresión del apetito, por inducción de saciedad; tratamiento o prevención de los trastornos por atracón, bulimia nerviosa y/u obesidad inducida por la administración de un antipsicótico o un esteroide; la reducción de la motilidad gástrica; y/o el retardo del vaciamiento gástrico; (vi) prevención y/o tratamiento de complicaciones diabéticas, tales como neuropatía, lo que incluye la neuropatía periférica; nefropatía; o retinopatía;

(vii) mejorar los parámetros lipídicos, tales como la prevención y/o el tratamiento de la dislipidemia, la disminución de los lípidos séricos totales; disminución de HDL; disminución de LDL densa y pequeña; disminución de VLDL: disminución de triglicéridos; reducción del colesterol; aumentar HDL; reducir los niveles plasmáticos de lipoproteína a (Lp(a)) en un humano; inhibir la generación de apolipoproteína a (apo(a)) in vitro y/o in vivo;

(iix) prevención y/o tratamiento de enfermedades cardiovasculares, tales como el síndrome X; aterosclerosis; infarto de miocardio; enfermedad coronaria; accidente cerebrovascular, isquemia cerebral; una enfermedad cardíaca temprana o cardiovascular temprana, tal como la hipertrofia ventricular izquierda; enfermedad de la arteria coronaria; hipertensión esencial; emergencia hipertensiva aguda; cardiomiopatía; insuficiencia cardíaca; tolerancia al ejercicio; insuficiencia cardíaca crónica; arritmia; disritmia cardíaca; síncope, aterosclerosis; insuficiencia cardíaca crónica leve; angina de pecho; reoclusión de derivación cardíaca; claudicación intermitente (aterosclerosis obliterante); disfunción diastólica; y/o disfunción sistólica;

(ix) prevención y/o tratamiento de enfermedades gastrointestinales, tales como síndrome inflamatorio del intestino; síndrome del intestino delgado o enfermedad de Crohn; dispepsia; y/o úlceras gástricas;

(x) prevención y/o tratamiento de enfermedades críticas, tales como el tratamiento de un paciente crítico, un paciente de polinefropatía por enfermedad crítica (CIPNP), y/o un paciente con CIPNP potencial; prevención de enfermedades críticas o desarrollo de CIPNP; prevención, tratamiento y/o curación del síndrome de respuesta inflamatoria sistémica (SIRS) en un paciente; y/o para la prevención o reducción de la posibilidad de que un paciente sufra de bacteriemia, septicemia y/o choque séptico durante la hospitalización; y/o

(xi) prevención y/o tratamiento del síndrome del ovario poliquístico (PCOS).

En una modalidad particular, la indicación se selecciona a partir del grupo que consiste en (i)-(iii) y (v)-(iix), tal como las indicaciones (i), (ii) y/o (iii); o indicación (v), indicación (vi), indicación (vii), y/o indicación (iix).

En otra modalidad particular, la indicación es (i). En una modalidad particular adicional la indicación es (v). Aún en otra modalidad particular la indicación es (iix).

Se prefieren particularmente las siguientes indicaciones: Diabetes tipo 2 y/u obesidad.

Ejemplos

Esta parte experimental comienza con una lista de abreviaturas y le continúa una sección que incluye los métodos generales para sintetizar y caracterizar los análogos y derivados de la invención. Después le continúa un número de ejemplos que se relacionan con la preparación de derivados de GLP-1 específicos y al final se incluye una serie de ejemplos relacionados con la actividad y las propiedades de estos análogos y derivados (sección titulada métodos farmacológicos).

Los ejemplos sirven para ilustrar la invención.

Lista de abreviaturas

Aib: ácido a-aminoisobutírico

API: Ingrediente Farmacéutico Activo

AUC: Área Bajo la Curva

BG: Glucosa en Sangre

BHK Riñón de hámster recién nacido

BW: Peso del Cuerpo

Boc: f-butiloxicarbonilo

Bom: benciloximetilo

BSA: Albúmina sérica bovina

Bzl: bencilo

CAS: Servicio de Resúmenes Químicos

Clt: 2-clorotritilo

colidina: 2,4,6-trimetilpiridina

DCM: diclorometano

Dde: 1-(4,4-dimetil-2,6-dioxociclohexilideno)etilo

DesH: des-amino histidina (también puede referirse como ácido imidazopropiónico, Imp) DIC: diisopropilcarbodiimida

DIPEA: diisopropiletilamina

DMEM: Medio de Eagle Modificado de Dulbecco (DMEM)

EDTA: ácido etilendiaminotetraacético

EGTA: ácido etilenglicoltetraacético

FCS: Suero Fetal de Ternera

Fmoc: 9-fluorenilmetiloxicarbonilo

HATU: (O-(7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio hexafluorofosfato)

HBTU: (2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3 tetrametiluronio hexafluorofosfato)

HEPES: ácido 4-(2-hidroxietil)-1-piperazinetanosulfónico

HFIP 1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-propanol o hexafluoroisopropanol

HOAt: 1-hidroxi-7-azabenzotriazol

HOBt: 1-hidroxibenzotriazol

HPLC: Cromatografía líquida de alto rendimiento

HSA: Albúmina sérica humana

IBMX: 3-isobutil-1 -metilxantina

Imp: Ácido imidazopropiónico (también denominado como des-amino histidina, DesH) i.v. por vía intravenosa

ivDde: 1-(4,4-dimetil-2,6-dioxociclohexilideno)-3-metilbutilo

IVGTT: Prueba de tolerancia a la glucosa intravenosa

LCMS: Cromatografía líquida acoplada a espectroscopía de masas

LYD: Landrace Yorkshire Duroc

MALDI-MS: Véase MALDI-TOF MS

MALDI-TOF MS: Espectroscopía de masas de tiempo de vuelo de Desorción/Ionización mediante láser asistida por matriz

MeOH: metanol

Mmt: 4-metoxitritilo

Mtt: 4-metiltritilo

NMP: N-metil pirrolidona

OBz: éster de benzoilo

OEG: ácido 8-amino-3,6-dioxaoctánico

OPfp: pentafluorofenoxi

OPnp: para-nitrofenoxi

OSu: Ésteres de O-succinimidilo (ésteres de hidroxisuccinimida)

OtBu: éster terc butílico

Pbf: 2,2,4,6,7-pentametildihidrobenzofuran-5-sulfonilo

PBS: Solución salina tamponada con fosfato

PD: Farmacodinámica

Pen/Estrep: Penicilina/Estreptomicina

PK: Farmacocinética

RP: Fase reversa

RP-HPLC: Cromatografía líquida de alto rendimiento de fase reversa

RT: Temperatura ambiente

Rt: Tiempo de retención

s.c.: Vía subcutánea

SD: Desviación estándar

SEC-HPLC: Cromatografía líquida de alto rendimiento de exclusión molecular

SEM: Error estándar de la media

SPA: Ensayo de Proximidad de Centelleo

SPPS: Síntesis de Péptidos en Fase Sólida

tBu: terc butilo

TFA: ácido trifluoroacético

TIS: triisopropilsilano

TLC: Cromatografía de Capa Delgada

Tos: tosilato (o para-toluenosulfonilo)

Tris: tris(hidroximetil)aminometano o 2-amino-2-hidroximetil-propano-1,3-diol

Trt: trifenilmetilo (tritilo)

Trx: ácido tranexámico

UPLC: Cromatografía líquida de ultra alto rendimiento

Materiales y métodos

Materiales

Ácido N-a,N-p-di-Fmoc-L-2,3-diaminopropiónico (CAS 201473-90-7)

Ácido 3,5-di-terc-butil-4-hidroxibenzóico (CAS 142l -49-4)

Ácido 3,5-di-terc-butilbenzoico (CAS 16225-26-6)

Ácido Fmoc-8-amino-3,6-dioxaoctanoico (CAS 166108-71 -0)

Ácido 17-(9-fluorenilmetiloxicarbonil-amino)-9-aza-3,6,12,15-tetraoxa-10-on-heptadecanoico (IRIS Biotech GmbH) Ácido Fmoc-L-glutámico 1-terc-butil éster (CAS 84793-07-7)

Ácido 2-(2-metoxietoxi)acético (CAS 16024-56-9)

N-a,N-e-bis(9-fluorenilmetiloxicarbonil)-L-lisina (CAS 78081-87-5)

Ácido 1-[(9H-fluoren-9-ilmetoxi)carbonil]piperidina-4-carboxílico (CAS 148928-15-8)

Ácido FMOC-8-aminocaprilo (CAS 126631-93-4)

Ácido 4-fenilbutírico (CAS 1716-12-7)

Ácido 4-(4-nitrofenil)butírico (CAS 5600-62-4)

Ácido 4-(4-clorofenil)butírico (CAS 4619-18-5)

Ácido FMOC-6-aminohexanóico (CAS 88574-06-5)

Ácido FMOC-12-aminododecanoico (CAS 128917-74-8)

Éster ferc-butílico del ácido 4-(9-carboxi-noniloxi)-benzoico (preparado como se describe en el Ejemplo 25, etapa 1 y 2 del documento WO 2006/082204)

Éster terc-butílico del ácido 4-(8-carboxi-octiloxi)-benzoico (M.p.: 71-72 °C.

1H NMR (300 MHz, CDCla, 8h): 7,93 (d, J=8,9 Hz, 2 H); 6,88 (d, J=8,9 Hz, 2 H); 4,00 (t, J=6,4 Hz, 2 H); 2,36 (t, J=7,4 Hz, 2 H); 1,80 (m, 2 H); 1,65 (m, 2 H);1,59 (s, 9 H); 1,53-1,30 (m, 8 H) (preparado como se describe en el Ejemplo 25, etapa 1 y 2 del documento WO 2006/082204, que reemplaza al 10-bromodecanoato de metilo con 9-bromononanoato de etilo (CAS 28598-81-4))

Éster terc-butílico del ácido 4-(7-carboxi-heptiloxi)-benzoico (espectro 1H NMR (300 MHz, CDCb, 8h): 7,93 (d, J=9,0 Hz, 2 H); 6,88 (d, J=9,0 Hz, 2 H); 4,00 (t, J=6,5 Hz, 2 H); 2,37 (t, J=7,4 Hz, 2 H); 1,80 (m, 2 H); 1,64 (m, 2 H);1,59 (s, 9 H); 1,53-1,33 (m, 6 H)) (preparado como se describe en el Ejemplo 25, etapa 1 y 2 del documento WO 2006/082204, que reemplaza al 10-bromodecanoato de metilo con 7-bromoheptanoato de etilo (CAS 29823-18-5))

Métodos químicos

Esta sección se divide en dos: La sección A que se relaciona con los métodos generales (de preparación (A1); y de detección y caracterización (A2)) y la sección B, en la que se describe la preparación y la caracterización de una serie de compuestos de ejemplo específicos.

A. Métodos generales

A1. Métodos de preparación

Esta sección se refiere a métodos para la síntesis de péptidos en fase sólida (métodos SPPS, que incluyen métodos para la desprotección de aminoácidos, métodos para escindir el péptido a partir de la resina, y para su purificación), así como también a los métodos para detectar y caracterizar el péptido resultante (métodos de LCMS, MALDI y UPLC). La síntesis de los péptidos en fase sólida puede mejorarse en algunos casos mediante el uso de dipéptidos protegidos en el enlace amida del dipéptido con un grupo que puede escindirse en condiciones ácidas tales como, pero sin limitarse a, 2-Fmoc-oxi-4-metoxibencilo o 2,4,6-trimetoxibencilo. En los casos en que está presente una serina o una treonina en el péptido, pueden usarse dipéptidos de pseudoprolina (disponibles de, por ejemplo, Novobiochem, véase también W.R. Sampson (1999), J. Pep. Sci. 5, 403). Los derivados de aminoácidos protegidos con Fmoc usados fueron el estándar recomendado: Fmoc-Ala-OH, Fmoc-Arg(Pbf)-OH, Fmoc-Asn(Trt)-OH, Fmoc-Asp(OtBu)-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-Gln(Trt)-OH, Fmoc-Glu(OtBu)-OH, Fmoc-Gly-OH, Fmoc-His(Trt)-OH, Fmoc-Ile-OH, Fmoc-Leu-OH, Fmoc-Lys(Boc)-OH, Fmoc-Met-OH, Fmoc-Phe-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Ser(tBu)-OH, Fmoc-Thr(tBu)-OH, Fmoc-Trp(Boc)-OH, Fmoc-Tyr(tBu)-OH, o, Fmoc-Val-OH etc. suministrado de, por ejemplo, Anaspec, Bachem, Iris Biotech o Novabiochem. Si no se especifica nada más, se usa la forma L natural de los aminoácidos. El aminoácido N-terminal se protegió con Boc en el grupo alfa amino (por ejemplo, Boc-His(Boc)-OH o Boc-His(Trt)-OH para los péptidos con His en el N-terminal). En el caso de la unión modular de la porción de unión a albúmina mediante el uso de SPPS, se usaron los siguientes componentes estructurales adecuadamente protegidos tales como, pero sin limitarse a ácido Fmoc-8-amino-3,6-dioxaoctanoico, ácido Fmoc-tranexámico, Fmoc-Glu-OtBu, éster mono-tercbutílico del ácido octadecanodioico, éster mono-terc-butílico del ácido nonadecanodioico, éster mono-terc-butílico del ácido tetradecanodioico o éster terc-butílico del ácido 4-(9-carboxinoniloxi)benzoico. Todas las operaciones indicadas más abajo se realizaron a una escala de síntesis de 250 pmol.

1. Síntesis de la cadena principal peptídica protegida unida a resina

Método: SPPS_P

SPPS_P se realizó en un sintetizador de péptidos en fase sólida Prelude de Protein Technologies (Tucson, AZ 85714 Estados Unidos) a una escala de 250 pmol mediante el uso de un exceso de seis veces de Fmoc-aminoácidos (300 mM en NMP con HOAt 300 mM) con relación a la carga de resina, por ejemplo, baja carga de Fmoc-Gly-Wang (0,35 mmol/g). La desprotección de Fmoc se realizó mediante el uso de piperidina al 20 % en NMP. El acoplamiento se realizó mediante el uso de 3 : 3 : 3 : 4 de aminoácido/HOAt/DIC/colidina en NMP. Se realizaron lavados superiores con NMP y DCM (7 ml, 0,5 min, 2 x 2 cada uno) entre las etapas de desprotección y acoplamiento. Los tiempos de acoplamiento fueron generalmente de 60 minutos. Algunos aminoácidos que incluyen, pero no se limitan a, Fmoc-Arg(Pbf)-OH, Fmoc-Aib-OH o Boc-His(Trt)-OH estaban “acoplados doblemente”, lo que significa que después del primer acoplamiento (por ejemplo, 60 min), la resina se drena y se añaden más reactivos (aminoácido, HOAt, DIC y colidina) y la mezcla se deja reaccionar de nuevo (por ejemplo, 60 min).

Método: SPPS_L

SPPS_L se realizó en un sintetizador de péptidos Liberty basado en microondas de CEM Corp. (Matthews, NC 28106, Estados Unidos) a una escala de 250 pmol o 100 pmol mediante el uso de un exceso de seis veces de Fmocaminoácidos (300 mM en NMP con HOAt 300 mM) con relación a la carga de resina, por ejemplo, baja carga de Fmoc-Gly-Wang (0,35 mmol/g). La desprotección de Fmoc se realizó mediante el uso de piperidina al 5 % en NMP a hasta 75 °C durante 30 segundos en donde después se drenó la resina y se lavó con NMP y se repitió la desprotección de Fmoc esta vez durante 2 minutos a 75 °C. El acoplamiento se realizó mediante el uso de 1 : 1 : 1 de aminoácido/HOAt/DIC en NMP. Los tiempos y las temperaturas de acoplamiento fueron generalmente de 5 minutos a hasta 75 °C. Los tiempos de acoplamiento más largos se usaron para reacciones a mayor escala, por ejemplo, 10 min. Los aminoácidos histidina se acoplaron doblemente a 50 °C, o se acoplaron cuatro veces si el aminoácido anterior estaba impedido estéricamente (por ejemplo, Aib). Los aminoácidos arginina se acoplaron a RT durante 25 minutos y después se calentaron a 75 °C durante 5 min. Algunos aminoácidos, tales como, pero sin limitarse a Aib, estaban “acoplados doblemente”, lo que significa que después del primer acoplamiento (por ejemplo, 5 minutos a 75 °C), la resina se drena y se añaden más reactivos (aminoácidos, HOAt y DIC) y la mezcla se calienta de nuevo (por ejemplo, 5 min a 75 °C). Se realizaron lavados con NMP (5 x 10 ml) entre las etapas de desprotección y acoplamiento.

