ES2530590B1 - Composición antialergénica y desinfectante - Google Patents

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ES2530590B1 ES201300714A ES201300714A ES2530590B1 ES 2530590 B1 ES2530590 B1 ES 2530590B1 ES 201300714 A ES201300714 A ES 201300714A ES 201300714 A ES201300714 A ES 201300714A ES 2530590 B1 ES2530590 B1 ES 2530590B1
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Abstract

Composición desinfectante y antialergénica, de utilización para todo tipo de superficies, tanto duras como blandas, incluyendo tejidos de tipo tejido y no tejido, incluso tejidos y objetos con hilos como mantas, alfombras, etc., formada principalmente por una solución acuosa de un tensioactivo catiónico biocida, dentro del grupo de los amonios cuaternarios, y un polímero formador de película, que incluye principalmente cloruro de didecil dimetil amonio, el copolímero Vinyl Caprolactam (Copolímero Dimetilaminoetil Metacrilato) y agua junto con otros solventes y perfumes; la composición es efectiva en aproximadamente no menos del 90% en la neutralización de los alérgenos más comunes del hogar, como bactericida y fungicida.

Description

COMPOSICION ANTIALERGENICA y DESINFECTANTE
CAMPO DE LA INVENCION La presente invención desarrolla una composición de uso doméstico, desinfectante y antialergénica, que puede utilizarse tanto en superficies duras como blandas,
telas.
alfombras, etc., con la que se obtienen unos
resultados
mejorados tanto en su eficacia desinfectante
como
en el combate de los alérgenos domésticos más
habituales.
ANTECEDENTES Un alérgeno es una sustancia ambiental capaz de generar una reacción alérgica en algunos individuos. Los alérgenoB más habituales corresponden a secuencias pept1dicas que derivan del polen, de la descamaci6n de animales, y de los ácaros del polvo, etc. La respuesta alérgica se produce con la generación por parte del sistema inmunitario de anticuerpos específicos contra el alérgeno provocando una rápida y exacerbada respuesta a
futuras exposiciones a dicho alérgeno.
La reducción de la respuesta alérgica se consigue habitualmente limitando la exposición al alérgeno. Una manera de reducir esta exposición es interfiriendo en la interacción entre las moléculas alergénicas y sus anticuerpos específicos atacando/impidiendo la afinidad/reconocimiento entre los mismos. El grado de esta interferencia se mide por un descenso en el reconocimiento antígeno-anticuerpo en un ensayo de ELISA.
En nuestros hogares conviven con nOBotroB infinidad de microorganismos, como es el caso de los ácaros que se alimentan principalmente de piel humana y animal descamada. Los ácaros del polvo más habituales son l os
Dermatophagoides farinae, Dermatophagoides pteronssinus y Euroglyphus maynei. Miden aproximadamente alrededor de 0,3 mm y viven aproximadamente unos cuatro meses y medio, de los que unos 25 días se emplean en las etapas de huevo, larva o ninfa. Son animales sexuados en que una hembra adulta puede poner de 20 a 50 huevos y realizar una o dos puestas en su vida. Cada d1a estos ácaros producen alrededor de 20 deposiciones fecales.
Estos ácaros del polvo son 75\ agua y necesitan la humedad para vivir. De hecho mueren en ambientes con humedades relativas inferiores al 50%. Sin embargo no beben agua, sino que absorben vapor de agua circundante por medio de glándulas situadas encima de sus patas que a s u vez producen secreciones altas en cloruro de sodio y potasio. En ambientes entre 20 a 3S"C necesitan una humedad de entre el 65 y el 80% para vivir. Los ácaros son fotof6bicos.
En
el extremo de sus patas estos ácaros disponen de
copas
succionadoras que les permite n colgarse de las
fibras
textiles, por ello no solo pueden poblar
superficies y rincones del ámbito doméstico, sino que también habitan alfombras, cortinas , etc . , y preferentemente almohadas y colchones, viéndose favorecidos por el calor y humedad corporales.
Para hacerse una idea de la importancia del problema,
basta tener en cuenta que en zonas de alta humedad pueden existir 18.000 ácaros por gramo de polvo y alrededor de 100.000 de sus deposiciones fecales.
Los alérgenos más importantes producidos por los ácaros del poIve están en sus defecaciones. Estas partículas son comparables en tamaño a los granos de polen. Miden unas 30 micras y quedan en suspensión en el aire con gran facilidad, por ejemplo tras la limpieza doméstica: al hacer las camas, pasar la aspiradora, etc.
Los alérgenos y los problemas que ocasionan en las personas son en la actualidad una preocupación sanitaria importante. Se ha comprobado que la proliferación de ácaros y de los alérgenos de los mismos. contribuyen a fomentar la respuesta alergénica en los individuos. De este modo, un hogar sucio, repleto de polvo y ácaros, es un lugar que fomenta la alergia; en cambio, un ambiente seco y limpio puede incluso corregir la respuesta alérgica de un individuo.
