ES2602965T3 - Inhibidores de aril lactama quinasa - Google Patents

Abstract

Un compuesto de formula (I)**Fórmula** o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, en la que: R1 se selecciona entre hidrogeno, alquenilo C2-C4, alcoxi C1-C3, alcoxi C1-C3-alquilo C1-C3, alquilo C1-C3, alquilamino C1-C3, aril-alquilo C1-C3, cicloalquilo C3-C6, cicloalquil C3-C6-alquilo C1-C3, haloalquilo C1-C3 e hidroxialquilo C1-C3; R2 se selecciona entre hidrogeno, alcoxi C1-C3, alcoxicarbonilamino C1-C3, alquilo C1-C3, alquilamino C1-C3, alquilcarbonilamino C1-C3, amino, arilamino, arilcarbonilamino, cicloalquilamino C3-C6, cicloalquilcarbonilamino C3-C6, cicloalquiloxi C3-C6, halo, haloalcoxi C1-C3, haloalquilo C1-C3, haloalquilamino C2-C3, haloalquilcarbonilamino C2-C3, hidroxi y fenilalquilamino C1-C3, en donde el fenilo esta opcionalmente sustituido con un grupo alcoxi C1-C3; R3 y R4 se seleccionan independientemente entre hidrogeno, alcoxi C1-C4, alcoxi C1-C3-alquilo C1-C3, alcoxicarbonilo C1-C3, alquilo C1-C4, alquilsulfonilo C1-C3, aminocarbonilo, ciano, cicloalquilo C3-C6, di(alquil C1- C3)aminocarbonilo, halo, haloalcoxi C1-C3, haloalquilo C1-C3, heteroarilo, hidroxi, hidroxialquilo C1-C3 y fenilo opcionalmente sustituido con un grupo halo; R5 es alquil C1-C3-Y o alquilo C2-C8, en donde el alquilo C2-C8 esta opcionalmente sustituido con uno, dos, tres o cuatro grupos seleccionados independientemente entre alcoxi C1-C3, alquilamino C1-C3, alcoxi C1-C3-alquilamino C2-C3, amino, arilo, di(alquil C1-C3)amino, halo, haloalquilamino C1-C3, haloalquilcarbonilamino C1-C3, hidroxi, - NRxRy y cicloalquilo C3-C8, en donde el cicloalquilo esta opcionalmente sustituido adicionalmente con uno, dos o tres grupos seleccionados independientemente entre alcoxi C1-C3, alquilo C1-C3, alquilamino C1-C3, alcoxi C1-C3- alquilamino C2-C3, amino, arilo, aril-alquilo C1-C3, halo, haloalquilo C1-C3, haloalquilamino C1-C3 e hidroxi; Rx y Ry, junto con el atomo de nitrogeno al que estan unidos, forman un anillo de tres a seis miembros; y Y se selecciona entre**Fórmula** en las que n es 0, 1, 2 o 3; cada R6 se selecciona independientemente entre hidrogeno, alquilo C1-C6, arilo, aril-alquilo C1-C3, cicloalquilo C3- C6, halo y haloalquilo C1-C3; cada R7 se selecciona independientemente entre hidrogeno, alcoxi C1-C3 e hidroxi; y R8 se selecciona entre hidrogeno, alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C6 y alquilcarbonilo C1-C6.

Description

imagen1

imagen2

imagen3

imagen4

imagen5

imagen6

Las sales de adición básicas pueden prepararse durante el aislamiento final y la purificación de los compuestos haciendo reaccionar un grupo carboxi con una base adecuada tal como el hidróxido, carbonato, o bicarbonato de un catión metálico o con amoniaco o una amina orgánica primaria, secundaria o terciaria. Los cationes de sales farmacéuticamente aceptables incluyen litio, sodio, potasio, calcio, magnesio y aluminio, así como cationes de amina

5 cuaternaria no tóxicos, tales como amonio, tetrametilamonio, tetraetilamonio, metilamina, dimetilamina, trimetilamina, trietilamina, dietilamina, etilamina, tributilamina, piridina, N,N-dimetilanilina, N-metilpiperidina, N-metilmorfolina, diciclohexilamina, procaína, dibencilamina, N,N-dibencilfenetilamina y N,N'-dibenciletilendiamina. Otras aminas orgánicas representativas útiles para la formación de sales de adición de bases incluyen etilendiamina, etanolamina, dietanolamina, piperidina y piperazina.

Una realización de la presente divulgación incluye métodos de inhibición de la quinasa asociada a adaptador 1 (AAK1), tanto in vitro como in vivo, que comprende poner en contacto la AAK1 con un compuesto de fórmula I o con una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

15 Cuando es posible que, para su uso en terapia, cantidades terapéuticamente eficaces de un compuesto de fórmula (I), así como sus sales farmacéuticamente aceptables, puedan administrarse como el producto químico bruto, es posible presentar al principio activo como una composición farmacéutica. Por consiguiente, la divulgación proporciona adicionalmente composiciones farmacéuticas que incluyen cantidades terapéuticamente eficaces de compuestos de fórmula (I) o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos y uno o más vehículos, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables. A menos que se indique otra cosa, una "cantidad terapéuticamente eficaz" de un compuesto es una cantidad suficiente para proporcionar un beneficio terapéutico en el tratamiento o control de una enfermedad o afección, o para retrasar o minimizar uno o más síntomas asociados con la enfermedad

o afección. La expresión "cantidad terapéuticamente eficaz" puede incluir una cantidad que mejore la terapia

completa, reduzca o evite síntomas o causas de una enfermedad o afección, o potencie la eficacia terapéutica de 25 otro agente terapéutico.

La expresión "cantidad terapéuticamente eficaz", como se utiliza en el presente documento, se refiere a una cantidad de uno o más compuestos, que es suficiente para proporcionar un beneficio terapéutico en el tratamiento o control de una enfermedad o afección, para retrasar o minimizar uno o más síntomas asociados con la enfermedad o afección. Una "cantidad terapéuticamente eficaz" de un compuesto significa una cantidad del agente terapéutico, solo o en combinación, con otras terapias, que proporciona un beneficio terapéutico en el tratamiento o control de la enfermedad o afección. La expresión "cantidad terapéuticamente eficaz" puede incluir una cantidad que mejore la terapia completa, reduzca o evite los síntomas o causas de una enfermedad o afección, o potencie la eficacia terapéutica de otro agente terapéutico. Cuando se aplica a un principio activo individual administrado solo, la 35 expresión se refiere a ese ingrediente solo. Cuando se aplica a una combinación, la expresión se refiere a las cantidades combinadas de los principios activos que dan como resultado el efecto terapéutico ya sean administradas en combinación, en serie o de forma simultánea. Los compuestos de fórmula (I) y sus sales farmacéuticamente aceptables, son como se describe anteriormente. El vehículo (o vehículos), el diluyente (o diluyentes) o el excipiente (o excipientes) debe ser aceptable en el sentido de ser compatible con los otros principios de la formulación y no nocivo para su destinatario. Según otro aspecto de la presente divulgación, también se proporciona un proceso para la preparación de una formulación farmacéutica que incluye combinar un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, con uno o más vehículos, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables. La expresión "farmacéuticamente aceptable", como se utiliza en el presente documento, se refiere a los compuestos, materiales, composiciones y/o formas de dosificación que son, dentro del ámbito del buen criterio

45 médico, adecuados para su uso en contacto con los tejidos de los pacientes sin excesiva toxicidad, irritación, respuesta alérgica u otro problema o complicación en consonancia con una relación beneficio/riesgo razonable y que son eficaces para el uso al cual están destinados.

Las formulaciones farmacéuticas pueden presentarse en formas de dosis unitarias que contienen una cantidad predeterminada de principio activo por dosis unitaria. En una monoterapia, para la prevención y el tratamiento de enfermedades, son típicos niveles de dosificación de entre aproximadamente 0,01 y aproximadamente 250 miligramos por kilogramo ("mg/kg") de peso corporal al día, preferentemente entre aproximadamente 0,05 y aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal al día de los compuestos de la presente divulgación. Normalmente, las composiciones farmacéuticas de la presente divulgación se administrarán desde aproximadamente 1 a 55 aproximadamente 5 veces al día o, como alternativa, como una infusión continua. Dicha administración puede utilizarse como una terapia crónica o aguda. La cantidad de principio activo que puede combinarse con los materiales vehículos para producir una forma de dosificación única variarán dependiendo de la afección que vaya a tratarse, de la gravedad de la afección, del tiempo de administración, de la vía de administración, de la tasa de excreción del compuesto empleado, de la duración del tratamiento y de la edad, sexo, peso y estado del paciente. Las formulaciones de dosificación unitaria preferidas son las que contienen una dosis o subdosis diaria, como se indica anteriormente en el presente documento, o una fracción apropiada de las mismas, de un principio activo. El tratamiento puede iniciarse con pequeñas dosificaciones sustancialmente menores que la dosis óptima del compuesto. A partir de entonces, la dosificación se aumenta en pequeños aumentos hasta que se alcanza el efecto óptimo según las circunstancias. En general, el compuesto se administra de forma muy conveniente a un nivel de

65 concentración que, en general, proporcionará resultados eficaces sin provocar ningún efecto secundario nocivo o dañino.

8

imagen7

imagen8

imagen9

imagen10

agua como se describe en Protective Groups in Organic Synthesis (Greene, Wuts; 3ª ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.). El ácido 6 puede convertirse en la amida 7 usando condiciones de acoplamiento convencionales, tales como EDC, HOBt y cloruro de amonio. La amida 7, tras el tratamiento con una fuente de hidruro tal como hidruro sódico en un disolvente tal como THF en una atmósfera inerte puede proporcionar la lactama restringida, 8. El análogo de éter de lactama restringida representado por 8 puede someterse a desprotección del grupo amino de cadena lateral usando condiciones apropiadas como se describe en Protective Groups in Organic Synthesis (Greene, Wuts; 3ª ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.) para producir los compuestos representados por la fórmula 9.

imagen11

10 Los compuestos representados por la fórmula 13 y 14 se preparan por los métodos descritos en el Esquema 2. El éster biarílico 4, preparado como se ha descrito en el Esquema 1, puede someterse a hidrólisis en condiciones de saponificación convencionales usando una base tal como hidróxido de litio o sodio en un disolvente tal como agua como se describe en Protective Groups in Organic Synthesis (Greene, Wuts; 3ª ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.) para producir los ácido carboxílicos correspondientes, que tras el tratamiento con condiciones de acoplamiento

15 amida convencionales tales como EDC, HOBt y cloruro de amonio o amina sustituida pueden convertirse en las amidas 10. La ciclación de las amidas 10 puede afectarse por un tratamiento con una fuente de hidruro tal como hidruro sódico en un disolvente tal como THF en una atmósfera inerte para producir los núcleos cloro de lactama restringidos 11. Los núcleos de cloro 11 pueden someterse a síntesis de éster catalizada con paladio usando condiciones de reacción conocidas por los expertos en la técnica siguiendo procedimientos tales como los descritos

20 por Gowrisankar, et. al. (J. Am. Chem. Soc. 2010, 132, 11592-11598) para proporcionar los compuestos representados por la fórmula 12. Las reacciones pueden realizarse usando (S) o (R)-aminoalcoholes apropiadamente protegidos, racémicos u ópticamente puros para proporcionar éteres racémicos u ópticamente puros 12. Los análogos de éter pueden someterse a desprotección del grupo amino de cadena lateral usando las condiciones apropiadas como se describe en Protective Groups in Organic Synthesis (Greene, Wuts; 3ª ed., 1999,

25 John Wiley & Sons, Inc.) para producir los compuestos de fórmula 13. En los casos en los que R2 sirve como un grupo protector, este grupo puede eliminarse usando las condiciones apropiadas como se describe en Protective Groups in Organic Synthesis (Greene, Wuts; 3ª ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.)

imagen12

30 Los compuestos representados por la fórmula 17 y 19 se preparan por los métodos descritos en el Esquema 3. El éter de lactama restringida, 15, sintetizado como se muestra en el Esquema 2, puede someterse a halogenación empleando N-halosuccinimida en disolventes apróticos polares, tales como acetonitrilo en la oscuridad para producir éteres mono-halo (X = halo, R3 = H) o dihalo-sustituidos (R3 = X = halo) 16. La cadena lateral de los éteres 16 puede

35 someterse a desprotección usando las condiciones apropiadas como se describe en Protective Groups in Organic

13

imagen13

imagen14

imagen15

imagen16

sustrato con los reactivos apropiados como se describe en Protective Groups in Organic Synthesis (Greene, Wuts; 3ª ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.) para proporcionar los compuestos desprotegidos de la fórmula 54.

imagen17

5 Los compuestos representados por la fórmula 56 58 se preparan por los métodos descritos en el Esquema 10. El éter de lactama restringida, 50, sintetizado como se muestra en el Esquema 8, puede someterse a cianación empleando un acoplamiento de Negishi convencional, usando Zn(CN)2 y un catalizador tal como Pd(PPh3)4 en un disolvente, tal como DMF, o usando CuCN a temperaturas que varían de 50 a 120 ºC para producir los compuestos

