EA022816B1

EA022816B1 - Ацилированные аналоги глюкагона

Info

Publication number: EA022816B1
Application number: EA201290027A
Authority: EA
Inventors: Дитте Рибер; Эдди Мейер; Йенс Росенгрен Даугаард; Мари Сковгаард; Якоб Линд Толборг; Гита Кампен; Камилла Эртеберг Бэк
Original assignee: Зилэнд Фарма А/С
Priority date: 2009-07-13
Filing date: 2010-06-24
Publication date: 2016-03-31
Also published as: HK1171035A1; RS53987B1; SI2454282T1; AU2010272944B2; HRP20150557T1; NZ597981A; EA201290027A1; CA2767792A1; PT2454282E; US9156901B2; WO2011006497A1; CN102574903B; AP2012006107A0; KR101809024B1; AU2010272944A1; MA33517B1; AP3329A; US10004786B2; JP2012532898A; KR20120052973A

Abstract

Настоящее изобретение обеспечивает вещества и способы для снижения массы тела или предотвращения увеличения массы тела и лечения диабета и связанных с ним метаболических нарушений. В частности, настоящее изобретение обеспечивает новые ацилированные пептиды, которые представляют собой аналоги глюкагона, эффективные в указанных способах. Указанные пептиды могут оказывать свое действие посредством повышенной избирательности по отношению к рецептору GLP-1 по сравнению с глюкагоном человека.

Description

Настоящее изобретение относится к ацилированным аналогам глюкагона и их применению в медицине, например, для лечения ожирения и сахарного диабета.

Уровень техники

Ожирение и сахарный диабет представляют собой растущие проблемы мирового здравоохранения и связаны с различными заболеваниями, в частности, сердечно-сосудистыми заболеваниями, обструктивным апноэ сна, инсультом, болезнью периферических артерий, нарушением микроциркуляции и остеоартритом.

В мире существует 246 млн больных диабетом и по прогнозам к 2025 г. 380 млн людей будут больны диабетом. У многих из них есть дополнительные факторы риска развития сердечно-сосудистых заболеваний, включая высокий/нарушенный уровень БЭБ (липопротеины низкой плотности) и триглицеридов и низкий уровень НЭБ (липопротеины высокой плотности).

Сердечно-сосудистые заболевания являются причиной 50% смертей пациентов с диабетом, и уровень заболеваемости и смертности от ожирения и диабета подчеркивает необходимость в эффективных способах лечения.

Препроглюкагон представляет собой полипептид-предшественник длиной 158 аминокислот, который подвергается дифференциальному процессингу в тканях и образует несколько структурно родственных пептидов, происходящих из проглюкагона, включая глюкагон (С1и), глюкагоноподобный пептид-1 (СЬР-1), глюкагоноподобный пептид-2 (СЬР-2) и оксинтомодулин (ОХМ). Указанные молекулы выполняют различные физиологические функции, включая гомеостаз глюкозы, секрецию инсулина, опорожнение желудка и рост кишечника, а также регуляцию потребления пищи.

Глюкагон представляет собой пептид из 29 аминокислот, который соответствует аминокислотам 53-81 препроглюкагона и имеет последовательность

Н|5-5ег-01п-01у-ТКгРИе-ТНг-5ег-А5р-Туг-Зег-1_у5-Туг-1-еи-А5р-5ег-Агд-Агд-А1а-С1п-Азр-РНе-\/а!-61п-Тгр-1-еи-МеБ

Азп-ТИг.

Оксинтомодулин (ОХМ) представляет собой пептид длиной 37 аминокислот, который включает полную последовательность из 29 аминокислот глюкагона и на С-конце удлинение из 8 аминокислот (аминокислоты 82 - 89 препроглюкагона, имеющие последовательность Ьу8-Ат§-А8п-Ат§-А8п-А8п-11е-А1а и обозначаемые термином промежуточный пептид 1 или 1Р-1; таким образом, полная последовательность оксинтомодулина человека представляет собой Н18-8ег-С1п-С1у-ТЬт-РЬе-ТЬт-§ег-А8р-Туг-§ег-Ьу8Туг-Ьеи-А8р-8ег-Аг§-Аг§-А1а-С1п-А8р-РЬе-Уа1-С1п-Тгр-Ьеи-Ме1-А8п-ТЬг-Ьу8-Аг§-А8п-Аг§-А8п-А8п-11еА1а). Основной биологически активный фрагмент СЬР-1 синтезируется в виде амидированного по Сконцу пептида из 30 аминокислот, который соответствует аминокислотам 98-127 препроглюкагона.

Глюкагон способствует поддержанию постоянного уровня глюкозы в крови посредством связывания с рецепторами глюкагона на гепатоцитах, вызывая высвобождение глюкозы из печени, запасенной в виде гликогена, в процессе глюкогенолиза. Когда эти запасы уменьшаются, глюкагон стимулирует синтез дополнительной глюкозы печенью в ходе глюконеогенеза. Эта глюкоза высвобождается в кровоток, предотвращая развитие гипогликемии. Также было показано, что глюкагон усиливает липолиз и уменьшает массу тела.

СЬР-1 снижает повышенный уровень глюкозы в крови благодаря улучшению секреции инсулина, вызванной глюкозой, и способствует уменьшению массы тела в основном из-за снижения потребления пищи.

Оксинтомодулин поступает в кровь в ответ на потребление пищи пропорционально количеству калорий в пище. Механизм действия оксинтомодулина еще не достаточно хорошо известен. В частности неизвестно, опосредуется ли действие этого гормона исключительно рецептором глюкагона и рецептором СЬР-1 или одним или более до сих пор не обнаруженными рецепторами.

Было показано, что другие пептиды связывают и активируют рецептор глюкагона и рецептор СЬР-1 (Нщй е! а1., 1оита1 οί Вю1ощса1 СЬеш18йу, 269, 30121-30124,1994) и подавляют увеличение массы тела и снижают потребление пищи (№О 2006/134340; \\'О 2007/100535; \\'О 2008/101017, \\'О 2008/152403, \\'О 2009/155257 и \УО 2009/155258). Было показано, что стабилизация пептидов обеспечивает лучший фармакокинетический профиль некоторых лекарственных средств. В частности, показано, что добавление одной или более группы полиэтиленгликоля (РЕС) или ацильной группы, продлевает период полувыведения пептидов, таких как СЬР-1 и других пептидов с непродолжительной стабильностью в плазме.

В публикациях \УО 00/55184А1 и \УО 00/55119 описаны способы ацилирования некоторых пептидов, в частности СЬР-1. В публикации Маб8еп е! а1. (1. Меб. СЬет. 2007, 50, 6126-6132) описан ацилированный в положении 20 СЬР-1 (Лираглутид) и представлены данные о его стабильности.

В публикациях №О2007/100535, №О08/071972 и Епйосг1по1о§у 2009, 150(4), 1712-1721 Этсе М. К. и др. показано, что стабилизация ОХМ благодаря пегилированию и ацилированию С-конца улучшает фармакокинетический профиль секретируемых аналогов.

Недавно было показано, что пегилирование аналогов глюкагона оказывает сильное влияние на фармакокинетический профиль исследованных соединений (\УО 2008/101017), но нарушает активность

- 1 022816 указанных соединений.

Краткое описание изобретения

Настоящее изобретение обеспечивает соединение, имеющее формулу:

где К¹ представляет собой Н, С1.4 алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил;

К² представляет собой ОН или ΝΗ₂и Ζ представляет собой пептид, имеющий формулу I

Н|5-Х2-С1п-С1у-Тйг-Рпе-Тпг-Зег-Азр-Туг-Зег-Х12-Туг-1еи-А5р-Х16-Х17-А1а-А1а-Х20-Х21-РЬеУа1-Х24-Тгр-1.ешХ27-Х28-А1а-Х30; (I) где

Х2 выбран из Αίό или §ет;

Х12 выбран из Ьук, Агд и Ьеи;

Х16 выбран из Агд и X;

Х17 выбран из Агд и X;

Х20 выбран из Агд, Ηΐδ и X;

Х21 выбран из Акр и О1ц;

Х24 выбран из А1а и X;

Х27 выбран из Ьеи и X;

Х28 выбран из Агд и X;

Х30 представляет собой X или отсутствует;

причём по меньшей мере один из Х16, Х17, Х20, Х24, Х27, Х28 и Х30 представляет собой X; и при этом каждый остаток X независимо выбран из группы, состоящей из 01ц, Ьук, 8ет, Сук, ЭЬи.

Όρτ и Огп;

причём боковая цепь по меньшей мере одного остатка X конъюгирована с липофильным заместителем, имеющим формулу:

(ί) Ζ¹, где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, конъюгированную непосредственно с боковой цепью X; или (ίί) Ζ¹Ζ², где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, Ζ² представляет собой спейсер, и Ζ¹ конъюгирована с боковой цепью X через Ζ²; при условии, что Ζ не является ΗδΟΟΤΡΤδΌΥ8К¥ЬП8-К(гексадеканоил-у-01и)-ААНПРУЕ№ЬЬКА.

Х30 может присутствовать или отсутствовать. Согласно вариантам реализации, в которых Х30 присутствует, он может предпочтительно представлять собой Ьук.

Согласно некоторым вариантам реализации любой остаток X, и особенно любой остаток X, который конъюгирован с липофильным заместителем, независимо выбран из Ьук, 01и или Сук.

Согласно некоторым вариантам реализации Х16 выбран из 01и, Ьук и 8ет;

Х17 выбран из Ьук и Сук;

Х20 выбран из Шк, Ьук, Агд и Сук;

Х24 выбран из Ьук, 01и и А1а;

Х27 выбран из Ьеи и Ьук; и/или Х28 выбран из 8ет, Агд и Ьук.

Определенные комбинации остатков, которые могут присутствовать в пептиде формулы I, включают следующие:

Х2 представляет собой АЪ, и Х17 представляет собой Ьук;

Х2 представляет собой АЪ, и Х17 представляет собой Сук;

Х2 представляет собой АЪ, и Х20 представляет собой Сук;

Х2 представляет собой АЪ, и Х28 представляет собой Ьук;

Х12 представляет собой Агд, и Х17 представляет собой Ьук;

Х12 представляет собой Ьеи, и Х17 представляет собой Ьук;

Х12 представляет собой Ьук, и Х20 представляет собой Ьук;

Х12 представляет собой Ьук, и Х17 представляет собой Ьук;

Х16 представляет собой Ьук, и Х17 представляет собой Ьук;

Х16 представляет собой 8ет, и Х17 представляет собой Ьук;

Х17 представляет собой Ьук, и Х20 представляет собой Ьук;

Х17 представляет собой Ьук, и Х21 представляет собой Акр;

Х17 представляет собой Ьук, и Х24 представляет собой 01и;

Х17 представляет собой Ьук, и Х27 представляет собой Ьеи;

Х17 представляет собой Ьук, и Х27 представляет собой Ьук;

Х17 представляет собой Ьук, и Х28 представляет собой 8ет;

Х17 представляет собой Ьук, и Х28 представляет собой Агд;

Х20 представляет собой Ьук, и Х27 представляет собой Ьеи;

- 2 022816

Х21 представляет собой Акр, и Х27 представляет собой Ьеи;

Х2 представляет собой АЪ, Х12 представляет собой Ьук, и Х16 представляет собой §ет;

Х12 представляет собой Ьук, Х17 представляет собой Ьук, и Х16 представляет собой §ет;

Х12 представляет собой Агд, Х17 представляет собой Ьук, и Х16 представляет собой О1и;

Х16 представляет собой О1и, Х17 представляет собой Ьук, и Х20 представляет собой Ьук;

Х16 представляет собой §ет, Х21 представляет собой Акр, и Х24 представляет собой О1и;

Х17 представляет собой Ьук, Х24 представляет собой О1и, и Х28 представляет собой Агд;

Х17 представляет собой Ьук, Х24 представляет собой О1и, и Х28 представляет собой Ьук;

Х17 представляет собой Ьук, Х27 представляет собой Ьеи, и Х28 представляет собой §ет;

Х17 представляет собой Ьук, Х27 представляет собой Ьеи, и Х28 представляет собой Агд;

Х20 представляет собой Ьук, Х24 представляет собой О1и, и Х27 представляет собой Ьеи;

Х20 представляет собой Ьук, Х27 представляет собой Ьеи, и Х28 представляет собой §ет;

Х20 представляет собой Ьук, Х27 представляет собой Ьеи, и Х28 представляет собой Агд;

Х16 представляет собой §ет, Х20 представляет собой Шк, Х24 представляет собой О1и, и

Х27 представляет собой Ьеи;

Х17 представляет собой Ьук, Х20 представляет собой Шк, Х24 представляет собой О1и, и

Х28 представляет собой §ет;

Х17 представляет собой Ьук, Х20 представляет собой Ьук, Х24 представляет собой О1и, и

Х27 представляет собой Ьеи; или

Х17 представляет собой Сук, Х20 представляет собой Ьук, Х24 представляет собой С1и, и

Х27 представляет собой Ьеи.

Может быть желательным, чтобы пептид формулы I содержал только одну аминокислоту того типа, который необходимо модифицировать посредством добавления липофильного заместителя. Например, указанный пептид может содержать только один остаток Ьук, только один остаток Сук или только один остаток С1и для осуществления конъюгации липофильного заместителя с указанным остатком.

Соединения согласно настоящему изобретению могут иметь один или более внутримолекулярных мостиков в пределах последовательности пептида формулы I. Каждый указанный мостик образуется между боковыми цепями двух аминокислотных остатков формулы I, которые обычно разделены тремя аминокислотами в линейной последовательности аминокислот (т.е. между аминокислотой А и аминокислотой А+4).

В частности, указанный мостик может быть образован между боковыми цепями пар остатков в положениях 16 и 20, 17 и 21, 20 и 24 или 24 и 28. Указанные боковые цепи могут быть связаны с другой цепью посредством ионных взаимодействий или ковалентных связей. Таким образом, указанные пары остатков могут содержать противоположно заряженные боковые цепи для образования соляного мостика посредством ионных взаимодействий. Например, один из остатков может представлять собой С1и или Акр, тогда как другой может представлять собой Ьук или Агд. Образование пар Ьук и О1и и Ьук и Акр также может обеспечивать взаимодействие с образованием лактамного кольца.

Примеры подходящих пар остатков в положениях 16 и 20 включают: Х16 представляет собой О1и, и Х20 представляет собой Ьук; Х16 представляет собой О1и, и Х20 представляет собой Агд; Х16 представляет собой Ьук, и Х20 представляет собой О1и; и Х16 представляет собой Агд, и Х20 представляет собой О1и.

Примеры подходящих пар остатков в положениях 17 и 21 включают: Х17 представляет собой Агд, и Х21 представляет собой О1и; Х17 представляет собой Ьук, и Х21 представляет собой О1и; Х17 представляет собой Агд, и Х21 представляет собой Акр; и Х17 представляет собой Ьук, и Х21 представляет собой Акр.

Примеры подходящих пар остатков в положениях 20 и 24 включают: Х20 представляет собой О1и аиб Х24 представляет собой Ьук; Х20 представляет собой О1и, и Х24 представляет собой Агд; Х20 представляет собой Ьук, и Х24 представляет собой О1и; и Х20 представляет собой Агд, и Х24 представляет собой О1и.

Примеры подходящих пар остатков в положениях 24 и 28 включают: Х24 представляет собой О1и, и Х28 представляет собой Ьук; Х24 представляет собой О1и, и Х28 представляет собой Агд; Х24 представляет собой Ьук, и Х28 представляет собой О1и; и Х24 представляет собой Агд, и Х28 представляет собой

С1и.

Образование пары Ьук и О1и, например, для образования лактамного кольца, может быть особенно желательным, особенно между положениями 24 и 28.

Очевидно, что остатки, участвующие в образовании внутримолекулярного мостика, нельзя подвергать дериватизации с липофильным заместителем. Таким образом, если один из остатков Х участвует в образовании внутримолекулярного мостика, по меньшей мере один из других остатков Х конъюгирован с липофильным заместителем или заместителями.

Считается, что такие внутримолекулярные мостики стабилизируют альфа-спиральную структуру молекулы и благодаря этому повышают ее активность и/или избирательность в отношении рецептора ОЬР-1 и возможно также рецептора глюкагона.

- 3 022816

Указанное соединение может иметь следующую формулу:

Κ’-Ζ-Κ² где К¹ представляет собой Н, С1.4 алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил; К² представляет собой ОН или ΝΗ₂; и Ζ представляет собой пептид, имеющий формулу 11а

Н|б-А|Ь-<31п-С1у-Т11г-Рпе-ТЬг-5ег-А5р-Туг-5ег-Х12-Туг-1-еи-А5р-Х16-Х17-А1а-А1а-Х20-Х21-Рпе7а!-Х24-Тгр-1_еи-1_еи-Х28-А1а; (На) где

Х12 выбран из Ьу8, Агд и Ьеи;

Х16 выбран из 8ег и X;

Х17 представляет собой X; Х20 выбран из Ηίδ и X;

Х21 выбран из Αδρ и О1и; Х24 выбран из А1а и О1и;

Х28 выбран из 8ег, Ьу^ и Агд;

и при этом каждый остаток X независимым образом выбран из группы, состоящей из О1ц, Ьу^ и

Суδ;

(ί) Ζ¹, где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, непосредственно конъюгированную с боковой цепью X; или (ίί) Ζ¹Ζ², где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, Ζ² представляет собой спейсер, и Ζ¹конъюгирована с боковой цепью X через Ζ².

В качестве альтернативы указанное соединение может иметь следующую формулу:

Κ¹-Ζ-Ρ² где К¹ представляет собой Н, С_1-4 алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил;

К² представляет собой ОН или ΝΗ₂; и Ζ представляет собой пептид, имеющий формулу 1ГЬ

Н'|з-Зег-61п-С1у-ТРг-РМе-ТЬг-5ег-А5р-7уг-5ег-Х12-Туг-Ьеи-А5р-Х16-Х17-А1а-А,а-Х20-Х21-РЬеУакХ24-Тгр<еи-Ьеи-Х28-А1а; (Нб) где

Х12 выбран из Ь-уъ. Агд и Ьеи;

Х16 выбран из 8ег и X;

Х17 представляет собой X;

Х20 выбран из Ηίδ и X;

Х21 выбран из Αδρ и О1и;

Х24 выбран из А1а и О1и;

Х28 выбран из 8ег, Ьу^ и Агд;

и при этом каждый остаток X независимым образом выбран из группы, состоящей из О1и, Ьу^ и

Суδ;

(ί) Ζ¹, где Ζ¹ представляет собой липофилыную группу, непосредственно конъюгированную с боковой цепью X; или (ίί) Ζ¹Ζ², где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, Ζ² представляет собой спейсер, и Ζ¹ конъюгирована с боковой цепью X через Ζ²;

при условии, что Ζ не представляет собой ΗδρΟΤΡΤδΌΥδΚΥΡΌδ-Κ (Гексадеканоил-у-О1и))АА^Г^'Е^РРКА.

Ρ¹-Ζ-Κ² где К¹ представляет собой Н, С_1-4 алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил;

К² представляет собой ОН или ΝΗ2; и Ζ представляет собой пептид, имеющий формулу ГГГа

Н|8-А|Ь-е1п-С1у-Тпг-Р11е-Т11г-5ег-Азр-Туг-Зег-Х12-Туг-1-еи-Азр-Зег-Х17-А1а-А1а-Х20-Х21-РИеУа1-Х24-Тгр-Ьеи-Ьеи-Х28-А1а; (Ша) где

Х12 выбран из Ь-уъ и Агд; Х17 представляет собой X; Х20 выбран из Ηίδ и X; Х21 выбран из Αδρ и О1и;

- 4 022816

Х24 выбран из А1а и О1и;

Х28 выбран из 8ег, Ьук и Агд;

и при этом каждый остаток X независимым образом выбран из О1и, Ьук и Сук;

(ί) Ζ¹ где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, непосредственно конъюгированную с боковой цепью X; или (ίί) Ζ¹Ζ², где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, Ζ² представляет собой спейсер, и Ζ¹конъюгирована с боковой цепью X через Ζ².

В качестве альтернативы, указанное соединение может иметь следующую формулу:

β¹-Ζ-Κ² где К¹ представляет собой Н, С_1-4 алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил;

К² представляет собой ОН или ΝΗ₂; и Ζ представляет собой пептид, имеющий формулу 111б

где

Х12 выбран из Ьук или Агд;

Х17 представляет собой X;

Х20 выбран из Ηίκ и X;

Х21 выбран из Акр и О1и;

Х24 выбран из А1а и О1и;

Х28 выбран из 8ет, Ьук и Агд;

(ί) Ζ¹, где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, непосредственно конъюгированную с боковой цепью X; или (ίί) Ζ¹Ζ², где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, Ζ² представляет собой спейсер, и Ζ¹конъюгирована с боковой цепью X через Ζ²;

при условии, что Ζ не представляет собой Н80СТЕТ8ОУ8КУЕО8-К (Гексадеканоил-у-О1и))ААНШАТАУН.НА.

К² представляет собой ОН или ΝΗ₂; и Ζ представляет собой пептид, имеющий формулу 1Уа

Н|5-А|Ь-О1п-61у-ТЬг-РЬе-ТКг-8ег-А5р-Туг-Зег-Х12-Туг-1еи-А5р-5ег-Х17-А1а-Аа-Н15-Х21-РИе-\/а1Х24-Тгр-1_еи-1_еи-Х2&-А1а; (1Уа) где

Х12 выбран из Ьук и Агд;

Х17 представляет собой X;

Х21 выбран из Акр и О1и;

Х24 выбран из А1а и О1и;

Х28 выбран из 8ег, Ьук и Агд;

где X выбран из группы, состоящей из О1и, Ьук и Сук;

и при этом боковая цепь X конъюгирована с липофильным заместителем, имеющим формулу:

(ί) Ζ¹, где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, непосредственно конъюгированную с боковой цепью X; или (ίί) Ζ¹Ζ², где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, Ζ² представляет собой спейсер, и Ζ¹конъюгирована с боковой цепью X через Ζ²

κ’-ζ-κ² где К¹ представляет собой Н, С_1-4 алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил;

К² представляет собой ОН или ΝΗ₂; и Ζ представляет собой пептид, имеющий формулу 1Уб

Н|8-Зег-С1п-в1у-ТТ|г-РЬе-ТЬг-5ег-А5р-Туг-5ег-Х12-Туг-1-еи-А8р-5ег-Х17-А1а-А1а-1-И8-Х21-РЬеУа1-Х24-Тгр-1_еи-1.еи-Х28-А1а; (IУб)

- 5 022816 где

Х12 выбран из Ьук и Агд;

Х17 представляет собой X;

Х21 выбран из Акр и О1и;

Х24 выбран из А1а и О1и Х28 выбран из 8ег, Ьук и Агд;

(ί) Ζ¹, где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, непосредственно конъюгированную с боковой цепью X; или (ίί) Ζ^!Ζ², где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, Ζ² представляет собой спейсер, и Ζ¹конъюгирована с боковой цепью X через Ζ²;

при условии, что Ζ не представляет собой ΗδρΟΤΡΤδΌΥδΚΥΡΌδ-Κ (Гексадеканоил-у-О1и))ΆΆΙΐυίΛΤΆΥΙ.Ι.ΚΆ.

