ES2300338T3 - Procedimiento para la preparacion de acido polilactico y dispositivo correspondiente. - Google Patents
Procedimiento para la preparacion de acido polilactico y dispositivo correspondiente. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2300338T3 ES2300338T3 ES01940346T ES01940346T ES2300338T3 ES 2300338 T3 ES2300338 T3 ES 2300338T3 ES 01940346 T ES01940346 T ES 01940346T ES 01940346 T ES01940346 T ES 01940346T ES 2300338 T3 ES2300338 T3 ES 2300338T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- lactic acid
- dilactide
- fermentation
- fermenter
- installation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
- C08G63/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a carboxylic ester link in the main chain of the macromolecule
- C08G63/78—Preparation processes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
- C08G63/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a carboxylic ester link in the main chain of the macromolecule
- C08G63/02—Polyesters derived from hydroxycarboxylic acids or from polycarboxylic acids and polyhydroxy compounds
- C08G63/06—Polyesters derived from hydroxycarboxylic acids or from polycarboxylic acids and polyhydroxy compounds derived from hydroxycarboxylic acids
- C08G63/08—Lactones or lactides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M29/00—Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
- C12M29/04—Filters; Permeable or porous membranes or plates, e.g. dialysis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M29/00—Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
- C12M29/18—External loop; Means for reintroduction of fermented biomass or liquid percolate
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M39/00—Means for cleaning the apparatus or avoiding unwanted deposits of microorganisms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M45/00—Means for pre-treatment of biological substances
- C12M45/09—Means for pre-treatment of biological substances by enzymatic treatment
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M47/00—Means for after-treatment of the produced biomass or of the fermentation or metabolic products, e.g. storage of biomass
- C12M47/10—Separation or concentration of fermentation products
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
- C12P7/56—Lactic acid
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/62—Carboxylic acid esters
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Polyesters Or Polycarbonates (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
Procedimiento para la preparación de ácido poliláctico con los siguientes pasos: a) obtención de ácido láctico por fermentación a partir de productos agrícolas amilíferos, para lo cual éstos se someten a una hidrólisis del almidón y donde la sustancia sólida restante que se produce durante la hidrólisis del almidón se somete adicionalmente a una extracción alcalina y el extracto de proteína obtenido se conduce al fermentador como fuente de sustancia de crecimiento, b) purificación intensa del ácido láctico mediante ultrafiltración, nanofiltración y/o electrodiálisis, c) concentración del ácido láctico y preparación de un prepolímero, d) despolimerización ciclante para formar dilactida, e) purificación de la dilactida, f) polimerización de apertura de anillo de la dilactida, g) desmonomerización de la dilactida.
Description
Procedimiento para la preparación de ácido
poliláctico y dispositivo correspondiente.
La invención se refiere a un procedimiento para
la preparación de ácido poliláctico a partir de ácido láctico
obtenido por fermentación, empleándose como materia prima productos
agrícolas amilíferos, preferentemente cereales. La invención se
refiere además a un dispositivo para la realización de este
procedimiento.
La preparación de ácido poliláctico
(polilactida) ha sido descrita diversas veces. Las bacterias del
ácido poliláctico necesitan para su crecimiento no sólo vitaminas
sino principalmente sustancias que contengan nitrógeno, tales como
aminoácidos y péptidos. Como fuente para estas sustancias se han
acreditado el extracto de levadura y la peptona. La fórmula de la
solución de cultivo propuesta sobre esta base por J.C. De Man et
al. (J. Appl. Bacteriol. 23 (1960), 130-135) se
viene utilizando desde entonces en todos los laboratorios del mundo
para el cultivo de bacterias de ácido láctico. Para el
abastecimiento de concentraciones de células > 10 g/l es sin
embargo necesario incrementar notablemente la proporción de
extracto de levadura y peptona en el medio (Amrane, A. et
al.: World J. Microbiol. Y Biotechnol. 14 (1998), x - y). Por
este motivo, ambas sustancias empleadas se convierten en factores de
coste en aplicaciones técnicas. En una planta de producción continua
con retención de células, el gasto por extracto de levadura puede
suponer por sí solo hasta un 38% de los costes de explotación
(Tejayadi, S. y Cheryan, M.: Appl. Microbiol. Biotechnol. 43 (1995),
242-248). Una posibilidad para reducir los costes
se contempla en el hecho de que en un proceso de dos etapas se
emplee primero una solución de cultivo rica en sustancias de
crecimiento y después una pobre en sustancias de crecimiento
(Olmos-Dichara, A. et al.: Biotechnol. Lett.
19(1997), 709-714). Sin embargo la mejor
alternativa a este respecto es la sustitución de las costosas
preparaciones de extracto de levadura y peptona por fuentes de
sustancia de crecimiento más económicas. En la bibliografía se
proponen para esto entre otros un concentrado de proteína de suero
de leche (Bury, D. et al.: Int. Dairy J. 8(1998),
149-151) y un autolisado de levadura de cerveza
(Selmer-Oisen, E. et al.: Milchwissenschaft
53(1998), 367-370). Shamala, T.R. et
al. (Enzyme Microb. Technol. 9(1987),
726-729) lograron resultados satisfactorios en la
gama de productividad baja de fermentaciones discontinuas con
hidrolizados de salvado de trigo. El empleo de extractos de salvado
de trigo neutros no hidrolizados en cambio condujo a resultados
considerablemente peores. También se han investigado los
hidrolizados de harina de trigo en cuanto a su aptitud como fuente
de sustancia de crecimiento (Hofvendahl, K. et al.: Enzyme
Microbial Technol. 20(1997), 310-307). Pero
allí se vio que para conseguir unas productividades elevadas era sin
embargo necesaria la aportación de extracto de levadura.
En un procedimiento de fabricación (PCT WO
98/28433) se introduce proteína de leche en el fermentador y allí
se hidroliza con ayuda de proteasas. En otro procedimiento (PCT WO
98/212611) se emplean como fuente de sustancia de crecimiento agua
de remojo de maíz y filtrado de gluten de cereal, pero que exige
añadir peróxido de hidrógeno para neutralizar la proporción de
SO_{2} allí contenida.
En otro trabajo (Payot, T. et al.: Enzyme
Microb. Technol. 24 (1999), 191-199) se emplea para
la sustitución parcial del extracto de levadura un extracto
bacteriano de la biomasa del Bacillus coagulans. Para este
fin, una vez terminada una fermentación por lote, se separan
mediante centrifugación las células de bacterias que se hayan
formado, se lavan y se destruyen en un molino de bolas. El
homogeneizado obtenido se hidroliza a continuación durante 2 horas
a 90ºC con adición de ácido sulfúrico 6 n, a continuación se
neutraliza con solución de amoníaco 6 n y se libera de partículas
sólidas mediante centrifugado. La solución se convierte en un
concentrado mediante secado por pulverización.
Esta forma de proceder entraña el inconveniente
de que además de la fermentación se necesita un proceso
independiente para la preparación del extracto de bacterias, y
porque en la forma de proceder indicada pasan al medio de
fermentación a través del extracto cantidades importantes de iones
sulfato y iones amonio, que durante la conversión en ácido láctico
de alta pureza se tiene que volver a eliminar de éste aplicando
medidas complejas.
El documento US 5 247 059 describe un
procedimiento para la preparación de lactida purificada y polímeros
de lactida. De acuerdo con la patente US antes mencionada se parte
de ácido láctico que ha sido obtenido de la fermentación y este
ácido láctico se superconcentra en un evaporador para obtener ácido
láctico del 85%. A continuación se forma un prepolímero y el ácido
poliláctico obtenido con un peso molecular de 100 a 5000 se
introduce en un reactor de lactida, con lo cual se obtiene lactida
como producto bruto. Esta lactida se purifica (> 99%) y se
somete a continuación a una polimerización de apertura del
anillo.
El inconveniente de este proceso es que se parte
de un ácido láctico de solamente un 15%, y porque el peso molecular
que se puede alcanzar con este procedimiento es todavía
insuficiente.
Javanainen et al. describen en
Biotechnology Techniques 1995, 9, 543-548 la
preparación de ácido láctico por fermentación a partir de harina de
cebada agrícola amilífera. Para ello se hidroliza harina de cebada
con harina de cebada que contenga glucoamilasa y
\alpha-amilasa. A continuación la harina de cebada
hidrolizada se emplea como medio para la preparación de ácido
láctico por fermentación mediante un cultivo mixto que contenga
Lactobazillus amylovorus y L. casei. En este
procedimiento no se necesitan otras sustancias aditivas tales como
nitrógeno, vitaminas o minerales.
Hofvendahl et al. describen en Microbiol.
Bitechnol. 1999, 52, 163-169 la preparación de ácido
láctico por fermentación a partir de harina de trigo agrícola
amilífera. Para ello se hidroliza harina de trigo con
\alpha-amilasa y amiloglucosidasa y se peptoniza
con una proteasa. La harina de trigo tratada se emplea a
continuación como medio para la preparación de ácido láctico por
fermentación. Aquí la harina de trigo contiene proteínas, vitaminas,
lípidos, minerales y almidón. No se necesitan otros aditivos. Es
ventajoso realizar la hidrólisis y la fermentación por separado.
Otro procedimiento para la preparación de ácido
poliláctico partiendo de una preparación que contenga ácido láctico
se describe en la memoria de Patente US-A 5.357.035.
