ES2870524T3

ES2870524T3 - Derivado de piridina como inhibidor de ASK1, y método de preparación y uso del mismo

Info

Publication number: ES2870524T3
Application number: ES18741136T
Authority: ES
Inventors: Chengde Wu; Tao Yu; Ning Li; Shuhui Chen
Original assignee: Fujian Cosunter Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Fujian Cosunter Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2017-01-22
Filing date: 2018-01-22
Publication date: 2021-10-27
Anticipated expiration: 2038-01-22
Also published as: CA3050346A1; SG11201906579UA; WO2018133866A1; CN109071538A; ZA201904737B; BR112019014756A2; EA201991693A1; DK3572412T3; PH12019501688A1; AU2018209574B2; JP6650552B2; EA037005B1; EP3572412A4; KR102089234B1; EP3572412B1; CA3050346C; US20200031823A1; MX2019008698A; CN109071538B; MY174821A

Abstract

Un compuesto como se muestra en la fórmula (II), una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un tautómero del mismo, **(Ver fórmula)** al menos uno de X1, X2 y X3 es N, el resto de los cuales es CH; n se selecciona de 0 o 1; R1 se selecciona de H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, o se selecciona del grupo que consiste en alquilo de C1-4, heteroalquilo de C1-4, heterocicloalquilo de 3-6 miembros y heteroarilo de 5-6 miembros, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 R; R2 se selecciona de H, F, Cl, Br, I; R3 se selecciona de H, F, Cl, Br, I, OH, NH2; R se selecciona de F, Cl, Br, I, OH, NH2, o se selecciona del grupo que consiste en alquilo de C1-3, alcoxi de C1-3 y heterocicloalquilo de 3-6 miembros, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 R'; R' se selecciona del grupo que consiste en F, Cl, Br, I, OH, NH2 y alquilo de C1-3; cada uno de los "hetero" en el heteroalquilo de C1-4, heteroarilo de 5-6 miembros y heterocicloalquilo de 3-6 miembros se selecciona independientemente del grupo que consiste en -NH-, N, -O- y -S-; en cualquiera de los casos anteriores, el número del heteroátomo se selecciona independientemente de 1, 2 o 3.

Description

DESCRIPCIÓN

Derivado de piridina como inhibidor de ASK1, y método de preparación y uso del mismo

Campo de invención

La presente invención se refiere a un compuesto como se muestra en la fórmula (II), un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y a un uso del mismo en la fabricación de un medicamento para tratar enfermedades relacionadas con ASK1.

Técnicas anteriores

La cinasa 1 reguladora de la señal de apoptosis (ASK1) es un miembro de la familia de la proteína cinasa cinasa cinasa activada por mitógenos (MAP3K). ASK1 puede activarse mediante una variedad de estímulos que incluyen estrés oxidativo, especies reactivas de oxígeno (ROS), LPS, TNF-a, FasL, estrés del retículo endoplásmico, aumento de la concentración de calcio intracelular, y similares. ASK1 responde a la variedad de estímulos activando proteína cinasas activadas por mitógenos JNK (cinasa N-terminal c-Jun) y p38, e induce una variedad de apoptosis a través de las señales que implican la ruta de muerte celular mitocondrial. La activación y la señalización de a Sk 1 desempeñan un papel importante en una amplia gama de enfermedades, que incluyen enfermedades neurodegenerativas, enfermedades cardiovasculares, enfermedades inflamatorias, enfermedades autoinmunes, y trastornos metabólicos. Por lo tanto, cuando el paciente padece una enfermedad neurodegenerativa, una enfermedad cardiovascular, una inflamación, una enfermedad autoinmune, y una enfermedad metabólica, la vida del paciente puede mejorarse mediante el uso de inhibidores de ASK1 como agentes terapéuticos. En el documento WO 2013/112741 se describen algunos inhibidores de ASK1.

Contenido de la presente invención

La presente invención proporciona un compuesto como se muestra en la fórmula (II), una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un tautómero del mismo,

al menos uno de X1 , X2 y X3 es N, el resto de los cuales es CH;

n se selecciona de 0 o 1;

R1 se selecciona de H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, o se selecciona del grupo que consiste en alquilo de C1-4, heteroalquilo de C1-4, heterocicloalquilo de 3-6 miembros y heteroarilo de 5-6 miembros, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con R;

R2 se selecciona de H, F, Cl, Br, I;

R3 se selecciona de H, F, Cl, Br, I, OH, NH2;

R se selecciona de F, Cl, Br, I, OH, NH2, o se selecciona del grupo que consiste en alquilo de C1-3, alcoxi de C1-3 y heterocicloalquilo de 3-6 miembros, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con 1,2 o 3 R’;

R’ se selecciona del grupo que consiste en F, Cl, Br, I, OH, NH2 y alquilo de C1-3;

cada uno de los “hetero” en el heteroalquilo de C1-4, heteroarilo de 5-6 miembros y heterocicloalquilo de 3-6 miembros se selecciona independientemente del grupo que consiste en -NH-, N, -O- y -S-;

en cualquiera de los casos anteriores, el número del heteroátomo se selecciona independientemente de 1,2 o 3. En algunas realizaciones de la presente invención, el R anterior se selecciona de F, Cl, Br, I, OH, NH2, o se seleccionado del grupo que consiste en Me,

cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con 1,2 o 3 R’;

En algunas realizaciones de la presente invención, el R anterior se selecciona del grupo que consiste en F, Cl, Br, I, OH, NH2, Me,

En algunas realizaciones de la presente invención, el Ri anterior se selecciona de H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, o seleccionado del grupo que consiste en alquilo de C1-3, alcoxi de C1-3, alquilamino de C1-3, morfolinilo y piridilo, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 R, y otras variables son como se definen en la presente invención.

En algunas realizaciones de la presente invención, el R1 anterior se selecciona de H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, o seleccionado del grupo que consiste en Me,

cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 R, y otras variables son como se definen en la presente invención.

En algunas realizaciones de la presente invención, el R1 anterior se selecciona del grupo que consiste en H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, Me,

y otras variables son como se definen en la presente invención.

En algunas realizaciones de la presente invención, el resto anterior

se selecciona del grupo que consiste en

y otras variables son como se definen en la presente invención.

En algunas realizaciones de la presente invención, el resto anterior

se selecciona del grupo que consiste en

' ' yr=H _n

yO

y otras variables son como se definen en la presente invención.

Otras realizaciones de la presente invención pueden obtenerse mediante la combinación arbitraria de las variables anteriores.

En algunas realizaciones de la presente invención, el compuesto anterior, la sal farmacéuticamente aceptable del mismo y el tautómero del mismo se selecciona del grupo que consiste en

en el que X1, X2, X3, R1, R2 y R3 son como se definen en la presente invención.

en el que,

R1, R2 y R3 son como se definen en la presente invención.

La presente invención también proporciona un compuesto como se muestra en la fórmula (I), una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un tautómero del mismo:

al menos uno de X1, X2 y X3 es N, el resto de los cuales es CH;

n es 0 o 1;

En algunas realizaciones de la presente invención, el resto anterior

N -

> - C * 3 £ X\

se selecciona del grupo que consiste en

En algunas realizaciones de la presente invención, el resto anterior

se selecciona del grupo que consiste en

En algunas realizaciones de la presente invención, el resto anterior

D>— i * •X 1,

*3

se selecciona del grupo que consiste en

y otras variables son como se definen en la presente invención.

En algunas realizaciones de la presente invención, el resto anterior

se selecciona del grupo que consiste en

y otras variables son como se definen en la presente invención.

en el que Xi, X2 y X3 son como se definen en la presente invención.

en el que n es como se define en la presente invención.

La presente invención también proporciona un compuesto, una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un tautómero del mismo que se selecciona del grupo que consiste en

La presente invención también proporciona una composición farmacéutica, que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto anterior o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo como ingrediente activo, y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

La presente invención también proporciona un uso del compuesto anterior o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la fabricación de un medicamento para tratar enfermedades relacionadas con ASK1.

La presente invención también proporciona un uso de la composición anterior en la fabricación de un medicamento para tratar enfermedades relacionadas con ASK1.

Efecto técnico

Como nuevo inhibidor de ASK1, el compuesto de la presente invención tiene un efecto inhibidor significativo contra ASK1. Mientras tanto, el compuesto de la presente invención tiene una buena capacidad para modular una diana debido a su buena solubilidad, permeabilidad, y similares, direccionamiento específico, y estabilidad metabólica.

Definición y descripción

A menos que se indique lo contrario, los siguientes términos, cuando se usan en las descripciones y reivindicaciones de la presente invención, tienen los siguientes significados. Un término o frase específico no debe considerarse indefinido o poco claro en ausencia de una definición particular, sino que debe entenderse en el sentido común. Cuando un nombre comercial aparece aquí, se pretende que se refiera a su correspondiente producto básico o ingrediente activo del mismo. La expresión “farmacéuticamente aceptable” se usa aquí en términos de aquellos compuestos, materiales, composiciones y/o formas de dosificación que son adecuados para uso en contacto con tejidos humanos y animales dentro del alcance de un juicio médico confiable, sin toxicidad excesiva, irritación, reacción alérgica u otros problemas o complicaciones, acordes con una relación beneficio/riesgo razonable.

La expresión “sal farmacéuticamente aceptable” se refiere a una sal del compuesto de la presente invención que se prepara haciendo reaccionar el compuesto que tiene un sustituyente específico de la presente invención con un ácido o base relativamente no tóxico. Cuando el compuesto de la presente invención contiene un grupo funcional relativamente ácido, se puede obtener una sal de adición de base poniendo en contacto la forma neutra del compuesto con una cantidad suficiente de base en una disolución pura o un disolvente inerte adecuado. La sal de adición de base farmacéuticamente aceptable incluye una sal de sodio, potasio, calcio, amonio, amina orgánica, o magnesio, o sales similares. Cuando el compuesto de la presente invención contiene un grupo funcional relativamente básico, se puede obtener una sal de adición de ácido poniendo en contacto la forma neutra del compuesto con una cantidad suficiente de ácido en una disolución pura o un disolvente inerte adecuado. Ejemplos de la sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable incluyen una sal de ácido inorgánico, en la que el ácido inorgánico incluye, por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido nítrico, ácido carbónico, bicarbonato, ácido fosfórico, monohidrogenofosfato, dihidrogenofosfato, ácido sulfúrico, hidrogenosulfato, ácido yodhídrico, ácido fosforoso, y similares; y una sal de ácido orgánico, en la que el ácido orgánico incluye, por ejemplo, ácido acético, ácido propiónico, ácido isobutírico, ácido maleico, ácido malónico, ácido benzoico, ácido succínico, ácido subérico, ácido fumárico, ácido láctico, ácido mandélico, ácido ftálico, ácido bencenosulfónico, ácido p-toluensulfónico, ácido cítrico, ácido tartárico, y ácido metanosulfónico, y similares; y una sal de aminoácido (tal como arginina y similares), y una sal de un ácido orgánico tal como ácido glucurónico y similares (refiérase a Berge et al., "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Science 66: 1-19 (1977)). Ciertos compuestos específicos de la presente invención que contienen grupos funcionales tanto básicos como ácidos pueden convertirse en cualquier sal de adición de ácido o base.

Preferiblemente, poniendo la sal en contacto con una base o un ácido de una manera convencional, y después separando el compuesto original, se regenera así la forma neutra del compuesto. La diferencia entre la forma original del compuesto y sus diversas formas de sal radica en propiedades físicas específicas, tal como la diferente solubilidad en un disolvente polar.

La “sal farmacéuticamente aceptable” usada aquí pertenece a un derivado del compuesto de la presente invención, en el que el compuesto original se modifica formando una sal con un ácido o una base. Los ejemplos de la sal farmacéuticamente aceptable incluyen, pero no se limitan a, una sal de ácido inorgánico o de ácido orgánico de un resto básico tal como una amina, una sal de metal alcalino o una sal orgánica de un resto ácido tal como ácido carboxílico, y similares. La sal farmacéuticamente aceptable incluye sal no tóxica convencional o sal de amonio cuaternario del compuesto original, tal como una sal formada por un ácido inorgánico no tóxico o un ácido orgánico. La sal no tóxica convencional incluye, pero no se limita a, la sal derivada de un ácido inorgánico y un ácido orgánico, en la que el ácido inorgánico o ácido orgánico se selecciona del grupo que consiste en ácido 2-acetoxibenzoico, ácido 2-hidroxietanosulfónico, ácido acético, ácido ascórbico, ácido bencenosulfónico, ácido benzoico, bicarbonato, ácido carbónico, ácido cítrico, ácido edético, ácido etanodisulfónico, ácido etanosulfónico, ácido fumárico, glucoheptosa, ácido glucónico, ácido glutámico, ácido glicólico, ácido bromhídrico, ácido clorhídrico, hidroyoduro, hidroxilo, hidroxinaftaleno, ácido isetiónico, ácido láctico, lactosa, ácido dodecilsulfónico, ácido maleico, ácido málico, ácido mandélico, ácido metanosulfónico, ácido nítrico, ácido oxálico, ácido pamoico, ácido pantoténico, ácido fenilacético, ácido fosfórico, ácido poligalactanal, ácido propiónico, ácido salicílico, ácido esteárico, ácido subacético, ácido succínico, ácido sulfámico, ácido sulfanílico, ácido sulfúrico, tanino, ácido tartárico, y ácido p-toluenosulfónico.

La sal farmacéuticamente aceptable de la presente invención se puede preparar a partir del compuesto original que contiene un resto ácido o básico mediante un método químico convencional. Generalmente, dicha sal se puede preparar haciendo reaccionar la forma de ácido o base libre del compuesto con una cantidad estequiométrica de una base o ácido apropiado en agua o en un disolvente orgánico o en una mezcla de los mismos. Generalmente, se prefieren medios no acuosos tales como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol, o acetonitrilo.

Además de la forma de sal, el compuesto proporcionado por la presente invención también existe en forma de profármaco. El profármaco del compuesto descrito aquí es el compuesto que experimenta fácilmente un cambio químico en condiciones fisiológicas para convertirse en el compuesto de la presente invención. Además, el profármaco se puede convertir en el compuesto de la presente invención mediante un método químico o bioquímico en un entorno in vivo.

Ciertos compuestos de la presente invención pueden existir en forma no solvatada o solvatada, incluida la forma hidratada. Generalmente, la forma solvatada es equivalente a la forma no solvatada, y ambas están englobadas dentro del alcance de la presente invención.

Ciertos compuestos de la presente invención pueden tener un átomo de carbono asimétrico (centro óptico) o un doble enlace. El racemato, el diastereómero, el isómero geométrico y el isómero individual están todos englobados dentro del alcance de la presente invención.

A menos que se especifique lo contrario, la configuración absoluta de un centro estereogénico está representada por un enlace sólido acuñado (>**) y un enlace discontinuo acuñado ( *‘1' ), una línea de onda (jj jJ ) representa un enlace sólido acuñado ( > * ) o un enlace discontinuo acuñado (■*''* ), y la configuración relativa de un centro estereogénico está representada por un enlace sólido lineal ) y un enlace discontinuo lineal ). Cuando el compuesto descrito aquí contiene un doble enlace olefínico u otros centros asimétricos geométricos, los isómeros geométricos E y Z están incluidos a menos que se especifique lo contrario. Asimismo, todas las formas tautoméricas están englobadas dentro del alcance de la presente invención.

El compuesto de la presente invención puede tener una forma geométrica o estereoisomérica específica. La presente invención contempla todos estos compuestos, incluyendo el isómero cis y trans, el enantiómero (-) y (+), el enantiómero (R) y (S), el diastereoisómero, el isómero (D), el isómero (L), y mezcla racémica y otras mezclas, por ejemplo una mezcla enriquecida en enantiómero o diastereoisómero, todos los cuales están englobados dentro del alcance de la presente invención. El sustituyente tal como alquilo puede tener un átomo de carbono asimétrico adicional. Todos estos isómeros y mezclas de los mismos están englobados dentro del alcance de la presente invención.

El isómero (R) y (S) ópticamente activo, o el isómero D y L, se pueden preparar usando síntesis quiral o reactivos quirales u otras técnicas convencionales. Si se va a obtener un tipo de enantiómero de cierto compuesto de la presente invención, el enantiómero puro deseado se puede obtener mediante síntesis asimétrica o acción de derivación del auxiliar quiral, seguido de la separación de la mezcla diastereoisomérica resultante y escisión del grupo auxiliar. Alternativamente, cuando la molécula contiene un grupo funcional básico (tal como amino) o un grupo funcional ácido (tal como carboxilo), el compuesto reacciona con un ácido o base ópticamente activo apropiado para formar una sal del isómero diastereomérico, que entonces se somete a resolución diastereomérica mediante el método convencional en la técnica para dar el enantiómero puro. Además, el enantiómero y el diastereoisómero se aíslan generalmente mediante cromatografía que usa una fase estacionaria quiral y opcionalmente se combina con un método de derivación químico (tal como carbamato generado a partir de amina).

El compuesto de la presente invención puede contener una proporción no natural de isótopo atómico en uno o más de un átomo o átomos que constituyen el compuesto. Por ejemplo, el compuesto puede marcarse radiactivamente con un isótopo radiactivo, tal como tritio (3H), yodo-125 (125I), o C-14 (14C). Todas las variaciones isotópicas del compuesto de la presente invención, ya sean radiactivas o no, están englobadas dentro del alcance de la presente invención.

La expresión “vehículo farmacéuticamente aceptable” se refiere a cualquier agente o medio portador que sea capaz de suministrar una cantidad eficaz de la sustancia activa de la presente invención, no interfiera con la actividad biológica de la sustancia activa, y no tenga efectos secundarios tóxicos en el hospedante o paciente. El vehículo representativo incluye agua, aceite vegetal y mineral, base de crema, base de loción, base de ungüento, y similares. La base incluye un agente de suspensión, un espesante, un potenciador de la penetración, y similares. Sus formulaciones son bien conocidas por los expertos en el campo cosmético o en el campo farmacéutico tópico. La información adicional sobre el vehículo se puede consultar en Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21a Ed., Lippincott, Williams & Wilkins (2005), cuyos contenidos se incorporan aquí como referencia.

El término “excipiente” se refiere generalmente al portador, diluyente y/o vehículo requerido para formular una composición farmacéutica eficaz.

Para un medicamento o un agente farmacológicamente activo, la expresión “cantidad eficaz” o “cantidad terapéuticamente eficaz” se refiere a una cantidad no tóxica pero suficiente para lograr un efecto deseado del medicamento o del agente. Para la forma de dosificación oral de la presente invención, una “cantidad eficaz” de la sustancia activa en la composición se refiere a una cantidad requerida para lograr un efecto deseado cuando se combina con otra sustancia activa en la composición. La cantidad eficaz varía de una persona a otra y se determina en función de la edad y el estado general del receptor, así como de la sustancia activa específica. El experto en la técnica puede determinar la cantidad eficaz apropiada en un caso individual basándose en un experimento de rutina.

La expresión “ingrediente activo”, “agente terapéutico”, “sustancia activa” o “agente activo” se refiere a una entidad química que puede tratar eficazmente el trastorno, enfermedad o afección diana.

“Opcional” u “opcionalmente” significa que el evento o condición subsiguiente puede ocurrir, pero no es un requisito, que el término incluye el caso en el que ocurre el evento o condición y el caso en el que no ocurre el evento o condición.

El término “sustituido” significa que uno o más de un átomo o átomos de hidrógeno en un átomo específico están sustituidos con el sustituyente, incluyendo las variantes de deuterio e hidrógeno, siempre que la valencia del átomo específico sea normal y el compuesto sustituido sea estable. Cuando el sustituyente es un oxígeno (es decir, = O), significa que dos átomos de hidrógeno están sustituidos. Las posiciones en un anillo aromático no se pueden sustituir con una cetona. La expresión “opcionalmente sustituido” significa que un átomo puede estar sustituido con un sustituyente o no; a menos que se especifique lo contrario, el tipo y número del sustituyente puede ser arbitrario siempre que sea químicamente alcanzable.

Cuando cualquier variable (tal como R) aparece en la constitución o estructura del compuesto más de una vez, la definición de la variable en cada caso es independiente. Así, por ejemplo, si un grupo está sustituido con 0-2 R, el grupo puede estar opcionalmente sustituido con hasta dos R, en el que la definición de R en cada caso es independiente. Además, se permite una combinación del sustituyente y/o la variante del mismo solo cuando la combinación da como resultado un compuesto estable.

Cuando el número de un grupo enlazante es 0, tal como -(CRR)ü-, significa que el grupo enlazante es un enlace sencillo.

Cuando una de las variables se selecciona de un enlace sencillo, significa que los dos grupos enlazados por el enlace sencillo están conectados directamente. Por ejemplo, cuando L en A-L-Z representa un enlace sencillo, la estructura de A-L-Z es en realidad A-Z.

