EA013566B1

EA013566B1 - Микроорганизм для детоксикации фумонизинов, а также его применение, способ детоксикации фумонизинов и кормовая добавка, содержащая этот микроорганизм

Info

Publication number: EA013566B1
Application number: EA200701069A
Authority: EA
Inventors: Герд Шатцмаир; Мартин Тойбель; Элизавет Фекиру; Ева-Мария Биндер
Original assignee: Эрбер Акциенгезелльшафт
Priority date: 2004-11-16
Filing date: 2005-11-15
Publication date: 2010-06-30
Also published as: AT501359A1; BRPI0518433A2; DK1860954T3; NO20073123L; ZA200703979B; CN101056541B; WO2006053357A3; ES2381272T3; US20070292579A1; EA200701069A1; WO2006053357A2; KR101172932B1; ATE542432T1; BRPI0518433B1; CA2587405C; AU2005306554A1; NO337513B1; EP1860954B1; AT501359B1; EP1860954A2

Abstract

Изобретение относится к микроорганизму для детоксикации фумонизинов и производных фумонизина, а также к применению бактерий или дрожжей, отдельно или в комбинации с двумя или более штаммами для детоксикации фумонизинов и производных фумонизина в пищевых продуктах и/или кормовых средствах, способу детоксикации фумонизинов и производных фумонизина с использованием микроорганизма, а также кормовой добавке для инактивации микотоксинов, в частности фумонизинов и производных фумонизина.

Description

Настоящее изобретение относится к микроорганизму для детоксикации фумонизинов и производных фумонизина, а также применению бактерий или дрожжей по отдельности или в комбинации двух или более штаммов для детоксикации фумонизинов и производных фумонизина в пищевых продуктах и/или кормовых средствах, способу детоксикации фумонизинов и производных фумонизина с использованием микроорганизма, а также кормовой добавке для инактивации микотоксинов, в частности фумонизинов и производных фумонизина.

Микотоксины, которые включают в себя множество самых различных токсинов, представляют все более увеличивающуюся проблему в современной промышленности пищевых продуктов и кормовых средств, так как множество растений, которые впоследствии перерабатываются в пищевые продукты или в кормовые средства, или непосредственно поедаются животными, являются пораженными самыми различными токсинами в самых различных концентрациях, так что, наряду с тем фактом, что соответствующий токсин должен быть обнаружен, должен быть привлечен или должен быть найден эффективный и безвредный способ для детоксикации или для расщепления соответствующих токсинов.

Одним путем получения не содержащих токсинов растений является попытка выведения так называемых трансгенных растений, которые являются устойчивыми против определенных токсинов, или получения посредством применения «геноманипулируемых» растений пищевых средств, которые на основе устойчивости соответствующих растений против токсинов не содержат их.

Этот путь, наряду с тем фактом, что он является чрезвычайно комплексным и сложным, во многих странах мира не является неоспоримым, и предпринимаются попытки нахождения другого вида детоксикации растений.

Токсинами, которые особенно часто встречаются на кукурузе и поэтому приводят к тяжелым вредным последствиям после поедания корма, являются фумонизины или производные фумонизина, которые, хотя и могут расщепляться в лабораторных опытах уже известными микроорганизмами, но для которых до сих пор не были найдены микроорганизмы, которые подобное расщепление могут проводить при самых разных концентрациях токсина и в самых разных питательных средах. Кроме того, известные микроорганизмы нуждаются для этого расщепления в порядочных периодах времени, больших чем 24 ч, так что подобные микроорганизмы неразумно использовать в промышленном или коммерческом масштабе.

Следующей проблемой в связи с микотоксинами в случае пищевых продуктов и кормовых средств является то, что на основании того факта, что выпускают все больше комбикормов или пищевых продуктов, которые содержат множество зерновых культур или сортов зерновых культур, несколько микотоксинов могут встречаться в одном и том же пищевом продукте или кормовом продукте, и что, повидимому, необходимо более осмысленное или нацеленное расщепление этих микотоксинов. Кроме того, в недавних исследованиях было установлено, что токсины могут обнаруживать между собой комбинаторные взаимодействия, которые дополнительно усиливают вредное действие отдельных токсинов. Так, например, Нагуеу 1996 сообщал, что у свиней наблюдаются синергические действия фумонизинов и деоксиниваленола. Кроме того, признается, что множество токсинов, которые могут, например, содержаться в кормовых средствах, приводят у животных к иммуносупрессивным эффектам, приводящим к параллельному появлению микотоксинов.

Настоящее изобретение направлено на то, чтобы получить микроорганизмы для детоксикации фумонизинов и производных фумонизина, которые, с одной стороны, могут очень быстро расшеплять токсин, а, с другой стороны, наряду с быстрым расщеплением, могут также проводить это расщепление в присутствии самых разных концентраций пищевых продуктов. Наконец, настоящее изобретение направлено на то, чтобы получить микроорганизм или комбинацию микроорганизмов, который (которые), наряду с фумонизинами, может (могут) расщеплять также дополнительные токсины по отдельности или в комбинации, для получения, в частности, при применении самых разных кормовых растений не содержащее токсинов кормовое средство.

Для решения этой задачи изобретение относится к микроорганизму для детоксикации фумонизинов и производных фумонизина, причем используются детоксицирующие бактерии или дрожжи, выбранные из штаммов Ό8Μ 16254 и Ό8Μ 16257, принадлежащих к таксону 8рЫпдотопабасеае, штамма Ό8Μ 16255, принадлежащего к таксону К1нхоЫа1е5. штамма Ό8Μ 16256, принадлежащего к таксону МктоЬас1епасеае, штамма Ό8Μ 16253, принадлежащего к таксону КЫ/оЫасеае, штамма Ό8Μ 16252, принадлежащего к таксону А1сайдепасеае, и РкЫа §р. Ό8Μ 16562, которые ферментативно превращают фумонизины в одностадийной или многостадийной реакции в деаминированные метаболиты. Вышеуказанные микроорганизмы не только в состоянии ферментативно превращать фумонизины в одностадийной или многостадийной реакции в деаминированные метаболиты, но могут выполнять это в течение чрезвычайно коротких периодов времени, а также в присутствии комплексных окружающих сред, таких как, например, кормовые средства или пищевые продукты, т.е. в присутствии нескольких или самых различных источников углерода и, в частности, в присутствии преобладания пищевого продукта.

В частности, могут быть вкратце описаны следующие микроорганизмы. Штамм Ό8Μ 16254 согласно частичному секвенированию рДНК 168 с прямым праймером 27 (длина последовательности 689 п.н.) относится к таксону 8рЫпдотопабасеае. Эта частичная последовательность рДНК 168 обнаруживает

- 1 013566 следующую последовательность оснований:

6ААСС-СТСС5 СССАТбССТА АСАСАТОСАА 6ТССААССАА бТСТТСССАС ТТАОТСбСбС

АСбббТбСбТ ААСССбТббб ААТСТОСССТ ТбббТАСбСА АТААСТСАбА САААТТТСТС

121 СТААТАСССТ АТААТ6ТСТТ СббАССАААС АТТТАТСОСС СААббАТбАб ССССССТААб

181 АТТАбСТАбТ ТббТбббСТА ААббСССАСС ААбССбАСбА ТСТТТА0СТ6 СТСТ6АОА6С

241 АТбАТСАССС АСАСТбббАС ТСАОАСАСбЕ СССАСАСТСС ТАСССбАббС АбСАбТбббб

301 ААТАТТСбАС ААТбббСОАА АбССТбАТСС АОСААТбССб СЕТбАОТСАТ 6АА6ССССТА

361 СббТТбТААА 6СТСТТТТАС СС6С6АТ6АТ ААТСАСАбТА ССбббАбААТ ААОСТССббС

421 ТААСТССбТб ССА6СА6СС6 СббТААТАСС 6А666А6СТА бССТТСТТСб СААТТАСТбб

481 бСбТАААбСО СбСбТАббСО 6ТТТТТСААС ТСАбАббТбА ААССССбббб СТСААСССС6

541 6ААТТСССТТ ТбАААСТббА АбАСТТбААТ СТТСбАбАбб ТСАбТОСААТ ТСС6А6Т6ТА

601 ОАОСССАДАТ ТСбТАСАТАТ ТС66АА6ААС АССАбТббСб ААббСбАСТб АСТСбАСААб

661 АТТСАСССТб АббТССЙААА бСбТббббА причем этот микроорганизм является грамотрицательным, образует небольшие палочки, которые встречаются преимущественно в виде отдельных клеток и частично образуют нитевидные цепочкообразные структуры.

