ES2214511T3 - Procedimiento para mejorar la inmunogenicidad de un compuesto inmunogenico o de un hapteno y aplicacion para la preparacion de vacunas. - Google Patents

Procedimiento para mejorar la inmunogenicidad de un compuesto inmunogenico o de un hapteno y aplicacion para la preparacion de vacunas.

Info

Publication number
ES2214511T3
ES2214511T3 ES95939338T ES95939338T ES2214511T3 ES 2214511 T3 ES2214511 T3 ES 2214511T3 ES 95939338 T ES95939338 T ES 95939338T ES 95939338 T ES95939338 T ES 95939338T ES 2214511 T3 ES2214511 T3 ES 2214511T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
baselineskip
sequence
seq
molecule
dna
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES95939338T
Other languages
English (en)
Inventor
Hans Binz
Thien Nguyen Ngoc
Christine Andreoni
Per Ake Nygren
Stefan Stahl
Mathias Uhlen
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Pierre Fabre Medicament SA
Original Assignee
Pierre Fabre Medicament SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pierre Fabre Medicament SA filed Critical Pierre Fabre Medicament SA
Application granted granted Critical
Publication of ES2214511T3 publication Critical patent/ES2214511T3/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/155—Paramyxoviridae, e.g. parainfluenza virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/385—Haptens or antigens, bound to carriers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55505—Inorganic adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55566—Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
    • A61K2039/6031—Proteins
    • A61K2039/6037—Bacterial toxins, e.g. diphteria toxoid [DT], tetanus toxoid [TT]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
    • A61K2039/6031—Proteins
    • A61K2039/6068—Other bacterial proteins, e.g. OMP
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18511—Pneumovirus, e.g. human respiratory syncytial virus
    • C12N2760/18522—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18511—Pneumovirus, e.g. human respiratory syncytial virus
    • C12N2760/18534—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

LA PRESENTE INVENCION SE REFIERE A UN PROCEDIMIENTO PARA MEJORAR LA INMUNOGENICIDAD, DE UN ANTIGENO O DE UN HAPTENO, CUANDO SE ADMINISTRA A UN HUESPED, INDEPENDIENTEMENTE DEL MODO DE ADMINISTRACION, CARACTERIZADO PORQUE DICHO ANTIGENO O HAPTENO ESTA ACOPLADO DE MANERA COVALENTE A UNA MOLECULA DE SOPORTE, PARA FORMAR UN COMPLEJO, Y PORQUE ESTA MOLECULA DE SOPORTE ES UN FRAGMENTO POLIPEPTIDICO CAPAZ DE UNIRSE ESPECIFICAMENTE A LA SERUMALBUMINA DE MAMIFERO. SE REFIERE TAMBIEN A LA UTILIZACION, COMO MEDICAMENTO, DEL PRODUCTO SUSCEPTIBLE DE OBTENERSE ASI.

