ES2585244T3 - Composiciones y métodos para modular una cinasa - Google Patents

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ES2585244T3 ES12780531.5T ES12780531T ES2585244T3 ES 2585244 T3 ES2585244 T3 ES 2585244T3 ES 12780531 T ES12780531 T ES 12780531T ES 2585244 T3 ES2585244 T3 ES 2585244T3
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Itai BLOCH
Efrat Ben-Zeev
Alina Shitrit
Avihai Yacovan
Sharon Gazal
Vered Behar
Alexander KONSON
Nili Schutz
Sima Mirilashvili
Gali Golan
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CLEVEXEL PHARMA
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Abstract

Compuesto de fórmula I:**Fórmula** o una sal farmacéuticamente aceptable, solvato o polimorfo del mismo, en el que: R1 se selecciona de entre el grupo que consiste en un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, o heteroalquilo, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3-C8, un heterocicloalquilo, una amina, un arilo y un heteroarilo, en el que dicho alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heterocicloalquilo, arilo, amina o heteroarilo está no sustituido o sustituido con uno o más Ra, en el que Ra se selecciona independientemente en cada aparición de entre el grupo que consiste en: a) un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, b) un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, c) un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, d) un haloalquilo de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado, e) un alcoxi o ariloxi de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado, f) un haloalcoxi de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado, g) un alquil C1-C6-sulfonilo lineal o ramificado, saturado o insaturado, h) un tioalquilo o tioarilo de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado, en el que dicho alquilo, alquenilo, alquinilo, y arilo en a)-h) está no sustituido o sustituido independientemente en cada aparición con uno o más Rb, i) un cicloalquilo de C3-C8, en el que dicho cicloalquilo está no sustituido o sustituido independientemente en cada aparición con uno o más Rb, j) un cicloalquenilo de C3-C8, en el que dicho cicloalquenilo está no sustituido o sustituido independientemente en cada aparición con uno o más Rb, k) un arilo, en el que dicho arilo está no sustituido o sustituido independientemente en cada aparición con uno o más Rb, l) un heteroarilo, en el que dicho heteroarilo está no sustituido o sustituido independientemente en cada aparición con uno o más Rb, m) un heterocicloalquilo, en el que dicho heterocicloalquilo está no sustituido o sustituido independientemente en cada aparición con uno o más Rb, n) hidroxilo, o) ciano, p) amino, q) nitro, r) halógeno, s) CORb, t) COORb, u) CONRbRc, v) NHCORb, y w) NRbRc o dos Ra, junto con los átomos a los que están unidos, forman un heterocicloalquilo de cinco o seis miembros, un arilo, o anillo heteroaromático; en el que Rb y Rc son, cada uno independientemente, hidrógeno o un grupo seleccionado de entre entre halógeno, C(O)CH3, CF3, un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3-C8, un heterocicloalquilo, un arilo y un heteroarilo; en los que dicho alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heterocicloalquilo, arilo o heteroarilo está no sustituido o sustituido con uno o más Rd, en el que Rd se selecciona independientemente en cada aparición de entre el grupo que consiste en un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3-C8, heterocicloalquilo, un arilo, una dialquilamina, una monoalquilamina, y un heteroarilo; o dos Rb, junto con los átomos a los que están unidos, forman un anillo heterocicloalquílico de cinco o seis miembros; R2 y R3 o bien (i) se seleccionan, cada uno independientemente, de entre el grupo que consiste en un hidrógeno, un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3-C8, y un heterocicloalquilo; o (ii) junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un anillo heterocicloalquílico o heteroaromático de cinco, seis o siete miembros, en el que dicho anillo está no sustituido; y en los que arilo significa fenilo y naftilo, heterocicloalquilo significa cualquier anillo monocíclico, bicíclico o tricíclico estable que está saturado y comprende unos átomos de carbono y uno o más heteroátomos anulares seleccionados independientemente de entre el grupo que consiste en nitrógeno, oxígeno, y azufre, y heteroarilo significa un anillo heterocíclico aromático monocíclico o bicíclico de 5, 6 o 7 miembros o anillo heterocíclico aromático bíclico de 7, 8, 9, 10, 11 o 12 miembros estable que consiste en átomos de carbono y uno o más heteroátomos seleccionados independientemente de entre el grupo que consiste en nitrógeno, oxígeno, y azufre; para uso como agente farmacéutico.

Description

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DESCRIPCION
Composiciones y metodos para modular una cinasa.
Solicitudes relacionadas
Esta solicitud esta relacionada con las Solicitudes Provisionales de U.S. nos 61/520.256, presentada el 7 de junio de 2011; 61/562.700, presentada el 22 de noviembre de 2011, y 61/640.139, presentada el 30 de abril de 2012.
Antecedentes de la invencion
La transduccion de senales es cualquier proceso mediante el cual una celula convierte un tipo de senal o estlmulo en otro. Los procesos de transduccion de senales comunmente implican una secuencia de reacciones bioqulmicas dentro de la celula, las cuales son llevadas a cabo por enzimas y enlazadas a traves de segundos mensajeros. En muchos procesos de transduccion, un numero cada vez mas alto de enzimas y otras moleculas se acoplan en los eventos que proceden a partir del estlmulo inicial. En tales casos, la cadena de etapas se conoce como una “cascada de senalizacion” o una “ruta de segundo mensajero”, y a menudo da resultado un pequeno estlmulo que provoca una gran respuesta. Una clase de moleculas implicadas en la transduccion de senales es la familia de enzimas cinasas. El grupo mas grande de cinasas es protelna cinasas, las cuales actuan en y modifican la actividad de protelnas especlficas. Estas se usan extensamente para transmitir senales y controlar procesos complejos en celulas.
Las protelna cinasas son una gran clase de enzimas que catalizan la transferencia del g-fosfato a partir de ATP al grupo hidroxilo en la cadena lateral de Ser/Thr o Tyr en protelnas y peptidos, y estan Intimamente implicadas en el control de varias funciones celulares importantes, tal vez mas notablemente: crecimiento, proliferacion, diferenciacion, supervivencia, adhesion, migration. Se calcula que existen alrededor de 2.000 protelna cinasas distintas en el cuerpo humano, y aunque cada una de estas fosforila sustratos protelna/peptido particulares, todas se unen al mismo segundo sustrato, ATP, en un bolsillo muy conservado. Las protelna fosfatasas catalizan la transferencia de fosfato en la direccion opuesta.
Una tirosina cinasa es una enzima que puede transferir un grupo fosfato desde ATP a un resto de tirosina en una protelna. La fosforilacion de protelnas por cinasas es un mecanismo importante en la transduccion de senales para la regulation de la actividad enzimatica. Las tirosina cinasas se dividen en dos grupos; aquellas que son protelnas citoplasmicas y las cinasas ligadas a receptores transmembranicos. En seres humanos, hay 32 protelna tirosina cinasas citoplasmicas y 58 protelna-tirosina cinasas ligadas a receptor. Las hormonas y factores de crecimiento que actuan en receptores ligados a tirosina cinasa de superficie celular son generalmente promotores del crecimiento y funcionan para estimular la division celular (por ejemplo, insulina, factor de crecimiento tipo insulina 1, factor de crecimiento epidermico).
Los inhibidores de varias protelna cinasas o protelna fosfatasas conocidas tienen una variedad de aplicaciones terapeuticas. Un uso terapeutico potencial prometedor para inhibidores de protelna cinasas o protelna fosfatasas es como agentes anticancer. Alrededor de 50% de los productos oncogenicos conocidos son protelna tirosina cinasas (PTKs), y se ha mostrado que su actividad de cinasa conduce a la transformation celular.
Debido a que las cinasas estan implicadas en la regulacion de una amplia variedad de rutas de transduccion de senales celulares normales (por ejemplo, crecimiento, proliferacion, diferenciacion, supervivencia, adhesion, migracion, etc., celular), se cree que las cinasas juegan un papel en una variedad de enfermedades y trastornos. De esta manera, la modulation de cascadas de senalizacion de cinasas puede ser una manera importante para tratar o prevenir estas enfermedades y trastornos.
Las solicitudes de patentes internacionales WO-A-00/33841 y WO-A-2008/027587 describen derivados de tiazol y su uso como inhibidores de cinasas para tratar diversas enfermedades, entre ellas artritis reumatoide. Los compuestos de la invencion difieren sustancialmente de los compuestos descritos en estas solicitudes.
Sumario de la invencion
Los compuestos de la invencion pueden ser utiles para modular uno o mas componentes implicados en una ruta de transduccion de senales celular normal (por ejemplo, crecimiento, proliferacion, diferenciacion, supervivencia, adhesion, migracion etc., celular), o una implicada en una enfermedad o trastorno. Estas enfermedades y trastornos incluyen, sin limitation, trastornos proliferativos celulares incluyendo canceres; trastornos inflamatorios; trastornos inmunitarios incluyendo trastornos autoinmunitarios, disfuncion del sistema inmunitario y rechazo de transplantes, y enfermedad de ojo seco (xeroftalmia). Por ejemplo, los compuestos de la invencion pueden ser utiles como moduladores (por ejemplo, inhibidores) de una tirosina cinasa, por ejemplo uno o mas componentes de una cascada de senalizacion de cinasas, tales como JAK, SYK y/o BTK.
Los compuestos de la invencion tambien pueden ser utiles para tratar enfermedades y trastornos que estan
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modulados por una ruta de transduccion de senales, tal como una ruta modulada por una tirosina cinasa de bazo (SYK), por ejemplo la ruta de senalizacion BCR. Por ejemplo, los compuestos de la invention pueden ser utiles para tratar enfermedades y trastornos que estan modulados por la inhibition de SYK. Los compuestos de la invencion tambien pueden ser utiles para tratar enfermedades y trastornos que estan, adicional o alternativamente, modulados por una ruta de transduccion de senales que no incluya una tirosina cinasa de bazo.
Los compuestos de la invencion tambien pueden ser utiles para tratar enfermedades y trastornos que estan modulados por una ruta de transduccion de senales, tal como una ruta modulada por una tirosina cinasa de Bruton (BTK). Por ejemplo, los compuestos de la invencion pueden ser utiles para tratar enfermedades y trastornos que estan modulados por inhibicion de BTK. Los compuestos de la invencion tambien pueden ser utiles para tratar enfermedades y trastornos que estan, adicional o alternativamente, modulados por una ruta de transduccion de senales que no incluya una tirosina cinasa de Bruton.
Los compuestos de la invencion tambien pueden ser utiles para tratar enfermedades y trastornos que estan modulados por una ruta de transduccion de senales, tal como una ruta modulada por una cinasa Janus (JAK). Por ejemplo, los compuestos de la invencion pueden ser utiles para tratar enfermedades y trastornos que estan modulados por inhibicion de JAK (por ejemplo, JAK3). Los compuestos de la invencion tambien pueden ser utiles para tratar enfermedades y trastornos que estan, adicional o alternativamente, modulados por una ruta de transduccion de senales que no incluya una cinasa Janus.
Por ejemplo, los compuestos de la invencion pueden ser utiles como agentes antiproliferativos, para tratar mamlferos, tal como para tratar seres humanos y animales. Los compuestos de la invencion se pueden usar sin limitation, por ejemplo como agentes anticancer, antiinflamatorios y/o inmunosupresores.
En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de la formula I:
imagen1
o una sal farmaceuticamente aceptable, solvato o polimorfo del mismo, en en el que R1, R2 y R3 son como se describen aqul, para uso como agente farmaceutico.
Por ejemplo, un compuesto de la invencion se usa como un agente antiproliferativo, para tratar seres humanos y/o animales, tal como para tratar seres humanos y/u otros mamlferos. Un compuesto de la invencion se puede usar sin limitacion, por ejemplo como agentes anticancer, antiinflamatorios y/o inmunosupresores. Ademas, un compuesto de la invencion puede usarse para trastornos relacionados con proliferation celular y trastornos autoinmunitarios. Un compuesto de la invencion se puede usar para enfermedad de ojo seco.
En un aspecto, un compuesto de la invencion se puede usar para tratar o prevenir un trastorno de proliferacion celular en un sujeto. En un aspecto, el trastorno de proliferacion celular es precancer o cancer. En otro aspecto, el trastorno de proliferacion celular es un trastorno hiperproliferativo. En ciertas realizaciones, la prevention o tratamiento del trastorno de proliferacion celular, cancer o trastorno hiperproliferativo ocurre a traves de la inhibicion de una tirosina cinasa, tal como JAK(JAK3), SYK o BTK. En ciertas realizaciones, el sujeto es un mamlfero, por ejemplo un ser humano.
En algunas realizaciones, los compuestos de la invencion se usan solos para prevenir o tratar cancer y/o trastorno de proliferacion de cancer. En algunas realizaciones, los compuestos de la invencion se usan en combination con otros agentes terapeuticos (por ejemplo, un modulador del metabolismo del cancer o un agente citotoxico) y/o terapias sin farmacos (por ejemplo, cirugla, inmunoterapia o tratamiento de radiation). En algunas realizaciones de tal terapia de combinacion, la terapia adicional se lleva a cabo sustancialmente de forma simultanea o concurrente con la administration de la composition farmaceutica. En algunas realizaciones, la administration de la composition farmaceutica se lleva a cabo antes de la terapia adicional de la terapia de combinacion. En algunas realizaciones, la administracion de la composicion farmaceutica se lleva a cabo despues de la terapia adicional. En algunas realizaciones, la composicion farmaceutica se administra cronicamente (por ejemplo, como parte de una terapia de mantenimiento). En algunas realizaciones, el cancer y/o trastorno de proliferacion celular es un trastorno proliferativo celular del sistema inmunitario (por ejemplo, leucemia o linfoma). En algunas realizaciones, el cancer del sistema hematologico es leucemia. En algunas realizaciones, la leucemia es mielofibrosis. En algunas realizaciones, la leucemia es leucemia mielogenosa aguda (AML). En algunas realizaciones, el trastorno de proliferacion celular se selecciona de policitemia vera (eritremla) y trombocitemia esencial. En algunas realizaciones, el cancer y/o trastorno de proliferacion celular es un trastorno proliferativo celular del pulmon (por ejemplo, cancer de pulmon). En algunas
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realizaciones, el cancer y/o trastorno de proliferacion celular es un trastorno proliferativo celular del colon (por ejemplo, cancer de colon). En algunas realizaciones, el cancer y/o trastorno de proliferacion celular es un trastorno proliferativo celular del pancreas (por ejemplo, cancer pancreatico). En algunas realizaciones, el cancer y/o trastorno de proliferacion celular es un trastorno proliferativo celular de la prostata (por ejemplo, cancer de prostata). En algunas realizaciones, el cancer y/o trastorno de proliferacion celular es un trastorno proliferativo celular de la piel (por ejemplo, un cancer de piel). En algunas realizaciones, el cancer y/o trastorno de proliferacion celular es un trastorno proliferativo celular del ovario (por ejemplo, cancer ovarico). En algunas realizaciones, el cancer y/o trastorno de proliferacion celular es un trastorno proliferativo celular de la mama (por ejemplo, cancer de mama).
En un aspecto, los compuestos de la invention se usan para regular la actividad del sistema inmunitario. Por ejemplo, modular la actividad del sistema inmunitario incluye modular enfermedades autoinmunitarias tales como rechazo de transplantes (por ejemplo, rinon, corazon, pulmon, hlgado, pancreas, piel, reaction de hospedante contra injerto (HVGR), etc.), artritis reumatoide, artritis psoriasica, y esclerosis lateral amiotrofica. En una realization, la enfermedad autoinmunitaria se selecciona de psoriasis, artritis reumatoide y artritis psoriasica. En un aspecto, la invencion incluye el uso de un compuesto de la invencion en la fabrication de un medicamento para regular la actividad del sistema inmunitario. En ciertas realizaciones, la regulation del sistema inmunitario ocurre a traves de la inhibition de proliferacion de linfocitos. En ciertas realizaciones, la regulacion del sistema inmunitario ocurre a traves de la inhibicion de la activation de linfocitos. Por ejemplo, se inhibe la proliferacion y/o activation de celulas T. Adicional o alternativamente, se inhibe la proliferacion y/o activacion de celulas B. En ciertas realizaciones, el sujeto es un mamlfero, por ejemplo un ser humano. En un aspecto, la invencion incluye el uso de un compuesto de la invencion en la fabricacion de un medicamento para tratar o prevenir un trastorno o enfermedad inflamatoria. En una realizacion, la enfermedad inflamatoria se selecciona de enfermedad intestinal inflamatoria y espondilitis anquilosante. En una realizacion, la enfermedad intestinal inflamatoria se selecciona de colitis ulcerosa y enfermedad de Crohn. En un aspecto, la invencion incluye el uso de un compuesto de la invencion en la fabricacion de un medicamento para tratar o prevenir enfermedad de ojo seco.
En un aspecto, la administration de un compuesto de la invencion se lleva a cabo oralmente, parenteralmente, subcutaneamente, intravenosamente, intramuscularmente, intraperitonealmente, por instilacion intranasal, por instilacion intracavitaria o intravesical, topicamente, intraarterialmente, intralesionalmente, por bomba dosificadora, o mediante aplicacion a membranas mucosas. En un aspecto, un compuesto de la invencion se administra con un portador farmaceuticamente aceptable. En un aspecto, un compuesto de la invencion se administra antes del comienzo de la irregularidad del sistema inmunitario. En un aspecto, un compuesto de la invencion se administra despues del comienzo de irregularidad en el sistema inmunitario.
La solicitud tambien esta dirigida a ciertos polimorfos de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1 -carbonil)-1 H-pi rrol-3- il)tiazol-2-il)fenil)acetamida y de la sal de acido clorhldrico de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1 -carbonil)-1 H-pi rrol-3- il)ti azol-2-il)fenil)aceta mida y composiciones farmaceuticas de los mismos.
El compuesto 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo o un polimorfo del compuesto o sal es util para modular uno o mas componentes implicados en una ruta de transduction de senales normal (por ejemplo, crecimiento, proliferacion, diferenciacion, supervivencia, adhesion, migration, etc., celular). Mas especlficamente, este compuesto modula uno o mas componentes de una ruta de serialization de cinasas, tal como una ruta modulada por cinasa Janus (JAK, por ejemplo JAK3), tirosina cinasa de bazo (SYK) y/o tirosina cinasa de Bruton (BTK).
Este compuesto es util para tratar enfermedades y trastornos que estan modulados por una ruta de transduccion de senales. Por ejemplo, la sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2- il)fenil)acetamida es util en el tratamiento de trastornos proliferativos celulares, incluyendo canceres; trastornos inflamatorios; trastornos inmunitarios, incluyendo trastornos autoinmunitarios, disfuncion del sistema inmunitario, y rechazo de transplantes; y enfermedad de ojo seco.
No se han descrito formas polimorficas de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2- il)fenil)acetamida o de una sal farmaceuticamente aceptable de la misma. Sin embargo, la forma cristalina de un farmaco puede afectar, entre otras propiedades flsicas y mecanicas, a la solubilidad, velocidad de disolucion, dureza, compresibilidad, y punto de fusion. Debido a que estas propiedades pueden afectar a su vez a la fabricacion de un farmaco y su utilidad, hay una necesidad existente en las tecnicas qulmicas y terapeuticas para la identification de formas cristalinas de farmacos y maneras de fabricarlas. Se describe aqul que 2-morfolino-N-(3-(4- (5-(pirrolidin-1 -carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida y la sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5- (pirrolidin-1 -carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida pueden existir cada una como una forma cristalina novedosa. Los polimorfos de la presente invencion exhiben propiedades que los hacen superiores a los compuestos y sales farmaceuticamente aceptables de los mismos previamente conocidos.
Se contempla que siempre que sea adecuado, cualquier realizacion de la presente invencion puede combinarse con una o mas de otras realizaciones de la presente invencion, incluso a pesar de que las realizaciones se describan bajo diferentes aspectos de la presente invencion.
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La anterior description establece de manera bastante amplia las caracterlsticas mas importantes de la presente invention de tal forma que la descripcion detallada de la misma que sigue pueda ser entendida, y de tal manera que las presentes contribuciones a la tecnica pueden apreciarse mejor. Otros objetivos y caracterlsticas de la presente invencion se haran manifiestos a partir de la siguiente descripcion detallada considerada conjuntamente con los ejemplos.
Breve descripcion de las figuras
La figura 1 es una grafica lineal que muestra cambios en el peso corporal en un estudio de seguridad durante 6 dlas de animales dosificados oralmente con control o compuesto 7A (100 mg/kg y 300 mg/kg).
La figura 2 es una grafica lineal que muestra cambios en volumen tumoral en un estudio de xenoinjerto de raton con linfoma de celulas B (llnea de celulas Daudi) a lo largo de 28 dlas cuando los ratones fueron tratados con vehlculo o compuesto 7A (100 mg/kg y 300 mg/kg).
La figura 3A es una grafica que muestra cambios en el tamano tumoral en un estudio de xenoinjerto de raton con linfoma de celulas B (llnea celular Daudi) cuando los ratones fueron tratados con vehlculo o compuesto 7A (100 mg/kg y 300 mg/kg).
La figura 3B es una grafica de barras que compara el peso tumoral de ratones tratados con vehlculo o compuesto 7A (100 mg/kg y 300 mg/kg) en un estudio de xenoinjerto de raton con linfoma de celulas B (llnea de celulas Daudi) a lo largo de 28 dlas.
La figura 3C es una grafica lineal que muestra cambios en el peso corporal de ratones tratados con vehlculo o compuesto 7A (100 mg/kg y 300 mg/kg) en un estudio de xenoinjerto de raton con linfoma de celulas B (llnea de celulas Daudi) a lo largo de 28 dlas.
La figura 4A es una grafica lineal que muestra cambios en las puntuaciones de CIA (artritis inducida por colageno) en un estudio de 20 dlas de ratones tratados con vehlculo o CP-690550 (30 mg/kg) o R-788 (60 mg/kg) usando un modelo de enfermedad de CIA de progresion lenta.
La figura 4B es una grafica lineal que muestra cambios en puntuaciones de gravedad de la enfermedad en un estudio de 20 dlas de artirits inducida por colageno en ratones tratados con vehlculo o CP-690550 (10 y 30 mg/kg) usando un modelo semi-terapeutico.
La figura 4C es una grafica lineal que muestra cambios en puntuaciones de CIA en un estudio de 20 dlas de ratones tratados con vehlculo, CP-690550 (30 mg/kg), R-788 (60 mg/kg), o compuesto 7A (100 mg/kg) usando un modelo de enfermedad de CIA de progresion lenta.
La figura 4D es una grafica de barras que compara la reduction en la puntuacion de CIA en el ultimo dla de un estudio de 20 dlas de ratones tratados con CP-690550 (30 mg/kg), R-788 (60 mg/kg), o compuesto 7A (100 mg/kg) frente a ratones tratados con vehlculo combinado usando un modelo de enfermedad de CI de progresion lenta.
La figura 4E es una grafica lineal que muestra cambios en el grosor medio de la pata trasera en mm durante un estudio de CIA de 20 dlas de ratones tratados con vehlculo, CP-690550 (30 mg/kg), R-788 (60 mg/kg), o compuesto 7A (100 mg/kg).
La figura 4F es una grafica de barras que compara AUC de las curvas de grosor de la pata trasera durante un estudio de CIA de 20 dlas de ratones tratados con vehlculo, CP-690550 (30 mg/kg), R-788 (60 mg/kg), o compuesto 7A (100 mg/kg).
La figura 4G es una grafica lineal que muestra cambios en las puntuaciones de CIA medias durante un estudio de CIA de 20 dlas de ratones tratados con vehlculo o compuesto 7A (a 15, 30 y 100 mg/kg) usando un modelo de enfermedad de CIA de progresion lenta.
La figura 4H es una grafica lineal que muestra cambios en el grosor medio de la pata trasera en mm durante un estudio de CIA de 20 dlas de ratones tratados con vehlculo o compuesto 7A (a 15, 30 y 100 mg/kg) usando un modelo de enfermedad de CIA de progresion lenta.
La figura 4I es una grafica de barras que compara AUC media de curvas de grosor de la pata trasera durante un estudio de CIA de 20 dlas de ratones tratados con vehlculo o compuesto 7A (15, 30 y 100 mg/kg) usando un modelo de enfermedad de CIA de progresion lenta.
La figura 5 es un patron de difraccion de rayos X caracterlstico de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)- 1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (compuesto 7A (muestra 1)) obtenido por el metodo del Ejemplo 11 y
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purificado por cromatografla.
La figura 6 es un patron de difraccion de rayos X caracterlstico de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)- 1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (compuesto 7A (muestra 2)).
La figura 7 es una superposicion del patron de difraccion de rayos X del compuesto 7A (muestra 1) (en la parte superior) con el patron de difraccion de rayos X de compuesto 7A (muestra 2) (en la parte inferior).
La figura 8 es un patron de difraccion de rayos X caracterlstico de sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5- (pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I), compuesto 9X (muestra 1).
La figura 9 es un patron de difraccion de rayos X caracterlstico de sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5- (pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I), compuesto 9X (muestra 2).
La figura 10 es un termograma de DSC para sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)- 1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I), compuesto 9X (muestra 1) (Ejemplo 14).
La figura 11 es un termograma de DSC para sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)- 1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I), compuesto 9X (muestra 2) (Ejemplo 14).
La figura 12 es un termograma de DSC para 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2- il)fenil)acetamida (Ejemplo 14).
La figura 13 es un termograma de DSC para la sal acido metanosulfonico de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1- carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Ejemplo 15).
La figura 14 es un patron de difraccion de rayos X caracterlstico de la sal de acido metanosulfonico de morfolino- N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Ejemplo 15).
La figura 15 es un patron de difraccion de rayos X caracterlstico de una forma cristalina de 2-morfolino-N-(3-(4- (5-(pirrolidin-1-carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (compuesto 1OX).
La figura 16 es un patron de difraccion de rayos X caracterlstico de una forma cristalina de sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) (compuesto 9X (muestra 3)).
La figura 17 es una superposicion del patron de difraccion de rayos X del compuesto 10X (en la parte superior) con el patron de difraccion de rayos X del compuesto 9X (muestra 3) (en la parte inferior).
La figura 18 es un termograma de DSC para 2-morfolino-N-(3- (4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2- il)fenil)acetamida compuesto 10X (Ejemplo 14).
Descripcion detallada de la invencion
Los detalles de una o mas realizaciones de la invencion se exponen en la descripcion que se acompana abajo. Aunque cualesquiera metodos y materiales similares o equivalentes a aquellos descritos en la presente pueden usarse en la practica o ensayo de la presente invencion, ahora se describen algunos de los metodos y materiales. Otras caracterlsticas, objetos y ventajas de la invencion seran manifiestos a partir de la descripcion. En la memoria descriptiva, las formas singulares tambien incluyen el plural a menos que el contexto claramente dicte lo contrario. A menos que se defina de otra forma, todos los terminos tecnicos y cientlficos usados aqul tienen el mismo significado que el entendido comunmente por alguien de pericia normal en la tecnica a la cual pertenece esta invencion. En caso de conflicto, imperara la presente presente memoria descriptiva.
Debido a que las cinasas estan implicadas en la regulacion de una amplia variedad de rutas de transduccion de senales celulares normales (por ejemplo, crecimiento, proliferacion, diferenciacion, supervivencia, adhesion, migracion, etc., celular), se cree que las cinasas juegan un papel en una variedad de enfermedades y trastornos. Asl, la modulacion de las cascadas de serialization de cinasas puede ser una ruta importante para tratar o prevenir estas enfermedades y trastornos. Estas enfermedades y trastornos incluyen, por ejemplo, trastornos proliferativos celulares incluyendo canceres; trastornos inflamatorios; trastornos inmunitarios incluyendo trastornos autoinmunitarios, disfuncion del sistema inmunitario y rechazo de transplantes, y enfermedad de ojo seco (xeroftalmia).
En un aspecto, un compuesto de la invencion puede ser util para modular uno o mas componentes implicados en una ruta de transduccion de senales para prevenir o tratar una enfermedad o trastorno en el cual la ruta juegue un papel, tal como una ruta modulada por una tirosina cinasa, por ejemplo JAK, SYK y/o BTK. En un aspecto, un compuesto de la invencion puede ser util para tratar tales enfermedades y trastornos que incluyen, sin limitation,
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trastornos proliferativos celulares incluyendo canceres, trastornos inflamatorios, trastornos inmunitarios incluyendo trastornos autoinmunitarios, disfuncion del sistema inmunitario y rechazo de transplantes, y enfermedad de ojo seco (xeroftalmia).
Cinasas Janus
En un aspecto, un compuesto de la invencion puede ser util para modular uno o mas componentes implicados en una ruta de transduccion de senales para prevenir o para tratar una enfermedad o trastorno en el cual la ruta juegue un papel, tal como una ruta modulada por una cinasa Janus (JAK).
Las cinasas Janus (JAK) son una familia de tirosina cinasas no receptoras intracelulares que consisten en JAK1, JAK2, JAK3 y tirosina cinasa 2 (TYK2). Las JAKs juegan un papel crucial en la senalizacion de citocinas. Los sustratos aguas abajo de la familia JAK de cinasas incluyen las protelnas transductoras de senal y activadoras de la transcription (STAT). La senalizacion de JAK/STAT ha estado implicada en la mediation de muchas respuestas inmunitarias anormales tales como alergias, asma, enfermedades autoinmunitarias tales como rechazo de transplantes (aloinjertos), artritis reumatoide, esclerosis lateral amiotrofica y esclerosis multiple, as! como en neoplasias solidas y hematologicas tales como leucemia y linfomas. Para una revision de la intervention farmaceutica de la ruta JAK/STAT vease Frank, 1999, Mol. Med. 5:432:456 and Seidel et al., 2000, Oncogene 19:2645-2656.
JAK3 es un miembro de la familia Janus de protelna cinasas. Aunque los demas miembros de esta familia son expresados esencialmente por todos los tejidos, la expresion de JAK3 esta limitada a celulas hematopoyeticas y transduce una senal en respuesta a su activation por medio de fosforilacion de tirosina por receptores de interleucina. JAK3 esta implicada en transduccion de senales por asociacion no covalente con receptores que emplean la cadena gamma comun (gC) de la familia de receptores de citocinas tipo I (por ejemplo, IL-2R, IL-4R, IL- 7R, IL-9R, IL-15R, e IL-21R). Las mutaciones que anulan la funcion de JAK3 causan una SCID (enfermedad de inmunodeficiencia combinada severa) autosomica, sugiriendo que el bloqueo de JAK3 se traducirla en inmunosupresion. Estas observaciones fueron apoyadas por datos con animales que indicaron que JAK3 no solo juega un papel en la maduracion de celulas B y T, sino que tambien es necesaria para mantener la funcion de celulas T (Fujimoto, M. et al., 2000. J. Immunol. 165:1799-806, Baird et al., 2000. J Immunol. 165:3680-3688).
JAK3 esta asociada con una variedad de canceres humanos. Individuos con slndrome de Down (DS) estan predispuestos a desarrollar leucemia megacarioblastica aguda (AMKL). El desarrollo subsiguiente de leucemia en DS a menudo es precedido anteriormente en la vida por un trastorno mieloproliferativo transitorio (TMD). Se han dado a conocer mutaciones adquiridas en JAK3 tanto en pacientes con DS con TMD, como en pacientes sin DS con AMKL (Walters DK, et al., 2006. Cancer Cell. 10:65-75, De Vita S., et al., 2007. Br. J. Haematol. 137:337-341). Analisis adicionales revelaron que una mutation de punto en JAK3 afecta su dominio de pseudocinasa y hace a la cinasa constitutivamente activa. Se obtuvo soporte adicional a partir de estudios con animales en los que medula osea murina transfectada con diferentes mutaciones de JAK3 indujo varias formas de leucemia, llevando a un trastorno linfoproliferativo de celulas T o enfermedad mieloproliferativa. La modulation o inhibition por medio de este mecanismo, por lo tanto, puede demostrar ser eficaz para el tratamiento de trastornos proliferativos inmunitarios tales como enfermedades autoinmunitarias (por ejemplo, artritis reumatoide) o diferentes formas de leucemia. Existe de este modo una necesidad en la tecnica de, entre otros, moduladores de rutas de transduccion de senales, tales como inhibidores de JAK3.
En un aspecto, un compuesto de la invencion puede ser util como moduladores (por ejemplo, inhibidores) de uno o mas componentes de una cascada de senalizacion de cinasas JAK, tal como JAK3. En un aspecto, un compuesto de la invencion puede ser util en la modulacion de mas de un componente de una cascada de senalizacion de cinasas JAK. En un aspecto, un compuesto de la invencion puede tambien ser util para tratar enfermedades y trastornos que ademas o como alternativa estan modulados por una ruta de transduccion de senales que no incluya una cinasa Janus.
La frase “modula uno o mas componentes de una cascada de senalizacion de cinasas JAK” significa que uno o mas componentes de la cascada de senalizacion de cinasas JAK son afectados de tal manera que el funcionamiento de una celula cambia. Los componentes de una cascada de senalizacion de protelna cinasas incluyen cualesquiera protelnas implicadas directa o indirectamente en una ruta de senalizacion de cinasas JAK, incluyendo segundos mensajeros y dianas aguas anteriormente y aguas abajo.
Tirosina cinasa de bazo
En un aspecto, un compuesto de la invencion puede ser util para modular uno o mas componentes implicados en una ruta de senalizacion para prevenir o para tratar una enfermedad o trastorno en el cual la ruta juegue un papel, tal como una ruta que incluya tirosina cinasa de bazo (SYK).
La tirosina cinasa de bazo (SYK) es un miembro de la familia SYK de tirosina protelna cinasas, una familia de tirosina cinasas citoplasmica caracterizadas por la presencia de dos dominios SH2 en el amino terminal de un solo
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dominio de cinasa. Se han identificado homologos de la familia SYK de protelna cinasas en un numero de especies, incluyendo la ZAP-70 humana. Se ha dado a conocer que SYK esta implicada en varios eventos de senalizacion celular. Por ejemplo, SYK participa en senalizacion de inmunorreceptores, senalizacion de integrinas y senalizacion de receptores acoplados a protelna G. Se sabe que SYK es expresada en celulas hematopoyeticas as! como en fibroblastos, celulas epiteliales, hepatocitos, celulas neuronales, celulas endoteliales, y mastocitos. SYK tambien esta implicada en respuestas hematopoyeticas tales como proliferacion, por ejemplo los inhibidores de SYK se han sugerido como moduladores de proliferacion, diferenciacion y fagocitosis de celulas ASM inducida por trombina.
Ademas, los inhibidores de SYK tambien han demostrado ser igualmente importantes en celulas no hematopoyeticas, tal como en fibroblastos, celulas epiteliales, tejido de mama, hepatocitos, celulas neuronales, y celulas endoteliales vasculares. En consecuencia, SYK se ha visto implicada en el desempeno de un papel crltico en funciones de celulas endoteliales, incluyendo el crecimiento, migration y supervivencia de celulas de morfogenesis, y en la contribution para mantener la integridad vascular in vivo. Para una revision adicional, vease Yanagi et al., Biochem. Biophys. Res. Comm. 288:495-498 (2001).
Se ha mostrado que inhibidores de SYK tanto antisentido como especlficos tienen cierta actividad en modelos de asma, y se cree que SYK es una diana para el tratamiento de asma y otras enfermedades de las vlas respiratorias, as! como para alergias, inflamacion y autoinmunidad. Tambien se ha sugerido SYK como una diana para el desarrollo de agonistas en terapia de cancer, debido a su papel en crecimiento celular.
SYK es esencial para activation de celulas B a traves de senalizacion de BCR. Las SYK son activadas despues de su union a BCR fosforilado, y de esta manera inician los eventos tempranos de senalizacion despues de la activacion de BCR. Ratones deficientes en SYK exhiben un bloqueo temprano en el desarrollo de celulas B (Cheng et al. Nature 378:303, 1995; Turner et al. Nature 378:298, 1995). Por lo tanto, la inhibition de la actividad enzimatica de SYK en celulas se propone como un tratamiento para enfermedades autoinmunitarias a traves de sus efectos en la produccion de autoanticuerpos.
En un aspecto, un compuesto de la invention puede ser util como moduladores (por ejemplo, inhibidores) de SYK. Algunos compuestos pueden ser utiles en la modulation de mas de un componente de una cascada de senalizacion que incluya SYK. En un aspecto, un compuesto de la invencion tambien puede ser util para tratar enfermedades y trastornos que ademas o como alternativa estan modulados por una ruta de senalizacion que no incluya BTK.
Tirosina cinasa de Bruton (BTK)
En un aspecto, un compuesto de la invencion puede ser util para modular uno o mas componentes implicados en una ruta de senalizacion para prevenir o para tratar una enfermedad o trastorno en el cual la ruta juegue un papel, tal como una ruta modulada por BTK.
La senalizacion a traves del receptor de celulas B (BCR) controla una gama de respuestas de celulas B incluyendo proliferacion y diferenciacion en celulas productoras de anticuerpos maduras. El BCR es un punto regulatorio clave para la actividad de celulas B, y la senalizacion aberrante puede causar proliferacion de celulas B desregulada y formation de autoanticuerpos patogenos que lleven a varias enfermedades autoinmunitarias y/o inflamatorias. La tirosina cinasa de Bruton (BTK) es una cinasa no asociada a BCR que esta cerca de la membrana e inmediatamente aguas abajo del BCR. Se ha mostrado que la falta de BTK bloquea la senalizacion de BCR, y por lo tanto la inhibicion de BTK podrla ser un enfoque terapeutico util para bloquear procesos de enfermedad mediados por celulas B.
BTK es un miembro de la familia T ec de tirosina cinasas, y se ha mostrado que es un regulador crltico del desarrollo de celulas B temprano y la activacion y supervivencia de celulas B maduras (Khan et al. Immunity 1995 3:283; Ellmeier et al. J. Exp. Med. 2000 192:1611). La mutation de BTK en seres humanos conduce a la afeccion agammaglobulinemia ligada a X (XLA) (revisado en Rosen et al. New Eng. J. Med. 1995 333:431 y Lindvall et al. Immunol. Rev. 2005 203:200). Estos pacientes estan inmunocomprometidos y muestran maduracion deteriorada de celulas B, niveles reducidos de inmunoglobulina y celulas B perifericas, respuestas inmunitarias independientes de celulas T disminuidas as! como movilizacion de calcio atenuada despues de la estimulacion de BCR.
Tambien se han proporcionado pruebas de un papel para BTK en enfermedades autoinmunitarias e inflamatorias mediante modelos de raton deficiente en BTK. En modelos de murino precllnicos de lupus eritematoso sistemico (SLE), ratones deficientes en Btk mostraron una marcada reduction de la progresion de la enfermedad. Ademas, los ratones deficientes en Btk son resistentes a artritis inducida por colageno (Jansson y Holmdahl Clin. Exp. Immunol. 1993 94:459). Un inhibidor de BTK selectivo ha demostrado su eficacia dependiente de la dosis en un modelo de artritis de raton (Z. Pan et al., Chem. Med Chem. 2007 2:58-61).
BTK tambien es expresada por celulas distintas de celulas B que pueden estar implicadas en procesos de enfermedad. Por ejemplo, BTK es expresada por mastocitos, y mastocidos derivados de medula osea deficientes en BTK demuestran desgranulacion inducida por antlgeno deteriorada (Iwaki et al. J. Biol. Chem. 2005 280:40261). Esto muestra que BTK podrla ser util para tratar respuestas patologicas de mastocitos tales como alergia y asma.
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Asimismo, los monocitos de pacientes con XLA, en los cuales la actividad de BTK esta ausente, muestran produccion de TNF alfa reducida tras la estimulacion (Horwood et al. J Exp Med 2003 197:1603). Por lo tanto, la inflamacion mediada por TNF alfa podrla ser modulada por inhibidores de Btk moleculares pequenos. Asimismo, se ha dado a conocer que Btk juega un papel en apoptosis (Islam y Smith Immunol. Rev. 2000 178:49), y de esta manera los inhibidores de BTK serlan utiles para el tratamiento de ciertos linfomas y leucemias de celulas B (Feldhahn et al. J. Exp. Med. 2005 201:1837).
En un aspecto, un compuesto de la invencion puede ser util como moduladores (por ejemplo, inhibidores) de BTK. En un aspecto, un compuesto de la invencion puede ser util en la modulation de mas de un componente de una cascada de serialization que incluya BTK. En un aspecto, un compuesto de la invencion tambien puede ser util para tratar enfermedades y trastornos que estan adicional o alternativamente modulados por una ruta de senalizacion que no incluya BTK.
En un aspecto, un compuesto de la invencion es util como un agente farmaceutico, por ejemplo como agente terapeutico para tratar seres humanos y animales. En un aspecto, un compuesto de la invencion puede usarse sin limitation, por ejemplo como agentes anticancer, antiinflamatorios y/o inmunosupresores. En un aspecto, un compuesto de la invencion puede usarse para otros trastornos relacionados con proliferation celular y trastornos autoinmunitarios.
En un aspecto, un compuesto de la invencion puede usarse para regular la actividad del sistema inmunitario en un sujeto, protegiendo de esta manera contra o previniendo enfermedades autoinmunitarias, por ejemplo lupus, rechazo de transplante (por ejemplo, rinon, corazon, pulmon, hlgado, pancreas, piel, reaction de hospedante contra injerto (HVGR), etc.), artritis reumatoide, artritis psoriasica, y esclerosis lateral amiotrofica, septicemia, enfermedades autoinmunitarias mediadas por celulas T tales como esclerosis multiple, psoriasis y slndrome de Sjogren, y reacciones de hipersensibilidad. En un aspecto, un compuesto de la invencion tambien se puede usar para proteger contra o prevenir neoplasias solidas y hematologicas, por ejemplo leucemia y linfomas. En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de la invencion en la fabrication de un medicamento para regular el sistema inmunitario. En un aspecto, un compuesto de la invencion puede usarse para tratar enfermedades autoinmunitarias en un sujeto. En un aspecto, la invencion incluye el uso de un compuesto de la invencion en la fabricacion de un medicamento para proteger contra o tratar neoplasias solidas y hematologicas. Por ejemplo, un compuesto de la invencion puede dar como resultado la reduction en la gravedad de slntomas o detener la progresion inminente de la enfermedad autoinmunitaria, o neoplasia solida o hematologica en un sujeto. En ciertas realizaciones, la regulation del sistema inmunitario se produce a traves de la inhibition de la proliferacion de linfocitos. En ciertas realizaciones, la regulacion del sistema inmunitario se produce a traves de la inhibicion de la activation de linfocitos. Por ejemplo, se inhibe la proliferacion y/o activacion de celulas T. Adicional o alternativamente, se inhibe la proliferacion y/o activacion de celulas B. En ciertas realizaciones, el sujeto es un mamlfero, por ejemplo un ser humano.
En un aspecto, un compuesto de la invencion puede estar implicado en modular una cascada de senalizacion de cinasas, por ejemplo un inhibidor de cinasa Janus (JAK) tal como un inhibidor de JAK1, JAK2, JAK3 o TYK2. Asl, sin desear estar atados por la teorla, se crea la hipotesis de que la administration de un compuesto de la invencion modula uno o mas miembros de la familia de cinasas JAK (por ejemplo, JAK1, JAK2, JAK3 o TYK2), y es util para el tratamiento de enfermedades mediadas inmunologicamente, por ejemplo reacciones de hipersensibilidad, rechazo de transplantes (por ejemplo, rechazo de transplantes agudo y cronico), alergias, artritis reumatoide, artritis psoriasica, esclerosis lateral amiotrofica, y neoplasias, por ejemplo leucemia y linfoma. En un aspecto, un compuesto de la invencion usado para tratar, prevenir o mejorar una enfermedad mediada inmunologicamente es un inhibidor de una tirosina cinasa. En un aspecto, un compuesto de la invencion usado en los metodos para tratar, prevenir o mejorar una enfermedad mediada inmunologicamente es un inhibidor de una tirosina cinasa seleccionado de entre JAK (JAK3), SYK y BTK.
La cinasa JAK3 se une a la cadena gamma comun de receptores citocineticos. Esta cadena gamma comun, la cual esta implicada tanto en union a ligando como en trasnsduccion de senales, es una subunidad compartida del receptor multicatenario para citocinas IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 e IL-21. Sin pretender estar atados por la teorla, debido a que la cinasa JAK3 se une a la cadena gamma comun de estos receptores, en un aspecto, un compuesto de la invencion puede usarse para regular, y en particular inhibir, estas y otras cascadas de senalizacion de receptores de citocinas que utilizan la cadena gamma comun. Asl, en un aspecto, la invencion incluye compuestos para uso regular, y en particular inhibir, las cascadas de transduction de senales en las cuales una cinasa JAK juega un papel, tales como cascadas de transduccion de senales de receptores de citocinas que utilizan la cadena gamma comun, incluyendo, pero sin limitarse a, las cascadas de transduccion de senales de IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 e IL- 21. Los compuestos de la invencion tambien se pueden usar para regular, y en particular inhibir, procesos aguas abajo o respuestas celulares provocadas por la activacion de la cascada de transduccion de senales dependiente de JAK particular. Los ejemplos de enfermedades que estan mediadas, por lo menos en parte, por cinasas JAK que pueden ser tratadas o prevenidas con compuestos de la invencion incluyen, pero no estan limitadas a, alergias, asma, enfermedades autoinmunitarias tales como rechazo de transplantes (por ejemplo, rinon, corazon, pulmon, hlgado, pancreas, piel, reaccion de hospedante contra injerto (HVGR), etc.), artritis reumatoide, artritis psoriasica y esclerosis lateral amiotrofica, esclerosis multiple, psoriasis y slndrome de Sjogren, enfermedad inflamatoria tipo II tal como inflamacion vascular (incluyendo vasculitis, arteritis, aterosclerosis y enfermedad de arterias coronarias),
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enfermedades inflamatorias cronicas tales como espondilitis anquilosante (conocida tambien como enfermedad de Bekhterev, sindrome de Bekhterev y enfermedades de Marie-Strumpell), enfermedades del sistema nervioso central tales como apoplejia, enfermedades pulmonares tales como bronquitis obliterante e hipertension primaria y pulmonar primaria, hipersensibilidad tipo IV mediada por celulas o retrasada, y neoplasias solidas y hematologicas tales como leucemias y linfomas.
En un aspecto, un compuesto de la invencion puede estar implicado en modular una cascada de serialization de cinasas, por ejemplo un inhibidor de tirosina cinasa de bazo (SYK) tal como un inhibidor de SYK o Zap-70. Asi, sin desear estar atados por la teoria, se teoriza que la administration de un compuesto de la invencion modula uno o mas miembros de la familia de cinasas SYK (por ejemplo, SYK o Zap-70), y es util para el tratamiento de enfermedades mediadas inmunologicamente, por ejemplo reacciones de hipersensibilidad, rechazo de transplantes (por ejemplo, rechazo de transplantes agudo y cronico), alergias, artritis reumatoide, artritis psoriasica, esclerosis lateral amiotrofica, y neoplasias, por ejemplo leucemia y linfoma. En un aspecto, un compuesto de la invencion usado para tratar, prevenir o mejorar una enfermedad mediada inmunologicamente es un inhibidor de una tirosina cinasa. En un aspecto, un compuesto de la invencion usado para tratar, prevenir o mejorar una enfermedad mediada inmunologicamente es un inhibidor de una tirosina cinasa seleccionada de JAK (JAK3), SYK y BTK.
La familia Syk de tirosina cinasas incluye, por ejemplo, SYK y Zap-70. SYK juega un papel en las cascadas de senalizacion desde ciertos receptores de superficie celular (por ejemplo, CD74, receptor de Fc e integrinas). Sin desear estar atados por la teoria, debido a que la cinasa SYK se une a los receptores de superficie celular tales como CD74, receptor de Fc e integrinas, en un aspecto, un compuesto de la invencion puede usarse para regular, y en particular inhibir, estos receptores y receptores similares. Asi, en un aspecto, los compuestos de la invencion se usan para regular, y en particular inhibir, cascadas de transduction de senales en las cuales una cinasa SYK juega un papel. Los compuestos tambien pueden usarse para regular, y en particular inhibir, procesos aguas abajo o respuestas celulares provocadas por la activation de la cascada de transduccion de senales dependiente de SYK particular. Los compuestos se pueden usar para regular cualquier cascada de transduccion de senales en la que se sabe ahora o se descubra mas tarde que cinasa SYK juega un papel. Los compuestos tambien se pueden usar en contextos in vitro o en contextos in vivo como un enfoque terapeutico hacia el tratamiento o prevention de enfermedades caracterizadas por, causadas por o asociadas con activacion de la cascada de transduccion de senales dependiente de SYK. Ejemplos de enfermedades que estan mediadas, por lo menos en parte, por cinasas SYK que pueden ser tratadas o prevenidas con los compuestos de la invencion incluyen, pero no estan limitadas a, alergias, asma, enfermedades autoinmunitarias tales como rechazo de transplantes (por ejemplo, rinon, corazon, pulmon, higado, pancreas, piel, reaction de hospedante contra injerto (HVGR), etc.), artritis reumatoide, artritis psoriasica, y esclerosis lateral amiotrofica, esclerosis multiple, psoriasis y sindrome de Sjogren, enfermedad inflamatoria tipo II tal como inflamacion vascular (incluyendo vasculitis, arteritis, aterosclerosis y enfermedad de arterias coronarias), enfermedades inflamatorias cronicas tales como espondilitis anquilosante (conocida tambien como enfermedad de Bekhterev, sindrome de Bekhterev, y enfermedades de Marie-Strumpell), enfermedades del sistema nervioso central tales como apoplejia, enfermedades pulmonares tales como bronquitis obliterante e hipertension primaria y pulmonar primaria, hipersensibilidad tipo IV retrasada o mediada por celulas, y neoplasias solidas y hematologicas tales como leucemias y linfomas.
Ademas, sin desear estar atados por la teoria, se muestra que los compuestos de la invencion en los Ejemplos mas abajo modulan otras rutas ademas de una cascada de transduccion de senales dependiente de JAK, tales como aquellas encontradas en linfocitos (por ejemplo, celulas B y celulas T). Sin desear estar atados por la teoria, los compuestos descritos en la presente pueden usarse para regular, y en particular inhibir, la proliferation y/o activacion de linfocitos (por ejemplo, proliferacion y/o activacion de celulas T y/o proliferacion y/o activacion de celulas B).
Compuestos
En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de acuerdo con la formula I:
imagen2
o una sal farmaceuticamente aceptable, solvato o polimorfo del mismo, en el que:
R1 se selecciona de entre el grupo que consiste en un alquilo de C1-C@ lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C@
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lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, o heteroalquilo, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3-C8, un heterocicloalquilo, una amina, un arilo y un heteroarilo,
en el que dicho alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heterocicloalquilo, arilo, amina o heteroarilo esta no sustituido o sustituido con uno o mas Ra,
en el que Ra se selecciona independientemente en cada aparicion de entre el grupo que consiste en:
a) un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado,
b) un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado,
c) un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado,
d) un haloalquilo de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
e) un alcoxi o ariloxi de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
f) un haloalcoxi de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
g) un alquil C1-C6-sulfonilo lineal o ramificado, saturado o insaturado,
h) un tioalquilo o tioarilo de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
en el que dichos alquilo, alquenilo, alquinilo, y arilo en a)-h) estan no sustituidos o sustituidos independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
i) un cicloalquilo de C3-C8, en el que dicho cicloalquilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
j) un cicloalquenilo de C3-C8, en el que dicho cicloalquenilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
k) un arilo, en el que dicho arilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
l) un heteroarilo, en el que dicho heteroarilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
m) un heterocicloalquilo, en el que dicho heterocicloalquilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
n) hidroxilo,
o) ciano,
p) amino,
q) nitro,
r) halogeno,
s) CORb,
t) COORb,
u) CONRbRc,
v) NHCORb, y
w) NRbRc
o dos Ra, junto con los atomos a los que estan unidos, forman un heterocicloalquilo de cinco o seis miembros, un arilo, o anillo heteroaromatico;
en el que Rb y Rc son, cada uno independientemente, hidrogeno o un grupo seleccionado de entre halogeno, C(O)CH3, CF3, un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3-C8, un heterocicloalquilo, un arilo y un heteroarilo;
en los que dicho alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heterocicloalquilo, arilo o heteroarilo esta no sustituido o sustituido con uno o mas Rd, en el que Rd se selecciona independientemente en cada aparicion de entre el grupo que consiste en un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, un
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alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3-C8, heterocicloalquilo, un arilo, una dialquilamina, una monoalquilamina, y un heteroarilo;
o dos Rb, junto con los atomos a los que estan unidos, forman un anillo heterocicloalqullico de cinco o seis miembros;
R2 y R3
(i) se seleccionan cada uno independientemente de entre el grupo que consiste en un hidrogeno, un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3-C8, y un heterocicloalquilo; o
(ii) junto con el atomo de nitrogeno al que estan unidos, forman un anillo heterocicloalqullico o heteroaromatico de cinco, seis o siete miembros, en el que dicho anillo esta no sustituido; para uso como agente farmaceutico.
En lo siguiente se describen los aspectos de la presente invencion que incluyen compuestos de diversas formulas. Se deberla entender que la presente invencion se refiere a dichos compuestos para uso como agente farmaceutico. En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula I o una sal, o un solvato del mismo, en el que:
R1 se selecciona de entre el grupo que consiste en un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, o heteroalquilo, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3-C8, heterocicloalquilo, una amina, un arilo y un heteroarilo,
en el que dicho alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heterocicloalquilo, arilo, amina o heteroarilo esta no sustituido o sustituido con uno o mas Ra,
en el que Ra se selecciona independientemente en cada aparicion de entre el grupo que consiste en:
a) un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado,
b) un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado,
c) un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado,
d) un haloalquilo de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
e) un alcoxi o ariloxi de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
f) un haloalcoxi de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
g) un alquil C1-C6-sulfonilo lineal o ramificado, saturado o insaturado,
h) un tioalquilo o tioarilo de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
en el que dichos alquilo, alquenilo, alquinilo, y arilo en a)-h) estan no sustituidos o sustituidos independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
i) un cicloalquilo de C3-C8, en el que dicho cicloalquilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
j) un cicloalquenilo de C3-C8, en el que dicho cicloalquenilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
k) un arilo, en el que dicho arilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
l) un heteroarilo, en el que dicho heteroarilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
m) un heterocicloalquilo, en el que dicho heterocicloalquilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
n) hidroxilo,
o) ciano,
p) amino,
q) nitro,
r) halogeno,
s) CORb,
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t)
COORb,
u)
CONRbRc,
v)
NHCORb, y
w)
NRbRc
en el que Rb y Rc son, cada uno independientemente, hidrogeno o un grupo seleccionado de entre halogeno, C(O)CH3, un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3-C8, un heterocicloalquilo, un arilo y un heteroarilo;
en los que dicho alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heterocicloalquilo, arilo o heteroarilo esta no sustituido o sustituido con uno o mas Rd, en el que Rd se selecciona independientemente en cada aparicion de entre el grupo que consiste en un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3-C8, heterocicloalquilo, un arilo, y un heteroarilo;
R2 y R3
(i) se seleccionan cada uno independientemente de entre el grupo que consiste en un hidrogeno, un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, un cicloalquilo de C3-C6, un cicloalquenilo de C3-C6, y heterocicloalquilo; o
(ii) colectivamente, junto con el atomo de nitrogeno al que estan unidos, forman un anillo heterocicloalqullico o heteroaromatico de cinco a siete miembros.
En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II:
imagen3
o una sal farmaceuticamente aceptable, solvato, o polimorfo del mismo, en el que R2 y R3 son como se describen
a1 a2 a3 a4 a5
para la formula I o posteriormente en la presente; R , R , R , R , y R se seleccionan cada uno independientemente de entre el grupo que consiste en:
a) un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado,
b) un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado,
c) un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado,
d) un haloalquilo de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
e) un alcoxi o ariloxi de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
f) un haloalcoxi de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
g) un alquil C1-C6-sulfonilo lineal o ramificado, saturado o insaturado,
h) un tioalquilo o tioarilo de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
en el que dichos alquilo, alquenilo, alquinilo, y arilo en a)-h) estan no sustituidos o sustituidos independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
i) un cicloalquilo de C3-C8, en el que dicho cicloalquilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
j) un cicloalquenilo de C3-C8, en el que dicho cicloalquenilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
k) un arilo, en el que dicho arilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb, l)
l) un heteroarilo, en el que dicho heteroarilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada
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aparicion con uno o mas Rb,
m) un heterocicloalquilo, en el que dicho heterocicloalquilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
n) hidroxilo,
o) ciano,
p) amino,
q) nitro,
r) halogeno,
s) CORb,
t) COORb,
u) CONRbRc,
v) NHCORb,
w) NRbRc, y
x) hidrogeno,
o dos de Ra1, Ra2, Ra3, Ra4 y Ra5, junto con los atomos a los que estan unidos, forman un heterocicloalquilo de cinco o seis miembros, un arilo, o anillo heteroaromatico;
en los que Rb y Rc son, cada uno independientemente, hidrogeno o un grupo seleccionado de entre halogeno, CF3, C(O)CH3, un alquilo de C1-C@ lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C@ lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C@ lineal o ramificado, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3-C8, heterocicloalquilo, un arilo y un heteroarilo;
en los que dicho alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heterocicloalquilo, arilo o heteroarilo esta no sustituido o sustituido con uno o mas Rd, en el que Rd se selecciona independientemente en cada aparicion de entre el grupo que consiste en un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3-C8, heterocicloalquilo, un arilo, una dialquilamina, una monoalquilamina, y un heteroarilo;
dos Rb, con los atomos a los que estan unidos, forman un anillo heterocicloalqullico de cinco o seis miembros.
En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula III:
imagen4
o una sal farmaceuticamente aceptable, solvato, o polimorfo del mismo, en el que Ra3, Ra4, R2, y R3 son como se describen para la formula I y II en la presente.
En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula IV:
imagen5
o una sal farmaceuticamente aceptable, solvato, o polimorfo del mismo, en el que Ra3, R2 y R3 son como se describen para la formula I y II.
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En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula V:
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o una sal farmaceuticamente aceptable, solvato, o polimorfo del mismo, en el que Ra4, R2 y R3 son como se describen para la formula I y II.
En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula VI:
imagen7
a4 r->b 02 ,-,3
describen para la formula I y II.
En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula VII:
imagen8
o una sal farmaceuticamente aceptable, solvato, o polimorfo del mismo, en el que Ra3, Rb, R2 y R3 son como se describen para la formula I y II.
En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula VIII:
imagen9
describen para la formula I y II.
Rd
R2 y R3 son como se
En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula IX:
imagen10
o una sal farmaceuticamente aceptable, solvato, o polimorfo del mismo, en el que R2 y R3 son como se describen para la formula I y II; Ra6 y Ra7 se seleccionan cada uno independientemente de entre el grupo que consiste en:
a) un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado,
b) un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado,
c) un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado,
d) un haloalquilo de C1-C@ lineal o ramificado, saturado o insaturado,
e) un alcoxi o ariloxi de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
f) un haloalcoxi de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
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g) un alquil Ci-C6-sulfonilo lineal o ramificado, saturado o insaturado,
h) un tioalquilo o tioarilo de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
en los que dicho alquilo, alquenilo, alquinilo, y arilo en a)-h) estan no sustituidos o sustituidos independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
i) un cicloalquilo de C3-C8, en el que dicho cicloalquilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
j) un cicloalquenilo de C3-C8, en el que dicho cicloalquenilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
k) un arilo, en el que dicho arilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
l) un heteroarilo, en el que dicho heteroarilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
m) un heterocicloalquilo, en el que dicho heterocicloalquilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
n) hidroxilo,
o) ciano,
p) amino,
q) nitro,
r) halogeno,
s) CORb,
t) COORb,
u) CONRbRc,
v) NHCORb,
w) NRbRc, y
x) hidrogeno,
o Ra6 y Ra7, junto con los atomos a los que estan unidos, forman un heterocicloalquilo de cinco o seis miembros, un arilo, o anillo heteroaromatico;
en los que Rb y Rc son, cada uno independientemente, hidrogeno o un grupo seleccionado de entre halogeno, CF3, C(O)CH3, un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3-C8, heterocicloalquilo, un arilo y un heteroarilo;
en los que dicho alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heterocicloalquilo, arilo o heteroarilo esta no sustituido o sustituido con uno o mas Rd, en el que Rd se selecciona independientemente en cada aparicion de entre el grupo que consiste en un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3-C8, heterocicloalquilo, un arilo, una dialquilamina, una monoalquilamina, y un heteroarilo;
dos Rb, con los atomos a los que estan unidos, forman un anillo heterocicloalqullico de cinco o seis miembros.
En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula X:
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o una sal farmaceuticamente aceptable, solvato, o polimorfo del mismo, en el que Ra7, R2 y R3 son como se describen para la formula IX y I y posteriormente en la presente.
En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI:
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o una sal farmaceuticamente aceptable, solvato, o polimorfo del mismo, en el que R2 y R3 son como se describen para la formula I y posteriormente en la presente; Rb1, Rb2, Rb3, Rb4, y Rb5 se seleccionan cada uno independientemente de hidrogeno, halogeno, CF3, C(O)CH3, un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3- Ca, heterocicloalquilo, un arilo y un heteroarilo; en los que dicho alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heterocicloalquilo, arilo o heteroarilo esta no sustituido o sustituido con uno o mas Rd, en el que Rd se selecciona independientemente en cada aparicion de un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3-C8, heterocicloalquilo, un arilo, una dialquilamina, una monoalquilamina, y un heteroarilo; o dos de Rb1, Rb2, Rb3, Rb4, o Rb5, junto con los atomos a los que estan unidos, forman un anillo heterocicloalqullico de cinco o seis miembros.
En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XII:
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o una sal farmaceuticamente aceptable, solvato, o polimorfo del mismo, en el que Rb1, Rb2, Rb3, Rb4, Rb5, R2 y R3 son como se describen para la formula XI y I y posteriormente en la presente.
En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XIII:
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o una sal farmaceuticamente aceptable, solvato, o polimorfo del mismo, en el que Rb1, R2 y R3 son como se describen para la formula I y posteriormente en la presente.
En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XIV:
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o una sal farmaceuticamente aceptable, solvato, o polimorfo del mismo, en el que Rb2, R2 y R3 son como se describen para la formula XI y I y posteriormente en la presente.
En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XV:
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o una sal farmaceuticamente aceptable, solvato, o polimorfo del mismo, en el que Rb3, R2 y R3 son como se describen para la formula XI y I y posteriormente en la presente.
Aunque todos los compuestos de esta invention son utiles, se prefieren ciertas clases. Los siguientes parrafos citan tales clases preferidas:
1) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII, XIV o XV en el que R2 y R3 se seleccionan cada uno independientemente de alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, hidrogeno, y cicloalquilo de C3-C8, o R2 y R3 junto con el atomo de nitrogeno al que estan unidos forman un heterocicloalquilo de cinco, seis o siete miembros.
2) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII, XIV
o XV en el que R2 y R3, junto con el atomo de nitrogeno al que estan unidos, forman un anillo
heterocicloalqullico de cinco, seis o siete miembros.
3) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII, XIV
o XV en el que R2 y R3, junto con el atomo de nitrogeno al que estan unidos, forman un anillo
heterocicloalqullico de cinco o seis miembros.
4) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII, XIV
o XV en el que R2 y R3, junto con el atomo de nitrogeno al que estan unidos, forman un anillo
heterocicloalqullico de cinco miembros.
5) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII, XIV o XV en la que R2 y R3, junto con el atomo de nitrogeno al que estan unidos, forman un anillo de pirrolidina o piperidina.
6) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII, XIV o XV en el que R2 y R3, junto con el atomo de nitrogeno al que estan unidos, forman un anillo de pirrolidina.

