DK171369B1 - Biologisk ren kultur af en stamme af Lactobacillus acidophilus, fremgangsmåde til isolering af en sådan kultur og terapeutisk præparat indeholdende denne - Google Patents
Biologisk ren kultur af en stamme af Lactobacillus acidophilus, fremgangsmåde til isolering af en sådan kultur og terapeutisk præparat indeholdende denne Download PDFInfo
- Publication number
- DK171369B1 DK171369B1 DK170186A DK170186A DK171369B1 DK 171369 B1 DK171369 B1 DK 171369B1 DK 170186 A DK170186 A DK 170186A DK 170186 A DK170186 A DK 170186A DK 171369 B1 DK171369 B1 DK 171369B1
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- bacteria
- strain
- acidophilus
- cell
- cells
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/12—Antidiarrhoeals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/225—Lactobacillus
- C12R2001/23—Lactobacillus acidophilus
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/853—Lactobacillus
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/853—Lactobacillus
- Y10S435/854—Lactobacillus acidophilus
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Dairy Products (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
DK 171369 B1
Opfindelsen angår en terapeutisk virksom bakteriestamme, nemlig en stamme af Lactobacillus acidophilus, en fremgangsmåde til isolering af en sådan stamme samt farmaceutisk præparat indeholdende denne.
5 L. acidophilus er en bestanddel af den normale tarmflora hos de fleste raske mennesker. Slægten Lactobacillus er vidt udbredt i naturen. Mange arter som f.eks. L. bulgari-cus og L. casei findes i mejeriprodukter såvel som i frugter og grøntsager. Andre Lactobacillus arter findes i pat-10 tedyrs og insekters tarm. Igennem mange århundreder er Lactobaciller blevet anvendt i mælke- og mejeriprodukter som forgæringsorganismer til fremstilling af yoghurt og forskellige typer fermenterede og syrnede mælkeprodukter, surmælksprodukter og flødetyper. Den art Lactobacillus, 15 der anvendes inden for mejeriindustrien, er sædvanligvis L. bulgaricus, skønt L. acidophilus stammer ret ofte også er blevet anvendt.
I de senere år er en række undersøgelser blevet udført under anvendelse af L. acidophilus stammer isoleret på North 20 Carolina State University ("NCSU"). Disse undersøgelser har vist, at NCSU stammerne, når de indtages af mennesker eller dyr, har gavnlig virkning på forskellige funktioner i mave-tarmkanalen, herunder undertrykkelse af aktivering af kemiske carcinogener i tyktarmen, en reduktion af fækal 25 udskillelse af cholesterol (der står i forbindelse med en reduceret risiko for tyktarmscancer) og en reduktion af gastrointestinale bivirkninger ved antibiotisk terapi.
Den foreliggende opfindelse tilvejebringer en hidtil ukendt L. acidophilus stamme, der udviser en række egen-30 skaber, der gør den nyttig for mennesker og specielt gør den værdifulde ved behandlingen af bivirkninger ved antibiotisk terapi, ulcerativ colitis og forstoppelse; som bi- DK 171369 B1 2 bringer resistens mod kolonisering af patogene mikroorganismer og gær i mavetarmkanalen; som reducerer choleste-roludskillelsen med fæces, og som reducerer østrogenudskillelse med fæces.
5 L. acidophilus stammen ifølge opfindelsen er ejendommelig ved det i krav l's kendetegnende del angivne. Lactobacil-lusstammen ifølge opfindelsen er i overensstemmelse med Budapesttraktatens bestemmelser deponeret i American Type Culture Collection under nummeret 53103.
10 Den omhandlede stamme adskiller sig overraskende væsentligt fra andre hidtil kendte Lactobacillus arter. Undersøgelser af forgæringen af forskellige sukkerarter med mikroorganismen ifølge opfindelsen (tabel 1 nedenfor) indicerer, at denne Lactobacillus stamme er en atypisk stamme 15 af Lactobacillus casei subspecies rhamnosus. Den er atypisk, fordi den ikke forgærer lactose, og fordi den kun langsomt (efter 5 dages inkubation) forgærer rhamnose, maltose, saccharose og inositol. Typiske L. casei subspecies rhamnosus forgærer disse sukkerarter (Collins. M.D.
20 Phillips B.A og Zanomi P (1989) Int. J. Syst. Bact. 39(2) 105-108).
DK 171369 B1 3
Tabel 1. Forgæring af kulhydrater af Lactobacillus GG [ATCC
53103] (APT 50 CHI, Bio Mérieux, France)_
Kulhydrat_Forgæring_Kulhydrat_Forgæring_ D-Arabinose +++ Glycerol
Ribose + Erythritol
Galactose +++ L-Arabinose D-Glucose +++ D-Xylose D-Fructose +++ L-Xylose D-Mannose +++ Adonitrol
Rhamnose + p-Methyl-xylosid
Dulcitol +++ L-Sorbose
Inositol + ot-Methyl-D-
Mannitol +++ mannosid
Sorbitol +++ a-Methyl-D- N-Acetyl glycosid
Glucosamin +++ Lactose
Amygdalin ++ Melibiose
Arbutin ++ Inulin
Esculine +++ D-Raffinose
Salicine +++ Amidon
Cellobiose +++ Glycogen
Maltose + Xylitol
Saccharose + D-Turanose
Trehalose +++ D-Lyxose
Melezitose ++ D-Fucose β-Gentiobiose ++ D-Arabitol
Tagatose +++ L-Arabitol L-Fucose +++ 2-Ceto-gluconat
Gluconat_+++_5-Ceto-gluconat_- _ +++ Forgæring i løbet af 1 dag ++ Forgæring i løbet af 2 dage + Forgæring i løbet af 5 dage DK 171369 B1 4
Yderligere undersøgelser af mikroorganismestammen ifølge opfindelsen under anvendelse af direkte sekvensering af et enzymatisk forstærket 1,5 kb segment af 16S rRNA genet har bekræftet, at stammen er forskellig fra hidtil kendte 5 stammer (i trykken: Chassy B. Clinical Infektions Diseases (ca. marts 1996).
Opfindelsen tilvejebringer også en fremgangsmåde til isolering af den omhandlede stamme fra en prøve indeholdende en hel række forskellige bakteriestammer, hvilken frem-10 gangsmåde er ejendommelig ved det i krav 3's kendetegnende del angivne.
Derudover angår opfindelsen terapeutiske præparater til behandling af gastrointestinale bivirkninger ved antibiotikaterapi, ulcerativ collitis og forstoppelse, hvilke 15 præparater er ejendommelige ved det i henholdsvis krav 4, 5 og 6 angivne.
Opfindelsen forklares nærmere i det følgende.
Raske mennesker bærer bakterier af arten L. acidophilus som en del af deres normale flora, sædvanligvis i koncen-20 trationer på ca. 109 lactobaciller pr. gram tarmindhold; således har et rask menneske over 1011 lactobaciller i sin tarmkanal. Det første trin ved fremgangsmåden er at undersøge prøver af fæces fra mennesker og udvælge de, hvori der er høje koncentrationer af lactobaciller. 1
Herefter undersøges disse prøver under anvendelse af en metode, der er udformet til at isolere stammer, der udviser de egenskaber, der er omtalt tidligere, og som kort kan opsummeres således: DK 171369 B1 5 (1) Stabilitet over for syre (2) Stabilitet over for galde (en egenskab der forud er identificeret som ønskelig af Department of Food Science, North Carolina State University) 5 (3) Evnen til at klæbe kraftigt til slimhindeceller fra menneskets tarmkanal (4) Mælkesyreproduktion (5) Kraftig in vitro vækst
Undersøgelse af stabiliteten over for galde og af stabili-10 tet over for et forholdsvist surt miljø udføres på følgende måde. LBS agar (beskrevet i J. Bacteriol. (1951) 62.