Existen diferentes estrategias para combatir los alérgenos. La limpieza y la aspiraci6n forma parte de muchas de ellas. Aunque la limpieza no elimina el problema, pues las heces y cadáveres de los ácaros pueden quedar en suspensión en el aire como consecuencia de la misma , disminuyen sus condiciones de vida idónea. vivir en poblaciones secas, en edificios bien ventilados y limpios, disminuye el problema de los ácaros. Sin embargo no siempre es posible cambiar de domicilio. Otras soluciones requieren, en un tratamiento continuado, la utilización de dispositivos y aparatos
que por su complej idad no son fác i lmente adaptables al consumo doméstico, como es la utilización de aspiradoras con filtro anti-ácaros de alta eficiencia, por ejemplo. Por otra parte, la industria qu1mica, de perfumer1a y limpieza, haciendo frente a esta situaci6n proporciona en el estado de la técnica, diferentes productos para combatir dichos alérgenos en el ámbito doméstico.
La utilización tradicional de compuestos desinfectantes muy fuertes basados por ej emplo en benzoato de beneiIo,
as1
como potentes compuestos insecticidas, tanto en
espuma
o polvo, además de las lógicas reservas de su
utilización
generalizada en un domicilio y más en
concreto
sobre las superficies habituales de un
dormitorio,
presenta problemas de eficacia y también de
resultados, afeando las superficies tratadas, dejando restos en los tejidos, haciéndolos pegajosos, un olor desagradable, etc. Lógicamente, ha sido y es un esfuerzo de la industria en este campo técnico el mejorar esta situación y proporcionar compuestos más eficientes en su lucha contra los ácaros y con un grado de aceptación mayor por parte del público cara a su utilización en nuestros hogares.
Igual que los alérgenos derivados del polvo, otros alérgenos provenientes del polen o de animales domésticos son comunes en el ámbito del hogar y al igual que los anteriores, los hábitos de limpieza pueden ayudar a favorecer la respuesta alérgica.
La patente US2002/0l50540 es una composición neutralizadora de alérgenos que contiene iones de
aluminio y cuando menos un 60% de este ién de aluminio es proporcionado por una sal de un anión del grupo de los sulfatos, cloruro, nitrito, sulfato de potasio u otros. Se reivindica una eficacia antialergénica de al menos un 60% de acuerdo con un test ELISA efectuado. La invención prevé por ejemplo la adición de desinfectantes de refuerzo, entre los que considera el grupo de los amonios cuaternarios, la inclusión de po11meros formadores de película, humectantes, etc.
La patente US2009/0175958 desarrolla una composición liquida de ácido hipohaloso para la desactivación de alérgenos y la desinfección. La invención contempla entre otros muchos ingredientes opcionales la inellisión como desinfectante de refuerzo de amonios cuaternarios. Utiliza en su formulación esencial hipoclorito que es un agente oxidante. Su poder desinfectante tiene como contrapartida que se ataca los tejidos.
La
patente US2011/0232683 desarrolla métodos y
composición
para eliminar alérgenos estando dicha
composición
formada por un tensioactivo, un
desnaturalizador de proteínas y dióxido de carbono de fase densa, con una presión de 400 a 1070 libras por pUlgada cuadrada. Contempla la utilización de amonios cuaternarios como auxiliar en la inactivación de proteínas alergénicas. Este documento precisa de un dispositivo aplicador a presión, no simplemente un spray de mano, lo que representa un coste económico a considerar y que lo descarta como artículo para el gran consumo doméstico.
El documento US64288 01 desarrolla un método y una composición para c ontrolar a los ácaros y sus alérgenos, en que la composición está. formada principalmente por alcohol como desinfectante, agua, benzoato de bencilo como acaricida y un pOlímero formador de pelicula, junto con propelente para dispensarse como aerosol. Este documento contempla la posibilidad de utilizar uno o más agentes antimicrobianos de refuerzo y entre ellos un amonio cuaternario.
A pesar de las ventajas de estos productos, la eficacia en la neutralización de alérgenos todavía es mejorable. El aumentar la eficacia de una composición antialergénica, tanto en el efecto inmediato como en su permanencia en el tiempo, son fundamentales de cara a su viabilidad.
La sensibilidad de las poblaciones alérgicas puede variar y una persona llegar a verse afectada por concentraciones relativamente bajas de alérgenos. La sensibilidad alérgica de, por ejemplo, un niño puede llegar a dispararse con concentraciones de alérgenos de tan s610 50 ng/g (alérgeno/polvo) . 2 pg/g son suficientes para alcanzar el nivel de sensibilidad en un
adulto,
l a \.1g/g pueden activar los s íntomas del asma.
Por
lo que, una insuficiente neutralización de los
alérgenos
de una superficie puede representar la
inutilidad
del producto para esta finalidad. Para
hacerse una idea de este problema vinculado a la eficacia del producto, baste considerar que si existen 10.000 ácaros por gramo de polvo en una habitación fuertemente infestada y éstos producen 20 defecaciones
diarias, en tan sólo 5 dias se obtiene un número de
alérgenos por gramo de polvo considerable. Una población
de ácaros es difícilmente exterminada al 100%. La
población superviviente puede recuperarse e incluso
5
incrementar sus niveles de población en varios ciclos
biológicos, cada uno de alrededor de 4 meses, de forma
que la producción de alérgenos puede volver a ser
importante en un periodo relativamente breve, debiéndose
sumar además los cadáveres de los ácaros eliminados que
10
incorporan también alérgenos.
La utilización de una composición antialergénica puede
contribuir a la mejora de la respuesta alérgica en las
poblaciones sensibles al disminuir el nivel de alérgenos
15
en el ambiente. En consecuencia, no s610 es conveniente
un producto eficaz tras su aplicación, sino que es
fundamental que mantenga un efecto alergénico residual
sobre la superficie tratada, y ello sin afectar el
tacto, color u olor de la misma.