Штамм Ό8Μ 16257 принадлежит согласно частичному секвенированию рДНК 168 (с обратным праймером 30, полученной длиной цепи 426 п.н.) также к таксону 8рЫпдошопабасеае. Он обнаруживает следующую последовательность:

1	6АТССТ66СТ	СА6ААС6ААС	ССТС0С66СА	ТСССТААСАС	АТОСААОТСб	ААСбААбТСТ
61	ТСССАСТТАС	ТбССОСАССб	6ТСС6ТААС6	ССТ606ААТС	ТбСССТТббб	ТАСббААТАА
121	СТСАбАСААА	ТТТ6Т6СТАА	ТАССбТАТАА	Т0АСТТС6СТ	ССАААбАТТТ	АТСбСССААб
181	САТбАССССб	СбТААбАТТА	бСТАбТТббТ	СОбОТААААб	ССТАССААОб	СбАСбАТСТТ
241	ТАССТббТСТ	СА6А66АТ6А	ТСА6ССАСАС	ТббСАСТСАС	АСАССССССА	САСТССТАСС
301	ббАбОСАССА	бТббббААТА	ТТббАСААТб	6СС6ААА6СС	ТбАТССАбСА	АТбССОССТб
361	АбТбАТбААб	бСССТАбббТ	ТбТАААбСТС	ТТТТАСССбб	6АТ6АТААТ6	АСАОТАССбб
421	6А6ААТ

Этот микроорганизм образует небольшие палочки, которые большей частью организованы в длинные нитевидные клеточные структуры.

Ό8Μ 16255 согласно частичному секвенированию рДНК 168 с прямым праймером 27 дает следующую последовательность с длиной 720 п.н.:

АСбСТббСбб САббСТТААС АСАТбСААбТ ССААСССТСТ СТТСббАССС АОТСССАСАС

ОССТбАСТАА ТССАТСббАА ТСТАСССТТС ТСТАСбСААТ ААСТСА6ССА ААСТТСТССТ

121 ААТАСССТАТ АСбСССТТТТ ббббАААбАТ ТТАТС60А6А АТ6АТ6А6СС САТ6ТТ66АТ

181 ТАбСТАОТТб 6ТА666ТААА ббССТАССАА ббСбАСОАТС САТА6СТ66Т СТСА6А66АТ

241 ОАТСАбССАС АСТбССАСТС АбАСАСббСС САбАСТССТА СОС6А6ОСАС САСТббббАА

301 ТАТТббАСАА ТСбССССААС ССТСАТССАб ССАТСССССС ТСАСТСАТСА АООСССТАбб

361 6ТТ6ТААА6С ТСТТТСАССО 6Т0АА6АТАА ТбАСббТААС СбСАбААбАА ССССС66СТА

421 АСТТСОТбСС А6СА6СС6С0 6ТААТАССАА ОООббСТАбС 6ТТ6ТТС66А ТТТАСТбббС

481 СТААА6С6СА СбТАбССббА СТТТТААСТС АСбббТбААА ТСССббббСТ СААССССббА

541 АСТСССТТТб АТАСТССААС ТСТТбАбТАТ ССААОАССТА АбТббААТТб С6АСТ6ТА6А

601 66Т6АААТТС СТАСАТАТТС 6СА66ААСАС САбТббСОАА ббСббСТТАС ТббТССАТТА

661 СТ6АС6СТ0А 66Т6С6ААА6 СбТбббббАб САААСА06АТ ТАОАТАСССТ 6СТА6ТССАС

Этот микроорганизм принадлежит к таксону К1ихоЫа1е5. является грамотрицательными и образует небольшие палочки преимущественно в виде отдельных клеток.

Микроорганизм Ό8Μ 16256 принадлежит к таксону МюгоЬаСепасеае. Частичное секвенирование рДНК 168 с прямым праймером 27 дает следующую последовательность с длиной 706 п.н.:

- 2 013566

1	СААСЕСТЕЕС	ЕЕСЕТЕСТТА	АСАСАТЕСАА	ЕТСБААССАТ	СААССТЕЕАЕ	сттестстсо
61	ТЕЕААЕАЕТЕ	ЕСЕААССЕЕТ	ЕАЕТААСАСЕ	ТЕАЕТААССТ	ЕССССАЕАСТ	СТЕЕЕАТААС
121	СССТЕЕАААС	ЕСССТСТААТ	АСТСЕАТАТС	АССССТАСАС	6САТСТСТТ0	6СЕСТССААА
181	ЕАТТТАТСЕЕ	ТСТОЕЕАТЕЕ	ЕСТСОСЕЕСС	ТАТСАЕСТАС	АТЕЕТСА06Т	ААСЕССТСАС
241	САТЕОСЕАСЕ	АССЕЕТАССС	ЕСССТ6АЕА6	ЕЕТСАСССЕС	САСАСТЕЕЕА	СТЗАЕАСАСС
301	ССССАСАСТС	СТАСЕЗСАЕЕ	САССАСТСЕС	СААТАТТССА	СААТЕЕЕССА	ААСССТСАТЕ
361	САЕСААСЕСС	ЕССТСАЕСЕА	ТЕАСТЕССТТ	СЕСЕТТЕТАА	АССТСТТТТА	ЕТАЕЕСААЕА
421	АСССАААСТЕ	АСССТАССТЕ	САЕАААААЕС	АСССССТААС	ТАСЕТЕССАЕ	САСССЕСЕЕТ
481	ААТАССТАЕЕ	СТССААЕСЕТ	ТСТССЕЕААТ	ТАТТССЕССТ	АААЕАЕСТСС	ТАЕЕСЕЕСТТ
541	ЕТСЕСЕТСТЕ	СТСТЕААААС	ССЕАЕЕСТСА	АССТСЕЕЕСС	ТССАСТОСЕТ	АСЕЕЕСАСЕС
601	ТАСАСТЕССЕ	ТАЕСЕЕАСАТ	ТССААТТССТ	ЕОТСТАЕССС	ТЕСААТСССС	АСАТАТСАСС
661	АЕЕААСАССС	АТ6ЕССАА6С	САЕАТСТСТС	ЕСССССТАСТ	ЕАСЕСТ

Этот микроорганизм является грамположительным и обнаруживает небольшие короткие палочки, которые частично организованы в цепочкообразные соединения клеток.

Ό8Μ 16253 принадлежит согласно частичному секвенированию рДНК 168 (обратный праймер 530, длина последовательности 392 п.н.) к таксону ШпхоЫассас. Эта последовательность является следующей:

ТССТСЕСТСА ЕААСЕААССС ТСЕСЕССАСЕ СТТААСАСАТ ЕСААЕТСЕАС ССССССбСАА

ССССАССЕЕС АСАСЕСЕТЕА СТААССССТС ССААТСТАСС САССССТССС ЕААТАЕСТСС

121 6ЕЕАААСТС6 ААТТААТАСС ОСАТАССССС ТАСЕЕСЕЕАА АЕАТТТАТСЕ ЕЕЕТТТЕАТЕ

181 АСССССССТТ СЕАТТАССТА СТТССТЕЕЕС ТАААСЕССТА ССААСЗСЕАС ЕАТССАТАЕС

241 ТЕСТСТСДОА ССАТСАТСАЕ ССАСАТТСЕС АСТЕАСАСАС ЕЕСССАААСТ ССТАСЕЕЕАЕ

301 ССАССАСТС6 ЕСААТАТТСЕ АСААТСЕЕСС СААСССТСАТ ССАСССАТСС С6СЕТЕАОТС

361 АТСААССССС ТАЕЕСТТЕТА ААССТСТТТС АС

Этот микроорганизм является грамотрицательным и обнаруживает небольшие палочки, которые встречаются преимущественно в виде отдельных клеток.

Микроорганизм Ό8Μ 16252 принадлежит к таксону А1сайдепасеае. Частичное секвенирование рДНК 168 дает длинный ДНК-фрагмент 476 п.н. со следующей нуклеотидной последовательностью:

ТССТ6ССТСА САТТЕААСЕС ТАЕСЕЕЕАТЕ ССТТАСАСАТ ЕСААЕТСЕАА СЕЕСАЕСАСЕ

САСТТСССТС ТСЕТЕССЕА6 ТЕССЕААСЕЕ ЕТСАСТААТС ТАТССЕААСЕ ТСССТАЕТАЕ

121 СЕЕСЕСАТАА СТАСЕССААА 5ССТА6СТАА ТАССССАТАС ССССТАСС6С ОЕАААЕСАЕЕ

181 СЕАТСЕСААС АССТТЕСАСТ АТТАСАСССС СССАТАТССЕ АТТАССТАСТ ТССТССССТА

241 АССЕСТСАСС АА6ЕСЕАСЕА ТССЕТАЕСТЕ ЕТТТСАСАЕО АССАССАЕСС АСАСТОЕСАС

301 ТСАЕАСАСЕС СССАЕАСТСС ТАСЕЕЕАЕСС АССАСТСЕЕС ААТТТТСЕАС ААТСССССАА

361 АСССТЕАТСС АЕССАТСССЕ СЕТЕТОССАТ ЕААЕСССТТС ΕΘΕΤΤΘΤΑΑΑ ЕСАСТТТТЕЕ

421 САСЕАААСАА АССТСАТЕСЕ СТААТАСССС СТЕАААСТЕА СЕЕТАССТЕС ΑΕΆΆΤΑ

Этот микроорганизм является грамотрицательным и обнаруживает небольшие прямые палочки, которые встречаются в виде комковатых многоклеточных соединений.

Ό8Μ 16562, а именно, РюЫа 8р.. обнаруживает овальные, относительно небольшие дрожжевые клетки, которые встречаются по отдельности и не встречаются в виде соединений клеток.

В частности, удалось доказать, что, хотя эти микроорганизмы являются относительно различными между собой, они, наряду с тем фактом, что все они могут чрезвычайно быстро детоксицировать фумонизины, обладают свойством, быстро и надежно выполнять детоксикацию фумонизинов в комплексных окружениях.

Согласно усовершенствованному варианту осуществления изобретения эти бактерии или дрожжи стабилизированы в форме порошков, жидкостей или геля, вследствие чего обеспечен стабильный, в любое время применимый для соответствующего использования продукт.

В соответствии с одним усовершенствованным вариантом изобретения эти бактерии или дрожжи используют в виде бесклеточного экстракта или необработанного экстракта, посредством чего этот применимый продукт микроорганизмов может быть приготовлен быстро и надежно.

Для по возможности полного удаления токсинов из пищевых продуктов или кормовых средств, в соответствии с одним усовершенствованным вариантом изобретения, с использованием микроорганиз

- 3 013566 мов по изобретению можно детоксицировать, наряду с фумонизинами и производными фумонизина, по меньшей мере еще один микотоксин, выбранный из зеараленонов, афлатоксинов или охратоксинов. В частности, оказалось, что микроорганизмы в соответствии с изобретением могут детоксицировать по меньшей мере еще один токсин, причем эта детоксикация может достигаться также быстро и надежно, как и детоксикация фумонизинов. Вследствие этого посредством приготовления микроорганизмов без дополнительной добавки удается полностью расщеплять большинство токсинов в пищевых продуктах и кормовых средствах, в частности в смеси пищевых продуктов или кормовых средств, и посредством этого обеспечивать высококачественный, не содержащий токсинов пищевой продукт или кормовое средство.

Настоящее изобретение относится также к применению бактерий или дрожжей, по отдельности или в комбинации из двух или более штаммов, выбранных из штаммов Ό8Μ 16254 и Ό8Μ 16256, принадлежащих к таксону 8рй1идотопабасеае, штамма Ό8Μ 16255, принадлежащего к таксону В1ихоЫа1с5. штамма Ό8Μ 16256, принадлежащего к таксону М1сгоЬас1ег1асеае, штамма Ό8Μ 16253, принадлежащего к таксону ВЫ/оЫасеае, штамма Ό8Μ 16252, принадлежащего к таксону А1сайдеиасеае, и РюЫа бр. Ό8Μ 16562, для детоксикации фумонизинов и производных фумонизина в пищевых продуктах и/или кормовых средствах. Посредством применения микроорганизмов в соответствии с изобретением удается не только полная детоксикация фумонизинов и производных фумонизина в пищевых продуктах и/или кормовых средствах, но, наряду с тем фактом, что эти микроорганизмы способны к детоксикации в средах, которые обеспечивают избыточное предоставление углерода, эти микроорганизмы могут проводить детоксикацию в течение чрезвычайно короткого времени. Кроме того, посредством применения вышеназванных микроорганизмов, удается, наряду с фумонизинами, детоксицировать дополнительный микотоксин, выбранный из зеараленонов, афлатоксинов или охратоксинов. Благодаря подобному применению, в частности, в смешанных кормовых средствах или смешанных зерновых продуктах для употребления в пищу человеком, гарантируется то, что различные присутствующие в зерне токсины быстро и надежно расщепляются посредством применения микроорганизмов по изобретению.

Для дополнительного улучшения этого расщепления в соответствии с изобретением используют смешанные культуры из бактерий и/или дрожжей для детоксикации микотоксинов. Посредством применения смешанных культур является возможным одновременное воздействие на большинство присутствующих токсинов на одном и том же пищевом продукте или кормовом средстве и тем самым может достигаться полная детоксикация. Кроме того, посредством подобного применения впервые становится возможным надежное предотвращение или пресечение появления нежелательных синергических эффектов вследствие существования различных типов микотоксинов.

Кроме того, посредством применения микроорганизмов в соответствии с изобретением удается расщеплять крайне низкие концентрации самых различных микотоксинов, в частности 100 мкг/кг - 500 мг/кг, предпочтительно 250 мкг/кг - 25 мг/кг, фумонизинов или производных фумонизина, 10 мкг/кг - 10 мг/кг, предпочтительно 40 мкг/кг - 2 мг/кг зеараленона или производного зеараленона, 1 мкг/кг - 2 мг/кг, предпочтительно 10 мкг/кг - 750 мкг/кг афлатоксинов, 1 мкг/кг - 2 мг/кг, предпочтительно 5 мкг - 500 мкг/кг охратоксинов, вследствие чего, наряду с тем фактом, что возможна детоксикация самых различных токсинов посредством применения микроорганизмов по изобретению, также гарантируется, что атакуются и расщепляются также крайне низкие концентрации этих токсинов, что было до сих пор трудным, если даже не невозможным, с обычными микроорганизмами.

Для достижения по возможности полной детоксикации всех, например, содержащихся в комбикорме токсинов, настоящее изобретение усовершенствовано в связи с этим таким образом, что комбинация или смешанная культура, содержащая дополнительно по меньшей мере одну дополнительную бактерию или одни дрожжи, выбранные из: 8рЫпдошопаб бр. Ό8Μ 14170 и Ό8Μ 14167, 81епо1горйотопаб ийгйгебисепб Ό8Μ 14168, 81епо1горйотопаб бр. Ό8Μ 14169, Ва1б1оша еШгорйа Ό8Μ 14171, ЕиЬас1егшт бр. Ό8Μ 14197, Тпсйоброгоп тусоЮхтпогапб Ό8Μ 14153, Сгур1ососсиб бр. Ό8Μ 14154, Вйобо1оги1а уагго\уи Ό8Μ 14155, Тпсйоброгоп тисокеб Ό8Μ 14156, Тпсйоброгоп би1сйит Ό8Μ 14162 или ЕиЬас1егшт Ό8Μ 117798, используется для детоксикации микотоксинов, в частности фумонизинов и производных фумонизина, зеараленона или производных зеараленона, охратоксинов, трихотеценов и/или афлатоксинов. Посредством применения комбинации или смешанной культуры, которая дополнительно содержит по меньшей мере одну дополнительную бактерию или одни дрожжи, которая (которые) пригодна (пригодны) для расщепления трихотеценов, зеараленона или производных зеараленона, афлатоксинов или охратоксинов, удалось, наряду с детоксицирующим действием микроорганизмов данного изобретения, а именно расщеплением фумонизинов, расширить их способность расщепления в отношении других токсинов в том смысле, что посредством нацеленного применения нескольких микроорганизмов все, возможно, присутствующие в кормовом продукте токсины могут расщепляться быстро и надежно вместе и независимо друг от друга.

При способе детоксикации фумонизинов и производных фумонизина с применением микроорганизма в соответствии с изобретением по существу происходит то, что фумонизины в корме с определенными количествами микроорганизмов расщепляются ферментативно в одностадийной или многостадийной реакции на деаминированные метаболиты. В соответствии с усовершенствованным вариантом осу

- 4 013566 ществления детоксикацию предпочтительно проводят в водных условиях в минимальной среде или комплексных средах с избыточной подачей питания и источников углерода. Подобное проведение опыта позволяет применять микроорганизмы в соответствии с изобретением в способах, в которых детоксикацию проводят непосредственно в кормовом средстве, без учета количества углерода, которое предоставляется микроорганизмам. Это особенно важно в связи с тем, что большая часть известных до настоящего времени микроорганизмов в состоянии обнаруживать их детоксицирующее действие только в минимальной среде или в условиях с неповышенной подачей углерода, что делает большинство известных микроорганизмов непригодными для прямого применения в пищевых продуктах и кормовых средствах на основе избыточного предоставления углерода.

Согласно предпочтительному усовершенствованному варианту способ проводят таким образом, что он проводится в пределах 15 мин - 12 ч, в частности 15 мин - 2 ч. При подобном проведении способа может, с одной стороны, гарантироваться, что все без исключения присутствующие в пищевых продуктах или кормовых средствах микотоксины, в частности фумонизины, расщепляются, и, с другой стороны, посредством этого удается не только расщеплять микотоксины, но также проводить это расщепление в течение такого быстрого времени, что подобный способ может использоваться в крупномасштабном применении, а не только в лабораторном масштабе.

Если, как это соответствует одному усовершенствованному варианту способа по изобретению, используют комбинацию или смешанную культуру, содержащую дополнительно по меньшей мере одну дополнительную бактерию или одни дрожжи, выбранные из БрЫидотоиак кр. Ό8Μ 14170 и Ό8Μ 14167, 81епо1горйотопак пйгйгебисепк Ό8Μ 14168, §1епо1горйотоиак кр. Ό8Μ 14169, К.а1к1оша еШгорйа Ό8Μ 14171, ЕиЬас1егшт кр. Ό8Μ 14197, Тпсйокрогоп тусоЮ.хйиуогапк Ό8Μ 14153, Сгур1ососсик кр. Ό8Μ 14154, ВйобоЮгЫа уаггслги Ό8Μ 14155, Тпсйокрогоп тисоШек Ό8Μ 14156, Тпсйокрогоп би1сйит Ό8Μ 14162 или ЕиЬас1егшт Ό8Μ 117798, для детоксикации микотоксинов, в частности фумонизинов и производных фумонизина, зеараленона или производных зеараленона, охратоксинов, трихотеценов и/или афлатоксинов, то, наряду с расщеплением фумонизинов или производных фумонизина и расщеплением микотоксинов, которые могут дополнительно расщепляться микроорганизмами в соответствии с изобретением, этот способ проводят таким образом, что достигается полная детоксикация пищевых продуктов и/или кормовых средств посредством применения нацеленного выбора микроорганизмов.

Для проведения детоксикации с полной надежностью, как это соответствует одному усовершенствованному варианту изобретения, для детоксикации пищевых продуктов и/или кормовых средств микроорганизмы смешивают с пищевыми продуктами и/или кормовыми средствами в каждом отдельном случае в количестве 0,01-1,5 мас.%, в частности 0,05-0,7 мас.%.

Наконец, изобретение включает в себя кормовую добавку для инактивации микотоксинов, в частности фумонизинов и производных фумонизина, которая отличается тем, что эта кормовая добавка содержит микроорганизм по пунктам 1-4 в количестве микроорганизмов от 2х10⁸/кг кормовой добавки до 2х10¹⁵/кг кормовой добавки, в частности 1х10⁹/кг кормовой добавки - 5х10¹²/кг кормовой добавки. Посредством применения кормовых добавок, которые содержат микроорганизмы с количествами микроорганизмов от 2х 10⁸/кг кормовой добавки до 2х 10¹⁵/кг кормовой добавки, гарантируется, что осуществляется полная детоксикация всех расщепляемых микроорганизмами согласно изобретению фумонизинов и производных фумонизина, и, кроме того, могут расщепляться также все дополнительные токсины, расщепляемые микроорганизмами по изобретению.

Для распространения этого расщепления также на микотоксины, которые могут расщепляться микроорганизмами по изобретению лишь частично или неполно, эту кормовую добавку подвергают усовершенствованию в том отношении, что она дополнительно содержит по меньшей мере одну дополнительную бактерию или одни дрожжи, выбранные из 8рЫпдотопак кр. Ό8Μ 14170 и Ό8Μ 14167, 81епо1горйотопак пйгйгебисепк Ό8Μ 14168, 81епо1горйотопак кр. Ό8Μ 14169, Ва1к1оша еи1горйа Ό8Μ 14171, ЕиЬас1епит кр. Ό8Μ 14197, Тпсйокрогоп тусоЮ.хшп'огапк Ό8Μ 14153, Сгур1ососсик кр. Ό8Μ 14154, Е1юбо1оги1а уагго\уп Ό8Μ 14155, Тпсйокрогоп тисойек Ό8Μ 14156, Тпсйокрогоп би1сйит Ό8Μ 14162 или ЕиЬас1егшт Ό8Μ 117798, для детоксикации микотоксинов, в частности фумонизинов и производных фумонизина, зеараленона или производных зеараленона, охратоксинов, трихотеценов и/или афлатоксинов. При помощи нацеленной комбинации нескольких микроорганизмов удается, следовательно, полное расщепление всех без исключения токсинов в одном и том же кормовом средстве, посредством чего можно с уверенностью избежать синергического действия нескольких токсинов в пищевом продукте или кормовом средстве.

Кормовые добавки в соответствии с изобретением пригодны, как это соответствует дополнительному усовершенствованному варианту изобретения, для инактивации фумонизина В1, В2, В3 и производных фумонизина, зеараленона, зеараленола, гликозидов зеараленона, афлатоксина В1, В2, 61, 62, Μ1, Μ1, дезоксиниваленола (ΌΘΝ), токсина Т-2, токсина НТ-2, ниваленола, моноацетоксисцирпенола, диацетоксисцирпенола, триходермола, веррукарина, рородина, ацетилдезоксиниваленола, изотриходермина, гидроксиизотриходермина, калонектрина, тетраола Т-2, триола Т-2, деацетилнеосоланиола, неосоланиола, ацетилнеосоланиола, споротрихиола, трихотриола, самбуцинола и кулморина и/или охратокси

- 5 013566 на А, В, С, И в кормовом средстве или пищеварительном тракте животных.