132) fremstilles, idet agaren har følgende sammensætning pr. liter:
Tripticase og pepton 10,0 g Gærekstrakt 5,0 g
Ammoniumcitrat 2,0 g
Monokaliumphosphat 6,0 g
Dextrose 20,0 g
Polysorbat PO4 1,0 g
Natriumacetathydrat 25,0 g
Magnesiumsulfat 0,575 g
Mangansulfat 0,12 g
Ferrosulfat 0,034 g
Agar 15,0 g 15 Til 84 g pulver af ovennævnte sammensætning, dehydratise-ret, sættes 300 ml tomatsaft og 800 ml destilleret vand og, efter blanding, 1,32 ml eddikesyre. 1,5 g oksegalde tilsættes herefter, og pH indstilles til 5,5 under anvendelse af IN HC1. Plader lagres i et anaerobt rum 1-3 dage inden DK 171369 B1 6 anvendelsen og anvendes herefter uden autoklavering. Prøver af fæces fra raske individer homogeniseres i vand under anaerobe betingelser og inkuberes som rækkefortyndinger på plader i 48 timer i et anaerobt kammer. De bakteri-5 er, der formerer sig på pladerne, udvælges og undersøges yderligere. Dette trin eliminerer mange af mikroorganismerne i prøven.
Undersøgelse af stabilitet over for mere sure betingelser udføres under anvendelse af MRS bouillon (Difco; beskrevet 10 i J. Applied Bacteriol. (1960) 22, 130) med følgende sammensætning:
Bacto-Protease Pepton nr. 3 10,0 g
Bacto-Kødekstrakt 10,0 g
Bacto-Gærekstrakt 5,0 g
Dextrose 20,0 g
Tween® 80 1,0 g
Ammoniumcitrat 2,0 g
Natriumacetat 5,0 g
Magnesiumsulfat 0,1 g
Mangansulfat 0,05 g
Dinatriumphosphat 2,0 g 55 g pulver af ovenstående sammensætning, dehydratiseret, blandes med 1000 ml destilleret vand og steriliseres ved 15 autoklavering i 15 minutter ved 15 lb. Bouillonen har en slut pH-værdi på 6,5 ved 25 °C. Derefter justeres pH under anvendelse af 1,0 N HC1 og eventuelt 1,0 N NaOH, og bouillonen sterilfiltreres. Bakterierne inkuberes i bouillonen i 48 timer i et anaerobt kammer. Udvalgte bakterier kan 20 formere sig fortrinsvis ved pH under 3,5, foretrukkent ved pH 3,0.
DK 171369 B1 7
Det næste trin er isoleringen, fra de bakterier der er i stand til at formere sig i syre og galde, af arten L. a-cidophilus. Denne behandling udføres under anvendelse af standard mikrobiologiske metoder.
5 Det næste trin er at afprøve syre- og galdestabile L. a-cidophilus bakterier for deres evne til at adhærere til gastrointestinale celler. Humane gastrointestinale celler isoleres først på almindelig måde. En metode indebærer opsamling af affaldsstoffer fra en patient med en godt fun-10 gerende ileostomi ved saltvandsudskylning.
Saltvandsskylningen opsamles i kold 1/10 rumfangspuffer I (0,1% gelatine, 1% glucose, 500 mM natriumphosphat, pH 7,4). Denne opløsning filtreres gennem nr. 25 silkedug for at fjerne klumper og småstykker og tyndtarms (ileal)slim-15 hindeceller opsamles ved centrifugering ved 100 x g i 10 minutter. Herefter vaskes cellerne i puffer II (0,45% NaCl, 0,1% glucose, 0,01% gelatine, 50 mM natriumphosphat, pH 7,4), idet der centrifugeres under samme betingelser som ovenfor. Til slut genopslæmmes cellerne i puffer II, 20 1/3 rumfang vævsdyrkningssubstrat NCTC 135 tilsættes, og cellerne lagres ved 4 °C, indtil de skal bruges. Antallet af tarmceller og levedygtigheden bestemmes ved hjælp af trypanblå farvning. De humane tyndtarmceller kan fryses i flydende nitrogen efter tilsætning af 10 rumfang/rumfang-% 25 glycerol.
Bakterierne dyrkes i 18 timer ved 37 °C i MRS bouillon til-sat 6 pCi H-alanin og H-leucin. Herefter vaskes bakterierne i 5 rumfang phosphatpufret saltopløsning, genopslæmmes i puffer II og filtreres gennem 2,0 μ polycarbonatfil-30 tre for at fjerne klumper. Herefter blandes bakterierne med de humane tyndtarmsceller, inkuberes ved 37 °C, og prøver udtages 5 minutter senere. Prøverne anbringes på 2,0 μ DK 171369 B1 8 polycarbonatfiltre, og overskud af væske fjernes ved forsigtig afsugning. Herefter renses filtrene, først med 2 ml og derefter med 5 ml phosphatpufret saltvand (pH 7,4). Ved at anvende disse filtre tilbageholdes tyndtarmscellerne og 5 de vedhæftede bakterier, men de frie bakterier går igennem filtret. Kontroller omfatter reaktionsblandingen uden de humane tyndtarmsceller. Den tilbageholdte radioaktivitet bestemmes ved væskescintillation. Den bakterielle specifikke aktivitet bestemmes ud fra de kolonidannende enheder 10 beregnet ud fra den optiske densitet ved 550 nm og den tilbageholdte radioaktivitet på 0,2 μ filtre. Den bakterielle specifikke aktivitet anvendes til beregning af antal bundne bakterier.
De bakterier, der binder ved ovennævnte metode, i en stør-15 relse på mindst 50, og fortrinsvis 100 bakterier pr. gastrointestinal celle (repræsenterende omtrent 10% af de bakterier, der er bragt i kontakt med cellerne) er de ønskede bakterier.
Mælkesyreproduktion måles ved at inkubere bakterierne i 20 MRS bouillon eller Scott Pepton-Gærbouillon under anaerobe betingelser og måle mælkesyre 8 eller 24 timer senere under anvendelse af gas-væskekromatografi. Udvalgte bakterier frembringer mindst 3,5 meq og fortrinsvis over 4 meq mælkesyre pr. 1010 CFU ved 37 °C over en 24 timers periode. 1 2 3 4 5 6
Det sidste undersøgelsestrin er selektionen af bakterier, 2 der udviser kraftig vækst in vitro udtrykt ved generati 3 onstiden. 5 x 10^ CFU af bakterier anvendes til at inoku- 4 lere næringssubstratet, f.eks. MRS bouillon, og CFU måles 5 efter 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 og 8 timer ved at udstryge 0,1 6 ml fortyndede prøver på LBS agar og inkubere pladerne 48 timer ved 37 °C under anaerobe betingelser. Bakterier ud- DK 171369 B1 9 vælges, der har en generationstid ved 37 °C på mindre end 1 time, fortrinsvis på ca. 45 minutter.
Hver af de ovennævnte undersøgelsesmetoder er udformet til at isolere L. acidophilus stammer, der er i besiddelse af 5 de egenskaber, der gør dem i stand til at udøve helbredende virkning på mennesker.
Syre- og galdestabilitet er vigtig, fordi bakterierne spises og skal gå gennem surt miljø i maven såvel som den galdeholdige tyndtarm, og de må være i stand til at over-10 leve og formere sig under disse betingelser, dersom bakterierne skal udøve helbredende virkning på den person, der indtager dem.
Adhærering er af vigtighed, fordi denne egenskab muliggør, at L. acidophilus bakterier kan kolonisere og blive etab-15 leret i mavetarmkanalen.
Mælkesyreproduktion er vigtig, fordi det antages, at mælkesyre produceret af bakterierne delvist er ansvarlig for de fordelagtige virkninger ved koloniseringen i tarmkanalen med de omhandlede stammer. Mælkesyre er en antimikro-20 biel forbindelse, og frembringelsen heraf af den omhandlede stamme kan hjælpe dem til at danne en beskyttende barriere mod patogener i tarmkanalen. Mælkesyre hjælper måske også til at inaktivere carcinogener i tarmkanalen.
Kraftig in vitro vækst er en vigtig egenskab, fordi den 25 omhandlede stammer skal være i stand til at reproduceres i stor målestok; kraftig vækst er også en indikator for, at bakterierne sandsynligvis vil gro ligeså godt in vivo.
Den omhandlede stamme (betegnet GG) havde følgende egenskaber: DK 171369 B1 10
Syrestabilitet
Stammen kan vokse ved pH 3,0 indtil en koncentration på 1 x 107 CFU. Ved højere pH-værdier er væksten endog kraftigere, idet der opnås 109 CFU ved pH 5,0.
5 I normal human mavesaft kan GG stammen, idet der startes
Q
med et inokulum på 10 CFU, overleve med mindre end 2 log nedgang af inokulummængden i mindst 30 minutter ved pH
2,5.
Q
Bakterier af GG stammen (10 CFU) inokuleredes ved hjælp 10 af en Levin slange direkte i maven på raske frivillige.