20
De hecho, la presente invención tiene por objeto
principal una composición con mejores efectos anti
alérgenos que la técnica previa, por ejemplo en cuanto
al tiempo en conseguir el efecto deseado, tras 15 min
2S
después de su aplicación.
Otro de los objetivos de la presente invención es una
composición que además de su efecto alergénico incluya
propiedades biocidas y contribuya a la desinfección de
30
las superficies y materiales donde se aplica.
Todavía otro de los objetos de la presente invención,
por tanto, es que el mencionado producto tenga unas cualidades de olor que no dificulten su aplicación en el Ambito doméstico. También que por su propia naturaleza no decolore o empañe las telas o fibras de modo que pueda aplicarse sobre material textil tanto tej ido como no tejido.
Estas y otras ventajas de la presente invenci6n serán más evidentes a lo largo de la explicación que sigue a continuación.
BREVE EXPLICACION DE LA INVENCION La presente invención desarrolla una composición alergénica, del tipo de las que se utilizan para combatir los alérgenos derivados de los ácaros, del tipo de ácaros domésticos o del polvo como D. farinae, D. m..inoceras o D. Euroglyphurs cuyas defecaciones producen material alérgeno, también de los alérgenos de los granos de polen y los producidos por la saliva y secreciones de animales domésticos como los gatos, es decir de los principales alérgenos presentes en nuestros hogares, en que en una solución acuosa se ha combinado un tensioactivo cati6nico dentro del grupo de los amonios cuaternarios y un po11mero formador de pe11cula, que no solo suma sus respectivas cualidades sino que permite la potenciación de las mismas con su efecto combinado.
En concreto, como tensioactivo cati6nico se utiliza el Cloruro de Didecil Dimetil Amonio. Uno de l os "Quats" de cuarta generación o amonios cuaternarios, que tiene un alto poder biocida, manteniendo un limitado nivel de
toxicidad.
Como polímero formador de película se utiliza el Vinyl Caprolactam (Copolimero Dimetilaminoetil Metacrilato). Es un polímero formador de film. Se fabrican en el mundo grandes cantidades de Caprolactam que es la base para la fabricación de Nylon . El Vinyl Caprolactam es, por su parte, ampliamente utilizado en acondicionadores de cabello, geles, etc., por su facilidad en la formación de películas y su naturaleza hidrosoluble.
Además la naturaleza tensioactiva del Quat permite una excelente combinación acuosa del compuest o que puede servirse en aerosoles, sprays, etc. A diferencia de otros productos conocidos, al no disponer de alcohol como solvente principal, el producto no clasifica como inflamable. A comparación con productos liberadores de c l oro para producir oxidación abundante, éste permite su utilización en tej idos sin que éstos se decoloren ni envej ezcan por su acción oxidante.
La composición de la invención es eficaz tanto a nivel desinfectante, presentando eficacia bactericida y fungicida según criterios definidos en l os estándares europeos de desinfección, como antialergénico, desnaturalizando las prote1nas alergénicas para disminuir el reconocimiento especifico entre ant1genoanticuerpo. Además es una composición con efecto de larga duración tanto sobre superficies duras como blandas. Es tos criterios han podido ser evaluados experimentalmente mediante métodos reconocidos. La eficacia antialergénica ha sido contrastada con el test
-
ELISA, obteniendo valores no menores al 90% de
disminución de reconocimiento especifico
antígeno/anticuerpo, o su utilidad como desinfectante
contra bacterias y hongos, contrastada mediante el"
5
cumplimiento de las normativas europeas de desinfección,
como es por ejemplo la UNE-EN 13697.
El producto se sirve en spray de mano, es incoloro y
presenta un olor adecuado y agradable, siendo el
10
producto eficaz en la desnaturalización de al menos el
90% de los alérgenos. Puede aplicarse sobre cualquier
tipo de superficies y es especialmente indicado en
aquellos objetos que no son fáciles de lavar, como
alfombras, tapicerías, etc. Aplicado sobre una
15
superficie¡ tanto dura como blanda, una tela, despliega
un efecto rápido ya a los 15 min de su aplicación. El
secado, dejando reposar el producto. es muy rápido.
Quita malos ol ores al eliminar las bacterias que los
provocan. Sus efectos, aunque decrecen con el tiempo,
20
permanecen activos durante dias, incluso más de una
semana, gracias a la pelicula de producto que de forma
invisible recubre las superficies tratadas, reteniendo a
los alérgenos e impidiendo su suspensión.
2S
De este modo, con la composición de la invención se han
obtenido todos los objetivos inventivos perseguidos,
resultando en un producto apto para el gran consumo,
eficaz y a la vez económico.
30
EXPLICACION DETALLADA DE LA INVENCION
Consiste la presente invención en una composición
desinfectante y antialergénica, de utilización para todo
5
tipo de superficies, tanto duras como blandas, incluyendo tejidos de tipo tejido y no tejido, incluso tejidos con hilos como mantas, alfombras, etc., de efecto prolongado sobre las superficies en que se aplica, que no decolora ni empaña tejidos y alfombras, no tiene mal olor y puede aplicarse en sprays, aerosoles, líquidos, etc.
