ES2912499T3

ES2912499T3 - Miméticos de tiodisacáridos a base de tetrahidropirano como inhibidores de galectina-3

Info

Publication number: ES2912499T3
Application number: ES19740100T
Authority: ES
Inventors: Richard A Hartz; Li Xu; David S Yoon; Alicia Regueiro-Ren; Prasada Rao Jalagam; Manoranjan Panda; Satheesh Kesavan Nair
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2018-06-15
Filing date: 2019-06-13
Publication date: 2022-05-26
Anticipated expiration: 2039-06-13
Also published as: US20210323991A1; KR20210021015A; JP7190513B2; US11970511B2; CN112292386A; EP3807290B1; WO2019241461A1; JP2021527102A; EP3807290A1

Abstract

Un compuesto de fórmula (I) **(Ver fórmula)** o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde: A es O, NH o N(COCH3); R1 es (R4)CONH- o **(Ver fórmula)** R2 es alquilo, (CO2(R5))alquilo o (CON(R6)(R7))alquilo; R3 es cicloalquilo, tetrahidropiranilo o Ar1, y está sustituido con 0-3 sustituyentes seleccionados entre ciano, halo, alquilo, haloalquilo, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi, CO2R5 y (R6)(R7)N; R4 es alquilo, cicloalquilo, biciclo[2.2.1-2]alquilo o Ar2, y está sustituido con 0-5 sustituyentes seleccionados entre ciano, halo, alquilo, haloalquilo, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi y CO2R5; R5 es hidrógeno o alquilo; R6 es hidrógeno, alquilo, alquilcarbonilo o fenilo; R7 es hidrógeno o alquilo; o (R6)(R7)N tomados juntos es azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, morfolinilo o dióxido de tiomorfolino, y está sustituido con 0-3 sustituyentes seleccionados entre halo, alquilo, hidroxi y alcoxi; Ar1 es fenilo, tiazolilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo o pirazinilo; y Ar2 es fenilo, bifenilo, naftalenilo, tiazolilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, quinolinilo, isoquinolinilo o quinoxalinilo.

Description

DESCRIPCIÓN

Miméticos de tiodisacáridos a base de tetrahidropirano como inhibidores de galectina-3

Antecedentes de la invención

La galectina-3 (Gal-3) es una lectina de unión a p-galactósidos de aproximadamente 30 KDa (Cell 76: 597-598), que está implicada en la regulación de procesos inflamatorios y fibróticos. (Immunological Reviews 230: 160-171). Bajo inflamación descontrolada y condición profibrótica, Gal-3 estimula la proliferación y transformación de fibroblastos y participa en la producción de colágeno (Circulation 110:3121-3128).

Gal-3 se localiza en muchas ubicaciones celulares, tales como el citoplasma, el núcleo y la superficie celular. Gal-3 también es secretada por diversos tipos celulares, principalmente macrófagos y monocitos en el torrente sanguíneo (J Pharmacol Exp Ther 351:336--343). Hay múltiples líneas de evidencia en la literatura que respaldan la participación de Gal-3 en el desarrollo del proceso fibrótico en múltiples órganos tales como pulmón (Am J. Respir. Crit. Care Med.

185: 537-546), hígado (PNAS 103:5060-5065) y riñón (Am. J. Pathol. 172:288-298). Gal-3 también se ha identificado como un biomarcador de insuficiencia cardíaca, lo que indica que la modulación de Gal-3 tiene posibles usos en el tratamiento de la insuficiencia cardíaca (Curr. Heart Fail. Rep. 7:1-8). La modulación de Gal-3 puede utilizarse en el tratamiento del cáncer, ya que Gal-3 está implicada en el crecimiento y la diferenciación celular y desempeña un papel fundamental en las rutas angiogénica, apoptótica y metastásica (Galectin-3C: Human Lectin for Treatment of Cancer. ACS Symposium Series, Vol. 1115. Capítulo 12, 195-23). Recientemente, se ha demostrado que los inhibidores de Gal-3 tienen efectos positivos cuando se utilizan en inmunoterapia combinada (Galectin Therapeutics. Comunicado de prensa, 7 de febrero de 2017).

Varias publicaciones y solicitudes de patente describen inhibidores sintéticos de Gal-3 que se están explorando como agentes antifibróticos. Ejemplos recientes de este enfoque son los documentos WO2005113568, WO2005113569, WO 2016005311, WO 2010126435 WO2017080971, WO2016120403, US20140099319 y WO2014067986.

Descripción de la invención

La presente divulgación se refiere a compuestos de la presente invención, que inhiben a Gal-3 e incluyen sales farmacéuticamente aceptables, composiciones que comprenden tales compuestos y métodos para la fabricación y el uso de tales compuestos y composiciones.

Un aspecto de la invención es un compuesto de Fórmula (I):

R2 es alquilo, (CO2(R5))alquilo o (CON(R6)(R7))alquilo;

R3 es cicloalquilo, tetrahidropiranilo o Ar1 y está sustituido con 0-3 sustituyentes seleccionados entre ciano, halo, alquilo, haloalquilo, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi, CO2R5y (R6)(R7)N;

R4 es alquilo, cicloalquilo, biciclo[2.2.1-2]alquilo o Ar2, y está sustituido con 0-5 sustituyentes seleccionados entre ciano, halo, alquilo, haloalquilo, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi y CO2R5;

R5 es hidrógeno o alquilo;

R6 es hidrógeno, alquilo, alquilcarbonilo o fenilo;

R7 es hidrógeno o alquilo;

o (R6)(R7)N tomados juntos es dióxido de tiomorfolino, azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo o morfolinilo, y está sustituido con 0-3 sustituyentes seleccionados entre halo, alquilo, hidroxi y alcoxi;

Ar1 es fenilo, tiazolilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo o pirazinilo; y

Ar2 es fenilo, bifenilo, naftalenilo, tiazolilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, quinolinilo, isoquinolinilo o quinoxalinilo.

Otro aspecto de la invención es un compuesto de Fórmula (Ia):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:

R1 es (R4)CONH- o

R2 es alquilo, (CO2(R5))alquilo o (CON(R6)(R7))alquilo;

R3 es cicloalquilo, tetrahidropiranilo o Ar1, y está sustituido con 0-3 sustituyentes seleccionados entre ciano, halo, alquilo, haloalquilo, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi, CO2R5y (R6)(R7)N;

R5 es hidrógeno o alquilo;

R6 es hidrógeno, alquilo, alquilcarbonilo o fenilo;

R7 es hidrógeno o alquilo;

Otro aspecto de la invención es un compuesto de Fórmula (I) o (la) en donde R1 es

Otro aspecto de la invención es un compuesto de Fórmula (I) o (la) en donde R2 es alquilo.

Otro aspecto de la invención es un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) en donde R2 es (CO2(R5))alquilo.

Otro aspecto de la invención es un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) en donde R2 es (CON(R6)(R7))alq

Otro aspecto de la invención es un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) en donde R3 es Ar1 y está sustituido con 0-3 sustituyentes seleccionados entre ciano, halo, alquilo, haloalquilo, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi, CO2R3 y (R6)(R7)N.

Otro aspecto de la invención es un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) en donde R3 es cicloalquilo o tetrahidropiranilo y está sustituido con 0-3 sustituyentes seleccionados entre ciano, halo, alquilo, haloalquilo, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi, CO2R5 y (R6)(R7)N.

Otro aspecto de la invención es un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) en donde R4 es Ar2 y está sustituido con 0-5 sustituyentes seleccionados entre ciano, halo, alquilo, haloalquilo, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi y CO2R5

Otro aspecto de la invención es un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) en donde R4 es alquilo, cicloalquilo o biciclo[2.2.1-2]alquilo y está sustituido con 0-5 sustituyentes seleccionados entre ciano, halo, alquilo, haloalquilo, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi y CO2R5.

Otro aspecto de la invención es un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) en donde Ar1 es fenilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo o pirazinilo, y está sustituido con 0-3 sustituyentes seleccionados entre ciano, halo, alquilo, haloalquilo, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi, CO2R5y (R6)(R7)N.

Otro aspecto de la invención es un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) en donde Ar2 es fenilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo o pirazinilo, y está sustituido con 0-5 sustituyentes seleccionados entre ciano, halo, alquilo, haloalquilo, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi y CO2R5

Para un compuesto de Fórmula I, el alcance de cualquier aparición de un sustituyente variable, incluidos R1, R2, R3,

R4, R5, R6, R7, Ar1 y Ar2, puede usarse independientemente con el alcance de cualquier otra aparición de un sustituyente variable. Como tal, la invención incluye combinaciones de los diferentes aspectos.

A menos que se especifique otra cosa, estos términos tienen los siguientes significados. "Alquilo" significa un grupo alquilo lineal o ramificado formado por 1 a 6 carbonos. "Alquenilo" significa un grupo alquilo lineal o ramificado compuesto por 2 a 6 carbonos con al menos un doble enlace. "Alquinilo" significa un grupo alquilo lineal o ramificado formado por 2 a 6 carbonos con al menos un triple enlace. "Cicloalquilo" significa un sistema de anillo monocíclico compuesto por 3 a 7 carbonos. Los términos con un resto hidrocarburo (por ejemplo, alcoxi) incluyen isómeros lineales y ramificados para la porción de hidrocarburo que están compuestos por 1 a 6 carbonos. "Halo" incluye fluoro, cloro, bromo y yodo. "Haloalquilo" y "haloalcoxi" incluyen todos los isómeros halogenados desde el monohalo hasta el perhalo "Arilo" significa un sistema anular aromático monocíclico o bicíclico que tiene de 5 a 12 átomos de carbono en donde uno o ambos anillos son aromáticos. Algunos ejemplos representativos de grupos arilo incluyen, pero sin limitación, indanilo, indenilo, naftilo, fenilo y tetrahidronaftilo. "Heteroarilo" significa un sistema de anillo aromático monocíclico de 5 a 7 miembros o bicíclico de 8 a 11 miembros con 1-5 heteroátomos seleccionados independientemente entre nitrógeno, oxígeno y azufre. Cuando no se especifica la ubicación de una unión de enlace, la unión puede realizarse en cualquier ubicación apropiada como se entiende por los expertos en la materia. Las combinaciones de sustituyentes y patrones de unión son solo aquellos que dan como resultado compuestos estables como se entiende por los expertos en la materia. Los términos entre paréntesis y paréntesis múltiples pretenden aclarar las relaciones de unión a los expertos en la materia. Por ejemplo, un término, tal como ((R)alquilo), significa un sustituyente alquilo que está sustituido adicionalmente con el sustituyente R.

La invención incluye todas las formas de sal farmacéuticamente aceptables de los compuestos. Las sales farmacéuticamente aceptables son aquellas en las que los contraiones no contribuyen significativamente a la actividad fisiológica o a la toxicidad de los compuestos y, como tales, funcionan como equivalentes farmacológicos. Estas sales pueden prepararse de acuerdo con técnicas orgánicas comunes empleando reactivos disponibles comercialmente.

Algunas formas de sales aniónicas incluyen acetato, acistrato, besilato, bromuro, cloruro, citrato, fumarato, glucouronato, bromhidrato, clorhidrato, yodhidrato, yoduro, lactato, maleato, mesilato, nitrato, pamoato, fosfato, succinato, sulfato, tartrato, tosilato y xinofoato. Algunas formas de sales catiónicas incluyen amonio, aluminio, benzatina, bismuto, calcio, colina, dietilamina, dietanolamina, litio, magnesio, meglumina, 4-fenilciclohexilamina, piperazina, potasio, sodio, trometamina y cinc.

Algunos de los compuestos de la invención existen en formas estereoisoméricas. La invención incluye todas las formas estereoisoméricas de los compuestos incluyendo enantiómeros y diastereómeros. Son conocidos en la técnica métodos para preparar y separar estereoisómeros. La invención incluye todas las formas tautoméricas de los compuestos. La invención incluye atropisómeros e isómeros rotacionales.

La invención pretende incluir todos los isótopos de los átomos que aparecen en los presentes compuestos. Los isótopos incluyen aquellos átomos que tienen el mismo número atómico pero diferentes números másicos. A modo de ejemplo general y sin limitación, los isótopos de hidrógeno incluyen deuterio y tritio. Los isótopos de carbono incluyen 13C y 14C. Los compuestos marcados con isótopos de la invención pueden prepararse generalmente por técnicas convencionales conocidas por los expertos en la materia o por procesos análogos a los descritos en el presente documento, usando un reactivo marcado con isótopos apropiado en lugar del reactivo no marcado empleado de otro modo. Tales compuestos pueden tener diversos usos potenciales, por ejemplo, como patrones y reactivos para determinar la actividad biológica. En el caso de los isótopos estables, dichos compuestos pueden tener el potencial de modificar favorablemente las propiedades biológicas, farmacológicas o farmacocinéticas.

MÉTODOS BIOLÓGICOS

TAMPÓN DE ENSAYO Composición: HEPES 25 mM, NaCl 100 mM, Tween 20 al 0,005 %, BSA al 0,05 % preparado en agua estéril (todos reactivos de Sigma)

CONTROLES:

Control positivo: DMSO al 100 % (1 j l ) hGal-3 etiquetada con His (20 jl)+ B-ASF (20 jl)+ Anticuerpo anti-His Terbio (5 j l ) Anticuerpo Estrep d2 (5 jl).

Control negativo: DMSO al 100% (1 j l ) hGal-3 marcada con His (20 jl)+Anticuerpo anti His Terbio (5 j l ) Anticuerpo Estrep d2 A (5 jl).

PREPARACIÓN DE SOLUCIONES DE PARTIDA:

PROTOCOLO: Los ensayos de Gal-3 se realizaron en placas Opti blancas de 384 en tres réplicas a temperatura ambiente con agitación suave a 250-300 rpm. De las soluciones de partida originales, se prepararon concentraciones soluciones de partida de trabajo de 2,525 X de Gal-3 humana (hGal-3) recombinante etiquetada con His y de B-ASF. De la solución de partida de trabajo, se añadieron a las placas 20 j l de hGal-3 (15 nM) y 20 j l de B-ASF (15 nM). En el control negativo solo se añadió hGal-3. Se preparó un intervalo de concentraciones de soluciones concentradas de trabajo 50 x para los compuestos en DMSO al 100 %. Se añadieron alícuotas de 1 ul de los compuestos a los pocillos y se preincubó con 20 j l de hGal-3 por pocillo durante 30 minutos. A continuación, se añadieron 20 j l de B-ASF y se incubó durante 1 hora más. Para detectar la señal, se añadieron 5 j l (conc. final de 1,0 nM) de anticuerpo anti-His marcado con terbio y se incubó durante 30 min, seguido de la adición de 5 j l (conc. final de 20 nM) de estreptavidina d2, y se incubó durante 1 hora más. La señal de ensayo se detectó utilizando el protocolo de cribado de HTRF (forma siglada de homogeneous time-resolved fluorescence) (longitud de onda de excitación = 340 nm, longitud de onda de emisión = 615 nm/665 nm) en un Envision 2104 Multilabel Reader. Los datos se analizaron utilizando Toolset y Curve Master. Los resultados se informan en la sección experimental (CI50 en jM).

COMPOSICIÓN FARMACÉUTICA Y MÉTODOS DE USO

Los compuestos de la presente invención inhiben a Gal-3. Por consiguiente, otro aspecto de la invención es una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un transportador farmacéuticamente aceptable.

En la presente divulgación, toda referencia a "un método de tratamiento" debe entenderse como referente a "un compuesto para su uso en un método de tratamiento" y no a un método de tratamiento en sí.

Otro aspecto de la invención es un método para el tratamiento de un paciente afectado por una enfermedad o afección seleccionada de fibrosis de órganos (incluyendo hígado, riñón, pulmón, corazón y piel), enfermedades y afecciones hepáticas (incluyendo hepatitis aguda, hepatitis crónica, fibrosis de hígado, cirrosis hepática, hipertensión portal, fallo regenerativo, esteatohepatitis no alcohólica (EHNA), hipofunción hepática y trastorno de la circulación sanguínea hepática), enfermedades proliferativas celulares, cánceres y afecciones (incluidos tumor sólido, metástasis tumoral sólida, fibroma vascular, mieloma, mieloma múltiple, sarcoma de Kaposi, leucemia, leucemia linfocítica crónica (LLC)) y metástasis invasiva de células cancerosas), enfermedades y afecciones inflamatorias (incluyendo psoriasis, nefropatía y neumonía), enfermedades y afecciones del tracto gastrointestinal (incluido síndrome del intestino irritable (SII), enfermedad inflamatoria intestinal (EII) y secreción pancreática anómala), enfermedades y afecciones renales, enfermedades y afecciones asociada a las vías urinarias (incluyendo hiperplasia prostática benigna o síntomas asociados a la enfermedad neuropática de la vejiga, tumor de la médula espinal, hernia de disco intervertebral, estenosis del conducto raquídeo y síntomas derivados de la diabetes), enfermedades y afecciones del tracto urinario inferior (incluida la obstrucción del tracto urinario inferior), enfermedades y afecciones inflamatorias del tracto urinario inferior (incluyendo disuria y polaquiuria), enfermedades y afecciones pancreáticas, enfermedades y afecciones asociadas a la angiogénesis anómala (incluyendo obstrucción arterial), esclerodermia, enfermedades y afecciones asociadas al cerebro (incluyendo infarto cerebral y hemorragia cerebral), dolor neuropático y neuropatía periférica, enfermedades y afecciones oculares (incluyendo degeneración macular senil (DMS), retinopatía diabética, vitreorretinopatía proliferativa (VRP), penfigoide cicatricial y cicatrización de cirugía de glaucoma con filtración) con un compuesto de la presente invención.

Otro aspecto de la invención es un método de tratamiento de la fibrosis renal, fibrosis pulmonar, fibrosis hepática, fibrosis arterial y esclerosis generalizada que comprende administrar un compuesto de la presente invención a un paciente.

Otro aspecto de la invención es un método para el tratamiento de la fibrosis de órganos (incluyendo hígado, riñón, pulmón, corazón y piel) que comprende administrar un compuesto de la presente invención a un paciente.

Otro aspecto de la invención es un método para el tratamiento de enfermedades y afecciones hepáticas (incluyendo hepatitis aguda, hepatitis crónica, fibrosis de hígado, cirrosis hepática, hipertensión portal, fallo regenerativo, esteatohepatitis no alcohólica (EHNA), hipofunción hepática y trastorno de la circulación sanguínea hepática), que comprende administrar un compuesto de la presente invención a un paciente.

Otro aspecto de la invención es un método para el tratamiento de enfermedades proliferativas celulares, cánceres y afecciones (incluidos tumor sólido, metástasis tumoral sólida, fibroma vascular, mieloma, mieloma múltiple, sarcoma de Kaposi, leucemia, leucemia linfocítica crónica (LLC)) y metástasis invasiva de células cancerosas) que comprende administrar un compuesto de la presente invención a un paciente.

Otro aspecto de la invención es un método para el tratamiento de enfermedades y afecciones inflamatorias (incluyendo psoriasis, nefropatía y neumonía) que comprende administrar un compuesto de la presente invención a un paciente.

Otro aspecto de la invención es un método para el tratamiento de enfermedades y afecciones del tracto gastrointestinal (incluyendo síndrome del intestino irritable (SII), enfermedad inflamatoria intestinal (EII) y secreción pancreática anómala) que comprende administrar un compuesto de la presente invención a un paciente.

Otro aspecto de la invención es un método para el tratamiento de enfermedades y afecciones renales que comprende administrar un compuesto de la presente invención a un paciente.

Otro aspecto de la invención es un método para el tratamiento de enfermedades y afecciones asociadas a las vías urinarias (incluyendo hiperplasia prostática benigna o síntomas asociados con la enfermedad neuropática de la vejiga, tumor de la médula espinal, hernia de disco intervertebral, estenosis del conducto raquídeo y síntomas derivados de la diabetes) que comprende administrar un compuesto de la presente invención a un paciente.

Otro aspecto de la invención es un método para el tratamiento de enfermedades y afecciones del tracto urinario inferior (incluida la obstrucción de las vías urinarios bajas), enfermedades y afecciones inflamatorias del tracto urinario inferior (incluyendo disuria y polaquiuria) que comprende administrar un compuesto de la presente invención a un paciente.

Otro aspecto de la invención es un método para el tratamiento de enfermedades y afecciones pancreáticas que comprende administrar un compuesto de la presente invención a un paciente.

Otro aspecto de la invención es un método para el tratamiento de enfermedades y afecciones asociadas a la angiogénesis anómala (incluyendo obstrucción arterial) que comprende administrar un compuesto de la presente invención a un paciente.

Otro aspecto de la invención es un método para el tratamiento de enfermedades y afecciones asociadas al cerebro (incluyendo infarto cerebral y hemorragia cerebral) que comprende administrar un compuesto de la presente invención a un paciente.

Otro aspecto de la invención es un método para el tratamiento del dolor neuropático y la neuropatía periférica que comprende administrar un compuesto de la presente invención a un paciente.

Otro aspecto de la invención es un método para el tratamiento de enfermedades y afecciones oculares (incluyendo degeneración macular senil (DMS), retinopatía diabética, vitreorretinopatía proliferativa (VRP), penfigoide cicatricial y cicatrización de cirugía de glaucoma con filtración) que comprende administrar un compuesto de la presente invención a un paciente.

Los compuestos de la invención pueden utilizarse en el tratamiento y/o la profilaxis de afecciones en las que Gal-3 desempeña un papel.

Los compuestos de la presente invención pueden utilizarse para la fabricación de un medicamento para el tratamiento y/o la profilaxis de una afección en la que la inhibición de la actividad fisiológica de Gal-3 es útil, tal como enfermedades en las que un receptor de Gal-3 participa, está implicado en la etiología o patología de la enfermedad o está asociado de otro modo con al menos un síntoma de la enfermedad.

Los compuestos de la invención pueden utilizarse solos, en combinación con otros compuestos de la presente invención, o en combinación con uno o más, preferentemente uno a dos, de otros agentes.

"Terapéuticamente eficaz" significa la cantidad de agente necesaria para proporcionar un beneficio significativo para el paciente tal como lo entienden los facultativos del campo del dolor.

"Paciente" significa una persona afectada por dolor y que es adecuada para la terapia tal como lo entienden los facultativos del campo.

"Tratamiento", "terapia" "régimen", y los términos relacionados se utilizan como lo entienden los facultativos del campo.

Los compuestos de la presente invención se proporcionan generalmente como composiciones farmacéuticas compuestas por una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención o su sal farmacéuticamente aceptable y un transportador farmacéuticamente aceptable, y pueden contener excipientes convencionales. Una cantidad terapéuticamente eficaz es la que es necesaria para proporcionar un beneficio significativo al paciente. Los transportadores farmacéuticamente aceptables son los transportadores conocidos convencionalmente que tienen perfiles de seguridad aceptables. Las composiciones abarcan todas las formas sólidas y líquidas comunes, incluyendo cápsulas, comprimidos, pastillas y polvos, así como suspensiones líquidas, jarabes, elixires y soluciones. Las composiciones se fabrican utilizando técnicas de formulación comunes y para las composiciones generalmente se utilizan excipientes (tales como agentes aglutinantes y humectantes) y vehículos (tales como agua y alcoholes) convencionales. Véase, por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, 17a edición, Mack Publishing Company, Easton, PA (1985).

Las composiciones sólidas se formulan normalmente en unidades de dosificación y se prefieren las composiciones que proporcionan de aproximadamente 1 a 1000 mg del principio activo por dosis. Algunos ejemplos de dosificaciones son 1 mg, 10 mg, 100 mg, 250 mg, 500 mg y 1000 mg. Generalmente, estarán presentes otros agentes antirretrovíricos en un intervalo de unidades similar a los agentes de esa clase utilizados clínicamente. Normalmente, esto es de 0,25-1000 mg/unidad.

Las composiciones líquidas habitualmente están en intervalos de unidades de dosificación. En general, la composición líquida estará en un intervalo de dosificación unitaria de 1-100 mg/ml. Algunos ejemplos de dosificaciones son 1 mg/ml, 10 mg/ml, 25 mg/ml, 50 mg/ml y 100 mg/ml.

La invención abarca todos los modos de administración convencionales; se preferentes los métodos orales y parenterales. En general, la posología será similar a la de otros agentes utilizados clínicamente. Normalmente, la dosis diaria será de 1-100 mg/kg de peso corporal al día. En general, se precisa más compuesto por vía oral y menos por vía parenteral. La posología específica, sin embargo, la determinará un médico utilizando un criterio médico adecuado.

MÉTODOS QUÍMICOS

Los compuestos de esta invención pueden prepararse por diversos métodos conocidos en la materia, incluyendo los de los siguientes esquemas y los de la sección de realizaciones específicas. La numeración de la estructura y la numeración de las variables que se muestran en los esquemas sintéticos son distintas de, y no deben confundirse con, la estructura o la numeración de las variables en las reivindicaciones o en el resto de la memoria descriptiva. Las variables de los esquemas solo pretenden ilustrar cómo preparar algunos de los compuestos de esta invención. La divulgación no se limita a los ejemplos ilustrativos anteriores y los ejemplos deben considerarse en todos los aspectos como ilustrativos y no restrictivos, haciéndose referencia a las reivindicaciones, en lugar de a los ejemplos anteriores, y todos los cambios que entran dentro del significado y rango de por lo tanto, se pretende que se adopte la equivalencia de las reivindicaciones.

SECCIÓN A

El tiempo de retención de CL-EM/HPLC analítico notificado para cada ejemplo e intermedio utiliza una de la siguiente condición analítica general de CL-EM/HPLC

Métodos CL/EM:

Método CL/EM 1

% inicial de B = 0, % final de B = 100 sobre un gradiente de 2 minutos; se mantuvo a B al 100 % durante 1 min

Caudal = 0,8 ml/min

Longitud de onda del detector = 254 nm

Disolvente A = agua al 90 %, metanol al 10 %, TFA al 0,1 %

Disolvente B = agua al 10 %, metanol al 90 %, 0,1 %: TFA

Columna = BEH C182,1 X 50 mm, 1,7 pm

Temp. del horno = 40 °C

Método CL/EM 2

Caudal = 0,8 ml/min

Longitud de onda del detector = 220 nm

Disolvente A = agua al 90 %, metanol al 10 %, TFA al 0,1 %

Disolvente B = agua al 10 %, metanol al 90 %, 0,1 %: TFA

Columna = BEH C182,1 X 50 mm, 1,7 pm

Temp. del horno = 40 °C

Método CL/EM 3

Condiciones: % inicial de B = 0, % final de B = 100 sobre un gradiente de 4 minutos; se mantuvo a B al 100 % durante 1 min Disolvente A: agua al 90 %, metanol al 10 %, acetato amónico 10 mM Disolvente B: agua al 10 %, metanol al 90 %, acetato amónico 10 mM

Columna: Phenomenex Luna C18, 2,0 x 50 mm, 3 pm

Caudal: 0,8 ml/min

Longitud de onda del detector: 220 nm

Método CL/EM 4

% inicial de B = 0, % final de B = 100 sobre un gradiente de 2 minutos; se mantuvo a B al 100 % durante 1 min Caudal = 0,8 ml/min

Longitud de onda del detector = 220 nm

Disolvente A = agua al 90 %, acetonitrilo al 10 %, TFA al 0,05 %

Disolvente B = agua al 10 %, acetonitrilo al 90 %, TFA al 0,05 %

Columna = BEH C182,1 x 50 mm, partículas de 1,7 pm

Métodos de HPLC preparativa

Método HPLC prep. 1

% inicial de B = 5, % de B = 50 sobre un gradiente de 15 min, % final de B = 100 sobre un gradiente adicional de 3 min; se mantuvo a B al 100 % durante 5 min

Caudal = 40 ml/min

Longitud de onda del detector = 254 nm

Disolvente A = acetonitrilo al 5 %, agua al 95 %, TFA al 0,1 %

Disolvente B = acetonitrilo al 95 %, agua al 5 % TFA al 0,1 %

Columna = Waters Sunfire 30 x 150 mm, 5 pm, C18

Método HPLC prep. 2

% inicial de B = 5, % final de B = 100 sobre un gradiente 20 min; se mantuvo a B al 100 % durante 5 min Caudal = 40 ml/min

Longitud de onda del detector = 254 nm

Disolvente A = acetonitrilo al 5 %, agua al 95 %, TFA al 0,1 %

Disolvente B = acetonitrilo al 95 %, agua al 5 % TFA al 0,1 %

Columna = Waters Sunfire 30 x 150 mm, 5 pm, C18

Método HPLC prep. 3

% inicial de B = 5, % de B = 60 sobre un gradiente de 15 min, % final de B = 100 sobre un gradiente adicional de 3 min; se mantuvo a B al 100 % durante 5 min

Caudal = 40 ml/min

Longitud de onda del detector = 254 nm

Disolvente A = acetonitrilo al 5 %, agua al 95 %, TFA al 0,1 %

Disolvente B = acetonitrilo al 95 %, agua al 5 %, TFA al 0,1 %

Columna = Waters Sunfire 30 x 150 mm, 5 pm, C18

Método HPLC prep. 4

% inicial de B = 30, % final de B = 100 sobre un gradiente de 15 minutos; se mantuvo a B al 100 % durante 5 min Caudal = 40 ml/min Longitud de onda del detector = 220 nm

Disolvente A = metanol al 10 %, agua al 90 %, TFA al 0,1 %

Disolvente B = metanol al 90 %, agua al 10 % TFA al 0,1 %

Columna = Luna Axia 30 x 100 mm, 5 pm, C18

Métodos de MPLC preparativa

Método MPLC prep. 1

% inicial de B = 5, % final de B = 100 sobre un gradiente de 18 min (14 volúmenes de columna); se mantuvo a B al 100 % durante 4 min (3 volúmenes de columna)

Caudal = 40 ml/min

Longitud de onda del detector = 254 nm

Disolvente A = acetonitrilo al 5 %, agua al 95 %, TFA al 0,1 %

Disolvente B = acetonitrilo al 95 %, agua al 5 % TFA al 0,1 %

Columna = columna de 50 g Redisep Gold, C18

Métodos de HPLC analítica

Método HPLC analítico 1

Condiciones: B al 10 % ^ B al 100 % sobre un gradiente de 15 min; se mantuvo a B al 100 % durante 10 min

Disolvente A: acetonitrilo al 5 %, agua al 95 %, TFA al 0,1 %

Disolvente B: acetonitrilo al 95 %, agua al 5 %, TFA al 0,1 %

Columna: Waters Sunfire C18, 3,0 x 150 mm, 3,5 pm

Caudal: 0,5 ml/min

Longitud de onda del detector: 254 nm

Método HPLC analítico 2

Disolvente A: acetonitrilo al 5 %, agua al 95 %, TFA al 0,1 %

Disolvente B: acetonitrilo al 95 %, agua al 5 %, TFA al 0,1 %

Columna: Waters Xbridge phenyl, 3,0 x 150 mm, 3,5 pm

Caudal: 0,5 ml/min

Longitud de onda del detector: 254 nm

Método HPLC analítico 3

Condiciones: B al 10 % ^ B al 100 % sobre un gradiente de 15 min; se mantuvo a B al 100 % durante 3 min

Disolvente A: acetonitrilo al 5 %, agua al 95 %, TFA al 0,1 %

Disolvente B: acetonitrilo al 95 %, agua al 5 %, TFA al 0,1 %

Columna: Xselect CSH C18, 3,0 x 150 mm, 3,5 pm

Caudal: 1,0 ml/min

Longitud de onda del detector: 254 nm

Método HPLC analítico 4

Disolvente A: acetonitrilo al 5 %, agua al 95 %, TFA al 0,1 %

Disolvente B: acetonitrilo al 95 %, agua al 5 %, TFA al 0,1 %

Columna: Zorbax Bonus RP, 3,0 x 150 mm, 3,5 |jm

Caudal: 1,0 ml/min

Longitud de onda del detector: 254 nm

Método HPLC prep. (detección CL/EM) 5

% inicial de B = 10, % final de B = 50 sobre un gradiente de 20 minutos; se mantuvo a B al 100 % durante 4 min

Caudal = 20 ml/min

Longitud de onda del detector = 220 nm (Recopilación de fracciones activada por señales CLEM) Disolvente A = acetonitrilo al 5 %, agua al 95 %, acetato amónico al 0,1 %

Disolvente B = acetonitrilo al 95 %, agua al 5 % acetato amónico al 0,1 %

Columna = Xbridge C18, 200 mm x 19 mm, partículas de 5 jm

Método HPLC prep. (detección CL/EM) 6

% inicial de B = 5, % final de B = 45 sobre un gradiente de 20 minutos; se mantuvo a B al 100 % durante 4 min

Caudal = 20 ml/min

Longitud de onda del detector = 220 nm (Recopilación de fracciones activada por señales CLEM) Disolvente A = acetonitrilo al 5 %, agua al 95 %, TFA al 0,1 %

Disolvente B = acetonitrilo al 95 %, agua al 5 % TFA al 0,1 %

Columna = Xbridge C18, 200 mm x 19 mm, partículas de 5 jm

Método HPLC prep. 7

% inicial de B = 0, % final de B = 100 sobre un gradiente de 10 minutos; se mantuvo a B al 100 % durante 2 min

Caudal = 40 ml/min

Longitud de onda del detector = 220 nm

Disolvente A = acetonitrilo al 10 %, agua al 90 %, TFA al 0,1 %

Disolvente B = acetonitrilo al 90 %, agua al 10 % TFA al 0,1 %

Columna = Phenomonex Luna AXIA C18, 30 mm x 100 mm, partículas de 5 jm

Métodos analíticos CL/EM

Método analítico CL/EM 1

% inicial de B = 0, % final de B = 100 sobre un gradiente de 3 minutos; se mantuvo a B al 100 % durante 0,75 min

Caudal = 1 ml/min

Longitud de onda del detector = 220 nm

Disolvente A = acetonitrilo al 5 %, agua al 95 %, acetato amónico al 0,1 %

Disolvente B = acetonitrilo al 95 %, agua al 5 % acetato amónico al 0,1 %

Columna = Xbridge C18, 2,1 mm x 50 mm, partículas de 1,7 jm

Temperatura = 50 °C

Método analítico CL/EM 2

% inicial de B = 0, % final de B = 100 sobre un gradiente de 3 minutos; se mantuvo a B al 100 % durante 0,75 min Caudal = 1 ml/min

Longitud de onda del detector = 220 nm

Disolvente A = acetonitrilo al 5 %, agua al 95 %, TFA al 0,1 %

Disolvente B = acetonitrilo al 95 %, agua al 5 % TFA al 0,1 %

Columna = Xbridge C18, 2,1 mm x 50 mm, partículas de 1,7 jm

Temperatura = 50 °C

Preparación de intermedios (1)

Preparación de 1-(difluorometil)-3-etinilbenceno

A una solución agitada de 3-etinilbenzaldehído (200 mg, 1,537 mmol) en CH2CI2 (4 ml) en atmósfera de N2 se le añadió DAST (0,305 ml, 2,305 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. La mezcla se transfirió a una ampolla de decantación que contenía solución acuosa saturada de NaHCO3 (10 ml). La capa acuosa se extrajo con diclorometano (3 x 15 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 0 % ^ 20 % en hexanos; columna de 40 g) para proporcionar 1-(difluorometil)-3-etinilbenceno (104 mg, 0,684 mmol, rendimiento del 45 %) en forma de un aceite incoloro. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,66 (s, 1H), 7,62 (dd, J = 7,7, 1,1 Hz, 1H), 7,56-7,50 (m, 1H), 7,48 - 7,42 (m, 1H), 6,65 (t, J = 56,2 Hz, 1H), 3,15 (s, 1H); RMN 19F (376 MHz, CLOROFORMO-d) 5-111,50 (s, 1F); RMN 13C (101 MHz, CLOROFORMO-d) 5 134,3 (t, J = 22,7 Hz, 1C), 133,9 (t, J = 1,9 Hz, 1C), 128,9 (t, J = 6,2 Hz, 1C), 128,4, 125,4 (t, J = 6,2 Hz, 1C), 122,5, 113,7 (t, J = 239,3 Hz, 1C), 82,2, 77,9.

Preparación de 1-(difluorometoxi)-3-etinilbenceno

A una solución de 3-etinilfenol (0,264 g, 2,235 mmol) en CH2O2 (9 ml) se le añadió hidróxido potásico acuoso (20 % en peso) (3,13 ml, 13,41 mmol). Después, se añadió (bromodifluorometil)trimetilsilano (0,556 ml, 3,58 mmol) mediante una jeringa y la mezcla de reacción se agitó a ta durante 2 h. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía agua (10 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 15 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 0 % ^ 20 % en hexanos; columna de 40 g) para proporcionar 1-(difluorometoxi)-3-etinilbenceno (195 mg, 1,160 mmol, rendimiento del 52 %) en forma de un aceite incoloro. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,42-7,32 (m, 2H), 7,28 (s a, 1H), 7,15 (dt, J = 7,1,2,1 Hz, 1H), 6,53 (t, J = 73,5 Hz, 1H), 3,14 (s, 1H); RMN 19F (376 MHz, CLOROFORMO-d) 5 -80,98 (s, 1F); RMN 13C (101 MHz, CLOROFORMO-d) 5150,5, 129,4, 128,8, 123,5, 122,7, 120,0, 115,3 (t, J=260,5 Hz, 1C), 82,0, 77,9.

Preparación de 2-etinil-5-fluoropirimidina

Se desgasificó una solución de 2-cloro-5-fluoropirimidina (0,8 g, 6,04 mmol) y etiniltrimetilsilano (1,779 g, 18,11 mmol) en tolueno (30 ml) en un recipiente de presión con N2. Después, se añadieron trietilamina (3,37 ml, 24,15 mmol), yoduro de cobre (I) (0,115 g, 0,604 mmol) y dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II) (0,424 g, 0,604 mmol). El recipiente se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se calentó a 60 °C durante 16 h. La mezcla se enfrió y se filtró a través de una capa de Celite. El filtrado se transfirió a un embudo de decantación que contenía solución acuosa saturada de NaHCO3 (25 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (25 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 5 % > 15 % en hexanos; columna de 120 g) para proporcionar 5-fluoro-2-((trimetilsilil)etinM)pirimidina (779 mg, 4,01 mmol, rendimiento del 66 %) en forma de un sólido de color amarillo: RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,60 (s, 2H), 0,32 (s, 9H); CL/EM (IEN) m/e 195,0 [(M+H)+, calc. para C gH ^F^S i 195,1], tR = 1,81 min (Método 2).

Etapa 2

A una mezcla de 5-fluoro-2-((trimetilsilil)etinil)pirimidina (760 mg, 3,91 mmol) en MeOH (20 ml) se le añadió carbonato potásico anhidro (81 mg, 0,587 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se trató con solución acuosa saturada de NH4O (3 ml) y HCl 1 N (0,4 ml). Después, la mezcla se concentró para retirar la mayoría del metanol. El líquido restante se transfirió a un embudo de decantación que contenía agua (20 ml) y solución acuosa saturada de NaHCO3 (20 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 30 % ^ 60 % en hexanos; columna de 80 g) para proporcionar 2- etinil-5-fluoropirimidina (349 mg, 2,86 mmol, rendimiento del 73 %) en forma de un sólido de color castaño. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 8,62 (s, 2H), 3,15 (s, 1H); RMN 19F (376 MHz, CLOROFORMO-d) 5 -134,28 (s, 1F); CL/EM (IEN) m/e 123,0 [(M+H)+, calc. para C6H4FN2123,0], tR = 0,71 min (Método 2).

