DK159407B - Fremgangsmaade og indretning til bestemmelse af antigeners eller antistoffers tilstedevaerelse - Google Patents

Fremgangsmaade og indretning til bestemmelse af antigeners eller antistoffers tilstedevaerelse Download PDF

Info

Publication number
DK159407B
DK159407B DK451982A DK451982A DK159407B DK 159407 B DK159407 B DK 159407B DK 451982 A DK451982 A DK 451982A DK 451982 A DK451982 A DK 451982A DK 159407 B DK159407 B DK 159407B
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
antigens
antibodies
zone
antigen
enzyme
Prior art date
Application number
DK451982A
Other languages
English (en)
Other versions
DK451982A (da
DK159407C (da
Inventor
Lance A Liotta
Original Assignee
Lance A Liotta
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lance A Liotta filed Critical Lance A Liotta
Publication of DK451982A publication Critical patent/DK451982A/da
Publication of DK159407B publication Critical patent/DK159407B/da
Application granted granted Critical
Publication of DK159407C publication Critical patent/DK159407C/da

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/558—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using diffusion or migration of antigen or antibody
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
    • G01N33/54386—Analytical elements
    • G01N33/54387—Immunochromatographic test strips
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
    • G01N33/525—Multi-layer analytical elements
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
    • G01N33/54386—Analytical elements
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/805—Test papers
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/97—Test strip or test slide
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/807—Apparatus included in process claim, e.g. physical support structures
    • Y10S436/81—Tube, bottle, or dipstick
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/815—Test for named compound or class of compounds
    • Y10S436/817—Steroids or hormones
    • Y10S436/818—Human chorionic gonadotropin
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/82—Hepatitis associated antigens and antibodies