р¹-г-к^г где К¹ представляет собой Н, С_1-4 алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил;

К² представляет собой ОН или ΝΗ₂; и Ζ представляет собой пептид, имеющий формулу V

Н|8-А1Ь-С1п-С1у-ТЬг-РЬе-ТЬг-5ег-Азр-Туг-Зег-1.у5-Туг-|_еи-Азр-5ег-1-уз-А1а-А1а-Н|з-А5р-РЬе-\/а1О1и-Тгр-1.еи-1-еи-Х28; (V) где

Х28 представляет собой δе^ или отсутствует;

Х17 представляет собой X, где X выбран из группы, состоящей из О1и, Ьук и Сук;

Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения пептид, имеющий формулу I, может иметь последовательность:

- 6 022816

НЗОбТРТЗОУЗКУЮЗКААНОРУЕЖЬРА;

НЗОбТРТЗОУЗКУЮККААНОРУЕУУНКА;

Η800ΤΡΤ30Υ5ΚΥΙ_05ΚΑΑΚ0ΡνΕννΐ-1-Ρ!Α;

НЗОбТРТЗОУЗКУЮЗКААНОРУЕХМ-ККА;

НЗОСТРТЗОУЗ КУЮЗКААНЮ Р УЕ\М_1_КА;

Η506ΤΡΤ50Υ3 РгУЮЗКААН ОР V Е \Л/1_ 1_ ГС А;

Η5<2ΟΤΡΤ3ΟΥ5Ι-ΥΙ-Ο3ΚΑΑΗΟΡνΕ\Λ/Ι-Ι-ΒΑ;

НЗОеТРТЗОУЗКУЮЗКААНОРУЕУУЫКАК;

Η3ΟΘΤΡΤ3ΟΥ5ΚΥΙ.Ο3ΚΑΑΗΟΡνΕννΐ.Ι.3ΑΚ Η3ΟΟΤΡΤ5ΟΥ5 КУЮЗКААНОРУЕ^ЬКЗА;

НЗСЮТРТЗОУЗ ЮТЮЗКААНЮ ΡνΚ\Λ/Ι_Ι_ΚΑ;

Η500ΤΡΤ30Υ5ΚΥΙ_050ΑΑΗ0ΡνΕννΐΛΠΑ;

НЗОСТРТЗОУЗКУЮЗСААНОРУЕ\Л/1кЗА;

НЗОСТРТЗОУЗ КУЮЗКААСО РУЕУУНКА;

Н5С1СТРТ5ОУЗКУЮК5ААНОРУЕ\М-1-Р!А;

Η-Αί6-α0ΤΡΤ30Υ5ΚΥΙ_05ΚΑΑΗϋΡνΕννΐ_1_5Α;

Η-Αί6-ΟΘΤΡΤ50Υ5ΚΥΙ_05ΚΑΑΗΟΡνΕννΐ-Ι-5ΑΚ;

Н-А|Ь-СЮТРТ5ОУ5КУЮ5КААГСОР\/А\Л,1-1-КА;

Η-Αί6-ΟΟΤΡΤ5ΟΥ5ΚΥΙ_Ο5ΚΑΑΚΟΡνΑννΐ_Ι_ΚΑ;

Η-Αίβ-<3ΟΤΡΤ50Υ5ΚΥΙ_05ΚΑΑΗ0ΡνΕΜΙ_Ι_Ρ:Α;

Н-А|Ь-ОСТРТ5ОУЗКУЮ5КААНОРУЕУ/1.1-КА

Η-Αίϋ-ΟΘΤΡΤ3ΟΥ3ΚΥΙΟ5ΚΑΑΚϋΡνΑννί15Α

Η-Αί6-Ω<3ΤΡΤ5ΟΥ3ΚΥΙ-Ο3ΚΑΑΗΟΡνΑννΐ_Ι_ΚΑ;

Η-Αί6-Ο<3ΤΡΤ3ΟΥ3ΚΥΙ_ΟΚΚΑΑΗΟΡνΑννΐ_Ι_ΡΑ;

Η-Αί6-αΘΤΡΤ3ΟΥ3ΒΥίΟ3ΚΑΑΗϋΡνΕυνίί3Α;

Η-ΑίΙ>-ΟβΤΡΤ5ΟΥ8ΚΥΙ-Ο5ΚΑΑΗΟΡνΚΥ/Ι_Ι_8Α;

Η-ΑίΙ>-06ΤΡΤ30Υ51-ΥΙ-05ΚΑΑΗ0ΡνΕννΐ_Ι.5Α;

Η-Αί6-ΟΘΤΡΤ3ΟΥ5ΚΥΙ_Ο5ΟΑΑΗΟΡνΕννΐ_Ι_3Α;

Н-А1Ь-С1СТРТ50У$КУЮ5КААС0РУЕУУ1_|_РА;

Η-Αί6-<3(3ΤΡΤ5ΟΥ8ΚΥΙ_ΟΚ()ΚΑΑΕ()ΟΡνΕννΐ-Ι-ΚΑ;

Η-Αί6-ΟΘΤΡΤ30Υ5ΚΥΙΟ3ΚΑΑΗ0ΡνΕ( )\ЛЛ_1_К( )Α Η-Αίό-ΟΘΤΡΤδϋ Υ5ΚΥΙ_Ο3ΚΑΑΚ( )ϋΡΥ ЕОУ/ЮКА:

Н-А|Ъ-СЮТРТ50У5КУЮ5К()ААН Е()РУЕ\М-1.КА; или Η-Αί6-ΟΘΤΡΤ5ΟΥ3ΚΥΙ_Ο3Κ()ΑΑΚΕ0ΡνΕννΐ.Ι.ΚΑ.

Согласно некоторым вариантам реализации указанные пептиды могут содержать липофильный заместитель в положениях, обозначенных например:

- 7 022816

Η3ΟΘΤΡΤ5ΟΥ3 КУШЗ-К'-ААН ϋ РУВЛП±КА; Η30ΘΤΡΤ30Υ5ΚΎί0-Κ*-ΚΑΑΗ0ΡνΕννΐ±ΚΑ;

Η30ΘΤΡΤ30Υ3ΚΥ103ΚΑΑ-Κ*-ϋ РУБРИКА; НЗОСТРТЗОУЗКУЮЗКААНОЕУЕ\Л/Ь-К*-КА; Η30ΘΤΡΤ30Υ5ΚΥΙ_05ΚΑΑΗ0ΡνΕννΐ.Ι.-Κ*-Α;

Η30ΘΤΡΤ30Υ5 ΚΥΙΧ>3-Κ*-ΑΑΗ0 РУЕ№1ХКА; Η30ΘΤΡΤ30Υ5Ι-ΥΙ-03-Κ*-ΑΑΗ0ΡνΕννΐ_1_ΡΑ; Η5ΟΟΤΡΤ30Υ3^03ΚΑΑΗ0ΡνΕννΐ_Ι_ΚΑ-Κ*;

Η3ΟΘΤΡΤ5ΟΥ3 КУШЗКААНОР УЕ \М_1_ЗА-К*; Η3ΟΘΤΡΤ3ΟΥ5ΚΥΙΟ5ΚΑΑΗϋΡνΕννί-Κ*-3Α; Ηβα6ΤΡΤ30Υ3ΚΥ1.03ΚΑΑΗ0Ρν-Κ*-ννΐ.Ι-Ρ!Α; Η5Οζ>ΤΡΤ5ΟΥ5ΚΥΙ_Ο5-Ο'-ΑΑΗΟΡνΕννΐ_Ι_ί3Α; НЗаСТРТЗОУЗКУЮЗ-С'-ААНОРУЕАНЗА; Η3α<3ΤΡΤ5ϋΥ3ΚΥΙ.Ο3ΚΑΑ-Ο*-ΟΡνΕννΐ.Ι_Ρ!Α; Η30ΘΤΡΤ30Υ3ΚΥίϋ’Κ*-3ΑΑΗ0ΡνΕννΐίΚΑ;

Н-А|Ь-ОСТРТЗ 0Υ3ΚΥΙ_ϋ3-Κ*-ΑΑΗ0 РУЕЖЬЗА;

Η-Αί6-αΘΤΡΤ3ΟΥ3ΚΥΙ-Ο5ΚΑΑΗΟΡνΕννΐ-1.5Α-Κ*;

Η-Αί6-ΟΘΤΡΤ3ϋΥ5ΚΥ1.03-Κ*-ΑΑΚΟΡνΑννΐΙ_ΡΑ;

Η-Αί0-α0ΤΡΤ50Υ3ΚΥί03ΚΑΑ-Κ*-0ΡνΑννΐ-Ι-ΡίΑ;

Η-Αί6-ΟΘΤΡΤ30Υ3ΚΥ103ΚΑΑΗ0ΡνΕννίΙ-Κ*-Α;

Н-А|Ь-О6ТРТЗОУЗКУЮЗ-К*-ААНОРУЕ\Л/ЬЬКА;

Η-ΑίΚ06ΤΡΤ5ϋΥ5ΚΥΙ_03-Κ*-ΑΑΗ0Ρ\/Εννΐ-Ι-ΚΑ;

Η-Αί6-αΘΤΡΤ3ΟΥ3ΚΥΙΟ5ΚΑΑ-Κ'*-ΟΡνΑννΐ±3Α;

Η-ΑίΗ-ΟΘΤΡΤ30Υ3ΚΥί03ΚΑΑΗ0ΡνΑννίΙ-Κ’-Α;

Η-ΑίΡ-ΟΘΤΡΤ30Υ3ΚΥΙ-0-Κ*-ΚΑΑΗ0ΡνΑννί.Ι_ΚΑ;

Η-Αί6-ΟΘΤΡΤ5ΟΥ3Ρ!ΥΙ.Ο3-Κ*-ΑΑΗΟΡνΕννΐ±3Α;

Η-Αί6-ΟΟΤΡΤΞΟΥ3ΚΥ108ΚΑΑΗϋΡν-Κ·-'ΜΧ5Α;

Н-А|Ь-ОСТРТ5ОУ51_УиЭ5-К*-ААНОРУЕ\М_|_5А;

Η-Αί6-06ΤΡΤ30Υ3ΚΥίϋ3-0*-ΑΑΙ40ΡνΕννίί3Α;

Н-А|Ь-СКЗТРТЗОУЗКУ1_ОЗКАА-С*-ОРУЕМ1_1_РА;

Η-Αί6-ΟβΤΡΤ30Υ3ΚΥίΟ-5-ΚΑΑΗΟΡνΕννίί5Α;

Н-А|Ь-С1СТРТ30У31Ог0К()К*ААЕ()0РУЕЖ1.РА;

Η-Αίβ-ζ)6ΤΡΤ5 0Υ3ΚΥ1.05Κ*ΑΑΗ ОРУЕ()ЖЬК( )Α; Η-Αί6-ΟΘΤΡΤ3ΟΥ3ΚΥί05Κ*ΑΑΚ()ΟΡνΕ()ννίΙΡΑ; Η-Αί6-α0ΤΡΤ50Υ3ΚΥί03Κ()ΑΑΗΕ()ΡνΕννίΙΚ*Α; или Η-Αί6-ΟΘΤΡΤ50Υ5ΚΥ1.05Κ()ΑΑΚ*Ε()ΡνΕννΐ-Ι.ΚΑ.

Остатки, обозначенные с помощью (), участвуют в образовании внутримолекулярной связи, например лактамного кольца.

Боковая цепь (цепи) одного или более остатков X конъюгирована с липофильным заместителем. Например, одна боковая цепь остатка X может быть конъюгирована с липофильным заместителем. В качестве альтернативы две или даже более двух боковых цепей остатков X могут быть конъюгированы с липофильным заместителем.

Например, по меньшей мере один из Х16, Х17, Х20 и Х28 может быть конъюгирован с липофильным заместителем. В таких случаях Х30 может отсутствовать. Если Х30 присутствует, он обычно конъюгирован с липофильным заместителем.

Таким образом, соединение может содержать по меньшей мере один липофильный заместитель в положении 16, 17, 20, 24, 27, 28 или 30, предпочтительно в положении 16, 17 или 20, в частности в положении 17.

В качестве альтернативы указанное соединение может содержать точно два липофильных заместителя, каждый в одном из положений 16, 17, 20, 24, 27, 28 или 30. Предпочтительно в одном из положений 16, 17 или 20 расположен один или оба липофильных заместителя.

Таким образом, указанное соединение может содержать липофильные заместителя в положениях 16 и 17, 16 и 20, 16 и 24, 16 и 27, 16 и 28 или 16 и 30; в положениях 17 и 20, 17 и 24, 17 и 27, 17 и 28 или 17 и 30; в положениях 20 и 24, 20 и 27, 20 и 28 или 20 и 30; в положениях 24 и 27, 24 и 28 или 24 и 30; в положениях 27 и 28 или 27 и 30; или в положениях 28 и 30.

Также согласно другим вариантам реализации указанное соединение может дополнительно содержать один или более липофильных заместителей (в общей сложности три или более) в других положениях, выбранных из положений 16, 17, 20, 24, 27, 28 или 30. Однако может быть желательно, чтобы не бо- 8 022816 лее двух положений были изменены таким образом.

Ζ¹ может содержать углеводородную цепь, включающую 10-24 атома углерода, например 10-22 атома углерода, например 10-20 атомов углерода. Она может включать по меньшей мере 11 атомов углерода и/или 18 атомов углерода или меньше. Например, указанная углеводородная цепь может содержать 12, 13, 14, 15, 16, 17 или 18 атомов углерода. Таким образом, Ζ¹ может представлять собой группу додеканоила, 2-бутилоктаноила, тетрадеканоила, гексадеканоила, гептадеканоила, октадеканоила или эйкозаноила.

Независимым образом, если присутствует, Ζ² может представлять собой или содержать один или более аминокислотных остатков. Например, Ζ² может представлять собой остаток у-О1и, О1и, β-ΑΙα или е-Ьу8 или группу 4-аминобутаноила, 8-аминооктаноила или 8-амино-3,6-диоксаоктаноила.

Определенные сочетания Ζ¹ и Ζ² включают додеканоил-у-О1и, гексадеканоил-у-О1и, гексадеканоилО1и, гексадеканоил-[3-аминопропаноил], гексадеканоил-[8-аминооктаноил], гексадеканоил-е-Ьук, 2бутилоктаноил-у-О1и, октадеканоил-у-О1и и гексадеканоил-[4-аминобутаноил].

Согласно некоторым вариантам реализации Ζ имеет формулу:

Н5О6ТРТ50¥5К¥Б0-К(Гексадеканоил-у-С1и)-КААН0РУЕУУББР!А; НЗО<ЗТРТЗОУ5К¥БОЗКААНОРУЕУ7Б-К(Гексадеканоил-у-01и)-КА; Н50СТР130УЗКУБ05КАА-К(Гексадеканоил-у-С!иТО РУЕУУББКА; НЗСКЗТРТЗО¥5КУБОЗКААНОРУЕ№БЕ-К(Гексадеканоил-у-<311])-А; Н-А|Ь-ОСТРТ5ОУ5КУБ05-К(Гексадеканоил-у-С1и)-ААН0РУЕУУЕБРА;

Η-Αί6-ΟΘΤΡΤ3ϋΥ5ΚΥΕ03-Κ( Гексадека но ил-у-О1и)-ААКОРУАУУББ КА;

Η-Αί6-α0ΤΡΤ30Υ5ΚΥΕ03-Κ( Гексадеканоил-у-С1и)-ААН ОРУЕУУББЗА;

Н-А|Ь-ОСТГТЗОУ5КУБОЗКААНОРУЕ№ББ-К(Гексадеканоил-у-С!и)-А;

Н-А|Ь-ОСТРТ5ОУЗКУБОЗ-К(Гексадеканоил-у-С1и)-ААНОРУЕ()\Л/ББК()А;

Н-А|Ь-СЮТРТ5ОУ5КУЕОЗ-К(Гексадеканоил-у-<31и)-ААНОРУЕУУБ1_КА;

НЗаеТРТЗОУЗКУБО5-К(Гексадеканоил-у-е1и)-ААНОРУЕ№ББКА;

Η-Αί6-αΘΤΡΤ5ΟΥ5ΚΥΕΟ5ΚΑΑ-Κ(Γβκε3Μβκ3ΗθΜΠ-γ-6Ιιι)-ΟΡνΑννΕΕΚΑ;

Н-А|Ь-С1СТРТ8ОУ5К¥ЕО5-К(Додеканоил-у-С1и)-ААНОРУЕ\УЕЕ5А;

Н-А|Ь-06ТРТЗОУЗКУБОЗ-К(Гексадеканоил-[3-аминопропаноил])-ААНОРУЕУУББЗА;

Н-А1Ь-С10ТРТЗП¥5КУЕ05-К(Гексадеканоил-[8-аминооктаноил])-ААНОРУЕ\Л/БЕ5А;

Н-А|Ь-ОСТРТЗОУ5К¥БОЗ-К(Гексадеканоил-е-Бу5)-ААНОРУЕ'Л/ББ8А:

Η3αθΤΡ730Υ3ΚΥΕϋ3-Κ(Γβκθ9Λβκ3ΗθΗΒ)-ΑΑΗΟΡνΕννΕΕ3Α;

НЗОСТПЗОУЗКУЮЗ-К(Октадеканоил- у-С1и)-ААНОРУЕУ/ББ5А; НЗабТРТЗОУ5К¥БОЗ-К([2-Бутилоктаноил]-у-С1и)-ААНОРУЕУ/ББЗА; НЗОСТРТЗОУЗКУБОЗ-К(Гексадеканоил-(4-Аминобутаноил])-ААНОРУЕУУББ5А; НЗОСТРТЗОУЗКУБОЗ-КГОктадеканои л- у-61и )-ААНОРУЕУУББЗА;

Н5С1СТРТ80УЗКУЕОЗ-К(Гексадеканоил-Е)-ААНОРУЕМЕЕЗА;

Н-А|Ь-ООТРТ5ОУ5КУБО5-К(Гексадеканоип)-ААНОРУЕ№ББ5А;

Н-А|Ь-0СТРТ50У5КУБ05-К(Октадеканоил-у-в1и)-ААН0РУЕМЕБ5А;

Н-А|Ь-ОеТРТЗОУ5КУБО5-К([2-Бугилоктаноил1-у-С1и)-ААНОРУЕ\Л/ББЗА;

Н-А|ЮеТРТЗОУ5КУБОЗ-К(Гексадеканоил-[4-Аминобутаноил]>-ААНОРУЕ\Л/ББ5А:

Н-А1Ь-0СТРТ30У5КУБ05-К(0ктадеканоил- у-С1и)-ААН0РУЕ\АББ5А; или

Н-А|Ь-ОСТРТЗОУ8КУБ05-К(Гексадеканоил-Е)-ААНОРУЕУ/ББЗА.

Остатки, обозначенные с помощью участвуют в образовании внутримолекулярной связи, например лактамного кольца.

Согласно другим вариантам реализации Ζ имеет формулу:

- 9 022816

Н-А|Ь-ОеТРТЗОУ5-К(Гексадеканоил-мзоС1и)-У1ОЗКААНОЕУЕ\^Ы5А;

Н-А|Ь-06ТРТ80У5КУЬО-К(Гексадеканоил-изое1и)-КААНОР7Е№/ЫЗА;

Н-А|Ъ-ОСТРТ5О¥ЗК¥1-О5КАА-К(Гексадеканоил-изоС1и)-ОРУЕА1.13А;

Н-А|Ь-аСТРТ50У5КУ1_О5КААН0Р\/-К(Гексадеканоил-изоС1и)-\Л/1_1_5А;

Н-А|Ь-абТРТ50У5КУЬ05-К(Гексадеканоил-изо1.уз)-ААКОРУА\/Уи-КА;

Н-А|Ь-06ТРТ50УЗКУЮЗ-К(Гексадеканоил-изо61и)-ААК0Р7ЕЖ13А;

Н-А|Ь-06ТРТ30¥ЗКУЬОЕ-К(Гексадеканоил-изое1и)-ААН0РУЕ\Л/б13А;

Н-А|Ь-ОеТРТ50¥ЗКУкОЗ-К(Гексадеканоил-изое1и)-ААНЕР7ЕЖ13А:

Н-А|Ь-аСТРТ5ОУЗК¥ЬОЗ-К(Гексадеканоил-изоС1и)-ААЕОРУЕ1Л/ЫЗА;

Н-А|Ь’00ТРТ50У5К¥1.05-К(Гексадекапоил-изо61и)-ААН0РУЕ\Л/и_ЕА.

Согласно другому аспекту Ζ имеет формулу:

Н-А|Ь-аеТРТЗО¥ЗКУЬОЗ-К(Гексадеканоил-изое1и)-ААНОРУЕАИЗ;

Н-А|Ь-аСТРТЗОУЗК¥Ь05-К(Гексадеканоил-иэоС1и)-ААНОРУЕАи-;

Согласно ещё одному аспекту Ζ имеет формулу: Η-Αίϋ-ΕΟΤΡΤδΌΥδΚΥΕΌδ-Κ (Гексадекано ил-изоΟ1ιι)-ΑΑΗΟΡνΕ\ν6ΕδΑ: Настоящее изобретение обеспечивает соединение, имеющее формулу:

Ρ¹-Ζ-β² где К¹ представляет собой Н, С1.4 алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил;

К² представляет собой ОН или ΝΗ₂; и Ζ представляет собой пептид, имеющий формулу I

Н|5-Х2-е1п-С1у-ТОг-РЬе-Тйг-Зег-Азр-Туг-Зег-Х12-Туг-Ьеи-А5р-Х16-Х17-А1а-А1а-Х20-Х21-РЬе\/а1-Х24-Тгр-1_еи-Х27-Х28-А1а-Х30;

где

Х2 представляет собой Αί6 или §ег;

Х12 выбран из Ьу8, Αγ§ или Ьеи;

Х16 представляет собой Αγ§ или X;

Х17 представляет собой Αγ§ или X;

Х20 представляет собой Лг§. Ηίδ или X;

Х21 представляет собой Αδρ или О1и;

Х24 представляет собой Αία или X;

Х27 представляет собой Ьеи или X;

Х28 представляет собой Αγ§ или X;

Х30 представляет собой X или отсутствует;

и при этом каждый остаток X независимым образом выбран из группы, состоящей из О1ц, Ьу8, 8ег, Су8, Оби, ΌρΓ и Огп;

(ί) Ζ¹, где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, непосредственно конъюгированную с боковой цепью X; или (б) Ζ¹Ζ², где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, Ζ² представляет собой спейсер, и Ζ¹конъюгирована с боковой цепью X через Ζ²;

при условии, что Ζ не представляет собой ΗδρΟΤΡΤδΌΥδΚΥΕΌδ-Κ (Гексадеканоил-у-О1и)ΑΑΗΌΡνΕνΕΕΚΑ.