Med maveindhold på pH 1,0-2,0 overlevede mindst 1000 organismer af GG stammen mindst 2 timer.
Galdestabilitet GG stammen kunne vokse i oksegalde i en koncentration på 15 0,15% i LBS agar.
Adhærerina til tarmslimhindeceller
Tabellen nedenfor viser graden af vedhæftning af bakterierne af GG stammen til tyndtarmslimhindeceller.
Behandlingstid Antal bundne bakterier pr. tarmcelle_ 5 minutter 119 10 minutter 235 15 minutter 333 20 Mælkesyreproduktion
Produktionen af mælkesyre blev målt ved hjælp af gas-væskekromatografi efter inkubation af GG stammen i flydende næringsbouillon. Følgende mælkesyrekoncentrationer måltes på de pågældende tider for inkubation.
DK 171369 B1 11
Inkuberingstid Mælkesyreproduktion 8 timer 1,53 meq/108 CFU
24 timer 4,44 meq/1010 CFU
Generationstid GG stammen viste kraftig vækst in vitro. Under anvendelse af et begyndelsesinokulum på 5 x 10^ CFU i MRS bouillon 5 viste stammen en 40-fold stigning i væksten i løbet af 4 timer, idet der nåedes en densitet på 2 x 106 CFU. Under denne 4 timers periode var der 5,2 generationer, hvilket giver en enkelt generationstid på 45 minutter.
Den omhandlede L. acidophilus stamme kan dyrkes i stor må-10 lestok og anvendes terapeutisk i lyofiliseret form eller sammen med farmaceutisk acceptable bærestoffer og kan sættes til fødevarer, specielt mejeriprodukter som mælk og yoghurt, således som man har gjort med andre L. acidophilus stammer i mange år. Bakterier af stammen alene, i fø-15 devarer eller i andre bærevehikler, kan indtages peroralt af mennesker i en effektiv mængde (f.eks. 106-1010 bakterier pr. person pr. dag) for at behandle eller forhindre en hel række sygdomme nævnte ovenfor og nærmere specificeret nedenfor.
20 Dyrkningsbetingelserne er følgende:
En stamopløsning består af steril skummetmælk indeholdende 1010 CFU levende organismer. 1 ml af denne stamopløsning sættes til 2 liter MRS bouillon. Beholderen anbringes i et anaerobt inkubationskammer og dyrkes natten over i 14 ti-25 mer under omrøring ved 37 °C. Bouillonen centrifugeres ved 10.000 x g i 20 minutter, og centrifugebundfaldet genop-slæmmes i 50-100 ml steril skummetmælk og lagres ved -80 °C.
DK 171369 B1 12 9 · 10
Ved én særlig måde for administrering sættes 10 til 10 organismer til mælk, enten i rumfang på 10 til 20 ml eller i store rumfang, f.eks. 250 til 500 ml. Mælken indtages én gang dagligt, således at 109 til 1010 CFU indgives pr. en-5 kelt administrering. Til dyr blandes 0,2 til 1,0 ml af stammælkeopløsningen i deres foder, således at de får 109 til 1010 CFU bakterier dagligt.
Diarré er hovedkomplikationen ved antibiotikabehandling, idet det forekommer hos omtrent 10% af patienterne, der 10 får antibiotika, specielt med ampicillin, amoxacillin, cephalosporiner, clindamycin, erythromycin og tetracycli-ner. Den omhandlede stamme kan anvendes til at behandle antibiotika-induceret diarré på samme måde som andre L. a-cidophilus præparater er blevet anvendt tidligere. Herud-15 over kan stammen anvendes inden eller sammen med antibiotikaterapien som profylaktisk behandling. Sådan profylaktisk administrering bør foregå inden for 24 timer af antibiotikabehandlingen.
Idiopatisk ulcerativ colitis, også betegnet inflammatorisk 20 tyktarmsyge, er et vanskeligt terapeutisk problem. Sygdommen er ret almindelig, og patienterne lider af gentagne anfald af diarré, der kan forekomme ved forskellige lejligheder gennem flere år, hvor sygdommen er aktiv. For øjeblikket er den eneste terapi, der har vist sig at være 25 anvendelig, salicylazosulfapyridin (SAS) og corticosteroi-der. Mange patienter får imidlertid atter anfald på trods af disse behandlinger. Herudover er behandlingerne i sig selv ofte forbundne med tilfælde af bivirkninger.
Adskillige kendsgerninger har antydet, at tarmmikrofloraen 30 spiller en rolle ved denne sygdom, enten som en initiator eller som en determinant for symptomerne.
DK 171369 B1 13
Bakterier af den omhandlede L. acidophilus stamme kan administreres som beskrevet ovenfor til behandling af antibiotikabivirkninger for at behandle eller forhindre ulce-rativ colitis.
5 Langsom tarmfunktion og kronisk forstoppelse er et af hovedproblemerne hos ældre mennesker. Forstoppelse fører til ubehag i maven, kramper og almindeligt dårligt velbefindende. Interessen hos det brede publikum for at fremme god tarmfunktion afspejles i den mængde produkter, der findes 10 tilgængelig til at behandle disse tilstande. Disse produkter varierer fra kraftige laxativer til kortkædede fedtsyrer, forskellige naturlige fiberprodukter som f.eks. pektiner, ligniner, gummier og slimstoffer.
Podede mejeriprodukter, yoghurt og syrnede mælkeprodukter 15 har været anvendt gennem historien til at afhjælpe kronisk forstoppelse.
De omhandlede bakterier af L. acidophilus stammen kan anvendes alene som beskrevet ovenfor eller kan blandes med en sub-terapeutisk dosis af lactulose, et syntetisk disac-20 charid, der har været anvendt til behandling af forstoppelse. Lactulosen vil blive nedbrudt af bakterierne, hvilket forøger deres helbredende virkning uden at frembringe de bivirkninger, der somme tider ses ved terapeutiske doser af lactulose. 1 2 3 4 5 6
Det er i de senere år blevet klart, at kolonisering af 2 tarmkanalen hos mennesker udgør et reservoir for spredning 3 af patogene mikroorganismer, specielt hos værter med im 4 munsygdomme. Tarmmikrofloraen hos raske individer kan mod 5 stå podning med uønskede mikroorganismer ved hjælp af en 6 hel række indre kontrolmekanismer. Selv om disse kontrolmekanismer ikke forstås fuldt ud, er nettoresultatet for- DK 171369 B1 14 holdsvis stabilitet i den humane tarmflora med opretholdelse af samme type og samme koncentration af bakterier gennem lange tidsrum.
Ved antibiotikabehandling kan uønskede mikroorganismer væ-5 re i stand til at kolonisere tarmkanalen. Blandt disse uønskede organismer er Pseudomonas, Enterobacter, Serra-tia, Klebsiella, Citrobacter og Proteus-Providencia. Svampe kan også kolonisere tarmen, specielt gær som f.eks. Candida.
10 Medens raske individer kan modstå tarmkolonisering selv under antibiotikabehandling, er der en alvorlig fare under disse forhold for værter med immunsygdomme. De uønskede mikroorganismer kan invadere slimhinden, hvorved der forekommer septicemia og livstruende sygdom.
15 De kliniske tilfælde, hvor tarmkolonisering med uønskede mikroorganismer spiller en afgørende rolle, omfatter cancer, specielt hos patienter der behandles med kraftig kemoterapi; arvelig eller erhvervet immundefekt syndrom; patienter, der behandles med corticosteroider for en hel 20 række tilstande, og patienter, der har modtaget organ transplantater som nyre, knoglemarv og lever. Der er også ældre, svagelige patienter, der koloniseres og til slut inficeres med disse uønskede mikroorganismer. Blandt spædbørn sker anbringelse på en intensiv afdeling ofte i for-25 bindelse med antibiotikabehandling, dårlig ernæringstil stand og immuntruende tilstande. Denne høje risikogruppe af børn udsættes også for problemerne med kolonisering med potentielt patogene bakterier og gærarter.