a1 a2 a3 a4 a5
7) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, en el que R , R , R , R , y R se seleccionan cada uno independientemente de hidrogeno, NHCORb, alcoxi de C1-C6, halogeno, hidroxilo, alquilo de C1-C6, CF3, y NRbRc.

a1 a2 a3 a4 a5

8) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, en el que uno de R , R , R , R , y R es
NHCORb y los restantes Ra1, Ra2, Ra3, Ra4, y Ra5 son hidrogeno.

a1 a2 a3 a4 a5

9) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, en el que uno de R , R , R , R , y R es
halogeno y los restantes Ra1, Ra2, Ra3, Ra4, y Ra5 son hidrogeno.
10) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, en el que uno de Ra1, Ra2, Ra3, Ra4, y Ra5 es fluor o cloro y los restantes Ra1, Ra2, Ra3, Ra4, y Ra5 son hidrogeno.
11) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, en el que uno de Ra3, Ra2, Ra3, Ra4, y Ra5 es alcoxi de C1-C6 y los restantes Ra1, Ra2, Ra3, Ra4, y Ra5 son hidrogeno.

a1 a2 a3 a4 a5

12) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, en el que uno de R , R , R , R , y R es
metoxi o etoxi y los restantes Ra1, Ra2, Ra3, Ra4, y Ra5 son hidrogeno.

a1 a2 a3 a4 a5

13) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, en el que uno de R , R , R , R , y R es
CF3 y los restantes Ra1, Ra2, Ra3, Ra4, y Ra5 son hidrogeno.
a1 a2 a3 a4
14) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, en el que uno o dos de R , R , R , R , y Ra5 son alquilo de C1-C6 y los restantes Ra1, Ra2, Ra3, Ra4, y Ra5 son hidrogeno.
a1 a2 a3 a4
15) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, en el que uno o dos de R , R , R , R , y
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Ra5 son metilo y los restantes Ra1, Ra2, Ra3, Ra4, y Ra5 son hidrogeno.
16) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, en el que Ra1 y Ra3 no son hidrogeno.
17) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, en el que Ra5 no es hidrogeno.
18) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, en el que Ra4 no es hidrogeno.
19) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, en el que Ra3 no es hidrogeno.
20) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II o III, en el que Ra3 y Ra4 se seleccionan cada uno independientemente de hidrogeno, NHCORb, alcoxi de C1-C6, halogeno, hidroxilo, un alquilo de C1-C6 lineal, y NRbRc.
21) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II o III, en el que uno de Ra3 y Ra4 es NHCORb, y los restantes Ra3 o Ra4 se seleccionan de alcoxi de C1-C6, halogeno, hidroxilo, un alquilo de C1-C6 lineal, y
NRbRc.
22) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II o III, en el que uno de Ra3 y Ra4 es NHCORb y los restantes Ra3 o Ra4 se seleccionan de hidrogeno, alcoxi de C1-C6, y halogeno.
23) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, III, IV, VII, u VIII, en el que Ra3 se selecciona de hidrogeno, NHCORb, alcoxi de C1-C6, halogeno, hidroxilo, un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, y NRbRc.
24) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, III, IV, VII, u VIII, en el que Ra3 se selecciona de hidrogeno, NHCORb, metoxi, etoxi, fluor, cloro, hidroxilo, metilo, y dimetilamina.
25) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, III, IV, VII, u VIII, en el que Ra3 se selecciona de hidrogeno, metoxi, etoxi, fluor, cloro, hidroxilo, metilo, y dimetilamina.
26) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, III, IV, VII, u VIII, en el que Ra3 es hidrogeno.
27) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, III, V o VI, en el que Ra4 se selecciona de hidrogeno, NHCORb, alcoxi de C1-C6, halogeno, hidroxilo, un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, y NRbRc.
28) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, III, V, o VI, en el que Ra4 se selecciona de hidrogeno, NHCORb, metoxi, metilo, y cloro.
29) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, III, V, o VI, en el que Ra4 se selecciona de hidrogeno, metoxi, metilo, y cloro.
30) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, III, V, o VI, en el que Ra4 es hidrogeno.
31) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, III, V, o VI, en el que Rb se selecciona de un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, cicloalquilo de C3-C8 no sustituido, arilo no sustituido y heterocicloalquilo no sustituido, en el que dicho alquilo de C1-C6 esta no sustituido o sustituido con uno o mas Rd.
32) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, III, IV, V, VI, o VII, en el que Rb se selecciona de -CH2Rd, un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado no sustituido, heterocicloalquilo no sustituido, y cicloalquilo de C3-C8 no sustituido.
33) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, III, IV, V, VI, o VII, en el que Rb es metilo.
34) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula VI, VII, VIII, IX, X, o XI, en el que Rb es -CH2Rd.
35) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, III, IV, V, VI o VII, en el que Rb es ciclopropilo o
imagen17
36) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, III, IV, V, VI, VII, u VIII, en el que Rd se selecciona de heterocicloalquilo, dialquilamina, monoalquilamina, y cicloalquilo de C3-C8.
37) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula II, III, IV, V, VI, VII, u VIII, en el que Rd se
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selecciona de metilpiperazina, piperidina, dimetilamina, morfolina, dimetilamina, y ciclopropilo.
38) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula I, II, III, IV, V, VI, VII u VIII, en el que Rd no es morfolina o ciclopropilo.
39) En un aspecto, la invencion incluye un metilpiperazina.
40) En un aspecto, la invencion incluye un piperidina.
41) En un aspecto, la invencion incluye un dimetilamina.
42) En un aspecto, la invencion incluye un morfolina.
43) En un aspecto, la invencion incluye un cicloalquilo de C3-C8.
44) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, o XII, en el que Rd es ciclopropilo.
45) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula I, II, III, IV, V, VI, VII u VIII, con la condicion de que R2 y R3, junto con el atomo de nitrogeno al que estan unidos, no formen un anillo de pirrolidina.
46) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula IX, en el que Ra6 y Ra7 se seleccionan cada uno independientemente de hidrogeno, un alquilo de C1-C6 lineal, un arilo, cicloalquilo de C3-C8, v heterocicloalquilo, en el que dicho arilo o alquilo esta no sustituido o sustituido con uno o mas Rb, o Ra6 y Ra7, junto con los atomos a los que estan unidos, forman un heterocicloalquilo de cinco o seis miembros.
47) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula IX, en el que Ra6 y Ra7 se seleccionan cada uno independientemente de hidrogeno, metilo, fenilo, ciclopropilo, ciclopentilo, y ciclohexilo, en el que dicho metilo o fenilo esta no sustituido o sustituido con uno o mas Rb o, tomados juntos, Ra6 y Ra7 forman una metilpiperazina o una morfolina.
48) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula IX o X, en el que Ra7 se selecciona de fenilo, ciclopropilo, ciclopentilo, y ciclohexilo, en el que dicho metilo o fenilo esta no sustituido o sustituido con uno o mas Rb.
49) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula IX o X, en el que Ra7 se selecciona de fenilo no sustituido o fenilo sustituido con uno o mas Rb.
50) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula IX o XI, en el que Ra6 es metilo.
51) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI o XII, en el que Rb1, Rb2, Rb3, Rb4, y Rb5 se seleccionan cada uno independientemente de hidrogeno, halogeno, C(O)CH3, un alquilo de C1-C6 lineal, CF3, y alcoxi de C1-C6, o Rb3 y Rb4, tomados juntos, forman un anillo heterocicloalqullico de cinco o seis miembros.
52) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI o XII, en el que Rb1, Rb2, Rb3, Rb4, y Rb5 se seleccionan cada uno independientemente de hidrogeno, fluor, C(O)CH3, morfolina no sustituida, metilo, CF3, y metoxi, o Rb3 y Rb4, tomados juntos, forman un anillo de dioxano.
53) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI o XII, en el que Rb1, Rb2, Rb3, Rb4, y Rb5 se seleccionan cada uno independientemente de hidrogeno, fluor, C(O)CH3, y morfolina no sustituida.
54) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI o XII, en el que Rb2 y Rb4 son hidrogeno.
55) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI o XII, en el que Rb1, Rb3, y Rb5 son fluor.
56) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI o XII, en el que Rb1, Rb2, Rb3, Rb4, y Rb5 se seleccionan cada uno independientemente de hidrogeno, halogeno, C(O)CH3, heterocicloalquilo, con la condicion de que cuando uno de Rb1, Rb2, Rb3, Rb4, y Rb5 sea fluor, los restantes Rb1, Rb2, Rb3, Rb4, y Rb5 sean hidrogeno.
57) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI, XII, o XIII, en el que Rb1 se selecciona de

