ES2908477T3 - Inhibidores de desmetilasas de histonas - Google Patents

Abstract

Un compuesto que tiene la estructura de fórmula II **(Ver fórmula)** en donde un compuesto de fórmula II es opcionalmente una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y en donde R2 es halógeno o CF3; R3 es hidrógeno, halógeno, -OH, -OR6, -N(R6)2, o alquilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, carbociclilalquilo, heterociclilalquilo, aralquilo o heteroarilalquilo opcionalmente sustituido, en donde cada R6 es independientemente hidrógeno, alquilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, carbociclilalquilo, heterociclilalquilo, aralquilo o heteroarilalquilo; R4 es hidrógeno, halógeno, -OH, -OR6, -N(R6)2, o alquilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, carbociclilalquilo, heterociclilalquilo, aralquilo o heteroarilalquilo opcionalmente sustituido; y R5 es hidrógeno, metilo, etilo, isopropilo, t-butilo, CHF2, CH2F, CF3, CH2OH, CHCH3OH, o C(CH3)2OH.

Description

DESCRIPCIÓN

Inhibidores de desmetilasas de histonas

Solicitudes relacionadas

Esta solicitud reivindica el beneficio prioritario de la solicitud de EE. UU. n.° 62/324,813 presentada el 19 de abril de 2016.

Campo

Generalmente, las presentes modalidades se refieren a compuestos y composiciones farmacéuticas útiles para modular la actividad de las desmetilasas de histonas.

Antecedentes

Existe una necesidad en la técnica de un tratamiento eficaz del cáncer, enfermedades neoplásicas u otras enfermedades asociadas con la actividad de la desmetilasa de histona. Los documentos WO 2016/044342 A1 y US 2015/291529 A1 se refieren a compuestos de la técnica anterior para modular la actividad de desmetilasas de histonas.

Resumen

La invención se expone en el conjunto de reivindicaciones adjuntas.

Descripción detallada

Debe entenderse que esta invención no se limita a la metodología, los protocolos y los reactivos particulares, etc., descritos en el presente documento y, como tales, pueden variar. La terminología usada en el presente documento solo tiene el propósito de describir modalidades particulares, y no pretende limitar el alcance de la presente invención, que se define únicamente por las reivindicaciones. Las referencias a métodos de tratamiento en los párrafos subsecuentes de esta descripción deben interpretarse como referencias a los compuestos, composiciones farmacéuticas y medicamentos de la presente invención para uso en un método para el tratamiento del cuerpo humano mediante terapia.

Como se usa en la presente descripción y en las reivindicaciones, las formas singulares "un", "un" y "el" incluyen la referencia en plural a menos que el contexto, claramente, lo indique de cualquier otra manera. A lo largo de esta especificación, a menos que se indique de cualquier otra manera, "comprender", "comprende" y "que comprende" se usan de forma inclusiva y no exclusiva, de modo que un número entero o grupo de números enteros declarados puede incluir uno o más números enteros o grupos de números enteros no declarados. El término "o" es inclusivo a menos que se modifique, por ejemplo, por "cualquiera". Por tanto, a menos que el contexto lo indique de cualquier otra manera, la palabra "o" significa cualquier miembro de una lista en particular y también incluye cualquier combinación de miembros de esa lista. Aparte de los ejemplos operativos, o donde se indique de cualquier otra manera, todos los números que expresan cantidades de ingredientes o condiciones de reacción usados en la presente descripción deben entenderse modificados en todos los casos por el término "aproximadamente".

Los encabezados se proporcionan solo por conveniencia y no deben interpretarse como una limitación de la invención de ninguna manera. A menos que se defina de cualquier otra manera, todos los términos técnicos y científicos usados en la presente descripción tienen el mismo significado que los entendidos comúnmente por un experto en la técnica. La terminología usada en la presente descripción tiene solo el propósito de describir modalidades particulares, y no pretende limitar el alcance de la presente invención, que se define únicamente por las reivindicaciones. A menos que se especifique de cualquier otra manera, la referencia a un compuesto incluye una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En otras palabras, el término "compuesto" abarca las sales farmacéuticamente aceptables de ese compuesto a menos que el contexto lo especifique de cualquier otra manera. Para que la presente divulgación pueda entenderse más fácilmente, se definen determinados términos. Se establecen definiciones adicionales a lo largo de la descripción detallada.

Definiciones

"Opcional" u "opcionalmente" significa que un evento o circunstancia descrito subsecuentemente puede o no ocurrir y que la descripción incluye los casos en los que el evento o la circunstancia ocurre y los casos en los que no ocurre. Por ejemplo, "arilo opcionalmente sustituido" significa que el grupo arilo puede estar o no sustituido y que la descripción incluye tanto radicales arilos sustituidos como radicales arilos que no tienen sustitución. En una lista de restos, radicales o sustituyentes, el uso de "opcionalmente sustituido" al principio de la lista indica que todos los miembros de la lista están opcionalmente sustituidos. En general, a menos que el contexto o el lenguaje lo indique de cualquier otra manera, los grupos químicos o radicales descritos en la presente descripción están opcionalmente sustituidos.

Generalmente, "alquilo" se refiere a una cadena de hidrocarburo lineal o ramificada que consiste únicamente de átomos de carbono e hidrógeno, que no contiene insaturación, que tiene generalmente de uno a quince átomos de carbono (por ejemplo, alquilo C¹-C¹⁵). En determinadas modalidades, un alquilo comprende de uno a ocho átomos de carbono (por ejemplo, alquilo C¹-C⁸). En otras modalidades, un alquilo comprende de uno a cinco átomos de carbono (por ejemplo, alquilo C¹-C⁵). En otras modalidades, un alquilo comprende un átomo de carbono (por ejemplo, alquilo C¹) (por ejemplo, metilo) o dos carbonos (por ejemplo, alquilo C²) (por ejemplo, etilo). En otras modalidades, un alquilo comprende de cinco a quince átomos de carbono (por ejemplo, alquilo C⁵-C¹⁵). En otras modalidades, un alquilo comprende de cinco a ocho átomos de carbono (por ejemplo, alquilo C⁵-C⁸). En otras modalidades, el grupo alquilo se selecciona de metilo, etilo, 1 -propilo (n-propilo), 1 -metiletilo (/so-propilo), 1 -butilo (nbutilo), 1 -metilpropilo (sec-butilo), 2-metilpropilo (/so-butilo), 1,1-dimetiletilo (ferc-butilo), 1 -pentilo (n-pentilo). El alquilo está típicamente unido al resto de la molécula por un enlace simple. A menos que se declare de cualquier otra manera, un grupo alquilo está opcionalmente sustituido con al menos un sustituyente, tal como halo, ciano, nitro, oxo, tioxo, imino, oximo, trimetilsilanilo, -ORa, -SRa, -OC(O)-Ra, -N(Ra)² , -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)N(Ra)², -N(Ra)C(O)ORa, -OC(O)-N(Ra)² , -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)S(O)tRa, -S(O)tORa, -S(O)tRa o -S(O)tN(Ra)², donde t es 1 o 2, donde cada Ra es independientemente hidrógeno o alquilo opcionalmente sustituido, fluoroalquilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, arilo, aralquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo, y en donde Ra está a sí mismo opcionalmente sustituido como se describe más arriba. Por ejemplo, en algunas modalidades, Ra está sustituido con halógeno, hidroxi, metoxi o trifluorometilo. Estos y otros sustituyentes son conocidos en la técnica. Véanse, por ejemplo, los documentos WO 2014089364, WO 2014100463, WO 2014100818, WO 2014164708, WO 2014151945, WO 2014151106, WO 2015058160, WO 2015089192, WO 2015168466, WO 2015200709, WO 2015200843, WO 2016004105, WO 2016003917, WO 2016037005, WO 2016044342, WO 2016044138, WO 2016044429, WO 2016168682, WO 2016172618.

"Alcoxi" se refiere a un radical enlazado a través de un átomo de oxígeno de la fórmula -O-alquilo, donde el alquilo es una cadena de alquilo como se definió más arriba; y a menos que se declare de cualquier otra manera, un resto que comprende un grupo alcoxi está opcionalmente sustituido como se describe para el alquilo.

"Alquenilo" se refiere a un grupo radical de cadena de hidrocarburo lineal o ramificada que consiste únicamente en átomos de carbono e hidrógeno, que contiene al menos un enlace doble carbono-carbono y que tiene de dos a doce átomos de carbono. En determinadas modalidades, un alquenilo comprende de dos a ocho átomos de carbono. En otras modalidades, un alquenilo comprende de dos a cuatro átomos de carbono. El alquenilo está unido al resto de la molécula por un enlace simple, por ejemplo, etenilo (es decir, vinilo), prop-1-enilo (es decir, alilo), but-1-enilo, pent-1-enilo, penta-1,4-dienilo y similares. A menos que se declare específicamente de cualquier otra manera en la especificación, un grupo alquenilo está opcionalmente sustituido como se describe para alquilo.

"Alquinilo" se refiere a un grupo radical de cadena de hidrocarburo lineal o ramificada que consiste únicamente en átomos de carbono e hidrógeno, que contiene al menos un enlace triple carbono-carbono, que tiene de dos a doce átomos de carbono. En determinadas modalidades, un alquinilo comprende de dos a ocho átomos de carbono. En otras modalidades, un alquinilo tiene de dos a cuatro átomos de carbono. El alquinilo está unido al resto de la molécula por un enlace simple, por ejemplo, etinilo, propinilo, butinilo, pentinilo, hexinilo y similares. A menos que se declare de cualquier otra manera, un grupo alquinilo está opcionalmente sustituido como se describe para alquilo.

"Alquileno", "cadena de alquileno", “cadena de alquilo” o “conector de alquilo” se refiere a una cadena de hidrocarburo divalente lineal o ramificada que conecta el resto de la molécula a un grupo radical, que consiste únicamente de carbono e hidrógeno, que no contiene insaturación y que tiene de uno a doce átomos de carbono, por ejemplo, metileno, etileno, propileno, n-butileno y similares. La referencia a alquilo puede referirse a dichas cadenas o conectores, como lo indica el contexto. De manera similar, "cadena de alquinileno" se refiere a una cadena de hidrocarburo divalente lineal o ramificada que conecta el resto de la molécula a un grupo radical, que consiste únicamente de carbono e hidrógeno, que contiene al menos un enlace triple carbono-carbono, y que tiene de dos a doce átomos de carbono. Estas cadenas hidrocarbonadas están opcionalmente sustituidas como se describe para alquilo.

"Arilo" se refiere a un sistema de anillo de hidrocarburo aromático monocíclico o multicíclico que contiene un sistema de electrones n deslocalizado (4n+2) de acuerdo con la teoría de Hückel. El arilo contiene solo hidrógeno y carbono, generalmente de cinco a dieciocho átomos de carbono, donde al menos uno de los anillos en el sistema de anillos está completamente insaturado. Los arilos incluyen benceno, fluoreno, indano, indeno, tetralina y naftaleno. A menos que se declare de cualquier otra manera, el término "arilo" o el prefijo "ar-" (tal como en "aralquilo") incluye arilos opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente de alquilo, alquenilo, alquinilo, halo, fluoroalquilo, ciano, nitro, arilo opcionalmente sustituido, aralquilo opcionalmente sustituido, aralquenilo opcionalmente sustituido, aralquinilo opcionalmente sustituido, carbociclilo opcionalmente sustituido, carbociclilalquilo opcionalmente sustituido, heterociclilo opcionalmente sustituido, heterociclilalquilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, heteroarilalquilo opcionalmente sustituido -Rb-ORa, -Rb-OC(O)-Ra, -Rb-OC(O)-ORa, -Rb-OC(O)-N(Ra)2, -Rb-N(Ra)2, -Rb-C(O)Ra, -Rb-C(O)ORa, -RLC(O)N(Ra)2, -RbO-Rc-C(O)N(Ra)2, -RbN(Ra)C(O)ORa, -Rb-N(Ra)C(O)Ra, -Rb-N(Ra)S(O)tRa, -Rb-S(O)tORa, -Rb-S(O)tRa, o -Rb-S(O)tN(R% donde t es 1 o 2, donde cada Ra es independientemente hidrógeno, alquilo, fluoroalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, arilo (opcionalmente sustituido con uno o más grupos halo), aralquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo, cada Rb es independientemente un enlace directo o una cadena de alquileno o alquenileno lineal o ramificada, y RC es una cadena de alquilo o alquenileno lineal o ramificada cadena, y donde cada uno de los sustituyentes más arriba está opcionalmente sustituido a menos que se indique de cualquier otra manera. Los sustituyentes adicionales son como se describe para alquilo.

"Aralquilo" se refiere a la fórmula -Rc-arilo donde Rc es un alquilo o una cadena de alquilo (por ejemplo, un conector de alquilo) como se definió más arriba, por ejemplo, metileno, etileno y similares. La parte de la cadena de alquilo del aralquilo está opcionalmente sustituida como se describe más arriba, por alquilo. La parte arilo del radical aralquilo está opcionalmente sustituida, como se describe para un grupo arilo.