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Description

DK 159407 B
Den her foreliggende opfindelse angår en indretning til bestemmelse af tilstedeværelsen af antigener respektivt antistoffer i biologiske væsker, nemlig en indretning til bestemmelse af tilstedeværelsen af antigener i en prøve 5 med en første zone med en matrix, som indeholder antigener og antistoffer, der er i stand til immunologisk at reagere med antigenerne, samt bundne enzymer, og med en anden zone, som indeholder et materiale, der er i stand til i en farvereaktion at reagere med enzymerne, samt en indretning 10 til bestemmelse af tilstedeværelsen af antistoffer i en prøve med en første zone med en matrix, som indeholder antigener og antistoffer, der er i stand til immunologisk at reagere med antigenerne, samt bundne enzymer, og med en anden zone, som indeholder et materiale, der er i stand 15 til i en farvereaktion at reagere med de bundne enzymer. Opfindelsen angår endvidere disse indretningers anvendelse samt en fremgangsmåde til hvis brug ifidretn Sagerne anvendes.
Immunologiske diagnostiske undersøgelser finder bred anvendelig e 20 til detektering af antigener, hormoner, infektiøse stoffer og serum-antistoffer i legemsvæsker. Generelt falder immunanalyse indenfor følgende to kategorier: For det første: antistof-anti-gen-udfældningsprøver, såsom radial immundiffusion, hæmagglu-tination og coated latexpartikelagglutination. For det andet: 25 undersøgelser med mærkede reagenter, såsom radioimmunanalyse, og enzymbunden immunanalyse.
Prøverne af udfældningstypen har den fordel, at de udføres manuelt og bruges kommercielt i eengangssæt, samt kan aflæses visuelt og ikke kræver et instrument. Aflæsningen af en præci-30 pitationstype-immunanalyse udtrykkes sædvanligvis som tilstedeværelsen eller fraværet af en agglutinationsreaktion i hver af et antal kendte fortyndinger af prøven eller det konkurrerende antigen. Ulemperne ved prøverne af præcipitationstypen er, 2
DK 159407 B
at de er væsentligt mindre sensitive end analyserne med mærkede reagenter, kræver tidrøvende inkubationstrin og er påvirkelige af subjektive fejl i den visuelle identifikation af præcipita-tionsreaktionen.
5 Immunanalyser med mærkede reagenter er kvantitative og særdeles sensitive, men har ikke desto mindre visse ulemper. Radioimmun-analyser anvender radioaktive sporstoffer og kræver derfor et gammastrålingsdetekteringsinstrument. De radioaktive sporstoffer har kort lagerlevetid, frembyder en helbredsmæssig fare for 10 teknikeren og har været underkastet restriktiv lovgigning.
Enzymbundne immunabsorberende analyser, også kaldet ELISA, anvender reagenter mærket med et enzym. Enzymet detekteres ved dets reaktion med et substrat til frembringelse af et produkt, som let kan måles, f.eks. ved dannelse af en farve. ELISA kræ-15 ver ikke radioaktive materialer og anvender reagente r med en lang lagerlevetid.
Prøven med ELISA finder sted med bindingen af en referencereagent til en fast fasebærer, såsom bunden af en plasticskål. Prøvevæsker, der er blandet med enzymmærket reagent, reageres 20 med den bundne referencereagent. Bundne og frie reagenter separeres via et antal fortyndings-, inkubations- og vasknings-trin, så mange som fjorten, og en farvedannelsesreaktion initieres. Intensiteten af farven, der dannes ved forskellige seriefortyndinger, giver den kvantitative måling. Udførelsen af 25 standard ELISA tåger mellem 4 og 12 timer. Følgelig er den væsentligste ulempe ved ELISA det store antal fortyndings-, inkubations- og vaskningstrin, som er tidrøvende og genstand for fejl.
Fra europæisk patentskrift nr. 0 013 156 kendes der en 30 indretning til bestemmelse af antigener i biologiske væsker (Fig. 13), hvilken indretning er sammensat af et lag med til enzymer bundne antigener, et lag med immobilisere-
DK 159407 B
3 de antistoffer og et lag, hvor sidstnævnte under farvedan-nelse reagerer med enzymerne. Eftersom det med enzym mærkede antigen ved denne indretning kompetitivt hindres i binding til et immobiliseret antistof, er indretningens 5 funktion meget kraftigt afhængig af koncentrationsforholdet mellem det med enzym mærkede antigen og det immobili-serede antistof. Det er her især en ulempe, at allerede et lille overskud af mærket antigen bevirker en høj baggrund ved målingen, og et overskud af antistoffer nedsætter føl-10 somheden kraftigt.
Det er den foreliggende opfindelses opgave at tilvejebringe en indretning af den indledningsvis angivne art, med hvilken de ovefor beskrevne vanskeligheder kan overvindes. Således skal også ved en forbedret ELISA-analyse, dvs. ved 15 en forbedret fremgangsmåde, fortyndings- og vasketrinene falde bort, og prøven skal kunne finde sted inden for en enkelt kort inkubationsperiode. Samtidigt skal der opnås en meget høj følsomhed respektivt en målebaggrund af værdien nul ved antigen- respektivt antistofbestemmelsen.
20 Denne opgave er ifølge opfindelsen løst ved hjælp af de den i patentkrav. 1 angivne indretning·.:i . Fordelagtige udformninger ifølge opfindelsen er angivet i underkravene.
Opgaven er også løst ved hjælp af fremgangsmåden ifølge opfindelsen angivet i patentkravene 10 og 11.
25 Den foreliggende opfindelse angår således en indretning til bestemmelse af tilstedeværelsen af antigener (antistoffer) i en prøve med en første zone, som indeholder antigener og antistoffer, der immonologisk kan reagere med disse antigener, samt bundne enzymer; samt en anden zone, 30 som indeholder et materiale, der er i stand til i en farvereaktion at reagere med enzymerne, og som udmærker sig ved, at antigenerne (antistofferne) foreligger immobilise-
DK 159407 B
4 rede i matricen, og at enzymerne er bundet til antistofferne (antigenerne).
Den foreliggende opfindelse angår endvidere en fremgangsmåde til bestemmelse af tilstedeværelsen af antigener (an-5 tistoffer) i en biologisk væske under brug af den ovenfor angivne indretning, og som udmærker sig ved, at den biologiske væskes antigener (antistoffer) i et første trin bringes til at reagere med enzym-sammenknyttede antistof* fer (antigener), at de dannede antigen-antistof-komplekser 10 bringes til at diffundere til et materiale, der i en farvereaktion reagerer med enzymet, og at de diffunderende, ikke i det første trin med antigen (antistoffer) omsatte enzym-sammenknyttede antistoffer (antigener) i et andet trin omsættes med immobiliseret antigen (antistoffer) og 15 herved hindres i en viderediffusion til indgåelse af en farvereaktion.
Af overskuelighedsårsager beskrives der i det følgende kun bestemmelse af antigener.
20 Analyseprøven foreligger i form af en tør, lagdelt prøvestrimmel, som udviser en farvereaktion, når den udsættes direkte for prøvevæsken. Strimlen udfører automatisk fortyndingstrinene, der kræves til kvantitation, og separerer det bundne antistof fra det fri antistof. Farvereaktionen 25 kan aflæses visuelt eller med et instrument, såsom et spektrofotometer. Endvidere kan indretningen ifølge den foreliggende opfindelse fremstilles i strimmelform og tages i brug som en målepind til hurtig detektering af antigen, såsom af et medikament eller af et hormon i urin. Som 30 eksempel på en specifik anvendelse kan nævnes den hurtige detektering af en overdosis af medikamenter på skadestuer, eller som en gør-det-selv graviditetsprøve.
Opfindelsen vil i det følgende blive nærmere forklaret med nogle udførelsesformer og henvisning til tegningen, hvor:
DK 159407 B
5 fig. 1 skematisk viser en udførelsesform med tre lag i indretningen ifølge opfindelsen/ fig. 2 skematisk viser en fremgangsmåde ifølge opfindelsen med antigen i prøvevæsken/ 5 fig. 3 skematisk en fremgangsmåde ifølge opfindelsen uden antigen i prøvevæsken, fig. 4 en yderligere udførelsesform med to lag i indretningen ifølge opfindelsen, fig. 5 et reaktionsforløb for en fremgangsmåde ifølge 10 fig. 2 med en indretning ifølge fig. 4, og fig. 6 et reaktionsforløb for en fremgangsmåde ifølge fig. 3.
Pig 1 viser skematisk en indretning 10 ifølge den foreliggende opfindelse, som er opbygget i tre adskilte 15 lag 12, 14, og 16. Lagene 12 og 14 danner' den første zone 18. Laget 16 danner den anden zone 20. Indretningen 10 er vist placeret på et bæreorgan 22. Laget 12 er fremstillet af et porøst materiale, hvori der er fordelt opløselige enzymbundne antistoffer 24. Laget 20 14 er også fremstillet af et porøst materiale og har. antigener 26 bundet til sig. Laget 16 er ligeledes fremstillet af et porøst materiale og indeholder en bundet farvedannelsesreagent 17, d.v.s. et materiale, som reagerer med et enzym til dannelse af en farve.
25 Pig. 2 viser skematisk fremgangsmåden ifølge opfindelsen ved anvendelse af indretningen i fig. 1. Specifikt tilføres en væske, der generelt er betegnet med 28, til overfladen 30 af laget 12. Når væsken diffunderer gennem matrixen 10, kontakter frie antigener 32 de en-30 zymbundne antistoffer 24 og forenes med dem. Efter en kort inkubationsperiode diffunderer de enzymbundne antistoffer med mættede accept/bindingssteder frit gennem den første zone 18 og ind i den anden zone 20, eller lag 16, hvor enzymet reagerer med den farvedannende 6
DK 159407 B
reagent til tilvejebringelse af en karakteristisk farve, som indicerer tilstedeværelsen af antigen i den tilførte væske.
Fig..3 viser skematisk fremgangsmåden ifølge opfin-5 delsen under anvendelse af indretningen i fig. 1, og viser, hvad der sker, når prøvevæsken er fri for antigen. Specifikt tilføres en væske, generelt betegnet med 34, til overfladen 30 af laget 12. Når væsken diffunderer gennem laget 12 af matrixen 10, opløses 10 de enzymbundne antistoffer 24 og føres ind i laget 14, hvor de går i forbindelse med hinanden og knyttes til de bundne antigener 26. Følgelig når ingen enzymbundne antistoffer den farvedannelsesreagent 17 i lar— get 16, anden zone 20, og der observeres ingen farve-15 ændring. Dette antyder naturligvis, at ingen antigener var til stede i væsken 34.
Fig. 4 viser en anden udførelsesform for opfindelsen, hvor indretningen eller matrixen 11 er udformet i to distinkte lag 36 og 38. I dette tilfælde er laget 36 20 den første zone 40, der har et deri bundet referenceantigen 44, som er kombineret med enzymbundet antistof 46. Laget 38 er den anden zone 42 og indeholder farvedannende reagent 17.
Som vist i fig. 5 vil det enzymbundne antistof fjerne 25 sig og diffundere ned i zonen 42 til fremkaldelse af en farvereaktion 52, når en prøvevæske 48 indeholder tilstrækkeligt frit antigen 50 til at konkurrere med det bundne antigen 44.
Omvendt vil der, som vist i fig. 6, ikke findes nogen 30 konkurrence sted, når en prøvevæske 54 ikke indeholder antigen, og følgelig vil intet enzymbundet antistof diffundere ind i den anden zone 42, og ingen farve vil 7
DK 159407 B
dannes.
Den foreliggende opfindelse er baseret på princippet om konkurrence mellem bundne og frie antigener til et fast antal af accept/bindingssteder på et enzymmærket 5 antistof. Det er en forbedret fremgangsmåde til udførelse ELISA-typeprøven. Analysens reagenter imprægneres til en med flere zoner forsynet prøvestrimmel. Den flydende prøve, der skal undersøges, tillades passivt at diffundere ind i prøvestrimlen. Bundne og frie antigener se-10 pareres automatisk under diffusionen. Denne separation fuldføres ved, at fastfasereferenceantigenet immobilise-res i en første zone, som er adskilt fra en anden zone, der indeholder enzymsubstratet. Opløseligt enzymbundet antistof, som har accept/bindingssteder, tillades at 15 blandes med prøven og at diffundere gennem lagene. De opløselige antigener i prøven konkurrerer med det immobiliserede referenceantigen om at gå sammen med det enzymbundne antistof. Derfor afhænger mængden af enzymbundet antistof, som til sidst når den anden zone, der 20 indeholder substratet, af koncentrationen af antigen, der prøves i væsken. Substratet i prøvestrimlen reagerer med enzymet for at frembringe en farvereaktion.
For at tilvejebringe kvantiteten er prøvestrimlen opbygget med flere separate områder, som hver indeholder 25 forskellige mængder af immobiliseret referenceantigen. Placeringen af farveændringen på prøvestrimlen er derfor afhængig af antigenkoncentrationen i prøven.
Som tidligere nævnt omfatter indretningen ifølge den foreliggende opfindelse en første zone, som indeholder 30 bundet antigen og specifikt enzymbundet antistof, og en anden zone, som indeholder en farvedannelsesreagent eller -substrat. De enzymbundne antistoffer er placeret i den første zone på en sådan måde, at de kan fjernes fra den 8
DK 159407 B
første zone, når de reageres med ubundet antigen, der indtræder i eller passerer derigennem, men kan ikke fjernes fra den første zone i fravær af sådanne antigener .