Х30 может присутствовать или отсутствовать. Согласно тем вариантам реализации, в которых Х30 присутствует, желательно, чтобы он представлял собой Ьу8.

Согласно определенным вариантам реализации любой остаток X, и особенно любой остаток X, который конъюгирован с липофильным заместителем, независимым образом выбран из Ьу8, О1и или Су8. Указанное соединение может иметь следующую формулу:

Ρ’-Ζ-Ρ² где К¹ представляет собой Н, С_1-4 алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил;

К² представляет собой ОН или ΝΗ₂; и Ζ представляет собой пептид, имеющий формулу 11а

Н|3-А||>С1п-С1у-ТЬг-Рпе-Тбг-Зег-А5р-Туг-5ег-Х12-Туг-1.еи-А5р-Х16-Х17-А1а-А1а-Х20-Х21-РОеУа1-Х24-Тгр-1_еи-Ьеи-Х28-А1а;

где

Х12 выбран из Ьу8, Αγ§ или Ьеи;

Х16 представляет собой §ег или X;

Х17 представляет собой X;

- 10 022816

Х20 представляет собой Ηίδ или X;

Х21 представляет собой Αδρ или С1и;

Х24 представляет собой А1а или С1и;

Х28 представляет собой §ег, Ьу8 или Агд;

и при этом каждый остаток X независимым образом выбран из группы, состоящей из С1и, Ьу8 или

Су8;

(ί) Ζ¹, где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, непосредственно конъюгированную с боковой цепью X; или (ΐΐ) Ζ¹Ζ², где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, Ζ² представляет собой спейсер, и Ζ¹конъюгирована с боковой цепью X через Ζ².

κ’-ζ-κ² где К¹ представляет собой Н, С1-4 алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил; К² представляет собой ОН или ΝΗ2; и Ζ представляет собой пептид, имеющий формулу 11б

Н в-Зег-С!п-С1у-ТЬг-РКе-Т0г-5ег-Авр-Туг-Зег-Х 12-Туг-1_еи-А5р-Х 16-Х17-А1а-А1а-Х20-Х21-РЬеУа1-Х24-Тгр-1_еи-1.еи-Х28-А1а;

где

Х12 выбран из Ьу8, Агд или Ьеи;

Х16 представляет собой §ег или X;

Х17 представляет собой X;

Х20 представляет собой Ηίδ или X;

Х21 представляет собой Αδρ или О1и;

Х24 представляет собой А1а или О1и;

Х28 представляет собой §ег, Иль или Агд;

и при этом каждый остаток X независимым образом выбран из группы, состоящей из О1и, Иль или

Суδ;

(ΐ) Ζ¹, где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, непосредственно конъюгированную с боковой цепью X; или (и) Ζ^!Ζ², где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, Ζ² представляет собой спейсер, и Ζ¹конъюгирована с боковой цепью X через Ζ²;

при условии, что Ζ не представляет собой ΗδΟΟΤΡΤδΌΥδΚΥΡΌδ-Κ (Гексадеканоил-у-О1и))ААН1)1АА\\'1.1.КА.

где К¹ представляет собой Н, С1-4 алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил; К² представляет собой ОН или ΝΗ2; и Ζ представляет собой пептид, имеющий формулу 111а

Н|3-А|Ь-61п-61у-Т0г-Р11е-ТЬг-5ег-Азр-Туг-5ег-Х12-Туг-1_еи-Азр-5ег-Х17-А1а-А)а-Х20-Х21-РЬеУа1-Х24-Тгр-1.еи-1-еи-Х28-А1а;

где

Х12 выбран из Иль или Агд;

Х17 представляет собой X;

Х20 представляет собой Ηίδ или X;

Х21 представляет собой Αδρ или О1и;

Х24 представляет собой А1а или О1и;

Х28 представляет собой §ег, Иль или Агд;

и при этом каждый остаток X независимым образом выбран из О1и, Иль или Суδ;

(ΐ) Ζ¹, где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, непосредственно конъюгированную с боковой цепью X; или (ΐΐ) Ζ¹Ζ², где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, Ζ² представляет собой спейсер, и Ζ¹конъюгирована с боковой цепью X через Ζ²

- 11 022816

Β'-Ζ-Κ² где К¹ представляет собой Н, С_1-4 алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил;

Н|5-Зег-(31п-С1у-ТЬг-РЬе-ТКг-Зег-Азр-Туг-Зег-Х12-Туг-1еи-А5р-Зег-Х17-А1а-А1а-Х20-Х21-Р1зеУа1-Х24-Тгр-Ьеи-Ьеи-Х28-А1а;

где

Х12 выбран из Ьук или Агд;

Х17 представляет собой X;

Х20 представляет собой Шк или X;

Х21 представляет собой Акр или О1и;

Х24 представляет собой А1а или О1и;

Х28 представляет собой δе^, Ьук или Агд;

и при этом каждый остаток X независимым образом выбран из О1и, Ьук или Сук;

при условии, что Ζ не представляет собой ΗδρΟΤΡΤδΌΥδΚΥΣΌδ-Κ (Гексадеканоил-у-О1и))ΆΆΙΐυίΛΤΆΥΙ.Ι.ΚΆ.

Κ¹-Ζ-Κ² где К¹ представляет собой Н, С_1-4 алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил;

К² представляет собой ОН или ΝΗ₂; и Ζ представляет собой пептид, имеющий формулу IV;·!

Н|3-А|Ь-<31п-61у-ТКг-Р11е-Т11г-Зег-Азр-Туг-Зег-Х12-Туг-Ьеи-Авр-Звг-Х17-А1а-А1а-Н|5-Х21-Р1те-\/а1Х24-Тгр-Ьеи-1_еи-Х28-А1а;

где

Х12 выбран из Ьук или Агд;

Х17 представляет собой X;

Х21 представляет собой Акр или О1и;

Х24 представляет собой А1а или О1и;

Х28 представляет собой δе^, Ьук или Агд;

где X выбран из группы, состоящей из О1и, Ьук или Сук;

и при этом указанная боковая цепь X конъюгирована с липофильным заместителем, имеющим формулу:

Κ¹-Ζ-Ρ^ζ где К¹ представляет собой Н, С_1-4 алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил;

К² представляет собой ОН или ΝΗ₂; и Ζ представляет собой пептид, имеющий формулу Шб

Н13-Зег-С1п-О1у-ТНг-Р(1е-Т(1г-Зег-Азр-Туг-Зег-Х12-Туг-1еи-Азр-5ег-Х17-А1а-А1а-Н|з-Х21-РКеУа1-Х24-Тгр-1.еи-1-еи-Х28-А1а;

где

Х12 выбран из Ьук или Агд;

Х17 представляет собой X;

Х21 представляет собой Акр или О1и;

Х24 представляет собой А1а или О1и

Х28 представляет собой δе^, Ьук или Агд;

(ί) Ζ¹, где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, непосредственно конъюгированную с боко- 12 022816 вой цепью X; или (ίί) Ζ^!Ζ², где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, Ζ² представляет собой спейсер, и Ζ¹конъюгирована с боковой цепью X через Ζ²;

при условии, что Ζ не представляет собой ΗδρΟΤΡΤδΌΥδΚΥΣΌδ-Κ (Гексадеканоил-у-01и))АЛНПРУЕ^ЬЬКА.

Согласно другому варианту реализации настоящее изобретение обеспечивает композицию, содержащую соединение согласно настоящему изобретению или его соль или производное в виде смеси с носителем. Согласно предпочтительным вариантам реализации указанная композиция представляет собой фармацевтически приемлемую композицию, и указанный носитель представляет собой фармацевтически приемлемый носитель. Указанная соль может представлять собой фармацевтически приемлемую кислотно-аддитивную соль указанного соединения, например, ацетат или хлорид.

Соединения согласно настоящему описанию будут применяться для предотвращения увеличения массы тела или обеспечения потери массы тела. Термин предотвращение обозначает подавление или снижение увеличения массы по сравнению с отсутствием лечения и необязательно означает полное прекращение увеличения массы тела. Указанные пептиды могут вызывать уменьшение потребления пищи и/или повышенное расходование энергии, приводящее к наблюдаемому влиянию на массу тела. Вне зависимости от их действия на массу тела указанные соединения согласно настоящему изобретению могут оказывать благоприятное влияние на уровень глюкозы в крови, переносимость глюкозы и/или уровень холестерина в крови, т.к. они могут понижать уровень ЬПЬ в крови и повышать соотношение ΗΌΡ/ΡΌΡ. Указанные соединения согласно настоящему изобретению можно применять в направленной или опосредованной терапии любого заболевания, вызванного или характеризуемого чрезмерной массой тела, например, для лечения и/или предотвращения ожирения, тяжелой формы ожирения, воспаления, вызванного ожирением, заболевания желчного пузыря, вызванного ожирением, апноэ сна, вызванного ожирением. Также они могут применяться при лечении преддиабетических состояний, устойчивости к инсулину, непереносимости глюкозы, диабета 2 типа, диабета 1 типа, гипертензии или атерогенной дислипидемии (или сочетания двух или более указанных метаболических факторов риска), атеросклероза, артериосклероза, ишемической болезни сердца, болезни периферических артерий, инсульта и болезни мелких кровеносных сосудов. Их действие на указанные заболевания может быть результатом или может быть связано с их влиянием на массу тела, или может не зависеть от них.

Таким образом, настоящее изобретение обеспечивает применение соединения согласно настоящему изобретению при лечении заболевания согласно описанию выше у индивидуума, нуждающегося в таком лечении.

Также настоящее изобретение обеспечивает соединение для применения в способе лечения, в частности в способе лечения заболевания согласно описанию выше.

Также настоящее изобретение обеспечивает применение соединения согласно настоящему изобретению в изготовлении лекарственного средства для лечения состояния согласно описанию выше.

Указанное соединение согласно настоящему изобретению можно вводить в виде компонента комбинированной терапии с агентом для лечения диабета, ожирения, дислипидемии или гипертензии.

В таких случаях указанные два активных агента можно вводить совместно или по-отдельности и в виде части той же лекарственной формы или в виде отдельных лекарственных форм.

Таким образом, соединения согласно настоящему изобретению (или их соли) можно использовать в сочетании с противодиабетическим агентом, включая, но не ограничиваясь ими, метформин, сульфонилмочевину, глинид, ингибитор ΌΡΡ-ΐν, глитазон или инсулин. Согласно предпочтительному варианту реализации указанное вещество или его соль применяют в сочетании с инсулином, ингибитором ΌΡΡ-ΐν, сульфонилмочевиной или метформином, в частности сульфонилмочевиной или метформином, для получения соответствующего контроля гликемии. Согласно более предпочтительному варианту реализации указанное соединение или его соль применяют в сочетании с метформином, сульфонилмочевиной, инсулином или аналогом инсулина для достижения соответствующего контроля гликемии. Примеры аналогов инсулина включают, но не ограничиваются ими, Лантус, Новорапид, Хумалог, Новомикс, Актрафан НМ, Левемир и Апидра.

Также указанное соединение или его соль можно применять в сочетании со средством против ожирения, включая, но не ограничиваясь ими, агонист рецепторов глюкагоноподобного пептида-1, пептид ΥΥ или его аналог, антагонист рецептора каннабиноидов 1, ингибитор липазы, агонист рецептора меланокортина 4 или антагонист рецептора меланин-концентрирующего гормона 1.

Также указанное соединение или его соль можно применять в сочетании со средством против гипертензии, включая, но не ограничиваясь ими, ингибитор ангиотензинконвертирующего фермента, блокатор рецептора ангиотензина II, диуретик, бета-блокатор или блокатор кальциевых каналов.

Указанное соединение или его соль можно применять в сочетании со средством против дислипидемии, включая, но не ограничиваясь ими, статин, фибрат, ниацин или ингибитор адсорбции холестерина.

Описание фигур

На фиг. 1 изображен фармакокинетический профиль соединения 13 после подкожного (к.с.) введения мышам в дозе 100 нМоль/кг.

- 13 022816

На фиг. 2 изображено влияние подкожного введения соединения 11 в течение 21 дня (10 нМоль/кг) на переносимость пероральной глюкозы мышами линии С57ВЬ/61, содержавшихся в течение длительного периода времени на высокожировой диете. Данные представлены в виде среднее ± СОС.

На фиг. 3. Мышам, больным диабетом (ЙЬ/ЙЬ), вводили носитель или соединение 7 (12,7 нмоль/кг) в течение 4 недель и определяли уровень НЬА1с (СоЬак® примечания по применению: А1С-2) в образцах цельной крови (20 мкл), полученных от обработанных мышей. ДНЬА1с (%) определяли у каждой мыши, вычитая из НЬА1с (%) через 4 недели НЬА1с (%) в начальный момент времени. ДНЬА1с (%) мышей ЙЬ/ЙЬ, которым в течение 4 недель вводили носитель, = 100%. * (Р = 0,03, Т-критерий Стьюдента).

На фиг. 4. изображено влияние подкожного введения соединения 11 в течение 21 дня на масу тела мышей линии С57ВЬ/61, содержавшихся в течение длительного периода времени на высокожировой диете. Данные представлены в виде среднее ± СОС.

На фиг. 5. Мышам модели ожирения, вызванного питанием (ΌΣΟ), вводили носитель или соединение 7 (12,7 нмоль/кг) в течение 4 недель и получали плазму из забранных образцов крови. В каждом образце плазмы определяли общий холестерин (СоЬак® примечания по применению: СНОЬ2) *** (Р < 0.0001, Т-критерий Стьюдента). Данные представлены в виде среднее ± СОС.

На фиг. 6. Мышам модели ожирения, вызванного питанием (ΌΣΟ), вводили носитель или соединение 7 (12,7 нмоль/кг) в течение 4 недель и получали плазму из забранных образцов крови. В каждом образце плазмы определяли уровнь ЬОЬ и НОЬ (СоЬак®; примечания по применению НОЬСЗ и ЬОЬ_С). *** (р < 0.0001, Т-критерий Стьюдента). Данные представлены в виде среднее ± СОС.

На фиг. 7 изображено влияние введения 8.с. агонистов С1иСЬР-1 на увеличение массы тела у мышей линии С57ВЬ/61, которых содержали на высокожировой диете. Данные представлены в виде среднее ± СОС. Черная линия: носитель (РВ8), серая линия: небольшая дозв (0,5 нмоль/кг), пунктир: большая доза (5 нмоль/кг).

На фиг. 8. изображено влияние острого введения 8.с. соединения 7 на переносимость пероральной глюкозы через 2, 4, 6, 8, 10 и 12 ч после введения дозы на на мышах линии С57ВЬ/61, которых содержали на высокожировой диете. Данные представлены в виде среднее ± СОС.

На фиг. 9. изображено влияние введения 8.с. соединения 7 и эксендина-4 на потребление пищи/массу тела у молодых худых мышей линии С57ВЬ/61. Данные представлены в виде среднее ± СОС. *=р<0.05 по сравнению с молодыми худыми мышами, которым вводили носитель. Данные представлены в виде среднее ± СОС.

На фиг. 10 изображено влияние введения 8.с. соединения 7 и эксендина-4 на общее потребление пищи/массу тела у старых мышей с ожирением линии С57ВЬ/61. Данные представлены в виде среднее ± СОС. *=р<0.05 по сравнению со старыми мышами с ожирением, которым вводили носитель.

На фиг. 11 изображено влияние 8.с. введения носители, эксендина-4 (10 нмоль/кг) и соединения 11 (10 нмоль/кг) на концентрацию липидов в плазме у старых мышей с ожирением линии С57ВЬ/61. Данные представлены в виде среднее ± СОС.

На фиг. 12. Мышам вводили два раза в сутки соединение 1 и соединение 11 (в двух дозах 0,5 и 5 нмоль/кг) или носитель в течение 2 недель. В день умерщвления забирали печень и взвешивали ее. Соединение 1 в высокой дозе приводило к существенному увеличению соотношения масса печени/масса тела. Соединение 11 не влияло на соотношение масса печени/масса тела в обеих дозах (0,5 и 5 нмоль/кг). Соединение 1 является неацилированным двойным агонистом С1иСЬР-1, и соединение 11 является ацилированными двойным агонистом С1иСЬР-1 длительного действия (фиг. 12).

На фиг. 13. Мышам, больным диабетом (ЙЬ/ЙЬ), вводили носитель или соединение 11 (12,7 нмоль/кг) в течение 4 недель, и определяли уровень НЬА1с (СоЬак® примечание по применению: А1С-2) в образцах цельной крови (20 мкл), полученных от обработанных мышей. Значение ДНЬА1с (%) рассчитывали для каждой мыши, вычитая из НЬА1с (%) мыши через 4 недели НЬА1с (%) в начальный момент времени. ДНЬА1с (%) мышей ЙЬ/ЙЬ, которым в течение 4 недель вводили носитель= 100%. * (Р = 0.03, Ткритерий Стьюдента).

Подробное описание изобретения

В настоящем описании используются однозначные и трехзначные обозначения природных аминокислот, а также принятые трехзначные обозначения других аминокислот, включая АЛ (α-аминомасляная кислота), От (орнитин), ЭЬп (2,4-диаминомасляная кислота) и ΌρΓ (2,3-диаминопропановая кислота).

Термин «нативный глюкагон» обозначает природный глюкагон человека, имеющий последовательность Н-Н18-§ег-С1п-С1у-ТЬг-РЬе-ТЬг-§ег-А8р-Туг-§ег-Ьу8-Туг-Ьеи-А8р-§ег-Аг§-Аг§-А1а-С1п-А8р-РЬе-Уа1С1п-Тгр-Ьеи-Ме1-А8п-ТЬг-ОН.

Пептидные последовательности соединений согласно настоящему изобретению отличаются от нативного глюкагона по меньшей мере в положениях 18, 20, 24, 27, 28 и 29. Также они могут отличаться от нативного глюкагона в одном или более из положений 12, 16 и 17.

Нативный глюкагон содержит Агд в положении 18. Соединение согласно настоящему изобретению содержат небольшой гидрофобный остаток А1а в положении 18, который, как считают, повышает его

- 14 022816 активность в отношении рецепторов глюкагона и СЬР-1, но в особенности рецептора СЬР-1.

По-видимому, остатки в положениях 27, 28 и 29 нативного глюкагона обеспечивают значительную избирательность по отношению к рецептору глюкагона. Замены в этих положениях в нативной последовательности глюкагона, в частности А1а в положении 29, могут повышать активность и/или избирательность в отношении рецептора СЬР-1, вероятно без значительного снижения активности в отношении рецептора глюкагона. Другие примеры, которые могут быть включены в соединения согласно настоящему изобретению, содержат Ьеи в положении 27 и Агд в положении 28. Более того, Агд в положении 28 может быть особенно предпочтительным, если присутствует С1и в положении 24, с которым он может образовать внутримолекулярный мостик, т.к. это может усилить его влияние на активность в отношении рецептора СЬР-1.

Замена природного остатка Ме! в положении 27 (например, на Ьеи, Ьук или С1и) также снижает риск окисления, повышая, таким образом, химическую стабильность указанных соединений.

Замена природного остатка Аки в положении 28 (например, на Агд или §ет) также снижает риск дезаминирования в кислом растворе, повышая, таким образом, химическую стабильность указанных соединений.

Активность и/или избирательность в отношении рецептора СЬР-1 без риска значительной потери активности в отношении рецептора глюкагона, также можно повысить посредством введения остатков, которые способствуют стабилизации структуры альфа-спирали в С-концевой части пептида. Может быть желательно, но не необходимо, чтобы указанная спиральная часть молекулы имела амфипатические свойства. Этому может помочь введение таких остатков, как Ьеи в положении 12 и/или А1а в положении 24. В качестве дополнения или альтернативы можно вводить заряженные остатки в одно или более из положений 16, 20, 24 или 28. Таким образом, все остатки в положениях 24 и 28 могут быть заряжены, все остатки в положениях 20, 24 и 28 могут быть заряжены, или все остатки в положениях 16, 20, 24 и 28 могут быть заряжены. Например, остаток в положении 20 может представлять собой Ηίκ или Агд, в частности Ηίκ. Остаток в положении 24 может представлять собой С1и, Ьук или Агд, в частности С1и. Остаток в положении 28 может представлять собой Агд. Введение внутримолекулярного мостика в указанной части молекулы, согласно описанию выше, также может способствовать стабилизации спиральной структуры, например, между положениями 24 и 28.

Замена одного или обоих природных остатков С1п в положениях 20 и 24 также снижает риск дезаминирования в кислом растворе, повышая, таким образом, химическую стабильность указанных соединений.

Замена в нативной последовательности глюкагона в положении 12 (т.е. Агд или Ьеи) может повышать активность в отношении обоих рецепторов и/или избирательность в отношении рецептора СЬР-1.

Укорочение С-конца пептида не снижает активность в отношении обоих рецепторов и/или избирательность в отношении рецептора СЬР-1. В частности укорочение в положении 29 или в обоих положениях 28 и 29 не снижает активность ни в отношении одного, ни другого рецептора.

Боковая цепь из одного или остатков, обозначенная X (т.е. положения 16, 17, 20, 24, 27 и 28 и/или 30 при наличии) конъюгирована с липофильным заместителем. Подразумевается, что конъюгация липофильного заместителя с конкретной боковой цепью может влиять на (например, снижать) определенные преимущества, которые может обеспечивать неконъюгированная боковая цепь в этом положении. Авторы изобретения обнаружили, что соединения согласно настоящему изобретению обеспечивают равновесие между преимуществами, которые даёт ацилирование и преимуществами определенных замен в природной последовательности глюкагона.

Композиции согласно настоящему изобретению также могут находиться в смеси или быть соединены, например, посредством ковалентных, гидрофобных или электростатических взаимодействий, с носителем лекарственного средства, системой для доставки лекарственных средств и усовершенствованной системой для доставки лекарственных средств для дальнейшего повышения стабильности соединения, повышения биодоступности, растворимости, снижения побочных эффектов, соблюдения хронотерапии, известной специалистам в данной области техники, и повышения соблюдения пациентами режима приема препарата, или их сочетания. Примеры носителей, систем для доставки лекарственных средств и усовершенствованных систем для доставки лекарственных средств включают, но не ограничиваются ими, полимеры, например, целлюлозу и ее производные, полисахариды, например, декстран и его производные, крахмал и его производные, поливиниловый спирт, полимеры акрилата и метакрилата, полимолочную и полигликолевую кислоту и их блочные сополимеры, полиэтиленгликоли, белки-носители, например, альбумин, гели, например, термогели, например, блочные сополимерные системы, известные специалистам в данной области техники, мицеллы, липосомы, микросферы, наночастицы, жидкие кристаллы и их дисперсии, Ь2 фазу и их дисперсии, известные специалистам в области техники распределения фаз в системе жидкость-вода, полимерные мицеллы, различные эмульсии, самоэмульгирующиеся, самомикроэмульгирующиеся агенты, циклодекстрины и их производные и дендромеры.