10 representados por la fórmula 55. El compuesto de nitrilo 55 puede hidrolizarse con HCl acuoso a temperaturas elevadas seguido de la formación de éster con cloruro de tionilo u oxalilo seguido de inactivación con un alcohol para proporcionar los compuestos representados por la fórmula 57. Como alternativa, el compuesto de nitrilo 55 puede hidrolizarse para dar la amida empleando una base tal como carbonato de cesio en un disolvente tal como DMF a temperaturas que varían de 100-120 ºC para proporcionar los compuestos representados por la fórmula 58. Si R1

15 contiene un grupo amina u otro grupo funcional que esté protegido, el grupo protector se retira tratando el sustrato con los reactivos apropiados como se describe en Protective Groups in Organic Synthesis (Greene, Wuts; 3ª ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.) para proporcionar compuestos de fórmula 56 58.

imagen18

20 Los compuestos representados por la fórmula 60 62 se preparan por los métodos descritos en el Esquema 11. El éter de lactama restringida, 50, sintetizado como se muestra en el Esquema 8, puede someterse a trifluorometilación catalizada con cobre empleando yoduro de cobre (I) y trimetil(trifluorometil)silano en un disolvente tal como NMP a altas temperaturas para proporcionar los compuestos representados por la fórmula 59. Como alternativa, el

25 compuesto halo 50 puede someterse a acoplamiento catalizado con cobre empleando yoduro de cobre (I), 1Hpirazol, N1, N2-dimetiletano-1,2-diamina y una base tal como fosfato potásico en un disolvente tal como DMF y 1,4

18

imagen19

imagen20

imagen21

imagen22

imagen23

23

imagen24

imagen25

imagen26

imagen27

imagen28

28

imagen29

imagen30

imagen31

imagen32

Descripción de las realizaciones específicas

En los siguientes ejemplos, los espectros de RMN de protón se registraron en un espectrómetro RMN Bruker 400 o 500 MHz. Los desplazamientos químicos se indican en valores δ con respecto a tetrametilsilano. El análisis por 5 LC/MS se realizó en un Shimadzu LC acoplado a un Waters Micromass ZQ. Los tiempos de retención de HPLC se obtuvieron usando al menos uno de los siguientes métodos:

Métodos LC-MS:

10 Método LC/MS A: Columna: PUROSPHER@star RP-18 (4 x 55 mm), 3 µm; Tampón: NH4OAC 20mM EN AGUA; Fase móvil A: Tampón + ACN (90+10); Fase móvil B: Tampón + MeCN(10+90); Flujo: 2,5 ml/min) Método LC/MS B: Columna: ZORBAX SB C18 (46 x 50 mm), 5 µm; Fase móvil A en modo positivo: MeOH al 10 % - H2Oal 90 % - TFA al 0,1 %; FasemóvilB: MeOH al 90 % - H2O al 10 % - TFA al 0,1 %; Flujo: 5 ml/min) Método LC/MS C: Columna - Ascentis Express C8 (5 x 2,1 mm), 2,7 µm; Fase móvil A: MeCN al 2 % -H2O al

15 98%- NH4COOH 10 mM; Fase móvil B: ACN al 98 % - H2Oal 2% - NH4COOH 10 mM; Flujo: 1 ml/min) Método LC/MS D: Columna -ACQUITY UPLC BEH C18 (2,1 x 50 mm), 1,7 µm; Fase móvil A: TFA al 0,1 % en agua; Fase móvil B: TFA al 1 % en ACN; Flujo: 1/min) Método LC/MS E: Columna -ACQUITY UPLC BEH C18 (2,1 x 50 mm), 1,7 µm; Fase móvil A: NH4OAc 5 mM:AC (95:5); Fase móvil B: NH4OAc 5 mM:ACN (5:95); Flujo: 1/min)

20 Método LC/MS F: Columna: X-Bridge BEH C18 (50 x 2,1 mm), 2,5 µm; Fase móvil A: ACN + H2O (2+98) + TFA al 0,1 %; Fase móvil B: ACN + H2O (98+2) + TFA al 0,05 %; Flujo: 1,2 ml/min. Método LC-MS G: Columna: Kinetex C18 (50 x 2,1 mm), 2,6 um: Fase móvil A: ACN al 2 %-H2O al 98 %-10 mM; Fase móvil B: ACN al 98 %-H2O al 2 %- NH4COOH 10 mM; Flujo: 1/min). Método LC-MS H: Columna: BEH C18 (50 x 3,0 mm), 1,7 µm: Fase móvil A: ACN al 5 %-H2O al 95 %-10 mM;

25 Fase móvil B: ACN al 95 %-H2O al 5 %-NH4COOH 10 mM; Flujo: 1,2/min). Método LC-MS I: Columna: Ace Excel 2 C18 (50 x 3,0 mm), 2,0 µm: Fase móvil A: ACN al 2 %-H2O al98%,10 mM; FasemóvilB: ACN al98 % - H2Oal 2% - NH4COOH 10 mM; Flujo: 1,2/min).

Método HPLC quiral: 30 Método A: CHIRALCEL OJH (250 x 4,6) mm 5 micrómetros, Fase móvil: DEA al 0,2 % en n-hexano:etanol

(80:20) Método B: CHIRALPAK AD-H (250 x 4,6) mm 5 micrómetros, Fase móvil A: DEA al 0,2 % en n-hexano (70) B: etanol (30)

35 Método C: CHIRALPAK- ASH (250 x 4,6) mm 5 micrómetros, Fase móvil A: DEA al 0,2 % en n-hexano:etanol

(90:10)

Métodos HPLC analítica:

40 Método A: Columna Waters analytical C18 sunfire (4,6 x 150 mm, 3,5 µm); fase móvil:

Tampón: TFA al 0,05 % en H2O pH = 2,5 ajustado con amoniaco A = tampón y acetonitrilo (95:5), B = acetonitrilo y tampón (95:5); 0 - 15 min, 0 % de B → 50 % de B; 15 - 18 min, 50 % de B → 100 % de B; 18

-23 min, 100 % de B; caudal = 1 ml/min; λ = 254 nm y 220 nm; tiempo de realización = 28 min.

45 Método B: Columna Waters analytical fenilo xbridge (4,6 x 150 mm, 3,5 µm), fase móvil: Tampón: TFA al 0,05% en H2O pH = 2,5 ajustado con amoniaco A = tampón y acetonitrilo (95:5), B = acetonitrilo y buffer (95:5); 0 -15min, 0% de B → 50 % de B; 15 - 18 min, 50% de B → 100% de B; 18 -23 min, 100% de B; caudal = 1 ml/min; λ = 254 nm y 220 nm; tiempo de realización = 28 min.

50 Método C: Columna Waters analytical C18 sunfire (3,0 x 150 mm, 3,5 µm); fase móvil: A = Bicarbonato am. 10 mM (pH = 9,5)/H2O al 95 %/metanol al 5 %, B = Bicarbonato am. 10 mM (pH = 9,5)/H2O al 5 %/metanol al 95 %;0 - 15min, 0% de B → 100 % de B; 15 - 18 min, 100 % de B; caudal = 1 ml/min; λ = 254 nm; tiempo de realización = 18 min.

55 Método D: Columna Waters analytical fenilo xbridge (3,0 x 150 mm, 3,5 µm), fase móvil: A = Bicarbonato am. 10 mM (pH = 9,5)/H2O al 95 %/metanol al 5 %, B = Bicarbonato am. 10 mM (pH = 9,5)/H2O al 5 %/metanol al 95 %;0 - 15min, 0% de B → 100 % de B; 15 - 18 min, 100 % de B; caudal = 1 ml/min; λ = 254 nm; tiempo de realización = 18 min.

60

Ejemplo 1

(S)8(2amino4metilpentiloxi)benzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

33

imagen33

imagen34

imagen35

imagen36

imagen37

Parte A. (1-((9-bromo-6-metil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-4-metilpentan-2-il)carbamato de (S)tercbutilo. A una solución de (4-metil-l-((6-metil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)pentan-2-il)carbamato 5 de(S)-tercbutilo (0,100 g, 0,235 mmol) (como se preparó en el Ej. 2, Parte D) en acetonitrilo anhidro (5 ml) se le añadió Nbromosuccinimida (0,042 g, 0,235 mmol) y la mezcla se calentó a 85 ºC durante 5 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua (10 ml), se extrajo con acetato de etilo (2 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato sódico y se evaporaron a presión reducida para proporcionar el producto en bruto que se purificó por TLC preparativa (gradiente de acetato de etilo y éter de petróleo) para proporcionar (1-((9-bromo-6-metil

10 5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-4-metilpentan-2-il)carbamato de (S)-tercbutilo (80 mg, 0,159 mmol, rendimiento del 68 %) en forma de un sólido de color blanquecino. LC/MS (ESI) m/e 504,2 [(M+H)+, calc. para C24H31BrN3O4 504,1]; Tiempo de retención de LC/MS (método A): tR = 2,23 min.

imagen38

15 Parte B. (S)8((2amino4metilpentil)oxi)9bromo6metilbenzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

A una solución de (1-((9-bromo-6-metil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-4-metilpentan-2-il)carbamato de (S)-tercbutilo (80 mg, 1,586 mmol) en metanol anhidro (5 ml) se le añadió gota a gota una solución 4 M de HCl en 1,4-dioxano (2 ml, 8 mmol) a 0 ºC. La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 20 2 h. Después, la mezcla se concentró a presión reducida para proporcionar el producto en bruto que se purificó por HPLC preparativa (acetato amónico 10 mM en agua; acetonitrilo) para proporcionar (S)-8-((2-amino-4metilpentil)oxi)-9-bromo-6-metilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (20 mg, 0,049 mmol, rendimiento del 30 %) en forma de un sólido de color blanquecino. LC/MS (ESI) m/e 404,1 [(M+H)+, calc. para C19H23BrN3O2 404,1]; Tiempo de retención de LC/MS (método A): tR = 1,47 min; tiempo de retención de HPLC (método A): tR = 9,55 min; tiempo de

25 retención de HPLC (método B): tR = 10,23 min; 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,48 (s, 1H), 8,80 (d, J = 5,77 Hz, 1H), 8,67 (s, 1 H), 8,26 (d, J = 5,77 Hz, 1H), 7,15 (s, 1H), 4,37 (dd, J = 9,54, 3,76 Hz, 1H), 4,18 (dd, J = 9,66, 6,40 Hz, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,48 - 3,56 (m, 1H), 1,89 (m, 1H), 1,51 -1,72 (m, 2H), 1,05 (t, J = 6,27 Hz, 6H).

Ejemplo 4

30

(S)8((2amino4metilpentil)oxi)6,9dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

imagen39

35 Parte A. (1((6,9dimetil5oxo5,6dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin8il)oxi)4metilpentan2il)carbamato de (S)tercbutilo

En un matraz de fondo redondo de 10 ml, se recogieron (1-((9-bromo-6-metil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin

40 8-il)oxi)-4-metilpentan-2-il)carbamato de (S)-tercbutilo (como se preparó en el Ej. 3, Parte A) (150 mg, 0,297 mmol), 2,4,6-trimetil-1,3,5,2,4,6-trioxatriborinano (41,1 mg, 0,327 mmol), Cs2CO3 (291 mg, 0,892 mmol) y PdCl2(dppf) (21,76 mg, 0,030 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano (2 ml) y agua (0,1 ml). La mezcla de reacción se purgó con

38

imagen40

imagen41

imagen42

imagen43

imagen44

5 A una solución de (1-((6-isopropil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-4-metilpentan-2-il)carbamato de (S)-tercbutilo (160 mg, 0,353 mmol) en diclorometano anhidro (4 ml) se le añadió gota a gota una solución 2 M de HCl en éter dietílico (0,88 ml, 1,76 mmol) a 0 ºC. La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 2 h. Después, la mezcla de reacción se concentró a presión reducida para proporcionar el producto en bruto que se purificó por HPLC preparativa (acetato amónico 10 mM en agua; acetonitrilo) para proporcionar (S)

10 8-((2-amino-4-metilpentil)oxi)-6-isopropilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (45 mg, 0,127 mmol, rendimiento del 36 %) en forma de un sólido de color blanquecino. LC/MS (ESI) m/e 354,2 [(M+H)+, calc. para C21H28N3O2 354,2]; Tiempo de retención de LC/MS (método C): tR = 1,81 min; tiempo de retención de HPLC (método A): tR = 8,85 min; tiempo de retención de HPLC (método B): tR = 9,50 min. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,43 (d, J = 0,75 Hz, 1H), 8,75 (d, J = 5,77 Hz, 1H), 8,42 (d, J = 9,04 Hz, 1H), 8,22 (d, J = 5,52 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 2,26 Hz, 1H), 7,10 (dd, J = 8,78,

15 2,26 Hz, 1H), 5,26 - 5,43 (m, 1H), 4,16 (dd, J = 9,16, 3,89 Hz, 1H), 3,98 (dd, J = 9,29, 7,03 Hz, 1H), 3,27 - 3,31 (m, 1H), 1,81 - 1,92 (m, 1H), 1,73 (d, J = 7,03 Hz, 6H), 1,41 - 1,51 (m, 2H), 1,02 (dd, J = 9,54, 6,53 Hz, 6H).