5 I en foretrukken udførelsesform for opfindelsen er immunanalyse-indretningen en sandwich-opbygning af tre porøse matrixlag, som vist i fig. 1. Det første porøse lag er imprægneret med et specifikt antistof bundet til et enzym. Det andet porøse lag indeholder immobiliseret, 10 dvs. bundet referenceantigen. Antigenet er af den type, der specifikt accepteres af antistoffet i det første porøse lag. Det tredie lag indeholder et farvedannende substrat, som reagerer med enzymet, der er bundet til antistoffet. Indretningens virkemåde er som følger, 15 jvf. fig. 2 og 3:
Prøvevæsken, der indeholder det antigen, som skal undersøges, anbringes i berøring med det første lag. Det frie antigen i prøven diffunderer ind i det andet lag og derefter ind i det tredie lag. Det frie antigen i prøven 20 konkurrerer med det immobiliserede bundne referenceantigen i det andet lag til forening med det enzymbundne antistof. Hvis det enzymbundne antistof forenes med frit antigen, vil det frit diffundere ind i det tredie lag og frembringe en farvereaktion. Hvis prøvevæsken ikke inde-25 holder antigen, vil alle enzymbundne antistoffer have frie accept/bindingssteder og vil forenes med det immo-biliserede antigen i det andet lag. Enzymbundet antistof, som forenes med det immobiliserede antigen i det andet lag, vil ikke diffundere ind i det tredie lag, og 30 der frembringes ingen farvereaktion. Forskellen i mængden af omdannet substrat og intensiteten af den frembragte farve er proportional med mængden af antigen i prøven.
For en given mængde af enzymmærket antistof i det første
DK 159407 B
9 lag bestemmes indretningens sensitivitet af mængden af referenceantigen, der er til stede i det andet lag. Typisk vil en undersøgelsesindretning indeholde et antal sandwichformede bestanddele, hver med forskellige mæng-5 der referenceantigen. Antallet af referenceantigenkon-centrationer er forudbestemt for at dække et sensivitets-område, der er passende for den prøveopløsning, som måles. Det bør understreges, at på ELISA prøvestrimlen indicerer en positiv farvereaktion tilstedeværelsen 10 af det antigen, der undersøges.
Materialerne, der anvendes til fremstilling af indretningen ifølge den foreliggende opfindelse er velkendte indenfor teknikken. Imidlertid har det i praksis vist sig ønskeligt at udforme zonerne eller laget af den ιοί 5 retrukne indretning af sammenvævede fibre, såsom nitrocellulose- eller diazobenzyloxymethyl-papir, hvor sidstnævnte benævnes DBM-papir. Nitrocellulosepapir binder direkte proteiner og har vist sig nyttigt til immobilisering af antigener. DBM matrix binder DNA, RNA og pro-20 tein ved hjælp af covalente bindinger til diazonium-gruppen. Endvidere kan benyttes en porøs gel, såsom polyacrylamid, agarose eller collagen. Antigenet kan være tilbageholdt i gelens porer eller kan være krydsbundet til gelen via aminogrupper af liganden og carbo-25 xylgrupperne på matrixen. Også partikler eller korn, der indeholder den bundne ligand tilbageholdt i en cellulose eller plasticfibermatrix kan anvendes. Et tilfredsstillende eksempel er polyacrylamidkorn med en diameter på 5-10 jj., der har antigen bundet til overfladen via en 30 peptidbinding. Kornene er tilbageholdt i en cellulose-filtermatrix med en porestørrelse på 1-2 jp.
Egnede substrater eller farvedannende reagenter er velkendte indenfor teknikken. I denne henseende er et antal 10
DK 159407 B
forskellige typer rensede enzymer almindeligt mærkede reagenter til brug i immunanalyser, såsom ELISA. Disse indbefatter peberrodperoxidase, alkalinphosphatase og betagalactosidase. Imidlertid er den foreliggende opfin-5 delse ikke begrænset til brugen af disse enzymer til mærkning af antistof eller antigen. Enzymet der bruges til mærkning af antistoffet, kan frembringe en farve i den anden zone i prøveindretningen ved at virke direkte eller indirekte med det farvedannende stof. For eksempel 10 reagerer substrater, der er velkendte indenfor teknikken, såsom diaminobenzidin eller p-nitrophenylphosphat, med peberrodperoxidase under tilstedeværelse af hydrogenpe-roxid til dannelse af en brun til sort farve. I en udførelsesform for den foreliggende opfindelse tilføres 15 hydrogenperoxid exogent under indretningens brug. Alternativt kan den lyophile farvedannende zone indeholde bundet glukoseoxidase, og den første zone kan indeholde glucose. Ved brug af indretningen diffunderer glucosen i den første zone ind i den anden zone og danner hydro-20 genperoxid ved reaktion med glucoseoxidase.
Enzymet, der er bundet til antistoffet, kan frembringe en farve i den anden zone ved indirekte midler, såsom at tilvejebringe permeabilitet af zonen. Et eksempel på denne metode, der er fundet egnet til den foreliggen-25 de opfindelse, er brugen af omhyggeligt renset collogena-se som det enzym, der er bundet til antistoffet. Dette enzym nedbryder collogen til små peptider. Til detektering af collogenasemærkningen anvendes to af en collo-genmatrixbarriere separerede reagenter, som kan forenes 30 til dannelse af en farve. Tilstedeværelsen af colloge-nasemærket antistof detekteres, fordi collogenasen nedbryder collogenbarrieren og tillader de separerede reagenter at blandes med hinanden og danne en farve. En passende collogenase er den, der opnås med Clostridium 11
DK 159407 B
histolyticium, der renses på kendt måde. En passende collogenmatrix er den, der dannes med bovin type I collogen i tredobbelt belical, dvs. naturlig, eller denatureret form, såsom gelatineform.
5 Det følgende er specifikke eksempler, som yderligere illustrerer brugen af den foreliggende opfindelse.
EKSEMPEL .1 PRØVE: Trelaget udførelsesform for opfindelsen til graviditetsundersøgelse_ 10 Anvendte materialer: a) antigen: human choriongonadotropin (hCG)
b) antistof: kaninantisera til hCG
c) enzym bundet til antistof: peberrodperoxidase d) farvedannende enzymsubstrat: diaminobenzidin 15 e) matrixmateriale, der danner porøse lag: nitrocellulose.
Fremgangsmåde:
Trin 1. Klargøring af lag, der indeholder farvedannende reagent: Nitrocellulosematrixplader ,0,2 mm tykke, blev 20 skåret i strimler af 2 cm bredde og 10 cm længde. Pladerne blev nedsænket i 30 minutter i en opløsning af 0,1 mg/ml diaminobenzidin i destilleret vand. Pladerne blev derefter frosset ved overdækning med tørre ispellets. De frosne plader blev lyophiliseret i et konventionelt lyophilise-25 ringsmiddel.
Trin 2. Klargøring af antigen-indeholdende lag: Antigen opløstes i salin med en phosphatbuffer i en koncentration på 5,0 I.U./ml, hvoraf der blev fremstillet et antal fortyndinger: 1:1, 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64, og 30 1:100.
Otte grupper af nitrocelluloseplader blev hver gennem-
DK 159407 B
12 vædet i hver sin forskellige fortynding af antigenopløsningen i 30 minutter ved 4°C. Alle plader blev derefter gennemvædet i en opløsning af 1% bovinserumalbu-min i salin med phosphatbuffer i 2 timer ved 4°C til 5 mætning af alle de frie proteinbindende accept/bindings-steder på nitrocellulosen, jvf. Tobin et al Proc. Natl.
Acad. og Sci 76 4350 - 4354, 1979.
Trin 3. Pladerne blev derpå lyopholiseret som ovenfor klargøring af enzymbundet antistofindeholdende lag: 10 Peroxidaseenzym blev konjugeret til antistoffet ved Wilson & Nakane's standard periodate metode, jvf. 1978 i W. Knapp et al, red., Immunofluorescence: and Related Techniques, Elsevier Co., Amsterdam, p. 215-225. Efter rensning af konjugatet ved hjælp af standardmetoder blev 15 det opløst i PBS til en koncentration på 1 mg/ml. Koncentrationen af enzymbundet antistof til imprægnering i laget blev bestemt ved at fortynde den enzymbundne antistofopløsning indtil en 20 microliter lille dråbe, der påførtes overfladen af nitrocellulosepladen, der inde-20 holdt immobiliseret antigen, ved en fortynding på 1:32, viste en fuldstændig binding af det antistof til immobiliseret antigen, dvs. fremstilling af en standardfortyndingskurve. Denne koncentration af enzymbundet antistof blev suget ind i strimler af cellulose-trækpapirmateriale 25 og lyophiliseret som beskrevet ovenfor i trin 1.
Trin 4. Fremstilling af trelaget sandwich; kvadrater af 1 cm kantlængde blev udskåret af hvert af strimlernes lyophiliserede lag. Den faste bærer var en strimmel af frasepareret polycarbonat plastic på 10 cm x 1 cm x 0,1 30 mm. Otte kvadrater af nitrocellulose indeholdende det farvedannende substrat blev klæbet til plasticbæreren med latexbaseklæbestof. Øverst på disse kvadrater blev de antigenindeholdende plader klæbet med et latexklæbe-
DK 159407 B
13 stof langs omkredsen. De otte forskellige antigenkoncentrationer blev anvendt. Endelig blev de enzymbundne antistoflag klæbet ovenpå antigenlagene.
Trin 5. Til udførelse af analysen tilførtes 50 microli-5 ter af prøveopløsningen til overfladen af det øverste lag. Prøveopløsningen bestod af standardantigen i phos-phatbufferforsynet salin, pH 7,4 med 0,1% hydrogenper-oxid. Analysens følsomhed var o,3 I.U. af hCG, som opviste en farvereaktion ved 1:32-fortyndingen af immobi-10 liseret antigen.
Resultater.
ELISA-prøvestrimlen fremstillet som beskrevet ovenfor blev i henseende til følsomhed sammenlignet med en stan-dardhæmagglutionationsreaktion. Prøven blev blandet med 15 human urin fra seks patienter som tidligere var konstateret gravide.
Fortynding Anslået hCG ELISA Konventionel hæmag- af urinprøve detekteret strimmel glutination_ 1:1 2,5 I.U. (+) (+) 1:2 1,2 I.U. (+) (+) 1:4 0,6 I.U. (+) (-) 1:8 0,3 I.U. (+) (-) 1:16 0,01 I.U. (-) (-) ELlSA-strimlens følsomhed er større end den konventionelle 25 hæmagglutinationsreaktion.
EKSEMPEL 2 PRØVE: a) til bestemmelse af tiden medgået til farve- dannelse for forskellige koncentrationer af enzymbundet antistof imprægneret i det første
DK 159407 B
14 lag af trelagsudførelsesformen.
b) til bestemmelse af muligheden for at detektere human hepatitis B antigen, i det følgende benævnt HBA.
Fremgangsmåde: 5 prøvestrimlen blev fremstillet ved metoder, der var identiske med eksempel 1. Det første lag indeholdt lyo-philiseret cellulosematrix imprægneret med følgende fortyndinger af perioxidasekonjugeret anti-HBA. 1/5, 1/50, 1/225, 1/625, 1/3125. I eksperimentet a) indeholdt 10 det andet lag intet antigen. I eksperimentet b) indeholdt det andet lag bundet HBA i en koncentration på 2 500 nanogram pr. cm . Det tredie lag indeholdt DAB substrat fremstillet som i eksempel 1 til detektering af hCG.
RESULTATER: >] 5 Eksperiment a):
Prøven bestod af normal human serum fortyndet 1/10 i med phosphatbuffer forsynet salin indeholdende 0,1% hydro-genperoxid.
FARVEREAKTION: 20 Fortynding tid: 10 sek. 30 sek. 1 min.
i dyb BN-SRT samme samme 1 /5 dyb BN-SRT samme samme 1/50 BN-SRT samme samme 1/225 BN mørk BN samme
25 1/625 lys BN BN mørk BN
1/3125 ingen farve meget lys EN lys BN
Forkortelser: BN=brun, SRT=sort
Konklusion: Det optimale koncentrat af enzymbundet antistof er 1/625, når det andet lag indeholder 500 nano-2 30 gram HBA pr. cm . At det kan lade sig gøre at detektere
DK 159407 B
15 HBA, eftervises ved tilstedeværelsen af det frie antigens konkurrence om det bundne referenceantigen ved en fortynding på 1/625.
Eksperiment(b).1 5 Bestemmelse af den optimale maksimale koncentration af enzymbundet antistof i det første lag, som er helt bundet til referenceantigen i det andet lag, når prøven er fri for antigen.
Fortynding af enzymkonjugeret Farvereaktion på 1 minut anti-HBA i det første lag_____
10 1/5 BN
1/50 lys BN
1/225 meget lys BN
1/625 ingen farve (fuld stændig binding med referenceantigen) 1/3125 ingen farve « 15 EKsperiment (b) . 2
En 1/625 fortynding, eksempelvis fra tabel (b)1 ovenfor, af konjugat valgtes til detektering af HBA ved 100 nano-gram/ml.
_ . Farvereaktion 30.sek 1 minut
20 hba til stede lys BN BN
HBA fraværende ingen farve ingen farve
Den foreliggende opfindelses teknik er lige anvendelig både til detekteringen af antistof og antigener. Antigenets og antistoffets roller ombyttes simpelt hen. Til de-tektering af antistoffer mærkes antigenet med enzym og referenceantistof immobiliseres i den første zone. Det enzymmærkede antigen vil binde sig til det immobiliserede
DK 159407 B
16 antistof i den første zone ved fravær af konkurrerende antistof i prøven og undlade at diffundere ind i den anden zone til dannelse af en farve. Hvis antistoffer er til stede i prøven, vil de konkurrere med de immobiliserede 5 referenceantistoffer. I dette tilfælde indikerer en positiv farvereaktion tilstedeværelsen af antistoffer i prøven.
Når den foreliggende opfindelse tilpasses til detektering af antistoffer, benyttes en indretning, som består af en første zone, der indeholder enzymbundne antigener og anti-10 stoffer, der er i stand til immunologisk at reagere med nævnte antigener, hvilke antigener befinder sig i nævnte første zone, således at de fjernes fra nævnte første zone, når de reageres med antistoffer, der passerer ind i eller gennem nævnte første zone, men som ikke fjernes fra nævnte 15 første zone ved sådanne antistoffers fravær; og en anden zone, der indeholder materiale, der kan reagere, enten direkte eller indirekte, med nævnte enzymbundne antigener til fremkaldelse af en farvedannelsesreaktion, som indikerer tilstedeværelsen af nævnte antigener.
20