Другие группы исследователей пытались увеличить период полувыведения двойного агониста С1иСЬР-1 посредством получения его производного с РЕС (\УО 2008/101017). Однако, оказалось, что более эффективно получать указанное производное по С-концу молекулы, чем производное центральной

- 15 022816 части каркаса пептида, и активность указанных соединений по-прежнему остается сниженной по сравнению с активностью соответствующего неизмененного пептида.

В отличие от этого, соединения согласно настоящему изобретению сохраняют высокую активность в отношении рецепторов глюкагона и ОЬР-1, имея длительный фармакокинетический профиль по сравнению с соответствующими неизмененными пептидами.

Нативный глюкагон содержит §ег в положении 16. Было показано, что его замена на А1а, О1у или ТЬг значительно снижает активацию аденилатциклазы рецептором глюкагона (Ипкои е1 а1. Ргос. Νηί1. Асаб. 8с1. 1994, 91, 454-458). Таким образом, нельзя было ожидать, что получение производного с заменой на липофильную группу в положении 16 позволит получить соединения, сохраняющие активность в отношении рецептора глюкагона, что неожиданно показано на примере соединений согласно настоящему описанию. В публикации νθ 2008/101017 обнаружено, что для наименьшей потери активности желательно наличие отрицательно заряженного остатка в положении 16.

Традиционно считается, что наличие основных аминокислот в положениях 17 и 18 необходимо для полной активации рецептора глюкагона (Ипкои е! а1. I. Βίο1. СЬет. 1998, 273, 10308-10312). Авторы настоящего изобретения обнаружили, что если в положении 18 находится аланин, замена на гидрофобную аминокислоту в положении 17 все-таки позволяет получать высоко активное соединение. Даже соединения, в которых аминокислота в положении 17 заменена на липофильный заменитель, почти полностью сохраняют активность в отношении рецепторов глюкагона и ОЬР-1, а также демонстрируют существенно более длительный фармакокинетический профиль. Это справедливо даже, если произошло преобразование лизина в положении 17, что превращает боковую цепь из основного амина в нейтральную амидную группу.

Также авторы настоящего изобретения обнаружили, что соединения, ацилированные в положении 20, по-прежнему являются высоко активными двойными агонистами, несмотря на результаты других исследований, согласно которым в положении 20 должна быть замена на основную аминокислоту, имеющую в боковой цепи 4-6 атомов, для усиления активности в отношении рецептора ОЬР-1 по сравнению с активностью в отношении рецептора глюкагона (νθ 2008/101017). Соединения согласно настоящему описанию обладают активностью в отношении рецептора к ОЬР-1 и глюкагона, если в положении 20 произошла замена на лизин и ацилирование.

Синтез пептидов

Пептидный компонент соединений согласно настоящему изобретению можно получить с помощью стандартных способов синтеза, систем экспрессии рекомбинатных генов или любого другого подходящего способа. Таким образом, указанный пептид можно синтезировать различными способами, включая, например, способ, который включает:

(а) синтезирование указанного пептида способами твердофазного или жидкофазного синтеза пептидов поэтапно или посредством сборки фрагментов и выделение и очистку конечного пептидного продукта;

(б) экспрессию конструкции нуклеиновой кислоты, которая кодирует указанный пептид в клетке хозяина, и выделение продукта экспрессии из культуры клеток хозяина; или (в) осуществление экспрессии конструкции нуклеиновой кислоты, которая кодирует указанный продукт, ίη νίίτο в бесклеточной системе и выделение продукта экспрессии;

или любое сочетание указанных способов (а), (б) и (в) для получения фрагментов указанного пептида с последующим лигированием фрагментов для получения указанного пептида и его выделение.

Может являться предпочтительным синтез аналогов согласно настоящему описанию способом твердофазного или жидкофазного синтеза пептидов. В связи с этим приводится ссылка на публикацию νθ 98/11125 и среди прочих Р1е1бк, ОВ е! а1., 2002, Ртшс1р1ек апб ргасЬсе о£ коЬб-рЬаке рерОбе купШеык в БуИЬеЬс Рер11бек (2 издание) и примеры в публикации.

Липофильный заместитель

Одна или более боковых цепей аминокислот соединения согласно настоящему изобретению конъюгированы с липофильным заместителем Ζ¹. Считается, что указанный липофильный заместитель связывает альбумин в кровотоке, защищая таким образом соединения согласно настоящему изобретению от разрушения ферментами, что может увеличить период полувыведения указанных соединений. Также он способен изменять активность указанного соединения, например, в отношении рецептора глюкагона и/или рецептора ОЬР-1.

Согласно некоторым вариантам реализации боковая цепь только одной аминокислоты конъюгирована с липофильным заместителем. Согласно другим вариантам реализации каждая из боковых цепей двух аминокислот конъюгирована с липофильным заместителем. Согласно другим вариантам реализации каждая из боковых цепей трех или более аминокислот конъюгирована с липофильным заместителем. Если соединение содержит два или более липофильных заместителя, они могут быть одинаковыми или различными.

Липофильный заместитель Ζ¹ может быть ковалентно связан с атомом в боковой цепи аминокислоты или в качестве альтернативы может быть конъюгирован с боковой цепью аминокислоты с помощью спейсера Ζ .

- 16 022816

Термин конъюгирован в настоящем описании используют для описания физического прикрепления одной определенной химической группы к другой и структурных взаимодействий между указанными группами. Это не требует использования какого-то определенного способа синтеза.

Если он присутствует, спейсер Ζ² используют для создания промежутка между соединением и липофильной группой.

Липофильный заместитель может быть присоединен к боковой цепи аминокислоты или спейсеру посредством эфира, сульфонового эфира, тиоэфира, амида или сульфониламида. Также следует понимать, что указанный липофильный заместитель включает ацильную группу, сульфонильную группу, атом азота, атом кислорода или атом серы, которые образуют часть указанного эфира, сульфонового эфира, тиоэфира, амида или сульфониламида. Предпочтительно ацильная группа указанного липофильного заместителя образует часть амида или эфира с боковой цепью аминокислоты или спейсера.

Указанный липофильный заместитель может включать углеводородную цепь, содержащую 10-24 атома углерода, например 10-22 атомов углерода, например 10-2 атомов углерода. Предпочтительно она содержит по меньшей мере 11 атомов углерода, предпочтительно она содержит 18 атомов углерода или меньше. Например, указанная углеводородная цепь может содержать 12, 13, 14, 15, 16, 17 или 18 атомов углерода. Указанная углеводородная цепь может быть линейной или разветвленной и может быть насыщенной или ненасыщенной. Из обсуждения выше будет понятно, что указанная углеводородная цепь предпочтительно замещена на группу, которая образует часть прикрепления к боковой цепи аминокислоты или спейсер, например ацильную группу, атом азота, кислорода или серы. Наиболее предпочтительно указанная углеводородная цепь замещена на ацил и поэтому указанная углеводородная цепь может быть частью алканоиловой группы, например, группой додеканоил, 2-бутилоктаноил, тетрадеканоил, Гексадеканоил, гептадеканоил, октадеканоил или эйкозаноил.

Как уже упоминалось выше, липофильный заместитель Ζ¹ может быть конъюгирован с боковой цепью аминокислоты с помощью спейсера Ζ². Если он присутствует, указанный спейсер присоединен к указанному липофильному заместителю и указанной боковой цепи аминокислоты. Указанный спейсер может быть прикреплен к указанному липофильному заместителю и указанной боковой цепи аминокислоты независимо в виде эфира, сульфонового эфира, тиоэфира, амида или сульфонамида. Соответственно он может содержать две функциональные группы, независимо выбранные из ацила, сульфонила, атома азота, атома кислорода или атома серы. Указанный спейсер может состоять из линейной углеводородной цепочки С_1-10 или более предпочтительно линейной углеводородной цепочки С_1-5. Более того указанный спейсер может быть иметь один или более заместителей, выбранных из С_1-6 алкила, С_1-6 аминоалкила, С_1-6 гидроксиалкила и С_1-6 карбоксиалкила.

Указанный спейсер может представлять собой, например, остаток природной или искусственной аминокислоты. Например, указанный спейсер может представлять собой остаток С1у, Рго, А1а, Уа1, Ьеи, Не, Мер Сук, РНе. Туг, Тгр, Шк, Ьук, Агд, Οίη, Акп, а-01и, у-О1и, ε-Ьук, Акр, 8ег, ТНг, СаЬа, ΛίΗ. β-Λ1η (т.е. 3-аминопропаноил), 4-аминобутаноила, 5-аминопентаноила, 6-аминогексаноила, 7-аминогептаноила, 8аминооктаноила, 9-аминононаноила, 10-аминодеканоила или 8-амино-3,6-диоктаноила. Согласно некоторым вариантам реализации указанный спейсер представляет собой остаток О1и, у-О1ц, ε-Ьук, в-А1а (т.е. 3-аминопропаноил), 4-аминобутаноила, 8-аминооктаноила или 8-амино-3,6-диоксаоктаноила. Согласно настоящему изобретению у-О1и и изо-О1и используются взаимозаменяемо.

Указанная боковая цепь аминокислоты, с которой конъюгирован указанный липофильный заместитель, представляет собой боковую цепь остатка О1и, Ьук, 8ег, Сук, ИЬи, Ирг или От. Например, она может представлять собой боковую цепь остатка Ьук, О1и или Сук. Если две или более боковых цепей имеют липофильный заместитель, их можно независимым образом выбирать из указанных остатков. Таким образом, указанная боковая цепь аминокислоты включает карбоксильную, гидроксильную, тиоловую, амидную или аминогруппу, для образования эфира, сульфонильного эфира, тоэфира, амида или сульнамида со спейсером или липофильным заместителем.

Пример липофильного заместителя, включающего липофильную группу Ζ¹ и спейсер Ζ², представлен на формуле ниже:

Согласно настоящему описанию указанная боковая цепь остатка Ьук из пептида согласно формуле I ковалентно соединена со спейсером у-О1и (Ζ²) посредством амидной связи. Гексадеканоиловая группа (Ζ¹) ковалентно соединена со спейсером у-О1и посредством амидной связи. Указанное сочетание липофильной группы и спейсера, конъюгированного с остатком Ьук, можно обозначать с помощью сокращения К (Гексадеканоил-у-О1и), например, в формулах определенных соединений. у-О1и также можно обо- 17 022816 значать как изо-01и, И гексадеканоиловую группу можно обозначать как пальмитоиловую группу. Таким образом, будет очевидно, что обозначение (Гексадеканоил-у-О1и) равносильно обозначениям (изоО1и(Ра1т)) или (изо-О1и(пальмитоил)), например, в публикации РСТ/ОВ 2008/004121.

Специалисту в данной области техники будут известны подходящие способы получения соединений согласно настоящему изобретению. Примеры способов представлены в публикациях №098/08871, №0 00/55184, №0 00/55119, Майδеη е! а1 (1. Мей. СЬет. 2007, 50, 6126-32) и Κпийδеп е! а1. 2000 (1. Мей СЬет. 43, 1664-1669).

Пегилированные и/или ацилированные соединения имеют короткий период полувыведения (Т¹/₂), что приводит к резкому повышению концентраций агониста 01и0ЬР-1. Таким образом, рецептор глюкагона подвергается интенсивному воздействию агониста глюкагона один раз (или два раза) в сутки ежедневно в течение периода лечения.

Без связи с какой-либо теорией, по-видимому, повторное внезапное действие агонистов глюкагона на О1иК нарушает перенос липидов и свободных жирных кислот между печенью и жировой тканью, что приводит к накоплению жира в печени.

Постоянное действие на О1иК агонистов глюкагона блокирует накопление жира в печени.

Было обнаружено, что повторная обработка глюкагоном или двойными агонистами короткого действия 01и0ЬР-1 приводит к увеличению печени за счет отложения жира и гликогена (СЬап е! а1., 1984. Ехр. Мо1. Ра!Ь. 40, 320-327).

Повторная обработка ацилированными двойными агонистами 01и0ЬР-1 длительного действия не приводит к изменению размера печени (увеличению или уменьшению) у пациентов с нормальным весом, но нормализует уровень липидов в печени (Эау е! а1., 2009; №Ц. СЬет. Βίο1. 5, 749-57).

Эффективность

Связывание соответствующих соединений с рецепторами 0ЬР-1 или глюкагона (О1и) можно использовать в качестве показателя активности агониста, но обычно предпочитают использовать биологический способ анализа, в котором измеряют передачу сигнала внутри клетки, вызванную связыванием указанного соединения с соответствующим рецептором. Например, активация рецептора глюкагона агонистом глюкагона будет стимулировать образование циклического АМФ (цАМФ) в клетке. Также активация рецептора 0ЬР-1 агонистом 0ЬР-1 будет стимулировать образование цАМФ. Таким образом, образование цАМФ в соответствующих клетках, экспрессирующих один из указанных рецепторов, можно использовать для наблюдения за активностью рецептора, представляющего интерес. Поэтому для определения активности агониста в отношении обоих типов рецепторов можно использовать соответствующую пару типов клеток, каждый из которых экспрессирует только один из рецепторов.

Специалисту в данной области техники известны соответствующие типы анализов, а их примеры представлены ниже. Рецептор ОЬР-1 и/или глюкагона могут иметь последовательность рецепторов согласно описанию в примерах. Например, при анализе можно использовать рецептор глюкагона человека (О1исадоп-К), имеющий первичный номер доступа ОГ: 4503947 (№_000151.1), и/или рецептор глюкагоноподобного рецептора человека 1 (ОЬР-1К), имеющий первичный номер доступа 01:166795283 (№_002053.3). (Если ссылаются на последовательности белков-предшественников, следует, конечно, понимать, что в анализах может быть использован зрелый белок, не содержащий сигнальную последовательность).

Значения ЕС₅₀ можно использовать в качестве количественной меры активности агониста в отношении данного рецептора. Значение ЕС₅₀ представляет собой концентрацию соединения, необходимую для проявления активности соединения, равной половине максимальной активности, в данном анализе. Таким образом, например, можно считать, что соединение, ЕС₅₀ [ОЬР-1К] которого ниже, чем ЕС₅₀[ОЬР-1К] нативного глюкагона по результатам определенного анализа, обладает большей активностью в отношении ОЬР-1К, чем глюкагон.

Соединения согласно настоящему описанию в большинстве случаев представляют собой двойные агонисты О1и-ОЬР-1, т.е. они могут стимулировать образование цАМФ как рецептором глюкагона, так и рецептором ОЬР-1. Стимуляцию каждого рецептора можно измерить в независимых анализах и после этого сравнить друг с другом.

Сравнивая значение ЕС₅₀ для рецептора глюкагона (ЕС₅₀ [О1исадоп-К]) со значением ЕС₅₀ для рецептора ОЬР-1 (ЕС₅₀ [ОЬР-1К]), можно определить относительную избирательность данного соединения в отношении рецептора глюкагона (%).

Относительная избирательность в отношении рецептора глюкагона (соединения^ (1/ЕС®о [С1исадоп-К})х100% / (1/ЕСм [О1исадоп-К] + 1/ЕС_м [ОЬР-1 К])

Таким же образом можно определить относительную избирательность в отношении ОЬР-1К: Относительная избирательность в отношении рецептора СЬР-1К (соединение) = (1/ЕС₅о [ОЬР-1 Р])х100% / (1/ЕСи [С1исадоп-В] + 1/ЕСя, [ОЬР-1 В])

Относительная избирательность соединения позволяет непосредственно сравнивать его действие на

- 18 022816 рецептор СЬР-1 или рецептор глюкагона с его действием на другой рецептор. Например, чем больше относительная избирательность соединения в отношении СЬР-1, тем более эффективным является соединение в отношении рецептора СЬР-1 по сравнению с рецептором глюкагона.

С помощью способов анализов описанных ниже авторы обнаружили, что относительная избирательность рецептора СЬР-1 в отношении глюкагона человека составляет приблизительно 5%.

Соединения согласно настоящему изобретению имеют более высокую относительную избирательность в отношении СЕР-1К, чем глюкагон человека. Таким образом, при определенном уровне активности агониста рецептора глюкагона человека указанное соединение будет проявлять повышенный уровень активности агониста СЕР-1К (т.е. большую активность в отношении рецептора СЬР-1), чем глюкагон. Следует понимать, что абсолютная активность конкретного соединения в отношении рецепторов глюкагона и СЬР-1 может быть выше, ниже или приблизительно равна активности нативного глюкагона человека, если соединение имеет соответствующую относительную избирательность в отношении СЕР-1К.

Однако у указанных соединений согласно настоящему описанию значение ЕС₅₀ [СЕР-1К] может быть меньше, чем у глюкагона человека. Указанные соединения могут иметь меньшее значение ЕС₅₀[СЕР-1К], чем глюкагон человека, при сохранении значения ЕС₅₀ [С1исадоп-К], которое не больше, чем в 10 раз выше ЕС₅о [С1исадоп-К] глюкагона человека, которое не больше, чем в 5 раз выше ЕС50 [С1исадоп-К] глюкагона человека, или которое не больше, чем в 2 раза выше ЕС₅₀ [С1исадоп-К] глюкагона человека.

Желательно, чтобы ЕС₅₀ любого данного соединения как для рецептора глюкагона человека (С1исадоп-К), так и для СЬР-1К была меньше 1 нМ.

Соединения согласно настоящему изобретению могут иметь ЕС₅₀ [С1исадоп-К] не больше, чем в 2 раза выше, чем глюкагон. Соединения согласно настоящему изобретению могут иметь ЕС₅₀ [С1исадоп-К] не больше, чем в 2 раза выше, чем глюкагон, и иметь ЕС₅₀ [СЕР-1К] не больше, чем половина, одна пятая или одна десятая ЕС₅₀ [СЬР-1К] глюкагона человека.

Относительная избирательность указанных соединений в отношении рецептора СЬР-1 может быть больше 5% и меньше 95%. Например, указанные соединения могут иметь относительную избирательность 5-20%, 10-30%, 20-50%, 30-70% или 50-80% или 30-50%, 40-60%, 50-70% или 75-95%.

Терапевтическое применение

Соединения согласно настоящему изобретению могут обеспечивать привлекательный способ лечения нарушений метаболизма, включая ожирение и сахарный диабет. Диабет включает группу метаболических заболеваний, для которых характерна гипергликемия, возникающая в результате нарушения секреции инсулина и/или действия инсулина. Острые признаки диабета включают обильную выработку мочи, приводящую к компенсаторной жажде и избыточному потреблению пищи, ухудшение зрения, беспричинную потерю веса, вялость и изменения энергетического метаболизма. Хроническая гипергликемия при диабете вызывает продолжительное разрушение, дисфункцию и отказ различных органов, в частности глаз, почек, нервов, сердца и кровеносных сосудов. Диабет классифицируют на диабет 1 типа, диабет 2 типа и гестационный сахарный диабет в зависимости от патогенетических особенностей.

Диабет 1 типа составляет 5-10% все случаев диабета и вызывается аутоиммунным разрушением инсулин-секретирующих бета-клеток поджелудочной железы.

На долю диабета 2 типа приходится 90-95% случаев заболевания диабетом, и он является результатом целого набора нарушений метаболизма. Диабет 2 типа является следствием того, что собственная выработка инсулина становится недостаточной для поддержания уровня глюкозы в плазме ниже порогового.

Термин гестационный диабет обозначает любую степень непереносимости глюкозы, обнаруженную во время беременности.

Преддиабетические состояния включают нарушенный уровень глюкозы натощак и нарушенную переносимость глюкозы, и обозначают те состояния, которые возникают, если уровень глюкозы в крови повышен, но ниже уровня, которые установлены для диагностики диабета.

Большая часть людей, страдающих от диабета 2 типа и преддиабетических состояний, имеет повышенный риск заболеваемости и смертности из-за высокого распространения дополнительных метаболических факторов риска, включая центральное ожирение (избыточная жировая ткань вокруг внутренних органов живота), атерогенную дислипидемию (нарушения уровня жира в крови, включая высокий уровень триглицеридов, низкий уровень НЭБ холестерина и/или высокий уровень ЬЭЬ холестерина, которые способствуют отложению бляшек в стенке артерий), повышенное давление (гипертензия), склонность к тромбообразованию (например, высокий уровень фибриногена или ингибитора активатора плазминогена-1 в крови) и провоспалительное состояние (например, повышенный уровень С-реактивного белка в крови).

В свою очередь, ожирение увеличивает риск развития преддиабетических состояний, диабета 2 типа, а также некоторых типов рака, обструктивного апноэ сна и болезни желчного пузыря.

Дислипидемия повышает риск развития сердцечно-сосудистых заболеваний. Липопротеины высокой плотности (НЭБ) имеют клиническое значение, т.к. существует обратная зависимость между концентрацией НЭБ в плазме и риском развития атеросклероза. Большая часть холестерина, отложенного в

- 19 022816 атеросклеротических бляшках, происходит от ЬОЬ, и поэтому повышенные концентрации липопротеинов низкой плотности (ЬОЬ) в большой степени связаны с атеросклерозом. Соотношение НПЬ/ЬПЬ является показателем риска развития атеросклероза и, в частности атеросклероза коронарных сосудов.

Без связи с определенной теорией, считают, что указанные соединения согласно настоящему изобретению действуют как двойные агонисты С1иСЬР-1. Двойные агонисты могут сочетать действие глюкагона, например, на обмен жиров, с действием СЬР-1, например, на уровень глюкозы в крови и потребление пищи. Поэтому они могут ускорять устранение лишней жировой ткани, вызывать устойчивую потерю веса и улучшать гликемический контроль. Также двойные агонисты С1иСЬР-1 могут влиять на снижение факторов риска развития сердечнососудистых заболеваний, таких как высокий уровень холестерина и ЬПЬ-холестерина.

Таким образом, соединения согласно настоящему описанию можно использовать в качестве фармацевтических агентов для предотвращения увеличения массы тела, обеспечения потери веса, снижения избыточной массы тела или лечения ожирения (например, благодаря контролю аппетита, кормления, потребления пищи, потребления калорий и/или расхода энергии), включая патологическое ожирение, а также сопутствующие заболевания и состояния, включая, но не ограничиваясь ими, воспаление, вызванное ожирением, заболевание желчного пузыря, вызванное ожирением, и апноэ сна, вызванное ожирением. Также соединения согласно настоящему изобретению можно использовать для лечения устойчивости к инсулину, переносимости глюкозы, преддиабетических состояний, повышенного уровня глюкозы в крови натощак, диабета 2 типа, гипертензии, дислипидемии (или сочетания указанных метаболических факторов риска), атеросклероза, артериосклероза, ишемической болезни сердца, заболевания периферических артерий и инсульта. Представлены все состояния, которые могут быть вызваны ожирением. Однако действия соединений согласно настоящему изобретению на указанные состояния могут осуществляться в целом или частично посредством влияния на массу тела или могут не зависеть от этого.

