EA030554B1 - Замещенное гетероциклом тетрациклическое соединение и способы его применения для лечения вирусных заболеваний - Google Patents

Замещенное гетероциклом тетрациклическое соединение и способы его применения для лечения вирусных заболеваний Download PDF

Info

Publication number
EA030554B1
EA030554B1 EA201591328A EA201591328A EA030554B1 EA 030554 B1 EA030554 B1 EA 030554B1 EA 201591328 A EA201591328 A EA 201591328A EA 201591328 A EA201591328 A EA 201591328A EA 030554 B1 EA030554 B1 EA 030554B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
compound
heterocycle
hcv
substituted
methods
Prior art date
Application number
EA201591328A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201591328A1 (ru
Inventor
Вэньшэн Юй
Лин Тун
Джозеф А. Козловски
Олег Селютин
Лэй Чэнь
Дзае-Хун Ким
Дэю Ша
Разия Ризви
Бандарпалле Шанкар
Бинь Ху
Бинь Чжун
Дахай Ван
Цзинлай Хао
Вэй Вэй
Тао Цзи
Шуай Цзань
Original Assignee
Мерк Шарп И Доум Корп.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Мерк Шарп И Доум Корп. filed Critical Мерк Шарп И Доум Корп.
Publication of EA201591328A1 publication Critical patent/EA201591328A1/ru
Publication of EA030554B1 publication Critical patent/EA030554B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4985—Pyrazines or piperazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5365—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/7056—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing five-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A61K31/7072—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid having two oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. uridine, uridylic acid, thymidine, zidovudine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D513/04—Ortho-condensed systems
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

Изобретение относится к новым замещенным гетероциклом тетрациклическим соединениям, а именно - к соединению формулы, представленной ниже, и его фармацевтически приемлемым солям. Изобретение относится также к композициям, содержащим замещенное гетероциклом тетрациклическое соединение, и к способам применения замещенного гетероциклом тетрациклического соединения для лечения или предупреждения инфекции ВГС у пациента.

