ES2877140T3 - Derivados de pirimidinona como inhibidores de Cdc7 - Google Patents
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Abstract
Un compuesto de Fórmula I: **(Ver fórmula)** o una sal o solvato del mismo en donde, X se elige de flúor, cloro, bromo, yodo y CN; R2 es un grupo A-B-C en donde, A es un enlace; B está ausente; y C es un heterocicloalquilo de 3 a 7 miembros que está opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5; R1 es un grupo heteroarilo de Fórmula A **(Ver fórmula)** en donde Z1 se selecciona de C y N, Z2 se selecciona de CRa, NRB, N, O y S, Z3 se selecciona de N y NRc, Z4 y Z5 se seleccionan independientemente de O, N, S, NRd y CRe; Ra se selecciona de hidrógeno, hidroxilo, halógeno, COOR3, C1-C6alquilo, C2-C6alquenilo, C2-C6alquinilo, C0- C6alquilarilo, C0-C6alquilcicloalquilo, C0-C6alquilheterocicloalquilo, C0-C6alquilheteroarilo, C0-C6alquilCN, C0- C6alquilC(=O)C0-C6alquiloR3, C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquilOR3, C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquilNR3R4, haloC1- C6alquil, NO2, C0-C6alquilNR3R4, C0-C6alquilNR3C0-C6alquilOR4,C0-C6alquilOS(=O)R4, -C0- C6alquilOS(=O)2R4,-C0-C6alquilS(=O)pR4, -OCN, y -SCN, en donde cualquiera de los anteriores está opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5; y RB y RC se seleccionan independientemente de hidrógeno, C1-C6 alquilo y C3-C6 cicloalquilo; o Ra y RC se toman juntos para formar un anillo fusionado de 6 miembros opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5; Rd se selecciona de hidrógeno, C1-C6 alquilo y C3-C6 cicloalquilo; Re se selecciona de hidrógeno, hidroxilo, halógeno, OR3, COOR3, C1-C6alquilo, C2-C6alquenilo, C2-C6alquinilo, C0-C6alquilarilo, C0-C6alquilcicloalquilo, C0-C6alquilheterocicloalquilo, C0-C6alquilheteroarilo, C0-C6alquilCN, C0- C6alquilC(=O)C0-C6alquiloR3, C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquiloOR3, C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquilNR3R4, haloC1- C6alquilo, NO2, C0-C6alquilNR3R4, C0-C6alquilNR3C0-C6alquilOR4,C0-C6alquilOS(=O)R4, -C0- C6alquilOS(=O)2R4,-C0-C6alquilS(=O)pR4, -OCN, y -SCN; o dos grupos Re adyacentes, grupos Rc y Re adyacents o Re y Rd adyacentes se toman juntos para formar un anillo fusionado de 6 miembros opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5; cada R3 y R4 se elige cada uno independientemente de H, C1-C6alquilo, C2-C6alquenilo, C2-C6alquinilo, haloC1- C6alquilo, C0-C6alquilarilo, C0-C6alquilcicloalquilo, C0-C6alquilheteroarilo, C0-C6alquilheterocicloalquilo, en donde cualquiera de los anteriores, excepto H, está opcionalmente sustituido con uno o más R5; o R3 y R4 se toman juntos para formar un sistema de anillo carbocíclico o heterocíclico de 3 a 7 miembros, en donde dicho sistema de anillo está opcionalmente sustituido con uno o más R5; cada R5 se elige independientemente de halógeno, hidroxilo, OR6, C1-C10alquilo, C2-C10alquenilo, C2- C10alquinilo, C0-C6alquilarilo, C0-C6alquilcicloalquilo, C0-C6alquilheterocicloalquilo, C0-C6alquilheteroarilo, -C0- C6alquilCN, -C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquilR6, -C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquilOR6, -C0-C6alquilC(=O)C0- C6alquilNR6R6, -C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquilNR6C(=O)OR6, haloC1-C6alquil, NO2, -C0-C6alquilNR6R6, -C0- C6alquilNR6C0-C6alquilOR6, -C0-C6alquilNR6C0-C6alquilC(=O)R6, -C0-C6alquilOR6, (=O),-C0-C6alquilOC(=O)C0- C6alquilR6, -C0-C6alquilOC(=O)C0-C6alquilNR6R6, -C0-C6alquilOC(=O)C0-C6alquilOR6, -C0-C6alquilOS(=O)R6, - C0-C6alquilOS(=O)2R6, -C0-C6alquilOS(=O)2C0-C6alquilOR6, -C0-C6alquilOS(=O)2C0-C6alquilNR6R6, -C0- C6alquilS(=O)pR6, -C0-C6alquilS(=O)2C0-C6alquilNR6R6, -C0-C6alquilS(=O)C0-C6alquilNR6R6, en donde cada uno de los anteriores está opcionalmente sustituido con R7, o junto con los átomos de carbono a los que están unidos, dos grupos R5 están unidos para formar un arilo fusionado, heteroarilo, heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros o un cicloalquilo de 3 a 6 miembros; cada R6 se elige independientemente de H, C1-C10alquilo, C2-C10alquenilo, C2-C10alquinilo, haloC1-C6alquilo, C0-C6alquilarilo, C0-C6alquilcicloalquilo, C0-C6alquilheteroarilo, C0-C6alquilheterocicloalquilo, en donde cada uno de los anteriores está opcionalmente sustituido con R7; o dos R6 se toman juntos para formar un sistema de anillo carbocíclico o heterocíclico de 3 a 15 miembros, en donde dicho sistema de anillo está opcionalmente sustituido con uno o más R7; cada R7 se elige independientemente de halógeno, hidroxilo, C1-C6alquilo, OC1-C6alquilo y haloC1-C6alquilo; y cada p es independientemente 0, 1 o 2.
Description
DESCRIPCIÓN
Derivados de pirimidinona como inhibidores de Cdc7
Esta solicitud se refiere a compuestos de Fórmula I como se definen en la presente descripción y sales o solvatos de los mismos.
Los compuestos de Fórmula I y sus sales tienen actividad inhibidora de Cdc7 y pueden usarse para tratar enfermedades o afecciones mediadas, al menos en parte, por Cdc7.
La presente solicitud proporciona además composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de Fórmula I y/o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo y un excipiente farmacéuticamente aceptable.
La presente solicitud también describe métodos para tratar una enfermedad o afección mediada, al menos en parte, por Cdc7 en un sujeto que lo necesite, que comprenden administrar al sujeto un compuesto de Fórmula I y/o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo.
Antecedentes de la invención
Las células eucariotas se dividen mediante un proceso escalonado dirigido y altamente regulado conocido como ciclo celular. La replicación del ADN es una parte esencial de la progresión del ciclo celular y una regulación estricta asegura que el ADN se replique con precisión solo una vez durante la fase S. En células de mamíferos, la replicación del ADN se inicia en múltiples sitios (orígenes de replicación). Numerosos complejos de pre-replicación (pre-RC) se forman en los orígenes de la replicación a lo largo de cada hebra de ADN durante G1 para asegurar que todo el genoma se replica completamente en la fase S. El pre-RC inactivo consiste en el complejo de mantenimiento de minicromosomas 2-7 (MCM2-7) de helicasa heterohexámera, el ciclo de división celular 6 (Cdc6) y licencia de cromatina y factor de replicación de ADN 1 (Cdt1) (Donaldson y otros, 1998; Masai y otros, 2002). El ciclo de división celular 7 (Cdc7) es una Ser/Thr quinasa, que junto con su socio regulador el formador de campanillas 4 (Dbf4), forma el complejo quinasa de fase S activa, quinasa dependiente de Dbf4 (DDK) (Kumagai y otros, 1999; Jiang y otros/, 1999; Duncker y otros/, 2003). La DDK es esencial para controlar el inicio de la replicación del ADN en combinación con Cdk/ciclinas mediante la activación o licenciamiento del pre-RC; esta activación implica la fosforilación de MCM2 y MCM4 (Kim 2003, Bousset y otros, 1998, Takeda y otros, 2001; Bruck y otros, 2009; Francis y otros/, 2009; Sheu y otros/, 2006; Sheu y otros/, 2010). Cdc7 fosforila MCM2 en varios sitios, incluidos Ser53 y Ser40 exclusivamente (Charych y otros/, 2008; Tsuji y otros, 2006; Montagnoli y otros, 2006; Cho y otros, 2006). La fosforilación del extremo amino de MCM4 por Cdc7 también es esencial para la replicación, pero se desconocen los sitios de fosforilación exactos (Masai y otros, 2006; Pereverzeva y otros, 2000).
El agotamiento de Cdc7 por el ARNip inhibe la fosforilación de MCM2 tanto en fibroblastos primarios no transformados como en líneas de células cancerosas; sin embargo, las células de fibroblastos primarios no transformados se detienen en G1 mientras que las células cancerosas mueren (Rodríguez-Acebes y otros/, 2010; Kulkarni y otros/, 2009, Montagnoli y otros, 2004). Se cree que la falta de muerte celular en las células normales se debe a la inducción de un punto de control G1 funcional que es deficiente en las líneas celulares cancerosas. Por lo tanto, cuando Cdc7 se agota, las células cancerosas entran en una fase S defectuosa y sufren apoptosis debido a una disfunción del punto de control (Tudzarova y otros, 2010; Soy y otros, 2008; Shreeram y otros, 2002). El agotamiento de Cdc7 por el ARNip en combinación con tratamiento con hidroxiurea o etopósido altera la hiperfosforilación de Mcm2 en sitios específicos de fosforilación dependientes de Cdc7 y la hiperfosforilación inducida por fármacos de Mcm4 unido a cromatina. De hecho, la inhibición sostenida de Cdc7 en presencia de hidroxiurea o etopósido aumenta la muerte celular, lo que respalda la idea de que la cinasa Cdc7 desempeña un papel en el mantenimiento de la viabilidad celular durante el estrés de replicación (Tenca y otros, 2007).
En un panel de 62 líneas celulares cancerosas, se encontró que la expresión de la proteína Cdc7 aumentaba en ~50 % de las líneas de células tumorales humanas examinadas, mientras que la proteína Cdc7 era muy baja o indetectable en tejidos y líneas celulares normales. Además, la mayoría de las líneas celulares cancerosas con niveles aumentados de proteína Cdc7 también tenían una mayor abundancia de Dbf4 y también se detectó una alta expresión de la proteína Cdc7 en tumores primarios de mama, colon y pulmón, pero no en los tejidos normales emparejados (Bonte y otros/, 2008). El análisis de muestras de tumores de cánceres de mama y de ovario ha demostrado una correlación entre la sobreexpresión de Cdc7 y la supervivencia deficiente, el grado del tumor, la inestabilidad genética y la aneuploidía (Rodríguez-Acebes y otros/, 2010; Kulkarni y otros/, 2009; Choschzick y otros/, 2010), lo que apoya la importancia de Cdc7 en la regulación de la proliferación celular. Además, Cdc7-Dbf4 se sobreexpresa en el carcinoma oral de células escamosas y la expresión se asocia positivamente con un resultado clínico deficiente y aumenta la resistencia a los agentes citotóxicos que dañan el ADN como la hidroxiurea y la camptotecina (Cheng y otros, 2013).
La observación de que la atenuación de Cdc7 mediada por ARNip da como resultado la apoptosis en múltiples líneas de células cancerosas pero no en células normales hace que Cdc7 sea un objetivo atractivo para el cáncer. Además, se ha demostrado que la inhibición de la actividad catalítica de Cdc7 da como resultado la muerte celular apoptótica en múltiples tipos de células cancerosas y la inhibición del crecimiento tumoral en modelos preclínicos de cáncer
(Montagoli y otros/, 2008). Además, la inhibición de Cdc7 bloquea la síntesis de ADN, previene la activación de los orígenes de la replicación pero no impide la progresión de la horquilla de replicación y no desencadena una respuesta sostenida al daño del ADN (Montagoli y otros/, 2008). Tomados en conjunto, estos estudios sugieren que la inhibición selectiva de Cdc7 es un tratamiento anticanceroso prometedor. Woods, KW y otros, Bioorg. Med. Chem. Lett. 2012; 22(5): 1940-1943 describe una serie de aminopirimidinonas, que se afirma que son útiles como inhibidores de la quinasa Cdc7.
Existe una necesidad en la técnica de agentes (alternativos y/o mejorados) capaces de inhibir Cdc7.
Resumen de la invención
En un aspecto, la presente invención proporciona un compuesto como se define en la presente y/o una sal o solvato del mismo.
En otro aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto como se define en la presente descripción, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo en mezcla con un diluyente o portador farmacéuticamente aceptable.
En otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto como se define en la presente descripción, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, o una composición farmacéutica como se define en la presente descripción, para su uso en terapia.
En otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto como se define en la presente descripción, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, o una composición farmacéutica como se define en la presente descripción, para su uso en el tratamiento de un trastorno proliferativo
En otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto como se define en la presente descripción, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, o una composición farmacéutica como se define en la presente descripción, para su uso en el tratamiento del cáncer.
En otro aspecto, la presente invención proporciona una combinación que comprende un compuesto o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define en la presente descripción, con uno o más agentes terapéuticos adicionales.
Las características preferidas, adecuadas y opcionales de cualquier aspecto particular de la presente invención son también características preferidas, adecuadas y opcionales de cualquier otro aspecto.
Descripción detallada de la invención
Definiciones
Los compuestos e intermedios descritos en la presente descripción se pueden nombrar de acuerdo con los sistemas de nomenclatura IUPAC (Unión Internacional para la Química Pura y Aplicada) o CAS (Servicio de Resumen Químico). Debe entenderse que, a menos que se indique expresamente lo contrario, los términos "compuestos de Fórmula I", "compuestos de Fórmula Ib", "compuestos de Fórmula Ic" y el término más general "compuestos" se refieren e incluyen todos y cada uno de los compuestos descritos por y/o con referencia a la Fórmula I, Ib y Ic respectivamente. También debe entenderse que estos términos abarcan todos los estereoisómeros, es decir, isómeros cis y trans, así como isómeros ópticos, es decir, los enantiómeros R y S de dichos compuestos y todas las sales de los mismos, en forma sustancialmente pura y/o cualquier mezcla de los anteriores en cualquier proporción. Esta comprensión se extiende a las composiciones farmacéuticas y a los métodos de tratamiento que emplean o comprenden uno o más compuestos de Fórmula I, Ib y Ic, ya sea por sí mismos o en combinación con agentes adicionales.
Los diversos restos que contienen hidrocarburo proporcionados en la presente descripción se pueden describir usando un prefijo que designa el número mínimo y máximo de átomos de carbono en el resto, por ejemplo, "(Ca-Cb)". Por ejemplo, alquilo (Ca-Cb) indica un resto alquilo que tiene el número entero "a" con respecto al número entero "b" de átomos de carbono, incluidos. Ciertos restos también pueden describirse de acuerdo con el número mínimo y máximo de miembros con o sin referencia específica a un átomo particular o estructura general. Por ejemplo, los términos "anillo de miembros a a b" o "que tiene entre miembros a a b" se refieren a un resto que tiene el número entero "a" con respecto al número entero "b" de átomos, incluidos.
"Aproximadamente" cuando se usa en la presente descripción junto con un valor medible como, por ejemplo, una cantidad o un período de tiempo y similares, pretende abarcar variaciones razonables del valor, por ejemplo, para permitir un error experimental en la medición de dicho valor.
Como se usan en la presente descripción por sí mismos o junto con otro término o términos, "alquilo" y "grupo alquilo" se refieren a una cadena de hidrocarburos saturados ramificada o no ramificada. A menos que se especifique lo
contrario, los grupos alquilo contienen típicamente de 1 a 10 átomos de carbono, tales como de 1 a 6 átomos de carbono o de 1 a 4 átomos de carbono o de 1 a 3 átomos de carbono, y pueden estar sustituidos o no sustituidos. Los ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a, metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, i-butilo, s-butilo, tbutilo, n-pentilo, n-hexilo, n-heptilo, n-octilo, n-nonilo, n-decilo, isopropilo, terc-butilo, isobutilo, etc.
Como se usan en la presente descripción por sí mismos o junto con otro término o términos, "alquileno" y "grupo alquileno" se refieren a una cadena de hidrocarburos saturados ramificada o no ramificada. A menos que se especifique lo contrario, los grupos alquileno contienen típicamente de 1 a 10 átomos de carbono, tales como de 1 a 6 átomos de carbono o de 1 a 3 átomos de carbono, y pueden estar sustituidos o no sustituidos. Los ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a, metileno (-CH2-), los isómeros de etileno (-CH(CH3)- y -CH2CH2-), los isómeros de propileno (-CH(CH3) CH2-, -CH(CH2CH=)-, -C(CH3)=- y -CH2CH2CH2-), etc.
Como se usan en la presente descripción por sí mismos o junto con otro término o términos, "alquenilo" y "grupo alquenilo" se refieren a una cadena de hidrocarburos ramificada o no ramificada que contiene al menos un doble enlace. A menos que se especifique lo contrario, los grupos alquenilo contienen típicamente de 2 a 10 átomos de carbono, tales como de 2 a 6 átomos de carbono o de 2 a 4 átomos de carbono, y pueden estar sustituidos o no sustituidos. Los ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a, etenilo, 3-buten-1-ilo, 2-etenilbutilo y 3-hexen-1-ilo.
Como se usan en la presente descripción por sí mismos o junto con otro término o términos, "alquinilo" y "grupo alquinilo" se refieren a una cadena de hidrocarburo ramificada o no ramificada que contiene al menos un triple enlace. A menos que se especifique lo contrario, los grupos alquinilo contienen típicamente de 2 a 10 átomos de carbono, tales como de 2 a 6 átomos de carbono o de 2 a 4 átomos de carbono, y pueden estar sustituidos o no sustituidos. Los ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a, etinilo, 3-butin-1-ilo, propinilo, 2-butin-1-ilo y 3-pentin-1-ilo.
Como se usa en la presente descripción por sí mismo o junto con otro término o términos, "aromático" se refiere a sistemas de anillos monocíclicos y policíclicos que contienen 4n+2 electrones pi, donde n es un número entero. Se debe entender que aromático se refiere a, e incluye, sistemas de anillo que contienen solo átomos de carbono (es decir, "arilo"), así como sistemas de anillo que contienen al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S (es decir, "heteroaromático" o "heteroarilo"). Un sistema de anillo aromático pueden estar sustituido o no sustituido.
Como se usa en la presente descripción por sí mismo o junto con otro término o términos, "no aromático" se refiere a un sistema de anillo monocíclico o policíclico que tiene al menos un doble enlace que no es parte de un sistema pi conjugado extendido. Como se usa en la presente descripción, no aromático se refiere e incluye sistemas de anillo que contienen solo átomos de carbono así como sistemas de anillo que contienen al menos un heteroátomo seleccionado de N, O o S. Un sistema de anillo no aromático puede estar sustituido o no sustituido.
Como se usan en la presente descripción por sí mismos o junto con otro término o términos, "arilo" y "grupo arilo" se refieren a fenilo y sistemas de anillos de hidrocarburos bicíclicos o tricíclicos de 7-15 miembros, incluidos los sistemas de anillos puenteados, espiro y/o fusionados, en que al menos uno de los anillos es aromático. Los grupos arilo pueden estar sustituidos o no sustituidos. A menos que se especifique lo contrario, un grupo arilo puede contener 6 átomos en el anillo (es decir, fenilo) o un sistema de anillo que contiene de 9 a 15 átomos, tal como 9 a 11 átomos en el anillo, o 9 o 10 átomos en el anillo. Los ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a, naftilo, indanilo, 1,2,3,4-tetrahidronaftalenilo, 6,7,8,9-tetrahidro-5H-benzocicloheptenilo y 6,7,8,9-tetrahidro-5H-benzocicloheptenilo. Convenientemente, un grupo arilo es fenilo.
Como se usan en la presente descripción por sí mismos o junto con otro término o términos, "arileno" y "grupo arileno" se refieren a un fenileno (-C6H4-) o a sistemas de anillos de hidrocarburos bicíclicos o tricíclicos de 7 a 15 miembros, incluidos los sistemas de anillos con puentes, espiro y/o fusionados, en los que al menos uno de los anillos es aromático. Los grupos arileno pueden estar sustituidos o no sustituidos. En algunas realizaciones, un grupo arileno puede contener 6 (es decir, fenileno) átomos en el anillo o ser un sistema de anillo que contiene de 9 a 15 átomos; tales como de 9 a 11 átomos en el anillo; o 9 o 10 átomos en el anillo. Los grupos arileno pueden estar sustituidos o no sustituidos.
Como se usan en la presente descripción por sí mismos o junto con otro término o términos, "alquilarilo" y "grupo alquilarilo" se refieren a un grupo alquilo en el que un átomo de hidrógeno se reemplaza por un grupo arilo, en donde el grupo alquilo y el grupo arilo son como se definieron previamente, tal como, por ejemplo, bencilo (C6H5CH2-). Los grupos alquilarilo pueden estar sustituidos o no sustituidos.
Como se usan en la presente descripción por sí mismos o junto con otro término o términos, "grupo carbocíclico" y "carbociclo" se refieren a sistemas de anillos monocíclicos y policíclicos que contienen solo átomos de carbono en el (los) anillo(s), es decir, sistemas de anillo de hidrocarburo, sin tener en cuenta o referencia a aromaticidad o grado de insaturación. Por lo tanto, debe entenderse que grupo carbocíclico se refiere e incluye sistemas de anillos que están completamente saturados (como, por ejemplo, un grupo ciclohexilo), sistemas de anillos que son aromáticos (como, por ejemplo, un grupo fenilo), así como sistemas de anillo que tienen porciones aromáticas, completamente saturadas
y/o insaturadas (tales como, por ejemplo, ciclohexenilo, 2,3-dihidro-indenilo y 1,2,3,4-tetrahidronaftalenilo). Los términos carbocíclico y carbociclo incluyen además sistemas de anillos con puentes, fusionados y espirocíclicos.
Como se usan en la presente descripción por sí mismos o junto con otro término o términos, "cicloalquilo" y "grupo cicloalquilo" se refieren a un sistema de anillo carbocíclico no aromático, que puede ser monocíclico, bicíclico o tricíclico, saturado o insaturado, y puede ser puenteado, espiro y/o fusionado. Un grupo cicloalquilo puede estar sustituido o no sustituido. A menos que se especifique lo contrario, un grupo cicloalquilo contiene típicamente de 3 a 12 átomos en el anillo. En algunos casos, un grupo cicloalquilo puede contener de 4 a 10 átomos en el anillo (por ejemplo, 4 átomos en el anillo, 5 átomos en el anillo, 6 átomos en el anillo, 7 átomos en el anillo, etc.). Los ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a, ciclopropilo, ciclopropenilo, ciclobutilo, ciclobutenilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo, ciclohexenilo, norbornilo, norbornenilo, biciclo[2.2.1]hexano, biciclo[2.2.1]heptano, biciclo[2.2.1]hepteno, biciclo[3.1.1]heptano, biciclo[3.2.1]octano, biciclo[2.2.2]octano, biciclo[3.2.2]nonano, biciclo[3.3.1]nonano y biciclo[3.3.2]decano.
Como se usa en la presente descripción por sí mismos o junto con otro término o términos, "alquilcicloalquilo" y "grupo alquilcicloalquilo" se refieren a un grupo alquilo en el que un átomo de hidrógeno se reemplaza por un grupo cicloalquilo, en donde el grupo alquilo y el grupo cicloalquilo son como se definieron previamente, como, por ejemplo, ciclohexilmetilo (C6H11CH2-). Los grupos alquilcicloalquilo pueden estar sustituidos o no sustituidos.
Como se usan en la presente descripción por sí mismos o junto con otro término o términos, "haloalquilo" y "grupo haloalquilo" se refieren a grupos alquilo en los que uno o más átomos de hidrógeno son reemplazados por átomos de halógeno. El haloalquilo incluye tanto grupos alquilo saturados como grupos alquenilo y alquinilo insaturados. Los ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a -CF3 , -CHF2 , -CH2F, -CF2CF3, -CHFCF3 , -CH2CF3, -CF2CH3, -CHFCH3 , -CF2CF2CF3, -CF2CH2CH3 , -CF=CF2 , -CCl=CH2, -CBr=CH2, -Cl=CH2 , -C=C-CF3, -CHFCH2CH3 y -CHFCH2CF3. Los grupos haloalquilo pueden estar sustituidos o no sustituidos.
Tal como se usan en la presente descripción por sí mismos o junto con otro término o términos, "halo" y "halógeno" incluyen átomos y sustituyentes de flúor, cloro, bromo y yodo.
Como se usan en la presente descripción por sí mismos o junto con otro término o términos, "heteroarilo" y "grupo heteroarilo" se refieren a (a) anillos aromáticos monocíclicos de 5 y 6 miembros, que contienen, además del o de los átomos de carbono, al menos un heteroátomo, como nitrógeno, oxígeno o azufre, y (b) anillos bicíclicos y tricíclicos de 7 a 15 miembros, que contienen, además del o de los átomos de carbono, al menos un heteroátomo, como nitrógeno, oxígeno o azufre, y en los que al menos uno de los anillos es aromático. En algunos casos, un grupo heteroarilo puede contener dos o más heteroátomos, que pueden ser iguales o diferentes. Los grupos heteroarilo pueden estar sustituidos o no sustituidos y pueden ser puenteados, espiro y/o fusionados. En algunos casos, un grupo heteroarilo puede contener 5, 6 u 8 a 15 átomos en el anillo. En otros casos, un grupo heteroarilo puede contener 5 a 10 átomos en el anillo, tal como 5, 6, 9 o 10 átomos en el anillo. Los ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a, 2,3-dihidrobenzofuranilo, 1,2-dihidroquinolinilo, 3,4-dihidroisoquinolinilo, 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolinilo, 1.2.3.4- tetrahidroquinolinilo, benzoxazinilo, benztiazinilo, cromanilo, furanilo, 2-furanilo, 3-furanilo, imidazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, oxazolilo, piridinilo, 2-, 3-, o 4-piridinilo, pirimidinilo, 2-, 4-, o 5-pirimidinilo, pirazolilo, pirrolilo, 2- o 3-pirrolilo, pirazinilo, piridazinilo, 3- o 4-piridazinilo, 2-pirazinilo, tienilo, 2-tienilo, 3-tienilo, tetrazolilo, tiazolilo, tiadiazolilo, triazinilo, triazolilo, piridin-2-ilo, piridin-4-ilo, pirimidin-2-ilo, piridazin-4-ilo, pirazin-2-ilo, naftiridinilo, pteridinilo, ftalazinilo, purinilo, alloxazinilo, bencimidazolilo, benzofuranilo, benzofurazanilo, 2H-1-benzopiranilo, benzotiadiazina, benzotiazinilo, benzotiazolilo, benzotiofenilo, benzoxazolilo, cinnolinilo, furopiridinilo, indolinilo, indolizinilo, indolilo, o 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, o 7-indolilo, 3H-indolilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, isoindolilo, isoquinolinilo, 10-aza-triciclo[6.3.1.027]dodeca-2(7),3,5-trienilo, 12-oxa-10-aza-triciclo[6.3.1.027]dodeca-2(7),3,5-trienilo, 12-aza-triciclo[7.2.1.027]dodeca-2(7),3,5-trienilo, 10-aza-triciclo[6.3.2.0 27]trideca-2(7),3,5-trienilo, 2,3,4,5-tetrahidro-1H-benzo[d]azepinilo, 1,3,4,5-tetrahidro-benzo[d]azepin-2-onilo, 1,3,4,5-tetrahidro-benzo[b]azepin-2-onilo, 2.3.4.5- tetrahidro-benzo[c]azepin-1-onilo, 1,2,3,4-tetrahidro-benzo[e][1,4]diazepin-5-onilo, 2,3,4,5-tetrahidro-1H-benzo[e][1,4]diazepinilo, 5,6,8,9-tetrahidro-7-oxa-benzocicloheptenilo, 2,3,4,5-tetrahidro-1H-benzo[b]azepinilo, 1.2.4.5- tetrahidro-benzo[e][1,3]diazepin-3-onilo, 3,4-dihidro-2H-benzo[b][1,4]dioxepinilo, 3,4-dihidro-2H-benzo[f][1,4]oxazepin-5-onilo, 6,7,8,9-tetrahidro-5-tia-8-aza-benzocicloheptenilo, 5,5-dioxo-6,7,8,9-tetrahidro-5-tia-8-aza-benzocicloheptenilo, y 2,3,4,5-tetrahidro-benzo[f][1,4]oxazepinilo. Convenientemente, un heteroarilo es un anillo heteroarilo de 5 o 6 miembros que comprende uno, dos o tres heteroátomos seleccionados de N, O o S.
Como se usan en la presente descripción por sí mismos o junto con otro término o términos, "alquilheteroarilo" y "grupo alquilheteroarilo" se refieren a un grupo alquilo en el que un átomo de hidrógeno se reemplaza por un grupo heteroarilo, en donde el grupo alquilo y el grupo heteroarilo son como se definieron previamente. Los grupos alquilheteroarilo pueden estar sustituidos o no sustituidos.
Como se usan en la presente descripción por sí mismos o junto con otro término o términos, "grupo heterocíclico" y "heterociclo" se refieren a sistemas de anillos monocíclicos y policíclicos que contienen átomos de carbono y al menos un heteroátomo seleccionado de nitrógeno, oxígeno, azufre o fósforo en el anillo o los anillos, sin tener en cuenta ni hacer referencia a la aromaticidad o al grado de insaturación. Por tanto, debe entenderse que un grupo heterocíclico se refiere e incluye sistemas de anillos que están completamente saturados (como, por ejemplo, un grupo piperidinilo),
sistemas de anillos que son aromáticos (como, por ejemplo, un grupo pirindinilo), así como como sistemas de anillo que tienen porciones totalmente saturadas, aromáticas y/o insaturadas (tales como, por ejemplo, 1,2,3,6-tetrahidropiridinilo y 6,8-dihidro-5H- [1,2,4]triazolo [4,3-a]pirizinilo). Los términos heterocíclico y heterociclo incluyen además sistemas de anillos con puentes, fusionados y espirocíclicos.
Como se usan en la presente descripción por sí mismos o junto con otro término o términos, "heterocicloalquilo" y "grupo heterocicloalquilo" se refieren a sistemas de anillos no aromáticos monocíclicos, bicíclicos y tricíclicos de 3 a 15 miembros, que contienen, además del o de los átomos de carbono, al menos un heteroátomo, como nitrógeno, oxígeno, azufre o fósforo. Los grupos heterocicloalquilo pueden estar completamente saturados o contener porciones insaturadas y pueden ser sistemas de anillos con puente, espiro y/o fusionados. En algunos casos, un grupo heterocicloalquilo puede contener al menos dos o heteroátomos, que pueden ser iguales o diferentes. Los grupos heterociloalquilo puede estar sustituidos o no sustituidos. En algunos casos, un grupo heterocicloalquilo puede contener de 3 a 10 átomos en el anillo o de 3 a 7 átomos en el anillo o de 5 a 7 átomos en el anillo, tal como 5 átomos en el anillo, 6 átomos en el anillo o 7 átomos en el anillo. Los ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a, tetrahidrofuranilo, pirrolidinilo, pirrolinilo, imidazolidinilo, imidazolinilo, pirazolidinilo, pirazolinilo, piperidilo, piperazinilo, indolinilo, isoindolinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, homomorfolinilo, homopiperidilo, homopiperazinilo, tiomorfolinil-5-óxido, tiomorfolinil-S,S-dióxido, pirrolidinilo, tetrahidropiranilo, piperidinilo, tetrahidrotienil, homopiperidinilo, homotiomorfolinil-S,S-dióxido, oxazolidinonilo, dihidropirazolilo, dihidropirrolilo, dihidropirazinilo, dihidropiridinilo, dihidropirimidinilo, dihidrofurilo, dihidropiranilo, tetrahidrotienil-5-óxido, tetrahidrotienil-S,S-dióxido, homotiomorfolinil-5-óxido, quinuclidinilo, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanilo, 8-oxa-3-aza-biciclo[3.2.1]octanilo, 3,8-diazabiciclo[3.2.1]octanilo, 2,5-diaza-biciclo[2.2.1]heptanilo, 3,8-diaza-biciclo[3.2.1]octanilo, 3,9-diazabiciclo[4.2.1]nonanilo, 2,6-diaza-biciclo[3.2.2]nonanilo, [1,4]oxafosfinanilo- 4-óxido, [1,4]azafosfinanilo- 4-óxido, [1,2]oxafosfolanil- 2-óxido, fosfinanilo-1-óxido, [1,3]azafosfolidiinilo- 3-óxido, [1,3]oxafosfolanil- 3-óxido, 7-oxabiciclo[2.2.1]heptanilo, 6,8-dihidro-5H-[1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-7-ilo, 6,8-dihidro-5H-imidazo[1,5-a]pirazin-7-ilo, 6,8-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]pirazin-7-ilo, 5,6,8,9-tetrahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-d][1,4]diazepin-7-ilo y 6,8-dihidro-5H-[1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-7-ilo. Convenientemente, un grupo heterociclilalquilo como se define en la presente descripción es un grupo monocíclico, bicíclico o espiro heterociclilo que comprende uno, dos o tres heteroátomos seleccionados de N, O o S.
Como se usan en la presente descripción por sí mismos o junto con otro término o términos, "heterocicloalquileno" y "grupo heterocicloalquileno" se refieren a sistemas de anillos no aromáticos monocíclicos, bicíclicos o tricíclicos de 3 a 15 miembros, que contienen, además del o de los átomos de carbono, al menos un heteroátomo, como nitrógeno, oxígeno, azufre o fósforo. Los grupos heterocicloalquileno pueden estar completamente saturados o contener porciones insaturadas y pueden ser puenteados, espiro y/o fusionados. El grupo heterocicloalquileno puede estar sustituido o no sustituido. En algunos casos, un grupo heterocicloalquileno puede contener de 3 a 10 átomos en el anillo; tal como de 3 a 7 átomos de anillo. En otros casos, un grupo heterocicloalquileno puede contener de 5 a 7 átomos en el anillo, tal como 5 átomos en el anillo, 6 átomos en el anillo o 7 átomos en el anillo.
Como se usan en la presente descripción por sí mismos o junto con otro término o términos, "alquilheterocicloalquilo" y "grupo alquilheterocicloalquilo" se refieren a un grupo alquilo en el que un átomo de hidrógeno se reemplaza por un grupo heterocicloalquilo, en donde el grupo alquilo y el grupo heterocicloalquilo son como se definieron previamente como, por ejemplo, pirrolidinilmetil (C4H8NCH2-). El grupo alquilheterocicloalquilo puede estar sustituido o no sustituido.
Como se usa en la presente descripción por sí mismo o junto con otro término o términos, "farmacéuticamente aceptable" se refiere a materiales que son generalmente química y/o físicamente compatibles con otros ingredientes (como, por ejemplo, con referencia a una formulación), y/o generalmente es fisiológicamente compatible con el receptor (tal como, por ejemplo, un sujeto) del mismo.
Como se usa en la presente descripción por sí mismo o junto con otro término o términos, "composición farmacéutica" se refiere a una composición que se puede usar para tratar una enfermedad, afección o trastorno en un sujeto, incluido un ser humano.
Como se usa en la presente descripción por sí mismo o junto con otro término o términos, "pseudohalógeno" se refiere a -OCN, -SCN, -CFay -CN.