Фармацевтические композиции

Соединения согласно настоящему изобретению или их соли, могут быть приготовлены в виде фармацевтических композиций, подготовленных для хранения или введения, которые обычно содержат терапевтически эффективное количество соединения согласно настоящему изобретению или его соли в фармацевтически приемлемом носителе. Терапевтически эффективное количество соединения согласно настоящему изобретению будет зависеть от способа введения, вида млекопитающего, которое лечат, и физических особенностей конкретного рассматриваемого млекопитающего. Перечисленные факторы и их роль в определении указанного количества известны специалистам в области медицины. Это количество и способ введения могут быть адаптированы для достижения оптимальной эффективности, а также могут зависеть от таких факторов, как вес, питание, сопутствующее лечение, и других факторов, хорошо известных специалистам в области медицины. Размеры доз и режим дозирования наиболее подходящий для человека, могут быть определены по результатам, полученными с помощью настоящего изобретения, и могут быть подтверждены надлежащим образом спланированными клиническими испытаниями.

Эффективную дозу и протокол лечения можно определить традиционными способами, начиная с низких доз на лабораторных животных, а затем увеличивая дозу при наблюдении действия, а также систематически изменяя режим дозирования. Многочисленные факторы могут быть приняты во внимание врачом при определении оптимальной дозы для данного пациента. Такие факторы известны специалистам в данной области науки.

Термин фармацевтически приемлемый носитель включает любые стандартные фармацевтические носители. Фармацевтически приемлемые носители для терапевтического использования хорошо известны в данной области техники и описаны в Кепппфоп'к РНагтассн11са1 §с1еисе5, Маск РиЬЬкПид Со. (А. К. Сеппаго ебП. 1985). Например, могут быть использованы стерильный физиологический раствор и фосфатный солевой буфер, имеющие слабокислый или физиологический рН. Буферные агенты могут преставлять собой фосфат, цитрат, ацетат, трис/гидроксиметил аминометан (ΤΚΙδ), Ν-трис (гидроксиметил) метил-3-аминопропансульфоновую кислоту (ТАР§), бикарбонат аммония, диэтаноламин, гистидин, который является предпочтительным буфером, аргинин, лизин или ацетат или их смеси. Термин также включает любые агенты, перечисленные в Фармакопее США для применения для животных, включая человека.

Термин фармацевтически приемлемая соль относится к соли этих соединений. Соли включают фармацевтически приемлемые соли, такие как кислотно-аддитивные соли и основные соли. Примеры аддитивных солей включают соли хлористо-водородной кислоты, соли лимонной кислоты и соли уксусной кислоты. Примеры основных солей включают соли, в которых катион выбран из катионов щелочных металлов, таких как натрий и калий, щелочно-земельных металлов, таких как кальций и ионы аммония +Ν(Κ³)3(Κ⁴), где К³ и К⁴ независимо обозначает необязательно замещенный С^б-алкил, необязательно замещенный С_2-6-алкенил, необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил. Другие примеры фармацевтически приемлемых солей описаны в публикации Кепппфоп'к РЬагтасеибса1 Бтепсек, 17 издание Еб. Айопко К. Сеппаго (Еб.), Магк РиЬБкЫпд Сотрапу, Еайоп. РА, И.8.А., 1985 и более поздних изданиях и в Энциклопедии Фармацевтической Технологии.

Термин лечение обозначает подход, направленный на достижение благоприятных или желаемых

- 20 022816 клинических результатов. В целях настоящего изобретения, благоприятные или желаемые клинические результаты включают, но не ограничиваются ими, облегчение симптомов, уменьшение степени развития заболевания, стабилизированное (т.е. не ухудшающееся) состояние заболевания, задержку или замедление развития заболевания, улучшение или ослабление болезненного состояния и ремиссию (как частичную, так и полную), как заметные, так и незаметные. Термин лечение также может означать продленное выживания по сравнению с ожидаемым выживанием в отсутствии лечения. Термин «лечение» означает вмешательство, осуществляемое с целью предупреждения развития или изменения патологии заболевания. Соответственно термин лечение относится как к терапевтическому лечению и предотвращению, так и профилактическим мерам. Те, кто нуждается в лечении, включают тех, кто уже страдает от заболевания, а также тех, у которых заболевание должно быть предотвращено. Под лечением понимают ингибирование или снижения роста патологии или симптомов (например, увеличение массы тела, гипергликемия) по сравнению с отсутствием лечения, и не обязательно полное прекращение соответствующего заболевания.

Фармацевтические композиции могут находиться в виде дозированной лекарственной формы. В таком виде композиция разделена на отдельные дозы, содержащие соответствующее количество активного компонента. Дозированная лекарственная форма может представлять собой упакованное лекарственное средство, при этом упаковка содержит определенные количества препаратов, например упакованные таблетки, капсулы и порошки во флаконах или ампулах. Дозированная лекарственная форма также может представлять собой капсулу, облатку или таблетку, или же она может представлять собой необходимое количество любой из этих упакованных форм. Она может быть представлена в виде одноразовой дозы для инъекций, например, в виде ручки. Композиции могут быть сформулированы для любого подходящего пути и способа введения. Фармацевтически приемлемые носители или разбавители включают носители или разбавители, которые используются в лекарственных формах, подходящих для перорального, ректального, назального или парентерального (включая подкожное, внутримышечное, внутривенное, внутрикожное и трансдермальное) введения. Композиции могут быть удобно представлены в виде дозированной лекарственной формы и могут быть получены любым из способов, хорошо известных в области фармацевтики.

Подкожный или трансдермальный способы введения могут быть особенно подходящими для соединения согласно настоящему описанию.

Комбинированная терапия

Указанные соединения согласно настоящему изобретению можно вводить в качестве компонента комбинированной терапии со средством для лечения диабета, ожирения, дислипидемии или гипертензии.

В таких случаях два активных агента можно вводить совместно или по-отдельности и в качестве компонента одного лекарственного средства или в виде отдельного лекарственного средства.

Таким образом, соединение согласно настоящему изобретению (или его соль) можно применять в сочетании с антидиабетическими средствами, включая, но не ограничиваясь ими, метформин, сульфонилмочевину, глинид, ингибитор ΌΡΡ-Γν глитазон или инсулин.

Согласно предпочтительному варианту реализации соединение или его соль применяют в сочетании с инсулином, ингибитором ΌΡΡΛν, сульфонилмочевиной или метформином, в частности с сульфонилмочевиной или метформином, для достижения адекватного контроля гликемии. Согласно более предпочтительному варианту реализации указанное соединение или его соль используется в сочетании с инсулином или аналогом инсулина для достижения адекватного контроля гликемии. Примеры аналогов инсулина, включают, но не ограничиваются ими, препараты Лантус, Новорапид, Хумалог, НовоМикс, Актрафан НМ, Левемир и Апидра.

Указанное соединение или его соль можно в дальнейшем применять в сочетании со средством против ожирения, включая, но не ограничиваясь ими, агонист рецептора глюкагон-подобного пептида 1, пептид ΥΥ или его аналог, антагонист рецептора каннабиноидов 1, ингибитор липазы, агонист рецептора меланокортина 4 или антагонист рецептора меланин концентрирующего гормона 1.

Соединение или его соль можно в дальнейшем применять в сочетании со средством против гипертензии, включая, но не ограничиваясь ими, ингибитор ангиотензинпревращающего фермента, блокатор рецептора ангиотензина II, диуретики, бета-блокаторы или блокаторы кальциевых каналов.

Указанное соединение или его соль можно в дальнейшем применять в сочетании со средством против дислипидемии, включая, но не ограничиваясь ими, статин, фибрат, ниацин и/или ингибитор всасывания холестерина.

Методы

Схема синтеза ацилированных аналогов глюкагона:

Твердофазный Ртос-синтез пептидов осуществляли с помощью системы для синтеза пептидов СЕМ ЫЪейу. Перед использованием смолу Τеηίа0е1 8 Кат (1 г; 0,25 ммоль/г) размачивали в ΝΜΡ (10 мл) и наносили между пробиркой и химическим реактором с использованием ЭСМ и ΝΜΡ.

Сопряжение:

Ртос-аминокислоту в ΝΜΡ/ΌΜΡ/ПСМ (1:1:1; 0,2 М; 5 мл) добавляли к смоле в микроволновой ячейке СЕМ ЭЛсоуег вместе с ΗАΤυ/NΜΡ (0.5 М; 2 мл) и ^IΡЕЛ/NΜΡ (2.0 М; 1 мл). Реакционную смесь

- 21 022816 нагревали до 75°С в течение 5 мин, при этом азот в виде пузырей проходил через смесь. Затем смолу промывали NΜР (4 х 10 мл).

Отщепление защитных групп:

Пиперидин/ΝΜΓ (20%; 10 мл) добавляли в смесь для начального отщепления защитных групп и указанную смесь нагревали с помощью микроволнового излучения (30 с; 40°С). Осушали химический реактор и вносили вторую часть пиперидин/ΝΜΓ (20%; 10 мл) и повторно нагревали (75°С; 3 мин). Затем смолу промывали ΝΜΓ (6 х 10 мл).

Ацилирование боковой цепи:

Ртос-Ьук(щОбе)-ОН или другую аминокислоту с ортогональной защитной группой боковой цепи вводили в положение ацилирования. Затем проводили Вос-защиту на Ν-конце каркаса пептида с использованием Вос2О или в качестве альтернативы с использованием Вос-защищенной аминокислоты при последнем сопряжении. Пока пептид оставался иммобилизованным на смоле, ортогональную защитную группу боковой цепи селективно отщепляли с использованием свежеприготовленного раствора гидразин гидрата (2-4%) в ΝΜΓ два раза по 15 мин. Незащищенную боковую цепь лизина сопрягали с Ртос-О1иΟίΒιι или другой аминокислотой спейсера, защиту которой снимали с помощью пиперидина, и которую ацилировали с помощью липофильной группы с использованием способа сопряжения пептидов согласно описанию выше.

Использовали следующие сокращения:

Ц'Эбе: 1 -(4,4-диметил-2,6-диоксоциклогексилиден)-3 -метилбутил

Эбе: 1-(4,4-диметил-2,6-диоксоциклогексилиден)-этил

Όί'.Μ: дихлорметан

ΌΜΡ: Ν,Ν-диметилформамид

ИГРЕА: диизопропилэтиламин

ΕίΟΗ: этанол

Εί₂Ο: диэтилэфир

НАТИ: Ж[(диметиламино)-1Н-1,2,3-триазол[4,5-Ъ]пиридин-1-илметилен]-Шметилметанамин гексафторфосфат Ν-оксид ЫеС№ ацетонитрил

ИЛР: Ν-метилпирролидон

ТРА: трифторуксусная кислота

Т1З:триизопропилсилан

Расщепление:

Смолу промывали ΕίΟΗ (3х 10 мл) и Εί₂Ο (3х 10 мл) и высушивали до постоянного веса при комнатной температуре (г.!.). Неочищенный пептид отщепляли от смолы с помощью ТРА/Т1З/вода (95/2.5/2.5; 40 мл, 2 ч; г.!.). Большую часть ТРА удаляли при пониженном давлении, осаждали неочищенный пептид, промывали три раза диэтиленом и высушивали до постоянного веса при комнатной температуре.

Очистка способом ВЭЖХ неочищенного пептида:

Неочищенный пептид очищали до степени более 90% с помощью препаративной обращенофазовой ВЭЖХ с использованием РегЗерШе Вюкук!етк νΐδΙΟΝ Vο^ккίаί^οη, оборудованной колонкой С-18 (5 см, 10 мкм), и коллектора фракций и пропускали со скоростью 35 мл/мин при градиенте буфера А (0.1% ТРА, вода) и буфера Б (0.1% ТРА, 90% ЫеСН вода). Фракции анализировали способом аналитической ВЭЖХ м МС и соответствующие фракции накапливали и лиофилизировали. Конечный продукт подвергали ВЭЖХ и МС.

Получение линий клеток, экспрессирующих рецепторы глюкагона и ОЬР-1 человека кДНК, кодирующие рецептор глюкагона человека (О1исадои-К) (основной номер доступа Р47871) или рецептор глюкагоноподобного пептида-1 человека (ОЬР-1К) (основной номер доступа Р43220) были клонированы из библиотеки кДНК ВС104854 (\1С.С: 132514/Гтаде: 8143857) или ВС112126 (\1С.С: 138331/1ЫАОЕ: 8327594), соответственно. ДНК, кодирующую рецептор глюкагона человека или ОЬР-1К, амплифицировали методом ПЦР с использованием праймеров, кодирующих терминальные сайты рестрикции для субклонирования. Праймеры 5'-конца дополнительно кодировали консенсусную последовательность Козак для обеспечения эффективной трансляции. Точность ДНК, кодирующих рецептор глюкагона человека (О1исадои -К) и ОЬР-1К, подтверждали с помощью секвенирования ДНК. ПЦР-продукты, кодирующие рецептор глюкагона человека или ОЬР-1К, субклонировали в вектор экспрессии млекопитающих, содержащий маркер устойчивости к неомицин (О418).

Векторами экспрессии млекопитающих, кодирующими рецептор глюкагона человека или ОЬР-1К, трансфицировали клетки НЕК293 с использованием стандартного кальций-фосфатного метода трансфекции. Через 48 ч после трансфекции клетки высевали для проведения клонирования методом серийных разведений, и отбирали клоны, добавляя в культуральную среду 1 мг/мл О418. Три недели спустя были отобраны 12 выживших колоний клеток, экспрессирующих рецептор глюкагона человека и ОЬР-1К, их культивировали и проводили анализ эффективности в отношении рецептора глюкагона человека и ОЬР1К согласно описанию ниже. Для профилирования соединений отобрали один клон, экспрессирующий рецептор глюкагона человека, и один клон, экспрессирующий ОЬР-1К.

- 22 022816

Анализы эффективности в отношении рецептора глюкагона и рецептора ОЬР-1

Клетки НЕК293, экспрессирующие рецептор глюкагона человека или ОЬР-1К человека, сеяли при плотности 40,000 клеток/лунка в 96-луночные микротитровальные планшеты, покрытые 0,01% поли-Ьлизином и культивировали в течение суток в 100 мкл питатльной среды. В день проведения анализа кондиционированную среду удаляли и клетки промывали 200 мкл раствора Тирода. Клетки инкубировали в 100 мкл раствора Тирода, содержавшего возрастающие концентрации исследуемых пептидов, 100 мкМ IΒМX и 6 мМ глюкозы в течение 15 мин при 37°С. Реакцию останавливали добавлением 25 мкл 0,5 М НС1 и выдерживали на льду в течение 0 мин. Количество цАМФ определяли с помощью набора Р1акНР1а1е® сАМР Реткш-Итет. ЕС50 и относительные эффективности по сравнению с контрольными соединениями (глюкагон и ОЬР-1) определяли с помощью автоматического построения кривой.

Биоаналитический способ анализа для количественного опредления агонистов пептида С1и-СЬР1 в плазме мышей после подкожного введения

Мышам вводили подкожно (к.с.) 100 нмоль/кг агонистов. Мышей забивали и получали кровь в следующие моменты времени; 0,5, 2, 4, 6, 16 и 24 ч. Образцы плазмы исследовали методом осаждения белков с последующей твердофазной экстракцией (8РЕ) и жидкой хроматографией и масс-спектрометрией (ЬС-М8).

Тест на переносимость пероральной глюкозы (ОСТТ), уровень липидов и масса тела у нормальных мышей линии С57В1/6Й, длительно содержавшихся на высокожировой диете, и НЬА1с у мышей ЙЬ/ЙЬ

Самцы мышей (линии С57В1/6Т длительно содержавшихся на высокожировой диете, линии С57В1/6Т кратковременно содержавшихся на высокожировой диете, и ЙЬ/ЙЬ) адаптировались к условиям и имели свободный доступ к пище и воде. Их содержали группами по 5-6 мышей в помещении с контролируемым освещеним, температурой и влажностью (цикл 12 ч свет: 12 ч темнота, свет включали/выключали в 20.00/8.00; 24°С; 50% относительная влажность).

Животным вводили к.с. 100 мкл контроля (раз в сутки) в течение 3 дней для адаптации животных к условиям содержания и инъекциям. Образцы крови получали из глаз или кончика хвоста. Перед началом лечения животных случайным образом распределяли по группам.

Два раза в день мышам вводили к.с. агонист О1иОЬР-1 или носитель (объем для введения = 2,5 мл/кг). Во время исследования ежедневно регистрировали массу тела и использовали ее для введения дозы пептида, подобранной в зависимости от массы тела. Растворы пептидов готовили непосредственно перед введением дозы.

Тесты на переносимость пероральной глюкозы (ООТТ) проводили после небольшой голодовки животных. Для предотвращения искажающего действия приема пищи животных подвергали голоданию в течение всех ООТТ. После введения дозы пептида проводили забор начальных образцов крови. После этого перорально вводили дозу глюкозы (1 г/кг), растворенной в фосфатном буфере (рН = 7.4) (5 мл/кг), и животных возвращали в домашние клетки (1 = 0). Уровень глюкозы в цельной крови (ВО) определяли в моменты времени 1=15 мин, 1=30 мин, 1=60 мин, 1=90 мин и 1=120 мин.

Концентрации ВО определяли глюкозооксидазным методом в капле крови (< 5 мкл; Е1йе Аи1оапа1укег, Вауег, Дания) согласно инструкциям изготовителя.

Определение НЬА1с

Можно оценивать долгосрочное действие соединения на уровень глюкозы у пациента по определению уровня гемоглобина А1С (НЬА1с). НЬА1с представляет собой гликозилированный гемоглобин, уровень которого в клетке отражает средний уровень глюкозы, которая действует на клетку в течение ее жизни. У мышей НЬА1с является биологическим маркером среднего уровня глюкозы в течение предшествующих 4 недель, т.к. превращение гемоглобина в НЬА1с ограничено продолжительностью жизни эритроцитов в течение 47 дней (АЬЬтесЫ & Ыйе11, 1972; ί. Арр1. РНук1о1. 32, 443-445).

Определение НЬА1с основано на ТитЫШтейтс ШЫЫйоп 1ттипоАккау (ТЮТА), в ходе которого НЬА1с в образце взаимодействует с антителами к НЬА1с с образованием растворимых комплексов антиген-антитело. При добавлении полигаптенов они взаимодействуют с лишними антителами к НЬА1с с образованием нерастворимого комплекса антитело-гаптен, который можно определить методами турбидиметрии. Свободный гемоглобин в гемолизированном образце превращается в производное, имеющее определенный спектр поглощения, который можно измерить бихроматически во время фазы предварительной инкубации. Конечный результат выражается в виде относительного содержания НЬА1с в общем гемоглобине (СоЬак® указание по применению А1С-2).

Определение уровня холестерина

Указанный анализ представляет собой ферментативный колориметрический метод. В присутствии ионов магния декстран сульфан избирательно образует водорастворимые комплексы с ЬЭЬ, УЬПЬА и хиломикронами, которые устойчивы к РЕО-модифицированным ферментам. НОЬ холестерин определяется ферментативно с помощью холестерин-эстеразы и холестерин-оксидазы, сопряженными с РЕО через аминогруппы. Эфиры холестерина распадаются ферментативно до свободного холестерина и жирных кислот. Холестерин НОЬ ферментативно окисляется до холест-4-ен-3-она и Н₂О₂, и образованная Н₂О₂

- 23 022816 определяется колориметрически (СоЬак®; указание по применению НОЬС3).

При прямом определении ЬОЬ используется избирательная мицеллярная растворимость ЬОЬ под действием неионного детергента и взаимодействие сахара и липопротеинов (УЬПЬ и хиломикронов). Сочетание сахара и детергента позволяет избирательно определять ЬОЬ в плазме. Принцип анализа такой же, как в случае холестерина и ΗΌΕ но из-за сахара и детергента только эфиры ЬОЬ-холестерин распадаются до свободного холестерина и жирных кислот. Свободный холестерин затем окисляется и образованная Н₂О₂ определяется колориметрически (Указание по применению ЬОЬ_С, СоЬак®).

Увеличение массы тела на мышах линии С57ВЬ/6Э, содержавшихся на высокожировой диете

Самцов мышей С57В1/61 в возрасте 6 недель адаптировали к новым условиям с трехразовым кормлением по высокожировой диете (Ό12492, КекеатсЬ Э|е1 1пс., №\у ВтипкМск, И8А) и доступом к воде. Животным вводили инъекции к.с. 100 мкл носителя в течение 3 дней для адаптации животных к условиям и инъекциям. Животным вводили два раза в сутки эксендин-4, соединение 3, соединение 6, соединение 7, соединение 8, соединение 11 и соединение 12 или носитель. На протяжении исследования ежедневно записывали массу тела и использовали это для введения дозы пептида в зависимости от массы тела. Всех животных умерщвляли в один день методом цервикальной дислокации.

Переносимость пероральной глюкозы через 2, 4, 6, 8, 10 и 12 ч после введения дозы средств на мышах линии С57ВЬ/6Э, содержавшихся на высокожировой диете

Самцов мышей С57В1/61 в возрасте 6 недель адаптировали к новым условиям с трехразовым кормлением по высокожировой диете (Ό12492, КекеатсЬ Э|е1 1пс., №\у ВтипкМск, И8А) и доступом к воде. Животным вводили инъекции носителя к.с. в течение 3 дней для адаптации животных к условиям и инъекциям. Из конца хвоста забирали образцы крови и определяли уровень глюкозы. Концентрацию глюкозы (мМ) определяли глюкозооксидазным методом в капле крови (< 5 мкл; Соп1оиг Аи1оапа1укег, Вауег, Оептагк) согласно инструкции производителя. Через 4 недели соблюдения высокожировой диеты животных взвешивали и использовали массу тела для введения дозы пептида в зависимости от массы тела. Тест на переносимость пероральной глюкозы (ОСТТ) проводили после подвергания животных голоданию в течение 4 ч. Через 2, 4, 6, 8, 10 и 12 ч после введения дозы пептида или носителя забирали начальный образец крови (1=-0 мин). Сразу после этого вводили пероральную дозу глюкозы (1 г/кг) и животных возвращали в их домашние клетки (1 = 0). Уровни ВС определяли через 1=15 мин, 1=30 мин, 1=60 мин и 1=90 мин. Непосредственно после забора крови всех животных умерщвляли под действием анестезии СО2 методом цервикальной дислокации.