Claims (11)

11 DK 159407 B
1. Indretning til bestemmelse af tilstedeværelse af antigener i en prøve med en første zone med en matrix, som indeholder antigener og antistoffer, der er i stand til 5 immonologisk at reagere med antigenerne, samt bundne enzymer, og med en anden zone, som indeholder et materiale, der er i stand til i en farvereaktion at reagere med enzymerne, kendetegnet ved , at antigenerne foreligger immobiliseret i matricen, og at enzymerne er 10 bundet til antistofferne.
2. Indretning til bestemmelse af tilstedeværelse af antistoffer i en prøve med en første zone med en matrix, som indeholder antigener og antistoffer, der er i stand til immunologisk at reagere med antigenerne, samt bundne 15 enzymer, og med en anden zone, som indeholder et materiale, der er i stand til i en farvereaktion at reagere med de bundne enzymer, kendetegnet ved , at antistofferne foreligger immobiliseret i matricen, og at enzymerne er bundet til antigenerne.
3. Indretning ifølge krav 1 eller 2 kende tegnet ved , at den første zone og den anden zone er således anordnet, at de grænser op til hinanden.
4. Indretning ifølge krav 1 kendetegnet ved , at den første zone indeholder med enzymer sam- 25 menknyttede antistoffer, som er bundet til de immobilise-rede antigener.
5. Indretning ifølge krav 1 kendetegnet ved. , at den første zone består af i det mindste to adskilte lag, hvor et af disse lag indeholder de med 30 enzymer sammenknyttede antistoffer, og det andet lag indeholder det immobiliseréde antigen.
6. Indretning ifølge krav 1, 2, 3, 4 eller 5 kendetegnet ved , at den første zones og/ eller den anden zones matrix består af en fibermatrix el- 35 ler en porøs polymergel. DK 159407 B 18
7. Anvendelse af indretning ifølge krav 1 til bestemmelse af menneskeligt chorion-gonadatropin.
8. Anvendelse af indretning ifølge krav 1 til bestemmelse af hepatitis-antigen.
9. Anvendelse af indretning ifølge krav 1 til bestem melse af rubellavirus-protein.
10. Fremgangsmåde til bestemmelse af tilstedeværelse af antigen i en biologisk væske under anvendelse af en indretning ifølge krav 1 kendetegnet ved , 10 at den biologiske væskes antigener i et første trin bringes til at reagere med enzym-sammenknyttede antistoffer, at bringe de dannede antigen-antistof-komplekser til dif-funderen til et materiale, som i en farvereaktion reagerer med enzymet, og at de diffunderende, ikke i det første 15 trin med antigen omsatte enzym-sammenknyttede antistoffer i· et andet trin omsættes med immobiliseret antigen og herved i en videre-diffusion hindres i indgåelse af en farvereaktion .
11. Fremgangsmåde til bestemmelse af tilstedeværelse 20 af antistoffer i en biologisk væske under anvendelse af en indretning ifølge krav 2 kendetegnet ved , at den biologiske væskes antistoffer i et første trin bringes til at reagere med enzym-sammenknyttede antigener, at bringe de dannede antigen-antistof-komplekser til diffun-25 deren til et materiale, som i en farvereaktion reagerer med enzymet, og at de diffunderende, ikke i det første trin med antistof omsatte enzym-sammenknyttede antigener i et andet trin omsættes med immobiliseret antistof og herved i en videre-diffusion hindres i indgåelse af en farvereak-30 tion.
DK451982A 1981-10-13 1982-10-13 Fremgangsmaade og indretning til bestemmelse af antigeners eller antistoffers tilstedevaerelse DK159407C (da)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US06/310,801 US4446232A (en) 1981-10-13 1981-10-13 Enzyme immunoassay with two-zoned device having bound antigens
US31080181 1981-10-13

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DK451982A DK451982A (da) 1983-04-14
DK159407B true DK159407B (da) 1990-10-08
DK159407C DK159407C (da) 1991-04-02

Family

ID=23204169

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK451982A DK159407C (da) 1981-10-13 1982-10-13 Fremgangsmaade og indretning til bestemmelse af antigeners eller antistoffers tilstedevaerelse

Country Status (14)

Country Link
US (1) US4446232A (da)
JP (2) JPS5876763A (da)
BE (1) BE894662A (da)
CA (1) CA1200483A (da)
DE (1) DE3237046A1 (da)
DK (1) DK159407C (da)
FR (1) FR2514511B1 (da)
GB (1) GB2111676B (da)
GR (1) GR76996B (da)
IE (1) IE53533B1 (da)
IT (1) IT1149089B (da)
LU (1) LU84402A1 (da)
NL (1) NL192138C (da)
SE (1) SE462606B (da)