Método: SPPS_A

La resina peptidilo protegida se sintetizó de acuerdo con la estrategia Fmoc en un sintetizador de péptidos Applied Biosystems 433 en una escala de 250 pmol o 1000 pmol con un exceso de tres a cuatro veces de Fmoc-aminoácidos, mediante el uso de los protocolos de FastMoc UV suministrados por el fabricante que emplean acoplamientos mediados por HBTU (hexafluorofosfato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3 tetrametiluronio) o HATU (hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio) en NMP y monitorización por UV de la desprotección del grupo de protección Fmoc, en algunos casos se usaron acoplamientos dobles, lo que significa que después del primer acoplamiento, la resina se drena y se añaden más Fmoc-aminoácidos y reactivos. La resina de partida usada para la síntesis de los péptidoamidas fue resina Rink-Amida y resina Wang precargada (por ejemplo, Fmoc-Gly-Wang o Fmoc-Lys(Mtt)-wang de baja carga) o de clorotritilo para los péptidos con un carboxi C-terminal. Los derivados de aminoácidos protegidos usados fueron Fmoc-aminoácidos estándar (suministrados, por ejemplo, por Anaspec o Novabiochem) suministrados en cartuchos pesados previamente adecuados para el sintetizador ABI433A con la excepción de aminoácidos no naturales tales como Fmoc-Aib-OH (ácido Fmoc-aminoisobutírico). El aminoácido N-terminal se protegió con Boc en el grupo alfa amino (por ejemplo, se usó Boc-His(Boc)-OH o Boc-His(Trt)-OH para los péptidos con His en el N-terminal). El grupo épsilon amino de las lisinas en la secuencia se protegió con Mtt, Mmt, Dde, ivDde o Boc, en dependencia de la ruta para la unión de la porción de unión a albúmina y el separador. La síntesis de los péptidos puede mejorarse en algunos casos mediante el uso de dipéptidos protegidos en el enlace amida del dipéptido con un grupo que puede escindirse en condiciones ácidas, tales como, pero sin limitarse a, 2-Fmoc-oxi-4-metoxibencilo o 2,4,6-trimetoxibencilo. En los casos en que está presente una serina o una treonina en el péptido, pueden usarse dipéptidos de pseudoprolina (ver, por ejemplo, el catálogo de Novobiochem 2009/2010 o una versión más reciente, o W.R. Sampson (1999), J. Pep. Sci. 5, 403).

Método: SPPS_M

SPPS_M se refiere a la síntesis de la resina peptidilo protegida mediante el uso de química manual de Fmoc. La química de acoplamiento fue DIC/HOAt/colidina en n Mp a un exceso molar de 4-10 veces. Las condiciones de acoplamiento fueron 1-6 h a temperatura ambiente. La desprotección de Fmoc se realizó con piperidina al 20-25 % en NMP (3 x 20 ml, 10 min cada uno) seguido por lavados con NMP (4 x 20 ml).

2. Síntesis de cadenas laterales

Monoésteres de diácidos grasos

El reflujo durante la noche de los diácidos C8, C10, C12, C14, C16 y C18 con Boc-anhídrido DMAP f-butanol en tolueno proporciona predominantemente el monoéster de f-butilo. Después del tratamiento se obtiene una mezcla de monoácido, diácido y diéster. La purificación se realiza mediante lavado, filtración en sílice de tapón corto y cristalización.

Síntesis de intermediarios

Ver el Ejemplo 117.

3. Unión de las cadenas laterales a la cadena principal peptídica protegida unida a la resina

Cuando está presente una acilación en una cadena lateral de lisina, el grupo épsilon amino de la lisina a acilar se protegió con Mtt, Mmt, Dde, ivDde o Boc, en dependencia de la vía para la unión de la porción de prolongación y el conector. La desprotección de Dde o del ivDde se realizó con hidracina al 2 % en NMP (2 x 20 ml, 10 min cada uno) seguido por lavados con NMP (4 x 20 ml). La desprotección de Mtt o Mmt se realizó con TFA al 2 % y TIS de 2-3 % en DCM (5 x 20 ml, 10 min cada uno) seguido por lavados con DCM (2 x 20 ml), MeOH al 10 % y DIPEA al 5 % en DCM (2 x 20 ml) y NMP (4 x 20 ml), o mediante el tratamiento con hexafluoroisopropanol/DCM (75:25, 5 x 20 ml, 10 min cada uno) seguido por lavados como los anteriores. En algunos casos el grupo Mtt se eliminó mediante etapas automatizadas en el sintetizador de péptidos Liberty. La desprotección de Mtt se realizó con hexafluoroisopropanol o hexafluoroisopropanol/DCM (75:25) a temperatura ambiente durante 30 min seguido por el lavado con d Cm (7 ml x 5), seguido por lavados con NMP (7 ml x 5). La porción de prolongación y/o el conector pueden unirse al péptido ya sea mediante la acilación del péptido unido a la resina o mediante la acilación en solución del péptido no protegido.

En el caso de la unión de la porción de prolongación y/o el conector a la resina peptidilo protegida, la unión puede ser modular mediante el uso de SPPS y los componentes estructurales adecuadamente protegidos.

Método: SC_P

El grupo de protección de N-e-lisina se eliminó como se describió anteriormente y la modificación química de la lisina se realizó mediante una o más etapas automatizadas en el sintetizador de péptidos Prelude mediante el uso de componentes estructurales protegidos adecuadamente como se describió anteriormente. Los acoplamientos dobles se realizaron como se describe en la SPPS_P con 3 horas por acoplamiento.

Método: SC_L

El grupo de protección de N-e-lisina se eliminó como se describió anteriormente y la modificación química de la lisina se realizó mediante una o más etapas automatizadas en el sintetizador de péptidos Liberty mediante el uso de componentes estructurales protegidos adecuadamente como se describió anteriormente. Los acoplamientos dobles se realizaron como se describe en la SPPS_L.

Método: SC_A

El grupo de protección de N-e-lisina se eliminó como se describió anteriormente y la modificación química de la lisina se realizó mediante una o más etapas automatizadas en el sintetizador de péptidos ABI mediante el uso de componentes estructurales protegidos adecuadamente como se describió en SPPS_A.

Método: SC_M1

El grupo de protección de N-e-lisina se eliminó como se describió anteriormente. Se disolvió la porción de prolongación o conector activado (éster activo o anhídrido simétrico) tal como éster mono-(2,5-dioxo-pirrolidin-1-ílico) del ácido octadecanodioico (Ebashi y otros, documento EP511600, 4 equivalentes molares con relación al péptido unido a la resina) en NMP (25 ml), se añadió a la resina y se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se filtró y la resina se lavó exhaustivamente con NMP, DCM, 2-propanol, metanol y éter dietílico.

Método: SC_M2

El grupo de protección de N-e-lisina se eliminó como se describió anteriormente. La porción de prolongación se disolvió en NMP/DCM (1:1, 10 ml). Se añadió el reactivo de activación tal como HOBt (4 equivalentes molares con relación a la resina) y DIC (4 equivalentes molares con relación a la resina) y la solución se agitó durante 15 minutos. La solución se añadió a la resina y se añadió DIPEA (4 equivalentes molares con relación a la resina). La resina se agitó de 2 a 24 horas a temperatura ambiente. La resina se lavó con NMP (2 x 20 ml), NMP/DCM (1:1, 2 x 20 ml) y DCM (2 x 20 ml).

Método: SC_M3

Se disolvió la porción de prolongación o conector activado (éster activo o anhídrido simétrico) tal como éster mono-(2,5-dioxo-pirrolidin-1 -ílico) del ácido octadecanodioico (Ebashi y otros, documento EP511600) 1-1,5 equivalentes molares con relación al péptido en un solvente orgánico tal como acetonitrilo, THF, DMF, DMSO o en una mezcla de agua/solvente orgánico (1-2 ml) y se añadió a una solución del péptido en agua (10-20 ml) junto con 10 equivalentes molares de DIPEA. En el caso de grupos protectores en la porción de prolongación, tal como terc-butilo, la mezcla de reacción se liofilizó durante la noche y el péptido crudo aislado se desprotegió después. En el caso de los grupos de protección terc-butilo la desprotección se realizó al disolver el péptido en una mezcla de ácido trifluoroacético, agua y triisopropilsilano (90:5:5). Después de 30 min, la mezcla se evaporó al vacío y el péptido crudo se purificó mediante HPLC preparativa como se describe más adelante.

4. Escisión del péptido unido a la resina con o sin cadenas laterales unidas y purificación

Método: CP_M1

Después de la síntesis la resina se lavó con DCM y el péptido se escindió de la resina mediante un tratamiento de 2­ 3 horas con TFA/TIS/agua (95/2,5/2,5 o 92,5/5/2,5) seguido por precipitación con éter dietílico. El péptido se disolvió en un solvente adecuado (tal como, por ejemplo, ácido acético al 30 %) y se purificó mediante RP-HPLC estándar en una columna C18, de 5 pM, mediante el uso de acetonitrilo/agua/TFA. Las fracciones se analizaron mediante una combinación de los métodos de UPLC, MALDI y LCMS, y las fracciones apropiadas se agruparon y se liofilizaron. Método: CP_L1

Después de la síntesis la resina se lavó con DCM y el péptido se escindió de la resina mediante el uso de un sistema de escisión en microondas CEM Accent. (CEM Corp., Carolina del Norte). La escisión de la resina se realizó a 38 °C durante 30 minutos mediante el tratamiento con TFA/TIS/agua (95/2,5/2,5) seguido por precipitación con éter dietílico. El péptido se disolvió en un solvente adecuado (tal como, por ejemplo, ácido acético al 30 %) y se purificó mediante RP-HPLC estándar en una columna C18, de 5 j M, mediante el uso de acetonitrilo/agua/TFA. Las fracciones se analizaron mediante una combinación de métodos de UPLC, MALDI y LCMS y, las fracciones apropiadas se agruparon y se liofilizaron.

A2. Métodos generales para la detección y caracterización

1. Métodos de LC-MS

Método: LCMS_1

Se usó un espectrómetro de masas LC/MSD TOF de Agilent Technologies (G1969A) para identificar la masa de la muestra después de la elución de un sistema de HPLC Agilent serie 1200. La desconvolución de los espectros de proteínas se calculó con el programa informático de confirmación de proteínas de Agilent. Eluyentes: A: Ácido trifluoroacético al 0,1 % en agua; B: Ácido trifluoroacético al 0,1 % en acetonitrilo. Columna: Zorbax 5 u, 300SB-C3, 4,8x50 mm. Gradiente: 25 % - 95 % de B durante 15 min.

Método: LCMS_2

Se usó un espectrómetro de masas API 3000 de Perkin Elmer Sciex para identificar la masa de la muestra después de la elución de un sistema de HPLC de Perkin Elmer Serie 200. Eluyentes: A: Ácido trifluoroacético al 0,05 % en agua; B: Ácido trifluoroacético al 0,05 % en acetonitrilo. Columna: Waters Xterra MS C-18 X 3 mm id 5 jm . Gradiente: 5 % - 90 % de B durante 7,5 min a 1,5 ml/min.

Método: LCMS_3

Se usó un espectrómetro de masas Waters Micromass ZQ para identificar la masa de la muestra después de la elución de un sistema de HPLC Waters Alliance HT. Eluyentes: A: Ácido trifluoroacético al 0,1 % en agua; B: Ácido trifluoroacético al 0,1 % en acetonitrilo. Columna: Phenomenex, Jupiter C450 X 4,60 mm id 5 jm . Gradiente: 10 % -90 % de B durante 7,5 min a 1,0 ml/min.

Método: LCMS_4

LCMS_4 se realizó en una configuración que consistía en un sistema Waters Acquity de UPLC y un espectrómetro de masas LCT Premier XE de Micromass. Eluyentes: A: Ácido fórmico al 0,1 % en agua

B: Ácido fórmico al 0,1 % en acetonitrilo. El análisis se realizó a RT mediante la inyección de un volumen apropiado de la muestra (preferentemente, 2-10 j l ) en la columna que se eluyó con un gradiente de A y B. Las condiciones de UPLC, los ajustes del detector y los ajustes del espectrómetro de masas fueron: Columna: Waters Acquity UPLC BEH, C-18, 1,7 jm , 2,1 mm x 50 mm. Gradiente: Lineal de 5 % - 95 % de acetonitrilo durante 4,0 min (alternativamente, 8,0 min) a 0,4 ml/min. Detección: 214 nm (salida analógica de TUV (detector de UV ajustable)) modo de ionización de MS: API-ES

Barrido: 100-2000 amu (alternativamente, 500-2000 amu), avance 0,1 amu.

Método: LCMS_AP

Se usó un espectrómetro de masas Micromass Quatro micro API para identificar la masa de la muestra después de la elución de un sistema de HPLC compuesto por un módulo de gradiente binario Waters2525, un gestor de muestras Waters2767, un detector de matriz de fotodiodos Waters 2996 y un detector ELS Waters 2420. Eluyentes: A: Ácido trifluoroacético al 0,1 % en agua; B: Ácido trifluoroacético al 0,1 % en acetonitrilo. Columna: Phenomenex Synergi MAXRP, 4 um, 75x4,6 mm. Gradiente: 5 % - 95 % de B durante 7 min a 1,0 ml/min.

2. Métodos de UPLC

Método: 05_B5_1

El análisis de RP se realizó mediante el uso de un sistema UPLC Waters equipado con un detector de doble banda. Las detecciones UV a 214 nm y 254 nm se registraron mediante el uso de una columna ACQUITY UPLC BEH130, C18, 130Á, 1,7 um, 2,1 mm x 150 mm, a 40 °C. El sistema de UPLC se conectó a dos depósitos de eluyente que contenían: A: Na2SO4 0,2 M, H³PO⁴ 0,04 M, 10 % CH³CN (pH 3,5); B: 70 % de CH³CN, 30 % de H²O. Se usó el siguiente gradiente lineal: 60 % de A, 40 % de B a 30 % de A, 70 % de B durante 8 minutos a un régimen de flujo de 0,40 ml/min.

Método: 05 B7 1

El análisis de RP se realizó mediante el uso de un sistema UPLC Waters equipado con un detector de doble banda. Las detecciones UV a 214 nm y 254 nm se registraron mediante el uso de una columna ACQUITY UPLC BEH130, C18, 130Á, 1,7 um, 2,1 mm x 150 mm, a 40 °C. El sistema de UPLC se conectó a dos depósitos de eluyente que contenían: A: Na2SO4 0,2 M, H³PO⁴ 0,04 M, 10 % CH³CN (pH 3,5); B: 70 % de CH³CN, 30 % de H²O. Se usó el siguiente gradiente lineal: 80 % de A, 20 % de B a 40 % de A, 60 % de B durante 8 minutos a un régimen de flujo de 0,40 ml/min.

Método: 05_B9_1

El análisis de RP se realizó mediante el uso de un sistema UPLC Waters equipado con un detector de doble banda. Las detecciones UV a 214 nm y 254 nm se registraron mediante el uso de una columna ACQUITY UPLC BEH130, C18, 130Á, 1,7 um, 2,1 mm x 150 mm, a 40 °C. El sistema de UPLC se conectó a dos depósitos de eluyente que contenían: A: Na2SO4 0,2 M, H³PO⁴ 0,04 M, 10 % CH³CN (pH 3,5); B: 70 % de CH³CN, 30 % de H²O. Se usó el siguiente gradiente lineal: 70 % de A, 30 % de B a 20 % de A, 80 % de B durante 8 minutos a un régimen de flujo de 0,40 ml/min.

Método: 04_A2_1

El análisis de RP se realizó mediante el uso de un sistema UPLC Waters equipado con un detector de doble banda. Las detecciones UV a 214 nm y 254 nm se registraron mediante el uso de una columna ACQUITY UPLC BEH130, C18, 130Á, 1,7 um, 2,1 mm x 150 mm, a 40 °C. El sistema de UPLC se conectó a dos depósitos de eluyente que contenían: A: 90 % de H²O, 10 % de CH³CN, bicarbonato de amonio 0,25 M; B: 70 % de CH³CN, 30 % de H²O. Se usó el siguiente gradiente lineal: 90 % de A, 10 % de B a 60 % de A, 40 % de B durante 16 minutos a un régimen de flujo de 0,40 ml/min.

Método: 04_A3_1

El análisis de RP se realizó mediante el uso de un sistema UPLC Waters equipado con un detector de doble banda. Las detecciones UV a 214 nm y 254 nm se registraron mediante el uso de una columna ACQUITY UPLC BEH130, C18, 130Á, 1,7 um, 2,1 mm x 150 mm, a 40 °C. El sistema de UPLC se conectó a dos depósitos de eluyente que contenían: A: 90 % de H²O, 10 % de CH³CN, bicarbonato de amonio 0,25 M; B: 70 % de CH³CN, 30 % de H²O. Se usó el siguiente gradiente lineal: 75 % de A, 25 % de B a 45 % de A, 55 % de B durante 16 minutos a un régimen de flujo de 0,40 ml/min.