Ejemplo 9

20 (S)6alil8((2amino4metilpentil)oxi)benzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

imagen45

25 Parte A. 4(4cloro2fluorofenil)Nciclopropilnicotinamida

A una solución de ácido 4-(4-cloro-2-fluorofenil)nicotínico (500 mg, 1,987 mmol) (preparada como en el Ej. 2, Parte A) en DMF (6 ml) enfriada a 0 ºC se le añadieron EDC (571 mg, 2,98 mmol) y HOBT (609 mg, 3,97 mmol) y la mezcla se agitó durante 5 min. A la solución resultante se le añadió DIPEA (1,04 ml, 5,96 mmol) seguido de

30 ciclopropanamina (567 mg, 9,93 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 12 h. La mezcla de reacción se trató con hielo y se extrajo con acetato de etilo (3 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (1 x 10 ml), se secaron (Na2SO4) y se concentraron a presión reducida para proporcionar 4-(4-cloro-2fluorofenil)-N ciclopropilnicotinamida (480 mg, 1,65 mmol, rendimiento del 83 %). LC/MS (ESI) m/e 291,0 [(M+H)+ , calc. para C15H13ClFN2O 291,1]; Tiempo de retención de LC/MS (método C): tR = 1,79 min.

imagen46

35

A una suspensión de hidruro sódico (72,6 mg, 3,03 mmol) en THF (8 ml) a 0 ºC se le añadió gota a gota una

40 solución de 4-(4-cloro-2-fluorofenil)-N-ciclopropilnicotinamida (440 mg, 1,51 mmol) en THF (10 ml) durante un periodo de 10 min. La mezcla de reacción se agitó a 0 ºC durante 1 h y después se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 1 h más. Después, la mezcla de reacción se trató con hielo y se extrajo con acetato de etilo (3 x 5 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (2 x 5 ml), se secaron (Na2SO4) y se concentraron a presión reducida para proporcionar 8-cloro-6-ciclopropilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona en bruto (340 mg,

43

imagen47

imagen48

imagen49

imagen50

imagen51

5 A una solución de 8-cloro-6-ciclopropilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (100 mg, 0,346 mmol) en tolueno (5 ml) a temperatura ambiente se le añadieron carbonato de cesio (169 mg, 0,520 mmol) y N-Boc-L-leucinol (226 mg, 1,039 mmol) y la mezcla se desgasificó con nitrógeno durante 5 min. Después, la mezcla se trató con di-tercbutil(2',4',6'-triisopropil-[1,1'-bifenil]-2-il)fosfina (47,8 mg, 0,208 mmol) seguido de acetato de paladio (II) (23,3 mg,

10 0,104 mmol) y se desgasificó durante 10 min más. La mezcla de reacción se cerró herméticamente y se calentó a 80 ºC. Después de una noche de agitación, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró a través de tierra de diatomeas (Celite®). El lecho se lavó con acetato de etilo (15 ml) y el filtrado se concentró a presión reducida para proporcionar el producto en bruto que se purificó por combi flash (gradiente de acetato de etilo y éter de petróleo) para proporcionar (1-((6-(2-metoxietil)-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-4

15 metilpentan-2-il)carbamato de (S)-tercbutilo (80 mg, 0,170 mmol, rendimiento del 49 %) en forma de una goma de color pardo. LC/MS (ESI) m/e 470,3 [(M+H)+, calc. C26H36N3O5 470,3]; Tiempo de retención de LC/MS (método A): tR = 2,02 min.

imagen52

20 Parte E. (S)8((2amino4metilpentil)oxi)6(2 metoxietil)benzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

A una solución de (1-((6-(2-metoxietil)-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-4-metilpentan-2-il)carbamato de (S)-terc-butilo (0,080 g, 0,170 mmol) en metanol anhidro (5 ml) se le añadió gota a gota una solución 4 M de HCl en 1,4-dioxano (0,21 ml, 0,85 mmol) a 0 ºC. La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se 25 agitó durante 2 h. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida para proporcionar el compuesto en bruto que se purificó por HPLC preparativa (acetato amónico 10 mM en agua: acetonitrilo) para proporcionar (S)-8-((2amino-4-metilpentil)oxi)-6-(2-metoxietil)benzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (20 mg, 0,054 mmol, rendimiento del 32 %) un sólido de color blanco. LC/MS (ESI) m/e 370,2 [(M+H)+, calc. para C21H28N3O3 370,2]; Tiempo de retención de LC/MS (método A): tR = 1,34 min; tiempo de retención de HPLC (método A): tR = 8,36 min; tiempo de retención de

30 HPLC (método B): tR = 8,78 min. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,45 (s, 1H), 8,76 (d, J = 5,77 Hz, 1H), 8,40 (d, J = 9,03 Hz, 1H,), 8,23 (d, J = 6,02 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 2,26 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 8,78 Hz, 1H), 4,61 (t, J = 5,65 Hz, 2H), 4,36 (s, 1H), 4,20 (s, 1H), 3,81 (t, J = 5,77 Hz, 2H), 3,63 - 3,71 (m, 1H), 3,37 (s, 3H), 1,86 (m, 1H), 1,67 (ct, J = 14,01, 7,09 Hz, 2H), 1,06 (d, J = 5,77 Hz, 6H).

35 Ejemplo 13

(S)8((2amino4metilpentil)oxi)6(ciclopropilmetil)benzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

imagen53

48

imagen54

imagen55

imagen56

imagen57

A una solución agitada de clorhidrato del ácido 2-amino-5,5,5-trifluoropentanoico (400 mg, 1,503 mmol, 78 % por LC/MS) en THF (8 ml) y agua (8 ml) a ta se le añadió K2CO3 (831 mg, 6,01 mmol) y la solución se agitó durante 10 min. A esta mezcla se le añadió Boc2O (656 mg, 3,01 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 8 h a ta y después se concentró a presión reducida. La capa acuosa se lavó con acetato de etilo (3 x 5 ml). La capa acuosa se 5 acidificó con una solución saturada de ácido cítrico (5 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 8 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (3 x 5 ml) seguido de solución de salmuera (1 x 10 ml), se secó sobre sulfato sódico y se concentró a presión reducida para proporcionar ácido 2-((terc-butoxicarbonil)amino)-5,5,5trifluoropentanoico (500 mg, 1,84 mmol, rendimiento del 100 %) en forma de un aceite incoloro. El material se recogió en la siguiente etapa sin purificación adicional. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 5,04 (s, 1H), 4,38 (s, 1H), 2,15

10 2,28 (m, 2H), 1,91-1,95 (m, 2H), 1,46 (s, 9H).

imagen58

A una solución agitada de ácido 2-((tercbutoxicarbonil)amino)-5,5,5-trifluoropentanoico (500 mg, 1,843 mmol) en

15 THF (15 ml) enfriada a -10 ºC en una atmósfera de nitrógeno se le añadió gota a gota N-metilmorfolina (0,223 ml, 2,028 mmol) seguido de cloroformiato de isobutilo (0,266 ml, 2,028 mmol). Después, la solución se agitó durante 30 min y después se filtró. El filtrado se añadió a borohidruro sódico (147 mg, 3,87 mmol) en agua (10 ml), se agitó durante 5 min y se diluyó con acetato de etilo (10 ml). La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera (2 x 10 ml), se secó (Na2SO4) y se evaporó a presión reducida para proporcionar (5,5,5-trifluoro-1-hidroxipentan-2-il)carbamato

20 de tercbutilo (400 mg, 1,555 mmol, rendimiento del 84 %) en forma de un sólido de color blanco que se llevó a la siguiente etapa sin purificación adicional. 1H RMN (400 MHz, MeOD) δ 3,44-3,56 (m, 3H), 2,16-2,26 (m, 2H), 1,831,92 (m, 1H), 1,57-1,67 (m, 1H), 1,47 (s, 9H).

imagen59

25 Parte E. 5,5,5trifluoro1(6metil5oxo5,6dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin8iloxi)pentan2ilcarbamato de tercbutilo

La reacción se realizó como en el Ej. 2, Parte D para producir el producto (5,5,5-trifluoro-1-((6-metil-5-oxo-5,6dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)pentan-2-il)carbamato de terc-butilo (160 mg, 0,237 mmol, rendimiento del 30 23 %) en forma de un sólido de color blanco. LC/MS (ESI) m/e 466,31 [(M+H)+, calc. para C23H27F3N3O4, 466,19]; Tiempo de retención de LC/MS (método D): tR = 1,04 min.

imagen60

35 A una solución de (5,5,5-trifluoro-1-((6-metil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)pentan-2-il)carbamato de tercbutilo (150 mg, 0,322 mmol) en éter dietílico (10 ml) en una atmósfera de nitrógeno, enfriada a 0 ºC se le añadió HCl 4 M en 1,4-dioxano (0,098 ml, 0,392 mmol) lentamente durante un periodo de 5 min. La mezcla de reacción de color amarillo claro se agitó a 0 ºC durante 5 min, después se calentó a temperatura ambiente y se dejó agitar

40 durante 12 h. El disolvente se retiró a presión reducida. El aceite de color amarillo residual se diluyó con agua (3 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 4 ml). La capa acuosa se separó y se trató con una solución sat. de Na2CO3 (3 ml). La capa acuosa resultante se extrajo con EtOAc (3 x 5 ml). Las capas orgánicas combinadas se separaron, se lavaron con agua (2 x 5 ml) y salmuera (1 x 5 ml) y se secaron sobre sulfato sódico. El filtrado se evaporó a presión reducida y se purificó por SFC (CO2 y DEA al 0,5 % en Metanol) para proporcionar 8-((2-amino-5,5,5-trifluoropentil)oxi)-6

45 metilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (102,8 mg, 0,278 mmol, rendimiento del 86 %) en forma de un sólido de color blanco. LC/MS (ESI) m/e 366,2 [(M+H)+, calc. para C18H19F3N3O2 366,13]; Tiempo de retención de LC/MS (método C): tR = 1,77 min; tiempo de retención de HPLC (método A): tR = 7,79 min; tiempo de retención de HPLC (método B): tR = 8,20 min. 1H RMN (400 MHz, MeOD) δ 9,48 (d, J = 0,80 Hz, 1H), 8,78 (d, J= 5,60 Hz, 1H), 8,44 (d, J= 8,80 Hz, 1H), 8,27 (d, J= 5,60 Hz, 1H), 7,17 (d, J= 2,40 Hz, 1H), 7,12 (dd, J = 2,40, 8,80 Hz, 1H), 4,17-4,20 (m, 1H), 4,09

50 (dd, J = 6,00, 9,40 Hz, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,28-3,28 (m, 1H), 2,33-2,49 (m, 2H), 1,92-1,99 (m, 1H), 1,73-1,80 (m, 1H).

53

imagen61

imagen62

imagen63

imagen64

Parte E. Ácido 8cloro6metil5oxo5,6dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin4ilcarbámico

A una solución agitada de fluoruro de 4-((tercbutoxicarbonil)amino)-8-cloro-6-metilbenzo[c][2,7]naftiridin-6-io (0,35 g, 0,65 mmol) y NaOH (0,162 g, 4,06 mmol) en una mezcla de DCM (10 ml) y agua (10 ml) se le añadió en porciones 5 KMnO4 (0,642 g, 4,06 mmol) a ta y la reacción se calentó a 90 ºC durante 1 h. La solución se diluyó con agua (10 ml) y se extrajo con DCM (2 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua 50 ml, se secaron sobre sulfato sódico y se concentraron a presión reducida para producir ácido (8-cloro-6-metil-5-oxo-5,6dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-4-il)carbámico (305 mg, 0,422 mmol, rendimiento del 65 %) en forma de un sólido de color amarillo, que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. LC/MS (ESI) m/e 304,1 [(M+H)+, calc. para

10 C14H11ClN3O3 304,04]; Tiempo de retención de LC/MS (Método D): tR = 1,01 min.

imagen65

15 Una solución de ácido (8-cloro-6-metil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-4-il)carbámico (300 mg, 0,415 mmol) en HCl conc. (15 ml, 494 mmol) se calentó a 90 ºC durante 2 h. El pH de la mezcla de reacción se ajustó a 8 con una solución saturada de bicarbonato sódico y se extrajo con DCM (2 x 30 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (30 ml), se secaron sobre sulfato sódico y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC prep. (TFA al 0,1 % en MeOH) para producir 4-amino-8-cloro-6-metilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)

20 ona (30 mg, 0,110 mmol, rendimiento del 27 %) en forma de la sal mono TFA. LC/MS (ESI) m/e 260,0 [(M+H)+, calc. para C13H11ClN3O 260,05]; Tiempo de retención de LC/MS (método B): tR = 1,18 min; tiempo de retención de HPLC (método A): tR = 5,24 min; tiempo de retención de HPLC (método B): tR = 6,31 min; 400 MHz, 1H RMN (DMSOd6) δ 9,95 (s, 1H), 8,75 (s, 1H), 8,56 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 8,23 (d, J = 6,80 Hz, 1H), 7,82 (dd, J = 6,80, 7,20 Hz, 2H), 7,54 (dd, J = 2,00, 8,80 Hz, 1H), 3,72 (s, 3H).