"Aralquenilo" se refiere a un grupo con la fórmula -Rd-arilo donde Rd es una cadena de alquenileno como se definió más arriba. La parte arilo del radical aralquenilo está opcionalmente sustituida como se describe más arriba, por un grupo arilo. La parte de la cadena de alquenileno del radical aralquenilo está opcionalmente sustituida como se definió más arriba, por un grupo alquenileno.

"Aralquinilo" se refiere a un radical de la fórmula -Re-arilo, donde Re es una cadena de alquinileno como se definió más arriba. La parte arilo del radical aralquinilo está opcionalmente sustituida como se describe más arriba, por un grupo arilo. La parte de la cadena de alquinileno del radical aralquinilo está opcionalmente sustituida como se definió más arriba, por una cadena de alquinileno.

"Aralcoxi" se refiere a un grupo enlazado a través de un átomo de oxígeno de la fórmula -O-Rc-arilo donde Rc es una cadena de alquilo como se definió más arriba, por ejemplo, metileno, etileno y similares. La parte de la cadena de alquilo del aralquilo está opcionalmente sustituida como se describe más arriba, por una cadena de alquilo. La parte arilo del radical aralquilo está opcionalmente sustituida como se describe más arriba para un grupo arilo.

"Carbociclilo" se refiere a un grupo de hidrocarburo no aromático monocíclico, bicíclico o policíclico estable (saturado) que consiste únicamente en átomos de carbono e hidrógeno, que incluye generalmente, sistemas de anillos fusionados o puenteados, que tienen de tres a quince átomos de carbono. En determinadas modalidades, un carbociclilo comprende de tres a diez átomos de carbono. En otras modalidades, un carbociclilo comprende de tres a siete átomos de carbono. El carbociclilo está unido al resto de la molécula por enlace(s) simple(s). Un grupo carbociclilo puede estar completamente saturado o parcialmente saturado. Un grupo carbociclilo completamente saturado también puede referirse a un "cicloalquilo". Los ejemplos de cicloalquilos monocíclicos incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo y ciclooctilo. Un carbociclilo insaturado también puede referirse también a un "cicloalquenilo". Los ejemplos de cicloalquenilos monocíclicos incluyen ciclopentenilo, ciclohexenilo, cicloheptenilo y ciclooctenilo. Los carbociclilos policíclicos incluyen, por ejemplo, adamantilo, norbornilo (es decir, biciclo[2.2.1]heptanilo), norbornenilo, decalinilo, 7,7-dimetil-biciclo[2.2.1]heptanilo y similares. A menos que se declare de cualquier otra manera, el término "carbociclilo" incluye carbociclilos que están opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente y como se describe más arriba.

"Carbociclilalquilo" se refiere a un grupo de la fórmula -Rc-carbociclilo, en donde RC es una cadena de alquilo, opcionalmente sustituida, como se describe más arriba. De manera similar, "carbociclilalquino" se refiere a un grupo de la fórmula -Rc-carbociclilo, donde Rc es una cadena de alquinileno, opcionalmente sustituida, como se definió más arriba. En algunas modalidades, el grupo carbociclilo es un grupo cicloalquilo, en el que la parte de la cadena de alquinileno del carbociclilalquinilo está opcionalmente sustituida como se definió más arriba, por una cadena de alquilo.

"Carbociclilalcoxi" se refiere a un radical enlazado a través de un átomo de oxígeno de la fórmula -O-Rc-carbociclilo donde Rc es una cadena de alquilo, opcionalmente sustituido, como se definió más arriba para alquilo.

Como se usa en la presente descripción, "bioisóstero de ácido carboxílico" se refiere a un grupo o resto funcional que exhibe propiedades físicas, biológicas y/o químicas similares a un resto de ácido carboxílico. Los ejemplos de bioisósteros de ácido carboxílico incluyen, pero no se limitan a,

y similares.

"Halo" o "halógeno" se refiere a los sustituyentes bromo, cloro, flúor o yodo.

"Fluoroalquilo" se refiere a un radical alquilo, como se definió más arriba, que está sustituido con uno o más radicales flúor como se definió más arriba, por ejemplo, trifluorometilo, difluorometilo, fluorometilo, 2,2,2-trifluoroetilo, 1-fluorometil-2-fluoroetilo y similares. La parte alquilo del radical fluoroalquilo puede estar opcionalmente sustituida como se definió más arriba para alquilo.

"Heterociclilo" se refiere a un radical de anillo no aromático estable de 3 a 18 miembros que comprende de dos a doce átomos de carbono y de uno a seis heteroátomos seleccionados de nitrógeno, oxígeno y azufre. A menos que se declare de cualquier otra manera específicamente en la especificación, el radical heterociclilo es un sistema de anillos monocíclicos, bicíclicos, tricíclicos o tetracíclicos, que puede incluir sistemas de anillos fusionados o puenteados. Los heteroátomos en el radical heterociclilo pueden estar opcionalmente oxidados. Uno o más átomos de nitrógeno, si están presentes, están opcionalmente cuaternizados. El radical heterociclilo está parcial o totalmente saturado. El heterociclilo puede estar unido al resto de la molécula a través de cualquier átomo del(de los) anillo(s). Los ejemplos de dichos radicales heterociclilos incluyen, pero no se limitan a, azocanilo, cromenilo, cinnolinilo, dioxolanilo, tienil[1,3]ditianilo, decahidroquinolilo, decahidroisoquinolilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, isotiazolidinilo, isoxazolidinilo, morfolinilo, octahidroindolilo, octahidroisoindolilo, 2-oxopiperazinilo, 2-oxo-piperidinilo, 2-oxopirrolidinilo, oxazolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-piperidonilo, pirrolidinilo, pirazolidinilo, quinuclidinilo, tiazolidinilo, tetrahidrofuranilo, tritianilo, tetrahidropiranilo, tiocanilo, tiomorfolinilo, tiamorfolinilo, 1-oxo-tiomorfolinilo y 1,1-dioxo-tiomorfolinilo. A menos que se declare de cualquier otra manera, el término "heterociclilo" incluye un grupo heterociclilo como se definió más arriba que está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes como se describe en la presente descripción.

"W-heterociclilo" o "heterociclilo unido a N" se refiere a un radical heterociclilo como se definió más arriba que contiene al menos un nitrógeno y donde el punto de unión del radical heterociclilo al resto de la molécula es a través de un átomo de nitrógeno en el radical heterociclilo. Un radical W-heterociclilo está opcionalmente sustituido como se describe más arriba, por los radicales heterociclilos. Los ejemplos de dichos radicales W-heterociclilos incluyen, pero no se limitan a, 1 -morfolinilo, 1 -piperidinilo, 1 -piperazinilo, 1 -pirrolidinilo, pirazolidinilo, imidazolinilo e imidazolidinilo. "C-heterociclilo" o "heterociclilo unido a C" se refiere a un radical heterociclilo como se definió más arriba que contiene al menos un heteroátomo y donde el punto de unión del radical heterociclilo al resto de la molécula es a través de un átomo de carbono en el radical heterociclilo. Un radical C-heterociclilo está opcionalmente sustituido como se describe más arriba, por los radicales heterociclilos. Los ejemplos de dichos radicales C-heterociclilos incluyen, pero no se limitan a, 2-morfolinilo, 2- o 3- o 4-piperidinilo, 2-piperazinilo, 2- o 3-pirrolidinilo y similares. "Heterociclilalquilo" se refiere a un radical de la fórmula -Rc-heterociclilo donde Rc es una cadena de alquileno como se definió más arriba. Si el heterociclilo es un heterociclilo que contiene nitrógeno, el heterociclilo está opcionalmente unido al radical alquilo en el átomo de nitrógeno. La cadena de alquilo del heterociclilalquilo y la parte de heterociclilo del grupo heterociclilalquilo pueden estar cada una opcionalmente sustituida como se definió más arriba.

"Heterociclilalcoxi" se refiere a un radical enlazado a través de un átomo de oxígeno de la fórmula -O-Rc-heterociclilo donde Rc es una cadena de alquileno como se definió más arriba. Si el heterociclilo es un heterociclilo que contiene nitrógeno, el heterociclilo está opcionalmente unido al radical alquilo en el átomo de nitrógeno. La cadena de alquilo del heterociclilalcoxi está opcionalmente sustituida como se definió más arriba, por alquilo. La parte heterociclilo del heterociclilalcoxi está opcionalmente sustituida como se definió más arriba para un grupo heterociclilo.

Heteroarilo" se refiere a un resto derivado de un anillo aromático de tres a dieciocho miembros que generalmente comprende de dos a diecisiete átomos de carbono y de uno a seis heteroátomos seleccionados de nitrógeno, oxígeno y azufre, en donde al menos uno de los anillos en el sistema de anillos está totalmente insaturado, es decir, contiene un sistema de electrones n cíclico y deslocalizado (4n+2) de acuerdo con la teoría de Hückel. El heteroarilo puede ser un sistema de anillo monocíclico, bicíclico, tricíclico o tetracíclico e incluye sistemas de anillos fusionados o puenteados. El(Los) heteroátomo(s) en el grupo heteroarilo está(n) opcionalmente oxidado(s). Uno o más átomos de nitrógeno, si están presentes, están opcionalmente cuaternizados. El heteroarilo puede unirse al resto de la molécula a través de cualquier átomo del(de los) anillo(s). A menos que se declare de cualquier otra manera, los heteroarilos están opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes como se describe en la presente descripción.

Los ejemplos de heteroarilos incluyen, pero no se limitan a, azepinilo, acridinilo, bencimidazolilo, benzin-dolilo, 1,3-benzodioxolilo, benzofuranilo, benzooxazolilo, benzo[d]-tiazolilo, benzotiadiazolilo, benzo[6][1,4]dioxepinilo, benzo[b][1,4]oxazinilo, 1,4-benzo-dioxanilo, benzonaftofuranilo, benzo-xazolilo, benzodioxolilo, benzodioxinilo, benzopiranilo, benzopiranonilo, benzofuranilo, benzofuranonilo, benzotienilo (benzotiofenilo), benzo-tieno[3,2-d]pirimidinilo, benzotriazolilo, benzo[4,6]imidazo[1,2-a]piridinilo, carbazolilo, cinnolinilo, ciclopenta[d]pirimidinilo, 6,7-dihidro-5H-ciclopenta[4,5]tieno[2,3-d]pirimidinilo, 5,6-dihidrobenzo[h]quinazolinilo, 5,6-dihidrobenzo[h]cinnolinilo, 6,7-dihidro-5H-benzo[6,7]-ciclohepta[1,2-c]piridazinilo, dibenzofuranilo, dibenzotiofenilo, furanilo, furanonilo, furo[3,2 c] piridinilo, 5,6,7,8,9,10-hexahidrocicloocta[d] pirimidinilo, 5,6,7,8,9,10-hexahidrocicloocta[d] piridazinilo, 5,6,7,8,9,10-hexahidrocicloocta[d] piridinilo, isotiazolilo, imidazolilo, indazolilo, indolilo, indazolilo, isoindolilo, indolinilo, isoindolinilo, isoquinolilo, indolizinilo, isoxazolilo, 5,8-metano-5,6,7,8-tetrahidroquina-zolinilo, naftiridinilo, 1,6-naftiridinonilo, oxadiazolilo, 2-oxoazepinilo, oxazolilo, oxiranilo, 5,6,6a,7,8,9,10,10a-octa-hidrobenzo[h]quinazolinilo, 1-fenil-1H-pirrolilo, fenazinilo, feno-tiazinilo, fenoxazinilo, ftalazinilo, pteridinilo, purinilo, pirrolilo, pirazolilo, pirazolo[3,4-d] pirimidinilo, piridinilo, pirido[3,2-d]-pirimidinilo, pirido[3,4-d]pirimidinilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, pirrolilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, 5,6,7,8-tetrahidroquinazolinilo, 5,6,7,8-tetrahidrobenzo[4,5]tieno[2,3-d]pirimidinilo, 6,7,8,9-tetrahidro-5H-ciclo-hepta[4,5]tieno[2,3-d] pirimidinilo, 5,6,7,8-tetrahidropirido[4,5-c] piridazinilo, tiazolilo, tiadiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, triazinilo, tieno[2,3-d]pirimidinilo, tieno\N[3,2-d]pirimi-dinilo, tieno\N[2,3-c]pridinilo y tiofenilo (es decir, tienilo).

"N-heteroarilo" se refiere a un heteroarilo que contiene al menos un nitrógeno y donde el punto de unión del heteroarilo al resto de la molécula es a través de un átomo de nitrógeno en el radical heteroarilo. Un N -heteroarilo está opcionalmente sustituido como se describe más arriba.

"C-heteroarilo" se refiere a un heteroarilo donde el punto de unión del heteroarilo al resto de la molécula es a través de un átomo de carbono en el heteroarilo. Un C-heteroarilo está opcionalmente sustituido como se describe más arriba para heteroarilo.

"Heteroarilalquilo" se refiere a un grupo de la fórmula -Rc-heteroarilo, en donde Rc es una cadena de alquileno como se definió más arriba. Si el heteroarilo es un heteroarilo que contiene nitrógeno, el heteroarilo está opcionalmente unido al radical alquilo en el átomo de nitrógeno. La cadena de alquileno del radical heteroarilalquilo está opcionalmente sustituida como se definió más arriba, por una cadena de alquileno. La parte heteroarilo del radical heteroarilalquilo está opcionalmente sustituida como se definió más arriba, por un grupo heteroarilo.