Families Citing this family (211)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5622871A (en) * 1987-04-27 1997-04-22 Unilever Patent Holdings B.V. Capillary immunoassay and device therefor comprising mobilizable particulate labelled reagents
US4446232A (en) * 1981-10-13 1984-05-01 Liotta Lance A Enzyme immunoassay with two-zoned device having bound antigens
US4604348A (en) * 1981-11-19 1986-08-05 New York Blood Center, Inc. Composition for use in immunoassays
US5073484A (en) * 1982-03-09 1991-12-17 Bio-Metric Systems, Inc. Quantitative analysis apparatus and method
GB8305197D0 (en) * 1983-02-24 1983-03-30 Amersham Int Plc Assay methods
JPS59170768A (ja) * 1983-03-17 1984-09-27 Fuji Photo Film Co Ltd 非アイソト−プアツセイ用多層分析要素およびそれを用いるアツセイ方法
US4549655A (en) * 1983-12-05 1985-10-29 E. I. Du Pont De Nemours And Company Container for a layered chemical analysis system
CA1261743A (en) * 1984-07-23 1989-09-26 Shai Inbar Biological diagnostic assay product, and process utilizing labeled fab fragments
US4617265A (en) * 1984-09-19 1986-10-14 Board Of Regents, University Of Texas System Colony blot assay for enterotoxigenic bacteria
US4826759A (en) * 1984-10-04 1989-05-02 Bio-Metric Systems, Inc. Field assay for ligands
DE3445816C1 (de) * 1984-12-15 1986-06-12 Behringwerke Ag, 3550 Marburg Flaechenfoermiges diagnostisches Mittel
US4764459A (en) * 1984-12-28 1988-08-16 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for determining anti-bodies against herpes simplex virus (HSV) types 1 and 2 in human sera
IT1200382B (it) * 1985-02-08 1989-01-18 Boehringer Biochemia Srl Sistema di rilevazione e/o dosaggio di parametri clinici per via immuno enzimatica
US4740468A (en) * 1985-02-14 1988-04-26 Syntex (U.S.A.) Inc. Concentrating immunochemical test device and method
US4859583A (en) * 1985-02-25 1989-08-22 Amoco Corporation Chemiluminescent immunochemical technique for low molecular weight antigens
US5879881A (en) * 1985-04-04 1999-03-09 Hybritech, Incorporated Solid phase system for use in ligand-receptor assays
US4824784A (en) * 1985-04-08 1989-04-25 Hygeia Sciences, Incorporated Chromogenic solution for immunoassay
WO1986006170A1 (en) * 1985-04-10 1986-10-23 Immunicon Corporation Direct homogeneous assay
US4803170A (en) * 1985-05-09 1989-02-07 Ultra Diagnostics Corporation Competitive immunoassay method, device and test kit
US4746631A (en) * 1985-05-09 1988-05-24 Ultra Diagnostics Corporation Immunoassay method, device, and test kit
US4931385A (en) * 1985-06-24 1990-06-05 Hygeia Sciences, Incorporated Enzyme immunoassays and immunologic reagents
US4774177A (en) * 1985-07-15 1988-09-27 Vet-Test Partners Immunoassay method for detection of antibodies and antigens
US4806312A (en) * 1985-08-28 1989-02-21 Miles Inc. Multizone analytical element having detectable signal concentrating zone
US4806311A (en) * 1985-08-28 1989-02-21 Miles Inc. Multizone analytical element having labeled reagent concentration zone
TW203120B (da) * 1985-10-04 1993-04-01 Abbott Lab
US4868106A (en) * 1985-10-17 1989-09-19 Konishiroku Photo Industry Co., Ltd. Analytical element and method for determining a component in a test sample
US5500350A (en) * 1985-10-30 1996-03-19 Celltech Limited Binding assay device
GB8526741D0 (en) * 1985-10-30 1985-12-04 Boots Celltech Diagnostics Binding assay device
US5501949A (en) * 1985-12-10 1996-03-26 Murex Diagnostics Corporation Particle bound binding component immunoassay
AU6839587A (en) * 1985-12-10 1987-06-30 Murex Corp. Particle-bound binding component immunoassay
US5236826A (en) * 1985-12-10 1993-08-17 Murex Corporation Immunoassay for the detection or quantitation of an analyte
US4868108A (en) * 1985-12-12 1989-09-19 Hygeia Sciences, Incorporated Multiple-antibody detection of antigen
JPH0814582B2 (ja) * 1986-02-20 1996-02-14 富士写真フイルム株式会社 免疫反応物定量用多層分析要素
JPH0750114B2 (ja) * 1986-03-17 1995-05-31 富士写真フイルム株式会社 免疫分析器具を用いる分析方法
US4937188A (en) * 1986-04-15 1990-06-26 Northeastern University Enzyme activity amplification method for increasing assay sensitivity
US4801726A (en) * 1986-04-15 1989-01-31 Northeastern University Repetitive hit-and-run immunoassay and stable support-analyte conjugates; applied to T-2 toxin
US5190864A (en) * 1986-04-15 1993-03-02 Northeastern University Enzyme amplification by using free enzyme to release enzyme from an immobilized enzyme material
US4837145A (en) * 1986-06-09 1989-06-06 Liotta Lance A Layered immunoassay using antibodies bound to transport particles to determine the presence of an antigen
CA1289872C (en) * 1986-06-18 1991-10-01 David L. Woodrum Reversible immobilization of assay reagents in a multizone test device
CA1289876C (en) * 1986-07-15 1991-10-01 Richard R. Anderson Solid phase system incorporating tetrazolium salts for use in ligand-receptor assays
US20010023075A1 (en) * 1992-04-03 2001-09-20 Siu-Yin Wong A immunodiagnositc device having a dessicant incorporated therein
US5763262A (en) * 1986-09-18 1998-06-09 Quidel Corporation Immunodiagnostic device
DE3640318A1 (de) * 1986-11-26 1988-06-09 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren und testtraeger zur bestimmung eines analyten
US4822747A (en) * 1986-12-09 1989-04-18 Miles Inc. Polyacrylamide gel particles having hapten moieties bound thereto as immunoassay reagent
GB8629740D0 (en) * 1986-12-12 1987-01-21 Iq Bio Ltd Immunoassay
ES2004066A6 (es) * 1987-01-21 1988-12-01 Euro Fassel Aktiebolag Metodo para analisis cualitativo y-o cuantitativo de antigenos,anticuerpos yno microorganismos u otras celulas y su correspondiente equipo
AU592174B2 (en) * 1987-02-17 1990-01-04 Genesis Labs, Inc. Immunoassay test strip
AU586552B2 (en) * 1987-02-25 1989-07-13 Genesis Labs, Inc. Dry test strip for devices using oxygen demanding detection system
AU590071B2 (en) * 1987-02-25 1989-10-26 Genesis Labs, Inc. Dry test strips having a red blood cell exclusion layer preventing interference by red blood cells in analyte detection visualization
CA1303983C (en) * 1987-03-27 1992-06-23 Robert W. Rosenstein Solid phase assay
USRE38430E1 (en) * 1987-03-27 2004-02-17 Becton, Dickinson And Company Solid phase chromatographic immunoassay
US4857453A (en) * 1987-04-07 1989-08-15 Syntex (U.S.A.) Inc. Immunoassay device
US4956275A (en) * 1987-04-14 1990-09-11 Molecular Devices Corporation Migratory detection immunoassay
ATE195022T1 (de) 1987-04-27 2000-08-15 Unilever Nv Spezifische bindungstestverfahren
US4855240A (en) * 1987-05-13 1989-08-08 Becton Dickinson And Company Solid phase assay employing capillary flow
US5238847A (en) * 1987-05-20 1993-08-24 Boehringer Mannheim Gmbh Test kit and process for the determination of an analyte in a pasty sample
DE3716891A1 (de) * 1987-05-20 1988-12-15 Boehringer Mannheim Gmbh Testkit zur bestimmung eines analyten im stuhl
US4883764A (en) * 1987-07-20 1989-11-28 Kloepfer Mary A Blood test strip
IT1223295B (it) * 1987-08-14 1990-09-19 Boehringer Biochemia Srl Dispositivo e metodo immunodiagnostico
FR2621393B1 (fr) * 1987-10-05 1991-12-13 Toledano Jacques Dispositif de detection immunoenzymatique de substances a partir d'une goutte de sang ou de liquide provenant d'un quelconque milieu biologique
DE3740471A1 (de) * 1987-11-28 1989-06-08 Boehringer Mannheim Gmbh Testtraeger zur analyse einer probenfluessigkeit und verfahren zu seiner herstellung
WO1989005978A1 (en) * 1987-12-14 1989-06-29 Liotta Lance A Layered immunoassay device containing fluid flow barrier
US4870007A (en) * 1987-12-18 1989-09-26 Eastman Kodak Company Immobilized biotinylated receptor in test device, kit and method for determining a ligand
DE3887491T2 (de) * 1987-12-21 1994-07-07 Abbott Lab Chromatographische Bindungstesteinrichtungen und Verfahren.
WO1989006791A1 (en) * 1988-01-21 1989-07-27 Boehringer Mannheim Corporation Apparatus for determining an analyte and method therefor
EP0389563A4 (en) * 1988-01-21 1991-01-23 Boehringer Mannheim Corporation Method and apparatus for analyte determination
EP0432155A4 (en) * 1988-02-16 1991-08-21 Boehringer Mannheim Corporation Analytical element which avoids premature reaction
USH1664H (en) * 1988-03-09 1997-07-01 Fuji Photo Film Co., Ltd. Analytical element for immunoassay and method for its preparation
DE3814370A1 (de) * 1988-04-28 1989-11-09 Boehringer Mannheim Gmbh Testtraeger fuer die analyse einer probenfluessigkeit, verfahren zur durchfuehrung einer solchen analyse und herstellungsverfahren
FR2630827B1 (fr) * 1988-04-28 1994-06-03 Oris Ind Dispositif et procede pour la determination qualitative et quantitative rapide de la presence d'un ligand reactif dans un fluide
US5013669A (en) * 1988-06-01 1991-05-07 Smithkline Diagnostics, Inc. Mass producible biologically active solid phase devices
US4981785A (en) * 1988-06-06 1991-01-01 Ventrex Laboratories, Inc. Apparatus and method for performing immunoassays
EP0345460B1 (en) * 1988-06-09 1995-09-06 Abbott Laboratories Method and device employing covalently immobilized colored dyes
US5094962A (en) * 1988-06-13 1992-03-10 Eastman Kodak Company Microporous article having a stabilized specific binding reagent, a method for its use and a diagnostic test kit
AU2684488A (en) * 1988-06-27 1990-01-04 Carter-Wallace, Inc. Test device and method for colored particle immunoassay
FR2634891B1 (fr) * 1988-08-01 1994-05-06 Biotrol Laboratoires Procede et dispositif pour la determination qualitative et/ou quantitative d'un ligand dans un fluide
US5030555A (en) * 1988-09-12 1991-07-09 University Of Florida Membrane-strip reagent serodiagnostic apparatus and method
US5102788A (en) * 1988-11-21 1992-04-07 Hygeia Sciences, Inc. Immunoassay including lyophilized reactant mixture
DE3842702A1 (de) * 1988-12-19 1990-06-21 Boehringer Mannheim Gmbh Testtraeger zur analytischen untersuchung einer probenfluessigkeit mit hilfe einer spezifischen bindungsreaktion zweier bioaffiner bindungspartner und entsprechendes testverfahren
US5939272A (en) * 1989-01-10 1999-08-17 Biosite Diagnostics Incorporated Non-competitive threshold ligand-receptor assays
US5028535A (en) * 1989-01-10 1991-07-02 Biosite Diagnostics, Inc. Threshold ligand-receptor assay
US5200317A (en) * 1989-02-02 1993-04-06 Abbott Laboratories Method and device for quantitative chromatography
US5045480A (en) * 1989-02-09 1991-09-03 Miles Inc. Gel particles having hapten moieties bound thereto as immunoassay reagent
US6352862B1 (en) 1989-02-17 2002-03-05 Unilever Patent Holdings B.V. Analytical test device for imuno assays and methods of using same
US5766933A (en) * 1989-04-26 1998-06-16 Diagnostic Products Corporation Method and element for measuring analytes in biological fluids using immobilized binder--analyte labeled complex
DE3941150A1 (de) * 1989-12-13 1991-06-20 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur bestimmung eines analyten
US5252496A (en) 1989-12-18 1993-10-12 Princeton Biomeditech Corporation Carbon black immunochemical label
AU647459B2 (en) * 1990-01-26 1994-03-24 United States of America, as represented by the Secretary, U.S. Department of Commerce, The A method for quantitatively measuring collagenase
US5922615A (en) 1990-03-12 1999-07-13 Biosite Diagnostics Incorporated Assay devices comprising a porous capture membrane in fluid-withdrawing contact with a nonabsorbent capillary network
US5468622A (en) * 1990-04-03 1995-11-21 Immunomatrix, Inc. Salt stabilization of antibody-enzyme conjugates heat-dried into paper
DE4013004C2 (de) * 1990-04-24 1993-10-21 Elvira Schecklies Verfahren zur quantitativen Bestimmung von niedermolekularen organischen Substanzen
US5212060A (en) * 1990-04-27 1993-05-18 Genesis Labs, Inc. Dry test strip comprising a dextran barrier for excluding erythrocytes
US5139934A (en) * 1990-05-25 1992-08-18 Becton, Dickinson And Company Substrate composition and method for solid phase urease immunoassay
DE69119312T2 (de) * 1990-07-18 1997-01-16 Abbott Lab Analyt-Austauschreagenz zur Verwendung in spezifischen Bindungstests, -vorrichtungen und -sätzen
US5166051A (en) * 1990-08-08 1992-11-24 Genesis Labs, Inc. Membranes, membrane overlays for exclusion of erythrocytes, and method for immunoassay of whole blood analytes
US5200321A (en) * 1990-09-07 1993-04-06 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Microassay on a card
US5143852A (en) * 1990-09-14 1992-09-01 Biosite Diagnostics, Inc. Antibodies to ligand analogues and their utility in ligand-receptor assays
AU658374B2 (en) * 1990-09-14 1995-04-13 Biosite Diagnostics Incorporated Antibodies to complexes of ligand receptors and ligands and their utility in ligand-receptor assays
FR2667943B1 (fr) * 1990-10-11 1994-05-13 Jacques Toledano Dispositif et procede pour la determination qualitative et quantitative rapide d'un ligand dans un fluide.
US5166054A (en) * 1991-01-02 1992-11-24 Becton, Dickinson And Company Method for immunoassay using lactoperoxidase, starch and iodine
CA2065719A1 (en) 1991-04-30 1992-10-31 John B. Findlay Nucleic acid amplification and detection methods using rapid polymerase chain reaction cycle
US5998220A (en) 1991-05-29 1999-12-07 Beckman Coulter, Inc. Opposable-element assay devices, kits, and methods employing them
US5468648A (en) * 1991-05-29 1995-11-21 Smithkline Diagnostics, Inc. Interrupted-flow assay device