imagen66

25

A una solución agitada de 4-amino-8-cloro-6-metilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (30 mg, 0,059 mmol) en DMF

30 (10 ml) a 0 ºC se le añadió NaH (7,09 mg, 0,295 mmol) y la reacción se agitó durante 5 min. A esta mezcla se le añadió 1-(clorometil)-4-metoxibenceno (0,026 ml, 0,191 mmol) y se agitó a ta durante 16 h. La reacción se interrumpió mediante la adición de hielo y la mezcla de reacción se extrajo con acetato de etilo (2 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (25 ml), se secaron sobre sulfato sódico y se concentraron a presión reducida para producir 8-cloro-4-((4-metoxibencil)amino)-6-metilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (29 mg,

35 0,044 mmol, rendimiento del 75 %). LC/MS (ESI) m/e 380,27 [(M+H)+, calc. para C21H19ClN3O2 380,11]; Tiempo de retención de LC/MS (Método D): tR = 0,86 min.

imagen67

58

imagen68

imagen69

imagen70

imagen71

elución en gradiente de agua/metanol/TFA al 0,1 %). Las fracciones que contenían el producto se neutralizaron con

bicarbonato sódico acuoso saturado y se concentraron a presión reducida. El residuo se repartió entre acetato de

etilo y salmuera y las capas se separaron. El producto acuoso se extrajo dos veces más con acetato de etilo y los

productos orgánicos combinados se lavaron una vez con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se

5 filtraron y se concentraron para proporcionar (R)-8-((2-amino-4-metilpentil)oxi)-4,6-dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin

5(6H)-ona (11,5 mg, 0,033 mmol, rendimiento del 14 %) en forma de un aceite de color lechoso. LC/MS, (ESI) m/z

340,2 [(M+H)+, calc. para C20H26N3O2 340,2]; tiempo de retención de HPLC (método C): tR = 13,02 min; tiempo de

retención de HPLC (método D): tR = 13,05 min; 1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) δ 8,68 -8,63 (m, 2H), 8,58 (d, J =

9,0 Hz, 1H), 7,22 (dd, J = 9,0, 2,3 Hz, 1H), 7,20 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 4,52 (dd, J = 10, 5, 3,3 Hz, 1H), 4,34 (dd, J = 10 10,7, 6,6 Hz, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,80 - 3,75 (m, 1H), 3,25 (s, 3H), 1,91 - 1,81 (m, 1H), 1,80-1,73 (m, 1H), 1,72 -1,64

(m, 1H), 1,07 (d, J = 5,8 Hz, 3H), 1,06 (d, J = 5,8 Hz, 3H).

Ejemplo 20

15 (R)8((2amino4metilpentil)oxi)9cloro4,6dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

imagen72

Una mezcla de (1-((4,6-dimetil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-4-metilpentan-2-il)carbamato de (R)terct-butilo (248 mg, 0,564 mmol) preparado como se describe en el Ejemplo 19, Parte A, NCS (151 mg, 1,128 mmol) y acetonitrilo (5 ml) se calentó a 90 ºC durante 1 h y después se agitó a temperatura ambiente durante

25 una noche. El material en bruto se concentró a presión reducida para proporcionar (1-((9-cloro-4,6-dimetil-5-oxo-5,6dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-4-metilpentan-2-il)carbamato de (R)-terct-butilo (15 mg, 0,032 mmol, rendimiento del 6 % en bruto). La mezcla se uso en la siguiente etapa sin purificación adicional. LC/MS, (ESI) m/z 474,2 [(M+H)+, calc. para C25H33ClN3O4 474,2].

imagen73

30

Una solución a temperatura ambiente de (1-((9-cloro-4,6-dimetil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-4

35 metilpentan-2-il)carbamato de (R)-terct-butilo (15 mg, 0,032 mmol) en diclorometano (0,5 ml) se trató con HCl (4 M en 1,4-dioxano) (0,396 ml, 1,58 mmol) y se agitó durante 1 h. La mezcla resultante se concentró y el residuo se purificó por cromatografía líquida de alto rendimiento de fase inversa (Phenomenex Luna C18 30 x 100 mm 10 micrómetros; elución en gradiente de agua/acetonitrilo/acetato amónico 10 mM). Las fracciones que contenían el producto se concentraron a presión reducida para proporcionar (1-((9-cloro-4,6-dimetil-5-oxo-5,6

40 dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-4-metilpentan-2-il)carbamato de (R)-terc-butilo (9,0 mg, 0,023 mmol, rendimiento del 73 %) en forma de un sólido de color blanco. LC/MS, (ESI) m/z 373,2 [(M+H)+ , calc. para C20H25ClN3O2 373,2]; tiempo de retención de HPLC (método C): tR = 14,21 min; tiempo de retención de HPLC (método D): tR = 14,30 min; 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) δ 8,70 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,79 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 6,83 (s, 1H), 4,18 (dd, J = 8,8, 3,8 Hz, 1H), 4,04 - 3,97 (m, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,48 (cd, J = 6,9, 3,5 Hz,

63

imagen74

imagen75

imagen76

imagen77

El compuesto del título se preparó como se describe en el Ejemplo 25 partiendo de (1-ciclobutil-3-((4,6-dimetil-5-oxo5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)propan-2-il)carbamato de (S)terc-butilo, preparado como se describe en el Ejemplo 22, Parte A para proporcionar (S)-8-(2-amino-3-ciclobutilpropoxi)-4,6,9-trimetilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)ona (18 mg, 0,046 mmol, rendimiento del 26 % para la etapa final) en forma de una película borrosa. LC/MS, (ESI)

5 m/z 366,3 [(M+H)+, calc. para C22H28N3O2 366,2]; tiempo de retención de HPLC (método C): tR = 14,65 min; tiempo de retención de HPLC (método D): tR = 15,04 min; 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) δ 8,62 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,82 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 6,69 (s, 1H), 4,05 (dd, J = 8,8, 4,0 Hz, 1H), 3,88 (dd, J = 8,5, 7,3 Hz, 1H), 3,74 (s, 3H), 3,34 - 3,20 (m, 1H), 3,16 (s, 3H), 2,63 - 2,46 (m, 1H), 2,36 (s, 3H), 2,23 - 2,08 (m, 2H), 2,01 -1,59 (m, 6H).

10 Ejemplo 27

(S)8((2amino4metilpentil)oxi)9(difluorometil)4,6dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

imagen78

20 A una solución de 8-cloro-4,6-dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (1 g, 3,87 mmol) preparada como se describe en el Ejemplo 16, Parte G, en ácido acético (30 ml) se le añadieron H2SO4 (0,021 ml, 0,387 mmol) y ácido peryódico (0,881 g, 3,87 mmol). La solución se calentó a 80 ºC durante 20 min y después se añadió yodo (0,294 g, 1,160 mmol). La mezcla se agitó durante 3 h más a 80 ºC. La solución se enfrió a temperatura ambiente y después se concentró a presión reducida. Al residuo se le añadió EtOAc y la capa se lavó con NaHCO3 acuoso saturado y

25 después H2O. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida para proporcionar 8-cloro-9-yodo-4,6-dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (1,2 g, 3,12 mmol, rendimiento del 81 % en bruto) en forma de un sólido de color blanquecino. El material se uso en la siguiente etapa sin purificación adicional. LC/MS (ESI) m/e 385,0 [(M+H)+, calc. para C14H11ClIN2O, 385,0]; Tiempo de retención de LC/MS (método B): tR = 1,09 min.

30

imagen79

35 Una solución de 8-cloro-9-yodo-4,6-dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (1,2 g, 2,71 mmol), complejo de 2,4,6trivinilciclotriboroxano piridina (0,784 g, 3,26 mmol), tetraquis(trifenilfosfina)paladio (0,157 g, 0,136 mmol) y Na2CO3 (0,575 g, 5,43 mmol) en tolueno (30 ml) y agua (0,5 ml) se purgó con nitrógeno y se calentó a 90 ºC durante 16 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se concentró a presión reducida. El residuo se recogió en acetato de etilo y se filtró a través de tierra de diatomeas (Celite®). La capa de EtOAc se lavó con salmuera y agua.

40 Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El material en bruto se purificó por gel de sílice cromatografía ultrarrápida usando EtOAc-hexano como eluyente para proporcionar 8-cloro-4,6-dimetil-9-vinilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (0,6 g, 1,43 mmol, rendimiento del 68 %)) en forma de un sólido gomoso de color pardo. LC/MS (ESI) m/e 285,0 [(M+H)+, calc. para C16H14ClN2O, 285,1]; Tiempo de retención de LC/MS (método B): tR = 2,25 min.

45

68

imagen80

imagen81

imagen82

imagen83

imagen84

5 A una solución agitada de 8-bromo-7-fluoro-4,6-dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (350 mg, 1,090 mmol) y (1hidroxi-2,4-dimetilpentan-2-il)carbamato de terc-butilo (504 mg, 2,180 mmol) en tolueno (10 ml) se le añadió carbonato de cesio (355 mg, 1,09 mmol) y 2-Di-t-butilfosfino-2',4',6'-tri-i-propil-1,1'-bifenilo (28 mg, 0,065 mmol). La mezcla de reacción se desgasificó con argón durante 5 min y después se le añadió acetato de paladio (7,34 mg,

10 0,033 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 100 ºC durante 18 h. Después, se filtró a través de tierra de diatomeas (Celite®) y el filtrado se evaporó para proporcionar (1-((7-fluoro-4,6-dimetil-5-oxo-5,6dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-2,4-dimetilpentan-2-il)carbamato terc-butilo que se llevó a la siguiente etapa sin purificación. LC/MS (ESI) m/e 472,2 [(M+H)+ , calc. para C26H35FN3O4 472,2]; Tiempo de retención de LC/MS (método C): tR = 2,17 min.

15

imagen85

20 A una solución de (1-((7-fluoro-4,6-dimetil-5-oxo-5,6 dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-2,4-dimetilpentan-2il)carbamato de terc-butilo (200 mg, 0,424 mmol) en MeOH (6 ml) a 0 ºC se le añadió HCl 4 M en 1,4-dioxano (3 ml, 99,0 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0 ºC durante 2 h. Después de 2 h, la mezcla de reacción se concentró a presión reducida para proporcionar el producto en bruto que se purificó por HPLC preparativa para proporcionar 8((2-amino-2,4-dimetilpentil)oxi)-7-fluoro-4,6-dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (10 mg, 0,024 mmol, rendimiento

25 del 6 %) en forma de un sólido de color blanquecino. LC/MS (ESI) m/e 372,0 [(M+H)+, calc. para C21H27FN3O2 372,2]; Tiempo de retención de LC/MS (método G): tR = 1,99 min. Tiempo de retención de HPLC (método A): tR = 8,37 min; tiempo de retención de HPLC (método B): tR = 9,72 min. 1H RMN (400 MHz, METANOLd4) δ ppm 8,58 (d, J = 6 Hz, 1 H), 8,22 (dd, J = 9,2 Hz, J = 2 Hz, 1 H), 8,14 (d, J = 6 Hz, 1 H), 7,23 (m, 1 H), 4,31 (d, J = 10 Hz, 1 H), 4,23 (d, J = 10,4 Hz, 1 H), 3,88 (d, J = 9,2 Hz, 3 H), 3,06 (s, 3 H), 1,90 (m, 2 H), 1,73 (m, 1 H), 1,52 (s, 3 H), 1,05 (m,

30 6H).

Ejemplo 30 y Ejemplo 31

8(((5)2amino4metilpentil)oxi)9(1hidroxietil)4,6dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

35

imagen86

73

imagen87

imagen88

imagen89

imagen90

0,850 mmol). La mezcla se calentó a 80 ºC durante una noche. La mezcla de reacción se concentró, se diluyó con acetato de etilo y exceso de NaHCO3 acuoso al 10 %. La capa de acetato de etilo se concentró. El residuo se purificó por HPLC prep. para proporcionar 9-bromo-8-cloro-4,6-dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (120 mg, 0,351 mmol, rendimiento del 45 %) en forma de un sólido de color blanco. LC/MS (ESI) m/e 337,0 [(M+H)+, calc. para C14H11BrClN2O, 337,0]; Tiempo de retención de LC/MS (Método C): tR = 2,55 min; 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) ppm 3,11 (s, 3H), 3,75 (s, 3H), 7,81 (s, 1H), 8,20-8,26 (m, 1H), 8,68 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,79 (s, 1H).

imagen91

10 Parte B. 8cloro9metoxi4,6dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

Una mezcla de 9-bromo-8-cloro-4,6-dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (0,05 g, 0,148 mmol) yoduro de cobre (I) (0,031 g, 0,163 mmol), L-prolina (0,020 g, 0,178 mmol), metóxido sódico (0,040 g, 0,741 mmol) y K2CO3 (0,041 g,0,296 mmol) se agitaron en DMSO (1,5 ml). La mezcla se calentó a 80 ºC durante 16 h. Después de un

15 periodo de refrigeración, la mezcla de reacción en bruto se diluyó con metanol, se filtró a través de tierra de diatomeas (Celite®) y se concentró a presión reducida para proporcionar 8-cloro-9-metoxi-4,6dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona, en forma de un sólido de color pardo (40 mg). LC/MS (ESI) m/e 289,0 [(M)+ , calc. para C15H14ClN2O2, 289,1]; Tiempo de retención de LC/MS (método D): tR = 0,89 min.

imagen92

20

25 Se sometió 8-cloro-9-metoxi-4,6-dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (0,04 g, 0,139 mmol) a acoplamiento Buchwald (Ejemplo 16, Parte H) con (1-hidroxi-2,4-dimetilpentan-2-il)carbamato de terc-butilo (0,048 g, 0,208 mmol) que proporcionó (1-((9-metoxi-4,6-dimetil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-2,4-dimetilpentan-2il)carbamato de tercbutilo en forma de un sólido de color blanco (15 mg, 0,029 mmol, rendimiento del 21 %). LC/MS (ESI) m/e 484,2 [(M+H)+, calc. para C27H38N3O5, 484,3]; Tiempo de retención de LC/MS (Método C): tR = 2,42 min.