Opretholdelse af naturlig resistens mod overgroning af 30 uønskede mikroorganismer er beskrevet i den nyere videnskabelige litteratur med udtrykket "koloniseringsresis- DK 171369 B1 15 tens" (CR). Forskellige tiltag er blevet foretaget for enten at forøge koloniseringsresistensen eller, alternativt, forhindre overgroning med tarmmikroorganismer. Forøgelse af CR opnås ved at anvende antibiotika, der kun frembrin-5 ger minimale virkninger på sammensætningen af den normale tarmflora, specielt ved at opretholde de normale anaerobe komponenter, der synes at være ansvarlige for at være i stand til at modstå overgroning af uønskede mikroorganismer. Den alternative metode er at forhindre kolonisering 10 ved administrering af perorale antibiotika, der i det væsentlige dræber en hvilken som helst ny tilkomst til mikrofloraen. Denne metode frembringer en "steril" mikroflora, idet mindste i korte tidsrum.
Medens hver af disse metoder til at forhindre kolonisering 15 har visse tiltrækkende træk, er de ikke nødvendigvis effektive. Relativt få terapeutiske antibiotika er i stand til at opretholde CR således, at denne metode ofte er uden virkning. Den anden metode, der indebærer administrering af perorale antibiotika, frembringer selv mange bivirknin-20 ger, og er ofte virkningsløs, da højt resistente mikroorganismer kan kolonisere selv i tilstedeværelse af antimi-krobielle lægemidler. Således forbliver problemerne med kolonisering af uønskede mikroorganismer hos patienter med dårligt immunsystem, hvad enten de er voksne eller børn, 25 et hovedproblem inden for den moderne medicin.
Bakterier af den omhandlede L. acidophilus stamme kan administreres til patienter som beskrevet ovenfor til opnåelse af CR på en heldig måde, da bakterierne ikke har nogen i sig selv iboende patogenicitet. Kolonisering af tar-30 men med denne naturlige mikroorganisme vil forhindre andre patogene former i at komme ind i floraen, medens der på samme tid opretholdes et forholdsvis sundt tarmmiljø.
DK 171369 Bl 16
Udskillelse af cholesterol
Betydelig interesse har i de senere år været om den fækale ekskretion af steroler, specielt cholesterol, da der kan være en sammenhæng med coloncancer. Undersøgelser hos for-5 søgsdyr udført for over 10 år siden viste, at kemisk induceret coloncancer kunne øges ved forøget ekskretion af cholesterol i fæces.
Det har været kendt gennem et stykke tid, at cholesterol gennemgår en enterohepatisk cirkulation, hvilket bevirker 10 tarmreabsorption af noget af cholesterolen og fækal ekskretion af resten. I tyktarmen underkastes cholesterol mikrobiel reduktion til coprostanol og coprostanon. De fleste mennesker udskiller hoveddelen af cholesterol som disse reducerede slutprodukter, men omtrent 20% mennesker ud-15 skiller mest ren cholesterol med kun en ringe mængde af reduktionsprodukterne.
Selv om disse dyreundersøgelser var interessante, var deres relevans ikke af særlig betydning, indtil kliniske forsøg med cholesterolsænkende lægemidler blev offentlig-20 gjort. Disse undersøgelser viste, at cholesterolsænkende lægemidler som at romid var i stand til at reducere serum cholesterolniveauerne og til at reducere hjerteanfald. Samtidig sås imidlertid en forøgelse i tyktarmscancer, fordi sænkningen af serum cholesterol skete på bekostning 25 af en forøgelse i fækal cholesterol. Disse kliniske undersøgelser verificerede de resultater, der sås hos dyr, hvor højere niveauer af fækal cholesterol stod i forbindelse med en forøget risiko for coloncancer.
Bakterier af den omhandlede L. acidophilus stamme kan ad-30 ministreres til patienter som beskrevet ovenfor for at re- DK 171369 B1 17 ducere mængden af udskilt cholesterol i patienternes fæces .
Udskillelse af østrogen
Forbedringer inden for laboratorieundersøgelser til måling 5 af østrogener har udvidet vor forståelse for disse vigtige kønshormoner. Østrogener produceres især i ovarierne og i mindre udstrækning i fedt- og andre væv. Hovedudskillelsen af østrogener er via urinen.
Et vigtigt fremskridt inden for de senere år er forståel-10 sen af den enterohepatiske cirkulation af østrogener. Det har vist sig, at så meget som halvdelen af de cirkulerende østrogener recirkuleres gennem galden ind i tarmkanalen, hvor de atter absorberes af kroppen. Kun 5% af østrogenerne udskilles i fæces.
15 For at blive udskilt i galden bindes østrogenerne sædvanligvis som et glucoronid eller sulfonat. Disse konjugerede østrogener går gennem galden ind i tarmen, hvor de atter adskilles ved hjælp af tarmbakterierne og herefter atter absorberes. 1 2 3 4 5 6
Betydningen af den enterohepatiske cirkulation blev vist i 2 undersøgelser af Adlercreutz et al., hvor fækale og urinæ 3 re østrogener blev undersøgt hos kvinder, der blev behand 4 let med ampicillin for mindre infektioner. Dette orale 5 antibiotikum forårsagede en 30% reduktion i udskillelsen 6 af urinære østrogener med en samtidig stigning i fækal østrogenudskillelse. Forklaringen er, at antibiotikumet undertrykker bakterierne i tarmen, der er ansvarlige for at frigøre østrogenerne. Dette fører til nedsat tarmreab-sorption og forøget fækal udskillelse af østrogener.
DK 171369 B1 18
Mange undersøgelser har vist, at højere østrogenniveauer i urin og plasma er korreleret med forøget risiko for brystcancer. Dette synes at passe med observationen, at kvinder, der lever vegetarisk, der har lave niveauer af urin-5 og plasmaøstrogener, mindre hyppigt har brystcancer.
Bakterier af den omhandlede L. acidophilus stamme kan administreres som beskrevet ovenfor til menstruerende kvinder for at sænke mængden af udskilt østrogen; de samme spaltende enzymer, der er involveret i østrogenreabsorpti-10 onen, påvirkes af indtagelsen af L. acidophilus.
Claims (6)
1. Biologisk ren kultur af en bakteriestamme af arten Lac-5 tobacillus acidophilus, kendetegnet ved, at stammen har deponeringsnummeret ATCC 53103, og at et gennemsnit på mindst 50 af bakterierne kan adhærere til en human tyndtarmsmucosacelle efter 5 minutters inkubation af bakterierne med cellen, 10 at bakterierne frembringer mindst 3,5 meq mælkesyre pr. 1010 kolonidannende enheder (CFU) i næringssubstrat ved 37 °C i løbet af 24 timer, og at bakterierne er i stand til at formere sig i næringssubstrat ved en pH-værdi på 3,0, at bakterierne udviser en 15 generationstid på mindre end en time i næringssubstrat ved 37 °C, og at bakterierne formerer sig i et substrat indeholdende mindst 0,1% galde.
2. Kultur ifølge krav 1, kendetegnet ved, at et gennemsnit på mindst 100 af bakterierne kan adhærere til 20 en human tyndtarmscelle efter 5 minutters inkubation af bakterierne med cellerne.
3. Fremgangsmåde til isolering af en terapeutisk værdifuld stamme af Lactobacillus acidophilus med deponeringsnummeret ATCC 53103 fra en prøve indeholdende en hel række for- 25 skellige bakteriestammer, kendetegnet ved, at man i vilkårlig rækkefølge udfører følgende undersøgelsestrin på prøven a) fra bakterieprøven isolerer arten Lactobacillus a-cidophilus og DK 171369 B1 20 b) inkuberer bakterier fra prøven roed gastrointestinale celler og selekterer bakterier, der (1) er i stand til at hæfte på cellerne i en gennemsnitsmængde på mindst 50 bakterieceller pr. gastrointestinalcelle i løbet af 5 5 minutters inkubering sammen, (2) formerer sig i næ ringssubstrat ved en pH-værdi på 3,0, (3) formerer sig i næringssubstrat indeholdende mindst 0,1% galde, (4) er i stand til at frembringe mindst 3,5 meq mælkesyre pr. 1010 kolonidannende enheder (CFU) i næringssubstrat 10 ved 37 °C i løbet af 24 timer og (5) udviser en genera tionstid på mindre end 1 time ved 37 °C.
4. Præparat til behandling af gastrointestinale bivirkninger ved antibiotikaterapi hos en human patient, kendetegnet ved, at det indeholder en bivirkningsredu- 15 cerende mængde af bakterier af L. acidophilus-stammen ifølge krav 1.
5. Præparat til behandling af ulcerativ colitis hos et menneske, kendetegnet ved, at det indeholder en terapeutisk effektiv mængde bakterier af L. acidophilus- 20 stammen ifølge krav 1.