Description

Procedimiento para mejorar la inmunogenicidad de un compuesto inmunogénico o de un hapteno y aplicación para la preparación de vacunas.
El VRS es la causa más frecuente de hospitalización de los lactantes de menos de un año de edad en las infecciones respiratorias agudas. Los niños afectados de laringotraqueobronquitis, bronquitis y neumonías necesitan unos cuidados hospitalarios y en los lactantes que presentan unas enfermedades cardíacas congénitas, la tasa de mortalidad es superior al 37%. Otros trastornos como las displasias broncopulmonares, las enfermedades renales y la inmunodeficiencia son asimismo unos factores responsables de las mortalidades elevadas. Las infecciones por VRS pueden asimismo ser una causa de mortalidad en las personas mayores.
En los países templados, la epidemia del VRS se manifiesta durante el periodo invernal de noviembre a abril y la mayor incidencia de enfermedades serias aparece en los lactantes de 2 a 6 meses. Se distinguen dos tipos de VRS: VRS-A y VRS-B por la variación antigénica de la glicoproteína G del VRS: sub-grupo A y sub-grupo B, que circulan conjuntamente. Un estudio reciente en Francia de 1982 a 1990 ha demostrado una alternancia entre un sub-grupo y el otro en un periodo de tiempo de 5 años. La cepa A es frecuentemente la causa de las afecciones por unas infecciones más graves que la cepa B.
En los años 60, la tentativa de puesta a punta de vacunas clásicas, es decir el VRS inactivado por el formol, análogo a unas vacunas anti-sarampión, fracasó. En lugar de conferir una protección a los niños vacunados, dicho tipo de vacunas tuvo el efecto de potenciar la enfermedad viral natural.
El VRS humano pertenece al género pneumovirus, miembro de la familia de los Paramyxoviridae. El genoma del virus está constituido por una hebra de ARN de polaridad negativa, no segmentada, que codifica para 10 proteínas diferentes: NS1, NS2, N, P, M, SH (o 1A), G, F, M2 (o 22 K) y L.
Numerosos experimentos publicadas han demostrado que las proteínas mayores implicadas en la protección son: F, G y N. La glicoproteína de fusión F sintetizada como precursor F_{0} se escinde en dos subunidades F1 (48 kDa) y F2 (20 kDa) enlazadas por unos puentes disulfuro. La proteína F está conservada entre el VRS-A y el VRS-B (91% homología). Al contrario, la glicoproteína de enlace C es muy variable de un sub-grupo a otro. Únicamente se conserva altamente, una región de 13 aminoácidos (aa 164 a aa 176) y cuatro residuos cisteína (173, 176, 182 y 186) se mantienen en cada sub-grupo. Se ha demostrado en los modelos animales que las dos glicoproteínas F y G juegan un papel mayor en la inmunología del VRS. Los anticuerpos monoclonales dirigidos contra G y F son capaces de neutralizar el virus in vitro y administrados pasivamente, protegen la rata de las algodoneras contra la infección por el VRS.
Los tratamientos actuales contra el agravamiento de la enfermedad debido al VRS en los lactantes son las liberaciones de la obstrucción de las vías respiratorias mediante la aspiración de las mucosidades y la asistencia respiratoria por ventilación. Un antiviral, la Ribavirina parece ser eficaz en los casos gravemente afectados. Sin embargo, su utilización en la terapia pediátrica está todavía mal definida. La inmunización pasiva con unas inmunoglobulinas anti-VRS es una vía alternativa en los tratamientos de las infecciones graves de VRS: no se ha observado ningún efecto secundario indeseable. Sin embargo, dicho tipo de tratamiento resulta muy costoso y difícilmente extrapolable a gran escala.
Se han emprendido las diferentes aproximaciones de vacunación contra el VRS humano: o bien la vacuna protege contra la infección del VRS en el animal (roedores, primates) pero induce una patología pulmonar, o bien la vacuna no es suficientemente inmunogénica y no protege (Connors y col., Vaccine 1992; 10: 475-484).
De entre los documentos de la técnica anterior, se puede citar el documento Sjölander et al. (Immunomethods, 2, 1, 79-82, 1993), que describe dos sistemas de expresión bacteriana de proteínas de fusión basados en ZZ y BB; ZZ es un dominio sintético derivado de la proteína A del Estafilococo que presenta afinidad por la IgG, BB es un derivado de la proteína G del Estreptococo que presenta afinidad por la albúmina humana. Se han fusionado diferentes inmunógenos de Plasmodium falciparum, P: M1, M2, M3, M5, CARP, N2-N4 con ZZ y/o BB.
Se puede asimismo citar el documento Sjölander et al. (Infection and Immunity, 58, 4, 858-859, 1990), que describe el mismo sistema dual de expresión basado en ZZ-M1 y BB-M1, M1 es un antígeno de Plasmodium falciparum. En dicho documento, los conejos se inmunizaron con ZZ-M1 en presencia del Adyuvante Freund (FCA) y las respuestas del anticuerpo control M1 se detectaron y analizaron con BB-M1 mediante el método ELISA.
Se puede asimismo citar el documento Sjölander et al. (Experimental Parasitology, 76, 2, 134-145, 1993), que describe unos experimentos de inmunización con las proteínas de fusión SpA-CARP, SpA es la proteína A del Estafilococo y CARP (Clustered Asparigine-Rich protein) es una proteína de 50 kD de Plasmodium falciparum. La proteína SpA-CARP se utiliza como inmunógeno en el conejo, en presencia de inmunoestimulantes tales como el Adyuvante Freund (CPA) o ISCOMS. Los autores describen asimismo que se llevan a cabo unos recuerdos de inmunización con BB-CARP.
Por último, se puede citar el documento de la patente europea publicada con el número EP 0 327 522 que describe la producción de una proteína de fusión recombinante que comprende un polipéptido derivado de la proteína G del Estreptococo fusionado con un antígeno de Plasmodium falciparum.
Es por ello que la presente invención tiene como objeto la utilización de un inmunógeno, de un antígeno o de una hapteno, y de una molécula soporte para la preparación de un complejo destinado a ser administrado a un huésped y para mejorar la inmunogenicidad de dicho inmunógeno en relación con la del inmunógeno solo, independientemente del modo de administración y en ausencia de cualquier co-administración de inmunoestimulante, caracterizada porque dicho antígeno o hapteno se acopla de forma covalente a dicha molécula soporte, para formar dicho complejo, porque dicha molécula soporte es un fragmento polipeptídico derivado de la proteína G del estreptococo capaz de unirse específicamente a la seroalbúmina de mamífero, y porque dicho inmunógeno se selecciona de entre el grupo siguiente de inmunógenos derivados de la glicoproteína G del virus respiratorio sincitial (VRS) humano o bovino, sub-grupo A o B:
-
la secuencia SEC ID nº 1, SEC ID nº 2, SEC ID nº 51 o una secuencia que presenta por lo menos el 80% de homología con dicha secuencia SEC ID nº 1, SEC ID nº 2 o SEC ID nº 51; y
-
las secuencias SEC ID nº 3, nº 4 y nº 14 a nº 70.
La presente invención tiene asimismo por objeto dicho complejo formado tal como se define en la presente utilización según la invención siguiente.
La administración puede ser principalmente enteral, parenteral, u oral.
El complejo entre el inmunógeno y la molécula soporte ve mejorada su inmunogenicidad en relación con la del inmunógeno solo, en ausencia de cualquier otro inmunoestimulante.
Un complejo particularmente adaptado descrito en la presente solicitud se obtiene mediante la utilización de un conjugado con un polipéptido derivado de la proteína G del estreptococo; dicha proteína ha sido caracterizada por Nygren et col (J. Mol. Recognit. 1988; 1:69-74).
La invención tiene como objeto la utilización según la presente invención y el complejo en los que la molécula soporte presenta la secuencia de aminoácidos denominada secuencia ID nº: 74 o una secuencia que presenta por lo menos el 80% y preferentemente por lo menos el 90% de homología con dicha secuencia ID nº: 74.
Dicha secuencia se pueden asociar a unas secuencias de unión que favorecen su expresión en un huésped.
Se puede asimismo utilizar según la presente descripción una molécula soporte que presenta una de las secuencias ID nº: 75 o nº: 78, así como unas moléculas que presentan por lo menos el 80% y preferentemente por lo menos el 90% de homología con dichas secuencias.
La secuencia peptídica ID nº: 78 presenta las características siguientes:
Secuencia ID nº: 78
Peso molecular: 26529
Gly: 10 (4,08%) Ala: 30 (12,24%) Ser: 14 (6,12%)
Thr: 16 (6,53%) Val: 20 (8,16%) Leu: 23 (9,39%)
Ile: 12 (4,90%) Pro: 4 (1,63%) Cys: 0 (0,00%)
Met: 1 (0,41%) His: 2 (0,82%) Tyr: 9 (3,67%)
Asp: 19 (7,76%) Glu: 19 (8,16%) Lys: 27 (11,02%)
Arg: 5 (2,04%) Asn: 16 (6,94%) Gln: 8 (3,27%)
Phe: 7 (2,86%)
El complejo entre la molécula soporte y el compuesto del que se desea mejorar la inmunogenicidad se puede producir según la presente invención mediante las técnicas de ADN recombinante, principalmente la inserción o fusión en la molécula de ADN que codifica para el soporte, del ADN que codifica para el inmunógeno o el hapteno.
Según otra forma de utilización de la presente invención el acoplamiento covalente entre la molécula soporte y el inmunógeno se realiza por vía química, según unas técnicas conocidas por la persona experta en la técnica.
La invención tiene asimismo por objeto la utilización y un complejo según la presente invención caracterizado porque la preparación de dicho complejo comprende una etapa en la que se introduce en una célula huésped, un gen de fusión que comprende una molécula de ADN híbrido producida por inserción o fusión en la molécula de ADN que codifica para la molécula soporte, del ADN que codifica para el inmonógeno o hapteno, fusionado con un promotor. Según la presente invención, dicho gen de fusión se puede introducir por medio de un vector que principalmente puede tener como origen un vector de ADN que proviene de un plásmido, de un bacteriofago, de un virus y/o de un cósmido.
Un vector que presenta la secuencia ID nº: 76 ó 77 forma parte de la invención, así como el polipéptido correspondiente. Dichos polipéptidos presentan las características siguientes:
Secuencia ID nº: 76
Peso molecular: 38681
Gly: 11 (3,15%) Ala: 31 (8,88%) Ser: 18 (5,16%)
Thr: 37 (10,60%) Val: 25 (7,16%) Leu: 23 (6,59%)
Ile: 15 (4,30%) Pro: 19 (5,44%) Cys: 4 (1,15%)
Met: 2 (0,57%) His: 4 (1,15%) Tyr: 9 (2,58%)
Asp: 22 (6,30%) Glu: 22 (6,30%) Lys: 48 (13,75%)
Arg: 7 (2,01%) Asn: 26 (7,45%) Gln: 13 (3,72%)
Phe: 12 (3,44%) Trp: 1 (0,29%)
Secuencia ID nº: 77
Peso molecular: 39288
Gly: 12 (3,37%) Ala: 31 (8,71%) Ser: 22 (6,18%)
Thr: 37 (10,39%) Val: 26 (7,30%) Leu: 23 (6,46%)
Ile: 15 (4,21%) Pro: 21 (5,90%) Cys: 2 (0,56%)
Met: 2 (0,56%) His: 4 (1,12%) Tyr: 9 (2,53%)
Asp: 23 (6,46%) Glu: 22 (6,18%) Lys: 48 (13,48%)
Arg: 7 (1,97%) Asn: 26 (7,30%) Gln: 13 (3,65%)
Phe: 12 (3,37%) Trp: 1(0,28%)
Según la presente invención, la molécula de ADN que codifica para el complejo entre el inmunógeno y la molécula soporte se puede integrar en el genoma de la célula huésped.
En la presente solicitud, se describe un procedimiento que comprende, en una de sus formas de utilización, una etapa de producción del complejo, mediante ingeniería genética, en una célula huésped.
Según la presente invención, la célula huésped puede ser de tipo procariota y se puede seleccionar principalmente de entre en el grupo que comprende: E. coli, Bacillus, Lactobacillus, Staphylococcus y Streptococcus; se puede tratar asimismo de una levadura.
Según otro aspecto de la invención, la célula huésped proviene de un mamífero.
Según la presente invención, el gen de fusión que codifica para el complejo que presenta una inmunogenicidad mejorada se puede introducir principalmente en la célula huésped por medio de un vector viral.
En la presente descripción, se indica que el inmumógeno utilizado puede proceder de bacterias, de parásitos y de virus.
Dicho inmunógeno puede ser un hapteno: péptido, polisacárido.
El procedimiento según la invención resulta particularmente adecuado para un polipéptido de superficie de un agente patógeno. Cuando dicho polipéptido se expresa en forma de proteína de fusión, mediante las técnicas de ADN recombinante. La presente invención tiene como objeto una utilización y un complejo según la invención caracterizados porque la molécula de fusión se expresa, se ancla y se expone ventajosamente en la superficie de la membrana de las células huésped. Se utilizan unas moléculas de ácidos nucleicos que son capaces de dirigir la síntesis del antígeno en la célula huésped.
Dichas moléculas comprenden unas secuencias promotor, señal de secreción ligadas de forma funcional y secuencia que codifica para una región de anclaje en la membrana, que se adaptaran por la persona experta en la técnica.
El inmunógeno puede derivar principalmente de una glicoproteína de superficie del VRS: F y/o G.
Se obtienen unos resultados particularmente ventajosos con unos fragmentos de la proteína G del VRS, sub-grupos A o B.
Según la presente invención, las proteínas derivadas de la glicoproteína G del sub-grupo A y del sub-grupo B del VRS se pueden fusionar genéticamente o enlazarse químicamente a BB.
La presente solicitud describe un complejo obtenido a partir de la secuencia comprendida entre los aminoácidos 130 y 230 de la proteína G del VRS, o una secuencia que presenta por lo menos el 80% de homología con dicha secuencia de la proteína G.
Dicha secuencia se puede obtener a partir de VRS humano o bovino, perteneciente a los sub-grupos A o B.
La secuencia comprendida entre los aminoácidos 130 y 230 de la proteína G puede sufrir diversos tipos de modificaciones destinadas a modular su actividad inmunogénica y su expresión por el sistema huésped.
La solicitante ha demostrado, en particular, el interés de los polipéptidos en los que:
- el aminoácido Cys en las posiciones 173 y/o 186 se ha sustituido por un aminoácido que no forma puentes disulfuro en particular la serina, y/o
- los aminoácidos de las posiciones 176 y 182 son susceptibles de formar un enlace convalente diferente de un puente disulfuro principalmente el ácido aspártico y la ornitina, y/o