30

imagen93

35 Se sometió (1-((9-metoxi-4,6-dimetil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-2,4-dimetilpentan-2-il)carbamato de tercbutilo (0,015 g, 0,031 mmol) a desprotección del grupo Boc como por el Ejemplo 2, Parte E para proporcionar 8-((2-amino-2,4-dimetilpentil)oxi)-9-metoxi-4,6-dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (8 mg, 0,02 mmol, rendimiento del 63 %) en forma de un sólido de color amarillo. LC/MS (ESI) m/e 384,2 [(M+H)+, calc. para C22H30N3O3, 384,5]; Tiempo de retención de LC/MS (Método C), tR = 6,57 min. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 8,63 (d, J = 6,0 Hz,

40 1H), 8,51 (s a, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,23 (s, 1H), 4,39 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 4,32 -4,24 (m, 1H), 4,10 (s, 3H), 3,83 (s, 3H), 3,19 (s, 3H), 1,99 - 1,86 (m, 2H), 1,73 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 1,55 (s, 3H), 1,09 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,05 (d, J = 6,5 Hz, 3H).

Ejemplo 35

45

(S)8((2amino4metilpentil)oxi)9(2hidroxipropan2il)4,6dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin5 (6H)ona

78

imagen94

imagen95

imagen96

imagen97

formaldehído (0,025 ml, 0,922 mmol) a temperatura ambiente. Después, la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 16 h. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida. El residuo se diluyó con 50 ml de agua y se extrajo con 80 ml de diclorometano. La capa orgánica se separó, se secó sobre sulfato sódico y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC de fase inversa (acetonitrilo/agua/NH4OAc 10 mM) para 5 proporcionar (S)-8-((2-(dimetilamino)-4-metilpentil)oxi)-6 metilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (8 mg, 0,021 mmol, rendimiento del 11 %) en forma de un sólido de color blanco. LC/MS (ESI) m/e 354,0 [(M+H)+, calc. para C21H28N3O2, 354,5]; Tiempo de retención de LC/MS (método C): tR = 1,85 min. Tiempo de retención de HPLC (método A): tR = 8,02 min; tiempo de retención de HPLC (método B): tR = 9,19 min. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 1,01 (d, J = 6,80 Hz, 6H), 1,50-1,61 (m, 2H), 1,73-1,80 (m, 1H), 2,52 (s, 1H), 3,15-3,16 (m, 1H), 3,73 (s, 3H), 4,23-4,31 (m,

10 2H), 7,04 (d, J = 8,00 Hz, 2H), 8,15 (s, 1H), 8,30 (d, J = 8,00 Hz, 1H), 8,71 (s, 1H), 8,39 (s, 1H).

Ejemplo 40

(S)8((2(dimetilamino)4metilpentil)oxi)4,6dimetilbenzo[c] [2,7]naftiridin5(6H)ona

15

imagen98

A una suspensión de (S)-8-((2-amino-4-metilpentil)oxi)-4,6-dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (0,1 g, 0,295 mmol) (síntesis descrita en el Ejemplo 16, parte I) en ácido fórmico (0,011 ml, 0,295 mmol) se le añadió 20 formaldehído (8,12 µl, 0,295 mmol) a TA. La mezcla de reacción se calentó a 100 ºC durante 16 h en un tubo cerrado herméticamente. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se concentró a presión reducida. Después, el residuo se repartió entre agua (50 ml) y diclorometano (80 ml). La capa orgánica se separó, se secó sobre sulfato sódico y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC de fase inversa (acetato amónico 10 mM/AcCN) para proporcionar (S)-8-((2-(dimetilamino)-4-metilpentil)oxi)-4,6-dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin25 5(6H)-ona (30 mg, 0,078 mmol, rendimiento del 26 %) en forma de un sólido de color blanco. LC/MS (ESI) m/e 368,0 [(M+H)+ , calc. para C22H30N3O3, 368,2]; Tiempo de retención de LC/MS (Método C): tR = 1,86 min. Tiempo de retención de HPLC (método A): tR = 7,98 min; tiempo de retención de HPLC (método B): tR = 9,44 min.1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) ppm δ 1,01 (d, J = 6,80 Hz, 6H), 1,61-1,95 (m, 3H), 2,66-2,69 (m, 6H), 3,06 (s, 3H), 3,373,43 (m, 1H), 3,74 (s, 3H), 4,37 (d, J = 4,80 Hz, 2H), 7,04-7,08 (m, 2H), 8,10 (d, J = 5,60 Hz, 1H), 8,36 (d, J =

30 8,80 Hz, 1H), 8,53 (d, J = 5,60 Hz, 1H).

Ejemplo 41

8((2amino2,4dimetilpentil)oxi)9cloro4,6dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin5 (6H)ona

35

imagen99

A la solución agitada de 8-((2-amino-2,4-dimetilpentil)oxi)-4,6-dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (preparada en el Ejemplo 32, Parte B) (0,08 g, 0,226 mmol) en acetonitrilo (5 ml) se le añadió NCS (0,030 g, 0,226 mmol)) a TA y la 40 mezcla de reacción se agitó durante 2 h. Después, la mezcla se evaporó a sequedad. El residuo se purificó por HPLC de fase inversa (TFA al 0,1 % en agua/AcCN) para proporcionar 8-((2-amino-2,4-dimetilpentil)oxi)-9-cloro-4,6dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (12 mg, 0,030 mmol, rendimiento del 13 %). LC/MS (ESI) m/e 388,0 [(M+H)+ , calc. para C21H27ClN3O2,388,2] en forma de un sólido de color blanquecino. Tiempo de retención de LC/MS (método C): tR = 2,13 min. Tiempo de retención de HPLC (método A): tR = 8,97 min; tiempo de retención de HPLC (método

45 B): tR = 10,16 min. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 0,99-1,02 (m, 6H), 1,30 (s, 3H), 1,54-1,66 (m, 2H), 1,841,90 (m, 1H), 3,05 (s, 1H), 3,73 (s, 1H), 4,04 (c, J = 23,20 Hz, 2H), 7,03 (s, 1H), 8,06 (d, J = 6,00 Hz, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,54 (d, J = 6,00 Hz, 1H).

Ejemplo 42

50

(S)8(2amino4metilpentiloxi)4metoxi6metilbenzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

83

imagen100

imagen101

imagen102

imagen103

imagen104

Se preparó como se describe en el Ejemplo 2, Parte C para proporcionar 8-cloro-6-(2,2,2trifluoroetil)benzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (150 mg, 0,480 mmol, rendimiento del 80 %) LC/MS (ESI) m/e 313,1, [(M+H)+, calc. para C14H9ClF9N2O, 313,0]; Tiempo de retención de LC/MS (método D): tR = 0,95 min.

imagen105

10 Parte C. (4metil1((5oxo6(2,2,2trifluoroetil)5,6dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin8il)oxi)pentan2il)carbamato de (S)tercbutilo

Se preparó como se describe en el Ejemplo 16, Parte H para proporcionar (4-metil-1-((5-oxo-6-(2,2,2-trifluoroetil)

15 5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)pentan-2-il)carbamato de (S)terc-butilo (100 mg, 0,203 mmol, rendimiento del 42 %) en forma de un sólido de color pardo. LC/MS (ESI) m/e 494,5, [(M+H)+, calc. para C25H31F3N3O4 494,2]; Tiempo de retención de LC/MS (método C): tR = 2,17 min.

imagen106

20

Se preparó como se describe en el Ejemplo 2, Parte E para proporcionar (S)-8-((2-amino-4-metilpentil)oxi)-6-(2,2,2trifluoroetil)benzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (25 mg, 0,061 mmol, rendimiento del 30 %), sólido de color blanco. 25 LC/MS (ESI) m/e 394,2, [(M+H)+, calc. para C20H20F3NO2, 394,2]; Tiempo de retención de LC/MS (método C): tR = 1,78 min. Tiempo de retención de HPLC (método A): tR = 5,26 min; tiempo de retención de HPLC (método B): tR = 5,60 min. 1H RMN (400 MHz, MeOD) δ 9,49 (s, 1H), 8,81 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,46 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,28 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,23 (s a, 1H), 7,15 (dd, J = 8,8, 2,0 Hz, 1H), 5,32 (dd, J = 8,8, 6,4 Hz, 2H), 4,21 (dd, J = 9,2, 3,6 Hz, 1H), 4,03 (dd, J = 9,2, 7,2 Hz, 1H), 3,40-3,33 (m, 1H), 1,92-1,80 (quin, J = 6,8, 1H), 1,52 -1,46 (m, 2H), 1,02 (d, J =

30 6,4 Hz, 3H), 1,00 (d, J = 6,4 Hz, 3H).

Ejemplo 46

(S)8(2amino4metilpentiloxi)9etil6metilbenzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

35

imagen107

88

imagen108

imagen109

imagen110

imagen111

imagen112

Se preparó como se describe en el Ejemplo 17, Parte G para proporcionar 8-cloro-6-(4-metoxibencil)-4metilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (710 mg, 1,362 mmol, rendimiento del 56 %) en forma de una goma de color pardo. LC/MS (ESI) m/e 365,1 [(M+H)+, calc. para C21H18ClN2O2 365,1] Tiempo de retención de LC/MS (método D): tR = 0,8 min.

imagen113

10

15 Se preparó como se describe en el Ejemplo 16, Parte H para proporcionar (6-(4-metoxibencil)-4-metil-5-oxo-5,6dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-iloxi)-4-metilpentan-2-ilcarbamato de (S)tercbutilo (130 mg, 0,21 mmol, rendimiento del 31 %, 88 % de pureza) en forma de una goma de color pardo. LC/MS (ESI) m/e 546,2 [(M+H)+, calc. para C32H40FN3O5 546,3] Tiempo de retención de LC/MS (método D): tR = 0,94 min.

imagen114

20

25 Se preparó como se describe en el Ejemplo 3, Parte A para proporcionar 1-(9-bromo-6-(4-metoxibencil)-4-metil-5oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-iloxi)-4-metilpentan-2-ilcarbamato de (S)-tercbutilo (140 mg, 0,146 mmol, rendimiento del 61 %, 65 % de pureza) en forma de un sólido de color naranja-rojo. LC/MS (ESI) m/e 624,2 [(M+H)+ , calc. para C32H39BrN3O5 624,2] Tiempo de retención de LC/MS (método D): tR = 0,98 min.

imagen115

30

35 La desprotección PMB realizada usando nitrato cérico de amonio como se describe en Protective Groups in organic synthesis (Greene, Wuts; 3ª ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.) proporcionó 1-(9-bromo-4-metil-5-oxo-5,6dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-iloxi)-4-metilpentan-2-ilcarbamato de (S)tercbutilo (60 mg, 0,12 mmol, rendimiento del 93 %) en forma de un sólido de color rojo. LC/MS (ESI) m/e 504,1 [(M+H)+, calc. para C24H31BrN3O4 504,14] Tiempo de retención de LC/MS (método D): tR = 0,91 min.

40

93

imagen116

imagen117

imagen118

imagen119

dietílico se recogió y se concentró a presión reducida para proporcionar (1-hidroxi-3-isopropoxipropan-2il)carbamato) de (R)-bencilo (14 mg, 0,058 mmol, rendimiento del 86 % en bruto) en forma de un aceite incoloro. El producto se uso en la siguiente etapa sin purificación adicional. 1H RMN (400 MHz, MeOD) δ 7,31-7,48 (m, 5H), 5,12 (s, 1H), 4,81 (s a, 1H), 3,41-3,91 (m, 6H), 1,12-1,26 (m, 6H).

imagen120

10 Se preparó como se describe en el Ejemplo 16, Parte H para proporcionar el producto del título (1-isopropoxi-3-((6metil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)propan-2-il)carbamato de (S)bencilo (220 mg, 0,130 mmol, rendimiento del 10 %) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC/MS (ESI) m/e 476,4, [(M+H)+, calc. para C27H30N3O5, 476,2]; Tiempo de retención de LC/MS (método E): tR = 1,04 min.