JO
La composición de la principalmente por una invención solución está acuosa tensioactivo catiónico biocida del grupo de los cuaternarios y un polímero formador de película. formada de un amonios
15
En la amonio amonio. realización cuaternario preferente de es el cloruro la de invención, dicho didecil dimetil
20
Los amonios cuaternarios son una familia de antimicrobianos considerados potentes en cuanto a su actividad desinfectante. Son activos frente a la mayoria de bacterias gram positivas y gram negativas. Son bactericidas, fungicidas y virucidas. Actúan tanto en un medio ácido como alcalino.
25 30
De amonios cuaternarios se conocen el cloruro de benzalconio o cloruro de n-alquil dimetil bencil amonio, en que la cadena alquilica puede tener variaciones en la composición del número de carbonos. Con 12 a 14 carbonos se obtiene ya un buen poder antibacteriano. Se trata de un producto de más de so años que sigue utilizándose ampliamente en la actualidad.
La presente invención utiliza de modo preferente cadenas dialquilicas lineales y sin anillo bencénico : el cloruro de didecil dimetil amonio o cloruro de dioctil dimetil amonio o cloruro de octil decl1 amonio, cada uno aislado . Tienen una excelente actividad germicida, son de baja espuma y tienen una alta tolerancia a las cargas de proteína y al agua dura.
El otro ingrediente esencial de la composición de la invención es el copollmero Vlnyl Caprolactam (Copollmero Dimetilaminoetil Metacrilato) . Polímero hidrosoluble
formador
de película, conocido en el mundo de la
cosmética
y muy utilizado en acondi cionado res de
cabello,
geles, etc .
El tensioactivo ayuda a la humectación de la superficie de aplicaci6n que de esta forma es "mojada" con facilidad en su totalidad por la formulaci6n acuosa de la presente invenci6n.
Los alcoholes presentes en el compuesto permiten, entre otras funciones , facilitar un rápido secado impidiendo que perdure la sensación de "humedad" o "de mojado" tras un periodo razonable de aplicaci6n del producto. Los perfumes proporcionan un olor refrescante y adecuado para un producto de aplicaci6n doméstica.
Aunque la técnica conocida ya habia utilizado con anterioridad Vinyl Caprolactam u otro polimero formador de peliculas y tensioactivos bactericidas en formulaciones antialergénicas. siempre fue corno ingredientes adicionales a los elementos activos
principal es de c ada composición, actuando en ampliaci ón de espectro germicida o reforzando la formación de film. Nunca como elementos esencial es, principales, de una composición antial ergénica y desinfectante.
La composición de la invención tiene unos excelentes resultados de eficacia antial ergénica y desinfectante de forma rápida, en los primeros 5 a lS minutos tras su
apl icación
y conserva un buen efecto residu al sobre las
superficies
tratadas, sin decol oración, sensación de
pegamento
o de polvillo en l a misma, etc.
Puede considerarse este resultado de eficacia, a la vista de la técnica previa conocida, como sorprendente e inesperado . El efecto antialergénico y/o desinfectante del compuesto es superior al de los componentes individuales y es que se establece entre ambos una relación de adición que contribuye a ampl iar su eficacia. Una hipótesis del porqué de esta vinculación sería que la proporción utilizada entre l os dos componentes de la invención, siendo l a óptima, promueve la máxima interacción entre los ingredientes activos y l os antígenos a inactivar. Esta máxima interacción viene definida por la relación existente e ntre el tamaño de l as mol éculas y sus cargas iónicas.
La composición de l a invención incluye dicho tensioactivo catiónico , el Cloruro de Didecil Dimetil Amonio, en aproximadamente entre 1,5 y 3% en peso, y más en concreto en aproximadamente 2% del peso total . Por otra parte, el polímero formador de film, e l Vinyl Caprol actam, está presente en la composición en
aproximadamente entre 0,28 y el 0,42% del peso total.
Debido a que no existe un protocolo estándar para evaluar la eficacia antialergénica de un producto, debe establecerse un procedimiento para evaluar la reducción obtenida de alérgenos. Se establecen dos objetivos para determinar la eficacia del producto.
-
Objetivo 1: la eficacia en la reducción de alérgenos se mide en términos de la habilidad de la composici6n de la invención para producir cualquier cambio estructural en el alérgeno que impida que éste pueda ser reconocido por el anticuerpo especifico. Si no existe reconocimiento especifico entre el ant1geno y el anticuerpo, se presume que no hay respuesta alérgica en la persona expuesta.
-
objetivo 2: determinar si la exposición en superficies textiles de los alérgenos a la composición de la invención interfiere al reconocimiento de los alérgenos por anticuerpos específicos.
Para el primer objetivo. se establecen los siguientes parámetros: tipo de alérgeno, cantidad de alérgeno, tipo de superficie, método de detección.
Los alérgenos seleccionados son Bet v la de Betula verrucosa (polen), Der p 1 (alérgeno de los ácaros del polvo) y Fel D 1 (alérgeno de la saliva del gato). Existen kits comerciales suministrados por empresas de biotecnologia como Biomay, MyBioSource.com y Thermo Fischer Scientific para la determinación y
cuantificación de estos alérgenos.
El efecto antialergénico se mide por la habilidad de la
formulación de generar cambios en la estructura del
5
alérgeno que hace que se rompa el reconocimiento
especifico entre el antígeno y el anticuerpo. Para
cuantificar este efecto se utiliza el test ELISA (Enzyme
linked Immune sorbent Assays Ensayo por inmuno
absorción ligado a enzimas) .