Description

Изобретение относится к новым замещенным гетероциклом тетрациклическим соединениям, а именно - к соединению формулы, представленной ниже, и его фармацевтически приемлемым солям. Изобретение относится также к композициям, содержащим замещенное гетероциклом тетрациклическое соединение, и к способам применения замещенного гетероциклом тетрациклического соединения для лечения или предупреждения инфекции ВГС у пациента.
030554 B1
030554
Область техники, к которой относится изобретения
Настоящее изобретение относится к новому гетероциклическому соединению, замещенному гетероциклом, композиции, содержащей гетероциклическое соединение, замещенное гетероциклом, и к способам применения гетероциклического соединения, замещенного гетероциклом, для лечения или предупреждения инфекции ВГС у пациента.
Уровень техники
Вирус гепатита C (ВГС) представляет собой основной патогенный фактор для человека. У значительной части данных индивидуумов, инфицированных ВГС, развивается серьезное прогрессирующее заболевание печени, включая цирроз и гепатоцеллюлярный рак, которые часто являются смертельными.
Недавно особенное внимание было обращено на идентификацию ингибиторов белка NS5A ВГС. NS5A ВГС представляет собой фосфопротеин, состоящий из 447 аминокислот, ферментативные функции которого определены недостаточно. Он проходит в виде полос 56 kd и 58 kd на гелях в зависимости от степени фосфорилирования (Tanji, et al. J. Virol. 69:3980-3986 (1995)). NS5A ВГС остается в комплексе репликации и может отвечать за переключение от репликации РНК к производству инфекционного вируса (Huang, Y. Et al., Virology 364:1-9 (2007)).
Имеется сообщение о полициклических ингибиторах NS5A ВГС. См. патентную публикацию США № US 20080311075, US 20080044379, US 20080050336, US 20080044380, US 20090202483 и US 2009020478. Ингибиторы NS5A ВГС, содержащие конденсированные трициклические группы, описаны в международной патентной публикации № WO 10/065681, WO 10/065668 и WO 10/065674.
Другие ингибиторы NS5A ВГС и их применение для снижения вирусной нагрузки у людей, инфицированных ВГС, описаны в патентной публикации США № US 20060276511.
Сущность изобретения
В одном из аспектов в настоящем изобретении предоставлено соединение, имеющее структуру
или его фармацевтически приемлемая соль.
Соединение, представленное структурной формулой (называемое в настоящем описании также "замещенное гетероциклом тетрациклическое соединение"), и его фармацевтически приемлемые соли могут применяться, например, для ингибирования вирусной репликации ВГС или активности репликона и для лечения или предупреждения инфекции ВГС у пациента. Не желая быть связанными какой-либо конкретной теорией, предполагается, что замещенное гетероциклом тетрациклическое соединение ингибирует вирусную репликацию ВГС за счет ингибирования NS5A ВГС.
Соответственно, в настоящем изобретении представлены способы лечения или предупреждения инфекции ВГС у пациента, включающие введение пациенту эффективного количества замещенного гетероциклом тетрациклического соединения.
Данное изобретение подробно изложено далее в прилагаемом подробном описании.
Несмотря на то что при осуществлении на практике или проверке настоящего изобретения можно использовать любые способы и материалы, сходные со способами и материалами, описанными в настоящем изобретении, далее описаны иллюстративные способы и материалы. Другие варианты осуществления, аспекты и признаки настоящего изобретения либо описаны далее, либо будут очевидны из следующего описания, примеров и прилагаемой формулы изобретения.
Подробное описание изобретения
Использованные в настоящем описании термины имеют свое обычное значение, и значение таких терминов независимо при каждом их появлении. Поэтому, несмотря на случаи, где указано иначе, и за их исключением, следующие определения применяются в описании и формуле изобретения. Химические названия, общие названия и химические структуры можно использовать взаимозаменяемо для описания одних и тех же структур. Если на химическое соединение ссылаются с использованием и химической структуры, и химического названия, структура имеет преимущество. Данные определения применяются вне зависимости от того, используется ли термин сам по себе или в сочетании с другими терминами, если не указано иначе.
Как использовано в настоящем описании и в настоящем раскрытии, следует понимать, что следующие термины, если не указано иначе, имеют следующие значения.
- 1 030554
Термин "пациент" представляет собой человека или не относящееся к человеку млекопитающее. В другом варианте осуществления, пациент представляет собой шимпанзе.
Использованный в настоящем описании термин "эффективное количество" относится к количеству замещенного гетероциклом тетрациклического соединения, которое эффективно при оказании необходимого терапевтического, благоприятного, ингибирующего или предупреждающего воздействия при введении пациенту, страдающему вирусной инфекцией или заболеванием вирусного происхождения.
Термин "предупреждение", использованный в отношении к вирусной инфекции ВГС или к нарушению, связанному с вирусом ВГС, относится к снижению вероятности инфекции ВГС.
Использованный в настоящем описании термин "практически в очищенном виде" относится к физическому состоянию соединения после выделения данного соединения из процесса синтеза (например, из реакционной смеси), природного источника или их сочетания. Термин "практически в очищенном виде" также относится к физическому состоянию соединения после получения данного соединения в результате способа или способов очистки, описанных в настоящем описании или известных квалифицированному специалисту (например, хроматография, перекристаллизация и т.д.), с чистотой, достаточной для характеризации стандартными аналитическими методами, описанными в настоящем документе или известными квалифицированному специалисту.
В случае, когда функциональную группу в соединении называют "защищенной", это означает, что данная группа находится в модифицированном виде, чтобы исключить нежелательные побочные реакции по защищенному участку, когда данное соединение вводят в реакцию. Подходящие защитные группы будут определены специалистами в данной области, а также при ссылке на общеизвестные учебники, например, такие как T.W. Greene et al. Protective Groups in Organic Synthesis (1991), Wiley, New York.
Предусматривается, что использованный в настоящем описании термин "композиция" включает продукт, содержащий конкретные ингредиенты в конкретных количествах, а также любой продукт, получаемый в результате сочетания конкретных ингредиентов в конкретных количествах.
Тетрациклическое соединение, замещенное гетероциклом, может образовывать соли, которые также входят в рамки данного изобретения. Подразумевается, что ссылка в настоящем описании на тетрациклическое соединение, замещенное гетероциклом, включает их соли, если не указано иначе. Термин "соль(соли)", использованный в описании, означает кислотные соли, образованные неорганическими и/или органическими кислотами, а также основные соли, образованные неорганическими и/или органическими основаниями.
В одном из вариантов осуществления данная соль представляет собой фармацевтически приемлемую (т.е. нетоксичную, физиологически приемлемую) соль. В другом варианте осуществления данная соль представляет собой соль, отличную от фармацевтически приемлемой соли. Соли соединения формулы (I) можно получить, например, взаимодействием тетрациклического соединения, замещенного гетероциклом, с количеством кислоты или основания, таким как эквивалентное количество, в среде, такой как среда, из которой данная соль выпадает в осадок, или в водной среде с последующей лиофилизацией.
Примеры кислотно-аддитивных солей включают ацетаты, аскорбаты, бензоаты, бензолсульфонаты, бисульфаты, бораты, бутираты, цитраты, камфораты, камфорсульфонаты, фумараты, гидрохлориды, гидробромиды, гидройодиды, лактаты, малеаты, метансульфонаты, нафталинсульфонаты, нитраты, оксалаты, фосфаты, пропионаты, салицилаты, сукцинаты, сульфаты, тартраты, тиоцианаты, толуолсульфонаты (известные также как тозилаты) и т.д. Кроме того, кислоты, которые также считаются подходящими для получения фармацевтически применимых солей из основных фармацевтических соединений, рассматриваются, например, у P. Stahl et al., Camille G. (eds.) Handbook of Pharmaceutical Salts. Propertiesr Selection and Use. (2002), Zurich: Wiley-VCH; S. Berge et al., Journal of Pharmaceutical Sciences (1977), 66(1): 1-19; P. Gould, International J. of Pharmaceutics (1963), 33:201-217; Anderson et al., The Practice of Medicinal Chemistry (1996), Academic Press, New Press, New York и в The Orange Book (Food & Drug Administration, Washington, D.C. на их веб-сайте). Данные раскрытия включены в настоящее описание ссылкой.
Примеры основных солей включают соли аммония, соли щелочных металлов, такие как соли натрия, лития и калия, соли щелочно-земельных металлов, такие как соли кальция и магния, соли органических оснований (например, органических аминов), такие как дициклогексиламина, трет-бутиламина, холина, и соли аминокислот, таких как аргинин, лизин и т.д. Основные азотсодержащие группы могут быть кватернизованы такими агентами, как низшие алкилгалогениды (например, метил, этил и бутилхлориды, бромиды и йодиды), диалкилсульфаты (напрмиер, диметил, диэтил и дибутилсульфаты), длинноцепные галогениды (например, децил, лаурил и стеарилхлориды, бромиды и йодиды), аралкилгалогениды (например, бензил и фенетилбромиды) и др.
Подразумевается, что все подобные соли кислот и соли оснований являются фармацевтически приемлемыми солями в рамках данного изобретения и все кислотные и основные соли считаются эквивалентными свободным формам соответствующих соединений для целей настоящего изобретения.
Диастереомерные смеси можно разделить на составляющие их индивидуальные диастереомеры на основании различий в их физико-химических свойствах при помощи методов, хорошо известных специалистам в данной области, например, таких как хроматография и/или дробная кристаллизация. Энантиомеры можно разделить, переводя энантиомерную смесь в диастереомерную смесь реакцией с соот- 2 030554