Cuando un sustituyente está vacante, significa que el sustituyente no existe. Por ejemplo, cuando X está vacante en A-X, la estructura de A-X es en realidad A. Cuando un enlace de un sustituyente puede reticularse con más de un átomo en un anillo, dicho sustituyente puede enlazarse a cualquier átomo del anillo. Por ejemplo, la unidad estructural

significa que el sustituyente R puede estar ubicado en cualquier posición del ciclohexilo o ciclohexadieno. Cuando un sustituyente enumerativo no indica mediante cuál átomo está unido a un compuesto incluido en la fórmula química general pero no mencionado específicamente, dicho sustituyente puede estar enlazado por cualquiera de sus átomos. Por ejemplo, el piridinilo como sustituyente puede estar unido al grupo sustituido mediante cualquier átomo de carbono en el anillo de piridina. Cuando el grupo enlazante enumerativo no indica la dirección de enlace, la dirección de enlace es arbitraria; por ejemplo, el grupo de enlace L contenido en

es -MW-, entonces -MW- puede unir el anillo A y el anillo B para formar

en la misma dirección que el orden de lectura de izquierda a derecha, y formar

en la dirección contraria al orden de lectura de izquierda a derecha. Se permite una combinación de grupo enlazante, sustituyentes y/o variantes de los mismos solo cuando dicha combinación puede dar como resultado un compuesto estable.

A menos que se especifique lo contrario, el término “hetero” representa un heteroátomo o un grupo heteroatómico (por ejemplo, un grupo de átomos que contiene un heteroátomo), incluyendo el átomo, excepto carbono (C) e hidrógeno (H), y el grupo de átomos que contiene el heteroátomo anterior, por ejemplo incluyendo oxígeno (O), nitrógeno (N), azufre (S), silicio (Si), germanio (Ge), aluminio (Al), boro (B), -O-, -S-, =O, =S, -C(=O)O-, -C(=O)-, -C(=S)-, -S(=O), -S(=O)2-, y el grupo que consiste en C(=O)N(H)-, -N(H)-, -C(=NH)-, -S(=O)2N(H)- y -S(=O)N(H)-, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido.

A menos que se especifique lo contrario, el término “anillo” se refiere a un cicloalquilo, heterocicloalquilo, cicloalquenilo, heterocicloalquenilo, cicloalquinilo, heterocicloalquinilo, arilo, o heteroarilo sustituidos o no sustituidos. El denominado anillo incluye un solo anillo, un anillo de enlace, un anillo en espiral, un anillo condensado, o un anillo con puente. El número del átomo en el anillo se define generalmente como el número de miembros del anillo, por ejemplo un “anillo de 5-7 miembros” significa que de 5 a 7 átomos están dispuestos en un anillo. A menos que se especifique lo contrario, el anillo contiene opcionalmente 1 a 3 heteroátomos. Por tanto, un “anillo de 5-7 miembros” incluye, por ejemplo, fenilo, piridinilo, y piperidinilo; por otro lado, la expresión “anillo heterocicloalquilo de 5-7 miembros” incluye piridilo y piperidinilo, pero excluye fenilo. El término “anillo” también incluye un sistema anular que contiene al menos un anillo, en el que cada anillo cumple independientemente la definición anterior.

A menos que se especifique lo contrario, el término “heterociclo” se refiere a un anillo monocíclico, bicíclico o tricíclico estable que contiene un heteroátomo o un grupo heteroatómico, que puede estar saturado, parcialmente insaturado, o insaturado (aromático), y puede contener átomos de carbono y 1, 2, 3 o 4 heteroátomos anulares seleccionados independientemente del grupo que consiste en N, O y S, en el que cualquiera del heterociclo anterior puede condensarse con un anillo de benceno para formar un anillo bicíclico. Los heteroátomos de nitrógeno y azufre se pueden oxidar opcionalmente (es decir, NO y S(O)p, p es 1 o 2). El átomo de nitrógeno puede estar sustituido o no sustituido (es decir, N o NR, en el que R es H u otros sustituyentes ya definidos aquí). El heterociclo se puede unir al grupo colgante de cualquier heteroátomo o átomo de carbono para formar una estructura estable. Si el compuesto resultante es estable, el heterociclo descrito aquí puede tener una sustitución en una posición de carbono o nitrógeno. El átomo de nitrógeno del heterociclo está opcionalmente cuaternizado. En una realización preferida, cuando el número total de átomos de S y O del heterociclo es más de 1, el heteroátomo no es adyacente entre sí. En otra realización preferida, el número total de átomos de S y O del heterociclo no es más de 1. Como se usa aquí, la expresión “grupo heterocíclico aromático” o “heteroarilo” se refiere a un anillo aromático heterocíclico estable monocíclico o bicíclico de 5, 6 o 7 miembros o bicíclico de 7, 8, 9 o 10 miembros que contiene átomos de carbono y 1,2, 3 o 4 heteroátomos anulares seleccionados independientemente de N, O y S. El átomo de nitrógeno puede estar sustituido o no sustituido (es decir, N o NR, en el que R es H u otros sustituyentes ya definidos aquí). Los heteroátomos de nitrógeno y azufre se pueden oxidar opcionalmente (es decir, NO y S(O)p, p es 1 o 2). Vale la pena señalar que el número total de átomos de S y O de un heterociclo aromático no es más de uno. El anillo con puente también se incluye en la definición del heterociclo. Un anillo con puente se forma cuando uno o más de un átomo (es decir, C, O, N o S) enlaza dos átomos de carbono o nitrógeno no adyacentes. Un anillo con puente preferido incluye, pero no se limita a, un átomo de carbono, dos átomos de carbono, un átomo de nitrógeno, dos átomos de nitrógeno, y un grupo carbono-nitrógeno. Vale la pena señalar que un puente siempre convierte un anillo monocíclico en un anillo tricíclico. En un anillo con puente, el sustituyente en el anillo también puede estar presente en el puente.

Los ejemplos del compuesto heterocíclico incluyen, pero no se limitan a: acridinilo, azocinilo, bencimidazolilo, benzofuranilo, benzomercaptofuranilo, benzomercaptofenilo, benzoxazolilo, benzoxazolinilo, benzotiazolilo, benzotriazolilo, benzotetrazolilo, benzoisoxazolilo, benzoisotiazolilo, benzoimidazolinilo, carbazolilo, 4aH-carbazolilo, carbolinilo, cromanilo, cromeno, cinolinilo, decahidroquinolinilo, 2H,6H-1,5,2-ditiazinilo, dihidrofuro[2,3-¿>]tetrahidrofuranilo, furanilo, furazanilo, imidazolidinilo, imidazolinilo, imidazolilo, 1 H-indazolilo, indolenilo, indolinilo, indolizinilo, indolilo, 3H-indolilo, isobenzofuranilo, isoindolilo, isoindolinilo, isoquinolinilo, isotiazolilo, isoxazolilo, metilendioxifenilo, morfolinilo, naftiridinilo, octahidro-isoquinolinilo, oxadiazolilo, 1,2,3-oxadiazolilo, 1,2,4-oxadiazolilo, 1.2.5- oxadiazolilo, 1,3,4-oxadiazolilo, oxazolidinilo, oxazolilo, hidroxindolilo, pirimidinilo, fenantridinilo, fenantrolinilo, fenazina, fenotiazina, benzoxantinilo, fenoloxazinilo, ftalazinilo, piperazinilo, piperidinilo, piperidonilo, 4-piperidonilo, piperonilo, pteridinilo, purinilo, piranilo, pirazinilo, pirazolidinilo, pirazolinilo, pirazolilo, piridazinilo, pirido-oxazolilo, pirido-imidazolilo, pirido-tiazolilo, piridinilo, pirrolidinilo, pirrolinilo, 2H-pirrolilo, pirrolilo, quinazolinilo, quinolinilo, 4H-quinolizinilo, quinoxalinilo, quinuclidinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidroisoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, tetrazolilo, 6H-1.2.5- tiadiazinilo, 1,2,3-tiadiazolilo, 1,2,4-tiadiazolilo, 1,2,5-tiadiazolilo, 1,3,4-tiadiazolilo, tiantrenilo, tiazolilo, isotiazoliltienilo, tieno-oxazolilo, tieno-tiazolilo, tieno-imidazolilo, tienilo, triazinilo, 1,2,3-triazolilo, 1,2,4-triazolilo, 1,2,5-triazolilo, 1,3,4-triazolilo, y xantenilo. También se incluyen compuestos anulares condensados y compuestos espiro.

A menos que se especifique lo contrario, el término “hidrocarbilo” o sus hipónimos (por ejemplo, alquilo, alquenilo, alquinilo y arilo, etc.), por sí mismo o como parte de otro sustituyente, se refiere a un radical hidrocarbonado lineal, de cadena ramificada, o cíclico, o cualquier combinación de los mismos. Pueden estar completamente saturados (por ejemplo, alquilo), mono- o poliinsaturados (por ejemplo, alquenilo, alquinilo y arilo), pueden estar mono- o polisustituidos, pueden ser monovalentes (por ejemplo, metilo), divalentes (por ejemplo, metileno), o multivalentes (por ejemplo, metenilo), también pueden incluir un grupo divalente o multivalente, tienen un número específico de átomos de carbono (por ejemplo, C1-C12 indica 1 a 12 átomos de carbono, C1-12 se selecciona de C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8, C9, C10, C11 y C12; C3-12 se selecciona de C3, C4, C5, C6, C7, C8, C9, C10, C11 y C12). El término “hidrocarbilo” incluye, pero no se limita a, hidrocarbilo alifático e hidrocarbilo aromático. El hidrocarbilo alifático incluye hidrocarbilo lineal y cíclico; específicamente incluye, pero no se limita a, alquilo, alquenilo y alquinilo. El hidrocarbilo aromático incluye, pero no se limita a, hidrocarbilo aromático de 6-12 miembros tal como fenilo, naftilo, y similares. En algunas realizaciones, el término “hidrocarbilo” se refiere a un grupo lineal o ramificado, o una combinación de los mismos, que puede estar completamente saturado, mono- o poliinsaturado, y puede incluir un grupo divalente o multivalente. Los ejemplos del grupo hidrocarbilo saturado incluyen, pero no se limitan a, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, terc-butilo, isobutilo, sec-butilo, ciclohexilo, (ciclohexil)metilo, ciclopropilmetilo, y el homólogo o isómero de n-amilo, nhexilo, n-heptilo, n-octilo, y otros grupos de átomos. El hidrocarbilo insaturado tiene uno o más de un doble o triple enlace. Los ejemplos del alquilo insaturado incluyen, pero no se limitan a, vinilo, 2-propenilo, butenilo, crotilo, 2-isopentenilo, 2-(butadienilo), 2,4-pentadienilo, 3-(1,4-pentadienilo), etinilo, 1- y 3-propinilo, 3-butinilo, y homólogos e isómeros más superiores.

A menos que se especifique lo contrario, el término “heterohidrocarbilo” o sus hipónimos (tales como heteroalquilo, heteroalquenilo, heteroalquinilo, y heteroarilo, etc.), por sí mismo o como parte de otro sustituyente, se refiere a un grupo hidrocarbonado estable lineal, ramificado o cíclico, o cualquier combinación de los mismos, que tiene un número especificado de átomos de carbono y al menos un heteroátomo. En algunas realizaciones, el término “heteroalquilo”, por sí mismo o en combinación con otro término, se refiere a un radical hidrocarbonado estable de cadena lineal, ramificado, o una combinación de los mismos, que tiene un número especificado de átomos de carbono y al menos un heteroátomo. En una realización específica, un heteroátomo se selecciona del grupo que consiste en B, O, N y S, en el que los átomos de nitrógeno y azufre están opcionalmente oxidados, y el átomo de nitrógeno está opcionalmente cuaternizado. El heteroátomo o grupo heteroatómico puede ubicarse en cualquier posición interior de un heterohidrocarbilo, incluyendo la posición en la que el hidrocarbilo se une a la parte restante de la molécula. Pero los términos “alcoxi”, “alquilamino” y “alquiltio” (o tioalcoxilo) se usan con el significado convencional, y se refieren a un grupo alquilo conectado a la parte restante de la molécula a través de un átomo de oxígeno, un amino o un átomo de azufre, respectivamente. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a, -CH2-CH2-O-CH3, -CH2-CH2-NH-CH3, -CH2-CH2-N(CH3)-CH3, -CH2-S-CH2-CH3, -CH2-CH2, -S(O)-CH3, -CH2-CH2-S(O)2-CH3, -CH=CH-O-CH3, -CH2-CH=N-OCH3 y -CH=CH-N(CH3)-CH3. Pueden estar presentes hasta dos heteroátomos consecutivos, tal como -CH2-NH-OCH3.

A menos que se especifique lo contrario, el término “ciclohidrocarbilo”, “heterociclohidrocarbilo”, o sus hipónimos (tales como arilo, heteroarilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, cicloalquenilo, heterocicloalquenilo, cicloalquinilo, heterocicloalquinilo, etc.), por sí mismo o en combinación con otro término, se refiere a “hidrocarbilo” o “heterohidrocarbilo” ciclados. Además, para heterohidrocarbilo o heterociclohidrocarbilo (por ejemplo, heteroalquilo y heterocicloalquilo), un heteroátomo puede ocupar la posición en la que el heterociclo se une a la posición restante de la molécula. Los ejemplos del cicloalquilo incluyen, pero no se limitan a, ciclopentilo, ciclohexilo, 1-ciclohexenilo, 3-ciclohexenilo, cicloheptilo, y similares. Los ejemplos no limitantes de heterocicloalquilo incluyen 1 -(1,2,5,6-tetrahidropiridilo), 1 -piperidinilo, 2-piperidinilo, 3-piperidinilo, 4-morfolinilo, 3-morfolinilo, tetrahidrofuran-2-ilo, tetrahidrofuran-3-ilo, tetrahidrotiofen-2-ilo, tetrahidrotiofen-3-ilo, 1 -piperazinilo, y 2-piperazinilo.

A menos que se especifique lo contrario, el término “alquilo” se refiere a un grupo hidrocarbonado saturado ramificado o de cadena lineal, que puede estar monosustituido (por ejemplo, -CH2F) o polisustituido (por ejemplo, -CF3), puede ser monovalente (por ejemplo, metilo), divalente (por ejemplo, metileno), o multivalente (por ejemplo, metenilo). Los ejemplos de alquilo incluyen metilo (Me), etilo (Et), propilo (tal como n-propilo e isopropilo), butilo (tal como n-butilo, isobutilo, s-butilo, f-butilo), pentilo (tal como n-pentilo, isopentilo, neopentilo), y similares.

A menos que se especifique lo contrario, el término “alquenilo” se refiere a un grupo alquilo que tiene uno o más de un doble enlace carbono-carbono en cualquier posición en la cadena, puede estar monosustituido o polisustituido, y puede ser monovalente, divalente o multivalente. Los ejemplos de alquenilo incluyen etenilo, propenilo, butenilo, pentenilo, hexenilo, butadienilo, pentadienilo, hexadienilo, y similares.

A menos que se especifique lo contrario, el término “alquinilo” se refiere a un grupo alquilo que tiene uno o más de un triple enlace carbono-carbono en cualquier posición en la cadena, puede estar monosustituido o polisustituido, y puede ser monovalente, divalente o multivalente. Los ejemplos de alquinilo incluyen etinilo, propinilo, butinilo, pentinilo, y similares.

A menos que se especifique lo contrario, cicloalquilo incluye cualquier hidrocarbilo cíclico o policíclico estable, y cualquier átomo de carbono está saturado, puede estar monosustituido o polisustituido, y puede ser monovalente, divalente o multivalente. Los ejemplos de cicloalquilo incluyen, pero no se limitan a, ciclopropilo, norbornanilo, [2.2.2]biciclooctano, [4.4.0]biciclodecanilo, y similares.

A menos que se especifique lo contrario, cicloalquenilo incluye cualquier hidrocarbilo cíclico o policíclico estable que tenga uno o más de un enlace sencillo carbono-carbono insaturado en cualquier posición en el anillo, puede estar monosustituido o polisustituido, y puede ser monovalente, divalente o multivalente. Los ejemplos del cicloalquenilo incluyen, pero no se limitan a, ciclopentenilo, ciclohexenilo, y similares.

A menos que se especifique lo contrario, cicloalquinilo incluye cualquier hidrocarbilo cíclico o policíclico estable que tenga uno o más triples enlaces carbono-carbono en cualquier posición en el anillo, puede estar monosustituido o polisustituido, y puede ser monovalente, divalente o multivalente.

A menos que se especifique lo contrario, el término “halo” o “halógeno”, por sí mismo o como parte de otro sustituyente, se refiere a un átomo de flúor, cloro, bromo, o yodo. Además, el término “haloalquilo” pretende incluir monohaloalquilo y polihaloalquilo. Por ejemplo, el término “haloalquilo(C1-C4)” se entiende que incluye, pero no se limita a, trifluorometilo, 2,2,2-trifluoroetilo, 4-clorobutilo, 3-bromopropilo, y similares. Ejemplos de haloalquilo incluyen, pero no se limitan a, trifluorometilo, triclorometilo, pentafluoroetilo, y pentacloroetilo.

El término “alcoxi” representa cualquier alquilo definido anteriormente que tiene un número específico de átomos de carbono unidos por un puente de oxígeno. A menos que se especifique lo contrario, alcoxi de C1-6 incluye alcoxi de C1, C2, C3, C4, C5 y C6. Los ejemplos de alcoxi incluyen, pero no se limitan a, metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, nbutoxi, sec-butoxi, ferc-butoxi, n-pentiloxi, y s-pentoxi.

A menos que se especifique lo contrario, el término “arilo” se refiere a un sustituyente aromático poliinsaturado, puede estar mono-, di- o polisustituido, puede ser monovalente, divalente o multivalente, puede ser un solo anillo o un anillo múltiple (por ejemplo, uno a tres anillos; en los que al menos un anillo es aromático), que están condensados entre sí o conectados covalentemente. El término “heteroarilo” se refiere a un arilo (o anillo) que contiene uno a cuatro heteroátomos. En un ejemplo ilustrativo, el heteroátomo se selecciona del grupo que consiste en B, O, N y S, en el que los átomos de nitrógeno y azufre están opcionalmente oxidados, y el átomo de nitrógeno está opcionalmente cuaternizado. Un heteroarilo puede unirse a la parte restante de una molécula a través de un heteroátomo. Los ejemplos no limitantes de arilo o heteroarilo incluyen fenilo, naftilo, bifenilo, pirrolilo, pirazolilo, imidazolilo, pirazinilo, oxazolilo, fenil-oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, furanilo, tienilo, piridilo, pirimidinilo, benzotiazolilo, purinilo, bencimidazolilo, indolilo, isoquinolilo, quinoxalinilo, quinolilo, 1 -naftilo, 2-naftilo, 4-bifenilo, 1 -pirrolilo, 2-pirrolilo, 3-pirrolilo, 3-pirazolilo, 2-imidazolilo, 4-imidazolilo, pirazinilo, 2-oxazolilo, 4-oxazolilo, 2-fenil-4-oxazolilo, 5-oxazolilo, 3-isoxazolilo, 4-isoxazolilo, 5-isoxazolilo, 2-tiazolilo, 4-tiazolilo, 5-tiazolilo, 2-furilo, 3-furilo, 2-tienilo, 3-tienilo, 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, 2-pirimidilo, 4-pirimidilo, 5-benzotiazolilo, purinilo, 2-bencimidazolilo, 5-indolilo, 1 -isoquinolilo, 5-isoquinolilo, 2-quinoxalinilo, 5-quinoxalinilo, 3-quinolilo, y 6-quinolilo. El sustituyente de cualquiera de los sistemas anulares de arilo y heteroarilo anteriores se selecciona del sustituyente aceptable descrito a continuación.

A menos que se especifique lo contrario, cuando arilo se combina con otros términos (tales como ariloxi, ariltio, arilalquilo), el arilo incluye el anillo de arilo y heteroarilo como se define anteriormente. De este modo, el término “aralquilo” incluye el grupo (por ejemplo, bencilo, fenetilo, piridilmetilo, etc.) en el que un arilo está unido a un alquilo, incluyendo un alquilo en el que el átomo de carbono (por ejemplo, metileno) se ha sustituido por un átomo tal como oxígeno, por ejemplo fenoximetilo, 2-piridiloxi, 3-(1-naftiloxi)propilo, y similares.

La expresión “grupo saliente” se refiere a un grupo funcional o átomo que puede ser reemplazado por otro grupo funcional o átomo mediante una reacción de sustitución (tal como una reacción de sustitución nucleófila). Por ejemplo, los grupos salientes representativos incluyen triflato; cloro, bromo y yodo; grupo sulfonato, tal como mesilato, tosilato, p-bromobencenosulfonato, p-toluenosulfonatos, y similares; aciloxi, tal como acetoxi, trifluoroacetoxi, y similares.

