EA001625B1

EA001625B1 - Производные 3-алкоксиизоксазол-4-илзамещенных 2-аминокарбоновых кислот

Info

Publication number: EA001625B1
Application number: EA199900358A
Authority: EA
Inventors: Бенни Банг-Андерсен; Клаус Петер Бегесе; Повль Крогсгор-Ларсен; Сибюлле Мольтсен Ленс
Original assignee: Х.Лундбекк А/С
Priority date: 1996-10-04
Filing date: 1997-10-03
Publication date: 2001-06-25
Also published as: WO1998015542A1; HUP0000084A2; ES2189978T3; CA2268028A1; TR199900724T2; US6200999B1; AR008880A1; CA2268028C; NZ334798A; BR9712198A; JP2001501630A; EP0934286B1; DE69718338T2; IL129135A0; AU733004B2; EA199900358A1; HUP0000084A3; CN1238766A; IS5009A; EP0934286A1

Abstract

Производные (3-алкоксиизоксазол-4-ил)замещенных 2-аминокарбоновых кислот и их серосодержащие аналоги общей формулы (I) или (II)где Rпредставляет водород, алкил, алкенил, алкинил, циклоалк(ен)ил, циклоалк(ен)ил-алк(ен/ин)ил или необязательно замещенный фенил-алк(ен/ин)ил; А представляет связь или углеводородную спейсерную группу; В представляет группу -CR(NRR)-COOR, где R-Rпредставляют независимо водород или алкил, и Rимеет те же значения, что и R, или представляет пивалоилоксиметил, или В представляет группу формулы (III), где R, Rи Rвыбирают независимо среди водорода, неароматической углеводородной группы, фенил- и тиенилалкила и гетероалифатической группы, или Rи Rсоединяются, образуя в результате алкиленовую, алкениленовую или алкиниленовую группу, или Rи Rсоединяются с образованием алкиленовой, алкениленовой или алкиниленовой группы, необязательно замещенной гидрокси или метилом, или с образованием группы СН-О-СН; Е представляет COOR, где Rимеет те же значения, что и R; X представляет О или S; и Y представляет О или S; являются лигандами рецепторов для возбудительных аминокислот (ЕАА), в частности АМРА- и/или NMDA-рецепторов, полезными при лечении церебральной ишемии, болезни Гентингтона, эпилептических нарушений, болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, шизофрении, боли, депрессии или страха.

Description

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к новому классу производных (3-алкоксиизоксазол-4ил)замещенных 2-аминокарбоновых кислот и их серосодержащим аналогам. Эти соединения являются лигандами рецепторов для возбудительных аминокислот (ЕАА), в частности, лигандами рецепторов для АМРА и/или ΝΜΡΑ, полезными при лечении церебральной ишемии, болезни Г ентингтона, эпилептических нарушений, болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, шизофрении, боли, депрессии и страха.

Предпосылки создания изобретения

В результате широких исследований в последние три десятилетия механизмов возбуждения в центральной нервной системе (ЦНС) теперь существует единое мнение, что (8)глутамат (С1и) является главным ЕААнейротрансмиттером в ЦНС (Ьобде, Ό., Ехсйа1огу Аш1ио Аабз ίη НеаПН апб Экеазе. 1. \УПеу & 8опз: ОпсйеЧег. 1988; ХУйеаР Н., Тйотзоп, А., Ехсйа!огу Аш1по Ас1бз апб 8упарбс ТгапкшЦ8юп. Асабеппс Ргезз: Ьопбоп, 1991; Ме1бгит,

В.8., Ехсйа!огу Атто Аабз Ап!адош8!8. В1аск\\с11 8с1 РиЫ.: ОхГогб, 1991; Кгодздаагб-Ьагзеп, Р., Напзеп, ЕЕ, Ехсйа1огу Атто Ас1бз ВесерЮгз: Эехщп оГ Адошз! апб Ап1адоп18!8. Е. Нопсооб: СЫсйе81ег, 1992). Управляемая С1инейтротрансмиссия опосредуется большим числом рецепторов, разделяемых, по меньшей мере, на четыре различных семейства рецепторов, называемых классами рецепторов для NΜ^Α, АМРА, каиновой кислоты и метаботропными рецепторами (Мопадйап, Ό.Τ., е! а1., Апп. Вет. Р11агшасо1. Тохюо1., 1989, 29, 365-402; ^аШпз, 1.С., Кгодздаагб-Ьагзеп, Р., Нопоге, Т., Тгепбз Р11агшасо1. 8ск, 1990, 11, 25-33; 81топ, В.Р., Ехсйа!огу Атто Аабз. ТЫете Меб. РиЫ.: №\ν Уогк, 1992).

Существует веское свидетельство, поддерживающее точку зрения, что чрезмерное возбуждение, опосредуемое ЕАА-рецепторами («эксцитотоксичность»), является очень важным фактором при церебральной ишемии после эмболии, травмы головы, асфиксии, субарахноидального кровотечения, остановки сердца и других ситуаций (Ьобде, Ό., 1988, цит. выше; Ме1бгит, Ό.8., 1991, цит. выше). На животных моделях показано, что повреждения, вызванные различными ишемическими состояниями, можно затормозить посредством введения С1и-антагонистов. Таким образом, хотя относительное значение различных ЕААрецепторов в явлениях, лежащих в основе ишемических инсультов, неясно, сходятся во мнении, что антагонисты ЕАА-рецепторов являются потенциальными лечебными средствами при таких состояниях.

Накапливающиеся результаты, получаемые на разных направлениях нейрохимических и фармакологических исследований, наводят на мысль, что разрушенные ЕАА-рецепторные механизмы, вероятно, включая «эксцитотоксичность», играют некую роль при болезни Гентингтона (Уоипд, А.В., е! а1., 8с1епсе, 1988, 241, 981-983), эпилептических нарушениях (Кгодздаагб-Ьагзеп, Р., Напзеп, 1.1., 1992, цит.1 выше), болезни Паркинсона (К1оскде!йег, Т., Тиг8к1, Ь., Тгепбз. №иго8сг, 1989, 12, 285-286) и болезни Альцгеймера (Сгеепатуге, 1.Т., Магадоз, ^.Е., СегеЬгоуазс. Вгат. Ме1аЬ. Вес., 1993, 5, 61-94; Егапс1з, Р.Т., е! а1., Е№игосйет., 1993, 60, 1589-1604).

Кроме того, центральные ЕАА-рецепторы могут участвовать в синаптических механизмах, лежащих в основе шизофрении (Веупо1бз, С.Р., Тгепбз. Рйагтасо1. 8сЕ, 1992, 13, 116-121), боли и страха (Пге_)ег, 1., в Ехсйа!огу Атто Ас1бз Весер!огз: Эез1дп оГ Адошз!з апб Ап1адошз!з (Ебз. Кгодздаагб-Ьагзеп, Р., Напзеп, 1.1.) Е. Нопсооб: СЫсйез!ег 1992, рр. 352-375) и депрессии (Тги11аз, В., 8ко1тск, Р., Еиг. 1. Рйагтасок, 1990, 185, 1-10, и Тги11аз е! а1., Еиг. 1. Рйагтасок, 1991, 203, 379-385). Так, оказывается, что пониженная функция ЕАА-рецепторов играет некую роль, например, при шизофрении (ЛенЬск 8.Ι., е! а1., С1т. №иго-рйагтасо1., 1989, 12, 1-13) и некоторых клинических симптомах, проявляющихся при болезни Альцгеймера (Сгеепатуге, 1.Т., е! а1., Ргод. №иго-Рзусйорйагтасо1. & Вю1. РзусЫа!., 1988, 12, 421-430). Возможно, что «эксцитотоксичность», так же, как и гипоактивность ЕАА, включаются в сложные механизмы, связанные с болезнью Альцгеймера (Сгеепатуге, 1.Т., 1988, цит. выше; Сгеепатуге, 1.Т., Магадоз, ^.Е., 1993, цит. выше).

Соответственно считается, что лиганды ЕАА-рецепторов полезны при лечении церебральной ишемии, болезни Гентингтона, эпилептических нарушений, болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, страха, шизофрении, депрессии и боли.

Большинство испытанных до сих пор агонистов ЕАА-рецепторов показывают более или менее явную нейротоксичность на модельных системах, и следовательно клиническое применение таких соединений может быть ограниченным (Саг1ззоп, М., Саг1ззоп, А., Тгепбз. Митоза., 1990, 13, 272-276; №Ше!!з, 1., Ва1з!ег, В.Ь., Ьеапбег, Ι.Ό., Тгепбз. Рйагтасо1. 8сЕ, 1990, 11, 423-428).

С другой стороны, для терапии могут представлять интерес частичные ЕАА-агонисты, показывающие подходящий баланс агонизма и антагонизма, ср. вышеприведенные показания (Сгеепатуге, 1.Т., 1988. цит. выше; Сйпз!епзеп, 1.Т., е! а1., Эгид. Эез. Эе1., 1989, 5, 57-71; Егапшз, Р.Т., е! а1., 1. №игосйет., 1993, 60, 1589-1604). Частичные агонисты могут, в силу своего профиля антагонистов ЕАА, показывать терапевтически полезную нейрозащиту и в то же время быть достаточно агонистическими, чтобы предотвращать полную блокировку нейротранс миссии, опосредуемой рецептором для определения ЕАА.

Есть сообщения, что АТРА - 5-третбутильный аналог АМРА ((К8)-2-амино-3-(3гидрокси-5-метилизоксазол-4-ил)пропионовая кислота) системно активен, хотя нет сообщений о нейротоксическом действии на животных (Огпз1ет, Р.Ь., е! а1., 1.Меб. Сйеш., 1993, 36, 2046-2048; Еаипбзеп, I., Нопоге, Т., КгодздаагбЕагзеп. Р., I. Меб. Сйеш., 1985, 28, 668-672).

Обнаружено, что подобно самой АМРА, ряд моно- и бициклических аналогов АМРА показывают селективное агонистическое действие в отношении АМРА-рецепторов (Напзеп, Ι.Ι., Кгодздаагб-Еагзеп, Р., Меб. Кез. Кеу., 1990, 10, 55-94; Кгодздаагб-Еагзеп, Р., Напзеп, Ι.Ι., 1992, цит. выше). Один из таких аналогов (К8)-2-амино-3-(3-гидрокси-5-фенилизоксазол4-ил)пропионовая кислота (АРРА), в котором метильная группа АМРА заменена фенильной группой, показывает слабый, но уникальный профиль частичного агониста (СЫгз1епзеп, Ι.Τ., е! а1., 1989, цит. выше).