6. Præparat til behandling af forstoppelse hos en patient, kendetegnet ved, at det indeholder en terapeutisk effektiv mængde af bakterier af L. acidophilus-stammen ifølge krav 1. 1
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US72411485 | 1985-04-17 | ||
US06/724,114 US4839281A (en) | 1985-04-17 | 1985-04-17 | Lactobacillus strains and methods of selection |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DK170186D0 DK170186D0 (da) | 1986-04-15 |
DK170186A DK170186A (da) | 1986-10-18 |
DK171369B1 true DK171369B1 (da) | 1996-09-30 |
Family
ID=24909071
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DK170186A DK171369B1 (da) | 1985-04-17 | 1986-04-15 | Biologisk ren kultur af en stamme af Lactobacillus acidophilus, fremgangsmåde til isolering af en sådan kultur og terapeutisk præparat indeholdende denne |
Country Status (9)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US4839281A (da) |
EP (1) | EP0199535B2 (da) |
JP (1) | JPH0648979B2 (da) |
AT (1) | ATE71140T1 (da) |
AU (1) | AU597882B2 (da) |
DE (1) | DE3683184D1 (da) |
DK (1) | DK171369B1 (da) |
FI (1) | FI90086C (da) |
NO (1) | NO169241C (da) |
Families Citing this family (153)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4839281A (en) * | 1985-04-17 | 1989-06-13 | New England Medical Center Hospitals, Inc. | Lactobacillus strains and methods of selection |
US5804179A (en) * | 1985-12-31 | 1998-09-08 | Research Corporation Technologies, Inc. | Lactobacillus compositions and methods for treating urinary tract infections |
US4946791A (en) * | 1986-10-02 | 1990-08-07 | Bio Techniques Laboratories, Inc. | Novel strain of Lactobacillus acidophilus |
US4980164A (en) * | 1986-10-02 | 1990-12-25 | Bio Techniques Laboratories, Inc. | Strains of lactobacillus for enhancing feed conversion efficiency |
CH674150A5 (da) * | 1987-10-30 | 1990-05-15 | 2 Oi Mo G Med I Im N I Pirogov | |
DK686187D0 (da) * | 1987-12-23 | 1987-12-23 | Hansens Chr Bio Syst | Veterinaert praeparat |
AU3836489A (en) * | 1988-06-09 | 1990-01-05 | Whitecliffe Laboratories Limited | Treatment of immunodeficiency |
IT1227154B (it) * | 1988-08-05 | 1991-03-19 | A Tosi Farmaceutici S R L Nova | Composizioni farmaceutiche per uso ginecologico a base di lattobacilli |
WO1991011510A1 (fr) * | 1990-01-31 | 1991-08-08 | San-Ei Sucrochemical Co., Ltd. | $i(LACTOBACTILLUS ACIDOPHILUS F-133, PREPARATION DE BACTERIES D'ACIDE LACTIQUE PREPAREE A PARTIR DE CELUI-CI, ET SON PROCEDE DE PREPARATION) |
US5139792A (en) * | 1990-07-19 | 1992-08-18 | Bio-Techniques Laboratories, Inc. | Method and system for dispensing live bacteria into animal feed and drinking water |
SE469875C (sv) * | 1991-07-25 | 1997-04-14 | Probi Ab | Stam av tarmkoloniserande Lactobacillus samt komposition för profylax eller behandling av infektioner i magtarmkanalen |
US5256425A (en) * | 1991-08-19 | 1993-10-26 | Bio Techniques Laboratories, Inc. | Antibiotic resistant strain of lactobacillus acidophilus |
US5179020A (en) * | 1991-08-19 | 1993-01-12 | Bio Techniques Laboratories, Inc. | Antibiotic resistant strain of lactobacillus acidophilus |
ES2124060T5 (es) * | 1992-07-06 | 2002-12-16 | Nestle Sa | Bacteria lactica. |
DE69223615T2 (de) * | 1992-07-06 | 1998-04-09 | Nestle Sa | Lactobacillus Acidophilus enthaltende Antigastritis-Mittel |
US5413785A (en) * | 1993-01-27 | 1995-05-09 | New England Deaconess Hospital Corp. | Methodology employing lactobacillus GG for reduction of plasma endotoxin levels circulating in-vivo |
RU2031586C1 (ru) | 1993-02-05 | 1995-03-27 | Тамара Георгиевна Извекова | Биологически активный кисломолочный продукт "ацидолакт-наринэ" и способ его получения |
US6156320A (en) * | 1993-02-05 | 2000-12-05 | Harry Parsekian | Fermented milk nutraceuticals |
WO1994018997A1 (en) * | 1993-02-24 | 1994-09-01 | Valio Ltd. | Method of enhancing immune response to oral vaccines |
JP2824821B2 (ja) * | 1993-11-04 | 1998-11-18 | カルピス株式会社 | 乳酸菌及び発酵乳製品 |
US5434765A (en) * | 1994-03-10 | 1995-07-18 | Holophane Corporation | Luminaire assembly |
JP2992945B2 (ja) * | 1994-03-11 | 1999-12-20 | カルピス株式会社 | ラクトバチルス・アシドフィルス乳酸菌 |
AU686389B2 (en) * | 1994-05-26 | 1998-02-05 | Dibra S.P.A. | Lactobacillus strains of human origin, their compositions and uses thereof |
US6036669A (en) | 1995-01-13 | 2000-03-14 | Abbott Laboratories | Apparatus for altering composition of nutritional product during enteral tube feeding |
US6277092B1 (en) | 1995-01-13 | 2001-08-21 | Abbott Laboratories | Apparatus for altering composition of nutritional product during enteral tube feeding |
US5533973A (en) * | 1995-01-13 | 1996-07-09 | Abbott Laboratories | Alteration of nutritional product during enteral tube feeding |
FI104465B (fi) † | 1995-06-14 | 2000-02-15 | Valio Oy | Proteiinihydrolysaatteja allergioiden hoitamiseksi tai estämiseksi, niiden valmistus ja käyttö |
IT1276783B1 (it) * | 1995-06-23 | 1997-11-03 | Bracco Spa | Formulazioni farmaceutiche e dietetiche per la profilassi e la cura di affezioni gastrointestinali |
FR2740471B1 (fr) * | 1995-10-31 | 1997-12-19 | Gervais Danone Co | Ferments lactiques, et leur utilisation pour l'obtention de produits hypocholesterolemiants |
AT405235B (de) * | 1995-11-02 | 1999-06-25 | Helmut Dr Viernstein | Probiotisch wirksame formulierung |
US5902578A (en) * | 1996-03-25 | 1999-05-11 | Abbott Laboratories | Method and formula for the prevention of diarrhea |
DK0818529T3 (da) * | 1996-07-09 | 2005-10-17 | Nestle Sa | Fremgangsmåde til spraytörring |
IT1284877B1 (it) * | 1996-08-09 | 1998-05-22 | Dicofarm Spa | Trattamento delle diarree acute del bambino e prevenzione della sensibilizzazione allergica verso alimenti introdotti nella fase |
AUPO203996A0 (en) * | 1996-08-30 | 1996-09-26 | Novogen Research Pty Ltd | Therapeutic uses |
JP2001505046A (ja) * | 1996-09-06 | 2001-04-17 | ソシエテ デ プロデユイ ネツスル ソシエテ アノニム | アイスクリーム |
GB9623068D0 (en) * | 1996-11-06 | 1997-01-08 | Cultech Limited | Microflora |
EP1728855A1 (en) * | 1996-11-29 | 2006-12-06 | Bio-K Plus International, Inc. | Lactic ferment comprising a particular strain of lactobacillus acidopuilus and use thereof |
CA2271930C (en) | 1996-11-29 | 2006-10-17 | Bio K + International Inc. | Lactic ferment comprising a particular strain of lactobacillus acidophilus and use thereof |
ATE496989T1 (de) * | 1997-02-11 | 2011-02-15 | Entpr Ie Trd As Bioresearch Ie | Probiotische stämme des lactobacillus salivarius und daraus hergestellte antimikrobielle mittel |
US6093394A (en) | 1997-04-11 | 2000-07-25 | Gynelogix, Inc. | Vaginal lactobacillus medicant |