Далее изобретение объясняется более подробно при помощи примеров, в которых в примере 1 показан временной ход расщепления фумонизина В1 при постоянной концентрации токсина в минимальной среде, в примере 2 показано расщепление фумонизина В1 при различных концентрациях токсина, в примере 3 показано расщепление фумонизина В1 в комплексных средах, в примере 4 показано расщепление фумонизина В1 в пищевых продуктах и кормовых средствах, в примере 5 показано расщепление охратоксина микроорганизмами по данному изобретению и в примере 6 показаны эксперимепнты с кормлением с использованием смеси микроорганизмов в соответствии с изобретением.

Пример 1. Расщепление или детоксикация фумонизина В1 в минимальной среде при концентрации токсина 2 мг/л фумонизина В1.

Для экспериментов использовали микроорганизмы Ό8Μ 16254 и Ό8Μ 257, а также в качестве сравнения штамм ЕхорЫа1а κρίηίΓοΓη Ό8Μ 1217.

Инкубация происходила во всех случаях при 25°С в аэробных условиях. Выращивание микроорганизмов происходило в присутствии 50 мг/л фумонизина В1 в общей среде для выращивания, чтобы создать условия случайно возможной индукции детоксифицирующих фумонизин В1 ферментов.

Из фиг. 1 видно, что штаммы Ό8Μ16254 и Ό8Μ 16257 уже после 1 ч инкубации превращали фумонизин В1, в то время как сравнительный штамм дрожжей Е. κρίηίΓοΓα мог превращать после продолжительности инкубации 24 ч только едва 41% токсина. Микроорганизмы в соответствии с данным изобретением не только в состоянии очень быстро детоксифицировать фумонизин В1 в минимальной среде, но эта детоксикация происходит до 100%.

Фиг. 2 показывает превращение в виде временного хода в той же самой экспериментальной смеси, т.е. в минимальной среде и при концентрации токсина 2 мг/л для штаммов Ό8Μ 16254, Ό8Μ 16256, Ό8Μ 16252, Ό8Μ 16257, а также штамма дрожжей Е. κρίηίΓοΓα Ό8Μ 1217 в качестве сравнения. Из этих экспериментов по расщеплению ясно видно, что микроорганизмы согласно данному изобретению очень быстро и во многих случаях, а именно в случае Ό8Μ 16254, Ό8Μ 16257, Ό8Μ 16252, Ό8Μ 16256, также расщепляют фумонизин до 100%, что не было возможным со сравнительным микроорганизмом Ό8Μ 1217.

Пример 2. Расщепление фумонизина В1 при различных концентрациях токсина.

Эти эксперименты проводили с Ό8Μ 16254, Ό8Μ 16257 и Ό8Μ 16256, а также в качестве сравнения со штаммом дрожжей Е. 8р1шГета Ό8Μ 1217. Используемыми концентрациями токсина были 2, 10, 50, 100 и 500 мг/л фумонизина В1. Инкубация происходила при аэробных условиях при 25°С. Представлены результаты после 5 ч инкубации экспериментальных смесей, так как подобные продолжительности инкубации являются практически релевантным диапазоном в отношении детоксикации фумонизинов в кормовых средствах. Фиг. 3 показывает результаты этого эксперимента. Микроорганизм Ό8Μ 16254 мог во всех диапазонах концентраций фумонизин В1 расщеплять до 100%, микроорганизм Ό8Μ 16257 мог давать только в диапазоне концентраций 100 мг/л фумонизина В1 96%-ное расщепление. Ό8Μ 16256 давал 100%-ное расщепление при концентрации 2 мг/л, более чем 50%-ное расщепление при концентрации 10 мг/л, 35 или 25%-ное расщепление при концентрациях 50 мг/л или 100 мг/л. Сравнение с Е. δρίηίΓега Ό8Μ 1217 показало, что в случае этого микроорганизма существовала, в частности, при очень низких концентрациях токсина, очень плохая способность расщепления, при 10 мг/л Ό8Μ 1217 обнаруживал наилучшую активность и разрушал фумонизин В1 до приблизительно 30%. Из этого эксперимента видно, что микроорганизмы в соответствии с данным изобретением превосходили Ό8Μ 1217 во всех концентрациях и что, в частности, при низких концентрациях токсина возможно 100%-ное расщепление, что не было возможным до сих пор с микроорганизмами предыдущего уровня техники.

Пример 3. Расщепление фумонизина В1 в комплексных средах.

В этом эксперименте исследовали, могут ли эти микроорганизмы детоксицировать фумонизин В1 также и в комплексных средах в присутствии более высоких концентраций питательных веществ. Выращивание микроорганизмов выполняли в комплексной питательной среде, состоящей из 5 г/л пептона из мясного экстракта и 3 г/л мясного экстракта, которую смешивали с двумя разными концентрациями фумонизина В1, а именно 10 мг/л и 100 мг/л. Определение скоростей превращения производили сравнением содержаний токсина в реакционных смесях к началу и в конце 72-часовой инкубации при 25°С при аэробных условиях. В обоих случаях удалось получить 100%-ную детоксикацию или 100%-ное разложение фумонизина В1 в присутствии 10 мг/л фумонизина В1 в среде. В присутствии 100 мг/л фумонизина В1 также удалось получить 100%-ную детоксикацию в обоих случаях. При помощи этого эксперимента удалось однозначно доказать, что микроорганизмы в соответствии с данным изобретением пригодны для расщепления фумонизинов в комплексных средах, т.е. средах с повышенным предоставлением питательных веществ.

Пример 4. Расщепление фумонизина В1 в пищевых продуктах и кормовых средствах.

Опять использовали микроорганизмы Ό8Μ 16254 или Ό8Μ 16257, и была сделана попытка расщепления токсина при концентрации 10 мг/л в пиве, кукурузной крупке и пшеничной крупке. После выращивания микроорганизмов их собирали, ресуспендировали в содержащем токсин буферном растворе и затем немедленно инкубировали с соответствующим продовольственным продуктом или кормовым средством. Скорость расщепления фумонизина В1 составляла во всех случаях 100%, так что удалось од

- 6 013566 нозначно доказать, что микроорганизмы по данному изобретению могут до 100% расщеплять фумонизин в кормовых средствах и пищевых продуктах.

Пример 5. Расщепление других микотоксинов микроорганизмами в соответствии с изобретением.

В качестве примера микотоксина в данном случае использовали охратоксин А. Для применения были выбраны штаммы Ό8Μ 16254, Ό8Μ 16255, Ό8Μ 16256 и Ό8Μ 16257. Расщепление охратоксина проводили в присутствии 400 мкг/л охратоксина А в аэробном буфере и инкубацию выполняли в течение 120 ч. Штамм Ό8Μ 16255 обнаруживал уже после 2 ч 95%-ную детоксикацию, после 24 ч как штамм Ό8Μ 16254, так и штамм 16255 детоксицировали 100% охратоксина А, после 48 ч можно было установить также и в случае Ό8Μ 16256 90%-ную детоксикацию, и после 120 ч штамм Ό8Μ 16257 также расщеплял охратоксин А до 100%.

Пример 6. Эксперименты с кормлением комбинациями или смешанными культурами из различных микроорганизмов для полной детоксикации смешанных с микотоксинами пищевых продуктов или кормовых средств.

Эксперимент I на поросятах.

В этом эксперименте использовали штаммы Ό8Μ 16254 и Ό8Μ 14153 в качестве добавки. Эта добавка имела количество микроорганизмов 1х10¹² КОЕ/кг добавки. Продолжительность эксперимента составляла 42 дня. Животных делили на четыре группы по 24 животных. Контрольная группа (КС) получала незагрязненный стандартный корм без кормовой добавки. Группа с токсинами (ТС) получала корм, который был смешан с 500 б.д. охратоксина А, 250 б.д. зеараленона и 1,500 б.д. фумонизина В1. Экспериментальная группа 1 (УС1) и экспериментальная группа 2 (УС2) получали в каждом случае тот же самый смешанный с токсинами корм, но в случае экспериментальной группы 2 с 0,5 кг добавки, а в случае экспериментальной группы 2 с 1 кг добавки. В конце эксперимента удалось получить следующие результаты. _____________________

	Масса в	конце	суточный прирост массы	коэффициент использования корма
КС	24,3	кг	434 г	1,493
тс	22,0	кг	380 г	1,573
νοι	23,4	кг	412 г	1,516
УС2	24,7	кг	443 г	1,467

Эксперимент II на поросятах.

В этом эксперименте использовали штаммы Ό8Μ 16254, Ό8Μ 11798 и Ό8Μ 14153 в качестве добавки. Эта добавка имела количество микроорганизмов 2,5х 10¹² КОЕ/кг добавки.

Продолжительность эксперимента составляла 42 дня. Животных делили на четыре группы по 19 животных. Группа с токсинами (ТС) получала корм, который был смешан с 1,1 м.д. деоксиниваленола и 2 м.д. фумонизина В1, но без добавки. Экспериментальная группа 1 (УС1), экспериментальная группа 2 (УС2) и экспериментальная группа 3 (УС3) получали в каждом случае тот же самый смешанный с токсинами корм, но в случае экспериментальной группы 1 с 0,5 кг добавки, в случае экспериментальной группы 2 с 1 кг добавки и в случае экспериментальной группы 3 с 2 кг добавки. В конце эксперимента удалось получить следующие результаты.

	Масса в конце	суточный прирост массы	коэффициент использования корма
ТС	22,90 кг	359 г	1,82
ν61	26,45 кг	442 Г	1,67
7С2	27,10 кг	463 г	1, 60
ν63	28,55 кг	485 г	1,71

Эксперимент III на поросятах.

В этом эксперименте использовали штамм Ό8Μ 16254 в качестве добавки. Эта добавка имела количество микроорганизмов 1х 10¹¹ КОЕ/кг добавки. Продолжительность эксперимента составляла 42 дня. Животных делили на две группы по 30 животных. Группа с токсинами (ТС) получала корм, который был смешан с 4,5 м.д. фумонизина В1. Экспериментальная группа получала тот же самый смешанный с токсинами корм, но с 0,5 кг добавки. В конце эксперимента получали следующие результаты.

	Начальные массы	Конечные массы	Суточные приросты	Коэффициент использования корма
Тохгпдгирре	6,76 кг	28,33 кг	514 г	2,21
УегвисНздгирре	6,88 кг	30,56 кг	564 г	2,03

- 7 013566

Эксперимент I на бройлерах.

В этом эксперименте использовали штамм Ό8Μ 16254 в качестве добавки. Эта добавка имела общее количество микроорганизмов 2,5x1ο¹¹ КОЕ/кг добавки. Животных делили на две группы по 140000 животных в каждой группе. Группа с токсинами (ТС) получала корм, который был смешан с 300 б.д. афлатоксина и 2 м.д. фумонизина. Экспериментальная группа получала то же самое со смешанным с токсинами кормом, но с 1 кг добавки/т кормового средства. В конце этого эксперимента удалось получить следующие результаты.

Неделя эксперимента	Экспериментальная группа	Группа с токсином
Смертность ί%)	Смертность (%)
1	1,02	2, 99
2	0,82	1,83
3	0,34	1,79
4	0,57	2,89
5	0,89	2,27
6	0,91	1,24
7	0,73	1,07
8	0,41	1, 63
Конечная масса (г)	1720	1298

Эксперимент II на бройлерах.

В этом эксперименте использовали штаммы Ό8Μ 16254 и Ό8Μ 11798 в качестве добавки. Эта добавка имела общее количество микроорганизмов 4x10^й КОЕ/кг добавки. Животных делили на три группы по 260 животных в каждой группе. Контрольная группа получала незагрязненный корм. Группа с токсинами (ТС) получала корм, который был смешан с 3,5 м.д. фумонизина и 1,8 м.д. Т-2-токсина. Экспериментальная группа получала то же самое со смешанным с токсинами кормом, но с 1 кг добавки/т кормового средства. В конце этого эксперимента удалось получить следующие результаты.

	Контрольная группа	Экспериментальная группа	Группа с токсинами
Общий прирост массы	1965,6	1952,4	1866,1
Общее увеличение массы	3983,9	4113,2	3894,0
Коэффициент использования корма	2,03	2, 11	2,08

- 8 013566

Список последовательностей

<110>	ЕгЬег АкЪ1епдезе11зсЬа££
<120>	Микроорганизм для детоксикации фумонизинов, а также его применение, способ детоксикации фумонизинов и кормовая добавка, содержащая этот микроорганизм
<130>	Р03275
<140>	РСТ/АТ2005/000453
<141>	2005-11-15
<150>	А 1912/2004
<151>	2004-11-16
<160>	6
<170>	Ра£епЪ1п νθΓ^ίοη 3.3
<210>	1
<211>	68 9
<212>	ДНК
<213>	ЗрМпдотопаз
<220>
<221>	16 5 г ОКА
<222>	(1)..(689)
<300>
<308>	ОЗМ 16254
<309>	2004-02-24
<313>	(1)..(689)
<400>	1

даасдсЬддз	ддсаСдссЬа	асасакдсаа	д£сдаасдаа	дРсЬСсддас	Ь£ад£ддсдс	60
асддд£дсд1:	аасдсд£ддд	аа£с£дссс1:	£ддд£асдда	а£аас£сада	даааНТ-дТд	120
сбаабассдФ	абаакдксФС	сддассааад	аС'Ь'ЬаЪсдсс	сааддабдад	сссдсдкаад	180
а££адсЕад£	Рдд£дддд£а	ааддсссасс	ааддсдасда	ЕсЕБкадстд	дЕсЬдададд	240
а£дабсадсс	асас£дддас	Ьдадасасдд	сссадасбсс	Ъасдддаддс	адсадидддд	300
аа^аС^ддас	аакдддсдаа	адссЬдабсс	адсаакдссд	сд^дад^дак	дааддсссЪа	360
дддккдСааа	дс£с£Ъ£Рас	ссддда£да£	аа£дасад£а	ссдддадаа!:	аадсЪссддс	420
Саасбссдбд	ссадсадссд	сддЬаабасд	дадддадсЬа	дсд££д£Ссд	дааЬЬасЬдд	480
дсдЬааадсд	сдсдбаддсд	дббббРсаад	ЬсададдЪда	аадсссдддд	сбсаассссд	540
даа£1дсс££	£.дааас£дда	адас£Сдаа£	скрддададд	ЬсадЬддааЬ	£ссдад£д£а	600
даддсдааа£	£сд£адаРа£	£сддаадаас	ассад'Ьддсд	ааддсдасбд	асФддасаад	660
аббдасдсбд	адд'Ьдсдааа	дсдбдддда				689

<210> 2 <211> 426 <212> ДНК <213> ЗрЫпдотопаз

- 9 013566 <220>

<221> 16 3 гДНК <222> (1)..(426) <300>

<308> ϋ3Μ 16257 <309> 2004-02-24 <313> (1)..(426) <400> 2

даЬссЬддсЬ	садаасдаас	дсЬддсддса	ЬдссЪаасас	аЬдсаадЬсд	аасдаадЬс!	60
ЬсддасЫад	Ьддсдсасдд	дкдсдЬаасд	сдЕддзаакс	Ъдсссбкддд	ЬасддааЬаа	120
сЬсададааа	ЬЬЬдЬдсЬаа	ЬассдЬаЬаа	ЬдасЬЬсддЬ	ссааадаььь	аксдсссаад	180
дабдадсссд	сдбаадаЕЬа	дскадЬ'Ьдд!:	ддддЪаааад	сскассаадд	сдасда£с1:11	240
ЬадсГдд-ЬсБ	дададдаЬда	Ьсадссасас	^дддасЬдад	асасддссса	дас^ссЪасд	300
ддаддсадса	дбддддаака	£0ддасаа£д	ддсдааадсс	ЬдаЪссадса	аЬдссдсдЬд	360
адкдаЬдаад	дссс'Ьаддд!	кдЬааадсЪс	кЬйЬасссдд	дакдакаакд	асадЬассдд	420

дадаа-ь 426

<210>	3
<211>	720
<212>	ДНК
<213>	ЕН12аЫа1ез

<220>
<221>	16 3 гДНК
<222>	(1)··(720)
<300>
<308>	ОЗМ
<309>	2004-0Д-24
<313>	(1)..(720)
<400>	3

асдсЬддсдд	саддсььаас	асабдсаадЬ	сдаасддЬсб	сЬЬсддаддс	адбддсадас	60
дддЕдадЬаа	ЬдсаЬ.дддаа	£σΐ:3θοςί:·ί:α	ЬсбасддааЬ	аасЕсаддда	аасЬЬдЬдск	120
ааЬассдЬаЪ	βεςεΰαΟϋΌΐ:	ддддааадаО	ЬЬаОсддада	аЪдаЬдадсс	саЬд'Ь'ЬддаЬ	180
ЬадсЬадЬЬд	дЬадддЬааа	ддссЬассаа	ддсдасдаСс	саСадсЪддЬ	сбдададдаь	240
даСоадссас	асЬдддасбд	адасасддсс	садасЬссЬа	сдддаддсад	садЬддддаа	300
ЕакЕддасаа	Ьдддсдсаад	ссЬдаЕссад	ссакдссдсд	ЕдадЕдакда	аддссскадд	360
дЫдбааадс	ЬсЫгЬсассд	д^даадаЪаа	ЬдасддЬаас	сддадаадаа	дссссддсЬа	420
ас£Лсд£дсс	адсадссдсд	д£.аа£асдаа	дддддскадс	д££д££сдда	б.ЬЬас'Ь.дддс	480
д£ааадсдса	сдЬаддсдда	сШзкаадЪс	аддддкдааа	ЬсссддддсС	саассссдда	540
асг.дссьы:д	аЬасйддаад	ЬсОЬдадИаТ	ддаададдЕа	ад£ддаа-Ы:д	сдадьдьада	600

- 10 013566 ддЕдаааЕЕс дЕадаЕаЕЕс дсаддаасас садЕддсдаа ддсддсЕЕас ЕддЕссаЕЕа660 сЕдасдсЕда ддЕдсдааад сдЕдддддад сааасаддак ЕадаЕасссЕ ддЕадЕссас720 <210>4 <211>706 <212> ДНК <213> МасгоЬасЕегтша <220 <221> 16 5 гДНК <222> (1) . .(706) <300>

<306> ЭЗМ 16256 <300 2004-02-24 <313> (1)..(706) <400 4

даасдсЕддс	ддсдЕдсЕЕа	асасаЕдсаа	дЕсдаасдаЕ	даадсЕддад	сЕЕдсЕсЕдд	60
ЕддаададЕд	дедааедддЕ	дадЕаасасд	ЕдадЕаассЕ	дссссадасЕ	сЕдддаЕаад	120
сдсЕддааас	ддсдЕсЕааЕ	асЕддаЕаЕд	ассссЕасад	дсаЕсЕдЕЕд	ддддЕддааа	180
даЕЕЕаЕедд	ЕсЕдддаЕдд	дсЕсдсддсс	ЕаЕсадсЕад	аЕддЕдаддЕ	аасддсЕсас	240
саЕддсдасд	асдддЕадсс	ддссЕдадад	ддЕдассддс	сасасЕддда	сЕдадасасд	300
дсссадасЕс	сЕасдддадд	садсадЕддд	дааЕаЕЕдса	сааЕдддсда	аадссЕдаЕд	360
садсаасдсс	дсдЕдаддда	ЕдасЕдссЕЕ	едддЕЕдЕаа	ассЕсЕЕЕЕа	дЕадддаада	420
адсдааадЕд	асддЕассЕд	садааааадс	ассддсЕаас	ЕасдЕдссад	садссдсддЕ	4Θ0
ааЕасдЕадд	дЕдсаадсдЕ	ЕдЕееддааЕ	ЕаЕЕдддсдЕ	ааададсЕсд	ЕаддсддсЕЕ	540
дЕсдсдбсЕд	сЕдЕдаааас	ссдаддсЕеа	ассЕсдддсс	ЕдсадЕдддЕ	асдддсаддс	600
ЕададЕдедд	ЕаддддадаЕ	ЕддааЕЕссЕ	ддЕдЕадедд	ЕддааЕдсдс	адаЕаЕсадд	660
аддаасассд	аЕддсдаадд	садаЕсЕсЕд	ддссдсЕасЕ	дасдсЕ		706

<210>	5
<211>	392
<212>	ДНК
<213>	КЫгоЫиш

<220
<221>	16 3 гДНК
<222>	(1) - - (392)
<300>
<308>	ОЗМ 16253
<300	2004-0^-24
<313>	(1)·.(392)
<400>	5

ЕссЕддсЕса даасдаасдс Еддсддсадд сЕЕаасасаЕ дсаадЕсдад сдссссдсаа 60

- 11 013566

ддддадсддс	а^асдддЕда	ддаасдсдид	ддааДсЕасс	дадсссЕдсд	дааЕадсЕсс	120
дддааасДдд	ааЕЕааЕасс	дсаЪасдссс	Еасдддддаа	адаПЕНаЕсд	дддД^ЕдаЬд	180
адсссдсдЕЕ	ддаДЕадсЕа	дЕСддСдддд	ЕаааддссЕа	ссааддодас	даЕссаИадс	240
ДддЬсЕдада	ддаЕда-Ссад	ссасаЕНддд	асЕдадасас	ддсссааасЕ	ссЕасдддад	300
дсадсадЕдд	ддааЕаЕЕдд	асаабдддсд	саадссДдаЕ	ссадссаЕдс	сдсдДдадЕд	360
аΐдааддссс	’Ь.адддЕЕдЕа	аадсЕсЕЕЕс	ас			392
<210>	6
<211>	476
<212>	ДНК
<213>	А1са11депез
<220>
<221>	16 ?	; гДНК
<222>	(1) .	• (476)
<300>
<308>	ΌΞΜ	16252
<309>	2004	-02-24
<313>	(1) .	. (476)
<400>	6
ЕссЕддсЕса	даЕЕдаасдс	Еадсдддабд	сс1:1:асаса1:	дсаадЕсдаа	сддсадсасд	60
дасЕ^сддЕс	ЕддЕддсдад	Еддсдаасдд	дЕдадЕааЪд	ЕаЪсддаасд	ЬдссЪадЕад	120
сдддддаЕаа	сЕасдсдааа	дсдЕадсЕаа	Еассдсабас	дсссЪасддд	ддааадсадд	180
ддаЕсдсаад	адсЕНдсасЕ	аЕЕададсдд	ссдаЕаНсдд	адпадсьадь	ЕддЕддддЕа	240
асддсДсасс	ааддсдасда	Ессд^адсЕд	дННддададд	асдассадсс	асасЕдддас	300
Едадасасдд	сссадасьсс	Сасдддаддс	адсадйдддд	ааДЕДЕддас	ааЪдддддаа	360
асссЕдаЕсс	адссаЕссад	сдЕдЕдсдаЕ	дааддссЕЕс	дддЕЕдЕааа	дсасЕЕЕЕдд	420
саддааадаа	асдЬсаЕддд	сЕааЕасссс	дЕдааасЕда	сддЬассЕдс	адааЕа	476

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Claims

1. Микроорганизм для детоксикации фумонизинов и производных фумонизина, выбранный из группы, включающей штаммы 8рйтдорух1б бр. (Ό8Μ 16254 и Ό8Μ 16257), принадлежащие к таксону 8рй1пдотопабасеае; штамм ОсйгоЬас!гцт бр. (Ό8Μ 16255), принадлежащий к таксону И1ихоЫа1еб; штамм ЬеисоЬасЬег бр. (Ό8Μ 16256), принадлежащий к таксону Μ^с^оЬасΐе^^асеае; штамм АдгоЬас1егшт бр. (Ό8Μ 16253), принадлежащий к таксону И1ихоЫа1еб; штамм А1са1щепеб бр. (Ό8Μ 16252), принадлежащий к таксону А1са1щепасеае; и штамм РюЫа бр. (Ό8Μ 16562), которые ферментативно превращают фумонизины в одностадийной или многостадийной реакции в деаминированные метаболиты.