АСРА ((К8)-2-амино-3-(3-карбоксиокси-5метилизоксазол-4-ил)-пропионовая кислота) описывается как мощный агонист АМРАрецепторов (Мабзеп, и., апб Шопд, Е., I., Меб. Сйеш., 1992, 35, 107-111).

Кроме того, в ШО-А1 95/12587 в качестве лигандов ЕАА-рецепторов описывается класс соединений (5-арилизоксазол-4-ил)- или (5арилизотиазол-4-ил)замещенных 2-аминокарбоновых кислот.

Как видно из описанного выше, для лечения различных упомянутых выше болезней весьма желательны ненейротоксичные лиганды рецепторов для ЦНС-активных ЕАА, и соответственно предметом настоящего изобретения являются такие новые лекарственные средства.

Краткое изложение сущности изобретения

Установлено, что новый класс производных (3-алкокси-изоксазол-4-ил)замещенных 2аминокарбоновых кислот и их серосодержащие аналоги являются лигандами ЕАА-рецепторов, в частности, лигандами АМРА- и/или КМОАрецепторов.

Соответственно настоящее изобретение относится к новому классу соединений общей формулы I или II

где Κι представляет водород, С1_-6-алкил, С_2-6алкенил, С_2-6-алкинил, циклоалк(ен)ил, циклоалк(ен)ил-С1_-6-алк(ен/ин)ил или фенил-С_1-6алк(ен/ин)ил, причем фенильная группа необязательно замещена СР₃, галогеном, С1_-6-алкилом или С1_-6-алкокси;

А - связь или спейсер, выбранный из С₁.₆алкилена, С2-6-алкенилена, С2-6-алкинилена и циклоалкилена;

В - группа -СК_а(КК_ЪК_с)-СООК₅, где К_а-К_снезависимо водород или С1_-6-алкил, и К₅ имеет те же значения, что и Κι, или представляет пивалоилоксиметил, или В представляет группу формулы III

где Κ2, Κ3 и Κ4 выбирают независимо из группы, состоящей из

a) водорода, С_1-6-алкила, С_2-6-алкенила, С₂6-алкинила, циклоалк(ен)ила, циклоалк(ен)илС1_-6-алк(ен/ин)ила, фенил-С1_-6-алкила, тиенилС1_-6-алкила, и

b) С_1-6-алкила, С_2-6-алкенила и С_2-6алкинила, в которых один или несколько атомов углерода заменены на Ν, О и/или 8; или

Κ3 и Κ4 соединяются, образуя в результате С2-6-алкилен, С2-6-алкенилен или С2-6-алкинилен, или К₄ и К₂ соединяются с образованием С_1-3алкиленовой, С2-3-алкениленовой или С2-3алкиниленовой группы, необязательно моноили дизамещенной гидрокси или метилом, или с образованием группы СН₂-О-СН₂;

Е - СООК₆, где К₆ имеет те же значения, что и К₅;

Х - О или 8; Υ - О или 8; и их фармацевтически приемлемым солям.

В другом аспекте изобретение относится к способу получения новых соединений формул I или II.

Еще в одном своем аспекте изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей новое соединение формулы I или II вместе с подходящим фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем.

Еще в одном своем аспекте изобретение относится к применению соединения формулы I или II для получения фармацевтической композиции для лечения церебральной ишемии, болезни Г ентингтона, эпилептических нарушений, болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, шизофрении, боли, депрессии или страха.

Обнаружено, что некоторые соединения данного изобретения являются лигандами АМРА-рецепторов с афинностью при микромолярных концентрациях, а некоторые соединения связываются с рецепторами для КМОА Кроме того, обнаружено, что некоторые из соединений изобретения являются агонистами, в то время как другие соединения являются антагонистами. Таким образом, соединения изобретения полезны при лечении церебральной ишемии, болезни Гентингтона, эпилептических нарушений, болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, шизофрении, боли, депрессии и страха. Соединения, в которых К₅ и/или Кб не представляют водород, являются пролекарствами соответствующих соединений, в которых К₅ и К₆ представляют водород.

Подробное описание изобретения

Некоторые из соединений общих формул I или II могут существовать в виде их оптических изомеров, и такие оптические изомеры также охватываются данным изобретением.

В общих формулах I или II термин «С_1-6алкил» предназначен для обозначения линейной или разветвленной алкильной группы с 1-6 атомами С, в том числе, таких как метил, этил, 1пропил, 2-пропил, 1-бутил, 2-бутил, 2-метил-2пропил и т.п. Подобным образом С_2-6-алкенил и С_2-6-алкинил обозначают соответствующие линейные или разветвленные группы с 2-6 атомами С, а С_1-6-алкилен, С_2-6-алкенилен и С_2-6алкинилен обозначают такие линейные или разветвленные двухвалентные группы. Циклоалкил обозначает соответствующую группу с 3-7 атомами углерода, а термин «С1-6-алкокси» обозначает соответствующие группы, содержащие С_1-6алкильную, С₂-₆-алкенильную или С_2-6алкинильную группы, определенные выше.

Термин «алк(ен/ин)ил» означает, что группа может представлять алкильную, алкенильную или алкинильную группу.

Термин «связь» (при определении А) означает, что В может присоединяться непосредственно в положении 4 изоксазольного кольца.

Галоген обозначает фтор, хлор, бром или иод.

Некоторые из соединений общей формулы I или II могут существовать в виде фармацевтически приемлемых солей, которые также охватываются данным изобретением.

Соли соединений общей формулы I или II являются солями, образованными с нетоксичными органическими кислотами, например, малеиновой, фумаровой, бензойной, аскорбиновой, щавелевой, винной, молочной и яблочной кислотой, или с неорганическими кислотами, например, хлористоводородной, бромистоводородной, серной, фосфорной и азотной кислотой, или они могут представлять соли неорганических оснований, такие как соли щелочных металлов, например, натриевые, калиевые или литиевые соли, соли щелочноземельных металлов, например, кальциевые или магниевые соли, или соли аммония, или соли органических оснований.

В формулах I и II А, предпочтительно, представляет связь или С_1-3-алкилен, наиболее предпочтительно - метилен.

В, предпочтительно, представляет группу -СК_а(ХК_ьК_с)-СООК₅, где К_1:-К_с представляют водород, а На представляет водород или С_1-6алкил, обычно метил, или группу формулы III, где К₂, К₃ и К₄ представляют водород или С_1-6алкил, или К₄ и К₂ соединяются с образованием С_1-3-алкиленовой группы. Наиболее предпочтительно, В представляет -СН(ХН₂)-СООН или группу формулы III, где каждый из К₂, К₃ и К₄представляет водород.

Предпочтительно Е представляет СООН.

Другая подгруппа включает соединения, в которых Е представляет С.'ООЕ₆. где Кб не является Н. Соответственно, в предпочтительной подгруппе соединений изобретения Х и Υ представляют О. Другими подгруппами являются подгруппы, где Х представляет О, а Υ представлят 8; Υ представляет О, а Х представляет 8; и Х и Υ представляют соответственно 8.

К₁, предпочтительно, представляет С_1-6алкил, С_2-6-алкенил или С_2-6-алкинил. Особенно предпочтительными группами К являются метил, этил, пропил, бутил и пропаргил.

В предпочтительном варианте воплощения изобретения соединение представляет соединение формулы I, где А представляет связь или С_1-3-алкилен, В представляет -СН(ХН₂)-СООН или группу формулы III, где каждый из К,₃, К₄ и К₂ представляет водород, Х и Υ - оба - представляют кислород и К₁ представляет С_1-6-алкил, С_2-6алкенил или С_2-6-алкинил. Особенно подходящими группами К₁ являются метил, этил, пропил, бутил или пропаргил.

В сооответствии с изобретением, соединения формул I или II получают следующими способами. Ради простоты, реакции а)-е) и д)-й) показаны только для соединений формулы I. Те же способы могут применяться в отношении соединений формулы II.

а) Чтобы получить соединение формулы I, где В представляет -СК_а(ХК_ьК_с)-СООК₅, где К_аК_с и К₅ имеют установленные ранее значения, и, по меньшей мере, один из К._ь, К₅ и К₆ представляет водород, осуществляют отщепление защитной группы от соединения общей формулы IV р_а№/^С°°^Р5'

где К₁, А, Х и Υ имеют установленные ранее значения, К_а' -К_с', Е' и К₅' имеют значения, установленные для К_а-К_с и Е и К₅ соответственно, или они являются защитными группами при условии, что, по меньшей мере, одна из групп Е', К₅' и К_с' является защитной группой.

Ь) Чтобы получить соединение формулы I, где В представляет группу -СВ_а(ХКьК_с)-СООК₅, где К_ь, К_с и К₅ все являются водородами, осуще ствляют отщепление защитной группы от соединения общей формулы V

где К₁, А, Υ, Х и Е' имеют установленные ранее значения.

с) Чтобы получить соединение формулы I, где В представляет группу формулы III, осуще ствляют реакцию присоединения-элимирования соединения общей формулы VI с соединением общей формулы VII

где К4-К4, А, X, Υ и Е' имеют установленные ранее значения.

б) Чтобы получить соединение формулы I, где В представляет группу формулы III, где К₄ и К₂ соединяются с образованием С_1-3алкиленовой, С_2-3-алкениленовой или С_2-3алкиниленовой группы, необязательно моноили дизамещенной гидрокси или метилом, осуществляют реакцию соединения формулы VIII восу

Ν ΝΗ —А кБ /х /X Ζ

Вз Ед—^2/ \ риУ'ч''*'VIII где К₁, К₃, А, X, Υ и Е' имеют установленные ранее значения;

К₄ и К₂ соединяются с образованием группы, определение которой дается выше, и ВОС представляет трет-бутоксикарбонил с 3,4диэтокси-3-циклобутен-1,2-дионом, и затем за мыкают кольцо и отщепляют защитную группу.

е) Чтобы получить соединение формулы I, где В представляет группу формулы III, и один или несколько К₂-К₄ отличаются от водорода, осуществляют алкилирование соединения формулы IX

/^хгг IX где К₁, К₂, К₃, К₄, А, X, Υ и Е' имеют установленные ранее значения, причем, по меньшей мере, один из К₂-К₄ представляет водород.