Preparación de 2-etinil-5-metoxipirimidina

A una mezcla de 5-fluoro-2-((trimetilsilil)etinil)pirimidina (310 mg, 1,596 mmol) en MeOH (8 ml) se le añadió carbonato potásico anhidro (33,1 mg, 0,239 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 14 h. La CL/EM mostró la formación de 2-etinil-5-fluoropirimidina junto con 2-etinil-5-metoxipirimidina La mezcla se concentró y se transfirió a un embudo de decantación que contenía agua (10 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 30 % ^ 60 % en hexanos; columna de 40 g) para proporcionar 2-etinil-5-fluoropirimidina (67 mg, 0,549 mmol, rendimiento del 34 %) en forma de un sólido de color castaño y 2-etinil-5-metoxipirimidina (20 mg, 0,149 mmol, rendimiento del 9 %) en forma de una espuma de color blanco.

Datos para 2-etinil-5-fluoropirimidina:

RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,62 (s, 2H), 3,15 (s, 1H); CL/EM (IEN) m/e 123,0 [(M+H)+, calc. para C6H4FN2 123,0], tR = 0,50 min (Método 1).

Datos para 2-etinil-5-metoxipirimidina:

RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,40 (s, 2H), 3,97 (s, 3H), 3,07 (s, 1H);

CL/EM (IEN) m/e 135,1 [(M+H)+. calc. para C7H7N2O 135,1], tR = 0,72 min (Método 1).

Preparación de 5-etinil-2-metoxipirimidina

En un tubo cerrado herméticamente, se combinaron 5-bromo-2-fluoropirimidina (175 mg, 0,989 mmol), cloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II) (17,35 mg, 0,025 mmol), yoduro de cobre (I) (4,71 mg, 0,025 mmol) y diisopropilamina (1691 |jl, 11,87 mmol) en una atmósfera de nitrógeno. Después, se añadió etiniltrimetilsilano (151 j l, 1,088 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 40 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se inactivó con agua y se extrajo con CH2O2 (3 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 0 % ^ 30 % en hexanos; columna de 40 g) para proporcionar 2-fluoro-5-((trimetilsilil)etinil)pirimidina (128 mg, 0,659 mmol, rendimiento del 67 %). RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,70 (d, J=1,5 Hz, 2H), 0,29 (s, 9H); CL/EM (IEN) m/e 195,0 [(M+H)+, calc. para C gH ^F^S i 195,1], fo = 1,89 min (Método 2).

Etapa 2

En un matraz de fondo redondo, se añadió hidróxido potásico (72,2 mg, 1,287 mmol) a una solución de 2-fluoro-5-((trimetilsilil)etinil)pirimidina (125 mg, 0,643 mmol) en MeOH (2 ml) y CH2O2 (1,000 ml). La reacción se agitó a ta durante 3 h. La reacción se interrumpió con agua (10 ml) y se extrajo con DCM (3x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 0 % ^ 30 % en hexanos; columna de 40 g) para proporcionar 5-etinil-2-metoxipirimidina (70 mg, 0,522 mmol, rendimiento del 81 %) RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,63 (s, 2H), 4,05 (s, 3H), 3,29 (s, 1H); RMN 13C (101 MHz, CLOROFORMO-d) 5163,9, 161,6, 111,4, 81,9, 54,9; CL/EM (IEN) m/e 135,0 [(M+H)+, calc. para C7H7N2O 135,0], tR = 1,39 min (Método 2).

Preparación de N-(2-etinilpirimidin-4-il)acetamida

En un matraz de fondo redondo, se añadió cloruro de acetilo (0,823 ml, 11,58 mmol) a una solución de 2-cloropirimidin-4-amina (750 mg, 5,79 mmol) en piridina (1,873 ml, 23,16 mmol) y CH2O2 (30 ml). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 16 h. La mezcla de reacción se lavó con HCl 1 N frío (2 x 40 ml), bicarbonato sódico acuoso saturado (50 ml) y salmuera (50 ml), se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 20 % ^ 65 % en hexanos; columna de 120 g) para proporcionar N-(2-cloropirimidin-4-il)acetamida (610 mg, 3,56 mmol, rendimiento del 61 %) en forma de un sólido de color amarillo pálido. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,53 (d, J=5,8 Hz, 1H), 8,13 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 2,27 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 171,9 [(M+Na)+, calc. para C6H6ClN3ONa 172,1], tR = 0,72 min (Método 2).

Etapa 2. Preparación de N-(2-((trimetilsilil)etinil)pirimidin-4-il)acetamida

Una solución de N-(2-cloropirimidin-4-il)acetamida (240 mg, 1,399 mmol) y etiniltrimetilsilano (0,233 ml, 1,678 mmol) en tolueno (6 ml) se desgasificó con N2. Después, se añadieron trietilamina (0,780 ml, 5,59 mmol), yoduro de cobre (l) (26,6 mg, 0,140 mmol) y dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II) (98 mg, 0,140 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 60 °C durante 16 h. La mezcla se enfrió a ta y se transfirió a un embudo de decantación que contenía solución acuosa saturada de NaHCO3 (25 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (25 ml) y salmuera (25 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 5 % ^ 50 % en hexanos; columna de 40 g) para proporcionar N-(2-((trimetilsilil)etinil)pirimidin-4-il)acetamida (120 mg, 0,514 mmol, rendimiento del 37 %). RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,62 (d, J=5,8 Hz, 1H), 8,28 (s a, 1H), 8,12 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 2,25 (s, 3H), 0,30 (s, 9H); CL/EM (IEN) m/e 234,0 [(M+H)+, calc. para C n H ^ O S i 234,1], tR = 1,77 min (Método 2). Etapa 3

En un vial cerrado herméticamente, se añadió TBAF (1,0 M en THF) (0,321 ml, 0,321 mmol) a una solución de N-(2-((trimetilsilil)etinil)pirimidin-4-il)acetamida (50 mg, 0,214 mmol) en THF (1,5 ml) a 0 °C. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 1 h. El producto en bruto se concentró al vacío y se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 20 % ^ 80 % en hexanos; columna de 24 g) para proporcionar N-(2-etinilpirimidin-4-il)acetamida (22 mg, 0,137 mmol, rendimiento del 64 %). RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,63 (d, J=5,8 Hz, 1H), 8,16 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 8,03 (s a, 1H), 3,12 (s, 1H), 2,26 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e162,0 [(M+Na)+, calc. para CsH7N3ONa 162,1], tR = 0,98 min (Método 2).

Preparación de N-(2-etinil-5-metoxipirimidin-4-il)acetamida

En un matraz de fondo redondo, se añadió cloruro de acetilo (0,891 ml, 12,53 mmol) a una solución de 2-cloro-5-metoxipirimidin-4-amina (1 g, 6,27 mmol) y piridina (2,027 ml, 25,07 mmol) en CH2Cl2 (30 ml). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 16 h. La CL/EM mostró la formación de productos mono y diacetilados. La mezcla de reacción se diluyó con CH2Ch (20 ml) y la capa orgánica se lavó con HCl 1 N (50 ml), bicarbonato sódico sat. (50 ml) y salmuera (50 ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 20 % que contenía MeOH al 5 %/hexanos al 80 % ^ acetato de etilo al 70 % que contenía MeOH al 5 %/hexanos al 20 %; columna de 120 g) para proporcionar N-(2-cloro-5-metoxipirimidin-4-il)acetamida (430 mg, 2,133 mmol, rendimiento del 34%) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 7,98 (s, 1H), 3,99 (s, 3H), 2,66 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 201,9 [(M+H)+, calc. para C7H9ON3O2202,0], k = 0,99 min (Método 2).

Etapa 2. Preparación de N-(5-metoxi-2-((trimetilsilil)etinil)pirimidin-4-il)acetamida

Una solución de N-(2-cloro-5-metoxipirimidin-4-il)acetamida (430 mg, 2,133 mmol) y etiniltrimetilsilano (0,355 ml, 2,56 mmol) en tolueno (15 ml) se desgasificó con N2. Después, se añadieron trietilamina (1,189 ml, 8,53 mmol), yoduro de cobre (I) (40,6 mg, 0,213 mmol) y dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II) (150 mg, 0,213 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 60 °C durante 16 h. La mezcla se enfrió a ta y se transfirió a un embudo de decantación que contenía solución acuosa saturada de NaHCO3 (25 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 25 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (25 ml) y salmuera (25 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 0 % ^ 80 % en hexanos; columna de 80 g) para proporcionar N-(5-metoxi-2-((trimetilsilil)etinil)pirimidin-4-il)acetamida (46 mg, 0,175 mmol, rendimiento del 8 %). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,08 (s, 1H), 4,00 (s, 3H), 2,68 (s, 3H), 0,37-0,25 (m, 9H); CL/EM (IEN) m/e 264,0 [(M+H)+, calc. para C12H^N3O2Si 264,1], tR = 1,71 min (Método 2).

Etapa 3

En un matraz de fondo redondo, se añadió TBAF (1,0 M en THF) (0,262 ml, 0,262 mmol) a una solución de N-(5-metoxi-2-((trimetilsilil)etinil)pirimidin-4-il)acetamida (46 mg, 0,175 mmol) a 0 °C. La mezcla de reacción se calentó a ta y se agitó durante 1 h. El producto en bruto se concentró al vacío y se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 20% ^ 100% en hexanos; columna de 24 g) para proporcionar N-(2-etinil-5-metoxipirimidin-4-il)acetamida (21 mg, 0,110 mmol, rendimiento del 63 %). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 8,10 (s, 1H), 8,03 (s a, 1H), 4,01 (s, 3H), 3,00 (s, 1H), 2,68 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 192,0 [(M+H)+, calc. para C9H10N3O2192,1], tR = 0,87 min (Método 2).

Preparación de 2-etiniltiazol

Una solución de 2-bromotiazol (500 mg, 3,05 mmol) y etiniltrimetilsilano (0,507 ml, 3,66 mmol) en tolueno (15 ml) se desgasificó con N2. Después, se añadieron trietilamina (1,700 ml, 12,19 mmol), yoduro de cobre (I) (58,1 mg, 0,305 mmol) y dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II) (214 mg, 0,305 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 60 °C durante 16 h. La mezcla se enfrió a ta y se transfirió a un embudo de decantación que contenía solución acuosa saturada de NaHCO3 (25 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 25 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (25 ml) y salmuera (25 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 0 % ^ 40 % en hexanos; columna de 80 g) para proporcionar 2-((trimetMsiMl)etinil)tiazol (330 mg, 1,820 mmol, rendimiento del 60 %). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,82 (d, J=3,3 Hz, 1H), 7,35 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 0,30 (s, 9H); CL/EM (IEN) m/e 181,9 [(M+H)+, calc. para CaH^NSSi 182,0], k = 1,91 min (Método 2).

Etapa 2

A una mezcla de 2-((trimetilsilil)etinil)tiazol (330 mg, 1,820 mmol) en MeOH (20 ml) se le añadió carbonato potásico anhidro (37,7 mg, 0,273 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se trató con solución acuosa saturada de NH4O (5 ml) y HCl 1 N (3 ml). Después, la mezcla se concentró para retirar la mayoría del metanol. El líquido restante se transfirió a un embudo de decantación que contenía agua (20 ml) y solución acuosa saturada de NaHCO3 (20 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 0 % ^ 50 % en hexanos; columna de 40 g) para proporcionar 2-etiniltiazol (82 mg, 0,751 mmol, rendimiento del 41 %) en forma de un sólido de color castaño. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,85 (d, J=3,3 Hz, 1H), 7,39 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 3,50 (s, 1H); CL/EM (IEN) m/e 109,9 [(M+H)+, calc. para C5H4NS 110,0], tR = 1,08 min (Método 2).

Preparación de 5-etinil-2-(trifluorometil)pirimidina

Una solución de 5-bromo-2-(trifluorometil)pirimidina (230 mg, 1,013 mmol) y etiniltrimetilsilano (0,168 ml, 1,216 mmol) en tolueno (8 ml) se desgasificó con N2. Después, se añadieron trietilamina (0,565 ml, 4,05 mmol), yoduro de cobre (l) (19,30 mg, 0,101 mmol) y dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II) (71,1 mg, 0,101 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 60 °C durante 16 h. La mezcla se enfrió a ta y se transfirió a un embudo de decantación que contenía solución acuosa saturada de NaHCO3 (25 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (25 ml) y salmuera (25 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 0 % ^ 75 % en hexanos; columna de 40 g) para proporcionar 2-(trifluorometil)-5-((trimetilsilil)etinil)pirimidina (230 mg, 0,941 mmol, rendimiento del 93 %). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,91 (s, 2H), 0,30 (s, 9H); CL/EM (IEN) m/e 245,0 [(M+H)+, calc. para C ^ H ^ ^ S i 245,1], tR = 2,13 min (Método 2).

Etapa 2

A una mezcla de 2-(trifluorometil)-5-((trimetilsilil)etinil)pirimidina (130 mg, 0,532 mmol) en MeOH (5 ml) se le añadió carbonato potásico anhidro (11,03 mg, 0,080 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se trató con solución acuosa saturada de NH4O (10 ml) y HCl 1 N (1 ml). Después, la mezcla se concentró para retirar la mayoría del metanol. El líquido restante se transfirió a un embudo de decantación que contenía agua (20 ml) y solución acuosa saturada de NaHCO3 (20 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (20 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 0 % ^ 40 % en hexanos; columna de 24 g) para proporcionar 5-etinil-2-(trifluorometil)pirimidina (25 mg, 0,145 mmol, rendimiento del 27 %). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,98 (s, 2H), 3,57 (s, 1H); CL/EM (IEN) m/e 173,0 [(M+H)+, calc. para C7H4F3N2173,0], tR = 1,51 min (Método 2).

Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6R)-3-acetoxi-6-bromo-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

diol

A una solución de (2R,3R,4S,5R,6S)-2-(hidroximetil)-6-(feniltio)tetrahidro-2H-piran-3,4,5-triol (Ohlsson, J., Magnusson, G. Carbohydr. Res., 2000, 329, 49) (29,5 g, 102 mmol) en MeCN (204 ml) (desgasificado con N2 (2 x)) se le añadió 1-(dimetoximetil)-4-metoxibenceno (22,54 ml, 132 mmol). Se añadió monohidrato del ácido ptoluenosulfónico (1,937 g, 10,18 mmol) y la mezcla de reacción se agitó en atmósfera de N2 durante 18 h. LA solución inicialmente homogénea se volvió una mezcla heterogénea. La mezcla se concentró a aproximadamente 1/3 de su volumen, después se diluyó con K2HPO41 N (ac.) (200 ml). El precipitado resultante se recogió por filtración al vacío, se lavó con agua, y el producto se purificó adicionalmente mediante la trituración con éter. El sólido se recogió por filtración al vacío, y el producto se secó al vacío para proporcionar (4aR,6S,7R,8R,8aR)-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxino-7,8-diol (28,0 g, 71,7 mmol, rendimiento del 70%) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 57,70 - 7,63 (m, 2H), 7,41 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,33-7,26 (m, 3H), 6,92 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 5,55 (s, 1H), 4,61 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 4,25 -4,18 (m, 2H), 4,10 (dd, J = 12,4, 1,4 Hz, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,73-3,58 (m, 3H); CL/EM (IEN) m/e 391,1 [(M+H)+, calc. para C20H23O6S 391,1]; ír = 3,29 min (Método 3).

Etapa 2. Preparación de acetato de (4aR,6S,7R,8S,8aS)-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)-8-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxin-7-ilo

A una solución de (4aR,6S,7R,8R,8aR)-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxino-7,8-diol (40,0 g, 102 mmol) en CH2Ch (427 ml) se le añadió piridina (33,1 ml, 410 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a - 10 °C. Después, se añadió gota a gota Tf2O (24,23 ml, 143 mmol). La mezcla de reacción se mantuvo a -10 °C durante 1 h, y después se dejó calentar lentamente a ta. Después de 2 h, La CLEM mostró aprox. 75 % de conversión. La mezcla de reacción se enfrió a 0 °C, y después, se añadió gota a gota cloruro de acetilo (8,74 ml, 123 mmol) y la mezcla de reacción se dejó que alcanzara ta durante una noche. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación y se lavó con HCl 1 N (3 x 150 ml), K2HPO4 1 M (150 ml) y salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El semisólido resultante se purificó por trituración usando una cantidad mínima de CH2Ch para suspender el sólido. Después, se añadió éter y la mezcla se agitó hasta que se rompieron los trozos sólidos. El producto se aisló por filtración al vacío y se secó al vacío para formar acetato de (4aR,6S,7R,8S,8aS)-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)-8-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxin-7-ilo (33,04 g, 58,5 mmol, rendimiento del 57 %) en forma de un sólido de color blanco. El filtrado se concentró y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (cartucho de 120 g; A = hexanos, B = acetato de etilo; grad. de 60 min; caudal de B al 0 % a B al 100 %= 120 ml/min). Las fracciones puras se combinaron, se concentraron y se secaron al vacío para proporcionar acetato de (4aR,6S,7R,8S,8aS)-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)-8-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxin-7-ilo adicional (6,2 g, 10,98 mmol, rendimiento del 11 %) en forma de un sólido de color amarillo pálido. El rendimiento total fue de 39,24 g (rendimiento del 68 %). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 57,58-7,50 (m, 2H), 7,41 - 7,32 (m, 3H), 7,31 -7,25 (m, 2H), 7,01 - 6,93 (m, 2H), 5,72 - 5,66 (m, 2H), 5,22 - 5,17 (m, 2H), 4,66 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 4,16 (dd, J = 3,3, 1,3 Hz, 2H), 3,96 (s, 1H), 3,79 (s, 3H), 2,09 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 565,0 [(M+H)+, calc. para C23H24F3O9S2565,1], ír = 4,10 min (Método 3).

Etapa 3. Preparación de acetato de (4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-hidroxi-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxin-7-ilo

A un matraz de fondo redondo de 1 l se le añadieron acetato de (4aR,6S,7R,8S,8aS)-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)-8-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxin-7-ilo (15,8 g, 28,0 mmol), nitrito potásico (11,82 g, 139 mmol) y DMF (347 ml). La mezcla de reacción se calentó a 50 °C durante 18 h. La mezcla se enfrió y se diluyó con agua (1 l) y se extrajo con EtOAc (2 x 500 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (cartucho de 330 g; A = hexanos, B = acetato de etilo; grad. de 45 min; caudal de B al 0 % a B al 100 %= 120 ml/min). Las fracciones puras se combinaron, se concentraron y se secaron al vacío para formar acetato de (4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-hidroxi-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxin-7-ilo (24,0 g, 42,2 mmol, rendimiento del 61 %) en forma de un sólido de color amarillo pálido. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 57,56-7,49 (m, 2H), 7,37 - 7,28 (m, 5H), 7,01 - 6,90 (m, 2H), 5,73 (d, J = 4,2 Hz, 1H), 5,55 (s, 1H), 5,20 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 4,77 (dd, J = 10,3, 3,1 Hz, 1H), 4,14 -4,01 (m, 3H), 3,98 - 3,93 (m, 1H), 3,86 (s, 1H), 3,78 (s, 3H), 2,03 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 433,1 [(M+H)+, calc. para C22H25 O7S 433,1]; ír = 3,68 min (Método 3).

Etapa 4. Preparación de acetato de (4aR,6S,7R,8R,8aS)-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)-8-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxin-7-ilo

A una solución de acetato de (4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-hidroxi-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxin-7-ilo (3,00 g, 6,94 mmol) en CH2Ch (50 ml) se le añadió piridina (2,81 ml, 34,7 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a -10 °C y se añadió anhídrido tríflico (2,344 ml, 13,87 mmol) lentamente mediante una jeringa. La mezcla de reacción se agitó durante 3 h mientras se dejaba calentar hasta 0 °C. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía HCl 1 N frío (50 ml). La capa acuosa se extrajo con diclorometano (3 x 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con solución acuosa saturada de NaHCO3 (25 ml) y salmuera (25 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron para proporcionar acetato de (4aR,6S,7R,8R,8aS)-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)-8-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxin-7-ilo (3,93 g, 6,96 mmol, rendimiento del 100%) en forma de una espuma ámbar. El producto se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,66-7,61 (m, 2H), 7,39 - 7,29 (m, 5H), 6,93 - 6,89 (m, 2H), 5,52 (s, 1H), 5,22 -5,18 (m, 1H), 5,15 (dd, J = 10,3, 3,0 Hz, 1H), 5,06 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,42 (dd, J = 12,5, 1,5 Hz, 1H), 4,24 (dd, J = 3,6, 0,9 Hz, 1H), 4,09 (dd, J = 12,7, 1,6 Hz, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,85 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 2,17 (s, 3H). CL/EM (IEN) m/e 587,1 [(M+Na)+, calc. para C23^3F3OgS2Na 587,1], ír = 2,21 min (Método 1).

Etapa 5. Preparación de acetato de (4aR,6S,7R,8S,8aR)-8-azido-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxin-7-ilo

Una mezcla de acetato de (4aR,6S,7R,8R,8aS)-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)-8-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxin-7-ilo (3,93 g, 6,96 mmol) y azida de tetrabutilamonio (5,94 g, 20,88 mmol) en DMF (35 ml) se calentó a 50 °C durante 3 h. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía agua (25 ml) y solución acuosa saturada de NaHCO3 (25 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 100 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (50 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 30 % ^ 50 % en hexanos; columna de 220 g) para proporcionar acetato de (4aR,6S,7R,8S,8aR)-8-azido-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxin-7-ilo (1,35 g, 2,95 mmol, rendimiento del 42% ) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 87,65-7,58 (m, 2H), 7,41 - 7,29 (m, 5H), 6,93 - 6,87 (m, 2H), 5,55 (s, 1H), 5,36 (t, J = 9,9 Hz, 1H), 4,71 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 4,40 (dd, J = 12,4., 1,6 Hz, 1H), 4,34 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,07 (dd, J = 12,5, 1,5 Hz, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,56 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 3,41 (dd, J = 10,3, 3,3 Hz, 1H), 2,19 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 480,1 [(M+Na)+, calc. para C22H23N3O6SNa 480,1], tR = 1,83 min (Método 1).

Etapa 6. Preparación de (2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-azido-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxin-7-ol

A una solución de acetato de (2S,4aR,6S,7R,8S,8aR)-8-azido-2-(4-metoxifenil)-6-(pbeniltio)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxin-7-ilo (4,2 g, 9,18 mmol) en metanol (6 ml) y THF (42 ml) a 0 °C, se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (8,40 ml, 36,7 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y se trató con HCl 1 N (100 ml). La mezcla se transfirió a un embudo de decantación y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 60 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con NaHCO3 acuoso saturado (100 ml) y salmuera (100 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. Después, el sólido se secó al aire seguido de secado al vacío para proporcionar (2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-azido-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxin-7-ol (3,81 g, 9,18 mmol, rendimiento del 100%) en forma de un sólido de color blanco. El producto se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 87,70 (dd, J=8,0, 1,3 Hz, 2H), 7,40 - 7,30 (m, 5H), 6,92 - 6,87 (m, 2H), 5,52 (s, 1H), 4,57 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,40 (dd, J = 12,4, 1,6 Hz, 1H), 4,24 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,06 (dd, J = 12,4, 1,6 Hz, 1H), 3,99 (t, J = 9,5 Hz, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,57 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 3,49 (dd, J = 10,0, 3,3 Hz, 1H); CL/EM (IEN) m/e 438,1 [(M+Na)+, calc. para C20H2-iN3O5SNa 438,1], tR = 1,69 min (Método 1).

Etapa 7. Preparación de (2S,4aR,6S,7R,8S,8aR)-8-azido-7-metoxi-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxina

A una solución de (2S,4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-azido-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)hcxahidropirano[3,2-d][1,3]dioxin-7-ol (3,8 g, 9,15 mmol) en DMF (75 ml) a 0 °C se le añadió hidruro sódico (0,915 g, 22,87 mmol). El baño de refrigeración se retiró y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. Después, se añadió yodometano (2,288 ml, 36,6 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 1 h. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía solución acuosa saturada de NaHCO3 (200 ml) y agua (200 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 200 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (250 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 20 % ^ 50 % en hexanos; columna de 330 g) para proporcionar (2S,4aR,6S,7R,8S,8aR)-8-azido-7-metoxi-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxina (3,7 g, 8,61 mmol, rendimiento del 94% ) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 87,76-7,67 (m, 2H), 7,51 - 7,40 (m, 2H), 7,36 - 7,22 (m, 3H), 7,00 -6,87 (m, 2H), 5,54 (s, 1H), 4,58 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,39 (dd, J = 12,5, 1,5 Hz, 1H), 4,24 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 4,05 (dd, J = 12,4, 1,6 Hz, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,68 - 3,63 (m, 1H), 3,62 (s, 3H), 3,54-3,46 (m, 2H); CL/EM (IEN) m/e 452,1 [(M+Na)+, calc. para C2-iH2aN3O5SNa 452,1], tR = 1,98 min (Método 1).

Etapa 8. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-4-azido-2-(hidroximetil)-5-metoxi-6-(feniltio)tetrahidro-2H-piran-3-ol

Se disolvió (2S,4aR,6S,7R,8S,8aR)-8-azido-7-metoxi-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxina (3,7 g, 8,61 mmol) en AcOH al 80 % (50 ml) y se calentó a 40 °C durante 2,5 h. La mezcla se concentró y después se volvió a concentrar a partir de heptano (2x). El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 10 % ^ 75 % en hexanos; columna de 120 g) para proporcionar (2R,3R,4S,5R,6S)-4-azido-2-(hidroximetil)-5-metoxi-6-(feniltio)tetrahidro-2H-piran-3-ol (2,6 g, 8,35 mmol, rendimiento del 97 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 87,62-7,54 (m, 2H), 7,39 - 7,30 (m, 3H), 4,66 - 4,61 (m, 1H), 4,06 (t, J = 2,3 Hz, 111). 4,01 - 3,93 (m, 1H), 3,91 - 3,83 (m, 111). 3,70 (s, 3H), 3,59 - 3,48 (m, 3H), 2,69 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 2,09 (dd, J = 7,4, 5,4 Hz, 1H); CL/EM (IEN) m/e 334,0 [(M+Na)+, calc. para C13H1yN3O4SNa 334,0], tR = 1,74 min (Método 1).

Etapa 9. Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-azido-5-metoxi-6-(feniltio)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

A una solución de (2R,3R,4S,5R,6S)-4-azido-2-(hidroximetil)-5-metoxi-6-(feniltio)tetrahidro-2H-piran-3-ol (0,580 g, 1,86 mmol) en piridina (15 ml) se le añadieron anhídrido acético (1,055 ml, 11,18 mmol) y DMAP (0,023 g, 0,186 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía acetato de etilo (150 ml). La capa orgánica se lavó con HCl 4 N frío (2 x 50 ml), solución acuosa saturada de NaHCO3 (25 ml), y salmuera (25 ml), se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 10 % ^ 30 % en hexanos; columna de 40 g) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetox¡-4-az¡do-5-metox¡-6-(fen¡lt¡o)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-il)metilo (0,735 g, 1,86 mmol, rend¡m¡ento del 100%) en forma de un ace¡te ¡ncoloro. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 87,63-7,56 (m, 2H), 7,40 - 7,31 (m, 3H), 5,37 (dd, J = 3,3, 1,0 Hz, 1H), 4,62 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,12 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 3,85 (td, J = 6,5, 1,0 Hz, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,60 (dd, J = 9,7, 3,4 Hz, 1H), 3,46 -3,36 (m, 1H), 2,17 (s, 3H), 2,06 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 418,0 [(M-1-Na)+, calc. para C1/H21NaO6SNa 418,1], tR = 2,01 m¡n (Método 1).

Etapa 10. Preparac¡ón de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetox¡-5-metox¡-6-(fen¡lt¡o)-4-(4-(3,4,5-tr¡fluorofen¡l)-1H-1.2.3- tr¡azol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)met¡lo

Se d¡solv¡eron acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetox¡-4-az¡do-5-metox¡-6-(pheny]t¡o)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)met¡lo (375 mg, 0,948 mmol) y 5-et¡n¡l~1,2,3-tr¡fluorobenceno (296 mg, 1,897 mmol) en una soluc¡ón desgas¡f¡cada prev¡amente de DMF (15 ml) y agua (5 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añad¡eron ascorbato sód¡co (188 mg, 0,948 mmol) y pentah¡drato de sulfato de cobre (II) (189 mg, 0,759 mmol) (d¡suelto prev¡amente en 1 ml de agua) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante 14 h. La mezcla se f¡ltró a través de una capa de Cel¡te y el f¡ltrado se transf¡r¡ó a un embudo de decantac¡ón que contenía soluc¡ón acuosa saturada de NaHCO3 (25 ml). La capa acuosa se extrajo con d¡clorometano (3 x 50 ml). Las capas orgán¡cas comb¡nadas se lavaron con salmuera (25 ml), se secaron sobre MgSO4, se f¡ltraron y se concentraron. El f¡ltrado se concentró y se pur¡f¡có por cromatografía en columna sobre gel de síl¡ce (acetato de et¡lo al 30 % ^ 70 % en hexanos; columna de 40 g) para proporc¡onar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetox¡-5-metox¡-6-(fen¡lt¡o)-4-(4-(3,4,5-tr¡fluorofen¡l)-1H-1.2.3- tr¡azol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)met¡lo (483 mg, 0,876 mmol, rend¡m¡ento del 92 %) en forma de un sól¡do de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 87,79 (s, 1H), 7,67 -7,61 (m, 2H), 7,46 (dd, J = 8,3, 6,5 Hz, 2H), 7,40 -7,35 (m, 3H), 5,52 (dd, J = 2,9, 0,9 Hz, 111). 4,75 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,65 (dd, J = 10,2, 3,1 Hz, 1H), 4,37 -4,29 (m, 1H), 4,21 (cd, J = 11,36,4 Hz, 2H), 4,09 -4,03 (m, 1H), 3,38 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 2,06 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 574,1 [(M+Na)+, calc. para C2aH24FaNaO6SNa 574,1], tR = 2,18 m¡n (Método 1).

Etapa 11

A una soluc¡ón de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetox¡-5-metox¡-6-(fen¡lt¡o)-4-(4-(3,4,5-tr¡fluorofen¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)met¡lo (250 mg, 0,453 mmol) en CH2Ch (5 ml) (d¡suelto prev¡amente sobre tam¡ces moleculares de 4 A) a 0 °C, se le añad¡ó bromo (soluc¡ón madre al 10 % en CH2Ch) (0,467 ml, 0,907 mmol) gota a gota. La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a 0 °C durante 1 h. El exceso de bromo se ¡nact¡vó med¡ante la ad¡c¡ón de soluc¡ón acuosa saturada de NaHCO3 y soluc¡ón acuosa saturada de Na2S2O3 (1 ml:3 ml) (desaparec¡ó el color rojo). La mezcla se transf¡r¡ó a un embudo de decantac¡ón que contenía agua (10 ml). La capa acuosa se extrajo con d¡clorometano (3 x 15 ml). Las capas orgán¡cas comb¡nadas se lavaron con salmuera (10 ml), se secaron sobre Na2SO4, se f¡ltraron y se concentraron. El producto se pur¡f¡có por cromatografía en columna sobre gel de síl¡ce (acetato de et¡lo al 20 % ^ 40 % en hexanos; columna de 24 g) para proporc¡onar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6R)-3-acetox¡-6-bromo-5-metox¡-4-(4-(3,4,5-tr¡fluorofen¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)met¡lo (195 mg, 0,373 mmol, rend¡m¡ento del 82 %) en forma de un sól¡do de color blanco. El producto se almacenó en el congelador hasta que se usó. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 87,82 (s, 1H), 7,46 (dd, J = 8,4, 6,4 Hz, 2H), 6,87 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 5,60 (dd, J = 2,9, 1,4 Hz, 1H), 5,01 (dd, J = 0,8, 3,0 Hz, 1H), 4,67 -4,59 (m, 1H), 4,49 (dd, J = 10,8, 3,8 Hz, 1H), 4,25 (dd, J = 11,8, 63 Hz, 1H), 4,18 (dd, 1,51, 6,8 Hz, 11-1), 3,40 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 2,09 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 522,0 [(M+H)+, calc. para C1gH20BrFaN3O6, 522,0], tR = 1,80 m¡n (Método 1).

Preparac¡ón de (-)-(3 S,4R,5R)-3-az¡do-5-(tr¡t¡lox¡)tetrah¡dro-27/-p¡ran-4-ol y (+)-(3S,4R,5S)-3-az¡do-5-(tr¡t¡lox¡)tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-ol

En un matraz de presión, se disolvieron 2-viniloxirano (7,00 g, 100 mmol) y prop-2-en-1-ol (13,58 ml, 200 mmol) en DMF (200 ml) y la solución se enfrió a 0 °C. Se añadió hidruro sódico (7,99 g, 200 mmol) a la mezcla de reacción que después se agitó a 0 °C durante 20 min. Después, se cerró herméticamente el matraz de presión y la mezcla de reacción se agitó a 50 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se enfrió a ta y se inactivó con HCl 1 N (200 ml). La mezcla se transfirió a un embudo de decantación y la capa acuosa se extrajo con éter (3 x 150 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (200 ml), se secaron sobre sulfato de magnesio y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 0 % ^ 20 % en hexanos; columna de 220 g) para proporcionar 1-(aliloxi)but-3-en-2-ol (10,8 g, 84 mmol, rendimiento del 84%) en forma de un aceite incoloro. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 55,99 - 5,80 (m, 2H), 5,43 - 5,19 (m, 4H), 4,38 -4,32 (m, 1H), 4,06 (dt, J = 5,8, 1,4 Hz, 2H), 3,53 (dd, J = 9,7, 3,4 Hz, 1H), 3,36 (dd, J = 9,7, 7,9 Hz, 1H), 2,47 - 2,22 (m, 1H).

Etapa 2. Preparación de (((l-(aliloxi)but-3-en-2-il)oxi)metanotriil)tribenceno

En un matraz de fondo redondo, se añadió DBU (45,0 ml, 298 mmol) a una solución de 1-(aliloxi)but-3-en-2-ol (15,3 g, 119 mmol) y (clorometanotriil)tribenceno (69,9 g, 251 mmol) en CH2CI2 (250 ml). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 2 días. La mezcla de reacción se concentró al vacío y se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 0 % ^ 15 % en hexanos; columna de 330 g, 3 ejecuciones) para proporcionar (((1-(aliloxi)but-3-en-2-il)oxi)metanotriil)tribenceno (34,2 g, 92 mmol, rendimiento del 77 %). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 7,60-7,53 (m, 6H), 7,34 - 7,23 (m, 9H), 5,88 - 5,66 (m, 2H), 5,25 - 5,10 (m, 2H), 5,03 - 4,85 (m, 21-1), 4,22 - 4,13 (m, 1H), 3,89 - 3,79 (m, 2H), 3,14-3,00 (m, 2H); CL/EM (IEN) m/e 393,2 [(M+Na)+, calc. para C26H26O2Na 393,2] tR = 1,67 min (Método 1).

Etapa 3. Preparación de 3-(tritiloxi)-3,6-dihidro-2H-piran

En un matraz de 3 bocas de 5 l, se añadió (((1-(aliloxi)but-3-en-2-il)oxi)metanotriil)tribenceno (34,2 g, 92 mmol) a una solución de cloruro de (1,3-dimesitilimidazolidin-2-ilideno)(2-isopropoxibencilideno)rutenio (Vi) (0,578 g, 0,923 mmol) en CH2CI2 (4 l). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 16 h. Se añadió etil vinil éter (50 ml) a la mezcla de reacción para descomponer el catalizador y la mezcla de reacción se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 0 % ^ 10 % en hexanos; columna de 330 g, 3 ejecuciones) para proporcionar 3-(tritiloxi)-3,6-dihidro-2H-pirano (28,05 g, 82 mmol, rendimiento del 89 %). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,57-7,52 (m, 6H), 7,36 -7,25 (m, 9H), 5,81 -5,72 (m, 1H), 5,40 (dc, J = 10,5, 2,6 Hz, 1H), 4,14 - 4,06 (m, 2H), 3,97 - 3,89 (m, 1H), 3,22 (dd, ,1=5,1, 1,4 Hz, 2H); CL/EM (IEN) m/e 364,8 [(M+Nat, calc. para C24H22O2Na 365,2] tR = 2,33 min (Método 2).

Etapa 4. Preparación de (1R,5R,6R)-5-(tritiloxi)-3,7-dioxabiciclo[4.1.0]heptano y (1S,5R,6S)-5-(tritiloxi)-3,7-dioxabiciclo[4.1.0]heptano

En un matraz de fondo redondo en una atmósfera de nitrógeno, se añadió bicarbonato sódico (8,26 g, 98 mmol) a una solución de 3-(tritiloxi)-3,6-dihidro-2H-pirano (28,05 g, 82 mmol) en CH2CI2 (950 ml). La mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y se añadió mCPBA (36,7 g, 164 mmol) a la mezcla de reacción. La mezcla de reacción se dejó calentar lentamente a ta y se agitó durante 16 h. La mezcla de reacción se lavó con una solución saturada acuosa de Na2S2O3 (400 ml) para destruir el exceso de mCPBA. La capa orgánica se lavó con NaOH 1 N (400 ml) y salmuera (400 ml), se secó sobre sulfato sódico y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 0 % ^ 15 % en hexanos; columna de 330 g, 3 ejecuciones) para proporcionar una mezcla inseparable (relación 2,5:1) de (1R,5R,6R)-5-(tritiloxi)-3,7-dioxabiciclo[4.1.0]heptano (principal) y (1S,5R,6S)-5-(tritiloxi)-3,7-dioxabiciclo[4.1.0]heptano (minoritario) (23,8 g, 66,4 mmol, rendimiento del 81 %). Rm N 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,61 - 7,50 (m, 6H), 7,40 - 7,23 (m, 9H), 4,00 (ddd, J = 9,3, 5,8, 2,0 Hz, 1H, secundario), 3,97 -3,89 (m, 2H, principal), 3,87 - 3,80 (m, 1H), 3,77-3,71 (m, 1H, secundario), 3,31 (dd, J = 11,5, 5,3 Hz, 1H, principal), 3,27 - 3,21 (m, 2H, secundario), 3,05 (dt, J = 4,0, 0,8 Hz, 1H, principal), 3,03 - 2,99 (m, 1H, secundario), 2,96 (dd, J = 11,4, 7,9 Hz, 1H, principal), 2,70 (d, J = 4,0 Hz, 1H, principal), 2,66 - 2,62 (m, 1H, minoritario);

CL/EM (IEN) m/e 380,8 [(M+Na)+, calc. para C24H22O3Na 381,2] tR = 2,18 min (Método 1).

Etapa 5. Preparación de (3S,4R,5R)-3-azido-5-(tritiloxi)tetrahidro-2H-piran-4-ol y (3R,4S,5R)-3-azido-5-(tritiloxi)tetrahidro-2H-piran-4-ol

En un vial cerrado herméticamente, se añadió azida sódica (8,60 g, 132 mmol) a una solución de una mezcla racémica de (1R,5R,6R)-5-(tritiloxi)-3,7-dioxabiciclo[4.1.0]heptano y (1S,5R,6S)-5-(tritiloxi)-3,7-dioxabiciclo[4.1.0]heptano (23,7 g, 66,1 mmol) en MeOH (500 ml) y agua (55,6 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 16 h a 80 °C. La mezcla de reacción se repartió entre agua (300 ml) y CH2Ch (300 ml). La capa acuosa se lavó con CH2CI2 (3 x 200 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato sódico y se concentraron al vacío. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 0 % —> 35 % en hexanos; columna de 330 g, 3 ejecuciones) para proporcionar los productos (3S,4R,5R)-3-azido-5-(tritiloxi)tetrahidro-211-piran-4--ol (9,30 g, 23,17 mmol, rendimiento del 35 %) y (3R,4S,5R)-3-azido-5-(tritiloxi)tetrahidro-2H-piran-4-ol (5,30 g, 13,20 mmol, rendimiento del 20 %).