La expresión “grupo protector” incluye, pero no se limita a, “grupo protector de amino”, “grupo protector de hidroxi”, o “grupo protector de tio”. La expresión “grupo protector de amino” se refiere a un grupo protector adecuado para bloquear la reacción secundaria en el nitrógeno de un amino. Los grupos protectores de amino representativos incluyen, pero no se limitan a: formilo; acilo, tal como alcanoílo (por ejemplo, acetilo, tricloroacetilo o trifluoroacetilo); alcoxicarbonilo, tal como tere-butoxicarbonilo (Boc); arilmetoxicarbonilo, tal como benciloxicarbonilo (Cbz) y 9-fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc); arilmetilo, tal como bencilo (Bn), tritilo (Tr), 1,1-bis-(4’-metoxifenil)metilo; sililo, tal como trimetilsililo (TMS) y terc-butildimetilsililo (TBS), y similares. La expresión “grupo protector de hidroxi” se refiere a un grupo protector adecuado para bloquear la reacción secundaria en hidroxi. Los grupos protectores de hidroxi representativos incluyen, pero no se limitan a: alquilo, tal como metilo, etilo y tere-butilo; acilo, tal como alcanoílo (por ejemplo, acetilo); arilmetilo, tal como bencilo (Bn), p-metoxibencilo (PMB), 9-fluorenilmetilo (Fm) y difenilmetilo (benzhidrilo, DPM); sililo, tal como trimetilsililo (TMS) y terc-butildimetilsililo (TBS), y similares.

El compuesto de la presente invención se puede preparar mediante una variedad de métodos sintéticos bien conocidos por los expertos en la técnica, incluyendo la siguiente realización enumerativa, la realización formada por la siguiente realización enumerativa en combinación con otros métodos de síntesis química y el reemplazo equivalente bien conocido por los expertos en la técnica. La realización preferida incluye, pero no se limita a, la realización de la presente invención.

Todos los disolventes usados en la presente invención están disponibles comercialmente. Esta presente invención adopta las siguientes palabras abreviadas como sigue: “Aq” se refiere a agua; “HATU” se refiere a hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N ’-tetrametiluronio; “EDC” se refiere a hidrocloruro de N-(3-dimetilaminopropil)-N ’-etilcarbodiimida; “m-CPBA” se refiere a ácido 3-cloroperoxibenzoico; “eq” se refiere a equivalente; “CDI” se refiere a carbonildiimidazol; “DCM” se refiere a diclorometano; “PE” se refiere a éter de petróleo; “DIAD” se refiere a azodicarboxilato de diisopropilo; “DMF” se refiere a N,N-dimetilformamida; “DMSO” se refiere a dimetilsulfóxido; “EtOAc” se refiere a acetato de etilo; “EtOH” se refiere a etanol; “MeOH” se refiere a metanol; “CBz” se refiere a benciloxicarbonilo, que es un grupo protector para las aminas; “BOC” se refiere a t-butilcarbonilo, que es un grupo protector para aminas; “HOAc” se refiere a ácido acético; “NaCNBH3” se refiere a cianoborohidruro de sodio; t.a. se refiere a temperatura ambiente; “O/N” se refiere a toda la noche; “THF “se refiere a tetrahidrofurano; “Boc2O” se refiere a dicarbonato de di-terc-butilo; “TFA” se refiere a ácido trifluoroacético; “DIPEA” se refiere a diisopropiletilamina; “SOCl2” se refiere a cloruro de tionilo; “CS2” se refiere a disulfuro de carbono; “TsOH” se refiere a ácido ptoluenosulfónico; “NFSI” se refiere a N-fluoro-N-(fenilsulfonil)bencenosulfonamida; “NCS” se refiere a 1 -cloropirrolidin-2,5-diona; “n-Bu4NF” se refiere a fluoruro de tetrabutilamonio; “iPrOH” se refiere a 2-propilo; “pf” se refiere al punto de fusión; “LDA” se refiere a diisopropilamiduro de litio; “DMP” se refiere a ftlalato de dimetilo; “Xantphos” se refiere a 4,5-bisdifenilfosfino-9,9-dimetiloxaxima; “Pd2(dba)3” se refiere a tris(dibencilidenacetona)dipaladio; “Xant-Phos” se refiere a 4,5-bisdifenilfosfino-9,9-dimetiloxaxano; “EGTA” se refiere a ácido etilenglicoltetraacético; “DIEA” se refiere a N,N-diisopropiletilamina; “Xantphos” se refiere a 4,5-bisdifenilfosfino-9,9-dimetiloxaxano; “AIBN” se refiere a 2,2’-azobis(2-metilpropionitrilo); “Pd2(dba)3” se refiere a tris(dibencilidenacetona)dipaladio; “Pd(dppf)Cl2” se refiere a dicloruro de [1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio; “BnBr” se refiere a bromuro de bencilo; “DMAP” se refiere a 4-dimetilaminopiridina; “EGTA” se refiere a ácido etilenglicoltetraacético; “TMSN3” se refiere a azidotrimetilsilano; “(Bpin)2” se refiere a bis(pinacolato)diboro; “BnBr” se refiere a bromuro de bencilo; “Tf2O” se refiere a anhídrido trifluorometanosulfónico; anhídrido trifluorometanosulfónico; “Hepes” se refiere a ácido 4-hidroxietilpiperazinetanosulfónico; “EGTA” se refiere a ácido etilenglicoltetraacético.

Los compuestos se nombran manualmente o mediante el software ChemDraw®, los compuestos disponibles comercialmente utilizan los nombres de su directorio de proveedores.

Descripción detallada de la realización preferida

Los siguientes ejemplos ilustran adicionalmente la presente invención.

Fragmento WXBB-1:

Ruta sintética:

Etapa

WXBB-1 -1 (50,00 g, 127,48 mmoles, 1,00 eq) se disolvió en acetonitrilo (500,00 ml), seguido de la adición de WXBB-1 -2 (12,87 g, 152,98 mmoles, 15,14 ml, 1,20 eq). La reacción se llevó a cabo a 70°C durante 2 horas en atmósfera de nitrógeno. Una vez completada la reacción, la disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se sometió a sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad mediante una bomba de agua a presión reducida a 40°C, y después se disolvió en diclorometano (150 ml). Después de lavar con agua (75 ml*2), la fase orgánica se concentró hasta alrededor de 90 ml, y después se añadieron 75 ml*3 de n-hexano (eliminando el diclorometano residual) y se sometió a sometió a evaporación rotatoria para dar un sólido blanco en la fase orgánica. El sólido blanco se filtró, y la torta del filtro se lavó con 180 ml de n-hexano, y la torta del filtro se sometió a sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar WXBB-1-3 (27,00 g, 106,17 mmoles, rendimiento del 83,29%) como un sólido blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-ds) 8 ppm 0,79 - 0,86 (m, 2 H) 0,88 - 0,97 (m, 2 H) 1,99 - 2,10 (m, 1 H) 2,42 (s, 3 H) 4,98 (s, 2 H) 7,49 (d, J=8,16 Hz, 2 H) 7,82 (d, J=8,28 Hz, 2 H), m/z= 255,1(M+1).

Etapa 2: Síntesis del Compuesto WXBB-1 -4

WXBB-1-4a (20,00 g, 98,02 mmoles, 1,00 eq) se disolvió en N-metilpirrolidona (100,00 ml), seguido de la adición de cianuro cuproso (17,56 g, 196,04 mmoles, 42,83 ml, 2,00 eq). La reacción se llevó a cabo a 180°C durante 3 horas. La disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, seguido de la adición de agua (300 ml) y amoníaco (300 ml), se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos, y se extrajo con acetato de etilo (200 ml*3). La fase orgánica se lavó con salmuera saturada (200 ml) y agua (200 ml), se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró con succión y se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar un producto bruto como un sólido marrón-negro. El producto bruto se aisló mediante cromatografía en columna de gel de sílice (PE:EA=20:1-3:1) para dar WXBB-1-4 (12,00 g, 79,92 mmoles, rendimiento del 81,53%) como un sólido amarillo. RMN 1H (400 Mh z , CLOROFORMO-d) 8 ppm 2,21 (s, 3 H) 3,68 (br s, 2 H) 6,80 (d, J=5,40 Hz, 1 H) 6,91 (d, J=9,29 Hz, 1 H).

Etapa 3: Síntesis del Compuesto WXBB-1 -5

Se añadieron WXBB-1-3 (6,00 g, 39,96 mmoles, 1,00 eq) y WXBB-1-4 a un matraz de una sola boca, seguido de la adición de diisopropiletilamina (10,85 g, 83,92 mmoles, 14,66 ml, 2,10 eq). La reacción se llevó a cabo a 100°C durante 18 horas en atmósfera de nitrógeno. Una vez completada la reacción, la disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, seguido de la adición de 50 ml de agua. Después de la separación de fases, la fase orgánica se lavó secuencialmente con 50 ml de disolución de cloruro de amonio (27%), 50 ml de disolución de hidrogenocarbonato de sodio (9%), y 45 ml de salmuera saturada, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, y se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad con bomba de agua a presión reducida a 45°C hasta que queden alrededor de 30 ml de tolueno. Se añadieron 60 ml de n-hexano a la fase orgánica, seguido de filtración. La torta del filtro se lavó con 60 ml de isopropanol (10 minutos en un baño de hielo), y se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad con una bomba de agua a presión reducida a 40°C (sólido blanco). El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna (SiO2, Malla 100-200, PE:EA = 10:1-3:1) para dar WXBB-1-5 (1,80 g, 7,75 mmoles, rendimiento del 19,39%) como un sólido amarillo. RMN 1H (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 0,81 - 0,86 (m, 2 H) 0,87 - 0,90 (m, 2 H) 2,42 (s, 3 H) 4,98 (s, 2 H) 5,20 - 5,28 (m, 1 H) 5,23 (s, 1 H) 6,67 (d, J=5,52 Hz, 2 H) 6,87 (d, J=5,77 Hz, 1 H).

Etapa 4: Síntesis del Compuesto WXBB-1 -6

WXBB-1-5 (1,25 g, 5,38 mmoles, 1,00 eq) se colocó en un matraz de una sola boca de 100 ml que contiene ácido acético (20,00 ml). Se añadió tiocianato de potasio sólido (1,05 g, 10,76 mmoles, 1,05 ml, 2,00 eq) a la disolución de reacción, y se cargó con nitrógeno tres veces. La reacción se llevó a cabo a 110°C durante 5 horas en atmósfera de nitrógeno. Una vez completada la reacción, la disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad con bomba de aceite a presión reducida a 6ü°C, y se disolvió en 10 ml de diclorometano. La fase orgánica se lavó con agua (5 ml*2), y la fase acuosa se extrajo con 10 ml*2 de diclorometano. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, y se sometieron a evaporación rotatoria hasta sequedad bajo presión reducida para dar un sólido marrón. El sólido marrón obtenido se disolvió con 5 ml de acetato de etilo, seguido de la adición de 15 ml de n-hexano. La disolución se colocó en capas con una capa superior marrón, y se agitó mediante magnetizador sin precipitación de sólidos. La mezcla se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar un aceite marrón. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna (SiÜ², Malla 100-200, pE:EA = 10:1-3:1) para dar WXBB-1 -6 (390,00 mg, 756,23 pmoles, rendimiento del 14,06%, pureza del 53%) como un sólido amarillo. m/z = 274,0 (M+1).

Etapa 5: Síntesis del Compuesto WXBB-1 -7

Se añadieron ácido acético (8,00 ml), agua (1,60 ml) y peróxido de hidrógeno (487,96 mg, 4,30 mmoles, 413,53 pl, pureza del 30%, 3,01 eq) a un matraz de tres bocas de 100 ml presecado, y la mezcla se calentó a 45°C (temperatura interna) en una atmósfera de nitrógeno. Después de la adición de WXBB-1 -6 (390,00 mg, 1,43 mmoles, 1,00 eq) como un sólido (la temperatura interna se mantuvo por debajo de 55°C), y la disolución de reacción se hizo reaccionar a 45°C durante 30 minutos. Una vez completada la reacción, la disolución de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente, seguido de la adición de 4 ml de una disolución de sulfito de sodio al 20%, se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas y se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad con una bomba de aceite para dar un sólido blanco. Se añadieron 4 ml de agua al sólido blanco, y se ajustó el pH a alrededor de 10 con hidróxido de amoniaco 4N. La fase acuosa se extrajo con diclorometano (6 ml*3). La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro y se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar WXBB-1 -7 (200,00 mg, 828,98 pmoles, rendimiento del 57,97%) como un sólido amarillo. m/z = 242,2 (M+1).

Etapa 6: Síntesis del Compuesto WXBB-1

Una disolución de reacción de WXBB-1-7 (200,00 mg, 828,98 pmoles, 1,00 eq) y ácido clorhídrico (6,00 ml, pureza del 38%) se añadió a un matraz de una sola boca de 100 ml seco, y se hizo reaccionar a 100°C durante 18 horas. Una vez completada la reacción, la disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad. Se le añadieron 5 ml*2 de tolueno, y se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar WXBB-1 (200,00 mg, 768,46 pmoles, rendimiento del 92,70%) como un sólido marrón. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 0,81 - 0,89 (m, 2 H) 0,98 - 1,06 (m, 2 H) 1,96 - 2,05 (m, 1 H) 2,24 (s, 3 H) 7,54 (d, J=11,29 Hz, 1 H) 7,74 (s, 1 H) 8,00 (d, J=6,78 Hz, 1 H) 9,28 (s, 1 H), m/z= 261,1(M+1).

Fragmento WXBB-2:

Ruta sintética:

Etapa 1: Síntesis del Compuesto WXBB-2-2

Se disolvió pentasulfuro de fósforo (52,24 g, 235,02 mmoles, 24,99 ml, 2,00 eq) en tetrahidrofurano (300,00 ml), seguido de la adición lenta de carbonato de sodio (12,45 g, 117,51 mmoles, 1,00 eq). El sistema se agitó a 20°C durante 1 hora. Se añadió el Compuesto WXBB-2-1 al sistema, y el sistema se calentó a 60°C y se agitó durante 48 horas. La disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, seguido de filtración. El filtrado se concentró hasta sequedad a presión reducida para dar un producto bruto. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna (0-60% de EA/PE) para dar el Compuesto WXBB-2-2 (6,20 g, 61,28 mmoles, rendimiento del 52,15%) como un sólido blanco. RMN 1H (400 MHz, CLÜRÜFÜRMÜ-d) 8 ppm 2,166-2,249 (m, 2 H) 2,896-2,936(m, 2 H) 3,664-3,699 (m, 2 H) 8,676 (s, 1 H).

Etapa 2: Síntesis del Compuesto WXBB-2

El Compuesto WXBB-2-2 (200,00 mg, 1,98 mmoles, 1,00 eq) y el Compuesto WXBB-4 (360,00 mg, 2,37 mmoles, 1,19 eq) se disolvieron en ciclohexanol (4,00 ml). El sistema se agitó a 170°C durante 24 horas en atmósfera de nitrógeno. La disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua (80 ml), y se extrajo con acetato de etilo (30 ml*6). La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se concentró a presión reducida para dar un producto bruto. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna (0-10% de MeOH/DCM) para dar el Compuesto WXBB-2 (180,00 mg, 831,88 mmoles, rendimiento del 42,01%, pureza del 93%) como un sólido amarillo. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 2,71 -2,64(m, 2H) 2,86(d, J=7,2 Hz, 2 H) 4,32(t, J=7,2 Hz, 2 H) 6,13(br.s, 2H) 6,48 (d, J=8,4 Hz, 1 H) 7,22(d, J=7,2 Hz, 1 H) 7,52-7,47(m,1H). m/z=202,0 [M+H]+.

Fragmento WXBB-3:

Ruta sintética:

Etapa 1: Síntesis del Compuesto WXBB-3-2

Se añadió pentasulfuro de fósforo (56,06 g, 252,19 mmoles, 26,82 ml, 1,00 eq) a acetonitrilo (500,00 ml) para formar una suspensión, seguido de la adición lenta de trietilamina (25,52 g, 252,19 mmoles, 34,96 ml, 1,00 eq). El sistema se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora, seguido de la adición de WXBB-3-1 (25,00 g, 252,19 mmoles, 1,00 eq), y el sistema se agitó a 60°C durante 19 horas. La disolución de reacción se vertió en hipoclorito sódico (200 ml), y se concentró a presión reducida para eliminar acetonitrilo, y se extrajo con diclorometano (200 ml*3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron secuencialmente con agua (400 ml) y salmuera (400 ml), y se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se concentró a presión reducida para dar un producto bruto. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna (0-10% de MeOH/DCM) para dar el Compuesto WXBB-3-2 (10,00 g, 86,81 mmoles, rendimiento del 34,42%) como un sólido amarillo. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1,53 - 1,71 (m, 4 H) 2,57 - 2,67 (m, 2 H) 3,13 (br s, 1 H) 3,18 (td, J=5,77, 2,51 Hz, 1 H).

Etapa 2: Síntesis del Compuesto WXBB-3

El Compuesto WXBB-3-2 (6,00 g, 52,08 mmoles, 1,00 eq) y el Compuesto WXBB-4 (8,72 g, 57,29 mmoles, 1,10 eq) se disolvieron en ciclohexanol (100,00 ml). El sistema se agitó a 170°C durante 6 horas en atmósfera de nitrógeno. La disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua (200 ml), se ajustó a pH 5 con ácido clorhídrico (2N, 100 ml), y se extrajo con acetato de etilo (200 ml). La fase acuosa se ajustó a pH 9 con hidróxido de sodio (2N, 100 ml) y se extrajo con acetato de etilo (200 ml*2). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron secuencialmente con agua (200 ml) y salmuera (200 ml), y se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se concentró a presión reducida para dar un producto bruto. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna (0-10% de DCM/MeOH) para dar el Compuesto WXBB-3 (5,00 g, 17,50 mmoles, rendimiento del 33,60%, pureza del 75,32%) como un sólido marrón. m/z = 216,0 [M+H]+.

Fragmento WXBB-4:

Ruta sintética:

Etapa 1: Síntesis del Compuesto WXBB-4

El Compuesto WXBB-4-1 (20,00 g, 131,45 mmoles, 1,00 eq) se disolvió en metanol (200,00 ml) para dar una disolución de color amarillo pálido, seguido de la adición lenta de hidrato de hidrazina (19,74 g, 394,35 mmoles, 19,17 ml, 3,00 eq). El sistema de reacción se agitó a 75°C durante 1,5 horas. Una vez completada la reacción, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, seguido de filtración. La torta del filtro se lavó con acetato de etilo (50 ml*2), y la torta del filtro se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar el Compuesto WXBB-4 (20,00 g, 131,45 mmoles, rendimiento del 100,00%) como un sólido blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 4,48 (br s, 2 H) 6,09 (s, 2 H) 6,60 (d, J=8,28 Hz, 1 H) 7,11 (d, J=7,03 Hz, 1 H) 7,51 (t, J=7,78 Hz, 1 H) 9,19 (brs, 1 H). Ejemplo 001: WX001

Ruta sintética:

Etapa 1: Síntesis del Compuesto WX001

WXBB-1 (100,00 mg, 337,02 mmoles, 1,00 eq, HCl) y WXBB-2 (80,00 mg, 369,73 mmoles, 1,10 eq) (pureza del 93%) se disolvieron en piridina (5,00 ml), seguido de la adición lenta de oxicloruro de fósforo (50,00 mg, 326,09 mmoles, 30,30 ml, 97 eq). El sistema de reacción se agitó a 50°C durante 1 hora. La disolución de reacción se inactivó con agua, y se concentró a presión reducida para dar un producto bruto. El producto bruto se aisló y se purificó mediante prep-HPLC (sistema neutro) para dar WX001. RMN 1H: 0,63 - 0,71 (m, 2 H) 0,74 - 0,83 (m, 2 H) 1,76 - 1,89 (m, 1 H) 2,23 (s, 3 H) 2,67 (quin, J=7,34 Hz, 2 H) 2,81 - 2,92 (m, 2 H) 4,38 (t, J=7,03 Hz, 2 H) 7,17 (d, J=0,75 Hz, 1 H) 7,47 (d, J=10,79 Hz, 1 H) 7,56 - 7,64 (m, 1 H) 7,68 (d, J=1,00 Hz, 1 H) 7,85 (d, J=7,53 Hz, 1 H) 7,98 (t, J=7,91 Hz, 1 H) 8,15 (d, J=8,28 Hz, 1 H) 10,90 (s, 1 H). m/z=444,2(M+1).