El procedimiento comprende una superpurificación y concentración
del ácido láctico, la preparación de un prepolímero, la
despolimerización ciclante, la purificación del lactida y la
polimerización de apertura de anillo del lactida para la preparación
de ácido poliláctico.
También se da a conocer en el documento DE 195
37 365 C1 un procedimiento para la estabilización de la viscosidad
de fusión de homopoliésteres o copoliésteres alifáticos o
aromáticos - alifáticos que contengan como catalizador o iniciador
compuestos de estaño, titanio y/o zirconio, donde en la masa fundida
que se forma durante la síntesis o el reacondicionamiento de los
poliésteres aparece un medio de enmascaramiento que contiene un
compuesto de por lo menos un anillo tropolón.
En otro procedimiento (DE 196 284 72) se
describe la preparación de poliésteres alifáticos y/o copoliésteres
mediante una polirreacción de por lo menos un monómero del grupo de
los láctidos, lactonas, carbonatos cíclicos y anhídridos
cíclicos.
Partiendo de esto, el objetivo de la presente
invención es proponer un nuevo procedimiento y un dispositivo
correspondiente mediante el cual se pueda preparar de forma continua
y con alto rendimiento polilactida de un elevado peso
molecular.
Este objetivo se resuelve por las propiedades
caracterizantes de la reivindicación 1, y en lo referente al
dispositivo por las propiedades caracterizadoras de la
reivindicación 20.
De acuerdo con la invención se obtiene por lo
tanto la polilactida biodegradable por polimerización del dímero
cíclico del ácido láctico. El ácido láctico procede de un proceso de
fermentación cuyo material de partida son productos agrícolas
amilíferos, en particular cereales, sometiéndose éstos a una
hidrólisis del almidón y sometiendo adicionalmente la sustancia
sólida residual que se produce durante la hidrólisis del almidón a
una extracción alcalina e introduciendo en el fermentador como
fuente de materia de crecimiento el extracto de proteína
obtenido.
Por lo tanto el proceso se compone de una parte
de técnica de proceso biológico con hidrólisis, fermentación y
purificación del ácido láctico mediante técnica de membrana y de una
sección comparable a procesos de polimerización.
La materia de partida es harina de cereal, en
particular harina de centeno, o más exactamente, el almidón
contenido en ésta. El almidón hidrolizado se degrada enzimáticamente
formando glucosa y se fermenta para obtener ácido láctico acuoso.
El ácido láctico a continuación se ha de purificar y concentrar
antes de poderlo policondensar para formar un primer prepolímero.
Este prepolímero se despolimeriza en condiciones adecuadas para
formar la materia de partida propiamente dicha de la
polimerización, el dímero cíclico del ácido láctico (dilactida).
Bajo la influencia de un catalizador (p.ej.
octoato de estaño) y sirviéndose de los grupos hidroxilo que actúan
como centros de iniciación se puede polimerizar entonces el lactida
para formar polilactida. La calidad del polímero depende sin
embargo decisivamente de la pureza del dilactida empleado, por lo
que es preciso que antes de proceder a la polimerización de
apertura de anillo se realice una purificación rectificativa del
dilactida.
La subsiguiente desmonomerización de la masa
fundida de polilactidaa está destinada a impedir procesos precoces
de degradación en el producto final.
El elemento esencial de la invención es la
obtención de ácido láctico de alta pureza mediante una fermentación
continua de alto rendimiento. A continuación se describe esta parte
del procedimiento con mayor detalle.
Al comienzo del proceso se encuentra la mezcla
de harina de cereal, preferentemente harina de centeno, y agua
desionizada. Esto se puede hacer en un sencillo cubo con agitador.
Es importante agitar cuidadosamente y evitar temperaturas altas del
agua ya que en caso contrario el vapor de agua ascendente podría
formar con la harina engrudo o grumos. De acuerdo con la práctica
actual era imprescindible que durante la fermentación continua de
alto rendimiento se añadieran cantidades considerables de fuentes
externas de sustancias de crecimiento, preferentemente peptona y
extracto de levadura. Los costes relacionados con ello hacen
cuestionable la rentabilidad de tales procedimientos. Además, con
la adición de tales fuentes se incorporan sustancias ajenas
molestas, p.ej. iones extraños (en particular cloruros), que
dificultan notablemente la purificación mediante procesos de
separación por membrana del lactato sódico formado o del ácido
láctico, y además, si la purificación es insuficiente, reducen la
obtención de polilactidaa en un proceso subsiguiente de
polimerización hasta hacerlo irrentable. En contra de la práctica
actual, de acuerdo con el procedimiento objeto de la invención no se
emplea en el paso a) del proceso ninguna fuente de sustancia de
crecimiento externa tal como extracto de levadura o peptona, sino
que la fuente de sustancia de crecimiento se obtiene del mismo
material de partida, es decir del cereal. Las sustancias de
crecimiento (péptidos, aminoácidos, vitaminas, sales) que necesitan
las bacterias del ácido láctico durante la fermentación, además de
una fuente de carbono aprovechable, proceden por lo tanto de
acuerdo con la invención del material de partida.
\newpage
Sorprendentemente se ha encontrado que los
extractos de proteína alcalinos procedentes de harina de cereal o
salvado de cereal ya representan un sustituto de pleno valor para la
peptona o el extracto de levadura, si se renuncia a una disociación
hidrolítica mediante proteinazas. El efecto se puede intensificar
más por el hecho de que el excedente de biomasa formado en el
proceso se someta a una lisis controlada, con lo cual determinadas
sustancias de crecimiento esenciales vuelven a quedar liberadas o se
liberan adicionalmente. De este modo, en las fermentaciones de alto
rendimiento se puede renunciar totalmente a la peptona así como
también al extracto de levadura.
Si se emplea cereal como materia prima se puede
acoplar la extracción de proteína con el proceso de hidrólisis del
almidón. Existe la posibilidad de emplear una cantidad parcial de la
harina o del salvado para la obtención del extracto, y aportar la
fracción de almidón restante en la fase de licuado de la hidrólisis.
Una alternativa de esto es la extracción alcalina del residuo de
materia sólida que se produce generalmente durante la hidrólisis
del almidón, que se separa del hidrolizado.
La lisis de una parte de la biomasa que se
encuentra en el sistema de fermentación deberá efectuarse lo más
íntegramente posible y de modo que con ello no se produzca ningún
daño en la fracción de células activas que se necesitan para
mantener el proceso de fermentación. Para ello se conduce una parte
de la biomasa procedente del fermentador a un circuito donde se
somete a lisis y el lisado obtenido se devuelve nuevamente al
fermentador. Además existe la posibilidad de separar el exceso de
biomasa y lisarlo fuera del sistema de fermentación, devolviendo al
sistema de fermentación el extracto así obtenido.
El ácido láctico obtenido de este modo se somete
a continuación a una purificación intensa, tal como ya se ha
expuesto inicialmente, y a continuación se reconcentra y somete a la
polimerización.
La invención se refiere además al
correspondiente dispositivo para realizar el procedimiento.
La invención se describe a continuación con
mayor detalle sirviéndose de figuras y ejemplos de realización.
Las figuras muestran:
Fig. 1 el esquema de la producción de extracto
de proteína a partir de harina de cereal/cereal molido,
Fig. 2 el esquema de la producción de extracto
de proteína a partir de residuos de la hidrólisis del almidón,
Fig. 3 esquema del proceso de la fermentación
continua con producción de extracto de bacterias,
Fig. 4a y b Desarrollo esquemático del proceso
de un dispositivo completo para la producción de polilactidaa,
Fig. 5 crecimiento de Lactobacillus
rhamnosus 4759 en un medio MRS sin peptona con adición de
extracto alcalino de proteína de centeno (2) en comparación con el
crecimiento en un medio MRS (1) y en un medio MRS sin peptona
(3),
Fig. 6 crecimiento de Lactobacillus
rhamnosus 4758 en un medio MRS sin extracto de levadura, con
adición de extractos de bacterias de diversas concentraciones
(producidos a partir de suspensiones de células con contenidos de
biomasa seca de 15,7 g/l (3) ó 78,4 g/l (2) en comparación con el
crecimiento en un medio MRS (1) y en un medio MRS sin extracto de
levadura (4),
Fig. 7 concentraciones de sustrato y de producto
de una fermentación por lotes de Lactobacillus paracasei
160111 sobre hidrolizado de harina de centeno con adición de
extracto de proteína de harina de centeno y extracto de bacterias
de biomasa propia.
La Figura 1 muestra esquemáticamente la
producción de extracto de proteína a partir de harina de cereal y
cereal molido. Según esto, una cantidad parcial de la harina o del
cereal molido se conduce directamente a la extracción alcalina para
la obtención de extracto, y el extracto de proteína obtenido se pasa
a continuación al fermentador para su fermentación. Para esto se
prefiere que entre una décima parte y la mitad, preferentemente una
cuarta parte de la harina de cereal se dedique a la extracción
alcalina y el resto se emplee para la hidrólisis del almidón.
Una alternativa de esto es la extracción
alcalina de la sustancia sólida residual que generalmente se produce
durante la hidrólisis del almidón, que se separa del hidrolizado
(Figura 2).