I) Чтобы получить соединение формулы I или II, осуществляют алкилирование соединения общей формулы Х

где А, X, Υ и Е' имеют установленные ранее значения, и В' представляет В, за исключением значений, данных при определении В_ь, водороды Кс и К₅ заменяют защитной группой, алкилирующим агентом Κ₁'Ζ, где К₁' представляет К₁, за исключением того, что он не может быть водородом, причем посредством этого получают смесь соединений XI и XII

х! *· хи где А, X, Υ, Е' и В' имеют установленные выше значения, и затем соединения разделяют и отщепляют защитные группы.

д) Чтобы получить соединение формулы I, где К₅ и/или К, отличаются от водорода, осуществляют этерификацию соединения формулы XIII или XIV

где К₁, К₂, К₃, К₄, А, X, Υ и К_а-К_с имеют установленные выше значения.

И) Чтобы получить соединение формулы I, где В представляет группу -СВ_а(ЫВ_ьК_с) -СООК₅, где К_а, В_ь, К_с и К₅ все являются водородами, и Е представляет СООН, в виде определенного чистого энантиомера, соединение формулы XV

XV подвергают реакции синтеза бислактимаминокислот по Щелькопфу (8сИо11кор1) и последующему отщеплению защитной группы от полученного бис-лактимэфира формулы XVI

где X, Υ, К_а и В! имеют установленные ранее значения, и А' имеет значения, определенные для А, за исключением того, что А не может представлять собой связь.

В способе изобретения предпочтительными защитными группами являются следующие группы: в случае Е=СООН - 4,5-дигидро-4,4диметилоксазол-2-ил, С_1-6-алкил или бензильная группа; в случае К₅=водород - С1_-6-алкил; и в случае В_ь=водород - С_1-6-алкилкарбонил.

Стадию отщепления защитной группы по способу а) осуществляют посредством обработки соединения формулы IV подходящей водной кислотой, обычно - 0,5-12 N водным раствором НС1, водным 48%-ным раствором НВг или насыщенным раствором НВг в уксусной кислоте. Отщепление защитной группы можно также осуществить постадийно с использованием водных кислот и водных оснований, традиционнопоследовательно в водной кислоте, такой как 0,5-12 N НС1, водном основании, таком как 1-8 N №О11, и водной кислоте, такой как 0,5-12 N НС1, или последовательно в водном основании, таком как 1-8 N №О11, в водной кислоте, такой как 0,5-12 N НС1.

Исходные вещества формулы IV удобно получать из 3-алкокси-4-метилизоксазол-5карбоновой кислоты (\УО 95/12587, А1) посредством полного отщепления защитных групп в водной кислоте в соответствии с описанными выше условиями отщепления защитной группы, необязательной этерификации 3-гидрокси-4метилизоксазол-5-карбоновой кислоты и последующего алкилирования подходящим галогенидом или просто посредством алкилирования. За этим следует бромирование 4метилизоксазольной группы и последующее алкилирование предшественником аминокислоты, например, диэтилацетамидомалонатом. Другие 4-алкилизоксазолы можно получить путем удлинения цепи, например, при алкилировании цианидом или диэтилмалонатом и последующей трансформации до первичного алкилгалогенида или альдегида. Галогенид можно обработать так, как описано выше. Альдегид можно использовать в качестве исходного вещества для получения соединений общей формулы V.

При способе Ь) стадию отщепления защитной группы осуществляют посредством обработки соединения формулы V подходящей водной кислотой или водным основанием, предпочтительно 0,5-0,8 N соляной кислотой. Отщепление защитной группы можно также осуществить постадийно путем использования водных кислот и водных оснований, как описано выше для способа а). Гидантоиновое кольцо можно также расщепить посредством использования водного раствора Ва(ОН)₂, водной 10-70%-ной серной кислоты или при использовании ферментов, таких как гидантоиназы. Расщепление гидантоинового кольца можно осуществить или до, или после отщепления защитной группы от группы Е. Группу К₁ можно снова ввести посредством алкилирования после полного отщепления защитных групп от промежуточного гидантоинового соединения.

Гидантоиновые кольца в соединениях общей формулы V подходящим образом образуются по способам, описанным \Уагс. Е., С11сш. Кеу., 1950, 46, 403-470. Расщепление гидантоинового кольца удобно осуществлять методами, аналогичными описанным в Сиггу, К., е! а1., I. Меб. С1ет., 1988, 31, 864-867; Еатпд!оп, О.К., е! а1., I. Меб. С1ет., 1987, 30, 2062-2067; Сгииеуа1б, С.Ь., е! а1., I. Меб. С1ет., 1980, 23, 754758, Ηίτοί, К., е! а1., С1ет. Рйагт. Ви11., 1968, 16, 444-447; или в 81агк, 6.В., е! а1., I. Вю1. С1ет., 1963, 238, 214-226. Исходные вещества для получения соединений формулы V можно получить так, как описано выше в случае получения исходных веществ для способа а). Если А представляет связь, альдегид можно получить из бромметильного соединения посредством бромирования и последующей трансформации в альдегид.

Реакцию присоединения-элимирования по способу с) удобно осуществлять в протонном органическом растворителе, таком как спирт, предпочтительно в присутствии подходящего неорганического основания, такого как водный раствор №1ОН, при комнатной температуре. Промежуточные соединения формулы VII можно получить способами, описанными в Сойеп,

8., е! а1., I. Атег. С1ет. 8ос., 1966, 88, 15331536, ЕР-А2-0496561, или в Ктпеу, №.А., е! а1., I. Меб. С1ет., 1992, 35, 4720-4726.

Промежуточные соединения общей формулы VI легко получить с помощью синтеза первичных аминов по Габриэлю, как описано в 8йеейап, 1.С., е! а1., I. Ат. С1ет. 8ос., 1950, 72, 2786-88. Исходные алкилгалогениды для этого синтеза удобно получать так, как это описано в отношении исходных веществ, используемых при способе а), см. выше.

Отщепление защитных групп удобно осуществлять с использованием водной кислоты или водного основания, предпочтительно 0,5 -8 N НС1 или водного 0,5-8 N раствора №1ОН, или при комнатной температуре, или при повышенных температурах.

При способе б) реакцию и последующие замыкание кольца и отщепление защитных групп осуществляют так, как описано в К1ппеу, №.А., е! а1., ЕР-А2-0496561.

Исходные вещества формулы VIII можно получить посредством взаимодействия, например, 4-бромметилизоксазола, полученного так, как это описано в отношении исходных веществ при способе а), с защищенным одной ВОСгруппой алкилендиамином, см. ЕР-А2-0496561.

Алкилирование соединений общей формулы IX по способу е) удобно осуществлять в инертном органическом растворителе, таком как подходящий спирт, кетон или диметилформамид, предпочтительно в присутствии подходящего основания, такого как гидрид натрия, карбонат калия или триэтиламин, как описано в Кшпеу, ^.А., ЕР-А2-0496561. Исходные вещества формулы IX можно получить по способу с).

При способе I) отщепление защитных групп от соединений общих формул XI и XII осуществляют так, как это описано при способе а), или с использованием раствора хлористоводородной кислоты в диэтиловом эфире, или другим способом отщепления защитной группы в неводной среде. Исходное вещество Х получают так, как это описано выше в отношении исходных веществ в способе а).

При способе д) этерификацию можно осуществлять способами, хорошо известными в технике, например, посредством обработки кислым раствором спирта. Исходные вещества получают по способу а)-е) или 11).

Расщепление соединений общей формулы I удобно осуществлять посредством образования диастереомерных солей с использованием оптически активных кислот или оснований, например, 1-фенилэтиламина. В некоторых случаях расщепление удобно осуществлять путем образования диастереомерных соединений и последующего разделения диастереомеров посредством флэш-хроматографии или кристаллизации. Некоторые диастереомеры можно удобно получать посредством асимметричного синтеза при использовании синтеза бислактимаминокислот по 8сйб11корГ. ср. способ й). При этом синтезе исходные вещества являются алкилгалогенидами, полученными так, как описано выше в случае исходных веществ для способа а). Защитная группа для 5карбоксиизоксазольной группы представляет предпочтительно 2-оксазолиновую группу, полученную из соответствующего 5цианоизоксазола (\УО 95/12587, А1) путем конденсации с аминоспиртом.

Соли соединений изобретения легко получают способами, хорошо известными в технике, т. е. посредством взаимодействия соединения или с эквивалентным количеством кислоты или основания в смешивающемся с водой растворителе, таком как ацетон или этанол, с выделением соли посредством концентрирования и охлаждения, или при реакции с избытком кислоты или основания в не смешивающемся с водой растворителе, таком как этиловый эфир или хлороформ, с непосредствнным выделением нужной соли. Эти соли можно также получить классическим способом двойного разложения соответствующих солей.

Соединения общей формулы I и их фармацевтически приемлемые соли присоединения кислот можно вводить любым подходящим способом, например, перорально или парентерально, и соединения могут находиться в любой подходящей для такого введения форме, например, в форме таблеток, капсул, порошков, сиропов или растворов или дисперсий для инъекции.

Эффективная суточная доза для соединения общей формулы I или его фармацевтически приемлемой соли составляет от 10 мкг/кг до 50 мг на кг массы тела.

Примеры

В дальнейшем изобретение поясняется с помощью примеров, которые не следует рассматривать как ограничивающие данное изобретение.

Все температуры плавления определяют на приборе 8МР-20, Висй1, и они являются нескорректированными. Спектры ¹Н ЯМР и ¹³С ЯМР регистрируют на спектрометре Вгискег, 250 МГц (250,13 МГц в случае ¹Н ЯМР и 62,90 МГц в случае ¹³С ЯМР) с использованием в качестве стандарта ТМС, если нет иных указаний.

Масс-спектры получают на системе М8М8 ОиаИго от УС Вю1есй, Екоик 1ик1гцтеик, соединенный с модульной системой ВЭЖХ НР 1050. В генератор рассеянных электронов с помощью автоматического пробоотборника со скоростью потока 30 мкл/мин вводят 20-50 мкл образца (10 мкг/мл), растворенного в смеси 1% уксусной кислоты в смеси ацетонитрила с водой (1:1) или в смеси ацетонитрила с водой и водным раствором аммиака (25%) (25:25:1) (цвиттерионы). Спектры регистрируют при стандартных условиях для получения информации о молекулярной массе (М+Н)⁺) или (М-Н). Фон вычитают.

Аналитическую ВЭЖХ осуществляют на колонке 150 х 4,6 мм, Ысйгосай 250-4 (Мегск), элюируют при 35°С метанолом с 0,01 М раствором ацетата аммония, рН 8 (3:2), со скоростью 1 мл/мин. Используемое оборудование составляют насос для ВЭЖХ Ь6200, колоночный термостат Й5025 и УФ-детектор У18 Й4000А (установленный на 230 нм). Чистоту диастетермеров, выраженную в виде избытка диастереомера (бе), вычисляют по площади пиков.