ветствующим оптически активным соединением (например, хиральным вспомогательным реагентом, таким как хиральный спирт или хлорангидрид кислоты Мошера), разделяя диастереомеры и переводя (например, гидролизом) индивидуальные диастереомеры в соответствующие чистые энантиомеры.
Стереохимически чистые соединения можно также получить при использовании хиральных исходных веществ или при использовании методов разделения солей. Кроме того, некоторые из тетрациклических соединений, замещенных гетероциклом, могут быть атропоизомерами (например, замещенные биарилы) и считаются частью данного изобретения. Энантиомеры можно также непосредственно разделять методом хиральной хроматографии.
Замещенное гетероциклом тетрациклическое соединение может также существовать в виде различных таутомерных форм, и все подобные формы включены в рамки данного изобретения. Например, все кето-енольные и имин-енаминные формы данных соединений включены в настоящее изобретение.
Все стереоизомеры (например, геометрические изомеры, оптические изомеры и т.д.) настоящего соединения (включая изомеры солей, а также солей), такие как изомеры, которые могут существовать благодаря наличию асимметрических атомов углерода в различных заместителях, включая энантиомерные формы (которые могут существовать даже в отсутствие асимметрических атомов углерода), ротамерные формы, атропоизмеры и диастереомерные формы, рассматриваются в рамках данного изобретения. Если тетрациклическое соединение, замещенное гетероциклом, содержит двойную связь или конденсированный цикл, то и цис-, и транс-формы, а также смеси входят в рамки данного изобретения.
Индивидуальные стереоизомеры соединения данного изобретения могут, например, практически не содержать других изомеров или могут находиться в виде смеси, например в виде рацематов или со всеми другими или некоторыми другими стереоизомерами. Хиральные центры соединений настоящего изобретения могут иметь R- или S-конфигурацию, определенную по правилам ИЮПАК 1974 года. Подразумевается, что термины "соль" используются равным образом для соли соединения настоящего изобретения.
В замещенном гетероциклом тетрациклическом соединении атомы могут проявлять свою природную изотопную обогащенность или один или более атомов могут быть искусственно обогащены конкретным изотопом, имеющим такой же атомный номер, но атомную массу или массовое число, отличающееся от атомной массы или массового числа, преимущественно находящегося в природе. Подразумевается, что настоящее изобретение включает все подходящие изотопные варианты соединения. Например, различные изотопные формы водорода (Н) включают протий (1Н) и дейтерий (2Н). Протий представляет собой преобладающий изотоп водорода, находящийся в природе. Обогащение дейтерием может привести к некоторым терапевтическим преимуществами, таким как увеличение периода полувыведения in vivo или снижение необходимой дозировки, или может обеспечить соединение, применимое в качестве стандарта для характеристики биологических образцов. Изотопно обогащенное замещенное гетероциклом тетрациклическое соединение можно получить без чрезмерной экспериментальной работы стандартными методами, которые хорошо известны специалистам в данной области, или способами, аналогичными способам, описанным на схемах или в примерах настоящего описания, с использованием изотопно обогащенных реагентов и/или промежуточных соединений.
Следующие сокращения использованы ниже и имеют следующие значения:
Ас представляет собой ацил,
AcCl представляет собой хлористый ацетил,
AcOH или НОАс представляет собой уксусную кислоту,
Amphos представляет собой (4-(М,М)-диметиламинофенил)ди-трет-бутилфосфин,
Aq представляет собой водный,
BF3-OEt2 представляет собой эфират трехфтористого бора,
BOC или Boc представляет собой трет-бутоксикарбонил,
Boc2O представляет собой Boc ангидрид,
Boc-Pro-OH представляет собой Вос-защищенный пролин,
L-Boc-Val-OH представляет собой Вос-защищенный L-валин,
ВОР представляет собой гексафторфосфат бензотриазол-1-илокси-трис-(диметиламино)фосфония,
DDQ представляет собой 2,3-дихлор-5,6-дициано-1,4-бензохинон,
реагент Десс-Мартина представляет собой 1,1-триацетокси-1,1-дигидро-1,2-бензйодоксол-3(1Н)-он,
DIPEA представляет собой диизопропилэтиламин,
DME представляет собой диметоксиэтан,
ДМФА представляет собой N.N-диметилформамид. dppf представляет собой дифенилфосфиноферроцен,
ДМСО представляет собой диметилсульфоксид,
EtMgBr представляет собой этилмагнийбромид,
EtOAc представляет собой этилацетат,
Et2O представляет собой диэтиловый эфир,
Et3N или NEt3 представляет собой триэтиламин,
HATU представляет собой гексафторфосфат О-(7-азабензотриазол-1-ил)-Н^№,№тетраметилурония,
- 3 030554
ВЭЖХ представляет собой высокоэффективную жидкостную хроматографию,
МСВР представляет собой масс-спектрометрию высокого разрешения,
KOAc представляет собой ацетат калия,
МС-ЖХ представляет собой жидкостную хроматографию/масс-спектрометрию,
LiHMDS представляет собой гексаметилдисилазид лития,
МСНР представляет собой масс-спектрометрию низкого разрешения,
MeI представляет собой йодметан,
MeOH представляет собой метанол,
NBS представляет собой N-бромсукцинимид,
NH4OAc представляет собой ацетат аммония,
NMM представляет собой N-метилморфолин,
Pd/C представляет собой палладий на угле,
Pd(PPh3)4 представляет собой тетракис-(трифенилфосфин)палладий(0),
PdCl2(dppf)2 представляет собой [1,1'-бис-(дифенилфосфиноферроцен)]дихлор палладий (II), PdCl2(dppf)2-CH2Cl2 представляет собой комплекс [1,1'-бис-(дифенилфосфиноферроцен)]дихлор
палладия(П) с хлористым метиленом,
пинакол2В2 представляет собой бис-(пинаколято)дибор,
PPTS представляет собой п-толуолсульфонат,
ЖХ-ОФ представляет собой жидкостную хроматографию с обращенной фазой,
Select-F представляет собой 1-хлорметил-4-фтор-1,4-диазонийбицикло[2.2.2]октан бис(тетрафторборат),
SEM-Cl представляет собой 2-(триметилсилил)этоксиметилхлорид,
TBAF представляет собой фторид тетрабутиламмония,
TBDMSC1 представляет собой трет-бутилдиметилсилилхлорил,
ТФУ представляет собой уксусную кислоту,
Tf2O представляет собой трифторметансульфоновый ангидрид,
ТГФ представляет собой тетрагидрофуран,
ТСХ представляет собой тонкослойную хроматографию,
TosCl представляет собой п-толуолсульфонилхлорид.
Соединение.
В настоящем изобретении представлено замещенное гетероциклом тетрациклическое соединение, имеющее структуру
и его фармацевтически приемлемая соль.
В одном из вариантов осуществления соединение имеет структуру
В одном из вариантов осуществления соединение имеет структуру
- 4 030554
В следующем варианте осуществления соединения формулы (Ic) находятся практически в очищенном виде.
Другие варианты осуществления настоящего изобретения включают:
(a) фармацевтическую композицию, содержащую эффективное количество соединения указанной структуры или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемый носитель;
(b) способ лечения инфекции ВГС и/или снижения вероятности или тяжести симптомов инфекции ВГС у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение данному субъекту эффективного количества соединения указанной структуры.
Применение замещенного гетероциклом тетрациклического соединения.
Замещенное гетероциклом тетрациклическое соединение применимо в медицине человека и ветеринарии для лечения или предупреждения вирусной инфекции у пациента. В одном из вариантов осуществления тетрациклическое соединение, замещенное гетероциклом, может являться ингибиторами вирусной репликации. В другом варианте осуществления тетрациклическое соединение, замещенное гетероциклом, может являться ингибиторами репликации ВГС. Соответственно, тетрациклическое соединение, замещенное гетероциклом, может применяться для лечения вирусных инфекций, таких как ВГС. Согласно изобретению тетрациклическое соединение, замещенное гетероциклом, можно вводить пациенту, нуждающемуся в лечении или предупреждении вирусной инфекции.
Соответственно, в одном из вариантов осуществления в изобретении представлены способы лечения вирусной инфекции у пациента, включающие введение данному пациенту эффективного количества замещенного гетероциклом тетрациклического соединения или его фармацевтически приемлемой соли.
Лечение или предупреждение флавивирусной инфекции.
Тетрациклическое соединение, замещенное гетероциклом, может применяться для лечения или предупреждения вирусной инфекции, вызванной вирусами семейства флавивирусов.
Примеры флавивирусных инфекций, которые можно лечить или предупреждать при помощи настоящих способов, включают в себя, но не ограничиваются, лихорадку денге, японский энцефалит, киасанурскую лихорадку, австралийский энцефалит, энцефалит Сент-Луис, клещевой энцефалит, энцефалит Западного Нила, желтую лихорадку и инфекцию вируса гепатита C (ВГС).
В одном из вариантов осуществления подлежащая лечению флавивирусная инфекция представляет собой инфекцию вируса гепатита C.
Лечение или предупреждение инфекции ВГС.
Замещенное гетероциклом тетрациклическое соединение применимо для ингибирования репликации ВГС, лечения инфекции ВГС и/или снижения вероятности или тяжести симптомов инфекции ВГС и ингибирования вирусной репликации ВГС и/или продукции вирусов ВГС в клеточной системе. Например, замещенное гетероциклом тетрациклическое соединение применимо для лечения инфекции, вызванной ВГС, после подозрения на подвергание действию ВГС при переливании крови, обмене жидкостей организма, укусах, случайного укола иглой или воздействия на кровь пациента в результате хирургических операций или других медицинских процедур.
В одном из вариантов осуществления инфекция гепатита C представляет собой острый гепатит C.
В другом варианте осуществления инфекция гепатита C представляет собой хронический гепатит C.