Datos para (3S,4R,5R)-3-azido-5-(tritiloxi)tetrahidro-2H-piran-4-ol (Compuesto A): RMN 1H (400 MHz, CHLO-ROFORM-d) 57,55 - 7,45 (m, 6H), 7,40 - 7,24 (m, 9H), 3,87 - 3,76 (m, 2H), 3,41 - 3,22 (m, 3H), 3,17 - 2,97 (m, 2H), 2,37 (s, 1H); CL/EM (IEN) m/e 423,7 [(M+Na)+, calc. para C24H23^O3Na 424,2] tR = 2,18 min (Método 2).

Datos para (3R,4S,5R)-3-azido-5-(tritiloxi)tetrahidro-2H-piran-4-ol (Compuesto B): RMN 1H (400 MHz, CHLO-ROFORM-d) 57,56 - 7,48 (m, 6H), 7,41 - 7,25 (m, 9H), 3,96 - 3,80 (m, 2H), 3,68 - 3,55 (m, 2H), 3,45 (td, J 11,2, 4,1 Hz, 2H), 2,95 - 2,75 (m, 1H), 2,46 (d, J = 3,3 Hz, 1H); CL/EM (IEN) m/e 423,7 [(M+Na)+, calc. para C24H23^O3Na 424,2] tR = 2,17 min (Método 2).

Etapa 6A. Preparación de (-)-(3S,4R,5R)-3-azido-5-(tritiloxi)tetrahidro-2H-piran-4-ol

Se separó una mezcla racémica del compuesto A (9,3 g) de los anteriores mediante cromatografía quiral SFC preparativa usando las condiciones que se describen a continuación:

Condiciones de HPLC quiral preparativa:

Columna preparativa: OJ-H (5x25 cm, 5 pm, n.° 74123)

presión BPR: 10 MPa (100 bar)

Temperatura: 35 °C

Caudal: 300 ml/min

Fase móvil: CO2/ MeOff (90/10)

Longitud de onda del

detector: 220 nm

Programa de separación: inyección de pila

Inyección: 0,6 ml con ciclo temporal: 2,75 min

Preparación de muestra: 9,3 g / 150 ml McOH:DCM (4:1), 62 mg/ml

Rendimiento: 811 mg/h

El análisis posterior de los enantiómeros individuales por HPLC quiral se realizó usando las condiciones siguientes:

Condiciones de HPLC quiral analítica:

Columna analítica: OJ-H (0,46x25 cm, 5 pm)

presión BPR: 14 MPa (140 bar)

Temperatura: 40 °C

Caudal: 3,0 ml/min

Fase móvil: CO2/ MeOff (90/10)

Longitud de onda del UV 200-400 nm

detector:

Pico 1 (no deseado): (+)-(3R,4S,5S)-3-azido-5-(tritiloxi)tetrahidro-2H-piran-4-ol (3,8 g): HPLC quiral tR = 5,44 min; [a]ü22 11,5, (c = 0,755, MeOH).

Pico 2 (deseado): (-)-(3S,4R,5R)-3-azido-5-(tritiloxi)tetrahidro-2H-piran-4-ol (3,6 g): HPLC quiral tR = 6,06 min; [a]ü22 -11,9, (c = 0,575, MeOH).

Etapa 6B. Preparación de (+)-(3S,4R,5S)-3-azido-5-(tritiloxi)tetrahidro-2H-piran-4-ol

Se separó una mezcla racémica del compuesto B (5,3 g) de los anteriores mediante cromatografía quiral SFC preparativa usando las condiciones que se describen a continuación:

Condiciones de HPLC quiral preparativa:

Columna preparativa: OJ-H (5x25 cm, 5 pm, n.° 74123)

presión BPR: 10 MPa (100 bar)

Temperatura: 35 °C

Caudal: 300 ml/min

Fase móvil: CO2/ MeOH (70/30)

Longitud de onda del

detector: 220 nm

(continuación)

Programa de separación: inyección de pila

Inyección: 0,5ml con ciclo temporal: 1,75 min

5,3 g / 56 ml de MeOH: DCM (1:1), 94,64

Preparación de muestra:

mg/ml

Rendimiento: 1,6 g/h

Condiciones analíticas:

Columna analítica: OJ-H (0,46x25 cm, 5 pm)

presión BPR: 14 MPa (140 bar)

Temperatura: 40 °C

Caudal: 3,0 ml/min

Fase móvil: CO2/ MeOH (90/10)

Longitud de onda del

_detector:UV 200-400 nm

Pico 1 (deseado): (+)-(3S,4R,5S)-3-azido-5-(tritiloxi)tetrahidro-2H-piran-4-ol (2,6 g): HPLC quiral tR = 4,81 min; [a]ü22 32,1, (c = 0,575, MeOH).

Pico 2 (no deseado): (-)-(3R,4S,5R)-3-azido-5-(tritiloxi)tetrahidro-2H-piran-4-ol (2,41 g): HPLC quiral tR = 6,89 min;

[a]o22 -29,4, (c = 0,575, MeOH).

Preparación de (-)-(3S,4R,5R)-3-azido-5-mercaptotetrahidro-2H-piran-4-ol (Método 1)

Se añadió cloruro de acetilo (1,240 ml, 17,44 mmol) a una solución de (-)-(3S,4R,5R)-3-azido-5-(tritiloxi)tetrahidro-2H-piran-4-ol (3,50 g, 8,72 mmol) y piridina (2,115 ml, 26,2 mmol) en CH2CI2 (100 ml) en una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó a ta durante 16 h. La mezcla de reacción se diluyó con CH2Ch (20 ml) y la capa orgánica se lavó con HCl 1 N (50 ml), bicarbonato sódico sat, (50 ml) y salmuera (50 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío para proporcionar acetato de (-S,4R,5R)-3-azido-5-(tritiloxi)tetrahidro-2H-piran-4-ilo (3,73 g, 8,41 mmol, rendimiento del 96 %). El producto se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.

[a]o22 -8,8, (c = 0,340, CHCb); RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,55-7,46 (m, 6H), 7,38 - 7,22 (m, 9H), 5,34 (t, J = 9,2 Hz, 1H), 3,85 (dd, J = 11,4, 5,1 Hz, 1H), 3,58 -3,44 (m, 1H), 3,42 - 3,32 (m, 1H), 3,30 - 3,10 (m, 3H), 2,03 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 465,7 [(M+Na)+, calc. para C26H25N3O4466,2], tR = 2,31 min (Método 2).

Etapa 2. Preparación de acetato de (-)-(3S,4R,5R)-3-az¡do-5-h¡drox¡tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡lo

Se añad¡ó acetato de (-)-(3S,4R,5R)-3-az¡do-5-(tr¡t¡lox¡)tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡lo (1,6 g, 3,61 mmol) a una soluc¡ón de ác¡do fórm¡co (4 ml, 104 mmol) y Et2O (6 ml). La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante una noche a ta. El progreso de la reacc¡ón se controló por TLC (t¡nc¡ón de Haness¡an). La mezcla se concentró al vacío y se pur¡f¡có por cromatografía en columna sobre gel de síl¡ce (acetato de et¡lo al 20 % ^ 70 % en hexanos; columna de 80 g) para proporc¡onar acetato de (-)-(3S,4R,5R)-3-az¡do-5-h¡drox¡tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡lo (570 mg, 2,83 mmol, rend¡m¡ento del 79 %), [a]D22 -58,4, (c = 0,290, CHCla); RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 84,84 (t, J= 8,9 Hz, 1H), 4,05 -3,93 (m, 2H), 3,73 -3,64 (m, 1H), 3,63 - 3,53 (m, 1H), 3,21 (ddd, J = 11,7, 10,0, 8,7 Hz, 2H), 2,18 (s, 3H); RMN 13C (101 MHz, CLOROFORMO-d) 8171,7, 779, 70,2, 68,8, 678, 58,6, 206

Etapa 3. Preparac¡ón de acetato de (+)-(3S,4R,5S)-3-az¡do-5-h¡drox¡tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡lo

Se añad¡ó tr¡fluorometanosulfón¡co anhídr¡do (0,846 ml, 5,01 mmol) a una soluc¡ón de acetato de (-)-(3S,4R,5R)-3-az¡do-5-h¡drox¡tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡lo (0,840 g, 4,18 mmol) y p¡r¡d¡na (1,013 ml, 12,53 mmol) en C ^ C h (40 ml) a -10 °C. La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a -10 °C durante 1,5 h. El progreso de la reacc¡ón se controló por TLC (t¡nc¡ón de Haness¡an). La mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con CH2Ch (20 ml) y se lavó con HCl 1 N (30 ml), b¡carbonato sód¡co sat. (30 ml) y salmuera (30 ml). La capa orgán¡ca se secó sobre MgSO4, se f¡ltró y se concentró al vacío para proporc¡onar acetato de (3S,4R,5R)-3-az¡do-5-(((tr¡fluoromet¡l)sulfon¡l)ox¡)tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡lo (1,39 g, 4,18 mmol, rend¡m¡ento del 100 %). El producto se usó s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal.

En un vaso de pres¡ón, se añad¡ó n¡tr¡to de tetrabut¡lamon¡o (3,62 g, 12,54 mmol) a una soluc¡ón de acetato de (3S,4R,5R)-3-az¡do-5-(((tr¡fluoromet¡l)sulfon¡l)ox¡)tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡lo en bruto (1,39 g, 4,18 mmol) a part¡r de lo anter¡or en DMF (40 ml). El rec¡p¡ente se cerró hermét¡camente y la mezcla de reacc¡ón se calentó a 50 °C durante 1,5 h. El progreso de la reacc¡ón se controló por TLC (t¡nc¡ón de Haness¡an). La mezcla de reacc¡ón se enfr¡ó a ta y se concentró al vacío. El producto se pur¡f¡có por cromatografía en columna sobre gel de síl¡ce (acetato de et¡lo al 10 % > 70 % en hexanos; columna de 80 g) para proporc¡onar acetato de (+)-(3S,4R,5S)-3-az¡do-5-h¡drox¡tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡lo (0,46 g, 2,267 mmol, rend¡m¡ento del 54%). [a]D22 34,7, (c = 0,325, CHCla); RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 84,88 (dd, J=9,4, 3,1 Hz, 1H), 4,13 - 4,09 (m, 1H), 4,07 - 3,91 (m, 3H), 3,56 (dd, J = 2,4, 1,6 Hz, 1H), 3,22 (dd, J = 11,3, 9,8 Hz, 1H), 2,43 (s a, 1H), 2,20 (s, 3H); RMN 13C (101 MHz, CLOROFORMO-d) 8169,8, 74,5, 69,8, 67,9, 66,5, 56,1, 20,7.

Etapa 4. Preparac¡ón de acetato de (+)-(3R,4R,5S)-3-(acet¡lt¡o)-5-az¡dotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡lo

A una soluc¡ón de acetato de (+)-(3S,4R,5S)-3-az¡do-5-h¡drox¡tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡lo (1,95 g, 9,69 mmol) y p¡r¡d¡na (3,92 ml, 48,5 mmol) en CH2Ch (50 ml) a -10 °C se le añad¡ó tr¡fluorometansulfón¡co anhídr¡do (4,09 ml, 24,23 mmol) gota a gota. La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a -10 °C durante 30 m¡n. El progreso de la reacc¡ón se controló por TLC (t¡nc¡ón de Haness¡an). La mezcla se transf¡r¡ó a un embudo de decantac¡ón que contenía d¡clorometano (25 ml) y se lavó con HCl 1 N frío (25 ml), NaHCO3 acuoso saturado (50 ml) y salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4, se f¡ltró y se concentró. Después, el producto en bruto se d¡solv¡ó en acetona seca (50 ml) (secada prev¡amente sobre tam¡ces moleculares de 4 A) y la mezcla se enfr¡ó a -10 °C. Se añad¡ó t¡oacetato potás¡co (5,53 g, 48,5 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a -10 °C durante 1,5 h. El progreso de la reacc¡ón se controló por TLC (t¡nc¡ón de Haness¡an). La mezcla se transf¡r¡ó a un embudo de decantac¡ón que contenía agua (40 ml). La capa acuosa se extrajo con d¡clorometano (3 x 40 ml). Las capas orgán¡cas comb¡nadas se lavaron con salmuera (40 ml), se secaron sobre MgSO4, se f¡ltraron y se concentraron. El producto se pur¡f¡có por cromatografía en columna sobre gel de síl¡ce (acetato de et¡lo al 0% ^ 40% en hexanos; columna de 120 g) para proporc¡onar acetato de (+)-(3R,4R,5S)-3-(acet¡lt¡o)-5-az¡dotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡lo (1,92 g, 7,41 mmol, rend¡m¡ento del 76%). [a]o22 12,8, (c = 0,510, CHCh); RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 84,98 (dd, J=10,8, 9,3 Hz, 1H), 4,08 - 4,01 (m, 1H), 3,95 (ddd, J = 11,5, 5,0, 0,9 Hz, 1H), 3,71 -3,61 (m, 2H), 3,30 (t, J = 11,3 Hz, 1H), 3,24 -3,15 (m, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,11 (s, 3H); RMN 13C (101 MHz, CLOROFORMO-d) 8193,3, 169,8, 72,1, 69,4, 68,2, 60,4, 43,0, 30,4, 20,4.

Etapa 5. Preparac¡ón de (-)-(3 S,4R,5R)-3-az¡do-S-mercaptotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-ol

A una soluc¡ón de acetato de (+)-(3R,4R,5S)-3-(acet¡lt¡o)-5-az¡dotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡lo (1,92 g, 7,41 mmol) en THF (100 ml) a -10 °C se le añad¡ó metóx¡do sód¡co (25 % en MeOH) (8,47 ml, 37,0 mmol) gota a gota med¡ante una jer¡nga. La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a -10 °C durante 15 m¡n. El progreso de la reacc¡ón se controló por TLC (t¡nc¡ón de Haness¡an). La mezcla de reacc¡ón se transf¡r¡ó a un embudo de decantac¡ón que contenía una soluc¡ón acuosa saturada de NH4Cl (50 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de et¡lo (3 x 50 ml). Las capas orgán¡cas comb¡nadas se lavaron con salmuera (50 ml), se secaron sobre MgSO4, se f¡ltraron y se concentraron. El producto se pur¡f¡có por cromatografía en columna sobre gel de síl¡ce (acetato de et¡lo al 0 % ^ 50 % en hexanos; columna de 40 g) para proporc¡onar (-)-(3S,4R,5R)-3-az¡do-5-mercaptotetrah¡dro-2H-p¡ran-4- ol (0,900 g, 5,14 mmol, rend¡m¡ento del 69 %).

[a]D22 -107,5, (c = 0,255, CHCh); RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 84,06 (td, J=11,3, 5,0 Hz, 2H), 3,53 (ddd, J = 10,8, 9,3, 5,0 Hz, 1H), 3,38 - 3,29 (m, 1H), 3,18 (t, J = 11,5 Hz, 2H), 2,96 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 2,90 - 2,76 (m, 1H), 1,32 (d, J = 10,0 Hz, 1H); RMN 13C (126 MHz, CLOROFORMO-d) 878,8, 72,7, 69,0, 62,3, 42,6.

Etapa 5 (Cond¡c¡ones alternat¡vas). Preparac¡ón de (-)-(3S,4R,5R)-3-az¡do-5-mercaptotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-ol y acetato de (-)-(3S,4R,5R)-3-azido-5-mercaptotetrahidro-2H-piran-4-ilo

A una solución de acetato de (+)-(3R,4R,5S)-3-(acetiltio)-5-azidotetrahidro-2H-piran-4-ilo (135 mg, 0,521 mmol) en THE (8 ml) a -78 °C se le añadió hidrato de hidrazina hidrato (0,126 ml, 2,60 mmol) gota a gota mediante una jeringa. Después, el baño de refrigeración se reemplazó con un baño de agua enfriada con hielo y la mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 15 min. Después, se añadió ácido acético (0,149 ml, 2,60 mmol) y la agitación se continuó durante 5 min. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía agua (10 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 10 % > 50 % en hexanos; columna de 24 g) para proporcionar (-)-(3S,4R,5R)-3-azido-5-mercaptotetrahidro-2H-piran-4-ol (29,2 mg, 0,167 mmol, rendimiento del 32 %) y acetato de (-)-(3S,4R,5R)-3-azido-5-mercaptotetrahidro-2H-piran-4-ilo (31 mg, 0,143 mmol, rendimiento del 27 %).

Datos para (-)-(3S,4R,5R)-3-azido-5-mercaptotetrahidro-2H-piran-4-ol: [a]ü22 -107,51, (c = 0,26, CHCh); RMN 1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) 57,30-7,27 (m, 1H), 4,10 - 4,00 (m, 2H), 3,58 - 3,46 (m, 1H), 3,33 (t a, J = 9,5 Hz, 1H), 3,22 -3,13 (m, 2H), 2,98 (s a, 1H), 2,82 (ddt, J = 8,4, 3,2, 1,6 Hz, 1H), 1,33 (dd, J = 9,8, 1,3 Hz, 1H); RMN 13C (126 MHz, CLOROFORMO-d) 578,8, 72,7, 69,0, 62,3, 42,6.

Datos para acetato de (-)-(3S,4R,5R)-3-azido-5-mercaptotetrahidro-2H-piran-4-ilo: [a]ü22 -113,4, (c = 0,290, CHCh); RMN 1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) 54,91-4,82 (m, 1H), 4,11 -4,03 (m, 2H), 3,57 (ddd, J = 10,9, 9,6, 5,2 Hz, 1H), 3,24 (td, J = 11,4, 9,7 Hz, 2H), 2,88 (cd, J = 10,5, 4,7 Hz, 1H), 2,21 (s, 3H), 1,35 (d, J = 9,8 Hz, 1H); RMN 13C (126 MHz, METANOL-d4) 5170,6, 77,5, 72,6, 68,1,60,8, 39,3, 19,4.

Preparación de (-)-(3S,4R,5R)-3-azido-5-mercaptotetrahidro-2H-piran-4-ol (Método 2)

En un matraz de fondo redondo, se añadió cloruro de acetilo (1,417 ml, 19,93 mmol) a una solución de (+)-(3S,4R,5S)-3-azido-5-(tritiloxi)tetrahidro-2H-piran-4-ol (4,0 g, 9,96 mmol) y piridina (2,418 ml, 29,9 mmol) en CH2O2 (100 ml) en una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó a ta durante 18 h. La mezcla de reacción se diluyó con CH2Cl2 (20 ml) y la capa orgánica se lavó con HCl 1 N (50 ml), solución acuosa saturada de NaHCO3 (50 ml) y salmuera (50 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío para proporcionar acetato de (+)-(3S,4R,5S)-3-azido-5-(tritiloxi)tetrahidro-2H-piran-4-ilo (4,42 g, 9,96 mmol, rendimiento del 100 %). El producto se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. [a]D22 56,6, (c = 0,450, CHCh); RMN 1H (400 m Hz , CLOROFORMO-d) 57,55-7,48 (m, 6H), 7,38 - 7,25 (m, 9H), 4,62 (dd, J = 7,5, 3,3 Hz, 1H), 4,07 - 3,83 (m, 3H), 3,43 - 3,22 (m, 2H), 3,02 (dd, J = 12,0, 2,8 Hz, 1H), 2,25 (s, 3H), CL/EM (IEN) m/e 465,7 [(M+Na)+, calc. para C26H25N3O4466,2], k = 2,36 min (Método 2).

Etapa 2. Preparación de acetato de (+)-(3S,4R,5S)-3-azido-5-bidroxitetrahidro-2H-piran-4-ilo

En un matraz de fondo redondo, se agitó acetato de (+)-(3S,4R,5S)-3-azido-5-(tritiloxi)tetrahidro-2H-piran-4-ilo (4,42 g, 9,97 mmol) en ácido fórmico (19 ml, 495 mmol) y Et2Ü (30 ml) a ta durante 16 h. La mezcla se concentró al vacío y el producto en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo 0 % ^ 60 % en hexanos; columna de 40 g) para proporcionar acetato de (+)-(3S,4R,5S)-3-azido-5-hidroxitetrahidro-2H-piran-4-ilo acetato (1,95 g, 9,69 mmol, rendimiento del 97%). [a]D22 35,1, (c = 0,360, CHCh); RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 54,90 (dd, J=9,4, 3,1 Hz, 1H), 4,14 - 3,90 (m, 4H), 3,58 (dd, J = 12,4, 1,6 Hz, 1H), 3,23 (dd, J = 11,3, 9,8 Hz, 1H), 2,22 (s, 3H); RMN 13C (101 MHz, CLOROFORMO-d) 5169,8, 74,5, 69,8, 67,9, 66,5, 56,1,20,7.

Etapa 3. Preparación de acetato de (+)-(3R,4R,5S)-3-(acetiltio)-5-azidotetrahidro-2H-piran-4-ilo

A una solución de acetato de (+)-(3S,4R,5S)-3-azido-5-hidroxitetrahidro-2H-piran-4-ilo (1,95 g, 9,69 mmol) y piridina (3,92 ml, 48,5 mmol) en CH2Ch (50 ml) a -10 °C se le añadió trifluorometansulfónico anhídrido (4,09 ml, 24,23 mmol) gota a gota. La mezcla de reacción se agitó a -10 °C durante 30 min. El progreso de la reacción se controló por TLC (tinción de Hanessian). La mezcla se transfirió a un embudo de separación que contenía diclorometano (25 ml) y se lavó con HCl 1 N frío (25 ml), NaHCO3 acuoso saturado (50 ml) y salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. Después, el producto en bruto se disolvió en acetona seca (50 ml) (secada previamente sobre tamices moleculares de 4 Á) y la mezcla se enfrió a -10 °C. Se añadió tioacetato potásico (5,53 g, 48,5 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a -10 °C durante 1,5 h.

El progreso de la reacción se controló por TLC (tinción de Hanessian). La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía agua (40 ml). La capa acuosa se extrajo con diclorometano (3 x 40 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (40 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 0 % ^ 40 % en hexanos; columna de 120 g) para proporcionar acetato de (+)-(3R,4R,5S)-3-(acetiltio)-5-azidotetrahidro-2H-piran-4-ilo (1,92 g, 7,41 mmol, rendimiento del 76 %). [a]D22 12,8, (c = 0,510, CHCh); RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 54,98 (dd, J=10,8, 9,3 Hz, 1H), 4,08 - 4,01 (m, 1H), 3,95 (ddd, J = 11,5, 5,0, 0,9 Hz, 1H), 3,71 - 3,61 (m, 2H), 3,30 (t, J = 11,3 Hz, 1H), 3,24 -3,15 (m, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,11 (s, 3H); RMN 13C (101 MHz, CLOROFORMO-d) 5193,3, 169,8, 72,1,69,4, 68,2, 60,4, 43,0, 30,4, 20,4.

Etapa 4

A una solución de acetato de (+)-(3R,4R,5S)-3-(acetiltio)-5-azidotetrahidro-2H-piran-4-ilo (1,92 g, 7,41 mmol) en THF (100 ml) a -10 °C se le añadió metóxido sódico (25 % en MeOH) (8,47 ml, 37,0 mmol) gota a gota mediante una jeringa. La mezcla de reacción se agitó a -10 °C durante 15 min. El progreso de la reacción se controló por TLC (tinción de Hanessian). La mezcla de reacción se transfirió a un embudo de decantación que contenía una solución acuosa saturada de NH4Cl (50 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (50 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 0 % ^ 50 % en hexanos; columna de 40 g) para proporcionar (-)-(3S,4R,5R)-3-azido-5-mercaptotetrahidro-2H-piran-4-ol (0,900 g, 5,14 mmol, rendimiento del 69%).

[a]D22 -107,5, (c = 0,255, CHCh); RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 54,06 (td, J=1,3, 5,0 Hz, 2H), 3,53 (ddd, J = 10,8, 9,3, 5,0 Hz, 1H), 3,38 - 3,29 (m, 1H), 3,18 (t, J = 11,5 Hz, 2H), 2,96 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 2,90 - 2,76 (m, 1H), 1,32 (d, J = 10,0 Hz, 1H); RMN 13C (126 MHz, CLOROFORMO-d) 578,8, 72,7, 69,0, 62,3, 42,6.

Preparación de acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

A una solución de (-)-(3S,4R,5R)-3-azido-5-mercaptotetrahidro-2H-piran-4-ol (225 mg, 1,284 mmol) en acetato de etilo (10 ml) y solución de carbonato sódico (1 M, ac.) (5,14 ml, 5,14 mmol) se le añadió acetato de ((2R,3R,4S,5R,6R)-3-acetoxi-6-bromo-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-tfifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrabydro-2H-piran-2-il)metilo (838 mg, 1,605 mmol) en acetato de etilo (4 ml) mediante una cánula. Se añadió hidrogenosulfato de tetrabutilamonio (1744 mg, 5,14 mmol) y la mezcla de reacción se agitó vigorosamente a temperatura ambiente durante 2,5 h. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía una solución acuosa saturada de NaHCO3 (20 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 25 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (25 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 15 % ^ 80 % en hexanos; columna de 40 g) para proporcionar acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3- acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (670 mg, 1,09 mmol, rendimiento del 85 %) en forma de un sólido de color blanco. [a]D22 37,99, (c = 0,240, CHCb); RMN 1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) 57,81 (s, 1H), 7,47 (dd, J = 8,2, 6,5 Hz, 2H), 5,52 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,66 - 4,59 (m, 2H), 4,28 - 4,19 (m, 2H), 4,18 - 4,09 (m, 3H), 4,05 - 3,96 (m, 2H), 3,67 - 3,60 (m, 1H), 3,54 (ddd, J = 10,9, 9,1, 5,2 Hz, 1H), 3,35 (s, 3H), 3,26 (t, J = 11,9 Hz, 1H), 3,13 (t, J = 11,3 Hz, 1H), 2,99 (ddd, J = 11,9, 9,7, 5,1 Hz, 1H), 2,15 (s, 3H), 2,12 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 617,2 [(M+H)+, calc. para C24H28F3N6O8S 617,1], ír = 2,03 min (Método 1).

Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-4- (4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

Etapa 1. Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-metoxi-6-(fenltio)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

Se disolvieron acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-azido-5-metoxi-6-(feniltio)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (70 mg, 0,177 mmol) y 1-etinil-3-fluorobenceno (63,8 mg, 0,531 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (1,5 ml) y agua (0,500 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (35,1 mg, 0,177 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (30,9 mg, 0,124 mmol) (disuelto previamente en 0,4 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla se filtró a través de una capa de Celite y el filtrado se transfirió a un embudo de decantación que contenía solución acuosa saturada de NaHCO3 (10 ml). La capa acuosa se extrajo con diclorometano (3 x 15 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 30 % ^ 80 % en hexanos; columna de 24 g) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-metoxi-6-(feniltio)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (76 mg, 0,147 mmol, rendimiento del 83%) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,84 (s, 1H), 7,68 - 7,62 (m, 2H), 7,62 - 7,53 (m, 2H), 7,45 - 7,33 (m, 4H), 7,05 (tdd, J = 8,4; 2,5; 0,8 Hz, 1H), 5,57 -5,51 (m, 1H), 4,76 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,69 (dd, J = 10,2, 3,1 Hz, 1H), 4,31 (t, J = 9,9 Hz, 1H), 4,26 - 4,14 (m, 2H), 4,10 - 4,02 (m, 1H), 3,37 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 2,06 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 515,7 [(M+H)+, calc. para C25H276FN3O6S 516,2], ír = 1,99 min (Método 2).

Etapa 2. Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6R)-3-acetoxi-6-bromo-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

A una solución de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-metoxi-6-(feniltio)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (75 mg, 0,145 mmol) en CH2O2 (2 ml) (secado previamente sobre tamices moleculares de 4 Á) a 0 °C se le añadió Br2 (10 % en DCM) (0,150 ml, 0,291 mmol) gota a gota. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 2 h. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 0 % ^ 50 % en hexanos; columna de 12 g) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6R)-3-acetoxi-6-bromo-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (55 mg, 0,113 mmol, rendimiento del 78 %). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,85 (s, 1H), 7,63 - 7,54 (m, 2H), 7,45 - 7,36 (m, 1H), 7,10 - 7,01 (m, 1H), 6,87 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 5,62 (dd, J = 3,0, 1,3 Hz, 1H), 5,02 (dd, J = 10,8, 3,0 Hz, 1H), 4,64 (td, J = 6,5, 0,9 Hz, 1H), 4,49 (dd, J = 10,8, 3,8 Hz, 1H), 4,29 - 4,11 (m, 2H), 3,39 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 2,09 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 485,6 [(M+H)+, calc. para C^H22BrFN3O6486,1], fo = 1,76 min (Método 2).

Etapa 3

A una solución de (-)-(3S,4R,5R)-3-azido-5-mercaptotetrahidro-2H-piran-4-ol (15 mg, 0,086 mmol) en acetato de etilo (1 ml) se le añadieron carbonato sódico 2 M (0,171 ml, 0,342 mmol), acetato de ((2R,3R,4S,5R,6R)-3-acetoxi-6-bromo-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (52,0 mg, 0,107 mmol) y hidrogenosulfato de tetrabutilamonio (116 mg, 0,342 mmol). La mezcla de reacción se agitó vigorosamente a temperatura ambiente durante 1,5 h. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía una solución acuosa saturada de NaHCO3 (20 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 25 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (25 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 15 % ^ 80 % en hexanos; columna de 24 g) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)- 5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (44 mg, 0,076 mmol, rendimiento del 89 %). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,86 (s, 1H), 7,63 - 7,54 (m, 2H), 7,42 (td, J = 7,9, 6,0 Hz, 1H), 7,07 (td, J = 8,4, 2,5 Hz, 1H), 5,54 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 4,68 (dd, J = 10,3, 3,0 Hz, 1H), 4,65 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 4,27 - 4,19 (m, 2H), 4,18 - 4,12 (m, 3H), 4,00 (dd, J = 11,5, 5,3 Hz, 1H), 3,67 - 3,60 (m, 1H), 3,54 (td, J = 10,0, 5,1 Hz, 1H), 3,34 (s, 3H), 3,26 (t, J = 11,8 Hz, 1H), 3,13 (t, J = 11,3 Hz, 1H), 3,00 (ddd, J = 11,9, 9,7, 5,0 Hz, 1H), 2,15 (s, 3H), 2,13 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 581,1 [(M+H)+, calc. para C24H30FN6O8S 581,2], tR = 1,77 min (Método 2).

Preparación de 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-2-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de metilo

Etapa 1. Preparación de 2-(((4aR,6S,7R,8S,8aR)-8-azido-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio-d][1,3]dioxin-7-il)oxi)acetato de metilo

A una solución de (4aR,6S,7R,8R,8aR)-8-azido-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxin-7-ol (1,59 g, 3,83 mmol) en DMF (30 ml) se le añadió hidruro sódico (0,459 g, 11,48 mmol). Después de agitar durante 15 min, la mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y se añadió 2-bromoacetato de metilo (1,449 ml, 15,31 mmol) mediante una jeringa. Después, la mezcla de reacción se agitó a ta durante 1,5 h. La mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y se inactivó mediante la adición de solución acuosa saturada de NaHCO3 (5 ml) y agua (5 ml). La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía éter (300 ml). La capa orgánica se lavó con agua (4 x 50 ml) y salmuera (25 ml), se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 30 % ^ 60 % en hexanos; columna de 120 g) para proporcionar 2-(((4aR,6S,7R,8S,8aR)-8-azido-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxin-7-il)oxi)acetato de metilo (1,53 g, 3,14 mmol, rendimiento del 82 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 87,73-7,66 (m, 2H), 7,46 - 7,40 (m, 2H), 7,32 - 7,20 (m, 3H), 6,96 - 6,90 (m, 2H), 5,55 (s, 1H), 4,69 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,51 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 4,39 (dd, J = 12,4, 1,4 Hz, 1H), 4,32 -4,24 (m, 2H), 4,06 (dd, J = 12,5, 1,5 Hz, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,80 (s, 3H), 3,78 (t a, J = 9,4 Hz, 1H), 3,71 - 3,64 (m, 1H), 3,54 (d, J = 0,8 Hz, 1H); CL/EM (IEN) m/e 510,2 [(M+Na)+, calc. para C23H25N3OySNa 510,1], ír = 1,98 min (Método 1).

Etapa 2. Preparación de 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-4-azido-5-hidroxi-6-(hidroximetil)-2-(feniltio)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de metilo

Se disolvió 2-(((4aR,6S,7R,8S,8aR)-8-azido-2-(4-metoxifenil)-6-(feniltio)hexahidropirano[3,2-d][1,3]dioxin-7-il)oxi)acetato de metilo (1,52 g, 3,12 mmol) en AcOH al 80 % (30 ml) y se calentó a 40 °C durante 45 min La mezcla se concentró y después se volvió a concentrar a partir de heptano (2 x). El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 30 % ^ 100 % en hexanos; columna de 120 g) para proporcionar 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-4-azido-5-hidroxi-6-(hidroximetil)-2-(feniltio)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de metilo (1,06 g, 2,87 mmol, rendimiento del 92 %) en forma de un aceite viscoso incoloro. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 7,57 (dd, J=7,3, 1,8 Hz, 2H), 7,41 - 7,30 (m, 3H), 4,72 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,59 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 4,40 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 4,11 (s a, 1H), 4,00 - 3,93 (m, 1H), 3,92 - 3,86 (m, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,77 - 3,64 (m, 2H), 3,56 (t, J = 4,9 Hz, 1H), 2,83 (s a, 1H), 2,21 (s a, 1H); CL/EM (IEN) m/e 392,0 [(M+Na)+, calc. para C15H-igN3O6SNa 392,1], ír = 1,56 min (Método 1).

Etapa 3. Preparación de 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-4-azido-2-(feniltio)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de metilo

A una solución de 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-4-azido-5-hidroxi-6-(hidroximetil)-2-(feniltio)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de metilo (1,02 g, 2,76 mmol) en piridina (20 ml) se le añadieron anhídrido acético (1,563 ml, 16,57 mmol) y DMAP (0,034 g, 0,276 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía acetato de etilo (150 ml). La capa orgánica se lavó con HCl 4 N frío (2 x 50 ml), bicarbonato sódico acuoso saturado (25 ml), y salmuera (25 ml), se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 20 % ^ 50 % en hexanos; columna de 80 g) para proporcionar 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-4-azido-2-(feniltio)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de metilo (1,09 g, 2,404 mmol, rendimiento del 87 %) en forma de un aceite incoloro. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 87,61-7,55 (m, 2H), 7,37 -7,32 (m, 3H), 5,41 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,71 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,59 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 4,37 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 4,13 (d, J = 6,3 Hz, 2H), 3,89 - 3,83 (m, 1H), 3,81 (s, 3H), 3,77 (dd, J = 9,5, 3,3 Hz, 1H), 3,58 - 3,51 (m, 1H), 2,16 (s, 3H), 2,07 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 476,1 [(M+Na)+, calc. para C19H23N3OaSNa 476,1], ír = 1,86 min (Método 1).

Etapa 4. Preparación de 2-(((2S,3R,4S,SR,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-2-(feniltio)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de metilo

Se disolvieron 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-4-azido-2-(feniltio)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de metilo (1,03 g, 2,271 mmol) y 5-etinil-1,2,3-trifluorobenceno (0,709 g, 4,54 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (42 ml) y agua (14 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (0,450 g, 2,271 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (0,454 g, 1,817 mmol) (disuelto previamente en 2 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla se filtró a través de una capa de Celite y el filtrado se transfirió a un embudo de decantación que contenía una solución acuosa saturada de NaHCO3 (50 ml). La capa acuosa se extrajo con diclorometano (3 x 100 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (50 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El filtrado se concentró y se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 30 % ^ 60 % en hexanos; columna de 80 g) para proporcionar 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-2-(feniltio)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de metilo (1,30 g, 2,133 mmol, rendimiento del 94%) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 87,87 (s, 1H), 7,67 - 7,62 (m, 2H), 7,44 (dd, J = 8,3, 6,5 Hz, 2H), 7,41 -7,36 (m, 3H), 5,53 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 4,84 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,80 (dd, J = 10,3, 3,0 Hz, 1H), 4,61 - 4,50 (m, 2H), 4,28 - 4,15 (m, 2H), 4,09 - 4,03 (m, 2H), 3,59 (s, 3H), 2,07 (s, 3H), 2,05 (s, 3H), CL/EM (IEN) m/e 632,1 [(M+Na)+, calc. para C27H26F3N3O8SNa 632,1], tR = 2,05 min (Método 1).

Etapa 5. Preparación de 2-(((2R,3R,4S,5R,6R)-5-acetox¡-6-(acetox¡met¡l)-2-bromo-4-(4-(3,4,5-tnfluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-¡l)oxi)acetato de metilo

A una soluc¡ón de 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-2-(feniltiol)-4-(4-(3,4,5-t^fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de met¡lo (550 mg, 0,902 mmol) en CH2Ch (9 ml) (secado prev¡amente sobre tam¡ces moleculares de 4 A) a 0 °C, se le añad¡ó bromo (soluc¡ón madre al 10 % en CH2Ch) (0,930 ml, 1,805 mmol) gota a gota. La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a 0 °C durante 1 h. La TLC mostró que el mater¡al de part¡da se había consum¡do. El exceso de bromo se ¡nact¡vó med¡ante la ad¡c¡ón de soluc¡ón acuosa saturada de NaHCO3 y soluc¡ón acuosa saturada de Na2S2O3 (2 ml:6 ml) (desaparec¡ó el color rojo). La mezcla se transf¡r¡ó a un embudo de decantac¡ón que contenía agua (25 ml). La capa acuosa se extrajo con d¡clorometano (3 x 25 ml). Las capas orgán¡cas comb¡nadas se lavaron con salmuera (15 ml), se secaron sobre Na2SO4, se f¡ltraron y se concentraron. El producto se pur¡f¡có por cromatografía en columna sobre gel de síl¡ce (acetato de et¡lo al 20 % ^ 50 % en hexanos; columna de 40 g) para proporc¡onar 2-(((2R,3R,4S,5R,6R)-5-acetox¡-6-(acetox¡met¡l)-2-bromo-4-(4-(3,4,5-tr¡fluorofen¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-¡l)ox¡)acetato de met¡lo (447 mg, 0,770 mmol, rend¡m¡ento del 85 %) en forma de una espuma de color blanco. El producto se almacenó en el congelador hasta que se usó. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 68,01 (s, 1H), 7,47 (dd, J = 8,3, 6,5 Hz, 2H), 7,18 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 5,63 -5,57 (m, 1H), 5,15 (dd, J = 10,7, 2,9 Hz, 1H), 4,74 (dd, J = 10,8, 3,8 Hz, 1H), 4,65 (t, J = 6,7 Hz, 1H), 4,27 -4,10 (m, 4H), 3,76 (s, 3H), 2,08 (s, 3H), 2,07 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 580,1 [(M+H)+, calc. para C2-iH22BrF3N3Oa 580,1], ír = 2,02 m¡n (Método 1).