La Figura 3 muestra un esquema de un proceso de
fermentación continua con producción de extracto de bacterias. En
un sistema de fermentación que se compone de un fermentador F y de
un módulo de ultrafiltración U situado en un circuito exterior, se
retiene la biomasa y se va enriqueciendo paulatinamente en el
sistema. Dado que para una producción efectiva de ácido láctico es
necesario mantener una concentración óptima de la biomasa activa,
se ve uno normalmente obligado a prever además de la salida de
filtrado B1 también una segunda salida B2. Esta última sirve para
retirar del fermentador el exceso de masa celular. Este segundo
flujo de sustancia de salida se utiliza de acuerdo con la invención
para la obtención de extracto celular, para lo cual se pasa por una
etapa de hidrólisis térmica T donde se destruyen las células por
termólisis. El lisado se devuelve entonces al fermentador una vez
enfriado. Existe además la posibilidad de añadirle enzimas lisantes
a este flujo de bacterias antes del tratamiento térmico o realizar
la lisis sirviéndose de radiación, en particular radiación de
microondas.
La forma de proceder conforme a la invención
ofrece al mismo tiempo también una nueva posibilidad para mantener
en un nivel óptimo constante la concentración de la biomasa activa
en el reactor, si mediante sistemas de regulación adecuados (p.ej.
mediante un sensor de enturbiamiento adecuado) se procura que por
unidad de tiempo se efectúe justamente la lisis de una cantidad de
biomasa igual a la que se ha incrementado por crecimiento durante
el mismo período de tiempo. En este caso, antes de devolver el flujo
de lisado al fermentador se libera de los componentes de sustancia
sólida restantes de la fermentación, p.ej. mediante filtración.
La Figura 4 muestra esquemáticamente el
desarrollo del proceso de la fabricación.
Al comienzo del proceso se encuentra en una
unidad mezcladora la mezcla de harina de cereal, preferentemente
harina de centeno. De acuerdo con la invención se dedica por lo
tanto una parte, preferentemente aproximadamente una cuarta parte
de la suspensión así formada, a la extracción continua de proteína
11, y aproximadamente tres cuartas partes fluyen directamente al
dispositivo de hidrólisis 2. Ésta puede estar realizada de modo
discontinuo o continuo. En el caso discontinuo trabaja en régimen
quasi continuo mediante contenedores tampón antepuestos y
pospuestos.
La hidrólisis es un proceso enzimático en dos
etapas. En la primera etapa se licua el almidón durante 2 horas a
80ºC con adición de la endoenzima \alpha-amilasa.
A continuación tiene lugar la disociación del almidón hidrolizado
sirviéndose de la hexoenzima glucoamilasa, a 55ºC. El segundo paso
dura aproximadamente 4 horas y se lleva a cabo en una etapa de
reacción independiente. De este modo se consigue la sacarinización
total del almidón contenido en la harina de centeno. Como aparatos
se pueden emplear sencillos tanques agitadores con
calentamiento.
El hidrolizado se separa de sustancias sólidas
en un filtro de presión y se conduce a la fermentación. La biomasa
que ha sido separada es un residuo y se puede aprovechar como
forraje o eventualmente para la producción de biogás.
Durante la extracción de proteína en el
extractor 11 se mantiene la suspensión de harina - agua durante un
período de tiempo de 8 horas en un valor pH 10 mediante la adición
de lejía sódica. De este modo se disuelve la fracción de proteína y
se puede separar como permeado en una ultrafiltración 30
subsiguiente, añadiéndola al fermentador. La torta de filtro se
neutraliza e hidroliza con ácido láctico. La presión y temperatura
corresponden a las condiciones ambientales. Puesto que es necesario
agitar la mezcla, el recipiente debería ser un tanque agitador.
Otras sustancias de crecimiento necesarias tales
como entre otras los aminoácidos y vitaminas se pueden obtener de
la biomasa ultrafiltrada producida durante la fermentación 3
mediante lisis inducida. Esto se lleva a cabo con el dispositivo de
ultrafiltración 12. La lisis inducida puede tener lugar de diversos
modos, en este caso consta de un calentamiento a 95ºC durante 20
minutos en un recipiente calentado. La ultrafiltración separa la
biomasa del extracto celular que vuelve a fluir a la fermentación 3.
La biomasa que se produce vuelve a poder utilizarse como
forraje.
Antes de que lleguen al fermentador 3 el
extracto de sustancia nutriente y el extracto de proteína así como
el hidrolizado se han de esterilizar brevemente (20 minutos) a 120ºC
(temperatura mínima 110ºC) mediante esterilizadores 13. El
hidrolizado y los extractos de sustancia de crecimiento no se pueden
esterilizar juntos con el fin de evitar las llamadas reacciones de
Maillard que tienen lugar a estas temperaturas entre los compuestos
de nitrógeno (proteínas) y la glucosa, que dan lugar especialmente
a una decoloración indeseable. Los recipientes 13 han de estar
diseñados para el tiempo de permanencia y la temperatura adecuados
para la esterilización.
La fermentación representa la etapa del proceso
en la cual tiene lugar la bioconversión de glucosa en ácido
láctico. Esto tiene lugar en las células de bacterias de ácido
láctico de acuerdo con un complicado desarrollo de numerosas
reacciones metabólicas de un solo paso (glicólisis), cada una de las
cuales se cataliza mediante una determinada enzima. Se trata de un
proceso anaerobio en el cual las bacterias forman ácido láctico para
obtener la energía necesaria para su multiplicación. La reacción
microbiana suministra además del ácido láctico también masa celular
y en cantidades muy pequeñas, otros productos.
La actividad de las células bacterianas depende
de una serie de parámetros del proceso (temperatura, valor pH,
osmolaridad, concentración del sustrato, oferta de sustancia de
crecimiento, etc.). Para la cepa elegida de Lactobacillus
paracasei, la temperatura óptima es de 33ºC y el valor pH de
6,0. Para regular el valor pH es necesario añadir lejía sódica. En
estas condiciones el ácido láctico se produce en forma de lactato
sódico. El tiempo de permanencia es normalmente entre hora y media
y cuatro horas (caudal: 0,25 - 0,67). En el fermentador 3 hay que
comprobar que por el interior tenga una superficie lo más lisa
posible, sin rincones, aristas ni ranuras, para que se pueda
realizar de forma sencilla y eficaz la necesaria esterilización
periódica del fermentador (limpieza por vapor de agua). Se necesita
un agitador.
El contenido del fermentador se somete
continuamente a ultrafiltración, produciéndose el lactato sódico
como permeado. El retenido que contiene las células vuelve a fluir
al fermentador 3. Para evitar la concentración de masa celular hay
un segundo flujo de producto que abandona el fermentador 3. El
lactato sódico allí contenido se recupera en otra etapa de
ultrafiltración 31, el retenido que contiene las células no fluye al
fermentador sino a la extracción de sustancia nutriente ya descrita
anteriormente.
En el procedimiento conforme a la invención es
esencial (característica b) la purificación intensiva del ácido
láctico. Esto es necesario porque la salida ultrafiltrada del
fermentador contiene además del ácido láctico en forma de lactato
sódico, otros componentes que especialmente molestan sensiblemente
para la ulterior polimerización e incluso pueden llegar a llevar al
fracaso a todo el proceso. Como sustancias contenidas indeseadas se
pueden citar principalmente ácidos inorgánicos y orgánicos (ácido
acético, ácido propiónico, ácido sulfúrico, ácido clorhídrico) así
como sus sales, mono-, di- y oligosacáridos y colorantes.
Mediante la nanofiltración 15 se trata de
separar en primer lugar los iones cloruro del lactato sódico. Los
iones cloruro se aportan al proceso principalmente con las enzimas
empleadas para la hidrólisis. No solamente molestan notablemente
durante las reacciones de polimerización sino que también atacan
fuertemente los materiales del recipiente. Con la membrana
utilizada se puede retener hasta el 98% de los iones cloruro.
Además de esto se infiltran a través de la
membrana otros iones tales como sulfatos y fosfatos, mientras que
el lactato sódico permanece en el retentato.
La electrodiálisis monopolar 16 es un proceso
discontinuo, igual que la bipolar. Para posibilitar a pesar de ello
una producción continua de ácido láctico se trabaja alternando con
dos instalaciones de diálisis.
La electrodiálisis monopolar se emplea por dos
motivos:
1. Separación de los componentes
no-iónicos de los iónicos, y
2. Concentración del lactato sodio.
Forman especialmente parte de los componentes
no-iónicos que se separan del lactatosódico, los
compuestos de nitrógeno y fósforo. Estas sustancias se encuentran
en la gran cantidad de agua residual que se produce e impiden que
esta cantidad de agua se devuelva íntegramente a la hidrólisis y
fermentación. La temperatura y presión son iguales que en las
condiciones ambientales.
Para obtener finalmente ácido láctico del
lactato sódico se emplea una electrodiálisis 17 con membranas
bipolares. La instalación consta de tres circuitos:
\ding{212} un circuito de sal en el que entra
el lactato sódico
\ding{212} un circuito de lejía en el que se
difunden los iones de sodio y se combinan con los iones hidróxido
para formar
{}\hskip0,8cm lejía sódica,
{}\hskip0,8cm lejía sódica,
\ding{212} y un circuito de ácido en el que
los iones lactato se combinan con protones para formar ácido
láctico.
Con el fin de mantener dentro de límites
económicos el consumo de corriente de la electrodiálisis 17 ésta se
conduce de tal modo que no se convierte todo el lactato sódico en
ácido láctico. Esta cantidad residual hay que sacarla fuera del
proceso. La lejía sódica producida vuelve a fluir a la fermentación
para regular allí el valor pH.
La temperatura de las soluciones que están
circulando debería mantenerse constante en 33ºC. Por lo tanto los
recipientes de almacenamiento intermedio se han de refrigerar.