15

imagen121

Una solución de (1-isopropoxi-3-((6-metil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)propan-2-il)carbamato de

20 (S)-bencilo (220 mg, 0,130 mmol) en MeOH (12 ml) se desgasificó con N2 durante 5 min. Se añadió Pd/C (68,9 mg, 0,065 mmol) y la mezcla se agitó en un globo de H2 durante 12 h. La mezcla de reacción se filtró a través de tierra de diatomeas (Celite®), eluyendo con metanol y el filtrado se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC de fase inversa (acetato amónico 10 mM en agua/AcCN) para proporcionar (S)-8-(2-amino-3isopropoxipropoxi)-6-metilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (90 mg, 0,108 mmol, rendimiento del 83 %) en forma de

25 un sólido de color blanquecino. LC/MS (ESI) m/e 342,2, [(M+H)+, calc. para C19H24N3O3, 342,2]; Tiempo de retención de LC/MS (método C): tR = 1,50 min. Tiempo de retención de HPLC (método A): tR = 7,20 min; tiempo de retención de HPLC (método B): tR = 8,00 min. 1H RMN (400 MHz, MeOD) δ ppm 9,54 (s, 1H), 8,23 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 8,52 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,44 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,20 (s, 1H), 7,18 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 4,52 (dd, J = 10,4, 3,6 Hz, 1H), 4,43 (dd, J = 10,4, 6,8 Hz, 1H), 3,88-3,75 (m, 7H), 1,26 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,25 (d, J = 6,4 Hz, 3H).

30

Ejemplo 54

(S)6metil8((4metil2(metilamino)pentil)oxi)benzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

35

imagen122

98

imagen123

imagen124

imagen125

imagen126

gris claro después de la agitación durante 3 h, una indicación de que la reacción estaba completa. La mezcla de reacción se cargó con Na2S2O3 acuoso (25 ml de solución al 5 %) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 30 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato sódico y se concentraron a presión reducida para proporcionar (1-((9-ciano-6-metil-5-oxo-5,6 dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-5,5,5-trifluoropentan-2-il)carbamato de terc-butilo (0,14 g, 0,143 mmol, rendimiento del 85 % en bruto) en forma de un sólido de color amarillo pálido. El material se llevó a la siguiente etapa sin purificación adicional. LC/MS (ESI) m/e 491,5 (M+H)+ , calc. para C24H26F3N4O4, 491,2]; Tiempo de retención de LC/MS (método D): tR = 0,87 min.

imagen127

10

Se preparó como se describe en el Ejemplo 2, Parte E para proporcionar el producto del título 8-((2-amino-5,5,5trifluoropentil)oxi)-6-metil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-9-carbonitrilo (0,027 g, 0,066 mmol, rendimiento del

15 34 %) en forma de un sólido de color blanco. LC/MS (ESI) m/e 391,2 [(M+H)+, calc. para C19H18F3N4O2, 391,1] Tiempo de retención de LC/MS (método C): tR = 1,61 min. Tiempo de retención de HPLC (método A): tR = 8,09 min; tiempo de retención de HPLC (método B): tR = 10,36 min. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 9,50 (s, 1H), 8,87 - 8,78 (m, 2H), 8,31 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 7,20 (s, 1H), 4,42 - 4,30 (m, 1H), 4,29 - 4,20 (m, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,40 3,38 (m, 1H), 2,58 - 2,31 (m, 2H), 2,09 -1,94 (m, 1H), 1,90 - 1,72 (m, 1H).

20

Ejemplo 57

6metil8(piperidin2ilmetoxi)benzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

imagen128

imagen129

30 A una solución agitada de piperidin-2-ilmetanol (1,5 g, 13,02 mmol) en diclorometano (25 ml) se le añadió DIPEA (6,82 ml, 39,1 mmol). Después de agitar durante 5 min se añadió Boc2O (3,63 ml, 15,63 mmol) y la mezcla se agitó a TA durante una noche. La mezcla se inactivó con agua y se diluyó con DCM (50 ml). La capa orgánica se separó, se secó sobre Na2SO4 y se concentró para dar 2-(hidroximetil)piperidin-1-carboxilato de tercbutilo (2 g, 9,29 mmol,

35 rendimiento del 71 % en bruto) en forma de un aceite incoloro, que se llevó a la siguiente etapa sin purificación adicional.1H RMN (400 MHz, CDCl3) ppm δ 4,27-4,28 (m, 1H), 3,80-3,82 (m, 1H), 3,75-3,77 (m, 1H), 3,56-3,58 (m, 1H), 2,63 (t, J = 7,20 Hz, 1H), 1,55-1,55 (m, 5H), 1,43 (s, 9H).

imagen130

103

imagen131

imagen132

imagen133

imagen134

imagen135

Se preparó como se describe en el Ejemplo 3, Parte A y el Ejemplo 4, Parte A para proporcionar (4-metil-1-((4,6,9trimetil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)pentan-2-il)carbamato de (S)-terc-butilo (30 mg, 0,038 mmol, rendimiento del 40 %) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC/MS, (ESI) m/z 453,9 [(M+H)+, calc. para

10 C26H N3O4 454,3]; Tiempo de retención de LC/MS (método C): tR = 2,16 min.

imagen136

15 Se preparó como se describe en el Ejemplo 2, Parte E para proporcionar (S)-8-((2-amino-4-metilpentil)oxi)-4,6,9trimetilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (15 mg, 0,040 mmol, rendimiento del 62 %) en forma de un sólido de color blanquecino. LC/MS, (ESI) m/z 353,9 [(M+H)+ , calc. para C21H28N3O2 354,2]; Tiempo de retención de LC/MS (método C): tR = 1,64 min. Tiempo de retención de HPLC (método A): tR = 8,21 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ

20 ppm 8,59 (d, J = 5,77 Hz, 1H) 8,27 (s, 1H) 8,15 (d, J = 5,60 Hz,1H) 6,92 (s, 1H) 3,90 - 4,08 (m, 2H) 3,68 (s, 3H) 3,12

-3,20 (m, 1H) 2,99 (s, 3H) 2,24(s, 3H) 1,85 (td, J = 13,68, 6,53 Hz, 3H) 1,22 - 1,43 (m, 3H) 0,86 -0,95 (m, 6H).

Ejemplo 64

25 (S)8(2amino4metilpentiloxi)4,6dimetil5oxo5,6dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin9carbonitrilo

imagen137

108

imagen138

imagen139

imagen140

imagen141

imagen142

Parte A: 4Cloro6metilnicotinato de metilo

5 A una solución de 4,6-dicloronicotinato de metilo (3,00 g, 14,56 mmol) y trimetilboroxina (1,097 g, 8,74 mmol) en 1,4dioxano (70 ml) y agua (7 ml), se le añadió carbonato de cesio (14,23 g, 43,7 mmol). La mezcla se desgasificó con argón durante un periodo de 5 min. A la mezcla de reacción se le añadió un aducto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (1,189 g, 1,456 mmol) y se calentó a 110 ºC durante 16 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua (100 ml) y se extrajo con acetato de etilo (200 ml). La fase orgánica se lavó con salmuera (2 x 100 ml), se

10 secó sobre Na2SO4 y se concentró a presión reducida. El residuo obtenido se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando una mezcla de acetato de etilo-éter de petróleo para proporcionar 4-cloro-6-metilnicotinato de metilo (700 mg, 2,87 mmol, rendimiento del 20 %) en forma de un líquido amarillo. LC/MS (ESI) m/e 186,0 [(M+H)+, calc. para C8H9ClNO2 186,0]; Tiempo de retención de LC/MS (Método I): tR = 1,79 min.

imagen143

15

A una solución de 4-cloro-6-metilnicotinato de metilo (660 mg, 3,56 mmol) y ácido (4-cloro-2-fluorofenil)borónico

20 (620 mg, 3,56 mmol) en 1,4-dioxano (20 ml) se le añadió carbonato de cesio (3,48 g, 10,67 mmol). La mezcla de reacción se desgasificó con argón durante un periodo de 5 min. A la mezcla de reacción se le añadió Pd(Ph3P)4 (205 mg, 0,178 mmol) y se calentó a 80 ºC durante 16 h. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo (100 ml). La fase orgánica se lavó con salmuera (2 x 50 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró a presión reducida. El residuo obtenido se purificó por cromatografía sobre gel de sílice para

25 proporcionar 4-(4-cloro-2-fluorofenil)-6-metilnicotinato de metilo (500 mg, 1,53 mmol, rendimiento del 43 %) en forma de un líquido amarillo. LC/MS (ESI) m/e 280,0 [(M+H)+, calc. para C14H12ClFNO2 280,0]; Tiempo de retención de LC/MS (Método C): tR = 1,87 min.

imagen144

30

A una solución de 4-(4-cloro-2-fluorofenil)-6-metilnicotinato de metilo (700 mg, 2,50 mmol) en MeOH (5 ml) se le añadió NaOH (200 mg, 7,51 mmol) en agua (5 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 35 2 h. Después, se evaporó a presión reducida y el residuo obtenido se ajustó a pH ~3 añadiendo una solución 1,5 N de HCl. El producto se extrajo con diclorometano. La fase orgánica se secó sobre Na2SO4 y se concentró a presión reducida para proporcionar ácido 4-(4-cloro-2-fluorofenil)-6-metilnicotínico (500 mg, 1,730 mmol, rendimiento del 69 % en bruto) en forma de un sólido de color blanco. El material se llevó a la siguiente etapa sin purificación adicional. LC/MS (ESI) m/e 266,0 [(M+H)+, calc. para C13H10ClFNO2 266,0]; Tiempo de retención de LC/MS (Método

40 I): tR = 1,51 min.

imagen145

A una solución de ácido 4-(4-cloro-2-fluorofenil)-6-metilnicotínico (500 mg, 1,88 mmol) en diclorometano (10 ml) a 0 ºC se le añadió gota a gota cloruro de oxalilo (0,988 ml, 11,29 mmol) seguido de DMF (0,2 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. La mezcla de reacción se evaporó a sequedad. El residuo se

113

imagen146

imagen147

imagen148

imagen149

Parte D. 8cloro9fluoro4,6dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

Se preparó como se describe en el Ejemplo 16, Parte G a partir de ácido 4-(4-cloro-2,5-difluorofenil)-2-metilnicotínico para proporcionar 8-cloro-9-fluoro-4,6-dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (530 mg, 1,532 mmol, rendimiento del 72 %) en forma de un sólido de color blanco. LC/MS (ESI) m/e 277,2 [(M+H)+, calc. para C14H11ClFN2O 277,04]; Tiempo de retención de LC/MS (método C): tR = 1,83 min.

imagen150

10 Parte E. 1(9fluoro4,6dimetil5oxo5,6dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin8iloxi)4metilpentan2ilcarbamato de (S)tercbutilo

Se preparó como se describe en el Ejemplo 16, Parte H a partir de 8-cloro-9-fluoro-4,6-dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin5(6H)-ona para proporcionar 1(9-fluoro-4,6-dimetil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-iloxi)-4-metilpentan-215 ilcarbamato de (S)tercbutilo (350 mg, 0,367 mmol, 24 %) en forma de un aceite. LC/MS (ESI) m/e 458,6 [(M+H)+ , calc. para C25H33FN3O4 458,23]; Tiempo de retención de LC/MS (método B): tR = 1,24 min.

imagen151

20 Parte F. (S)8(2amino4metilpentiloxi)9fluoro4,6dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

Se preparó como se describe en el Ejemplo 16, Parte I a partir de 1-(9-fluoro-4,6-dimetil-5-oxo-5,6dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-iloxi)-4-metilpentan-2-ilcarbamato de (S)tercbutilo para proporcionar (S)-8-(2-amino4-metilpentiloxi)-9-fluoro-4,6-dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (57,6 mg, 0,095 mmol, 91 %) en forma de un

25 aceite de color amarillo. LC/MS (ESI) m/e 358,2 [(M+H)+, calc. para C20H25FN3O2 358,2]; Tiempo de retención de LC/MS (método C): tR = 1,53 min; tiempo de retención de HPLC (método B): tR = 8,16 min. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,58 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 8,23 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 8,09 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 4,26 (dd, J = 9,5, 4,0 Hz, 1H), 4,08 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,41 - 3,38 (m, 1H), 3,10 (s, 3H), 1,94 - 1,82 (m, 1H), 1,58 - 1,39 (m, 2H), 1,04 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,01 (d, J = 6,5 Hz, 3H).