Método: 04_A4_1

El análisis de RP se realizó mediante el uso de un sistema UPLC Waters equipado con un detector de doble banda. Las detecciones UV a 214 nm y 254 nm se registraron mediante el uso de una columna ACQUITY UPLC BEH130, C18, 130Á, 1,7 um, 2,1 mm x 150 mm, a 40 °C. El sistema de UPLC se conectó a dos depósitos de eluyente que contenían: A: 90 % de H²O, 10 % de CH³CN, bicarbonato de amonio 0,25 M; B: 70 % de CH³CN, 30 % de H²O. Se usó el siguiente gradiente lineal: 65 % de A, 35 % de B a 25 % de A, 65 % de B durante 16 minutos a un régimen de flujo de 0,40 ml/min.

Método: 04_A6_1

El análisis de RP se realizó mediante el uso de un sistema UPLC Waters equipado con un detector de doble banda. Las detecciones UV a 214 nm y 254 nm se registraron mediante el uso de una columna ACQUITY UPLC BEH130, C18, 130Á, 1,7 um, 2,1 mm x 150 mm, a 40 °C. El sistema de UPLC se conectó a dos depósitos de eluyente que contenían: A: TRIS 10 mM, sulfato de amonio 15 mM, 80 % de H²O, 20 % de CH³CN, pH 7,3; B: 80 % de CH³CN, 20 % de H²O. Se usó el siguiente gradiente lineal: 95 % de A, 5 % de B a 10 % de A, 90 % de B durante 16 minutos a un régimen de flujo de 0,35 ml/min.

Método: 04_A7_1

El análisis de RP se realizó mediante el uso de un sistema UPLC Waters equipado con un detector de doble banda. Las detecciones UV a 214 nm y 254 nm se registraron mediante el uso de una columna ACQUITY UPLC BEH130, C18, 130Á, 1,7 um, 2,1 mm x 150 mm, a 40 °C. El sistema de UPLC se conectó a dos depósitos de eluyente que contenían: A: TRIS 10 mM, sulfato de amonio 15 mM, 80 % de H²O, 20 % de CH³CN, pH 7,3; B: 80 % de CH³CN, 20 % de H²O. Se usó el siguiente gradiente lineal: 95 % de A, 5 % de B a 40 % de A, 60 % de B durante 16 minutos a un régimen de flujo de 0,40 ml/min.

Método:B2_1

El análisis de RP se realizó mediante el uso de un sistema UPLC Waters equipado con un detector de doble banda. Las detecciones UV a 214 nm y 254 nm se registraron mediante el uso de una columna ACQUITY UPLC BEH130, C18, 130Á, 1,7 um, 2,1 mm x 150 mm, a 40 °C. El sistema de UPLC se conectó a dos depósitos de eluyente que contenían: A: 99,95 % de H²O, 0,05 % de TFA; B: 99,95 % de CH³CN, 0,05 % de TFA. Se usó el siguiente gradiente lineal: 95 % de A, 5 % de B a 40 % de A, 60 % de B durante 16 minutos a un régimen de flujo de 0,40 ml/min.

Método: B4_1

El análisis de RP se realizó mediante el uso de un sistema UPLC Waters equipado con un detector de doble banda. Las detecciones UV a 214 nm y 254 nm se registraron mediante el uso de una columna ACQUITY UPLC BEH130, C18, 130Á, 1,7 um, 2,1 mm x 150 mm, a 40 °C. El sistema de UPLC se conectó a dos depósitos de eluyente que contenían: A: 99,95 % de H²O, 0,05 % de TFA; B: 99,95 % de CH³CN, 0,05 % de TFA. Se usó el siguiente gradiente lineal: 95 % de A, 5 % de B a 95 % de A, 5 % de B durante 16 minutos a un régimen de flujo de 0,40 ml/min.

Método: 05_B10_1

El análisis RP se llevó a cabo mediante el uso un sistema Waters UPLC equipado con un detector de doble banda. Las detecciones UV a 214 nm y 254 nm se registraron mediante el uso de una columna ACQUITY UPLC BEH130, C18, 130Á, 1,7 um, 2,1 mm x 150 mm, a 40 °C. El sistema de UPLC se conectó a dos depósitos de eluyente que contenían: A: Na2SO4 0,2 M, H³PO⁴ 0,04 M, 10 % CH³CN (pH 3,5); B: 70 % de CH³CN, 30 % de H²O. Se usó el siguiente gradiente lineal: 40 % de A, 60 % de B a 20 % de A, 80 % de B durante 8 minutos a un régimen de flujo de 0,40 ml/min.

Método: 10_B14_1

El análisis RP se llevó a cabo mediante el uso un sistema Waters UPLC equipado con un detector de doble banda. Las detecciones UV a 214nm y 254nm se registraron mediante el uso de una columna ACQUITY UPLC BEH ShieldRP18, 1,7um, 2,1 mm x 150 mm, 50oC. El sistema de UPLC se conectó a dos depósitos de eluyente que contenían: A: 99,95 % de H²O, 0,05 % de TFA; B: 99,95 % de CH³CN, 0,05 % de TFA. Se usó el siguiente gradiente lineal: 70 % de A, 30 % de B a 40 % de A, 60 % de B durante 12 minutos a un régimen de flujo de 0,40 ml/min.

Método: 05_B8_1

El análisis de RP se realizó mediante el uso de un sistema UPLC Waters equipado con un detector de doble banda. Las detecciones UV a 214 nm y 254 nm se registraron mediante el uso de una columna ACQUITY UPLC BEH130, C18, 130Á, 1,7 um, 2,1 mm x 150 mm, a 40 °C. El sistema de UPLC se conectó a dos depósitos de eluyente que contenían: A: Na2SO4 0,2 M, H³PO⁴ 0,04 M, 10 % CH³CN (pH 3,5); B: 70 % de CH³CN, 30 % de H²O. Se usó el siguiente gradiente lineal: 50 % de A, 50 % de B a 20 % de A, 80 % de B durante 8 minutos a un régimen de flujo de 0,40 ml/min.

Método: 08_B29_1

El análisis de RP se realizó mediante el uso de un sistema UPLC Waters equipado con un detector de doble banda. Las detecciones UV a 215 nm y 254 nm se recolectaron mediante el uso de una columna kinetex 1,7u C18, 100A 2,1 x 150 mm, 60 °C. El sistema de UPLC se conectó a dos depósitos de eluyente que contenían: A: 90 % de agua y 10 % de CH3CN con 0,045 M (NH4)2HPO4, pH 3,6, B: 20 % de isopropanol, 20 % de agua y 60 % de CH3CN. Se usó el siguiente gradiente por etapas: 35 % de B y 65 % de A durante 2 minutos, después 35 % de B, 65 % de A a 65 % de B, 35 % de A durante 15 minutos, después 65 % de B, 35 % de A a 80 % de B, 20 % de A durante 3 minutos a un régimen de flujo de 0,5 ml/min.

Método: 10_B29_1

El análisis de RP se realizó mediante el uso de un sistema UPLC Waters equipado con un detector de doble banda. Las detecciones UV a 215 nm y 254 nm se recolectaron mediante el uso de una columna kinetex 1,7u C18, 100A 2,1 x 150 mm, 60 °C. El sistema de UPLC se conectó a dos depósitos de eluyente que contenían: A: 90 % de agua y 10 % de CH3CN con 0,045 M (NH4)2HPO4, pH 3,6, B: 20 % de isopropanol, 20 % de agua y 60 % de CH3CN. Se usó el siguiente gradiente por etapas: 35 % de B y 65 % de A durante 2 minutos, después 35 % de B, 65 % de A a 65 % de B, 35 % de A durante 15 minutos, después 65 % de B, 35 % de A a 80 % de B, 20 % de A durante 3 minutos a un régimen de flujo de 0,5 ml/min.

Método: 10_B31_1

El análisis de RP se realizó mediante el uso de un sistema UPLC Waters equipado con un detector de doble banda. Las detecciones UV a 215 nm y 254 nm se recolectaron mediante el uso de una columna kinetex 1,7u C18, 100A 2,1 x 150 mm, 60 °C. El sistema de UPLC se conectó a dos depósitos de eluyente que contenían: A: 90 % de agua y 10 % de MeCN con 0,045 M (NH4)2HPO4, pH 3,6, B: 20 % de isopropanol, 20 % de agua y 60 % de CH3CN. Se usó el siguiente gradiente por etapas: 25 % de B y 75 % de A durante 2 minutos, después 25 % de B, 75 % de A a 55 % de B, 45 % de A durante 15 minutos, después 55 % de B, 45 % de A a 80 % de B, 20 % de A durante 3 minutos a un régimen de flujo de 0,5 ml/min.

Método: AP_B4_1

El análisis de RP se realizó mediante el uso de un sistema UPLC Waters equipado con un detector de doble banda. Las detecciones UV a 214 nm y 254 nm se recolectaron mediante el uso de una columna ACQUITY UPLC BEH130, C18, 130 A, 1,7 um, 2,1 mm x 150 mm, 30 °C. El sistema de UPLC se conectó a dos depósitos de eluyente que contenían: A: 99,95 % H²O, 0,05 % TFA; B: 99,95 % CH³CN, 0,05 % TFA. Se usó el siguiente gradiente lineal: 95 % de A, 5 % de B a 5 % de A, 95 % de B durante 16 minutos a un régimen de flujo de 0,30 ml/min.

Método: 04_A9_1

El análisis de RP se realizó mediante el uso de un sistema UPLC Waters equipado con un detector de doble banda. Las detecciones UV a 214 nm y 254 nm se recolectaron usando una columna ACQUITY UPLC BEH Shield RP18, C18, 1,7 um, 2,1 mm x 150 mm, 60 oC. El sistema de UPLC se conectó a dos depósitos de eluyente que contenían: A: Na2SO4200 mM Na2HPO420 mM NaH2PO420 mM en 90 % de H²O^{/ 1 0} % de CH³CN, pH 7,2; B: 70 % de CH³CN, 30 % de H²O. Se usó el siguiente gradiente por etapas: 90 % de A, 10 % de B a 80 % de A, 20 % de B durante 3 minutos, 80 % de A, 20 % de B a 50 % de A, 50 % de B durante 17 minutos a un régimen de flujo de 0,40 ml/min. Método: B2_1

El análisis de RP se realizó mediante el uso de un sistema de UPLC Waters equipado con un detector de doble banda. Las detecciones UV a 214 nm y 254 nm se registraron mediante el uso de una columna ACQUITY UPLC BEH130, C18, 130A, 1,7 um, 2,1 mm x 150 mm, a 40 °C. El sistema de UPLC se conectó a dos depósitos de eluyente que contenían: A: 99,95 % de H²O, 0,05 % de TFA; B: 99,95 % de CH³CN, 0,05 % de TFA. Se usó el siguiente gradiente lineal: 95 % de A, 5 % de B a 40 % de A, 60 % de B durante 16 minutos a un régimen de flujo de 0,40 ml/min.

3. Método de MALDI-MS

Método: MALDI_MS

Los pesos moleculares se determinaron mediante el uso de la espectroscopia de masas de tiempo de vuelo de ionización y desorción con láser asistida por matriz (MALDI-MS) y se registraron en un Microflex o Autoflex (Bruker). Se usó una matriz de ácido alfa-ciano-4-hidroxi cinámico.

B. Compuestos de ejemplo específicos

Ejemplo 1

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil],Ns37-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Arg26,Arg34,Lys37]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 20:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

Método de LCMS: LCMS_4: Rt = 2,15 min m/z: 5029,7; M/3: 1677

M/4: 1258; M/5: 1006

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,45 min

Método de UPLC: 04_A3_1: Rt = 8,55 min

Ejemplo 2

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoNamino]butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]aminojetoxi]etoxi]acetN]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 21:

H

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,29 min, m/z: 4902,3

Método de UPLC: B4_1 Rt = 8,83 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 4,77 min

Ejemplo 3

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 22:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,18 min m/z: 4900,5; M/3: 1634; M/4: 1226;

M/5: 980

UPLC: Método: B4_1: Rt = 7,90 min

UPLC: Método: 04_A3_1: Rt = 5,68 min

Ejemplo 4

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns37-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Imp7,Lys18,Glu22,Arg26,Arg34,Lys37]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 23:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,53 min m/z: 5000,6; M/5: 1001; M/4: 1250; M/3: 1667

UPLC: Método: B4_1: Rt = 8,56 min

UPLC: Método: 04_A3_1, Rt = 8,19 min

Ejemplo 5

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetM]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 24:

Método de preparación: SPPS_L: SC_L; CP_M1

La masa molecular teórica de 4459,1 Da se confirmó mediante el Método: MALDI_MS: m/z: 4457

Método de UPLC: B4_1: Rt = 9,1 min

Método de UPLC: 04_A3_1: Rt = 7,3 min

Ejemplo 6

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Glu30,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 25:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 3,14 min, m/z: 4516,0

Método de UPLC: B2_1: Rt = 14,25 min

Método de UPLC: 04_A3_1: Rt = 6,20 min

Ejemplo 7

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,His26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 26:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,93 min, m/z: 4439,0

Método de UPLC: B2_1: Rt = 13,91 min

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 6,67 min

Ejemplo 8

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 27:

Método de preparación: SPPS_L: SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,87 min m/z: 4401,8; M/3 :1468,07; M/4: 1101,3

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,4 min

Método de UPLC: 04_A3_1: Rt = 5,3 min

Ejemplo 9

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Aib8,Lys18,Glu22,Arg26,Lys27,His31,Arg34]-GLP-1 -(7-35)-péptido

Quím. 28:

Método de preparación: SPPS_L: SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,66 min m/z: 4594,3; M/3:1532,1; M/4: 1149,33; M/5: 914,9

Método de UPLC: B4_1: Rt = 7,9 min

Método de UPLC: 04_A3_1: Rt = 5,5 min

Ejemplo 10

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 29:

Método de preparación: SPPS_L; SPPS_M; SC_L

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,60 min m/3:1481; m/4:1111; m/5:889

Método de UPLC: B2_1: Rt = 13,67 min

Método de UPLC: 04_A2_1: Rt = 14,96 min

Ejemplo 11

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoNamino)butanoN]ammo]etoxi]etoxi]acetN]ammo]etoxi]etoxi]acetN]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 30:

Método de preparación: SPPS_L; SPPS_M; SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,60 min m/z: m/3:1463; m/4:1097; m/5:877

Método de UPLC: B2_1: Rt = 12,64 min

Método de UPLC: 04_A2_1: Rt = 13,65 min

Ejemplo 12

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Imp7,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 31:

Método de preparación: SPPS_L; SPPS_M; SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,65 min m/z: m/3:1476; m/4:1107 m/5:886

Método de UPLC: B2_1: Rt = 14,11 min

Método de UPLC: 04_A3_1: Rt = 7,06 min

Ejemplo 13

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoNammo)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Imp7,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 32:

Método de preparación: SPPS_L; SPPS_M; SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,53 min m/3 = 1458; m/4 = 1093; m/5 = 874

Método de UPLC: B2_1: Rt = 13,01 min

Ejemplo 14

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Ser8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26, Lys31,Gly34]-GLP-1 -(7-34)-péptido

Q uím . 33:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt =2,70 min m/z: m/3=1487 m/4=1115 m/5=892

Método de UPLC: B2_1: Rt = 13,92 min

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 6,88 min

Ejemplo 15

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Lys18,Glu22,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 34:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt =2,63 min: m/3=1472; m/4=1104; m/5=883

Método de UPLC: B2_1: Rt = 13,39 min

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 5,95 min

Ejemplo 16

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetM]-[Aib8,Lys18,Glu22,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1 -(7-34)-péptido

Quím. 35:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt =2,67 min m/z: m/3=1477; m/4=1107; m/5=886

Método de UPLC: B2_1: Rt = 13,42 min

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 6,10 min

Ejemplo 17

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Arg23,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 36:

Método de preparación:SPPS_L:SC_L;CP_M1

LCMS: Método:LCMS__2: Rt = 4,32 min m/z: m/3=1496

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,72 min

Método de UPLC: 04_A3_1: Rt = 7,96 min

Ejemplo 18

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,His27,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím 37:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L;CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,73 min; m/z: M/3 : 1489,0; M/4 : 1116,8

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,69 min

Método de UPLC: 04_A3_1: Rt = 7,95 min

E je m p lo 19

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8 Lys18Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 38:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,91 min, m/z: m/3=1520,0 m/4=1140,3 m/5=912,7

Método de UPLC: B2_1: Rt = 13,85 min

Método de UPLC: 04_A3_1: Rt = 7,68 min

Ejemplo 20

Ns18-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 39:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,93 min; m/3:1389; m/4:1042; m/5:833

Método de UPLC: B2_1: Rt = 14,07 min

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 8,39 min

Ejemplo 21

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4 carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetM]-[Imp7,Aib8, Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1 -(7-34)-péptido

Quím. 40:

Método de preparación: SPPS_L: SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt =2,80 min; m/3:1481; m/4:1111; m/5:888

Método de UPLC: B2_1: Rt =14,32 min

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 8,38 min

Ejemplo 22

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoNammo)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Imp7,Aib8, Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1 -(7-34)-péptido