- los aminoácidos fenilalanina que corresponden a las posiciones 163, 165, 168 y/o 170 de la secuencia de la proteína G se han sustituido por un aminoácido polar, en particular la serina, y/o
- la secuencia comprendida entre los aminoácidos numerados 162 y 170 se ha eliminado.
Unos péptidos que presentan una de las secuencias ID nº: 1 a 73, o una secuencia que presenta por lo menos el 90% de homología con una de las secuencias ID nº 1 a 73 se describen particularmente en la presente solicitud.
Se han descrito asimismo otros inmunógenos en la presente solicitud. Dichos últimos comprenden un derivado de la proteína de superficie del virus de la hepatitis A, B y C, una proteína de superficie del virus del sarampión, una proteína de superficie del virus parainfluenza 3, en particular una glicoproteína de superficie tal como la hemaglutinina, neuraminidasa HN y la proteína de fusión F.
Las secuencias nucleotídicas, ARN o ADN, que codifican para unos complejos según la presente invención, y que pueden presentar unos elementos que permiten dirigir la expresión de determinadas células huésped específicas están comprendidas en la invención, principalmente cuando se trata de un gen de fusión que permite la preparación de tal complejo. Se pueden incorporar en un vector, viral o plasmídico, dicho vector está comprendido en la presente invención; dicho vector se administrará a un mamífero, principalmente en el núcleo de una composición farmacéutica, para permitir la producción in situ del complejo entre el inmumógeno y la molécula soporte.
La invención tiene asimismo como objeto un complejo entre un inmunógeno (P) y una molécula soporte, o un vector según la presente invención, a título de medicamento. Las composiciones farmacéuticas que contienen el gen o el complejo con unos excipientes fisiológicamente aceptables se describen en la presente solicitud.
La presente invención comprende asimismo la utilización de un complejo o una secuencia nucleotídica según la presente invención para la preparación de una vacuna.
La inmunización se podrá obtener mediante la administración de la secuencia nucleotídica, sola o por medio de un vector viral. Se puede asimismo utilizar la célula huésped, principalmente una bacteria inactivada. Por último, el complejo obtenido mediante el acoplamiento químico o en forma de una proteína de fusión induce una respuesta de los anticuerpos muy fuerte comparada con (P) solo enlazado con el adyuvante de Freund.
En el marco de una vacuna contra el VRS, la solicitante ha demostrado la eficacia de la proteína de fusión BBG2A, en la que G2A es un fragmento de 101 aminoácidos de la proteína G del VRS-A (G aa 130-aa 230) SEC. Id nº 1. Inmunizados los roedores, BBG2A y BBG2A\deltaC enlazados con el Alum (hidróxido de Aluminio) confieren una protección total contra la prueba de infección experimental contra el VRS-A (cepa Long).
Los ejemplos que siguen se destinan a ilustrar la invención.
En dichos ejemplos se referirá a la figura siguiente:
- Figura 1: Construcción de pVABBG2 (A).
Ejemplo 1 Clonaje del gen G2A y G2A\deltaC en un vector de expresión pVABB308 y producción de proteínas de fusión BBG2A, BBG2A\deltaC en Escherichia coli 1) Vector de expresión pVABB308
El vector de expresión en E.coli, pVABB308 (5,5 Kbp) incluye el promotor del operón triptófano (Trp), seguido del gen codificante para la región de unión a la Albúmina humana BB, de origen de la proteína G del Estreptococo (Nygren et col, J. Mol. Recognit. 1988; 1: 69-74) y un sitio de clonaje múltiple mp8, en el que se pueden insertar diversos genes heterólogos (ver figura 1). El plásmido pVABB308 contiene un gen de resistencia a la ampicilina (AMP), un gen de resistencia a la Tetraciclina (Tet) y el origen de replicación de E.coli. La expresión del gen se induce por adición del I.A.A (Indole Acrylic Acid) en el medio de cultivo de E.coli en fase de crecimiento exponencial.
2) Clonaje del gen G2A y G2A\deltaC en pVABB308 2.1 BBG2A
El gen codificante para G (130-230) del VRS-A se ha obtenido mediante el método de ensamblaje de genes sintéticos en fase sólida (según Stahl et col, Biotechniques 1992; 14: 424-434) y se ha clonado en el vector de expresión pVABB por los sitios de restricción EcoRI y Hind III. El vector resultante se denomina pVABBG2A (5791 pb). El producto de fusión BBG2A se purifica a partir del citosol de E.coli transformado mediante el vector pVABBG2A bajo dos formas:
- una forma soluble, BBG2A (sol.), después de la desintegración de las células y la centrifugación, el sobrenadante que contiene las proteínas solubles se carga directamente en la columna de afinidad.
Los productos se recuperan después de la elusión a un pH ácido.
- una forma insoluble, BBG2A (insoluble), obtenido después de la renaturalización en un medio oxidante de los cuerpos de inclusión disueltos en un agente caotrópico (Guanidina HCI) (31, 93) y después se purifica por afinidad.
2.2 BBG2A\deltaC
Los dos residuos cisteina (173, 186) se sustituyen por unas serinas (Ser). En el momento del ensamblaje de los genes, el oligonucleótido que presenta los 2 residuos Cys codificados por el triplete (TGC) se ha sustituido simplemente por otro oligonucleótido del que se ha cambiado uno de los nucleótidos: (TCC) codificante para Ser. Se ha querido alterar deliberadamente un puente disulfuro en dicha versión para guardar únicamente el puente disulfuro formado por las Cys (176, 182), que es crítico para la protección (Trudel et col., Virology 1991; 185: 749-757).
Se ha introducido un residuo Met entre la cola de afinidad BB y G2A o BB y G2A\deltaC:BB-Met-G2A, BBM y G2A\deltaC, lo que permite llevar a cabo una partición química del producto de fusión mediante el bromuro de cianógeno (CNBr); la mezcla se pasa por la columna de afinidad de HSA-Sefarosa. El péptido dividido G2A (G2A\deltaC) no se fija y por lo tanto se recupera en el eluato, y a continuación se purifica mediante HPLC de fase inversa.
3) Fermentación y purificación de las proteínas de fusión
En dos erlenmeyers que contienen 250 ml de medio TSB (Triptic Soy Broth, Difco) con Ampicilina (100 \mug/ml, sigma) y Tetraciclina (8 \mug/ml, sigma), se inocula E. coli RV308 transformada con los plásmidos pVABBG2A y pVABBG2A\deltaC respectivamente. Se incuba durante 16 horas a una temperatura Tª = 32ºC bajo agitación. Se inoculan 200 ml de dicho cultivo en un fermentador (CHEMAP CF 3000, ALFA LAVAL) que contiene 2 litros de medio de cultivo. El medio contiene (g/l) = glicerol, 5; sulfato de amonio, 2,6; dihidrogenofosfato de potasio, 3; hidrogenofosfato dipotásico, 2; citrato de sodio 0,5; extracto de levadura, 1; Ampicilina, 0,1; Tetraciclina 0,008; Tiamina, 0,07; sulfato de magnesio, 1 y 1 ml/l de solución de elementos trazas y 0,65 ml/l de solución de vitaminas. Los parámetros controlados durante la fermentación son: el pH, la agitación, la temperatura, la tasa de oxigenación, la alimentación de las fuentes combinadas (glicerol o glucosa). El pH se regula a 7,3. La temperatura se fija a 32ºC. El crecimiento se controla mediante la alimentación de glicerol a una velocidad constante para mantener la señal de presión del oxígeno disuelto al 30%. Cuando la turbidez del cultivo (medida a 580 nm) alcanza el valor de 80 (aproximadamente después de 27 horas de cultivo), la producción de las proteínas se induce mediante la adición del ácido indol acrílico (I.A.A) a la concentración final de 25 mg/l. Tres horas después de la inducción, las células se recogen por centrifugación. Los rendimientos en biomasa obtenidos son de aproximadamente 150 g/l de cultivo.
Se resuspende una fracción de 30 g de biomasa húmeda en 70 ml de solución TST (Tris-HCl 50 mM pH 8,0, NaCl 200 mM, 0,05% Tween 20 y EDTA 0,5 mM). Las células se desintegran por sonicación (Vibracell 72401, Sonics & Materials). Después de la centrifugación del lisado celular, se filtra el sobrenadante (1,2 \mum) y se diluye en 500 ml de TST. Las proteínas de fusión obtenidas de este modo en formas solubles se purifican en una columna de afinidad: HSA-Sefarosa (human serum albumin) según el protocolo descrito por (Stahl et al, J. Immunol. Methods, 1989; 124: 43-52).
El lisado insoluble, después de la centrifugación, se lava una vez con un tampón (Tris-HCl 50 mM pH 8,5; MgCl_{2} 5 mM). Después del lavado, el depósito se solubiliza en 30 ml de clorhidrato de guanidina 7 M, Tris-HCl 25 mM (pH 8,5), Ditiotreitol (DTT) 10 mM, seguido de una incubación a una temperatura de 37ºC durante 2 horas. Las proteínas solubilizadas se adicionan a un tampón de renaturalización (Tris-HCl 25 mM (pH 8,5); NaCl 150 mM y 0,05% Tween 20).
La concentración del clorhidrato de guanidina se ajusta a la concentración final de 0,5 M en el tampón de renaturalización antes de la adición de las proteínas de fusión solubilizadas. La mezcla se incuba a temperatura ambiente, bajo agitación moderada, durante 16 horas. Después de la centrifugación, los productos de fusión solubles en el sobrenadante se purifican en la columna de HSA-sefarosa. Las proteínas de fusión purificadas se analizan en gel de SDS-PAGE (12%) en unas condiciones reducidas, sobre el aparato MINI PROTEAN II SYSTEM (BIORADS). Las proteínas se visualizan con Coomassie brilliant blue R250.
Ejemplo 2 Efecto portador del polipeptido BB e inmunogenicidad de BBG2A\deltaC 1. Esquema de inmunizaciones
Unos ratones C57BL/6 (5 por lote) recibieron 2 inyecciones sub-cutáneas de 10 \mug de equivalente G2A\deltaC en presencia de adyuvantes de Freund a J0 (adyuvante completo) y J14 (adyuvante incompleto). Al J21, se comprobaron individualmente los sueros mediante ELISA para la producción de anticuerpos específicos de G2A\deltaC. El título de anticuerpos se determina como la inversa de la dilución del suero que presenta 2 veces la absorbancia del suero del animal antes de la inmunización. Los resultados presentados son la media aritmética de los títulos de los anticuerpos anti-G2A\deltaC obtenidos para cada uno de los lotes.
TABLA DE RESULTADOS
Antígeno Título medio de anticuerpo anti G2A\deltaC
1) G2A\deltaC + AF 180
2) BBG2A\deltaC + AF 92.800
3) G2A\deltaC +BB + AF 1.200
2. Resultados
La tabla anterior muestra que G2A\deltaC es un inmunógeno débil incluso en presencia de adyuvante de Freund. La proteína BB presenta un poder adyuvante bajo, ya que adicionada a G2A\deltaC el título de anticuerpo únicamente aumenta de un log. Al contrario, la fusión de BB con G2A\deltaC aumenta la producción de anticuerpo anti-G2A\deltaC en aproximadamente 3 log.
Podemos por lo tanto concluir que BB es una excelente proteína portadora para G2A\deltaC y que la proteína de fusión BBG2A\deltaC es muy inmunogénica.
Ejemplo 3 Estudio de protección inducida por unas proteínas de fusión BBG2A y BBG2A\deltaC en los roedores a) Protocolos de estudio
Se utilizan en los experimentos de inmunización, unos ratones BALB/c y unas ratas de las algodoneras (Sigmodon hispidus) hembras (IFFA-CREDO), modelos animales para la infección por el VRS.
Los grupos de animales reciben 1, 2, o 3 dosis de 200 \mug, 20 \mug, 2 \mug o 0,2 \mug de vacuna candidata VRS-A en el 20% de hidróxido de aluminio (Al(OH)_{3}) (v/v) con 2 semanas de intervalo. Los ratones se inmunizan por vía intraperitoneal (i.p.), las ratas de las algodoneras mediante inyecciones intramusculares (i.m.). Los grupos control reciben 10^{5} DITC_{50} de VRS-A o del PBS-A (PBS sin Ca^{2+} no Mg^{2+}) en el 20% de hidróxido de aluminio (v/v).
De tres a cuatro semanas después de la última inmunización, los ratones se infectan experimentalmente por vía intranasal (i.n.) con aproximadamente 10^{5} DICT_{50} VRS-A. Se sacrifican los animales 5 días más tarde, después de una punción sanguínea intracardíaca. La presencia del virus en los pulmones se comprueba según Trudel et col., Virology 1991; 185, 749-757).
Los diferentes productos ensayados son BBG2A, BBG2A\deltaC y BB sólo.
b) Tabla de resultados TABLA 3.1 Resultados de protección en los roedores
1
2
TABLA 3.3 Resultados de los ensayos inmunológicos en los ratones
Antígenos ELISA (LOG 10 medio) Anticuerpos neutralizantes (título medio/25 \mul)
BBG2A 5,08 (28) \geq 512 (15)
BBG2A\deltaC 3,71 (29) \geq 256 (12)
RSV-A 5,32 (21) \geq 512 (12)
( ) = número de animales ensayados
C) Discusión
Los resultados experimentales de protección se presentan en las tablas 3.1 y 3.2. Cada molécula se ha ensayado en el transcurso de 2 ensayos independientes, al menos. Los resultados muestran claramente que, independientemente de los protocolos de inmunización utilizados, BBG2A protege los roedores contra una infección pulmonar por el VRS-A. En nuestras condiciones experimentales, una inyección única de 200 \mug, 2 de 2 \mug, o 3 de solamente 0,2 \mug de BBG2A son suficientes para proteger los ratones contra la infección (Tabla 3.2). Se ha detectado virus en un tercer animal del mismo grupo pero en el límite de detección. Dichos resultados sugieren que BBG2A presenta un potencial y una eficacia muy comparables a las del VRS-A en los animales inmunizados controles y a los de las vacunas candidatas sub-unitarias del VRS-A descritas en la literatura.
BBG2A\deltaC ha resultado asimismo eficaz en los ratones, protegiendo 32 animales de 34 contra la infección pulmonar. Dos dosis de 200 \mug se han revelado eficaces, así como 3 inyecciones de 0,2 \mug. De este modo, en dichos esquemas de inmunización que presentan diversas inyecciones, BBG2A\deltaC ha resultado comparable en actividad y eficacia en el ratón a las vacunas candidatas sub-unitarias del VRS-A descritas anteriormente.
Los resultados de los ensayos inmunológicos de la respuesta humoral y celular, en los ratones BALB/c, se presentan en la tabla 3.3. En general, los títulos medios de anticuerpos específicos anti-VRS-A obtenidos por la técnica ELISA se consideran como uno de los reflejos de la actividad protectora de las vacunas candidatas. Los sueros de los ratones inmunizados con el VRS-A han presentado de forma constante unos títulos de anticuerpos anti-VRS-A elevados. El virus no se ha detectado nunca en los pulmones de dichos animales. Los ratones inmunizados por BBG2A han presentado unos títulos medios de anticuerpos anti-VRS-A similarmente elevados y siempre se han protegido en el momento de una infección experimental por el VRS-A.