Соответственно, в одном из вариантов осуществления в данном изобретении представлены способы лечения инфекции ВГС у пациента, при этом данные способы включают введение данному пациенту эффективного количества замещенного гетероциклом тетрациклического соединения или его фармацевтически приемлемой соли. В конкретном варианте осуществления вводимое количество эффективно для лечения или предупреждения у пациента инфекции, вызванной ВГС. В другом конкретном варианте осуществления вводимое количество эффективно для ингибирования вирусной репликации ВГС и/или продукции вирусов у пациента.
Замещенное гетероциклом тетрациклическое соединение применимо также для получения и проведения скрининговых исследований для противовирусных соединений. Например, замещенное гетероциклом тетрациклическое соединение применимо для идентификации скрытых мутаций в клеточных линиях с репликоном, резистентных к ВГС, в NS5A, которые являются превосходными формами для скрининга для более эффективных противовирусных соединений.
Композиции настоящего изобретения могут применяться для лечения пациента, страдающего инфекционным заболеванием, относящимся к любому генотипу ВГС. Типы и подтипы ВГС могут различаться по своей антигенности, степени виремии, тяжести вызванного заболевания и реакции на терапию интерфероном, как описано у Holland et al., Pathology, 30(2):192-195 (1998). Номенклатура, приведенная у Simmonds et al., J Gen Virol, 74(Pt.11):2391-2399 (1993), широко используется и подразделяет изоляты на шесть основных генотипов, с 1 по 6, с двумя или более родственными подтипами, например 1а и 1b. Предложены дополнительные генотипы 7-10, однако филогенетическое основание данной классификации вызывает сомнение и, таким образом, типы 7, 8, 9 и 11 изолятов переклассифицировали как тип 6 и тип 10 изолятов в виде типа 3 (см. Lamballerie et al., J. Gen. Virol., 78(Pt.1):45-51 (1997)). Было определено, что совпадение последовательностей основных генотипов составляет от 55 до 72% (в среднем 64,5%),
- 5 030554
совпадение в подтипах в пределах типов составляет 75-86% (в среднем 80%), при секвенировании в области NS-5 (см. Simmonds et al., J. Gen. Virol., 75(Pt.5):1053-1061 (1994)).
Композиции и введение.
Благодаря своей активности тетрациклическое соединение, замещенное гетероциклом, применимо в ветеринарии и медицине человека. Как описано выше, замещенное гетероциклом тетрациклическое соединение применимо для лечения или предупреждения инфекции ВГС нуждающегося в этом пациента.
При введении пациенту замещенное гетероциклом тетрациклическое соединение можно вводить в виде компонента композиции, содержащей фармацевтически приемлемый носитель или среду. В настоящем изобретении представлены фармацевтические композиции, содержащие эффективное количество замещенного гетероциклом тетрациклического соединения, и фармацевтически приемлемый носитель. В фармацевтических композициях и способах настоящего изобретения активные ингредиенты обычно будут вводить в смеси с материалами подходящих носителей, подходящим образом выбранных в зависимости от предполагаемой формы введения, т.е. пероральных таблеток, капсул (с твердым наполнением, полутвердым наполнением или жидким наполнением), порошков для составления, пероральных гелей, эликсиров, диспергируемых гранул, сиропов, суспензий и т.д., и в соответствии со стандартной фармацевтической практикой. Например, для перорального введения в виде таблеток или капсул активный компонент лекарственного средства можно соединить с любым пероральным нетоксичным фармацевтически приемлемым инертным носителем, таким как лактоза, крахмал, сахароза, целлюлоза, стеарат магния, фосфат дикальция, сульфат кальция, тальк, маннит, этиловый спирт (жидкие формы) и так далее. Препараты в виде твердых форм включают порошки, таблетки, диспергируемые гранулы, капсулы, саше и суппозитории. Порошки и таблетки могут включать в себя примерно от 0,5 до примерно 95% композиции изобретения. В качестве твердых лекарственных форм, подходящих для перорального введения, можно использовать таблетки, порошки и капсулы.
Кроме того, при желании или необходимости, в смесь можно также ввести подходящие связывающие вещества, смазочные вещества, разрыхлители и окрашивающие вещества. Подходящие связывающие вещества включают крахмал, желатин, природные сахара, сахаристое веществ из кукурузы, природные и синтетические смолы, такие как аравийская камедь, альгинат натрия, карбоксиметилцеллюлоза, полиэтиленгликоль и воски. Из смазочных веществ для использования в данных лекарственных формах можно упомянуть борную кислоту, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и т.д. Разрыхлители включают в себя крахмал, метилцеллюлозу, гуаровую камедь и т.д. При необходимости, можно также включать подслащивающие и окрашивающие вещества и консерванты.
Жидкие препараты включают растворы, суспензии и эмульсии и могут включать в себя воду или раствор вода-пропиленгликоль для парентерального введения.
Также сюда входят твердые препараты, предназначенные для переведения, непосредственно перед применением, в жидкие препараты либо для перорального, либо для парентерального введения. Такие жидкие формы включают растворы, суспензии и эмульсии.
Для изготовления суппозиториев низкоплавкий воск, такой как смесь глицеридов жирных кислот или масло какао, сначала расплавляют и гомогенно диспергируют в нем активный ингредиент путем перемешивания. После этого расплавленную гомогенную смесь выливают в форму стандартного размера и оставляют остывать и, таким образом, затвердевать.
Кроме того, композиции настоящего изобретения можно составить в виде форм с замедленным высвобождением, чтобы обеспечить контролируемую скорость высвобождения любого из одного или более компонентов или активных ингредиентов для оптимизации терапевтических эффектов, т.е. противовирусной активности и т.д. Подходящие лекарственные формы замедленного высвобождения включают в себя многослойные таблетки, содержащие слои с переменной скоростью диспергирования и имеющие форму таблетки или капсулы, или полимерные матрицы с контролируемым высвобождением, импрегнированные активными компонентами и имеющие форму таблеток или капсул, содержащих подобные импрегнированные или инкапсулированные пористые полимерные матрицы.
В одном из вариантов осуществления замещенное гетероциклом тетрациклическое соединение вводят перорально.
В следующем варианте осуществления тетрациклическое соединение, замещенное гетероциклом, вводят внутривенно.
В еще одном варианте осуществления тетрациклическое соединение, замещенное гетероциклом, вводят сублингвально.
В одном из вариантов осуществления фармацевтический препарат, содержащий замещенное гетероциклом тетрациклическое соединение, имеет вид единичной лекарственной формы. В такой форме препарат делят на единичные дозы, содержащие эффективные количества активных компонентов.
Композиции можно получить стандартными методами смешивания, гранулирования или нанесения покрытия соответственно, и настоящие композиции могут содержать в одном из вариантов осуществления примерно от 0,1 до примерно 99% тетрациклического соединения(соединений), замещенных гетероциклом по массе или объему. В различных вариантах осуществления настоящие композиции могут содержать в одном из вариантов осуществления примерно от 1 до примерно 70% или примерно от 5 до
- 6 030554
примерно 60% замещенного гетероциклом тетрациклического соединения(ий) по массе или объему.
Количество и частота введения замещенного гетероциклом тетрациклического соединения будут регулировать согласно решению лечащего врача с учетом таких факторов, как возраст, состояние и габариты пациента, а также тяжесть подлежащих лечению симптомов. Как правило, общая суточная доза замещенного гетероциклом тетрациклического соединения, вводимого отдельно или в виде комбинированной терапии, может изменяться примерно от 1 до примерно 2500 мг в сутки, хотя неизбежно возникнут изменения в зависимости от объекта терапевтического лечения, пациента и способа введения. В одном из вариантов осуществления доза составляет примерно от 10 до примерно 1000 мг/сутки при введении в виде единичной дозы или в виде 2-4 разделенных доз. В следующем варианте осуществления доза составляет примерно от 1 до примерно 500 мг/сутки при введении в виде единичной дозы или в виде 2-4 разделенных доз. В еще одном варианте осуществления доза составляет примерно от 1 до примерно 100 мг/сутки, при введении в виде единичной дозы или в виде 2-4 разделенных доз. В еще одном варианте осуществления доза составляет примерно от 1 до примерно 50 мг/сутки при введении в виде единичной дозы или в виде 2-4 разделенных доз. В следующем варианте осуществления доза составляет примерно от 500 до примерно 1500 мг/сутки при введении в виде единичной дозы или в виде 2-4 разделенных доз. В еще одном варианте осуществления доза составляет примерно от 500 до примерно 1000 мг/сутки при введении в виде единичной дозы или в виде 2-4 разделенных доз. В еще одном варианте осуществления доза составляет примерно от 100 до примерно 500 мг/сутки при введении в виде единичной дозы или в виде 2-4 разделенных доз.
Способы получения соединения.
Соединение настоящего изобретения можно получить из известных или легко получаемых исходных веществ способами, известными специалисту в области органического синтеза.
Специалисту в данной области будут известны стандартные методы приготовления лекарственных средств, описанные в открытом доступе, а также в учебниках, таких как Zheng, "Formulation and Analytical Development for Low-dose Oral Dug Products", Wiley, 2009, ISBN.
Примеры
Общие способы.
Коммерчески доступные растворители, реагенты и промежуточные соединения использовали в том виде, в котором они были получены. Реагенты и промежуточные соединения, коммерчески недоступные, получали способом, описанным далее. Спектры ЯМР 'H регистрировали на спектрометре Bruker Avance 500 (500 МГц) и приводили в м.д. в слабом поле относительно Me4Si, при этом количество протонов, мультиплетности и константы спин-спинового взаимодействия в герцах указаны в скобках. При представлении данных ЖХ/МС анализы проводили с использованием масс-спектрометра Applied Biosystems API-100 и ЖХ колонки Shimadzu SCL-10A: ALtech platinum C18, 3 мкм, 33x7 мм ID, градиентный поток: 0 мин - 10% CH3CN, 5-7 мин - 95% CH3CN, 7 мин - стоп. Приведено время удерживания и наблюдаемый исходный ион. Колоночную флэш-хроматографию осуществляли с использованием расфасованного нормально-фазового оксида кремния от Biotage, Inc. или рассыпного оксида кремния от Fisher Scientific. Если не указано иначе, колоночную хроматографию осуществляли с использованием градиентного элюирования смесью гексан/этилацетат от 100% гексана до 100% этилацетата.