Ejemplo 002: WX002

Ruta sintética:

Etapa 1: Síntesis del Compuesto WX002

WXBB-1 (100,00 mg, 337,02 mmoles, 1,21 eq, HCl) se disolvió en diclorometano (5,00 ml), seguido de la adición de cloruro de oxalilo (70,76 mg, 557,49 mmoles, 48,80 ml, 2,00 eq) y N,N-dimetilformamida (20,37 mg, 278,75 mmoles, 21,45 ml, 1,00 eq) en atmósfera de nitrógeno. El sistema se agitó a 0°C durante 1 hora. La disolución de reacción se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida, seguido de la adición secuencial de diclorometano (5,00 ml), WXBB-3 (60,00 mg, 278,75 mmoles, 1,00 eq) y DMAP (136,22 mg, 1,12 mmoles, 4,00 eq). El sistema se agitó a 0°C durante 3 horas. La disolución de reacción se sometió a evaporación rotatoria a presión reducida para dar un producto bruto. El producto bruto se aisló mediante placa de prep-TLC (DCM: MeOH = 20:1) para dar WX002. RMN 1H (400MHz, METANOL-d4) ppm 9,17 (s, 1H), 8,47 (d, J=8,3 Hz, 1H), 8,16 - 8,08 (m, 1H), 8,06 - 7,96 (m, 2H), 7,63 (s, 1 H), 7,50 (d, J=10,8 Hz, 1 H), 4,82 (br. s., 2H), 3,27 (t, J=6,0 Hz, 2H), 2,36 (s, 3H), 2,20 (br. s., 2H), 2,15 - 2,04 (m, 3H), 1,22 - 1,12 (m, 2H), 0,98 - 0,89 (m, 2H).

Ejemplo 003: WX003

Ruta sintética:

Etapa 1: Síntesis del Compuesto WX003-3

WX003-1 (1,50 g, 9,99 mmoles, 1,00 eq) se disolvió en acetonitrilo (60,00 ml) y se enfrió a 0°C, seguido de la adición de nitrito de isoamilo (1,76 g, 14,99 mmoles, 2,02 ml, 1,50 eq), y después se añadió gota a gota TMSN3 (1,73 g, 14,99 mmoles, 1,96 ml, 1,50 eq) a la disolución de reacción. El baño de hielo se retiró tras 25 minutos. La disolución de reacción se calentó a temperatura ambiente 25°C, y se hizo reaccionar durante 2 horas. Entonces se añadieron WX003-2 (1,98 g, 29,97 mmoles, 2,48 ml, 3,00 eq) y Cu2O (142,95 mg, 999,00 mmoles, 102,11 ml, 0,10 eq) a la disolución de reacción, y la reacción se llevó a cabo a 50°C durante 18 horas en atmósfera de nitrógeno. Una vez completada la reacción, la disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad, se diluyó con 50 ml de diclorometano, se lavó secuencialmente con 30 ml de cloruro de amonio saturado y 30 ml de salmuera saturada, y se secó sobre sulfato de sodio anhidro, y se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna (SiO2, PE:EA = 10:1 a 4:1) para dar WX003-3. m/z = 242,9 [M+1].

Etapa 2: Síntesis del Compuesto WX003-4

WX003-3 (380,00 mg, 1,57 mmoles, 1,00 eq) se añadió en ácido clorhídrico al 38% (15,00 ml), y se calentó a reflujo a 100°C durante 18 horas. La disolución de reacción se ajustó a pH 9 con carbonato de sodio sólido, y se extrajo con 10 ml*3 de acetato de etilo. La fase acuosa se retuvo, se ajustó a pH 2 con HCl 2N, y se extrajo con 30 ml*3 de acetato de etilo. La fase orgánica se retuvo, y se secó sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad para dar WX003-4. m/z = 261,9 [M+1].

Etapa 3: Síntesis del Compuesto WX003-5

WX003-4 (300,00 mg, 1,15 mmoles, 1,00 eq) se disolvió en diclorometano anhidro (10,00 ml) y se cargó con gas nitrógeno, seguido de la adición de cloruro de oxalilo (248,15 mg, 1,95 mmoles, 171,14 ml, 1,70 eq) para formar una emulsión. Después, se le añadió N,N-dimetilformamida anhidra (8,41 mg, 115,00 mmoles, 8,85 ml, 0,10 eq), y la reacción se llevó a cabo a 25°C durante 2 horas en atmósfera de nitrógeno. Se añadieron 5 ml de diclorometano anhidro a la disolución de reacción, y se concentró a presión reducida a 35°C hasta que quedaron 5 ml de diclorometano anhidro. Tales procedimientos se repitieron cuatro veces, y el producto resultante en DCM anhidro se usó directamente en la siguiente etapa. El WX003-5 resultante se disolvió en 5 ml de diclorometano. m/z = 276,1 [MS de éster metílico].

Etapa 4: Síntesis del Compuesto WX003

Se añadió diisopropiletilamina (131,82 mg, 1,02 mmoles, 178,14 ml, 1,00 eq) a una disolución de WX003-5 (285,29 mg, 1,02 mmoles, 1,00 eq) en diclorometano anhidro (6,00 ml) en atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de WXBB-3 (220,00 mg, 1,02 mmoles, 1,00 eq). La reacción se llevó a cabo a 25°C durante 18 horas en atmósfera de nitrógeno. Una vez completada la reacción, se añadieron 5 ml de salmuera saturada a la disolución de reacción. La fase orgánica se separó y se sometió a evaporación rotatoria (evaporación rotatoria con bomba de agua a 40°C) hasta sequedad a presión reducida para dar un producto bruto. El producto bruto se purificó mediante prep-HPLC (columna: water Xbridge 150*255u; fase móvil: [Agua (10 mM NH4HCÜ3)-ACN]; B%: 12%-52%, 10,5 min) para dar el Compuesto WX003. RMN 1H (400 MHz, CLÜRÜFÜRMÜ-d) 8 ppm 0,95 - 1,00 (m, 2 H) 1,03 - 1,10 (m, 2 H) 1,95 - 2,02 (m, 2 H) 2,04 - 2,12 (m, 3 H) 2,35 (s, 3 H) 3,10 (t, J=6,34 Hz, 2 H) 4,51 (t, J=6,09 Hz, 2 H) 7,23 (s, 1 H) 7,50 (s, 1 H) 7,90 (t, J=8,03 Hz, 1 H) 8,12 (dd, J=15,37, 7,34 Hz, 2 H) 8,36 (d, J=8,28 Hz, 1 H) 9,02 (br d, J=14,30 Hz, 1 H).

Ejemplo 004: WX004

Etapa 1: Síntesis del Compuesto WX004-2

Se añadió N-bromosuccinimida (22,97 g, 129,75 mmoles, 1,00 eq) a una mezcla de WX004-1 (20,00 g, 129,75 mmoles, 1,00 eq) y ácido sulfúrico concentrado (200,00 ml), y se agitó a 20°C durante 20 minutos. La disolución de reacción se vertió en agua con hielo (1000 ml) mientras se agitaba, y se formó un sólido blanco. Después filtrar, la torta del filtro se disolvió con 500 ml de diclorometano, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró, y se evaporó hasta sequedad para dar WX004-2. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 2,45 (s, 3 H) 7,07 (d, J=11,17 Hz, 1 H) 8,16 (d, J=6,90 Hz, 1 H).

Etapa 2: Síntesis del Compuesto WX004-3

El material bruto WX004-2 (27,00 g, 115,86 mmoles, 1,00 eq) se disolvió en metanol (200,00 ml), seguido de la adición de ácido sulfúrico concentrado (11,36 g, 115,86 mmoles, 6,18 ml, 1,00 eq). La reacción se llevó a cabo a 90°C durante 18 horas. La disolución de reacción se evaporó hasta sequedad, y se disolvió en 250 ml de diclorometano, seguido de la adición de 150 ml de disolución saturada de bicarbonato de sodio, extracción y evaporación hasta sequedad para dar WX004-3. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 2,42 (s, 3 H) 3,92 (s, 3 H) 7,04 (d, J=11,04 Hz, 1 H) 8,09 (d, J=6,90 Hz, 1 H).

Etapa 3: Síntesis del Compuesto WX004-4

Se disolvió WX004-3 (5,00 g, 20,24 mmoles, 1,00 eq) en dioxano (60,00 ml), seguido de la adición de (Bpin)2 (7,71 g, 30,36 mmoles, 1,50 eq), acetato de potasio (5,96 g, 60,72 mmoles, 3,00 eq) y Pd(dppf)Cl2 (2,96 g, 4,05 mmoles, 0,20 eq), y se cargó con gas nitrógeno. La reacción se llevó a cabo a 90°C durante 18 horas en atmósfera de nitrógeno. Una vez completada la reacción, la mezcla de reacción se filtró a través de diatomita, y el filtrado se evaporó hasta sequedad. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna (SiO2, PE:EA = 20:1-7:1) para dar WX004-4. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,31 - 1,37 (m, 12 H) 2,53 - 2,58 (m, 3 H) 3,90 (s, 3 H) 6,92 (d, J=12,17 Hz, 1 H) 8,32 (d, J=8,53 Hz, 1 H)

Etapa 4: Síntesis del Compuesto WX004-5

WX004-4 se disolvió en tetrahidrofurano (35,00 ml), seguido de la adición de peryodato de sodio (5,09 g, 23,80 mmoles, 1,32 ml, 2,00 eq), y disolución de ácido clorhídrico 1N (10,00 ml). La disolución de reacción se hizo reaccionar a 25°C durante 18 horas. Una vez completada la reacción, la disolución de reacción se evaporó hasta sequedad, y se diluyó con 60 ml de acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con 40 ml de agua y 40 ml de salmuera saturada, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, y se evaporó hasta sequedad para dar un producto bruto. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna (SiO2, PE:EA = 5:1 hasta EA) para dar WX004-5.

Etapa 5: Síntesis del Compuesto WX004-6

Se añadieron azida sódica (9,69 g, 149,05 mmoles, 2,50 eq) y cloruro de tributil-estannoso (48,52 g, 149,05 mmoles, 40,10 ml, 2,50 eq) a una disolución de WX004-6a (4,00 g, 59,62 mmoles, 4,40 ml, 1,00 eq) en o-xileno (50,00 ml). La reacción se llevó a cabo a 160°C durante 6 horas en atmósfera de nitrógeno. (El aparato de reacción se inactivó con hipoclorito sódico). Después de que la disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, la disolución de reacción se ajustó a pH 9 con hidróxido de sodio al 20%, y se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora, seguido de separación. La fase acuosa se ajustó a pH=2 con ácido clorhídrico 2N, se extrajo con 100 ml*3 de acetato de etilo, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, y se evaporó hasta sequedad con la colocación de los deflectores para dar WX004-6. RMN 1H (400 MHz, METANOL-C4) 8 ppm 1,01 - 1,09 (m, 2 H) 1,19 - 1,25 (m, 2 H) 2,17 - 2,25 (m, 1 H). Etapa 6: Síntesis del Compuesto WX004-7

WX004-6 (800,00 mg, 7,26 mmoles, 1,00 eq), WX004-5 (1,54 g, 7,26 mmoles, 1,00 eq) y Cu2O (51,98 mg, 363,00 mmoles, 37,13 ml, 0,05 eq) se añadieron secuencialmente en dimetilsulfóxido (24,00 ml). La disolución se hizo reaccionar a 110°C durante 18 horas en atmósfera de O2. Una vez completada la reacción, la disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con 80 ml de diclorometano, y se lavó con 60 ml de ácido clorhídrico 1M y 60 ml de salmuera saturada. Tras la separación, la fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro y se evaporó hasta sequedad. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna (SiO2, éter de petróleo: acetato de etilo = 1:0 a 50:1 hasta 20:1) para dar WX004-7. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-C) 8 ppm 1,1 (m, 2 H) 1,2 (m, 2 H) 2,2 (m, 1 H) 2,42 (s, 3 H) 3,94 (m, 3 H) 7,19 (d, J=10,67 Hz, 1 H) 8,19 (d, J=6,65 Hz, 1 H).

Etapa 7: Síntesis del Compuesto WX004-8

WX004-7 (500,00 mg, 1,81 mmoles, 1,00 eq) se disolvió en tetrahidrofurano (5,00 ml) y agua (5,00 ml), seguido de la adición de LiOH (130,04 mg, 5,43 mmoles, 3,00 eq). La disolución de reacción se hizo reaccionar a 25°C durante 2 horas, y se extrajo con 10 ml de metil terc-butil éter. La fase acuosa aislada se ajustó a pH 2 con ácido clorhídrico 2N, y se extrajo con 20 ml*3 de acetato de etilo. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se evaporó hasta sequedad para dar WX004-8. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-C) 8 ppm 1,18 (d, J=6,78 Hz, 4 H) 2,26 - 2,36 (m, 1 H) 2,45 (s, 3 H) 7,23 (d, J=10,79 Hz, 1 H) 8,27 (d, J=6,65 Hz, 1 H).

Etapa 8: Síntesis del Compuesto WX004-9

WX004-8 (150,00 mg, 572,00 mmoles, 1,00 eq) se añadió a un vial que contenía diclorometano anhidro (7,00 ml), y se cargó con gas nitrógeno tres veces. Entonces se le añadió cloruro de oxalilo (123,43 mg, 972,40 mmoles, 85,12 ml, 1,70 eq) para formar una emulsión, seguido de la adición de N,N-dimetilformamida (4,18 mg, 57,20 mmoles, 4,40 ml, 0,10 eq). La reacción se llevó a cabo a 25°C durante 1 hora en atmósfera de nitrógeno. Se añadieron 5 ml de diclorometano anhidro a la disolución de reacción, y se evaporó a temperatura ambiente a presión reducida hasta que quedaron 2 ml de diclorometano anhidro. Tales procedimientos se repitieron cuatro veces para dar WX004-9 disuelto en 2 ml de diclorometano anhidro. m/z = 277,1 (M+1) (MS éster metílico).

Etapa 9: Síntesis del Compuesto WX004

WX004-9 (130,40 mg, 464,58 mmoles, 1,00 eq) se disolvió en diclorometano anhidro (3,00 ml) en un vial, seguido de la adición de WXBB-3 (100,00 mg, 464,58 mmoles, 1,00 eq) y diisopropiletilamina (60,04 mg, 464,58 mmoles, 81,14 ml, 1,00 eq). La reacción se llevó a cabo a 25°C durante 18 horas en atmósfera de nitrógeno. La disolución de reacción se lavó con 10 ml de salmuera saturada, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, y se evaporó para dar un producto bruto. El producto bruto se purificó mediante prep-HPLC (columna: Waters Xbridge 150*25 mm 5 mm; fase móvil: [agua (10 mM NH4HCO3)-ACN]; B%: 25%-60%, 10,5 min) para dar WX004. m/z = 460,2 [M+1]. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-C) 8 ppm 1,19 (d, J=6,65 Hz, 4 H) 1,94 - 2,13 (m, 4 H) 2,32 (t, J=6,53 Hz, 1 H) 2,49 (s, 3 H) 3,11 (t, J=6,15 Hz, 2 H) 4,52 (t, J=5,96 Hz, 2 H) 7,26 (br s, 1 H) 7,91 (t, J=8,03 Hz, 1 H) 8,11 (d, J=7,28 Hz, 1 H) 8,35 - 8,40 (m, 1 H) 8,45 (d, J=7,28 Hz, 1 H) 9,01 (br d, J=15,06 Hz, 1 H)

Ejemplo 005: WX005

Ruta sintética:

Etapa 1: Síntesis del Compuesto WX005-3

Se añadió WX005-3a (2,28 g, 33,91 mmoles, 2,50 ml, 1,00 eq) en un matraz de tres bocas de 100 ml presecado, y se cargó con gas nitrógeno tres veces, seguido de la adición de 10 ml de ácido clorhídrico (4,87 N en dioxano). Después, se añadió gota a gota etanol anhidro (1,56 g, 33,91 mmoles, 1,98 ml, 1,00 eq) al sistema de reacción en atmósfera de nitrógeno. Una vez completada la adición, la mezcla se hizo reaccionar a 25°C durante 3 horas. La disolución de reacción se filtró y se evaporó hasta sequedad para dar WX005-3. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,12 - 1,23 (m, 4 H) 1,36 (t, J=7,03 Hz, 3 H) 2,30 - 2,41 (m, 1 H) 4,54 (q, J=7,03 Hz, 2 H) 11,15 (brs, 1 H) 12,24 (br s, 1 H). Etapa 2: Síntesis del Compuesto WX005-2

WX005-1 (1,72 g, 11,46 mmoles, 1,00 eq) se disolvió en ácido clorhídrico (63,00 ml) y se enfrió a 0°C, seguido de la adición gota a gota de una disolución de nitrito de sodio (948,49 mg, 13,75 mmoles, 746,84 pl, 1,20 eq) en agua (6,00 ml). Una vez completada la adición gota a gota, la reacción se llevó a cabo a 0-5°C durante 0,5 horas. Se añadió gota a gota una disolución de cloruro estannoso dihidrato (7,76 g, 34,38 mmoles, 2,86 ml, 3,00 eq) en ácido clorhídrico (4 ml, 37%) a la disolución de reacción, y la reacción se llevó a cabo a 25°C durante 3 horas, formando una gran cantidad de precipitados grises. Una vez completada la reacción, se filtró la disolución de reacción, y se añadió metanol (20 ml) a la torta del filtro. El filtrado se ajustó a pH 8 con disolución acuosa saturada de bicarbonato de sodio, y se extrajo con acetato de etilo (3x100 ml). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera saturada (2x100 ml), se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, y se concentraron a presión reducida para dar un sólido de color amarillo oscuro. El sólido de color amarillo oscuro se aisló mediante cromatografía en columna ultrarrápida (gel de sílice: malla 100-200; DCM: MeOH = 20:1) para dar el producto. WX005-2. m/z = 166,3 [M+1].

Etapa 3: Síntesis del Compuesto WX005-5

Se añadieron WX005-2 (3,00 g, 14,88 mmoles, 1,00 eq) y WX005-3 (2,23 g, 14,88 mmoles, 1,00 eq) a un vial de 40 ml presecado, seguido de la adición de etanol anhidro (45,00 ml) y trietilamina (3,01 g, 29,76 mmoles, 4,12 ml, 2,00 eq). La reacción se llevó a cabo a 20°C durante 0,5 horas. El disolvente se eliminó mediante evaporación rotatoria. Después, se añadieron al producto bruto WX005-4 (15,79 g, 148,80 mmoles, 16,28 ml, 10,00 eq) y ácido carbámico (1,88 g, 29,76 mmoles, 2,00 eq), respectivamente. Se elevó la temperatura a °C y se llevó a cabo la reacción durante 15,5 horas. El sistema de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con 50 ml de bicarbonato de sodio saturado y 50 ml de acetato de etilo. La fase orgánica se recogió tras la separación, y la acuosa se extrajo con acetato de etilo (20 mlx3). La fase orgánica se combinó, se lavó con salmuera saturada (50 ml), se secó sobre sulfato de sodio anhidro y se concentró a presión reducida para dar un sólido amarillo. El producto bruto se recristalizó con acetato de etilo/éter de petróleo = 1/5 (30 ml) para dar el producto WX005-5. RMN 1H (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 = 8,01 (s, 1 H), 7,54 (d, J=5,9 Hz, 1 H), 7,23 - 7,13 (m, 1 H), 2,31 - 2,21 (m, 3H), 2,05 (quin, J=6,6 Hz, 1H), 0,97 (d, J=6,7 Hz, 4H). Etapa 4: Síntesis del Compuesto WX005-6

WX005-5 (500,00 mg, 2,06 mmoles, 1,00 eq) se añadió a un matraz de 100 ml presecado, y se disolvió en ácido clorhídrico (10,20 g, 279,76 mmoles, 10,00 ml, 135,81 °C eq). La reacción se agitó a 100°C durante 16 horas. El sistema de reacción se enfrió a temperatura ambiente, y precipitó una gran cantidad de sólido tras enfriar, seguido de filtración a través de un embudo de cinco orificios. La torta del filtro se recogió para dar WX005-6. RMN 1H (400MHz, METANOL-d4) 8 = 9,67 (s, 1 H), 8,06 (d, J=6,6 Hz, 1 H), 7,36 (d, J=11,0 Hz, 1 H), 2,32 (s, 3H), 2,26 - 2,11 (m, 1 H), 1,27 - 1,18 (m, 2H), 1,15 - 1,05 (m, 2H).

Etapa 5: Síntesis del Compuesto WX005-7

WX005-6 (300,00 mg, 1,15 mmoles, 1,00 eq) se añadió a un vial de 40 ml presecado. Se le añadió diclorometano anhidro (5,00 ml) y se cargó con gas nitrógeno, seguido de adición lenta de cloruro de oxalilo (291,51 mg, 2,30 mmoles, 201,04 ml, 2,00 eq) y N,N-dimetilformamida anhidra (8,39 mg, 114,83 mmoles, 8,83 ml, 0,10 eq) a 0°C. Una vez completada la adición, se llevó a cabo la reacción a 20°C durante 1 hora. El sistema de reacción se concentró a presión reducida y se disolvió repetidamente con diclorometano anhidro, seguido de la evaporación hasta sequedad tres veces para dar WX005-7.