Etapa 6

A una soluc¡ón de (-)-(3S,4R,5R)-3-az¡do-5-mercaptotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-ol (115 mg, 0,656 mmol) en acetato de et¡lo (3 ml) y soluc¡ón de carbonato sód¡co (1 M, ac.) (3 ml, 3,00 mmol) se le añad¡ó 2-(((2R,3R,4S,5R,6R)-5-acetox¡-6-(acetox¡met¡l)-2-bromo-4-(4-(3,4,5-tnfluorofen¡l)-1H-1,2,3-tnazol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-¡l)ox¡)acetato de met¡lo (438 mg, 0,755 mmol) en acetato de et¡lo (3 ml) med¡ante una cánula. Se añad¡ó h¡drogenosulfato de tetrabut¡lamon¡o (891 mg, 2,63 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó v¡gorosamente a temperatura amb¡ente durante 2,5 h. La mezcla se transf¡r¡ó a un embudo de decantac¡ón que contenía una soluc¡ón acuosa saturada de NaHCO3(25 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de et¡lo (3 x 25 ml). Las capas orgán¡cas comb¡nadas se lavaron con salmuera (25 ml), se secaron sobre MgSO4, se f¡ltraron y se concentraron. El producto se pur¡f¡có por cromatografía en columna sobre gel de síl¡ce (acetato de et¡lo al 40 % ^ 70 % en hexanos; columna de 24 g) para proporc¡onar 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetox¡-6-(acetox¡met¡l)-2-(((3R,4R,5S)-5-az¡do-4-h¡drox¡tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-¡l}t¡o)-4-(4-(3,4,5-tr¡fluorofen¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-¡l)ox¡)acetato de met¡lo (445 mg, 0,660 mmol, rend¡m¡ento del 100 %) en forma de un sól¡do de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 67,86 (s, 1H), 7,45 (dd, J = 7,5, 6,5 Hz, 2H), 5,54 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 4,83 -4,72 (m, 2H), 4,57 -4,47 (m, 1H), 4,40 (d, J = 15,8 Hz, 1H), 4,26 -4,05 (m, 5H), 4,01 (dd, J = 11,5, 5,0 Hz, 1H), 3,69 - 3,63 (m, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,60 -3,50 (m, 1H), 3,24 (t, J = 11,9 Hz, 1H), 3,12 (t, J = 11,2 Hz, 1H), 2,99 (ddd, J = 11,7, 9,7, 4,9 Hz, 1H), 2,14 (s, 3H), 2,08 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 675,2 [(M+H)+, calc. para C26H30F3N6O10S 675,2], tR = 2,04 m¡n (Método 1).

Preparac¡ón de los productos f¡nales

Ejemplo 1. Preparac¡ón de (2R,3R,4S,SR,6S)-4-(4-(3-fluorofen¡l)-1H-1,2,3-tnazol-1-¡l)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-fluorofen¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)-4-h¡drox¡tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-¡l)t¡o)-2-(h¡drox¡met¡l)-5-metox¡tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-ol

Etapa 1. Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

Se disolvieron acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (40 mg, 0,069 mmol) y 1-etinil-3-fluorobenceno (13,24 mg, 0,110 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (1,5 ml) y agua (0,500 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (16,38 mg, 0,083 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (24,08 mg, 0,096 mmol) (disuelto previamente en 0,5 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla y el sólido adherido a la barra de agitación se disolvieron mediante la adición de diclorometano y metanol. Se añadieron agua (5 ml) y bicarbonato sódico acuoso saturado (5 ml) dando como resultado la formación de un precipitado. La mezcla se filtró a través de una capa de Celite y la torta de filtro se aclaró con metanol al 5 % en diclorometano. El filtrado se transfirió a un embudo de decantación. Se añadió salmuera (10 ml) y la capa acuosa se extrajo (con suave sacudida) con metanol al 5 % en diclorometano (4 x 15 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (15 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 20 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 80 % ^ acetato de etilo al 80 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 20 %; columna de 24 g) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-6-((3R,4R,5S)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (45 mg, 0,064 mmol, rendimiento del 93 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,94 (s, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,62 - 7,53 (m, 4H), 7,41 (tdd, J = 7,9; 6,0; 2,0 Hz, 2H), 7,11 - 7,02 (m, 2H), 5,53 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 4,76 - 4,70 (m, 2H), 4,56 - 4,48 (m, 1H), 4,38 (dd, J = 11,5, 4,8 Hz, 1H), 4,34 - 4,28 (m, 2H), 4,27 - 4,22 (m, 1H), 4,20 - 4,10 (m, 4H), 4,09 - 4,03 (m, 1H), 3,53 (t, J = 11,9 Hz, 1H), 3,35 (s, 3H), 3,17 (ddd, J = 11,8, 9,8, 5,0 Hz, 1H), 2,11 (s, 3H), 1,93 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 701,2 [(M+H)+, calc. para C32H35F2N6O8S 701,2], k = 1,97 min (Método 2).

Etapa 2

A una suspensión de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (45 mg, 0,064 mmol) en THF (0,75 ml) y MeOH (0,75 ml) a 0 °C se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,073 ml, 0,321 mmol). El baño de refrigeración se retiró y la mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1 N (0,2 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC de fase inversa (Método 3). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar (2R,3R,4S,5R,6S)-4-(4-(3-fluorofenil)-1 H-1,2,3-triazol-1-il)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-3-ol (30 mg, 0,049 mmol, rendimiento del 76 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 58,90 (s, 1H), 8,76 (s, 1H), 7,77 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,74 -7,68 (m, 2H), 7,67 - 7,61 (m, 1H), 7,52 (tdd, J = 8,0; 6,1; 3,5 Hz, 2H), 7,18 (tdd, J = 8,2; 5,5; 2,6 Hz, 2H), 4,95 (dd, J = 10,5, 3,0 Hz, 1H), 4,83 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,64 - 4,55 (m, 1H), 4,25 (dd, J = 11,6, 4,7 Hz, 1H), 4,13 (dd, J = 11,1,4,9 Hz, 1H), 4,04 (t, J = 9,9 Hz, 1H), 3,98 - 3,91 (m, 2H), 3,85 - 3,77 (m, 2H), 3,58 - 3,50 (m, 3H), 3,30 (dt, J = 10,8, 5,5 Hz, 2H), 3,25 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 617,2 [(M+H)+, calc. para C28H31F2N6O6S 617,2], k = 1,79 min (Método 2); HPLC (Método 3): tR = 10,01 min; HPLC (Método 4): tR = 8,68 min. hGal-3 CI50 = 0,060 pM.

Ejemplo 2. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

Etapa 1

Ejemplo 2

Etapa 1. Preparación de acetato de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-acetoxi-5-azidotetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ilo

A una solución de acetato de (-)-(3S,4R,5R)-3-azido-5-mercaptotetrahidro-2H-piran-4-ilo (43 mg, 0,198 mmol) en acetato de etilo (3 ml), se le añadieron carbonato sódico (0,396 ml, 0,792 mmol), acetato de ((2R,3R,4S,5R,6R)-3-acetoxi-6-bromo-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (114 mg, 0,218 mmol) e hidrogenosulfato de tetrabutilamonio (269 mg, 0,792 mmol). La mezcla de reacción se agitó vigorosamente a temperatura ambiente durante 1,5 h. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía solución acuosa saturada de NaHCO3 (5 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (5 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 0 % ^ 70 % en hexanos; columna de 24 g) para proporcionar acetato de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-acetoxi-5-azidotetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ilo (101 mg, 0,153 mmol, rendimiento del 77 %). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,81 (s, 1H), 7,46 (dd, J = 8,3, 6,5 Hz, 2H), 5,51 (dd, J = 3,1,0,9 Hz, 1H), 5,06 (dd, J = 10,8, 9,3 Hz, 1H), 4,69 - 4,61 (m, 2H), 4,27 - 4,01 (m, 6H), 3,69 (ddd, J = 10,7, 9,2, 5,3 Hz, 1H), 3,59 - 3,49 (m, 1H), 3,31 (s, 3H), 3,25 (t, J = 11,2 Hz, 1H), 3,14 (td, J = 11,0, 4,8 Hz, 1H), 2,20 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 2,08 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 658,6 [(M+H)+, calc. para C26H30F3N6O9S 659,2], tR = 2,10 min (Método 2).

Etapa 2. Preparación de acetato de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-acetoxi-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ilo

Se disolvieron acetato de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-acetoxi-5-azidotetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ilo (101 mg, 0,153 mmol) y 1-etinil-3-fluorobenceno (55,3 mg, 0,460 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (3 ml) y agua (1,000 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (30,4 mg, 0,153 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (26,8 mg, 0,107 mmol) (disuelto previamente en 0,4 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla de reacción se filtró a través de una capa de Celite y el filtrado se transfirió a un embudo de decantación que contenía solución acuosa saturada de NaHCO3 (10 ml). La capa acuosa se extrajo con diclorometano (3 x 15 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 20 % ^ 75 % en hexanos; columna de 24 g) para proporcionar acetato de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-acetoxi-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ilo (85 mg, 0,109 mmol, rendimiento del 71 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,91 (s, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,65 - 7,60 (m, 1H), 7,60 - 7,56 (m, 1H), 7,46 (dd, J = 8,0, 6,3 Hz, 2H), 7,44 - 7,38 (m, 1H), 7,11 - 7,04 (m, 1H), 5,61 - 5,49 (m, 2H), 4,85 (td, J = 10,2, 4,9 Hz, 1H), 4,70 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,65 (dd, J = 10,2, 3,1 Hz, 1H), 4,38 (t, J = 4,0 Hz, 1H), 4,36 - 4,33 (m, 1H), 4,29 - 4,21 (m, 2H), 4,17 - 4,08 (m, 2H), 3,98 (t, J = 11,2 Hz, 1H), 3,77 (t, J = 11,8 Hz, 1H), 3,37 - 3,31 (m, 1H), 3,30 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 2,01 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 778,4 [(M+H)+, calc. para C34H35F4N6O9S 779,2], fo = 2,12 min (Método 2).

Etapa 3

A una solución de acetato de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-acetoxi-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ilo (80 mg, 0,103 mmol) en metanol (1,0 ml) y THF (1,0 ml) a 0 °C se le añadió metóxido sódico (25 % en peso en MeOH) (0,117 ml, 0,514 mmol). El baño de refrigeración se retiró y la mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1N (0,2 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 3). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol (26 mg, 0,039 mmol, rendimiento del 38 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, METANOL-d4) 58,69 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 7,73 - 7,64 (m, 3H), 7,63 - 7,57 (m, 1H), 7,47 (td, J = 8,0, 6,0 Hz, 1H), 7,13 -7,06 (m, 1H), 4,94 (dd, J = 10,5, 3,0 Hz, 1H), 4,80 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,71 - 4,62 (m, 1H), 4,32 (dd, J = 12,0, 5,0 Hz, 1H), 4,23 (dd, J = 11,1,5,0 Hz, 1H), 4,13 - 4,04 (m, 3H), 3,95 (t, J = 11,1 Hz, 1H), 3,87 - 3,79 (m, 2H), 3,76 - 3,70 (m, 1H), 3,62 (t, J = 11,7 Hz, 1H), 3,35 (d a, J = 5,3 Hz, 1H), 3,32 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 652,5 [(M+H)+, calc. para C28H29F4N6O6S 653,2], tR = 1,99 min (Método 2); HPLC (Método 3): tR = 10,54 min; HPLC (Método 4): tR = 9,33 min. hGal-3 CC50 = 0,046 |jM.

Ejemplo 3. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(piridin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

Etapa 1. Preparación de acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(piridin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

Se disolvieron acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (75 mg, 0,122 mmol) y 2-etinilpiridina (37,6 mg, 0,365 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (2,1 ml) y agua (0,7 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (28,9 mg, 0,146 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (42,5 mg, 0,170 mmol) (disuelto previamente en 0,3 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla y el sólido adherido a la barra de agitación se disolvieron mediante la adición de diclorometano y metanol. Se añadieron agua (5 ml) y bicarbonato sódico acuoso saturado (5 ml) dando como resultado la formación de un precipitado. La mezcla se filtró a través de una capa de Celite y la torta de filtro se aclaró con metanol al 5 % en diclorometano. El filtrado se transfirió a un embudo de decantación. Se añadieron varios mililitros de salmuera y la fase acuosa se extrajo (con agitación suave) con metanol al 5 % en diclorometano (4 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml). El embudo de decantación que contenía la salmuera se aclaró con diclorometano (2x) para recoger el residuo de color amarillo y esta capa orgánica se combinó con el extracto orgánico original. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 40 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 60 % ^ acetato de etilo al 100 % que contenía metanol al 5 %; columna de 24 g) para proporcionar acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(piridin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (80,6 mg, 0,112 mmol, rendimiento del 92 %) en forma de un sólido de color blanco. [a]D22 31,9, (c = 0,245, DMF); RMN 1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) 58,63-8,56 (m, 1H), 8,31 (s, 1H), 8,19 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,84 - 7,78 (m, 2H), 7,47 (dd, J = 8,1, 6,4 Hz, 2H), 7,28 -7,24 (m, 1H), 5,51 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 4,70 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,65 (dd, J = 10,2, 3,1 Hz, 1H), 4,61 - 4,52 (m, 1H), 4,38 (dd, J = 11,6, 4,9 Hz, 1H), 4,31 (dd, J = 11,9, 5,0 Hz, 1H), 4,25 (t, J = 10,0 Hz, 1H), 4,21 - 4,00 (m, 5H), 3,51 (t, J = 12,0 Hz, 1H), 3,36 (s, 3H), 3,18 (ddd, J = 11,9, 9,8, 5,0 Hz, 1H), 2,10 (s, 3H), 1,93 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 720,2 [(M+H)+, calc. para C31H33F3N7O8S 720,2], fo = 1,90 min (Método 1).

Etapa 2

A una suspensión de acetato de (+)-(2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-acetoxi-5-(4-(piridin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ilo (34,5 mg, 0,045 mmol) en THF (0,7 ml) y MeOH (0,7 ml) a 0 °C se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,052 ml, 0,226 mmol). El baño de refrigeración se retiró y la mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1 N (0,18 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 1). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar (+)-(2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(piridin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol t Fa (31,3 mg, 0,041 mmol, rendimiento del 91 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. [a]D22 45,9, (c = 0,330, DMF); RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 58,98 (s, 1H), 8,76 (s, 1H), 8,62 (d a, J = 4,7 Hz, 1H), 8,06 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,94 (t a, J = 7,7 Hz, 1H), 7,89 - 7,82 (m, 2H), 7,42 - 7,35 (m, 1H), 5,00 - 4,96 (m, 1H), 4,85 (d a, J = 9,3 Hz, 1H), 4,65 (td, J = 10,3, 4,9 Hz, 2H), 4,23 (dd a, J = 11,7, 5,0 Hz, 2H), 4,11 (a dd, J = 10,5, 5,0 Hz, 2H), 4,02 - 3,93 (m, 4H), 3,88 - 3,82 (m, 1H), 3,80 (t a, J = 6,2 Hz, 1H), 3,54 (dd a, J = 10,1,4,0 Hz, 3H), 3,25 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 636,2 [(M+H)+, calc. para C27H29F3N7O6S 636,2], tR = 1,74 min (Método 1); HPLC (Método 1): tR = 5,94 min; HPLC (Método 2): tR = 6,06 min. hGal-3 CI50 = 0,019 |jM.

Ejemplo 4. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirimidin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2)-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-¡l)t¡o)-5-metox¡-4-(4-(3,4,5-tr¡fluorofen¡l)-1H-1,2,3-triazol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-il)metilo

Se d¡solv¡eron acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-az¡do-4-h¡drox¡tetrah¡dro-2H-piran-3-¡l)t¡o)-5-metox¡-4-(4-(3,4,5-tr¡fluorofen¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrahidro-2H-p¡ran-2-¡l)met¡lo (28 mg, 0,045 mmol) y 2-et¡n¡lp¡r¡m¡d¡na (9,46 mg, 0,091 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (0,9 ml) y agua (0,3 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (9,00 mg, 0,045 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (9,07 mg, 0,036 mmol) (disuelto previamente en 0,3 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla y el sólido adherido a la barra de agitación se disolvieron mediante la adición de diclorometano y metanol. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación. Se añadieron agua (5 ml) y bicarbonato sódico acuoso saturado (5 ml) junto con varios mililitros de salmuera dando como resultado la formación de un precipitado. La capa acuosa se extrajo (con agitación suave) con metanol al 5 % en diclorometano (4 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml). El embudo de decantación que contenía la salmuera se aclaró con diclorometano (2x) para recoger el residuo de color amarillo y esta capa orgánica se combinó con el extracto orgánico original. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 50 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 50 % ^ acetato de etilo al 100 % que contenía metanol al 5 %; columna de 12 g) para proporcionar acetato de met¡lo((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetox¡-6-(((3R,4R,5S)-4-h¡drox¡-5-(4-(p¡rim¡d¡n-2-¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-¡l)t¡o)-5-metox¡-4-(4-(3,4,5-tr¡fluorofen¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrahidro-2H-p¡ran-2-¡l)met¡lo (27,5 mg, 0,038 mmol, rendimiento del 84 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 88,84 (d, J=5,0 Hz, 2H), 8,42 (s, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,47 (dd, J = 8,3, 6,5 Hz, 2H), 7,28 - 7,23 (m, 1H), 5,51 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 4,74 -4,64 (m, 2H), 4,57 (td, J = 10,3, 4,8 Hz, 1H), 4,41 (dd, J = 11,3, 5,0 Hz, 1H), 4,35 -4,04 (m, 8H), 3,57 -3,47 (m, 2H), 3,36 (s, 3H), 3,17 (ddd, J = 11,9, 9,7, 5,0 Hz, 1H), 2,11 (s, 3H), 1,95 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 721,2 [(M+H)+. calc. para C30H32F3N8O8S 721,2], ír = 1,79 min (Método 1).

Etapa 2

A una suspensión de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetox¡-6-(((3R,4R,5S)-4-h¡droxi-5-(4-(p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-1-p¡ran-3-¡l)t¡o)-5-metox¡-4-(4-(3,4,5-tr¡fluorofen¡l)-1H-1,2,3-triazol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-il)metilo (24 mg, 0,033 mmol) en THF (0,7 ml) y MeOH (0,7 ml) a 0 °C se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,038 ml, 0,167 mmol). El baño de refrigeración se retiró y la mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1 N (0,1 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 1). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-h¡drox¡-5-(4-(p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-il)tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-¡l)t¡o)-2-(h¡drox¡met¡l)-5-metox¡-4-(4-(3,4,5-trifluorofen¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-il)tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-ol (18,6 mg, 0,029 mmol, rendimiento del 86%) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6)8 8,96 (s, 1H), 8,80 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 8,00 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,89 - 7,80 (m, 2H), 7,66 - 7,59 (m, 1H), 7,55 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,11 (t, J = 55,8 Hz, 1H), 4,98 (dd, J = 10,5, 2,9 Hz, 1H), 4,83 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,65 -4,57 (m, 1H), 4,26 (dd a, J = 11,7, 4,8 Hz, 1H), 4,14 (dd a, J = 11,0, 4,9 Hz, 1H), 4,02 - 3,93 (m, 3H), 3,85 - 3,78 (m, 2H), 3,58 - 3,50 (m, 3H), 3,29 (dd, J = 10,7, 4,7 Hz, 1H), 3,25 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 637,2 [(M+H)+, calc. para C26H28F3N8O6S 637,2], ír = 1,84 min (Método 1); HPLC (Método 1): ír = 6,14 min; HPLC (Método 2): ír = 5,75 min. hGal-3 CC50 = 0,018 pM.

Ejemplo 5. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-(difluorometil)fen¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)-4-h¡drox¡tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-¡l)t¡o)-2-(hidrox¡met¡l)-5-metox¡-4-(4-(3,4,5-tr¡fluorofen¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-piran-3-ol

Ejemplo 5

Etapa 1. Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-(difluorometil)fenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

Se disolvieron acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (48 mg, 0,078 mmol) y 1-(difluorometil)-3-etinilbenceno (23,69 mg, 0,156 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (0,9 ml) y agua (0,3 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (15,42 mg, 0,078 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (15,55 mg, 0,062 mmol) (disuelto previamente en 0,3 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla y el sólido adherido a la barra de agitación se disolvieron mediante la adición de diclorometano y metanol. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación. Se añadieron agua (5 ml) y bicarbonato sódico acuoso saturado (5 ml) junto con varios mililitros de salmuera dando como resultado la formación de un precipitado. La capa acuosa se extrajo (con agitación suave) con metanol al 5 % en diclorometano (4 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml). El embudo de decantación que contenía la salmuera se aclaró con diclorometano (2x) para recoger el residuo de color amarillo y esta capa orgánica se combinó con el extracto orgánico original. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 30 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 70 % ^ acetato de etilo al 70 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 30 %; columna de 12 g) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-(difluorometil)fenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (56,8 mg, 0,074 mmol, rendimiento del 95 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,01-7,95 (m, 3H), 7,82 (s, 1H), 7,61 - 7,44 (m, 4H), 6,72 (t, J = 56,5 Hz, 1H), 5,52 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,73 - 4,62 (m, 2H), 4,53 (td, J = 10,3, 4,8 Hz, 1H), 4,40 (dd, J = 11,5, 4,8 Hz, 1H), 4,35 - 4,23 (m, 3H), 4,21 - 4,04 (m, 4H), 3,57 - 3,49 (m, 2H), 3,36 (s, 3H), 3,16 (ddd, J = 11,9, 9,7, 5,0 Hz, 1H), 2,11 (s, 3H), 1,93 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 769,2 [(M+H)+, calc. para C33H34F5N6O8S 769,2], k = 1,96 min (Método 1).

Etapa 2

A una suspensión de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-(difluorometil)fenil)-1H-1,2,3-triazol-1 -il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1 H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (47 mg, 0,061 mmol) en THF (0,7 ml) y MeOH (0,7 ml) a 0 °C se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,070 ml, 0,306 mmol). El baño de refrigeración se retiró y la mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1 N (0,2 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 2). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-(difluorometil)fenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol (38 mg, 0,055 mmol, rendimiento del 90 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 58,96 (s, 1H), 8,80 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 8,00 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,89 - 7,80 (m, 2H), 7,66 - 7,59 (m, 1H), 7,55 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,11 (t, J = 55,8 Hz, 1H), 4,98 (dd, J = 10,5, 2,9 Hz, 1H), 4,83 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,65 - 4,57 (m, 1H), 4,26 (dd a, J = 11,7, 4,8 Hz, 1H), 4,14 (dd a, J = 11,0, 4,9 Hz, 1H), 4,02 - 3,93 (m, 3H), 3,85 - 3,78 (m, 2H), 3,58 - 3,50 (m, 3H), 3,29 (dd, J = 10,7, 4,7 Hz, 1H), 3,25 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 685,2 [(M+H)+, calc. para C29H30F5N6O6S 685,2], tR = 2,04 min (Método 1); HPLC (Método 1): tR = 8,16 min; HPLC (Método 2): tR = 7,50 min. hGal-3 CC50 = 0,051 pM.

Ejemplo 6. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-(difluorometoxi)fenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

Ejemplo 6

Etapa 1. Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-(difluorometoxi)fenil)-1H-1.2.3- triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

Se disolvieron acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1 H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (23,1 mg, 0,037 mmol) y 1-(difluorometoxi)-3-etinilbenceno (12,60 mg, 0,075 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (0,9 ml) y agua (0,3 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (7,42 mg, 0,037 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (7,48 mg, 0,030 mmol) (disuelto previamente en 0,3 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla y el sólido adherido a la barra de agitación se disolvieron mediante la adición de diclorometano y metanol. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación. Se añadieron agua (5 ml) y bicarbonato sódico acuoso saturado (5 ml) junto con varios mililitros de salmuera dando como resultado la formación de un precipitado. La capa acuosa se extrajo (con agitación suave) con metanol al 5 % en diclorometano (4 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml). El embudo de decantación que contenía la salmuera se aclaró con diclorometano (2x) para recoger el residuo de color amarillo y esta capa orgánica se combinó con el extracto orgánico original. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 30 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 70 % ^ acetato de etilo al 70 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 30 %; columna de 12 g) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-(difluorometoxi)fenil)1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1.2.3- triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (26,7 mg, 0,034 mmol, rendimiento del 91 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,94 (s, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,67 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,51 - 7,41 (m, 3H), 7,13 (dd, J = 8,0, 2,3 Hz, 1H), 6,60 (t, J = 73,8 Hz, 1H), 5,51 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 4,72 -4,64 (m, 2H), 4,52 (td, J = 10,5, 4,9 Hz, 1H), 4,39 (dd, J = 11,5, 4,8 Hz, 1H), 4,34 -4,22 (m, 3H), 4,21 -4,01 (m, 5H), 3,53 (t, J = 11,9 Hz, 1H), 3,36 (s, 3H), 3,16 (ddd, J = 11,7, 10,0, 5,1 Hz, 1H), 2,11 (s, 3H), 1,93 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 785,1 [(M+H)+, calc. para C33H34F5N6O9S 785,2], ír = 2,13 min (Método 1).

Etapa 2

A una suspensión de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-(difluorometoxi)fenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (25 mg, 0,032 mmol) en THF (0,7 ml) y MeOH (0,7 ml) a 0 °C se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,036 ml, 0,159 mmol). El baño de refrigeración se retiró y la mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1 N (0,1 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 2). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-(difluorometoxi)fenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol (19,6 mg, 0,028 mmol, rendimiento del 87 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 58,99 (s, 1H), 8,78 (s, 1H), 7,86 (dd, J = 8,9, 6,8 Hz, 2H), 7,72 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,53 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,33 (t, J = 73,9 Hz, 1H), 7,16 (dd, J = 8,2, 2,1 Hz, 1H), 4,98 (dd, J = 10,6, 2,8 Hz, 1H), 4,83 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,63 -4,56 (m, 1H), 4,25 (dd, J = 11,7, 5,0 Hz, 1H), 4,13 (dd a, J = 11,1,5,1 Hz, 1H), 4,01 -3,91 (m, 3H), 3,84 -3,76 (m, 2H), 3,56 - 3,49 (m, 3H), 3,32 - 3,27 (m, 1H), 3,25 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 701,2 [(M+H)+, calc. para C29H30F5N6O7S 701,2], tR = 2,02 min (Método 1); HPLC (Método 1): tR = 8,25 min; HPLC (Método 2): tR = 7,56 min. hGal-3 CC50 = 0,058 pM. Ejemplo 7. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(5-fluoropirimidin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3--triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3)-ol

Ejemplo 7

Etapa 1. Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(5-fluoropirimidin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

Se disolvieron acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (17 mg, 0,028 mmol) y 2-etinil-5-fluoropirimidina (10,10 mg, 0,083 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (0,6 ml) y agua (0,2 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (5,46 mg, 0,028 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (5,51 mg, 0,022 mmol) (disuelto previamente en 0,3 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. El sólido adherido a la barra de agitación se disolvió mediante la adición de diclorometano y metanol. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía agua (5 ml) y bicarbonato sódico acuoso saturado (5 ml) dando como resultado la formación de un precipitado. La capa acuosa se extrajo (con agitación suave) con metanol al 5 % en diclorometano (4 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml). El embudo de decantación que contenía la salmuera se aclaró con diclorometano (2x) para recoger el residuo de color naranja y esta capa orgánica se combinó con el extracto orgánico original. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 50 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 50 % ^ acetato de etilo al 100 % que contenía metanol al 5%; columna de 12 g) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(5-fluoropirimidin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (15,9 mg, 0,022 mmol, rendimiento del 78 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6)58,98 (s, 2H), 8,96 (s, 1H), 8,86 (s, 1H), 7,81 (dd, J = 86, 6,8 Hz, 2H), 5,72 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 5,39 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 5,27 (dd, J = 10,5, 3,1 Hz, 1H), 5,04 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,68 (td, J = 10,4, 5,0 Hz, 1H), 4,35 (t, J = 6,3 Hz, 1H), 4,21 (dd, J = 11,7, 4,7 Hz, 1H), 4,15 (dd, J = 10,9, 5,0 Hz, 1H), 4,11 - 4,01 (m, 4H), 3,88 (t, J = 11,1 Hz, 1H), 3,58 (t, J = 11,6 Hz, 1H), 3,26 (s, 3H), 3,25 - 3,20 (m, 1H), 2,04 (s, 3H), 2,03 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 739,2 [(M+H)+, calc. para C30H31F4N8O8S 739,1], tR = 1,90 min (Método 1). Etapa 2

A una suspensión de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(5-fluoropirimidin-2-il)-1H-1,2,3triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (28 mg, 0,038 mmol) en THF (0,7 ml) y MeOH (0,7 ml) a -10 °C se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,043 ml, 0,190 mmol). La mezcla de reacción se agitó a -10 °C durante 1 h. La mezcla se neutralizó hasta que se volvió ligeramente ácida mediante la adición de HCl 1 N (0,35 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 1). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(5-fluoropirimidin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol (20,3 mg, 0,031 mmol, rendimiento del 81 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6)58,98 (s, 2H), 8,96 (s, 1H, principal), 8,94 (s, 1H, secundario), 8,86 (s, 1H), 7,88 - 7,80 (m, 2H), 5,15 (dd, J = 10,4, 2,9 Hz, 1H, secundario), 4,98 (dd, J = 10,5, 2,9 Hz, 1H), 4,84 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,70 - 4,63 (m, 2H), 4,52 (d a, J = 2,6 Hz, 1H, secundario), 4,23 (dd a, J = 11,9, 5,0 Hz, 2H), 4,15 - 4,08 (m, 2H), 4,03 - 3,93 (m, 3H), 3,91 - 3,83 (m, 1H), 3,80 (t, J = 6,3 Hz, 1H), 3,58 - 3,51 (m, 3H), 3,25 (s, 3H, principal), 3,29 - 3,23 (m, 1H), 3,22 (s, 3H, minoritario); CL/EM (IEN) m/e 655,2 [(M+H)+, calc. para C26H27F4N8O6S 655,2], tR = 1,78 min (Método 1); HPLC (Método 1): tR = 4,84 min; HPLC (Método 2): tR = 4,82 min. hGal-3 CC50 = 0,009 pM.

Ejemplo 8. (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(5-metoxipirimidin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

Ejemplo 8

Etapa 1. Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(5-metoxipirimidin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

Se disolvieron acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (25,8 mg, 0,042 mmol) y 2-etinil-5-metoxipirimidina (11,23 mg, 0,084 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (0,75 ml) y agua (0,25 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (8,29 mg, 0,042 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (8,36 mg, 0,033 mmol) (disuelto previamente en 0,3 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. El sólido adherido a la barra de agitación se disolvió mediante la adición de diclorometano y metanol. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía agua (5 ml) y bicarbonato sódico acuoso saturado (5 ml) dando como resultado la formación de un precipitado. La capa acuosa se extrajo (con agitación suave) con metanol al 5 % en diclorometano (4 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml). El embudo de decantación que contenía la salmuera se aclaró con diclorometano (2x) para recoger el residuo de color amarillo y esta capa orgánica se combinó con el extracto orgánico original. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 50 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 50 % ^ acetato de etilo al 100 % que contenía metanol al 5%; columna de 12 g) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(5-metoxipirimidin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (25,3 mg, 0,034 mmol, rendimiento del 81 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,50 (s, 2H), 8,32 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,48 (dd, J = 8,2, 6,4 Hz, 2H), 5,52 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,74 - 4,66 (m, 2H), 4,61 - 4,52 (m, 1H), 4,40 (dd, J = 11,7, 4,9 Hz, 1H), 4,34 - 4,20 (m, 3H), 4,19 - 4,05 (m, 5H), 4,00 (s, 3H), 3,52 (t, J = 11,9 Hz, 1H), 3,36 (s, 3H), 3,18 (ddd, J = 11,7, 9,7, 5,1 Hz, 1H), 2,11 (s, 3H), 1,95 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 751,2 [(M+H)+, calc. para C31H34F3N8O9S 751,2], k = 1,90 min (Método 1).

Etapa 2

A una suspensión de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(5-metoxipirimidin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (25,8 mg, 0,034 mmol) en THF (0,7 ml) y MeOH (0,7 ml) a 0 °C se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,039 ml, 0,172 mmol). El baño de refrigeración se retiró y la mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1 N (0,1 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 1). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(5-metoxipirimidin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol (22,8 mg, 0,034 mmol, rendimiento del 98 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 58,96 (s, 1H), 8,77 (s a, 1H, principal), 8,94 (s, 1H, secundario), 8,77 (s a, 1H), 8,64 (s a, 2H), 7,85 (dd, J = 8,9, 6,8 Hz, 2H), 5,15 (dd a, J = 10,2, 2,9 Hz, 1H, secundario), 4,98 (dd, J = 10,6, 3,0 Hz, 1H), 4,84 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,71 -4,61 (m, 2H), 4,52 (d a, J = 32 Hz, 1H, secundario), 4,26 - 4,19 (m, 2H), 4,11 (dd a, J = 10,8, 4,8 Hz, 2H), 4,04 - 3,93 (m, 3H), 3,89 - 3,82 (m, 1H), 3,80 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 3,58 - 3,51 (m, 3H), 3,25 (s, 3H, principal), 3,27 (d a, J = 4,7 Hz, 1H), 3,22 (s, 1H, minoritario); CL/EM (IEN) m/e 667,2 [(M+H)+, calc. para C27H30F3N8O7S 667,2], tR = 1,79 min (Método 1); HPLC (Método 1): tR = 5,74 min; HPLC (Método 2): tR = 5,44 min. hGal-3 CC50 = 0,012 pM.

Ejemplo 9. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirirnidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

Ejemplo 9

Etapa 1. Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

Se disolvieron acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (18 mg, 0,029 mmol) y 5-etinil-2-metoxipirimidina (11,75 mg, 0,088 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (0,9 ml) y agua (0,300 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (6,94 mg, 0,035 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (10,20 mg, 0,041 mmol) (disuelto previamente en 0,3 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla y el sólido adherido a la barra de agitación se disolvieron mediante la adición de diclorometano y metanol. Se añadieron agua (5 ml) y bicarbonato sódico acuoso saturado (5 ml) dando como resultado la formación de un precipitado. La mezcla se filtró a través de una capa de Celite y la torta de filtro se aclaró con metanol al 5 % en diclorometano. El filtrado se transfirió a un embudo de decantación. Se añadió salmuera (10 ml) y la capa acuosa se extrajo (con suave sacudida) con metanol al 5 % en diclorometano (4 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 20 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 60 % ^ acetato de etilo al 80 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 20 %; columna de 12 g) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (18 mg, 0,024 mmol, rendimiento del 82 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,96 (s, 2H), 7,98 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,47 (dd, J = 8,0, 6,5 Hz, 2H), 5,52 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 4,72 - 4,66 (m, 2H), 4,54 (td, J = 10,3, 4,8 Hz, 1H), 4,39 (dd, J = 11,4, 4,9 Hz, 1H), 4,34 - 4,29 (m, 1H), 4,31 - 4,22 (m, 2H), 4,19 - 4,11 (m, 4H), 4,09 (s, 3H), 3,59 - 3,49 (m, 1H), 3,35 (s, 3H), 3,20 - 3,11 (m, 1H), 2,10 (s, 3H), 1,95 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 751,2 [(M+H)+, calc. para C31H34F3N8O9S 751,2], tR = 2,05 min (Método 2).

Etapa 2

A una suspensión de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (18 mg, 0,024 mmol) en THF (0,5 ml) y MeOH (0,5 ml) a 0 °C se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,027 ml, 0,120 mmol). El baño de refrigeración se retiró y la mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1 N (0,18 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 3). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol (12,0 mg, 0,015 mmol, rendimiento del 62 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 59,03 (s, 2H), 8,98 (s, 1H), 8,76 (s, 1H), 7,86 (dd, J = 8,8, 7,0 Hz, 2H), 5,72 (s a, 1H), 5,49 (s a, 1H), 4,98 (dd, J = 10,4, 2,6 Hz, 1H), 4,84 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,62 (td, J = 10,4, 4,9 Hz, 1H), 4,26 (dd a, J = 11,4, 4,9 Hz, 1H), 4,14 (dd a, J = 10,9, 4,6 Hz, 1H), 3,98 (s, 3H), 3,95 (s a, 2H), 3,86 - 3,78 (m, 2H), 3,54 (t a, J = 11,4 Hz, 4H), 3,30 (dd a, J = 11,0, 5,0 Hz, 1H), 3,25 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 667,2 [(M+H)+, calc. para C27H29F3N8O7S 667,2], tR = 1,92 min (Método 2); HPLC (Método 3): tR = = 8,65 min; HPLC (Método 4): tR = 7,44 min. hGal-3 CC50 = 0,012 pM.

Ejemplo 10. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(3-hidroxifenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

Ejemplo 10

Etapa 1. Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(3-hidroxifenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

Se disolvieron acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3¡l)t¡o)-5-metox¡-4-(4-(3,4,5-tr¡fluorofen¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)met¡lo (18 mg, 0,029 mmol) y 3-etinilfenol (10,35 mg, 0,088 mmol) en una soluc¡ón desgas¡f¡cada prev¡amente de DMF (0,9 ml) y agua (0,300 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añad¡eron ascorbato sód¡co (6,94 mg, 0,035 mmol) y pentah¡drato de sulfato de cobre (II) (10,20 mg, 0,041 mmol) (d¡suelto prev¡amente en 0,3 ml de agua) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante 14 h. La mezcla y el sól¡do adher¡do a la barra de ag¡tac¡ón se d¡solv¡eron med¡ante la ad¡c¡ón de d¡clorometano y metanol. Se añad¡eron agua (5 ml) y b¡carbonato sód¡co acuoso saturado (5 ml) dando como resultado la formac¡ón de un prec¡p¡tado. La mezcla se f¡ltró a través de una capa de Cel¡te y la torta de f¡ltro se aclaró con metanol al 5 % en d¡clorometano. El f¡ltrado se transf¡r¡ó a un embudo de decantac¡ón. Se añad¡ó salmuera (10 ml) y la capa acuosa se extrajo (con suave sacud¡da) con metanol al 5 % en d¡clorometano (4 x 20 ml). Las capas orgán¡cas comb¡nadas se lavaron con salmuera (10 ml). La capa orgán¡ca se secó sobre MgSO4, se f¡ltró y se concentró. El producto se pur¡f¡có por cromatografía en columna sobre gel de síl¡ce (acetato de et¡lo al 20 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 60 % ^ acetato de et¡lo al 80 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 20 %; columna de 12 g) para proporc¡onar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetox¡-6-(((3R,4R,5S)-4-h¡drox¡-5-(4-(3-h¡drox¡fen¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-¡l)t¡o)-5-metox¡-4-(4-(3,4,5-tr¡fluorofen¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)met¡lo (15 mg, 0,020 mmol, rend¡m¡ento del 70%) en forma de un sól¡do de color blanco. RMN 1H (400 MHz, Acetona) 88,81 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 7,74 (dd, J = 9,0, 6,8 Hz, 2H), 7,49 -7,42 (m, 1H), 7,38 -7,34 (m, 1H), 7,30 - 7,22 (m, 1H), 6,83 (ddd, J = 8,0, 2,5, 1,0 Hz, 1H), 5,59 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 5,26 (dd, J = 10,5, 3,0 Hz, 1H), 5,06 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,75 -4,61 (m, 1H), 4,44 (t, J = 6,7 Hz, 1H), 4,32 -4,12 (m, 7H), 3,98 (t, J = 11,2 Hz, 1H), 3,64 (t, J = 11,7 Hz, 1H), 3,36 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,99 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 735,3 [(M+H)+, calc. para C32H34F3N6O9S 735,2], tR = 2,03 m¡n (Método 2).