DE69834251T2 (de) | 1997-07-05 | 2007-01-04 | Société des Produits Nestlé S.A. | gefrorenes Dessert, welches Milchsäurebakterien und fermentierbare Ballaststoffe enthält |
US6080132A (en) * | 1998-02-27 | 2000-06-27 | Abbott Laboratories | Apparatus for altering characteristics of a fluid |
US7029702B2 (en) | 1998-07-07 | 2006-04-18 | Ritter Natural Sciences Llc | Method for increasing lactose tolerance in mammals exhibiting lactose intolerance |
EP1159951A1 (en) * | 2000-06-02 | 2001-12-05 | Societe Des Produits Nestle S.A. | Use of exogenous lactic bacteria strain against Actinomyces naeslundii-related diseases |
EP1104281B1 (en) * | 1998-08-12 | 2011-03-16 | Societe Des Produits Nestle S.A. | Incorporation of exogenous lactic bacteria into the oral microflora |
FR2785809B1 (fr) | 1998-11-18 | 2001-01-12 | Gervais Danone Sa | Selection et utilisations de souches de bacteries lactiques modulatrices de l'immunite non-specifique |
ID29150A (id) * | 1999-01-15 | 2001-08-02 | Entpr Ireland Cs | Penggunaan lactobacillus salivarius |
IT1312098B1 (it) * | 1999-04-23 | 2002-04-04 | Proge Farm Srl | Metodo di selezione di ceppi di lattobacilli adesivi con proprieta'terapeutiche e ceppi ottenuti con tale metodo. |
US7998470B2 (en) * | 1999-04-30 | 2011-08-16 | Kibow Biotech, Inc. | Compositions and methods improving renal function |
US20040197352A1 (en) * | 1999-04-30 | 2004-10-07 | Natarajan Ranganathan | Methods of improving or augmenting kidney function |
US6706287B2 (en) | 2001-05-15 | 2004-03-16 | Kibow Biotech Inc. | Prebiotic and probiotic compositions and methods for their use in gut-based therapies |
RU2146454C1 (ru) * | 1999-05-18 | 2000-03-20 | Анисимова Таисия Ивановна | Штамм бактерий lactobacillus acidophilus n.v.ep 317/402 "наринэ" ааа, используемый при приготовлении препаратов, диетических и лечебно-профилактических продуктов для лечения дисбактериоза и его последствий |
IL130303A0 (en) | 1999-06-03 | 2000-06-01 | M G Novobiotech Ltd | A bacterial strain processed plant extracts and probiotic compositions for human and veterinary use |
US6251432B1 (en) | 1999-07-01 | 2001-06-26 | Abbott Laboratories | Sustained release dosage form unit having latex coating and method of making the same |
DE19963104A1 (de) * | 1999-12-24 | 2001-06-28 | Ralf Kirkamm | Mittel zur Behandlung von Bakterienmangel |
WO2001097821A1 (en) * | 2000-06-19 | 2001-12-27 | Mucoprotec Pty Ltd | Immunotherapy or treating bacterial or viral infection at mucosal surfaces with probiotics, and compositions therefor. |
IT1320772B1 (it) * | 2000-11-02 | 2003-12-10 | Proge Farm Srl | Composizione farmaceutica a base di agenti attivi contro la candidaper il trattamento di disturbi della mucosa orale e intestinale |
US7214370B2 (en) | 2000-12-18 | 2007-05-08 | Probiohealth, Llc | Prebiotic and preservative uses of oil-emulsified probiotic encapsulations |
AU2002246679B2 (en) | 2000-12-18 | 2006-11-16 | Probiohealth Llc | Probiotic compounds derived from lactobacillus casei strain KE01 |
FI109602B (fi) | 2001-01-25 | 2002-09-13 | Valio Oy | Probioottiyhdistelmä |
US7060687B2 (en) * | 2001-02-07 | 2006-06-13 | Genmont Biotechnology Co. | Live vaccines for allergy treatment |
GB0124580D0 (en) * | 2001-10-12 | 2001-12-05 | Univ Reading | New composition |
ES2311718T3 (es) * | 2002-03-21 | 2009-02-16 | Bifodan A/S | Cepas de lactobacillus. |
US7300787B2 (en) * | 2002-07-05 | 2007-11-27 | Archer-Daniels-Midland Company | Lactobacillus strains and use thereof in fermentation for L-lactic acid production |
JP4618970B2 (ja) * | 2002-08-02 | 2011-01-26 | マルホ株式会社 | 肛門圧低下外用剤 |
TWI241912B (en) * | 2002-10-30 | 2005-10-21 | Food Industry Res & Dev Inst | Novel Acid-and bile salt-resistant Lactobacillus isolates having the ability to lower and assimilate cholesterol |
FI113057B (fi) * | 2002-11-04 | 2004-02-27 | Valio Oy | Menetelmä hiivojen kasvun estämiseksi |
US20040208863A1 (en) * | 2003-01-30 | 2004-10-21 | James Versalovic | Anti-inflammatory activity from lactic acid bacteria |
PT1631431T (pt) | 2003-05-22 | 2017-07-24 | Propex Operating Co Llc | Processo para fabrico de artigos poliméricos |
EP1675617B1 (en) | 2003-09-30 | 2017-07-26 | Kibow Biotech, Inc. | Compositions for augmenting kidney function |
US20050158294A1 (en) | 2003-12-19 | 2005-07-21 | The Procter & Gamble Company | Canine probiotic Bifidobacteria pseudolongum |
US8877178B2 (en) | 2003-12-19 | 2014-11-04 | The Iams Company | Methods of use of probiotic bifidobacteria for companion animals |
MY143693A (en) | 2004-03-24 | 2011-06-30 | Nestec Sa | Shelf stable product wih living micro-organisms |
JP2007533755A (ja) * | 2004-04-20 | 2007-11-22 | ザ ユニヴァーシティ オヴ シカゴ | 高分子量peg様化合物を含む治療薬送達システム |
US7862808B2 (en) * | 2004-07-01 | 2011-01-04 | Mead Johnson Nutrition Company | Method for preventing or treating respiratory infections and acute otitis media in infants using Lactobacillus rhamnosus LGG and Bifidobacterium lactis Bb-12 |
US20060003454A1 (en) * | 2004-07-02 | 2006-01-05 | Conjugon, Inc. | Non-dividing donor cells for gene transfer |
WO2006012536A2 (en) | 2004-07-22 | 2006-02-02 | Ritter Andrew J | Methods and compositions for treating lactose intolerance |
FR2875406B1 (fr) * | 2004-09-21 | 2007-01-05 | Danisco | Souche de lactobacillus acidophilus ayant des proprietes analgesiques au niveau du systeme gastro-intestinal |
JP4777365B2 (ja) * | 2005-02-15 | 2011-09-21 | シャーウッド エル. ゴルバック | プロバイオティクスおよび単離されたβ−グルカンを含有する食物ならびにその使用方法 |
MX2007012697A (es) | 2005-04-13 | 2008-01-14 | Nestec Sa | Formula para infantes con probioticos. |
US20060233762A1 (en) * | 2005-04-15 | 2006-10-19 | Mcmahon Robert J | Method for treating or preventing systemic inflammation in formula-fed infants |
US7303745B2 (en) * | 2005-04-15 | 2007-12-04 | Bristol-Myers Squibb Company | Method for preventing or treating the development of respiratory allergies |
US20060270040A1 (en) * | 2005-05-26 | 2006-11-30 | Conjugon, Inc. | Compositions and methods for treating tissue |
WO2006130188A1 (en) | 2005-05-31 | 2006-12-07 | The Iams Company | Feline probiotic bifidobacteria |
DK1880001T3 (da) | 2005-05-31 | 2011-09-12 | Iams Company | Feline probiotiske lactobacilli |
KR20140043145A (ko) | 2005-07-26 | 2014-04-08 | 네스텍 에스.아. | 항비만제 및 항비만 식품 |
DK2277524T3 (da) | 2005-09-28 | 2016-02-08 | Nordisk Rebalance As | Behandling af IBS ved anvendelse af både probiotiske bakterier og fermenteret cerealie som behandlingseffektorer |
PT1986669E (pt) | 2006-02-15 | 2012-05-15 | Nestec Sa | Utilização de bifidobacterium longum para a prevenção e tratamento de inflamação |