BBG2A\deltaC ha permitido inducir unos títulos medios de anticuerpos anti-VRS-A inferiores en relación con las moléculas citadas anteriormente. Además, los animales inmunizados por dicha molécula han demostrado una protección ligeramente reducida. Si los sueros de algunos animales inmunizados por BBG2A\deltaC han presentado unos títulos de anticuerpos específicos anti-VRS-A muy bajos (datos no representados), algunos de dichos animales no obstante han estado totalmente protegidos en el momento de una infección experimental por el VRS-A.
Los estudios de protección ponen de manifiesto la eficacia protectora de las vacunas candidatas sub-unitarias anti-VRS-A. Dos moléculas, BBG2A y BBG2A\deltaC, se han revelado muy eficaces en dos modelos de roedores para la infección con el VRS-A, en el momento de la infección experimental con el virus homólogo.
Ejemplo 4 Eficacia inmunogénica y protectora de BBG2A\deltaC en relación con G2A\deltaC en los ratones BALB/c Materiales y métodos
Dos grupos de 4 ratones BALB/c, seronegativos en relación con el VRS-A, se han inmunizado con unas inyecciones intraperitoneales (i.p.) 2 veces con un intervalo de 2 semanas de 5,1, 0,51 y 0,051 nM de BBG2A\deltaC y de G2A\deltaC. La última molécula se deriva de una partición química de BBG2A\deltaC mediante Bromuro de cianógeno. Un grupo de 3 ratones se ha inmunizado 2 veces con 2 semanas de intervalo con el tampón PBS para servir de controles negativos. El Alhydrogel (Al (OH)_{3}) (20% v/v) (Superfos Biosector, Denmark) se ha utilizado como adyuvante para todas las inmunizaciones. Se ha realizado una punción sanguínea 2 semanas después de la última inmunización con el fin de determinar los títulos mediante ELISA contra el G2A\deltaC. Los ratones se han infectado experimentales con el VRS-A (10^{5} DITC_{50}) 3 semanas después de la última inmunización. Se han sacrificado los ratones 5 días más tarde y se han sometido a una punción cardiaca con el fin de titular los anticuerpos anti-VRS-A post-infección, y se han extraído los pulmones con el fin de titular el VRS-A pulmonar.
\newpage
Resultados
Ver Tabla 4
Los resultados de ELISA anti-G2A\deltaC indican que BBG2A\deltaC ha sido siempre más inmunogénica que G2A\deltaC, sea cual sea la dosis administrada (0,051 - 5,1 nM). Sobretodo a 0,051 nM, BBG2A\deltaC induce un título medio anti-G2A\deltaC de log_{10} 3,27, mientras que la misma concentración de G2A\deltaC no induce los anticuerpos anti-G2A\deltaC detectables. Del mismo modo, en lo que se refiere a los resultados de ELISA anti-VRS-A; 4 ratones de 4 inmunizados con 5,1 o 0,51 nM de BBG2A\deltaC fueron seropositivos, cuyos títulos medios de log_{10} 2,67 y 2,78, respectivamente. Dos ratones de 4, sin embargo, inmunizados con 5,1 nM de G2A\deltaC fueron seropositivos, de los que uno en el límite de detección del ensayo y un título medio de log_{10} \leq 2,19. Los ratones inmunizados con 0,51 ó 0,051 nM de G2A\deltaC no han mostrado evidencia de anticuerpo anti-VRS-A.
Todos los ratones inmunizados con 5,1 ó 0,51 nM de BBG2A\deltaC han tenido sus pulmones protegidos contra una infección experimental con el virus homólogo. Menos en un ratón inmunizado con 0,51 nM de BBG2A\deltaC que sólo ha presentado virus en el límite de detección del método, la presencia de virus pulmonar no se ha puesto de manifiesto en ninguno de los otros animales. Después de la inmunización con 0,051 nM de BBG2A\deltaC, 3 ratones de 4 están protegidos, de los que 2 sin ninguna evidencia de virus pulmonar. El 4º ha sufrido una disminución de virus pulmonar del orden de log_{10} 1,16 en relación con el título medio de los controles inmunizados con el PBS-A.
Tres ratones de 4, inmunizados con 5,1 nM de G2A\deltaC, han tenido los pulmones protegidos contra una infección experimental con el VRS-A. El 4rto ha sufrido una disminución del virus pulmonar del orden de log_{10} 1,75 en relación con el título medio de los controles inmunizados con el tampón PBS-A. De entre los ratones protegidos, sólo se ha detectado uno sin virus pulmonar detectado. Hemos observado los mismos resultados después de la inmunización con 0,51 nM de G2A\deltaC, a parte de un ratón no protegido que no ha presentado una disminución importante de virus pulmonar en relación con los controles inmunizados con el tampón PBS-A. Las vías respiratorias inferiores de los ratones inmunizados con 0,051 nM de G2A\deltaC no se han protegido contra una infección experimental con el virus homólogo.
Conclusiones
Los resultados indican, según las condiciones de dicho estudio, que BBG2A\deltaC es del orden de 10 a 100 veces más eficaz que G2A\deltaC para la inducción de las respuestas inmunitarias que protegen los pulmones contra una infección experimental con el VRS-A.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(Tabla pasa a página siguiente)
3
Ejemplo 5 Eficacia protectora de las vacunas candidatas en los ratones BALB/c contra una infección experimental con el VRS-A Materiales y métodos
Se inmunizaron unos grupos de 3 ratones 2 veces con un intervalo de 2 semanas con 20 \mug de los productos siguientes:
BBG7A, BBG200A, BBG198A, BBG196A, BBG194A y BBG192A,
G7A (SEC id 29), G200 (SEC id 23), G198 (SEC id 24), G196 (SEC id 25), G194 (SEC id 26); G192 (SEC id 27).
Se inmunizaron dos grupos de 6 y 4 ratones 2 veces con 2 semanas de intervalo con el PBS-A y el VRS-A (10^{5} TCID_{3}), respectivamente, como controles. El Alhydrogel (Al (OH)_{3}) (20% v/v) se ha utilizado como adyuvante para cada inmunización. Se llevó a cabo una extracción de sangre en el ojo en todos los animales antes de la 1era inmunización con el fin de comprobar su seronegatividad frente a VRS-A. Todos ellos fueron sero-negativos o bien presentaban unos títulos en el límite de detección del ensayo de ELISA. Dos semanas después de la 2ª inmunización, se llevó a cabo una extracción en el ojo para confirmar su seroconversión frente a los antígenos y al VRS-A. Tres semanas después de la última inmunización, se infectaron experimentalmente los ratones por vía intra-nasal con 10^{5} TCID_{50} de VRS-A. Se sacrificaron los ratones 5 días después de la infección experimental, se sometieron a una punción cardiaca; se extrajeron los pulmones con el fin de titular el virus en las vías respiratorias inferiores. Se ensayaron los sueros post-infección mediante ELISA contra los antígenos virales.
Resultados
Ver Tabla 5
Los ratones inmunizados con BBG200A, BBG198A, BBG196A, BBG194A y BBG192A y BBG7A están protegidos contra una infección experimental con el virus VRS-A sin evidencia de virus en los pulmones. Todos los productos han inducido unos títulos medios de anticuerpos elevados contra el antígeno de inmunización (log_{10} 5,77 - 6,41) y el VRS-A (log_{10} 3,38 - 4,66).
Dichos resultados están en concordancia con los que se obtienen de los ratones inmunizados con el VRS-A.
Conclusiones
Las moléculas anteriores son muy inmunogénicas e inducen unas respuestas inmunitarias capaces de proteger los pulmones de los ratones BALB/c contra una infección experimental con el VRS-A. Constituyen por lo tanto unas vacunas candidatas potenciales contra el VRS-A.
Ejemplo 6 Eficacia protectora de BB-G4A en los ratones BALB/c contra una infección experimental con el VRS-A Materiales y métodos
Se inmunizaron dos grupos de 3 ratones 2 veces con un intervalo de 2 semanas con 20 \mug de BB-G4A o TT-G4A. Las moléculas son derivadas de un acoplamiento químico del péptido G4A (residuos 172-187) sobre las proteínas portadoras (o bien BB o bien TT). Se inmunizaron dos grupos de 6 y 4 ratones 2 veces con 2 semanas de intervalo con el PBS- A y el VRS-A (10^{5} TCID_{50}), respectivamente, como controles. El Alhydrogel (Al (OH)_{3}) (20% v/v) se ha utilizado como adyuvante para cada inmunización. Se llevó a cabo una extracción en el ojo en todos los animales antes de la 1era inmunización con el fin de comprobar su sero-negatividad frente al VRS-A. Todos ellos fueron sero-negativos o bien presentaban unos títulos en el límite de detección del ensayo de ELISA. Dos semanas después de la 2ª inmunización, se llevó a cabo una extracción en el ojo para confirmar su seroconversión frente a los antígenos y a VRS-A. Tres semanas después de la última inmunización, se infectaron experimentalmente los ratones por vía intra-nasal con 10^{5} TCID_{50} de VRS-A. Se sacrificaron los ratones 5 días después de la infección experimental, se sometieron a una punción cardiaca; se extrajeron los pulmones con el fin de titular el virus en las vías respiratorias inferiores. Se ensayaron los sueros post-infección mediante ELISA contra los antígenos virales.
Resultados
BB-G4A, proteína derivada de un acoplamiento del péptido G4A con BB, ha protegido los ratones sin evidencia del virus pulmonar. TT-G4A, proteína derivada de un acoplamiento del péptido G4A con TT ha resultado menos eficaz que BB-G4A en lo que se refiere a la protección de los pulmones; 2 ratones de 3 están protegidos, respectivamente, en los que 1 sin evidencia de virus pulmonar. EL ratón no protegido ha sufrido una disminución de la tasa de virus del orden de log_{10} 1,52 en relación con los controles inmunizados con el PBS-A. Las proporciones portador: péptido para BB-G4A y TT-G4A son de \sim 1:7 y \sim 1:21, respectivamente. Dichos resultados indican por lo tanto que BB es un mejor portador de G4A que TT.
Los 2 productos han inducido unos títulos de anticuerpos elevados contra el antígeno de inmunización (log{10} 5,77 y 6,73, respectivamente, para los sueros anti-BB-G4A y anti-TT-G4A post-inmunización). Al contrario, los animales inmunizados con unas vacunas candidatas han presentado unos títulos anti-VRS-A muy bajos (log_{10} 2,11 \pm 0,28 y 2,43 \pm 0,48, respectivamente, para los sueros anti-BB-G4A y anti-TT-G4A post-inmunización).
Conclusiones
BB-G-4A es capaz de proteger los ratones contra una infección experimental con el VRS-A sin evidencia de virus pulmonar. Confirma por lo tanto el potencial como vacuna anti-VRS-A. Los resultados indican asimismo que BB es un mejor portador de G4A que TT.
4
Ejemplo 7 Protección cruzada de los pulmones de los ratones BALB/c inmunizados con BBG2A por vía intraperitoneal contra una infección heteróloga con el VRS-B (Cepa 8/60) Materiales y métodos
Se inmunizaron unos ratones BALB/c ya sea 2 veces o bien 3 veces con un intervalo de 2 semanas con 20 \mug de BBG2A mediante una inyección intraperitoneal. Se inmunizó otro grupo de ratones de la misma forma con PBS-A como controles. El Alhydrogel (Al (OH)_{3}) (20% v/v) se ha utilizado como adyuvante para cada inmunización. Se llevó a cabo una extracción de sangre antes de la 1era inmunización con el fin de comprobar su sero-negatividad frente al VRS-A. Tres semanas después de la última inmunización se infectaron experimentalmente los ratones por vía intra-nasal con 10^{5} TCID_{50} de VRS-A o con 10^{5} TCID_{50} de VRS-B . Se sacrificaron los ratones 5 días después de la infección, se sometieron a una punción cardiaca; se extrajeron los pulmones con el fin de titular el virus en las vías respiratorias inferiores. Se ensayaron los sueros post-infección mediante ELISA contra los antígenos virales.
Resultados
Todos los ratones fueron sero-negativos para el VRS-A al principio del estudio. El primer grupo, 11 ratones de 11, inmunizados con 20 \mug de BBG2A, están protegidos frente a la infección experimental con el VRS-A. El segundo grupo, 11 ratones de 11, están asimismo protegidos contra una infección heteróloga con el VRS-B (tabla 7).
Conclusiones
La inmunización de los ratones BALB/c con el antígeno BBG2A confiere una protección no solamente contra el VRS-A sino también frente una infección experimental con el VRS-B. El antígeno BBG2A induce por lo tanto una protección cruzada frente a una infección heteróloga.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(Tabla pasa a página siguiente)
5
Ejemplo 8 Estudio del efecto priming de BB sobre la inmunizacion con BBG2A
Se sensibilizan unos ratones BALB/c frente la proteína BB y posteriormente reciben una inyección de BBG2A. Los títulos IgG anti-G2A obtenidos de dichos animales se comparan con los obtenidos de unos ratones que reciben dos inyecciones de BBG2A.
Material y métodos
Dos ratones BALB/c (N = 5 /lote) se inmunizan subcutáneamente tal como se describe a continuación:
J0 J14
Lote 1 0,1 ml de PBS 0,1 ml de PBS
Lote 2 20 \mug BBG2A + AFC 20 \mug BBG2A + AFI
Lote 3 100 \mug BB + AFC 100 \mug BB + AFI
AFC: adyuvante Freund completo; AFI: adyuvante Freund incompleto
La sangre de los animales se extrae a J7 y J21 y el título IgG sérico anti-G2A se determina individualmente mediante ELISA.
Resultados
Tabla de títulos IgG anti-G2A
J7 J21
Lote 2 Lote 1 Lote 2 Lote 3
S1 2 2 3,81 3,51
S2 2 2 3,81 4,11
S3 2 2 3,81 4,41
S4 2 2 4,41 3,51
S5 2 2 3,81 4,71
m \pm \sigma 2 2 3,93 \pm 0,27 4,05 \pm 0,54
En resumen, la tabla de los títulos IgG anti-G2A a J7 y J21:
J0 J7 J14 J21
Lote 1 0,1 ml de PBS - 0,1 ml de PBS 2
Lote 2 20 \mug BBG2A + AFC 2 20 \mug BBG2A + AFI 3,93 \pm 0,27
Lote 3 100 \mug BB + AFC - 100 \mug BB + AFI 4,05 \pm 0,54
Lote 2
2 inyecciones de BBG2A
Una semana después de la primera inyección de 20 \mug de BBG2A, no se detecta IgG anti-G2A. Al contrario, una semana después de la segunda inyección de BBG2A se produce una fuerte producción de IgG anti-G2A; aproximadamente 4 log 10.
Lote 3
Inyección nº 1 = BB, inyección nº 2 = BBG2A
Después de la sensibilización con 100 \mug de BB, una inyección de 20 \mug de BBG2A es suficiente para inducir un título IgG anti-G2A de 4 log 10, título similar al obtenido con 2 inyecciones de 20 \mug de BBG2A.
Conclusión