El ácido láctico procedente de la
electrodiálisis bipolar 17 hay que seguir concentrándolo
(característica c). De acuerdo con la invención se lleva a cabo
una concentración del ácido láctico en dos etapas mediante el
evaporador 18, 19. Para ello, el ácido láctico acuoso se lleva
primeramente a ebullición bajo sobrepresión, con lo cual ya se
evapora una gran cantidad del agua. A continuación se puede emplear
este vapor de agua como medio calefactor para seguir expulsando
agua del ácido láctico restante, a una presión más baja. El líquido
que entonces todavía queda se concentra en un evaporador Roberts 20
que lleva colocada una columna de rectificación de tres fondos
formando ácido láctico al 90%, preferentemente al 95% (alta
concentración).
El ácido láctico concentrado se somete ahora a
una policondensación en dos reactores 20, 21 con evaporador de
recirculación exterior y añadiendo un catalizador, para formar un
prepolímero. La condensación previa tiene lugar a dos presiones
diferentes. En el primer reactor 20 reina presión ambiente o incluso
ligera sobrepresión para evitar la evaporación del ácido láctico.
Cuando la mayor parte del ácido láctico ha sido policondensada para
formar un oligómero con punto de ebullición más alto se puede
continuar la reacción en el segundo reactor 21 en vacío (50 mbar).
El vacío aplicado facilita la evaporación del agua de la masa
fundida que se forma durante la reacción y evita por lo tanto que
se llegue a detener la reacción por alcanzar el equilibrio químico.
El tiempo de permanencia en los reactores es de 3 y 4 horas, las
temperaturas son de 180ºC y 190ºC, respectivamente en el primer y
segundo reactor. El prepolímero tiene un peso molecular de 3400
g/mol (2500 - 4000 g/mol).
La despolimerización (característica d)) para
formar el verdadero monómero de la polilactida, la dilactida, tiene
lugar preferentemente en un evaporador molecular por gravedad 7. El
prepolímero se reparte entre varios tubos verticales calentados y
desciende dentro de éstos formando una película delgada. La
temperatura se sube a unos 210ºC y se mantiene la depresión de la
precondensación (5 kPa). La temperatura aumentada acelera la
formación de dilactida, el vacío y la delgada película descendente
(< 1 mm) procuran una evaporación rápida del dilactida formado.
El evaporador molecular por gravedad 7 trabaja como evaporador de
recirculación con el fin de asegurar el humedecimiento completo de
las superficies calentadas.
El flujo de producto en forma de vapor
procedente del evaporador molecular por gravedad se condensa
parcialmente de modo inmediato. La temperatura y presión de la
condensación parcial se eligen para ello de modo que el agua que se
encuentra en el vapor y la parte mayor posible del ácido láctico se
mantengan en forma de vapor. El dilactida se condensa casi en su
totalidad. El condensado contiene sólo cantidades escasas de ácido
láctico y de oligómeros tales como p.ej. ácido lactoilláctico, el
dímero lineal del ácido láctico. En conjunto se obtiene de ahí la
importante concentración de grupos hidroxilo que típicamente es de
57 meq.
Durante la polimerización de apertura de anillo
el peso molecular que se puede alcanzar, y por lo tanto unas
propiedades mecánicas importantes de la polilactida, dependen de la
pureza de la dilactida. Debido al ácido láctico restante y al ácido
lactoilláctico hay grupos hidroxilo en la dilactida. Éstos
representan centros de inicio de la polimerización. Cuanto mayor
sea la concentración de grupos hidroxilo en la dilactida tanto
mayor es el número de moléculas de polímero que se forman y tanto
menor es el peso molecular que se puede conseguir. La concentración
de grupos hidroxilo deseada es de 20 meq, lo cual conduce a un peso
molecular teórico de 50.000 g/mol. La pureza máxima de dilactida
alcanzable con esta columna es de 10 meq.
La concentración de los grupos hidroxilo en la
dilactida sigue siendo demasiado grande después de la
despolimerización ciclidizante. En una columna de rectificación 8
con extracción lateral se depura la dilactida condensada para
obtener la concentración deseada de grupos hidroxilo. Al mismo
tiempo se puede aprovechar la columna para controlar el peso
molecular.
La dilactida impurificada entra por la parte
superior de la columna y la abandona purificada por la parte
inferior como extracción lateral en forma de vapor. El vapor de
dilactida se condensa antes de pasar a los reactores de
polimerización de apertura de anillo. El producto de cabeza (148ºC,
30 mbar) es el ácido láctico restante, encima del sumidero (172ºC,
60 mbar) se extraen los oligómeros del ácido láctico de punto de
ebullición superior así como eventuales otras impurezas existentes.
La columna se hace funcionar desde el punto de vista termodinámico
en vacío (30 - 60 mbar) (evitar temperaturas demasiado altas,
mejorar las volatilidades relativas).
La polimerización por apertura de anillo
(característica f)) tiene lugar en una cascada de tanques agitadores
9 de dos reactores con adición de un catalizador. La concentración
del catalizador se mantiene para ello relativamente reducida (5*10
-5 mol de catalizador/mol de dilactida, intervalo de concentración:
2*10-4 a 2*10-5 mol/mol), para
obtener masas molares elevadas y rechazar reacciones secundarias.
Los reactores se encuentran a la presión atmosférica.
La polimerización de apertura de anillo es una
reacción exotérmica. Para evitar temperaturas superiores a 340ºC
(descomposición térmica, reacciones secundarias) es necesario
evacuar una parte del calor de reacción que se produce. En el
primer reactor esto tiene lugar mediante la alimentación de
dilactida subenfriado: para ello la dilactida se subenfría tanto
que en el primer reactor se ajuste una temperatura de 200ºC. Con un
tiempo de permanencia de 2,5 horas se polimeriza entonces aprox. el
70 por ciento de la dilactida.
El segundo reactor trabaja en régimen adiabático
y el tiempo de permanencia (2 horas) se elige de modo que la
conversión de dilactida sea finalmente del 90 por ciento. Para ello
la temperatura de la masa fundida sube a 215ºC.
La polilactida tiene ahora el peso molecular
aproximado de aprox. 50.000 g/mol. Sin embargo en la masa fundida
hay todavía aprox. un 9 por ciento de monómeros. Pero una
polilactida que deba tener estabilidad a largo plazo no ha de
contener más de un 1 por ciento de dilactida. Por lo tanto es
preciso proceder a una desmonomerización. Esto vuelve a
dificultarse por el hecho de que la polimerización de apertura de
anillo es una reacción de equilibrio. A unas temperaturas alrededor
de 200ºC la concentración de equilibrio de dilactida está
aproximadamente en un 5 por ciento. Por lo tanto la
desmonomerización ha de efectuarse o bien muy rápidamente para
reducir al mínimo la reformación de dilactida, lo cual sin embargo
es muy difícil de conseguir dadas las altas viscosidades. Una
segunda posibilidad que encuentra aplicación aquí consiste en la
adición de un estabilizador (p.ej.
\alpha-tropolón, véase memoria de patente DE 195
37 365 C1) para bloquear el catalizador llegando casi a detener la
reacción y evitar de este modo la perniciosa reformación de
dilactida.
En el presente proceso, la desmonomerización
(característica g)) tiene lugar después de la adición del
estabilizador, en dos aparatos independientes 10. En el primer
aparato se distiende la masa fundida a una presión de 10 mbar, con
lo cual se evapora la mayor parte del monómero. El contenido de
dilactida se puede reducir por lo tanto aproximadamente al 2%.
Ahora bien, al hacerlo también baja la temperatura a 195ºC lo cual
da lugar a un aumento de viscosidad hasta aproximadamente 700 Pa*s.
Para evaporar finalmente el último 2% de dilactida de la masa
fundida de alta viscosidad se reduce la presión en el segundo
aparato, el llamado acabador, a 2,5 mbar.
Antes de seguir desmonomerizando la masa
fundida, ésta sufre un aumento de temperatura para evitar
viscosidades demasiado altas a la salida del acabador. El acabador
se compone de una envolvente cilíndrica del reactor que está
llenada en un 20 a 30% de su volumen con masa fundida de polímero.
Alrededor del eje del cilindro gira un soporte a modo de cesta
sobre el cual van situados unos discos circulares dispuestos
verticalmente. Los discos penetran con parte de su superficie en la
masa fundida. Mediante la rotación, los discos arrastran la masa
fundida de alta viscosidad y la exponen al vacío en forma de
película. El principio de un acabador adecuado se describe p.ej. en
el documento US 5 77 99 86.
En lugar de un acabador "yacente" de esta
clase también es adecuado lo que se denomina un evaporador de capa
delgada. En éste la masa fundida desmonomerizada fluye por la pared
interior de un tubo vertical calentado por el exterior. En el eje
geométrico del tubo gira un árbol accionado que lleva elementos
rascadores que distribuyen la masa fundida por la superficie
calentada mientras fluye hacia abajo formando una película delgada.
La formación de capas delgadas y su constante renovación facilitan
la evaporación del monómero.
Con los dispositivos descritos a título de
ejemplo se obtiene una superficie muy grande que se renueva
constantemente, tal como se precisa para una desmonomerización
hasta un 0,5% de contenido de monómero. Para ello la temperatura de
la masa fundida desciende a 190ºC y la viscosidad aumenta
aproximadamente a 1440 Pa*s.
En un fermentador de agitación de 10 l se
incorpora 1 kg de harina de centeno en 5 l de agua ajustando al
mismo tiempo el valor pH a 10,0 (adición de una solución 3N NaOH).