Etapa 6: Síntesis del Compuesto WX005

El material bruto WX005-7 (300,00 mg, 1,07 mmoles, 1,00 eq) se añadió a un vial de 40 ml presecado, seguido de la adición de diclorometano (3 ml), el sistema de reacción se cargó con gas nitrógeno y se enfrió a 0°C en un baño de hielo y agua. Después, se añadió material bruto WXBB-3 (230,32 mg, 1,07 mmoles, 1,00 eq), y se añadió lentamente a 0°C una disolución de diisopropiletilamina (138,29 mg, 1,07 mmoles, 186,88 ml, 1,00 eq) en diclorometano (2 ml). La temperatura se elevó de forma natural a la temperatura ambiente, y la reacción se agitó a 20°C durante 16 horas. El sistema de reacción se diluyó con 10 ml de agua/10 ml de diclorometano. La fase orgánica se recogió tras la separación, y la fase acuosa se extrajo con diclorometano (5 ml x 3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera saturada (20 ml), se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, y se concentraron a presión reducida. El producto bruto se aisló y se purificó mediante prep-HPLC (neutra) para dar el producto bruto WX005. RMN 1H (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 = 9,02 (br d, J=14,8 Hz, 1 H), 8,36 (d, J=7,7 Hz, 1 H), 8,16 - 8,08 (m, 2H), 7,90 (t, J=7,9 Hz, 1 H), 7,22 (d, J=12,3 Hz, 1H), 4,51 (t, J=6,1 Hz, 2H), 3,10 (t, J=6,5 Hz, 2H), 2,37 (s, 3H), 2,22 - 2,11 (m, 1 H), 2,11 - 2,03 (m, 2H), 2,02 - 1,92 (m, 2H), 1,10 - 1,00 (m, 4H).

Ejemplo 006: WX006

Ruta sintética:

Etapa 1: Síntesis del Compuesto WX006-2

Se añadieron WX006-1 (100,00g, 455,48 mmoles, 1,00 eq) y EtOH (700,00 ml) a un matraz de tres bocas de 250 ml presecado. Se añadió gota a gota H2SO4 (223,37 g, 2,28 mol, 121,40 ml, 5,00 eq) a la disolución de reacción, y se calentó a reflujo a 80°C durante 5 horas. El sistema de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con 200 ml de EA. La fase orgánica se recogió tras la separación, y la fase acuosa se extrajo con EA (2*100 ml). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron secuencialmente con disolución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (2*100 ml), con agua (2*100 ml) y con salmuera saturada (2*100 ml), se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, y se concentraron a presión reducida para dar el residuo WX006-2.

Etapa 2: Síntesis del Compuesto WX006-3

WX006-2 (117,00 g, 472,52 mmoles, 1,00 eq), Fe (65,98 g, 1,18 mol, 2,50 eq), NH4Cl (27,80 g, 519,77 mmoles, 18,17 ml, 1,10 eq) y los disolventes H2O (345,00 ml) y EtOH (1,10 l) se añadieron a un matraz de fondo redondo de 2 l presecado, y la disolución de reacción se calentó a reflujo a 80°C durante 6 horas. La disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, y se filtró a través del embudo Buchner con diatomita. La torta del filtro se lavó con diclorometano (300 ml), y el filtrado se extrajo con diclorometano (2x400 ml). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera saturada (2x300 ml), se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, y se concentraron a presión reducida para dar el residuo WX006-3.

Etapa 3: Síntesis del Compuesto WX006-4

WX006-3 (37,00 g, 170,02 mmoles, 1,00 eq), WXBB-1-3 (47,56 g, 187,02 mmoles, 1,10 eq) y DIEA (65,92 g, 510,06 mmoles, 89,08 ml, 3,00 eq) se añadieron a un matraz de fondo redondo de 500 ml presecado, seguido de la adición de xileno (300,00 ml), y se agitaron continuamente a 140°C durante 10 horas. El sistema de reacción se enfrió a temperatura ambiente, y se diluyó con 150 ml de agua. La fase orgánica se recogió después de la separación y la fase acuosa se extrajo con EA (2*150 ml). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron secuencialmente con disolución de cloruro de amonio saturada (2*150 ml), con salmuera saturada (2*100 ml), se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, y se concentraron a presión reducida para dar WX006-4.

Etapa 4: Síntesis del Compuesto WX006-5

WX006-4 (47,80 g, 159,48 mmoles, 1,00 eq) y AcOH (250,00 ml) se añadieron en un matraz presecado de 500 ml, seguido de la adición de tiocianato de potasio (31,00 g, 318,96 mmoles, 31,00 ml, 2,00 eq), y se agitaron continuamente a 110°C durante 4 horas. Una vez completada la reacción, la disolución de reacción se evaporó hasta sequedad a presión reducida, y el residuo se disolvió en DCM (150 ml), seguido de la adición de agua (150 ml). La fase acuosa se extrajo con DCM (2x100 ml). Las fases orgánicas se combinaron y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración por succión y evaporación hasta sequedad a presión reducida. El residuo se recristalizó con EA (15 ml) para dar WX006-5.

Etapa 5: Síntesis del Compuesto WX006-6

Se añadieron ácido acético (53,19 ml), agua (10,00 ml) y peróxido de hidrógeno (4,49 g, 39,61 mmoles, 3,81 ml, pureza del 30%, 3,00 eq) a un matraz de tres bocas de 250 ml presecado, y la temperatura de reacción se controló a 45°C con un termómetro interno, seguido de la adición de WX006-5 (4,5 g, 13,20 mmoles, 1,00 eq) en porciones. La temperatura se controló por debajo de 55°C, y la reacción se llevó a cabo a esta temperatura durante 30 minutos. Después de la reacción de 30 minutos, la disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, seguido de la adición de 20 ml de disolución saturada de sulfito de sodio. No se detectó color azul mediante el papel de almidón de yoduro de potasio. Después de la evaporación rotatoria a presión reducida, el residuo se disolvió en 100 ml de agua, y se ajustó a pH 10 con hidróxido de amoniaco, seguido de la extracción con diclorometano (2x150 ml). Las fases orgánicas se combinaron y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de evaporación rotatoria a presión reducida. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (EA: PE = 1:10-1:2) para dar WX006-6.

Etapa 6: Síntesis del Compuesto WX006-7

WX006-6 (3,85 g, 12,47 mmoles, 1,00 eq), hidróxido de litio (895,97 mg, 37,41 mmoles, 3,00 eq) y tetrahidrofurano (38,00 ml) y agua (38,00 ml) se añadieron a un matraz de fondo redondo de 250 ml presecado. La disolución transparente se agitó a 25°C durante 2 horas, y se ajustó a pH 4-5 con ácido clorhídrico 2N, seguido de la extracción con cloroformo: alcohol isopropílico (3:1,5x50 ml). Las fases orgánicas se combinaron, y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración por succión y evaporación rotatoria para dar WX006-7. m/z = 281,1 [M+1].

Etapa 7: Síntesis del Compuesto WX006-8

WX006-7 (2,06 g, 7,34 mmoles, 1,00 eq) se añadió a un matraz de fondo redondo de 100 ml presecado, y se cargó tres veces con gas nitrógeno, seguido de la adición de diclorometano (54,00 ml). Después, se le añadieron lentamente gota a gota cloruro de oxalilo (1,86 g, 14,68 mmoles, 1,29 ml, 2,00 eq) y N,N-dimetilformamida (53,65 mg, 734,00 mmoles, 56,47 ml, 0,10 eq) en atmósfera de nitrógeno. Una vez completada la adición gota a gota, la reacción se llevó a cabo a 25°C durante 1 hora, seguido de evaporación rotatoria con bomba de agua. Cuando el volumen de la disolución se redujo a alrededor de un tercio de su volumen original, se añadieron 10 ml de diclorometano anhidro. Tales procedimientos se repitieron tres veces para dar una disolución de WX006-8 en diclorometano para uso directo en la siguiente reacción. m/z = 295,1 [M+14].

Etapa 8: Síntesis del Compuesto WX006-9

Un matraz de fondo redondo de 100 ml que contenía WX006-8 (1,08 g, 3,61 mmoles, 1,00 eq) se cargó con gas nitrógeno tres veces, seguido de la adición de diclorometano (30 ml) y diisopropiletilamina (699,93 mg, 5,42 mmoles, 943,30 ml, 1,5 eq). Se le añadió WXBB-3 (816,03 mg, 3,79 mmoles, 1,05 eq) en atmósfera de nitrógeno, y la disolución transparente se hizo reaccionar a 25°C durante 0,5 horas. El producto se redisolivó con diclorometano (20 ml) y se extrajo con agua a pH = 2 (3x30 ml). Después, la fase acuosa se ajustó a pH = 10, y se extrajo con diclorometano (3x50 ml). Las fases orgánicas se combinaron, y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración por succión y evaporación hasta sequedad para dar WX006-9. m/z = 478,2 [M+1].

Etapa 9: Síntesis del Compuesto WX006

WX006-9 (0,3 g, 627,72 mmoles, 1,00 eq), ácido 3-piridinborónico (154,32 mg, 1,26 mmoles, 2,00 eq), acetato de paladio (14,09 mg, 62,77 mmoles, 0,10 eq), n-butilbis(1-adamantil)fosfina (22,51 mg, 62,77 mmoles, 0,10 eq) y carbonato de potasio (260,27 mg, 1,88 mmoles, 3,00 eq) se añadieron en un vial de 10 ml presecado, y se cargaron con gas nitrógeno tres veces, seguido de la adición de agua (0,5 ml) y dioxano (5 ml). El sistema de reacción se colocó en un baño de aceite a 90°C en atmósfera de nitrógeno, y se agitó durante 2 horas. La disolución de reacción se evaporó hasta sequedad, y se purificó mediante columna de gel de sílice corta (malla 100-200) para dar WX006. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 0,59 - 0,67 (m, 2 H) 0,73 - 0,83 (m, 2 H) 1,73 (ddd, J=13,34, 8,38, 4,96 Hz, 1 H) 1,86 - 2,07 (m, 4 H) 3,03 (br t, J=6,28 Hz, 2 H) 4,44 (br t, J=5,95 Hz, 2 H) 6,53 (s, 1 H) 7,16 (s, 1 H) 7,21 - 7,26 (m, 1 H) 7,32 (d, J=11,91 Hz, 1 H) 7,85 (t, J=8,05 Hz, 1 H) 8,05 (d, J=7,72 Hz, 1 H) 8,17 (d, J=7,06 Hz, 1 H) 8,31 (d, J=8,38 Hz, 1 H) 8,46 (d, J=1,76 Hz, 1 H) 8,57 (dd, J=4,52, 1,65 Hz, 1 H) 8,99 (br d, J=13,89 Hz, 1 H).

Ejemplo 007: WX007

Ruta sintética:

Etapa 1: Síntesis del Compuesto WX007-2

2-Bromo-1-metoxietano (20 g, 84,75 mmoles, 1 eq) y N,N-dimetilformamida (150 ml) se añadieron en un matraz de fondo redondo de 250 ml presecado, seguido de la adición de WX007-1 (14,13 g, 101,70 mmoles, 9,55 ml, 1,2 eq) y carbonato de potasio (23,43 g, 169,49 mmoles, 2 eq). El sistema se hizo reaccionar a 50°C durante 20 horas. La disolución de reacción se evaporó hasta sequedad, y se redisolvió en acetato de etilo (100 ml) y agua (100 ml). Se separaron la fase orgánica y la fase acuosa, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3x50 ml). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera saturada (2x150 ml), y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración por succión para dar un producto bruto. El producto bruto se purificó mediante una columna de gel de sílice ultrarrápida (EA:PE = 1:10-1:4) para dar WX007-2. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 3,41 (s, 3 H) 3,73 - 3,82 (m, 2 H) 4,14 - 4,28 (m, 1 H) 4,14 - 4,28 (m, 1 H) 6,93 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 8,10 (d, J=7,28 Hz, 1 H). Etapa 2: Síntesis del Compuesto WX007-3

WX007-2 (22,3 g, 75,83 mmoles, 1,00 eq), polvo de Fe (12,71 g, 227,49 mmoles, 3 eq), cloruro de amonio (4,46 g, 83,41 mmoles, 2,92 ml, 1,10 eq), agua (130 ml) y etanol (400 ml) se añadieron a un matraz con forma de berenjena de 1000 ml presecado. La disolución de reacción se calentó a reflujo a 80°C durante 6 horas. La disolución de reacción se hizo pasar a través de diatomita, seguido de evaporación rotatoria hasta sequedad y disolución en diclorometano (100 ml) y agua (80 ml). La fase acuosa se extrajo con diclorometano (2x50 ml). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera saturada (2x100 ml), se secaron, se filtraron, y se concentraron para dar un producto bruto. Se proporcionó WX007-3 mediante columna de gel de sílice ultrarrápida (acetato de etilo:éter de petróleo = 1:8-1:1). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 3,41 (s, 3 H) 3,71 - 3,77 (m, 4 H) 4,06 - 4,10 (m, 2 H) 6,62 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 6,80 (d, J=6,84 Hz, 1 H).

Etapa 3: Síntesis del Compuesto WX007-4

WX007-3 (12,64 g, 47,86 mmoles, 1,00 eq), WXBB-10 (13,39 g, 52,65 mmoles, 1,10 eq) y tolueno (120 ml) se añadieron a un matraz de reacción de 500 ml presecado. La temperatura de la reacción se elevó a 100°C, seguido de la adición de diisopropiletilamina (12,37 g, 95,72 mmoles, 16,67 ml, 2,00 eq). La reacción se llevó a cabo a 100°C durante 10 horas, seguido de evaporación rotatoria hasta sequedad y purificación por cromatografía en columna (acetato de etilo: éter de petróleo = 0-1:10) para dar WX007-4. m/z = 346,1,348,1 [M+1].

Etapa 4: Síntesis del Compuesto WX007-5

WX007-4 (14,85 g, 42,90 mmoles, 1,00 eq) y ácido acético glacial (200 ml) se añadieron en un matraz de fondo redondo de 500 ml presecado, seguido de la adición de tiocianato de potasio (8,34 g, 85,79 mmoles, 8,34 ml, 2,00 eq). La temperatura de la reacción se elevó a 110°C, y se hizo reaccionar durante 3 horas. Una vez completada la reacción, la disolución de reacción se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida, y el residuo se redisolvió en diclorometano (60 ml), seguido de la adición de agua (60 ml). La fase acuosa se extrajo con diclorometano (2x40 ml). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera saturada (2x50 ml), y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración por succión, evaporación rotatoria y purificación por cromatografía en columna (acetato de etilo: éter de petróleo = 1:10-1:1) para dar WX007-5. m/z = 387,1 389,1 [M+1].

Etapa 5: Síntesis del Compuesto WX007-6

Ácido acético glacial (100 ml), agua (18 ml) y peróxido de hidrógeno (9,39 g, 82,80 mmoles, 7,95 ml, pureza del 30%, 3,00 eq) se añadieron a un matraz de tres bocas de 250 ml presecado, y la temperatura de reacción se controló a 45°C con un termómetro interno, seguido de la adición de WX007-5 (10,69 g, 27,60 mmoles, 1,00 eq) en porciones. La temperatura se controló por debajo de 55°C, y la reacción se llevó a cabo a esta temperatura durante 30 minutos. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, seguido de la adición de 20 ml de disolución de sulfito de sodio saturada. No se detectó color azul mediante el papel de almidón de yoduro de potasio. Tras la evaporación rotatoria a presión reducida, el residuo se disolvió en 100 ml de agua, y se ajustó a pH 10 con hidróxido de amoniaco, seguido de extracción con diclorometano (2x150 ml). Las fases orgánicas se combinaron y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de evaporación rotatoria a presión reducida para dar WX007-6. m/z = 355,1 357,1 [M+1].

Etapa 6: Síntesis del Compuesto WX007-7

WX007-6 (7,1 g, 19,99 mmoles, 1,00 eq) y trietilamina (4,05 g, 39,98 mmoles, 5,56 ml, 2,00 eq) se añadieron a un matraz de hidrogenación de 250 ml, seguido de la adición de metanol (100 ml) y Pd(dppf)Cl2 (2,19 g, 3,00 mmoles, 0,15 eq), y se cargó con monóxido de carbono tres veces y se sometió a presión de 50 psi. La vasija de reacción se colocó en un baño de aceite a 70°C (temperatura externa) y se agitó durante 10 horas. La disolución de reacción se sometió a evaporación rotatoria y se aisló mediante cromatografía en columna (acetato de etilo: éter de petróleo = 1:10-1:1) para dar WX007-7. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 0,70 - 0,78 (m, 2 H) 0,81 - 0,89 (m, 2 H) 1,81 - 1,91 (m, 1 H) 3,36 (s, 3 H) 3,66 - 3,73 (m, 2 H) 3,88 (s, 3 H) 4,14 - 4,21 (m, 2 H) 6,78 (d, J= 11,69 Hz, 1 H) 6,90 (s, 1 H) 7,66 (s, 1 H) 7,84 (d, J=7,50 Hz, 1 H).

Etapa 7: Síntesis del Compuesto WX007-8

WX007-7 (0,6 g, 1,79 mmoles, 1,00 eq), hidróxido de litio (128,94 mg, 5,38 mmoles, 3,00 eq), tetrahidrofurano (12 ml) y agua (12 ml) se añadieron a un matraz de 100 ml presecado. La disolución transparente se agitó a 25°C durante 1 hora. Una vez completada la reacción, la disolución de reacción se sometió directamente a evaporación rotatoria con bomba de agua, seguido de la adición de tolueno (2x10 ml) para eliminar el agua residual que dejó la evaporación rotatoria, para dar WX007-8. m/z = 321,2 [M+1].

Etapa 8: Síntesis del Compuesto WX007-9

WX007-8 (574,83 mg, 1,79 mmoles, 1,00 eq) se añadió a un matraz de fondo redondo de 100 ml presecado, y se desplazó con nitrógeno tres veces, seguido de la adición de diclorometano (20 ml). Después, se le añadieron lentamente gota a gota en atmósfera de nitrógeno cloruro de oxalilo (455,57 mg, 3,59 mmoles, 314,19 pl, 2,00 eq) y W,W-dimetilformamida (13,12 mg, 179,46 pmoles, 13,81 pl, 0,10 eq). Una vez completada la adición gota a gota, la reacción se llevó a cabo a 25°C durante 1 hora, seguido de la evaporación rotatoria con bomba de agua. Cuando el volumen de la disolución se redujo a alrededor de un tercio de su volumen original, se añadieron 20 ml de diclorometano anhidro. Tales procedimientos se repitieron tres veces para dar una disolución de WX007-9 en diclorometano para uso directo en la siguiente reacción. m/z = 335,2 [M+14].

Etapa 9: Síntesis del Compuesto WX007

Un matraz de fondo redondo de 100 ml que contiene WX007-9 (721,80 mg, 2,13 mmoles, 1,05 eq) se cargó con gas nitrógeno tres veces, seguido de la adición de diclorometano (30 ml) y diisopropiletilamina (393,39 mg, 3,04 mmoles, 530,17 pl, 1,5 eq). Se le añadió WXBB-3 (687,43 mg, 2,03 mmoles, 1,00 eq) en atmósfera de nitrógeno, y la disolución transparente se hizo reaccionar a 25°C durante 10 horas, seguido de la extracción con agua de pH=2 (3x30 ml). Después, la fase acuosa se ajustó a pH=10 y se extrajo con diclorometano (3x50 ml). Las fases orgánicas se combinaron, y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración por succión y evaporación rotatoria hasta sequedad para dar un producto bruto. El producto bruto se aisló mediante preparación rápida para dar WX007 (42,7 mg, 82,50 mmoles, rendimiento del 4,07%). RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 0,78 - 0,91 (m, 2 H) 1,02 -1,10 (m, 2 H) 1,98 - 2,13 (m, 5 H) 3,05 (t, J=6,40 Hz, 2 H) 3,41 (s, 3 H) 3,77 (dd, J=5,14, 3,39 Hz, 2 H) 4,34 - 4,42 (m, 2 H) 4,59 (t, J=5,96 Hz, 2 H) 7,32 (d, J=12,42 Hz, 1 H) 7,46 (s, 1 H) 7,91 (d, J=7,15 Hz, 1 H) 7,99 - 8,06 (m, 2 H) 8,34 (d, J=7,78 Hz, 1 H) 8,66 (s, 1 H).