US6168956B1 (en) 1991-05-29 2001-01-02 Beckman Coulter, Inc. Multiple component chromatographic assay device
US5607863A (en) * 1991-05-29 1997-03-04 Smithkline Diagnostics, Inc. Barrier-controlled assay device
US5877028A (en) 1991-05-29 1999-03-02 Smithkline Diagnostics, Inc. Immunochromatographic assay device
US5869345A (en) * 1991-05-29 1999-02-09 Smithkline Diagnostics, Inc. Opposable-element assay device employing conductive barrier
DE4121493A1 (de) * 1991-06-28 1993-01-07 Draegerwerk Ag Analysevorrichtung zur quantitativen, immunologischen bestimmung von schadstoffen
EP0525723B1 (en) * 1991-07-29 1997-05-14 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. Process and device for specific binding assay
DE4216696C2 (de) * 1992-04-10 1995-01-26 Deutsche Aerospace Verfahren und Vorrichtung zur Empfindlichkeits- und Selektivitätssteigerung bei Immuno-Assays, Molekül-Rezeptor-, DNA-komplementär-DNA- und Gast-Wirtsmolekül-Wechselwirkungs-Assays
DE4217474A1 (de) * 1992-05-27 1993-12-02 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren und Mittel zur Bestimmung eines Analyts
FR2702841B1 (fr) * 1993-03-19 1996-01-26 Toledano Jacques Dispositif et procédé immunologique peptide-anti-peptide.
US5837546A (en) * 1993-08-24 1998-11-17 Metrika, Inc. Electronic assay device and method
FR2709349B1 (fr) 1993-08-25 1995-10-27 Stago Diagnostica Procédé d'identification d'une substance immunologique au moyen d'un système multimembranaire.
US5512448A (en) * 1994-04-28 1996-04-30 Yamazaki; Hiroshi Stabilization of peroxidase conjugates in solution
US5589344A (en) 1994-06-15 1996-12-31 Johnson & Johnson Clinical Diagnostics, Inc. Test kit and method for competitive specific binding assay
US6653066B1 (en) 1994-06-17 2003-11-25 Trinity Biotech Device and method for detecting polyvalent substances
US6686170B1 (en) 1994-08-17 2004-02-03 Abbott Laboratories Assay devices with mobile control reagents
US5597532A (en) * 1994-10-20 1997-01-28 Connolly; James Apparatus for determining substances contained in a body fluid
US5780239A (en) * 1994-11-23 1998-07-14 Carter; Jesse M. Method for the determination of cast in urine
US5569608A (en) * 1995-01-30 1996-10-29 Bayer Corporation Quantitative detection of analytes on immunochromatographic strips
US20010051350A1 (en) 1995-05-02 2001-12-13 Albert Nazareth Diagnostic detection device and method
US5739041A (en) * 1995-05-02 1998-04-14 Carter Wallace, Inc. Diagnostic detection device
AU2890995A (en) * 1995-06-28 1997-01-30 Popbb Snc Improved immunological test device
US5741714A (en) * 1995-07-18 1998-04-21 Immunivest Corporation Detection of bound analyte by magnetic partitioning and masking
US7635597B2 (en) 1995-08-09 2009-12-22 Bayer Healthcare Llc Dry reagent particle assay and device having multiple test zones and method therefor
US5660990A (en) * 1995-08-18 1997-08-26 Immunivest Corporation Surface immobilization of magnetically collected materials
DE19540541A1 (de) * 1995-10-31 1997-05-07 Human Ges Fuer Biochemica Und Testvorrichtung und Testverfahren
EP0799894B1 (de) * 1996-02-09 2004-05-19 Degussa AG Verfahren zur Herstellung von (S)-Cyanhydrinen
US5968839A (en) * 1996-05-13 1999-10-19 Metrika, Inc. Method and device producing a predetermined distribution of detectable change in assays
US5942407A (en) * 1996-06-25 1999-08-24 Immunomatrix, Inc. Light-emitting immunoassay
US5945345A (en) * 1996-08-27 1999-08-31 Metrika, Inc. Device for preventing assay interference using silver or lead to remove the interferant
US6001658A (en) * 1996-09-13 1999-12-14 Diagnostic Chemicals Limited Test strip apparatus and method for determining presence of analyte in a fluid sample
US5879951A (en) * 1997-01-29 1999-03-09 Smithkline Diagnostics, Inc. Opposable-element assay device employing unidirectional flow
US20050101032A1 (en) * 1997-02-10 2005-05-12 Metrika, Inc. Assay device, composition, and method of optimizing assay sensitivity
US5939252A (en) * 1997-05-09 1999-08-17 Lennon; Donald J. Detachable-element assay device
US5895765A (en) * 1997-06-30 1999-04-20 Bayer Corporation Method for the detection of an analyte by immunochromatography
US6436721B1 (en) 1997-07-25 2002-08-20 Bayer Corporation Device and method for obtaining clinically significant analyte ratios
US6824985B1 (en) * 1997-09-09 2004-11-30 Bayer Corporation Formulation for reducing urea effect for immunochromatography assays using urine samples
US5972595A (en) * 1997-12-19 1999-10-26 Nen Life Science Products, Inc. Enzyme assay using a solid phase substrate
US6066446A (en) * 1997-12-19 2000-05-23 Nen Life Science Products, Inc. Assay member and method for its manufacture
US8062908B2 (en) * 1999-03-29 2011-11-22 Orasure Technologies, Inc. Device for collection and assay of oral fluids
DK1696236T3 (da) 1998-03-30 2014-08-18 Orasure Technologies Inc Opsamlingsindretning til analyse af mundvæsker
US6303081B1 (en) 1998-03-30 2001-10-16 Orasure Technologies, Inc. Device for collection and assay of oral fluids
US20060019404A1 (en) * 1998-05-06 2006-01-26 Blatt Joel M Quantitative assay with extended dynamic range
US7799521B2 (en) * 1998-06-24 2010-09-21 Chen & Chen, Llc Thermal cycling
US6780617B2 (en) 2000-12-29 2004-08-24 Chen & Chen, Llc Sample processing device and method
JP3395673B2 (ja) 1998-11-18 2003-04-14 株式会社豊田中央研究所 微小酸素電極を利用した特異的結合対測定方法
US6171295B1 (en) * 1999-01-20 2001-01-09 Scimed Life Systems, Inc. Intravascular catheter with composite reinforcement
US7577469B1 (en) * 1999-03-11 2009-08-18 Jack L. Aronowitz Noninvasive transdermal systems for detecting an analyte in a biological fluid and methods
DE10003734A1 (de) * 2000-01-28 2001-08-02 Bosch Gmbh Robert Detektionsverfahren und -vorrichtung
US6365417B1 (en) 2000-02-09 2002-04-02 A-Fem Medical Corporation Collection device for lateral flow chromatography
US6998273B1 (en) * 2000-02-09 2006-02-14 A-Fem Medical Corporation Collection device for lateral flow chromatography
CA2437298A1 (en) * 2000-02-23 2001-08-30 Besst-Test Aps Method for correlating blood coagulation activity with markers in body fluids, e.g. urine
US6699722B2 (en) 2000-04-14 2004-03-02 A-Fem Medical Corporation Positive detection lateral-flow apparatus and method for small and large analytes
RU2278612C2 (ru) * 2000-07-14 2006-06-27 Лайфскен, Инк. Иммуносенсор
US8124348B2 (en) 2000-08-23 2012-02-28 Jonathan Zmuda Oral fluid rapid assay for hepatitis C virus (HCV) antibodies using non-antibody labeling of IgA molecules recognizing HCV peptide epitopes
US6584781B2 (en) 2000-09-05 2003-07-01 Enersea Transport, Llc Methods and apparatus for compressed gas
US7087389B2 (en) * 2001-02-09 2006-08-08 Council Of Scientific & Industrial Research Highly cost-effective analytical device for performing immunoassays with ultra high sensitivity
DE10108680A1 (de) * 2001-02-23 2002-09-26 Biognostic Ag Affinitätsassay zur schnellen Untersuchung biologischer Materialien
US20050266499A1 (en) * 2001-04-25 2005-12-01 Rockeby Biomed Corporation, Ltd. Method and apparatus for testing for presence or absence of select biological substances
AT5044U1 (de) * 2001-05-10 2002-02-25 Medsystems Diagnostics Gmbh Quantitativer einschritt immuntest in lyophilisierter form
US7531362B2 (en) 2001-06-07 2009-05-12 Medmira Inc. Rapid diagnostic assay
US7270959B2 (en) 2001-07-25 2007-09-18 Oakville Hong Kong Company Limited Specimen collection container
US7300633B2 (en) 2001-07-25 2007-11-27 Oakville Hong Kong Company Limited Specimen collection container
CN1262351C (zh) * 2001-09-11 2006-07-05 伊库姆有限公司 试样容器
US20030124618A1 (en) * 2001-12-04 2003-07-03 Lattec I/S Device for analysing analyte compounds and use hereof
US7459127B2 (en) * 2002-02-26 2008-12-02 Siemens Healthcare Diagnostics Inc. Method and apparatus for precise transfer and manipulation of fluids by centrifugal and/or capillary forces
US20030180814A1 (en) * 2002-03-21 2003-09-25 Alastair Hodges Direct immunosensor assay
US20060134713A1 (en) * 2002-03-21 2006-06-22 Lifescan, Inc. Biosensor apparatus and methods of use
JP3637392B2 (ja) * 2002-04-08 2005-04-13 独立行政法人産業技術総合研究所 燃料電池
US20030232401A1 (en) * 2002-06-12 2003-12-18 Pugia Michael J. Bacterial test method by glycated label binding
US7108993B2 (en) * 2002-07-19 2006-09-19 Bayer Healthcare Llc Use of dual conjugated labels in the elimination of serum interference in immunochromatographic assays
US20040038197A1 (en) * 2002-08-22 2004-02-26 Usda Ars Ott Extraction and concentration method
US20040092036A1 (en) * 2002-09-11 2004-05-13 Lattec I/S Device for analysing analyte compounds and use hereof
US7093166B2 (en) * 2002-10-08 2006-08-15 Dell Products L.P. Method and apparatus for testing physical memory in an information handling system under conventional operating systems
US7094354B2 (en) * 2002-12-19 2006-08-22 Bayer Healthcare Llc Method and apparatus for separation of particles in a microfluidic device
US7125711B2 (en) * 2002-12-19 2006-10-24 Bayer Healthcare Llc Method and apparatus for splitting of specimens into multiple channels of a microfluidic device
CA2511372C (en) * 2002-12-26 2014-07-08 Jeff D. Debad Methods, compositions and kits for biomarker extraction
US7560272B2 (en) 2003-01-04 2009-07-14 Inverness Medical Switzerland Gmbh Specimen collection and assay container
US7718421B2 (en) 2003-02-05 2010-05-18 Iquum, Inc. Sample processing
US8101429B2 (en) * 2003-06-03 2012-01-24 Siemens Healthcare Diagnostics Inc. Native analyte as a reference in lateral flow assays
US20040265172A1 (en) * 2003-06-27 2004-12-30 Pugia Michael J. Method and apparatus for entry and storage of specimens into a microfluidic device
US20040265171A1 (en) * 2003-06-27 2004-12-30 Pugia Michael J. Method for uniform application of fluid into a reactive reagent area
US20080257754A1 (en) * 2003-06-27 2008-10-23 Pugia Michael J Method and apparatus for entry of specimens into a microfluidic device
US7347617B2 (en) * 2003-08-19 2008-03-25 Siemens Healthcare Diagnostics Inc. Mixing in microfluidic devices
US7517495B2 (en) 2003-08-25 2009-04-14 Inverness Medical Switzerland Gmbh Biological specimen collection and analysis system
US7943395B2 (en) * 2003-11-21 2011-05-17 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Extension of the dynamic detection range of assay devices
US7150995B2 (en) * 2004-01-16 2006-12-19 Metrika, Inc. Methods and systems for point of care bodily fluid analysis
US20050227370A1 (en) * 2004-03-08 2005-10-13 Ramel Urs A Body fluid analyte meter & cartridge system for performing combined general chemical and specific binding assays
US7319032B2 (en) * 2004-04-22 2008-01-15 Medtox Non-sugar sweeteners for use in test devices
DE102006058374A1 (de) * 2006-12-08 2008-07-03 Biosensor Gmbh Analyseverfahren und portables Analysegerät
EP2304437A4 (en) * 2008-07-22 2012-06-20 Siemens Healthcare Diagnostics DIAGNOSTIC AID SPECIFIC TO A DISEASE
US8012770B2 (en) 2009-07-31 2011-09-06 Invisible Sentinel, Inc. Device for detection of antigens and uses thereof
MX2012004105A (es) 2009-10-09 2012-09-07 Invisible Sentinel Inc Dispositivo para deteccion de antigenos y usos del mismo.
KR101271022B1 (ko) * 2009-11-24 2013-06-04 주식회사 인포피아 다공성 필름이 부착되어 있는 멤브레인 바이오센서 및 이를 이용한 면역반응 또는 효소반응 측정방법
US8956859B1 (en) 2010-08-13 2015-02-17 Aviex Technologies Llc Compositions and methods for determining successful immunization by one or more vaccines
EP2668501B1 (en) 2011-01-27 2019-06-12 Invisible Sentinel, Inc. Analyte detection devices, multiplex and tabletop devices for detection of analytes, and uses thereof
IE20120533A1 (en) * 2011-12-13 2013-06-19 Kieran Gerard Walshe An assay
US8293487B1 (en) * 2012-01-06 2012-10-23 Jiandi Zhang Zestern, a simple, fast, specific and quantifiable improvement of immunodetection process
CN104919055B (zh) 2012-03-09 2018-06-19 因威瑟堡善迪诺有限公司 用单一信号检测多种分析物的方法和组合物
US20130280696A1 (en) 2012-04-23 2013-10-24 Elliott Millenson Devices and methods for detecting analyte in bodily fluid
US9285323B2 (en) 2012-08-08 2016-03-15 Scanadu Incorporated Quantifying color changes of chemical test pads induced concentrations of biological analytes under different lighting conditions
US9528941B2 (en) 2012-08-08 2016-12-27 Scanadu Incorporated Method and apparatus for determining analyte concentration by quantifying and interpreting color information captured in a continuous or periodic manner
US9311520B2 (en) 2012-08-08 2016-04-12 Scanadu Incorporated Method and apparatus for performing and quantifying color changes induced by specific concentrations of biological analytes in an automatically calibrated environment
CN106232832B (zh) * 2013-12-06 2022-04-05 哈佛大学校长及研究员协会 基于纸的合成基因网络
WO2016025935A2 (en) 2014-08-15 2016-02-18 Scanadu Incorporated Precision luxmeter methods for digital cameras to quantify colors in uncontrolled lighting environments
US9927443B2 (en) 2015-04-10 2018-03-27 Conquerab Inc. Risk assessment for therapeutic drugs
CN108780088A (zh) 2015-11-06 2018-11-09 维蒂卡实验室公司 在伴侣动物中检测炎症标志物和治疗炎性病症的方法
US9903866B2 (en) 2016-04-05 2018-02-27 Conquerab Inc. Portable devices for detection of antibodies against therapeutic drugs
WO2020241871A1 (ja) * 2019-05-30 2020-12-03 国立大学法人北海道大学 物質検出装置

Family Cites Families (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL154600B (nl) * 1971-02-10 1977-09-15 Organon Nv Werkwijze voor het aantonen en bepalen van specifiek bindende eiwitten en hun corresponderende bindbare stoffen.
US3654090A (en) * 1968-09-24 1972-04-04 Organon Method for the determination of antigens and antibodies
US3723064A (en) * 1971-07-26 1973-03-27 L Liotta Method and device for determining the concentration of a material in a liquid
FI49086C (fi) * 1973-01-25 1975-03-10 Matti Antero Reunanen Radioimmunologinen määritysmenetelmä.
US3926732A (en) * 1973-02-16 1975-12-16 Alfa Laval Ab Method for assaying catalase in milk and other liquids
US3992158A (en) * 1973-08-16 1976-11-16 Eastman Kodak Company Integral analytical element
US4039652A (en) * 1973-10-11 1977-08-02 Miles Laboratories, Inc. Column method of immunoassay employing an immobilized binding partner
SE388694B (sv) * 1975-01-27 1976-10-11 Kabi Ab Sett att pavisa ett antigen exv i prov av kroppvetskor, med utnyttjande av till porost berarmaterial bundna eller adsorberande antikroppar
CA1054034A (en) * 1975-06-20 1979-05-08 Barbara J. Bruschi Multilayer analytical element
US4042335A (en) * 1975-07-23 1977-08-16 Eastman Kodak Company Integral element for analysis of liquids
US4016043A (en) * 1975-09-04 1977-04-05 Akzona Incorporated Enzymatic immunological method for the determination of antigens and antibodies
US4059407A (en) * 1976-04-14 1977-11-22 Becton, Dickinson And Company Disposable chemical indicators
US4094647A (en) * 1976-07-02 1978-06-13 Thyroid Diagnostics, Inc. Test device
JPS5344622A (en) * 1976-09-30 1978-04-21 Mochida Pharm Co Ltd Immunologically measuring method
US4200690A (en) * 1976-12-16 1980-04-29 Millipore Corporation Immunoassay with membrane immobilized antibody
CA1095819A (en) * 1977-01-14 1981-02-17 Eastman Kodak Company Element for analysis of liquids
US4277560A (en) * 1978-10-24 1981-07-07 Technicon Instruments Corporation Enzyme immunoassays using immobilized reagents in a flowing stream
JPH0142041Y2 (da) * 1978-12-11 1989-12-11
US4258001A (en) * 1978-12-27 1981-03-24 Eastman Kodak Company Element, structure and method for the analysis or transport of liquids
US4181501A (en) * 1979-03-26 1980-01-01 General Electric Company Method and apparatus for measuring antibody levels
US4264560A (en) * 1979-12-26 1981-04-28 Samuel Natelson Clinical analytical system
JPS5767860A (en) * 1980-10-15 1982-04-24 Fuji Photo Film Co Ltd Material for multilayer analysis
US4446232A (en) * 1981-10-13 1984-05-01 Liotta Lance A Enzyme immunoassay with two-zoned device having bound antigens