- 7 030554
Суспензию 10а (10 г, 61 ммоль) циклопропилбороновой кислоты (21 г, 243 ммоль), Pd(OAc)2 (683 мг, 3 ммоль), Cs2CO3 (79 г, 243 ммоль), n-BuPACl2 (79 г, 243 ммоль) в смеси толуол/вода (10:1, 200 мл) кипятили при 100°C примерно в течение 15 ч в атмосфере N2. После охлаждения до комнатной температуры смесь разбавляли EtOAc и водой. Органический слой промывали насыщенным раствором соли и сушили над безводным сульфатом натрия. После концентрирования в вакууме полученный остаток очищали хроматографией на SiO2, элюируя смесью петролейный эфир:этилацетат (100/1-40/1), получая соединение 10b (2 г, 32%).
Стадия 2.
К смеси 10b (1,8 г, 14,4 ммоль) в ТГФ (30 мл) прибавляли 2,5 М раствор n-BuLi (6,3 мл, 15,8 ммоль) при -78°C в атмосфере N2. Смесь перемешивали в течение 1 ч при данной температуре, затем добавляли ДМФА (1,6 г, 21,6 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, затем гасили насыщенным раствором NH4Cl и экстрагировали EtOAc. Органический слой сушили над сульфатом натрия, концентрировали в вакууме и очищали хроматографией на SiO2, элюируя смесью петролейный эфир:этилацетат (50/1-20/1), получая соединение 10с (1,5 г, 49%).
Стадия 3.
К смеси 10с (0,520 г, 3,4 ммоль) и Int-1b (1 г, 2,6 ммоль) в безводном CH3CN (20 мл) прибавляли ТФУ (0,089 г, 0,78 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 6 ч при температуре окружающей среды. Реакционная смесь превращалась в прозрачный раствор, а затем выпадал осадок. Осадок выделяли фильтрованием и промывали CH3CN, получая требуемое соединение 10d (0,9 г, 68%).
Стадия 4.
К раствору 10d (0,86 г, 1,65 ммоль) в сухом толуоле (20 мл) добавляли DDQ (0,560 г, 2,5 ммоль). После кипячения в течение 2 ч растворитель удаляли в вакууме и разбавляли остаток EtOAc. Органический слой промывали насыщенным водным раствором Na2SO3 и насыщенным раствором соли, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток промывали MeOH (10 мл), фильтровали, и твердое вещество непосредственно представляло собой продукт 10е (0,6 г, 82%).
Стадия 5.
К раствору 10е (0,6 г, 1,2 ммоль) в 1,4-диоксане прибавляли бис-пинаколборат (0,88 г, 3,5 ммоль) и Pd(dppf)Cl2 (0,080 г, 0,12 ммоль) и KOAc (0,470 г, 4,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере N2 и нагревали до 110°C примерно в течение 15 ч. После этого растворитель удаляли в вакууме, а остаток очищали хроматографией на SiO2, элюируя смесью петролейный эфир:этилацетат (5/1-1/1), получая соединение 10f (0,6 г, выход 82%).
- 8 030554
Стадия 6.
Суспензию 10f (614 мг, 1 ммоль), кэп 5 (0,933 г, 2,5 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (73 мг, 0,1 ммоль), Na2CO3 (0,424 г, 4 ммоль) в ТГФ/Н2О (10:1, 27 ммоль) кипятили при 95°C примерно в течение 15 ч в атмосфере N2. После этого смесь фильтровали, а фильтрат промывали водой (50 мл) и экстрагировали EtOAc (100 мл). Органический слой промывали насыщенным раствором соли и сушили над безводным сульфатом натрия. После фильтрования и концентрирования в вакууме полученный остаток очищали ВЭЖХ, получая соединение 10g.
Стадия 7.
Соединение 10g (90 мг, 45%) очищали методом СФХ в следующих условиях, получая соединение
10.
Колонка: Chiralpak AS-H 250x4,6 мм I.D.
40% изопропанол (0,05% DEA) в СО2.
Скорость потока: 2,5 мл/мин.
Длина волны: 34 0 нм.
Ή ЯМР (MeOD) δ: 8,02 (с, 1Н), 7,97 (с, 1Н), 7,90 (с, 1Н), 7,76 (с, 1Н), 7,60-7,53 (м, 2Н), 7,40 (м, 1Н), 7,35 (с, 1Н), 7,21 (с, 1Н), 7,10 (с, 1Н), 5,24-5,12 (м, 2Н), 4,22-4,15 (м, 2Н), 4,15-4,05 (м, 2Н), 3,89-3,82 (м, 2Н), 3,63 (м, 6Н), 2,62-2,45 (м, 2Н), 2,30-2,21 (м, 2Н), 2,19-2,11 (м, 5Н), 2,05-1,95 (м, 2Н), 1,05-0,95 (м, 2Н), 0,98 (м, 2Н), 0,97-0,85 (м, 12Н).
ЖХ/МС: Анализ выч. для [М+Н]+ C49H55FN10O7S: 947,40; найдено 947,8.
Пример 2.
Исследования репликона ВГС в клетках.
Для определения клеточной анти-ВГС активности соединений настоящего изобретения применяли два комплементарных анализа с использованием различных репликонов. В первом анализе ("анализ репликона А") клетки, содержащие репликон, высевали при плотности 2000 клеток/лунку в 384-луночном плоскодонном культуральном обработанном планшете с прозрачным дном (Corning 3707) в присутствии тестируемого соединения. В анализируемую смесь добавляли тестируемое соединение в различных концентрациях, обычно в 10 серийных разбавлениях, при этом начальная концентрация изменялась от 333,3 до 1,667 нМ. Конечная концентрация ДМСО составляла 0,5%. Концентрация плодной бычьей сыворотки в анализируемой среде составляла 5%. Клетки собирали на 3 день, удаляя среду и промывая клетки подходящим промывным буфером. Клетки лизировали, добавляя 1х лизирующий буфер Qiagen (Cat. # 1062731). Уровень репликации РНК определяли методом ПЦР в реальном времени (TaqMan® EZ RT-PCR, Applied Biosystems 403028) со следующими праймерами и зондами:
Neo Forward: CCG GCT ACC TGC CCA TTC.
Neo Reverse: CCA GAT CAT CCT GAT CGA CAA G.
Зонд Neo: FAM-ACA TCG CAT CGA GCG AGC ACG TAC-Tamra.
Зонд Сус: 5'-JOE-CGCGTCTCCTTTGAGCTGTTTGCA-Tamra-3'.
Cyc Forward праймер: ACGGCGAGCCCTTGG.
Cyc Reverse праймер: TTTCTGCTGTCTTTGGGACCT.
В качестве эндогенного контроля использовали РНК циклофилина, которую амплифицировали в той же реакции в качестве NS5B (множественная ПЦР). Реакции РВ-ПЦР в реальном времени проводили в секвенаторе ABI PRISM 7900HT с использованием следующей программы: 50°C в течение 2 мин, 60°C в течение 30 мин, 95°C в течение 5 мин, 40 циклов при 94°C в течение 20 с, 55°C в течение 1 мин.
Количество РНК репликона ВГС в лунке определяли при помощи кривой регрессии для известного количества в нанограммах (нг) тотальной РНК с репликоном ВГС. Его определяли, нанося на график значения порогового цикла (Ct) из данных Neo зонда и праймера относительно log (нг) для каждого стандарта тотальной РНК с репликоном ВГС. Количество РНК ВГС для каждого образца репликона рассчитывали, поделив значение Ct образца минус линейный коэффициент, на наклон прямой. Аналогичным образом, количество мРНК циклофилина в лунке также определяли с использованием кривой регрессии для известного количества в нанограммах (нг) тотальной РНК с репликоном ВГС. Вновь, его определяли, нанося на график значения порогового цикла (Ct) из набора данных циклофилинового зонда и праймера относительно log (нг) для каждого стандарта тотальной РНК с репликоном ВГС.
В другом анализе ("анализ репликона В") высевали 1000 клеток/лунку в 384-луночном черном планшете с коллагеновым покрытием от Greiner bio-one (Cat#781946) с 5% FBS. Ингибиторы данного изобретения добавляли через 24 ч после высевания и инкубировали планшеты в течение 3 дней. После этого клетки лизировали лизисным буфером Qiagen (Cat. # 1062731) для экстракции РНК. Содержание РНК репликона ВГС определяли методом ПЦР в реальном времени с использованием набора RNA-to-CT от Applied Biosystems (Cat. # 4392656) и генотип-специфических праймеров и зондов. Ампликон находился в NS5B. Последовательности ПЦР праймеров являются следующими:
5B. 2F, ATGGACAGGCGCCCTGA (SEQ. ID NO: 1);
5B. 2R, TTGATGGGCAGCTTGGTTTC (SEQ. FAM-меченую CACGCCATGCGCTGCGG
(SEQ. ID NO: 3).
- 9 030554
Для определения генотипа 1А использовали праймер 1А F, TGCGGAACCGGTGAGTACA и 1А R, GCGGGTTTATCCAAGAAAGGA, последовательность зонда представляла собой FAM-CGGAATTGCCAGGACGACCGG.
Реакции РВ-ПЦР в реальном времени проводили в секвенаторе ABI PRISM 7900HT или секвенаторе Viia 7 с использованием следующей программы: 48°C в течение 30 мин, 95°C в течение 10 мин, 40 циклов при 95°C в течение 15 с, 60°C в течение 1 мин. 50%-ная эффективная концентрация (ЕС50) представляла собой концентрацию лекарственного препарата, необходимую для повышения значения порогового цикла (CT) на 1 по сравнению с предполагаемым базисным CT. ЕС90 представляла собой концентрацию лекарственного препарата, необходимую для повышения CT на 3,2 по сравнению с предполагаемым базисным CT.
Данные получали для соединения настоящего изобретения с использованием способов, описанных в приведенном выше примере, и представляли в таблице, приведенной непосредственно далее. Данные для репликонов 1А, 1A Y93H и 2В получали при помощи анализа репликации А, а данные для репликонов 1A Q30D и 1В получали при помощи анализа репликации В.
ID 1А IC50 (нМ> 1А Y93H IC50 (НМ) 1А Q30D IC50 (НМ) 1В IC50 (нМ) 2В IC50 (нМ)
10 0, 0014 0,0035 0, 097 0, 002 0,011
- 10 030554
Список последовательностей
<110> Yu, Wensheng Tong, Ling Kozlowski, Joseph a.
Selyutin, Oleg
Chen, Lei
Kim, Jae-Hun
sha, Deyou
Ri zvi, Razi a
Shankar, Bandarpalle
Hu, Bin
zhong, Bin
wang, Dahai
Hao, Jinglai
Wei, Wei
Ji, тао
zan, Shuai
<120> ЗАМЕЩЕННЫЕ ГЕТЕРОЦИКЛОМ ТЕТРАЦИКЛИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ И СПОСОБЫ их применения для лечения вирусных заболеваний
<130> 23422
<160> 6
<170> Patentln version 3.5
<210> 1
<211> 20
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Олигонуклеотидный праймер
<400> 1
cacccaagaa cagggtttgt 20
<210> 2
<211> 21
<212> ДНК
<213> искусственная последовательность
<220>
<223> Олигонуклеотидный праймер
<400> 2
tggccatggg tatgttgtta а 21
<210> 3
<211> 19
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Олигонуклеотидный праймер
<400> 3
ttaccgggct ctgccatct 19
<210> 4
<211> 17
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность <22О>
<223> Олигонуклеотидный праймер
<400> 4
tgcccgccat catccta 17
<210> 5
<211> 23
<212> ДНК
<213> искусственная последовательность
<22О>
<223> Олигонуклеотидный праймер
<400> 5
cgtctgttat gtaaaggatg cgt 23
<210> 6
<211> 21
<212> днк
<213> искусственная последовательность
<220>
<223> Олигонуклеотидный праймер
<400> 6
tcctcatcgc cctcccatcc с 21
- 11 030554