"Heteroarilalcoxi" se refiere a un radical enlazado a través de un átomo de oxígeno de la fórmula -O-Rc-heteroarilo, donde Rc es una cadena de alquilo. Si el heteroarilo es un heteroarilo que contiene nitrógeno, el heteroarilo está opcionalmente unido al radical alquilo en el átomo de nitrógeno. La cadena de alquilo del heteroarilalcoxi está opcionalmente sustituida como se definió más arriba, por alquilo. La parte heteroarilo del heteroarilalcoxi está opcionalmente sustituida como se definió más arriba para heteroarilo.

Los compuestos divulgados en la presente descripción pueden contener uno o más centros asimétricos y, por tanto, pueden dar lugar a enantiómeros, diastereómeros y otras formas estereoisoméricas que pueden definirse, en términos de estereoquímica absoluta, como (R)- o (S)-. A menos que se declare de cualquier otra manera, se pretende que todas las formas estereoisoméricas de los compuestos divulgados en la presente descripción estén contempladas en esta divulgación. Cuando los compuestos descritos en la presente descripción contienen dobles enlaces de alqueno, y a menos que se especifique de cualquier otra manera, se pretende que esta divulgación incluya tanto los isómeros geométricos tanto E como Z (por ejemplo, cis o trans). Asimismo, también se pretende incluir todos los isómeros posibles, así como también sus formas racémicas y ópticamente puras y todas las formas tautoméricas. El término "isómero geométrico" se refiere a los isómeros geométricos E o Z (por ejemplo, cis o trans) de un doble enlace de alqueno. El término "isómero posicional" se refiere a los isómeros estructurales alrededor de un anillo central, tales como orto-, meta- y para-isómeros alrededor de un anillo de benceno.

Un "tautómero" se refiere a una molécula en donde es posible un cambio de protones de un átomo de una molécula a otro átomo de la misma molécula. Los compuestos presentados en la presente descripción pueden, en determinadas modalidades, existir como tautómeros. En circunstancias donde es posible la tautomerización, existirá un equilibrio químico de los tautómeros. La relación exacta de los tautómeros depende de varios factores, que incluye el estado físico, la temperatura, el solvente y el pH. Algunos ejemplos de equilibrio tautomérico incluyen:

"Sal farmacéuticamente aceptable" incluye tanto las sales de adición de ácido y base. Una sal farmacéuticamente aceptable de uno cualquiera de los compuestos descritos en la presente descripción pretende abarcar cualquier y todas las formas de sal farmacéuticamente adecuadas. Una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos compuestos pretende abarcar cualquier y todas las formas de sal farmacéuticamente adecuadas, que incluyen sales farmacéuticamente aceptables tales como sales de adición de ácidos y bases, como son bien conocidas en la técnica. Véanse, por ejemplo, los documentos WO 2014089364, Wo 2014100463, WO 2014100818, WO 2014164708, WO 2014151945, WO 2014151106, WO 2015058160, WO 2015089192, WO 2015168466, WO 2015200709, WO 2015200843, WO 2016004105, WO 2016003917, WO 2016037005, WO 2016044342, WO 2016044138, WO 2016044429, WO 2016168682, WO 2016172618.

Además, un compuesto descrito en el presente documento puede producirse o formularse como un "profármaco". Los profármacos son compuestos que pueden ser inactivos cuando se administran, pero que se convierten bajo condiciones fisiológicas o por hidrólisis (es decir, in vivo) en un compuesto biológicamente activo; por tanto, los profármacos son precursores farmacéuticamente aceptables de un compuesto biológicamente activo. Los compuestos del profármaco pueden ofrecer ventajas de solubilidad, compatibilidad tisular o liberación retardada en un sujeto. Los profármacos también se refieren al uso de portadores enlazados covalentemente que liberan el compuesto activo in vivo cuando dicho profármaco se administra al sujeto. Los profármacos de un compuesto activo pueden prepararse mediante la modificación de los grupos funcionales presentes en el compuesto activo de forma que las modificaciones se escindan, ya sea en la manipulación rutinaria o in vivo, al compuesto activo original. Por ejemplo, los profármacos incluyen compuestos en los que un grupo hidroxi, amino o mercapto está enlazado a cualquier grupo que, cuando el profármaco del compuesto activo se administra a un sujeto mamífero, se escinde para formar un grupo hidroxi libre, amino libre o mercapto libre, respectivamente. Los ejemplos de profármacos incluyen derivados de acetato, carboxilato, formiato y benzoato de grupos funcionales alcohol o amina en los compuestos activos. Véase, por ejemplo, Bundgard, Design of prodrugs, en 7-9, 21-24 (Elsevier, Amsterdam, 1985); Higuchi y otros, Pro drugs as Novel Delivery Systems, 14 A.C.S. Series de simposio; Bioreversible carriers in drug design (Edward B. Roche (ed.), Am. Pharm. Assoc. y Pergamon Press, 1987).

En consecuencia, y tal como se usa en la presente descripción, la referencia a "compuesto" o "fórmula" o "compuesto de fórmula I", y similares, incluye dentro de esa referencia una sal farmacéuticamente aceptable, un hidrato, un solvato, un N-óxido, un estereoisómero, un tautómero, una versión enriquecida radioisotópicamente o deuterada, o un profármaco del mismo.

Como se usa en la presente descripción, "tratamiento" o "tratar", "paliar" o "mejorar" se usan indistintamente en la presente descripción. Estos términos se refieren a un enfoque para obtener resultados beneficiosos o deseados que incluyen, pero no se limitan a, un beneficio terapéutico o un beneficio profiláctico. Por "beneficio terapéutico" se entiende la erradicación o la mejora del trastorno subyacente que se trata. También, se logra un beneficio terapéutico con la erradicación o la mejora de uno o más de los síntomas fisiológicos asociados con el trastorno subyacente, de modo que se observa una mejora en el paciente, a pesar de que el paciente todavía puede estar afectado por el trastorno subyacente. Para beneficio profiláctico, las composiciones pueden administrarse a un paciente con riesgo de desarrollar una enfermedad particular, o a un paciente que informa uno o más de los síntomas fisiológicos de una enfermedad, aunque no se haga un diagnóstico de esta enfermedad.

El término "modulador" significa, en relación con la desmetilación de histonas, un proceso en el que la actividad enzimática de la desmetilasa de histona cambia por contacto con un compuesto derivado de triazolilpiridina sustituida descrito en la presente descripción en comparación con un control; el nivel de actividad puede aumentar o disminuir (es decir, inhibirse) en dependencia del contexto celular o molecular particular de la desmetilasa de histona. La actividad original no modulada puede ser de cualquier tipo de actividad, que incluye la ausencia de cualquier actividad. El término "modular la actividad" incluye, por ejemplo, cualquier cambio en la actividad de la desmetilasa de histona que conduce a un aumento de la función de una ruta celular (por ejemplo, una ruta de señalización), que incluye las rutas que concluyen con la apoptosis. La actividad enzimática puede aumentar desde cero (actividad ausente o inconmensurable) hasta una determinada cantidad; o, más típicamente, puede disminuir desde una determinada cantidad hasta una pequeña cantidad inconmensurable o cero. La actividad de modulación puede expresarse, por ejemplo, como IC5o cuando un compuesto derivado de triazolilpiridina sustituida inhibe la actividad enzimática de una desmetilasa de histona (véanse los ejemplos).

Compuestos derivados de triazolilpiridina sustituida

Se describen en la presente descripción los compuestos sustituidos que inhiben una enzima desmetilasa de histonas. Estos compuestos, y las composiciones que comprenden estos compuestos, son útiles para el tratamiento del cáncer y las enfermedades neoplásicas. Por lo tanto, los compuestos descritos en la presente descripción pueden ser útiles para tratar el cáncer de páncreas, el cáncer de próstata, el cáncer de mama, el cáncer de vejiga, el cáncer de pulmón, el cáncer gástrico, la leucemia o el melanoma y similares. Como se observó más arriba: a menos que se declare de cualquier otra manera, todas las referencias a un compuesto incluyen las sales farmacéuticamente aceptables del mismo. Las siguientes modalidades relacionadas con un compuesto que tiene la estructura de la fórmula I no están de acuerdo con la invención y se presentan solo con fines ilustrativos.

Al menos una modalidad proporciona un compuesto que tiene la estructura de la fórmula I

En donde el compuesto de fórmula I incluye sales farmacéuticas del mismo, y en donde

R1 es halógeno, CH2G, NHG u OG, en donde

G es hidrógeno, alquilo o -X-Y, en el que

X es hidrógeno o alquileno -C¹, y

Y es aralquilo opcionalmente sustituido, aralquenilo, aralquinilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, adamantilo, benzofuranilo, 2,3-dihidrobenzofuranilo, cromanilo, indanilo, indolilo, naftilo, 1,2-dihidronaftilo opcionalmente sustituido, fenilo, piridilo, tetrahidroquinolinilo, tetralinilo, 2,3-dihidrobenzo[£>][1,4]dioxinilo o tiocromanilo, o -Rb-ORa, -Rb-OC(O)-Ra, -Rb-OC(O)-ORa, -Rb-OC(O)-N(R% -Rb-N(Ra)2, -Rb-C(O)Ra, -Rb-C(O)ORa, -Rb-OvRc-C(O)N(Ra)² , -Rb-N(Ra)C(O)ORa, -Rb-N(Ra)C(O)Ra, -Rb-N(Ra)S(O)tRa, -Rb-S(O)tORa, -Rb-S(O)tORa, o -Rb-S(O)tN(Ra)² , en el que

cada Ra es independientemente hidrógeno, alquilo, fluoroalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, arilo, aralquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo, cada Rb es independientemente un enlace directo o una cadena de alquileno o alquenileno lineal o ramificada,

cada Rc es una cadena de alquileno o alquenileno lineal o ramificada; y t es 1 o 2;

R2 es halógeno o CF3; y

R5 hidrógeno, metilo, etilo, isopropilo, /-butilo, CHF2, CH2F, CF3, CH2OH, CHCH3OH, o C(CH3)2OH.

En algunas modalidades del compuesto de la fórmula I, R1 es flúor.

En algunas modalidades del compuesto de fórmula I, R2 es CF3.

En algunas modalidades del compuesto de fórmula I, R5 es hidrógeno.

En algunas modalidades del compuesto de fórmula I, Y es fenilo opcionalmente sustituido con alquilo, alquinilo, cloro, flúor, fluoroalquilo, nitro o aralquilo, aralquenilo, aralquinilo, carbociclilo, carbociclilalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo opcionalmente sustituido o -Rb-ORa, -Rb-OC(O)-Ra, -Rb-OC(O)-ORa, -Rb-OC(O)-N(Ra)z, -Rb-N(Ra)², -Rb-C(O)Ra, -Rb-C(O)ORa, -Rb-OvRc-C(O)N(Ra)² , -Rb-N(Ra)C(O)ORa, -Rb-N(Ra)C(O)Ra, -Rb-N(Ra)S(O),Ra, -Rb-S(o)tORa, -Rb-S(O)tORa, o -Rb-S(O)tN(Ra)² , en el que cada Ra es independientemente hidrógeno, alquilo, fluoroalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, arilo, aralquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, heteroarilo o heteroarilalquilo; cada Rb es independientemente un enlace directo o una cadena de alquilo o alquenilo lineal o ramificada; cada Rc es una cadena de alquilo o alquenilo lineal o ramificada; y t es 1 o 2.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I en donde R1 es alquilo. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I, en donde R1 es metilo.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I, en donde R1 es carbociclilo o carbociclilalquilo. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I, en donde R1 es carbociclilo (alquilo C¹ -C6). Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I, en donde R1 es carbocicliletilo o carbociclimetilo.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I, en donde R1 es carbociclilo (alquilo C¹ -C6) y el carbociclilo es 1,2,3,4-tetrahidronaftilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados de halógeno, hidroxi, -CN, alquilo, alcoxi, alquilamino, arilo, carbociclilo, heterociclilo, carbociclilalquilo o heterociclilalquilo.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I en donde R1 es heterociclilo o heterociclilalquilo opcionalmente sustituido.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I en donde R1 es heteroarilo o heteroarilalquilo opcionalmente sustituido.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I en donde R1 es arilo o aralquilo opcionalmente sustituido. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I en donde R1 es aralquilo opcionalmente sustituido y el aralquilo es arilo (alquilo C1 -C6). Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I en donde R1 es aralquilo opcionalmente sustituido, el aralquilo es ariletilo o arilmetilo.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I, en donde Y es arilo o aralquilo opcionalmente sustituido, y el arilo es fenilo opcionalmente sustituido con al menos un halógeno, hidroxi, -CN, alquilo, alcoxi, alquilamino, arilo, carbociclilo, heterociclilo, carbociclilalquilo o heterociclilalquilo.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I, en donde Y es arilo o aralquilo opcionalmente sustituido, y el arilo es naftilo opcionalmente sustituido con al menos un halógeno, hidroxi, -CN, alquilo, alcoxi, alquilamino, arilo, carbociclilo, heterociclilo, carbociclilalquilo o heterociclilalquilo.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I en donde Y es hidrógeno, halógeno, -CN o un alquilo opcionalmente sustituido con al menos un flúor. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I en donde X es hidrógeno. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I en donde R1 es flúor. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I en donde R1 es cloro. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I en donde R1 es yodo. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I en donde Y es -CN. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I en donde R2 es -CF3.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I en donde R1 es hidrógeno o arilo. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I en donde R1 es hidrógeno. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I en donde R1 es arilo. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I en donde R1 es arilo y el arilo es fenilo opcionalmente sustituido con al menos un halógeno, hidroxi, -CN, alquilo, alcoxi, -O-(cicloalquilalquilo), alquilamino, arilo, carbociclilo, heterociclilo, carbociclilalquilo o heterociclilalquilo. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I en donde R1 es arilo y el arilo es un fenilo sustituido con uno o más grupos seleccionados de halógeno, alcoxi u -O-(cicloalquilalquilo). Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula I en donde R5 es hidrógeno.