compuesto de formula I, II, III, IV, V, VI, VII u VIII, en el que Rd es

compuesto de formula I, II, III, IV, V, VI, VII u VIII, en el que Rd es

compuesto de formula I, II, III, IV, V, VI, VII u VIII, en el que Rd es

compuesto de formula I, II, III, IV, V, VI, VII u VIII, en el que Rd es

compuesto de formula I, II, III, IV, V, VI, VII u VIII, en el que Rd es
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hidrogeno, halogeno, C(O)CH3, heterocicloalquilo, un alquilo de C1-C6 lineal, CF3, alcoxi de C1-C6, y
cicloalquilo de C3-C8.
58) En un aspecto, la invention incluye un compuesto de formula XI, XII, o XIII, en el que Rb1 se selecciona de hidrogeno, fluor, C(O)CH3, morfolina no sustituida, metilo, CF3, y metoxi, y ciclopropilo.
59) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI, XII, o XIII, en el que Rb1 se selecciona de hidrogeno, fluor, C(O)CH3, y morfolina no sustituida.
60) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI, XII, o XIII, en el que Rb1 es fluor.
61) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI, XII, o XIII, en el que Rb1 es metoxi.
62) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI, XII, o XIII, en el que Rb1 es CF3.
63) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI, XII, o XIII, en el que Rb2 se selecciona de
hidrogeno, halogeno, C(O)CH3, heterocicloalquilo, un alquilo de C1-C6 lineal, CF3, alcoxi de C1-C6, y
cicloalquilo de C3-C8.
64) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI, XII, o XIII, en el que Rb2 se selecciona de hidrogeno, fluor, C(O)CH3, morfolina no sustituida, metilo, CF3, y metoxi, y ciclopropilo.
65) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI, XII, o XIII, en el que Rb2 se selecciona de hidrogeno, fluor, C(O)CH3, y morfolina no sustituida.
66) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI, XII, o XIII, en el que Rb2 es cloro o fluor.
67) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI, XII, o XIII, en el que Rb2 es metoxi.
68) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI, XII, o XV, en el que Rb3 se selecciona de hidrogeno, halogeno, C(O)CH3, heterocicloalquilo, un alquilo de C1-C6 lineal, CF3, alcoxi de C1-C6, y cicloalquilo de C3-C8.
69) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI, XII, o XV, en el que Rb3 se selecciona de hidrogeno, fluor, C(O)CH3, morfolina no sustituida, metilo, CF3, y metoxi, y ciclopropilo.
70) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI, XII, o XV, en el que Rb3 se selecciona de hidrogeno, fluor, C(O)CH3, y morfolina no sustituida.
71) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI, XIII, o XV, en el que Rb3 se selecciona de fluor, C(O)CH3, y metoxi, morfolina no sustituida, metoxi, y metilo.
72) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI, XIII, o XV, en el que R3b es fluor.
73) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula XI, XIII, o XV, en el que R3b es metoxi.
74) En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de formula IX, X, XI, XII, XIII, XIV, o XV, en el que R2 y R3, junto con el atomo de nitrogeno al que estan unidos, no forman un anillo de pirrolidina.
Se entendera que las clases anteriores se pueden combinar para formar clases preferidas adicionales, como por ejemplo la combination de selecciones preferidas para dos o mas sustituyentes.
En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de la Tabla A. En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de la Tabla B. En un aspecto, la invencion incluye un compuesto de la Tabla C.
Tabla A
Nombre del compuesto
Estructura
16A
0 U H
17A
0 -
Nombre del compuesto
Estructura
13A
o H rYNYNvO ^ FXJ I/^nh
15A
o
14A
o o
18A
o 11
19A
H o
20A
cX ^
21A
anJUyn^-/’0 h a_^V-NH
22A
°-vl O
23A
j0i 1 ✓ H sll^_JVNH ^
24A
25A
"'N0-^A XX^ 5^/
26A
^N. 0 H s^7^-nh
27A
o0jl g, \ P
28A
O^J H U
29A
O-^, O \ 1.n^n1JI N /-TNH= h ^NH
30A
O'''''] o f^>, % ~ -J^N/-AC H \,NH
Nombre del compuesto
Estructura
31A
1 ^ O NV 3
32A
0^ 0 1 0^nJUvnvvVlO H S^/^NH
33A
[-'"N 0 'tt h 's^> VNH
34A
\-N /=-fO H 'S^J> V-NH
35A
° Vk i. - An ^NXJL^Nv/==f 10 H \,NH
36A
i ° n n^3) H s~y^>'NH
37A
vri a ^
38A
\«y, 0 0 XX^N -AO NH
Tabla B
Nombre del compuesto
Estructura
7A
Ox'si O 'vi h s_/^-NH
12A
0 0) X/A-nh
8A
0 pf X/^nh
5A
0 0^K\W~'O s-ZA-nh
10A
9A
'^'°YA A iLACnh
Nombre del compuesto
Estructura
3A
2A
4A
X T>^Vnh
11A
39A
0 |i j
40A
0 /°YvV.n
41A
0 rr x/XX s-y
42A
0 V XJ^A-nh
43A
0 Ut0 IJ^-ox 1
44A
4p H L ^ r^XNyX=' Nn—^ IJ \J^m
45A
0 /VyvWl,0 <J TJ"VNH
46A
0 V_? FXJ
47A
X/A^h
48A
o r^VNv-/^N4? a7 iix«H F
49A
""n'-'N X ^ AX\ /^fO s^y^NH
Nombre del compuesto
Estructura
50A
0 CJT tj^vnh
51A
0 H U U^NH
52A
0 H O^ss^N N/Ssf N^J L I J LtVnh
53A
54A
HO o ^L/^Cnh
55A
n 0 N ij^3h
56A
N <3^- N/=^''1 TJ^m
57A
58A
0 ^TJ^nh
59A
60A
61A
c|sa O Cnh
62A
C|-^!v^x^Ns^/==rf U^NH
63A
64A
Nombre del compuesto
Estructura
6A
0 \J B
Tabla C
1B
O {rO^ j o—' X) Mex b 2B 0 H /^N‘N^Y'Nv o Me
3B
f^N \ . u Xj-vnH 4B 0 H II N. A /\ _ y CO N \ JL > Me^^S
5B
0 n;1 \^s Me 6B 9 H c^A j6
7B
y\ f A 0^0 HAs r CH 2 1 8B II /"v G" cG> N v) \\ / r
9B
GV 'I)1 h2 n . fi r\ \^n_lc ^ wvc_Nv/,) s—^ ^NH 10B fi1 h2__h r\ G/N^c -f UVc-nJ s-* 'Lnh HCI
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15B
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18B
19B
H o=pO a A A Me 20B 0 H oA F ch2 He
21B
Si H OF NyS V HN o O—“ 22B ^ A?s Oj °~o i,A> Y-* CK * X" 3 M 'K Me
23B
/v jfA C “O A A / '~X> 24B 0 CnAh Kf ^s NMe F HN MeNVA^Me Me
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40B
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\S
II
H
OH:
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w
CH-
NH
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Et
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O'
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C=0
NH
Me
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En un aspecto, la invention incluye un solvato de un compuesto de la invention. En un aspecto, la invention incluye un solvato, en el que el solvato es un hidrato de un compuesto de la invencion. En un aspecto, la invencion incluye una sal de adicion de acidos de un compuesto de la invencion, por ejemplo una sal de hidrocloruro. En un aspecto, la invencion incluye una sal farmaceuticamente aceptable de un compuesto de la invencion. En un aspecto, la invencion incluye una composition farmaceutica que comprende un compuesto de la invencion y por lo menos un excipiente farmaceuticamente aceptable.
En un aspecto, la invencion incluye cualquiera de los compuestos listados en la Tabla C o una sal o solvato del mismo, en el que el compuesto inhibe una tirosina cinasa en por lo menos alrededor de 10%, en por lo menos alrededor de 20%, en por lo menos alrededor de 25%, en por lo menos 30%, en por lo menos alrededor de 40%, en por lo menos alrededor de 50%, en por lo menos alrededor de 60%, en por lo menos alrededor de 70%, en por lo menos alrededor de 75%, en por lo menos alrededor de 80%, en por lo menos alrededor de 90%, o en alrededor de 95% o mas.
En un aspecto, un compuesto de la invencion inhibe una tirosina cinasa en por lo menos alrededor de 10%, en por lo menos alrededor de 20%, en por lo menos alrededor de 25%, en por lo menos alrededor de 30%, en por lo menos alrededor de 40%, en por lo menos alrededor de 50%, en por lo menos alrededor de 60%, en por lo menos alrededor de 70%, en por lo menos alrededor de 75%, en por lo menos alrededor de 80%, en por lo menos alrededor de 90%, o en alrededor de 95% o mas.
En un aspecto, la invencion incluye cualquiera de los compuestos listados en la Tabla C o una sal o solvato del mismo, en el que el compuesto inhibe JAK en por lo menos alrededor de 10%, en por lo menos alrededor de 20%, en por lo menos alrededor de 25%, en por lo menos alrededor de 30%, en por lo menos alrededor de 40%, en por lo menos alrededor de 50%, en por lo menos alrededor de 60%, en por lo menos alrededor de 70%, en por lo menos alrededor de 75%, en por lo menos alrededor de 80%, en por lo menos alrededor de 90%, o en alrededor de 95% o mas. En un aspecto, JAK es JAK3.
En un aspecto, un compuesto de la invencion inhibe una JAK en por lo menos alrededor de 10%, en por lo menos alrededor de 20%, en por lo menos 25%, en por lo menos alrededor de 30%, en por lo menos alrededor de 40%, en por lo menos alrededor de 50%, en por lo menos alrededor de 60%, en por lo menos alrededor de 70%, en por lo menos alrededor de 75%, en por lo menos alrededor de 80%, en por lo menos alrededor de 90%, o en alrededor de 95% o mas. En un aspecto, JAK es JAK3.
En un aspecto, la invencion incluye cualquiera de los compuestos listados en la Tabla C o una sal o solvato del mismo, en el que el compuesto inhibe SYK en por lo menos alrededor de 10%, en por lo menos alrededor de 20%, en por lo menos alrededor de 25%, en por lo menos alrededor de 30%, en por lo menos alrededor de 40%, en por lo menos alrededor de 50%, en por lo menos alrededor de 60%, en por lo menos alrededor de 70%, en por lo menos alrededor de 75%, en por lo menos alrededor de 80%, en por lo menos alrededor de 90%, o en alrededor de 95% o mas.
En un aspecto, un compuesto de la invencion inhibe una SYK en por lo menos alrededor de 10%, en por lo menos alrededor de 20%, en por lo menos alrededor de 25%, en por lo menos alrededor de 30%, en por lo menos alrededor de 40%, en por lo menos alrededor de 50%, en por lo menos alrededor de 60%, en por lo menos alrededor de 70%, en por lo menos alrededor de 75%, en por lo menos alrededor de 80%, en por lo menos alrededor de 90%, o en alrededor de 95% o mas.
En un aspecto, la invencion incluye cualquiera de los compuestos listados en la Tabla C o una sal o solvato del
mismo, en el que el compuesto inhibe BTK en por lo menos alrededor de 10%, en por lo menos alrededor de 20%, en por lo menos alrededor de 25%, en por lo menos alrededor de 30%, en por lo menos alrededor de 40%, en por lo menos alrededor de 50%, en por lo menos alrededor de 60%, en por lo menos alrededor de 70%, en por lo menos alrededor de 75%, en por lo menos alrededor de 80%, en por lo menos alrededor de 90%, o en alrededor de 95% o 5 mas.
En un aspecto, un compuesto de la invencion inhibe BTK en por lo menos alrededor de 10%, en por lo menos alrededor de 20%, en por lo menos alrededor de 25%, en por lo menos alrededor de 30%, en por lo menos alrededor de 40%, en por lo menos alrededor de 50%, en por lo menos alrededor de 60%, en por lo menos alrededor de 70%, 10 en por lo menos alrededor de 75%, en por lo menos alrededor de 80%, en por lo menos alrededor de 90%, o en alrededor de 95% o mas.
Los compuestos de la invencion se sintetizan usando metodos conocidos por alguien experto en la tecnica.
15 Por ejemplo, para compuestos de la formula II, el material de partida 4-acetil-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo puede prepararse a partir del compuesto comercialmente disponible 1H-pirrol-2-carboxilato de etilo de acuerdo con el procedimiento publicado (vease, por ejemplo, Journal of the American Chemical Society, 129(11), 3078-3079; 2007; Chemical & Pharmaceutical Bulletin, 44(1), 48-54; 1996; Heterocycles, 27(8), 1855-60; 1988) usando cloruro de acilo como agente acilante. Como alternativa, se puede preparar partiendo de acido 4-acetil-1H-pirrol-2-carboxllico, 20 tambien un compuesto comercialmente disponible (Esquema 1).
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Esquema 1 25
De manera similar, el analogo de imidazol puede prepararse partiendo de 1H-imidazol-2-carboxilato de etilo comercialmente disponible (Esquema 2).
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30 Esquema 2
La siguiente etapa es proteger el nitrogeno de pirrol o imidazol y luego bromacion con acetilo (Esquema 3) de acuerdo con procedimientos publicados (vease, por ejemplo, Heterocycles, 55(8), 1475-1486; 2001; Journal of Medicinal Chemistry, 33(2), 543-52; 1990; Sol. de Pat. Eur. 259085, 09 de marzo de 1988).
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X = C o N
40 PG = grupo protector Esquema 3
Como alternativa, los materiales de partida anteriores pueden sufrir una reaccion de acilacion con bromuro de 2-
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bromoacetilo para dar directamente el producto deseado (vease, por ejemplo, esquema 4).
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Esquema 4
En la siguiente etapa, el intermedio 4-(2-bromoacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo, o su analogo de imidazol, sufren una reaccion de condensacion con derivados de benzotiazol 3-sustituidos para dar el compuesto de tiazol [2] (Esquema 5).
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Esquema 5
Los derivados de tioamida usados en el Esquema 5 pueden prepararse usando conversion asistida por BF3-eterato de nitrilos en tioamidas con reactivo de Lawesson (vease, por ejemplo, Synthesis, (24), 4012-4018; 2008;Farmaco, 54(8), 533-541; 1999) (Esquema 6).
Esquema 6
Como alternativa, la condensacion del intermedio [1] con derivados de benzamida 3-sustituidos dara el compuesto de oxazol [3] (Esquema 7) (Letters in Drug Design & Discovery, 6(1), 21-28; 2009; Journal of Heterocyclic Chemistry, 18(5), 885-8; 1981).
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Esquema 7
Con referencia al Esquema 8, el intermedio [3] obtenido sufre reacciones de amidacion sobre ambos lados, una en el resto de ester etllico y la segunda en la amina obtenida despues de la reduccion del grupo nitro. Cuando W es hidroxilo, puede sufrir una reaccion de alquilacion.
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Esquema 8
Sal cristalina de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidi n-1 -carbonil-1 H-pi rrol-3-il)tiazol-2-il)fenilaceta mida
La presente invencion incluye sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-
2- il)fenil)acetamida cristalina (Forma I) caracterizada por patron de difraccion de rayos X, metodos de fabricacion, composiciones farmaceuticas que comprenden este polimorfo, y metodos para tratar enfermedades y trastornos que estan modulados por una ruta de transduccion de senales. Por ejemplo, la sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3- (4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida, Forma I, es util en el tratamiento de trastornos proliferativos celulares, incluyendo canceres; trastornos inflamatorios; trastornos inmunitarios, incluyendo trastornos autoinmunitarios, disfuncion del sistema inmunitario y rechazo de transplantes; y enfermedad de ojo seco.
La sal de hidrocloruro puede prepararse bajo una variedad de condiciones diferentes. Sin embargo, de acuerdo con la presente invencion, el cierto polimorfo sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pi rrolidin-1 -carbonil)-1 H-pirrol-
3- il)tiazol-2-il)fenil)acetamida, Forma I, se prepara como sigue: la base libre 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1- carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida se disuelve en tolueno (por calentamiento) y se anade gota a gota HCl en EtOH. Cuando se completa la adicion, el precipitado se recoge por filtracion, se lava y se seca a vaclo para dar sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida cristalina (Forma I).
Como alternativa, 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (compuesto 8) puede recristalizarse en etanol o metanol para dar sal de hidrocloruro de N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1 H-pi rrol-3- il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I).
La sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma
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I) tiene caracterlsticas combinadas con un caracter inerte hacia excipientes comunes usados en formulaciones farmaceuticas que la hacen altamente adecuada para uso en formulaciones farmaceuticas. Ademas, la sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) exhibe solubilidad superior.
En un aspecto, la invencion proporciona un polimorfo sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1- carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) representado por la formula:
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en el que dicho polimorfo se caracteriza por lo menos por uno de los siguientes: un patron de difraccion de rayos X caracterizado por un patron de picos de difraccion de rayos X sustancialmente similar a aquel mostrado en la figura 8 o un Termograma de calorimetrla de Barrido Diferencial (DSC) que tiene una traza de descomposicion sustancialmente similar a aquel mostrado en la figura 10.
En un aspecto, la invencion proporciona un polimorfo sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1- carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) representado por la formula:
imagen79
en el que dicho polimorfo se caracteriza por lo menos por uno de los siguientes: un patron de difraccion de rayos X caracterizado por un patron de picos de difraccion de rayos X sustancialmente similar al mostrado en la figura 8.
En un aspecto, la invencion proporciona el polimorfo sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1- carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) caracterizado por un patron de difraccion de rayos X que incluye picos caracterlsticos en alrededor de 26,4, 24,1, 22,8, 20,0, 18,9, y 9,8 grados 20. En un aspecto, el polimorfo se caracteriza por un patron de difraccion de rayos X que incluye picos caracterlsticos en alrededor de 22,8, 21,4, 20,0, 19,6, 18,9, 18,0, 16,4, 16,0, 13,7, y 9,8 grados 20. En un aspecto, el polimorfo se caracteriza por un patron de rayos X que carece de picos en alrededor de 4,3, 19,2 y 22,1 grados 20.
En un aspecto, la invencion proporciona un polimorfo, en el que dicha difraccion de rayos X se mide con una fuente de rayos X de cobre. En un aspecto, dicho patron de difraccion de rayos X se mide por un Bruker D8 Advance.
En un aspecto, la invencion proporciona un polimorfo, en el que dicho termograma de DSC se mide por un DSC Q2000 V24.4 Build 116.
En un aspecto, la invencion proporciona un polimorfo, en el que la sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5- (pirrolidin-1 -carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) es obtenible por un procedimiento que comprende las etapas de: 1) calentar 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2- il)fenil)acetamida en tolueno, y 2) tratar dicha 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2- il)fenil)acetamida en tolueno con acido clorhldrico en etanol. En un aspecto, dicho tratamiento es con una disolucion 1,4 M de HCl en etanol.
En un aspecto, la invencion proporciona un polimorfo, en el que la sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5- (pirrolidin-1 -carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) es obtenible por recristalizacion de la sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida a partir de un disolvente organico. En un aspecto, el disolvente organico se selecciona de etanol y metanol. En un aspecto, el disolvente organico es etanol. En un aspecto, el disolvente organico es metanol.
En un aspecto, la invencion proporciona un ingrediente activo que consiste en sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N- (3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) representada por la formula:
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en el que dicho ingrediente activo se caracteriza por lo menos por uno de los siguientes: un patron de difraccion de rayos X caracterizado por un patron de picos de difraccion de rayos X sustancialmente similar al mostrado en la figura 8 o un termograma de Calorimetrla de Barrido Diferencial (DSC) que tiene una traza de descomposicion sustancialmente similar a la mostrada en la figura 10.
En un aspecto, la invention proporciona un ingrediente activo que consiste en sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N- (3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) representada por la formula:
O ^ \
HCI H *VNH
imagen81
en el que dicho ingrediente activo se caracteriza por lo menos por uno de los siguientes: un patron de difraccion de rayos X caracterizado por un patron de picos de difraccion de rayos X sustancialmente similar al mostrado en la figura 8.
En un aspecto, la invencion proporciona un ingrediente activo caracterizado por un patron de difraccion de rayos X que incluye picos caracterlsticos en alrededor de 26,4, 24,1, 22,8, 20,0, 18,9 y 9,8 grados 20. En un aspecto, el ingrediente activo se caracteriza por un patron de difraccion de rayos X que incluye picos caracterlsticos en alrededor de 26,4, 24,1, 22,8, 21,4, 20,0, 19,6, 18,9, 18,0, 16,4, 16,0, 13,7 y 9,8 grados 20. En un aspecto, el ingrediente activo se caracteriza por un patron de difraccion de rayos X que carece de picos en alrededor de 4,3, 19,2 y 22,1 grados 20.
En un aspecto, la invencion proporciona un ingrediente activo, en el que dicha difraccion de rayos X se mide con una fuente de rayos X de cobre. En un aspecto, dicho patron de difraccion de rayos X se mide por un Bruker D8 Advance.
En un aspecto, la invencion proporciona un ingrediente activo, en el que dicho termograma de DSC se mide por un DSC Q2000 V24.4 Build 116.
En un aspecto, la invencion proporciona un ingrediente activo, en el que la sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3- (4-(5-(pirrolidin-1 -carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) es obtenible por un procedimiento que comprende las etapas de: 1) calentar 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2- il)fenil)acetamida en tolueno, y 2) tratar dicha 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2- il)fenil)acetamida en tolueno con acido clorhldrico en etanol. En un aspecto, dicho tratamiento es con una disolucion 1,4 M de HCl en etanol.
En un aspecto, la invencion proporciona un ingrediente activo, en el que la sal de hidrocloruro de N-(3-(4-(5- (pirrolidin-1 -carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) es obtenible por recristalizacion de la sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida a partir de un disolvente organico. En un aspecto, el disolvente organico se selecciona de etanol y metanol. En un aspecto, el disolvente organico es etanol. En un aspecto, el disolvente organico es metanol.
En un aspecto, la invencion proporciona una composition farmaceutica que comprende un ingrediente activo que consiste en sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) representada por la formula:
QJCCuJ-O
HCI H V-NH
en el que dicho ingrediente activo se caracteriza por lo menos por uno de los siguientes: un patron de difraccion de rayos X caracterizado por un patron de picos de difraccion de rayos X sustancialmente similar al mostrado en la figura 8 o un termograma de Calorimetrla de Barrido Diferencial (DSC) que tiene una traza de descomposicion sustancialmente similar a la mostrada en la figura 10, y un portador farmaceuticamente aceptable.
En un aspecto, la invencion proporciona una composicion farmaceutica que comprende un ingrediente activo que consiste en sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) representada por la formula:
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en el que dicho ingrediente activo se caracteriza por lo menos por uno de los siguientes: un patron de difraccion de rayos X caracterizado por un patron de picos de difraccion de rayos X sustancialmente similar al mostrado en la figura 8, y un portador farmaceuticamente aceptable.
En un aspecto, la invencion proporciona una composition farmaceutica que comprende un ingrediente activo que comprende sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) representada por la formula:
imagen83
en el que dicho ingrediente activo se caracteriza por lo menos por uno de los siguientes: un patron de difraccion de rayos X caracterizado por un patron de picos de difraccion de rayos X sustancialmente similar al mostrado en la figura 8 o un termograma de Calorimetrla de Barrido Diferencial (DSC) que tiene una traza de descomposicion sustancialmente similar a la mostrada en la figura 10, y un portador farmaceuticamente aceptable.
En un aspecto, la invencion proporciona una composicion farmaceutica que comprende un ingrediente activo que comprende sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pi rrolidin-1-carbonil)-1 H-pi rrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) representada por la formula:
imagen84
en el que dicho ingrediente activo se caracteriza por lo menos por uno de los siguientes: un patron de difraccion de rayos X caracterizado por un patron de picos de difraccion de rayos X sustancialmente similar al mostrado en la figura 8, y un portador farmaceuticamente aceptable.
En un aspecto, la invencion proporciona una composicion farmaceutica, en la que el ingrediente activo se caracteriza por un patron de difraccion de rayos X que incluye picos caracterlsticos en alrededor de 26,4, 24,1, 22,8, 20,0, 18,9 y 9.8 grados 20.
En un aspecto, la invencion proporciona una composicion farmaceutica, en la que el ingrediente activo se caracteriza por un patron de difraccion de rayos X que incluye picos caracterlsticos en alrededor de 26,4, 24,1, 22,8, 21,4, 20,0, 19,6, 18,9, 18,0, 16,4, 16,0, 13,7, y 9,8 grados 20. En un aspecto, el ingrediente activo se caracteriza por un patron de difraccion de rayos X que carece de picos en alrededor de 4,3, 19,2 y 22,1 grados 20.
En un aspecto, la invencion proporciona una composicion farmaceutica, en la que dicha difraccion de rayos X del ingrediente activo se mide con una fuente de rayos X de cobre. En un aspecto, dicho patron de difraccion de rayos X se mide por un Bruker D8 Advance.
En un aspecto, la invencion proporciona una composicion farmaceutica, en la que dicho termograma de DSC del ingrediente activo se mide por un DSC Q2000 V24.4 Build 116.
En un aspecto, una composicion farmaceutica, en la que la sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1- carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) es obtenible por un procedimiento que comprende las etapas de: 1) calentar 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida en tolueno, y 2) tratar dicha 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida en tolueno con acido clorhldrico en etanol. En un aspecto, dicho tratamiento es con una disolucion 1,4 M de HCl en etanol.
En un aspecto, la invencion proporciona una composicion farmaceutica, en la que la sal de hidrocloruro de 2- morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) es obtenible por recristalizacion de la sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2- il)fenil)acetamida a partir de un disolvente organico. En un aspecto, el disolvente organico se selecciona de etanol y
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metanol. En un aspecto, el disolvente organico es etanol. En un aspecto, el disolvente organico es metanol.
Base libre de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida
En un aspecto, la invencion proporciona un polimorfo de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1 -carbonil)-1 H-pi rrol-3- il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) representado por la formula:
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en el que dicho polimorfo se caracteriza por lo menos por uno de los siguientes: un patron de difraccion de rayos X caracterizado por un patron de picos de difraccion de rayos X sustancialmente similar al mostrado en la figura 15 o un termograma de calorimetrla de Barrido Diferencial (DSC) que tiene una traza de descomposicion sustancialmente similar a la mostrada en la figura 18.
En un aspecto, la invencion proporciona un polimorfo de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1 -carbonil)-1 H-pi rrol-3- il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) representado por la formula:
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en el que dicho polimorfo se caracteriza por lo menos por uno de los siguientes: un patron de difraccion de rayos X caracterizado por un patron de picos de difraccion de rayos X sustancialmente similar al mostrado en la figura 15.
En un aspecto, la invencion proporciona un polimorfo de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1 -carbonil)-1 H-pi rrol-3- il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) caracterizado por un patron de difraccion de rayos X que incluye picos caracterlsticos en alrededor de 21,3, 22,7 y 24,5 grados 20. En un aspecto, el polimorfo se caracteriza por un patron de difraccion de rayos X que incluye picos caracterlsticos en alrededor de 18,4, 21,3, 22,7 y 24,5 grados 20. En un aspecto, el polimorfo es un polimorfo de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2- il)fenil)acetamida (Forma I) caracterizado por un patron de difraccion de rayos X que incluye picos caracterlsticos en alrededor de 15,4, 18,4, 19,5, 21,3, 22,7, 24,5, 25,2 y 28,0 grados 20.
En un aspecto, la invencion proporciona un polimorfo, en el que la difraccion de rayos X se mide con una fuente de rayos X de cobre. En un aspecto, el patron de difraccion de rayos X se mide por un Bruker D8 Advance.
En un aspecto, la invencion proporciona un polimorfo en el que el termograma de DSC se mide por un DSC Q2000 V24.4 build 116.
En un aspecto, la invencion proporciona un polimorfo de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1 -carbonil)-1 H-pi rrol-3- il)ti azol-2-il)fenil)aceta mida, en el que la 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-
il)fenil)acetamida (Forma I) es obtenible por recristalizacion de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pi rrolidin-1-carbonil)-1 H-pirrol- 3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida a partir de un disolvente organico. En un aspecto, el disolvente organico es etanol.
En un aspecto, la invencion proporciona un ingrediente activo que consiste en 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1- carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) representada por la formula:
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en el que dicho ingrediente activo se caracteriza por lo menos por uno de los siguientes: un patron de difraccion de rayos X caracterizado por un patron de picos de difraccion de rayos X sustancialmente similar al mostrado en la figura 15 o un termograma de calorimetrla de barrido diferencial (DSC) que tiene una traza de descomposicion sustancialmente similar a la mostrada en la figura 18.
En un aspecto, la invencion proporciona un ingrediente activo que consiste en 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1- carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) representada por la formula:
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en el que dicho ingrediente activo se caracteriza por lo menos por uno de los siguientes: un patron de difraccion de rayos X caracterizado por un patron de picos de difraccion de rayos X sustancialmente similar al mostrado en la figura 15.
En un aspecto, la invencion proporciona un ingrediente activo de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H- pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) caracterizado por un patron de difraccion de rayos X que incluye picos caracterlsticos en alrededor de 21,3, 22,7 y 24,5 grados 20. En un aspecto, el ingrediente activo se caracteriza por un patron de difraccion de rayos X que incluye picos caracterlsticos en alrededor de 18,4, 21,3, 22,7 y 24,5 grados 20. En un aspecto, el ingrediente activo se caracteriza por una difraccion de rayos X que incluye picos caracterlsticos en alrededor de 15,4, 18,4, 19,5, 21,3, 22,7, 24,5, 25,2 y 28,0 grados 20.
En un aspecto, la invencion proporciona un ingrediente activo, en el que la difraccion de rayos X de 2-morfolino-N-(3- (4-(5-(pirrolidin-1 -carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) se mide con una fuente de rayos X de cobre. En un aspecto, dicho patron de difraccion de rayos X se mide por un Bruker D8 Advance.
En un aspecto, la invencion proporciona un ingrediente activo, en el que el termograma de DSC de 2-morfolino-N-(3- (4-(5-(pirrolidin-1 -carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) se mide por un DSC Q2000 V24.4 Build 116.
En un aspecto, la invencion proporciona un ingrediente activo, 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidi n-1-carbonil)-1 H-pirrol- 3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) que es obtenible por recristalizacion de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1- carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida a partir de un disolvente organico. En un aspecto, el disolvente organico es etanol.
En un aspecto, la invencion proporciona una composition farmaceutica que comprende un ingrediente activo que consiste en 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) representada por la formula:
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en la que dicho ingrediente activo se caracteriza por lo menos por uno de los siguientes: un patron de difraccion de rayos X caracterizado por un patron de picos de difraccion de rayos X sustancialmente similar al mostrado en la figura 15 o un termograma de Calorimetrla de Barrido Diferencial (DSC) que tiene una traza de descomposicion sustancialmente similar a la mostrada en la figura 19, y un portador farmaceuticamente aceptable.
En un aspecto, la invencion proporciona una composicion farmaceutica que comprende un ingrediente activo que consiste en 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) representada por la formula:
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en la que dicho ingrediente activo se caracteriza por lo menos por uno de los siguientes: un patron de difraccion de rayos X caracterizado por un patron de picos de difraccion de rayos X sustancialmente similar al mostrado en la figura 15, y un portador farmaceuticamente aceptable.
En un aspecto, la invencion proporciona una composicion farmaceutica que comprende un ingrediente activo que consiste en 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) representada por la formula:
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en la que dicho ingrediente activo se caracteriza por lo menos por uno de los siguientes: un patron de difraccion de rayos X caracterizado por un patron de picos de difraccion de rayos X sustancialmente similar al mostrado en la figura 15 o un termograma de calorimetrla de barrido diferencial (DSC) que tiene una traza de descomposicion sustancialmente similar a la mostrada en la figura 18, y un portador farmaceuticamente aceptable.
En un aspecto, la invencion proporciona una composition farmaceutica que comprende un ingrediente activo que consiste en 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) representada por la formula:
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en la que dicho ingrediente activo se caracteriza por lo menos por uno de los siguientes: un patron de difraccion de rayos X caracterizado por un patron de picos de difraccion de rayos X sustancialmente similar al mostrado en la figura 15, y un portador farmaceuticamente aceptable.
En un aspecto, la invencion proporciona una composicion farmaceutica que comprende un ingrediente activo caracterizado por un patron de difraccion de rayos X que incluye picos caracterlsticos en alrededor de 21,3, 22,7 y 24,5 grados 20. En un aspecto, la composicion farmaceutica comprende un ingrediente activo caracterizado por un patron de difraccion de rayos X que incluye picos caracterlsticos en alrededor de 18,4, 21,3, 22,7 y 24,5 grados 20. En un aspecto, la composicion farmaceutica comprende un ingrediente activo caracterizado por un patron de difraccion de rayos X que carece de picos en alrededor de 15,4, 18,4, 19,5, 21,3, 22,7, 24,5, 25,2 y 28,0 grados 20.
En un aspecto, la invencion proporciona una composicion farmaceutica, en la que la difraccion de rayos X del ingrediente activo se mide con una fuente de rayos X de cobre. En un aspecto, el patron de difraccion de rayos X se mide por un Bruker D8 Advance.
En un aspecto, la invencion proporciona una composicion farmaceutica, en la que el termograma de DSC del ingrediente activo se mide por un DSC Q2000 V24.4 Build 116.
En un aspecto, la invencion proporciona una composicion farmaceutica, en la que la 2-morfolino-N-(3-(4-(5- (pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) es obtenible por recristalizacion de 2- morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida a partir de un disolvente organico. En un aspecto, el disolvente organico es etanol.
En un aspecto, la invencion proporciona una composicion farmaceutica, en la que dicha 2-morfolino-N-(3-(4-(5- (pirrolidin-1 -carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) esta sustancialmente libre de impurezas.
Uso medico de compuestos de la invencion
En un aspecto, los compuestos de la invencion se utilizan para prevenir o tratar un trastorno relacionado con proliferation celular que incluye cancer; un trastorno inflamatorio; un trastorno inmunitario incluyendo enfermedad autoinmunitaria, disfuncion del sistema inmunitario y rechazo de transplantes y/o enfermedad de ojo seco al administrar a un sujeto que lo requiera una composicion farmaceutica que incluye un compuesto de la invencion y por lo menos un excipiente farmaceuticamente aceptable a un sujeto que lo requiera. Cuando la composicion farmaceutica incluye un compuesto de la invencion que tiene mas de una forma esteroisomerica, la composicion farmaceutica puede prepararse con una forma enantiomerica pura o esencialmente pura del compuesto, con una enantiopureza de por lo menos 90% de exceso enantiomerico (EE), por lo menos 95% de EE, por lo menos 98% de EE y por lo menos 99% de EE. Como alternativa, la composicion farmaceutica puede prepararse como mezcla de formas enantiomericas del compuesto (por ejemplo, como una mezcla racemica o como una mezcla con una relation de 60:40, 70:30, 80:20 o 90:10 entre las formas enantiomericas). La invencion incluye tambien el uso de un compuesto de la invencion en la fabricacion de un medicamento para prevenir o tratar un trastorno relacionado con proliferacion celular que incluye un cancer; un trastorno inflamatorio; un trastorno inmunologico incluyendo enfermedad autoinmunitaria, disfuncion del sistema inmunitario y rechazo de transplante y/o enfermedad de ojo seco. Cuando el medicamento incluye un compuesto de la invencion que tiene mas de una forma esteroisomerica, el medicamento puede prepararse con una forma enantiomerica pura o esencialmente pura del compuesto, con una
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enantiopureza de por lo menos 90% de exceso enantiomerico (EE), por lo menos 95% de EE, por lo menos mas de 98% de EE, y por lo menos 99% de EE. Como alternativa, el medicamento puede prepararse como mezcla de formas enantiomericas de un compuesto de la invencion (por ejemplo, como una mezcla racemica o como una mezcla con una relacion de 60:40, 70:30, 80:20 o 90:10 entre las formas enantiomericas).
Los compuestos de la invencion tambien se utilizan en combinacion con por lo menos un excipiente farmaceuticamente aceptable para tratar o prevenir una enfermedad o trastorno que esta modulado por inhibicion de una o mas tirosina cinasas (JAK, SYK y/o BTK). Cuando la composition farmaceutica incluye un compuesto de la invencion que tiene mas de una forma esteroisomerica, la composicion farmaceutica puede prepararse con una forma enantiomerica pura o esencialmente pura del compuesto, con una enantiopureza de por lo menos 90% de exceso enantiomerico (EE), por lo menos 95% de EE, por lo menos 98% de EE y por lo menos 99% de EE. Como alternativa, la composicion farmaceutica puede prepararse como mezcla de formas enantiomericas de un compuesto de la invencion (por ejemplo, como una mezcla racemica o como una mezcla con una relacion de 60:40, 70:30, 80:20 o 90:10 entre las formas enantiomericas). Por ejemplo, la enfermedad o trastorno que esta modulado por la inhibicion de una o mas tirosina cinasas es cancer, precancer o un trastorno hiperproliferativo.
En algunas realizaciones, la administration de un compuesto de la invencion se lleva a cabo oralmente, parenteralmente, subcutaneamente, intravenosamente, intramuscularmente, intraperitonealmente, por instilacion intranasal, por instilacion intracavitaria o intravesical, topicamente, intraarterialmente, intralesionalmente, por bomba dosificadora, o por aplicacion a membranas mucosas. En algunas realizaciones, un compuesto de la invencion se administra con un portador farmaceuticamente aceptable.
Los compuestos de la invencion tambien se utilizan para regular la actividad del sistema inmunitario. Las realizaciones de la invencion tambien incluyen el uso de un compuesto de la invencion en la fabrication de un medicamento para regular la actividad del sistema inmunitario. Ejemplos de enfermedades que pueden ser tratadas o prevenidas con los compuestos de la invencion incluyen, pero no estan limitadas a, alergias, asma, enfermedades autoinmunitarias tales como rechazo de transplantes (por ejemplo, rinon, corazon, pulmon, hlgado, pancreas, piel, reaction de hospedante contra injerto (HVGR), etc.), artritis reumatoide, artritis psoriasica, y esclerosis lateral amiotrofica, esclerosis multiple, psoriasis y slndrome de Sjogren, enfermedad inflamatoria tipo II tal como inflamacion vascular (incluyendo vasculitis, arteritis, aterosclerosis y enfermedad de arterias coronarias), enfermedades inflamatorias cronicas tales como espondilitis anquilosante (AS) (tambien conocida como enfermedad de Bekhterev, slndrome de Bekhterev y enfermedades de Marie-Strumpell), enfermedades del sistema nervioso central tales como apoplejla, enfermedades pulmonares tales como bronquitis obliterante e hipertension primaria y pulmonar primaria, hipersensibilidad tipo IV retrasada o mediada por celulas, y neoplasias solidas y hematologicas tales como leucemias y linfomas. En algunas realizaciones, el compuesto de la invencion inhibe uno o mas componentes de una cascada de serialization de tirosina cinasas. En algunas realizaciones, un compuesto de la invencion inhibe JAK. Por ejemplo, JAK es JAK3. En algunas realizaciones, un compuesto de la invencion inhibe SYK. En algunas realizaciones, un compuesto de la invencion inhibe BTK. En algunas realizaciones, un compuesto de la invencion inhibe JAK y SYK. En algunas realizaciones, un compuesto de la invencion inhibe JAK y BTK. En algunas realizaciones, un compuesto de la invencion inhibe BTK y SYK. En algunas realizaciones, un compuesto de la invencion inhibe JAK, SYK y BTK. En algunas realizaciones, un compuesto de la invencion inhibe JAK3 y no tiene actividad en JAK2. En algunas realizaciones, la regulation del sistema inmunitario se produce a traves de la inhibicion de la proliferation de linfocitos. En ciertas realizaciones, la regulacion del sistema inmunitario se produce a traves de la inhibicion de la activation de linfocitos. Por ejemplo, se inhibe la proliferacion y/o activation de celulas T. Adicional o alternativamente, se inhibe la proliferacion y/o activacion de celulas B. En ciertas realizaciones, el sujeto es un mamlfero, por ejemplo un ser humano.
En algunas realizaciones, la administracion de un compuesto de la invencion se lleva a cabo oralmente, parenteralmente, subcutaneamente, intravenosamente, intramuscularmente, intraperitonealmente, por instilacion intranasal, por instilacion intracavitaria o intravesical, topicamente, intraarterialmente, intralesionalmente, por bomba dosificadora, o por aplicacion a membranas mucosas. En algunas realizaciones, un compuesto de la invencion se administra con un portador farmaceuticamente aceptable.
Los compuestos de la invencion tambien se usan en una cantidad eficaz para tratar o prevenir cancer o un trastorno de proliferacion. El compuesto de la invencion puede ser un inhibidor de cinasa JAK (por ejemplo, un inhibidor de JAK3). El compuesto de la invencion puede inhibir una cinasa JAK directamente, o puede afectar la ruta de cinasa JAK. El compuesto de la invencion puede ser un inhibidor de SYK. El compuesto de la invencion puede inhibir SYK directamente o puede afectar la ruta de SYK. El compuesto de la invencion puede ser un inhibidor de BTK. El compuesto de la invencion puede inhibir BTK directamente o puede afectar la ruta de BTK.
En ciertas realizaciones, el trastorno de proliferacion celular incluye cualquier tipo de cancer, incluyendo tumores solidos y tumores no solidos. En realizaciones especlficas, los tumores solidos se seleccionan de tumores en el SNC (sistema nervioso central), cancer de hlgado, carcinoma colorrectal, cancer de mama, cancer gastrico, cancer pancreatico, carcinoma de vejiga, carcinoma cervical, tumores de cabeza y cuello, cancer vulvar, y neoplasias dermatologicas incluyendo melanoma, carcinoma de celulas escamosas y carcinomas de celulas basales. En otras realizaciones, los tumores no solidos incluyen trastornos linfoproliferativos, incluyendo leucemias y linfomas. En
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otras realizaciones, el trastorno es enfermedad metastasica.
Un compuesto de la invencion tambien se puede usar en el tratamiento de un cancer o trastorno de proliferacion celular en una terapia de combination con uno o mas de tratamientos anticancer tales como cirugla, terapia de radiation, inmunoterapia y/o uno o mas agentes anticancer seleccionados de entre el grupo que consiste en agentes antiproliferativos, agentes que modulan el metabolismo de celulas cancerosas, agentes citotoxicos, agentes citostaticos, y agentes quimioterapeuticos, y sales y derivados de los mismos. En un aspecto, un compuesto de la invencion puede usarse en el tratamiento de un cancer o trastorno de proliferacion celular en terapia de combinacion con cualquiera de los farmacos seleccionados de un grupo que consiste en un alcaloide, un agente alquilante, un antibiotico antitumoral, un antimetabolito, un inhibidor de tirosina cinasa Bcr-Abl, un analogo de nucleosido, un agente de reversion de resistencia a varios farmacos, un agente de union a ADN, farmaco de union a microtubulos, una toxina y un antagonista de ADN. Aquellos expertos en la tecnica reconoceran los agentes quimioterapeuticos clasificados en una o mas clases particulares de agentes quimioterapeuticos descritos anteriormente.
Cuando se usa en combinacion con agentes anti-proliferation adicionales, un compuesto de la invencion puede incrementar (por ejemplo, sinergizar) la actividad de estos agentes. Ademas, esta sinergia permitira a un compuesto de la invencion, agentes anti-proliferacion adicionales o ambos ser administrados a dosis mas bajas, y/o puede mejorar significativamente las propiedades anti-proliferacion de un compuesto en cualquier dosis dada.
Definiciones
Por conveniencia, se recaban aqul ciertos terminos usados en la memoria descriptiva, ejemplos y reivindicaciones anexas.
Para evitar dudas, la expresion “un compuesto de la invencion” se refiere a un compuesto de las formulas I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII, XIV o XV o un compuesto en la Tabla A, Tabla B o Tabla C. Siempre que se usa en el contexto de la presente invencion, debe entenderse que la referencia se esta haciendo tanto a la base libre como a las sales, solvatos, polimorfos, y profarmacos correspondientes de los mismos siempre y cuando eso sea posible y/o adecuado bajo las circunstancias.
Los terminos “inhibidor”, “activador” y “modulador”, segun se usan en relation con la expresion o actividad, se refieren a moleculas inhibidoras, activadoras o moduladoras, respectivamente. Los inhibidores de acuerdo con la presente invencion incluyen un compuesto de la invencion o una composition que inhibe la expresion de uno o mas componentes de una cascada de senalizacion de tirosina protelna cinasas, tal como una cascada de senalizacion de cinasas JAK (por ejemplo, JAK3), una cascada de senalizacion de SYK y/o una cascada de senalizacion de BTK, o se une a, bloquea parcial o totalmente la estimulacion, disminuye, previene, retrasa la activation, inactiva, desensibiliza o reduce la actividad de uno o mas componentes de una cascada de senalizacion de protelna cinasas, tales como una cascada de senalizacion de cinasas JAK (por ejemplo, JAK3), una cascada de senalizacion de SYK y/o una cascada de senalizacion de BTK. Muestras o ensayos que comprenden uno o mas componentes de una cascada de senalizacion de protelna cinasas, tal como una cascada de senalizacion de cinasas JAK (por ejemplo, JAK3), cascada de senalizacion de SYK y/o cascada de senalizacion de BTK pueden tratarse con un compuesto de la invencion y compararse con muestras de control sin un compuesto de la invencion. A las muestras de control (no tratadas con un compuesto de la invencion) se les puede asignar un valor de actividad relativo de 100%. En ciertas realizaciones, la inhibition de uno o mas componentes de una cascada de senalizacion de protelna cinasas, tal como una cinasa JAK (por ejemplo, JAK3), SYK y/o cascada de senalizacion de BTK se logra cuando el valor de actividad con relacion al control es de alrededor de 80% o menos.
“Tratar” incluye cualquier efecto, por ejemplo reducir, disminuir, modular o eliminar, que da como resultado la mejora de la afeccion, enfermedad o trastorno, etc. “T ratar” o “tratamiento” de un estado de enfermedad incluye: (1) inhibir el estado de enfermedad, es decir, detener el desarrollo del estado de enfermedad o sus slntomas cllnicos, o (2) aliviar el estado de enfermedad, es decir, causar regresion temporal o permanente del estado de enfermedad o sus slntomas cllnicos.
“Prevenir” significa hacer que los slntomas cllnicos del estado de enfermedad no se desarrollen, es decir, inhibir el inicio de la enfermedad, en un sujeto que pueda estar expuesto a o predispuesto al estado de enfermedad, pero que aun no experimente o presente slntomas del estado de enfermedad.
“Estado de enfermedad” significa cualquier enfermedad, trastorno, afeccion, slntoma o indication.
Segun se usa en la presente, las expresiones “trastorno de proliferacion celular” y “trastorno relacionado con proliferacion celular” se refieren a condiciones en las cuales el crecimiento desregulado y/o anormal de celulas puede llevar al desarrollo de una condition o enfermedad no deseada, la cual puede ser cancerosa o no cancerosa, por ejemplo una condicion psoriasica.
En algunas realizaciones, el trastorno de proliferacion celular es cancer. Segun se usa en la presente, el termino “cancer” incluye tumores solidos, tales como canceres de pulmon, mama, colon, ovario, cerebro, hlgado, pancreas,
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prostata, melanoma maligno, canceres de piel que no son melanoma, as! como tumores hematologicos y/o neoplasias, tales como leucemia de ninez y linfomas, mieloma multiple, enfermedad de Hodgkin, linfomas de origen linfocltico y cutaneo, leucemia aguda y cronica tal como leucemia linfoblastica aguda, mielofibrosis, mielocltica aguda o mielocltica cronica, neoplasia de celulas plasmaticas, neoplasia linfoide y canceres asociados con SIDA.
Una “cantidad eficaz” de un compuesto es la cantidad que, cuando se administra a un sujeto que tiene una enfermedad o trastorno, da como resultado la regresion de la enfermedad o trastorno en el sujeto. Asl, por ejemplo, para un trastorno de proliferacion celular, una cantidad eficaz de un compuesto de la invencion es la cantidad que, cuando se administra a un sujeto que tiene un trastorno de proliferacion celular, da como resultado la regresion del crecimiento celular en el sujeto. La cantidad del compuesto de la invencion que se administrara a un sujeto dependera del trastorno particular, el modo de administration, compuestos co-administrados, si los hay, y las caracterlsticas del sujeto, tal como salud general, otras enfermedades, edad, sexo, genotipo, peso corporal y tolerancia a farmacos. El experto en la tecnica sera capaz de determinar dosis adecuadas dependiendo de estos y otros factores.
Una “cantidad terapeuticamente eficaz” significa la cantidad de un compuesto que, cuando se administra a un mamlfero, por ejemplo un ser humano, para tratar una enfermedad, es suficiente para llevar a cabo el tratamiento de la enfermedad. La “cantidad terapeuticamente eficaz” variara dependiendo del compuesto, la enfermedad y su gravedad, y la edad, peso, etc., del mamlfero que sera tratado.
Una cantidad terapeuticamente eficaz de uno o mas de los compuestos puede formularse con un portador farmaceuticamente aceptable para su administracion a un ser humano o a un animal. En consecuencia, un compuesto de la invencion o una formulation del mismo puede administrarse, por ejemplo, por vlas oral, parenteral
0 topica, para proporcionar una cantidad eficaz del compuesto. En un aspecto, un compuesto de la invencion puede usarse para recubrir o impregnar un dispositivo medico, por ejemplo una endoprotesis vascular.
La expresion “cantidad profilacticamente eficaz” significa una cantidad eficaz de un compuesto de la invencion que se administra para evitar o reducir el riesgo de un estado de enfermedad.
“Efecto farmacologico”, segun se usa en la presente, abarca efectos producidos en el sujeto que logran el fin pretendido de una terapia.
El termino “cristalino”, segun se usa en la presente, significa que tiene una disposition de repetition regular de moleculas o planos de cara externa. La expresion “pureza cristalina” significa porcentaje de un compuesto cristalino en una muestra que puede contener una forma amorfa del mismo compuesto, por lo menos otra forma cristalina del compuesto o una mezcla de los mismos. En un aspecto, la sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1- carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) tiene una pureza cristalina de alrededor de 97,0%, 99,0%, 100% de pureza cristalina.
Ademas, un polimorfo puede existir ya sea en una forma hidratada o no hidratada (la anhidra) o como solvatos con otras moleculas de disolvente. Ejemplos no limitativos de hidratos incluyen monohidratos, dihidratos, etc. Ejemplos no limitativos de solvatos incluyen solvatos de etanol, solvatos de acetona, etc.
Un “polimorfo de la invencion”, segun se usa en la presente, significa sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5- (pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) o 2-morfolino-N-(3-(4-(5- (pirrolidin-1-carbonil)-
1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I).
“Solvato” significa las formas de adicion de disolvente que contienen cantidades ya sea estequiometricas o no estequiometricas de disolvente. Algunos polimorfos tienen una tendencia a atrapar una relation molar fija de moleculas de disolvente en el estado solido cristalino, formando asl un solvato. Si el disolvente es agua, el solvato formado es un hidrato, cuando el disolvente es alcohol, el solvato formado es un alcoholato. Los hidratos se forman por la combinacion de una o mas moleculas de agua con una de las sustancias en las cuales el agua conserva su estado molecular como H2O, siendo capaz esta combination de formar uno o mas hidratos.
Con respecto a los compuestos utiles en la presente invencion, pueden ser aplicables los siguientes terminos:
El termino “sustituido”, segun se usa en la presente, significa que uno cualquiera o mas hidrogenos en el atomo designado se reemplaza por una selection del grupo indicado, siempre que la valencia normal del atomo designado no sea excedida, y que la sustitucion de como resultado un compuesto estable. Cuando un sustituyente sea ceto (es decir, =O), entonces se reemplazan 2 hidrogenos en el atomo. Los sustituyentes ceto no estan presentes en restos aromaticos. Los dobles enlaces de anillo, segun se usa en la presente, son dobles enlaces que se forman entre dos atomos de anillo adyacentes (por ejemplo, C=C, C=N, o N=N).
La invencion pretende incluir todos los isotopos de atomos que se presentan en los compuestos de la invencion. Los isotopos incluyen aquellos atomos que tienen el mismo numero atomico pero diferentes numeros masicos. A manera de ejemplo general y sin limitation, los isotopos de hidrogeno incluyen tritio y deuterio, y los isotopos de carbono
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incluyen C-13 y C-14.
Los compuestos de la invencion descritos en la presente pueden tener centros asimetricos. Los compuestos de la invencion que contienen un atomo sustituido asimetricamente pueden ser aislados en formas opticamente activas o racemicas. Se conoce bien en la tecnica como preparar formas opticamente activas, tal como mediante resolucion de formas racemicas o por slntesis a partir de materiales de partida opticamente activos. Muchos isomeros geometricos de olefinas, dobles enlaces C=N, y similares tambien pueden estar presentes en los compuestos descritos aqul, y todos estos isomeros estables se contemplan en la presente invencion. Los isomeros geometricos cis y trans pueden estar aislados como una mezcla de isomeros o como formas isomericas separadas. Se pretenden todas las formas isomericas quirales, diastereomericas, racemicas y geometricas de una estructura, a menos que la esteroqulmica especlfica o forma isomerica se indique especlficamente. Todos los tautomeros de compuestos mostrados o descritos tambien se consideran parte de la presente invencion.
Cuando cualquier variable (por ejemplo, Rd) aparece mas de una vez en cualquier constituyente o formula para un compuesto de la invencion, su definicion en cada caso es independiente de su definicion en cualquier otra aparicion. Asl, por ejemplo, si un grupo se muestra como sustituido con 0-2 restos Rd, entonces el grupo puede estar opcionalmente sustituido con hasta dos restos Rd, y Rd en cada caso se selecciona independientemente de la definicion de Rd. Asimismo, son permisibles combinaciones de sustituyentes y/o variables, pero solo si estas combinaciones dan como resultado compuestos estables.
Cuando un atomo o un resto qulmico va seguido por un intervalo numerico en su Indice (por ejemplo, C1-6), la invencion intenta abarcar cada numero dentro del intervalo asl como todos los intervalos intermedios. Por ejemplo, “alquilo de CW intenta incluir grupos alquilo con 1, 2, 3, 4, 5, 6, 1-6, 1-5, 1-4, 1-3, 1-2, 2-6, 2-5, 2-4, 2-3, 3-6, 3-5, 34, 4-6, 4-5, y 5-6 carbonos.
Segun se usa en la presente, “alquilo” pretende incluir grupos hidrocarburo alifaticos saturados de cadena lineal y ramificada (lineal) que tienen el numero especificado de atomos de carbono. Por ejemplo, alquilo de C1-6 pretende incluir grupos alquilo de C1, C2, C3, C4, C5 y C6. Ejemplos de alquilo incluyen, pero no estan limitados a, metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, s-butilo, t-butilo, n-pentilo, s-pentilo y n-hexilo. En ciertas realizaciones, un alquilo de cadena lineal o cadena ramificada tiene seis o menos atomos de carbono en su cadena principal (por ejemplo, C1-C6 para cadena lineal, C3-C6 para cadena ramificada), y en otras realizaciones, un alquilo de cadena lineal (lineal) o cadena ramificada tiene cuatro o menos atomos de carbono. Segun se usa en la presente, “cicloalquilo de C3-C8” tiene de tres a ocho atomos de carbono en la estructura de anillo, y en otras realizaciones, “cicloalquilo de C5-C6” tiene cinco o seis carbonos en la estructura de anillo.
A menos que el numero de carbonos se especifique de otra manera, “alquilo inferior” incluye un grupo alquilo, como el definido anteriormente, pero que tiene de uno a diez, o en otras realizaciones de uno a seis, atomos de carbono en su estructura de cadena principal. “Alquenilo inferior” y “alquinilo inferior” tienen longitudes de cadena de, por ejemplo, 2-6 atomos de carbono.
La expresion “alquilo sustituido” se refiere a restos alqullicos que tienen sustituyentes que reemplazan un atomo de hidrogeno en uno o mas carbonos de la cadena principal de hidrocarburo. Estos sustituyentes pueden incluir, por ejemplo, alquilo, alquenilo, alquinilo, halogeno, hidroxilo, alquilcarboniloxi, arilcarboniloxi, alcoxicarboniloxi, ariloxicarboniloxi, carboxilato, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo, dialquilaminocarbonilo, alquiltiocarbonilo, alcoxilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, ciano, amino (incluyendo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino, y alquilarilamino), acilamino (incluyendo alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamollo y ureido), amidino, imino, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinilo, sulfonato, sulfamollo, sulfonamido, nitro, trifluorometilo, ciano, azido, heterociclilo, alquilarilo, o un resto aromatico o heteroaromatico. Los cicloalquilos pueden estar sustituidos adicionalmente, por ejemplo con sustituyentes descritos anteriormente. Un resto “alquilarilo” o “aralquilo” es un alquilo sustituido con un arilo (por ejemplo, fenilmetilo (bencilo)).
“Alquenilo” incluye grupos alifaticos insaturados analogos en longitud y posible sustitucion a los alquilos descritos anteriormente, pero que contienen por lo menos un doble enlace. Por ejemplo, el termino “alquenilo” incluye grupos alquenilo de cadena lineal (lineal) (por ejemplo, etenilo, propenilo, butenilo, pentenilo, hexenilo, heptenilo, octenilo, nonenilo, decenilo), grupos alquenilo de cadena ramificada, grupos cicloalquenilo (por ejemplo, aliclclicos) (por ejemplo, ciclopropenilo, ciclopentenilo, ciclohexenilo, cicloheptenilo, ciclooctenilo), grupos cicloalquenilo sustituidos con alquilo o alquenilo, y grupos alquenilo sustituidos con cicloalquilo o cicloalquenilo. En ciertas realizaciones, un grupo alquenilo de cadena lineal o cadena ramificada tiene seis o menos atomos de carbono en su cadena principal (por ejemplo, C2-C6 para cadena lineal (lineal), C3-C6 para cadena ramificada). Asimismo, los grupos cicloalquenilo pueden tener de tres a ocho atomos de carbono en su estructura de anillo, y en algunas realizaciones, los grupos cicloalquenilo tienen cinco o seis carbonos en la estructura de anillo. El termino “C2-C6” incluye grupos alquenilo que contienen dos a seis atomos de carbono. El termino “C3-C6” incluye grupos alquenilo que contienen tres a seis atomos de carbono.
La expresion “alquenilo sustituido” se refiere a restos alquenllicos que tienen sustituyentes que reemplazan un
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atomo de hidrogeno en uno o mas atomos de carbono de la cadena principal de hidrocarburo. Estos sustituyentes pueden incluir, por ejemplo, grupos alquilo, grupos alquinilo, halogenos, hidroxilo, alquilcarboniloxi, arilcarboniloxi, alcoxicarboniloxi, ariloxicarboniloxi, carboxilato, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo, dialquilaminocarbonilo, alquiltiocarbonilo, alcoxilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, ciano, amino (incluyendo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino, y alquilarilamino), acilamino (incluendo alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamollo y ureido), amidino, imino, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinilo, sulfonato, sulfamollo, sulfonamido, nitro, trifluorometilo, ciano, azido, heterociclilo, alquilarilo, o un resto aromatico o heteroaromatico.
“Alquinilo” incluye grupos alifaticos insaturados analogos en longitud y sustitucion posible a los alquilos descritos anteriormente, pero los cuales contienen por lo menos un triple enlace. Por ejemplo, “alquinilo” incluye grupos alquinilo de cadena lineal (por ejemplo, etinilo, propinilo, butinilo, pentinilo, hexinilo, heptinilo, octinilo, nonilo, decinilo), grupos alquinilo de cadena ramificada y grupos alquinilo sustituidos con cicloalquilo o cicloalquenilo. En ciertas realizaciones, un grupo alquinilo de cadena lineal o cadena ramificada tiene seis o menos atomos de carbono en su cadena principal (por ejemplo, C2-C6 para cadena lineal, C3-C6 para cadena ramificada). El termino “C2-C6” incluye grupos alquinilo que contienen dos a seis atomos de carbono. El termino “C3-C6” incluye grupos alquinilo que contienen tres a seis atomos de carbono.
La expresion “alquinilo sustituido” se refiere a restos alquinllicos que tienen sustituyentes que reemplazan un atomo de hidrogeno en uno o mas atomos de carbono de la cadena principal de hidrocarburo. Estos sustituyentes pueden incluir, por ejemplo, grupos alquilo, grupos alquinilo, halogenos, hidroxilo, alquilcarboniloxi, arilcarboniloxi, alcoxicarboniloxi, ariloxicarboniloxi, carboxilato, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, alcoxicarbonilo, amino carbonilo, alquilaminocarbonilo, dialquilamino carbonilo, alquiltiocarbonilo, alcoxilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, ciano, amino (incluyendo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino, y alquilarilamino), acilamino (incluyendo alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamollo y ureido), amidino, imino, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinilo, sulfonato, sulfamollo, sulfonamido, nitro, trifluorometilo, ciano, azido, heterociclilo, alquilarilo, o un resto aromatico o heteroaromatico.
“Arilo” incluye fenilo y naftilo. Los anillos de arilo pueden estar sustituidos en una o mas posiciones de anillo con sustituyentes tales como los descritos anteriormente, como por ejemplo, halogeno, hidroxilo, alcoxi, alquilcarboniloxi, arilcarboniloxi, alcoxicarboniloxi, ariloxicarboniloxi, carboxilato, alquilcarbonilo, alquilaminocarbonilo, aralquilaminocarbonilo, alquenilaminocarbonilo, alquilacarbonilo, arilcarbonilo, aralquilcarbonilo, alquenilcarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquiltiocarbonilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, ciano, amino (incluyendo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino, y alquilarilamino), acilamino (incluyendo alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamollo y ureido), amidino, imino, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinilo, sulfonato, sulfamollo, sulfonamido, nitro, trifluorometilo, ciano, azido, heterociclilo, alquilarilo, o un resto aromatico o heteroaromatico. Los grupos arilo tambien pueden estar condensados o puenteados con anillos aliclclicos o heteroclclicos, los cuales no son aromaticos para formar as! un sistema multiclclico (por ejemplo, tetralina, metilendioxifenilo).
Segun se usa en la presente, “halo” o “halogeno” se refiere a fluoro, cloro, bromo y yodo. El termino “perhalogenado” se refiere generalmente a un resto en el que todos los hidrogenos son reemplazados por atomos de halogeno.
Segun se usa en la presente, “carbociclo” o “anillo carboclclico” pretende significar cualquier anillo monoclclico, biclclico o triclclico estable que tenga el numero de carbonos especificado, cualquiera de los cuales puede ser saturado, insaturado o aromatico. Por ejemplo, un carbociclo de C3-14 pretende significar un anillo mono-, bi- o triclclico que tiene 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 o 14 atomos de carbono. Ejemplos de carbociclos incluyen, pero no estan limitados a, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclobutenilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo, cicloheptenilo, cicloheptilo, cicloheptenilo, adamantilo, ciclooctilo, ciclooctenilo, ciclooctadienilo, fluorenilo, fenilo, naftilo, indanilo, adamantilo, y tetrahidronaftilo. Los anillos puenteados tambien se incluyen en la definicion de un carbociclo, incluyendo, por ejemplo, [3.3.0]biciclooctano, [4.3.0]biciclononano, [4.4.0]biciclodecano y [2.2.2]biciclooctano. Un anillo puenteado se presenta cuando uno o mas atomos de carbono enlazan dos atomos de carbono no adyacentes. En algunas realizaciones, los anillos de puente son uno o dos atomos de carbono. Se hace notar que un puente siempre convierte un anillo monoclclico en un anillo triclclico. Cuando un anillo es puenteado, los sustituyentes descritos para el anillo tambien pueden estar presentes en el puente. Tambien se incluyen anillos fusionados (por ejemplo, naftilo y tetrahidronaftilo) y espiro.
Segun se usa en la presente, el termino “heterociclo” o “heteroclclico” pretende significar cualquier anillo monoclclico, biclclico o triclclico estable que sea saturado, insaturado o aromatico y comprenda atomos de carbono y uno o mas heteroatomos de anillo, por ejemplo 1 o 1-2 o 1-3 o 1-4 o 1-5 o 1-6 heteroatomos, seleccionados independientemente de entre el grupo que consiste en nitrogeno, oxlgeno y azufre. Un heterociclo biclclico o triclclico puede tener uno o mas heteroatomos ubicados en un anillo, o los heteroatomos pueden ubicarse en mas de un anillo. Los heteroatomos de nitrogeno y azufre pueden estar opcionalmente oxidados (es decir, N®O y S(O)p, en el que p = 1 o 2). Cuando un atomo de nitrogeno se incluye en el anillo, es ya sea N o Nh, dependiendo de si esta unido o no a un doble enlace en el anillo (es decir, un hidrogeno esta presente si se tiene que mantener la trivalencia del atomo de nitrogeno). El atomo de nitrogeno puede estar sustituido o no sustituido (es decir, N o NR en el que R
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es H u otro sustituyente, segun se defina). El anillo heterociclico puede estar unido a su grupo colgante en cualquier heteroatomo o atomo de carbono que de como resultado una estructura estable. Los anillos heteroclclicos descritos en la presente pueden estar sustituidos en un atomo de carbono o nitrogeno si el compuesto resultante es estable. Un nitrogeno en el heterociclo puede estar opcionalmente cuaternizado. En algunas realizaciones, cuando el numero total de atomos de S y O en el heterociclo excede 1, entonces estos heteroatomos no estan adyacentes entre si. Los anillos puenteados tambien estan incluidos en la definition de heterociclo. Un anillo puenteado se presenta cuando uno o mas atomos (es decir, C, O, N o S) enlazan dos atomos de carbono o nitrogeno no adyacentes. Los puentes incluyen, pero no estan limitados a, un atomo de carbono, dos atomos de carbono, un atomo de nitrogeno, dos atomos de nitrogeno, y un grupo carbono-nitrogeno. Se indica que un puente siempre convierte un anillo monoclclico en un anillo triclclico. Cuando un anillo esta puenteado, los sustituyentes descritos para el anillo tambien pueden estar presentes en el puente. Tambien se incluyen los anillos espiro y condensados.
Segun se usa en la presente, el termino “heterocicloalquilo” pretende significar cualquier anillo monoclclico, biclclico o tri clclico estable que es saturado y comprende atomos de carbono y uno o mas heteroatomos de anillo, por ejemplo 1 o 1-2 o 1-3 o 1-4 o 1-5 o 1-6 heteroatomos, seleccionados independientemente de entre el grupo que consiste en nitrogeno, oxlgeno y azufre.
Segun se usa aqul, la expresion “heterociclo aromatico” o “heteroarilo” pretende significar un anillo heterociclico aromatico monoclclico o biclclico de 5, 6 o 7 miembros o anillo heterociclico aromatico biclico de 7, 8, 9, 10, 11 o 12 miembros estable que consiste en atomos de carbono y uno o mas heteroatomos, por ejemplo 1 o 1-2 o 1-3 o 1-4 o 1-5 o 1-6 heteroatomos, seleccionados independientemente de entre el grupo que consiste en nitrogeno, oxigeno y azufre. En el caso de anillos aromaticos heterociclicos biciclicos, solo uno de los dos anillos tiene que ser aromatico (por ejemplo, 2,3-dihidroindol), aunque ambos pueden serlo (por ejemplo, quinolina). El segundo anillo tambien puede estar condensado o puenteado como se definio anteriormente para heterociclos. El atomo de nitrogeno puede estar sustituido o no sustituido (es decir, N o NR en el que R es H u otro sustituyente, segun se defina). Los heteroatomos de nitrogeno y azufre pueden estar opcionalmente oxidados (es decir, N®O y S(O)p, en el que p = 1 o 2). Tambien se debe notar que el numero total de atomos de S y O en el heterociclo aromatico no es mayor que 1.
Ejemplos de heterociclos incluyen, pero no estan limitados a, acridinilo, azocinilo, bencimidazolilo, benzofuranilo, benzotiofuranilo, benzotiofenilo, benzoxazolilo, benzoxazolinilo, benztiazolilo, benztriazolilo, benztetrazolilo, bencisoxazolilo, bencisotiazolilo, bencimidazolinilo, carbazolilo, 4aH-carbazolilo, carbolinilo, cromanilo, cromenilo, cinnolinilo, decahidroquinolinilo, 2H,6H-1,5,2-ditiazinilo, dihidrofuro[2,3-b]tetrahidrofurano, furanilo, furazanilo, imidazolidinilo, imidazolinilo, imidazolilo, 1H-indazolilo, indolenilo, indolinilo, indolizinilo, indolilo, 3H-indolilo, isatinoilo, isobenzofuranilo, isocromanilo, isoindazolilo, isoindolinilo, isoindolilo, isoquinolinilo, isotiazolilo, isoxazolilo, metilendioxifenilo, morfolinilo, naftiridinilo, octahidroisoquinolinilo, oxadiazolilo, 1,2,3-oxadiazolilo, 1,2,4-oxadiazolilo,
1.2.5- oxadiazolilo, 1,3,4-oxadiazolilo, 1,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona, oxazolidinilo, oxazolilo, oxindolilo, pirimidinilo,
fenantridinilo, fenantrolinilo, fenazinilo, fenotiazinilo, fenoxatinilo, fenoxazinilo, ftalazinilo, piperazinilo, piperidinilo, piperidonilo, 4-piperidonilo, piperonilo, pteridinilo, purinilo, piranilo, pirazinilo, pirazolidinilo, pirazolinilo, pirazolilo, piridazinilo, piridooxazol, piridoimidazol, piridotiazol, piridinilo, piridilo, pirimidinilo, pirrolidinilo, pirrolinilo, 2H-pirrolilo, pirrolilo, quinazolinilo, quinolinilo, 4H-quinolizinilo, quinoxalinilo, quinuclidinilo, tetrahidrofuranilo,
tetrahidroisoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, tetrazolilo, 6H-1,2,5-tiadiazinilo, 1,2,3-tiadiazolilo, 1,2,4-tiadiazolilo,
1.2.5- tiadiazolilo, 1,3,4-tiadiazolilo, tiantrenilo, tiazolilo, tienilo, tienotiazolilo, tienooxazolilo, tienoimidazolilo, tiofenilo, triazinilo, 1,2,3-triazolilo, 1,2,4-triazolilo, 1,2,5-triazolilo, 1,3,4-triazolilo, y xantenilo.
“Acilo” se refiere al radical acilo (CH3CO-). “Acilo sustituido” incluye grupos acilo en los que uno o mas de los atomos de hidrogeno son reemplazados por, por ejemplo, grupos alquilo, grupos alquinilo, halogenos, hidroxilo, alquilcarboniloxi, arilcarboniloxi, alcoxicarboniloxi, ariloxicarboniloxi, carboxilato, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquilamino carbonilo, dialquilaminocarbonilo, alquiltiocarbonilo, alcoxilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, ciano, amino (incluyendo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino y alquilarilamino), acilamino (incluyendo alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamoilo y ureido), amidino, imino, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinilo, sulfonato, sulfamoilo, sulfonamido, nitro, trifluorometilo, ciano, azido, heterociclilo, alquilarilo o un resto aromatico o heteroaromatico.
“Acilamino” incluye restos en los que un resto de acilo esta enlazado a un grupo amino. Por ejemplo, el termino incluye grupos alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamoilo y ureido.
“Arollo” incluye compuestos y restos con un resto de arilo o heteroaromatico unido a un grupo carbonilo. Ejemplos de grupos arollo incluyen fenilcarboxi, naftilcarboxi, etc.
“Alcoxialquilo”, “alquilaminoalquilo” y “tioalcoxialquilo” incluyen grupos alquilo, como los descritos anteriormente, los cuales incluyen ademas atomos de oxlgeno, nitrogeno o azufre que reemplazan uno o mas atomos de carbono de la cadena principal de hidrocarburo, por ejemplo atomos de oxigeno, nitrogeno o azufre.
El termino “alcoxi” o “alcoxilo” incluye grupos alquilo, alquenilo y alquinilo sustituidos y no sustituidos enlazados covalentemente a un atomo de oxigeno. Ejemplos de grupos alcoxi (o radicales alcoxilo) incluyen grupos metoxi, etoxi, isopropiloxi, propoxi, butoxi y pentoxi. Ejemplos de grupos alcoxi sustituidos incluyen grupos alcoxi
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halogenados. Los grupos alcoxi pueden estar sustituidos con grupos tales como alquenilo, alquinilo, halogeno, hidroxilo, alquilcarboniloxi, arilcarboniloxi, alcoxicarboniloxi, ariloxicarboniloxi, carboxilato, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo, dialquilaminocarbonilo, alquitiocarbonilo, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo, dialquilaminocarbonilo, alquiltiocarbonilo, alcoxilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, ciano, amino (incluyendo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino, y alquilarilamino), acilamino (incluyendo alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamollo y ureido), amidino, imino, sulfhidrilo, nitro, trifluorometilo, ciano, azido, heterociclilo, alquilarilo, o un resto aromatico o heteroaromatico. Ejemplos de grupos alcoxi sustituidos con halogeno incluyen, pero no estan limitados a, fluorometoxi, difluorometoxi, trifluorometoxi, clorometoxi, diclorometoxi y triclorometoxi.
El termino “tiocarbonilo” o “tiocarboxi” incluye compuestos y restos que contienen un carbono conectado con un doble enlace a un atomo de azufre.
El termino “eter” o “alcoxi” incluye compuestos o restos que contienen un oxlgeno enlazado a dos atomos de carbono o heteroatomos diferentes. Por ejemplo, el termino incluye “alcoxialquilo” que se refiere a un grupo alquilo, alquenilo o alquinilo enlazado covalentemente a un atomo de oxlgeno que esta enlazado covalentemente a otro grupo alquilo.
El termino “ester” incluye compuestos y restos que contienen un carbono o un heteroatomo unido a un atomo de oxlgeno que esta enlazado al carbono de un grupo carbonilo. El termino “ester” incluye grupos alcoxicarboxi tales como metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, propoxicarbonilo, butoxicarbonilo, pentoxicarbonilo, etc. Los grupos alquilo, alquenilo o alquinilo son como se definio anteriormente.
El termino “tioeter” incluye compuestos y restos que contienen un atomo de azufre enlazado a dos carbonos o heteroatomos diferentes. Ejemplos de tioeteres incluyen, pero no estan limitados a, alqtioalquilos, alqtioalquenilos y alqtioalquinilos. El termino “alqtioalquilos” incluye compuestos con un grupo alquilo, alquenilo o alquinilo enlazado a un atomo de azufre que esta enlazado a un grupo alquilo. Similarmente, el termino “alqtioalquenilos” y “alqtioalquinilos” se refieren a compuestos o restos en los que un grupo alquilo, alquenilo o alquinilo esta enlazado a un atomo de azufre que esta enlazado covalentemente a un grupo alquinilo.
El termino “hidroxi” o “hidroxilo” se refiere al grupo -OH. “Policiclilo” o “radical policlclico” se refiere a dos o mas anillos clclicos (por ejemplo, cicloalquilos, cicloalquenilos, cicloalquinilos, arilos y/o heterociclilos) en los cuales dos o mas carbonos son comunes a dos anillos adyacentes. Los anillos que estan unidos a traves de atomos no adyacentes se denominan anillos “puenteados”. Cada uno de los anillos del policiclo puede estar sustituido con sustituyentes tales como los descritos anteriormente, como por ejemplo, halogeno, hidroxilo, alquilcarboniloxi, arilcarboniloxi, alcoxicarboniloxi, ariloxicarboniloxi, carboxilato, alquilcarbonilo, alcoxicarbonilo, alquilaminocarbonilo,