Etapa 2

A una suspens¡ón de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetox¡-6-(((3R,4R,5S)-4-h¡drox¡-5-(4-(3-h¡drox¡fen¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-¡l)t¡o)-5-metox¡-4-(4-(3,4,5-tr¡fluorofen¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)met¡lo (15 mg, 0,020 mmol) en THF (0,5 ml) y MeOH (0,5 ml) a 0 °C se añad¡ó metóx¡do sód¡co (soluc¡ón al 25 % en peso en metanol) (0,023 ml, 0,102 mmol). El baño de refr¡gerac¡ón se ret¡ró y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a ta durante 1 h. La mezcla se neutral¡zó parc¡almente med¡ante la ad¡c¡ón de HCl 1 N (0,18 ml). La mezcla se concentró y se recog¡ó en d¡oxano/metanol/agua y se f¡ltró y se pur¡f¡có por HPLC preparat¡va de fase ¡nversa (Método 3). El d¡solvente orgán¡co se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se l¡of¡l¡zó para proporc¡onar (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-h¡drox¡-5-(4-(3-h¡drox¡fen¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-¡l)t¡o)-2-(h¡drox¡met¡l)-5-metox¡-4-(4-(3,4,5-tr¡fluorofen¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-ol (11,4 mg, 0,017 mmol, rend¡m¡ento del 84%) en forma de un sól¡do amorfo de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 89,59 (s a, 1H), 8,98 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 7,86 (dd, J = 8,9, 6,9 Hz, 2H), 7,28 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 7,26 - 7,21 (m, 2H), 6,77 - 6,70 (m, 1H), 5,79 - 5,61 (m, 1H), 5,56 - 5,43 (m, 1H), 4,98 (dd, J = 10,4, 2,9 Hz, 1H), 4,84 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,64 - 4,50 (m, 1H), 4,29 - 4,20 (m, 1H), 4,11 (dd a, J = 10,9, 4,9 Hz, 1H), 4,02 - 3,92 (m, 3H), 3,85 - 3,76 (m, 2H), 3,56 - 3,51 (m, 2H), 3,26 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 651,2 [(M+H)+, calc. para C28H30F3N6O7S 651,2], tR = 1,92 m¡n (Método 2); HPLC (Método 3): tR = 9,11 m¡n; HPLC (Método 4): tR = 8,16 m¡n. hGal-3 CC50 = 0,038 pM.

Ejemplo 11. Preparac¡ón de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(2-clorop¡r¡d¡n-4-¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)-4-h¡drox¡tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-¡l)t¡o)-2-(h¡drox¡met¡l)-5-metox¡-4-(4-(3,4,5-tr¡fluorofen¡l)-1H-1,2,3-tr¡azo]-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-ol

Ejemplo 11

Etapa 1. Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(2-cloropiridin-4-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

Se disolvieron acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1 H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (20 mg, 0,032 mmol) y 2-cloro-4-etinilpiridina (13,39 mg, 0,097 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (0,9 ml) y agua (0,300 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (7,71 mg, 0,039 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (11,34 mg, 0,045 mmol) (disuelto previamente en 0,3 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla y el sólido adherido a la barra de agitación se disolvieron mediante la adición de diclorometano y metanol. Se añadieron agua (5 ml) y bicarbonato sódico acuoso saturado (5 ml) dando como resultado la formación de un precipitado. La mezcla se filtró a través de una capa de Celite y la torta de filtro se aclaró con metanol al 5 % en diclorometano. El filtrado se transfirió a un embudo de decantación. Se añadió salmuera (10 ml) y la capa acuosa se extrajo con metanol al 5 % en diclorometano (3 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 40 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 60 % ^ acetato de etilo al 100 % que contenía metanol al 5 %; columna de 12 g) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(2-cloropiridin-4-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (23 mg, 0,030 mmol, rendimiento del 94 %). RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,45 (d, J=5,0 Hz, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,67 (dd, J = 5,3, 1,3 Hz, 1H), 7,46 (dd, J = 7,8, 6,5 Hz, 2H), 5,52 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 4,73 - 4,65 (m, 2H), 4,57 - 4,49 (m, 1H), 4,40 (dd a, J = 11,5, 4,8 Hz, 1H), 4,35 - 4,29 (m, 2H), 4,29 - 4,22 (m, 2H), 4,17 - 4,10 (m, 2H), 4,09 -4,02 (m, 1H), 3,52 (t, J = 11,9 Hz, 1H), 3,35 (s, 3H), 3,15 (ddd, J = 11,7, 10,0, 5,1 Hz, 1H), 2,10 (s, 3H), 1,94 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 754,2 [(M+H)+, calc. para C31H32CF3N7O8S 754,2], k = 1,91 min (Método 2).

Etapa 2

A una suspensión de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(2-cloropiridin-4-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (23 mg, 0,030 mmol) en THF (0,5 ml) y MeOH (0,5 ml) a 0 °C se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,035 ml, 0,152 mmol). El baño de refrigeración se retiró y la mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1 N (0,18 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 3). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(2-cloropiridin-4-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol TFA (14,1 mg, 0,017 mmol, rendimiento del 57 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 59,03 (s, 1H), 8,98 (s, 1H), 8,50 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,89 - 7,81 (m, 3H), 5,74 (dd a, J = 4,5, 1,5 Hz, 1H), 5,50 (d a, J = 5,5 Hz, 1H), 4,98 (dd, J = 10,5, 2,8 Hz, 1H), 4,84 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,62 (td, J = 10,4, 4,9 Hz, 1H), 4,26 (dd a, J = 11,7, 4,6 Hz, 1H), 4,16 (dd, J = 10,8, 4,8 Hz, 1H), 4,02 - 3,90 (m, 3H), 3,85 - 3,76 (m, 2H), 3,57 - 3,51 (m, 4H), 3,34 - 3,27 (m, 1H), 3,25 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 670,1 [(M+H)+, calc. para C27H28CIF3N7O6S 670,1], ír = 1,80 min (Método 2); HPLC (Método 3): ír = 9,75 min; HPLC (Método 4): tR = 8,66 min. hGal-3 CI50 = 0,037 pM.

Ejemplo 12. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

Ejemplo 12

Etapa 1. Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

Se disolvieron acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (24 mg, 0,039 mmol) y etinilbenceno (11,93 mg, 0,117 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (0,9 ml) y agua (0,300 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (9,25 mg, 0,047 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (13,61 mg, 0,054 mmol) (disuelto previamente en 0,3 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla y el sólido adherido a la barra de agitación se disolvieron mediante la adición de diclorometano y metanol. Se añadieron agua (5 ml) y bicarbonato sódico acuoso saturado (5 ml) dando como resultado la formación de un precipitado. La mezcla se filtró a través de una capa de Celite y la torta de filtro se aclaró con metanol al 5 % en diclorometano. El filtrado se transfirió a un embudo de decantación. Se añadió salmuera (10 ml) y la capa acuosa se extrajo (con suave sacudida) con metanol al 5 % en diclorometano (4 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 40 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 60 % ^ acetato de etilo al 100 % que contenía metanol al 5 %; columna de 12 g) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (11 mg, 0,015 mmol, rendimiento del 39 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 7,92 (s, 1H), 7,86 - 7,80 (m, 3H), 7,50 - 7,41 (m, 4H), 7,40 - 7,33 (m, 1H), 5,51 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 4,74 - 4,65 (m, 2H), 4,57 - 4,48 (m, 1H). 4,38 (dd, J = 11,5, 4,8 Hz, 1H), 4,34 - 4,03 (m, 7H), 3,53 (t, J = 11,9 Hz, 1H), 3,36 (s, 3H), 3,18 (ddd, J = 11,9, 9,5, 5,0 Hz, 1H), 2,10 (s, 3H), 1,93 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 719,3 [(M+H)+, calc. para C32H34F3N6O8S 719,2], Ír = 2,01 min (Método 2).

Etapa 2

A una suspensión de acetato de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-acetoxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ilo (11 mg, 0,014 mmol) en THF (0,5 ml) y MeOH (0,5 ml) a 0 °C se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,017 ml, 0,072 mmol). El baño de refrigeración se retiró y la mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1 N (0,18 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 3). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol (8,1 mg, 0,012 mmol, rendimiento del 81 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 58,98 (s, 1H), 8,68 (s, 1H), 7,89 - 7,82 (m, 4H), 7,47 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 7,40 - 7,32 (m, 1H), 5,72 - 5,66 (m, 1H), 5,49 (d a, J = 5,5 Hz, 1H), 4,98 (dd, J = 10,5, 2,9 Hz, 1H), 4,84 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 4,63 - 4,55 (m, 1H), 4,25 (dd, J = 11,5, 5,0 Hz, 1H), 4,12 (dd, J = 10,7, 4,7 Hz, 1H), 4,01 - 3,92 (m, 3H), 3,84 - 3,76 (m, 2H), 3,56 - 3,49 (m, 3H), 3,28 (dd a, J = 11,0, 4,4 Hz, 1H), 3,25 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 635,2 [(M+H)+, calc. para C28H30F3N6O6S 635,2], fo = 1,88 min (Método 2); HPLC (Método 3): tR = 13,65 min; HPLC (Método 4): tR = 11,47 min. hGal-3 CC50 = 0,032 |jM.

Ejemplo 13. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-aminofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

Ejemplo 13

Etapa 1. Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-aminofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

Se disolvieron acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (24 mg, 0,039 mmol) y 3-etinilanilina (13,68 mg, 0,117 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (0,9 ml) y agua (0,300 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (9,25 mg, 0,047 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (13,61 mg, 0,054 mmol) (disuelto previamente en 0,3 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla y el sólido adherido a la barra de agitación se disolvieron mediante la adición de diclorometano y metanol. Se añadieron agua (5 ml) y bicarbonato sódico acuoso saturado (5 ml) dando como resultado la formación de un precipitado. La mezcla se filtró a través de una capa de Celite y la torta de filtro se aclaró con metanol al 5 % en diclorometano. El filtrado se transfirió a un embudo de decantación. Se añadió salmuera (10 ml) y la capa acuosa se extrajo (con suave sacudida) con metanol al 5 % en diclorometano (4 x 5 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml). El embudo de decantación que contenía la salmuera se aclaró con diclorometano (2x) para recoger el residuo de color amarillo y esta capa orgánica se combinó con el extracto orgánico original. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 40 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 60 % ^ acetato de etilo al 100 % que contenía metanol al 5 %; columna de 12 g) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-aminofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (25 mg, 0,034 mmol, rendimiento del 88 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,87 (s, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,47 (dd, J = 8,0, 6,5 Hz, 2H), 7,28 - 7,19 (m, 3H), 7,12 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 6,77 - 6,65 (m, 1H), 5,50 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 4,72 - 4,65 (m, 2H), 4,55 - 4,47 (m, 1H), 4,37 (dd, J = 11,5, 4,8 Hz, 1H), 4,32 - 4,25 (m, 2H), 4,22 (d a, J = 9,0 Hz, 1H), 4,19 - 4,11 (m, 2H), 4,09 - 4,00 (m, 2H), 3,53 (t, 1,9 Hz, 1H), 3,35 (s, 3H), 3,22 - 3,12 (m, 2H), 2,10 (s, 3H), 1,93 (s, 4H); CL/EM (IEN) m/e 734,2 [(M+H)+, calc. para C32H35F3N7O8S 734,2], tR = 1,79 min (Método 2).

Etapa 2

A una suspensión de acetato de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-acetoxi-5-(4-(3-aminofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2Hpiran-3-ilo (25 mg, 0,032 mmol) en THF (0,5 ml) y MeOH (0,5 ml) a 0 °C se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,037 ml, 0,161 mmol). El baño de refrigeración se retiró y la mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1 N (0,18 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 3). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-aminofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol (22,5 mg, 0,028 mmol, rendimiento del 87 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSo-d6) 58,98 (s, 1H), 8,66 (s, 1H), 7,86 (dd, J = 8,7, 6,9 Hz, 2H), 7,57 (s a, 1H), 7,45 (d a, J = 7,2 Hz, 1H), 7,41 - 7,34 (m, 1H), 6,99 (d a, J = 7,5 Hz, 1H), 4,98 (dd, J = 10,5, 2,7 Hz, 1H), 4,84 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,59 (td, J = 10,3, 5,0 Hz, 1H), 4,28 -4,20 (m, 1H), 4,12 (dd a, J = 11,1,4,8 Hz, 1H), 4,00 -3,92 (m, 3H), 3,84 - 3,77 (m, 2H), 3,57 - 3,49 (m, 3H), 3,30 -3,26 (m, 1H), 3,25 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 650,2 [(M+H)+, calc. para C28H31F3N7O6S 650,2], ír = 1,65 min (Método 2); HPLC (Método 3): ír = 9,63 min; HPLC (Método 4): ír = 7,35 min. hGal-3 CC50 = 0,022 pM.

Ejemplo 14. Preparación de N-(3-(1-((3S,4R,5R)-4-hidroxi-5-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-6-(hidroximetil)-3-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)tio)tetrahidro-2H-piran-3-il)-1H-1,2,3-triazol-4-il)fenil)acetamida

Ejemplo 14

Etapa 1. Preparación de acetato de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-acetamidofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ilo

Se disolvieron acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (24 mg, 0,039 mmol) y N-(3-etinilfenil)acetamida (18,59 mg, 0,117 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (0,9 ml) y agua (0,300 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (9,25 mg, 0,047 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (13,61 mg, 0,054 mmol) (disuelto previamente en 0,3 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla y el sólido adherido a la barra de agitación se disolvieron mediante la adición de diclorometano y metanol. Se añadieron agua (5 ml) y bicarbonato sódico acuoso saturado (5 ml) dando como resultado la formación de un precipitado. La mezcla se filtró a través de una capa de Celite y la torta de filtro se aclaró con metanol al 5 % en diclorometano. El filtrado se transfirió a un embudo de decantación. Se añadió salmuera (10 ml) y la capa acuosa se extrajo (con suave sacudida) con metanol al 5 % en diclorometano (4 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml). El embudo de decantación que contenía la salmuera se aclaró con diclorometano (2x) para recoger el residuo de color amarillo y esta capa orgánica se combinó con el extracto orgánico original. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 40 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 60 % ^ acetato de etilo al 100 % que contenía metanol al 5 %; columna de 24 g) para proporcionar acetato de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-acetamidofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ilo (28 mg, 0,036 mmol, rendimiento del 93 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,96-7,83 (m, 3H), 7,56 (d a, J = 7,8 Hz, 1H), 7,45 (dd a, J = 13,3, 6,3 Hz, 3H), 7,37 - 7,31 (m, 1H), 5,51 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 4,89 (s a, 1H), 4,73 (d a, J = 9,8 Hz, 2H), 4,54 - 4,45 (m, 1H), 4,38 - 4,26 (m, 4H), 4,23 -4.10 (m, 2H), 4,08 -4,00 (m, 1H), 3,56 (t a, J = 11,9 Hz, 1H), 3,35 (s, 3H), 3,21 (td, J = 10,8, 5,0 Hz, 1H), 2,23 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1,96 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 776,3 [(M+H)+, calc. para C34H37F3N7O9S 776,2], ír = 1,92 min (Método 2). Etapa 2

A una suspensión de acetato de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-acetamidofenil)-1H-1,2,3 -triazol-1-il)-4-acetoxitetrahidro-2H-piran-3-N)tio)-2-(acetoximetN)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenN)-1H-1,2,3-triazol-1-N)tetrahidro-2H-piran-3-ilo (28 mg, 0,034 mmol) en THF (0,5 ml) y MeOH (0,5 ml) a 0 °C se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,039 ml, 0,171 mmol). El baño de refrigeración se retiró y la mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1 N (0,18 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 3). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar N-(3-(1-((3S,4R,5R)-4-hidroxi-5-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-6-(hidroximetil)-3-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)tio)tetrahidro-2H-piran-3-il)-1H-1,2,3-triazol-4-il)fenil)acetamida (24,1 mg, 0,028 mmol, rendimiento del 82 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 510,06 (s, 1H), 8,98 (s, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,86 (dd, J = 8,9, 6,8 Hz, 2H), 7,54 (d a, J = 8,2 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,41 - 7,33 (m, 1H), 4,98 (dd, J = 10,6, 2,8 Hz, 1H), 4,83 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,63 - 4,56 (m, 1H), 4,29 - 4,20 (m, 1H), 4,11 (dd a, J = 11,1,4,9 Hz, 1H), 4,01 - 3,92 (m, 3H), 3,86 - 3,77 (m, 2H), 3,59 - 3,49 (m, 3H), 3,31 - 3,26 (m, 1H), 3,25 (s, 3H), 2,07 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 692,2 [(M+H)+, calc. para C30H33F3N7O7S 692,2], ír = 1,73 min (Método 2); HPLC (Método 3): ír = 13,31 min; HPLC (Método 4): ír = 11,65 min. hGal-3 CC50 = 0,020 |jM.

Ejemplo 15. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

Etapa 1. Preparación de acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2- il)metilo

Se disolvieron acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (27 mg, 0,044 mmol) y 5-etinilpirimidina (13,68 mg, 0,131 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (0,9 ml) y agua (0,300 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (8,68 mg, 0,044 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (7,65 mg, 0,031 mmol) (disuelto previamente en 0,2 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla de reacción se filtró a través de una capa de Celite y el filtrado se transfirió a un embudo de decantación que contenía solución acuosa saturada de NaHCO3 (10 ml). La capa acuosa se extrajo con diclorometano (3 x 15 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 10 % ^ 100 % en hexanos; columna de 12 g) para proporcionar acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3- acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4(3,4,5-trifluorofenilo,)-1H-1,2,3-triazol-12,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (12 mg, 0,017 mmol, rendimiento del 38 %) en forma de un sólido de color blanco. [a]D22 72,0, (c = 0,320, CHCI3); RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 59,23 (s, 1H), 9,20 (s, 2H), 8,10 (s, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,47 (dd, J = 8,2, 6,4 Hz, 2H), 5,52 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 4,72 -4,63 (m, 2H), 4,60 - 4,51 (m, 1H), 4,41 (dd, J = 11,7, 4,9 Hz, 1H), 4,32 (dd, J = 12,2, 5,1 Hz, 1H), 4,27 (t, J = 9,9 Hz, 1H), 4,21 - 4,03 (m, 4H), 3,58 - 3,48 (m, 1H), 3,36 (s, 3H), 3,15 (ddd, J = 12,0, 9,9, 5,0 Hz, 1H), 3,01 - 2,88 (m, 1H), 2,11 (s, 3H), 1,95 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 720,4 [(M+H)+, calc. para C30H31F3N8O8S 721,2], k = 1,81 min (Método 2).

Etapa 2

A una solución de acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluoro'fenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (23 mg, 0,032 mmol) en metanol (0,5 ml) y tetrahidrofurano (0,5 ml) a 0 °C, se le añadió metóxido sódico (25 % en peso en MeOH) (0,036 ml, 0,160 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 2 h. La mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y se neutralizó parcialmente con HCl 1 N (0,10 ml). El volumen del disolvente se redujo en el rotovapor y la mezcla se diluyó con metanol, se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 4). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar (+)-(2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifiuorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol (11,4 mg, 0,018 mmol, rendimiento del 56 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. [a]D22 64,3, (c = 0,235, DMF); RMN 1H (500 MHz, Acetona) 59,24 (s, 2H), 9,13 (s, 1H), 8,77 (s, 1H), 8,73 (s, 1H), 7,76 (dd, J = 8,9, 6,8 Hz, 2H), 5,00 (dd, J = 10,5, 2,9 Hz, 1H), 4,92 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,74 - 4,67 (m, 1H), 4,32 - 4,22 (m, 3H), 4,18 (t, J = 9,9 Hz, 1H), 4,08 (t, J = 10,0 Hz, 1H), 4,01 - 3,92 (m, 2H), 3,84 (dd, J = 5,8, 3,5 Hz, 2H), 3,62 (t, J = 11,7 Hz, 1H), 3,37 - 3,32 (m, 1H), 3,30 (s, 3H); RMN 13C (126 MHz, DMSO-d6) 5158,1, 153,7, 143,8, 140,6, 125,5, 123,5, 122,9, 110,0, 110,0, 109,8, 82,9, 79,6, 76,8, 72,2, 71,7, 69,2, 67,9, 66,5, 64,0, 60,7, 60,1, 55,4, 46,7; CL/EM (IEN) m/e 637,2 [(M+H)+, calc. para C26H28F3N8O6S 637,2], tR = 1,70 min (Método 2); HPLC (Método 3): tR = 8,32 min; HPLC (Método 4): tR = 6,98 min. hGal-3 CC50 = 0,015 mM.

Ejemplo 16. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-clorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

Etapa 1. Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-clorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

Se disolvieron acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (18 mg, 0,029 mmol) y 1-cloro-3-etinilbenceno (11,96 mg, 0,088 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (0,9 ml) y agua (0,300 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (6,94 mg, 0,035 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (10,20 mg, 0,041 mmol) (disuelto previamente en 0,3 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla y el sólido adherido a la barra de agitación se disolvieron mediante la adición de diclorometano y metanol. Se añadieron agua (5 ml) y bicarbonato sódico acuoso saturado (5 ml) dando como resultado la formación de un precipitado. La mezcla se filtró a través de una capa de Celite y la torta de filtro se aclaró con metanol al 5 % en diclorometano. El filtrado se transfirió a un embudo de decantación. Se añadió salmuera (10 ml) y la capa acuosa se extrajo (con suave sacudida) con metanol al 5 % en diclorometano (4 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (20 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 10 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 90 % ^ acetato de etilo al 70 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 30 %; columna de 12 g) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-clorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (21 mg, 0,028 mmol, rendimiento del 96 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,94 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,81 (t, J = 1,6 Hz, 1H), 7,71 (dt, J = 7,5, 1,4 Hz, 1H), 7,47 (dd, J = 8,2, 6,4 Hz, 2H), 7,42 - 7,31 (m, 2H), 5,51 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 4,74 - 4,66 (m, 2H), 4,58 -4,47 (m, 1H), 4,38 (dd, J = 11,5, 4,8 Hz, 1H), 4,34 -4,23 (m, 3H), 4,21 -4,12 (m, 4H), 4,10 -4,01 (m, 1H), 3,53 (t, J = 12,0 Hz, 1H), 3,35 (s, 3H), 3,16 (ddd, J = 12,0, 9,7, 5,1 Hz, 1H), 2,10 (s, 3H), 1,93 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 753,2 [(M+H)+, calc. para C32H33CF3N6O8S 753,2], fo = 1,99 min (Método 2).

Etapa 2

A una suspensión de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-clorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (21 mg, 0,028 mmol) en THF (0,5 ml) y MeOH (0,5 ml) a 0 °C se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,032 ml, 0,139 mmol). El baño de refrigeración se retiró y la mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1 N (0,18 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 3). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(3-clorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol (15,6 mg, 0,023 mmol, rendimiento del 81 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 58,95 (s, 1H), 8,78 (s, 1H), 7,89 (t, J = 1,8 Hz, 1H), 7,87 - 7,79 (m, 3H), 7,54 - 7,48 (m, 1H), 7,43 - 7,39 (m, 1H), 4,97 (dd, J = 10,5, 2,9 Hz, 1H), 4,83 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,63 -4,55 (m, 1H), 4,25 (dd, J = 11,7, 4,7 Hz, 1H), 4,13 (dd, J = 11,1, 5,0 Hz, 1H), 4,01 -3,91 (m, 3H), 3,83 - 3,76 (m, 2H), 3,57 - 3,49 (m, 3H), 3,29 (dd a, J = 10,8, 4,7 Hz, 1H), 3,25 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 669,1 [(M+H)+, calc. para C28H29CF3N6O6S 669,1], tR = 1,90 min (Método 2); HPLC (Método 3): tR = 15,4 min; HPLC (Método 4): tR = 14,1 min. hGal-3 CC50 = 0,068 pM.

Ejemplo 17. Preparación de W-(2-(1-((3S,4R,5R.)-4-hidroxi-5-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-6-(hidroximetil)-3-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)tio)tetrahidro-2H-piran-3-il)-1H-1,2,3-triazol-4-il)pirimidin-4-il)acetamida

Etapa 1. Preparación de acetato de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(4-acetamidopirimidin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1il)tetrahidro-2H-piran-3-ilo

Se disolvieron acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-f,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (37 mg, 0,060 mmol) y N-(2-etinilpirimidin-4-il)acetamida (22,24 mg, 0,138 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (1,5 ml) y agua (0,500 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (14,27 mg, 0,072 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (20,98 mg, 0,084 mmol) (disuelto previamente en 0,5 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla y el sólido adherido a la barra de agitación se disolvieron mediante la adición de diclorometano y metanol. Se añadieron agua (10 ml) y bicarbonato sódico acuoso saturado (10 ml) dando como resultado la formación de un precipitado. La mezcla se filtró a través de una capa de Celite y la torta de filtro se aclaró con metanol al 5 % en diclorometano. El filtrado se transfirió a un embudo de decantación. Se añadió salmuera (20 ml) y la capa acuosa se extrajo (con suave sacudida) con metanol al 5 % en diclorometano (4 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 20 % ^ 100 % que contenía metanol al 5 %/hexanos; columna de 24 g) para proporcionar acetato de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(4-acetamidopirimidin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ilo (35 mg, 0,045 mmol, rendimiento del 75 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 11,16 (s, 1H), 8,99 (s, 1H), 8,81 (s, 1H), 8,71 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 7,89 - 7,78 (m, 2H), 5,76 (d a, J = 6,8 Hz, 1H), 5,40 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 5,28 (dd, J = 10,5, 3,0 Hz, 1H), 5,05 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,69 (td, J = 10,2, 4,9 Hz, 1H), 4,35 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 4,26 -4,13 (m, 2H), 4,11 - 3,99 (m, 4H), 3,90 (t, J = 11,2 Hz, 1H), 3,59 (t a, J = 11,5 Hz, 1H), 3,27 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,05 (s, 3H), 2,04 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 778,3 [(M+H)+, calc. para C32H35F3N9O9S 778,2], tR = 1,90 min (Método 2).

Etapa 2

A una suspensión de acetato de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(4-acetamidopirimidin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)- 4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ilo (15 mg, 0,019 mmol) en THF (0,75 ml) y MeOH (0,75 ml) a -20 °C (baño de acetona/hielo seco) se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,022 ml, 0,096 mmol). El baño de refrigeración se retiró y la mezcla de reacción se agitó a -20 °C durante 1 h. También se observó una pequeña cantidad del producto secundario de anilina. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1 N (0,18 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 3). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar N-(2-(1-((3S,4R,5R)-4-hidroxi-5-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-6-(hidroximetil)-3-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)tio)tetrahidro-2H-piran-3-il)-1H-1,2,3-triazol-4-il)pirimidin-4-il)acetamida (9,8 mg, 0,012 mmol, rendimiento del 62 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 5 11,13 (s, 1H), 9,01 - 8,95 (m, 1H), 8,79 (s, 1H), 8,70 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 7,85 (dd a, J = 8,9, 6,9 Hz, 2H), 4,97 (dd, J = 10,7, 2,7 Hz, 1H), 4,84 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,67 (td, J = 10,2, 5,0 Hz, 1H), 4,27 - 4,18 (m, 2H), 4,13 (dd a, J = 10,7, 4,7 Hz, 2H), 4,02 - 3,93 (m, 3H), 3,91 -3,84 (m, 1H), 3,80 (t a, J = 6,1 Hz, 1H), 3,57 -3,49 (m, 3H), 3,25 (s, 3H), 3,29 - 3,22 (m, 1H), 2,17 (s, 3H), 1,24 (s, 1H); CL/EM (IEN) m/e 694,2 [(M+H)+, calc. para C28H31F3N9O7S 694,2], tR = 1,78 min (Método 2); HPLC (Método 3): tR = 13,5 min; HPLC (Método 4): tR = 11,5 min. hGal-3 CC50 = 0,012 |jM.

Ejemplo 18. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(4-aminopirimidin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

A una suspensión de acetato de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(4-acetamidopirimidin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ilo (15 mg, 0,019 mmol) en THF (0,75 ml) y MeOH (0,75 ml) a ta se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,022 ml, 0,096 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1 N (0,18 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 1). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(4 aminopirimidin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol (11,6 mg, 0,015 mmol, rendimiento del 75 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 58,96 (s, 1H), 8,89 (s, 1H), 8,14 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 7,91 - 7,80 (m, 2H), 6,60 (d a, J = 6,6 Hz, 1H), 5,70 (d a, J = 1,7 Hz, 1H), 5,47 (s a, 1H), 4,97 (dd, J = 10,5. 3,0 Hz, 1H), 4,84 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,78 - 4,71 (m, 1H), 4,28 - 4,20 (m, 1H), 4,15 (dd a, J = 10,9, 4,8 Hz, 1H), 4,02 - 3,93 (m, 3H), 3,89 (t a, J = 11,1 Hz, 1H), 3,79 (t a, J = 6,4 Hz, 1H), 3,61 - 3,51 (m, 3H), 3,30 - 3,26 (m, 1H), 3,24 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 652,2 [(M+H)+, calc. para C26H29F3N9O6S 652,2], fo = 1,64 min (Método 2); HPLC (Método 3): tR = 12,34 min; HPLC (Método 4): tR = 10,03 min. hGal-3 CC50 = 0,013 pM.

Ejemplo 19. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-ciclohexil-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

Etapa 1. Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-ciclohexil-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4- hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

Se disolvieron acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (19 mg, 0,031 mmol) y etinilciclohexano (10,00 mg, 0,092 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (0,9 ml) y agua (0,300 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (7,33 mg, 0,037 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (10,77 mg, 0,043 mmol) (disuelto previamente en 0,3 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla y el sólido adherido a la barra de agitación se disolvieron mediante la adición de diclorometano y metanol. Se añadieron agua (10 ml) y bicarbonato sódico acuoso saturado (10 ml) dando como resultado la formación de un precipitado. La mezcla se filtró a través de una capa de Celite y la torta de filtro se aclaró con metanol al 5 % en diclorometano. El filtrado se transfirió a un embudo de decantación. Se añadió salmuera (10 ml) y la capa acuosa se extrajo (con suave sacudida) con metanol al 5 % en diclorometano (4 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 20 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 80 % ^ acetato de etilo al 80 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 20 %; columna de 12 g) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5- (4-ciclohexil-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1 -il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (21 mg, 0,029 mmol, rendimiento del 94 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, Acetona) 58,78 (s, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,73 (dd, J = 9,0, 6,8 Hz, 2H), 5,58 (dd, J = 3,1, 0,9 Hz, 1H), 5,26 (dd, J = 10,4, 3,1 Hz, 1H), 5,05 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,72 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 4,59 - 4,50 (m, 1H), 4,46 -4,40 (m, 1H), 4,28 - 4,19 (m, 2H), 4,17 - 4,10 (m, 4H), 3,89 (t, J = 11,3 Hz, 1H), 3,59 (t, J = 11,7 Hz, 1H), 3,35 (s, 3H), 3,32 - 3,24 (m, 1H), 2,09 (s, 3H), 1,98 (s, 3H), 1,84 - 1,78 (m, 2H), 1,76 - 1,68 (m, 2H), 1,50-1,36 (m, 6H); CL/EM (IEN) m/e 725,3 [(M+H)+, calc. para C32H40F3N6O8S 725,3], tR = 2,08 min (Método 2).

Etapa 2

A una suspensión de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-ciclohexil-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (21 mg, 0,029 mmol) en THF (0,75 ml) y MeOH (0,75 ml) a ta se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,033 ml, 0,145 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1 N (0,18 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 3). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-ciclohexil-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol (8,5 mg, 0,013 mmol, rendimiento del 45 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 58,95 (s, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,87 - 7,81 (m, 2H), 4,96 (dd, J = 10,5, 2,7 Hz, 1H), 4,81 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,49 (td, J = 10,4, 4,8 Hz, 1H), 4,20 (dd a, J = 11,4, 5,0 Hz, 1H), 4,03 - 3,92 (m, 3H), 3,88 (t a, J = 10,1 Hz, 1H), 3,78 (t a, J = 6,2 Hz, 1H), 3,72 (t a, J = 11,1 Hz, 1H), 3,55 - 3,48 (m, 3H), 3,24 (s, 3H), 3,21 - 3,15 (m, 1H), 2,65 (s a, 1H), 1,96 (d a, J = 5,8 Hz, 2H), 1,78 - 1,71 (m, 2H), 1,67 (d a, J = 12,7 Hz, 1H), 1,36 (t a, J = 9,8 Hz, 4H), 1,28-1,18 (m, 2H); CL/EM (IEN) m/e 641,2 [(M+H)+, calc. para C28H36F3N6O6S 641,2], tR = 1,99 min (Método 2); HPLC (Método 3): tR = 11,24 min; HPLC (Método 4): tR = 9,99 min. hGal-3 CC50 = 0,013 pM.

Ejemplo 20. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1 H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

Etapa 1. Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

Se disolvieron acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (20 mg, 0,032 mmol) y 4-etiniltetrahidro-2H-pirano (10,72 mg, 0,097 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (0,9 ml) y agua (0,300 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (7,71 mg, 0,039 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (11,34 mg, 0,045 mmol) (disuelto previamente en 0,3 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla y el sólido adherido a la barra de agitación se disolvieron mediante la adición de diclorometano y metanol. Se añadieron agua (5 ml) y bicarbonato sódico acuoso saturado (5 ml) dando como resultado la formación de un precipitado. La mezcla se filtró a través de una capa de Celite y la torta de filtro se aclaró con metanol al 5 % en diclorometano. El filtrado se transfirió a un embudo de decantación. Se añadió salmuera (10 ml) y la capa acuosa se extrajo (con suave sacudida) con metanol al 5 % en diclorometano (4 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 10 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 90 % ^ acetato de etilo al 80 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 20 %, columna de 12 g) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (22 mg, 0,030 mmol, rendimiento del 93 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, ACETONITRILO-d3) 58,32 (s, 1H), 7,68 - 7,61 (m, 3H), 5,47 - 5,46 (m, 1H), 5,03 (dd, J = 10,4, 3,1 Hz, 1H), 4,88 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,52 (ddd, J = 11,0, 9,7, 4,9 Hz, 1H), 4,26 - 4,19 (m, 3H), 4,16 - 4,04 (m, 4H), 4,00 - 3,94 (m, 2H), 3,85 (t, J = 11,2 Hz, 1H), 3,62 - 3,48 (m, 3H), 3,29 (s, 3H), 3,23 (ddd, J = 11,5, 10,2, 4,9 Hz, 1H), 3,00 (tt, J = 11,6, 3,8 Hz, 1H), 2,05 (s, 3H), 1,98 (s, 3H), 1,92 (dt, J = 13,2, 1,9 Hz, 2H), 1,71 (cd, J = 12,1, 4,4 Hz, 2H); CL/EM (IEN) m/e 727,3 [(M+H)+, calc. para C31H38F3N6O9S 727,2], k = 1,88 min (Método 2).

Etapa 2

A una suspensión de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (22 mg, 0,030 mmol) en THF (0,75 ml) y MeOH (0,75 ml) a ta se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,035 ml, 0,151 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1 N (0,18 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 3). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol (11,2 mg, 0,016 mmol, rendimiento del 54 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 58,95 (s, 1H, principal), 8,94 (s, 1H, secundario), 7,99 - 7,97 (m, 1H), 7,88 - 7,81 (m, 2H), 5,14 (dd, J = 10,5, 2,8 Hz, 1H, secundario), 5,01 - 4,93 (m, 1H, principal), 4,82 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,56 - 4,44 (m, 2H), 4,24 - 4,17 (m, 2H), 4,11-4,07 (m, 2H, secundario), 4,02 (dd a, J = 10,6, 4,5 Hz, 1H), 3,99 - 3,86 (m, 4H), 3,80 - 3,71 (m, 4H), 3,53 (dd, J = 6,3, 2,9 Hz, 2H), 3,50 - 3,42 (m, 4H), 3,24 (s, 3H, principal), 3,22 (s, 3H, secundario), 2,97 - 2,89 (m, 1H), 1,86 (d a, J = 13,6 Hz, 2H), 1,67-1,56 (m, 2H); CL/EM (IEN) m/e 643,2 [(M+H)+, calc. para C27H34F3N6O7S 643,2], tR = 1,77 min (Método 2); HPLC (Método 3): tR = 9,14 min; HPLC (Método 4): tR = 7,81 min. hGal-3 CI50 = 0,018 pM.

Ejemplo 21. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(4-amino-5-metoxipirimidin-2-il)-1 H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

Etapa 1. Preparación de acetato de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(4-acetamido-5-metoxipirimidin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1 -il)tetrahidro-2H-piran-3-ilo

Se disolvieron acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (42 mg, 0,068 mmol) y N-(2-etinil-5-metoxipirimidin-4-il)acetamida (20,84 mg, 0,109 mmol) en una solución desgasificada previamente de d Mf (1,5 ml) y agua (0,500 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (16,19 mg, 0,082 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (23,81 mg, 0,095 mmol) (disuelto previamente en 0,5 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla y el sólido adherido a la barra de agitación se disolvieron mediante la adición de diclorometano y metanol. Se añadieron agua (5 ml) y bicarbonato sódico acuoso saturado (5 ml) dando como resultado la formación de un precipitado. La mezcla se filtró a través de una capa de Celite y la torta de filtro se aclaró con metanol al 5 % en diclorometano. El filtrado se transfirió a un embudo de decantación. Se añadió salmuera (10 ml) y la capa acuosa se extrajo (con suave sacudida) con metanol al 5 % en diclorometano (4 x 20 ml).

Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 20 % que contenía metanol al 5 %/hexanos ^ acetato de etilo al 100 % que contenía metanol al 5 %; columna de 24 g) para proporcionar acetato de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(4-acetamido-5-metoxipirimidin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ilo (25 mg, 0,031 mmol, rendimiento del 45 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,22 (s, 2H), 8,18 - 8,14 (m, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,56 - 7,44 (m, 2H), 5,52 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 4,85 - 4,76 (m, 2H), 4,55 (td, J = 10,3, 4,5 Hz, 1H), 4,38 - 4,25 (m, 4H), 4,25 - 4,18 (m, 2H), 4,16 - 4,12 (m, 1H), 4,12 - 4,07 (m, 1H), 4,03 (s, 3H), 3,59 (t a, J = 11,8 Hz, 1H), 3,35 (s, 3H), 3,21 (td, J = 10,9, 5,0 Hz, 1H), 2,64 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,98 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 808,3 [(M+H)+, calc. para C33H37F3N9O10S 808,2], k = 1,85 min (Método 2).

Etapa 2

A una suspensión de acetato de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(4-acetamido-5-metoxipirimidin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ilo (25 mg, 0,031 mmol) en THF (0,8 ml) y MeOH (0,8 ml) a -20 °C (baño de acetona/hielo seco) se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,036 ml, 0,158 mmol). El baño de refrigeración se retiró y la mezcla de reacción se agitó a -20 °C durante 1 h. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1 N (0,03 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 3). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(4-amino-5-metoxipirimidin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol (15,4 mg, 0,022 mmol, rendimiento del 71 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 58,96 (s, 1H), 8,79 (s, 1H), 7,87 - 7,82 (m, 3H), 5,69 (s a, 1H), 5,47 (s a, 1H), 4,97 (dd, J = 10,5, 2,7 Hz, 1H), 4,84 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 4,73 (td, J = 10,1,5,0 Hz, 1H), 4,29 - 4,19 (m, 1H), 4,14 (dd a, J = 10,8, 4,9 Hz, 1H), 4,02 - 3,96 (m, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,89 (t a, J = 11,1 Hz, 2H), 3,79 (t a, J = 6,3 Hz, 1H), 3,59 - 3,49 (m, 3H), 3,24 (s, 3H), 3,29-3,21 (m, 1H); CL/EM (IEN)m/e 682,3 [(M+H)+, calc. para C27H31F3N9O7S 682,2], tR = 1,65 min (Método 2); HPLC (Método 3): tR = 7,59 min; HPLC (Método 4): tR =5,98 min. hGal-3 CI50 = 0,023 pM.