Después de un tiempo de agitación de 2 horas a 20ºC se efectúa la
separación de la fracción de sustancia sólida amilífera mediante
filtración. El residuo acuoso se añade al medio de fermentación
como extracto alcalino de proteína.
La eficacia de este extracto de proteína se
puede ver por el comportamiento de crecimiento de la cepa de
Lactobacillus rhamnosus 4759 en placas de microtitrado del
sistema de aparatos Bioscreen (Firma Labsystems, Finlandia). Para
este fin se combinaron 0,24 ml de un medio de glucosa - MRS, que no
contenía peptona, con 0,1 ml del extracto de proteína que se había
preparado, y se inocularon con 0,01 ml de un cultivo de 18 h de la
cepa antes citada y se cultivaron en condiciones estándar (T = 33C,
pH) 6,0). Como preparaciones de control se utilizaron un medio MRS
pleno y un medio MRS sin peptona. Las curvas de crecimiento del
Lactobacillus rhamnosus 4759 en los tres medios descritos
están representadas en la Figura 5. Las curvas de crecimiento (1) y
(2) se diferencian sólo escasamente, es decir que en este caso el
extracto de proteína se puede considerar como sustituto de pleno
valor de la peptona.
La masa celular de Lactobacillus
rhamnosus se separa del líquido fermentado del fermentador
mediante centrifugación y se resuspende en agua, de modo que se
formen suspensiones celulares con contenido seco de biomasa de 15,7
g/l y 78,4 g/l. Éstas se calientan a 60ºC durante 20 minutos para la
lisis de las células. Después de enfriar a unos 30ºC y de separar
los restos de paredes celulares se añade la solución transparente al
medio de fermentación en forma de extracto de bacterias.
La eficacia de este extracto de bacterias se
puede ver por el comportamiento de crecimiento de la cepa
Lactobacillus rhamnosus 4759 en placas de microtitrado del
sistema de aparatos Bioscreen (Firma Labsystems, Finlandia). A cada
0,24 ml de un medio MRS sin extracto de levadura se añadieron
respectivamente 0,1 ml de uno de los dos extractos de bacterias y
0,01 ml de un cultivo previo 18-h de la cepa antes
citada y se incubaron a T = 33ºC y pH 6,0. Como preparaciones de
control sirvieron un medio MRS total y un medio MRS sin extracto de
levadura. Las curvas de crecimiento del Lactobacillus
rhamnosus 4759 en los cuatro medios citados están representadas
en la Figura 6. Las curvas de crecimiento (1) y (2) se diferencian
sólo escasamente, es decir que en este caso el extracto de
bacterias se puede considerar como sustituto de pleno valor del
extracto de levadura.
En un fermentador con agitación de 50 l se
esterilizó internamente hidrolizado de almidón de centeno (contenido
de glucosa: 120 g/l) obtenido por vía enzimática. A continuación
tuvo lugar en condiciones asépticas la adición de 10 l del extracto
de proteína preparado de acuerdo con el ejemplo 1, así como 6 l del
extracto de células bacterianas producido de acuerdo con el ejemplo
2 y 1 l de una solución acuosa que contenía 96 g de fosfato
dipotásico hidrogenado, 4,8 g de sulfato de magnesio y 2,4 g de
sulfato de manganeso. Como inóculo se emplearon 2 l de un cultivo
previo de la cepa Lactobacillus paracasei 160111. Durante el
subsiguiente proceso de fermentación se mantuvo la temperatura
cons-
tantemente a 33ºC y el valor pH en 6,0. Como medio de corrección para regular el pH sirvió una lejía sódica al 30%.
tantemente a 33ºC y el valor pH en 6,0. Como medio de corrección para regular el pH sirvió una lejía sódica al 30%.
Después de 48 horas estaba totalmente consumida
la glucosa empleada y convertida en ácido láctico (Figura 7).
En un fermentador de 5 l que estaba acoplado con
un módulo de ultrafiltración en el circuito exterior, se dosificó a
velocidad constante un medio de cultivo salino que contenía entre
otras cosas, 50 g/l de glucosa, 10 g/l de extracto de levadura y 10
g/l de peptona. La misma cantidad de líquido abandonaba en el mismo
tiempo el sistema de fermentación por la salida de la unidad de
ultrafiltración como solución de lactato sódico exenta de células.
Las productividades de la obtención de ácido láctico determinadas
con la cepa Lactobacillus paracasei 160111 con diferentes
caudales se confrontan en la Tabla 1 con las productividades que se
habían obtenido, a igualdad de condiciones restantes, con una
solución de cultivo que estaba compuesta en un 10% de extracto de
proteína según el ejemplo 1 y contenía 50 g/l de glucosa así como 10
g/l de extracto de levadura.
En un fermentador de 50 l que estaba acoplado
con un módulo de ultrafiltración en el circuito exterior, se
dosificó con una velocidad de 6 l/hora un medio de cultivo salino
que contenía entre otros 40 g/l de glucosa, 10 g/l de extracto de
levadura y 10 g/l de peptona. El medio de fermentación circulaba
constantemente entre el fermentador y el módulo de ultrafiltración,
donde en el mismo tiempo la misma cantidad de líquido abandonaba el
sistema de fermentación como solución de lactato sódico exenta de
células. La productividad de ácido láctico obtenida con la cepa
Lactobacillus paracasei 160111 con un caudal D = 0,12
h^{-1} fue de 4,0 g/lh.
En un fermentador de 50 l que estaba acoplado
con un módulo de ultrafiltración en el circuito exterior se
dosificó con una velocidad de 6 l/h un medio de cultivo salino de
hidrolizado de centeno que se componía en un 20% de extracto de
proteína de centeno según el ejemplo 1 y que contenía 40 g/l de
glucosa. El medio de fermentación circulaba constantemente entre
el fermentador y el módulo de ultrafiltración donde en el mismo
tiempo la misma cantidad de líquido abandonaba el sistema de
fermentación como solución de lactato sódico exenta de células. En
comparación con el ejemplo 4, el régimen de fermentación se modificó
de modo que la biomasa crecida adicionalmente en el transcurso del
proceso por encima de la concentración deseada de 20 g/l se calentó
en un segundo circuito durante 5 minutos a 80ºC y después se
devolvió nuevamente al sistema del reactor en forma de lisado. En
el presente caso, el incremento de biomasa crecida en el fermentador
fue de 2 g/lh, de modo que cada hora se extrajeron del dispositivo
fermentador respectivamente 4,5 l que contenían aproximadamente 100
g de biomasa y que se lisaron en la forma descrita. La
productividad de ácido láctico obtenida por la cepa Lactobacillus
paracasei 160111 con un caudal de D = 0,12 h^{-1} fue de 3,95
g/lh.
En un fermentador de 50 l que estaba acoplado
con un módulo de ultrafiltración en el circuito exterior se
dosificó con una velocidad de 12,5 l/h un medio de cultivo de
hidrolizado de centeno que se componía en un 20% de extracto de
proteína de centeno y que contenía 20 g/l de glucosa. En este caso
se empleó un extracto de proteína de centeno cuya proporción de
sustancia activa era el doble que la del extracto producido según
el ejemplo 1. Como material de partida no se empleó en este caso
harina sino el residuo exento de almidón procedente de la
hidrólisis de la harina de almidón, siendo la proporción de materia
sólida-agua durante la extracción el doble que en
el ejemplo 1. El medio de fermentación circulaba constantemente
entre el fermentador y el módulo de ultrafiltración donde el
volumen de líquido correspondiente a la cantidad dosificada
abandonaba en el mismo tiempo el sistema de fermentación como
solución de lactato sódico exento de células. La concentración de
biomasa en el sistema reactor se mantuvo constante en aprox. 30 g/l
porque permanentemente un caudal parcial del líquido de
fermentación, que se controlaba mediante una medición de
enturbiamiento Flow-Injection, se conducía por el
tramo de lisado térmico (T = 100ºC) y después de separar los
residuos de células se conducía de nuevo al fermentador mediante un
dispositivo de filtración integrado en el proceso.
La productividad de ácido láctico obtenida con
la cepa Lactobacillus paracasei 160111 con un caudal de D =
0,25 h^{-1} fue de 13,5 g/lh.
La solución de lactato sódico exenta de células
del ejemplo 7 hay que depurarla ahora de sustancias extrañas y
transformarla en ácido láctico. Ya desde los materiales de partida
ya se vigiló que la carga de sustancias extrañas fuera mínima. De
este modo se puede reducir la concentración de iones sulfato en el
medio de fermentación de 286 g/l a 86 g/l mediante el empleo de
óxido de magnesio en lugar de sulfato de magnesio y ácido láctico
en lugar de ácido sulfúrico. La aportación de iones cloruro en el
proceso tiene lugar principalmente por la enzima Termamyl 120 L. Se
puede reducir así el contenido de cloruro de los 675 g/l originales
a 212 g/l sirviéndose de un intercambiador de iones.
La mayor parte de los iones cloruro restantes se
separa de la solución de lactato sódico durante la nanofiltración
subsiguiente a la ultrafiltración. La nanofiltración trabaja como
diafiltración de tres etapas. Los iones cloruro se difunden a
través de la membrana y los iones lactato permanecen en el rechazo.
De este modo se reduce la concentración de cloruro de 0,892 g/l en
el filtrado de cultivo a 0,003 g/l en el concentrado de la tercera
etapa de nanofiltración.