Also Published As

Publication number Publication date
JPH0416745B2 (da) 1992-03-25
DE3237046A1 (de) 1983-04-21
DK451982A (da) 1983-04-14
IT1149089B (it) 1986-12-03
JPS5876763A (ja) 1983-05-09
DE3237046C2 (da) 1988-08-04
FR2514511B1 (fr) 1986-02-21
NL8203946A (nl) 1983-05-02
NL192138B (nl) 1996-10-01
IE822464L (en) 1983-04-13
SE462606B (sv) 1990-07-23
SE8205751D0 (sv) 1982-10-08
NL192138C (nl) 1997-02-04
GB2111676A (en) 1983-07-06
DK159407C (da) 1991-04-02
CA1200483A (en) 1986-02-11
BE894662A (nl) 1983-04-11
US4446232A (en) 1984-05-01
SE8205751L (sv) 1983-04-14
IE53533B1 (en) 1988-12-07
IT8249171A0 (it) 1982-09-27
JPH0464062A (ja) 1992-02-28
FR2514511A1 (fr) 1983-04-15
GR76996B (da) 1984-09-04
GB2111676B (en) 1985-08-21
LU84402A1 (fr) 1983-06-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK159407B (da) Fremgangsmaade og indretning til bestemmelse af antigeners eller antistoffers tilstedevaerelse
US4517288A (en) Solid phase system for ligand assay
CA1289875C (en) Immunoassay test strip
JPH06317595A (ja) 補足的な視覚シグナルイムノアッセイ
DK164943B (da) Multizoneproeveanordning til en specifik bindingsbestemmelse af en analyt i en flydende proeve
JPH0278934A (ja) 液体試料の成分を分析測定するためのテスト担体
DK165932B (da) Anordning og fremgangsmaade til hurtig kvalitativ og kvantitativ bestemmelse af tilstedevaerelsen af en reaktiv ligand i et fluidum
US20100317126A1 (en) Agglutination assay method in porous medium layer
US4774174A (en) Solid phase system for ligand assay
US20040214254A1 (en) Methods and device for detecting prostate specific antigen (PSA)
EP2674757A2 (en) Agglutination assay
AU601993B2 (en) Process and agent for the detection of an analyte
US4786606A (en) Solid phase system for ligand assay
US7067264B2 (en) Test device for detecting human blood and method of use
US6686167B2 (en) Test device for detecting semen and method of use
EP0347839A2 (en) Dry-type analytical element for immunoassay
JPS63210664A (ja) 酸素要求検出系を用いる装置のための乾燥試験片及び被検流体中の分析成分の検出方法
JP2002214236A (ja) 血中抗原検出方法及び装置
EP0310940B1 (en) Analytical element for enzyme immunoassays
EP0308704A1 (en) Heterogeneous enzymimmunoassay
JPH1048212A (ja) 免疫クロマトグラフィー試験片を用いて分析対象物を測定する方法
JP2616805B2 (ja) 乾式免疫分析要素
JP2616806B2 (ja) 乾式免疫分析要素
JPH0283448A (ja) 免疫測定方法
JPH0814580B2 (ja) 乾式免疫分析要素

Legal Events

Date Code Title Description
PUP Patent expired