Ejemplo 008: WX008

Ruta sintética:

Etapa 1: Síntesis del Compuesto WX008-2

WX008-1 (28 g, 118,65 mmoles, 1 eq) se disolvió en DMF anhidra (200 ml), seguido de la adición de K2CO3 (32,80 g, 237,29 mmoles, 2 eq) y BnBr (24,35 g, 142,38 mmoles, 16,91 ml, 1,2 eq). La mezcla se agitó a 20°C durante 16 horas. La disolución de reacción se vertió en agua (600 ml), y se extrajo con EA (300 ml*2). La fase orgánica se lavó con agua (300 ml) y con salmuera saturada (300 ml), y se secó sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se evaporó hasta sequedad a presión reducida. La suspensión del producto bruto se llevó a cabo con PE/EA = 5/1 (120 ml) a 20°C durante 0,5 horas, seguido de filtración. La torta del filtro se filtró con succión hasta sequedad a presión reducida para dar WX008-2. RMN 1H (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 = 8,20 (d, J=7,3 Hz, 1H), 7,50 - 7,38 (m, 5H), 6,94 (d, J=9,8 Hz, 1H), 5,25 (s, 2H).

Etapa 2: Síntesis del Compuesto WX008-3

WX008-2 (26,5 g, 81,26 mmoles, 1 eq) se disolvió en MeOH (500 ml), seguido de la adición de NÍCI 6 H2O (69,53 g, 292,53 mmoles, 3,6 eq) en porciones, y adición de NaBH4 (15,37 g, 406,26 mmoles, 5 eq) en porciones a 0°C. La mezcla se agitó a 25°C durante 0,5 horas, seguido de la adición de una disolución saturada de cloruro de amonio (500 ml). La disolución de reacción se sometió a evaporación rotatoria para eliminar el metanol, seguido de la adición de EA (500 ml), y se agitó durante 10 minutos. El sólido insoluble se separó por filtración. El filtrado se separó para recoger la fase orgánica, y la fase acuosa se extrajo con EA (250 ml). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera saturada (250 ml), y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar WX008-3. RMN 1H (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 = 7,43 (br s, 5H), 6,87 (br d, J=5,0 Hz, 1H), 6,70 (br d, J=9,5 Hz, 1H), 5,07 (br s, 2H), 3,75 (br s, 2H).

Etapa 3: Síntesis del Compuesto WX008-4

WX008-3 (22 g, 63,81 mmoles, 1 eq) (pureza: 85,59%) se añadió a tolueno anhidro (200 ml), seguido de la adición de WXBB-1-3 (17,04 g, 67,00 mmoles, 1,05 eq) y DIEA (16,49 g, 127,62 mmoles, 22,23 ml, 2 eq). La mezcla se agitó a 100°C durante 16 horas. La disolución de reacción se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad, seguido de la adición de agua (200 ml) y extracción con EA (200 ml*2). La fase orgánica se lavó con salmuera saturada (100 ml), y se secó sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida. Se añadió PE/EA=5/1 (60 ml) al producto bruto, y se llevó a cabo una suspensión a 20°C durante 0,5 horas, seguido de filtración. La torta del filtro se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar WX008-4. RMN 1H (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 = 7,38 - 7,23 (m, 5H), 6,58 (d, J=9,8 Hz, 1H), 6,48 (d, J=6,8 Hz, 1H), 5,02 (br d, J=4,8 Hz, 1H), 5,00 (s, 2H), 4,06 (d, J=5,0 Hz, 2H), 1,98 - 1,88 (m, 1H), 1,08 (quin, J=3,8 Hz, 2H), 0,96 - 0,87 (m, 2H)

Etapa 4: Síntesis del Compuesto WX008-5

Se añadió WX008-4 (15 g, 35,58 mmoles, 1 eq) (pureza: 89,71%) a AcOH (120 ml), seguido de la adición de KSCN (6,91 g, 71,15 mmoles, 6,91 ml, 2 eq). La mezcla se agitó a 110°C durante 4 horas en atmósfera de nitrógeno. La disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se vertió en agua (300 ml), y se agitó durante 15 minutos con la precipitación de sólidos, seguido de filtración. La torta del filtro se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar WX008-5. RMN 1H (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 = 11,56 (br s, 1H), 7,60 (d, J=7,3 Hz, 1H), 7,30 - 7,21 (m, 5H), 6,79 (d, J=9,8 Hz, 1H), 6,31 (s, 1H), 5,02 (s, 2H), 1,67 - 1,58 (m, 1H), 0,84 - 0,77 (m, 2H), 0,61 - 0,53 (m, 2H).

Etapa 5: Síntesis del Compuesto WX008-6

WX008-5 se disolvió en una disolución mixta de AcOH (150 ml) y H2O (15 ml), seguido de la adición gota a gota de H2O2 (12,97 g, 114,42 mmoles, 10,99 ml, pureza del 30%, 3,22 eq), y el sistema se agitó a 45°C durante 0,5 horas. Tras enfriar a temperatura ambiente, la disolución de reacción se añadió lentamente a una disolución de sulfato de sodio (30 g) en agua (30 ml), seguido de la extracción con EA (300 ml*2). La fase orgánica se lavó con bicarbonato de sodio saturado (300 ml), y se secó sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna (EA/PE = 0-10% a 20%) para dar WX008-6. RMN 1H (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 = 7,64 (d, J=1,0 Hz, 1H), 7,48 (d, J=7,0 Hz, 1H), 7,42 - 7,34 (m, 3H), 7,33 - 7,29 (m, 2H), 6,94 - 6,88 (m, 2H), 5,11 (s, 2H), 1,95 - 1,86 (m, 1H), 0,92 - 0,86 (m, 2H), 0,83 - 0,77 (m, 2H).

Etapa 6 : Síntesis del Compuesto WX008-7

WX008-6 (6 g, 14,56 mmoles, 1 eq) (pureza del 93,95%) se disolvió en MeOH anhidro (100 ml), seguido de adición de Pd(dppf)Cl2 (1,07 g, 1,46 mmoles, 0,1 eq) y Et3N (2,95 g, 29,11 mmoles, 4,05 ml, 2 eq). El sistema se agitó a 80°C durante 4 horas en atmósfera de CO (50 psi). La disolución de reacción se filtró, y el filtrado se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna (EA/PE = 0-10%-20%-40%) para dar WX008-7. RMN 1H (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 = 7,92 (d, J=7,5 Hz, 1H), 7,67 (d, J=0,8 Hz, 1H), 7,44 - 7,31 (m, 5H), 6,93 (d, J=0,8 Hz, 1H), 6,87 (d, J=11,8 Hz, 1H), 5,19 (s, 2H), 3,94 (s, 3H), 1,96 - 1,86 (m, 1H), 0,93 - 0,86 (m, 2H), 0,84 - 0,78 (m, 2H).

Etapa 7: Síntesis del Compuesto WX008-8

WX008-7 (2,7 g, 7,37 mmoles, 1 eq) se disolvió en THF anhidro (20 ml), seguido de la adición de una disolución de LiOH (530 mg, 22,13 mmoles, 3 eq) en H2O (10 ml). La mezcla se agitó a 20°C durante 1 hora. La disolución de reacción se secó directamente para dar un producto bruto. La suspensión del producto bruto se llevó a cabo con (DCM: MeOH = 10:1, 44 ml) a 20°C durante 0,5 horas, seguida de filtración. El filtrado se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar WX008-8. RMN 1H (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 0,59 - 0,65 (m, 2 H) 0,69 - 0,78 (m, 2 H) 1,73 - 1,83 (m, 1 H) 5,15 (s, 2 H) 6,99 (d, J=11,80 Hz, 1 H) 7,08 (s, 1 H) 7,33 (br dd, J=7,78, 4,77 Hz, 1 H) 7,36 (d, J=1,51 Hz, 2 H) 7,37 (br s, 2 H) 7,57 (d, J=7,78 Hz, 1 H) 7,64 (s, 1 H).

Etapa 8: Síntesis del Compuesto WX008-9

El Compuesto WX008-8 (690 mg, 1,96 mmoles, 1 eq) se añadió a un matraz de fondo redondo de 50 ml presecado, y se cargó con gas nitrógeno tres veces, seguido de la adición de diclorometano (50,00 ml). Después, se le añadieron lentamente gota a gota a 25°C en atmósfera de nitrógeno cloruro de oxalilo (497,12 mg, 3,92 mmoles, 342,84 ml, 2 eq) y N,N-dimetilformamida (14,31 mg, 195,82 mmoles, 15,07 ml, 0,1 eq). Una vez completada la adición gota a gota, la reacción se llevó a cabo a 25°C durante 1 hora, seguido de evaporación rotatoria con bomba de agua. Cuando el volumen de la disolución se redujo a alrededor de un tercio de su volumen original, se añadieron 50 ml de diclorometano anhidro. Tales procedimientos se repitieron durante tres veces para dar una disolución de WX008-9 (0,726 g) en diclorometano para uso directo en la siguiente reacción. EM: m/z = 367 [M+1 de éster metílico].

Etapa 9: Síntesis del Compuesto WX008-10

Se añadió diclorometano (30 ml) a un matraz de fondo redondo que contenía el Compuesto WX008-9 (0,726 g, 1,96 mmoles, 1 eq), y se añadió rápidamente gota a gota al matraz de reacción una disolución de Compuesto WXBB-3 (442,52 mg, 2,06 mmoles, 1,05 eq) en disolución de diclorometano (20 ml), seguido de la adición de diisopropiletilamina (278,34 mg, 2,15 mmoles, 375,13 ml, 1,1 eq) en atmósfera de nitrógeno. La disolución transparente se hizo reaccionar a 25°C durante 1 hora. La disolución de reacción se concentró, y el producto se redisolvió entonces con diclorometano (100 ml), se ajustó a pH = 2-3 con disolución acuosa 1M de ácido clorhídrico. La disolución de reacción se agitó completamente, y después se dejó reposar para la separación. La fase acuosa se recogió y se ajustó a pH = 8-9 con bicarbonato de sodio con precipitación de sólidos, seguido de filtración para dar los sólidos. Los sólidos se disolvieron con diclorometano y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, seguida de filtración. El filtrado se concentró para dar WX008-10 (0,8 g, 1,30 mmoles, rendimiento del 66,17%, pureza del 89%). RMN 1H (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 = 8,89 (br d, J=14,8 Hz, 1 H), 8,28 (d, J=8,2 Hz, 1 H), 8,07 (d, J=8,2 Hz, 1 H), 8,00 (d, J=7,5 Hz, 1 H), 7,82 (t, J=7,9 Hz, 1 H), 7,65 (d, J=0,9 Hz, 1 H), 7,36 - 7,30 (m, 2H), 7,30 - 7,25 (m, 2H), 6,90 (s, 1 H), 6,84 (d, J=13,5 Hz, 1 H), 5,15 (s, 2H), 4,41 (t, J=6,0 Hz, 2H), 3,02 (t, J=6,4 Hz, 2H), 2,04 - 1,95 (m, 2H), 1,94 - 1,88 (m, 2H), 1,83 (br dd, J=4,1,9,2 Hz, 1 H), 0,87 - 0,79 (m, 2H), 0,76 - 0,69 (m, 2H).

Etapa 10: Síntesis del Compuesto WX008

El Compuesto WX008-9 (0,8 g, 1,46 mmoles, 1 eq) se disolvió en metanol (50 ml), seguido de la adición de paladio sobre carbono (0,8 g, pureza del 50%). La mezcla se agitó a 25°C durante 2 horas en una atmósfera de hidrógeno (50 Psi). La disolución de reacción se filtró con diatomita. La torta del filtro se lavó secuencialmente con metanol (500 ml), diclorometano (500 ml), tetrahidrofurano (500 ml) y metanol (500 ml). El filtrado se concentró a presión reducida para dar un producto bruto. La suspensión del producto bruto se llevó a cabo con metanol (10 ml), seguido de la filtración. El filtrado se concentró para dar WX008 (0,15 g, 319,93 mmoles, rendimiento del 21,98%, pureza del 98%). RMN 1H (400MHz, DMSO-d6) 8 = 10,66 (s, 1 H), 8,16 (d, J=7,9 Hz, 1 H), 7,98 (t, J=7,9 Hz, 1H), 7,85 (d, J=7,5 Hz, 1H), 7,80 (s, 1 H), 7,69 (d, J=7,5 Hz, 1H), 7,23 (d, J=0,9 Hz, 1 H), 6,90 (d, J=11,9 Hz, 1H), 4,47 (t, J=5,8 Hz, 2H), 2,91 (t, J=6,3 Hz, 2H), 1,92 (br d, J=4,6 Hz, 2H), 1,88 - 1,79 (m, 3H), 0,82 - 0,75 (m, 2H), 0,71 - 0,64 (m, 2H).

Ejemplo 009: WX009

Ruta sintética:

Etapa 1: Síntesis del Compuesto WX009

Se añadieron Compuesto WX008 (200 mg, 435,28 mmoles, 1 eq), carbonato de potasio (120,32 mg, 870,56 mmoles, 2 eq), acetona (50 ml) y 2-bromoetanol (81,59 mg, 652,92 mmoles, 46,36 ml, 1,5 eq) a un vial de 40 ml presecado. La disolución de reacción se agitó a 75°C durante 16 horas. La disolución de reacción se concentró a presión reducida con una bomba de aceite para dar un sólido bruto. El producto bruto sólido se disolvió en N,N-dimetilformamida (8 ml), y después se aisló y purificó mediante preparación rápida (agua (NH4HCO310 mM)-ACN) para dar el Compuesto WX009. RMN 1H (400MHz, METANOL-d4) 8 = 8,32 (d, J=8,2 Hz, 1 H), 8,02-7,88 (m, 4H), 7,23 (m, 2H), 4,57 (t, J=5,8 Hz, 2H), 4,30 - 4,22 (m, 2H), 3,90 (t, J=4,4 Hz, 2H), 3,07 - 2,99 (m, 2H), 2,06 (br d, J=4,2 Hz, 2H), 2,00 (br s, 2H), 1,89 (br s, 1H), 0,87 (br d, J=6,0 Hz, 2H), 0,75 (br s, 2H).

Ejemplo 010: WX010

Ruta sintética:

Etapa 1: Síntesis del Compuesto WX010-2

El Compuesto WX010-1 (200 mg, 1,96 mmoles, 194,17 pl, 1 eq) y diclorometano (5 ml) se añadieron a un vial de reacción de 40 ml presecado, seguido de la adición secuencial de trietilamina (297,24 mg, 2,94 mmoles, 408,85 pl, 1,5 eq), dimetilaminopiridina (23,92 mg, 195,83 pmoles, 0,1 eq) y cloruro de p-toluenosulfonilo (448,01 mg, 2,35 mmoles, 1,2 eq). La disolución de reacción se agitó a 25°C durante 3 horas. Se añadió a la disolución de reacción una disolución acuosa saturada de cloruro de amonio (10 ml), y se extrajo con diclorometano (10mlx3). Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, y se concentraron a presión reducida para dar un producto bruto. El producto bruto se purificó mediante cromatografía de capa fina en placa de gel de sílice (éter de petróleo:acetato de etilo = 3:1) para dar WX010-2. RMN 1H (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 = 7,82 (d, J=8,2 Hz, 2H), 7,37 (d, J=7,9 Hz, 2H), 4,44 - 4,30 (m, 4H), 4,12 (s, 2H), 2,47 (s, 3H), 1,32 (s, 3H).

Etapa 2: Síntesis del Compuesto WX010

Se añadieron secuencialmente Compuesto WX008 (100 mg, 217,64 pmoles, 1 eq), carbonato de potasio (45,12 mg, 326,46 pmoles, 1,5 eq), N,N-dimetilformamida (4 ml) y Compuesto WX010-2 (66,94 mg, 261,17 pmoles, 1,2 eq) a un vial de reacción de 40 ml presecado. La disolución de reacción se agitó a 80°C durante 16 horas. La disolución de reacción se aisló y se purificó mediante preparación rápida (agua (NH4HCO310 mM)-ACN) para dar WX010. RMN 1H (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 = 8,99 (d, J=14,8 Hz, 1 H), 8,37 (d, J=8,2 Hz, 1 H), 8,17 (d, J=8,2 Hz, 1 H), 8,09 (d, J=7,7 Hz, 1 H), 7,91 (t, J=8,0 Hz, 1 H), 7,63 (d, J=1,3 Hz, 1 H), 6,98 - 6,89 (m, 2H), 4,54 - 4,49 (m, 2H), 4,48 (s, 4H), 4,23 (s, 2H), 3,11 (t, J=6,4 Hz, 2H), 2,09 - 2,08 (m, 2H), 2,06 - 2,00 (m, 2H), 1,99 - 1,91 (m, 1 H), 1,39 (s, 3H), 0,90 - 0,88 (m, 2H), 0,82 - 0,79 (m, 2H).

Ejemplo 011: WX011

Ruta sintética:

Etapa 1: Síntesis del Compuesto WX011 -2

El Compuesto WX011 -1 (200 mg, 2,27 mmoles, 1 eq) y diclorometano (5 ml) se añadieron a un matraz de reacción de 40 ml presecado, seguido de trietilamina (344,56 mg, 3,41 mmoles, 473,94 ml, 1,5 eq), dimetilaminopiridina (27,73 mg, 227,00 mmoles, 0,1 eq) y cloruro de p-toluenosulfonilo 1 (519,34 mg, 2,72 mmoles, 1,2 eq). La disolución de reacción se agitó a 25°C durante 16 horas. A la disolución de reacción se añadió una disolución acuosa saturada de cloruro de amonio (20 ml), y se extrajo con diclorometano (20 mlx3). Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, y se concentraron a presión reducida para dar un producto bruto. El producto bruto se purificó mediante cromatografía de capa fina en placa de gel de sílice (éter de petróleo:acetato de etilo = 3:1) para dar WX011 -2. RMN 1H (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 = 7,78 (d, J=8,0Hz, 2H), 7,34 (d, J=8,0 Hz, 2H), 4,70(dd, J=7,6, 6,4 Hz, 2H), 4,30 (t, J=6,4 Hz, 2H), 4,23 (d, J=76,8 Hz, 2H), 3,29-3,22 (m, 1 H), 2,43 (s, 3H).

Etapa 2: Síntesis del Compuesto WX011

El Compuesto WX008 (100 mg, 217,64 mmoles, 1 eq) y N,N-dimetilformamida (4 ml) se añadieron a un vial de reacción de 40 ml presecado, seguido de la adición secuencial de carbonato de potasio (45,12 mg, 326,46 mmoles, 1,5 eq), yoduro de potasio (18,06 mg, 108,82 mmoles, 0,5 eq) y Compuesto WX011 -2 (63,28 mg, 261,17 mmoles, 2,32 ml, 1,2 eq). La disolución de reacción se agitó a 80°C durante 16 horas. La disolución de reacción se filtró, se separó y se purificó mediante preparación rápida. La disolución de reacción se separó y se purificó mediante preparación rápida para dar WX011. RMN 1H (400MHz, DMSO-d6) 8 = 10,83 (s, 1H), 8,17 (d, J=7,7 Hz, 1 H), 8,00 (t, J=8,0 Hz, 1 H), 7,87 (dd, J=0,8, 7,6 Hz, 1 H), 7,80 - 7,74 (m, 2H), 7,40 (d, J=12,1 Hz, 1 H), 7,24 (d, J=1,3 Hz, 1 H), 4,68 (dd, J=6,2, 7,9 Hz, 2H), 4,47 (br t, J=5,7 Hz, 2H), 4,43 - 4,37 (m, 4H), 3,44 - 3,36 (m, 1 H), 2,92 (t, J=6,3 Hz, 2H), 1,97 - 1,89 (m, 2H), 1,84 (br dd, J=5,2, 8,5 Hz, 3H), 0,81 - 0,75 (m, 2H), 0,68 - 0,63 (m, 2H).

Ejemplo 012: WX012

Ruta sintética:

Etapa 1: Síntesis del Compuesto WX012

El Compuesto WX008 (150 mg, 221,99 mmoles, 1 eq), carbonato de potasio (61,36 mg, 443,99 mmoles, 2 eq), N,N-dimetilformamida (4 ml) y 1-bromo-2-fluoroetano (56,37 mg, 443,99 mmoles, 30,91 ml, 2 eq) se añadieron secuencialmente a un matraz de reacción de 40 ml presecado. La disolución de reacción se agitó a 100°C durante 5 horas. La disolución de reacción se filtró a través de un filtro para dar una disolución transparente, que se aisló y purificó mediante preparación rápida para dar WX012. RMN 1H (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 = 8,98 (br d, J=14,8 Hz, 1 H), 8,39 - 8,33 (m, 1 H), 8,16 (d, J=8,2 Hz, 1 H), 8,08 (dd, J=0,9, 7,7 Hz, 1 H), 7,95 - 7,86 (m, 1 H), 7,73 (d, J=1,1 Hz, 1 H), 6,99 (d, J=1,1 Hz, 1H), 6,89 (d, J=13,2 Hz, 1H), 4,86 - 4,81 (m, 1H), 4,75 - 4,68 (m, 1H), 4,50 (t, J=6,1 Hz, 2H), 4,41 - 4,37 (m, 1H), 4,36 - 4,31 (m, 1H), 3,10 (t, J=6,4 Hz, 2H), 2,11 - 2,03 (m, 2H), 2,02 - 1,95 (m, 2H), 1,95 -1,88 (m, 1 H), 0,94 - 0,87 (m, 2H), 0,87 - 0,81 (m, 2H).