En al menos una modalidad, el compuesto de la fórmula I tiene la estructura:

en donde G, R2 y R5 son como se describe más arriba.

En al menos una modalidad, el compuesto de la fórmula I tiene la estructura:

en donde

R2 y R5 son como se describe más arriba; y

Z es independientemente al menos un hidrógeno, halógeno, -OH, -CN, alquilo C¹-C⁶ opcionalmente sustituido, alcoxi C¹-C⁶ , carbociclilo C³-C⁷, carbocicliloxi C³-C⁷, carbociclilalquilo C⁴-C¹², carbociclilalcoxi C⁴-C12, alquinilo C1-C6, alquenilo C1-C6, arilo C6-C10, ariloxi C6-C10, aril-S-C6-C10, aralcoxi C7-C14, heteroarilo o heteroariloxi.

En algunas modalidades de un compuesto de fórmula Ib, Z es al menos un halógeno. En algunas modalidades del compuesto, Z es al menos un flúor. En algunas modalidades, R2 es CF3. En algunas modalidades, R5 es hidrógeno. En otra modalidad de un compuesto de fórmula Ib, Z es independientemente al menos un hidroxi, halógeno, ciano, NH2, NHRd, N(Rd)2, NHC(O)Rd, NHC(O)ORd, NHC(O)NHRd, NHC(O)N(Rd)2, NHS(O)2Rd, NRdC(O)Rd, NRdC(O)ORd, NRdC(O)NHRd, NRdC(O)N(Rd)2, NRdS(O)2Rd, alquilo, alquenilo, alquinilo, alcoxi, arilo, ariloxi, aralquilo, carbociclilo, heterociclilo, heteroarilo, carbociclilalquilo, heterociclilalquilo o heteroarilalquilo; en el que cada Rd es independientemente alquilo, arilo, aralquilo, carbociclilo, heterociclilo, heteroarilo, carbociclilalquilo, heterociclilalquilo o heteroarilalquilo.

En algunas modalidades de un compuesto de fórmula Ib, R2 es CF3, uno de Z es flúor; uno de Z es un alquilo C1 - C6 lineal, ramificado o cíclico opcionalmente sustituido, y R5 es hidrógeno. En algunas modalidades del compuesto, R2 es CF³, uno de Z es flúor y uno de Z es un alcoxi C¹ -C6 lineal, ramificado o cíclico opcionalmente sustituido, y R5 es hidrógeno. En algunas modalidades del compuesto, R2 es CF³ , uno de Z es flúor, uno de Z es trifluorometiloxi y R5 es hidrógeno. En algunas modalidades del compuesto de fórmula I, R2 es CF³, uno de Z es flúor y uno de Z es fenilmetoxi, y R5 es hidrógeno. En algunas modalidades del compuesto, R2 es CF³, uno de Z es flúor, uno de Z es NHRd o N(Rd)² y R5 es hidrógeno. En algunas modalidades del compuesto, R2 es CF³, R1 es NHG, donde G es -X-Y y X es alquileno -C¹ y R5 es hidrógeno.

La invención se refiere a un compuesto que tiene la estructura de fórmula II:

Fórmula II

En donde un compuesto de fórmula II incluye sales farmacéuticamente aceptables del mismo, y en donde

R2 es halógeno o CF³ ;

R3 y R4 son cada uno independientemente hidrógeno, halógeno, -OH, -OR6, -N(R6)², alquilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, carbociclilalquilo, heterociclilalquilo, aralquilo o heteroarilalquilo, en los que cada R6 es independientemente hidrógeno, alquilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, carbociclilalquilo, heterociclilalquilo, aralquilo o heteroarilalquilo; y

R5 es hidrógeno, metilo, etilo, isopropilo, t -butilo, -CHF2, -CH2F, -CF3, -CH2OH, -CHCH3OH, o -C(CH3)2OH. Algunas modalidades proporcionan un compuesto de fórmula II en el que R2 es CF3. Algunas modalidades proporcionan un compuesto de fórmula II en donde R5 es hidrógeno.

Otras modalidades proporcionan un compuesto de fórmula II en donde R4 es alquilo Ci -C⁴ opcionalmente sustituido. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R4 es alquilo C¹ -C⁴ y el alquilo está sustituido con al menos un flúor. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R4 es CH² F, CHF² o CF³. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R4 es CF³. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R5 es H.

Otra modalidad proporciona el compuesto de fórmula II en donde R4 es arilo. Otra modalidad proporciona el compuesto de fórmula II, en donde R4 es heteroarilo. Otra modalidad proporciona el compuesto de fórmula II en donde R4 es arilo, y cada arilo está opcionalmente sustituido independientemente con halógeno, alcoxi, carbocicliloxi, heterocicliloxi, ariloxi, heteroariloxi, carbociclilalcoxi, heterociclilalcoxi, aralquiloxi o heteroarilalcoxi. Otra modalidad proporciona el compuesto de fórmula II en donde R4 es arilo y el arilo está opcionalmente sustituido con halógeno, alcoxi, carbocicliloxi, heterocicliloxi, ariloxi, heteroariloxi, carbociclilalcoxi, heterociclilalcoxi, aralcoxi o heteroarilalcoxi.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R3 es hidrógeno. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R3 es alquilo. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R2 es metilo.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II, en donde R3 es carbociclilo o carbociclilalquilo opcionalmente sustituido. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R3 es carbociclilo (alquilo C¹ -C6). Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R3 es carbociclilo (alquilo C¹ -C6) y el alquilo C¹ - C6 es etilo o metilo.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II, en donde R3 es carbociclilo (alquilo C¹ -C6) opcionalmente sustituido, y el carbociclilo es 1,2,3,4-tetrahidronaftilo opcionalmente sustituido con al menos un halógeno, hidroxi, -CN, alquilo, alcoxi, cicloalquilalcoxi, alquilamino, arilo, carbociclilo, heterociclilo, carbociclilalquilo o heterociclilalquilo. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R3 es heterociclilo o heterociclilalquilo opcionalmente sustituido. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R3 es heterociclilo (alquilo C¹ -C6) opcionalmente sustituido.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R3 es heteroarilo o heteroarilalquilo opcionalmente sustituido. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R3 es heterociclilalquilo opcionalmente sustituido y R4 y R5 son hidrógeno. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R3 es cicloalquilo opcionalmente sustituido y R4 y R5 son hidrógeno. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R3 es feniloximetilo y R4 y R5 son hidrógeno.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II, en donde R3 es heteroarilo o heteroarilalquilo opcionalmente sustituido, y el heteroarilo es piridina o pirimidina opcionalmente sustituido con al menos un halógeno, hidroxi, -CN, alquilo, alcoxi, cicloalquilalcoxi, alcamino, arilo, carbociclilo, heterociclilo, carbociclilalquilo o heterociclilalquilo.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II, en donde R3 es heteroarilo opcionalmente sustituido, y el heteroarilo es un cromanilo opcionalmente sustituido con al menos un halógeno, hidroxi, -CN, alquilo, alcoxi, cicloalquilalcoxi, alquilamino, arilo, carbociclilo, heterociclilo, carbociclilalquilo o heterociclilalquilo.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R3 es heteroarilalquilo opcionalmente sustituido, y el heteroarilalquilo comprende un cromanilo opcionalmente sustituido con al menos un halógeno, hidroxi, -CN, alquilo, alcoxi, cicloalquilalcoxi, alquilamino, arilo, carbociclilo, heterociclilo, carbociclilalquilo o heterociclilalquilo. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R3 es etilo o metilo. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R3 es arilo o aralquilo. Otra modalidad proporciona el compuesto de fórmula II en donde R5 es hidrógeno.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R3 es arilo o aralquilo opcionalmente sustituido, y el arilo es un fenilo opcionalmente sustituido con al menos un halógeno, hidroxi, -CN, alquilo, alcoxi, cicloalquilalcoxi, alcamino, arilo, carbociclilo, heterociclilo, carbociclilalquilo o heterociclilalquilo. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R2 es arilo o aralquilo y el arilo es fenilo opcionalmente sustituido con al menos un halógeno, alcoxi o alquilo.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R3 es aralquilo opcionalmente sustituido y el aralquilo es arilo (alquilo C¹ -C6). Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R3 es aralquilo, el aralquilo es arilo (alquilo C¹ -C6) y el arilo es fenilo opcionalmente sustituido con uno o más de halógeno, hidroxi, -CN, alquilo, alcoxi, cicloalquilalcoxi, alquilamino, arilo, carbociclilo, heterociclilo, carbociclilalquilo o heterociclilalquilo. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R3 es aralquilo, el aralquilo es arilo (alquilo C¹ -C6) y el (alquilo C¹ -C6) es etilo o metilo.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R³ es aralquilo y el aralquilo comprende un naftilo opcionalmente sustituido con al menos un halógeno, hidroxi, -CN, alquilo, alcoxi, cicloalquilalcoxi, alquilamino, arilo, carbociclilo, heterociclilo, carbociclilalquilo o heterociclilalquilo. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde el aralquilo comprende además un alquileno Ci o un alquileno C2.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II, en donde R¹ o R⁵ son hidrógeno. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II, en donde tanto R¹ como R⁵ son hidrógeno.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R³ es arilo. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II en donde R³ es hidrógeno o arilo.

Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R³ es arilo y el arilo es un fenilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados de halógeno, hidroxi, -CN, alquilo, alcoxi, cicloalquilalcoxi, alquilamino, arilo, carbociclilo, heterociclilo, carbociclilalquilo o heterociclilalquilo. Otra modalidad proporciona un compuesto de fórmula II, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R¹ es arilo y el arilo es un fenilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados de halógeno, alcoxi o cicloalquilalcoxi.

En algunas modalidades, un compuesto como se divulga en la presente descripción tiene la estructura proporcionada en la Tabla 1:

En algunas modalidades, el compuesto divulgado en la presente descripción tiene la estructura proporcionada en la Tabla ² , donde R es Cl, F o CF³.

Preparación de los compuestos derivados de triazoMIpiridina sustituida

Los compuestos usados en las reacciones descritas en la presente descripción se elaboran de acuerdo con las técnicas de síntesis orgánica conocidas por los expertos en esta técnica, a partir de productos químicos disponibles en el mercado y/o de compuestos descritos en la literatura química. Los "productos químicos disponibles en el mercado" se obtienen de fuentes comerciales estándar, que incluyen Acros Organics (Pittsburgh, Pensilvania, EE. UU.), Aldrich Chemical (Milwaukee, Wisconsin, EE. UU.; incluye Sigma Chemical y Fluka), Apin Chemicals Ltd. (Milton Park, Reino Unido), Avocado Research (Lancashire, Reino Unido), BDH Inc. (Toronto, Canadá), Bionet (Cornwall, Reino Unido), Chemservice Inc. (West Chester, Pensilvania, EE. UU.), Crescent Chemical Co. (Hauppauge, Nueva York, Estados Unidos), Eastman Organic Chemicals, Eastman Kodak Company (Rochester, Nueva York, Estados Unidos), Fisher Scientific Co. (Pittsburgh, Pensilvania, EE. UU.), Fisons Chemicals (Leicestershire, Reino Unido), Frontier Scientific (Logan, Utah, EE. UU.), ICN Biomedicals, Inc. (Costa Mesa, California, EE. UU.), Key Organics (Cornwall, Reino Unido), Lancaster Synthesis (Windham, Nuevo Hampshire, EE. UU.), Maybridge Chemical Co. Ltd. (Cornwall, Reino Unido), Parish Chemical Co. (Orem, Utah, EE. UU.), Pfaltz & Bauer, Inc. (Waterbury, Connecticut, EE. UU.), Polyorganix (Houston, Texas, EE. UU.), Pierce Chemical Co. (Rockford, Illinois, EE. UU.), Riedel de Haen AG (Hannover, Alemania), Spectrum Quality Product, Inc. (New Brunswick, Nueva Jersey, EE. UU.), TCI America (Portland, Oregón, EE. UU.), Trans World Chemicals, Inc. (Rockville, Maryland, EE. UU.) y Wako Chemicals USA, Inc. (Richmond, Virginia, EE. UU.).