Анализ методом хиральной ВЭЖХ осуществляют на колонке 150 х 4,6 мм с 8ит1сЫга1 ОА-5000, элюируемой при температуре окружающей среды 5 мМ раствором Си8О₄ (водн.) со скоростью 1 мл/мин. Используемое оборудование составляют автоматический пробоотборник А8 2000, насос для ВЭЖХ Й6200, колоночный термостат Т6300, УФ-детектор У18 Й4250 (установленный на 240 нм) и устройство сопряжения с компьютером Ό 6000 - все от МегскНйасйт Чистоту энантиомеров, выраженную в виде избытка энантиомера (ее), вычисляют по площади пиков.

Пример 1.

Гидрат (К.8)-2-амино-3 -(5 -карбокси-3 метоксиизоксазол-4-ил)-пропионовой кислоты (соедин.1)

1) 3 -Г идрокси-4-метилизоксазол-5 -карбо новая кислота.

3-Этокси-4-метилизоксазол-5 -карбоновую кислоту (15 г, 88 ммоль) и 47% НВг (водн.) (150 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 6 ч. Раствор охлаждают и собирают фильтрацией кристаллическое, названное в заголовке соединение (8,7 г, 69%); т.пл. 257-259°С. К кислому фильтрату добавляют воду (100 мл) и экстрагируют диэтиловым эфиром (6 х 400 мл). Органические экстракты промывают рассолом (100 мл), сушат (Мд8О₄) и концентрируют в вакууме, и получают неочищенное целевое соединение (3,0 г, 24%). Общий выход составляет 93%. На последующей стадии используют смесь этих двух сборов.

2) Этил-3-гидрокси-4-метилизоксазол-5карбоксилат.

3-Гидрокси-4-метилизоксазол-5-карбоновую кислоту (6,0 г, 42 ммоль) и насыщенный раствор НС1 в ЕЮН (110 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 4 ч. Раствор концентрируют в вакууме, и остаток растворяют в ЕЮАс, сушат (Мд8О₄) и концентрируют в вакууме, и получают неочищенное названное в заголовке соединение (7,2 г, 100%). Небольшой образец перекристаллизовывают (ЕЮАс с гептаном), и получают бесцветное кристаллическое вещество; т.пл. 133-134°С. Неочищенный про дукт используют на последующей стадии без дополнительной очистки.

3) Этил-3 -метокси-4-метилизоксазол-5 карбоксилат.

Смесь этил-3 -гидрокси-4-метилизоксазол5-карбоксилата (1,0 г, 5,8 ммоль), йодистого метила (0,4 мл, 5,8 ммоль) и К₂СО₃ (1,6 г, 11,7 ммоль) в ДМФА (40 мл) греют при 40°С в течение 1 ч. Смесь выливают в смесь воды со льдом (100 мл) и экстрагируют диэтиловым эфиром (3 х 100 мл). Органические экстракты промывают водой (2 х 50 мл), рассолом (50 мл), сушат (Мд§О₄) и концентрируют в вакууме (0,8 г, 74%). Процедуру повторяют, чтобы получить сырой продукт, эквивалентный 17,5 ммоль исходного вещества, и подвергают его флэшхроматографии (силикагель, элюент - смесь дихлорметана с диэтиловым эфиром, 9:1), и получают неочищенное целевое соединение в виде желтого масла (1,4 г, 43%), которое используют на последующей стадии без дополнительной очистки.

4) Этил-4-(бромметил)-3-метоксиизоксазол5-карбоксилат.

Этил-3 -метокси-4-метилизоксазол-5карбоксилат (1,3 г, 7,0 ммоль), ΝΒ8 (Νбромсукцинимид) (1,4 г, 7,9 ммоль), дибензоилпероксид (каталитическое количество) и тетрахлорметан (40 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 10 ч. Смесь охлаждают, фильтруют и концентрируют в вакууме, и получают сырое целевое соединение в виде желтого масла (1,8 г, 97%). Неочищенный продукт используют на последующей стадии без дополнительной очистки.

5) Этил-2 -ацетамидо -2-(этоксикарбонил) 3-[5-(этоксикарбонил)-3-метоксиизоксазол-4ил] пропионат.

Смесь диэтилацетамидомалоната (1,6 г, 7,4 ммоль) и трет-бутоксида калия (0,9 г, 8,0 ммоль) в Ν-метилпирролидоне (30 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляют этил-4-(бромметил)-3-метоксиизоксазол-5-карбоксилат (1,8 г, 6,8 ммоль) в N метилпирролидоне (10 мл) (темп. 22-28°С), и получающуюся в результате смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Реакционную смесь выливают в смесь льда с водой (100 мл), и водную фазу экстрагируют ЕЮАс (3 х 150 мл). Органические экстракты промывают водным раствором третбутоксида калия, водой (100 мл) и рассолом (100 мл), сушат (Мд§О₄) и концентрируют в вакууме. После флэш-хроматографии (силикатель, элюент - смесь ЕЮАс с гептаном, 1:1) получают сырое целевое соединние (1,8 г, 66%). Небольшой образец перекристаллизовывают (ЕЮАс с гептаном), и получают бесцветное кристаллическое вещество; т.пл. 78-80°С. Сырой продукт используют на последующей стадии без дополнительной очистки.

6) Гидрат (К8)-2-амино-3-(5-карбокси-3метоксиизоксазол-4-ил)пропионовой кислоты (соед.1).

Суспензию этил-2-ацетамидо-2-(этоксикарбонил)-3-[5-(этоксикарбонил)-3-метоксиизоксазол-4-ил]пропионата (1,2 г, 3,0 ммоль) в 0,5 М НС1 (100 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 48 ч. Смесь охлаждают, промывают дихлорметаном (100 мл) и диэтиловым эфиром (2 х 100 мл), фильтруют и концентрируют в вакууме. Добавляют воду (5 мл) и доводят рН примерно до 3, добавляя раствор ΝαΟΗ (0,1 М и 1 М). Водную фазу уменьшают в объеме в вакууме (2 мл) и собирают выпавший осадок фильтрацией. Осадок перемешивают в воде (2 мл) при комнатной температуре в течение 24 ч, и после фильтрации получают соединение 1 (70 мг, 10%); т. пл. 222-225°С (разл.).

^!Н ЯМР (ДМСО-46) δ 2,88 (дд, 1Н); 3,01 (дд, 1Н); 3,85-3,96 (м, 1Н), 3,90 (с, 3Н). ¹³С ЯМР (ДМСО-46) 4 22,70, 52,38, 57,32, 103,25, 159,43, 165,95, 170,66 (2 С). М.-с. ((М+Н)⁺ т/е 231.

Элементный анализ: (С₈Н|₀©О₆-0.25Н_;О) вычислено: С-40,94; Н-4,51; N-11,94; найдено: С-41,01, Н-4,37, N-11,91.

Подобным образом получают перечисленные ниже соединения.

(Я8)-2-Амино-3-(5-карбокси-3-этоксиизоксазол-4-ил)-пропионовая кислота (соед.2).

Т.пл. 238-240°С (разл.).

¹Н ЯМР (ДМСО-46) 4 1,34 (т, 3Н); 2,90 (дд, 1Н); 3,03 (дд, 1Н); 3,96 (дд, 1Н), 4,23 (к, 2Н). ¹³С ЯМР (ДМСО-4б) δ 14,46, 22,41, 51,89, 65,63, 103,34, 159,22, 164,97, 169,75, 170,40. М.-с. (М+Н)⁺ т/е 245.

Элементный анализ: (С₉Н₁₂^О₆) вычислено: С-44,27; Н-4,95; N-11,47; найдено: С-44,10, Н-4,92, N-11,34. (Я8)-2-Амино-3-(5-карбокси-3изопропоксиизоксазол-4-ил)-пропионовая кислота (соед. 3).

Т.пл. 242-243°С (разл.).

^!Н ЯМР (ДМСО-46) 4 1,32 (дд, 6Н); 2,88 (дд, 1Н); 3,01 (дд, 1Н); 3,96 (дд, 1Н), 4,79 (г, 1Н). ¹³С ЯМР (ДМСО-46) δ 21,57, 21,77, 22,35, 51,82, 73,13, 103,56, 159,22, 164,91, 169,08, 170,36. М.с. ((М+Н)⁺) т/е 259.

Элементный анализ: (С₁₀Н₁₄^О₆) вычислено: С-46,51; Н-5,46; N-10,85; найдено: С-46,37, Н-5,46, N-10,83.

Гидрат (К8)-2-амино-3 -(5 -карбокси-3 гидроксиизоксазол-4-ил)пропионовой кислоты (соед. 4) Т. пл. 175-177°С.

¹Н ЯМР (ДМСО-46) δ 3,00 (д, 2Н); 3,88 (т, 1Н); ¹³С ЯМР (ДМСО 4₆) δ 23,07, 52,07, 105,84,

159,41, 162,11, 169,89, 170,78. М.-с. ( (М+Н)⁺) т/е 217.

Элементный анализ: (С-Н₈©О₆.0.25Н₂О) вычислено: С-38,10; Н-3,88; N-12,70; найдено: С-37,72, Н-3,98, N-12,52.

Пример 2.

Гидрат (К8) -2 -амино-3 -(5 -карбокси-2,3 дигидро-2-метил-3-оксоизоксазол-4-ил)пропионовой кислоты (соед. 5).

Этил-2,3-дигидро-2,4-диметил-3-оксоизоксазол-5 -карбоксилат.

Смесь этил-3 -гидрокси-4-метилизоксазол5-карбоксилата (2,0 г, 11,7 ммоль) и К₂СО₃ (4,0 г, 29 ммоль) в этаноле (50 мл) греют при 40°С в течение 26 ч. Через 1 ч добавляют йодистый метил (0,8 мл, 13 ммоль), и осуществляют добавление еще 3 раза в течение последующих 25 ч. Раствор фильтруют и уменьшают его объем в вакууме (согласно 'Н ЯМР, получают смесь целевого соединения и этил-3-метокси-4метилизоксазол-5 -карбоксилата, 1:1). Флэшхроматография (силикатель, элюент - смесь дихлорметана с диэтиловым эфиром, 9:1, затем 1:1) дает этил-3-метокси-4-метилизоксазол-5карбоксилат в виде желтого масла (0,40 г, 18%) и целевое соединение (0,45 г, 21%). Небольшой образец последнего вещества перекристаллизовывают (Е1ОАс/гептан), и получают бесцветное кристаллическое вещество с т.пл. 64-65°С. Сырое целевое соединение используют на последующей стадии без дополнительной очистки.