10
El alérgeno de los Acaros del polvo Natural Der p ~ se
obtuvo de rodoar Blotechnologies (Warmlnster, Reino
Unido). Der p 1 es una tiol proteasa presente en las
heces de l os ácaros domésticos en Europa
15
(Dermatophagoides pteronyssinus). Der p 1 es uno de l os
alérgenos más importantes con origen en los ácaros del
polvo que causa una reacción alérgica en humanos y
enlaza con anticuerpos especificos en un 80% de los
pacientes con alergia al polvo.
20
El alérgeno de la saliva del gato, natural Fel d 1 fue
obtenido de Indoor Biotechnologies. Este alérgeno es
producido de forma abundante en la saliva del gato y en
sus glándulas sebáceas, siendo el alérgeno principal en
2S
gatos .
El alérgeno Bet vla recombinante fue obtenido de Biomay
(Viena, Austria). Es el principal alérgeno del polen de
abedul. Está presente en el polen del abedul blanco
30
(Betula verrucosa) que es de los más extendidos en
Europa. La sensibilidad hacia Bet v la es la causa
principal de alergias de tipo 1 al inicio de la
primavera, caracterizándose por un asma bronquial, rinitis alérgica y conjuntivitis.
Se evalúa la capacidad de los anticuerpos especificos de detectar Fel D 1 en presencia o en ausencia de la solución de la invención mediante el protocolo descrito anteriormente. Se determina la cantidad de señal inespecifica de la composición en ausencia de la proteína alergénica. La concentración de Fel O específicamente reconocida en cada muestra fue corregida tras eliminar la señal inespecifica obtenida de la composición de la invención. Este procedimiento fue también el utilizado para medir el resultado de la acción de la composición de la invención ante Der pI y Bet v la.
Se utiliza un método liquido-liquido para determinar el reconocimiento de los alérgenos por anticuerpos especificos. PBS son las iniciales para Phosphate Buffer Saline o tampón fosfato salino que es una solución isotónica acuosa que contiene fosfato sódico, fosfato de potasio, cloruro sódico y cloruro de potasio. Se realizaron las siguientes incubaciones:
Para Fel DI y Der p l: 39 )..1l de formulado o PBS que se añadieron cada una a 261 ~l de PBS con 25 ng de Fel D l Y Der pI, respectivamente.
Para Bet v la: 75 ~l de formulado o PBS que se añadieron a 500 ~l de PBS con 500 ng de Bet vI a.
Todas las incubaciones fueron real izadas durante 15 min ELISA de los kits respectivos de rndear Technologies
a · la
temperatura ambiente. Después de este tiempo, se
utilizaron
100 pI de la mezcla para determinar la
reactividad
del alérgeno con sándwiches específicos
(EL-BVl para Bet v1 a, EL-DPl para Der Pl y EL-FDl para Fel D 1).
La determinación del alérgeno fue realizada primero recubriendo placas ELISA durante lSh a 4°C con lOOpl de SOmM de un búfer carbonato-bicarbonato (PH 9,6) que contiene anticuerpos especificas capturados (en dilución 1:1000) -Se realizaron tres lavados con PBS 0,1% Tween-20 (PBS-T) . Se bloquearon los pocillos con PBS 2,5% BSA durante 90 minutos a temperatura ambiente. Se cargó en cada pocillo 100\.11 de cada muestra de incubación y permaneció a 1h a temperatura ambiente. Se analizó cada muestra por triplicado. Se incluyeron muestras de control sin proteina alergénica para verificación. Las placas fueron lavadas tres veces con PBS-T e incubadas durante 1h a temperatura ambiente con 100 ~l de PBS T 1% BSA incluyendo anticuerpos biotinilados contra el alérgeno de estudio en una diluci6n 1:1000. Se lavó las placas tres veces con PBS
T. Se cargó en cada pocillo 100 ~l de PBS-T 1% BSA que contiene avidin-HRP en una dilución 1:1000 y se permitió la incubación durante 30 minutos a temperatura ambiente. Transcurrido este tiempo, se añadieron en cada pocillo 50 ~l de una solución de citrato-fosfato 70 mM (pH 4,2) con OPD y H20, realizando lecturas de la placa en S, 10 Y 15 min después de la adición de OPD . Todas las lecturas fueron realizadas a 450nm utilizando un lector de placa Tecan Elisa (Tecan, Manneford, Suiza).
Estas pruebas indican que la solución de la invención tiene capacidad para reducir el reconocimiento d~ los alérgenos Fel D 1, Der PI y Bet v la. La tabla 1 ofrece
5 los niveles de detección de los principales alérgenos en ng/ml, una vez aplicado el tratamiento.