PL1993576T3 (pl) | 2006-03-07 | 2016-04-29 | Nestec Sa | Mieszanina synbiotyczna |
DK1993577T3 (da) * | 2006-03-10 | 2014-05-12 | Nutricia Nv | Anvendelse af ufordøjelige sakkarider til at give et spædbarn den bedste start efter fødsel |
AU2013201783B2 (en) * | 2006-10-02 | 2015-06-04 | International N&H Denmark Aps | Probiotics for use in reducing the incidence and duration of illness |
US20080095752A1 (en) * | 2006-10-20 | 2008-04-24 | Win-Chin Chiang | Method for extending the shelf-life of powdered nutritional formulations which contain viable probiotics |
US7387427B2 (en) * | 2006-10-20 | 2008-06-17 | Bristol-Myers Squibb Company | Method for blending heat-sensitive material using a conical screw blender with gas injection |
JP5799299B2 (ja) | 2007-02-01 | 2015-10-21 | ザ・アイムス・カンパニーThe Iams Company | ブドウ糖代謝拮抗物質、アボカド又はアボカド抽出物を使用する、哺乳動物における炎症及びストレスの低下方法 |
EP1974743A1 (en) | 2007-03-28 | 2008-10-01 | Nestec S.A. | Probiotics to Improve Gut Microbiota |
EP1974735A1 (en) | 2007-03-28 | 2008-10-01 | Nestec S.A. | Reduction of risk of diarrhoea |
CN101273737B (zh) * | 2007-03-28 | 2011-08-24 | 哈尔滨正方科技有限公司 | 一种在常温下保持高活菌数的发酵乳饮料的制备方法 |
EP2072052A1 (en) | 2007-12-17 | 2009-06-24 | Nestec S.A. | Prevention of opportunistic infections in immune-compromised subjects |
AU2009207823B2 (en) | 2008-01-24 | 2015-02-19 | Société des Produits Nestlé S.A. | Capsule containing nutritional ingredients and method of delivery of a nutritional liquid from the capsule |
FI121912B (fi) * | 2008-02-05 | 2011-06-15 | Valio Oy | Probioottien uusi käyttö |
RU2495927C2 (ru) | 2008-03-14 | 2013-10-20 | Нестек С.А. | Синбиотическая смесь |
EP2127661A1 (en) | 2008-05-27 | 2009-12-02 | Nestec S.A. | Probiotics to improve gut microbiotica |
US9771199B2 (en) | 2008-07-07 | 2017-09-26 | Mars, Incorporated | Probiotic supplement, process for making, and packaging |
EP2147678A1 (en) | 2008-07-21 | 2010-01-27 | Nestec S.A. | Probiotics to increase IgA secretion in infants born by caesarean section |
CA2750576C (en) | 2009-02-02 | 2019-02-26 | Willem Meindert De Vos | Novel pilus polypeptides |
KR20110124780A (ko) | 2009-02-24 | 2011-11-17 | 리터 파마슈티컬즈 인코오포레이티드 | 프리바이오틱 제제 및 사용 방법 |
FI121952B (fi) | 2009-05-06 | 2011-06-30 | Oriola Oy | Menetelmä pisaroina annosteltavan terveystuotteen valmistamiseksi |
US10104903B2 (en) | 2009-07-31 | 2018-10-23 | Mars, Incorporated | Animal food and its appearance |
GB0914878D0 (en) | 2009-08-26 | 2009-09-30 | Plant Bioscience Ltd | Competetive exclusion compositions and methods |
EP2295535A1 (en) | 2009-09-11 | 2011-03-16 | Mead Johnson Nutrition Company | Probiotic material |
US20140093614A1 (en) | 2009-09-20 | 2014-04-03 | Mead Johnson Nutrition Company | Probiotic stabilization |
US20110070334A1 (en) * | 2009-09-20 | 2011-03-24 | Nagendra Rangavajla | Probiotic Stabilization |
FI20096058A0 (fi) | 2009-10-13 | 2009-10-13 | Valio Oy | Koostumuksia ja niihin liittyviä menetelmiä ja käyttöjä |
CA2783768A1 (en) | 2009-12-08 | 2011-06-16 | Nestec S.A. | Infant formula with probiotics and milk fat globule membrane components |
EP2563372A4 (en) | 2010-04-28 | 2013-10-02 | Ritter Pharmaceuticals Inc | PREBIOTIC FORMULATIONS AND METHODS OF USE |
WO2011141762A1 (en) | 2010-05-12 | 2011-11-17 | Compagnie Gervais Danone | Synergistic fermentation of lactobacillus rhamnosus and lactobacillus paracasei subsp paracasei |
US9474298B2 (en) | 2011-10-11 | 2016-10-25 | Mead Johnson Nutrition Company | Partially hydrolyzed casein-whey nutritional compositions for reducing the onset of allergies |
US20130251829A1 (en) * | 2012-03-23 | 2013-09-26 | Mead Johnson Nutrition Company | Probiotic derived non-viable material for infection prevention and treatment |
CA2868362C (en) | 2012-03-29 | 2018-07-31 | Jerome Schentag | Gastrointestinal site-specific oral vaccination formulations active on the ileum and appendix |
GB201206599D0 (en) | 2012-04-13 | 2012-05-30 | Univ Manchester | Probiotic bacteria |
US20130344042A1 (en) | 2012-06-20 | 2013-12-26 | Gretchen Tanbonliong | Dietary management of celiac disease and food allergy |
DK2900805T3 (da) * | 2012-09-25 | 2023-02-27 | Aquilon Cyl S L Sanidad Animal | Probiotiske og præbiotiske sammensætninger |
NZ709392A (en) | 2012-11-23 | 2016-10-28 | Seres Therapeutics Inc | Synergistic bacterial compositions and methods of production and use thereof |
US8906668B2 (en) | 2012-11-23 | 2014-12-09 | Seres Health, Inc. | Synergistic bacterial compositions and methods of production and use thereof |
US10064900B2 (en) | 2013-02-04 | 2018-09-04 | Seres Therapeutics, Inc. | Methods of populating a gastrointestinal tract |
WO2014121304A1 (en) | 2013-02-04 | 2014-08-07 | Seres Health, Inc. | Compositions and methods |
CA3101218A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-09-25 | Therabiome, Llc | Targeted gastrointestinal tract delivery of probiotic organisms and/or therapeutic agents |
JP2016519664A (ja) | 2013-03-15 | 2016-07-07 | セレス セラピューティクス インコーポレイテッド | ネットワークを基にした微生物組成物及び方法 |
EP3035944B1 (en) | 2013-08-22 | 2019-10-02 | Nederlandse Organisatie voor toegepast- natuurwetenschappelijk onderzoek TNO | Probiotics for use in the treatment of bacterial vaginosis |
MX367109B (es) | 2013-11-25 | 2019-08-05 | Seres Therapeutics Inc | Composiciones bacterianas sinergicas y sus metodos de produccion y usos. |
WO2015095241A2 (en) | 2013-12-16 | 2015-06-25 | Seres Health, Inc. | Bacterial compositions and methods of use thereof for treatment of immune system disorders |
US20150305359A1 (en) | 2014-04-24 | 2015-10-29 | Mead Johnson Nutrition Company | Nutritional compositions directed to subjects having cow's milk protein allergies |
MA41020A (fr) | 2014-11-25 | 2017-10-03 | Evelo Biosciences Inc | Compositions probiotiques et prébiotiques, et leurs procédés d'utilisation pour la modulation du microbiome |
US10525016B2 (en) | 2015-06-03 | 2020-01-07 | Mead Johnson Nutrition Company | Nutritional compositions containing an elevated level of inositol and uses thereof |
CN115252650A (zh) | 2015-11-03 | 2022-11-01 | 布里格姆及妇女医院股份有限公司 | 用于治疗和/或预防食物***反应的治疗性微生物群 |
US9730969B2 (en) | 2015-11-06 | 2017-08-15 | Mead Johnson Nutrition Company | Nutritional compositions for promoting gut barrier function and ameliorating visceral pain |
US10034937B2 (en) | 2015-12-04 | 2018-07-31 | Mead Johnson Nutrition Company | Synergistic nutritional compositions and uses thereof |
CA3004740A1 (en) | 2015-11-09 | 2017-05-18 | Mjn U.S. Holdings Llc | Nutritional compositions comprising a casein hydrolysate, as well as dietary butyrate and/or a compound for stimulating formation of endogenous butyrate |
US20180161292A1 (en) | 2016-12-12 | 2018-06-14 | Mead Johnson Nutrition Company | Nutritional compositions containing butyrate and uses thereof |
US20180160714A1 (en) | 2016-12-12 | 2018-06-14 | Mead Johnson Nutrition Company | Nutritional compositions containing butyrate and uses thereof |
RU2744271C2 (ru) | 2016-12-16 | 2021-03-04 | Компани Жервэ Данон | Пробиотическая композиция, содержащая штаммы Lactobacillus rhamnosus и Lactobacillus paracasei |
US20180168215A1 (en) | 2016-12-21 | 2018-06-21 | Mead Johnson Nutrition Company | Nutritional compositions containing inositol and uses thereof |
US20180332881A1 (en) | 2017-05-17 | 2018-11-22 | Mead Johnson Nutrition Company | Preterm infant formula containing butyrate and uses thereof |
DE102017113263A1 (de) | 2017-06-16 | 2018-12-20 | Lactopia GmbH | Pharmazeutische Zusammensetzung enthaltend Bakterienstämme aus der Familie der Lactobacillaceae und Molke |
MX2020001774A (es) | 2017-08-14 | 2020-09-09 | Seres Therapeutics Inc | Composiciones y métodos para tratar enfermedad colestásica. |
US20190208807A1 (en) | 2018-01-05 | 2019-07-11 | Mead Johnson Nutrition Company | Nutritional compositions containing milk-derived peptides and uses thereof |
US20220000948A1 (en) | 2018-09-10 | 2022-01-06 | Lactobio A/S | Method for reducing the transfer of pathogenic microorganisms |
US20220015998A1 (en) | 2018-12-21 | 2022-01-20 | Lactobio A/S | Topical composition comprising viable microorganisms |
BR112021013190A2 (pt) | 2019-01-04 | 2021-09-28 | Lactobio A/S | Cepa bacteriana isolada, composição e uso de composição |
WO2020234382A1 (en) | 2019-05-20 | 2020-11-26 | Lactobio Aps | Composition for treatment, alleviation or prophylaxis of acne |
CN114007434A (zh) | 2019-06-05 | 2022-02-01 | 森永乳业株式会社 | 营养组合物 |
WO2020249734A1 (en) | 2019-06-13 | 2020-12-17 | Lactobio Aps | A gel composition comprising viable microorganisms |
EP4003061B1 (en) | 2019-07-23 | 2024-04-24 | FrieslandCampina Nederland B.V. | Nutritional composition comprising milk fat and immunoglobulin |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
NL294835A (da) * | 1962-07-19 | 1900-01-01 | ||
LU44002A1 (da) * | 1962-07-19 | 1963-09-03 | ||
DE1617755A1 (de) * | 1966-10-21 | 1972-02-17 | Rehm Eberhard | Verfahren zur Herstellung eines durch selektive Zuechtung von Laktobakterien erhaltenen Praeparates |
GB1167196A (en) * | 1966-12-12 | 1969-10-15 | Yakult Honsha Kk | Lactic Acid Bacteria. |
FI59925C (fi) * | 1980-01-11 | 1981-11-10 | Esko Viljo Nurmi | Foerfarande foer framstaellning av ett bakteriepreparat anvaendbart foer foerhindrande av salmonellainfektion hos fjaederfae |
IT1141095B (it) * | 1980-11-27 | 1986-10-01 | Ravizza Spa | Processo di risoluzione della sulpiride racema |
US4525351A (en) * | 1983-01-11 | 1985-06-25 | Chr. Hansen's Laboratory, Inc. | Liquid adherent disinfectant compositions for topical application and method of preparation |
US4839281A (en) * | 1985-04-17 | 1989-06-13 | New England Medical Center Hospitals, Inc. | Lactobacillus strains and methods of selection |
-
1985
- 1985-04-17 US US06/724,114 patent/US4839281A/en not_active Expired - Lifetime
-
1986
- 1986-01-16 FI FI860194A patent/FI90086C/fi not_active IP Right Cessation
- 1986-04-15 AU AU56112/86A patent/AU597882B2/en not_active Expired
- 1986-04-15 DK DK170186A patent/DK171369B1/da not_active IP Right Cessation
- 1986-04-16 AT AT86302836T patent/ATE71140T1/de not_active IP Right Cessation
- 1986-04-16 EP EP86302836A patent/EP0199535B2/en not_active Expired - Lifetime
- 1986-04-16 DE DE8686302836T patent/DE3683184D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1986-04-16 NO NO861483A patent/NO169241C/no unknown
- 1986-04-17 JP JP61089160A patent/JPH0648979B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1989
- 1989-04-20 US US07/341,027 patent/US5032399A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
NO169241B (no) | 1992-02-17 |
AU597882B2 (en) | 1990-06-14 |
DK170186D0 (da) | 1986-04-15 |
FI860194A (fi) | 1986-10-18 |
JPS61280433A (ja) | 1986-12-11 |
EP0199535B1 (en) | 1992-01-02 |
ATE71140T1 (de) | 1992-01-15 |
US4839281A (en) | 1989-06-13 |
EP0199535A2 (en) | 1986-10-29 |
US5032399A (en) | 1991-07-16 |
EP0199535A3 (en) | 1988-08-03 |
NO169241C (no) | 1992-05-27 |
FI90086C (fi) | 1993-12-27 |
DK170186A (da) | 1986-10-18 |
NO861483L (no) | 1986-10-20 |
AU5611286A (en) | 1987-10-22 |
FI860194A0 (fi) | 1986-01-16 |
EP0199535B2 (en) | 1995-11-02 |
DE3683184D1 (de) | 1992-02-13 |
FI90086B (fi) | 1993-09-15 |
JPH0648979B2 (ja) | 1994-06-29 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DK171369B1 (da) | Biologisk ren kultur af en stamme af Lactobacillus acidophilus, fremgangsmåde til isolering af en sådan kultur og terapeutisk præparat indeholdende denne | |
AU673525B2 (en) | Lactic acid bacterium | |
JP3186202B2 (ja) | 親生物 | |
JP4580542B2 (ja) | 肥満又は糖尿病治療用微生物及びその微生物を含む医薬組成物 | |
US6942857B2 (en) | Microorganisms for preventing and/or treating obesity or diabetes mellitus | |
KR20050057259A (ko) | 프로바이오틱 박테리아 : 락토바실러스 퍼멘텀 | |
US11857580B2 (en) | Lactobacillus having antimicrobial effect on Gardnerella vaginalis and Candida albicans | |
CN106176833A (zh) | 一种防治糖尿病并控制体重的复合益生菌液及其制备方法 | |
CN106138114A (zh) | 一种防治糖尿病并控制体重的复合益生菌制剂的制备方法 | |
CN113832077A (zh) | 鼠李糖乳杆菌及其应用 | |
CN108283285A (zh) | 一种糖尿病的理疗保健食品 | |
KR100794702B1 (ko) | 비만증 또는 당뇨병 예방 및/또는 치료용 미생물 | |
KR20040027180A (ko) | 비만 또는 당뇨병의 예방 및 치료 효과를 갖는 유산균발효 유제품 및 그 제조방법 | |
CN115120646A (zh) | 一种平衡肠道菌群的益生菌组合物及其制备方法和应用 | |
KR100794701B1 (ko) | 비만 또는 당뇨 예방 및 치료용 미생물 | |
MXPA97001816A (en) | Bacterials and pharmaceutical composition containing such strains and using the same to prevent and treat diseases associated with metabolism altered biliary deactives or caused by my | |
CN111067109A (zh) | 一种膳食纤维组合物及其制备方法与应用 | |
Huhtanen | Bile acid inhibition of Clostridium botulinum | |
JP2796635B2 (ja) | 免疫増強剤 | |
FI95193C (fi) | Uusi Lactobacillus acidophilus-kanta ja sen käyttö elintarvikkeiden, erityisesti meijerituotteiden valmistamiseen | |
CN113924107B (zh) | 用于预防单纯性和/或复发性膀胱炎的包含酵母的组合物 | |
WO2022255568A1 (ko) | 질염 예방 또는 치료용 조성물 | |
CN112237287B (zh) | 一株能够缓解便秘的鼠李糖乳杆菌lr519及其组合物 | |
JPH08283166A (ja) | 感染防御剤 | |
CN117089494A (zh) | 一种防治幽门螺杆菌感染的副干酪乳杆菌及其组合物与应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
B1 | Patent granted (law 1993) | ||
B1 | Patent granted (law 1993) | ||
PBP | Patent lapsed | ||
PBP | Patent lapsed |