Como se usan en la presente descripción por sí mismos o junto con otro término o términos, "estable" y "químicamente estable" se refieren a un compuesto que es suficientemente robusto para ser aislado de una mezcla de reacción con un grado útil de pureza. La presente solicitud se dirige únicamente a la preparación de compuestos estables. Cuando las listas de sustituyentes alternativos incluyen miembros que, debido a requisitos de valencia, estabilidad química u otras razones, no pueden usarse para sustituir a un grupo particular, la lista debe leerse en contexto para incluir aquellos miembros de la lista que son adecuados para sustituir el grupo particular. Por ejemplo, cuando se considera el grado de sustitución opcional de un resto particular, debe entenderse que el número de sustituyentes no excede la valencia apropiada para ese resto. Por ejemplo, si R1 es un grupo metilo (-CH3), se puede sustituir opcionalmente por 1 a 3 R 5.
Como se usan en la presente descripción por sí mismos o junto con otro término o términos, "sujeto(s)" y "paciente(s)", se refieren a mamíferos, incluidos los seres humanos.
Como se usa en la presente descripción por sí mismo o junto con otro término o términos, "sustituido" indica que un átomo de hidrógeno en una molécula ha sido reemplazado con un átomo o grupo de átomos diferente y el átomo o grupo de átomos que reemplaza al átomo de hidrógeno es un "sustituyente". Debe entenderse que los términos "sustituyente", "sustituyentes", "resto", "restos", "grupo" o "grupos" se refieren a sustituyentes.
Como se usan en la presente descripción por sí mismos o junto con otro término o términos, "terapéutica" y "cantidad terapéuticamente eficaz" se refieren a una cantidad de un compuesto, composición o medicamento que (a) inhibe o provoca una mejora en una enfermedad, afección o trastorno particular ; (b) atenúa, mejora o elimina uno o más síntomas de una enfermedad, afección o trastorno particular; (c) o retrasa la aparición de uno o más síntomas de una enfermedad, afección o trastorno particular descrito en la presente descripción. Debe entenderse que los términos "terapéutico" y "terapéuticamente eficaz" abarcan cualquiera de los efectos (a)-(c) antes mencionados, ya sea solo o en combinación con cualquiera de los otros (a)-(c). Debe entenderse que, por ejemplo, en un ser humano u otro mamífero, una cantidad terapéuticamente eficaz puede determinarse experimentalmente en un laboratorio o en un entorno clínico, o una cantidad terapéuticamente eficaz puede ser la cantidad requerida por las directrices de la Administración de Fármacos y Alimentos de los Estados Unidos (FDA) u organismo regulador extranjero equivalente, para la enfermedad particular y el sujeto que se está tratando. Debe apreciarse que la determinación de las formas de dosificación, cantidades de dosificación y vías de administración adecuadas está dentro del nivel de conocimiento de los expertos en las técnicas farmacéutica y médica.
Como se usan en la presente descripción, ya sea por sí mismos o junto con otro término o términos, "tratar", "tratado" y "tratamiento", se refieren e incluyen usos y resultados profilácticos, de mejora, paliativos y curativos. En algunas realizaciones, los términos "tratar", "tratado" y "tratamiento" se refieren a usos y resultados curativos, así como a usos y resultados que disminuyen o reducen la gravedad de una afección, característica, síntoma, trastorno o enfermedad particular descritos en la presente descripción. Por ejemplo, el tratamiento puede incluir la disminución de varios síntomas de una afección o trastorno o la erradicación completa de dicha afección o trastorno. Debe entenderse que el término "profiláctico", como se usa en la presente descripción, no es absoluto, sino que se refiere a usos y resultados en los que la administración de un compuesto o composición disminuye la probabilidad o gravedad de una afección, síntoma o estado de enfermedad, y/o retrasa la aparición de una afección, síntoma o estado de enfermedad durante un período de tiempo.
Como se usa en la presente descripción, un "agente terapéuticamente activo", ya sea que se use solo o junto con otro término o términos, se refiere a cualquier compuesto, es decir, un fármaco, que se ha encontrado útil en el tratamiento de una enfermedad, trastorno o afección y no se describe en la Fórmula I. Debe entenderse que un agente terapéuticamente activo puede no estar aprobado por la FDA o un organismo regulador extranjero equivalente.
"Una cantidad terapéuticamente eficaz" significa la cantidad de un compuesto que, cuando se administra a un sujeto o paciente para tratar una enfermedad, es suficiente para efectuar tal tratamiento de la enfermedad. La "cantidad terapéuticamente eficaz" variará en dependencia del compuesto, la enfermedad y su gravedad y la edad, peso, etc., del sujeto o paciente a tratar.
Compuestos
En un primer aspecto la presente invención se refiere a un compuesto de Fórmula I
o una sal o solvato del mismo en donde,
X se elige de flúor, cloro, bromo, yodo y CN;
R2 es un grupo A-B-C en donde,
A es un enlace;
B está ausente; y
C es un heterocicloalquilo de 3 a 7 miembros que está opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5;
R1 es un grupo heteroarilo de Fórmula A
Fórmula A
en donde
Z1 se selecciona de C y N,
Z2 se selecciona de CRa, NRb, N, O y S,
Z3 se selecciona de N y NRC,
Z4 y Z5 se seleccionan independientemente de O, N, S, NRd y CRe.
Ra se selecciona de hidrógeno, hidroxilo, halógeno, COOR3, C1-C6alquilo, C2-C6alquenilo, C2-C6alquinilo, C0-Caalquilarilo, C0-C6alquilcicloalquilo, C0-C6alquilheterocicloalquilo, C0-C6alquilheteroarilo, C0-C6alquilCN, C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquilR3, C0-CaalquilC(=O)C0-CaalquilOR3, C0-CaalquilC(=O)C0-CaalquilNR3R4, haloCi-Caalquilo, NO2 , C0-CaalquilNR3R4, C0-CaalquilNR3C0-CaalquilOR4,C0-CaalquilOS(=O)R4, -C0-CaalquilOS(=O)2R4,-C0-CaalquilS(=O)PR4, -OCN, y -SCN, en donde cualquiera de los anteriores está opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5;
Rb y Rc se seleccionan independientemente de hidrógeno, Ci-Ca alquilo y C3-Ca cicloalquilo;
Ra y Rc se toman juntos para formar un anillo fusionado de a miembros opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5;
Rd se selecciona de hidrógeno, Ci-Ca alquilo y C3-Ca cicloalquilo; y
Re se selecciona de hidrógeno, hidroxilo, halógeno, OR3, COOR3, Ci-Caalquilo, C2-Caalquenilo, C2-Caalquinilo, C0-Caalquilarilo, C0-Caalquilcicloalquilo, C0-Caalquilheterocicloalquilo, C0-Caalquilheteroarilo, C0-CaalquilCN, C0-CaalquilC(=0)C0-CaalquilR3, C0-CaalquilC(=O)C0-CaalquilOR3, C0-CaalquilC(=O)C0-CaalquilNR3R4, haloCi-Caalquil, NO2 , C0-CaalquilNR3R4, C0-CaalquilNR3C0-CaalquilOR4,C0-CaalquilOS(=O)R4, -C0-CaalquilOS(=O)2R4,-C0-CaalquilS(=O)PR4, -OCN, y-SCN; o;
dos grupos Re adyacentes, grupos Rc y Re adyacentes o Re y Rd adyacentes se toman juntos para formar un anillo fusionado de a miembros opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5;
cada uno de R3 y R4 se elige independientemente de H, Ci-Caalquilo, C2-Caalquenilo, C2-Caalquinilo, haloCi-Caalquilo, C0-Caalquilarilo, C0-Caalquilcicloalquilo, C0-Caalquilheteroarilo, C0-Caalquilheterocicloalquilo, en donde cualquiera de los anteriores, excepto H, está opcionalmente sustituido con uno o más R5; o
R3 y R4 se toman juntos para formar un sistema de anillo carbocíclico o heterocíclico de 3 a 7 miembros, en donde dicho sistema de anillo está opcionalmente sustituido con uno o más R5;
Cada R5 se elige independientemente de halógeno, hidroxilo, ORa, Ci-Caalquilo, C2-C i0alquenilo, C2-C i0alquinilo, C0-Caalquilarilo, C0-Caalquilcicloalquilo, C0-Caalquilheterocicloalquilo, C0-Caalquilheteroarilo, -C0-CaalquilCN, -C0-CaalquilC(=O)C0-CaalquilRa, -C0-CaalquilC(=O)C0-CaalquilORa, -C0-CaalquilC(=O)C0-CaalquilNRaRa, -C0-CaalquilC(=O)C0-CaalquilNRaC(=O)ORa, haloCi-Caalquilo, NO2, -C0-CaalquilNRaRa, -C0-CaalquilNRaC0-CaalquilORa, -C0-CaalquilNRaC0-CaalquilC(=O)Ra, -C0-CaalquilORa, (=O),-C0-CaalquilOC(=O)C0-CaalquilRa, -C0-CaalquilOC(=O)C0-CaalquilNRaRa, -C0-CaalquilOC(=O)C0-CaalquilORa, -C0-CaalquilOS(=O)Ra,-C0-CaalquilOS(=O)2Ra, -C0-CaalquilOS(=O)2C0-CaalquilORa, -C0-CaalquilOS(=O)2C0-CaalquilNRaRa, -C0-CaalquilS(=O)PRa, -C0-CaalquilS(=O)2C0-CaalquilNRaRa, -C0-CaalquilS(=O)C0-CaalquilNRaRa, en donde cada uno de los anteriores está opcionalmente sustituido con R7, o
junto con los átomos de carbono a los que están unidos, dos grupos R5 están unidos para formar un arilo fusionado, heteroarilo, heterocicloalquilo de 3 a a miembros o un cicloalquilo de 3 a a miembros;
cada Ra se elige independientemente de H, C i-C i0alquilo, C2-C i0alquenilo, C2-C i0alquinilo, haloCi-Caalquilo, C0-Caalquilarilo, C0-Caalquilcicloalquilo, C0-Caalquilheteroarilo, C0-Caalquilheterocicloalquilo, en donde cada uno de los anteriores está opcionalmente sustituido con R7; o
dos Ra se toman juntos para formar un sistema de anillo carbocíclico o heterocíclico de 3 a i5 miembros, en donde dicho sistema de anillo está opcionalmente sustituido con uno o más R7;
cada R7 se elige independientemente de halógeno, hidroxilo, Ci-Caalquilo, OCi-Caalquilo y haloCi-Caalquilo; y cada p es independientemente 0, i o 2.
Realizaciones particulares de la invención incluyen, por ejemplo, compuestos de fórmula I, o sales y/o solvatos de los mismos, en donde definiciones alternativas de cada uno de p, Ri, R2 , R3 , R4 , R5 , Ra, R7 y Xse definen en los siguientes párrafos numerados. Cuando no se describa de otra manera, los sustituyentes tienen el mismo significado que se describe en el primer aspecto anterior.
1) Cada p es independientemente i o 2.
2) p es 2;
3) X se elige de flúor o cloro;
4) X es cloro;
5) R2 es un grupo A-B-C en donde C se selecciona de un heterocicloalquilo de 5 a 7 miembros que está opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5
6) R2 es un grupo A-B-C en donde C se selecciona de:
cada uno opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5.
7) R2 es un heterocicloalquilo de 6 y 7 miembros opcionalmente sustituido con uno o más R5;
8) R2 se selecciona de un grupo piperidinilo, piperazinilo, homopiperazinilo, morfolino y tetrahidropiranilo, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5.
9) R2 se selecciona de:
cada uno opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5.
10) R2 se selecciona de piperazinilo, homopiperazinilo y morfolino, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5.
11 R2 se selecciona de
cada uno opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5.
12 R2 se selecciona de
) Z1 es C.
) Z2 es CRa.
) Z3 es N.
) Z5 es O o S
) Z4 es NRDo N
) Z3 es N y Z4 es NRd.
) Z3 es N, Z4 es NRd y Z2 es CRa.
) Z3 es N, Z4 es NRd y Z5 es CRe.
) Z3 es N, Z4 es NH y Z2 es CRa.
) Z3 es N, Z4 es NH y Z5 es CRe.
) Z1 es C, Z3 es N, Z4 es NRd y Z2 es CRa. ) Z1 es C, Z3 es N, Z4 es NRdy Z5 es CRe. ) Z3 es N y Z5 es S u O.
) Z3 es N, Z5 es S o O y Z2 es CRa.
) Z3 es N, Z5 es S o O, Z1 es C y Z2 es CRa ) R1 es un grupo heteroarilo de Fórmula A1:
) R1 es un grupo heteroarilo de Fórmula A2:
) R1 es un grupo heteroarilo de Fórmula A3:
33) R1 se selecciona de
36) R3 y R4 cada uno se elige independientemente de H, Ci-C3alquilo, haloCi-C3alquilo, C0-C6alquilarilo, C0-C6alquilcidoalquilo, C0-C6alquilheteroarilo, o C0-C6alquilheterocidoalquilo;
37) R3 y R4 cada uno se elige independientemente de H, C1-C3alquilo, haloC1-C3alquilo, arilo, cicloalquilo, heteroarilo o heterocicloalquilo;
38) R3y R4 cada uno se elige independientemente de H, C1-C3alquilo o haloC1-C3alquilo;
39) R3 y R4 se eligen cada uno independientemente de H o C1-C3alquilo;
40) Cada R5 es halógeno, hidroxilo, OR6, C1-C10alquilo, C2-C10alquenilo, C2-C10alquinilo, C0-C6alquilarilo, C0-C6alquilcicloalquilo, C0-C6alquilheterocicloalquilo, C0-C6alquilheteroarilo, -C0-C6alquilCN, -C0-CralquilC(=O)C0-C6alquiloR6, -C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquiloOR6, -C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquilNR6R6, -C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquilNR6C (=O)O6, haloC1-C6alquilo y NO2, donde cada uno de los anteriores está opcionalmente sustituido con R7, o
junto con los átomos de carbono a los que están unidos, dos grupos R5 están unidos para formar un arilo fusionado, heteroarilo, heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros o un cicloalquilo de 3 a 6 miembros;
41) Cada R5 es halógeno, hidroxilo, OR6, C1-C10alquilo, C2-C10alquenilo, C2-C10alquinilo, C0-C6alquilarilo, C0-C6alquilcicloalquilo, C0-C6alquilheterocicloalquilo, C0-C6alquilheteroarilo, -C0-C6alquilCN, haloC1-C6alquil y NO2 , en donde cada uno de los anteriores está opcionalmente sustituido con R7, o
junto con los átomos de carbono a los que están unidos, dos grupos R5 están unidos para formar un arilo fusionado, heteroarilo, heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros o un cicloalquilo de 3 a 6 miembros;
42) Cada R5 es halógeno, hidroxilo, OR6, C1-C10alquilo, C0-C6alquilarilo, C0-C6alquilcicloalquilo, C0-C6alquilheterocicloalquilo, C0-C6alquilheteroarilo, -C0-C6alquilCN, haloC1-C6alquilo y NO2, donde cada uno de los anteriores está opcionalmente sustituido con R7, o
junto con los átomos de carbono a los que están unidos, dos grupos R5 están unidos para formar un arilo fusionado, heteroarilo, heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros o un cicloalquilo de 3 a 6 miembros;
43) Cada R5 es halógeno, hidroxilo, OR6, C1-C6alquilo, C0-C6alquilarilo, C0-C6alquilcicloalquilo, C0-C6alquilheterocicloalquilo, C0-C6alquilheteroarilo, -C0-C6alquilCN, haloC1-C6alquilo y NO2, en donde cada uno de los anteriores está opcionalmente sustituido con R7.
44) Cada R5 se selecciona de halógeno, hidroxilo, OR6, C1-C10alquilo, -C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquiloR6, -C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquiloOR6, haloC1-C6alquilo, -C0-C6alquiloOR6 y (=O), en donde cada uno de los anteriores está opcionalmente sustituido con R7.
45) Cada R5 se selecciona de halógeno, hidroxilo, C1-C3alquilo, haloC1-C6alquilo y (=O).
46) Cada R5 se selecciona de C1-C4alquilo, haloC1-C3alquilo o halógeno;
47) Cada R5 se selecciona de flúor, cloro, metilo, trifluorometilo y difluorometilo.
48) Cada R6 se elige independientemente de H, C1-C10alquilo, haloC1-C6alquilo, C0-C2alquilarilo, C0-C2alquilcicloalquilo, C0-C2alquilheteroarilo, C0-C2alquilheterocicloalquilo, en donde cualquiera de los anteriores excepto H está opcionalmente sustituido con uno o más R7; o
Dos R6 pueden tomarse juntos para formar un sistema de anillo carbocíclico o heterocíclico de 3 a 6 miembros, en donde dicho sistema de anillo está opcionalmente sustituido con uno o más R7;
49) Cada R6 se elige independientemente de H, C1-C6alquilo, haloC1-C4alquilo, C0-C2alquilarilo, C0-C2alquilocicloalquilo de 5 o 6 miembros, C0-C2alquil-heteroarilo de 5 o 6 miembros, C0-C2alquil-heterocicloalquilo de 5 o 6 miembros, en donde cualquiera de los anteriores excepto H está opcionalmente sustituido con uno o más R7; 50) Cada R6 se elige independientemente de H, C1-C4alquilo, haloC1-C2alquilo, C0-C2alquilarilo, C0-C2alquilocicloalquilo de 5 o 6 miembros, C0-C2alquil-heteroarilo de 5 o 6 miembros, C0-C2alquil-heterocicloalquilo de 5 o 6 miembros, en donde cualquiera de los anteriores excepto H está opcionalmente sustituido con uno o más R7; 51) Cada R6 se elige independientemente de halógeno y C1-C4alquilo.
52) Cada R7 se elige independientemente de halógeno, hidroxilo y C1-C6alquilo.
53) Cada R7 se elige independientemente de halógeno y C1-C4alquilo.
En una realización, X es como se define en cualquiera de los párrafos (4), R1 es como se define en cualquiera de los párrafos (28) a (35).
En una realización, X es como se define en cualquiera de los párrafos (4), R1 es como se define en cualquiera de los párrafos (28) a (35) y R2 es como se define en el párrafo (7).
En una realización, X es como se define en cualquiera de los párrafos (4), R1 es como se define en cualquiera de los párrafos (28) a (35) y R2 es como se define en el párrafo (9).
En una realización, X es como se define en cualquiera de los párrafos (4), R1 es como se define en cualquiera de los párrafos (28) a (35) y R2 es como se define en el párrafo (11).
En una realización, X es como se define en cualquiera de los párrafos (4), R2 es como se define en cualquiera de los párrafos (5) a (12).
En una realización, X es como se define en cualquiera de los párrafos (4), R2 es como se define en cualquiera de los párrafos (5) a (12) y R1 es como se define en cualquiera de los párrafos (29) y (30).
En una realización, X es como se define en cualquiera de los párrafos (4), R2 es como se define en cualquiera de los párrafos (5) a (12) y R1 es como se define en el párrafo (31).
En una realización, X es como se define en cualquiera de los párrafos (4), R2 es como se define en cualquiera de los párrafos (5) a (12) y R1 es como se define en el párrafo (35).
En una realización, el compuesto de la presente invención está de acuerdo con cualquiera de los párrafos (14), (19), (21), (23), (26) a (32) en donde Ra se selecciona de hidrógeno, hidroxilo, halógeno, COOR3, CrCaalquilo, C0-C6alquilarilo, C0-C6alquilcicloalquilo, C0-C6alquilheterocicloalquilo, C0-C6alquilheteroarilo, C0-C6alquilCN, haloCr C6alquilo, NO2, C0-C6alquilNR3R4, -OCN y-SCN, en donde cualquiera de los anteriores está opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5.
En una realización, el compuesto de la presente invención está de acuerdo con cualquiera de los párrafos (14), (19), (21), (23), (26) a (32) en donde Ra se selecciona de hidrógeno, hidroxilo, halógeno, CrCsalquilo, -OCN, -s Cn , -Cn y haloC1-C3alquilo.
En una realización, el compuesto de la presente invención está de acuerdo con cualquiera de los párrafos (14), (19), (21), (23), (26) a (32) en donde Ra se selecciona de hidrógeno, hidroxilo, flúor, cloro, metilo, etilo, trifluorometilo, NO2 , CN, Oc N, SCN y difluorometilo.
En una realización, el compuesto de la presente invención está de acuerdo con cualquiera de los párrafos (14), (19), (21), (23), (26) a (32) en donde Ra se selecciona de hidrógeno, hidroxilo, flúor, cloro, metilo, etilo, trifluorometilo y difluorometilo.
En una realización, el compuesto de la presente invención está de acuerdo con cualquiera de los párrafos (14), (19), (21), (23), (26) a (32) en donde Ra se selecciona de cloro y metilo.
En una realización, el compuesto de la presente invención está de acuerdo con cualquiera de los párrafos (20), (22), (24), (29) a (32) en donde Re se selecciona de hidrógeno, hidroxilo, halógeno, COOR3, C1-C6alquilo, C0-C6alquilarilo, C0-C6alquilcicloalquilo, C0-C6alquilheterocicloalquilo, C0-C6alquilheteroarilo, C0-C6alquilCN, haloC1-C6alquilo, NO2, C0-C6alquilNR3R4, -OCN y -SCN, en donde cualquiera de los anteriores está opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5.
En una realización, el compuesto de la presente invención está de acuerdo con cualquiera de los párrafos (20), (22), (24), (29) a (32) en donde Re se selecciona de hidrógeno, hidroxilo, halógeno, CrCaalquilo, -OCN, -Sc N, -CN y haloCr C3alquilo.
En una realización, el compuesto de la presente invención está de acuerdo con cualquiera de los párrafos (20), (22), (24), (29) a (32) en donde Re se selecciona de hidrógeno, hidroxilo, flúor, cloro, metilo, etilo, trifluorometilo, NO2, CN, OCN, SCN y difluorometilo.
En una realización, el compuesto de la presente invención está de acuerdo con cualquiera de los párrafos (20), (22), (24), (29) a (32) en donde Re se selecciona de hidrógeno, hidroxilo, flúor, cloro, metilo, etilo, trifluorometilo y difluorometilo.
En una realización, el compuesto de la presente invención está de acuerdo con cualquiera de los párrafos (20), (22), (24), (29) a (32) en donde Re se selecciona de cloro y metilo.
En una realización, el compuesto de la presente invención está de acuerdo con cualquiera de los párrafos (17) a (20), (23) y (24) en donde Rb se selecciona de hidrógeno o metilo.
En una realización, el compuesto de la invención está de acuerdo con cualquiera de los párrafos (5) a (12) y (31) en donde cada R5 se selecciona independientemente de halógeno, hidroxilo, OR6, C-i-C10alquilo, C2-C10alquenilo, C2-C10alquinilo, C0-C6alquilarilo, C0-C6alquilcicloalquilo, C0-C6alquilheterocicloalquilo, C0-C6alquilheteroarilo, -C0-C6alquilCN, -C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquiloR6, -C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquiloOR6, -C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquilNR6R6, -C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquilNR6C (=O)O6, haloC1-C6alquilo y NO2 , en donde cada uno de los anteriores está opcionalmente sustituido con R7, o
junto con los átomos de carbono a los que están unidos, dos grupos R5 están unidos para formar un arilo fusionado, heteroarilo, heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros o un cicloalquilo de 3 a 6 miembros;
En una realización, el compuesto de la invención está de acuerdo con cualquiera de los párrafos (5) a (12) y (31) en donde cada R5 es halógeno, hidroxilo, OR6, C1-C10alquilo, C2-C10alquenilo, C2-C10alquinilo, C0-C6alquilarilo, C0-C6alquilcicloalquilo, C0-C6alquilheterocicloalquilo, C0-C6alquilheteroarilo, -C0-C6alquilCN, haloC1-C6alquilo y NO2, en donde cada uno de los anteriores está opcionalmente sustituido con R7, o
junto con los átomos de carbono a los que están unidos, dos grupos R5 están unidos para formar un arilo fusionado, heteroarilo, heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros o un cicloalquilo de 3 a 6 miembros;
En una realización, el compuesto de la invención está de acuerdo con cualquiera de los párrafos (5) a (12) y (31) en donde cada R5 es halógeno, hidroxilo, OR6, C1-C10alquilo, C0-C6alquilarilo, C0-C6alquilcicloalquilo, C0-C6alquilheterocicloalquilo, C0-C6alquilheteroarilo, -C0-HaloC1-C6alquilo y NO2, en donde cada uno de los anteriores está opcionalmente sustituido con R7, o
junto con los átomos de carbono a los que están unidos, dos grupos R5 están unidos para formar un arilo fusionado, heteroarilo, heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros o un cicloalquilo de 3 a 6 miembros;
En una realización, el compuesto de la invención está de acuerdo con cualquiera de los párrafos (5) a (12) y (31) donde cada R5 es halógeno, hidroxilo, OR6, C1-C6alquilo, C0-C6alquilarilo, C0-C6alquilcicloalquilo, C0-C6alquilheterocicloalquilo, C0-C6alquilheteroarilo, -C0-HaloC1-C6alquilo y NO2, donde cada uno de los anteriores está opcionalmente sustituido con R7.
En una realización, el compuesto de la invención está de acuerdo con cualquiera de los párrafos (5) a (12) y (31) en donde cada R5 se selecciona de halógeno, hidroxilo, OR6, C1-C10alquilo, -C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquiloR6, -C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquiloOR6, haloC1-C6alquilo,-C0-C6alquiloOR6 y (=O), en donde cada uno de los anteriores está opcionalmente sustituido con R7
En una realización, el compuesto de la invención está de acuerdo con cualquiera de los párrafos (5) a (12) y (31) en donde cada R5 se selecciona de halógeno, hidroxilo, C1-C3alquilo, haloC1-C6alquilo y (=O).
En una realización, el compuesto de la invención está de acuerdo con cualquiera de los párrafos (5) a (12) y (31) en donde cada R5 se selecciona de C1-C4alquilo, haloC1-C6alquilo o halógeno.
En una realización, el compuesto de la invención está de acuerdo con cualquiera de los párrafos (5) a (12) y (31) en donde cada R5 se selecciona de flúor, cloro, metilo, trifluorometilo y difluorometilo.
En otra realización, la presente invención se refiere a un subgénero de Fórmula I, Fórmula Ib:
o una sal o solvato del mismo en donde,
X se elige de flúor cloro, bromo y yodo y CN;
R2 se selecciona de:
cada uno opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5;
R5 se selecciona de halógeno, hidroxilo, Ci-C3alquilo, haloCi-C6alquilo y (=O);
Z5 se selecciona de O, N y S; y
Re y Ra se seleccionan independientemente de hidrógeno, hidroxilo, halógeno, C1-C3alquilo, -OCN,-SCN, -CN y haloC1-C3alquilo.
Realizaciones particulares de la invención incluyen, por ejemplo, compuestos de Fórmula Ib, o sales y/o solvatos de los mismos, en donde definiciones alternativas de cada uno de X, R2, Ra, Re y Z5 se definen en los siguientes párrafos numerados. Cuando no se describa de otra manera, los sustituyentes tienen el mismo significado que el descrito para la Fórmula Ib anterior.
1) X se elige de flúor o cloro;
2) X es cloro;
3) R2 se selecciona de
cada uno opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5.
6) Z5 es S
7 ) Ra y Re se seleccionan independientemente de hidrógeno, hidroxilo, flúor, cloro, metilo, etilo, trifluorometilo y difluorometilo.
8) Ra y Re se seleccionan independientemente de hidrógeno, cloro y metilo.
En una realización, el compuesto de la invención es un compuesto de Fórmula Ib de acuerdo con cualquiera de los párrafos (1) a (8) anteriores en donde Re es hidrógeno.
En una realización, el compuesto de la invención es un compuesto de Fórmula Ib de acuerdo con cualquiera de los párrafos (1) a (8) anteriores en donde Ra se selecciona de cloro y metilo.
En una realización, el compuesto de la invención es un compuesto de Fórmula Ib de acuerdo con cualquiera de los párrafos (3) y (4) anteriores en donde R5 se selecciona de flúor, cloro, metilo, trifluorometilo y difluorometilo.
En otra modalidad, la presente invención se refiere a un subgénero de Fórmula I, Fórmula le:
o una sal o solvato del mismo en donde,
X se elige de flúor, cloro, bromo, yodo y CN;
R2 se selecciona de:
cada uno opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5;
R5 se selecciona de halógeno, hidroxilo, Ci-C3alquilo, haloCi-C6alquilo y (=O);
Z4 se selecciona de CRe, NRd, O y S; y
Re y Ra se seleccionan independientemente de hidrógeno, hidroxilo, halógeno, C1-C3alquilo, -OCN,-SCN, -CN y haloC1-C3alquilo.
Realizaciones particulares de la invención incluyen, por ejemplo, compuestos de Fórmula Ic, o sales y/o solvatos de los mismos, en donde definiciones alternativas de cada uno de X, R2, Ra, Re y Z5 se definen en los siguientes párrafos numerados. Cuando no se describa de otra manera, los sustituyentes tienen el mismo significado que el descrito para la Fórmula Ic anterior.
1) X se elige de flúor o cloro;
2) X es cloro;
3) R2 se selecciona de
cada uno opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5.
4) R2 se selecciona de
7) Rd es metilo o hidrógeno
8) Z4 es NH
9) Ra y Re se seleccionan independientemente de hidrógeno, hidroxilo, flúor, cloro, metilo, etilo, trifluorometilo y difluorometilo.
10) Ra y Re se seleccionan independientemente de hidrógeno, cloro, CF3 y metilo.
En una realización, el compuesto de la invención es un compuesto de Fórmula Ic de acuerdo con cualquiera de los párrafos (1) a (10) anteriores en donde Re es metilo, etilo, CF3, cloro.
En una realización, el compuesto de la invención es un compuesto de Fórmula Ic de acuerdo con cualquiera de los párrafos (1) a (10) anteriores en donde Ra se selecciona de hidrógeno, flúor, cloro, metilo, trifluorometilo y difluorometilo.
En una realización, el compuesto de la invención es un compuesto de Fórmula Ic de acuerdo con cualquiera de los párrafos (1) a (10) anteriores en donde Ra es hidrógeno y Re se selecciona de cloro, metilo, etilo y trifluorometilo.
En una realización, el compuesto de la invención es un compuesto de Fórmula Ic de acuerdo con cualquiera de los párrafos (3) y (4) anteriores en donde R5 se selecciona de flúor, cloro, metilo, trifluorometilo y difluorometilo.
En una realización, la presente invención se relaciona con un compuesto seleccionado de:
terc-butil 4-[5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il] piperidin-1-carboxilato;
5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-(4-piperidil)-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-4-[1-(2,2-difluorociclopropanocarbonil) -4-piperidil]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-4-[1-(4-metiltiazol-5-carbonil)-4- piperidil]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-[1-(tiazol-4-carbonil)-4-piperidil]-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-4-[1-(3-metil-1H-pirazol-5-carbonil)-4-piperidil]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-4-[1-(1,5-dimetilpirazol-3-carbonil)-4-piperidil]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-4-[1-(2,5-dimetilpirazol-3-carbonil)-4-piperidil]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-4-[1-(5-metilisoxazol-3-carbonil)-4-piperidil]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-[1-(piridazina-4-carbonil)-4-piperidil]-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-4-(1-isobutil-4-piperidil)-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-2-(5-etil-1H-pirazol-4-il)-4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-4-tetrahidropiran-4-il-2-tiazol-5-il-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-2-(4-metilthiadiazol-5-il)-4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-2-(4-metiloxazol-5-il)-4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidin-6-ona;
5-fluoro-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidin-6-ona;
5-bromo-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidin-6-ona;
5-yodo-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidin-6-ona;
2-(4-metiltiazol-5-il)-6-oxo-4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidina-5-carbonitrilo;
5-cloro-2-(2-hidroxi-4-metil-tiazol-5-il)-4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-4-(4-hidroxi-1-piperidil)-2-(4-metiltiazol-5-il)-1 H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-4-(4-metil-1-piperidil)-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-[3-(trifluorometil)piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-4-[(3-metilpiperazin-1-il]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-4-[(3R)-3-metilpiperazin-1-il]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-4-[4-(hidroximetil)-1-piperidil]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;
4- [5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il]-1,4-diazepan-2-ona;
5- cloro-4-(3,3-difluoro-1-piperidil)-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-4-[3-(hidroximetil)-1-piperidil]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-4-[(3S)-3-metilpiperazin-1-il]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-piperazin-1-il-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-2-(4-etiltiazol-5-il)-4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-2-(3-metil-1H-pirazol-4-il)-4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-[3-(trifluorometil)piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-[(3R)-3-(trifluorometil)piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-tetrahidropiran-4-il-2-[4-(trifluorometil)tiazol-5-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-[3-isopropilpiperazin-1-il]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-[(3S)-3-isopropilpiperazin-1-il]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-tetrahidropiran-4-il-2-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]-lH-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(2-metilpirazol-3-il)-4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-morfolino-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-morfolino-2-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-[2-metilpiperazin-1-il]-2-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-[(2R)-2-metilpiperazin-1-il]-2-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-[3-metilmorfolin-4-il]-2-(1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)-lH-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-[(3R)-3-metilmorfolin-4-il]-2-(1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-[3-iTietNiTiorfoNn-4-N]-2-[5-(trifluoroiTietN)-1H-pirazol-4-N]-1H-piriiTiidin-6-ona;
5-doro-4-[(3R)-3-metilmorfolin-4-il]-2-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-[2-metilpiperazin-1-il]-2-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-[(2R)-2-metilpiperazin-1-il]-2-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-[3-metilmorfolin-4-il]-2-pirazolo[1,5-a]piridin-3-il-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-[(3R)-3-metilmorfolin-4-il]-2-pirazolo[1,5-a]piridin-3-il-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-[2-metilpiperazin-1-il]-2-(1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-[(2R)-2-metilpiperazin-1-il]-2-(1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-(6,6-difluoro-1,4-diazepan-1-il)-2-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(5-doro-1H-pirazol-4-il)-4-[(2R)-2-metilpiperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-(6,6-difluoro-1,4-diazepan-1-il)-2-(1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-(2,2-dimetilpiperazin-1-il)-2-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-[2-metilpiperazin-1-il]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-4-[(2R)-2-metilpiperazin-1-il]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(3-metilisoxazol-4-il)-4-[(2R)-2-metilpiperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-[3-metilmorfolin-4-il]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-[(3R)-3-metilmorfolin-4-il]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-(6,6-difluoro-1,4-diazepan-1-il)-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(5-doro-1H-pirazol-4-il)-4-[3-metilmorfolin-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(5-doro-1H-pirazol-4-il)-4-[(3R)-3-metilmorfolin-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-[2-(trifluorometil)piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-[2-(difluorometil)piperazin-1-il]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-(6-fluoro-1,4-diazepan-1-N)-2-(4-iTietNtiazol-5-N)-1H-piriiTiidin-6-ona;
5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[2-metilpiperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[(2R)-2-metilpiperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-[2-metilpiperazin-1-il]-2-(2-metilpirazol-3-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-4-[(2R)-2-metilpiperazin-1-il]-2-(2-metilpirazol-3-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[3-metilmorfolin-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[(3R)-3-metilmorfolin-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-(6,6-difluoro-1,4-diazepan-1-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(2-metilimidazol-1-il)-4-[3-metilmorfolin-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(2-metilimidazol-1-il)-4-[(3R)-3-metilmorfolin-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(5-doro-1H-pirazol-4-il)-4-(6,6-difluoro-1,4-diazepan-1-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-4-(6,6-difluoro-1,4-diazepan-1-il)-2-[4-(trifluorometil)tiazol-5-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[2-(difluorometil)piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[2-(trifluorometil)piperazin-1-il]-1 H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-(6-fluoro-1,4-diazepan-1-il)-lH-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[2-(difluorometil)piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[(2S)-2-(difluorometil)piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[(2R)-R-(difluorometil)piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[6-fluoro-1,4-diazepan-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[(6S)-6-fluoro-1,4-diazepan-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(4-dorothiazol-5-il)-4-[(6R)-6-fluoro-1,4-diazepan-1-il]-1H-pirimidin-6-ona, o una sal o solvato del mismo.