Ejemplo 013: WX013

Ruta sintética:

Etapa 1: Síntesis del Compuesto WX013

El Compuesto WX008 (100 mg, 148,00 pmoles, 1 eq), carbonato de potasio (40,91 mg, 295,99 pmoles, 2 eq), N,N-dimetilformamida (1 ml) y 1-bromo-3-fluoro-propano (41,73 mg, 295,99 pmoles, 30,91 pl, 2 eq) se añadieron secuencialmente a un matraz de reacción de 40 ml presecado. La disolución de reacción se agitó a 90°C durante 2 horas. La disolución de reacción se filtró a través de un filtro para dar una disolución transparente. La disolución transparente se aisló y se purificó mediante preparación rápida para dar WX013. RMN 1H (400MHz, CLOROFORMO-d) 8 = 8,99 (br d, J=15,2 Hz, 1 H), 8,37 (d, J=8,2 Hz, 1 H), 8,15 (d, J=8,2 Hz, 1 H), 8,08 (d, J=7,7 Hz, 1 H), 7,90 (t, J=8,0 Hz, 1H), 7,67 (d, J=0,9 Hz, 1 H), 6,96 - 6,86 (m, 2H), 4,64 (t, J=5,5 Hz, 1 H), 4,56 - 4,47 (m, 3H), 4,25 (t, J=6,1 Hz, 2H), 3,10 (t, J=6,4 Hz, 2H), 2,24 (t, J=5,7 Hz, 1H), 2,18 (t, J=5,7 Hz, 1H), 2,11 - 2,03 (m, 2H), 2,02 - 1,95 (m, 2H), 1,94 -1,87 (m, 1 H), 0,94 - 0,86 (m, 2H), 0,85 - 0,79 (m, 2H).

Ejemplo 014: WX014

Ruta sintética:

Etapa 1: Síntesis del Compuesto WX014-2

El Compuesto WX014-1 (24 g, 101,70 mmoles, 1 eq) se disolvió en diclorometano anhidro (200 ml), seguido de la adición de dimetilaminopiridina (0,65 g, 5,32 mmoles, 0,05 eq) y diisopropiletilamina (26,29 g, 203,39 mmoles, 35,43 ml, 2 eq). El sistema se enfrió a 0°C, seguido de la adición lenta de anhídrido trifluorometanosulfónico (43,04 g, 152,55 mmoles, 25,17 ml, 1,5 eq) a 0°C. El sistema se calentó entonces a 20°C, y se agitó durante 2 horas. Se añadió agua (200 ml) a la disolución de reacción mientras se agitaba. La fase orgánica se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar un producto bruto. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna (acetato de etilo/éter de petróleo = 0 a 5%) para dar el Compuesto WX014-2. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 7,29 (d, J=7,53 Hz, 1 H) 8,51 (d, J=6,52 Hz, 1 H).

Etapa 2: Síntesis del Compuesto WX014-3

El Compuesto WX014-2 (24 g, 65,21 mmoles, 1 eq) se disolvió en tolueno seco (200 ml) y se cargó con gas nitrógeno tres veces, seguido de la adición de dimetilamina (4,80 g, 58,86 mmoles, 5,39 ml, 0,9 eq, HCl), terc-butóxido de sodio (9,36 g, 97,39 mmoles, 1,49 eq) y Pd2(dba)3 (4,80 g, 5,24 mmoles, 0,08 eq). La mezcla se agitó a 105°C durante 12 horas en atmósfera de nitrógeno. La disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, seguido de la adición de agua (400 ml) y extracción con acetato de etilo (200 ml*3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera saturada (300 ml), se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar un producto bruto. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna (acetato de etilo/éter de petróleo = 0 a 5%) para dar el Compuesto WX014-3. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 2,91 (s, 6 H) 6,75 (d, J=11,04 Hz, 1 H) 8,02 - 8,07 (m, 1 H).

Etapa 3: Síntesis del Compuesto WX014-4

El Compuesto WX014-3 (9 g, 28,59 mmoles, 1 eq) (pureza: 83,568%) se disolvió en ácido acético (80 ml), seguido de la adición de polvo de Fe (6,39 g, 114,36 mmoles, 4 eq) en porciones. La mezcla se agitó a 20°C durante 16 horas. La disolución de reacción se añadió gota a gota a NaOH saturado (100 ml), y se extrajo con acetato de etilo (50 ml*3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera saturada (300 ml), y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida. El producto bruto se purificó mediante columna (acetato de etilo/éter de petróleo = 0-25%) para dar el Compuesto WX014-4. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 2,65 (s, 6 H) 6,80 (d, J=10,29 Hz, 1 H) 6,86 (d, J=6,78 Hz, 1 H).

Etapa 4: Síntesis del Compuesto WX014-5

El Compuesto WX014-4 (1,1 g, 3,42 mmoles, 1 eq) (pureza del 72,474%) se disolvió en tolueno anhidro (10 ml), seguido de la adición del Compuesto WXBB-1 -3 (3 g, 11,80 mmoles, 3,45 eq) y diisopropiletilamina (928,29 mg, 7,18 mmoles, 1,25 ml, 2,1 eq). La mezcla se hizo reaccionar a 140°C durante 0,5 horas en condiciones de microondas. La disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, seguido de la adición de agua (50 ml) y extracción con acetato de etilo (50 ml*3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con cloruro de sodio (50 ml), y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna (acetato de etilo/éter de petróleo = 0 a 10%) para dar el Compuesto WX014-5. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 0,93 (dq, J=7,47, 3,70 Hz, 2 H) 1,09 (quin, J=3,83 Hz, 2 H) 1,90 - 1,99 (m, 1 H) 2,56 (s, 6 H) 4,07 (d, J=3,51 Hz, 2 H) 6,49 (d, J=6,53 Hz, 1 H) 6,73 (d, J=10,04 Hz, 1 H).

Etapa 5: Síntesis del Compuesto WX014-6

El Compuesto WX014-5 (750 mg, 2,38 mmoles, 1 eq) se disolvió en ácido acético (8 ml), y se cargó con gas nitrógeno tres veces, seguido de la adición de tiocianato de potasio (463 mg, 4,76 mmoles, 463,00 ml, 2 eq). La mezcla se agitó a 110°C durante 4 horas en atmósfera de nitrógeno. La disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se concentró a presión reducida, se ajustó a pH=8 con bicarbonato de sodio saturado (20 ml), y se extrajo con diclorometano (20 ml*3). La fase orgánica se lavó con cloruro de sodio saturado (30 ml), y se secó sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida. El Compuesto WX014-6 se proporcionó como el producto, que se usó directamente en la siguiente reacción sin purificación. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 0,64 - 0,71 (m, 2 H) 0,78 - 0,89 (m, 2 H) 1,67 - 1,76 (m, 1 H) 2,57 (s, 6 H) 6,75 (d, J=1,51 Hz, 1 H) 7,00 (d, J=11,80 Hz, 1 H) 7,40 (d, J=7,53 Hz, 1 H) 12,28 (br s, 1 H).

Etapa 6: Síntesis del Compuesto WX014-7

El Compuesto WX014-6 (500 mg, 1,40 mmoles, 1 eq) se disolvió en ácido acético (5 ml), seguido de la adición de agua (1 ml) y peróxido de hidrógeno (477 mg, 4,21 mmoles, 404,24 ml, pureza del 30%, 3 eq). La mezcla se agitó a 45°C durante 1 hora. La disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, y se le añadió sulfito de sodio saturado hasta que no se detectó ningún color azul mediante el papel de almidón de yoduro de potasio. Una parte del disolvente se separó por evaporación, y no se detectó peróxido de hidrógeno residual mediante el papel de almidón de yoduro de potasio. La disolución de reacción se ajustó a pH=8 con bicarbonato de sodio saturado (20 ml) y se extrajo con diclorometano (20 ml*3). La fase orgánica se lavó con cloruro de sodio saturado (50 ml), y se secó sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida. El Compuesto WX014-7 se proporcionó como el producto, que se usó directamente en la siguiente reacción sin purificación. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 0,62 - 0,71 (m, 2 H) 0,77 - 0,82 (m, 2 H) 2,32 - 2,34 (m, 1 H) 2,43 (s, 6 H) 7,08 (d, J=11,29 Hz, 1 H) 7,14 (s, 1 H) 7,56 (d, J=7,53 Hz, 1 H) 7,69 (s, 1 H).

Etapa 7: Síntesis del Compuesto WX014-8

El Compuesto WX014-7 (400 mg, 1,09 mmoles, 1 eq) (pureza del 88,522%) se disolvió en metanol (4 ml), seguido de la adición de Pd(dppf)Cl2 (120 mg, 164,00 mmoles, 0,15 eq) y trietilamina (221 mg, 2,18 mmoles, 303,99 ml, 2 eq), e introducción de monóxido de carbono (50 Psi). La mezcla se agitó a 70°C durante 16 horas. La disolución de reacción se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna (acetato de etilo/éter de petróleo = 0 a 30%). El producto se purificó adicionalmente mediante prep-TLC (acetato de etilo) para dar el Compuesto WX014-8. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 0,77 - 0,83 (m, 2 H) 0,85 - 0,92 (m, 2 H) 1,86 - 1,95 (m, 1 H) 2,61 (s, 6 H) 3,89 (s, 3 H) 6,63 (d, J=13,30 Hz, 1 H) 6,86 (d, J=1,00 Hz, 1 H) 7,54 (d, J=1,00 Hz, 1 H) 7,73 (d, J=7,78 Hz, 1 H).

Etapa 8: Síntesis del Compuesto WX014-9

El Compuesto WX014-8 (200 mg, 566,13 mmoles, 1 eq) (pureza del 85,863%) se disolvió en una mezcla de tetrahidrofurano (1 ml) y agua (1 ml) (relación en volumen: 1:1), seguido de la adición de hidróxido de litio (41 mg, 1,71 mmoles, 3,02 eq). La mezcla se agitó a 20°C durante 1 hora. La disolución de reacción se concentró para dar el Compuesto WX014-9. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 0,65 - 0,71 (m, 2 H) 0,75 - 0,81 (m, 2 H) 1,79 - 1,88 (m, 1 H) 2,41 (s, 6 H) 6,67 (d, J=12,30 Hz, 1 H) 7,06 (s, 1 H) 7,44 (d, J=8,03 Hz, 1 H) 7,61 (s, 1 H).

Etapa 9: Síntesis del Compuesto WX014

El Compuesto WX014-9 (160 mg, 553,05 mmoles, 1 eq) se disolvió en diclorometano (2 ml), seguido de la adición de N,N-dimetilformamida (4 mg, 54,72 mmoles, 4,21 ml, 0,1 eq) y cloruro de oxalilo (120 mg, 945,43 mmoles, 82,76 ml, 1,71 eq). La mezcla se agitó a 20°C durante 2 horas. El disolvente se eliminó por evaporación a presión reducida hasta que la mezcla fue viscosa, seguido de la adición de 5 ml de diclorometano anhidro. Dichos procedimientos se repitieron tres veces, seguido de la adición del Compuesto WXBB-3 (119 mg, 552,84 mmoles, 1 eq) y diisopropiletilamina (72 mg, 557,09 mmoles, 97,04 ml, 1,01 eq). La mezcla se agitó a 20°C durante 1 hora, seguido de la adición de agua (50 ml) y extracción con diclorometano (20 ml*3). La fase orgánica se lavó con cloruro de sodio saturado (50 ml), y se secó sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida. El producto bruto seco se purificó mediante prep-TLC (diclorometano/metanol = 10/1), y se aisló mediante preparación rápida para dar WX014. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 0,69 (br s, 2 H) 0,79 (br d, J=8,03 Hz, 2 H) 1,24 (br s, 1 H) 1,80 - 2,00 (m, 6 H) 2,53 (br s, 6 H) 4,43 - 4,51 (m, 2 H) 6,97 (br d, J=13,05 Hz, 1 H) 7,15 (s, 1 H) 7,55 (br d, J=7,28 Hz, 1 H) 7,71 (s, 1 H) 7,85 (d, J=7,53 Hz, 1 H) 7,98 (t, J=7,91 Hz, 1 H) 8,15 (d, J=8,03 Hz, 1 H) 10,61 (s, 1 H).

Ejemplo 015: WX015

Ruta sintética:

Etapa 1: Síntesis del Compuesto WX015-2

WX015-1 (24 g, 101,70 mmoles, 1 eq) se disolvió en diclorometano anhidro (200 ml), seguido de la adición de DMAP (0,65 g, 5,32 mmoles, 0,05 eq) y diisopropiletilamina (26,29 g, 203,39 mmoles, 35,43 ml, 2 eq). El sistema se enfrió a 0°C, seguido de la adición lenta de Tf2Ü (43,04 g, 152,55 mmoles, 25,17 ml, 1,5 eq) a 0°C. Después, el sistema se calentó gradualmente a 20°C, y se agitó durante 2 horas. Se añadió agua (200 ml) a la disolución de reacción mientras se agitaba, y la fase orgánica se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar un producto bruto. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna con 0-5% de acetato de etilo/éter de petróleo para dar el producto WX015-2. RMN 1H (400 MHz, CLÜRÜFÜRMÜ-d) 8 ppm 7,20 (d, J=7,28 Hz, 1 H) 8,41 (d, J=6,53 Hz, 1 H).

Etapa 2: Síntesis del Compuesto WX015-3

WX015-2 (13 g, 35,32 mmoles, 1 eq) se disolvió en tolueno anhidro (130 ml), terc-butóxido de sodio (5,20 g, 54,11 mmoles, 1,53 eq) y Pd2(dba)3 (2,60 g, 2,84 mmoles, 0,08 eq). El sistema se agitó a 105°C durante 20 horas en atmósfera de nitrógeno. La disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se añadió a agua (200 ml), y se extrajo con acetato de etilo (200 ml*2). La fase orgánica se lavó secuencialmente con agua (300 ml), con salmuera saturada (300 ml), y se secó sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar un producto bruto. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna con 0-20% de acetato de etilo/éter de petróleo para dar el producto WX015-3. RMN 1H (400 MHz, CLÜRÜFÜRMÜ-d) 8 ppm 3,04 - 3,09 (m, 4 H) 3,84 - 3,87 (m, 4 H) 6,86 (d, J=10,04 Hz, 1 H) 8,12 (d, J=7,03 Hz, 1 H).

Etapa 3: Síntesis del Compuesto WX015-4

WX015-3 (8 g, 26,22 mmoles, 1 eq) se disolvió en ácido acético glacial (80 ml), seguido de la adición lenta de polvo de Fe (5,86 g, 104,88 mmoles, 4 eq) en porciones mientras se agitaba. El sistema se agitó a 20°C durante 1 hora. La disolución de reacción se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar un material bruto, y se diluyó con agua (200 ml). La disolución se ajustó a pH 8-9 con disolución saturada de bicarbonato de sodio (200 ml), y se extrajo con diclorometano (100 ml*2). La fase orgánica se lavó con agua (200 ml), y se secó sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad para dar el producto WX015-4.

Etapa 4: Síntesis del Compuesto WX015-5

WXBB-1-3 (6,98 g, 27,47 mmoles, 3 eq) se disolvió en tolueno anhidro (30 ml), seguido de la adición de WX015-4 (3 g, 9,16 mmoles, 1 eq) (pureza: 83,959%) y diisopropiletilamina (2,49 g, 19,27 mmoles, 3,36 ml, 2,1 eq). El sistema se calentó a 140°C en condiciones de microondas, y se agitó durante 1 hora. La disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, seguido de la adición de agua (50 ml) y extracción con acetato de etilo (50 ml*2). La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar un producto bruto. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna (0-12% de acetato de etilo/éter de petróleo) para dar el producto WX015-5.

Etapa 5: Síntesis del Compuesto WX015-6

WX015-5 (1,2 g, 2,71 mmoles, 1 eq) (pureza del 80,641%) se disolvió en ácido acético glacial (20 ml), seguido de la adición de tiocianato de potasio (0,36 g, 3,70 mmoles, 360,00 pl, 1,37 eq). El sistema se agitó a 110°C durante 3 horas. La disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua (100 ml), y se extrajo con diclorometano (50 ml*3). Las fases orgánicas se combinaron, seguido de la adición de una disolución saturada de bicarbonato de sodio (200 ml), y se agitaron durante 5 minutos. El pH de la fase orgánica fue 7-8, medido mediante un papel de ensayo de pH. La fase orgánica se aisló, se lavó con agua (200 ml), y se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar el producto WX015-6.

Etapa 6: Síntesis del Compuesto WX015-7

WX015-6 (1,2 g, 2,62 mmoles, 1 eq) (pureza del 87,114) se disolvió en una mezcla de ácido acético glacial (12 ml) y agua (2,5 ml), seguido de la adición de peróxido de hidrógeno (0,9 g, 7,94 mmoles, 762,71 pl, pureza del 30%, 3,02 eq) mientras se agitaba. El sistema se agitó a 45°C durante 0,5 horas. La disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua (100 ml), y se extrajo con diclorometano (50 ml*3). Las fases orgánicas se combinaron, seguido de la adición de una disolución saturada de sulfito de sodio (50 ml), y se agitaron durante 5 minutos. No se detectó ningún color azul mediante el papel de almidón de yoduro de potasio. Después, se le añadió disolución saturada de Na2CÜ3 (200 ml), y se agitó durante 5 minutos. El pH de la fase orgánica fue 7-8, medido mediante un papel de ensayo de pH. La fase orgánica se aisló, se lavó con agua (200 ml), y se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar el producto WX015-7.

Etapa 7: Síntesis del Compuesto WX015-8

WX015-7 (1 g, 1,78 mmoles, 1 eq) (pureza del 65,303%) se disolvió en metanol (10 ml), seguido de la adición de Pd(dppf)Cl2 (0,04 g, 54,67 pmoles, 0,15 eq) y trietilamina (400,00 mg, 3,95 mmoles, 550,21 pl, 2,22 eq). El sistema se agitó a 70°C durante 16 horas en atmósfera de CO (50 psi). La disolución de reacción se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar un material bruto, que se purificó mediante cromatografía en columna con 0-40% de acetato de etilo/éter de petróleo para dar el producto WX015-8.

Etapa 8: Síntesis del Compuesto WX015-9

WX015-8 (0,6 g, 1,55 mmoles, 1 eq) (pureza: 89,457%) se disolvió en tetrahidrofurano anhidro (5 ml), seguido de la adición de una disolución de hidróxido de litio (0,112 g, 4,68 mmoles, 3,01 eq) en agua (5 ml). El sistema se agitó a 20°C durante 1 hora. La disolución de reacción se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar un material bruto. Se añadió una disolución mixta de diclorometano/metanol = 10/1 (15 ml) al producto bruto, y se agitó durante 15 min, seguido de filtración. El filtrado se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar el producto WX015-9. RMN 1H (400 MHz, DMSO-afe) 8 ppm 0,66 (br d, J=3,01 Hz, 2 H) 0,72 - 0,84 (m, 2 H) 1,77 - 1,91 (m, 1 H) 2,58 (br s, 4 H) 3,55 (br s, 4 H) 6,74 (d, J=11,80 Hz, 1 H) 7,16 (s, 1 H) 7,50 (d, J=7,78 Hz, 1 H) 7,72 (s, 1 H).