Claims (8)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Соединение, имеющее структуру
    или его фармацевтически приемлемая соль.
  2. 2. Соединение, имеющее структуру
    или его фармацевтически приемлемая соль.
  3. 3. Соединение, имеющее структуру
    или его фармацевтически приемлемая соль.
  4. 4. Фармацевтически приемлемая соль соединения, имеющего структуру
  5. 5. Фармацевтическая композиция, содержащая эффективное количество соединения по п. 1 или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемый носитель.
  6. 6. Способ лечения пациента, инфицированного ВГС, включающий стадию введения количества соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли, эффективного для лечения инфекции ВГС у указанного пациента.
  7. 7. Фармацевтическая композиция, содержащая эффективное количество соединения по п.3 и фармацевтически приемлемый носитель.
  8. 8. Способ лечения пациента, инфицированного ВГС, включающий стадию введения количества соединения по п.3, эффективного для лечения инфекции ВГС у указанного пациента.
    4^j)
EA201591328A 2013-01-16 2013-12-31 Замещенное гетероциклом тетрациклическое соединение и способы его применения для лечения вирусных заболеваний EA030554B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/CN2013/000038 WO2014110687A1 (en) 2013-01-16 2013-01-16 Thiazolyl-substitued tetracyclic compounds and methods of use thereof for treatment of viral diseases
PCT/CN2013/001676 WO2014110705A1 (en) 2013-01-16 2013-12-31 Heterocycle-substitued tetracyclic compounds and methods of use thereof for treatment of viral diseases