En otra realización, la presente invención se refiere a un compuesto seleccionado de 5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[2-metilpiperazina-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[(2R)-2-metilpiperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[3-metilmorfolin-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[(3R)-3-metilmorfolin-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-(6,6-difluoro-1,4-diazepan-1-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[2-(difluorometil)piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[2-(trifluorometil)piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-(6-fluoro-1,4-diazepan-1-il)-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[2-(difluorometil)piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[(2S)-2-(difluorometil)piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[(2R)-R-(difluorometil)piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[6-fluoro-1,4-diazepan-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[(6R)-6-fluoro-1,4-diazepan-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;
5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[(6S)-6-fluoro-1,4-diazepan-1-il]-1H-pirimidin-6-ona, o una sal o solvato del mismo.
Aunque la presente invención puede referirse a cualquier compuesto o grupo particular de compuestos definidos en la presente descripción por medio de características opcionales, preferidas o adecuadas o de otra manera en términos de realizaciones particulares, la presente invención también puede referirse a cualquier compuesto o grupo particular de compuestos que excluya específicamente dichas características opcionales, preferidas o adecuadas o realizaciones particulares.
Convenientemente, la presente invención excluye cualquier compuesto individual que no posea la actividad biológica definida en la presente descripción.
Sales y solvatos
Los compuestos (incluidos los productos finales e intermedios) descritos en la presente descripción pueden aislarse y usarse per se o puede aislarse en forma de una sal, adecuadamente sales farmacéuticamente aceptables. Debe entenderse que los términos "sal(es)" y "forma(s) de sal" usados por sí mismos o junto con otro término o términos abarcan todas las sales inorgánicas y orgánicas, incluidas las sales industrialmente aceptables, como se define en la presente descripción y sales farmacéuticamente aceptables, como se define en la presente descripción, a menos que se especifique lo contrario. Como se usa en la presente descripción, las sales industrialmente aceptables son sales que generalmente son adecuadas para la fabricación y/o procesamiento (incluida la purificación) así como para el envío y almacenamiento, pero pueden no ser sales que se administran típicamente para uso clínico o terapéutico. Las sales industrialmente aceptables se pueden preparar a escala de laboratorio, es decir, de varios gramos o menos, o en una escala mayor, es decir, hasta e incluyendo un kilogramo o más.
Las sales farmacéuticamente aceptables, como se usan en la presente descripción, son sales que son generalmente química y/o físicamente compatibles con los otros ingredientes que comprenden una formulación, y/o son generalmente fisiológicamente compatibles con el receptor de la misma. Las sales farmacéuticamente aceptables se pueden preparar a escala de laboratorio, es decir, de varios gramos o menor, o en una escala mayor, es decir, hasta e incluyendo un kilogramo o más. Debe entenderse que las sales farmacéuticamente aceptables no se limitan a las sales que son administradas o aprobadas típicamente por la FDA o un organismo regulador extranjero equivalente para uso clínico o terapéutico en humanos. Un médico con experiencia normal en la técnica apreciará fácilmente que algunas sales son industrialmente aceptables así como farmacéuticamente aceptables. Debe entenderse que todas estas sales, incluyendo las formas de sales mixtas, están dentro del alcance de la solicitud.
En una realización, los compuestos de Fórmula I se aíslan como sales farmacéuticamente aceptables.
Una sal farmacéuticamente aceptable adecuada de un compuesto de la invención es, por ejemplo, una sal de adición de ácido de un compuesto de la invención que es suficientemente básico, por ejemplo, una sal de adición de ácido con, por ejemplo, un ácido inorgánico u orgánico, por ejemplo, ácido clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, fosfórico, trifluoroacético, fórmico, cítrico o maleico. Además, una sal farmacéuticamente aceptable adecuada de un compuesto de la invención que es suficientemente ácida es una sal de metal alcalino, por ejemplo, una sal de sodio o potasio, una sal de metal alcalinotérreo, por ejemplo, una sal de calcio o magnesio, una sal de amonio o una sal con una base orgánica que proporciona un catión fisiológicamente aceptable, por ejemplo, una sal con metilamina, dimetilamina, trimetilamina, piperidina, morfolina o tris-(2-hidroxietil)amina.
En general, las sales de la presente solicitud se pueden preparar en el lugar durante el aislamiento y/o purificación de un compuesto (incluyendo intermedios), o haciendo reaccionar por separado el compuesto (o intermedio) con una base o ácido orgánico o inorgánico adecuado (según sea apropiado) y aislando la sal así formada. El grado de ionización en la sal puede variar desde completamente ionizada hasta casi no ionizada. En la práctica, las diversas sales pueden precipitarse (con o sin la adición de uno o más cosolventes y/o anti-solventes) y recolectarse por filtración o las sales pueden recuperarse por evaporación de solvente(s). Las sales de la presente solicitud también se pueden formar mediante un "cambio de sal" o una reacción de intercambio iónico/doble desplazamiento, es decir, una reacción en la que un ion se reemplaza (total o parcialmente) con otro ión que tiene la misma carga. Un experto en la técnica apreciará que las sales se pueden preparar y/o aislar usando un solo método o una combinación de métodos.
Las sales representativas incluyen, pero no se limitan a, acetato, aspartato, benzoato, besilato, bicarbonato/carbonato, bisulfato/sulfato, borato, camsilato, citrato, edisilato, esilato, formiato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, hexafluorofosfato, hibenzato, hidrocloruro/cloruro, hidrobromuro/bromuro, hidroyoduro/yoduro, isetionato, lactato, malato, maleato, malonato, mesilato, metilsulfato, naftilato, 2-napsilato, nicotinato, nitrato, orotato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/hidrógeno fosfato/dihidrógeno fosfato, sacarato, estearato, succinato, tartrato, tosilato, trifluoroacetato y similares. Otros ejemplos de sales representativas incluyen cationes de metales alcalinos o
alcalinotérreos tales como sodio, litio, potasio, calcio, magnesio y similares, así como cationes de amonio, amonio cuaternario y amina no tóxicos que incluyen, entre otros, amonio, tetrametilamonio, tetraetilamonio, lisina, arginina, benzatina, colina, trometamina, diolamina, glicina, meglumina, olamina y similares.
Ciertos compuestos de la Fórmula I pueden existir en formas solvatadas así como no solvatadas, tales como, por ejemplo, formas hidratadas. Debe entenderse que la invención abarca todas las formas solvatadas que poseen actividad antiproliferativa.
Polimorfos
También debe entenderse que ciertos compuestos de la Fórmula I pueden exhibir polimorfismo y que la invención abarca todas las formas que poseen actividad antiproliferativa.
N-óxidos
Los compuestos de la Fórmula I que contienen una función amina pueden formar además N-óxidos. Una referencia en la presente descripción a un compuesto de la Fórmula I que contiene una función amina incluye además el N-óxido. Cuando un compuesto contiene varias funciones aminas, uno o más que un átomo de nitrógeno puede ser oxidado para formar un N-óxido. Los ejemplos particulares de N-óxidos son los N-óxidos de una amina terciaria o un átomo de nitrógeno de un heterociclo que contiene nitrógeno. Los N-óxidos pueden formarse por tratamiento de la amina correspondiente con un agente oxidante tal como peróxido de hidrógeno o un perácido (por ejemplo, un ácido peroxicarboxílico), ver por ejemplo Advanced Organic Chemistry, de Jerry March, 4ta Edición, Wiley Interscience, páginas. Más particularmente, los N-óxidos pueden obtenerse mediante el procedimiento de L. W. Deady (Syn. Comm.
1977, 7, 509-514) en el que el compuesto de amina reacciona con ácido m-cloroperoxibenzoico (MCPBA), por ejemplo, en un solvente inerte como diclorometano.
Tautómeros
Los compuestos de la Fórmula I pueden existir en varias formas tautoméricas diferentes y las referencias a los compuestos de la Fórmula I incluyen todas estas formas. Para evitar dudas, cuando un compuesto puede existir en una de varias formas tautoméricas y solo una se describe o muestra específicamente, todas las demás están incluidas en la Fórmula I. Los ejemplos de formas tautoméricas incluyen las formas ceto-, enol-y enolato-, como en, por ejemplo, los siguientes pares tautoméricos: ceto/enol (ilustrado a continuación), pirimidona/hidroxipirimidina, imina/enamina, amida/imino alcohol, amidina/amidina, nitroso/oxima, tiocetona/enetiol y nitro/aci-nitro.
ceto enol enolato
Isómeros
Los compuestos que tienen la misma fórmula molecular pero difieren en la naturaleza o secuencia de unión de sus átomos o la disposición de sus átomos en el espacio se denominan 'isómeros'. Los isómeros que difieren en la disposición de sus átomos en el espacio se denominan "estereoisómeros". Los estereoisómeros que no son imágenes especulares entre sí se denominan 'diastereómeros' y aquellos que son imágenes especulares no superponibles entre sí se denominan 'enantiómeros'. Cuando un compuesto tiene un centro asimétrico, por ejemplo, está unido a cuatro grupos diferentes, un par de enantiómeros es posible. Un enantiómero puede caracterizarse por la configuración absoluta de su centro asimétrico y se describe por las reglas de secuenciación R- y S- de Cahn y Prelog, o por la manera en la que la molécula rota el plano de luz polarizada y se designan como dextrógiros o levógiros (es decir, como (+) o (-)-isómeros respectivamente). Un compuesto quiral puede existir como enantiómero individual o como una mezcla de este. Una mezcla que contiene proporciones iguales de los enantiómeros se denomina una 'mezcla racémica'.
Ciertos compuestos de Fórmula I pueden tener uno o más centros asimétricos y, por lo tanto, pueden existir en varias configuraciones estereoisoméricas. En consecuencia, tales compuestos se pueden sintetizar y/o aislar como mezclas de enantiómeros y/o como enantiómeros individuales (puros) y, en el caso de dos o más centros asimétricos, diastereómeros simples y/o mezclas de diastereómeros. Debe entenderse que la presente solicitud incluye todos estos enantiómeros y diastereómeros y mezclas de los mismos en todas las proporciones.
Isótopos
Los compuestos de la presente invención se describen aquí usando fórmulas estructurales que no mencionan específicamente los números de masa o las proporciones de isótopos de los átomos constituyentes. Como tal, se pretende que la presente solicitud incluya compuestos en los que los átomos constituyentes están presentes en cualquier proporción de formas isotópicas. Por ejemplo, los átomos de carbono pueden estar presentes en cualquier proporción de 12C, 13C, y 14C; los átomos de hidrógeno pueden estar presentes en cualquier proporción de 1H 2H, y 3H; etc. Preferiblemente, los átomos constituyentes en los compuestos de la presente invención están presentes en sus proporciones naturales de formas isotópicas.
Profármacos y metabolitos
Los compuestos de la Fórmula I pueden administrarse en forma de un profármaco que se descompone en el cuerpo humano o animal para liberar un compuesto de la invención. Un profármaco puede usarse para alterar las propiedades físicas y/o las propiedades farmacocinéticas de un compuesto de la invención. Se puede formar un profármaco cuando el compuesto de la invención contiene un grupo o sustituyente adecuado al que se puede unir un grupo que modifica la propiedad. Los ejemplos de profármacos incluyen derivados de éster escindibles in vivo que pueden formarse en un grupo carboxi o un grupo hidroxi en un compuesto de la Fórmula I y derivados de amida escindibles in vivo que pueden formarse en un grupo carboxi o un grupo amino en un compuesto de la Fórmula I.
En consecuencia, la presente invención incluye aquellos compuestos de la Fórmula I como se definió aquí anteriormente cuando estén disponibles por síntesis orgánica y cuando estén disponibles dentro del cuerpo humano 0 animal por medio de la escisión de un profármaco del mismo. En consecuencia, la presente invención incluye aquellos compuestos de la Fórmula I que se producen por medio de síntesis orgánica y además los compuestos que se producen en el cuerpo humano o animal por medio del metabolismo de un compuesto precursor, es decir, un compuesto de la Fórmula I puede ser un compuesto producido sintéticamente o un compuesto producido metabólicamente.
Un profármaco farmacéuticamente aceptable adecuado de un compuesto de la Fórmula I es uno que se basa en un criterio médico razonable como adecuado para la administración al cuerpo humano o animal sin actividades farmacológicas indeseables y sin toxicidad indebida.
Varias formas de profármaco han sido descritas, por ejemplo, en los siguientes documentos:-a) Methods in Enzymology, Vol. 42, págs. 309-396, editado por K. Widder, y otros (Academic Press, 1985);
b) Design of Pro-drugs, editado por H. Bundgaard, (Elsevier, 1985);
c) A Textbook of Drug Design and Development, editado por Krogsgaard-Larsen y H. Bundgaard, Capítulo 5 "Design and Application of Pro-drugs", de H. Bundgaard págs. 113-191 (1991);
d) H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1-38 (1992);
e) H. Bundgaard, y otros, Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, 285 (1988);
f) N. Kakeya, y otros, Chem. Pharm. Bull., 32, 692 (1984);
g) T. Higuchi y V. Stella, "Pro-Drugs as Novel Delivery Systems", A.C.S. Symposium Series, Volume 14; y
h) E. Roche (editor), "Portadores biorreversibles en el diseño de fármacos", Pergamon Press, 1987.
Un profármaco farmacéuticamente aceptable adecuado de un compuesto de la Fórmula I que posee un grupo carboxi es, por ejemplo, un éster escindible in vivo del mismo. Un éster escindible in vivo de un compuesto de la Fórmula I que contienen un grupo carboxi es, por ejemplo, un éster farmacéuticamente aceptable que se escinde en el cuerpo humano o animal para producir el ácido original. Los ésteres farmacéuticamente aceptables adecuados para los carboxi incluyen C1-6alquil ésteres tales como metilo, etilo y tere-butilo, ésteres de C1-6alcoximetilo tales como ésteres de metoximetilo, ésteres de C1-6alcanoiloximetilo tales como ésteres de pivaloiloximetilo, ésteres de 3-ftalidilo, ésteres de C3-8cicloalquilcarboniloxi-C1-6alquilo tales como ésteres de ciclopentilcarboniloximetilo y 1-ciclohexilcarboniloxietilo, ésteres de 2-oxo-1,3-dioxolenilmetilo tales como ésteres de 5-metil-2-oxo-1,3-dioxolen-4-ilmetilo y ésteres de C1-6alcoxicarboniloxi-C1-6alquilo tales como ésteres de metoxicarboniloximetilo y 1-metoxicarboniloxietilo.
Un profármaco farmacéuticamente aceptable de un compuesto de la Fórmula I que tiene un grupo hidroxi es, por ejemplo, un éster o éter escindible in vivo del mismo. Un éster o éter escindible in vivo de un compuesto de la Fórmula 1 que contiene un grupo hidroxi es, por ejemplo, un éster farmacéuticamente aceptable o éter que es escindible en el cuerpo animal o humano para producir el compuesto hidroxi original. Grupos formadores de éster farmacéuticamente aceptables adecuados para un grupo hidroxi incluyen ésteres inorgánicos tales como ésteres de fosfato (incluyendo ésteres cíclicos fosforamídicos). Otros grupos fromadores de éster farmacéuticamente aceptables adecuados para un grupo hidroxi incluyen grupos C1-10alcanoilo tales como acetilo, benzoilo, fenilacetilo y benzoilo sustituido y grupos fenilacetilo, grupos C1-10alcoxicarbonilo tales como los grupos etoxicarbonilo, N,N-(C1-6)2 carbamoilo, 2-dialquilaminoacetilo y 2-carboxiacetilo. Los ejemplos de sustituyentes en el anillo en los grupos fenilacetilo y benzoilo incluyen aminometilo, N-alquilaminometilo, NN-dialquilaminometilo, morfolinometilo, piperazin-1-ilmetilo y 4-(C1-4alquil)piperazin-1 -ilmetilo. Los grupos formadores de éter farmacéuticamente aceptables adecuados para un grupo hidroxi incluyen grupos a-aciloxialquilo tales como grupos acetoximetilo y pivaloiloximetilo.
Un profármaco farmacéuticamente aceptable adecuado de un compuesto de la Fórmula I que tiene un grupo carboxi es, por ejemplo, una amida escindible in vivo del mismo, por ejemplo una amida formada con una amina tal como
amoniaco, una C^alquilamina tal como metilamina, una (C-Malquil^amina como dimetilamina, A/-etil-W-metilamina o dietilamina, un Ci-4alcoxi- C2-4alquilamina como 2-metoxietilamina, una fenil-Ci-4alquilamina tal como bencilamina y aminoácidos tales como glicina o un éster del mismo.
Un profármaco farmacéuticamente aceptable adecuado de un compuesto de la Fórmula I que tiene un grupo amino es, por ejemplo, un derivado de amida escindible in vivo del mismo. Las amidas farmacéuticamente aceptables adecuadas de un grupo amino incluyen, por ejemplo una amida formada con grupos C1-10alcanoilo como un acetilo, benzoilo, fenilacetilo y benzoilo sustituido y grupos fenilacetilo. Los ejemplos de sustituyentes en el anillo en los grupos fenilacetilo y benzoilo incluyen aminometilo, W-alquilaminometilo, N,N-dialquilaminometilo, morfolinometilo, piperazin-1-ilmetilo y 4-(C1_4alquil)piperazin-1 -ilmetilo.
Los efectos in vivo de un compuesto de la Fórmula I pueden ser ejercidos en parte por uno o más metabolitos que se forman dentro del cuerpo humano o animal después de la administración de un compuesto de la Fórmula I. Como se indicó anteriormente, los efectos in vivo de un compuesto de la Fórmula I también pueden ejercerse mediante el metabolismo de un compuesto precursor (un profármaco).
Composiciones Farmacéuticas
De acuerdo con un aspecto adicional de la invención se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención como se define en la presente descripción anteriormente, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, en asociación con un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable.
Las composiciones de la invención pueden estar en una forma adecuada para uso oral (por ejemplo, como tabletas, pastillas, cápsulas duras o blandas, suspensiones acuosas u oleosas, emulsiones, polvos o gránulos dispersables, jarabes y elixires), para uso tópico (por ejemplo, como cremas, ungüentos, geles o soluciones o suspensiones acuosas u oleosas), para administración por inhalación (por ejemplo como un polvo finamente dividido o un aerosol líquido), para la administración por insuflación (por ejemplo, como un polvo finamente dividido) o para administración parenteral (por ejemplo como una solución acuosa u oleosa estéril para la dosificación intravenosa, subcutánea, intramuscular, intraperitoneal o intramuscular o como un supositorio para la dosificación rectal).
Las composiciones de la invención pueden obtenerse por procedimientos convencionales usando excipientes farmacéuticos convencionales bien conocido en la técnica. Así, las composiciones para uso oral pueden contener, por ejemplo, uno o más agentes colorantes, edulcorantes, saborizantes o conservantes.
Una cantidad eficaz de un compuesto de la presente invención para su uso en terapia es una cantidad suficiente para tratar o prevenir una afección proliferativa a la que se hace referencia en la presente descripción, ralentizar su progresión y/o reducir los síntomas asociados con la afección.
La cantidad de ingrediente activo que se combina con uno o más excipientes para producir una única forma de dosificación variará necesariamente dependiendo del individuo tratado y de la vía de administración particular. Por ejemplo, una formulación destinada a la administración oral a humanos generalmente contendrá, por ejemplo, de 0,5 mg a 0,5 g de agente activo (más adecuadamente de 0,5 a 100 mg, por ejemplo de 1 a 30 mg) compuesto con una cantidad adecuada y conveniente de excipientes que puede variar de aproximadamente 5 a aproximadamente 98 por ciento en peso de la composición total.
El tamaño de la dosis para fines terapéuticos o profilácticos de un compuesto de la Fórmula I variará naturalmente de acuerdo con la naturaleza y la gravedad de las afecciones, la edad y el sexo del animal o paciente y la vía de administración, de acuerdo con principios bien conocidos de medicina.
Cabe señalar que las dosis y los regímenes de dosificación pueden variar con el tipo y la gravedad de la afección a aliviar, y pueden incluir la administración de dosis únicas o múltiples, es decir, QD (una vez al día), BID (dos veces al día), etc., durante un período de tiempo determinado (días u horas). Se entiende además que para cualquier sujeto o paciente en particular, es posible que sea necesario ajustar regímenes de dosificación específicos con el tiempo de acuerdo con la necesidad individual y el juicio profesional de la persona que administra o supervisa la administración de las composiciones farmacéuticas. Por ejemplo, las dosis pueden ajustarse en función de parámetros farmacocinéticos o farmacodinámicos, que pueden incluir efectos clínicos tales como efectos tóxicos y/o valores de laboratorio. Por lo tanto, la presente solicitud abarca el escalado de dosis intra-paciente según lo determinado por el experto en la técnica. Los procedimientos y procesos para determinar las dosis apropiadas y los regímenes de dosificación son bien conocidos en la técnica relevante y los expertos en la técnica los determinarán fácilmente. Como tal, un experto en la técnica apreciaría y reconocería fácilmente que los intervalos de dosificación establecidos en la presente son solo a modo de ejemplo y no pretenden limitar el alcance o la práctica de las composiciones farmacéuticas descritas en la presente descripción.
Al usar un compuesto de la invención para fines terapéuticos o profilácticos, generalmente se administrará de modo que se reciba una dosis diaria en el intervalo, por ejemplo, de 0,1 mg/kg a 75 mg/kg de peso corporal, dado si se requiere en dosis divididas. En general se administrarán dosis más bajas cuando se emplee la ruta parenteral. Así,
por ejemplo, para la administración intravenosa o intraperitoneal, una dosis en el intervalo, por ejemplo, 0,1 mg/kg a 30 mg/kg de peso corporal se usará generalmente. Similarmente, para la administración por inhalación, una dosis en el intervalo, por ejemplo, 0,05 mg/kg a 25 mg/kg de peso corporal se usará. La administración oral también puede ser adecuada, particularmente en forma de tabletas. Típicalmente, las formas de dosificación unitaria contendrán aproximadamente 0,.5 mg a 0,5 g de un compuesto de esta invención.
Aplicaciones y usos terapéuticos
La presente invención proporciona compuestos que funcionan como inhibidores de Cdc7.
En la presente descripción se describe un método para inhibir la actividad de la enzima Cdc7 in vitro o in vivo, dicho método comprende poner en contacto una célula con una cantidad eficaz de un compuesto, o una sal, hidrato o solvato del mismo farmacéuticamente aceptable, como se define en la presente descripción.
En la presente descripción se describe un método para tratar una enfermedad o trastorno en el que la actividad de Cdc7 está implicada en un paciente que necesita dicho tratamiento, dicho método comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto, o una sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, o una composición farmacéutica como se define en la presente descripción.
En la presente descripción se describe un método para inhibir proliferación celular in vitro o in vivo, dicho método comprende poner en contacto una célula con una cantidad eficaz de un compuesto o una sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo como se define en la presente descripción.
En la presente descripción se describe un método para tratar un trastorno proliferativo en un paciente que necesita de este tratamiento, dicho método comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto o una sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, o una composición farmacéutica como se define en la presente descripción.
En la presente descripción se describe un método para tratar el cáncer en un paciente que necesita de este tratamiento, dicho método comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto, o una sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, o una composición farmacéutica como se define en la presente descripción.
La presente invención proporciona un compuesto, o una sal, hidrato o solvato del mismo farmacéuticamente aceptable, o una composición farmacéutica como se define en la presente descripción para su uso en terapia.
La presente invención proporciona un compuesto, o una sal, hidrato o solvato del mismo farmacéuticamente aceptable, o una composición farmacéutica como se define en la presente descripción para su uso en el tratamiento de una afección proliferativa.
La presente invención proporciona un compuesto, o una sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, o una composición farmacéutica como se define en la presente descripción para su uso en el tratamiento del cáncer. En una realización particular, el cáncer es un cáncer en humanos.
En la presente descripción se describe un compuesto, o una sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define en la presente para su uso en la inhibición de la actividad de la enzima Cdc7.
En la presente descripción se describe un compuesto, o una sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define en la presente para su uso en el tratamiento de una enfermedad o trastorno en el que está implicada la actividad de Cdc7.
En la presente descripción se describe el uso de un compuesto, o una sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define en la presente en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de una afección proliferativa.
En la presente descripción se describe el uso de un compuesto, o una sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define en la presente en la elaboración de un medicamento para el tratamiento del cáncer. Adecuadamente, el medicamento es para usar en el tratamiento de cánceres en humanos.
En la presente descripción se describe el uso de un compuesto, o una sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define en la presente en la elaboración de un medicamento para la inhibición de la actividad de la enzima Cdc7.
En la presente descripción se describe el uso de un compuesto, o una sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define en la presente en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad o trastorno en el que está implicada la actividad de Cdc7. El término "trastorno proliferativo" se usa
indistintamente en la presente y se refieren a una proliferación celular no deseada o incontrolada de células excesivas o anormales que no son deseadas, tales como crecimiento neoplásico o hiperplásico, ya sea in vitro o in vivo. Los ejemplos de afecciones proliferativas incluyen, pero no se limitan a, proliferación celular premalignas y malignas, que incluyen, pero no se limitan a, neoplasias y tumores malignos, cánceres, leucemias, psoriasis, enfermedades óseas, trastornos fibroproliferativos (por ejemplo, de tejidos conectivos), y aterosclerosis. Cualquier tipo de célula puede ser tratada, incluyendo pero sin limitarse a, pulmón, colon, mama, ovario, próstata, hígado, cerebro y piel.
Los efectos antiproliferativos de los compuestos de la presente invención tienen particular aplicación en el tratamiento de cánceres humanos (en virtud de sus propiedades de inhibición de la actividad de la enzima Cdc7).
El efecto anticancerígeno puede surgir a través de uno o más mecanismos, que incluyen, pero no se limitan a, la regulación de la proliferación celular, la inhibición de la angiogénesis (la formación de nuevos vasos sanguíneos), la inhibición de la metástasis (la diseminación de un tumor desde su origen), la inhibición de la invasión (la diseminación de las células tumorales a las estructuras normales vecinas), o la promoción de la apoptosis (muerte celular programada).
En una realización particular de la invención, la afección proliferativa a tratar es el cáncer. Por ejemplo, cáncer de pulmón, cáncer de colon, cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer de próstata, cáncer de hígado, cáncer de páncreas, cáncer de cerebro y cáncer de piel.
Rutas de administración
Los compuestos de la invención o la composición farmacéutica que comprende estos compuestos puede administrarse a un sujeto mediante cualquier ruta conveniente de administración, ya sea sistémica/ periféricamente o tópicamente (es decir, un sitio de acción deseado).
Las rutas de administración incluyen, pero no se limitan a, oral (por ejemplo, por ingestión); bucal; sublingual; transdérmica (que incluye, por ejemplo, un parche, emplasto, etc.); transmucosa (que incluye, por ejemplo, un parche, emplasto, etc.); intranasal (por ejemplo, por pulverización nasal); ocular (por ejemplo, gotas para los ojos); pulmonar (por ejemplo, mediante terapia de inhalación o insuflación usando, por ejemplo, un aerosol, por ejemplo, a través de la boca o la nariz); rectal (por ejemplo, por supositorio o enema); vaginal (por ejemplo, por pesario); parenteral, por ejemplo, mediante inyección, que incluye subcutánea, intradérmica, intramuscular, intravenosa, intraarterial, intracardíaca, intratecal, intraespinal, intracapsular, subcapsular, intraorbital, intraperitoneal, intratraqueal, subcuticular, intraarticular, subaracnoidea e intraesternal; mediante implante de un depósito o reservorio, por ejemplo, por vía subcutánea o intramuscular.
Terapias de combinación
El tratamiento antiproliferativo definido de aquí en lo adelante puede aplicarse como una sola terapia o puede involucrar, además del compuesto de la invención, quimioterapia, radioterapia o cirugía convencional. La quimioterapia puede incluir una o más de las siguientes categorías de agentes antitumorales:
(i) otros fármacos antiproliferativos/antineoplásicos y combinaciones de éstos, como se usa en oncología médica, tales como los agentes alquilatantes (por ejemplo cis-platino, oxaliplatino, carboplatino, ciclofosfamida, mostaza de nitrógeno, melfalano, clorambucilo, busulfán, temozolamida y nitrosoureas); antimetabolitos (por ejemplo gemcitabina y antifolatos tales como fluoropirimidinas como 5-fluorouracil ytegafur, raltitrexed, metotrexato, arabinósido de citosina, e hidroxiurea); antibióticos antitumorales (por ejemplo antraciclinas como adriamicina, bleomicina, doxorubicina, daunomicina, epirubicina, idarubicina, mitomicina-C, dactinomicina y mitramicina); agentes antimitóticos (por ejemplo alcaloides vinca como vincristina, vinblastina, vindesina y vinorelbina y taxoides como taxol y taxotere e inhibidores de poloquinasa); e inhibidores de topoisómerasa (por ejemplo, epipodofilotoxinas como etopósido y tenipósido, amsacrina, topotecan y camptotecina);
(ii) agentes citostáticos tales como antioestrógenos (por ejemplo tamoxifeno, fulvestrant, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno y yodoxifeno), antiandrógenos (por ejemplo bicalutamia, flutamida, nilutamida y acetato de ciproterona), antagonistas LHRH o agonistas LHRH (por ejemplo goserelina, leuprorelina y buserelina), progestogenas (por ejemplo acetato de megestrol), inhibidores de aromatasa (por ejemplo como anastrozol, letrozol, vorazol y exemestano) e inhibidores de la 5a-reductasa tal como finasteride;
(iii) agentes antiinvasión [por ejemplo inhibidores de la familia de la cinasa c-Src como 4-(6-cloro-2,3-metilenodioxianilino)-7-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]-5-tetrahidropiran-4-iloxiquinazolina (AZD0530; Solicitud internacional de patente WO 01/94341), W-(2-cloro-6-metilfenil)-2-{6-[4-(2-hidroxietil)piperazin-1-il]-2-metilpirimidin-4-ilamino}tiazol-5-carboxamida (dasatinib, BMS-354825; J. Med. Chem., 2004, 47, 6658-6661) y bosutinib (Sk I-606), e inhibidores de la metaloproteinasa como marimastat, inhibidores de la función del receptor del activador del plasminógeno uroquinasa o anticuerpos contra la heparanasa];
(iv) inhibidores de la función del factor de crecimiento: por ejemplo, dichos inhibidores incluyen anticuerpos del factor de crecimiento y anticuerpos del receptor del factor de crecimiento (por ejemplo, el anticuerpo anti-erbB2 trastuzumab [Herceptin™], el anticuerpo anti-EGFR panitumumab, el anticuerpo anti-erbBl cetuximab [ Erbitux, C225] y cualquier factor de crecimiento o anticuerpos del receptor del factor de crecimiento descritos por Stern y otros. (Critical reviews
in oncology/haematology 2005, Vol. 54, págs. 11-29); tales inhibidores también incluyen inhibidores de tirosina quinasa, por ejemplo, inhibidores de la familia del factor de crecimiento epidérmico (por ejemplo, inhibidores de tirosina quinasa de la familia EGFR tales como W-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-metoxi-6-(3 -morfolinopropoxi)quinazolin-4-amina (gefitinib, ZD1839), N-(3-etinilfenil)-6,7-bis(2-metoxietoxi) quinazolina-4-amina (erlotinib, OSl-774) y 6-acrilamido-W-(3-cloro-4-fluorofenil) -7-(3-morfolinopropoxi)-quinazolin-4-amina (Cl 1033), inhibidores de tirosina quinasa erbB2 tales como lapatinib); inhibidores de la familia de factores de crecimiento de hepatocitos; inhibidores de la familia de factores de crecimiento de la insulina; inhibidores de la familia de factores de crecimiento derivados de plaquetas como imatinib y/o nilotinib (AMN107); inhibidores de serina/treonina quinasas (por ejemplo, inhibidores de señalización de Ras/Raf como inhibidores de farnesil transferasa, por ejemplo sorafenib (bAy 43-9006), tipifarnib (R115777) y lonafarnib (SCH66336)), inhibidores de la señalización celular a través deMEKy/oAKT quinasas, inhibidores de c-kit, inhibidores de quinasa abl, inhibidores de quinasa PI3, inhibidores de quinasa Plt3, inhibidores de quinasa CSF-1R, inhibidores de quinasa del receptor de IGF (factor de crecimiento similar a la insulina); inhibidores de quinasa Aurora (por ejemplo AZD1152, PH739358, VX-680, MLN8054, R763, MP235, MP529, VX-528 Y AX39459) e inhibidores de quinasa dependientes de ciclina tales como inhibidores de CDK2 y/o CDK4;
(v) agentes antiangiogénicos tales como los que inhiben los efectos del factor de crecimiento vascular endotelial, [por ejemplo, el anticuerpo del factor de crecimiento celular anti-vascular endotelial bevacizumab (Avastin™) y por ejemplo, un inhibidor de la tirosina cinasa del receptor VEGF tal como vandetanib (ZD6474), vatalanib (PTK787), sunitinib (SU11248), axitinib (AG-013736), pazopanib (GW 786034) y 4-(4-fluoro-2-metilindol-5-iloxi)-6-metoxi-7-(3-pirrolidin-1-ilpropoxi)quinazolina (AZD2171; Ejemplo 240 en WO 00/47212), los compuestos tales como los descritos en las solicitudes internacionales de patente WO97/22596, WO 97/30035, WO 97/32856 y WO 98/13354 y los compuestos que funcionan por otros mecanismos (por ejemplo linomida, inhibidores de la función de la integrina avp3 y angioestatina)];
(vi) agentes dañinos vasculares tales como Combretastatin A4 y compuestos descritos en las solicitudes internacionales de patente WO 99/02166, WO 00/40529, WO 00/41669, WO 01/92224, WO 02/04434 y WO 02/08213; (vii) un antagonista del receptor de endotelina, por ejemplo, zibotentan (ZD4054) o atrasentan;
(viii) terapias antisentido, por ejemplo, aquellas que están dirigidas a las dianas mencionadas anteriormente, tales como ISIS 2503, un antisentido anti-ras;
(ix) aproximaciones a la terapia de genes, incluyendo, por ejemplo, aproximaciones para reemplazar genes aberrantes tales como p53 aberrante o BRCA1 o BRCA2 aberrantes, aproximaciones de GDEpT (terapia génica dirigida enzimaprofármaco) tales como aquellas que usan citosina deaminasa, timidina cinasa o una enzima nitroreductasa bacteriana y aproximaciones para aumentar la tolerancia del paciente a la quimioterapia o radioterapia tales como terapia génica de resistencia a múltiples fármacos; y
(x) aproximaciones de inmunoterapia, incluyendo, por ejemplo, aproximaciones ex-vivo e in-vivo para aumentar la inmunogenicidad de las células tumorales del paciente, tal como la transfección con citoquinas como la interleuquina 2, interleuquina 4 o factor de estimulación de colonias de granulocitos-macrófagos, aproximaciones para disminuir la anergia de células T, aproximaciones para usar células inmunitarias transfectadas, como células dendríticas transfectadas con citoquinas, aproximaciones para usar líneas celulares tumorales transfectadas con citoquinas y aproximaciones para usar anticuerpos antiidiotípicos.