Dichos resultados muestran que BB induce la protección de células Th memoria que han proporcionado el "help" necesario para las células B específicas de G2A en el momento de la inmunización primaria con BBG2A, lo que desemboca en una respuesta secundaria de tipo IgG. De este modo, unas células simples B pueden por lo tanto ser estimuladas para producir unos anticuerpos anti-G2A.
BB proporciona por lo tanto el "T cell help" adecuado para la producción de anticuerpos dirigidos contra G2A; y debido a ello, se comporta como una proteína portadora.
1) INFORMACIONES GENERALES:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
DEPOSITANTE:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE: PIERRE FABRE MEDICAMENT
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
CALLE: 45 PLACE ABEL GANGE
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
CIUDAD: BOULOGNE
\vskip0.333000\baselineskip
(E)
PAÍS: FRANCIA
\vskip0.333000\baselineskip
(F)
CODIGO POSTAL: 92100
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TÍTULO DE LA INVENCIÓN: PROCEDIMIENTO PARA MEJORAR LA INMUNOGENICIDAD DE UN COMPUESTO INMUNOGÉNICO O DE UN HAPTENO Y APLICACIÓN PARA LA PREPARACIÓN DE VACUNAS
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
NÚMERO DE SECUENCIAS: 78
\vskip0.666000\baselineskip
(iv)
FORMA DESCIFRABLE POR ORDENADOR:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
TIPO DE SOPORTE: Disquete
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
ORDENADOR: Apple Macintosh
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
SISTEMA OPERATIVO: MAC OS Sistema 7
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
PROGRAMA: PatentIn Release # 1.0, versión # 1,30 (OEB)
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
DATOS DE LA SOLICITUD ANTERIOR:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NÚMERO DE LA SOLICITUD: FR 9413310
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
FECHA DE DEPÓSITO: 07-NOV-1994
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 1:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 303 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 303
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 1
6 
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 2:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 303 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 303
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 2
7 
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 3:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 303 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
UBICACIÓN: 1 .... 303
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 3
8 
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 4:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 303 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 303
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 4
9 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 5:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 42 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
UBICACIÓN: 1 .... 42
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 5
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.333000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskip
AGC ATC TGC AGC AAC AAC CCG ACC TGC TGG GCG ATC TGC AAA 
\hfill
42 
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Ile Cys Ser Asn Asn Pro Thr Cys Trp Ala Ile Cys Lys}
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 6:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 42 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 42
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 6
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.333000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskip
AGC ATC TGC GGC AAC AAC CAG CTG TGC AAA AGC ATC TGC AAA 
\hfill
42 
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Ile Cys Gly Asn Asn Gln Leu Cys Lys Ser Ile Cys Lys}
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 7:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 42 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 42
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 7
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.333000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskip
AGC ATC TGC AGC AAC AAC CCG ACC TGC TGG GCG ATC AGC AAA 
\hfill
42 
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Ile Cys Ser Asn Asn Pro Thr Cys Trp Ala Ile Ser Lys}
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 8:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 42 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 42
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 8
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.333000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskip
AGC ATC TGC GGC AAC AAC CAG CTG TGC AAA AGC ATC AGC AAA 
\hfill
42 
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Ile Cys Gly Asn Asn Gln Leu Cys Lys Ser Ile Ser Lys}
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 9:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 14 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Modified-site
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 9
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRAS INFORMACIONES:/Xaa significa Orn
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 9
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Ile Asp Ser Asn Asn Pro Thr Xaa Trp Ala Ile Cys Lys}
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 10:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 14 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Modified-site
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 9
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRAS INFORMACIONES:/Xaa significa Orn
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 10
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Ile Asp Gly Asn Asn Gln Leu Xaa Lys Ser Ile Cys Lys}
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 11:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 14 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Modified-site
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 9
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRAS INFORMACIONES:/Xaa significa Orn
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 11
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Ile Asp Ser Asn Asn Pro Thr Xaa Trp Ala Ile Ser Lys}
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 12:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 14 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Modified-site
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 9
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
OTRAS INFORMACIONES:/Xaa significa Orn
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 12
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Ile Asp Gly Asn Asn Gln Leu Xaa Lys Ser Ile Ser Lys}
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 13:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 48 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 48
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 13
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.333000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskip
AGC AAA CCG ACC ACC AAA CAG CGT CAG AAC AAA CCG CCG AAC AAA CCG 
\hfill
48 
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Lys Pro Thr Thr Lys Gln Arg Gln Asn Lys Pro Pro Asn Lys Pro}
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 14:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 303 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 303
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 14
10 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 15:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 51 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 51
\vskip0.666000\baselineskip
(xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 15
\vskip1.000000\baselineskip
11 
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 16:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 51 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 51
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 16
\vskip1.000000\baselineskip
12 
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 17:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 51 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 51
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 17
\vskip1.000000\baselineskip
13 
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 18:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 51 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.333000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 51
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 18
\vskip1.000000\baselineskip
14 
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 19:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 17 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Modified-site
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 16
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRAS INFORMACIONES:/Xaa significa Orn
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 19
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Val Pro Asp Ser Ile Asp Ser Asn Asn Pro Thr Xaa Trp Ala Ile Xaa}
\vskip1.000000\baselineskip
\sac{Lys}
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 20:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 17 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Modified-site
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 12
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRAS INFORMACIONES:/Xaa significa Orn
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 20
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Val Pro Ser Ser Ile Asp Ser Asn Asn Pro Thr Xaa Trp Ala Ile Ser Lys}
\vskip1.000000\baselineskip
\sac{Lys}
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 21:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 17 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Modified-site
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 12
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRAS INFORMACIONES:/Xaa significa Orn
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Modified-site
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 16
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRAS INFORMACIONES:/Xaa significa Orn
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 21
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Val Pro Asp Ser Ile Asp Gly Asn Asn Gln Leu Xaa Lys Ser Ile Xaa Lys}
\vskip1.000000\baselineskip
\sac{Lys}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 22:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 17 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Modified-site
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 12
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRAS INFORMACIONES:/Xaa significa Orn
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 22
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Val Pro Ser Ser Ile Asp Gly Asn Asn Gln Leu Xaa Lys Ser Ile Ser Lys}
\vskip1.000000\baselineskip
\sac{Lys}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 23:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 183 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 183
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 23
15 
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 24:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 177 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 177
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 24
\vskip1.000000\baselineskip
16 
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 25:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 171 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 171
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 25
\vskip1.000000\baselineskip
17 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 26:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 165 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 165
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 26
\vskip1.000000\baselineskip
18 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 27:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 159 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 159
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 27
\vskip1.000000\baselineskip
19 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 28:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 153 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 153
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 28
\vskip1.000000\baselineskip
20 
\newpage
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 29:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 99 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 99
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 29
\vskip1.000000\baselineskip
21 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 30:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 183 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.666000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 183
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 30
\vskip1.000000\baselineskip
22 
\newpage
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 31:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 177 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 177
\vskip0.666000\baselineskip
(xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 31
\vskip1.000000\baselineskip
23 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 32:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 171 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 171
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 32
24 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 33:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 165 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 165
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 33
\vskip1.000000\baselineskip