Etapa 9: Síntesis del Compuesto WX015

WX015-9 (0,1 g, 301,80 pmoles, 1 eq) se disolvió en diclorometano anhidro (2 ml), seguido de la adición de N,N-dimetilformamida (5 mg, 68,41 pmoles, 5,26 pl, 2,27e-1 eq), y adición de cloruro de oxalilo (0,08 g, 630,29 pmoles, 55,17 pl, 2,09 eq) en atmósfera de nitrógeno. El sistema se agitó a 20°C durante 0,5 horas. La disolución de reacción se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida hasta que se puso viscosa, seguido de la adición de diclorometano anhidro (2 ml). Dichos procedimientos se repitieron tres veces, seguido de la adición secuencial de diclorometano anhidro (2 ml), WXBB-3 (0,065 g, 301,97 pmoles, 1,00 eq) y diisopropiletilamina (0,08 g, 618,99 pmoles, 107,82 pl, 2,05 eq). El sistema se agitó a 20°C durante 1 hora. La disolución de reacción se diluyó con agua (20 ml), y se extrajo con diclorometano (20 ml*2). La fase orgánica se lavó con agua (30 ml), y se secó sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar un producto bruto. El producto bruto se aisló y purificó mediante preparación rápida para dar WX015. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 0,80 (br d, J=3,26 Hz, 2 H) 0,91 (br d, J=8,03 Hz, 2 H) 1,87 - 1,94 (m, 1 H) 1,96 - 2,09 (m, 4 H) 2,79 (br d, J=4,02 Hz, 4 H) 3,10 (br t, J=6,27 Hz, 2 H) 3,73 (br s, 4 H) 4,50 (br t, J=6,02 Hz, 2 H) 6,81 (d, J=13,80 Hz, 1 H) 6,99 (s, 1 H) 7,71 (s, 1 H) 7,84 - 7,96 (m, 1 H) 8,05 (dd, J=15,69, 7,91 Hz, 2 H) 8,36 (d, J=8,28 Hz, 1 H) 9,00 (br d, J=15,56 Hz, 1 H)

Ejemplo 016: WX016

Ruta sintética:

Etapa 1: Síntesis del Compuesto WX016-2

WX016-1 (20 g, 201,75 mmoles, 1 eq) se disolvió en CHCh (200 ml) en un matraz de fondo redondo de 100 ml presecado. Después de que el sistema de reacción se enfrió a 0°C, se le añadió PCl5 (84,03 g, 403,51 mmoles, 2 eq) en porciones. El sistema se hizo reaccionar a 0°C durante 30 minutos. Después, se añadieron al sistema ZnCl2 (1,37 g, 10,09 mmoles, 472,48 ml, 0,05 eq) y Br2 (64,48 g, 403,51 mmoles, 20,80 ml, 2 eq). La temperatura de reacción se elevó entonces a 0-25°C, y se llevó a cabo la reacción durante 5 horas. Se añadió lentamente una disolución saturada de sulfito de sodio a la disolución de reacción mientras se agitaba hasta pH = 8-9. La fase orgánica se recogió tras la separación, y la fase acuosa se extrajo con diclorometano (3*100 ml). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera saturada (1*200 ml), y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se concentró a presión reducida para dar WX016-2.

Etapa 2: Síntesis del Compuesto WX016-3

La materia prima WX016-2 (10 g, 38,92 mmoles, 1 eq) se añadió a un matraz de fondo redondo de 250 ml presecado, seguido de la adición de una mezcla de H2O (5 ml) y MeOH (45 ml). Se añadió lentamente PPh3 (10,21 g, 38,92 mmoles, 1 eq) al sistema a 40°C, y se agitó durante 3 horas. El disolvente del sistema de reacción se concentró a vacío hasta la mitad de su volumen original, y se añadió agua lentamente hasta que no precipitaron sólidos. Los sólidos se separaron por filtración, y el filtrado se extrajo con diclorometano (3*30 ml). La fase orgánica se lavó con salmuera saturada (2*40 ml), se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró, y se concentró a presión reducida para dar WX016-3. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,73 - 1,87 (m, 2 H) 2,13 - 2,23 (m, 2 H) 2,23 - 2,31 (m, 3 H) 3,37 -3,49 (m, 2 H) 4,51 (t, J=4,39 Hz, 1 H), m/z = 178,09 [M+1].

Etapa 3: Síntesis del Compuesto WX016-4

WX016-3 (7,2 g, 28,31 mmoles, 1 eq) se añadió a un matraz seco de fondo redondo, seguido de la adición de ACN (20 ml), kOac (11,11 g, 113,24 mmoles, 4 eq) y 18-corona-6 (2,24 g, 8,49 mmoles, 0,3 eq) mientras se agitaba, y se calentó a reflujo a 85°C durante 1 hora. El sistema de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se ajustó a pH=3-4 con ácido clorhídrico 1M, y se extrajo con diclorometano (3*20 ml). Las fases orgánicas se combinaron, se ajustaron con bicarbonato de sodio saturado a pH=8-9, y se extrajeron con diclorometano (3x30 ml). Las fases orgánicas se lavaron con salmuera saturada (2x40 ml), se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (DCM: MeOH = 100:0 a 40:1 a 20:1) para dar WX016. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,79 - 1,96 (m, 4 H) 2,01 - 2,08 (m, 1 H) 2,22 - 2,32 (m, 2 H) 3,25 - 3,37 (m, 3 H) 5,17 - 5,25 (m, 1 H), m/z = 158,1 [M+1].

Etapa 4: Síntesis del Compuesto WX016-6

El Compuesto WX016-4 (20,00 g, 127,25 mmoles, 1 eq) y el Compuesto WX016-5 (14,52 g, 38,18 mmoles, 0,3 eq) se añadieron a un matraz seco de fondo redondo, seguido de la adición de acetonitrilo (250 ml). El sistema de reacción se calentó a 60°C, y se agitó durante 4 horas. La disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, seguido de evaporación rotatoria hasta sequedad. Se añadieron agua (250 ml) y diclorometano (250 ml) al matraz de reacción. Después de que se separaron la fase orgánica y la fase acuosa, la fase acuosa se extrajo con diclorometano (200 ml*2). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera saturada (200 ml), se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron, y se sometieron a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar WX016-6. RMN 1H (RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,86 - 1,93 (m, 2 H) 1,96 - 2,07 (m, 2 H) 2,11 (s, 3 H) 3,28 - 3,35 (m, 2 H) 5,41 - 5,47 (m, 1 H)

Etapa 5: Síntesis del Compuesto WX016-7

El Compuesto WX016-6 (12,00 g, 67,29 mmoles, 1 eq) se añadió a un matraz seco de fondo redondo, seguido de la adición secuencial del Compuesto WXBB-4 (10,54 g, 69,27 mmoles, 1 eq) y ciclohexanol (200 ml). El aire en el sistema se cargó con un globo de nitrógeno, y los procedimientos se repitieron dos veces. El sistema de reacción se calentó a 135°C, y se agitó durante 12 horas. La disolución de reacción se enfrió a temperatura ambiente, seguido de la adición de agua (250 ml), y se ajustó a pH=4-5 con ácido clorhídrico 1M. La fase acuosa se lavó con acetato de etilo (200 ml*3), y la fase acuosa obtenida se ajustó a pH=9 con hidróxido de sodio 1 M, seguido de la extracción con diclorometano (250 ml*3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera saturada (250 ml), y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida (bomba de agua, 50°C) para dar un producto bruto. El producto bruto se aisló y purificó mediante prep-HPLC (agua (0,04% de NH3 H2O 10 mM de NH4HCO3)-ACN) para dar el Compuesto WX016-7. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,99 - 2,09 (m, 2 H) 2,11 (s, 3 H) 2,14 - 2,26 (m, 2 H) 4,21 - 4,37 (m, 1 H) 4,56 (br s, 2 H) 4,75 (dt, J=13,93, 4,83 Hz, 1 H) 6,24 (t, J=4,02 Hz, 1 H) 6,51 - 6,58 (m, 1 H) 7,51 - 7,57 (m, 1 H) 7,60 - 7,65 (m, 1 H). MS m/z: 274 [M+H]+.

Etapa 6: Síntesis del Compuesto WX016-8

El Compuesto WXBB-1 (3,50 g, 13,39 mmoles, 1 eq) se añadió a un matraz seco de fondo redondo, seguido de la adición de diclorometano (35 ml). El aire en el sistema se cargó dos veces con un globo de nitrógeno. Se le añadieron W,W-dimetilformamida (0,1 ml, 1,3 mmoles, 0,1 eq) y cloruro de oxalilo (2 ml, 22,85 mmoles, 1,7 eq) en atmósfera de nitrógeno. El sistema de reacción se agitó a temperatura ambiente (20°C) durante 3 horas hasta que la disolución de reacción se volvió transparente. La disolución de reacción se concentró hasta 15 ml, seguido de la adición de diclorometano anhidro (20 ml), y después se concentró hasta 15 ml. Dichos procedimientos se repitieron tres veces. Después, se añadió diclorometano anhidro (20 ml), y el aire del sistema se cargó dos veces con un globo de nitrógeno. Se le añadió el Compuesto WX016-7 (3,50 g, 12,03 mmoles, 0,9 eq) y W,W-dimetilformamida (2,4 ml, 13,78 mmoles, 1 eq) en atmósfera de nitrógeno. El sistema de reacción se agitó a temperatura ambiente (20°C) durante 1 hora, seguido de la adición de agua (50 ml), y después se ajustó a pH=9 con carbonato de potasio sólido, y se extrajo con diclorometano (50 ml*3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera saturada (50 ml), y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar WX016-8. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 0,68 - 0,73 (m, 2 H) 0,78 - 0,83 (m, 2 H) 1,81 - 1,89 (m, 1 H) 1,99 - 2,08 (m, 4 H) 2,09 (s, 3 H) 2,25 (s, 3 H) 4,28 - 4,36 (m, 1 H) 4,71 - 4,81 (m, 1 H) 6,19 (s, 1 H) 7,19 (d, J=1,25 Hz, 1 H) 7,49 (d, J=11,04 Hz, 1 H) 7,64 (d, J=6,53 Hz, 1 H) 7,70 (d, J=1,25 Hz, 1 H) 7,93 (d, J=7,03 Hz, 1 H) 8,04 (t, J=7,91 Hz, 1 H) 8,22 (d, J=8,03 Hz, 1 H) 11,03 (s, 1 H). MS m/z: 516,4 [M+H]+.

Etapa 7: Síntesis del Compuesto WX016

El Compuesto WX016-8 (3,00 g, 4,23 mmoles, 1 eq) (pureza del 72,65%) se añadió a un matraz seco de fondo redondo, y se añadió una mezcla de tetrahidrofurano (15 ml) y agua (5 ml) al matraz de reacción, seguida de la adición de hidróxido de litio monohidrato (532 mg, 12,68 mmoles, 3 eq). El sistema de reacción se agitó a temperatura ambiente (24°C) durante 2 horas. Se añadió agua (50 ml) a la disolución de reacción, seguido de extracción con diclorometano (50 ml*3). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera saturada (50 ml), y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, seguido de filtración. El filtrado se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad a presión reducida para dar WX016. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 0,68 - 0,73 (m, 2 H) 0,78 - 0,83 (m, 2 H) 1,81 - 1,89 (m, 1 H) 1,99 - 2,08 (m, 4 H) 2,09 (s, 3 H) 2,25 (s, 3 H) 4,28 - 4,36 (m, 1 H) 4,71 - 4,81 (m, 1 H) 6,19 (s, 1 H) 7,19 (d, J=1,25 Hz, 1 H) 7,49 (d, J=11,04 Hz, 1 H) 7,64 (d, J=6,53 Hz, 1 H) 7,70 (d, J=1,25 Hz, 1 H) 7,93 (d, J=7,03 Hz, 1 H) 8,04 (t, J=7,91 Hz, 1 H) 8,22 (d, J=8,03 Hz, 1 H) 11,03 (s, 1 H). MS m/z: 474,2 [M+H]+.

Ejemplo 017: WX017-WX018

Etapa 1: Síntesis del Compuesto WX017, WX018

El Compuesto WX016 se separó mediante SFC (columna: YMC CHIRAL Amylose-C (250 mm*30 mm, 10 pm): fase móvil: [0,1% NH3-H2Ü EtOH]: B: 55%-55%, min) para dar WX017 y WX018 con un tiempo de retención a 0,921 min y 1,459 min, respectivamente.

El tiempo de retención de WX017 es 0,921 min. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 0,67 - 0,73 (m, 2 H) 0,77 - 0,84 (m, 2 H) 1,82 - 1,97 (m, 4 H) 2,14 (br dd, J=9,16, 5,65 Hz, 1 H) 2,25 (s, 3 H) 4,20 - 4,30 (m, 1 H) 4,68 (br d, J=13,80 Hz, 1 H) 4,90 (br d, J=4,77 Hz, 1 H) 5,81 (d, J=5,27 Hz, 1 H) 7,19 (d, J=1,25 Hz, 1 H) 7,49 (d, J=10,79 Hz, 1 H) 7,63 (d, J=6,53 Hz, 1 H) 7,70 (d, J=1,25 Hz, 1 H) 7,91 (d, J=7,53 Hz, 1 H) 8,02 (t, J=7,91 Hz, 1 H) 8,20 (d, J=8,28 Hz, 1 H) 10,99 (s, 1 H). MS m/z: 474,5 [M+H]+.

El tiempo de retención de WX018 es 1,459 min. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) d ppm0,68 - 0,73 (m, 2 H) 0,77 - 0,84 (m, 2 H) 1,81 - 1,98 (m, 4 H) 2,14 (br dd, J=8,91,5,40 Hz, 1 H) 2,25 (s, 3 H) 4,21 - 4,29 (m, 1 H) 4,68 (br d, J=14,31 Hz, 1 H) 4,87 - 4,93 (m, 1 H) 5,82 (d, J=5,02 Hz, 1 H) 7,19 (d, J=1,00 Hz, 1 H) 7,49 (d, J=10,79 Hz, 1 H) 7,63 (d, J=6,53 Hz, 1 H) 7,70 (d, J=1,00 Hz, 1 H) 7,91 (d, J=7,28 Hz, 1 H) 8,02 (t, J=7,91 Hz, 1 H) 8,20 (d, J=8,03 Hz, 1 H) 11,00 (s, 1 H). MS m/z: 474,2 [M+H]+.

Ensayo de actividad biológica:

Ejemplo experimental 1: actividad enzimática

Reactivos:

Disolución amortiguadora de reacción primaria: Hepes 20 mM (pH 7,5), MgCl210 mM, EGTA 1 mM, 0,02% de Brij35, BSA 0,02 mg/ml, Na3VÜ40,1 mM, DTT 2 mM, 1% de DMSÜ

Tratamiento del compuesto:

Los compuestos ensayados se formularon en una disolución madre 10 mM en DMSÜ, se diluyeron en un gradiente de 3 veces para un total de 10 concentraciones, y se colocaron en una placa de 384 pocillos (Cyclic Ülefin Copolymer LDV Echo®).

Nombre de la cinasa: ASK1/MAP3K5 (Invitrogen, Carlsbad, CA)

Tipo: Proteína humana recombinante de longitud completa, etiquetada con GST

Concentración de reacción final de la enzima: 20 nM

Sustrato: Proteína básica de mielina, MBP (Active Motif, Carlsbad, CA)

Concentración de reacción final del sustrato: 20 pM

Procedimientos experimentales:

1. El sustrato se disolvió en una disolución amortiguadora de reacción primaria recién preparada,

2. Se añadió el factor de coenzima deseado a la disolución de sustrato anterior,

3. La cinasa se añadió a la disolución de sustrato y se mezcló suavemente,

4. La disolución del compuesto ensayado en DMSÜ se añadió a la disolución de reacción de cinasa y se incubó a temperatura ambiente durante 20 minutos.

5. La reacción se inició añadiendo 33P-ATP (actividad específica 10 pCi/pl) a la disolución de reacción.

6. Se incubó a temperatura ambiente durante 2 horas.

7. Se colocó una pequeña porción de los agentes reaccionantes sobre el papel de filtro de intercambio iónico P-81.

8. El papel de filtro se lavó tres veces con amortiguador de fosfato al 0,75% para eliminar el fosfato no unido, y después se secó.

9. Se determinó la radiactividad restante en el papel de filtro,

10. Los datos de la actividad de cinasa se expresaron como la relación entre la actividad de cinasa que queda en la muestra de ensayo y la actividad de cinasa en el vehículo (DMSO).

11. Los valores de IC50 y el ajuste de la curva se recopilaron mediante Prism (software GraphPad). Los resultados experimentales se muestran en la Tabla 1 y la Tabla 2:

Tabla 1: Resultados in vitro del ensayo de cribado de los compuestos de la invención

Tabla 2: Resultados in vitro del ensayo de cribado de los compuestos de la invención

Conclusión: Los compuestos de la presente invención tienen un efecto inhibidor significativo contra ASK1.

Ejemplo experimental 2: Estudio de las características farmacocinéticas

Métodos experimentales:

En este estudio se utilizaron ratones machos C57BL/6. La concentración de fármaco en el plasma de ratones sometidos a la administración intravenosa u oral del compuesto de ensayo en diferentes puntos de tiempo se determinó cuantitativamente mediante el método de LC/MS/MS, respectivamente, para evaluar las características farmacocinéticas de los fármacos ensayados en ratones.

Se inyectó una disolución transparente del compuesto de ensayo en ratones C57BL/6 a través de la vena de la cola (ayuno durante la noche, 7-10 semanas de edad), y el compuesto de ensayo se administró por vía intragástrica a ratones C57BL/6 (ayuno durante la noche, 7-10 semanas de edad). Se recogieron 30 pl de sangre de la vena yugular o de la vena de la cola de los animales 0,0833, 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 6, 8 y 24 horas después de la administración, y se colocaron en el tubo anticoagulante que contenía EDTA-K2, seguido de centrifugación a 4°C durante 15 minutos para recoger el plasma. La concentración plasmática se determinó mediante LC-MS/MS. Los parámetros farmacocinéticos se calcularon mediante el método trapezoidal logarítmico lineal del modelo sin compartimentos utilizando el software farmacocinético WinNonlin™ Versión 6.3 (Pharsight, Mountain View, CA). Los resultados experimentales se muestran en la Tabla 3:

Tabla 3. Resultados del ensayo farmacocinético

Conclusión experimental: Los compuestos de la invención tienen una alta exposición y biodisponibilidad en ratones.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto como se muestra en la fórmula (II), una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un tautómero del mismo,

al menos uno de X1 , X2 y X3 es N, el resto de los cuales es CH;

n se selecciona de 0 o 1;

R1 se selecciona de H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, o se selecciona del grupo que consiste en alquilo de C1-4, heteroalquilo de C1-4, heterocicloalquilo de 3-6 miembros y heteroarilo de 5-6 miembros, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 R;

R2 se selecciona de H, F, Cl, Br, I;

R3 se selecciona de H, F, Cl, Br, I, OH, NH2;

en cualquiera de los casos anteriores, el número del heteroátomo se selecciona independientemente de 1,2 o 3.

2. El compuesto, la sal farmacéuticamente aceptable del mismo o el tautómero del mismo según la reivindicación 1, en el que R se selecciona de F, Cl, Br, I, OH, NH2, o se selecciona del grupo que consiste en Me,

cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con 1,2 o 3 R’.

3. El compuesto, la sal farmacéuticamente aceptable del mismo o el tautómero del mismo según la reivindicación 2, en el que R se selecciona de F, Cl, Br, I, OH, NH2, Me,

4. El compuesto, la sal farmacéuticamente aceptable del mismo o el tautómero del mismo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 -3, en el que R1 se selecciona de H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, o se selecciona del grupo que consiste en alquilo de C1-3, alcoxi de C1-3, alquilamino de C1-3, morfolinilo y piridilo, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 R.

5. El compuesto, la sal farmacéuticamente aceptable del mismo o el tautómero del mismo según la reivindicación 4, en el que R1 se selecciona de H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, o se selecciona del grupo que consiste en Me,

cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con 1,2 o 3 R.

6. El compuesto, la sal farmacéuticamente aceptable del mismo o el tautómero del mismo según la reivindicación 5, en el que R1 se selecciona de H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, Me

7. El compuesto, la sal farmacéuticamente aceptable del mismo o el tautómero del mismo según una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en el que el resto

se selecciona del grupo que consiste en

8. El compuesto, la sal farmacéuticamente aceptable del mismo o el tautómero del mismo según una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en el que el resto

se selecciona del grupo que consiste en

9. El compuesto, la sal farmacéuticamente aceptable del mismo o el tautómero del mismo según una cualquiera de las reivindicaciones 1-6, se selecciona del grupo que consiste en

en el que,

X1 , X2, X3, R2 y R3 se definen según la reivindicación 1;

R1 se define según una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 4-6;

opcionalmente, el compuesto, la sal farmacéuticamente aceptable del mismo o el tautómero del mismo se selecciona del grupo que consiste en

en el que,

R2 y R3 se definen según la reivindicación 1;

R1 se define según una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 4-6.

10. Un compuesto según la reivindicación 1, una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un tautómero del mismo que se selecciona del grupo que consiste en

11. Una composición farmacéutica, que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo según una cualquiera de las reivindicaciones 1-10 como ingrediente activo, y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

12. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 -10, para uso como medicamento.

13. Composición según la reivindicación 11, para uso como medicamento.

14. El compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 -10, para uso en el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas, enfermedades cardiovasculares, enfermedades inflamatorias, enfermedades autoinmunes, y/o trastornos metabólicos.

15. La composición según la reivindicación 11, para uso en el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas, enfermedades cardiovasculares, enfermedades inflamatorias, enfermedades autoinmunes, y/o trastornos metabólicos.