Потребление пищи молодыми худыми мышами линии С57ВЬ/6Э и старыми мышами с ожирением линии С57ВЬ/6Э

Мышей линии С57ВЬ/61 содержали на высокожировой диете в течение 11 дней и мышей линии С57ВЬ/61 содержали на высокожировой диете в течение 52 недель. За три дня до начала исследования мышей помещали в отдельные клетки и взвешивали. За 4 дня до начала исследования их адаптировали к обращению и введению средств с помощью ежедневных инъекций к.с. За день до начала исследования пищу забирали в 20:00. В день исследования мышей взвешивали и вводили им инъекции к.с. эксендина4, соединения 7 или носителя в момент времени 1=0 ч (8:00) и 1=12 ч (20:00). Непосредственно после введения средств (1=0) мышам давали предварительно взвешенную пищу и определяли общее потребление пищи, взвешивая оставшуюся пищу через 1=1, 2, 4, 8, 12 и 24 ч. После взвешивания пищи и животных в момент времени 1=24 ч мышей умерщвляли посредством цервикальной дислокации.

Образование цАМФ в гепатоцитах

Методика

Первичные гепатоциты человека, полученные от Ьопга \Уа1кегкуП1, 1пс., аккуратно промывали буфером ТВ и инкубировали при 37°С с пептидами, растворенными в буфере ТВ, в который добавляли 100 мкМ 1ВМХ и 0,1% казеин в течение 15 мин. Перед добавлением к клеткам указанные растворы пептидов нагревали до 37°С. Реакцию останавливали добавлением 25 мкл ледяного 0,5 М НС1 и клетки инкубировали на льду в течение 60 мин. Содержание цАМФ в лунках определяли, добавляя 25 мкл кислых вытяжек лунок в 75 мкл раствора буфера ацетата натрия, рН 6,2, в 96-луночные микротитровальные планшеты Р1ак№1а1ек, покрытые сцинтиллятором и антителами к цАМФ. После добавления 100 мкл раствора 10 μθ [¹²⁵1]цАМФ в каждую лунку, планшеты инкубировали в течение ночи при 4°С, опустошали их и количество [¹²⁵1]цАМФ, связавшегося с планшетами Р1ак№1а1ек, определяли с помощью программы [¹²⁵1]сАМР ДакЬр1а1е 10 тш на ТорСоип1 ΝΧΤ. Пептиды исследовали в концентрациях в пределах 0,11000 нМ.

Анализ данных и статистика

Количество цАМФ, образованного в клетках, определяли по стандартной кривой, построенной по данным о количестве цАМФ.

Значения ЕС₅₀ определяли, подставляя данные количества цАМФ в формулу ниже с использованием §1дта Р1о1:

- 24 022816

ΟΤΒΘΤ цАМФ- (цАМФ максимальной — ЦАМФ циннияпьнгд)*С +ЦАМФ минимальное с+ЕСэо

Приведенные ниже примеры представлены для иллюстрации настоящего изобретения.

Масса печени/масса тела мышей линии С57ВЬ/6Л

Два раза в сутки мышам вводили к.с. соединение 1 и соединение 11 (в двух дозах: 0,5 и 5 нмоль/кг) или носитель в течение 2 недель. Во время проведения исследования ежедневно записывали массу тела и использовали это для введения доз пептида в зависимости от массы тела. В день, когда животных умерщвляли, изымали печень и определяли ее вес.

Примеры

Пример 1. Синтез соединений и свойства пептидов

Пример синтеза:

Соединение 9 синтезировали методом твердофазного Ртос-синтеза с помощью синтезатора СЕМ ЫЪейу с использованием смолы ΤеηΐаΟе1 δ Кат (1,17 г; 0,23 ммоль/г) согласно описанию выше. В положении 17 использовали Ртос-Ьук(1у06е)-ОН и для каркаса пептида использовали псевдопролины РтосРПе-ΤΙΐΓ (Ркк Ме, Ме про)-ОН и Ртос-Акр(О1Ви)Жг (.РкП, Ме, Ме про)-ОН. После синтеза каркаса пептида на смоле ручным способом отщепляли Ν-концевую Ртос-группу с последующей Вос-защитой с использованием Вос₂О (226 мг) и ΩΙΕΛ (54 мкл) в ЭСМ. Затем с помощью свежеприготовленного раствора гидразин-гидрата/NМР (4%; 2 х 15 мин) отщепляли группу БОбе. После этого на синтезаторе СЕМ ЫЪег1у оставшиеся два элементарных блока Ртос-О1и-О1Би и гексадекановую кислоту добавляли к незащищенной боковой цепи лизина.

Пептид отщепляли от смолы согласно описанию выше и осуществляли его очистку на колонке Сет^η^-NX (5 см, 10 мкм, С18) при пропускании смеси буфера А (0,1% ΤРА, вода) и буфера Б (0,1% ΤРА, 90% МеСН вода). Проводили элюцию продукта градиентом 25-65% буфера Б в течение 47 мин и фракции (9 мл) собирали с помощью коллектора фракций. Проводили аналитическую ВЭЖХ и МС соответствующих, и фракции с чистотой выше 95% собирали и лиофилизировали с получением белого порошка. Выход продукта весом 72 мг имел чистоту 97% по результатам аналитической ВЭЖХ и молекулярную массу 3697,05 Да по результатам МС (3696,97 Да).

Пример 2. Эффективность в отношении рецепторов к ОЬР-1 и глюкагону

Эффективность агонистов О1иОЬР-1 определяли посредством действия на клетки, экспрессирующие рецептор глюкагона человека (ЬО1исадоиК) и НСБР-1Р. возрастающих концентраций ацилированных соединений из списка и измерения образованного цАМФ согласно описанию в Методах. Результаты представлены в табл. 1.

- 25 022816

Таблица 1. Значения ЕС₅₀ ацилированных соединений для рецептора ОЬР-1 и рецептора глюкагона

Последовательность	Соединение	ЕСи (нМ) СЬР -1К	ЕС„{нМ) С1иР
Η-Μ3θεΤΡΤ30Υ5ΚΥ1_Ο8ΚΑΑΗ0ΡνΕννΐ_Ι-ΡΑ-ΝΗ2	Соединение 1	0,06	0,06
Н-Н8ОСТРТ8ОУЗКУЮ-К(Гексадеканоил-у-С1и)- ΚΑΑΗΟΡνΕ\Λ/Ι±ΚΑ-ΝΗ2	Соединение 2	0,20	0,13
Н-НЗабТРТЗОУ5КУЬО-3-К(Гексадеканоил-у-С1и)- ΑΑΗΟΡνΕ™.Ι_ΚΑ-ΝΗ2	Соединение 3	0,11	0,12
Н-НЗОбТРТЗОУЗКУЬОЗКАА-КСГексадеканоил-у- ΒΙιι)-ΟΡνΕννΐ-Ι_ΡΙΑ-ΝΗ2	Соединение 4	0,10	0,04
Η-Η30ΘΤΡΤ50Υ5ΚΥΙ-05ΚΑΑΗ0ΡνΕννΐ.- К(Г ексадеканоип-у-С1и)-КА-МН2	Соединение 5	0,57	0,22
Η-Η50ΘΤΡΤ30Υ5ΚΥΙ-Ο3ΚΑΑΗΟΡνΕννΐ_Ι_- К(Гексадеканоил-у-С1ирА-ЫН2	Соединение 6	0,09	0,10
Н-Н-А\|Ь-О6ТРТЗОУ5КУЮЗ-К(Гексадеканоил-у-61и}- ΑΑΗΟΡνΕννίί5Α-ΝΗ2	Соединение 7	0,11	0,16
Η-Η-Αίό-ΟΘΤΡΤ5ΟΥ5ΚΥ105-Κ(ΓθΚ03Λ©Κ3Η0ΐιη-γ-6Ιυ)- ΑΑΡΟΡνΑ\Μ_Ι_ΚΑ-ΝΗ2	Соединение 9	0,12	0,17
Н-Н-А1Ь-ОеТРТЗОУЗКУЬОЗКАА-К(Гексадеканонл-у- 5Ιιι)-ΟΡνΑννΐ-Ι.ΡΑ-ΝΗ2	Соединение 10	0,15	0,63
Н-Н-А\|Ь-ОСТРТ50У5КУЬ03-К(Гексадеианоил-у-С1и)- ΑΑΗϋΡνΕ¹ΛΊΙβΑ-ΝΗ2	Соединение 11	0,09	0,16
Η-Η-Αί6-ΟΘΤΡΤ30Υ5ΚΥίΟ3ΚΑΑΗ0ΡνΕννΐΙ- К(Гексадеканоил-у-61и)-А-МН2	Соединение 12	0,27	0,27
Н-Н-А\|Ь-ОСТРТЗОУ5КУ1_О5-К(Гексадеканоил-у-<31и)- ΑΑΗΟΡνΕ()ννΐΙΚ()Α-ΝΗ2	Соединение 13	0,08	0,26
Н-Н-А\|Ь-аеТРТЗОУ5К¥ЬОЗ-К(Додеканоил-у-С1и)- ΑΑΗΟΡνΕ\νί18Α-ΝΗ2	Соединение 14	0,14	0,78
Η-Η-Αϊ6-ΟΘΤΡΤ50Υ5ΚΥί03-Κ(Γβκο3Λβκ3ΗθΗΠ-[3Аминопропаноил])-ААН ϋΡνΕννΐ-Ι-8Α-Ν Η2	Соединение 15	0,23	1,87
Н-Н-А\|Ь-ОеТРТ5ОУ5КУ1_О5-К(Гексадеканоил-[8Аминооктаноил] )-ААН0РУЕЖ1_5А-М Н2	Соединение 16	0,24	0,46
Н-Н-/МЬ-ОСТРТЗОУ5КУЮЗ-К(Гексадеканоил-£-1у5)- ΑΑΗϋΡνΕΛΊ13Α-ΝΗ2	Соединение 17	0,09	0,39

Остатки, обозначенные с помощью (), образуют внутримолекулярное лактамное кольцо.

- 26 022816

Таблица 1а. Значения ЕС₅₀ дополнительных соединений согласно настоящему изобретению

Последовательность	Соединение	ЕС_М <нМ, С1.Р- 1К	ЕС_Ж (нМ) С1иК
Ч-Н-А\|Ь-ОСТРТ5ОУЗКУЮЗ-К(Гексадеканоил- изоС(и)-ААНОРУЕУЛ.[-3-ОН	Соединение 18	0.066	0,091
Н-Н-А\|Ь-аСТРТЗОУ5КУЮЗ-К(ГексадеканОил- изо61и)-ААНЮРУЕ\Л/1_1--ОН	Соединение 19	0,048	0,483
Н-Н-А\|Ь-Е6ТРТ50УЗКУЬ03-К(Ге(<садеканоил- /ΐ3θΟΙυ)-ΑΑΗΟΡνΕν/Ι_Ι_5Α-ΟΗ	Соединение 20	0,057	13,266
Н-Н-А\|Ь-<ЭСТРТ5ОУ5КУ1_О8-К(Гексадеканоил- изоеыу-ААНОРУЕ^ИЗА-ОН	Соединение 21	0,077	0,150
Н-Н-А\|Ь-ЕСТРТЗОУЗКУЮ5-К(Гексадеканоил- ϋ3ο6Ιϋ)-ΑΑΗΟΡνΕννί18Α-Ν Н2	Соединение 22	0,014	26,370
Н-Н-А\|Ь-ОСТРТЗОУЗКУЬОЗ-К(Гексадеканоил)- ААНОРУЕ«ИЗА-ЫН2	Соединение 23	0,140	0,124
Н-Н-А\|Ь-(ЭСТРТ5ОУ5КУ1-ОЗ-К([2-Бугилоктаноил]- изоС1и)-ААНОР νΕννίί3Α-Ν Н2	Соединение 24	0,161	0,133
Н-Н-А\|Ь-аеТРТЗОУЗКУ105-К(Октадеканоил- Μ3θ6Ιιι)-ΑΑΗ0ΡνΕννΐ_Ι-5Α-ΝΗ2	Соединение 25	0,069	0,103
Н-Н-А\|Ь-ОСТРТЗОУЗКУБОЗ-К(Додеканоил-изоС1и)- ΑΑΗΟΡνΕν\/Ι_1_5Α-ΝΗ2	Соединение 26	0,097	0,116
Н-Н-А\|Ь-06ТРТ50У5КУи05-К(Гексадеканоил-[4- Аминобуганоип])-ААНОР\/ЕМ1_1_5А-ЬН2	Соединение 27	0,152	0,147
Н-Н-А\|Ь-ОСТРТЗОУЗКУЬОЗ-К(Гексадеканоил-Е)- ΑΑΗϋΡνΕννΐ_Ι_5Α-ΝΗ2	Соединение 28	0,149	0,108
Н-Н-А\|Ь-06ТРТ30У8КУЮ5-К(Гексадеканоил-[8- Аминооктаноил])-ААНОР\/Е\М-1-5А-МН2	Соединение 29	0,199	0,123
Н-Н-А\|Ь-абТРТЗОУЗКУЮ5-К(Гексадеканоил-	Соединение	0,132	0,110

- 27 022816

33ΰίγ6)-ΑΑΗΟΡνΕννίί5Α-ΝΗ2	30
Н-Н-А1Ь-О6ТРТЗОУ5КУЮЗ-К(Гексадеканоил-[3- ^минопропаноил])-ААРГОР7Е\Л/1_кЗА-МН2	Соединение 31	0,103	0,151
4-Н-А\|Ь-ОСТРТ5ОУЗКУ1-О5-Огп(Гексадеканоил- изое1и)-ААНОР νΕννί15Α-Ν Н2	Соединение 32	0,195	0,193
Н-Н-А\|Ь-СЮТРТЗОУ5-К(Гексадеканоил-изоС1и)- УЮЗКААНОРУЕМИ-З Α-Ν Н2	Соединение 33	0,131	0,389
Н-Н-А\|Ь-ОСТРТ50УЗКУЬ0-К(Гексадеканоип-изоб1и)- <ΑΑΗΟΡνΕΜΙ_Ι_5Α-ΝΗ2	Соединение 34	0,109	0,053
4-Н-А\|Ь-С!СТРТ50У5КУ1,05КАА-К(Гексадеканоил- Λ3θΘΙυ)-ΟΡνΕννίί3Α-ΝΗ2	Соединение 35	0,202	0.180
Η-Η-ΑϊΙ>αΘΤΡΤ3ΟΥ3ΚΥΙ_Ο3ΚΑΑΗΟΡν- К(Гексддеканоил-изо01и)-\Л/ЫЗА-МН2	Соединение 36	0.191	0.213
ΨΗ-ΑίΡ-ΟΟΤΡΤ5ΟΥ5ΚΥΙ_Ο3ΚΑΑΗΟΡνΕ\ΥΙ_Ι_- К(Гексадеканоил-изоС1и)-А-МН2	Соединение 37	0,207	0,147
4-Н-А1Ь-0СТРТ30У5КУЮ5-К(Гексадеканоип- иэо1_у5)-ААЦОРУА\М-1-КА-НН2	Соединение 38	0,132	0,183
Н-Н-А\|Ь-ОСТРТЗОУЗКУЮЗ-К(Гексадеканоип- 33θΟΙυ)-ΑΑΚϋΡνΕ\Υί15Α-ΝΗ2	Соединение 39	0,16	0,24
Н-Н-А\|Ь-аСТРТ5ОУЗКУЮЕ-К(Гексадеканоил- изо61и)-ААНОРУЕ1/7И8А-МН2	Соединение 40	0,20	0,18
Н-Н-А\|Ь-аСТРТ30У5КУЮ5-К(Гексадеканоил- изоС1и)-ААНЕРУЕМ/1_1_5А-МН2	Соединение 41	0,13	0,08
Н-Н-А\|Ь-С>СТРТЗОУЗКУ1_ОЗ-К(Гексадеканоил- ,13О(31и)-ААЕОР\/ЕМ1_1_5А-МН2	Соединение 42	0,03	0,27
Н-Н-А\|Ь-ОСТРТЗОУЗКУ1_ОЗ-К(ГексадеканОил- 13ОС[и)-ААНОР УЕ ΜΙΑΕΑ-Ν Н2	Соединение 43	0,082	0,12

В случае соединения 28 Η-Η-Αίϋ-ρΟΤΡΤδΌΥδΚΥΡΌδ-Κ (Гексалеканоил-Е)-ААНОРУЕ^ЬЬ§АΝΗ2 также может быть записано как Η-Η-Αίϋ-ρΟΤΡΤδΌΥδΚΥΡΌδ-Κ (Гексадеканоил-аС1и)ΑΑΙΙΙ)ΙΑΊΑ\'Ι.ΙΑΑ-ΝΊΙ2

Пример 3. Исследование фармакокинетики

Определили фармакокинетические профили различных ацилированных соединений. Вычисленные значения Τι/₂ представлены в табл. 2 по сравнению с неацилированным соединением 1.

*: Только две временные точки использовали для вычисления ТА

Все ацилированные соединения имели улучшенный Т¹/₂ по сравнению с соединением 1. Пример фармакокинетического профиля для соединения 13 представлен на фиг. 1.

Пример 4. Тест на переносимость пероральной глюкозы на мышах ΌΙΘ

Исследовали влияние к.с. введения в течение 21 дней соединения 11 (10 нмоль/кг) на переносимость пероральной глюкозы на мышах линии С57ВЬ/61, которых в течение длительного периода времени содержали на высокожировой диете. Мышей, которых содержали на высокожировой диете, подвергали голоданию и забирали первичные образцы крови для определения уровня глюкозы в крови натощак

- 28 022816 (1=0). Затем перорально вводили глюкозу (1 г/кг из расчета 5 мл/кг) и определяли уровень глюкозы в крови через 1=30 мин, 1=60 мин и 1=120 мин. Соединение 11 существенно повышало переносимость глюкозы (двухфакторный дисперсионный анализ). Данные представлены в виде среднее ± СОС (стандартная ошибка среднего).

Пример 5. НЪА1 с у мышей ЙЪ/ЙЪ через 28 дней

Мышам, больным диабетом (ЙЪ/ЙЪ), вводили носитель или соединение 7 в течение 4 недель и определяли уровень НЪА1с (СоЪак® примечания по применению: А1С-2) в образцах цельной крови (20 мкл), полученных от обработанных мышей. Результаты представлены на фиг. 3. Значение ДНЪА1с (%) определяли для каждой мыши, вычитая из НЪА1с (%) через 4 недели НЪА1с (%) в начальный момент времени. Обработка соединением 7 существенно снижала АНЪА1с (%) (Р = 0,03; Т-критерий Стьюдента) по сравнению с носителем.

Пример 6. Сниженная масса тела

Определяли влияние к.с. введения соединения 11 в течение 21 дней на массу тела в отделенном периоде на мышах линии С57ВI/6^. которых в течение длительного периода времени содержали на высокожировой диете. Самцам мышей С57ВI/6^, содержавшихся на высокожировой диете (ΗΡΌ), вводили (Ъ.1.Й.; к.с.) соединение 11 (10 нмоль/кг) или носитель. Ежедневно записывали массу тела и учитывали ее при введении дозы пептида, подобранной в зависимости от массы тела на протяжении исследования. Данные представлены в виде среднее±СОС на фиг. 4. Соединение 11 заметно снижало массу тела (р<0.05).

Пример 7. Общий холестерин и соотношение НПЬ/ЬПЬ

Мышам модели ожирения, вызванного питанием (ЭЮ), вводили носитель или соединение 7 в течение 4 недель и получали плазму из забранных образцов крови. В каждом образце плазмы определяли общий холестерин, ЬПЬ и НОЬ (СоЪак® примечания по применению: СНОЬ2, НОЬС3 и ЬПЬ_С). Результаты представлены на фигурах 5 и 6. Обработка соединением 7 существенно (Р < 0.0001, Т-критерий Стьюдента) снижала концентрации общего холестерина (на фиг. 5) и существенно (Р < 0.0001, Ткритерий Стьюдента) увеличивало соотношение НПЬ/ЬПЬ (на фиг. 6).

Пример 8. Увеличение массы тела у мышей линии С57ВЬ/61, содержавшихся на высокожировой диете.

Исследовали влияние к.с. введения в течение 10 дней эксендина-4, соединения 8, соединения 3, соединения 7, соединения 11, соединения 12 и соединения 6 на мышей линии С57ВЬ/61, содержавшихся в течение короткого периода времени на высокожировой диете. Самцам мышей С57ВI/6^, содержавшихся на высококалорийной диете (ΗΡΌ), вводили пептид (Ъ.1.Й.; к.с.) (0,5 и 5 нмоль/кг) или носитель. Ежедневно записывали массу тела и учитывали ее при введении дозы пептида, подобранной в зависимости от массы тела. Данные представлены на фиг. 7 в виде среднее±СОС.

Контрольный пептид (эксендин-4) так же, как соединение 8, приводил к существенному снижению увеличение массы тела в обеих дозах (0,5 и 5 нмоль/кг). Соединение 3, соединение 7, соединение 11 и соединение 12 существенно снижали увеличение массы тела в большой дозе (5 нмоль/кг), но не в малой дозе (0,5 нмоль/кг) (фиг. 7). Соединение 6 существенно снижало увеличение массы тела только в небольшой дозе (0,5 нмоль/кг).

Пример 9. Переносимость пероральной глюкозы через 2, 4, 6, 8, 10 и 12 ч после введения дозы на мышах линии С57ВЬ/61, содержавшихся на высокожировой диете.

После голодания в течения 4 ч на животных проводили тест на переносимость пероральной глюкозы (00ΤΤ). Через 2, 4, 6, 8, 10 и 12 ч после введения дозы соединения 7 или носителя забирали начальный образец крови (1=-0 мин). Непосредственно после этого вводили перорально дозу глюкозы (1 г/кг). Уровень глюкозы в крови определяли через 1=15 мин, 1=30 мин, 1=60 мин и 1=90 мин. Непосредственно после забора образца крови животных умерщвляли под действием анестезии СО₂ методом цервикальной дислокации. Исследование показало, что подкожное введение соединения 7 (10 нмоль/кг) существенно улучшает переносимость глюкозы (по результатам сниженного АИС во время теста на переносимость пероральной глюкозы) через 2, 4, 6, 8, 10 и 12 ч после введения дозы мышам линии С57ВЬ/61, содержавшимся на высококалорийной диете.

Пример 10. Потребление пищи молодыми худыми мышами линии С57ВЬ/61 и старыми мышами с ожирением линии С57ВЬ/61

Мышей С57ВЬ/61 содержали на высокожировой диете в течение 11 дней, и мышей С57ВЬ/61 содержали на высокожировой диете в течение 52 недель.

В день проведения эксперимента мышей взвешивали и вводили к.с. в виде инъекций эксендрин-4, соединение 7 или носитель в момент времени 1=0 ч (8:00) и 1=12 ч (20:00). Непосредственно после введения (1=0) мышам вводили взвешенное количество пищи и определяли общее потребление пищи посредством взвешивания остатков пищи через 1=1, 2, 4, 8, 12 и 24 ч.

У молодых худых мышей соединение 7 статистически значимо (р<0,05) снижало потребление пищи в течение периодов времени 0-4, 0-8, 0-12 и 0-24. Эксендин-4 статистически значимо (р<0.05) снижал потребление пищи в течение периодов времени 0-2, 0-4, 0-8, 0-12 и 0-24.