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201591328A1 EA201591328A1 (ru) 2015-11-30
EA030554B1 true EA030554B1 (ru) 2018-08-31

Family

ID=51208906

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201591328A EA030554B1 (ru) 2013-01-16 2013-12-31 Замещенное гетероциклом тетрациклическое соединение и способы его применения для лечения вирусных заболеваний

Country Status (26)

Country Link
US (1) US9555038B2 (ru)
EP (1) EP2945952B1 (ru)
JP (3) JP6093451B2 (ru)
KR (1) KR101748974B1 (ru)
CN (1) CN105073755B (ru)
AP (1) AP2015008625A0 (ru)
AR (1) AR094496A1 (ru)
AU (1) AU2013374112B2 (ru)
BR (1) BR112015016325A2 (ru)
CA (1) CA2898049C (ru)
CL (1) CL2015001971A1 (ru)
CR (1) CR20150378A (ru)
DO (1) DOP2015000169A (ru)
EA (1) EA030554B1 (ru)
EC (1) ECSP15035530A (ru)
HK (1) HK1211290A1 (ru)
IL (1) IL239832A0 (ru)
MA (1) MA38315B1 (ru)
MD (1) MD20150075A2 (ru)
MX (1) MX356203B (ru)
PE (1) PE20151892A1 (ru)
PH (1) PH12015501560A1 (ru)
SG (1) SG11201505536RA (ru)
TN (1) TN2015000293A1 (ru)
TW (1) TW201441231A (ru)
WO (2) WO2014110687A1 (ru)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014110687A1 (en) * 2013-01-16 2014-07-24 Merck Sharp & Dohme Corp. Thiazolyl-substitued tetracyclic compounds and methods of use thereof for treatment of viral diseases
US10457690B2 (en) 2015-06-04 2019-10-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Process for preparing substituted tetracyclic heterocycle compounds
US20180228826A1 (en) * 2015-08-04 2018-08-16 Merck Sharp & Dohme Corp. Fixed-dose combinations of antiviral compounds
US20180228828A1 (en) * 2015-08-04 2018-08-16 Merck Sharp & Dohme Corp. Fixed-dose combinations of antiviral compounds
US20190002480A1 (en) * 2015-12-21 2019-01-03 Merck Sharp & Dohme Corp. Silane-Containing Heterocyclic Compounds and Methods of Use Thereof for the Treatment of Viral Diseases
WO2017181383A1 (en) 2016-04-21 2017-10-26 Merck Sharp & Dohme Corp. Hepatitis c virus inhibitors
WO2017219808A1 (zh) * 2016-06-21 2017-12-28 浙江柏拉阿图医药科技有限公司 丙型肝炎病毒抑制剂及应用
WO2018032468A1 (en) * 2016-08-18 2018-02-22 Merck Sharp & Dohme Corp. Heterocycle-substitued tetracyclic compounds and methods of use thereof for treatment of viral diseases
WO2018032467A1 (en) * 2016-08-18 2018-02-22 Merck Sharp & Dohme Corp. Chromane-substitued tetracyclic compounds and uses thereof for treatment of viral diseases
CN109206396B (zh) * 2017-07-05 2023-03-28 上海迪赛诺化学制药有限公司 2-c-甲基-4,5-o-(1-甲基乙烯基)-d-***糖酸乙酯的制备方法
CN109232612A (zh) * 2017-07-11 2019-01-18 周龙兴 抑制丙肝病毒的化合物、药物组合物及其用途
US20210361663A1 (en) * 2018-10-26 2021-11-25 Merck Sharp & Dohme Corp. Formulations of Antiviral Compounds
TW202317145A (zh) * 2021-06-17 2023-05-01 美商亞堤製藥公司 有利之抗hcv組合療法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012041014A1 (en) * 2010-09-29 2012-04-05 Merck Sharp & Dohme Corp. Tetracyclic indole derivatives for treating hepatitis c virus infection
WO2012050850A1 (en) * 2010-09-29 2012-04-19 Merck Sharp & Dohme Corp. Polycyclic heterocycle derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
CN102427729A (zh) * 2009-03-27 2012-04-25 默沙东公司 丙型肝炎病毒复制的抑制剂