Гидрат (К8)-2-амино-3 -(5 -карбокси-2,3дигидро-2-метил-3-оксоизоксазол-4-ил) пропионовой кислоты (соед.5).

Названное в заголовке соединение получают способом, аналогичным способу, примера 1, стадии 2)-6), с использованием продукта, полученного выше на стадии 1) (70 мг, бесцветные кристаллы, 72%).

Т.пл. 211-212°С (разл.).

^!Н ЯМР (ДМСО-б6) δ 2,87 (дд, 1Н); 2,97 (дд, 1Н); 3,43 (с, 3Н), 3,92 (дд, 1Н). ¹³С ЯМР (ДМСО-б6) δ 23,10, 32,32, 51,79, 106,51, 158,59, 162,37, 166,64, 170,35. М.-с. ((М+Н)⁺) т/е 231.

Элементный анализ: (С₈Н1₀Ы₂О₆-0,25Н₂О) вычислено: С-40,94; Н-4,51; N-11,94;

найдено: С-40,93, Н-4,55, N-11,71.

Подобным образом получают соединение моногидрат (К8)-2-амино-3-(5-карбокси-2-этил2,3-дигидро-3-оксоизоксазол-4-ил)пропионовой кислоты (соед. 6).

^!Н ЯМР (Ό2Ο, 1,4-диоксан, б 3,70) δ 1,28 (т, 3Н); 3,19 (д, 2Н); 4,01 (к, 2Н); 4,18 (т, 1Н). ¹³С ЯМР (Ό2Ο, 1,4-диоксан, δ 67,40) 5 12,87, 23,85, 42,31, 53,27, 110,57, 159,88, 162,65, 166,67, 172,55. М.-с. (М+Н)⁺) т/е 245.

Элементный анализ: (09Ηι₂Ν₂0₆Ή₂0) вычислено: С-41,22; Н-5,38; N-10,68;

найдено: С-41,28, Н-4,74, N-10,27. Пример 3.

(8)-2-Амино-3-(5-карбокси-3-этоксиизоксазол-4-ил)пропионовая кислота (соед. (8)-2).

(К)-2-Амино -3-(5 -карбокси-3 -этоксиизо ксазол-4-ил)пропионовая кислота (соед. (К)-2).

1) 5-(4,5-Дигидро-4,4-диметил-1,3-оксазол2-ил)-3-этокси-4-метилизоксазол.

3-Этокси-4 -метилизоксазол-5 -карбонитрил (2,6 г, 7,1 ммоль), 5,4 М №ЮМе в МеОН (0,6 мл, 3,4 ммоль) и Е1ОН (80 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляют уксусную кислоту (2,2 мл, 39,3 ммоль) и 2-амино-2-метилпропан-1-ол (1,8 мл, 18,8 ммоль), и получающуюся в результате смесь кипятят с обратным холодильником в течение 20 ч. Реакционную смесь охлаждают, добавляют воду (100 мл) и экстрагируют ЕЮАс (3 х 100 мл). Органические экстракты промывают 1 М раствором ΝαΟΗ, рассолом, сушат (Мд8О₄) и упаривают в вакууме. Остаток растворяют в ЕЮН (60 мл), добавляют раствор КОН (1,8 г, 32 ммоль) в воде (12 мл), и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 20 ч. ЕЮН удаляют в вакууме, добавляют воду (80 мл), и водную фазу экстрагируют ЕЮАс (3 х 100 мл). Органические экстракты промывают рассолом, сушат (Мд8О₄) и упаривают в вакууме. Флэш-хроматография (силикагель, элюент ЕЮАс с гептаном и триэтиламином, 75:25:1) дает неочищенное целевое соединение в виде желтого масла (2,0 г, 52%).

2) 4 -(Бромметил) -5 -(4,5-дигидро -4,4диметил-1,3-оксазол-2-ил)-3-этоксиизоксазол.

5-(4,5-Дигидро-4,4-диметил-1,3-оксазол-2ил)-3-этокси-4-метилизоксазол (2,0 г, 8,9 ммоль), ΝΒ8 (1,75 г, 9,8 ммоль) и тетрахлорметан (150 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 5 ч. Смесь охлаждают, фильтруют и концентрируют в вакууме. Флэшхроматография (силикатель, элюент - толуол с ЕЮАс и триэтиламином, 100:10:1) дает целевое соединение в виде желтого масла (2,0 г, 74%).

3) (28,5К)-2,5-Дигидро-2-{ [5-(4,5-дигидро -

4,4-диметил-1,3-оксазол-2-ил)-3 -этоксиизоксазол-4-ил]метил}-5-изопропил-3,6-диметоксипиразин и (2К,5К)-2,5-дигидро-2-{[5-(4,5дигидро -4,4-диметил-1,3-оксазо л-2 -ил)-3этоксиизоксазол-4-ил]метил}5-изопропил-3,6диметоксипиразин.

К предварительно охлажденному (-78°С) раствору (2К)-(-)-2,5-дигидро-2-изопропил-3,6диметоксипиразина (0,5 мл, 2,8 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (8 мл) добавляют 1,6 М раствора бутиллития в гексане (1,9 мл, 3,0 ммоль). Продолжают перемешивание при -78°С в течение 10 мин, добавляют 4-(бромметил)-5(4,5-дигидро-4,4-диметил-1,3-оксазол-2-ил)-3этоксиизоксазол (0,85 г, 2,8 ммоль), растворенный в тетрагидрофуране (5 мл), и получающуюся в результате смесь перемешивают при -78°С в течение 4,5 ч. Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в диэтиловом эфире (40 мл) и выливают в смесь льда с водой (40 мл). Слои разделяют, и водную фазу экстрагируют диэтиловым эфиром (2х40 мл). Органические экстракты промывают рассолом, сушат (Мд8О₄) и концентрируют в вакууме. Флэшхроматография (силикагель, элюент - гептан с

ЕЮАс, 3:1) дает названное в заголовке (28,5В)соединение в виде желтого масла (0,65 г, 57%), йе = 99,2% (время удержания прибл. 38 мин). Дополнительное элюирование дает неочищенное целевое (2К,5К)-соединение в виде желтого масла (38 мг, 3%).

4) (2В,58)-2,5-Дигидро-2-{[5-(4,5-дигидро-

4.4- диметил-1,3-оксазол-2-ил)-3 -этоксиизоксазол-4-ил] метил}-5 -изопропил-3,6-диметоксипиразин и (28,58)-2,5-дигидро-2-{[5-(4,5-дигидро-

4.4- диметил-1,3-оксазол-2-ил)-3-этоксиизоксазол-4-ил] метил} -5 -изопропил-3,6-диметоксипиразин.

Целевые соединения получают с помощью процедуры, описанной выше на стадии 3), с использованием в качестве исходного вещества (28)-(+)-2,5-дигидро-2-изопропил-3,6диметоксипиразина. Флэш-хроматография (силикагель, элюент - гептан с ЕЮЛс. 3:1) дает названное в заголовке (2К,58)-соединение в виде желтого масла (0,8 г, 54%), йе > 99,2% (время удержания прибл. 38 мин). Дополнительное элюирование дает неочищенное целевое (28,58)-соединение в виде желтого масла (60 мг, 4%).

5) (8)-2-Амино-3-(5-карбокси-3 -этоксиизоксазол-4-ил)-пропионовая кислота (соед. (3)-2).

Суспензию (28,5В)-2,5-дигидро-2-{ [5-(4,5дигидро-4,4-диметил-1,3-оксазол-2-ил)-3этоксиизоксазол-4-ил]метил}-5-изопропил-3,6диметоксипиразина (0,6 г, 1,5 ммоль) в 1 М трифторуксусной кислоте (200 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 5 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме (2 мл), остаток растворяют в воде (50 мл) и промывают ЕЮАс (3 х 50 мл). Водную фазу фильтруют, упаривают в вакууме досуха, и остаток обрабатывают водой (10 мл). Осадок, который образуется, перемешивают при комнатной температуре в течение 24 ч, собирают посредством фильтрации и перекристаллизовывают (вода), и получают соединение (8)-2 в виде бесцветных кристаллов (0,12г, 33%); т.пл. 259-261°С (разл.); ее > 99% (время удержания прибл. 30 мин).

Ή ЯМР (ДМСО-й₆) δ 1,34 (т, 3Н); 2,90 (дд, 1Н); 3,03 (дд, 1Н); 3,96 (дд, 1Н); 4,23 (к, 2Н). М.с. ((М+Н)⁺) т/е 245.

Элементный анализ: (С₉Н₁₂Ы₂О₆) вычислено: С-44,27; Н-4,95; N-11,47; найдено: С-44,45, Н-4,96, N-11,46.

6) (В)-2-Амино-3 -(5 -карбокси-3-этоксиизоксазол-4-ил)-пропионовая кислота (соед. (К)-2).

К раствору (2В,58)-2,5-дигидро-2-{ [5-(4,5дигидро -4,4-диметил-1,3-оксазол-2 -ил)-3этоксиизоксазол-4-ил]метил}-5-изопропил-3,6диметоксипиразина (0,6 г, 1,5 ммоль) в МеОН (7 мл) при перемешивании добавляют 0,25 М НС1 (74 мл, 7,4 ммоль), и получающуюся в результате смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Доводят рН примерно до 7, добавляя водный раствор аммиака (0,5 М), и удаляют МеОН в вакууме. Доводят рН до 8-9, добавляя водный раствор аммиака (0,5 М), и водную фазу экстрагируют ЕЮАс (4х50 мл). Органические экстракты промывают рассолом, сушат (Мд8О₄) и концентрируют в вакууме. Остаток суспендируют в 1 М НС1, и смесь кипятят с обратным холодильником в течение 4,5 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме (2 мл), остаток растворяют в воде (50 мл) и промывают ЕЮАс (3х50 мл). Водную фазу фильтруют, упаривают в вакууме досуха, и остаток обрабатывают водой (10 мл). Осадок, который образовался, перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч, собирают посредством фильтрации и перекристаллизовывают (вода), и получают соединение (К)-2 в виде бесцветных кристаллов (0,13 г, 36%); т.пл. 258260°С (разл.); ее >99% (время удержания прибл. 50 мин.).

' Н ЯМР (ДМСО-йе) δ 1,34 (т, 3Н); 2,90 (дд, 1Н); 3,03 (дд, 1Н); 3,96 (дд, 1Н); 4,23 (к, 2Н). М.с. ((М+Н)⁺) т/е 245.

Элементный анализ: (С₉Н₁₂Ы₂О₆) вычислено: С-44,27; Н-4,95; N-11,47; найдено: С-44,56, Н-4,95, N-11,53. Пример 4.

Гидрат (КЯ)-2-амино-3-[3-этокси-5-(1Н-

1.2.4- триазол-3-ил)-изоксазол-4-ил]пропионовой кислоты (соед. 7).

№[( Диметиламино)метилиден]-3-этокси-4 метилизоксазол-5 -карбоксамид.

Раствор 3 -этокси-4-метилизоксазол-5 карбоксамида (3,5 г, 21 ммоль) в Ν,Νдиметилформамиддиметилацетале (15 мл) перемешивают при 1 20°С в течение 15 мин. После охлаждения собирают целевое соединение в виде бесцветного кристаллического вещества (4,2 г, 91%).

3-(3-Этокси-4-метилизоксазол-5-ил)-1Н-

1.2.4- триазол.

К раствору гидразингидрата (0,6 мл, 12,4 ммоль) в уксусной кислоте (15 мл) добавляют №[(диметиламино)метилиден] -3 -этокси-4метилизоксазол-5-карбоксамид (1,8 г, 8,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 90°С в течение 15 мин, и затем оставляют при комнатной температуре для кристаллизации, и получают чистое целевое соединение (1,2 г, 77%); т.пл. 194-196°С. Добавляют воду (40 мл), и водную фазу экстрагируют ЕЮАс (3 х 30 мл). Органические экстракты промывают рассолом, сушат (Мд8О₄) и концентрируют в вакууме, и получают неочищенное целевое соединение (0,3 г, 20%). Обе партии вещества объединяют.

3-(3-Этокси-4-метилизоксазол-5-ил)-1 тритил-1Н-1,2,4-триазол.

К 3-(3-этокси-4-метилизоксазол-5-ил)-1Н-

1.2.4- триазолу (1,1 г, 5,7 ммоль), триэтиламину (2,5 мл, 18 ммоль) и ДМФА (20 мл) добавляют тритилхлорид (1,6 г, 5,7 ммоль) в ДМФА (5 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 ч и выливают в смесь льда с водой (200 мл). Водную фазу экстрагируют ди этиловым эфиром (3 х 200 мл), и органические экстракты промывают водным раствором Ыа₂СО₃ (10%) (200 мл) и рассолом (200 мл). Раствор сушат (Να₂8Ο₄) и концентрируют в вакууме, и получают сырое целевое соединение (2,5 г). Небольшой образец кристаллизуют (ЕЮАс), и получают отдельный изомер в виде бесцветного кристаллического вещества; т.пл. 181-183°С. Сырое вещество используют на последующей стадии без дополнительной очистки.

3-[(4-Бромметил)-3 -этоксиизоксазол-5-ил]1-тритил-1Н-1,2,4-триазол.

Смесь 3-(3-этокси-4-метилизоксазол-5-ил)1-тритил-1Н-1,2,4-триазола (2,4 г, 5,5 ммоль) и ΝΒ8 (1,1 г, 6,2 ммоль) в тетрахлорметане (50 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждают, фильтруют и концентрируют в вакууме, и получают неочищенное соединение (2,8 г). Сырой продукт используют на последующей стадии без дополнительной очистки.

Этил-2-ацетамидо-3-[3 -этокси-5 -(1 -тритил1Н-1,2,4-триазол-3 -ил)изоксазол-4-ил] -2-(этоксикарбонил)пропионат.

Смесь диэтилацетамидомалоната (1,3 г, 6,0 ммоль) и трет-бутоксида калия (0,73 г, 6,5 ммоль) в Ν-метилпирролидоне (30 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляют 3-[(4-бромметил)-3этоксиизоксазол-5-ил]-1-тритил-1Н-1,2,4триазол (2,8 г, 5,4 ммоль) в Νметилпирролидоне (20 мл) (темп. 22-28°С), и получающуюся в результате смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь выливают в смесь льда с водой (250 мл), и водную фазу экстрагируют ЕЮАс (3 х 250 мл). Органические экстракты промывают водным раствором трет-бутоксида калия и рассолом, сушат (№₂8О₄) и концентрируют в вакууме. Флэш-хроматография (силикатель, элюент ЕЮАс с гептаном и триэтиламином, 50:50:2) дает соединение (2,2 г, 62%); т.пл. 145-149°С.

Гидрат (К8)-2-амино-3-[3 -этокси-5 -(1Н1,2,4-триазол-3-ил)-изоксазол-4-ил]пропионовой кислоты (соед. 7).

Суспензию этил-2-ацетамидо-3-[3 -этокси5-( 1 -тритил- 1Н-1,2,4-триазол-3 -ил)изоксазол-4ил]-2-(этоксикарбонил)пропионата (1,5 г, 2,3 ммоль) в 1 М НС1 (150 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 24 ч. Раствор охлаждают, промывают диэтиловым эфиром (2 х 150 мл) и дихлорметаном (150 мл), фильтруют и концентрируют в вакууме. Добавляют воду (5 мл), и доводят рН примерно до 3,5 путем добавления раствора МЮН (0,1 М и 1М), и посредством фильтрации получают соединение 7 (0,35 г, 56%).

Т.пл. 225-227°С (разл.).

'|| ЯМР (ДМСО-б₆) δ 1,38 (т, 3Н); 2,94 (дд, 1Н); 3,18 (дд, 1Н); 3,58 (дд, 1Н), 4,30 (к,2Н); 8,64 (с, 1Н). ¹³С ЯМР (ДМСО-бе) δ 14,52, 23,60, 53,30, 65,93, 104,25, 146,18, 150,87, 158,44, 169,47, 170,51. М.-с. ((М+Н)⁺) т/е 268.

Элементный анализ: (С1₀Н1₃№О₄-0,25Н₂О) вычислено: С-44,20; Н-5,01; N-25,77; найдено: С-44,42, Н-5,29, N-25,52.

Пример 5. (Я8)-2-Амино-3-[3-этокси-5-(5-тетразолил) изоксазол-4-ил]-пропионовая кислота (соед.8).

Целевое соединение получают из 2ацетамидо -3-[3 -этокси-5 -(тетразол-5 -ил) изоксазол-4-ил] -2-(этоксикарбонил)пропионата по способу, аналогичному способу, описанному в примере 4.

Пример 6.

(К8)-2-Амино-3 -(3-бензилокоси-5-карбоксиизоксазол-4-ил)-пропионовая кислота (соед. 9).

(К.8)-2-Амино-3-(5-карбокси-3-гидроксиизоксазол-4-ил)пропионовую кислоту (3,5 г, 11,8 ммоль) и раствор НС1 в этаноле (50 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 2,5 ч и упаривают в вакууме досуха. Получают этил-(Я8)-2-амино-3-(5-этоксикарбонил-3-гидроксиизоксазол-4-ил)пропионат (4,15 г, 100%). К раствору этил-(Я8)-2-амино-3-(5-этоксикарбонил-3-гидроксиизоксазол-4-ил) пропионата (4,15 г, 11,7 ммоль) в смеси воды и 1,4диоксана (1:1, 50 мл) добавляют смесь ди-третбутилдикарбоната (3,1 г, 14 ммоль), триэтиламина (3,8 г, 37 ммоль) и 1,4-диоксана (15 мл), и получающуюся в результате смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16

ч. Выпаривают 1,4-диоксан в вакууме, и водную фазу подкисляют разбавленной соляной кислотой. Водную фазу экстрагируют этилацетатом, и органические экстракты промывают водой, рассолом, сушат (Мд8О₄) и концентрируют в вакууме. Флэш-хроматография (8Ю₂, элюент гептан с этилацетатом и уксусной кислотой (1:1, 4%) дает этил-(Я8)-2-трет-бутоксикарбониламино-3-(5-этоксикарбонил-3-гидроксиизоксазол-4-ил)пропионат в виде масла (4,1 г, 92%).

Смесь этил-(Я8)-2-трет-бутоксикарбониламино-3-(5-этоксикарбонил-3-гидроксиизоксазол-4-ил)пропионата (3,2 г, 8,6 ммоль) и К₂СО₃ (2,4 г, 17,2 ммоль) в ацетоне (40 мл) нагревают до образования флегмы. Добавляют бензилбромид (2,2 г, 12,9 ммоль), и смесь кипятят с обратным холодильником в течение 1,5 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме, и подвергают остаток флэш-хроматографии (8Ю₂, элюент - гептан с этилацетатом, 2:1), и получают этил-(Я8)-2-[(трет-бутоксикарбонил) амино [-3 - [3 -бензилокси-5 -(этоксикарбонил)изо ксазол-4-ил]пропионат (1,64 г, 41%) и этил(Я8)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-(2бензил-5-этоксикарбонил-2,3-дигидро-3оксоизоксазол-4-ил)пропионат (0,7 г, 18%).

Смесь этил-(Я8)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино] -3-[3-бензилокси-5 -(этоксикарбонил) изоксазол-4-ил]пропионата (0,65мг, 1,4 ммоль) и 1 М раствора ЫаОН (50 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 16 ч. Смесь охлаждают (5°С), подкисляют разбавленной соляной кислотой и концентрируют в вакууме. Остаток перекристаллизовывают из воды и получают (К8) -2-амино-3 -(3 -бензилокси-5 -карбоксиизоксазол-4-ил) пропионовую кислоту (0,1 г, 23%).

Т.пл. 209-211°С (разл.).

¹Н ЯМР (ДМСО-бе) δ 2,95 (дд 1Н); 3,05 (дд, 1Н); 3,99 (т, 1Н), 5,26 (с, 2Н); 7,31-7,52 (м, 5Н). М.-с. ((М+Н)⁺) т.е 307.

Элементный анализ:

вычислено: С-54,89; Н-4,62; N-9,15; найдено: С-54,31, Н-4,56, N-8,97. Подобным образом получают перечисленные ниже соединения.

(К8)-2-Амино-3 -(3 -пропокси-5-карбоксиизоксазол-4-ил)-пропионовая кислота (соед. 10).

Т.пл. 250-251°С (разл.).

1Н ЯМР (Э₂О, диоксан, 1 М №1ОЭ) б 0,95 (т, 3Н); 1,76 (сп, 2Н); 2,78 (дд, 1Н); 2,90 (дд, 1Н); 3,42 (дд, 1Н), 4,17 (т, 2Н). ¹³С ЯМР б 12,3, 24,4,

29,8, 58,3, 74,9, 111,5, 164,3, 166,6, 173,9, 184,8. М.-с. ((М+Н)⁺) т/е 259.

Элементный анализ:

вычислено: С-46,51; Н-5,46; N-10,85; найдено: С-46,43, Н-5,41, N-10,54. (К8)-2-Амино-3 -(3 -бутокси-5-карбоксиизоксазол-4-ил)-пропионовая кислота (соед. 11).

Т.пл. 238-240°С (разл.).

¹Н ЯМР (Э₂О, диоксан, 1М №1ОЭ) б 0,95 (т, 3Н); 1,43 (сп, 2Н); 1,76 (кв, 2Н); 2,8 (дд, 1Н);

2,91 (дд, 1Н); 3,44 (дд, 1Н), 4,25 (т, 2Н). ¹³С ЯМР (Э₂О, диоксан, 1М №ОЭ) б 13,79, 19,30, 27,90, 31,03, 56,39, 71,27, 109,65, 162,39, 164,72, 172,02, 189,92. М.-с. ((М+Н)⁺) т/е 273.

Элементный анализ:

вычислено: С-48,53; Н-5,92; N-10,29; найдено: С-48,80; Н-5,99, N-10,34. (К8)-2-Амино-3 -(3 -аллилокси-5-карбоксиизоксазол-4-ил)-пропионовая кислота (соед. 12).

Т.пл. 239-240°С (разл.).

Ή ЯМР (ДМСО-б₆) б 2,93 (дд, 1Н); 3,06 (дд, 1Н); 3,99 (дд, 1Н), 4,73 (д,2Н); 5,29 (дд, 1Н); 5,44 (дд, 1Н); 6,05 (дк, 1Н).

Также подобным образом можно получить (К8)2-амино-3-[3-(транс-2-бутенокси) -5карбоксиизоксазол-4-ил]пропионовую кислоту и (К8)-2-амино-3-[3-(3-метил-2-бутенокси)-5карбоксиизоксазол-4-ил]пропионовую кислоту.

Пример 7.

Моногидрат гидрохлорида (К8)-2-амино-3(2-бензил-5-карбокси-2,3-дигидро-3-оксоизоксазол-4-ил)пропионовой кислоты (соед.13).

Смесь этил-(К8)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино] -3 -(2-бензил-5 -этоксикарбонил-2,3 дигидро-3 -оксоизоксазол-4-ил)пропионата (0,9 г, 1,9 ммоль) и 1М НС1 кипятят с обратным холодильником в течение 5 ч. Смесь упаривают в вакууме досуха (0,56 г, 80%).

Т.пл. 146-148°С (разл.).

'11 ЯМР (ДМСО-66) δ 3,08 (дд, 1Н); 3,19 (дд,1Н), 4,17 (ушс, 1Н); 5,16 (с, 2Н); 7,24-7,45 (м, 5Н). М.-с. ((М+Н)⁺) т/е 307.

Элементный анализ:

вычислено: С-46,60; Н-4,76; N-7,77; найдено: С-46,88, Н-4,81, N-7,96.

Пример 8.

Гидрохлорид бензил-(К8)-2-амино-3-(5бензилоксикарбонил-3-этоксиизоксазол-4-ил) пропионата (соед. 14).

Смесь ди-трет-бутилдикарбоната (1,1 г, 4,9 ммоль), NаНСОз (1,1 г, 13 ммоль) и 1,4-диоксана (3 мл) добавляют к раствору (К8)-2-амино-3-(5карбокси-3-этоксиизоксазол-4-ил)пропионовой кислоты (1,0 г, 4,1 ммоль) в смеси воды с 1,4диоксаном (1:1, 10 мл) и получающуюся в результате смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч. Испаряют 1,4диоксан в вакууме, и подкисляют водную фазу разбавленной соляной кислотой. Водную фазу экстрагируют этилацетатом, и органические экстракты промывают водой и рассолом, сушат (Мд8О₄), концентрируют в вакууме и подвергают флэш-хроматографии (81О₂, элюент - этилацетат с этанолом и уксусной кислотой (3:1, 4%). Получают (К8)-2-[(трет-бутоксикарбонил) амино] -3 -(5-карбокси-3 -этоксиизоксазол-4ил)пропионовую кислоту (1,4 г, 100%).

К смеси (К8)-2-[(трет-бутоксикарбонил) амино] -3 -(5-карбокси-3 -этоксиизоксазол-4-ил) пропионовой кислоты (1,4 г, 4,1 ммоль) и бензилбромида (1,4 г, 8,2 ммоль) в смеси бензола с тетрагидрофураном (4:1) добавляют 1,8диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен (1,3 г, 8,6 ммоль), и получающуюся в результате смесь кипятят с обратным холодильником в течение 3 ч. Смесь фильтруют и упаривают в вакууме. Флэш-хроматография (81О₂, элюэнт - этилацетат с гептаном (1:3) дает бензил-(К8)-2-[(третбутоксикарбонил)амино]-3-(5-бензилоксикарбонил-3-этоксиизоксазол-4-ил)пропионат в виде масла (1,9 г, 86%).

Смесь бензил-(К8)-2-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-(5-бензилоксикарбонил-3-этоксиизоксазол-4-ил)пропионата (1,9 г, 3,6 ммоль) и насыщенного раствора НС1 в диэтиловом эфире (40 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 2 ч. Образовавшиеся кристаллы собирают фильтрацией, перемешивают с этилацетатом и собирают фильтрацией (0,53 г, 32%).

Т.пл. 142-144°С.

'11 ЯМР (ДМСО-бе) δ 1,32 (т, 3Н); 3,17 (дд, 1Н); 3,25 (дд, 1Н), 4,17-4,32 (м, 3Н); 5,09 (дд, 2Н); 5,39 (с, 2Н); 7,24-7,53 (м, 10Н). М.-с. ((М+Н)⁺) т/е 425.

Элементный анализ:

вычислено: С-59,93; Н-5,48; N-6,08; найдено: С-59,70; Н-5,49; N-6,26.

Пример 9.

Оксалат этил-(В8)-2-амино-3-(3-этокси-5этоксикарбонилизоксазол-4-ил)пропионата (соед. 5).

Смесь (В8)-2-амино-3-(5-карбокси-3-этоксиизоксазол-4-ил)-пропионовой кислоты (2,0 г, 8,2 ммоль) и раствора НС1 в этаноле (35 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 3 ч, и получают этил-(В8)-2-амино-3-(5-карбокси-3этоксиизоксазол-4-ил)пропионат. Этил-(В8)-2амино-3 -(5-карбокси-3-этоксиизо-ксазол-4ил)пропионат (0,6 г) добавляют к разбавленному раствору ΝαΟΗ, и водную фазу экстрагируют этилацетатом. Органические экстракты промывают рассолом, сушат (Мд80₄), фильтруют и упаривают досуха в вакууме. Остаток растворяют в ацетоне (6 мл), и добавляют раствор щавелевой кислоты (0,14 г, 1,6 ммоль) в ацетоне (6 мл), и образовавшийся осадок собирают фильтрацией (110 мг, 10%).

Т.пл. 159-161°С.

Ή ЯМР (ДМСО-б₆) δ 1,11 (т, 3Н); 1,32 (т, 3Н); 1,36 (т, 3Н); 3,02 (дд, 1Н); 3,11 (дд, 1Н), 3,98-4,16 (м, 3Н); 4,32 (к, 2Н); 4,37 (к, 2Н). М.-с. ((М+Н)⁺) т/е 301.

Элементный анализ:

вычислено: С-46,15; Н-5,69; N-7,18; найдено: С-46,38, Н-5,69; N-7,36.

Пример 10.

Оксалат бутил-(В8)-2-амино-3-(5-бутоксикарбонил-3-этоксиизоксазол-4-ил) пропионата (соед. 16).

Соединение получают способом, подобным способу, описанному в примере 9, с использованием раствора НС1 в бутаноле.

Т.пл. 120-121°С.

Ή ЯМР (ДМСО-б₆) δ 0,84 (т, 3Н); 0,92 (т, 3Н); 1,14-1,31 (м, 2Н); 1,31-1,51 (м, 4Н); 1,37 (т, 3Н); 1,62-1,75 (м, 2Н); 3,01 (дд, 1Н); 3,13 (дд, 1Н), 3,98-4,09 (м, 3Н); 4,16-4,36 (м, 4Н). М.-с. ((М+Н)⁺) т/е 357.

Элементный анализ:

вычислено: С-51,11; Н-6,79; N-6,28; найдено: С-51,06, Н-6,82, N-6,35.

Пример 11.

[4-(2-Амино-3,4-диоксоциклобут-1 -ен-1 ил)аминометил] -3 -этоксиизоксазол-5 -карбоновая кислота (соед. 17).

Этил-3-этокси-4-метилизоксазол-5-карбоксилат.

Ацетилхлорид (25 мл, 0,35 ммоль) при 0°С добавляют к ЕЮН (250 мл), и раствор перемешивают при 0°С в течение 20 мин. Добавляют раствор 3 -этокси-4-метилизоксазол-5 карбоновой кислоты (XVΟ 95/12587, А1) (18 г, 0,10 моль) в Е10Н (20 мл), и получающуюся в результате смесь кипятят с обратным холодильником в течение 4 ч. Смесь охлаждают, добавляют раствор ЫаНСОз (200 мл) и экстрагируют диэтиловым эфиром (3 х 300 мл). Органические экстракты сушат (Мд80₄) и концентрируют в вакууме, и получают неочищенное соединение (18г, 86%).

Этил-4 -бромметил-3 -этоксиизоксазол-5 карбоксилат.

Этил-3-этокси-4-метилизоксазол-5-карбоксилат (18 г, 91 ммоль), N88 (17,5 г, 100 ммоль), дибензоилпероксид (1 г, 4,1 ммоль) в тетрахлорметане (500 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 16 ч. Смесь охлаждают, фильтруют и концентрируют в вакууме, и получают названное в заголовке неочищенное соединение (24,5 г, 97%).

Этил-3-этокси-4-фталимидометилизоксазол-5-карбоксилат.

