EA008837B1 - Аналоги глюкагоноподобного пептида и их применение - Google Patents

Аналоги глюкагоноподобного пептида и их применение Download PDF

Info

Publication number
EA008837B1
EA008837B1 EA200300026A EA200300026A EA008837B1 EA 008837 B1 EA008837 B1 EA 008837B1 EA 200300026 A EA200300026 A EA 200300026A EA 200300026 A EA200300026 A EA 200300026A EA 008837 B1 EA008837 B1 EA 008837B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
azr
xaa
haa
analogue
tug
Prior art date
Application number
EA200300026A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200300026A1 (ru
Inventor
Вольфганг Глеснер
Рон Ли Милликан
Original Assignee
Эли Лилли Энд Компани
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Эли Лилли Энд Компани filed Critical Эли Лилли Энд Компани
Publication of EA200300026A1 publication Critical patent/EA200300026A1/ru
Publication of EA008837B1 publication Critical patent/EA008837B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/26—Glucagons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A61P5/50—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones for increasing or potentiating the activity of insulin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/605—Glucagons

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Изобретение относится к аналогам глюкагоноподобного пептида-1 (GLP-1). Также изобретение относится к применению аналогов глюкагоноподобного пептида-1 для лечения ожирения, инсульта, инфаркта миокарда, катаболических изменений после хирургической операции или синдрома раздраженного кишечника. Изобретение также относится к применению аналогов глюкагоноподобного пептида-1 для получения лекарственного средства для лечения инсулиннезависимого диабета, ожирения, инсульта, инфаркта миокарда, катаболических изменений после хирургической операции или синдрома раздраженного кишечника.

Description

Глюкагоноподобный пептид-1 (ОБР-1) представляет собой пептид из 37 аминокислот, который секретируется Б-клетками кишечника в ответ на проглатывание пищи. Было обнаружено, что он стимулирует секрецию инсулина (инсулинотропное действие), вызывая в результате этого захват глюкозы клетками и снижение уровня глюкозы в крови (смотри, например, Μο_|8ον, 8., Ιηΐ. I. Рерййе Рго1ет Кезеагсй, 40: 333-343 (1992)). Однако ОБР-1(1-37) является малоактивным, и внимание сосредотачивали на его укороченных аналогах, обозначаемых как соединения ОБР, которые биологически намного более эффективны, чем ОБР-1. Примеры включают ОБР-1(7-37), О1.1’-1(7-36)МГ, О1у8-ОБР-1(7-37)ОН и 8ег34-ОБР-1(7-37)ОН. Благодаря своей способности стимулировать секрецию инсулина аналоги ОБР-1 являются многообещающими в качестве агентов для лечения диабета, ожирения и родственных им состояний.
Аналоги ОБР-1 могут существовать по меньшей мере в двух различных формах. Первая форма является физиологически активной и легко растворяется в водном растворе при физиологическом рН (7,4). В отличие от этого, вторая форма не обладает или обладает небольшой инсулинотропной активностью и, по существу, не растворима в воде при рН 7,4. К сожалению, неактивная форма с легкостью получается при перемешивании водных растворов ОБР-1, их контакте с гидрофобными поверхностями или при больших поверхностях контакта воздух/вода. Тенденция к превращению в нерастворимую форму существенно осложняет получение промышленных количеств активных аналогов ОБР-1; операции по смешиванию или продолжительное продвижение через насос являются обычными операциями в объемных промышленных процессах, и данные операции вызывают перемешивание, создают большие поверхности контакта воздух/вода и/или контакт с гидрофобными поверхностями, что ведет к образованию нерастворимой формы. Превращение в неактивную форму может также осуществляться при хранении или после введения больному, что дополнительно осложняет применение данных соединений в качестве лекарств. Следовательно, существует настоятельная необходимость в биологически активных аналогах ОБР-1, которые превращаются в нерастворимую форму с меньшей легкостью, чем доступные в настоящее время соединения ОБР-1.
В настоящее время обнаружено, что ряд аналогов ОБР-1 с модификациями в одном или более из следующих положений: 11, 12, 16, 22, 23, 24, 26, 27, 30, 33, 34, 35, 36 или 37, проявляют заметно пониженную склонность к агрегации по сравнению с ОБР-1(7-37)ОН.
Многие из данных аналогов сохраняют способность к активации рецепторов ОБР-1, которая сравнима и в некоторых случаях выше, чем для известных соединений ОБР-1, таких как ОБР-1(7-37)ОН и Уа18-ОБР-1(7-37)ОН. Например, время агрегации Уа18-О1и22-ОБР-1(7-37)ОН является более чем в 20 раз большим и его активация рецепторов ОБР-1 является приблизительно на 25% более высокой, чем ОБР1(7-37)ОН. На основе данных находок здесь раскрываются новые аналоги ОБР-1 и способы лечения с применением новых соединений ОБР-1.
В одном осуществлении настоящего изобретения представлен полипептид, имеющий аминокислотную последовательность формулы I (8ЕР ГО N0: 1):
Н13-Хаа8-С1и-С1у-Хаац-Хаа12_ТЪг“Зег-А5р-Хаа1б-5ег8ег~Туг-Ьеи-С1и-Хаа22-Хаа23“Хаа24-А1а-Хаа2б~Хаа27”РЬе11е-А1а-Хаа31-Ьеи-Хаа3з-Хааз4-Хааз5-Хааз€-К
Формула I (8ЕР ГО N0: 1) где
Хаа8 представляет собой О1у, А1а, Уа1, Беи, 11е, 8ег или Тйг;
Хаац представляет собой Азр, О1и, Агд, Тйг, А1а, Буз или Н1з;
Хаа12 представляет собой Н1з, Тгр, Рйе или Туг;
Хаа16 представляет собой Беи, 8ег, Тйг, Тгр, Н1з, Рйе, Азр, Уа1, Туг, О1и или А1а;
Хаа22 представляет собой О1у, Азр, О1и, О1п, Азп, Буз, Агд, Суз или цистеиновую кислоту;
Хаа23 представляет собой Н1з, Азр, Буз, О1и, О1п или Агд;
Хаа24 представляет собой О1и, Агд, А1а или Буз;
Хаа26 представляет собой Тгр, Туг, Рйе, Азр, Буз, О1и или Н1з;
Хаа27 представляет собой А1а, О1и, Н1з, Рйе, Туг, Тгр, Агд или Буз;
Хаа30 представляет собой А1а, О1и, Азр, 8ег или Н1з;
Хаа33 представляет собой Азр, Агд, Уа1, Буз, А1а, О1у или О1и;
Хаа34 представляет собой О1и, Буз или Азр;
Хаа35 представляет собой Тйг, 8ег, Буз, Агд, Тгр, Туг, Рйе, Азр, О1у, Рго, Н1з или О1и;
Хаа36 представляет собой Тйг, 8ег, Азр, Тгр, Туг, Рйе, Агд, О1и или Н1з;
К представляет собой Буз, Агд, Тйг, 8ег, О1и, Азр, Тгр, Туг, Рйе, Н1з, -№Н2, О1у, О1у-Рго или О1у-РгоΝ42 или отсутствует, при условии, что полипептид не имеет последовательности ОБР-1(7-37)ОН или ОБР-1(7-36)^Н2, и при условии, что полипептид не является О1у8-ОБР-1(7-37)ОН, О1у8-ОБР-1(7-36^Н2, Уа18-ОБР-1(7-37)ОН, Уа18-ОБР-1(7-36^Н2, Беи8-ОБР-1(7-37)ОН, Беи8-ОБР-1(7-36^Н2, 11е8-ОБР-1(7-37)0Н, 11е8-О1.1’-1(7-36)МГ,
- 1 008837
8ег8-СЬР-1(7-37)ОН, 8ег8-СЬР-1(7-36)КН2, ТЬг8-СЬР-1(7-37)ОН или ΤΗγ8-6ΕΡ-1(7-36)ΝΗ2, А1а11-СЬР-1(7-37)ОН, А1а11-СЬР-1(7-36)КИ2, А1а16-СГР-1 (7-37)ОН, А1а16-СЬР-1(7-36)КН2, А1а27-СЬР-1 (7-37)ОН, А1а27-СЬР-1(7-
36) КИ2, С1и27-СЬР-1(7-37)ОН, С1и27-СЬР-1(7-36)КИ2, А1а33-СЬР-1(7-37)ОН или А1а33-СЬР-1(7-36)КИ2.
В другом осуществлении настоящего изобретения представлен полипептид, имеющий аминокислотную последовательность формулы II (8Е() II) NО: 2):
Н1з-Хаа8“61и-С1у-ТЬг-Хаа1.2-ТЪг-5ег--Азр-Хаа1в-5ег5ег-Туг-Ъеи-61и-Хаа22-Хаа2зА1а-А1а-Хаа2б-С1и-РЬе11е-Хаазо-Тгр-Ьеи-¥а1-Ьуз-Хааз5-Агд-В
Формула II (8Ер ГО КО: 2) где
Хаа8 представляет собой С1у, А1а, Уа1, Ьеи, Не, 8ег или ТЬг;
Хаа12 представляет собой Н!з, Тгр, РЬе или Туг;
Хаа16 представляет собой Ьеи, 8ег, ТЬг, Тгр, Н1з, РЬе, Азр, Уа1, С1и или А1а;
Хаа22 представляет собой С1у, Азр, С1и, С1п, Азп, Ьуз, Агд, Суз или цистеиновую кислоту;
Хаа23 представляет собой Н:з, Азр, Ьуз, С1и или С1п;
Хаа26 представляет собой Азр, Ьуз, С1и или Н1з;
Хаа30 представляет собой А1а, С1и, Азр, 8ег или Н1з;
Хаа35 представляет собой ТЬг, 8ег, Ьуз, Агд, Тгр, Туг, РЬе, Азр, С1у, Рго, Н1з или С1и;
В представляет собой Ьуз, Агд, ТЬг, 8ег, С1и, Азр, Тгр, Туг, РЬе, Н1з, -КИ2, С1у, С1у-Рго или С1у-РгоΝΗ2 или отсутствует, при условии, что полипептид не имеет последовательности СЬР-1(7-37)ОН или ΟΕΡ-1(7-36)-ΝΗ2, и при условии, что полипептид не является С1у8-СЬР-1(7-37)ОН, С1у8-СЬР-1(7-36)КИ2, Уа18-СЬР-1(7-37)ОН, Уа18-СЬР-1(7-36)ЫН2, Ьеи8-СЬР-1(7-37)ОН, Ееи8-СЕР-1(7-36)\Н.-, Не8-СЬР-1(7-37)ОН, Пе8-СЬР-1(7-36)КИ2, 8ег8-СЕР-1(7-3 7)ОН, 8ег8-СЕР-1(7-36)\Н.-, ТЬг8-СЬР-1(7-3 7)ОН, ТЬг8-СЬР-1(7-36)КИ2, А1а16-СЬР-1(7-
37) ОН или А1а16-СЬР-1(7-36)КИ2.
В другом осуществлении настоящего изобретения представлен полипептид, имеющий аминокислотную последовательность формулы III (8Е0 ГО NО: 3):
Н1з-Хаа8-С1и-С1у-Т1тг-РНе-ТНг-Зег-А5р-Уа1-Зег-5егТуг-Ьеи-01и-Хаа22-Хаа2з“А1а-А1а-Ьуз-Хаа27-РЬе-11еХаазо-’Тгр-Ъеи-Уа1~Ьуз-(э1у-Агд-В
Формула III (8Ер ГО КО: 3) где
Хаа8 представляет собой С1у, А1а, Уа1, Ьеи, Не, 8ег или ТЬг;
Хаа22 представляет собой С1у, Азр, С1и, С1п, Азп, Ьуз, Агд, Суз или цистеиновую кислоту;
Хаа23 представляет собой Н1з, Азр, Ьуз, С1и или С1п;
Хаа27 представляет собой А1а, С1и, Н1з, РЬе, Туг, Тгр, Агд или Ьуз;
Хаа30 представляет собой А1а, С1и, Азр, 8ег или Н1з;
В представляет собой: Ьуз, Агд, ТЬг, 8ег, С1и, Азр, Тгр, Туг, РЬе, Н1з, -КИ2, С1у, С1у-Рго или С1у-РгоΝΗ2 или отсутствует, при условии, что полипептид не имеет последовательности СЬР-1(7-37)ОН или СЬР-1(7-36)-КИ2, и при условии, что полипептид не является С1у8-СЬР-1(7-37)ОН, С1у8-СЕР-1(7-36)КИ2, Уа18-СЬР-1(7-37)ОН, Уа18-СЬР-1(7-36)ЫИ2, Ьеи8-СЬР-1(7-37)ОН, Ееи8-СЕР-1(7-36)\Н.-, Пе8-СЬР-1(7-37)ОН, Пе8-СЬР-1(7-36)КИ2, 8ег8-СЬР-1(7-37)ОН, 8ег8-СЕР-1(7-36)\Н.-, ТЬг8-СЬР-1(7-37)ОН, ТЬг8-СЬР-1(7-36)КИ2, А1а16-СЬР-1(7-37)ОН, А1а16-СЬР-1(7-36)КН2, С1и27-СЬР-1(7-37)ОН или С1и27-СЬР-1(7-36)КИ2.
В другом осуществлении настоящего изобретения представлен полипептид, имеющий аминокислотную последовательность формулы ГУ (8ЕР ГО ΝΌ: 4):
Хаа7-Хаав-61и-С1у-ТНг-РЬе-ТНг-Зег-Азр-Уа1-ЗегЗег-Туг-Ъеи-С1и-Хаа22-б1п-А1а-А1а-Ьуз-С1и-РЪе’· 11е-А1а-Тгр-Ьеи-Уа1-Ьуз~С1у-Агд-В
Формула НУ (8Ер ГО КО: 4) где
Хаа7 представляет собой Ь-гистидин, ϋ-гистидин, дезаминогистидин, 2-аминогистидин, β-гидроксигистидин, гомогистидин, α-фторметилгистидин или α-метилгистидин;
Хаа8 представляет собой глицин, аланин, валин, лейцин, изолейцин, серин или треонин. Предпочтительно Хаа8 представляет собой глицин, валин, лейцин, изолейцин, серин или треонин;
Хаа22 представляет собой аспарагиновую кислоту, глутаминовую кислоту, глутамин, аспарагин, лизин, аргинин, цистеин или цистеиновую кислоту;
В представляет собой -КИ2 или С1у(ОИ).
- 2 008837
В другом осуществлении настоящего изобретения представлен аналог глюкагоноподобного пептида-1 (СЬР-1). имеющий в положении 8 аминокислоту, отличную от аланина, и в положении 22 аминокислоту, отличную от глицина.
В другом осуществлении настоящего изобретения представлен способ стимуляции рецептора СЬР1 у субъекта, нуждающегося в стимуляции рецептора СЬР-1. Способ включает стадию введения субъекту эффективного количества описанных здесь аналогов СЬР-1 или полипептида, имеющего аминокислотную последовательность 8ЕЦ ГО N0: 1, 8ЕЦ ГО N0: 2, 8ЕЦ ГО N0: 3, 8ЕЦ ГО N0: 4.
Еще в одном осуществлении настоящего изобретения представлены описанные здесь аналоги СЕР1 или полипептид, имеющий аминокислотную последовательность 8ЕЦ ГО N0: 1, 8ЕЦ ГО N0: 2, 8ЕЦ ГО N0: 3 или 8ЕЦ ГО N0: 4, для применения для стимуляции рецептора СЕР-1 у субъекта, нуждающегося в стимуляции рецептора СЕР-1.
Аналоги СЕР-1 по настоящему изобретению сохраняют способность к активации рецептора СЕР-1 и, кроме того, имеют пониженную склонность к агрегации по сравнению с другими аналогами СЕР-1. В результате этого растворы данных соединений могут перемешиваться с минимальным превращением в нерастворимую неактивную форму. Это преимущество значительно упрощает производственный процесс. Кроме того, ожидается, что после введения больным агрегация ίη νίνο будет небольшой или будет отсутствовать, результатом чего будет увеличение активности и сведение к минимуму возможности побочных реакций. Кроме того, данные аналоги СЕР-1 устойчивы к деградации под действием диаминопептидазы IV, и связывают цинк, и, следовательно, как ожидается, обеспечат продолжительное по времени действие ίη νίνο.
На фиг. 1 представлены аминокислотные последовательности Vа18-С1и22-С^Р-1(7-37)0Н (8ЕЦ ГО N0: 5), Vа18-Α8ρ22-С^Р-1(7-37)ОН (8Е0 ГО N0: 6), Vа18-А^§ 22-С^Р-1(7-37)0Н (8Е0 ГО N0: 7) и ναΐ8Еуз22-СЕР-1(7-37)0Н (8Е0 ГО N0: 8).
На фиг. 2 представлены аминокислотные последовательности С1у8-С1и22-СЕР-1(7-37)ОН (8ЕЦ ГО N0: 9), С1у8-Азр22-СЕР-1(7-37)ОН (8Е0 ГО N0: 10), С1у8-Аг§ 22-СЕР-1(7-37)0Н (8Е0 ГО N0: 11) и С1у8Еуз22-СЕР-1(7-37)0Н (8Е0 ГО N0: 12).
На фиг. 3 представлены аминокислотные последовательности Vа18-С1и30-С^Р-1(7-37)ΟН (8ЕЦ ГО N0: 13), С1у8-С1и30-СЕР-1(7-37)0Н (8Е0 ГО N0: 14), Vа18-Н^837-С^Р-1(7-37)0Н (8Е0 ГО N0: 15) и С1у8Н1837-СЕР-1(7-37)0Н (8Е0 ГО N0: 16).
22 27
На фиг. 4 представлены аминокислотные последовательности να1 -С1и -А1а -СЕР-1(7-37)0Н (8ЕР ГО N0: 17) и Vа18-^у822-С1и23-С^Р-1(7-37)0Н (8Е0 ГО N0: 18).
Аналог СЕР-1 представляет собой полипептид, имеющий от приблизительно 25 до приблизительно 39 встречающихся в природе или не встречающихся в природе аминокислот, и он характеризуется существенной гомологией с СЕР-1(7-37)ОН, так что он проявляет инсулинотропную активность. Примеры не встречающихся в природе аминокислот включают α-метиламинокислоты (например, α-метилаланин), Эаминокислоты, гистидиноподобные аминокислоты (например, 2-аминогистидин, β-гидроксигистидин, гомогистидин, α-фторметилгистидин и α-метилгистидин), аминокислоты, имеющие дополнительный метилен в боковой цепи (гомо аминокислоты) и аминокислоты, в которых функциональная группа карбоновой кислоты в боковой цепи замещена группой сульфокислоты (например, цистеиновая кислота).
Предпочтительно, однако, чтобы соединения СЕР-1 настоящего изобретения включали только природные аминокислоты, за исключением специально здесь оговоренного.
Аналог СЕР-1 обычно включает полипептид, имеющий аминокислотную последовательность СЕР1(7-37)ОН, аналог СЕР-1(7-37)ОН, фрагмент СЕР-1(7-37)ОН или фрагмент аналога СЕР-1(7-37)ОН. СЕР-1(7-37)ОН имеет аминокислотную последовательность 8ЕЦ ГО N0: 19:
7Н15-А1а-С1и-10С1у-ТЕг-Рке-ТЬг-5ег-15Азр-Уа1-5ег-5егТуг-20Ьеи-С1и-С1у-С1п-А1а-25А1а-Ьу5-С1и-РЪе-11е-30А1аТгр-Ьеи-7а1-Ъу5-35С1у-Агд-37С1у (8Е0 ГО N0: 19)
По традиции в данной области техники аминоконец СЕР-1(7-37)ОН был обозначен как номер остатка 7, а карбоксильный конец номером 37. Другие аминокислоты в полипептиде нумеруются последовательно, как показано в 8ЕЦ ГО N0: 19. Для примера в положении 12 находится фенилаланин, в положении 22 находится глицин. Если это специально не оговорено, С-конец находится в обычной карбоксильной форме.
Фрагмент СЕР-1 представляет собой полипептид, полученный после удаления одной или более аминокислот с №конца и/или С-конца СЕР-1(7-37)ОН или аналога СЕР-1(7-37)ОН. Номенклатура, применяемая для описания СЕР-1(7-37)ОН, распространяется на фрагменты СЕР-1. Например, СЕР-1(9-36)ОН обозначает фрагмент СЕР-1, полученный удалением двух аминокислот с Оконца и одной аминокислоты с С-конца. Аминокислоты во фрагменте обозначаются тем же номером, что и соответствующая аминокислота в СЕР-1(7-37)ОН. Например, ^концевая глутаминовая кислота в СЕР-1(9-36)ОН находится в положении 9; положение 12 занято фенилаланином; а положение 22 занято глицином, как и в СЕР-1(7-37)ОН.
- 3 008837
Аналог СБР-1 также включает полипептиды, полученные добавлением одной или более аминокислот к Ν-концу и/или к С-концу СЬР-1(7-37)ОН или его фрагментов. Аналоги СЬР-1 данного типа содержат до приблизительно 39 аминокислот. Аминокислоты удлиненного аналога СБР-1 обозначают тем же номером, что и соответствующую аминокислоту в СЬР-1(7-37)ОН. Например, Ν-концевая аминокислота аналога СБР-1. полученного добавлением двух аминокислот к Ν-концу СЬР-1(7-3 7)ОН, находится в положении 5; а С-концевая аминокислота аналога СБР-1. полученного добавлением одной аминокислоты к С-концу СЬР-1(7-37)ОН, находится в положении 38. Таким образом, положение 12 занято фенилаланином, а положение 22 занято глицином в обоих данных удлиненных аналогах СБР-1. как и в СЬР-1(7-37)ОН. Аминокислоты 1-6 удлиненного аналога СЬР-1 являются предпочтительно теми же или представляют собой консервативную замену аминокислоты в соответствующем положении СЬР-1(1-37)ОН. Аминокислоты 38-45 удлиненного аналога СБР-1 являются предпочтительно теми же или представляют собой консервативную замену аминокислоты в соответствующем положении глюкагона или эксендина-4.
Аналог СЬР-1 обладает значительной гомологией с 6ЬР-1(7-37)ОН или с фрагментом 6ЬР-1(7-37)ОН, так что аналог обладает инсулинотропной активностью. Предпочтительно, чтобы аналог СБР-1 имел аминокислотную последовательность СЬР-1(7-37)ОН или его фрагмента, модифицированную так, чтобы от одной, двух, трех, четырех или пяти аминокислот отличались от аминокислоты в соответствующем положении 6ЬР-1(7-37)ОН или фрагмента 6ЬР-1(7-37)ОН. В применяемой здесь номенклатуре для обозначения аналогов СБР-1 замещающая аминокислота и ее положение указываются перед структурой родительского соединения. Например, С1и22-СЬР-1(7-37)ОН обозначает соединение СЬР-1, в котором глицин, нормально находящийся в положении 22 СЬР-1(7-37)ОН, был заменен глутаминовой кислотой; Уа18-С1и22-СЬР-1(7-37)ОН обозначает соединение СЬР-1, в котором аланин, нормально находящийся в положении 8, и глицин, нормально находящийся в положении 22 СЬР-1(7-37)ОН, были заменены валином и глутаминовой кислотой, соответственно.
Ν-Конец аналога СЬР-1 обычно является незамещенным, но может быть также алкилирован или ацилирован (предпочтительно С1-С20). С-Конец может быть незамещенным, как в случае с СЬР-1(7-37)ОН, амидированным -ΝΗ2, -ΝΗΚ или ΝΚΚ' или этерифицированным -ΘΚ. К. и Я' независимо представляют собой алкильную или ацильную группы (предпочтительно С1-С20). Я'' является алкилом (С1-С20). СЬР-1(7-36)МН2 является примером амидированного соединения СЬР. Предпочтительно, чтобы аналоги СБР-1 по настоящему изобретению имели С-конец, который не замещен или замещен -ΝΗ2.
Предпочтительно, чтобы аналоги СБР-1 настоящего изобретения включали аналоги СЬР-1 или фрагменты аналогов СБР-1. в которых скелет для таких аналогов или фрагментов содержал аминокислоту, отличную от аланина в положении 8 (аналоги по положению 8). Скелет может также включать Ьгистидин, Ό-гистидин или модифицированные формы гистидина, такие как дезаминогистидин, 2-аминогистидин, β-гидроксигистидин, гомогистидин, α-фторметилгистидин или α-метилгистидин в положении 7. Предпочтительно, чтобы данные аналоги по положению 8 содержали одно или более дополнительных изменений в положениях 11, 12, 16, 22, 23, 24, 26, 27, 30, 33, 34, 35, 36 и 37 по сравнению с соответствующей аминокислотой природного СЬР-1(7-37)ОН. Более предпочтительно, чтобы данные аналоги по положению 8 содержали одно или более дополнительных изменений в положениях 12, 16, 22, 23, 26, 30, 35 и 37 по сравнению с соответствующей аминокислотой природного СЬР-1(7-37)ОН. Даже еще более предпочтительно, чтобы данные аналоги по положению 8 содержали одно или более дополнительных изменений в положениях 22, 23, 27, 30 и 37 по сравнению с соответствующей аминокислотой природного 6ЬР-1(7-37)ОН.
Также предпочтительно, чтобы данные аналоги содержали 6 или меньшее количество изменений по сравнению с соответствующими аминокислотами природного СЬР-1(7-37)ОН. Более предпочтительные аналоги содержат 5 или менее изменений по сравнению с соответствующими аминокислотами природного СЬР-1(7-37)ОН или содержат 4 или менее изменений по сравнению с соответствующими аминокислотами природного СЬР-1(7-37)ОН. Даже более предпочтительно, чтобы данные аналоги содержали 3 или менее изменений по сравнению с соответствующими аминокислотами природного СЬР-1(7-37)ОН. Наиболее предпочтительно, чтобы данные аналоги содержали 2 или менее изменений по сравнению с соответствующими аминокислотами природного СЬР-1(7-37)ОН.
Было обнаружено, что данные замены снижают склонность аналогов СБР-1 к агрегации и образованию нерастворимой формы. Аналоги СБР-1 настоящего изобретения, в целом, агрегируют по меньшей мере приблизительно в 5 раз медленнее, чем СЬР-1(7-37)ОН, при оценке, например, с помощью теста агрегации, описанного в примере 3, предпочтительно по меньшей мере в 20 раз медленнее, более предпочтительно по меньшей мере в 40 раз медленнее, более предпочтительно по меньшей мере приблизительно в 50 раз медленнее, даже более предпочтительно приблизительно в 60 раз медленнее и даже более предпочтительно по меньшей мере приблизительно в 65 раз медленнее. Предпочтительно, чтобы описанные здесь аналоги СБР-1 были аналогами СБР-1(7-36)НН2 или 6ЬР-1(7-36)ОН.
В предпочтительном осуществлении аминокислота в положении 22 аналога СБР-1 настоящего изобретения содержит боковую цепь, которая включает по меньшей мере 2 атома углерода и полярную или заряженную функциональную группу. Сюда включается аспарагиновая кислота, которая содержит метилен и карбоксильный углерод. Более предпочтительно, чтобы боковая цепь аминокислоты в положении
- 4 008837 была алкильной группой с неразветвленной или разветвленной цепью с от 2 до 6 атомами углерода и заряженной функциональной группой, например группой карбоновой кислоты, аминогруппой, гуанидиногруппой или сульфокислотной группой. Таким образом, примеры предпочтительных аминокислот в положении 22 включают глутаминовую кислоту, аспарагиновую кислоту, аргинин и лизин. Когда в положении 22 находятся аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота, аргинин или лизин, в положении 8 предпочтительно находятся глицин, валин, лейцин, изолейцин, серин, треонин или метионин, и более предпочтительно валин или глицин. Примером аминокислоты с сульфокислотной группой в боковой цепи является цистеиновая кислота (-ИН-СН(СН28О3)-СО-, обозначаемая как Суа). Когда в положении 22 находится сульфокислота, такая как цистеиновая кислота, в положении 8 предпочтительно находятся глицин, валин, лейцин, изолейцин, серин, треонин или метионин, и более предпочтительно валин или глицин.
В другом предпочтительном осуществлении аминокислота в положении 8 является предпочтительно глицином, валином, лейцином, изолейцином, серином, треонином или метионином, и более предпочтительно валином или глицином, а в положении 30 находятся глутаминовая кислота, аспарагиновая кислота, серин или гистидин, и более предпочтительно глутаминовая кислота.
В другом предпочтительном осуществлении аминокислота в положении 8 является предпочтительно глицином, валином, лейцином, изолейцином, серином, треонином или метионином, и более предпочтительно валином или глицином, а в положении 37 находятся гистидин, лизин, аргинин, треонин, серин, глутаминовая кислота, аспарагиновая кислота, триптофан, тирозин, фенилаланин, и более предпочтительно гистидин.
В другом предпочтительном осуществлении аминокислота в положении 8 является предпочтительно глицином, валином, лейцином, изолейцином, серином, треонином или метионином, и более предпочтительно валином или глицином, а в положении 22 находятся глутаминовая кислота, лизин, аспарагиновая кислота или аргинин, и более предпочтительно глутаминовая кислота или лизин, а в положении 23 находятся лизин, аргинин, глутаминовая кислота, аспарагиновая кислота и гистидин, и более предпочтительно лизин или глутаминовая кислота.
В другом предпочтительном осуществлении аминокислота в положении 8 является предпочтительно глицином, валином, лейцином, изолейцином, серином, треонином или метионином, и более предпочтительно валином или глицином, а в положении 22 находятся глутаминовая кислота, лизин, аспарагиновая кислота или аргинин, и более предпочтительно глутаминовая кислота или лизин, а в положении 27 находятся аланин, лизин, аргинин, триптофан, тирозин, фенилаланин или гистидин, и более предпочтительно аланин.
В другом предпочтительном осуществлении аналоги СЬР-1 настоящего изобретения содержат аминокислоту в положении 8 и имеют одну, две или три аминокислоты, выбранные из группы, состоящей из положения 11, положения 12, положения 16, положения 22, положения 23, положения 24, положения 26, положения 27, положения 30, положения 33, положения 34, положения 35, положения 36 и положения 37, которые отличаются от аминокислоты в соответствующем положении природного СЬР-1(7-37)ОН.
В другом предпочтительном осуществлении аналоги СЬР-1 настоящего изобретения содержат одну или две аминокислоты в дополнение к аминокислоте в положении 8, выбранных из группы, состоящей из положения 11, положения 12, положения 16, положения 22, положения 23, положения 24, положения 26, положения 27, положения 30, положения 33, положения 34, положения 35, положения 36 и положения 37, которые отличаются от аминокислоты в соответствующем положении природного СЬР-1(7-37)ОН.
Как описано выше, аналоги СЬР-1 настоящего изобретения могут содержать аминокислоты в дополнение к таковым в положении 8, 11, 12, 16, 22, 23, 24, 26, 27, 30, 33, 34, 35, 36 и 37, которые отличаются от аминокислоты в соответствующем положении СЬР-1(7-37) или фрагмента СЬР-1(7-37). Аминокислоты в положениях 8, 11, 12, 16, 22, 23, 24, 26, 27, 30, 33, 34, 35, 36 и 37 в аналогах СЬР, которые отличаются от аминокислоты в соответствующем положении СЬР-1(7-37)ОН, являются предпочтительно консервативными заменами, и более предпочтительно являются высококонсервативными заменами.
Предпочтительно, чтобы аналоги СЬР-1 настоящего изобретения содержали ноль, одну, две или три аминокислоты в дополнение к аминокислотам в положениях 8 и 22, которые отличаются от аминокислоты в соответствующем положении СЬР-1(7-37)ОН или фрагмента СЬР-1(7-37)ОН. В одном примере одна или более аминокислот в положениях 7, 21 и 27 аналога СЬР-1 отличаются от соответствующей аминокислоты в СЬР-1(7-37)ОН или фрагменте СЬР-1(7-37)ОН, в дополнение к аминокислотам в положениях 8 и 22.
Предпочтительно, чтобы лишь положения 7, 8 и 22 отличались от аминокислоты в соответствующем положении СЬР-1(7-37)ОН (или его фрагмента). Ожидается, что другие улучшенные аналоги СЬР-1 со сниженной способностью к агрегации могут быть получены из известных биологически активных аналогов СЬР-1 путем замены глицина в положении 22 и предпочтительно аланина в положении 8 данных аналогов подходящей аминокислотой, как здесь описано. Известные биологически активные аналоги СЬР-1 раскрыты в патенте США № 5977071, принадлежащем Нойтапп, с1 а1., в патенте США № 5545618, принадлежащем Виск1еу, с1 а1., АйеШога!, с1 а1., 1. Бю1. Сйет. 269: 6275 (1994), полные указания которых включены здесь в качестве ссылки.
- 5 008837
Консервативная замена представляет собой замену аминокислоты другой аминокислотой, имеющей тот же чистый электронный заряд и приблизительно тот же размер и форму. Аминокислоты с алифатическими или замещенными алифатическими боковыми цепями аминокислоты имеют приблизительно одинаковый размер в том случае, когда общее количество углеродных или гетероатомов в их боковых цепях отличается не более чем приблизительно на четыре. Они имеют приблизительно одинаковую форму, когда количество ветвей в их боковых цепях различается не более чем на одну. Аминокислоты с фенильными или замещенными фенильными группами в их боковых цепях рассматриваются как имеющие приблизительно одинаковые размер и форму. Ниже перечислены пять групп аминокислот. Замена аминокислоты в аналоге ОЬР-1 другой аминокислотой из той же группы приводит к консервативной замене.
Группа I: глицин, аланин, валин, лейцин, изолейцин, серин, треонин, цистеин и неприродные аминокислоты с С1-С4 алифатическими или С1-С4 замещенными гидроксилом алифатическими боковыми цепями (с неразветвленными или одноразветвленными цепями).
Группа II: глутаминовая кислота, аспарагиновая кислота и неприродные аминокислоты с замещенными карбоновой кислотой, С1-С4 алифатическими боковыми цепями (неразветвленными или с одной точкой ветвления).
Группа III: лизин, орнитин, аргинин и неприродные аминокислоты с замещенными амином или гуанидино С1-С4 алифатическими боковыми цепями (неразветвленными или с одной точкой ветвления).
Группа IV: глутамин, аспарагин и неприродные аминокислоты с замещенными амидом С1-С4 алифатическими боковыми цепями (неразветвленными или с одной точкой ветвления).
Группа V: фенилаланин, фенилглицин, тирозин и триптофан.
За исключением специально оговоренного здесь, консервативные замены предпочтительно производятся с применением природных аминокислот.
Высококонсервативная замена представляет собой замену аминокислоты другой аминокислотой, имеющей ту же функциональную группу в боковой цепи и почти тот же размер и форму. Аминокислоты с алифатическими или замещенными алифатическими боковыми цепями аминокислоты имеют почти тот же размер в том случае, когда общее количество углеродных и гетероатомов в их боковых цепях отличается не более чем на два. Они имеют почти одинаковую форму, когда они содержат одинаковое количество ветвей в их боковых цепях. Пример высококонсервативных замен включает валин вместо лейцина, треонин вместо серина, аспарагиновую кислоту вместо глутаминовой кислоты и фенилглицин вместо фенилаланина. Примеры замен, которые не являются высококонсервативными, включают аланин вместо валина, аланин вместо серина и аспарагиновую кислоту вместо серина.
Один пример аналога ОЬР-1 настоящего изобретения представляет собой полипептид, имеющий аминокислотную последовательность ЗЕО ГО N0: 1. В предпочтительном примере аналог ОЬР-1 представляет собой ОЬР-1(7-3 7)ОН, за исключением того, что Хаа8 представляет собой О1у или ναΙ, Хаа22 представляет собой О1и или Ьуз, а Хаа23 представляет собой О1и или Ьуз. В другом примере аналог ОЬР1 представляет собой ОЬР-1(7-37)ОН, за исключением того, что Хаа8 представляет собой О1у или να1, а Хаа30 представляет собой О1и. Дополнительным примером является аналог ОЬР-1, который представляет собой ОЬР-1(7-37)ОН, за исключением того, что Хаа8 представляет собой О1у или Vа1, а Хаа37 представляет собой Н13.
Другой пример аналога ОЬР-1 по настоящему изобретению представляет собой полипептид, имеющий аминокислотную последовательность ЗЕО ГО N0: 4. В предпочтительном примере в ЗЕО ГО N0: 4 Хаа7 представляет собой Ь-гистидин, Ό-гистидин, дезаминогистидин, 2-аминогистидин, β-гидроксигистидин, гомогистидин, α-фторметилгистидин или α-метилгистидин, Хаа8 представляет собой глицин, аланин, валин, лейцин, изолейцин, серин или треонин, и предпочтительно глицин, валин, лейцин, изолейцин, серин или треонин, Я представляет собой -ΝΗ2 или О1у(ОН), а Хаа22 представляет собой лизин, глутаминовую кислоту, аспарагиновую кислоту или аргинин. В более предпочтительном примере Хаа7 представляет собой Ь-гистидин, Хаа8 представляет собой глицин или валин, Хаа22 представляет собой лизин, глутаминовую кислоту, аспарагиновую кислоту или аргинин и Я представляет собой 01у(0Н). В противоположном варианте Хаа7, Хаа8 и Я в ЗЕО ГО N0: 4 представляют собой описанное выше и Хаа22 представляет собой аминокислоту с боковой цепью, включающей группу сульфокислоты, например цистеиновую кислоту.
В другом примере аналогов ОЬР-1 настоящего изобретения аминокислота в положении 8 не является Ό-аминокислотой и не имеет боковой цепи из глицина, серина, треонина, цистеина или бета-аланина, когда аминокислота в положении 22 имеет С1-С2 алкильную боковую цепь, С1-С2 гидроксилированную алкильную боковую цепь или С1-С2 тиолированную алкильную боковую цепь (например, цистеин). В предпочтительном примере аналогов ОЬР-1 настоящего изобретения аминокислота в положении 8 не является Ό-аминокислотой и не имеет боковой цепи из глицина, серина, треонина, цистеина или бетааланина, когда аминокислота в положении 22 имеет С1-С4 алкильную боковую цепь, С1-С4 гидроксилированную алкильную боковую цепь или С1-С4 тиолированную алкильную боковую цепь.
В другом примере аналогов ОЬР-1 настоящего изобретения аминокислота в положении 8 представляет собой глицин, валин, лейцин, изолейцин, метионин, серин, треонин, цистеин, аспарагиновую кисло
- 6 008837 ту, глутаминовую кислоту, лизин, аргинин, аспарагин, глутамин, фенилаланин, тирозин, гистидин или триптофан; и аминокислота в положении 22 представляет собой аспарагиновую кислоту, глутаминовую кислоту, лизин, аргинин, аспарагин, глутамин или гистидин.
Конкретные примеры аналогов СЬР-1 настоящего изобретения включают
С1и22-(зЪР-1 (7-37) ОН (ЗЕО Ю N0: 20) , Азр22-СЬР-1(7-37)ОН (ЗЕО Ю N0:· 21), Агд22-ОЬР-1 (7-37) ОН (ЗЕО Ю ΝΟ: 22), Ъуз22-бЬР-1 (7-37) ОН (ЗЕО Ю N0: 23), Суа22СЬР-1 (7-37) ОН (ЗЕО Ю N0: 24), Уа18-С1и22-ОЬР-1 (7-37) ОН (ЗЕО 10 N0: 5), Уа18-Азр22-0ЬР-1 (7-37) ОН (ЗЕО Ю N0: 6), Уа18Агд22-СЬР-1(7-37)ОН (ЗЕО Ю N0: 7), Уа18-Ьуз22-СЪР-1 (7-37) ОН (ЗЕО Ю N0: 8), Уа18-Суа22-6ЪР-1 (7-37) ОН (ЗЕО 10 N0: 25), 01у8-61и22-0ЬР-1 (7-37)ОН (ЗЕО Ю N0: 9), 01у8-Азр22-0ЬР-1 (737) ОН (ЗЕО Ю N0: 10), С1у8-Агд22-0ЬР-1 (7-37) ОН (ЗЕО Ю N0: 11), С1у8-Ьуз22-0ЬР-1(7-37) ОН (ЗЕО 10 НО: 12), О1у8-Суа22СЬР-1 (7-37)ОН (ЗЕО 10 N0: 26), С1и22-СЪР-1 (7-36) ΝΗ2 (ЗЕО Ю N0: 27), Азр22-СЬР-1 (7-36)ЫН2 (ЗЕО 10 N0: 28), Ага22-СЬР-1 (736)ΝΗ2 (ЗЕО 10 N0: 29), Ьуз22-СЬР-1(7-36)ΝΗ2 (ЗЕО Ю N0: 30), Суа22-СЬР-1 (7-36)ΝΗ2 .(ЗЕО Ю N0: 31), Уа18-С1и22-СЪР-1(7-
36) ΝΗ2 (5Е0 Ю N0: 32), Уа18-Азр22-СЬР-1 (7-36) ΝΗ2 (ЗЕО 10 N0: 33), Уа18-Агд22-6ЬР-1 (7-36)ΝΗ2 (ЗЕО 10 N0: 34), Уа18-Ьуз22СЬР-1(7-36)ΝΗ2 (ЗЕО Ю N0: 35), Уа18-Суа22-СЬР-1 (7-36) ЫН2 (ЗЕО Ю N0: 36), С1у8-С1и22-СЪР-1 (7-36)ΝΗ2 (ЗЕО 10 N0; 37), С1у8-Азр22-6ЪР-1 (7-36)ΝΗ2 (ЗЕО Ю N0: 38), С1у8-Агд22-6ЬР1(7-36)ΝΗ2 (ЗЕО Ю N0: 39), 61у8-Ьуз22-СЬР-1 (7-36) ΝΗ2 (ЗЕО 10 N0: 40) апб О1у8-Суа22-СЬР-1 (7-36) ЯН2 (ЗЕО Ю N0: 41), Уа18Ьуз23—СЬР—1 (7—37) ОН (ЗЕО 10 N0: 42), Уа18-А1а27-СЬР-1 (7-37)ОН (ЗЕО Ю N0: 43), Уа18-61и30-СЬР-1 (7-37)ОН (ЗЕО Ю N0: 44), С1у8-О1и30-СЬР-1 (7-37) ОН (ЗЕО 10 N0: 45), Уа18-Н1535-СЬР-1 (7-
37) ОН (ЗЕО 10 N0: 46), Уа18-Н1а37-СЪР-1 (7-37) ОН (5Е0 10 N0: 47), Уа18-С1и22-Ьуз23-СЬР-1 (7-37)0Н (ЗЕО 10 N0: 48), Уа18С1и22-С1и23-СЪР-1 (7-37)0Н (ЗЕО Ю N0: 49), Уа18-61и22-А1а27ОЪР-1 (7-37)0Н (ЗЕО 10 N0: 50), Уа18-С1у34-Ъуз35-6ЬР-1 (7-37) ОН (ЗЕО Ю N0: 51), Уа18-Н1з37-СЬР-1(7-37)ОН (ЗЕО Ю N0: 52), 61у8-Н1з37-0ЬР-1 (7-37)ОН (ЗЕО И N0: 53).
Применяемый здесь термин аналог СЬР-1 также включает фармацевтически приемлемые соли описанных здесь соединений. Аналог СЬР-1 данного изобретения может обладать достаточно кислотной, достаточно основной или обеими функциональными группами и, соответственно, реагировать с любым из ряда неорганических оснований и неорганических и органических кислот с образованием соли. Кислоты, обычно применяемые для образования кислотно-аддитивных солей, представляют собой неорганические кислоты, такие как соляная кислота, бромисто-водородная кислота, иодисто-водородная кислота, серная кислота, фосфорная кислота и т.п., органические кислоты, такие как п-толуолсульфокислота, метансульфокислота, щавелевая кислота, п-бромфенилсульфокислота, карбоновая кислота, янтарная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, уксусная кислота и т.п. Примеры таких солей включают сульфат, пиросульфат, бисульфат, сульфит, бисульфит, фосфат, вторичный кислый фосфат, первичный кислый фосфат, метафосфат, пирофосфат, хлорид, бромид, иодид, ацетат, пропионат, деканоат, каприлат, акрилат, формиат, изобутират, капроат, гептаноат, пропиолат, оксалат, малонат, сукцинат, суберат, себа
- 7 008837 цат, фумарат, малеат, бутин-1,4-диоат, гексин-1,6-диоат, бензоат, хлорбензоат, метилбензоат, динитробензоат, гидроксибензоат, метоксибензоат, фталат, сульфонат, ксилолсульфонат, фенилацетат, фенилпропионат, фенилбутират, цитрат, лактат, гамма-гидроксибутират, гликолат, тартрат, метансульфонат, пропансульфонат, нафталин-1-сульфонат, нафталин-2-сульфонат, манделат и т.п.
Основно-аддитивные соли включают производные неорганических оснований, таких как гидроксиды аммония, щелочных или щелочно-земельных металлов, карбонаты, бикарбонаты и т.п. Такие основания, пригодные для получения солей данного изобретения, таким образом, включают гидроксид натрия, гидроксид калия, гидроксид аммония, карбонат калия и т. п.
Аналоги ОЬР-1 можно применять для лечения субъектов с широким спектром заболеваний и состояний. Считается, что аналоги ОЬР-1, включая аналоги настоящего изобретения, проявляют свои биологические эффекты посредством действия на рецептор, обозначаемый как рецептор ОЬР-1 (смотри патент США № 5670360, принадлежащий Тйоггеиз). Субъекты с заболеваниями и/или состояниями, которые благоприятно реагируют на стимуляцию рецептора ОЬР-1 или введение аналогов ОЬР-1, могут, следовательно, подвергаться лечению аналогами ОЬР-1 настоящего изобретения. Говорят, что данные субъекты нуждаются в лечении аналогами ОЬР-1 или нуждаются в стимуляции рецептора ОЬР-1. Включенными являются субъекты с инсулиннезависимым диабетом, инсулинзависимым диабетом, инсультом (смотри заявку \УО 00/16797, принадлежащую ЕГепФс). инфарктом миокарда (смотри заявку \УО 98/08531, принадлежащую ЕГепбю). ожирением (смотри заявку \УО 98/19698, принадлежащую Е£епФс), катаболическими изменениями после хирургической операции (смотри патент США № 6006753, принадлежащий Είοηάίο), функциональной диспепсией и синдромом воспаленного кишечника (смотри заявку XVО 99/64060, принадлежащую ЕГепбЬ). Включаются также субъекты, требующие профилактического лечения аналогами ОЬР-1, например субъекты с риском развития инсулиннезависимого диабета (смотри заявку VО 00/07617). Субъекты с нарушенной толерантностью к глюкозе или с ухудшенным уровнем глюкозы натощак, субъекты, чья масса тела составляет приблизительно на 25% выше нормальной массы тела для субъектов их роста и конституции, субъекты с частичной панкреатектомией, субъекты, имеющие одного или более предков с инсулиннезависимым диабетом, субъекты, которые страдали диабетом беременных, и субъекты, которые страдали острым или хроническим панкреатитом, являются группами риска развития инсулиннезависимого диабета.
Эффективное количество аналога ОЬР-1 представляет собой количество, которое ведет к желаемому терапевтическому и/или профилактическому эффекту, не вызывая неприемлемых побочных эффектов при введении субъекту, нуждающемуся в стимуляции рецептора ОЬР-1. Желаемый терапевтический эффект включает одно или более из следующего: 1) ослабление симптома(ов), связанного(ых) с заболеванием или состоянием; 2) отсрочку проявления симптомов, связанных с заболеванием или состоянием; 3) увеличение продолжительности жизни по сравнению с наблюдаемой в отсутствие лечения; и 4) лучшее качество жизни по сравнению с наблюдаемым в отсутствие лечения. Например, эффективное количество аналога ОЬР-1 для лечения диабета представляет собой такое количество, которое должно приводить к лучшему контролю над концентрацией глюкозы в крови, чем в отсутствие лечения, в результате чего достигается отсрочка возникновения осложнений диабета, таких как ретинопатия, нейропатия или заболевание почек. Эффективное количество аналога ОЬР-1 для профилактики диабета представляет собой такое количество, которое должно отсрочить по сравнению с наблюдаемым в отсутствие лечения наступление такого увеличения уровня глюкозы в крови, которое требует лечения антигипогликемическими лекарствами, такими как сульфонилмочевина, тиазолидиндионы, инсулин и/или бисгуанидины.
Эффективное количество аналога ОЬР-1, вводимого субъекту, должно также зависеть от типа и тяжести заболевания и особенностей субъекта, таких как общее состояние здоровья, возраст, пол, масса тела и толерантность к лекарствам. Опытный специалист будет способен определить подходящие дозы в зависимости от данных и других факторов. Обычно терапевтически эффективное количество аналога ОЬР-1 может варьировать от приблизительно 0,01 до приблизительно 1000 мг в день для взрослого. Предпочтительно, чтобы доза варьировала от приблизительно 0,1 до приблизительно 100 мг в день, более предпочтительно от приблизительно 1,0 до приблизительно 10 мг в день.
Аналоги ОЬР-1 настоящего изобретения могут вводиться, например, перорально, интраназально, путем ингаляции или парентерально. Парентеральное введение может включать, например, системное введение, такое как внутримышечная, внутривенная, подкожная или внутрибрюшинная инъекция. Аналоги ОЬР-1 можно вводить субъекту в сочетании с приемлемым фармацевтическим носителем, разбавителем или наполнителем в качестве части фармацевтической композиции для лечения обсуждавшихся выше заболеваний. Фармацевтическая композиция может быть раствором или - при парентеральном введении - суспензией аналога ОЬР-1 или суспензией аналога ОЬР-1, комплексированного с катионом двухвалентного металла, как описано ниже. Подходящие фармацевтические носители могут содержать инертные ингредиенты, которые не взаимодействуют с пептидом или производным пептида. Могут быть применены стандартные технологии образования фармацевтического состава, такие как описанные в Кеттдои'з Рйагтасеи(1са1 8с1еисез, Маск РиЬйзЫид Сотраиу, Еаз(ои, РА. Подходящие фармацевтические носители для парентерального введения включают, например, стерильную воду, физиологический
- 8 008837 раствор, бактериостатический солевой раствор (солевой раствор, содержащий приблизительно 0,9% мг/мл бензилового спирта), забуференный фосфатом физиологический раствор, раствор Хенка, раствор Рингера с лактатом и т.п. Некоторые примеры подходящих наполнителей включают лактозу, декстрозу, сахарозу, трегалозу, сорбит и маннит.
Субъектом является млекопитающее, предпочтительно человек, но им может также быть и животное, например животные-компаньоны (например, собаки, кошки и т.п.), сельскохозяйственные животные (например, коровы, овцы, свиньи, лошади и т.п.) и лабораторные животные (например, крысы, мыши, морские свинки и т.п.).
Аналоги СЬР-1 настоящего изобретения могут быть комплексированы с подходящим катионом двухвалентного металла. Комплексы аналогов СЬР-1 с двухвалентным металлом обычно нерастворимы в водном растворе в области физиологического рН. Таким образом, данные комплексы можно вводить подкожно в виде суспензий, и при этом наблюдается сниженная скорость высвобождения ίη νινο, благодаря чему продлевается время действия аналога. Примеры подходящих катионов двухвалентного металла включают Ζη44, Μη44, Те44, Са++, Со44, Сб, Νί++ и т.п. Предпочтительным является Ζη++.
Для получения комплексов между аналогами СЬР-1 по настоящему изобретению и катионом двухвалентного металла СЬР-1 растворяют в подходящем буфере в присутствии соли металла. Смесь оставляют инкубироваться при комнатной температуре для преципитации комплекса. Подходящими буферами являются такие, которые поддерживают рН смеси в диапазоне от приблизительно 3,0 до приблизительно 9,0 и не влияют на реакцию комплексирования. Примеры включают фосфатные буферы, ацетатные буферы, цитратные буферы и буферы Сообе, например НЕРЕ8, Трис и Трис-ацетат. Подходящими солями металла являются такие, в которых металл доступен для комплексирования. Примеры подходящих солей цинка включают хлористый цинк, ацетат цинка, оксид цинка и сульфат цинка. Предпочтительно, чтобы катионная соль двухвалентного металла, такая как хлористый цинк, вносилась в избытке для обеспечения молярного соотношения до приблизительно 50 молекул катиона двухвалентного металла на каждую молекулу аналога СЬР-1.
Инсулинотропная активность относится к стимуляции секреции инсулина в ответ на повышенный уровень глюкозы, что тем самым увеличивает захват глюкозы клетками и снижает уровень глюкозы в крови. Инсулинотропная активность может быть оценена с помощью способов, известных в данной области техники, включая применение экспериментов ίη νινο и анализов ίη νίΐΓο, в которых измеряется связывающая активность рецептора СЬР-1 или активация рецептора, например анализов с применением клеток островков поджелудочной железы или клеток инсулиномы, как описано в ЕР 619322, принадлежащем беИапб, е1 а1., и патенте США № 5120712, соответственно. Полные указания данных ссылок включены здесь в качестве ссылок.
Аналоги СЬР-1 по настоящему изобретению могут быть получены с применением стандартных способов технологии твердофазного синтеза пептидов. Пептидные синтезаторы имеются в продаже, например, от Аррйеб Вюку^етк, Еойег С11у СА. Реактивы для твердофазного синтеза имеются в продаже, например, от Μί6\\Ό5ΐ Вю1ее11 (Екйега, ΙΝ). Твердофазные пептидные синтезаторы можно применять в соответствии с инструкциями производителя для блокирования интерферирующих групп, защиты реагирующей аминокислоты, присоединения, расщепления и кепирования непрореагировавших аминокислот.
Обычно защищенную α-Ν-карбамоилом аминокислоту и Ν-концевую аминокислоту на растущей полипептидной цепи на смоле соединяют при комнатной температуре в инертном растворителе, таком как диметилформамид, Ν-метилпирролидон или метиленхлорид, в присутствии агентов присоединения, таких как дициклогексилкарбодиимид и 1-гидроксибензотриазол, и основания, такого как диизопропилэтиламин. Защитную α-Ν-карбамоильную группу удаляют из полученной пептидной смолы с помощью такого реагента, как трифторуксусная кислота или пиперидин, и реакцию присоединения повторяют со следующей желаемой Ν-защищенной аминокислотой, которая должна быть добавлена к пептидной цепи. Подходящие защитные группы для амина хорошо известны в технике и описаны, например, в Сг^п апб ХУиК РгсИесбид Сгоирк ίη Огдашс БуШНеМ^, ίοΐιη \УПеу анб δοηκ, 1991, полные указания которой включены в качестве ссылки. Примеры включают трет-бутилоксикарбонил (ΐ-Вос) и флуоренилметоксикарбонил (Е-шос).
Пептиды также синтезируют с применением протоколов стандартного автоматизированного твердофазного синтеза с применением трет-бутоксикарбонил- или фторенилметоксикарбонил-альфа-аминокислот при подходящей защите боковых групп. После завершения синтеза пептиды отщепляют от твердофазной подложки при одновременном снятии защиты боковых групп с помощью стандартных способов с применением фтористого водорода. Сырые пептиды затем дополнительно очищают с помощью хроматографии с обращенной фазой на колонках Уубас С18 с применением градиентов ацетонитрила в 0,1% трифторуксусной кислоте (ТФУ). Для удаления ацетонитрила пептиды лиофилизуют из раствора, содержащего 0,1% ТФУ, ацетонитрил и воду. Чистота может быть подтверждена с помощью аналитической хроматографии с обращенной фазой. Идентичность пептидов может быть проверена масс-спектрометрией. Пептиды можно растворять в водных буферах при нейтральном рН.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами, какое-либо ограничение которых не преду
- 9 008837 смотрено.
Пример 1. Получение аналогов СЬР-1 настоящего изобретения с помощью твердофазной химии с применением 1-Вое.
Приблизительно 0,5-0,6 г (0,38-0,45 ммоль) смолы Вос С1у-РЛМ помещали в стандартный 60-мл реакционный сосуд и производили двойные реакции присоединения с помощью синтезатора пептидов Лррйсб Вюзуз!етз ΑΒΙ430Α. От М1б^ез! Вю!есй (Е1зйегз, ΙΝ) были получены и применены в синтезе следующие аминокислоты с защищенными боковыми цепями (картриджи по 2 ммоль Вос-аминокислот): Агд-тозил (ТО8), Αδρ-δ-циклогексиловый эфир (СНХЬ), 61и-5-циклогексиловый эфир (СНХЬ), Ηίδ-бензилоксиметил (ВОМ), Ьуз-2-хлорбензилоксикарбонил (2Ο-Ζ). Ме!-сульфоксид (О), 8ег-О-бензиловый эфир (ΟΒζΙ), Тйг-О-бензиловый эфир (ΟΒζΙ), Тгр-формил (СНО) и Туг-2-бромбензилоксикарбонил (2ВгΖ) и смола Вос С1у РАМ. Трифторуксусную кислоту (ТФУ), диизопропилэтиламин (ΌΙΕΑ), 0,5М гидроксибензотриазол (НОВ!) в ДМФ и 0,5М дициклогексилкарбодиимид (ЭСС) в дихлорметане были получены от ΡΕ-Αρρ^ά Вюзуз!етз (Еоз!ег Сйу, СΑ). Диметилформамид (ДМФ-ВигФск апб 1аскзоп) и дихлорметан (ДХМ-МаШпкгоб!) были получены от Мауз Сйет1са1 Со. (1пб1апаро118, ΙΝ).
Стандартные двойные реакции присоединения проводили с применением либо симметричного ангидрида, либо сложных эфиров НОВ!, полученных с помощью ЭСС. Второй этап двойного присоединения (без снятия защиты ТФУ) проводили по Тгр31, ТПг13 и ТПг11. После завершения синтеза Ν-концевую Вос группу удаляли и пептидильные смолы обрабатывали 20% пиперидином в ДМФ для деформилирования боковой цепи Тгр. После промывки ДХМ смолу переносили в тефлоновый реакционный сосуд и сушили в вакууме.
Для аналогов, содержащих Ме!, проводили восстановление на смоле с применением смеси ТФУ/10% диметилсульфид (ЭМ8)/2% концентрированная НС1. Отщепление проводили путем подсоединения реакционных сосудов к аппарату с НЕ (фтористо-водородной кислотой) (Реппш8и1а ЬаЬога!опе8). Добавляли 1 мл м-крезола на грамм смолы и в предварительно охлажденный сосуд конденсировали 10 мл НЕ (полученной от ΑΟΑ, 1пб1апаро118, ΙΝ). Когда имелся метионин, добавляли 1 мл ЭМ8 на грамм смолы. Реакционные смеси перемешивали в течение 1 ч на ледяной бане и НЕ удаляли в вакууме. Остатки суспендировали в этиловом эфире и твердые вещества отфильтровывали и промывали эфиром. Каждый пептид экстрагировали в водную уксусную кислоту и либо лиофилизовали, либо прямо наносили на колонку с обращенной фазой.
Очистку проводили на колонке 2,2х25 см ΥΥΌΑΕ С18 в буфере А (0,1% трифторуксусная кислота в воде, В: 0,1% ТФУ в ацетонитриле). При ВЭЖХ (^а!егз) применяли градиент В от 20 до 90% в течение 120 мин при скорости 10 мл/мин и отслеживании в УФ при 280 нм (4,0 А) и сборе фракций каждую минуту. Подходящие фракции объединяли, замораживали и лиофилизовали. Высушенные продукты анализировали с помощью ВЭЖХ (0,46х15 см МΕΤΑ8I^ ΑΟ С18) и масс-спектрометрии ΜΑΕΌΙ.
Пример 2. Получение аналогов СЬР-1 настоящего изобретения с помощью твердофазной химии с применением Е-Мос.
Приблизительно 114 мг (50 ммоль) смолы ЕМОС С1у νΑΝΟ (полученной от №уаВюсйет, Ьа1о11а, СΑ) помещали в каждую из программируемых лунок 96-луночного реакционного блока и производили двойные реакции присоединения с помощью синтезатора пептидов Αбνаηсеб СйетТесй 396. Аналоги с С-концевым амидом получали с применением 75 мг (50 мкмоль) смолы Ыпк Αт^бе ΑМ (№уаВюсйет, Ьа 1о11а, СΑ).
Следующие ЕМОС аминокислоты были получены от Αбνаηсеб СйетТесй (ЬошзуШе, ΚΥ), БоуаВюсйет (Ьа 1о11а, СΑ) и М1б^е8! ВюТесй (Е18Йег8, ΙΝ): Α^д-2,2,4,6,7-пенτамеτилдигидробензофуран-5-сульфонил (РЬБ), (Тг!), Αδρ-β-трет-бутиловый эфир (!Ви), С1и-5-трет-бутиловый эфир (!Ви), С1п-тритил (Тг!), Н18-тритил (Тг!), Ьуз-трет-бутилоксикарбонил (Вос), 8ег-трет-бутиловый эфир (О!Ви), Тйг-трет-бутиловый эфир (О!Ви), Тф-трет-бутилоксикарбонил (Вос), Туг-трет-бутиловый эфир (О!Ви).
Растворители диметилформамид (ДМФ-Вигбюк апб 1аскзоп), Ν-метилпирролидон (БМР-Вигб1ск апб 1аскзоп), дихлорметан (ДХМ-МаШпкгоб!) были получены от Мауз С11е1шса1 Со. (Iпб^апаρо1^δ, ΙΝ).
Гидроксибензотризол (НОВ!), диизопропилкарбодиимид (ΌΙΟ), диизопропилэтиламин (ΌΙΕΑ) и пиперидин (Р1]э) были получены от Α16πΗι С11е1шса1 Со (Мй^аикее, νΙ).
Все аминокислоты растворяли в 0,45М НОВ! в БМР и после 20-минутного снятия защиты с применением 20% Р|])/ДМФ производили в течение 50 мин активированные Э!С/НОВ1 реакции присоединения. После снятия защиты и реакции присоединения каждую смолу промывали ДМФ. После последней реакции присоединения и снятия защиты пептидильные смолы промывали ЭСМ и сушили в вакууме в реакционном блоке.
После установки блока реакции/расщепления на место в каждую лунку добавляли 2 мл реактива Κ и смесь реакции расщепления перемешивали в течение 2 ч (реактив Κ=0,75 г фенола, 0,5 мл тиоанизола, 0,25 мл этандитиола, 0,5 мл воды на 10 мл трифторуксусной кислоты (ТФУ), все реактивы получены от Α16πΗι С11е1шса1 Со., Мй^аикее, νΙ). Фильтраты ТФУ добавляли к 40 мл этилового эфира и преципитаты центрифугировали 2 мин при 2000 об./мин. Надосадочные фракции декантировали, осадки ресуспен- 10 008837 дировали в 40 мл эфира, повторно центрифугировали, вновь декантировали, сушили в атмосфере азота и затем в вакууме.
0,3-0,6 мг каждого продукта растворяли в 1 мл 0,1% ТФУ/ацетонитрила (АСЫ) и 20 мкл анализировали ВЭЖХ (0,46х15 см МЕТА81Б АО С18, 1 мл/мин, 45°С, 214 нм (0,2 А), А=0,1% ТФУ, В=0,1% ТФУ/50% АСМ. Градиент=от 50 до 90% В на протяжении 30 мин).
Очистку проводили на колонке 2,2х25 см УУЭАС С18 в буфере А (0,1% ТФУ в воде, В: 0,1% ТФУ в ацетонитриле). На колонку ВЭЖХ (\Уа1сг5) наносили градиент от 20 до 90% В на протяжении 120 мин со скоростью 10 мл/мин с отслеживанием в УФ при 280 нм (4,0 А) и сбором фракций каждую 1 мин. Соответствующие фракции объединяли, замораживали и лиофилизовали. Высушенные продукты анализировали с помощью ВЭЖХ (0,46х15 см МЕТА81Ь АО С18) и масс-спектрометрии МАЬОЬ
Пример 3. Анализ агрегации ОЬР.
Пептиды ОЬР данного изобретения анализировали в отношении их способности агрегировать в растворе. В целом, пептиды в растворе перемешивали при повышенной температуре в подходящем буфере и регистрировали мутность при 350 нм как функцию времени. Для количественной оценки способности данной молекулы ОЬР агрегировать при данных стрессовых условиях измеряли время наступления агрегации.
Протокол.
Аналог ОЬР-1 сначала растворяли в щелочных условиях (рН 10,5) в течение 30 мин для растворения любого предварительно агрегированного материала. После этого рН раствора доводили до 7,4 и производили фильтрацию. Конкретно, 4 мг лиофилизованного аналога ОЬР-1 растворяли в 3 мл 10 мМ фосфата/10 мМ цитрата. рН доводили до 10,0-10,5 и выдерживали в течение 30 мин. рН раствора доводили до 7,4 с помощью НС1 и производили фильтрацию через подходящий фильтр, например шприцевый фильтр МШех ОУ (Мййроге Согрогабоп, ВебГогб, МА). Данный раствор затем разводили до конечного образца, содержащего 0,3 мг/мл белка в 10 мМ цитрате, 10 мМ фосфате, 150 мМ ЫаС1, и рН доводили до величины от 7,4 до 7,5. Образец инкубировали при 37°С в кварцевой кювете. Мутность раствора измеряли каждые 5 мин при 350 нм на спектрофотометре АУ1У Мобе1 14Ό8 иУ-У18 (Ьаке^ооб, N1). В течение 30 с до измерения и во время измерения раствор перемешивали с помощью магнитной мешалки от 81агиа СеШ, 1пс. (А1а8сабего, СА). Повышение ОП при 350 нм указывает на агрегацию пептида ОЬР. Время до агрегации аппроксимировали по пересечению подобранных линейных графиков к фазе, предшествующей росту, и к фазе роста в соответствии со способом Эгаке (Агу1п1е Т., Сибб А., апб Эгаке А.Р. (1993) 1. Бю. Сйет. 268, 6415-6422).
Между экспериментами кювету отмывали раствором едкого мыла (например, Соп1габ-70).
Результаты для ряда аналогов ОЬР-1 по настоящему изобретению представлены в табл. 1 в виде времени в часах, необходимого для агрегации соединения. Как можно видеть, аналоги по настоящему изобретению проявляют значительно увеличенное время агрегации по сравнению с аналогами ОЬР-1, известными из предшествующего уровня техники.
Пример 4. Активация рецептора ОЬР-1 аналогами ОЬР-1 настоящего изобретения.
Способность аналогов ОЬР-1 по настоящему изобретению активировать рецептор ОЬР-1 оценивали с помощью тестов ш уйго, таких как описанные в ЕР 619322, принадлежащем Ое1Гапб, е! а1., и патенте США № 5120712, соответственно. Полные указания данных ссылок включены здесь в качестве ссылки. Активность данных аналогов относительно активности ОЬР-1(7-37)ОН представлена в табл. 1. Как можно видеть из этих результатов, активность аналогов ОЬР-1 по настоящему изобретению, в целом, приблизительно такая же хорошая или лучше, чем активность ОЬР-1(7-37)ОН.
Таблица 1
Соединение ОЬР-1 Агрегация: время, ч Активация рецептора ОЬР-1
ОЬР-1(7-37)ОН 1 1,0
Уа18-ОЬР-1(7-37)ОН 0,9±0,2 (п=6) 0,47
О1у8-Н1§11 -ОЬР-1 (7-37)ОН 9* 0,282
Уа18-А1а -ОЬР- 1(7-37)ОН 10 0,021
Уа18-Ьу§11 -ОЬР-1 (7-37)ОН 13 0,001
Уа18-Туг12-ОЬР- 1(7-37)ОН 6 0,81
Уа18-О1и16-ОЬР-1 (7-37)ОН 12 0,047
Уа18-А1а16-ОЬР-1(7-37)ОН 16 0,112
Уа18-Туг16-ОЬР-1(7-37)ОН 5 1,175
Уа18-Ьу§20-ОЬР-1 (7-37)ОН 5 0,33
О1п22-ОЬР-1(7-37)ОН 7 0,42
Уа18-А1а22-ОЬР- 1(7-37)ОН 19 0,56
Уа18-8ег22-ОЬР-1(7-37)ОН 22 0,50
Уа18-А§р22-ОЬР-1(7-37)ОН >90 0,40
Уа18-О1и22-ОЬР-1 (7-37)ОН 72 1,29
Уа18-Ьу§22-ОЬР-1 (7-37)ОН 100,54 0,58
- 11 008837
Уа18-Рте22-ОЬР-1 (7-37)ОН >75 0,01
Уа18-Н1§22-ОЬР-1 (7-37)ОН >75 0,14
Уа18-Ьу522-ОЬР-1(7-36^Н2 24 0,53
Уа18-О1и22-ОЬР-1(7-36^Н2 >65 1,0
О1у8-О1и22-ОЬР-1(7-37)ОН 19 1,07
Уа18-О1и23-ОЬР-1 (7-36)ОН 65 0,28
Уа18-Ьу§23-ОЬР-1 (7-37)ОН >45 0,18
Уа18-Н1§24-ОЬР-1 (7-37)ОН 3 0,007
Уа18-Ьу§24-ОЬР-1 (7-37)ОН 22 0,02
А1а8-Н1526-ОЬР-1(7-37)ОН >24 0,8
А1а8-О1и26-ОЬР-1 (7-37)ОН >24 0,7
Уа18-Н1527-ОЬР-1(7-37)ОН 10 0,37
Уа18-А1а27-ОЬР-1(7-37)ОН 2 0,47
О1у8-О1и30-ОЬР-1(7-37)ОН >40 0,29
Уа18-О1и30-ОЬР-1 (7-37)ОН 30 0,29
Уа18-А§р30-ОЬР-1(7-37)ОН >45 0,15
Уа18-8ег30-ОЬР-1(7-37)ОН 8 0,19
Уа18-Н1530-ОЬР-1(7-37)ОН 13 0,19
Уа18-О1и33-ОЬР-1 (7-37)ОН >70 0,039
Уа18-А1а33-ОЬР-1 (7-37)ОН 20 0,1
Уа18-О1у33-ОЬР- 1(7-37)ОН 9 0,01
Уа18-О1и34-ОЬР-1 (7-37)ОН >40* 0,17
Уа18-Рте35-ОЬР-1 (7-37)ОН 14 0,094
Уа18-Н1835-ОЬР-1(7-37)ОН >45, 30 0,41
Уа18-О1и35-ОЬР-1 (7-37)ОН 63 0,15
Уа18-О1и36-ОЬР-1 (7-37)ОН >45 0,11
Уа18-Н1536-ОЬР-1(7-37)ОН 8 0,22
Уа18-Н1537-ОЬР-1(7-37)ОН >40 0,33
Уа18-Ьеи16-О1и26-ОЬР-1 (7-37)ОН >20 0,23
Уа18-Ьу§22-О1и30-ОЬР-1 (7-37)ОН 4 0,37
Уа18-Ьу§22-О1и23-ОЬР-1 (-7-37)ОН >30 0,35
Уа18-О1и22-О1п23-ОЬР-1 (7-37)ОН >20 0,47
Уа18-О1и22-А1а27-ОЬР-1 (7-37)ОН >45 1,02
Уа18-О1и22-Ьу§23-ОЬР-1 (7-37)ОН >65 1,43
Уа18-Ьу§33-Уа134-ОЬР-1 (7-37)ОН 22 0,08
Уа18-Ьу533-А§п34-ОЬР-1(7-37)ОН >48 0,09
Уа18-О1у34-Ьу§35-ОЬР-1(7-37)ОН 27 0,34
Уа18-О1у36-Рте37-ОЬР-1 (7-37)ΝΠ2 2 0,53
* Время агрегации, измеренное при 30°С.
Пример 5. Осаждение аналогов ОЬР-1 цинком.
Отдельные аналоги ОЬР-1 получали, как описано в примерах 1 или 2. В 3 мл буфера 0,1М НЕРЕ8 с рН 10,5 растворяли 3 мг индивидуальных лиофилизованных молекул ОЬР. После этого рН полученного раствора доводили до величины между 10,0 и 10,5 с помощью 0,2н. ΝαΟΗ. Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и после этого рН раствора доводили до 7,4 с помощью 0,2н. НС1. Раствор фильтровали через подходящий фильтр для шприцев, например шприцевый фильтр МШех ОУ (Мййроге Согрогабоп. ВебГогб, МА), и концентрацию аналога ОЬР-1 устанавливали измерением поглощения при 280 нм на спектрофотометре, например Весктап Όυ640. Концентрацию белка затем доводили до 200 мкМ в НЕРЕ8 с рН 7,4.
Отфильтрованные растворы ОЬР-1 (100 мкл) разводили 100 мкл буфера 0,1М НЕРЕ8 с рН 7,4, содержащего различные количества хлористого цинка, в планшете для ИФА (например, Еа1соп Мюте1ей™ 96), что давало 200 мкл раствора, содержащего различные количества хлористого цинка и 100 мкМ аналогов ОЬР-1. Данные растворы инкубировали при комнатной температуре (22°С) в течение 18 ч и затем центрифугировали, например, в центрифуге Шиап СР412 с адаптерами для микропланшет. После центрифугирования 150 мкл надосадочных фракций переносили в ИФА-планшет для микротитрования, пригодный для снятия показаний в УФ (например, планшет Сойат υν), и измеряли ОП при 280 нм на микропланшетном ридере (например, Мо1еси1аг Ье/сех 8РЕСТКАтах РЬи8, 8ОЕТтах РРО). Результаты эксперимента показаны в табл. 2. Величины А280 представляют собой результат двух независимых определений.
- 12 008837
Таблица 2
Ζη/ОЬРЛ ОЬР-1 О1у* Уа1* О1п22- Уа18-О1и22 Уа18-А1а22 Уа18-8ег22. Уа18-Р11е22. Уа18-Рго22. Уа18-Ьуз22. Уа18-Азр22.
молярное (7-37)ОН ОЬР-1 ОЬР-1 ОЬР-1 ОЬР-1 ОЬР-1 ОЬР-1 ОЬР-1 ОЬР-1 ОЬР-1 ОЬР-1
отношение А280 (7-37)ОН А280 (7-37)ОН А280 (7-37)ОН А280 (7-37)ОН А280 (7-37)ОН А280 (7-37)ОН А280 (7-37)ОН А280 (7-37)ОН А280 (7-37)ОН А280 (7-37)ОН А280
0 0,337 0,32 0,3 0,290 0,295 0,289 0,2855 0,31 0,2595 0,299 0,288
0,3 0,318 0,166 0,27 0,390 0,291 0,202 0,2805 0,1485 0,2455 0,0825 0,2785
0,5 0,329 0,151 0,26 0,123 0,292 0,107 0,2665 0,1165 0,2325 0,0905 0,2845
0,7 0,253 0,156 0,124 0,076 0,293 0,104 0,1825 0,1015 0,219 0,1195 0,287
1 0,148 0,119 0,06 0,074 0,26 0,110 0,149 0,1265 0,1905 0,1225 0,291
2 0,092 0,089 0,025 0,095 0,078 0,110 0,0935 0,092 0,1695 0,1675 0,184
3 0,081 0,085 0,021 0,095 0,052 0,104 0,101 0,061 0,1615 0,1475 0,1485
5 0,074 0,078 0,019 0,097 0,035 0,119 0,0615 0,00795 0,171 0,142 0,1675
Данные результаты показывают, что лишь небольшие количества цинка необходимы для комплексирования с различными аналогами ОЬР-1 и осаждения их значительной части из данных разбавленных растворов.
Эквиваленты
Хотя данное изобретение было конкретно показано и описано со ссылками на его предпочтительные осуществления, специалистам в данной области техники должно быть понятно, что внутри него могут быть сделаны различные изменения в форме и деталях без выхода за пределы сути и объема изобретения, как определено в прилагаемой формуле изобретения. Специалисты в данной области техники должны признать или должны быть способными убедиться не иначе, чем путем обычного экспериментирования, в том, что возможны многие эквиваленты конкретных осуществлений изобретения, описанных здесь конкретно. Такие эквиваленты предназначены для включения в объем формулы изобретения.
Перечень последовательностей <110> εΊί 1_П1у апс! Сотрапу
<12 0> Аналоги глюкагон-подобного пептида 1
<130> Х-13989
<160> 53
<170> РаьепЫп уегзтоп 3.0
<210> 1
<211> 37
<212> БЕЛОК
<213> Искусственный
<220>
<223> синтетическая конструкция
<22О>
<221> ВАРИАНТ
<222> (8) . . (8)
<223> Хаа в положении 8 представляет собой 61 у или Уа1;
<22О>
<221> ВАРИАНТ
<222> (11)..(11)
<22 3> Хаа в положении 11 представляет собой Азр, 61 и, Агд, тНг, А
1а, ьуз или нтз; *
- 13 008837 <220>
<221> ВАРИАНТ <222> (12)..(12) <223> Хаа в положении 12 представляет собой Нтз, тгр, РНе или Туг <220>
<221> ВАРИАНТ <222> (16)..(16) <223> Хаа в положении 16 представляет собой 1_еи, 5ег, тНг, Тгр, н 15, РЬе, Азр, х/а1, Туг, С1и или А1а <220>
<221> ВАРИАНТ <222> (22)..(22) <223> Хаа в положении 22 представляет собой 61 и;
<220>
<221> ВАРИАНТ <222> (23)..(23) <223> Хаа в положении 23 представляет собой Н15, Азр, ьуз, 61 и, С 1п или Агд;
<220>
<221> ВАРИАНТ <222> (24)..(24) <223> Хаа в положении 24 представляет собой 61 и, Агд, А1а или ьуз <220>
<221> ВАРИАНТ <222> (26)..(26) <223> Хаа в положении 26 представляет собой тгр, Туг, РЬе, Азр, 1_ уз, 61 и или Н1з;
<220>
<221> ВАРИАНТ <222> (27)..(27) <223> Хаа в положении 27 представляет собой А1а, 61 и, Н15, РЬе, Т уг, тгр, Агд или Ьуз;
<220>
<221> ВАРИАНТ <222> (30)..(30) <223> хаа в положении 30 представляет собой А1а, б1и, Азр, 5ег ил и Н1з;
<220>
<221> ВАРИАНТ <222> (33)..(33) <223> Хаа в положении 33 представляет собой Азр, Агд, Уа1, 1_уг, А 1а, 61 у или 61 и;
<220>
<221> ВАРИАНТ <222> (34)..(34) <223> хаа в положении 34 представляет собой 61 и, ьуз или Азр;
- 14 008837 <220>
<221> ВАРИАНТ <222> (35)..(35) <223> Хаа в положении 35 представляет собой ТЬг, Зег, 1_у5, Агд, т гр, туг, РЬе, Азр, 61у, Рго, Нтз или 61и <220>
<221> ВАРИАНТ <222> (36)..(36) <223> Хаа в положении 36 представляет собой ТЬг, Зег, Азр, тгр, т уг, РЬе, Агд, С1и или нтз;
<22О>
<221> ВАРИАНТ <222> (37)..(37) <223> Хаа в положении 37 представляет собой Ьуз, Агд, ТЬг, Зег, 6 1и, Азр, тгр, Туг, РЬе, нтз, -ΝΗ2, С1у, б1у-Рго или б1у-Рго-1Мн2 ил и делетирован <400> 1
Н15 хаа 61 и 61 у Хаа Хаа ТЬг Зег Азр Хаа Зег Зег Туг Беи 61 и Хаа
11 16 21 хаа хаа А1а хаа хаа РЬе 11е хаа тгр Беи хаа хаа хаа хаа хаа
26 31 36
<210> 2
<211> 31
<212> БЕЛОК
<213> Искусственный
<220>
<223> <220> синтетическая конструкция
<221> ВАРИАНТ
<222> (8) .. (8)
<223> Хаа в положении 8 представляет собой 61 у или \/а1
<220>
<221> ВАРИАНТ <222> (12)..(12)
<223> 9 Хаа в положении 12 представляет собой Нтз, тгр, РЬе или туг
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (16). . (16)
<223> хаа в положении 16 представляет собой Беи, 5ег, ТЬг, тгр, н
15, РЬе, Азр, Уа1, 61 и или А1а
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (22)..(22)
<223> Хаа в положении 22 представляет собой 61 и;
<22О>
<221> ВАРИАНТ
<222> (23)..(23)
<223> Хаа в положении 23 представляет собой нтз, Азр, 1_уз, 61 и ил
и 61 η;
<220>
- 15 008837 <221> ВАРИАНТ <222> (26)..(26)
<223> Хаа в положении 26 представляет собой Азр, Буг, 01 и ИЛИ Н15
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (30)..(30)
<223> хаа в положении 30 представляет собой А1а, 01 и, Азр, Зег ил
и Нт з;
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (35)..(35)
<223> Хаа в положении 35 представляет собой ТЬг, Зег, ЬУ5, Агд, Т
гр, туг, РЬе, А5р, С1у, Рго, нтз или С1и <220>
<221> ВАРИАНТ <222> (37)..(37) <223> хаа в положении 37 представляет собой Буз, Агд, тНг, Зег, С 1и, Азр, Тгр, Туг, РЬе, нтз, -ΝΗ2, О1у, С1у-Рго или С1у-Рго-ИН2 ил и делетирован <400>2
ΗΊ3 хаа 01 и 01 у тЬг хаа тЬг зег Азр хаа Зег Зег туг Беи 01 ихаа
11 1621 хаа А1а А1а хаа 01 и РЬе 11е Хаа тгр Беи Уа1 Буз хаа АгдХаа
3136
<210> 3
<211> 37
<212> <213> БЕЛОК Искусственный
<220>
<223> синтетическая конструкция <22О>
<221> ВАРИАНТ <222> (8)..(8) <223> Хаа в положении 8 представляет собой 01 у или Уа1 <220>
<221> ВАРИАНТ <222> (22)..(22)
<223> Хаа в положении 22 представляет собой 01 и;
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (23)..(23)
<223> и 01 η; Хаа в положении 23 представляет собой Н15, Азр, ЬУ5, 01 и ил
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (27)..(27)
<223> Хаа в положении 27 представляет собой А1а, 01 и, ΗΊ5, РЬе, τ
уг, тгр, Агд или Буз;
<220>
<221> ВАРИАНТ
- 16 008837 <222> (33)..(33) <223> хаа в положении 33 представляет собой АТа, СТи, Азр, Бег ил и Ηί 5;
<220>
<221> ВАРИАНТ <222> (37)..(37) <223> Хаа в положении 37 представляет собой ьуз, Агд, тНг, Бег, С 1и, Азр, тгр, Туг, РНе, нтз, -ΝΗ2, СТу, сТу-Рго или с1у-Рго-мн2 ил и делегирован <400>3
ΗΊ5 хаа С1и СТу тНг РНе тНг Бег Азр УаТ Бег Бег туг ьеи С1и хаа
7 11 16 21
хаа АТа АТа ьуз Хаа РНе Не Хаа тгр Ьеи УаТ ьуз СТ у Агд Хаа
26 31 36
<210>4 <211>37 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <220>
<221> ВАРИАНТ <222> (7)..(7) <223> хаа в положении 7 представляет собой 1_-гистидин, ϋ-гистидин , дезамино-гистидин, 2 амино-гистидин, бета-гидрокси-гистидин, гом огистидин, альфафторметил-гистидин или альфа-метил-гистидин
<22О> <221> ВАРИАНТ
<222> (8)..(8)
<223> Хаа в положении 8 представляет собой С1у или УаТ;
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (22)..(22)
<223> Хаа в положении 22 представляет собой СТи;
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (37)..(37)
<223> Хаа в положении 37 представляет собой -ΝΗ2 или сТу.
<400> 4
хаа хаа С1и С1у ТНг РНе ТНг Бег Азр УаТ Бег Бег Туг |_еи СТи хаа 21
7 11 16
С1п А1а А1а ьуз СТи РНе 11е АТа тгр ьеи УаТ ьуз СТу Агд хаа
26 31 36
<210> 5
<211> 37
<212> БЕЛОК
<213> Искусственный
<220>
<223> синтетическая конструкция
<400> 5
ΗΊ5 УаТ С1и СТу тНг РНе тНг Бег АБР УаТ Бег Бег туг ьеи СТи СТи
7 11 16 21
- 17 008837
С1п А1а А1а ьуз 61 и РНе 11е А1а тгр ьеи Уа1 ьуз 61 у Агд 61 у 26 31 36 <210> 6 <211> 37 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400>6
нтз Уа1 61 и 61 у тНг РНе тНг Бег Азр Уа1 Бег Бег Туг ьеи 61 и Азр
7 11 16 21
61 η А1а А1а ьуз 61 и РНе Не А1а тгр ьеи Уа1 ьуз 61 у Агд 61 у
26 31 36
<210>7 <211>37 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400> 7
нтз 7 Уа1 61 и 61 у ТНг 11 РНе ТНг Бег Азр Уа1 16 Бег Бег Туг ьеи 61 и Агд 21
61 η А1а А1а ЬУ* 61 и РНе Не А1а Тгр 1_еи Уа1 ьуз 61 у Агд 61 у
26 31 36
<210> 8 <211> 37 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400>8 нтз Уа1 61 и 61 у тНг РНе тНг Бег Азр Уа1 Бег Бег туг 1_еи 61 иьуз
Ί 11 1621 η А1а А1а ьуз 61 и Рпе 11 е А1а тгр 1_еи Уа1 гуз 61 у Агд61 у
3136 <210>9 <211>37 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400>9 нтз б1у О1и О1у ТНг РНе ТНг Бег Азр Уа1 Бег Бег туг 1_еи О1и61и
11 1621 η А1а А1а ьуз 61 и РНе 11 е А1а Тгр ьеи Уа1 Ьуз 61 у Агд61 у
3136 <210> 10 <211>37 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400>10 нтз 61 у 61 и 61 у тНг РНе тНг Бег Азр Уа1 Бег Бег Туг Ьеи 61 иАзр
11 1621 η А1а А1а ьуз 61 и РНе 11 е А1а тгр ьеи Уа! Ьуз 61 у Агдб1у
3136
- 18 008837
БЕЛОК искусственный синтетическая конструкция <210>
<211>
<212>
<213>
<220>
<223>
<400>
нтз 61 у 61 и 61 у ТНг РНе тНг Зег А5р Уа1 Зег Зег Туг ьеи 61 и Агд
11 1621 η А1а А1а ьуз 61 и РНе 11 е А1а тгр ьеи Уа1 ьуз 61 у Агд61 у
3136 <210> 12 <211>37 <212> БЕЛОК <213> искусственный<220>
<223> синтетическая конструкция <400>12 нтз 61 у 61 и 61 у тНг РНе тНг Зег Азр Уа1 Зег Зег туг ьеи 61 и1_у5
11 1621 η А1а А1а ьуз 61 и РНе Не А1а Тгр Ьеи Уа1 Ьуз 61 у Агд61 у
3136 <210>13 <211>37 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400>13
Нт5 Уа1 61 и б!у тНг РЬе тНг Зег Азр Уа1 Зег Зег туг ьеи61 и
11 1621 η А1а А1а Ьуз 61 и РНе 11 е 61 и тгр 1_еи Уа1 1_уз 61 у АгдС1у
3136 <210>14 <211>37 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400> 14, нтз б1у 61 и б1у ТЬг РНе ТНг Зег Азр \/а1 5ег 5ег туг ьеи61 и
11 1621 η А1а А1а Ьуз 61 и РНе 11 е 61 и Тгр Ьеи \/а1 Ьуз 61 у Агд61 у
3136 <210>15 <211>37 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400>15 нтз Уа1 61 и б!у ТНг РНе тНг Зег Азр Уа1 Зег Зег туг ьеи61 и
11 1621
61л А1а А1а ьуз 61 и РНе 11е А1а Тгр Ьеи Уа1 Ьуз 61 у Агднтз
3136 <210> 16 у
у у
- 19 008837 <211> 37 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400>16
ΗΊ5 С1у С1и С1у тЬг РЬе тЬг Бег Азр Уа1 16 Бег Бег туг ьеи 61 и 61 у 21
7 11
61 η А1а А1а ьуз 61 и РЬе 11 е 26 А1а тгр 31 ьеи Уа1 ьуз 61 у Агд 36 ΗΊ5
<210> 17
<211> 37
<212> БЕЛОК
<213> Искусственный
<220>
<223> синтетическая конструкция
<400> 17
Ήΐ5 Уа1 7 61и О1у ТЬг РЬе тЬг 11 Бег Аэр Уа1 16 Бег Бег туг ьеи 61 и 21 61 и
61 η А1а ι А1а Ьуз А1а РЬе 11 е 26 А1а тгр 31 ьеи Уа1 ьуз 61 у Агд 36 НТ 8
<210> 18 <211>37 <212> БЕЛОК <213> искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400>18
нт 5 Уа1 61 и 61 у тЬг РЬе тЬг Бег Азр \/а1 Бег Бег туг Ьеи 61 и
7 11 16 21
61 и А1а А1а ьуз 61 и РЬе 11 е А1а тгр ьеи Уа1 1_уз 61 у Агд НТ 8
26 31 36
<210>19 <211>37 <212> БЕЛОК <213> Ното зартепз <400>19
НТ 8 А1а 61 и 61 у тЬг РЬе тЬг Бег Азр Уа1 Бег Бег Туг ьеи 61 и
7 11 16 21
61 η А1а А1а ьуз 61 и РЬе 11е А1а Тгр Ьеи Уа1 ьуз 61 у Агд 61 у
26 31 36
<210> 20 <211>37 <212> БЕЛОК <213> искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400> 20
НТ 5 А1а 61 и 61 у ТЬг РЬе тЬг Бег Азр уа! Бег Бег Туг ьеи 61 и 61 и
7 11 16 21
61 η А1а А1а ьуз 61 и РЬе 11е А1а тгр ьеи Уа1 ьуз 61 у Агд 61 у
26 31 36
<210> 21 <211> 37 <212> БЕЛОК <213> Искусственный
- 20 008837 <220>
<223> синтетическая конструкция <400>21
ΗΊ8 А1а 61 и 61у тНг РНе ТНг Зег Азр Уа1 Зег 5ег туг Беи 61 и Азр
7 и. 16 21
61 η А1а А1а Буз 61 и РЬе 11 е А1а тгр 26 31 ьеи Уа1 Буз 61 у Агд 36 61 у
<210> 22
<211> 37
<212> БЕЛОК
<213> Искусственный
<220>
<223> синтетическая конструкция
<400> 22
Ήΐ5 А1а 61 и б!у ТНг РНе тНг Зег А5р Уа1 Зег Зег туг Беи 61 и Агд
7 11 16 21
61 η А1а А1а ьуз 61 и РНе 11 е А1а тгр Беи Уа1 Буз 61 у Агд 61 у
26 31 36
<210> 23
<211> 37
<212> БЕЛОК
<213> искусственный
<220>
<223> синтетическая конструкция
<400> 23
ΗΊ5 А1а б!и б!у тНг РНе ТНг Зег Азр Уа1 Зег Зег туг Беи 61 и Буз
7 11 16 21
61 η А1а А1а Буз 61 и РНе 11 е А1а Тгр Беи Уа1 Буз 61 у Агд 61 у
26 31 36
<210>24 <211>37 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <220>
<221> ВАРИАНТ <222> (22)..(22) <223> Хаа в положении 22 представляет собой сузГетс астс!
<400> 24
Н18 А1 а б1и 61у тНг РНе тНг Зег Азр Уа1 Зег Зег Туг Беи 61 и хаа
7 11 16 21
61 η А1 а А1а Буз 61 и РНе 11 е А1а тгр 26 31 Беи \/а1 Буз 61 у Агд 61 у 36
<210> 25
<211> 37
<212> БЕЛОК
<213> Искусственный
<220>
<223> синтетическая конструкция
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (22)..(22)
<223> Хаа в положении 22 представляет собой сузтетс астд.
- 21 008837 <400> 25
НТ 8 Уа1 61 и 61 у ТЬг РЬе тЬг 5ег Азр Уа1 Бег Бег туг 1_еи 61 и Хаа
7 11 16 21
61 η А1а А1а ЬУЗ 61и РЬе Не А1а тгр ьеи Уа1 ьуз 61 у Агд 61 у
26 31 36
<210> 26 <211> 37 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <220>
<221> ВАРИАНТ <222> (22)..(22) <223> хаа в положении 22 представляет собой сузгетс аст'с!
<400> 26
Нт5 61 у 61 и 61 у ТЬг РЬе ТЬг Бег АЗр Уа1 Бег Бег туг ьеи 61 и Хаа
7 11 16 21
61 η А1а А1а 1_уз 61 и 26 РЬе Не А1а тгр 31 |_еи Уа1 Ьуз 61 у Агд 36 61 у
<210> 27
<211> 36
<212> БЕЛОК
<213> Искусственный
<220>
<223> синтетическая конструкция
<400> 27
нт5 А1а 61 и С1у ТЬг РЬе тЬг Бег А5р Уа1 Бег Бег туг Ьеи 61 и 61 и
7 11 16 21
61 η А1а А1а Ьуз 61 и РЬе Не А1а тгр ьеи Уа1 ьуз 61 у Агд
31 36 <210> 28 <211> 36 <212> БЕЛОК <213> искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400>28
нт 5 А1а 61 и 61 у ТЬг РЬе тЬг Бег Азр Уа1 Бег Бег туг ьеи 61 и Азр
7 11 16 21
61 η А1а А1а 1_уз 61 и РЬе Не А1 а тгр ьеи Уа1 ьуз 61 у Агд
26 31 36
<210>29 <211>36 <212> БЕЛОК <213> искусственный <22О>
<223> синтетическая конструкция <400> 29
Нт 8 А1а 61 и 61 у ТЬг РЬе ТЬг Бег Азр Уа1 Бег Бег Туг ьеи 61 и Агд
7 11 16 21
61 η А1а А1а ЬУ5 61 и РЬе Не А1а тгр ьеи Уа1 ьуз 61 у Агд
26 31 36
<210> 30 <211> 36
- 22 008837 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400>30 нтз А1а С1и 01 у ТКг РКе тКг Бег Азр Уа1 Бег Бег Туг ьеи 01 и ьуз
11 1621 η А1а А1а 1_уз 01 и РКе 11 е А1а тгр Ьеи Уа1 ьуз 01 у Агд
3136 <210>31 <211>36 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <220>
<221> ВАРИАНТ <222> (22)..(22) <223> Хаа в положении 22 представляет собой цистеиновую кислоту <400>31
Нтз А1а 01 и 01 у тКг РКе тНг Бег Азр Уа1 Бег Бег Туг ьеи 01 и хаа
11 1621 η А1а А1а ьуз 01 и РКе 11 е А1а Тгр Ьеи Уа1 ьуз 01 у Агд
3136 <210>32 <211>36 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400>32 нтз Уа1 С1и С1у тКг РКе тКг Бег Азр Уа1 Бег Бег Туг ьеи 01и С1и 7 11 1621 η А1а А1а 1_у5 01 и РКе 11 е А1а тгр 1_еи Уа1 1_уз 01 у Агд
3136 <210>33 <211>36 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400>33 нтз νΒ1 С1и С1у тКг РКе тКг Бег А5р Уа1 Бег Бег туг |_еи С1и Азр 7 11 1621 η А1а А1а Ьуз 01 и РКе Не А1а Тгр 1_еи Уа1 1_уз 01 у Агд
3136 <210>34 <211>36 <212> БЕЛОК <213> искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция
- 23 008837 <400> 34
Нт з Уа1 7 01 и 01 у ТЬг 11 РЬе тЬг Бег Азр Уа1 16 Бег Бег Туг Беи 01 и 21 Агд
01 η А1а ι А1а Еуэ 01 и 26 РЬе Не А1а Тгр 31 Беи Уа1 Буз 01 у Агд 36
<210> 35
<211> 36
<212> БЕЛОК
<213> Искусственный
<220>
<223> синтетическая ι конструкция
<400> 35
Нтз Уа1 7 01 и 01 у тЬг 11 РЬе ТЬг Бег Азр Уа1 16 Бег Бег Туг Беи 01 и 21 Буз
01 η А1а А1а Буз 01 и 26 РЬе Не А1а тгр 31 Беи Уа1 Буз 01 у Агд 36
<210> 36 <211> 36 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <220>
<221> ВАРИАНТ <222> (22)..(22) <223> Хаа в положении 22 представляет собой цистеиновую кислоту <400>36
Нт з УаТ 01 и 01 у тЬг РЬе тЬг Бег Азр УаТ Бег Бег туг ьеи С1и Хаа 7 И 1621 η А1а А1а Буз 01 и РЬе 11 е А1а Тгр Беи Уа1 Буз С1у Агд 26 3136 <210>37 <211>36 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400>37
НТ 5 01 у 01 и 01 у ТЬг РЬе ТЬг Бег АЗр Уа1 Бег Бег туг Беи 01 и 01 и
7 11 16 21
01 η А1а А1а Буз 01 и РЬе Не А1а Тгр Беи Уа1 Буз 01 у Агд
26 31 36
<210>38 <211>36 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400>38
Нтз С1у С1и С1у тЬг РЬе тЬг Бег Азр Уа1 Бег Бег Туг Беи С1и Азр 7 11 1621 η А1а А1а Буз С1и РЬе 11е А1а тгр Беи Уа1 Буз С1у Агд
3136 <210>39 <211>36 <212> БЕЛОК
- 24 008837 <213> искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400>39
НТЗ 61 у 61 и 61 у тЬг РЬе тЬг зег Азр Уа1 зег Зег туг ьеи б1и Агд
7 11 16 21
61 η А1а А1а ьуз 61 и РЬе 11е А1а тгр ьеи Уа1 ьуз 61 у Агд
26 31 36
<210>40 <211>36 <212> БЕЛОК <213> искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400>40
ΗΊ5 7 61 у 61 и 61 у тЬг 11 РЬе тЬг Зег Азр Уа1 16 Зег зег туг ьеи 61 и Ьу5 21
61 η А1а А1а ьуз 61 и РЬе И е А1а тгр ьеи Уа1 ьуз 61 у Агд
26 31 36
<210>41 <211>36 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <220>
<221> ВАРИАНТ <222> (22)..(22) <223> Хаа в положении 22 представляет собой цистеиновую кислоту <400> 41
нтз 61 у 61 и 61 у тЬг РЬе ТЬг зег Азр Уа1 16 5ег зег туг ьеи 61 и 21
7 11
61 η А1а А1а ьуз б!и РЬе 11 е А1а тгр ьеи Уа1 ьуз 61 у Агд
26 31 36
<210> 42
<211> 37
<212> БЕЛОК
<213> Искусственный
<22О>
<223> синтетическая конструкция
<400> 42
Нтз Уа1 61 и 61 у тЬг РЬе ТЬг Зег Азр Уа1 Зег Зег Туг ьеи 61 и
7 11 16 21
Ьуз А1а А1а ьуэ 61 и РЬе 11е А1а Тгр Ьеи Уа1 Ьуз 61 у Агд 61 у
26 31 36
<210> 43
<211> 37
<212> БЕЛОК
<213> Искусственный
<220>
<223> синтетическая конструкция
<400> 43
Нтз Уа1 61 и 61 у ТЬг РЬе ТЬг Зег Азр Уа1 Зег Зег Туг ьеи 61 и
7 11 16 21
61 η А1а ι А1а ьуз А1а РЬе 11 е А1а тгр ьеи Уа1 ьуз 61 у Агд 61 у
- 25 008837
3136 <210>44 <211>37 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400>44 нтз Уа1 СТи С1у тНг РНе тНг Бег Азр УаТ Бег Бег туг 1_еи СТиСТу
11 1621 сТп АТа АТа ьуз СТи РНе 1Те СТи тгр |_еи УаТ ьуз СТу АгдсТу
3136 <210>45 <211>37 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400>45
НТЗ СТу СТи СТу тНг РНе тНг Бег Азр УаТ Бег Бег туг 1_еи СТи
7 11 16 21
СТп АТа АТа ьуз СТи РНе Не СТи тгр ьеи УаТ ьуз СТу Агд СТу
26 31 36
<210>46 <211>37 <212> БЕЛОК <213> искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400>46
Нтз УаТ сТи СТу ТНг РНе тНг Бег Азр УаТ Бег Бег туг 1_еи сТисТу
И 1621
СТп АТа АТа 1_уз сТи РНе 1Те АТа тгр ьеи УаТ ьуз нтз АгдСТу
3136 <210>47 <211>37 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400>47
Нтз УаТ СТи СТу ТНг РНе тНг Бег Азр УаТ Бег Бег Туг 1_еи сТиС1у
11 1621
СТп АТа АТа ьуз СТи РНе 1Те АТа тгр ьеи УаТ ьуз СТу Агднт5
3136 <210>48 <211>37 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400>48 нтз УаТ сТи СТу тНг РНе тНг Бег Азр УаТ Бег Бег Туг ьеи сТиСТи
11 1621 ьуз АТа АТа ьуз сТи РНе 1Те АТа тгр 1_еи УаТ Ьуз СТу АгдсТу
3136
- 26 008837 <210> 49 <211> 37 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400> 49
нтз Уа1 7 61 и 61 у ТНг 11 РНе тНг Бег Азр Уа1 16 Бег Бег Туг ьеи 61 и 21 61 и
61 и А1а А1а 1_уз 61 и 26 РНе 11е А1а тгр 31 Ьеи Уа1 ьуз 61 у Агд 36 61 у
<210> 50
<211> 37
<212> БЕЛОК
<213> Искусственный
<22О>
<223> синтетическая конструкция
<400> 50
нтз Х/а1 7 61 и 61 у ТНг 11 РНе тНг Бег Азр уа1 16 Бег Бег Туг |_еи 61 и 21 61 и
61 η А1а А1а ьуз А1а 26 РНе 11е А1а тгр 31 ьеи Уа1 ьуз 61у Агд 36 6'1 у
<210> 51 <211> 37 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400>51 нтз Уа1 61 и 61 у тНг РНе тНг Бег Азр Уа1 Бег Бег туг ьеи 61 и61 у
11. 1621 η А1а А1а 1_уз 61 и РНе 11 е А1а тгр Ьеи Уа1 61 у 1_уз Агд61 у
3136 <210>52 <211>37 <212> БЕЛОК <213> Искусственный <220>
<223> синтетическая конструкция <400> 52 нтз Уа1 61 и 61 у тНг РНе тНг Бег Азр Уа1 Бег Бег туг ьеи 61 и б1у 7 11 16 21
61 η А1а А1а 1_уз 61 и РНе 26 11е А1а Тгр 31 1_еи Уа1 ьуз 61у Агд 36 Нтз
<210> 53
<211> 37
<212> БЕЛОК
<213> Искусственный
<220>
<223> синтетическая конструкция
<400> 53
нтз е1у б1и б1у тНг РНе тНг 7 11 Бег Азр Уа1 16 Бег Бег туг ьеи 61 и 61 у 21
61 η А1а А1а 1_уз 61 и РНе 26 11е А1а Тгр 31 1_еи Уа1 Ьуз 61 у Агд 36 Нтз

Claims (18)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Аналог глюкагоноподобного пептида (СЬР-1), включающий аминокислотную последовательность формулы I (8Е() Ιϋ ΝΟ: 1):
    Н1з-Хаа8-01и-С1у-Хаа11-Хаа12_ТЬг“Зег-А5р-Хаа1б-5ег8еГ“Туг-Ьеи-С1и-Хаа22-Хаа23“Хаа24“А1а-Хаа2б~Хаа27”РЬе11е-А1а-Хаа31-Беи-Хаазз-Хааз4“Хааз5-Хааз€-Н
    Формула I (8Ер ГО ΝΟ: 1) где
    Хаа8 представляет собой С1у или Уа1;
    Хаа11 представляет собой Азр, С1и, Агд, ТЬг, А1а, Ьуз или Н1з;
    Хаа12 представляет собой Н1з, Тгр, РЬе или Туг;
    Хаа16 представляет собой Ьеи, 8ег, ТЬг, Тгр, Н1з, РЬе, Азр, Уа1, Туг, С1и или А1а;
    Хаа22 представляет собой С1и;
    Хаа23 представляет собой Н1з, Азр, Ьуз, С1и, С1п или Агд;
    Хаа24 представляет собой С1и, Агд, А1а или Ьуз;
    Хаа26 представляет собой Тгр, Туг, РЬе, Азр, Ьуз, С1и или Н1з;
    Хаа27 представляет собой А1а, С1и, Н1з, РЬе, Туг, Тгр, Агд или Ьуз;
    Хаа30 представляет собой А1а, С1и, Азр, 8ег или Н1з;
    Хаа33 представляет собой Азр, Агд, Уа1, Ьуз, А1а, С1у или С1и;
    Хаа34 представляет собой С1и, Ьуз или Азр;
    Хаа35 представляет собой ТЬг, 8ег, Ьуз, Агд, Тгр, Туг, РЬе, Азр, С1у, Рго, Н1з или С1и;
    Хаа36 представляет собой ТЬг, 8ег, Азр, Тгр, Туг, РЬе, Агд, С1и или Н1з;
    К представляет собой Ьуз, Агд, ТЬг, 8ег, С1и, Азр, Тгр, Туг, РЬе, Н1з, -ЫН2, С1у, С1у-Рго или С1у-РгоИН2 или отсутствует.
  2. 2. Аналог глюкагоноподобного пептида (СЬР-1), включающий аминокислотную последовательность формулы II (8Е0 ГО ΝΟ: 2):
    Н18-Хаав“61и-б1у-ТЬг-Хаа12-Тйг-Зег--Азр-Хаа1в-5ег5ег-Туг-Ъеи-51и-Хаа22-Хаа2зА1а-А1а-Хаа2б-С1и-РЬе11е-Хаа3о-Тгр-Ьеи-Уа1-Ьуз-Хааз5-Агд-й
    Формула II (8Ер ГО ΝΟ: 2) где
    Хаа8 представляет собой С1у или Уа1;
    Хаа12 представляет собой Н1з, Тгр, РЬе или Туг;
    Хаа16 представляет собой Ьеи, 8ег, ТЬг, Тгр, Н1з, РЬе, Азр, Уа1, С1и или А1а;
    Хаа22 представляет собой С1и;
    Хаа23 представляет собой Н1з, Азр, Ьуз, С1и или С1п;
    Хаа26 представляет собой Азр, Ьуз, С1и или Н1з;
    Хаа30 представляет собой А1а, С1и, Азр, 8ег или Н1з;
    Хаа35 представляет собой ТЬг, 8ег, Ьуз, Агд, Тгр, Туг, РЬе, Азр, С1у, Рго, Н1з или С1и;
    К представляет собой Ьуз, Агд, ТЬг, 8ег, С1и, Азр, Тгр, Туг, РЬе, Н1з, -ЫН2, С1у, С1у-Рго или С1у-РгоИН2 или отсутствует.
  3. 3. Аналог глюкагоноподобного пептида (СЬР-1), включающий аминокислотную последовательность формулы III (8Е0 ГО ΝΟ: 3):
    Н1з-Хаа8-61и-С1у-ТНг-РЬе-ТИг-Зег-Азр-Уа1-Зег-5егТуг-Ьеи-61и-Хаа22”Хаа2з“А1а-А1а-Ьуз-Хаа27РЬе-11еХаазо-'Тгр-Ьеи-УаХ-Ьуз-СЗ.у-Агд-к
    Формула III (8Ер ГО ΝΟ: 3) где
    Хаа8 представляет собой С1у или Уа1;
    Хаа22 представляет собой С1и;
    Хаа23 представляет собой Н1з, Азр, Ьуз, С1и или С1п;
    Хаа27 представляет собой А1а, С1и, Н1з, РЬе, Туг, Тгр, Агд или Ьуз;
    Хаа30 представляет собой А1а, С1и, Азр, 8ег или Н1з;
    К представляет собой Ьуз, Агд, ТЬг, 8ег, С1и, Азр, Тгр, Туг, РЬе, Н1з, -ЫН2, С1у, С1у-Рго или С1у-РгоИН2 или отсутствует.
  4. 4. Аналог СЬР-1 по любому из пп.1-3, в котором не более чем 6 аминокислот отличаются от соответствующей аминокислоты в известном аналоге СЬР-1(7-37)ОН или СЬР-1(7-36)ХН2.
  5. 5. Аналог СЬР-1 по п.4, в котором не более чем 5 аминокислот отличаются от соответствующей
    - 28 008837 аминокислоты в СЬР-1(7-37)ОН или СЬР-1(7-36)БН;.
  6. 6. Аналог СЬР-1 по п.5, в котором не более чем 4 аминокислоты отличаются от соответствующей аминокислоты в известном аналоге СЬР-1(7-37)ОН или СЬР-1(7-36)НН;.
  7. 7. Аналог СЬР-1 по п.6, в котором не более чем 3 аминокислоты отличаются от соответствующей аминокислоты в известном аналоге СЬР-1(7-37)ОН или СЬР-1(7-36)БН;.
  8. 8. Аналог СЬР-1 по п.7, в котором не более чем 2 аминокислоты отличаются от соответствующей аминокислоты в известном аналоге СЬР-1(7-37)ОН или СЬР-1(7-36)НН;.
  9. 9. Аналог СЬР-1 по любому из пп.4-7, где Хаа8 представляет собой глутаминовую кислоту.
  10. 10. Аналог СЬР-1 по любому из пп.4-7, где Я представляет собой гистидин, фенилаланин, тирозин, триптофан, аспарагиновую кислоту, глутаминовую кислоту, серин, треонин, аргинин или лизин.
  11. 11. Аналог СЬР-1 по п.10, где Я представляет собой гистидин.
  12. 12. Аналог СЬР-1 по любому из пп.4-7, где Хаа23 представляет собой глутаминовую кислоту или лизин.
  13. 13. Аналог СЬР-1 по любому из пп.4-7, где Хаа27 представляет собой аланин.
  14. 14. Применение аналога СЬР-1 по любому из пп.1-13 для лечения инсулиннезависимого диабета.
  15. 15. Применение аналога СЬР-1 по любому из пп.1-13 для профилактики инсулиннезависимого диабета.
  16. 16. Применение аналога СЬР-1 по любому из пп.1-13 для лечения ожирения, инсульта, инфаркта миокарда, катаболических изменений после хирургической операции или синдрома раздраженного кишечника.
  17. 17. Применение соединения СЬР-1 по любому из пп.1-13 для получения лекарственного средства для лечения инсулиннезависимого диабета.
  18. 18. Применение соединения СЬР-1 по любому из пп.1-13 для получения лекарственного средства для лечения ожирения, инсульта, инфаркта миокарда, катаболических изменений после хирургической операции или синдрома раздраженного кишечника.
EA200300026A 2000-06-16 2001-06-01 Аналоги глюкагоноподобного пептида и их применение EA008837B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US21217100P 2000-06-16 2000-06-16
US24034900P 2000-10-13 2000-10-13
PCT/US2001/016474 WO2001098331A2 (en) 2000-06-16 2001-06-01 Glucagon-like peptide-1 analogs

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200300026A1 EA200300026A1 (ru) 2003-04-24
EA008837B1 true EA008837B1 (ru) 2007-08-31

Family

ID=26906843

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200300026A EA008837B1 (ru) 2000-06-16 2001-06-01 Аналоги глюкагоноподобного пептида и их применение

Country Status (33)

Country Link
US (2) US7084243B2 (ru)
EP (2) EP1294757B1 (ru)
JP (1) JP4716641B2 (ru)
KR (1) KR100847615B1 (ru)
CN (1) CN100469791C (ru)
AR (1) AR031701A1 (ru)
AT (2) ATE424413T1 (ru)
AU (2) AU2001264791B2 (ru)
BR (1) BR0111562A (ru)
CA (1) CA2412004C (ru)
CY (2) CY1105917T1 (ru)
CZ (1) CZ304002B6 (ru)
DE (2) DE60137876D1 (ru)
DK (2) DK1294757T3 (ru)
DZ (1) DZ3388A1 (ru)
EA (1) EA008837B1 (ru)
EG (1) EG24755A (ru)
ES (2) ES2275685T3 (ru)
HK (1) HK1055121A1 (ru)
HR (1) HRP20020996B1 (ru)
HU (2) HU229208B1 (ru)
IL (2) IL153453A0 (ru)
MX (1) MXPA02012203A (ru)
MY (1) MY137350A (ru)
NO (1) NO330686B1 (ru)
NZ (1) NZ522330A (ru)
PE (1) PE20011363A1 (ru)
PL (1) PL206302B1 (ru)
PT (2) PT1294757E (ru)
SI (1) SI1695983T1 (ru)
SK (1) SK287757B6 (ru)
TW (1) TWI321134B (ru)
WO (1) WO2001098331A2 (ru)

Families Citing this family (158)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001000654A2 (en) 1999-06-29 2001-01-04 Pharmaceutical Discovery Corporation Purification and stabilization of peptide and proteins in pharmaceutical agents
US9006175B2 (en) 1999-06-29 2015-04-14 Mannkind Corporation Potentiation of glucose elimination
ATE424413T1 (de) * 2000-06-16 2009-03-15 Lilly Co Eli Analoge des glucagon-ähnlichen peptids-1
US7371721B2 (en) 2000-09-18 2008-05-13 Sanos Bioscience A/S Use of GLP-2 and related compounds for the treatment, prevention, diagnosis, and prognosis of bone-related disorders and calcium homeostasis related syndromes
WO2002022151A2 (en) 2000-09-18 2002-03-21 Osteometer Bio Tech A/S Use of glp-1 and flp-2 peptides for treatment of bone disorders
US7186683B2 (en) 2000-09-18 2007-03-06 Sanos Bioscience A/S Use of GLP for the treatment, prevention, diagnosis, and prognosis of bone-related and nutrition-related disorders
EP1412384B1 (en) * 2001-06-28 2007-12-26 Novo Nordisk A/S Stable formulation of modified glp-1
CN1363654A (zh) 2001-07-19 2002-08-14 上海华谊生物技术有限公司 生产促胰岛素分泌肽glp－1(7－36)的基因工程菌以及生产glp－1(7－36)的方法
EP1432730A4 (en) * 2001-08-23 2006-10-11 Lilly Co Eli GLP-1 ANALOGUES (GLUCAGON-LIKE PEPTIDE 1)
GB0121709D0 (en) * 2001-09-07 2001-10-31 Imp College Innovations Ltd Food inhibition agent
IL160917A0 (en) * 2001-10-18 2004-08-31 Bristol Myers Squibb Co Human glucagon-like-peptide-1 mimics and their use in the treatment of diabetes and related conditions
EP2261250B1 (en) 2001-12-21 2015-07-01 Human Genome Sciences, Inc. GCSF-Albumin fusion proteins
WO2003059372A2 (en) * 2001-12-29 2003-07-24 Novo Nordisk A/S Combined use of a glp-1 compound and a modulator of diabetic late complications
ES2614603T3 (es) * 2002-02-20 2017-06-01 Emisphere Technologies, Inc. Procedimiento de administración de moléculas GLP-1
DE60318938T2 (de) 2002-03-20 2009-01-22 Mannkind Corp., Valencia Inhalationsgerät
WO2003103572A2 (en) * 2002-06-04 2003-12-18 Eli Lilly And Company Modified glucagon-like peptide-1 analogs
US20080260838A1 (en) * 2003-08-01 2008-10-23 Mannkind Corporation Glucagon-like peptide 1 (glp-1) pharmaceutical formulations
US7790681B2 (en) 2002-12-17 2010-09-07 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Treatment of cardiac arrhythmias with GLP-1 receptor ligands
US7731947B2 (en) 2003-11-17 2010-06-08 Intarcia Therapeutics, Inc. Composition and dosage form comprising an interferon particle formulation and suspending vehicle
WO2004067548A2 (en) * 2003-01-31 2004-08-12 Theratechnologies Inc. Chemically modified metabolites of regulatory peptides and methods of producing and using same
EP1594529B1 (en) * 2003-02-19 2010-01-20 Ipsen Pharma Analogues of glp-1
WO2004103390A2 (en) 2003-05-15 2004-12-02 Trustees Of Tufts College Stable analogs of peptide and polypeptide therapeutics
US8008255B2 (en) 2003-05-30 2011-08-30 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for enhanced transmucosal delivery of peptides and proteins
EP2292254A3 (en) * 2003-06-03 2011-12-14 Novo Nordisk A/S Stabilized pharmaceutical peptide compositions
JP2007524592A (ja) * 2003-06-03 2007-08-30 ノボ・ノルデイスク・エー／エス 安定化された薬学的ペプチド組成物
KR100758755B1 (ko) 2003-06-12 2007-09-14 일라이 릴리 앤드 캄파니 Ｇｌｐ-1 유사체 융합 단백질
CA2545034C (en) 2003-11-20 2013-03-05 Novo Nordisk A/S Propylene glycol-containing peptide formulations which are optimal for production and for use in injection devices
JP4865565B2 (ja) 2003-12-09 2012-02-01 ノヴォ ノルディスク アー／エス Ｇｌｐ−１アゴニストを用いた食物選択の制御
EP2210900A3 (en) 2003-12-16 2010-08-11 Ipsen Pharma Analogues of GLP-1
US7521527B2 (en) * 2003-12-16 2009-04-21 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A.S. GLP-1 pharmaceutical compositions
JP2007537149A (ja) 2004-01-08 2007-12-20 セラテクノロジーズ インコーポレイテッド 長時間作用性のグルカゴン様ペプチド−１類似体
CA2897475C (en) 2004-04-30 2018-07-10 Dow Agrosciences Llc Novel herbicide resistance genes
US20090069226A1 (en) * 2004-05-28 2009-03-12 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Transmucosal delivery of peptides and proteins
EP2316446A1 (en) 2004-06-11 2011-05-04 Novo Nordisk A/S Counteracting drug-induced obesity using GLP-1 agonists
DK1786784T3 (da) 2004-08-20 2011-02-14 Mannkind Corp Katalyse af diketopiperazinsyntese
JP4990142B2 (ja) 2004-08-23 2012-08-01 マンカインド コーポレイション 薬物送達のためのジケトピペラジン塩、ジケトモルホリン塩、又はジケトジオキサン塩
PL1789434T3 (pl) * 2004-08-31 2014-07-31 Novo Nordisk As Zastosowanie tris(hydroksymetylo)aminometanu do stabilizacji peptydów, polipeptydów i białek
JP2008515856A (ja) * 2004-10-07 2008-05-15 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ 遅延性ｇｌｐ−１化合物
EP1799711B1 (en) 2004-10-07 2012-06-20 Novo Nordisk A/S Protracted exendin-4 compounds
EP1817048B1 (en) 2004-11-12 2014-02-12 Novo Nordisk A/S Stable formulations of insulinoptropic peptides
EP2505207B1 (en) 2005-01-14 2015-04-22 Wuxi Grandchamp Pharmaceutical Technology Co., Ltd. Modified exendins and uses thereof
WO2006083761A2 (en) 2005-02-03 2006-08-10 Alza Corporation Solvent/polymer solutions as suspension vehicles
US11246913B2 (en) 2005-02-03 2022-02-15 Intarcia Therapeutics, Inc. Suspension formulation comprising an insulinotropic peptide
EP1864661A1 (en) * 2005-03-18 2007-12-12 Ajinomoto Co., Inc. Prophylactic/therapeutic agent for stress-induced bowel disease
US8183340B2 (en) * 2005-05-13 2012-05-22 Eli Lilly And Company GLP-1 pegylated compounds
EA012287B1 (ru) * 2005-06-30 2009-08-28 Сосьете Де Консей Де Решерш Э Д`Аппликасьон Сьентифик С.А.С. Фармацевтическая композиция glp-1
HUE028691T2 (en) 2005-09-14 2016-12-28 Mannkind Corp A method for formulating a drug based on increasing the affinity of crystalline microparticle surfaces towards active ingredients
AU2006308959B2 (en) 2005-10-28 2012-09-06 Corteva Agriscience Llc Novel herbicide resistance genes
ES2572952T3 (es) 2005-11-07 2016-06-03 Indiana University Research And Technology Corporation Análogos de glucagón que muestran solubilidad y estabilidad fisiológicas
CN100374462C (zh) * 2005-11-21 2008-03-12 大连帝恩生物工程有限公司 截短胰高血糖素样肽1(sGLP-1)、制法及其应用
US20130172274A1 (en) 2005-12-20 2013-07-04 Duke University Methods and compositions for delivering active agents with enhanced pharmacological properties
US8841255B2 (en) 2005-12-20 2014-09-23 Duke University Therapeutic agents comprising fusions of vasoactive intestinal peptide and elastic peptides
CA2634034A1 (en) 2005-12-20 2007-06-28 Duke University Methods and compositions for delivering active agents with enhanced pharmacological properties
WO2008063203A2 (en) * 2006-01-27 2008-05-29 Whitehead Institute For Biomedical Research Compositions and methods for efficient gene silencing in plants
AU2007216966C1 (en) 2006-02-22 2014-03-20 Mannkind Corporation A method for improving the pharmaceutic properties of microparticles comprising diketopiperazine and an active agent
WO2007124461A2 (en) 2006-04-20 2007-11-01 Amgen Inc. Glp-1 compounds
EP2020990B1 (en) 2006-05-30 2010-09-22 Intarcia Therapeutics, Inc Two-piece, internal-channel osmotic delivery system flow modulator
CN101466398A (zh) * 2006-06-09 2009-06-24 诺瓦提斯公司 稳定的***多肽
AU2007269622A1 (en) * 2006-07-06 2008-01-10 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Glucagon-like peptides and uses thereof
AR061930A1 (es) 2006-07-18 2008-10-01 Centocor Inc Mimeticuerpos de glp-1 humanos, composiciones, metodos y usos
AU2007284759B2 (en) 2006-08-09 2010-10-28 Intarcia Therapeutics, Inc. Osmotic delivery systems and piston assemblies
KR100851560B1 (ko) * 2006-12-27 2008-08-11 고려대학교 산학협력단 새로운 글루카곤 유사 펩타이드-1 (ｇｌｐ-1) 작용제 및 그용도
ES2628063T3 (es) 2007-01-05 2017-08-01 Indiana University Research And Technology Corporation Análogos de glucagón que muestran una mayor solubilidad en tampones de pH fisiológicos
CN101041693B (zh) * 2007-02-06 2011-08-17 珠海联邦制药股份有限公司 一种降血糖多肽及其应用
KR20090119876A (ko) 2007-02-15 2009-11-20 인디애나 유니버시티 리서치 앤드 테크놀로지 코퍼레이션 글루카곤/ｇｌｐ-1 수용체 공동-항진물질
AU2008244523B2 (en) 2007-04-23 2012-02-16 Intarcia Therapeutics, Inc. Suspension formulations of insulinotropic peptides and uses thereof
GB2448895A (en) * 2007-05-01 2008-11-05 Activotec Spp Ltd GLP-1 like compounds and uses thereof
US8464239B2 (en) * 2007-06-11 2013-06-11 Red Hat, Inc. Real-time installation and/or configuration assistant
EP3260129A1 (en) 2007-08-03 2017-12-27 Eli Lilly and Company An fgf-21 compound and a glp-1 compound for use in the treatment of obesity
US8785396B2 (en) 2007-10-24 2014-07-22 Mannkind Corporation Method and composition for treating migraines
KR20130123470A (ko) * 2007-10-24 2013-11-12 맨카인드 코포레이션 활성제의 전달
KR101736502B1 (ko) * 2007-10-24 2017-05-16 맨카인드 코포레이션 Ｇｌｐ-1에 의한 유해 효과의 예방 방법
WO2009058662A2 (en) 2007-10-30 2009-05-07 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon antagonists
ES2558155T3 (es) 2007-10-30 2016-02-02 Indiana University Research And Technology Corporation Compuestos que muestran actividad antagonista de glucacón y agonista de GLP-1
EP2240155B1 (en) 2008-02-13 2012-06-06 Intarcia Therapeutics, Inc Devices, formulations, and methods for delivery of multiple beneficial agents
US8485180B2 (en) 2008-06-13 2013-07-16 Mannkind Corporation Dry powder drug delivery system
ES2655921T3 (es) 2008-06-13 2018-02-22 Mannkind Corporation Un inhalador de polvo seco y sistema para administración de fármacos
KR20110040760A (ko) 2008-06-17 2011-04-20 인디애나 유니버시티 리서치 앤드 테크놀로지 코퍼레이션 대사 질환 및 비만 치료용 ｇｉｐ-기초된 혼합형 항진제
CN103641907A (zh) 2008-06-17 2014-03-19 印第安纳大学研究及科技有限公司 胰高血糖素/glp-1受体共激动剂
CN104447980A (zh) * 2008-06-17 2015-03-25 印第安纳大学研究及科技有限公司 在生理pH缓冲液中具有增强的溶解性和稳定性的胰高血糖素类似物
ES2904623T3 (es) 2008-06-20 2022-04-05 Mannkind Corp Aparato interactivo para establecer un perfil en tiempo real de esfuerzos de inhalación
EP2926825A1 (en) 2008-06-27 2015-10-07 Duke University Therapeutic agents comprising elastin-like peptides
TWI532497B (zh) 2008-08-11 2016-05-11 曼凱公司 超快起作用胰島素之用途
CN101337989B (zh) * 2008-08-28 2012-10-24 中国药科大学 一类新型胰高血糖素样肽-1(glp-1)类似物及其应用
CN101367873B (zh) * 2008-10-08 2011-05-04 南开大学 一种改构的胰高血糖素样肽-1的类似物和修饰物及其应用
ES2614427T3 (es) 2008-11-07 2017-05-31 The General Hospital Corporation Fragmentos C-terminales de péptido glucagonoide 1 (GLP-1)
EP2376097A4 (en) 2008-12-19 2012-10-03 Univ Indiana Res & Tech Corp AMID-BASED PEPTIDE PRODRUGS OF THE GLUCAGON SUPERFAMILY
US8314106B2 (en) 2008-12-29 2012-11-20 Mannkind Corporation Substituted diketopiperazine analogs for use as drug delivery agents
EP2405963B1 (en) 2009-03-11 2013-11-06 MannKind Corporation Apparatus, system and method for measuring resistance of an inhaler
WO2010144789A2 (en) 2009-06-12 2010-12-16 Mannkind Corporation Diketopiperazine microparticles with defined specific surface areas
MX2011013625A (es) 2009-06-16 2012-01-20 Univ Indiana Res & Tech Corp Compuestos glucagon activo de receptor de gip.
AU2010272944B2 (en) 2009-07-13 2015-11-19 Zealand Pharma A/S Acylated glucagon analogues
SG10201407329RA (en) 2009-08-14 2015-01-29 Phasebio Pharmaceuticals Inc Modified vasoactive intestinal peptides
RU2547990C2 (ru) 2009-09-28 2015-04-10 Интарсия Терапьютикс, Инк. Быстрое достижение и/или прекращение существенной стабильной доставки лекарственного средства
BR112012011467A2 (pt) * 2009-10-30 2019-09-24 Otsuka Chemical Co Ltd forma glicosilada de análogo ao glp-1 antigênico.
WO2011056889A1 (en) 2009-11-03 2011-05-12 Mannkind Corporation An apparatus and method for simulating inhalation efforts
AU2010323117B2 (en) 2009-11-25 2015-09-03 Capsugel Belgium Nv Mucosal delivery compositions comprising a peptide complexed with a crown comppound and/or a counter ion
US8703701B2 (en) 2009-12-18 2014-04-22 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon/GLP-1 receptor co-agonists
BR112012018585A2 (pt) 2010-01-27 2017-01-10 Univ Indiana Res & Tech Corp conjungados e composições de glucagon antagonista-gip agonista para o tratamento de distúrbios metabólicos e de obesidade
WO2011123943A1 (en) 2010-04-09 2011-10-13 Mount Sinai Hospital Methods for treating disorders of the gastrointestinal tract using a glp-1 agonist
BR112012028707A2 (pt) 2010-05-13 2019-09-24 Univ Indiana Res & Tech Corp composto de glucagon da superfamília de peptídeos exibindo atividade do receptor g com proteína acoplada, pró farmaco, dímero ou multímro, composição farmacêutica que o compreendem e método de administração do mesmo.
CA2797095A1 (en) 2010-05-13 2011-11-17 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon superfamily peptides exhibiting nuclear hormone receptor activity
AU2010353685B2 (en) * 2010-05-17 2014-09-25 Betta Pharmaceuticals Co., Ltd. Novel glucagon like peptide analogs, composition, and method of use
KR20130117755A (ko) 2010-06-21 2013-10-28 맨카인드 코포레이션 건조 분말 약물 운반 시스템 및 방법
JP2013540102A (ja) 2010-06-24 2013-10-31 インディアナ ユニバーシティー リサーチ アンド テクノロジー コーポレーション アミド結合を介して修飾されたグルカゴンスーパーファミリーのペプチドプロドラッグ
CN103080125A (zh) 2010-07-02 2013-05-01 安吉奥开米公司 用于治疗性结合物的短且含d氨基酸的多肽及其使用
WO2012061466A2 (en) 2010-11-02 2012-05-10 The General Hospital Corporation Methods for treating steatotic disease
JP6086067B2 (ja) 2010-12-22 2017-03-01 インディアナ ユニヴァーシティ リサーチ アンド テクノロジー コーポレイション Ｇｉｐレセプター活性を示すグルカゴンアナローグ
US20120208755A1 (en) 2011-02-16 2012-08-16 Intarcia Therapeutics, Inc. Compositions, Devices and Methods of Use Thereof for the Treatment of Cancers
CN105667994B (zh) 2011-04-01 2018-04-06 曼金德公司 用于药物药盒的泡罩包装
CN102180963B (zh) * 2011-04-22 2014-06-25 中国药科大学 胰高血糖素样肽-1(glp-1)类似物及其应用
CN102219850A (zh) * 2011-05-03 2011-10-19 上海格尼生物技术有限公司 新的长效glp-1化合物
US9561262B2 (en) 2011-06-06 2017-02-07 Phasebio Pharmaceuticals, Inc. Use of modified vasoactive intestinal peptides in the treatment of hypertension
WO2012174472A1 (en) 2011-06-17 2012-12-20 Mannkind Corporation High capacity diketopiperazine microparticles
AU2012273365A1 (en) 2011-06-22 2014-01-16 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon/glp-1 receptor co-agonists
PT2723367T (pt) 2011-06-22 2017-08-11 Univ Indiana Res & Tech Corp Co-agonistas do recetor da glucagina/glp-1
EP2729157B1 (en) 2011-07-06 2019-01-16 The General Hospital Corporation A pentapeptide derived from the c-terminus of glucagon-like peptide 1 (glp-1) for use in treatment
MX354705B (es) * 2011-09-23 2018-03-16 Novo Nordisk As Analogos de glucagon novedosos.
WO2013063160A1 (en) 2011-10-24 2013-05-02 Mannkind Corporation Methods and compositions for treating pain
RU2014117678A (ru) 2011-11-17 2015-12-27 Индиана Юниверсити Рисерч Энд Текнолоджи Корпорейшн Пептиды глюкагонового суперсемейства, обладающие глюкокортикоидной рецепторной активностью
CN104583232B (zh) 2012-06-21 2018-04-13 印第安纳大学研究及科技有限公司 展现gip受体活性的胰高血糖素类似物
CN108057154B (zh) 2012-07-12 2021-04-16 曼金德公司 干粉药物输送***和方法
US10159644B2 (en) 2012-10-26 2018-12-25 Mannkind Corporation Inhalable vaccine compositions and methods
CN103087177A (zh) * 2012-11-30 2013-05-08 中国药科大学 一类长效化胰高血糖素样肽-1(glp-1)类似物及其应用
CN103087175A (zh) * 2012-11-30 2013-05-08 中国药科大学 新型长效化胰高血糖素样肽-1(glp-1)类似物及其应用
CN103087178A (zh) * 2012-11-30 2013-05-08 中国药科大学 长效化胰高血糖素样肽-1(glp-1)类似物及其应用
CN103087179A (zh) * 2012-11-30 2013-05-08 中国药科大学 长效化胰高血糖素样肽-1(glp-1)类似物及其应用
CN103087176A (zh) * 2012-11-30 2013-05-08 中国药科大学 长效化胰高血糖素样肽-1(glp-1)类似物及其应用
JP6523247B2 (ja) 2013-03-15 2019-05-29 マンカインド コーポレイション 微結晶性ジケトピペラジン粒子の製造方法および乾燥粉末組成物の製造方法
MY174727A (en) 2013-04-18 2020-05-11 Novo Nordisk As Stable, protracted glp-1/glucagon receptor co-agonists for medical use
EP3021834A1 (en) 2013-07-18 2016-05-25 MannKind Corporation Heat-stable dry powder pharmaceutical compositions and methods
EP3030294B1 (en) 2013-08-05 2020-10-07 MannKind Corporation Insufflation apparatus
CN104262481B (zh) * 2013-08-09 2018-02-09 天津药物研究院有限公司 一种侧链修饰的长效glp‑1类似物的制备方法及其应用
CN103405753B (zh) * 2013-08-13 2016-05-11 上海仁会生物制药股份有限公司 稳定的促胰岛素分泌肽水针药物组合物
US10307464B2 (en) 2014-03-28 2019-06-04 Mannkind Corporation Use of ultrarapid acting insulin
US11052132B2 (en) 2014-05-08 2021-07-06 Phasebio Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for treating cystic fibrosis
US10570184B2 (en) 2014-06-04 2020-02-25 Novo Nordisk A/S GLP-1/glucagon receptor co-agonists for medical use
US9889085B1 (en) 2014-09-30 2018-02-13 Intarcia Therapeutics, Inc. Therapeutic methods for the treatment of diabetes and related conditions for patients with high baseline HbA1c
US10561806B2 (en) 2014-10-02 2020-02-18 Mannkind Corporation Mouthpiece cover for an inhaler
US10413593B2 (en) * 2014-10-24 2019-09-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Co-agonists of the glucagon and GLP-1 receptors
CN114652817A (zh) 2015-02-09 2022-06-24 费斯生物制药公司 用于治疗肌肉疾病和病症的方法和组合物
EP3302354B1 (en) 2015-06-03 2023-10-04 i2o Therapeutics, Inc. Implant placement systems
EP3398961B1 (en) * 2015-12-31 2022-06-29 Hanmi Pharm. Co., Ltd. Triple activator activating glucagon, glp-1 and gip receptor
RU2760007C2 (ru) 2016-05-16 2021-11-22 Интарсия Терапьютикс, Инк. Полипептиды, селективные к рецепторам глюкагона, и способы их применения
USD860451S1 (en) 2016-06-02 2019-09-17 Intarcia Therapeutics, Inc. Implant removal tool
USD840030S1 (en) 2016-06-02 2019-02-05 Intarcia Therapeutics, Inc. Implant placement guide
WO2018129058A1 (en) 2017-01-03 2018-07-12 Intarcia Therapeutics, Inc. Methods comprising continuous administration of a glp-1 receptor agonist and co-adminstration of a drug
PL3474820T3 (pl) 2017-08-24 2024-05-13 Novo Nordisk A/S Kompozycje glp-1 i ich zastosowania
WO2019140021A1 (en) 2018-01-12 2019-07-18 Eli Lilly And Company Combination therapy
HUE060135T2 (hu) 2018-04-05 2023-02-28 Sun Pharmaceutical Ind Ltd Új GLP-1 analógok
TWI705820B (zh) 2018-06-22 2020-10-01 美商美國禮來大藥廠 Gip/glp1促效劑組合物
AU2019357621A1 (en) 2018-10-11 2021-05-27 Intarcia Therapeutics, Inc. Human amylin analog polypeptides and methods of use
WO2020087305A1 (zh) * 2018-10-30 2020-05-07 刘建宁 具有glp-1受体激动剂活性的glp-1多肽及其用途
CA3056663C (en) 2019-04-05 2022-10-18 Jeffrey S. RIESMEYER Use of dulaglutide in reducing risk of cardiovascular events in patients with type 2 diabetes mellitus
CN112898406B (zh) * 2019-10-12 2023-11-10 深圳纳福生物医药有限公司 不同构型的glp-1类似肽修饰二聚体及其制备方法在治疗ii型糖尿病中的应用
CN113728013B (zh) 2020-01-11 2022-06-14 北京质肽生物医药科技有限公司 Glp-1和fgf21的融合蛋白的缀合物
EP4106724A1 (en) 2020-02-18 2022-12-28 Novo Nordisk A/S Glp-1 compositions and uses thereof
US11981718B2 (en) * 2020-05-27 2024-05-14 Ampsource Biopharma Shanghai Inc. Dual-function protein for lipid and blood glucose regulation

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1991011457A1 (en) * 1990-01-24 1991-08-08 Buckley Douglas I Glp-1 analogs useful for diabetes treatment
WO1998019698A1 (en) * 1996-11-05 1998-05-14 Eli Lilly And Company Use of glp-1 analogs and derivatives administered peripherally in regulation of obesity
WO1999030731A1 (en) * 1997-12-16 1999-06-24 Eli Lilly And Company Glucagon-like peptide-1 crystals
US5977071A (en) * 1993-12-09 1999-11-02 Eli Lilly And Company Glucagon-like insulinotropic peptides, compositions and methods
WO2000007617A1 (en) * 1998-07-31 2000-02-17 Novo Nordisk A/S Use of glp-1 and analogues for preventing type ii diabetes

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5545618A (en) 1990-01-24 1996-08-13 Buckley; Douglas I. GLP-1 analogs useful for diabetes treatment
US5424286A (en) 1993-05-24 1995-06-13 Eng; John Exendin-3 and exendin-4 polypeptides, and pharmaceutical compositions comprising same
WO1999007404A1 (en) 1997-08-08 1999-02-18 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Novel exendin agonist compounds
ATE381939T1 (de) 1997-11-14 2008-01-15 Amylin Pharmaceuticals Inc Neuartige exendin agonisten
AU756836B2 (en) 1997-11-14 2003-01-23 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Novel exendin agonist compounds
AU2610699A (en) 1998-02-27 1999-09-15 Novo Nordisk A/S Derivatives of glp-1 analogs
AU2610799A (en) 1998-02-27 1999-09-15 Novo Nordisk A/S Glp-1 derivatives with helix-content exceeding 25 per cent, forming partially structured micellar-like aggregates
US6429197B1 (en) * 1998-10-08 2002-08-06 Bionebraska, Inc. Metabolic intervention with GLP-1 or its biologically active analogues to improve the function of the ischemic and reperfused brain
ATE424413T1 (de) * 2000-06-16 2009-03-15 Lilly Co Eli Analoge des glucagon-ähnlichen peptids-1
CZ308214B6 (cs) * 2000-12-07 2020-03-04 Eli Lilly And Company GLP-1 fúzní proteiny
DE60228972D1 (de) * 2001-07-31 2008-10-30 Us Gov Health & Human Serv Glp 1 exendin 4 peptidanaloga und deren verwendungen
AU2010279305A1 (en) * 2009-08-07 2012-03-01 Perry Felix Method and apparatus for surface and subsurface sanitizing of food products in a cooking appliance using ultraviolet light

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1991011457A1 (en) * 1990-01-24 1991-08-08 Buckley Douglas I Glp-1 analogs useful for diabetes treatment
US5977071A (en) * 1993-12-09 1999-11-02 Eli Lilly And Company Glucagon-like insulinotropic peptides, compositions and methods
WO1998019698A1 (en) * 1996-11-05 1998-05-14 Eli Lilly And Company Use of glp-1 analogs and derivatives administered peripherally in regulation of obesity
WO1999030731A1 (en) * 1997-12-16 1999-06-24 Eli Lilly And Company Glucagon-like peptide-1 crystals
WO2000007617A1 (en) * 1998-07-31 2000-02-17 Novo Nordisk A/S Use of glp-1 and analogues for preventing type ii diabetes

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DEACON C.F. ET AL.: "Dipeptidyl peptidase IV resistant analogues of glucagon-like peptide-1 which have extended metabolic stability and improved biological activity", DIABETOLOGIA, vol. 41, 1998, pages 271-278, XP002202152, page 276, figure 3; tables 1, 3 *

Also Published As

Publication number Publication date
US7498308B2 (en) 2009-03-03
NO20025949L (no) 2002-12-11
NO20025949D0 (no) 2002-12-11
DK1695983T3 (da) 2009-05-18
CY1105917T1 (el) 2011-04-06
CY1109061T1 (el) 2014-07-02
PT1695983E (pt) 2009-05-05
MXPA02012203A (es) 2003-06-06
KR100847615B1 (ko) 2008-07-21
CZ20024088A3 (cs) 2003-05-14
MY137350A (en) 2009-01-30
HU229208B1 (en) 2013-09-30
BR0111562A (pt) 2003-04-15
AU6479101A (en) 2002-01-02
PL360406A1 (en) 2004-09-06
US7084243B2 (en) 2006-08-01
HK1055121A1 (en) 2003-12-24
EP1294757B1 (en) 2006-11-22
JP4716641B2 (ja) 2011-07-06
DZ3388A1 (fr) 2001-12-27
JP2004501162A (ja) 2004-01-15
PL206302B1 (pl) 2010-07-30
SK17782002A3 (sk) 2003-07-01
CN100469791C (zh) 2009-03-18
CN1468258A (zh) 2004-01-14
WO2001098331A2 (en) 2001-12-27
NZ522330A (en) 2004-11-26
NO330686B1 (no) 2011-06-06
PT1294757E (pt) 2007-02-28
ATE424413T1 (de) 2009-03-15
SI1695983T1 (sl) 2009-08-31
HU229108B1 (en) 2013-09-30
SK287757B6 (sk) 2011-08-04
EP1695983B1 (en) 2009-03-04
CA2412004C (en) 2010-12-21
EP1294757A2 (en) 2003-03-26
DE60137876D1 (de) 2009-04-16
CZ304002B6 (cs) 2013-08-14
EG24755A (en) 2010-07-26
IL153453A (en) 2009-11-18
AR031701A1 (es) 2003-10-01
PE20011363A1 (es) 2002-01-15
CA2412004A1 (en) 2001-12-27
EP1695983A2 (en) 2006-08-30
DE60124710T2 (de) 2007-09-13
US20030220243A1 (en) 2003-11-27
DE60124710D1 (de) 2007-01-04
HUP0301212A3 (en) 2004-09-28
US20060263849A1 (en) 2006-11-23
EP1695983A3 (en) 2007-02-21
TWI321134B (en) 2010-03-01
ATE346093T1 (de) 2006-12-15
DK1294757T3 (da) 2007-03-19
WO2001098331A3 (en) 2003-01-03
HRP20020996A2 (en) 2004-02-29
ES2321439T3 (es) 2009-06-05
ES2275685T3 (es) 2007-06-16
AU2001264791B2 (en) 2006-11-23
IL153453A0 (en) 2003-07-06
HRP20020996B1 (en) 2011-09-30
EA200300026A1 (ru) 2003-04-24
KR20030009537A (ko) 2003-01-29
HUP0301212A2 (hu) 2003-08-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA008837B1 (ru) Аналоги глюкагоноподобного пептида и их применение
KR100593348B1 (ko) 글루카곤-유사 펩티드-1 유사체
JP4519324B2 (ja) 共有結合で架橋されたインスリンダイマー
US8097586B2 (en) Modified exedins and uses thereof
JP4282485B2 (ja) 伸長グルカゴン様ペプチド−１アナログ
AU2001264791A1 (en) Glucagon-like peptide-1 analogs
ZA200210098B (en) Glucagon-like peptide-1 analogs.
EP1152011A1 (en) Peptides inhibiting vascular endothelial cell migration
US20060252693A1 (en) Glucagon-like peptide-1 analogs

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM BY KZ KG MD TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AZ TJ RU