Quím. 41:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,70 min; m/3=1462 m/4=1097 m/5=877

Método de UPLC: B2_1: Rt = 6,87 min

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 13,30 min

E je m p lo 23

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(17-carboxiheptadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(17-carboxiheptadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 42:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; SC_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt =2,78 min m/3:1638; m/4:1228; m/5:983

Método de UPLC: B4_1: Rt = 10,40 min

Método de UPLC: 04_A4_1: Rt = 5,66 min

Ejemplo 24

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoNammo)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys27,His31,Gly34]-GLP-1 -(7-34)-péptido

Quím. 43:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,65 min, m/z: m/3=1470,7 m/4=1103,0 m/5=882,9

Método de UPLC: B2_1: Rt = 12,27 min

Método de UPLC: 04_A3_1: Rt = 6,50 min

Ejemplo 25

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoNamino)butanoN]aiTiino]etoxi]etoxi]acetN]aiTiino]etoxi]etoxi]acetN]-[Ser8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26, Lys31,Gly34]-GLP-1 -(7-34)-péptido

Quím. 44:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,69 min, m/z: 1/3=1468,7 1/4=1101,8

Método de UPLC: B2_1 Rt = 12,80 min

Método de UPLC: 04_A3_1: Rt = 5,97 min

Ejemplo 26

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], ], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys27,His31,Gly34]-GLP-1 -(7-34)-péptido

Quím. 45:

Método de preparación: SPPS_L: SC_L; CP_M1

La masa molecular teórica de 4467,13 Da se confirmó mediante el Método: MALDI_MS: m/z: 4466,3 Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,52 min

Método de UPLC: 04_A3_1: Rt = 7,06 min

Ejemplo 27

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,His26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 46:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

La masa molecular teórica de 4383,9 Da se confirmó por MALDI-MS (alfa-ciano); m/z: 4382,6

Método de UPLC: B2_1: Rt = 12,8 min

E je m p lo 28

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoNamino)etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetNHLys18,Glu22,Arg26,Lys27His31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 47:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_2: Rt = 4,22 min m/z: 4166,8; M/3: 1390; M/4: 1043

UPLC: Método: B4_1: Rt = 8,81 min

UPLC: Método: 05_B8_1: Rt = 4,64 min

UPLC: Método: 04_A3_1: Rt = 8,52 min

Ejemplo 29

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns27-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitndecanoNamino)etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]butanoil]-[Lys18,Glu22,Arg26,Lys27,His31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 48:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_2: Rt =4,13 min m/z: 4425,0; M/3: 1476; M/4: 1108:

UPLC: Método: B4_1: Rt = 8,43 min

UPLC: Método: 05_B8_1: Rt = 4,20 min

Ejemplo 30

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Arg26,Lys27,His31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 49:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

LCMS: método LCMS_4: Rt = 1,96 min m/z: 4525,1; M/3: 1509; M/4: 1132

UPLC: Método: 05_B5_1: Rt = 5,29 min

UPLC: Método: B4_1: Rt = 8,18 min

Ejemplo 31

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Imp7,Lys18,Glu22,Arg26,Lys27,His31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 50:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,17 min m/z: 4151,8; M/3: 1385; M/4: 1039

UPLC: Método: 05_B8_1: R t=4,45 min

UPLC: Método: B4_1: Rt = 8,88 min

UPLC: Método: 04_A3_1: Rt = 8,96 min

Ejemplo 32

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns27-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitndecanoNamino)etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]butanoil]-[imp7,Lys18,Glu22,Arg26,Lys27,His31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 51:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,12 min m/z: 4410,0; M/3: 1470; M/4: 1103

UPLC: Método: 05_B5_1: Rt = 6,57 min

UPLC: Método: 05_B8_1: Rt = 3,81 min

UPLC: Método: B4_1: Rt = 8,59 min

UPLC: Método: 04_A3_1: Rt = 6,60 min

E je m p lo 33

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Imp7,Lys18,Glu22,Arg26,Lys27,His31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 52:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,04 min m/z: 4510,1; M/3: 1504; M/4: 1128

UPLC: Método: 05_B5_1: Rt = 5,79 min

UPLC: Método: B4_1: Rt = 8,36 min

UPLC: Método: 04_A3_1: Rt = 5,57 min

Ejemplo 34

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Gln34]-GLP-1 -(7-37)-péptido

Quím. 53:

Método de preparación: SPPS_L: SC_L; CP_M1

La masa molecular teórica de 4816,4 Da se confirmó por MALDI_MS: m/z: 4819,5

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,85 min

Método de UPLC: 05_B8_1: Rt = 3,42 min

Ejemplo 35

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,His26,Lys27,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 54:

Método de preparación: SPPS_L: SC_L; CP_M1

La masa molecular teórica de 4896,5 Da se confirmó por MALDI_MS: m/z: 4896

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,65 min

Método de UPLC: 05_B8_1: Rt = 2,98 min

E je m p lo 36

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns31-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoNamino)etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]butanoN]-[Aib8 Lys18Glu22Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 55:

Método de preparación: SPPS_L: SC_L; CP_M1

La masa molecular teórica de 4459,1 Da se confirmó por MALDI_MS: m/z: 4458,8

Método de UPLC: B4_1: Rt = 9,28 min

Método de UPLC: 05_B8_1: Rt = 5,6 min

Ejemplo 37

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31]-GLP-1-(7-33)-péptido amida

Quím. 56:

Método de preparación: SPPS_L: SC_L; CP_M1

La masa molecular teórica de 4401,1 Da se confirmó por MALDI_MS: m/z: 4401,3

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,65 min

Método de UPLC: 05_B8_1: Rt = 4,47 min

E je m p lo 38

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 57:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,23 min, m/z: 4888,5

Método de UPLC: B2_1: Rt = 13,59 min

Método de UPLC: 04_A7_1: Rt = 5,03 min

Ejemplo 39

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 58:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L

LCMS: Método: LCMS_4: Rt =2,03 min m/z:4744,8; m/3:1582; m/4:1187; m/5:950

Método de UPLC: B2_1: Rt = 12,80 min

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 5,64 min

Ejemplo 40

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1 -(7-37)-péptido

Quím. 59:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,03 min; m/3:1577; m/4:1183; m/5:946 (1A)

Método de UPLC: B2_1: Rt = 12,76 min

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 5,54

Ejemplo 41

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys27,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 60:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,51 min, m/z: 4957,6

Método de UPLC: B2_1: Rt = 13,57 min

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 6,50 min

Ejemplo 42

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys27,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 61:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,31 min, m/z: 4942,3

Método de UPLC: B2_1: Rt = 13,53 min

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 6,34 min

Ejemplo 43

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 62:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L

LCMS: Método: LCMS_4: Rt =1,92 min m/z: 4815; m/3:1605; m/4:1204; m/5:963

Método de UPLC: B2_1: Rt = 12,32 min

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 5,28 min

Ejemplo 44

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 63:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L

LCMS: Método:LCMS_4: Rt = 2,03 min; m/3:1595; m/4:1197; m/6:957

Método de UPLC: B2_1: Rt = 12,99 min

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 5,48 min

Ejemplo 45

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 64:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,03 min; m/3=1572; m/4=1179; m/5=943;

Método de UPLC: B2_1: Rt = 13,19 min

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 5,00 min

Ejemplo 46

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys27,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 65:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,05 min; m/3:1624; m/4:1218; m/5:975;

Método de UPLC: B2_1: Rt = 13,08 min

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 6,32 min

Ejemplo 47

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4 carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetM]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys27,His31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 66:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 1,87 min; m/3:1608; m/4:1206; m/5:965; m/6:804

Método de UPLC: B2_1: Rt = 11,79 min

Método de UPLC: 05_B9_1: Rt = 7,23 min

Ejemplo 48

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys27,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 67:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,13 min; m/3:1615; m/4:1211; m/5:969

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 6,59 min

Método de UPLC: B2_1: Rt = 13,55 min

E je m p lo 49

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns27-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]-[Lys18,Glu22,Arg26,Lys27His31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 68:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,12 min m/z: 4525,1; M/3: 1509; M/4: 1132

UPLC: Método: 05_B5_1: Rt = 5,54 min

UPLC: Método: B4_1: Rt = 8,50 min

UPLC: Método: 04_A7_1: Rt = 7,02 min

UPLC: Método: 04_A3_1: Rt = 7,83 min

Ejemplo 50

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns30-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys30,Gly34]-GLP-1 -(7-34)-péptido

Quím. 69:

Método de preparación: SPPS_L: SC_L; CP_M1

La masa molecular teórica de 4560,2 Da se confirmó por MALDI_MS: m/z: 4559

Método de UPLC: B4_1: Rt = 9,89 min

Ejemplo 51

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns30-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Aib8 Lys18Glu22,Arg26,Lys30,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 70:

Método de preparación: SPPS_L: SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,05 min m/z: 4916,5; M/3 :1639; M/4: 1229; M/5: 983

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,38 min

Ejemplo 52

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns30-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys30,His31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 71:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método:LCMS_4: Rt = 2,27 min, m/z: 4510,9

Método de UPLC: B2_1: Rt = 13,51 min

Método de UPLC: 05_B9_1: Rt = 7,42 min

Ejemplo 53

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns30-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Leu27,Lys30,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 72:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,72 min, m/z: 4544,0

Método de UPLC: B4_1: Rt = 10,34 min

Método de UPLC: 05_B9_1: Rt = 10,24 min

Ejemplo 54

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1 -(7-37)-péptido

Quím. 73:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,29 min, m/z: 4788,1

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,98 min

Método de UPLC: 05_B9_1: Rt = 7,94 min

Ejemplo 55

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns31-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitndecanoNamino)etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]butanoil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 74:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L

LCMS: Método: LCMS_4: Rt =2,01 min m/z: m/3:1605; m/4:1204; m/5:963

Método de UPLC: B2_1: Rt = 12,82 min

Método de UPLC: 05_B7_1: Rt = 9,18 min

Método de UPLC: 05_B9_1: Rt = 7,16 min

E je m p lo 56

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns31-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitndecanoNamino)etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]ammo]butanoM]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 75:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L

LCMS: Método: LCMS_4: Rt =1,86 min m/z:4785,6; m/3:1596; m/4:1197; m/5:958

Método de UPLC: B2_1: Rt = 13,22 min

Método de UPLC: 04_A7_1: Rt = 7,05 min

Ejemplo 57

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Lys18,Glu22,Glu23,Val25,Arg26,Lys27,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 76:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,06 min m/3:1624; m/4:1218; m/5:974

Método de UPLC: B2_1: Rt = 13,12 min

E je m p lo 58

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Glu23,Val25,Arg26,Lys27,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 77:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L

LCMS: Método: LCMS_4: Rt =1,86 min m/3:1614; m/4:1211; m/5:969

Método de UPLC: B2_1: Rt = 13,60 min

Ejemplo 59

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns27-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]butanoN]-[Lys18,Glu22,Arg26,Lys27,His31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 78:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

LCMS: método LCMS_4: Rt = 2,10 min m/z: 4393,0; M/3: 1465; M/4: 1099

UPLC: Método: B4_1: Rt = 8,25 min

UPLC: Método: 05_B5_1: Rt = 4,28 min

UPLC: Método: 04_A7_1: Rt = 5,03 min

E je m p lo 60

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]airiino]etoxi]etoxi]acetN]aiTiino]etoxi]etoxi]acetN]-[Lys18,Glu22,His26,Lys27,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 79:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L

LCMS: Método: LCMS_4: Rt =2,00 min; m/3:1608; m/4:1206; m/5:965

Método de UPLC B2_1: Rt = 12,62 min

Método de UPLC 05_B5_1: Rt = 4,61 min

Ejemplo 61

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,His26,Lys27,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 80:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L

LCMS: Método: LCMS_4: Rt =2,05 min; m/3:1598; m/4:1199; m/5:960

Método de UPLC B2_1: Rt = 12,98 min

E je m p lo 62

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Lys18,Glu22,His26,Lys27,His31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 81:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L

LCMS: Método: LCMS_4: Rt =2,11 min m/3:1592; m/4:1194; m/5:956

Método de UPLC B2_1: Rt = 11,35 min

Ejemplo 63

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns34-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Leu27]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 82:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,67 min, m/z: 4572,0

Método de UPLC: B4_1: Rt = 10,23 min

Ejemplo 64

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[9-(4-carboxifenoxi)nonanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4 carboxi-4-[9-(4-carboxifenoxi)nonanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18Glu22Arg26,Lys27,His31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 83:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,01 min m/z: 4497,0; M/3: 1500; M/4: 1125

UPLC: Método: B4_1: Rt = 8,10 min

UPLC: Método: 05_B5_1: Rt = 4,37 min

UPLC: Método: 04_A7_1: Rt = 4,83 min

Ejemplo 65

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns26-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitndecanoNamino)etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]butanoMHAib8 Lys18Glu22Gln34]-GLP-1 -(7-37)-péptido

Quím. 84:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L;CP_M1

LCMS: Método LCMS_4: Rt = 2,40 min m/z:4802; M/3=1601; M/4=1201

Método de UPLC: B4_1: Rt = 9,11 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 5,76 min

E je m p lo 66

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns34-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoNammo)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,His31]-GLP-1-(7-34)-péptido

Quím. 85

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,06 min, m/z: 4469,3

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,07 min

Método de UPLC: 05_B9_1: Rt = 6,40 min

Ejemplo 67

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,His26,Lys27,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 86:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,13 min, m/z: 4823,8

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,41 min

E je m p lo 68

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[4-(4-iodofenil)butanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[4-(4-iodofenil)butanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Val26,Lys27,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 87:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,22 min m/z:: m/3 1597; m/4 1198; m/5959

Método de UPLC B4_1: Rt = 8,96

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 6,05

Ejemplo 69

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]et oxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]et oxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 88:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,22 min, m/z: 5480,9

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,64 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 4,22 min

E je m p lo 70

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]airiino]etoxi]etoxi]acetN]aiTiino]etoxi]etoxi]acetN]-[Lys18,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1 -(7-37)-péptido

Quím. 89:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,12 min, m/z: 4714,3

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,03 min

Método de UPLC: 04_A7_1: Rt = 6,61 min

Ejemplo 71

N818-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 90:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,29 min, m/z: 5224,9

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,01 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 5,48 min

Ejemplo 72

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,His26,Lys31,Arg34]-GLP-1 -(7-37)-péptido

Quím. 91:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 1,96 min, m/z: 4693,9

Método de UPLC: B4_1: Rt = 7,88 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 4,90 min

Ejemplo 73

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8 Lys18Glu22Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 92:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,03 min m/z: 4800,48 m/3=1600 m/4=1200 m/5=960

Método de UPLC: B2_1: Rt = 12,785 min

Ejemplo 74

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetM]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 93:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L

LCMS: Método: LCMS_4: Rt =1,97 min; m/3:1609; m/4:1207; m/5:965

Método de UPLC: B2_1: Rt = 12,45 min

Método de UPLC: 04_A7_1: Rt = 6,68 min

Ejemplo 75

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 94:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L

LCMS: Método: LCMS_4: Rt =1,95 min; m/3:1638; m/4:1228; m/5:983

Método de UPLC: B2_1: Rt = 12,45 min

Método de UPLC: 04_A7_1: Rt = 7,3 min

Ejemplo 76

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 95:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,07 min; m/z=4928,0; m/3=1643; m/4=1232; m/5=986

Método de UPLC: B2_1: Rt = 12,45 min

E je m p lo 77

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Lys18,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 96:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,10 min, m/z: 4742,5

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,18 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 5,57 min

Ejemplo 78

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Lys18,Glu22,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 97:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 1,80 min, m/z: 4785,9

Método de UPLC: B4_1: Rt = 7,90 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 4,31 min

Ejemplo 79

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[(2-fenilcidopropanocarbonil)amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[(2-fenilciclopropanocarbonil)amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 98:

Método de preparación: SSPS_L: SC_L con ácido trans-2-fenil-1-cidopropanocarboxílico unido como se describe en el método SC_M2 con la modificación de que se usaron 8 eq. de HOBt/DIC y ácido trans-2-fenil-1-cidopropanocarboxílico; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,16 m/z: m/3 1537; m/4 1152; m/5922

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,37 min.

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 4,61 min.