Ejemplo 22. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(tiazol-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

Etapa 1. Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(tiazol-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

Se disolvieron acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-az¡do-4-h¡drox¡tetrah¡dro-2H-piran-3-¡l)t¡o)-5-metox¡-4-(4-(3,4,5-tr¡fluorofen¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrahidro-2H-p¡ran-2-¡l)met¡lo (16 mg, 0,026 mmol) y 2-etiniltiazol (4,53 mg, 0,042 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (0,9 ml) y agua (0,300 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (6,17 mg, 0,031 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (9,07 mg, 0,036 mmol) (disuelto previamente en 0,3 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla y el sólido adherido a la barra de agitación se disolvieron mediante la adición de diclorometano y metanol. Se añadieron agua (5 ml) y bicarbonato sódico acuoso saturado (5 ml) dando como resultado la formación de un precipitado. La mezcla se filtró a través de una capa de Celite y la torta de filtro se aclaró con metanol al 5 % en diclorometano. El filtrado se transfirió a un embudo de decantación. Se añadió salmuera (10 ml) y la capa acuosa se extrajo (con suave sacudida) con metanol al 5 % en diclorometano (4 x 15 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (15 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 20 % que contenía metanol al 5 %/hexanos ^ acetato de etilo al 80 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 20 %; columna de 12 g) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-h¡droxi-5-(4-(t¡azol-2-¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-¡l)t¡o)-5-metox¡-4-(4-(3,4,5-tr¡fluorofen¡l)-1H-1,2,3-triazol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)metilo (16 mg, 0,022 mmol, rendimiento del 85 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 88,26 (s, 1H), 7,87 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,47 (dd, J = 8,0, 6,5 Hz, 2H), 7,40 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 5,51 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 4,74 -4,64 (m, 2H), 4,60 -4,52 (m, 1H), 4,45 -4,23 (m, 4H), 4,20 -4,11 (m, 4H), 3,58 - 3,48 (m, 1H), 3,35 (s, 3H), 3,18 (ddd, J = 11,9, 9,7, 5,0 Hz, 1H), 2,11 (s, 3H), 1,94 (s, 3B); CL/EM (IEN) m/e 726,2 [(M+H)+, calc. para C29H31F3N7O8S2726,2], ír = 1,34 min (Método 2).

Etapa 2

A una suspensión de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-h¡droxi-5-(4-(t¡azol-2-¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-¡l)t¡o)-5-metox¡-4-(4-(3,4,5-tr¡fluorofen¡l)-1H-1,2,3-triazol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-il)metilo (16 mg, 0,022 mmol) en THF (0,5 ml) y MeOH (0,5 ml) a ta (baño de acetona/hielo seco) se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,025 ml, 0,110 mmol). El baño de refrigeración se retiró y la mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1 N (0,18 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 3). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-h¡droxi-5-(4-(t¡azol-2-¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-¡l)t¡o)-2-(h¡droximet¡l)-5-metox¡-4-(4-(3,4,5-tr¡fluorofen¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-ol (13,3 mg, 0,020 mmol, rendimiento del 92 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 88,96 (s, 1H), 8,79 (s, 1H), 7,94 (d, J = 3,4 Hz, 1H), 7,85 (dd, J = 8,9, 6,7 Hz, 2H), 7,78 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 4,97 (dd, J = 10,5, 3,1 Hz, 1H), 4,84 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,70 - 4,61 (m, 1H), 4,23 (dd a, J = 11,8, 4,8 Hz, 1H). 4,12 (dd, J = 10,8, 5,0 Hz, 1H).

4,03 - 3,93 (m, 4H), 3,84 (t a, J = 11,1 Hz, 1H), 3,80 (t a, J = 6,4 Hz, 1H), 3,58 - 3,49 (m, 4H), 3,25 (s, 3H), 3,29-3,22 (m, 1H); CL/EM (IEN) m/e 642,2 [(M+H)+, calc. para C25H27F3N7O6S2642,1], ír = 1,82 min (Método 2); HPLC (Método 3): ír = 9,76 min; HPLC (Método 4): ír = 8,54 min. hGal-3 CI50 = 0,005 pM

Ejemplo 23. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidrox¡-5-(4-(2-(tr¡fluoromet¡l)p¡r¡m¡d¡n-5-¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-il)t¡o)-2-(h¡drox¡met¡l)-5-metox¡-4-(4-(3,4,5-tr¡fluorofen¡l)-1H-1,2,3-tr¡azol-1-¡l)tetrahidro-2H-piran-3-ol

Etapa 1. Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

Se disolvieron acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (20 mg, 0,032 mmol) y 5-etinil-2-(trifluorometil)pirimidina (8,93 mg, 0,052 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (0,9 ml) y agua (0,300 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (7,71 mg, 0,039 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (11,34 mg, 0,045 mmol) (disuelto previamente en 0,5 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla y el sólido adherido a la barra de agitación se disolvieron mediante la adición de diclorometano y metanol. Se añadieron agua (10 ml) y bicarbonato sódico acuoso saturado (10 ml) dando como resultado la formación de un precipitado. La mezcla se filtró a través de una capa de Celite y la torta de filtro se aclaró con metanol al 5 % en diclorometano. El filtrado se transfirió a un embudo de decantación. Se añadió salmuera (10 ml) y la capa acuosa se extrajo (con suave sacudida) con metanol al 5 % en diclorometano (4 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (20 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 25 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 75 % ^ acetato de etilo al 100 % que contenía metanol al 5 %; columna de 12 g) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (12 mg, 0,015 mmol, rendimiento del 47 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 59,36 (s, 2H), 8,22 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,47 (dd, J = 8,0, 6,5 Hz, 2H), 5,53 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 4,74 - 4,65 (m, 2H), 4,58 (td, J = 10,3, 4,8 Hz, 1H), 4,43 (dd, J = 11,4, 4,9 Hz, 1H), 4,33 (dd a, J = 11,9, 5,1 Hz, 1H), 4,27 (t, J = 10,0 Hz, 2H), 4,16 - 4,13 (m, 3H), 3,54 (t, J = 12,0 Hz, 2H), 3,36 (s, 3H), 3,15 (ddd, J = 11,9, 9,8, 5,1 Hz, 1H), 2,11 (s, 3H), 1,97 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 789,3 [(M+H)+, calc. para C31H31F6N8O8S 789,2], tR = 2,13 min (Método 2).

Etapa 2

A una suspensión de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (12 mg, 0,015 mmol) en THF (0,5 ml) y MeOH (0,5 ml) a 0 °C se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,017 ml, 0,076 mmol). El baño de refrigeración se retiró y la mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1 N (0,18 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 3). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol (7,3 mg, 9,84 pmol, rendimiento del 65 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 59,49 (s, 2H), 9,08 (s, 1H), 8,99 (s, 1H), 7,85 (dd a, J = 8,8, 6,8 Hz, 2H), 6,53 (s, 1H), 5,76 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 5,49 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 4,97 (dd, J = 10,5, 2,7 Hz, 1H), 4,85 - 4,79 (m, 2H), 4,73 - 4,65 (m, 1H), 4,27 - 4,22 (m, 1H), 4,17 (dd a, J = 1,1, 4,9 Hz, 1H), 4,02 - 3,97 (m, 1H), 3,96 - 3,92 (m, 2H), 3,89 - 3,83 (m, 1H), 3,83 - 3,77 (m, 1H), 3,55 - 3,51 (m, 3H), 3,25 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 705,2 [(M+H)+, calc. para C27H27F6N8O6S 705,2], k = 1,92 min (Método 2); HPLC (Método 3): tR = 10,58 min; HPLC (Método 4): tR = 9,38 min. hGal-3 CC50 = 0,041 pM.

Ejemplo 24. Preparación de 6-(1-((3S,4R,5R)-4-hidroxi-5-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-6-(hidroximetil)-3-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)tio)tetrahidro-2H-piran-3-il)-1H-1,2,3-triazol-4-il)picolinato de metilo

Etapa 1. Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(6-cianopiridin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

Se disolvieron acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (20 mg, 0,032 mmol) y 6-etinilpicolinonitrilo (12,47 mg, 0,097 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (0,9 ml) y agua (0,300 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (7,71 mg, 0,039 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (11,34 mg, 0,045 mmol) (disuelto previamente en 0,3 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla y el sólido adherido a la barra de agitación se disolvieron mediante la adición de diclorometano y metanol. Se añadieron agua (5 ml) y bicarbonato sódico acuoso saturado (5 ml) dando como resultado la formación de un precipitado. La mezcla se filtró a través de una capa de Celite y la torta de filtro se aclaró con metanol al 5 % en diclorometano El filtrado se transfirió a un embudo de decantación. Se añadió salmuera (10 ml) y la capa acuosa se extrajo con metanol al 5 % en diclorometano (3 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 40 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 60 % ^ acetato de etilo al 100 % que contenía metanol al 5 %; columna de 12 g) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(6-cianopiridin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (22 mg, 0,030 mmol, rendimiento del 91 %). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,41-8,39 (m, 1H), 8,42 (d a, J = 1,0 Hz, 1H), 7,94 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,65 (dd, J = 7,8, 1,0 Hz, 1H), 7,47 (dd, J = 8,0, 6,5 Hz, 2H), 5,51 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 4,74 - 4,67 (m, 2H), 4,61 - 4,52 (m, 1H), 4,40 (dd, J = 11,5, 4,8 Hz, 1H), 4,34 - 4,22 (m, 3H), 4,19 -4,03 (m, 5H), 3,51 (t, J = 11,9 Hz, 1H), 3,35 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,96 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 745,2 [(M+H)+, calc. para C32H32F3N8O8S 745,2], tR = 1,86 min (Método 2).

Etapa 2

A una suspensión de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-(4-(6-cianopiridin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (22 mg, 0,030 mmol) en THF (0,5 ml) y MeOH (0,5 ml) a ta se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,034 ml, 0,148 mmol) y la mezcla se agitó durante 1 h. La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC de fase inversa (Método 4). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar 6-(1-((3S,4R,5R)-4-hidroxi-5-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-6-(hidroximetil)-3-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2Hpiran-2-il)tio)tetrahidro-2H-piran-3-il)-1H-1,2,3-triazol-4-il)picolinato de metilo (4,5 mg, 0,0054 mmol, rendimiento del 18 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 58,98 (s, 1H), 8,82 (s, 1H), 8,28 (dd, J = 7,9, 0,9 Hz, 1H), 8,12 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 8,02 (dd, J = 7,7, 0,9 Hz, 1H), 7,86 (dd, J = 8,8, 7,0 Hz, 2H), 6,57 (s a, 1H). 5,69 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 5,49 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 4,98 (dd, J = 10,7, 2,6 Hz, 1H), 4,84 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,79 (s a, 1H), 4,69 (td, J = 10,4, 5,0 Hz, 1H), 4,27 -4,20 (m, 1H), 4,11 (dd a, J = 10,7, 4,9 Hz, 1H), 4,05 (d a, J = 7,3 Hz, 1H), 4,01 - 3,94 (m, 2H), 3,93 (s, 3H), 3,91 - 3,86 (m, 1H), 3,80 (t, J = 6,3 Hz, 1H), 3,54 (d a, J = 11,3 Hz, 3H), 3,26 (s, 3H), CL/EM (IEN) m/e 694,2 [(M+H)+, calc. para C29H31F3N7O8S 694,2], k = 1,76 min (Método 2); HPLC (Método 3): tR = 14,01 min; HPLC (Método 4): tR = 12,10 min. hGal-3 CC50 = 0,014 |jM.

Ejemplo 25. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirazin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

Etapa 1. Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirazin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

Se disolvieron acetato de (+)-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1 H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (62 mg, 0,101 mmol) y 2-etinilpirazina (16,75 mg, 0,161 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (3 ml) y agua (1,000 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (23,90 mg, 0,121 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (35,2 mg, 0,141 mmol) (disuelto previamente en 0,5 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla y el sólido adherido a la barra de agitación se disolvieron mediante la adición de diclorometano y metanol. Se añadieron agua (10 ml) y bicarbonato sódico acuoso saturado (10 ml) dando como resultado la formación de un precipitado. La mezcla se filtró a través de una capa de Celite y la torta de filtro se aclaró con metanol al 5 % en diclorometano. El filtrado se transfirió a un embudo de decantación. Se añadió salmuera (10 ml) y la capa acuosa se extrajo (con suave sacudida) con metanol al 5 % en diclorometano (4 x 15 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (15 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 30 % que contenía metanol al 5 %/hexanos ^ acetato de etilo al 100 % que contenía metanol al 5 %/hexanos; columna de 24 g) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirazin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (65 mg, 0,090 mmol, rendimiento del 90 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 59,44 (d, J=0,8 Hz, 1H), 8,55 (s, 2H), 8,35 (s, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,47 (dd, J = 8,0, 6,5 Hz, 2H), 5,51 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,74 - 4,64 (m, 2H), 4,62 - 4,52 (m, 1H), 4,40 (dd, J = 11,5, 5,0 Hz, 1H), 4,32 (dd, J = 11,8, 5,0 Hz, 1H), 4,26 (t, J = 9,9 Hz, 1H), 4,20 - 4,09 (m, 4H), 4,09 - 4,03 (m, 1H), 3,52 (t, J = 11,9 Hz, 1H), 3,36 (s, 3H), 3,17 (ddd, J = 11,8, 9,8, 5,0 Hz, 1H), 2,10 (s, 3H), 1,94 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 721,2 [(M+H)+, calc. para C30H32F3N8O8S 721,2], tR = 1,88 min (Método 2).

Etapa 2

A una suspensión de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirazin-2-il)-1H-1,2,3triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,.2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (65 mg, 0,090 mmol) en THF (2 ml) y MeOH (2 ml) a 0 °C se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,103 ml, 0,451 mmol). El baño de refrigeración se retiró y la mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1 N (0,2 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC de fase inversa (Método 4). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirazin-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol (46 mg, 0,072 mmol, rendimiento del 80 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 59,26 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 8,96 (s, 1H), 8,87 (s, 1H), 8,73 - 8,67 (m, 1H), 8,63 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,90 - 7,80 (m, 2H), 5,74 - 5,61 (m, 1H), 5,46 (d a, J = 1,2 Hz, 1H), 4,98 (dd, J = 10,6, 2,8 Hz, 1H), 4,84 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,68 (td, J = 10,4, 4,9 Hz, 1H), 4,24 (dd a, J = 11,4, 4,7 Hz, 1H), 4,13 (dd, J = 10,9, 5,0 Hz, 1H), 4,04 -3,93 (m, 3H), 3,86 (t, J = 11,1 Hz, 1H), 3,80 (t, J = 6,3 Hz, 1H), 3,59 -3,51 (m, 3H), 3,25 (s, 3H), 3,29-3,22 (m, 1H); CL/EM (IEN) m/e 637,2 [(M+H)+, calc. para C26H28F3N8O6S 637,2], k = 1,77 min (Método 2); HPLC (Método 3): tR = 8,84 min; HPLC (Método 4): tR = 7,54 min. hGal-3 CI50=0,016 |jM.

Ejemplo 26. Preparación de ácido 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3)-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acético

Etapa 1. Preparación de 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ií)tio)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de metilo

Se disolvieron 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-2-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-4-(4-(3,4,5-uifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de metilo (101 mg, 0,150 mmol) y 5-etinilpirimidina (31,2 mg, 0,299 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (2,7 ml) y agua (0,9 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (29,7 mg, 0,150 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (29,9 mg, 0,120 mmol) (disuelto previamente en 0,3 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla y el sólido adherido a la barra de agitación se disolvieron mediante la adición de diclorometano y metanol. Se añadieron agua (10 ml) y solución acuosa saturada de NaHCO3 (10 ml) dando como resultado la formación de un precipitado. La mezcla se filtró a través de una capa de Celite y la torta de filtro se aclaró con metanol al 5 % en diclorometano. El filtrado se transfirió a un embudo de decantación. Se añadieron varios mililitros de salmuera y la fase acuosa se extrajo (con agitación suave) con metanol al 5 % en diclorometano (4 x 15 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml). El embudo de decantación que contenía la salmuera se aclaró con diclorometano (2x) para recoger el residuo de color amarillo y esta capa orgánica se combinó con el extracto orgánico original. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 50 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 50 % ^ acetato de etilo al 100 % que contenía metanol al 5 %; columna de 24 g) para proporcionar 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de metilo (81,2 mg, 0,104 mmol, rendimiento del 70 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 9,23 (s, 1H), 9,21 (s, 2H), 8,13 (s, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,45 (dd, J = 7,8, 6,8 Hz, 2H), 5,55 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 4,85 - 4,75 (m, 2H), 4,61 - 4,49 (m, 2H), 4,44 - 4,28 (m, 4H), 4,21 (td, J = 9,8, 2,3 Hz, 1H), 4,16 (s, 3H), 4,14 - 4,02 (m, 2H), 3,62 (s, 3H), 3,53 (t, J = 11,9 Hz, 1H), 3,19 - 3,08 (m, 1H), 2,98 (s, 1H), 2,91 (s, 1H), 2,08 (s, 3H), 2,01 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 779,2 [(M+H)+, calc. para C32H34F3N8O10S 779,3], k = 1,91 min (Método 1).

Etapa 2

A una suspensión de 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-2-(((3R,4R,5 S)-4-hidroxi-5-(4-(pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de metilo (80 mg, 0,103 mmol) en THF (2 ml) y MeOH (2 ml) a 0 °C se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,117 ml, 0,514 mmol). El baño de refrigeración se retiró y la mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1 N (0,1 ml). La mezcla se concentró y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 1). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar ácido 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5 S)-4-hidroxi-5-(4-(pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazo1-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acético (66,5 mg, 0,098 mmol, rendimiento del 95 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 59,24 (s, 2H), 9,18 (s, 1H), 8,91 (d, J = 3,8 Hz, 2H), 7,80 (dd, J = 8,8, 6,8 Hz, 2H), 5,88 - 5,66 (m, 1H), 5,52 - 5,37 (m, 1H), 5,05 (dd, J = 10,5, 2,8 Hz, 1H), 4,86 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,65 (td, J = 10,3, 5,0 Hz, 1H), 4,47 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 4,30 -4,19 (m, 2H), 4,15 (dd a, J = 10,8, 5,0 Hz, 1H), 4,00 - 3,88 (m, 3H), 3,86 - 3,78 (m, 2H), 3,54 - 3,45 (m, 2H), 3,26 (td, J = 10,8, 4,9 Hz, 1H), CL/EM (IEN) m/e 681,2 [(M+H)+, calc. para C27H28F3N8O8S 681,1], tR = 1,58 min (Método 1); HPLC (Método 1): tR = 5,07 min; HPLC (Método 2): tR = 4,74 min. hGal-3 CC50 = 0,015 |jM.

Ejemplo 27. Preparación de 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazo]-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroxitnetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de metilo

A una solución de ácido 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acético (16,5 mg, 0,024 mmol) en CH2Ch (0,9 ml) y MeOH (0,3 ml) a 0 °C, se le añadió trimetilsilildiazometano (0,077 ml, 0,048 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 2,5 h. La mezcla se concentró. El producto se tritó con éter y se secó al vacío para proporcionar 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de metilo (12,5 mg, 0,016 mmol, rendimiento del 65 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-cfe) 59,24 (s, 2H), 9,18 (s, 1H), 8,91 (d, J = 3,8 Hz, 2H), 7,80 (dd, J = 8,6, 6,9 Hz, 2H), 5,81 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 5,48 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 5,07 (dd, J = 10,5, 2,6 Hz, 1H), 4,85 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,81 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 4,69 - 4,61 (m, 1H), 4,58 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 4,28 - 4,21 (m, 2H), 4,15 (dd a, J = 11,0, 5,0 Hz, 1H), 4,07 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 3,95 (dd a, J = 5,7, 2,4 Hz, 1H), 3,93 - 3,87 (m, 1H), 3,85 - 3,80 (m, 2H), 3,57 - 3,46 (m, 3H), 3,39 (s, 3H), 3,29-3,23 (m, 1H); CL/EM (IEN) m/e 695,2 [(M+H)+, calc. para C28H30F3N8O8S 695,2], tR = 1,69 min (Método 1); HPLC (Método 1): tR = 5,86 min; HPLC (Método 2): tR = 5,54 min. hGal-3 CI50 = 0,017 jM .

Ejemplo 28. Preparación de 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)-1-morfolinoetan-1-ona

A una solución de ácido 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-1-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acético (17 mg, 0,025 mmol) y morfolina (4,31 |jl, 0,050 mmol) en DMF (0,8 ml), se le añadió N,N-diisopropiletilamina (0,022 ml, 0,125 mmol) seguido de HATU (18,99 mg, 0,050 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 14 h. La mezcla se diluyó con acetonitrilo y una pequeña cantidad de agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 1). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazo)-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)-1-morfolinoetan-1-ona (15,1 mg, 0,020 mmol, rendimiento del 80 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 59,25 (s, 2H), 9,18 (s, 1H), 8,93 - 8,88 (m, 2H), 7,84 - 7,74 (m, 2H), 5,25 (dd a, J = 10,4, 2,7 Hz, 1H, secundario), 5,11 - 5,03 (m, 2H), 4,89 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,68 - 4,60 (m, 1H), 4,56 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 4,52 (dd, J = 7,7, 4,8 Hz, 1H), 4,28 - 4,19 (m, 2H), 4,18 - 4,12 (m, 1H), 4,09 (d a, J = 10,7 Hz, 1H, secundario), 4,05 - 4,00 (m, 1H), 3,99 - 3,92 (m, 2H), 3,89 - 3,80 (m, 2H), 3,57 - 3,49 (m, 3H), 3,41-2,97 (m, 10H); CL/EM (IEN) m/e 750,2 [(M+H)+, calc. para C31H35F3N9O8S 750,2], tR = 1,57 min (Método 1); HPLC (Método 1): tR = 5,18 min; HPLC (Método 2): tR = 4,93 min. hGal-3 CC50 = 0,010 jM .

Ejemplo 29. Preparación de 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-y])oxi)-N-metil-N-fenilacetamida

A una solución de ácido 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirimidiri-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acético (16 mg, 0,024 mmol) y N-metilanilina (5,09 j l , 0,047 mmol) en DMF (0,8 ml), se le añadió N,N-diisopropiletilamina (0,021 ml, 0,118 mmol) seguido de HATU (17,88 mg, 0,047 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 14 h. La mezcla se diluyó con acetonitrilo y una pequeña cantidad de agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 2). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1 -il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1 H-1,2,3- triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)-N-metil-N-fenilacetamida (4,6 mg, 5,92 jmol, rendimiento del 25 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 59,26 (s, 2H), 9,19 (s, 1H), 8,95 -8,89 (m, 1H), 8,81 (s a, 1H), 7,78 -7,68 (m, 2H), 7,30 - 7,16 (m, 3H), 7,12 - 7,00 (m, 2H), 5,82-5,76 (m, 1H, secundario), 5,70 (s a, 1H, principal), 5,39 (d a, J = 4,0 Hz, 1H, principal), 5,23 - 5,14 (m, 1H, secundario), 5,04 - 4,95 (m, 1H), 4,84 (d a, J = 8,9 Hz, 1H, principal), 4,80 - 4,71 (m, 1H, secundario), 4,68 - 4,57 (m, 1H), 4,49 (s a, 1H, secundario), 4,25 - 3,76 (m, 9H), 3,49 (t a, J = 11,6 Hz, 3H), 3,22 - 3,13 (m, 1H), 2,95 (s, 3H, principal), 2,93 (s a, 3H, minoritario); CL/EM (IEN) m/e 770,2 [(M+H)+, calc. para C34H35F3N9O7S 770,2], tR = 1,80 min (Método 1); HPLC (Método 1): tR = 6,43 min; HPLC (Método 2): tR = 6,10 min. hGal-3 CC50 = 0,025 pM.

Ejemplo 30. Preparación de ácido 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirimidin-5-il)- 1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acético

Ejemplo 30

Etapa 1. Preparación de 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de metilo

Se disolvieron 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-2-(((3R,4R,5S)-5-azido-4-hidroxitetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de metilo (250 mg, 0,371 mmol) y 5-etinil-2-metoxipirimidina (99 mg, 0,741 mmol) en una solución desgasificada previamente de DMF (6 ml) y agua (2 ml) y la mezcla se puso en una atmósfera de argón. Se añadieron ascorbato sódico (73,4 mg, 0,371 mmol) y pentahidrato de sulfato de cobre (II) (74,0 mg, 0,296 mmol) (disuelto previamente en 0,3 ml de agua) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla y el sólido adherido a la barra de agitación se disolvieron mediante la adición de diclorometano y metanol. Se añadieron agua (15 ml) y bicarbonato sódico acuoso saturado (15 ml) dando como resultado la formación de un precipitado. La capa acuosa se extrajo (con agitación suave) con metanol al 5 % en diclorometano (4 x 25 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml). El embudo de decantación que contenía la salmuera se aclaró con diclorometano (2x) para recoger el residuo de color amarillo y esta capa orgánica se combinó con el extracto orgánico original. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 50 % que contenía metanol al 5 %/hexanos al 50 % ^ acetato de etilo al 100 % que contenía metanol al 5 %; columna de 40 g) para proporcionar 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de metilo (260 mg, 0,321 mmol, rendimiento del 87 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-cfe) 59,04 (s, 2H), 8,89 (s, 1H), 8,76 (s, 1H), 7,78 (dd, J = 8,8, 6,8 Hz, 2H), 5,83 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 5,40 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 5,36 (dd, J = 10,4, 2,9 Hz, 1H), 5,05 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,64 (td, J = 10,4, 4,9 Hz, 1H), 4,54 (d, J = 16,1 Hz, 1H), 4,40 - 4,31 (m, 2H), 4,24 - 4,14 (m, 2H), 4,11 - 4,01 (m, 3H), 3,98 (s, 3H), 3,96 - 3,81 (m, 2H), 3,53 (t a, J = 11,5 Hz, 1H), 3,38 (s, 3H), 3,25 (td, J = 10,8, 4,8 Hz, 1H), 2,03 (s, 3H), 2,02 (s, 3H); CL/EM (IEN) m/e 809,3 [(M+H)+, calc. para C33H36F3N8O11S 809,2], tR = 1,89 min (Método 1).

Etapa 2

A una suspensión de 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3)-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de metilo (217 mg, 0,268 mmol) en THF (3 ml) y MeOH (3 ml) a 0 °C se le añadió metóxido sódico (solución al 25 % en peso en metanol) (0,307 ml, 1,342 mmol). El baño de refrigeración se retiró y la mezcla de reacción se agitó a ta durante 1 h. La mezcla se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 1 N (1 ml). La mezcla se concentró parcialmente para retirar el THF y se recogió en dioxano/metanol/agua y se filtró y se purificó por MPLC preparativa de fase inversa usando una columna C18 Redisep Gold (2 inyecciones) (Método 1). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar ácido 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acético (162,5 mg, 0,226 mmol, rendimiento del 84 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 5 12,36 (s a, 1H), 9,05 - 9,00 (m, 2H), 8,89 (s, 1H), 8,75 (s, 1H), 7,85 - 7,72 (m, 2H), 5,71 (d a, J = 6,6 Hz, 1H), 5,42 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 5,05 (dd, J = 10,4, 2,4 Hz, 1H), 4,85 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,77 (t a, J = 5,2 Hz, 1H), 4,62 (td, J = 10,3, 5,0 Hz, 1H), 4,46 (d, J = 15,9 Hz, 1H), 4,28 - 4,18 (m, 2H), 4,13 (dd a, J = 10,8, 4,9 Hz, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,96 -3,88 (m, 3H), 3,85 - 3,78 (m, 2H), 3,56 - 3,46 (m, 3H), 3,29-3,21 (m, 1H); CL/EM (IEN) m/e 711,2 [(M+H)+, calc. para C28H30F3N8O9S 711,2], tR = 1,60 min (Método 1); HPLC (Método 1): tR = 5,78 min; HPLC (Método 2): tR = 5,45 min. hGal-3 CC50 = 0,008 pM.

Ejemplo 31. Preparación de 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)-1-morfolinoetan-1-ona

A una solución de ácido 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metlioxipirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-il)oxi)acético (24 mg, 0,034 mmol) y morfolina (5,83 pl, 0,068 mmol) en DMF (0,8 ml), se le añadió W,W-diisopropiletilamina (0,029 ml, 0,169 mmol) seguido de HATU (25,7 mg, 0,068 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 14 h. La mezcla se diluyó con acetonitrilo y una pequeña cantidad de agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 2). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)-1-morfolinoetan-1-ona (25,1 mg, 0,031 mmol, rendimiento del 93 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 59,03 (s, 2H), 8,90 (s, 1H, principal), 8,88 (s, 1H, secundario), 8,75 (s, 1H), 7,84 - 7,77 (m, 2H), 5,25 (dd, J = 10,2, 2,7 Hz, 1H, secundario), 5,09 - 5,02 (m, 1H), 488 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 4,62 (td, J = 10,3, 5,0 Hz, 1H), 4,55 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 4,53 - 4,48 (m, 1H), 4,27 - 4,20 (m, 3H), 4,18 - 4,10 (m, 2H), 4,04 - 3,99 (m, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,96 - 3,91 (m, 1H), 3,83 (td, J = 11,1, 7,2 Hz, 2H), 3,55 - 3,48 (m, 3H), 3,41-2,98 (m, 10H); CL/EM (IEN) m/e 780,3 [(M+H)+, calc. para C32H37F3N9O9S 780,3], tR = 1,68 min (Método 1); HPLC (Método 1): tR = 5,94 min; HPLC (Método 2): tR = 5,66 min. hGal-3 CC50 = 0,013 pM.

Ejemplo 32. Preparación de 1-(2,6-dimetilmorfolmo)-2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-mctoxipirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1 -il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)etan-1 -ona

A una solución de ácido 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirimidin-5-il)- 1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-M)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenM)-1 H-1,2,3-triazol-1-M)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acético (23 mg, 0,032 mmol) y 2,6-dimetilmorfolina (7,46 mg, 0,065 mmol) en DMF (0,8 ml), se le añadió W,W-diisopropiletilamina (0,028 ml, 0,162 mmol) seguido de HATU (24,61 mg, 0,065 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 14 h. La mezcla se diluyó con acetonitrilo y una pequeña cantidad de agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 2). Estaban presentes dos picos que tenían la masa correcta. El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar 1-(2,6-dimetilmorfolino)-2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)etan-1-ona (4,1 mg, 4,91 pmol, rendimiento del 15 %) (Isómero 1) en forma de un sólido amorfo de color blanco y 1-(2,6-dimetilmorfolino)-2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)etan-1-ona (21,5 mg, 0,026 mmol, rendimiento del 80%) (Isómero 2) en forma de un sólido amorfo de color blanco. Se aisló y caracterizó el pico principal (isómero 2). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 59,02 (s, 2H), 8,93 - 8,86 (m, 1H), 8,75 (s, 1H), 7,85 - 7,74 (m, 2H), 5,25 (d a, J = 10,1 Hz, 1H, secundario), 5,06 (d a, J = 10,7 Hz, 1H), 4,87 (t a, J = 9,4 Hz, 1H), 4,65 - 4,48 (m, 3H), 4,28 - 3,99 (m, 5H), 3,97 (s, 3H), 3,96 - 3,88 (m, 3H), 3,86 - 3,79 (m, 2H), 3,55 - 3,48 (m, 3H), 3,41 - 3,15 (m, 5H), 2,44 - 2,32 (m, 1H), 2,09 - 1,94 (m, 1H), 0,96-0,89 (m, 6H); CL/EM (IEN) m/e 808,3 [(M+H)+, calc. para C34H41F3N9O9S 808,3], k = 1,84 min (Método 1); HPLC (Método 1): tR = 6,59 min; HPLC (Método 2): tR = 6,21 min. hGal-3 CI50 = 0,019 pM

Ejemplo 33. Preparación de 1-(1,1-dioxidotiomorfolino)-2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-tnfluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)etan-1-ona

A una solución de ácido 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipytimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acético (23 mg, 0,032 mmol) y 1,1-dióxido de tiomorfolina (8,75 mg, 0,065 mmol) en DMF (0,8 ml), se le añadió W,W-diisopropiletilamina (0,028 ml, 0,162 mmol) seguido de HATU (24,61 mg, 0,065 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 14 h. La mezcla se diluyó con acetonitrilo y una pequeña cantidad de agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 2). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar 1-(1,1-dioxidotiomorfolino)-2-(((2S,3R,4S,5R,6R)- 5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)etan-1-ona (25,5 mg, 0,030 mmol, rendimiento del 92 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 59,03 (s, 2H), 8,91 (s, 1H, principal), 8,89 (s, 1H, secundario), 8,75 (s, 1H, principal), 8,74 (s, 1H, secundario), 7,85 - 7,76 (m, 2H), 5,29-5,24 (m, 1H, secundario), 5,08 (dd, J = 10,5, 2,7 Hz, 1H), 5,04 (d, J = 9,5 Hz, 1H, secundario), 4,87 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 4,67 -4,58 (m, 2H), 4,57-4,52 (m, 1H, secundario), 4,29 - 4,05 (m, 6H), 3,97 (s, 3H), 3,96 (d a, J = 3,1 Hz, 1H), 3,94 - 3,90 (m, 1H), 3,86 - 3,79 (m, 2H), 3,73 - 3,59 (m, 3H), 3,56 - 3,45 (m, 5H), 3,28 (td, J = 10,8, 5,0 Hz, 1H), 3,12-2,86 (m, 4H); CL/EM (IEN) m/e 828,2 [(M+H)+, calc. para C32H37F3N9O10S2828,2], tR = 1,57 min (Método 1); HPLC (Método 1): tR = 5,94 min; HPLC (Método 2): tR = 5,71 min. hGal-3 CC50 = 0,012 pM.

Ejemplo 34. Preparación de 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)-1-(3-hidroxiazetidin-1-il)etan-1-ona

A una solución de ácido 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirimidin-5-il)-1H-1.2.3- triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acético (23 mg, 0,032 mmol) y azetidin-3-ol-HCl (7,09 mg, 0,065 mmol) en DMF (0,8 ml), se le añadió W,W-diisopropiletilamina (0,028 ml, 0,162 mmol) seguido de HATU (24,61 mg, 0,065 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 14 h. La mezcla se diluyó con acetonitrilo y una pequeña cantidad de agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 2). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirimidin-5-il)-1H-1.2.3- triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroxitmetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3)-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)-1-(3-hidroxiazetidin-1-il)etan-1-ona (18,7 mg, 0,024 mmol, rendimiento del 73%) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H. (500 MHz, DMSO-d6) 59,03 (s, 2H), 8,95 - 8,90 (m, 1H), 8,75 (s, 1H), 7,84 -7,78 (m, 2H), 5,23 (d a, J = 10,4 Hz, 1H, secundario), 5,05 (dd a, J = 10,5, 1,9 Hz, 1H), 4,86 (d a, J = 9,3, 2,3 Hz, 1H), 4,62 (td, J = 10,3, 5,0 Hz, 1H), 4,40 (d a, J = 13,6 Hz, 1H), 4,36 - 4,08 (m, 5H), 3,97 (s, 3H), 3,96 - 3,84 (m, 4H), 3,84 - 3,78 (m, 3H), 3,69 (dd a, J = 9,7, 4,5 Hz, 1H, secundario), 3,57 - 3,48 (m, 3H), 3,41 (dd a, J = 10,2, 3,8 Hz, 1H), 3,31 3,21 (m, 1H); CL/EM (IEN) m/e 766,2 [(M+H)+, calc. para C31H35F3N9O9S 750,2], tR = 1,54 min (Método 1); HPLC (Método 1): tR = 5,19 min; HPLC (Método 2): tR = 4,87 min. hGal-3 CC50 = 0,024 pM.

Ejemplo 35. Preparación de 1-(azetidin-1-il)-2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-tiifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1 -il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)etan-1 -ona

A una solución de ácido 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluo 3-y])oxi)acético (14 mg, 0,020 mmol) y azetidina (9,00 mg, 0,158 mmol) en DMF (0,6 ml), se le añadió W,W-diisopropiletilamina (0,017 ml, 0,099 mmol) seguido de HATU (14,98 mg, 0,039 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 4 h. La CL/EM mostró que solo aprox. se produjo un 30 % de conversión al producto. La mezcla de reacción se calentó a 50 °C y se añadieron azetidina adicional (9,00 mg, 0,158 mmol) y HATU (14,98 mg, 0,039 mmol) y la agitación se continuó durante 1 h. Se añadieron azetidina adicional (9,00 mg, 0,158 mmol) y HATU (14,98 mg, 0,039 mmol) dos veces más en intervalos de 45 min. La mayoría del material de partida se convirtió en producto. La mezcla se diluyó con acetonitrilo y una pequeña cantidad de agua y se filtró y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 2). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar 1-(azetidin-1-il)-2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-hidroxi-2-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-(2-metoxipirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3)-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)etan-1-ona (8,6 mg, 0,011 mmol, rendimiento del 57 %) en forma de un sólido amorfo de color blanco. RMN 1H (500 MHz, METANOL-d4) 59,01 (s, 2H), 8,67 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 7,68 (dd, J = 8,6, 6,6 Hz, 2H), 5,02 (dd, J = 10,5, 3,0 Hz, 1H), 4,82 (s, 1H, parcialmente oscurecido), 4,73 - 4,66 (m, 1H), 4,46 (d, J = 14,0 Hz, 1H), 4,38 - 4,30 (m, 2H), 4,24 (dd, J = 11,1,4,9 Hz, 1H), 4,15 -4,09 (m, 3H), 4,08 (s, 3H), 4,04 - 3,77 (m, 8H), 3,75 - 3,70 (m, 1H), 3,61 (t, J = 11,7 Hz, 1H), 2,19 (quint., J = 7,8 Hz, 2H); CL/EM (IEN) m/e 750,3 [(M+H)+, calc. para C31H35F3N9O8S 750,2], tR = 1,82 min (Método 1); HPLC (Método 1): tR = 5,87 min; HPLC (Método 2): tR = 5,63 min. hGal-3 CI50 = 0,032 |jM

Preparación de intermedios (2)

Preparación de 4-etinilpiridazina

A un matraz en forma de pera de 200 ml se le añadieron piridazin-4-carbaldehído (0,10 g, 0,93 mmol), K2CO3 (0,26 g, 1,9 mmol) y MeOH (9 ml). La reacción se agitó durante 10 min, después se añadió (1-diazo-2-oxopropil)fosfonato de dimetilo (0,19 g, 0,97 mmol). Después de agitar durante 18 h, la mezcla se diluyó con éter (50 ml) y se lavó sucesivamente con K2HPO41,5 M (ac.) (2 x 25 ml) y salmuera. La fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por gel de sílice (cartucho de 12 g; A = Hex, B = EtOAc; grad. de 15 min; B al 0 % a B al 70 %; caudal = 12 ml/min). Las fracciones puras se combinaron, se concentraron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (17 mg, 0,16 mmol, rendimiento del 18 %) en forma de un sólido de color castaño. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 59,16-9,10 (m, 2H), 7,47 - 7,40 (m, 1H), 3,42 (s, 1H)

Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6R)-3-acetoxi-4-azido-6-bromo-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo A un matraz de fondo redondo de 250 ml se le añadieron acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-azido-5-metoxi-6-(feniltio)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (1,5 g, 3,7 mmol) y DCM (60 ml). El recipiente se enfrió a 0 °C, después, se añadió gota a gota bromo (0,28 ml, 5,5 mmol) disuelto en DCM (15 ml). La reacción se agitó a la temperatura anterior durante 1 h. El exceso de bromo se inactivó con una mezcla de K2HPO41 N (ac.) y Na2SO4 (ac.) sat. (1:1,20 ml). La mezcla se diluyó adicionalmente con agua (100 ml) y las capas se separaron. La fase acuosa se extrajo con DCM (3x50 ml). La fase orgánica se combinó, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto se secó al vacío para proporcionar el compuesto del título (0,87 g, 2,4 mmol, rendimiento del 65 %) en forma de un sólido de color blanco que se usó inmediatamente o se almacenó en el congelador. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 56,72-6,64 (m, 1H), 5,48 - 5,40 (m, 1H), 4,49 - 4,35 (m, 1H), 4,24 - 4,14 (m, 1H), 4,11 - 4,04 (m, 1H), 4,01 - 3,91 (m, 1H), 3,59 - 3,56 (m, 1H), 3,55 (s, 3H), 2,22 - 2,14 (m, 3H), 2,13 - 2,04 (m, 3H). CL/EM (IEN) m/e 387,5 [(M+H2O)+, calc. para CnH^BrN3O6, 366,2], fo = 1,64 min (Método 2).