Los métodos conocidos por un experto en la técnica se identifican a través de varios libros de referencia y bases de datos. Libros de referencia y tratados adecuados que detallan la síntesis de reactivos útiles en la preparación de los compuestos descritos en la presente descripción, o proporcionan referencias a artículos que describen la preparación. Véanse, por ejemplo, Synthetic organic chem. (John Wiley & Sons, Inc., Nueva York); Sandler y otros, Organic functional group prep., 2a ed. (Academic Press, Nueva York 1983); House, Modern synthetic reactions, 2.a ed. (W.A. Benjamin, Inc., Menlo Park, California, 1972); Gilchrist, HETEROCYCLIC CHEM., 2a ed. (John Wiley & Sons, Nueva York, 1992); March, Advanced organic chem.: Reactions, mechanisms & structure, 4a ed., (Wiley-Interscience, Nueva York, 1992). Las referencias adicionales adecuadas que detallan la síntesis de reactivos útiles en la preparación de los compuestos descritos en la presente descripción, o proporcionan referencias a artículos que describen la preparación, son conocidas en la técnica. Véanse, por ejemplo, Fuhrhop & Penzlin, Organic synth.: Concepts, methods, starting mat'ls, 2a ed. revisada y ampliada. (John Wiley & Sons, ISBN: 3-527-29074-5, 1994); Hoffman, Organic chem., Intermediate text (Oxford Univ. Press, ISBN 0-19-509618-5, 1996); Larock, Comprehensive organic transformations: Guide to functional group preparations, 2a ed. (Wiley-VCH, ISBN: 0-471-19031-4, 1999); March, Advanced organic chem.: Reactions, mechanisms, & structure, 4a ed. (John Wiley & Sons, ISBN: 0-471­ 60180-2, 1992); Modern carbonyl chem. (Otera (ed.), Wiley-VCH, ISBN: 3-527-29871-1,2000); Patai, PATAI'S 1992 Guide to chem. of functional groups (Interscience ISBN: 0-471-93022-9, 1992); Solomons, ORGANIC CHEM., 7a ed. (John Wiley & Sons, ISBN: 0-471-19095-0, 2000); Stowell, Intermedíate organic CHEM., 2' ed. (Wiley-Interscience, ISBN: 0-471-57456-2, 1993); Industrial organic chem.: Starting materials & intermediates: Ullmann's encyclopedia (John Wiley & Sons, ISBN: 3-527-29645-X, 1999) en 8 volúmenes; Organic reactions (1942-2000) (John Wiley & Sons), en más de 55 volúmenes;), en más de 55 volúmenes; Chem. functional groups (John Wiley & Sons), en 73 volúmenes.

Los reactivos específicos y análogos también pueden identificarse a través de los índices de sustancias químicas conocidas preparados por el Chemical Abstract Service de la American Chemical Society, que están disponibles en la mayoría de las bibliotecas públicas y universitarias, así como también a través de las bases de datos en línea (puede contactarse con la American Chemical Society, Washington, DC, para obtener más detalles). Los productos químicos que se conocen, pero no están disponibles comercialmente en los catálogos, pueden prepararse por empresas de síntesis química personalizada, donde muchas de las empresas de suministro de productos químicos estándar (por ejemplo, las enumeradas más arriba) proporcionan los servicios de síntesis personalizados. Una referencia para la preparación y la selección de sales farmacéuticas de los compuestos derivados heterocíclicos sustituidos descritos en la presente descripción es Stahl & Wermuth, Handbook of pharmaceutical salts (Verlag Helvetica Chimica Acta, Zurich, 2002).

También se conocen métodos generales para la síntesis de derivados heterocíclicos sustituidos. Véanse, por ejemplo, los documentos WO 2009158396; WO 200563768; WO 2006112666; Briet y otros, 58 Tetrahedron 5761 (2002); WO 200877550; WO 200877551; WO 200877556; WO 200712421; WO 200712422; US200799911; WO 200877550; Havera y otros, 42 J. Med. Chem. 3860 (1999); WO 200429051; US20090054434. Se conocen ejemplos adicionales de la síntesis de derivados heterocíclicos sustituidos. Véase, por ejemplo, los documentos WO 2012/171337; WO 2011/044157; WO 2009/097567; WO 2005/030791; EP 203216; Becknell y otros, 21 Bioorg. Med. Chem. Letts. 7076 (2011); Svechkarev y otros, Visnik Kharkivs'kogo Natsional'nogo Univ. im. V.N. Karazina, 770:201 (2007); Coskun y otros, 35 Synth. Commun. 2435 (2005); Alvarez y otros, 15 Sci. Synth. 839 (2005); Kihara y otros, 53 Heterocycl. 359 (2000); Couture y otros, 7 J. Chem. Soc'y, Perkin Transact. 1: Org. Bio-Org. Chem. 789 (1999); Kihara y otros, 48 Heterocycles 2473 (1998); Couture y otros, 52 Tetrahed. 4433 (1996); Couturre y otros, 37 Tetrahed. Lett. 3697 (1996); Natsugari y otros, 38 J. Med. Chem. 3106 (1995); Moehrle y otros, 321 Archiv Pharm.

759 (Weinheim, Alemania) 321:759 (1988); Gore y otros, 3 J. Chem. Soc'y, Perkin Transact. 1: Org. Bio-Org. Chem.

481 (1972-1999) (1988); Narasimhan y otros, 3 J. Chem. Soc'y, Chem. Commun. 191 (1987); Henry y otros, 40 J. Org. Chem. 1760 (1975); Berti, 90 Gazzetta Chim. Italiana 559 (1960); Berti y otros, 49 Annal. Chim. 2110 (Roma, Italia) (1959); Berti y otros, 49 Annal. Chim. 1253 (Roma, Italia) (1959); W^o 2012000595; Couture y otros, 52 Tetrahed. 4433 (1996); WO 2010069504; WO 2010069504; WO 2006030032; WO 2005095384; US20050222159; WO 2013064984; Mishra y otros, 2013 Eur. J. Org. Chem. 693 (2013); Vachhani y otros, 69 Tetrahed. 359 (2013); Xie y otros, 45 Eur. J. Med. Chem. 210 (2010); Mukaiyama y otros, 15 Bioorg. Med. Chem. 868 (2007); JP2005/089352; Wang y otros, 9 Molec. 574 (2004); WO 2000023487; US20060287341; CN103183675; Hares y otros, 32 Egyptian J. Pharm. Sci. 303 (1991); DE2356005; DE2133898; DE2133998; Patente de EE. UU. n.° 3,816,422; d E2011970; Staehle y otros, 8 Justus Liebigs Annalen der Chem. 1275 (1973).

Los métodos adicionales para la síntesis de los compuestos derivados heterocíclicos sustituidos divulgados en la presente descripción están fácilmente disponibles para los expertos en la técnica. En algunas modalidades, los compuestos derivados heterocíclicos sustituidos divulgados en la presente descripción se preparan mediante las rutas sintéticas generales descritas en los siguientes esquemas 1 y 2, que son ilustrativos para un experto en la técnica y no son limitantes.

En referencia al esquema 1, más arriba, la 3-fluoro-4-yodopiridina (1-0) se somete a una reacción de acoplamiento Stille con el reactivo de estaño, tributilestanilo-3,3,3-trifluoro-1 -propino, en presencia de una cantidad catalítica de Pd(O), en tolueno, a temperatura elevada, tal como 130 °C, en un horno de microondas para dar (1-2). Luego se calienta con 1-azidometil-4-metoxi-benceno a reflujo en un solvente orgánico, como alcohol t-butílico o tolueno, para dar una mezcla de intermedios de trifluorometil triazol protegidos con -p-metoxibencilo (protegidos con PMB) (1-4a) y (1 -4b). El desplazamiento del grupo 3-fluoro con aminas en presencia de K²CO³ en sulfóxido de dimetilo (DMSO) a alta temperatura, tal como 180 °C, da la mezcla (1-5a) y (1-5b), que luego se trata con ácido trifluoroacético (TFA) a temperatura ambiente (TA) durante toda la noche, o a 50 °C durante un período de tiempo más corto, para dar el producto final (¹ -⁶ ).

En el Esquema 2, más arriba, se proporciona un método para preparar compuestos tales como los compuestos (2­ 9). De acuerdo con este enfoque, la 2-fluoro-4-yodopiridina se trata con hidrato de hidrazina en un solvente alcohólico, tal como etanol, a temperatura elevada (por ejemplo, de aproximadamente 60 °C a 100 °C) para dar el intermedio (2-1). La reacción subsecuente con un éster de acetoacetilo en una mezcla de un solvente alcohólico (como etanol) calentado a reflujo en presencia de ácido acético proporciona los intermedios de piridina de hidroxipirazol ciclado (2-3). Después de una protección del grupo hidroxilo por PMB, los intermedios (2-4) se someten a un acoplamiento de Stille con el reactivo de estaño, tributilestanilo-3,3,3-trifluoro-1-propino, en presencia de una cantidad catalítica de Pd(O), en tolueno, a temperatura elevada, tal como 120 °C, en un horno de microondas para dar (2-6). Luego se calienta con 1-azidometil-4-metoxi-benceno a reflujo en un solvente orgánico, como alcohol t-butílico o tolueno, para dar una mezcla de intermedios de trifluorometil triazol protegidos con PMB (2-8a) y (2- ⁸ b), que se tratan con TFA a temperatura ambiente durante toda la noche, o a 50 °C durante un período de tiempo más corto, para dar el producto final (2-9).

En cada uno de los procedimientos o esquemas de reacción más arriba mencionados, los diversos sustituyentes pueden seleccionarse entre los diversos sustituyentes que se enseñan de cualquier otra manera en la presente descripción.

Composiciones farmacéuticas

Como se observó más arriba, en determinadas modalidades, los compuestos derivados de triazolilpiridina sustituidos como se describe en la presente descripción pueden administrarse como un producto químico puro o una sal del mismo. En otras modalidades, los compuestos derivados de la triazolilpiridina sustituida descritos en la presente descripción se preparan en una composición farmacéutica en la que el compuesto derivado de la triazolilpiridina sustituida se combina con al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable o farmacéuticamente adecuado (también denominado en la presente descripción como portador farmacéuticamente adecuado (o aceptable), excipiente fisiológicamente adecuado (o aceptable) o portador fisiológicamente adecuado (o aceptable), seleccionado en base a una vía de administración elegida y a las prácticas farmacéuticas estándares, como son bien conocidas. Véase, por ejemplo, REMINGTON: SCI. & PrACTICE PHARM. 21a ed. (Gennaro, Mack Pub. Co., Easton, Pensilvania (2005)).

En consecuencia, se proporcionan en la presente descripción composiciones farmacéuticas que comprenden al menos un compuesto derivado heterocíclico sustituido, o un estereoisómero, una sal farmacéuticamente aceptable, un hidrato, un solvato o un N-óxido del mismo, junto con al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable. El excipiente (o portador) es aceptable o adecuado si el excipiente es compatible con los otros agentes activos o excipientes de la composición, no es perjudicial para el receptor (es decir, el sujeto) de la composición, y se prepara bajo buenas prácticas de laboratorio como se requiere para la forma de dosificación particular.

Una modalidad proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Una modalidad proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la fórmula II, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En determinadas modalidades, los compuestos derivados de triazolilpiridina sustituida como se describe en la presente descripción son sustancialmente puros, en el sentido de que dicho compuesto contiene menos de aproximadamente el 5 %, o menos de aproximadamente el 1 %, o menos de aproximadamente el 0,1 %, de otras pequeñas moléculas orgánicas, tales como intermedios contaminantes o subproductos que se crean, por ejemplo, en una o más de las etapas de un proceso de síntesis.

Las formas de dosificación oral adecuadas incluyen, por ejemplo, comprimidos, píldoras, sobres o cápsulas de gelatina dura o blanda, metilcelulosa u otro material adecuado fácil de disolver en el tracto digestivo. Se usan portadores sólidos no tóxicos adecuados que incluyen, por ejemplo, grados farmacéuticos de manitol, lactosa, almidón, estearato de magnesio, sacarina sódica, talco, celulosa, glucosa, sacarosa, carbonato de magnesio y similares. Véase, por ejemplo, REMINGTON, 2005.

La dosis de la composición que comprende al menos un compuesto derivado de la triazolilpiridina sustituida, tal como se describe en la presente descripción, puede ser diferente, en dependencia del estado del paciente (por ejemplo, ser humano), es decir, la etapa de la enfermedad, el estado general de salud, la edad y otros factores que un experto en la técnica médica usará para determinar la dosis.

Las composiciones farmacéuticas pueden administrarse de una manera apropiada para la enfermedad a tratar (o prevenir) según lo determinen las personas expertas en las técnicas médicas. Una dosis apropiada y una duración y frecuencia de administración adecuadas se determinarán por factores tales como la condición del paciente, el tipo y la gravedad de la enfermedad del paciente, la forma particular del ingrediente activo y el método de administración. En general, una dosis y un régimen de tratamiento apropiados proporcionan la(s) composición(es) en una cantidad suficiente para proporcionar un beneficio terapéutico y/o profiláctico (por ejemplo, un resultado clínico mejorado), tales como remisiones parciales o completas más frecuentes, o más tiempo libre de enfermedad y/o supervivencia general, o una disminución de la gravedad de los síntomas. Las dosis óptimas generalmente pueden determinarse mediante el uso de modelos experimentales y/o ensayos clínicos. La dosis óptima puede depender de la masa corporal, el peso o el volumen sanguíneo del paciente. Típicamente, el intervalo de las dosis orales es de aproximadamente 1,0 mg a aproximadamente 1000 mg, de una a cuatro veces, o más, por día.