30

Ejemplo 71

(S)8(2amino4metilpentiloxi)9(hidroximetil)4,6dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

imagen152

imagen153

118

imagen154

imagen155

imagen156

imagen157

Ejemplo 75 (S)8(2amino4metilpentiloxi)4,6dimetil9(trifluorometil)benzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

imagen158

Se recogió (1-((4,6-dimetil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-4-metilpentan-2-il)carbamato de (S)terc

butilo (300 mg, 0,683 mmol) en AcOH (15 ml) y se trató con ácido peryódico (156 mg, 0,683 mmol) y H2SO4

(0,018 ml, 0,341 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 80 ºC durante 20 min, tiempo después del cual se 15 añadió yodo (104 mg, 0,410 mmol) y el calentamiento continuó durante 3 h más. Después de un periodo de

refrigeración, los volátiles se evaporaron. El residuo se recogió en acetato de etilo (25 ml) y la capa orgánica se lavó

con NaHCO3 acuoso saturado (10 ml), después con salmuera (10 ml), se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró a

presión reducida para proporcionar (S)-2-(1-(4,6-dimetil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-iloxi)-4

metilpentan-2-il)isoindolin-1,3-diona (300 mg, 0,61 mmol, rendimiento del 90 % en bruto) en forma de un sólido de 20 color pardo. Esto se llevó a la siguiente etapa sin purificación adicional. LC/MS (ESI) m/e 466,1 [(M+H)+, calc. para

C20H25IN3O2 466,1]; Tiempo de retención de LC/MS (método F): tR = 0,58 min.

imagen159

25 Parte B. (S)2(1(9yodo4,6dimetil5oxo5,6dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin8iloxi)4metilpentan2il)isoindolin1,3diona

A una solución de (S)-8-((2-amino-4-metilpentil)oxi)-9-yodo-4,6-dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)ona (130 mg, 0,140 mmol) en 1,4-dioxano (3 ml) se le añadieron N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (54,2 mg, 0,419 mmol) e 30 isobenzofuran-1,3-diona (24,83 mg, 0,168 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 16 h. Después de un periodo de refrigeración, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (10 ml). Los extractos orgánicos se lavaron con agua y NaHCO3 acuoso saturado. Las capas acuosas combinadas se extrajeron con acetato de etilo (3 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato sódico y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó por placa de TLC preparativa usando Metanol al 2 %:DCM como un sistema de eluyente para

35 proporcionar (S)-2-(1-((9-yodo-4,6-dimetil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-4-metilpentan-2il)isoindolin-1,3-diona (85 mg, 0,084 mmol, rendimiento del 60 %) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC/MS (ESI) m/e 596,5 [(M+H)+, calc. para C28H27IN3O4 596,1] Tiempo de retención de LC/MS (método E): tR = 1,3 min.

123

imagen160

imagen161

imagen162

imagen163

imagen164

5 Una solución de ácido 4-(4-cloro-2-fluorofenil)-2-metilnicotínico (2 g, 5,19 mmol), preparado como se describe en el Ejemplo 16, Parte E, en cloruro de tionilo (5 ml, 68,5 mmol), se calentó a 70 ºC durante 2 h. Después de un periodo de refrigeración, los volátiles se retiraron a presión reducida. El residuo se disolvió en 4 ml de DCM anhidro y se añadió a una solución enfriada previamente de 2-metoxietanamina (0,390 g, 5,19 mmol) y trietil amina (3,62 ml,

10 26,0 mmol) en DCM (8 ml) a 0 ºC. La mezcla de reacción resultante se agitó a ta durante 4 h. Después, se añadió agua (30 ml) y la solución se extrajo con DCM (2 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (20 ml), se secaron sobre sulfato sódico y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de EtOAc y hexano como eluyente para producir 4-(4-cloro-2fluorofenil)-N(2-metoxietil)-2-metilnicotinamida (1,3 g, 2,88 mmol, rendimiento del 56 %) en forma de un aceite de

15 color amarillo. LC/MS (ESI) m/e 323,1 [(M+H)+, calc. para C16H17ClFN2O2 323,1]; Tiempo de retención de LC/MS (método D): tR = 0,61 min.

imagen165

20 Parte B: 8cloro6(2metoxietil)4metilbenzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

Se sometió 4-(4-cloro-2-fluorofenil)-N(2-metoxietil)-2-metilnicotinamida a una reacción de ciclación como se describe en el Ejemplo 2, Parte C para producir 8-cloro-6-(2-metoxietil)-4-metilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (1,12 g, 2,55 mmol, rendimiento del 89 %) en forma de un sólido de color blanco. LC/MS (ESI) m/e 303,2 [(M+H)+ ,

25 calc. para C16H16ClN2O2 303,1]; Tiempo de retención de LC/MS (método B): tR = 1,38 min.

imagen166

Se sometió 8-cloro-6-(2-metoxietil)-4-metilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona a síntesis de éter como se describe Ejemplo 16, Parte H para proporcionar (1-((6-(2-metoxietil)-4-metil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-4metilpentan-2-il)carbamato de (S)terc-butilo (511 mg, 0,723 mmol, rendimiento del 53 %) en forma de un sólido de

35 color blanco. LC/MS (ESI) m/e 484,6 [(M+H)+, calc. para C27H18N3O5 484,3]; Tiempo de retención de LC/MS (método E): tR = 1,17 min.

128

imagen167

imagen168

imagen169

imagen170

imagen171

5 En un matraz que contenía (S)-8-((2-amino-4-metilpentil)oxi)-4,6-dimetil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-9carbonitrilo (60 mg, 0,165 mmol), (preparado como se describe en el Ejemplo 64) se añadió HCl concentrado (5 ml). La mezcla resultante se calentó a 80 ºC durante 12 h. Después de un periodo de refrigeración, los volátiles se retiraron a presión reducida para proporcionar ácido (S)-8-((2-amino-4-metilpentil)oxi)-4,6-dimetil-5-oxo-5,6

10 dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-9-carboxílico (40 mg, 0,104 mmol, rendimiento del 63 % en bruto) en forma de un sólido de color amarillo. El material se uso en la siguiente etapa sin purificación adicional. LC/MS (ESI) m/e 384,1 [(M+H)+ , calc. para C21H26N3O4 384,2]; Tiempo de retención de LC/MS (método D): tR = 0,71 min.

imagen172

15 Parte B:  c][2,7]naftiridin9carboxilato de (S)metilo

En un matraz que contenía ácido (S)-8-((2-amino-4-metilpentil)oxi)-4,6-dimetil-5-oxo-5,6

20 dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-9-carboxílico (40 mg, 0,104 mmol) en MeOH (3 ml) a 0 ºC se le añadió gota a gota SOCl2 (0,076 ml, 1,043 mmol). La solución resultante se calentó a 70 ºC durante 12 h. Después de un periodo de refrigeración, los volátiles se retiraron a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC prep. (usando TFA al 0,1 % ACN:agua) para proporcionar 8-((2-amino-4-metilpentil)oxi)-4,6-dimetil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin9-carboxilato de (S)-metilo, 2 TFA (1,65 mg, 2,427 µmol, rendimiento del 2 %) en forma de un sólido de color pardo

25 pálido. LC/MS (ESI) m/e 398,2 [(M+H)+, calc. para C22H28N3O4 398,2]; Tiempo de retención de LC/MS (método C): tR = 1,58 min; tiempo de retención de HPLC (método A): tR = 9,14 min; tiempo de retención de HPLC (método B): tR = 9,58 min; 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 9,01 (s, 1H), 8,68 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,40 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,23 (s, 1H), 4,69 (dd, J = 10,0, 3,0 Hz, 1H), 4,36 (dd, J = 10,5, 7,0 Hz, 1H), 4,02 (s, 3H), 3,88 -3,81 (m, 4H), 3,16 (s, 3H), 1,93 - 1,65 (m, 3H), 1,09 (d, J = 4,0 Hz, 3H), 1,07 (d, J = 4,0 Hz, 3H).

30

Ejemplo 85

(S)8((2amino4metilpentil)oxi)1fluoro6metilbenzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

imagen173

A una solución de ácido 4-cloro-5-fluoronicotínico (1,7 g, 9,68 mmol) en acetonitrilo (18 ml) enfriada a 0 ºC se le añadió gota a gota DBU (3,65 ml, 24,21 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 30 min. A esta mezcla yodometano (3,03 ml, 48,4 mmol) se le añadió gota a gota y se agitó a ta durante 12 h. Los volátiles se retiraron a

133

imagen174

imagen175

imagen176

imagen177

imagen178

5 La mezcla diastereomérica 1 (30 mg, 0,061 mmol) se sometió a desprotección Boc como se describe en el Ejemplo 2, Parte E para proporcionar 8-((2-amino-5,5,5-trifluoro-4-metilpentil)oxi)-4,6-dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (72,3 mg, 0,172 mmol, rendimiento del 99 %) en forma de un sólido de color blanquecino. LC/MS (ESI) m/e 394,6 [(M+H)+ , calc. para C20H23F3N3O2 394,2]; tiempo de retención de HPLC (método A): tR = 8,62 min; tiempo de

10 retención de HPLC (método B): tR = 8,77 min; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,62 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 8,44 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,19 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 7,08 - 6,92 (m, 2H), 4,11 - 3,90 (m, 2H), 3,67 (s, 3H), 3,01 (s, 3H), 3,17 3,10 (m, 1H), 1,96 - 1,82 (m, 1H), 1,66 - 1,48 (m, 2H), 1,10 (d, J = 6,8 Hz, 3H). La Mezcla diastereomérica 2 Bocprotegida (80 mg, 0,162 mmol) se sometió a desprotección Boc como se describe en el Ejemplo 2, Parte E para proporcionar 8-((2-amino-5,5,5-trifluoro-4-metilpentil)oxi)-4,6-dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H 

15 0,025 mmol, rendimiento del 50 %) en forma de un sólido de color blanquecino. LC/MS (ESI) m/e 394,6 [(M+H)+ , calc. para C20H23F3N3O2 394,2]; tiempo de retención de HPLC (método A): tR = 8,75 min; tiempo de retención de HPLC (método B): tR = 8,8 min; 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) δ ppm 8,64 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 8,16 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 6,89 (dd, J = 8,8, 2,3 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 4,05 (dd, J = 9,0, 4,0 Hz, 1H), 3,89 (dd, J = 8,8, 6,5 Hz, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,40 - 3,34 (m, 1H), 3,16 (s, 3H), 2,60 - 2,42 (m, 1H), 1,98 (dt, J =

20 14,3, 6,1 Hz, 1H), 1,50 - 1,40 (m, 1H), 1,23 (d, J = 7,0 Hz, 3H).

Ejemplo 89

(S)8((2amino4metilpentil)oxi)9metoxi4,6dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

25

imagen179

30 Parte A. 8cloro9yodo4,6dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

A una solución agitada de 8-cloro-4,6-dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (1,0 g, 3,87 mmol) en ácido acético

(25 ml) se le añadió H2SO4 (0,206 ml, 3,87 mmol) seguido de ácido peryódico (0,881 g, 3,87 mmol). Después, la

mezcla se calentó a 80 ºC durante 20 min. Después, se añadió I2 (0,294 g, 1,160 mmol) a 80 ºC y se agitó durante 35 120 min. Después de enfriar a temperatura ambiente, el ácido acético se retiró a presión reducida. El residuo se

neutralizó con 70 ml de una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico. El sólido obtenido de esta manera se

recogió por filtración al vacío y se secó al aire para proporcionar 8-cloro-9-yodo-4,6-dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin

5(6H)ona (1,3 g, 3,21 mmol, rendimiento del 83 %) en forma de un sólido de color pardo. LC/MS (ESI) m/e 385,1

[(M+H)+ , calc. para C14H11ClIN2O 384,9]; Tiempo de retención de LC/MS (método E): tR = 1,09 min;1H RMN 40 (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,96 (s, 1 H) 8,69 (d, J = 5,58 Hz, 1 H) 8,36 (d, J = 5,52Hz, 1 H) 7,76 (s, 1 H) 3,63 (s, 3

H) 3,00 (s, 3 H).

138

imagen180

imagen181

imagen182

imagen183

imagen184

5 Se preparó como se describe en el Ejemplo 2, Parte E para proporcionar 8-(2-amino-4,4,4-trifluorobutoxi)-6metilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona (35 mg, 0,098 mmol, rendimiento del 44 %) en forma de un sólido de color blanquecino. LC/MS (ESI) m/e 352,0 [(M+H)+ , calc. para C17H17F3N3O2 352,1]; Tiempo de retención de LC/MS (Método C): tR = 1,92 min; tiempo de retención de HPLC (método A): tR = 7,07 min; tiempo de retención de HPLC (método B): tR = 7,44 min; 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ 9,46 (s, 1H), 8,76 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,40 (d, J =

10 8,8 Hz, 1H), 8,23 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,14 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,10 (dd, J = 8,8, 2,4 Hz, 1H), 4,22 - 4,13 (m, 2H), 3,79 (s, 3H), 3,67 - 3,57 (m, 1H), 2,71 - 2,63 (m, 1H), 2,49 - 2,40 (m, 1H).