Tabla 1 -Niveles de Detección (ng/rnl) Fel D 1 Der P 1 Bet v 1 a Réplica 1 0,97 6,76 3,94 Réplica 2 4,30 2,88 16,15 Réplica 3 2,22 9,36 3,59 Media 2,50 6,33 7,89
10 La eficacia de la interferencia sobre el reconocimiento sobre dichos alérgenos fue calculada utilizando la siguiente fórmula:
15 Eficiencia de la interferencia (l) = IDO -[(Cantidad
media de alérgeno reconocida en la réplica / cantidad media de alérgeno reconocida en la réplica control con PES) *1001
20 Tabla II -Eficiencia de la interferencia (%) Fel D 1 Der P 1 Bet v 1 a Réplica 1 97,30 86,93 95,15 Réplica 2 88,08 94,83 78,86 Réplica 3 93,76 83,77 95,44 Media 93,04 88,51 99,92
La media global de la eficiencia de la interferencia en el reconocimiento de los alérgenos es entonces de
acuerdo con la tabla Ir, de 90,46% (DS 6.33). De forma que la composici6n de la invención cumple con uno de sus
objetivos
principales resultando en un producto
altamente
eficaz en la neutralización de los alérgenos
más
representativos.
En cuanto al 2° objetivo, se pretende determinar si la exposición de los alérgenos a la solución de la invención cuando se encuentran sobre superficies textiles interfiere en el reconocimiento del alérgeno por los anticuerpos específicos.
En los ensayos se han utilizado los siguientes tejidos: Algodón 1 (100% algodón), Algodón Ir (100% algodón -más fino que Algodón 1), Algod6n-polyester 111 (70% algodón , 30% polyester) .
Se añadieron piezas de los tejidos especificados (5 cm x 5 cm) en tubos falcon de 50 mI con tapa adhesiva. Se colocó una alicuota de alérgeno en el tej ido (20 1..11 de PBS con Con 500ng de Bet v1a, 10 J..ll de PBS con 100ng de natural Der PI o 20 J..ll de PBS con 35ng de natural Fel O
1. Se permit i6 que los a1érgenos se fijaran a la pieza durante 15 mino Para cada réplica se dispararon dos sprays a unos 10 cm de distancia permitiendo que se secaran durante 15 min. Se retiraron las piezas de tela de los tubos y se incubaron en 2ml de PBS para eluir los alérgenos del tejido durante 20 mino Se realizaron las incubaciones en tubos rotatorios a temperatura ambiente. Después se usaron 100 J..ll para determinar la reactividad alergénica vfa un kit sándwich especifico de ELISA
(Indoor Technologies, EL-BVl Para Bet v1 a, EL-DP1 para
Der
P 1 Y EL-FDl para Feld DI). La determinación de
alérgenos
fue realizada por un primer recubrimiento de
placas
ELISA durante 15h a 4 oC con 100 III de 50rnM de
búfer carbonato-bicarbonato (PH 9,6) con anticuerpos específicos en una dilución 1:1000. Se realizó tres lavados con PBS-O,l% Tween-2Q (PSB-T). Se bloqueó las cajas con PBS-2,5t BSA durante 90 min a temperatura ambiente. Se cargó 100 pl de cada réplica de incubación en cada caja y se mantuvo lh a temperatura ambient~.
Se analizó por triplicado cada réplica. Para cada solución testada se incluyó una réplica de control sin proteínas alergénicas. Las caj as se lavaron tres veces con PBS-T e incubadas lh a temperatura ambiente con 100 111 de PBS-T-l% BSA con anticuerpos biotinilados contra el alérgeno de estudio en una dilución 1:1000. Se lavó nuevamente las cajas tres veces con PBS-T. Se cargó en cada caja 100 ~l de PBS-T-1% BSA conteniendo avidin-HRP en una dilución 1: 1000 y se incubó durante 30 min a temperatura ambiente.
Tras este tiempo, se añadió 50 ~l de una solución 70mM citrato-Fosfato (pH 4,2) con OPD y H~O~ a cada caja y se realizaron lecturas de la placa a los 5, 10 Y 15 mino Todas las lecturas se realizaron a 450nm utilizando un lector de placas Tecan Elisa (Tecan, Mannedorf, Suiza). Para cada solución química se determinó también la cantidad de señal inespecífica en ausencia de proteína alérgica. La concentración de alérgeno específicamente reconocida en cada réplica fue corregida después de eliminar la señal inespecífica obtenida para cada tipo de solución qu1mica". Para cada experimento, en cada
réplica de incubación, se realizaron 3 medidas. Las tablas muestran los valores medios de estos tres experimentos independientes.
5 Tabla 111-Niveles de Detecci6n (ng/mll
Feld D 1 De, P 1 Bet V 1 a
11 111 11 111 11 111 Réplica 1 1,77 0,64 1,55 13,98 16,07 7,17 0,69 0,00 1,26 Réplica 2 2,00 1,66 1,63 13,42 18,04 10,23 0,00 0,00 0,00 Réplica 3 1,94 2,06 1,70 13,33 15,92 13,31 0,00 0,02 0,45 Media 1,90 1,45 1,63 13,58 16,68 10,24 0,23 0,01 0,57
La eficacia de la interferencia sobre el reconocimiento sobre dichos alérgenos fue calculada utilizando la
10 siguiente fórmula:
Eficiencia de la interferencia (tJ = 100 -{(Cantidad de alérgeno en una réplica / cantidad de alérgeno en la 15 réplica control con PBSJ*100J
Tabla IV -Eficiencia de la interferencia (%)
Feld D 1 DerP 1 BetVla
11 111 11 111 11 111 Réplica 1 84,89 91,81 82,15 39,98 35,06 14,16 99,08 100,00 92,63 Réplica 2 83,02 77,87 80,53 33,12 23,75 -33,62 100,00 100,00 100,00 Réplica 3 79,36 74,60 76,87 26,08 21,85 -79,31 100,00 99,97 97,65 Media 82,42 81,43 79,85 32,73 26,89 -32,92 99,69 99,99 97,76
Los resultados presentados en las tablas 111 y IV 20 muestran eficacias elevadas, 81,23% para Fel 01 o 99,15%
para Bet V la en 109 tres tipos de tejidos. En cambio, el resultado es bajo o negativo para Der P 1 debido a una limitación técnica en el proceso de recuperación.