En una realización particular, el tratamiento antiproliferativo definido de aquí en lo adelante puede involucrar, además del compuesto de la invención, quimioterapia, radioterapia o cirugía convencional.
Tal tratamiento conjunto puede lograrse mediante dosificación simultánea, separada o secuencial de los componentes individuales del tratamiento. Tales productos de combinación emplean los compuestos de esta invención dentro del intervalo de dosificación descrito anteriormente y el otro agente farmacéuticamente activo dentro de su intervalo de dosificación aprobado.
En la presente se describe una combinación para su uso en el tratamiento de un cáncer (por ejemplo un cáncer que involucra un tumor sólido) que comprende un compuesto de la invención como se definió en la presente descripción anteriormente, o una sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, y otro agente antitumoral.
En la presente se describe una combinación para su uso en el tratamiento de una afección proliferativa, tal como cáncer (por ejemplo, un cáncer que involucra un tumor sólido), que comprende un compuesto de la invención como se define anteriormente, o una sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, y cualquiera de los agentes antitumorales enumerados aquí anteriormente.
En la presente se describe además un compuesto de la invención o una sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento del cáncer en combinación con otro agente antitumoral, opcionalmente seleccionado de uno de los enumerados anteriormente en la presente.
En la presente descripción, donde se usa el término "combinación" debe entenderse que se se refiere a una administración simultánea, separada o secuencial. En un aspecto de la invención "combinación" se refiere a una administración simultánea. En otro aspecto de la invención "combinación" se refiere a una administración separada. En un aspecto adicional de la invención "combinación" se refiere a una administración secuencial. Cuando la administración es secuencial o separada, el retraso en administrar el segundo componente no debe ser tal que pierda
los efectos beneficiosos de la combinación. En una realización, una combinación se refiere a un producto de combinación.
En la presente descripción se describe una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención, o una sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, en combinación con un agente antitumoral (opcionalmente seleccionado de uno de los enumerados anteriormente en la presente portador farmacéuticamente aceptable.
EJEMPLOS
Química
Los ejemplos siguientes se proporcionan solamente para ilustrar la presente invención y no pretenden limitar el alcance de la invención como se describe en la presente descripción.
Los compuestos de la invención se pueden preparar usando técnicas sintéticas que son conocidas en la técnica (como se ilustra en los ejemplos en la presente descripción).
Por conveniencia, en la presente descripción se usan las siguientes abreviaturas comunes:
Boc para ferc-butiloxicarbonilo
DAST para trifluoruro de dietilaminoazufre;
DBU para 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno;
DCM para diclorometano;
DEA para dietanolamina
DIPEA para W,W-diisopropiletilamina, base de Hünig
DMA para W,W-dimetilacetamida
DMF para W,W-dimetilformamida
DMSO para dimetilsulfóxido.
h para horas
HBTU para 0-(benzotriazoM-il)-W,W,W'W'-tetrametiluronio hexafluorofosfato
HPLC = para cromatografía líquida de alta presión.
IPA para alcohol isopropílico
LC-Ms para cromatografía líquida-espectrometría de masas.
MI para ion molecular
min para minutos
MW para microondas
NBS para W-bromosuccinamida
NCS para W-clorosuccinimida
NIS para W-yodosuccinamida
Nm M para W-metilmorfolina
NMP para 1 -metil-2-pirrolidinona
NMR para Resonancia Magnética Nuclear.
p-TSA para ácido para-toluenosulfónico
Pd(dppf)Cl2 para [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(N)
Pd(dba)2 para bis(dibencilidenoacetona)paladio
RT para tiempo de retención.
SCX-2 para un sorbente a base de sílice con un grupo funcional de ácido propilsulfónico químicamente unido SFC para cromatografía de fluidos supercríticos
TBME para ferc-butilmetil éter
TFA para ácido trifluoroacético
THF para tetrahidrofurano
THP para tetrahidropirano
Procedimientos generales: NMR
Los espectros de RMN de protones se registraron usando una máquina Bruker AMX-300 NMR a 300 MHz, una máquina Bruker AMX-400 n Mr a 400 MHz o una máquina Bruker Avance 500 a 500 MHz. Los cambios se informaron en valores de ppm en relación con un patrón interno de tetrametilsilano (TMS) o solvente prótico residual. Se usaron las siguientes abreviaturas para describir los patrones de división: s (singlete), d (doblete), t (triplete), q (cuarteto), m (multiplete), dd (doble-doblete), dt (doble-triplete), br (ancho).
Procedimientos generales: Métodos de LCMS
Método: 1 LCMS1
El método 1LCMS1 empleó bombas Waters 515, un mezclador Waters 2525 con válvulas que direccionan a las
diferentes columnas y un detector de matriz de diodos Waters 2487. La detección se realizó a 254 nm. El
espectrómetro de masas fue un micromasa ZQ de Waters que detectó masas entre 100 y 700 g/mol. La columna
usada fue una columna C18 SunFire, tamaño de poro de 5 micrómetros, de dimensiones 50 x 4,60 mm. El volumen
de inyección fue de 10 pl a una concentración máxima de 1 mg/ml. El caudal fue de 1,5 ml/min y las fases móviles de
agua y metanol contenían ácido fórmico al 0,1 %. La elución se inició con 85 % de agua: 15 % de metanol aumentando
hasta 15 % de agua: 85 % de metanol durante 4,5 minutos, estas condiciones se mantuvieron durante 1 minuto antes
de que el nivel del eluyente volviera a las condiciones iniciales de 85 % de agua: Metanol al 15 % durante 6 segundos.
Estas condiciones se mantuvieron durante 1,4 minutos para permitir el equilibrio de la columna antes de inyectar la
siguiente muestra. La ejecución duró 7 minutos en total.
Método: 1 LCMS12
El método 1LCMS12 empleó bombas Waters 515, un mezclador Waters 2525 con válvulas que direccionan a las
diferentes columnas y un detector de matriz de diodos Waters 2998. La detección se realizó entre 210 nm y 400 nm.
El espectrómetro de masas fue un micromasa ZQ de Waters que detectó masas entre 100 y 700 g/mol. La columna
usada fue una columna C18 SunFire, tamaño de poro de 5 micrómetros, de dimensiones 50 x 4,60 mm. El volumen
de inyección fue de 10 pl a una concentración máxima de 1 mg/ml. El caudal fue de 1,5 ml/min y las fases móviles de
agua y acetonitrilo contenían ácido fórmico al 0,1 %. La elución se inició con 95 % agua:5 % acetonitrilo aumentando
hasta 5 % agua:95 % acetonitrilo durante 5 minutos, estas condiciones se mantuvieron durante 0,5 minutos antes de
que el nivel del eluyente volviera a las condiciones iniciales de 95 % agua:5 % acetonitrilo durante 6 segundos. Estas
condiciones se mantuvieron durante 1,4 minutos para permitir el equilibrio de la columna antes de inyectar la siguiente
muestra. La ejecución duró 7 minutos en total.
Método: 1LCMS13
El método 1LCMS13 empleó bombas Waters 515, un mezclador Waters 2525 con válvulas que direccionan a las
diferentes columnas y un detector de matriz de diodos Waters 2998. La detección se realizó entre 210 nm y 400 nm.
El espectrómetro de masas fue un micromasa ZQ de Waters que detectó masas entre 100 y 700 g/mol. La columna
usada fue una columna C18 SunFire, tamaño de poro de 5 micrómetros, de dimensiones 50 x 4,60 mm. El volumen
de inyección fue de 10 pl a una concentración máxima de 1 mg/ml. El caudal fue de 1,5 ml/min y las fases móviles de
agua y acetonitrilo contenían ácido fórmico al 0,1 %. La elución se inició con 95 % agua:5 % acetonitrilo aumentando
hasta 5 % agua:95 % acetonitrilo durante 2,5 minutos, estas condiciones se mantuvieron durante 3 minutos antes de
que el nivel del eluyente volviera a las condiciones iniciales de 95 % agua:5 % acetonitrilo durante 18 segundos. Estas
condiciones se mantuvieron durante 1,2 minutos para permitir el equilibrio de la columna antes de inyectar la siguiente
muestra. La ejecución duró 7 minutos en total.
Método: 2LCMS1
El método 2LCMS1 empleó bombas Waters 515, un mezclador Waters 2545 con válvulas que direccionan a las
diferentes columnas y un detector de matriz de diodos Waters 2996. La detección se realizó entre 210 nm y 650 nm.
El espectrómetro de masas fue un Waters 3100 que detectó masas entre 100 y 700 g/mol. La columna usada fue una
XBridge, tamaño de poro de 5 micrómetros, C18, 50 x 4,60 mm. El volumen de inyección fue de 10 pl a una concentración máxima de 1 mg/ml. El caudal fue de 1,5 mL/min y las fases móviles de agua pH 10 (solución de amoniaco al 35 % (ac.) 0,3 mL/L) y metanol (solución de amoniaco al 35 % (ac.) 0,3 mL/L). La elución se inició con 85
% de agua:15 % de metanol aumentando gradualmente hasta 15 % de agua:85 % de metanol durante 4,5 minutos.
Estas condiciones se mantuvieron durante 1 minuto antes de que el nivel del eluyente volviera a las condiciones
iniciales de 85 % de agua: Metanol al 15 % durante 6 segundos. Estas condiciones se mantuvieron durante 1,4 minutos
para permitir el equilibrio de la columna antes de inyectar la siguiente muestra. La ejecución duró 7 minutos en total.
Método: 2LCMS5
El método 2LCMS5 empleó bombas Waters 515, un mezclador Waters 2545 con válvulas que direccionan a las
diferentes columnas y un detector de matriz de diodos Waters 2996. La detección se realizó entre 210 nm y 650 nm.
El espectrómetro de masas fue un Waters 3100 que detectó masas entre 100 y 700 g/mol. La columna usada fue una
XBridge, tamaño de poro de 5 micrómetros, C18, 50 x 4,60 mm. El volumen de inyección fue de 10 pl a una concentración máxima de 1 mg/ml. El caudal fue de 1,5 mL/min y las fases móviles de agua pH 10 (solución de amoniaco al 35 % (ac.) 0,3 mL/L) y acetonitrilo (solución de amoniaco al 35 % (ac.) 0,3 mL/L). La elución se inició con
95 % agua:5 % acetonitrilo aumentando gradualmente hasta 5 % agua:95 % acetonitrilo durante 5 minutos. Estas
condiciones se mantuvieron durante 0,5 minutos antes de que el nivel del eluyente volviera a las condiciones iniciales
95 % agua:5 % acetonitrilo durante 18 segundos. Estas condiciones se mantuvieron durante 1,2 minutos para permitir
el equilibrio de la columna antes de inyectar la siguiente muestra. La ejecución duró 7 minutos en total.
Método: 4LCMS1
El método 4LCMS1 empleó un manipulador de líquidos Alliance e2695 y un SFO con un detector de matriz de diodos Waters 2998. La detección se realizó a 254 nm y una matriz entre 210-600 nm. El espectrómetro de masas usado fue un Acquity SQ que detectó masas entre 100 y 700 g/mol. La columna usada fue una columna C18 SunFire, tamaño de poro de 5 micrómetros, de dimensiones 50 x 4,60 mm. El volumen de inyección fue de 10 j l a una concentración máxima de 1 mg/ml. El caudal fue de 1,5 ml/min y las fases móviles de agua y acetonitrilo contenían ácido fórmico al 0,1 %. La elución se inició con 95 % agua:5 % acetonitrilo aumentando hasta 5 % agua:95 % acetonitrilo durante 5 minutos, estas condiciones se mantuvieron durante 0,5 minutos antes de que el nivel del eluyente volviera a las condiciones iniciales de 95 % agua:5 % acetonitrilo durante 6 segundos. Estas condiciones se mantuvieron durante 1,4 minutos para permitir el equilibrio de la columna antes de inyectar la siguiente muestra. La ejecución duró 7 minutos en total.
Método: 4LCMS3
El método 4LCMS3 empleó un manipulador de líquidos Alliance e2695 y un SFO con un detector de matriz de diodos Waters 2998. La detección se realizó a 254 nm y una matriz entre 210-600 nm. El espectrómetro de masas usado fue un Acquity SQ que detectó masas entre 100 y 700 g/mol. La columna usada fue una columna C18 SunFire, tamaño de poro de 5 micrómetros, de dimensiones 50 x 4,60 mm. El volumen de inyección fue de 10 j l a una concentración máxima de 1 mg/ml. El caudal fue de 1,5 ml/min y las fases móviles de agua y acetonitrilo contenían ácido fórmico al 0,1 %. La elución se inició con 95 % agua:5 % acetonitrilo aumentando hasta 5 % agua:95 % acetonitrilo durante 2,25 minutos, estas condiciones se mantuvieron durante 2,8 minutos antes de que el nivel del eluyente volviera a las condiciones iniciales de 95 % agua:5 % acetonitrilo durante 6 segundos. Estas condiciones se mantuvieron durante 0,8 minutos para permitir el equilibrio de la columna antes de inyectar la siguiente muestra. La ejecución duró 3,7 minutos en total.
Método: 4LCMS6
El método 4LCMS6 empleó un manipulador de líquidos Alliance e2695 y un SFO con un detector de matriz de diodos Waters 2998. La detección se realizó a 254 nm y una matriz entre 210-600 nm. El espectrómetro de masas usado fue un Acquity SQ que detectó masas entre 100 y 700 g/mol. La columna usada fue una Waters Cortecs, tamaño de poro de 2,7 micrómetros, columna C18 de dimensiones 50 x 4,60 mm usada a una temperatura de 45 °C. El volumen de inyección fue de 10 j l a una concentración máxima de 1 mg/ml. El caudal fue de 2,2 ml/min y las fases móviles de agua y acetonitrilo contenían ácido fórmico al 0,1 %. La elución se inició con 95 % agua:5 % acetonitrilo aumentando hasta 5 % agua:95 % acetonitrilo durante 2,2 minutos, estas condiciones se mantuvieron durante 2,5 minutos antes de que el nivel del eluyente volviera a las condiciones iniciales de 95 % agua:5 % acetonitrilo durante 6 segundos. Estas condiciones se mantuvieron durante 0,6 minutos para permitir el equilibrio de la columna antes de inyectar la siguiente muestra. La ejecución duró 3,2 minutos en total.
Método: 5LCMS1
El método 5LCMS1 empleó bombas Waters 515, un mezclador Waters 2525 con válvulas que direccionan a las diferentes columnas y un detector de matriz de diodos Waters 2998. La detección se realizó a 254 nm y una matriz entre 210-600 nm. El espectrómetro de masas usado fue un Waters 3100 que detectó masas entre 100 y 700 g/mol. La columna usada fue una columna C18 SunFire, tamaño de poro de 5 micrómetros, de dimensiones 50 x 4,60 mm. El volumen de inyección fue de 10 j l a una concentración máxima de 1 mg/ml. El caudal fue de 1,5 ml/min y las fases móviles de agua y acetonitrilo contenían ácido fórmico al 0,1 %. La elución se inició con 95 % agua:5 % acetonitrilo aumentando hasta 5 % agua:95 % acetonitrilo durante 5 minutos, estas condiciones se mantuvieron durante 0,5 minutos antes de que el nivel del eluyente volviera a las condiciones iniciales de 95 % agua:5 % acetonitrilo durante 6 segundos. Estas condiciones se mantuvieron durante 1,4 minutos para permitir el equilibrio de la columna antes de inyectar la siguiente muestra. La ejecución duró 7 minutos en total.
Síntesis
En la presente descripción se describen varios métodos para la síntesis química de la presente solicitud. Estos y/u otros métodos bien conocidos pueden modificarse y/o adaptarse de diversas formas para facilitar la síntesis de compuestos adicionales dentro del alcance de la presente solicitud y las reivindicaciones. Esos métodos alternativos y modificaciones deben entenderse dentro del espíritu y alcance de esta solicitud y reivindicaciones. Por consiguiente, debe entenderse que los métodos expuestos en las siguientes descripciones, esquemas y ejemplos están destinados a fines ilustrativos y no deben interpretarse como limitantes del alcance de la divulgación.
En un enfoque (Esquema general 1), los compuestos de Fórmula [F1-3] se preparan mediante la reacción de un compuesto de éster p-cetopropílico 3-sustituido de Fórmula [F1-1] en una reacción de condensación usando un derivado de carboximidamida heterocíclico adecuadamente sustituido de Fórmula general [F1-2] en un solvente polar como metanol o THF en presencia de una base como metóxido de sodio o DBU. La reacción se lleva a cabo de forma adecuada a temperatura ambiente o a alta temperatura, ya sea mediante calentamiento térmico o usando un reactor de microondas. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante una extracción líquido-líquido, el producto de reacción se usó en bruto en la siguiente etapa o se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC
preparativa de fase inversa o recristalización. Los derivados de Fórmula general [F1-5] se preparan mediante la reacción de compuestos de Fórmula [F1-3] con un agente halogenante como NCS o NBS en un solvente polar como DMF o THF y una base como Et3N o DIPEA a temperatura ambiente. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante una extracción líquido-líquido, el producto de reacción se usó en bruto en la siguiente etapa o se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC preparativa de fase inversa o recristalización.
Alternativamente, los compuestos de Fórmula [F1-5] se preparan mediante la reacción de un compuesto de éster pcetopropílico 2,3-disustituido de Fórmula [F1-4] en una reacción de condensación utilizando un derivado de carboximidamida heterocíclico adecuadamente sustituido de Fórmula general [F1-2] en un solvente polar como metanol o THF en presencia de una base como metóxido de sodio o DBU. La reacción se lleva a cabo de forma adecuada a temperatura ambiente o a alta temperatura, ya sea mediante calentamiento térmico o usando un reactor de microondas. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante una extracción líquido-líquido, el producto de reacción se usó en bruto en la siguiente etapa o se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC preparativa de fase inversa o recristalización.
En los casos en que el sustituyente R2 contenía una amina protegida por un grupo protector de amina estándar como ferc-butiloxicarbonilo (Boc), los compuestos de Fórmula [F1-5] pueden desprotegerse mediante una reacción de desprotección adecuada, por ejemplo, reacción con un ácido tal como TFA en un solvente adecuado tal como DCM a temperatura ambiente. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante una liberación de líquido (extracción de líquido o purificación mediante captura de intercambio iónico ácido), el producto bruto puede purificarse mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC preparativa de fase inversa o recristalización.
Síntesis de clorhidrato de 4-metiltiazol-5-carboxamidina (1-001)
Cloruro de amonio (7,81 g, 146 mmol) se suspendió en tolueno (50 ml) bajo nitrógeno y se enfrió a 0 °C. Una solución de trimetilaluminio (2,0 M en tolueno, 62,5 ml, 125 mmol) se añadió gota a gota a la mezcla de reacción manteniendo la temperatura por debajo de 10 °C. Una vez que se completó la adición, la mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 1 hora. Después, la reacción se calentó a reflujo durante 18 h antes de enfriar hasta temperatura ambiente. Se añadió etil 4-metil-1,3-tiazol-5-carboxilato (2,50 g, 14,6 mmol) y la reacción se calentó a reflujo durante 7 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se añadió otro lote de etil 4-metil-1,3-tiazol-5-carboxilato (2,50 g, 14,6 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 18 h, luego se enfrió a temperatura ambiente y se añadió otro lote de etil 4-metil-1,3-tiazol-5-carboxilato (2,50 g, 14,6 mmol). La reacción se calentó a reflujo durante 24 h más y luego se enfrió hasta temperatura ambiente. La mezcla de reacción se añadió lentamente a MeOH (100 ml) con agitación vigorosa (se observó exotermia). El precipitado espeso obtenido se filtró sobre una hoja de filtración de fibra de vidrio bajo un flujo de nitrógeno. La almohadilla se lavó con MeOH y el filtrado combinado se concentró al vacío. El residuo se sonicó durante 15 min en DCM (50 ml), luego se agitó vigorosamente
para romper los cristales. La suspensión se filtró a través de un embudo sinterizado para dar un sólido blanquecino. El sólido recogido se secó en un horno de vacío a 50 °C durante 1 h para proporcionar el compuesto del título (4,0 g, 51 %). LCMS: MI 143, Método (1LCMS1); 1H NMR (500 MHz, DMSO-^) 59,51 (br s, 3H), 9,30 (s, 1H), 7,70 (br s, 3H), 2,54 (s, 3H).
Síntesis de terc-butil 4-[5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il] piperidina-1-carboxilato (1-002)
Clorhidrato de 4-metiltiazol-5-carboxamidina (1-001) (2,00 g, 14,2 mmol) se disolvió en MeOH (50 ml) y se añadió terc-butil-4-(3-etoxi-3-oxopropanoil)tetrahidro-1(2H)-piridinacarboxilato (4,24 g, 14,2 mmol), seguido de DBU (8,47 ml, 56,7 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 24 h. Después, la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo se suspendió en EtOAc (20 ml) y luego se sonicó. El precipitado obtenido se recogió mediante filtración al vacío. El sólido recogido se repartió entre DCM y una solución 1 N de HCl (ac). La fase orgánica se separó, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró al vacío para dar el compuesto del título (2,59 g, 49 %). 1H NMR (300 MHz, CDCl3) 5 11,93 (br s, 1H), 8,83 (s, 1H), 6,21 (s, 1H), 4,23 (br s, 2H), 2,89 - 2,72 (m, 5H), 2,68 - 2,55 (m, 1H), 1,90 (d, J =12,9 Hz, 2H), 1,65 (qd, J = 12,4, 4,3 Hz, 2H), 1,47 (s, 9H).
Síntesis de terc-butil 4-[5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il]piperidina-1-carboxilato (1)
terc-Butil 4-[5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il]piperidina-1-carboxilato (1-002) (2,00 g, 5,31 mmol) en ácido acético glacial (50 ml) se trató con NCS (0,850 g, 6,37 mmol) y se calentó a reflujo durante 5 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar hasta la temperatura ambiente y luego se añadió hielo (50 ml). La mezcla resultante se extrajo con DCM. La fase acuosa se extrajo después con DCM. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se disolvió en un volumen mínimo de DCM y se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con MeOH en DCM (0 a 5 %). Las fracciones de interés se combinaron y se concentraron al vacío para dar el compuesto del título (0,194 g, 9 %). LCMS: RT 3,58 min, MI 411, Método (1LCMS1); 1H NMR (300 MHz, CDCls) 5 12,11 (s, 1H), 8,86 (s, 1H), 4,25 (s, 2H), 3 ,38-3 ,15 (m, 1H), 3,00 -2,58 (m, 5H), 1,98 - 1,61 (m, 4H), 1,48 (s, 9H).
Síntesis de 5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-(4-piperidil)-1H-pirimidin-6-ona (2)
terc-Butil 4-[5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il]piperidina-1-carboxilato (1) (0,634 g, 1,544 mmol) se tomó en DCM (20 ml) y se añadió HCl en dioxano (4 M, 0,385 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, seguido de 45 °C durante 18 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y luego se concentró bajo un flujo de nitrógeno. El residuo se repartió entre DCM y una solución acuosa saturada de NaHCO3. La fase de DCM se lavó con salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró al vacío para dar el
compuesto del título (0,437 g, 91 %). LCMS: RT2,16 min, MI 311, Método (1LCMS1); 1H NMR (300 MHz, DMSO-^) 5 9,13 (s, 1H), 3,36 (d, J =11,6 Hz, 3H), 3,05 (s, 2H), 2,72 (s, 3H), 1,94 (d, J = 26,0 Hz, 4H).
Síntesis de 2-(4-metiltiazol-5-il)-4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidin-6-ona (1-003)
En un matraz de fondo redondo de 50 ml equipado con un condensador, bajo nitrógeno, se añadió 4-metiltiazol-5-carboxamidina; clorhidrato (1-001) (0,502 g, 2,82 mmol) en MeOH (10 ml). Este se trató con éster etílico del ácido 3-oxo-3-tetrahidropiran-4-il propiónico (0,568 g, 2,82 mmol) seguido de DBU (1,69 ml, 11,3 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 65 °C durante 18 h. La mezcla de reacción se concentró luego al vacío. El residuo se disolvió en un volumen mínimo de DCM y se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre gel de sílice, eluyendo con MeOH en DCM (0 a 5 %). Las fracciones apropiadas se concentraron al vacío y el residuo se suspendió en EtOAcy luego se sonicó durante 5 min. La suspensión se recogió mediante filtración al vacío en un embudo sinterizado para dar el compuesto del título (0,486 g, 62 %). LCMS: RT 3,52 min, MI 278, Método (1LCMS1). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 5 12,11 (brs, 1H), 9,04 (s, 1H), 6,37 (s, 1H), 3,93 (d, J =10,7 Hz, 2H), 3,49-3,34 (m, 2H), 2,87-2,70 (m, 4H), 1,83-1,62 (m, 4H).
Síntesis de 5-bromo-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidin-6-ona (3)
2-(4-Metiltiazol-5-il)-4-tetrahidropiran-4-il-1 H-pirimidin-6-ona (1-003) (27,7 mg, 0,100 mmol) se suspendió en DCM (1 ml). Se añadió NBS (200 mg, 0,110 mmol), seguido de Et3N (0,100 ml, 0,719 mmol) y la reacción se dejó en agitación durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se concentró a presión reducida y el residuo se purificó mediante HPLC preparativa para dar el compuesto del título (23 mg, 65 %). lCm S: RT 3,11 min, MI 357, Método (1LCMS1); 1H NMR (300 MHz, CDCls) 58,88 (s, 1H), 4,10 (dd, J =11,4, 3,8 Hz, 2H), 3,57 (t, J =11,5 Hz, 2H), 3,37 (td, J = 9,8, 8,0, 6,0 Hz, 1H), 2,87 (s, 3H), 2,03 (qd, J = 12,5, 4,3 Hz, 2H), 1,71 (d, J =12,6 Hz, 2H).
Síntesis de éster etílico del ácido 2-fluoro-3-oxo-3-(tetrahidro-piran-4-il)-propiónico (1-004)
Se combinaron éster etílico del ácido 3-oxo-3-tetrahidropiran-4-il propiónico (1,00 g, 5,00 mmol) y Selectfluor (1,95 g, 5,00 mmol) en acetonitrilo (10 ml). La reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 2 días. El solvente se evaporó a presión reducida y se añadió DCM (20 ml) al residuo. Precipitó un sólido que se eliminó por filtración. El filtrado se concentró a presión reducida y el aceite resultante se purificó mediante cromatografía en columna (eluyendo con DCM al 0 % hasta MeOH al 20 % en DCM) para dar el compuesto del título (0,85 g, 78%). 1H NMR (300 MHz, CDCls) 55,29 (d, J = 49,3 Hz, 1H), 4,43-4,24 (m, 2H), 4,08-3,90 (m, 2H), 3,56-3,33 (m, 2H), 3,21-3,01 (m, 1H), 1,90 1,55 (m, 4H), 1,39-1,16 (m, 3H).
Síntesis de tiazol-5-carboxamidina (1-005)
Tiazol-5-carbonitrilo (0,69 g, 6,30 mmol) se disolvió en metanol (15 ml) y se trató con metóxido de sodio (0,033 g, 0,63 mmol) y luego se trató con cloruro de amonio (0,33 g, 6,30 mmol). La mezcla de reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 3 días y luego se evaporó el solvente a presión reducida hasta un sólido de color
amarillo pálido. Se añadió metanol (2 ml) seguido de éter dietílico (20 ml). El precipitado blanco resultante se filtró y se lavó con éter dietílico (5 ml). El sólido se secó a presión reducida para proporcionar el compuesto del título (0.38 g, 47 %) como un sólido blanco. LCMS: RT 0,53 min, MI 128, Método (4Lc Ms 1).
Síntesis de 2 -metil-2H -pirazol-3-carboxamidina (1-006)
Cloruro de amonio (1,87 g, 35,0 mmol) se suspendió en tolueno seco (50 ml) y se destiló azeotrópicamente hasta sequedad. El residuo se colocó bajo nitrógeno y se disolvió en tolueno (30 ml). La suspensión se enfrió a 0 °C. La mezcla de reacción se trató gota a gota con trimetilaluminio (2 M en tolueno, 17,5 ml, 35,0 mmol), manteniendo la temperatura por debajo de 10 °C. La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se dejó en agitación durante tres horas. A la mezcla de reacción se añadió éster etílico del ácido 2-metil-2H-pirazol-3-carboxílico (1,07 g, 7,00 mmol) y luego se calentó a 80 °C durante 15 horas. La mezcla de reacción se inactivó mediante la adición cuidadosa de metanol (40 ml) a 0° C. La mezcla de reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 30 min y la suspensión turbia blanca espesa se filtró a través de celita para eliminar el exceso de residuos de aluminio. Los filtrados se evaporaron a presión reducida para dar un sólido blanco que se recogió en una cantidad mínima de metanol (10 ml). Se añadió éter dietílico (50 ml) para precipitar el exceso de residuos de aluminio que luego se separaron por filtración. Los filtrados se concentraron a presión reducida para proporcionar el compuesto del título (0,58 g, 67 %) como un sólido amarillo. LCMS: RT 0,56 min, MI 125, Método (5LCMS1); 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 59,41 (d, 3 H), 7,65 (d, 1 H), 6,86 (d, 1 H), 3,99 (s, 3 H).
Síntesis de 4-metil-oxazol-5-carboxamidina (1-007)
Cloruro de amonio se suspendió en tolueno y se destiló azeotrópicamente en un evaporador rotatorio. El cloruro de amonio (1,59 g, 30,0 mmol) se pesó en un matraz de fondo redondo de 3 cuellos bajo una atmósfera de nitrógeno. Se añadió tolueno (15 ml) y la suspensión se enfrió a 0 °C. La mezcla de reacción se trató gota a gota con trimetilaluminio 2 M en tolueno (15 ml, 30,0 mmol). La mezcla de reacción se dejó calentar hasta temperatura ambiente y se agitó durante 3 horas. Se añadió éster etílico del ácido 4-metil-oxazol-5-carboxílico (0,465 g, 3,00 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 80 °C durante la noche. La reacción se enfrió y se inactivó mediante la adición lenta de metanol (30 ml). Precipitó un sólido blanco que luego se filtró a través de celita, lavando con más metanol. A continuación, se evaporó el metanol hasta que quedaron aproximadamente 5 ml. Esto se trató luego con éter dietílico (20 ml) y se filtró de nuevo. El filtrado se evaporó después para proporcionar el compuesto del título (0,34 g, 89 %). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 59,52 (s, 2H), 9,35 (s, 2H), 8,78 (s, 1H), 2,41 (s, 3H).
Síntesis de 4-etil-tiazol-5-carboxamidina (1-008)
Cloruro de amonio se suspendió en tolueno y se destiló azeotrópicamente en un evaporador rotatorio. El cloruro de amonio (0,53 g, 10,0 mmol) se pesó en un matraz de fondo redondo de 3 cuellos bajo una atmósfera de nitrógeno. Se añadió tolueno (5 ml) y la suspensión se enfrió a 0 °C. La mezcla de reacción se trató gota a gota con trimetilaluminio 2 M en hexano (5 ml, 10,0 mmol). La mezcla de reacción se dejó calentar hasta temperatura ambiente y se agitó durante 3 horas. Luego se añadió éster etílico del ácido 4-etil-tiazol-5-carboxílico (0,185 g, 1,00 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 80 °C durante la noche. La reacción se enfrió y se inactivó mediante la adición lenta de metanol (30 ml). Precipitó un sólido blanco que luego se filtró a través de celita, lavando con más metanol. A continuación, se evaporó el metanol hasta que quedó aproximadamente 1 ml. Esto se trató luego con éter dietílico (5 ml) y se filtró de nuevo. El solvente residual se evaporó luego para dar el compuesto del título (0,13 g, 81 %) LCMS: RT Frente del solvente, Método (4LCMS1).
Síntesis de 4-trifluorometil-tiazol-5-carboxamidina (1-009)
Cloruro de amonio se suspendió en tolueno y se destiló azeotrópicamente en un evaporador rotatorio. El cloruro de amonio (6,42 g, 120,0 mmol) se pesó en un matraz de fondo redondo de 3 cuellos bajo una atmósfera de nitrógeno. Se añadió tolueno (60 ml) y la suspensión se enfrió a 0 °C. La mezcla de reacción se trató gota a gota con trimetilaluminio 2 M en tolueno (60 ml, 120,0 mmol). La mezcla de reacción se dejó calentar hasta la temperatura ambiente y se agitó durante 3 horas. Luego se añadió éster etílico del ácido 4-trifluorometil-tiazol-5-carboxílico (2,70 g, 12,0 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 80 °C durante la noche. La reacción se enfrió y se inactivó mediante la adición lenta de metanol (30 ml). Precipitó un sólido blanco que luego se filtró a través de celita, lavando con más metanol. A continuación, se evaporó el metanol hasta que quedaron aproximadamente 10 ml. Esto se trató luego con éter dietílico (50 ml) y se filtró de nuevo El solvente residual se evaporó para dar el compuesto del título (2,0 g, 85 %). LCMS: RT Frente del solvente, Método (4LCMS1).
Síntesis de éster metílico del ácido 4-cloro-tiazol-5-carboxílico (1-010)
Una solución de metil 2,4-diclorotiazol-5-carboxilato (1,06 g, 5,00 mmol) se calentó a reflujo en AcOH (15 ml) y se añadió polvo de zinc (1,00 g, 15,0 mmol). La mezcla se agitó a reflujo durante 2 h. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente antes de la adición de una solución acuosa de NaOH 2 M (90 ml), agua (50 ml) y una solución acuosa saturada de NaHCO3 (60 ml) (se alcanzó un pH de aproximadamente 7). La mezcla se extrajo con DCM (2 x 200 ml) y los extractos orgánicos combinados se secaron y concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice (eluyendo con EtOAc al 0-10 % en ciclohexano) para proporcionar el compuesto del título (0,507 mg. 57 %) como un sólido blanco. LCMS: RT 3,40 min, MI 178, Método (4LCMS1).