Desmetilasa de histonas

La cromatina es el complejo de ADN y proteína que forma los cromosomas. Las histonas son el principal componente proteico de la cromatina, que actúan como carretes alrededor de los cuales se enrolla el ADN. Los cambios en la estructura de la cromatina se ven afectados por las modificaciones covalentes de las proteínas histonas y por las proteínas de unión no histonas. Se conocen varias clases de enzimas que pueden modificar covalentemente las histonas en diversos sitios.

En consecuencia, la estructura de la cromatina desempeña un papel fundamental en la regulación de la transcripción génica, que no puede ocurrir de manera eficiente en una cromatina altamente condensada. La estructura de la cromatina se controla por una serie de modificaciones postraduccionales a las proteínas histonas, especialmente las histonas H3 y H4, y más comúnmente dentro de las “colas de las histonas” que se extienden más allá de la estructura central del nucleosoma. Estas modificaciones postraduccionales incluyen la acetilación, la metilación, la fosforilación, la ribosilación, la sumoilación, la ubiquitinación, la citrulinación, la desiminación y la biotinilación. Además de las colas de las histonas, pueden modificarse los núcleos de las histonas H2A y H3. Dada la función de las histonas en la cromatina, las modificaciones de las histonas son parte integral de diversos procesos biológicos, tales como la expresión génica, la replicación del ADN, la reparación del ADN y la condensación cromosómica. Las proteínas pueden modificarse postraduccionalmente por metilación en los grupos amino de lisinas y grupos guanidino de argininas o carboximetilarse en aspartato, glutamato o en el C-terminal de la proteína. La metilación postraduccional de las proteínas está implicada en diversos procesos celulares, tales como el procesamiento del ARN, la señalización mediada por receptores y la diferenciación celular. Se conoce ampliamente que la metilación postraduccional de las proteínas ocurre en las histonas, dichas reacciones son catalizadas por las histonas metiltransferasas, que transfieren grupos metilo de la S-adeniosilmetionina (SAM) a las histonas. Se conoce que la metilación de las histonas participa en un diverso gama de procesos biológicos, que incluyen la formación de heterocromatina, la inactivación del cromosoma X y la regulación transcripcional. Lachner y otros, 116 J. Cell Sci.

2117-24 (2003); Margueron y otros, 15 Curr. Opin. Genet. Devel 163-76 (2005).

A diferencia de la acetilación, que generalmente se correlaciona con la activación transcripcional, el hecho de que la metilación de las histonas conduzca a la activación o a la represión de la transcripción depende del sitio particular de metilación y del grado de metilación (por ejemplo, si un residuo de lisina de la histona en particular es mono-, di- o trimetilado). La metilación de los residuos de histonas H3K9, H3K27 y H4K20, generalmente está conectada al silenciamiento génico; y la metilación de H3K4, H3K36 y H3K79, generalmente está asociada a la expresión génica activa. Además, la tri- y dimetilación de H3K4 generalmente marca los sitios de partida transcripcional de los genes transcritos activamente, mientras que la monometilación de H3K4 se asocia con las secuencias potenciadoras de la transcripción.

Una "desmetilasa" o "proteína desmetilasa", se denomina en la presente descripción, a una enzima que elimina al menos un grupo metilo de una cadena lateral de aminoácido. Algunas desmetilasas actúan sobre las histonas, por ejemplo, actúan como una desmetilasa de histona H3 o H4. Por ejemplo, una desmetilasa H3 puede desmetilar una o más de H3K4, H3K9, H3K27, H3K36 o H3K79. Alternativamente, una desmetilasa H4 puede desmetilar la histona H4K20. Se conocen desmetilasas que pueden desmetilar un sustrato mono-, di- o trimetilado. Además, las desmetilasas de histonas pueden actuar sobre un sustrato metilado de histona central, un sustrato mononucleosómico, un sustrato dinucleosómico o un sustrato oligonucleosómico, un sustrato peptídico o la cromatina (por ejemplo, en un ensayo basado en células).

La primera lisina desmetilasa descubierta fue la desmetilasa 1 específica de lisina (LSD1/KDM1), que usa flavina como un cofactor en la desmetilación de la H3K4 mono- y dimetilada o de la H3K9 mono- y dimetilada. Se predijo una segunda clase de desmetilasas de histonas que contienen el dominio Jumonji C (JmjC), y luego se confirmó cuando un ensayo de liberación de formaldehído identificó una desmetilasa H3K36; esta desmetilasa de histonas se nombró desmetilasa de histonas que contienen el dominio JmjC 1 (JHDM1/KDM2A).

Subsecuentemente se identificaron proteínas adicionales, que contienen el dominio JmjC, las cuales pueden agruparse filogenéticamente en siete subfamilias: JHDM1, JHDM2, JHDM3, JMJD2, JARID, PHF2/PHF8, UTX/UTY o dominio JmjC.

FBXL10 y FBXL11

La proteína F-box y de repetición enriquecida en leucina 10 (FBXL10) y la proteína F-box y de repetición enriquecida en leucina 11 (FBXL11) son proteínas multifuncionales de la familia F-box que desmetilan la histona H3 mediante un mecanismo basado en la hidroxilación. La FBXL10, también conocida como desmetilasa 2B específica de la lisina (K) (KDM2B) o desmetilasa de histonas 1B que contiene el dominio Jumonji C (JHDM1B), desmetila preferentemente la H3K4 trimetilada y la H3K36 dimetilada, pero tiene una actividad débil o nula para la H3K36 mono y trimetilada. FBXL10 contiene tres dominios: un dominio JMJC catalítico, un dominio F-box y un dominio CXXC de unión al ADN. El dominio JMJC N-terminal coordina el hierro y el a-cetoglutarato para catalizar la desmetilación a través de un mecanismo basado en la hidroxilación. El dominio CXXC de unión al ADN facilita la unión preferente del FBXL10 a las regiones transcritas del ARN ribosomal, lo que causa la represión de la transcripción del gen del ARN ribosomal, que en última instancia causa la inhibición del crecimiento y la proliferación celular. FBXL10 se sobreexpresa en la leucemia mieloide aguda, el carcinoma de vejiga y el adenocarcinoma ductal pancreático. Adicionalmente, el FBXL10 regula la expresión de genes diana de Polycomb que codifican proteínas activas como reguladores epigenéticos esenciales para la diferenciación de las células madre y por tanto implica al FBXL10 en la tumorogénesis.

FBXL11, también se conoce como KDM2A o JHDM1A, desmetila la H3K36 mono y dimetilada. El dominio de unión al ADN FBXL11 CXXC reconoce el ADN no metilado y se dirige a las regiones de islas CpG donde elimina específicamente la metilación de H3K36. Además, se requiere FBXL11 para mantener un estado heterocromático y mantener la integridad centromérica y la estabilidad genómica durante la mitosis. Además, FBXL11 es un regulador negativo clave de NF-KB. Se observa la sobreexpresión de FBXL11 en líneas celulares de cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC), donde FBXL11 regula positivamente el fósforo-ERK1/2 al reprimir la expresión de DUSP3. La regulación negativa de la expresión del gen gluconeogénico mediante FBXL11 da como resultado la supresión de dos enzimas gluconeogénicas limitantes de la velocidad que son fundamentales para mantener la homeostasis de la glucosa en sangre.

En consecuencia, al menos una modalidad adicional proporciona un método para inhibir una enzima desmetilasa de histona que comprende poner en contacto una enzima desmetilasa de histona con un compuesto de fórmula I o fórmula II. Una modalidad adicional proporciona un método para inhibir una enzima desmetilasa de histonas, en donde la enzima desmetilasa de histonas comprende un dominio JmjC. Todavía otra modalidad adicional proporciona un método para inhibir una enzima desmetilasa de histona, en donde la enzima desmetilasa de histona es FBXL10 o FBXL11.

Métodos de tratamiento

Los métodos divulgados en la presente descripción para modular la desmetilación en una célula o en un sujeto, ya sea generalmente o con respecto a uno o más genes dianas específicos. La desmetilación puede modularse para controlar una variedad de funciones celulares, que incluyen, sin limitarse a: la diferenciación; la proliferación; la apoptosis; la tumorigénesis, la leucemogénesis u otros eventos de transformación oncogénica; la pérdida del cabello; o la diferenciación sexual. Por ejemplo, modalidades particulares proporcionan métodos para tratar una enfermedad regulada por la metilación o desmetilación de histonas en un sujeto que lo necesita mediante modulación de la actividad de FBXL10 o FBXL11.

Las modalidades proporcionan además un método terapéutico para modular la metilación de proteínas, la expresión génica, la proliferación celular, la diferenciación celular o la apoptosis in vivo en afecciones, enfermedades, trastornos, infecciones o enfermedades divulgadas en la presente descripción, en particular cáncer, enfermedad inflamatoria o enfermedad viral, que comprende administrar a un sujeto en necesidad de dicha terapia una cantidad farmacológicamente activa o terapéuticamente eficaz de al menos un compuesto derivado de triazolilpiridina sustituida descrito en la presente descripción, que puede administrarse en una composición farmacéutica.

Las modalidades proporcionan además un método para tratar a un sujeto, tal como un ser humano, que padece cáncer, una enfermedad neoplásica u otro trastorno proliferativo. El método comprende administrar a un sujeto en necesidad de dicho tratamiento una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un compuesto derivado de triazolilpiridina sustituida descrito en la presente descripción, que funciona por inhibición de una desmetilasa y, en general, mediante la modulación de la expresión génica, para modular diversos efectos celulares, en particular, inducir o reprimir la expresión génica, detener la proliferación celular, inducir la diferenciación celular o inducir la apoptosis.

Las modalidades se refieren además a un método para tratar o mejorar el cáncer, la enfermedad neoplásica u otro trastorno proliferativo mediado al menos en parte por la actividad de la desmetilasa de histona, mediante la administración de una cantidad eficaz de una composición farmacéutica que comprende un compuesto derivado de triazolilpiridina sustituida descrito en la presente descripción, a un mamífero, en particular un ser humano, en necesidad de dicho tratamiento. En algunos aspectos, la enfermedad a tratar por los métodos de las presentes modalidades es el cáncer.

En una modalidad adicional es el método para tratar el cáncer en un sujeto en donde el cáncer es cáncer de páncreas, cáncer de próstata, cáncer de mama, cáncer gástrico, leucemia, cáncer de vejiga, cáncer de pulmón o melanoma.

Otras modalidades y usos serán evidentes para los expertos en la técnica a la luz de las presentes divulgaciones. Los siguientes ejemplos se proporcionan meramente como ilustrativos de diversas modalidades y no deben interpretarse como una limitación de la invención de ninguna manera.

Ejemplos

A menos que se observe de cualquier otra manera, los reactivos y los solventes se usaron tal como se recibieron de los suministradores comerciales. Se usaron solventes anhidros y material de vidrio secado al horno para las transformaciones de síntesis sensibles a la humedad o al oxígeno. Los rendimientos no se optimizaron. Los tiempos de reacción son aproximados y no se optimizaron. La cromatografía en columna y la cromatografía en capa fina (TLC) se realizaron sobre gel de sílice a menos que se observe de cualquier otra manera. Los espectros se dan en ppm (5) y las constantes de acoplamiento J se informan en hercios. Para los espectros de protones se usó el pico del solvente como el pico de referencia.

Preparación 1A: 3-fluoro-4-(3,3,3-trifluoroprop-1-in-1-il)piridina

Una mezcla de 3-fluoro-4-yodopiridina (1 g, 4,48 mmol), 1- tributilestanilo-3,3,3-trifluoro-1-propino (2,3 g, 5,38 mmol, 90 %) y Pd(PPh3)4 (259 mg, 0,045 mmol) en tolueno (15 mL) se calentó durante 5 h a 130 °C bajo N2 en un horno de microondas. La mezcla se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre gel de sílice (EtOAc/Hex=0 %-20 %) para proporcionar el compuesto del título (260 mg, 31 %). [M+H] calculado para C8H3F4N: 190; encontrado: 190.

Preparación 1B: 3-fluoro-4-{1-[(4-metoxifenil)metil]-5-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-4-il}piridina y 3-fluoro-4-{1-[(4-metoxifenil)metil]-4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-5-il}piridina

Una solución de 3-fluoro-4-(3,3,3-trifluoroprop-1-in-1-il)piridina (260 mg, 1,37 mmol) y 1-azidometil-4-metoxi benceno (4 mL, 2 mmol, 0,5 M en éter metil t-butil) en f-butanol (10 mL) se calentó a 80 °C durante 2 h. La solución se concentró y purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre gel de sílice (EtOAc/Hex = 0 %-20 %) para proporcionar una mezcla de los compuestos del título (110 mg, 23 %). [M+H] calculado para Ci6Hi2F4N4O: 353; encontrado: 353.