Ejemplo 94

15 (S)8((2amino4metilpentil)oxi)4,6dimetil5oxo5,6dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin9carboxamida

imagen185

En un matraz de fondo redondo de 25 ml, (S)-8-((2-amino-4-metilpentil)oxi)-4,6-dimetil-5-oxo-5,6

20 dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-9-carbonitrilo (0,1 g, 0,274 mmol), (preparado como se describe en el Ejemplo 64) y CS2CO3 (0,358 g, 1,098 mmol) se recogieron en DMF (2 ml) y agua (0,6 ml). La mezcla se irradió en un microondas a 120 ºC durante 2 h. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y se diluyó con acetato de etilo y agua. Los extractos orgánicos combinados se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC Prep. (Columna: Xbridge Phenyl (150 x 4,6 mm) 3,5 micrómetros SC/749 usando tampón: TFA al 0,05 % en agua) para

25 proporcionar (S)-8-((2-amino-4-metilpentil)oxi)-4,6-dimetil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-9-carboxamida (5 mg, 0,012 mmol, rendimiento del 5 %) en forma de un sólido de color blanquecino. LC/MS (ESI) m/e 383,2 [(M+H)+ , calc. para C21H27N4 3 383,2]; Tiempo de retención de LC/MS (método C): tR = 1,74 min; tiempo de retención de HPLC (método A): tR = 10,51 min; tiempo de retención de HPLC (método B): tR = 10,58 min; 1H RMN (400 MHz, metanol-d4): δ ppm 8,64 (s, 1H), 8,46 (d, 1H), 8,12 (d, 1H), 6,67 (s, 1H), 3,72-3,79 (m, 1H), 3,69 (s, 3H),

30 3,65-3,69 (m, 2H), 3,04 (s, 3H), 1,84-1,88 (m, 1H), 1,62-1,68 (m, 1H), 1,49-1,57 (m, 1H), 1,31 (d, 3H), 1,29 (d, 3H).

Ejemplo 95

(S)4,6dimetil8(4metil2(metilamino)pentiloxi)benzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

35

imagen186

143

imagen187

imagen188

imagen189

imagen190

presión reducida y el residuo se diluyó con agua (50 ml) y se extrajo con acetato de etilo (2 x 80 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (100 ml), se secaron sobre sulfato sódico, se filtraron y se concentraron a presión reducida para proporcionar 1-bromo-4-cloro-2-fluoro-3-metoxibenceno (4 g, 16,7 mmol, rendimiento del 90 % en bruto) en forma de un sólido de color pardo. El material se llevó a la siguiente etapa sin purificación adicional. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7,2 (m, 1 H), 7,04 (m, 1 H), 3,98 (s, 3 H).

imagen191

10 A una solución agitada de 1-bromo-4-cloro-2-fluoro-3-metoxibenceno (3 g, 12,53 mmol) en tetrahidrofurano (20 ml) enfriada a -10 ºC se le añadió gota a gota bromuro de isopropilmagnesio (5,18 ml, 15,03 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a -10 ºC durante 1 h. Después, la mezcla de reacción se calentó a 0 ºC y se agitó durante 1 h. Después, la reacción se enfrió a -10 ºC y se añadió lentamente gota a gota 2-isopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2

15 dioxaborolano (2,56 ml, 12,53 mmol). La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 16 h. La mezcla de reacción se inactivó con hidróxido sódico acuoso al 5 % y se extrajo con acetato de etilo (2 x 25 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con una solución de salmuera, se secaron sobre sulfato sódico, se filtraron y se concentraron a presión reducida para proporcionar 2-(4-cloro-2-fluoro-3-metoxifenil)-4,4,5,5tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (2,3 g, 8,03 mmol, rendimiento del 64 % en bruto) en forma de un aceite de color

20 pardo. El material se llevó a la siguiente etapa sin purificación adicional. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7,35 (m, 1 H), 7,15 (m, 1 H), 3,95 (s, 3 H), 1,33 (s, 6 H), 1,23 (s, 6 H).

imagen192

25 Parte D. 4(4cloro2fluoro3metoxifenil)2metilnicotinato de metilo

Una mezcla de 4-cloro-2-metilnicotinato de metilo (1,5 g, 8,08 mmol), 2-(4-cloro-2-fluoro-3-metoxifenil)-4,4,5,5

tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (2,316 g, 8,08 mmol), sal potásica del ácido fosfórico (3,43 g, 16,16 mmol) y aducto de

PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (0,660 g, 0,808 mmol) en 1,4-dioxano (25 ml) y agua (5 ml) se purgó con nitrógeno durante 30 5 min. Después, la reacción se calentó a 100 ºC durante 18 h. Después de un periodo de refrigeración, la reacción

se diluyó con agua (50 ml) y se extrajo con acetato de etilo (2 x 75 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron

con una solución de salmuera, se secaron sobre sulfato sódico, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó

por cromatografía sobre gel de sílice usando acetato de etilo al 50 % en hexanos para producir 4-(4-cloro-2-fluoro-3

metoxifenil)-2-metilnicotinato de metilo (1,2 g, 2,52 mmol, rendimiento del 31 %) en forma de un aceite de color 35 pardo pálido. LC/MS (ESI) m/e 309,9 [(M+H)+, calc. para C15H14ClFNO3 310,1]; Tiempo de retención de LC/MS

(método D): tR = 0,84 min.

imagen193

40 Parte E. Ácido 4(4cloro2fluoro3metoxifenil)2metilnicotínico

Se preparó como se describe en el Ejemplo 16, Parte E por hidrólisis del 4-(4-cloro-2-fluoro-3-metoxifenil)-2metilnicotinato de metilo para proporcionar ácido 4-(4-cloro-2-fluoro-3-metoxifenil)-2-metilnicotínico (780 mg, 2,137 mmol, rendimiento del 93 %) en forma de un aceite de color pardo. LC/MS (ESI) m/e 295,9 [(M+H)+, calc. para

45 C14H12ClFNO3 296,04]; Tiempo de retención de LC/MS (método D): tR = 0,61 min.

148

imagen194

imagen195

imagen196

imagen197

imagen198

5 Se preparó como se describe en el Ejemplo 41, Parte A a partir de (1-((7-fluoro-6-(4-metoxibencil)-4-metil-5-oxo-5,6dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-4-metilpentan-2-il)carbamato de (S)-terc-butilo (síntesis descrita en el Ejemplo 82, Parte C) para proporcionar el compuesto del título (2135 mg, 0,063 mmol, rendimiento del 60 % en bruto) en forma de un sólido de color amarillo. El material se llevó a la siguiente etapa sin purificación. LC/MS (ESI) m/e 598,3

10 [(M+H)+, calc. para C32H38ClFN3O5 598,2]; Tiempo de retención de LC/MS (método E): tR = 1,32 min.

imagen199

15 A una solución de (1-((9-cloro-7-fluoro-6-(4-metoxibencil)-4-metil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-4metilpentan-2-il)carbamato de (S)-terc-butilo (0,08 g, 0,037 mmol) en TFA (8 ml) enfriada a 0 ºC se le añadió ácido metanosulfónico (0,243 µl, 3,75 µmol). Después, la mezcla de reacción se calentó a 70 ºC durante 2 h. Los volátiles se evaporaron. El residuo se recogió en agua y se neutralizó con NaHCO3 acuoso al 10 %. La solución se extrajo

20 con EtOAc (3 x 15 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (1 x 15 ml), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC preparativa (Columna: X-Bridge (19 x 150 mm) 5 µm, Caudal: 15 ml/min; Disolvente A: TFA al 0,01 %, Disolvente B: ACN) para proporcionar (S)-8-((2-amino-4-metilpentil)oxi)-9-cloro-7-fluoro-4-metilbenzo[c][2,7]naftiridin-5(6H)-ona, 3 TFA (9,5 mg, 0,013 mmol, rendimiento del 34,4 %) en forma de un sólido de color blanquecino. LC/MS (ESI) m/e 378,0 [(M+H)+ ,

25 calc. para C19H22ClFN3O2 378,1]; Tiempo de retención de LC/MS (método C): tR = 2,02 min; tiempo de retención de HPLC (método A): tR = 7,47 min; tiempo de retención de HPLC (método B): tR = 8,41 min; 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,70 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,40 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 8,35 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 4,49 (dd, J = 10,7, 2,6 Hz, 1H), 4,35 (dd, J = 10,5, 5,8 Hz, 1H), 3,75 - 3,69 (m, 1H), 3,14 (s, 3H), 1,90 -1,74 (m, 2H), 1,70 - 1,56 (m, 1H), 1,04 (d, J = 2,3 Hz, 3H), 1,03 (d, J = 2,5 Hz, 3H).

30

Ejemplo 104

(S)8(2amino4metilpentiloxi)9(metoximetil)4,6dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

imagen200

imagen201

153

imagen202

imagen203

imagen204

imagen205

calentó a 80 ºC durante 45 min y después se concentró a presión reducida. El material en bruto se purificó sobre SiO2 (amoniaco al 1-4 % 2 M en elución en gradiente de metanol/diclorometano) para proporcionar (1-((9-bromo-4,6dimetil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-5,5-difluoropent-4-en-2-il)carbamato de (S)-terc-butilo (0,81 g, 1,51 mmol, rendimiento del 67 %) en forma de un sólido de color blanco. LC/MS, (ESI) m/z 537,9 [(M+H)+, calc. para C24H27BrF2N3O4, 538,1]; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8,62 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 8,22 (s, 1H), 7,65 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 6,75 (s, 1H), 5,01 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 4,41 - 4,26 (m, 1H), 4,24 - 4,04 (m, 3H), 3,67 (s, 3H), 3,12 (s, 3H), 2,64 2,34 (m, 2H), 1,48 (s, 9H).

imagen206

10 Parte I: (1((9ciano4,6dimetil5oxo5,6dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin8il)oxi)5,5difluoropent4en2il)carbamato de (S)tercbutilo

Una suspensión de (1-((9-bromo-4,6-dimetil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-5,5-difluoropent-4-en-2

15 il)carbamato de (S)-terc-butilo (0,48 g, 0,892 mmol), cianuro de cinc (0,115 g, 0,981 mmol), 1,1'bis(difenilfosfino)ferroceno (0,074 g, 0,134 mmol), Pd2(dba)3 (0,041 g, 0,045 mmol), N,N-dimetilformamida (3 ml) y agua (0,3 ml) se cargó en un vial a presión de 20 ml y se burbujeó con una corriente de nitrógeno durante 10 minutos. El vial se cerró herméticamente, se purgó de oxígeno y se agitó en una atmósfera de nitrógeno en un bloque de reacción calentado previamente a 115 ºC durante una noche. Después de un periodo de refrigeración, la

20 mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo (35 ml) y se filtró a través de tierra de diatomeas (Celite®). El filtrado se lavó con salmuera (3 x 50 ml), se secó sobre sulfato sódico y se concentró a presión reducida. El material en bruto se purificó sobre SiO2 (amoniaco al 0-4 % 2 M en elución en gradiente de metanol/diclorometano) para proporcionar (1-((9-ciano-4,6-dimetil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-5,5-difluoropent-4-en-2il)carbamato de (S)-terc-butilo (0,15 g, 0,280 mmol, rendimiento del 32 %) en forma de un sólido de color castaño.

25 LC/MS, (ESI) m/z 485,1 [(M+H)+, calc. para C25H27F2N4O4, 485,2]; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8,75 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 8,45 (s, 1H), 7,81 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 7,00 (s, 1H), 4,85 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,40 - 4,21 (m, 3H), 4,07 (s a, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,17 (s, 3H), 2,62 -2,52 (m, 1H), 2,49 - 2,38 (m, 1H), 1,49 (s, 9H).

imagen207

30 Parte J: (S)8((2amino5,5difluoropent4en1il)oxi)4,6dimetil5oxo5,6dihidrobenzo[c] [2,7]naftiridin9carbonitrilo

Una solución a temperatura ambiente de (1-((9-ciano-4,6-dimetil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-8-il)oxi)-5,5

35 difluoropent-4-en-2-il)carbamato de (S)-terc-butilo (60 mg, 0,124 mmol) en metanol (1 ml) se trató con HCl 4 M en 1,4-dioxano (1,3 ml, 5,20 mmol) y se mantuvo durante una noche. La solución resultante se concentró a presión reducida. El material en bruto se purificó a través de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 µm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo:agua con acetato amónico 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato amónico 10 mM; Gradiente: 10-50 % de B durante 20 minutos,

40 después un mantenimiento de 5 minutos en 100 % de B; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se concentraron a través de evaporación por centrifugación para proporcionar (S)-8-((2amino-5,5-difluoropent-4-en-1-il)oxi)-4,6-dimetil-5-oxo-5,6-dihidrobenzo[c][2,7]naftiridin-9-carbonitrilo (7,6 mg, 0,020 mmol, rendimiento del 16 %) en forma de un sólido de color blanco. LC/MS, (ESI) m/z 385,3 [(M+H)+, calc. para C20H19F2N4O2, 385,1]; 1H RMN (500 MHz, DMSO) δ ppm 8,82 (s, 1H), 8,60 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 8,18 (d, J =

45 5,8 Hz, 1H), 6,97 (s, 1H), 4,74 - 4,59 (m, 1H), 4,22 - 4,05 (m, 2H), 3,62 (s, 3H), 3,19 - 3,10 (m, 1H), 2,93 (s, 3H), 2,36

-2,25 (m, 1H), 2,19 - 2,08 (m, 1H).

Ejemplo 107

50 (S)8((2amino4metilpentil)oxi)9cloro7fluoro4,6dimetilbenzo[c][2,7]naftiridin5(6H)ona

158

imagen208

imagen209

imagen210

imagen211

Claims (1)

1. imagen1

   imagen2

   imagen3

   imagen4