Síntesis de 4-cloro-tiazol-5-carboxamidina (1-011)
Cloruro de amonio se suspendió en tolueno y se destiló azeotrópicamente. Se colocó cloruro de amonio (1,65 g, 30,9 mmol) bajo nitrógeno y se disolvió en tolueno (15 ml). La suspensión se enfrió a 0 °C. La mezcla de reacción se trató gota a gota con trimetilaluminio 2 M en tolueno (16 ml, 30,9 mmol), controlando cuidadosamente la temperatura de -5 a 0 °C. La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se dejó en agitación durante 2,5 horas. Éster metílico del ácido 4-cloro-tiazol-5-carboxílico (1-010) (0,549 g, 3,09 mmol) en tolueno (10 ml) se añadió y la mezcla se calentó a 80 °C durante la noche bajo nitrógeno. La mezcla se enfrió a 0 °C y se inactivó con la adición lenta de MeOH (30 ml). El precipitado blanco resultante se filtró a través de celita y se lavó con MeOH (70 ml). El filtrado se evaporó bajo presión reducida. El residuo se trituró en metanol (10 ml) y el líquido sobrenadante se recogió con una pipeta. Esto se repitió 3 veces. Los líquidos sobrenadantes combinados se concentraron a presión reducida. Una mezcla de MeOH: Et2O (relación 1: 2, 50 ml) se añadió luego, la mezcla se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (0,386 g, 77 %) como un sólido amarillo. LCMS: RT 0,6 min, MI 162, Método (4LCMS1). Síntesis de 2-(4-clorotiazol-5-il)-4-tetrahidropiran-4-il-1 H-pirimidin-6-ona (1-012)
4-doro-tiazol-5-carboxamidina (1-011) (0,385 g, 2,380 mmol) se disolvió en MeOH (25 ml) y luego se añadió éster etílico del ácido 3-oxo-3-(tetrahidropirano-4-il)-propiónico (0,524 g, 2,620 mmol) y DBU (0,71 ml, 4,760 mmol). La mezcla se calentó hasta reflujo durante 2 h. La reacción se concentró a presión reducida y el residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice (eluyendo con EtOAc al 30 %/ciclohexano, luego MeOH al 10 %/DCM) para dar el compuesto del título (0,177 g, 25 %) como un sólido naranja. LCMS: RT 2,88 min, MI 298, Método (4LCMS1).
Síntesis de 5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidin-6-ona (4)
A una solución de 2-(4-clorotiazol-5-il)-4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidin-6-ona (1-012) (0,176 g, 0,590 mmol) en MeCN (6 ml) se añadió N-clorosuccinamida (0,083 g, 0,620 mmol) y trietilamina (0,164 ml, 1,180 mmol) y la mezcla se dejó en agitación a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 4 h. Se añadió más NCS (30 mg) y la mezcla se dejó en agitación a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se concentró a presión reducida, el residuo se disolvió en DCM (50 ml) y se lavó con una solución saturada de citrato disódico (50 ml). La capa acuosa se extrajo con con más DCM (50 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron y concentraron a presión reducida para proporcionar un sólido naranja. Este se purificó mediante HPLC preparativa para dar el compuesto del título (0,120 g, 60 %). LCMS: RT 3,52 min, MI 332, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, DMSO-^) 59,25 (s, 1H), 3,96 (ddd, J = 11,4, 4,5, 1,7 Hz, 2H), 3,46 (td, J = 11,9, 2,0 Hz, 2H), 1,86 (ddt, J =16,7, 12,0, 6,0 Hz, 2H), 1,76-1,47 (m, 3H).
Síntesis de 2-cloro-4-metil-tiazol-5-carboxamidina (1-013)
Cloruro de amonio se suspendió en tolueno y se destiló azeotrópicamente en un evaporador rotatorio. El cloruro de amonio (4,81 g, 90,0 mmol) se pesó en un matraz de fondo redondo de 3 cuellos bajo una atmósfera de nitrógeno. Se añadió tolueno (45 ml) y la suspensión se enfrió a 0 °C. La mezcla de reacción se trató gota a gota con trimetilaluminio 2 M en hexano (45 ml, 90,0 mmol). La mezcla de reacción se dejó calentar hasta la temperatura ambiente y se agitó durante 3 horas. Luego se añadió éster metílico del ácido 2-cloro-4-metil-tiazol-5-carboxílico (1,85 g, 9,00 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 80 °C durante la noche. La reacción se enfrió y se inactivó mediante la adición lenta de metanol (30 ml). Precipitó un sólido blanco que luego se filtró a través de celita, lavando con más metanol. A continuación, se evaporó el metanol hasta que quedó aproximadamente 1 ml. Esto se trató luego con éter dietílico (5 ml) y se filtró de nuevo. El solvente se evaporó luego para dar el compuesto del título (1,4 g, 89 %). LCMS: MI 176, Método (4LCMS1).
Síntesis de 2-(2-cloro-4-metil-tiazol-5-il)-4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidin-6-ona (1-014)
2- Cloro-4-metil-tiazol-5-carboxamidina (1-013) (0,79 g, 4,50 mmol) en IPA (50 ml) y se trató con éster etílico del ácido 3- oxo-3-(tetrahidro-piran-4-il)-propiónico (0,837 g, 4,50 mmol) y DBU (1,77 mL, 13,5 mmol), esto se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante la noche. Después, la mezcla de reacción se evaporó y el aceite resultante se volvió a disolver en DCM y se lavó con citrato de sodio saturado para proporcionar el compuesto del título (1,05 g, 75 %) como un sólido naranja. LCMS: RT 3,74 min, MI 312, Método (4lCm S1).
Síntesis de 5-cloro-2-(2-cloro-4-metil-tiazol-5-il)-4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidin-6-ona (1-015)
2-(2-cloro-4-metil-tiazol-5-il)-4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidin-6-ona (1-014) (0,624 g, 2,00 mmol) se disolvió en DCM (10 ml) y se trató con NCS (0,60 g, 4,50 mmol) seguido de trietilamina (0,60 ml, 4,50 mmol) y se dejó en agitación durante 30 minutos. Después, la mezcla de reacción se lavó con citrato de sodio saturado y luego se evaporó. Esto se purificó después mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice (eluyendo con acetato de etilo al 0-100 % en hexano), y luego se evaporaron las fracciones que contenían el producto para dar el compuesto del título (0,60 g, 87%). LCMS: RT 4,29 min, MI 346, Método (4LCMS1).
Síntesis de 5-cloro-2-(2-hidroxi-4-metil-tiazol-5-il) -4-tetrahidropirano-4-il-1H-pirimidin-6-ona (5)
5-cloro-2-(2-cloro-4-metil-tiazol-5-il) -4-tetrahidropirano-4-il-1H-pirimidin-6-ona (1-015) (0,172 g, 0,500 mmol) se disolvió en THF (5 ml) y se trató con hidróxido de sodio acuoso (5 ml) y se calentó en el microondas a 100°C durante 1 hora. Esto se acidificó después a pH 5 y se extrajo con DCM. El producto permaneció en la capa acuosa que luego se evaporó a presión reducida y el residuo se volvió a disolver en DMSO y luego se filtró. Esto se purificó por HPLC preparativa. Las fracciones que contienen el producto se combinaron y evaporaron para dar el compuesto del título (0,03 g, 19%) LCMS: RT 3,08 min, MI 328, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 5 12,88 (s, 1H), 11,70 (s, 1H), 3,97 (dd, J =11,3, 3,4 Hz, 2H), 3,47 (t, J =11,0 Hz, 2H), 3,35 (s, 3H), 3,30 (dt, J = 7,9, 3,8 Hz, 1H), 1,81 (qd, J = 12,7, 12,2, 4,4 Hz, 2H), 1,64 (d, J =11,2 Hz, 2H).
Los siguientes compuestos se sintetizaron de acuerdo con la síntesis general que se muestra en el esquema [1]:
Síntesis de éster metílico del ácido 5-etil-1 -(tetrahidro-pirano-2 -il)-1H-pirazol-4-carboxílico (1-016)
Se pesó 5-etil-1H-pirazol-4-carbonitrilo (0,150 g, 1,00 mmol) en un matraz de fondo redondo y se disolvió en THF (5 ml). A la solución se le añadió 3,4-dihidro-2H-pirano (0,120 g, 1,50 mmol), tamices moleculares y ácido ptoluensulfónico monohidrato (90,02 g, 0,100 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 1 hora y después se enfrió hasta temperatura ambiente. El solvente se eliminó a presión reducida y se añadió DCM (20 ml) y
agua (20 ml). Los orgánicos se recolectaron, se secaron con MgSO4, se filtraron y se evaporaron para proporcionar el compuesto del título (90,21 g, 87 %) como un sólido blanco. LCMS: RT 4,13 min, MI 239, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, CDCls)58,04 (s, 1H), 5,36 - 5,19 (m, 1H), 4,08 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,81 (s, 3H), 3,76-3,60 (m, 1H), 2,90 (q, J =7,5 Hz, 2H), 2,15-1,95 (m, 3H), 1,85- 1,45 (m, 3H), 1,25 (t, 3H).
Síntesis de 5-etil-1 -(tetrahidro-piran-2 -il)-1H-pirazol-4-carboxamidina (1-017)
Cloruro de amonio (0,48 g, 9,00 mmol) se suspendió en tolueno y se destiló azeotrópicamente en un evaporador rotatorio y luego se transfirió a un matraz de fondo redondo de 3 cuellos y se colocó bajo una atmósfera de nitrógeno. Se añadió tolueno (5 ml) y la suspensión se enfrió a 0 °C. La mezcla de reacción se trató gota a gota con trimetilaluminio 2 M en tolueno (4,5 ml, 9,00 mmol). La mezcla de reacción se dejó calentar hasta la temperatura ambiente y se agitó durante 3 horas. Luego, éster metílico del ácido 5-etil-1-(tetrahidro-pirano-2-il)-1H-pirazol-4-carboxílico (1-016) (0,21 g, 0,90 mmol) se añadió en tolueno (2 ml) y la mezcla de reacción se calentó a 80 °C durante 15 horas. La mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y se trató cuidadosamente con metanol (5 ml). La mezcla de reacción se dejó en agitación durante 30 minutos y luego se filtró a través de celita lavando con metanol. Los filtrados se evaporaron a presión reducida para producir un sólido blanco. Este se recogió en la cantidad mínima de metanol y se trató con éter dietílico (10 ml) para precipitar un sólido blanco que se filtró y se desechó. El proceso se repitió de nuevo en los filtrados y la evaporación a presión reducida proporcionó el compuesto del título (0,11 g, 55 %) como una goma de color amarillo pálido. LCMS: RT 1,60 min, MI 223, Método (4LCMS1).
Síntesis de 2-(5-etil-1-tetrahidropirano-2-il-pirazol-4-il) -4-tetrahidropirano-4-il-1H-pirimidin-6-ona (1-018)
5-Etil-1-(tetrahidro-pirano-2 -il)-1H-pirazol-4-carboxamidina (1-017) (0,11 g, 0,50 mmol) se disolvió en metanol (5 ml) y se trató con éster etílico del ácido 3-oxo-3-(tetrahidro-piran-4-il)-propiónico (0,069 g, 0,50 mmol) y DBU (0,15 ml, 1,00 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 4 horas y luego se dejó enfriar a temperatura ambiente y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía de columna utrarrápida (eluyendo con 95:5 DCM:MeOH) para proporcionar el compuesto del título (0,14 g, 77 %) como un sólido blanco. LCMS: rT 3,38 min, MI 359/360, Método (4LCMS1).
Síntesis de 5-cloro-2-(5-etil-1-tetrahidropirano-2-il-pirazol-4-il) -4-tetrahidropirano-4-il-1H-pirimidin-6-ona (1-019)
2-(5-etil-1-tetrahidropiran-2-il-pirazol-4-il) -4-tetrahidropirano-4-il-1H-pirimidin-6-ona (1-018) (0,14 g, 0,40 mmol) se disolvió en diclorometano (2 ml) y trietilamina (0,14 ml, 1,00 mmol) y se trató con N-clorosuccinamida (0,13 g, 1,00 mmol). La mezcla de reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 15 horas. Una solución de NH4Cl acuoso saturado se añadió (10 ml) y se separaron los orgánicos. Los orgánicos se secaron con MgSO4, se filtraron y se evaporaron para producir un sólido naranja. Este se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida
(eluyendo con DCM y luego con DCM: MeOH 95:5) para dar el compuesto del título (0,15 g, 93 %) como un sólido amarillo pálido. LCMS: RT 4,02 min, MI 393/395, Método (4LCMS1).
Síntesis de 5-cloro-2-(5-etil-1H-pirazol-4-il) -4-tetrahidropirano-4-il-1H-pirimidin-6-ona (15)
5-cloro-2-(5-etil-1-tetrahidropirano-2-il-pirazol-4-il) -4-tetrahidropirano-4-il-1H-pirimidin-6-ona (1-019) (0,15 g, 0,40 mmol) se suspendió en metanol (15 ml) y se trató con p-TSA (0,010 g, 0,004 mmol). La mezcla de reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 2 días. Se añadió más metanol (10 ml) para disolver el sólido y se añadió más p-TSA (5 mg, 0,002 mmol). La solución resultante, se dejó en agitación durante 3 días a temperatura ambiente. El solvente se eliminó a presión reducida y el residuo se disolvió en DCM (20 mL) y se lavó con una solución acuosa de NH4Cl (20 mL). Los orgánicos se pasaron a través de un cartucho de separación de fases y se evaporaron a presión reducida. El residuo se purificó mediante LCMS dirigida de masas. Las fracciones se evaporaron para proporcionar el compuesto del título (0,016 g, 13 %) como un sólido blanquecino. LCMS: RT 3,11 min, MI 309/311, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 5 12,77 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 3,95 (dd, J =11,2, 3,7 Hz, 2H), 3,55- 3,39 (m, 2H), 3,29 (dd, J = 25,7, 14,0 Hz, 1H), 3,03 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 1,84 (dt, J =12,3, 8,3 Hz, 2H), 1,61 (d, J = 10,9 Hz, 2H), 1,22 (t, J = 7,5 Hz, 3H).
Los siguientes compuestos se sintetizaron usando un procedimiento similar al del compuesto (15) anterior, usando un pirazol prote ido con THP apropiadamente sustituido:
Síntesis de 2-(4-metiltiazol-5-il) -6-oxo-4-tetrahidropirano-4-il-1H-pirimidina-5-carbonitrilo (18)
5-Yodo-2-(4-metiltiazol-5-il) -4-tetrahidropirano-4-il-1H-pirimidin-6-ona (7) (0,081 g, 0,200 mmol), Zn(CN)2 (0,047 g, 0,400 mmol), Pd(PPh3)4 (0,070 g, 0,060 mmol) y Cul (0,020 g, 0,100 mmol) se combinaron en Dm F seca (1 ml). La mezcla se lavó abundantemente con nitrógeno, se selló y se calentó en el microondas durante 30 min a 130 °C. La suspensión se diluyó con MeOH y la suspensión resultante se filtró a través de celite. El filtrado se concentró bajo vacío. El residuo se purificó mediante HPLC dirigida de masas en fase inversa para dar el compuesto del título (2 mg, 3 %). LCMS: RT 4,50 min, MI 303, Método (1LCMS1).
Síntesis de 5-cloro-4-[1-(2,2-difluorociclopropanocarbonil)-4-piperidil]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona (19)
A una solución de ácido 2,2-difluorocidopropanocarboxíNco (13,4 mg, 0,110 mmol) en DMF seca (1 ml) se le añadió DIPEA (87 pL, 0,250 mmol) seguido de HBTU (57 mg, 0,150 mmol). La mezcla de reacción se colocó bajo nitrógeno, se selló y luego se agitó durante 15 minutos. Una suspensión de 5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-(4-piperidil)-1H-pirimidin-6-ona (2) (35 mg, 0,100 mmol) en DMF (1 ml) y se añadió DIPEA (87 pl, 0,250 mmol) a la mezcla de reacción y la mezcla se agitó durante 1 h. Después de este tiempo, la mezcla se purificó mediante HPLC preparativa para producir el compuesto del título. LCMS: RT4,47 min, MI 415,1/417,1, Método (1LCMS1); 1H NMR (500 MHz, DMSO-cfe) 513,17 (s, 1H), 9,09 (s, 1H), 4,47 (d, J =13,1 Hz, 1H), 4,25 - 4,08 (m, 1H), 3,47-3,09 (m, 3H), 2,87 - 2,74 (m, 1H), 2,73 - 2,64 (m, 3H), 2,00 - 1,45 (m, 6H).
Los siguientes com uestos se sintetizaron usando un rocedimiento similar al del com uesto 19 anterior:
Síntesis de 5-cloro-4-(1-isobutil-4-piperidil)-2-(4-metMtiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona (27)
A una solución de 5-doro-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-(4-piperidil)-1H-pirimidin-6-ona (2) (0,104 g, 0,300 mmol) en ácido acético glacial ( 10 ml) se añadió isobutiraldehído (0,435 ml, 4,800 mmol) y la mezcla se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 4 h. Se añadió triacetoxiborohidruro de sodio (0,318 g, 1,50 mmol) y se continuó agitando durante 18 h. Después de este tiempo, la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo se repartió entre DCM y una solución acuosa saturada de NaHCO.3. La fase DCM se secó (Na2CO3), se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna de fase inversa para dar el compuesto del título (0,020 g, 18 %). LCMS: RT 1,89 min, MI 367, Método (1LCMS1); 1H NMR (300 MHz, DMSO-de 2 eq cf-TFA) 513,56 (br s, 2H), 9,13 (s, 1H), 3,59 (d, J =12,2 Hz, 2H), 3,42 - 3,25 (m, 1H), 3,17 - 3,00 (m, 2H), 2,93 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 2,72 (s, 3H), 2,22 - 2,03 (m, 3H), 2,00 - 1,85 (m, 2H), 0,96 (d, J = 6 , 6 Hz, 6 H).
Esquema general 2
En un enfoque (Esquema general 2), los compuestos de Fórmula general [F2-3] se prepararon mediante la reacción de un derivado de a-halo-malonato de Fórmula general [F2-1] en una reacción de condensación usando un derivado de carboximidamida heterocíclico adecuadamente sustituido de Fórmula general [F2-2] en un solvente polar como metanol o THF en presencia de una base como metóxido de sodio, ferc-butóxido de potasio o DBU. La reacción se lleva a cabo de forma adecuada a temperatura ambiente o a alta temperatura, ya sea mediante calentamiento térmico o usando un reactor de microondas. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante una extracción líquido-líquido, el producto de reacción se usó en bruto en la siguiente etapa o se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC preparativa de fase inversa o recristalización. Los derivados de Fórmula general [F2-4] se prepararon mediante la reacción de un derivado de 5-halo-2-heterociclil-1H-pirimidina-4,6-diona de Fórmula general [F2-3] con un agente halogenante como el oxicloruro de fósforo a alta temperatura. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante la adición de agua seguida de la adición de una base como hidróxido de sodio acuoso, la mezcla de reacción bruta se purificó mediante extracción líquido-líquido, y el producto de reacción se usó en bruto en la siguiente etapa o se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC preparativa de fase inversa o recristalización. Los derivados de Fórmula general [F2-5] se prepararon mediante una reacción de hidrólisis de un derivado de 4,5,6-halo-2-heterociclil-pirimidina de Fórmula general [F2-4] con un ácido mineral como HCl o H2SO4 o una base acuosa como NaOH a alta temperatura. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante una extracción líquido-líquido, el producto de reacción se usó en bruto en la siguiente etapa o se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC preparativa de fase inversa o recristalización. Los compuestos de Fórmula general [F2-7] se prepararon mediante la reacción de derivados de 5,6-dicloro-2-heterociclil-3H-pirimidina-4-ona de Fórmula general [F2-5] en una reacción de tipo de sustitución aromática nucleofílica usando una amina de Fórmula general [F2-6], y una base como Et3N o NaH, o un ácido mineral como HCl, en un solvente polar como etanol, butanol, dioxano, DMA o DMF a alta temperatura, ya sea por calentamiento térmico o usando un reactor de microondas. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante una extracción líquido-líquido, el producto de reacción se usó en bruto en la siguiente etapa o se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC preparativa de fase inversa o recristalización. En los casos en los que el heterociclo (het) o el sustituyente R' o R" contenía una amina protegida por un grupo protector de amina estándar, como un ferc-butiloxicarbonilo (Boc), los compuestos de Fórmula [F2-7] pueden prepararse mediante una reacción de desprotección adecuada, por ejemplo, la reacción con un ácido como TFA en un solvente adecuado como DCM a temperatura ambiente. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante una extracción líquido - líquido o purificación mediante capturaliberación por intercambio iónico ácido, el producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC preparativa de fase inversa o recristalización.
Síntesis de 5-doro-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidina-4,6-diona (2-001)
A una solución de clorhidrato de 4-metiltiazol-5-carboxamidina (1-001) (1,936 g, 10,90 mmol) en MeOH (50 ml) bajo nitrógeno se añadió cloromalonato de dimetilo (1,53 ml, 11,99 mmol) seguido de DBU (6,50 ml, 43,60 mmol) (se observó exotermia). La mezcla de reacción se agitó luego a temperatura ambiente durante 24 h bajo nitrógeno antes de concentrar a presión reducida. El residuo aceitoso se trató mediante la adición de HCl acuoso 1 M hasta que se alcanzó un pH 2. La suspensión cremosa se diluyó con agua (30 ml), luego se filtró a través de un embudo sinterizado y se lavó con HCl acuoso 0,5 M (30 ml). La pasta cremosa recogida se tomó en MeOH y luego se sonicó durante 40 min. La suspensión se recogió mediante filtración al vacío y luego se dejó secar mediante succión al vacío durante la noche para darel compuesto del título (2,25 g, 85 %) en forma de un sólido beige. LCMS: RT 2,70 min, MI 243, Método (1 LCMS1).
Síntesis de 4-metil-5-(4,5,6-tricloropirimidin-2-il) tiazol (2-002)
En un matraz de fondo redondo de 50 ml bajo nitrógeno, 5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidina-4,6-diona (2-001) (2,25 g, 9,23 mmol) se añadió a POCh (25 ml) y la mezcla de reacción se calentó a 120 °C durante 16 h antes de
enfriar a temperatura ambiente. Luego, la mezcla de reacción se añadió cuidadosamente a hielo con agitación vigorosa. La suspensión obtenida se filtró a través de un embudo sinterizado. El filtrado se extrajo con DCM (x3), luego se neutralizó y se extrajo con más DCM (x3). Las fases orgánicas combinadas se concentraron al vacío para dar el compuesto del título (1,40 g, 54 %) como un polvo beige. LCMS: RT 6,37 min, MI 282, Método (1LCMS1).
Síntesis de 4,5-dicloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona (2-003)
En un matraz de fondo redondo de 25 ml equipado con un condensador de aire, 4-metil-5- (4,5,6-tricloropirimidin-2-il) tiazol (2-002) (1,40 g, 5,00 mmol) se añadió a HCl concentrado (25 ml) y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 4 días. Después, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y la suspensión se filtró a través de un embudo sinterizado. El sólido recogido se lavó con agua y luego se secó mediante filtración al vacío para dar el compuesto del título (1,18 g, 90 %) como un polvo beige. Lc Ms : RT 5,65 min, MI 262, Método (1LCMS1).
Síntesis de 5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-[(3R)-3-(trifluorometil)piperazina-1-il]-1H-pirimidin-6-ona (28)
A una solución de 4,5-dicloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona (2-003) (0,100 g, 0,382 mmol) en EtOH (2,5 ml) se añadió (2R)-2-trifluorometil) piperazina (0,145 g, 0,763 mmol) seguido de Et3 N (0,212 ml, 1,526 mmol). La mezcla se calentó en el microondas a 150 °C durante 45 min. La mezcla de reacción de color marrón oscuro se dejó enfriar a temperatura ambiente y luego se sonicó durante 15 min. La suspensión se concentró al vacío, el residuo se recogió en DMSO (2 ml) y se calentó hasta su disolución y luego se dejó cristalizar. La suspensión se filtró a través de un embudo sinterizado. El filtrado se purificó mediante HPLC preparativa para dar el compuesto del título (0,095 g, 66 %) como un polvo blanquecino. LCMS: RT 3,51 min, MI 378,3/380,3, Método (1LCMS1); 1H NMR (300 MHz, DMSO-cf6) 5 9,07 (s, 1H), 4,18 (d, J =12,7 Hz, 1H), 3,98 (d, J =13,0 Hz, 1H), 3,61 -3,46 (m, 1H), 3,24-3,06 (m, 2H), 3,00-2,92 (m, 1H), 2 ,82-2,63 (m, 4H).
Los si uientes compuestos se sintetizaron de acuerdo con la síntesis eneral que se muestra en el esquema [2]:
Esquema general 3
En un enfoque (Esquema general 3), los compuestos de Fórmula general [F3-3] se prepararon mediante la reacción de un derivado 4,6-didoro-5-halo-2-yodo-pirimidina de Fórmula general [F3-1] en una reacción de tipo sustitución aromática nucleófila que utiliza una amina adecuada de Fórmula general [F3-2], y una base como Et3N o N,N-diisopropiletilamina en un solvente polar como etanol, 1,4-dioxano, DMA o Dm F a alta temperatura, bien por calentamiento térmico o usando un reactor de microondas. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante una extracción líquido-líquido, el producto de reacción se usó en bruto en la siguiente etapa o se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC preparativa de fase inversa o recristalización. Derivados de 4-cloro-5-halo-2-heterociclil-pirimidina de Fórmula general [F3-5] se prepararon mediante una reacción de acoplamiento de tipo Suzuki con un ácido borónico o ésterde boronato adecuado de Fórmula general [F3-4] utilizando un catalizador adecuado tal como dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II), tetraquis(trifenilfosfina)paladio o 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II), y una base tal como carbonato de sodio, carbonato de potasio o carbonato de cesio, en una mezcla de solventes polares, como 1,4-dioxano/agua a alta temperatura, ya sea mediante calentamiento térmico o usando un reactor de microondas. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante una extracción líquido-líquido, el producto de reacción se usó en bruto en la siguiente etapa o se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC preparativa de fase inversa o recristalización. Derivados 5-halo-(2-heterociclil)-3H-pirimidina-4-ona de Fórmula general [F3-6] se prepararon mediante una reacción de hidrólisis de derivados 4-cloro-5-halo-2-(heterociclil)-pirimidina de Fórmula general [F3-5] con una base acuosa como NaOH o KOH a alta temperatura por calentamiento térmico o usando un reactor de microondas. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante una extracción líquido-líquido o purificación mediante captura-liberación de intercambio iónico ácido, el producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC preparativa de fase inversa o recristalización. En los casos en los que el heterociclo (het) o el sustituyente R' o R" contenía una amina protegida por un grupo protector de amina estándar como ferc-butiloxicarbonilo (Boc), los compuestos de Fórmula [F3-6] se preparan mediante una reacción de desprotección adecuada, por ejemplo, reacción con un ácido como TFAo HCl en un solvente adecuado como DCM a temperatura ambiente. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante una extracción líquido-líquido o purificación mediante captura-liberación de intercambio iónico ácido, el producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC preparativa de fase inversa o recristalización.
Una suspensión de 2-amino-4,6-dicloropirimidina (2,0 g, 12,20 mmol) en cloroformo (30 mL) se preparó y se añadió N-clorosuccinimida (1,71 g, 12,81 mmol) en porciones. La mezcla de reacción se sometió a reflujo durante 2 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente, se diluyó con una solución saturada de NaHCO3 y luego se extrajo con DCM y acetato de etilo. Se formó un precipitado que se eliminó por filtración. Los extractos orgánicos combinados se secaron y se concentraron a presión reducida. El residuo en bruto se purificó por cromatografía ultrarrápida en sílice, eluyendo 0 - 40 % EtOAc en ciclohexano. Las fracciones apropiadas se combinaron y concentraron para dar el compuesto del título (2,1 g, 86,8 % de rendimiento). LCMS: RT 4,03 min, MI 199,8, Método (4LCMS1)
Síntesis de 4,5,6-tricloro-2-yodo-pirimidina (3-002)
4,5,6-Tridoropirimidina-2-amina (3-001) (5,0 g, 25,20 mmol) y diyodometano (20,3 ml, 251,96 mmol) se suspendieron en MeCN (25 ml). Esto luego se trató con la adición gota a gota nitrito de tere-butilo (15,04 ml, 125,98 mmol). La reacción se volvió de color verde pálido y se desprendió un gas. La mezcla de reacción se calentó a 80 °C durante 2 horas antes de dejar enfriar a temperatura ambiente y se trató con una solución saturada de bicarbonato de sodio (desprendimiento de gas). Después, la reacción se extrajo en DCM (2 x 50 ml), los orgánicos se secaron y se concentraron a presión reducida. El producto bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice, eluyendo con ciclohexano que contenía 0-5 % EtOAc. Las fracciones apropiadas se combinaron y concentraron para dar el compuesto del título (4,13 g, 53 % de rendimiento) como un sólido blanco. LCMS: RT 4,98 min, MI 310, Método (4LCMS1).
Síntesis de tere-butil 4-(5,6-dicloro-2-yodo-pirimidin-4-il)-6,6-difluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (3-003)
A una solución de 4,5,6-tricloro-2-yodo-pirimidina (3-002) (0,50 g, 1,62 mmol) en 1,4-dioxano (5 ml) y N,N-diisopropiletilamina (0,56 ml, 3,23 mmol) se añadió tere-butil 6,6-difluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (0,42 g, 1,778 mmol) como una solución en 1,4-dioxano (5 ml) y la reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se concentró al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna eluyendo con un gradiente EtOAc/hexano (10-30 % EtOAc). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y concentraron a presión reducida para dar el compuesto del título (500 mg, 60,8 % de rendimiento) como un aceite incoloro. LCMS: RT 5,70 min, MI 508/510, Método (4LCMS1). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 54,68 - 4,01 (m, 2H), 4,08 - 3,49 (m, 6H), 1,41 (s, 9H).
Síntesis de 4-yodo-1-[(4-metoxifenil) metil]pirazol (3-004)
4-Yodopirazol (10,0 g, 51,55 mmol) se disolvió en 1,4-dioxano (40 ml) y a esto se añadió carbonato de potasio (7,12 g, 51,55 mmol) seguido de cloruro de 4-metoxibencilo (6,99 ml, 51,55 mmol) y la reacción se agitó a reflujo durante la noche. Después de enfriar, la mezcla de reacción se concentró y el residuo se repartió entre acetato de etilo y agua. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó para dar un aceite de color amarillo. Este se purificó mediante cromatografía en columna eluyendo con un gradiente de acetato de etilo/hexano, 0-30 % acetato de etilo. Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para dar el compuesto del título (9,20 g, 57 %) como un aceite de color pajizo que cristalizó en reposo. 1H NMR (400 MHz, DMSO-CÍ6) 57,98 (d, J =0,7 Hz, 1H), 7,52 (d, J =0,7 Hz, 1H), 7 ,28-7,17 (m, 2H), 6,98- 6,85 (m, 2H), 5,24 (s, 2H), 3,73 (s, 3H).
Síntesis de 5-cloro-4-yodo-1-[(4-metoxifenil)metil]pirazol (3-005)
Se preparó una solución agitada de diisopropilamina (3,01 ml, 21,49 mmol) en THF (10 ml) bajo nitrógeno y se enfrió a -78 °C. Se añadió n-butiMitio (2,5 M) en hexanos (8,28 ml, 20,69 mmol) y la mezcla de reacción se calentó hasta 0 °C y se agitó a esta temperatura durante diez minutos. Después, la mezcla de reacción se enfrió de nuevo a -780 °C. Esta solución se añadió gota a gota a una solución a -78 °C de 4-yodo-1-[(4-metoxifenil) metil]pirazol (3-004) (5,00 g, 15,92 mmol) en tetrahidrofurano (10 ml) durante dos minutos. Después de cinco minutos, se añadió hexacloroetano (4,52 g, 19,10 mmol) diluido en la cantidad mínima de THF y se continuó agitando a -78 °C durante 1 h. A continuación, se dejó calentar la solución a temperatura ambiente. Se añadió cloruro de amonio acuoso saturado y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (2 x 50 ml). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de terc-butilmetil éter/éter de petróleo, 0-20 % TBME. Las fracciones que contenían el producto se combinaron y evaporaron para dar el compuesto del título (4.40 g, 79 %) como un sólido amarillo. 1H NMR (400 MHz, DMSO-da) 57,71 (s, 1H), 7,16 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,91 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 5,35 (s, 2H), 3,73 (s, 3H).
Síntesis de 5-cloro-1-[(4-metoxifenil) metil]-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)pirazol (3-006)
5-Cloro-4-yodo-1-[(4-metoxifenil)metil]pirazol (3-005) (5,30 g, 15,20 mmol) se disolvió en acetonitrilo (4 ml) y a esto se le añadió acetato de paladio (68,27 mg, 0,304 mmol), yoduro de cobre (I) (0,579 g, 3,04 mmol), trifenilfosfina (79,76 mg, 0,304 mmol), carbonato de cesio (7,431 g, 22,81 mmol) y bis(pinacolato)diboro (5,79 g, 22,81 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. A la reacción se añadió una porción adicional de yoduro de cobre (I) (0,579 g, 3,04 mmol), trifenilfosfina (79,76 mg, 0,304 mmol), acetato de paladio (68,27 mg, 0,304 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 h. La reacción se concentró y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna usando un gradiente de acetato de etilo/éter de petróleo eluyendo con 0-20 % acetato de etilo. Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se concentraron para dar el compuesto del título (3,00 g, 57 %) como un aceite incoloro que cristalizó en reposo. Lc Ms : RT 5,06 min, Ml 348, Método (4LCMS3); 1H n Mr (400 MHz, DMSO-^) 57,70 (s, 1H), 7,15 (d, J =8,7 Hz, 2H), 6,90 (d, J =8,7 Hz, 2H), 5,30 (s, 2H), 3,73 (s, 3H), 1,16 (s, 12H).
Síntesis de terc-butil 4-[5,6-dicloro-2-[5-cloro-1-[(4-metoxifenil)metil] pirazol-4-il] pirimidin-4-il]-6,6-difluoro-1,4-diazepano-1 -carboxilato (3-007)
terc-Butil 4-(5,6-dicloro-2-yodo-pyrimidin-4-yl)-6,6-difluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (3-003) (0,250 g, 0,491 mmol), 5-cloro-1-[(4-metoxifenil)metil]-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)pirazol (3-006) (0,21 g, 0,589 mmol), 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(ll), complejo con diclorometano (0,04 g, 0,049 mmol), e hidrógeno carbonato de sodio (0,080 g, 0,982 mmol), se trataron con 1,4-dioxano (5 ml) y agua (1 ml) y se calentaron a 100 °C durante la noche. A continuación, se diluyó con agua (100 ml) que luego se extrajo en DCM (2 x 100 ml) y EtOAc (100 ml). Las fracciones orgánicas se combinaron y se evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida en sílice
(eluyendo con 0-20 % acetato de etilo en ciclohexano). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para dar el compuesto del título (110 mg, 37 %). LCMS: RT 6,20 min, MI 605, Método (4LCMS1).