Family Cites Families (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3927630B2 (ja) 1996-09-27 2007-06-13 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 ウイルス感染症の予防・治療剤
AU2001293817A1 (en) 2000-09-20 2002-04-02 Merck Patent Gmbh 4-amino-quinazolines
CA2531511A1 (en) 2003-07-10 2005-01-20 Paradigm Therapeutics Ltd. Silicon compounds and their use
US20070049593A1 (en) 2004-02-24 2007-03-01 Japan Tobacco Inc. Tetracyclic fused heterocyclic compound and use thereof as HCV polymerase inhibitor
JP4143669B2 (ja) 2004-02-24 2008-09-03 日本たばこ産業株式会社 ４環縮合複素環化合物及びそのｈｃｖポリメラーゼ阻害剤としての利用
WO2007084413A2 (en) 2004-07-14 2007-07-26 Ptc Therapeutics, Inc. Methods for treating hepatitis c
US7153848B2 (en) 2004-08-09 2006-12-26 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of HCV replication
EP1807397A2 (en) 2004-10-26 2007-07-18 Istituto di Richerche di Biologia Molecolare P. Angeletti S.p.A. Tetracyclic indole derivatives as antiviral agents
GB2438802A (en) 2005-02-28 2007-12-05 Univ Rockefeller Structure of the hepatitis C virus NS5A protein
US7994360B2 (en) 2005-05-16 2011-08-09 Xtl Biopharmaceuticals Ltd. Benzofuran compounds
US20110104109A1 (en) 2005-07-13 2011-05-05 Frank Bennett Tetracyclic indole derivatives and their use for treating or preventing viral infections
CN101213190A (zh) 2005-07-14 2008-07-02 Irm责任有限公司 用作tpo模拟物的化合物和组合物
US7473784B2 (en) 2005-08-01 2009-01-06 Bristol-Myers Squibb Company Benzothiazole and azabenzothiazole compounds useful as kinase inhibitors
FR2894963A1 (fr) 2005-12-16 2007-06-22 Inst Nat Sante Rech Med Nouveaux composes interagissant avec pea-15
US7745636B2 (en) 2006-08-11 2010-06-29 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7642251B2 (en) 2007-08-09 2010-01-05 Bristol-Myers Squibb Company Compounds for the treatment of hepatitis C
US20110130361A1 (en) 2007-08-09 2011-06-02 Jonathan Grimm Silicon derivatives as histone deacetylase inhibitors
EP2187883A2 (en) 2007-08-10 2010-05-26 Genelabs Technologies, Inc. Nitrogen containing bicyclic chemical entities for treating viral infections
US7704992B2 (en) 2008-02-13 2010-04-27 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CA2715839C (en) 2008-02-13 2014-12-09 Bristol-Myers Squibb Company Imidazolyl biphenyl imidazoles as hepatitis c virus inhibitors
CN102159285B (zh) 2008-07-22 2014-05-14 默沙东公司 作为hcv ns3蛋白酶抑制剂的大环喹喔啉化合物
WO2010041687A1 (ja) 2008-10-09 2010-04-15 コニカミノルタホールディングス株式会社 有機光電変換素子、太陽電池及び光センサアレイ
WO2010062821A1 (en) 2008-11-28 2010-06-03 Glaxosmithkline Llc Anti-viral compounds, compositions, and methods of use
CN104163816A (zh) 2008-12-03 2014-11-26 普雷西迪奥制药公司 Hcv ns5a的抑制剂
EP2411038B1 (en) 2009-03-27 2016-12-28 Van Andel Research Institute Parathyroid hormone peptides and parathyroid hormone-related protein peptides and methods of use
KR20110131312A (ko) 2009-03-27 2011-12-06 프레시디오 파마슈티칼스, 인코포레이티드 융합된 고리 ｃ형 간염 억제제
AU2010253790A1 (en) 2009-05-29 2011-12-15 Merck Sharp & Dohme Corp. Antiviral compounds composed of three aligned aryl moieties to treat diseases such as Hepatitis C
US8221737B2 (en) 2009-06-16 2012-07-17 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis C virus inhibitors
US8377980B2 (en) 2009-12-16 2013-02-19 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US20130156731A1 (en) 2009-12-22 2013-06-20 Kevin X. Chen Fused tricyclic compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseas
ES2558554T3 (es) 2010-03-09 2016-02-05 Merck Sharp & Dohme Corp. Compuestos de sililo tricíclicos condensados y métodos de uso de los mismos para el tratamiento de enfermedades víricas
WO2012040923A1 (en) * 2010-09-29 2012-04-05 Merck Sharp & Dohme Corp. Tetracyclic indole derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
WO2014110688A1 (en) * 2013-01-16 2014-07-24 Merck Sharp & Dohme Corp. Thiophene- sub stitued tetracyclic compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
WO2014110687A1 (en) 2013-01-16 2014-07-24 Merck Sharp & Dohme Corp. Thiazolyl-substitued tetracyclic compounds and methods of use thereof for treatment of viral diseases

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102427729A (zh) * 2009-03-27 2012-04-25 默沙东公司 丙型肝炎病毒复制的抑制剂
WO2012041014A1 (en) * 2010-09-29 2012-04-05 Merck Sharp & Dohme Corp. Tetracyclic indole derivatives for treating hepatitis c virus infection
WO2012050850A1 (en) * 2010-09-29 2012-04-19 Merck Sharp & Dohme Corp. Polycyclic heterocycle derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases

Also Published As

Publication number Publication date
EP2945952B1 (en) 2019-08-28
AU2013374112A1 (en) 2015-07-16
CL2015001971A1 (es) 2015-10-23
EP2945952A1 (en) 2015-11-25
JP6417380B2 (ja) 2018-11-07
MX2015009225A (es) 2015-10-15
KR101748974B1 (ko) 2017-06-19
AU2013374112B2 (en) 2016-11-17
CN105073755B (zh) 2017-08-18
WO2014110705A9 (en) 2015-03-05
MX356203B (es) 2018-05-18
US9555038B2 (en) 2017-01-31
CA2898049C (en) 2018-04-17
US20150335648A1 (en) 2015-11-26
AR094496A1 (es) 2015-08-05
ECSP15035530A (es) 2017-08-31
WO2014110687A1 (en) 2014-07-24
JP6148779B2 (ja) 2017-06-14
MA38315A1 (fr) 2017-02-28
TW201441231A (zh) 2014-11-01
PH12015501560A1 (en) 2015-09-21
BR112015016325A2 (pt) 2017-08-22
IL239832A0 (en) 2015-08-31
WO2014110705A1 (en) 2014-07-24
SG11201505536RA (en) 2015-08-28
MA38315B1 (fr) 2018-05-31
AP2015008625A0 (en) 2015-07-31
EA201591328A1 (ru) 2015-11-30
DOP2015000169A (es) 2015-12-31
KR20150104630A (ko) 2015-09-15
HK1211290A1 (en) 2016-05-20
JP6093451B2 (ja) 2017-03-08
CA2898049A1 (en) 2014-07-24
MD20150075A2 (ru) 2016-02-29
TN2015000293A1 (en) 2016-10-03
PE20151892A1 (es) 2015-12-24
CR20150378A (es) 2015-12-09
JP2016510321A (ja) 2016-04-07
JP2017095450A (ja) 2017-06-01
EP2945952A4 (en) 2016-07-20
JP2017075158A (ja) 2017-04-20
CN105073755A (zh) 2015-11-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA030554B1 (ru) Замещенное гетероциклом тетрациклическое соединение и способы его применения для лечения вирусных заболеваний
EP2430015B1 (en) Fused tricyclic compounds useful for the treatment of viral diseases
US8633309B2 (en) Nucleoside phosphoramidates
CN110072866A (zh) 作为bet蛋白降解剂的稠合的1,4-二氮杂*
KR20120138242A (ko) 뉴클레오사이드 포스포르아미데이트
EP2435425A1 (en) Hepatitis c virus inhibitors
JP2013541499A (ja) 置換されたビフェニレン化合物およびウイルス性疾患の治療のためのその使用方法
JP2016508151A (ja) チオフェン置換四環式化合物およびウイルス性疾患を治療するためのその使用法
KR20140145126A (ko) Hcv ns5a의 저해제를 포함하는 고체형태, 이의 조성물 및 이에 의한 용도
EP3083634B1 (en) Fused tetracyclic heterocyclic compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
EP3500578A1 (en) Heterocycle-substituted tetracyclic compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
WO2023091550A1 (en) Methods of treating estrogen receptor-associated diseases
TW201920178A (zh) Tyk2抑制劑及其用途
EP3393585A1 (en) Silane-containing heterocyclic compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU