EA022061B1 - Миметики белка smac - Google Patents

Миметики белка smac Download PDF

Info

Publication number
EA022061B1
EA022061B1 EA201171494A EA201171494A EA022061B1 EA 022061 B1 EA022061 B1 EA 022061B1 EA 201171494 A EA201171494 A EA 201171494A EA 201171494 A EA201171494 A EA 201171494A EA 022061 B1 EA022061 B1 EA 022061B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
cancer
compound
mmol
carcinoma
tumors
Prior art date
Application number
EA201171494A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201171494A1 (ru
Inventor
Стивен М. Кондон
Ицзюнь Дэн
Мэтью Дж. Лапорте
Сьюзен Р. Риппин
Original Assignee
Тетралоджик Фармасьютикалз Корп.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=43411387&utm_source=***_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA022061(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Тетралоджик Фармасьютикалз Корп. filed Critical Тетралоджик Фармасьютикалз Корп.
Publication of EA201171494A1 publication Critical patent/EA201171494A1/ru
Publication of EA022061B1 publication Critical patent/EA022061B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/05—Dipeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/555—Heterocyclic compounds containing heavy metals, e.g. hemin, hematin, melarsoprol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/03—Peptides having up to 20 amino acids in an undefined or only partially defined sequence; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/07—Tetrapeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61N—ELECTROTHERAPY; MAGNETOTHERAPY; RADIATION THERAPY; ULTRASOUND THERAPY
    • A61N5/00—Radiation therapy
    • A61N5/06—Radiation therapy using light
    • A61N5/0613—Apparatus adapted for a specific treatment
    • A61N5/062—Photodynamic therapy, i.e. excitation of an agent
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61N—ELECTROTHERAPY; MAGNETOTHERAPY; RADIATION THERAPY; ULTRASOUND THERAPY
    • A61N5/00—Radiation therapy
    • A61N5/10—X-ray therapy; Gamma-ray therapy; Particle-irradiation therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0693—Tumour cells; Cancer cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/30—Organic components
    • C12N2500/46—Amines, e.g. putrescine
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Radiology & Medical Imaging (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

Настоящее изобретение касается соединения формулыили его фармацевтически приемлемой соли. Оно также относится к фармацевтической композиции для лечения пролиферативного заболевания, содержащей соединение согласно изобретению.

Description

Настоящее изобретение относится к миметикам белка 8МЛС, их композициям и их применению для лечения пролиферативных заболеваний, в том числе рака.
Предпосылки создания изобретения
Ингибиторы белков апоптоза (ΙΑΡ) представляют собой внутриклеточные белки естественного происхождения, подавляющие каспаззависимый апоптоз. Белок §МАС, также известный как И1АБЬО, является еще одним внутриклеточным белком, антагонизирующим, т.е. ингибирующим активность ΙΑΡ. В нормальных здоровых клетках белок §МАС и ΙΑΡ функционируют вместе для поддержания здоровых клеток. Тем не менее, при определенном течении заболевания, например, при раке и других пролиферативных заболеваниях не удается в достаточной степени антагонизировать ΙΑΡ, и, таким образом, они предотвращают апоптоз и вызывают или индуцируют аномальную пролиферацию и выживание.
Миметики белка 8МАС, также известные как ΙΑΡ-антагонисты, являются синтетическими малыми молекулами, имитирующими структуру и активность ΙΑΡ-антагониста четырех Ν-концевых аминокислот белка δМΑС. (Миметики белка §МΑС в ряде случаев называют ΙΑΡ-антагонистами). При введении животным, страдающим от пролиферативных заболеваний, миметики белка §МΑС антагонизируют ΙΑΡ, тем самым вызывая усиление апоптоза среди аномально пролиферирующих клеток.
Примеры пептидомиметиков белка §МΑС раскрыты в патентах И8 7517906; И8 7309792; И8 7419975; И8 2005/0234042; И8 2005/0261203; И8 2006/0014700; И8 2006/0025347; И8 2006/0052311; И8 2006/0128632; И8 2006/0167066; И8 2007/0042428; И8 2007/032437; И8 2008/0132485; АО 2005/069888; АО 2005/069894; АО 2006/010118; АО 2006/122408; АО 2006/017295; АО 2006/133147; АО 2006/128455; АО 2006/091972; АО 2006/020060; АО 2006/014361; АО 2006/097791; АО 2005/094818; АО 2008/045905; АО 2008/016893; АО 2007/136921; АО 2007/021825; АО 2007/130626; АО 2007/106192 и АО 2007/101347.
Краткое изложение существа изобретения
В одном аспекте настоящее изобретение предусматривает создание ^{1§-[2К-(6,6'-дифтор-3'-{4§гидрокси-1-[2§-(2§-метиламинопропиониламино)бутирил]пирролидин-2К-илметил}-1Н,1'Н-[2,2']бииндолил-3-илметил)-4§-гидроксипирролидин-1-карбонил]пропил}-2§-метиламинопропионамид и его фармацевтически приемлемых солей, а также различных форм такого соединения и его солей в соответствии с описанием, изложенным ниже.
Указанное соединение имеет нижеприведенную структуру:
в которой К.5 обозначает -СН2СН3. Указанное соединение также называется в настоящем описании соединением 15.
В соответствующих аспектах настоящее изобретение предусматривает создание фармацевтической композиции, включающей такое соединение, и способа лечения пролиферативных заболеваний у человека или у нечеловекоподобных млекопитающих, нуждающихся в таком лечении, предусматривающем введение в организм субъекта эффективного количества указанного соединения или его фармацевтически приемлемой соли.
В других аспектах настоящее изобретение предусматривает создание способа лечения пролиферативных заболеваний у млекопитающих, нуждающихся в таком лечении, например у человека или домашних животных, мясомолочного скота или охотничьих животных, предусматривающего введение в организм животного эффективного количества соединения 15 или его фармацевтически приемлемой соли.
В другом иллюстративном примере настоящее изобретение предусматривает создание способа индуцирования апоптоза в клетке, включающей создание контактного взаимодействия между клеткой и соединением 15 или его фармацевтически приемлемой солью. В данном примере осуществления настоящего изобретения клетка может представлять собой, например, раковую клетку.
В дополнительных иллюстративных примерах осуществления настоящее изобретение предусматривает создание любого одного или нескольких из вышеуказанных способов, далее включающих проведение терапии вторичного рака, такой как, например, лучевой терапии, химиотерапии, иммунотерапии и
- 1 022061 (или) фотодинамической терапии и их сочетание.
В дополнительном иллюстративном примере осуществления настоящее изобретение предусматривает создание способа лечения аутоиммунного заболевания, при котором состояние вызвано или индуцировано аномальным регулированием апоптоза в млекопитающем, нуждающемся в таком лечении, в том числе, например, системной красной волчанки, псориаза и идиопатической тромбоцитопенической пурпуры (синдрома Верльгофа), при этом способ предусматривает введение в организм животного эффективного количества соединения 15 или его фармацевтически приемлемой соли.
Краткое описание чертежей
Фиг. 1 - средняя потеря веса тела крыс в процентном выражении через 4 дня после внутривенного болюсного введения миметиков белка 8МАС в соответствии с описанием в примере 4.
Фиг. 2 - средний объем опухоли (2А) и изменение веса тела (2В) в результате лечения ксенотрансплантата от человека у безтимусных мышей с использованием миметиков белка 8МАС в соответствии с описанием в примере 5.
Подробное описание изобретения
Соединение в соответствии с настоящим изобретением является миметиком белка 8МАС, который может быть использован при лечении пролиферативных заболеваний, например различных доброкачественных или злокачественных опухолей (рака), доброкачественных пролиферативных заболеваний (например, псориаза, доброкачественной гиперплазии предстательной железы и рестеноза), либо аутоиммунных заболеваний (например, аутоиммунного пролиферативного гломерулонефрита, лимфопролиферативных аутоиммунных ответов). Виды рака, лечение которых потенциально можно проводить с использованием ΙΑΡ-антагонистов, включают без ограничения следующие виды рака: легочную аденокарциному, рак поджелудочной железы, рак толстой кишки, рак яичников, рак молочной железы, мезотелиому, периферическую нейрому, рак мочевого пузыря, глиобластому, меланому, адренокортикальную карциному, СПИД-ассоциированную лимфому, рак анального канала, менигиому, глиому, астроцитому, рак шейки матки, хронические миелопролиферативные заболевания (например, хронический лимфоцитарный лейкоз, хроническая гранулоцитная лейкемия), рак толстой кишки, рак эндокринных желез, эндометриальный рак, эпендимому, рак пищевода, саркому Юинга, экстракраниальные герминогенные опухоли, внегонадные герминогенные опухоли, рак внепеченочных желчных путей, рак желчного пузыря, рак желудка, карциноидные опухоли желудочно-кишечного тракта, гестационные трофобластические опухоли, лейкоз ворсистых клеток, лимфому Ходжкина, неходжкиновскую лимфому, гипофарингеальный рак, интраокулярную меланому, рак островковых клеток, саркому Капоши, ларингеальный рак, лейкемию, острый лимфобластный лейкоз, острый миелолейкоз, рак губы, рак ротовой полости, рак печени, рак мужской груди, злокачественную мезотелиому, медуллобластому, меланому, карциному из клеток Меркеля, метастатический сквамозный рак шеи, множественную миелому и иные неоплазмы плазмацитов, фунгоидный микоз и синдром Сезари, миелодиспластический синдром, назофарингеальный рак, нейробластому, мелкоклеточный рак лёгкого, немелкоклеточный рак лёгкого, рак ротоглотки, рак костей, в том числе остеосаркому и злокачественную фиброзную гистиоцитоксантому костей, эпителиальный рак яичников, овариальные герминогенные опухоли, пограничную опухоль яичника, рак поджелудочной железы, рак придаточных пазух носа, рак паращитовидной железы, рак полового члена, феохромоцитому, опухоли гипофиза, рак предстательной железы, рак прямой кишки, гипернефроидный рак, ретинобластому, рабдомиосаркому, рак слюнных желез, рак кожи, рак тонкого кишечника, саркому мягких тканей, супратенториальные примитивные нейроэктодермальные опухоли, пинеобластому, рак яичек, тимому, рак вилочковой железы, рак щитовидной железы, переходно-клеточный рак почечной лоханки и мочеточника, уретральный рак, саркому матки, влагалищный рак, вульварный рак, опухоль Уилма и иные опухоли почек у детей.
В ряде примеров осуществления настоящего изобретения предусматривается индуцирование апоптоза клеток, в частности патологически пролиферирующих клеток. Указанные способы могут быть осуществлены ίη νίίτο или ίη νίνο.
Способы в соответствии с настоящим изобретением могут предусматривать введение соединения в соответствии с настоящим изобретением отдельно, введение сочетания ΙΑΡ-антагонистов или введение соединения в соответствии с настоящим изобретением с одним или несколькими дополнительными ΙΑΡантагонистами или без них и одного или нескольких дополнительных химиотерапевтических веществ. Введение нескольких веществ может осуществляться одновременно или последовательно. Эффективные химиотерапевтические вещества включают без ограничения алкилирующие вещества (например, циклофосфамид, мехлорэтамин, хлорамбуцил, мелфалан), антрациклины (например, даунорубицин, доксорубицин, эпирубицин, идарубицин, митоксантрон, валрубицин), цитоскелетные деструкторы (например, паклитаксел, доцетаксел), эпотилоны (например, эпотилон А, эпотилон В, эпотилон Ό), ингибиторы топоизомеразы ΙΙ (например, этопозид, тенипозид, тафлупозид), аналоги нуклеотидов и аналоги прекурсоров (например, азацитидин, азатиоприн, капецитабин, ситарабин, доксифлюридин, фторурацил, гемцитабин, меркаптопурин, метотрексат, тиогуанин), пептидные антибиотики (например, блеомицин), вещества на основе платины (например, карбоплатин, цисплатин, оксалиплатин), ретиноиды (например, политрансретиноевая кислота) и алкалоиды и производные винка (например, винбластин, винкристин, виндезин,
- 2 022061 винорелбин). В ряде примеров осуществления настоящего изобретения химиотерапевтические вещества включают флударабин, доксорубицин, паклитаксел, доцетаксел, камптотецин, этопозид, топотекан, иринотекан, цисплатин, карбоплатин, оксалиплатин, амсакрин, митоксантрон, 5-фтор-урацил или гемцитабин.
В ряде примеров осуществления настоящего изобретения фармацевтические композиции, содержащие соединение в соответствии с настоящим изобретением в отдельности или в сочетании с одним или несколькими другими активными фармацевтическими ингредиентами, вводят человеку или животному. Фармацевтические композиции обычно содержат по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество, например носитель или разбавитель, и они могут быть введены обычным способом, в том числе системно, топикально или перорально. Введение обычно осуществляется путем внутривенной инъекции либо в виде болюсного или инфузионного введения, однако не исключены иные способы введения. Составы для внутривенного введения могут представлять собой соединение 15 (1 мг/мл) в стерильном 0,05М фосфат-цитратном буферном растворе (РВ§), рН 5. Конкретные способы введения зависят от показания и иных факторов, в том числе от конкретно вводимого соединения. Количество вводимого соединения является количеством, являющимся терапевтически эффективным. Вводимая доза зависит от характеристик субъекта, подвергаемого лечению, например от конкретного подвергаемого лечению пациента, возраста, веса, состояния здоровья, видов сопутствующего лечения, если таковое проводится. Частота лечения может быть легко определена специалистом в данной области техники (например, врачом-клиницистом).
Обычно соединение в соответствии с настоящим изобретением вводят путем внутривенной инъекции, в том числе, например, путем инфузионного введения в течение от приблизительно 1 до приблизительно 120 мин, например в течение приблизительно 30 мин.
Фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением является композицией, в которой активный фармацевтический ингредиент, т.е. соединение в соответствии с настоящим изобретением, является достаточно чистым, и композиция в любом случае является приемлемой для введения в организм человека или иного млекопитающего. Фармацевтическая композиция может быть приготовлена в форме одноразовой дозы, т.е. в форме, приемлемой для одноразового введения субъекту. Таким образом, например, фармацевтическая композиция в форме внутривенной одноразовой дозы может включать ампулу или предварительно заполненный шприц, при этом каждое из устройств содержит эффективное количество или подходящую фракцию эффективного количества таким образом, чтобы обеспечивалось введение одного из содержимых одной ампулы или шприца за один прием. Такое введение может быть повторено до приблизительно 4 раз в день в течение определенного периода времени при необходимости достижения накопленной эффективной дозы, например, при необходимости достижения регрессии опухоли. Режим дозирования может представлять собой, например, ежедневные или проводимые два раза в неделю внутривенные инъекции, либо, например, еженедельные инъекции при трехнедельном цикле и недельном перерыве в том случае, если лечение является эффективным, например, до тех пор, пока болезнь прогрессирует или не разовьется непереносимость препарата. Эффективная доза, вводимая при каждой инъекции, представляет собой эффективное и переносимое количество; эффективная доза может составлять, например, 0,01-30 мг/м2, например 0,2-10 мг/м2 или, например, 0,5-5 мг/м2
Соединение в соответствии с настоящим изобретением может быть применимо локально в виде изолированной перфузии конечностей. Соединение в соответствии с настоящим изобретением также может быть применено топикально в виде крема, геля, лосьона или мази, либо в виде резервуарного или матричного пластыря, либо в виде системы активной трансдермальной доставки.
Эффективная доза является дозой, которая в течение курса терапии, который может, например, составлять 1 или несколько недель, например несколько курсов с 3-недельным циклом и недельном перерывом, и которая позволяет достичь положительного результата при лечении пролиферативного заболевания, т.е. позволяет снизить скорость прогрессии заболевания, прекратить прогрессию заболевания либо достичь регрессии или ремиссии.
Используемые фармацевтические композиции содержат терапевтически эффективное количество соединения в соответствии с вышеприведенным описанием либо его фармацевтически приемлемую соль или его иную форму с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами. Фраза фармацевтическая композиция относится к композиции, приемлемой для введения при медицинском применении. Следует учесть, что определение надлежащей лекарственной формы, размеров дозировки и способов введения в отношении конкретного пациента находится в пределах компетенции средних специалистов в фармацевтической и медицинской областях.
Композиции, приемлемые для парентерального введения, включают стерильный водный препарат соединения или композиции в соответствии с настоящим изобретением, который предпочтительно изотоничен крови реципиента. Рецептура указанного водного препарата может быть составлена в соответствии с известными методами с использованием приемлемых носителей или разбавителей, которые могут включать буферный раствор.
При осуществлении совместной, или комбинированной терапии, описание которой более подробно приведено ниже, соединения и композиции в соответствии с настоящим изобретением могут вводиться
- 3 022061 одновременно с проведением химиотерапии или лучевой терапии, после или до их проведения в той степени, в какой химиотерапевтическое вещество или облучение сенсибилизирует систему к соединениям и композициям в соответствии с настоящим изобретением.
Настоящее изобретение также предусматривает использование соединений и композиций в качестве вещества, потенциирующего эффект химиотерапии с другими методами лечения. Термин химиопотенциирующее вещество относится к веществу, действие которого направлено на повышение чувствительности организма, тканей или клеток к химическому соединению или относится к лечению, а именно химиотерапевтическим веществам или химиопрепаратам или к лучевой терапии. Таким образом, соединения и композиции в соответствии с настоящим изобретением могут быть использованы для ингибирования роста опухоли ίη νίνο путем их введения в сочетании с биологическим или химиотерапевтическим веществом либо путем их использования в сочетании с химиолучевой терапией. При таком применении введение соединений и композиций в соответствии с настоящим изобретением может быть проведено до времени и в течение достаточного периода времени для того, чтобы вызвать сенсибилизацию участка, подвергаемого лечению. В другом случае соединения и композиции в соответствии с настоящим изобретением могут быть использованы одновременно с лучевой терапией и(или) дополнительными противораковыми химическими веществами (ниже). Такие системы позволяют избежать многократного введения соединений и композиций в соответствии с настоящим изобретением, тем самым повышая удобство для субъекта и врача и могут являться исключительно приемлемыми для определенных композиций в соответствии с настоящим изобретением.
Биологические и химиотерапевтические/антинеопластические вещества и облучение вызывают апоптоз путем активирования внешнего или внутреннего апоптотического пути и ввиду того, что соединения и композиции в соответствии с настоящим изобретением высвобождают антагонисты апоптотических белков (ΙΑΡδ) и, таким образом, устраняют блокирование апоптоза, сочетание химиотерапевтических/антинеопластических веществ и облучение с соединениями и композициями в соответствии с настоящим изобретением должно обеспечивать аддитивное действие или синергизм для ускорения апоптоза.
Сочетание соединения в соответствии с настоящим изобретением и биологического/ химиотерапевтического/антинеопластического вещества и(или) лучевой терапии любого типа, активирующей внешний или внутренний путь, позволяет создать более эффективный способ разрушения опухолевых клеток. Соединение в соответствии с настоящим изобретением взаимодействует с ΙΛΡ'δ, таким как ΧΙΑΡ, с1АР-1, с1АР-2, МЬ-ΙΑΡ и т.д., и удаляет ΙΑΡ-опосредованный блок апоптоза. Большинство химиотерапевтических/антинеопластических веществ и(или) лучевая терапия убивают активно делящиеся клетки путем активирования внутреннего апоптотического пути, что в результате приводит к апоптозу и гибели клеток. Биологические противоопухолевые вещества, такие как ТКАЮ (ΤΝΡ-зависимый лиганд, индуцирующий апоптоз), активируют внешние апоптотические пути. Как описано более подробно ниже, примеры осуществления настоящего изобретения предусматривают создание сочетаний соединения в соответствии с настоящим изобретением и биологического или химиотерапевтического/ антинеопластического вещества и(или) облучения, что обеспечивает синергетическое действие против нежелательной клеточной пролиферации. Такое синергетическое действие между соединением в соответствии с настоящим изобретением и биологическим или химиотерапевтическим/антинеопластическим веществом и(или) лучевой терапией позволяет повысить эффективность биологического или химиотерапевтического/антинеопластического вещества и(или) лучевой терапии. Это позволяет повысить эффективность используемых в настоящее время биологических или химиотерапевтических/антинеопластических веществ или лучевой терапии, тем самым позволяя повысить процент опухолей, реагирующих на терапию, повысить ремиссию опухолей и потенциально снизить дозу биологического или химиотерапевтического/антинеопластического вещества, необходимого для лечения опухоли, тем самым при этом обеспечивая использование более переносимых доз биологического или химиотерапевтического/антинеопластического вещества и(или) облучения.
В примере осуществления в соответствии с настоящим изобретением пациент проходит лечение путем введения соединения или фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением в период времени, когда пациент подвержен одновременному или предшествующему облучению или химиотерапии для лечения неопролиферативной патологии опухоли, такой как, без ограничения, рак мочевого пузыря, рак груди, рак простаты, рак легких, рак поджелудочной железы, рак желудка, рак толстой кишки, рак яичников, рак почек, гепатома, меланома, лимфома, саркома и их сочетаний.
В другом примере осуществления настоящего изобретения соединение или композиция в соответствии с настоящим изобретением может быть введена в сочетании с биологической или химиотерапевтической терапией и(или) для использования в сочетании с лучевой терапией, иммунотерапией и(или) фотодинамической терапией, тем самым способствуя апоптозу и повышая эффективность химиотерапии, лучевой терапии, иммунотерапии и(или) фотодинамической терапии.
Примеры осуществления настоящего изобретения также включают способ лечения пациента, пораженного раком, путем одновременного или совместного введения биологического или химиотерапевтического вещества. Такие биологические и химиотерапевтические вещества включают, без ограничения,
- 4 022061 химиотерапевтические вещества, описание которых приведено в работе Мобет РЬагтасо1оду \\ί11ι С1т1са1 ЛррНсайоик, δίχΐΗ Εάίίίοη, Спнд & δηΐ/ек СНр1. 56, рд. 639-656 (2004), инкорпорированной в настоящее описание путем отсылки. Химиотерапевтическое вещество может представлять собой без ограничения алкилирующие вещества, антиметаболиты, противоопухолевые антибиотики, продукты растительного происхождения, такие как таксаны, энзимы, гормональные вещества, различные вещества, такие как цисплатин, моноклональные антитела, глюкокортикоиды, митотические ингибиторы, ингибиторы топоизомеразы I, ингибиторы топоизомеразы II, иммуномодулирующие вещества, такие как интерфероны, факторы клеточного роста, цитокины и нестероидные противовоспалительные соединения (ΙΝδΑΙΌ), факторы клеточного роста и ингибиторы киназы. Другие приемлемые классификации для химиотерапевтических веществ включают митотические ингибиторы и антиэстрогенные вещества.
Конкретные примеры приемлемых биологических и химиотерапевтических веществ включают без ограничения цисплатин, кармустин (ΒСNυ), 5-фторурацил (5-РИ), цитарабин (Ага-С), гемцитабин, метотрексат, даунорубицин, доксорубицин, дексаметазон, топотекан, этопозид, паклитаксел, винкристин, тамоксифен, ΤΝΡ-α, ТКА1Ь и иные члены, т.е. кроме ТКА1Ь и ΤΝΡ-α, суперсемейства молекул ΤΝΡ, интерферон (в его как α-, так и β-формах), талидомид, производные талидомида, такие как леналидомид, мелфалан и ингибиторы РАРР. Другие конкретные примеры приемлемых химиотерапевтических веществ включают хлорметины, такие как циклофосфамид, алкилсульфонаты, нитрозомочевина, этиленимины, триазены, фолатные антагонисты, пуриновые аналоги, пиримидиновые аналоги, антрациклины, блеомицины, митомицины, дактиномицины, пликамицин, алкалоиды винка, эпиподофиллотоксины, таксаны, глюкокортикоиды, Ь-аспарагиназа, эстрогены, эндрогены, прогестины, лютеинизирующие гормоны, ацетат октреотида, гидроксимочевина, прокарбазин, митотан, гексаметилмеламин, карбоплатин, митоксантрон, моноклональные антитела, левамизол, интерфероны, интерлейкины, филграстим и сарграмостим.
Другой пример настоящего изобретения относится к использованию соединения или композиции в соответствии с настоящим изобретением в сочетании с ингибиторами топоизомеразы для потенциирования их индуцирующего апоптоз эффекта. Ингибиторы топоизомеразы ингибируют ДНК-репликацию и репарацию, тем самым способствуя апоптозу, и указанные ингибиторы используются в качестве химиотермотерапевтических веществ. Ингибиторы топоизомеразы вызывают повреждение ДНК путем ингибирования энзимов, которые необходимы в процессе ДНК репарации. Таким образом, экспорт белка 8тас из митохондриа в клеточный цитазол спровоцирован повреждением ДНК, вызванным ингибиторами топоизомеразы. Предусматривается, что ингибиторы топоизомеразы как типа I (камптотецин, топотекан, δΝ-38 (активный метаболит иринотекана)), так и типа II (этопозид) продемонстрируют сильный синергизм с соединениями в соответствии с настоящим изобретением. Дополнительные примеры веществ, ингибирующих топоизомеразу, которые также могут быть использованы, включают без ограничения иринотекан, топотекан, этопозид, амсакрин, экзатекан, гиматекан и т.д. Другие ингибиторы топоизомеразы включают, например, аклациномицин А, камптотецин, даунорубицин, доксорубицин, эллиптицин, эпирубицин и митаксантрон.
Другой пример осуществления настоящего изобретения относится к использованию соединения или композиции в соответствии с настоящим изобретением в сочетании с нестероидными противовоспалительными препаратами (ΝδΑΓΌδ).
В другом примере осуществления настоящего изобретения химиотерапевтическое/ антинеопластическое вещество, предназначенное для использования в сочетании с соединениями и композициями в соответствии с настоящим изобретением, может представлять собой содержащее платину соединение. В одном примере настоящего изобретение содержащим платину соединением является цисплатин. Цисплатин способен синергировать с соединением в соответствии с настоящим изобретением и потенциировать ингибирование IΑР, такого как без ограничения XIΑР, ШАРП, с4АР-2, МЬ-ίΑΡ и т.д. В другом примере осуществления настоящего изобретения содержащим платину соединением является карбоплатин. Карбоплатин способен синергировать с соединением в соответствии с настоящим изобретением и потенциировать ингибирование IΑΡ, включая без ограничения XIΑΡ, ШАРП, с4АР-2, МЬПАР и т.д. В другом примере осуществления настоящего изобретения содержащим платину соединением является оксалиплатин. Оксалиплатин способен синергировать с соединением в соответствии с настоящим изобретением и потенциировать ингибирование IΑΡ, включая без ограничения XIΑΡ, ШАРП, с4АР-2, МЬ-[АР и т.д.
Химиотерапевтические препараты на основе платины относятся к общей группе ДНКмодифицирующих веществ. ДНК-модифицирующие вещества могут представлять собой любое высокореактивное химическое соединение, связывающееся с различными нуклеофильными группами в нуклеиновых кислотах и белках, и вызывать мутагенные, канцерогенные или цитотоксические эффекты. ДНКмодифицирующие вещества действуют на основе различных механизмов - нарушение функции ДНК и гибель клеток; повреждение ДНК/формирование поперечных мостиков или связей между атомами в ДНК; и индуцирование ошибочного спаривания нуклеотидов, ведущее к мутациям для достижения одного и того же конечного результата. Три неограничивающих примера содержащих платину ДНК- 5 022061 модицфицирующих веществ включают цисплатин, карбоплатин и оксалиплатин.
Еще в одном примере осуществления настоящего изобретения предусматривается терапевтическая комбинация или терапевтическое использование соединения или композиции в соответствии с настоящим изобретением в комбинации с ТКА1Ь, либо с антителами-агонистами ТКА1Ь, либо иными химическими или биологическими веществами, связывающимися с рецептором(ами) ТКА1Ь и активирующими их. Многие типы раковых клеток являются чувствительными к ТКА1Ь-индуцированному апоптозу, в то время как большинство нормальных клеток, по-видимому, проявляют резистентность к указанному действию ТКА1Ь. ТКА1Ь-резистентные клетки могут возникнуть за счет широкого разнообразия различных механизмов, включающих потерю рецептора, присутствие рецепторов-ловушек или сверхэкспрессию РЫР, которая конкурирует за связывание зимогенкаспазы-8 в процессе образования Э18С и ингибирования активированной каспазы-3 и(или) каспазы-9 Х1АР. При резистентности в отношении ТКА1Ь соединение или композиция в соответствии с настоящим изобретением могут повысить чувствительность опухолевых клеток к ТКА1Ь, вызывая повышенную гибель клеток, клинические корреляции которой, повидимому, заключаются в повышенной апоптотической активности в ТКА1Ь-резистентных опухолях, улучшенном клиническом ответе, увеличенной длительности ответа и, в конечном счете, в повышенной выживаемости пациентов.
В другом примере осуществления настоящего изобретения соединение 15 вводят в сочетании с цитокином, например ΕΝΕα.
Соединения и композиции в соответствии с настоящим изобретением также могут быть использованы для повышения эффективности лучевой терапии (или радиотерапии), т.е. медицинского использования ионизирующей радиации как части раковой терапии для борьбы с клетками злокачественных опухолей. Несмотря на то, что радиотерапию нередко используют как часть радикального лечения, в некоторых случаях ее используют для проведения паллиативного лечения, когда излечивание является невозможным, и цель заключается в облегчении симптомов. Радиотерапию обычно используют для лечения опухолей. Она может быть использована в качестве первичной терапии. Также общепринятой практикой является сочетание радиотерапии с хирургией и(или) химиотерапией. Наиболее распространенными опухолями, лечение которых проводится с использованием радиотерапии, являются рак молочной железы, рак простаты, рак прямой кишки, рак головы и шеи, гинекологические злокачественные опухоли, рак мочевого пузыря и лимфома. Лучевую терапию обычно применяют для воздействия исключительно на локализованный участок, пораженный злокачественной опухолью. Нередко поля облучения также включают дренирующие лимфатические узлы. Возможно проведение, однако в исключительно редких случаях, лучевой терапии всего тела или всей поверхности кожи. Лучевую терапию обычно проводят ежедневно до 35-38 фракций (суточная доза является фракцией). Облучение такими небольшими частыми дозами позволяет здоровым клеткам продолжить рост, устранить повреждение, нанесенное облучением. Три основные раздела радиотерапии включают дистанционную лучевую терапию, или телетерапию, брахитерапию, или радиотерапию с введением источника излучения в капсуле внутрь поражённого органа и радиотерапию с введением источника излучения внутрь поражённого органа путем инъецирования или приема вовнутрь, все из которых являются приемлемыми примерами протокола лечения в соответствии с настоящим изобретением. Различия заключаются в размещении источника излучения; внешний источник излучения располагают снаружи тела, в то время как закрытый и незакрытый источник радиотерапии содержит радиоактивный материал, доставляемый вовнутрь организма. Закрытые источники брахитерапии обычно извлекают после проведения курса лечения, в то время как незакрытые источники инъецируются в организм пациента.
Соединение 15 способно образовывать фармацевтически приемлемые соли, в том числе без ограничения соли присоединения кислоты и(или) соли присоединения основания. Такие соли включены во все аспекты настоящего изобретения.
Предусматривается, что настоящее изобретение охватывает соединение 15, синтезируемое ίη νίίτο с использованием лабораторных методов, таких методов, которые хорошо известны химикам-синтетикам, либо синтезируемое с использованием способов ίη νίνο, например, путем метаболизма, ферментации, гидролиза и т.д. Также предусматривается, что соединение в соответствии с настоящим изобретением может быть синтезировано путем сочетания методов ίη νίίτο и ίη νίνο.
Настоящее изобретение также включает изотопически обогащенные соединения, являющиеся идентичными соединению 15, за исключением того факта, что один или несколько атомов заменены атомом, имеющим атомную массу или массовое число, отличающееся от атомной массы или массового числа, обычно встречающегося в природе. Примеры изотопов, которые могут быть включены в соединение в соответствии с настоящим изобретением, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, фтора и хлора, такие как 2Н, 3Н,13С, 14С, 15Ν, 16О, 17О, 31Р, 32Р, 35δ, 18Ε и 36С1. Кроме того, предусматривается замещение более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий, т.е. 2Н. Изотопически обогащенные соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть обычно получены путем замещения неизотопически обогащенного реагента общедоступным изотопически меченым реагентом. Например, включение дейтерия может быть достигнуто путем замещения боргидрата натрия боргидратом ά4натрия либо путем замены йодметана й3-йодметаном. Репрезентативные примеры конкретных дейтери- 6 022061 рованных аналогов и их препаратов приведены в примере 1.
Соединение 15 в соответствии с настоящим изобретением может существовать в несольватных, а также сольватных формах, в том числе в гидратных формах. Кроме того, соединение 15 в соответствии с настоящим изобретением может существовать в различных твердых состояниях, в том числе в кристаллической, полукристаллической и аморфной форме (некристаллической форме) и в форме клатратов, пролекарств, полиморфов, биогидролизуемых сложных эфиров, рацемических смесей, нерацемических смесей, либо в виде очищенных стереоизомеров, включая без ограничения оптически чистые энантиомеры и диастереомеры. В целом, все из указанных и иных таких форм предусматривается включить в объем термина соединение 15.
Ссылки на соединение 15 и на соединение в соответствии с настоящим изобретением и иные аналогичные фразы в настоящем описании изобретения и в формуле изобретения включают не только соединение формулы (I), но и фармацевтически приемлемые соли соединения 15, а также различные формы указанного соединения или его соли, такие как формы соединения или его соли, описание которых приведено выше или ниже.
В дополнительных примерах осуществления настоящее изобретение предусматривает создание соединений, используемых в качестве промежуточных соединений при синтезировании соединения 15, а также в процессах получения таких промежуточных соединений и соединений 15. Например, в таких примерах осуществления настоящее изобретение предусматривает создание соединений, приведенных в примерах ниже, таких как соединения 9, 10, 11, 12, 13, 14, и изотопически обогащенных соединений, таких как соединения 18-32. Одним таким примером осуществления изобретения является соединение 15, в котором заместитель 4-ОН на пирролидиновой части защищен защитной группой. Иллюстративной защитной группой является ацетильная группа, проиллюстрированная в соединениях 11-14 ниже. Другие эффективные защитные группы очевидны для специалиста в данной области техники, и они включают, например, бензоильную, бензильную, триметилсилильную и трифенилметильную группы. Защитную группу удаляют, например, путем обеспечения взаимодействия между защищенным промежуточным соединением и кислотой или основанием, как показано в схемах XIII и XIV ниже. Таким образом, изобретение предусматривает создание изобретения, имеющего структуру соединения 15, а также защищенного вариантами соединения 15, такими как соединения 13 и 14, в которых Ν-концы защищены карбаматными частями, и(или) свободные гидроксильные группы защищены как сложные эфиры таких соединений, при этом на такие соединения в настоящем описании называются как защищенное соединение 15. Настоящее изобретение дополнительно включает этап снятия защиты с защищенного соединения 15 путем взаимодействия защищенного соединения 15 с кислотой или основанием, в результате чего происходит удаление защитной группы и получение соединения 15. Изотопически обогащенные соединения в соответствии с настоящим изобретением включают дейтерированные формы соединения 15, такие как соединения 20, 29 и 32. Защищенные формы указанных соединений, например, соединений 19, 28 и 31 также включены в объем настоящего изобретения.
Примеры
Нижеприведенные препараты и схемы иллюстрируют синтез соединений в соответствии с настоящим изобретением. Аббревиатуры, используемые во всех указанных схемах и в заявке в целом, определены в нижеприведенной таблице:
- 7 022061
АББРЕВИАТУРА ЗНАЧЕНИЕ АББРЕВИАТУРА ЗНАЧЕНИЕ
АСЫ Ацетонитрил ΝΜΡ Ν-метилпирролидинон
АСгО Уксусный ангидрид РНСОС1 Бензоил хлорид
Ο>ζηΖ Бензилоксикарбонил ΜΑϋ Диизопропил азодикарбоксил ат
Вое и/или Ьос Трет-бутил окси карбон ил ШВАБ Диизобутил алюминий гидрид
ТНР Тетрагидрофуран ОМАР 4-диметиламино пиридин
осм Дихлорметан ДМФ Диметилформамид
ϋΕ>0 2.3- дихлор-5,6*диииано- 1.4- бензохинон ЦМЗО Диметил сульфоксид
тСРВА 3-хлорпербензойная кислота ТГА Трифторуксусная кислота
СЬг-С1 Бензилоксикарбонил хлорид ТРАА Трифторуксусный ангидрид
Нех Гексаны НОАс или АсОН Уксусная кислота
НРЬС Высокоэффективная жидкостная хроматография ϋΙΡΕΑ Диизопропилэтиламин
тьс Тонкопленочная хроматография ΝΜΜ Λ'-м етилморфолин
ЕЮАс Этилацетат N05 /У-хлорсукцинимид
РЬ Фенил ТЕА (Ε13Ν) Триэтиламин
идти 2-(7-аза-1 Н-бензотриазоя1-ил )-1,1,3,3тетраметилу ро ний гексафторфосфат М$С1 Метан-сульфонил хлорид
Ме Метил* Е1 Этил
/Рг Изопропил гВи или тиретм-Ви /ярст-бутил
сРг Циклопропил сНех Циклогексил
(2й-ЕЮМе) и (или) Р-МеСНОМе .Ме м*— ο/νχ (2й-ЕЮН)и (или) Д-МеСНОН Мй^, ^пн Λ/ΤΛ
ТВАР Т етр абутиламмоний фторид М5С1 Метансульфонил хлорид
ОМ5 Метансульфонилокси ОТ5 -О-8О;-РЬ-Ме
ТВЦМ5С1 или ТВ5С1 Трет-бутил-диметил-силил хлорид ОТВ5 Трет-бутил-диметил- снпанилокси
рьэр Трифенил фосфин Ас О г -5—С—Ме Ацетил ( ν )
«-Ви Нормальный бутил ОМА Димегиламин
&\ует[О] Окисление но Сверну нта Реакция ХорнераУэдсворта-Эммонса
ТВА-С1 Тетра-я-бутиламмоний хлорид эмз Диметилсульф ид
ΝΡ-НРЬС Высокоэффективная жидкостная хроматография нормальными фазами Кислота Мелдрума 2,2-диметил-1,3-диоксан4,6-дион
ЕРС1 Ν-3- (диметнламинопропил)Ν’-этилжарбодннмид гидрохлорид 1-этил-3-(3Диметиламинопропил)кар бодцимид-НС1 Имид. Имидазол
Е12О Этиленоксид (Ά) НОВТилиНВТ Гидрокснбензотриазол
ТЕЗ Триэтилсилая ВТ Комнатная температура
ΜβΝΟ2 Нитрометан МеОН Метанол
ЕЮН Этанол №ОАс Ацетат натрия
ϋΟΕ или ЕЭС Дихлорэтан, этиленди хлорид С1СОгМе Этил хлорформат
КаНМО5 Гексаметилдиснлазид натрия или бие(триметилсилил)амнц натрия ТВ8С1 Трет-бутил-диметилсиланил хлорид
Вос-СЬё-ОН (Вос-Ь- циклоге кс илглинии) у г 0 СЬг-К(Ме)А1а-ОН 2-К(Ме)А1а-ОН
Вос-М(Ме)А1д-ОН Ме ΥϊΥ к Вос-Т1е-ОН ^Α^γ0
Вос-АЪи-ОН Вос-Уа1-ОН
Вос-Зег-ОН СЬг-5ег(1Ви)-ОН Ο'-ΓΥ
Вос-5ег(Ме)-ОН .ОМе ааа^ о СЬг-ТЬг(1Ви)-ОН οΆ
- 8 022061
Вос-ТЬг(1Ви)-ОН Вос-ТЬг-ОН
Вос-ТЫ<Ме)-ОН ф7лойм2 Фунты на кв. дюйм (манометр)
И час ШОМе Метоксид натрия
Пример 1. Синтез.
Схема I
2
1-Бензил эфир 4-(трет-бутилдиметилсиланилокси)пирролидин-1,2-дикарбоновой кислоты (2).
Раствор Ζ-Нур-ОН (1, 300 г, 1,13 моль), ТЕА (395 мл, 2,83 моль) и ΌΒυ (17,2 г, 1,13 моль) в ΌΜΡ (1,25 л) перемешивали на холодной водяной бане, при этом медленно добавляли суспензию ТВ8-С1 (188 г, 1,24 моль) в ΌΜΡ (270 мл) при 21-26°С [примечание: умеренно экзотермическая реакция]. Полученную жидкую суспензию перемешивали в течение 22 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждали до 2°С и быстро охлаждали водой (1,54 л) при <26°С [примечание: значение рН водного слоя составляло 8,5-9,0]. Добавляли МТВЕ (3 л) и смесь подкисляли до значения рН 3-4 концентрированной НС1 (168 г) при 17-19°С. Органический слой отделяли и промывали водой (2 х 1,5 л). Органический слой концентрировали под вакуумом и высушивали путем дополнительной дистилляции МТВЕ. Добавляли толуол (2 х 500 мл), дистиллировали для удаления влаги и получали 603 г соединения 2 в виде масла светло-желтого цвета [примечание: содержание воды по методу Карла Фишера составляло 508 ррт]. Путем сушки получали небольшой образец соединения 2 в виде твердого вещества, конечный вес соединения 2 составил 412 г (выход - 96%, без учета поправки на чистоту).
!Н ЯМР (300 МГц, СССТ): δ 7.34 (т, 3Н), 7.29 (т, 2Н), 5.24-5.11 (т, 2Н), 4.52 (т, 1Н), 4.43 (т, 1Н), 3.64-3.42 (т, 2Н), 2.27-2.09 (т, 2Н), 0.85 (5, 9Н), 0.06 (5, 3Н), 0.04 (5, 3Н) ррт; 13С ЯМР (75 МГц, й6ΌΜ8Ο), смесь ротамеров: δ 178.7, 178.4, 159.3, 158.9, 141.9, 141.8, 133.4, 133.3, 132.8, 132.6, 132.3, 131.9,
75.3, 74.6, 71.0, 71.0, 62.8, 62.3, 158.9, 141.9, 141.8, 133.4, 133.3, 132.8, 132.6, 132.3, 131.9, 75.3, 74.6, 71.0, 71.0, 62.8, 62.3, 60.1, 59.7, 44.4, 43.4, 30.6, 30.6, 22.6, 22.6, 0.1, 0.0 ррт. Масс-спектр (Е81), отношение массы к заряду 379.5 [(М)+; рассчитано для С^Н^ЫОзБг 379.5].
Бензил эфир 4-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-2-(6-фтор-1Н-индол-3-карбонил)пирролидин-1карбоновой кислоты (3).
Ζ-Нур(ΟТΒ§)-ΟН (2, 55,5 г, 145 ммоль) растворяли в толуоле (265 мл). Добавляли ΌΜΡ (0,1 мл) и оксалил хлорид (22,4 г, 174 ммоль) при комнатной температуре. Через 2-3 ч кипение прекращалось. Через 4 ч смесь концентрировали под вакуумом (баня при 65°С, приблизительно 30 мин) и получали 95 г раствора светло-желтого цвета, который по результатам 'Н ЯМР-анализа был определен как хлорангидрид.
6-Фториндол (39,2 г, 290 ммоль) растворяли в безводном хлорбензоле (300 мл) и толуоле (200 мл) и раствор охлаждали до -4°С с использованием ледяной/ацетоновой бани. Раствор 3М ΕΙΜ§Βγ в диэтиловом эфире (101 г, 294 ммоль) добавляли в течение 31 мин при <2,5°С, в результате чего получали раствор слабо-янтарного цвета. Через 30 мин добавляли раствор хлорангидрида/толуола (см. выше) в течение 45 мин при <2°С. Реакционную смесь выдерживали на холоде в течение 1 ч, затем происходил медленный нагрев смеси. Через приблизительно 4 ч (10,6°С) реакционную смесь быстро охлаждали ледяным НОАс (9,0 г, экзотермическая реакция до 17,5°С) и затем водой (экзотермическая реакция). Добавляли воду (200 мл) и ЕЮАе (300 мл) и органический слой отделяли и промывали водой (100 мл, медленное отделение). Органический слой концентрировали под вакуумом и получали 227 г соединения 3 в виде масла
- 9 022061 янтарного цвета, которое использовали без дальнейшей очистки.
'II ЯМР (300 МГц, СЭС13), ~2:1 смесь ротамеров: δ 9.38 (т, 0.7Н), 8.58 (т, 0.3Н), 8.35 (арр. άά, 1 =
5.2, 8.2 Гц, 0.3Н), 8.03 (арр. άά, 1 = 5.2, 8.2 Гц, 0.7Н), 7.74 (ά, 1 = 2.9 Гц, 0.7Н), 7.66 (ά, 1 = 2.9 Гц, 0.3Н), 7.38-7.32 (т, 5Н), 7.07 (т, 1Н), 6.95 (т, 1Н), 6.85 (т, 1Н), 5.26-4.92 (т, 3Н), 4.54 (т, 1Н), 3.80 (арр. άΐ, 1 = 5.2, 11.1 Гц, 1Н), 3.61 (арр. ά, 1 = 11.1 Гц, 0.3Н), 3.55 (арр. ά, 1 = 11.1 Гц, 0.7Н), 2.25-2.07 (т, 2Н), 0.88 (к, 9Н), 0.06 (к, 3Н), 0.00 (к, 3Н) ррт; 13С ЯМР (75 МГц, ά6-ΌΜδΟ), смесь ротамеров: δ 193.4, 193.0, 159.3 (ά, 1СР = 235.5 Гц), 153.9 (ά, 1СР = 16.2 Гц), 136.7, 136.8 (ά, 1СР = 34.0 Гц), 134.6, 128.3, 127.8, 127.2, 126.6,
122.4, 113.7 (ά, 1СР = 13.5 Гц), 110.2 (ά, 1СР = 20.2 Гц), 98.5 (ά, 1СР = 25.4 Гц), 70.6, 69.8, 65.8, 65.8, 60.6,
60.3, 55.5, 55.0, 25.7, 25.6, 17.7, 17.7, -4.8, -4.9 ррт. Масс-спектр (ΕδΙ), отношение массы к заряду 518.9 [[(М-Н)+Ыа]+; рассчитано для С27Н32РЫ2О^1Ма: 518.6].
Бензиловый эфир 2-(6-фтор-1 Н-индол-3-карбонил)-4-гидроксипирролидин-1-карбоновой кислоты (4).
К раствору, содержащему соединение 3 (227 г) в ТНР (600 мл), добавляли 1М ΤΒΆΡ в ТНР (160 мл) при комнатной температуре. Через 9 ч добавляли еще 20 мл раствора 1М ТВАР/ТНР. Через приблизительно 48 ч реакционную смесь концентрировали под вакуумом и затем повторно растворяли в ЕЮАс (600 мл). Органический раствор промывали водой (310 мл) и продукт осаждался с образованием густой суспензии, которую затем (медленно) фильтровали. Твердые вещества промывали ЕЮАс (165 мл порциями), высушивали и получали 43 г соединения 4. Комбинированный фильтрат концентрировали под вакуумом для осаждения дополнительно 4,8 г соединения 4 после процесса сушки.
'Н ЯМР (300 МГц, ά6-ΌΜδΟ), смесь ротамеров: δ 12.08 (Ьг к, 1Н), 8.43 (ά, 1 = 10.5 Гц, 1Н), 8.16 (άάά, 1 = 5.4, 8.7, 14.1 Гц, 1Н), 7.36-7.31 (т, 2Н), 7.27 (арр. ά, 1 = 10.2 Гц, 1Н), 7.09-6.93 (т, 4Н), 5.24 (άΐ, 1 = 8.1, 15.6 Гц, 1Н), 5.14 (Ьг к, 1Н), 5.04 (арр. ά, 1 = 6.4 Гц, 1Н), 4.90 (арр. άά, 1 = 13.4, 28.4 Гц, 1Н), 4.30 (Ьг к, 1Н), 3.58-3.43 (т, 2Н), 2.27 (т, 1Н), 1.93 (т, 1Н) ррт; 13С ЯМР (75 МГц, ά6-ΌΜδΟ), смесь ротамеров: δ 194.0, 193.6, 159.9 (ά, 1СР = 235.2 Гц), 154.6 (ά, 1СР = 9.6 Гц), 138.1, 137.5 (ά, 1СР = 26.9 Гц), 136.0, 129.0, 128.5, 128.1 (ά, 1СР = 40.0 Гц), 123.4, 123.3, 123.0, 122.9, 114.4 (ά, 1СР = 11.7 Гц), 110.6 (ά, 1СР = 23.7 Гц), 99.3 (ά, 1СР = 25.2 Гц), 69.5, 68.8, 66.4, 66.3, 61.4, 61.1, 56.2, 55.7 ррт. Масс-спектр (ΕδΙ), отношение массы к заряду 382.6 [(М)+; рассчитано для С^Н^РНЮ^ 382.3].
Бензиловый эфир 2-(6-фтор-1Н-индол-3-карбонил)-4-(4-нитробензоилокси)пирролидин-1карбоновой кислоты (5).
Раствор, содержащий 4 (51,1 г, 134 ммоль), 4-нитробензойную кислоту (27,9 г, 167 ммоль) и трифенилфосфин (48,9 г, 187 ммоль) в безводном ТНР (700 мл) и ЭМР (175 мл), охлаждали до 2°С. Добавляли ΌΙΑΌ (37,4 мл, 194 ммоль) в течение 1 ч при 2-3°С. Через 1 ч раствор нагревался до комнатной температуры. Через приблизительно 16 ч реакционную смесь концентрировали под вакуумом, добавляли МеОН (250 мл) и концентрировали до получения густой суспензии (322 г). Дополнительно добавляли МеОН (250 мл), раствор концентрировали под вакуумом и получали густую суспензию (420 г), которую охлаждали в ледяной бане. Через приблизительно 1,5 ч твердое вещество собирали на вакуумном фильтре и промывали охлажденным МеОН (190 мл). Продукт высушивали на воздухе на фильтре и получали 82,9 г (>100%) соединение 5 в виде твердого вещества светло-желтого цвета, которое использовали непосредственно в следующей реакции.
'II ЯМР (300 МГц, ά6-ΌΜδΟ), смесь ротамеров: δ 12.14 (Ьг к, 1Н), 8.47 (арр. ά, 1 = 6.6 Гц, 1Н), 8.298.21 (т, 3Н), 8.03 (άά, 1 = 2.7, 8.4 Гц, 2Н), 7.43-7.33 (т, 2Н), 7.28 (арр. άά, 1 = 2.1, 9.6 Гц, 1Н), 7.20-7.08 (т, 4Н), 5.55 (Ьг к, 1Н), 5.42 (άά, 1 = 8.4, 15.3 Гц, 1Н), 5.13 (άά, 1 = 12.6, 22.2 Гц, 1Н), 5.04 (к, 1Н), 3.99 (т, 1Н), 3.73 (ά, 1 = 12.3 Гц, 1Н), 2.91 (т, 1Н), 2.36 (т, 1Н) ррт; 13С ЯМР (75 ΜΤπ, ά6-ΌΜδΟ), смесь ротамеров: δ 192.9, 192.4, 164.2, 160.0 (ά, 1СР = 235.5 Гц), 154.5 (ά, 1СР = 12.0 Гц), 150.9, 137.5, 137.1 (ά, 1СР = 12.6 Гц), 135.6, 135.1, 131.3, 128.9 (ά, 1СР = 28.0 Гц), 128.5, 128.2, 128.1, 127.6, 124.2, 123.0, 113.5 (ά, 1СР = 8.5 Гц), 110.9 (ά, 1СР = 21.9 Гц), 99.1 (ά, 1СР = 25.5 Гц), 75.2, 74.3, 66.7, 66.5, 62.4, 62.1, 53.6, 53.0, 38.6, 37.6 ррт.
- 10 022061
Масс-спектр (ΕδΙ), отношение массы к заряду 531.8 [(М)+; рассчитано для СДЧСЮ-: 531.5].
Схема V
Бензиловый эфир 2-(6-фтор-1Н-индол-3-карбонил)-4-гидроксипирролидин-1-карбоновой кислоты (6).
К суспензии 5 (82,9 г) в ТНЕ (600 мл), МеОН (200 мл) и воде (100 мл) добавляли 50% водный раствор ΝαΟΗ (16,0 г, 200 ммоль) [примечание: экзотермическая реакция; повышение температуры с 23,7 до 25,9°С]. Через 2 ч добавляли ледяной НОАс (5,3 г) для регулирования значения рН до 7-8 [примечание: раствор оранжевого цвета изменился на раствор бледно-желтого цвета], реакционную смесь концентрировали под вакуумом. Добавляли воду (500 мл) и растворитель удаляли под вакуумом до получения густой суспензии. Твердое вещество собирали на вакуумном фильтре и промывали водой (400 мл по порциям). Твердое вещество высушивали в вакуумной печи при 55°С и получали 42,6 г (83%, 2 этапа) соединения 6 в виде твердого вещества серовато-белого цвета.
Ή ЯМР (300 МГц, ά6-ΌΜδΟ): δ 8.38 (ά, 1 = 11.1 Гц, 1Н), 8.14 (άάά, 1 = 5.7, 8.7, 14.1 Гц, 1Н), 7.357.29 (т, 2Н), 7.25 (арр. άά, 1 = 2.1, 9.9 Гц, 1Н), 7.10-6.95 (т, 4Н), 5.16-4.98 (т, 2Н), 4.90 (арр. ф 1 = 13.5, 25.8 Гц, 1Н), 4.26 (т, 1Н), 3.74 (арр. άάά, 1 = 6.3, 11.1, 18.3 Гц, 1Н), 3.22 (т, 1Н), 2.59 (т, 1Н), 1.73 (арр. άάά, 1 = 6.6, 12.9, 25.2 Гц, 1Н) ррт; 13С ЯМР (75 МГц, ά6-ΌΜδΟ): δ 193.8, 193.3, 160.0 (ά, 1СЕ = 235.2 Гц), 154.4 (ά, 1СЕ = 14.5 Гц), 137.5 (ά, 1СЕ = 26.0 Гц), 137.2 (ά, 1СЕ = 12.3 Гц), 129.0, 128.5, 128.2 (ά, 1СЕ = 35.4 Гц),
128.1, 127.4, 123.2, 123.1, 114.4 (ά, 1СЕ = 11.4 Гц), 110.8 (ά, 1СЕ = 23.7 Гц), 110.8 (ά, 1СЕ = 23.7 Гц), 99.0 (ά, 1СЕ = 25.8 Гц), 69.4, 68.6, 66.5, 66.4, 61.5, 61.2, 54.9, 54.6 ррт. Масс-спектр (ΕδΙ), отношение массы к заряду 383.8 [(М+Н)+; рассчитано для С21Н20Е^О4: 383.3].
Бензиловый эфир 2-(6-фтор-1Н-индол-3-илметил)-4-гидроксипирролидин-1-карбоновой кислоты (7).
К суспензии 6 (10,1 г, 26 ммоль) в безводном ТНЕ (200 мл) добавляли 2М Ь1ВН4 в ТНЕ (26,2 мл, 52 ммоль) в течение приблизительно 7 мин [примечание: экзотермическая реакция; повышение температуры с 21,5 до 28,2°С]. Через 2,5 ч раствор бледно-желтого цвета охлаждали до приблизительно 11°С и добавляли метансульфоновую кислоту (4,66 г, 48 ммоль) в течение приблизительно 4 мин [примечание: экзотермическая реакция; повышение температуры до 14,2°С].
Через 16 ч реакционную смесь охлаждали в ледяной бане и осторожно охлаждали водой (50 мл) [примечание: добавление воды вызвало экзотермическую реакцию и высвобождение большого количества газа]. После добавления воды значение рН регулировали до 1 с помощью концентрированной НС1 (1,9 г). Реакционную смесь концентрировали для удаления ТНЕ и водный раствор экстрагировали ЕЮАс (110 мл). Органический слой отделяли и промывали водой (2x50 мл) [примечание: окончательное значение рН составило приблизительно 5]. Органический раствор концентрировали под вакуумом и азеотропно высушивали, используя безводный ЕЮАс и получали 10,2 г соединения 7 в виде пены белого цвета [примечание: 87,7 А%, анализ методом ВЭЖХ].
Ή ЯМР (300 МГц, ά6-ΌΜδΟ), ~1:1 смесь ротамеров: δ 10.91 (арр. ά, 1 = 5.4 Гц, 1Н), 7.69 (άά, 1 = 6.0, 8.4 Гц, 0.5Н), 7.48-7.30 (т, 4.5Н), 7.13-7.07 (т, 3Н), 6.85 (арр. 1, 1 = 8.4 Гц, 0.5Н), 6.58 (арр. 1, 1 = 9.9 Гц, 0.5Н), 5.19-5.10 (т, 3Н), 4.25 (Ьг 5, 1Н), 4.03-3.96 (т, 1Н), 3.55 (άά, 1 =5.1, 11.4 Гц, 1Н), 3.29 (ά, 1 = 11.4 Гц, 1Н), 3.17-2.98 (т, 2Н), 1.79 (т, 2Н) ррт. 13С ЯМР (300 МГц, ά6-ΌΜδΟ), смесь ротамеров: δ 159.5 (ά, 1СЕ = 232.1 Гц), 159.4 (ά, 1СЕ = 232.3 Гц), 154.9, 137.7 (ά, 1СЕ = 36.6 Гц), 136.7 (ά, 1СЕ = 12.6 Гц), 136.6 (ά, 1СЕ = 12.9 Гц), 129.1, 129.1, 128.7, 128.6 (ά, 1СЕ = 26.3 Гц), 128.2, 125.0 (ά, 1СЕ = 21.4 Гц), 124.5, 124.3, 120.1 (ά, 1СЕ = 28.3 Гц), 120.0 (ά, 1СЕ = 28.6 Гц), 112.4 (ά, 1СЕ = 14.6 Гц), 107.4 (ά, 1СЕ = 24.3 Гц), 107.3 (ά, 1СЕ = 24.3 Гц), 69.9, 69.2, 67.1, 66.3, 58.7, 58.1, 56.1, 55.6, 38.3, 37.6, 31.2, 30.1 ррт. Масс-спектр (ΕδΙ), отношение массы к заряду 368.6 [(М)+; рассчитано для С21Н21ЕN2Οз: 368.4].
- 11 022061
Схема ΥΙΙ
Бензиловый эфир 4-ацетокси-2-(6-фтор-1Н-индол-3-илметил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (8).
К раствору, содержащему соединение 7 (4,7 г, 12,8 ммоль) и ΩΙΟΑΡ (81 мг, 0,66 ммоль) в ЭСМ (100 мл), добавляли уксусный ангидрид (2,6 г, 25,5 ммоль) при комнатной температуре. Через 16 ч реакционную смесь быстро охлаждали МеОН (приблизительно 3 мл) и последовательно промывали 10% водным раствором №-ьСО3, (50 мл), разбавленной НС1 (50 мл) и 10% водным раствором №-ьСО3, (50 мл). Органический раствор концентрировали под вакуумом и фильтровали через короткую колонку с силикагелем (приблизительно 25 г) [элюент: ЭСМ (200 мл) до 0,5% (объемное отношение) МеОН/ОСМ (80 мл) до 2% МеОН/ОСМ (100 мл) до 5% МеОН/ОСМ (100 мл)]. Содержащие продукт фракции комбинировали, концентрировали и получали 3,28 г (63%) соединения 8 в виде пены белого цвета [примечание: 94,3 А%, анализ методом высокоэффективной жидкостной хроматографии].
'Н ЯМР (300 МГц, СОС13), ~1:1 смесь ротамеров: δ 7.99 (т, 1Н), 7.75-6.61 (т, 9Н), 5.28 (т, 1Н), 5.20 (т, 2Н), 4.23 (т, 1Н), 3.82 (й1, 1 =5.4, 13.5 Гц, 1Н), 3.60 (арр. ΐ, 1 = 13.2 Гц, 1Н), 3.50 (й, 1 = 11.7 Гц, 0.5Н), 3.31 (й, 1 = 12.9 Гц, 0.5Н), 2.87 (й1, 1 = 5.1, 13.5 Гц, 1Н), 2.13 (в, 3Н), 2.01 (т, 2Н) ррт; 13С ЯМР (75 МГц, СОС13), ~1:1 смесь ротамеров: δ 170.8, 160.2 (1СР = 236.4 Гц), 155.2, 136.8, 136.6, 136.4, 128.9, 128.8, 128.5 (.1·.. = 24.3 Гц), 124.5 (1СР = 21.4 Гц), 123.0, 123.0, 120.0(1СР = 27.1 Гц), 119.9 (1СР = 26.0 Гц), 112.8 (1СР = 10.5 Гц), 108.2 СЬ = 24.3 Гц), 97.7 (1СР = 25.7 Гц), 74.0, 73.2, 67.9, 67.2, 58.5, 57.6, 53.4, 53.0, 35.4, 34.6,
30.8, 29.7, 21.5 ррт. Масс-спектр (ΕδΙ), отношение массы к заряду 410.6 [(М)+; рассчитано для С23Н23Р^О4: 410.4].
Схема ΥΙΙΙ
Бензиловый эфир 4-ацетокси-2-[3'-(4-ацетокси-1-бензилоксикарбонилпирролидин-2-илметил)-6,6'дифтор-1Н,1'Н-[2,2']бииндолил-3-илметил]пирролидин-1-карбоновой кислоты (9).
Раствор, содержащий соединение 8 (2,9 г, 7,1 ммоль) в ΕΐΌΑο (приблизительно 5 мл), охлаждали в ледяной бане и добавляли предварительно охлажденную ΤΡΑ (20,3 мл) в виде одной порции. Полученный раствор желтого цвета перемешивали при 2-4°С. Через 4,75 ч холодную реакционную смесь при постоянном перемешивании перелили (через канюлю) в предварительно охлажденную смесь ΕΐΌΑο (30 мл) и 25% водный раствор К2СО3 (80,7 г). Водный слой отделяли, экстрагировали ΕΐΌΑο (3x30 мл) и комбинированные органические экстракты промывали 10% водным раствором №-ьСО3 (30 г). Органический раствор концентрировали под вакуумом, азеотропно высушивали, используя безводный ΕΐΌΑο, и получали 2,95 г соединения диастереомеров индолилиндолина в виде пены желтого цвета, которую использовали непосредственно в следующей реакции. Масс-спектр (ΕδΙ), отношение массы к заряду 821.3 [(М)+; рассчитано для С46Н46Р2^О8: 820.9].
К раствору, содержащему диастереомеры индолилиндолина (2,95 г) в ΕΐΌΑ<; (30 мл), добавляли ЭЭО (885 мг, 3,9 ммоль) в виде однократной порции [примечание: экзотермическая реакция; повышение температуры с 26 до 31,6°С]. Через 3 ч реакционную смесь темно-оранжевого/коричневого цвета фильтровали через Се1йе® с последующим промыванием ΕΐΌΑο (50 мл) [примечание: вторую реакцию, проведенную при 0,5-ммольной шкале, комбинировали для выделения продукта реакции]. Фильтрат промывали 10% водным раствором №2СО3 (2 промывки: 74 г, затем 58 г). Органический слой концентрировали под вакуумом и получали 2,14 г соединения 9 в виде твердого вещества светло-коричневого цвета.
Слой СеШе® затем промывали ТНР (100 мл), который концентрировали под вакуумом и получали дополнительно 1,12 г соединения 9 в виде твердого вещества бежевого цвета. Комбинированные твердые вещества растворяли в изопропилацетате (ιΡγΑο. 50 мл). Раствор ίΡιΑα восстанавливали приблизительно до 20 мл и полученную суспензию нагревали до дефлегмирования, охлаждали до комнатной температуры и затем помещали в ледяную баню. Через 1 ч твердое вещество собирали путем вакуумного фильтрования, промывали ίΡιΑα (10 мл), высушивали в вакуумной печи и получали 2,13 г (65%, 2 этапа) соеди- 12 022061 нения 9 в виде твердого вещества бежевого цвета [примечание: ~100 А%, анализ методом высокоэффективной жидкостной хроматографии].
1Н ЯМР (300 МГц, СОС13): δ 11.29 (Ьг 5, 2Н), 7.57-7.36 (т, 14Н), 6.90 (арр. άί, I = 2.1, 9.3 Гц, 2Н), 5.39-5.30 (т, 6Н), 4.28 (ί, I = 9.0 Гц, 2Н), 3.84-3.73 (т, 4Н), 3.66 (ά, I = 13.2 Гц, 2Н), 3.40 (άά, I = 12.0, 14.4 Гц, 2Н), 2.31 (5, 6Н), 2.17 (т, 2Н), 2.05 (т, 2Н) ррт; 13С ЯМР (75 МГц, СПС13): δ 170.7, 161.9, 158.8,
156.3, 137.5, 137.3, 136.5, 128.9, 128.6, 128.5, 125.9, 118.8, 118.6, 108.8, 108.5, 108.3, 98.7, 98.3, 74.4, 68.0,
60.1, 53.5, 34.5, 28.9, 21.7 ррт. Масс-спектр (Ε8Ι), отношение массы к заряду 818.2 [(М)+; рассчитано для С46Н44Р2Ы4О8: 818.8].
Схема IX
5-[3'-(4-Ацетоксипирролидин-2-илметил)-6,6'-дифтор-1Н,1'Н-[2,2']бииндолил-3-илметил]пирролидин-3-ил эфир уксусной кислоты (10).
Суспензию, содержащую соединение 9 (35 г, 42,7 ммоль) в ЕЮАс/МеОН (1:1) (400 мл), распределяли по двум 500-мл колбам Парра (приблизительно по 200 мл в каждой) и помещали в них 10% Ρά-наугле (влажный, по 5000 мг в каждой, АИпсН®). Реакционную смесь подвергали воздействию давления до 50 фунтов/дюйм2 Н2 и встряхивали в течение 3 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой СеШе® и твердые вещества промывали ЕЮАс. Очищенный фильтрат концентрировали под вакуумом и получали 24 г соединения 10 в виде твердого вещества серовато-белого цвета, которое использовали непосредственно в следующей реакции.
Ίΐ ЯМР (300 МГц, СОС13): δ 13.10 (Ьг 5, 2Н), 7.45 (άά, I = 5.2, 8.9 Гц, 2Н), 7.03 (άά, I = 2.3, 9.8 Гц, 2Н), 6.85 (т, 2Н), 5.35 (т, 2Н), 3.71 (т, 2Н), 3.18-3.35 (т, 4Н), 2.90-3.14 (т, 4Н), 2.56 (т, 2Н), 2.00-2.10 (т, 2Н), 2.04 (5, 6Н), 1.80-1.92 (т, 2Н) ррт; 13С ЯМР (75 МГц, СПС13): δ 171.3, 161.7, 158.6, 136.1, 135.9,
130.5, 130.4, 125.4, 119.1, 118.9, 109.6, 108.0, 107.6, 97.6, 97.5, 75.1, 57.7, 51.6, 38.7, 32.8, 21.6 ррт. Массспектр (Ε8Ι), отношение массы к заряду 550.9 [(М)+; рассчитано для С30Н32Р2Ы4О4: 550.6].
5-(3'-[4-Ацетокси-1-(2-трет-бутоксикарбониламинобутирил)пирролидин-2-илметил]-6,6'-дифтор1Н,1'Н-[2,2']бииндолил-3-илметил}-1-(2-трет-бутоксикарбониламинобутирил)пирролидин-3-ил эфир уксусной кислоты (11).
К раствору, содержащему Вос-АЬи-ОН (20,4 г, 100 ммоль) и НАТи (42,0 г, 110 ммоль) в безводном ΝΜΡ (150 мл), при 0°С добавляли ΝΜΜ (16 мл, 150 ммоль) с последующим добавлением раствора соединения 10 (24 г, 42 ммоль) в ΝΜΡ (100 мл). Реакционную смесь медленно нагревали до комнатной температуры. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли МТВЕ (1000 мл) и гетерогенную смесь промывали водой (500 мл). Слои отделяли и органическая фаза образовывала гетерогенную суспензию. Добавляли МТВЕ (1000 мл) и ЕЮАс (500 мл) и уже однородный раствор последовательно промывали 1Ν НС1 (2x100 мл), насыщенным водным раствором NаНСО3 (2x100 мл), рассолом, высушивали над безводным №-128О4. фильтровали и концентрировали. Остаток растворяли в ОСМ/МеОН (соотношение 1:1) (600 мл) и ОСМ (приблизительно 200 мл) удаляли с помощью дистилляции при 50°С [примечание: наблюдалось выпадение незначительного количества осадка белого цвета]. Добавляли МеОН (200 мл) и удаляли дополнительный растворитель (приблизительно 200 мл) при 50°С. Гетерогенную смесь охлаждали при -5°С. Через 16 ч твердое вещество собирали методом вакуумной фильтрации и промывали холодным МеОН. Твердое вещество высушивали при низком вакууме и получали 32 г соединения 11 в виде твердо- 13 022061 го вещества серовато-белого цвета.
Ή ЯМР (300 МГц, СОС13), смесь ротамеров: δ 11.22 (Ьг 5, 2Н), 7.40 (άά, 1 = 5.1, 8.7 Гц, 2Н), 7.31 (ά, 1 = 9.3 Гц, 2Н), 6.76 (άά, 1 = 8.40, 8.40, 2Н), 6.26 (Ьг 5, 2Н), 5.44 (т, 2Н), 4.39 (άά, 1 = 7.5, 16.5 Гц, 2Н), 4.24 (т, 2Н), 4.15 (άά, 1 = 5.1, 12.9 Гц, 2Н), 3.79 (ά, 1 = 12.9 Гц, 2Н), 3.10-3.30 (т, 4Н), 2.32 (ά, 1 =14.7 Гц, 2Н), 2.24 (5, 6Н), 1.90 (т, 2Н), 1.74 (т, 2Н), 1.56 (5, 18Н), 0.99 (ί, 1 = 7.5 Гц, 6Н) ррт; 13С ЯМР (75 МГц, СПС13): δ 172.2, 170.4, 161.4, 158.3, 155.8, 137.0, 136.9, 128.6, 125.5, 118.9, 118.7, 108.6, 108.4, 108.1, 98.3, 98.0,
80.8, 74.7, 60.4, 53.8, 53.5, 34.1, 28.7, 28.6, 26.2, 21.5, 10.5 ррт. Масс-спектр (ΕδΙ), отношение массы к заряду 920.5 [(М)+; рассчитано для С48Н62Р2Ы6О10: 921.0].
5-{ 3'-[4-Ацетокси-1 -(2-аминобутирил)пирролидин-2-илметил] -6,6'-дифтор-1Н, 1 'Н-[2,2']бииндолил3-илметил)-1-(2-аминобутирил)пирролидин-3-ил эфир уксусной кислоты (12).
Раствор, содержащий соединение 11 (27,5 г, 30 ммоль) в ЭСМ (200 мл), охлаждали до 0°С. Добавляли ТРА (50 мл) и реакцию контролировали до тех пор, пока результаты ЖХ/МС анализа не указывали на полное преобразование соединения 11 в соединение 12 (приблизительно 3 ч). Растворитель удаляли под вакуумом и остаток темно-зеленого цвета растворяли в ЕЮАс (приблизительно 1 л). Раствор ЕЮАс осторожно вливали в смесь насыщенного водного раствора ЫаНСО3/льда/воды для нейтрализации остатка ТРА. Отделяли органическую фазу и дважды промывали насыщенным водным раствором ЫаНСО3 и затем один раз рассолом. Комбинированные водные слои обратимо экстрагировали ЕЮАс (2x100 мл) и комбинированные органические экстракты высушивали над безводным Ыа28О4, фильтровали, концентрировали и получали 22 г неочищенного соединения 12 в виде твердого вещества серовато-белого цвета.
1Н ЯМР (300 МГц, СПС13 + ά44^ΘΗ), смесь ротамеров: δ 11.62 (Ьг 5, 2Н), 7.48-7.62 (т, 4Н), 6.89 (άάά, 1 = 2.4, 9.3, 9.3 Гц, 2Н), 5.48 (άά, 1 = 4.5, 4.8 Гц, 2Н), 4.52 (άά, 1 = 9.3, 9.3 Гц, 2Н), 4.06 (άά, 1 = 4.8, 12.3 Гц, 2Н), 3.78 (ά, 1 = 12.3 Гц, 2Н), 3.54-3.70 (т, 4Н), 3.30-3.40 (т, 2Н), 2.33 (5, 6Н), 2.02-2.16 (т, 2Н), 1.70-1.96 (т, 4Н), 1.09 (ί, 1 = 7.2 Гц, 6Н) ррт; 13С ЯМР (75 МГц, СПС13 + άζ,-МеОН): δ 173.5, 170.9, 161.8,
158.6, 137.2, 137.1, 128.2, 128.1, 125.6, 118.7, 118.6, 108.6, 108.3, 108.0, 98.6, 98.1, 74.6, 60.1, 53.5, 33.5, 28.0, 21.4, 9.7 ррт. Масс-спектр (ΕδΙ), отношение массы к заряду 721.4 [(М)+; рассчитано для СЮ КЕХ О..: 720.8].
5-(3'-{4-Ацетокси-1-[2-(2-метил-(трет-бутоксикарбонил)аминопропиониламино)бутирил]пирролидин-2-илметил}-6,6'-дифтор-1Н,1'Н-[2,2']бииндолил-3-илметил)-1-[2-(2-метил-(трет-бутоксикарбонил) аминопропиониламино)бутирил]пирролидин-3-ил эфир уксусной кислоты (13).
К раствору, содержащему Вос-Ы(Ме)А1а-ОН (14,6 г, 72 ммоль) и НАТИ (30,4 г, 80 ммоль) в безводном ΝΜΡ (150 мл), при 0°С добавляли ΝΜΜ (12 мл, 105 ммоль) с последующим добавлением соединения 12 (30 ммоль) в ΝΜΡ (200 мл). Полученную смесь выдерживали до тех пор, пока она не нагревалась до комнатной температуры. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли диэтиловым эфиром (1 л), последовательно промывали водой (1 л), 1Ν НС1 (2x100 мл), насыщенным водным раствором NаНСО3 (2x100 мл), рассолом, высушивали над безводным №^О4, фильтровали, концентрировали и получали 33,5 г неочищенного соединения 13.
Неочищенное соединение 13 растворяли в ЕЮН (50 мл) и затем медленно добавляли в воду (1000 мл), активно перемешивая при 50°С, в результате чего получали осадок в виде вещества белого цвета. Гетерогенную смесь охлаждали до -5°С. Через 16 ч твердое вещество собирали методом вакуумной
- 14 022061 фильтрации и промывали водой. Влажное твердое вещество высушивали при низком вакууме при 50°С и получали 29,9 г соединения 13 в виде твердого вещества серовато-белого цвета.
'II ЯМР (300 МГц, СПС13): δ 11.57 (Ьг 5, 2Н), 7.40-7.60 (т, 4Н), 6.89 (т, 2Н), 5.50 (т, 2Н), 4.75 (т, 2Н), 4.67 (ц, 1 = 6.9 Гц, 2Н), 4.50 (ΐ, 1 = 9.6 Гц, 2Н), 4.20 (άά, 1 = 3.9, 12.3 Гц, 2Н), 3.85 (ά, 1 = 12.3 Гц, 2Н), 3.57 (Ьг ά, 1 = 13.5 Гц, 2Н), 3.34 (άά, 1 = 12.0, 13.8 Гц, 2Н), 2.89 (5, 6Н), 2.34 (5, 6Н), 2.10 (т, 2Н), 1.95 (άί, ί = 6.0, 13.8 Гц, 2Н), 1.79 (άί, ί = 7.2, 14.1 Гц, 2Н), 1.52 (5, 18Н), 1.39 (ά, ί = 7.2 Гц, 6Н), 1.03 (ί, ί = 7.2 Гц, 6Н) ррт; 13С ЯМР (75 МГц, СПС13): δ 174.0, 172.1, 171.9, 170.5, 161.8, 158.7, 137.5, 137.3, 128.4, 125.8, 118.7,
118.6, 108.8, 108.4, 108.1, 98.8, 98.5, 81.0, 74.6, 60.1, 54.0, 52.0, 33.7, 30.5, 28.6, 28.1, 25.9, 21.6, 14.0, 9.9 ррт. Масс-спектр (Εδί), отношение массы к заряду 1091.7 [(М)+; рассчитано для С56Н76Р2М8О10: 1091.2].
Схема Χίίί
5-(3'{4-Ацетокси-1-[2-(2-метиламинопропиониламино)бутирил]пирролидин-2-илметил}-6,6'дифтор-1Н, 1 'Н-[2,2']бииндолил-3 -илметил)-1-[2-(2-метиламинопропиониламино)бутирил]пирролидин-3 ил эфир уксусной кислоты (14).
Раствор, содержащий соединение 13 (28,5 г, 26 ммоль) в ΌΕΜ (150 мл), охлаждали до 0°С. Добавляли ТЕЛ (50 мл). Через 30 мин реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и контролировали до тех пор, пока результаты ЖХ/МС анализа не указывали на полное преобразование соединения 13 в соединение 14 (приблизительно 4 ч). Растворитель удаляли под вакуумом, остаток темно-зеленого цвета растворяли в ЕЮЛс (500 мл) и осторожно вливали в смесь водного раствора ЫаНСО3/льда. Водную фазу отделяли и обратимо экстрагировали ЕЮЛс (2x250 мл). Комбинированные органические экстракты промывали несколько раз насыщенным водным раствором ЫаНСО3, затем рассолом, высушивали над безводным Ыа28О4, фильтровали, концентрировали и получали 24 г соединения 14 в виде твердого вещества светло-желтого цвета.
Ίΐ ЯМР (300 МГц, СОС13): δ 11.66 (Ьг 5, 2Н), 8.16 (ά, ί = 8.4 Гц, 2Н), 7.52 (άά, ί = 2.1, 9.6 Гц, 2Н), 7.43 (άά, ί = 5.4, 8.4 Гц, 2Н), 6.83 (άάά, ί = 2.1, 9.0, 9.0 Гц, 2Н), 5.41 (άά, ί = 4.2, 4.5 Гц, 2Н), 4.64 (άά, ί =
7.8, 14.1 Гц, 2Н), 4.36 (Ьг ά, ί = 9.3, 9.6 Гц, 2Н), 4.13 (άά, ί = 4.8, 12.6 Гц, 2Н), 3.81 (ά, ί = 12.0 Гц, 2Н), 3.44 (ά, ί = 13.2 Гц, 2Н), 3.0-3.18 (т, 4Н), 2.50 (5, 6Н), 2.30 (5, 6Н), 2.15 (ά, ί = 14.4 Гц, 2Н), 1.90-2.08 (т, 2Н), 1.76-1.90 (т, 2Н), 1.33 (ά, ί = 7.2 Гц, 6Н), 1.08 (ί, ί = 7.2 Гц, 6Н) ррт; 13С ЯМР (75 МГц, СПС13): δ 175.3,
172.6, 170.4, 161.8, 137.5, 137.3, 128.4, 128.3, 125.9, 118.6, 118.5, 108.5, 108.1, 107.8, 98.7, 98.3, 74.5, 60.9, 59.9, 53.9, 51.3, 35.8, 33.6, 27.6, 26.2, 21.5, 20.2, 10.1 ррт. Масс-спектр (Εδί), отношение массы к заряду 891.6 [(М)+; рассчитано для С46Н60Е2Ы8О8: 891.0].
N-{1δ-[2Κ-(6,6'-дифтор-3'-{4δ-гидрокси-1-[2δ-(2δ-метиламинопропиониламино)бутирил]пирролидин-2Κ-илметил}-1Н,1'Н-[2,2']бииндолил-3-илметил)-4δ-гидроксипирролидин-1-карбонил]пропил}2δ-метиламинопропионамид (15).
К раствору, содержащему соединение 14 (24 г) в МеОН (200 мл), добавляли 1М ЫаОН (80 мл) при 0°С. Реакционную смесь дегазировали и выдерживали в атмосфере азота, обернув емкость алюминиевой фольгой. Ледяную баню удаляли. Через 60 мин удаляли МеОН под вакуумом, остаток разбавили водой (200 мл) и экстрагировали ЕЮЛс (500 мл). Водную фазу и обратимо экстрагировали ЕЮЛс (2x150 мл). Комбинированные органические экстракты промывали рассолом, высушивали над безводным Ыа^О4, фильтровали, концентрировали и получали 22,5 г неочищенного соединения 15 в виде твердого вещества светло-коричневого/желтого цвета.
Неочищенное соединение 15 (22,5 г) растворяли в МеОН (50 мл) и ЕЮЛс (200 мл). Объем сокращали (50%) путем дистилляции при пониженном давлении при 60°С, используя роторный испаритель. До- 15 022061 бавляли МТВЕ (300 мл) и непрозрачный раствор нагревали до 60°С. Через 30 мин раствор охлаждали до комнатной температуры и затем выдерживали при -5°С.
Через 16 ч твердое вещество собирали методом вакуумной фильтрации и промывали холодным 25% ЕЮЛс/МТВЕ, высушивали при низком вакууме при комнатной температуре и получали 16,6 г соединения 15 в виде твердого вещества серовато-белого цвета. Дополнительно получали 5,5 г соединения 15 из фильтрата путем удаления растворителя и вакуумной сушки.
'II ЯМР (300 МГц, СОС13): δ 11.74 (β, 2Н), 8.27 (ά, 1 = 8.7 Гц, 2Н), 7.71 (бб, 1 = 5.4, 8.4 Гц, 2Н), 7.55 (бб, 1 = 2.4, 9.6 Гц, 2Н), 6.88 (ббб, 1 = 2.4, 9.3, 9.3 Гц, 2Н), 4.62-4.78 (т, 4Н), 4.43 (бб, 1 = 9.3, 9.9 Гц, 2Н), 4.03 (бб, 1 = 4.8, 11.4 Гц, 2Н), 3.80 (б, 1 = 11.4 Гц, 2Н), 3.66 (бб, 1 = 2.7, 14.4 Гц, 2Н), 3.53 (бб, 1 = 11.4, 14.4 Гц, 2Н), 3.11 (ц, 1 = 6.9 Гц, 2Н), 2.56 (в, 6Н), 2.45 (т, 2Н), 2.19 (б, 1 = 14.4 Гц, 2Н), 1.76-2.10 (т, 6Н), 1.59 (Ьг 5, 2Н), 1.39 (б, 1 = 6.9 Гц, 6Н), 1.22-1.38 (т, 2Н), 1.07 (ΐ, 1 = 7.2 Гц, 6Н) ррт; 13С ЯМР (75 МГц, б6ΌΜδΟ): δ 175.2, 172.8, 161.6, 158.5, 137.3, 137.2, 128.4, 128.3, 126.4, 120.8, 120.6, 109.4, 108.7, 108.4, 98.4, 98.0, 70.8, 60.2, 59.9, 56.6, 51.8, 36.4, 35.3, 28.3, 25.6, 20.0, 10.6 ррт. Масс-спектр (Е§1), отношение массы к заряду 807.5 [(М)+; рассчитано для С42Н56Е2Н8О6: 806.9].
Схема XV
Ы-трет-бутоксикарбонил-Ν-((б3-метил)аланин (17).
К раствору Вос-А1а-ОН (16, 3,5 г, 18,5 ммоль) в безводном ТНЕ (50 мл) добавляли №Н (2,1 г, 60% в минеральном масле, 51,0 ммоль) при 0°С. Через 45 мин реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и затем нагревали до 45°С в течение еще 20 мин. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и добавляли б3-йодметан (10,0 г, 69,0 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре. Через 16 ч реакционную смесь быстро охлаждали водой и экстрагировали ЕЮАс. Органическую фазу отделяли и водный раствор подкисляли до достижения значения рН 3 1Ν НС1 и экстрагировали ЕЮАс. Органическую фазу промывали рассолом, высушивали над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали методом ОФ ВЭЖХ (колонка Эупатах 2 С18; 10-100% раствор АСН/вода, содержащий 0,1% НОАс, в течение 30 мин; 40 мл/мин) и получали соединение 17 (3,6 г, 94%) в виде твердого вещества белого цвета после лиофилизации.
'II ЯМР (300 МГц, б4-МеОН), смесь ротамеров: δ 4.80 (Ьг 5, 1Н), 4.67 (ц, 1 = 6.9 Гц, 0.5Н), 4.38 (ц, 1 = 6.9 Гц, 0.5Н), 1.36-1.52 (т, 12Н) ррт. Масс-спектр (Е§1), отношение массы к заряду 207.0 [(М+Н)+; рассчитано для СаН^О^Оу 207.2].
5-(3'-{4-Ацетокси-1-[2-(2-б3-метил-(трет-бутоксикарбонил)аминопропиониламино)бутирил]пирролидин-2-илметил}-6,6'-дифтор-1Н,1'Н-[2,2']бииндолил-3-илметил)-1-[2-(2-б3-метил-(трет-бутоксикарбонил)аминопропиониламино)бутирил]пирролидин-3-ил эфир уксусной кислоты (18).
К раствору, содержащему Вос-Жб3-Ме)А1а-ОН (17, 1,00 г, 4.83 ммоль) и НАТИ (2,00 г, 5,30 ммоль) в безводном ΝΜΡ (20 мл), при 0°С добавляли ΝΜΜ (0,8 мл, 7,20 ммоль) с последующим добавлением соединения 12 (неочищенное, 1,73 г, 2,40 ммоль) в ΝΜΡ (20 мл). Полученную смесь выдерживали до тех пор, пока она не нагревалась до комнатной температуры. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли диэтиловым эфиром (200 мл) и последовательно промывали водой (200 мл), ΙΝ НС1 (2x100 мл), насыщенным водным раствором №НСО3, (2x100 мл), рассолом, высушивали над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали методом ОФ ВЭЖХ (колонка Эупатах 2 С18; 10-100% раствор АСН/вода, содержащий 0,1% НОАс, в течение 30 мин; 40 мл/мин). Содержащие продукт фракции комбинировали, замораживали, лиофилизировали и получали 1,1 г соединения 18 (42%) в виде твердого вещества серовато-белого цвета.
'Н ЯМР (300 МГц, СОС13), смесь ротамеров: δ 11.56 (Ьг 5, 2Н), 7.56 (бб, 1 = 5.4, 8.7 Гц, 2Н), 7.52 (т, 2Н), 7.10 (Ьг 5, 2Н), 6.89 (ббб, 1 =2.1, 9.0, 9.0 Гц, 2Н), 5.47 (ΐ, 1 = 4.8 Гц, 2Н), 4.75 (Ьг 5, 2Н), 4.67 (д, 1 = 6.9
- 16 022061
Гц, 2Н), 4.50 (ί, 1 = 9.3 Гц, 2Н), 4.18 (йй, 1 = 4.2, 11.7 Гц, 2Н), 3.85 (й, 1 = 12.6 Гц, 2Н), 3.57 (йй, 1 = 2.1, 14.4 Гц, 2Н), 3.34 (йй, 1 = 12.0, 14.4 Гц, 2Н), 2.34 (5, 6Н), 2.29 (Ьг 5, 2Н), 2.10 (т, 2Н), 1.97 (т, 2Н), 1.79 (т, 2Н), 1.51 (5, 18Н), 1.39 (й, 1 = 6.9 Гц, 6Н), 1.03 (ί, ί = 7.5 Гц, 6Н) ррт. Масс-спектр (Е8Г), отношение массы к заряду 1097.7 [(М)+; рассчитано для С56Н70П6Р2М8О12: 1097.3].
5-(3'-{4-Ацетокси-1-[2-(2-й-метиламинопропиониламино)бутирил]пирролидин-2-илметил}-6,6'дифтор-1Н,1'Н-[2,2']бииндолил-3-илметил)-1-[2-(2-йз-метиламинопропиониламино)бутирил]пирролидин-3-ил эфир уксусной кислоты (19).
Раствор, содержащий соединение 18 (1,10 г, 1,00 ммоль) в ЭСМ (15 мл), охлаждали до 0°С. Добавляли ТЕЛ (5 мл). Через 30 мин реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и контролировали до тех пор, пока результаты ЖХ/МС анализа не указывали на полное преобразование соединения 18 в соединение 19 (приблизительно 4 ч). Растворитель удаляли под вакуумом и остаток темно-зеленого цвета растворяли в ЕЮЛс (100 мл) и осторожно вливали в смесь водного раствора ЫаНСО3/льда. Водную фазу отделяли и обратимо экстрагировали ЕЮЛс (2x50 мл). Комбинированные органические экстракты промывали несколько раз насыщенным водным раствором ЫаНСО3, затем рассолом, высушивали над безводным Ыа28О4, фильтровали, концентрировали и получали неочищенное соединение 19, которое использовали без дальнейшей очистки. Масс-спектр (ЕЗР), отношение массы к заряду 897.5 [(М)+; рассчитано для С46Н54П6Е2Ы8О8: 897.0].
Схема XVIII
Ы-{18-[2К-(6,6'-Дифтор-3'-{48-гидрокси-1-[28-(28-й3-метиламинопропиониламино)бутирил]пирролидин-2К-илметил}-1Н,1'Н-[2,2']бииндолил-3-илметил)-48-гидроксипирролидин-1-карбонил]пропил)28-й3-метиламинопропионамид (20).
К раствору, содержащему неочищенное соединение 19 (приблизительно 1,00 ммоль) в МеОН (20 мл), добавляли 1М ЫаОН (2 мл) при комнатной температуре. Через 35 мин МеОН удаляли под вакуумом, остаток разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали ЕЮЛс (2x50 мл). Комбинированные органические экстракты промывали рассолом и высушивали над безводным Ыа28О4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали методом ОФ ВЭЖХ (колонка Эупатах 2 С18; 10-100% раствор АСЫ/вода, содержащий 0,1% НОАс, в течение 30 мин; 40 мл/мин). Содержащие продукт фракции комбинировали, замораживали, лиофилизировали и получали 0,6 г соединения 20 (75%) в виде хлопьевидного твердого вещества белого цвета.
Ή ЯМР (300 МГц, С1ХСХ). смесь ротамеров: δ 11.86 (5, 2Н), 7.91 (й, 1 = 7.8 Гц, 2Н), 7.71 (йй, 1 = 5.4, 8.7 Гц, 2Н), 7.45 (йй, 1 = 2.4, 9.9 Гц, 2Н), 6.83 (т, 2Н), 4.56 (т, 2Н), 4.47 (т, 2Н), 4.20 (т, 2Н), 3.84 (йй, 1 = 4.2, 11.1 Гц, 2Н), 3.66 (й, 1 = 11.1 Гц, 2Н), 3.45 (т, 4Н), 2.93 (ц, 1 = 6.9 Гц, 2Н), 1.60-1.89 (т, 8Н), 1.19 (й, 1 = 6.9 Гц, 6Н), 0.94 (ί, 1 = 7.2 Гц, 6Н) ррт; 13С ЯМР (75 МГц, С1ХСХ + й4-МеОН), смесь ротамеров: δ 175.2, 173.0, 162.4, 159.3, 137.8, 137.6, 128.8, 128.7, 126.8, 110.8, 120.7, 109.5, 108.7, 108.4, 98.5, 98.1, 71.6, 60.5,
60.1, 56.8, 52.6, 36.6, 28.6, 26.0, 22.7, 19.0, 10.1 ррт. Масс-спектр (ЕЗЦ, отношение массы к заряду 813.4 [(М)+; рассчитано для С42Н50П6Е2Ы8О6: 813.0].
- 17 022061
Схема ΧΙΧ
21
Бензиловый эфир 2-(6-фтор-1Н-индол-3-ил-Д2-метил)-4-гидроксипирролидин-1-карбоновой кислоты (21).
Суспензию соединения 6 (3,0 г, 7,85 ммоль) в безводном ТНР (50 мл) охлаждали до 0°С. Добавляли ά4-Ν;·ιΒΗ4 (0,66 г, 15,7 ммоль) в виде однократной порции с последующим добавлением ВР3этерата (1,1 мл, 8,60 ммоль). Через приблизительно 10 мин ледяную баню удаляли и реакционную смесь нагревали до дефлегмирования.
Через 3 ч реакционную смесь охлаждали в ледяной бане и осторожно быстро охлаждали насыщенным водным раствором ΝΗ4Ο1 (50 мл). Двухфазную смесь разбавляли ЕЮАс. органический слой отделяли, промывали водой (2x50 мл) и затем рассолом. ЕЮАс слой высушивали над безводным №28О4, фильтровали, концентрировали и получали 3,2 г неочищенного соединения 21 (>колич.), которое использовали без дальнейшей очистки. Масс-спектр (Ε8Ι), отношение массы к заряду 371.2 [(М+Н)+; рассчитано для 021Η20ϋ2ΡΝ2Ο3: 371.4].
Бензиловый эфир 4-ацетокси-2-(6-фтор-1Н-индол-3-ил-Д2-метил)пирролидин-1-карбоновой кислоты (22).
К раствору, содержащему неочищенное соединение 21 (приблизительно 7,85 ммоль), Εί3Ν (1,2 г, 12,0 ммоль) и ΌΜΑΡ (50 мг, са1.) в ЭСМ (30 мл), добавляли уксусный ангидрид (0,74 мл, 7,85 ммоль) при комнатной температуре. Через 3 ч реакционную смесь быстро охлаждали насыщенным водным раствором №НСО3, (50 мл), затем разбавляли ЭСМ. ЭСМ слой отделяли и последовательно промывали разбавленной НС1 (50 мл), водой (50 мл) и рассолом (50 мл). Органический раствор высушивали над безводным Ν;·ι2δΟ4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали методом флэшхроматографии на силикагелевой колонке [30-40% ΕίΟΑс в гексане] и получали 2,0 г (62%, 2 этапа) соединения 22 в виде пены белого цвета.
Ή ЯМР (300 МГц, СИС13), ~1:1 смесь ротамеров: δ 8.41 (Ьг δ, 1Н), 7.80-6.50 (т, 9Н), 5.25 (т, 1Н), 5.21 (т, 2Н), 4.27 (т, 1Н), 3.82 (άί, I = 5.1, 13.2 Гц, 1Н), 3.61 (ДД, I = 11.4, 11.7 Гц, 1Н), 2.13 (δ, 3Н), 2.00 (т, 2Н) ррт; 13С ЯМР (75 МГц, СНС13),~ 1:1 смесь ротамеров: δ 170.8, 160.2 (1СР = 236.2 Гц), 155.2, 136.9,
136.6, 136.5, 129.0, 128.9, 128.6 (1СР = 24.4 Гц), 124.5 ДСР = 22.1 Гц), 123.1, 120.1 (1СР = 27.2 Гц), 119.9 (1СР = 27.2 Гц), 112.8, 108.2 (1СР = 23.5 Гц), 97.7 (1СР = 25.7 Гц), 74.1, 73.3, 68.0, 67.2, 58.5, 57.6, 53.4, 53.1, 35.4,
34.6, 21.5 ррт. Масс-спектр (Ε8Ι), отношение массы к заряду 413.1 [(М)+; рассчитано для С23Н21И2Р^О4: 412.4].
Бензиловый эфир 4-ацетокси-2-[3'-(4-ацетокси-1-бензилоксикарбонилпирролидин-2-ил-Д2-метил)6,6'-дифтор-1Н,'Н-[2,2']бииндолил-3-ил-Д2-метил]пирролидин-1-карбоновой кислоты (23).
Индол 22 (2,0 г, 4,80 ммоль) растворяли в предварительно охлажденной (-5°С) ΤΡΑ (10 мл). Полученный раствор желтого цвета выдерживали до тех пор, пока он медленно не нагревался до комнатной температуры в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом для удаления ΤΡΑ и неочищенную смесь диастереомеров индолилиндолина использовали непосредственно в следующей реакции. Масс-спектр (Ε8Ι), отношение массы к заряду 825.4 [(М)+; рассчитано для С46Н42И4Р^4О8: 824.9].
- 18 022061
К раствору, содержащему диастереомеры индолилиндолина в ЕЮАс (100 мл), добавляли ΌΌΟ (0,58 г, 2,5 ммоль) в виде однократной порции. Через 15 мин реакционную смесь темнооранжевого/коричневого цвета быстро охлаждали насыщенным водным раствором №-1НСО3. Слои отделяли, органическую фазу последовательно промывали насыщенным водным раствором ЫаНСОз (3x50 мл) и рассолом, высушивали над безводным Ыа28О4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в ЭСМ (10 мл) и раствор затем разбавляли МеОН (50 мл). При медленном удалении ЭСМ под вакуумом получали осадок, который собирали вакуумным фильтрованием, промывали холодной МеОН, высушивали и получали 1,7 г соединения 23 (86%, 2 этапа).
1Н ЯМР (300 МГц, СЭСЬ): δ 11.30 (Ьг 5, 2Н), 7.60-7.30 (т, 14Н), 6.90 (арр. 4ΐ, 1 = 2.4, 9.3 Гц, 2Н), 5.40 (т, 2Н), 5.36 (4, 1 = 3.6 Гц, 4Н), 4.28 (4, 1 = 8.1 Гц, 2Н), 3.79 (т, 4Н), 2.31 (5, 6Н), 2.06 (т, 4Н) ррт. Масс-спектр (Е81), отношение массы к заряду 823.3 [(М)+; рассчитано для ^6Η40Ό4Ρ2Ν4Ο8: 822.9].
Схема XXII
5-[3'-(4-Ацетоксипирролидин-2-ил-42-метил)-6,6'-дифтор-1Н,1'Н-[2,2']бииндолил-3-ил-42-метил] пирролидин-3-ил эфир уксусной кислоты (24).
Суспензию, содержащую соединение 23 (0,40 г, 0,48 ммоль) в ЕЮАс/МеОН (соотношение 1:1) (40 мл), помещали в колбу Парра объемом 500 мл и помещали в нее 10% Р4-на-угле (влажный, приблизительно 200 мг). Реакционную смесь подвергали воздействию давления до 50 фунтов/дюйм2 Н2 и встряхивали в течение 3 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой СеШе® и твердые вещества промывали ЕЮАс. Очищенный фильтрат концентрировали под вакуумом и получали неочищенное соединение 24 в виде твердого вещества серовато-белого цвета, которое использовали непосредственно в следующей реакции. Масс-спектр (Е81), отношение массы к заряду 555.2 [(М)+; рассчитано для ^0Η28Ό4Ρ2Ν4Ο4: 554.6].
5-{ 3'-[4-Ацетокси-1 -(2-трет-бутоксикарбониламинобутирил)пирролидин-2-ил-42-метил] -6,6'дифтор-1Н,1'Н-[2,2']бииндолил-3-ил-42-метил}-1-(2-трет-бутоксикарбониламинобутирил)пирролидин-3ил эфир уксусной кислоты (25).
К раствору, содержащему Вос-АЬи-ОН (224 мг, 1,1 ммоль) и НАТи (442 мг, 1,2 ммоль) в безводном ΝΜΡ (10 мл) при 0°С, добавляли ΝΜΜ (0,2 мл, 1,7 ммоль) с последующим добавлением раствора соединения 24 (0,48 ммоль) в ΝΜΡ (10 мл). Реакционную смесь медленно нагревали до комнатной температуры. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли диэтиловым эфиром (100 мл), смесь последовательно промывали водой (5x50 мл), 1Ν НС1 (50 мл), насыщенным водным раствором NаНСΟ3 (50 мл) и рассолом, высушивали над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали методом ОФ ВЭЖХ (колонка Эупатах 2 С18; 10-100% раствор АСМвода, содержащий 0,1% НОАс, в течение 30 мин; 40 мл/мин). Содержащие продукт фракции комбинировали, концентрировали, лиофилизировали и получали 310 мг соединения 25 (70%, 2 этапа) в виде хлопьевидного твердого вещества белого цвета.
Ή ЯМР (300 МГц, СОС13), смесь ротамеров: δ 11.17 (Ьг 5, 2Н), 7.39 (44, I = 5.4, 8.4 Гц, 2Н), 7.29 (4, I = 9.3 Гц, 2Н), 6.75 (44, I = 8.40, 8.40, 2Н), 6.40 (Ьг 5, 2Н), 5.44 (т, 2Н), 4.40 (44, I = 7.8, 16.5 Гц, 2Н), 4.22 (4, I = 7.8 Гц, 2Н), 4.15 (44, I = 5.1, 12.9 Гц, 2Н), 3.80 (4, I = 12.9 Гц, 2Н), 2.23 (5, 6Н), 1.90 (т, 2Н), 1.74 (т, 2Н), 1.57 (5, 18Н), 0.99 (ΐ, I = 7.2 Гц, 6Н) ррт; 13С ЯМР (75 МГц, СОС13), смесь ротамеров: δ 172.1, 170.4, 161.4, 158.2, 155.8, 137.0, 136.9, 128.6, 125.5, 118.9, 118.8, 108.6, 108.4, 108.1, 98.3, 98.0, 80.8, 74.7,
- 19 022061
60.3, 53.8, 53.6, 34.1, 28.7, 28.6 (Ьг), 26.2, 21.5, 10.5 ррт. Масс-спектр (ΕδΙ), отношение массы к заряду 925.4 [(М)+; рассчитано для С48Н58Э4Р2Ы6О10: 925.0].
5-{3 '-[4-Ацетокси-1 -(2-аминобутирил)пирролидин-2-илЦ2-метил] -6,6'-дифтор-1Н, 1 'Н[2,2']бииндолил-3-илЦ2-метил}-1-(2-аминобутирил)пирролидин-3-ил эфир уксусной кислоты (26).
Раствор, содержащий соединение 25 (310 мг, 0,34 ммоль) в ΩΕΜ (20 мл), охлаждали до 0°С. Добавляли ТРА (5 мл) и реакцию контролировали до тех пор, пока результаты ЖХ/МС анализа не указывали на полное преобразование соединения 25 в соединение 26 (приблизительно 3 ч). Растворитель удаляли под вакуумом и остаток темно-зеленого цвета растворяли в ЕЮАс (50 мл). Раствор ЕЮАс осторожно вливали в смесь насыщенного водного раствора ЫаНСО3/лед/вода для нейтрализации остатка ТРА. Отделяли органическую фазу и дважды промывали насыщенным водным раствором ЫаНСО3, затем один раз рассолом. Комбинированные водные слои обратимо экстрагировали ЕЮАс (2x20 мл) и комбинированные органические экстракты высушивали над безводным Ыа^О4, фильтровали, концентрировали и получали неочищенное соединение 26 (250 мг) в виде твердого вещества серовато-белого цвета. Массспектр ^δΙ), отношение массы к заряду 725.3 [(М)+; рассчитано для С38Н42Э4Р2Ы6О6: 724.8].
5-(3'-{4-Ацетокси-1-[2-(2-метил-(трет-бутоксикарбонил)аминопропиониламино)бутирил]пирролидин-2-илЦ2-метил}-6,6'-дифтор-1Н,ГН-[2,2']бииндолил-3-илЦ2-метил)-1-[2-(2-метил-(трет-бутоксикарбонил)аминопропиониламино)бутирил]пирролидин-3-ил эфир уксусной кислоты (27).
К раствору, содержащему Вос-Ы^е^а-ОН (83 мг, 0,41 ммоль) и НАТИ (172 мг, 0,45 ммоль) в безводном ΝΜΡ (5 мл) при 0°С, добавляли ΝΜΜ (0,1 мл, 0,85 ммоль) с последующим добавлением неочищенного соединения 26 (123 мг, 0,17 ммоль) в ΝΜΡ (5 мл). Полученную смесь выдерживали до тех пор, пока она не нагревалась до комнатной температуры. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли диэтиловым эфиром (100 мл), последовательно промывали водой (50 мл), 1Ν НС1 (2x50 мл), насыщенным водным раствором ЫаНСО3 (2x50 мл), рассолом, высушивали над безводным Ыа^О4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали методом ОФ ВЭЖХ (колонка Эупатах 2 С18; 10100% раствор АСЫ/вода, содержащий 0,1% НОАс, в течение 30 мин; 40 мл/мин). Содержащие продукт фракции комбинировали, концентрировали, лиофилизировали и получали 170 мг соединения 27 (91%, 2 этапа) в виде хлопьевидного твердого вещества серовато-белого цвета.
Ίί ЯМР (300 МГц, СЭС13), смесь ротамеров: δ 11.51 (Ьг к, 2Н), 7.40-7.60 (т, 4Н), 6.86 (т, 2Н), 5.46 (т, 2Н), 4.74 (Ьг к, 2Н), 4.65 (ц, 1 = 6.9 Гц, 2Н), 4.45 (ά, 1 = 8.7 Гц, 2Н), 4.17 (άά, 1 = 4.8, 12.3 Гц, 2Н) 3.82 (ά, 1 = 12.3 Гц, 2Н), 2.87 (к, 6Н), 2.28 (к, 6Н), 2.05 (т, 2Н), 1.92 (т, 2Н), 1.78 (т, 2Н), 1.48 (к, 18Н), 1.37 (ά, 1 = 7.2 Гц, 6Н), 1.01 (ΐ, 1 = 7.2 Гц, 6Н) ррт; 13С ЯМР (75 МГц, СЭС13), смесь ротамеров: δ 173.3, 170.2,
170.1, 170.5, 168.6, 159.9, 135.5, 135.4, 126.5, 126.4, 123.8, 116.8, 116.7, 106.8, 106.4, 106.1, 96.8, 96.5, 79.1,
72.6, 57.9, 52.1, 50.1, 31.7, 28.5, 26.6, 25.5 (Ьг), 23.9, 19.6, 19.0, 12.1, 8.0 ррт. Масс-спектр ^δΙ), отношение массы к заряду 1095.5 [(М)+; рассчитано для С56Н72Э4Р2Ы8О12: 1095.3].
- 20 022061
Схема XXVI
5-(3'-{4-Ацетокси-1-[2-(2-метиламинопропиониламино)бутирил]пирролидин-2-ил-й2-метил}-6,6'дифтор-1Н,1'Н-[2,2']бииндолил-3-ил-62-метил)-1-[2-(2-метиламинопропиониламино)бутирил]пирролидин-3-ил эфир уксусной кислоты (28).
Раствор, содержащий соединение 27 (170 мг, 0,15 ммоль) в ЭСМ (15 мл), охлаждали до 0°С. Добавляли ТЕА (5 мл). Через 30 мин реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и контролировали до тех пор, пока результаты ЖХ/МС анализа не указывали на полное преобразование соединения 27 в соединение 28 (приблизительно 4 ч). Растворитель удаляли под вакуумом и остаток темно-зеленого цвета растворяли в ЕЮАс (100 мл) и осторожно вливали в смесь водного раствора NаΗСΟз/льда. Водную фазу отделяли и обратимо экстрагировали ЕЮАс (2x20 мл). Комбинированные органические экстракты промывали несколько раз насыщенным водным раствором ΝαΗί'Ό3,. затем рассолом, высушивали над безводным №28О4, фильтровали, концентрировали и получали неочищенное соединение 28 в виде твердого вещества светло-желтого цвета. Масс-спектр (Е§1), отношение массы к заряду 895.3 [(М)+; рассчитано для 895.0].
^{1§'-[2К-(6,6'-Дифтор-3'-{4§'-гидрокси-1-[2§-(2§'-метиламинопропиониламино)бутирил]пирролидин-2К-ил-62-метил}-1Н,1'Н-[2,2']бииндолил-3-ил-й2-метил)-4§-гидроксипирролидин-1-карбонилпропил)-2 δ -метиламинопропионамид (29).
К раствору, содержащему неочищенное соединение 28 (0,15 ммоль) в МеОН (20 мл), добавляли 1М ΝαΟΗ (5 мл) при 0°С. Реакционную смесь дегазировали и выдерживали в атмосфере азота, при этом емкость была обернута алюминиевой фольгой. Ледяную баню удаляли. Через 60 мин МеОН удаляли под вакуумом, остаток разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали ЕЮАс (50 мл). Водную фазу отделяли и обратимо экстрагировали ЕЮАс (2x50 мл). Комбинированные органические экстракты промывали рассолом, высушивали над безводным Να2δΟ4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали методом ОФ ВЭЖХ (колонка Όνηαιηαχ 2 С18; 10-100% раствор АС.%/вода, содержащий 0,1% НОАс, в течение 30 мин; 40 мл/мин). Содержащие продукт фракции комбинировали, концентрировали, лиофилизировали и получали 110 мг соединения 29 (90%, 2 этапа) в виде хлопьевидного твердого вещества белого цвета.
Ή ЯМР (300 МГц, С1)С1; + а4-МеОН), смесь ротамеров: δ 11.58 (5, 2Н), 7.80 (άά, I = 5.4, 8.7 Гц, 2Н), 7.45 (άά, I = 2.4, 9.9 Гц, 2Н), 6.87 (άάά, I = 2.4, 9.2, 9.2 Гц, 2Н), 4.66 (άά, I = 5.7, 7.8 Гц, 2Н), 4.60 (Ьг 5, 2Н), 4.47 (ά, I = 7.2 Гц, 2Н), 4.00 (άά, I = 4.8, 11.4 Гц, 2Н), 3.76 (ά, I = 11.4 Гц, 2Н), 3.43 (д, I = 6.9 Гц, 2Н), 2.55 (5, 6Н), 2.19 (ά, I = 14.4 Гц, 2Н), 1.78-2.02 (т, 8Н), 1.46 (ά, I = 7.2 Гц, 6Н), 1.09 (ί, I = 7.2 Гц, 6Н) ррт; 13С ЯМР (75 МГц, С1)С1; + άζ,-МеОН), смесь ротамеров: δ 173.6, 171.8, 161.7, 158.6, 137.1, 136.9, 128.1, 128.0, 125.9, 119.8, 119.7, 108.3, 108.2, 107.8, 97.8, 97.5, 70.9, 69.4, 59.0, 56.1, 52.0, 36.3, 35.7, 25.5, 18.5, 9.8 ррт. Масс-спектр (Е§1), отношение массы к заряду 811.4 [(М)+; рассчитано для С.12Н52О.,Р2Н8О6: 810.9].
- 21 022061
5-(3'-{4-Ацетокси-1-[2-(2-б3-метил-(трет-бутоксикарбонил)аминопропиониламино)бутирил]пирролидин-2-ил-б2-метил}-6,6'-дифтор-1Н,1'Н-[2,2']бииндолил-3-ил-б2-метил)-1-[2-(2-б3-метил-(третбутоксикарбонил)аминопропиониламино)бутирил]пирролидин-3-ил эфир уксусной кислоты (30).
К раствору, содержащему Вос-Ы(б3-Ме)А1а-ОН (17, 83 мг, 0,41 ммоль) и НАТи (172 мг, 0,45 ммоль) в безводном NМΡ (5 мл), при 0°С добавляли ΝΜΜ (0,1 мл, 0,85 ммоль) с последующим добавлением неочищенного соединения 26 (123 мг, 0,17 ммоль) в ИМР (5 мл). Полученную смесь выдерживали до тех пор, пока она не нагревалась до комнатной температуры. Через 16 ч реакционную смесь разбавляли диэтиловым эфиром (100 мл), последовательно промывали водой (50 мл), 1Ν НС1 (2x50 мл), насыщенным водным раствором NаНСО3 (2x50 мл), рассолом, высушивали над безводным Ν;·ι2δΟ4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали методом ОФ ВЭЖХ (колонка Эупатах 2 С18; 10100% раствор АС4/вода, содержащий 0,1% НОАс, в течение 30 мин; 40 мл/мин). Содержащие продукт фракции комбинировали, концентрировали, лиофилизировали и получали 160 мг соединения 30 (85%, 2 этапа) в виде хлопьевидного твердого вещества белого цвета.
Ή ЯМР (300 МГц, СОС13), смесь ротамеров: δ 11.51 (Ьг 5, 2Н), 7.40-7.60 (т, 4Н), 6.87 (άάά, 1 = 2.1, 9.0, 9.0 Гц, 2Н), 5.47 (ΐ, 1 = 4.8 Гц, 2Н), 4.74 (Ьг 5, 2Н), 4.65 (ц, 1 = 12 Гц, 2Н), 4.46 (ά, 1 = 8.1 Гц, 2Н), 4.18 (άά, 1 = 3.9, 11.7 Гц, 2Н), 3.83 (ά, 1 = 12.3 Гц, 2Н), 2.30 (5, 6Н), 2.24 (т, 2Н), 2.05 (т, 2Н), 1.93 (т, 2Н), 1.79 (т, 2Н), 1.49 (5, 18Н), 1.38 (ά, 1 = 6.9 Гц, 6Н), 1.02 (ΐ, 1 = 7.2 Гц, 6Н) ррт; 13С ЯМР (75 МГц, СПС13), смесь ротамеров: δ 175.6, 172.2, 172.1, 170.6, 161.8, 158.7, 137.5, 137.3, 128.5, 128.4, 125.8, 118.7, 118.6, 108.7, 108.4, 108.0, 98.8, 98.4, 81.1, 74.6, 66.1, 59.9, 54.0, 52.1, 33.7, 28.6, 27.5 (Ьг), 25.8, 21.6, 20.9, 14.0, 9.9 ррт. Масс-спектр (Εδ^, отношение массы к заряду 1101.5 [(М)+; рассчитано для СУЯ^ОнР^О]/ 1101.3].
5-(3'-{4-Ацетокси-1-[2-(2-ά3-метиламинопропиониламино)бутирил]пирролидин-2-ил-ά2-метил}-6,6'дифтор-1Н,1Ή-[2,2']бииндолил-3-ил-ά2-метил)-1-[2-(2-ά3-метиламинопропиониламино)бутирил]пирролидин-3-ил эфир уксусной кислоты (31).
Раствор, содержащий соединение 30 (160 мг, 0,14 ммоль) в ЭСМ (15 мл), охлаждали до 0°С. Добавляли ТРА (5 мл). Через 30 мин реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и контролировали до тех пор, пока результаты ЖХ/МС анализа не указывали на полное преобразование соединения 30 в соединение 31 (приблизительно 4 ч). Растворитель удаляли под вакуумом, остаток темно-зеленого цвета растворяли в ЕЮАс (100 мл) и осторожно вливали в смесь водного раствора NаНСΟ3/льда. Водную фазу отделяли и обратимо экстрагировали ЕЮАс (2x20 мл). Комбинированные органические экстракты промывали несколько раз насыщенным водным раствором NаНСΟ3, затем рассолом, высушивали над безводным №2δΟ4, фильтровали, концентрировали и получали неочищенное соединение 31 в виде твердого вещества светло-желтого цвета. Масс-спектр (Εδ^, отношение массы к заряду 901.5 [(М)+; рассчитано для СЮI, О-РАЧХ: 901.1].
- 22 022061
М-{1§'-[2К-(6,6'-Дифтор-3'-{4§'-гидрокси-1-[2§'-(2§'-метиламинопропиониламино)бутирил]пирролидин-2К-ил-02-метил)-1Н,1'Н-[2,2']бииндолил-3-ил-Й2-метил)-4§-гидроксииирролидин-1-карбонил] пропил)-2§-метиламинопропионамид (32).
К раствору, содержащему неочищенное соединение 31 (0,14 ммоль) в МеОН (20 мл), добавляли 1М ΝαΟΗ (5 мл) при 0°С. Реакционную смесь дегазировали и выдерживали в атмосфере азота, при этом емкость была завернута в алюминиевую фольгу. Ледяную баню удаляли. Через 60 мин МеОН удаляли под вакуумом, остаток разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали ЕЮАс (50 мл). Водную фазу отделяли и обратимо экстрагировали ЕЮАс (2x50 мл). Комбинированные органические экстракты промывали рассолом, высушивали над безводным Ν;·ι2δΟ4. фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали методом ОФ ВЭЖХ (колонка Эуиатах 2 С18; 10-100% раствор ΑΟΝ/вода, содержащий 0,1% НОАс, в течение 30 мин; 40 мл/мин). Содержащие продукт фракции комбинировали, концентрировали, лиофилизировали и получали 100 мг соединения 32 (87%, 2 этапа) в виде хлопьевидного твердого вещества белого цвета.
Ή ЯМР (300 МГц, СЭС13 + а4-МеОН), смесь ротамеров: δ 11.62 (5, 2Н), 7.79 (άά, 1 = 5.4, 8.4 Гц, 2Н), 7.47 (άά, 1 = 2.4, 10.2 Гц, 2Н), 6.87 (άάά, 1 = 2.4, 9.2, 9.2 Гц, 2Н), 4.68 (άά, 1 = 5.4, 7.5 Гц, 2Н), 4.58 (т, 2Н), 4.45 (ά, 1 = 6.6 Гц, 2Н), 3.99 (άά, 1 = 4.8, 11.1 Гц, 2Н), 3.75 (ά, 1 = 11.1 Гц, 2Н), 3.19 (д, 1 = 6.9 Гц, 2Н), 2.15 (Ьг ά, 1 = 12 Гц, 2Н), 1.78-2.02 (т, 8Н), 1.39 (ά, 1 = 6.6 Гц, 6Н), 1.07 (ΐ, 1 = 7.5 Гц, 6Н) ррт; 13С ЯМР (75 МГц, СЭС13 + άζ,-МеОН), смесь ротамеров: δ 175.4, 172.0, 161.8, 158.7, 137.1, 137.0, 128.2, 128.0, 126.0, 119.9, 119.7, 108.4, 108.3, 107.9, 98.0, 97.6, 71.0, 60.0, 59.6, 56.2, 51.6, 36.4, 25.8, 19.5, 9.8 ррт. Массспектр (Е§1), отношение массы к заряду 817.4 [(М)+; рассчитано для С.12Н.16Э10Р2Н8О6: 817.0].
Примеры 2, 3, 4 и 5.
Соединения, проанализированные в примерах 2, 3, 4 и 5, представлены в табл. 1.
Таблица 1
С’оединепие К5 к
15 -СН2СНЗ 6-Р
2 СН(СНЗ)СНЗ 6-Р
3 -к- СН(ОН)СНЗ 6-Р
4 -5- СН(ОН)СНЗ 6-Р
5 -к- СН(ОСНЗ)СНЗ 6-Р
Пример 2А. Анализ деградации с1АР.
Концентрация, индуцирующая деградацию с1АР-1 и с1АР-2 на 50% (1С50) в отношении различных соединений, была определена путем контроля за потерей ОРР (зеленый флуоресцентный белок) сигнала в клетках А375. Вкратце, линии клеток А375, экспрессирующие ОРР-меченый с1АР-1 и с1АР-2, были генерированы путем трансфицирования вектором НА2xЕОРР-рс^NА3. содержащим кодирующую об- 23 022061 ласть либо ЛАР-1 (А3750с1), либо ЛАР-2 (А3750с2). 2х104 клеток А3750с1 или А3750с2 были выращены в 96-луночной плашке и обработаны испытуемыми соединениями при различных концентрациях в течение 2 ч. После инкубирования клетки собирали путем трипсинизации и суспендировали в 150 мкл ЭМЕМ-10% РВ8. В общей сложности было проанализировано 104 клеток с использованием прибора РАСЗсап (ВеЛоп Оюкиъоп). ОРР флуоресценцию контролировали с помощью фильтров возбуждения при 488 нм и эмиссию измеряли с помощью 530 нм фильтра. Ιί'.'50 определяли как концентрацию лекарственного препарата, при которой обеспечивалось 50% ингибирование ОРР сигнала.
Результаты анализа деградации ЛАР-1 и -2 приведены в табл. 2.
Таблица 2
Соединение СРР-С1АР-1 1С50 (пМ) 80 ОРР-с1АР-2 1С™ (пМ) 50 1С50 отношение с1АР-2/с!АР-1
15 27 (п=56) 5 174 (п=61) 100 6,4
2 4 (п=3> ,6 7(п=3) 0,8 1,8
3 328 (п=3) 3 674 (п=3) 69 2,1
4 464(п=12) 12 604 (11=12) 192 1,3
5 10 (п=41) | 37 (п=38) 19 3,7
Указанные данные демонстрируют, что соединение 15 обладает более высокой относительной активностью при деградировании ЛАР-1 относительно ЛАР-2 при сравнении с соединениями 2, 3, 4 и 5.
Пример 2В. Анализ дерепрессии каспазы-3.
Экспоненциально растущие МОА-МВ-231 опухолевые клетки (АТСС) получали путем трипсинизации и собирали путем центрифугирования в настольной центрифуге при 1000хд в течение 10 мин при комнатной температуре. Клеточную массу промывали один раз путем ресуспендирования в 5 мл гипотонического лизисного буфера (20 ммоль НЕРЕ8, рН 7,5, 10 ммоль КС1, 1,5 ммоль МдС12, 1,0 ммоль ЕЭТА, 1,0 ммоль ΌΤΤ) и повторно собирали путем центрифугирования. Массу далее ресуспендировали в 1 объеме гипотонического лизисного буфера с добавлением целой таблетки ингибитора протеазы (Роше) и помещали на лед для набухания в течение 30 мин. Клетки измельчали путем пропускания приблизительно 50 раз через иглу 27 калибра. Лизис контролировали с использованием оптической микроскопии. Лизат центрифугировали при 12000х§ в течение 10 мин при 4°С для удаления мембранной фракции, нелизированных клеток и клеточных остатков. Собирали растворимую фракцию для определения концентрации белка и проведения последующего анализа.
Гипотонический лизат (25 мкг белка), 50 мкг/мл цитохрома с и 10 ммоль άΑΤΡ комбинировали в микроцентрифужной пробирке до окончательного объема в размере 9 мкл в гипотоническом лизисном буфере с последующим добавлением испытуемого соединения и проводили инкубирование в течение 30 мин при комнатной температуре. После инкубирования добавляли 50 мкл гипотонического лизисного буфера, содержащего 5 мкмоль ЮЕМО-КТЮ^) субстрата каспазы-3 на основе профлуоресцентного родамина-110(2) и контролировали интенсивность люминесценции с течением времени. Активация лизата путем добавления цитохрома с и άΑΤΡ приводит к образованию апоптосомного комплекса и последующей активации каспазы-9 и -3. Эндогенный XIΑΡ ингибирует значительную часть указанной активности, и добавление испытуемого соединения к активированному лизату приводит к повышению активности каспазы по сравнению с активностью, генерируемой только одним активированным лизатом, определяемой по увеличению интенсивности флуоресценции при расщеплении /ОЕУО-К1101-2, каспазой-3. Значения Юзо были рассчитаны с использованием программы ОгаркР;Л Рп5т путем построения графика увеличения интенсивности флуоресценции в зависимости от различных концентраций испытуемых соединений (результаты приведены в табл. 3).
- 24 022061
Таблица 3
Указанные данные показывают, что соединение 15 обладает более низкой активностью для антагонизирования функции Х1АР по сравнению с соединениями 2, 3, 4 и 5.
Пример 3. Цитотоксичность.
Данные о цитотоксичности δΕΌν^ овариальных опухолевых клеток были получены в соответствии с процедурой, изложенной ниже. Анализ на основе (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразол бромида) (МТТ) является примером анализа, использовавшегося для измерения роста клеток в соответствии с ранее приведенным описанием (Нап5еп, М.В., №е15еп, δ.Ε., αηά Вегг, К. (1989) ί. 1ттипо1. Ме1Нοά5 119, 203-210), инкорпорированным в настоящий патент путем отсылки во всей своей полноте.
Вкратце, клетки δΚ^ν-3 высевали в 96-луночных плашках в среде Мак-Коя, содержащей альбумин 10% эмбриональной бычьей сыворотки (5000 на лунку) и инкубировали в течение ночи при 37°С. На следующий день добавляли испытуемые соединения при различных концентрациях (0,003-10 мкмоль) и плашки инкубировали при 37 °С в течение дополнительно 72 ч. Указанное время инкубирования являлось оптимальным для определения ингибирующих эффектов различных аналогов. В каждую лунку добавляли 50 мкл реагента МТТ (5 мг/мл) и плашки инкубировали при 37°С в течение 3 ч. По завершению инкубационного периода в каждую плашку добавляли 50 мкл ^ΜδО для растворения клеток, и проводилось измерение оптической плотности лунок с использованием считывающего устройства для микропланшетов (νίΟοτ2 1420, ^а11ас, Р1п1ап0) при 535 нм. Была подсчитана выживаемость клеток на основе нижеприведенного уравнения:
Выживаемость клеток ^δ) = (оптическая плотность (ΌΌ) обработанных лунок/средняя оптическая плотность (ΌΌ) контрольных лунок) х 100%
СС50, определенная как концентрация лекарственного препарата, приводящая к 50% Сδ (выживаемости клеток), была получена путем расчета точки, в которой кривая зависимости доза-эффект пересекает точку 50% Сδ с использованием программы СгарНР;·^ Рп5т. Данные результаты указывают на то, что миметики белка δΜАС, связывающиеся с с1АР-1, могут быть использованы при лечении рака либо в качестве монотерапии, либо в сочетании с химиотерапевтическими препаратами. Результаты анализов цитотоксичности δΚОV-3 в отношении испытуемых соединений в данном анализе приведены в табл. 4.
Таблица 4
Приведенные в таблице данные указывают на то, что соединение 15 по своей активности эквивалентно соединению 5 и является более активным по сравнению с соединениями 2, 3 и 4.
Пример 4. Токсичность.
Данные о потере массы тела, смертности и дополнительной токсичности получены в основном на основе проведения нижеследующей процедуры. Крысам линии Спраг Доули ежедневно вводили дозу (раз в день х 4, внутривенное медленное болюсное введение) соединений 15, 4 и 5. На 4-й день измеряли массу тела крыс, значения массы приведены на диаграмме в виде процентного изменения по отношению к дню 1. Соединения 4 и 5 вводили в дозе 0,3, 1 или 3 мг/кг; соединение 15 вводили в дозе 1, 5 или 10 мг/кг.
Результаты анализа потери массы тела приведены на фиг. 1.
Смертность.
Соединения 4 и 5 оказались непереносимыми при дозе 3 мг/кг, и такая доза вызывала гибель животных. Смертность не была зафиксирована при введении соединения 15 в дозе 5 мг/кг (смертность наблюдалась при дозе 10 мг/кг).
Клинические результаты.
- 25 022061
При дозе 1 мг/кг/день не наблюдались клинические симптомы после 4 дней введения соединения 15. У животных, которым вводили соединение 15 в дозе 5 мг/кг/день, проявились клинические симптомы, аналогичные симптомам при введении соединений 4 и 5 в дозе 1 мг/кг/день, такие как вялость, учащенное/неравномерное дыхание и повышенная частота сердечных сокращений. У крыс, получавших соединение 5 в дозе 1 мг/кг, проявились дополнительные клинические симптомы, в том числе обезвоживание, неухоженный вид, хроморинорея, алопеция (головы) и чрезмерное почёсывание со 2 по 4 день.
Масса тела.
При дозе 1 мг/кг у животных, получавших соединения 4 и 5, наблюдалась потеря массы тела, в то время как у животных, получавших соединение 15 в дозе 1 мг/кг/день, наблюдалось увеличение массы тела. Со дня 1 по день 4 наблюдалась связанная с лечением средняя потеря массы тела, составившая приблизительно 8% при введении животным соединения 15 в дозе 5 мг/кг/день. У животных, которым вводили соединения 4 и 5 в дозе 1 мг/кг/день, наблюдалась связанная с лечением средняя потеря массы тела, составившая приблизительно 4 и 6% соответственно.
Патология.
Оценка анатомической патологии после проведения лечения с использованием соединений 4 и 5 при дозе 1 мг/кг/день позволила сделать следующие выводы. Наблюдалась бедность ткани клетками костного мозга эритроидного ряда средней и тяжелой степени выраженности, повышенное содержание паренхиматозных клеток миелоидного ряда слабой и средней степени и слабая и средняя гипертрофия и гиперплазия мегакариоцитов в большеберцовой кости и грудине при введении соединений 4 и 5 в дозе 1 мг/кг/день. В отношении соединений 4 и 5 в легких наблюдалась диффузная гипертрофия/гиперплазия (слабой и средней степени) пневмоцитов 2 типа, сопровождаемая увеличением альвеолярных макрофагов, гипертрофированного бронхиолярного эпителия, пролиферирующих периваскулярных мононуклеарных клеток и гипертрофированных клеток висцеральной плевры. В противоположность этому при оценке анатомической патологии после проведения лечения соединением 15 при аналогичной дозе (1 мг/кг/день) была определена гипоцеллюлярность эритроидных клеток от минимальной до слабой степени выраженности, гиперцеллюлярность миелоидных клеток от минимальной до слабой степени выраженности и минимальная гипертрофия пневмоцитов 2 типа в легких.
Приведенные выше данные указывают на то, что соединение 15 приблизительно в 5 раз лучше переносится организмом крыс по сравнению с соединениями 4 и 5 на дозовой основе.
Пример 5. Уменьшение объема опухоли и изменение массы тела.
Данные о ксенотрансплантате из линии клеток ΜΌΑ-ΜΒ-231 были получены на основе нижеприведенной процедуры. Опухолевые клетки молочной железы человека ΜΌΑ-ΜΒ-231 инъецировали в жировое тело молочной железы самок безтимусных мышей, и инъецирование доз началось двенадцать дней спустя после того, как средний объем опухоли составил приблизительно 148 нм3. Ни одна из опухолевых масс не была ассоциирована с указанной моделью, основанной на отсутствии потери массы тела или смертности животных в контрольных группах. Мышам подкожно инъецировали в жировую ткань молочной железы 1х107 клеток, суспендированных в 200 мкл раствора, содержащего сбалансированный солевой раствор Хенкса:Матригеля в отношении 1:1; инъецированные клетки находились на девяти пассажах исходной серии. Были зафиксированы объемы опухолей до проведения исследований, приблизительно за одну неделю до намеченной даты начала исследований. Когда размер опухолей достиг приблизительно 150 мм3, животных отбирали в зависимости от объема опухоли в лечебные и контрольные группы, и к введению доз приступили на день 0; мыши были помечены, и за ними велось индивидуальное наблюдение на протяжении всего периода времени проведения эксперимента. Животным вводили дозу в зависимости от массы тела (0,01 мл на 1 г; 10 мл/кг).
Начиная со дня 0, за животными ежедневно велось наблюдение, их взвешивали дважды в неделю на цифровых весах (ОЬаи5 8Р601); по каждой группе фиксировались данные, включающие индивидуальную и среднюю массу тела в граммах (средний Ас ± 8Ό), среднее изменение массы тела в процентном выражении по отношению ко дню 0 (% νΌ0) и среднее изменение массы тела в процентном выражении по отношению к предыдущим измерениям (% νΌ-χ), и по завершению исследования на основании указанных данных были составлены графики.
Начиная со дня 0, дважды в неделю проводили измерение размеров опухолей с использованием штангенциркуля с цифровой индикацией (То\\'1сг и11га-Са1 IV), данные, включающие индивидуальные и средние определенные объемы опухолей (средний Τν ± 8ΕΜ), фиксировали по каждой группе; объем опухоли рассчитывали по следующей формуле: Τν = \νίΦ1ι2 х 1спдЙ1 х 0,52 (Объем опухоли = ширина2 х длину х 0,52). Отдельным мышам, достигшим предварительно установленной конечной точки исследования (определенный объем опухоли приблизительно 1 см3), присваивали значение времени конечной точки (ТТЕ), соответствующее этому дню; исследование по изучению задержки роста опухоли (ΤΟΌ) было завершено после того, как все мыши достигли конечной точки исследования, или спустя шестьдесят дней после начала исследования. По завершению исследования рассчитывали ΤΟΌ и % ΤΟΌ с использованием медианного значения ТТЕ (МТТЕ) для каждой лечебной группы (Т) по отношению к контрольной группе (С) по формулам: ΤΟΌ(4αγ5)= Τ-С и % ΤΟΟ=Τ-ί.’/ί'.’ х 100, в которых Т-С обозначает раз- 26 022061 ницу между МТТЕ-лечебной группой и МТТЕ-контрольной группой. Животные с развившимися опухолями, не достигшими предварительно установленного конечного объёма к завершению исследования, рассматривались как долгожители (ΕΤδ), и им присваивали значение ТТЕ, соответствующее последнему дню исследования; животные без опухоли не включены в расчеты ΤΟΌ. Для определения статистически значимых различий между всеми опытными данными о выживаемости при сравнении каждой лечебной группы с контрольной группой использовали логранговый критерий. Отдельные мыши, у которых в соответствии с полученными данными объем опухоли составил <50% со дня 0 проведения измерений за два последовательных измерения в течение семидневного периода, рассматривались как животные, частично ответившие на лечение (РК). Если частичный ответ на лечение (РК) сохранялся до завершения исследования, процентную регрессию опухоли (% ТК) определяли по формуле % ТК = 1-Т£/Т1 х 100; среднее значение рассчитывали, если несколько мышей, частично ответивших на лечение (РК), находились в одной группе. Отдельных мышей, у которых отсутствовали пальпируемые опухоли (< 4x4 мм2 за два последовательных измерения в течение семидневного периода), классифицировали как животных, полностью ответивших на лечение (СК); животные, полный ответ на лечение (СК) которых сохранялся до завершения исследования, рассматривались как выжившие без опухоли животные (ΊΈδ); животных ΊΈδ исключали из расчетов ТОР и статистического анализа. Сравнение статистических различий между значениями МТТЕ в контрольных и лечебных группах проводили с использованием логрангового критерия.
Инъекционно вводили только одно соединение 15 интраперитонеально в дозах 20, 40 или 60 мг/кг по схеме ς3άχ5 (один раз в день в течение трех дней, 5 циклов). Значения Т-С 22 дней рассчитывали для указанных групп, все из которых были определены как статистически значимые по сравнению с контрольной группой (р=0,005, р<0,0001 или р=0,0001). В группе, в которой животным вводили дозу 20 мг/кг, 6 из 10 мышей рассматривались как долгожители, у трех мышей отмечалась частичная регрессия опухоли. В группе, в которой животным вводили дозу 40 мг/кг, 9 из 10 мышей рассматривались как долгожители, у трех мышей отмечалась частичная регрессия опухоли. В группе, в которой животным вводили дозу 60 мг/кг, 8 из 10 мышей рассматривались как долгожители, у семи мышей отмечалась частичная регрессия опухоли.
Инъекционно вводили только одно соединение 5 интраперитонеально в дозе 15 мг/кг по схеме ς3άχ5. Значение Т-С 21 дня рассчитывали для указанной группы, которая была определена как статистически значимая по сравнению с контрольной группой (р=0,002). В указанной группе 3 из 10 мышей рассматривались как долгожители и у пяти мышей отмечалась частичная регрессия опухоли. Эффективность указанной дозы позволила достичь половину количества долгожителей, как и доза соединения 15 в размере 20 мг/кг.
Результаты анализа ксенотрансплантата из линии клеток ΜΌΑ-ΜΒ-231 приведены на фиг. 2А и 2В. Соединение 15 при дозе 20 мг/кг обладало противоопухолевой активностью, сопоставимой с соединением 5 при дозе 15 мг/кг. Дальнейшие исследования показали, что минимальная эффективная доза соединения 15 в этой модели составляет менее 1 мг/кг. Потеря массы тела была выше у мышей, которым вводили соединение 5 в дозе 15 мг/кг по сравнению с мышами, которым вводили соединение 15 в дозе 20 мг/кг. Таким образом, соединение 15 обладает эффективностью при меньшей токсичности, сопоставимой с эффективностью соединения 5, и, следовательно, имеет улучшенный терапевтический индекс.
Соединение формулы 1 является исключительно хорошо переносимым и приемлемым для использования в фармацевтической композиции, а также в способе лечения пролиферативного заболевания или аутоиммунного заболевания. В частности, фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением для лечения пролиферативного заболевания, включающая эффективное количество соединения 15 дополнительно по меньшей мере к одному фармацевтически приемлемому вспомогательному веществу, может улучшить терапевтический индекс путем снижения токсичности. Снижение токсичности включает, например, один из нижеперечисленных факторов или любое их сочетание:
уменьшение потери массы тела; снижение смертности;
снижение бедности ткани клетками костного мозга эритроидного ряда; снижение повышенного содержания паренхиматозных клеток миелоидного ряда; уменьшение гипертрофии и гиперплазии мегакариоцитов;
уменьшение диффузной гипертрофии и гиперплазии пневмоцитов типа 2;
снижение вялости;
более регулярное дыхание;
снижение частоты сердечных сокращений.
Перечисленные выше факторы, обусловленные пониженной токсичностью, наблюдались у исследуемых животных. Аналогичные, дополнительные или отличающиеся факторы, обусловленные пониженной токсичностью, будут наблюдаться у человека. Снижение токсичности является относительным, например относительным к той степени, в которой токсичность наблюдалась бы после введения в организм фармацевтической композиции, в которой активный фармацевтический ингредиент является аналогом соединения 15, например, одного или нескольких аналогов, в которых К5 обозначает -СН2СН3,
- 27 022061
-СН(СН3)СН3, -К-СН(ОН)СН3, -§-СН(ОН)СН3 и -К-СН(ОСН3)СН3, например, при аналогичной дозе или при дозе, сопоставимой эффективности.
Очевидно, что примеры и варианты осуществления настоящего изобретения, описанные в настоящем патенте, приведены исключительно в иллюстративных целях, и специалистам в данной области техники очевидно, что в свете вышеуказанного, в настоящее изобретение могут быть внесены различные модификации или изменения, не выходящие за пределы существа и объема настоящей заявки и объема прилагаемой формулы.

Claims (13)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы или его фармацевтически приемлемая соль.
  2. 2. Фармацевтическая композиция для лечения пролиферативного заболевания, содержащая соединение формулы или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
  3. 3. Фармацевтическая композиция по п.2 для лечения рака.
  4. 4. Фармацевтическая композиция по п.2 или 3, выполненная в виде стерильной жидкости для инъекций.
  5. 5. Фармацевтическая композиция по пп.2, 3 или 4, являющаяся единичной лекарственной формой.
  6. 6. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по п.1 для лечения пролиферативного заболевания у млекопитающих.
  7. 7. Применение по п.6, в котором пролиферативным заболеванием является рак, выбранный из группы, включающей следующие виды рака: рак поджелудочной железы, рак яичников, рак молочной железы, мезотелиому, периферическую нейрому, глиобластому, меланому, адренокортикальную карциному, СПИД-ассоциированную лимфому, рак анального канала, менингиому, глиому, астроцитому, рак шейки матки, хронические миелопролиферативные заболевания, рак толстой кишки, эндометриальный рак, эпендимому, рак пищевода, саркому Юинга, экстракраниальные герминогенные опухоли, внегонадные герминогенные опухоли, рак внепеченочных желчных путей, рак желчного пузыря, рак желудка, карциноидные опухоли желудочно-кишечного тракта, гестационные трофобластические опухоли, лейкоз ворсистых клеток, лимфому Ходжкина, неходжкиновскую лимфому, гипофарингеальный рак, интраокулярную меланому, рак островковых клеток, саркому Капоши, ларингеальный рак, лейкемию, рак губы, рак ротовой полости, рак печени, рак мужской груди, злокачественную мезотелиому, медуллобластому, карциному из клеток Меркеля, метастатический сквамозный рак шеи, множественную миелому и иные неоплазмы плазмацитов, фунгоидный микоз и синдром Сезари, миелодиспластический синдром, назофа- 28 022061 рингеальный рак, нейробластому, немелкоклеточный рак лёгкого, мелкоклеточный рак лёгкого, рак ротоглотки, рак костей, в том числе остеосаркому и злокачественную фиброзную гистиоцитоксантому костей, рак придаточных пазух носа, рак паращитовидной железы, рак полового члена, феохромоцитому, опухоли гипофиза, рак предстательной железы, рак прямой кишки, гипернефроидный рак, ретинобластому, рабдомиосаркому, рак слюнных желез, рак тонкого кишечника, саркому мягких тканей, супратенториальные примитивные нейроэктодермальные опухоли, пинеобластому, рак яичек, тимому, рак щитовидной железы, переходно-клеточный рак почечной лоханки и мочеточника, уретральный рак, саркому матки, влагалищный рак, вульварный рак, опухоль Уилма и иные опухоли почек у детей.
  8. 8. Применение по п.6, в котором пролиферативным заболеванием является рак, выбранный из группы, включающей саркомы, рак мочевого пузыря, рак яичников, рак молочной железы, рак мозга, рак поджелудочной железы, рак толстой кишки, рак крови, рак кожи, рак легких и рак костей.
  9. 9. Применение по п.6, в котором пролиферативным заболеванием является рак, выбранный из группы, включающей колоректальный рак, карциному почек, карциному яичника, карциному поджелудочной железы, карциному простаты, карциному молочных желез, меланому, глиобластому, острый миелолейкоз, мелкоклеточный рак лёгкого, немелкоклеточный рак лёгкого, рабдомиосаркому и базалиому.
  10. 10. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по п.1 для индуцирования апоптоза в клетке.
  11. 11. Применение по п.10, в котором клетка является раковой клеткой.
  12. 12. Применение по любому из пп.6-11, при котором соединение или его фармацевтическую соль по п.1 применяют (или назначают) в сочетании с другой противораковой терапией, выбранной из лучевой терапии, химиотерапии, иммунотерапии и(или) фотодинамической терапии или их сочетаний.
  13. 13. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по п.1 для лечения аутоиммунного заболевания, в котором аутоиммунное заболевание является заболеванием, при котором состояние вызвано или обусловлено аномальным регулированием апоптоза и выбрано из группы, включающей системную красную волчанку, псориаз и идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру (синдрома Верльгофа).
EA201171494A 2009-07-02 2010-06-25 Миметики белка smac EA022061B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US22266809P 2009-07-02 2009-07-02
US12/819,221 US8283372B2 (en) 2009-07-02 2010-06-20 2-(1H-indol-3-ylmethyl)-pyrrolidine dimer as a SMAC mimetic
PCT/US2010/039976 WO2011002684A1 (en) 2009-07-02 2010-06-25 Smac mimetic

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201171494A1 EA201171494A1 (ru) 2012-06-29
EA022061B1 true EA022061B1 (ru) 2015-10-30

Family

ID=43411387

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201171494A EA022061B1 (ru) 2009-07-02 2010-06-25 Миметики белка smac

Country Status (27)

Country Link
US (10) US8283372B2 (ru)
EP (1) EP2448923B8 (ru)
JP (1) JP5674780B2 (ru)
KR (1) KR101755218B1 (ru)
CN (1) CN102471275B (ru)
AP (1) AP3619A (ru)
AR (1) AR077629A1 (ru)
AU (1) AU2010266525C1 (ru)
BR (1) BRPI1013958B1 (ru)
CA (1) CA2766162C (ru)
CL (1) CL2011003333A1 (ru)
CO (1) CO6480975A2 (ru)
DK (1) DK2448923T3 (ru)
EA (1) EA022061B1 (ru)
EC (1) ECSP11011557A (ru)
ES (1) ES2565337T3 (ru)
HK (2) HK1169410A1 (ru)
HU (1) HUE026982T2 (ru)
IL (1) IL217237A (ru)
MX (1) MX2011013819A (ru)
MY (1) MY153116A (ru)
NZ (1) NZ597051A (ru)
PE (1) PE20131173A1 (ru)
SG (1) SG177404A1 (ru)
TW (1) TWI485148B (ru)
WO (1) WO2011002684A1 (ru)
ZA (1) ZA201109342B (ru)

Families Citing this family (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2005274937B2 (en) 2004-07-15 2011-08-18 Medivir Ab IAP binding compounds
EA012810B1 (ru) * 2005-02-25 2009-12-30 Тетралоджик Фармасеутикалс Димерные ингибиторы ингибиторов белков апоптоза (iap)
US20100317593A1 (en) * 2009-06-12 2010-12-16 Astrazeneca Ab 2,3-dihydro-1h-indene compounds
US8283372B2 (en) 2009-07-02 2012-10-09 Tetralogic Pharmaceuticals Corp. 2-(1H-indol-3-ylmethyl)-pyrrolidine dimer as a SMAC mimetic
MY153042A (en) 2009-07-02 2014-12-31 Sanofi Sa Novel (6-oxo-1, 6-dihydro-pyrimidin-2-yl)-amide derivatives, preparation thereof, and pharmaceutical use thereof as akt(pkb) phosphorylation inhibitors
UY33236A (es) * 2010-02-25 2011-09-30 Novartis Ag Inhibidores dimericos de las iap
UY33794A (es) 2010-12-13 2012-07-31 Novartis Ag Inhibidores diméricos de las iap
JP2014528409A (ja) 2011-09-30 2014-10-27 テトラロジック ファーマシューティカルズ コーポレーション 増殖性疾患（がん）の治療において使用するためのＳＭＡＣ模倣体（ビリナパント（ｂｉｒｉｎａｐａｎｔ））
US20130196927A1 (en) * 2012-01-27 2013-08-01 Christopher BENETATOS Smac Mimetic Therapy
US20150190470A1 (en) * 2012-08-01 2015-07-09 Tetralogic Pharmaceuticals Corporation Combination therapy
CN105451726B (zh) 2013-06-25 2021-03-16 沃尔特和伊利莎豪医学研究所 治疗细胞内感染的方法
US20160161495A1 (en) * 2013-07-30 2016-06-09 Health Researc Inc. Method of Treatment
WO2016079527A1 (en) 2014-11-19 2016-05-26 Tetralogic Birinapant Uk Ltd Combination therapy
WO2016097773A1 (en) 2014-12-19 2016-06-23 Children's Cancer Institute Therapeutic iap antagonists for treating proliferative disorders
SG11201807003UA (en) * 2016-02-24 2018-09-27 Childrens Hospital Of Eastern Ontario Res Institute Inc Smc combination therapy for the treatment of cancer
AU2017258145A1 (en) * 2016-04-27 2018-12-13 Medshine Discovery Inc. Benzimidazole-linked indole compound acting as novel divalent IAP antagonist
WO2019080928A1 (zh) * 2017-10-27 2019-05-02 南京明德新药研发股份有限公司 一种iap拮抗剂的晶型及其制备方法
CA3080943A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 The Regents Of The University Of California Novel agents targeting inhibitor of apoptosis proteins
US10944377B2 (en) * 2017-12-31 2021-03-09 Skyworks Solutions, Inc. Broadband power splitter
CN111655713B (zh) * 2018-02-09 2023-06-27 广东东阳光药业有限公司 Iap抑制剂及其在药物中的应用
JP7515175B2 (ja) 2018-07-31 2024-07-12 ファイメクス株式会社 複素環化合物
US10870663B2 (en) 2018-11-30 2020-12-22 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Compounds useful in HIV therapy
JPWO2021020585A1 (ru) 2019-07-31 2021-02-04
CN112521372B (zh) * 2019-09-18 2022-07-08 南京华威医药科技集团有限公司 一种细胞凋亡蛋白抑制剂及其制备方法和用途
CN112778398A (zh) * 2019-11-07 2021-05-11 杜心赟 肝靶向药、其药物组合物及其用途
CN114980883A (zh) 2020-01-20 2022-08-30 阿斯利康(瑞典)有限公司 用于治疗癌症的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂
AU2021399292A1 (en) * 2020-12-17 2023-07-13 Council Of Scientific & Industrial Research Smac mimetics for treatment of cancer, process for preparation and pharmaceutical composition thereof
WO2023194547A1 (en) 2022-04-08 2023-10-12 Medivir Ab Birinapant polymorph h
TW202410919A (zh) 2022-05-23 2024-03-16 美商英伊布里克斯公司 Dr5促效劑與iap拮抗劑之組合療法
WO2024133721A1 (en) 2022-12-21 2024-06-27 Step Pharma S.A.S. Combinations of ctps1 inhibitor with iap inhibitor for use in the treatment of cancer

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060194741A1 (en) * 2005-02-25 2006-08-31 Condon Stephen M Dimeric IAP inhibitors
US20080119532A1 (en) * 2004-03-01 2008-05-22 Board Of Regents, The University Of Texas System Dimeric Small Molecule Potentiators of Apoptosis

Family Cites Families (94)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3854480A (en) 1969-04-01 1974-12-17 Alza Corp Drug-delivery system
US3832253A (en) 1973-03-21 1974-08-27 Baxter Laboratories Inc Method of making an inflatable balloon catheter
DE2714880A1 (de) 1977-04-02 1978-10-26 Hoechst Ag Cephemderivate und verfahren zu ihrer herstellung
DE3174064D1 (en) 1980-10-15 1986-04-17 Takeda Chemical Industries Ltd Method for immunochemical assay and kit therefor
US4667014A (en) 1983-03-07 1987-05-19 Syntex (U.S.A.) Inc. Nonapeptide and decapeptide analogs of LHRH, useful as LHRH antagonists
US4452775A (en) 1982-12-03 1984-06-05 Syntex (U.S.A.) Inc. Cholesterol matrix delivery system for sustained release of macromolecules
US4525300A (en) 1983-01-07 1985-06-25 Japanese Foundation For Cancer Research Human leukemia virus-related peptides, antibodies of the peptides and a process for production of the antibodies
CA1200416A (en) 1983-05-13 1986-02-11 Societe Des Produits Nestle S.A. Food process
US5075109A (en) 1986-10-24 1991-12-24 Southern Research Institute Method of potentiating an immune response
US4935493A (en) 1987-10-06 1990-06-19 E. I. Du Pont De Nemours And Company Protease inhibitors
US5208007A (en) 1988-11-22 1993-05-04 Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Isotopic tracer composition and method for making and using same
US5023077A (en) 1989-01-24 1991-06-11 Aphton Corporation Immunogenic compositions and methods for the treatment and prevention of gastric and duodenal ulcer disease
US5545719A (en) 1990-05-01 1996-08-13 Neuromedica, Inc. Nerve growth peptides
JPH04167172A (ja) 1990-10-31 1992-06-15 Nec Corp ベクトルプロセッサ
DE4105480A1 (de) 1991-02-21 1992-08-27 Boehringer Mannheim Gmbh Verbesserte aktivierung von rekombinanten proteinen
US5831002A (en) 1992-05-20 1998-11-03 Basf Aktiengesellschaft Antitumor peptides
EP0656368B2 (en) 1992-08-05 2003-06-04 Meito Sangyo Kabushiki Kaisha Small-diameter composite composed of water-soluble carboxypolysaccharide and magnetic iron oxide
DE69230043T2 (de) 1992-12-11 2000-01-27 University Of Florida, Gainesville Materialien und methoden zur schädlingsbekämpfung
US5468494A (en) 1993-11-12 1995-11-21 Aphton Corp. Immunogenic compositions against human gastrin 17
US5688506A (en) 1994-01-27 1997-11-18 Aphton Corp. Immunogens against gonadotropin releasing hormone
US5527775A (en) 1994-10-13 1996-06-18 Enzon, Inc. Reduction of mammalian neoplasms with phospholipase A2 activating substances
US6187557B1 (en) 1995-08-08 2001-02-13 Tularik Inc. c-IAP1 and c-IAP2: inhibitors of apoptosis
US5786173A (en) 1996-03-19 1998-07-28 Idun Pharmaceuticals, Inc. MCH4 and MCH5, apoptotic protease, nucleic acids encoding and methods of use
US6133437A (en) 1997-02-13 2000-10-17 Apoptogen, Inc. Modulation of IAPs for the treatment of proliferative diseases
US5961955A (en) 1997-06-03 1999-10-05 Coulter Pharmaceutical, Inc. Radioprotectant for peptides labeled with radioisotope
US5977311A (en) 1997-09-23 1999-11-02 Curagen Corporation 53BP2 complexes
US6110691A (en) 2000-01-06 2000-08-29 Board Of Regents, The University Of Texas System Activators of caspases
US6608026B1 (en) 2000-08-23 2003-08-19 Board Of Regents, The University Of Texas System Apoptotic compounds
WO2002016418A2 (en) 2000-08-24 2002-02-28 Thomas Jefferson University An iap binding peptide or polypeptide and methods of using the same
WO2002026775A2 (en) 2000-09-29 2002-04-04 Trustees Of Princeton University Compositions and methods for regulating apoptosis
US6992063B2 (en) 2000-09-29 2006-01-31 The Trustees Of Princeton University Compositions and method for regulating apoptosis
WO2002030959A2 (en) 2000-10-13 2002-04-18 Abbott Laboratories Peptides derived from smac (diablo) and methods of use therefor
US20020160975A1 (en) 2001-02-08 2002-10-31 Thomas Jefferson University Conserved XIAP-interaction motif in caspase-9 and Smac/DIABLO for mediating apoptosis
JP2004531731A (ja) 2001-05-31 2004-10-14 ザ トラスティーズ オブ プリンストン ユニバーシテイ Ｉａｐ結合ペプチドおよびｉａｐに結合する化合物を同定するアッセイ
CA2456269A1 (en) 2001-08-23 2003-03-06 The Government Of The United States Of America Methods of inhibiting formation of vascular channels and profileration using pyridinone derivatives
US20060258581A1 (en) 2001-11-21 2006-11-16 Reed John C Methods and composition for derepressions of IAP-inhibited caspase
JP2005510569A (ja) 2001-11-21 2005-04-21 ザ バーナム インスティチュート Ｉａｐ阻害カスパーゼの活性化のための方法および組成物
CN100384819C (zh) 2002-07-02 2008-04-30 诺瓦提斯公司 与细胞凋亡蛋白抑制剂结合的smac蛋白的肽抑制剂
EP1578777B1 (en) 2002-07-15 2008-11-26 The Trustees of Princeton University Iap binding compounds
US7149755B2 (en) 2002-07-29 2006-12-12 Hewlett-Packard Development Company, Lp. Presenting a collection of media objects
US20080199439A1 (en) 2003-02-12 2008-08-21 Mclendon George L IAP-binding cargo molecules and peptidomimetics for use in diagnostic and therapeutic methods
US7135575B2 (en) 2003-03-03 2006-11-14 Array Biopharma, Inc. P38 inhibitors and methods of use thereof
CA2553871A1 (en) 2004-01-16 2005-08-04 The Regents Of The University Of Michigan Smac peptidomimetics and the uses thereof
BRPI0506883A (pt) 2004-01-16 2007-05-29 Univ Michigan miméticos de smac conformacionalmente comprimidos e seus usos
US20110251134A1 (en) 2004-02-05 2011-10-13 Leigh Zawel Combination of (a) a dna toposomerase inhibitor and (b) an iap inhibitor
JP5122275B2 (ja) 2004-03-23 2013-01-16 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｉａｐのアザビシクロ−オクタンインヒビター
PT2253614E (pt) 2004-04-07 2013-01-09 Novartis Ag Inibidores de iap
CA2570321C (en) 2004-07-02 2013-10-08 Genentech, Inc. Inhibitors of iap
US7674787B2 (en) 2004-07-09 2010-03-09 The Regents Of The University Of Michigan Conformationally constrained Smac mimetics and the uses thereof
JP2008505976A (ja) 2004-07-12 2008-02-28 アイディーユーエヌ・ファーマスーティカルズ・インコーポレーテッド テトラペプチド類似体
AU2005274937B2 (en) 2004-07-15 2011-08-18 Medivir Ab IAP binding compounds
JP2008016458A (ja) 2004-08-18 2008-01-24 Teijin Ltd 電磁波吸収シート材料
KR101278732B1 (ko) 2004-12-20 2013-07-09 제넨테크, 인크. Ｉａｐ의 피롤리딘 억제제
US20060228352A1 (en) * 2005-02-24 2006-10-12 Schoenberger Stephen P TRAIL and methods of modulating T cell activity and adaptive immune responses using TRAIL
CN101128425B (zh) * 2005-02-25 2012-12-26 泰特拉洛吉克药业公司 Iap二聚体抑制剂
US20070003535A1 (en) 2005-03-17 2007-01-04 Reed John C Methods and compositions for derepression of IAP-inhibited caspase
US7763604B2 (en) 2005-05-16 2010-07-27 Thallion Pharma Ceuticals, Inc. Methods for administration of a farnesyl dibenzodiazepinone
CA2607940C (en) 2005-05-18 2009-12-15 Aegera Therapeutics Inc. Bir domain binding compounds
AU2006254538A1 (en) 2005-05-25 2006-12-07 2Curex Aps Compounds modifying apoptosis
MX2007015419A (es) 2005-06-08 2008-02-21 Novartis Ag Compuestos organicos.
JP2009509128A (ja) 2005-08-09 2009-03-05 テトラロジック ファーマシューティカルズ コーポレーション 増殖性疾患の治療
US20070203749A1 (en) 2005-08-09 2007-08-30 Sri Chunduru Business methods for compounds for treatment of proliferative disorders
AU2006308453B9 (en) 2005-10-25 2011-12-01 Pharmascience Inc. IAP BIR domain binding compounds
CA2632807A1 (en) 2005-12-19 2007-09-20 Genentech, Inc. Inhibitors of iap
KR20080080131A (ko) 2005-12-20 2008-09-02 노파르티스 아게 Ｉａｐ-억제제와 탁산의 조합물
WO2007101347A1 (en) 2006-03-07 2007-09-13 Aegera Therapeutics Inc. Bir domain binding compounds
TWI504597B (zh) 2006-03-16 2015-10-21 Pharmascience Inc 結合於細胞凋亡抑制蛋白（ｉａｐ）之桿狀病毒ｉａｐ重複序列（ｂｉｒ）區域之化合物
EP1996184A4 (en) 2006-03-21 2010-09-22 Joyant Pharmaceuticals Inc SMALL MOLECULAR APOPTOSIS PROMOTERS
US8202902B2 (en) 2006-05-05 2012-06-19 The Regents Of The University Of Michigan Bivalent SMAC mimetics and the uses thereof
BRPI0711326B8 (pt) 2006-05-05 2021-05-25 Univ Michigan Regents compostos miméticos de smac bivalentes
CN101535300B (zh) 2006-05-16 2014-05-28 埃格拉医疗公司 Iap bir域结合化合物
AR064235A1 (es) 2006-07-24 2009-03-25 Tetralogic Pharmaceuticals Cor Dipeptidos antagonistas de iap, una composicion farmaceutica que los comprende y el uso de los mismos para el tratamiento del cancer
CL2007002167A1 (es) * 2006-07-24 2009-01-23 Tetralogic Pharm Corp Compuestos derivados de indol, antagonistas iap; composicion farmaceutica que comprende a dicho compuesto; y uso del compuesto en el tratamiento de cancer.
US20100144650A1 (en) 2006-07-24 2010-06-10 Tetralogic Pharmaceuticals Corporation Dimeric iap inhibitors
WO2008014240A2 (en) 2006-07-24 2008-01-31 Tetralogic Pharmaceuticals Corporation Dimeric iap inhibitors
US20100056495A1 (en) 2006-07-24 2010-03-04 Tetralogic Pharmaceuticals Corporation Dimeric iap inhibitors
US20100143499A1 (en) 2006-07-24 2010-06-10 Tetralogic Pharmaceuticals Corporation Dimeric iap inhibitors
PE20110217A1 (es) 2006-08-02 2011-04-01 Novartis Ag DERIVADOS DE 2-OXO-ETIL-AMINO-PROPIONAMIDA-PIRROLIDIN-2-IL-SUSTITUIDOS COMO INHIBIDORES DEL ENLACE DE LA PROTEINA Smac AL INHIBIDOR DE LA PROTEINA DE APOPTOSIS
AU2007318220A1 (en) 2006-10-19 2008-05-15 Novartis Ag Organic compounds
WO2008079735A1 (en) 2006-12-19 2008-07-03 Genentech, Inc. Imidazopyridine inhibitors of iap
WO2008128121A1 (en) 2007-04-12 2008-10-23 Joyant Pharmaceuticals, Inc. Smac mimetic dimers and trimers useful as anti-cancer agents
RU2491276C2 (ru) 2007-04-30 2013-08-27 Дженентек, Инк. Ингибиторы iap
CA2686638A1 (en) 2007-05-07 2008-11-13 Tetralogic Pharmaceuticals Corp. Tnf.alpha. gene expression as a biomarker of sensitivity to antagonists of inhibitor of apoptosis proteins
US20110288116A1 (en) 2008-01-24 2011-11-24 Tetralogic Pharmaceuitcal Corporation Iap inhibitors
EP2328412A4 (en) 2008-09-17 2012-03-14 Tetralogic Pharm Corp IPA INHIBITORS
CA2750764A1 (en) 2009-01-29 2010-08-05 Otto-Von-Guericke-Universitaet Magdeburg Method of determining sensitivity of human or non-human animal cells to an iap antagonist
NZ596669A (en) 2009-05-28 2013-11-29 Tetralogic Pharm Corp Iap inhibitors
CN102458116B (zh) 2009-05-28 2014-12-31 泰特拉洛吉克药业公司 Iap抑制剂
US8283372B2 (en) 2009-07-02 2012-10-09 Tetralogic Pharmaceuticals Corp. 2-(1H-indol-3-ylmethyl)-pyrrolidine dimer as a SMAC mimetic
JP2014528409A (ja) 2011-09-30 2014-10-27 テトラロジック ファーマシューティカルズ コーポレーション 増殖性疾患（がん）の治療において使用するためのＳＭＡＣ模倣体（ビリナパント（ｂｉｒｉｎａｐａｎｔ））
US20130196927A1 (en) 2012-01-27 2013-08-01 Christopher BENETATOS Smac Mimetic Therapy
US20150190470A1 (en) 2012-08-01 2015-07-09 Tetralogic Pharmaceuticals Corporation Combination therapy
WO2014121178A1 (en) 2013-02-04 2014-08-07 Tetralogic Pharmaceuticals Corp. Smac mimetic method of treatment
US20140303090A1 (en) 2013-04-08 2014-10-09 Tetralogic Pharmaceuticals Corporation Smac Mimetic Therapy

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20080119532A1 (en) * 2004-03-01 2008-05-22 Board Of Regents, The University Of Texas System Dimeric Small Molecule Potentiators of Apoptosis
US20060194741A1 (en) * 2005-02-25 2006-08-31 Condon Stephen M Dimeric IAP inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
CA2766162A1 (en) 2011-01-06
MY153116A (en) 2014-12-31
AP3619A (en) 2016-02-29
US8603816B2 (en) 2013-12-10
US8986993B2 (en) 2015-03-24
ES2565337T3 (es) 2016-04-04
US10314881B2 (en) 2019-06-11
SG177404A1 (en) 2012-02-28
US8283372B2 (en) 2012-10-09
CN102471275B (zh) 2014-05-28
AU2010266525B2 (en) 2015-05-21
ZA201109342B (en) 2014-05-28
KR20120047905A (ko) 2012-05-14
US20150158908A1 (en) 2015-06-11
US20180303897A1 (en) 2018-10-25
TW201113276A (en) 2011-04-16
EP2448923B8 (en) 2016-01-27
HK1169410A1 (zh) 2013-01-25
CN102471275A (zh) 2012-05-23
DK2448923T3 (en) 2016-02-29
AR077629A1 (es) 2011-09-14
ECSP11011557A (es) 2012-06-29
NZ597051A (en) 2013-10-25
IL217237A0 (en) 2012-02-29
AU2010266525A1 (en) 2012-01-19
HUE026982T2 (en) 2016-08-29
US20170182116A1 (en) 2017-06-29
EP2448923A4 (en) 2013-05-01
US11951147B2 (en) 2024-04-09
WO2011002684A1 (en) 2011-01-06
PE20131173A1 (es) 2013-10-03
US10596220B2 (en) 2020-03-24
TWI485148B (zh) 2015-05-21
MX2011013819A (es) 2012-06-08
US20140073579A1 (en) 2014-03-13
AP2012006066A0 (en) 2012-02-29
US20190255139A1 (en) 2019-08-22
AU2010266525C1 (en) 2015-10-01
KR101755218B1 (ko) 2017-07-07
EA201171494A1 (ru) 2012-06-29
US20130012564A1 (en) 2013-01-10
CA2766162C (en) 2018-07-24
BRPI1013958B1 (pt) 2022-04-05
US11351221B2 (en) 2022-06-07
EP2448923A1 (en) 2012-05-09
US10034912B2 (en) 2018-07-31
HK1171022A1 (en) 2013-03-15
US20230149500A1 (en) 2023-05-18
US20120115922A1 (en) 2012-05-10
CL2011003333A1 (es) 2012-07-20
EP2448923B1 (en) 2015-11-25
CO6480975A2 (es) 2012-07-16
JP2012532129A (ja) 2012-12-13
JP5674780B2 (ja) 2015-02-25
US20110003877A1 (en) 2011-01-06
US20200282002A1 (en) 2020-09-10
BRPI1013958A2 (pt) 2019-09-03
IL217237A (en) 2014-09-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA022061B1 (ru) Миметики белка smac
CN102958928B (zh) 二聚体smac模拟物
ES2395196T3 (es) Agente inmunosupresor que comprende un compuesto heterocíclico como ingrediente activo
CN112996518A (zh) Wd40重复结构域蛋白5(wdr5)降解/破坏化合物和使用方法
CN111936502B (zh) 杂二环羧酸及其盐
AU2012315986A1 (en) Smac mimetic (birinapant) for use in the treatment of proliferative diseases (cancer)
JP6615207B2 (ja) 複素環式化合物及びその使用
KR20050113612A (ko) 인돌리논 화합물을 사용한 과도한 골 용해의 치료
KR20130031358A (ko) 퀴나졸린 화합물
WO2023215449A1 (en) Tetrahydroisoquinoline heterobifunctional bcl-xl degraders
JP2024512046A (ja) プロテインキナーゼｃ（ｐｋｃ）に対して作用するジテルペノイド化合物

Legal Events

Date Code Title Description
PC4A Registration of transfer of a eurasian patent by assignment
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

PC4A Registration of transfer of a eurasian patent by assignment
TK4A Corrections in published eurasian patents