2. Микроорганизм по п.1, отличающийся тем, что он стабилизирован в форме порошка, жидкости или геля.

3. Применение по отдельности или в комбинации двух или более штаммов, выбранных из группы, включающей штаммы 8рЫидорух1б бр. (Ό8Μ 16254 и Ό8Μ 16257), принадлежащие к таксону 8рЫидотопабасеае; штамм Ос1гоЬас1гит бр. (Ό8Μ 16255), принадлежащий к таксону Κй^ζоЬ^а1еб; штамм ЬеисоЬас1ег бр. (Ό8Μ 16256), принадлежащий к таксону Μ^с^оЬасΐе^^асеае; штамм АдгоЬас1егшт бр. (Ό8Μ 16253), принадлежащий к таксону И1ихоЫа1еб; штамм А1са1|§епеб бр. (Ό8Μ 16252), принадлежащий к таксону А1са1щепасеае; и штамм РюЫа бр. (Ό8Μ 16562), для детоксикации в пищевых продуктах и/или кормовых средствах микотоксинов, в частности фумонизина и производных фумонизина, зеараленона или производных зеараленона, афлатоксинов или охратоксинов.

4. Применение по п.3 для детоксикации низких концентраций микотоксинов, в частности 100 мкг/кг - 500 мг/кг, предпочтительно 250 мкг/кг - 25 мг/кг фумонизинов и производных фумонизина, 10 мкг/кг

- 12 013566

10 мг/кг, предпочтительно 40 мкг/кг - 2 мг/кг зеараленона или производного зеараленона, 1 мкг/кг - 2 мг/кг, предпочтительно 10-750 мкг/кг афлатоксинов, 1 мкг/кг - 2 мг/кг, предпочтительно 5-500 мкг/кг охратоксинов.

5. Применение по п.3 или 4, отличающееся тем, что дополнительно используют комбинацию или смешанную культуру, содержащую по меньшей мере один микроорганизм, выбранный из группы, включающей штаммы 8рЫпдотопа5 5р. (Ό8Μ 14170 и Ό8Μ 14167), штамм 8!епо!горйотопа5 ш!п!гебисеп5 (Ό8Μ 14168), штамм 8!епо!горйотопа5 5р. (Ό8Μ 14169), штамм Как!оша еШгорйа (Ό8Μ 14171), штамм ЕиЬас!егшт 5р. (Ό8Μ 14197), штамм Тпс1ю5рогоп тусоЮх1П1гогап5 (Ό8Μ 14153), штамм Сгур!ососси5 5р. (Ό8Μ 14154), штамм В1юбоЮги1а уагго\уи (Ό8Μ 14155), штамм Тпс1ю5рогоп тисоИе5 (Ό8Μ 14156), штамм Тпс1ю5рогоп би1сйит (Ό8Μ 14162) или штамм ЕиЬас!егшт 5р. (Ό8Μ 117798), для совместной детоксикации встречающихся микотоксинов, в частности фумонизина и производных фумонизина, зеараленона или производных зеараленона, афлатоксинов или охратоксинов.

6. Применение бесклеточного экстракта или необработанного экстракта по меньшей мере одного микроорганизма, определенного в пп.3-5, для детоксикации фумонизинов и производных фумонизина.

7. Способ детоксикации фумонизина и его производных в пищевых продуктах и/или кормовых средствах, включающий их обработку микроорганизмом по любому из пп.1 или 2.

8. Способ по п.7, отличающийся тем, что кормовые средства обрабатывают микроорганизмом в количестве 10³-10⁸/г корма, в частности 2х 10⁴-5х 10⁶/г корма.

9. Способ по п.7 или 8, отличающийся тем, что его проводят в течение от 15 мин до 12 ч, в частности от 15 мин до 2 ч.

10. Способ по одному из пп.7-9, отличающийся тем, что дополнительно используют комбинацию или смешанную культуру, содержащую по меньшей мере один микроорганизм выбранный из группы, включающей штаммы 8рЫпдотопа5 5р. (Ό8Μ 14170 и Ό8Μ 14167), штамм 8!епо!горйотопа5 ш!гйгебисеш5 (Ό8Μ 14168); штамм 8!епо!горйотопа5 5р. (Ό8Μ 14169), штамм Как!оша еи!горйа (Ό8Μ 14171), штамм ЕиЬас!егшт 5р. (Ό8Μ 14197), штамм Тпс1ю5рогоп тусо!ох1Шуогап5 (Ό8Μ 14153), штамм Сгур!ососси5 5р. (Ό8Μ 14154), штамм Кйобо!оги1а уаггслгп (Ό8Μ 14155), штамм Тпс1ю5рогоп тисо1бе5 (Ό8Μ 14156), штамм Тпс1ю5рогоп би1сйит (Ό8Μ 14162) или штамм ЕиЬас!егшт 5р. (Ό8Μ 117798), для совместной детоксикации микотоксинов, в частности фумонизинов и производных фумонизина, зеараленона или производных зеараленона, охратоксинов, трихотеценов и/или афлатоксинов.

11. Способ по одному из пп.7-10, отличающийся тем, что для детоксикации пищевых продуктов и/или кормовых средств микроорганизмы смешивают с пищевыми продуктами и/или кормовыми средствами в количестве 0,01-1,5 мас.%, в частности 0,05-0,7 мас.%.

12. Кормовая добавка для инактивации фумонизинов и производных фумонизина, отличающаяся тем, что она содержит микроорганизм по любому из пп.1, 2 в количестве от 2х10⁸ до 2х10¹⁵/кг кормовой добавки, в частности 1х10⁹-5х10¹²/кг кормовой добавки.

13. Кормовая добавка по п.12, отличающаяся тем, что для совместной детоксикации микотоксинов, в частности фумонизинов и производных фумонизина, зеараленона или производных зеараленона, охратоксинов, трихотеценов и/или афлатоксинов, она дополнительно содержит по меньшей мере один микроорганизм, выбранный из группы, включающей штаммы 8рЫпдотопа5 5р. (Ό8Μ 14170 и Ό8Μ 14167), штамм 81епо1горйотопа5 ш!гйгебисеп5 (Ό8Μ 14168), штамм 81епо1горйотопа5 5р. (Ό8Μ 14169), штамм Как!оша еи!горйа (Ό8Μ 14171), штамм ЕиЬас!егшт 5р. (Ό8Μ 14197), штамм Тпс1ю5рогоп тусоЮ.х1Шуогап5 (Ό8Μ 14153), штамм Сгур!ососси5 5р. (Ό8Μ 14154), штамм Кйобо!оги1а уагго^и (Ό8Μ 14155), штамм Тпс1ю5рогоп тисоИе5 (Ό8Μ 14156), штамм Тпс1ю5рогоп би1сйит (Ό8Μ 14162) или штамм ЕиЬас!егшт 5р. (Ό8Μ 117798).

14. Применение кормовой добавки по п.12 или 13 для инактивации фумонизина В1, В2, В3 и производных фумонизина, зеараленона или производных зеараленона, зеараленола, гликозидов зеараленона, афлатоксина В1, В2, 61, 62, Μ1, Μ1, дезоксиниваленола (ΌΘΝ), токсина Т-2, токсина НТ-2, ниваленола, моноацетоксисцирпенола, диацетоксисцирпенола, триходермола, веррукарина, рородина, ащетилдезоксиниваленола, изотриходермина, гидроксиизотриходермина, калонектрина, тетраола Т-2, триола Т-2, деацетилнеосоланиола, неосоланиола, ацетилнеосоланиола, споротрихиола, трихотриола, самбуцинола и кулморина и/или охратоксина А, В, С, Ό в кормовом средстве или пищеварительном тракте животных.