Ejemplo 80

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 99:

Método de preparación: SPPS_P; SC_L; CP_M1

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,917 min

Método de UPLC: 04_A9_1: Rt = 9,996 min

Método de LCMS: LCMS_2: Rt = 6,99 min; m/3 = 1603, m/4 = 1202

Ejemplo 81

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns30-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoilamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Aib8,Lys18,His26,Lys30,Arg34]-GLP-1-(7-35)-péptido

Quím. 100:

Método de preparación: SPPS_P, SC_P, CP_M1

La masa molecular teórica de 4611 Da se confirmó por MALDI-MS (alfa-ciano); m/z: 4610

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,7 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 5,7 min

Ejemplo 82

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns26-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 101:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método de LCMS_4: Rt = 2,64 min, m/z: 4902,3

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,97 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 5,01 min

Ejemplo 83

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns30-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Aib8 Lys18Glu22,Arg26,Lys30,Arg34]-GLP-1-(7-35)-péptido

Quím. 102:

Método de preparación: SPPS_P, SC_P, CP_M1

La masa molecular teórica de 4702 Da se confirmó por MALDI_MS: m/z: 4701

Método de UPLC: B4_1: Rt = 9,0 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 4,6 min

E je m p lo 84

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 103:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L;CP_M1

La masa molecular teórica se confirmó mediante MALDI_MS: m/z: 4544

Método de UPLC: B4_1: Rt = 9,4 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 6,2 min

Ejemplo 85

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22, Lys26,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 104:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L;CP_M1

LCMS: Método de LCMS_4: Rt = 2,33 min m/z:4644: M/3 = 1549; M/4=1162;

Método de UPLC: B4_1: Rt = 9,31 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 5,85 min

Ejemplo 86

Ns18-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2

[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1 -(7-37)-péptido

Quím. 105:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L;CP_M1

LCMS: Método de LCMS_4: Rt = 2,27 min m/z: M/3=1601; M/4=1201;

Método de UPLC: B4_1: Rt = 9,01 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 5,08 min

Ejemplo 87

Ns182-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[8-(4-carboxifenoxi)octanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[8-(4-carboxifenoxi)octanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 106:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

La masa molecular teórica de 4846,4 Da se confirmó por MALDI_MS: m/z: 4846,3

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,26 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 3,93 min

Ejemplo 88

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 107:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método de LCMS_4: Rt = 2,03 min, m/z: 4930,6

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,63 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 5,31 min

Ejemplo 89

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[8-(4-carboxifenoxi)octanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[8-(4-carboxifenoxi)octanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 108:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LC/MS_4: Rt = 2,13 min m/z: 4832,3; M/3: 1611; M/4: 1209

UPLC: Método: B4_1: Rt = 8,23 min

UPLC: Método: 04_A6_1: Rt = 3,77 min

UPLC: Método: 04_A7_1: Rt = 4,90 min

Ejemplo 90

Ns18-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 109:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,32 min, m/z: 4902,4

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,95 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 4,97 min

Ejemplo 91

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1 -(7-37)-péptido

Quím. 110:

Método de preparación: SPPS_P, SC_P, CP_M1

La masa molecular teórica de 5230 Da se confirmó por MALDI_MS: m/z: 5230

Método de UPLC: B4_1: Rt = 7,56 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 3,9 min

Ejemplo 92

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoNamino]butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Aib8,Lys18,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 111:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método de LCMS_4: Rt = 2,29 min, m/z: 4829,2

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,90 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 5,39 min

E je m p lo 93

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 112:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método de LCMS_4: Rt = 2,18 min, m/z: 4858,4

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,56 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 5,26 min

Ejemplo 94

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 113:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método de LCMS_4: Rt = 2,17 min, m/z: 4916,5

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,51 min

Ejemplo 95

Nsl8-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoNaiTiino]butanoN]aiTiino]etoxi]etoxi]acetN]aiTiino]etoxi]etoxi]acetNHLys18Arg34]-GLP-1 -(7-37)-péptido

Quím. 114:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

La masa molecular teórica de 4448,5 Da se confirmó por MALDI-MS (alfa-ciano): m/z: 4448,9

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,53 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 5,73 min

Ejemplo 96

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Arg34]-GLP-1 -(7-37)-péptido

Quím. 115:

Método de preparación: SPPS_L, SC_L, CP_M1

LCMS: Método de LC-MS_4: Rt = 2,23 min m/z: 4816,10 (calca. 4816,4766 Da)

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 5,803 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 5,847 min

Ejemplo 97

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Arg34]-GLP-1 -(7-37)-péptido

Quím. 116:

Método de preparación: SPPS_L, SC_L, CP_M1

LCMS_4: Rt = 2,22 min m/z: 5073,50,

Método de UPLC: B4_1: Rt = 11,06 min

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 4,77 min

E je m p lo 98

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoNamino)butanoN]aiTiino]etoxi]etoxi]acetN]aiTiino]etoxi]etoxi]acetN]aiTiino]etoxi]etoxi]acetN]aiTiino]etoxi]e toxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]e toxi]acetN]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg2®Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 117:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L;CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,03 min m/z: 5395; M/4=1350; M/5=1080

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,08 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 4,59 min

Ejemplo 99

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetii]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]e toxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]e toxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 118:

Método de preparación: SPPS_L: SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,08 min m/z: 5975,8; M/4 :1494,5; M/5: 1195,6

UPLC: Método: B4_1: Rt = 7,89 min

UPLC: Método: 04_A6_1: Rt = 5,51 min

Ejemplo 100

Nsl8-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN],N626-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Aib8,Lys18,Glu22,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 119:

Método de preparación: SPPS_L: SC_L; CP_M1

LCMS_4: Rt = 5,8 min m/z:1610 (M 3+), 1208 (M 4+) y 966 (M 5+)

Método de UPLC: 10_B14_1: Rt = 6,653 min

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,713 min

E je m p lo 101

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 120:

Método de preparación: SPPS_P, SC_P, CP_M1

La masa molecular teórica de 5331 Da se confirmó por MALDI_MS; m/z: 5330

Método de UPLC: B4_1: Rt = 7,8 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 4,03 min

Ejemplo 102

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 121:

Método de preparación: SPPS_P, SC_P, CP_M1

La masa molecular teórica de 5345 Da se confirmó por MALDI_MS: m/z: 5344

Método de UPLC B4_1: Rt = 7,8 min

Método de UPLC 04_A6_1: Rt = 4,1 min

Ejemplo 103

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Arg34]-GLP-1 -(7-37)-péptido

Quím. 122:

Método de preparación: SPPS_A , SC_A, CP_M1

LCMS: método LCMS_4: Rt = 2,22 min m/z: 5016 , M/4 :1254.6; M/5: 1004,1

Método de UPLC: 10_B14_1: Rt = 5,07 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 4,71 min

Ejemplo 104

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns31-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitndecanoNamino)etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]ammo]butanoN]-[Lys18,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 123:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método:LCMS_4: Rt = 2,27 min, m/z: 4742,5

Método de UPLC: B4_1: Rt = 9,47 min

Método de UPLC: 05_B9_1: Rt = 8,19 min

Ejemplo 105

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4R)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4R)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 124:

Método de preparación: SPPS_L, SC-L, CP_M1

LCMS: Método de LCMS_4: Rt = 2,34 min m/mi/z: 5060,27 (calc. 5060,6795)

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,811 min

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 5,237 min

Ejemplo 106

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns26-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]-[Lys18,Arg34]-GLP-1 -(7-37)-péptido

Quím. 125:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,27 min, m/z: 4843,2

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,71 min

Ejemplo 107

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 126:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,13 min, m/z: 4841,6

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,42 min

Ejemplo 108

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Arg34]-GLP-1 -(7-37)-péptido

Quím. 127:

Método de preparación: SPPS_A, SC_A, CP_M1

LCMS: método LCMS_4: Rt = 2,10 min m/z: 4960,5 , M/4 :1240,8; M/5: 992,9 (1A)

Método de UPLC: 10_B14_1: Rt = 5,07 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 4,25 min

Ejemplo 109

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[8-[[(4S)-4-carboxi-4-(4-fenilbutanoilamino)butanoil]amino]octanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[8-[[(4S)-4-carboxi-4-(4-fenilbutanoilamino)butanoil]amino]octanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 128:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método de LCMS_4: Rt = 2,27 min, m/z: 5154,6

UPLC: Método B4_1: Rt = 10,11 min

UPLC: Método 05_B9_1: Rt = 7,04 min

Ejemplo 110

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[6-[[(4S)-4-carboxi-4-(4-fenilbutanoilamino)butanoil]amino]hexanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[6-[[(4S)-4-carboxi-4-(4-fenilbutanoilamino)butanoil]amino]hexanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 129:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,12 min, m/z: 5039,7

Método de UPLC: B4_1: Rt = 9,45 min

Método de UPLC: 05_B9_1: Rt = 6,53 min

Ejemplo 111

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns31-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 130:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L

LCMS: Método: LCMS_4: Rt =2,05 min; m/3:1691; m/4:1268; m/5:1014

UPLC: Método: B2_1: Rt = 12,26 min

UPLC: Método: 05_B7_1: Rt = 8,18 min

E je m p lo 112

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitndecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Aib8,Lys18,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 131:

Método de preparación: SPPS_P; SC_L

LCMS: Método: LCMS_4: Rt =2,12 min; m/3:1586; m/4:1189; m/5:951

Método de UPLC: B2_1: Rt = 14,31 min

Método de UPLC: 05_B7_1: Rt = 8,82 min

Ejemplo 113

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[12-[[(4S)-4-carboxi-4-(4-fenilbutanoilamino)butanoil]amino]dodecanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[12-[[(4S)-4-carboxi-4-(4-fenilbutanoilamino)butanoil]amino]dodecanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 132:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,46 min, m/z: 5267,0

Método de UPLC: B4_1: Rt = 9,10 min

Método de UPLC: 05_B9_1: Rt = 8,12 min

Ejemplo 114

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns26-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 133:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método de LCMS_4: Rt = 2,37 min, m/z: 5160,6

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,74 min

Método de UPLC: 05_B9_1: Rt = 8,05 min

Ejemplo 115

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns26-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]-[Aib8,Lys18,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 134:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método de LCMS_4: Rt = 2,34 min, m/z: 4857,8

Método de UPLC: B4_1: Rt = 10,0 min

Método de UPLC: 05_B9_1: Rt = 8,85 min

Ejemplo 116

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns31-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitndecanoNamino)etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]butanoN]-[Lys18,Glu22,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 135:

Método de preparación: SPPS_L:SC_L:CP_M1

LCMS: Método de LCMS_4: Rt = 2,13 min, m/z: 4785,9

Método de UPLC: B4_1: Rt = 9,09 min

Método de UPLC: 05_B9_1: Rt = 7,30 min

E je m p lo 117

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-amino-4-carboxibutanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-amino-4-carboxibutanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8 Lys18Val26,Lys27,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 136:

Métodos de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

LCMS: Método de LCMS_4: Rt = 1,90: m/z: m/3 1416; m/4 1062; m/5850; m/6708

Método de UPLC: B4_1: Rt = 7,19 min.

Este compuesto es un producto intermedio en la preparación del compuesto del Ejemplo 68 (Quím. 87).

Ejemplo 118

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil],N s27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys27,His31,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 161:

Métodos de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

Método de LCMS: LCMS_4: Rt = 2,08 min; m/3 = 1598; m/4 = 1199; m/5 = 959

Método de UPLC: B2_1: Rt = 12,20 min

Método de UPLC: 05_B9_1: Rt = 7,50 min

Ejemplo 119

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,His26,Lys27,His31,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 162:

Métodos de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

Método de LCMS: LCMS_4: Rt = 1,87 min; m/3 = 1583; m/4 = 1187; m/5 = 949 (1A)

Método de UPLC: B2_1: Rt = 11,74 min

Método de UPLC: 04_A7_1: Rt = 5,41 min

Ejemplo 120

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[4-(4-fluorofenoxi)fenil]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns22-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[4-(4-fluorofenoxi)fenil]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Lys22,Arg26,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 163:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_L1

Método de LCMS: LCMS_4: Rt = 2,15 min; m/5 = 959; m/4 = 1198; m/3 = 1597

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,53 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 6,50 min

Ejemplo 121

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[4-(4-clorofenil)butanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[4-(4-clorofenil)butanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 164:

LCMS: Método; LCMS_4: Rt = 2,27 min; m/4 = 1171; m3 = 1561

Método de preparación: SPPS_P; SC_M1; CP_M1

Método de UPLC B4_1: Rt = 8,37 min

Método de UPLC 05_B5_1: Rt = 4,61 min

Ejemplo 122

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[4-(4-nitrofenil)butanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[4-(4-nitrofenil)butanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 165:

Método de preparación: SPPS_P; SC_M1; CP_M1

LCMS: Método; LCMS_4: Rt = 2,17 min; m/5 = 941; m4 = 1176; m/3 = 1568

Método de UPLC B4_1: Rt = 8,24 min

Método de UPLC 05_B5_1: Rt = 4,90 min

E je m p lo 123

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(6-fenilhexanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(6-fenNhexanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetNHAib8 Lys18Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 166:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt: 2,31 min; m/3: 1557; m/4: 1168; m/5: 935

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,86 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 5,47 min

Ejemplo 124

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 167:

Método de preparación: SPPS_P; SC_M1; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_AP: Rt: 8,51 min; m/3: 1587; m/4: 1190

Método de UPLC: AP_B4_1: Rt = 8,04 min

Ejemplo 125

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-(trifluorometil)fenil]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns22-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4 carboxi-4-[[2-[2-(trifluorometil)fenil]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Lys22,Arg26,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 168:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_L1

Método de LCMS: LCMS_4: Rt = 2,01 min; m/5 = 942; m/4 = 1177; m/3 = 1570

Método de UPLC: B4_1: Rt = 7,94 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 5,27 min

Ejemplo 126

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns22-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Lys22,Arg26,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 169:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_L1

Método de LCMS: LCMS_4: Rt = 2,20 min; m/5 = 1016; m/4 = 1269; m/3 = 1692

Método de UPLC: B4_1: Rt = 8,49 min

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 5,64 min

Ejemplo 127

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[8-[[(4S)-4-carboxi-4-(6-fenilhexanoilamino)butanoil]amino]octanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[8-[[(4S)-4-carboxi-4-(6-fenilhexanoilamino)butanoil]amino]octanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 170:

Método de preparación: SPPS_P; SC_M1; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt: 2,31 min; m/5 = 1043; m/4 = 1303; m/3 = 1737

Método de UPLC: B4_1: Rt = 10,84 min

Método de UPLC: 05_B9_1: Rt = 7,90 min

Ejemplo 128

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[12-[[(4S)-4-carboxi-4-[(2-fenilacetil)amino]butanoil]amino]dodecanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[12-[[(4S)-4-carboxi-4-[(2-fenilacetil)amino]butanoil]amino]dodecanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 171:

Método de preparación: SPPS_P; SC_M1; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,34 min; m/5 = 1043; m/4 = 1303; m/3 = 1738

Método de UPLC B4_1: Rt = 8,68 min

Método de UPLC 05_B9_1: Rt = 7,54 min

Ejemplo 129

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[6-[[(4S)-4-carboxi-4-(6-fenilhexanoilamino)butanoil]amino]hexanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[6-[[(4S)-4-carboxi-4-(6-fenilhexanoilamino)butanoil]amino]hexanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 172:

Método de preparación: SPPS_P; SC_M1; CP_M1

LCMS: Método: LCMS_4: Rt = 2,31 min; m/5 = 1019: m/4 = 1274; m/3 = 1699

Método de UPLC B4_1: Rt = 9,91 min

Método de UPLC 05_B9_1: Rt = 7,25 min

Ejemplo 130

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]e toxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]e toxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 173:

Método de preparación: SPPS_P; SC_P; CP_M1

Método de LCMS: LCMS_4: Rt = 2,22 min; m/5 = 1083; m/4 = 1353; m/3 = 1804

Método de UPLC: B4_1: Rt = 7,92 min

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 4,57 min

Ejemplo 131

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]e toxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]e toxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 174:

Método de preparación: SPPS_P; SC_P; CP_M1

Método de LCMS: LCMS_4: Rt = 2,20 min; m/6 = 999; m/5 = 1199; m/4 = 1498; m/3 = 1997

Método de UPLC: B2_1: Rt = 11,95 min

Método de UPLC: 05_B5_1: Rt = 4,62 min

Ejemplo 132

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido amida

Quím. 175:

Método de preparación: SPPS_P; SC_M1; CP_M1

La masa molecular teórica de 4901 Da se confirmó mediante el método: MALDI_MS: m/z: 4899

Método de UPLC: B2_1: Rt = 13,47 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 5,15 min

Ejemplo 133

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil],Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido amida

Quím. 176:

Método de preparación: SPPS_P; SC_M1; CP_M1

La masa molecular teórica de 4813,5 Da se confirmó mediante el método: MALDI_MS: m/z: 4813

Método de UPLC: B2_1: Rt = 12,42 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 5,18 min

Ejemplo 134

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(15-carboxipentadecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2

[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(15-carboxipentadecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLp-1-(7-37)-péptido

Quím. 177:

Método de preparación: SPPS_P; SC_P; CP_M1

LCMS: Método de LCMS_4: Rt= 3,1 min; m/5 = 1029; m/4 = 1286; m/3 = 1715

UPLC: Método: B4_1: Rt = 8,7 min

Ejemplo 135

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(15-carboxipentadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]eto xi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(15-carboxipentadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]eto xi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido amida