- 29 022816

У старых мышей с ожирением соединение 7 статистически значимо (р<0,05) снижало потребление пищи в течение периодов времени 0-2, 0-4, 0-8, 0-12 и 0-24. Эксендин-4 статистически значимо (р<0,05) снижал потребление пищи в течение всех периодов времени.

Пример 11. Влияние подкожного введения агониста С1иСЬР-1 соединения 11 в течение 3 недель на уровень липидов у мышей, содержавшихся на высокожировой диете в течение 30 недель.

Исследовали влияние (8.с.) введения в течение 3 недель на уровень липидов у мышей, предварительно за 30 недель содержавшихся на высокожировой диете в течение 30 недель, носителя (РВ§), эксендина-4 (10 нмоль/кг) или соединения 11 (10 нмоль/кг) два раза в сутки (Фигура 11). О влиянии судили по уровню ЬИЬ, НИЬ и триглицеридов (СНО: общий холестерин; НИЬ: холестерин высокой плотности; ЬИЬ: холестерин низкой плотности; ТК1С: триглицериды; НИЬ/ЬИЬ: соотношение НИЬ и ЬИЬ).

Соединение 11 существенно снижало уровень холестерина, НИЬ, ЬИЬ (Р < 0.001) и триглицеридов (Р < 0.05), при этом соотношение НИЬ/ЬИЬ существенно повышалось (р < 0.001) (фиг. 11). Соотношение НИЬ/ЬИЬ считается показателем риска развития заболеваний сердца. Чем больше соотношение, тем меньше риск сердечного приступа или других сердечно-сосудистых заболеваний.

Пример 12. Влияние соединения 11 на образование цАМФ в гепатоцитах.

Все исследованные пептиды проявляли свойства полных агонистов, учитывая образование цАМФ, стимулированное С1иК, кроме чистых агонистов СЬР-1 эксендина-4 и лираглютида. Из таблицы ниже следует, что по степени активности вещества распределены следующим образом: соединение 1 > глюкагон > соединение 11 > оксинтомодулин >>> эксендин-4 и лираглютид (табл. 9).

В конечном итоге, при высоких концентрациях соединение не вызывало уменьшение числа рецепторов и снижение ответа цАМФ, в отличие от результатов, полученных на клетках НЕК293, несущих С1иК.

Таблица 9. Влияние агонистов глюкагона на образование цАМФ в первичных культурах клеток человека

Пример 13. Масса печени у здоровых мышей С57 контрольной группы, обрабатываемых в течение 2 недель

Повторное введение ацилированных двойных агонистов С1иСЬР-1 длительного действия, таких как соединение 11, не приводило к изменению размера печени (увеличению или уменьшению) по сравнению с соединением 1 - неацилированным двойным агонистом С1иСЬР-1 (фиг. 12).

Пример 14. НЬА1с у мышей бЬ/бЬ через 28 дней

Мышам, больным диабетом (бЬ/бЬ), вводили носитель или соединение 11 в течение 4 недель и определяли уровень НЬА1с (СоЬа8® примечания по применению: А1С-2) в образцах цельной крови (20 мкл), полученных от обработанных мышей. Результаты представлены на фиг. 13. Значение АНЬА1с (%) определяли у каждой мыши, вычитая из значения НЬА1с (%) через 4 недели значение НЬА1с (%) в начальный момент времени. Обработка соединением 11 существенно уменьшала АНЬА1с (%) (Р = 0,03; Ткритерий Стьюдента) по сравнению с носителем.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение, имеющее формулу где К¹ представляет собой Н, С1-4 алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил; К² представляет собой ОН или ИН2;

Ζ представляет собой пептид согласно формуле I

Н1з-Х2-О1и-О1у-ТЬг-РЬе-ТИг-8ег-А5р-Туг-5ет-Х12-Туг-Ьеи-А5р-Х16-Х17-А1а-А1а-Х20-Х21

РЬе-Уа1-Х24-Тгр-Ьеи-Х27-Х28-А1а-Х30;(1) где

Х2 выбран из АФ и §ег;

Х12 выбран из Ьу8, Агд или Ьеи;

- 30 022816

X16 выбран из Агд и X;

X17 выбран из Агд и X;

Х20 выбран из Агд, Шк и X;

Х21 выбран из Акр и 01и;

Х24 выбран из А1а и X;

Х27 выбран из Ьеи и X;

Х28 выбран из Агд и X;

Х30 представляет собой X или отсутствует;

причём по меньшей мере один из X16, Х17, Х20, Х24, Х27, Х28 и Х30 представляет собой X; и при этом каждый остаток X независимым образом выбран из группы, состоящей из О1и, Ьук, δе^.

Сук, ОЪи, Орг и От;

при этом боковая цепь по меньшей мере одного остатка X конъюгирована с липофильным заместителем, имеющим формулу:

(ί) Ζ¹, где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, непосредственно конъюгированную с боковой цепью X; или (ίί) Ζ^!Ζ², где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, Ζ² представляет собой спейсер, и Ζ¹конъюгирована с боковой цепью X через Ζ²;

при условии, что Ζ не представляет собой ΗδρΟΤΡΤδΌΥδΚΥΣΌδ-Κ (гексадеканоил-у-О1и)ΆΆΙΐυίΛΤΆΥΙ.Ι.ΗΆ.
2. Соединение по п.1, в котором один или более указанных остатков X независимым образом выбран из Ьук, О1и и Сук.
3. Соединение по п.1 или 2, в котором X16 выбран из О1и, Ьук и δе^;

X17 выбран из Ьук и Сук;

Х20 выбран из Шк, Ьук, Агд и Сук;

Х24 выбран из Ьук, О1и и А1а;

Х27 выбран из Ьеи и Ьук и/или Х28 выбран из δе^. Агд и Ьук.
4. Соединение по любому из пп.1-3, в котором указанный пептид формулы I содержит одну из следующих комбинаций остатков:

Х2 представляет собой АЪ, и X17 представляет собой Ьук;

Х2 представляет собой АЪ, и X17 представляет собой Сук;

Х2 представляет собой АЪ, и Х20 представляет собой Сук;

Х2 представляет собой АЪ, и Х28 представляет собой Ьук;

Х12 представляет собой Агд, и Х17 представляет собой Ьук;

Х12 представляет собой Ьеи, и Х17 представляет собой Ьук;

Х12 представляет собой Ьук, и Х20 представляет собой Ьук;

Х12 представляет собой Ьук, и X17 представляет собой Ьук;

Х16 представляет собой Ьук, и Х17 представляет собой Ьук;

X16 представляет собой δе^. и X17 представляет собой Ьук;

X17 представляет собой Ьук, и Х20 представляет собой Ьук;

Х17 представляет собой Ьук, и Х21 представляет собой Акр;

X17 представляет собой Ьук, и Х24 представляет собой О1и;

X17 представляет собой Ьук, и Х27 представляет собой Ьеи;

X17 представляет собой Ьук, и Х27 представляет собой Ьук;

X17 представляет собой Ьук, и Х28 представляет собой δе^;

X17 представляет собой Ьук, и Х28 представляет собой Агд;

Х20 представляет собой Ьук, и Х27 представляет собой Ьеи;

Х21 представляет собой Акр, и Х27 представляет собой Ьеи;

Х2 представляет собой АЪ, X12 представляет собой Ьук, и X16 представляет собой δе^;

Х12 представляет собой Ьук, X17 представляет собой Ьук, и Х16 представляет собой δе^;

Х12 представляет собой Агд, X17 представляет собой Ьук, и Х16 представляет собой О1и;

Х16 представляет собой О1и, X17 представляет собой Ьук, и Х20 представляет собой Ьук;

Х16 представляет собой δе^. X21 представляет собой Акр, и Х24 представляет собой О1и;

X17 представляет собой Ьук, X24 представляет собой О1и, и Х28 представляет собой Агд;

X17 представляет собой Ьук, X24 представляет собой О1и, и Х28 представляет собой Ьук;

X17 представляет собой Ьук, X27 представляет собой Ьеи, и Х28 представляет собой δе^;

X17 представляет собой Ьук, X27 представляет собой Ьеи, и Х28 представляет собой Агд;

Х20 представляет собой Ьук, X24 представляет собой О1и, и Х27 представляет собой Ьеи;

Х20 представляет собой Ьук, X27 представляет собой Ьеи, и Х28 представляет собой δе^;

Х20 представляет собой Ьук, X27 представляет собой Ьеи, и Х28 представляет собой Агд;

X16 представляет собой δе^. X20 представляет собой Шк, X24 представляет собой О1и, и Х27 пред- 31 022816 ставляет собой Ьеи;

Х17 представляет собой Ьук, Х20 представляет собой Ηίκ, Х24 представляет собой С1и, и Х28 представляет собой §ег;

Х17 представляет собой Ьук, Х20 представляет собой Ьук, Х24 представляет собой С1и, и Х27 представляет собой Ьеи; или

Х17 представляет собой Сук, Х20 представляет собой Ьук, Х24 представляет собой С1и, и Х27 представляет собой Ьеи.
5. Соединение по любому из предыдущих пунктов, в котором указанный пептид формулы I содержит только одну аминокислоту указанного типа, конъюгированную с липофильным заместителем.
6. Соединение по п.5, в котором указанный пептид содержит только один остаток Ьук, только один остаток Сук или только один остаток С1и, и при этом указанный лиофильный заместитель конъюгирован с этим остатком.
7. Соединение по любому из предыдущих пунктов, в котором указанная последовательность пептида формулы I содержит один или более внутримолекулярных мостиков.
8. Соединение по п.7, в котором указанный внутримолекулярный мостик образован между боковыми цепями двух аминокислотных остатков, которые разделены тремя аминокислотами в линейной аминокислотной последовательности формулы I.
9. Соединение по п.8, в котором указанный внутримолекулярный мостик образован между боковыми цепями пар остатков 16 и 20, 17 и 21, 20 и 24 или 24 и 28.
10. Соединение по любому из пп.7-9, в котором указанный внутримолекулярный мостик представляет собой соляной мостик или лактамное кольцо.
11. Соединение по любому из пп.7-10, в котором указанный внутримолекулярный мостик включает пару остатков, где

Х16 представляет собой С1и, и Х20 представляет собой Ьук;

Х16 представляет собой С1и, и Х20 представляет собой Агд;

Х16 представляет собой Ьук, и Х20 представляет собой С1и; или

Х16 представляет собой Агд, и Х20 представляет собой С1и;

Х17 представляет собой Агд, и Х21 представляет собой С1и;

Х17 представляет собой Ьук, и Х21 представляет собой С1и;

Х17 представляет собой Агд, и Х21 представляет собой Акр; или

Х17 представляет собой Ьук, и Х21 представляет собой Акр;

Х20 представляет собой С1и, и Х24 представляет собой Ьук;

Х20 представляет собой С1и, и Х24 представляет собой Агд;

Х20 представляет собой Ьук, и Х24 представляет собой С1и; или

Х20 представляет собой Агд, и Х24 представляет собой С1и;

Х24 представляет собой С1и, и Х28 представляет собой Ьук;

Х24 представляет собой С1и, и Х28 представляет собой Агд;

Х24 представляет собой Ьук, и Х28 представляет собой С1и или

Х24 представляет собой Агд, и Х28 представляет собой С1и.
12. Соединение по любому из предыдущих пунктов, в котором по меньшей мере один из Х16, Х17, Х20 и Х28 конъюгирован с липофильным заместителем.
13. Соединение по любому из пп.1-10, в котором Х30 отсутствует.
14. Соединение по любому из пп.1-10, в котором Х30 присутствует и конъюгирован с липофильным заместителем.
15. Соединение по любому из предыдущих пунктов, в котором указанное соединение содержит только один липофильный заместитель в положении 16, 17, 20, 24, 27, 28 или 30, предпочтительно в положении 16, 17 или 20, в частности в положении 17.
16. Соединение по любому из пп.1-14, в котором указанное соединение содержит точно два липофильных заместителя, каждый в одном из положений 16, 17, 20, 24, 27, 28 или 30.
17. Соединение по п.16, в котором указанное соединение содержит липофильные заместители в положениях 16 и 17, 16 и 20, 16 и 24, 16 и 27, 16 и 28 или 16 и 30; в положениях 17 и 20, 17 и 24, 17 и 27, 17 и 28 или 17 и 30; в положениях 20 и 24, 20 и 27, 20 и 28 или 20 и 30; в положениях 24 и 27, 24 и 28 или 24 и 30; в положениях 27 и 28 или 27 и 30; или в положениях 28 и 30.
18. Соединение по п.1, имеющее формулу где К¹ представляет собой Н, С1-4 алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил; К² представляет собой ОН или ΝΗ2;

Ζ представляет собой пептид согласно формуле 11а

Н15-А1Ь-О1п-Сйу-Ч11Г-Р11е-ТЬг-Зег-А5р-'Гу|'-Зег-Х12-Туг-Ьеи-А5р-Х16-Х17-А1а-А1а-Х20Х21 -РЬе-Уа1-Х24-Тгр-Ьеи-Ьеи-Х28-А!а; (Па) где

- 32 022816

X12 выбран из Ьук, Агд и Ьеи;

Х16 выбран из 8ег и X;

X17 представляет собой X;

Х20 выбран из Шк и X;

Х21 выбран из Акр и О1и;

Х24 выбран из А1а и О1и;

Х28 выбран из 8ег, Ьук и Агд;

и при этом каждый остаток X независимым образом выбран из группы, состоящей из О1и, Ьук и

Сук;

причём боковая цепь по меньшей мере одного остатка X конъюгирована с липофильным заместителем, имеющим формулу:

(ί) Ζ¹, где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, непосредственно конъюгированную с боковой цепью X; или (ίί) Ζ^!Ζ², где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, Ζ² представляет собой спейсер, и Ζ¹конъюгирована с боковой цепью X через Ζ²
19. Соединение по п.1, имеющее формулу ιυ-ζ-κ² где К¹ представляет собой Н, С!-4 алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил; К² представляет собой ОН или ΝΗ2;

Ζ представляет собой пептид согласно формуле 11Ь

Н5-5ег-О1п-О1у-ТЪг-РЬе-'П1Г-Бег-А5р-Туг-8ег-Х12-Туг-Ьеи-Азр-Х16-Х17-А1а-А1а-Х20-Х21 РЬе-Уа1-Х24-Тгр-Ьеи-Ьеи-Х28-А1а; (НЬ) где

Х12 выбран из Ьук, Агд и Ьеи;

XI6 выбран из 8ег и X;

XI7 представляет собой X;

Х20 выбран из Шк и X;

Х21 выбран из Акр и О1и;

Х24 выбран из А1а и О1и;

Х28 выбран из 8ег, Ьук и Агд;

и при этом каждый остаток X независимым образом выбран из группы, состоящей из О1и, Ьук и

Сук;

причём боковая цепь по меньшей мере одного остатка X конъюгирована с липофильным заместителем, имеющим формулу:

(ί) Ζ¹, где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, непосредственно конъюгированную с боковой цепью X; или (ίί) Ζ^!Ζ², где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, Ζ² представляет собой спейсер, и Ζ¹конъюгирована с боковой цепью X через Ζ²;

при условии, что Ζ не представляет собой Н80ОТЕТ8ОУ8КУЕО8-1< (гексадеканоил-у-О1и)).Ά.ΆΙ ΙΙίΙΑΤΛΥΙ ,1 ,Η.Ά.
20. Соединение по п.18, имеющее формулу

Κ’-Ζ-Κ² где К¹ представляет собой Н, С!-4 алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил; К² представляет собой ОН или ΝΗ2;

Ζ представляет собой пептид согласно формуле 111а где

Х12 выбран из Ьук и Ад;

X17 представляет собой X;

Х20 выбран из Шк и X;

Х21 выбран из Акр и О1и;

Х24 выбран из А1а и О1и;

Х28 выбран из 8ег, Ьук и Агд;

и при этом каждый остаток X независимым образом выбран из О1и, Ьук и Сук;

причём боковая цепь по меньшей мере одного остатка X конъюгирована с липофильным заместителем, имеющим формулу:

(ί) Ζ¹, где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, непосредственно конъюгированную с боковой цепью X; или (ίί) Ζ^!Ζ², где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, Ζ² представляет собой спейсер, и Ζ¹

- 33 022816 конъюгирована с боковой цепью Х через Ζ².
21. Соединение по п.19, имеющее формулу

Κ'-Ζ-Κ² где К¹ представляет собой Н, С1-4 алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил; К² представляет собой ОН или ΝΗ2; и Ζ представляет собой пептид согласно формуле 11ГЪ где

Х12 выбран из Ьук и Агд;

Х17 представляет собой Х;

Х20 выбран из Шк и Х;

Х21 выбран из Акр и О1и;

Х24 выбран из А1а и О1и;

Х28 выбран из Зег, Ьук и Агд;

и при этом каждый остаток Х независимым образом выбран из О1и, Ьук и Сук;

причем боковая цепь по меньшей мере одного остатка Х конъюгирована с липофильным заместителем, имеющим формулу:

(ί) Ζ¹, где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, непосредственно конъюгированную с боковой цепью Х; или (ίί) Ζ¹Ζ², где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, Ζ² представляет собой спейсер, и Ζ¹конъюгирована с боковой цепью Х через Ζ²;

при условии, что Ζ не представляет собой НЗОСТРТЗОУЗКУБЭЗ-К (гексадеканоил-у-О1и))ΑΑΗ^РVΕV^^КΑ.
22. Соединение по п.20, имеющее формулу

К-/-К где К¹ представляет собой Н, С1-4 алкил, ацетил, формил, бензил или трифторацетил; К² представляет собой ОН или ΝΗ2;

Ζ представляет собой пептид согласно формуле Ша

Мз-А1Ь-С1п-С1у-ТЬг-РНе-Т11Г-8ег-Азр-Туг-$ег-Х12-Туг-Ьеи-Азр-8ег-Х17-А1а-А1а-Н1£;-Х21 РНе-Уа1-Х24-Тгр-Ъеи-Ьеи-Х28-А1а; (1Уа) где

Х12 выбран из Ьук и Агд;

Х17 представляет собой Х;

Х21 выбран из Акр и О1и;

Х24 выбран из А1а и О1и;

Х28 выбран из Зег, Ьук и Агд;

причём Х выбран из группы, состоящей из О1и, Ьук и Сук;

и при этом боковая цепь Х конъюгирована с липофильным заместителем, имеющим формулу:

(ί) Ζ¹, где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, непосредственно конъюгированную с боковой цепью Х; или (ίί) Ζ¹Ζ², где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, Ζ² представляет собой спейсер, и Ζ¹конъюгирована с боковой цепью Х через Ζ².
23. Соединение по п.21, имеющее формулу

ΚΛΖ-Κ² где К¹ представляет собой Н, С1-4 алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил; К² представляет собой ОН или ΝΗ2;

Ζ представляет собой пептид согласно формуле 1Ш

Н1<.-8ег-О1п-(31у-'П1г-РЬе-ТЬг-8ег-А5р-Туг-8ег-Х12-Туг-кеи-А5р-£ег-Х17-А1а-А1а-Н|з-Х21 РПе-Уа1-Х24-Тгр-Ьеи-Ьеи-Х28-А1а; (1УЬ) где

Х12 выбран из Ьук и Агд;

Х17 представляет собой Х;

Х21 выбран из Акр и О1и;

Х24 выбран из А1а и О1и;

Х28 выбран из Зег, Ьук и Агд;

причём Х выбран из группы, состоящей из О1и, Ьук и Сук;

и при этом боковая цепь Х конъюгирована с липофильным заместителем, имеющим формулу:

(ί) Ζ¹, где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, непосредственно конъюгированную с боко- 34 022816 вой цепью X; или (ίί) Ζ¹Ζ², где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, Ζ² представляет собой спейсер, и Ζ¹конъюгирована с боковой цепью X через Ζ²;

при условии, что Ζ не представляет собой ΗδρΟΤΡΤδΌΥδΚΥΕΌδ-Κ (гексадеканоил-у-О1и))ΑΑΗΌΡνΕνΕΕΚΑ.
24. Соединение по любому из предыдущих пунктов, в котором указанный пептид формулы I имеет последовательность

Н5рСТГТЗОУ8КУ1,П8КААЛОРУЕ\\ЪЫ<А;

НЗОСТРТЗОУЗКУЬОККААНОРУЕАЬЬКА;

Н8рОТРТ8ПУЗК¥ЕО8КААКОРУЕ\УЪЬКА;

НЗООТРТЗОУЗКУЬПЗКААНОРУЕАЬККА;

НЗРСТРТЗРУЗКУЕОЗКААНОРУЕАЬЬКА;

НКрОТРТЗСУЗНУЬОЗКААНПРУЕХУЬЬКА;

НЗООТРТЗОУЗЬУЬОЗКААНОРУЕАЬЪКА;

НЗОСТРТЗОУЗКУЬВЗКААНОГУЕАЕЬКАК;

Η50ΟΤΡΤ5ϋΥ8ΚΥΕΟ3ΚΑΑΗΟΡνΕ5¥ΙΧ5ΑΚ

НЗООТРТЗОУЗКУГОЗКЛМГОРУЕАЛЪКЗА,

Η30αΤΡΤ3ΟΥ5ΚΥΕΟ3ΚΑΑΗϋΡνκ\νΕΕΚΑ;

НЗООТРТЗОУЗКУЬОЗСААНОРУЕДУЕЕКА;

Н8 ООТРТЗОУЗКУЕОЗС ААНБРУЕ^ЪЕЗА;

Н39ОТРТ£ОУ8КУЕО8КЛЛС1Л'\Е\УЕЕКА;

НЗООТРТЗОУЗКУЕРКЗААНОРУЕУУЕЕКА;

Н-А|Ь-9СТРТ8ОУЗКУЕО8КААНОРУЕ\¥ЕЕ8А;

Н-А|Ъ-<ЗСТРТ8ОУ8КУЕО8КААНОРУЕ\УЕЕ5АК;

Н-А1Ь-0СТРТ5ОУЗКУЕО8КААЕи>РУА\¥ЕЕКА;

Η-Αΐ0-0ΟΤΡΤ3ΠΥ8ΚΥΕΟ8ΚΑΑΚΟΡνΑλνΕΕΚΑ;

Н-Л1Ь-0ОТРТ5ОУ8КУЕОЗКААНРР\'Е\УЕЕКА,

Н-АкЬ-ООТРТЗОУЗКУЕРЗКААНОРУЕУУЕЕКА

Н-АЛ-ОСТРТЗРУЗКУЕРЗКААКОРУАХУЕЕЗА

Н-АФ-ОСТРТЗРУЗКУЕРЗКААНРРУА^ЬЬКА;

Η-Αίό-ρΟΤΡΤϊϋΥδΚΥΕΟΚΚΑΑΗΟΡνΑΧνΕΕΚΑ;