Preparación de acetato de ((2fi,3R,4S,5fi,6S)-3-acetoxi-4-azido-6-(((3fi,4fi,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

A un matraz con forma de pera de 100 ml se le añadieron acetato de (3S,4R,5S)-3-azido-5-hidroxitetrahidro-2H-piran-4-ilo (0,52 g, 2,6 mmol), etinilbenceno (0,85 ml, 7,8 mmol), seguido de una mezcla desgasificada de DMF (12 ml) y agua (4 ml). A esta mezcla se le añadió pentahidrato de sulfato de cobre (II) (0,45 g, 1,8 mmol) y ascorbato sódico (0,51 g, 2,6 mmol) disuelto en agua (2 ml). El recipiente se evacuó y se lavó abundantemente con N2. Después de agitar durante 18 h, la reacción se filtró y la torta de filtro se lavó con DCM. El filtrado se diluyó con K2HPO41 N (ac.) (200 ml) y la fase acuosa se extrajo con DCM (3x100 ml). La fase orgánica se combinó, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (cartucho de gel de sílice de 40 g; A = Hex, B = EtOAc; grad. de 20 min; B al 0 % a B al 100 %; caudal = 40 ml/min). Las fracciones puras se combinaron, se concentraron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (0,38 g, 1,3 mmol, rendimiento del 49 %) en forma de un sólido de color blanco. [a]D22 36,8, (c = 1,0, CHCh); 1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 58,49 - 8,45 (m, 1H), 7,88 - 7,79 (m, 2H), 7,50 - 7,42 (m, 2H), 7,42 - 7,33 (m, 1H), 5,57 -5,45 (m, 1H), 5,19 - 5,07 (m, 1H), 4,26 - 4,22 (m, 1H), 4,22 - 4,19 (m, 1H), 4,10 - 4,02 (m, 1H), 4,01 - 3,95 (m, 1H), 3,84 - 3,77 (m, 1H), 2,02-1,91 (m, 3H); CL/EM (IEN) m/e 304,1 [(M+H)+, calc. para C15H17N3O4303,3], tR = 0,71 min (Método 4).

Etapa 2. Preparación de acetato de -(3R,4R,5S)-3-(acetiltio)-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazo1-1 il)tetrahidro-2H-piran-4-ilo

A un matraz con forma de pera de 100 ml se le añadieron acetato de (3S,4R,5S)-3-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-4-ilo (0,37 g, 1,2 mmol), DCM (24 ml) y piridina (0,40 ml, 4,9 mmol). La reacción se enfrió a -10 °C, después se añadió trifluorometanosulfónico anhídrido (0,41 ml, 2,4 mmol) durante un periodo de 5 min. La reacción se agitó a la temperatura anterior durante 1 h. La mezcla se diluyó con d Cm (25 ml) y se lavó sucesivamente con HCl 1 M (ac.) (3 x 25 ml), K2HPO41 M (ac.) (25 ml) y salmuera. La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo resultante se disolvió en acetona (20 ml) y se enfrió a -10 °C. A esta mezcla se le añadió tioacetato potásico (0,56 g, 4,9 mmol) y la reacción se calentó a ta y se agitó. Después de 18 h, la mezcla se diluyó con agua (100 ml) y se extrajo con d Cm (3 x 50 ml). La fase orgánica se combinó, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (cartucho de 80 g de gel de sílice; A = Hex, B = EtOAc; grad. de 30 min; B al 0 % a B al 60 %; caudal = 60 ml/min). Las fracciones puras se combinaron, se concentraron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (0,35 g, 0,97 mmol, rendimiento del 80 %) en forma de un sólido de color blanco. [a]D22 139,7, (c = 1,0, CHCh); RMN 1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) 57,86-7,79 (m, 3H), 7,45 (s, 2H), 7,40 - 7,34 (m, 1H), 5,64 - 5,52 (m, 1H), 4,85 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 4,34 (d a, J = 5,0 Hz, 1H), 4,23 -4,11 (m, 1H), 3,99 - 3,92 (m, 1H), 3,92 - 3,84 (m, 1H), 3,62 - 3,54 (m, 1H), 2,39 (s, 3H), 1,94 (s, 3H), CL/EM (IEN) m/e 362,2 [(M+H)+, calc. para C17H19N3O4S 361,4], k =2,885 min (Método 3).

Etapa 3. Preparación de (3R,4R,5S)-3-mereapto-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-4-ol

A un matraz con forma de pera de 100 ml se le añadieron acetato de (3R,4R,5S)-3-(acetiltio)-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-4-ilo (0,35 g, 0,97 mmol) y THF (13 ml). La reacción se enfrió a -10 °C, después se añadió metóxido sódico (0,22 ml, 0,97 mmol) (solución al 25 % en p/v en MeOH) y la reacción se agitó a la temperatura anterior. Después de 20 min, el disolvente se concentró y el residuo se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (cartucho de 12 g de gel de sílice; A = Hex, B = EtOAc; grad. de 15 min; B al 0 % a B al 100 %; caudal = 12 ml/min). Las fracciones puras se combinaron, se concentraron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (0,14 g, 0,52 mmol, rendimiento del 54 %) en forma de un sólido de color blanco. [a]D22-13,7, (c = 1,0, MeOH); RMN 1H (500 MHz, ACETONITRILO-d3) 58,20 - 8,17 (m, 1H), 7,91 - 7,86 (m, 2H), 7,52 - 7,46 (m, 2H), 7,42 - 7,36 (m, 1H), 4,57 -4,48 (m, 1H), 4,24 -4,16 (m, 1H), 4,13 -4,07 (m, 1H), 3,91 (t, J = 11,1 Hz, 2H), 3,88 -3,84 (m, 1H), 3,45 (t, J = 11,6 Hz, 1H), 3,04 - 2,95 (m, 1H), 1,91-1,79 (m, 1H); CL/EM (IEN) m/e 278,1 [(M+H)+, calc. para C13H15N3O2S 277,3], tR = 0,75 min (Método 4).

Etapa 4

A un matraz con forma de pera de 20 ml se le añadieron (3R,4R,5S)-3-mercapto-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-4-ol (0,14 g, 0,52 mmol), acetato de ((2R,3R,4S,5R,6R)-3-acetoxi-4-azido-6-bromo-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (0,20 g, 0,55 mmol), hidrogenosulfato de tetrabutilamonio (0,71 g, 2,1 mmol) y EtOAc (7 ml). A esta mezcla se le añadió carbonato sódico 2 M (ac.) (1,1 ml, 2,1 mmol) y la reacción se agitó vigorosamente. Después de 2 h, la mezcla se diluyó con K2HPO4 1 M (50 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 25 ml). La fase orgánica se combinó, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (cartucho de 12 g de gel de sílice; A = Hex, B = EtOAc; grad. de 15 min; B al 0 % a B al 100 %; caudal = 12 ml/min). Las fracciones puras se combinaron, se concentraron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (0,240 g, 0,427 mmol, rendimiento del 82 %) en forma de un sólido de color blanco. [a]D22 1,2, (c = 1,0, MeOH); RMN 1H (500 MHz, ACETONITRILO-d3) 58,21 (s, 1H), 7,90 - 7,85 (m, 2H), 7,52 - 7,45 (m, 2H), 7,42 - 7,35 (m, 1H), 5,38 - 5,32 (m, 1H), 4,71 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,63 -4,53 (m, 1H), 4,24 -4,16 (m, 2H), 4,11 -3,96 (m, 3H), 3,90 (s, 1H), 3,82 -3,75 (m, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,58 -3,52 (m, 1H), 3,42 -3,36 (m, 1H), 3,34 -3,28 (m, 1H), 3,24 - 3,14 (m, 1H), 2,16 (s, 3H), 2,14-2,12 (m, 3H); CL/EM (IEN) m/e 563,3 [(M+H)+, calc. para C24H30N6O8S 562,6], tR = 3,68 min (Método 3).

Preparación de acetato de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-acetoxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-4-amino-5-metoxitetrahidro-2H-piran-3-ilo

Etapa 1. Preparación de acetato de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-acetoxi-5-(4-fenil-1H-1,2)-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-4-azido-5-metoxitetrahidro-2H-piran-3-ilo

A un matraz con forma de pera de 20 ml se le añadieron acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-azido-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (70 mg, 0,12 mmol), DCM (3 ml) y piridina (20 j l, 0,25 mmol). A esta mezcla se le añadió cloruro de acetilo (11 j l, 0,15 mmol) y la reacción se agitó en atmósfera de N2. Después de 18 h, se añadieron piridina adicional (25 jl, 0,31 mmol) y cloruro de acetilo (22 jl, 0,31 mmol) y se continuó la reacción. Después de 18 h, el disolvente se concentró y el producto en bruto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (cartucho de 12 g de gel de sílice; A = Hex, B = EtOAc; grad. de 10 min; B al 0 % a B al 100 %; caudal = 12 ml/min). Las fracciones puras se combinaron, se concentraron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (50 mg, 0,083 mmol, rendimiento del 67 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,79-7,71 (m, 3H), 7,39 - 7,32 (m, 2H), 7,30 - 7,24 (m, 1H), 5,46 - 5,36 (m, 1H), 5,33 - 5,26 (m, 1H), 4,80 - 4,67 (m, 1H), 4,46 - 4,40 (m, 1H), 4,28 - 4,18 (m, 2H), 4,06 - 3,98 (m, 2H), 3,87 - 3,76 (m, 2H), 3,64 - 3,56 (m, 1H), 3,52 (s, 3H), 3,51 - 3,47 (m, 1H), 3,24 - 3,05 (m, 2H), 2,09 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,90 (s, 3H). CL/EM (IEN) m/e 605,2 [(M+H)+, calc. para C26H32N6O9S 604,6], tR = 0,94 min (Método 4).

Etapa 2

A un matraz de fondo redondo de 10 ml se le añadieron acetato de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-acetoxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-4-azido-5-metoxitetrahidro-2H-piran-3-ilo (50 mg, 0,083 mmol), Ph3P (43 mg, 0,17 mmol), agua (30 jl, 1,7 mmol) y THF (3 ml). La reacción se agitó a la temperatura de reflujo. Después de 18 h, el disolvente se concentró y el residuo se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (cartucho de 12 g de gel de sílice; A = Hex, B = EtOAc; grad. de 15 min; B al 0 % a B al 100 %, caudal = 12 ml/min). Las fracciones puras se combinaron, se concentraron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (63 mg, 0,058 mmol, rendimiento del 70 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,74-7,72 (m, 1H), 7,64 - 7,56 (m, 1H), 7,51 - 7,44 (m, 1H), 7,42 - 7,32 (m, 2H), 7,30 - 7,24 (m, 1H), 5,43 (s, 1H), 4,94 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 4,79 -4,67 (m, 1H), 4,47 (dd, J = 9,9, 1,8 Hz, 1H), 4,30 - 4,19 (m, 3H), 4,18 -4,08 (m, 2H), 4,03 (dt, J = 4,8, 2,2 Hz, 1H), 3,81 (t, J = 11,2 Hz, 1H), 3,62 (t, J = 11,9 Hz, 1H), 3,40 (s, 3H), 3,33 (s, 1H), 3,16 - 3,06 (m, 1H), 2,06 (s, 3H), 1,93 (d, J = 1,1 Hz, 3H), 1,89 (s, 3H). CL/EM (IEN) m/e 579,2 [(M+H)+, calc. para C26H34N4O9S 578,6], tR = 0,70 min (Método 4).

Ejemplo A1. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(piridin-3-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

A un matraz con forma de pera de 20 ml se le añadieron acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-azido-6-(((3R,4R, 5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (15 mg, 0,027 mmol) y 3-etinilpiridina (8,3 mg, 0,080 mmol) seguido de Dm F (1 ml) y agua (0,3 ml). El recipiente se evacuó y se lavó abundantemente con nitrógeno. A esta mezcla se le añadieron pentahidrato de sulfato de cobre (II) (9,3 mg, 0,037 mmol) y ascorbato sódico (6,3 mg, 0,032 mmol) disuelto en agua (0,4 ml). El recipiente se evacuó de nuevo y se lavó abundantemente con nitrógeno y se agitó. Después de 18 h, la mezcla se diluyó con EtOAc (20 ml) y se filtró. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo resultante se disolvió en MeOH (3 ml) y THF (3 ml). A esta mezcla se le añadió metóxido sódico (12 j l , 0,053 mmol) (solución al 25 % p/v en MeOH). Después de agitar 45 min, la reacción se neutralizó con HCl 1 N (ac.) hasta pH 6-7 y se concentró. El producto en bruto se purificó por HPLC preparativa (Método 5). Las fracciones puras se combinaron, se concentraron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (11 mg, 0,020 mmol, rendimiento del 71 %). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 59,10 (s, 1H), 8,86 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,57 -8,53 (m, 1H), 8,28 -8,19 (m, 1H), 7,84 (d a, J = 7,6 Hz, 2H), 7,55 - 7,41 (m, 3H), 7,40 - 7,31 (m, 1H), 5,00 - 4,93 (m, 1H), 4,86 - 4,79 (m, 1H), 4,65 - 4,55 (m, 1H), 4,28 - 4,21 (m, 1H), 4,16 - 4,10 (m, 1H), 4,09 - 4,03 (m, 1H), 4,00 (s a, 2H), 3,82 (d a, J = 3,7 Hz, 2H), 3,63 -3,50 (m, 3H), 3,42 - 3,29 (m, 1H), 3,25 (s, 3H); CL/EM analítica (IEN) m/e 582,1 [(M+H)+, calc. para C27H31N7O6S 581,7], tR = 1,32 min (Método 1); CL/EM analítica (IEN) m/e 582,1 [(M+H)+, calc. para C27H31N7O6S 581,7], tR = 1,17 min (Método 2). hGal-3 CI50 = 1,1 jM .

Ejemplo A2. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(piridin-4-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

Ejemplo A2

A un matraz con forma de pera de 20 ml se le añadieron acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-aeetoxi-4-azido-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (15 mg, 0,027 mmol) y 4-etinilpiridina (8,3 mg, 0,080 mmol) seguido de DMF (1 ml) y agua (0,3 ml). El recipiente se evacuó y se lavó abundantemente con nitrógeno. A esta mezcla se le añadieron pentahidrato de sulfato de cobre (II) (9,3 mg, 0,037 mmol) y ascorbato sódico (6,3 mg, 0,032 mmol) disuelto en agua (0,4 ml). El recipiente se evacuó de nuevo y se lavó abundantemente con nitrógeno y se agitó. Después de 18 h, la mezcla se diluyó con EtOAc (20 ml) y se filtró. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo resultante se disolvió en MeOH (3 ml) y THF (3 ml). A esta mezcla se le añadió metóxido sódico (12 |jl, 0,053 mmol) (solución al 25 % p/v en MeOH). Después de agitar 45 min, la reacción se neutralizó con HCl 1 N (ac.) hasta pH 6-7 y se concentró. El producto en bruto se purificó por HPLC preparativa (Método 5). Las fracciones puras se combinaron, se concentraron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (13 mg, 0,022 mmol, rendimiento del 82 %). RMN de 1H (500 MHz, DMSO-d6) 59,07-9,03 (m, 1H), 8,68 - 8,62 (m, 3H), 7,90 - 7,86 (m, 2H), 7,86 - 7,81 (m, 2H), 7,50 - 7,44 (m, 2H), 7,37 - 7,32 (m, 1H), 5,73 - 5,43 (m, 1H), 5,03 - 4,96 (m, 1H), 4,83 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,68 -4,55 (m, 1H), 4,29 - 4,21 (m, 1H), 4,15 - 4,10 (m, 1H), 4,09 - 4,02 (m, 1H), 4,00 - 3,93 (m, 2H), 3,84 - 3,77 (m, 2H), 3,60 - 3,52 (m, 1H), 3,48 - 3,42 (m, 1H), 3,32 - 3,26 (m, 1H), 3,25 (s, 3H); CL/EM analítica (IEN) m/e 581,9 [(M+H)+, calc. para C27H31N7O6S 581,7], fo = 1,43 min (Método 1); CL/EM analítica (IEN) m/e 582,2 [(M+H)+, calc. para C27H31N7O6S 581,7], tR = 1,40 min (Método 2). hGal-3 CI50 = 1,1 jM .

Ejemplo A3. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-4-(4-([1,1’-bifenil]-4-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-3-ol

A un matraz con forma de pera de 20 ml se le añadieron acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-azido-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (15 mg, 0,027 mmol) y 4-etinil-1,1’-bifenilo (14 mg, 0,080 mmol) seguido de DMF (1 ml) y agua (0,3 ml). El recipiente se evacuó y se lavó abundantemente con nitrógeno. A esta mezcla se le añadieron pentahidrato de sulfato de cobre (II) (9,3 mg, 0,037 mmol) y ascorbato sódico (6,3 mg, 0,032 mmol) disuelto en agua (0,4 ml). El recipiente se evacuó de nuevo y se lavó abundantemente con nitrógeno y se agitó. Después de 18 h, la mezcla se diluyó con EtOAc (20 ml) y se filtró. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo resultante se disolvió en MeOH (3 ml) y THF (3 ml). A esta mezcla se le añadió metóxido sódico (12 jl, 0,053 mmol) (solución al 25 % p/v en MeOH). Después de agitar 45 min, la reacción se neutralizó con HCl 1 N (ac.) hasta pH 6-7 y se concentró. El producto en bruto se purificó por HPLC preparativa (Método 5). Las fracciones puras se combinaron, se concentraron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (8,9 mg, 0,014 mmol, rendimiento del 48 %). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 58,84 (s, 1H), 8,70 - 8,62 (m, 1H), 8,00 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 7,87 - 7,82 (m, 2H), 7,81 - 7,76 (m, 2H), 7,75 - 7,70 (m, 2H), 7,52 - 7,43 (m, 4H), 7,42 - 7,32 (m, 2H), 5,70 - 5,65 (m, 1H), 5,49 - 5,44 (m, 1H), 4,97 - 4,92 (m, 1H), 4,87 - 4,80 (m, 2H), 4,66 - 4,56 (m, 1H), 4,29 - 4,22 (m, 1H), 4,16 - 4,05 (m, 2H), 4,02 - 3,93 (m, 2H), 3,86 - 3,77 (m, 2H), 3,60 - 3,52 (m, 1H), 3,43 (s a, 1H), 3,34 - 3,27 (m, 1H), 3,26 (s, 3H), 3,18 (d, J = 5,2 Hz, 1H); CL/EM analítica (IEN) m/e 657,1 [(M+H)+, calc. para C34H36N6O6S 656,8], tR = 2,02 min (Método 1); CL/EM analítica (IEN) m/e 657,2 [(M+H)+, calc. para C34H36N6O6S 656,8], tR = 2,10 min (Método 2). hGal-3 CI50 = >11 mM.

Ejemplo A4. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-3-ol

A un matraz con forma de pera de 20 ml se le añadieron acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-azido-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (15 mg, 0,027 mmol) y 1-etinil-3-fluorobenceno (9,6 mg, 0,080 mmol) seguido de DMF (1 ml) y agua (0,3 ml). El recipiente se evacuó y se lavó abundantemente con nitrógeno. A esta mezcla se le añadieron pentahidrato de sulfato de cobre (II) (9,3 mg, 0,037 mmol) y ascorbato sódico (6,3 mg, 0,032 mmol) disuelto en agua (0,4 ml). El recipiente se evacuó de nuevo y se lavó abundantemente con nitrógeno y se agitó. Después de 18 h, la mezcla se diluyó con EtOAc (20 ml) y se filtró. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo resultante se disolvió en MeOH (3 ml) y THF (3 ml). A esta mezcla se le añadió metóxido sódico (12 mI, 0,053 mmol) (solución al 25 % p/v en MeOH). Después de agitar 45 min, la reacción se neutralizó con HCl 1 N (ac.) hasta pH 6-7 y se concentró. El producto en bruto se purificó por HPLC preparativa (Método 5). Las fracciones puras se combinaron, se concentraron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (10 mg, 0,017 mmol, rendimiento del 60 %). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 58,79-8,74 (m, 1H), 8,59 - 8,54 (m, 1H), 7,87 - 7,80 (m, 2H), 7,77 - 7,71 (m, 1H), 7,70 - 7,65 (m, 1H), 7,53 - 7,42 (m, 3H), 7,38 - 7,31 (m, 1H), 7,18 - 7,10 (m, 1H), 5,61 - 5,33 (m, 1H), 4,98 - 4,88 (m, 1H), 4,83 - 4,76 (m, 1H), 4,66 - 4,55 (m, 1H), 4,26 - 4,19 (m, 1H), 4,16 - 4,08 (m, 1H), 3,98 (s a, 3H), 3,80 (d a, J = 7,4 Hz, 2H), 3,61 - 3,55 (m, 2H), 3,31 - 3,25 (m, 1H), 3,24 (s, 3H); CL/EM analítica (IEN) m/e 598,9 [(M+H)+, calc. para C28H31FN6O6S 598,7], tR = 1,64 min (Método 1); CL/EM analítica (IEN) m/e 599,2 [(M+H)+, calc. para C28H31FN6O6S 598,7], tR = 1,58 min (Método 2). hGal-3 CI50 = 0,026 mM.

Ejemplo A5. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(tiazol-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

Ejemplo A5

A un matraz con forma de pera de 20 ml se le añadieron acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-azido-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (15 mg, 0,027 mmol) y 2-etiniltiazol (8,7 mg, 0,080 mmol) seguido de DMF (1 ml) y agua (0,3 ml). El recipiente se evacuó y se lavó abundantemente con nitrógeno. A esta mezcla se le añadieron pentahidrato de sulfato de cobre (II) (9,3 mg, 0,037 mmol) y ascorbato sódico (6,3 mg, 0,032 mmol) disuelto en agua (0,4 ml). El recipiente se evacuó de nuevo y se lavó abundantemente con nitrógeno y se agitó. Después de 18 h, la mezcla se diluyó con EtOAc (20 ml) y se filtró. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo resultante se disolvió en MeOH (3 ml) y THF (3 ml). A esta mezcla se le añadió metóxido sódico (12 mI 0,053 mmol) (solución al 25 % p/v en MeOH). Después de agitar 45 min, la reacción se neutralizó con HCl 1 N (ac.) hasta pH 6-7 y se concentró. El producto en bruto se purificó por HPLC preparativa (Método 6). Las fracciones puras se combinaron, se concentraron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (16 mg, 0,026 mmol, rendimiento del 97 %). RMN 12H (500 MHz, DMSO-d6) 58,83 (s, 1H), 8,70 - 8,63 (m, 1H), 7,96 - 7,90 (m, 1H), 7,87 - 7,81 (m, 2H), 7,80 - 7,76 (m, 1H), 7,50 - 7,44 (m, 2H), 7,38 - 7,31 (m, 1H). 5,68 - 5,38 (m, 1H), 5,04 - 4,95 (m, 1H), 4,79 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 4,66 - 4,55 (m, 1H), 4,27 - 4,20 (m, 1H), 4,13 (d a, J = 9,2 Hz, 2H), 4,00 - 3,89 (m, 2H), 3,84 - 3,76 (m, 2H), 3,60 - 3,49 (m, 1H), 3,44 - 3,34 (m, 1H), 3,25 (s, 3H), 3,04-2,94 (m, 1H); CL/EM analítica (IEN) m/e 588,2 [(M+H)+, calc. para C25H29N7O6S2587,7], fo = 1,27 min (Método 1); CL/EM analítica (lEN) m/e 588,0 [(M+H)+, calc. para C25H29N7O6S2 587,7], tR = 1,35 min (Método 2). hGal-3 CI50 = 0,49 pM.

Ejemplo A6. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-S-(4-fenil-1H-1,2,3-triazo1-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(pirimidin-5-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

A un matraz con forma de pera de 20 ml se le añadieron ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-azido-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (15 mg, 0,027 mmol) y 5-etinilpirimidina (8,3 mg, 0,080 mmol) seguido de d Mf (1 ml) y agua (0,3 ml). El recipiente se evacuó y se lavó abundantemente con nitrógeno. A esta mezcla se le añadieron pentahidrato de sulfato de cobre (II) (9,3 mg, 0,037 mmol) y ascorbato sódico (6,3 mg, 0,032 mmol) disuelto en agua (0,4 ml). El recipiente se evacuó de nuevo y se lavó abundantemente con nitrógeno y se agitó. Después de 18 h, la mezcla se diluyó con EtOAc (20 ml) y se filtró. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo resultante se disolvió en MeOH (3 ml) y THF (3 ml). A esta mezcla se le añadió metóxido sódico (12 pl, 0,053 mmol) (solución al 25 % p/v en MeOH). Después de agitar 45 min, la reacción se neutralizó con HCl 1 N (ac.) hasta pH 6-7 y se concentró. El producto en bruto se purificó por HPLC preparativa (Método 5). Las fracciones puras se combinaron, se concentraron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (11 mg, 0,019 mmol, rendimiento del 69 %). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 59,33-9,27 (m, 2H), 9,20 - 9,15 (m, 1H), 9,09 - 9,04 (m, 1H), 8,70 - 8,62 (m, 1H), 7,88 - 7,80 (m, 2H), 7,51 - 7,43 (m, 2H), 7,40 - 7,29 (m, 1H) 5,73 - 5,47 (m, 1H) 5,06 - 4,99 (m, 1H), 4,88 - 4,80 (m, 1H), 4,64 - 4,55 (m, 1H), 4,29-4,21 (m, 1H), 4,16-4,09 (m, 1H), 4,03 (s, 1H), 3,97 (s a, 2H), 3,81 (s, 2H), 3,59-3,51 (m, 1H) 3,48 -3,42 (m, 1H) 3,32 - 3,27 (m, 1H), 3,26 (s, 3H); CL/EM analítica (IEN) m/e 583,1 [(M+H)+, calc. para C26H30N8O6S 582,6], tR = 1,12 min (Método 1); CL/EM analítica (IEN) m/e 583,1 [(M+H)+, calc. para C26H30N8O6S 582,6], tR = 1,21 min (Método 2). hGal-3 CI50 = 0,36 pM.

Ejemplo A7. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(tiazol-5-il)-1H-1,2,3-triazo1-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

Ejemplo A7

A un matraz con forma de pera de 20 ml se le añadieron acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-azido-6-(((3R,4R,5S-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (15 mg, 0,027 mmol) y 5-etiniltiazol (8,7 mg, 0,080 mmol) seguido de d Mf (1 ml) y agua (0,3 ml). El recipiente se evacuó y se lavó abundantemente con nitrógeno. A esta mezcla se le añadieron pentahidrato de sulfato de cobre (II) (9,3 mg, 0,037 mmol) y ascorbato sódico (6,3 mg, 0,032 mmol) disuelto en agua (0,4 ml). El recipiente se evacuó de nuevo y se lavó abundantemente con nitrógeno y se agitó. Después de 18 h, la mezcla se diluyó con EtOAc (20 ml) y se filtró. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo resultante se disolvió en MeOH (3 ml) y THF (3 ml). A esta mezcla se le añadió metóxido sódico (12 |ji, 0,053 mmol) (solución al 25 % p/v en MeOH). Después de agitar 45 min, la reacción se neutralizó con HCl 1 N (ac.) hasta pH 6-7 y se concentró. El producto en bruto se purificó por HPLC preparativa (Método 5).

Las fracciones puras se combinaron, se concentraron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (8,5 mg, 0,014 mmol, rendimiento del 52 %). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 59,09 (s, 1H), 8,84 (s, 1H), 8,66 (s, 1H), 8,30 (s, 1H), 7,84 (d a, J = 7,3 Hz, 2H), 7,47 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 7,39 - 7,31 (m, 1H), 5,72 - 5,42 (m, 1H), 5,01 - 4,91 (m, 1H), 4,82 (d a, J = 9,2 Hz, 2H), 4,65 -4,53 (m, 1H), 4,29 -4,21 (m, 1H), 4,16 -4,09 (m, 1H), 4,06 -3,99 (m, 1H), 3,99 - 3,91 (m, 2H), 3,85 - 3,75 (m, 2H), 3,58 - 3,50 (m, 1H), 3,42 - 3,36 (m, 1H), 3,25 (s, 3H); CL/EM analítica (IEN) m/e 588,1 [(M+H)+, calc. para C25H29N7O6S2587,7], fo= 1,33 min (Método 1); CL/EM analítica (IEN) m/e 588,1 [(M+H)+, calc. para C25H29N7O6S2587,7], tR = 1,26 min (Método 2). hGal-3 CI50 = 0,84 jM .

Ejemplo A8. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(quinoxalin-6-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

A un matraz con forma de pera de 20 ml se le añadieron acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-azido-6-(((3fi,4fi,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (15 mg, 0,027 mmol) y 6-etinilquinoxalina (12 mg, 0,080 mmol) seguido de DMF (1 ml) y agua (0,3 ml). El recipiente se evacuó y se lavó abundantemente con nitrógeno. A esta mezcla se le añadieron pentahidrato de sulfato de cobre (II) (9,3 mg, 0,037 mmol) y ascorbato sódico (6,3 mg, 0,032 mmol) disuelto en agua (0,4 ml). El recipiente se evacuó de nuevo y se lavó abundantemente con nitrógeno y se agitó. Después de 18 h, la mezcla se diluyó con EtOAc (20 ml) y se filtró. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo resultante se disolvió en MeOH (3 ml) y THF (3 ml). A esta mezcla se le añadió metóxido sódico (12 j l , 0,053 mmol) (solución al 25 % p/v en MeOH). Después de agitar 45 min, la reacción se neutralizó con HCl 1 N (ac.) hasta pH 6-7 y se concentró. El producto en bruto se purificó por HPLC preparativa (Método 6).

Las fracciones puras se combinaron, se concentraron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (4,4 mg, 0,007 mmol, rendimiento del 26 %). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 59,17-9,11 (m, 1H), 9,00-8,96 (m, 1H), 8,96-8,91 (m, 1H), 8,70 - 8,64 (m, 1H), 8,63 - 8,58 (m, 1H), 8,48 - 8,43 (m, 1H), 8,24 - 8,18 (m, 1H), 7,87 - 7,81 (m, 2H), 7,50 - 7,44 (m, 2H), 7,40 - 7,32 (m, 1H), 5,77 - 5,45 (m, 1H), 5,06 - 4,97 (m, 1H), 4,90 - 4,81 (m, 1H), 4,68 - 4,54 (m, 1H), 4,30 - 4,21 (m, 1H), 4,17 - 4,06 (m, 2H), 4,03 - 3,93 (m, 2H), 3,88 - 3,77 (m, 2H), 3,60 - 3,52 (m, 1H), 3,48 -3,40 (m, 1H), 3,34 - 3,30 (m, 1H), 3,29 (s, 3H); CL/EM analítica (IEN) m/e 633,1 [(M+H)+, calc. para C30H32N8O6S 632,7], tR = 1,40 min (Método 1); CL/EM analítica (IEN) m/e 633,1 [(M+H)+, calc. para C30H32N8O6S 632,7], tR = 1,44 min (Método 2). hGal-3 CI50 = 0,17 jM .

Ejemplo A9. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(piridazin-4-il)-1H-1,2,3 -triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

Ejemplo A9

A un matraz con forma de pera de 20 ml se le añadieron acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-azido-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (15 mg, 0,027 mmol) y 4-etinilpiridazina (8,3 mg, 0,080 mmol) seguido de DMF (1 ml) y agua (0,3 ml). El recipiente se evacuó y se lavó abundantemente con nitrógeno. A esta mezcla se le añadieron pentahidrato de sulfato de cobre (II) (9,3 mg, 0,037 mmol) y ascorbato sódico (6,3 mg, 0,032 mmol) disuelto en agua (0,4 ml). El recipiente se evacuó de nuevo y se lavó abundantemente con nitrógeno y se agitó. Después de 18 h, la mezcla se diluyó con EtOAc (20 ml) y se filtró. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo resultante se disolvió en MeOH (3 ml) y THF (3 ml). A esta mezcla se le añadió metóxido sódico (12 |jl, 0,053 mmol) (solución al 25 % p/v en MeOH). Después de agitar 45 min, la reacción se neutralizó con HCl 1 N (ac.) hasta pH 6-7 y se concentró. El producto en bruto se purificó por HPLC preparativa (Método 6). Las fracciones puras se combinaron, se concentraron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (8,4 mg, 0,014 mmol, rendimiento del 52%). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 59,76-9,71 (m, 1H), 9,31 -9,24 (m, 1H), 9,20 -9,12 (m, 1H), 8,63 -8,57 (m, 1H), 8,12 - 8,06 (m, 1H), 7,88 - 7,81 (m, 2H), 7,51 - 7,43 (m, 2H), 7,39 - 7,3 1 (m, 1H), 5,07 - 4,99 (m, 1H), 4,90 - 4,80 (m, 1H), 4,67 - 4,52 (m, 1H), 4,29 - 4,19 (m, 1H), 4,17 - 4,10 (m, 1H), 4,09 - 3,94 (m, 3H), 3,82 (s, 2H), 3,58 (d a, J = 4,8 Hz, 3H), 3,38 (s, 3H), 3,35-3,30 (m, 1H); CL/EM analítica (IEN) m/e 583,4 [(M+H)+, calc. para C26H30N8O6S 582,6], k = 1,14 min (Método 1); CL/EM analítica (IEN) m/e 583,3 [(M+H)+, calc. para C26H30N8O6S 582,6], tR= 1,12 min (Método 2). hGal-3 CI50 = 1,24 jM .

Ejemplo A10. Preparación de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxi-4-(4-(naftalen-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol

A un matraz con forma de pera de 20 ml se le añadieron acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-azido-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (15 mg, 0,027 mmol) y 2-etinilnaftaleno (12 mg, 0,080 mmol) seguido de DMF (1 ml) y agua (0,3 ml). El recipiente se evacuó y se lavó abundantemente con nitrógeno. A esta mezcla se le añadieron pentahidrato de sulfato de cobre (II) (9,3 mg, 0,037 mmol) y ascorbato sódico (6,3 mg, 0,032 mmol) disuelto en agua (0,4 ml). El recipiente se evacuó de nuevo y se lavó abundantemente con nitrógeno y se agitó. Después de 18 h, la mezcla se diluyó con EtOAc (20 ml) y se filtró. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo resultante se disolvió en MeOH (3 ml) y THF (3 ml). A esta mezcla se le añadió metóxido sódico (12 j l, 0,053 mmol) (solución al 25 % p/v en MeOH). Después de agitar 45 min, la reacción se neutralizó con HCl 1 N (ac.) hasta pH 6-7 y se concentró. El producto en bruto se purificó por HPLC preparativa (Método 5). Las fracciones puras se combinaron, se concentraron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (7,7 mg, 0,012 mmol, rendimiento del 46 %). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 58,87-8,82 (m, 1H), 8,63 - 8,57 (m, 1H), 8,46 - 8,40 (m, 1H), 8,09 - 8,03 (m, 1H), 8,03 - 7,95 (m, 2H), 7,95 - 7,90 (m, 1H), 7,87 - 7,81 (m, 2H), 7,59 - 7,49 (m, 2H), 7,49 - 7,43 (m, 2H), 7,38 - 7,31 (m, 1H), 5,58 - 5,33 (m, 1H), 5,01 - 4,93 (m, 1H), 4,87 - 4,80 (m, 1H), 4,68 - 4,57 (m, 1H), 4,31 - 4,21 (m, 1H) 4,19 - 4,06 (m, 2H), 4,05 - 3,95 (m, 2H), 3,86 - 3,79 (m, 2H), 3,62 - 3,57 (m, 2H), 3,39 (s, 3H), 3,37-3,34 (m, 1H); CL/EM analítica (IEN) m/e 631,4 [(M+H)+, calc. para C32H34N6O6S 630,7], tR = 1,76 min (Método 1); CL/EM analítica (IEN) m/e 631,4 [(M+H)+, calc. para C32H34N6O6S 630,7], tR = 1,75 min (Método 2). hGal-3 CI50 = 0,33 jM .

Ejemplo A11. Preparación de 4-(1-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-hidroxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-1,2,3-triazol-4-il)biciclo[2.2.2]octano-1-carboxilato de metilo

A un matraz con forma de pera de 20 ml se le añadieron acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-azido-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (15 mg, 0,027 mmol) y metil4-etinilbiciclo[2.2.2]octano-1-carboxilato (13 mg, 0,067 mmol) (Fukuda, Y. et al. WO 2013/003383) seguido de DMF (1 ml) y agua (0,3 ml). El recipiente se evacuó y se lavó abundantemente con nitrógeno. A esta mezcla se le añadieron pentahidrato de sulfato de cobre (II) (9,3 mg, 0,037 mmol) y ascorbato sódico (6,3 mg, 0,032 mmol) disuelto en agua (0,4 ml). El recipiente se evacuó de nuevo y se lavó abundantemente con nitrógeno y se agitó. Después de 18 h, la mezcla se diluyó con EtOAc (20 ml) y se filtró. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo resultante se disolvió en MeOH (3 ml) y THF (3 ml). A esta mezcla se le añadió metóxido sódico (12 |jl, 0,053 mmol) (solución al 25 % p/v en MeOH). Después de agitar 45 min, la reacción se neutralizó con HCl 1 N (ac.) hasta pH 6-7 y se concentró. El producto en bruto se purificó por HPLC preparativa (Método 5). Las fracciones puras se combinaron, se concentraron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (11 mg, 0,017 mmol, rendimiento del 63 %). RMN 1H (500 MHz, DMSO-de) 58,62 - 8,57 (m, 1H), 7,96 - 7,91 (m, 1H), 7,85 - 7,79 (m, 2H), 7,49 - 7,42 (m, 2H), 7,38 - 7,31 (m, 1H), 5,76 - 5,30 (m, 1H), 5,00 - 4,88 (m, 1H), 4,80 - 4,75 (m, 1H), 4,73 - 4,68 (m, 1H), 4,63 - 4,56 (m, 1H), 4,24 - 4,16 (m, 1H), 4,13 - 4,07 (m, 1H), 3,97 - 3,85 (m, 2H), 3,82 - 3,74 (m, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,58 (s, 1H), 3,54 - 3,46 (m, 2H), 3,29 - 3,21 (m, 1H), 3,10 (s, 3H), 1,80 (s, 12H); CL/EM analítica (IEN) m/e 670,9 [(M+H)+, calc. para C32H42N6O8S 670,8], tR = 1,64 min (Método 1); CL/EM analítica (lEN) m/e 671,2 [(M+h )+, calc. para C32H42N6O8S 670,8], tR = 1,62 min (Método 2). hGal-3 CI50 = 1,86 jM .