Ejemplo 1

3-fluoro-4-[5-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-4-il]piridina

Una mezcla de 3-fluoro-4-{1-[(4-metoxifenil)metil]-5-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-4-il}piridina y 3-fluoro-4-{1-[(4-metoxifenil)metil]-4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-5-il}piridina (50 mg, 0,14 mmol) se disolvió en 5 mL de T^fA y se agitó durante toda la noche a 50 °C. Después de eliminar el solvente bajo vacío, el residuo se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida para dar el compuesto del título (25 mg, 77 %). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d⁶ ): 57,68 (1H, s), 8,62 (s, 1H), 8,81 (s, 1H). Calculado para C⁸H⁴F⁴N⁴ : 233; encontrado: 233.

Ejemplo 2

N-(5-cloro-2-fluorofenil)-4-[5-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-4-il]piridin-3-amina

Una mezcla de 3-fluoro-4-{ 1-[(4-metoxifenil)metil]-5-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-4-il}piridina y 3-fluoro-4-{1-[(4-metoxifenil)metil]-4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-5-il}piridina (28 mg, 0,08 mmol), 5-cloro-2-fluoroanilina (17 mg, 0,12 mmol) y K²CO³ (27 mg, 0,2 mmol) en DM^s O (2 mL) se calentó a 180 °C durante 5 h en un horno de microondas. La mezcla de reacción se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre gel de sílice (EtOAc/Hex=0 %-20 %) para proporcionar un intermedio que se disolvió en 5 mL de TFA y se agitó durante toda la noche a 50 °C. Después de eliminar el solvente bajo vacío, el residuo se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida para dar el compuesto del título (5 mg, 17 %). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d⁶ ): 56,81 (1H, dd, J=2,5 y 7,2 Hz), 6,90 (1H, m), 7,17 (1H, dd, J=2,6 y 8,7 Hz), 7,40 (1H, d, J=5,0 Hz), 8,35 (1H, d, J=5,0 Hz), 8,44 (1H, s). Calculado para Ci ⁴H⁸CIF⁴N5: 359; encontrado: 359.

Ejemplo 3

N-[(1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il)metil]-4-[5-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-4-il]piridin-3-amina

El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 7 % de acuerdo con el procedimiento general para la síntesis como en el ejemplo 2, que parte de la preparación 1B. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d⁶ ): 51,64-1,75 (4h , m), 2,68 (2H, m), 3,08 (1H, m), 3,51 (2H, m), 7,09 (3H, m), 7,25 (1H, m), 7,39 (1H, m), 8,01 (1H, d, J=4,6 Hz), 8,29 (1H, s). [M+H] calculado para C¹⁹H¹⁸F³N⁵ : 374; encontrado: 374.

Preparación 4A: 2-hidrazinil-4-yodopiridina

A una solución de 2-fluoro-4-yodopiridina (16 g, 71,74 mmol) en EtOH (160 mL) se añadió NH²NH²-H2O (40 mL). La mezcla de reacción se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente. Luego se concentró al vacío y el residuo se trituró con PE (200 mL) para proporcionar el producto deseado (16 g, 95 %). [M+H] calculado para C⁵H⁶ IN3: 235; encontrado: 235.

Preparación 4B: 3-[(4-clorofenil)metil]-1-(4-yodopiridin-2-il)-1H-pirazol-5-ol

A una solución de 4-(4-clorofenil)-3-oxobutanoato de etilo (2 g, 8,30 mmol) en EtOH (20 mL) se le añadió una solución de 2-hidrazinil-4-yodopiridina (1,94 g, 8,30 mmol) en EtOH (20 mL) a 50 °C, luego se agitó durante 1 h a 50 °C. Luego, se añadió 5 mL de CH³COOH y la mezcla se calentó a reflujo durante toda la noche, luego se concentró y el residuo se disolvió en DCM y se lavó con Na2CO3 acuoso, se secó, se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre gel de sílice (PE/EA=5/1 a 1/1), para dar el compuesto del título (1,9 g, 56 %). [M+H] calculado para Ci5Hh CNN3O: 412; encontrado: 412.

Preparación 4C: 2-{3-[(4-clorofenil)metil]-5-[(4-metoxifenil)metoxi]-1H-pirazol-1 -il}-4-yodopiridina

A una mezcla de 3-[(4-clorofenil)metil]-1-(4-yodopiridin-2-il)-1H-pirazol-5-ol (1 g, 2,43 mmol) y K2CO3 (470 mg, 3,41 mmol) en DMF (20 ml) se añadió PMBCl (457 mg, 2,92 mmol) a 0 °C, luego se agitó durante 1 h a 60 °C. Después de la concentración, el residuo se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre gel de sílice (p E/EA =10/1 a 3/1) para dar el compuesto del título (430 mg, 33 %). [M+H] calculado para C23Hi9ClIN3O2: 532; encontrado: 532.

Preparación 4D: 2-{3-[(4-clorofenil)metil]-5-[(4-metoxifenil)metoxi]-1H-pirazol-1-il}-4-(3,3,3-trifluoroprop-1- in-1-il)piridina

Una mezcla de 2-{3-[(4-clorofenil)metil]-5-[(4-metoxifenil)metoxi]-1H-pirazol-1-il}-4-yodopiridina (430 mg, 0,81 mmol), 1- tributilestanilo-3,3,3-trifluoro-1-propino (363 mg, 0,85 mmol, 90 %) y Pd(Ph3)4 (88 mg, 0,081 mmol) en tolueno (15 mL) se agitó durante 2 h a 120 °C bajo N2 en un horno de microondas. La mezcla se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre gel de sílice (PE/EA=10/1 a 3/1) para proporcionar el compuesto del título (211 mg, 52 %). [M+H] calculado para C26H19ClF3N3O2: 498; encontrado: 498.

Preparación 4E: 2-{3-[(4-clorofenil)metil]-5-[(4-metoxifenil)metoxi]-1H-pirazol-1-il}-4-{1-[(4-metoxifenil)metil] -5-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-4-il}piridina y 2-{3-[(4-clorofenil)metil]-5-[(4-metoxifenil)metoxi]-1H- pirazol-1-il}-4-{1-[(4-metoxifenil)metil]-4-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-5-il}piridina

Una solución de 2-{3-[(4-clorofenil)metil]-5-[(4-metoxifenil)metoxi]-1H-pirazol-1-il}-4-(3,3,3-trifluoroprop-1- in-1-il)piridina (210 mg, 0,42 mmol) y 1-azidometil-4-metoxi-benceno (71 mg, 0,42 mmol) en tolueno (20 mL) se sometió a reflujo durante 22 horas. La solución se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre gel de sílice (PE/EA=10/1 a 3/1) para proporcionar una mezcla de los compuestos del título (226 mg, 81 %).

[M+H] calculado para C34H28ClF3N6O3: 661; encontrado, 661.

Ejemplo 4

3-[(4-clorofenil)metil]-1-{4-[5-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-4-il]piridin-2-il}-1H-pirazol-5-ol

Una solución de 2-{3-[(4-dorofenil)metil]-5-[(4-metoxifenil)metoxi]-1H-pirazol-1-il}-4-{1-[(4-metoxifenil)metil] -5-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-4-il}piridina (l2o mg, 0,18 mmol) en TFA (5 mL) se agitó durante 1 hora a 50 °C, después de la concentración el residuo se purificó por prep-HPLC para dar el compuesto del título (30 mg, 39 %). RMN 1H (400 MHz, DMSO): 53,88 (2H, s), 5,24 (1H, br), 7,34-7,51 (6H, m), 8,60 (1H, d, J=5,6 Hz). [M+H] calculado para C18H12ClF3N6O: 421; encontrado: 421.

Ejemplo 5

Ensayo de inhibición enzimática in vitro

Este ensayo determina la capacidad de un compuesto de prueba para inhibir la actividad de las desmetilasas PHF8, FBXL10 y FBXL11. El FBXL11 expresado en baculovirus (Acceso de GenBank # NM_ 012308, AA1-1162) se adquirió de BPS Bioscience (catálogo # 50102). El FBXL10 expresado en baculovirus (Acceso de GenBank # NM_032590, AA 1-650) se adquirió de BPS Bioscience (catálogo # 50120). El PHF8 expresado en baculovirus (Acceso de GenBank # NP_055922.1) se adquirió de Active Motif (catálogo # 31435).

Ensayo con FBXL11

La capacidad de los compuestos de prueba para inhibir la actividad de FBXL11 se determinó en un formato de placa de 384 pocillos bajo las siguientes condiciones de reacción: 0,15 nM de FBXL11, 30 nM de péptido H3K36me2-biotina marcado (catálogo de Anaspec # 64442), 0,2 ^M de ácido alfa-cetoglutárico en tampón de ensayo de 50 mM de HEPES, pH 7,3, Brij35 al 0,005 %, 0,5 mM de TCEP, 0,2 mg/mL de BSA, 50 ^M de L-ascorbato de sodio, 5 ^M de sulfato de amonio hierro II. El producto de la reacción se determinó cuantitativamente por detección AlphaScreen después de la adición de los reactivos de detección anticuerpo anti-H3K36mel, perlas de donantes recubiertas con estreptavidina AlphaScreen® y perlas de aceptor de proteína A AlphaScreen® en 50 mM de HEPES, pH 7,3, 10 mM de NaCl, Brij35 al 0,005 %, 5 mM de EDTA, 2 mg/mL de BSA hasta unas perlas finales de 10 ^g/mL.

La reacción del ensayo se inició de la siguiente manera: En cada pocillo de la Proxiplate de 384 pocillos (Perkin Elmer) se añadieron 3 ^L de la mezcla de 90 nM de péptido H3K36me2-biotina marcado y 0,6 ^M de ácido alfacetoglutárico con 3 ^L de inhibidor diluido en serie de 11 puntos en DMSO al 3 %, seguido de la adición de 3 ^L de 0,45 nM de FBXL11 para iniciar la reacción. La mezcla de reacción se incubó a temperatura ambiente durante 1 h y se terminó con la adición de 3 ^L de la dilución apropiada de anticuerpo anti-H3K36mel en 50 mM de HEPES, pH 7,3, 10 mM de NaCl, Brij35 al 0,005 %, 5 mM de EDTA, y 2 mg/mL de BSA. Luego, las placas se incubaron a temperatura ambiente durante 40 min, seguido de la adición de 3 ^L de 50 ^g/mL de perlas de donante recubiertas con estreptavidina AlphaScreen® y de perlas de aceptor de proteína A AlphaScreen® en 50 mM de HEPES, pH 7,3, 10 mM de NaCl, Brij35 al 0,005 %, 10 mM de EDTA, 2 mg/mL de BSA. Las placas se leyeron con el lector EnVision Multilabel Reader en modo AlphaScreen después de un mínimo de 2 h de incubación a temperatura ambiente. La señal AlphaScreen de cada pocillo se usó para determinar la constante de inhibición (IC5o).

Ensayo con FBXL10

La capacidad de los compuestos de prueba para inhibir la actividad de FBXL10 se determinó en un formato de placa de 384 pocillos bajo las siguientes condiciones de reacción: 0,3 nM de FBXL10, 30 nM de péptido H3K36me2-biotina marcado (catálogo de Anaspec # 64442), 0,2 ^M de ácido alfa-cetoglutárico en tampón de ensayo de 50 mM de HEPES, pH 7,3, Brij35 al 0,005 %, 0,5 mM de Tc EP, 0,2 mg/mL de BSA, 50 ^M de L-ascorbato de sodio, 5 ^M de sulfato de amonio hierro II. El producto de la reacción se determinó cuantitativamente por detección AlphaScreen después de la adición de los reactivos de detección anticuerpo anti-H3K36mel, perlas de donantes recubiertas con estreptavidina AlphaScreen® y perlas de aceptor de proteína A AlphaScreen® en 50 mM de HEPES, pH 7,3, 10 mM de NaCl, Brij35 al 0,005 %, 5 mM de EDTA, 2 mg/mL de BSA hasta unas perlas finales de 10 ^g/mL.

La reacción del ensayo se inició de la siguiente manera: en cada pocillo de la Proxiplate de 384 pocillos (Perkin Elmer) se añadieron 3 ^L de la mezcla de 90 nM de péptido H3K36me2-biotina marcado y 0,6 ^M de ácido alfacetoglutárico con 3 ^L de inhibidor diluido en serie de 11 puntos en DMSO al 3 %, seguido de la adición de 3 ^L de 0,9 nM de FBXL10 para iniciar la reacción. La mezcla de reacción se incubó a temperatura ambiente durante 1 h y se terminó con la adición de 3 pL de la dilución apropiada de anticuerpo anti-H3K36mel en 50 mM de HEPES, pH 7,3, 10 mM de NaCl, Brij35 al 0,005 %, 5 mM de EdTA y 2 mg/mL de BSA. Luego, las placas se incubaron a temperatura ambiente durante 40 min, seguido de la adición de 3 pL de 50 pg/mL de perlas de donante recubiertas con estreptavidina AlphaScreen® y de perlas de aceptor con proteína A AlphaScreen® en 50 mM de HEPES, pH 7,3, 10 mM de NaCl, Brij35 al 0,005 %, 5 mM de EDTA, 2 mg/mL de BSA. Las placas se leyeron con el lector EnVision Multilabel Reader en modo AlphaScreen después de un mínimo de 2 horas de incubación a temperatura ambiente. La señal AlphaScreen de cada pocillo se usó para determinar la constante de inhibición (IC⁵⁰).