Síntesis de ferc-butil 4-[5-cloro-2-[5-cloro-1-[(4-metoxifenil)metil]pirazol-4-il] -6-oxo-1H-pirimidin-4-il]-6,6- difluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (3-008)
ferc-butil 4-[5,6-dicloro-2-[5-cloro-1-[(4-metoxifenil)metil]pirazol-4-il]pirimidin-4-il]-6,6-difluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (3-007) (0,110 g, 0,182 mmol) se disolvió en 1,4-dioxano (2 ml) y se trató con NaOH acuoso 2 M (1,09 ml, 2,19 mmol). A continuación, se calentó en el microondas a 120 °C durante 60 minutos. Después, la mezcla de reacción se diluyó mediante la adición de DCM y se lavó con agua. La capa de DCM se evaporó y el residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice (eluyendo con acetato de etilo al 0-100 % en ciclohexano seguido de metanol al 0-10 % en DCM). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para dar el compuesto del título (45 mg, 42 %). LCMS: RT 4,95 min, MI 585, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 5 12,63 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,22 (d, J =8,7 Hz, 2H), 6,99-6,85 (m, 2H), 5,37 (s, 2H), 4,38 (t, J = 12,6 Hz, 2H), 3,80 (d, J =14,3 Hz, 6H), 3,73 (s, 3H), 1,39 (d, J =12,5 Hz, 9H).
Síntesis de clorhidrato de 5-doro-2-(5-doro-1H-pirazol-4-N)-4-(6,6-difluoro-1,4-diazepan-1-N)-1H-pirimidm-6-ona (40)
tere-butilo 4-[5-cloro-2-[5-cloro-1-[(4-metoxifenil) metil] pirazol-4-il] -6-oxo-1H-pirimidin-4-il]-6,6- difluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (3-008) (0,050 g, 0,077 mmol) se disolvió en TfA (1,00 ml, 0,077 mmol) y DCM (1 ml) y se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 4 horas, luego a 80 °C durante 2 horas. Luego se dejó que la mezcla de reacción volviera a la temperatura ambiente y se evaporó hasta sequedad. El residuo se trató con HCl 2 M en éter dietílico (1 ml), la reacción se filtró y se lavó con éter. Después, el sólido se disolvió en DMSO y se purificó mediante HPLC preparativa. Las fracciones recuperadas se trataron luego con HCl 2 M en éter dietílico (1 ml) y se evaporaron para dar el compuesto del título (12 mg, 39 %). LCMS: RT 1,74 min, MI 365, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, DMSO-CÍ6) 513,71 (s, 1H), 12,61 (s, 1H), 8,64 (s, 1H), 4,60 (t, J = 13,3 Hz, 2H), 4,01 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 3,76 (t, J = 12,9 Hz, 2H), 3,56-3,42 (m, 2H).
Síntesis de (3R)-4-(5,6-dicloro-2-yodo-pirimidin-4-il)-3-metil-morfolina (3-009)
A una solución agitada de 4,5,6-tricloro-2-yodo-pirimidina (3-002) (2,00 g, 6,47 mmol) y trietilamina (0,950 ml, 6,79 mmol) en cloroformo (60 ml) se añadió (R)-3-metilmorfolina (0,730 ml, 6,47 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 100 h. Se añadió agua (30 ml) y se separaron las dos fases. La fase
acuosa se extrajo adicionalmente con DCM (2 x 15 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (separador de fases) y se concentraron hasta un aceite amarillo. El aceite se purificó usando cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice eluyendo con una mezcla de acetato de etilo en éter de petróleo (0-50 %). Las fracciones deseadas se concentraron proporcionando el compuesto del título (1,53 g, 63 %) como un polvo blanco. LCMS: 5,25 min, MI 374, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, CDCls) 54,55 (qd, J = 6,9, 3,0 Hz, 1H), 4,17 - 4,07 (m, 1H), 3,94 (ddd, J =11,3, 3,4, 1,4 Hz, 1H), 3,71 (d, J = 2,2 Hz, 2H), 3,62 (td, J =11,7, 2,5 Hz, 1H), 3,54 - 3,43 (m, 1H), 1,43 (d, J = 6,8 Hz, 3H).
Síntesis de (3R)-4-[5,6-dicloro-2-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]pirimidin-4-il]-3-metil-morfolina (3-010)
(3R)-4-(5,6-dicloro-2-yodo-pirimidin-4-il)-3-metil-morfolina (3-009) (0,630 g, 1,68 mmol), 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5-(trifluorometil)-1H-pirazol (0,440 g, 1,68 mmol), 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II), complejo con diclorometano (0,140 g, 0,168 mmol) e hidrogeno carbonato de sodio (0,280 g, 3,37 mmol) se trataron con 1,4-dioxano (1,5 mL) y agua (0,5 mL) y se calienta a 120 °C en el microondas durante 20 minutos. Esto se diluyó luego con DCM (20 ml) y se lavó con agua (20 ml). A continuación, el DCM se evaporó y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice (eluyendo con 0-50 % acetato de etilo en ciclohexano). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para dar el compuesto del título como un aceite incoloro (0,550 g, 85%). LCMS: RT 4,93 min, MI 382, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 513,99 (s, 1H), 8,74-8,39 (m, 1H), 4,50 (d, J= 7,3 Hz, 1H), 4,14 - 4,04 (m, 1H), 3,89 (d, J=11,2 Hz, 1H), 3,71 - 3,40 (m, 3H), 1,40 (s, 1H), 1,36 (d, J= 6,8Hz, 3H).
Síntesis de 5-cloro-4-[(3R)-3-metilmorfolin-4-il]-2-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirimidin-6-ona (41)
(3R)-4-[5,6-dicloro-2-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]pirimidin-4-il]-3-metil-morfolina (3-010) (0,550 g, 1,44 mmol) se trató con 1,4-dioxano (8,6 ml) e hidróxido de sodio acuoso 2 M (8,63 ml, 17,27 mmol) y se calentó a 100 °C durante 3 días. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente durante la noche, luego se enfrió a 5 °C en un baño de hielo y se trató con citrato de sodio saturado (~10 ml), se formó un precipitado blanco. La mezcla se trató con acetato de etilo (75 ml) y agua (25 ml) y se mezcló suavemente. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo adicional (75 ml). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con agua (50 ml) y luego con salmuera (50 ml), se pasaron a través de un separador de fases y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice, eluyendo con 0-100 % acetato de etilo y después 0-10 % metanol en DCM. Las fracciones apropiadas se combinaron y se concentraron a presión reducida para dar un sólido de color amarillo pálido. El sólido se suspendió en éter dietílico, se filtró, se lavó con más éter y se secó durante la noche en un horno de vacío. Luego, el sólido se suspendió en metanol y se concentró. El residuo se suspendió en agua y luego se concentró. El residuo se purificó mediante SCX, lavando primero con metanol y luego con amoniaco metanólico 2 M. La primera fracción eluida se evaporó para dar el compuesto del título (0,029 g, 6 %) como un polvo amarillo. LCMS: RT 3,45 min, MI 364, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, DMSO-da) 514,09 (s, 1H), 12,57 (s, 1H), 8,70 (s, 1H), 4,37 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 3,86 (t, J =12,4 Hz, 2H), 3 ,70-3,35 (m, 4H), 1,30 (d, J = 6,8 Hz, 3H).
Síntesis de 1-[(4-metoxifenil) metil]-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5-(trifluorometil)pirazol (3-011)
Carbonato de potasio (678,8 g, 4911 mmol) se añadió a una solución de 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5-(trifluorometil)-1H-pirazol (2,00 g, 7,63 mmol) en MeCN (30 ml) seguido de cloruro de 4-metoxibencilo (1,03 ml, 7,63
mmol) y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante la noche. La mezcla se concentró a presión reducida y el residuo se diluyó con salmuera y EtOAc. La fase acuosa se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se secó en MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, eluyendo con 0-30 % EtOAc:ciclohexano. Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se evaporaron para dar el compuesto del título (2,27 g, 78 %) como una mezcla de isómeros de pirazol. LCMS: TR 3,46/3,59 min, MI 383, Método (1LCMS13).
Los si uientes compuestos se sintetizaron de acuerdo con la síntesis eneral que se muestra en el esquema [3]:
Síntesis de terc-butil (3R)-4-(5,6-didoro-2-yodo-pirimidin-4-il)-3-metil-piperazina-1-carboxilato (3-012)
A una solución agitada de 4,5,6-tridoro-2-yodo-pirimidina (3-002) (18,8 g, 60,8 mmol) y trietilamina (8,9 ml, 63,9 mmol) en cloroformo (160 ml) se añadió (R)-1-boc-3-metilpiperazina (12,2 g, 60,8 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 20 h. Se añadió agua (100 ml) y las dos fases se separaron. Lo acuoso se extrajo con DCM (2 x 100 ml). Los orgánicos combinados se secaron y concentraron dando un aceite amarillo. El aceite se disolvió en una pequeña cantidad de metanol caliente. La mezcla se enfrió provocando la formación de un precipitado blanco. El precipitado se recogió mediante filtración al vacío y se secó al vacío proporcionando el compuesto del título (19 g, 66 %) en forma de un polvo blanco. LCMS: RT 5,98 min, MI 473, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, CDCls) 5 4,61 (s, 1H), 4,25- 3,80 (m, 3H), 3,34 (dd, J = 13,8, 3,5 Hz, 1H), 3 ,18-2,89 (m, 2H), 1,48 (s, 9H), 1,32 (d, J = 6,7 Hz, 3H).
Síntesis de terc-butil (3R) -4-(5-cloro-2-yodo-6-oxo-1H-pirimidin-4-il)-3-metil-piperazina-1-carboxilato (3-013)
Una suspensión de terc-butil (3R) -4-(5,6-dicloro-2-yodo-pirimidin-4-il)-3-metilpiperazina-1-carboxilato (3-012) (0,200 g, 0,423 mmol) en 1,4-dioxano (3 ml) se preparó y se añadió NaOH (3,17 ml de una solución acuosa 2 M, 6,34 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h y después se calentó a 100 °C durante 1 h La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se neutralizó a pH 7 mediante la adición de una solución acuosa saturada de NH4Cl y luego HCl (1 M ac.). La mezcla se extrajo con CH2Cl2 (2 x 25 mL) luego 9:1 CHCl3:/sopropanol (20 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4 , se filtraron y se concentraron mediante evaporación rotatoria. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con 50 - 75 % EtOAc en ciclohexano. Las fracciones apropiadas se combinaron y se concentraron para dar el compuesto del título (0,107 g, 56 %). LCMS RT 2,88 min, MI 455, Método (1LCMS13).
Síntesis de terc-butil (3R)-4-[2-[1-(bencenosulfonil)pirrolo[2,3-b]piridin-3-il]-5-cloro-6-oxo-1H-pirimidin-4-il]-3-metilpiperazina-1-carboxilato (3-014)
Una suspensión de terc-butil (3R)-4-(5-cloro-2-yodo-6-oxo-1H-pirimidin-4-il)-3-metil-piperazina-1-carboxilato (3-013) (0,100 g, 0,220 mmol), pinacol ésterdel ácido 1-(fenilsulfonil)-7-azaindol-3-borónico (0,089 g, 0,231 mmol), carbonato de cesio (0,107 g, 0,330 mmol) y tetraquis(trifenilfosfina)paladio (0,013 g, 0,011 mmol) en 1,4-dioxano (1 ml) y agua (0,3 ml) se preparó, se desgasificó y se calentó a 80 °C durante 1 h. La mezcla de reacción se dividió entre NaHCO3 (sat. ac.) y CH2Cl2. La fase orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con CH2Cl2. Las porciones orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4 , se filtraron y se concentraron mediante evaporación rotatoria. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con ciclohexano que contenía 5-50 % EtOAc. Las fracciones apropiadas se combinaron y concentraron para dar el compuesto del título (0,050 g, 39%) como un sólido incoloro. LCMS: RT 3,33 min, MI 585, Método (1LCMS13); 1H NMR (600 MHz, DMSO-de) 512,82 (s, 1H), 9,15 (s, 1H), 8,60 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 8,47 (dd, J = 4,9, 1,6 Hz, 1H), 8,16 - 8,15 (m, 2H), 7,78 - 7,75 (m, 1H), 7,66 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 7,50 (dd, J = 8,0, 4,8 Hz, 1H), 4,47 (br s, 1H), 4,04 - 3,99 (m, 2H), 3,78 (dt, J = 13,2, 2,1 Hz, 1H), 3,35 - 3,30 (m, 1H), 3,20 - 2,95 (br m, 2H), 1,41 (s, 9H), 1,21 (d, J = 6,7 Hz, 3H).
Síntesis de terc-butil (3R)-4-[5-cloro-6-oxo-2-(1H-pirrolo [2,3-b]piridina-3-il)-1H-pirimidin-4-il]-3-metilpiperazina-1-carboxilato (3-015)
Una suspensión de terc-butil (3R)-4-[2-[1-(bencenosulfonil)pirrolo [2,3-b]piridin-3-il]-5-cloro-6-oxo-1H-pirimidin-4-il]-3-metilpiperazina-1-carboxilato (3-014) (0,050 g, 0,085 mmol) en 1,4-dioxano (1 ml) se preparó y se añadió terc-butóxidode sodio (0,012 g, 0,128 mmol). La mezcla se calentó a 80 °C durante 1 h, luego se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua y se extrajo con CHCh:/so-propanol. Las porciones orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron mediante evaporación rotatoria. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con diclorometano que contenía 0-10 % MeOH, luego 10-20 % MeOH. Las fracciones apropiadas se combinaron y concentraron para dar el compuesto del título (0,012 g, 32 %). LCMS: RT 2,73 min, MI 445, Método (1LCMS13). 1H NMR (600 MHz, DMSO-de) 512,48 (br s, 1H), 12,42 (br s, 1H), 8,61 - 8,58 (m, 2H), 8,34 (dd, J = 4,7, 1,6 Hz, 1H), 7,30 (dd, J = 8,0, 4,6 Hz, 1H), 4,50 (br s, 1H), 4,06 - 3,93 (m, 2H), 3,79 (d, J =13,2 Hz, 1H), 3 ,37-3,34 (br m, 1H), 3,21 - 3,00 (m, 2H), 1,43 (s, 9H), 1,24 (d, J = 6,9 Hz, 3H).
Síntesis de ácido 5-cloro-4-[(2R)-2-metilpiperazina-1-il]-2-(1H-pirrolo[2,3-b]piridina-3-il)-1H-pirimidin-6-ona-2,2,2-trifluoroacético (55)
Una solución de terc-butil (3R)-4-[5-cloro-6-oxo-2-(1H-pirrolo [2,3-b] piridina-3-il)-1H-pirimidin-4-il]-3-metilpiperazina-1-carboxilato (0,027 g, 0,0607 mmol) (3-015) en cloroformo (0,500 ml) y se añadió ácido trifluoroacético (0,093 ml, 1,21 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla de reacción se concentró mediante evaporación rotatoria y el residuo se trituró en éter dietílico. El sólido amarillo resultante se filtró y se secó al vacío para dar el compuesto del título (0,008 g, 29 %). LCMS: RT 1,66 min, MI 345, Método (1LCMS13); 1H NMR (500 MHz, DMSO-CÍ6) 5 12,59 (s, 1H), 12,54 (s, 1H), 8,82 (br d, J =141,6 Hz, 2H), 8,64 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 8,54 (dd, J = 8,1, 1,5 Hz, 1H), 8,36 (dd, J = 4,7, 1,7 Hz, 1H), 7,27 (dd, J = 8,0, 4,7 Hz, 1H), 4,60 - 4,52 (m, 1H), 4,05 - 3,98 (m, 1H), 3,54 - 3,46 (m, 1H), 3,39 - 3,36 (m, 1H), 3,29 - 3,13 (m, 3H), 1,39 (d, J = 6,9 Hz, 3H).
Síntesis de (3R)-4-[5,6-dicloro-2-(2-metilimidazol-1-il)pirimidin-4-il]-3-metil-morfolina (3-016)
A una solución completamente desgasificada de (3R)-4-(5,6-dicloro-2-yodo-pirimidin-4-il)-3-metilmorfolina (200 mg, 0,535 mmol) (3-009), 2-metilimidazol (43,9 mg, 0,535 mmol), carbonato de potasio (81,3 mg, 0,588 mmol) y 8-hidroxiquinolina (3,88 mg, 0,027 mmol) en DMSO (5 ml) se añadió yoduro de cobre (5,09 mg, 0,027 mmol). La mezcla se calentó hasta 110 °C durante 2 h. Después, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó con agua (50 ml) provocando la formación de un precipitado azul. La mezcla se filtró y la torta del filtro se lavó con acetato de etilo (2 x 20 mL). El filtrado se separó y la fase acuosa se extrajo adicionalmente con acetato de etilo (3 x 20 ml), los orgánicos combinados se concentraron hasta sequedad para producir un aceite verde. El aceite se purificó usando cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice en C18 eluyendo con una mezcla de acetonitrilo en agua (5-40 % con ácido fórmico al 0,1 %). Las fracciones deseadas se pasaron a través de un cartucho SCX-2 y el producto se eluyó con amoniaco en metanol. El eluyente básico se concentró a sequedad para proporcionar el compuesto del título (126 mg, 72 %) como una película de color verde amarillo. LCMS: 2,51 min, Ml 328, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, CDCls) 57,72 (d, J =1,7 Hz, 1H), 6,93 (d, J =1,7 Hz, 1H), 4,57 (d, J =7,0 Hz, 1H), 4,10 (dt, J =13,5, 1,2 Hz, 1H), 4,01 - 3,96 (m, 1H), 3,76 (d, J= 2,2 Hz, 2H), 3,68 (td, J =11,5, 2,4 Hz, 1H), 3,60 - 3,51 (m, 1H), 2,77 (s, 3H), 1,46 (d, J = 6,8 Hz, 3H).
Síntesis de 5-cloro-2-(2-metilimidazol-1-il)-4-[(3R)-3-metilmorfolin-4-il]-1 H-pirimidin-6-ona (56)
A un vial que contiene (3R)-4-[5,6-d¡cloro-2-(2-met¡l¡m¡dazol-1-¡l)p¡rim¡d¡n-4-¡l]-3-met¡l-morfol¡na (3-016) (126 mg, 0,384 mmol) en 1,4-d¡oxano (2 ml) y agua (0,5 ml) se añad¡ó h¡dróx¡do de sod¡o (0,18 g, 4,61 mmol). El v¡al se selló y se ¡rrad¡ó en el m¡croondas a 120 °C durante 20 m¡n. Se añad¡ó HCl acuoso 1 M para llevar la mezcla a pH 7 antes de pasar a través de un cartucho SCX-2. El cartucho se lavó con metanol antes de elu¡r el compuesto con amon¡aco 2,0 M en metanol. La fracc¡ón bás¡ca se concentró a sequedad para produc¡r una película blanca. La película se pur¡f¡có med¡ante cromatografía ultrarráp¡da sobre gel de síl¡ce en C18 eluyendo con una mezcla de aceton¡tr¡lo en agua (5 100 % con ác¡do fórm¡co al 0,1 %). Las fracc¡ones deseadas se concentraron hasta sequedad para proporc¡onar el compuesto del título (5,43 mg, 5 %) como un polvo blanco. LCMS: 2,21 m¡n, MI 310, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, Metanol-^) 57,89 (d, J =1,9 Hz, 1H), 7,03 (d, J =1,8 Hz, 1H), 4,37 - 4,30 (m, 1H), 3,89 (dt, J =11,3, 3,0 Hz, 1H), 3,79 (dd, J =11,3, 3,1 Hz, 1H), 3,70 (td, J = 10,9, 2,8 Hz, 1H), 3,64 (dd, J =11,2,2,7 Hz, 2H), 3,55 - 3,46 (m, 1H), 2,82 (s, 3H), 1,29 (d, J = 6,7 Hz, 3H).
Esquema general 4.
En un enfoque (Esquema general 4), los compuestos de Fórmula general [F4-3] se prepararon med¡ante la reacc¡ón de un der¡vado de 4,6-d¡cloro-5-halo-2-yodo-p¡r¡m¡d¡na de Fórmula general [F4-1] en una reacc¡ón de t¡po sust¡tuc¡ón aromát¡ca nucleóf¡la que ut¡l¡za una am¡na adecuada de Fórmula general [F4-2], y una base como Et3N o N,N-d¡¡soprop¡let¡lam¡na en un solvente polar como etanol, 1,4-d¡oxano, DMA o Dm F a alta temperatura, b¡en por calentam¡ento térm¡co o usando un reactor de m¡croondas. Después del desarrollo de la reacc¡ón, típ¡camente med¡ante una extracc¡ón líqu¡do-líqu¡do, el producto de reacc¡ón se usó en bruto en la s¡gu¡ente etapa o se purificó med¡ante cromatografía en columna ultrarráp¡da, HPLC preparat¡va de fase ¡nversa o recr¡stal¡zac¡ón. Derivados 5-halo-(2-heteroc¡cl¡l)-3H-p¡r¡m¡d¡na-4-ona de Fórmula general [F4-5] se prepararon med¡ante una reacc¡ón de acoplam¡ento de act¡vac¡ón de C-H catal¡zada por metal de compuestos de Fórmula general [F4-3] con un heteroc¡clo adecuado de Fórmula general [F4-4] ut¡l¡zando un catal¡zador adecuado tal como acetato de palad¡o y una base tal como carbonato de ces¡o, con o s¡n un l¡gando adecuado tal como tri-ferc-tetrafluoroborato de but¡lfosfon¡o, en un solvente polar como terc-butanol, alcohol /so-amíl¡co o DMA a alta temperatura, ya sea por calentamiento térm¡co o usando un reactor de m¡croondas. Después del desarrollo de la reacc¡ón, típ¡camente med¡ante una extracc¡ón líquídolíqu¡do, el producto de reacc¡ón se usó en bruto en la s¡gu¡ente etapa o se purificó med¡ante cromatografía en columna ultrarráp¡da, HPLC preparat¡va de fase ¡nversa o recr¡stal¡zac¡ón. En los casos en los que el heteroc¡clo (het) o el sust¡tuyente R' o R" contenía una am¡na proteg¡da por un grupo protector de am¡na estándar como terc-but¡lox¡carbon¡lo (Boc), los compuestos de Fórmula [F4-5] se preparan med¡ante una reacc¡ón de desprotecc¡ón adecuada, por ejemplo, reacc¡ón con un ác¡do como TFA o HCl en un solvente adecuado como DCM a temperatura amb¡ente. Después del desarrollo de la reacc¡ón, típ¡camente med¡ante una extracc¡ón líqu¡do-líqu¡do o pur¡f¡cac¡ón med¡ante captura-l¡berac¡ón de ¡ntercamb¡o ¡ón¡co ác¡do), el producto bruto se purificó med¡ante cromatografía en columna ultrarráp¡da, HPLC preparat¡va de fase ¡nversa o recr¡stal¡zac¡ón.
Síntes¡s de terc-but¡l 4-[5-cloro-2-(4-met¡lt¡azol-5-¡l)-6-oxo-1H-p¡r¡m¡d¡n-4-¡l]-6,6-d¡fluoro-1,4-d¡azepano-1-carbox¡lato (4-001)
Una solución agitada de 4-metiltiazol (0,15 ml, 1,62 mmol), terc-butil 4- (5,6-dicloro-2-yodo-pirimidin-4-il)-6,6-difluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (3-003, preparado en el esquema 3) (0,75 g, 1,47 mmol) y carbonato de cesio (1,44 g, 4,42 mmol) en DMA (10 ml) se desgasificó y se colocó bajo una atmósfera de nitrógeno. Se añadió acetato de paladio (0,03 g, 0,147 mmol) y la mezcla se calentó a 110°C durante 18 h. La mezcla de reacción se concentró, proporcionando un aceite negro. El aceite se purificó usando cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, eluyendo con una mezcla de acetato de etilo en DCM (20-100 %). Las fracciones deseadas se concentraron hasta sequedad proporcionando el compuesto del título (0,254 g, 37 %) como una película amarilla. LCMS: 4,17 min, MI 462, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, CDCls) 512,57 (s, 1H), 8,85 (s, 1H), 4,34 (t, J = 12,2 Hz, 2H), 3,86 (d, J = 12,4 Hz, 6H), 2,80 (s, 3H), 1,49 (s, 9H).
Síntesis de clorhidrato de 5-cloro-4-(6,6-difluoro-1,4-diazepan-1-il)-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona (57)
A una solución agitada de terc-butil 4-[5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il) -6-oxo-1H-pirimidin-4-il] -6,6-difluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (4-001) (0,25 g, 0,55 mmol) en Dc M (5 ml) se añadió HCl (2,75 ml de una solución 2,0 M en éter dietílico, 5,49 mmol) bajo nitrógeno. La reacción se dejó en agitación durante 18 h. Después de este tiempo, se formó un precipitado amarillo en la reacción que se recogió mediante filtración al vacío. El polvo resultante se purificó usando LCMS preparativa básica. Las fracciones deseadas se concentraron dando un polvo blanco, El polvo se disolvió en DCM y se añadió cloruro de hidrógeno 2,0 M en éter dietílico provocando la precipitación de un polvo amarillo. El polvo se recogió mediante filtración al vacío para dar el compuesto del título (160 mg, 73 %) como un polvo amarillo. LCMS: 1,93 min, MI 362, Método (2LCMS1); 1H NMR (400 MHz, M etano ld) 59,50 (s, 1H), 4,56 (t, J = 13,5 Hz, 2H), 4,17 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 3,89 (t, J =11,9 Hz, 2H), 3,68 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 2,87 (s, 3H).
Los siguientes compuestos se sintetizaron de acuerdo con la síntesis general que se muestra en el esquema [4]:
Número Producto [F4-5] Caracterización
Esquema general 5.
En un enfoque (esquema general 5), los compuestos de Fórmula general [F5-3] se prepararon mediante una reacción de acoplamiento de activación de C-H catalizada por metal de derivados de 6-doro-5-halo-2-yodo-pirimidina de Fórmula general [F5 -1] con un heterociclo adecuado de Fórmula general [F5-2] utilizando un catalizador adecuado tal como acetato de paladio y una base tal como carbonato de cesio, con o sin un ligando adecuado tal como tri-terctetrafluoroborato de butilfosfonio, en un solvente polar como terc-butanol, alcohol /so-amílico o DMA a alta temperatura, ya sea por calentamiento térmico o usando un reactor de microondas. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante una extracción líquido-líquido, el producto de reacción se usó en bruto en la siguiente etapa o se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC preparativa de fase inversa o recristalización. Derivados 6-aliloxi-5-halo-2-heterociclil-pirimidina de Fórmula general [F5-4] se prepararon mediante una reacción de
tipo de sustitución aromática nucleofílica de compuestos de Fórmula general [F5-3] utilizando alcohol alílico y una base adecuada tal como hidruro de sodio en un solvente polar como THF a baja temperatura o temperatura ambiente. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante una extracción líquido-líquido, el producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC preparativa de fase inversa o recristalización. Derivados 5-halo-(2-heterociclil)-3H-pirimidina-4-ona de Fórmula general [F5-5] se prepararon mediante una reacción de desprotección catalizada por metal de compuestos de Fórmula general [F5-4] utilizando un catalizador adecuado tal como [1,1'-bis (difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II) y una base adecuada como morfolina, en un solvente adecuado como diclorometano a temperatura ambiente. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante una extracción líquido-líquido, el producto en bruto podría purificarse mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC preparativa de fase inversa o recristalización. En los casos en los que el heterociclo (het) o el sustituyente R' o R" contenía una amina protegida por un grupo protector de amina estándar como ferc-butiloxicarbonilo (Boc), los compuestos de Fórmula [F5-5] se preparan mediante una reacción de desprotección adecuada, por ejemplo, reacción con un ácido como TFA o HCl en un solvente adecuado como DCM a temperatura ambiente. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante una extracción de líquido-líquido o purificación mediante captura-liberación de intercambio iónico ácido, el producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC preparativa de fase inversa o recristalización.
A una solución agitada completamente desgasificada de ferc-butil (3R)-4-(5,6-dicloro-2-yodo-pirimidin-4-il)-3-metilpiperazina-1-carboxilato (3-012, preparado en el esquema 3) (19,0 g, 40,2 mmol), 4-clorotiazol (4,8 g, 40,2 mmol) y carbonato de cesio (19,6 g, 60,2 mmol) en ferc-butanol (200 mL) ae añadió tetrafluoroborato de tri-ferc-butilfosfonio (1,16 g, 4,01 mmol) y acetato de paladio (0,45 g, 2,014 mmol). La reacción se calentó a 80 °C durante 72 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente, se filtró, y el filtrado se concentró hasta sequedad para proporcionar un aceite marrón. Esto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida sobre sílice (eluyendo con una mezcla de acetato de etilo en ciclohexano 0-60 %) para dar el compuesto del título (3,80 g, 20 %) como un polvo amarillo. LCMS: RT 3,34 min, MI 466, Método (4LCMS6); 1H NMR (400 MHz, CDCls) 58,75 (s, 1H), 4,70 (s, 1H), 4,32 - 3,84 (m, 4H), 3,41 (td, J =13,9, 13,0, 3,3 Hz, 1H), 3,17 (s, 1H), 1,49 (s, 9H), 1,37 (d, J =6,7 Hz, 3H).
Síntesis de ferc-butil (3R)-4-[6-aliloxi-5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)pirimidin-4-il] -3-metil-piperazina-1-carboxilato (5-002)
A una solución agitada de alcohol alílico (2,78 ml, 40,9 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C bajo nitrógeno se le añadió hidruro de sodio (60 % en aceite mineral, 1,63 g, 40,9 mmol) en porciones. La mezcla se agitó durante 10 min. La mezcla de alcohol alílico se añadió gota a gota a una solución de terc-butil (3R)-4-[5,6-dicloro-2-(4-clorotiazol-5-il)pirimidin-4-il]-3-metilpiperazina-1-carboxilato (5-001) (3,8 g, 8,17 mmol) en t Hf (20 ml) a 0 °C bajo nitrógeno. Una vez que se completó la adición, la reacción se agitó durante 10 min más. Se añadió agua (100 ml) y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 x 150 ml). Los orgánicos combinados se secaron (MgSO4) y se concentró hasta sequedad para producir una película amarilla. La película se purificó usando cromatografía ultrarrápida en gel de sílice, eluyendo con una mezcla de acetato de etilo y ciclohexano (0-30 %). Las fracciones deseadas se concentraron hasta sequedad para dar el compuesto del título (3,5 g, 8 8 %) como una película amarilla. 1H NMR (400 MHz, CDCh) 58,71 (s, 1H), 6,11 (ddt, J = 17,3, 10,5, 5,6 Hz, 1H), 5,47 (dq, J = 17,2, 1,5 Hz, 1H), 5,33-5,27 (m, 1H), 5,00 (dt, J = 5,6, 1,4 Hz, 2H), 4,58 (s, 1H), 4,21 - 3,79 (m, 3H), 3,37 (td, J = 13,6, 3,3 Hz, 1H), 3,23 - 2,9 (m, 2H), 1,49 (s, 9H), 1,32 (d, J = 6,7 Hz, 3H).
Síntesis de terc-butil (3R)-4-[5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il]-3-metil-piperazina-1-carboxilato (5 003)
A una solución agitada desgasificada de terc-butil (3R)-4-[6-aliloxi-5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)pirimidin-4-il]-3-metilpiperazina-1-carboxilato (5-002) (3,81 g, 7,84 mmol) y morfolina (2,06 ml, 23,5 mmol) en DCM ( 8 0 ml) bajo nitrógeno se añadió [1,1'-bis (difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II), complejo con diclorometano (0,32 g, 0,392 mmol). La mezcla se agitó durante 18 h. Se añadió agua ( 2 0 ml) y se separaron las dos fases. La fase acuosa se extrajo adicionalmente con DCM (2 x 20 ml) antes de que los extractos orgánicos combinados se pasaran a través de un separador de fases y se concentraran hasta sequedad para producir una película amarilla. La película se sonicó en éter dietílico y se dejó reposar durante 90 min. Se formó un precipitado de color crema. El precipitado se recogió mediante filtración al vacío proporcionando el compuesto del título (1,74 g, 49 %) en forma de un polvo de color canela. LCMS: RT 4,49 min, MI 446, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, CDCh) 58 , 8 6 (s, 1H), 4,55 (s, 1H), 4,29-3,76 (m, 3H), 3,36 (td, J = 13,6, 3,4 Hz, 1H), 3,13 (s, 2H), 1,49 (s, 9H), 1,34 (d, J = 6,7 Hz, 3H).
Síntesis de clorhidrato de 5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[(2R)-2-metilpiperazina-1-il]-1H-pirimidin-6-ona (65)
A una solución agitada de terc-butil (3R)-4-[5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il]-3-metil-piperazina-1-carboxilato (5-003) (1,74 g, 3,91 mmol) en d Cm (20 ml) se añadió cloruro de hidrógeno (19,53 ml de una solución 4,0 M en 1,4-dioxano, 78,1 mmol). La mezcla se agitó durante 2 h. Se añadió éter (100 ml) y el precipitado resultante se recogió mediante filtración al vacío proporcionando un polvo blanco. El polvo se disolvió en metanol (10 ml) y se añadió HCl 2,0 M en éter dietílico (10 ml), lo que provocó la formación de un precipitado de color amarillo pálido. El precipitado se recogió mediante filtración al vacío proporcionando un polvo amarillo. El polvo amarillo se secó al vacío para dar el compuesto del título (0,843 g, 56 %). LCMS: RT 1,65 min, MI 346, Método (5LCMS1); 1H NMR (400 MHz, DMSO-da)
5 12,87 (s, 1H), 9,48 (s, 1H), 9,23 (s, 1H), 9,11 (s, 1H), 4,64 - 4.49 (m, 1H), 4,11 (d, J = 14,6 Hz, 1H), 3,47 (dd, J = 14,8, 2,9 Hz, 1H), 3,28 (d, J =12,5 Hz, 1H), 3,19 (s, 2H), 3,11 (s, 1H), 1,44 (d, J = 7,1 Hz, 3H).
Síntesis de terc-butil 4-[5,6-didoro-2-(4-dorotiazol-5-il) pirimidin-4-il]-6,6-difluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (5-004)
A una solución completamente desgasificada de terc-butil 4-(5,6-dicloro-2-yodo-pirimidin-4-il)-6,6-difluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (3-003, preparado en el esquema 3) (1,6 g, 3,14 mmol), 4-clorotiazol (0,38 g, 3,14 mmol) y carbonato de cesio (1,54 g, 4,71 mmol) en alcohol isoamílico (16 ml) se añadió acetato de paladio (0,04 g, 0,157 mmol) ) y tetrafluoroborato de tri-terc-butilfosfonio (0,09 g, 0,314 mmol). La mezcla se calentó hasta 90 °C durante 18 h. La mezcla de reacción se enfrió antes de diluirla con acetato de etilo y HCl 2 M y se separaron las dos fases. La fase acuosa se extrajo adicionalmente con acetato de etilo, las fases orgánicas combinadas se secaron (MgSO4) y se concentraron hasta sequedad proporcionando una película de color marrón oscuro. La película se purificó usando cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice eluyendo con una mezcla de acetato de etilo en ciclohexanos (0-50 %). Las fracciones deseadas se concentraron hasta sequedad para dar el compuesto del título (282 mg, 18 %) como una película marrón. LCMS: RT 5,82 min, MI 502, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, CDCls) 58,78 (s, 1H), 4,49 (t, J = 12,1 Hz, 2H), 3,94 (s, 4H), 3,86 - 3,77 (m, 2H), 1,49 (s, 9H).