La electrodiálisis monopolar subsiguiente sirve
para la concentración de la solución de lactato sódico así como
para la segregación de los componentes no-iónicos.
En particular permanece en el diluado la mayor parte del azúcar
residual (mono-, di, y oligosacáridos reductores y no reductores).
La concentración total de fósforo se puede reducir de 0,58 g/l en
la entrada a 0,12 g/l en el concentrado. Para el nitrógeno se
obtiene una reducción de 1,04 g/l a
0,131 g/l.
0,131 g/l.
Si no se separa totalmente el azúcar residual
del ácido láctico se reduce notablemente el rendimiento durante la
polimerización: los sacáridos restantes dan lugar durante la
despolimerización ciclante a una intensa carbonatación del
prepolímero. Según las impurezas se puede carbonizar por este motivo
hasta un 50% del prepolímero empleado que por lo tanto queda
inservible.
Por último la electrodiálisis bipolar transforma
el lactato sódico en ácido láctico acuoso y lejía sódica. Esta
última se reconduce y se emplea en la fermentación para la
regulación del pH. El ácido láctico producido tiene una
concentración de aprox. 150 g/l. La concentración de iones cloruro
es inferior a 30 mg/l y la de los iones sulfato es inferior a 10
mg/l. Las concentraciones de nitrógeno total y del fósforo están
respectivamente por debajo de 100 mg/l. El ácido láctico se compone
en un 95% de ácido láctico L(+) y en un 5% de ácido láctico
D(-).
El ácido láctico acuoso del ejemplo 8 se
reconcentra en una concentración en dos etapas seguida de
rectificación. En la primera etapa de la concentración aumenta la
proporción en peso de ácido láctico de 0,15 a 0,4. Después de la
segunda etapa es del 78%. En la columna de rectificación de tres
fondos se aumenta finalmente el contenido de ácido láctico al
95%.
El ácido láctico reconcentrado se polimeriza en
una policondensación de dos etapas y con ayuda de SnCl_{2} como
catalizador formando un prepolímero de un peso molecular medio de
3400 g/mol. En el primer reactor reina para ello presión
atmosférica a una temperatura de 180ºC. En el segundo reactor la
presión es de 50 mbar y la temperatura de 190ºC.
Manteniendo el vacío y aumentando la temperatura
a 225ºC se despolimeriza a continuación el prepolímero en un
evaporador molecular por gravedad formando dilactida, el dímero
cíclico del ácido láctico. El flujo de producto en forma de vapor
contiene un 98% de dilactida, un 1% de ácido láctico y ácido
lactioilláctico y un 1% de agua. Mediante condensación parcial se
separa de la dilactida el agua residual y una parte del ácido
láctico. El condensado presenta una concentración de grupos OH de
0,04 mol/kg. En la subsiguiente rectificación se separa el ácido
lactoilláctico restante y el ácido láctico de la dilactida para
obtener la pureza deseada de 0,02 mol/hg. Esta pureza es necesaria
para conseguir un peso molecular del polímero de 50.000 g/mol. En
los dos reactores siguientes tiene lugar la polimerización de
apertura de anillo. Añadiendo 5 mol de octoato de estaño por
100.000 mol de dilactida y a una temperatura de 195ºC se polimeriza
la dilactida en el primer reactor formando polilactida con un peso
molecular medio de 35.000 g/mol, convirtiéndose un 70% de
dilactida. En el segundo reactor la temperatura aumenta a 215ºC y
el peso molecular a 50.000 g/mol. La conversión en dilactida
aumenta al 90%. Los dos reactores están sometidos a presión
atmosférica.
En este estado la polilactida contiene todavía
un 10% de dilactida. Para obtener una polilactida estable es
preciso reducir la proporción de dilactida a menos de un 1%. Esto
también se realiza en dos etapas. En la primera etapa la
polilactida penetra en un tubo descendente que está bajo vacío (10
mbar). Allí se evapora una gran parte de la dilactida y la masa
fundida que sale presenta todavía un 2% de monómeros. La
desmonomerización hasta menos de un 1% de dilactida tiene lugar en
un reactor de discos que está sometido a una presión de 2,5 mbar.
La gran superficie que se precisa para evaporar el monómero restante
se genera por los discos giratorios que van girando a través de la
masa fundida y de este modo transportan a la superficie dilactida
procedente del interior de la masa fundida.
La polilactida producida de este modo tiene un
peso molecular de 50.000 g/mol, un contenido en monómeros inferior
al 1% y un punto de fusión de aprox. 170ºC. La polilactida
ligeramente amarillenta se compone en un 95% de
L-dilactida y en un 5% de
D-dilactida.
\vskip1.000000\baselineskip
Claims (30)
1. Procedimiento para la preparación de ácido
poliláctico con los siguientes pasos:
- a)
- obtención de ácido láctico por fermentación a partir de productos agrícolas amilíferos, para lo cual éstos se someten a una hidrólisis del almidón y donde la sustancia sólida restante que se produce durante la hidrólisis del almidón se somete adicionalmente a una extracción alcalina y el extracto de proteína obtenido se conduce al fermentador como fuente de sustancia de crecimiento,
- b)
- purificación intensa del ácido láctico mediante ultrafiltración, nanofiltración y/o electrodiálisis,
- c)
- concentración del ácido láctico y preparación de un prepolímero,
- d)
- despolimerización ciclante para formar dilactida,
- e)
- purificación de la dilactida,
- f)
- polimerización de apertura de anillo de la dilactida,
- g)
- desmonomerización de la dilactida.
2. Procedimiento según la reivindicación 1,
caracterizado porque en el paso a) del procedimiento, una
parte de los componentes externos de sustancia de crecimiento
aportados originalmente con la solución de cultivo y aprovechada
por las bacterias se vuelve a dejar disponible directamente en el
circuito de fermentación para las células activadas mediante lisis
del exceso de biomasa formada que se realiza por vía térmica, por
radiación o por medio de enzimas.
3. Procedimiento según la reivindicación 2,
caracterizado porque el producto agrícola amilífero,
preferentemente cereal, se muele y una primera parte del producto
se somete a una hidrólisis de almidón y la solución de glucosa
obtenida se transforma en condiciones anaerobias en un fermentador
con unas bacterias, sometiéndose la segunda parte del producto a
una extracción alcalina y conduciendo al fermentador el extracto de
proteína obtenido como fuente de sustancia de crecimiento, y
conduciendo a la hidrólisis del almidón el residuo amilífero no
disuelto.
4. Procedimiento según por lo menos una de las
reivindicaciones 2 a 3, caracterizado porque el exceso de
biomasa obtenido en la fermentación se conduce a un circuito
independiente donde se somete a lisis y a continuación se devuelve
al fermentador.
5. Procedimiento según una de las
reivindicaciones 2 a 4, caracterizado porque para mantener
constante en el nivel deseado la concentración de biomasa en el
fermentador se lisa por medio de un proceso de regulación tanta
biomasa por unidad de tiempo como masa adicional haya crecido.
6. Procedimiento según por lo menos una de las
reivindicaciones 2 a 5, caracterizado porque la hidrólisis
del almidón que se lleva a cabo en forma de un proceso enzimático
en dos etapas se acopla con la obtención de extracto de
proteína.
7. Procedimiento según la reivindicación 6,
caracterizado porque el almidón se licua en la primera etapa
con la enzima \alpha-amilasa y se sacarifica en
la segunda etapa con la enzima glucoamilasa.
8. Procedimiento según por lo menos una de las
reivindicaciones 1 a 7, caracterizado porque como productos
agrícolas se emplean cereales tales como centeno, trigo, cebada y/o
harina tritical así como maíz, arroz y/o yuca.
9. Procedimiento según por lo menos una de las
reivindicaciones 2 a 8, caracterizado porque para la
fermentación se emplean cultivos individuales o mixtos de las cepas
lactobacillus, lactococcus, streptococcus, enterococcus o
pediococcus.
10. Procedimiento según por lo menos una de las
reivindicaciones 2 a 9, caracterizado porque se esterilizan
el hidrolizado y/o el extracto de proteína o el extracto de
sustancia de cultivo.
11. Procedimiento según la reivindicación 1,
caracterizado porque el hidrolizado y los extractos de
sustancia de cultivo o sustancia de proteína se esterilizan por
separado.
12. Procedimiento según por lo menos una de las
reivindicaciones 1 a 10, caracterizado porque la fermentación
se realiza de forma continua y la separación y purificación del
ácido láctico tiene lugar mediante procesos de separación por
membrana.
13. Procedimiento según por lo menos una de las
reivindicaciones 1 a 12, caracterizado porque la
concentración (paso c) del procedimiento) se realiza de tal modo
que se obtenga un ácido láctico de por lo menos al 90%.
14. Procedimiento según la reivindicación 13,
caracterizado porque la concentración tiene lugar mediante
una evaporación en dos etapas y una superconcentración,
aprovechándose el calor de condensación de la segunda etapa para la
evaporación en la primera etapa.
15. Procedimiento según por lo menos una de las
reivindicaciones 1 a 14, caracterizado porque la
despolimerización ciclante (paso d) del procedimiento) se realiza
en un evaporador molecular por gravedad.
16. Procedimiento según por lo menos una de las
reivindicaciones 1 a 15, caracterizado porque en el paso e)
del procedimiento se lleva a cabo la purificación hasta una
concentración de los grupos hidroxilo < 25 meq.
17. Procedimiento según la reivindicación 15,
caracterizado porque la purificación de la lactida tiene
lugar en una columna de rectificación.