25 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 34:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 159 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 159
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 34
\vskip1.000000\baselineskip
26 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 35:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 153 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 153
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 35
\vskip1.000000\baselineskip
27 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 36:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 99 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 99
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 36
\vskip1.000000\baselineskip
28 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 37:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 183 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 183
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 37
\vskip1.000000\baselineskip
29 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 38:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 177 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 177
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 38
\vskip1.000000\baselineskip
30 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 39:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 171 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 171
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 39
\vskip1.000000\baselineskip
31 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 40:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 165 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 165
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 40
\vskip1.000000\baselineskip
32 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 41:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 159 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 159
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 41
\vskip1.000000\baselineskip
33 
\newpage
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 42:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 153 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 153
\vskip0.666000\baselineskip
(xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 42
\vskip1.000000\baselineskip
34 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 43:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 99 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 99
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 43
\vskip1.000000\baselineskip
35 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 44:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 183 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 183
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 44
\vskip1.000000\baselineskip
36 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 45:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 177 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 177
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 45
\vskip1.000000\baselineskip
37 
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 46:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 171 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 171
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 46
\vskip1.000000\baselineskip
38 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 47:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 165 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 165
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 47
\vskip1.000000\baselineskip
39 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 48:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 159 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 159
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 48
\vskip1.000000\baselineskip
40 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 49:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 153 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 153
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 49
\vskip1.000000\baselineskip
41 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 50:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 99 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 99
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 50
\vskip1.000000\baselineskip
42 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 51:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 303 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 303
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 51
\vskip1.000000\baselineskip
43 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 52:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 303 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 303
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 52
44 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 53:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 183 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 183
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 53
45 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 54:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 177 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 177
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 54
\vskip1.000000\baselineskip
46 
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 55:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 171 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 171
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 55
47 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 56:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 165 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 165
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 56
\vskip1.000000\baselineskip
49 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 57:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 159 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 159
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 57
\vskip1.000000\baselineskip
50 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 58:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 153 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 153
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 58
\vskip1.000000\baselineskip
51 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 59:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 99 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 183
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 59
\vskip1.000000\baselineskip
52 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 60:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 183 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 183
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 60
\vskip1.000000\baselineskip
53 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 61:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 177 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 177
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 61
\vskip1.000000\baselineskip
54 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 62:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 171 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 171
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 62
\vskip1.000000\baselineskip
55 
\newpage
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 63:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 165 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 165
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 63
\vskip1.000000\baselineskip
56 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 64:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 159 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 159
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 64
\vskip1.000000\baselineskip
57 
\newpage
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 65:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 153 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
UBICACIÓN: 1 .... 153
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 65
\vskip1.000000\baselineskip
58 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 66:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 99 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 99
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 66
\vskip1.000000\baselineskip
59 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 67:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 51 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 51
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 67
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.333000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskip
GTT CCG TGC AGC ACA TGC GAA GGT AAC CTT GCA TGC TTA TCA CTC TGC 
\hfill
48 
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Val Pro Cys Ser Thr Cys Glu Gly Asn Leu Ala Cys Leu Ser Leu Cys}
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.333000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskip
CAT 
\hfill
51 
\vskip1.000000\baselineskip
\sac{His}
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 68:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 51 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 51
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 68
\vskip1.000000\baselineskip
60 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 69:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 17 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Modified-site
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 12
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRAS INFORMACIONES:/Xaa significa Orn
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Modified-site
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 16
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRAS INFORMACIONES:/Xaa significa Orn
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 69
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Val Pro Asp Ser Thr Asp Glu Gly Asn Leu Ala Xaa Leu Ser Leu Xaa His}
\vskip1.000000\baselineskip
\sac{His}
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 70:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 17 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Modified-site
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 12
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRAS INFORMACIONES:/Xaa significa Orn
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 70
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Val Pro Ser Ser Thr Asp Glu Gly Asn Leu Ala Xaa Leu Ser Leu Ser His}
\vskip1.000000\baselineskip
\sac{His}
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 71:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 42 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 42
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 71
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.333000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskip
AGT ACA TGT GAA GGT AAT CTT GCA TGC TTA TCA CTC TGC CAT 
\hfill
42 
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Thr Cys Glu Gly Asn Leu Ala Cys Leu Ser Leu Cys His}
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 72:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 42 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 42
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 72
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.333000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskip
AGT ACA TGT GAA GGT AAT CTT GCA TGC TTA TCA CTC AGC CAT 
\hfill
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Thr Cys Glu Gly Asn Leu Ala Cys Leu Ser Leu Ser His}
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 73:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 14 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Modified-site
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 9
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRAS INFORMACIONES:/Xaa significa Orn
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 73
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Thr Asp Glu Gly Asn Leu Ala Xaa Leu Ser Leu Ser His}
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 74:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 657 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 657
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 74
61 
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 75:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 324 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 324
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 75
\vskip1.000000\baselineskip
71 
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 76:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 1050 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 1050
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 76
\vskip1.000000\baselineskip
62
63
64 
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 77:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 1071 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 1041
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 77
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
65
66
67 
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIONES PARA LA SEC ID nº 78:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 726 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: nucleótido
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
NÚMERO DE HEBRAS: simple
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
CONFIGURACIÓN: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADN
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: CDS
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
UBICACIÓN: 1 .... 726
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID nº 78
68
69