Síntesis de terc-butil 4-[6-aliloxi-5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)pirimidin-4-il]-6,6-difluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (5 005)
A una solución agitada de alcohol alílico (0,18 ml, 2,62 mmol) en THF (4 ml) a 0 °C bajo nitrógeno se le añadió hidruro de sodio (60 % en aceite mineral, 80 mg, 3,14 mmol) en porciones. La mezcla se agitó durante 2 min. terc-Butil 4-[5,6-dicloro-2-(4-clorotiazol-5-il) pirimidin-4-il]-6,6-difluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (5-004) (328 mg, 0,524 mmol) en THF (6 ml) se añadió a la solución de alcohol alílico. La mezcla se agitó durante 5 min. Se añadió agua (20 ml) gota a gota. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 x 40 mL), los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO4) y se concentraron hasta sequedad para producir una película marrón. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice eluyendo con una mezcla de acetato de etilo en ciclohexano (0-30 %) para proporcionar el compuesto del título (214 mg, 78 %) como una película amarilla. LCMS: RT 6,15 min, Ml 522, Método (5LCMS1); 1H NMR (400 MHz, CDCls) 58,72 (s, 1H), 6,11 (ddt, J = 17,2, 10,5, 5,6 Hz, 1H), 5,48 (dq, J = 17,2, 1,6 Hz, 1H), 5,32 (dq, J =10,4, 1,3 Hz, 1H), 5,00 (dt, J = 5,6, 1,4 Hz, 2H), 4,41 (t, J = 12,4 Hz, 2H), 3,96- 3,76 (m, 6H), 1,49 (s, 9H).
Síntesis de terc-butil 4-[5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il]-6,6-difluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato ( 5-006)
A una solución desgasificada de terc-butil 4-[6-aliloxi-5-doro-2-(4-dorotiazol-5-N) pirimidin-4-M]-6,6-difluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (5-005) (214 mg, 0,41 mmol) y morfolina (0,11 ml, 1,23 mmol) en DCM (6 ml) se añadió tetraquis(trifenilfosfina)paladio (20 mg, 0,021 mmol). La mezcla se agitó durante 5 min bajo nitrógeno. Se añadieron agua (10 ml) y DCM (10 ml) y se separaron las dos fases. Los orgánicos se concentraron hasta sequedad proporcionando un aceite amarillo. El aceite se purificó usando cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice, eluyendo con una mezcla de metanol en DCM (0-10 % con amoniaco 0,1 %). Las fracciones deseadas se concentraron hasta sequedad para proporcionar el compuesto del título (135 mg, 68 %) como una película de color amarillo pálido. LCMS: RT 4,43 min, MI 484, Método (4LCMS1). 1H NMR (400 MHz, CDCls) 58,80 (s, 1H), 4,26 (t, J = 12,2 Hz, 2H), 3,89 -3,76 (m, 6H), 1,48 (s, 9H).
Síntesis de clorhidrato de 5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-(6,6-difluoro-1,4-diazepan-1-il)-1H-pirimidin-6-ona (66)
A una solución agitada de terc-butil 4-[5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il) -6-oxo-1H-pirimidin-4-il]-6,6-difluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (5-006) (199 mg, 0,413 mmol) en DCM (2 ml) se añadió cloruro de hidrógeno (4,63 ml de una solución 4 M en 1,4-dioxano, 18,5 mmol). La mezcla se agitó durante 1 h antes de concentrar hasta sequedad para producir un polvo amarillo. El polvo se cargó en un cartucho SCX-2, se lavó con metanol y se eluyó con amoniaco 2 M en metanol. Las fracciones básicas se concentraron hasta sequedad para producir un polvo amarillo. El polvo se recogió en metanol y se añadió cloruro de hidrógeno (1 ml de una solución 4 M en 1,4-dioxano). La mezcla se concentró para proporcionar el compuesto del título (103 mg, 60 %) en forma de un polvo de color amarillo claro. LCMS: RT 1,81 min, MI 382, Método (5LCMS1); 1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 59,24 (s, 1H), 4,59 (t, J = 13,2 Hz, 2H), 4,05 (s, 2H), 3,76 (t, J = 13,3 Hz, 2H), 3,52 - 3,49 (m, 2H).
Los siguientes compuestos se sintetizaron de acuerdo con la síntesis eneral que se muestra en el esquema [5]:
Esquema general 6
En un enfoque (Esquema general 6), los compuestos de Fórmula general [F6-3] se prepararon mediante la reacción de un derivado de a-halo-malonato de Fórmula general [F6-1] en una reacción de condensación utilizando un derivado de carboximidamida heterocíclico adecuadamente sustituido de Fórmula general [F6-2] en un solvente polar como metanol o THF en presencia de una base como metóxido de sodio, terc-butóxido de potasio o DBU. La reacción se lleva a cabo de forma adecuada a temperatura ambiente o a alta temperatura, ya sea mediante calentamiento térmico o usando un reactor de microondas. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante una extracción líquido-líquido, el producto de reacción se usó en bruto en la siguiente etapa o se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC preparativa de fase inversa o recristalización. Los derivados de Fórmula general [F6-4] se prepararon mediante la reacción de un derivado de 5-halo-2-heterociclil-1H-pirimidina-4,6-diona de Fórmula general
[F6-3] con un agente halogenante como el oxicloruro de fósforo a alta temperatura. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante la adición de agua seguida de la adición de una base como hidróxido de sodio acuoso, la mezcla de reacción bruta se purificó mediante extracción líquido-líquido, y el producto de reacción se usó en bruto en la siguiente etapa o se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC preparativa de fase inversa o recristalización. Los compuestos de Fórmula general [F6-6] se prepararon mediante la reacción de derivados 4,6-dicloro-5-halo-2-heterociclil-pirimidina de Fórmula general [F6-4] en una reacción de tipo de sustitución aromática nucleófila utilizando una amina adecuada de Fórmula general [F6-5], y una base como Et3N o NaH, o un ácido mineral como HCl, en un solvente polar como etanol, butanol, dioxano, DMA o DMF a alta temperatura, ya sea por calentamiento térmico o usando un reactor de microondas. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante una extracción líquido-líquido, el producto de reacción se usó en bruto en la siguiente etapa o se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC preparativa de fase inversa o recristalización. Derivados 6-Aliloxi-5-halo-2-heterociclil-pirimidina de Fórmula general [F6-7] se prepararon mediante una reacción de tipo sustitución aromática nucleofílica de compuestos de Fórmula general [F6-6] utilizando alcohol alílico y una base adecuada como hidruro de sodio en un solvente polar como THF a baja temperatura o temperatura ambiente. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante una extracción líquido-líquido, el producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC preparativa de fase inversa o recristalización. Derivados 5-halo-(2-heterociclil)-3H-pirimidina-4-ona de Fórmula general [F6-8] se prepararon mediante una reacción de desprotección catalizada por metales de compuestos de Fórmula general [F6-7] utilizando un catalizador adecuado tal como [1,1'-bis (difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II) y una base adecuada como morfolina, en un solvente adecuado tal como diclorometano a temperatura ambiente. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante una extracción líquido-líquido, el producto en bruto podría purificarse mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC preparativa de fase inversa o recristalización. En los casos en los que el heterociclo (het) o el sustituyente R' o R" contenía una amina protegida por un grupo protector de amina estándar como terc-butiloxicarbonilo (Boc), los compuestos de Fórmula [F6-8] se preparan mediante una reacción de desprotección adecuada, por ejemplo, reacción con un ácido como TFA o HCl en un solvente adecuado como DCM a temperatura ambiente. Después del desarrollo de la reacción, típicamente mediante una extracción líquido-líquido o purificación mediante captura-liberación de intercambio iónico ácido, el producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida, HPLC preparativa de fase inversa o recristalización.
Esquema general 6
Síntesis de 4-clorotiazol-5-carbonitrilo (6-001)
Se disolvió 2,4-dicloro-tiazol-5-carbonitrilo (10,0 g, 55,86 mmol) en ácido acético (100 ml), luego se trató con zinc en polvo (10,96 g, 167,57 mmol) y se dejó en agitación durante 2 días bajo nitrógeno a temperatura ambiente. Se añadieron 4 g más de zinc seguidos de ácido acético (10 ml) y se dejó en agitación durante la noche. Se añadieron 2 g más de zinc, seguido de ácido acético (10 ml) y la mezcla se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 48 h. Después, la mezcla se filtró a través de celita, se lavó con metanol (300 ml) y el filtrado se concentró a presión reducida. Se añadió acetato de etilo (150 ml) y el residuo se trituró para formar un sólido blanquecino. Este se eliminó mediante filtración y se lavó con más EtOAc (100 ml). El filtrado se concentró a presión reducida para producir un aceite marrón que se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice, eluyendo con 0-20 % EtOA/ciclohexano para proporcionar el compuesto del título (5,57 g, 69 %) como un sólido blanco. LCMS: RT 3,18 min, MI 145, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, DMSO-De) 59,45 (s, 1H).
Síntesis de 4-cloro-N-hidroxi-tiazol-5-carboxamidina (6-002)
Se preparó una solución de 4-clorotiazol-5-carbonitrilo (6-001) (5,60 g, 38,73 mmol) en etanol (129 ml) y se añadió hidroxilamina 50 % p/p en agua (4,74 ml, 77,47 mmol). La reacción se calentó a 80 °C durante 2 horas. La mezcla de reacción se concentró por evaporación rotatoria para dar el compuesto del título (6,50 g, 94 %) como un sólido amarillo que se usó sin purificación adicional. LCMS: RT 1,43 min, MI 178, Method (4LCMS1); 1H n Mr (400 MHz, DMSO-CÍ6) 5 10,08 (s, 1H), 9,07 (s, 1H), 5,97 (s, 2H).
Síntesis de clorhidrato de 4-clorotiazol-5-carboxamidina (6-003)
Una solución de 4-cloro-N-hidroxi-tiazol-5-carboxamidina (6-002) (3,16 g, 17,76 mmol) en ácido acético (59 ml). Se añadió anhídrido acético (2,52 ml, 26,64 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se evacuó y se volvió a llenar con nitrógeno 3 veces antes de la adición de 10 % Pd/C (0,95 g, 8,882 mmol. Después, la mezcla se purgó con hidrógeno (x3) y se dejó en agitación bajo un globo de hidrógeno a temperatura ambiente durante la noche. Se añadió más Pd/C 10 % (0,95 g, 8,882 mmol) y la mezcla se dejó en agitación bajo hidrógeno a temperatura ambiente durante la noche. Se añadió más Pd/C 10 % (0,95 g, 8,882 mmol) y la mezcla se dejó en agitación bajo hidrógeno a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se filtró a través de celita y se lavó con metanol (500 ml) el filtrado se concentró. El residuo se disolvió en 1,4-dioxano (10 ml) antes de la adición gota a gota de una solución de cloruro de hidrógeno 4 M en 1,4-dioxano (17,8 ml, 71,1 mmol). La mezcla se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 5 min antes de la adición de éter dietílico (30 ml). El sólido de color canela resultante se recogió por filtración, se lavó con más éter dietílico (20 ml) y se secó al aire para proporcionar el compuesto del título (1,80 g, 43 %). 1H NMR (400 MHz, DMSO-de) 59,86 - 9,69 (d, J = 6,4 Hz, 4H), 9,44 (s, 1H).
Síntesis de 5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-1H-pirimidina-4,6-diona (6-004)
A una solución agitada de clorhidrato de 4-clorotiazol-5-carboxamidina (6-003) (1,77 g, 7,53 mmol) y cloromalonato de dimetilo (1,84 ml, 7,53 mmol) en metanol (50 ml) se le añadió 1,8-diazabiciclo [5,4 0,0] undec-7-eno (2,36 ml, 15,8 mmol) gota a gota. La mezcla se agitó durante 10 min a temperatura ambiente antes de calentarla a reflujo durante 2 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró para producir un aceite rojo oscuro. El aceite se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre sílice en C18, eluyendo con una mezcla de acetonitrilo en agua (5-50 % con ácido fórmico al 0,1 %). Las fracciones deseadas se concentraron para eliminar el acetonitrilo antes de acidificarse a pH 2, lo que provocó la formación de cristales marrones. Los cristales se recogieron mediante filtración al vacío para proporcionar el compuesto del título (0,550 g, 28 %) en forma de un sólido marrón. LCMS: 2,37 min, MI 264; método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, m e ta n o l^ ) 59,12 (s, 1 H).
Síntesis de 4-cloro-5-(4,5,6-tricloropirimidin-2-il) tiazol (6-005)
A una solución agitada de 5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-1H-pirimidina-4,6-diona (6-004) (550 mg, 2,08 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (1,45 ml, 8,33 mmol) en tolueno (10 ml) bajo nitrógeno, se añadió oxicloruro de fósforo (0,78 ml, 8,33 mmol) gota a gota y la mezcla se calentó a 100 °C durante 1 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y luego se añadió gota a gota a una solución de hidróxido de amonio 50:50 en hielo con DCM (100 ml). Una vez completada la adición, se separaron las dos fases y la fase acuosa se extrajo adicionalmente con DCM (2 x 100 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con una solución acuosa saturada de citrato de sodio (2 x 100 ml) antes de pasar a través de un separador de fases. Los orgánicos se concentraron para producir un polvo marrón. El polvo se trituró en metanol y el sólido resultante se recogió mediante filtración al vacío. El precipitado de crema recogido se secó al vacío para proporcionar el compuesto del título (502 mg, 80 %). LCMS: RT 5,29 min, MI 302, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, CDCls) 58,84 (s, 1H).
Síntesis de terc-butil 4-[5,6-dicloro-2-(4-clorotiazol-5-il) pirimidin-4-il]-3-(difluorometil)piperazina-1-carboxilato (6-006)
A una solución agitada de terc-butil 3-(difluorometil)piperazina-1-carboxilato (0,43 g, 1,83 mmol) en THF (5 ml) a 0 °C bajo nitrógeno se le añadió hidruro de sodio (60 % en aceite mineral, 0,09 g, 2,168 mmol) en porciones. Una vez que se completó la adición, la mezcla se agitó durante 20 min. La solución de amina desprotonada se añadió gota a gota a una solución agitada de 4-cloro-5-(4,5,6-tricloropirimidin-2-il)tiazol (6-005) (0,50 g, 1,67 mmol) en THF (5 ml) también a 0 °C bajo nitrógeno. La mezcla se dejó calentara temperatura ambiente con agitación durante 1 h, antes de calentarla a reflujo durante 96 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó con acetato de etilo (200 ml). Los orgánicos se lavaron con agua (2 x 200 ml). Los acuosos combinados se extrajeron con acetato de etilo (3 x 200 ml). Los orgánicos combinados se secaron (MgSO4) y se concentraron a sequedad proporcionando un aceite marrón. El aceite se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice eluyendo con una mezcla de acetato de etilo en ciclohexano (0-100 %) para proporcionar el compuesto del título (0,40 g, 47 %) como un polvo de crema. LCMS: 5,81 min, MI 502, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 59,27 (s, 1H), 6,45 (t, J = 54,9 Hz, 1H), 4,94 (s, 1H), 4,26 (d, J = 14,3 Hz, 1H), 4,16 (d, J = 13,7 Hz, 1H), 4,08 - 3,95 (m, 1H), 3,60 - 3,47 (m, 1H), 3,34 - 3,24 (m, 1H), 3,01 (s, 1H), 1,42 (s, 9H).
Síntesis de terc-butil 4-[6-aliloxi-5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)pirimidin-4-il]-3-(difluorometil)piperazina-1-carboxilato (6 007)
A una solución agitada de alcohol alílico (0,27 ml, 4,00 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C bajo nitrógeno se le añadió hidruro de sodio (60 % en aceite mineral, 0,16 g, 4,00 mmol) en porciones. La mezcla se agitó durante 10 min. La mezcla de alcohol alílico se añadió gota a gota a una solución de terc-butil 4-[5,6-dicloro-2-(4-clorotiazol-5-il)pirimidin-4-il]-3-(difluorometil) piperazina-1-carboxilato (6-006) (0,4 g, 0,801 mmol) en THF (20 ml) también a 0 °C bajo nitrógeno. Una vez que se completó la adición, la reacción se agitó durante 10 min más. Se añadió gota a gota agua (20 ml) y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 x 40 ml). Los orgánicos combinados se secaron (MgSO4) y se concentraron hasta sequedad para producir una película amarilla. La película se purificó usando cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice eluyendo con una mezcla de acetato de etilo en ciclohexano (0-30 %). Las fracciones deseadas se concentraron hasta sequedad para proporcionar el compuesto del título (0,358 g, 86 %) como una película amarilla.
LCMS: 6,10 min, MI 466, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, CDCla) 58,72 (s, 1H), 6,36- 5,95 (m, 2H), 5,48 (dq, J = 17,2, 1,5 Hz, 1H), 5,32 (dq, J = 10,5, 1,4 Hz, 1H), 5,01 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 4,73 (s, 1H), 4,40 (d, J =14,1 Hz, 1H), 4,26 - 4,05 (m, 2H), 3,51 (td, J = 14,1, 3,5 Hz, 1H), 3,32 (dt, J = 14,2, 3,7 Hz, 1H), 3,20 - 2,94 (m, 1H), 1,49 (s, 9H).
Síntesis de terc-butil 4-[5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il]-3-(difluorometil)piperazina-1-carboxilato (6-008)
A una solución desgasificada de terc-butil 4-[6-aliloxi-5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)pirimidin-4-il]-3-(difluorometil) piperazina-1-carboxilato (6-007) (0,358 g, 0,685 mmol) y morfolina (0,18 ml, 2,06 mmol) en DCM (8 ml) se añadió tetraquis (trifenilfosfina) paladio (0,04 g, 0,034 mmol). La mezcla se agitó durante 5 min bajo nitrógeno. Se añadieron agua (10 ml) y DCM (10 ml) y se separaron las dos fases. Los orgánicos se concentraron hasta sequedad para producir un aceite amarillo. El aceite se purificó usando cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice eluyendo con una mezcla de metanol en DCM (0-10 % con amoniaco 0,1 %). Las fracciones deseadas se concentraron hasta sequedad para proporcionar el compuesto del título (0,178 g, 54 %) como una película de color amarillo pálido. LCMS: 4,44 min, MI 482, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, CDCla) 58,87 (s, 1H), 6,06 (td, J =55,9, 5,0 Hz, 1H), 4 ,78-4,47 (m, 1H), 4,39 (d, J = 14,1 Hz, 1H), 4,21 (s, 1H), 4,03 (d, J = 13,7 Hz, 1H), 3,48 (dd, J = 12,3, 3,2 Hz, 1H), 3,25 (d, J = 14,2 Hz, 1H), 3,02 (s, 1H), 1,49 (s, 9H).
Separación quiral de terc-butil 4-[5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il]-3-(difluorometil)piperazina-1-carboxilato
terc-Butil 4-[5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il]-3-(difluorometil)piperazina-1-carboxilato (6-008) (0,18 g, 0,369 mmol) se disolvió a 30 mg/ml en metanol y luego se purificó mediante SFC (columna = Lux C1 (21,2 mm x 250 mm, 5 ^m; temperatura de la columna 40 °C; caudal = 50 ml/min), BPR = 125 BarG, Condiciones isocráticas 40:60 MeOH:CO2). Las fracciones apropiadas que contenían el primer isómero eluyente (enantiómero 1, estereoquímica absoluta desconocida) se concentraron hasta sequedad proporcionando terc-butil 4-[5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il]-3-(difluorometil)piperazina-1-carboxilato, enantiómero 1 (6-009) (0,0686 g, 39 %) como una crema en polvo con 98,4 % de ee (RT: 2,76 min; Detalles de la columna: Lux C14,6 mm x250 mm, 5 ^m; Temperatura de la columna: 40 °C; Velocidad de flujo: 4 ml/min; Condiciones isocráticas: 40:60 MeOH: CO2). LCMS: 2.49 min, MI 480, Método (4LCMS3); 1H NMR (400 MHz, CDCh) 58,89 (s, 1H), 6,07 (td, J = 55.8, 4.9 Hz, 1H), 4,63 (s, 1H), 4,39 (d, J = 14,1 Hz, 1H), 4,28-4.13 (m, 1H),4,05 (d, J =13,4 Hz, 1H), 3,49 (td, J = 13,1,3.4 Hz, 1H), 3,25 (d, J = 13,7 Hz, 1H), 3,02 (s, 1H), 1,49 (s, 9H).
Las fracciones apropiadas que contenían el segundo isómero eluyente (enantiómero 2, estereoquímica absoluta desconocida) se concentraron hasta sequedad proporcionando terc-butil 4- [5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il) -6-oxo-1H-pirimidin-4-il] -3-(difluorometil) piperazina-1-carboxilato, enantiómero 2 (6-010) (0,0709 g, 40 %) como una crema en polvo con 9 8 , 6 % de ee (RT: 3,16 min; Detalles de la columna: Lux C1 4,6 mm x 250 mm, 5 ^m; Temperatura de la columna: 40 °C; Caudal: 4 ml/min; Condiciones Isocráticas: 40:60 MeOH:CO2). LCMS: 2,49 min, MI 480, Método (4LCMS3); 1H NMR (400 MHz, CDCh) 58,87 (s, 1H), 6,07 (td, J = 55,9, 4,9 Hz, 1H), 4,63 (s, 1H), 4,39 (d, J =14,1 Hz, 1H), 4,26-4,11 (m, 1H), 4,04 (d, J = 13,7 Hz, 1H), 3,56-3,43 (m, 1H), 3,25 (d, J =13,8 Hz, 1H), 3,02 (s, 1H), 1,49 (s, 9H).
Síntesis de clorhidrato de 5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[2-(difluorometil)piperazina-1-il]-1H-pirimidin-6-ona, Enantiómero 1 (69)
A una solución agitada de terc-butil 4-[5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il]-3-(difluorometil) piperazina-1-carboxilato, enantiómero 1 (6-009) (69 mg, 0,142 mmol) en DCM (2 ml) se añadió cloruro de hidrógeno (l,42 ml de una solución 4 M en 1,4-dioxano, 2,85 mmol). La mezcla se agitó durante 20 min. Se añadió éter dietílico (10 ml) y el precipitado resultante se recogió mediante filtración al vacío. La crema en polvo se secó al vacío para proporcionar el compuesto del título (46,1 mg, 77 %). LCMS: 1,75 min, MI 382, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, DMSO-de) 5 13,11 (s, 1H), 9,36 (s, 1H), 9,25 (s, 1H), 8,99 (s, 1H),6,68(td, J = 55,1,4,8 Hz, 1H),4,92(t, J =13,3 Hz, 1H), 4,19 (d, J =14,5 Hz, 1H), 3,63-3,51 (m, 2H), 3 ,42-3,24 (m, 2H), 3,19-3,04 (m, 1H).
Síntesis de clorhidrato de 5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[2-(difluorometil)piperazina-1-il]-1H-pirimidin-6-ona, Enantiómero 2 (70)
A una solución agitada de terc-butil 4-[5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il) -6-oxo-1H-pirimidin-4-il]-3-(difluorometil)piperazina-1-carboxilato, Enantiómero 2 (6-010) (70 mg, 0,147 mmol) con d Cm (2 ml) se añadió cloruro de hidrógeno (1,47 ml de una solución 4 M en 1,4-dioxano, 2,94 mmol). La mezcla se agitó durante 1 h. Se añadió éter dietílico (10 ml) y el precipitado resultante se recogió mediante filtración al vacío. La crema en polvo se secó al vacío durante la noche para proporcionar el compuesto del título (50 mg, 82 %). LCMS: 1,75 min, Ml 382, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, DMSO-de) 513,11 (s, 1H), 9,47 (s, 1H), 9,25 (s, 1H), 9,07 (s, 1H), 6,71 (td, J = 55,1, 5,0 Hz, 1H), 4,94 (s, 1H), 4,20 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 3 ,67-3,48 (m, 2H), 3,40-3,26 (m, 2H), 3,13 (t, J = 12,2 Hz, 1H).
Síntesis de terc-butil 4-[5,6-dicloro-2-(4-clorotiazol-5-il)pirimidin-4-il]-6-fluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (6-011)
Se preparó una solución de 4-cloro-5-(4,5,6-tricloropirimidin-2-il)tiazol (6-005) (398 mg, 1,32 mmol) y trietilamina (0,19 mL, 1,39 mmol) en cloroformo (11 ml), a lo que se añadió terc-butil 6-fluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (0,29 g, 1,32 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 5 días. La mezcla de reacción cruda se dividió entre DCM (400 ml) y agua (400 ml). La fase orgánica se separó y la fase acuosa se extrajo adicionalmente con DCM (2 x 200 ml). La fase orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró por evaporación rotatoria para dar el compuesto del título (614 mg, 64 %). LCMS: RT 5,72 min, Ml 383, Método (4LCMS1).
Síntesis de terc-butil 4- [6-aliloxi-5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il) pirimidin-4-il]-6-fluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (6 012)
A una solución agitada de alcohol alílico (0,28 ml, 4,14 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C bajo nitrógeno se le añadió hidruro de sodio (60 % en aceite mineral, 0,17 g, 4,14 mmol) en porciones. La mezcla se agitó durante 10 min. La mezcla de alcohol alílico se añadió gota a gota a una solución de terc-butil 4-[5,6-dicloro-2-(4-clorotiazol-5-il)pirimidin-4-il] -6-fluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (6-011) (0,4 g, 0,829 mmol) en THF (20 ml) también a 0 °C bajo nitrógeno. Una vez
que se completó la adición, la reacción se agitó durante 10 min más. Se añadió gota a gota agua (20 ml) y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 x 40 ml). Los orgánicos combinados se secaron (MgSO4) y se concentraron hasta sequedad para proporcionar una película amarilla. La película se purificó usando cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice eluyendo con una mezcla de acetato de etilo en ciclohexano (0-30 %). Las fracciones deseadas se concentraron hasta sequedad para proporcionar el compuesto del título (0,290 g, 69 %) como una película amarilla. LCMS: 6,06 min, MI 504, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, CDCls) 58,71 (s, 1H), 6,11 (ddt, J = 17,2, 10,5, 5,6 Hz, 1H), 5,47 (dq, J = 17,2, 1,6 Hz, 1H), 5,31 (dq, J = 10,4, 1,3 Hz, 1H), 5,22 - 5,01 (m, 1H), 4,99 (d, J =5,6 Hz, 2H), 4,32 - 3,91 (m, 4H), 3,87 - 3,55 (m, 4H), 1,42 (s, 9H).
Síntesis de ferc-butil 4- [5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il] -6-fluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (6 013)
A una solución desgasificada de ferf-butil 4-[6-aliloxi-5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il) pirimidin-4-il]-6-fluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (6-012) (290 mg, 0,575 mmol) y morfolina (0,15 ml, 1,73 mmol) en DCM (5 ml) se añadió el complejo Pd(dppf)Cl2 con DCM (0,02 g, 0,029 mmol). La mezcla se agitó durante 5 min bajo nitrógeno. Se añadieron agua (10 ml) y DCM (10 ml) y se separaron las dos fases. Los orgánicos se concentraron hasta sequedad para producir un aceite amarillo. El aceite se purificó usando cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice en C18 eluyendo con una mezcla de acetonitrilo en agua (5-60 % con ácido fórmico al 0,1 %). Las fracciones deseadas se concentraron hasta sequedad para proporcionar el compuesto del título (0,149 g, 56 %) en forma de un polvo de color amarillo pálido. LCMS: 4,21 min, MI 464, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, CDCls) 58,88 (s, 1H), 5,42 - 4,78 (m, 1H), 4,25 - 3,93 (m, 3H), 3,89 - 3,28 (m, 5H), 1,50 - 1,37 (m, 9H).
Síntesis de clorhidrato de 5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-(6-fluoro-1,4-diazepan-1-il)-1H-pirimidin-6-ona (racémico) (71)
A una solución agitada de ferc-butil 4-[5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il]-6-fluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (6-013) (33,0 mg, 0,071 mmol) en DCM (1,5 ml) se añadió cloruro de hidrógeno (0,36 ml, 1,421 mmol, 4 M en dioxano). La mezcla se dejó en agitación durante 3 días antes de concentrar a presión reducida para producir un polvo naranja. El polvo se sonicó en DCM (2 ml) y éter (2 ml). El sólido resultante se recogió mediante filtración al vacío. El sólido marrón recogido se sonicó en metanol, se filtró y el filtrado se concentró para producir un polvo marrón. Este se sonicó en DCM y HCl 2 M en éter dietílico. El sólido resultante se recogió mediante filtración al vacío y se secó al vacío para proporcionar el compuesto del título (9,7 mg, 34 %) en forma de un polvo marrón. LCMS: RT 1,76 min, MI 364, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, DMSO-de) 512,74 (s, 1H), 9,84 (s, 1H), 9,23 (s, 1H), 9,16 (s, 1H), 5,34 (d, J = 44,4 Hz, 1H), 4 ,44-4,29 (m, 1H), 4,27 - 4,12 (m, 2H), 3,98 - 3,86 (m, 1H), 3,62 - 3,42 (m, 3H), 3,31 (s, 1H).
Separación quiral de ferc-butil 4- [5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il] -6-fluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato
ferc-Butil 4- [5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il]-6-fluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato (6-013) (0,15 g, 0,32 mmol) se disolvió a 30 mg/ml en metanol y luego se purificó mediante SFC (Columna = Amy-C (20 mm x 250 mm, 5 ^m; temperatura de la columna 40 °C; caudal = 50 ml/min, BPR = 125 BarG, condiciones isocráticas 35:65 MeOH:CO2). Las fracciones apropiadas que contenían el primer isómero eluyente (Enantiómero 1, estereoquímica absoluta desconocida) se concentraron hasta sequedad proporcionando ferc-butil 4- [5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il]-6-fluoro-1-4-diazepano-1-carboxilato, Enantiómero 1 (6-014) (59,3 mg, 40 %) como un polvo marrón con 100 % ee (RT: 2,25 min; Detalles de la columna: Lux A1 4,6 mm x 250 mm, 5 ^m; Temperatura de la columna: 40 °C; Velocidad de flujo: 4 ml/min; Condiciones isocráticas: 35:65 MeOH:CO2). lCm S: 2,41 min, MI 464,
Método (4LCMS3); 1H NMR (400 MHz, CDCla) 58,86 (s, 1H), 5,20-4,83 (m, 1H), 4 ,19-3,94 (m, 3H), 3 ,92-3,27 (m, 5H), 1,49- 1,40 (m, 9H).
Las fracciones apropiadas que contenían el segundo isómero eluyente (Enantiómero 2, estereoquímica absoluta desconocida) se concentraron hasta sequedad proporcionando ferc-butil 4-[5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il]-6-fluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato, Enantiómero 2 (6-015) (60,4 mg, 41 %) como un polvo marrón con 98,8 % de ee (RT: 2,26 min; Detalles de la columna: LuxA1 4,6 m m x250 mm, 5 ^m; Temperatura de la columna: 40 °C; Velocidad de flujo: 4 ml/min; Isocrático Condiciones: 35:65 MeOH:CO2). Lc Ms : 2,37 min, MI 464, Método (4LCMS3); 1H NMR (400 MHz, CDCla) 58,87 (s, 1H), 5,18 - 4,88 (m, 1H), 4,18 - 3,95 (m, 3H), 3,93 - 3,27 (m, 5H), 1,58 - 1,16 (m, 9H).
Síntesis de clorhidrato 5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-(6-fluoro-1,4-diazepan-1-il)-1H-pirimidin-6-ona, Enantiómero 1 (72)
A una solución agitada de ferc-butil 4-[5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il]-6-fluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato, Eenantiómero 1 (6-014) (0,06 g, 0,128 mmol) en DCM (2 ml) se añadió cloruro de hidrógeno (0,64 ml, 2,55 mmol) (4,0 M en 1,4-dioxano). La mezcla se agitó durante 20 min. Después, la mezcla de reacción se concentró a sequedad y se suspendió en éter. El precipitado resultante se recogió mediante filtración al vacío y se secó al vacío para proporcionar el compuesto del título (42,5 mg, 83 %) en forma de un polvo marrón. LCMS: 1,71 min, MI 364, Método (4LCMS1); 1H NMR (400 MHz, DMSO-de) 512,75 (s, 1H), 9,77 (s, 1H), 9,23 (s, 1H), 9,14 - 8,90 (m, 1H), 5,32 (d, J = 44,9 Hz, 1H), 4,42 - 4,30 (m, 1H), 4,26 - 4,10 (m, 2H), 4,00 - 3,85 (m, 1H), 3,62 - 3,40 (m, 4H).
Síntesis de clorhidrato de 5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-(6-fluoro-1,4-diazepan-1-il)-1H-pirimidin-6-ona, Enantiómero 2 (73)
A una solución agitada de ferc-butil 4-[5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il]-6-fluoro-1,4-diazepano-1-carboxilato, Enantiómero 2 (6-015) (0,06 g, 0,13 mmol) en DCM (2 ml) se añadió cloruro de hidrógeno (1,3 ml de una solución 4 M en 1,4-dioxano, 2,60 mmol). La mezcla se agitó durante 20 min. Después, la mezcla de reacción se concentró a sequedad y se suspendió en éter, lo que provocó la formación de un precipitado marrón. El precipitado se recogió mediante filtración al vacío y se secó al vacío para proporcionar el compuesto del título (51,8 mg, 99 %) en forma de un polvo marrón. LCMS: 2,00 min, MI 364, Método (2LCMS1); 1H NMR (400 MHz, DMSO-de) 512,75 (s, 1H), 9,78 (s, 1H), 9,23 (s, 1H), 9,07 (s, 1H), 5,34 (d, J = 43,9 Hz, 1H), 4,43-4,30 (m, 1H), 4,27 - 4,12 (m, 2H), 3,99-3,87 (m, 1H), 3,65-3,39 (m, 4H).
Biología
Sistemas y métodos de modelo y Ensayos.
Se ensayó la capacidad de los compuestos descritos en la presente descripción para inhibir la actividad de Cdc7 de acuerdo con los métodos descritos a continuación. En general, se encontró que los compuestos de Fórmula I inhiben eficazmente la actividad de Cdc7.
Ensayos bioquímicos de Cdc7
Método 1
Este protocolo describe un método para analizar la actividad de Cdc7/ASK. El ensayo es un ensayo ELISA de 384 pocilios, que utiliza un sustrato de proteína completa (MCM2) y un anticuerpo contra Phospho MCM2 (S53). Se cree que este sitio es específico para la fosforilación de Cdc7/ASK y el ensayo se ha validado utilizando mutantes inactivados.
Reactivos
TBS: 25 mM Tris pH 7,2, 150 mM NaCl. (Diluir la solución madre 10X a 1:10).
Tampón de lavado: TBS 0,05 % Tween 20. (Agregar 100 mL de Tris 1 M pH 7,2, 120 mL de NaCl 5 M y 2 mL e Tween 20 al 100 % por 4 L).
Tampón de reacción de quinasa: 50 mM Tris-HCl pH 8,5, 10 mM MgCh, 1 mM DTT. (Diluir la solución madre 10X a 1:10 y agregar 100 pl de DTT 1 M por 100 ml antes del ensayo).
Tampón de dietanolamina: Dietanolamina 1 M pH 9,8, 0,5 mM MgCh.
Detener la solución: NaOH 1 M.
MCM2 se expresó y purificó internamente y se usó en el ensayo a una concentración de ensayo final de 436 ng/pocillo.
Cdc7/ASK se compra a proveedores comerciales y se utiliza en el ensayo a una concentración de ensayo final de 37,97 ng/pocillo o 20,63 nM.