Ejemplo A12. Preparación de 3,4,5-trifluoro-N-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-hidroxi-6-(((3R,4R,5SJ-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-4-il)benzamida

A un matraz con forma de pera de 10 ml se le añadieron acetato de (2R,3R,4S,5R,6S)-6-(((3R,4R,5S)-4-acetoxi-5-(4-fenil-1 H-1,2,3- triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-4-amino-5-metoxitetrahidro-2H-piran-3-ilo (28 mg, 0,041 mmol), ácido 3,4,5-trifluorobenzoico (15 mg, 0,083 mmol), piridina (10 jl, 0,12 mmol) y DMF (1 ml). A esta mezcla se le añadió 1-propanofosfónico anhídrido (solución al 50 % en EtOAc) (0,049 ml, 0,083 mmol) y la reacción se agitó en atmósfera de N2. Después de 18 h, la mezcla se diluyó con agua (25 ml) y se extrajo con EtOAc (2x15 ml). La fase orgánica se combinó, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por HPLC preparativa (Método 7). Las fracciones puras se combinaron y se concentraron. El residuo resultante se disolvió en THF (0,1 ml) y MeOH (0,1 ml). A esta mezcla se le añadió metóxido sódico (25 % p/v en MeOH) (2,8 jl, 0,012 mmol) y la reacción se agitó. Después de 1 h, se añadió HCl 1 M hasta pH 7. El disolvente se concentró y el residuo se purificó por HPLC preparativa (Método 6). Las fracciones puras se combinaron, se concentraron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (6,2 mg, 0,010 mmol, rendimiento del 25 %). RMN 1H (500 MHz, DMSO-de) 58,59 (s, 1H), 8,57 - 8,50 (m, 1H), 7,93 - 7,86 (m, 2H), 7,84 (d a, J = 7,4 Hz, 2H), 7,46 (s, 2H), 7,38 - 7,31 (m, 1H), 5,48 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 5,04 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 4,66 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 4,62 - 4,51 (m, 1H), 4,22 (dd a, J = 11,6, 4,8 Hz, 1H), 4,16 - 4,07 (m, 2H), 4,02 - 3,93 (m, 1H), 3,86 - 3,76 (m, 2H), 3,64 - 3,49 (m, 4H), 3,44 (s, 3H). CL/EM analítica (IEN) m/e 611,1 [(M+H)+, calc. para C27H29F3N4O7S 610,6], tR = 1,55 min (Método 1). CL/EM analítica (IEN) m/e 611,1 [(M+H)+, calc. para C27H29F3N4O7S 610,6], tR = 1,55 min (Método 2). hGal-3 CI50 = 1,4 jM .

Ejemplo A13. Preparación de 2,3,5,6-tetrafluoro-N-((2R,3R,4S,5R,6S)-3-N-hidroxi-6-(((3R,4R,5S)-4-hidroxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(hidroximetil)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-4-il)-4-metoxibenzamida

A un matraz con forma de pera de 10 ml se le añadieron ácido 2,3,5,6-tetrafluoro-4-metoxibenzoico (15 mg, 0,068 mmol), DMF (0,4 |jl, 5,1 jmol) y DCM (1 ml). A esta mezcla se le añadió cloruro de oxalilo (6,0 j l, 0,068 mmol) y la reacción se agitó en atmósfera de N2. Después de 2 h, el disolvente se concentró (a temperatura ambiente), el residuo se disolvió en DCM (1 ml) y se añadió a una solución de acetato de (2fi,3R,4S,5fi,6S)-6-(((3fi,4fi,5S)-4-acetoxi-5-(4-fenil-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)tio)-2-(acetoximetil)-4-amino-5-metoxitetrahidro-2H-piran-3-ilo (23 mg, 0,034 mmol) y DMAP (4,2 mg, 0,034 mmol), disuelto en DCM (1 ml). La reacción se agitó en atmósfera de N2. Después de 18 h, el disolvente se concentró y el intermedio en bruto se purificó por HPLC preparativa (Método 7). Las fracciones puras se combinaron y se concentraron. El residuo resultante se disolvió en THF (0,5 ml) y MeOH (0,5 ml). A esta mezcla se le añadió metóxido sódico (25 % p/v en MeOH) (1,7 jl, 0,0077 mmol) y la reacción se agitó. Después de 1 h, se añadió HCl 1 M hasta pH 7. El disolvente se concentró y el residuo se purificó por HPLC preparativa (Método 6). Las fracciones puras se combinaron, se concentraron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (0,9 mg, 0,0014 mmol, rendimiento del 4%). RMN 1H (500 MHz, DMSO-de) 59,05 - 8,95 (m, 1H), 8,71 - 8,60 (m, 1H), 7,87 - 7,78 (m, 2H), 7,51 - 7,43 (m, 2H), 7,39 - 7,30 (m, 1H), 5,65 - 5,48 (m, 1H), 5,19 - 5,02 (m, 1H), 4,72 -4,64 (m, 1H), 4,59 - 4,50 (m, 1H), 4,24 - 4,16 (m, 1H), 4,10 - 4,07 (m, 2H), 4,09 (s, 3 H), 3,98 - 3,89 (m, 1H), 3,85 - 3,72 (m, 2H), 3,64 - 3,56 (m, 1H), 3,56 - 3,46 (m, 2H), 3,43 (s, 3H), 2,56 - 2,53 (m, 1H) CL/EM analítica (IEN) m/e 658,9 [(M+H)+, calc. para C28H30F4N4O8S 658,6], ír = 1,68 min (Método 1). CL/EM analítica (IEN) m/e 659,0 [(M+H)+, calc. para C28H30F4N4O8S 658,6], ír = 1,65 min (Método 2). hGal-3 CI50 = 0,57 jM .

SECCIÓN B

El tiempo de retención de CL-EM/HPLC analítico notificado para cada ejemplo e intermedio utiliza una de las siguientes condiciones analíticas generales de CL-EM/HPLC:

Condiciones de LCMS:

Método A:

Columna: XBridge BEH XP C18 (50 x 2,1) mm, 2,5 jm ;

Fase móvil A: NH4OAc 10 mM, Agua:Acetonitrilo (95:5)

Fase móvil B: NH4OAc 10 mM, Agua:Acetonitrilo (5:95)

Gradiente = B al 0-100 % durante 3 min

Temperatura: 50 °C;

Caudal: 1,1 ml/min

Detección: UV a 220 nm

Método B:

Columna: XBridge BEH XP C18 (50 x 2,1) mm, 2,5 jm

Fase móvil A: TFA al 0,1 % en agua, Acetonitrilo (95:5)

Fase móvil B: TFA al 0,1 % en agua, Acetonitrilo (5:95)

Gradiente = B al 0-100 % durante 3 min

Temperatura: 50 °C

Caudal: 1,1 ml/min

Detección: UV a 220 nm

Método C:

Columna-KINETEX-XB-C18 (75 x 3mm-2,6 jm )

Fase móvil A: NH4OAc 10 mM, Agua:Acetonitrilo (98:2)

Fase móvil B: NH4OAc 10 mM, Agua: Acetonitrilo (2:98)

Gradiente = B al 20-100 % durante 5 min

Caudal: 1,5 ml/min

Detección: UV a 254 nm

Método D:

Columna: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2,1 x 50 mm), 1,7 pm

Fase móvil A: NH4OAC 10 mM, Agua:Acetonitrilo (95:5)

Fase móvil B: NH4OAC 10 mM, Agua:Acetonitrilo (5:95)

Gradiente = B al 20-90 % durante 1,1 minuto, después se mantuvo 0,6 minutos a B al 90 % Temperatura: 50 °C

Caudal: 0,7 ml/min

Detección: UV a 220 nm

Método E:

Columna-ZORBAX-SB-C18 (50 x 4,6 mm), 6pm

Fase móvil A: NH4OAC 10 mM, Agua:Acetonitrilo (98:2)

Fase móvil B: NH4OAC 10 mM Agua:Acetonitrilo (2:98)

Gradiente = B al 30-100 % durante 5 min

Caudal: 1,5 ml/min

Detección: UV a 254 nm

Condiciones de HPLC prep.:

Método A:

Columna: Waters XBridge C18, (19 x 150 mm), partículas de 5 pm

Fase móvil A: acetato amónico 10 mM en agua

Fase móvil B: acetonitrilo

Gradiente: B al 15-50 % durante 20 minutos, después se mantuvo 5 minutos a B al 100 % Flujo: 15 ml/min

Método B:

Columna: Inertsil ODS (250 x 19 mm), partículas de 5 pm

Fase A: acetato amónico 10 mM en agua

Fase móvil B: acetonitrilo

Gradiente: B al 40-65 % durante 20 minutos, después se mantuvo 5 minutos a B al 100 % Flujo: 20 ml/min

Método C:

Columna: Sunfire C18 (19 x 150 mm), partículas de 5 pm

Fase móvil A: acetato amónico 10 mM en agua

Fase móvil B: acetonitrilo

Gradiente: B al 40-45 % durante 12 minutos, después se mantuvo 5 minutos a B al 100 % Flujo: 20 ml/min

Método D:

Columna: Sunfire C18 (19 x 150 mm), partículas de 5 pm

Fase móvil A: acetato amónico 10 mM en agua

Fase móvil B: acetonitrilo

Gradiente: B al 30-75 % durante 12 minutos, después se mantuvo 5 minutos a B al 100 % Flujo: 20 ml/min

Método E:

Columna: Sunfire C18 (19 x 150 mm), partículas de 5 pm

Fase móvil A: acetato amónico 10 mM en agua

Fase móvil B: acetonitrilo

Gradiente: B al 20-60 % durante 20 minutos, después se mantuvo 5 minutos a B al 100 % Flujo: 15 ml/min

Método F:

Columna: Inertsil ODS (250 x 19) mm, partículas de 5 pm

Fase A: acetato amónico 10 mM en agua

Fase móvil B: acetonitrilo

Gradiente: B al 40-75 % durante 20 minutos, después se mantuvo 5 minutos a B al 100 %

Flujo: 17 ml/min

Método G:

Columna: YMC trart C18, 19 x 150 mm, partículas de 5 pm

Fase móvil A: acetato amónico 10 mM pH 4,5 con TFA

Fase móvil B: acetonitrilo

Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después se mantuvo 5 minutos a B al 100 %

Flujo: 20 ml/min

Preparación de Intermedios

Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-6-((triisopropilsilil)tio)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

Una solución agitada de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6R)-3-acetoxi-6-bromo-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1 -il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (350 mg, 0,670 mmol) en acetonitrilo seco (15 ml) se purgó durante 10 min con gas argón. Después, se añadió carbonato potásico (278 mg, 2,010 mmol) seguido de triisopropilsilanotiol (0,216 ml, 1,005 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 4 h y después se concentró a presión reducida. El residuo se extrajo con CH2Ch (3 x 30 ml), se lavó con agua (20 ml) y salmuera (20 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró. El residuo en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 20 % ^ 50 % en hexanos) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-6-((triisopropilsilil)tio)tetrahidro-2Hpiran-2-il)metilo (300 mg, 0,467 mmol, rendimiento del 69%) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,76 (s, 1 H), 7,56 - 7,37 (m, 2 H), 5,48 (d, J = 2,5 Hz, 1 H), 4,62 (d, J = 9,2 Hz, 1 H), 4,58 (dd, J = 10,4, 3,2 Hz, 1H), 4,26 -4,03 (m, 3 H), 3,99 - 3,89 (m, 1 H), 3,43 (s, 3 H), 2,08 (s, 3 H), 2,04 (s, 3 H), 1,36 - 1,35 (m, 3 H), 1,17 (d, J = 7,3 Hz, 18 H); CL/EM [M+H]+ = 632,2, k = 4,19 min (Método C).

Preparación de 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-2-((triisopropilsilil)tio)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de etilo

Una solución agitada de 2-(((2R,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-2-bromo-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de etilo (300 mg, 0,505 mmol) en acetonitrilo seco (15 ml), se purgó durante 10 min con gas argón. Después, se añadió carbonato potásico (209 mg, 1,514 mmol) seguido de triisopropilsilanotiol (0,163 ml, 0,757 mmol) y la reacción se agitó durante 4 h a ta. Después, la mezcla de reacción se concentró a presión reducida. El residuo se extrajo con CH2Ch (3 x 50 ml), se lavó con agua (30 ml) y salmuera (30 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró. El residuo en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 50% ^ 100% en hexanos) para proporcionar 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol -1-il)-2-((triisopropilsilil)tio)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de etilo (80 mg, 0,078 mmol, rendimiento del 16%) en forma de un líquido incoloro. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,85 (s, 1 H), 7,47 - 7,35 (m, 2 H), 5,51 (d, J = 2,5 Hz, 1 H), 4,78 - 4,62 (m, 2 H), 4,55 - 4,40 (m, 1 H), 4,19 -4,05 (m, 4 H), 4,03 - 3,82 (m, 3 H), 2,07 (s, 3 H), 2,04 (s, 3 H), 1,42 - 1,21 (m, 3 H), 1,20-1,06 (m, 18 H); CL/EM [M+H]+ = 704,2, k = 4,25 min (Método C).

Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-metoxi-6-((triisopropilsilil)tio)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

Una solución agitada de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6R)-3-acetoxi-6-bromo-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (400 mg, 0,823 mmol) en acetonitrilo seco (15 ml) se purgó con gas argón durante 10 min. Se añadió carbonato potásico (341 mg, 2,468 mmol) seguido de triisopropilsilanotiol (0,216 ml, 1,005 mmol) y la reacción se agitó durante 4 h a ta. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida. El residuo se extrajo con CH2Cl2 (3 x 30 ml), se lavó con agua (20 ml) y salmuera (20 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró. El residuo en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 20 % ^ 50 % en hexanos) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-metoxi-6-((triisopropilsilil)tio)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (70 mg, 0,108 mmol, rendimiento del 13 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,80 (s, 1 H), 7,60 - 7,47 (m, 2 H), 7,39 (d, J = 6,0 Hz, 1 H), 7,03 (d, J = 1,2 Hz, 1 H), 5,50 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 4,64 - 4,54 (m, 2 H), 4,19 - 4,06 (m, 3 H), 3,97 (d, J = 6,4 Hz, 1 H), 3,43 (s, 3 H), 2,08 (s, 3 H), 2,06 (s, 3 H), 1,39-1,21 (m, 21 H); [RMN con EtOAc como pico de residuo de disolvente]; CL/EM [M+H]+ = 596,2, tR = 4,29 min (Método C).

Preparación de (1S,5S,6R)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-7-oxa-3-azabicycio[4.1.0]heptano-3-carboxilato de (-)-terc-butilo

Etapa 1. Preparación (1S,5R,6R)-5-hidroxi-7-oxa-3-azabiciclo[4.1.0]heptano-3-carboxilato de terc-butilo

A una solución de W-Boc-3-hidroxi-1,2,3,6-tetrahidropiridina (500 mg, 2,51 mmol) en CH2O2 (25 ml), se le añadió bicarbonato sódico (211 mg, 2,51 mmol) seguido de mCPBA (928 mg, 3,76 mmol) en CH2O2 (3 ml) a 0 °C en una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 24 h. La mezcla de reacción se diluyó con CH2Ch (100 ml), se filtró a través de una capa de Celite y el filtrado se lavó con Na2SO3 saturado (2x50 ml), NaHCO3 saturado (2x50 ml) y NaCI saturado (25 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró y el residuo en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (acetato de etilo al 40% ^ 50% en hexanos) para producir (1S,5R,6R)-5-hidroxi-7-oxa-3-azabiciclo[4.1.0]heptano-3-carboxilato de tere-butilo (430 mg, 2,002 mmol, rendimiento del 80 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 4,01 (s a, 1 H), 3,92 - 3,44 (m, 5 H), 3,10 (dd, J = 12,8, 7,2 Hz, 1H), 1,29 (s, 9 H) (mezcla rotamérica).

Etapa 2. Preparación (1S,5S,6R)-5-azido-7-oxa-3-azabiciclo[4.1.0]heptano-3-carboxilato de tere-butilo

A una solución agitada de 5-hidroxi-7-oxa-3-azabiciclo[4.1.0]heptano-3-carboxilato de (1S,5R,6R)-tere-butilo (325 mg, 1,510 mmol) en THF (50 ml) se le añadió trifenilfosfina (792 mg, 3,02 mmol). La mezcla de reacción se enfrió 0 °C. Se añadieron DEAD (0,478 ml, 3,02 mmol) y DPPA (0,651 ml, 3,02 mmol) secuencialmente en una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 16 h. El disolvente se retiró a presión reducida y el residuo en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (acetato de etilo al 10 % ^ 15% en hexanos) para producir (1S,5S,6R)-5-azido-7-oxa-3-azabiciclo[4.1.0]heptano-3-carboxilato de tere-butilo (230 mg, 0,957 mmol, rendimiento del 64 %) en forma de un aceite de color amarillo pálido. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 54,09 - 3,82 (m, 2 H), 3,62 - 3,38 (m, 4 H), 3,17 (dd, J = 13,1,3,3 Hz, 1H), 1,40 (s, 9 H) (mezcla rotamérica).

Etapa 3. Preparación (1S,5S,6R)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-7-oxa-3-azabiciclo[4.1.0]heptano-3-carboxilato de tere-butilo

A una solución de 5-azido-7-oxa-3-azabiciclo[4.1.0]heptano-3-carboxilato de (1R,5R,6S)-tere-butilo (1,6 g, 6,66 mmol) en DMF (30 ml) y agua (7,50 ml), se le añadieron ascorbato sódico (1,319 g, 6,66 mmol), pentahidrato de sulfato de cobre (II) (1,496 g, 5,99 mmol) y 3-fluorofenilacetileno (3,08 ml, 26,6 mmol) secuencialmente a ta. La mezcla de reacción se desgasificó con N2 durante 5 min y se calentó a 85 °C durante 30 min. La mezcla se enfrió a ta, se diluyó con agua enfriada con hielo (100 ml) y se agitó durante 15 min para conseguir un sólido. El sólido se filtró, se suspendió en CH2Cl2 (100 ml), se filtró a través de un lecho de celite y se lavó con CH2Ch en exceso. El filtrado se secó sobre sulfato sódico y se concentró. El residuo se purificó por gel de sílice (acetato de etilo al 40 % ^ 80 % en hexanos) para proporcionar (1S,5S,6R)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-7-oxa-3-azabiciclo[4.1.0]heptano-3-carboxilato de tere-butilo (1,1 g, 3,03 mmol, rendimiento del 46 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,83 (s a, 1 H), 7,59 - 7,55 (m, 2 H), 7,42 - 7,38 (m, 1 H), 7,10 - 7,07 (m, 1 H), 5,18 - 5,06 (m, 1 H), 4,34 - 4,29 (m, 1 H), 3,93 - 3,45 (m, 5 H), 1,47 - 1,11 (m, 9 H) (mezcla rotamérica); CL/EM, [M+H]+ = 361,0, k = 2,01 min (Método E).

Etapa 4. Preparación (1S,5S,6R)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-7-oxa-3-azabiciclo[4.1.0]heptano-3-carboxilaton de (-)-tere-butilo

Se separó una mezcla racémica del compuesto A (1,1 g) de los anteriores mediante cromatografía quiral SFC preparativa usando las condiciones que se describen a continuación

Condiciones de HPLC quiral preparativa:

Columna preparativa: Chiralpak AD-H (250 x 30 mm), 5um

presión BPR: 10 MPa (100 bar)

Temperatura: 30 °C

Caudal: 120 g/min

Fase móvil: CO2/DEA al 0,2 % en MeOH (60/40)

Longitud de onda del 242 nm

detector:

Programa de inyección de pila

separación:

(continuación)

Inyección: 0,6 ml con ciclo temporal: 2,80 min

Preparación de 1,1 g / 40 ml de MeOH:THF (1:1), 27,5 mg/ml muestra:

El pico 1 ha tomado para las etapas posteriores

Condiciones de HPLC quiral analítica:

Columna analítica: Chiralpak AD-H (250 x 4,6 mm), 5um

presión BPR: 10 MPa (100 bar)

Temperatura: 30 °C

Caudal: 4 g/min

Fase móvil: CO2/DEA al 0,2 % en MeOH (50/50)

Longitud de onda del

detector: UV 200-400 nm

Pico 1 (deseado): 0,3 g: HPLC quiral fo = 2,45 min; [a]ü22 -72,0, (c = 0,1, MeOH).

Pico 2 (no deseado): 0,5 g: HPLC quiral tR = 3,07 min; [a]ü22 58,0, (c = 0,1, MeOH).

Preparación de 1-((1S,5S,6R)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-7-oxa-3-azabiciclo[4.1.0]heptan-3-il)etan-1-ona

Etapa 1. Preparación de (1S,5S,6R)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-7-oxa-3-azabiciclo[4.1.0]heptano A una solución agitada de (1S,5S,6R)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-7-oxa-3-azabiciclo[4.1.0]heptano-3-carboxilato de terc-butilo (200 mg, 0,555 mmol) en CH2CL2 (10 ml), se le añadieron gota a gota MS de 4 Á activados (0,4 g) y BF3-OEt2 (0,211 ml, 1,665 mmol) a 0 °C. La mezcla se agitó durante 15 min a 0 °C. Después, la mezcla de reacción se inactivó con MeOH (2 ml), se diluyó con CH2Ch (30 ml), se lavó con agua, NaHCO3 al 10 %, se secó sobre Na2SO4 y se concentró para dar (1S,5S,6R)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-7-oxa-3-azabiciclo[4.1.0]heptano (110 mg, 0,335 mmol, rendimiento del 60 %) en forma de un sólido de color blanco que se llevó a la siguiente etapa sin purificación adicional. CL/EM [M+H]+ = 261,2, tR = 0,86 min (Método D).

Etapa 2

A una solución agitada de (1S,5S,6R)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-7-oxa-3-azabiciclo[4.1.0]heptano (110 mg, 0,423 mmol) en CH2O2 (4 ml), se le añadieron trietilamina (0,177 ml, 1,268 mmol), anhídrido acético (0,060 ml, 0,634 mmol) y DMAP (5,16 mg, 0,042 mmol) secuencialmente a ta y la mezcla se agitó durante 16 h. La mezcla de reacción se extrajo con CH2Ch (3 x 30 ml), se lavó con agua y salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se concentró para dar 1-((1S,5S,6R)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-7-oxa-3-azabiciclo[4.1.0]heptan-3-il)etan-1-ona (100 mg, 0,32 mmol, rendimiento del 75 %) en forma de un líquido de color pardo que se llevó a la siguiente etapa sin purificación adicional. CL/EM [M+H]+ = 303,0, tR = 1,30 min (Método C).

Preparación de los productos finales

Ejemplo B1. Preparación de (3S,4R,5R)-3-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-(((2S,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-hidroxi-6-(hidroximetil)-3-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)tio)piperidin-4-ol

Etapa 1. Preparación de (3R,4R,5S)-3-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-3-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1 -il)tetrahidro-2H-piran-2-il)tio)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato de tere-butilo

A un solución agitada de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-6-((triisopropilsilil)tio)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (20 mg, 0,032 mmol) en acetonitrilo (2 ml), se le añadió (1S,5S,6R)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-7-oxa-3-azabiciclo[4.1.0]heptano-3-carboxilato de tere-butilo (11,41 mg, 0,032 mmol) en acetonitrilo (2 ml). La solución se purgó con argón durante 10 min. Se añadió TBAF (0,032 ml, 0,032 mmol) gota a gota y la mezcla se agitó durante 10 min a ta en una atmósfera de argón. El disolvente se retiró a presión reducida para proporcionar (3R,4R,5S)-3-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-3-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)tio)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato de tere-butilo (30 mg, 0,020 mmol, rendimiento del 65 %) que se llevó a la siguiente etapa sin purificación adicional. CL/EM [M+H]+ = 836,0, Ír = 3,47 min (Método C).

Etapa 2

A una solución de (3R,4R,5S)-3-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-3-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)tio)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato de tere-butilo (30 mg, 0,036 mmol) en CH2O2 (5 ml), se le añadió TFA (2,77 |jl, 0,036 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 1 h. Después, el disolvente se retiró a presión reducida. El residuo se disolvió en metanol (2 ml) y se añadió posteriormente metóxido sódico (0,194 mg, 3,59 jmol). La mezcla se agitó durante 30 min a ta. La mezcla de reacción se acidificó con AcOH (0,1 ml) y se concentró y se purificó por HPLC preparativa (Método A) para proporcionar (3S,4R,5R)-3-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-(((2S,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-hidroxi-6-(hidroximetil)-3-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)tio)piperidin-4-ol (3 mg, 4,47 jmol, rendimiento del 13%) (Ejemplo B1). RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 58,66 (s, 1 H), 8,53 (s, 1 H), 7,70 - 7,60 (m, 4 H), 7,52 -7,46 (m, 1 H), 7,15 - 7,10 (m, 1 H), 4,94 - 4,80 (m, 3 H), 4,19 - 4,12 (m, 3 H), 3,89 - 3,76 (m, 6 H), 3,45 - 3,32 (m, 2 H), 3,32 (s, 3 H, oscurecido con pico de disolvente); CL/EM [M+H]+ = 652,3, ír = 1,63 min (Método A). hGal3 CI50 = 0,067 jM .

Ejemplo B2. Preparación de (3S,4R,5R)-3-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-(((2S,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-hidroxi-6-(hidroximetil)-3-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)tio)piperidin-4-ol

Etapa 1. Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-1-acetil-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1 -il)-4-hidroxipiperidin-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenM)-1H-1,2,3-triazol-1 -il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo

A una solución agitada de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorophenyi)-1H-1,2,3-triazol-1 -il)-6-((triisopropilsilil)tio)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (30 mg, 0,047 mmol) en acetonitrilo (2 ml), se le añadió 1-((1S,5S,6R)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-7-oxa-3-azabiciclo[4.1.0]heptan-3-il)etan-1-ona (14,36 mg, 0,047 mmol) en acetonitrilo (2 ml). La solución se purgó con argón durante 10 min. Después, se añadió TBAF (0,032 ml, 0,032 mmol) gota a gota y la mezcla se agitó durante 10 min a ta en una atmósfera de argón. El disolvente se retiró a presión reducida y el producto se purificó por HPLC preparativa (Método C) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-1-acetil-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxipiperidin-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (8 mg, 10,29 jmol, rendimiento del 22 %) en forma de un sólido de color blanco. CL/EM, [M+H]+ = 778,2, fo = 2,68 min (Método C).

Etapa 2

A una solución agitada de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-1-acetil-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxipiperidin-3-il)tio)-5-metoxi-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-2- il)metilo (7 mg, 9,00 jmol) en metanol (2 ml) se le añadió metóxido sódico (25 % en peso en metanol) (1,945 mg, 9,00 jmol) y la mezcla se agitó durante 30 min a ta. La mezcla de reacción se acidificó con AcOH (0,1 ml), se concentró y se purificó por HPLC preparativa (Método A) para proporcionar ((3S,4R,5R)-3-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-(((2S,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-hidroxi-6-(hidroximetil)-3-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)tio)piperidin-4-ol (2,3 mg, 3,32 jmol, rendimiento del 37%) (Ejemplo B2). RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 5 8,75, 8,70* (s, 1 H), 8,52 (s, 1 H), 7,77 - 7,63 (m, 4 H), 7,51 - 7,45 (m, 1 H), 7,13 - 7,07 (m, 1 H), 4,96 - 4,94 (m, 1 H), 4,77 (d, J = 9,2 Hz, 1 H), 4,58 - 4,48 (m, 2 H), 4,26 - 4,17 (m, 1 H), 4,15 - 4,05 (m, 2 H), 3,86 -3,77 (m, 3 H), 3,76 - 3,71 (m, 1 H), 3,45 - 3,37 (m, 3 H), 3,32 (s, 3 H, oscurecido con pico de disolvente), 2,31,2,23* (s, 3H) (*Mezcla rotamérica); CL/EM [M+H]+ = 694,3, tR = 1,71 min (Método A). hGal3 CI50 = 0,037 |jM.

Ejemplo B3. Preparación de 1-((3S,4R,5R)-3-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-(((2S,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-hidroxi-6-(hidroximetil)-3-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)tio)-4-hidroxipiperidin-1-il)etan-1-ona

Etapa 1. Preparación de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-1-acetil-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1 -il)-4-hidroxipiperidin-3-il)tio)-4-(4-(3-fluorofenM)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metMo

A una solución agitada de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-metoxi-6-((triisopropilsilil)tio)tetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (20 mg, 0,034 mmol) en acetonitrilo (2 ml) se le añadió 1-((1S,5S,6R)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-7-oxa-3-azabiciclo[4.1.0]heptan-3-il)etan-1-ona (10,15 mg, 0,034 mmol) en acetonitrilo (2 ml). La solución se purgó con argón durante 10 min. Después, se añadió TBAF (0,034 ml, 0,034 mmol) gota a gota y la mezcla se agitó durante 10 min a ta en una atmósfera de argón. El disolvente se retiró a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC prep. (Método B) para proporcionar acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-1-acetil-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxipiperidin-3-il)tio)-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (7 mg, 9,44 pmol, rendimiento del 28%) en forma de un sólido de color blanco. CL/EM [M+H]+ = 742,0, fo = 2,40 min (Método C).

Etapa 2

A una solución agitada de acetato de ((2R,3R,4S,5R,6S)-3-acetoxi-6-(((3R,4R,5S)-1-acetil-5-(4-(3-fluorophenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxipiperidin-3-il)tio)-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-metoxitetrahidro-2H-piran-2-il)metilo (7 mg, 9,44 pmol) en metanol (2 ml) se le añadió metóxido sódico (25 % en peso en metanol) (2,0 mg, 9,44 pmol) y la mezcla se agitó durante 30 min a ta. La mezcla de reacción se acidificó con AcOH (0,1 ml), se concentró y se purificó por HPLC preparativa (Método A) para proporcionar 1-((3S,4R,5R)-3-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-(((2S,3R,4S,5R,6R)-4-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-5-hidroxi-6-(hidroximetil)-3-metoxitetrahidro-2H-piran-2- il)tio)-4-hidroxipiperidin-1-il)etan-1-ona (2,76 mg, 4,11 pmol, rendimiento del 44 %) (Ejemplo B3). RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 58,58, 8,53* (s, 1 H), 8,39 (s, 1 H), 7,60 - 7,39 (m, 4 H), 7,38 - 7,01 (m, 2 H), 7,01 - 6,95 (m, 2 H), 4,83 - 4,78 (m, 2 H), 4,65 - 4,47 (m, 1 H), 4,41 - 4,01 (m, 3 H), 3,99 - 3,93 (m, 2 H), 3,77 - 3,62 (m, 4 H), 3,38 - 3,03 (m, 2 H), 3,32, 3,25* (s, 3 H, oscurecido con pico de disolvente), 2,19, 2,11* (s, 3H) (*Mezcla rotamérica); CL/EM [m H]+ = 658,0, tR = 1,86 min (Método C). hGal3 CI50 = 0,054 pM

Ejemplo B4. Preparación de ácido 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-2-(((3R,4R,5S)-1-acetil-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxipiperidin-3-il)tio)-5-hidroxi-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3- il)oxi)acético

Etapa 1. Preparación de 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-2-(((3R,4R,5S)-1-acetil-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxipiperidin-3-il)tio)-4-(4-(’3,4,5-trifluorofenil)-lH-1,2,3-triazol-1 -il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de etilo

A una solución agitada de 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-2-((triisopropiilsilil)tio)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de etilo (40 mg, 0,057 mmol) en acetonitrilo (2 ml), se le añadió ((1S,5S,6R)-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-7-oxa-3-azabiciclo[4.1.0]heptan-3-il)etan-1-ona (17,18 mg, 0,057 mmol) en acetonitrilo (2 ml). La solución se purgó con argón durante 10 min. Después, se añadió TBAF (0,057 ml, 0,057 mmol) gota a gota y la mezcla se agitó durante 10 min a ta en una atmósfera de argón. El disolvente se retiró a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC preparativa (Método D) para proporcionar 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-2-(((3R,4R,5S)-1-acetil-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxipiperidin-3-il)tio)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de etilo (12 mg, 0,013 mmol, rendimiento del 23 %) en forma de un sólido de color blanco. CL/EM [M+H]+ = 850,2, fo = 2,82 min (Método C).

Etapa 2

A una solución agitada de 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-5-acetoxi-6-(acetoximetil)-2-(((3R,4R,5S)-1-acetil-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxipiperidin-3-il)tio)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazoí-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acetato de etilo (11 mg, 0,013 mmol) en THF (2 ml), se le añadieron agua (0,500 ml) y LiOH (0,930 mg, 0,039 mmol) a ta y la mezcla se agitó durante 1 h. Después, el disolvente se retiró a presión reducida y el residuo se purificó por HPLC preparativa (Método E) para proporcionar ácido 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-2-(((3R,4R,5S)-1-acetil-5-(4-(3-fluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1-il)-4-hidroxipiperidin-3-il)tio)-5-hidroxi-6-(hidroximetil)-4-(4-(3,4,5-trifluorofenil)-1H-1,2,3-triazol-1 -il)tetrahidro-2H-piran-3-il)oxi)acético (2,3 mg, 3,09 pmol, rendimiento del 24 %) (Ejemplo B4). RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 58,69, 8,65* (s, 1H), 8,53, 8,52* (s, 111). 7,69 - 7,60 (m, 4 H), 7,50 - 7,43 (m, 1 H), 7,13 -7,06 (m, 1 H), 5,15 - 4,94 (m, 2 H), 4,95 (d, J = 9,2 Hz, 1 H), 4,59 - 4,42 (m, 5 H), 4,17 - 4,06 (m, 3 H), 3,93 - 3,74 (m, 4 H), 3,50 - 3,44 (m, 1 H), 2,30, 2,23* (s, 3 H) (*Mezcla rotamérica); CL/EM [M-H]+ = 736,0, tR = 1,11 min (Método C). hGal3 CI50 = 0,032 mM.

Será evidente para un experto en la materia que la presente descripción no se limita a los ejemplos ilustrativos anteriores.

Por tanto, los ejemplos deben considerarse en todos los aspectos como ilustrativos y no restrictivos, haciéndose referencia a las reivindicaciones adjuntas, en lugar de a los ejemplos anteriores.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de fórmula (I)

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:

A es O, NH o N(COCHa);

R1 es (R4)CONH- o

R2 es alquilo, (CO2(R5))alquilo o (CON(R6)(R7))alquilo;

R5 es hidrógeno o alquilo;

R6 es hidrógeno, alquilo, alquilcarbonilo o fenilo;

R7 es hidrógeno o alquilo;

o (R6)(R7)N tomados juntos es azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, morfolinilo o dióxido de tiomorfolino, y está sustituido con 0-3 sustituyentes seleccionados entre halo, alquilo, hidroxi y alcoxi;

2. Un compuesto de la reivindicación 1, en donde el compuesto es de Fórmula (Ia):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

3. Un compuesto de la reivindicación 1 o de la reivindicación 2 en donde R1 es

4. Un compuesto de la reivindicación 1 o de la reivindicación 2 en donde R2 es alquilo.

5. Un compuesto de la reivindicación 1 o de la reivindicación 2 en donde R2 es (CO2(R5))alquilo o (CON(R6)(R7))alquilo.

6. Un compuesto de la reivindicación 1 o de la reivindicación 2 en donde R3 es Ar1 y está sustituido con 0-3 sustituyentes seleccionados entre ciano, halo, alquilo, haloalquilo, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi, CO2R5 y (R6)(R7)N.

7. Un compuesto de la reivindicación 1 o de la reivindicación 2 en donde R3 es cicloalquilo o tetrahidropiranilo y está sustituido con 0-3 sustituyentes seleccionados entre ciano, halo, alquilo, haloalquilo, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi, CO2R5 y (R6)(R7)N.

8. Un compuesto de la reivindicación 1 o de la reivindicación 2 en donde R4 es Ar2 y está sustituido con 0-5 sustituyentes seleccionados entre ciano, halo, alquilo, haloalquilo, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi y CO2R5

9. Un compuesto de la reivindicación 1 o de la reivindicación 2 en donde R4 es alquilo, cicloalquilo o biciclo[2.2.1-2]alquilo y está sustituido con 0-5 sustituyentes seleccionados entre ciano, halo, alquilo, haloalquilo, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi y CO2R5.

10. Un compuesto de la reivindicación 1 o de la reivindicación 2 en donde Ar1 es fenilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo o pirazinilo, y está sustituido con 0-3 sustituyentes seleccionados entre ciano, halo, alquilo, haloalquilo, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi, CO2R5 y (R6)(R7)N.

11. Un compuesto de la reivindicación 1 o de la reivindicación 2 en donde Ar2 es fenilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo o pirazinilo, y está sustituido con 0-5 sustituyentes seleccionados entre ciano, halo, alquilo, haloalquilo, hidroxi, alcoxi, haloalcoxi y CO2R5.

12. Una composición que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

13. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en un método para el tratamiento de la fibrosis de órganos (incluyendo hígado, riñón, pulmón, corazón y piel), enfermedades y afecciones hepáticas (incluyendo hepatitis aguda, hepatitis crónica, fibrosis de hígado, cirrosis hepática, hipertensión portal, fallo regenerativo, esteatohepatitis no alcohólica (EHNA), hipofunción hepática y trastorno de la circulación sanguínea hepática), enfermedades proliferativas celulares, cánceres y afecciones (incluidos tumor sólido, metástasis tumoral sólida, fibroma vascular, mieloma, mieloma múltiple, sarcoma de Kaposi, leucemia, leucemia linfocítica crónica (LLC)) y metástasis invasiva de células cancerosas), enfermedades y afecciones inflamatorias (incluyendo psoriasis, nefropatía y neumonía), enfermedades y afecciones del tracto gastrointestinal (incluido síndrome del intestino irritable (SII), enfermedad inflamatoria intestinal (EII) y secreción pancreática anómala), enfermedades y afecciones renales, enfermedades y afecciones asociadas a las vías urinarias (incluyendo hiperplasia prostática benigna o síntomas asociados a la enfermedad neuropática de la vejiga, tumor de la médula espinal, hernia de disco intervertebral, estenosis del conducto raquídeo y síntomas derivados de la diabetes), enfermedades y afecciones del tracto urinario inferior (incluida la obstrucción del tracto urinario inferior), enfermedades y afecciones inflamatorias del tracto urinario inferior (incluyendo disuria y polaquiuria), enfermedades y afecciones pancreáticas, enfermedades y afecciones asociadas a la angiogénesis anómala (incluyendo obstrucción arterial), esclerodermia, enfermedades y afecciones asociadas al cerebro (incluyendo infarto cerebral y hemorragia cerebral), dolor neuropático y neuropatía periférica, enfermedades y afecciones oculares (incluyendo degeneración macular senil (DMS), retinopatía diabética, vitreorretinopatía proliferativa (VRP), penfigoide cicatricial y cicatrización de cirugía de glaucoma con filtración), que comprende administrar a un paciente una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

14. El compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 13 donde la enfermedad o la afección son fibrosis renal, fibrosis pulmonar, fibrosis hepática, fibrosis arterial o esclerosis generalizada.

15. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en terapia.