Quím. 178:

Método de preparación: SPPS_P; SC_P; CP_M1

La masa molecular teórica de 5463 Da se confirmó mediante el método: Maldi_MS: m/z 5463

UPLC: Método: 10_B29_1, Rt = 10,7 min

UPLC: Método: 04_A6_1, Rt = 5,9 min

Ejemplo 136

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Imp7,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 179:

Método de preparación: SPPS_P; SC_M1; CP_M1

LCMS: Método de LCMS_4: Rt = 2,37 min; m/4 = 1219; m/3 = 1625

Método de UPLC B4_1: Rt = 9,16 min

Método de UPLC 04_A6_1: Rt = 4,5 min

Ejemplo 137

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]e toxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]e toxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 180:

Método de preparación: SPPS_P; SC_P; CP_M1

La masa molecular teórica de 5409 Da se confirmó mediante el método: Maldi_MS: m/z 5408

UPLC: Método 10_B29_1: Rt = 8,6 min

UPLC: Método 04_A6_1: Rt = 5,2 min

Ejemplo 138

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(15-carboxipentadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(15-carboxipentadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Arg34]-GLP-1-(7-35)-péptido

Quím. 181:

Método de preparación: SPPS_P; SC_P; CP_M1

La masa molecular teórica de 4673 Da se confirmó mediante el método: Maldi_MS: m/z 4673

UPLC: Método 10_B29_1: Rt = 15,7 min

UPLC: Método 04_A6_1: Rt = 4,6 min

Ejemplo 139

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Aib8,Leu12,Lys18,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 182:

Método de preparación: SPPS_P; SC_P; CP_M1

La masa molecular teórica de 4796 Da se confirmó mediante el método: Maldi_MS: m/z 4796

UPLC: Método 10_B31_1: Rt = 16,6 min

UPLC: Método 04_A6_1: Rt = 5,6 min

Ejemplo 140

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Arg34]-GLP-1-(7-35)-péptido

Quím. 183:

Método de preparación: SPPS_P; SC_P; OP_M1

La masa molecular teórica de 4717 Da se confirmó mediante el método: Maldi_MS: m/z 4716

UPLO: Método 10_B31_1: Rt = 18,0 min

UPLO: Método 04_A6_1: Rt = 4,6 min

Ejemplo 141

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Gln34]-GLP-1 -(7-37)-péptido

Quím. 189:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

Método de UPLC: B2_1; Rt = 13,70 min

método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 6,23 min

Método de LCMS: LCMS_4: Rt = 3,08 min; m/3 = 1577; m/4 = 1183; m/5 = 947

Ejemplo 142

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,His34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 190:

Método de preparación: SPPS_P; SC_P; CP_M1

Método de UPLC: 10_B31_1; Rt = 16,5 min

Método de UPLC: 04_A6_1; Rt = 5,2 min

La masa molecular teórica de 4839 Da se confirmó mediante el método: Maldi MS: m/z 4837

E je m p lo 143

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(15-carboxipentadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(15-carboxipentadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 191:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

Método de UPLC: B4_1; Rt = 9,56 min

Método de UPLC: 08_B29_1; Rt = 9,15 min

Método de LCMS: LCMS_4: Rt = 2,48 min m/z = 4859; m/3 = 1620; m/4 = 1215; m/5 = 972; m/6 = 810; m/7 = 695

Ejemplo 144

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]e toxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]e toxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 192:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

Método de UPLC: B4_1; Rt = 7,78 min

Método de UPLC: 04_A6_1; Rt = 5,01 min

Método de UPLC: 10_B29_1; Rt = 8,31 min

Método de LC-MS: LCMS_4; RT = 2,01 min; m/4: 1498; m/5: 1199

Ejemplo 145

Ns18-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 193:

Método de preparación: SPPS_A; SC_A; CP_M1

Método de UPLC: 10_B29_1: Rt = 10,56 min

Método de UPLC:B4_1: Rt = 8,35 min

Método de UPLC: 04_A6_1:Rt = 5,37 min

Método de LCMS: LCMS_4: Rt = 2,12 min; m/3 = 1611; m/4 = 1208; m/5 = 967

Ejemplo 146

Ns18-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-(15-carboxipentadecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-(15-carboxipentadecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 194:

Método de preparación: SPPS_A; SC_A; CP_M1

Método de UPLC: 10_B29_1: Rt = 13,63 min

Método de UPLC: B4_1: Rt = 9,02 min

Método de UPLC: 04_A9_1: Rt = 13,76 min

Método de LCMS: LCMS_4: Rt = 2,27 min; m/3 = 1629; m/4 = 1222; m/5 = 978

Ejemplo 147

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(15-carboxipentadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(15-carboxipentadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Imp7,Lys18,Glu22,Arg26,Lys27,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 195:

Método de preparación: SPPS_L; SC_L; CP_M1

Método de UPLC: B4_1: Rt = 9,3 min

Método de UPLC: 04_A6_1: Rt = 6,5 min

Método de LCMS: LCMS_4: Rt = 2,52 min; m/3: 1619; m/4: 1215

Métodos biológicos

Ejemplo 148: Potencia in vitro

El propósito de este ejemplo es probar la actividad o potencia, de los derivados de GLP-1 in vitro.

Se determinaron las potencias de los derivados de GLP-1 de los Ejemplos 1-79, 81-116 y 118-146 como se describe a continuación, es decir, como la estimulación de la formación de AMP cíclico (AMPc) en un medio que contiene membranas que expresan el receptor de GLP-1 humano.

Principio

Las membranas plasmáticas purificadas de una línea celular transfectada estable, BHK467-12A (tk-ts13), que expresan el receptor de GLP-1 humano se estimularon con el derivado de GLP-1 en cuestión y la potencia de la producción de AMPc se midió mediante el uso del kit de ensayo de AMPc AlphaScreenTM de Perkin Elmer Life Sciences. El principio básico del ensayo The AlphaScreen es una competencia entre el AMPc endógeno y el AMPcbiotina añadido exógenamente. La captura de AMPc se alcanza mediante el uso de un anticuerpo específico conjugado a perlas aceptoras.

Cultivo celular y preparación de las membranas

Para el tamizaje se seleccionaron una línea celular transfectada estable y un clon de alta expresión. Las células se cultivaron en CO² al 5 % en DMEM, FCS al 10 %, Pen/Strep (penicilina/estreptomicina) al 1 % y 1,0 mg/ml del marcador de selección G418.

Las células a una confluencia aproximada del 80 % se lavaron 2X con PBS y se cosecharon con Versene (solución acuosa de la sal tetrasódica de ácido etilendiaminotetraacético), se centrifugaron 5 min a 1000 rpm y se eliminó el sobrenadante. Las etapas adicionales se hicieron todas en hielo. El sedimento celular se homogeneizó mediante el Ultrathurax durante 20-30 segundos en 10 ml de Tampón 1 (Na-HEPES 20 mM, EDTA 10 mM, pH = 7,4), se centrifugó 15 minutos a 20000 rpm y el sedimento se resuspendió en 10 ml de Tampón 2 (Na-HEPES 20 mM, Ed TA 0,1 mM, pH = 7,4). La suspensión se homogeneizó durante 20-30 s y se centrifugó durante 15 minutos a 20 000 rpm. La suspensión en el Tampón 2, la homogeneización y la centrifugación se repitieron una vez y las membranas se resuspendieron en el Tampón 2. Se determinó la concentración de proteínas y las membranas se almacenaron a -80 °C hasta su uso.

El ensayo se realizó en placas de 96 pocillo de A área, de parte inferior plana (núm. de catálogo de Costar:3693). El volumen final por pocillo fue de 50 pl.

Soluciones y reactivos

El kit de ensayo de AMPc AlphaScreen de Perkin Elmer Life Sciences (núm. de catálogo: 6760625M); que contiene perlas aceptoras de anti-AMPc (10 U/|il), perlas donantes de Estreptavidina (10 U/|il) y AMPc-biotinilado (133 U/|il).

Tampón de AlphaScreen, pH=7,4: 50 mM TRIS-HCl (Sigma, núm. de catálogo: T3253); 5 mM HEPES (Sigma, núm. de catálogo: H3375); 10 mM MgCl2, 6H2O (Merck, núm. de catálogo: 5833); 150 mM NaCl (Sigma, núm. de catálogo: S9625); Tween al 0,01 % (Merck, núm. de catálogo: 822184). Lo siguiente se añadió al Tampón de AlphaScreen antes de su uso (concentraciones finales indicadas): BSA (Sigma, núm. de catálogo A7906): 0,1 %; IBMX (Sigma, núm. de catálogo: l5879): 0,5 mM; ATP (Sigma, núm. de catálogo: A7699): 1 mM; GTP (Sigma, núm. de catálogo: G8877): 1 uM.

Estándar de AMPc (factor de dilución en el ensayo = 5): Solución de AMPc: 5 |iL de una solución concentrada de AMPc 5 mM 495 |iL de Tampón de AlphaScreen.

La serie de dilución adecuada en tampón de AlphAscreen se preparó del estándar de AMPc así como también el derivado de GLP-1 a analizar, por ejemplo las siguientes ocho concentraciones del compuesto GLP-1: 10-7, 10-8, 10­ 9, 10-10, 10-11, 10-12, 10-13 y 10-14 M, y una serie a partir de, por ejemplo, 10-6 a 3x10-11 de AMPc.

Membrana/Perlas aceptoras

Usar membranas hGLP-1/ BHK 467-12A; 3 |ig/pocillo que corresponde a 0,6 mg/ml (la cantidad de membranas usadas por pocillo puede variar)

“Sin membranas”: Perlas aceptoras (2 unidades/pocillo final) en tampón de AlphaScreen

“membranas a 3 |ig/pocillo”: membranas perlas aceptoras (2 unidades/pocillo final) en tampón de AlphaScreen

Añadir 10 |il de ”Sin membranas” al estándar de AMPc (por pocillo en duplicados) y los controles positivos y negativos

Añadir 10 |il de “membranas a 3 |ig/pocillo” a los derivados de GLP-1 (por pocillo en duplicados/triplicados)

Control Pos. 10 |il de ”Sin membranas” 10 |il de Tampón de AlphaScreen

Control Neg. Control: 10 |il de ”Sin membranas” 10 |il de solución concentrada de AMPc (50 |iM)

Como las perlas son sensibles a la luz directa, cualquier manipulación se hizo en la oscuridad (lo más oscura posible), o en luz verde. Todas las diluciones se hicieron en hielo.

Procedimiento

1. Preparar el tampón de AlphaScreen.

2. Disolver y diluir los derivados de GLP-1/estándar de AMPc en tampón de AlphaScreen.

3. Preparar la solución de perlas donantes (mediante la mezcla de perlas donantes de estreptavidina (2 unidades/pocillo) y AMPc biotinilado (1,2 unidades/pocillo) e incubar 20-30 min. en la oscuridad a RT.

4. Añadir el AMPc/derivados de GLP-1 a la placa: 10 |il por pocillo.

5. Preparar la solución de membrana/perlas aceptoras y añadir esto a las placas: 10 |il por pocillo.

6. Añadir las perlas donantes: 30 |il por pocillo.

7. Envolver la placa en hoja de aluminio e incubar en el agitador durante 3 horas (muy lentamente) a RT. 8. Contar en AlphaScreen - cada placa se pre incuba en el AlphaScreen durante 3 minutos antes del conteo.

Resultados

Los valores EC⁵⁰ [nM] se calcularon mediante el uso del programa informático Graph-Pad Prism (versión 5).

Se confirmó la potencia in vitro de todos los derivados. 138 derivados tuvieron una buena potencia in vitro correspondiente a una EC⁵⁰ de 2000 pM o menor; 131 derivados fueron incluso más potentes al tener una EC⁵⁰ por debajo de 1200 pM; 110 derivados tuvieron una potencia aún más mejorada correspondiente a una EC⁵⁰ a 500 pM o menor; 78 derivados fueron muy potentes, correspondiente a una EC50 de 200 pM o menor; y 52 derivados tuvieron una potencia muy buena correspondiente a una EC⁵⁰ de 100 pM o menor.

Para comparación, el compuesto núm. 13 en la Tabla 1 de Journal of Medicinal Chemistry (2000), vol. 43, núm. 9, p.

1664-669 (GLP-1(7-37) acilado en K2634 con bis-diácido-C12) tuvo una potencia in vitro correspondiente a una EC⁵⁰ de 1200 pM.

Si es conveniente, la variación en veces en relación con GLP-1 puede calcularse como EC⁵⁰ (GLP-1)/EC50 (análogo) - 3693,2.

Ejemplo 149: Unión al receptor de GLP-1

El propósito de este experimento es investigar la unión al receptor de GLP-1 de los derivados de GLP-1, y cómo la unión está potencialmente influenciada por la presencia de albúmina. Esto se hace en un experimento in vitro como se describió más abajo.

La afinidad de unión de los derivados de GLP-1 de los Ejemplos 1-116 y 118-147 al receptor de GLP-1 humano se midió por medio de su capacidad para desplazar el 125I-GLP-1 del receptor. Para analizar la unión de los derivados al receptor en presencia de albúmina, el ensayo se realizó con una baja concentración de albúmina (0,005 % -correspondiente a la cantidad residual de esta en el trazador), así como también con una alta concentración de albúmina (añadida al 2,0 %). Un cambio en la afinidad de unión, IC⁵⁰, es una indicación de que el derivado en cuestión se une a albúmina y de esta manera es una predicción de un posible perfil farmacocinético prolongado del derivado en cuestión en modelos animales.

Condiciones

Especie (in vitro): Hámster

Punto Final Biológico: Unión al Receptor

Método de Ensayo: SPA

Receptor: receptor de GLP-1

Línea Celular: BHK tk-ts13

Cultivo celular y preparación de las membranas

Para el tamizaje se seleccionaron una línea celular transfectada estable y un clon de alta expresión. Las células se cultivaron en CO² al 5 % en DMEM, FCS al 10 %, Pen/Strep (penicilina/estreptomicina) al 1 % y 1,0 mg/ml del marcador de selección G418.

Las células a una confluencia aproximada del 80 % se lavaron 2X con PBS y se cosecharon con Versene (solución acuosa de la sal tetrasódica de ácido etilendiaminotetraacético), se centrifugaron 5 min a 1000 rpm y se eliminó el sobrenadante. Las etapas adicionales se hicieron todas en hielo. El sedimento celular se homogeneizó mediante el Ultrathurax durante 20-30 s en una cantidad adecuada de Tampón 1 (Na-HEPES 20 mM, EDTA 10 mM, pH=7,4), pero por ejemplo 10-20 ml, se centrifugó 15 min a 20000 rpm y el sedimento se resuspendió en una cantidad adecuada de Tampón 2 (Na-HEPES 20 mM, EDTA 0,1 mM, pH = 7,4), pero por ejemplo 10-20 ml. La suspensión se homogeneizó durante 20-30 s y se centrifugó durante 15 minutos a 20000 rpm. La suspensión en Tampón 2, homogeneización y centrifugación se repitieron una vez más y las membranas se resuspendieron en Tampón 2. Se determinó la concentración de proteínas y las membranas se almacenaron a -80 °C hasta su uso.

Ensayo de unión a SPA:

Los compuestos de prueba, las membranas, las partículas de SPA y [125I]-GLP-1(7-36)NH2 se diluyeron en tampón del ensayo. Se añadieron 25 ul (microlitros) de los compuestos de prueba a Optiplate. Se añadió (50 ul) del Tampón (experimento de “albúmina baja” que contiene HSA al 0,005 %) o HSA (experimento de “albúmina alta” que contiene 2 % HSA). Se añadió 5-10 ug de proteína/muestra (50 ul) correspondiente a 0,1 - 0,2 mg de proteína/ml (para ser optimizada preferentemente para cada preparación de membrana). Las partículas de SPA (perlas SPA de aglutinina de trigo germinado, Perkin Elmer, #RPNQ0001) se añadieron en una cantidad de 0,5 mg/pocillo (50 ul). La incubación se inició con [125I]-GLP-1(7-36)NH2 (concentración final 0,06 nM correspondiente a 49,880 DPM, 25 ul). Las placas se sellaron con PlateSealer y se incubaron durante 120 minutos a 30 °C mientras se agitaba. Las placas se centrifugaron (1500 rpm, 10 min) y se contaron en Topcounter.

Tampón de ensayo:

HEPES 50 mM

EGTA 5 mM

MgCl25 mM

Tween 20 al 0,005 %

pH 7,4

HSA fue SIGMA A1653.

Cálculos

El valor de IC⁵⁰ se leyó a partir de la curva como la concentración que desplaza el 50 % de 125I-GLP-1 del receptor, y se determinó la relación de [(IC50/nM) a alta HSA] / [(IC50/nM) a baja HSA].