aralquilaminocarbonilo, alquenilaminocarbonilo, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, aralquilcarbonilo, alquenilcarbonilo, aminocarbonilo, alquiltiocarbonilo, alcoxilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, ciano, amino (incluyendo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino y alquilarilamino), acilamino (incluyendo alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamollo y ureido), amidino, imino, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinilo, sulfonato, sulfamollo, sulfonamido, nitro, trifluorometilo, ciano, azido, heterociclilo, alquilo, alquilarilo, o un resto aromatico o heteroaromatico.
En la memoria descriptiva, la formula estructural del compuesto representa cierto isomero por conveniencia en algunos casos, pero la invencion incluye todos los isomeros tales como isomeros geometricos, isomeros opticos a base de un carbono asimetrico, esteroisomeros, tautomeros y similares que se presenten estructuralmente y una mezcla isomerica y no esta limitada a la description de la formula por conveniencia, y puede ser cualquier isomero o una mezcla. Por lo tanto, un atomo de carbono asimetrico puede estar presente en la molecula y un compuesto opticamente activo y un compuesto racemico pueden estar presentes en el compuesto, pero la invencion no esta limitada a ellos e incluye cualquiera. Ademas, un polimorfismo de cristal puede estar presente pero no es limitativo, sino que cualquier forma de cristal puede ser individual o una mezcla de formas de cristal, o un anhidro o hidrato. Ademas, el llamado metabolito que se produce por degradation del compuesto in vivo esta incluido en el alcance de la invencion.
“Isomerla” significa compuestos que tienen formulas moleculares identicas pero que difieren en la naturaleza o la secuencia de enlazamiento de sus atomos o en la disposition de sus atomos en el espacio. Los isomeros que difieren en la disposicion de sus atomos en el espacio se denominan “estereoisomeros”. Los esteroisomeros que no son imagenes especulares unos de otros se denominan “diastereoisomeros”, y los estereoisomeros que son imagenes especulares que no se pueden superponer se denominan “enantiomeros”, o algunas veces isomeros opticos. Un atomo de carbono enlazado a cuatro sustituyentes no identicos se denomina un “centro quiral”.
Un “isomero quiral” significa un compuesto con por lo menos un centro quiral. Tiene dos formas enantiomericas de quiralidad opuesta y puede existir ya sea como un enantiomero individual o como una mezcla de enantiomeros. Una mezcla que contenga cantidades iguales de formas enantiomericas individuales de quiralidad opuesta se denomina
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una “mezcla racemica”. Un compuesto que tenga mas de un centro quiral tiene 2n-1 pares enantiomericos, en el que n es el numero de centros quirales. Compuestos con mas de un centro quiral pueden existir ya sea como un diastereomero individual o como una mezcla de diastereomeros, denominada una “mezcla diastereomerica”. Cuando esta presente un centro quiral, un estereoisomero puede ser caracterizado por la configuracion absoluta (R o S) de ese centro quiral. Configuracion absoluta se refiere a la disposicion en el espacio de los sustituyentes unidos al centro quiral. Los sustituyentes unidos al centro quiral en consideracion son clasificados de acuerdo con el Sequence Rule of Cahn, Ingold y Prelog. (Cahn et al, Angew. Chem. Inter. Edit. 1966, 5, 385; errata 511; Cahn et al., Angew. Chem. 1966, 78, 413; Cahn e Ingold, J. Chem. Soc. 1951 (Londres), 612; Cahn et al., Experientia 1956, 12, 81; Cahn, J., Chem. Educ. 1964,41, 116).
“Isomero geometrico” significa los diastereomeros que deben su existencia a la rotacion impedida a alrededor de dobles enlaces. Estas configuraciones se diferencian en sus nombres por los prefijos cis y trans, o Z y E, los cuales indican que los grupos estan en el mismo lado o el lado opuesto del doble enlace en la molecula de acuerdo con las reglas de Cahn-Ingold-Prelog.
Ademas, un compuesto de la invencion incluye todos los isomeros atropicos del mismo. Los “isomeros atropicos” son un tipo de esteroisomero en el cual los atomos de dos isomeros estan dispuestos diferentemente en el espacio. Los isomeros atropicos deben su existencia a una rotacion restringida causada por el impedimento de rotacion de grupos grandes alrededor de un enlace central. Estos isomeros atropicos existen tlpicamente como una mezcla; sin embargo como resultado de avances recientes en cromatografla, ha sido posible separar mezclas de dos isomeros atropicos en casos selectos.
Las expresiones “polimorfo de cristal” o “polimorfo” o “forma de cristal” significan estructuras de cristal en las cuales un compuesto de la invencion puede cristalizarse en diferentes disposiciones de empaquetamiento de cristal, todas las cuales tienen la misma composicion elemental. Diferentes formas de cristal normalmente tienen diferentes patrones de difraccion de rayos X, espectrales infrarrojos, puntos de fusion, dureza de densidad, forma de cristal, propiedades opticas y electricas, estabilidad y solubilidad. El disolvente de recristalizacion, velocidad de cristalizacion, temperatura de almacenamiento y otros factores pueden causar que una forma de cristal domine. Los polimorfos de cristal de un compuesto de la invencion pueden prepararse por cristalizacion bajo diferentes condiciones.
Ademas, un compuesto de la invencion, por ejemplo una sal de un compuesto de la invencion, puede existir ya sea en forma hidratada o no hidratada (la anhidra) o como solvatos con otras moleculas de disolvente. Ejemplos no limitativos de hidratos, incluyen monohidratos, dihidratos, etc.
Ejemplos no limitativos de solvatos incluyen solvatos de etanol, solvatos de acetona, etc.
“Solvato” significa formas de adicion de disolvente que contienen ya sea cantidades estequiometricas o no estequiometricas de disolvente.
Algunos compuestos tienen una tendencia a atrapar una relacion molar fija de moleculas de disolvente en el estado solido cristalino, formando as! un solvato. Si el disolvente es agua, el solvato formado es un hidrato, cuando el disolvente es alcohol, el solvato formado es un alcoholato. Los hidratos se forman por la combinacion de una o mas moleculas de agua con una de las sustancias en las cuales el agua conserva su estado molecular como H2O, siendo esta combination capaz de formar uno o mas hidratos.
“Tautomero” se refiere a compuestos cuyas estructuras difieren marcadamente en disposicion de los atomos, pero que existen en equilibrio rapido y facil. Se debe entender que los compuestos de la invencion se pueden representar como tautomeros diferentes. Tambien debe entenderse que cuando un compuesto de la invencion tiene formas tautomericas, se pretende que todas las formas esten dentro del alcance de la invencion, y el nombre de los compuestos no excluye ninguna forma tautomerica.
Algunos compuestos de la invencion pueden existir en una forma tautomerica que tambien esta destinada a estar abarcada dentro del alcance de la invencion.
En un aspecto, un compuesto de la invencion puede existir en varias formas tautomericas, incluyendo la forma enol e imina, y la forma ceto y enamina e isomeros geometricos y mezclas de los mismos. Todas estas formas tautomericas estan incluidas dentro del alcance de la invencion. Los tautomeros existen como mezclas de un conjunto tautomerico en disolucion. En forma solida, normalmente un predomina tautomero. Incluso a pesar de que un tautomero pueda describirse, la invencion incluye todos los tautomeros del compuesto.
Un tautomero es uno de dos o mas isomeros estructurales que existen en equilibrio y se convierten facilmente de una forma isomerica a otra. Esta reaction da como resultado la migration formal de un atomo de hidrogeno acompanado por un cambio de dobles enlaces conjugados adyacentes. En disoluciones en las que es posible la tautomerizacion, se alcanzara un equilibrio qulmico de los tautomeros. La relacion exacta de los tautomeros depende de varios factores, incluyendo temperatura, disolvente y pH. El concepto de tautomeros que son
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interconvertibles por tautomerizaciones se denomina tautomerla.
De los diferentes tipos de tautomerla que son posibles, dos se observan comunmente. En la tautomerla ceto-enol, se produce un desplazamiento simultaneo de electrones y un atomo de hidrogeno. La tautomerla de cadena de anillo es mostrada por glucosa. Se origina como resultado del grupo aldehldo (-CHO) en una molecula de cadena de azucar que reacciona con uno de los grupos hidroxi (-OH) en la misma molecula para darle una forma clclica (forma de anillo).
Las tautomerizaciones son catalizadas por: base: 1. desprotonacion; 2. formacion de un anion deslocalizado (por ejemplo, un enolato); 3. protonacion en una posicion diferente del anion; acido: 1. protonacion; 2. formacion de un cation deslocalizado; 3. desprotonacion en una posicion diferente adyacente al cation.
Los pares tautomericos comunes son: tautomerla de cetona-enol, amida-nitrilo, lactama-lactima, amida-acido imldico en los anillos heteroclclicos (por ejemplo, en las nucleobases guanina, timina y citosina), amina-enamina y enamina- enamina.
Un compuesto de la invencion puede incluir atomos de carbono asimetricos. Se debe entender en consecuencia que los isomeros que se originan de esta asimetrla (por ejemplo, todos los enantiomeros y diastereomeros) estan incluidos dentro del alcance de la invencion, a menos que se indique lo contrario. Estos isomeros pueden obtenerse en forma sustancialmente pura mediante tecnicas de separacion clasicas y por slntesis controladas estereoqulmicamente. Ademas, las estructuras y otros compuestos y restos descritos en esta solicitud tambien incluyen todos los tautomeros de los mismos. Los alquenos pueden incluir ya sea la geometrla E o Z, cuando sea adecuado. Un compuesto de la invencion puede existir en forma estereoisomerica, por lo tanto se puede producir como estereoisomeros individuales o como mezclas.
Segun se usa en la presente, el termino “analogo” se refiere a un compuesto que es estructuralmente similar a otro pero difiere ligeramente en composition (como en el reemplazo de un atomo por un atomo de un elemento diferente o en presencia de un grupo funcional particular, o el reemplazo de un grupo funcional por otro grupo funcional). Asl, un analogo es un compuesto que es similar o comparable en funcion y apariencia, pero no en estructura u origen al compuesto de referencia.
Segun se define en la presente, el termino “derivado” se refiere a un compuesto que tiene una estructura central comun y esta sustituido con varios grupos como los descritos en la presente. Por ejemplo, todos los compuestos representados por la formula IV son derivados de 4-(tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-carboxamida y tienen 4-(tiazol-4-il)-1H- pirrol-2-carboxamida como un nucleo comun.
Una “composicion farmaceutica” es una formulation que contiene compuestos en una forma adecuada para su administration a un sujeto. En algunas realizaciones, la composicion farmaceutica esta en forma global o de dosis unica. La forma de dosis unica es cualquiera de una variedad de formas, incluyendo, por ejemplo, una capsula, una bolsa IV, un comprimido, una bomba individual en un inhalador de aerosol, o un vial. La cantidad de ingrediente activo (por ejemplo, una formulacion de un compuesto de la invencion o una sal, solvato, polimorfo, o profarmaco del mismo) en una dosis unitaria de composicion es una cantidad eficaz y varla de acuerdo con el tratamiento particular indicado.
Un experto en la tecnica apreciara que algunas veces es necesario hacer variaciones de rutina a la dosis dependiendo de la edad y condicion del paciente. La dosis tambien dependera de la ruta de administracion. Se contempla una variedad de rutas, incluyendo oral, pulmonar, rectal, parenteral, transdermica, subcutanea, intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, inhalacional, bucal, sublingual, intrapleural, intratecal, intranasal, y similar. Formas de dosis para la administracion topica o transdermica de un compuesto de la invencion incluyen polvos, pulverizaciones, pomadas, pastas, cremas, lociones, geles, disoluciones, parches e inhalantes. En algunas realizaciones, el compuesto activo es mezclado bajo condiciones esteriles con un portador farmaceuticamente aceptable, y con cualesquiera conservantes, amortiguadores o propelentes que se requieran.
La expresion “dosis instantanea” se refiere a formulaciones de compuesto que son formas de dosificacion de dispersion rapida.
La expresion “liberation inmediata” se define como una liberation de compuesto a partir de una forma de dosis en un perlodo de tiempo relativamente breve, generalmente de hasta alrededor de 60 minutos. La expresion “liberacion modificada” se define para incluir liberacion retrasada, liberacion extendida y liberacion pulsada. La expresion “liberacion pulsada” se define como una serie de liberaciones de farmaco desde una forma de dosificacion. La expresion “liberacion prolongada” o “liberacion extendida” se define como la liberacion continua de un compuesto de una forma de dosificacion durante un perlodo prolongado.
Un “sujeto” incluye mamlferos, por ejemplo seres humanos, animales de companla (por ejemplo, perros, gatos, aves y similares), animales de granja (por ejemplo, vacas, ovejas, cerdos, caballos, aves de corral y similares) y animales de laboratorio (por ejemplo, ratas, ratones, cobayas, aves y similares). En algunas realizaciones, el sujeto es un ser
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humano.
Segun se usa en la presente, la frase “farmaceuticamente aceptable” se refiere a aquellos compuestos, materiales, composiciones, portadores y/o formas de dosificacion que son, dentro del alcance del juicio medico correcto, adecuados para usarse en contacto con los tejidos de seres humanos y animales sin toxicidad, irritacion, respuesta alergica excesivas u otro problema o complication, de acuerdo con una relation beneficio/riesgo razonable.
“Excipiente farmaceuticamente aceptable” significa un excipiente que es util en la preparation de una composition farmaceutica que generalmente es segura, no toxica y ni biologicamente ni de otra manera indeseable, e incluye un excipiente que es aceptable para uso veterinario as! como uso farmaceutico en humanos. Un “excipiente farmaceuticamente aceptable” segun se usa en la presente incluye tanto uno como mas de uno de estos excipientes.
En un aspecto, un compuesto de la invention es capaz de formar ademas sales. Todas estas formas tambien se contemplan dentro del alcance de la invencion.
“Sal farmaceuticamente aceptable” de un compuesto de la invencion significa una sal que es farmaceuticamente aceptable y que posee la actividad farmacologica deseada del compuesto de origen.
Segun se usa en la presente, “sales farmaceuticamente aceptables” se refiere a derivados de un compuesto de la invencion, en el que el compuesto de origen es modificado al obtener sales de acidos o bases del mismo. Ejemplos de sales farmaceuticamente aceptables incluyen, pero no estan limitadas a, sales de acidos minerales u organicos de restos basicos tales como aminas, sales alcalinas u organicas de restos acidos tales como acidos carboxllicos, y similares. Las sales farmaceuticamente aceptables incluyen las sales no toxicas convencionales o las sales de amonio cuaternario del compuesto de origen formadas, por ejemplo, a partir de acidos inorganicos u organicos no toxicos. Por ejemplo, estas sales no toxicas convencionales incluyen, pero no estan limitadas a, aquellas derivadas de acidos inorganicos y organicos seleccionados de acidos 2-acetoxibenzoico, 2-hidroxietanosulfonico, acetico, ascorbico, bencenosulfonico, benzoico, bicarbonico, carbonico, cltrico, edetico, etanodisulfonico, 1,2-etanosulfonico, fumarico, glucoheptonico, gluconico, glutamico, glicolico, glicoliarsanllico, hexilresorclnico, hidrabamico, bromhldrico, clorhldrico, yodhldrico, hidroximaleico, hidroxinaftoico, isetionico, lactico, lactobionico, laurilsulfonico, maleico, malico, mandelico, metanosulfonico, napsllico, nltrico, oxalico, pamoico, pantotenico, fenilacetico, fosforico, poligalacturonico, propionico, salicllico, estearico, subacetico, succlnico, sulfamico, sulfanllico, sulfurico, tanico, tartarico, toluenosulfonico, y aminoacidos que se presentan comunmente, por ejemplo glicina, alanina, fenilalanina, arginina, etc.
Otros ejemplos incluyen acido hexanoico, acido ciclopentanopropionico, acido puruvico, acido malonico, acido 3-(4- hidroxibenzoil)benzoico, acido cinamico, acido 4-clorobencenosulfonico, acido 2-naftalenosulfonico, acido 4- toluenosulfonico, acido canfosulfonico, acido 4-metilbiciclo-[2.2.2]oct-2-en-1-carboxllico, acido 3-fenilpropionico, acido trimetilacetico, acido butilacetico terciario, acido muconico, y similares. La invencion tambien abarca sales formadas cuando un proton acido presente en el compuesto de origen es reemplazado por un ion metalico, por ejemplo un ion de metal alcalino, un ion alcalino-terreo, o un ion de aluminio; o se coordina con una base organica tal como etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, trometamina, N-metilglucamina, y similares.
Se debe entender que todas las referencias a sales farmaceuticamente aceptables incluyen formas de adicion con disolvente (solvatos) o formas de cristal (polimorfos) como los definidos aqul, de la misma sal.
Las sales farmaceuticamente aceptables de la presente invencion pueden ser sintetizadas a partir de un compuesto de origen que contenga un resto basico o acido mediante metodos qulmicos convencionales. Generalmente, estas sales pueden prepararse al hacer reaccionar las formas de acido o base libre de estos compuestos con una cantidad estequiometrica de la base o acido adecuado en agua o en un disolvente organico, o en una mezcla de los dos; se pueden usar medios no acuosos tales como eter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o acetonitrilo. Listas de sales adecuadas se encuentran en Remington's Pharmaceutical Sciences, 18a edicion (Mack Publishing Company, 1990).
“Compuesto estable” y “estructura estable” intentan indicar un compuesto que es lo suficientemente robusto como para sobrevivir al aislamiento hasta un grado de pureza util a partir de una mezcla de reaccion, y su formulacion en un agente terapeutico eficaz.
En la memoria descriptiva, las formas singulares tambien incluyen el plural, a menos que el contexto claramente dicte lo contrario. A menos que se defina de otro modo, todos los terminos tecnicos y cientlficos usados aqul tienen el mismo significado que el entendido comunmente por alguien de pericia normal en la tecnica a la cual esta invencion pertenece. En caso de conflicto, prevalecera la presente memoria descriptiva.
Todos los porcentajes y relaciones usados en la presente, a menos que se indique lo contrario, estan en peso.
La invencion proporciona compuestos para uso para el tratamiento de un trastorno proliferativo celular. El trastorno proliferativo celular puede ser cancer o una condicion precancerosa. La invencion proporciona ademas compuestos
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para uso para proteger contra un trastorno proliferativo celular. El trastorno proliferativo celular puede ser cancer o una condicion precancerosa.
Segun se usa en la presente, un “sujeto que lo requiera” es un sujeto que tiene un trastorno proliferativo celular, o un sujeto que tiene un riesgo incrementado de desarrollar un trastorno proliferativo celular con relacion a la poblacion en su conjunto. Un sujeto que lo requiera puede tener una condicion precancerosa. En un aspecto, un sujeto que lo requiera tiene cancer. Un “sujeto” incluye un mamlfero. El mamlfero puede ser, por ejemplo, cualquier mamlfero, por ejemplo un ser humano, primate, ave, raton, rata, ave, perro, gato, vaca, caballo, cabra, camello, ovejas o un cerdo. En un aspecto, el mamlfero es un ser humano.
Segun se usa en la presente, la expresion “trastorno proliferativo celular” se refiere a condiciones en las cuales un crecimiento desregulado o anormal, o ambos, de celulas puede llevar al desarrollo de una condicion o enfermedad no deseada, la cual puede o no ser cancerosa. Ejemplos de trastornos proliferativos celulares de la invencion abarcan una variedad de condiciones en las que la division celular esta desregulada. Ejemplos de trastorno proliferativo celular incluyen, pero no estan limitados a, neoplasias, tumores benignos, tumores malignos, condiciones precancerosas, tumores in situ, tumores encapsulados, tumores metastasicos, tumores llquidos, tumores solidos, tumores inmunologicos, tumores hematologicos, canceres, carcinomas, leucemias, linfomas, sarcomas, y celulas de division rapida. La expresion “celula de division rapida”, segun se usa en la presente, se define como cualquier celula que se divide a una velocidad que excede o es mayor que la que se espera u observa entre celulas vecinas o yuxtapuestas dentro del mismo tejido. Un trastorno proliferativo celular incluye un precancer o una condicion precancerosa. Un trastorno proliferativo celular incluye cancer. Los compuestos proporcionados en la presente se usan para tratar o aliviar un slntoma de cancer. El termino “cancer” incluye tumores solidos, as! como tumores hematologicos y/o neoplasias. Una “celula de precancer” o “celula precancerosa” es una celula que manifiesta un trastorno proliferativo celular que es un precancer o una condicion precancerosa.
Una “celula de cancer” o “celula cancerosa” es una celula que manifiesta un trastorno proliferativo celular que es un cancer. Cualquier medio reproducible de medicion puede usarse para identificar celulas cancerosas o celulas precancerosas. Las celulas cancerosas o celulas precancerosas pueden identificarse por tipificacion o graduacion histologica de una muestra de tejido (por ejemplo, una muestra de biopsia). Las celulas de cancer o celulas precancerosas pueden identificarse a traves del uso de marcadores moleculares adecuados.
Ejemplos de condiciones o trastornos no cancerosos incluyen pero no estan limitados a, artritis reumatoide; artritis psoriasica, inflamacion; enfermedad autoinmunitaria; enfermedad de ojo seco, condiciones linfoproliferativas; acromegalia; espondilitis reumatoide; osteoartritis; gota, otras condiciones artrlticas; septicemia; choque septico; choque endotoxico; septicemia por gramnegativas; slndrome de choque toxico; asma; slndrome de distension respiratoria del adulto; slndrome disneico del adulto; inflamacion pulmonar obstructiva cronica; inflamacion pulmonar cronica; enfermedad intestinal inflamatoria (por ejemplo, colitis ulcerosa y enfermedad de Crohn); psoriasis; eccema; fibrosis pancreatica; fibrosis hepatica; enfermedad renal aguda y cronica; slndrome del intestino irritable; piresis; restenosis; malaria cerebral; apoplejla y lesion isquemica; trauma neural; enfermedad de Alzheimer; enfermedad de Huntington; enfermedad de Parkinson; dolor agudo y cronico; rinitis alergica; conjuntivitis alergica; insuficiencia cardlaca cronica; slndrome coronario agudo; caquexia; malaria; lepra; leishmaniasis; enfermedad de Lyme; slndrome de Reiter; sinovitis aguda; degeneracion muscular, bursitis; tendinitis; tenosinovitis; slndrome de disco intervertebral herniado, roto o prolapsado; osteopetrosis; trombosis; restenosis; silicosis; sarcosis pulmonar; enfermedades de resorcion osea, tales como osteoporosis; rechazo de hospedante contra injerto; esclerosis multiple; lupus; fibromialgia; SIDA y otras enfermedades virales tales como herpes Zoster, herpes simple I o II, virus de la gripe y citomegalovirus; y diabetes mellitus.
Ejemplos de canceres incluyen, pero no estan limitados a, carcinoma adrenocortical, canceres relacionados con SIDA, linfoma relacionado con SIDA, cancer anal, cancer anorrectal, cancer del canal anal, cancer de apendice, astrocitoma cerebeloso infantil, astrocitoma cerebral infantil, carcinoma de celulas basales, cancer de piel (no melanoma), cancer biliar, cancer del conducto biliar extrahepatico, cancer del conductos biliar intrahepatico, cancer de vejiga, cancer de vejiga urinaria, cancer de hueso y articulaciones, osteosarcoma e histiocitoma fibroso maligno, cancer de cerebro, tumor cerebral, glioma de tallo cerebral, astrocitoma cerebeloso, astrocitoma cerebral/glioma maligno, ependimoma, meduloblastoma, tumores neuroectodeimales primitivos supratentoriales, glioma de la ruta visual e hipotalamico, cancer de mama, adenomas/carcinoides bronquiales, tumor carcinoide, gastrointestinal, cancer del sistema nervioso, linfoma del sistema nervioso, cancer del sistema nervioso central, linfoma del sistema nervioso central, cancer cervical, canceres infantiles, leucemia linfocltica cronica, leucemia mielogenosa cronica, leucemia mielogenosa aguda (tumores solidos), trastornos mieloproliferativos cronicos, cancer de colon, cancer colorrectal, linfoma de celulas T cutaneo, neoplasia linfoide, micosis fungoide, slndrome de Seziary, cancer endometrial, cancer esofagico, tumor de celulas germinales extracraneal, tumor de celulas germinales extragonadal, cancer del conducto biliar extrahepatico, cancer de ojo, melanoma intraocular, retinoblastoma, cancer de veslcula biliar, cancer gastrico (estomago), tumor carcinoide gastrointestinal, tumor estromico gastrointestinal (GIST), tumor de celulas germinales, tumor de celulas germinales ovarico, glioma de tumor trofoblastico gestacional, cancer de cabeza y cuello, cancer hepatocelular (hlgado), linfoma de Hodgkin, cancer hipofarlngeo, melanoma intraocular, cancer ocular, tumores de celulas de los islotes (pancreas endocrino), sarcoma de Kaposi, cancer renal (rinon), carcinoma de celulas renales (hipernefroma), cancer de laringe, leucemia linfoblastica aguda, leucemia mieloide
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aguda (AML) (tambien conocida como leucemia mielogenosa aguda), leucemia linfocitica cronica, leucemia mielogenosa cronica, leucemia de celulas pilosas, cancer de labio y cavidad oral, cancer de hlgado, cancer de pulmon, cancer pulmonar no microcltico, cancer pulmonar microcltico, linfoma relacionado con SIDA, linfoma no de Hodgkin, linfoma del sistema nervioso central primario, macroglobulinemia de Waldenstram, meduloblastoma, melanoma, melanoma intraocular (ojo), carcinoma de celulas de Merkel, mesotelioma maligno, mesotelioma, cancer de cuello escamoso metastasico, cancer de boca, cancer de la lengua, slndrome de neoplasia endocrina multiple, micosis fungoide, slndromes mielodisplasicos, enfermedades mielodisplasicas/mieloproliferativas, leucemia mielogenosa cronica, mieloma multiple, trastornos mieloproliferativos cronicos, cancer nasofarlngeo, neuroblastoma, cancer oral, cancer de cavidad oral, cancer orofarlngeo, cancer ovarico, cancer epitelial ovarico, tumor de bajo potencial maligno ovarico, cancer pancreatico, cancer pancreatico de celulas de los islotes, cancer de senos paranasales y cavidad nasal, cancer de paratiroides, cancer de pene, cancer farlngeo, feocromocitoma, pineoblastoma y tumores neuroectodermicos primitivos supratentoriales, tumor pituitario, neoplasia de celulas plasmaticas/mieloma multiple, blastoma pleuropulmonar, cancer de prostata, cancer rectal, pelvis renal y ureter, cancer de celulas transicionales, retinoblastoma, rabdomiosarcoma, cancer de glandulas salivares, la familia de Ewing de tumores de sarcoma, sarcoma de Kaposi, sarcoma de tejidos blandos, cancer uterino, sarcoma uterino, cancer de piel (no melanoma), cancer de piel (melanoma), carcinoma de piel de celulas de Merkel, cancer de intestino delgado, sarcoma de tejidos blandos, carcinoma de celulas escamosas, cancer de estomago (gastrico), tumores neuroectodermicos primitivos supratentoriales, cancer testicular, cancer de garganta, timoma, timoma y carcinoma tlmico, cancer de tiroides, cancer de celulas transicionales de la pelvis renal y ureter y otros organos urinarios, tumor trofoblastico gestacional, cancer uretral, cancer uterino endometrial, sarcoma uterino, cancer de cuerpo uterino, cancer vaginal, cancer vulvar y tumor de Wilm.
Un “trastorno proliferativo celular del sistema hematologico” es un trastorno proliferativo celular que incluye celulas del sistema hematologico. Un trastorno proliferativo celular del sistema hematologico puede incluir linfoma, leucemia, neoplasias mieloides, neoplasias de mastocitos, mielodisplasia, ganmopatla monoclonal benigna, granulomatosis linfomatoide, papulosis linfomatoide, policitemia vera (eritremia), leucemia mielocltica cronica, metaplasia mieloide agnogenica, y trombocitemia esencial. Un trastorno proliferativo celular del sistema hematologico puede incluir hiperplasia, displasia y metaplasia de celulas del sistema hematologico. En un aspecto, una composition de la invention puede usarse para tratar un cancer seleccionado de entre el grupo que consiste en un cancer hematologico de la presente invencion o un trastorno proliferativo de celulas hematologicas de la presente invencion. Un cancer hematologico de la presente invencion puede incluir mieloma multiple, linfoma (incluyendo linfoma de Hodgkin, linfoma no de Hodgkin, linfomas infantiles y linfomas de origen linfocltico y cutaneo), leucemia (incluyendo leucemia infantil, leucemia de celulas pilosas, leucemia linfocitica aguda, leucemia mielocltica aguda, leucemia linfocitica cronica, leucemia mielocltica cronica, leucemia mielogenosa cronica y leucemia de mastocitos), neoplasias mieloides y neoplasias de mastocitos.
Un “trastorno proliferativo celular del pulmon” es un trastorno proliferativo celular que incluye celulas del pulmon. Los trastornos proliferativos celulares del pulmon pueden incluir todas las formas de trastornos proliferativos celulares que afecten celulas del pulmon. Los trastornos proliferativos celulares del pulmon pueden incluir cancer de pulmon, un precancer o condition precancerosa del pulmon, crecimientos o lesiones benignas del pulmon, y crecimientos o lesiones malignas del pulmon, y lesiones metastasicas en tejido y organos en el cuerpo distintos del pulmon. Composiciones de la invencion pueden usarse para tratar cancer pulmonar o trastornos proliferativos celulares del pulmon. El cancer de pulmon puede incluir todas las formas de cancer del pulmon. El cancer de pulmon puede incluir neoplasias de pulmon malignos, carcinoma in situ, tumores carcinoides tlpicos, y tumores carcinoides atlpicos. El cancer de pulmon puede incluir cancer pulmonar microcltico (“SCLC”), cancer pulmonar no microcltico (“NSCLC”), carcinoma de celulas escamosas, adenocarcinoma, carcinoma microcltico, carcinoma macrocitico, carcinoma de celulas adenoescamosas, y mesotelioma. El cancer de pulmon puede incluir “carcinoma cicatricial”, carcinoma broncoalveolar, carcinoma de celulas gigantes, carcinoma de celulas fusiformes, y carcinoma neuroendocrino macrocitico. El cancer de pulmon puede incluir neoplasias de pulmon que tengan heterogeneidad histologica y ultraestructural (por ejemplo, tipos de celulas mixtas).
Los trastornos proliferativos celulares del pulmon pueden incluir todas las formas de trastornos proliferativos celulares que afecten a las celulas del pulmon. Los trastornos proliferativos celulares del pulmon pueden incluir cancer de pulmon, condiciones precancerosas del pulmon. Los trastornos proliferativos celulares del pulmon pueden incluir hiperplasia, metaplasia y displasia del pulmon. Los trastornos proliferativos celulares del pulmon pueden incluir hiperplasia inducida por asbesto, metaplasia escamosa y metaplasia mesotelial reactiva benigna. Los trastornos proliferativos celulares del pulmon pueden incluir reemplazo de epitelio columnar por epitelio escamoso estratificado y displasia de mucosas. Los individuos expuestos a agentes ambientales daninos inhalados tales como humo de cigarrillo y asbesto pueden estar en riesgo incrementado de desarrollar trastornos proliferativos celulares del pulmon. Las enfermedades de pulmon anteriores que pueden predisponer a los individuos al desarrollo de trastornos proliferativos celulares del pulmon pueden incluir enfermedad pulmonar intersticial cronica, enfermedad pulmonar necrotizante, esclerodermia, enfermedad reumatoide, sarcoidosis, neumonia intersticial, tuberculosis, neumonias repetidas, fibrosis pulmonar idiopatica, granulomas, asbestosis, alveolitis fibrosante, y enfermedad de Hodgkin.
Un “trastorno proliferativo celular del colon” es un trastorno proliferativo celular que incluye celulas del colon. El
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trastorno proliferativo celular del colon es cancer de colon. Las composiciones de la invencion pueden usarse para tratar cancer de colon o trastornos proliferativos celulares del colon. El cancer de colon puede incluir todas las formas de cancer del colon. El cancer de colon puede incluir canceres de colon esporadicos y hereditarios. El cancer de colon puede incluir neoplasias de colon malignos, carcinoma in situ, tumores carcinoides tlpicos y tumores carcinoides atlpicos. El cancer de colon puede incluir adenocarcinoma, carcinoma de celulas escamosas, y carcinoma de celulas adenoescamosas. El cancer de colon puede estar asociado con un slndrome hereditario seleccionado de entre el grupo que consiste en cancer colorrectal sin poliposis hereditario, poliposis adenomatosa familiar, slndrome de Gardner, slndrome de Peutz-Jeghers, slndrome de Turcot y poliposis juvenil. El cancer de colon puede ser causado por un slndrome hereditario seleccionado de entre el grupo que consiste en cancer colorrectal sin poliposis hereditario, poliposis adenomatosa familiar, slndrome de Gardner, slndrome de Peutz- Jeghers, slndrome de Turcot y poliposis juvenil.
Los trastornos proliferativos celulares del colon pueden incluir todas las formas de trastornos proliferativos celulares que afecten a celulas del colon. Los trastornos proliferativos celulares del colon pueden incluir cancer de colon, condiciones precancerosas del colon, polipos adenomatosos del colon, y lesiones metacronosas del colon. Un trastorno proliferativo celular del colon puede incluir adenoma. Los trastornos proliferativos celulares del colon pueden caracterizarse por hiperplasia, metaplasia y displasia del colon. Las enfermedades del colon previas que pueden predisponer a individuos al desarrollo de trastornos proliferativos celulares del colon pueden incluir cancer de colon previo. Enfermedad actual que puede predisponer a individuos al desarrollo de trastornos proliferativos celulares del colon puede incluir enfermedad de Crohn y colitis ulcerosa. Un trastorno proliferativo celular del colon puede estar asociado con una mutacion en un gen seleccionado de entre el grupo que consiste en p53, ras, FAP y DCC. Un individuo puede tener un riesgo elevado de desarrollar un trastorno proliferativo celular del colon debido a la presencia de una mutacion en un gen seleccionado de entre el grupo que consiste en p53, ras, FAP y DCC.
Un “trastorno proliferativo celular del pancreas” es un trastorno proliferativo celular que incluye celulas del pancreas. Los trastornos proliferativos celulares del pancreas pueden incluir todas las formas de trastornos proliferativos celulares que afecten a celulas pancreaticas. Los trastornos proliferativos celulares del pancreas pueden incluir cancer de pancreas, un precancer o condicion precancerosa del pancreas, hiperplasia del pancreas y displasia del pancreas, crecimientos o lesiones benignas del pancreas y crecimientos o lesiones malignas del pancreas, y lesiones metastasicas en tejido y organos en el cuerpo distintos el pancreas. El cancer pancreatico incluye todas las formas de cancer del pancreas. El cancer pancreatico puede incluir adenocarcinoma ductal, carcinoma adenoescamoso, carcinoma de celulas gigantes pleomorfico, adenocarcinoma mucinoso, carcinoma de celulas gigantes tipo osteoclasto, cistadenocarcinoma mucinoso, carcinoma acinar, carcinoma macrocltico no clasificado, carcinoma microcltico, pancreatoblastoma, neoplasia papilar, cistadenoma mucinoso, neoplasia clstica papilar y cistadenoma seroso. El cancer pancreatico tambien puede incluir neoplasias pancreaticas que tengan heterogeneidad histologica y ultraestructural (por ejemplo, tipos de celulas mixtos).
Un “trastorno proliferativo celular de la prostata” es un trastorno proliferativo celular que incluye celulas de la prostata. Los trastornos proliferativos celulares de la prostata pueden incluir todas las formas de trastornos proliferativos celulares que afecten a celulas de la prostata. Los trastornos proliferativos celulares de la prostata pueden incluir cancer de prostata, un precancer o condicion precancerosa de la prostata, crecimientos o lesiones benignas de la prostata, y crecimientos o lesiones malignas de la prostata, y lesiones metastasicas en tejido y organos en el cuerpo distintos la prostata. Los trastornos proliferativos celulares de la prostata pueden incluir hiperplasia, metaplasia y displasia de la prostata.
Un “trastorno proliferativo celular de la piel” es un trastorno proliferativo celular que incluye celulas de la piel. Los trastornos proliferativos celulares de la piel pueden incluir todas las formas de trastornos proliferativos celulares que afecten a celulas dermicas. Los trastornos proliferativos celulares de la piel pueden incluir un precancer o condicion precancerosa de la piel, crecimientos o lesiones benignas de la piel, melanoma, melanoma maligno y otros crecimientos o lesiones malignos de la piel, y lesiones metastasicas en tejido y organos en el cuerpo distintos de la piel. Los trastornos proliferativos celulares de la piel pueden incluir hiperplasia, metaplasia y displasia de la piel.
Un “trastorno proliferativo celular del ovario” es un trastorno proliferativo celular que incluye celulas del ovario. Los trastornos proliferativos celulares del ovario pueden incluir todas las formas de trastornos proliferativos celulares que afectan a celulas del ovario. Los trastornos proliferativos celulares del ovario pueden incluir un precancer o condicion precancerosa del ovario, crecimientos o lesiones benignas del ovario, cancer ovarico, crecimientos o lesiones malignas del ovario, y lesiones metastasicas en tejido y organos en el cuerpo distintos del ovario. Los trastornos proliferativos celulares de la piel pueden incluir hiperplasia, metaplasia y displasia de celulas del ovario.
Un “trastorno proliferativo celular de la mama” es un trastorno proliferativo celular que incluye celulas de la mama. Los trastornos proliferativos celulares de la mama pueden incluir todas las formas de trastornos proliferativos celulares que afecten a celulas de la mama. Los trastornos proliferativos celulares de la mama pueden incluir cancer de mama, un precancer o condicion precancerosa de la mama, crecimientos o lesiones benignas de la mama, y crecimientos o lesiones malignas de la mama, y lesiones metastasicas en tejido y organos en el cuerpo distintos de la mama. Los trastornos proliferativos celulares de la mama pueden incluir hiperplasia, metaplasia y displasia de la mama.
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Un trastorno proliferativo celular de la mama puede ser una condicion precancerosa de la mama. Composiciones de la presente invencion pueden usarse para tratar una condicion precancerosa de la mama. Una condicion precancerosa de la mama puede incluir hiperplasia atlpica de la mama, carcinoma ductal in situ (DCIS), carcinoma intraductal, carcinoma lobulillar in situ (LClS), neoplasia lobulillar y crecimiento o lesion en etapa 0 o grado 0 de la mama (por ejemplo, cancer de mama en etapa 0 o grado 0, o carcinoma in situ). Una condicion precancerosa de la mama puede ser clasificada de acuerdo con el esquema de clasificacion TNM aceptado por el American Joint Committee on Cancer (AJCC), en el que el tumor primario (T) ha sido asignado a una etapa de T0 o Tis; y en el que a los ganglios linfaticos regionales (N) se les ha asignado una etapa de N0; y en el que a la metastasis distante (N) se le ha asignado una etapa de M0.
El trastorno proliferativo celular de la mama puede ser cancer de mama. El cancer de mama incluye todas las formas de cancer de la mama. El cancer de mama puede incluir canceres de mama epiteliales primarios. El cancer de mama puede incluir canceres en los cuales la mama esta implicada por otros tumores tales como linfoma, sarcoma o melanoma. El cancer de mama puede incluir carcinoma de la mama, carcinoma ductal de la mama, carcinoma lobulillar de la mama, carcinoma no diferenciado de la mama, cistosarcoma filoide de la mama, angiosarcoma de la mama, y linfoma primario de la mama. El cancer de mama puede incluir cancer de mama de etapa I, II, IIIA, IIIB, IIIC y IV. El carcinoma ductal de la mama puede incluir carcinoma invasivo, carcinoma invasivo in situ con componente intraductal predominante, cancer de mama inflamatorio y carcinoma ductal de la mama con un tipo histologico seleccionado de entre el grupo que consiste en comedo, mucinoso (coloide), medular, medular con infiltrado linfocltico, papilar, cirroso, y tubular. El carcinoma lobulillar de la mama puede incluir carcinoma lobulillar invasivo con componente in situ predominante, carcinoma lobulillar invasivo, y carcinoma lobulillar infiltrante. El cancer de mama puede incluir enfermedad de Paget, enfermedad de Paget con carcinoma intraductal, y enfermedad de Paget con carcinoma ductal invasivo. El cancer de mama puede incluir neoplasias de la mama que tengan heterogeneidad histologica y ultraestructural (por ejemplo, tipos de celulas mixtas).
Un cancer de mama que vaya a ser tratado puede incluir cancer de mama familiar. Un cancer de mama que vaya a ser tratado puede incluir cancer de mama esporadico. Un cancer de mama que vaya a ser tratado puede originarse en un sujeto masculino. Un cancer de mama que vaya a ser tratado puede originarse en un sujeto femenino. Un cancer de mama que vaya a ser tratado puede originarse en un sujeto femenino premenopausico o un sujeto femenino postmenopausico. Un cancer de mama que vaya a ser tratado puede originarse en un sujeto igual a o mayor que 30 anos de edad, o un sujeto mas joven que 30 anos de edad. Un cancer de mama que vaya a ser tratado se ha originado en un sujeto igual a o mayor que 50 anos de edad, o un sujeto mas joven que 50 anos de edad. Un cancer de mama que vaya a ser tratado puede originarse en un sujeto igual a o mayor que 70 anos de edad, o un sujeto de mas de 70 anos de edad.
Un cancer de mama que vaya a ser tratado puede ser tipificado para identificar una mutacion familiar o espontanea en BRCA1, BRCA2 o p53. Un cancer de mama que vaya a ser tratado puede ser tipificado por tener amplificacion del gen HER2/neu, por sobreexpresar HER2/neu, o por tener un nivel bajo, intermedio o alto de expresion de HER2/neu. Un cancer de mama que vaya a ser tratado puede ser tipificado como negativo para HER2 o positivo para HER2. La tipificacion por HER2 de un cancer de mama puede llevarse a cabo por cualquier medio reproducible. Un cancer de mama que se va a tratar puede ser tipificado para un marcador seleccionado de entre el grupo que consiste en receptor de estrogenos (ER), receptor de progesterona (PR), receptor 2 de factor de crecimiento epidermico humano, Ki-67, CA15-3, CA 27-29 y c-Met. Un cancer de mama que se va a tratar puede ser tipificado como desconocido para ER, rico en ER o pobre en ER. Un cancer de mama que se va a tratar puede ser tipificado como negativo para ER o positivo para ER. La tipificacion de ER de un cancer de mama se puede llevar a cabo por cualquier medio reproducible. La tipificacion de ER de un cancer de mama puede llevarse a cabo como se muestra en Onkologie 27: 175-179 (2004). Un cancer de mama que se va a tratar puede ser tipificado como desconocido para PR, rico en PR o pobre en PR. Un cancer de mama que se va a tratar puede ser tipificado como negativo para PR o positivo para PR. La tipificacion de PR de un cancer de mama puede llevarse a cabo mediante cualquier medio reproducible. Un cancer de mama que se va a tratar puede ser tipificado como positivo para el receptor o negativo para el receptor. Un cancer de mama que se va a tratar puede tener multiples receptores, cada uno tipificado independientemente como positivo para el receptor o negativo para el receptor. Por ejemplo, un cancer de mama que puede ser tratado puede ser “un cancer de mama negativo triple” (es decir, tipificado como negativo para ER, negativo para PR y negativo para HER2). Un cancer de mama que se va a tratar puede ser tipificado como por estar asociado con niveles elevados en sangre de CA 15-3, o CA 27-29, o ambos.
Un cancer de mama que se va a tratar puede incluir un tumor localizado de la mama. Un cancer de mama que se va a tratar puede incluir un tumor de la mama que esta asociado con una biopsia de ganglio linfatico centinela (SLN) negativa. Un cancer de mama que se va a tratar puede incluir un tumor de la mama que esta asociado con una biopsia de ganglio linfatico centinela (SLN) positiva. Un cancer de mama que se va a tratar puede incluir un tumor de la mama que esta asociado con uno o mas ganglios linfaticos axilares positivos, en el que los ganglios linfaticos axilares se han clasificado por fases mediante un metodo aplicable. Un cancer de mama que se va a tratar puede incluir un tumor de la mama que se ha tipificado por tener un estado ganglionar negativo (por ejemplo, ganglio negativo) o estado ganglionar positivo (por ejemplo, ganglio positivo). Un cancer de mama que se va a tratar puede incluir un tumor de la mama que se ha metastatizado a otras localizaciones en el cuerpo. Un cancer de mama que
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se va a tratar se puede clasificar por haberse metastatizado hacia una localizacion seleccionada de entre el grupo que consiste en hueso, pulmon, hlgado, o cerebro. Un cancer de mama que se va a tratar se puede clasificar segun una caracterlstica seleccionada de entre el grupo que consiste en metastasico, localizado, regional, local-regional, localmente avanzado, distante, multicentrico, bilateral, ipsilateral, contralateral, recientemente diagnosticado, recurrente, e inoperable.
Un compuesto de la presente invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, polimorfo o solvato del mismo, se puede usar para tratar o prevenir un trastorno proliferativo celular de la mama, o para tratar o prevenir cancer de mama, en un sujeto que tiene un mayor riesgo de desarrollar cancer de mama con respecto a la poblacion en general. Un sujeto con mayor riesgo de desarrollar cancer de mama con respecto a la poblacion en general es un sujeto femenino con antecedentes familiares o antecedentes personales de cancer de mama. Un sujeto con un mayor riesgo de desarrollar cancer de mama con respecto a la poblacion en general es un sujeto femenino que tiene una mutacion de llnea germinal o espontanea en BRCA1 o BRCA2, o en ambos. Un sujeto con un mayor riesgo de desarrollar cancer de mama con respecto a la poblacion en general es un sujeto femenino con un antecedente familiar de cancer de mama y una mutacion de llnea germinal o espontanea en bRcAI o BRCA2, o en ambos. Un sujeto con un mayor riesgo de desarrollar cancer de mama con respecto a la poblacion en general es un sujeto femenino que tiene mas de 30 anos de edad, mas de 40 anos de edad, mas de 50 anos de edad, mas de 60 anos de edad, mas de 70 anos de edad, mas de 80 anos de edad, o mas de 90 anos de edad. Un sujeto con un mayor riesgo de desarrollar cancer de mama con respecto a la poblacion en general es un sujeto con hiperplasia atlpica de la mama, carcinoma ductal in situ (DCIS), carcinoma intraductal, carcinoma lobulillar in situ (LCIS), neoplasia lobulillar, o un crecimiento o lesion de fase 0 de la mama (por ejemplo, cancer de mama de fase 0 o grado 0, o carcinoma in situ).
Un cancer de mama que se va a tratar se puede graduar histologicamente segun el sistema de Scarff-Bloom- Richardson, en el que a un tumor de mama se le ha asignado una puntuacion de recuento mitotico de 1, 2 o 3; una puntuacion de pleiomorfismo nuclear de 1, 2, o 3; una puntuacion de formacion de tubulos de 1, 2, o 3; y una puntuacion de Scarff-Bloom-Richardson total de entre 3 y 9. A un cancer de mama que se va a tratar se le puede asignar un grado tumoral segun el Panel de Consenso Internacional en el Tratamiento de Cancer de Mama seleccionado de entre el grupo que consiste en grado 1, grado 1-2, grado 2, grado 2-3, o grado 3.
Un cancer que se va a tratar se puede clasificar segun el sistema de clasificacion TNM del American Joint Committee on Cancer (AJCC), en el que al tumor (T) se le asigna una fase de TX, T1, T1mic, T1a, T1b, T1c, T2, T3, T4, T4a, T4b, T4c, o T4d; y en el que a los ganglios linfaticos regionales (N) se les ha asignado una fase de NX, N0, N1, N2, N2a, N2b, N3, N3a, N3b, o N3c; y en el que a la metastasis distante (M) se le puede asignar una fase de MX, M0, o M1. Un cancer que se va a tratar se puede clasificar segun una clasificacion de la American Joint Committee on Cancer (AJCC) de Fase I, Fase IIA, Fase I IB, Fase IIIA, Fase IIIB, Fase IIIC, o Fase IV. A un cancer que se va a tratar se le puede asignar un grado segun una clasificacion de AJCC como Grado GX (por ejemplo, el grado no se puede evaluar), Grado 1, Grado 2, Grado 3 o Grado 4. Un cancer que se va a tratar se puede clasificar segun una clasificacion patologica (pN) de AJCC de pNX, pN0, PN0 (I-), PN0 (I+), PN0 (mol-), PN0 (mol+), PN1, PN1(mi), PN1a, PN1b, PN1c, pN2, pN2a, pN2b, pN3, pN3a, pN3b, o pN3c.
Un cancer que se va a tratar puede incluir un tumor el cual se ha determinado que es menor o igual que alrededor de 2 centlmetros de diametro. Un cancer que se va a tratar puede incluir un tumor el cual se ha determinado que tiene de alrededor de 2 a alrededor de 5 centlmetros de diametro. Un cancer que se va a tratar puede incluir un tumor el cual se ha determinado que es mayor o igual que alrededor de 3 centlmetros de diametro. Un cancer que se va a tratar puede incluir un tumor el cual se ha determinado que es mayor que 5 centlmetros de diametro. Un cancer que se va a tratar se puede clasificar por aspecto microscopico as! como diferenciado, moderadamente diferenciado, pobremente diferenciado, o no diferenciado. Un cancer que se va a tratar se puede clasificar mediante aspecto microscopico con respecto al recuento mitotico (por ejemplo, cantidad de division celular) o pleiomorfismo nuclear (por ejemplo, cambio en las celulas). Un cancer que se va a tratar se puede clasificar mediante aspecto microscopico por estar asociado con areas de necrosis (por ejemplo, areas de celulas que mueren o que se degeneran). Un cancer que se va a tratar se puede clasificar por tener un cariotipo anormal, tener un numero anormal de cromosomas, o tener uno o mas cromosomas que tienen aspecto anormal. Un cancer que se va a tratar se puede clasificar por ser aneuploide, triploide, tetraploide, o por tener una ploidla alterada. Un cancer que se va a tratar se puede clasificar por tener una translocacion cromosomica, o una supresion o duplicacion de todo el cromosoma, o una region de supresion, duplicacion o amplificacion de una porcion de un cromosoma.
Un cancer que se va a tratar se puede evaluar mediante citometrla de ADN, citometrla de flujo, o citometrla de imagen. Un cancer que se va a tratar se puede tipificar por tener 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, o 90% de celulas en la fase de slntesis de la division celular (por ejemplo, en la fase S de la division celular). Un cancer que se va a tratar se puede tipificar por tener una fraccion baja de fase S o una fraccion elevada de fase S.
Segun se usa en la presente, una “celula normal” es una celula que no se puede clasificar como parte de un “trastorno proliferativo celular”. Una celula normal carece de crecimiento no regulado o anormal, o de ambos, que puede conducir al desarrollo de una afeccion o enfermedad indeseada. En un aspecto, una celula normal posee mecanismos de control del punto de control del ciclo celular que funcionan normalmente.
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Segun se usa en la presente, “poner en contacto una celula” se refiere a una condition en la que un compuesto u otra composition de materia estan en contacto directo con una celula, o esta suficientemente proximo para inducir un efecto biologico deseado en una celula.
Segun se usa en la presente, “compuesto candidato” se refiere a un compuesto de la presente invention, o a una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, polimorfo o solvato del mismo, que se ha ensayado o se ensayara en uno o mas ensayos biologicos in vitro o in vivo, a fin de determinar si es probable que ese compuesto provoque una respuesta biologica o medica deseada en una celula, tejido, sistema, animal o ser humano que se busca por un investigador o medico. Un compuesto candidato es un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, polimorfo o solvato del mismo. La respuesta biologica o medica puede ser el tratamiento de cancer. La respuesta biologica o medica puede ser tratamiento o prevention de un trastorno proliferativo celular. Los ensayos biologicos in vitro o in vivo pueden incluir, pero no se limitan a, ensayos de actividad enzimatica, ensayos de desplazamiento de la movilidad electroforetica, ensayos de gen informador, ensayos de viabilidad celular in vitro, y los ensayos descritos en la presente.
Segun se usa en la presente, “monoterapia” se refiere a la administration de un unico compuesto activo o terapeutico a un sujeto que lo requiera. En un aspecto, la monoterapia implicara la administracion de una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto activo. Por ejemplo, monoterapia del cancer con uno de los compuestos de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, analogo o derivado de los mismos, a un sujeto que necesita tratamiento de cancer. La monoterapia se puede poner en contraste con terapia de combinacion, en la que se administra una combinacion de multiples compuestos activos, o con cada componente de la combination presente en una cantidad terapeuticamente eficaz. En un aspecto, la monoterapia con un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, polimorfo o solvato del mismo, es mas eficaz que la terapia de combinacion en la induction de un efecto biologico deseado.
Segun se usa en la presente, “tratando” o “tratar” describe el manejo y cuidado de un paciente con el fin de combatir una enfermedad, afeccion, o trastorno, e incluye la administracion de un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, polimorfo o solvato del mismo, para aliviar los slntomas o complicaciones de una enfermedad, afeccion o trastorno, o para eliminar la enfermedad, afeccion o trastorno.
Un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, polimorfo o solvato del mismo, se puede usar tambien para prevenir una enfermedad, afeccion o trastorno. Segun se usa en la presente, “que previene” o “prevenir” describe reducir o eliminar el comienzo de los slntomas o complicaciones de la enfermedad, afeccion o trastorno.
Segun se usa en la presente, el termino “aliviar” describe un proceso mediante el cual se disminuye la gravedad de un signo o slntoma de un trastorno. De forma importante, un signo o slntoma se puede aliviar sin ser eliminado. En una realization, la administracion de composiciones farmaceuticas de la invencion conduce a la elimination de un signo o slntoma; sin embargo, no se requiere la eliminacion. Se espera que las dosis eficaces disminuyan la gravedad de un signo o slntoma. Por ejemplo, un signo o slntoma de un trastorno tal como cancer, que puede aparecer en multiples localizaciones, se alivia si la gravedad del cancer se disminuye en por lo menos una de las multiples localizaciones.
Segun se usa en la presente, el termino “gravedad” describe el potencial del cancer para transformarse de un estado precanceroso, o benigno, en un estado maligno. Como alternativa, o ademas, la gravedad describe una fase del cancer, por ejemplo segun el sistema TNM (aceptado por la International Union Against Cancer (UICC) y el American Joint Committee on Cancer (AJCC)) o mediante otros metodos reconocidos en la tecnica. La fase del cancer se refiere a grado o gravedad del cancer, en base a factores tales como la localization del tumor primario, tamano del tumor, numero de tumores, e implication de los ganglios linfaticos (diseminacion del cancer en los ganglios linfaticos). Como alternativa, o ademas, la gravedad describe el grado tumoral mediante metodos reconocidos en la tecnica (vease el Instituto Nacional del Cancer,
www.cancer.gov). El grado tumoral es un sistema usado para clasificar celulas cancerosas en terminos de cuan anormales parecen bajo un microscopio y cuan rapidamente crecera y se diseminara probablemente el tumor. Cuando se determina el grado tumoral se consideran muchos factores, incluyendo la estructura y el patron de crecimiento de las celulas. Los factores especlficos usados para determinar el grado tumoral varlan con cada tipo de cancer. La gravedad tambien describe un grado histologico, tambien denominado diferenciacion, que se refiere a cuanto se asemejan las celulas tumorales a celulas normales del mismo tipo tisular (vease Instituto Nacional del Cancer,
www.cancer.gov). Ademas, la gravedad describe un grado nuclear, que se refiere al tamano y forma del nucleo en celulas tumorales, y el porcentaje de celulas tumorales que se dividen (vease Instituto Nacional del Cancer,
www.cancer.gov).
En otro aspecto de la invencion, la gravedad describe el grado hasta el cual un tumor ha segregado factores de crecimiento, ha degradado la matriz extracelular, se ha vascularizado, ha perdido adhesion a tejidos yuxtapuestos, o se ha metastatizado. Ademas, la gravedad describe el numero de localizaciones hacia las cuales se ha metastatizado un tumor primario. Finalmente, la gravedad incluye la dificultad de tratar tumores de tipos y localizaciones variables. Por ejemplo, los tumores inoperables, aquellos canceres que tienen un mayor acceso a
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multiples sistemas del cuerpo (tumores hematologicos e inmunologicos), y aquellos que son los mas resistentes a tratamientos tradicionales son considerados muy graves. En estas situaciones, prolongar la esperanza de vida del sujeto y/o reducir el dolor, disminuir la proporcion de celulas cancerosas o restringir las celulas a un sistema, y mejorar la fase del cancer/grado tumoral/grado histologico/grado nuclear se consideran aliviar un signo o slntoma del cancer.
Segun se usa en la presente, el termino “slntoma” se define como una indication de enfermedad, mal, lesion, o que algo no va bien en el cuerpo. Los slntomas son sentidos o percibidos por el individuo que experimenta el slntoma, pero pueden no ser percibidos facilmente por otros. Otros se definen como profesionales no sanitarios.
Segun se usa en la presente, el termino “signo” tambien se define como una indicacion de que algo no va bien en el cuerpo. Pero los signos se definen como sucesos que pueden ser observados por un medico, enfermera, u otro profesional sanitario.
El cancer es un grupo de enfermedades que pueden provocar casi cualquier signo o slntoma. Los signos y slntomas dependeran de donde esta el cancer, del tamano del cancer, y de cuanto afecta a los organos o estructuras cercanos. Si un cancer se disemina (metastatiza), entonces los slntomas pueden aparecer en diferentes partes del cuerpo.
A medida que un cancer crece, comienza a presionar organos, vasos sangulneos, y nervios. Esta presion crea algunos de los signos y slntomas de cancer. Si el cancer esta en un area crltica, tal como ciertas partes del cerebro, incluso el tumor mas pequeno puede provocar slntomas tempranos.
Pero algunas veces los canceres comienzan en lugares en los que no provocan ningun slntoma hasta que el cancer ha crecido bastante. Por ejemplo, los canceres del pancreas habitualmente no crecen suficientemente para ser sentidos fuera del cuerpo. Algunos canceres pancreaticos no provocan slntomas hasta que comienzan a crecer alrededor de nervios cercanos (esto provoca dolor de espalda). Otros crecen alrededor del conducto biliar, que bloquea el flujo de bilis y conduce a un amarillamiento de la piel conocido como ictericia. Para cuando un cancer pancreatico provoca estos signos o slntomas, habitualmente ha alcanzado una fase avanzada.
Un cancer tambien puede provocar slntomas tales como fiebre, fatiga, o perdida de peso. Esto puede ser debido a que las celulas del cancer gastan mucho del suministro de energla del cuerpo, o liberan sustancias que cambian el metabolismo corporal. O el cancer puede hacer que el sistema inmune reaccione de manera que produzca estos slntomas.
Algunas veces, las celulas del cancer liberan sustancias en el torrente sangulneo que provocan slntomas que no se piensa habitualmente que resultan de canceres. Por ejemplo, algunos canceres del pancreas pueden liberar sustancias que provocan que se desarrollen coagulos de sangre en las venas de las piernas. Algunos canceres de pulmon crean sustancias similares a hormonas que afectan a los niveles de calcio en sangre, afectando a nervios y musculos y provocando debilidad y mareo.
El cancer presenta varios signos o slntomas generales que aparecen cuando esta presente una variedad de subtipos de celulas de cancer. La mayorla de personas con cancer perderan peso en algun momento con su enfermedad. Una perdida de peso inexplicada (no intencionada) de 4,53 kilos o mas puede ser el primer signo de cancer, particularmente canceres del pancreas, estomago, esofago o pulmon.
La fiebre es muy comun con el cancer, pero se observa mas a menudo en enfermedad avanzada. Casi todos los pacientes con cancer tendran fiebre en algun momento, especialmente si el cancer o su tratamiento afecta al sistema inmune y hace mas diflcil que el cuerpo luche contra la infection. Menos a menudo, la fiebre puede ser un signo temprano de cancer, tal como con leucemia o linfoma.
La fatiga puede ser un slntoma importante a medida que el cancer avanza. Sin embargo, puede ocurrir tempranamente en canceres tales como con leucemia, o si el cancer esta provocando una perdida continua de sangre, como en algunos canceres de colon o de estomago.
El dolor puede ser un slntoma temprano con algunos canceres tales como canceres de hueso o cancer testicular. Pero muy a menudo el dolor es un slntoma de la enfermedad avanzada.
Junto con canceres de la piel (vease la proxima section), algunos canceres internos pueden provocar signos de la piel que se pueden observar. Estos cambios incluyen el oscurecimiento (hiperpigmentacion), amarillamiento (ictericia), o enrojecimiento (eritema) de la piel; prurito; o crecimiento excesivo del pelo.
Como alternativa, o ademas, subtipos de cancer presentan signos o slntomas especlficos. Los cambios en los habitos intestinales o en la funcion de la vejiga podrlan indicar cancer. El estrenimiento a largo plazo, la diarrea, o un cambio en el tamano de las heces puede ser un signo de cancer de colon. El dolor al orinar, la sangre en la orina, o un cambio en la funcion de la vejiga (tal como miccion mas frecuente o menos frecuente) podrlan estar relacionados
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con cancer de vejiga o de prostata.
Los cambios en el estado de la piel o la aparicion de un nuevo estado de la piel podrian indicar cancer. Los canceres de piel pueden sangrar y parecer ulceras que no se curan. Una ulcera de larga duracion en la boca podria ser un cancer oral, especialmente en pacientes que fuman, mastican tabaco, o beben alcohol frecuentemente. Las ulceras en el pene o vagina pueden ser signos de infeccion o de un cancer temprano.
La hemorragia o flujo inusual podria indicar cancer. La hemorragia inusual puede ocurrir en cancer temprano o avanzado. La sangre en el esputo (flema) puede ser un signo de cancer de pulmon. La sangre en las heces (o unas heces oscuras o negras) podria ser un signo de cancer de colon o cancer rectal. El cancer del cuello uterino o del endometrio (forro del utero) puede provocar hemorragia vaginal. La sangre en la orina puede ser un signo de cancer de vejiga o de rinon. Un flujo sangriento del pezon puede ser un signo de cancer de mama.
Un engrosamiento o bulto en la mama o en otras partes del cuerpo podria indicar la presencia de un cancer. Muchos canceres se pueden sentir a traves de la piel, mayoritariamente en la mama, testiculo, ganglios linfaticos (glandulas), y los tejidos blandos del cuerpo. Un bulto o engrosamiento puede ser un signo temprano o tardio de cancer. Cualquier bulto o engrosamiento podria ser indicativo de cancer, especialmente si la formacion es nueva o ha crecido en tamano.
La indigestion o los problemas al tragar podrian indicar cancer. Aunque estos sintomas tienen habitualmente otras causas, la indigestion o los problemas al tragar pueden ser un signo de cancer del esofago, estomago, o faringe (garganta).
Cambios recientes en una verruga o lunar podrian ser indicativos de cancer. Cualquier verruga, lunar, o peca que cambia de color, tamano, o forma, o pierde sus fronteras definidas indica el desarrollo potencial de cancer. Por ejemplo, la lesion de la piel puede ser un melanoma.
Una tos o ronquera persistente podria ser indicativa de cancer. Una tos que no se va puede ser un signo de cancer de pulmon. La ronquera puede ser un signo de cancer de la laringe (caja de la voz) o de tiroides.
Aunque los signos y sintomas enunciados anteriormente son los mas comunes observados con el cancer, hay muchos otros que son menos comunes y no se enumeran aqui. Sin embargo, todos los signos y sintomas de cancer reconocidos en la tecnica estan contemplados y englobados por la actual invencion.
El tratamiento del cancer puede dar como resultado una reduccion en el tamano de un tumor. Una reduccion en el tamano de un tumor tambien se puede denominar como “regresion tumoral”. En un aspecto, tras el tratamiento, el tamano del tumor se reduce en alrededor de 5% o mas con respecto a su tamano previo al tratamiento; el tamano tumoral se reduce en alrededor de 10% o mas; se reduce en alrededor de 20% o mas; se reduce en alrededor de 30% o mas; se reduce en alrededor de 40% o mas; se reduce en alrededor de 50% o mas; y se reduce en alrededor de mas de 75% o mas. El tamano de un tumor se puede medir por cualquier medio reproducible de medida. El tamano de un tumor se puede medir como un diametro del tumor.
El tratamiento del cancer puede dar como resultado una reduccion en el volumen tumoral. En un aspecto, tras el tratamiento, el volumen tumoral se reduce en alrededor de 5% o mas con respecto a su tamano previo al tratamiento; el volumen tumoral se reduce en alrededor de 10% o mas; se reduce en alrededor de 20% o mas; se reduce en alrededor de 30% o mas; se reduce en alrededor de 40% o mas; se reduce en alrededor de 50% o mas; y se reduce en alrededor de mas de 75% o mas. El volumen tumoral se puede medir por cualquier medio reproducible de medida.
El tratamiento del cancer puede dar como resultado una disminucion en el numero de tumores. En un aspecto, tras el tratamiento, el numero de tumores se reduce en alrededor de 5% o mas con respecto al numero previo al tratamiento; el numero de tumores se reduce en alrededor de 10% o mas; se reduce en alrededor de 20% o mas; se reduce en alrededor de 30% o mas; se reduce en alrededor de 40% o mas; se reduce en alrededor de 50% o mas; y se reduce en mas de alrededor de 75%. El numero de tumores se puede medir por cualquier medio reproducible de medida. El numero de tumores se puede medir contando los tumores visibles a simple vista o a un aumento especifico. En un aspecto, el aumento especifico es 2x, 3x, 4x, 5x, 10x, o 50x.
El tratamiento del cancer puede dar como resultado una disminucion en el numero de lesiones metastasicas en otros tejidos u organos distantes del sitio del tumor primario. En un aspecto, tras el tratamiento, el numero de lesiones metastasicas se reduce en alrededor de 5% o mas con respecto al numero previo al tratamiento; el numero de lesiones metastasicas se reduce en alrededor de 10% o mas; se reduce en alrededor de 20% o mas; se reduce en alrededor de 30% o mas; se reduce en alrededor de 40% o mas; se reduce en alrededor de 50% o mas; y se reduce en mas de alrededor de 75%. El numero de lesiones metastasicas se puede medir por cualquier medio reproducible de medida. El numero de lesiones metastasicas se puede medir contando las lesiones metastasicas visibles a simple vista o a un aumento especifico. En un aspecto, el aumento especifico es 2x, 3x, 4x, 5x, 10x, o 50x.
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El tratamiento del cancer puede dar como resultado un incremento en el tiempo medio de supervivencia de una poblacion de sujetos tratados en comparacion con una poblacion que recibe portador solo. En un aspecto, el tiempo medio de supervivencia se incrementa en mas de 30 dlas; en mas de 60 dlas; en mas de 90 dlas; y en mas de 120 dlas. Un incremento en el tiempo medio de supervivencia de una poblacion se puede medir por cualquier medio reproducible. Un incremento en el tiempo medio de supervivencia de una poblacion se puede medir, por ejemplo, calculando para una poblacion la duracion media de la supervivencia tras el inicio del tratamiento con un compuesto activo. Un incremento en el tiempo medio de supervivencia de una poblacion tambien se puede medir, por ejemplo, calculando para una poblacion la duracion media de la supervivencia tras terminar una primera ronda de tratamiento con un compuesto activo.
El tratamiento del cancer puede dar como resultado un incremento en el tiempo medio de supervivencia de una poblacion de sujetos tratados en comparacion con una poblacion de sujetos no tratados. En un aspecto, el tiempo medio de supervivencia se incrementa en mas de 30 dlas; en mas de 60 dlas; en mas de 90 dlas; y en mas de 120 dlas. Un incremento en el tiempo medio de supervivencia de una poblacion se puede medir por cualquier medio reproducible. Un incremento en el tiempo medio de supervivencia de una poblacion se puede medir, por ejemplo, calculando para una poblacion la duracion media de la supervivencia tras el inicio del tratamiento con un compuesto activo. Un incremento en el tiempo medio de supervivencia de una poblacion tambien se puede medir, por ejemplo, calculando para una poblacion la duracion media de la supervivencia tras terminar una primera ronda de tratamiento con un compuesto activo.
El tratamiento del cancer puede dar como resultado un incremento en el tiempo medio de supervivencia de una poblacion de sujetos tratados en comparacion con una poblacion que recibe monoterapia con un farmaco que no es un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, analogo o derivado del mismo. En un aspecto, el tiempo medio de supervivencia se incrementa en mas de 30 dlas; en mas de 60 dlas; en mas de 90 dlas; y en mas de 120 dlas. Un incremento en el tiempo medio de supervivencia de una poblacion se puede medir por cualquier medio reproducible. Un incremento en el tiempo medio de supervivencia de una poblacion se puede medir, por ejemplo, calculando para una poblacion la duracion media de la supervivencia tras el inicio del tratamiento con un compuesto activo. Un incremento en el tiempo medio de supervivencia de una poblacion tambien se puede medir, por ejemplo, calculando para una poblacion la duracion media de la supervivencia tras terminar una primera ronda de tratamiento con un compuesto activo.
El tratamiento del cancer puede dar como resultado una disminucion en la tasa de mortalidad de una poblacion de sujetos tratados en comparacion con una poblacion que recibe portador solo. El tratamiento del cancer puede dar como resultado una disminucion en la tasa de mortalidad de una poblacion de sujetos tratados en comparacion con una poblacion no tratada. El tratamiento del cancer puede dar como resultado una disminucion en la tasa de mortalidad de una poblacion de sujetos tratados en comparacion con una poblacion que recibe monoterapia con un farmaco que no es un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, analogo o derivado del mismo. En un aspecto, la tasa de mortalidad se disminuye en mas de alrededor de 2%; en mas de alrededor de 5%; en mas de alrededor de 10%; y en mas de alrededor de 25%. Una disminucion en la tasa de mortalidad de una poblacion de sujetos tratados se puede medir por cualquier medio reproducible. Una disminucion en la tasa de mortalidad de una poblacion se puede medir, por ejemplo, calculando para una poblacion el numero medio de muertes relacionadas con la enfermedad por unidad de tiempo tras el inicio del tratamiento con un compuesto activo. Una disminucion en la tasa de mortalidad de una poblacion tambien se puede medir, por ejemplo, calculando para una poblacion el numero medio de muertes relacionadas con la enfermedad por unidad de tiempo tras terminar una primera ronda de tratamiento con un compuesto activo.
El tratamiento del cancer puede dar como resultado una disminucion en la tasa de crecimiento del tumor. En un aspecto, tras el tratamiento, la tasa de crecimiento del tumor se reduce en por lo menos alrededor de 5% con respecto al numero previo al tratamiento; la tasa de crecimiento del tumor se reduce en por lo menos alrededor de 10%; se reduce en por lo menos alrededor de 20%; se reduce en por lo menos alrededor de 30%; se reduce en por lo menos alrededor de 40%; se reduce en por lo menos alrededor de 50%; se reduce en por lo menos alrededor de 50%; y se reduce en por lo menos alrededor de 75%. La tasa de crecimiento del tumor se puede medir por cualquier medio reproducible de medida. La tasa de crecimiento del tumor se puede medir segun un cambio en el diametro del tumor por unidad de tiempo.
El tratamiento del cancer puede dar como resultado una disminucion en el recrecimiento del tumor. En un aspecto, tras el tratamiento, el recrecimiento del tumor es menor que alrededor de 5%; el recrecimiento del tumor es menor que alrededor de 10%; menor que alrededor de 20%; menor que alrededor de 30%; menor que alrededor de 40%; menor que alrededor de 50%; menor que alrededor de 50%; y menor que alrededor de 75%. El recrecimiento del tumor se puede medir por cualquier medio reproducible de medida. El recrecimiento del tumor se mide, por ejemplo, midiendo un incremento en el diametro de un tumor tras una contraccion previa del tumor que siguio al tratamiento. Una disminucion en el recrecimiento del tumor esta indicada mediante la imposibilidad de los tumores para volver a aparecer despues de que el tratamiento se ha detenido.
El tratamiento o prevencion de un trastorno proliferativo celular puede dar como resultado una reduction en la tasa de proliferation celular. En un aspecto, tras el tratamiento, la tasa de proliferation celular se reduce en por lo menos
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alrededor de 5%; en por lo menos alrededor de 10%; en por lo menos alrededor de 20%; en por lo menos alrededor de 30%; en por lo menos alrededor de 40%; en por lo menos alrededor de 50%; y en por lo menos alrededor de 75%. La tasa de proliferacion celular se puede medir por cualquier medio reproducible de medida. La tasa de proliferacion celular se mide, por ejemplo, midiendo el numero de celulas que se dividen en una muestra tisular por unidad de tiempo.
El tratamiento o prevencion de un trastorno proliferativo celular puede dar como resultado una reduccion en la proporcion de celulas proliferantes. En un aspecto, tras el tratamiento, la proporcion de celulas proliferantes se reduce en por lo menos alrededor de 5%; en por lo menos alrededor de 10%; en por lo menos alrededor de 20%; en por lo menos alrededor de 30%; en por lo menos alrededor de 40%; en por lo menos alrededor de 50%; y en por lo menos 75%. La proporcion de celulas proliferantes se puede medir por cualquier medio reproducible de medida. En un aspecto, la proporcion de celulas proliferantes se mide, por ejemplo, cuantificando el numero de celulas que se dividen con respecto al numero de celulas que no se dividen en una muestra tisular. La proporcion de celulas proliferantes puede ser equivalente al Indice mitotico.
El tratamiento o prevencion de un trastorno proliferativo celular puede dar como resultado una disminucion en el tamano de un area o zona de proliferacion celular. En un aspecto, tras el tratamiento, el tamano de un area o zona de proliferacion celular se reduce en por lo menos alrededor de 5% con respecto a su tamano antes del tratamiento; se reduce en por lo menos alrededor de 10%; se reduce en por lo menos alrededor de 20%; se reduce en por lo menos alrededor de 30%; se reduce en por lo menos alrededor de 40%; se reduce en por lo menos alrededor de 50%; y se reduce en por lo menos alrededor de 75%. El tamano de un area o zona de proliferacion celular se puede medir por cualquier medio reproducible de medida. El tamano de un area o zona de proliferacion celular se puede medir como un diametro o anchura de un area o zona de proliferacion celular.
El tratamiento o prevencion de un trastorno proliferativo celular puede dar como resultado una disminucion en el numero o proporcion de celulas que tienen un aspecto o morfologla anormal. En un aspecto, tras el tratamiento, el numero de celulas que tienen una morfologla normal se reduce en por lo menos alrededor de 5% con respecto a su tamano antes del tratamiento; se reduce en por lo menos alrededor de 10%; se reduce en por lo menos alrededor de 20%; se reduce en por lo menos alrededor de 30%; se reduce en por lo menos alrededor de 40%; se reduce en por lo menos alrededor de 50%; y se reduce en por lo menos alrededor de 75%. Un aspecto o morfologla celular anormal se puede medir por cualquier medio reproducible de medida. Una morfologla celular anormal se puede medir mediante microscopla, por ejemplo usando un microscopio de cultivo tisular invertido. Una morfologla celular anormal puede tomar la forma de pleiomorfismo nuclear.