Раствор этил-4-бромметил-3-этоксиизоксазол-5-карбоксилата (5 г, 17,9 ммоль) в ДМФА (85 мл) добавляют при 90°С к суспензии фталимида калия (3,6 г, 19,7 ммоль) в ДМФА (125 мл). Получающуюся в результате смесь перемешивают при 90°С в течение 40 мин, затем охлаждают и концентрируют в вакууме. Добавляют воду (250 мл), и водную фазу экстрагируют диэтиловым эфиром (2 х 200 мл). Органические экстракты сушат (Мд80₄) и концентрируют в вакууме, и получают сырой продукт реакции, который перекристаллизовывают (Е10Н), и получают целевое соединение (3,70 г, 60%); т.пл. 93-94°С.

Г идрохлорид 4-аминометил-3 -этоксиизоксазол-5-карбоновой кислоты.

Раствор этил-3 -этокси-4-фталимидометилизоксазол-5-карбоксилата в 1 М растворе №ЮН кипятят с обратным холодильником в течение 45 мин. Смесь охлаждают, добавляют концентрированную НС1 и экстрагируют диэтиловым эфиром (3 х 400 мл). Органические экстракты концентрируют в вакууме, добавляют 1 М НС1 (600 мл), и кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч. После охлаждения смесь промывают диэтиловым эфиром (3 х 600 мл) и концентрируют в вакууме, и получают сырой продукт реакции, который перекристаллизовывают (уксусная кислота) и получают соединение (1,5 г, 82%); т.пл. 215-216°С (разл.).

[4-(2-Амино-3,4-диоксоциклобут-1 -ен-1 ил)аминометил] -3 -этоксиизоксазол-5 -карбо новая кислота.

К раствору гидрохлорида 4-аминометил-3этоксиизоксазол-5-карбоновой кислоты (1,2 г, 5,4 ммоль) и 3-амино-4-этоксициклобут-3-ен1,2-диона (0,60 г, 5,9 ммоль) в ЕЮН (300 мл) добавляют 1 М раствор №0Н (12 мл). Получающуюся в результате суспензию перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч, затем концентрируют в вакууме, добавляют воду (100 мл) и промывают ЕЮАс (2 х 100 мл). Доводят рН примерно до 3, добавляя 1 М НС1. Выпавший осадок отфильтровывают и перекристаллизовывают (вода), и получают целевое соединение в виде желтого порошка (0,71 г, 47%).

Т.пл. 236-238°С (разл.).

Ή ЯМР (ДМСО-б₆) б 1,30 (т, 3Н); 4,22 (к, 2Н); 4,68 (ушс, 2Н). ¹³С ЯМР (ДМСО-б₆) δ 14,41,

35,27, 65,54, 107,16, 159,14, 163,54, 168,71, 169,15, 169,73, 183,20, 183,34. М.-с. ((М+Н)⁺) т/е 282.

Элементный анализ: (СпН^зО^^НЮ) вычислено: С-41,06; Н-4,86; N-13,06; найдено: С-41,16, Н-4,46, N-12,96.

Фармакология

Соединения изобретения испытывают перечисленными ниже вполне признанными и заслуживающими доверия методами.

Связывание [³Η] АМРА.

При этом испытании путем измерения способности к вытесению [³Н]АМРА из АМРАрецепторов определяют аффинность лекарственного средства к АМРА-рецепторам.

Испытание проводят по модифицированному варианту метода Нопоге, Т., апб Мекеп, М., №иго8сг Ьей., 1985, 54, 27-32. Испытание проводят в присутствии К8С.'№ Это означает, что помечаются только места связывания с высоким сродством к [³Н]АМРА.

Используемые мембранные препараты получают по методу Капкот, К.^., апб 8!ес., I. №игосйет., 1988, 51, 830-836.

Модель кортикального клина.

Модель кортикального клина представляет испытание, при котором срезы головного мозга крысы исследуют т уйго, чтобы количественно определить действие лигандов на различные С1и-рецепторы и оценить фармакологический профиль лигандов (т.е., соотношение агонистических и антагонистических свойств). Испытание проводят так, как описано в Напкоп, №Ь., апб 81ттопб§, М.А., Вг. I. Рйагтасо1., 1985, 84, 381-391, в измененном варианте по ^йеа!1еу, Р.Ь., Вг. I. Рйагтасо1., 1986, 87, 159Р.

Таблица 1

Кортикальный клин

Соеди- нение	Профиль	ЕС50, мкМ	рК1	Подтип рецептора
1	Агонист	1,2		АМРА
2	Агонист	4,8		АМРА
(8)-2	Агонист	4,4		АМРА
(К)-2	Антагонист		3,28	АМРА
3	Агонист	40,0		АМРА
8	Агонист	2000		АМРА
10	Агонист	80		АМРА
11	Част.агонист	325		АМРА
12	Агонист	40		АМРА
13	Антагонист		3,5	ММЭА
17	Антагонист		3,3	ММЭА

Результаты

Обнаружено, что данные соединения являются лигандами рецепторов для возбудительных аминокислот (ЕАА). Обнаружено, что некоторые из этих соединений являются агонистами рецепторов для АМРА, а другие соединения являются селективными антагонистами

АМРА- или ΝΜΌΑ-рецепторов. Соединения показывают активность в микромолярном интервале.

Примеры композиций

Фармацевтические композиции данного изобретения можно получить традиционными в технике способами.

Например, таблетки можно получить посредством смешивания активного ингредиента с обычными адъювантами и/или разбавителями и последующего прессования смеси в обычной таблетирующей машине. Примерами адъювантов или разбавителей являются кукурузный крахмал, лактоза, тальк, стеарат магния, желатин, лактоза, смолы и подобные вещества. Можно использовать любой другой адъювант или добавку - красители, ароматизаторы, консерванты и т.п., при условии, что они совместимы с активными ингредиентами.

Растворы для инъекций можно получить путем растворения активного ингредиента и приемлемых добавок в части носителя, предпочтительно - стерильной воде, доведения раствора до нужного объема, стерилизации раствора и наполнения подходящих ампул или флаконов. Можно добавить любую подходящую добавку, обычно применяемую в технике, такую как агенты токсичности, консерванты, антиоксиданты и т. п.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Производное (3-алкоксиизоксазол-4ил)замещенной 2-аминокарбоновой кислоты или его серосодержащий аналог общей формулы I или II где Κι представляет водород, С1_-6-алкил, С_2-6алкенил, С_2-6-алкинил, циклоалк(ен)ил, циклоалк(ен)ил-С1_-6-алк(ен/ин)ил или фенил-С_£-6алк(ен/ин)ил, причем фенильная группа необязательно замещена СР₃, галогеном, С1_-6-алкилом или С1_-6-алкокси;

А представляет связь или спейсер, выбранный из С1_-6-алкилена, С_2-6-алкенилена или С2-6-алкинилена и циклоалкилена;

В представляет группу -СК_а(ХН_ьК_с)СООК₅, где К_а-К независимо представляют собой водород или С1_-6-алкил и К₅ имеет те же значения, что и или представляет пивалоилоксиметил, или В представляет группу формулы III

К» ^к2 ш где К₂, К₃ и К₄ выбирают независимо из группы, состоящей из

a) водорода, С1.б-алкила, С₂.б-алкенила, С₂₆-алкинила, циклоалк(ен)ила, циклоалк(ен)илС_1-6-алк(ен/ин)ила, фенил-С_1-6-алкила, тиенилС1.6-алкила, и

b) С_1-6-алкила, С₂.₆-алкенила и С_2-6алкинила, в которых один или несколько атомов углерода заменены на Ν, О и/или 8, или

В₃ и В₄ соединяются, образуя в результате С_2-6-алкиленовую, С₂-₆-алкениленовую или С_2-6алкиниленовую группы; или

В₄ и К₂ соединяются с образованием С_1-3алкиленовой, С_2-3-алкениленовой или С_2-3алкиниленовой группы, необязательно моноили дизамещенной гидрокси или метилом, или с образованием групп СН₂-О-СН₂;

Е представляет СООВ₆, где Кб имеет те же значения, что и К₅;

Х представляет О или 8;

Υ представляет О или 8;

и его фармацевтически приемлемая соль.
2. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что имеет формулу I.
3. Соединение по п. 1 , отличающееся тем, что имеет формулу II.
4. Соединение по любому из пп. 1-3, где Е представляет группу СООК₆, где К₆ не является водородом, а предпочтительно К₆ представляет С_1-6-алкил, фенил-С_1-6-алк(ен/ин)ил или пивалоилоксиметил.
5. Соединение по любому из пп. 1-3, где Е представляет СО-ОН.
6. Соединение по любому из пп. 1-5, где В представляет группу формулы -СК._а(КК_ЬК.)СООК.5.
7. Соединение по п.6, где В_Ь и Вс представляют водород, а К, представляет водород или С1-6-алкил, предпочтительно водород или метил.
8. Соединение по п.6 или 7, где В₅ представляет водород.
9. Соединение по п.6 или 7, где В₅ не является водородом, а предпочтительно В₅ представляет С_1-6-алкил, фенил-С_1-6-алк(ен/ин)ил или пивалоилоксиметил.
10. Соединение по любому из пп. 1-5, где В представляет группу формулы III.
11. Соединение по п. 10, где В₂, В₃ и К₄представляют водород или С_1-6-алкил, или К₄ и В₂ соединяются с образованием С_1-3алкиленовой группы.
12. Соединение по п. 11, где каждый из В₂, В₃ и В₄ представляет водород.
13. Соединение по любому из пп. 1-12, где Х представляет кислород.
14. Соединение по любому из пп. 1-12, где Х представляет серу.
15. Соединение по любому из пп. 1-14, где Υ представляет кислород.
16. Соединение по любому из пп. 1-14, где Υ представляет серу.
17. Соединение по любому из пп. 1-16, где К представляет С_1-6-алкил, С_2-6-алкенил или С_2-6алкинил, предпочтительно метил, этил, пропил или пропаргил.
18. Соединение по любому из пп.1-17, где А представляет связь или С_1-3-алкилен, предпочтительно метилен.
19. Соединение по п.2, где А представляет связь или С_1-3-алкилен, В представляет группу формулы -СН(NΗ₂)-СООΗ или группу формулы III, где каждый из В₃, В₄ и В₂ представляет водород, Х и Υ оба представляют кислород и В₁представляет С_1-6-алкил, С_2-6-алкенил или С_2-6алкинил, предпочтительно метил, этил, пропил или пропаргил.
20. Фармацевтическая композиция, отличающаяся тем, что включает соединение по любому из пп. 1-19 вместе с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем.
21. Применение соединения по любому из пп.1-20 для получения фармацевтической композиции для лечения церебральной ишемии, болезни Гентингтона, эпилептических нарушений, болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, шизофрении, боли, депрессии или страха.