18. Procedimiento según por lo menos una de las
reivindicaciones 1 a 17, caracterizado porque la
polimerización de apertura de anillo de la dilactida (paso f) del
procedimiento) se realiza con una concentración de catalizador de 2
x 10^{-4} a 2 x 10^{-5} mol por mol.
19. Procedimiento según una de las
reivindicaciones 1 a 18, caracterizado porque antes de la
desmonomerización se añade un estabilizador que bloquea el
catalizador.
20. Dispositivo para realizar el procedimiento
según por lo menos una de las reivindicaciones 1 a 19, que comprende
respectivamente por lo menos una instalación mezcladora (1), una
instalación de hidrólisis (2) que está unida por lo menos a un
extractor de proteína (11), un fermentador (3), una instalación de
superpurificación (4), un concentrador (5), una instalación de
policondensación (6), un dispositivo de despolimerización (7) una
instalación de superpurificación (8) para la dilactida, un reactor
(9) para la polimerización y un dispositivo de desmonomerización
(10).
21. Dispositivo según la reivindicación 20,
caracterizado porque la instalación de hidrólisis (2)
presenta un módulo de ultrafiltración (12) situado en el circuito
exterior.
22. Dispositivo según por lo menos una de las
reivindicaciones 20 ó 21, caracterizado porque antes del por
lo menos un fermentador (3) está dispuesto por lo menos un
dispositivo de esterilización (13).
23. Dispositivo según por lo menos una de las
reivindicaciones 20 a 22, caracterizado porque como
instalación de superpurificación (4) están previstas conectadas una
detrás de la otra una instalación de nanofiltración (15), una
instalación de electrodiálisis monopolar (16) y una instalación de
electrodiálisis bipolar (17).
24. Dispositivo según por lo menos una de las
reivindicaciones 20 a 23, caracterizado porque la instalación
de concentración (5) está realizada en tres etapas y consiste en
evaporadores (18) y (19) dispuestos uno detrás de otro y un
superconcentrador (20) conectado a continuación.
25. Dispositivo según por lo menos una de las
reivindicaciones 20 a 24, caracterizado porque la
precondensación (5) tiene lugar en dos reactores (21) y (22) con
evaporador de recirculación situado en el exterior.
26. Dispositivo según por lo menos una de las
reivindicaciones 20 a 25, caracterizado porque el dispositivo
de despolimerización (7) es un evaporador molecular por
gravedad.
27. Dispositivo según por lo menos una de las
reivindicaciones 20 a 26, caracterizado porque la instalación
de superpurificación (8) para la purificación de la dilactida es
por lo menos una columna de rectificación.
28. Dispositivo según por lo menos una de las
reivindicaciones 20 a 27, caracterizado porque el reactor (9)
para la polimerización de apertura de anillo es una cascada de
tanques agitadores con por lo menos dos reactores.
29. Dispositivo según por lo menos una de las
reivindicaciones 20 a 28, caracterizado porque la instalación
de desmonomerización (10) consta de un reactor bajo vacío y un
reactor de discos anulares.
30. Dispositivo según por lo menos una de las
reivindicaciones 20 a 29, caracterizado porque la instalación
de desmonomerización presenta un evaporador de capa delgada.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE10020898 | 2000-04-20 | ||
DE10020898A DE10020898B4 (de) | 2000-04-20 | 2000-04-20 | Verfahren zur Herstellung von Polymilchsäure und Vorrichtung hierzu |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
ES2300338T3 true ES2300338T3 (es) | 2008-06-16 |
Family
ID=7640244
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
ES01940346T Expired - Lifetime ES2300338T3 (es) | 2000-04-20 | 2001-04-19 | Procedimiento para la preparacion de acido polilactico y dispositivo correspondiente. |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US6875839B2 (es) |
EP (1) | EP1276890B1 (es) |
KR (1) | KR100714364B1 (es) |
CN (1) | CN1263865C (es) |
AT (1) | ATE382703T1 (es) |
AU (1) | AU2001273954A1 (es) |
DE (2) | DE10020898B4 (es) |
ES (1) | ES2300338T3 (es) |
PT (1) | PT1276890E (es) |
WO (1) | WO2001081610A2 (es) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2020021346A1 (es) * | 2018-07-26 | 2020-01-30 | Cuervo Garces Laura Viviana | Método de obtención de ácido poliláctico (pla) a partir del suero de queso |
Families Citing this family (42)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2810792B1 (fr) * | 2000-06-22 | 2003-07-04 | Commissariat Energie Atomique | Transistor mos vertical a grille enterree et procede de fabrication de celui-ci |
DE60226931D1 (de) | 2001-07-16 | 2008-07-17 | Canon Kk | Verfahren zur Herstellung von Polyester, Verfahren zur Herstellung von substituierter alpha-Hydroxycarbonsäure und Clostridium beijerinckii-Stamm HICA432 |
KR100507698B1 (ko) * | 2002-05-31 | 2005-08-11 | 주식회사 효성 | 뱃치식 폴리에스터 중합장치 |
EP1766039A4 (en) * | 2004-06-09 | 2011-08-24 | Alexander Sunguroff | METHOD FOR PRODUCING NANOTECHNOLOGICAL AND MACROMOLECULAR BIOMIMETIC STRUCTURES |
JP3734821B1 (ja) | 2004-09-30 | 2006-01-11 | 株式会社グリーン環境テクノロジー | ポリ乳酸の製造方法、及びポリ乳酸製造装置 |
DE102005028016A1 (de) * | 2005-06-16 | 2006-12-21 | Uhde Gmbh | Beschichtetes Düngemittel mit kontrollierter Wirkstofffreisetzung und Verfahren zu dessen Herstellung |
DE102005056668A1 (de) * | 2005-11-28 | 2007-05-31 | Basf Ag | Fermentative Herstellung organischer Verbindungen |
NL2000454C1 (nl) | 2006-11-28 | 2008-01-02 | Purac Biochem Bv | Stabiele lactidedeeltjes. |
US20080146822A1 (en) * | 2006-11-28 | 2008-06-19 | Purac Biochem B.V. | Stable lactide particles |
AT504206B8 (de) * | 2006-12-19 | 2008-09-15 | Gruene Bioraffinerie At Gmbh | Verfahren zur behandlung eines stoffstromes |
TWM321371U (en) * | 2006-12-22 | 2007-11-01 | Chun-Chih Lai | Flaky texture for polylactic acid and thin wood sheet |
WO2008139658A1 (ja) * | 2007-05-16 | 2008-11-20 | National Institute Of Advanced Industrial Science And Technology | 乳酸オリゴマーおよびその製造方法 |
EP2031083A1 (de) * | 2007-09-03 | 2009-03-04 | Uhde Inventa-Fischer GmbH | Verfahren zur Herstellung von Milchsäuredilactid oder daraus herstellbaren Polyestern |
ES2359086T3 (es) * | 2007-09-03 | 2011-05-18 | Uhde Inventa-Fischer Gmbh | Procedimiento para purificar vapores de proceso en la preparación de polilactida. |
EP2031009A1 (de) * | 2007-09-03 | 2009-03-04 | Uhde Inventa-Fischer GmbH | Reinigungsvorrichtung zur Abtrennung von Dilactid aus Stoffgemischen, Polymerisationsvorrichtung, Verfahren zur Abtrennung von Dilactid aus Stoffgemischen sowie Verwendung |
DE102007045701B3 (de) * | 2007-09-24 | 2009-05-14 | Uhde Gmbh | Gewinnung von Milchsäure durch Fermentation und Extraktion mit Aminen |
AT506038B1 (de) * | 2007-11-14 | 2015-02-15 | Jungbunzlauer Austria Ag | Verfahren zur herstellung zyklischer diester von l-, d- und d,l-milchsäure |
AT506768B1 (de) | 2008-04-16 | 2013-10-15 | Jungbunzlauer Austria Ag | Verfahren zur reinigung zyklischer diester der l- bzw. d-milchsäure |
CN102066305B (zh) * | 2008-06-20 | 2015-11-25 | 旭化成化学株式会社 | α-羟酸的制造方法 |
CN101665567B (zh) | 2008-09-01 | 2011-11-23 | 南京工业大学 | 卡宾衍生物催化的环状化合物可调控开环聚合方法 |
CN101665565B (zh) * | 2008-09-01 | 2012-01-04 | 南京工业大学 | 一种用卡宾衍生物催化制备聚乳酸的方法 |
CN101665566B (zh) * | 2008-09-01 | 2012-01-04 | 南京工业大学 | 一种利用双螺杆挤出机制备聚乳酸及其制品的方法 |
WO2010089765A1 (en) * | 2009-01-07 | 2010-08-12 | Praj Industries Limited | Enzymatic polymerization process for the production of polylactide polymers |
BE1018628A3 (fr) * | 2009-01-16 | 2011-05-03 | Futerro Sa | Acide polylactique isotactique et son procede de fabrication. |
KR101154029B1 (ko) | 2009-05-20 | 2012-06-07 | 한국화학연구원 | 젖산에스테르로부터 락타이드의 직접 전환용 촉매 및 이를 이용한 락타이드의 제조방법 |