Segun se usa en la presente, el termino “selectivamente” significa que tiende a ocurrir a una mayor frecuencia en una poblacion que en otra poblacion. Las poblaciones comparadas pueden ser poblaciones de celulas. En un aspecto, un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, polimorfo o solvato del mismo, actua selectivamente sobre un cancer o celula precancerosa pero no sobre una celula normal. En un aspecto, un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, polimorfo o solvato del mismo, actua selectivamente para modular una diana molecular (por ejemplo, JAK3) pero no modula significativamente otra diana molecular (por ejemplo, JAK2). Los compuestos de la invencion tambien se pueden usar para inhibir o activar selectivamente la actividad de una enzima, tal como una cinasa (por ejemplo, JAK3). En un aspecto, un suceso ocurre selectivamente en una poblacion A con respecto a una poblacion B si ocurre mas de dos veces mas frecuentemente en la poblacion A en comparacion con la poblacion B. Un suceso ocurre selectivamente si ocurre mas de cinco veces mas frecuentemente en la poblacion A. Un suceso ocurre selectivamente si ocurre mas de diez veces mas frecuentemente en la poblacion A; mas de cincuenta veces; mas de 100 veces; y mas de 1000 veces mas frecuentemente en la poblacion A en comparacion con la poblacion B. Por ejemplo, se afirmarla que la muerte celular ocurre selectivamente en celulas cancerosas si ocurre mas de dos veces tan frecuentemente en celulas cancerosas segun se compara con celulas normales.
Un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, polimorfo o solvato del mismo, puede modular la actividad de una diana molecular (por ejemplo, JAK3). Modular se refiere a estimular o inhibir una actividad de una diana molecular. En un aspecto, un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, polimorfo o solvato del mismo, modula la actividad de una diana molecular si estimula o inhibe la actividad de la diana molecular en por lo menos 10% con respecto a la actividad de la diana molecular en las mismas condiciones pero que carecen solamente de la presencia de dicho compuesto. En un aspecto, un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, polimorfo o solvato del mismo, modula la actividad de una diana molecular si estimula o inhibe la actividad de la diana molecular en por lo menos 2 veces, por lo menos 5 veces, por lo menos 10 veces, por lo menos 20 veces, por lo menos 50 veces, por lo menos 100 veces, con respecto a la actividad de la diana molecular en las mismas condiciones pero que carecen solamente de la presencia de dicho compuesto. La actividad de una diana molecular se puede medir por cualquier medio reproducible. La actividad de una diana molecular se puede medir in vitro o in vivo. Por ejemplo, la actividad de una diana molecular se puede medir in vitro o in vivo mediante un ensayo de actividad enzimatica.
Un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, polimorfo o solvato
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del mismo, no modula significativamente la actividad de una diana molecular si la adicion del compuesto no estimula o inhibe la actividad de la diana molecular en mas de 10% con respecto a la actividad de la diana molecular en las mismas condiciones pero que carecen solamente de la presencia de dicho compuesto.
Segun se usa en la presente, la expresion “selectivo de la isozima” significa inhibicion o estimulacion preferente de una primera isoforma de una enzima en comparacion con una segunda isoforma de una enzima (por ejemplo, inhibicion o estimulacion preferente de una isozima alfa de cinasa en comparacion con una isozima beta de cinasa).
Un cambio en la actividad enzimatica causado por un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, polimorfo o solvato del mismo, puede medirse en los ensayos descritos. El cambio en la actividad enzimatica puede caracterizarse por el cambio en el grado de fosforilacion de ciertos sustratos. Segun se usa aqul, “fosforilacion” se refiere a la adicion de grupos fosfato a un sustrato, incluyendo protelnas y moleculas organicas, y juega un papel importante en regular las actividades biologicas de las protelnas. En un aspecto, la fosforilacion ensayada y medida incluye la adicion de grupos fosfato a restos de tirosina. El sustrato puede ser un peptido o protelna.
En algunos ensayos, se emplean reactivos inmunologicos, por ejemplo anticuerpos y antlgenos. La fluorescencia se puede utilizar en la medida de la actividad enzimatica en algunos ensayos. Segun se usa en la presente, “fluorescencia” se refiere a un proceso a traves del cual una molecula emite un foton como resultado de absorber un foton entrante de mayor energla por la misma molecula. En los ejemplos se describen metodos especlficos para evaluar la actividad biologica de un compuesto de la invencion.
Activar se refiere a colocar una composicion de materia (por ejemplo, protelna o acido nucleico) en un estado adecuado para llevar a cabo una funcion biologica deseada. Una composicion de materia capaz de ser activada tambien tiene un estado inactivado. Una composicion de materia activada puede tener una funcion biologica inhibidora o estimulante, o ambas.
La elevacion se refiere a un incremento en una actividad biologica deseada de una composicion de materia (por ejemplo, una protelna o un acido nucleico). La elevacion se puede producir a traves de un incremento en la concentracion de una composicion de materia.
El tratamiento de cancer o de un trastorno proliferativo celular puede dar como resultado la muerte celular, y la muerte celular da como resultado una disminucion de por lo menos alrededor de 10% en el numero de celulas en una poblacion. En un aspecto, muerte celular significa una disminucion de por lo menos alrededor de 20%; una disminucion de por lo menos alrededor de 30%; una disminucion de por lo menos alrededor de 40%; una disminucion de por lo menos alrededor de 50%; una disminucion de por lo menos alrededor de 75%. El numero de celulas en una poblacion se puede medir por cualquier medio reproducible. Un numero de celulas en una poblacion se puede medir mediante clasificacion celular activada por fluorescencia (FACS), microscopla de inmunofluorescencia y microscopla optica. Los metodos para medir la muerte celular son como se muestran en Li et al., Proc Natl Acad Sci USA. 100(5): 2674-8, 2003. En un aspecto, la muerte celular se produce por apoptosis.
En un aspecto, una cantidad eficaz de un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, polimorfo o solvato del mismo, no es significativamente citotoxica para las celulas normales. Una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto no es significativamente citotoxica para las celulas normales si la administracion del compuesto en una cantidad terapeuticamente eficaz no induce la muerte celular en mas de 10% de celulas normales. Una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto no afecta significativamente a la viabilidad de celulas normales si la administracion del compuesto en una cantidad terapeuticamente eficaz no induce la muerte celular en mas de 10% de celulas normales. En un aspecto, la muerte celular se produce mediante apoptosis.
La puesta en contacto de una celula con un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, polimorfo o solvato del mismo, puede inducir o activar selectivamente la muerte celular en celulas cancerosas. La administracion a un sujeto que lo requiera de un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, polimorfo o solvato del mismo, puede inducir o activar selectivamente la muerte celular en celulas cancerosas. La puesta en contacto de una celula con un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, polimorfo o solvato del mismo, puede inducir selectivamente la muerte celular en una o mas celulas afectadas por un trastorno proliferativo celular. En un aspecto, la administracion a un sujeto que lo requiera de un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, polimorfo o solvato del mismo, induce selectivamente la muerte celular en una o mas celulas afectadas por un trastorno proliferativo celular.
Un experto en la tecnica se puede dirigir a textos de referencia generales para descripciones detalladas de tecnicas conocidas explicadas aqul o tecnicas equivalentes. Estos textos incluyen Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, Inc. (2005); Sambrook et al., Molecular Cloning, A Laboratory Manual (3a edicion), Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, Nueva York (2000); Coligan et al., Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons, N.Y.; Enna et al., Current Protocols in Pharmacology, John Wiley & Sons, N.Y.;
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Fingl et al., The Pharmacological Basis de Therapeutics (1975), Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA, 18a edicion (1990). Por supuesto, estos textos tambien pueden citarse al obtener o usar un aspecto de la invencion.
“Terapia de combination” (o “co-terapia”) incluye la administration de un compuesto de la invencion y por lo menos un segundo agente como parte de un regimen de tratamiento especlfico destinado a proporcionar el efecto beneficioso a partir de la co-accion de estos agentes terapeuticos. El efecto beneficioso de la combinacion incluye, pero no esta limitado a, co-accion farmacocinetica o farmacodinamica que resulta de la combinacion de agentes terapeuticos. La administracion de estos agentes terapeuticos en combinacion se lleva a cabo tlpicamente durante un perlodo de tiempo definido (normalmente minutos, horas, dlas o semanas dependiendo de la combinacion seleccionada). “Terapia de combinacion” puede, pero generalmente no esta destinada a abarcar la administracion de dos o mas de estos agentes terapeuticos como parte de reglmenes de monoterapia separados que incidental y arbitrariamente dan como resultado las combinaciones de la presente invencion.
“Terapia de combinacion” esta destinada abarcar la administracion de estos agentes terapeuticos de una manera secuencial, es decir, en el que cada agente terapeutico se administra en un momento diferente, as! como la administracion de estos agentes terapeuticos, o por lo menos dos de los agentes terapeuticos, de una manera sustancialmente simultanea. La administracion sustancialmente simultanea puede lograrse, por ejemplo, al administrar al sujeto una sola capsula que tenga una relation fija de cada agente terapeutico o en varias capsulas individuales para cada uno de los agentes terapeuticos. La administracion secuencial o sustancialmente simultanea de cada agente terapeutico puede llevarse a cabo mediante cualquier ruta adecuada incluyendo, pero no limitada a, rutas orales, rutas intravenosas, rutas intramusculares, y absorcion directa a traves de tejidos de membrana mucosa. Los agentes terapeuticos pueden administrarse por la misma ruta o por rutas diferentes. Por ejemplo, un primer agente terapeutico de la combinacion seleccionada puede administrarse por inyeccion intravenosa mientras que los demas agentes terapeuticos de la combinacion pueden administrarse oralmente. Como alternativa, por ejemplo, todos los agentes terapeuticos pueden administrarse oralmente, o todos los agentes terapeuticos pueden administrarse por inyeccion intravenosa. La secuencia en la cual los agentes terapeuticos se administran no es estrechamente crltica.
“Terapia de combinacion” abarca tambien la administracion de los agentes terapeuticos como los descritos anteriormente en combinacion con otros ingredientes biologicamente activos y/o terapias sin farmacos (por ejemplo, cirugla, inmunoterapia o tratamiento con radiation). Cuando la terapia de combinacion comprende un tratamiento sin farmacos, el tratamiento sin farmacos puede llevarse a cabo en cualquier momento adecuado siempre y cuando se logre un efecto beneficioso a partir de la coaccion de la combinacion de los agentes terapeuticos y tratamiento sin farmaco. Por ejemplo, en casos adecuados, el efecto beneficioso aun se logra cuando el tratamiento sin farmaco se retira temporalmente de la administracion de los agentes terapeuticos, tal vez por dlas o incluso semanas.
Un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, analogo o derivado del mismo, puede administrarse en combinacion con un segundo agente anticancer. El segundo agente anticancer (tambien denominado un agente anti-neoplasico o agente anti-proliferativo) puede ser un agente que module el metabolismo del cancer, un agente alquilante; un antibiotico; un anti-metabolito; un agente desintoxicante; un interferon; un anticuerpo policlonal o monoclonal; un inhibidor de EGFR; un inhibidor de HER2; un inhibidor de histona desacetilasa; una hormona; un inhibidor mitotico; un inhibidor de MTOR; un inhibidor de varias cinasas; un inhibidor de serina/treonina cinasa; inhibidores de tirosina cinasa; un inhibidor de VEGF/VEGFR; un taxano o derivado de taxano; un inhibidor de aromatasa, una antraciclina, un farmaco dirigido a microtubulos, un farmaco de veneno de topoisomerasa, un inhibidor de una diana molecular o enzima (por ejemplo, un inhibidor de cinasa), un farmaco analogo de citidina o cualquier agente quimioterapeutico, antineoplasico o antiproliferativo listado en
www.cancer.org/docroot/cdg/cdg_0.asp.
Ejemplos de agentes alquilantes incluyen, pero no estan limitados a, ciclofosfamida (Cytoxan; Neosar); clorambucilo (Leukeran); melfalano (Alkeran); carmustina (BiCNU); busulfano (Busulfex); lomustina (CeeNU); dacarbazina (DTIC- Dome); oxaliplatino (Eloxatin); carmustina (Gliadel); ifosfamida (Ifex); mecloretamina (Mustargen); busulfano (Myleran); carboplatino (Paraplatin); cisplatino (CDDP; Platinol); temozolomida (Temodar); tiotepa (Thioplex); bendamustina (Treanda); o estreptozocina (Zanosar).
Ejemplos de antibioticos incluyen, pero no estan limitados a, doxorrubicina (Adryamicin); doxorrubicina liposomica (Doxil); mitoxantrona (Novantrone); bleomicina (Blenoxane); daunorrubucina (Cerubidine); daunorrubicina liposomica (DaunoXome); dactinomicina (Cosmegen); epirrubicina (Ellence); idarrubicina (Idamycin); plicamicina (Mithracin); mitomicina (Mutamycin); pentostatina (Nipent); o valrubicina (Valstar).
Ejemplos de anti-metabolitos incluyen, pero no estan limitados a, fluorouracilo (Adrucil); capecitabina (Xeloda); hidroxiurea (Hydrea); mercaptopurina (Purinethol); pemetrexed (Alimta); fludarabina (Fludara); nelarabina (Arranon); cladribina (Cladribine Novaplus); clofarabina (Clolar); citarabina (Cytosar-U); decitabina (Dacogen); citarabina
liposomal (DepoCyt); hidroxiurea (Droxia); pralatrexato (Folotyn); floxuridina (FUDR); gemcitabina (Gemzar);
cladribina (Leustatin); fludarabina (Oforta); metotrexato (MTX; Rheumatrex); metotrexato (Trexall); tioguanina
(Tabloid); TS-1 o citarabina (Tarabina PFS).
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Ejemplos de agentes desintoxicantes incluyen, pero no estan limitados a, amifostina (Ethyol) o mesna (Mesnex).
Ejemplos de interferones incluyen, pero no estan limitados a, interferon alfa-2b (Intron A) o interferon alfa-2a (Roferon-A).
Ejemplos de anticuerpos policlonales o monoclonales incluyen, pero no estan limitados a, trastuzumab (Herceptin); ofatumumab (Arzerra); bevacizumab (Avastin); rituximab (Rituxan); cetuximab (Erbitux); panitumumab (Vectibix); tositumomab/yodo131 tositumomab (Bexxar); alemtuzumab (Campath); ibritumomab (Zevalin; In-111; Y-90 Zevalin); gemtuzumab (Mylotarg); eculizumab (Soliris) ordenosumab.
Ejemplos de inhibidores de EGFR incluyen, pero no estan limitados a, gefitinib (Iressa); lapatinib (Tykerb); cetuximab (Erbitux); erlotinib (Tarceva); panitumumab (Vectibix); PKI-166; canertinib (CI-1033); matuzumab (Emd7200) o EKB- 569.
Ejemplos de inhibidores de HER2 incluyen, pero no estan limitados a, trastuzumab (Herceptin); lapatinib (Tykerb) o AC-480.
Los inhibidores de histona desacetilasa incluyen, pero no estan limitados a, vorinostat (Zolinza).
Ejemplos de hormonas incluyen, pero no estan limitadas a, tamoxifeno (Soltamox; Nolvadex); raloxifeno (Evista); megestrol (Megace); leuprolida (Lupron; Lupron Depot; Eligard; Viadur); fulvestrant (Faslodex); letrozol (Femara); triptorelina (Trelstar LA; Trelstar Depot); exemestano (Aromasin); goserelina (Zoladex); bicalutamida (Casodex); anastrozol (Arimidex); fluoximesterona (Androxy; Halotestin); medroxiprogesterona (Provera; Depo-Provera); estramustina (Emcyt); flutamida (Eulexin); toremifeno (Fareston); degarelix (Firmagon); nilutamida (Nilandron); abarelix (Plenaxis); o testolactona (Teslac).
Ejemplos de inhibidores mitoticos incluyen, pero no estan limitados a, paclitaxel (Taxol; Onxol; Abraxane); docetaxel (Taxotere); vincristina (Oncovin; Vincasar PFS); vinblastina (Velban); etoposido (Toposar; Etopophos; VePesid); teniposido (Vumon); ixabepilona (Ixempra); nocodazol; epotilona; vinorelbina (Navelbina); camptotecina (CPT); irinotecan (Camptosar); topotecan (Hycamtin); amsacrina o lamelarina D (LAM-D).
Ejemplos de inhibidores de MTOR incluyen, pero no estan limitados a, everolimus (Afinitor) o temsirolimus (Torisel); rapamune, ridaforolimus; o AP23573.
Ejemplos de inhibidores de varias cinasas incluyen, pero no estan limitados a, sorafenib (Nexavar); sunitinib (Sutent); BIBW 2992; E7080; Zd6474; PKC-412; motesanib; o AP24534.
Ejemplos de inhibidores de serina/treonina cinasas incluyen, pero no estan limitados a, ruboxiestaurina; hidrocloruro de erilo/easudilo; flavopiridol; seliciclib (CYC202; Roscovitrine); SNS-032 (BMS-387032); Pkc412; briostatina; KAI- 9803; SF1126; VX-680; Azd1152; Arry-142886 (AZD-6244); SCIO-469; GW681323; CC-401; CEP-1347 o PD 332991.
Ejemplos de inhibidores de tirosina cinasas incluyen, pero no estan limitados a, erlotinib (Tarceva); gefitinib (Iressa); imatinib (Gleevec); sorafenib (Nexavar); sunitinib (Sutent); trastuzumab (Herceptin); bevacizumab (Avastin); rituximab (Rituxan); lapatinib (Tykerb); cetuximab (Erbitux); panitumumab (Vectibix); everolimus (Afinitor); alemtuzumab (Campath); gemtuzumab (Mylotarg); tensirolimus (Torisel); pazopanib (Votrient); dasatinib (Sprycel); nilotinib (Tasigna); vatalinib (Ptk787; ZK222584); CEP-701; SU5614; MLN518; XL999; VX-322; Azd0530; BMS- 354825; SKI-606 CP-690; AG-490; WHI-P154; WHI-P131; AC-220; o AMG888.
Ejemplos de inhibidores de VEGF/VEGFR incluyen, pero no estan limitados a, bevacizumab (Avastin); sorafenib (Nexavar); sunitinib (Sutent); ranibizumab; pegaptanib; o vandetinib.
Ejemplos de farmacos que actuan sobre los microtubulos incluyen, pero no estan limitados a, paclitaxel, docetaxel, vincristina, vinblastina, nocodazol, epotilonas y navelbina.
Ejemplos de farmacos de veneno de topoisomerasas incluyen, pero no estan limitados a, teniposido, etoposido, adriamicina, camptotecina, daunorrubicina, dactinomicina, mitoxantona, ansacrina, epirrubicina e idarrubicina.
Ejemplos de taxanos o derivados de taxano incluyen, pero no estan limitados a, paclitaxel y docetaxol.
Ejemplos de agentes quimioterapeuticos, anti-neoplasicos y anti-proliferativos generales incluyen, pero no estan limitados a, altretamina (Hexalen); isotretinolna (Accutane; Ammesteem; Claravis; Sotret); tretinolna (Vesanoid); azacitidina (Vidaza); bortezomib (Velcade) asparaginasa (Elspar); levamisol (Ergamisol); mitotano (Lysodren); procarbazina (Matulane); pegaspargasa (Oncaspar); denileucina diftitox (Ontak); porflmero (Photofrin); aldesleucina (Proleukin); lenalidomida (Revlimid); bexaroteno (Targretin); talidomida (Thalomid); temsirolimus (Torisel); trioxido de
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arsenico (Trisenox); verteporfina (Visudyne); mimosina (Leucenol); (tegafur 1M-5-cloro-2,4-dihidroxiprimidina 0,4 M- oxonato de potasio 1M) o lovastatina.
En otro aspecto, el segundo agente quimioterapeutico puede ser una citocina tal como G-CSF (factor estimulante de colonias de granulocitos). En otro aspecto, un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, analogo o derivado del mismo, puede administrarse en combinacion con terapia de radiacion. La terapia de radiacion tambien se puede administrar en combinacion con un compuesto de la invencion y otro agente quimioterapeutico descrito en la presente como parte de una terapia de varios agentes. En todavla otro aspecto, un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, analogo o derivado del mismo, se puede administrar en combinacion con combinaciones de quimioterapia estandar tales como, pero no restringidas a, CMF (ciclofosfamida, metotrexato y 5- fluorouracilo), CAF (ciclofosfamida, adriamicina y 5- fluorouracilo), AC (adriamicina y ciclofosfamida), FEC (5-fluorouracilo, epirrubicina y ciclofosfamida), ACT o ATC (adriamicina, ciclofosfamida, y paclitaxel), rituximab, Xeloda (capecitabina), cisplatino (CDDP), carboplatino, TS-1 (tegafur, gimestat y otestat potasico a una relacion molar de 1:0,4:1), camptotecina-11 (CPT-11, irinotecan o Camptosar™) o CMFP (ciclofosfamida, metotrexato, 5-fluorouracilo y prednisona).
En un aspecto, un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable, profarmaco, metabolito, polimorfo o solvato del mismo, puede administrarse con un inhibidor de una enzima, tal como una cinasa receptora o no receptora. Las cinasas receptoras o no receptoras de la invencion son, por ejemplo tirosina cinasas o serina/treonina cinasas. Los inhibidores de cinasas de la invencion son moleculas pequenas, acidos polinucleicos, polipeptidos o anticuerpos.
Ejemplos de inhibidores de cinasas incluyen, pero no estan limitados a, Bevacizumab (que actua sobre VEGF), BIBW 2992 (que actua sobre EGFR y Erb2), Cetuximab/Erbitux (que actua sobre Erb1), Imatinib/Gleevic (que actua sobre Bcr-Abl), Trastuzumab (que actua sobre Erb2), Gefitinib/Iressa (que actua sobre EGFR), Ranibizumab (que actua sobre VEGF), Pegaptanib (que actua sobre VEGF), Erlotinib/Tarceva (que actua sobre Erb1), Nilotinib (que actua sobre Bcr-Abl), Lapatinib (que actua sobre Erb1 y Erb2/Her2), ditosilato de GW-572016/lapatinib (que actua sobre HER2/Erb2), Panitumumab/Vectibix (que actua sobre EGFR), Vandetinib (que actua sobre RET/VEGFR), E7080 (multiples dianas, incluyendo RET y VEGFR), Herceptina (que actua sobre HER2/Erb2), PKI-166 (que actua sobre EGFR), Canertinib/CI-1033 (que actua sobre EGFR), Sunitinib/SU-11464/Sutent (que actua sobre EGFR y FLT3), Matuzumab/Emd7200 (que actua sobre EGFR), EKB-569 (que actua sobre EGFR), Zd6474 (que actua sobre EGFR y VEGFR), PKC-412 (que actua sobre VEGR y FLT3), Vatalanib/Ptk787/ZK222584 (que actua sobre VEGR), CEP-701 (que actua sobre FLt3), SU5614 (que actua sobre FLT3), MLN518 (que actua sobre FLT3), XL999 (que actua sobre FLT3), VX-322 (que actua sobre FLT3), Azd0530 (que actua sobre SRC), BMS-354825 (que actua sobre SRC), SKI-606 (que actua sobre SRC), CP-690 (que actua sobre JAK), AG-490 (que actua sobre JAk), WHI- P154 (que actua sobre JAK), WHI-P 131 (que actua sobre JAK), sorafenib/Nexavar (que actua sobre RAF cinasa, VEGFR-1, VEGFR-2, VEGFR-3, PDGFR-b, KIT, FLT-3, y RET), Dasatinib/Sprycel (BCR/ABL y Src), AC-220 (que actua sobre Flt3), AC-480 (actua sobre todas las protelnas HER, “panHER”), difosfato de Motesanib (que actua sobre VEGF1-3, PdGFR, y c-kit), Denosumab (que actua sobre RANKL, inhibidores de SRC), AMG888 (que actua sobre HER3), y AP24534 (multiples dianas, incluyendo Flt3).
Ejemplos de inhibidores de serina/treonina cinasas incluyen, pero no estan limitados a, Rapamune (que actua sobre mTOR/FRAP1), Deforolimus (que actua sobre mTOR), Certican/Everolimus (que actua sobre mTOR/FRAP1), AP23573 (que actua sobre mTOR/FRAP1), hidrocloruro de Erilo/Fasudilo (que actua sobre RHO), Flavopiridol (que actua sobre CDK), Seliciclib/CYC202/Roscovitrina (que actua sobre CDK), SNS-032/BMS-387032 (que actua sobre CDK), Ruboxistaurina (que actua sobre PKC), Pkc412 (que actua sobre PKC), Briostatina (que actua sobre PKC), KAI-9803 (que actua sobre PKC), SF1126 (que actua sobre PI3K), VX-680 (que actua sobre Aurora cinasa), Azd1152 (que actua sobre Aurora cinasa), Arry-142886/AZD-6244 (que actua sobre MAP/MEK), SCIO-469 (que actua sobre MAP/MEK), GW681323 (que actua sobre MAP/MEK), CC-401 (que actua sobre JNK), CEP-1347 (que actua sobre JNK), y PD 332991 (que actua sobre CDK).
A lo largo de la description, cuando las composiciones se describen por tener, incluir, o comprender componentes especlficos, se contempla que las composiciones tambien consisten esencialmente en, o consisten en, los componentes citados. De forma similar, cuando se describe que los metodos o procedimientos tienen, incluyen, o comprenden etapas de procedimiento especlficas, los procedimientos tambien consisten esencialmente en, o consisten en, las etapas de procesamiento citadas. Ademas, se deberla de entender que el orden de las etapas o el orden para llevar a cabo ciertas acciones es inmaterial en tanto que la invencion siga siendo operable. Ademas, dos o mas etapas o acciones se pueden llevar a cabo simultaneamente.
En un aspecto, un compuesto de la invencion o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, se administra oralmente, nasalmente, transdermicamente, pulmonarmente, mediante inhalation, bucalmente, sublingualmente, intraperitonealmente, subcutaneamente, intramuscularmente, intravenosamente, rectalmente, intrapleuralmente, intratecalmente, y parenteralmente. En algunas realizaciones, un compuesto se administra oralmente. Un experto en la tecnica reconocera las ventajas de ciertas vlas de administration.
El regimen de dosificacion que utiliza un compuesto de la invencion se selecciona segun una variedad de factores,
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incluyendo el tipo, especie, edad, peso, sexo y condicion medica del paciente; la gravedad de la afeccion a tratar; la via de administracion; la funcion renal y hepatica del paciente; y el compuesto particular o sal del mismo empleado. Un medico o veterinario de pericia normal puede determinar facilmente y prescribir la cantidad eficaz del farmaco requerido para prevenir, contrarrestar, o detener el progreso de la afeccion.
En Remington: the Science and Practice of Pharmacy, 19a edicion, Mack Publishing Co., Easton, PA (1995), se pueden encontrar tecnicas para la formulacion y administracion de un compuesto de la invencion. En un aspecto, un compuesto de la invencion, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, se usa en preparaciones farmaceuticas en combination con un portador o diluyente farmaceuticamente aceptable. Los portadores farmaceuticamente aceptables adecuados incluyen cargas o diluyentes solidos inertes y disoluciones acuosas u organicas esteriles. Los compuestos estaran presentes en tales composiciones farmaceuticas en cantidades suficientes para proporcionar la cantidad de dosis deseada en el intervalo descrito en la presente.
En algunas realizaciones, un compuesto de la invencion se prepara para administracion oral, en el que un compuesto de la invencion o una sal del mismo se combina con un portador o diluyente solido o llquido adecuado para formar capsulas, comprimidos, pastillas,, polvos, jarabes, disoluciones, suspensiones y similares.
Los comprimidos, pastillas, capsulas y similares contienen alrededor de 1 a alrededor de 99 por ciento en peso del ingrediente activo y un aglutinante tal como goma de tragacanto, goma arabiga, almidon de malz o gelatina; excipientes tales como fosfato dicalcico; un agente disgregante tal como almidon de malz, almidon de patata o acido alglnico; un lubricante tal como estearato de magnesio; y/o un agente edulcorante tal como sacarosa, lactosa, sacarina, xilitol y similares. Cuando una forma unitaria de dosificacion es una capsula, comunmente contiene, ademas de materiales del tipo anterior, un portador llquido tal como un aceite graso.
En algunas realizaciones, estan presentes diversos otros materiales como recubrimientos o para modificar la forma flsica de la unidad de dosificacion. Por ejemplo, en algunas realizaciones, los comprimidos son recubiertos con goma laca, azucar o con ambos. En algunas realizaciones, un jarabe o elixir contiene, ademas del ingrediente activo, sacarosa como un agente edulcorante, metil y propilparabenos como conservantes, un colorante y un saborizante tal como sabor de cereza o naranja, y similares.
Para algunas realizaciones relacionadas con la administracion parenteral, un compuesto de la invencion puede combinarse con medios acuosos u organicos esteriles para formar disoluciones o suspensiones inyectables. En algunas realizaciones, las composiciones inyectables son disoluciones o suspensiones isotonicas acuosas. Las composiciones pueden ser esterilizadas y/o contener adyuvantes, tales como agentes conservantes, estabilizantes, humectantes o emulsionantes, y promotores de la disolucion, sales para regular la presion osmotica y/o amortiguadores. Ademas, tambien pueden contener otras sustancias terapeuticamente valiosas. Las composiciones se preparan de acuerdo con metodos convencionales de mezclamiento, granulation o recubrimiento, respectivamente, y contienen alrededor de 0,1 a 75%, en otra realization, las composiciones contienen alrededor de 1 a 50% del ingrediente activo.
Por ejemplo, las disoluciones inyectables se producen usando disolventes tales como aceite de sesamo o cacahuete
0 propilenglicol acuoso, as! como disoluciones acuosas de sales farmaceuticamente aceptables hidrosolubles de un compuesto de la invencion. En algunas realizaciones, las dispersiones se preparan en glicerol, polietilenglicoles llquidos y mezclas de los mismos en aceites. Bajo condiciones ordinarias de almacenamiento en uso, estas preparaciones contienen un conservante para evitar el crecimiento de microorganismos. Las expresiones “administracion parenteral” y “administrado parenteralmente”, segun se usan en la presente, significan modos de administracion distintos de la administracion enterica y topica, normalmente por inyeccion, e incluyen, sin limitation, inyeccion e infusion intravenosa, intramuscular, intraarterial, intratecal, intracapsular, intraorbital, intracardlaca, intradermica, intraperitoneal, transtraqueal, subcutanea, subcuticular, intraarticular, subcapsular, subaracnoide, intraespinal e intraesternal.
Para administracion rectal, las composiciones farmaceuticas adecuadas son, por ejemplo, preparaciones topicas, supositorios o enemas. Los supositorios se preparan adecuadamente a partir de emulsiones o suspensiones grasas. Las composiciones pueden ser esterilizadas y/o contener adyuvantes, tales como agentes conservantes, estabilizantes, humectantes o emulsionantes, promotores de la disolucion, sales para regular la presion osmotica, y/o amortiguadores. Ademas, tambien pueden contener otras sustancias terapeuticamente valiosas. Las composiciones se preparan de acuerdo con metodos convencionales de mezclamiento, granulacion o recubrimiento, respectivamente, y contienen alrededor de 0,1 a 75%, en otra realizacion, las composiciones contienen alrededor de
1 a 50% del ingrediente activo.
En algunas realizaciones, un compuesto de la invencion se formula para suministrar el agente activo por administracion pulmonar, por ejemplo administracion de una formulacion en aerosol que contiene el agente activo, desde por ejemplo un aspersor de bomba manual, nebulizador o inhalador de dosis medida presurizado. En algunas realizaciones, las formulaciones adecuadas de este tipo tambien incluyen otros agentes, tales como agentes antiestaticos, para mantener los compuestos de la invencion como aerosoles efectivos.
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Un dispositivo de suministro de farmaco para suministrar aerosoles comprende una lata para aerosol adecuada con una valvula dosificadora que contiene una formulacion en aerosol farmaceutica como la descrita y un alojamiento de accionador adaptado para contener la lata y permitir el suministro de farmaco. La lata en el dispositivo de suministro de farmaco tiene un espacio superior que representa mas de alrededor de 15% del volumen total de la lata. Comunmente, el pollmero destinado para administration pulmonar es disuelto, suspendido o emulsionado en una mezcla de un disolvente, tensioactivo y propelente. La mezcla se mantiene bajo presion en una lata que ha sido sellada con una valvula dosificadora.
Para administracion nasal, se puede usar un portador solido o llquido. El portador solido incluye un polvo grueso que tiene un tamano de partlculas en la escala de, por ejemplo alrededor de 20 a alrededor de 500 micrometros, y esta formulacion se administra por inhalation rapida a traves de los conductos nasales. En algunas realizaciones en el que el portador llquido es usado, la formulacion se administra como una pulverization nasal o gotas e incluye disoluciones aceitosas o acuosas de los ingredientes activos.
Tambien se contemplan formulaciones que son formas de dosificacion de dispersion rapida, conocidas tambien como formas de “dosis instantanea”. En particular, algunas realizaciones de la presente invention se formulan como composiciones que liberan sus ingredientes activos dentro de un corto perlodo de tiempo, por ejemplo tlpicamente menos de alrededor de cinco minutos. En otra realization, menos de alrededor de noventa segundos, en otra realization, menos de alrededor de 30 segundos, y en otra realizacion, en menos de alrededor de diez o quince segundos. Estas formulaciones son adecuadas para su administracion a un sujeto por medio de una variedad de rutas, por ejemplo por insertion en una cavidad del cuerpo o aplicacion a una superfine corporal humeda o herida abierta.
Tlpicamente, una “dosis instantanea” es una forma de dosificacion solida que se administra oralmente, la cual se dispersa rapidamente en la boca, y por consiguiente no requiere de gran esfuerzo para tragar y permite que el compuesto sea rapidamente ingerido y absorbido a traves de las membranas de la mucosa oral. En algunas realizaciones, las formas de dosificacion de dispersion rapida adecuadas tambien se usan en otras aplicaciones, incluyendo el tratamiento de heridas y otros ataques corporales y estados enfermos en los cuales la liberation del medicamento por humedad suministrada externamente no sea posible.
Las formas de “dosis instantanea” se conocen en la tecnica; vease, por ejemplo, formas de dosis efervescentes y recubrimientos de liberacion rapida de micropartlculas insolubles en las patentes U.S. nos 5.578.322 y 5.607.697; espumas liofilizadas y llquidos en patentes U.S. nos 4.642.903 y 5.631.023; centrifugation en fundido de formas de dosificacion en las patentes U.S. nos 4.855.326, 5.380.473 y 5.518.730; fabrication en forma libre y solida en la patente de U.S. n° 6.471.992; matriz portadora a base de sacaridos y un aglutinante llquido en las patentes U.S. n°® 5.587.172, 5.616.344, 6.277.406 y 5.622.719; y otras formas conocidas en la tecnica.
Un compuesto de la invencion se formula tambien como formulaciones de “liberacion pulsada”, en las cuales el compuesto se libera de las composiciones farmaceuticas en una serie de liberaciones (es decir, pulsos). Un compuesto de la invencion tambien se formula como formulaciones de “liberacion prolongada” en las cuales el compuesto se libera continuamente de la composition farmaceutica durante un perlodo prolongado.
Tambien se contemplan formulaciones, por ejemplo formulaciones llquidas, que incluyen agentes encapsulantes o solvatantes clclicos o aclclicos, por ejemplo ciclodextrinas, polieteres o polisacaridos (por ejemplo, metilcelulosa), o en otra realizacion, derivados de b-ciclodextrina polianionicos con un grupo de sal sulfonato de sodio separado de la cavidad lipofila por un grupo espaciador de eter alqullico o polisacaridos. En algunas realizaciones, el agente es metilcelulosa. En otra realizacion, el agente es un derivado de b-ciclodextrina polianionico con una sal de sulfonato de sodio separada de la cavidad lipofila por un grupo espaciador de eter butllico, por ejemplo CAPTISOL® (CyDex Pharmaceuticals Inc., Lenexa, KS). Un experto en la tecnica puede evaluar las relaciones adecuadas de formulacion de agente/compuesto al preparar una disolucion del agente en agua, por ejemplo una disolucion al 40% en peso; preparando diluciones en serie, por ejemplo para obtener disoluciones de 20%, 10, 5%, 2,5%, 0% (control), y similares; anadiendo un exceso (en comparacion con la cantidad que se puede solubilizar por el agente) del compuesto; mezclando bajo condiciones adecuadas, por ejemplo calentamiento, agitation, sonicacion y similares; centrifugando o filtrando las mezclas resultantes para obtener disoluciones transparentes; y analizando las disoluciones para determinar la concentracion del compuesto.
Todas las publicaciones y documentos de patente citados en la presente se incorporan aqul como referencia como si cada una de estas publicaciones o documentos se indicasen especlfica e individualmente para ser incorporadas en la presente como referencia. La cita de publicaciones y documentos de patente no se propone como una admision de que cualquiera es tecnica anterior pertinente, ni constituye ninguna admision en cuanto a los contenidos o fecha de los mismos. Habiendose descrito ahora la invencion a modo de description escrita, aquellos expertos en la tecnica reconoceran que la invencion puede llevarse a la practica en una variedad de realizaciones y que la anterior descripcion y los siguientes ejemplos son para fines ilustrativos y no limitativos de las reivindicaciones que siguen.
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Ejemplo 1: Sfntesis de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida:
La 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Formula VI-1) se sintetizo como sigue:
imagen93
Formula VI-1
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Reactivos - Sintesis de 1
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 13,33 g 100
Cloruro de cloroacetilo
113 7,95 ml 100
DCM
--- 100 ml —
Sintesis de 1
Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo en DCM (30 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCl3 y cloruro de cloroacetilo en DCM (70 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formation de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Despues de 2 horas, el analisis mediante HPLC mostro 90% de conversion, y se anadieron 25 mmoles adicionales del complejo a fin de terminar la reaction. Cuando se observo la conversion total, la reaction se vertio en 100 ml de agua y hielo picado y se agito durante 1 hora. La fase organica se recogio, y el producto (parcialmente como un precipitado) se extrajo varias veces con bastante DCM. Las fracciones organicas se combinaron, se secaron sobre Na2SO4 y se evaporaron, produciendo un producto solido blanco (6,85 g, 68% de rendimiento).
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-nitrobenzamida
166,13 1,66 g 10
4-(2-cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 3,02 g 15
Acetato de sodio
82 2,4 g 30
Acido acetico
20 ml
Sintesis de 2 5
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 3-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF 2:1. La reaccion se agito a 50°C durante 2 horas y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla agitada de agua y hielo picado (150 ml). La mezcla lechosa se calento hasta 10 ebullicion y despues se dejo enfriar hasta temperatura ambiente dando como resultado cristales amarillos (1,4 g, 77% de rendimiento).
Reactivos - Sintesis de 3
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-nitrobenzotioamida
182,2 2,73 g 15
Reactivo de Lawesson
404 4,04 g 10
NaHCOa
84 1 g 12
1,2 Dimetoxietano
60 ml
THF
--- 30 ml —
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Sintesis de 3
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion transparente seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 6-8 horas (la conversion 20 de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). El disolvente se elimino a presion reducida, y el residuo se recogio en DCM y agua. La fase organica se recogio, y el producto se extrajo con bastante DCM (debido a su baja solubilidad). La fase organica se evaporo produciendo 3,4 g (69%) de solido verde.
Reactivo - Sintesis de 4 25
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
329,33 3,3 g 10
NaOH
40 1,6 g 40
Dioxano
--- 100 ml —
H2O
--- 50 ml —
Sintesis de 4
Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O 2:1. La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual 30 se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico usando acido clorhidrico concentrado. El producto se extrajo con acetato de etilo, se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un polvo amarillo verdoso (2,9 g, 92% de rendimiento).
Reactivos - Sintesis de 5 35
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
acido 4-(2-(3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilico
315,3 2,33 g 7,4
carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo)
256,17 1,9 g 7,4
Acetonitrilo
100 ml
T rietilamina
101 3 ml 22
pirrolidina
71,12 0,63 ml 7,5
Sintesis de 5:
Se anadio trietilamina a una mezcla del acido y del agente activante en acetonitrilo, dando como resultado una 40 disolucion transparente. Los componentes se agitaron a temperatura ambiente, y la formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC. Despues, se anadio pirrolidina, y se observo formacion inmediata de la amida. Se anadieron porciones adicionales de pirrolidina hasta que se observo la conversion completa del ester activo. El disolvente se elimino entonces a presion reducida, se anadio cloroformo, y la mezcla se lavo tres veces con
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disolucion saturada de bicarbonato. El disolvente organico se evaporo produciendo un polvo verde (2 g, 73%). Reactivo - Sintesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pi rrol-2-il)(pirrolidin-1-il)metanona
368,41 2 g 5,4
Pd/C
THF
— 50 ml —
Sintesis de 6:
El nitrocompuesto de partida se disolvio en THF. Se anadio el catalizador, y la mezcla se sometio a atmosfera de hidrogeno toda la noche. El catalizador se elimino mediante filtracion sobre celita, y el disolvente se evaporo produciendo una espuma blanca (1,8 g, rendimiento cuantitativo).
Reactivos - Sintesis de 7 y 8
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-ami nofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-il)( pirrolidi n-1-il)metanona
338,43 1,8 g 5,3
Cloruro de cloroacetilo
113 0,46 ml 5,83
T rietilamina
101 2,2 ml 16
morfolina
87,12 1,3 ml 15
T rietilamina*
101 2,1 ml 15
THF
80 ml
*Sintesis de 8
Sintesis de 7:
Una disolucion de cloruro de cloroacetilo en THF (30 ml) se anadio gota a gota al material de partida en una disolucion de anilina y trietilamina en THF (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo. La mezcla de reaccion se agito durante 1 hora. El disolvente se elimino a presion reducida, y el residuo oleoso se uso como tal en la etapa siguiente.
Sintesis de 8:
Se anadio dioxano al residuo oleoso junto con morfolina y trietilamina. La mezcla se agito durante 2-3 horas. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente se elimino a presion reducida. El residuo se recogio en EtOAc hirviendo y se lavo con disolucion saturada de bicarbonato, la fase organica se evaporo produciendo un solido naranja (1,5 g, 90% de pureza), que se purifico adicionalmente mediante cromatografia ultrarrapida (gradiente de PE-THF), produciendo 280 mg (11,1%) de producto puro.
Como alternativa, 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Formula VI) se sintetizo como sigue:
imagen95
Formula VI-1
imagen96
Tabla de reactivos - Sintesis de 1
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
5
Procedimiento
Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con 10 enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato. La fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
15
Tabla de reactivo - Sintesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrobenzamida
182,2 3,32 g 20
Reactivo de Lawesson
404 6,06 g 15
NaHCOa
84 2 g 12
1,2 Dimetoxietano
— 80 ml —
THF
--- 40 ml —
Procedimiento
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 3-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF (2:1). La reaccion
se agito a 50°C durante 2 h y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a rt durante 1 h. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla agitada de agua y hielo picado (300 ml). La mezcla lechosa se calento hasta ebullicion y despues se dejo enfriar hasta rt. dando como resultado cristales amarillos. (2,8 g, 77% de rendimiento).
5
Tabla de reactivo - Sintesis de 3
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrotiobenzamida
182 4,55 g 25
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 5,04 g 25
Acetato de sodio
82 4,1 g 50
Acido acetico
— 20 ml —
Procedimiento
10
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion transparente seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 3-5 horas (la conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt, y el solido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. (90% de polvo 15 amarillo mostaza).
T abla de reactivos - Sintesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
329,33 6,6 g 20
NaOH
40 3,2 g 80
Dioxano
— 100 ml —
H2O
— 50 ml —
20 Procedimiento
Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O (2:1). La mezcla de reaccion se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico usando acido clorhldrico concentrado. El producto se extrajo con acetato de etilo, 25 se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un polvo amarillo verdoso (5,8 g, 92% de rendimiento).
Tabla de reactivo - Sintesis de 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxllico
315,3 3,15 g 10
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo)
256,17 2,56 g 10
Acetonitrilo-dioxano 1:1
— 200 ml —
T rietilamina
101 4,15 ml 22
Pirrolidina
71,12 1,25 ml 15
30 Procedimiento
Se anadio trietilamina a una mezcla del acido en una mezcla de acetonitrilo-dioxano, dando como resultado una disolucion transparente. El agente activante se anadio entonces, y los componentes se agitaron a rt. La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC, y se anadieron porciones pequenas del agente activante hasta un 35 punto de conversion de 90-95%. Despues, se anadio pirrolidina, y se observo una formacion inmediata de la amida (precipitado). Se anadieron porciones adicionales de pirrolidina hasta que se observo la conversion completa del ester activo. El solido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua (70 ml) y se seco a vaclo (2 g, 73%).
T abla de reactivos - Sintesis de 6 40
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pi rrol-2-il)(pirrolidin-1-il)metanona
368,41 2 g 5,4
Pd/C
— 150 mg —
THF
— 50 ml —
Procedimiento
El nitrocompuesto se disolvio en THF hirviendo. Se anadio el catalizador, y la mezcla se sometio a atmosfera de 45 hidrogeno toda la noche. El catalizador se elimino mediante filtracion sobre celita, y el disolvente se evaporo
5
10
15
20
25
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45
50
55
produciendo una espuma blanca (1,8 g, rendimiento cuantitativo). T abla de reactivos - Sintesis de 7 y 8
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Aminofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-il)(pirrolidin-1-il)metanona
338,43 1,8 g 5,3
Cloruro de cloroacetilo
113 0,46 ml 5,83
T rietilamina
101 2,2 ml 16
Morfolina
87,12 1,3 ml 15
T rietilamina*
101 2,1 ml 15
THF
80 ml
*Slntesis de 8
Sintesis de 7
Una disolucion de cloruro de cloroacetilo en DCM (30 ml) se anadio gota a gota a una mezcla de anilina y trietilamina en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo. (Con la adicion, la mezcla se vuelve una disolucion transparente). La mezcla de reaccion se agito durante 1 h. (Si es necesario, se anade otra porcion de cloruro de cloroacetilo). El disolvente se elimino a presion reducida, y el residuo oleoso se uso como tal en la etapa siguiente.
Sintesis de 8
Se anadio dioxano al residuo oleoso junto con morfolina y trietilamina. La mezcla se puso a reflujo vigorosamente durante 2-3 horas (si es necesario, para la terminacion de la reaccion, se anade morfolina). Cuando la reaccion estuvo terminada, el calentamiento se detuvo, se anadio norit, y la mezcla se agito durante 30 minutos. Los solidos se eliminaron mediante filtracion, y el disolvente se elimino a presion reducida. El residuo oleoso se cristalizo en EtOH (2 g, 80%). HPLC - 99% de pureza. LCMS - (ES+) Calc. 465,58, encontrado 466,56 (MH+).
Ejemplo 2A: Ensayos de actividad enzimatica de JAK3
La inhibicion de JAK3 en DMSO al 1% mediante varios compuestos se determino usando el Z'-LYTE® Biochemical Kinase Assay (Invitrogen, Madison, WI). Los ensayos se llevaron a cabo segun los protocolos del fabricante, excepto que antes de la reaccion de cinasa se preincubaron durante 2 horas a 4°C, a fin de ser capaces de evaluar la inhibicion dependiente del tiempo.
Ademas del compuesto, cada 10 ml de reaccion de cinasa JAK3 contenla 0,43-1,89 ng de JAK3 y sustrato peptldico 2 pM en HEPES 50 mM (pH 7,5), 0,01% de BRIJ-35, MgCh 10 mM y EGTA 1 mM. La reaccion de cinasa se dejo transcurrir durante 1 hora. La Ki para la celula con actividad de JAK3 libre (2 h de preincubacion a 4°C) de compuestos de la invention se presenta mas abajo en la Tabla 1 (3a columna). El dato se presenta en el que la letra “A” significa que el compuesto tiene Ki entre 0,0000001 pM < 1 pM, la letra “B” significa que el compuesto tiene una Ki entre 1,1 pM <10 pM, la letra “C” significa que el compuesto tiene una Ki > 10 pM.
En la Tabla 1 (4a columna) tambien se presenta mas abajo la IC50 para la inhibicion de la ruta de JAK3 a base de celulas para compuestos de la invencion. La IC50 para la inhibicion de la ruta de JAK3 a base de celulas para compuestos de la invencion se determino segun lo siguiente: celulas STAT6-bla RA1 se descongelaron y se resuspendieron en Medio de Ensayo (OPTI-MEM, 0,5% de FBS dializado, NEAA 0,1 mM, piruvato de sodio 1 mM, Pen/Strep 100 U/ml/100 pg/ml, y CD40L 550 ng/ml) hasta una concentration de 781.250 celulas/ml. Se anadieron 32 pl de la suspension celular (25.000 celulas) a cada pocillo de una placa de ensayo tratada con TC de 384 pocillos. Las celulas en el Medio de Ensayo se incubaron durante 16-24 horas en la placa a 37°C/5% de CO2 en una incubadora humidificada. Se anadieron 4 pl de una dilution en serie 10X de un compuesto de la invencion a pocillos apropiados de la placa, y se preincubaron a 37°C/5% de CO2 en una incubadora humidificada con celulas durante 30 minutos. A los pocillos que contienen el compuesto de la invencion se anadieron 4 pl de activador de control IL-4 10X a la concentracion ECs0 predeterminada. La placa se incubo durante 5 horas a 37°C/5% de CO2 en una incubadora humidificada. Se anadieron 8 pl de Disolucion de Carga de Sustrato 1 pM a cada pocillo, y la placa se incubo durante 2 horas a temperatura ambiente. La placa se leyo en un lector de placas de fluorescencia.
El dato se presenta en el que la letra “E” significa que el compuesto tiene una IC50 entre 0,0000001 pM < 0,1 pM, la letra “F” significa que el compuesto tiene una IC50 entre 0,11 pM < 1,0 pM, la letra “G” significa que el compuesto tiene una IC50 entre 1,1 pM <10 pM, y la letra “H” significa que el compuesto tiene una IC50 de > 10pM.
Un experto en la tecnica reconocera que los compuestos se pueden evaluar frente a otras tirosina cinasas, y que la presentation de datos es ilustrativa y de ningun modo pretende limitar el alcance de la presente invencion. Los compuestos de la invencion se pueden evaluar frente a un intervalo de tirosina cinasas, dependiendo de la actividad de comportamiento deseada a reunir. Ademas, las letras “A”, “B”, “C”, “E”, “F”, “G”, y “H” tambien son ilustrativas y de ningun modo pretenden limitar el alcance de la presente invencion. Por ejemplo, el slmbolo “C” no quiere indicar que
5
10
15
20
25
30
35
un compuesto carece necesariamente de actividad o utilidad, sino mas bien que su valor Ki frente a la tirosina cinasa indicada es mayor que 10 mM.
Ejemplo 2B: Ensayos de actividad de inhibicion del receptor de celulas B NFAT-bla RA1
La inhibicion del receptor de celulas B NFAT-bla RA1 (activado mediante anti-IgM humana de cabra, que estimula la ruta de senalizacion SYK) mediante varios compuestos se determino usando el Protocolo de Cribado y Condiciones de Ensayo (Invitrogen, Madison, WI). Los ensayos se llevaron a cabo segun los protocolos del fabricante. Para detalles, vease el Ejemplo 3, Protocolos Especfficos de Lfneas Celulares, actividad del receptor de celulas B en celulas Ramos.
En la Tabla 1 (6a columna) mas abajo se presenta la IC50 para la inhibicion del receptor de celulas B NFAT-bla RA1 para compuestos de la invencion.
El dato se presenta en el que la letra “I” significa que el compuesto tiene una IC50 entre 0,0000001 mM < 0,1 mM, la letra “J” significa que el compuesto tiene una IC50 entre 0,11 mM < 1,0 mM, la letra “K” significa que el compuesto tiene una IC50 entre 1,1 mM < 10 mM, y la letra “L” significa que el compuesto tiene una IC50 de > 10 mM. Las letras “I”, “J”, “K”, y “L” son tambien ilustrativas y de ningun modo estan destinadas a limitar el alcance de la presente invencion.
Ejemplo 2C: Ensayos de actividad de inhibicion de Interleucina 4/STAT6-STAT6-bla RA1
La inhibicion de Interleucina 4/STAT6-STAT6-bla RA1 (activado por IL-4) mediante varios compuestos se determino usando el Protocolo de Cribado y Condiciones de Ensayo (Invitrogen, Madison, WI). Los ensayos se llevaron a cabo segun los protocolos del fabricante. Para detalles, Ejemplo 4, Protocolos Especfficos de Lfneas Celulares, actividad de STAT6 estimulada por IL-4 en celulas Ramos. En la Tabla 1 (7a columna mas abajo) se presenta la iC50 para la inhibicion de Interleucina 4/STAT6-STAT6-bla RA1 por los compuestos de la invencion.
El dato se presenta en el que la letra “M” significa que el compuesto tiene una IC50 entre 0,0000001 mM < 0,1 mM, la letra “N” significa que el compuesto tiene una IC50 entre 0,11 mM <1,0 mM, la letra “O” significa que el compuesto tiene una IC50 entre 1,1 mM < 10 mM, y la letra “P” significa que el compuesto tiene una IC50 de > 10mM. Las letras “M”, “N”, “O”, y “P” tambien son ilustrativas y de ningun modo pretenden limitar el alcance de la presente invencion.
Tabla 1
Nombre del compuest o
Estructura Actividad de JAK3 libre de celulas (preincuba cion durante 2 h a (4 °C) Ki Inhibicion de la ruta de JAK3 a base de celulas IC50 % de inh. max. Estimula cion mediante IL4 a base de celulas IC50 Estimula cion mediante IGM a base de celulas IC50
7A
H \^NH B F 75 I M
12A
O U LrV"" A F 81
16A
U H 'sJ^NH C
17A
O 1^1 H C F
13A
0 1 J S^ A F 78
15A
O ij l J^VNH C
Nombre del compuest o
Estructura Actividad de JAK3 libre de celulas (preincuba cion durante 2 h a (4 °C) Ki Inhibition de la ruta de JAK3 a base de celulas IC50 % de inh. max. Estimula cion mediante IL4 a base de celulas IC50 Estimula cion mediante IGM a base de celulas IC50
14A
o rrVVC^ o B
18A
o FUF1-/^™ B
19A
o^J s-^Vnh B
20A
QjiNXXrN^~/'NC) F 80,22
21A
i-XL-^O H \,NH F 84,41
22A
H OtiCWt) F 100
23A
OJt.JOLvJ'-r H \^nh G 75,10
24A
OnAnXX^N /=W G 74,68
25A
k/N^ANXj^N v/^f N\ H #N/A
26A
MX^vw^O H ^Vnh F 74,58
27A
o *1 P* H \^NH G 100
28A
<U H U^NH F 82,29
29A
OJ^-OLn Vy-/'NH2 H N^NH H #N/A
30A
oaHjOvw-^c H \^NH G 98,15
Nombre del compuest o
Estructura Actividad de JAK3 libre de celulas (preincuba cion durante 2 h a (4 °C) Ki Inhibition de la ruta de JAK3 a base de celulas IC50 % de inh. max. Estimula cion mediante IL4 a base de celulas IC50 Estimula cion mediante IGM a base de celulas IC50
31A
H G 76,84
32A
Oj.XVv-Tt^ F 71,7 ; 63
33A
Oj6our^o H \,NH F 69,83 ; 59,2
34A
0J.NXXywV'O F 79,67
35A
OaXw-^c H V-NH F 78,89
8A
0 /y^>Nv-/s/'fO yl IJ^VNH B
5A
0 B G 68
10A
oXX^Ns/^Ao B
9A
I B
3A
0 A I
2A
A*vr^ A I
4A
^_/-Vnh A
Nombre del compuest o
Estructura Actividad de JAK3 libre de celulas (preincuba cion durante 2 h a (4 °C) Ki Inhibition de la ruta de JAK3 a base de celulas IC50 % de inh. max. Estimula cion mediante IL4 a base de celulas IC50 Estimula cion mediante IGM a base de celulas IC50
11A
Oyw^O B J
39A
o F:;lYY,Y"y//',0 B
40A
0 I f\NH A
41A
0 N 1 J NH A
42A
0 ^vvcA V s^/^NH A
43A
o (tvvnv<=/'nO U0 I/^nh A
44A
p F F 0 U U^nh A
45A
u X'fN>-X'N'^ B <j U^Vnh
46A
0 1 J U^VNH A
47A
F\^\ ?l s^/Vnh B
48A
0 AyvAA jrj ij-vnh F A
49A
^NYNvn ^ V-NH A
Nombre del compuest o
Estructura Actividad de JAK3 libre de celulas (preincuba cion durante 2 h a (4 °C) Ki Inhibition de la ruta de JAK3 a base de celulas IC50 % de inh. max. Estimula cion mediante IL4 a base de celulas IC50 Estimula cion mediante IGM a base de celulas IC50
50A
0 IJ^vnh A
51A
0 YYVvf^O A
52A
O |j ' ^ "\^NH A
53A
° 0>Nvy^Ao \^VNH A F 72
54A
H0V^ °« ^ Qy1./®/'rO A
55A
.n 9. A
56A
Ol.iwV'O L/-Vnh A
57A
Xlyw^O Vnh A
58A
°« ^ s-y^'NH A
59A
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60A
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61A
^^Vnv-/=^Ln'^ S~y V-NH A F 60
62A
aXXy A
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Nombre del compuest o
Estructura Actividad de JAK3 libre de celulas (preincuba cion durante 2 h a (4 °C) Ki Inhibicion de la ruta de JAK3 a base de celulas IC50 % de inh. max. Estimula cion mediante IL4 a base de celulas IC50 Estimula cion mediante IGM a base de celulas IC50
63A
A F 63
64A
1 B
6A
O sj H B G
Celulas vacfas = no ensayadas #N/A = numero no disponible
Ejemplo 3: Ensayos celulares in vitro
Este ejemplo describe ensayos para medir la capacidad de los compuestos de la invention para inhibir la proliferation celular de una variedad de lfneas celulares y para inhibir varias rutas de transduction de senales.
Protocolos de ensayos basados en el mecanismo
Protocolo general
Se llevaron a cabo ensayos de inhibition basados en el mecanismo usando el compuesto 7A (Tabla 1) usando GeneBLAzer® Technology (Invitrogen Corporation), segun las especificaciones del fabricante. De forma breve, la tecnologfa GeneBLAzer® usa un gen informador de beta-lactamasa optimizado para mamffero (bla) combinado con un sustrato incapaz de FRET para proporcionar una detection fiable y sensible en celulas intactas. Las celulas se cargaron con un sustrato fluorescente manipulado que contiene dos fluoroforos, cumarina y fluorescefna. Sin la expresion de bla, la molecula de sustrato permanece intacta. En este estado, la excitation de la cumarina da como resultado transferencia de energfa de resonancia de fluorescencia al resto de fluorescefna y emision de luz verde. Pero cuando se expresa bla, el sustrato se escinde, los fluoroforos se separan, y la transferencia de energfa se interrumpe. La excitacion de la cumarina en presencia de la actividad de beta-lactamasa da como resultado una senal de fluorescencia azul. La relation resultante de cumarinaifluorescefna proporciona una respuesta informadora normalizada, que puede minimizar el ruido experimental que puede enmascarar la respuesta biologica subyacente de interes. Mas abajo se proporcionan detalles mas especfficos.
Protocolo de ensayo de activador general
1. Se anadieron 32 ml de celulas diluidas en Medio de Ensayo hasta la densidad celular apropiada a una placa de ensayo. Si es necesario, las celulas se incubaron a 37°C/5% de CO2 durante 6 o 16-24 horas (dependiendo de las particularidades de la lfnea celular) antes de que se anadiese el compuesto.
2. Se anadieron 40 nl de compuesto o de titulacion de activador conocido 1000X mas 4 ml de medio de ensayo a las celulas en la placa de ensayo.
3. Se anadieron 4 ml de Medio de Ensayo a todos los pocillos para llevar el volumen final del ensayo hasta 40 ml.
4. La placa de ensayo se incubo durante 5 o 16 horas (dependiendo de las particularidades de la lfnea celular) a 37°C/5% de CO2 en una incubadora humidificada.
5. Se anadieron 8 ml de la Disolucion de Carga de Sustrato a la placa de ensayo.
6. La placa de ensayo se incubo durante 2 horas a temperatura ambiente, en la oscuridad.
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7. La placa de ensayo se leyo en un lector de placas de fluorescencia (Tecan Safire2), y el dato se analizo. Protocolo de ensayo de inhibidor general
Se llevo a cabo un cribado de ensayo de activador para obtener la concentracion ECs0 del activador conocido a anadir en la etapa 3.
1. Se anadieron 32 ml de celulas diluidas en Medio de Ensayo hasta la densidad celular apropiada a una placa de ensayo. Si es necesario, las celulas se incubaron a 37°C/5% de CO2 durante 6 o 16-24 horas (dependiendo de las particularidades de la llnea celular) antes de que se anadiese el compuesto.
2. Se anadieron 40 nl de compuesto o de titulacion de activador conocido 1000X mas 4 ml de medio de ensayo a las celulas en la placa de ensayo, y se incubaron durante 30 minutos a 37°C/5% de CO2 en una incubadora humidificada.
3. Se anadieron 4 ml de la concentracion ECs0 de activador, segun se determina en un ensayo de activador, a todos los pocillos que contienen compuesto e inhibidor conocido para llevar el volumen final del ensayo hasta 40 ml.
4. Se anadieron 4 ml de Medio de Ensayo a los pocillos de control restantes para llevar el volumen hasta 40 ml.
5. La placa de ensayo se incubo durante 5 o 16 horas (dependiendo de las particularidades de la llnea celular) a 37°C/5% de CO2 en una incubadora humidificada.
6. Se anadieron 8 ml de la Disolucion de Carga de Sustrato a la placa de ensayo.
7. La placa de ensayo se incubo durante 2 horas a temperatura ambiente, en la oscuridad.
8. La placa de ensayo se leyo en un lector de placas de fluorescencia (Tecan Safire), y el dato se analizo. Protocolos especificos de las lineas celulares
Actividad de STAT6 estimulada por IL-4 en celulas Ramos
Celulas STAT6-bla RA1 se descongelaron. Se anadieron 32 ml de suspension celular a cada pocillo de una placa de ensayo tratada con TC de 384 pocillos. Las celulas en el Medio de Ensayo se incubaron durante 16-24 horas en la placa a 37°C/5% de CO2 en una incubadora humidificada. Se anadieron 4 ml de una dilucion en serie 10X de inhibidor I de JAK (concentracion de partida del inhibidor de control, 10.000 nM) o compuesto a los pocillos apropiados de la placa, y se preincubaron a 37°C/5% de CO2 en una incubadora humidificada con celulas durante 30 minutos. Se anadieron 4 ml de activador de control IL-4 10X a la concentracion EC80 predeterminada a pocillos que contienen el inhibidor de control o compuesto. La placa se incubo durante 5 horas a 37°C/5% de CO2 en una incubadora humidificada. Se anadieron 8 ml de Disolucion de Carga de Sustrato 1 mM a cada pocillo, y la placa se incubo durante 2 horas a temperatura ambiente. La placa se leyo en un lector de placas de fluorescencia.
Actividad del receptor de celulas B en celulas Ramos
Se descongelaron celulas NFAT-bla RA1. Se anadieron 4 ml de una dilucion en serie 10X de inhibidor II de Syk (concentracion de partida del inhibidor de control, 10.000 nM) o compuesto a pocillos apropiados de una placa de ensayo de poli-D-lisina. Se anadieron 32 ml de suspension celular a los pocillos y se preincubaron a 37°C/5% de CO2 en una incubadora humidificada con compuesto y titulacion de inhibidor de control durante 30 minutos. Se anadieron 4 ml de activador de control anti-IgM humana de cabra 10X a la concentracion EC8o predeterminada a pocillos que contienen el inhibidor de control o compuesto. La placa se incubo durante 5 horas a 37°C/5% de CO2 en una incubadora humidificada. Se anadieron 8 ml de Disolucion de Carga de Sustrato 1 mM a cada pocillo, y la placa se incubo durante 2 horas a temperatura ambiente. La placa se leyo en un lector de placas de fluorescencia.
Actividad de STAT5 estimulada por IL-2 en celulas CTLL-2
Se descongelaron celulas Irf1-bla CTLL-2 y se prepararon como se describio anteriormente para el Cribado del Activador. Se anadieron 32 ml de suspension celular a cada pocillo de una placa de ensayo tratada con TC de 384 pocillos. Se incubaron celulas en Medio de Ensayo durante 16-24 horas en la placa a 37°C/5% de CO2 en una incubadora humidificada. Se anadieron 4 ml de una dilucion en serie 10X de inhibidor I de JAK (concentracion de partida del inhibidor de control, 1.000 nM) o compuesto a pocillos apropiados de la placa, y se preincubaron a 37°C/5% de CO2 en una incubadora humidificada con celulas durante 30 minutos. Se anadieron 4 ml de activador de control EPO 10X a la concentracion EC80 predeterminada a pocillos que contienen el inhibidor de control o
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compuesto. La placa se incubo durante 5 horas a 37°C/5% de CO2 en una incubadora humidificada. Se anadieron 8 pi de Disolucion de Carga de Sustrato 1 pM a cada pocillo, y la placa se incubo durante 2 horas a temperatura ambiente. La placa se leyo en un lector de placas de fluorescencia.
Cribado del activador NFkB - NFkB-bla THP-1
Se descongelaron celulas NFkB-bla THP-1 y se resuspendieron en Medio de Ensayo (RPMI, 10% de FBS dializado, NEAA 0,1 nM, piruvato de sodio 1 mM, Pen/Strep 100 U/ml/100 pg/ml) a una concentracion de 625.000 celulas/ml. Se anadieron 32 pl de suspension celular (20.000 celulas) a cada pocillo de una placa de ensayo tratada con TC de 384 pocillos. Las celulas en el Medio de Ensayo se incubaron durante 16-24 horas en la placa a 37°C/5% de CO2 en una incubadora humidificada. Se anadieron 4 pl de una dilucion en serie 10X de TNF-alfa (concentracion de partida del activador de control, 1 nM) o compuestos a pocillos apropiados de la placa. Se anadieron 4 pl de Medio de Ensayo a todos los pocillos para llevar el volumen final del ensayo hasta 40 pl. La placa se incubo durante 5 horas a 37°C/5% de CO2 en una incubadora humidificada. Se anadieron 8 pl de Disolucion de Carga de Sustrato 1 pM a cada pocillo, y la placa se incubo durante 2 horas a temperatura ambiente. La placa se leyo en un lector de placas de fluorescencia.
NFkB/Ramos
Las celulas se cultivaron en placas en el dla antes del ensayo. Los medios requeridos incluyeron:
Componente
Medio de Crecimiento Medio de Ensayo Medio de Congelacion
RPMI 1640
90% 90% 85%
FBS inactivado por calor
10% 10% 10%
Piruvato sodico
1 mM 1 mM 1 mM
Penicilina
100 U/ml 100 U/ml 100 U/ml
Estreptomicina
100 pg/ml 100 pg/ml 100 pg/ml
Antibiotico Blasticidina
5 pg/ml - -
DMSO
- - 5%
Aminoacidos No Esenciales
0,1 mM 0,1 mM 0,1 mM
Nota: Excepto que se senale de otro modo, tenganse todos los medios y disoluciones por lo menos a temperatura ambiente (recomendamos 37°C para un comportamiento optimo) antes de anadirlos a las celulas.
1. Las celulas se recogieron del cultivo en Medio de Crecimiento y se resuspendieron en Medio de Ensayo a una densidad de 1,6 x 106 celulas/ml.
2. Se anadieron 32 pl por pocillo de Medio de Ensayo a los pocillos de control libres de celulas. Se anadieron 32 pl por pocillo de una suspension celular a pocillos no estimulados y estimulados
3. Tras colocar en placas, las placas se incubaron en una incubadora a 37°C/5% de CO2 durante 16-20 horas. Preparacion de la disolucion de DMSO:
Se preparo una disolucion de disolucion de DMSO al 5% (10x) en Medio de Ensayo.
Preparacion de disolucion madre:
Se preparo una disolucion de disolucion de TNFa 10X en Medio de Ensayo. Se recomienda realizar una curva de respuesta frente a la dosis para determinar la EC80 para la Disolucion de Estimulacion.
Estimulacion de las celulas
1. Se anadieron 4 pl de disolucion de DMSO 10X a cada pocillo.
2. Se anadieron 4 pl de Medio de Ensayo a los pocillos no estimulados y a los pocillos libres de celulas.
3. Se anadieron 4 pl del TNFa 10X a los pocillos estimulados.
4. La placa de ensayo se incubo en una incubadora humidificada a 37°C/5% de CO2 durante 5 horas. Carga de sustrato e incubacion
Este protocolo se disena para cargar celulas con el sustrato LiveBLAzer™-FRET B/G (CCF4-AM) o CCF2-AM. Si se usan sustratos alternativos, se recomienda seguir el protocolo de carga proporcionado con el sustrato. Se preparo mezcla de sustrato LiveBLAzer™-FRET B/G (CCF4-AM) o CCF2-AM 6X, y la carga de celulas se realizo en ausencia de luz fuerte directa.
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1. Se prepare la Disolucion A: Disolucion madre de sustrato LiveBLAzer™-FRET B/G (CCF2-AM, MW = 1096) 1 mM en DMSO seco. Se almacenaron alicuotas de la disolucion madre a -20°C hasta el uso.
2. La preparacion de mezcla de sustrato Live BLAzer™-FRET B/G (CCF4-AM) 6X se llevo a cabo como sigue: Anadanse 6 ml de Disolucion A a 60 ml de Disolucion B y sometase a vortice.
Anadanse 934 ml de Disolucion C a las disoluciones combinadas de la etapa anterior y sometase a vortice.
3. Retirese la placa de ensayo de la incubadora humidificada a 37°C/5% de CO2.
4. Anadanse 8 ml de Mezcla de Sustrato 6X de la Etapa 2 a cada pocillo.
5. Cubrase la placa para protegerla de la luz y de la evaporacion.
6. Incubese a temperatura ambiente durante 2,5 horas.
Condiciones detalladas de crecimiento para celulas usadas en el protocolo anterior
Metodo de descongelacion
1. Se colocaron 14 ml de Medio de Crecimiento sin Blasticidina en un matraz T75.
2. El matraz se coloco en una incubadora humidificada a 37°C/5% de CO2 durante 15 minutos, y el medio se dejo equilibrar hasta el pH y temperatura apropiados.
3. El vial de celulas a descongelar se retiro del nitrogeno liquido y se descongelo rapidamente colocandolo a 37°C en un bano de agua con agitacion suave durante 1-2 minutos.
4. El vial se descontamino frotandolo con etanol al 70% antes de abrirlo en una cabina de seguridad biologica de Clase II.
5. Los contenidos del vial se transfirieron gota a gota en 10 ml de Medio de Crecimiento sin Blasticidina en un tubo conico de 15 ml esteril.
6. Las celulas se centrifugaron a 200 x g durante 5 minutos.
7. El sobrenadante se aspiro y el pelete celular se resuspendio en 1 ml de Medio de Crecimiento sin Blasticidina reciente.
8. Los contenidos se transfirieron al matraz T75 de cultivo tisular que contiene Medio de Crecimiento sin Blasticidina preequilibrado, y el matraz se coloco en una incubadora humidificada a 37°C/5% de CO2.
9. En la primera pasada, se realizo un cambio a Medio de Crecimiento con Blasticidina.
Metodo de propagacion
1. Las celulas se hicieron pasar o se alimentaron por lo menos dos veces a la semana. Las celulas se mantuvieron a una densidad celular entre 2 x 105 y 1 x 106 celulas/ml.
2. Para la pasada de las celulas, la cantidad deseada de suspension celular se centrifugo y se resuspendio a 200.000 celulas/ml en Medio de Crecimiento reciente.
Metodo de congelation
1. Las celulas se cosecharon como se describe en la Section 7.2. Las celulas se contaron y despues las celulas se centrifugaron y se resuspendieron a 4°C en Medio de Congelacion a 5 x 106 celulas/ml.
2. Se dispensaron alicuotas de 1,0 ml en viales criogenicos.
3. Las alicuotas se colocaron en un recipiente aislado para el enfriamiento lento y se almacenaron toda la noche a -80°C.
4. Transfieranse a nitrogeno liquido al dia siguiente para el almacenamiento.
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Cribado del activador JAK2/STAT5 - irf1-bla TF1
Celulas irf1 -bla TF1 se descongelaron y se resuspendieron en Medio de Ensayo (OPTI-MEM, 0,5% de FBS dializado, NEAA 0,1 mM, piruvato de sodio 1 mM, Pen/Strep 100 U/ml/100 mg/ml) hasta una concentration de 1.562.500 celulas/ml. Se anadieron 32 ml de suspension celular (50.000 celulas) a cada pocillo de una placa de ensayo tratada con TC de 384 pocillos. Las celulas en el Medio de Ensayo se incubaron durante 16-24 horas en la placa a 37°C/5% de CO2 en una incubadora humidificada. Se anadieron 4 ml de una dilution en serie 10X de EPO (concentracion de partida del activador de control, 10 nM) o compuestos a pocillos apropiados de la placa. Se anadieron 4 ml de Medio de Ensayo a todos los pocillos para llevar el volumen final de ensayo hasta 40 ml. La placa se incubo durante 5 horas a 37°C/5% de CO2 en una incubadora humidificada. Se anadieron 8 ml de Disolucion de Carga de Sustrato 1 mM a cada pocillo, y la placa se incubo durante 2 horas a temperatura ambiente. La placa se lee en un lector de placas de fluorescencia.
Proliferation de PBMC estimulada por IL-2
Recogida de sangre reciente y ensayo de separation de PBMC
1. Se usaron tres donantes para recoger suficientes muestras de sangre. La sangre reciente se almaceno en tubos con heparina sodica.
2. Transfierase la sangre a un tubo de centrifugadora de 50 ml. Se colocaron 15 ml de sangre en un tubo.
3. Anadase el mismo volumen de DPBS al tubo de la sangre y mezclese suavemente.
4. Introduzcase lentamente de forma subyacente 10 ml de Ficoll usando una pipeta (teniendo cuidado de no perturbar las 2 fases).
5. Centrifuguese 30 min. a 800 g a RT sin romper.
6. Asplrese la capa leucocitaria (que contiene PBMC) en la interfaz entre el suero y ficoll. La PBMC se lavo mediante suficiente DPBS y se centrifugo a 900 g para eliminar el Ficoll.
7. Anadase Medio RPMI-1640 a la PBMC recogida y recuentese la concentracion de PBMC. Por lo menos se separa 1 millon de PBMC de 1 ml de sangre.
Proliferacion de PBMC inducida por IL-2 mediante ensayo Cell Titer Glow
1. Recuentense los numeros de PBMC y ajustese la densidad celular a 1,0 * 10A6/ml.
2. Siembrense las celulas en RPMI completo en presencia de PHA (fitohemaglutinina, 10 ug/ml).
3. Anadanse 100 ml de suspension celular a la placa (blanca) de 96 pocillos segun el mapa de la placa planificado. De manera que hubo 1,0 * 10A5 celulas en cada pocillo. Cultlvese durante 3 dlas.
4. Sustituyase el medio por RPMI completo mas IL-2, 100 unidades/ml y compuestos, por ejemplo se anadieron compuestos solamente en la etapa de incubation con IL-2. Cultlvese durante 2 dlas.
5. Llevese a cabo mas/menos estimulacion anadiendo IL-2 a los pocillos segun el mapa de la placa planificado.
6. Incubese la placa a 37°C en una incubadora de celulas con CO2 durante 2 dlas. Los pocillos exteriores de las placas de 96 pocillos a menudo se secan con >5 dlas de cultivo. Es preferible montar las placas de manera que los pocillos exteriores puedan ser llenados con agua esteril o PBS.
7. En el punto final, equillbrese la placa a temperatura ambiente durante aproximadamente 30 minutos.
8. Anadanse 100 ml de reactivo CellTiter-Glo en cada pocillo de la placa.
9. Mezclense los contenidos durante 2 minutos en un agitador orbital para inducir la lisis celular.
10. Dejese incubar la placa a temperatura ambiente durante 10 minutos para estabilizar la senal luminiscente.
11. Reglstrese la luminiscencia con Flexstation 3 y exportense los datos.
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Proliferacion de celulas RS4;11, Ramos, Namalwa, RL, Molt-4 y Daudi
La actividad inhibidora del crecimiento frente a las lineas de celulas tumorales humanas RS4;11 y Daudi, se determino usando el ensayo Cell Titer-Glo® de Promega. Las celulas tumorales humanas se colocaron en una placa de microcultivo de 96 pocillos (Costar blanca, fondo plano n° 3917) en un volumen total de 90 pl/pocillo. Despues de 24 horas de incubacion en una incubadora humidificada a 37°C con 5% de CO2 y 95% de aire, se anadieron a cada pocillo 10 pl de agentes de ensayo diluidos en serie en medio de crecimiento. Despues de 96 horas totales de cultivo en una incubadora con CO2, las celulas colocadas en placas y los reactivos Cell Titer-Glo® (Promega n° G7571) se llevaron a temperatura ambiente para equilibrarlos durante 30 minutos. Se anadieron 100 pl de reactivo Cell Titer- Glo® a cada pocillo. La placa se agito durante 2 minutos, y despues se dejo equilibrar durante 10 minutos antes de leer la luminiscencia en un lector de microplacas Tecan GENios.
Se calculo el porcentaje de inhibicion del crecimiento celular con respecto a pocillos de control no tratados. Todos los ensayos se llevaron a cabo por duplicado en cada nivel de concentracion. El valor de IC50 para los agentes de ensayo se estimo usando Prism 3.03 mediante el ajuste de curva de los datos usando la siguiente ecuacion logistica de cuatro parametros:
Y =
Superior - Inferior
imagen97
+Inferior
en la que Superior es el % maxi mo de la absorbancia de control, Inferior es el % minirno de la absorbancia de control a la concentracion de agente mas elevada, Y es el % de la absorbancia de control, X es la concentracion del agente, IC50 es la concentracion de agente que inhibe el crecimiento celular en un 50% en comparacion con las celulas de control, y n es la pendiente de la curva.
Proliferacion de celulas NALM-6
La proliferacion celular de la linea de celulas tumorales de leucemia precursora de celulas B humana NALM-6 se midio mediante un ensayo de indice de proliferacion celular. Este ensayo se baso en la velocidad de dilucion de un marcador de membrana fluorescente que esta directamente relacionado con la division celular. De forma breve, el ensayo se llevo a cabo cargando las celulas con un analogo fosfolipidico fluorescente no toxico antes de la siembra. La sonda se inserta de forma estable en la membrana plasmatica y se distribuyo entre las celulas hijas tras la division. El analisis de citometria de flujo de la sonda fluorescente se llevo a cabo directamente tras la carga de las celulas y despues de 96 horas de cultivo. La velocidad de dilucion de la sonda fluorescente a nivel de una unica celula estaba directamente correlacionada con el numero de divisiones celulares. Todos los experimentos se llevaron a cabo por triplicado.
La detection de los sucesos celulares se llevo a cabo por triplicado en placas de 96 pocillos despues de 72 horas de tratamiento mediante citometria de flujo automatizada. Las regresiones no lineales se llevaron a cabo con el software Prism 4.01 de GraphPad.
El lapso de tiempo del experimento fue como sigue:
Las celulas se descongelaron previamente y se amplificaron en condiciones de cultivo estandar (37°C, 5% de CO2). Celulas NALM-6 se cultivaron en RPMI 1640 + 10% de Suero Fetal Bovino inactivado.
Dfa 0: Las celulas se marcaron para la medida de la proliferacion subsiguiente y se sembraron a 8000 celulas/pocillo en placas de cultivo de 96 pocillos siguiendo condiciones de cultivo estandar.
Dfa 1: Despues de 24 horas de cultivo, las celulas se trataron con estaurosporina (compuesto de referencia antiproliferativo) en respuesta a la dosis (8 concentraciones, incluyendo el cero), y con seis compuestos en respuesta a la dosis (8 concentraciones, incluyendo el cero).
Dfa 4: Despues de 71 horas de tratamiento, las celulas se analizaron mediante citometria de flujo automatizada.
Resultados
Los resultados de los ensayos basados en el mecanismo y basados en la proliferacion celular que usan el compuesto 7A se resumen en las siguientes Tablas. En la Tabla 2, * la menor potencia libre de celulas es debido a inhibicion “no de Tipo I”.
5
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25
JAK3 Ki (uM, libre de celulas)*
IC50 mM
Celulas B