Se usó ATP como concentración de ensayo final de 2 pM.
Anticuerpo primario: El anti-Fosfo MCM2 de conejo (Anticuerpo S53 (BL3353)), se adquiere de proveedores comerciales a 0,2 mg/ml y se usa a una concentración de ensayo final diluyendo 1:800 en TBS.
Anticuerpo secundario: El anticuerpo anti-conejo/AP es suministrado por la compra a proveedores comerciales a 1 mg/ml y se usa a una concentración de ensayo final diluyendo 1:2000 en TBS.
Reactivo de desarrollo: Disolver una tableta de 20 mg de PNPP (Sigma, producto N2765, 20 mg por tableta) por 20 ml de tampón de dietanolamina (o una tableta de 5 mg de PNPP por 5 ml de tampón de dietanolamina). Cubrir con papel de aluminio y dejar agitando en un agitador de rodillos a temperatura ambiente hasta una hora para que se disuelva.
Métodos
1. Agregar 20 pl de la solución de trabajo 1X de sustrato (MCM2) en TBS a todos los pocillos de una microplaca de quelato de níquel transparente de 384 pocillos para obtener una concentración final de 250 ng/pocillo. Incubar a temperatura ambiente durante al menos 1 hora. Las placas pueden recubrirse previamente durante 1 hora y almacenarse a 4 °C hasta por 8 días.
2. Lavar con TBS Tween 200,05 % (80 pl x 3).
3. Agregar 2 pl de compuestos de prueba 10X, incluido el control positivo, en 40 % DMSO/agua a los pocillos de "prueba". Agregar 2 pl de 40 % DMSO/agua a los pocillos de "control" y "blanco". La concentración final de DMSO será del 4 %.
4. Agregar 13 pl de CDC7/ASK quinasa (solución madre 1,5X) en tampón de reacción de quinasa a los pocillos de "prueba" y "control" para obtener una concentración final de 5 ng/pocillo. Agregar 13 pl de tampón de reacción de quinasa a los pocillos "blanco".
5. Agregar 5 pl de ATP (solución madre 4X) en tampón de reacción de quinasa a todos los pocillos para obtener una concentración final de 2 pM).
6. Incubar a temperatura ambiente durante 90 minutos.
7. Lavar con Tb S Tween 200,05 % (80 pl x 3).
8. Agregar 20 pl de solución de trabajo 1X de anticuerpo primario en TBS a todos los pocillos. Incubar a temperatura ambiente durante 30 minutos.
9. Lavar con TBS Tween 200,05 % (80 pl x 3).
10. Agregar 20 pl de solución de trabajo 1X de anticuerpo secundario en TBS a todos los pocillos. Incubar a temperatura ambiente durante 30 minutos.
11. Lavar con TBS Tween 200,05 % (80 pl x 3).
12. Agregar 20 pl de reactivo de desarrollo 1X a todos los pocillos.
13. Incubar a temperatura ambiente durante 2 horas. Detener la reacción mediante la adición de 20 pl de solución de parada a todos los pocillos y registrar la absorbancia en un lector de placas Pherastar.
Los valores porcentuales de inhibición se calcularon a partir de los valores de absorbancia, usando los valores de control sin compuesto (DMSO) y sin enzima como inhibición del 0 % y del 100 %, respectivamente. La determinación de IC50 se realizó con el software ExcelFit (IDBS) usando el ajuste de la curva 205. Se determinaron los factores Z' para cada placa ensayada y todos estuvieron por encima de 0,5.
Método 2
Este protocolo describe un método para analizar la capacidad de un compuesto para inhibir la actividad de Cdc7 midiendo los niveles de pS40MCM2 en un ensayo de enzima TR-FRET de Cdc7/Dbf4.
Se incubó Cdc7/Dbf42,5 nM con 100 nM de péptido 35-TDALTS(pS)PGRDLP marcado con biotina en presencia de ATP 1 |jM a 25 °C durante 120 minutos. La fosforilación del péptido se detectó usando TR-FRET. El anticuerpo anti-Mcm2 (pS40), el anticuerpo secundario anti-conejo marcado con terbio y estreptavidina-Alexa Fluor488 forman el sistema de detección.
Método 3
Este protocolo describe un método para analizar la actividad de Cdc7/ASK. El ensayo es un ensayo de cambio de movilidad (MSA) sin chip realizado en Carna Biosciences.
Materiales y procedimientos
1. Preparación de la solución del compuesto de prueba.
El compuesto de prueba se disolvió y se diluyó con dimetilsulfóxido (DMSO) para lograr una concentración 100 veces mayor que la especificada por el patrocinador. Luego, la solución se diluyó 25 veces más con tampón de ensayo para preparar la solución final del compuesto de prueba. Los compuestos de referencia para el control del ensayo se prepararon de forma similar.
2. Quinasa
Cdc7/ASK: Cdc7 humano de longitud completa [aminoácidos 1 -574(final) de número de acceso NP_003494.1] se coexpresó como proteína de fusión N-terminal g St (92 kDa) con Dbf4(ASK) [aminoácidos 1 -674(final) de número de acceso NP_006707.1] usando el sistema de expresión de baculovirus. GST-Cdc7 se purificó usando cromatografía de glutatión sefarosa.
3. Procedimientos y reactivos de ensayo
Ensayo de cambio de movilidad sin chip (MSA)
1) Los 5 ml de la solución del compuesto x4, 5 ml de solución de sustrato/ATP/metal x4 y 10 ml de solución de quinasa x2 se prepararon con tampón de ensayo (HEPES 20 mM, Triton X-100 al 0,01 %, DTT 1 mM, pH 7,5) y se mezclaron e incubaron en un pocillo de microplaca de polipropileno de 384 pocillos durante 5 horas a temperatura ambiente. 2) 70 ml de tampón de terminación (QuickScout Screening Assist MSA; Carna Biosciences) se añadieron al pocillo.
3) La mezcla de reacción se aplicó al sistema LabChip (Perkin Elmer), y los picos de péptido del sustrato y del producto se separaron y cuantificaron.
4) La reacción de la quinasa se evaluó mediante la relación de producto calculada a partir de las alturas de los picos de péptidos de producto (P) y sustrato (S) (P/(P+S)).
4. Condiciones de reacción
El tiempo de reacción es 5 horas.
5. Análisis de Datos
El valor de lectura del control de la reacción (mezcla de reacción completa) se estableció como una inhibición del 0 % y el valor de lectura del fondo (enzima (-)) se estableció como una inhibición del 100 %, luego se calculó el porcentaje de inhibición de cada solución de prueba.
El valor de IC50 se calculó a partir de las curvas de concentración contra el % de inhibición ajustando una curva logística de cuatro parámetros.
Resultados
Ensayos de farmacodinámica de células Cdc7
Método 1
Este protocolo describe un método para investigar la inhibición de la actividad Cdc7 de los compuestos midiendo los niveles de pS53MCM2 en las células después del tratamiento.
Reactivos
• Células HCT116 (positivas para P53 de tipo salvaje)
• Medios McCoys 5A (PAA Laboratories Ltd, E15-022)
• FCS al 10 % (Sera Laboratories International Ltd, EU000F Lote: 108005)
• L-glutamina 100X (Invitrogen, 25030-024)
• D-PBS sin CaCl2 y MgCh (Invitrogen, ref. 14190-094)
• Tripsina/EDTA (Invitrogen 25300-054)
2 % BSA en PBS
Tampón de extracción celular (Invitrogen FNN0011)
Cóctel de inhibidores de proteasa (Sigma P-2714)
Solución madre PMSF 0,3 M en DMSO (Sigma P7626)
Anticuerpo -pMCM2 Ser53 de conejo (Bethyl # A300-756A)
Anticuerpo -MCM2 de cabra (Betil # A300-122A)
Anticuerpo -IgG de cabra anti-conejo HRP (Perbio Science UK Ltd 31462)
1X PBS
Tampón de lavado FACE (Triton X100 al 0,02 % en 1xPBS)
Sustrato quimioluminiscente SuperSignal ELISA Pico (Perbio Science UK Ltd 37070) Método
72 horas antes del inicio del experimento colocar en placa 1 x106 células HCT116 en un matraz 150 cm2 en medio McCoys 5A completo (+ 10 % FCS L-glutamina 1X).
Colocar 20 000 células HCT116 por pocillo en una placa de 96 pocillos tratada con TC estándar en 100 pl de medio McCoys 5A completo.
Dejar que las células se asienten durante la noche en la incubadora a 37 °C y 5 % de CO2.
Retirar la placa intermedia de la nevera y colocarla a 37 °C durante la noche para permitir que se equilibre. Tratamiento celular: placa de ensayo celular de 100 pL; volumen de transferencia celular a hijo 3,33 pL; volumen hijo 45 pl; volumen placa madre a hijo 5 pL.
Una vez que se hayan tratado todas las células, llevar las células a la incubadora e incubar durante 6 horas. Diluir el anticuerpo de captura (MCM2 total # A300-122A) 1 en 250 en el volumen requerido de PBS (5 ml por placa de ensayo) y agregar 50 pl a cada pocillo de una placa Hybond excluyendo los pocillos 12E a 12H. En estos pocillos, agregar 50 pl de PBS. Sellar la placa e incubar a temperatura ambiente durante un mínimo de 2 horas.
Descongelar una alícuota del tampón de extracción celular de Invitrogen (FNN0011) en hielo y complementar con el volumen apropiado de cóctel inhibidor de proteasa Sigma (P-2714) y PMSF (concentración final 1 mM de una solución madre 1 M en DMSO).
Después del tiempo de tratamiento celular de 6 horas, vaciar los medios de las placas de ensayo y colocarlos en el congelador a -70 °C durante al menos 5 minutos.
Retirar las placas del congelador y agregar 20 pl de tampón de lisis completo helado en hielo. Incubar las células durante 30 minutos a 4 °C.
Agregar 80 pl por pocillo de BSA al 2 %.
Transferir 80 pl de la placa de lisis a los mismos pocillos de la placa de captura/ELISA. Cubrir con el sello de placa e incubar las placas durante la noche a 4 °C
Lavar las placas con PBS, eliminar cualquier líquido residual restante y agregar 50 pl por pocillo de anticuerpo pMCM2 Ser53 (#A300-756A) diluido 1 en 100 en BSA al 2 %. Cubrir la placa e incubar a temperatura ambiente durante 2 horas con agitación suave.
Lavar las placas con PBS, eliminar el líquido residual e incubar con 50 pl de anticuerpo de cabra anti-conejo (dilución 1 en 800 en BSA al 2 %) durante 1 hora a temperatura ambiente.
Lavar las placas con PBS, eliminar cualquier líquido restante y agregar 50 pl de sustrato SuperSignal Pico mezclado.
Incubar cada placa durante 5 minutos a temperatura ambiente protegiendo las placas de la luz directa (con una placa de cubierta). Leer las placas con detección luminiscente.
Método 2
Este protocolo describe un método para investigar la inhibición de la actividad de Cdc7 midiendo los niveles de pS40MCM2 en las células, después del tratamiento con compuestos.
Reactivos
Células HCT116 (ATCC, #CCL-247)
McCoys 5A con L-glutamina (Cellgro, #10-050-CV)
FCS al 10 % (Cellgro, #35-010-CV)
D-PBS sin CaCl2 y MgCh (Cellgro, #21-031-CV)
Tripsina/EDTA (Cellgro, #25-052-CL)
BSA (Calbiochem, 126593)
Tampón de extracción celular (Invitrogen FNN0011)
Cóctel de inhibidores de proteasa (Sigma P-2714)
PMSF 0,3 M de solución madre en DMSO (Sigma P7626)
Anticuerpo -conejo pMCM2 Ser40 (Abcam, AB133243)
Anticuerpo -MCM2 de cabra (Betil # A300-122A)
Anticuerpo -IgG HRP de cabra anti-conejo (Thermo, 31462)
Sustrato quimioluminiscente SuperSignal ELISA Pico (Perbio Science UK Ltd 37069)
10X PBS (Growcells, MRGF-6236)
Triton X100 (Sigma, P-T8787)
DMSO (Fisher, D128-1)
2-Propanol (J.T. Baker, 9095-03)
Método
Sembrar 1 x 106 células HCT116 en cada uno de dos matraces de 175 cm2 que contienen 30 ml de medio de crecimiento celular e incubar a 37 °C, 5 % de CO2 durante 3 días.
Cosechar las células de un matraz T175 de cm2 y contar.
Diluir con medio de crecimiento celular hasta una densidad celular de 2 x 105. Dispensar 100 j l en cada pocillo (20000 células HCT116/pocillo) de placa(s) de 96 pocillos tratada(s) con TC.
Dejar que las células se asienten durante la noche en la incubadora a 37 °C y 5 % de CO2.
Tratamiento celular: Transferir 0,25 jl/pocillo desde la placa del compuesto a los pocillos de la o las placas de células. Esta es una dilución 1:400 del compuesto en el ensayo.
Una vez que se hayan tratado todas las células, volver a colocar las células en la incubadora e incubar durante 18 horas.
Diluir el anticuerpo de captura (MCM2 total # A300-122A) 1 en 250 en el volumen requerido de PBS (5 mL por placa de ensayo, más 5 mL para el volumen muerto) y agregue 50 j l a cada pocillo de una placa Hybond excepto los pocillos A12 y B12. Sellar la placa e incubar a temperatura ambiente durante un mínimo de 2 horas.
Descongelar una alícuota del tampón de extracción celular de Invitrogen (FNN0011) en hielo y complementar con el volumen apropiado de cóctel inhibidor de proteasa Sigma (P-2714) y PMSF (concentración final 1 mM de una solución madre 1 M en DMSO).
Después del tiempo de tratamiento celular de 6 o 18 horas, vaciar los medios de las placas de ensayo y colocarlos en el congelador a -70 °C durante al menos 5 minutos.
Extraer el líquido restante en las placas de captura Ab previamente preparadas y agregar 200 j l de BSA al 2 % por pocillo. Incubar durante 1 hora a temperatura ambiente.
Retirar las placas del congelador y agregar 20 j l de tampón de lisis completo helado. Incubar las células durante 30 minutos a 4 °C.
Agregar 30 j l por pocillo de BSA al 2 %
Al final de la incubación de 1 hora, lavar las placas de captura/ELISA con tampón de lavado en el lavador de placas BioTek.
Transferir 40 j l por pocillo de la o las placas de lisis a los mismos pocillos en la placa de captura/ELISA. Incubar las células durante la noche a 4 °C.
Al final de la incubación durante la noche, lavar la o las placas ELISA con tampón de lavado en el lavador de placas BioTek.
Preparar el tampón de detección de anticuerpos y dispensar 50 j l en todos los pocillos de las placas ELISA excepto en los pocillos G1 y H1. Cubrir la placa e incubar a temperatura ambiente durante 2 horas con agitación suave.
Al final de las 2 horas de incubación, lavar la o las placas ELISA con tampón de lavado en el lavador de placas BioTek.
Preparar el tampón de anticuerpo conjugado y dispensar 50 j l en todos los pocillos de las placas ELISA.
Cubir la placa e incubar a temperatura ambiente durante 1 hora con agitación suave.
Al final de la incubación de 1 hora, lavar la o las placas ELISA con tampón de lavado en el lavador de placas BioTek.
Preparar el tampón de sustrato y dispensar 50 j l en todos los pocillos de la o las placas ELISA.
Incubar durante un mínimo de 10 minutos y leer las placas en el lector multietiquetas EnVision 2100 (Espejo: luminiscencia (404) y luminiscencia 700 (212); altura de medición: 6,5 mm; tiempo de medición: 0,2 s).
Método 3
Este protocolo describe un método para investigar la inhibición de la actividad de Cdc7 midiendo los niveles de pS53MCM2 en las células, después del tratamiento con compuestos.
Reactivos
• Células SW48
• RPMI 1640 (Sigma, R5886)
FCS al 10 % (Sera Laboratories International Ltd, EU000F Lote: 108005)
L-glutamina 100X (Invitrogen, 25030-024)
Solución D-glucosa (10 %) (Sigma, G8644)
Solución tampón HEPES (Sigma, 83264)
Piruvato de sodio (Sigma, S8636)
PBS (Fisger, BP399-4)
Tripsina/EDTA (Invitrogen 25300-054)
2 % de BSA en PBS
Tampón de extracción celular (Invitrogen FNN0011)
Cóctel de inhibidores de proteasa (Sigma P-2714)
PMSF 0,3 M solución madre en DMSO (Sigma P7626)
Anticuerpo -pMCM2 Ser53 de conejo (Bethyl #A300-756A)
Anticuerpo -MCM2 de cabra (Betil # A300-122A)
Anticuerpo -IgG de cabra anti-conejo HRP (Perbio Science UK Ltd 31462)
Sustrato quimioluminiscente SuperSignal ELISA Pico (Perbio Science UK Ltd 37070)
Método
• Colocar 30000 células SW48 por pocillo en una placa de 96 pocillos tratada con TC estándar en 100 pl de medio RPMI 1640 completo.
Dejar que las células se asienten durante la noche en la incubadora a 37 °C y 5 % de CO2.
Tratamiento celular: preparar una placa de 384 pocillos que contenga 80 pl de PBS/pocillo. El PBS debe estar a temperatura ambiente, lo que se denomina placa intermedia. Transferir 2 pl de compuesto de la placa madre al intermedio (placa secundaria) dilución 1:40, luego 5 pl del intermedio a la placa celular (hija).
Una vez que se hayan tratado todas las células, volver a colocar las células en la incubadora e incubar durante 6 horas.
Diluir el anticuerpo de captura (MCM2 total # A300-122A) 1 en 250 en el volumen requerido de PBS (5 ml por placa de ensayo, más 5 ml para el volumen muerto) y agregar 50 pl a cada pocillo de una placa Hybond. Sellar la placa e incubar a temperatura ambiente durante un mínimo de 2 horas.
Descongelar una alícuota l tampón de extracción celular de Invitrogen (FNN0011) en hielo y complementar con el volumen apropiado de cóctel inhibidor de proteasa Sigma (P-2714) y PMSF (concentración final 1 mM de una solución madre 1 M en DMSO).
Después del tiempo de tratamiento celular de 6 horas, vaciar los medios de las placas de ensayo y colocarlos en el congelador a - 8 0 °C durante al menos 5 minutos.
Retirar las placas del congelador y agregar 20 pl de tampón de lisis completo helado, con el multigotas. Incubar las células durante 30 minutos a 4 °C.
Agregar 80 pl por pocillo de BSA al 2 %.
Extraer el líquido restante de la placa de captura y transferir 80 pl de la placa de lisis a los mismos pocillos en la placa de captura/ELISA, usando el Biomek. Cubrir con el sello de la placa e incubar las placas durante la noche a 4 °C.
Lavar las placas con PBS, eliminar cualquier líquido residual restante y agregar 50 pl por pocillo de anticuerpo pMCM2 Ser53 (#A300-756A) diluido 1 en 100 en BSA al 2 %. Cubrir la placa e incubar a temperatura ambiente durante 2 horas con agitación suave.
Lavar las placas con PBS, eliminar el líquido restante e incubar con 50 pl de anticuerpo de cabra anti-conejo (dilución 1 en 800 en BSA al 2 %) durante 1 hora a temperatura ambiente.
Lavar las placas con PBS, eliminar cualquier líquido restante y agregar 50 pl de sustrato SuperSignal Pico mezclado.
Incubar cada placa durante 5 minutos a temperatura ambiente protegiendo las placas de la luz directa (con una placa de cubierta). Leer las placas con detección luminiscente.
Resultados
Todos los títulos y subtítulos se usan en la presente descripción solo por conveniencia y no deben interpretarse como limitantes de la invención de ninguna manera.
El uso de cualquiera y de todos los ejemplos, o lenguaje ilustrativo (por ejemplo, “tal como”) proporcionados en la presente descripción simplemente tiene el propósito de ilustrar mejor la invención y no representan una limitación en el alcance de la invención a menos que se indique lo contrario. Ningún lenguaje en la descripción debe interpretarse en el sentido de que indica cualquier elemento no incluido en un párrafo como esencial para la práctica de la invención.
Claims (20)
- REIVINDICACIONES
o una sal o solvato del mismo en donde,X se elige de flúor, cloro, bromo, yodo y CN;R2 es un grupo A-B-C en donde,A es un enlace;B está ausente; yC es un heterocicloalquilo de 3 a 7 miembros que está opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5; R1 es un grupo heteroarilo de Fórmula A
Fórmula Aen dondeZ1 se selecciona de C y N,Z2 se selecciona de CRa, NRb, N, O y S,Z3 se selecciona de N y NRc,Z4 y Z5 se seleccionan independientemente de O, N, S, NRd y CRe;Ra se selecciona de hidrógeno, hidroxilo, halógeno, COOR3, C1-C6alquilo, C2-C6alquenilo, C2-C6alquinilo, C0-C6alquilarilo, C0-C6alquilcicloalquilo, C0-C6alquilheterocicloalquilo, C0-C6alquilheteroarilo, C0-C6alquilCN, C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquiloR3, C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquilOR3, C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquilNR3R4, haloC1-C6alquil, NO2, C0-C6alquilNR3R4, C0-C6alquilNR3C0-C6alquilOR4,C0-C6alquilOS(=O)R4, -C0-C6alquilOS(=O)2R4,-C0-C6alquilS(=O)PR4, -OCN, y -SCN, en donde cualquiera de los anteriores está opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5; yRB y RC se seleccionan independientemente de hidrógeno, C1-C6 alquilo y C3-C6 cicloalquilo; oRa y RC se toman juntos para formar un anillo fusionado de 6 miembros opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5;Rd se selecciona de hidrógeno, C1-C6 alquilo y C3-C6 cicloalquilo;Re se selecciona de hidrógeno, hidroxilo, halógeno, OR3, COOR3, C1-C6alquilo, C2-C6alquenilo, C2-C6alquinilo, C0-C6alquilarilo, C0-C6alquilcicloalquilo, C0-C6alquilheterocicloalquilo, C0-C6alquilheteroarilo, C0-C6alquilCN, C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquiloR3, C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquiloOR3, C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquilNR3R4, haloC1-C6alquilo, NO2, C0-C6alquilNR3R4, C0-C6alquilNR3C0-C6alquilOR4,C0-C6alquilOS(=O)R4, -C0-C6alquilOS(=O)2R4,-C0-C6alquilS(=O)PR4, -OCN, y -SCN; odos grupos Re adyacentes, grupos Rc y Re adyacents o Re y Rd adyacentes se toman juntos para formar un anillo fusionado de 6 miembros opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5;cada R3 y R4 se elige cada uno independientemente de H, C1-C6alquilo, C2-C6alquenilo, C2-C6alquinilo, haloC1-C6alquilo, C0-C6alquilarilo, C0-C6alquilcicloalquilo, C0-C6alquilheteroarilo, C0-C6alquilheterocicloalquilo, en donde cualquiera de los anteriores, excepto H, está opcionalmente sustituido con uno o más R5; oR3 y R4 se toman juntos para formar un sistema de anillo carbocíclico o heterocíclico de 3 a 7 miembros, en donde dicho sistema de anillo está opcionalmente sustituido con uno o más R5;cada R5 se elige independientemente de halógeno, hidroxilo, OR6, C1-C10alquilo, C2-C10alquenilo, C2-C10alquinilo, C0-C6alquilarilo, C0-C6alquilcicloalquilo, C0-C6alquilheterocicloalquilo, C0-C6alquilheteroarilo, -C0-C6alquilCN, -C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquilR6, -C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquilOR6, -C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquilNR6R6, -C0-C6alquilC(=O)C0-C6alquilNR6C(=O)OR6, haloC1-C6alquil, NO2 , -C0-C6alquilNR6R6, -C0-C6alquilNR6C0-C6alquilOR6, -C0-C6alquilNR6C0-C6alquilC(=O)R6, -C0-C6alquilOR6, (=O),-C0-C6alquilOC(=O)C0 C6alquilR6, -C0-C6alquilOC(=O)C0-C6alquilNR6R6, -C0-C6alquilOC(=O)C0-C6alquilOR6, -C0-C6alquilOS(=O)R6, -C0-C6alquilOS(=O)2R6, -C0-C6alquiloS(=O)2C0-C6alquilOR6, -C0-C6alquilOS(=O)2C0-C6alquilNR6R6, -C0-C6alquilS(=O)pR6, -C0-C6alquilS(=O)2C0-C6alquilNR6R6, -C0-C6alquilS(=O)C0-C6alquilNR6R6, en donde cada uno de los anteriores está opcionalmente sustituido con R7, ojunto con los átomos de carbono a los que están unidos, dos grupos R5 están unidos para formar un arilo fusionado, heteroarilo, heterocicloalquilo de 3 a 6 miembros o un cicloalquilo de 3 a 6 miembros;cada R6 se elige independientemente de H, C1-C10alquilo, C2-C10alquenilo, C2-C10alquinilo, haloC1-C6alquilo, C0-C6alquilarilo, C0-C6alquilcicloalquilo, C0-C6alquilheteroarilo, C0-C6alquilheterocicloalquilo, en donde cada uno de los anteriores está opcionalmente sustituido con R7; o dos R6 se toman juntos para formar un sistema de anillo carbocíclico o heterocíclico de 3 a 15 miembros, en donde dicho sistema de anillo está opcionalmente sustituido con uno o más R7;cada R7 se elige independientemente de halógeno, hidroxilo, C1-C6alquilo, OC1-C6alquilo y haloC1-C6alquilo; y cada p es independientemente 0, 1 o 2. - 2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde X es cloro.
- 3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, en donde C se selecciona de un heterocicloalquilo de 5 a 7 miembros que está opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5.
- 4. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde C se selecciona de:
cada uno opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5. - 5. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde C se selecciona de:
cada uno opcionalmente sustituido con uno o más grupos R5. - 6. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores en donde R5 se selecciona de flúor, cloro, metilo, trifluorometilo y difluorometilo.
- 7. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores en donde Z1 es C; y/o Z2 es CRa; y/o Z3 es N.
- 8. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores en donde R1 es un grupo heteroarilo de Fórmula A1:
en donde Ra, Z4 y Z5 son como se definen en la reivindicación 1. - 9. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores en donde R1 es un grupo heteroarilo de Fórmula A2:
en donde Ra, Re y Z5 son como se definen en la reivindicación 1; oen donde R1 es un grupo heteroarilo de Fórmula A3:
en donde Ra, Re y Z4 son como se definen en la reivindicación 1. - 10. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 en donde R1 se selecciona de:
- 11. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores en donde Re se selecciona de hidrógeno, hidroxilo, halógeno, Ci-C3alquilo, -OCN, -SCN, -CN y haloCi-C3alquilo.
- 12. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores en donde Ra se selecciona de hidrógeno, hidroxilo, flúor, cloro, metilo, etilo, trifluorometilo y difluorometilo.
- 13. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores en donde R1 se selecciona de:
- 14. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 seleccionado de:terc-butil 4-[5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-6-oxo-1H-pirimidin-4-il] piperidin-1-carboxilato;5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-(4-piperidil)-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-4-[1-(2,2-difluorociclopropanocarbonil) -4-piperidil]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-4-[1-(4-metiltiazol-5-carbonil)-4- piperidil]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-[1-(tiazol-4-carbonil)-4-piperidil]-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-4-[1-(3-metil-1H-pirazol-5-carbonil)-4-piperidil]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-4-[1-(1,5-dimetilpirazol-3-carbonil) -4-piperidil]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-4-[1-(2,5-dimetilpirazol-3-carbonil) -4-piperidil]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-4-[1-(5-metilisoxazol-3-carbonil) -4-piperidil]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-[1-(piridazina-4-carbonil)-4-piperidil]-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-4-(1-isobutil-4-piperidil)-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-tetrahidropirano-4-il-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(5-etil-1H-pirazol-4-il) -4-tetrahidropirano-4-il-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-4-tetrahidropirano-4-il-2-tiazol-5-il-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-metiltiadiazol-5-il) -4-tetrahidropirano-4-il-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-metiloxazol-5-il) -4-tetrahidropirano-4-il-1H-pirimidin-6-ona;5-fluoro-2-(4-metiltiazol-5-il) -4-tetrahidropirano-4-il-1H-pirimidin-6-ona;5-bromo-2-(4-metiltiazol-5-il) -4-tetrahidropirano-4-il-1H-pirimidin-6-ona;5-yodo-2-(4-metiltiazol-5-il) -4-tetrahidropirano-4-il-1H-pirimidin-6-ona;2-(4-metiltiazol-5-il) -6-oxo-4-tetrahidropirano-4-il-1H-pirimidina-5-carbonitrilo;5-cloro-2-(2-hidroxi-4-metil-tiazol-5-il) -4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-4-(4-hidroxi-1-piperidil)-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-4-(4-metil-1-piperidil)-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-[3-(trifluorometil) piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-4-[(3-metilpiperazina-1-il]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-4-[(3R)-3-metilpiperazina-1-il]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-4-[4-(hidroximetil)-1-piperidil]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;4- [5-cloro-2-(4-metiltiazol-5-il) -6-oxo-1H-pirimidin-4-il]-1,4-diazepan-2-ona;5- doro-4-(3,3-difluoro-1-piperidil)-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-4-[3-(hidroximetil)-1-piperidil]-2-(4-metiltiazol-5-il)-lH-pirimidin-6-ona;5-doro-4-[(3S)-3-metilpiperazina-1-il]-2-(4-i r ietiltiazol-5-ii)-1H-pin iT iidin-6-ona;5-doro-2-(4-metiltiazol-5-il) -4-piperazina-1-il-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-etiltiazol-5-il) -4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(3-metil-1H-pirazol-4-il) -4-tetrahidropirano-4-il-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-[3-(trifluorometil) piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-[(3R)-3-(trifluorometil)piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-dorotiazol-5-il) -4-tetrahidropirano-4-il-lH-pirimidin-6-ona;5-cloro-4-tetrahidropirano-4-il-2-[4-(trifluorometil)tiazol-5-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-4-[3-isopropilpiperazina-1-il]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-4-[(3S)-3-isopropilpiperazina-1-il]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;-cloro-4-tetrahidropirano-4-il-2-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(2-metilpirazol-3-il) -4-tetrahidropiran-4-il-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(5-metil-1H-pirazol-4-il) -4-morfolino-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-4-morfolino-2-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-4-[2-metilpiperazina-1-il]-2-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-4-[(2R)-2-metilpiperazina-1-il]-2-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-4-[3-metilmorfolin-4-il]-2-(1H-pirrolo [2,3-b] piridin-3-il)-lH-pirimidin-6-ona;5-doro-4-[(3R)-3-metilmorfolin-4-il]-2-(1H-pirrolo [2,3-b] piridin-3-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-4-[3-metilmorfolin-4-il]-2-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-4-[(3R)-3-metilmorfolin-4-il]-2-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirimidin-6-ona; 5-doro-4-[2-metilpiperazina-1-il]-2-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-4-[(2R) -2-metilpiperazin-1-il]-2-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirimidin-6-ona; 5-cloro-4-[3-metilmorfolin-4-il]-2-pirazolo[1,5-a] piridin-3-il-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-4-[(3R)-3-metilmorfolin-4-il]-2-pirazolo [1,5-a] piridin-3-il-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-4-[2-metilpiperazina-1-il]-2-(lH-pirrolo [2,3-b]piridin-3-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-4-[(2R)-2-metilpiperazin-1-il]-2-(1H-pirrolo [2,3-b] piridin-3-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-4-(6,6-difluoro-1,4-diazepan-1-il)-2-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirimidin-6-ona; 5-cloro-2-(5-doro-1H-pirazol-4-il)-4-[(2R) -2-metilpiperazina-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-4-(6,6-difluoro-1,4-diazepan-1-il)-2-(1H-pirrolo [2,3-b] piridina-3 -il)-1H-pirimidina-6- ona; 5-doro-4-(2,2-dimetilpiperazin-1-il)-2-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirimidin-6-ona; 5-doro-4-[2-metilpiperazina-1-il]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-4-[(2R)-2-metilpiperazina-1-il]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(3-metilisoxazol-4-il)-4-[(2R) -2-metilpiperazina-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-4-[3-metilmorfolin-4-il]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-4-[(3R)-3-metilmorfolin-4-il]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-4-(6,6-difluoro-1,4-diazepan-1-il)-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-2-(5-doro-1H-pirazol-4-il)-4-[3-metilmorfolin-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-2-(5-doro-1H-pirazol-4-il)-4-[(3R)-3-metilmorfolin-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-2-(4-metiltiazol-5-il)-4-[2-(trifluorometil) piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-4-[2-(difluorometil)piperazin-1-il]-2-(4-metiltiazol-5-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-4-(6-fluoro-1,4-diazepan-1-il)-2-(4-metiltiazol-5-il)-lH-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[2-metilpiperazina-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[(2R) -2-metilpiperazina-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-4-[2-metilpiperazin-1-il]-2-(2-metilpirazol-3-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-4-[(2R)-2-metilpiperazina-1-il]-2-(2-metilpirazol-3-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[3-metilmorfolin-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[(3R)-3-metilmorfolin-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-(6,6-difluoro-1,4-diazepan-1-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-2-(2-metilimidazol-1-il)-4-[3-metilmorfolin-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-2-(2-metilimidazol-1-il)-4-[(3R)-3-metilmorfolin-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(5-doro-1H-pirazol-4-il) -4-(6,6-difluoro-1,4-diazepan-1-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-4-(6,6-difluoro-1,4-diazepan-1-il)-2-[4-(trifluorometil) tiazol-5-il]-lH-pirimidin-6-ona; 5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[2-(difluorometil)piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[2-(trifluorometil) piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-(6-fluoro-1,4-diazepan-1-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[2-(difluorometil)piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[(2S)-2-(difluorometil)piperazina-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[(2R)-R-(difluorometil) piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[6-fluoro-1,4-diazepan-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[(6S) -6-fluoro-1,4-diazepan-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[(6R) -6-fluoro-1,4-diazepan-1-il]-1H-pirimidina-6-ona, o una sal o solvato del mismo.
- 15. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, seleccionado de:5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[2-metilpiperazina-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[(2R) -2-metilpiperazina-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-doro-2-(4-dorotiazol-5-il)-4-[3-metilmorfolin-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[(3R)-3-metilmorfolin-4-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-(6,6-difluoro-1,4-diazepan-1-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[2-(difluorometil)piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[2-(trifluorometil) piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-(6-fluoro-1,4-diazepan-1-il)-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[2-(difluorometil)piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[(2S)-2-(difluorometil)piperazina-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[(2R)-R-(difluorometil)piperazin-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[6-fluoro-1,4-diazepan-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[(6R) -6-fluoro-1,4-diazepan-1-il]-1H-pirimidin-6-ona;5-cloro-2-(4-clorotiazol-5-il)-4-[(6S) -6-fluoro-1,4-diazepan-1-il]-1H-pirimidina-6-ona,o una sal o solvato del mismo.
- 16. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 15, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, en mezcla con un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable.
- 17. Un compuesto como se definió en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, para usar en terapia.
- 18. Un compuesto como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, para usar en el tratamiento de un trastorno proliferativo.
- 19. Un compuesto como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, para usar en el tratamiento del cáncer.
- 20. Una combinación que comprende un compuesto, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, con uno o más agentes terapéuticos adicionales.
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