A partir de estos estudios se puede concluir que la concentración de alérgeno Der p 1 recuperado en PBS depende del tipo de tejido sobre el que se ha absorbido el alérgeno. El porcentaje de recuperación de Der p 1 a partir de (1), (II) y (III) es 41\, 46% Y 15%, respectivamente. Teniendo en cuenta los valores medios de estps experimentos, el uso del producto en Der Pl previamente absorbido a 111 produjo un aumento de los niveles de detección de Der p 1 después de lavar las piezas de tej ido en comparación de cuando se aplica el control de PBS en vez del producto de la invención.
Esta observación podría explicarse por el hecho de que estas soluciones químicas pueden promover la elución de Der pIde 111 en comparación al control, enmascarando asi la actividad de interferencia de estas soluciones de productos químicos. De hecho, a partir de los datos obtenidos mediante el uso de PBS después de la absorción, llegamos a la conclusión de que Der p 1 muestra una tendencia a adsorberse mejor a 111 que a 1 y
11. Si este alérgeno, en particular, se eluye de manera más eficiente de 111 cuando la pieza de tela ha sido rociada con ciertas soluciones quimicas (en comparación con PBS), es posible que se obtenga un aumento de la concentración de alérgeno después del lavado en comparación con la cantidad de alérgeno obtenido cuando se incubó con PBS.
Cuando se toma una medición de la capacidad de los anticuerpos específicos para reconocer el alérgeno, el aumento de la concentración de alérgeno en la solución puede contrarrestar el efecto de interferencia de las soluciones químicas y esto explica tanto la alta variabilidad en los experimentos realizados con II! y el aumento de las lecturas de detección de alérgenos cuando se utilizan ciertas soluciones.
De las pruebas efectuadas, resumiendo las enseñanzas de los cuadros anteriores, puede concluirse que la composición de la invención es un agente con no menos de un 90% de eficacia en la neutralización de los alérgenos domésticos más habituales: alérgenos de los ácaros del polvo, de gatos y el polen.
El efecto de la composición de la invención aplicada a telas depende de la naturaleza de las mismas, al tipo de
tejido.
En general, su eficacia ronda de promedio el
90%,
siendo un dato variable en función del tipo de
superficie,
si bien en los tejidos de polyester su
efecto
no ha podido ser claramente determinado.
La composición preferente de la invención ha sido contrastada en su eficacia biocida con l os criterios establecidos en las normas europeas para la evaluación de los productos desinfectantes. El producto cumple con la norma UNE EN 13697 utilizada para evaluar la eficacia bactericida y fungicida de los desinfectantes. También cumple con 'la norma UNE EN 14476 para la evaluación de la eficacia virucida de 109 desinfectantes. Para el producto de nuestra invención, se reporta una eficacia virucida a los 5 min de aplicación. Por ejemplo, se reporta que la composición de la invención es eficaz en más del 99,99% a los 5 min de aplicación contra el virus Influenza A (HINl).
El principal solvente de la formulaci6n de la invención
es
el agua, pues se trata de una solución acuosa. La
proporción
en peso de agua des tilada sobre el total es
de
aproximadamente entre el 85 y el 93%.
Otros solventes utilizados están dentro del grupo de los alcoholes de bajo peso molecular, con poco número de carbonos. La invención incluye en la formulación de su realización preferente, etanol e isopropanol. Estos elementos facilitan además el secado rápido de la composición de la invención. Sus proporciones en peso del total son de aproximadamente entre el 6 y el 8% del total para el etanol yen aproximadamente entre 0,5 y 2% para el isopropanol.
El producto de acuerdo a la composición de la presente invención se aplica, de acuerdo a la técnica conocida, de forma preferente mediante un spray que obtiene una pulverización extrafina que produce pequeñas gotas de producto que se secan muy rápido. Se pulveriza a 30 cm, aproximadamente, de las superficies, telas, etc., hasta humedecerlas ligeramente. Luego basta con dejar secarlas libremente o ventilando la habitación. En caso de tejidos resistentes puede repetirse varias veces la aplicación para asegurar el resultado.
La utilización de microparticulas, es decir, el hecho de
que la expedición preferente del producto mediante spray utilice micropartículas o microgotas de agua para su _aplicación, favorece un efecto de impregnación del polvo y de los alérgenos a él vinculados que aumentan su peso conjunto, dificultándose su fácil suspensión en el aire. Además el efecto agregativo de las gotas, favorecido por el tensioactivo utilizado en la composición, aumenta esta fijación al vincular unas partículas de polvo con otras próximas.
Como que la utilización del producto de la invención es principalmente el ámbito doméstico, no s610 la apariencia del producto, incoloro y acuoso, debe inspirar confianza en el usuario, sino que esta confianza es influida también por el olor. Un producto de olor nauseabundo difícilmente será de aplicación en nuestros hogares y principalmente en nuestros dormitorios, afectando almohadas, colchones y alfombras.