Claims (37)

1. Utilización de un inmunógeno, de un antígeno o de un hapteno, y de una molécula soporte para la preparación de un complejo destinado a ser administrado en un huésped y a mejorar la inmunogenicidad de dicho inmunógeno en relación con la del inmunógeno solo, independientemente del modo de administración y en ausencia de cualquier co-administración de inmunoestimulante, caracterizada porque dicho antígeno o hapteno se acopla de forma covalente a dicha molécula soporte, para formar dicho complejo, porque dicha molécula soporte es un fragmento polipeptídico derivado de la proteína G del estreptococo capaz de enlazarse específicamente con la seroalbúmina de mamífero, y porque dicho inmunógeno se selecciona de entre el grupo siguiente de inmunógenos derivados de la glicoproteína G del virus respiratorio sincitial (VRS) humano o bovino, sub-grupo A o B:
-
la secuencia SEC ID nº 1, SEC ID nº 2, SEC ID nº 51 o una secuencia que presenta por lo menos un 80% de homología con dicha secuencia SEC ID nº 1, SEC ID nº 2 o SEC ID nº 51, y
-
las secuencias SEC ID nº 3, nº 4 y nº 14 a nº 70.
2. Utilización según la reivindicación 1, caracterizada porque la molécula soporte presenta la secuencia en aminoácidos SEC ID nº 74 o una secuencia que presenta por lo menos el 80% de homología con dicha secuencia ID nº 74.
3. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 y 2, caracterizada porque el enlace covalente se lleva a cabo gracias a la tecnología del ADN recombinante.
4. Utilización según la reivindicación 3, caracterizada porque el complejo se produce mediante la inserción o fusión en la molécula de ADN que codifica para el soporte, del ADN que codifica para el antígeno o el hapteno.
5. Utilización según una de las reivindicaciones 1 y 2, caracterizada porque dicho enlace covalente se lleva a cabo por vía química.
6. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque la preparación de dicho complejo comprende una etapa en la que se introduce en una célula huésped un gen de fusión, comprendiendo dicho gen de fusión una molécula de ADN híbrida producida por inserción o fusión en la molécula de ADN que codifica para la molécula soporte, del ADN que codifica para el antígeno o el hapteno, fusionado con un promotor.
7. Utilización según la reivindicación 6, caracterizada porque se introduce el gen de fusión por medio de un vector de ADN que procede de un plásmido, de un bacteriófago, de un virus y/o de un cósmido.
8. Utilización según una de las reivindicaciones 6 ó 7, caracterizada porque el gen de fusión se integra en el genoma de la célula huésped.
9. Utilización según una de las reivindicaciones 6 a 8, caracterizada porque la célula huésped es un procariota.
10. Utilización según la reivindicación 9, caracterizada porque la célula huésped se selecciona de entre el grupo que comprende: E. coli, Bacillus, Lactobacillus, Staphylococcus y Streptococcus.
11. Utilización según las reivindicaciones 6 a 8, caracterizada porque la célula huésped es una levadura.
12. Utilización según las reivindicaciones 6 a 8, caracterizada porque la célula huésped es una célula de mamífero.
13. Utilización según las reivindicaciones 7 y 8, caracterizada porque se utiliza un vector viral.
14. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 11 ó 13, caracterizada porque la molécula de fusión se expresa, se ancla y se expone en la membrana de las células huéspedes.
15. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 14, caracterizada porque las proteínas derivadas de la glicoproteína G del sub-grupo A y del sub-grupo B del VRS se fusionan genéticamente o se acoplan químicamente a BB.
16. Complejo caracterizado porque está formado por un enlace covalente entre un inmunógeno, un antígeno o un hapteno, es un molécula soporte, siendo dicha molécula soporte un fragmento polipeptídico derivado de la proteína G del estreptococo capaz de ligarse específicamente a la seroalbúmina de mamífero, y seleccionándose dicho inmunógeno de entre el grupo siguiente de inmunógenos derivados de la glicoproteína G del virus respiratorio sincitial (VRS) humano o bovino, sub-grupo A o B:
-
la secuencia SEC ID nº 1, SEC ID nº 2, SEC ID nº 51 o una secuencia que presenta por lo menos un 80% de homología con dicha secuencia SEC ID nº 1, SEC ID nº 2 o SEC ID nº 51; y
-
las secuencias SEC ID nº 3, nº 4 y nº 14 a nº 70.
17. Complejo según la reivindicación 16, caracterizado porque la molécula soporte presenta la secuencia de aminoácidos SEC ID nº 74 o una secuencia que presenta por lo menos el 80% de homología con dicha secuencia ID nº 74.
18. Complejo según la reivindicación 16 y 17, caracterizado porque el enlace covalente se lleva a cabo gracias a la tecnología del ADN recombinante.
19. Complejo según la reivindicación 18, caracterizado porque el complejo se produce por inserción o fusión en la molécula de ADN que codifica para el soporte, del ADN que codifica para el antígeno o el hapteno.
20. Complejo según las reivindicaciones 16 y 17, caracterizado porque dicho enlace covalente se lleva a cabo por vía química.
21. Complejo según una de las reivindicaciones 16 a 19, caracterizado porque la preparación de dicho complejo comprende una etapa en la que se introduce en una célula huésped un gen de fusión, comprendiendo dicho gen de fusión una molécula de ADN híbrido producida por inserción o fusión en la molécula de ADN que codifica para la molécula soporte, del ADN que codifica para el antígeno o el hapteno, fusionado con un promo-
tor.
22. Complejo según la reivindicación 21, caracterizado porque se introduce el gen de fusión por medio de un vector de ADN que procede de un plásmido, de un bacteriófago, de un virus y/o de un cósmido.
23. Complejo según la reivindicación 21 ó 22, caracterizado porque el gen de fusión se integra en el genoma de la célula huésped.
24. Complejo según una de las reivindicaciones 21 a 23, caracterizado porque la célula huésped es un procario-
ta.
25. Complejo según la reivindicación 24, caracterizado porque la célula huésped se selecciona de entre el grupo que comprende: E. coli, Bacillus, Lactobacillus, Staphylococcus y Streptococcus.
26. Complejo según las reivindicaciones 21 a 23, caracterizado porque la célula huésped es una levadura.
27. Complejo según las reivindicaciones 21 a 23, caracterizado porque la célula huésped es una célula de mamífero.
28. Complejo según las reivindicaciones 22 y 23, caracterizado porque se utiliza un vector viral.
29. Complejo según las reivindicaciones 21 a 26 y 28, caracterizado porque la molécula de fusión se expresa, se ancla y se expone en la membrana de las células huésped.
30. Complejo según las reivindicaciones 16 a 29, caracterizado porque las proteínas derivadas de la glicoproteína G del sub-grupo A y del sub-grupo B del VRS se fusionan genéticamente o se enlazan químicamente con
BB.
31. Secuencia nucleotídica que codifica para un complejo según las reivindicaciones 16 a 30.
32. Secuencia nucleotídica según la reivindicación 31, caracterizada porque presenta unos elementos que permiten dirigir la expresión del complejo en una célula huésped específica.
33. Secuencia nucleotídica según cualquiera de las reivindicaciones 31 ó 32, caracterizada porque se selecciona de entre el grupo que consiste en las construcciones de ADN y las construcciones de ARN.
34. Secuencia según la reivindicación 31, caracterizada porque se trata de un gen de fusión que permite la preparación de dicho complejo de la utilización según una de las reivindicaciones 3, 4 ó 6 a 14.
35. Vector caracterizado porque comprende una secuencia nucleotídica según una de las reivindicaciones 31 a
34.
36. Complejo según las reivindicaciones 16 a 30, o vector de ADN según la reivindicación 35, como medicamen-
tos.
\newpage
37. Utilización para la preparación de una vacuna de un complejo entre un inmunógeno y una molécula soporte según las reivindicaciones 16 a 30, o de una secuencia nucleotídica según cualquiera de las reivindicaciones 31 a 34.
ES95939338T 1994-11-07 1995-11-07 Procedimiento para mejorar la inmunogenicidad de un compuesto inmunogenico o de un hapteno y aplicacion para la preparacion de vacunas. Expired - Lifetime ES2214511T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR9413310A FR2726471B1 (fr) 1994-11-07 1994-11-07 Procede pour ameliorer l'immunogenicite d'un compose immunogene ou d'un haptene et application a la preparation de vaccins
FR9413310 1994-11-07