DE102009036080A1 (de) * | 2009-08-04 | 2011-02-17 | Siemens Aktiengesellschaft | Verfahren zum Abbau von organischen Schadstoffen in industriellem Abwasser und zugehörige Anlage |
CN101665564B (zh) * | 2009-09-24 | 2011-09-14 | 同济大学 | 膜式脱水型乳酸缩聚反应装置 |
DE102010002065B4 (de) * | 2010-02-17 | 2014-04-10 | Deutsches Institut Für Lebensmitteltechnik E.V. | Vorrichtung und integriertes Herstellungsverfahren für Ammoniumlactat |
EP2601303A1 (en) * | 2010-08-02 | 2013-06-12 | Springhill S.A. | The novel biodegradable polymer process |
WO2012070747A2 (ko) * | 2010-11-26 | 2012-05-31 | Wy Soon Myung | 폴리유산과 고전도성 폴리유산 중합체의 제조방법 및 고전도성 폴리유산 중합체의 제조장치 |
CN102020628B (zh) * | 2011-01-06 | 2013-07-31 | 云南富集生物材料科技有限公司 | 一种聚乳酸中间体丙交酯制备工艺的改进方法 |
CN104080833B (zh) * | 2011-11-04 | 2016-05-11 | 蒂森克虏伯工业解决方案股份公司 | 用于可聚合乳酸的品质测试以及其生产方法 |
EP2725019B1 (de) | 2012-10-26 | 2015-04-08 | Uhde Inventa-Fischer GmbH | Verfahren zur Herstellung cyclischer Diester, insbesondere Dilactid |
EP2746313B1 (de) | 2012-12-18 | 2017-08-30 | Uhde Inventa-Fischer GmbH | Vorrichtung und Verfahren zur Abtrennung eines cyclischen Diesters aus Polymerschmelzen |
CN110272534A (zh) * | 2013-04-26 | 2019-09-24 | 希乐克公司 | 将羟基羧酸加工成聚合物 |
CN103451244B (zh) * | 2013-08-29 | 2015-08-26 | 山东省食品发酵工业研究设计院 | 一种屎肠球菌在制备l-乳酸中的应用 |
CN105733000A (zh) * | 2014-12-10 | 2016-07-06 | 黑龙江鑫达企业集团有限公司 | 一种聚乳酸薄膜的制备 |
CN106117526A (zh) * | 2016-07-13 | 2016-11-16 | 张静 | 一种亲水性聚乳酸复合材料的制备方法 |
CN106633726A (zh) * | 2016-12-16 | 2017-05-10 | 全椒祥瑞塑胶有限公司 | 一种可降解塑料 |
CN109456581A (zh) * | 2018-09-30 | 2019-03-12 | 嘉兴凡高电子商务有限公司 | 一种儿童玩具用降解的pla生物复合材料及其制备方法 |
CN110981557A (zh) * | 2019-12-10 | 2020-04-10 | 安徽尘缘节能环保科技有限公司 | 一种废弃蛋白微波酸解制备复合氨基酸*** |
CN114377421B (zh) * | 2022-02-18 | 2024-07-02 | 华陆工程科技有限责任公司 | 一种乳酸低聚反应与脱水装置 |
Family Cites Families (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AT144346B (de) * | 1933-08-01 | 1936-01-10 | Hauser & Sobotka A G | Verfahren zur Herstellung von technischer Milchsäure durch Gärung. |
FR2599751A2 (fr) * | 1985-04-26 | 1987-12-11 | Fives Cail Babcock | Perfectionnements aux procedes de fermentation lactique avec traitement biologique des effluents |
US6005067A (en) * | 1992-01-24 | 1999-12-21 | Cargill Incorporated | Continuous process for manufacture of lactide polymers with controlled optical purity |
US6326458B1 (en) * | 1992-01-24 | 2001-12-04 | Cargill, Inc. | Continuous process for the manufacture of lactide and lactide polymers |
US5142023A (en) | 1992-01-24 | 1992-08-25 | Cargill, Incorporated | Continuous process for manufacture of lactide polymers with controlled optical purity |
US5503750A (en) * | 1993-10-04 | 1996-04-02 | Russo, Jr.; Lawrence J. | Membrane-based process for the recovery of lactic acid by fermentation of carbohydrate substrates containing sugars |
US5521278A (en) * | 1994-08-18 | 1996-05-28 | Ecological Chemical Products | Integrated process for the manufacture of lactide |
DE19537365C1 (de) * | 1995-10-06 | 1996-12-19 | Fraunhofer Ges Forschung | Verfahren zur Stabilisierung der Schmelzeviskosität von Zinn-, Titan- und/oder Zirkoniumverbindungen als Katalysator und/oder Initiator enthaltender aliphatischer oder aromatisch-aliphatischer Homo- oder Copolyester und Verwendung einer Verbindung, die mindestens einen Tropolonring aufweist als Maskierungsmittel in Polyesterschmelzen |
DE19628472A1 (de) * | 1996-07-15 | 1998-01-29 | Brussels Biotech S A | Aliphatischer Polyester und/oder Copolyester und Verfahren zu seiner Herstellung |
US5801255A (en) | 1996-08-01 | 1998-09-01 | Shimadzu Corporation | Method for producing lactide and apparatus used therefor |
JP3855359B2 (ja) * | 1997-04-15 | 2006-12-06 | トヨタ自動車株式会社 | 乳酸アンモニウムからポリ乳酸を製造する方法 |
DE19718608A1 (de) * | 1997-05-02 | 1998-11-05 | Ireks Gmbh | Verfahren zur Herstellung von Milchsäure |
KR100329019B1 (ko) * | 1999-04-13 | 2002-03-18 | 윤덕용 | 유기산의 고효율 생산방법 |
-
2000
- 2000-04-20 DE DE10020898A patent/DE10020898B4/de not_active Expired - Fee Related
-
2001
- 2001-04-19 ES ES01940346T patent/ES2300338T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-04-19 CN CNB018098827A patent/CN1263865C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-04-19 EP EP01940346A patent/EP1276890B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-04-19 WO PCT/EP2001/004482 patent/WO2001081610A2/de active IP Right Grant
- 2001-04-19 PT PT01940346T patent/PT1276890E/pt unknown
- 2001-04-19 AT AT01940346T patent/ATE382703T1/de active
- 2001-04-19 DE DE50113440T patent/DE50113440D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-04-19 KR KR1020027014145A patent/KR100714364B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2001-04-19 US US10/258,036 patent/US6875839B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-04-19 AU AU2001273954A patent/AU2001273954A1/en not_active Abandoned
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2020021346A1 (es) * | 2018-07-26 | 2020-01-30 | Cuervo Garces Laura Viviana | Método de obtención de ácido poliláctico (pla) a partir del suero de queso |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP1276890B1 (de) | 2008-01-02 |
PT1276890E (pt) | 2008-01-17 |
WO2001081610A2 (de) | 2001-11-01 |
DE50113440D1 (de) | 2008-02-14 |
US20030158360A1 (en) | 2003-08-21 |
KR20030016249A (ko) | 2003-02-26 |
AU2001273954A1 (en) | 2001-11-07 |
WO2001081610A3 (de) | 2002-04-11 |
ATE382703T1 (de) | 2008-01-15 |
CN1430676A (zh) | 2003-07-16 |
DE10020898A1 (de) | 2002-01-10 |
CN1263865C (zh) | 2006-07-12 |
EP1276890A2 (de) | 2003-01-22 |
DE10020898B4 (de) | 2004-02-05 |
US6875839B2 (en) | 2005-04-05 |
KR100714364B1 (ko) | 2007-05-02 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
ES2300338T3 (es) | Procedimiento para la preparacion de acido polilactico y dispositivo correspondiente. | |
Swetha et al. | A review on biodegradable polylactic acid (PLA) production from fermentative food waste-Its applications and degradation | |
Wee et al. | Biotechnological production of lactic acid and its recent applications | |
Karp et al. | Application of the biorefinery concept to produce L-lactic acid from the soybean vinasse at laboratory and pilot scale | |
ES2313754T3 (es) | Fermentacion de acido lactico a ph bajo. | |
ES2288919T3 (es) | Procedimiento de preparacion de un medio de fermentacion a partir de una materia prima renovable. | |
US20130164800A1 (en) | Production of Polyhydroxyalkanoates | |
EP1397501B9 (en) | Method of production of biodegradable lactic acid polymers | |
Weymarn et al. | Scale‐up of a New Bacterial Mannitol Production Process | |
EP1618202A1 (en) | Polylactic acid production from sugar molasses | |
AU2001287551A1 (en) | The method of production of biodegradable lactic acid polymers and the use of lactic acid polymers produced using such a method | |
CN101003615A (zh) | 用可再生淀粉质物制造高分子量聚乳酸的方法 | |
US20070037266A1 (en) | Process for producing erythritol | |
CN104789607B (zh) | 一种发酵‑分离耦合制备乳酸和/或乳酸盐的方法 | |
CN102659566A (zh) | 药用无水枸橼酸的生产工艺 | |
Chotani et al. | Industrial biotechnology: Discovery to delivery | |
US10883126B2 (en) | Process for producing lactic acid or its salts from fermentation using thermotolerance Bacillus bacteria | |
CN1208367C (zh) | 生物降解塑料母料的制备方法 | |
ES2397730B2 (es) | Preparaci�n de pha (polihidroxialcanoatos) a partir de residuo c�trico | |
WO2019008680A1 (ja) | ポリ乳酸の製造方法及びポリ乳酸製造装置 | |
Chotani et al. | Industrial biotechnology: discovery to delivery | |
CN1648242A (zh) | 透性化细胞海藻糖合酶及其制备和用途 | |
Wyman | Sterilization of fermentation vessels by ethanol/water mixtures |