Η-ΑΠ>-<}0ΤΡΤ8ΟΥ8ΚΥΕΟ3ΚΑΑΗΡΡνΕΐΥΕΕ5Α;

Κ-ΑΪΙ>-9ΟΊΎΊ·8ΟΥ8ΚΥΕΡ8ΚΑΑΗΟΡνΚ\νΕΕ3Λ;

Η-ΑίΕ-ρΟΤΡΤδΡΥδ ΕΥΕΡ5ΚΑ.ΑΗΟΡ νΕΆΈΕΚ А; Η-ΑίΙ>-Ρ0ΤΡΤ50Υ5ΚΥΕ05ΕΑΑΗ0ΡνΕ\νΕΕ5Α; Η-ΑίΙ>-()ΟΤΡΤ8ΟΥ3ΚΥΕΟ3ΚΑΑ€ΟΡνΕ\νΕΕΚΑ; Η-ΑίΙ^ΟΤΡΤ3ΡΥ5ΚΥΕΟΚ()ΚΑΑΕ0ΟΡνΕΆΈΕΚΑ;

Η-ΑίΚΟΟΤΡΤδϋΥδ ΚΥΕΡ8ΚΑ АНРРУЕ(ЛУЕЕК()А Η-Λϋ>-9ΟΤΡΤ3Γ)Υ8ΚΥΙ.1·)8ΚΛΛΚ()ϋΡνΕ()%ΈΕΚΑ, Η-ΑιΙ>-9Ο1Έ'1'8ΡΥ8ΚΥΕΡ3Κ()ΑΑΗΕ0ΡνΕ\νυ.ΚΑ. или Η-ΑίΕ-ΟΟΤΡΤ8ΟΥΪΚΥΕΡ5ΚΟΑΑΚΕ0ΡνΕ\νΕΕΚΑ.
25. Соединение по любому из предыдущих пунктов, которое содержит пептид формулы I, имеющий указанную последовательность

- 35 022816

Ε180Ο^ΓΓΕΈ8ΟΥ8ΚΥΕΟ8-Κ*-ΑΑΗΒΡνΕ¹ΑΈΕΚΑ,

Η8ρθΤΡΤδΟΥδΚΥΕΟ-Κ*-ΚΑΑΗΟΡνΕλνΕΕΚΑ;

Η80ϋΤΓΤ8ΟΥ3ΚΥΕΟ5ΚΑΛ-Κ*-ΟΡνΕ\νΕΕΚΑ,

Η50ΟΤΓΤ5Γ)Υ5ΚΥΕΟ8ΚΑΑΗΟΓνΕ\νΐ.-Κ*-ΚΑ;

Н80СТРТ8ОУ8КУкО8КААНОРУ£\УЬЬ-К*-А:

Н80ОТГТ80У8^ЬО8-К*-ААРГОРУЕ\¥ЬЬКА;

Η300ΤΡΤ8ΟΥ8ΕΥΕΟ8-Κ.*-ΑΑΗ0ΡνΕ\νΕΕΚ.Α;

Η80ΟΤΓΤ80ΥδΚΥΙ.Ο8ΚΑΑΗΟΡνΕ\νίΕΚΑ-Κ*;

Η80ΟΤΡΤ8ΟΥ8ΚΥΕΟ8ΚΑΑΗϋΡνΕ\νΕΕ3Α-Κ*;

Η3φΟΤΡΤδΟΥ8ΚΥΕΟδΚΑΑΗΟΡνΕ\νΕ-Κ*-8Α;

Η30ΟΤΡΤ8ΟΥ8ΚΥΕΟ3ΚΑΑΗΟΡν-Κ*-\νΕΕΚΑ;

Η80ΟΤΡΤ8ΟΥδΚΥΕΟ8-σ*-ΑΑΗΟΡνΕ\νΕΕΚΑ;

Η3Ρ)0ΤΡΤ30Υ3Κ.Υ'ΕΟ3-0*-ΑΑϋΟΡνΕ\\·ΤΕ8Α:

Η80ΟΤΡΤ8ΟΥ8ΚΥΕΟδΚΑΑ-€*-ΟΡνΕλνΕΕΚΑ;

Η30ΟΤΡΤ3ΟΥ8ΚΥΕΟ-Κ*-5ΑΑΗΟΡνΕ\νΕΕΚΑ;

Η-ΑίΜ3ΟΤΡΤ8ΟΥ8ΚΥΕΟ8-Κ*-ΑΑΗΟΡνΕ\νΕΕ8Α;

Η-Αι8-ρθϊΡΎ8ΟΥδΚΥΕΟ8ΚΛΑΡΙΒΡνΕ\νΕΕ8Λ-Κ*;

Η-Αι8ΌΟΤΡΤ30Υ5ΚΥΕϋ8-Κ*-ΑΑΚΟΡνΑ\νΕΕΙ<Α.

Η-ΑιΕ-φΟΤΡΤ8ΟΥ8ΚΥΕΟ5Κ-ΑΑ-Κ*-ΟΡνΑ’ΑΈΕΚΑ,

Η-ΑιΕ-0ΟΐΓΤ8Γ>Υ5ΚΥΕΒ5ΚΑΑΗΟΡνΕ\νΕΕ-Κ*-Λ,

Η-ΑίΙ>-<3ΟΤΡΤ3ΟΥ3ΚΥΕΠ8-Κ*-ΑΑΗΟΡνΕ\νΕΕΚΑ;

Н-А11>рОТРТЗОУ8КУЕО8-К*-ААНОРУЕдаЛКА;

Η-Αί1>0ΟΤΡΤ8ΟΥ3ΚΥΕΟ3ΚΑΑ-Κ*-ΟΡνΑ\νΕΕ8Α;

Η-ΑΛ-0ΟΤΡΤ8ΟΥ8ΚΥΕΟ5ΚΑΑΗ0ΓνΑ\νΕΕ-Κ*-Α,

Η-ΑιΕ-ζ>ΟΤΕΤ8Γ)Υ3ΚΥΕϋ-Κ*-Κ.ΑΑΗΟΡνΑ\νΕΕΚΑ,

Η-Α«)-φΟΤΡΤ8ΟΥδΚΥΕΟδ-Κ*-ΑΑΗΟΓνΕ\νΕΕδΑ;

Η-ΑίΕ-()ΟΤΓΤ8ΟΥ8ΚΥΕΟ8ΚΑΑΗΟΡν-Κ*-\νΕΕ8Α:

Η-Αί1>()ΟΤΡΤ3ΟΥ8ΕΥΕΟ3-Κ*-ΑΑΗΒΡνΕ4ΤΧ8Α;

Η-Αίϋ-0ΟΤΡΤ8ΒΥ5ϊίΥΕΟ3-(:*-ΑΑΗΟΓνΕΐνΕΕ5Α,

Η-Α]8-0(5ΤΡτ3ΟΥ3ΚΥΕΟ8ΚΑΑ-Ε*-ΒΓ\Έ\νΕΕ{<Α,

Η-ΑιΙ>-0ΟΤΡΤ8ΟΥ8ΚΥΕΟ-8*-ΚΑΑΗΟΡνΕ\νΕΕ5Α;

Η-Λ]5-θατΡΤ3ΟΥ8ΚΥΕΒΚ0Κ*ΑΑΕ()ΟΡνΕ\νΕΕΚΑ;

Η-Αί1>0ΟΤΡΤ8ΟΥ3Κ.ΥΕΟ3Κ*ΑΑΗΟΡνΕ()νΕΕΚ0Α

Η-Αίθ-ΟΟΤΡΤδΟΥδΚΥΕΒδΚ+ΑΑΚΟΟΡνΕΟΜ,ΕΚΑ,

Η-Αίϋ-(ΪΟΤΡΤ8ΟΥ8ΚΥΕΟδΚ()ΑΑΗΕ0ΓνΕ\νΕΕΚ*Α;ιωΗ

Η-ΑιΙ>0ΟΤΡΤδϋΥ5ΚΥΕΟ8Κ()ΑΑΚ*Ε()ΡνΕλνΕΕΚΑ.

где указывает положение липофильного заместителя
26. Соединение по любому из предыдущих пунктов, в котором Ζ¹ содержит углеводородную цепь, включающую 10-24 атомов С, 10-22 атомов С или 10-20 атомов С.
27. Соединение по п.26, в котором Ζ¹ представляет собой группу додеканоила, 2-бутилоктаноила, тетрадеканоила, гексадеканоила, гептадеканоила, октадеканоила или эйкозаноила.
28. Соединение по любому из предыдущих пунктов, в котором Ζ² представляет собой или содержит один или более аминокислотных остатков.
29. Соединение по п.28, в котором Ζ² представляет собой остаток у-О1и, О1и, в-А1а или ε-^уδ или группу 3-аминопропаноила, 4-аминобутаноила, 8-аминооктаноила или 8-амино-3,6-диоктаноила.
30. Соединение по п.29, в котором указанный лиофильный заместитель выбран из группы, состоящей из додеканоил-у-О1и, гексадеканоил-у-О1и, гексадеканоил-О1и, гексадеканоил-[3-аминопропаноила], гексадеканоил-[8-аминооктаноила], гексадеканоил-ε-^уδ, 2-бутилоктаноил-у-О1и, октадеканоил-у-О1и и гексадеканоил-[4-аминобутаноила].
31. Соединение по п.30, в котором Ζ имеет формулу

- 36 022816

Н800ТРТ80У8К.¥ЬО-К(гексадеканоил-у-01и)-КААНОРУЕ№ЪЬКА;

Н800ТРТ80У8КУЬ08КААНОРУЕ\УЬ-К(гексадеканоил-у-01и)-КА;

НЗ<ХЗТГТ80У8КУЕ08КАА-Цгексадеканоил-у-01и)-ОРУЕ\УЕЕКА;

Н800ТРТ80У8К¥Ь08КААНОРУЕ\УЬЬ-К(гексадеканоил-у-01и)-А;

Н-А1Ъ-<)СТРТЗОУ8КУЕ08-К(гексадеканоил-у-0]и)-ААНОРУЕ5¥ЕЕКА.;

Н-А|Ъ-9С1ТРТКО¥8КЛЪО8-К(гексадекан0ил-у-О1и)-АЛГ<ОР\'Л\УЕЕКА;

Н-А1Ъ-90ТРТ80У8КУЕ08-К(гексацеканоил-у-01ц)-ААНОРУЕ^УЕЕ8А;

Н-А1Ь-0СТРТЗОУ8К.УЕО8КААНОРУЕ\УЕЕ-К(гексадеканоил-у-С1и)-А;

Н-А1Ъ-рОТТТ5ОУ5К.УЕО5-К(гексадекан0ил-у-О1и)-ААНОРУЕ\УЕЕКА;

Н-А1Ь-90ТРТ80У8К.УЕОЗ-К(гексадеканоил-у-01и)-ААНОРУЕО№ЕЕК()А;

Н89ОТГТЗОУ8КУЬО5-К(гексадеканоил-у-О]и)-ААНОРУЕ\УЕЕКА;

Н-А|Ь-0ОТРТ8ОУ8КУЬО8КАА-К(гексадекан0ил-у-О1и)-ОРУА1УЬЕКА;

Н-А1Ь-0СТРТ8ОУ8КУЕО8-К(додеканокл-у-О1и)-ААНОРУЕ\УЕЕ8А;

Η-Αί Ь-рОТРТ8 ϋΥ 8КУЕ08-К(гексадеканоил-[ З-аминопропаноил])- А АНОРУЕ\¥1ХЗ А; Н-А1Ъ-ООТРТ80У8КУЕОЗ-К(гексадеканоил-[8-аминооктаноил])-ААНОРУЕ\У1Х8А; Н-АГЬ-<)СТРТЗОУ8КУЕО8-К(гексадеканоил-е-Еу5)-ААНОРУЕ\УЬЕЗА; Н80ОТРТЗОУ8КУЕО8-К(гексадеканоил)-ААНОРУЕ\УЕЬ8А;

Н8 рОТРТЗО У5КУЬП8-К(оиадскано1И- γ-Ο1ιι)-Α АНЭР УЕЧЫЛ А;

Н8СкЗТРТЗОУ8КУЕО8-К([2-бутилоктаноил]-у-О1и)-ААНОГУЕ\УЕЕ8А,

Н800ТРТ80У8КУЕ08-К(гексадеканоил-[4-Аминобутаноил])-ААНОРУЕ\УЕЬ8А;

Н800ТРТ80У8КУЕ08-К(октадеканоил-у-01и)-ААРГОГУЕ\¥ЕЕ8А;

НЗОСгГРГЗОУ8КУЬ08-К(гекоадеианоил-Е)-ЛАНОРУЕ’\\'ЪЕ5А

Н-АГЬ-(}СТРТ80У8К.УЕ08-К.(гексадеканоил)-ААНОРУЕ\УЕЕЗА;

Н-А1Ь-ООТРТЗОУ8КУЕОЗ-К(окгадеканоил-у-01и)-ААНОРУЕ\УЕЕ8А;

Н-А1Ъ-ОСТРТ80У8КУЕ08-КД2-бутилоктаноил]-у-01и)-ААНОРУЕ\УЕЕЗА;

Н-А1Ь-90ТРТЗОУ8КУЕОЗ-К(гексадеканоил-[4-аминобутаноил])-ААНОРУЕ\УЕЕ8А;

Н-А1Ь-ООТРТ8ВУ8КУЕ08-К(октадеканоил-у-01и)-ААНОРУЕ\УЕЕ8А; или

Н-А1Ь-9СТРТ80У8КУЕ08-К(гексадеканоил-Е)-ААНОРУЕ\УЕЕ8А;

где остатки, обозначенные () участвуют в образовании внутримолекулярной связи.
32. Соединение по п.30, в котором Ζ имеет формулу

Н-А1Ъ-90ТРТ80УЗ-К(Гексадекалоил-изо01и)-УЕОЗКААНОРУЕ\¥ЕЕ8А;

Н-А1Ь-<ЗОТРТ50У8КУЕО-К(Гексадеканоил-изоС1и)-КААНОРУЕ\УЕЕ8А;

Н-А1Ь-(ЗОТРТ80У8К¥Е08КАА-К(Гексадеканоил-изо01и)-ОРУЕ\УЕЕ8А;

Н-А1Ь-0ОТРТ8ОУ8КУЕО8КААНОРУ-К(1'ексадеканош1-изоО1и)-\УЕЕЗА:

Н-А1Ь-ООТРТ80У8КУЕ08-К(Гексадеканоил-изоЕуз)-ААКОРУА\УЕЕКА;

Н-А1Ь-ОСТРТ80У8КУЕ08-К(Гексадеканоил-изо01и)-ААКВРУЕ\УЕЕ8А;

Н-А1Ь-ООТРТ80¥ЗКУЕОЕ-К(Гексадеканоил-изо01и)-ААНОРУЕЛУЕЕ8А,

Н-А1Ь-фОТРТ80У8КУЕОЗ-К.(Гексадеканоил-изо01и)-ААНЕРУЕ\УЕЕЙА;

Н-А]Ь-ООТРТ80У8КУЕОЗ-К(Гексадеканоил-изоС1и)-ААЕОРУЕ1УЕЕЗА;

Н-А1Ь-ООТРТ80У8КУЕ08-К(Гексадекаиоил-изо01и)-ААНОРУЕ\УЕЕЕА.
33. Соединение, имеющее формулу κ'-ζ-κгде К¹ представляет собой Н, С1-4 алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил; К² представляет собой ОН или ΝΗ2;

Ζ представляет собой пептид согласно формуле V

Нк-А|Ъ-С1п-СЙу-Т11Г-РЬе-Т11Г-8ег-А$р-Туг-$ег-Еу<-Туг-Ееи-А5р-8ег-Х17-А]а-А1а-Н15-А5р· РНе-Уа]-О1и-Тгр-Ееи-Ееи-Х28; (V)

- 37 022816 где

Х17 представляет собой X;

Х28 представляет собой §ег или отсутствует;

причём X выбран из группы, состоящей из С1и, Ьук и Сук;

и при этом боковая цепь X конъюгирована с липофильным заместителем, имеющим формулу:

(ί) Ζ¹, где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, непосредственно конъюгированную с боковой цепью X; или (ίί) Ζ^!Ζ², где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, Ζ² представляет собой спейсер, и Ζ¹конъюгирована с боковой цепью X через Ζ²
34. Соединение по п.33, в котором Ζ имеет формулу: Η-ΛΦ-ΟΟΤΡΤδΌΥδΚΥΡΌδ-Κ (гексадеканоилизо-С1и)-ААНПРУЕ^ЪЬ§; (гексадеканоил-изо-СЬкААНПРУЕ^РЬ.
35. Соединение, имеющее формулу κ’-ζ-κ² где К¹ представляет собой Н, С₁.₄ алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил;

К² представляет собой ОН или ΝΗ₂;

Ζ представляет собой пептид согласно формуле VI

Н15'А1Ь-С1и-С1у-'П1Г-РНе-Т11г-8ег-А5р-Туг-8ег-Ьу5-Туг-Ьеи-А5р-8ег-Х17-А1а-А1а-Н1К-АйрРНе-Уа1-С1и-Тгр-Ееи-Е€и-8ег-А1а; (VI) где

X17 представляет собой X;

причём X выбран из группы, состоящей из С1и, Ьук и Сук;

и при этом боковая цепь X конъюгирована с липофильным заместителем, имеющим формулу:

(ί) Ζ¹, где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, непосредственно конъюгированную с боковой цепью X; или (ίί) Ζ^!Ζ², где Ζ¹ представляет собой липофильную группу, Ζ² представляет собой спейсер, и Ζ¹конъюгирована с боковой цепью X через Ζ²
36. Соединение по п.35, где Ζ имеет формулу Н-А1Ь-ЕСТРТ§П)§К)РП§-К (гексадеканоил-изоСЬкААНПРУЕ^РЬБА.
37. Композиция, содержащая соединение по любому из пп.1-36 или его соль или производное в виде смеси с носителем.
38. Композиция по п.37, отличающаяся тем, что указанная композиция представляет собой фармацевтически приемлемую композицию и указанный носитель представляет собой фармацевтически приемлемый носитель.
39. Применение соединения по любому из пп.1-36 для предотвращения увеличения массы тела или обеспечения снижения массы тела у нуждающегося в этом индивидуума.
40. Применение соединения по любому из пп.1-36 в способе нормализации уровня глюкозы в крови, переносимости глюкозы и/или уровня холестерина в крови, снижения уровня ЬВЬ в крови и/или увеличения соотношения НВЬ/РВЬ у индивидуума, нуждающегося в этом.
41. Применение соединения по любому из пп.1-37 в способе лечения заболевания, вызванного избыточной массой тела или для которого характерна избыточная масса тела, например лечения и/или предотвращения ожирения, тяжелой формы ожирения, воспаления, вызванного ожирением, заболевания желчного пузыря, вызванного ожирением, апноэ сна, вызванного ожирением, метаболического синдрома, преддиабетических состояний, устойчивости к инсулину, непереносимости глюкозы, диабета 2 типа, диабета 1 типа, гипертензии, атерогенной дислипидемии, атеросклероза, артериосклероза, ишемической болезни сердца, болезни периферических артерий, инсульта или заболевания мелких сосудов у индивидуума, нуждающегося в этом.
42. Применение по любому из пп.39-41, согласно которому соединение вводят в виде компонента комплексного лечения вместе со средством для лечения диабета, ожирения, дислипидемии или гипертензии.
43. Применение по п.42, отличающееся тем, что указанное средство для лечения диабета представляет собой метформин, сульфонилмочевину, глинид, ингибитор ЭРР-ГУ, глитазон, инсулин или аналог инсулина.
44. Применение по п.42, отличающееся тем, что указанное средство для лечения ожирения представляет собой агонист рецептора глюкагоноподобного пептида 1, пептид ΥΥ или его аналог, антагонист рецептора каннабиноида 1, ингибитор липазы, агонист рецептора меланокортина 4 или антагонист рецептора меланин концентрирующего гормона 1.
45. Применение по п.42, отличающееся тем, что указанное средство для лечения гипертензии представляет собой ингибитор ангиотензин-конвертирующего фермента, блокатор рецептора к ангиотензину II, диуретик, бета-блокатор или блокатор кальциевых каналов.
46. Применение по п.42, отличающееся тем, что указанное средство для лечения дислипидемии представляет собой статин, фибрат, ниацин и/или ингибитор всасывания холестерина.

- 38 022816
47. Способ предотвращения увеличения массы тела или обеспечения снижения массы тела у нуждающегося в этом индивидуума, который включает введение указанному индивидууму терапевтически эффективного количества соединения согласно любому из пп.1-36.
48. Способ нормализации уровня глюкозы в крови, переносимости глюкозы и/или уровня холестерина в крови, снижения уровня ЬОЬ в крови и/или увеличения соотношения НПЬ/ЬПЬ у нуждающегося в этом индивидуума, который включает введение указанному индивидууму терапевтически эффективного количества соединения согласно любому из пп.1-36.
49. Способ лечения заболевания, вызванного избыточной массой тела или для которого характерна избыточная масса тела, например лечения и/или предотвращения ожирения, тяжелой формы ожирения, воспаления, вызванного ожирением, заболевания желчного пузыря, вызванного ожирением, апноэ сна, вызванного ожирением, метаболического синдрома, преддиабетических состояний, устойчивости к инсулину, непереносимости глюкозы, диабета 2 типа, диабета 1 типа, гипертензии, атерогенной дислипидемии, атеросклероза, артериосклероза, ишемической болезни сердца, болезни периферических артерий, инсульта или заболевания мелких сосудов у нуждающегося в этом индивидуума, который включает введение указанному индивидууму терапевтически эффективного количества соединения согласно любому из пп.1-37.
50. Способ по любому из пп.47-49, отличающийся тем, что указанное соединение вводят в виде компонента комплексного лечения вместе со средством для лечения диабета, ожирения, дислипидемии или гипертензии.
51. Способ по п.50, отличающийся тем, что указанное средство для лечения диабета представляет собой метформин, сульфонилмочевину, глинид, ингибитор ΌΡΡ^ν, глитазон, инсулин или аналог инсулина.
52. Способ по п.50, отличающийся тем, что указанное средство для лечения ожирения представляет собой агонист рецептора глюкагоноподобного пептида 1, пептид ¥¥ или его аналог, антагонист рецептора каннабиноида 1, ингибитор липазы, агонист рецептора меланокортина 4 или антагонист рецептора меланин концентрирующего гормона 1.
53. Способ по п.50, отличающийся тем, что указанное средство для лечения гипертензии представляет собой ингибитор ангиотензин-конвертирующего фермента, блокатор рецептора к ангиотензину II, диуретик, бета-блокатор или блокатор кальциевых каналов.
54. Способ по п.50, отличающийся тем, что указанное средство для лечения дислипидемии представляет собой статин, фибрат, ниацин и/или ингибитор всасывания холестерина.