Linfocitos T Selectividad basada en celulas
basado en el mecanismo
basado en el mecanismo
basado en el resultado Ruta de NF-kB Ruta de JAK2
Celulas Ramos
Celulas Ramos
mCTLL-2 PBMCs estimuladas con IL-2 Celulas THP-1 Celulas Ramos Celulas TF-1
Actividad de STAT6 estimulada mediante IL4
Actividad de NFAT estimulada mediante IgM Actividad de STAT5 estimulada mediante IL-2 Proliferation
0,795
0,032 0,124 6,2 3-6 40,8 >100 49,5
Tabla 3
IC50 (uM)
Celulas B
Linfocitos T
Basado en el resultado: Proliferacion
Celulas Daudi
Celulas Ramos Celulas RS4;11 Celulas NALM-6 Celulas Namalwa Celulas RL Celulas Molt-4
Linfoma de Burkitt
Linfoma de Burkitt
ALL ALL Linfoma de Burkitt Linfoma no de Hodgkin ALL
0,159
0,534 0,500 0,480 28 26 35
Ejemplo 4: Perfil farmacologico
En un aspecto, los compuestos de la invencion se administran oralmente. Por ejemplo, el perfil farmacologico del compuesto 7A se muestra a continuation en la Tabla 5. Satisface los criterios para un candidato de desarrollo clinico oral.
Tabla 5
cLogP hLM T1/2 (min) Caco-2 hERG IC50 (uM) Union a proteinas Inhibition de CYP Solubilidad Turbidez (uM) PK de raton (PO)
P app A-B
Eflujo
T1/2 (h)
%F
(*107cms" 1)
Criterio
2-5 >30 > 17 no > 5 <99% > 10 >50 uM > 1 h > 30%
Compuesto 7A
2.2 36 24 no >10 98% >10 60-80 3,2 h 88%
Ejemplo 5: Seguridad
Los compuestos de la invencion son seguros para la administration. Por ejemplo, se obtuvo un excelente dato de seguridad en un estudio de dosis tolerada maxima de 6 dias a 100 mg/kg y 300 mg/kg de compuesto 7A, administrado PO a ratones atimicos ICR hembras de seis a ocho semanas. Los animales a los que se les administro el compuesto 7 no mostraron mortalidad, no mostraron perdida de peso, no mostraron cambio en el consumo de alimento, no mostraron anormalidades en la observation clinica, y la necropsia fue normal (interna y externa). La figura 1 muestra los cambios en el peso corporal para el estudio, y la Tabla 6 a continuacion muestra el consumo de alimento individual en gramos en el dia 1 y en el dia 6 del estudio.
Tabla 6.
Grupo n°
Consumo de alimento individual (g)
Dia 1
Dia 6
PO-Control 0 mg/kg
5,37 5,34
PO-Bajo 100 mg/kg
4,61 5,44
PO-Alto 300 mg/kg
4,45 5,13
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Ejemplo 6: Estudio de xenoinjerto in vivo con linfoma de celulas B
El efecto antitumoral de los compuestos de la invention se puede evaluar in vivo. Por ejemplo, el efecto antitumoral del compuesto 7A se determino usando un estudio de xenoinjerto de raton con linfoma de celulas B (llnea celular Daudi). A los ratones (n = 8 todos) se les administro compuesto 7A durante un perlodo de 28 dlas. El compuesto se dosifico a 100 mg/kg IP QD y PO QD. El volumen tumoral se midio a lo largo del tiempo.
El cultivo de la llnea celular Daudi se preparo usando la llnea celular Daudi (ATCC, USA), medio RPMI 1640 (Invitrogen, USA), y FBS (Invitrogen, Australia). Ratones atlmicos Balb/c hembras (Slac Laboratory Animal Co., Ltd., Shanghai, China) se dejaron aclimatarse durante un perlodo de 3 dlas antes de que a los ratones se les implantara subcutaneamente (s.c.) 200 ml de 10 x 106 celulas Daudi en Matrigel al 50% en el flanco derecho. Cuando los tumores alcanzaron un volumen promedio de 100-200 mm3, los ratones que poseen tumores se asignaron aleatoriamente a grupos de ocho antes de la dosificacion de 10 ml/kg de vehlculo o de compuesto 7A durante 28 dlas. Durante el tratamiento, la suspension de compuesto 7A se obtuvo diariamente de forma reciente en CMC al 0,5% (Sigma, USA) y Tween 80 al 1% (Sigma, USA).
Los ratones se pesaron en cada dosificacion y se registro cada dla. El tamano tumoral se midio en dlas alternos en dos dimensiones usando un calibre, y el volumen se expreso en mm3 usando la formula: V = 0,5 a x b2, en la que a y b fueron los diametros largo y corto del tumor, respectivamente. En el punto final del experimento, los ratones se eutanasiaron mediante exposition a CO2 al dla siguiente tras la ultima dosis. El volumen tumoral, el peso de los tumores disecados, y el peso corporal de los ratones se midieron y se registraron. Los tumores se fotografiaron y despues se guardaron a -80°C para ensayos futuros.
La diferencia entre los valores medios del volumen tumoral en grupos tratados y grupos de vehlculo se analizo en busca de la significancia usando una prueba de ANOVA de una via en cada punto de tiempo despues de la transformation logarltmica. La diferencia entre los valores medios del peso tumoral en grupos tratados y de vehlculo se analizo en busca de la significancia usando la prueba de la t. En ambos analisis, P < 0,05 se considero estadlsticamente significativo.
Los ratones tratados con 100 mg/kg IP QD mostraron una inhibition del crecimiento tumoral del 89%, y los ratones tratados con 300 mg/kg PO QD mostraron una inhibicion del crecimiento tumoral del 87%. Los resultados de este estudio se muestran en las figuras 2 y 3. La figura 2 muestra los cambios en el volumen tumoral. Las figuras 3A y 3B comparan el tamano tumoral y el peso, y la figura 3C compara los cambios en el peso corporal.
Ejemplo 7: Modelo de CIA in vivo
Los compuestos de la invencion se evaluaron en modelos de raton de artritis inducida por colageno (CIA). Hay varios modelos conocidos de CIA como se esquematizan en la tabla a continuation:
Enfermedad leve Enfermedad grave
Modelo de enfermedad que progresa lentamente Modelo semiterapeutico Modelo de enfermedad aguda
Inmunizacion
Dla -21 Dla -21 Dla -21
Colageno tipo II + adyuvante completo de Freund
Colageno tipo II + adyuvante completo de Freund
Colageno tipo II + adyuvante completo de Freund
Reinmunizacion
Dla -1 Dla -1 Dla -1
Colageno tipo II + adyuvante incompleto de Freund Colageno tipo II + adyuvante incompleto de Freund Colageno tipo II + adyuvante completo de Freund
Tiempo de tratamiento
20 Dlas 22 Dlas 11 Dlas
La enfermedad grave comienza en
~ Dla 12 ~ Dla 12 Dla 4
Los estudios de CIA utilizaron un modelo de enfermedad leve (que progresa lentamente). Los ratones DBA/1 desarrollaron artritis inducida por colageno (CIA) tras inmunizacion con una emulsion de colageno de pollo Hooke Kit™/Adyuvante Completo de Freund (CFA) (EK-0210), seguido de una dosis de recuerdo de emulsion de colageno de pollo Hooke Kit™/Adyuvante Incompleto de Freund (IFA) (EK-0211). Cada estudio uso 54 ratones DBA/1 hembras (Taconic Farms modelo DBA1BO, 9 semanas de edad) asignados mas tarde a 4 grupos experimentales, con 10 ratones por grupo. 4 ratones no se inmunizaron ni se trataron, y se dejaron como grupo de controles sin tratamiento para el posible analisis histologico. Los otros 50 ratones se trataron terapeuticamente.
5
10
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20
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30
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50
55
Un estudio comprende el grupo 1 - Vehlcuio, grupo 2 - CP-690550, 30 mg/kg PO QD, grupo 3 - R-788, 60 mg/kg PO QD, y grupo 4 - compuesto 7, 100 mg/kg, IP QD. El otro estudio comprende grupo 1 - Vehlcuio, grupo 2 - compuesto 7, 15 mg/kg PO QD, grupo 3 -compuesto 7, 30 mg/kg PO QD, y grupo 4 - compuesto 7, 100 mg/kg, IP QD.
Los ratones se inmunizaron en primer lugar con emulsion de colageno/CFA en el Dla 0 tras aclimatarlos durante por lo menos 7 dlas. El procedimiento de inmunizacion fue como sigue: Un raton se inmovilizo usando un inmovilizador. La cola se limpio con etanol al 70%, y el area se seco por frotamiento con una gasa esteril. La jeringuilla que contiene emulsion de colageno/CFA se coloco paralelamente a la cola, y la punta de la aguja se coloco senalando hacia el cuerpo del raton, sobre el espacio entre la vena dorsal y lateral de la cola. La aguja se inserto 7 a 10 mm en el espacio subcutaneo para asegurarse de que la aguja estaba visible bajo la piel. El sitio de la entrada de la aguja se presiono firmemente para evitar cualquier fuga hacia atras de la emulsion durante la inyeccion. Se inyectaron 0,05 ml de la emulsion a medida que se observo que la emulsion blanca entraba en el espacio subcutaneo. La aguja se mantuvo insertada durante 10 a 15 segundos tras la inyeccion, para evitar la fuga de la emulsion. Despues, el raton se libero nuevamente a la jaula. El procedimiento se repitio con todos los ratones.
El procedimiento de reinmunizacion con colageno de pollo/IFA en el Dla 21 fue como sigue: Un raton inmunizado se inmovilizo usando un inmovilizador. La cola se limpio con etanol al 70%, y el area se seco por frotamiento con una gasa esteril. La jeringuilla/aguja que contiene la emulsion de colageno tipo II/IFA se coloco paralela a la cola, y la punta de la aguja se situo senalando el cuerpo del raton. La emulsion se inyecto en el lado de la cola que no habla recibido la inyeccion de inmunizacion inicial. Y para la inyeccion se escogio el area palida para evitar punzar un vaso sangulneo dilatado o su area cerrada. La aguja se inserto 7 a 10 mm en el espacio subcutaneo para asegurarse de que la aguja era visible bajo la piel. La aguja y la cola se presionaron fuertemente en el sitio de entrada de la aguja para evitar cualquier fuga de reflujo de la emulsion durante la inyeccion. Se inyectaron muy lentamente 0,05 ml de la emulsion (o 0,025 ml de emulsion en dos sitios). La aguja se mantuvo insertada durante 10 a 15 segundos tras la inyeccion, para evitar la fuga de la emulsion. Despues, el raton se libero nuevamente a la jaula. El procedimiento se repitio con todos los ratones inmunizados.
Los ratones se comprobaron en busca de signos de CIA cada 2 a 3 dlas, comenzando en el dla 14 tras la inmunizacion. Tan pronto como se producen los primeros signos de inflamacion de la articulacion, a los ratones se les proporcionaron peletes de alimento y comida humeda en el suelo de la jaula, y agua muy accesible. Como fuente de agua se uso Transgel (Charles River Laboratories).
Los ratones inmunizados se consideraron inicialmente como un unico grupo hasta la reinmunizacion con colageno de pollo/IFA en el Dla 21. Los ratones con cualquier signo de artritis en el Dla 21 se excluyeron del estudio. Cada raton con signos cllnicos recientemente desarrollados de CIA se asigno a 1 de los 5 grupos experimentales de manera balanceada, y el tratamiento de esos ratones se inicio en el mismo dla.
A los ratones se les dosifico oralmente al mismo tiempo todos los dlas (+/- 1 hora) hasta el final del estudio. Los compuestos de la invencion se formularon semanalmente (3 preparaciones en total).
Todas las lecturas, incluyendo puntuaciones de CIA, puntuaciones de anquilosis, peso corporal y grosor de la pata trasera, se tomaron hasta el final del estudio, que se produjo 20 dlas tras la inscripcion de cada raton. El ultimo dla del estudio fue diferente para ratones diferentes.
Puntuaciones de CIA: La puntuacion diaria de CIA comenzo en el Dla 21 y continuo hasta que se inscribieron 40 ratones en el estudio. Tras la inscripcion, los ratones se puntuaron en dlas alternos. La puntuacion de CIA se llevo a cabo de forma enmascarada, por una persona que desconoce tanto el tratamiento como las puntuaciones previas para cada raton. Los ratones se puntuaron en la escala de 0 a 16 (0 a 4 para cada pata, sumando las puntuaciones para todas las 4 patas), usando los siguientes criterios:
Puntuacion de la pata
Observaciones cllnicas
0
Pata normal.
1
Un dedo inflamado e hinchado.
2
Mas de un dedo, pero no toda la pata, inflamado e hinchado, o hinchamiento leve de toda la pata.
3
Toda la pata inflamada e hinchada.
4
Pata muy inflamada e hinchada o pata anquilosada. Si la pata esta anquilosada, el raton no puede agarrar la parte superior de alambre de la jaula.
Puntuaciones de anquilosis: La puntuacion de anquilosis se llevo a cabo de forma enmascarada, por una persona que desconocla tanto el tratamiento como las puntuaciones previas para cada raton. Al mismo tiempo que se llevo a cabo la puntuacion de CIA (tanto durante como despues de la inscripcion), la anquilosis se puntuo como la suma de puntuaciones de 0-3 para cada pata usando los siguientes criterios:
5
10
15
20
25
30
35
Puntuacion de la pata
Observaciones cllnicas
0
Sin anquilosis
1
Anquilosis leve
2
Anquilosis moderada
3
Anquilosis severa
Peso corporal: El peso corporal se midio en el Dla -1 (un dla antes de la inmunizacion) y despues nuevamente en el dla de la inscripcion. Tras la inscripcion, el peso corporal se midio en dlas alternos.
Grosor de la pata trasera: Dos veces entre los Dias 1 y 14 tras la inmunizacion (antes de que comienza la inscripcion), ambas patas traseras de todos los ratones se midieron usando calibres para establecer valores de llnea base para el grosor de la pata. Con la inscripcion en uno de los grupos experimentales, cada raton se examino para determinar el hinchamiento de la pata trasera. A aquellos ratones que en ese momento tuvieron la pata trasera hinchada se les midio la pata con calibres. Si ambas patas traseras estaban hinchadas, se midio la pata mas hinchada. Despues, a esos ratones se les midio la misma pata trasera con calibres al mismo tiempo que la puntuacion de CIA. A los ratones que desarrollaron en primer lugar hinchamiento de la pata en una pata delantera no se les midio el grosor de ninguna de sus patas despues de la inscripcion.
Las figuras 4A y 4B muestran los resultados de los controles positivos en modelos de enfermedad leve. Los compuestos del control son CP-690.550 (tofacitinib), un inhibidor de pan-JAK en ensayos cllnicos de Fase III para Pfizer, y R-788 (fostamatinib), un inhibidor no selectivo de SYK en ensayos cllnicos de Fase III para Rigel/AstraZeneca. La figura 4A muestra la puntuacion de CIA durante 20 dlas de tratamiento con los controles positivos en el modelo de enfermedad leve conocido. CP-690.550 se administro a 30 mg/kg PO QD, y R-788 se administro a 60 mg/kg PO QD. La figura 4B muestra la puntuacion de gravedad de la enfermedad durante 20 dlas despues del tratamiento con controles positivos en el modelo de CIA semiterapeutico conocido (Pfizer 2010) (H.T. Lin et al., Arthritis Rheum. (2010), 62:2283-93). CP-690.550 se administro a 10 mg/kg y 30 mg/kg. La figura 4C muestra los resultados del compuesto 7A en el modelo de CIA leve en comparacion con los controles. El compuesto 7A se administro a 100 mg/kg IP QD, n = 10 todos; P < 0,05. El compuesto 7A mostro una reduction en la puntuacion de CIA en el ultimo dla frente al vehlculo combinado (figura 4D). Un incremento en el grosor de la pata trasera es un signo de artritis. Las figuras 4E y 4F muestran los resultados del grosor de la pata trasera tras el tratamiento durante 20 dlas de administration del compuesto 7A a 100 mg/kg IP QD en comparacion con controles positivos. La figura 4G muestra las puntuaciones de CIA para el compuesto 7A administrado en 3 cantidades de dosificacion diferentes (15 mg/kg PO QD, 30 mg/kg PO QD, y 100 mg/kg IP QD) durante 20 dlas.
Ejemplo 8: Slntesis de compuestos de la invencion
Se proporcionan a continuation ejemplos sinteticos ilustrativos de los compuestos de la invencion. Observese que los numeros de los compuestos citados en la slntesis descrita aqul corresponden a los numeros mostrados en el esquema relacionado que precede a la description de la slntesis.
Slntesis de compuesto:
imagen98
T abla de reactivos - Slntesis de 2 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Procedimiento
Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una 10 mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formation de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaction se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato. La fase 15 organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Anilina
93 9,11 ml 100
Isotiocianato de amonio
76 11,4 g 150
HCl 1N
— 100 ml —
20 Procedimiento
Ambos reactivos se pusieron a reflujo toda la noche en HCl 1N. Cuando se observo la conversion total, la reaccion se detuvo, y la mezcla se enfrio en un bano de hielo. El precipitado formado se recogio mediante filtration y se lavo con agua (30 ml). Rendimiento 4,5 g (30%).
25
T abla de reactivos - Slntesis de 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Fenil tiourea
152,22 3,04 g 20
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 4,03 g 20
Acetato de sodio
82 3,28 g 40
Acido acetico
--- 20 ml —
Procedimiento
30
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion transparente, seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 3-5 horas (la conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. 35 (Cuantitativo, polvo amarillo).
T abla de reactivos - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(Fenilamino)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
299 5,98 g 20
NaOH
40 3,2 g 80
Dioxano
— 100 ml —
H2O
--- 50 ml —
40 Procedimiento
Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O 2:1 (150 ml). La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico hasta pH - 5 usando acido clorhldrico concentrado. El producto se extrajo con acetato de etilo (si
la extraction falla, se deberla anadir mas HCl 1N), se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un polvo verde (rendimiento cuantitativo).
T abla de reactivos - Slntesis de 7 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(fenilamino)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxllico
285 2,85 g 10
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidi n-1-ilo)
256,17 2,56 g 10
Acetonitrilo
— 200 ml —
T rietilamina
101 4,15 ml 30
Pirrolidina
71,12 1,25 ml 15
Procedimiento
Se anadio trietilamina a una mezcla del acido en acetonitrilo dando como resultado una disolucion transparente. El 10 agente activante se anadio entonces, y los componentes se agitaron a rt. La formation del ester activo se monitorizo mediante HPLC, y se anadieron porciones pequenas del agente activante hasta un punto de conversion de 90-95%. Despues, se anadio pirrolidina, y se observo una formacion inmediata de la amida (precipitado). Se anadieron porciones adicionales de pirrolidina hasta que se observo la conversion completa del ester activo. El disolvente organico se elimino a presion reducida. Se anadio DCM junto con disolucion saturada de bicarbonato. El precipitado 15 formado al agitar en el embudo de separation se recogio mediante filtracion y se lavo con MeOH hirviendo. (1,3 g, 38%). HPLC - 98% de pureza. LCMS - (ES+) Calc. 338,43, encontrado 339,25 (MH+).
Sintesis del compuesto:
20
imagen99
Esquema 11
25 T abla de reactivos - Slntesis de 1
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCL
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una 5 mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formation de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaction se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato. La fase 10 organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrobenzamida
182,2 3,32 g 20
Reactivo de Lawesson
404 6,06 g 15
NaHCO3
84 2 g 12
1,2 Dimetoxietano
--- 80 ml —
THF
--- 40 ml —
15 Procedimiento
Se anadio reactivo Lawesson a una mezcla agitada de 3-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF (2:1). La reaccion se agito a 50°C durante 2 h, y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a rt durante 1 h. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla agitada de 20 agua y hielo picado (300 ml). La mezcla lechosa se calento hasta ebullition y despues se dejo enfriar hasta rt. dando como resultado cristales amarillos. (2,8 g, 77% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 3
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrotiobenzamida
182 4,55 g 25
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 5,04 g 25
Acetato de sodio
82 4,1 g 50
Acido acetico
--- 20 ml —
25
Procedimiento
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion transparente, seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 3-5 horas (la 30 conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se recogio mediante filtration, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. (90% de polvo amarillo mostaza).
T abla de reactivos - Slntesis de 4 35
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
329,33 6,6 g 20
NaOH
40 3,2 g 80
Dioxano
--- 100 ml —
H2O
--- 50 ml —
Procedimiento
Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O (2:1). La mezcla de reaccion se calento hasta 70-80°C, 40 durante lo cual se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico usando acido clorhldrico concentrado. El producto se extrajo con acetato de etilo, se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un polvo amarillo verdoso (5,8 g, 92% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 5 45
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxllico
315,3 3,15 g 10
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo)
256,17 2,56 g 10
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acetonitrilo
- 200 ml -
T rietilamina
101 4,15 ml 22
pirrolidina
71,12 1,25 ml 15
Procedimiento
Se anadio trietilamina a una mezcla del acido en una mezcla de acetonitrilo-dioxano dando como resultado una 5 disolucion transparente. El agente activante se anadio entonces, y los componentes se agitaron a rt. La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC, y se anadieron porciones pequenas del agente activante hasta un punto de conversion de 90-95%. Despues, se anadio pirrolidina y se observo una formacion inmediata de la amida (precipitado). Se anadieron porciones adicionales de pirrolidina hasta que se observo la conversion completa del ester activo. El disolvente organico se elimino a presion reducida. Se anadio una disolucion saturada de bicarbonato, 10 y el producto se llevo a DCM (~1000 ml, se lavo con una porcion adicional de bicarbonato, se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un polvo amarillo (rendimiento cuantitativo).
Tabla de reactivo - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-il)( pirrolidin-1-il) metanona
368,41 2 g 5,4
Pd/C
- 150 mg -
THF
— 50 ml —
15
Procedimiento
El nitrocompuesto se disolvio en THF hirviendo. Se anadio el catalizador, y la mezcla se sometio a atmosfera de hidrogeno toda la noche. El catalizador se elimino mediante filtracion sobre celita, y el disolvente se evaporo 20 produciendo una espuma blanca (1,8 g, rendimiento cuantitativo).
T abla de reactivos - Slntesis de 7
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Aminofenil)tiazol-4-il)-1 H-pi rrol-2-il)(pirrolidin-1-il)metanona
338,43 0,507 g 1,5
Cloruro de benzollo
140,57 0,174 ml 1,5
T rietilamina
101 0,62 ml 4,5
25 Slntesis de 7
Los componentes se agitaron en una mezcla de DCM-THF 3:1. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el producto se cristalizo en MeOH. (170 mg, 25%), HPLC - 98% de pureza. LCMS - (ES+) Calc. 442,53, encontrado 443,46 (MH+).
30
Slntesis del compuesto:
imagen100
imagen101
Esquema 12
5 T abla de reactivos - Slntesis de 1
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Procedimiento
10 Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica 15 desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato. La fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrobenzamida
182,2 3,32 g 20
Reactivo de Lawesson
404 6,06 g 15
NaHCO3
84 2 g 12
1,2 Dimetoxietano
--- 80 ml —
THF
--- 40 ml —
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 3-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF 2:1. La reaccion se agito a 50°C durante 2 h, y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a rt durante 5 1 h. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla
agitada de agua y hielo picado (300 ml). La mezcla lechosa se calento hasta ebullicion y despues se dejo enfriar hasta rt. dando como resultado cristales amarillos. (2,8 g, 77% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 3
10
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrotiobenzamida
182 4,55 g 25
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 5,04 g 25
Acetato de sodio
82 4,1 g 50
Acido acetico
— 20 ml —
Procedimiento
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion 15 transparente, seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 3-5 horas (la conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. (90% de polvo amarillo mostaza).
20 T abla de reactivos - Slntesis de 4
Reactivos/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
329,33 6,6 g 20
NaOH
40 3,2 g 80
Dioxano
— 100 ml —
H2O
— 50 ml —
Procedimiento
25 Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O 2:1. La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico usando acido clorhldrico concentrado. El producto se extrajo con acetato de etilo, se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un polvo amarillo verdoso (5,8 g, 92% de rendimiento).
30 T abla de reactivos - Slntesis de 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxllico
315,3 3,15 g 10
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo)
256,17 2,56 g 10
Acetonitrilo
— 200 ml —
T rietilamina
101 4,15 ml 22
Pirrolidina
71,12 1,25 ml 15
Procedimiento
35 Se anadio trietilamina a una mezcla del acido en una mezcla de acetonitrilo-dioxano dando como resultado una disolucion transparente. El agente activante se anadio entonces, y los componentes se agitaron a rt. La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC, y se anadieron porciones pequenas del agente activante hasta un punto de conversion de 90-95%. Despues, se anadio pirrolidina y se observo una formacion inmediata de la amida (precipitado). Se anadieron porciones adicionales de pirrolidina hasta que se observo la conversion completa del 40 ester activo. El disolvente organico se elimino a presion reducida. Se anadio una disolucion saturada de bicarbonato, y el producto se llevo a DCM (~ 1000 ml, se lavo con una porcion adicional de bicarbonato, se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un polvo amarillo (rendimiento cuantitativo).
T abla de reactivos - Slntesis de 6 45
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-il)( pirrolidin-1-il) metanona
368,41 2 g 5,4
Pd/C
— 150 mg —
THF
— 50 ml —
5
10
15
20
25
30
El nitrocompuesto se disolvio en THF hirviendo. Se anadio el catalizador, y la mezcla se sometio a atmosfera de hidrogeno toda la noche. El catalizador se elimino mediante filtracion sobre celita, y el disolvente se evaporo produciendo una espuma blanca (1,8 g, rendimiento cuantitativo).
T abla de reactivos - Slntesis de 7 y 8
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Aminofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-il)(pirrolidin-1-il)metanona
338,43 0,507 g 1,5
Cloruro de cloroacetilo
113 0,13 ml 1,65
T rietilamina
101 0,62 ml 4,5
1-metilpiperazina*
100 0,33 ml 3
T rietilamina*
101 0,62 ml 4,5
* Sintesis de 8
Sintesis de 7
Una disolucion de cloruro de cloroacetilo en DCM (30 ml) se anadio gota a gota a una mezcla de anilina y trietilamina en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo (con la adicion, la mezcla se vuelve una disolucion transparente). La mezcla de reaccion se agito durante 1 h. (Si es necesario, se anade otra porcion de cloruro de cloroacetilo). El disolvente se elimino a presion reducida, y el residuo oleoso se uso como tal en la etapa siguiente.
Sintesis de 8
Se anadio dioxano al residuo oleoso junto con 1-metilpiperazina y trietilamina. La mezcla se puso a reflujo vigorosamente durante 2 horas (si es necesario, para la terminacion de la reaccion, se anade 1-metilpiperazina). Cuando la reaccion estuvo terminada, el calentamiento se detuvo, y el disolvente se elimino a presion reducida. El residuo oleoso se trituro en acetona hirviendo. (Rendimiento - 150 mg, 20%). HPLC - 100% de pureza. LCMS - (ES+) Calc. 478,61, encontrado 479,56 (MH+).
Sintesis del compuesto:
imagen102
Esquema 13
T abla de reactivos - Sintesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Procedimiento
Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una 5 mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formation de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaction se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato; la fase 10 organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-Fluoroanilina
111,12 5,55 g 50
Isotiocianato de amonio
76 5,7 g 75
HCl 1N
— 50 ml —
15 Procedimiento
Ambos reactivos se pusieron a reflujo toda la noche en HCl 1N. El color naranja de la anilina desaparecio despues de 1 h. La mezcla se enfrio, y el precipitado formado se recogio mediante filtration y se lavo con agua (30 ml). Rendimiento 3 g (35%).
20
T abla de reactivos - Slntesis de 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-Fluorofeniltiourea
170,2 1,70 g 10
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 2,01 g 10
Acetato de sodio
82 1,64 g 20
Acido acetico
— 10 ml —
Procedimiento
25
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion transparente, seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 3-5 horas (la conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. Polvo 30 blanco, rendimiento cuantitativo.
T abla de reactivos - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-((4-fluorofenil)amino)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
317 3,11 g 9,8
NaOH
40 1,57 g 40
Dioxano
— 100 ml —
H2O
— 50 ml —
35 Procedimiento
Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O 2:1 (150 ml). La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico hasta pH - 1-2 usando acido clorhldrico (1N). El producto se extrajo con acetato de etilo, se seco 40 sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un polvo verde (2,5 g, 84%).
T abla de reactivos - Slntesis de 7
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-((4-fluorofenil)amino)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-carboxllico
303 0,61 g 2
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo)
256,17 0,51 g 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acetonitrilo
— 60 ml —
Dioxano
— 20 ml —
T rietilamina
101 0,83 ml 6
pirrolidina
71,12 0,33 ml 4
Procedimiento
Se anadio trietilamina a una mezcla del acido y agente activante en acetonitrilo. No se observo solubilidad, se anadio 5 dioxano dando como resultado una disolucion transparente. La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC, y se anadieron porciones pequenas del agente activante hasta un punto de conversion de 90-95%. Despues, se anadio pirrolidina y se observo una formacion inmediata de la amida (precipitado). Se anadieron porciones adicionales de pirrolidina hasta que se observo la conversion completa del ester activo. El disolvente organico se elimino a presion reducida. Se anadio acetato de etilo junto con disolucion saturada de bicarbonato. El precipitado 10 formado al agitar en el embudo de separacion se recogio mediante filtracion. La fase organica se seco sobre Na2SO4, se filtro y se evaporo produciendo aceite marron que se trituro usando EtOH (rendimiento 25 mg, 3,5%). HPLC - 100% de pureza. LCMS - (ES+) Calc. 356,42, encontrado 357,33 (MH+).
15
20
Sintesis del compuesto:
imagen103
Esquema 14
T abla de reactivos - Sintesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCls
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Procedimiento
25
Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCU (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion 30 total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato. La fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
N-Metilanilina
166 8,3 g 50
Isotiocianato de amonio
76 5,7 g 75
HCl 1N
- 50 ml -
Procedimiento
5
Ambos reactivos se pusieron a reflujo toda la noche en HCl 1N. El producto se extrajo con acetato de etilo (100 ml). La fase organica se seco sobre Na2So4 y se evaporo produciendo un residuo oleoso.
T abla de reactivos - Slntesis de 5
10
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1 -Metil-1-feniltiourea
166,2 1,16 g 7
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 1,41 g 7
Acetato de sodio
82 1,15 g 14
Acido acetico
--- 7 ml ---
Procedimiento
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion 15 transparente. Cuando se observo la conversion total, la fase organica se recogio en acetato de etilo y se lavo con agua. La fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un producto oleoso marron (2,1 g, 95%).
T abla de reactivos - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(Metil(fenil)amino)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
313,37 2 g 6,4
NaOH
40 1,02 g 25,5
Dioxano
— 100 ml —
H2O
— 50 ml —
20
Procedimiento
Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O 2:1 (150 ml). La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el 25 residuo se acidifico hasta pH - 1-2 usando acido clorhldrico (1N). El producto se extrajo con acetato de etilo, se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo una espuma marron (1,6 g, 84%).
T abla de reactivos - Slntesis de 7
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(metil(fenil)amino)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2- carboxllico
299,35 1,67 g 5,6
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo)
256,17 1,43 g 5,6
Acetonitrilo
— 60 ml —
Dioxano
— 20 ml —
T rietilamina
101 2,3 ml 16,7
Pirrolidina
71,12 0,93 ml 11,2
30
Procedimiento
El acido, Et3N y el agente activante se llevaron a una mezcla de acetonitrilo-dioxano 1:1 (100 ml). La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC, y se anadieron porciones pequenas del agente activante hasta un punto 35 de conversion total. Despues, se anadio pirrolidina, y la mezcla se agito a rt. Los disolventes organicos se eliminaron a presion reducida. Se anadio acetato de etilo, y la fase organica se lavo con disolucion saturada de bicarbonato, se seco sobre Na2SO4, se filtro y se evaporo produciendo una espuma marron que se trituro usando EtOH hirviendo (polvo marron, 160 mg, 8%). HPLC - 100% de pureza. LCMS - (Es+) Calc. 352,45, encontrado 353,32 (MH+).
imagen104
5
imagen105
Esquema 15
T abla de reactivos - Sintesis de 2
10
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Procedimiento
Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una 15 mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formation de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaction se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato. La fase 20 organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
T abla de reactivos - Sintesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1-(4-Aminofenil)etanona
135 2,5 g 18,5
Isotiocianato de amonio
76 2,11 g 27,7
HCl 1N
15 ml
25 Procedimiento
Ambos reactivos se pusieron a reflujo toda la noche en HCl 1N. Se formo un precipitado, se anadio HCl 1N (10 ml), y la mezcla se enfrio en un bano de hielo. El solido amarillo se recogio mediante filtracion (2,5 g, 70%).
30 T abla de reactivos - Sintesis de 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1-(4-Acetilfenil)tiourea
194,25 1,36 g 7
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 1,41 g 7
5
10
15
20
25
30
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acetato de sodio
82 1,15 g 14
Acido acetico
— 7 ml —
Procedimiento
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo. Cuando se observo la conversion total, la mezcla se enfrio hasta rt. El solido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua con hielo (80 ml) produciendo un polvo amarillo (rendimiento cuantitativo).
T abla de reactivos - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-((4-Acetilfenil)amino)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
341,38 2,38 g 7
NaOH
40 1,12 g 28
Dioxano
— 100 ml ---
H2O
— 50 ml ---
Procedimiento
Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-HLO 2:1 (150 ml). La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico hasta pH - 1-2 usando acido clorhldrico (1N). El producto se recogio mediante filtracion (1,34 g, 58%).
T abla de reactivos - Slntesis de 7
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-((4-acetilfenil)amino)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-carboxllico
327,36 0,98 g 3
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo)
256,17 0,768 g 3
Acetonitrilo
--- 75 ml —
Dioxano
— 75 ml —
T rietilamina
101 1,25 ml 9
Pirrolidina
71,12 0,50 ml 6
Procedimiento
El acido, Et3N y el agente activante se llevaron a una mezcla de acetonitrilodioxano 1:1 (100 ml). Se anadio DMF a fin de lograr la solubilidad. La formation del ester activo se monitorizo mediante HPLC y se anadieron porciones pequenas del agente activante hasta un punto de conversion total. Despues, se anadio pirrolidina, y la mezcla se agito a rt. Los disolventes organicos se eliminaron a presion reducida, y el residuo se trituro usando agua y etanol. La mezcla se hirvio, y el solido se recogio mediante filtracion. Rendimiento 60 mg (5%). HPLC - 100% de pureza. LCMS - (ES+) Calc. 380,46, encontrado 381,38 (MH+).
Slntesis del compuesto:
imagen106
imagen107
Esquema 16
5 T abla de reactivos - Slntesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlC3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Procedimiento
10 Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica 15 desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato; la fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
2,4,6 T rifluoroanilina
147 2,2 g 15
Isotiocianato de amonio
76 1,37 g 18
HCl 1N
15 ml
20
Procedimiento
Ambos reactivos se pusieron a reflujo toda la noche en HCl 1N. Cuando se observo la conversion total, la mezcla se enfrio en un bano de hielo. El producto se recogio mediante filtracion (2,1 g, 68%).
25
T abla de reactivos - Slntesis de 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1-(2,4,6-T rifluo rofe ni l)tiourea
206 1,03 g 5
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 1,008 g 5
Acetato de sodio
82 0,82 g 10
Acido acetico
— 5 ml —
Procedimiento
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo. Cuando se observo la conversion total, la mezcla
5
10
15
20
25
se enfrio hasta rt. El solido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua con hielo (80 ml) produciendo un polvo amarillo (rendimiento cuantitativo).
T abla de reactivos - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-((2,4,6-T rifluorofenil)amino)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
353 1,76 g 5
NaOH
40 0,8 g 20
Dioxano
— 100 ml —
H2O
— 50 ml —
Procedimiento
Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-hbO 2:1 (60 ml). La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico hasta pH - 1-2 usando acido clorhldrico (1N). El producto se recogio mediante filtracion (1,45 g, 85%).
T abla de reactivos - Slntesis de 7
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-((2,4,6-trifluorofenil)amino)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-carboxllico
339,29 0,68 g 2
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo)
256,17 0,512 g 2
Acetonitrilo
- 25 ml -
Dioxano
--- 25 ml -
T rietilamina
101 0,83 ml 6
Pirrolidina
71,12 0,25 ml 3
Procedimiento
El acido, EtsN y el agente activante se llevaron a una mezcla de acetonitrilodioxano 1:1. La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC, y se anadieron porciones pequenas del agente activante hasta un punto de conversion total. Despues, se anadio pirrolidina, y la mezcla se agito a rt. Los disolventes organicos se eliminaron a presion reducida, y el residuo se hirvio en acetona. El precipitado blanco se elimino mediante filtracion. El filtrado se evaporo y se cristalizo en EtOH-agua. La mezcla se hirvio, y el solido se recogio mediante filtracion. Rendimiento 300 mg (38%). HPLC - 100% de pureza. LCMS - (ES+) Calc. 392,40, encontrado 393,36 (MH+).
Slntesis del compuesto:
imagen108
5
10
15
20
25
imagen109
Esquema 17
T abla de reactivos - Slntesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Procedimiento
Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato. La fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Cloruro de benzollo
140,57 1,74 ml 15
Isotiocianato de amonio
76 1,29 g 17
4-Morfolinoanilina
178 2,67 g 15
Acetona
— 15 ml —
NaOH
NaOH al 5% 100 ml —
Procedimiento
Una disolucion de cloruro de benzollo en acetona se anadio gota a gota a una disolucion de isotiocianato de amonio en acetona. La mezcla resultante se puso a reflujo durante 30 minutos seguido de la adicion de anilina y de reflujo durante 30 minutos adicionales. Los componentes se vertieron en hielo picado (100 ml) dando como resultado un solido oscuro que se recogio mediante filtracion, y se anadio una disolucion de NaOH (5%, 100 ml). La mezcla se agito a 80°C. El producto hidrolizado se recogio mediante filtracion (1,5 g, 42%).
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1-(4-Morfolinofenil)tiourea
237 1,19 g 5
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 1,01 g 5
Acetato de sodio
82 0,82 g 10
Acido acetico
--- 5 ml —
5 Procedimiento
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo. Cuando se observo la conversion total, la mezcla se enfrio hasta rt. Con lo que se formo un precipitado. El solido se recogio mediante filtracion, se lavo con bastante agua con hielo produciendo 1,56 g (80%) de solido verde.
10
T abla de reactivos - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-((4-morfolinofenil)amino)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
384 1,56 g 4
NaOH
40 0,64 g 16
Dioxano
— 60 ml —
H2O
— 30 ml —
Procedimiento
15
Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O 2:1 (60 ml). La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico hasta pH - 1-2 usando acido clorhldrico (1N). El producto se recogio mediante filtracion (0,9 g, 60%).
20
T abla de reactivos - Slntesis de 7
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-((4-morfolinofenil)amino)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-carboxllico
370,43 0,74 g 2
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo)
256,17 0,51 g 2
Acetonitrilo
--- 75 ml —
Dioxano
--- 75 ml —
DMF
--- 30 ml —
T rietilamina
101 0,83 ml 6
Pirrolidina
71,12 0,5 ml 6
Procedimiento
25
El acido, EtsN y el agente activante se agitaron en una mezcla de acetonitrilodioxano 1:1 (150 ml). A fin de lograr la solubilidad, se anadio DMF (30 ml). La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC, y se anadieron porciones pequenas del agente activante hasta un punto de conversion total. Despues, se anadio pirrolidina, y la mezcla se agito a rt. Los disolventes organicos se eliminaron a presion reducida, y el residuo se trituro con agua, y el 30 residuo se lavo con una cantidad adicional de agua y se recogio mediante filtracion. El solido obtenido se lavo con EtOH hirviendo y se recogio mediante filtracion produciendo un solido verde (60 mg, 7%). HPLC - 95% de pureza. LCMS - (ES+) Calc. 423,53, encontrado 424,43 (MH+).
Slntesis del compuesto:
35
imagen110
imagen111
Esquema 18
5 T abla de reactivo - Slntesis de 1
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
1125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Procedimiento
10 Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica 15 desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato; la fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrobenzamida
182,2 3,32 g 20
Reactivo de Lawesson
404 6,06 g 15
NaHCOs
84 2g 12
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1,2 Dimetoxietano
— 80 ml —
THF
— 40 ml —
Procedimiento
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 3-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF 2:1. La reaccion 5 se agito a 50°C durante 2 h, y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a rt durante 1 h. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla agitada de agua y hielo picado (300 ml). La mezcla lechosa se calento hasta ebullicion y despues se dejo enfriar hasta rt. dando como resultado cristales amarillos. (2,8 g, 77% de rendimiento).
10 Tabla de reactivos - Slntesis de 3
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrotiobenzamida
182 4,55 g 25
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 5,04 g 25
Acetato de sodio
82 4,1 g 50
Acido acetico
— 20 ml —
Procedimiento
15 Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion transparente, seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 3-5 horas (la conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. (90% de polvo amarillo mostaza).
20
T abla de reactivos - Slntesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
329,33 6,6 g 20
NaOH
40 3,2 g 80
Dioxano
— 100 ml —
H2O
— 50 ml —
Procedimiento
25
Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O 2:1. La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico usando acido clorhldrico concentrado. El producto se extrajo con acetato de etilo o se recogio mediante filtracion. Polvo amarillo (5,8 g, 92% de rendimiento).
30
T abla de reactivos - Slntesis de 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxllico
315,3 3,15 g 10
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo)
256,17 2,56 g 10
Acetonitrilo-Dioxano 1:1
— 200 ml —
T rietilamina
101 4,15 ml 22
pirrolidina
71,12 1,25 ml 15
Procedimiento
35
Se anadio trietilamina a una mezcla del acido en una mezcla de acetonitrilo-dioxano dando como resultado una disolucion transparente. El agente activante se anadio entonces, y los componentes se agitaron a rt. La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC. Se anadieron porciones extra del agente activante hasta un punto de conversion de 90-95%. Despues, se anadio pirrolidina y se observo una formacion inmediata de la amida 40 (precipitado). Se introdujeron porciones adicionales de pirrolidina hasta que se observo la conversion completa del ester activo. El solido obtenido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua (70 ml) y se seco a vaclo (2 g, 73%).
T abla de reactivos - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-il)( pirrolidin-1-il) metanona
368,41 ____2g____ 5,4
5
10
15
20
25
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Pd/C
— 150 mg —
THF
— 50 ml —
Procedimiento
El nitrocompuesto se disolvio en THF hirviendo. Se anadio el catalizador, y la mezcla se sometio a atmosfera de hidrogeno toda la noche. El catalizador se elimino mediante filtracion sobre celita, y el disolvente se evaporo produciendo una espuma blanca (1,8 g, rendimiento cuantitativo).
T abla de reactivos - Slntesis de 7 y 8
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Aminofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-il)(pirrolidin-1-il)metanona
338,4 1,8 g 5,3
Cloruro de cloroacetilo
113 ~0,1 ml 1,2
T rietilamina
101 0,41 ml 3
Piperidina
85 0,3 ml 3
T rietilamina*
101 0,41 ml 3
DCM
— 20 ml —
Dioxano
--- 40 ml ---
* Sintesis de 8
Sintesis de 7
Una disolucion de cloruro de cloroacetilo en DCM se anadio gota a gota a una mezcla de anilina y trietilamina en DCM con enfriamiento en un bano de hielo. (Con la adicion, la mezcla se vuelve una disolucion transparente). La mezcla de reaccion se agito durante 1 h. (Si es necesario, se anade otra porcion de cloruro de cloroacetilo). El disolvente se elimino a presion reducida, y el residuo oleoso se uso como tal en la etapa siguiente.
Sintesis de 8
Se anadio dioxano al residuo oleoso junto con piperidina y trietilamina. La mezcla se puso a reflujo vigorosamente durante 2-3 horas (si es necesario, para la terminacion de la reaccion, se anade morfolina). Cuando la reaccion estuvo terminada, se detuvo el calentamiento. El producto se recristalizo en MeOH (159 mg, 34%). HPLC - 99% de pureza. MS - (ES+) Calc. 463,2, encontrado 464,2 (MH+).
Sintesis del compuesto:
imagen112
imagen113
Esquema 19
5 T abla de reactivos - Slntesis de 1.
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Procedimiento
10 Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica 15 desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato; la fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrobenzamida
182,2 3,32 g 20
Reactivo de Lawesson
404 6,06 g 15
NaHCO3
84 2 g 12
1,2 Dimetoxietano
--- 80 ml —
THF
--- 40 ml —
20
Procedimiento
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 3-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF 2:1. La reaccion se agito a 50°C durante 2 h, y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a rt durante
1 h. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla agitada de agua y hielo picado (300 ml). La mezcla lechosa se calento hasta ebullicion y despues se dejo enfriar hasta rt. dando como resultado cristales amarillos. (2,8 g, 77% de rendimiento).
5 T abla de reactivos - Slntesis de 3
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrotiobenzamida
182 4,55 g 25
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 5,04 g 25
Acetato de sodio
82 4,1 g 50
Acido acetico
— 20 ml —
Procedimiento
10 Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion transparente, seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 3-5 horas (la conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. (90% de polvo amarillo mostaza).
15
T abla de reactivos - Slntesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
329,33 6,6 g 20
NaOH
40 3,2 g 80
Dioxano
— 100 ml —
H2O
— 50 ml —
Procedimiento
20
Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O 2:1. La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico usando acido clorhldrico concentrado. El producto se extrajo con acetato de etilo o se recogio mediante filtracion. Polvo amarillo (5,8 g, 92% de rendimiento).
25
T abla de reactivos - Slntesis de 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxllico
315,3 3,15 g 10
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo)
256,17 2,56 g 10
Acetonitrilo-Dioxano 1:1
200 ml
T rietilamina
101 4,15 ml 22
pirrolidina
71,12 1,25 ml 15
Procedimiento
30
Se anadio trietilamina a una mezcla del acido en una mezcla de acetonitrilo-dioxano, dando como resultado una disolucion transparente. El agente activante se anadio entonces, y los componentes se agitaron a rt. La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC. Se anadieron porciones extra del agente activante hasta un punto de conversion de 90-95%. Despues, se anadio pirrolidina y se observo una formacion inmediata de la amida 35 (precipitado). Se introdujeron porciones adicionales de pirrolidina hasta que se observo la conversion completa del ester activo. El solido obtenido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua (70 ml) y se seco a vaclo (2 g, 73%).
T abla de reactivos - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-il)(pirrolidin-1-il) metanona
368,41 2 g 5,4
Pd/C
— 150 mg —
THF
— 50 ml —
40
Procedimiento
El nitrocompuesto se disolvio en THF hirviendo. Se anadio el catalizador, y la mezcla se sometio a atmosfera de hidrogeno toda la noche. El catalizador se elimino mediante filtracion sobre celita, y el disolvente se evaporo 45 produciendo una espuma blanca (1,8 g, rendimiento cuantitativo).
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Aminofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-il)(pirrolidin-1-il)metanona
338,4 0,507 g 1,5
Cloruro de acetilo
78,5 ~0,13 ml 1,8
T rietilamina
101 0,62 ml 4,5
DCM
--- 20 ml —
5 Procedimiento
Una disolucion de cloruro de acetilo en DCM se anadio gota a gota a una mezcla de anilina y trietilamina en DCM con enfriamiento en un bano de hielo. Se observo disolucion parcial seguido de un precipitado blanco. El solido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua y se seco a vaclo produciendo un polvo blanco (0,128 g 22%). HPLC - 10 100% de pureza. LCMS - (ES+) Calc. 380,13, encontrado 381,1 (MH+).
Sintesis del compuesto:
imagen114
Esquema 20
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
5
Procedimiento
Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con 10 enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato; la fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
15
T abla de reactivos - Slntesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-Nitrobenzamida
182,2 6,64 g 40
Reactivo de Lawesson
404 12,12 g 30
NaHCOs
84 2,52 g 30
1,2 Dimetoxietano
--- 100 ml —
THF
--- 50 ml —
Procedimiento
20
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 4-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF 2:1. La reaccion se agito a 50°C durante 2 h, y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a rt durante 1 h. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla agitada de agua y hielo picado (600 ml). La mezcla lechosa se calento hasta ebullicion y despues se dejo enfriar 25 hasta 30°C dando como resultado cristales naranjas. (4,5 g, 61% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 3
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-Nitrotiobenzamida
182 2,00 g 11
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 2,22 g 11
Acetato de sodio
82 1,80 g 22
Acido acetico
--- 8 ml —
30 Procedimiento
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion transparente, seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 3-5 horas (la conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se 35 recogio mediante filtracion, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. (2,86 g 79% de polvo amarillo mostaza).
T abla de reactivos - Slntesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(4-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
329,33 2,86 g 8,7
NaOH
40 1,39 g 34,8
Dioxano
— 100 ml —
H2O
— 50 ml —
40
Procedimiento
Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O 2:1. La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el
residuo se acidifico usando acido clorhldrico concentrado. El producto se recogio mediante filtracion. Polvo amarillo (rendimiento cuantitativo).
T abla de reactivos - Slntesis de 5 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(4-nitrofenil)ti azol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxflico
315,3 2,71 g 8,6
bis(2,5-Dioxopirrolidin-1-ilo) carbonato de
256,17 2,20 g + 1,3 g 8,6 + 5
Acetonitrilo-Dioxano 1:1
— 90 ml —
T rietilamina
101 3,6 ml 26
pirrolidina
71,12 2,17 ml 26
Procedimiento
Se anadio trietilamina a una mezcla del acido en una mezcla de acetonitrilo-dioxano dando como resultado una 10 disolucion transparente. El agente activante se anadio entonces, y los componentes se agitaron a rt. La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC. Se anadieron porciones extra del agente activante (1,28 g, total 5 mmoles) hasta un punto de conversion de 95%. Despues, se anadio pirrolidina y se observo una formacion inmediata de la amida (precipitado). Se introdujeron porciones adicionales de pirrolidina hasta que se observo la conversion completa del ester activo. El solido obtenido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua (100 ml) y 15 se seco a vaclo (1,6 g, 50%).
T abla de reactivos - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-il)(pirrolidin-1-il) metanona
368,41 1,6 g 4,3
Pd/C
— 150 mg —
THF
— 300 ml —
20 Procedimiento
El nitrocompuesto se disolvio en THF hirviendo. Se anadio el catalizador, y la mezcla se sometio a atmosfera de hidrogeno toda la noche. El catalizador se elimino mediante filtracion sobre celita, y el disolvente se evaporo produciendo un polvo amarillo (0,8 g, 55%).
25
T abla de reactivos - Slntesis de 7 y 8
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(4-Ami nofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-il)( pirrolidi n-1-il)metanona
338,4 0,338 g 1
Cloruro de cloroacetilo
113 ~0,1 ml 1,2
T rietilamina
101 0,41 ml 3
morfolina
87,12 0,35 ml 4
T rietilamina*
101 0,41 ml 3
DCM
--- 20 ml —
Dioxano
--- 40 ml —
* Slntesis de 8
30
35
Slntesis de 7
Una disolucion de cloruro de cloroacetilo en DCM se anadio gota a gota a una mezcla de anilina y trietilamina en DCM con enfriamiento en un bano de hielo. (Con la adicion, la mezcla se vuelve una disolucion transparente). La mezcla de reaccion se agito durante 1 h. (Si es necesario, se anade otra porcion de cloruro de cloroacetilo). El disolvente se elimino a presion reducida, y el residuo oleoso se uso como tal en la etapa siguiente.
Slntesis de 8
Se anadio dioxano al residuo oleoso junto con morfolina y trietilamina. La mezcla se puso a reflujo vigorosamente durante 2-3 horas (si es necesario, para la terminacion de la reaccion, se anade morfolina). Cuando la reaccion 40 estuvo terminada, el calentamiento se detuvo. El producto se recristalizo en MeOH, se recogio mediante filtracion y se lavo con agua (109 mg, 23%). HPLC - 96% de pureza. MS - (ES+) Calc. 465,18, encontrado 466,3 (MH+).
imagen115
5
imagen116
Esquema 21
Tabla de reactivos - Sintesis de 1
10
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Procedimiento
Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una 15 mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formation de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaction se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato; la fase 20 organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrobenzamida
182,2 3,32 g 20
Reactivo de Lawesson
404 6,06 g 15
NaHCO3
84 2 g 12
1,2 Dimetoxietano
--- 80 ml —
THF
--- 40 ml —
Procedimiento
5
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 3-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF 2:1. La reaccion se agito a 50°C durante 2 h, y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a rt durante 1 h. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla agitada de agua y hielo picado (300 ml). La mezcla lechosa se calento hasta ebullicion y despues se dejo enfriar 10 hasta rt. dando como resultado cristales amarillos. (2,8 g, 77% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 3
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrotiobenzamida
182 4,55 g 25
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 5,04 g 25
Acetato de sodio
82 4,1 g 50
Acido acetico
— 20 ml —
15 Procedimiento
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion transparente, seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 3-5 horas (la conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se 20 recogio mediante filtracion, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. (90% de polvo amarillo mostaza).
T abla de reactivos - Slntesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
329,33 6,6 g 20
NaOH
40 3,2 g 80
Dioxano
— 100 ml —
H2O
— 50 ml —
25
Procedimiento
Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O 2:1. La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el 30 residuo se acidifico usando acido clorhldrico concentrado. El producto se extrajo con acetato de etilo o se recogio mediante filtracion. Polvo amarillo (5,8 g, 92% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(3-n itrofe nil)ti azol-4-i l)-1 H-pirrol-2-carboxllico
315,3 630,6 mg 2,0
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo) (DSC)
256,17 769 mg 3,0
Acetonitrilo-Dioxano 1:1
— 40 ml —
T rietilamina
101 0,84 ml 6,0
Dimetilamina
45,1 3 ml 5,0
35
Procedimiento
Se anadio DSC a una disolucion del acido y trietilamina en dioxano-acetonitrilo, y los componentes se agitaron a rt. La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC. Se anadieron porciones extra del agente activante hasta 40 un punto de conversion de 90-95%. Despues, se anadio dimetilamina y se observo la formacion inmediata de la amida (el color de la reaccion cambio). Se introdujeron porciones adicionales de dimetilamina hasta que se observo la conversion completa del ester activo. El solido obtenido se elimino mediante filtracion, se lavo con agua y se seco a alto vaclo para producir el producto deseado como un solido amarronado: 580 mg, 84,7% de rendimiento.
5
10
15
20
25
30
Reactivo/materia prima
PM(g/mol) Cantidad mmoles
N,N-Dimetil-4-(2-(3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-carboxamida
342,4 580 mg 1,69
Pd/C
— 100 mg cat.
THF
— 50 ml —
Procedimiento
El nitrocompuesto se disolvio en THF hirviendo. Se anadio el catalizador, y la mezcla se sometio a atmosfera de hidrogeno durante 48 h. El catalizador se elimino mediante filtracion sobre celita, y el disolvente se evaporo produciendo el producto como un solido amarillo: 470 mg, 89% de rendimiento.
T abla de reactivos - Slntesis de 7 y 8
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Aminofenil)tiazol-4-il)-N,N-di metil-1H-pirrol-2-carboxamida
312,4 470 mg 1,5
Cloruro de cloroacetilo
113 0,13 ml 1,65
T rietilamina
101 0,63 ml 4,5
Morfolina
87,12 0,12 ml 1,5
T rietilamina*
101 0,21 ml 1,5
DCM
— 25ml —
Dioxano
— 8 ml —
* Slntesis de 8
Slntesis de 7
Una disolucion de cloruro de cloroacetilo en DCM se anadio gota a gota a una mezcla de anilina y trietilamina en DCM con enfriamiento en un bano de hielo. (Con la adicion, la mezcla se vuelve una disolucion transparente). La mezcla de reaccion se agito durante 1 h. El disolvente se elimino a presion reducida, y el residuo oleoso se uso como tal en la etapa siguiente.
Slntesis de 8
Se anadio dioxano al residuo oleoso junto con morfolina y trietilamina. La mezcla se puso a reflujo vigorosamente durante 2 horas (si es necesario, para la terminacion de la reaccion, se anade morfolina). Cuando la reaccion estuvo terminada, el calentamiento se detuvo, se anadio norit, y la mezcla se agito durante 20 minutos. El carbon se elimino mediante filtracion, y el disolvente se evaporo a presion reducida. El filtrado se evaporo, y el producto oleoso se purifico sobre sllice de fase normal (eluido mediante gradiente de PE:THF) para producir el producto puro como un solido blanco: 35 mg, 15,9% de rendimiento, 100% de pureza. HPLC - 100% de pureza. Ms - (ES+) Calc. 439,5, encontrado 440,1 (mH+).
Slntesis del compuesto:
imagen117
imagen118
Esquema 22
5 T abla de reactivos - Slntesis de 1
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Procedimiento
10 Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica 15 desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato; la fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrobenzamida
182,2 3,32 g 20
Reactivo de Lawesson
404 6,06 g 15
NaHCOs
84 2 g 12
1,2 Dimetoxietano
— 80 ml —
THF
--- 40 ml —
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 3-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF 2:1. La reaccion 5 se agito a 50°C durante 2 h, y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a rt durante 1 h. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla agitada de agua y hielo picado (300 ml). La mezcla lechosa se calento hasta ebullicion y despues se dejo enfriar hasta rt. dando como resultado cristales amarillos. (2,8 g, 77% de rendimiento).
10 Tabla de reactivos - Slntesis de 3
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrotiobenzamida
182 4,55 g 25
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 5,04 g 25
Acetato de sodio
82 4,1 g 50
Acido acetico
--- 20 ml —
Procedimiento
15 Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion transparente, seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 3-5 horas (la conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. (90% de polvo amarillo mostaza).
20
T abla de reactivos - Slntesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
329,33 6,6 g 20
NaOH
40 3,2 g 80
Dioxano
— 100 ml —
H2O
— 50 ml —
Procedimiento
25
Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O 2:1. La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico usando acido clorhldrico concentrado. El producto se extrajo con acetato de etilo o se recogio mediante filtracion. Polvo amarillo (5,8 g, 92% de rendimiento).
30
T abla de reactivos - Slntesis de 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(3-n itrofe nil)ti azol-4-i l)-1 H-pirrol-2-carboxllico
315,3 630,6 mg 2,0
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo) (DSC)
256,17 769 mg 3,0
Acetonitrilo-Dioxano 1:1
— 40 ml —
T rietilamina
101 0,84 ml 6,0
Dimetilamina
45,1 3 ml 5,0
Procedimiento
35
Se anadio DSC a una disolucion del acido y trietilamina en dioxano-acetonitrilo, y los componentes se agitaron a rt. La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC. Se anadieron porciones extra del agente activante hasta un punto de conversion de 90-95%. Despues, se anadio dimetilamina y se observo la formacion inmediata de la amida (el color de la reaccion cambio). Se introdujeron porciones adicionales de dimetilamina hasta que se observo 40 la conversion completa del ester activo. El solido obtenido se elimino mediante filtracion, se lavo con agua y se seco a alto vaclo para producir el producto deseado como un solido amarronado: 580 mg, 84,7% de rendimiento.
T abla de reactivos - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
N,N-dimetil-4-(2-(3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-carboxamida
342,4 580 mg 1,69
Pd/C
--- 100 mg cat.
THF
--- 50 ml —
5
10
15
20
25
30
T abla de reactivos - Slntesis de 7 y 8
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Aminofenil)tiazol-4-il)-N,N-di metil-1H-pirrol-2-carboxamida
312,4 470 mg 1,5
Cloruro de cloroacetilo
113 0,13 ml 1,65
T rietilamina
101 0,63 ml 4,5
Piperidina
85,2 128 mg 1,5
T rietilamina*
101 0,21 ml 1,5
DCM
--- 25 ml ---
Dioxano
--- 8 ml ---
* Sintesis de 8
Sintesis de 7
Una disolucion de cloruro de cloroacetilo en DCM se anadio gota a gota a una mezcla de anilina y trietilamina en DCM con enfriamiento en un bano de hielo. (Con la adicion, la mezcla se vuelve una disolucion transparente). La mezcla de reaccion se agito durante 1 h. El disolvente se elimino a presion reducida, y el residuo oleoso se uso como tal en la etapa siguiente.
Sintesis de 8
Se anadio dioxano al residuo oleoso junto con piperidina y trietilamina. La mezcla se puso a reflujo vigorosamente durante 1 hora (si es necesario, para la terminacion de la reaccion, se anade piperidina). Cuando la reaccion estuvo terminada, el calentamiento se detuvo, se anadio norit, y la mezcla se agito durante 20 minutos. El carbon se elimino mediante filtracion, y el disolvente se evaporo a presion reducida. El filtrado se evaporo, y el producto oleoso se purifico sobre sllice de fase normal (eluido mediante gradiente de PE:THF) para producir el producto puro como un solido amarillo: 15 mg, 6,9% de rendimiento, 96% de pureza. HPLC - 96% de pureza. MS - (ES+) Calc. 437,5, encontrado 438,1 (MH+).
Sintesis del compuesto:
imagen119
imagen120
Esquema 23
5 T abla de reactivos - Slntesis de 1
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Procedimiento
10 Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica 15 desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato; la fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrobenzamida
182,2 3,32 g 20
Reactivo de Lawesson
404 6,06 g 15
NaHCOs
84 2 g 12
1,2 Dimetoxietano
- 80 ml —
THF
- 40 ml —
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 3-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF 2:1. La reaccion se agito a 50°C durante 2 h, y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a rt durante 5 1 h. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla
agitada de agua y hielo picado (300 ml). La mezcla lechosa se calento hasta ebullicion y despues se dejo enfriar hasta rt. dando como resultado cristales amarillos. (2,8 g, 77% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 3
10
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrotiobenzamida
182 4,55 g 25
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 5,04 g 25
Acetato de sodio
82 4,1 g 50
Acido acetico
— 20 ml —
Procedimiento
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion 15 transparente, seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 3-5 horas (la conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. (90% de polvo amarillo mostaza).
20 T abla de reactivos - Slntesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
329,33 6,6 g 20
NaOH
40 3,2 g 80
Dioxano
— 100 ml —
H2O
— 50 ml —
Procedimiento
25 Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O 2:1. La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico usando acido clorhldrico concentrado. El producto se extrajo con acetato de etilo o se recogio mediante filtracion. Polvo amarillo (5,8 g, 92% de rendimiento).
30 T abla de reactivos - Slntesis de 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxllico
315,3 630,6 mg 2,0
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo) (DSC)
256,17 769 mg 3,0
Acetonitrilo-Dioxano 1:1
— 40 ml —
T rietilamina
101 0,84 ml 6,0
Dimetilamina
45,1 3 ml 5,0
Procedimiento
35 Se anadio DSC a una disolucion del acido y trietilamina en dioxano-acetonitrilo, y los componentes se agitaron a rt. La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC. Se anadieron porciones extra del agente activante hasta un punto de conversion de 90-95%. Despues, se anadio dimetilamina y se observo la formacion inmediata de la amida (el color de la reaccion cambio). Se introdujeron porciones adicionales de dimetilamina hasta que se observo la conversion completa del ester activo. El solido obtenido se elimino mediante filtracion, se lavo con agua y se seco 40 a alto vaclo para producir el producto deseado como un solido amarronado: 580 mg, 84,7% de rendimiento.
T abla de reactivos - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
N,N-Dimetil-4-(2-(3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-carboxamida
342,4 580 mg 1,69
Pd/C
— 100 mg cat.
THF
— 50 ml —
5
10
15
20
25
30
T abla de reactivos - Slntesis de 7 y 8
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Aminofenil)tiazol-4-il)-N,N-dimetil-1H-pirrol-2-carboxamida
312,4 470 mg 1,5
Cloruro de cloroacetilo
113 0,13 ml 1,65
T rietilamina
101 0,63 ml 4,5
1-Metilpiperazina
100,2 150,3 mg 1,5
T rietilamina*
101 0,21 ml 1,5
DCM
--- 25ml ---
Dioxano
— 8 ml —
* Sintesis de 8
Sintesis de 7
Una disolucion de cloruro de cloroacetilo en DCM se anadio gota a gota a una mezcla de anilina y trietilamina en DCM con enfriamiento en un bano de hielo. (Con la adicion, la mezcla se vuelve una disolucion transparente). La mezcla de reaccion se agito durante 1 h. El disolvente se elimino a presion reducida, y el residuo oleoso se uso como tal en la etapa siguiente.
Sintesis de 8
Se anadio dioxano al residuo oleoso junto con 1-metilpiperazina y trietilamina. La mezcla se puso a reflujo vigorosamente durante 1 hora (si es necesario, para la terminacion de la reaccion, se anade 1-metilpiperazina). Cuando la reaccion estuvo terminada, el calentamiento se detuvo, se anadio norit, y la mezcla se agito durante 20 minutos. El carbon se elimino mediante filtracion, y el disolvente se evaporo a presion reducida. El filtrado se evaporo, y el producto oleoso se purifico sobre sllice de fase normal (eluido mediante gradiente de PE:THF) para producir el producto puro como un solido amarillo: 156 mg, 69% de rendimiento, 100% de pureza. HPLC - 100% de pureza. MS - (ES+) Calc. 452,6, encontrado 453,1 (MH+).
Sintesis del compuesto:
imagen121
imagen122
Esquema 24
5 T abla de reactivos - Slntesis de 1
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml -
Procedimiento
10 Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica 15 desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato; la fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrobenzamida
182,2 3,32 g 20
Reactivo de Lawesson
404 6,06 g 15
NaHCO3
84 2 g 12
1,2 Dimetoxietano
--- 80 ml —
THF
--- 40 ml —
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 3-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF 2:1. La reaccion se agito a 50°C durante 2 h, y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a rt durante 5 1 h. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla
agitada de agua y hielo picado (300 ml). La mezcla lechosa se calento hasta ebullicion y despues se dejo enfriar hasta rt. dando como resultado cristales amarillos. (2,8 g, 77% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 3
10
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrotiobenzamida
182 4,55 g 25
4-(2-cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 5,04 g 25
Acetato de sodio
82 4,1 g 50
Acido acetico
— 20 ml —
Procedimiento
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion 15 transparente, seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 3-5 horas (la conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. (90% de polvo amarillo mostaza).
20 T abla de reactivos - Slntesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
329,33 6,6 g 20
NaOH
40 3,2 g 80
Dioxano
— 100 ml —
H2O
— 50 ml —
Procedimiento
25 Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O 2:1. La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico usando acido clorhldrico concentrado. El producto se extrajo con acetato de etilo o se recogio mediante filtracion. Polvo amarillo (5,8 g, 92% de rendimiento).
30 T abla de reactivos - Slntesis de 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxllico
315,3 3,15 g 10
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo)
256,17 2,56 g 10
Acetonitrilo-Dioxano 1:1
— 200 ml —
T rietilamina
101 4,15 ml 22
pirrolidina
71,12 1,25 ml 15
Procedimiento
35 Se anadio trietilamina a una mezcla del acido en una mezcla de acetonitrilo-dioxano dando como resultado una disolucion transparente. El agente activante se anadio entonces, y los componentes se agitaron a rt. La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC. Se anadieron porciones extra del agente activante hasta un punto de conversion de 90-95%. Despues, se anadio pirrolidina, y se observo una formacion inmediata de la amida (precipitado). Se introdujeron porciones adicionales de pirrolidina hasta que se observo la conversion completa del 40 ester activo. El solido obtenido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua (70 ml) y se seco a vaclo (2 g, 73%).
T abla de reactivos - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-il)(pi rrolidin-1- il)metanona
368,41 2 g 5,4
Pd/C
— 150 mg —
THF
— 50 ml —
5
10
15
20
25
T abla de reactivos - Slntesis de 7 y 8
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Aminofenil)tiazol-4-il)-1H-pirro1-2-il)(pirrolidin-1-il)metanona
338,4 0,338 g 1
Cloruro de cloroacetilo
113 ~0,1 ml 1,2
T rietilamina
101 0,41 ml 3
Dimetilamina (2M en MeOH)
85 2 ml 4
T rietilamina*
101 0,41 ml 3
DCM
--- 20 ml —
Dioxano
--- 40 ml —
* Sintesis de 8
Sintesis de 7
Una disolucion de cloruro de cloroacetilo en DCM se anadio gota a gota a una mezcla de anilina y trietilamina en DCM con enfriamiento en un bano de hielo. (Con la adicion, la mezcla se vuelve una disolucion transparente). La mezcla de reaccion se agito durante 1 h. (Si es necesario, se anade otra porcion de cloruro de cloroacetilo). El disolvente se elimino a presion reducida, y el residuo oleoso se uso como tal en la etapa siguiente.
Sintesis de 8
Se anadio dioxano al residuo oleoso junto con dimetilamina y trietilamina. La mezcla se puso a reflujo vigorosamente durante 2-3 horas (si es necesario, para la terminacion de la reaccion, se anade dimetilamina). Cuando la reaccion estuvo terminada, el calentamiento se detuvo. El disolvente se elimino a presion reducida. El residuo se trituro usando isopropanol, se recogio mediante filtracion y se lavo con agua. El secado a alto vaclo produjo 55 mg (13%). HPLC - 96% de pureza. MS - (ES+) Calc. 423,17, encontrado 424,2 (MH+).
Sintesis del compuesto:
imagen123
5
10
imagen124
Tabla de reactivos - Slntesis de 1
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Procedimiento
Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato; la fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrobenzamida
182,2 3,32 g 20
Reactivo de Lawesson
404 6,06 g 15
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
NaHCO3
84 2 g 12
1,2 Dimetoxietano
— 80 ml —
THF
— 40 ml —
Procedimiento
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 3-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF 2:1. La reaccion 5 se agito a 50°C durante 2 h, y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a rt durante 1 h. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla agitada de agua y hielo picado (300 ml). La mezcla lechosa se calento hasta ebullicion y despues se dejo enfriar hasta rt. dando como resultado cristales amarillos. (2,8 g, 77% de rendimiento).
10 Tabla de reactivos - Slntesis de 3
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrotiobenzamida
182 4,55 g 25
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 5,04 g 25
Acetato de sodio
82 4,1 g 50
Acido acetico
— 20 ml —
Procedimiento
15 Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion transparente, seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 3-5 horas (la conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. (90% de polvo amarillo mostaza).
20
T abla de reactivos - Slntesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
329,33 6,6 g 20
NaOH
40 3,2 g 80
Dioxano
— 100 ml —
H2O
— 50 ml —
Procedimiento
25
Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O 2:1. La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico usando acido clorhldrico concentrado. El producto se extrajo con acetato de etilo o se recogio mediante filtracion. Polvo amarillo (5,8 g, 92% de rendimiento).
30
T abla de reactivos - Slntesis de 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxllico
315,3 0,945 g 3
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo) (DSC)
256,17 0,768+0,384 g 3+1,5
Acetonitrilo-Dioxano 1:1
— 50 ml —
T rietilamina
101 1,25 ml 9
Ciclopropilamina
57,1 0,7 ml 10
Procedimiento
35
Se anadio DSC a una disolucion del acido y trietilamina en dioxano-acetonitrilo, y los componentes se agitaron a rt. La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC. Se anadieron porciones extra del agente activante hasta un punto de conversion de 90-95%. Despues, se anadio ciclopropilamina, y se observo una formacion inmediata de la amida (precipitado). Se introdujeron porciones adicionales de pirrolidina hasta que se observo la conversion 40 completa del ester activo. El solido obtenido se elimino mediante filtracion, y el filtrado (90% de pureza) se evaporo y el solido resultante se agito en agua (30 ml). El secado a vaclo produjo 0,46 g (43%) de solido amarillo.
5
10
15
20
25
30
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
N-Ciclopropil-4-(2-(3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-carboxamida
354,38 0,46 g 1,3
Pd/C
— 150 mg —
THF
— 150 ml —
Procedimiento
El nitrocompuesto se disolvio en THF hirviendo. Se anadio el catalizador, y la mezcla se sometio a atmosfera de hidrogeno toda la noche. El catalizador se elimino mediante filtracion sobre celita, y el disolvente se evaporo produciendo una espuma blanca (0,32 g, 76%).
T abla de reactivos - Slntesis de 7 y 8
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Aminofenil)tiazol-4-il)-N-ciclopropil-1H-pirrol-2-carboxamida
324 0,320 g 0,99
Cloruro de cloroacetilo
113 ~0,1 ml 1,2
T rietilamina
101 0,41 ml 3
Morfolina
87,12 0,35 ml 4
T rietilamina*
101 0,41 ml 3
DCM
— 20 ml —
Dioxano
— 40 ml —
* Slntesis de 8
Slntesis de 7
Una disolucion de cloruro de cloroacetilo en DCM se anadio gota a gota a una mezcla de anilina y trietilamina en DCM con enfriamiento en un bano de hielo. (Con la adicion, la mezcla se vuelve una disolucion transparente). La mezcla de reaccion se agito durante 1 h. (Si es necesario, se anade otra porcion de cloruro de cloroacetilo). El disolvente se elimino a presion reducida, y el residuo oleoso se uso como tal en la etapa siguiente.
Slntesis de 8
Se anadio dioxano al residuo oleoso junto con morfolina y trietilamina. La mezcla se puso a reflujo vigorosamente durante 2 horas (si es necesario, para la terminacion de la reaccion, se anade morfolina). Cuando la reaccion estuvo terminada, el calentamiento se detuvo. El disolvente se elimino a presion reducida. El residuo se recogio en EtOH y se anadio norit. La mezcla se agito durante 30 minutos y el carbon se elimino mediante filtracion. El filtrado se evaporo, y el producto oleoso se purifico sobre sllice de fase normal (eluido mediante gradiente de PE:THF). 20 mg (4,46%). HPLC - 98% de pureza. MS - (ES+) Calc. 451,17, encontrado 451,6 (MH+).
Slntesis del compuesto:
imagen125
5
10
15
20
25
imagen126
Esquema 26
Tabla de reactivos - Slntesis de 1
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Procedimiento
Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato; la fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrobenzamida
182,2 3,32 g 20
Reactivo de Lawesson
404 6,06 g 15
NaHCOs
84 2 g 12
1,2 Dimetoxietano
--- 80 ml —
THF
--- 40 ml —
Procedimiento
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 3-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF 2:1. La reaccion se agito a 50°C durante 2 h, y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a rt durante 1 h. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla
agitada de agua y hielo picado (300 ml). La mezcla lechosa se calento hasta ebullicion y despues se dejo enfriar hasta rt. dando como resultado cristales amarillos. (2,8 g, 77% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 3 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrotiobenzamida
182 4,55 g 25
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 5,04 g 25
Acetato de sodio
82 4,1 g 50
Acido acetico
--- 20 ml —
Procedimiento
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion 10 transparente, seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 3-5 horas (la conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. (90% de polvo amarillo mostaza).
15 Tabla de reactivos - Slntesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
329,33 6,6 g 20
NaOH
40 3,2 g 80
Dioxano
— 100 ml —
H2O
— 50 ml —
Procedimiento
20 Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O 2:1. La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico usando acido clorhldrico concentrado. El producto se extrajo con acetato de etilo o se recogio mediante filtracion. Polvo amarillo (5,8 g, 92% de rendimiento).
25 T abla de reactivos - Slntesis de 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxflico
315,3 3,15 g 10
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo)
256,17 2,56 g 10
Acetonitrilo-Dioxano 1:1
— 200 ml —
T rietilamina
101 4,15 ml 22
pirrolidina
71,12 1,25 ml 15
Procedimiento
30 Se anadio trietilamina a una mezcla del acido en una mezcla de acetonitrilo-dioxano, dando como resultado una disolucion transparente. El agente activante se anadio entonces, y los componentes se agitaron a rt. La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC. Se anadieron porciones extra del agente activante hasta un punto de conversion de 90-95%. Despues, se anadio pirrolidina, y se observo una formacion inmediata de la amida (precipitado). Se introdujeron porciones adicionales de pirrolidina hasta que se observo la conversion completa del 35 ester activo. El solido obtenido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua (70 ml) y se seco a vaclo (2 g, 73%).
T abla de reactivos - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pi rrol-2-il)(pirrolidin-1-il)metanona
368,41 2 g 5,4
Pd/C
— 150 mg —
THF
— 50 ml —
40 Procedimiento
El nitrocompuesto se disolvio en THF hirviendo. Se anadio el catalizador, y la mezcla se sometio a atmosfera de hidrogeno toda la noche. El catalizador se elimino mediante filtracion sobre celita, y el disolvente se evaporo produciendo una espuma blanca (1,8 g, rendimiento cuantitativo).
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Aminofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-il)(pirrolidin-1 -il) metanona
338,4 0,338 g 1
Cloruro de N-carbonil morfolina
149,5 ~0,23 ml 2
T rietilamina
101 0,41 ml 3
Acetonitrilo-THF 1:1
— 60 ml —
Sintesis de 7 5
Los componentes se agitaron a 70°C en una mezcla de acetonitrilo-THF 1:1. El progreso de la reaccion se monitorizo mediante HPLC. Se observo conversion total tras agitar toda la noche, y los disolventes se eliminaron a presion reducida. El producto se purifico sobre sllice de fase normal (elucion usando gradiente de PE-THF). (32 mg, 7%). HPLC - 98% de pureza. MS - (ES+) Calc. 451,17, encontrado 451,7 (MH+).
10
Sintesis del compuesto:
imagen127
15
imagen128
Esquema 27
Tabla de reactivos - Sintesis de 1
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Procedimiento
Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una 5 mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formation de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaction se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato; la fase 10 organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrobenzamida
182,2 3,32 g 20
Reactivo de Lawesson
404 6,06 g 15
NaHCOs
84 2 g 12
1,2 Dimetoxietano
--- 80 ml —
THF
--- 40 ml —
15 Procedimiento
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 3-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF 2:1. La reaccion se agito a 50°C durante 2 h, y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a rt durante 1 h. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla 20 agitada de agua y hielo picado (300 ml). La mezcla lechosa se calento hasta ebullition y despues se dejo enfriar hasta rt. dando como resultado cristales amarillos. (2,8 g, 77% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 3
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrotiobenzamida
182 4,55 g 25
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 5,04 g 25
Acetato de sodio
82 4,1 g 50
Acido acetico
— 20 ml —
25
Procedimiento
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion transparente, seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 3-5 horas (la 30 conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se recogio mediante filtration, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. (90% de polvo amarillo mostaza).
T abla de reactivos - Slntesis de 4 35
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
329,33 6,6 g 20
NaOH
40 3,2 g 80
Dioxano
— 100 ml —
H2O
— 50 ml —
Procedimiento
Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O 2:1. La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual 40 se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico usando acido clorhldrico concentrado. El producto se extrajo con acetato de etilo o se recogio mediante filtracion. Polvo amarillo (5,8 g, 92% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 5
5
10
15
20
25
30
35
40
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxllico
315,3 0,790 g 2,5
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo) (DSC)
256,17 0,64 g + 0,32 g 2,5+1,25
Acetonitrilo-Dioxano 1:1
--- 50 ml —
T rietilamina
101 1,04 ml 7,5
Amonlaco en MeOH (7M)
57,1 0,7 ml 10
Procedimiento
Se anadio DSC a una disolucion del acido y trietilamina en dioxano-acetonitrilo, y los componentes se agitaron a rt. La formation del ester activo se monitorizo mediante HPLC. Se anadieron porciones extra del agente activante hasta un punto de conversion de 95%. Despues, se anadio disolucion de amonlaco, y se observo una formacion inmediata de la amida (precipitado). Se introdujeron porciones adicionales de amonlaco hasta que se observo la conversion completa del ester activo. El solido obtenido se recogio mediante filtration, se lavo con agua, se llevo a EtOH y se evaporo hasta sequedad produciendo 0,32 g (1,02 mmoles, 40% de rendimiento) de polvo amarillo.
T abla de reactivos - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-carboxamida
314,32 0,32 g 1,02
Pd/C
— 100 mg —
THF
— 150 ml —
Procedimiento
El nitrocompuesto se disolvio en THF hirviendo. Se anadio el catalizador, y la mezcla se sometio a atmosfera de hidrogeno toda la noche. El catalizador se elimino mediante filtracion sobre celita, y el disolvente se evaporo produciendo una espuma blanca (rendimiento cuantitativo).
T abla de reactivos - Slntesis de 7 y 8
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Aminofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-carboxamida
284,34 0,28 g 1
Cloruro de cloroacetilo
113 ~0,1 ml 1,2
T rietilamina
101 0,41 ml 3
Morfolina
87,12 0,52 ml 6
T rietilamina*
101 0,41 ml 3
DCM
--- 20 ml —
Dioxano
--- 40 ml —
*Slntesis de 8
Slntesis de 7
Una disolucion de cloruro de cloroacetilo en DCM se anadio gota a gota a una mezcla de anilina y trietilamina en DCM con enfriamiento en un bano de hielo. (Con la adicion, la mezcla se vuelve una disolucion transparente). La mezcla de reaction se agito durante 1 h. (Si es necesario, se anade otra portion de cloruro de cloroacetilo). El disolvente se elimino a presion reducida, y el residuo oleoso se uso como tal en la etapa siguiente.
Slntesis de 8
Se anadio dioxano al residuo oleoso junto con morfolina y trietilamina. La mezcla se puso a reflujo vigorosamente durante 2 horas (si es necesario, para la termination de la reaccion, se anade morfolina). Cuando la reaccion estuvo terminada, el calentamiento se detuvo. El disolvente se elimino a presion reducida. El filtrado se evaporo, y el producto oleoso se purifico sobre sllice de fase normal (eluido mediante gradiente de PE:THF). 20 mg (5%). HPLc - 96% de pureza. MS - (ES+) Calc. 411,14, encontrado 411,8 (MH+).
Slntesis del compuesto:
imagen129
imagen130
Esquema 28 5
Tabla de reactivos - Slntesis de 1
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Procedimiento
10
Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion 15 total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato; la fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 2
20
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrobenzamida
182,2 3,32 g 20
Reactivo de Lawesson
404 6,06 g 15
NaHCO3
84 2 g 12
1,2 Dimetoxietano
--- 80 ml —
THF
--- 40 ml —
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 3-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF 2:1. La reaccion se agito a 50°C durante 2 h, y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a rt durante 5 1 h. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla
agitada de agua y hielo picado (300 ml). La mezcla lechosa se calento hasta ebullicion y despues se dejo enfriar hasta rt. dando como resultado cristales amarillos. (2,8 g, 77% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 3
10
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-
182 4,55 g 25
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 5,04 g 25
Acetato de sodio
82 4,1 g 50
Acido acetico
— 20 ml —
Procedimiento
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion 15 transparente, seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 3-5 horas (la conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. (90% de polvo amarillo mostaza).
20 T abla de reactivos - Slntesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
329,33 6,6 g 20
NaOH
40 3,2 g 80
Dioxano
— 100 ml —
H2O
— 50 ml —
Procedimiento
25 Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O 2:1. La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico usando acido clorhldrico concentrado. El producto se extrajo con acetato de etilo o se recogio mediante filtracion. Polvo amarillo (5,8 g, 92% de rendimiento).
30 T abla de reactivos - Slntesis de 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxllico
315,3 0,780 g 2,5
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo) (DSC)
256,17 0,64g + 0,32 g 2,5 + 1,25
Acetonitrilo-Dioxano 1:1
— 30 ml —
T rietilamina
101 1,04 ml 7,5
Dietilamina
73,14 0,82 ml 8
Procedimiento
35 Se anadio DSC a una disolucion del acido y trietilamina en dioxano-acetonitrilo, y los componentes se agitaron a rt. La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC. Se anadieron porciones extra del agente activante hasta un punto de conversion de 97%. Despues, se anadio dietilamina. Se introdujeron porciones adicionales de dietilamina hasta que se observo la conversion completa del ester activo. Los disolventes se eliminaron a presion reducida. Se anadio DCM, y la disolucion se lavo con disolucion saturada de bicarbonato de sodio. La fase organica 40 se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo 0,8 g (86%) de polvo amarillo.
T abla de reactivos - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
N,N-Dietil-4-(2-(3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-carboxamida
370,43 0,80 g 2,2
Pd/C
— 120 mg —
THF
— 150 ml —
5
10
15
20
25
T abla de reactivos - Slntesis de 7 y 8
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Aminofenil)tiazol-4-il)-N,N-dietil-1H-pirrol-2-carboxamida
340 0,68 g 2
Cloruro de cloroacetilo
113 ~0,19 ml 2,4
T rietilamina
101 0,83 ml 6
Morfolina
87,12 0,53 ml 6
T rietilamina*
101 0,83 ml 3
DCM
--- 20 ml ---
Dioxano
--- 40 ml ---
* Sintesis de 8
Sintesis de 7
Una disolucion de cloruro de cloroacetilo en DCM se anadio gota a gota a una mezcla de anilina y trietilamina en DCM con enfriamiento en un bano de hielo. (Con la adicion, la mezcla se vuelve una disolucion transparente). La mezcla de reaccion se agito durante 1 h. (Si es necesario, se anade otra porcion de cloruro de cloroacetilo). El disolvente se elimino a presion reducida, y el residuo oleoso se uso como tal en la etapa siguiente.
Sintesis de 8
Se anadio dioxano al residuo oleoso junto con morfolina y trietilamina. La mezcla se puso a reflujo vigorosamente durante 2 horas (si es necesario, para la terminacion de la reaccion, se anade morfolina). Cuando la reaccion estuvo terminada, el calentamiento se detuvo. El disolvente se elimino a presion reducida. La disolucion se evaporo, y el producto oleoso se purifico sobre sllice de fase normal (eluido mediante gradiente de PE:THF). Las fracciones se combinaron y se evaporaron. El producto oleoso se trituro adicionalmente usando una cantidad pequena de THF. (87 mg, 9,3%). HPLC - 100% de pureza. MS - (ES+) Calc. 467,2, encontrado 467,9 (MH+).
Sintesis del compuesto:
imagen131
imagen132
Esquema 29
5 T abla de reactivos - Slntesis de 1
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Procedimiento
10 Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica 15 desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato; la fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrobenzamida
182,2 3,32 g 20
Reactivo de Lawesson
404 6,06 g 15
NaHCOs
84 2 g 12
1,2 Dimetoxietano
--- 80 ml —
THF
--- 40 ml —
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 3-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF 2:1. La reaccion se agito a 50°C durante 2 h, y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a rt durante 5 1 h. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla
agitada de agua y hielo picado (300 ml). La mezcla lechosa se calento hasta ebullicion y despues se dejo enfriar hasta rt. dando como resultado cristales amarillos. (2,8 g, 77% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 3
10
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrotiobenzamida
182 4,55 g 25
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 5,04 g 25
Acetato de sodio
82 4,1 g 50
Acido acetico
— 20 ml —
Procedimiento
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion 15 transparente, seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 3-5 horas (la conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. (90% de polvo amarillo mostaza).
20 T abla de reactivos - Slntesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
329,33 6,6 g 20
NaOH
40 3,2 g 80
Dioxano
— 100 ml —
H2O
— 50 ml —
Procedimiento
25 Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O 2:1. La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico usando acido clorhldrico concentrado. El producto se extrajo con acetato de etilo o se recogio mediante filtracion. Polvo amarillo (5,8 g, 92% de rendimiento).
30 T abla de reactivos - Slntesis de 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxllico
315,3 0,78 g 2,5
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo) (DSC)
256,17 0,64 + 0,32 g 2,5
Acetonitrilo-Dioxano 1:1
— 50 ml —
T rietilamina
101 1,03 ml 7,5
Piperidina
85,15 0,98 ml 10
Procedimiento
35 se anadio DSC a una disolucion del acido y trietilamina en dioxano-acetonitrilo, y los componentes se agitaron a rt. La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC. Se anadieron porciones extra del agente activante hasta un punto de conversion de 90-95%. Despues, se anadio piperidina, y se observo una formacion inmediata de la amida (precipitado). Se introdujeron porciones adicionales de pirrolidina hasta que se observo la conversion completa del ester activo. El solido obtenido se elimino mediante filtracion, y el filtrado (90% de pureza) se evaporo, 40 y el solido resultante se agito en agua (30 ml). El secado a vaclo produjo 0,33 g (34%) de solido amarillo.
T abla de reactivos - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pi rrol-2-il)(piperidin-1-il)metanona
382,43 0,33 g 0,86
Pd/C
— 100 mg —
THF
— 150 ml —
5
10
15
20
25
T abla de reactivos - Slntesis de 7 y 8
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Ami nofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-il)( piperidi n-1-il)metanona
352 0,3 g 0,85
Cloruro de cloroacetilo
113 0,82 ml 1
T rietilamina
101 0,42 ml 3
Morfolina
87,12 0,26 ml 3
T rietilamina*
101 0,42 ml 3
DCM
— 20 ml —
Dioxano
--- 40 ml —
* Sintesis de 8
Sintesis de 7
Una disolucion de cloruro de cloroacetilo en DCM se anadio gota a gota a una mezcla de anilina y trietilamina en DCM con enfriamiento en un bano de hielo. (Con la adicion, la mezcla se vuelve una disolucion transparente). La mezcla de reaccion se agito durante 1 h. El disolvente se elimino a presion reducida, y el residuo oleoso se uso como tal en la etapa siguiente.
Sintesis de 8
Se anadio dioxano al residuo oleoso junto con morfolina y trietilamina. La mezcla se puso a reflujo vigorosamente durante 2 horas (si es necesario, para la terminacion de la reaccion, se anade morfolina). Cuando la reaccion estuvo terminada, el calentamiento se detuvo, y el disolvente se elimino a presion reducida. El residuo se recogio en EtOH, y se anadio norit. La mezcla se agito durante 30 minutos, y el carbon se elimino mediante filtracion. El filtrado se evaporo, y el producto oleoso se purifico sobre sllice de fase normal (eluido mediante gradiente de PE:THF). 104 mg (25%). HPLC - 97,4% de pureza. MS - (ES+) Calc. 479,59, encontrado 480,9 (MH+).
Sintesis del compuesto:
imagen133
imagen134
Esquema 30
5 T abla de reactivos - Slntesis de 1
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Procedimiento
10 Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCU (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica 15 desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato; la fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-Metoxi-3-nitrobenzamida
196,16 1,1 g 5,6
Reactivo de Lawesson
404 1,6 g 4,0
NaHCOs
84 0,53 g 6,0
1,2 Dimetoxietano
— 80 ml —
THF
--- 40 ml —
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 4-metoxi-3-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF 2:1. La reaccion se agito a 50°C durante 2 h, y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a rt 5 durante 1 h. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla agitada de agua y hielo picado (300 ml). La mezcla lechosa se calento hasta ebullicion y despues se dejo enfriar hasta rt. dando como resultado cristales amarillos. (0,9 g, 76% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 3
10
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-Metoxi-3-nitrobenzotioamida
212,2 0,85 g 4,2
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 0,9 g 4,2
Acetato de sodio
82 0,7 g 8,5
Acido acetico
--- 4 ml ---
Procedimiento
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion 15 transparente, seguido de la formation de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 2 horas (la conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se recogio mediante filtration, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. (1,04 g, 68% de solido naranja).
20 T abla de reactivos - Slntesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(4-Metoxi-3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
359,4 1,04 g 2,9
NaOH
40 0,46 g 11,6
Dioxano
— 15 ml —
H2O
— 7,5 ml —
Procedimiento
25 Se anadio NaOH a una mezcla del ester en una mezcla de dioxano-H2O 2:1. La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se formo una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico usando acido clorhldrico concentrado. El producto se extrajo con acetato de etilo o se recogio mediante filtracion. Solido naranja (980 mg, 98% de rendimiento).
30 T abla de reactivos - Slntesis de 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(4-metoxi-3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-carboxllico
345,3 980 mg 2,8
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo) (DSC)
256,17 1,09 g 4,2
Acetonitrilo-Dioxano 1:1
--- 60 ml —
T rietilamina
101 1,2 ml 8,5
Pirrolidina
71,1 0,6 ml 7,1
Procedimiento
35 Se anadio DSC a una disolucion del acido y trietilamina en dioxano-acetonitrilo, y los componentes se agitaron a rt. La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC. Se anadieron porciones extra del agente activante hasta un punto de conversion de 90-95%. Despues, se anadio pirrolidina y se observo la formacion inmediata de la amida (el color de la reaccion cambio). Se introdujeron porciones adicionales de pirrolidina hasta que se observo la conversion completa del ester activo. El solido obtenido se elimino mediante filtracion, se lavo con agua y se seco a 40 alto vaclo para producir el producto deseado as un solido naranja: 1,04 g, 91,9% de rendimiento.
T abla de reactivos - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(4-Metoxi-3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-il)(pirrolidin-1-il) metanona
398,4 1,04 g 2,61
Pd/C
— 150 mg cat.
THF
— 100 ml —
5
10
15
20
25
T abla de reactivos - Slntesis de 7 y 8
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Amino-4-metoxifenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-il)(pirrolidin-1-il)metanona
368,5 950 mg 2,6
Cloruro de cloroacetilo
113 0,23 ml 2,8
T rietilamina
101 1,09 ml 7,7
Morfolina
87,1 0,17 ml 1,94
T rietilamina*
101 0,27 ml 1,94
DCM
— 40 ml —
Dioxano
--- 12 ml ---
* Sintesis de 8
Sintesis de 7
Una disolucion de cloruro de cloroacetilo en DCM se anadio gota a gota a una mezcla de anilina y trietilamina en DCM con enfriamiento en un bano de hielo. (Con la adicion, la mezcla se vuelve una disolucion transparente). La mezcla de reaccion se agito durante 1 h. El disolvente se elimino a presion reducida, y el residuo oleoso se uso como tal en la etapa siguiente.
Sintesis de 8
Se anadio dioxano al residuo oleoso junto con morfolina y trietilamina. La mezcla se puso a reflujo vigorosamente durante 1 hora (si es necesario, para la terminacion de la reaccion, se anade morfolina). Cuando la reaccion estuvo terminada, el calentamiento se detuvo, se anadio norit, y la mezcla se agito durante 20 minutos. El carbon se elimino mediante filtracion, y el disolvente se evaporo a presion reducida. El filtrado se evaporo, y el producto oleoso se purifico sobre sllice de fase normal (eluido mediante gradiente de PE:THF) para producir el producto puro como un solido amarillo: 7,5 mg, 2,3% de rendimiento, 100% de pureza. HPLC - 100% de pureza. MS - (ES+) Calc. 495,59, encontrado 496,27 (MH+).
Sintesis del compuesto:
imagen135
5
imagen136
Esquema 31
Tabla de reactivos - Slntesis de 1
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Procedimiento
10 Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica 15 desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato; la fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-Metoxi-3-nitrobenzamida
196,16 1,1 g 5,6
Reactivo de Lawesson
404 1,6 g 4,0
NaHCOs
84 0,53 g 6,0
1,2 Dimetoxietano
--- 80 ml —
THF
--- 40 ml —
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 4-metoxi-3-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF 2:1. La reaccion se agito a 50°C durante 2 h, y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a rt 5 durante 1 h. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla agitada de agua y hielo picado (300 ml). La mezcla lechosa se calento hasta ebullicion y despues se dejo enfriar hasta rt. dando como resultado cristales amarillos. (0,9 g, 76% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 3
10
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-Metoxi-3-nitrobenzotioamida
212,2 0,85 g 4,2
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 0,9 g 4,2
Acetato de sodio
82 0,7 g 8,5
Acido acetico
--- 4 ml ---
Procedimiento
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion 15 transparente, seguido de la formation de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 2 horas (la conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se recogio mediante filtration, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. (1,04 g, 68% de solido naranja).
20 T abla de reactivos - Slntesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(4-Metoxi-3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
359,4 1,04 g 2,9
NaOH
40 0,46 g 11,6
Dioxano
— 15 ml —
H2O
— 7,5 ml —
Procedimiento
25 Se anadio NaOH a una suspension del ester en una mezcla de dioxano-H2O 2:1. La mezcla se calento hasta 70- 80°C, durante lo cual se formo una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico usando acido clorhldrico concentrado. El producto se extrajo con acetato de etilo o se recogio mediante filtracion. Solido naranja (980 mg, 98% de rendimiento).
30 T abla de reactivos - Slntesis de 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(4-metoxi-3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-carboxllico
345,3 980 mg 2,8
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo) (DSC)
256,17 1,09 g 4,2
Acetonitrilo-Dioxano 1:1
--- 60 ml —
T rietilamina
101 1,2 ml 8,5
Pirrolidina
71,1 0,6 ml 7,1
Procedimiento
35 Se anadio DSC a una disolucion del acido y trietilamina en dioxano-acetonitrilo, y los componentes se agitaron a rt. La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC. Se anadieron porciones extra del agente activante hasta un punto de conversion de 90-95%. Despues, se anadio pirrolidina, y se observo la formacion inmediata de la amida (el color de la reaccion cambio). Se introdujeron porciones adicionales de pirrolidina hasta que se observo la conversion completa del ester activo. El solido obtenido se elimino mediante filtracion, se lavo con agua y se seco a 40 alto vaclo para producir el producto deseado como un solido naranja: 1,04 g, 91,9% de rendimiento.
T abla de reactivos - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(4-Metoxi-3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-il)(pirrolidin-1- il)metanona
398,4 1,04 g 2,61
Pd/C
— 150 mg cat.
THF
— 100 ml —
5
10
15
20
25
30
T abla de reactivos - Slntesis de 7 y 8
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Amino-4-metoxifenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-il)(pirrolidin-1-il)metanona
368,5 950 mg 2,6
Cloruro de cloroacetilo
113 0,23 ml 2,8
T rietilamina
101 1,09 ml 7,7
Piperidina
85,2 0,19 ml 1,94
T rietilamina*
101 0,27 ml 1,94
DCM
— 40 ml —
Dioxano
--- 12 ml ---
* Sintesis de 8
Sintesis de 7
Una disolucion de cloruro de cloroacetilo en DCM se anadio gota a gota a una mezcla de anilina y trietilamina en DCM con enfriamiento en un bano de hielo. (Con la adicion, la mezcla se vuelve una disolucion transparente). La mezcla de reaccion se agito durante 1 h. El disolvente se elimino a presion reducida, y el residuo oleoso se uso como tal en la etapa siguiente.
Sintesis de 8
Se anadio dioxano al residuo oleoso junto con piperidina y trietilamina. La mezcla se puso a reflujo vigorosamente durante 1 hora (si es necesario, para la terminacion de la reaccion, se anade piperidina). Cuando la reaccion estuvo terminada, el calentamiento se detuvo, se anadio norit, y la mezcla se agito durante 20 minutos. El carbon se elimino mediante filtracion, y el disolvente se evaporo a presion reducida. El filtrado se evaporo, y el producto oleoso se purifico sobre sllice de fase normal (eluido mediante gradiente de PE:EtOAc) para producir el producto puro como un solido amarillo: 31 mg, 9,7% de rendimiento, 99% de pureza. HPLC - 99% de pureza. MS - (ES+) Calc. 493,62, encontrado 494,51 (MH+).
Sintesis del compuesto:
imagen137
imagen138
Esquema 32
5 T abla de reactivos - Slntesis de 1
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Procedimiento
10 Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCU (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica 15 desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato; la fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-Metoxi-3-nitrobenzamida
196,16 1,1 g 5,6
Reactivo de Lawesson
404 1,6 g 4,0
NaHCO3
84 0,53 g 6,0
1,2 Dimetoxietano
--- 80 ml —
THF
--- 40 ml —
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 4-metoxi-3-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF 2:1. La reaccion se agito a 50°C durante 2 h, y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a rt 5 durante 1 h. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla agitada de agua y hielo picado (300 ml). La mezcla lechosa se calento hasta ebullicion y despues se dejo enfriar hasta rt. dando como resultado cristales amarillos. (0,9 g, 76% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 3
10
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-Metoxi-3-nitrobenzotioamida
212,2 0,85 g 4,2
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 0,9 g 4,2
Acetato de sodio
82 0,7 g 8,5
Acido acetico
--- 4 ml ---
Procedimiento
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion 15 transparente, seguido de la formation de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 2 horas (la conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se recogio mediante filtration, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. (1,04 g, 68% de solido naranja).
20 T abla de reactivos - Slntesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(4-Metoxi-3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
359,4 1,04 g 2,9
NaOH
40 0,46 g 11,6
Dioxano
— 15 ml —
H2O
— 7,5 ml —
Procedimiento
25 Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O (2:1). La mezcla de reaccion se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se formo una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico usando HCl concentrado. El producto se extrajo con acetato de etilo o se recogio mediante filtracion. Solido naranja (980 mg, 98% de rendimiento).
30 T abla de reactivos - Slntesis de 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(4-metoxi-3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-carboxllico
345,3 980 mg 2,8
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo) (DSC)
256,17 1,09 g 4,2
Acetonitrilo-Dioxano 1:1
--- 60 ml —
T rietilamina
101 1,2 ml 8,5
Pirrolidina
71,1 0,6 ml 7,1
Procedimiento
35 Se anadio DSC a una disolucion del acido y trietilamina en dioxano-acetonitrilo, y los componentes se agitaron a rt. La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC. Se anadieron porciones extra del agente activante hasta un punto de conversion de 90-95%. Despues, se anadio pirrolidina, y se observo la formacion inmediata de la amida (el color de la reaccion cambio). Se introdujeron porciones adicionales de pirrolidina hasta que se observo la conversion completa del ester activo. El solido obtenido se elimino mediante filtracion, se lavo con agua y se seco a 40 alto vaclo para producir el producto deseado como un solido naranja: 1,04 g, 91,9% de rendimiento.
T abla de reactivos - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(4-Metoxi-3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-il)(pirrolidin-1-il)metanona
398,4 1,04 g 2,61
Pd/C
— 150 mg cat.
THF
— 100 ml —
5
10
15
20
25
30
T abla de reactivos - Slntesis de 7 y 8
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Amino-4-metoxifenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-il)(pirrolidin-1-il)metanona
368,5 950 mg 2,6
Cloruro de cloroacetilo
113 0,23 ml 2,8
T rietilamina
101 1,09 ml 7,7
Dietilamina
73 1,35 ml 12,9
T rietilamina*
101 0,27 ml 1,94
DCM
— 40 ml —
Dioxano
--- 12 ml ---
* Sintesis de 8
Sintesis de 7
Una disolucion de cloruro de cloroacetilo en DCM se anadio gota a gota a una mezcla de anilina y trietilamina en DCM con enfriamiento en un bano de hielo. (Con la adicion, la mezcla se vuelve una disolucion transparente). La mezcla de reaccion se agito durante 1 h. El disolvente se elimino a presion reducida, y el residuo oleoso se uso como tal en la etapa siguiente.
Sintesis de 8
Se anadio dioxano al residuo oleoso junto con dietilamina y trietilamina. La mezcla se puso a reflujo vigorosamente durante 1 hora (si es necesario, para la terminacion de la reaccion, se anade dietilamina). Cuando la reaccion estuvo terminada, el calentamiento se detuvo, se anadio norit, y la mezcla se agito durante 20 minutos. El carbon se elimino mediante filtracion, y el disolvente se evaporo a presion reducida. El filtrado se evaporo, y el producto oleoso se purifico sobre sllice de fase normal (eluido mediante gradiente de PE:EtOAc) para producir el producto puro como un solido amarillo: 32 mg, 10,3% de rendimiento, 99% de pureza. HPLC - 99% de pureza. mS - (ES+) Calc. 481,61, encontrado 482,23 (MH+).
Sintesis del compuesto:
imagen139
imagen140
Esquema 33
5 T abla de reactivos - Slntesis de 1
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Procedimiento
10 Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica 15 desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato; la fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 2a
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-fluoro-3-nitrobenzoico
185,1 1,1 g 6,0
Cloruro de tionilo
— 5 ml —
NH3 en MeOH
84 1,7 ml 12,0
Tolueno
--- 15 ml ---
Etapa A: a una mezcla de acido 4-fluoro-3-nitrobenzoico en tolueno, se anadio cloruro de tionilo. La mezcla se agito 5 a 80°C durante 20 h, y el disolvente se evaporo para dar el cloruro de acilo.
Etapa B: se disolvio cloruro de acilo en tolueno. Se anadio gota a gota amonlaco en MeOH a la disolucion, dando como resultado la formacion de un precipitado amarillo. La mezcla se agito 15 minutos a rt. Despues, se anadio HCl 1 M. El solido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua y se seco a vaclo para producir el producto puro como 10 un solido amarillo: 740 mg, 67% de rendimiento.
T abla de reactivos - Slntesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-Fluoro-3-nitrobenzamida
184,1 1,5 g 8,0
Reactivo de Lawesson
404 2,4 g 6,0
NaHCO3
84 0,5 g 6,0
1,2 Dimetoxietano
--- 16 ml —
THF
--- 8 ml —
15 Procedimiento
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 4-fluoro-3-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF 2:1. La reaccion se agito a 50°C durante 2 h, y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a rt durante 1 h. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una 20 mezcla agitada de agua y hielo picado (60 ml). La mezcla lechosa se calento hasta ebullicion y despues se dejo enfriar hasta rt. dando como resultado cristales amarillos. (1,23 g, 75,4% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 3
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-Fluoro-3-nitrobenzotioamida
200,2 1,24 g 6,14
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 1,24 g 6,14
Acetato de sodio
82 1,0 g 12,3
Acido acetico
--- 5 ml ---
25
Procedimiento
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion transparente, seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 2 horas (la conversion 30 de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo (1,5 g, 70,3% de solido naranja).
T abla de reactivos - Slntesis de 4 35
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(4-Fluoro-3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
347,3 700 mg 2,0
Pd/C
— 200 mg cat.
THF
— 60 ml —
Procedimiento
El nitrocompuesto se disolvio en THF hirviendo. Se anadio el catalizador, y la mezcla se sometio a atmosfera de 40 hidrogeno durante 72 h. El catalizador se elimino mediante filtracion sobre celita, y el disolvente se evaporo produciendo el producto como un solido marron: 680 mg, 100% de rendimiento.
T abla de reactivos - Slntesis de 5 y 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-amino-4-fluorofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
317,3 680 mg 2,14
Cloruro de cloroacetilo
113 0,19 ml 2,36
T rietilamina
101 0,90 ml 6,43
Morfolina
87,1 0,57 ml 6,43
T rietilamina*
101 0,90 ml 6,43
5
10
15
20
25
30
35
40
45
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
DCM
— 35 ml —
Dioxano
— 35 ml —
* Sintesis de 6
Sintesis de 5
Una disolucion de cloruro de cloroacetilo en DCM se anadio gota a gota a una mezcla de anilina y trietilamina en DCM con enfriamiento en un bano de hielo. (Con la adicion, la mezcla se vuelve una disolucion transparente). La mezcla de reaccion se agito durante 1 h. El disolvente se elimino a presion reducida, y el residuo oleoso se uso como tal en la etapa siguiente.
Sintesis de 6
Se anadio dioxano al residuo oleoso junto con morfolina y trietilamina. La mezcla se puso a reflujo vigorosamente durante 2 horas (si es necesario, para la terminacion de la reaccion, se anade morfolina). Cuando la reaccion estuvo terminada, el calentamiento se detuvo, se anadio norit, y la mezcla se agito durante 20 minutos. El carbon se elimino mediante filtracion, y el disolvente se evaporo a presion reducida. El filtrado se evaporo, y el producto oleoso se llevo a la etapa siguiente sin tratamiento adicional: 1,2 g, 100% de rendimiento.
T abla de reactivos - Sintesis de 7
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(4-Fluoro-3-(2-morfolinoacetamido)fenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2- carboxilato de metilo
444,5 1,2 g 2,7
NaOH
40 0,43 g 10,8
Dioxano
— 12 ml —
H2O
— 6 ml —
Procedimiento
Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-HLO 2:1. La mezcla se calento hasta 80°C durante 2 h, durante lo cual se formo una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico usando acido clorhidrico concentrado. El producto se recogio mediante filtracion y se lavo con agua. T ras secar a vacio, el producto deseado se obtuvo como un solido marron (380 mg, 32,7% de rendimiento).
T abla de reactivos - Sintesis de 8
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(4-fluoro-3-(2-morfolinoacetamido)fenil)tiazol-4-il)-1H- pirrol-2-carboxilico
430,45 380 mg 0,88
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo) (DSC)
256,17 340 mg 1,32
Acetonitrilo-Dioxano 1:1
--- 18 ml —
T rietilamina
101 268 mg 2,65
Pirrolidina
71,1 157 mg 2,20
Procedimiento
Se anadio DSC a una disolucion del acido y trietilamina en dioxano-acetonitrilo, y los componentes se agitaron a rt. La formation del ester activo se monitorizo mediante HPLC. Se anadieron porciones extra del agente activante hasta un punto de conversion de 90-95%. Despues, se anadio pirrolidina y se observo la formacion inmediata de la amida (el color de la reaccion cambio). Se introdujeron porciones adicionales de pirrolidina hasta que se observo la conversion completa del ester activo. El solido obtenido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua y se seco a alto vacio para producir el producto bruto. El bruto se purifico mediante columna Combi-flash para dar el producto con 94% de pureza. La cristalizacion en MeOH caliente produjo el producto deseado puro como un solido blanco: 15 mg, 3,5% de rendimiento, 100% de pureza. HPLC - 100% de pureza. MS - (ES+) Calc. 483,56, encontrado 484,36 (MH+).
Sintesis del compuesto:
imagen141
5
10
15
20
25
imagen142
Esquema 34
Tabla de reactivos - Slntesis de 1
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCl3
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
Procedimiento
Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCl3 (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato; la fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrobenzamida
182,2 3,32 g 20
Reactivo de Lawesson
404 6,06 g 15
NaHCOs
84 2 g 12
1,2 Dimetoxietano
--- 80 ml —
THF
--- 40 ml —
Procedimiento
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 3-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF 2:1. La reaccion se agito a 50°C durante 2 h, y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a rt durante 1 h. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla agitada de agua y hielo picado (300 ml). La mezcla lechosa se calento hasta ebullicion y despues se dejo enfriar hasta rt. dando como resultado cristales amarillos. (2,8 g, 77% de rendimiento).
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrotiobenzamida
182 4,55 g 25
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 5,04 g 25
Acetato de sodio
82 4,1 g 50
Acido acetico
— 20 ml —
5 Procedimiento
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion transparente, seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 3-5 horas (la conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se 10 recogio mediante filtracion, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. (90% de polvo amarillo mostaza).
T abla de reactivos - Slntesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
329,33 6,6 g 20
NaOH
40 3,2 g 80
Dioxano
— 100 ml —
H2O
— 50 ml —
15
Procedimiento
Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O (2:1). La mezcla de reaccion se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se 20 evaporo, y el residuo se acidifico usando acido clorhldrico concentrado. El producto se extrajo con acetato de etilo o se recogio mediante filtracion. Polvo amarillo (5,8 g, 92% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxllico
315,3 3,1 g 10
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo) (DSC)
256,17 2,56 + 1,28 g 10 + 5
Acetonitrilo-Dioxano 1:1
— 50 ml —
T rietilamina
101 4,15 ml 30
Pirrolidina
71,12 2,5 ml 30
25
Procedimiento
Se anadio DSC a una disolucion del acido y trietilamina en dioxano-acetonitrilo, y los componentes se agitaron a rt. La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC. Se anadieron porciones extra del agente activante hasta 30 un punto de conversion de 90-95%. Despues, se anadio pirrolidina, y se observo una formacion inmediata de la amida (precipitado). Se introdujeron porciones adicionales de pirrolidina hasta que se observo la conversion completa del ester activo. El solido obtenido se elimino mediante filtracion, y el filtrado (90% de pureza) se evaporo, y el solido resultante se agito en agua (30 ml). El secado a vaclo produjo el producto deseado puro: 3,68 g, 100% de rendimiento.
35
T abla de reactivos - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pi rrol-2-il)(pirrolidin-1-il)metanona
368,41 3,68 g 10
Pd/C
— 150 mg —
THF
— 150 ml —
Procedimiento
40
El nitrocompuesto se disolvio en THF hirviendo. Se anadio el catalizador, y la mezcla se sometio a atmosfera de hidrogeno toda la noche. El catalizador se elimino mediante filtracion sobre celita, y el disolvente se evaporo produciendo una espuma blanca (1,0 g, 80%).
45 T abla de reactivos - Slntesis de 7
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Ami nofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-il)(pirrolidi n-1-il) metanona
338 1,0 g 2,95
Cloruro de 3-metilbutanoilo
120 ~0,1 ml 1,2
T rietilamina
101 0,41 ml 3
Sintesis de 7
5 Una disolucion de cloruro de 3-metilbutanollo en DCM se anadio gota a gota a una mezcla de anilina y trietilamina en DCM con enfriamiento en un bano de hielo. La mezcla de reaccion se agito durante 1 h. El producto precipito gradualmente de la mezcla, se recogio mediante filtracion y se lavo con agua. 160 mg, 31% de rendimiento. HPLc - 100% de pureza. MS - (ES+) Calc. 422,54, encontrado 423,31 (MH+).
10 Sintesis del compuesto:
imagen143
15
Esquema 35 Tabla de reactivos - Sintesis de 1
imagen144
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCls
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
20
Procedimiento
Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCU (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con 25 enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato; la fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrobenzamida
182,2 3,32 g 20
Reactivo de Lawesson
404 6,06 g 15
NaHCO3
84 2 g 12
1,2 Dimetoxietano
--- 80 ml —
THF
--- 40 ml —
5 Procedimiento
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 3-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF 2:1. La reaccion se agito a 50°C durante 2 h, y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a rt durante 1 h. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla 10 agitada de agua y hielo picado (300 ml). La mezcla lechosa se calento hasta ebullicion y despues se dejo enfriar hasta rt. dando como resultado cristales amarillos. (2,8 g, 77% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 3
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrotiobenzamida
182 4,55 g 25
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 5,04 g 25
Acetato de sodio
82 4,1 g 50
Acido acetico
--- 20 ml —
15
Procedimiento
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion transparente, seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 3-5 horas (la 20 conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. (90% de polvo amarillo mostaza).
T abla de reactivos - Slntesis de 4 25
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
329,33 6,6 g 20
NaOH
40 3,2 g 80
Dioxano
--- 100 ml —
H2O
--- 50 ml —
Procedimiento
Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O 2:1. La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual 30 se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se evaporo, y el residuo se acidifico usando acido clorhldrico concentrado. El producto se extrajo con acetato de etilo o se recogio mediante filtracion. Polvo amarillo (5,8 g, 92% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 5 35
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxllico
315,3 3,1 g 10
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo) (DSC)
256,17 2,56 + 1,28 g 10 + 5
Acetonitrilo-Dioxano 1:1
— 50 ml —
T rietilamina
101 4,15 ml 30
Pirrolidina
71,12 2,5 ml 30
Procedimiento
Se anadio DSC a una disolucion del acido y trietilamina en dioxano-acetonitrilo, y los componentes se agitaron a rt.
40 La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC. Se anadieron porciones extra del agente activante hasta un punto de conversion de 90-95%. Despues, se anadio pirrolidina, y se observo una formacion inmediata de la amida (precipitado). Se introdujeron porciones adicionales de pirrolidina hasta que se observo la conversion completa del ester activo. El solido obtenido se elimino mediante filtracion, y el filtrado (90% de pureza) se evaporo,
5
10
15
20
25
y el solido resultante se agito en agua (30 ml). El secado a vaclo produjo el producto deseado puro: 3,68 g, 100% de rendimiento.
T abla de reactivos - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-il)(pirrolidin-1-il)metanona
368,41 3,68 g 10
Pd/C
— 200 mg —
THF
— 150 ml —
Procedimiento
El nitrocompuesto se disolvio en THF hirviendo. Se anadio el catalizador, y la mezcla se sometio a atmosfera de hidrogeno toda la noche. El catalizador se elimino mediante filtracion sobre celita, y el disolvente se evaporo produciendo una espuma blanca (1,0 g, 80%).
T abla de reactivos - Slntesis de 7
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Ami nofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-il)(pirrolidi n-1-il) metanona
338 0,338 g 1,0
Cloruro de acetilo
78,5 0,085 ml 1,2
T rietilamina
101 0,42 ml 3,0
Slntesis de 7
Una disolucion de cloruro de acetilo en DCM se anadio gota a gota a una mezcla de anilina y trietilamina en DCM con enfriamiento en un bano de hielo. La mezcla de reaccion se agito durante 1 h. El producto precipito gradualmente de la mezcla, se recogio mediante filtracion y se lavo con agua. El producto se cristalizo en MeOH. 83 mg, 22% de rendimiento. HPLC - 97,6% de pureza. MS - (Es+) Calc. 380,46, encontrado 381,30 (MH+).
Slntesis del compuesto:
imagen145
imagen146
Esquema 36
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,13 6,25 g 50
AlCls
133,34 16,67 g 125
Cloruro de cloroacetilo
113 10 ml 125
DCM
--- 100 ml —
5
Procedimiento
Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (6,25 g, 50 mmoles) en DCM (80 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCU (16,67 g, 125 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (10 ml, 125 mmoles) en DCM (50 ml) con 10 enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (300 ml) y se agito hasta que la fase organica desaparecio. El producto se extrajo con EA y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato; la fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo un solido gris (9 g, 90% de rendimiento).
15
T abla de reactivos - Slntesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrobenzamida
182,2 3,32 g 20
Reactivo de Lawesson
404 6,06 g 15
NaHCOs
84 2 g 12
1,2 Dimetoxietano
--- 80 ml —
THF
--- 40 ml —
Procedimiento
20
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 3-nitrobenzamida en dimetoxietano-THF (2:1). La reaccion se agito a 50°C durante 2 h, y, cuando se termino, se anadio bicarbonato de sodio, y la mezcla se agito a rt durante 1 h. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla agitada de agua y hielo picado (300 ml). La mezcla lechosa se calento hasta ebullicion y despues se dejo enfriar 25 hasta rt. dando como resultado cristales amarillos. (2,8 g, 77% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 3
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
3-Nitrotiobenzamida
182 4,55 g 25
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 5,04 g 25
Acetato de sodio
82 4,1 g 50
Acido acetico
--- 20 ml —
30 Procedimiento
Los reactivos se agitaron en acido acetico y se calentaron a reflujo dando como resultado una disolucion transparente, seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 3-5 horas (la conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC). La mezcla se enfrio hasta rt., y el solido se 35 recogio mediante filtracion, se lavo con agua con hielo (80 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo. (90% de polvo amarillo mostaza).
Tabla de reactivo - Slntesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
329,33 6,6 g 20
NaOH
40 3,2 g 80
Dioxano
— 100 ml —
H2O
— 50 ml —
40
Procedimiento
Se anadio NaOH a una mezcla del ester en dioxano-H2O (2:1). La mezcla de reaccion se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se forma una disolucion oscura. Cuando la reaccion estuvo terminada, el disolvente organico se
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40
45
evaporo, y el residuo se acidifico usando acido clorhldrico concentrado. El producto se extrajo con acetato de etilo o se recogio mediante filtracion. Polvo amarillo (5,8 g, 92% de rendimiento).
T abla de reactivos - Slntesis de 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
Acido 4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxllico
315,3 3,1 g 10
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo) (DSC)
256,17 2,56 + 1,28 g 10 + 5
Acetonitrilo-Dioxano 1:1
— 50 ml
T rietilamina
101 4,15 ml 30
Pirrolidina
71,12 2,5 ml 30
Procedimiento
Se anadio DSC a una disolucion del acido y trietilamina en dioxano-acetonitrilo, y los componentes se agitaron a rt. La formation del ester activo se monitorizo mediante HPLC. Se anadieron porciones extra del agente activante hasta un punto de conversion de 90-95%. Despues, se anadio pirrolidina, y se observo una formacion inmediata de la amida (precipitado). Se introdujeron porciones adicionales de pirrolidina hasta que se observo la conversion completa del ester activo. El solido obtenido se elimino mediante filtracion, y el filtrado (90% de pureza) se evaporo, y el solido resultante se agito en agua (30 ml). El secado a vaclo produjo el producto deseado puro: 3,68 g, 100% de rendimiento.
T abla de reactivo - Slntesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pi rrol-2-il)(pirrolidin-1-il)metanona
368,41 3,68 g 10
Pd/C
— 200 mg —
THF
— 150 ml —
Procedimiento
El nitrocompuesto se disolvio en THF hirviendo. Se anadio el catalizador, y la mezcla se sometio a atmosfera de hidrogeno toda la noche. El catalizador se elimino mediante filtracion sobre celita, y el disolvente se evaporo produciendo una espuma blanca (1,0 g, 80%).
T abla de reactivo - Slntesis de 7
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles
(4-(2-(3-Aminofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-il)(pirrolidin-1-il)metanona
338 0,236 g 0,7
Cloruro de ciclopropanocarbonilo
104,53 0,08 ml 0,84
T rietilamina
101 0,29 ml 2,1
Slntesis de 7
Una disolucion de cloruro de ciclopropanocarbonilo en DCM se anadio gota a gota a una mezcla de anilina y trietilamina en DCM con enfriamiento en un bano de hielo. La mezcla de reaction se agito durante 1 h. El producto precipito gradualmente de la mezcla, se recogio mediante filtracion y se lavo con agua. 87,6 mg, 31% de rendimiento. HPLC - 99% de pureza. MS - (ES+) Calc. 406,50, encontrado 407,40 (MH+).
Ejemplo 9: Proliferacion de celulas Daudi
Los compuestos de la invention se ensayaron en la proliferacion de Daudi segun el procedimiento en el Ejemplo 4 (para celulas Daudi): Proliferacion de celulas RS4;11, Ramos, Namalwa, RL, Molt-4 y Daudi. Los compuestos de la invencion se ensayaron en la proliferacion de Daudi (72 h), dilution de 3 veces, y 9 puntos por duplicado. La concentration superior para compuestos de la invencion fue 10 uM; la concentration superior del compuesto 7A de referencia fue 10 uM; y paclitaxel fue 500 nM. La viabilidad celular se determino usando el reactivo de Cell Titer Glo (CTG), y se detecto mediante EnVision. Las EC50 se calcularon mediante Prism 5.
El principio del ensayo se representa en el esquema a continuation:
imagen147
Esquema 37
5 El ensayo de viabilidad celular luminiscente de CellTiter-Glo™ usa ATP, un cofactor requerido de la reaccion de luciferasa, como un indicador de celulas metabolicamente activas. La enzima luciferasa actua sobre luciferina en presencia de Mg2+ y ATP para producir oxiluciferina y para liberar energla en forma de luminiscencia. Puesto que la reaccion de luciferasa requiere ATP, la luminescencia producida es proporcional a la cantidad de ATP presente, un indicador de la actividad metabolica celular.
10
La Tabla 7 muestra los resultados del Ensayo de CTG para Daudi. El dato se presenta en el que la letra “A” significa que el compuesto tiene una IC50 entre 0,0000001 pM < 0,1 pM, la letra “B” significa que el compuesto tiene una IC50 entre 0,11 pM < 1,0 pM, la letra “C” significa que el compuesto tiene una IC50 entre 1,1 pM < 10 pM, y la letra “D” significa que el compuesto tiene una IC50 de > 10 pM.
15
Tabla 7
Nombre del compuesto
IC50
29A
D
30A
C
31A
C
32A
B
33A
B
34A
B
35A
B
7A
A
Paclitaxel
A
Las IC50 de paclitaxel y del compuesto 7A de control fueron 4,495 nM y 101,5 nM, y se confirmaron con datos 20 histologicos de 4,691 nM y 122,1 nM, respectivamente. Los compuestos 32A y 33A se calentaron hasta 60°C y 70°C para disolverlos, y hubo precipitacion de los compuestos despues de que se anadiesen a las celulas. El ensayo se repitio, y los resultados fueron comparables.
Ejemplo 10: Preparacion de la base libre 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2- il)fenil)acetamida (compuesto 7A (muestra 1))
5
imagen148
Esquema 38
Tabla de reactivo - Slntesis de 1
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles Relacion en moles
1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
125,1 12,5 g 100 1,0
AlCl3
133,3 33,3 g 250 2,5
Cloruro de cloroacetilo
112,9 20 ml 250 2,5
DCM
— 250 ml — —
10
Procedimiento
Una disolucion de 1H-pirrol-2-carboxilato de metilo (12,5 g, 100 mmoles) en DCM (150 ml) se anadio gota a gota a una mezcla agitada de AlCU (33,3 g, 250 mmoles) y cloruro de cloroacetilo (20 ml, 250 mmoles) en DCM (100 ml) 15 con enfriamiento en un bano de hielo, dando como resultado la formacion de un precipitado blanco. Cuando la adicion estuvo terminada, la mezcla se puso a reflujo y se monitorizo mediante HPLC. Cuando se observo la conversion total, la reaccion se vertio en una mezcla de agua y hielo picado (600 ml) y se agito hasta que la fase organica desaparecio. El producto se extrajo con acetato de etilo y se lavo 3 veces con disolucion saturada de bicarbonato. La fase organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo produciendo el producto puro como un solido gris 20 (19,9 g, 98,7% de rendimiento, 100% de pureza).
Tabla de reactivo - Slntesis de 2
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles Relacion en moles
3-Nitrobenzamida
166,1 9,0 g 54,2 1,0
Reactivo de Lawesson
404 16,4 g 40,6 0,75
NaHCOs
84 3,41 g 40,6 0,75
1,2 Dimetoxietano/ THF (2:1)
— 300 ml — —
Se anadio reactivo de Lawesson a una mezcla agitada de 3-nitrobenzamida en una mezcla de DME/THF (2:1). La mezcla de reaccion se agito a 50°C durante 2 h, y, cuando se termino (segun HPLC), se anadio bicarbonato de 5 sodio, y la agitacion se continuo a rt durante 1 h adicional. Los disolventes se eliminaron a presion reducida, y el residuo oleoso se anadio lentamente a una mezcla agitada de agua y hielo picado (400 ml) dando como resultado cristales amarillos. La mezcla se calento hasta 70-80°C con agitacion durante 15 min. y despues se dejo enfriar hasta rt. El solido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua, se seco al aire y despues se seco a vaclo. El producto puro se obtuvo como un solido cristalino amarillo (9,9 g, 100% de rendimiento, 100% de pureza)
10
Tabla de reactivo - Slntesis de 3
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles Relation en moles
3-Nitrotiobenzamida
182,2 11,5 g 63,1 1,0
4-(2-Cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo
201,6 12,7 g 63,1 1,0
Acetato de sodio
82 10,4 g 126,2 2,0
Acido acetico
--- 50 ml --- —
Procedimiento
15
Se suspendieron 3-nitrotiobenzamida y 4-(2-cloroacetil)-1H-pirrol-2-carboxilato de metilo en acido acetico, y se anadio acetato de sodio. La mezcla de reaccion se calento hasta reflujo dando como resultado una disolucion transparente, seguido de la formacion de un precipitado. La mezcla se puso a reflujo durante 1-2 horas (la conversion de los materiales de partida se monitorizo mediante HPLC), despues se enfrio a rt. El solido se recogio 20 mediante filtracion, se lavo con agua con hielo (200 ml), se seco al aire y despues se seco a vaclo produciendo el producto puro como un solido amarillo mostaza (15,6 g, 75% de rendimiento, 100% de pureza).
Tabla de reactivo - Slntesis de 4
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles Relacion en moles
4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo
329,3 23,5 g 71,4 1,0
NaOH
40 11,4 g 285,5 4,0
Dioxano/H2O (2:1)
— 500 ml — —
25
Procedimiento
Se disolvio 4-(2-(3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2-carboxilato de metilo en una mezcla de dioxano/H2O (2:1), y se anadio NaOH. La mezcla se calento hasta 70-80°C, durante lo cual se formo una disolucion oscura. El progreso se 30 monitorizo usando HPLC y LCMS. Cuando la reaccion estuvo terminada, (1 h), el volumen del disolvente organico se redujo mediante evaporation (hasta ~30 ml) y despues se acidifico usando HCl conc. El solido formado se enfrio en un bano de hielo durante 10 min., despues se recogio mediante filtracion y se lavo con agua. Tras secar a vaclo, el producto deseado se obtuvo como un polvo amarillo (21,4 g, 95% de rendimiento, 100% de pureza).
35 T abla de reactivo - Slntesis de 5
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad Mmoles Relacion en moles
Acido 4-(2-(3-nitrofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2- carboxllico
315,3 9,46 g 30,0 1,0
Carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-ilo)
256,2 10,0 g 39,0 1,3
Pirrolidina
71,1 6,3 ml 75,0 2,5
T rietilamina
101,2 10,5 ml 75,0 2,5
Acetonitrilo-Dioxano (1:1)
--- 500 ml --- ---
Procedimiento
40 A una mezcla del acido en una mezcla de ACN/dioxano, se anadio trietilamina dando como resultado una disolucion transparente. El agente activante se anadio entonces, y los componentes se agitaron a rt para preparar el producto intermedio. La formacion del ester activo se monitorizo mediante HPLC y LCMS. Se anadieron porciones extra del agente activante hasta un punto de conversion de 90-95% (2 h). Despues, se anadio pirrolidina, y se observo una formacion inmediata de la amida (precipitado). Se introdujeron porciones adicionales de pirrolidina hasta que se
45 observo la conversion completa del ester activo del producto deseado (1 h). El solido obtenido se recogio mediante filtracion, se lavo con agua (200 ml) y se seco a vaclo para producir el producto puro como un solido amarillo (7,9 g, 71,5%). El filtrado se evaporo, y al residuo obtenido se anadieron EtOAc y HCl 1 M. El solido formado en la fase acida se aislo mediante filtracion y se lavo con agua para dar mas producto puro (1,5 g, 13,6% de rendimiento). El
5
10
15
20
25
30
35
rendimiento total del producto fue: 9,4 g, 85,1% de rendimiento, 100% de pureza. Tabla de reactivo - Sintesis de 6
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad Mmoles Relacion en moles
(4-(2-(3-Nitrofenil)tiazol-4-il)-1H-pirrol-2-il)(pirrolidin- 1-il)metanona
368,4 11,1 g 30,0 1,0
H2/Pd-C (10%)
— 0,3 g — —
THF (HPLC)
— 400 ml — —
Procedimiento
El nitrocompuesto se disolvio en THF hirviendo (HPLC). se anadio el reactivo catalizador, y la mezcla se sometio a atmosfera de hidrogeno toda la noche. Tras 48 h a rt., la HPLC y la LCMS indicaron que el material de partida se habia consumido completamente. El catalizador se elimino mediante filtracion sobre celita, y el disolvente se evaporo produciendo un solido blanco (10,0 g, rendimiento cuantitativo).
Tabla de reactivo - Sintesis de 7 y 7A (muestra 1)
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad Mmoles Relacion en moles
(4-(2-(3-Ami nofenil)tiazol-4-il)-1 H-pirrol-2- il)(pirrolidin-1-il)metanona
338,4 1,8 g 5,3 1,0
Cloruro de cloroacetilo
112,9 0,46 ml 5,8 1,1
T rietilamina
101,2 2,2 ml 16 3,0
Morfolina
87,1 1,3 ml 15 3,0
T rietilamina*
101,2 2,1 ml 15 3,0
THF
— 80 ml — —
* Sintesis de 7A (muestra 1)
Sintesis de 7
Una disolucion de cloruro de cloroacetilo en DCM (30 ml) se anadio gota a gota a una mezcla de anilina y trietilamina en DCM (50 ml) con enfriamiento en un bano de hielo. (Con la adicion, la mezcla se vuelve una disolucion transparente). La mezcla de reaccion se agito durante 1 h. (Si es necesario, se anade otra porcion de cloruro de cloroacetilo). El disolvente se elimino a presion reducida, y el residuo oleoso se uso como tal en la etapa siguiente. Sintesis de compuestos 7A (muestra 1), 7A (muestra 2), y 10X
Se anadio dioxano al residuo oleoso junto con morfolina y trietilamina. La mezcla se puso a reflujo vigorosamente durante 2-3 horas (si es necesario, para la terminacion de la reaccion, se anade morfolina). Cuando la reaccion estuvo terminada, el calentamiento se detuvo, se anadio norit, y la mezcla se agito durante 30 minutos.
Los solidos se eliminaron mediante filtracion, y el disolvente se elimino a presion reducida. El producto se purifico mediante cromatografia ultrarrapida (CombiFlash).
La figura 5 muestra un patron de difraccion de rayos X caracteristico del compuesto 7A (muestra 1) preparado mediante el metodo anterior. El compuesto 7A (muestra 1) es un cristal amorfo.
El compuesto 7A (muestra 1) se recristalizo en etanol para producir compuesto 10X. La figura 15 muestra un patron de difraccion de rayos X caracteristico del compuesto 10X. La Tabla 10 enumera el parametro de XRD del compuesto 10X. La figura 18 muestra un termograma de DSC para el compuesto 10X.
Tabla 8. Listado del parametro de XRD del compuesto 7A (muestra 1)
n°
Angulo Valor d Intensidad Intensidad (%) Area neta Area (%) FWHM
° 2-Theta
Angstrom Recuento Cps x ° 2-Theta
° 2-Theta
1
7,431 11,88721 761 22 2,444 9,18 0,169
2
10,704 8,25806 167 4,8 0,358 1,34 0,165
3
15,434 5,73636 260 7,5 1,007 3,78 0,224
4
16,826 5,26481 155 4,5 0,381 1,43 0,163
5
18,394 4,81946 292 8,4 0,876 3,29 0,172
6
19,494 4,55005 141 4,1 0,229 0,86 0,145
7
21,236 4,18044 756 21,8 1,898 7,13 0,154
8
22,447 3,95755 3462 100 26,63 100,00 0,37
9
23,79 3,7372 243 7 0,315 1,18 0,166
10
24,353 3,65198 331 9,6 0,629 2,36 0,16
n°
Angulo Valor d Intensidad Intensidad (%) Area neta Area (%) FWHM
° 2-Theta
Angstrom Recuento Cps x ° 2-Theta
° 2-Theta
11
25,189 3,53267 181 5,2 0,481 1,81 0,226
12
25,961 3,42938 130 3,8 0,262 0,98 0,223
13
26,526 3,35759 130 3,8 0,367 1,38 0,234
14
27,86 3,19973 190 5,5 0,293 1,10 0,141
El patron de difraccion de rayos X del compuesto 7A (muestra 1) se comparo con el patron de difraccion de rayos X de la muestra de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (compuesto 7A (muestra 2) de Enamina/
www.enamina.net; numero de orden: Z134827882) (figura 6).
5
Tabla 9. Listado del parametro de XRD de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2- il)fenil)acetamida (compuesto 7A (muestra 2)):
n°
Angulo Valor d Intensidad Intensidad (%) Area neta Area (%) FWHM
° 2-Theta
Angstrom Recuento Cps x ° 2-Theta
° 2-Theta
1
7,469 11,82723 1291 10,9 4,525 9,76 0,171
2
15,357 5,76514 145 1,2 0,3 0,65 0,143
3
16,858 5,25507 207 1,7 0,531 1,15 0,177
4
18,377 4,82394 293 2,5 0,505 1,09 0,139
5
21,233 4,18115 1126 9,5 2,899 6,25 0,147
6
22,599 3,93127 11860 100 46,37 100,00 0,181
7
23,911 3,7186 515 4,3 1,29 2,78 0,162
8
24,393 3,64615 1029 8,7 2,487 5,36 0,152
9
25,161 3,5365 230 1,9 0,378 0,82 0,156
10
27,543 3,2359 209 1,8 0,31 0,67 0,175
11
27,891 3,19623 303 2,6 0,608 1,31 0,167
12
30,303 2,94714 208 1,8 0,551 1,19 0,174
13
31,297 2,85576 275 2,3 0,808 1,74 0,178
10
La figura 7 muestra una superposicion de los dos espectros. Las formas cristalinas de las dos muestras son identicas. Los patrones de xRd tienen una similitud de 100% encontrada para picos con intensidad por encima de
10%.
Tabla 10. Listado del parametro de XRD de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2- 15 il)fenil)acetamida (compuesto 10X):
n°
Angulo Valor d Intensidad Intensidad Area neta Area FWHM
° 2-Theta Angstrom Recuento (%) Cps x ° 2-Theta (%) ° 2-Theta
1
7,54 11,71533 194 20 0,243 4,46 0,178
2
10,782 8,19871 118 12,1 0,175 3,21 0,197
3
14,244 6,21281 161 16,6 0,471 8,64 0,213
4
15,421 5,74124 358 36,8 1,419 26,03 0,216
5
16,907 5,23979 111 11,4 0,095 1,74 0,185
6
18,442 4,80715 435 44,8 2,351 43,12 0,279
7
19,552 4,53658 335 34,5 1,009 18,51 0,231
8
21,31 4,1662 972 100 5,452 100,00 0,251
9
22,701 3,91392 968 99,6 6,457 118,43 0,337
10
23,849 3,72811 212 21,8 0,437 8,02 0,263
11
24,457 3,6368 590 60,7 2,431 44,59 0,232
12
25,212 3,52952 299 30,8 0,913 16,75 0,287
13
27,952 3,1895 333 34,3 1,208 22,16 0,223
14
28,707 3,10728 105 10,8 0,031 0,57 0,055
15
31,472 2,84027 97 10 0,071 1,30 0,185
16
32,282 2,77083 93 9,6 0,032 0,59 0,059
17
32,98 2,71378 158 16,3 0,06 1,10 0,084
18
35,626 2,51808 104 10,7 0,083 1,52 0,188
19
37,235 2,41286 108 11,1 0,04 0,73 0,126
20
39,764 2,26504 95 9,8 0,077 1,41 0,14
Experimental:
20 Instrumento: Bruker D8 Advance
Una fuente de CuK (= 1,54056 angstrom) que opera mlnimamente a 40 kV y 200 mA, barre cada muestra entre 4 y
5
10
15
20
25
30
35
40 grados 2-theta.
Ejemplo 11: Preparacion de sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3- il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) (compuesto 9X)
imagen149
Reactivo/materia prima
PM (g/mol) Cantidad mmoles Relacion en moles
2-Morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H- pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida
465,6 465,6 mg 1,0 1,0
HCl (1,41 M disolucion en EtOH)
1,41 M 1,42 ml 2,0 2,0
Tolueno
— 30 ml — —
Procedimiento de sal de HCl de 9X
Se disolvio 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (compuesto 7A (muestra 1)) en tolueno (mediante calentamiento), y se anadio gota a gota HCl (disolucion 1,41 M en EtOH) dando como resultado la formacion de un precipitado amarillo. Cuando la adicion estuvo terminada, el precipitado se dejo reposar a rt. durante 30 min., despues se recogio mediante filtracion, se lavo con agua y se seco a vaclo, y produjo compuesto 9X (muestra 3).
La recristalizacion en EtOH caliente produjo el producto puro como un solido cristalino blancuzco: 360 mg, 70% de rendimiento (compuesto 9X (muestra 2)). Como alternativa, la recristalizacion en metanol caliente produjo el producto puro como un solido cristalino blancuzco (compuesto 9X (muestra 1)). La forma cristalina de las tres muestras del compuesto 9X es la misma.
Analisis (compuesto 7A (muestra 1))
RMN 1H - DMSO-d6, ppm.: 1,87-1,98 (4H, m, -CH2-CH2-); 2,45-2,55 (4H, m, -CH2-CH2-); 3,17 (2H, s, -CH2-CO- NH); 3,53 (2H, ancho, -CH2- N); 3,66 (4H, t, -CH2-O-CH2-); 3,78 (2H, ancho, -N-CH2-); 7,08 (1H, ancho, CH Ar); 7,42 (1H, t, CH Ar); 7,67 (1H, d, CH Ar); 7,72 (1H, s, CH-S); 7,77 (1H, d, CH Ar); 8,31 (1H, s, CH-); 9,94 (1H, s, CH- NH); 11,58 (1H, s, NH). HPLC - 100% de pureza.
MS - (ES+) Calc. 465,18, encontrado 466,0 (MH+).
La figura 8 muestra un patron de difraccion de rayos X caracterlstico de la sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4- (5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) (compuesto 9X (muestra 1)) preparada mediante el metodo anterior.
La Tabla 11 enumera los parametros de XRD del compuesto 9X (muestra 1):
N°
Angulo Valor d Intensidad Intensidad (%) Area neta Area (%) FWHM
° 2-Theta
Angstrom Recuento Cps x ° 2-Theta
° 2-Theta
1
8,734 10,11647 101 6,6 0,134 2,83 0,104
2
9,8 9,01854 176 11,6 0,312 6,59 0,122
3
10,288 8,59167 122 8 0,158 3,34 0,084
4
12,324 7,17621 97 6,4 0,154 3,25 0,137
5
13,732 6,44323 152 10 0,268 5,66 0,091
6
14,403 6,14494 106 7 0,172 3,63 0,097
7
15,227 5,81385 71 4,7 0,067 1,41 0,111
8
16,025 5,52637 276 18,1 0,552 11,66 0,115
9
16,445 5,38607 205 13,5 0,426 8,99 0,122
10
16,991 5,21415 100 6,6 0,213 4,50 0,142
11
17,507 5,06171 83 5,5 0,085 1,79 0,086
N°
Angulo Valor d Intensidad Intensidad (%) Area neta Area (%) FWHM
° 2-Theta
Angstrom Recuento Cps x ° 2-Theta
° 2-Theta
12
18,023 4,91793 201 13,2 0,388 8,19 0,12
13
18,4 4,8179 71 4,7 0,084 1,77 0,126
14
18,935 4,6831 246 16,2 0,596 12,58 0,126
15
19,607 4,524 306 20,1 0,589 12,44 0,13
16
20,023 4,43096 354 23,3 0,825 17,42 0,148
17
20,598 4,3085 71 4,7 0,075 1,58 0,084
18
20,96 4,2349 142 9,3 0,292 6,17 0,113
19
21,429 4,14324 175 11,5 0,398 8,40 0,148
20
22,755 3,90482 266 17,5 0,616 13,01 0,152
21
23,637 3,76098 155 10,2 0,194 4,10 0,103
22
24,093 3,69082 1521 100 4,736 100,00 0,138
23
25,149 3,53816 85 5,6 0,242 5,11 0,336
24
25,843 3,4447 127 8,3 0,322 6,80 0,214
25
26,404 3,37278 324 21,3 0,72 15,20 0,144
26
27,087 3,28931 103 6,8 0,209 4,41 0,187
27
29,659 3,00965 86 5,7 0,097 2,05 0,171
28
31,61 2,82824 68 4,5 0,107 2,26 0,214
28
34,714 2,58206 84 5,5 0,138 2,91 0,152
30
36,225 2,4778 69 4,5 0,108 2,28 0,124
El patron de difraccion de rayos X del compuesto 9X (muestra 1) (vease la Tabla 11) se compare con el patron de difraccion de rayos X de una muestra de sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol- 3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida (Forma I) (compuesto 9X (muestra 2)) (vease la figura 9). Se encontro que las 5 muestras tienen los mismos patrones de XRD, con una similitud de 92,31% encontrada para los picos con intensidad por encima de 10%.
La Tabla 12 enumera los parametros de XRD del compuesto 9X (muestra 3):
N°
Angulo Valor d Intensidad Intensidad (%) Area neta Area (%) FWHM
° 2-Theta
Angstrom Recuento Cps x ° 2-Theta
° 2-Theta
1
8,653 10,21131 96 19,3 0,025 0,86 0,094
2
9,71 9,10183 115 23,1 0,113 3,90 0,157
3
11,23 7,8725 78 15,7 0,064 2,21 0,103
4
12,037 7,34691 78 15,7 0,047 1,62 0,15
5
12,582 7,02957 77 15,5 0,119 4,11 0,264
6
13,734 6,44247 111 22,3 0,155 5,35 0,254
7
16,029 5,52485 172 34,6 0,542 18,72 0,283
8
17,837 4,96876 150 30,2 0,299 10,33 0,213
9
19,022 4,66168 150 30,2 0,261 9,02 0,318
10
19,954 4,44601 249 50,1 0,789 27,25 0,372
11
20,846 4,25782 129 26 0,071 2,45 0,198
12
21,285 4,17094 125 25,2 0,094 3,25 0,187
13
22,663 3,92033 185 37,2 0,08 2,76 0,108
14
23,058 3,8541 169 34 0,063 2,18 0,067
15
23,866 3,72549 497 100 2,895 100,00 0,405
16
25,881 3,43984 189 38 0,044 1,52 0,091
17
26,151 3,40488 197 39,6 0,061 2,11 0,091
18
26,548 3,35482 162 32,6 0,019 0,66 0,06
19
27,003 3,29936 141 28,4 0,04 1,38 0,092
20
29,459 3,02967 101 20,3 0,027 0,93 0,05
21
30,962 2,8859 92 18,5 0,057 1,97 0,124
22
36,744 2,44395 66 13,3 0,063 2,18 0,172
23
38,012 2,3653 71 14,3 0,055 1,90 0,102
El XRD para el compuesto 9X (muestra 3) es el mismo que para el compuesto 9X (muestra 1) y el compuesto 9X (muestra 2).
Experimental:
15
Instrumento: Bruker D8 Advance
Una fuente de CuK (= 1,54056 angstrom) que opera mlnimamente a 40 kV y 40 mA, barre cada muestra entre 4 y 40 grados 2-theta.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Ejemplo 12:
Comparacion de los patrones de difraccion de rayos X del compuesto 7A (muestra 1) obtenido mediante el metodo del Ejemplo 11 y del compuesto 9X (muestra 1) preparado mediante el metodo del Ejemplo 12. Comparado con el compuesto 9X (muestra 1), el compuesto 7A (muestra 1) tiene picos caracterlsticos a 4,262°, 19,126°, 22,072°, respectivamente, indicando que tiene una forma cristalina diferente.. Las muestras tienen patrones de XRPD diferentes con una similitud de 30,77% encontrada para picos con intensidad por encima de 10%.
Ejemplo 13:
Se llevo a cabo el analisis calorimetrico por barrido diferencial (DSC) en el compuesto 7A (muestra 1), compuesto 9X (muestras 1 y 2) y compuesto 10X obtenidos de acuerdo con el procedimiento de la presente invencion. Los termogramas de DSC se muestran en las figuras 10, 11, 13 y 18. El compuesto de origen (base libre) funde a 217,6°C. Por el contrario, la sal de hidrocloruro de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1-carbonil)-1H-pirrol-3-il)tiazol-2- il)fenil)acetamida (forma I) sufre descomposicion antes de la fusion, y de esta manera no hay pico aparente para ser reconocido.
Equipo: DSC Q2000 V24.4 Build 116 Condiciones de Calorlmetro del Barrido Diferencial Gas 1: nitrogeno 50,0 ml/min.
Masa de la bandeja: 29,765 28,364 mg Tipo de bandeja: aluminio Registro de metodo:
1: equillbrese a 25,00°C
2: elevese 10,00°C/min. hasta 400,00°C
3: finallcese del metodo
Ejemplo 14: Ensayo de solubilidad acuosa
La solubilidad cinetica de los compuestos de ensayo se evaluo en amortiguador de fosfato 100 mM (7,4). La concentracion de ensayo fue 100 pM (0% de DMSO para compuestos de ensayo, 1% de DMSO para compuestos de referencia). El sistema de ensayo fue un amortiguador de fosfato de 100 mM (pH 7,4). El tamano de la muestra estaba duplicado (n = 2), y el metodo bioanalltico fue LC-UV (Agilent-1200). Fase movil A: H2O-1% de TFA, B: MeOH-1% de TFA; columna Boston Symmetrix ODS-H (2,1 x 50 mm, 5 pm); condiciones de LC 0,4 ml/min.
Para compuestos
de ensayo:
Tiempo (min.)
Bomba B
0,1
30
1,6
95
3,8
95
4,0
30
60
parada
Nombre del compuesto Tiempo de retencion (min.) Longitud de onda (nm)
T amoxifeno 4,7 min. 295 nm
Tiempo de retencion y
Ketoconazol 4,6 min. 280 nm
longitud de onda
Propranolol 4,3 min. 295 nm
Compuesto 7A (muestra 1) 3,8 min. 260 nm
Compuesto 9X (muestra 2) 3,8 min. 260 nm
Los resultados se muestran en la tabla 13 mas abajo. Tamoxifeno es un control de baja solubilidad y mostro menos de 1 pM en PBS; ketoconazol fue un control de solubilidad moderada y mostro solubilidad de 15,9 pM en PBS; propranolol fue un control de alta solubilidad y mostro solubilidad en PBS alrededor de la concentracion de dosificacion de 100 pM. Los resultados en la tabla 13 muestran que la sal hidrocloruro cristalina (compuesto 9X (muestra 2)) exhibe superior solubilidad sobre el compuesto de origen 7A (muestra 1). Especlficamente, la solubilidad del compuesto es baja <10 pM en PBS, mientras que el compuesto 9X (muestra 2) exhibio una solubilidad de 10-80 pM en PBS.
Tabla 13.
Artlculo de ensayo
Sistema de ensayo Ecuacion lineal* R2 Solubilidad (pM)
Media
RSD
T amoxifeno
Amortiguador de fosfato 100 mM (pH y = 14,843x - 1,902 0,9994 <1 N/A
5
10
15
20
25
Artlculo de ensayo
Sistema de ensayo Ecuacion lineal* R2 Solubilidad (pM)
Media
RSD
7,4)
Ketoconazol
Amortiguador de fosfato 100 mM (pH 7,4) y = 2,5231x + 4,0853 0,9993 15,9 0,00
Propranolol
Amortiguador de fosfato 100 mM (pH 7,4) y = 13,605x - 10,331 0,9997 >100 (112,8) 0,01
Compuesto 7A (muestra 1)
Amortiguador de fosfato 100 mM (pH 7,4) y = 41,583x - 2,8644 1,0000 5,9 0,01
Compuesto 9X (muestra _____2)_____
Amortiguador de fosfato 100 mM (pH 7,4) y = 35,014x - 7,7358 0,9997 51,9 0,03
Procedimiento de ensayo
1. Para compuestos de referencia:
S Anadanse 8 pi de disolucion madre de DMSO 10 mM en 792 pi de amortiguador de fosfato 100 mM (n = 2). Conc. final = 100 pM (1% de DMSO)
Para compuestos de ensayo:
S Anadanse 8 pi de disolucion madre de DMSO 10 mM en ios tubos (n = 2).
S Sequense las muestras en nitrogeno
S Anadanse 800 pl de amortiguador de fosfato 100 mM en los tubos. Conc. final = 100 pM (0% de DMSO).
2. Los tubos de las muestras se agitan durante 1 hora (1.000 rpm) a temperatura ambiente y 37°C.
3. Las muestras se centrifugan (10 min. - 12000 rpm) para precipitar partlculas no disueltas.
4. Los sobrenadantes se transfieren a tubos nuevos.
5. Las concentraciones de los sobrenadantes despues de la centrifugacion se determinan por deteccion de LC-UV. Ejemplo 15: Preparacion de otras formas de sal cristalina
Se intento la preparacion de otras formas de sal cristalina de 2-morfolino-N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1 -carbonil)-1 H-pi rrol-3- il)tiazol-2-il)fenil)acetamida. Especlficamente, se hicieron intentos para preparar formas cristalinas de las sales de H2SO4, de acido metanosulfonico y de acido acetico. La recristalizacion de la sal de sulfato y de la sal de acetato en tolueno no dio formas cristalinas adecuadas para el estudio adicional. La recristalizacion de la sal de acido metanosulfonico en tolueno produjo una forma amorfa. Las figuras 13 y 14 muestran los datos de DSC y XRPD obtenidos para esta sal de acido metanosulfonico.

Claims (16)

  1. 5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
    50
    55
    1. Compuesto de formula I:
    imagen1
    o una sal farmaceuticamente aceptable, solvato o polimorfo del mismo, en el que:
    R1 se selecciona de entre el grupo que consiste en un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, o heteroalquilo, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3-C8, un heterocicloalquilo, una amina, un arilo y un heteroarilo,
    en el que dicho alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heterocicloalquilo, arilo, amina o heteroarilo esta no sustituido o sustituido con uno o mas Ra,
    en el que Ra se selecciona independientemente en cada aparicion de entre el grupo que consiste en:
    a) un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado,
    b) un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado,
    c) un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado,
    d) un haloalquilo de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
    e) un alcoxi o ariloxi de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
    f) un haloalcoxi de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
    g) un alquil C1-C6-sulfonilo lineal o ramificado, saturado o insaturado,
    h) un tioalquilo o tioarilo de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
    en el que dicho alquilo, alquenilo, alquinilo, y arilo en a)-h) esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
    i) un cicloalquilo de C3-C8, en el que dicho cicloalquilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
    j) un cicloalquenilo de C3-C8, en el que dicho cicloalquenilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
    k) un arilo, en el que dicho arilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
    l) un heteroarilo, en el que dicho heteroarilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
    m) un heterocicloalquilo, en el que dicho heterocicloalquilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
    n) hidroxilo,
    o) ciano,
    p) amino,
    q) nitro,
    r) halogeno,
    s) CORb,
    t) COORb,
    5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
    50
    55
    u) CONRbRc,
    v) NHCORb, y
    w) NRbRc
    o dos Ra, junto con los atomos a los que estan unidos, forman un heterocicloalquilo de cinco o seis miembros, un arilo, o anillo heteroaromatico;
    en el que Rb y Rc son, cada uno independientemente, hidrogeno o un grupo seleccionado de entre entre halogeno, C(O)CH3, CF3, un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3-C8, un heterocicloalquilo, un arilo y un heteroarilo;
    en los que dicho alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heterocicloalquilo, arilo o heteroarilo esta no sustituido o sustituido con uno o mas Rd, en el que Rd se selecciona independientemente en cada aparicion de entre el grupo que consiste en un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3-C8, heterocicloalquilo, un arilo, una dialquilamina, una monoalquilamina, y un heteroarilo;
    o dos Rb, junto con los atomos a los que estan unidos, forman un anillo heterocicloalqullico de cinco o seis miembros;
    R2 y R3 o bien
    (i) se seleccionan, cada uno independientemente, de entre el grupo que consiste en un hidrogeno, un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3-C8, y un heterocicloalquilo; o
    (ii) junto con el atomo de nitrogeno al que estan unidos, forman un anillo heterocicloalqullico o heteroaromatico de cinco, seis o siete miembros, en el que dicho anillo esta no sustituido;
    y en los que arilo significa fenilo y naftilo, heterocicloalquilo significa cualquier anillo monoclclico, biclclico o triclclico estable que esta saturado y comprende unos atomos de carbono y uno o mas heteroatomos anulares seleccionados independientemente de entre el grupo que consiste en nitrogeno, oxlgeno, y azufre, y heteroarilo significa un anillo heteroclclico aromatico monoclclico o biclclico de 5, 6 o 7 miembros o anillo heteroclclico aromatico blclico de 7, 8, 9, 10, 11 o 12 miembros estable que consiste en atomos de carbono y uno o mas heteroatomos seleccionados independientemente de entre el grupo que consiste en nitrogeno, oxlgeno, y azufre; para uso como agente farmaceutico.
  2. 2. Compuesto para uso como agente farmaceutico segun la reivindicacion 1, de formula II:
    imagen2
    o una sal farmaceuticamente aceptable, solvato, o polimorfo del mismo, en el que
    Ra1, Ra2, Ra3, Ra4, y Ra5 se seleccionan, cada uno independientemente, de entre el grupo que consiste en:
    a) un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado,
    b) un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado,
    c) un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado,
    d) un haloalquilo de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
    e) un alcoxi o ariloxi de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
    f) un haloalcoxi de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
    g) un alquil C1-C6-sulfonilo lineal o ramificado, saturado o insaturado,
    h) un tioalquilo o tioarilo de C1-C6 lineal o ramificado, saturado o insaturado,
    en los que dichos alquilo, alquenilo, alquinilo, y arilo en a)-h) estan no sustituidos o sustituidos independientemente
    5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
    50
    55
    60
    65
    en cada aparicion con uno o mas Rb,
    i) un cicloalquilo de C3-C8, en el que dicho cicloalquilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
    j) un cicloalquenilo de C3-C8, en el que dicho cicloalquenilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
    k) un arilo, en el que dicho arilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
    l) un heteroarilo, en el que dicho heteroarilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
    m) un heterocicloalquilo, en el que dicho heterocicloalquilo esta no sustituido o sustituido independientemente en cada aparicion con uno o mas Rb,
    n) hidroxilo,
    o) ciano,
    p) amino,
    q) nitro,
    r) halogeno,
    s) CORb,
    t) COORb,
    u) CONRbRc,
    v) NHCORb,
    w) NRbRc, y
    x) hidrogeno,
    o dos de Ra1, Ra2, Ra3, Ra4 y Ra5, junto con los atomos a los que estan unidos, forman un heterocicloalquilo de cinco o seis miembros, un arilo, o anillo heteroaromatico;
    en los que Rb y Rc son, cada uno independientemente, hidrogeno o un grupo seleccionado de entre halogeno, CF3, C(O)CH3, un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3-C8, heterocicloalquilo, un arilo y un heteroarilo;
    en los que dicho alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heterocicloalquilo, arilo o heteroarilo esta no sustituido o sustituido con uno o mas Rd, en el que Rd se selecciona independientemente en cada aparicion de entre el grupo que consiste en un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, un alquenilo de C2-C6 lineal o ramificado, un alquinilo de C2-C6 lineal o ramificado, un cicloalquilo de C3-C8, un cicloalquenilo de C3-C8, heterocicloalquilo, un arilo, una dialquilamina, una monoalquilamina, y un heteroarilo; dos Rb, con los atomos a los que estan unidos, forman un anillo heterocicloalqullico de cinco o seis miembros.
  3. 3. Compuesto para uso como agente farmaceutico segun la reivindicacion 1 o 2, en el que R2 y R3 se seleccionan, cada uno independientemente, de entre un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, hidrogeno, y cicloalquilo de C3-C8, o R2 y R3, junto con el atomo de nitrogeno al que estan unidos, forman un heterocicloalquilo de cinco, seis o siete miembros.
  4. 4. Compuesto para uso como agente farmaceutico segun la reivindicacion 3, en el que R2 y R3, junto con el atomo de nitrogeno al que estan unidos, forman un anillo de pirrolidina o piperidina.
  5. 5. Compuesto para uso como agente farmaceutico segun la reivindicacion 4, en el que R2 y R3, junto con el atomo de nitrogeno al que estan unidos, forman un anillo de pirrolidina.
  6. 6. Compuesto para uso como agente farmaceutico segun cualquiera de las reivindicaciones 2 a 6, en el que Ra1, Ra2, Ra3, Ra4, y Ra5 se seleccionan, cada uno independientemente, de entre hidrogeno, NHCORb, alcoxi de C1-C6,
    5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    halogeno, hidroxilo, C1-C6 alquilo, CF3, y NRbRc.
  7. 7. Compuesto para uso como agente farmaceutico segun la reivindicacion 6, en el que uno de Ra1, Ra2, Ra3, Ra4, y Ra5 es NHCORb y los restantes Ra1, Ra2, Ra3, Ra4, y Ra5 son hidrogeno.
  8. 8. Compuesto para uso como agente farmaceutico segun la reivindicacion 7, en el que Ra4 no es hidrogeno.
  9. 9. Compuesto para uso como agente farmaceutico segun la reivindicacion 8, en el que Ra4 se selecciona de entre hidrogeno, NHCORb, metoxi, metilo, y cloro.
  10. 10. Compuesto para uso como agente farmaceutico segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en el que Rb se selecciona de entre un alquilo de C1-C6 lineal o ramificado, cicloalquilo de C3-C8 no sustituido, arilo no sustituido y heterocicloalquilo no sustituido, en el que dicho alquilo de C1-C6 esta no sustituido o sustituido con uno o mas Rd.
  11. 11. Compuesto para uso como agente farmaceutico segun la reivindicacion 10, en el que Rb es -CH2Rd.
  12. 12. Compuesto para uso como agente farmaceutico segun la reivindicacion 11, en el que Rd es morfolina.
  13. 13. Compuesto para uso como agente farmaceutico segun la reivindicacion 1, que es 2-morfolino-N-(3-(4-(5- (pirrolidin-1 -carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida de formula:
    HCI H k--NH
  14. 14. Compuesto para uso como agente farmaceutico segun la reivindicacion 1, que es N-(3-(4-(5-(pirrolidin-1- carbonil)-1 H-pirrol-3-il)tiazol-2-il)fenil)acetamida de formula:
    imagen3
  15. 15. Compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, para uso como inhibidor de las rutas de tirosina cinasas para prevenir o tratar un cancer y/o un trastorno proliferativo celular.
  16. 16. Compuesto segun la reivindicacion 15, para uso para prevenir o tratar leucemia tal como mielofibrosis o leucemia mielogenosa aguda (AML), linfoma, policitemia vera (eritremia), trombocitemia, cancer de pulmon, cancer de colon, cancer pancreatico, cancer de prostata, cancer de piel, cancer ovarico, cancer de mama, enfermedades autoinmunitarias tales como rechazo de transplantes, artritis reumatoide, artritis psoriasica, esclerosis lateral amiotrofica, psoriasis, colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn, espondilitis anquilosante y enfermedad de ojo seco.
    imagen4
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