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2214511T3 true ES2214511T3 (es) 2004-09-16

Family

ID=9468568

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES95939338T Expired - Lifetime ES2214511T3 (es) 1994-11-07 1995-11-07 Procedimiento para mejorar la inmunogenicidad de un compuesto inmunogenico o de un hapteno y aplicacion para la preparacion de vacunas.

Country Status (15)

Country Link
US (2) US6149911A (es)
EP (1) EP0791064B1 (es)
JP (1) JPH10509311A (es)
AT (1) ATE259878T1 (es)
AU (1) AU712468B2 (es)
BR (1) BR1100315A (es)
CA (1) CA2204619A1 (es)
DE (1) DE69532588T2 (es)
DK (1) DK0791064T3 (es)
ES (1) ES2214511T3 (es)
FR (1) FR2726471B1 (es)
NZ (1) NZ296564A (es)
PT (1) PT791064E (es)
WO (1) WO1996014416A1 (es)
ZA (1) ZA959419B (es)

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2686899B1 (fr) * 1992-01-31 1995-09-01 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveaux polypeptides biologiquement actifs, leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant.
FR2726471B1 (fr) * 1994-11-07 1997-01-31 Pf Medicament Procede pour ameliorer l'immunogenicite d'un compose immunogene ou d'un haptene et application a la preparation de vaccins
GB9526733D0 (en) * 1995-12-30 1996-02-28 Delta Biotechnology Ltd Fusion proteins
FR2748476B1 (fr) * 1996-05-07 1998-08-14 Pf Medicament Complexe immunogene, son utilisation, son procede de preparation et vaccin le contenant
US6248334B1 (en) * 1997-01-08 2001-06-19 Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine Process for preparing conjugate vaccines including free protein and the conjugate vaccines, immunogens, and immunogenic reagents produced by this process
FR2766192B1 (fr) * 1997-07-17 2001-07-13 Pf Medicament Epitopes du vrs et anticorps les comportant, utiles dans le diagnostic et la therapie
GB9920000D0 (en) * 1999-08-25 1999-10-27 Imp Cancer Res Tech Polypeptides
US6946134B1 (en) 2000-04-12 2005-09-20 Human Genome Sciences, Inc. Albumin fusion proteins
EP2267026A1 (en) * 2000-04-12 2010-12-29 Human Genome Sciences, Inc. Albumin fusion proteins
EP1174506A1 (en) * 2000-06-28 2002-01-23 Stichting Dienst Landbouwkundig Onderzoek C-terminal Erns peptide and analogues thereof
US20050054051A1 (en) * 2001-04-12 2005-03-10 Human Genome Sciences, Inc. Albumin fusion proteins
US20050244931A1 (en) * 2001-04-12 2005-11-03 Human Genome Sciences, Inc. Albumin fusion proteins
US20060084794A1 (en) * 2001-04-12 2006-04-20 Human Genome Sciences, Inc. Albumin fusion proteins
US7507413B2 (en) 2001-04-12 2009-03-24 Human Genome Sciences, Inc. Albumin fusion proteins
US6970509B2 (en) * 2001-07-31 2005-11-29 Wis Technologies, Inc. Cell array and method of multiresolution motion estimation and compensation
WO2003030821A2 (en) * 2001-10-05 2003-04-17 Human Genome Sciences, Inc. Albumin fusion proteins
PT1463751E (pt) 2001-12-21 2013-08-26 Human Genome Sciences Inc Proteínas de fusão de albumina
US20080131450A1 (en) * 2004-07-23 2008-06-05 Pierre Fabre Medicament Immunogenic complexes, preparation method thereof and use of same in pharmaceutical compositions
FR2873378A1 (fr) * 2004-07-23 2006-01-27 Pierre Fabre Medicament Sa Complexes immunogenes, leur procede de preparation et leur utilisation dans des compositions pharmaceutiques
ES2346178T3 (es) * 2007-07-31 2015-11-02 Affibody Ab Nuevas composiciones, procedimientos y usos de unión de la albúmina
CN103037898B (zh) 2010-07-07 2016-06-29 人工细胞科技公司 呼吸道合胞病毒抗原组合物和方法
EP2508537A1 (en) * 2011-04-04 2012-10-10 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Quantitative standard for mass spectrometry of proteins
EP3656396A1 (en) 2012-08-01 2020-05-27 Bavarian Nordic A/S Recombinant modified vaccinia virus ankara (mva) respiratory syncytial virus (rsv) vaccine

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4415491A (en) * 1980-01-14 1983-11-15 The Regents Of The University Of California Synthetic vaccine peptide epitomes of hepatitis B surface antigen
SE501169C2 (sv) * 1988-02-05 1994-11-28 Aake Nygren Framställning av serumalbuminbindande fusionsproteiner vilka innehåller protein G-domäner
SE509359C2 (sv) * 1989-08-01 1999-01-18 Cemu Bioteknik Ab Användning av stabiliserade protein- eller peptidkonjugat för framställning av ett läkemedel
IL97985A0 (en) * 1990-05-07 1992-06-21 North American Vaccine Inc Improved vaccine compositions
JPH05509231A (ja) * 1990-07-24 1993-12-22 ザ ユーエイビー リサーチ ファンデーション ウシｒｓウイルスの組換えｄｎａ、タンパク質ワクチン、抗体、および形質転換細胞の使用法
SE9101433D0 (sv) * 1991-05-13 1991-05-13 Marianne Hansson Recombinant dna sequence and its use
GB9120221D0 (en) * 1991-09-23 1991-11-06 Smithkline Beecham Biolog Novel compounds
FR2726471B1 (fr) * 1994-11-07 1997-01-31 Pf Medicament Procede pour ameliorer l'immunogenicite d'un compose immunogene ou d'un haptene et application a la preparation de vaccins

Also Published As

Publication number Publication date
FR2726471B1 (fr) 1997-01-31
DK0791064T3 (da) 2004-06-07
CA2204619A1 (fr) 1996-05-17
US6149911A (en) 2000-11-21
AU4120296A (en) 1996-05-31
DE69532588T2 (de) 2004-12-16
BR1100315A (pt) 1999-11-23
US6558673B1 (en) 2003-05-06
AU712468B2 (en) 1999-11-04
PT791064E (pt) 2004-07-30
DE69532588D1 (de) 2004-03-25
WO1996014416A1 (fr) 1996-05-17
EP0791064B1 (fr) 2004-02-18
JPH10509311A (ja) 1998-09-14
ZA959419B (en) 1996-05-28
ATE259878T1 (de) 2004-03-15
EP0791064A1 (fr) 1997-08-27
FR2726471A1 (fr) 1996-05-10
NZ296564A (en) 1999-06-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2214511T3 (es) Procedimiento para mejorar la inmunogenicidad de un compuesto inmunogenico o de un hapteno y aplicacion para la preparacion de vacunas.
ES2304787T3 (es) Vesiculovirus recombinantes y sus usos.
ES2268691T3 (es) Fragmento peptidico de la proteina g del virus respiratorio sincitial, agente inmunogeno, composicion farmaceutica que lo contiene y procedimiento de preparacion.
EP0390799B1 (en) Respiratory syncytial virus: vaccines
ES2314102T3 (es) Nuevos peptidos derivados de la proteina g del vrs y su uso en una vacuna.
ES2236718T3 (es) Proteina portadora de efecto adyuvante, complejo inmunogenico que la contiene, su procedimiento de preparacion, secuencia nucleotidica y vacuna.
US20210322544A1 (en) Vaccine composition comprising hepatitis b virus-like particle as adjuvant
HU196131B (en) Process for preparing polypeptide vaccine
US11111275B2 (en) Compositions and methods for making and using virus-like particles (VLPs)
ES2315405T3 (es) Proteina pre-s del virus de la hepatitis b (vhb) como adyuvante y un componente de una vacuna frente a vhb.
MXPA02003132A (es) Uso de una proteina a de membrana externa (ompa) de enterobacteria combinada con un peptido inmunogenico rsv para preparar vacunas para administracion intranasal.
EP3202780A1 (en) Fusion protein comprising the n protein of a virus of the pneumovirinae subfamily
JP2003535147A (ja) 遊離形態でｆｈａタンパク質又はそのフラグメントを含むアジュバント組成物
US10232033B2 (en) Respiratory syncytial virus vaccine
Levi A synthetic approach to influenza vaccines
FR2798292A1 (fr) Utilisation d'ammoniums quaternaires aliphatiques pour induire une reponse mixte th1/th2