Generalmente, la unión al receptor del GLP-1 a baja concentración de albúmina debería ser tan buena como sea posible, correspondiente a un valor de IC⁵⁰ bajo.

El valor de IC⁵⁰ a concentración alta de albúmina es una medida de la influencia de la albúmina en la unión del derivado al receptor de GLP-1. Como se conoce, los derivados de GLP-1 también se unen a la albúmina. Este es un efecto generalmente conveniente, el que extiende su tiempo de vida media en plasma. Por lo tanto, el valor de IC⁵⁰ a albúmina alta será mayor generalmente que el valor de IC⁵⁰ a albúmina baja, lo que corresponde a una unión reducida al receptor de GLP-1, provocada por la unión a la albúmina que compite con la unión al receptor de GLP-1.

Una relación alta (valor de IC50 (albúmina alta) / valor de IC⁵⁰ (albúmina baja)) puede tomarse por lo tanto como una indicación de que el derivado en cuestión se une bien a albúmina (puede tener una vida media larga) y además per se se une bien al receptor de GLP-1 (el valor de IC⁵⁰ (albúmina alta) es alto y el valor de IC⁵⁰ (albúmina baja) es bajo).

Resultados

Se obtuvieron los siguientes resultados, donde "relación" se refiere a [(IC50/nM) a alta HSA] / [(IC50/nM) a baja HSA]):

Todos los derivados tuvieron una relación por encima de 1,0; 116 derivados estuvieron por encima de 10; 86 derivados estuvieron por encima de 50; 56 derivados estuvieron por encima de 100; 17 derivados estuvieron por encima de 500; y 7 derivados tuvieron una relación por encima de 1000.

Además, en lo que respecta a la IC⁵⁰ (albúmina baja), todos los derivados tuvieron una IC⁵⁰ (albúmina baja) por debajo de 1000 nM; 144 derivados estuvieron por debajo de 500 nM; 137 derivados estuvieron por debajo de 100 nM; 126 derivados estuvieron por debajo de 50 nM; 95 derivados estuvieron por debajo de 10 nM; 70 derivados estuvieron por debajo de 5,0 nM; y 34 derivados estuvieron por debajo de 1,0 nM y 21 derivados estuvieron por debajo de 0,50 nM.

Finalmente en lo que respecta a la IC⁵⁰ (albúmina alta), 110 derivados tuvieron una IC⁵⁰ (albúmina alta) por debajo de 1000 nM; 79 derivados estuvieron por debajo de 500 nM; y 28 derivados estuvieron por debajo de 100 nM.

Ejemplo 150: Estimación de la biodisponibilidad oral

El propósito de este experimento es estimar la biodisponibilidad oral de los derivados de GLP-1.

Con este fin, la exposición en plasma después de la inyección directa en el lumen intestinal de los derivados de GLP-1 de los Ejemplos 2-3, 10, 17, 19-20, 26, 28-29, 31, 34-35, 38-39, 41-53, 55-64, 67, 70, 74-80, 82-86, 88, 90, 92-95, 98, 100, 106 y 118-123 se estudió in vivo en ratas, como se describe a continuación.

Los derivados de GLP-1 se probaron a una concentración de 1000 uM en una solución de 55 mg/ml de caprato de sodio.

Se obtuvieron de Taconic (Dinamarca) 32 ratas macho Sprague Dawley con un peso del cuerpo a la llegada de aproximadamente 240 g y se asignaron a los diferentes tratamientos mediante aleatorización simple, 4 ratas por grupo. Las ratas se someten a ayuno durante aproximadamente 18 horas antes del experimento y se ponen en anestesia general (Hypnorm/Dormicum).

Los derivados de GLP-1 se administran en el yeyuno ya sea en la parte proximal (10 cm distal para el duodeno) o en el intestino medio (50 cm proximal para el ciego). Se insertó un catéter PE50 de 10 cm de longitud en el yeyuno, se introdujo al menos 1,5 cm en el yeyuno y se aseguró antes de la dosificación mediante una ligadura alrededor del intestino y el catéter con una sutura de 3/0 distal a la punta para evitar la fuga o el desplazamiento del catéter. El catéter se colocó sin jeringa y aguja y se administraron 2 ml de solución salina en el abdomen antes de cerrar la incisión con clips para heridas.

Se inyectaron 100 pl del derivado de GLP-1 respectivo en el lumen del yeyuno a través del catéter con una jeringa de 1 ml. Subsecuentemente, se introdujeron 200 pl de aire en el lumen del yeyuno con otra jeringa para "enjuagar" el catéter. Esta jeringa se dejó conectada al catéter para evitar el flujo de regreso en el catéter.

Las muestras de sangre (200 ul) se recolectaron a intervalos convenientes (generalmente en los tiempos 0, 10, 30, 60, 120 y 240 min) en tubos de EDTA a partir de la vena caudal y se centrifugaron 5 minutos, 10000 G, a 4°C dentro de 20 minutos. Se separó el plasma (75 ul) en tubos Micronic, se congeló inmediatamente y se mantuvo a -20 °C hasta que se analizó la concentración plasmática del derivado de GLP-1 respectivo con LOCI (inmunoensayo Luminiscente de Canalización de Oxígeno), generalmente como se describió para la determinación de insulina por Poulsen y Jensen en Journal of Biomolecular Screening 2007, vol. 12, p.240-247. Las perlas donantes se recubrieron con estreptavidina, mientras que las perlas aceptoras se conjugaron con un anticuerpo monoclonal que reconoce un epítopo medio/C-terminal del péptido. Otro anticuerpo monoclonal, específico para el N-terminal, se biotiniló. Los tres reactivos se combinaron con el analito y formaron un inmunocomplejo de dos sitios. La iluminación del complejo liberó átomos de oxígeno singlete a partir de las perlas donantes, que se canalizaron en las perlas aceptoras y desencadenaron la quimioluminiscencia que se midió en un lector de placas Envision. La cantidad de luz fue proporcional a la concentración del compuesto.

Después de tomar la muestra de sangre las ratas se sacrificaron bajo anestesia y se abrió el abdomen para verificar la colocación correcta del catéter.

Las concentraciones plasmáticas medias (n=4) (pmol/l) se determinaron como una función del tiempo. La relación de la concentración plasmática (pmol/l) dividida por la concentración de la solución de dosificación (pmol/l) se calculó para cada tratamiento y los resultados para t = 30 min (30 minutos después de la inyección del compuesto en el yeyuno) se evaluaron (exposición corregida por la dosis a los 30 min) como una medida sustitutiva de la biodisponibilidad intestinal. Se espera que la exposición corregida por la dosis se correlacione con la biodisponibilidad real.

Se obtuvieron los siguientes resultados, donde la exposición corregida por la dosis a los 30 minutos se refiere a (la concentración plasmática 30 minutos después de la inyección del compuesto en el yeyuno (pM)), dividida por (la concentración del compuesto en la solución de dosificación (pM)):

Todos los derivados excepto tres tuvieron una exposición corregida por la dosis a los 30 min por encima de 45; 64 derivados estuvieron por encima de 50, 49 derivados estuvieron por encima de 100; 25 derivados estuvieron por encima de 150; 13 derivados estuvieron por encima de 200; y 2 derivados estuvieron por encima de 250.

Para comparación, el compuesto núm. 13 en la Tabla 1 de Journal of Medicinal Chemistry (2000), vol. 43, núm. 9, p.

1664-669 (GLP-1(7-37) acilado en K2634 con bis-diácido-C12) tuvo una exposición corregida por la dosis a los 30 min de menos de 45, y la exposición corregida por la dosis a los 30 min para semaglutida estaba en el mismo intervalo de menos de 45.

Ejemplo 151: Efecto sobre la glucosa en sangre y el peso del cuerpo

El propósito del estudio es verificar el efecto de los derivados de GLP-1 sobre la glucosa en sangre (BG) y el peso del cuerpo (BW) en un ambiente diabético.

Los derivados del GLP-1 de los Ejemplos 2 y 5 se analizaron en un estudio de respuesta a la dosis en un modelo de ratón obeso, diabético (ratones db/db) como se describe a continuación.

Cincuenta ratones db/db (Taconic, Dinamarca), alimentados desde el nacimiento con la dieta NIH31 (NIH 31M Rodent Diet, comercialmente disponible de Taconic Farms, Inc., Estados Unidos, véase www.taconic.com), se inscribieron para el estudio a la edad de 7-9 semanas. Los ratones tienen acceso libre a la comida estándar (por ejemplo, Altromin 1324, Brogaarden, Gentofte, Dinamarca) y agua corriente y se mantienen a 24 °C. Después de 1-2 semanas de aclimatación, la glucosa en sangre de referencia se evaluó dos veces por dos días consecutivos (es decir a las 9 am). Los 8 ratones con los valores más bajos de glucosa en sangre se excluyeron de los experimentos. En base a la media de los valores de glucosa en sangre, se seleccionaron los 42 ratones restantes para experimentación adicional y se asignaron a 7 grupos (n=6) con niveles de glucosa concordantes. Los ratones se usaron en experimentos con una duración de 5 días hasta 4 veces. Después del último experimento los ratones se sacrificaron.

Los siete grupos recibieron el tratamiento de la siguiente manera:

1: Vehículo, s.c.

2: Derivado de GLP-1, 0,3 nmol/kg, s.c.

3: Derivado de GLP-1, 1,0 nmol/kg, s.c.

4: Derivado de GLP-1, 3,0 nmol/kg, s.c.

5: Derivado de GLP-1, 10 nmol/kg, s.c.

6: Derivado de GLP-1, 30 nmol/kg, s.c.

7: Derivado de GLP-1, 100 nmol/kg, s.c.

Vehículo: fosfato de sodio 50 mM, cloruro de sodio 145 mM, tween 80 al 0,05 %, pH 7,4.

El derivado de GLP-1 se disolvió en el vehículo, a concentraciones de 0,05, 0,17, 0,5, 1,7, 5,0 y 17,0 nmol/ml. Los animales se dosificaron s.c. con un volumen de dosis de 6 ml/kg (es decir, 300 pl por 50 g de ratón).

El día de la dosificación, la glucosa en sangre se evaluó al tiempo - ^ h (8.30 a.m.), los ratones se pesaron después de esto. El derivado del GLP-1 se dosificó aproximadamente a las 9 am (tiempo 0). El día de la dosificación, la glucosa en sangre se evaluó en los tiempos 1,2, 4 y 8 h (10 am, 11 am, 1 pm y 5 pm).

En los días siguientes, se evaluó la glucosa en sangre por ejemplo a los tiempos 24, 48, 72 y 96 h después de la dosificación (es decir, a las 9 a.m. del día 2, 3, 4, 5). En cada día, los ratones se pesaron después del muestreo de glucosa en sangre.

Los ratones se pesaron individualmente en una balanza digital.

Las muestras para la medición de la glucosa en sangre se obtuvieron del capilar de la punta de la cola de ratones conscientes. La sangre, 10 pl, se recolectó en capilares heparinizados y se transfirió a 500 pl de tampón de glucosa (solución del sistema EKF, Eppendorf, Alemania). La concentración de glucosa se midió mediante el uso del método de la glucosa oxidasa (analizador de glucosa Biosen 5040, EKF Diagnostic, GmbH, Barleben, Alemania). Las muestras se mantuvieron a temperatura ambiente durante hasta 1 h hasta el análisis. Si fue necesario posponer el análisis, las muestras se mantuvieron a 4 °C durante un máximo de 24 h.

La ED⁵⁰ es la dosis que da lugar al efecto semimáximo en nmol/kg. Este valor se calcula sobre la base de la capacidad de los derivados a menor peso del cuerpo así como también la capacidad a menor glucosa en sangre, como es explicado más abajo.

La ED⁵⁰ para el peso del cuerpo se calcula como la dosis que da lugar al efecto semimáximo sobre delta BW 24 horas después de la administración subcutánea del derivado. Por ejemplo, si la disminución máxima del peso del cuerpo después de 24 horas es 4,0 g, entonces la ED⁵⁰ del peso del cuerpo es la dosis en nmol/kg que da lugar a una disminución del peso del cuerpo después de 24 horas de 2,0 g. Esta dosis (ED⁵⁰ del peso del cuerpo) puede leerse a partir de la curva de respuesta a la dosis.

La ED⁵⁰ para la glucosa en sangre se calcula como la dosis que da lugar a un efecto semimáximo sobre delta BG en AUC 8 horas después de la administración subcutánea del análogo.

El valor de la ED⁵⁰ sólo puede calcularse si existe una relación sigmoidal de respuesta a la dosis apropiada con una clara definición de la respuesta máxima. Por lo tanto, si este no fuera el caso el derivado en cuestión se reprueba a un intervalo de dosis diferente hasta que se obtenga la relación sigmoidal de respuesta a la dosis.

Se obtuvieron los siguientes resultados:

Los derivados probados tuvieron el efecto esperado sobre la glucosa en sangre así como también sobre el peso del cuerpo (una disminución en ambos casos). Además, se obtuvo una curva dosis-respuesta sigmoidal que permite el cálculo de los valores de ED⁵⁰ de glucosa en sangre y peso del cuerpo, respectivamente, como se explicó anteriormente.

Ejemplo 152: Vida media en minicerdos

El propósito de este estudio fue determinar la prolongación in vivo de los derivados de GLP-1 después de la administración i.v. a minicerdos, es decir la prolongación de su tiempo de acción. Esto se realiza en un estudio farmacocinético (PK), en donde se determinó la vida media terminal del derivado en cuestión. Por vida media terminal se entiende generalmente el período de tiempo que se tarda en reducir a la mitad una determinada concentración plasmática, medida después de la fase de distribución inicial.

En los estudios se usaron minicerdos macho de Gottingen (Ellegaard Gottingen Minipigs A/S, Dalmose, Dinamarca), de aproximadamente 7-14 meses de edad y con un peso de aproximadamente 16-35 kg. Los minicerdos se alojaron individualmente y se alimentaron de forma restringida una o dos veces al día con dieta SDS para minicerdos (Special Diets Services, Essex, Reino Unido). Después de al menos 2 semanas de aclimatación, se implantaron dos catéteres venosos centrales permanentes en la vena cava caudalis o craneal en cada animal. A los animales se les permitió una recuperación de 1 semana después de la cirugía y después se usaron para estudios farmacocinéticos repetidos con un período de lavado adecuado entre las dosificaciones.

Los animales se mantuvieron en ayunas durante aproximadamente 18 h antes de la dosificación y durante al menos 4 h después de la dosificación, pero tuvieron acceso ad libitum al agua durante todo el período.

Los derivados de GLP-1 de los Ejemplos 2, 10, 17, 20, 23, 28-29, 43-44, 74-76, 82, 84-86, 90, 92, y 118 se disolvieron en fosfato de sodio 50 mM, cloruro de sodio 145 mM, Tween 80 al 0,05 %, pH 7,4 a una concentración de generalmente 20-60 nmol/ml. Se administraron inyecciones intravenosas (el volumen correspondiente a generalmente 1-2 nmol/kg) de los compuestos a través de un catéter y se tomaron muestras de sangre en puntos de tiempo predefinidos hasta 13 días después de la dosificación (preferentemente a través del otro catéter). Las muestras de sangre se recolectaron en tampón de EDTA (8 mM) y después se centrifugaron a 4 °C y 1942 G durante 10 minutos. El plasma se pipeteó en tubos Micronics sobre hielo seco y se mantuvo a -20 °C hasta que se analizó la concentración plasmática del compuesto GLP-1 respectivo mediante el uso de ELISA o un ensayo basado en anticuerpo similar o LC-MS. Los perfiles individuales de concentración plasmática-tiempo se analizaron mediante un modelo no compartimental en WinNonlin v. 5.0 (Pharsight Inc., Mountain View, CA, Estados Unidos), y se determinaron las vidas medias terminales resultantes (media armónica).

Se obtuvieron los siguientes resultados: Todos los derivados tuvieron una vida media terminal por encima de 8 horas; 18 derivados por encima de 10 horas; 16 derivados por encima de 20 horas; 10 derivados por encima de 40 horas; 6 derivados por encima de 60 horas; y 2 derivados por encima de 80 horas.

Ejemplo 153: Efecto sobre la ingestión de alimentos

El propósito de este experimento es investigar el efecto de los derivados del GLP-1 sobre la ingestión de alimentos en cerdos. Esto se hace en un estudio farmacodinámico (PD) como se describe a continuación, en el cual la ingestión de alimentos se mide 1, 2, 3 y 4 días después de la administración de una dosis única del derivado de GLP-1, en comparación con un grupo de control tratado con vehículo.

Se usaron cerdos hembra Landrace Yorkshire Duroc (LYD), de aproximadamente 3 meses de edad, con peso de aproximadamente 30-35 kg (n=3-4 por grupo). Los animales se alojaron en un grupo durante 1-2 semanas durante la aclimatación a las instalaciones de los animales. Durante el período experimental, los animales se colocaron en corrales individuales desde el lunes por la mañana hasta el viernes por la tarde para la medición de la ingestión de alimentos individual. Los animales se alimentaron ad libitum con forraje para cerdos (Svinefoder, Antonio) en todos los momentos durante la aclimatación y el período experimental. La ingestión de alimentos se monitoreó en línea mediante el registro del peso del forraje cada 15 minutos. El sistema usado fue Mpigwin (Ellegaard Systems, Faaborg, Dinamarca).