En consecuencia la invención incluye perfumes para mej orar la fragancia del compuesto, con objeto de que este sea de olor agradable e incremente la sensación de frescor y limpieza tras su aplicación. Se incluyen
perfumes,
dentro de los conocidos de la técnica, en una
proporción
de aproximada mente entre el 0,1 Y el 1% del
peso
total.
El producto fue sometido a pruebas de olor ante 1S expertos. Las intensidades del perfume y del mal olor fueron evaluadas según una escala de 1 a 9, el olor más fuerte "sin olor"=1, "olor tipo cocina"=6, etc. Como control se utilizó un olor de referencia "tipo cocina".
En placas Petri se colocaron 29 de perfume base y lpl de Réplica de mal olor. Cada Réplica de olor o producto perfumado fue introducida en una bolsa de plá.stico que fue dejada en reposo para equilibrarse durante un periodo mayor a 16h.
Estas pruebas reportaron un funcionamiento grado 1, "sin olor" y grados entre 5 y 6 de intensidad de perfume, tanto en las pruebas directas, como en textiles en los que nuevamente se habían agregado malos olores.
La invención, en consecuencia, de acuerdo con lo expuesto anteriormente cumple con todos los obj etivos inicialmente previstos, configurándose como un producto desinfectante y antialergénico altamente eficaz, concebido para su utilización doméstica en un spray, los resultados de cuya aplicaci6n son de efecto rápido sobre las superficies de aplicaci6n, manteniéndose sobre dichas superficies tratadas un efecto residual de duración prolongada. Aplicabl e tanto sobre superficies duras como muebles, mesas, etc. , sobre superficies blandas como almohadas, sábanas, telas, etc., e incl uso sobre superficies y objetos de dificil lavado a máquina y/o que incorporan hilos, como cortinas, tapicerias, alfombras, etc.

Claims (10)

  1. REIVINDICACIONES
    1.
    -COMPQSICION DESINFECTANTE Y ANTIALERGENICA, de utilización para todo tipo de superficies, tanto duras como blandas, incluyendo tej idos de tipo tej ido y no tejido, incluso tejidos y objetos con hilos como mantas, alfombras, etc., CARACTERIZADA por estar formada
  2. 2.
    -COMPOSICION DESINFECTANTE y ANTIALERGENICA, según la reivindicación anterior, CARACTERIZADA por estar formada principalmente por Cloruro de Didecil Dimetil Amonio, el copolimero vinyl Caprolactam (Copol ímero Dimetilaminoetil Metacrilato) yagua.
    principalmente
    por una solución acuosa de un
    tensioactivo
    cati6nico biocida, dentro del grupo de los
    amonios
    cuaternarios, y un polímero formador de
    película.
  3. 3.-COMPOSICION DESINFECTANTE y ANTIALERGENICA, según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, CARACTERIZADA porque dicho amonio cuaternario está incluido en la composición en aproximadamente entre 1,5 y 3% en peso, y más en concreto en aproximadamente 2% del peso total.
    4,-COMPOSICION DESINFECTANTE y ANTIALERGENICA, según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, CARACTERIZADA porque dicho copolímero formador de film está presente en la composición en aproximadamente entre 0,28 Y el 0,42\ del peso total.
  4. 5.-COMPOSICION DESINFECTANTE y ANTIALERGENICA, según
    una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, CARACTERIZADA porque dicha composici6n es efectiva de acuerdo con el test protocolo ELISA en aproximadamente no menos del 90% en la neutralización de alérgenos.
  5. 6.-COMPOSICION DESINFECTANTE y ANTIALERGENICA, según
    una
    cualquiera de las reivindicaciones anteriores,
    CARACTERIZADA
    porque dicha composición es efectiva de
    acuerdo
    con el test protocolo UNE EN 13697 como
    bactericida tras eliminar el 99,99% de bacterias tras 5 mio de la aplicación de la composición; y es fungicida tras eliminar el 99,9% de los hongos tras 15 min de la aplicación.
  6. 7.-COMPOSICION DESINFECTANTE y ANTIALERGENICA, según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, CARACTERIZADA porque dicha composición es virucida de acuerdo con el test protocolo UNE EN 14476, e liminando por ejemplo el virus Influenza A (H1N1) en más del 99,99% tras los S minutos de aplicación.
  7. 8.-COMPQSICION DESINFECTANTE y ANTIALERGENICA, según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, CARACTERIZADA porque dicha composición incluye además de agua alcoholes como solventes.
  8. 9.-COMPOSICION DESINFECTANTE y ANTIALERGENICA. según una cualquiera de las reivindicaciones anteri ores, CARACTERIZADA porque la proporción en peso de agua destilada sobre el total es de aproximadamente entre el 85 y el 93%.
  9. 10. -COMPOSICION DESINFECTANTE y ANTIALERGENICA, según una cualquiera de las reívindicaciones anteriores, CARACTERIZADA porque dichos alcoholes son el etanol y el alcohol isopropilico o isopropanol; siendo sus
    5 proporciones en peso del total de aproximadamente entre el 6 y el 8% del total; y el isopropanol en aproximadamente entre 0,5 y 2%.
  10. 11. -COMPOsrCION DESINFECTANTE y ANTIALERGENICA, según
    10 una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, CARACTERIZADA porque incluye perfumes; siendo su proporción en aproximadamente entre el 0,1 Y el 1% del peso total.
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