Ensayo con PHF8

La capacidad de los compuestos de prueba para inhibir la actividad de PHF8 se determinó en un formato de placa de 384 pocillos bajo las siguientes condiciones de reacción: 3 nM de PHF8, 200 nM de péptido H3K9mel-biotina marcado (catálogo de Anaspec # 64358), 0,5 pM de ácido alfa-cetoglutárico en tampón de ensayo de 50 mM de HEPES, pH 7,3, Brij35 al 0,005 %, 0,5 mM de TCEP, 0,2 mg/mL de BSA, 50 pM de L-ascorbato de sodio y 5 pM de sulfato de amonio hierro II. El producto de la reacción se determinó cuantitativamente por TR-FRET después de la adición del reactivo de detección Estreptavidina-aloficocianina de Phycolink (Prozyme) y del anticuerpo antihistona H3 lisina 9/lisina27 (H3K9/K27) no modificada conjugado con Europium (PerkinElmer) en presencia de 5 mM de EDTA en tampón de detección LANCE (PerkinElmer) a una concentración final de 25 nM y 0,5 nM, respectivamente. La reacción del ensayo se inició de la siguiente manera: en cada pocillo de la placa se añadieron 2 pL de la mezcla de 600 nM de péptido H3K9mel-biotina marcado y 1,5 pM de ácido alfa-cetoglutárico con 2 pL de inhibidor diluido en serie de 11 puntos en DMSO al 3 %, seguido de la adición de 2 pL de 9 nM de PHF8 para iniciar la reacción. La mezcla de reacción se incubó a temperatura ambiente durante 15 minutos y se terminó mediante la adición de 6 pL de 5 mM de EDTA en tampón de detección LANCE que contiene 50 nM de Estreptavidina-aloficocianina de Phycolink y 1 nM de anticuerpo anti-H3K9/K27 no modificada conjugado con Europium. Las placas se leyeron con el lector EnVision Multilabel Reader en modo TR-FRET (excitación a 320 nm, emisión a 615 nm y 665 nm) después de 1 hora de incubación a TA. Se calculó una relación (665/615) para cada pocillo y se ajustó para determinar la constante de inhibición (IC⁵⁰).

Ejemplo 6

Ensayo de inhibición enzimática in vitro

Este ensayo determina la capacidad de un compuesto de prueba para inhibir la actividad de las desmetilasas Jarid1B, j Mj D2C y JMJD3. El JaridlB expresado en baculovirus (Acceso de GenBank # NM-006618, AA 2-751) se adquirió de BPS Bioscience (catálogo # 50121) o se fabricó de manera personalizada por MolecularThroughput. El JMJD2C expresado en baculovirus (Acceso de GenBank # BC143571, AA 2-372) se adquirió de BPS Bioscience (catálogo # 50105). El JMJD3 expresado en baculovirus (Acceso de GenBank # NM-001080424, extremo AA1043) se adquirió de BPS Bioscience (catálogo # 50115).

Ensayo con JaridlB

La capacidad de los compuestos de prueba para inhibir la actividad de JaridlB se determinó en un formato de placa de 384 pocillos bajo las siguientes condiciones de reacción: 0,8 nM de Jarid1B, 300 nM de péptido H3K4me3-biotina marcado (catálogo de Anaspec # 64357), 2 pM de ácido alfa-cetoglutárico en tampón de ensayo de 50 mM de HEPES, pH 7,3, Brij35 al 0,005 %, 0,5 mM de TCEP, 0,2 mg/mL de BSA, 50 pM de L-ascorbato de sodio y 2 pM de sulfato de amonio hierro II. El producto de la reacción se determinó cuantitativamente por TR-FRET después de la adición del reactivo de detección Estreptavidina-aloficocianina de Phycolink (Prozyme) y del anticuerpo antihistona H3 lisina 4 (H3K4me1-2) mono o dimetilada conjugado con Europium (PerkinElmer) en presencia de 5 mM de EDTA en tampón de detección LANCE (PerkinElmer) a una concentración final de 25 nM y 1 nM, respectivamente.

La reacción del ensayo se inició de la siguiente manera: En cada pocillo de la placa se añadieron 2 pL de la mezcla de 900 nM de péptido H3K4me3-biotina marcado y 6 pM de ácido alfa-cetoglutárico con 2 pL de inhibidor diluido en serie de 11 puntos en DMSO al 3 %, seguido de la adición de 2 pL de 2,4 nM de JaridlB para iniciar la reacción. La mezcla de reacción se incubó a temperatura ambiente durante 30 minutos y se terminó mediante la adición de 6 pL de 5 mM de EDTA en tampón de detección LANCE que contiene 50 nM de Estreptavidina-aloficocianina de Phycolink y 2 nM de anticuerpo anti-H3K4mel-2 conjugado con Europium. Las placas se leyeron con el lector EnVision Multilabel Reader en modo TR-FRET (excitación a 320 nm, emisión a 615 nm y 665 nm) después de 1 hora de incubación a temperatura ambiente. Se calculó una relación (665/615) para cada pocillo y se ajustó para determinar la constante de inhibición (IC⁵⁰).

Ensayo con JMJD2C

La capacidad de los compuestos de prueba para inhibir la actividad de JMJD2C se determinó en un formato de placa de 384 pocillos bajo las siguientes condiciones de reacción: 0,3 nM de JMJD2C, 300 nM de péptido H3K9me3-biotina marcado (catálogo de Anaspec # 64360), 2 pM de ácido alfa-cetoglutárico en tampón de ensayo de 50 mM de HEPES, pH 7,3, Brij35 al 0,005 %, 0,5 mM de TCEP, 0,2 mg/mL de BSA, 50 pM de L-ascorbato de sodio y 2 pM de sulfato de amonio hierro II. El producto de la reacción se determinó cuantitativamente por TR-FRET después de la adición del reactivo de detección Estreptavidina-aloficocianina de Phycolink (Prozyme) y del anticuerpo antihistona H3 lisina (H3K9me2) dimetilada conjugado con Europium (PerkinElmer) en presencia de 5 mM de EDT^a en tampón de detección LANCE (PerkinElmer) a una concentración final de 50 nM y 1 nM, respectivamente.

La reacción del ensayo se inició de la siguiente manera: en cada pocillo de la placa se añadieron 2 pL de la mezcla de 900 nM de péptido H3K9me3-biotina marcado y 6 pM de ácido alfa-cetoglutárico con 2 pL de inhibidor diluido en serie de 11 puntos en DMSO al 3 %, seguido de la adición de 2 pL de 0,9 nM de JMJD2C para iniciar la reacción. La mezcla de reacción se incubó a temperatura ambiente durante 30 minutos y se terminó mediante la adición de 6 pL de 5 mM de EDTA en tampón de detección LANCE que contiene 100 nM de Estreptavidina-aloficocianina de Phycolink y 2 nM de anticuerpo anti-H3K9me2 conjugado con Europium. Las placas se leyeron con el lector EnVision Multilabel Reader en modo TR-FRET (excitación a 320 nm, emisión a 615 nm y 665 nm) después de 1 hora de incubación a TA. Se calculó una relación (665/615) para cada pocillo y se ajustó para determinar la constante de inhibición (IC⁵⁰).

Ensayo con MJD3

La capacidad de los compuestos de prueba para inhibir la actividad de JMJD3 se determinó en un formato de placa de 384 pocillos bajo las siguientes condiciones de reacción: 1 nM de JMJD3, 250 nM de péptido H3K27me3-biotina marcado (catálogo de Anaspec # 64367), 1 pM de ácido alfa-cetoglutárico en tampón de ensayo de 50 mM de HEPES, pH 7,3, Brij35 al 0,005 %, 0,5 mM de TCEP, 0,2 mg/mL de BSA, 50 pM de L-ascorbato de sodio, 5 pM de sulfato de amonio hierro II. El producto de la reacción se determinó cuantitativamente por detección AlphaScreen después de la adición de los reactivos de detección anticuerpo anti-H3K27mel, 5 pg/mL de perlas de donante recubiertas con estreptavidina AlphaScreen® y 5 pg/mL de perlas de aceptor de proteína A AlphaScreen® en 50 mM de HEPES, pH 7,3, 10 mM de NaCl, Brij35 al 0,005 %, 10 mM de EDTA, 2 mg/mL de BSA.

La reacción del ensayo se inició de la siguiente manera: en cada pocillo de la Proxiplate de 384 pocillos (Perkin Elmer) se añadieron 3 pL de la mezcla de 750 nM de péptido H3K27me3-biotina marcado y 3 pM de ácido alfacetoglutárico con 3 pL de inhibidor diluido en serie de 11 puntos en DMSO al 3 %, seguido de la adición de 3 pL de 3 nM de JMJD3 para iniciar la reacción. La mezcla de reacción se incubó a temperatura ambiente durante 20 min y se terminó con la adición de 3 pL de la dilución apropiada de anticuerpo anti-H3K27mel en 50 mM de HEPES, pH 7,3, 10 mM de NaCl, Brij35 al 0,005 %, 5 mM de E^dT^a , 2 mg/mL de B^sA. Las placas se incubaron a TA durante 1 h, seguido de la adición de 3 pL de 25 pg/mL de perlas de donante recubiertas con estreptavidina AlphaScreen® y de perlas de aceptor de proteína A AlphaScreen® en 50 mM de HEPES, pH 7,3, 10 mM de NaCl, Brij35 al 0,005 %, 10 mM de EDTA, 2 mg/mL de BSA. Las placas se leyeron con el lector EnVision Multilabel Reader en modo AlphaScreen (excitación a 320 nm, emisión a 615 nm y 665 nm) después de un mínimo de 2 horas de incubación a ^tA. La señal de AlphaScreen para cada pocillo se usó para determinar la constante de inhibición (IC⁵⁰).

Se cuantificó la capacidad para inhibir la actividad de la desmetilasa y se determinó el valor IC⁵⁰ respectivo para compuestos derivados de triazolilpiridina sustituida. La Tabla 3 proporciona los valores IC⁵⁰, en pM, de diversos compuestos divulgados en la presente descripción; en la que los datos de IC⁵⁰ del ensayo bioquímico se designan en los siguientes intervalos A: < 0,10 pM; B: > 0,10 pM a < 1,0 pM; C: > 1,0 pM a < 10 pM; y D: > 10 pM.

Ejemplo 7

Preparación de formas de dosificación farmacéuticas: Tableta oral

Se prepara un comprimido mediante la mezcla del 48 % en peso de un compuesto de fórmula I o fórmula II, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, el 45 % en peso de celulosa microcristalina, el 5 % en peso de hidroxipropilcelulosa de baja sustitución y el 2 % en peso del estearato de magnesio. Las tabletas se preparan por compresión directa. El peso total de las tabletas comprimidas se mantiene a 250 mg-500 mg.

Claims (11)

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto que tiene la estructura de fórmula II

en donde un compuesto de fórmula II es opcionalmente una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y en donde

R2 es halógeno o CF3;

R3 es hidrógeno, halógeno, -OH, -OR6, -N(R6)2, o alquilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, carbociclilalquilo, heterociclilalquilo, aralquilo o heteroarilalquilo opcionalmente sustituido, en donde cada R6 es independientemente hidrógeno, alquilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, carbociclilalquilo, heterociclilalquilo, aralquilo o heteroarilalquilo;

R4 es hidrógeno, halógeno, -OH, -OR6, -N(R6)2, o alquilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, carbociclilalquilo, heterociclilalquilo, aralquilo o heteroarilalquilo opcionalmente sustituido; y R5 es hidrógeno, metilo, etilo, isopropilo, /-butilo, CHF2, CH2F, CF3, CH2OH, CHCH3OH, o C(CH3)2OH.

2. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R2 es cloro o flúor, o en donde R2 es CF3.

3. El compuesto de la reivindicación 1,

en donde R3 es heterociclilalquilo opcionalmente sustituido, y R4 y R5 son hidrógeno;

en donde R3 es ciclilalquilo opcionalmente sustituido, y R4 y R5 son hidrógeno; o

en donde R3 es feniloximetilo opcionalmente sustituido, y R4y R5 son hidrógeno.

4. El compuesto de la reivindicación 1, que tiene la estructura:

5. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde el compuesto es una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto.

6. Un compuesto de la reivindicación 1 seleccionado del grupo que consiste en

3-[(4-clorofenil)metil]-1-{4-[5-(trifluorometil)-1H-1,2,3-triazol-4-il]piridin-2-il}-1H-pirazol-5-ol, y

una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

7. Una composición farmacéutica que comprende el compuesto de la reivindicación 1 o la reivindicación 6 y al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.

8. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o la composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 7 para uso en el tratamiento de enfermedades cancerosas o neoplásicas.

9. El compuesto o la composición farmacéutica para el uso de acuerdo con la reivindicación 8, en donde el cáncer es cáncer de páncreas, cáncer de próstata, cáncer de mama, cáncer de vejiga, cáncer de pulmón, cáncer gástrico, leucemia y/o melanoma.

10. El compuesto o la composición farmacéutica para el uso de acuerdo con la reivindicación 9, en donde la leucemia es leucemia mieloide aguda.

11. El compuesto o la composición farmacéutica para el uso de acuerdo con la reivindicación 9, en donde el cáncer de páncreas es adenocarcinoma ductal pancreático.