Los derivados de GLP-1 se disolvieron en un tampón fosfato (fosfato 50 mM, tween 80 al 0,05 %, pH 8) a concentraciones de 12, 40, 120, 400 o 1200 nmol/ml correspondientes a dosis de 0,3, 1, 3, 10 o 30 nmol/kg. El tampón fosfato sirvió como vehículo. Los animales recibieron una dosis subcutánea única del derivado de GLP-1 o vehículo (volumen de dosis de 0,025 ml/kg) en la mañana del día 1 y la ingestión de alimentos se midió durante 4 días después

Claims (12)

REIVINDICACIONES

1. Un análogo de GLP-1 modificado químicamente de Fórmula I:

Xaa7-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Xaai2-Thr-Ser-Asp-Xaai6-Ser-Lys-Xaai9-Xaa20-Glu-Xaa22-Xaa23-Ala-Xaa25-Xaa26-Xaa27-Phe-Ile-Xaa30-Xaa31-Leu-Xaa33-Xaa34-Xaa35-Xaa36-Xaa37-Xaa38, en donde

Xaa7 es L-histidina, imidazopropionilo, a-hidroxi-histidina, D-histidina, desamino-histidina, 2-amino-histidina, phidroxi-histidina, homohistidina, Na-acetil-histidina, Na-formil-histidina, a-fluorometil-histidina, a-metil-histidina, 3-piridilalanina, 2-piridilalanina o 4-piridilalanina;

Xaa8 es Ala, Gly, Val, Leu, Ile, Thr, Ser, Lys, Aib, ácido (1-aminociclopropil) carboxílico, ácido (1-aminociclobutil) carboxílico, ácido (1-aminociclopentil) carboxílico, ácido (1-aminociclohexil) carboxílico, ácido (1-aminocicloheptil) carboxílico o ácido (1-aminociclooctil) carboxílico;

Xaa¹² es Phe o Leu;

Xaa¹⁶ es Val o Leu;

Xaa19 es Tyr o Gln;

Xaa²⁰ es Leu o Met;

Xaa²² es Gly, Glu, Lys o Aib;

Xaa23 es Gln, Glu o Arg;

Xaa25 es Ala o Val;

Xaa²⁶ es Val, His, Lys o Arg;

Xaa27 es Glu, His, Leu o Lys;

Xaa30 es Ala, Glu, Lys o Arg;

Xaa31 es Trp, Lys o His

Xaa33 es Val o Lys;

Xaa34 es Lys, Glu, Asn, Gly, Gln, Arg, His o está ausente;

Xaa35 es Gly, Aib o está ausente;

Xaa36 es Arg, Gly, Lys o está ausente;

Xaa37 es Gly, Ala, Glu, Pro, Lys, Arg o está ausente; y

Xaa38 es Ser, Gly, Ala, Glu, Pro, Lys, Arg o está ausente;

cuyo análogo comprende un primer residuo de K en una posición correspondiente a la posición 18 y un segundo residuo de K en una posición correspondiente a 22, 26, 27, 30, 31, 34 o 37 de GLP-1(7-37) (SEQ ID NO: 1) y un máximo de doce cambios de aminoácidos en comparación con GLP-1(7-37),

cuyo análogo de GLP-1 modificado químicamente comprende dos porciones de prolongación unidas a dicho primer y segundo residuo de K, respectivamente, mediante un conector, en donde

la porción de prolongación se selecciona de Quím. 2, Quím. 1 y Quím. 3,

en donde -C⁶H⁴- en Quím. 2 y Quím. 3 se refiere al fenileno:

Quím. 2: HOOC-C6H4-O-(CH2)y-CO-*

Quím. 1: HOOC-(CH²)x-CO-*

Quím. 3: R2-C6H4-(CH2)z-CO-* ,

en el que x es un número entero en el intervalo de 6-18, y es un número entero en el intervalo de 3-17, z es un número entero en el intervalo de 1-5 y R2 es un grupo que tiene una masa molar no mayor que 150 Da; y el conector comprende

Quím. 4:

en donde k es un número entero en el intervalo de 1-5, y n es un número entero en el intervalo de 1-5; o dicho análogo de GLP-1 modificado químicamente en forma de una sal, amida o éster farmacéuticamente aceptable.

2. El análogo de GLP-1 modificado químicamente de acuerdo con la reivindicación 1, en donde si Xaa37 está ausente, entonces Xaa38 también está ausente, en donde si Xaa36 está ausente, entonces Xaa37 y Xaa38 también están ausentes, en donde si Xaa35 está ausente, entonces Xaa36, Xaa37 y Xaa38 también están ausentes, y en donde si Xaa34 está ausente, entonces Xaa35, Xaa36, Xaa37 y Xaa38 también están ausentes.

3. El análogo de GLP-1 modificado químicamente de cualquiera de las reivindicaciones 1-2, en donde la porción de prolongación se selecciona de Quím. 1 y Quím. 2.

4. El análogo de GLP-1 modificado químicamente de cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en donde el segundo residuo de K está en una posición correspondiente a 26, 27 o 31; o preferentemente en una posición correspondiente a 26 o 31.

5. El análogo de GLP-1 modificado químicamente de cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde x es 10, 12, 14 o 16; preferentemente x es 12 o 14.

6. El análogo de GLP-1 modificado químicamente de cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en donde y es 7, 8 o 9;

preferentemente y es 9.

7. El análogo de GLP-1 modificado químicamente de cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en donde el análogo se modifica de modo que comprenda una amida C-terminal.

8. El análogo de GLP-1 modificado químicamente de cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en donde el análogo tiene un ácido carboxílico C-terminal.

9. El análogo de GLP-1 modificado químicamente de acuerdo con la reivindicación 1 seleccionado de lo siguiente: Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil],Ns37-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Arg26,Arg34,Lys37]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 20:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetii]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 21:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetii]-[Aib8 Lys18Glu22Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 22:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoNamino]butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN], Ns37-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoNamino]butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetii]-[Imp7,Lys18,Glu22,Arg26,Arg34,Lys37]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 23:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím. 24:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Glu30,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Q uím . 25:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,His26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím. 26:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Q uím . 27:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Arg26,Lys27,His31,Arg34]-GLP-1 -(7-35)-péptido,

Quím. 28:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím. 29:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4 carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím. 30:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Imp7,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím. 31:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Imp7,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím. 32:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Ser8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26, Lys31,Gly34]-GLP-1 -(7-34)-péptido,

Quím. 33:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Q uím . 34:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1 -(7-34)-péptido,

Quím. 35:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Arg23,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím. 36:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,His27,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím 37:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18G lu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Q uím . 38:

Ns18-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1 -(7-34)-péptido,

Quím. 39:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Imp7,Aib8 Lys18Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím. 40:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Imp7,Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím. 41:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(17-carboxiheptadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(17-carboxiheptadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 42:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys27,His31,Gly34]-GLP-1 -(7-34)-péptido,

Quím. 43:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Ser8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26, Lys31,Gly34]-GLP-1 -(7-34)-péptido,

Quím. 44:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], ], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys27,His31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím. 45:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,His26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím. 46:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Arg26,Lys27,His31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím. 47:

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns27-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]-[Lys18,Glu22,Arg26,Lys27,His31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Q uím . 48:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Arg26,Lys27,His31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím. 49:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Imp7,Lys18,Glu22,Arg26,Lys27,His31,Gly34]-GLP-1 -(7-34)-péptido,

Q uím . 50:

carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns27-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]-[lmp7,Lys18,Glu22,Arg26,Lys27,His31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím. 51:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Imp7,Lys18,Glu22,Arg26,Lys27,His31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím. 52:

N s18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 53

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,His26,Lys27,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 54:

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns31-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím. 55:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31]-GLP-1-(7-33)-péptido amida,

Q uím . 56:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 57:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 58:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 59:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8 Lys18Glu22Val25,Arg26,Lys27Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 60:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys27,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 61:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 62:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[

carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 63:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gly34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 64:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys27,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 65:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys27,His31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 66:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys27,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 67:

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns27-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]-[Lys18,Glu22,Arg26,Lys27,His31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím. 68:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns30-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys30,Gly34]-GLP-1 -(7-34)-péptido,

Quím. 69:

Ns18

carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns30-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Arg26,Lys30,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 70:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns30-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys30,His31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím. 71:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns30-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Leu27,Lys30,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Q uím . 72:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1 -(7-37)-péptido,

Quím. 73:

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns31-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 74:

N

carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns31-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 75:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Glu23,Val25,Arg26,Lys27,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 76:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Glu23,Val25,Arg26,Lys27,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 77:

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns27-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]-[Lys18,Glu22,Arg26,Lys27,His31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím. 78:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,His26,Lys27,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 79:

carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,His26,Lys27,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 80:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,His26,Lys27,His31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 81:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns34-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Leu27]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím. 82:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[9-(4-carboxifenoxi)nonanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[9-(4-carboxifenoxi)nonanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Arg26,Lys27,His31,Gly34]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím. 83:

carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns26-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 84:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns34-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,His31]-GLP-1-(7-34)-péptido,

Quím. 85:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,His26,Lys27,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 86:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[4-(4-yodofenil)butanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[4-(4-yodofenil)butanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Val26,Lys27,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 87:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amin o]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amin o]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 88:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1 -(7-37)-péptido,

Quím. 89:

carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]ac etil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]ac etil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido

Quím. 90:

carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,His26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 91:

carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 92:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 93:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 94:

N

carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 95:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 96:

Ns

carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 97:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 99:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns30-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,His26,Lys30,Arg34]-GLP-1-(7-35)-péptido

Quím. 100:

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns26-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 101:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns30-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8 Lys18Glu22Arg28Lys30,Arg34]-GLP-1-(7-35)-péptido,

Quím. 102:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 103:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22, Lys26,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 104:

Ns18-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 105:

Ns182-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[8-(4-carboxifenoxi)octanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[8-(4-carboxifenoxi)octanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 106:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 107:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[8-(4-carboxifenoxi)octanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[8-(4-carboxifenoxi)octanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 108:

Ns18-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 109:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1 -(7-37)-péptido,

Q uím . 110:

carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetii]-[Aib8,Lys18,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 111:

carboxifenoxi)decanoNamino]butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilaiTimo]butanoN]aiTiino]etoxi]etoxi]acetN]aiTiino]etoxi]etoxi]acetN]-[Aib8,Lys18,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 112:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 113:

Nsl8-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 114:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Arg34]-GLP-1 -(7-37)-péptido,

Quím. 115:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 116:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilaiTi ino)butanoN]aiTi ino]etoxi]etoxi]acetN]aiTiino]etoxi]etoxi]acetN]aiTi ino]etoxi]etoxi]acetN]aiTi ino]eto xi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]eto xi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 117:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]eto xi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]eto xi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 118:

Nsl8-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil],Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 119:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns3l-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 120:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 121:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Arg34]-GLP-1 -(7-37)-péptido,

Q uím . 122:

carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns31-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]-[Lys18,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 123:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4R)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4R)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 124:

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns26-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]-[Lys18,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetii]-[Lys18,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 126:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 127:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[8-[[(4S)-4-carboxi-4-(4-fenilbutanoilamino)butanoil]amino]octanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[8-[[(4S)-4-carboxi-4-(4-fenilbutanoilamino)butanoil]amino]octanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 128:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[6-[[(4S)-4-carboxi-4-(4-fenilbutanoilamino)butanoil]amino]hexanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[6-[[(4S)-4-carboxi-4-(4-fenilbutanoilamino)butanoil]amino]hexanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím.

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns31-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 130:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 131:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[12-[[(4S)-4-carboxi-4-(4-fenilbutanoilamino)butanoil]amino]dodecanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[12-[[(4S)-4-carboxi-4-(4-fenilbutanoilamino)butanoil]amino]dodecanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 132:

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns26-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 133:

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns26-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]-[Aib8,Lys18,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 134:

Ns18-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil], Ns31-[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]-[Lys18,Glu22,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 135:

carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil],N s27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys27,His31,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 161:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,His26,Lys27,His31,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 162:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[4-(4-fluorofenoxi)fenil]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns22-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[4-(4-fluorofenoxi)fenil]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Lys22,Arg26,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 163:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[4-(4-dorofenil)butanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[4-(4-dorofenil)butanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 164:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[4-(4-nitrofenil)butanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[4-(4-nitrofenil)butanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 165:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(6-fenilhexanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(6-fenilhexanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 166:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(11-carboxiundecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 167:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-(trifluorometil)fenil]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns22-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-(trifluorometil)fenil]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Lys22,Arg26,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 168:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns22-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Lys22,Arg26,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 169:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[8-[[(4S)-4-carboxi-4-(6-fenilhexanoilamino)butanoil]amino]octanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[8-[[(4S)-4-carboxi-4-(6-fenilhexanoilamino)butanoil]amino]octanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 170:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[12-[[(4S)-4-carboxi-4-[(2-fenilacetil)amino]butanoil]amino]dodecanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[12-[[(4S)-4-carboxi-4-[(2-fenilacetil)amino]butanoil]amino]dodecanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 171:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[6-[[(4S)-4-carboxi-4-(6-fenilhexanoilamino)butanoil]amino]hexanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[6-[[(4S)-4-carboxi-4-(6-fenilhexanoilamino)butanoil]amino]hexanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 172:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]eto xi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]eto xi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 173:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetii]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]eto xi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoNamino)butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]eto xi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 174:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoNamino]butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoNamino]butanoN]amino]etoxi]etoxi]acetN]amino]etoxi]etoxi]acetN]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido amida,

Quím. 175:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil],Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido amida,

Quím. 176:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(15-carboxipentadecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[(4S)-4-carboxi-4-(15-carboxipentadecanoilamino)butanoil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 177:

N8l8-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(15-carboxipentadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino ]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(15-carboxipentadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino ]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido amida,

Quím. 178:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Imp7,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 179:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilaiT iino)butanoN]aiT iino]etoxi]etoxi]acetN]aiT iino]etoxi]etoxi]acetN]aiT iino]etoxi]etoxi]acetN]aiT iino]eto xi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]eto xi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 180:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(15-carboxipentadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(15-carboxipentadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Arg34]-GLP-1-(7-35)-péptido,

Q uím . 181:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Leu12,Lys18,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Arg34]-GLP-1-(7-35)-péptido,

Q uím . 183:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Gln34]-GLP-1 -(7-37)-péptido,

Quím. 189:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[10-(4-carboxifenoxi)decanoilamino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,His34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 190:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(15-carboxipentadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns26-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(15-carboxipentadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]eto xi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(13-carboxitridecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]eto xi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 192:

Ns18-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-(13-carboxitridecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8 Lys18Glu22Val25,Arg28Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Quím. 193:

Ns18-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-(15-carboxipentadecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns31-[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-[[2-[2-[2-(15-carboxipentadecanoilamino)etoxi]etoxi]acetil]amino]butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Aib8,Lys18,Glu22,Val25,Arg26,Lys31,Arg34]-GLP-1-(7-37)-péptido,

Q uím . 194:

Ns18-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(15-carboxipentadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil], Ns27-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-carboxi-4-(15-carboxipentadecanoilamino)butanoil]amino]etoxi]etoxi]acetil]amino]etoxi]etoxi]acetil]-[Imp7,Lys18,Glu22,Arg26,Lys27,Gln34]-GLP-1-(7-37)-péptido, and

Quím. 195:

o una sal, amida o éster farmacéuticamente aceptable de este.

10. Un análogo de GLP-1 modificado químicamente de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 -9, para el uso como un medicamento.

11. Un análogo de GLP-1 modificado químicamente de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 -9, para el uso en el tratamiento y/o prevención de todas las formas de diabetes y enfermedades relacionadas que incluyen trastornos alimentarios, enfermedades cardiovasculares, enfermedades gastrointestinales, complicaciones diabéticas, enfermedades críticas y/o síndrome del ovario poliquístico; y/o para retardar o prevenir la progresión de la enfermedad diabética.

12. Uso de un análogo de GLP-1 modificado químicamente de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-9 en la fabricación de un medicamento para el tratamiento y/o prevención de todas las formas de diabetes y enfermedades relacionadas, tales como trastornos alimentarios, enfermedades cardiovasculares, enfermedades gastrointestinales, complicaciones diabéticas, enfermedades críticas y/o síndrome del ovario poliquístico; y/o para mejorar parámetros lipídicos, mejorar la función de las células p y/o para retardar o prevenir la progresión de la enfermedad diabética.